BR112021010633A2 - Compostos com atividade inibidora de pde9a e usos farmacêuticos dos mesmos - Google Patents

Compostos com atividade inibidora de pde9a e usos farmacêuticos dos mesmos Download PDF

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Chae Jo Lim
Mi Young Lee
Ju Hee Lee
Kwang-Seok Oh
Jeong Hyun Lee
Kyu Yang Yi
Nack Jeong KIM
Byung Ho Lee
Ho Won Seo
Soo Hee Kim
Junyoung Choi
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Korea Research Institute Of Chemical Technology.
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Abstract

COMPOSTOS COM ATIVIDADE INIBIDORA DE PDE9A E USOS FARMACÊUTICOS DOS MESMOS. A presente invenção fornece um composto com uma estrutura química específica e com atividade inibidora de PDE9A, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. A presente invenção fornece uma composição contendo o composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. A presente invenção fornece um uso farmacêutico, para o tratamento ou prevenção de doenças relacionadas à PDE9A, do composto de acordo com a presente invenção, um sal do mesmo e uma composição contendo o composto ou sal. A presente invenção também fornece um método para tratar ou prevenir doenças relacionadas à PDE9A, o método compreendendo a administração de uma quantidade eficaz do composto de acordo com a presente invenção, um sal do mesmo, ou uma composição contendo o composto ou sal a um indivíduo em necessidade de tratamento.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “COMPOSTOS COM ATIVIDADE INIBIDORA DE PDE9A E USOS FARMACÊUTICOS DOS MESMOS” [Campo Técnico]
[001] Este pedido reivindica prioridade ao Pedido Coreano No. 10-2018-0156031 depositado em 6 de dezembro de 2018, e todos os conteúdos descritos no relatório descritivo e nos desenhos do pedido são incorporados neste documento por referência.
[002] A presente invenção se refere a um grupo de compostos com uma estrutura específica e excelente atividade inibidora de PDE9A. A invenção também se refere a composições farmacêuticas compreendendo tais compostos. A presente invenção refere-se a um método útil para o tratamento de doenças relacionadas à PDE9A usando estes compostos. Ou seja, a presente invenção refere-se a uma utilização médica dos compostos de acordo com a presente invenção para o tratamento ou prevenção de doenças relacionadas à PDE9A. [Técnica Anterior]
[003] A fosfodiesterase 9A (PDE9A) é expressa principalmente no cérebro, particularmente no neocórtex do cerebelo e hipocampo, e é conhecida por estar associada a regulação da concentração de cGMP, ou seja, sinalização relacionada ao glutamato através da memória e aprendizado. Portanto, a inibição da fosfodiesterase 9A é conhecida por ser útil no tratamento da doença de Alzheimer, distúrbios do SNC ou distúrbios cognitivos causados por vários processos neurodegenerativos. Portanto, é reconhecido como um alvo farmacológico útil para o tratamento ou alívio de distúrbios cognitivos, como demência com degeneração do lobo frontal, incluindo demência de corpo de Lewy, síndrome de Pick, doença de Parkinson e doença de Alzheimer com problemas de aprendizagem e memória.
[004] Ademais, além de doenças dos nervos cranianos, a superexpressão de fosfodiesterase 9A foi encontrada em pacientes com doença cardíaca, especialmente em pacientes com insuficiência cardíaca que preserva o débito cardíaco, e a superexpressão de fosfodiesterase 9A foi observada em modelos animais que induzem condições patológicas do coração. Além disso, os efeitos da melhora da função cardíaca e o alívio da hipertrofia miocárdica por meio da inibição da fosfodiesterase 9A foram relatados e, portanto, está atraindo atenção recentemente como um alvo farmacológico útil para pacientes com doenças cardiovasculares, especialmente aqueles com insuficiência cardíaca que preserva o débito cardíaco. [Descrição] [Problema Técnico]
[005] Consequentemente, um problema a ser resolvido pela presente invenção é fornecer um composto com atividade inibidora de PDE9A, uma composição farmacêutica compreendendo o composto como um ingrediente ativo e um uso médico para o tratamento ou prevenção de doenças relacionadas à PDE9A do mesmo.
[006] Outro problema a ser resolvido pela presente invenção é fornecer um método para tratar ou aliviar doenças relacionadas à PDE9A, caracterizado por inibir a atividade de PDE9A e compreender a administração do composto de acordo com a presente invenção a um paciente em necessidade de tratamento, melhoria ou prevenção de doenças relacionadas à PDE9A. [Solução Técnica]
[007] A fim de resolver o problema acima, uma modalidade da presente invenção fornece um composto representado pela seguinte Fórmula Química 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. [Fórmula Química 1]
[008] Na Fórmula Química 1,
[009] A é fenila não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, C1-5 alquila reta ou ramificada não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, cicloalquila de 3 a 6 membros não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, ou heterocicloalquila de 3 a 6 membros não substituída ou substituída por um ou mais halogênios,
[0010] R1 e R2 são, cada um, independentemente -H, halogênio, - NO2, -CF3, fenila não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, C1-5 alquila reta ou ramificada não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, ou C1-5 alcóxi reto ou ramificado não substituído ou substituído por um ou mais halogênios.
[0011] Quando aqui usado, os termos "halogênio" e "halo" significam flúor, cloro, bromo ou iodo.
[0012] Quando aqui usado, o termo “cicloalquila” significa um anel saturado monocíclico ou policíclico com átomos de carbono e hidrogênio e sem ligações múltiplas carbono-carbono. Exemplos de grupos cicloalquila incluem, mas não estão limitados a, grupos (C3-C6) cicloalquila, incluindo ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila e ciclo-heptila. Um grupo cicloalquila pode ser não substituído ou opcionalmente substituído. Em uma modalidade, o grupo cicloalquila é um anel monocíclico ou anel bicíclico.
[0013] Como usado aqui, o termo “heterocicloalquila” significa um anel no qual pelo menos um dos átomos de carbono do cicloalquila é independentemente substituída a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre.
[0014] Quando aqui usado, o termo “sal (is) farmaceuticamente aceitável (is)” refere-se a um sal preparado a partir de compostos ativos de acordo com a presente descrição com ácidos ou bases relativamente não tóxicos, dependendo dos substituintes particulares desses compostos. Quando os compostos têm um grupo relativamente ácido, os sais com adição de base podem ser obtidos contactando os compostos neutros com uma quantidade suficiente da base desejada e um solvente puro ou inerte. Sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem, mas não estão limitados a sais de sódio, potássio, cálcio, alumínio, amino orgânico, magnésio e similares. Quando os compostos têm um grupo relativamente básico, os sais de ácido adicionado podem ser obtidos por contato com o neutro compostos com uma quantidade suficiente do ácido desejado e solvente puro ou inerte. Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem sais derivados de ácidos orgânicos não tóxicos, incluindo, mas não estão limitados a, ácido acético, ácido propiônico, ácido isobutílico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malônico, ácido benzoico, ácido succínico, ácido subérico, ácido fumárico, ácido mandélico, ácido ftálico, ácido benzenossulfônico, ácido p-tolilsulfônico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido metanossulfônico e similares e ácidos inorgânicos não tóxicos, incluindo, mas não estão limitados a, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido nítrico, ácido carbônico, ácido mono- hidrogenocarbônico, ácido fosfórico, ácido mono-hidrogenofosfórico, ácido di-hidrogenofosfórico, ácido sulfúrico, ácido mono- hidrogenossulfúrico, iodeto de hidrogênio, ácido fosforoso e similares. Também inclui um sal de aminoácido, como arginato ou seus análogos, e também inclui análogos de ácido orgânico, como ácido glicurônico ou galacturônico. Alguns compostos específicos desta descrição têm funcionalidade básica e ácida para a conversão de compostos com sais de porção (adição) básica ou ácida.
[0015] Quando aqui usada, a frase “composto (s) desta/da invenção” inclui qualquer composto (s) de Fórmula Química 1, bem como clatratos, hidratos, solvatos ou polimorfos dos mesmos. E, mesmo que o termo “composto (s) da invenção” não mencione seus sais farmaceuticamente aceitáveis, o termo inclui seus sais. Em uma modalidade, os compostos desta descrição incluem compostos estereoquimicamente puros, por exemplo, aqueles substancialmente livres (por exemplo, maior que 85 % ee, maior que 90 % ee, maior que 95 % ee, maior que 97 % ee, ou maior de 99 % ee) de outros estereoisômeros. Ou seja, se os compostos de Fórmula Química 1 de acordo com a presente descrição ou seus sais são isômeros tautoméricos e/ou estereoisômeros (por exemplo, isômeros geométricos e isômeros conformacionais), tais isômeros isolados e suas misturas também estão incluídos no escopo desta descrição . Se os compostos da presente descrição ou seus sais têm um carbono assimétrico em suas estruturas, seus isômeros ópticos ativos e suas misturas racêmicas também estão incluídos no escopo desta descrição.
[0016] Quando aqui usado, o termo “polimorfo” refere-se a formas cristalinas sólidas de um composto desta descrição ou complexo do mesmo. Diferentes polimorfos do mesmo composto podem exibir diferentes propriedades físicas, químicas e/ou espectroscópicas. Diferentes propriedades físicas incluem, mas não estão limitadas à estabilidade (por exemplo, ao calor ou à luz), compressibilidade e densidade (importante na formulação e fabricação do produto) e taxas de dissolução (que podem afetar a biodisponibilidade). As diferenças na estabilidade podem resultar de mudanças na reatividade química (por exemplo, oxidação diferencial, de modo que uma forma de dosagem descolorir mais rapidamente quando composta de um polimorfo do que quando composta de outro polimorfo) ou características mecânicas (por exemplo, comprimidos se desintegram no armazenamento como cineticamente favorecido polimorfo se converte em polimorfo termodinamicamente mais estável) ou ambos (por exemplo, comprimidos de um polimorfo são mais suscetíveis à degradação em alta umidade). Diferentes propriedades físicas de polimorfos podem afetar seu processamento., por exemplo, um polimorfo pode ser mais propenso a formar solvatos ou pode ser mais difícil de filtrar ou lavar livre de impurezas do que outro devido, por exemplo, à forma ou distribuição de tamanho de suas partículas.
[0017] Quando aqui usado, o termo “solvato” significa um composto ou seu sal de acordo com esta descrição que inclui ainda uma quantidade estequiométrica ou não estequiométrica de um solvente ligado por forças intermoleculares não covalentes. Os solventes preferidos são voláteis, não tóxicos e aceitáveis para administração a humanos em pequenas quantidades.
[0018] Quando aqui usado, o termo “hidrato” significa um composto ou seu sal de acordo com esta descrição que inclui ainda uma quantidade estequiométrica ou não estequiométrica de água ligada por forças intermoleculares não covalentes.
[0019] Quando aqui usado, o termo “clatrato” significa um composto ou seu sal na forma de uma rede cristalina que contém espaços (por exemplo, canais) que têm uma molécula hóspede (por exemplo, um solvente ou água) presa dentro.
[0020] Em uma modalidade de acordo com a presente invenção, de preferência, o substituinte A da Fórmula Química 1 é fenila, C1-5 alquila reta ou ramificada não substituída ou substituída com um ou mais halogênios, ou heterocicloalquila de 3 ou 6 membros compreendendo um heteroátomo de O ou S não substituído ou substituído por um ou mais halogênios, e R1 e R2 são cada um independentemente -H, halogênio, -NO2, -CF3, fenila, C1-5 alquila reta ou ramificada não substituída ou substituída com um ou mais halogênios, ou C1-5 alcóxi reto ou ramificado não substituído ou substituído por um ou mais halogênios.
[0021] Em uma modalidade de acordo com a presente invenção, mais preferencialmente, o substituinte A da Fórmula Química 1 é fenila, , , , , ou , e R1 e R2 são cada qual independentemente -H, halogênio, -NO2, -CF3, -CH3, - C(CH3)3, ou fenila.
[0022] A fim de alcançar o objetivo acima mencionado, os presentes inventores realizaram vários experimentos de avaliação após sintetizar vários compostos, a fim de assegurar compostos com alta atividade inibidora de PDE9A e alta seletividade para eles e seu uso e, finalmente, a presente invenção foi concluída pela confirmação de que os compostos da presente invenção eram adequados para os fins da presente invenção.
[0023] Exemplos não limitativos de compostos preferidos de acordo com a presente invenção incluem os compostos da Tabela 1 abaixo e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
[0024] Além disso, a presente invenção fornece, como mostrado no Esquema 1 abaixo,
[0025] um método A para obter um composto representado pela Fórmula Química 1 pela reação de um composto representado pela Fórmula Química 2 com um composto representado pela Fórmula Química 3; e
[0026] um método B para preparar um composto representado pela Fórmula Química 1 pela reação de um composto representado pela Fórmula Química 4 com um composto representado pela Fórmula Química 5. [Esquema 1]
[0027] No Esquema 1, A e R são conforme definidos na Fórmula Química 1.
[0028] Daqui em diante, o método de fabricação representado pelo Esquema 1 de acordo com a presente invenção será descrito em detalhes.
[0029] O composto representado pela Fórmula Química 1 de acordo com a presente invenção pode ser obtido por acoplamento de um composto de pirazol pirimidinona representado pela Fórmula Química 2 como um material de partida com um composto de benzoxazol representado pela Fórmula Química 3 na presença de uma base (Método A), e também pode ser obtido por acoplamento de um composto tioxo representado pela Fórmula Química 4 como um material de partida com um composto de halogênio representado pela Fórmula Química 5 na presença de uma base (Método B), como mostrado no Esquema 1 acima. Os exemplos específicos são os seguintes. Método de Fabricação
[0030] Como mostrado no Esquema 1, um composto representado pela Fórmula Química 1 pode ser preparado acoplando um composto representado pela Fórmula Química 2 e um composto representado pela Fórmula Química 3 (Método A), ou acoplando um composto representado pela Fórmula Química 4 e um composto representado pela Fórmula Química 5 (Método B) na presença de uma base.
[0031] Neste momento, a base é usada para acelerar a reação e aumentar o rendimento, e as bases disponíveis incluem bases orgânicas como N,N-dimetilaminopiridina (DMAP), piridina, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina e 1,8-diazabiciclo[5.4.0]-7-undeceno (DBU) ou bases inorgânicas, tais como bicarbonato de sódio, carbonato de césio, carbonato de potássio, hidróxido de sódio e hidróxido de potássio. Estes podem ser usados sozinhos ou em combinação e podem ser usados em quantidade equivalente ou em excesso.
[0032] Além disso, os solventes que podem ser usados na reação incluem solventes de éter, tais como tetra-hidrofurano, dioxano, diclorometano e 1,2-dimetoxietano; solventes de hidrocarbonetos aromáticos, tais como benzeno, tolueno e xileno; dimetilformamida (DMF); dimetilsulfóxido; acetonitrila e similares. Eles podem ser usados sozinhos ou em combinação. A temperatura da reação é de 0°C ao ponto de ebulição do solvente. Preparação 1 do material de partida (composto representado pela Fórmula Química 2)
[0033] O composto de Fórmula Química 2, que é o material de partida do Esquema 1, pode ser preparado por um método de fabricação compreendendo uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 8 pela reação de um composto representado pela Fórmula Química 6 com um composto representado pela Fórmula Química 7 (Etapa 1); e
[0034] uma etapa de reação do composto representado pela Fórmula Química 8 obtido na referida etapa 1 para obter um composto representado pela Fórmula Química 2 (Etapa 2) como mostrado no Esquema 2 abaixo. [Esquema 2]
[0035] No Esquema 2, A é conforme definido na Fórmula Química 1.
[0036] Daqui em diante, o método de fabricação representado pelo Esquema 2 será descrito em detalhes.
[0037] No método de fabricação representado pelo Esquema 2, a Etapa 1 é uma etapa para obter um composto representado pela Fórmula Química 8 pela reação de um composto representado pela Fórmula Química 6 com um composto representado pela Fórmula Química 7. Especificamente, é uma etapa para obter um composto representado pela Fórmula Química 8 por reação de condensação do haleto representado pela Fórmula Química 6 sob condições básicas.
[0038] Na reação acima, o composto representado pela Fórmula Química 6 era um composto disponível comercialmente.
[0039] Além disso, as bases utilizáveis na reação incluem bases orgânicas, como piridina, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina e 1,8- diazabiciclo[5.4.0]-7-undeceno (DBU), e bases inorgânicas, como hidróxido de sódio, carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de césio e similares, e estes podem ser usados em uma quantidade equivalente ou em excesso.
[0040] Além disso, o solvente da reação é um solvente de éter, como tetra-hidrofurano, dioxano e 1,2-dimetoxietano, um solvente de hidrocarboneto aromático, como benzeno, tolueno e xileno, um álcool inferior, como metanol, etanol, propanol e butanol, dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), acetonitrila, água, etc. podem ser usados sozinhos ou em combinação, e a temperatura de reação é de 0°C ao ponto de ebulição do solvente.
[0041] No método de fabricação representado pelo Esquema 2, a Etapa 2 é uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 2 pela reação do composto representado pela Fórmula Química 8 obtido na Etapa 1. Especificamente, nesta etapa, um composto de pirazol pirimidinona representado por Química A Fórmula 2 é preparada hidrolisando um composto de halogênio representado pela Fórmula Química 8, que é obtido na Etapa 1, em condições básicas.
[0042] Nesta reação, a base inclui bases inorgânicas, tais como carbonato de sódio, carbonato de potássio, hidróxido de potássio, hidróxido de sódio, carbonato de césio, hidróxido de bário e similares, e pode ser usado sozinho ou em combinação em uma quantidade equivalente ou em excesso.
[0043] Além disso, os solventes que podem ser usados na reação incluem solventes de éter, como tetra-hidrofurano, dioxano, diclorometano e 1,2-dimetoxietano, solventes de hidrocarbonetos aromáticos, como benzeno, tolueno e xileno, solventes à base de álcool, como metanol e etanol, dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), acetonitrila, água e similares. Eles podem ser usados sozinhos ou em combinação. A temperatura da reação é de 0°C ao ponto de ebulição do solvente. Preparação 2 do material de partida (composto representado pela
Fórmula Química 3 ou 5)
[0044] O composto de Fórmula Química 3, que é um material de partida do Esquema 1, pode ser preparado por um método de fabricação compreendendo uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 5 por meio da reação de um composto representado pela Fórmula Química 9 (Etapa 1); uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 10 por meio da reação do composto representado pela Fórmula Química 5 obtido na Etapa 1 (Etapa 2); e uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 3 por meio da reação do composto representado pela Fórmula Química 10 obtido na Etapa 2 (Etapa 3), como mostrado no Esquema 3 abaixo. [Esquema 3]
[0045] No Esquema de Reação 3, R é conforme definido na Fórmula Química 1.
[0046] Daqui em diante, o método de fabricação representado pelo Esquema 3 será descrito em detalhes.
[0047] No método de fabricação representado pelo Esquema 3, a Etapa 1 é uma etapa na qual um composto representado pela Fórmula Química 5 é obtido a partir de um composto representado pela Fórmula Química 9. Especificamente, esta é uma etapa para obter um composto representado pela Fórmula Química 5 por reação de condensação de um aminofenol representado pela Fórmula Química 9 sob condições básicas.
[0048] Na reação acima, o composto representado pela Fórmula Química 9 era um composto disponível comercialmente.
[0049] Além disso, as bases utilizáveis na reação incluem bases orgânicas, como piridina, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina e 1,8- diazabiciclo[5.4.0]-7-undeceno (DBU), e bases inorgânicas, como hidróxido de sódio, carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de césio e similares, e estes podem ser usados em uma quantidade equivalente ou em excesso.
[0050] Além disso, o solvente da reação é um solvente de éter, como tetra-hidrofurano, dioxano e 1,2-dimetoxietano, um solvente de hidrocarboneto aromático, como benzeno, tolueno e xileno, um álcool inferior, como metanol, etanol, propanol e butanol, dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), acetonitrila, água, etc., podem ser usados sozinhos ou em combinação, e a temperatura de reação é de 0°C ao ponto de ebulição do solvente.
[0051] No método de fabricação representado pelo Esquema 3, a Etapa 2 é uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 10 pela reação do composto representado pela Fórmula Química 5 obtido na Etapa 1. Especificamente, esta é uma etapa de preparação de um composto tioacetila representado por Fórmula Química 10 substituindo um composto de halogênio representado pela Fórmula Química 5 obtida na Etapa 1.
[0052] Neste momento, os solventes utilizáveis na reação incluem solventes de éter, como tetra-hidrofurano, dioxano, diclorometano e 1,2-dimetoxietano, solventes de hidrocarbonetos aromáticos, como benzeno, tolueno e xileno, solventes à base de álcool, como metanol e etanol, dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), acetonitrila, acetona, água e similares. Eles podem ser usados sozinhos ou em combinação. A temperatura da reação é de 0 °C ao ponto de ebulição do solvente.
[0053] No método de fabricação representado pelo Esquema 3, a Etapa 3 é uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 3 pela reação do composto representado pela Fórmula Química 10 obtido na Etapa 2. Especificamente, esta é uma etapa de preparação de um composto de tiol representado por Fórmula Química 3 por desproteger o composto tioacetila representado pela Fórmula Química 10 obtida na Etapa 2.
[0054] Nesta reação, as bases utilizáveis na reação incluem bases orgânicas, como piridina, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina e 1,8- diazabiciclo[5.4.0]-7-undeceno (DBU), e bases inorgânicas, como hidróxido de sódio, carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de césio e similares, e estes podem ser usados em uma quantidade equivalente ou em excesso.
[0055] Além disso, o solvente de reação inclui um solvente de éter, como tetra-hidrofurano, dioxano e 1,2-dimetoxietano, um solvente de hidrocarboneto aromático, como benzeno, tolueno e xileno, um álcool inferior, como metanol, etanol, propanol e butanol, dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), acetonitrila, água, etc. Estes podem ser usados sozinhos ou em combinação, e a temperatura de reação é de 0 °C ao ponto de ebulição do solvente. Preparação 3 do material de partida (composto representado pela Fórmula Química 4)
[0056] O composto de Fórmula Química 4, que é o material de partida do Esquema 1, pode ser obtido por um método de fabricação compreendendo uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 12 pela reação de um composto representado pela Fórmula Química 11 com um composto representado por Química Fórmula 7 (Etapa 1); uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 13 pela reação do composto representado pela Fórmula Química 12 obtido na Etapa 1 (Etapa 2); e uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 4 pela reação do composto representado pela Fórmula Química 13 obtido na Etapa 2 (Etapa 3) como mostrado no Esquema 4 abaixo. [Esquema 4]
[0057] No Esquema de Reação 4, A é conforme definido na Fórmula Química 1.
[0058] Daqui em diante, o método de fabricação representado pelo Esquema 4 será descrito em detalhes.
[0059] No método de fabricação representado pelo Esquema 4, a Etapa 1 é uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 12 pela reação de um composto representado pela Fórmula Química 11 com um composto representado pela Fórmula Química 7. Especificamente, esta é uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 12 por uma reação de condensação de um composto de acrilato representado pela Fórmula Química 11 com um composto de hidrazina sob condições básicas.
[0060] Na reação acima, o composto representado pela Fórmula Química 11 era um composto disponível comercialmente.
[0061] Além disso, as bases utilizáveis na reação incluem bases orgânicas, como piridina, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina e 1,8- diazabiciclo[5.4.0]-7-undeceno (DBU), e bases inorgânicas, como hidróxido de sódio, carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de césio e similares. Podem ser usados em quantidade equivalente ou em excesso.
[0062] Além disso, o solvente de reação inclui um solvente de éter, como tetra-hidrofurano, dioxano e 1,2-dimetoxietano, um solvente de hidrocarboneto aromático, como benzeno, tolueno e xileno, um álcool inferior, como metanol, etanol, propanol e butanol, dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), acetonitrila, água, etc. Estes podem ser usados sozinhos ou em combinação, e a temperatura de reação é de 0 °C ao ponto de ebulição do solvente.
[0063] No método de fabricação representado pelo Esquema 4, a Etapa 2 é uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 13 pela reação do composto representado pela Fórmula Química 12 obtido na Etapa 1. Especificamente, esta é uma etapa de preparação de um composto de tioureia representado por Fórmula Química 13 por reação de acoplamento de um composto de amina representado pela Fórmula Química 12 obtida na Etapa 1 com um composto de tioisocianato.
[0064] Neste momento, os solventes utilizáveis na reação incluem solventes de éter, como tetra-hidrofurano, dioxano, diclorometano e 1,2-dimetoxietano, solventes de hidrocarbonetos aromáticos, como benzeno, tolueno e xileno, solventes à base de álcool metanol e etanol, dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), acetonitrila, água e similares. Eles podem ser usados sozinhos ou em combinação. A temperatura da reação é de 0 °C até o ponto de ebulição do solvente.
[0065] No método de fabricação representado pelo Esquema 4, a Etapa 3 é uma etapa de obtenção de um composto representado pela Fórmula Química 4 pela reação do composto representado pela Fórmula Química 13 obtido na Etapa 2. Especificamente, esta é uma etapa de preparação de um composto tioxo representado por Fórmula Química 4 por ciclização de um composto de tioureia representado pela Fórmula Química 13 obtida na Etapa 2.
[0066] Neste caso, as bases utilizáveis na reação incluem bases orgânicas, como piridina, trietilamina, N,N-diisopropiletilamina e 1,8- diazabiciclo[5.4.0]-7-undeceno (DBU), e bases inorgânicas, como hidróxido de sódio, carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de césio e similares. Podem ser usados em quantidade equivalente ou em excesso.
[0067] Além disso, o solvente da reação é um solvente de éter, como tetra-hidrofurano, dioxano e 1,2-dimetoxietano, um solvente de hidrocarboneto aromático, como benzeno, tolueno e xileno, um álcool inferior, como metanol, etanol, propanol e butanol, dimetilformamida (DMF), dimetilsulfóxido (DMSO), acetonitrila, água, etc. Estes podem ser usados sozinhos ou em combinação, e a temperatura de reação é de 0 °C ao ponto de ebulição do solvente.
[0068] Em outra modalidade, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de Fórmula Química 1 de acordo com a presente invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um veículo farmaceuticamente aceitável.
[0069] Em outra modalidade, a presente invenção fornece um método para o tratamento de uma doença ou condição que compreende a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula Química 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo a um indivíduo em necessidade, em que a doença ou condição é uma doença relacionada à fosfodiesterase 9A.
[0070] Ou seja, a presente invenção proporciona uma utilização médica, caracterizada por o composto de Fórmula Química 1 de acordo com a presente invenção ou um seu sal farmaceuticamente aceitável ser utilizado como ingrediente ativo. Em uma modalidade, o uso médico da presente invenção é uma doença relacionada à fosfodiesterase 9A.
[0071] Em uma modalidade, a doença relacionada à fosfodiesterase 9A é uma doença neurológica ou uma doença mental. Em uma modalidade, o distúrbio neurológico ou mental é a doença de Alzheimer, doença de Huntington, demência com corpo de Lewy ou síndrome de Pick.
[0072] Em outra modalidade, a doença relacionada à fosfodiesterase 9A é a insuficiência cardíaca, particularmente a insuficiência cardíaca que preserva o débito cardíaco ou a doença falciforme.
[0073] Os compostos da presente invenção são geralmente administrados numa quantidade terapeuticamente eficaz. Os compostos da presente invenção podem ser administrados por qualquer via adequada na forma de uma composição farmacêutica adequada para esta via e numa dosagem eficaz para o tratamento pretendido. As dosagens eficazes são geralmente cerca de 0,001 a cerca de 100 mg/kg de peso corporal/dia, de preferência cerca de 0,01 a cerca de 50 mg/kg/dia, em doses únicas ou divididas. Dependendo da idade, espécie e doença ou condição a ser tratada, os níveis de dosagem abaixo do limite inferior deste intervalo podem ser adequados. Em outros casos, doses ainda maiores podem ser usadas sem efeitos colaterais prejudiciais. Dosagens maiores podem ser divididas em várias dosagens menores, para administração ao longo do dia. Métodos para determinar uma dosagem apropriada são bem conhecidos na técnica à qual a presente invenção pertence, e, por exemplo, Remington: The Science e Practice of Pharmacy, Mack Publishing Co., 20 ed., 2000 pode ser usado.
[0074] Para o tratamento das doenças ou condições referidas acima, os compostos aqui descritos ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser administrados da seguinte forma: Administração oral
[0075] Os compostos da presente descrição podem ser administrados por via oral, incluindo engolindo, de modo que o composto entre no trato gastrointestinal ou absorvido na corrente sanguínea diretamente da boca (por exemplo, administração bucal ou sublingual).
[0076] As composições adequadas para administração oral incluem formulações sólidas, líquidas, em gel ou em pó e têm uma forma de dosagem tal como comprimido, pastilha, cápsula, grânulo ou pó.
[0077] As composições para administração oral podem ser formuladas como liberação imediata ou modificada, incluindo liberação retardada ou prolongada, opcionalmente com revestimento entérico.
[0078] As formulações líquidas podem incluir soluções, xaropes e suspensões, que podem ser usados em cápsulas moles ou duras. Essas formulações podem incluir um veículo farmaceuticamente aceitável, por exemplo, água, etanol, polietileno glicol, celulose ou um óleo. A formulação também pode incluir um ou mais agentes emulsionantes e/ou agentes de suspensão.
[0079] Em uma forma de dosagem de comprimido, a quantidade de fármaco presente pode ser de cerca de 0,05 % a cerca de 95 % em peso, mais tipicamente de cerca de 2 % a cerca de 50 % em peso da forma de dosagem. Além disso, os comprimidos podem conter um desintegrante, compreendendo de cerca de 0,5 % a cerca de 35 % em peso, mais tipicamente de cerca de 2 % a cerca de 25 % da forma de dosagem. Exemplos de desintegrantes incluem, mas não estão limitados a, lactose, amido, glicolato de amido de sódio, crospovidona, croscarmelose de sódio, maltodextrina ou suas misturas.
[0080] Lubrificantes adequados, para uso em um comprimido, podem estar presentes em quantidades de cerca de 0,1 % a cerca de 5 % em peso e incluem, mas não estão limitados a, talco, dióxido de silício, ácido esteárico, cálcio, zinco ou estearato de magnésio, sódio estearilfumarato e similares.
[0081] Aglutinantes adequados, para uso em um comprimido, incluem, mas não estão limitados a, gelatina, polietileno glicol, açúcares, gomas, amido, polivinilpirrolidona, hidroxipropilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose e similares. Diluentes adequados, para uso em um comprimido, incluem, mas não estão limitados a, manitol, xilitol, lactose, dextrose, sacarose, sorbitol, celulose microcristalina e amido.
[0082] Solubilizantes adequados, para uso em um comprimido, podem estar presentes em quantidades de cerca de 0,1 % a cerca de 3 % em peso e incluem, mas não estão limitados a, polissorbatos, lauril sulfato de sódio, dodecil sulfato de sódio, propileno carbonato, monoetil éter de dietileno glicol, dimetil isossorbida, óleo de rícino de polietileno glicol (natural ou hidrogenado), HCORTM (Nikkol), éster oleílico, GelucireTM, mono/diglicerídeo de ácido caprílico/caprílico, ésteres de ácido graxo de sorbitano e Solutol HSTM. Administração Parenteral
[0083] Os compostos da presente descrição podem ser administrados diretamente na corrente sanguínea, músculo ou órgãos internos. Os meios adequados para administração parentérica incluem intravenosa, intramuscular, intra-arterial subcutânea, intraperitoneal,
intratecal, intracraniana e similares. Dispositivos adequados para administração parenteral incluem injetores (incluindo agulha e injetores sem agulha) e métodos de infusão.
[0084] As composições para administração parenteral podem ser formuladas como liberação imediata ou modificada, incluindo liberação retardada ou prolongada.
[0085] A maioria das formulações parenterais são soluções aquosas contendo excipientes, incluindo sais, agentes tamponantes e agentes isotônicos.
[0086] As formulações parentéricas também podem ser preparadas em uma forma desidratada (por exemplo, por liofilização) ou como soluções não aquosas estéreis. Estas formulações podem ser utilizadas com um veículo adequado, como água esterilizada. Os agentes de aumento da solubilidade também podem ser usados na preparação de soluções parenterais. Administração Tópica
[0087] Os compostos da presente descrição podem ser administrados topicamente na pele ou transdermicamente. As formulações para esta administração tópica podem incluir loções, soluções, cremes, géis, hidrogéis, unguentos, espumas, implantes, emplastros e similares. Os transportadores farmaceuticamente aceitáveis para formulações de administração tópica podem incluir água, álcool, óleo mineral, glicerina, polietileno glicol e similares. A administração tópica também pode ser realizada por eletroporação, iontoforese, fonoforese e similares.
[0088] As composições para administração tópica podem ser formuladas como liberação imediata ou modificada, incluindo liberação retardada ou prolongada. Efeitos Vantajosos
[0089] A presente invenção fornece um composto capaz de exibir várias atividades farmacológicas por meio da inibição da atividade de PDE 9A, uma composição farmacêutica contendo o composto como um ingrediente ativo, seu uso médico (especialmente para tratar ou aliviar doenças neuropáticas e mentais) e um método para tratar ou prevenção, compreendendo a administração a um indivíduo em necessidade. Modo de Invenção
[0090] A presente invenção será descrita em mais detalhes com base nos exemplos a seguir, mas isso não se destina a limitar o escopo da presente invenção. Além disso, aqueles versados na técnica serão capazes de adicionar várias modificações e variações à presente invenção dentro do escopo não prejudicial ao espírito da presente invenção. <Exemplo de Preparação 1> Preparação de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona Etapa 1: Preparação de terc-butil 2-(tetra-hidro-4H-piran-4- ilideno)hidrazina-1-carboxilato
[0091] 3 g de tetra-hidro-4H-piran-4-ona (29,96 mmol) foi dissolvido em 60 ml de hexano, 3,96 g de terc-butil carbazita (29,96 mmol) foi adicionado, seguido por agitação em refluxo durante 3 horas.
Depois da conclusão da reação, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 6,4 g do composto do título (29,95 mmol) em 100 % de rendimento. Rf = 0,19 (hexano:acetato de etila = 1 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,65 (br s, 1 H), 3,69 (t, J = 5,7 Hz, 2 H), 3,60 (t, J = 5,7 Hz, 2 H), 2,41 (t, J = 5,7 Hz, 2 H), 2,27 (t, J = 5,7 Hz, 2 H), 1,43 (s, 9H) Etapa 2: Preparação de terc-butil 2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)hidrazina- 1-carboxilato
[0092] 6,4 g de terc-butil 2-(tetra-hidro-4H-piran-4- ilideno)hidrazina-1-carboxilato (29,95 mmol) preparados na Etapa 1 foram dissolvidos em 80 ml de THF e 12,7 g de triacetoxiboro-hidreto de sódio (59,92 mmol) foram adicionados, e agitados em temperatura ambiente durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi extraída com 30 ml de acetato de etila, lavada com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secada em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4), e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano:acetato de etila = 1 : 2, v/v) para produzir 6 g do composto do título (27,74 mmol) em 92 % de rendimento. Rf = 0,38 (hexano:acetato de etila = 1 : 2, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 6,24 (br s, 1 H), 3,95-3,99 (m, 2 H), 3,38- 3,43 (m, 2 H), 3,05-3,11 (m, 1 H), 1,75-1,81 (m, 2 H), 1,40-1,52 (m, 11H) Etapa 3: Preparação de cloreto de hidrogênio de (tetra-hidro-2H-piran- 4-il)hidrazina
[0093] 6 g de terc-butil 2-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)hidrazina-1- carboxilato (27,74 mmol) obtidos na Etapa 2 foram dissolvidos em 60 ml de metanol, e ácido clorídrico foi adicionado a isto, e em seguida agitados a 50 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 4 g do composto do título (26,21 mmol) em 94 % de rendimento. 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,25 (br s, 1 H), 3,83-3,92 (m, 2 H), 3,23-3,31 (m, 2 H), 3,08-3,18 (m, 1 H), 1,84-1,95 (m, 2 H), 1,41-1,54 (m, 2H) Etapa 4: Preparação de 4,6-dicloro-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H- pirazol[3,4-d]pirimidina
[0094] 5,55 g de 2,4,6-tricloropirimidina-5-carbaldeído (26,21 mmol) foram dissolvidos em 60 ml de etanol e 4 g de cloreto de hidrogênio de (tetra-hidro-2H-piran-4-il)hidrazina (26,21 mmol) obtidos na Etapa 3 acima e 14 ml de N,N-diisopropiletilamina (78,63 mmol) foram adicionados a -78 °C e agitados durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano:acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 6,5 g do composto do título (23,80 mmol) em 91 % de rendimento. Rf = 0,20 (hexano:acetato de etila = 9 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,57 (s, 1 H), 4,96-5,03 (m, 1 H), 3,98- 4,02 (m, 2 H), 3,56-3,61 (m, 2 H), 2,10-2,19 (m, 2 H), 1,90-1,95 (m, 2H) Etapa 5: Preparação de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[0095] 6,5 g de 4,6-dicloro-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H- pirazol[3,4-d]pirimidina (23,80 mmol) preparados na Etapa 4 acima foram dissolvidos em 50 ml de THF, e 25 ml de hidróxido de sódio 2N (47,60 mmol) foram adicionados, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, a mistura foi acidificada com ácido clorídrico 6N, e o composto sólido precipitado foi filtrado para produzir 5,4 g do composto do título (21,20 mmol) em 89 % de rendimento. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 13,21 (br s, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 4,75- 4,81 (m, 1 H), 3,95-3,99 (m, 2 H), 3,51-3,56 (m, 2 H), 2,05-2,12 (m, 2 H), 1,81-1,86 (m, 2H) <Exemplo de Preparação 2> Preparação de benzo[d]oxazol-2- ilmetanotiol Etapa 1: Preparação de 2-(clorometil)benzo[d]oxazol
[0096] 500 mg de 2-aminofenol (4,58 mmol) foram dissolvidos em 15 ml de xileno, e 0,55 ml de cloreto de cloroacetila (6,87 mmol) foi adicionado a 0 °C, seguido por agitação. Depois de 30 minutos, 0,7 ml de trietilamina (5,04 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 7 : 1, v/v) para produzir 600 mg do composto do título (3,58 mmol) em 78 % de rendimento. Rf = 0,47 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,76-7,80 (m, 2 H), 7,41-7,48 (m, 2 H),
5,07 (s, 2H) Etapa 2: Preparação de S-(benzo[d]oxazol-2-ilmetil)etanotioato
[0097] 280 mg de 2-(clorometil)benzo[d]oxazol (1,67 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 8 ml de acetona, e 286 mg de tioacetato de potássio (2,50 mmol) foram adicionados, seguido por agitação durante 1 hora a 60 °C. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 290 mg do composto do título (1,39 mmol) em 84 % de rendimento. Rf = 0,28 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,68-7,73 (m, 1 H), 7,49-7,54 (m, 1 H), 7,30-7,37 (m, 2 H), 4,41 (s, 2 H), 2,45 (s, 3H) Etapa 3: Preparação de benzo[d]oxazol-2-ilmetanotiol
[0098] 290 mg de S-(benzo[d]oxazol-2-ilmetil)etanotioato (1,39 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em uma mistura de 4 ml de metanol e 1 ml de água, e 386 mg de carbonato de potássio (2,79 mmol) foram adicionados, seguido por agitação em temperatura ambiente durante 2 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 30 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida para produzir 170 mg do composto do título (1,03 mmol) em 74 % de rendimento. Rf = 0,40 (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,70-7,73 (m, 1 H), 7,49-7,55 (m, 1 H), 7,32-7,39 (m, 2 H), 4,17 (s, 1,3 H), 3,99 (d, J = 8,3 Hz, 0,7 H), 2,24 (t, J = 8,3 Hz, 0,4 H), 1,65 (s, 0,6H) <Exemplo 1> Preparação de 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-(tetra-
hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[0099] 50 mg de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro- 4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,20 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 1 acima foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 65 mg de benzo[d]oxazol-2-ilmetanotiol (0,39 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 e 83 mg de carbonato de potássio (0,60 mmol) foram adicionados. A mistura foi agitada a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 55 mg do composto do título (0,14 mmol) em 72 % de rendimento. Rf = 0,21 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,65 (br s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,68- 7,71 (m, 2 H), 7,33-7,39 (m, 2 H), 4,80 (s, 2 H), 4,50-4,57 (m, 1 H), 3,84-3,89 (m, 2 H), 3,35-3,40 (m, 2 H), 1,89-1,97 (m, 2 H), 1,51-1,56 (m, 2H) <Exemplo de Preparação 3> Preparação de 6-cloro-1-fenil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
Etapa 1: Preparação de 4,6-dicloro-1-fenil-1H-pirazol[3,4-d]pirimidina
[00100] 2 g de 2,4,6-tricloropirimidina-5-carbaldeído (9,44 mmol) foram dissolvidos em 30 ml de etanol e 0,9 ml de cloridrato de fenilhidrazina (9,44 mmol) e 4,8 ml de N,N-diisopropiletilamina (28,32 mmol) foram adicionados a -78 °C, seguido por agitação durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 300 ml de acetato de etila, lavado com 200 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 20 : 1, v/v) para produzir 1,7 g do composto do título (6,41 mmol) em 68 % de rendimento. Rf = 0,50 (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (300 MHz, CD3OD) δ 8,35 (s, 1 H), 8,17 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 7,59 (dd, J = 8,5, 7,6 Hz, 2 H), 7,44 (dd, J = 7,6, 7,6 Hz, 1H) Etapa 2: Preparação de 6-cloro-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00101] 1,9 g de 4,6-dicloro-1-fenil-1H-pirazol[3,4-d]pirimidina (8,98 mmol) preparados na Etapa 1 foram dissolvidos em 20 ml de THF e 10 ml de hidróxido de sódio 2N (17,96 mmol) foram adicionados, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, a mistura foi acidificada com ácido clorídrico 6N, e o composto sólido precipitado foi filtrado para produzir 2,2 g do composto do título (8,98 mmol) em 99 % de rendimento.
Rf = 0,23 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 13,47 (br s, 1 H), 8,35 (s, 1 H), 7,94 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 7,58 (dd, J = 8,0, 7,4 Hz, 2 H), 7,43 (dd, J = 7,4, 7,4 Hz, 1H) <Exemplo 2> Preparação de 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-fenil- 1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00102] 60 mg de 6-cloro-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,24 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 foram dissolvidos em 5 ml de DMF, e 150 mg de benzo[d]oxazol-2- ilmetanotiol (0,91 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 e 186 mg de carbonato de potássio (1,35 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 70 mg do composto do título (0,19 mmol) em 78 % de rendimento. Rf = 0,27 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,96 (br s, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 7,93 (d, J = 7,8 Hz, 2 H), 7,69 (dd, J = 8,8, 8,3 Hz, 2 H), 7,45 (dd, J = 7,8, 7,5 Hz, 2 H), 7,32-7,38 (m, 3 H), 5,75 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 4> Preparação de (5-metilbenzo[d]oxazol-2- il)metanotiol
Etapa 1: Preparação de 2-(clorometil)-5-metilbenzo[d]oxazol
[00103] 500 mg de 2-amino-4-metilfenol (4,06 mmol) foram dissolvidos em 15 ml de xileno, e 0,48 ml de cloreto de cloroacetila (6,09 mmol) foi adicionado a 0 °C, seguido por agitação. Depois de 30 minutos, 0,62 ml de trietilamina (4,47 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 240 mg do composto do título (1,32 mmol) em 33 % de rendimento. Rf = 0,54 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,54 (s, 1 H), 7,45 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,22 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 4,76 (s, 2 H), 2,49 (s, 3H) Etapa 2: Preparação de S-((-5-metilbenzo[d]oxazol-2- il)metil)etanotioato
[00104] 220 mg de 2-(clorometil)-5-metilbenzo[d]oxazol (1,21 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 6 ml de acetona, e 208 mg de tioacetato de potássio (1,82 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 :
1, v/v) para produzir 250 mg do composto do título (1,13 mmol) em 93 % de rendimento. Rf = 0,40 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,49 (s, 1 H), 7,39 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,16 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 4,40 (s, 2 H), 2,47 (s, 3 H), 2,45 (s, 3H) Etapa 3: Preparação de (5-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol
[00105] 230 mg de S-((-5-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)etanotioato (1,04 mmol) obtidos na Etapa 2 foram dissolvidos em uma mistura de 4 ml de metanol e 1 ml de água, e 287 mg de carbonato de potássio (2,08 mmol) foram adicionados, seguido por agitação em temperatura ambiente durante 2 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 170 mg do composto do título (0,95 mmol) em 91 % de rendimento. Rf = 0,17 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,49 (s, 1 H), 7,41 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 7,17 (d, J = 8,3 Hz, 1 H), 3,96 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 2,48 (s, 3 H), 2,23 (t, J = 8,4 Hz, 1H) <Exemplo 3> Preparação de 6-(((5-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00106] 50 mg de 6-cloro-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,20 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 foram dissolvidos em 5 ml de DMF, e 100 mg de (5- metilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,55 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 4 acima e 83 mg de carbonato de potássio (0,60 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 60 mg do composto do título (0,15 mmol) em 77 % de rendimento. Rf = 0,27 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,91 (br s, 1 H), 7,94 (d, J = 7,8 Hz, 2 H), 7,56 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,47 (dd, J = 7,8, 7,4 Hz, 2 H), 7,36 (dd, J = 7,4, 7,4 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 4,79 (s, 2 H), 2,38 (s, 3H) <Exemplo de Preparação 5> Preparação de (5-fluorobenzo[d]oxazol-2- il)metanotiol Etapa 1: Preparação de 2-(clorometil)-5-metilbenzo[d]oxazol
[00107] 500 mg de 2-amino-4-fluorofenol (3,93 mmol) foram dissolvidos em 15 ml de xileno, e 0,50 ml de cloreto de cloroacetila (5,90 mmol) foi adicionado a 0 °C, seguido por agitação. Depois de 30 minutos, 0,60 ml de trietilamina (4,32 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 200 mg do composto do título (1,08 mmol) em 27 % de rendimento. Rf = 0,56 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,52 (dd, J = 8,9, 4,8 Hz, 1 H), 7,45 (dd, J = 8,1, 2,5 Hz, 1 H), 7,16 (ddd, J = 9,1, 8,9, 2,5 Hz, 1 H), 4,76 (s, 2H) Etapa 2: Preparação de S-((-5-fluorobenzo[d]oxazol-2- il)metil)etanotioato
[00108] 180 mg de 2-(clorometil)-5-fluorobenzo[d]oxazol (0,97 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 6 ml de acetona, e 166 mg de tioacetato de potássio (1,45 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 210 mg do composto do título (0,93 mmol) em 96 % de rendimento. Rf = 0,44 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,45 (dd, J = 8,8, 4,2 Hz, 1 H), 7,39 (dd, J = 8,3, 2,7 Hz, 1 H), 7,09 (ddd, J = 9,0, 8,8, 2,7 Hz, 1 H), 4,40 (s, 2 H), 2,46 (s, 3H) Etapa 3: Preparação de (5-fluorobenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol
[00109] 190 mg de S-((-5-fluorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)etanotioato (0,84 mmol) obtidos na Etapa 2 foram dissolvidos em uma mistura de 4 ml de metanol e 1 ml de água, e 233 mg de carbonato de potássio (1,69 mmol) foram adicionados, seguido por agitação em temperatura ambiente durante 2 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 115 mg do composto do título (0,63 mmol) em 75 % de rendimento. Rf = 0,22 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,47 (dd, J = 8,8, 4,1 Hz, 1 H), 7,40 (dd, J = 9,2, 2,5 Hz, 1 H), 7,10 (ddd, J = 9,2, 8,8, 2,5 Hz, 1 H), 3,97 (d, J = 8,2 Hz, 2 H), 2,25 (t, J = 8,2 Hz, 1H) <Exemplo 4> Preparação de 6-(((5-fluorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00110] 50 mg de 6-cloro-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,20 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 foram dissolvidos em 5 ml de DMF, e 90 mg de (5- fluorobenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,49 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 5 e 83 mg de carbonato de potássio (0,60 mmol) foram adicionados, seguido por agitação 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 54 mg do composto do título (0,14 mmol) em 69 % de rendimento. Rf = 0,27 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,91 (br s, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 7,90
(d, J = 8,3 Hz, 2 H), 7,72 (dd, J = 8,3, 4,7 Hz, 1 H), 7,60 (dd, J = 9,2, 2,6 Hz, 1 H), 7,46 (dd, J = 8,3, 7,4 Hz, 2 H), 7,36 (dd, J = 7,4, 7,4 Hz, 1 H), 7,22 (ddd, J = 9,1, 8,3, 2,6 Hz, 1 H), 4,82 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 6> Preparação de (6-metilbenzo[d]oxazol-2- il)metanotiol Etapa 1: Preparação de 2-(clorometil)-6-metilbenzo[d]oxazol
[00111] 500 mg de 6-amino-m-cresol (4,00 mmol) foram dissolvidos em 15 ml de xileno, e 0,48 ml de cloreto de cloroacetila (6,09 mmol) foi adicionado a 0 °C, seguido por agitação. Depois de 30 minutos, 0,62 ml de trietilamina (4,47 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 20 : 1, v/v) para produzir 640 mg do composto do título (3,52 mmol) em 88 % de rendimento. Rf = 0,64 (hexano : acetato de etila = 9 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,52 (dd, J = 8,9, 4,8 Hz, 1 H), 7,45 (dd, J = 8,1, 2,5 Hz, 1 H), 7,16 (ddd, J = 9,1, 8,9, 2,5 Hz, 1 H), 4,76 (s, 2H) Etapa 2: Preparação de S-((-6-metilbenzo[d]oxazol-2- il)metil)etanotioato
[00112] 600 mg de 2-(clorometil)-6-metilbenzo[d]oxazol (3,30 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 10 ml de acetona, e 566 mg de tioacetato de potássio (4,96 mmol) foram adicionados, seguido por agitação 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 690 mg do composto do título (3,12 mmol) em 94 % de rendimento. Rf = 0,18 (hexano : acetato de etila = 9 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,57 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,15 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 4,39 (s, 2 H), 2,48 (s, 3 H), 2,44 (s, 3H) Etapa 3: Preparação de (6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol
[00113] 500 mg de S-((-6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)etanotioato (2,26 mmol) obtidos na Etapa 2 foram dissolvidos em uma mistura de 6 ml de metanol e 1 ml de água, e 624 mg de carbonato de potássio (4,52 mmol) foram adicionados, seguido por agitação em temperatura ambiente durante 2 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 50 ml de acetato de etila, lavado com 50 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 370 mg do composto do título (2,06 mmol) em 91 % de rendimento. Rf = 0,36 (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,58 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,33 (s, 1 H), 7,17 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 3,96 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 2,50 (s, 3 H), 2,22 (t, J = 8,3 Hz, 1H) <Exemplo 5> Preparação de 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00114] 50 mg de 6-cloro-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,20 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 foram dissolvidos em 5 ml de DMF e 108 mg de (6- metilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,60 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 6 e 83 mg de carbonato de potássio (0,60 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 67 mg do composto do título (0,17 mmol) em 86 % de rendimento. Rf = 0,27 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,94 (br s, 1 H), 8,23 (s, 1 H), 7,94 (d, J = 7,8 Hz, 1 H), 7,57 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,45-7,49 (m, 3 H), 7,37 (dd, J = 7,5, 7,5 Hz, 1 H), 7,16 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 4,79 (s, 2 H), 2,41 (s, 3H) <Exemplo de Preparação 7> Preparação de (5-clorobenzo[d]oxazol-2- il)metanotiol Etapa 1: Preparação de 2-cloro-N-(5-cloro-2-hidroxifenil)acetamida
[00115] 1 g de 2-amino-4-clorofenol (6,96 mmol) foi dissolvido em 20 ml de MC, e 0,83 ml de cloreto de cloroacetila (10,44 mmol) foi adicionado a 0 °C, seguido por agitação. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) para produzir 1,3 g do composto do título (5,91 mmol) em 85 % de rendimento. Rf = 0,20 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 10,81 (br s, 1 H), 6,94-6,98 (m, 2 H), 6,90 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 4,59 (s, 2H) Etapa 2: Preparação de 5-cloro-2-(clorometil)benzo[d]oxazol
[00116] 200 mg de 2-cloro-N-(5-cloro-2-hidroxifenil)acetamida (0,91 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 5 ml de fenol, e 78 mg de ácido p-toluenossulfonílico (0,45 mmol) ) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 180 mg do composto do título (0,89 mmol) em 98 % de rendimento. Rf = 0,48 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,93 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,85 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,53 (dd, J = 8,6, 2,0 Hz, 1 H), 5,09 (s, 2H) Etapa 3: Preparação de S-((5-clorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)etanotioato
[00117] 180 mg de 5-cloro-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,89 mmol) obtidos na Etapa 2 foram dissolvidos em 6 ml de acetona, e 152 mg de tioacetato de potássio (1,33 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 :
1, v/v) para produzir 200 mg do composto do título (0,83 mmol) em 93 % de rendimento. Rf = 0,38 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,84 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 7,76 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 7,45 (dd, J = 8,5, 1,9 Hz, 1 H), 4,47 (s, 2 H), 2,43 (s, 3H) Etapa 4: Preparação de (5-clorobenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol
[00118] 200 mg de S-((5-clorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)etanotioato (0,83 mmol) obtidos na Etapa 3 foram dissolvidos em uma mistura de 5 ml de metanol e 1 ml de água, e 229 mg de carbonato de potássio (1,66 mmol) foram adicionados, seguido por agitação em temperatura ambiente durante 2 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 30 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 160 mg do composto do título (0,80 mmol) em 96 % de rendimento. Rf = 0,28 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,70 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,46 (d, J = 8,4 Hz, 1 H), 7,35 (dd, J = 8,4, 2,0 Hz, 1 H), 3,97 (d, J = 8,2 Hz, 2 H), 2,25 (t, J = 8,2 Hz, 1H) <Exemplo 6> Preparação de 6-(((5-clorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00119] 60 mg de 6-cloro-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-
d]pirimidin-4-ona (0,24 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 foram dissolvidos em 5 ml de DMF e 150 mg de (5- clorobenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,75 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 7 e 100 mg de carbonato de potássio (0,72 mmol) foram adicionados, seguido por agitação 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 95 mg do composto do título (0,23 mmol) em 96 % de rendimento. Rf = 0,17 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,95 (br s, 1 H), 8,23 (s, 1 H), 7,91 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 7,83 (d, J = 2,1 Hz, 1 H), 7,75 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,47 (dd, J = 8,3, 7,5 Hz, 2 H), 7,42 (dd, J = 8,6, 2,1 Hz, 1 H), 7,36 (dd, J = 7,5, 7,5 Hz, 1 H), 4,84 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 8> Preparação de (5-bromobenzo[d]oxazol- 2-il)metanotiol Etapa 1: Preparação de 2-cloro-N-(5-bromo-2-hidroxifenil)acetamida
[00120] 500 mg de 2-amino-4-bromofenol (2,66 mmol) foram dissolvidos em 10 ml de MC, e 0,32 ml de cloreto de cloroacetila (3,99 mmol) foi adicionado a 0 °C, seguido por agitação. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) para produzir 600 mg do composto do título (2,27 mmol) em 85 % de rendimento. Rf = 0,23 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,37 (br s, 1 H), 7,12 (dd, J = 8,5, 2,3 Hz, 1 H), 6,98 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 6,89 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 4,65 (s, 2H) Etapa 2: Preparação de 5-bromo-2-(clorometil)benzo[d]oxazol
[00121] 600 mg de 2-cloro-N-(5-broro-2-hidroxifenil)acetamida (2,27 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 8 ml de fenol, e 195 mg de ácido p-toluenossulfonílico (1,13 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 340 mg do composto do título (1,38 mmol) em 61 % de rendimento. Rf = 0,50 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,06 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 7,79 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,65 (dd, J = 8,6, 2,0 Hz, 1 H), 5,09 (s, 2H) Etapa 3: Preparação de S-((5-brorobenzo[d]oxazol-2- il)metil)etanotioato
[00122] 320 mg de 5-broro-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (1,30 mmol) obtidos na Etapa 2 foram dissolvidos em 6 ml de acetona, e 222 mg de tioacetato de potássio (1,95 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 100 ml de acetato de etila, lavado com 100 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 :
1, v/v) para produzir 360 mg do composto do título (1,26 mmol) em 97 % de rendimento. Rf = 0,39 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,97 (d, J = 1,7 Hz, 1 H), 7,72 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 7,57 (dd, J = 8,5, 1,7 Hz, 1 H), 4,48 (s, 2 H), 2,43 (s, 3H) Etapa 4: Preparação de (5-brorobenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol
[00123] 350 mg de S-((5-brorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)etanotioato (1,22 mmol) obtidos na Etapa 3 foram dissolvidos em uma mistura de 5 ml de metanol e 1 ml de água, e 338 mg de carbonato de potássio (2,45 mmol) foram adicionados, seguido por agitação em temperatura ambiente durante 2 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 30 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 290 mg do composto do título (1,19 mmol) em 97 % de rendimento. Rf = 0,30 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,85 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 7,49 (dd, J = 8,5, 1,9 Hz, 1 H), 7,42 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 3,97 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 2,25 (t, J = 8,3 Hz, 1H) <Exemplo 7> Preparação de 6-(((5-bromobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00124] 60 mg de 6-cloro-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,24 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 foram dissolvidos em 5 ml de DMF, e 180 mg de (5-
bromobenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,75 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 8 e 100 mg de carbonato de potássio (0,72 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas.
Depois da conclusão da reação, foi realizada extração com 20 ml de acetato de etila, lavada com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secada em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4), e a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida.
O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 88 mg do composto do título (0,19 mmol) em 81 % de rendimento.
Rf = 0,28 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,95 (br s, 1 H), 8,23 (s, 1 H), 7,96 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 7,91 (d, J = 8,5 Hz, 2 H), 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 7,54 (dd, J = 8,5, 1,9 Hz, 1 H), 7,47 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 2 H), 7,36 (dd, J = 7,2, 7,2 Hz, 1 H), 4,84 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 9> Preparação de 6-cloro-1-(4,4- difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
Etapa 1: Preparação de terc-butil 2-(4,4-difluorociclo- hexilideno)hidrazina-1-carboxilato
[00125] 300 mg de 4,4-difluorociclo-hexanona (2,24 mmol) foram dissolvidos em 6 ml de hexano, 296 mg de terc-butil carbazita (2,24 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi concentrado sob pressão reduzida para produzir 550 mg do composto do título (2,24 mmol) em 100 % de rendimento. Rf = 0,30 (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) 1 H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,72 (br s, 1 H), 2,45 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,37 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 1,99-2,12 (m, 4 H), 1,43 (s, 9H) Etapa 2: Preparação de terc-butil 2-(4,4-difluorociclo-hexil)hidrazina-1- carboxilato
[00126] 550 mg de terc-butil 2-(4,4-difluorociclo- hexilideno)hidrazina-1-carboxilato (2,21 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 5 ml de THF, e 950 mg de triacetoxi boro-hidreto de sódio (4,48 mmol) foram adicionados, seguido por agitação em temperatura ambiente durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 30 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) para produzir 465 mg do composto do título (1,86 mmol) em 84 % de rendimento. Rf = 0,45 (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) 1 H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,20 (br s, 1 H), 4,38 (br s, 1 H), 2,86- 2,95 (m, 1 H), 1,93-2,11 (m, 2 H), 1,59-1,83 (m, 4 H), 1,41-1,49 (m, 2 H), 1,38 (s, 9H) Etapa 3: Preparação de cloreto de hidrogênio de (4,4-difluorociclo- hexil)hidrazina
[00127] 465 mg de terc-butil 2-(4,4-difluorociclo-hexil)hidrazina-1- carboxilato (1,86 mmol) obtidos na Etapa 2 foram dissolvidos em 5 ml de metanol, e ácido clorídrico foi adicionado a isto, seguido por agitação a 50 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 335 mg do composto do título (1,79 mmol) em 96 % de rendimento. Rf = 0,00 (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) 1 H RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 3,05-3,12 (m, 1 H), 1,96-2,09 (m, 4 H), 1,79-1,91 (m, 2 H), 1,52-1,59 (m, 2H) Etapa 4: Preparação de 4,6-dicloro-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1H- pirazol[3,4-d]pirimidina
[00128] 340 mg de 2,4,6-tricloropirimidina-5-carbaldeído (1,61 mmol) foram dissolvidos em 5 ml de etanol e 300 mg de cloreto de hidrogênio de (4,4-difluorociclo-hexil)hidrazina (1,61 mmol) obtidos na Etapa 3 acima e 0,86 ml de N,N-diisopropiletilamina (4,82 mmol) foi adicionado a -78 °C, seguido por agitação durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 360 mg do composto do título (1,17 mmol) em 73 % de rendimento. Rf = 0,35 (hexano : acetato de etila = 9 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,57 (s, 1 H), 4,97-5,04 (m, 1 H), 2,13- 2,23 (m, 6 H), 2,03-2,07 (m, 2H) Etapa 5: Preparação de 6-cloro-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro- 4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00129] 340 mg de 4,6-dicloro-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1H- pirazol[3,4-d]pirimidina (1,11 mmol) obtidos na Etapa 4 foram dissolvidos em 5 ml de THF, e 1,2 ml de hidróxido de sódio 2N (2,21 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, a mistura foi acidificada com ácido clorídrico 6N, e o composto sólido precipitado foi filtrado para produzir 320 mg do composto do título (1,11 mmol) em 99 % de rendimento. Rf = 0,38 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,11 (s, 1 H), 4,77-4,81 (m, 1 H), 2,08- 2,17 (m, 6 H), 1,94-2,00 (m, 2H) <Exemplo 8> Preparação de 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-(4,4- difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00130] 50 mg de 6-cloro-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H- pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,17 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 9 foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 43 mg de benzo[d]oxazol-2-ilmetanotiol (0,26 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 e 70 mg de carbonato de potássio (0,51 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 57 mg do composto do título (0,13 mmol) em 80 % de rendimento. Rf = 0,20 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,67 (br s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,68- 7,71 (m, 2 H), 7,34-7,40 (m, 2 H), 4,83 (s, 2 H), 3,54-3,60 (m, 1 H), 1,90-2,08 (m, 6 H), 1,74-1,78 (m, 2H) <Exemplo de Preparação 10> Preparação de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H-
tiopiran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona Etapa 1: Preparação de terc-butil 2-(tetra-hidro-4H-tiopiran-4- ilideno)hidrazina-1-carboxilato
[00131] 3,3 g de tetra-hidro-4H-tiopiran-4-ona (28,40 mmol) foram dissolvidos em 60 ml de hexano, e 4,13 g de terc-butil carbazita (31,24 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 6,5 g do composto do título (28,40 mmol) em 100 % de rendimento. Rf = 0,15 (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 9,67 (br s, 1 H), 2,73-2,76 (m, 2 H), 2,65-2,68 (m, 2 H), 2,60-2,63 (m, 2 H), 2,47-2,50 (m, 2 H), 1,43 (s, 9H) Etapa 2: Preparação de terc-butil 2-(tetra-hidro-2H-tiopiran-4- il)hidrazina-1-carboxilato
[00132] 6,4 g de terc-butil 2-(tetra-hidro-4H-tiopiran-4- ilideno)hidrazina-1-carboxilato (28,40 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 80 ml de THF, e 12 g de triacetoxi boro-hidreto de sódio (56,80 mmol) foram adicionados, seguido por agitação em temperatura ambiente durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 300 ml de acetato de etila, lavado com 300 ml de uma solução salina inorgânica, secada em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 2 : 1, v/v) para produzir 6,5 g do composto do título (27,97 mmol) em 98 % de rendimento. Rf = 0,34 (hexano : acetato de etila = 2 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,20 (br s, 1 H), 4,28 (br s, 1 H), 2,65- 2,73 (m, 3 H), 2,05-2,49 (m, 2 H), 1,93-1,98 (m, 2 H), 1,34-1,43 (m, 1H) Etapa 3: Preparação de cloreto de hidrogênio de (tetra-hidro-2H- tiopiran-4-il)hidrazina
[00133] 6,5 g de terc-butil 2-(tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il)hidrazina-1- carboxilato (27,97 mmol) obtidos na Etapa 2 foram dissolvidos em 60 ml de metanol, e ácido clorídrico foi adicionado, seguido por agitação a 50 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para produzir 4,7 g do composto do título (27,97 mmol) em 94 % de rendimento. 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 2,91-2,96 (m, 1 H), 2,66-2,72 (m, 2 H), 2,57-2,62 (m, 2 H), 2,25-2,29 (m, 2 H), 1,53-1,60 (m, 2H) Etapa 4: Preparação de 4,6-dicloro-1-(tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il)-1H- pirazol[3,4-d]pirimidina
[00134] 5,9 g de 2,4,6-tricloropirimidina-5-carbaldeído (27,97 mmol) foram dissolvidos em 60 ml de etanol, e 4,7 g de cloreto de hidrogênio de (tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il)hidrazina (27,97 mmol) obtidos na Etapa 3 e 15 ml de N,N-diisopropiletilamina (83,91 mmol) foram adicionados a -78 °C, seguido por agitação durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 200 ml de acetato de etila, lavado com 200 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 7 g do composto do título (24,20 mmol) em 86 % de rendimento. Rf = 0,41 (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v)
H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,57 (s, 1 H), 4,78-4,85 (m, 1 H), 2,93- 2,98 (m, 2 H), 2,73-2,78 (m, 2 H), 2,15-2,25 (m, 4H) Etapa 5: Preparação de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il)-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00135] 7 g de 4,6-dicloro-1-(tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il)-1H- pirazol[3,4-d]pirimidina (24,20 mmol) obtidos na Etapa 4 acima foram dissolvidos em 50 ml de THF, e 25 ml de hidróxido de sódio 2N (47,60 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, a mistura foi acidificada com ácido clorídrico 6N, e o composto sólido precipitado foi filtrado para produzir 5,7 g do composto do título (21,05 mmol) em 87 % de rendimento. Rf = 0,31 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 13,20 (br s, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 4,56- 4,63 (m, 1 H), 2,88-2,94 (m, 2 H), 2,72-2,76 (m, 2 H), 2,10-2,20 (m, 4H) <Exemplo 9> Preparação de 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-(tetra- hidro-2H-tiopiran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00136] 50 mg de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il)-1,5-di-hidro- 4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,18 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 10 acima foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 46 mg de benzo[d]oxazol-2-ilmetanotiol (0,28 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 e 75 mg de carbonato de potássio (0,54 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 62 mg (0,15 mmol) do composto do título em 86 % de rendimento. Rf = 0,36 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,65 (br s, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,69- 7,72 (m, 2 H), 7,34-7,40 (m, 2 H), 4,81 (s, 2 H), 4,33-4,39 (m, 1 H), 2,68-2,74 (m, 2 H), 2,59-2,64 (m, 2 H), 1,97-2,04 (m, 2 H), 1,88-1,93 (m, 2H) <Exemplo de Preparação 11> Preparação de 6-cloro-1-ciclopropil-1,5- di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona Etapa 1: Preparação de 4,6-dicloro-1-ciclopropil-1H-pirazol[3,4- d]pirimidina
[00137] 1,95 g de 2,4,6-tricloropirimidina-5-carbaldeído (9,21 mmol) foram dissolvidos em 30 ml de etanol, e 1 g de cloreto de hidrogênio de ciclopropil hidrazina (9,21 mmol) e 4,8 ml de N,N- diisopropiletilamina (27,63 mmol) foram adicionados a -78 °C, seguido por agitação durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 200 ml de acetato de etila, lavado com 200 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 :
1, v/v) para produzir 950 mg do composto do título (4,15 mmol) em 45 % de rendimento. Rf = 0,45 (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,10 (s, 1 H), 3,88-3,92 (m, 1 H), 1,35- 1,38 (m, 2 H), 1,21-1,25 (m, 2H) Etapa 2: Preparação de 6-cloro-1-ciclopropil-1,5-di-hidro-4H- pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00138] 930 mg de 4,6-dicloro-1-ciclopropil-1H-pirazol[3,4- d]pirimidina (4,06 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 12 ml de THF, e 4 ml de hidróxido de sódio 2N (8,12 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, a mistura foi acidificada com ácido clorídrico 6N, e o composto sólido precipitado foi filtrado para produzir 680 mg do composto do título (3,23 mmol) em 80 % de rendimento. Rf = 0,28 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 13,20 (br s, 1 H), 8,02 (s, 1 H), 3,78- 3,82 (m, 1 H), 1,05-1,15 (m, 4H) <Exemplo 10> Preparação de 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1- ciclopropil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00139] 50 mg de 6-cloro-1-ciclopropil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,24 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 11 foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 59 mg de benzo[d]oxazol-2- ilmetanotiol (0,36 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 e 100 mg de carbonato de potássio (0,72 mmol) foram adicionados a isto, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 48 mg do composto do título (0,14 mmol) em 59 % de rendimento. Rf = 0,28 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,64 (br s, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,69- 7,72 (m, 2 H), 7,34-7,40 (m, 2 H), 4,83 (s, 2 H), 3,65-3,69 (m, 1 H), 0,95-0,99 (m, 2 H), 0,90-0,94 (m, 2H) <Exemplo de Preparação 12> Preparação de 6-cloro-1-isopropil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona Etapa 1: Preparação de 4,6-dicloro-1-isopropil-1H-pirazol[3,4-d]pirimidina
[00140] 2,22 g de 2,4,6-tricloropirimidina-5-carbaldeído (10,49 mmol) foram dissolvidos em 30 ml de etanol, e 1,16 g de cloreto de hidrogênio de isopropil hidrazina (10,49 mmol) e 5,5 ml de N,N- diisopropiletilamina (31,47 mmol) foram adicionados a -78 °C, seguido por agitação durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 200 ml de acetato de etila, lavado com 200 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 :
1, v/v) para produzir 2,1 g do composto do título (9,08 mmol) em 87 % de rendimento. Rf = 0,48 (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,16 (s, 1 H), 5,16-5,22 (m, 1 H), 1,60 (d, J = 6,7 Hz, 6H) Etapa 2: Preparação de 6-cloro-1-isopropil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00141] 2 g de 4,6-dicloro-1-isopropil-1H-pirazol[3,4-d]pirimidina (8,65 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 12 ml de THF, e 8,6 ml de hidróxido de sódio 2N (17,13 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, a mistura foi acidificada com ácido clorídrico 6N, e o composto sólido precipitado foi filtrado para produzir 1,7 g do composto do título (7,99 mmol) em 92 % de rendimento. Rf = 0,29 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 13,16 (br s, 1 H), 8,08 (s, 1 H), 4,85- 4,91 (m, 1 H), 1,44 (d, J = 7,0 Hz, 6H) <Exemplo 11> Preparação de 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1- isopropil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00142] 50 mg de 6-cloro-1-isopropil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,23 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 12 foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 58 mg de benzo[d]oxazol-2- ilmetanotiol (0,35 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 e 100 mg de carbonato de potássio (0,72 mmol) foram adicionados a isto, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 44 mg do composto do título (0,13 mmol) em 56 % de rendimento. Rf = 0,44 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,60 (br s, 1 H), 7,91 (s, 1 H), 7,68- 7,72 (m, 2 H), 7,33-7,39 (m, 2 H), 4,79 (s, 2 H), 4,70-4,75 (m, 1 H), 1,22 (d, J = 6,5 Hz, 6H) <Exemplo de Preparação 13> Preparação de 6-cloro-1-ciclo-hexil-1,5- di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona Etapa 1: Preparação de 4,6-dicloro-1-ciclo-hexil-1H-pirazol[3,4- d]pirimidina
[00143] 4,39 g de 2,4,6-tricloropirimidina-5-carbaldeído (20,71 mmol) foram dissolvidos em 50 ml de etanol, e 3,12 g de cloreto de hidrogênio de ciclo-hexil hidrazina (20,71 mmol) e 11 ml de N,N- diisopropiletilamina (62,13 mmol) foram adicionados a -78 °C, seguido por agitação durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 200 ml de acetato de etila, lavado com 200 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 5,2 g do composto do título (19,18 mmol) em 92 % de rendimento. Rf = 0,39 (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,15 (s, 1 H), 4,75-4,82 (m, 1 H), 2,01- 2,08 (m, 2 H), 1,93-1,99 (m, 2 H), 1,77-1,81 (m, 1 H), 1,48-1,57 (m, 2 H), 1,30-1,39 (m, 1 H), 1,01-1,04 (m, 2H) Etapa 2: Preparação de 6-cloro-1-ciclo-hexil-1,5-di-hidro-4H- pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00144] 5 g de 4,6-dicloro-1-ciclo-hexil-1H-pirazol[3,4-d]pirimidina (18,44 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 12 ml de THF, e 19 ml de hidróxido de sódio 2N (36,88 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, a mistura foi acidificada com ácido clorídrico 6N, e o composto sólido precipitado foi filtrado para produzir 4,6 g do composto do título (18,20 mmol) em 98 % de rendimento. Rf = 0,35 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 13,18 (br s, 1H0, 8,07 (s, 1 H), 4,46- 4,52 (m, 1 H), 1,80-1,87 (m, 4 H), 1,66-1,69 (m, 1 H), 1,40-1,48 (m, 2 H), 1,18-1,25 (m, 1H) <Exemplo 12> Preparação de 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-ciclo- hexil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00145] 50 mg de 6-cloro-1-ciclo-hexil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,20 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 13 foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 49 mg de benzo[d]oxazol-2-
ilmetanotiol (0,30 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 2 e 83 mg de carbonato de potássio (0,60 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 55 mg do composto do título (0,14 mmol) em 72 % de rendimento. Rf = 0,27 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,61 (br s, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,67- 7,69 (m, 2 H), 7,33-7,39 (m, 2 H), 4,79 (s, 2 H), 4,25-4,31 (m, 1 H), 1,56-1,74 (m, 7 H), 1,26-1,34 (m, 2 H), 1,16-1,21 (m, 1H) <Exemplo 13> Preparação de 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00146] 50 mg de 6-cloro-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H- pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,17 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 9 acima foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 61 mg de (6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,34 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 6 e 70 mg de carbonato de potássio (0,51 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 60 mg do composto do título (0,14 mmol) em 82 % de rendimento. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,67 (br s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,55 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,18 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 4,80 (s, 2 H), 4,52- 4,58 (m, 1 H), 2,42 (s, 3 H), 1,89-2,10 (m, 6 H), 1,74-1,78 (m, 2H) <Exemplo 14> Preparação de 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00147] 50 mg de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro- 4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,20 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 1 acima foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 72 mg de (6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,40 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 6 acima e 83 mg de carbonato de potássio (0,60 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 51 mg do composto do título (0,13 mmol) em 64 % de rendimento. Rf = 0,40 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,65 (br s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,54 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,17 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 4,77 (s, 2 H), 4,51-4,57 (m, 1 H), 3,86-3,89 (m, 2 H), 3,37-3,41 (m, 2 H), 2,42 (s, 3 H), 1,90-1,98 (m, 2 H), 1,52-1,55 (m, 2H)
<Exemplo 15> Preparação de 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1- (tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00148] 50 mg de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il)-1,5-di-hidro- 4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,18 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 10 acima foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 64 mg de (6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,36 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 6 acima e 75 mg de carbonato de potássio (0,54 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 59 mg do composto do título (0,14 mmol) em 78 % de rendimento. Rf = 0,33 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,64 (br s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,56 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,18 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 4,78 (s, 2 H), 4,33-4,39 (m, 1 H), 2,70-2,75 (m, 2 H), 2,62-2,66 (m, 2 H), 2,42 (s, 3 H), 1,97-2,05 (m, 2 H), 1,89-1,93 (m, 2H) <Exemplo 16> Preparação de 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-ciclo-hexil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00149] 50 mg de 6-cloro-1-ciclo-hexil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,20 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 13 foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 72 mg de (6- metilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,40 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 6 e 83 mg de carbonato de potássio (0,60 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 55 mg do composto do título (0,14 mmol) em 70 % de rendimento. Rf = 0,45 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,62 (br s, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,54 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,17 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 4,76 (s, 2 H), 4,25-4,32 (m, 1 H), 2,41 (s, 3 H), 1,56-1,75 (m, 7 H), 1,27-1,36 (m, 2 H), 1,15-1,23 (m, 1H) <Exemplo 17> Preparação de 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-ciclopropil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00150] 50 mg de 6-cloro-1-ciclopropil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,24 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 11 foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 86 mg de (6- metilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,48 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 6 e 100 mg de carbonato de potássio (0,72 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 50 mg do composto do título (0,14 mmol) em 59 % de rendimento. Rf = 0,29 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,64 (br s, 1 H), 7,89 (s, 1 H), 7,57 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,17 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 4,81 (s, 2 H), 3,66-3,71 (m, 1 H), 2,43 (s, 3 H), 0,91-1,01 (m, 4H) <Exemplo 18> Preparação de 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-isopropil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00151] 50 mg de 6-cloro-1-isopropil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,24 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 12 foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 82 mg de (6- metilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol (0,46 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 6 acima e 95 mg de carbonato de potássio (0,69 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 56 mg do composto do título (0,16 mmol) em 68 % de rendimento. Rf = 0,21 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,60 (br s, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 7,55 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,17 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 4,76 (s, 2
H), 4,71-4,75 (m, 1 H), 2,42 (s, 3 H), 1,23 (d, J = 6,5 Hz, 6H) <Exemplo de Preparação 14> Preparação de 1-(benzo[d]oxazol-2- il)etan-1-tiol
[00152] 1 g de 2-aminofenol (9,16 mmol) foram dissolvidos em 20 ml de tolueno, e 1 ml de ácido tiolático (9,16 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 5 horas. Em seguida, 1,6 g de ácido p-toluenossulfônico (9,16 mmol) foram adicionados e agitados sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 50 ml de acetato de etila, lavado com 50 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 2 : 1, v/v) para produzir 240 mg do composto do título (1,33 mmol) em 15 % de rendimento. Rf = 0,50 (hexano : acetato de etila = 2 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,71-7,73 (m, 1 H), 7,53-7,55 (m, 1 H), 7,35-7,37 (m, 2 H), 4,34-4,39 (m, 1 H), 2,42 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 1,90 (d, J = 6,9 Hz, 2H) <Exemplo 19> Preparação de 6-((1-(benzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)-1-fenil- 1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00153] 50 mg de 6-cloro-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,20 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 3 foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 55 mg de 1-(benzo[d]oxazol-2-
il)etan-1-tiol (0,30 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 14 e 83 mg de carbonato de potássio (0,61 mmol) foram adicionados, seguido por agitação 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 49 mg do composto do título (0,13 mmol) em 63 % de rendimento. Rf = 0,37 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,90 (br s, 1 H), 8,25 (s, 1 H), 7,96- 7,99 (m, 2 H), 7,74 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,70 (d, J = 7,1 Hz, 1 H), 7,51- 7,54 (m, 2 H), 7,34-7,40 (m, 3 H), 5,38-5,42 (m, 1 H), 1,89 (d, J = 5,1 Hz, 3H) <Exemplo 20> Preparação de 6-((1-benzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)-1-(4,4- difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00154] 25 mg de 6-cloro-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H- pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,08 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 9 acima foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 55 mg de 1- (benzo[d]oxazol-2-il)etan-1-tiol (0,30 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 14 acima e 36 mg de carbonato de potássio (0,24 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 10 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 30 mg do composto do título (0,07 mmol) em 80 % de rendimento. Rf = 0,33 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,65 (br s, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,71- 7,74 (m, 2 H), 7,36-7,42 (m, 2 H), 5,43 (q, J = 7,4 Hz, 1 H), 4,55-4,61 (m, 1 H), 2,07-2,17 (m, 4 H), 1,96-2,01 (m, 2 H), 1,89 (d, J = 7,4 Hz, 3 H), 1,83-1,90 (m, 1 H), 1,74-1,76 (m, 1H) <Exemplo 21> Preparação de 6-((1-benzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00155] 30 mg de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro- 4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,12 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 1 acima foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 42 mg de 1- (benzo[d]oxazol-2-il)etan-1-tiol (0,23 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 14 acima e 50 mg de carbonato de potássio (0,37 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 10 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 17 mg do composto do título (0,04 mmol) em 36 % de rendimento. Rf = 0,33 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,63 (br s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,71- 7,73 (m, 2 H), 7,35-7,40 (m, 2 H), 5,37 (q, J = 7,3 Hz, 1 H), 4,50-4,56
(m, 1 H), 3,87-3,93 (m, 2 H), 3,36-3,45 (m, 2 H), 1,90-2,04 (m, 2 H), 1,87 (d, J = 7,3 Hz, 3 H), 1,63-1,66 (m, 1 H), 1,47-1,51 (m, 1H) <Exemplo de Preparação 15> Preparação de 1-(6- metilbenzo[d]oxazol-2-il)etan-1-tiol
[00156] 1 g de 2-amino-5-metilfenol (8,12 mmol) foi dissolvido em 10 ml de tolueno, e 0,72 ml de ácido tiolático (8,13 mmol) foi adicionado, seguido por agitação a 100 °C durante 24 horas. Depois da conclusão da reação, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 384 mg do composto do título (1,83 mmol) em 22 % de rendimento. Rf = 0,48 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,59 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,33 (s, 1 H), 7,17 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 4,31-4,37 (m, 1 H), 2,50 (s, 3 H), 2,40 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 1,88 (d, J = 7,1 Hz, 3H) <Exemplo 22> Preparação de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-((1-(6- metilbenzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin- 4-ona
[00157] 50 mg de 6-cloro-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H- pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,17 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 9 acima foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 72 mg de 1- (6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)etan-1-tiol (0,35 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 15 acima e 72 mg de carbonato de potássio (0,52 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 10 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 60 mg do composto do título (0,13 mmol) em 75 % de rendimento. Rf = 0,18 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,67 (br s, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,59 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,20 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 5,40 (q, J = 7,0 Hz, 1 H), 4,54-4,59 (m, 1 H), 2,42 (s, 3 H), 1,91-2,19 (m, 7 H), 1,87 (d, J = 7,0 Hz, 3 H), 1,73-1,76 (m, 1H) <Exemplo 23> Preparação de 6-((1-(6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00158] 50 mg de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro- 4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,20 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 1 acima foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 84 mg de 1- (6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)etan-1-tiol (0,40 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 15 acima e 83 mg de carbonato de potássio (0,60 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 10 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 50 mg do composto do título (0,12 mmol) em 66 % de rendimento. Rf = 0,11 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,62 (br s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,59 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,19 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 5,35 (q, J = 7,1 Hz, 1 H), 4,51-4,57 (m, 1 H), 3,98-3,95 (m, 2 H), 3,38-3,47 (m, 2 H), 2,42 (s, 3 H), 1,87-2,06 (m, 2 H), 1,86 (d, J = 7,1 Hz, 3 H), 1,65- 1,68 (m, 1 H), 1,48-1,51 (m, 1H) <Exemplo 24> Preparação de 6-((1-(6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)- 1-(tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4- ona
[00159] 50 mg de 6-cloro-1-(tetra-hidro-2H-tiopiran-4-il)-1,5-di-hidro- 4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona (0,18 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 10 acima foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 77 mg de 1-(6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)etano-1-tiol (0,37 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 15 acima e 75 mg de carbonato de potássio (0,54 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 10 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 62 mg do composto do título (0,14 mmol) em 77 % de rendimento. Rf = 0,19 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,61 (br s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,60 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,20 (d, J = 7,9 Hz, 1 H), 5,37 (q, J =
7,0 Hz, 1 H), 4,34-4,40 (m, 1 H), 2,66-2,82 (m, 4 H), 2,42 (s, 3 H), 1,96- 2,12 (m, 3 H), 1,88-1,91 (m, 1 H), 1,86 (d, J = 7,0 Hz, 3H) <Exemplo de Preparação 16> Preparação de (5-fenilbenzo[d]oxazol-2- il)metanotiol Etapa 1: Preparação de 5-bromo-2-metilbenzo[d]oxazol
[00160] 220 mg de 2-amino-4-bromofenol (1,17 mmol) foram dissolvidos em 0,43 ml de trietilosoacetato (2,34 mmol) e 7 μl de ácido acético (0,12 mmol), seguido por agitação a 100 °C durante 0,5 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 10 ml de acetato de etila, lavado com 10 ml de uma solução salina inorgânica, secada em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) para produzir 228 mg do composto do título (1,07 mmol) em 92 % de rendimento. Rf = 0,36 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,81 (d, J = 1,8 Hz, 1 H), 7,44 (dd, J = 8,6, 1,4 Hz, 1 H), 7,37 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 2,67 (s, 3H) Etapa 2: Preparação de 2-metil-5-fenilbenzo[d]oxazol
[00161] 210 mg de 5-bromo-2-metilbenzo[d]oxazol (0,99 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em uma mistura de dioxano e água, e 181 mg de ácido fenilborônico (1,48 mmol), 40 mg de Pd(dppf))Cl2 (0,05mmol) e 410 mg de carbonato de potássio (2,97mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) para produzir 199 mg do composto do título (0,95 mmol) em 96 % de rendimento. Rf = 0,25 (hexano : acetato de etila = 5 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,87 (s, 1 H), 7,64 (d, J = 7,3 Hz, 2 H), 7,54-7,55 (m, 2 H), 7,48 (dd, J = 7,5, 7,3 Hz, 2 H), 7,38 (dd, J = 7,3, 7,3 Hz, 1 H), 2,69 (s, 3H) Etapa 3: Preparação de 2-(bromometil)-5-fenilbenzo[d]oxazol
[00162] 199 mg de 2-metil-5-fenilbenzo[d]oxazol (0,95 mmol) preparados na Etapa 2 foram dissolvidos em clorobenzeno, e 169 mg de N-bromossuccinimida (0,95 mmol), 31 mg de AIBN (azobisisobutilonitrila) (0,19 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 2 horas. Depois da conclusão da reação, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 8 : 1, v/v) para produzir 110 mg do composto do título (0,38 mmol) em 40 % de rendimento. Rf = 0,30 (hexano : acetato de etila = 8 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,94 (s, 1 H), 7,61-7,66 (m, 4 H), 7,49 (dd, J = 7,7, 7,4 Hz, 2 H), 7,40 (dd, J = 7,4, 7,4 Hz, 1 H), 4,64 (s, 2H) Etapa 4: Preparação de S-((5-fenilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)etanotioato
[00163] 100 mg de 2-(bromometil)-5-fenilbenzo[d]oxazol (0,34 mmol) preparados na Etapa 3 foram dissolvidos em acetona, e 59 mg de tioacetato de potássio (0,52 mmol) foram adicionados, seguido por agitação a 50 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica, e secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) para produzir 95 mg do composto do título (0,33 mmol) em 96 % de rendimento.
Rf = 0,23 (hexano : acetato de etila = 6 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,90 (s, 1 H), 7,58-7,62 (m, 4 H), 7,48 (dd, J = 7,7, 7,4 Hz, 2 H), 7,39 (dd, J = 7,4, 7,4 Hz, 1 H), 4,44 (s, 2 H), 2,47 (s, 3H) Etapa 5: Preparação de (5-fenilbenzo[d]oxazol-2-il)metanotiol
[00164] 90 mg de S-((5-fenilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)etanoato (0,32 mmol) preparados na Etapa 4 foram dissolvidos em 6 ml de uma mistura de metanol e água, e 131 mg de carbonato de potássio (0,95 mmol) foram adicionados, seguido por agitação em temperatura ambiente durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica, e secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) para produzir 75 mg do composto do título (0,31 mmol) em 99 % de rendimento. Rf = 0,14 (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,90 (s, 1 H), 7,58-7,63 (m, 4 H), 7,49 (dd, J = 7,8, 7,5 Hz, 2 H), 7,39 (dd, J = 7,5, 7,5 Hz, 1 H), 4,01 (d, J = 8,1 Hz, 2 H), 2,27 (t, J = 8,1 Hz, 1H) <Exemplo 25> Preparação de 1-fenil-6-(((5-fenilbenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00165] 38 mg de 6-cloro-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 3 foram dissolvidos em 3 ml de DMF, e 75 mg de (5-fenilbenzo[d]oxazol- 2-il)metanotiol (0,31 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 16 e 128 mg de carbonato de potássio (0,93 mmol) foram adicionados,
seguido por agitação a 60 °C durante 1 hora. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 10 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) para produzir 50 mg do composto do título (0,11 mmol) em 71 % de rendimento. Rf = 0,35 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,96 (br s, 1 H), 8,24 (s, 1 H), 7,95- 7,97 (m, 3 H), 7,78 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 7,65-7,69 (m, 3 H), 7,45-7,51 (m, 4 H), 7,35-7,39 (m, 2 H), 4,86 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 17> Preparação de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7- tetra-hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona Etapa 1: Preparação de etil 5-amino-1-fenil-1H-pirazol-4-carboxilato
[00166] 5 g de etil (E)-2-ciano-3-etoxiacrilato (30 mmol) foram dissolvidos em 100 ml de etanol, e 3,9 g de fenil hidrazina (36 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 7 g do composto do título (30 mmol) em 100 % de rendimento.
Rf = 0,30 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,75 (s, 1 H), 7,55-7,45 (m, 4 H), 7,41- 7,34 (m, 1 H), 5,36 (br s, 2 H), 4,28 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 1,35 (t, J = 7,1 Hz, 3H) Etapa 2: Preparação de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H- pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00167] 7 g de etil 5-amino-1-fenil-1H-pirazol-4-carboxilato (30 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 60 ml de tetra- hidrofurano, e 4,95 ml de isotiocianato de benzoíla (39 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 13 horas. Em seguida, 92 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, e uma mistura foi agitada sob refluxo durante 30 minutos. Depois da conclusão da reação, é neutralizada com ácido clorídrico 2N e ácido acético é adicionado para precipitar um sólido. O resíduo foi purificado com água, hexano, e diclorometano para produzir 4,48 g do composto do título (18,34 mmol) em 60 % de rendimento. Rf = 0,15 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 11,27 (br s, 1 H), 10,46 (s, 1 H), 8,13 (s, 1 H), 7,87 (d, J = 7,6 Hz, 2 H), 7,68-7,47 (m, 3H) <Exemplo de Preparação 18> Preparação de 2-(clorometil)-4- metilbenzo[d]oxazol
[00168] 300 mg de 2-amino-3-metilfenol (2,44 mmol) foram dissolvidos em 6 ml de xileno, e 0,29 ml de cloreto de cloroacetila (3,66 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,37 ml de trietilamina (2,68 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 30 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 363 mg do composto do título (2,0 mmol) em 82 % de rendimento. Rf = 0,5 (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,36 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,28-7,24 (m, 1 H), 7,15 (d, J = 7,4 Hz, 1 H), 4,77 (s, 2 H), 2,62 (s, 3H). <Exemplo 26> Preparação de 6-(((4-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00169] 40 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em metanol, e 33 mg de 2-(clorometil)-4- metilbenzo[d]oxazol (0,18 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 18 e 0,1 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 55 mg do composto do título (0,14 mmol) em 86 % de rendimento. Rf = 0,3 (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,22 (s, 1 H), 8,06 (d, J = 8,1 Hz, 2 H), 7,53-7,44 (m, 3 H), 7,40-7,38 (m, 1 H), 7,26-7,23 (m, 1 H), 7,15 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 4,82 (s, 2 H), 2,48 (s, 3H) <Exemplo de Preparação 19> Preparação de 5-(terc-butil)-2- (clorometil)benzo[d]oxazol
[00170] 200 mg de 2-amino-4-(terc-butil)fenol (1,21 mmol) foram dissolvidos em 5 ml de xileno, e 0,14 ml de cloreto de cloroacetila (1,81 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,19 ml de trietilamina (1,33 mmol) foi adicionado e agitado sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 20 : 1, v/v) para produzir 154 mg do composto do título (0,69 mmol) em 57 % de rendimento. Rf = 0,55 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,77 (s, 1 H), 7,50-7,46 (m, 2 H), 4,76 (s, 2 H), 1,40 (s, 9H) <Exemplo 27> Preparação de 6-(((5-(terc-butil)benzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00171] 20 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,08 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 20 mg de 5-(terc-butil)-2- (clorometil)benzo[d]oxazol (0,09 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 19 acima e 0,05 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas.
Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida e purificada por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 36 mg do composto do título (0,08 mmol) em 100 % de rendimento. Rf = 0,3 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,17 (s, 1 H), 7,98 (d, J = 8,4 Hz, 2 H), 7,66 (s, 1 H), 7,57 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,49-7,45 (m, 2 H), 7,43-7,41 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,36-7,34 (m, 1 H), 4,78 (s, 2 H), 1,30 (s, 9H) <Exemplo de Preparação 20> Preparação de 2-(clorometil)-6- nitrobenzo[d]oxazol
[00172] 200 mg de 2-amino-5-nitrofenol (1,30 mmol) foram dissolvidos em 5 ml de xileno, e 0,16 ml de cloreto de cloroacetila (1,95 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,2 ml de trietilamina (1,43 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 190 mg do composto do título (0,89 mmol) em 67 % de rendimento. Rf = 0,4 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,47 (s, 1 H), 8,33 (d, J = 8,8, 1 H), 7,87 (d, J = 8,8, 1 H), 4,82 (s, 2H) <Exemplo 28> Preparação de 6-(((6-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00173] 40 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 38 mg de 2-(clorometil)-6- nitrobenzo[d]oxazol (0,18 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 20 e 0,1 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida e purificada por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 100: 1, v/v) para produzir 22 mg do composto do título (0,05 mmol) em 32 % de rendimento. Rf = 0,3 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,59 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 8,24 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 7,91 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,87 (d, J = 7,7 Hz, 2 H), 7,52-7,45 (m, 2 H), 7,39-7,36 (m, 1 H), 4,90 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 21> Preparação de 2-(clorometil)-5- nitrobenzo[d]oxazol
[00174] 400 mg de 2-amino-4-nitrofenol (2,60 mmol) foram dissolvidos em 5 ml de xileno, e 0,32 ml de cloreto de cloroacetila (3,90 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,4 ml de trietilamina (2,86 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 20 ml de acetato de etila, lavado com 20 ml de uma solução salina inorgânica,
secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 42 mg do composto do título (0,19 mmol) em 8 % de rendimento. Rf = 0,4 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,66 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,38 (dd, J = 9,0, 2,2 Hz, 1 H), 7,69 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 4,80 (s, 2H) <Exemplo 29> Preparação de 6-(((5-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00175] 40 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 37 mg de 2-(clorometil)-5- nitrobenzo[d]oxazol (0,17 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 21 e 0,05 ml de hidróxido de sódio 2N foi adicionado, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida e purificada por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 100: 1, v/v) para produzir 28 mg do composto do título (0,06 mmol) em 41 % de rendimento. Rf = 0,3 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,96 (s, 1 H), 8,58 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 8,28 (dd, J = 9,0, 2,3 Hz, 1 H), 8,21 (s, 1 H), 7,94 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,90 (d, J = 8,1 Hz, 2 H), 7,48 (dd, J = 7,7, 8,1 Hz, 2 H), 7,36 (d, J = 7,7 Hz, 1 H), 4,90 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 22> Preparação de 2-(clorometil)-4- nitrobenzo[d]oxazol
[00176] 600 mg de 2-amino-3-nitrofenol (3,89 mmol) foram dissolvidos em 10 ml de xileno, 0,66 ml de cloreto de cloroacetila (5,83 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,6 ml de trietilamina (4,27 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 40 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 508 mg do composto do título (2,39 mmol) em 61 % de rendimento. Rf = 0,4 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,27 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,96 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,61 (dd, J = 8,2, 8,2 Hz, 1 H), 4,90 (s, 2H) <Exemplo 30> Preparação de 6-(((4-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)- 1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00177] 40 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 38 mg de 2-(clorometil)-4- nitrobenzo[d]oxazol (0,17 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 22 e 0,05 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida e purificada por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 100: 1, v/v) para produzir 34 mg do composto do título (0,08 mmol) em 50 % de rendimento. Rf = 0,3 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,88 (s, 1 H), 8,24 (s, 1 H), 8,17-8,14 (m, 1 H), 8,01-7,96 (m, 3 H), 7,60 (d, J = 8,2 Hz, 1 H), 7,55-7,52 (m, 2 H), 7,47 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 4,13 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 23> Preparação de 5-cloro-2-(clorometil)-6- nitrobenzo[d]oxazol
[00178] 500 mg de 2-amino-4-cloro-5-nitrofenol (2,65 mmol) foram dissolvidos em 8 ml de xileno, e 0,32 ml de cloreto de cloroacetila (3,97 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,41 ml de trietilamina (2,91 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 40 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 329 mg do composto do título (1,33 mmol) em 50 % de rendimento. Rf = 0,4 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,15 (s, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 4,80 (s, 2H) <Exemplo 31> Preparação de 6-(((5-nitro-6-nitrobenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00179] 40 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 45 mg de 5-cloro-2- (clorometil)-6-nitrobenzo[d]oxazol (0,17 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 23 e 0,1 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida e purificada por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 100 : 1, v/v) para produzir 22 mg do composto do título (0,05 mmol) em 29 % de rendimento. Rf = 0,2 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 10,63 (s, 1 H), 8,59 (s, 1 H), 8,22 (s, 1 H), 8,18 (s, 1 H), 7,96-7,93 (m, 1 H), 7,86-7,84 (m, 1 H), 7,51-7,47 (m, 2 H), 7,37 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 4,90 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 24> Preparação de 5,7-dicloro-2-(clorometil)- benzo[d]oxazol
[00180] 500 mg de 2-amino-4,6-diclorofenol (2,81 mmol) foram dissolvidos em 10 ml de xileno, e 0,34 ml de cloreto de cloroacetila (4,21 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,43 ml de trietilamina (3,09 mmol) foi adicionado e agitado sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 40 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 470 mg do composto do título (1,99 mmol) em 71 % de rendimento. Rf = 0,4 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,62 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 7,38 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 4,77 (s, 2H) <Exemplo 32> Preparação de 6-(((5,7-diclorobenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00181] 40 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 43 mg de 5,7-dicloro-2- (clorometil)-benzo[d]oxazol (0,17 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 24 e 0,1 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 11 mg do composto do título (0,02 mmol) em 15 % de rendimento. Rf = 0,3 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,20 (s, 1 H), 7,92 (d, J = 7,9 Hz, 2 H), 7,86 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 7,68 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 7,45 (t, J = 7,8 Hz, 2 H), 7,34 (t, J = 7,3 Hz, 1 H), 4,86 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 25> Preparação de 2-(clorometil)-5,7- dimetilbenzo[d]oxazol
[00182] 500 mg de 2-amino-4,6-dimetilfenol (3,64 mmol) foram dissolvidos em 10 ml de xileno, e 0,44 ml de cloreto de cloroacetila (5,46 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,56 ml de trietilamina (4,00 mmol) foi adicionado e agitado sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 40 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 479 mg do composto do título (2,45 mmol) em 67 % de rendimento. Rf = 0,4 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,31 (s, 1 H), 6,95 (s, 1 H), 4,71 (s, 2 H), 2,46 (s, 3 H), 2,38 (s, 3H) <Exemplo 33> Preparação de 6-(((5,7-dimetilbenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00183] 40 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 35 mg de 2-(clorometil)-5,7- dimetilbenzo[d]oxazol (0,17 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 24 e 0,1 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida e purificada por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 100: 1, v/v) para produzir 17 mg do composto do título (0,04 mmol) em 26 % de rendimento. Rf = 0,3 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,24 (s, 1 H), 7,99 (d, J = 7,9 Hz, 2 H), 7,45 (dd, J = 7,9, 7,3 Hz, 2 H), 7,37 (d, J = 7,3 Hz, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 7,00 (s, 1 H), 4,80 (s, 2 H), 2,38 (s, 3 H), 2,34 (s, 3H) <Exemplo de Preparação 26> Preparação de 2-(clorometil)-5- metoxibenzo[d]oxazol
[00184] 412 mg de 2-amino-4-metoxifenol (2,96 mmol) foram dissolvidos em 10 ml de xileno, e 0,35 ml de cloreto de cloroacetila (4,44 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,45 ml de trietilamina (3,25 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 40 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 20 : 1, v/v) para produzir 254 mg do composto do título (1,29 mmol) em 43 % de rendimento. Rf = 0,4 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,48-7,38 (m, 1 H), 7,21 (d, J = 2,6 Hz, 1 H), 6,99 (dd, J = 9,0, 2,6 Hz, 1 H), 4,74 (s, 2 H), 3,86 (s, 3H) <Exemplo 34> Preparação de 6-(((5-metoxibenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00185] 40 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 36 mg de 2-(clorometil)- 5metoxibenzo[d]oxazol (0,17 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 25 e 0,1 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 15 mg do composto do título (0,04 mmol) em 23 % de rendimento. Rf = 0,2 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,94 (s, 1 H), 8,24 (s, 1 H), 7,94 (d, J = 7,9 Hz, 2 H), 7,59 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 7,48 (t, J = 7,7 Hz, 2 H), 7,37 (t, J = 7,5 Hz, 1 H), 7,25 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 6,94 (dd, J = 8,9, 2,6 Hz, 1 H), 4,80 (s, 2 H), 3,77 (s, 3H) <Exemplo de Preparação 27> Preparação de 2-(clorometil)-6- metoxibenzo[d]oxazol
[00186] 412 mg de 2-amino-5-metoxifenol (2,96 mmol) foram dissolvidos em 10 ml de xileno, e 0,35 ml de cloreto de cloroacetila (4,44 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,45 ml de trietilamina (3,25 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 40 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 20 : 1, v/v) para produzir 236 mg do composto do título (1,19 mmol) em 40 % de rendimento. Rf = 0,4 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,58 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,03 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,94 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1 H), 4,72 (s, 2 H), 3,83 (s, 3H) <Exemplo 35> Preparação de 6-(((6-metoxibenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00187] 40 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 36 mg de 2-(clorometil)-6- metoxibenzo[d]oxazol(0,17 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 26 e 0,1 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 25 mg do composto do título (0,06 mmol) em 38 % de rendimento. Rf = 0,2 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,93 (s, 1 H), 8,24 (s, 1 H), 7,97 (d, J = 8,0 Hz, 2 H), 7,58 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 7,50 (t, J = 7,7 Hz, 2 H), 7,38 (t, J = 7,4 Hz, 1 H), 7,30 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,93 (dd, J = 8,8, 2,4 Hz, 1 H), 4,79 (s, 2 H), 3,79 (s, 3H) <Exemplo de Preparação 28> Preparação de 2-(clorometil)-5- (trifluorometil)benzo[d]oxazol
[00188] 776 mg de 2-amino-4-(trifluorometil)fenol (4,38 mmol) foram dissolvidos em 12 ml de xileno, 0,52 ml de cloreto de cloroacetila (6,57 mmol) foi lentamente adicionado, seguido por agitação a 0 °C durante 2 horas. A seguir, 0,67 ml de trietilamina (4,82 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 40 ml de acetato de etila, lavado com 40 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 10 : 1, v/v) para produzir 275 mg do composto do título (1,17 mmol) em 27 % de rendimento. Rf = 0,5 (hexano : acetato de etila = 4 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 8,09-8,02 (m, 1 H), 7,73-7,64 (m, 2 H), 4,81 (s, 2H) <Exemplo 36> Preparação de 1-fenil-6-(((5-(trifluorometil)benzo[d]oxazol- 2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00189] 40 mg de 1-fenil-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4- d]piridin-4-ona (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 17 foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 41 mg de 2-(clorometil)-5- (trifluorometil)benzo[d]oxazol (0,17 mmol) obtidos no Exemplo de
Preparação 27 e 0,1 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 25 mg do composto do título (0,06 mmol) em 34 % de rendimento. Rf = 0,25 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,97 (s, 1 H), 8,20 (s, 1 H), 8,16-8,12 (m, 1 H), 7,96-7,90 (m, 3 H), 7,75 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 7,47 (dd, J = 7,7, 8,1 Hz, 2 H), 7,35 (dd, J = 7,5, 7,7 Hz, 1 H), 4,88 (s, 2H) <Exemplo de Preparação 29> Preparação de 1-(4,4-difluorociclo- hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona Etapa 1: Preparação de etil 5-amino-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1H- pirazol-4-carboxilato
[00190] 1 g de etil (E)-2-ciano-3-etoxiacrilato (5,91 mmol) foi dissolvido em 30 ml de etanol, e 1,32 g de (4,4-difluorociclo- hexil)hidrazina (7,09 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 50 ml de acetato de etila, lavado com 50 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) para produzir 1,16 g do composto do título (4,31 mmol) em 73 % de rendimento. Rf = 0,40 (hexano : acetato de etila = 3 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,65 (s, 1 H), 5,03 (br s, 2 H), 429 (q, J = 8,0 Hz, 2 H), 3,95-3,90 (m, 1 H), 2,34-2,27 (m, 4 H), 2,08-1,84 (m, 4 H), 1,36 (t, J = 8,0 Hz, 4H) Etapa 2: Preparação de etil 5-(3-benzoiltioureído)-1-(4,4-difluorociclo- hexil)-1H-pirazol-4-carboxilato
[00191] 200 mg de etil 5-amino-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1H-pirazol- 4-carboxilato (0,73 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 5 ml de tetra-hidrofuran e 0,12 ml de isotiocianato de benzoíla (0,87 mmol) foi adicionado, seguido por agitação sob refluxo durante 2 horas. Depois da conclusão da reação, a solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida e purificada por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 2 : 1, v/v) para produzir 312 mg do composto do título (0,72 mmol) em 98 % de rendimento. Rf = 0,55 (hexano : acetato de etila = 2 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 12,17 (s, 1 H), 9,44 (s, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 7,97 (d, J = 7,8 Hz, 2 H), 7,73 (dd, J = 7,8 Hz, 7,8 Hz, 1 H), 7,61 (dd, J = 7,8 Hz, 7,8 Hz, 2 H), 4,29 (q, J = 7,3 Hz, 2 H), 2,42-2,26 (m, 4 H), 2,16-2,10 (m, 2 H), 1,91-1,80 (m, 2 H), 1,30 (t, J = 7,3 Hz, 3H) Etapa 3: Preparação de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona
[00192] 100 mg de etil 5-(3-benzoiltioureído)-1-(4,4-difluorociclo- hexil)-1H-pirazol-4-carboxilato (0,23 mmol) obtidos na Etapa 2 foram dissolvidos em 3 ml de etanol, e 44 mg de terc-butóxido de sódio (0,46 mmol) foram adicionados, seguido por agitação em temperatura ambiente durante 3 horas. Depois da conclusão da reação, ela foi neutralizada com ácido clorídrico 1N para precipitar um sólido, que foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 50 mg do composto do título (0,17 mmol) em 76 % de rendimento. 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 13,44 (br s, 1 H), 12,19 (br s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 4,77 (s, 1 H), 2,37-1,81 (m, 8H) <Exemplo 37> Preparação de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((6- nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00193] 40 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,14 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 33 mg de 2-(clorometil)-6-nitrobenzo[d]oxazol (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 20 acima e 0,08 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 48 mg do composto do título (0,10 mmol) em 75 % de rendimento. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,71 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 8,29 (dd, J = 8,8, 2,3 Hz, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,93 (d, J = 8,8 Hz, 1 H), 4,90 (s, 2 H), 4,54-4,49 (m, 1 H), 2,09-1,89 (m, 6 H), 1,78-1,68 (m, 2H) <Exemplo 38> Preparação de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((5- nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-
d]pirimidin-4-ona
[00194] 24 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,08 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 20 mg de 2-(clorometil)-5-nitrobenzo[d]oxazol (0,09 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 21 acima e 0,05 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 41 mg do composto do título (0,09 mmol) em 63 % de rendimento. Rf = 0,20 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,69 (s, 1 H), 8,60 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 8,32 (dd, J = 8,9, 2,3 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 4,90 (s, 2 H), 4,55 (s, 1 H), 2,10-1,90 (m, 6 H), 1,79-1,71 (m, 2H) <Exemplo 39> Preparação de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((4- nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00195] 40 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-
hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridina-4-ona obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima (0,14 mmol) foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 33 mg de 2-(clorometil)-4-nitrobenzo[d]oxazol (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 22 acima e 0,08 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 13 mg do composto do título (0,03 mmol) em 21 % de rendimento. Rf = 0,20 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,54 (s, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,35-7,16 (m, 3 H), 4,93-4,81 (m, 1 H), 4,18 (s, 2 H), 2,12-1,96 (m, 5 H), 1,95- 1,83 (m, 3H) <Exemplo 40> Preparação de 6-(((5-cloro-6-nitrobenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00196] 40 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridina-4-ona (0,14 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 38 mg de 5-cloro-2-(clorometil)-6-nitrobenzo[d]oxazol (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 23 acima e 0,08 ml de 2Nhidróxido de sódio foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 70 mg do composto do título (0,14 mmol) em 100 % de rendimento. Rf = 0,20 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v)
H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,66 (s, 1 H), 8,82 (s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 4,89 (s, 1 H), 4,55-4,47 (m, 1 H), 2,29-1,70 (m, 8H) <Exemplo 41> Preparação de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((4- metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00197] 40 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridina-4-ona (0,14 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 28 mg de 2-(clorometil)-4-metilbenzo[d]oxazol (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 18 e 0,08 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água e acetato de etila para produzir 39 mg do composto do título (0,09 mmol) em 66 % de rendimento. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,97 (s, 1 H), 7,48 (d, J = 8,0 Hz, 1 H), 7,27 (dd, J = 8,0, 7,6 Hz, 1 H), 7,18 (d, J = 7,6 Hz, 1 H), 4,83 (s, 2 H), 4,67-4,54 (m, 1 H), 2,49 (s, 3 H), 2,18-1,96 (m, 5 H), 1,95-1,77 (m, 3H) <Exemplo 42> Preparação de 6-(((5-(terc-butil)benzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1, 5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin- 4-ona
[00198] 40 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridina-4-ona (0,14 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 34 mg de 5-(terc-butil)-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 19 acima e 0,08 ml de hidróxido de sódio 2N foram dissolvido, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas.
Depois da conclusão da reação, o resultante foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 100 : 1, v/v) para produzir 64 mg do composto do título (0,13 mmol) em 97 % de rendimento.
Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,67 (s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,64 (d, J = 2,9 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,44 (dd, J = 8,6, 2,9 Hz, 1 H), 4,79 (s, 2 H), 4,55-4,50 (m, 1 H), 2,09-1,86 (m, 6 H), 1,76-1,71 (m, 2 H), 1,32 (s, 9H) <Exemplo 43> Preparação de 6-(((5,7-diclorobenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-(4,4-difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00199] 40 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridina-4-ona (0,14 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 36 mg de 5,7-dicloro-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 24 acima e 0,08 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água e acetato de etila para produzir 17 mg do composto do título (0,03 mmol) em 25 % de rendimento. Rf = 0,20 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,94 (s, 1 H), 7,85 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 7,69 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 4,85 (s, 2 H), 4,55-4,50 (m, 1 H), 2,12-1,74 (m, 8H) <Exemplo 44> Preparação de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((5,7- dimetilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00200] 40 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridina-4-ona (0,14 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 30 mg de 5,7-dimetil-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 25 acima e 0,08 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água e acetato de etila para produzir 22 mg do composto do título
(0,05 mmol) em 36 % de rendimento. Rf = 0,20 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,95 (s, 1 H), 7,27 (s, 1 H), 7,02 (s, 1 H), 4,79 (s, 2 H), 4,59 (s, 1 H), 2,38 (d, J = 19,4 Hz, 5 H), 2,04 (q, J = 10,9, 9,9 Hz, 4 H), 1,91 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 1,79 (d, J = 11,3 Hz, 2H) <Exemplo 45> Preparação de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((5- metoxibenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00201] 40 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridina-4-ona (0,14 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 30 mg de 5-metóxi-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 26 acima e 0,08 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água e acetato de etila para produzir 43 mg do composto do título (0,09 mmol) em 70 % de rendimento. Rf = 0,20 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,67 (s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 7,59 (d, J = 8,9 Hz, 1 H), 7,23 (d, J = 2,5 Hz, 1 H), 6,96 (dd, J = 8,9, 2,6 Hz, 1 H), 4,80 (s, 2 H), 4,63-4,48 (m, 1 H), 3,78 (s, 3 H), 2,14-1,87 (m, 6 H), 1,81-1,74 (m, 2H) <Exemplo 46> Preparação de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((6- metoxibenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-
d]pirimidin-4-ona
[00202] 40 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,14 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 30 mg de 6-metóxi-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 27 e 0,08 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água e acetato de etila para produzir 23 mg do composto do título (0,05 mmol) em uma 37 % de rendimento. Rf = 0,20 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,66 (s, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 7,56 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 7,34 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,95 (dd, J = 8,7, 2,4 Hz, 1 H), 4,79 (s, 2 H), 4,60 (s, 1 H), 3,80 (s, 3 H), δ 2,16-1,88 (m, 6 H), 1,86- 1,73 (m, 2H) <Exemplo 47> Preparação de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((5- (trifluorometil)benzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00203] 40 mg de 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,14 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 29 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 36 mg de 5-(trifluorometil)-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 28 acima e 0,08 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água e acetato de etila para produzir 53 mg do composto do título (0,11 mmol) em 78 % de rendimento. Rf = 0,25 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,71 (s, 1 H), 8,15 (s, 1 H), 7,97 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,77 (dd, J = 8,7, 1,8 Hz, 1 H), 4,86 (s, 2 H), 4,51 (s, 1 H), 2,10-1,93 (m, 6 H), 1,76-1,70 (m, 2H) <Exemplo de Preparação 30> Preparação de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4- il)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona Etapa 1: Preparação de etil 5-amino-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H- pirazol-4-carboxilato
[00204] 2,08 g de etil (E)-2-ciano-3-etoxiacrilato (12,3 mmol) foram dissolvidos em 30 ml de etanol, e 2,25 g de (tetra-hidro-2H-piran-4- il)hidrazina (14,76 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 15 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi extraído com 50 ml de acetato de etila, lavado com 50 ml de uma solução salina inorgânica, secado em sulfato de sódio anidroso (Na2SO4) e concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna (hexano : acetato de etila = 1 : 1, v/v) para produzir 2,2 g do composto do título (9,22 mmol) em 75 % de rendimento. Rf = 0,50 (hexano : acetato de etila = 1 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 7,66 (s, 1 H), 5,04 (br s, 2 H), 4,29 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 4,19-4,10 (m, 2 H), 4,08-3,94 (m, 1 H), 3,60-3,45 (m, 2 H), 2,40-2,20 (m, 2 H), 1,92-1,80 (m, 2 H), 1,36 (t, J = 7,1 Hz, 3H) Etapa 2: Preparação de etil 5-(3-benzoiltioureído)-1-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)-1H-pirazol-4-carboxilato
[00205] 2,20 g de etil 5-amino-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1H- pirazol-4-carboxilato (9,22 mmol) obtidos na Etapa 1 foram dissolvidos em 30 ml de tetra-hidrofurano, e 1,48 ml de isotiocianato de benzoíla (11,06 mmol) foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 2 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi concentrado sob pressão reduzida e purificado com hexano para produzir 3,54 g do composto do título (8,74 mmol) em 95 % de rendimento. Rf = 0,60 (hexano : acetato de etila = 1 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, CDCl3) δ 12,16 (br s, 1 H), 9,53 (br s, 1 H), 8,02 (s, 1 H), 7,98 (d, J = 7,4 Hz, 2 H), 7,71 (dd, J = 7,4 Hz, 7,4 Hz, 1 H), 7,60 (dd, J = 7,4 Hz, 7,4 Hz, 2 H), 4,44-4,34 (m, 1 H), 4,28 (q, J = 7,1 Hz, 2 H), 4,17-4,09 (m, 2 H), 3,58-3,50 (m, 2 H), 2,37-2,30 (m, 2 H), 2,10- 2,00 (m, 2 H), 1,31 (t, J = 7,1 Hz, 3H) Etapa 3: Preparação de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6-tioxo-1,5,6,7- tetra-hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona
[00206] 100 mg de etil 5-(3-benzoiltioureído)-1-(tetra-hidro-2H-piran- 4-il)-1H-pirazol-4-carboxilato (0,25 mmol) obtidos na Etapa 2 foram dissolvidos em 3 ml de etanol, e 0,75 ml de hidróxido de sódio 2N (1,50 mmol) foi adicionado, seguido por agitação sob refluxo durante 30 minutos. Depois da conclusão da reação, ela foi neutralizada com ácido clorídrico 1N para precipitar um sólido, que foi purificado com água e hexano para produzir 30 mg do composto do título (0,12 mmol) em um rendimento de 48 %. Rf = 0,00 (hexano : acetato de etila = 1 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 13,48 (br s, 1 H), 12,17 (br s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 4,91-4,82 (m, 1 H), 4,08-3,91 (m, 2 H), 3,55-3,45 (m, 2 H), 2,10-1,90 (m, 2 H), 1,90-1,76 (m, 2H) <Exemplo 48> Preparação de 6-(((6-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00207] 40 mg de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 30 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 37 mg de 2-(clorometil)-6-nitrobenzo[d]oxazol (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 20 acima e 0,09 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 24 mg do composto do título (0,06 mmol) em 36 % de rendimento. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,74 (d, J = 2,2 Hz, 1 H), 8,28 (dd, J = 8,8, 2,2 Hz, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,92 (s, 1 H), 4,88 (s, 2 H), 4,52-4,43 (m, 1 H), 3,87-3,82 (m, 2 H), 3,45-3,36 (m, 2 H), 1,95-1,87 (m, 2 H), 1,52-1,48 (m, 2H)
<Exemplo 49> Preparação de 6-(((5-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00208] 40 mg de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 30 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 37 mg de 2-(clorometil)-5-nitrobenzo[d]oxazol (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 21 acima e 0,09 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 41 mg do composto do título (0,09 mmol) em 60 % de rendimento. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,68 (s, 1 H), 8,60 (d, J = 2,3 Hz, 1 H), 8,31 (dd, J = 9,0, 2,3 Hz, 1 H), 8,00 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 4,87 (s, 2 H), 4,53-4,46 (m, 1 H), 3,89-3,82 (m, 2 H), 3,42-3,36 (m, 2 H), 1,96-1,88 (m, 2 H), 1,54-1,50 (m, 2H) <Exemplo 50> Preparação de 6-(((4-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00209] 40 mg de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-
hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 30 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 37 mg de 2-(clorometil)-4-nitrobenzo[d]oxazol (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 22 acima e 0,09 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 26 mg do composto do título (0,06 mmol) em 39 % de rendimento. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,97 (s, 1 H), 7,29 (dd, J = 7,5, 2,2 Hz, 1 H), 7,25-7,18 (m, 2 H), 4,90-4,84 (m, 1 H), 4,18 (s, 2 H), 3,90-3,86 (m, 2 H), 3,39-3,35 (m, 2 H), 2,04-1,96 (m, 2 H), 1,77-1,70 (m, 2H) <Exemplo 51> Preparação de 6-(((5-cloro-6-nitrobenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00210] 40 mg de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 30 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 43 mg de 5-cloro-2-(clorometil)-6-nitrobenzo[d]oxazol (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 23 acima e 0,09 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água, éter, e acetato de etila para produzir 20 mg do composto do título (0,04 mmol) em 27 % de rendimento. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v)
H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,70 (s, 1 H), 8,21 (s, 1 H), 7,96 (s, 1 H), 4,87 (s, 2 H), 4,47-4,40 (m, 1 H), 3,89-3,81 (m, 2 H), 3,40-3,37 (m, 2 H), 1,93-1,86 (m, 2 H), 1,53-1,48 (m, 2H) <Exemplo 52> Preparação de 6-(((4-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona
[00211] 40 mg de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 30 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 32 mg de 2-(clorometil)-4-metilbenzo[d]oxazol (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 18 e 0,09 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água e acetato de etila para produzir 14 mg do composto do título (0,03 mmol) em um rendimento de 22 %. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,58 (br s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,49 (d, J = 8,1 Hz, 1 H), 7,25 (dd, J = 8,1, 7,5 Hz, 1 H), 7,16 (d, J = 7,5 Hz, 1 H), 4,81 (s, 2 H), 4,62-4,55 (m, 1 H), 3,89 (dd, J = 11,0, 4,4 Hz, 2 H), 3,41-3,36 (m, 2 H), 2,49 (s, 3 H), 2,04-1,91 (m, 2 H), 1,65-1,61 (m, 2H) <Exemplo 53> Preparação de 6-(((5-(terc-butil)benzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-(tetra-hidro-2H-piran4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00212] 40 mg de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 30 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 39 mg de 5-(terc-butil)-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 19 acima e 0,09 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o resultante foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna (diclorometano : metanol = 100 : 1, v/v) para produzir 23 mg do composto do título (0,05 mmol) em 33 % de rendimento. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,94 (s, 1 H), 7,64 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 7,59 (d, J = 8,6 Hz, 1 H), 7,42 (dd, J = 8,7, 2,0 Hz, 1 H), 4,77 (s, 2 H), 4,55-4,49 (m, 1 H), 3,87-3,84 (m, 2 H), 3,39-3,35 (m, 2 H), 1,99-1,90 (m, 2 H), 1,56-1,50 (m, 2 H), 1,31 (s, 9H) <Exemplo 54> Preparação de 6-(((5,7-diclorobenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-(tetra-hidro-2H-piran4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00213] 40 mg de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra-
hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 30 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 41 mg de 5,7-dicloro-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 24 e 0,09 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água e acetato de etila para produzir 41 mg do composto do título (0,09 mmol) em 57 % de rendimento. Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,67 (br s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,86 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 7,69 (d, J = 1,9 Hz, 1 H), 4,85 (s, 2 H), 4,54-4,45 (m, 1 H), 3,88-3,84 (m, 2 H), 3,39-3,34 (m, 2 H), 1,98-1,90 (m, 2 H), 1,58-1,54 (m, 2H) <Exemplo 55> Preparação de 6-(((5,7-dimetilbenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00214] 40 mg de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 30 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 34 mg de 5,7-dimetil-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 25 acima e 0,09 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água e acetato de etila para produzir 22 mg do composto do título (0,05 mmol) em 36 % de rendimento.
Rf = 0,30 (diclorometano : metanol = 20 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,62 (br s, 1 H), 7,94 (s, 1 H), 7,27 (d, J = 1,6 Hz, 1 H), 7,00 (s, 1 H), 4,78 (s, 2 H), 4,61-4,55 (m, 1 H), 3,88-3,84 (m, 2 H), 3,41-3,35 (m, 2 H), 2,41 (s, 3 H), 2,35 (s, 3 H), 2,00-1,90 (m, 2 H), 1,62-1,58 (m, 2H) <Exemplo 56> Preparação de 6-(((6-metoxibenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona
[00215] 40 mg de 1-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)-6-tioxo-1,5,6,7-tetra- hidro-4H-pirazol[3,4-d]piridin-4-ona (0,15 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 30 acima foram dissolvidos em 3 ml de metanol, e 35 mg de 6-metóxi-2-(clorometil)benzo[d]oxazol (0,16 mmol) obtidos no Exemplo de Preparação 27 acima e 0,09 ml de hidróxido de sódio 2N foram adicionados, seguido por agitação sob refluxo durante 12 horas. Depois da conclusão da reação, o precipitado sólido foi purificado com água e acetato de etila para produzir 48 mg do composto do título (0,12 mmol) em 74 % de rendimento. Rf = 0,20 (diclorometano : metanol = 10 : 1, v/v) 1 H RMN (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,64 (s, 1 H), 7,95 (s, 1 H), 7,55 (d, J = 8,7 Hz, 1 H), 7,33 (d, J = 2,4 Hz, 1 H), 6,94 (dd, J = 8,7, 2,4 Hz, 1 H), 4,76 (s, 2 H), 4,64-4,53 (m, 1 H), 3,94-3,86 (m, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 3,46-3,38 (m, 2 H), 2,03-1,90 (m, 2 H), 1,62-1,55 (m, 2H)
[00216] As fórmulas estruturais químicas dos compostos preparados nos Exemplos 1-56 são resumidas e mostradas na tabela a seguir.
[Tabela 1]
Legenda:- Exemplo ;- Estrutura Química
[00217] A atividade inibidora dos compostos representativos de acordo com a presente invenção contra a fosfodiesterase 9A foi testada com base no ensaio de polarização (kit expresso de rastreamento IMAP-FP) fornecido por MDS (MDS Analitical Technologies, Sunivale, CA, USA). Como uma solução tampão, uma solução de reação (uma solução de reação contendo Tween20 a 0,01 % fornecida por MDS foi diluída 5 vezes, em seguida, DTT 5 mM é adicionado) e uma solução de detecção de polarização (solução de ligação A e B fornecida por MDS foram misturadas em uma relação de 3: 1 e foi adicionado reagente de ligação IMAP 1/600). Foram preparados 100 μM do substrato (substrato Fl-cGMP; MDS) e 3,6 μg/ml da enzima PDE9A (ab54113; abcam). 3,6 μg/ml de PDE9A e 100 μM de substrato foram diluídos a 20 ng/ml (concentração de reação final: 5 ng/ml) e 400 nM (concentração de reação final: 100 nM), respectivamente. A solução tampão usada para todos os processos de diluição e preparação foi 1 × solução de reação com 1 mM de DTT adicionado, e a solução de detecção de polarização foi usada para induzir a polarização no final.
[00218] As amostras preparadas foram dispensadas em microplacas pretas (placas Multiwell 384 cavidades, # 3573, Corning Life Sciences, Lowell, MA, USA)usando uma pipeta de 16 canais (16 canais múltiplos, Finnpipette, Thermo Scientific, Essex, UK). O volume total da reação por cavidade é de 20 µl. Neste momento, 10 µl de DMSO a 2 %, 5 µl de solução de substrato e 5 µl de solução de reação foram usados como um controle negativo e 10 µl de DMSO a 2 %, 5 µl de solução de substrato e 5 µl de solução de PDE9A foram usados como um controle positivo. Como grupo experimental, foram usados 10 µl do composto preparado no Exemplo, 5 µl da solução de substrato e 5 µl da solução de PDE9A. Após o pré-tratamento entre o composto e a enzima ter sido realizado por cerca de 10 minutos antes da reação de enzima-substrato, 5 µl de cGMP foram adicionados para induzir a reação enzimática. Durante a reação, cada composto, enzima e substrato ocuparam 50 %, 25 % e 25 % do volume total, respectivamente, e eles foram preparados em altas concentrações de 2, 4 e 4 vezes, respectivamente, imediatamente antes da adição. Após a reação enzimática, ela foi agitada levemente por 1 minuto e a reação enzimática foi induzida em temperatura ambiente por 1 hora. Em seguida, 60 µl da solução de detecção de polarização preparada com antecedência foram adicionados para induzir a polarização.
[00219] Nanopartículas compostas de íons metálicos trivalentes são misturadas na solução de detecção de fluorescência, que combina a exposição ao ácido fosfórico por reação enzimática ao aumento do peso molecular e induz a polarização. Depois de deixá-lo em temperatura ambiente por 2 horas, o valor de polarização (Polarização de fluorescência, FP) foi medido usando um contador multilabel (Envision, PerkinElmer, Turku, Finland) (comprimento de ondas de emissão: P-535 nm, S-535 nm, comprimento de ondas de excitação: 480 nm), e o resultado foi expresso como um valor de IC50, que é a concentração do composto que inibiu PDE9A em 50 % in vitro (Tabela 2). [Tabela 2] Exemplo No. PDE9A (IC50, μM) Exemplo No. PDE9A (IC50, μM) 1 0,005 31 38,9 % 2 0,049 32 27,7 % 3 0,081 33 0,95 4 0,083 34 0,12 5 0,049 35 83,6 % 6 0,19 36 34,1 7 0,10 37 0,074 8 0,005 38 0,045 9 0,006 39 0,077 10 0,22 40 1,66 11 0,006 41 0,022 12 0,004 42 0,13 13 0,012 43 0,12
Exemplo No. PDE9A (IC50, μM) Exemplo No. PDE9A (IC50, μM) 14 0,004 44 0,015 15 0,010 45 0,008 16 0,006 46 0,003 17 0,19 47 0,12 18 0,004 48 0,023 19 0,028 49 0,032 20 0,006 50 0,13 21 0,003 51 0,035 22 0,006 52 0,017 23 0,002 53 0,045 24 0,005 54 0,019 25 10,3 % 55 0,010 26 0,14 56 0,003 27 6,63 28 51,5 % 29 2,40 30 1,72
[00220] Na Tabela 2, os valores expressos como % significam a % de inibição de PDE9A em 10 μM do composto.

Claims (9)

REIVINDICAÇÕES
1. Composto caracterizado pelo fato de que é representado pela seguinte fórmula química 1 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. [Fórmula Química 1] Na fórmula química 1, A é fenila não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, C1-5 alquila reta ou ramificada não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, cicloalquila de 3 a 6 membros não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, ou heterocicloalquila de 3 a 6 membros não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, R1 e R2 são, cada um, independentemente -H, halogênio, -NO2, -CF3, fenila não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, C1-5 alquila reta ou ramificada não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, ou C1-5 alcóxi reto ou ramificado não substituído ou substituído por um ou mais halogênios.
2. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que, A é fenila, C1-5 alquila reta ou ramificada não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, ou heterocicloalquila de 3 a 6 membros não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, R1 e R2 são, cada um, independentemente -H,
halogênio, -NO2, -CF3, fenila, C1-5 alquila reta ou ramificada não substituída ou substituída por um ou mais halogênios, ou C1-5 alcóxi reto ou ramificado não substituído ou substituído por um ou mais halogênios.
3. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que, A é fenila, , , , , ou ,e R1 e R2 são cada qual independentemente -H, halogênio, -NO2, -CF3, -CH3, -C(CH3)3, ou fenila.
4. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que, o composto é 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-(tetra-hidro-2H-piran- 4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-fenil-1,5-di-hidro-4H- pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-fluorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-clorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-bromobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona,
6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-(4,4-difluorociclo- hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-(tetra-hidro-2H- tiopiran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-ciclopropil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-isopropil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-((benzo[d]oxazol-2-ilmetil)tio)-1-ciclo-hexil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(4,4- difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(tetra-hidro- 2H-tiopiran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-ciclo-hexil- 1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-ciclopropil- 1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-isopropil- 1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-((1-(benzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)-1-fenil-1,5-di-hidro- 4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-((1-benzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)-1-(4,4-difluorociclo- hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-((1-benzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)-1-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-((1-(6-metilbenzo[d]oxazol- 2-il)etil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona,
6-((1-(6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)-1-(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-((1-(6-metilbenzo[d]oxazol-2-il)etil)tio)-1-(tetra-hidro- 2H-tiopiran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 1-fenil-6-(((5-fenilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((4-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-(terc-butil)benzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil- 1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((6-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((4-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5-di- hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-nitro-6-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil- 1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5,7-diclorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5- di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5,7-dimetilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5- di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-metoxibenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5- di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((6-metoxibenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-fenil-1,5- di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 1-fenil-6-(((5-(trifluorometil)benzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((6-nitrobenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona,
1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((5-nitrobenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((4-nitrobenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-cloro-6-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(4,4- difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((4-metilbenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-(terc-butil)benzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(4,4- difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5,7-diclorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(4,4- difluorociclo-hexil)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((5,7-dimetilbenzo[d]oxazol-2- il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((5-metoxibenzo[d]oxazol- 2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((6-metoxibenzo[d]oxazol- 2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 1-(4,4-difluorociclo-hexil)-6-(((5- (trifluorometil)benzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4- d]pirimidin-4-ona, 6-(((6-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((4-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-cloro-6-nitrobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((4-metilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(tetra-hidro-
2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5-(terc-butil)benzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(tetra- hidro-2H-piran4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5,7-diclorobenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(tetra- hidro-2H-piran4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, 6-(((5,7-dimetilbenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona, ou 6-(((6-metoxibenzo[d]oxazol-2-il)metil)tio)-1-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)-1,5-di-hidro-4H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-ona.
5. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende o composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, e um veículo farmaceuticamente aceitável.
6. Composição farmacêutica para tratar ou prevenir uma doença relacionada à fosfodiesterase 9A, caracterizada pelo fato de que compreende o composto ou um seu sal farmaceuticamente aceitável como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4 como um ingrediente ativo.
7. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a doença é uma doença neurológica ou uma doença mental.
8. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o distúrbio neurológico ou mental é doença de Alzheimer, doença de Huntington, demntia do corpo de Lewy ou síndrome de Pick.
9. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a doença é insuficiência cardíaca, em particular insuficiência cardíaca que preserva o débito cardíaco ou doença falciforme.
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Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1598354A1 (en) * 2004-05-18 2005-11-23 Vasopharm Biotech GmbH Compounds containing a N-heteroaryl moiety linked to fused ring moieties for the inhibition of NAD(P)H oxidases and platelet activation
WO2008055959A1 (en) * 2006-11-09 2008-05-15 Galapagos N.V. Novel compounds useful for the treatment of degenerative & inflammatory diseases
GEP20125405B (en) * 2007-05-11 2012-02-27 Pfizer Amino-heterocyclic compounds
AU2008323694A1 (en) * 2007-11-07 2009-05-14 Foldrx Pharmaceuticals, Inc. Modulation of protein trafficking
TW201206935A (en) * 2010-07-16 2012-02-16 Lundbeck & Co As H Triazolo-and pyrazoloquinazoline derivatives as PDE10A enzyme inhibitor
UA110347C2 (uk) * 2010-08-12 2015-12-25 Бьорінгер Інгельхайм Інтернаціональ Гмбх ПОХІДНІ 6-ЦИКЛОАЛКІЛ-1,5-ДИГІДРОПІРАЗОЛО[3,4-d]ПІРИМІДИН-4-ОНУ І ЇХ ЗАСТОСУВАННЯ ЯК ІНГІБІТОРІВ PDE9A
US8809345B2 (en) * 2011-02-15 2014-08-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh 6-cycloalkyl-pyrazolopyrimidinones for the treatment of CNS disorders
KR101379808B1 (ko) * 2012-04-03 2014-04-24 울산대학교 산학협력단 산화질소 생성 억제용 피라졸로피리미딘 유도체 화합물
WO2016040951A1 (en) * 2014-09-12 2016-03-17 Vanderbilt University Compounds and methods for inhibition of hedgehog signaling and phosphodiesterase
WO2016192083A1 (en) * 2015-06-04 2016-12-08 Merck Sharp & Dohme Corp. Dihydropyrazolopyrimidinone compounds as pde2 inhibitors
WO2017123766A1 (en) * 2016-01-12 2017-07-20 Sperovie Biosciences, Inc. Compounds and compositions for the treatment of disease
CN108101910B (zh) * 2017-12-12 2020-01-10 中山大学 一种N-取代吡唑并[3,4-d]嘧啶酮类化合物及其制备方法和应用

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