BR112021010178A2

BR112021010178A2 - Bactérias christensenellaceae incluindo christensenella minuta e usos das mesmas

Info

Publication number: BR112021010178A2
Application number: BR112021010178-0A
Authority: BR
Inventors: Yolanda Sanz Herranz; Eva Maria Gomez Del Pulgar Villanueva; Ana Agusti Feliu; Carmen Maria Cenit Laguna
Original assignee: Consejo Superior De Investigaciones Cientificas (Csic)
Priority date: 2018-11-28
Filing date: 2019-11-27
Publication date: 2021-08-31
Also published as: US20220000942A1; CN113166714A; KR20210097716A; MX2021005984A; IL283418A; ES2763350B2; EP3887504A1; ES2763350A1; BR112021010178A8; AU2019389278A1; WO2020109414A1; CA3120905A1; JP2022513154A

Abstract

bactérias christensenellaceae incluindo christensenella minuta e usos das mesmas. a presente invenção se refere a bactérias christensenellaceae que incluem a cepa dsm 32891 de christensenella minuta, aos componentes celulares, metabólitos e moléculas secretadas dos mesmos, e a composições que compreendem os produtos acima, e também ao uso da referida cepa para a prevenção e/ou tratamento de transtornos de humor ou afetivos, tais como depressão, transtornos de estresse, transtornos de ansiedade e enxaqueca.

Description

“BACTÉRIAS CHRISTENSENELLACEAE INCLUINDO CHRISTENSENELLA MINUTA E USOS DAS MESMAS” REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS

[0001] Este pedido reivindica o benefício do Pedido de Patente Espanhola nº de série P201831153, depositado em 28 de novembro de 2018, que é incorporado a este documento por referência em sua totalidade.

DIVULGAÇÃO DA SEQUÊNCIA

[0002] Este pedido inclui, como parte de sua divulgação, uma listagem de sequência biológica contida em um arquivo de texto anexo, que é incorporado a este documento por referência em sua totalidade.

CAMPO

[0003] A presente divulgação se refere a bactérias Christensenellaceae incluindo Christensenella minuta cepa DSM 32891 e ao uso das mesmas para a prevenção ou tratamento de transtornos afetivos ou de humor, tais como depressão, transtornos de estresse e transtornos de ansiedade. A presente divulgação se enquadra no campo da atividade terapêutica de composições ou preparações farmacêuticas e também no campo da nutrição.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0004] Os transtornos do humor e, em particular, a depressão, são uma das principais causas de incapacidade em todo o mundo. Estima-se que o custo total dos transtornos mentais seja de 798 bilhões de euros, dos quais os transtornos do humor representam um custo anual direto e indireto de cerca de 118 bilhões de euros [1]. Os referidos transtornos de humor incluem depressão, depressão típica ou melancólica e atípica, depressão pré e pós-parto, transtorno bipolar, depressão psicótica, distimia, transtorno de personalidade depressiva, transtorno afetivo sazonal, transtorno de humor causado por abuso de substâncias ou pelo uso de drogas, etc. Além disso, a eficácia das terapias atuais é um tanto limitada. Estima-se que apenas cerca de

50% dos tratamentos antidepressivos são eficazes; muitos pacientes mantêm sintomatologia subclínica e outros não apresentam melhora.

[0005] A depressão é uma patologia complexa caracterizada pela presença de sintomas heterogêneos, o que sugere a existência de diferentes formas de depressão ou fenótipos (por exemplo, depressão típica, caracterizada por maior hiperatividade do eixo hipotálamo- hipófise-adrenal [HPA] e depressão atípica, caracterizada por maior desregulação metabólica e aumento do apetite/peso) [2, 3]. No entanto, pouco se sabe sobre os mecanismos moleculares subjacentes a essas patologias. A depressão também mostra uma alta comorbidade com distúrbios mentais (por exemplo, ansiedade) e distúrbios físicos (por exemplo, distúrbios cardiometabólicos, como síndrome metabólica, diabetes e doença cerebrovascular), que afetam adversamente o curso da doença, reduzem a resposta terapêutica e aumentam o risco de sofrer da referida doença.

[0006] Pesquisas epidemiológicas em seres humanos revelaram associações entre alterações na configuração da microbiota intestinal (disbiose) e transtornos psiquiátricos, tais como transtornos de humor ou afetivos e, entre estes, em particular, a depressão [4-9]. Pensa-se que essas associações entre disbiose e depressão são determinadas em grande medida por fatores ambientais psicossociais (trauma infantil, estresse relacionado ao trabalho, falta de sono) e estilo de vida (alimentação pouco saudável, estilo de vida sedentário, medicação), bem como por outras características individuais como o genoma, idade e sexo da pessoa em questão e a presença de comorbidades [2, 10]. Em modelos animais, um aumento induzido por estresse na resposta do eixo HPA, um fator de risco bem estabelecido para depressão, causa disbiose intestinal; a microbiota disbiótica, por sua vez, contribui para os transtornos comportamentais e de humor [11]. Estudos em animais também mostram que a configuração específica da microbiota intestinal influencia a resposta ao estresse, agravando ou melhorando suas consequências neuroquímicas ou comportamentais, por meio de mecanismos que coordenam o diálogo dos sistemas imunológico, endócrino ou nervoso [8, 12, 13].

[0007] O uso de probióticos convencionais (lactobacilos e bifidobactérias) para o tratamento da depressão demonstrou ter efeitos diferentes dependendo da cepa utilizada. Possivelmente, as bifidobactérias têm sido as mais comumente utilizadas para avaliar sua eficácia no combate à ansiedade e à depressão; no entanto, os resultados obtidos nem sempre foram conclusivos ou de magnitude suficiente [14, 15]

[0008] Além das bifidobactérias, outras espécies bacterianas podem ser de interesse para essas aplicações, mas estudos observacionais que estabelecem associações entre diferentes grupos bacterianos e depressão, mostrando um aumento ou redução nos indivíduos que sofrem dessa depressão, não são conclusivos. Assim, por exemplo, Yu et al. (2017) [16] observaram baixas proporções dos grupos bacterianos Marvinbryantia, Corynebacterium, Psychrobacter, Christensenella, Lactobacillus, Peptostreptococcaceae incertae sedis, Anaerovorax, Clostridialesincertae sedis e Coprococcus em modelos de camundongos de depressão induzida. No entanto, Mironova et al. (2017) [17] publicaram resultados que mostram que a microbiota de pacientes com doença de Parkinson e depressão moderada mostrou uma abundância maior de Christensenella minuta, Clostridium disporicum e Oscillibacter valericigenes em comparação com pacientes com doença de Parkinson e depressão leve ou sem depressão.

[0009] Nesse sentido, a busca por estratégias preventivas e terapêuticas mais eficazes continua. Essas estratégias podem melhorar a gestão dos transtornos de humor, o que permite reduzir seu impacto econômico e social.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0010] A presente invenção se refere à cepa Christensenella minuta (C. mintua) DSM 32891 (C. minuta DSM 32891), aos componentes celulares, metabólitos e moléculas secretadas da referida cepa e às composições que compreendem os produtos mencionados acima, bem como o uso dos mesmos para a prevenção e/ou tratamento de transtornos de humor (como depressão), transtornos de estresse e transtornos de ansiedade.

[0011] Os inventores constataram que a cepa de C. minuta DSM 32891 tem a capacidade de atenuar o comportamento depressivo em animais expostos a estresse social agudo. Esse efeito foi demonstrado pela administração oral das bactérias (cepa DSM 32891 de C. minuta) a um modelo animal de estresse social que induz sintomas depressivos (ver exemplo 2).

[0012] Além disso, os inventores mostraram que a administração da cepa DSM 32891 de C. minuta modula as respostas de estresse hormonal em animais expostos a um estresse social de 10 dias (exemplo 3), indicando que doenças e afecções envolvendo respostas de estresse hormonal podem ser tratáveis pela administração dessa cepa também.

[0013] Assim, em um aspecto, a presente invenção refere-se à cepa DSM 32891 de Christensenella minuta, doravante a “cepa de acordo com a invenção”, “cepa DSM 32891 de C. minuta” ou “cepa DSM 32891”.

[0014] A cepa DSM 32891 de C. minuta foi isolada de fezes de humanos saudáveis. A cepa foi depositada pelo requerente em 7 de agosto de 2018 no Leibniz Institute DSMZ como Autoridade Depositária Internacional ao abrigo do Tratado de Budapeste - Coleção Alemã de Micro- organismos e Culturas de Células, Inhoffenstraβe 7B, 38.124 Braunschweig, Alemanha). O número do depósito atribuído foi DSM 32891.

[0015] A classificação científica da cepa de acordo com a invenção é: Domínio: Bactérias; Filo: Firmicutes; Classe: Clostridia; Ordem: Clostridiales; Família: Christensenellaceae; Espécie: C. minuta.

[0016] Outro aspecto da invenção refere-se a uma cepa derivada da cepa DSM 32891 de C. minuta, em que a referida cepa mantém ou melhora as capacidades descritas ao longo da presente invenção. O micro- organismo derivado pode ser produzido naturalmente ou intencionalmente, por métodos de mutagênese que são conhecidos na técnica anterior, tais como,

embora não se limitando a, o crescimento do micro-organismo original na presença de agentes mutagênicos ou produtores de estresse, ou por engenharia genética direcionada à modificação de genes específicos. De acordo com uma modalidade preferida, a cepa derivada da cepa DSM 32891 de C. minuta é um mutante geneticamente modificado. Os termos cepa mutante ou cepa derivada podem ser usados indistintamente.

[0017] Outro aspecto da invenção se refere a uma bactéria que compreende uma sequência de rRNA 16S com uma identidade de sequência percentual especificada com a sequência de rRNA 16S da cepa DSM 32891 de C. minuta (SEQ ID Nº: 3), tal como uma sequência de rRNA 16S tendo pelo menos 90% de identidade, pelo menos 95% de identidade, pelo menos 96% de identidade, pelo menos 97% de identidade, pelo menos 98% de identidade, pelo menos 99% de identidade ou pelo menos 99,5% de identidade com a SEQ ID Nº: 3. A menos que indicado de outra forma, tal bactéria que tem a identidade percentual acima mencionada com a SEQ ID Nº: 3, por exemplo, pelo menos 90% de identidade, pelo menos 95% de identidade, pelo menos 96% de identidade, pelo menos 97% de identidade, pelo menos 98% de identidade , pelo menos 99% de identidade, ou pelo menos 99,5% de identidade com a mesma, pode ser substituída pela cepa DSM 32891 de C. minuta nas modalidades da presente divulgação (incluindo as cepas, os métodos, usos e as composições descritos neste documento).

[0018] A cepa DSM 32891 de C. minuta, ou qualquer mutante ou derivado da mesma, pode ser usada em qualquer forma que produza os efeitos descritos, tal como, por exemplo, de acordo com uma modalidade preferida da invenção, a cepa DSM 32891 de C. minuta está na forma de células viáveis (cultiváveis ou não cultiváveis) ou, de acordo com outra modalidade preferida da invenção, a cepa está na forma de células não viáveis (células “mortas” que foram inativadas por qualquer técnica conhecida na técnica anterior, tal como, por exemplo, mas não se limitando a, calor, congelamento ou radiação ultravioleta).

[0019] Outro aspecto da presente invenção refere-se aos componentes celulares, metabólitos, moléculas secretadas ou qualquer uma das combinações dos mesmos, obtidos a partir da cepa de acordo com a invenção, ou de uma combinação de micro-organismos que compreende pelo menos uma cepa de acordo com a invenção.

[0020] Entre os componentes celulares das bactérias podem ser incluídos componentes da parede celular (tais como, por exemplo, mas não limitados a, peptidoglicano), ácidos nucleicos, componentes de membrana, ou outros, tais como proteínas, lipídios, carboidratos e combinações dos mesmos, tais como lipoproteínas, glicolipídeos ou glicoproteínas. Metabólitos incluem qualquer molécula produzida ou modificada pelas bactérias como consequência da sua atividade metabólica durante o crescimento, a sua utilização em processos tecnológicos (por exemplo, mas não se limitando a, processos de produção de alimentos ou fármacos), durante o armazenamento do produto ou durante o trânsito gastrointestinal. Exemplos dos referidos metabólitos são, mas não estão limitados a, ácidos orgânicos e inorgânicos, proteínas, peptídeos, aminoácidos, enzimas, lipídeos, carboidratos, lipoproteínas, glicolipídeos, glicoproteínas, vitaminas, sais, metais ou ácidos nucleicos. As moléculas secretadas incluem qualquer molécula exportada ou liberada para fora pelas bactérias durante o seu crescimento, a sua utilização em processos tecnológicos (por exemplo, produção de alimentos ou fármacos), armazenamento de produtos ou trânsito gastrointestinal. Exemplos das referidas moléculas são, mas não estão limitados a, ácidos orgânicos e inorgânicos, proteínas, peptídeos, aminoácidos, enzimas, lipídios, carboidratos, lipoproteínas, glicolipídios, glicoproteínas, vitaminas, sais, metais ou ácidos nucleicos.

[0021] Outro aspecto da presente invenção refere-se a uma composição, doravante referida como a “composição de acordo com a invenção”, que compreende a cepa de acordo com a invenção e/ou os componentes celulares, metabólitos ou moléculas secretadas da cepa de acordo com a invenção ou qualquer uma das suas combinações.

[0022] A composição, definida de maneira geral, é um conjunto de componentes que é constituído, pelo menos, pela cepa de acordo com a invenção em qualquer concentração; ou pelo menos pelos componentes celulares, metabólitos ou moléculas secretadas da cepa de acordo com a invenção ou qualquer das suas combinações; ou uma combinação dos mesmos.

[0023] Em uma modalidade preferida, a composição de acordo com a invenção tem uma concentração da cepa de acordo com a invenção de entre 104 e 1014 unidades formadoras de colônias (CFU) por grama ou mililitro da composição final. O termo CFU refere-se ao número de bactérias capazes de dar origem a uma colônia após a propagação, ou seja, bactérias viáveis. Deve ser entendido que bactérias não viáveis podem estar presentes nas composições também e, em geral, não se espera que tenham qualquer efeito adverso nas propriedades das bactérias vivas na composição e, pelo contrário, podem exercer um efeito sobre suas próprias.

[0024] Em outra modalidade particular, a composição de acordo com a invenção também pode compreender pelo menos um outro micro-organismo adicional que é diferente da cepa de acordo com a invenção e/ou dos componentes celulares, metabólitos ou moléculas secretadas dos mesmos, ou qualquer combinação dos mesmos. Por exemplo, mas não limitado a, o micro-organismo adicional que pode fazer parte da referida composição é selecionado dentre pelo menos um dos seguintes grupos:

[0025] - pelo menos uma cepa de outra espécie da família Christensenellaceae, especialmente do gênero Christensenella e especialmente da espécie Christensenella minuta;

[0026] - pelo menos uma bactéria lática ou bifidobactéria de origem intestinal, alimentar ou ambiental. As bactérias acido láticas são selecionadas da lista que compreende, mas não está limitada a, uma bactéria do gênero Bifidobacterium, Lactobacillus, Lactococcus, Enterococcus, Propionibacterium, Leuconostoc, Weissella, Pediococcus ou Streptococcus;

[0027] - pelo menos uma cepa de outros grupos filogenéticos, gêneros ou espécies de procariotas de origem intestinal, alimentar ou ambiental, tais como, por exemplo, mas não se limitando a, Archaea, Firmicutes, Bacteroidetes, Proteobacteria, Actinobacteria, Verrucomicrobia, Fusobacteria, Metanobacteria, Spirochaetes, Fibrobacteres, Deferribacteres, Deinococcus, Thermus, Cianobacteria, Methanobrevibacterium, Peptostreptococcus, Ruminococcus, Coprococcus, Subdolingranulum, Dorea, Bulleidia, Anaerofustis, Gemella, Roseburia, Catenibacterium, Dialister, Anaerotruncus, Staphylococcus, Micrococcus, Propionibacterium, Enterobacteriaceae, Faecalibacterium, Bacteroides, Parabacteroides, Prevotella, Eubacterium, Akkermansia, Bacillus, Butyrivibrio ou Clostridium;

[0028] - pelo menos uma cepa de fungo ou levedura, tal como, por exemplo, mas não se limitando àquelas pertencentes ao gênero Saccharomyces, Candida, Pichia, Debaryomyces, Torulopsis, Aspergillus, Rhizopus, Mucor ou Penicillium.

[0029] O referido micro-organismo adicional pode ser uma cepa da mesma espécie ou de uma espécie ou grupo taxonômico de micro- organismos diferente daquele correspondente à cepa de acordo com a invenção. As células compreendidas na composição podem ser viáveis ou não viáveis e podem estar em qualquer fase do estado de desenvolvimento ou crescimento (latente, exponencial, estacionário, etc.), independentemente da morfologia apresentada. Em uma modalidade particular, o referido micro-organismo adicional compreende pelo menos uma bactéria do intestino ou uma bactéria do ácido lático.

[0030] Opcionalmente, em outra modalidade particular, a composição de acordo com a invenção também pode compreender pelo menos um componente bioativo (substância ativa, ingrediente ativo ou agente terapêutico), tal como, por exemplo, componentes de alimentos, produtos vegetais e/ou fármacos.

[0031] O termo “componente bioativo” refere-se a um composto com atividade biológica no campo de aplicação da patente que pode melhorar ou complementar a atividade da cepa DSM 32891 de C. minuta, incluindo ingredientes ou componentes de alimentos (por exemplo, e não limitados a, ácidos graxos poli-insaturados, ácido linoleico conjugado, prebióticos, fibra, goma de guar, glucomanano, quitosano, picolinato de cobre, cálcio, etc.), outros probióticos, plantas, extratos ou componentes de plantas, e fármacos.

[0032] Em uma modalidade particular, a composição de acordo com a invenção é uma composição farmacêutica. A composição farmacêutica é um conjunto de componentes que é constituído, pelo menos, pela cepa de acordo com a invenção em qualquer concentração; ou pelo menos pelos componentes celulares, metabólitos ou moléculas secretadas da cepa de acordo com a invenção ou qualquer uma das combinações dos mesmos, que tem pelo menos uma aplicação na melhoria do bem-estar físico, fisiológico ou psicológico de um sujeito, o que resulta em uma melhoria no estado geral de saúde do referido sujeito ou uma redução do risco de doença. A referida composição farmacêutica pode ser um remédio.

[0033] O termo “remédio” tem um significado mais limitado do que o de “composição farmacêutica”, conforme definido na presente invenção, visto que um remédio ou medicamento tem necessariamente um efeito preventivo ou terapêutico. O dito remédio ao qual a presente invenção se refere pode ser para uso humano ou veterinário. Um “remédio para uso humano” é qualquer substância ou combinação de substâncias que se apresenta como tendo propriedades para o tratamento ou prevenção de doenças em seres humanos ou que pode ser usada em seres humanos ou administrada a seres humanos a fim de restaurar, corrigir ou modificar as funções fisiológicas, produzindo uma ação farmacológica, imunológica ou metabólica, ou para estabelecer um diagnóstico médico. O termo "medicamento para uso veterinário' é qualquer substância ou combinação de substâncias que se apresenta como tendo propriedades curativas ou preventivas em relação a doenças animais ou que pode ser administrada ao animal a fim de restabelecer, corrigir ou modificar as funções fisiológicas produzindo uma ação farmacológica, imunológica ou metabólica, ou para estabelecer um diagnóstico veterinário. São também consideradas “medicamentos veterinários” as “pré-misturas para alimentos medicamentosos para animais” preparadas para incorporação em um alimento para animais.

[0034] Além do requisito de eficácia terapêutica, onde a referida composição farmacêutica pode exigir o uso de outros agentes terapêuticos, pode haver razões fundamentais adicionais que em geral requerem ou tornam aconselhável o uso de uma combinação de um composto de acordo com a invenção e um componente bioativo, onde uma atividade é reivindicada para o referido componente bioativo de modo a constituir um remédio. O referido composto de acordo com a invenção obviamente se refere à cepa de acordo com a invenção, ou à cepa derivada dela, ou aos componentes celulares, metabólitos ou moléculas secretadas, ou qualquer das combinações dos mesmos, obtidos a partir da cepa de acordo com a invenção.

[0035] Em uma modalidade particular, a composição farmacêutica também compreende pelo menos um veículo e/ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis.

[0036] O "veículo" ou transportador é de preferência uma substância inerte. A função do veículo é facilitar a incorporação de outros compostos, permitir uma melhor dosagem e administração ou dar consistência e forma à composição farmacêutica. Os veículos exemplares incluem crioprotetores ou lioprotetores. Assim, o veículo é uma substância que é utilizada no remédio para diluir qualquer um dos componentes da composição farmacêutica de acordo com a presente invenção até um volume ou peso fixo; ou alternativamente, mesmo sem diluir os referidos componentes, o referido veículo é capaz de permitir uma melhor dosagem e administração ou de dar consistência e forma ao remédio. Quando a forma de apresentação é líquida, o veículo farmaceuticamente aceitável é o diluente.

[0037] Composições exemplares da divulgação incluem uma bactéria da presente divulgação, por exemplo, a cepa DSM 32891 da bactéria C. minuta e um "lioprotetor", que é uma substância que, quando combinada com uma bactéria, por exemplo, uma bactéria da presente divulgação, reduz significativamente a instabilidade química e/ou física da mesma após a desidratação (por exemplo, liofilização) e/ou armazenamento subsequente. Lioprotetores exemplares incluem açúcares e seus álcoois de açúcar correspondentes, tais como sacarose, lactose, trealose, dextrano, eritritol, arabitol, xilitol, sorbitol e manitol; aminoácidos, tais como arginina ou histidina; sais liotrópicos, tais como sulfato de magnésio; polióis, tais como propilenoglicol, glicerol, poli(etilenoglicol) ou polipropilenoglicol); e suas combinações. Os lioprotetores exemplares adicionais incluem gelatina, dextrinas, amido modificado e carboximetilcelulose. Álcoois de açúcar preferidos são aqueles compostos obtidos por redução de mono e dissacarídeos, tais como lactose, trealose, maltose, lactulose e maltulose. Exemplos adicionais de álcoois de açúcar são glucitol, maltitol, lactitol e isomaltulose. O lioprotetor é geralmente adicionado à formulação pré-liofilizada em uma "quantidade lioprotetora". Isso significa que, após a liofilização das bactérias na presença da quantidade lioprotetora do lioprotetor, as bactérias retêm a viabilidade (capacidade de formar colônias mediante reconstituição) em maior medida do que se desidratadas e armazenadas da mesma forma na ausência do lioprotetor.

[0038] Composições exemplares da divulgação incluem bactérias da presente divulgação, tais como bactérias C. minuta cepa DSM 32891, e um "crioprotetor", que é uma substância usada para proteger as referidas bactérias de danos durante o congelamento e descongelamento. O crioprotetor pode ser qualquer aditivo, desde que proteja as bactérias contra danos durante o congelamento e descongelamento. Exemplos de crioprotetores incluem, mas não estão limitados a, açúcares (por exemplo, sacarose, frutose,

trealose), poliálcoois (por exemplo, glicerol, sorbitol, manitol), polissacarídeos (por exemplo, celuloses, amido, gomas, maltodextrina), poliéteres (por exemplo, polipropilenoglicol, polietilenoglicol, polibutilenoglicol), antioxidantes (por exemplo, antioxidantes naturais, tais como ácido ascórbico, beta-caroteno, vitamina E, glutationa, antioxidantes químicos), óleos (por exemplo, óleo de colza, óleo de girassol, azeite), tensoativos (por exemplo, Tween20, Tween80, ácidos graxos), peptonas (por exemplo, peptonas de soja, peptona de trigo, peptona de soro de leite), triptonas, vitaminas, minerais (por exemplo, ferro, manganês, zinco), hidrolisados (por exemplo, hidrolisados de proteína, tais como soro de leite em pó, extrato de malte, soja), aminoácidos, peptídeos, proteínas, ácidos nucleicos, nucleotídeos, nucleobases (por exemplo, citosina, guanina, adenina, timina, uracila, xantina, hipoxantina, inosina), extratos de levedura (por exemplo, extratos de levedura das espécies Saccharomyces, Kluyvermomycesa ou Torula), extrato de carne bovina , fatores de crescimento e lipídios.

[0039] O termo "excipiente" refere-se a uma substância que ajuda a absorção de qualquer um dos componentes da composição de acordo com a presente invenção, estabiliza os referidos componentes ou auxilia na preparação da composição farmacêutica no sentido de dar consistência à referida composição farmacêutica ou adicionar sabores que tornam a referida composição farmacêutica mais agradável. Assim, os excipientes podem ter uma função de manter os componentes juntos, tais como, por exemplo, amidos, açúcares ou celuloses, uma função adoçante, uma função corante, uma função protetora do remédio, tal como, por exemplo, isolar o referido remédio do ar e/ou umidade, uma função de enchimento para uma pílula, cápsula ou qualquer outra forma de apresentação tal como, por exemplo, fosfato de cálcio dibásico, uma função desintegrante para facilitar a dissolução dos componentes e a absorção dos mesmos no intestino, sem excluir outros tipos de excipientes não mencionados neste parágrafo. Assim, o termo "excipiente" é definido como aquele material que, incluído nas formas galênicas, é adicionado aos ingredientes ativos ou às suas associações para tornar possível a preparação e estabilidade dos mesmos, para modificar as propriedades organolépticas dos mesmos ou para determinar as propriedades físico-químicas da composição farmacêutica e sua biodisponibilidade. O excipiente ”farmaceuticamente aceitável” deve permitir a atividade dos compostos da composição farmacêutica, ou seja, deve ser compatível com os referidos componentes.

[0040] Além disso, como será entendido por um versado na técnica, o excipiente e o veículo, quando presentes, devem ser farmacologicamente aceitáveis, isto é, o excipiente e o veículo devem ser permitidos e avaliados de modo a não causar danos aos organismos aos quais os referidos excipientes ou veículos são administrados.

[0041] A composição farmacêutica ou remédio podem ser apresentados em qualquer forma de administração clinicamente permitida e em uma quantidade terapeuticamente eficaz. Por exemplo, a referida composição farmacêutica ou remédio podem estar em uma forma adequada para administração oral, sublingual, nasal, intratecal, brônquica, retal, transdérmica, inalada ou parenteral, preferencialmente em uma forma adequada para administração oral. A composição farmacêutica de acordo com a invenção pode ser formulada em formas sólidas, semissólidas, líquidas ou gasosas, tais como um comprimido, cápsula, pó, pélete, pomada, solução, supositório, injeção, inalante, gel, microesfera ou aerossol. A forma adequada para administração oral é selecionada a partir da lista que compreende, mas não está limitada a, gotas, xarope, tisana, elixir, suspensão, suspensão extemporânea, frasco para beber, comprimido, cápsula, pélete, hóstia, pílula, comprimido, goma medicamentosa, pastilha, ou na forma liofilizada. Em uma modalidade particular, a composição de acordo com a invenção é apresentada em uma forma adequada para administração oral, sublingual, nasal, brônquica, linfática, retal, transdérmica, inalada ou parenteral.

[0042] Em uma modalidade mais particular, a composição de acordo com a invenção é apresentada em uma forma adequada para administração oral. A forma adequada para administração oral refere-se a um estado físico que pode permitir a administração oral. A referida forma adequada para administração oral é selecionada a partir da lista que compreende, mas não está limitada a, gotas, xarope, tisana, elixir, suspensão, suspensão extemporânea, frasco para beber, comprimido, cápsula, pélete, hóstia, pílula, comprimido em forma de cápsula, goma medicamentosa, pastilha, ou na forma liofilizada.

[0043] A "forma galênica" ou "forma farmacêutica" é o arranjo pelo qual os ingredientes ativos e excipientes são adaptados para formar um remédio. É definida como a combinação da forma em que a composição farmacêutica é apresentada pelo fabricante e a forma em que a referida composição farmacêutica é administrada. Na presente invenção, a expressão "quantidade eficaz" ou "quantidade terapeuticamente eficaz" referem- se à quantidade do componente da composição farmacêutica que, quando administrada a um mamífero, de preferência um ser humano, é suficiente para produzir a prevenção e/ou tratamento, conforme definido abaixo, de uma doença ou condição patológica de interesse no mamífero, de preferência um ser humano. A quantidade terapeuticamente eficaz irá variar, por exemplo, de acordo com a atividade da cepa de acordo com a invenção; dos componentes celulares, metabólitos, moléculas secretadas ou qualquer uma das combinações dos mesmos, em qualquer forma de apresentação; a quantidade terapeuticamente eficaz também irá variar de acordo com a estabilidade metabólica e a duração da ação do composto; a idade, peso corporal, estado geral de saúde, sexo e dieta do paciente; a forma e o tempo de administração, a velocidade de excreção, a combinação de fármacos; a gravidade do distúrbio ou condição patológica particular; e o sujeito que se submete à terapia, mas pode ser determinada por uma pessoa versada na técnica de acordo com seu próprio conhecimento e esta descrição.

[0044] Como alternativa à composição farmacêutica, a composição de acordo com a invenção também pode ser uma composição nutricional.

[0045] O termo "composição nutricional" de acordo com a presente invenção refere-se àquele alimento que, enquanto fornece nutrientes ao sujeito que toma a referida composição nutricional, afeta beneficamente uma ou mais funções do organismo, de modo a proporcionar um melhor estado de saúde e bem-estar. Consequentemente, a referida composição nutricional pode ser destinada à prevenção e/ou tratamento de uma doença ou do fator que causa uma doença. Assim, o termo "composição nutricional" de acordo com a presente invenção pode ser usado como um sinônimo para um alimento funcional ou um alimento para fins nutricionais específicos ou um alimento medicinal.

[0046] Em uma modalidade particular, a composição nutricional é um alimento, um suplemento, um nutracêutico, um probiótico ou um simbiótico.

[0047] Em uma modalidade mais particular, o alimento é selecionado da lista que compreende um produto lácteo, produto vegetal, produto à base de carne, aperitivo, chocolate, bebida ou alimento infantil. O produto lácteo é selecionado da lista que compreende, mas não está limitada a, um produto derivado de leite fermentado (por exemplo, mas não limitado a, iogurte ou queijo) ou leite não fermentado (por exemplo, mas não limitado a, sorvete, manteiga, margarina, soro de leite). O produto vegetal é, por exemplo, mas não se limita a, um cereal em qualquer forma de apresentação, fermentado ou não fermentado. A bebida pode ser, mas não se limita a, qualquer suco de fruta ou leite não fermentado.

[0048] O termo "suplemento", um sinônimo de qualquer um dos termos "suplemento dietético", "suplemento nutricional" ou "suplemento alimentar", é um "ingrediente alimentar" destinado a complementar a nutrição. Alguns exemplos de suplementos dietéticos são, mas não estão limitados a, vitaminas, minerais, produtos botânicos, aminoácidos e componentes de alimentos, tais como enzimas e extratos glandulares. Os referidos suplementos não são apresentados como substitutos de um alimento convencional ou como um único componente de uma refeição ou de uma dieta nutricional, mas como um complemento dietético.

[0049] O termo "nutracêutico", conforme usado na presente invenção, refere-se a substâncias que foram isoladas de um alimento e usadas em uma forma dosada que têm um efeito benéfico à saúde.

[0050] O termo "probiótico", conforme utilizado na presente invenção, refere-se a micro-organismos vivos que, quando fornecidos em quantidades adequadas, promovem benefícios na saúde do organismo hospedeiro.

[0051] O termo "simbiótico", conforme usado na presente invenção, refere-se aos alimentos que contêm uma mistura de prebióticos e probióticos. Como regra geral, os referidos alimentos contêm um componente prebiótico que promove o crescimento e/ou a atividade metabólica e, em última análise, o efeito do probiótico com o qual o referido alimento é combinado, tal como, por exemplo, mas não limitado à, possível associação de fruto-oligossacarídeos ou galacto-oligossacarídeos com bifidobactérias.

[0052] Outro aspecto da presente invenção refere-se ao uso da cepa de acordo com a invenção, ou dos componentes derivados dela, ou da composição de acordo com a invenção, para a fabricação de um remédio, de uma composição nutricional ou de um alimento.

[0053] Outro aspecto da presente invenção refere-se à cepa de C. minuta DSM 32891, um componente celular, metabólito, molécula secretada ou qualquer uma das suas combinações obtidas a partir da cepa de acordo com a invenção, ou da composição de acordo com a invenção, para uso como um remédio. O termo remédio foi definido anteriormente e aplica-se ao presente aspecto da invenção.

[0054] Em outro aspecto, a presente invenção se refere à cepa de acordo com a invenção, uma cepa derivada da mesma, um componente celular, metabólito, molécula secretada ou qualquer uma das suas combinações obtidas a partir da cepa de acordo com a invenção, ou da composição de acordo com a invenção, para uso na prevenção e/ou tratamento de transtornos de humor (como depressão), transtornos de estresse e transtornos de ansiedade.

[0055] Na presente invenção, o termo "tratamento" refere-se ao combate dos efeitos causados como consequência de uma doença ou condição patológica de interesse em um sujeito (de preferência, um mamífero e, mais preferencialmente, um ser humano) que inclui:

[0056] (i) inibir a doença ou condição patológica, ou seja, retardar o seu desenvolvimento;

[0057] (ii) aliviar a doença ou condição patológica, ou seja, causar a regressão da doença ou condição patológica ou da sintomatologia das mesmas;

[0058] (iii) estabilizar a doença ou condição patológica.

[0059] Na presente invenção, o termo "prevenção" refere-se à prevenção do aparecimento da doença, isto é, prevenir a doença ou condição patológica sendo produzida em um sujeito (de preferência um mamífero e, mais preferencialmente, um ser humano), em particular quando referido sujeito tem uma predisposição para a condição patológica.

[0060] Na presente invenção, os transtornos ou distúrbios do humor incluem, mas não estão limitados a, depressão, transtorno depressivo maior, depressão atípica, depressão típica ou melancólica, depressão psicótica, depressão catatônica, depressão pré e pós-parto, transtorno bipolar, transtorno afetivo sazonal, distimia, transtorno de personalidade depressiva, depressão dupla, transtorno depressivo não especificado, transtorno depressivo breve recorrente, depressão menor,

transtorno do humor induzido por abuso de substâncias ou pelo uso de drogas, etc.

[0061] Métodos exemplares da presente divulgação fornecem a prevenção ou tratamento de distúrbios associados a trauma e distúrbios relacionados a estressores, nos quais a exposição a um evento traumático ou estressante é listada explicitamente como um critério de diagnóstico. Tais distúrbios são referidos neste documento como “transtornos de estresse" e incluem, por exemplo, transtorno de apego reativo, transtorno de engajamento social desinibido, transtorno de estresse pós-traumático (PTSD), transtorno de estresse agudo e transtornos de ajustamento.

[0062] Os métodos da presente divulgação também fornecem a prevenção ou tratamento de transtornos de ansiedade, como ataque de pânico, transtorno do pânico, agorafobia, fobia social ou transtorno de ansiedade social, transtorno obsessivo-compulsivo, transtorno de estresse pós- traumático (ASD), transtorno de ansiedade generalizada ou transtorno de estresse agudo.

[0063] Sem a intenção de ser limitado pela teoria, acredita-se que os transtornos de estresse e transtornos de ansiedade mencionados acima são caracterizados por alteração nos níveis de epinefrina, norepinefrina, serotonina e/ou dopamina, de modo que se espera que os efeitos modulatórios da cepa inventiva DSM 32891 de C. minuta sobre esses hormônios trate, melhore ou amenize essas condições ou um ou mais dos seus sintomas.

[0064] Os sujeitos passíveis de tratamento de acordo com a invenção incluem sujeitos mamíferos, incluindo humanos, sofrendo de ou em risco de qualquer um de uma variedade de transtornos divulgados neste documento, incluindo transtornos de humor (tais como transtornos depressivos), transtornos de ansiedade e transtornos de estresse. Dentro dos métodos da invenção, a cepa DSM 32891 de C. minuta, ou uma composição que compreende a cepa DSM 32891 de C. minuta, é administrada em uma quantidade eficaz para tratar um transtorno especificado sozinha ou em combinação com um fármaco psicoterapêutico incluindo, mas não se limitando a, fármacos das classes gerais de antidepressivos, estabilizadores do humor, ansiolíticos, anticonvulsivantes, antipsicóticos, antiaditivos, supressores do apetite e agonistas opiáceos. (Ver, por exemplo, R J. Baldessarini em Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9ª edição, capítulo 18, McGraw-Hill, 1996).

[0065] Os métodos da presente divulgação podem ser usados para o tratamento ou prevenção de distúrbios em animais humanos ou não humanos. Animais não humanos exemplares incluem, sem limitação, animais de companhia, animais de criação, animais de zoológico, mamíferos, etc., como cães, gatos, porquinhos-da-índia, furões, hamsters, porcos, vacas, cabras, ovelhas, cavalos, camundongos, ratos, etc.

[0066] O referido tratamento ou prevenção de transtornos pode compreender a administração de uma quantidade eficaz da cepa DSM 32891 de C. minuta. A quantidade de bactérias administradas pode compreender entre 104 e 1014 unidades formadoras de colônias (UFC). Uma quantidade eficaz pode ser determinada com base em fatores conhecidos pelos versados na técnica, incluindo, sem limitação, a idade, peso corporal, gênero e tipo e gravidade do transtorno. Se as referidas bactérias são administradas em uma composição, a referida composição tem uma concentração da bactéria dentre 104 e 1014 unidades formadoras de colônias (CFU) por grama ou mililitro de composição final.

[0067] Em outro aspecto, a presente invenção se refere à cepa de acordo com a invenção, à cepa derivada da cepa de acordo com a invenção, ao componente celular, metabólito, molécula secretada ou qualquer uma das suas combinações obtidas a partir da cepa de acordo com a invenção, ou à composição de acordo com a invenção, para uso como um adjuvante no tratamento ou prevenção de transtornos do humor (tais como depressão), transtornos de estresse e transtornos de ansiedade.

[0068] Em modalidades exemplares, a bactéria ou composição da mesma para uso pode ser para administração em qualquer forma de administração clinicamente permitida e em uma quantidade terapeuticamente eficaz. Por exemplo, a referida bactéria ou composição da mesma pode ser para administração oral, sublingual, nasal, intratecal, brônquica, retal, transdérmica, inalada ou parentérica, preferencialmente administração oral. A composição farmacêutica de acordo com a invenção pode ser formulada em formas sólidas, semissólidas, líquidas ou gasosas, tais como um comprimido, cápsula, pó, pélete, pomada, solução, supositório, injeção, inalante, gel, microesfera ou aerossol. A forma adequada para administração oral é selecionada a partir da lista que compreende, mas não está limitada a, gotas, xarope, tisana, elixir, suspensão, suspensão extemporânea, frasco para beber, comprimido, cápsula, pélete, hóstia, pílula, comprimido, goma medicamentosa, pastilha, ou na forma liofilizada. Em uma modalidade particular, a composição de acordo com a invenção é apresentada em uma forma adequada para administração oral, sublingual, nasal, brônquica, linfática, retal, transdérmica, inalada ou parenteral e/ou é administrada por tal via de administração. As vias de administração preferidas entregam a cepa DSM 32891 de C. minuta ou sua composição ao trato gastrointestinal, por exemplo, por administração oral, sublingual ou retal.

[0069] Em uma modalidade mais particular, a composição de acordo com a invenção é apresentada em uma forma adequada para administração oral e/ou é administrada por via oral. A forma adequada para administração oral refere-se a um estado físico que pode permitir a administração oral. A referida forma adequada para administração oral é selecionada a partir da lista que compreende, mas não está limitada a, gotas, xarope, tisana, elixir, suspensão, suspensão extemporânea, frasco para beber, comprimido, cápsula, pélete, hóstia, pílula, comprimido em forma de cápsula, goma medicamentosa, pastilha, ou na forma liofilizada.

[0070] Na presente invenção, "adjuvante" é entendido como aquele composto que ajuda a melhorar a eficácia ou eficiência de outros remédios para o tratamento de transtornos do humor (como depressão), transtornos de estresse e transtornos de ansiedade e enxaquecas que permitiriam que a dosagem e/ou a frequência da sua administração fossem reduzidas ou aumentar a sua eficácia pela administração de uma formulação da cepa de acordo com a invenção com mecanismos com ação complementar.

[0071] Em outro aspecto, a presente invenção se refere ao uso da cepa de acordo com a invenção, de uma cepa derivada da cepa de acordo com a invenção, do componente celular, metabólito, molécula secretada ou qualquer uma das combinações dos mesmos obtidas a partir da cepa de acordo com a invenção, ou da composição de acordo com a invenção, para a preparação de um alimento. O termo remédio foi definido anteriormente na presente descrição e aplica-se ao presente aspecto da invenção. Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria isolada da cepa de Christensenella minuta com o número de depósito DSM 32891.

[0072] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria isolada de uma cepa derivada da cepa de Christensenella minuta com o número de depósito DSM 32891. Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria isolada que compreende um mutante geneticamente modificado da cepa de Christensenella minuta com o número de depósito DSM 32891 ou uma cepa derivada da mesma.

[0073] A referida bactéria isolada pode ser viável ou não viável.

[0074] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece componente celular, metabólito, molécula secretada ou qualquer combinação dos mesmos obtida a partir das bactérias descritas neste documento.

[0075] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma composição que compreende uma bactéria da cepa de Christensenella minuta com o número de depósito DSM 32891. A referida composição também pode compreender pelo menos um componente bioativo. A referida composição pode compreender pelo menos um micro-organismo que é de uma cepa diferente da bactéria, que pode ser uma bactéria intestinal ou uma bactéria lática. A referida composição pode ser uma composição farmacêutica. A referida composição pode ainda compreender pelo menos um veículo e/ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis. A referida composição pode ser apresentada em uma forma adequada para administração oral, sublingual, nasal, brônquica, linfática, retal, transdérmica, inalada ou parenteral. A referida composição pode ser uma composição nutricional. A referida composição pode ser um alimento, um suplemento, um nutracêutico, um probiótico ou um simbiótico. O referido alimento pode ser selecionado a partir da lista que é composta por um produto lácteo, produto vegetal, produto à base de carne, aperitivo, chocolate, bebida ou alimento infantil. A referida composição pode ter uma concentração da bactéria dentre 10 4 e 1014 unidades formadoras de colônias (CFU) por grama ou mililitro de composição final.

[0076] A referida bactéria pode ser liofilizada, em que a referida composição compreende opcionalmente um lioprotetor, tal como um açúcar, álcool de açúcar, aminoácido ou poliol. O referido lioprotetor pode compreender um açúcar ou álcool de açúcar, como sacarose, lactose, trealose, dextrano, eritritol, arabitol, xilitol, sorbitol, manitol, lactulose, maltulose, glucitol, maltitol, lactitol ou isomaltulose; um aminoácido, tal como arginina ou histidina; um sal liotrópico, tal como sulfato de magnésio; um poliol, tal como propilenoglicol, glicerol, poli(etilenoglicol) ou polipropilenoglicol); ou uma gelatina, dextrinas, dextrano, amido modificado, carboximetilcelulose ou hidroxipropil-beta-ciclodextrina, ou uma combinação dos mesmos.

[0077] Os referidos veículo e/ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis podem compreender um crioprotetor, tal como glicerol, ou um crioprotetor selecionado a partir de açúcares, tais como sacarose, frutose, trealose; álcoois de açúcar, tais como glicerol, sorbitol, manitol; polissacarídeos, tais como celuloses, amido, gomas, maltodextrina; poliéteres, tais como polipropilenoglicol, polietilenoglicol, polibutilenoglicol; antioxidantes,

tais como antioxidantes naturais, tais como ácido ascórbico, beta-caroteno, vitamina E, glutationa, antioxidantes químicos; óleos, tais como óleo de colza, óleo de girassol, azeite; tensoativos, tais como Tween20, Tween80, ácidos graxos; peptonas, tais como peptonas de soja, peptona de trigo, peptona de soro de leite; triptonas, vitaminas, minerais, tais como ferro, manganês, zinco; hidrolisados, tais como hidrolisados de proteínas, tais como soro de leite em pó, extrato de malte, soja; aminoácidos, peptídeos, proteínas, ácidos nucleicos, nucleotídeos, nucleobases, tais como citosina, guanina, adenina, timina, uracila, xantina, hipoxantina, inosina; extratos de levedura; extrato de carne bovina; fatores de crescimento; lipídios; e suas combinações.

[0078] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria ou uma composição conforme divulgada neste documento para uso como um medicamento.

[0079] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece um método terapêutico que compreende a administração de uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgada neste documento a um sujeito em necessidade da mesma.

[0080] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgada neste documento para uso na prevenção e/ou no tratamento de transtornos de humor.

[0081] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece um método de prevenção e/ou o tratamento de transtornos de humor que compreende a administração de uma quantidade eficaz de uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgado neste documento.

[0082] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgada neste documento para seu uso como um adjuvante nos tratamentos de alterações do estado de espírito.

[0083] Um método de tratamento e/ou prevenção de um estado de espírito alterado, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgado neste documento.

[0084] O transtorno de humor pode ser selecionado a partir da lista que compreende: depressão, depressão maior, depressão atípica, depressão típica ou melancólica, depressão psicótica, depressão catatônica, depressão pré e pós-parto, transtorno bipolar, transtorno afetivo sazonal, distimia, transtorno de personalidade depressiva, depressão dupla, transtorno depressivo não especificado, transtorno depressivo breve recorrente, depressão menor, alterações do estado de espírito e transtorno do humor induzidos por abuso de substâncias ou pelo uso de drogas, tais como drogas de abuso.

[0085] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece o uso de uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgado neste documento para a preparação de um alimento.

[0086] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece um método de preparação de um alimento, que compreende misturar uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgado neste documento.

[0087] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgadas neste documento para uso na prevenção e/ou no tratamento de um transtorno de estresse.

[0088] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece um método de tratamento ou prevenção de um distúrbio de estresse, compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgado neste documento.

[0089] O referido transtorno de estresse pode ser selecionado a partir de transtorno de apego reativo, transtorno de engajamento social desinibido, transtorno de estresse pós-traumático (PTSD), transtorno de estresse agudo e transtornos de ajustamento.

[0090] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgadas neste documento para uso na prevenção e/ou no tratamento de um transtorno de ansiedade.

[0091] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece um método de tratamento ou prevenção de um transtorno de ansiedade, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgado neste documento.

[0092] O referido transtorno de ansiedade pode ser selecionado dentre ataque de pânico, transtorno do pânico, agorafobia, fobia social ou transtorno de ansiedade social, transtorno obsessivo-compulsivo, transtorno de estresse pós-traumático (ASD), transtorno de ansiedade generalizada ou transtorno de estresse agudo.

[0093] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgadas neste documento para uso como um remédio.

[0094] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece um método de tratamento ou prevenção de uma doença ou transtorno em um sujeito em necessidade do mesmo, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgado neste documento.

[0095] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria Christensenellaceae, especialmente uma bactéria Christensenellaceae isolada, ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, para uso na prevenção e/ou tratamento de um transtorno de humor, transtorno de estresse, transtorno de ansiedade e/ou enxaqueca.

[0096] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece um método de tratamento ou prevenção de um transtorno de humor, transtorno de estresse, transtorno de ansiedade e/ou enxaqueca, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de uma bactéria ou uma composição conforme divulgado neste documento.

[0097] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece uma bactéria Christensenellaceae ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, para uso como um adjuvante em tratamentos para transtornos de humor e/ou transtornos de estresse e/ou transtornos de ansiedade e/ou enxaquecas.

[0098] Em uma modalidade exemplar, a divulgação fornece um método de tratamento ou prevenção de transtornos de humor e/ou estresse e/ou ansiedade, que compreende a administração de uma quantidade eficaz de uma bactéria isolada ou uma composição conforme divulgado neste documento.

[0099] O transtorno de humor pode ser selecionado a partir da lista que compreende: depressão, depressão maior, depressão atípica, depressão típica ou melancólica, depressão psicótica, depressão catatônica, depressão pré e pós-parto, transtorno bipolar, transtorno afetivo sazonal, distimia, transtorno de personalidade depressiva, depressão dupla, transtorno depressivo não especificado, transtorno depressivo breve recorrente, depressão menor, alterações do estado de espírito e transtorno do humor induzidos por abuso de substâncias ou pelo uso de drogas, tais como drogas de abuso.

[0100] Nos métodos e usos divulgados neste documento, as referidas bactérias Christensenellaceae podem ser bactérias do gênero Christensenella. As referidas bactérias Christensenella podem ser selecionadas a partir das espécies Christensenella minuta, Christensenella timonensis, Christensenella massiliensis ou qualquer combinação das mesmas. As referidas bactérias Christensenella podem ser uma cepa de Christensenella massiliensis com o número de depósito DSM 102344 ou uma cepa de Christensenella timonensis com o número de depósito DSM 102800 qualquer combinação das mesmas. As referidas bactérias Christensenella podem ser da cepa DSM 32891 de Christensenella minuta ou um derivado ou mutante da mesma, ou Christensenella minuta com o número de depósito DSM 22607 ou um derivado ou mutante da mesma, ou qualquer combinação das mesmas.

[0101] Nos métodos e utilizações aqui divulgados, as referidas bactérias Christensenellaceae podem estar na forma de células viáveis e/ou na forma de células não viáveis.

[0102] Nos métodos e usos divulgados neste documento, a referida bactéria Christensenellaceae pode compreender uma sequência de rRNA 16S que tem pelo menos 90% de identidade, pelo menos 95% de identidade, pelo menos 96% de identidade, pelo menos 97% de identidade, pelo menos 98% de identidade, pelo menos 99% de identidade, ou pelo menos 99,5% de identidade com a sequência de rRNA 16S da cepa de Christensenella minuta com o número de depósito DSM 32891 (SEQ ID Nº: 3), ou pode compreender a cepa de Christensenella minuta com o número de depósito DSM 32891.

[0103] Os métodos e usos divulgados neste documento podem ser para uso em um sujeito selecionado dentre um animal humano ou um não humano. Animais não humanos exemplares incluem animais de companhia, animais de criação, animais de zoológico, mamíferos, cães, gatos, porquinhos-da-índia, furões, hamsters, porcos, vacas, cabras, ovelhas, cavalos, camundongos e ratos.

[0104] Os métodos e usos descritos no presente documento podem compreender a administração de entre 10 4 e 1014 unidades formadoras de colônias (UFC) das referidas bactérias Christensenellaceae, especialmente se as referidas bactérias Christensenellaceae forem administradas em uma composição, a referida composição tem uma concentração da bactéria de entre 104 e 1014 unidades formadoras de colônias (CFU) por grama ou mililitro de composição final.

[0105] Ao longo da descrição e das reivindicações, a palavra "compreende" e suas variantes não se destinam a excluir outras características técnicas, aditivos, componentes ou etapas. Para os versados na técnica, outros objetivos, vantagens e características da invenção se tornarão claras em parte a partir da descrição e em parte da prática da invenção. Os seguintes exemplos e figuras são fornecidos como ilustração e não se destinam a limitar a presente invenção.

BREVE DESCRIÇÃO DAS DIVERSAS VISTAS DOS DESENHOS

[0106] Fig. 1: Avaliação do efeito da administração de B. breve MF217 (1x109 CFU/dia) e C. minuta DSM 32891 (1x109 CFU/dia) em camundongos C57BL/6 (n = 10/grupo) expostos a estresse social agudo no teste de preferência de sacarose (SPF). Os dados são expressos em gramas com médias e erro padrão da média. Diferenças estatisticamente significativas foram estabelecidas aplicando-se ANOVA para um fator seguido pelo teste post hoc de Bonferroni (*= p <0,05, **= p <0,01). C, camundongos de controle; S, camundongos submetidos a estresse agudo sem tratamento; S + B. bre, camundongos submetidos a estresse agudo e tratados com B. breve; S + C.min, camundongos submetidos a estresse agudo e tratados com C. minuta.

[0107] Fig. 2: Avaliação do efeito da administração da cepa B. breve MF217 (1x109 CFU/dia) e C. minuta DSM 32891 (1x109 CFU/dia) em camundongos C57BL/6 (n = 10/grupo) expostos a estresse social agudo no teste de suspensão pela cauda (TST). Os dados são expressos como médias do tempo (segundos) e seu erro padrão da média. Diferenças estatisticamente significativas foram estabelecidas aplicando-se ANOVA para um fator seguido do teste post hoc de Bonferroni (***= p <0,001). C, camundongos de controle; S, camundongos submetidos a estresse social agudo sem tratamento; S + B.bre, camundongos submetidos a estresse agudo e tratados com B. breve; S + C.min, camundongos submetidos a estresse agudo e tratados com C. minuta.

[0108] Figs. 3A a 3D: Avaliação do efeito da administração de C. minuta DSM 32891 (1x109 cfu/dia) em camundongos C57BL/6 expostos a estresse social em marcadores de estresse no plasma. Os dados são expressos em nM com médias e erro padrão. As diferenças estatisticamente significativas foram estabelecidas aplicando-se ANOVA de um fator seguido do teste post hoc de Bonferroni (* = p <0,05, ** = p <0,001, *** = p <0,001). C, camundongos de controle; S, camundongos submetidos a estresse não tratados; S+M, camundongos submetidos a estresse e tratados com C. minuta. Os marcadores de estresse foram medidos 1 dia antes da derrota social, 1 dia após o início da derrota social e 10 dias após o início da derrota social. Os resultados são mostrados para adrenalina (FIG. 3A), noradrenalina (FIG. 3B), serotonina (FIG. 3C) e dopamina (FIG. 3D).

EXEMPLOS

[0109] A seguir, a invenção será ilustrada por meio de alguns testes que demonstram as propriedades e eficácia de produtos exemplares de acordo com a invenção. Esses exemplos pretendem ilustrar, em vez de limitar, a invenção, que é limitada apenas pelas reivindicações. EXEMPLO 1. ISOLAMENTO E IDENTIFICAÇÃO DAS

ESPÉCIES DE CHRISTENSENELLA

[0110] O material biológico objeto da patente foi isolado de fezes de voluntários saudáveis, que foram processadas e inoculadas em meio de microbiota intestinal (GMM), cuja composição é baseada nos meios recomendados em publicações anteriores [18], [19], com modificações projetadas pelos inventores. As referidas modificações consistiram em fermentar as fezes processadas, mantendo o pH constante, em câmara anaeróbica durante 24 horas. O meio GMM fermentado foi utilizado como suplemento para o meio ágar anaeróbio fastidioso (FAA) com 0,5% de sangue desfibrinado, que foi utilizado para inocular diluições seriadas das fezes e isolar as colônias, após incubação das placas por 72 horas a 37 °C em uma câmara anaeróbica. A Christensenella minuta DSM 32891 foi isolada das colônias que cresceram.

[0111] A identificação foi realizada por sequenciamento do gene 16S rRNA (1,26 Kb) usando os iniciadores 27f (SEQ ID Nº: 1: 5'-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3') e 1401r (SEQ ID Nº: 2: 5'- CGGTGTGTACAAGACCC-3') pela tecnologia de sequenciamento Sanger em um sequenciador ABI 3730XL. Ao comparar as sequências obtidas com as do banco de dados do NCBI e do algoritmo BLASTn, a cepa isolada DSM 32891 foi identificada com a espécie Christensenella minuta com 100% de porcentagem de identidade. A sequência completa (SEQ ID Nº: 3) é mostrada abaixo:

[0112] >Sequência do gene de RNAr 16S de Christensenella minuta DSM 32891

ACTTCATGTGGGCGGGTTGCAGCCCACAATCCGAACTGGGACCGGCTTTT TGAGATTCGC TTCCCCTTACGGGTTCGCTGCCCTTTGTACCGGCCATTGTAGCACGTGTGT AGCCCAAGA CATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCGTCCCCACCTTCCTCCGAGTTGTC CCCGGCAGTC TCACTAGAGTTCCCGCCTTTACGCGCTGGCAACTAGCAATAAGGGTTGCG CTCGTTGCGG GACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACC TGTCTCTCTG CCCCGAAGGGAAACTGTATCTCTACAGTCGTCAGAGGATGTCAAGCCTTG GTAAGGTTCT TCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCGCTGCTTGTGCGGGCCCCC GTCAATTCCT TTGAGTTTCAACCTTGCGATCGTACTCCCCAGGCGGGATACTTAATGCGTT TGCTTCGGC ACGGAACCCTATCGGGCCCCACACCTAGTATCCATCGTTTACGGCGTGGA CTACCAGGGT ATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGTGCCTCAGTGTCAGTTACAGT CCAGAAAGT CGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTCCTAATATCTACGCATTTCACCGCTACAC TAGGAATTC CACTTCCCTCTCCTGTACTCAAGTCACACAGTTTCAAATGCAACCCCGGGG TTAAGCCCC GGTCTTTCACATCTGACTTACATGACCACCTACGCACCCTTTACGCCCAGT AATTCCGGA CAACGCTTGCTCCCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCG GAGCTTCCTC CTATGGTACCGTCATTTCTTTCGTCCCATAGGACAAAGGTTTACAATCCGA AGACCTTCT TCCCTCACGCGGCGTTGCTGGGTCAGGGTTTCCCCCATTGCCCAATATTC CCCACTGCTG CCTCCCGTAGGAGTCTGGACCGTGTCTCAGTTCCAGTGTGGCCGATCACC CTCTCAGGTC GGCTACCCATCGTTGACTTGGTGGGCCGTTACCTCACCAACTATCTAATGG GACGCGAGC CCATCCTGCATCGAATAAATCCTTTTACCTCAAAACCATGCGGTTTCGTGG TCTCATGCG GTATTAGCAGTCGTTTCCAACTGTTGTCCCCCGTTGCAGGGCAGGTTGCT CACGCGTTAC TCACCCGTCCGCCACTCGGTATACCCACAGTTCCTCCCGAAGGATTCACA

AAGGGCAACC T EXEMPLO 2. EFEITOS DA CEPA DE C. MINUTA DSM 32891 EM UM MODELO ANIMAL DE DEPRESSÃO INDUZIDA POR

ESTRESSE SOCIAL DESENVOLVIMENTO DO MODELO ANIMAL DE ESTRESSE SOCIAL AGUDO E COLETA DE AMOSTRAS

[0113] Camundongos machos C57BL/6 que atingiram a adolescência (dia pós-natal 32, Charles River, Les Oncins, França) foram usados para este estudo. Os referidos camundongos foram mantidos em condições controladas de temperatura (23 ºC), umidade relativa (40 a 50%) e ciclo claro/escuro de 12 horas e alimentados com uma dieta padrão (D12450K, Research diet, Brogaarden, Dinamarca) por 11 semanas (na primeira semana, os referidos camundongos foram mantidos em quarentena em uma sala preparada para prevenir possíveis zoonoses). Os camundongos foram divididos aleatoriamente em quatro grupos experimentais (n=10). Grupo de controle (C), grupo de estresse (S), grupo tratado com Christensenella minuta DSM 32891 (S + C.min) e grupo tratado com Bifidobacterium breve MF217 (S + B. Breve) usada para fins de comparação. Os camundongos do grupo S + C.min foram tratados com uma dose oral da cepa bacteriana de acordo com a invenção (1x10 9 unidades formadoras de colônias [CFU]) suspensa em leite desnatado a 10%; o grupo S + B.breve foi tratado com uma dose de B. breve (1x109 unidades formadoras de colônia [UFC]) suspensa em leite desnatado a 10%. O veículo ou placebo (leite desnatado a 10%) foi administrado da mesma forma tanto ao grupo controle quanto ao grupo de estresse. O tratamento ou placebo foi administrado por dez semanas. Ao final dessas dez semanas, os camundongos foram sacrificados por deslocamento cervical para a obtenção de amostras, incluindo de sangue, intestino, cérebro, conteúdo fecal e fezes.

MODELO DE ESTRESSE SOCIAL AGUDO

[0114] Para induzir ao estresse social agudo, um modelo de derrota social animal baseado no paradigma intruso-residente foi usado [20]. Nesse modelo, um de dois animais (o residente) tinha permissão para estabelecer a territorialidade em sua própria gaiola. Em seguida, os camundongos do estudo (intrusos), neste caso, machos C57BL/6, foram introduzidos um a um na gaiola do camundongo residente. Para isso, foram utilizados machos adultos agressivos da cepa CD-I (quatro semanas de idade) (Charles River, Les Oncins, França) (como agressores residentes), previamente isolados e treinados para serem mais agressivos. Por quatro dias consecutivos, encontros agonísticos foram realizados (introdução de um camundongo não tratado na gaiola do residente por dez minutos) em que o contato físico entre os referidos camundongos foi permitido e em que o camundongo intruso sofreu um alto nível de estresse (refletido na produção de níveis elevados de corticosterona). Os encontros agonísticos ocorreram em uma sala neutra e não no biotério onde os referidos camundongos costumavam ser mantidos. Os ratos experimentais (intrusos) apresentaram comportamento de evasão ou fuga e também comportamento de defesa/submissão após sofrer agressão (ameaça/ataque) do oponente. O critério empregado para definir se um animal foi derrotado foi a adoção de uma postura específica que indica derrota. Essa postura é caracterizada por uma postura ereta de submissão com as patas dianteiras lânguidas, a cabeça inclinada para cima e as orelhas retraídas [21].

[0115] O grupo de controle não foi exposto à derrota social; entretanto, todos os camundongos desse grupo foram introduzidos por dez minutos em uma gaiola exatamente igual àquela usada para realizar os encontros agonísticos. Por dez minutos, os ditos camundongos exploraram a gaiola sem ter contato com nenhum oponente.

[0116] Antes de realizar os encontros agonísticos, os animais jejuaram por 12 horas. Imediatamente após a derrota social, os animais foram expostos por duas horas a comida, água e água com sacarose a 3%. TESTE DE PREFERÊNCIA DE SACAROSE A 3% (SPT)

[0117] O teste de preferência de sacarose a 3% foi realizado para avaliar o comportamento hedônico/anedônico associado à conduta depressiva. O comportamento anedônico (a incapacidade de sentir prazer) é considerado um dos sintomas mais claros da depressão [22]. Diferentes estudos em animais demonstraram que animais deprimidos consomem menos da água de sacarose a 3%, sendo esse comportamento considerado anedônico.

[0118] O teste consiste em privar os animais de água por 12 horas e, em seguida, expor esses animais a duas opções, água ou água com 3% de sacarose dissolvida. As garrafas de sacarose e água foram trocadas durante o período de teste de duas horas para garantir que não houvesse nenhum efeito relacionado a preferência de lugar. A quantidade de sacarose a 3% ingerida durante essas duas horas indicaria comportamento hedônico/anedônico. Uma ingestão menor de sacarose indicaria anedonia. A preferência pela sacarose foi calculada como o percentual de sacarose ingerido em relação ao total de líquido consumido, corrigido pelo peso corporal.

[0119] Os resultados (Fig. 1) indicam que os animais estressados (S) ingerem significativamente menos de sacarose a 3% do que os camundongos de controle (C) (p <0,01), indicando comportamento anedônico e, portanto, depressivo. O tratamento de camundongos estressados com B. breve (S + B.bre) remedia parcialmente a anedonia, embora essa melhora não seja significativa. No entanto, o tratamento de camundongos estressados com C. minuta (S + C.min) remedia totalmente o comportamento depressivo (p <0,05), indicando uma maior eficácia em relação à B. breve.

TESTE DE SUSPENSÃO PELA CAUDA

[0120] Os camundongos foram suspensos da borda de uma mesa com fita adesiva colocada a aproximadamente 1 cm da ponta da cauda, em uma posição da qual os ditos camundongos não pudessem escapar ou se pendurar nas superfícies próximas. Foi quantificado o comportamento de tentativa de fuga e o tempo de imobilidade por cinco minutos. A duração da imobilidade (como medida de desmotivação) foi registrada durante os cinco minutos que durou o teste. Esse teste é comumente usado para avaliar o comportamento depressivo em camundongos [21].

[0121] Os resultados (Fig. 2) indicam que os animais estressados (S) permanecem imóveis por significativamente mais tempo em relação ao tempo em que os referidos camundongos se movem (p <0,001), enquanto os camundongos de controle (C) não mostram nenhuma diferença significativa. Isso indica um comportamento depressivo, pois os animais não tentam fugir, mas desistem, demonstrando pouca motivação para sobreviver. O tratamento de camundongos estressados com B. breve (S + B.bre) não melhora esse comportamento depressivo, com diferenças significativas entre o tempo de imobilidade e o tempo em que os camundongos se moviam sendo mantidas (p <0,001). No entanto, o tratamento de camundongos estressados com C. minuta (S + C.min) remedia esse comportamento depressivo, reduzindo o tempo em que os camundongos ficam imóveis, de forma que as diferenças entre as duas medidas foram reduzidas e não foram significativas.

[0122] Esses resultados demonstram que o tratamento oral com C. minuta mostra maior eficácia em comparação com possíveis probióticos convencionais, tais como B. breve, na melhoria do comportamento depressivo em um modelo de depressão induzida por estresse social agudo.

[0123] Os resultados de ambos os testes demonstram pela primeira vez que o tratamento com C. minuta remedia o comportamento depressivo em camundongos que foram expostos a estresse social agudo. Os dados demonstram que a C. minuta seria uma escolha melhor como tratamento para melhorar os transtornos do humor, tais como o comportamento depressivo, do que os probióticos convencionais. EXEMPLO 3. EFEITOS DA CEPA DSM 32891 DE C.

MINUTA SOBRE MARCADORES DE ESTRESSE EM UM MODELO ANIMAL DE DEPRESSÃO INDUZIDA POR ESTRESSE SOCIAL

[0124] Este exemplo relata o efeito de C. minuta DSM 32891 em marcadores de estresse em um modelo animal de estresse social e depressão (10 dias).

[0125] Para este estudo, camundongos machos C57BL/6 foram usados (Charles River, Les Oncins, França). Os camundongos foram mantidos em condições de temperatura controlada (23 °C), umidade relativa (40 a 50%) e ciclo claro/escuro de 12 horas e alimentados com dieta padrão (D12450K, Research diet, Brogaarden, Dinamarca). Os camundongos foram divididos aleatoriamente em 3 grupos experimentais (n = 15/grupo). Os três grupos foram: um grupo de controle (C), grupo estressado não tratado (S) e grupo estressado tratado com Christensenella minuta DSM 32891 (S + M).

[0126] Os camundongos no grupo S+M foram tratados diariamente com uma dose oral da cepa bacteriana DSM 32891 de Christensenella minuta (1x109 unidades formadoras de colônia (CFU)) suspensa em PBS + Glicerol a 20%. Os camundongos dos grupos C e S foram tratados diariamente com PBS + Glicerol a 20% (placebo).

[0127] O tratamento de camundongos estressados com C. minuta ou placebo foi administrado por 38 dias. O protocolo de derrota social (10 dias) começou após 2 semanas de tratamento. O modelo utilizado é adaptado do paradigma residente-intruso [20], e o tempo de encontro foi reduzido para 5 minutos. Machos adultos da cepa CD-I (4 semanas de idade) foram usados como camundongos agressivos (Charles River, Les Oncins, França), os quais foram previamente isolados e treinados para serem mais agressivos. Durante 10 dias consecutivos, encontros agonísticos (introdução de um camundongo agressivo na gaiola do residente por 5 minutos) foram realizados, nos quais foi permitido o contato físico entre eles e nos quais o camundongo residente sofreu um alto grau de estresse. As reuniões agonísticas ocorreram em uma sala neutra e não na sala dos animais onde geralmente ficavam alojados. Os ratos experimentais apresentaram comportamento de evasão ou fuga, bem como comportamento de defesa/submissão após sofrer agressão (ameaça/ataque) por parte de seu oponente. O critério utilizado para definir que um animal havia sido derrotado foi a adoção de uma postura específica que significasse derrota. Ela é caracterizada por uma postura de submissão vertical com as patas dianteiras lânguidas, a cabeça inclinada para cima e as orelhas retraídas [21].

[0128] O grupo de controle não foi exposto à derrota social; entretanto, todos os camundongos desse grupo foram colocados por 5 minutos em uma gaiola igual àquelas usadas para realizar os encontros agonísticos. Por 5 minutos eles exploraram a gaiola sem ter contato com nenhum oponente.

[0129] Após 38 dias, os camundongos foram sacrificados por deslocamento cervical e amostras de sangue coletadas.

[0130] Amostras de sangue foram testadas quanto a níveis de adrenalina, noradrenalina, serotonina e dopamina nos seguintes pontos no tempo: na linha de base antes do estresse social, 4 horas o encontro agonístico no dia 1 de estresse social, e 4 horas após o encontro agonístico no dia 10 de estresse social. Os resultados são mostrados nas Figs. 3A a 3D; dentro de cada grupo experimental (C: controle, S: animais estressados tratados com placebo, ou S+M: animais estressados tratados com C. minuta) são mostrados os resultados da esquerda para a direita para os pontos no tempo da linha de base (antes do estresse), do dia 1 (após 1 dia de derrota social) e do dia 10 (após 10 dias de derrota social).

[0131] Os resultados indicam que os animais estressados (S) exibiram níveis aumentados de adrenalina no sangue 10 dias após a derrota social (FIG. 3A). O tratamento com C. minuta evitou esse aumento nos níveis de adrenalina. Tendências semelhantes foram observadas com os níveis de noradrenalina (FIG. 3B).

[0132] Além disso, os animais estressados (S) exibiram níveis diminuídos de serotonina no sangue 10 dias após a derrota social (FIG. 3C). O tratamento de camundongos estressados com C. minuta (S+M) não só evitou essa diminuição nos níveis de serotonina em camundongos estressados, mas aumentou os níveis de serotonina 10 dias após o estresse em comparação com camundongos estressados não tratados. O tratamento de camundongos estressados com C. minuta também aumentou significativamente os níveis de dopamina no sangue (FIG. 3D). Isso não foi observado em camundongos de controle nem em camundongos estressados não tratados.

[0133] Esses resultados demonstram que o tratamento com C. minuta foi eficaz para inibir o efeito do estresse no aumento de marcadores específicos (adrenalina, noradrenalina) e aumentar os níveis de serotonina e dopamina no sangue durante o estresse. EXEMPLO 4. CARACTERIZAÇÃO DA SEQUÊNCIA DE CEPA DSM 32891 DE C. MINUTA

[0134] Este exemplo descreve a comparação das sequências genômicas de cepa DSM 32891 de C. minuta com as outras cepas de bactérias pertencentes à família Christensenellaceae.

[0135] A comparação do genoma foi feita usando o Calculador de Distância de Genoma a Genoma v2. 1 Fórmula 2 [25] para determinar uma pontuação de hibridização de DNA-DNA digital (dDDH) entre cada cepa e a cepa DSM 32891 de C. minuta. Se a dDDH for superior a 70%, as cepas pertencem à mesma espécie. Se a dDDH for superior a 79%, as cepas pertencem à mesma espécie e subespécie. Se a dDDH for 100%, as cepas são idênticas [26]. #dDDH com cepa Cepa Referência pública de cepa DSM 32891 - Artigo [27] C. minuta - Depositado junto ao DSMZ sob o 96,50% DSM 22607 número DSM 22607 - Artigo [23] C. - Depositado junto ao DSMZ sob o timonensis número DSM 19,50% DSM 102800 102800 - Outra coleção N°CSUR P2437 - Artigo [24] C. - Depositado junto ao DSMZ sob o massiliensis 21,70% número DSM DSM 102344 102344 - Outra coleção N° CSUR P2438

[0136] Esta análise, mostrada na tabela acima, demonstra que a cepa DSM 32891 tem uma dDDH inferior a 70% com as cepas C. timonensis e C. massiliensis, confirmando que pertencem a espécies diferentes. Isso está de acordo com o fato de que a DSM 32891 pertence à espécie Christensenella minuta.

[0137] Isso também mostra que a cepa DSM 32891 e a cepa DSM 22607 têm uma dDDH de 96,5%, superior a 79%, e pertencem à mesma subespécie, mas são cepas diferentes.

[0138] Isso confirma que a cepa DSM 32891 é uma nova cepa pertencente à espécie Christensenella minuta.

BIBLIOGRAFIA

[0149] 1. Gustavsson, A., et al., Cost of disorder of the brain in Europe 2010. Eur Neuropsychopharmacol, 2011. 21 (10): p. 718 a 779.

[0150] 2. Lamers, F., et al., Evidence for a different role of HPA-axis function, inflammation and metabolic syndrome in melancholic versus atypical depression. Mol Psychiatry, 2013. 18 (6): p. 692 a 699.

[0151] 3. Milaneschi Y, L.F., Bot M, Drent ML, Penninx BW, Leptin Dysregulation Is Specifically Associated With Major Depression With Atypical Features: Evidence for a Mechanism Connecting Obesity and Depression. . Biol Psychiatry. , 2017. 1° de maio; 81 (9): p. 807 a

814.

[0152] 4. Zhernakova, A., et al., Population-based metagenomics analysis reveals markers for gut microbiome composition and diversity. Science, 2016. 352 (6.285): p. 565 a 569.

[0153] 5. McDonald, D., et al., American Gut: an Open Platform for Citizen Science Microbiome Research. mSystems, 2018. 3(3).

[0154] 6. Aizawa, E., et al., Possible association of Bifidobacterium and Lactobacillus in the gut microbiota of patients with major depressive disorder. J Affect Disord, 2016. 202: p. 254 a 257.

[0155] 7. Jiang, H., et al., Altered fecal microbiota composition in patients with major depressive disorder. Brain Behav Immun,

2015. 48: p. 186 a 194.

[0156] 8. Kelly, JR, et al., Transferring the blues: Depression-associated gut microbiota induces neurobehavioural changes in the rat. J Psychiatr Res, 2016. 82: p. 109 a 118.

[0157] 9. Naseribafrouei A, H.K., Avershina E, Sekelja M, Linløkken A, Wilson R, Rudi K., Correlation between the human fecal microbiota and depression. Neurogastroenterol Motil., 2014. Ago; 26 (8): p.

1.155 a 1.162.

[0158] 10.Gibson-Smith, D., et al., The role of obesity measures in the development and persistence of major depressive disorder. J Affect Disord, 2016. 198: p. 222 a 229.

[0159] 11. De Palma, G., et al., Microbiota and host determinants of behavioural phenotype in maternally separated mice. Nat Commun, 2015. 6: p. 7.735.

[0160] 12. Sanz, Y, Bifidobacteria in foods: health effects, in The Encyclopedia of Food and Health.B. Caballero, P. Finglas, and F. Toldrá, Editors. Oxford Academic Press: Oxford, 2016: p. p. 388 a 394.

[0161] 13. Dinan, T.G. and J.F. Cryan, Mood by microbe: towards clinical translation. Genome Med, 2016. 8 (1): p. 36

[0162] 14. Romijn, A.R, et al, A double-blind, randomized, placebo-controlled trial of Lactobacillus helveticus and Bifidobacterium longum for the symptoms of depression. Aust NZJ Psychiatry,

2017. 51 (8): p. 810 a 821.

[0163] 15. Pinto-Sanchez, M.l, et al., Probiotic Bifidobacterium longum NCC3001 Reduces Depression Scores and Alters Brain Activity: A Pilot Study in Patients With Irritable Bowel Syndrome. Gastroenterologia, 2017. 153 (2): p. 448 a 459 e8.

[0164] 16. Yu, M, et al., Variations in gut microbiota and fecal metabolic phenotype associated with depression by 16S rRNA gene sequencing and LC/MS-based metabolomics. J Pharm Biomed Anal, 2017. 138: p. 231 a 239.

[0165] 17. I. Mironova, IZ, N. Zhukova, V. Alifirova, A. Latypova, O. Izhboldina, M. Nikitina, V. Petrov, M. Titova, Affective disorders and microbiome in patients with Parkinson's disease (PR2063). European Journal of Neurology, 2017. 24 (Suplemento 1),: p. 445 a 678.

[0166] 18. Gibson GR, C.J., Macfarlane GT., Use of a three-stage continuous culture system to study the effect of mucin on dissimilatory sulfate reduction and methanogenesis by mixed populations of human gut bacteria. Appl Environ Microbiol. Novembro de 1988; 54 (II), 1988. Novembro; 54 (11): p. 2.750 a 2.755.

[0167] 19. Lesmes, U., et al., Effects of resistant starch type III polymorphs on human colon microbiota and short chain fatty acids in human gut models. J Agric Food Chem, 2008. 56 (13): p. 5.415 a 5.421.

[0168] 20. Tamashiro, K.L., M.M. Nguyen, and R.R. Sakai, Social stress: from rodents to primates. Front Neuroendocrinol, 2005. 26 (1): p. 27 a 40.

[0169] 21. Can, A., et al., The tail suspension test. J Vis Exp, 2012(59): p. e3769.

[0170] 22. Duncko, R., et al., Altered function of peripheral organ systems in rats exposed to chronic mild stress model of depression. Cell Mol Neurobiol, 2001. 21 (4): p. 403 a 411.

[0171] 23. Ngondo, S, et al., Christensenella timonensis, a new bacterial species isolated from the human gut. New Microbe and New Infect 2016; 13: 32 a 33.

[0172] 24. Ngondo, S, et al., Christensenella massiliensis, a new bacterial species isolated from the human gut. New Microbe and New Infect 2016; 12: 69 a 70.

[0173] 25. Meir Kolthof JP, et al., Genome seguence- based species delimitation with confidence intervals and improved distance functions, BMC Bioinformatics volume 14, Artigo número: 60 (2013).

[0174] 26. Meir Kolthof JP, et al., Complete genome sequence of DSM 30083T, the typestrain (U5/41T) of Escherichia coli, and a proposal for delineating subspecies in microbial taxonomy, Standards in Genomic Sciences, volume 9, Artigo número: 2 (2014).

[0175] 27. Morotomy M, et al., Description of Christensenella minuta gen. nov.,sp. nov., isolated from human faeces, which forms a distinct branch in the order Clostridiales, and proposal of Christensenellaceae fam. nov., International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology (2012), 62, 144 a 149.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Cepa de Christensenella minuta, caracterizada pelo fato de que é com o número de depósito DSM 32891.

2. Cepa, caracterizada pelo fato de que é derivada da cepa de acordo com a reivindicação 1.

3. Cepa, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que a cepa é caracterizada pelo fato de que é um mutante geneticamente modificado.

4. Cepa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, em que a dita cepa é caracterizada pelo fato de que está na forma de uma célula viável ou não viável.

5. Componente celular, metabólito, molécula secretada ou qualquer combinação dos mesmos, caracterizados pelo fato de que são obtidos a partir da cepa de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4.

6. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende uma cepa de Christensenella minuta, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, ou um componente celular, metabólito, molécula secretada ou qualquer combinação dos mesmos de acordo com a reivindicação

5.

7. Composição, de acordo com a reivindicação 6, em que a composição é caracterizada pelo fato de que também compreende pelo menos um componente bioativo.

8. Composição, de acordo com a reivindicação 6 ou 7, em que a composição é caracterizada pelo fato de que também compreende pelo menos um micro-organismo que é de uma cepa diferente da bactéria de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4.

9. Composição, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que o micro-organismo é uma bactéria intestinal ou uma bactéria lática.

10. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 a 9, em que a referida composição é caracterizada pelo fato de que é uma composição farmacêutica.

11. Composição, de acordo com a reivindicação 10, em que a composição é caracterizada pelo fato de que também compreende pelo menos um veículo e/ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis.

12. Composição, de acordo com a reivindicação 10 ou 11, em que a referida composição é caracterizada pelo fato de que é apresentada em uma forma adequada para administração oral, sublingual, nasal, brônquica, linfática, retal, transdérmica, inalada ou parenteral.

13. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 a 9, em que a referida composição é caracterizada pelo fato de que é uma composição nutricional.

14. Composição, de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pelo fato de que a composição nutricional é um alimento, um suplemento, um nutracêutico, um probiótico ou um simbiótico.

15. Composição, de acordo com a reivindicação 14, caracterizada pelo fato de que o referido alimento é selecionado a partir da lista que é composta por um produto lácteo, produto vegetal, produto à base de carne, aperitivo, chocolate, bebida ou alimento infantil.

16. Composição, de acordo com qualquer das reivindicações 6 a 15, em que a referida composição é caracterizada pelo fato de que tem uma concentração da bactéria de entre 104 e 1014 unidades formadoras de colônias (CFU) por grama ou mililitro de composição final.

17. Cepa de Christensenella minuta, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, um componente celular, metabólito, molécula secretada ou qualquer combinação dos mesmos, de acordo com a reivindicação 5, ou uma composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 a 16, caracterizados pelo fato de que são para uso como medicamento ou como um remédio.

18. Bactéria Christensenellaceae ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, caracterizadas pelo fato de que são para uso na prevenção e/ou tratamento de um transtorno de humor e/ou transtorno de estresse e/ou transtorno de ansiedade e/ou enxaqueca.

19. Bactéria Christensenellaceae ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, caracterizadas pelo fato de que são para uso como um adjuvante em tratamentos para transtornos de humor e/ou transtornos de estresse e/ou transtornos de ansiedade e/ou enxaquecas.

20. Bactéria Christensenellaceae ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, caracterizadas pelo fato de que são para uso de acordo com a reivindicação 18 ou 19, em que os transtornos de humor são selecionados a partir da lista que compreende: depressão, depressão maior, depressão atípica, depressão típica ou melancólica, depressão psicótica, depressão catatônica, depressão pré e pós-parto, transtorno bipolar, transtorno afetivo sazonal, distimia, transtorno da personalidade depressiva, depressão dupla, transtorno depressivo não especificado, transtorno depressivo breve recorrente, depressão menor, alterações do estado de espírito e transtorno do humor induzidos por abuso de substâncias ou pelo uso de drogas, tais como drogas de abuso.

21. Bactéria Christensenellaceae, caracterizada pelo fato de que é para uso de acordo com a reivindicação 18 ou 19, em que o referido transtorno de estresse é selecionado a partir de transtorno de apego reativo, transtorno de engajamento social desinibido, transtorno de estresse pós- traumático (PTSD), transtorno de estresse agudo e transtornos de ajustamento.

22. Bactéria Christensenellaceae, caracterizada pelo fato de que é para uso de acordo com a reivindicação 18 ou 19, em que o referido transtorno de ansiedade é selecionado a partir de ataque de pânico, transtorno do pânico, agorafobia, fobia social ou transtorno de ansiedade social, transtorno obsessivo-compulsivo, transtorno de estresse pós-traumático (ASD), transtorno de ansiedade generalizada ou transtorno de estresse agudo.

23. Bactéria Christensenellaceae ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, caracterizadas pelo fato de que são para uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 18 a 22, em que as referidas bactérias Christensenellaceae são bactérias do gênero Christensenella.

24. Bactéria Christensenellaceae ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, caracterizadas pelo fato de que são para uso de acordo com a reivindicação 23, em que as referidas bactérias Christensenella são selecionadas dentre as espécies Christensenella minuta, Christensenella timonensis, Christensenella massiliensis ou qualquer uma das suas combinações.

25. Bactéria Christensenella ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, caracterizadas pelo fato de que são para uso de acordo com a reivindicação 24, em que a referida bactéria Christensenellaceae é uma cepa de Christensenella massiliensis com número de depósito DSM 102344 ou uma cepa de Christensenella timonensis com o número de depósito DSM 102800 qualquer uma das combinações das mesmas.

26. Bactéria Christensenella ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, caracterizadas pelo fato de que são para uso de acordo com a reivindicação 24, em que a referida bactéria Christensenellaceae é uma cepa de Christensenella massiliensis com número de depósito 32891 selecionada a partir da bactéria de qualquer uma das reivindicações 1 a 4, uma cepa de Christensenella timonensis com o número de depósito DSM 22607 ou qualquer uma das combinações das mesmas.

27. Bactéria Christensenellaceae ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, caracterizadas pelo fato de que são para uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 18 a 26, em que as referidas bactérias Christensenellaceae estão na forma de células viáveis e/ou na forma de células não viáveis.

28. Bactéria Christensenellaceae ou uma composição que compreende uma bactéria Christensenellaceae, caracterizadas pelo fato de que são para uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 18 a 27, em que a referida bactéria Christensenellaceae compreende uma sequência de rRNA 16S que tem pelo menos 90% de identidade, pelo menos 95% de identidade, pelo menos 96% de identidade, pelo menos 97% de identidade, pelo menos 98% de identidade, pelo menos 99% de identidade ou pelo menos 99,5% de identidade com a sequência de rRNA 16S da cepa de Christensenella minuta com o número de depósito DSM 32891 (SEQ ID Nº: 3), ou em que a referida bactéria Christensenellaceae compreende a cepa de Christensenella minuta com o número de depósito DSM 32891.

29. Bactéria para uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 17 a 28, caracterizada pelo fato de que é para uso em um sujeito selecionado dentre um animal humano ou não humano.

30. Bactéria para uso de acordo com a reivindicação 29, caracterizada pelo fato de que o referido animal não humano é selecionado dentre animais de companhia, animais de criação, animais de zoológico, mamíferos, cães, gatos, porquinhos-da-índia, furões, hamsters, porcos, vacas, cabras, ovelhas, cavalos, camundongos e ratos.

31. Bactéria para uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 17 a 30, caracterizada pelo fato de que o referido uso compreende a administração de entre 104 e 1014 unidades formadoras de colônias (UFC) das referidas bactérias.

32. Uso da cepa de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, de um componente celular, metabólito, molécula secretada ou qualquer uma das suas combinações de acordo com a reivindicação 5, ou de uma composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 a 16, caracterizado pelo fato de que é para a preparação de um alimento.