KR20220118423A - 박테리아 균주를 포함하는 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 푸시카테니박터(Fusicatenibacter) 속의 박테리아 균주를 포함하는 조성물 및 이의 의약 용도를 제공한다.

Description

박테리아 균주를 포함하는 조성물

본 발명은 박테리아 균주를 포함하는 조성물, 및 치료법에서의 이러한 조성물의 용도에 관한 것이다.

인간의 장은 태내에서 무균 상태인 것으로 생각되지만, 출산 직후 매우 다양한 모체 미생물 및 환경 미생물에 노출된다. 그 후, 미생물 집락화 및 계승의 역동적 기간이 발생하며, 이는 전달 방식, 환경, 식이 및 숙주 유전자형과 같은 요인에 의해 영향을 받으며, 이들 모두는 특히 생애 초기 동안 장내 미생물총의 조성에 영향을 미친다. 그 후, 미생물총은 안정화되어 성인과 같이 된다[1]. 인간의 장내 미생물총은 2가지 주요 박테리아 분과(문)인 박테로이데테스(Bacteroidetes) 및 피르미쿠테스(Firmicutes)가 풍부도 수준에서 지배적인 1,500가지가 넘는 서로 다른 계통형을 함유한다[2 내지 3]. 인간 장의 박테리아 집락화로 인한 성공적인 공생 관계는 다양한 대사, 구조, 보호 및 기타 유익한 기능을 초래했다. 집락화된 장의 향상된 대사 활동은 그렇지 않으면 소화불가능한 식이 성분이 부산물의 방출과 함께 분해되도록 하여 숙주에게 중요한 영양 공급원, 및 부가적인 건강상의 이점을 제공한다. 유사하게, 장내 미생물총의 면역학적 중요성은 잘 알려져 있으며 공생 박테리아의 도입 후에 기능적으로 재구성되는 손상된 면역계를 가진 무균 동물에서 예시되어 있다[4 내지 6].

미생물총 조성의 극적인 변화는 염증성 장 질환(IBD)과 같은 위장 장애에서 기록되어 있다. 예를 들어, 클로스트리듐(Clostridium) 클러스터 XIVa 및 클로스트리듐 클러스터 XI(F. prausnitzii) 박테리아의 수준은 IBD 환자에서 감소하는 반면, E. 콜라이(E. coli)의 수는 증가하며, 이는 장내 공생체와 병원체의 균형 변화를 시사한다[7 내지 11].

특정 박테리아 균주가 동물의 장에 미칠 수 있는 잠재적인 긍정적 효과의 인식에 있어서, 다양한 질환의 치료에 사용하기 위한 다양한 균주가 제안되었다(예를 들어, [12 내지 15] 참조). 대부분 락토바실러스 및 비피도박테리움 균주를 포함한 다수의 균주가 다양한 장 장애를 치료하는데 사용하기 위해 제안되었다(논평에 대해 [16] 참조). 가열 사멸된 푸시카테니박터 사카리보란스(Fusicatenibacter saccharivorans)의 사용은 궤양성 대장염을 감소시키는 것으로 제안되었다[17]. WO2017/182796은 장으로부터 다양한 박테리아 종의 단리를 교시하고, 이들 박테리아를 C. 디피실리(C. difficile)와 같은 병원성 감염을 치료하는데 사용하기 위한 용도에 대해 추측한다. US 2019/0030098은 C. 디피실리와 같은 병원성 감염의 치료에서 2종 이상의 정제된 박테리아 균주를 포함하는 조성물의 사용을 논의한다. WO2018/067887은 박테리아 분류군에 대해 대상체로부터의 샘플을 검정하는 것을 수반하는 간경변증 대상체의 장내 진균 불균형을 진단하는 방법에 관한 것이다. 또한, 장내불균형이 프로바이오틱스에 의해 치료될 수 있다고 추측하지만, 그러한 프로바이오틱스의 조성에 대한 암시는 전혀 없다.

박테리아는 다양한 질병의 치료에 큰 가능성을 보여주고 있으며 박테리아를 사용한 새로운 치료법의 개발이 요구되고 있다.

본 발명자들은 중추신경계 질환 또는 장애, 증가된 장 투과성과 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환을 치료 및 예방하기 위한 신규 치료법을 개발했다. 본 발명자들은 푸시카테니박터(Fusicatenibacter) 속의 박테리아 균주를 포함하는 조성물이 자폐증의 뮤린 모델에서 상동적(stereotyped), 사회적 행동 및 우울 유사 행동의 치료에 특히 효과적이라는 것을 입증했다.

본 발명은 중추신경계 질환 또는 장애, 증가된 장 투과성과 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환을 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 푸시카테니박터 속 유래의 박테리아를 포함하는 조성물을 제공한다. 본 발명은 또한 중추신경계 질환 또는 장애, 증가된 장 투과성과 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환을 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 서열번호 1, 2 또는 3에 대해 적어도 98.65% 서열 유사성을 갖는 16s rRNA 서열을 갖는 박테리아 균주를 포함하는 조성물을 제공한다. 중추신경계 질환 또는 장애는 신경퇴행성 질환, 신경발달 장애 또는 신경정신병적 장애일 수 있다.

추가로, 본 발명은 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 중추신경계 질환 또는 장애, 증가된 장 투과성과 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환을 치료 또는 예방하는 방법을 제공한다.

더욱이, 본 발명은 중추신경계 질환 또는 장애, 증가된 장 투과성과 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환을 치료 또는 예방하는 약제의 제조에 사용되는 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는 조성물의 용도를 제공한다.

중추신경계 질환 또는 장애는 미생물총-장-뇌 축에 의해 매개될 수 있다. 특정 실시형태에서, 조성물은 미생물총-장-뇌 축을 조절하는 방법에 사용하기 위한 것이다.

본 발명은 또한 신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는 조성물, 용도 및 방법도 제공한다. 신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태는 자폐 스펙트럼 장애(ASD); 아동 발달 장애; 강박 장애(obsessive compulsive disorder: OCD); 주요 우울 장애; 우울증; 계절성 정동 장애; 불안 장애; 만성 피로 증후군(근통성 뇌척수염); 스트레스 장애; 외상 후 스트레스 장애; 정신분열 스펙트럼 장애(schizophrenia spectrum disorder); 정신분열증(schizophrenia); 양극성 장애; 정신병; 기분 장애; 만성 통증; 길랑-바레(Guillain-

) 증후군 및 수막염, 치매, 예를 들어, 루이소체, 혈관 및 전두측두엽 치매; 원발성 진행성 실어증; 가벼운 인지 장애; HIV 관련 인지 장애 및 피질기저 변성으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명은 자폐증의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 바람직하게는 경구 조성물이다. 본 발명자들은 본 발명의 조성물의 경구 투여가 본원에 개시된 병태, 특히 염증성 중추신경계 질환 및 장애, 특히 미생물총-장-뇌 축에 의해 매개되는 질환을 치료하는 데 효과적일 수 있음을 보여주었다. 또한, 경구 투여는 환자 및 개업의에게 편리하고 장으로의 전달 및/또는 장의 부분 또는 전체 집락화를 가능하게 한다.

본 발명의 조성물은 하나 이상의 약제학적으로 허용 가능한 부형제 또는 담체를 포함할 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 동결건조되었다. 본 발명의 조성물은 또한 푸시카테니박터 속의 동결건조된 박테리아 균주를 포함할 수 있다. 박테리아 균주는 동결 건조되었을 수 있다. 동결건조는 박테리아의 전달을 허용하는 안정적인 조성물을 제조하기에 효과적이고 편리한 기술이다. 특히 바람직한 실시형태에서, 박테리아 균주는 생존가능하고 장에 부분적으로 또는 전체적으로 집락화 가능하다.

본 발명은 추가로 위에서 기재된 바와 같은 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는 조성물을 포함하는 식품을 제공한다. 본 발명은 또한 전술한 바와 같은 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는 백신 조성물을 제공한다.

본 발명자들은 치료법에 특히 유용한 푸시카테니박터 사카리보란스(Fusicatenibacter saccharivorans) 박테리아 균주를 식별하고 특성화했다. 본 발명의 푸시카테니박터 사카리보란스 종은 중추신경계 질환 또는 장애와 같은 본 명세서에 기재된 질환을 치료하는 데 효과적인 것으로 나타났다.

도 1은 형광을 사용하여 측정한, 회장(A) 및 결장(B) 투과성을 보여준다.
도 2는 β-액틴으로 정규화된, 회장에서의 IDO1(A) 및 TPH1(B)의 발현, 및 결장(C)에서의 TPH1의 발현을 보여준다. *=p≤0.05.
도 3은 맹장 함유물 중의 단쇄 지방산인 아세테이트(A), 프로피오네이트(B), 아이소부티레이트(C), 부티레이트(D), 아이소발레레이트(E) 및 발레레이트(F)의 농도를 보여준다.
도 4는 편도체에서 BDNF(A), Grin2a(B), 글루코코르티코이드 수용체(C), CRFR2(D) 및 IL-6(E)의 발현 및 편도체에서 β-액틴으로 정규화된 PFC 중 TLR-4(F) 및 BDNF(G)의 발현을 보여준다. ^*= p≤0.05.
도 5는 Btrb(A) 및 MIA(B) 마우스의 구슬 파묻기(marble burying) 행동을 보여주며, 이는 파묻은 구슬 수로 표현된다. ^*= p≤0.05.
도 6은 사회적 자극 대 비사회적 자극에 소비한 시간 (A) 및 새로운 동물 대 친숙한 동물을 탐색하는 데 소비한 시간(B)을 측정하기 위한 실험 설정을 보여준다. 기간은 초(s)로 표시된다. 패널 C 및 D는 Btbr 마우스에 대한 결과를, 패널 E 및 F는 MIA 마우스에 대한 결과를 보여준다. ^*= p≤0.05; ^**= p≤0.01; ^***= p≤0.001 및 ^****= p≤0.0001.
도 7은 Btbr(A) 및 MIA(B) 마우스에 대한 강제 수영 테스트 결과를 보여준다. ^**= p≤0.01 및 ^****= p≤0.0001.
도 8은 Btbr(A) 및 MIA(B) 마우스의 장 운동성 테스트 결과를 보여준다.
도 9는 푸시카테니박터 사카리보란스에 의한 치료 후, Btbr 및 MIA 마우스에서 회장(A) 및 결장(B)의 투과성을 보여준다.

박테리아 균주

본 발명의 조성물은 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함한다. 실시형태에서, 조성물은 푸시카테니박터 속의 살아있는 박테리아 균주를 포함한다. 바람직하게는, 본 발명의 조성물의 박테리아 균주는 생존 가능하다. 바람직하게는, 박테리아 균주는 장에 부분적 또는 전체적으로 집락화 가능하다. 바람직하게는, 본 발명의 조성물에서 박테리아 균주는 생존 가능하며 장에 부분적으로 또는 전체적으로 집락화 가능하다. 실시예는 이 속의 박테리아(특히 살아있는 박테리아)가 중추신경계 질환 또는 장애, 증가된 장 투과성과 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환과 같은 질환을 치료하거나 예방하는 방법에 유용하다는 것을 입증한다. 바람직한 실시형태에서, 푸시카테니박터 속 박테리아는 자폐증을 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다.

본 발명에 사용하기 위한 푸시카테니박터 종의 예로는 푸시카테니박터 사카리보란스를 포함한다. 푸시카테니박터 종은 비운동성, 비포자형성성, 및 방추형인 그람 반응 양성의 절대 혐기균이다. 푸시카테니박터 종은 포도당으로부터 발효 최종 산물로서 젖산, 포름산, 아세트산, 및 숙신산을 생성할 수 있다. 실시예에서 증명된 바와 같이, 푸시카테니박터 속의 박테리아는 부티레이트 생산자로서 새롭게 식별되었다.

푸시카테니박터는 사람의 장에서 분리될 수 있다. 사람의 분변에서 단리된 푸시카테니박터 사카리보란스 균주의 예로는 HT03-11T, KO-38 및 TT-111을 포함한다[18]. 푸시카테니박터 사카리보란스의 기준 균주는 HT03-11^T(=YIT 12554^T = JCM 18507^T = DSM 26062^T)이다. 푸시카테니박터 사카리보란스 균주 HT03-11T, KO-38 및 TT-111의 16S rRNA 유전자 서열에 대한 GenBank 수탁 번호는 각각 AB698910, AB698914 및 AB698915이다(본 명세서에 서열번호 1 내지 3으로 개시됨).

바람직한 푸시카테니박터 사카리보란스 균주는 본 명세서에서 Ref 1로 지칭된 균주이다.

실시예에서 테스트된 균주와 밀접한 관련이 있는 박테리아 균주도 역시 본 명세서에 언급된 질환, 특히 중추신경계 질환 또는 장애의 치료 및 예방에 사용하기에 효과적일 것으로 예상된다. 특정 실시형태에서, 본 발명에 사용하기 위한 박테리아 균주는 푸시카테니박터 사카리보란스 박테리아 균주의 16s rRNA 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 동일한 16s rRNA 서열을 갖고 있다. 바람직하게는, 본 발명에 사용하기 위한 박테리아 균주는 서열번호 1 내지 3 중 어느 하나에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 동일한 16s rRNA 서열을 갖고 있다. 바람직하게는, 본 발명에 사용하기 위한 박테리아 균주는 서열번호 1, 2 또는 3에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 동일한 16s rRNA 서열을 갖고 있다.

바람직하게, 박테리아 균주는 서열번호 1, 2, 또는 3에 대해 적어도 98.65%의 서열 유사성을 갖는 16s rRNA 서열을 갖는다. 16S rRNA 유전자 서열 간의 쌍별 유사성은 문헌[19]에 기재된 EzTaxon 서버와 같은 강력한 전역 서열 정렬 알고리즘을 기반으로 계산할 수 있다.

위에서 언급한 HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주의 생물형(biotype)인 박테리아 균주도 본 명세서에 언급된 질환, 특히 중추신경계 질환 또는 장애의 치료 및 예방에 사용하기에 효과적일 것으로 예상된다. 생물형은 본 명세서에 정의된 바와 동일하거나 매우 유사한 생리적 및 생화학적 특성이 있는 근연 균주이다.

HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주의 생물형이며 본 발명에 사용하기에 적합한 균주는 이러한 균주에 대한 다른 뉴클레오타이드 서열을 시퀀싱하여 식별할 수 있다. 예를 들어, 실질적으로 전체 게놈이 시퀀싱될 수 있고, 본 발명에 사용하기 위한 생물형 균주는 전체 게놈의 적어도 80%에 걸쳐(예를 들어, 적어도 85%, 90%, 95%, 또는 99%, 또는 전체 게놈에 걸쳐) 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 서열 동일성을 가질 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 생물형 균주는 게놈의 적어도 98%에 걸쳐 적어도 98% 서열 동일성, 또는 게놈의 99%에 걸쳐 적어도 99% 서열 동일성을 갖는다. 생물형 균주를 식별하는데 사용하기에 적합한 다른 서열로는 hsp60 또는 반복 서열, 예컨대, BOX, ERIC, (GTG)₅ 또는 REP를 포함할 수 있다[20]. 생물형 균주는 HT03-11T, KO-38, 또는 TT-111 균주의 상응하는 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 서열 동일성이 있는 서열을 가질 수 있다. 일부 실시형태에서, 생물형 균주는 서열번호 1, 2 또는 3의 16S rRNA 서열에 대해 적어도 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 서열 동일성이 있는 서열을 갖는다.

특정 실시형태에서, 본 발명에 사용하기 위한 박테리아 균주는 게놈의 적어도 60%(예를 들어, 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%)에 걸쳐 푸시카테니박터 사카리보란스의 게놈에 대해 적어도 90% 서열 동일성(예를 들어, 적어도 92%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성)이 있는 게놈을 갖는다.

대안적으로, HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주의 생물형이며 본 발명에 사용하기에 적합한 균주는 제한 단편 분석 및/또는 PCR 분석을 사용하여, 예를 들어, 형광 증폭 단편 길이 다형성(FAFLP) 및 반복적인 DNA 요소(rep)-PCR 핑거프린팅 또는 단백질 프로파일링, 또는 부분 16S 또는 23s rDNA 시퀀싱을 사용하여 식별할 수 있다. 바람직한 실시형태에서, 이러한 기술들은 다른 푸시카테니박터 사카리보란스 균주를 식별하기 위해 사용될 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 발명에 사용하기에 적합한 HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주의 생물형인 균주는 증폭 리보솜 DNA 제한 분석(ARDRA)으로 분석했을 때, 예를 들어, Sau3AI 제한 효소를 사용할 때(예시적인 방법 및 설명은 예를 들어, 문헌[21]을 참조한다), HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주와 동일한 패턴을 제공하는 균주이다. 대안적으로, 생물형 균주는 HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주와 동일한 탄수화물 발효 패턴을 가진 균주로서 식별된다.

HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주의 생물형과 같은 본 발명에 특히 유용한 다른 푸시카테니박터 균주 또는 푸시카테니박터 사카리보란스 균주는 실시예에 기재된 검정을 포함하는, 임의의 적절한 방법 또는 전략을 사용하여 식별할 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 사용하기 위한 균주는 박테리아를 배양하고, 이를 MIA 또는 BTBR 마우스에게 투여한 후, 구슬 파묻기, 사회적 행동 및/또는 강제 수영 테스트를 완료함으로써 식별할 수 있다. 또 다른 예에서, 본 발명에 사용하기 위한 균주는 박테리아를 배양하고 이들의 단쇄 지방산(SCFA) 생산 프로파일을 평가함으로써 식별할 수 있다; 본 발명에 이용될 수 있는 생물형은 부티레이트, 발레레이트 및/또는 아이소발레레이트를 생성할 수 있다. 부가적으로, 본 발명에 사용하기 위한 균주는 이를 뮤린 모델에 투여하고 장 투과성에 미치는 효과를 관찰함으로써 식별할 수 있다. 특히, HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주와 비슷한 성장 패턴, 대사형 및/또는 표면 항원을 갖는 박테리아 균주는 본 발명에 유용할 수 있다. 유용한 균주는, 예를 들어, 마우스 모델에서 구슬 파묻기, 사회적 행동 및 강제 수영 테스트에 의해 평가 시, HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주와 비슷한 활성을 가질 것이다. 특히, 생물형 균주는, 실시예에 기재된 배양 및 투여 프로토콜을 사용함으로써 식별될 수 있는, 실시예에서 밝혀진 효과와 비슷한 효과를 장 투과성 및/또는 SCFA 생산에 대해 유도해낼 것이다. 예를 들어, 생물형 균주는 37℃에서 유지된 산소첨가된(95% O2, 5% CO2) 크렙스 완충액이 있는 Ussing 챔버를 사용하여 측정 시, 대조군에 비해, Btbr 또는 MIA 마우스의 장 투과성을 적어도 약 10%, 적어도 약 20%, 또는 적어도 약 50%±10% 정도 감소시킬 수 있을 것이다. 또한, 또는 대안적으로, ZB-FFAP 컬럼이 장착된 Varian 3500 GC 화염 이온화 시스템을 사용하여 측정 시, Balb 마우스에게 투여된 대조군에 비해 SCFA 생산을 적어도 약 10, 적어도 약 20, 또는 적어도 약 50% 증가시킬 수 있다.

푸시카테니박터 사카리보란스 종에 속하는 것으로서 16S 상동성 및 MALDI-TOF 분석을 사용하여 식별한 균주는 실시예에서 테스트되었고, 질환을 치료하는 데 효과적인 것으로 나타났다. 따라서, 본 발명은 치료법, 특히 본 명세서에 기재된 질환에 대한 치료법에 사용하기 위한 푸시카테니박터 사카리보란스 종의 세포, 예컨대 단리된 세포를 제공한다. 또한, 본 발명은 치료법, 특히 본 명세서에 기재된 질환의 치료법에 사용하기 위한 푸시카테니박터 사카리보란스 종의 세포, 예컨대 단리된 세포, 또는 이의 파생물을 제공한다.

HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주의 파생물은 딸 균주(자손) 또는 원균으로부터 배양된(서브클로닝된) 균주일 수 있다. 본 발명의 균주의 파생물은, 예를 들어, 유전자 수준에서, 생물학적 활성을 약화시킴이 없이 변형될 수 있다. 특히, 본 발명의 파생 균주는 치료적 활성이다. 파생 균주는 HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주와 비슷한 미생물총 조절 활성을 가질 것이다. 특히, 파생 균주는 실시예에 제시된 효과와 비슷한 효과를 자폐증 모델에 대해 유도해낼 것이며, 이는 실시예에 기재된 배양 및 투여 프로토콜을 사용하여 식별할 수 있다.

또한, 박테리아 균주는 HT03-11T, KO-38 또는 TT-111 균주와 동일한 안전성 및 치료 효능 특성을 가진 균주일 수 있다.

치료 용도

본 발명은 중추신경계 질환 또는 장애, 염증 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환을 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 조성물을 제공한다. 중추신경계 질환 또는 장애는 신경발달 장애, 신경퇴행성 질환 또는 신경정신병적 병태를 포함할 수 있다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 자폐 스펙터럼 장애를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 것이다.

바람직하게는, 본 발명의 조성물은 감염 질환, 예를 들어, 클로스트리듐 디피실리 감염과 같은 미생물 감염을 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이 아니다. 바람직하게는, 치료될 대상체는 클로스트리듐 디피실리 감염을 앓고 있지 않거나, 감염 위험에 있다.

신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태는 자폐 스펙트럼 장애(ASD); 아동 발달 장애; 강박 장애(OCD); 주요 우울 장애; 우울증; 계절성 정동 장애; 불안 장애; 만성 피로 증후군(근통성 뇌척수염); 스트레스 장애; 외상 후 스트레스 장애; 정신분열 스펙트럼 장애; 정신분열증; 양극성 장애; 정신병; 기분 장애; 만성 통증; 길랑-바레 증후군 및 수막염, 치매, 예를 들어, 루이소체, 혈관 및 전두측두엽 치매; 원발성 진행 실어증; 가벼운 인지 장애; HIV 관련 인지 장애 및 피질기저 변성으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.

신경퇴행성 질환은 진행성 핵상 마비, 진행성 핵상 마비, 스틸-리차드슨-올제프스키(Steele-Richardson-Olszewski) 증후군, 정상압 수두증, 혈관 또는 동맥경화성 파킨슨증 및 약물 유발 파킨슨증을 포함하는 파킨슨병; 벤슨(Benson) 증후군을 포함한 알츠하이머병; 다발성 경화증; 헌팅턴 병; 근위축성 측삭 경화증; 루게릭병; 운동 염증성 뉴런 질환; 프리온병; 척수소뇌 운동실조 및 척수성 근위축증으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.

본 발명의 조성물은 위궤양, 감염성 설사, 과민성 대장 증후군, 기능성 GI 질환, 염증성 장 질환, 체강 질환 및 암(식도, 결장직장), 식품 알레르기, 급성 염증(패혈증, 전신 염증 반응 증후군(SIRS), 다발성 장기 부전), 비만, 대사 질환(예를 들어, NAFLD 및 NASH)과 같은 장 투과성과 연관된 질환의 치료 또는 예방 방법에 사용하기 위한 것이다.

본 발명의 조성물은 비만 및 당뇨병과 같은 대사 질환의 치료 또는 예방 방법에 사용하기 위한 것이다. 본 발명의 조성물은 죽상경화증, 고혈압, 관상동맥 질환, 협심증 및 심근경색증, 심장 부정맥, 심부전, 판막 심장 질환, 심낭 질환, 뇌졸중, 고혈압성 심장 질환, 류마티스성 심장 질환, 심근병증, 선천성 심장 질환, 심장염, 대동맥류, 말초 동맥 질환, 혈전색전성 질환, 및 정맥 혈전증과 같은 심혈관 질환의 치료 방법에 사용하기 위한 것이다.

본 발명의 조성물은 성인 환자의 중추신경계 질환 또는 장애, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환을 치료 또는 예방하는 데 유용할 수 있다. 바람직한 실시형태에서, 환자는 18세 내지 65세, 예를 들어 40세 내지 65세 또는 40세 초과의 성인일 수 있다. 성인 환자는 18세, 20세, 30세, 40세, 50세, 60세, 70세 이상일 수 있다. 성인 환자는 18세 내지 70세 사이, 18세 내지 50세 사이 또는 18세 내지 30세 사이일 수 있다. 본 발명의 조성물은 노령과 연관된 질환, 예를 들어 50세 초과의 환자에서 진단된 질환을 치료하는데 사용하기 위한 것일 수 있다. 본 발명의 조성물은 노인 환자, 예를 들어 65세 이상인 환자에서 발생하는 신경퇴행성 질환과 같은 중추신경계 질환 또는 장애를 치료하는 데 효과적일 수 있다.

본 발명의 조성물은 아동, 예를 들어 청소년 및 유아에서 중추신경계 질환 또는 장애, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환을 치료 또는 예방하는 데 유용할 수 있다. 환자는 1세 내지 17세 사이의 아동, 예를 들어, 1세 내지 2세, 2세 내지 5세, 5세 내지 7세, 5세 내지 9세, 7세 내지 11세, 5세 초과, 7세 초과, 10세 초과, 15세 초과일 수 있다. 자폐 스펙트럼 장애의 조기 진단 및 개입이 권장되므로[22], 환자는 생후 9 내지 24개월 또는 18 내지 24개월일 수 있다.

미생물총-장-뇌 축의 조절

장과 뇌 사이의 소통(미생물총-장-뇌 축)은 양방향 신경체액 소통 시스템을 통해 발생한다. 최근의 증거는 장에 존재하는 미생물총이 뇌 발달을 조절하고 미생물총-장-뇌 축을 통해 행동 표현형을 생성할 수 있음을 보여준다. 실제로 많은 논평은 중추신경계 기능성을 유지하는 데 있어 미생물총-장-뇌 축의 역할을 시사하고 중추신경계 장애 및 병태의 발달에서 미생물총-장-뇌 축의 기능장애를 암시한다[10], [13], [14], [23].

뇌와 장 사이(즉, 장-뇌 축)의 양방향 소통은 중추신경계, 신경내분비계 및 신경면역계, 예를 들어, 시상하부-뇌하수체-부신(HPA) 축, 자율신경계(ANS)의 교감신경 부문 및 부교감신경 부문, 예를 들어, 장 신경계(ENS) 및 미주 신경, 및 장내 미생물총을 포함한다.

실시예에서 입증된 바와 같이, 본 발명의 조성물은 미생물총-장-뇌 축을 조절하고 CNS 장애와 연관된 행동 증상을 감소시킬 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물은 중추신경계(CNS)의 장애, 특히 미생물총-장-뇌 축의 기능장애와 연관된 장애 및 병태를 치료 또는 예방하는 데 유용할 수 있다.

본 발명의 조성물은 또한 신경발달 장애 및/또는 신경정신병적 병태를 치료 또는 예방하는 데 유용하다. 신경발달 질환 및 신경정신병적 병태는 미생물총-장-뇌 축과 종종 연관되어 있다. 본 발명의 조성물은 미생물총-장-뇌 축의 기능장애에 의해 매개되는 신경발달 질환 및/또는 신경정신병적 병태를 치료 또는 예방하는 데 유용할 수 있다. 추가 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 자폐 스펙트럼 장애(ASD); 아동 발달 장애; 강박 장애(OCD); 주요 우울 장애; 우울증; 계절성 정동 장애; 불안 장애; 정신분열 스펙트럼 장애; 정신분열증; 양극성 장애; 정신병; 기분 장애; 만성 피로 증후군(근통성 뇌척수염); 스트레스 장애; 외상 후 스트레스 장애; 치매; 알츠하이머; 파킨슨 병; 및/또는 만성 통증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 질환 또는 병태를 치료 또는 예방하는 데 유용할 수 있다. 추가 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 운동 뉴런 질환; 헌팅턴 병; 길랑 바레 증후군, 및/또는 수막염을 치료 또는 예방하는 데 유용할 수 있다.

본 발명의 조성물은 만성 질환의 치료 또는 예방, 다른 치료법(예컨대, 항정신병제 및/또는 항우울제에 의한 치료)에 반응하지 않는 환자 질환의 치료 또는 예방, 및/또는 미생물총-장-뇌 축의 기능장애와 연관된 조직 손상 및 증상의 치료 또는 예방에 특히 유용할 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 CNS를 조절한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 자율 신경계(ANS)를 조절한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 장 신경계(ENS)를 조절한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 시상하부, 뇌하수체, 부신(HPA) 축을 조절한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 신경내분비 경로를 조절한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 신경면역 경로를 조절한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 CNS, ANS, ENS, HPA 축 및/또는 신경내분비 및 신경면역 경로를 조절한다.

미생물총-장-뇌 축의 신호전달은 신경계에 의해 조절된다. 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 신경계의 신호전달을 조절한다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 중추신경계의 신호전달을 조절한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 감각 뉴런의 신호전달을 조절한다. 다른 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 운동 뉴런의 신호전달을 조절한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ANS의 신호전달을 조절한다. 일부 실시형태에서, ANS는 부교감 신경계이다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 미주 신경의 신호전달을 조절한다. 다른 실시형태에서, ANS는 교감 신경계이다. 다른 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 장 신경계의 신호전달을 조절한다. 특정 실시형태에서, ANS 및 ENS 뉴런의 신호전달은 위장관의 관강 함유물에 직접 반응한다. 다른 실시형태에서, ANS 및 ENS 뉴런의 신호전달은 내강 박테리아에 의해 생성된 신경화학물질에 간접적으로 반응한다. 다른 실시형태에서, ANS 및 ENS 뉴런의 신호전달은 내강 박테리아 또는 장내분비 세포에 의해 생성된 신경화학물질에 반응한다. 특정한 바람직한 실시형태에서, ENS의 뉴런은 CNS의 기능에 영향을 미치는 구심성 미주신경을 활성화한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 장크롬친화성 세포의 활성을 조절한다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 동물 모델에서 공포 조건화를 조절한다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 공포 및/또는 불안의 발달을 조절하고, 및/또는 공포 및/또는 불안이 대상체에서 소멸되는 정도를 조절하는 데 사용될 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 동물 모델에서 스트레스-유도된 고열의 정도를 조절하는 데 사용될 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체의 스트레스 및/또는 불안의 수준을 조절한다.

실시예는 본 발명의 조성물이 BDNF의 활성화를 증가시킬 수 있음을 입증한다. BDNF는 중추신경계의 특정 뉴런에 작용하여 기존 뉴런의 생존을 지원하고 새로운 뉴런과 시냅스의 성장과 발달을 돕는다. BDNF는 해마, 피질 및 기저 전뇌에서 활동하며 장기 기억에 중요하다. 따라서, 본 발명의 조성물은 BDNF의 분비를 증가시키는 데 유용할 수 있다. 따라서, 조성물은 장기 기억의 손상과 연관된 신경퇴행성 질환 및/또는 신경정신병적 병태의 치료에 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 장기 기억을 개선하기 위해, 특히 신경퇴행성 질환 및/또는 신경정신병적 병태에 의해 손상된 장기 기억을 개선하기 위해 사용될 수 있다.

키누레닌의 증가된 수준은 인간 도파민성 신경모세포종 세포주에서 시험관내 MPP+ 유도 신경 세포 사멸을 약화시키는 것으로 나타났다[24]. 특정 실시형태에서, 키누레닌 및 키누렌산은 GI 아릴 탄화수소 수용체(Ahr) 및 GPR35 수용체를 활성화할 수 있다. Ahr 수용체의 활성화는 IL-22 생성을 유도하여 국소 염증을 저해할 수 있다. GPR35의 활성화는 이노시톨 삼인산염 생성 및 Ca2+ 동원을 유도한다.

IDO-결핍 마우스 및 IDO 저해제로 치료된 마우스는 동종이계 임신 동안 태아를 견디지 못하고, 장내 미생물총의 점막 저항성 실패로 인해 대장염을 겪고, 세포사멸 세포를 제거하는 능력을 상실한다. 또한, IDO 발현을 차단하거나 제거하면 이식편대숙주 질환, 자가면역, 및 만성 육아종 질환 및 당뇨병과 같은 만성 병태의 모델에서 염증이 악화되며, 이는 염증 제어에 있어서 IDO가 수행하는 주요 역할을 분명하게 보여준다[25]. 실시예는 본 발명의 조성물이 IDO 발현을 증가시킬 수 있음을 입증한다. 본 발명의 조성물은 질환 또는 장애, 예컨대 중추신경계 질환 또는 장애 또는 병태, 장 장벽 기능 장애, 장 투과성 증가와 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 및 심혈관 질환을 치료하는데 유용할 수 있다.

신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태

본 발명은 또한 신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는 조성물을 제공한다.

신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태는 자폐 스펙트럼 장애, 강박 장애, 주요 우울 장애, 불안 장애 또는 염증성 신경인지 장애로부터 선택될 수 있다.

자폐 스펙트럼 장애(ASD)

자폐 스펙트럼 장애는 사회적 상호작용, 의사소통 및 특이 제한적이고 반복적인 행동 및 관심에서 조기 발병의 어려움을 특징으로 하는 불균일한 신경발달 병태의 세트이다. 증상은 아주 어린 나이부터 인식될 수 있지만, ASD는 정통 교육을 시작하는 더 능력있는 아동에서 종종 진단된다. 자폐증은 ASD의 1차 유형을 나타낸다.

역사적으로, 자폐증은 3가지 핵심 영역을 기반으로 하여 진단되었다: 사회적 상호작용 손상, 비정상적인 의사소통, 제한적이고 반복적인 행동 및 관심. 국제 질환 분류(ICD-10R, WHO 1993) 및 진단 및 통계 매뉴얼(DSM IV, American Psychiatric Association, 2000)에서, 자폐증은 하기 4가지 가능한 진단 아형을 갖는 전반적 발달 장애(PDD)라는 포괄적 용어에 속한다: 아스퍼거(Asperger) 증후군, 아동기 자폐증/자폐 장애, 비정형 자폐증, 및 달리 명시되지 않는 PDD. DMS-5에서 이러한 진단 아형은 단일 범주의 자폐 스펙트럼 장애(ASD)로 조합되며, 이전에 사용된 손상의 3가지 핵심 영역은 감각 통합 기능 장애를 포함하는 2가지 주요 영역, 즉 사회적 의사소통과 상호작용, 및 반복적 행동으로 축소되었다.

ASD는 각 사람에게 다양한 여러 방식으로 영향을 미치고 매우 경증부터 중증까지 다양하기 때문에 '스펙트럼 장애'이다. 영향을 받은 개인의 기능은 언어 능력, 지능 수준, 동반이환, 증상 조성 및 서비스 접근성에 따라 실질적으로 다르다. 인지 기능, 학습, 주의력 및 감각 처리가 일반적으로 손상된다.

DSM-IV는 자폐증의 진단이 사회적 상호작용에 있어서 최소 2가지 질적 손상의 측도, 의사소통에 있어서 질적 손상의 1가지 증상, 및 제한적이고 반복적인 행동의 1가지 증상을 포함하여 적어도 6가지 증상의 존재를 필요로 한다고 진술한다. DMS-5는 ASD 진단을 2가지 증상 영역으로 재정의한다: (i) 사회적 상호작용 및 사회적 의사소통 결핍; (ii) 행동, 관심 또는 활동의 제한적이고 반복적인 패턴.

동반이환 의학적 병태는 ASD에서 매우 만연하다. 동반이환으로는 불안 및 우울증, 발작, 주의력 결핍, 공격적인 행동, 수면 문제, 위장 장애, 간질, 정신 지체, 지적 장애 및 섭식 장애를 포함한다.

실시예는 본 발명의 조성물이 자폐 스펙트럼 장애의 동물 모델에서 질환 발병률 및 질환 중증도의 감소를 달성하여 자폐 스펙트럼 장애의 치료 또는 예방에 유용할 수 있음을 입증한다.

부티르산나트륨은 자폐증 마우스 모델에서 사회적 행동 결함을 약화시키는 것으로 알려져 있다[26]. 실시예는 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주가 부티레이트를 생성할 수 있음을 처음으로 입증한다. 따라서, 특정 이론에 얽매임이 없이, 실시예에서 시험된 박테리아 균주는 부티레이트를 생성함으로써 자폐 스펙트럼 장애의 동물 모델에서 질병 발병률 및 질병 중증도를 감소시킬 수 있다.

ASD는 환경적 요인에 의해 부분적으로 촉발되는 중추신경계 장애이다. 따라서, 미생물총-장-뇌 축의 기능장애는 ASD의 발달 및 지속에 책임이 있을 수 있다. 따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 자폐 스펙트럼 장애의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 것이다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 자폐증의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 것이다. 일부 실시형태에서, 자폐증은 전반적 발달 장애(PDD)이다. 다른 실시형태에서, PDD는 아스퍼거 증후군, 아동기 자폐증/자폐 장애, 비정형 자폐증 및/또는 달리 명시되지 않는 PDD이다. 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 자폐 스펙트럼 장애, 자폐증, 전반적 발달 장애; 아스퍼거 증후군; 아동기 자폐증/자폐 장애, 비정형 자폐증 및/또는 달리 명시되지 않는 PDD를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다.

본 발명의 조성물은 대상체의 미생물총-장-뇌 축을 조절하는데 유용할 수 있다. 따라서, 바람직한 실시형태에서 본 발명의 조성물은 ASD의 위험이 있는 것으로 식별되었거나, 또는 태아기 또는 초기 발달기에서 ASD로 진단된 환자; 아동기 및/또는 성인기에서 ASD를 예방하는 데 사용하기 위한 것이다. 본 발명의 조성물은 ASD의 발달을 예방하는 데 유용할 수 있다.

본 발명의 조성물은 ASD를 관리하거나 완화시키는데 유용할 수 있다. ASD의 치료 또는 예방은, 예를 들어, 증상의 중증도의 완화, 또는 악화의 빈도 또는 환자에게 문제인 촉발인자의 범위에 대한 감소를 지칭할 수 있다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD의 적어도 하나의 핵심 증상을 예방, 감소 또는 완화시킨다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 DMS-5로 분류된 ASD의 2가지 증상 영역 중 적어도 하나를 예방, 감소 또는 완화시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 사회적 상호작용 및/또는 사회적 의사소통 결핍을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 행동, 관심 또는 활동의 제한적이고 반복적인 패턴을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 사회적 상호작용, 사회적 의사소통 결핍 및/또는 제한적이고 반복적인 행동, 관심 또는 활동의 패턴을 예방, 감소 또는 완화시킨다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 반복적 행동, 상동적 행동, 강박적 행동, 일상적 행동, 동일성 행동 및 제한된 행동을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD를 가진 대상체에서 사회적 인식, 사회적 정보 처리, 사회적 의사소통 능력, 사회적 불안/회피, 및 자폐적 선입관 및 특성을 개선한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD의 핵심 증상과 연관된 추가 증상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD가 있는 대상체에서 과민성(공격성, 고의적 자해 및 분노발작을 포함함), 동요, 울음, 무기력, 사회적 위축, 상동적 행동, 과잉행동, 비순응, 부적절한 언어, 불안, 우울증 및/또는 과잉 또는 과소 통제된 행동을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD가 있는 대상체에서 인지 기능, 학습, 주의 및/또는 감각 처리를 개선한다.

다른 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD가 있는 대상체에서 2차 결과 측정값을 개선한다. 일부 실시형태에서, 2차 결과 측정값으로는 부가적인 증상 및/또는 기능의 평가 척도, 행동 척도 및 기타 다양한 관심 측정값을 포함한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD가 있는 대상체의 핵심 증상을 평가하기 위한 진단 및/또는 증상 척도에서 긍정적인 변화를 야기한다. 일부 실시형태에서, 진단 및/또는 증상 척도는 자폐증 진단 면접조사-개정안(Autism Diagnostic Interview - Revised(ASI-R))이다. 일부 실시형태에서, 진단 또는 증상 척도는 현재 ADOS-2라고 하는 자폐증 진단 관찰 일정-일반(ADOS-G)이다. 다른 실시형태에서, 진단 또는 증상 척도는 ADI-R(Autism Diagnostic Interview Revised)이다. 다른 실시형태에서, 진단 또는 증상 척도는 사회적 및 의사소통 장애에 대한 진단 면접조사(DISCO)이다. 또 다른 실시형태에서, 진단 또는 증상 척도는 아동기 자폐증 평가 척도(CARS 및 CARS2)이다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD의 효능 평가변수의 일반적인 측정값에서 긍정적인 변화를 야기한다. 특정 실시형태에서, 일반적인 측정값으로는 비정상 행동 체크리스트(ABC), 아동 행동 체크리스트(CBCL), Vineland-II 적응 행동 척도(VABS), 사회적 반응 척도(SRS), 및/또는 반복 행동 척도 - 개정안(RBS-R)을 포함하지만, 이에 제한되지는 않는다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신 및 신경계 장애를 평가하기 위한 임상 전반 인상 - 전반적 개선(Clinical Global Impression - Global Improvement(CGI-I)) 척도를 개선시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD가 있는 대상체의 전반적인 기능에 긍정적인 효과를 나타낸다.

부가적인 척도는 본 기술분야의 기술자에게 공지되어 있을 것이다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 본 기술분야의 기술자에게 공지된 진단 및/또는 증상 척도의 결과를 개선시킬 것이다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD의 동반이환의 발병을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 불안 및 우울증, 발작, 주의력 결핍, 공격적 행동, 수면 문제, 위장 장애(과민성 대장 증후군(IBS) 포함), 간질, 정신 지체, 지능 장애 및/또는 섭식 곤란의 발병을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 복통, 설사 및 고창과 같은 위장 동반이환을 예방, 감소 또는 완화시킨다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 자폐증과 임상적으로 유사할 수 있는 특정 정신 및 행동 장애의 증상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 따라서, 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 주의력 결핍 장애(ADHD); 정동/불안 장애; 애착 장애; 반항 장애(ODD); 강박 장애(OCD) 및/또는 정신분열증(인지 손상)을 포함하는 정신병을 예방, 감소 또는 완화시킨다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD를 치료하기 위한 또 다른 치료법과 조합하여 사용될 때 ASD를 예방, 감소 또는 완화시키는데 특히 효과적이다. 이러한 치료법으로는 항정신병제, 항불안제 및 항우울제를 포함한다. 이러한 약물로는 리스페리돈(Risperdal™); 올란자핀(Zyprexa™); 플루옥세틴(Prozac™); 세르트랄린(Zoloft™); 플루복사민(Luvox™); 클로미프라민(Anafranil™); 할로페리돌(Haldol™); 티오리다진; 플루페나진; 클로르프로마진; 지프라시돈(Geogon™); 카르바마제핀(Tegretol™); 라모트리진(Lamictal™); 토피라메이트(Topomax™); 발프로산(Depakote™); 메틸페니데이트(Ritalin™); 디아제팜(Valium™) 및 로라제팜(Ativan™)을 포함한다.

자폐 스펙트럼 장애를 치료하기 위한 의약품의 임상 개발에 관한 EMA 지침은, 질환의 이질성으로 인해, 단일 화합물을 이용하여 모든 핵심 증상에 유의미한 효과를 달성하는 것은 불가능할 수 있으며, 따라서 적어도 하나의 핵심 증상에 대해 단기간 효능이 입증되어야 한다고 명시한다. 실시예에 사용된 살아있는 생물치료 균주는 자폐 스펙트럼 장애의 적어도 하나의 핵심 증상의 효과적인 치료를 보여주었는 바, 이들 균주 및 관련 블라우티아(Blautia) 균주는 인간 질환에 대해 효과적일 것으로 예상된다.

강박 장애(OCD)

OCD는 불안 장애에 속하는 이질적 만성 불능 장애이다. DSM-IV 정의에 따르면, OCD의 본질적인 특징은 심각하고 시간이 소모적인(하루에 1시간 초과) 반복적 집착증 및/또는 강박증(기준 A)이거나, 또는 현저한 고통을 유발하거나 대상체의 정상적인 일상, 직업 기능, 일상적인 사회 활동 또는 관계를 유의적으로 방해한다(기준 C). 장애가 진행되는 동안 어느 시점에서 그 사람은 집착 또는 강박이 과도하거나 지나치다는 것을 인식했다(기준 B).

집착은 거슬리고 부적절한 것으로 느끼고 현저한 불안이나 고민을 야기하는 반복적이고 지속적인 생각, 충동 또는 이미지로 정의된다. 생각, 충동 또는 이미지는 단순히 실생활 문제에 대한 과도한 걱정이 아니라, 환자 자신의 마음의 산물(예를 들어, 오염에 대한 두려움, 대칭성 집착)로서 환자가 인식하는 것이다. 이러한 사람은 일부 다른 생각이나 행동에 의해 집착을 무시, 억제 또는 중화하려고 시도한다.

강박은 집착에 대한 반응으로 또는 반드시 적용해야 하는 규칙에 따라 사람이 수행해야 한다고 느끼는 반복적 행동(예를 들어, 손 씻기, 주문하기, 비축하기, 확인하기) 또는 정신적 행동(예를 들어, 기도하기, 계산하기, 조용히 단어 반복하기)으로 정의된다.

OCD는 종종 주요 우울 장애, 기타 불안 장애(범불안 장애, 사회적 불안 장애, 공황 장애), 물질 남용 및 섭식 장애(거식증 및 폭식증)를 비롯한 다른 정신 질환의 동반이환율과 연관된다.

OCD는 미생물총-장-뇌 축의 기능 장애로 인해 발생하거나 지속될 수 있는 정신 장애이다. 따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체의 OCD를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 OCD의 필수 증상 특징을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체에서 반복되는 집착 및/또는 강박을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 집착은 침해적이고 부적절한 것으로 느끼고 현저한 불안 또는 고통을 야기하는 반복적이거나 지속적인 생각, 충동 또는 이미지이다. 특정 실시형태에서, 강박은 대상체가 집착에 대한 반응으로 또는 엄격하게 적용되어야 하는 규칙에 따라 수행해야 하는 것으로 느끼는 반복적 행동이다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 Y-BOCS 및/또는 NIMH-OC 진단 및/또는 증상 척도에 따라 대상체의 OCD 증상을 개선한다. 일부 실시형태에서, Y-BOCS 척도는 1차 평가변수의 개선을 모니터링하는 데 사용된다. 일부 실시형태에서, NIMH-OC 척도는 2차 매개변수의 개선을 모니터링하는 데 사용된다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신 및 신경계 장애를 평가하기 위한 임상 전반 인상 - 전반적 개선(CGI-I) 척도를 개선시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 ASD가 있는 대상체의 전반적인 사회적 기능(관계, 일 등)에 긍정적인 효과를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 전반적인 척도는 쉬한(Sheehan) 불능 척도이다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 OCD의 적어도 하나의 동반이환을 예방, 감소 또는 완화시킨다. OCD의 동반이환으로는 주요우울장애, 기타 불안장애(범불안장애, 사회불안장애, 공황장애), 약물남용 및 섭식장애(거식증 및 폭식증), 질 드 라 투렛(Gilles de la Tourette) 증후군, ADHD(주의력 결핍/과잉행동 장애) 및 발달 장애를 포함한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 OCD를 치료하기 위한 또 다른 치료법과 조합으로 사용될 때 OCD를 예방, 감소 또는 완화시키는데 특히 효과적이다. 이러한 치료법으로는 세로토닌 및 도파민 재흡수 저해제; 클로미프라민 및 항정신병제를 포함한다.

주요 우울 장애(MDD)

MDD는 과도한 이환율 및 사망률(자살 위험이 상당함)뿐만 아니라 상당한 심리사회적 기능 장애 및 높은 개인의 정신적 긴장과 관련이 있다. 주요우울장애라는 용어는 임상적 우울증, 주요 우울증, 단극성 우울증, 단극성 장애, 재발성 우울증 및 단순 우울증을 포괄한다. 주요 우울 장애라는 용어는 기분 장애; 기분 부전증; 만성 우울증; 계절성 정동 장애 및 경계선 성격 장애를 커버한다.

DMS-5 기준에 따르면 MDD 증상으로는 우울한 기분 또는 2주 초과 동안 일상 활동에 대한 흥미나 즐거움의 상실; 및 사회적, 직업적, 및 교육적 기능 장애를 포함한다. 특정 증상인 다음 9가지 중 적어도 5가지는 거의 매일 존재한다: 거의 하루 종일 우울한 기분이나 과민성; 대부분 매일 대부분의 활동에서 흥미 또는 즐거움 감소; 상당한 체중 변화 또는 식욕 변화; 수면 변화(불면증 또는 과다수면); 활동의 변화(정신운동 동요 또는 지체); 피로 또는 에너지 손실; 죄책감 또는 무가치함(무가치함 또는 과도하거나 부적절한 죄책감의 감정); 집중력 감소(생각 또는 집중하는 능력 감소, 또는 우유부단함 증가); 및 자살충동(죽음이나 자살에 대한 생각, 또는 대상체가 자살 계획을 가짐). 또한, MDD는 비합리적인 걱정; 불쾌한 걱정에 의한 선입견; 휴식 어려움 및/또는 긴장감을 포함하는 불안 증상과 연관이 있다. MDD 에피소드는 경증, 중등도 또는 중증일 수 있다.

MDD 에피소드는 종종 다른 정신 장애 또는 파킨슨병, 알츠하이머병, 뇌혈관 장애, 암 및 만성 통증 증후군과 같은 신체 장애와의 동반이환과 연관이 있다. MDD는 범불안 장애; 불안 장애; 물질 사용 장애; 외상 후 스트레스 장애(PTSD); 인격 장애; 통증; 스트레스; 과민성 대장 증후군; 불면증; 두통 및 대인관계 문제를 비롯한 동반이환으로서 광범위한 다른 정신 장애와 흔히 연관된다.

주요 우울 장애는 미생물총-장-뇌 축의 기능장애로 인해 발달하거나 지속될 수 있는 정신병 장애이다. 따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체에서 MDD를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 급성 주요 우울 에피소드의 치료 또는 예방 및/또는 새로운 에피소드의 예방(재발 예방)에 사용하기 위한 것이다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 경증, 중등도 또는 중증 MDD 에피소드의 발생을 예방, 감소 또는 완화시킨다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 본 명세서에 열거된 DMS-5 기준에 의해 분류되는 MDD의 증상 중 하나 이상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체의 우울한 기분을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체의 대부분의 활동에 관심 또는 즐거움의 저하를 예방, 감소 또는 완화시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 2주 기간 내에 MDD의 증상의 발생을 감소시킨다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 증상 또는 진단 척도에 따라 MDD의 증상을 개선한다. 증상 개선을 평가하기 위한 이러한 척도로는 해밀턴의 우울증 평가 척도(Hamilton Rating Scale of Depression(HAMD)) 및 몽고메리 아스버그 우울증 평가 척도(Montgomery Asberg Depression Rating Scale)를 포함한다. 또한, 중 자가평가 우울 척도(Zung Self-Rating Depression Scale(SDS)) 및 중 자가평가 불안 척도(Zung Self-Rating Anxiety Scale(SAS))도 적절한 증상 개선 척도이다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신 및 신경계 장애를 평가하기 위한 임상 전반 인상 - 전반적 개선(CGI-I) 척도를 개선한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 MDD를 갖는 대상체의 전반적인 사회적 및 직업적 기능에 긍정적인 효과를 나타낸다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 치료 내성 MDD를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 MDD의 적어도 하나의 동반이환을 예방, 감소 또는 완화시킨다. MDD의 동반이환으로는 범불안 장애; 불안 장애; 물질 사용 장애; 외상후 스트레스 장애(PTSD); 인격 장애; 통증; 스트레스; IBS; 불면증; 두통과 대인관계 문제를 포함한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 MDD를 치료하기 위한 또 다른 치료법과 조합으로 사용될 때 MDD를 예방, 감소 또는 완화시키는데 특히 효과적이다. 이러한 치료법으로는 항우울제, 증강 전략(예를 들어, 조합 치료법, 리튬 및 기타 기분 안정제, 갑상선 호르몬 및 비정형 항정신병 약물) 또는 심지어 2세대 항정신병 약물을 포함한다.

불안 장애

불안 장애는 불안과 두려움의 감정을 특징으로 하는 정신 장애 그룹이다. 불안 장애에는 범불안장애(GAD); 특정 공포증; 사회 불안 장애; 분리 불안 장애; 공황 장애 및 선택적 함구증을 비롯한 다수가 있다.

GAD는 6가지 기준에서 DMS-5에 따라 진단된다. 제1 기준은 많은 활동과 관련된 시간 대부분에서 불안 또는 걱정이 존재하는 6개월 초과 동안의 너무 많은 불안 또는 걱정이다. 제2 기준은 대상체가 제1 기준의 증상을 관리할 수 없다는 것이다. 제3 기준은 다음 중 적어도 3가지(아동의 경우 1가지)가 발생하는 것이다: 쉽게 피로해짐; 집중 문제; 과민성; 근육 긴장 및 수면 문제. 마지막 3가지 기준은 그 증상들이 유의미한 사회적, 직업적 및 기능적 손상을 초래하고; 그 증상들이 약물, 약 또는 다른 신체적 건강 문제로 인한 것이 아니며; 그 증상들이 공황 장애와 같은 다른 정신병 문제와 더 잘 어울리지 않는다는 것이다. 다른 모든 불안 장애는 GAD의 감별 진단으로 간주될 수 있다.

GAD는 우울증; 물질 사용 장애; 스트레스; IBS; 불면증; 두통; 통증; 심장 이벤트; 대인관계 문제와 ADHD를 비롯한 동반이환으로서 매우 광범위한 다른 정신 장애와 흔히 연관된다.

불안 장애는 미생물총-장-뇌 축의 기능장애로 인해 발달하거나 지속될 수 있는 정신병 장애이다. 따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체의 불안 장애를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다. 특정 실시형태에서, 불안 장애는 범불안 장애(GAD)이고; 특정 공포증; 사회 불안 장애; 분리 불안 장애; 광장 공포증; 공황 장애 및 선택적 함구증이다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 본 명세서에 열거된 DMS-5 기준에 의해 분류된 대상체에서 GAD의 증상 중 하나 이상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. DMS-5에 따르면. 동일 증상은 다른 불안 장애와 연관이 있다. 따라서, 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체에서 불안 장애의 하나 이상의 증상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체의 불안 또는 걱정을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 6개월 기간 내에 증상의 발생을 감소시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 초조; 피로; 집중력 상실; 과민증; 근육 긴장; 및/또는 수면 문제를 예방, 감소 또는 완화시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 불안 장애와 연관된 사회적, 직업적 및 기능적 손상을 예방, 감소 또는 완화시킨다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 증상 또는 진단 척도에 따라 불안 장애의 증상을 개선시킨다. 특정 실시형태에서, 증상 개선을 평가하기 위한 척도는 해밀턴 불안 평가 척도(HAM-A)를 포함한다. 일부 실시형태에서, HAM-A 총 척도는 1차 평가변수를 평가하는데 사용된다. 다른 실시형태에서, HAM-A 정신 불안 요인은 2차 평가변수로서 유용할 수 있다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신 및 신경계 장애를 평가하기 위한 임상 전반 인상 - 전반적 개선(CGI-I) 척도를 개선시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 불안 장애가 있는 대상체의 전반적인 사회적, 직업적 및 기능적 손상에 긍정적인 효과를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 전반적인 척도는 쉬한 불능 척도이다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 GAD 및 불안 장애의 적어도 하나의 동반이환을 예방, 감소 또는 완화시킨다. GAD의 동반이환으로는 우울증; 물질 사용 장애; 스트레스; IBS; 불면증; 두통; 통증; 심장 이벤트; 대인관계 문제 및 ADHD를 포함한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 불안 장애를 치료하기 위한 또 다른 치료법과 조합으로 사용될 때 불안 장애를 예방, 감소 또는 완화하는데 특히 효과적이다. 이러한 치료법으로는 선택적 세로토닌 재흡수 저해제(벤라팍신, 둘록세틴, 에스시탈로프람 및 파록세틴); 벤조다이아제핀(알프라졸람, 로라제팜 및 클로나제팜); 프레가발린(Lyrica®) 및 가바펜틴(Neurontin®); 세로토닌 수용체 부분 작용제(부스피론 및 탄도스피론); 비정형 세로토닌성 항우울제(예컨대, 이미프라민 및 클로미프라민); 모노아민 산화효소 저해제(MAOI)(예컨대, 모클로베미드 및 페넬진); 하이드록시진; 프로프라놀롤; 클로니딘; 구안파신 및 프라조신을 포함한다.

외상 후 스트레스 장애(PTSD)

PTSD는 심각한 불능성 장애이며, 이의 필수 특징은 이 장애의 촉발 요인으로서 정신적 외상 이벤트의 내포이다.

PTSD의 증상은 DMS-V 기준에 따라 4가지 주요 클러스터로 분류된다: (i) 침입: 예로는 악몽, 외상 이벤트의 원치 않는 생각, 회상, 및 정서적 고통 또는 생리적 반응으로 외상적 상기시키는 것에 대한 반응을 포함함; (ii) 회피: 예로는 장소, 대화 또는 기타 상기시키는 것을 포함하는 외상적 기억에 대한 촉발인자를 회피하는 것을 포함함; (iii) 인지 및 기분의 부정적인 변화: 예로는 외상 이벤트에 대한 왜곡된 자신이나 타인의 비난, 자신이나 세상에 대한 부정적인 믿음, 지속적인 부정적 감정(예를 들어, 두려움, 죄책감, 수치심), 소외감, 및 위축된 감정(예를 들어, 긍정적인 감정을 경험할 수 없음)을 포함함; (iv) 각성 및 반응성의 변화: 예로는 화를 내거나, 무모하거나, 또는 자기 파괴적인 행동, 수면 문제, 집중력 문제, 놀람 반응 증가, 및 과잉경계를 포함함.

외상 이벤트 후 4주 이내에 해소되는 증상은 급성 스트레스 장애의 기준을 충족한다. DSM은 급성(3개월 미만의 증상 지속) 및 만성 PTSD(3개월 초과의 증상 지속)를 구분한다. 증상이 스트레스요인 이후 6개월 후에 시작된다면, 장애는 지연 발병 PTSD로 정의된다.

PTSD는 주요 우울 장애 및 물질 사용 장애와 높은 동반이환을 수반한다.

PTSD는 미생물총-장-뇌 축의 기능장애로 인해 발달하거나 지속될 수 있는 정신 장애이다. 따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체에서 PTSD를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다. 유사한 발병기전에 따르면, 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 스트레스 장애를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 급성 스트레스 장애를 치료한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 급성 및/또는 만성 PTSD를 치료한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 지연 발병 PTSD를 치료한다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 본 명세서에 열거된 DMS-5 기준에 의해 분류되는 대상체의 PTSD(또는 스트레스 장애) 증상 중 하나 이상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 PTSD를 갖는 대상체에서 침입 생각을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 PTSD를 갖는 대상체에서 회피 행동을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 PTSD를 갖는 대상체에서 인지 및 기분의 부정적인 변화를 예방, 감소 또는 완화시킨다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 PTSD가 있는 대상체에서 각성 및 반응성의 변화를 예방한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 증상 또는 진단 척도에 따라 PTSD 및 스트레스 장애의 증상을 개선한다. 특정 실시형태에서, 증상 개선을 평가하기 위한 척도는 임상적-투여된 PTSD(CAPS) 척도이다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신병 및 신경계 장애를 평가하기 위한 임상 전반 인상 - 전반적 개선(CGI-I) 척도를 개선한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 PTSD 및 스트레스 장애가 있는 대상체의 전반적인 사회적, 직업적 및 기능적 손상에 대해 긍정적인 효과를 나타낸다. 일부 실시형태에서, 전반적인 척도는 쉬한 불능 척도이다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 PTSD 및 스트레스 장애의 적어도 하나의 동반이환을 예방, 감소 또는 완화시킨다. PTSD 및 스트레스 장애의 동반이환으로는 MDD, 물질 사용 장애; 스트레스와 불안을 포함한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 PTSD 및 스트레스 장애를 치료하기 위한 또 다른 치료법과 조합으로 사용될 때 PTSD 및 스트레스 장애를 예방, 감소 또는 완화시키는데 특히 효과적이다. 이러한 치료법으로는 세로토닌 작용제, 삼환계 항우울제, 기분 안정제, 아드레날린 저해제, 항정신병제, 벤조다이아제핀, 세르트랄린(Zoloft™), 플루옥세틴(Prozac™) 및/또는 파록세틴(Paxil™)을 포함한다.

정신분열증 스펙트럼 및 정신병적 장애

이러한 질환은 대상체가 명확하게 생각하고, 올바른 판단을 내리고, 감정적으로 반응하고, 효과적으로 의사소통하고, 현실을 이해하고, 적절하게 행동하는 능력에 영향을 미친다. 정신병 질환으로는 정신분열증(이하에 열거된 증상); 분열정동 장애(대상체가 정신분열증 및 기분 장애, 예를 들어, 우울증 또는 양극성 장애의 증상을 모두 갖고 있음); 정신분열형 장애(정신분열증의 증상을 나타내지만, 증상이 더 짧은 기간 동안 지속됨: 1개월에서 6개월 사이); 단기 정신병 장애(대상체가 가족의 죽음과 같은, 종종 매우 스트레스가 많은 이벤트에 대한 반응으로 갑작스럽고 짧은 기간의 정신병 행동을 나타냄 - 회복은 일반적으로 1개월 미만임); 망상 장애(망상은 적어도 1개월 동안 지속됨); 공유 정신병 장애; 물질 유도 정신병 장애; 다른 의학적 병태로 인한 정신병 장애; 편집분열증(정신분열증과 유사한 증상을 보이며 생애 후반, 사람들이 노년기일 때 시작함)을 포함한다. 가장 잘 알려진 정신병 장애는 정신분열증이며 대부분의 정신병 장애는 정신분열증과 유사한 증상을 보인다.

정신분열증은 이질적 경과 및 증상 프로파일을 갖는 심각한 정신 질환이다. 정신분열증은 임상적으로 소위 긍정적인 및 부정적인 증상을 나타낸다. 긍정적인 증상은 망상, 환각, 와해된 언어, 와해되거나 긴장된 행동을 포함한다. 부정적인 증상은 정서적 평탄화, 사고 및 언어의 유창함 및 생산성 제한, 목표 지향적인 행동의 시작을 포함한다. 긍정적인 증상은 정상 기능의 과잉 또는 왜곡을 반영하는 것으로 보이는 반면, 부정적인 증상은 정상 기능의 축소 또는 상실을 반영하는 것으로 보인다. 또한, 인지 결핍(작업 기억, 정보 처리, 주의/경계, 학습, 추론 및 사회적 인지의 결함)이 일반적이다. 인지 결핍은 일반적으로 현재의 항정신병 치료에 의해 잘 개선되지 않는다. 정신분열증 환자도 기분 증상을 겪는다. 이러한 주요 증상 외에도, 정신분열증은 조증 및 우울 증상, 불안 또는 강박 증상, 물질 남용 및 의존, 및 인격 장애와 같은 다른 정신병 증상을 갖는 동반이환과 연관이 있다.

DMS-5에 따르면, 정신분열증의 진단을 위해 대상체는 다음 증상 중 적어도 2가지를 가져야 한다: 망상; 환각; 와해된 연설; 무질서하거나 긴장된 행동 및 부정적인 증상. 증상 중 적어도 하나는 망상, 환각 또는 와해된 언어의 존재여야 한다. 장애의 지속적인 징후는 적어도 6개월 동안 지속되어야 하며, 그 동안 대상체는 사회적 또는 직업적 악화 문제가 상당한 시간에 걸쳐 발생하는, 적어도 1개월간 활성 증상을 경험해야 한다.

정신분열증 스펙트럼 및 정신병 장애는 미생물총-장-뇌 축의 기능장애로 인해 발달하거나 지속될 수 있는 정신 장애이다. 따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체에서 정신분열증 스펙트럼 및/또는 정신병 장애를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다. 특정 실시형태에서, 정신분열증 스펙트럼 및 정신병 장애는 정신분열증; 분열정동 장애; 정신분열형 장애; 단기 정신병 장애; 망상 장애; 공유 정신병 장애; 물질 유도 정신병 장애; 다른 의학적 병태로 인한 정신병 장애 및 편집분열증으로부터 선택된다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신분열증의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 것이다. 특정 실시형태에서, 정신분열증은 편집성, 와해성, 긴장성, 미분화 및 잔류 정신분열증으로부터 선택된다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 본 명세서에 열거된 DMS-5 기준에 의해 분류된 바와 같이, 대상체의 하나 이상의 정신분열증 증상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 이들 실시형태는 다른 정신분열증 스펙트럼 및 정신병 장애의 증상의 예방, 감소 또는 완화에 적용된다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신분열증의 부정적인 증상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신분열증의 긍정적인 증상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신분열증의 긍정적인 및 부정적인 증상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신분열증이 있는 대상체에서 망상, 환각, 와해된 언어 및 와해되거나 긴장성 행동을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신분열증이 있는 대상체에서 정서적 평탄화, 사고 및 언어의 유창성 및 생산성 및 목표 지향적 행동의 개시의 제한을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신분열증이 있는 대상체에서 인지 결함 및/또는 기분 장애를 예방, 감소 또는 완화시킨다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 6개월 기간 내에 대상체의 정신분열증의 긍정적인 및/또는 부정적인 증상의 발생을 감소시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신분열증 스펙트럼 또는 정신병 장애가 있는 대상체에서 사회적 및/또는 직업적 기능을 개선시킨다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 증상 또는 진단 척도에 따라 정신분열증 스펙트럼 또는 정신병 장애의 증상을 개선시킨다. 특정 실시형태에서, 증상 개선을 평가하기 위한 척도는 긍정적인 및 부정적인 증상 척도(PANSS) 및 단기 정신병 평가 척도(BPRS)이다. 특정 실시형태에서, 부정적인 증상 평가 척도(SANS)가 사용된다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신병 및 신경계 장애를 평가하기 위한 임상 전반 인상 - 전반적 개선(CGI-I) 척도를 개선시킨다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신분열증 스펙트럼 또는 정신병 장애를 갖는 대상체의 전반적인 사회적 및 직업적 손상에 대해 긍정적인 효과를 나타낸다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신분열증 스펙트럼 또는 정신병 장애의 적어도 하나의 동반이환을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 동반이환은 조증 및 우울 증상, 불안 또는 강박 증상, 물질 남용 및 의존, 및 인격 장애 같은 것이다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 난치성 정신분열증의 치료 저항성을 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 PTSD 및 스트레스 장애를 치료하기 위한 또 다른 치료법과 조합으로 사용될 때 정신분열증 스펙트럼 또는 정신병 장애를 예방, 감소 또는 완화시키는데 특히 효과적이다. 특정 실시형태에서, 이러한 치료법으로는 클로르프로마진, 플루페나진, 할로페리돌 및/또는 페르페나진을 포함하는 1세대 항정신병제를 포함한다. 특정 실시형태에서, 이러한 치료법은 아리피프라졸(Abilify™); 아세나핀(Saphris™); 브렉스피프라졸(Rexulti™); 카리프라진(Vraylar™); 클로자핀(Clozaril™); 일로페리돈(Fanapt™); 루라시돈(Latuda™); 올란자핀(Zyprexa™); 팔리페리돈(Invega); 퀘티아핀(Seroquel™); 리스페리돈(Risperdal™); 지프라시돈(Geodon™)을 포함하는 2세대 치료법을 포함한다.

양극성 장애

양극성 장애는 일반적으로 만성 질환이다. 조증은 양극성 장애의 가장 중요한 증상이다. 조증 및 우울 에피소드의 특정 기간과 패턴에 따라 양극성 장애에는 여러 유형이 있다. DMS-5에서는 양극성 I 장애, 양극성 II 장애, 순환기분장애, 급속 순환 양극성 장애 및 양극성 장애 NOS 사이에 차이를 둔다.

DSM에 따르면, 조증은 비정상적 및 지속적으로 고양되고 과대망상적이거나 과민한 기분이 뚜렷한 시기이다. 에피소드는 일주일 동안 지속되어야 하며 기분은 다음 증상 중 적어도 3가지를 가져야 한다: 높은 자존감; 수면의 필요성 감소; 연설 속도 증가; 발상의 빠른 급변; 쉽게 산만해짐; 목표 또는 활동에 대한 관심 증가; 정신운동 동요; 위험이 높은 활동에 대한 추구 증가.

양극성 I 장애는 하나 이상의 조증 또는 혼합(조증 및 우울증) 에피소드 및 적어도 하나의 주요 우울 에피소드(MDD 에피소드의 증상에 대해서는 상기 참조)를 수반한다. 양극성 II 장애는 적어도 하나의 경조증 에피소드에 의해 동반되는 하나 이상의 주요 우울 에피소드를 갖는다. 조증 또는 혼합 에피소드는 없다. 경조증은 조증이 적은 형태이다. 증상은 유의미한 사회적, 직업적 및 기능적 손상에 책임이 있다. 순환기질은 경조증 기간과 함께 낮은 수준의 우울증을 변화시키는 것을 특징으로 한다. 진단을 내리기 전에 성인의 경우 최소 2년 또는 아동의 경우 1년 동안 증상이 존재해야 한다. 성인 및 아동의 무증상 기간은 각각 2개월 또는 1개월을 넘지 않는다. 급속 순환 양극성 장애는 양극성 장애의 중증 형태이다. 1년 이내에 주요 우울증, 조증, 경조증 또는 혼합 상태의 에피소드가 적어도 4회 있을 때 발생한다. 달리 명시되지 않는(NOS) 양극성 장애는 다른 유형에 명확하게 들어 맞지 않는 양극성 증상으로 분류된다. NOS는 여러 양극성 증상이 있지만 임의의 다른 하위유형에 대한 표지를 충족시키기에 충분하지 않을 때 진단된다.

양극성 장애는 다음 동반이환과 연관이 있다: ADHD; 불안 장애; 물질 장애; 비만 및 대사증후군.

양극성 장애는 미생물총-장-뇌 축의 기능장애로 인해 발생하거나 지속될 수 있는 정신 장애이다. 따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체에서 양극성 장애를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다. 특정 실시형태에서, 양극성 장애는 양극성 I 장애이다. 특정 실시형태에서, 양극성 장애는 양극성 II 장애이다. 특정 실시형태에서, 양극성 장애는 순환기질 장애이다. 특정 실시형태에서, 양극성 장애는 급속 순환성 양극성 장애이다. 특정 실시형태에서, 양극성 장애는 양극성 장애 NOS이다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체에서 양극성 장애의 하나 이상의 증상을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체에서 조증 에피소드의 발생을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 비정상적 및 지속적으로 고양되거나, 과대망상적이거나, 과민한 기분의 발생을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 다음 증상 중 하나 이상을 예방, 감소 또는 완화시킨다: 높은 자존감; 수면의 필요성 감소; 연설 속도 증가; 발상의 빠른 급변; 쉽게 산만해짐; 목표 또는 활동에 대한 관심 증가; 정신운동 동요; 높은 위험 리스크가 있는 활동에 대한 추구 증가. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체에서 하나 이상의 조증 또는 혼합 에피소드의 발생을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 대상체에서 적어도 하나의 주요 우울 에피소드의 발생을 감소시킨다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 적어도 하나의 경조증 에피소드를 동반하는 적어도 하나의 주요 우울 에피소드의 발생을 예방, 감소 또는 완화시킨다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 양극성 장애의 급성기를 치료하고/하거나 추가 에피소드의 발생을 예방한다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 양극성 장애가 있는 대상체에서 조증/우울 에피소드의 급성기를 치료하고 추가 조증/우울 에피소드의 발생을 예방한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 증상 또는 진단 척도에 따라 양극성 장애의 증상을 개선시킨다. 특정 실시형태에서, 조증 에피소드의 증상 개선을 평가하기 위한 척도는 조증 상태 평가 척도 및 영 조증 평가 척도(Young Mania Rating Scale)이다. 특정 실시형태에서, 척도는 베흐-라펠슨 조증 척도(Bech-Rafaelsen Mania Scale(BRMAS))이다. 특정 실시형태에서, 조증에서 우울 에피소드로의 전환의 증상 개선을 평가하기 위한 척도로는 해밀턴 우울 평가 척도, 몽고메리-아스버그 평가 척도, 및 베흐-라펠슨 우울 척도를 포함한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정신과 및 신경계 장애를 평가하기 위한 임상 전반 인상 - 전반적 개선(CGI-I) 척도를 개선한다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 양극성 장애가 있는 대상체의 전반적인 사회적, 직업적 및 기능적 손상에 대해 긍정적인 효과를 나타낸다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 양극성 장애의 적어도 하나의 동반이환을 예방, 감소 또는 완화시킨다. 특정 실시형태에서, 동반이환은 ADHD, 불안 장애, 물질 장애, 비만 및 대사 증후군으로부터 선택된다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 리튬 및 다이발프로엑스(divalproex)에 반응하지 않는 조울증 및 양극성 장애를 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 양극성 장애를 치료하기 위한 또 다른 치료법과 조합으로 사용될 때 양극성 장애를 예방, 감소 또는 완화하는데 특히 효과적이다. 특정 실시형태에서, 이러한 치료법으로는 탄산리튬, 항경련제(발프로에이트, 다이발프로엑스, 카르바마제핀 및 라모트리진 포함) 및 항정신병 약물(아리피프라졸, 올란자핀, 퀘티아핀 및 리스페리돈 포함)을 포함한다.

장 투과성

박테리아는 장 투과성 수준을 조절하여 미생물총-장-뇌 축의 신호를 조절할 수 있다. 장 장벽은 외부 "물리적" 장벽과 내부 "기능적" 면역 장벽으로 구성된 내강 환경과 내부 환경을 분리하는 복잡한 다층 시스템이다. 장 장벽은 숙주와 환경 사이의 분자 교환과 영양소의 흡수를 허용하면서 항원과 미생물이 체내로 들어가는 것을 방지한다. 장내 장 투과성은 주어진 부위에서 장 장벽의 기능적 특징으로서 정의되며, 장 벽을 가로질러 분자가 불활성이면 유속을 분석하여 측정할 수 있다[27].

본 명세서에서 논의된 몇몇 CNS 장애 외에도, 장내 장 투과성과 관련된 질환으로는 장 질환; 예컨대, 위궤양, 감염성 설사, 과민성 대장 증후군; 기능성 GI 질환, 염증성 장 질환, 체강 질환 및 암(식도, 결장직장) 및 장외 질환; 예컨대, 식품 알레르기, 감염(예를 들어, 호흡기), 급성 염증(패혈증, 전신 염증 반응 증후군(SIRS), 다발성 장기 부전), 비만, 대사 질환(예를 들어, 예컨대 NAFLD 및 NASH, 제2형 당뇨병 또는 심혈관 질환) 및 만성 염증(예를 들어, 관절염)을 포함한다. 이러한 질환은 내강에서 체내로 성분의 전위에 의해 촉발될 수 있는 염증을 특징으로 한다[27].

본 발명자들은 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주가 장내 장 투과성을 감소시킬 수 있음을 입증했다. 부티레이트는 장 장벽을 유지하는 역할을 하는 것으로 알려져 있다. 부티레이트의 감소는 치밀 이음부 병변 및 장 투과성 손상을 유발한다[27]. 실시예는 본 발명의 박테리아 균주가 부티레이트 생산을 증가시킬 수 있음을 입증한다. 따라서, 본 발명의 조성물은 장 투과성을 감소시키는데 유용하다.

따라서, 본 발명의 박테리아 균주는 장 장벽 기능의 개선 및 이에 따라 증가된 장 투과성과 연관된 질환의 치료 또는 예방에 특히 유용하다. 본 발명의 박테리아 균주는 또한 변경된 장 투과성을 특징으로 하는 질환의 치료 또는 예방에 유용하다. 본 발명의 조성물은 특히 부티레이트 생성을 유도하고/하거나 위장관에서 부티레이트 수준을 증가시킴으로써 대상체에서 장 투과성을 감소시키는 데 유용하다. 실시예는 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주가 부티레이트를 생성할 수 있음을 처음으로 입증한다.

본 발명의 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 예를 들어 장 장벽 기능이 손상된 것으로 식별된 대상체에서 장 장벽 기능을 개선하기 위한 것이다. 본 발명의 조성물의 이러한 효과는 손상된 장 장벽 기능을 갖는 것으로 식별된 대상체가 다른 병태, 특히 증가된 장 투과성과 연관된 병태를 갖는 것으로 식별된 대상체가 본 발명의 조성물을 사용한 치료에 반응할 가능성이 더 높을 수 있기 때문에 새로운 임상 상황을 제공한다.

따라서, 본 발명의 조성물은 위궤양, 감염성 설사, 과민성 대장 증후군, 기능성 GI 질환, 염증성 장 질환, 체강 질환 및 암(식도, 결장직장), 식품 알레르기, 감염(예를 들어, 호흡기), 급성 염증(패혈증, 전신 염증 반응 증후군(SIRS), 다발성 장기 부전), 비만, 대사 질환(예를 들어, NAFLD 및 NASH, 제2형 진성 당뇨병 또는 심혈관 질환) 및 만성 염증(예를 들어, 관절염)의 치료 또는 예방에 유용할 수 있다.

따라서, 본 발명의 조성물은 증가되거나 변경된 장 투과성과 연관된 질병의 발병 또는 진행을 예방하거나 지연시키는 데 특히 효과적일 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 증가되거나 변경된 장 투과성과 연관된 질환의 발병 또는 진행을 지연시키는 데 사용하기 위한 것이다. 본 발명의 조성물의 투여 후 장투과성의 증가 또는 변화와 연관된 질병의 예방은 치료 전 환자, 건강한 개체 또는 증가하거나 변경된 장 투과성과 연관된 보다 심각한 형태의 질환이 있는 개체에서 관찰된 질환 상태에 상대적으로 측정될 수 있다.

단쇄 지방산(SCFA) 생산

아세테이트(C2), 프로피오네이트(C3) 및 부티레이트(C4)와 같은 단쇄 지방산(SCFA)은 장에서 혐기성 박테리아 발효의 대사 산물이다. 이러한 SCFA는 장내 미생물군집에 의해 유도되는 유익한 효과의 핵심 매개인자이며, 미생물총과 숙주 조직 사이의 연결 고리인 것으로 제안된다. 주로 부티레이트인 SCFA는 대식세포에 의한 염증 매개인자(TNF-α, IL-6 및 IL-10 포함)의 생산을 조절할 수 있다. 염증 반응을 조절하는 능력 때문에 염증성 장 질환, 패혈증 및 급성 폐 손상(ALI)과 같은 염증 병태에 SCFA의 치료 적용이 제안되었다[28]. 본 발명자들은 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주가 부티레이트를 생성할 수 있다는 것을 새롭게 식별했다. 임의의 특정 이론에 얽매이게 하려는 것은 아니지만, 본 발명의 조성물은 염증 매개인자, 예를 들어 TNF-α, IL-6 및 IL-10의 생산을 조절하여 염증성 병태, 예컨대 염증성 장 질환, 패혈증 및 급성 폐 손상(ALI)을 치료 또는 예방하는 데 특히 효과적일 수 있다.

SCFA는 또한 대사 및 심혈관 건강을 조절하는데 연루되어 있다. SCFA는 수축기 혈압과 이완기 혈압을 조절하는 것으로 밝혀져 있고, 예를 들어, 연구는 부티레이트가 염증 감소를 통해 이완기 혈압을 감소시킬 수 있음을 보여주었다. 또한, SCFA는 식욕과 에너지 섭취를 줄이고 포도당 항상성을 조절하여 식이 유도 비만을 예방한다는 것이 시사된 바 있다[29]. 트라이메틸아민-N-옥사이드(TMAO) 경로는 장내 미생물총과 죽상동맥경화증과 같은 심혈관 질환을 연결하는 것으로 밝혀져 있다[30].

실시예는 푸시카테니박터 속의 박테리아가 부티레이트를 포함한 SCFA 생산을 증가시킬 수 있음을 입증한다. 따라서, 본 발명의 조성물은 염증성 장 질환, 패혈증 및 급성 폐 손상(ALI)과 같은 염증성 질환의 치료 또는 예방에 유용할 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 비만 및 당뇨병과 같은 대사 질환 및 죽상동맥경화증, 고혈압, 관상동맥 질환, 협심증 및 심근경색증과 같은 심혈관 질환, 심장 부정맥, 심부전, 판막 심장 질환, 심낭 질환, 뇌졸중, 고혈압성 심장 질환, 류마티스성 심장 질환, 심근병증, 선천성 심장 질환, 심장염, 대동맥류, 말초 동맥 질환, 혈전색전성 질환 및 정맥 혈전증의 치료 또는 예방에 유용할 수 있다.

투여 방식

바람직하게는, 본 명세서에 개시된 조성물은 본 발명의 박테리아 균주에 의한 장으로의 전달 및/또는 부분적 또는 전체적 집락화를 가능하게 하기 위해 위장관에 투여되어야 한다. 다시 말해서, 박테리아는 위장관의 일부 또는 전체에 집락화될 수 있고/있거나 이러한 집락화는 일시적이거나 영구적일 수 있다.

보다 구체적으로, 일부 실시형태에서, "장의 전체 집락화"는 박테리아가 장의 모든 부분(즉, 소장, 대장 및 직장)에 집락화되었음을 의미한다. 추가로 또는 대안적으로, 용어 "전체 집락화"는 박테리아가 장의 일부 또는 전체 부분에 영구적으로 생착된 것을 의미한다.

일부 실시형태에서, "장의 부분 집락화"는 박테리아가 장의 전체 부분이 아닌 일부에 집락화되었음을 의미한다. 추가로 또는 대안적으로, 용어 "부분 집락화"는 박테리아가 장의 일부 또는 전체 부분에서 일시적으로 생착된 것을 의미한다.

생착의 과도기는 휴약 기간, 즉 투약 간격 종료와 본 발명의 박테리아 균주의 검출가능 수준이 존재하지 않는 시기 사이의 기간을 결정하기 위해 투약 간격의 마지막 후에, 본 발명의 박테리아 균주의 풍부도를 주기적으로(예를 들어, 매일) 평가함으로써(예를 들어, 대변 샘플에서) 결정될 수 있다. 본 발명의 실시형태에서, 휴약 기간은 14일 이하, 12일 이하, 10일 이하, 7일 이하, 4일 이하, 3일 이하, 2일 이하 또는 1일 이하이다.

본 발명의 실시형태에서, 본 발명의 박테리아는 대장에 일시적으로 생착된다.

일반적으로, 본 발명의 조성물은 경구로 투여되지만, 직장으로, 비강내로, 또는 협측 또는 설하 경로를 통해 투여될 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 정제, 발포체, 스프레이 또는 겔로서 투여될 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 예를 들어 테오브로마 오일(코코아 버터), 합성 경질 지방(예를 들어, 서포시레, 위텝솔), 글리세로-젤라틴, 폴리에틸렌 글리콜 또는 비누 글리세린 조성물 형태의 직장 좌약과 같은 좌약으로서 투여될 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 비위관, 구강위관, 위관, 공장절개관(J관), 경피적 내시경 위루관(PEG), 또는 포트, 예컨대, 위, 공장 또는 기타 적절한 접근 포트에 대한 접근을 제공하는 흉벽 포트에 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물은 1회 투여될 수 있거나, 치료 치료법의 일부로서 순차적으로 투여될 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 매일(1회 또는 수회) 투여되어야 한다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 연장된 시간 기간 동안, 예컨대 적어도 1주, 2주, 1개월, 2개월, 6개월, 또는 1년 동안 정기적으로, 예컨대 매일, 2일마다, 주마다 투여된다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 7일, 14일, 16일, 21일 또는 28일 또는 7일 이하, 14일 이하, 16일 이하, 21일 이하 또는 28일 이하 동안 투여된다. 예를 들어, 일부 실시형태에서 본 발명의 조성물은 16일 동안 투여된다.

본 발명의 특정 실시형태에서, 본 발명에 따른 치료는 환자의 장내 미생물총의 평가를 동반한다. 본 발명의 균주의 전달 및/또는 부분 또는 전체 집락화가 달성되지 않아 효능이 관찰되지 않는다면 치료를 반복할 수 있고, 또는 전달 및/또는 부분 또는 전체 집락화가 성공적이고 효능이 관찰된다면 치료를 중단할 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 임신한 동물, 예를 들어 인간과 같은 포유동물에게 투여되어 자궁내 및/또는 출생 후에 아이에서 질병, 장애 또는 병태가 발병하는 것을 예방할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 조성물은 중추신경계 질환 또는 장애의 발병을 예방하기 위해 임신한 동물에게 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물은 질환, 장애 또는 병태, 예를 들어 중추신경계 질환 또는 장애로 진단되었거나, 질환, 장애 또는 병태의 위험이 있는 것으로 식별된 환자에게 투여될 수 있다. 조성물은 또한 건강한 환자에서 질환, 장애 또는 병태의 발병을 예방하기 위한 예방적 조치로서 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물은 자폐증으로 진단된 환자에게 투여될 수 있다. 이들은 또한 자폐증의 위험이 있는 것으로 식별된 환자에게 투여될 수 있다. 조성물은 또한 건강한 환자에서 자폐증의 발병을 예방하기 위한 예방적 조치로서 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물은 비정상적인 장내 미생물총을 갖는 것으로 식별된 환자에게 투여될 수 있다. 예를 들어, 환자는 푸시카테니박터, 특히 푸시카테니박터 사카리보란스에 의한 집락화가 감소되었거나 없을 수 있다.

본 발명의 조성물은 영양 보충제와 같은 식품으로 투여될 수 있다.

일반적으로, 본 발명의 조성물은 가금류, 돼지, 고양이, 개, 말 또는 토끼와 같은 일위성(monogastric) 포유동물을 포함하는 동물을 치료하는데 사용될 수 있지만, 인간의 예방 또는 치료를 위한 것이다. 본 발명의 조성물은 동물의 성장 및 수행 능력을 향상시키는 데 유용할 수 있다. 동물에게 투여하는 경우, 경구 위관영양법이 사용될 수 있다.

일부 실시형태에서, 조성물이 투여되는 대상체는 성인 인간이다. 일부 실시형태에서, 조성물이 투여되어야 하는 대상체는 아동 인간이다. 일부 실시형태에서, 조성물이 투여되어야 하는 대상체는 유아 인간이다.

조성물

본 발명의 조성물은 박테리아를 포함한다. 본 발명자들은 염증성 중추신경계 질환 또는 장애를 치료하는 푸시카테니박터 속의 박테리아의 놀라운 능력을 식별하였다. 그러나, 푸시카테니박터 속의 박테리아가 유익한 효과를 발휘하기 위해서는 소장에 살아있는 상태로 및/또는 생존가능한 상태로 효과적으로 전달되어야 한다. 따라서, 일반적으로 본 발명의 조성물은 푸시카테니박터 종의 불활성화된 박테리아, 특히 푸시카테니박터 종의 열-불활성화된 박테리아를 포함하지 않는다.

본 발명은 박테리아가 상부 소화관에서 분해 또는 흡수되어 그 효과를 발휘할 수 없는 것을 방지하도록 제형화된 조성물을 제공한다. 예를 들어, 조성물은 산소 제거제 및/또는 프리바이오틱 기질, 예컨대 비타민 C 및 소화불가능한 탄수화물을 포함할 수 있다.

또한, 조성물은 소장으로 가는 경로에서 박테리아가 분해되지 않도록 장용 제형화될 수 있다.

따라서, 바람직한 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 장으로 박테리아 균주의 전달을 가능하게 하도록 캡슐화된다. 캡슐화는, 예를 들어, pH 변화에 의해 촉발될 수 있는, 압력, 효소 활성 또는 물리적 붕해와 같은 화학적 또는 물리적 자극에 의한 파열을 통해, 표적 위치에 전달될 때까지 조성물이 분해되지 않도록 보호한다. 임의의 적절한 캡슐화 방법이 사용될 수 있다. 예시적인 캡슐화 기술은 다공성 매트릭스 내의 포획, 고체 담체 표면에 대한 부착 또는 흡착, 응집 또는 가교제에 의한 자가-응집, 및 미세다공성 막 또는 미세캡슐에 숨겨진 기계적 봉쇄를 포함한다. 본 발명의 조성물을 제조하는 데 유용할 수 있는 캡슐화에 대한 지침은, 예를 들어, 참고 문헌 [31] 및 [32]에서 이용 가능하다.

본 발명의 바람직한 실시형태에서, 조성물은 동결-건조된 형태로 제형화된다. 예를 들어, 본 발명의 조성물은 본 발명의 박테리아 균주를 포함하는 과립 또는 젤라틴 캡슐, 예를 들어 경질 젤라틴 캡슐을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 조성물은 동결건조된 박테리아를 포함한다. 박테리아의 동결건조는 잘 확립된 절차이며, 관련 지침은, 예를 들어, 참고 문헌 [33 내지 35]에서 이용 가능하다. 실시예는 동결건조된 조성물이 특히 효과적임을 입증한다.

대안적으로, 본 발명의 조성물은 살아있는 활성 박테리아 배양물을 포함할 수 있다. 실시예는 본 발명의 박테리아의 배양물이 치료적으로 효과적임을 입증한다.

본 발명의 조성물에서 박테리아 균주는 불활성화되지 않았을 수 있고, 예를 들어 열-불활성화되지 않았을 수 있다. 본 발명의 조성물에서 박테리아 균주는 사멸되지 않았을 수 있고, 예를 들어 가열 사멸되지 않았을 수 있다. 본 발명의 조성물에서 박테리아 균주는 약독화되지 않았을 수 있으며, 예를 들어 열 약독화되지 않았을 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 조성물에서 박테리아 균주는 사멸, 불활성화 및/또는 약독화되지 않았을 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 조성물에서 박테리아 균주는 살아 있다. 예를 들어, 본 발명의 조성물에서 박테리아 균주는 생존가능하다. 예를 들어, 본 발명의 조성물에서 박테리아 균주는 장에 부분적 또는 전체적으로 집락화될 수 있다.

본 발명의 조성물 내의 박테리아 균주는 바람직하게는 생존가능하다. 바람직하게는 장에 부분적으로 또는 전체적으로 집락화될 수 있다. 본 발명의 조성물에서 박테리아 균주는 살아있고 생존가능할 수 있다. 본 발명의 조성물에서 박테리아 균주는 살아있고, 생존가능하며, 장에 부분적으로 또는 전체적으로 집락화될 수 있다.

조성물은 살아있는 박테리아 균주 및 사멸된 박테리아 균주의 혼합물을 포함할 수 있다.

조성물은 경구 투여될 수 있고 정제, 캡슐 또는 분말의 형태일 수 있다. 푸시카테니박터는 절대 혐기성이므로 캡슐화된 제품이 바람직하다.

본 발명의 조성물은 본 발명의 박테리아 균주의 치료적 유효량을 포함한다. 박테리아 균주의 치료적 유효량은 환자에게 유익한 효과를 발휘하기에 충분하다. 박테리아 균주의 치료적 유효량은 환자의 장으로의 전달 및/또는 부분 또는 전체 집락화를 초래하기에 충분할 수 있다.

박테리아의 적합한 1일 용량은, 예를 들어, 성인 인간의 경우, 약 1×10³ 내지 약 1×10¹¹ 집락 형성 단위(CFU); 예를 들어, 약 1×10⁷ 내지 약 1×10¹⁰ CFU; 다른 예에서 약 1×10⁶ 내지 약 1×10¹⁰ CFU; 다른 예에서 약 1×10⁷ 내지 약 1×10¹¹ CFU; 다른 예에서 약 1×10⁸ 내지 약 1×10¹⁰ CFU; 다른 예에서 약 1×10⁸ 내지 약 1Х10¹¹ CFU일 수 있다.

특정 실시형태에서, 박테리아의 용량은 1일당 적어도 10⁹ 세포, 예컨대 1일당 적어도 10¹⁰, 적어도 10¹¹ 또는 적어도 10¹²개 세포이다.

조성물의 용량은 조성물의 중량에 대해 약 1×10⁶ 내지 약 1×10¹¹ 집락 형성 단위(CFU)/g의 박테리아 균주를 포함할 수 있다. 이 용량은 성인에게 적합할 수 있다. 예를 들어, 조성물은 약 1×10³ 내지 약 1×10¹¹ CFU/g; 예를 들어, 약 1Х10⁷ 내지 약 1×10¹⁰ CFU/g; 다른 예에서 약 1×10⁶ 내지 약 1×10¹⁰ CFU/g; 다른 예에서 약 1×10⁷ 내지 약 1×10¹¹ CFU/g; 다른 예에서 약 1×10⁸ 내지 약 1×10¹⁰ CFU/g; 다른 예에서 약 1×10⁸ 내지 약 1×10¹¹ CFU/g, 약 1×10⁸ 내지 약 1×10¹⁰ CFU/g를 포함할 수 있다. 이 용량은, 예를 들어, 1g, 3g, 5g 및 10g일 수 있다.

조성물은 프로바이오틱으로 제형화될 수 있다. FAO/WHO는 프로바이오틱을 적절한 양으로 투여 시에 숙주에게 건강상의 이점을 주는 살아있는 미생물이라고 정의한다.

전형적으로, 본 발명의 조성물과 같은 프로바이오틱은 적어도 하나의 적합한 프리바이오틱 화합물과 선택적으로 조합된다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 프로바이오틱 조성물은 총 중량 조성물에 대해 약 1 내지 약 30 중량%(예를 들어, 5 내지 20 중량%)의 양으로 프리바이오틱 화합물을 포함할 수 있다. 알려진 프리바이오틱스로는 이눌린 및 트랜스갈락토-올리고당과 같은 시판 제품을 포함한다.

프리바이오틱 화합물은 일반적으로 올리고당류 또는 다당류 또는 당 알코올과 같은 소화불가능한 탄수화물이며, 이는 상부 소화관에서 분해되거나 흡수되지 않는다.

잠재적인 프리바이오틱스는 다음을 포함하는 수많은 유익한 생리학적 특성을 가질 수 있다: 소화관 상부에서 소화 내성, 장내 미생물총에 의해 발효될 수 있음, 숙주의 건강에 유익한 효과가 있음, 프로바이오틱스의 성장을 선택적으로 자극할 수 있음 및 다양한 식품 또는 사료 가공 조건에서 안정적임.

탄수화물은 프럭토-올리고당류(또는 FOS), 단쇄 프럭토-올리고당류, 이눌린, 아이소말트-올리고당류, 펙틴, 자일로-올리고당류(또는 XOS), 키토산-올리고당류(또는 COS), 베타-글루칸, 경작성 검 변성 및 내성 전분, 폴리덱스트로스, D-타가토스, 아카시아 섬유, 캐럽, 귀리 및 감귤 섬유로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 일 양상에서, 프리바이오틱스는 단쇄 프럭토-올리고당류(간단하게 이하에 FOSs-c.c로 표시됨)이고; 상기 FOSs-c.c.는 일반적으로 사탕무의 전환에 의해 수득되고, 3개의 포도당 분자가 결합된 당류 분자를 포함하는 소화불가능한 탄수화물이다. 프리바이오틱은 위장관에서 푸시카테니박터 속의 박테리아의 성장 및 활동을 자극할 수 있다. 이것은 박테리아가 염증성 중추 신경계 질환 또는 장애를 치료하는 숙주에 유익한 효과를 발휘할 수 있도록 한다.

다른 프리바이오틱 화합물(예컨대, 비타민 C)은 산소 제거제로서 포함될 수 있고, 전달 및/또는 부분 또는 전체 집락화 및 생체내 생존을 개선시킬 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 프로바이오틱 조성물은 식품 또는 영양 제품, 예컨대, 우유 또는 유청 기반 발효 유제품으로서, 또는 의약 제품으로서 경구 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물은 중추신경계 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하기 위한 또 다른 치료 화합물과 조합으로 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물은 신경보호 또는 신경증식을 조절하는 영양 보충제와 함께 투여될 수 있다. 영양 보충제는 영양 비타민을 포함하거나, 이것으로 이루어진다. 예를 들어, 비타민은 비타민 B6, 마그네슘, 다이메틸글리신(비타민 B16) 및 비타민 C일 수 있다. 본 발명의 조성물은 다른 프로바이오틱과 조합으로 투여될 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 중추 신경계 질환 또는 장애에 대한 제2 작용제의 효과를 향상시키는 데 사용하기 위한 것이다. 본 발명의 조성물의 면역 조절 효과는 레보도파, 도파민 작동제, MAO-B 저해제, COMT 저해제, 글루타메이트 길항제 또는 항콜린제와 같은 통상적인 요법에 뇌를 보다 민감하게 만들 수 있으며, 이들은 본 발명의 조성물과 조합하여(순차적으로 또는 동시적으로) 투여되는 예시적인 2차 작용제이다.

본 발명의 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 부형제 또는 담체를 포함할 수 있다. 이러한 적합한 부형제의 예는 참고문헌[36]에서 찾아볼 수 있다. 치료 용도로 허용되는 담체 또는 희석제는 약학 분야에 잘 알려져 있으며, 예를 들어 참고문헌[37]에 기재되어 있다. 적합한 담체의 예로는 락토스, 전분, 글루코스, 메틸 셀룰로스, 스테아르산마그네슘, 만니톨, 소르비톨 등을 포함한다. 적합한 희석제의 예로는 에탄올, 글리세롤 및 물을 포함한다. 약제학적 담체, 부형제 또는 희석제의 선택은 의도된 투여 경로 및 표준 약제학적 관행과 관련하여 선택할 수 있다. 약제학적 조성물은 담체, 부형제 또는 희석제로서 또는 이에 더하여, 임의의 적합한 결합제(들), 윤활제(들), 현탁제(들), 코팅제(들), 가용화제(들)를 포함할 수 있다. 적합한 결합제의 예로는 전분, 젤라틴, 천연 당, 예컨대, 글루코스, 무수 락토스, 자유 유동 락토스, 베타-락토스, 옥수수 감미료, 천연 및 합성 검, 예컨대, 아카시아, 트라가칸트 또는 알긴산나트륨, 카복시메틸 셀룰로스 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다. 적합한 윤활제의 예로는 올레산나트륨, 스테아르산나트륨, 스테아르산마그네슘, 벤조산나트륨, 아세트산나트륨, 염화나트륨 등을 포함한다. 보존제, 안정제, 염료 및 심지어 향미제가 약제학적 조성물에 제공될 수 있다. 보존제의 예는 벤조산나트륨, 소르브산, 시스테인 및 p-하이드록시벤조산의 에스터를 포함하고, 예를 들어, 일부 실시형태에서, 보존제는 벤조산나트륨, 소르브산 및 p-하이드록시벤조산의 에스터로부터 선택된다. 산화방지제 및 현탁제가 또한 사용될 수 있다.

본 발명의 조성물은 식품으로 제형화될 수 있다. 예를 들어, 식품은 영양 보충제와 같이 본 발명의 치료 효과 외에도 영양상의 이점을 제공할 수 있다. 유사하게, 식품은 본 발명의 조성물의 맛을 향상시키거나, 또는 약제학적 조성물이라기보다는 일반적인 식품 품목에 더 유사하여 소비하기에 더욱 매력적인 조성물을 만들도록 제형화될 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 우유 기반 제품으로 제형화된다. "우유 기반 제품"이라는 용어는 다양한 지방 함량을 갖는 임의의 액체 또는 반고체 우유 또는 유청 기반 제품을 의미한다. 우유 기반 제품은, 예를 들어, 소 우유, 염소 우유, 양 우유, 탈지 우유, 전유, 분유와 유청을 임의의 가공 없이 재조합한 우유, 또는 요구르트, 응고 우유, 응유, 사워유, 사워 전유, 버터 우유 및 기타 사워유 제품일 수 있다. 또 다른 중요한 그룹으로는 우유 음료, 예컨대, 유청 음료, 발효유, 연유, 유아 또는 아기용 우유, 향료 첨가 우유, 아이스크림, 사탕과 같은 우유 함유 식품을 포함한다.

본 발명의 조성물은 푸시카테니박터 속의 하나 이상의 박테리아 균주를 포함할 수 있고 임의의 다른 속의 박테리아를 함유하지 않거나, 또는 최소량 또는 생물학적으로 관련 없는 양의 다른 속의 박테리아만을 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명은 치료법에 사용하기 위한, 임의의 다른 속의 박테리아를 함유하지 않거나, 또는 최소량 또는 생물학적으로 관련 없는 양의 다른 속의 박테리아만을 포함하는 푸시카테니박터 속의 하나 이상의 박테리아 균주를 포함하는 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 푸시카테니박터 사카리보란스 종의 하나 이상의 박테리아 균주를 포함할 수 있고 임의의 다른 종의 박테리아를 함유하지 않거나, 또는 최소량 또는 생물학적으로 관련 없는 양의 다른 종의 박테리아만을 포함할 수 있다. 따라서, 본 발명의 조성물은 치료법에 사용하기 위한, 푸시카테니박터 사카리보란스 종의 하나 이상의 박테리아 균주를 포함할 수 있고, 임의의 다른 종의 박테리아를 함유하지 않거나, 또는 최소량 또는 생물학적으로 관련 없는 양의 다른 종의 박테리아를 포함할 수 있다.

일부 실시형태에서, 조성물은 클로스트리듐(Clostridium) 종의 박테리아를 포함하지 않고/않거나, 박테로이데스 프라길리스(Bacteroides fragilis) 종의 박테리아를 포함하지 않는다. 일부 실시형태에서, 조성물은 박테로이데스 테타이오타오미크론(Bacteroides thetaiotaomicron)을 포함하지 않는다.

본 발명의 조성물은 단일 박테리아 종을 함유할 수 있고 임의의 다른 박테리아 종을 함유하지 않을 수 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 단일 박테리아 균주를 함유하고 임의의 다른 박테리아 균주를 함유하지 않는다. 예를 들어, 본 발명의 조성물은 푸시카테니박터 사카리보란스 종의 박테리아 균주만을 포함할 수 있다. 이러한 조성물은 최소한의 또는 생물학적으로 관련 없는 양의 다른 박테리아 균주 또는 종만을 포함할 수 있다. 이러한 조성물은 다른 종의 유기체가 실질적으로 없는 배양물일 수 있다. 일부 실시형태에서, 이러한 조성물은 다른 종의 유기체가 실질적으로 없는 동결건조물일 수 있다.

본 발명은 또한 임의의 다른 균주로부터의 박테리아를 함유하지 않거나, 치료법에 사용하기 위한 다른 균주로부터의 박테리아를 최소한으로 또는 생물학적으로 관련 없는 양으로만 포함하는 푸시카테니박터 속의 단일 박테리아 균주를 포함하는 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 임의의 다른 균주로부터의 박테리아를 함유하지 않거나 치료법에 사용하기 위한 다른 균주로부터의 최소량 또는 생물학적으로 관련 없는 양의 박테리아만을 포함하는 푸시카테니박터 사카리보란스 종의 단일 박테리아 균주를 포함하는 조성물을 제공한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 1종 초과의 박테리아 균주를 포함할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 동일 종 내의 1개 초과의 균주(예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40 또는 45개 초과의 균주)를 포함하고, 선택적으로, 임의의 다른 종의 박테리아를 함유하지 않는다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 동일 종 내의 50개 미만(예를 들어, 45, 40, 35, 30, 25, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4 또는 3개 미만의 균주)의 균주를 포함하고, 선택적으로 임의의 다른 종의 박테리아를 함유하지 않는다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 동일 종 내의 1-40, 1-30, 1-20, 1-19, 1-18, 1-15, 1-10, 1-9, 1-8, 1-7, 1-6, 1-5, 1-4, 1-3, 1-2, 2-50, 2-40, 2-30, 2-20, 2-15, 2-10, 2-5, 6-30, 6-15, 16-25, 또는 31-50개 균주를 포함하고, 선택적으로, 임의의 다른 종의 박테리아를 함유하지 않는다. 본 발명은 전술한 것의 임의의 조합을 포함한다.

조성물은 미생물 컨소시엄을 포함할 수 있다. 예를 들어, 조성물은 미생물 컨소시엄의 일부로서 푸시카테니박터 균주를 포함할 수 있다. 예를 들어, 푸시카테니박터 균주는 푸시카테니박터 속 및/또는 장내 생체내에서 공생적으로 살 수 있는 다른 속의 하나 이상(예를 들어, 적어도 2, 3, 4, 5, 10, 15 또는 20개)의 다른 박테리아 균주와 조합으로 존재할 수 있다. 예를 들어, 조성물은 상이한 속의 박테리아 균주와 조합으로 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함한다. 일부 실시형태에서, 미생물 컨소시엄은 단일 유기체, 예를 들어, 인간의 분변 샘플로부터 수득된 2종 이상의 박테리아 균주를 포함한다. 일부 실시형태에서, 미생물 컨소시엄은 천연에서 함께 발견되지 않을 수 있다. 예를 들어, 미생물 컨소시엄은 적어도 2종의 상이한 유기체의 분변 샘플로부터 수득된 박테리아 균주를 포함한다. 미생물 컨소시엄은 동일 종 유래, 예를 들어, 상이한 두 인간으로부터 유래하는 2개의 상이한 유기체로부터의 박테리아를 포함할 수 있다. 예를 들어, 2개의 상이한 유기체는 유아 인간 및 성인 인간이다. 미생물 컨소시엄은 동일한 종이 아닌, 예컨대, 인간 및 비-인간 포유동물과 같은 2가지 상이한 유기체로부터의 박테리아를 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물은 HT03-11T, KO-38, 또는 TT-111 푸시카테니박터 사카리보란스 균주와 동일한 안정성 및 치료 효능 특성을 갖는 박테리아 균주를 부가적으로 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물이 1개 초과의 박테리아 균주, 종 또는 속을 포함하는 일부 실시형태에서, 개별 박테리아 균주, 종 또는 속은 별도의, 동시 또는 순차적 투여를 위한 것일 수 있다. 예를 들어, 조성물은 1개 초과의 박테리아 균주, 종 또는 속 모두를 포함할 수 있거나, 박테리아 균주, 종 또는 속은 별도로 저장되고 별도로, 동시에 또는 순차적으로 투여될 수 있다. 일부 실시형태에서, 1개 초과의 박테리아 균주, 종 또는 속은 별도로 저장되지만, 사용 전에 함께 혼합된다.

일부 실시형태에서, 본 발명에 사용하기 위한 박테리아 균주는 인간 성인 분변으로부터 수득된다. 본 발명의 조성물이 1개 초과의 박테리아 균주를 포함하는 일부 실시형태에서, 모든 박테리아 균주는 인간 성인 분변으로부터 수득되거나, 다른 박테리아 균주가 존재한다면, 최소한의 양으로만 존재한다. 박테리아는 인간 성인 분변으로부터 수득된 후 배양되어 본 발명의 조성물에 사용될 수 있다.

일부 실시형태에서, 본 발명에 사용하기 위한 박테리아 균주는 인간 유아 분변으로부터 수득된다. 본 발명의 조성물이 1개 초과의 박테리아 균주를 포함하는 일부 실시형태에서, 모든 박테리아 균주는 인간 유아 분변으로부터 수득되거나, 다른 박테리아 균주가 존재한다면, 최소한의 양으로만 존재한다. 박테리아는 인간 유아 분변으로부터 수득된 후 배양되어 본 발명의 조성물에 사용될 수 있다.

상기에 언급한 바와 같이, 일부 실시형태에서, 하나 이상의 푸시카테니박터 박테리아 균주(들)는 본 발명의 조성물에 유일한 치료 활성제(들)이다. 일부 실시형태에서, 조성물 중 박테리아 균주(들)는 본 발명의 조성물 중 유일한 치료 활성제(들)이다.

본 발명에 따라 사용하기 위한 조성물은 시판 승인을 필요로 하거나 필요로 하지 않을 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 상기 박테리아 균주가 동결건조된 상기 약제학적 조성물을 제공한다. 특정 실시형태에서, 본 발명은 앞서 논의된 박테리아 균주를 포함하는 동결건조된 약제학적 조성물을 제공한다. 특정 실시형태에서, 본 발명은 상기 박테리아 균주가 분무 건조된 상기 약제학적 조성물을 제공한다. 특정 실시형태에서, 본 발명은 상기 박테리아 균주가 동결건조되거나 분무 건조되고 살아있는 상기 약제학적 조성물을 제공한다. 특정 실시형태에서, 본 발명은 박테리아 균주가 동결건조되거나 분무 건조되고 생존가능한 상기 약제학적 조성물을 제공한다. 특정 실시형태에서, 본 발명은 박테리아 균주가 동결건조되거나 분무건조되고 장에 부분적으로 또는 전체적으로 집락화할 수 있는 상기 약제학적 조성물을 제공한다. 특정 실시형태에서, 본 발명은 박테리아 균주가 동결건조되거나 분무건조되고 생존가능하고 장에 부분적으로 또는 전체적으로 집락화할 수 있는 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

일부 경우에, 동결건조된 박테리아 균주는 투여 전에 재구성된다. 일부 경우에, 재구성은 본 명세서에 기재된 희석제의 사용에 의한 것이다.

본 발명의 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 부형제, 희석제 또는 담체를 포함할 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 본 발명의 박테리아 균주; 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공하고; 여기서 박테리아 균주는 필요로 하는 대상체에게 투여했을 때 염증성 신경퇴행성 장애를 치료하기에 충분한 양으로 존재한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 본 발명의 박테리아 균주; 및 약제학적으로 허용 가능한 부형제, 담체 또는 희석제를 포함하는 약제학적 조성물을 제공하고; 여기서 박테리아 균주는 염증성 신경퇴행성 장애를 치료 또는 예방하기에 충분한 양으로 존재한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 박테리아 균주의 양이 조성물의 중량에 대해 그램당 약 1×10³ 내지 약 1×10¹¹ 집락 형성 단위인 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 조성물이 1g, 3g, 5g 또는 10g의 용량으로 투여되는 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 경구, 직장, 피하, 비강, 협측 및 설하로 이루어진 군으로부터 선택되는 방법에 의해 투여되는 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 락토스, 전분, 글루코스, 메틸 셀룰로스, 스테아르산마그네슘, 만니톨 및 소르비톨로 이루어진 군으로부터 선택되는 담체를 포함하는 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 에탄올, 글리세롤 및 물로 이루어진 군으로부터 선택되는 희석제를 포함하는 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 전분, 젤라틴, 글루코스, 무수 락토스, 자유 유동 락토스, 베타-락토스, 옥수수 감미료, 아카시아, 트라가칸트, 알긴산나트륨, 카복시메틸 셀룰로스, 폴리에틸렌 글리콜, 올레산나트륨, 스테아르산나트륨, 스테아르산마그네슘, 벤조산나트륨, 아세트산나트륨 및 염화나트륨으로 이루어진 군으로부터 선택되는 부형제를 포함하는 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 보존제, 산화방지제 및 안정화제 중 적어도 하나를 추가로 포함하는 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 벤조산나트륨, 소르브산 및 p-하이드록시벤조산의 에스터로 이루어진 군으로부터 선택되는 보존제를 포함하는 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 상기 박테리아 균주가 동결건조된 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

특정 실시형태에서, 본 발명은 조성물이 약 4℃ 또는 약 25℃에서 밀봉된 용기에 저장되고 용기가 50% 상대 습도를 갖는 대기에 배치된 경우, 집락 형성 단위로 측정된 박테리아 균주의 적어도 80%가 적어도 약 1개월, 3개월, 6개월, 1년, 1.5년, 2년, 2.5년 또는 3년의 기간 후 남아 있는, 상기 약제학적 조성물을 제공한다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 본 명세서에 기재된 바와 같은 조성물을 포함하는 밀봉된 용기에 제공된다. 일부 실시형태에서, 밀봉된 용기는 사셋(sachet) 또는 병이다. 일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 본 명세서에 기재된 바와 같은 조성물을 포함하는 주사기에 제공된다.

본 발명의 조성물은 일부 실시형태에서 약제학적 제형으로서 제공될 수 있다. 예를 들어, 조성물은 정제 또는 캡슐로서 제공될 수 있다. 일부 실시형태에서, 캡슐은 젤라틴 캡슐("젤-캡")이다. 캡슐은 경질 또는 연질 캡슐일 수 있다. 일부 실시형태에서, 제형은 연질 캡슐이다. 연질 캡슐은 캡슐 외피에 존재하는, 예를 들어, 글리세롤, 소르비톨, 말티톨 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 연화제의 첨가로 인해, 특정 탄성 및 연성을 가질 수 있는 캡슐이다. 연질 캡슐은, 예를 들어, 젤라틴 또는 전분을 기준으로 생산될 수 있다. 젤라틴 기반 연질 캡슐은 다양한 공급업체로부터 상업적으로 입수할 수 있다. 예를 들어, 경구 또는 직장과 같은 투여 방법에 따라, 연질 캡슐은 다양한 모양을 가질 수 있으며, 예를 들어 원형, 타원형, 직사각형 또는 어뢰 모양일 수 있다. 연질 캡슐은 통상적인 공정, 예컨대, 쉬어러(Scherer) 공정, 아코겔(Accogel) 공정 또는 액적 또는 취입 공정에 의해 생산될 수 있다.

일부 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 경구 투여된다. 경구 투여는 화합물이 위장관으로 들어가도록 삼킴을 수반할 수 있다.

경구 투여에 적합한 약제학적 제형은 정제와 같은 고체 플러그, 고체 미세미립자, 반고체 및 액체(다중상 또는 분산 시스템 포함), 예컨대 정제; 다중 또는 나노 미립자, 액체(예를 들어, 수용액), 에멀젼 또는 분말을 함유하는 연질 또는 경질 캡슐; 로젠지(액체 충전된 것 포함); 츄잉제; 젤; 속분산 투여 형태; 필름제; 난자제형(ovule); 스프레이; 및 협측/점막접착 패치를 포함한다.

일부 실시형태에서, 약제학적 제형은 장용 제형, 즉, 경구 투여에 의해 본 발명의 조성물을 장으로 전달하기에 적합한 위-내성 제형(예를 들어, 위 pH에 내성)이다. 장용 제형은 박테리아 또는 조성물의 다른 성분이 산 민감성, 예를 들어, 위 조건 하에 분해되기 쉬울 때, 특히 유용할 수 있다.

일부 실시형태에서, 장용 제형은 장용 코팅을 포함한다. 일부 실시형태에서, 제형은 장용 코팅된 투여 형태이다. 예를 들어, 제형은 장용 코팅된 정제 또는 장용 코팅된 캡슐 등일 수 있다. 장용 코팅은 통상적인 장용 코팅, 예를 들어, 경구 전달을 위한 정제, 캡슐 등에 대한 통상적인 코팅일 수 있다. 제형은 필름 코팅, 예를 들어, 장용 중합체의 박막 층, 예를 들어, 산불용성 중합체의 박막 층을 포함할 수 있다.

일부 실시형태에서, 장용 제형은 본질적으로 장용성이며, 예를 들어, 장용 코팅이 필요하지 않은 위-내성이다. 따라서, 일부 실시형태에서, 제형은 장용 코팅을 포함하지 않는 장용 제형이다. 일부 실시형태에서, 제형은 열겔화 물질로 제조된 캡슐이다. 일부 실시형태에서, 열겔화 물질은 메틸셀룰로스, 하이드록시메틸셀룰로스 또는 하이드록시프로필메틸셀룰로스(HPMC)와 같은 셀룰로스 물질이다. 일부 실시형태에서, 캡슐은 임의의 필름 형성 중합체를 함유하지 않는 외피를 포함한다. 일부 실시형태에서, 캡슐은 외피를 포함하고 외피는 하이드록시프로필메틸셀룰로스를 포함하고 임의의 필름 형성 중합체를 포함하지 않는다(예를 들어, 문헌 [38] 참조). 일부 실시형태에서, 제형은 본질적으로 장용 캡슐(예를 들어, Capsugel의 Vcaps™)이다.

배양 방법

본 발명에 사용하기 위한 박테리아 균주는, 예를 들어, 참고문헌 [39 내지 41]에 상세히 설명된 바와 같은 표준 미생물학 기술을 사용하여 배양할 수 있다.

배양에 사용되는 고체 또는 액체 배지는, 예를 들어, YCFA 아가 또는 YCFA 배지일 수 있다. YCFA 배지는 다음을 포함할 수 있다(100㎖당, 근사값): 카시톤(Casitone)(1.0g), 효모 추출물(0.25g), NaHCO₃(0.4g), 시스테인(0.1g), K₂HPO₄(0.045g), KH₂PO₄(0.045g), NaCl(0.09g), (NH₄)₂SO₄(0.09g), MgSO₄·7H₂O(0.009g), CaCl₂(0.009g), 레사주린(0.1㎎), 헤민(1㎎), 비오틴(1㎍), 코발라민(1㎍), p-아미노벤조산(3㎍), 엽산(5㎍), 및 피리독사민(15㎍).

일반

본 발명의 실시는 달리 지시되지 않는 한, 본 기술분야의 기술 내에 있는 화학, 생화학, 분자 생물학, 면역학 및 약리학의 통상적인 방법을 사용할 것이다. 이러한 기술은 문헌에 충분히 설명되어 있다. 예를 들어, 참고문헌 [42 내지 49] 등을 참조한다.

"포함하는(comprising)"이라는 용어는 "포함하는(including)" 뿐만 아니라 "이루어지는(consisting)"도 포괄하며, 예를 들어, X를 "포함하는" 조성물은 X로만 이루어질 수도 있고, 또는 추가적인 어떤 것, 예를 들어, X + Y를 포함할 수 있다.

수치 값 x와 관련하여 용어 "약"은 선택적이며, 예를 들어 x±10%를 의미한다.

"실질적으로"라는 단어는 "완전히"를 배제하지 않으며, 예를 들어, Y가 "실질적으로 없는" 조성물은 Y가 완전히 없을 수 있다. 필요한 경우 "실질적으로"라는 단어는 본 발명의 정의에서 생략될 수 있다.

"질환"은 외부 또는 내부 요인에 대한 병태생리학적 반응의 결과이다. "장애"는 신체 또는 신체 일부의 정상 또는 규칙적인 기능에 대한 질환의 붕괴이다. "병태"는 정상적인 활동이나 웰빙 느낌을 방해하는 비정상적인 건강 상태이다.

2개의 뉴클레오타이드 서열 사이의 서열 동일성 백분율에 대한 언급은 정렬 시, 2개의 서열을 비교할 때 동일한 뉴클레오타이드의 백분율을 의미한다. 2개의 뉴클레오타이드 서열 사이의 서열 유사성(서열 상동성이라고도 알려짐) 백분율에 대한 언급은 두 서열 사이의 비슷함의 정도를 측정하며, 상이한 뉴클레오타이드 염기가 정렬된 정도를 입증한다. 이러한 정렬 및 상동성 또는 서열 동일성의 퍼센트는 본 기술분야에 공지된 소프트웨어 프로그램, 예를 들어, 참고문헌[50]의 섹션 7.7.18에 기재된 것을 사용하여 결정할 수 있다. 바람직한 정렬은 5 또는 12, 바람직하게는 5의 갭 개방 패널티 및 2의 갭 확장 패널티, 62의 BLOSUM 행렬을 갖는 아핀 갭 탐색(affine gap search)을 사용하는 스미스-워터만 상동성 탐색 알고리즘에 의해 결정된다. 스미스-워터만 상동성 탐색 알고리즘은 참고문헌[51]에 개시되어 있다.

구체적으로 명시되지 않는 한, 다수의 단계를 포함하는 공정 또는 방법은 이 방법의 시작 또는 끝에 추가 단계를 포함할 수 있거나, 또는 추가 중재 단계를 포함할 수 있다. 또한, 적절한 경우, 단계를 조합하거나, 생략하거나, 또는 대체 순서로 수행할 수 있다.

본 발명의 다양한 실시형태가 본 명세서에 기재된다. 각각의 실시형태에 명시된 특징은 다른 특정한 특징과 조합되어 추가의 실시형태를 제공할 수 있음을 이해할 것이다. 특히, 본 명세서에서 적합하거나, 전형적이거나 또는 바람직한 것으로 강조된 실시형태는 서로 조합될 수 있다(상호 배타적인 경우 제외).

본 명세서에 인용된 모든 특허 및 문헌 참고는 그 전체가 본 명세서에 참고로 포함된다.

작용제를 환자에게 투여하는 것을 포함하는 치료 방법에 대한 임의의 언급은 또한 상기 치료 방법에 사용하기 위한 작용제, 뿐만 아니라 상기 치료 방법에 사용되는 작용제의 용도, 및 약제의 제조에 사용되는 작용제의 용도를 커버한다.

하기 실시예는 단지 예시의 목적으로 제공되며, 어떠한 방식으로도 본 발명의 범위를 제한하려고 의도된 것이 아니다.

발명을 수행하기 위한 방식

실시예 1 - 장 투과성에 대한 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과

요약

이 연구는 마우스 회장 및 결장 샘플의 장 투과성에 대한 16S 상동성 및 MALDI-TOF 분석에 의한 푸시카테니박터 사카리보란스 종에 속하는 것으로서 식별된 균주의 효과를 조사했다. 장의 과도한 투과성 또는 '누설'은 장의 다수 염증 장애와 연관이 있다.

재료 및 방법

수컷 BALB/c 마우스는 연속 6일 동안 1×10⁹ CFU의 푸시카테니박터 사카리보란스를 경구 위관영양법(200㎕ 부피)으로 투여받았다. 7일차에, 동물을 경추 탈구로 안락사시키고, 원위 회장 및 결장을 떼어내고, 냉각된 크렙스(Krebs) 용액에 넣고, 장간막 라인을 따라 개방하고 조심스럽게 헹궜다. 그 다음, 산소첨가된(95% O₂, 5% CO₂) 크렙스 완충액이 37℃에서 유지되는, 이전에 설명된 바와 같은(Hyland and Cox, 2005) Ussing 챔버(Harvard Apparatus, 영국 켄트 소재, 노출 면적 0.12 cm²)에 준비물을 넣었다. 4 kDa FITC-덱스트란을 점막 챔버에 2.5 ㎎/㎖의 최종 농도로 첨가했고; 200㎕ 샘플을 다음 3시간 동안 30분마다 장막 챔버에서 수집하고 이들 샘플의 형광을 측정했다.

결과

도 1에 나타낸 바와 같이, 푸시카테니박터 사카리보란스에 의한 치료는 결장의 투과성을 감소시켰다(도 1b). 따라서, 본 발명의 박테리아 균주는 장 장벽 기능을 개선시켜, 장 투과성과 연관된 질환의 치료 또는 예방에 유용할 수 있다.

실시예 2 - 키누레닌 경로에 대한 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과

요약

이 연구에서는 키누레닌 경로 및 트립토판 이화작용의 효소에 미치는 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과를 조사했다. 인돌아민 2,3 다이옥시게나제-1(IDO1)은 여러 생물활성 키누레닌 기반 대사산물을 생성하는 경로를 따라 트립토판 이화작용을 개시하는 효소이다. 트립토판 하이드록실라제-1(TPH-1)은 세로토닌 경로의 중간체인 5-HT 생합성에서 최초의 속도 제한 단계인, L-트립토판으로부터 5-하이드록시-L-트립토판(5-HTP)의 형성을 촉매한다.

재료 및 방법

방법

수컷 BALB/c 마우스는 연속 6일 동안 1×10⁹ CFU의 관련 박테리아 균주를 경구 위관영양법(200㎕ 부피)으로 투여받았다. 7일차에 동물을 안락사시켰다. 장 조직(회장 및 결장의 1cm 분절)을 절제했다. 총 RNA는 mirVana™ miRNA 단리 키트(Ambion/Llife technologies, 영국 페이즐리 소재)를 사용하여 추출하고, 제조업체의 권장에 따라 DNase 처리했다(Turbo DNA-free, Ambion/life technologies). RNA는 제조사의 지침에 따라 NanoDrop™ 분광광도계(Thermo Fisher Scientific Inc., 미국 델라웨어주 윌밍턴 소재)를 사용하여 정량했다. RNA 품질은 Agilent Bioanalyzer(Agilent, 영국 스톡포트 소재)를 사용하여 제조업체의 절차에 따라 평가하고 RNA 무결성 수(RIN)를 계산했다. RIN 값이 7 초과인 RNA를 후속 실험에 사용했다. RNA는 Applied Biosystems High Capacity cDNA 키트(Applied Biosystems, 영국 워링톤 소재)를 제조업체의 지침에 따라 사용하여 cDNA로 역전사시켰다. 간단히 말해서, Multiscribe 역전사효소(50 U/㎕)를 RT 마스터 믹스의 일부로서 첨가하고, 25℃에서 10분, 37℃에서 2시간, 85℃에서 5분 동안 인큐베이션하고 4℃에서 보관했다. 정량적 PCR은 β-액틴을 내인성 대조군으로 사용하면서, Applied Biosystems에 의해 설계된 마우스 특이적 표적 유전자에 대한 프로브(6 카복시 플루오레세인 - FAM)를 사용하여 수행했다. 증폭 반응은 1㎕ cDNA, 5㎕의 2X PCR 마스터 믹스(Roche) 및 900nM의 각 프라이머를 함유했고, RNase가 없는 물을 첨가하여 총 10㎕가 되도록 했다. 모든 반응은 LightCycler®480 시스템에서 96웰 플레이트를 사용하여 3반복으로 수행했다. 열 사이클링 조건은 55 주기 동안 제조업체(Roche)에서 권장한 바와 같았다. 앰플리콘 오염을 확인하기 위해, 각 실행에는 사용된 각 프로브에 대한 3반복에서 주형 대조군을 함유하지 않았다. 주기 역치(Ct) 값을 기록했다. 데이터는 β-액틴을 사용하여 정규화했고, 2-ΔΔCT 방법을 사용하여 변환시켰고, 대조군에 대한 배수 변화로서 제시했다.

결과

미처리된 대조군에 비해 푸시카테니박터 사카리보란스를 투여받은 마우스에서는 IDO1 발현이 결장에서 훨씬 더 높았다(도 2a). 또한, 회장(도 2b) 및 결장(도 2c)에서 TPH1의 발현도 증가하는 경향이 있었다. 데이터는 푸시카테니박터 속의 박테리아가 세로토닌 및 키누레닌 경로를 조절할 수 있음을 보여준다.

실시예 3 - 단쇄 지방산 생산에 대한 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과

요약

이 연구는 마우스에서 단쇄 지방산(SCFA) 생산에 대한 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과를 조사했다. 아세테이트, 프로피오네이트, 발레레이트, 부티레이트, 아이소부티레이트 및 아이소발레레이트를 포함하는 SCFA는 식이 섬유의 미생물 부산물이다. 임의의 SCFA의 증가는 미생물총의 생산성 증가를 시사하며 바람직한 특성이다.

재료 및 방법

수컷 BALB/c 마우스는 연속 6일 동안 1×10⁹ CFU의 관련 박테리아 균주를 경구 위관영양법(200㎕ 부피)으로 투여받았다. 7일차에, 동물을 안락사시켰다. 맹장을 제거하고 무게를 측정한 후, SCFA 분석을 위해 -80℃에 보관했다. 맹장 함유물은 MilliQ 물과 혼합 및 볼텍싱하고 실온에서 10분 동안 인큐베이션했다. 원심분리(10000g, 5분, 4℃)를 통해 박테리아 및 기타 고형물을 펠릿화하고 0.2㎛에 의해 여과하여 상청액을 수득했다. 이를 투명한 GC 바이알로 옮기고 2-에틸부티르산(Sigma)을 내부 표준물질로 사용했다. SCFA의 농도는 ZB-FFAP 컬럼(30m x 0.32mm x 0.25mm; Phenomenex)이 장착된 Varian 3500 GC 화염 이온화 시스템을 사용하여 분석했다. 아세테이트, 프로피오네이트, 아이소-부티레이트, n-부티레이트, 아이소발레레이트 및 발레레이트(Sigma)를 함유하는 표준 혼합물의 다양한 농도로 표준 곡선을 작성했다. Varian Star Chromatography Workstation 버전 6.0 소프트웨어를 사용하여 피크를 통합했다. 모든 SCFA 데이터는 μ㏖/g로 표시된다.

결과

도 3은 푸시카테니박터 사카리보란스에 의한 처리가 아세테이트(A), 프로피오네이트(B), 아이소부티레이트(C), 부티레이트(D), 아이소발레레이트(E) 및 발레레이트(F)의 전반적인 증가를 초래했음을 보여준다. 미생물군집의 박테리아에 의해 생성된 SCFA는 장 미생물군집에 의해 도출되는 유익한 효과의 핵심 매개인자이다. 이들 데이터는 푸시카테니박터 속의 박테리아가 미생물총의 생산성을 촉진하는 데 유용할 수 있어, 미생물총의 생산성 감소와 연관된 질환을 치료 또는 예방하는 데 유용할 수 있다. SCFA는 면역 반응을 조절할 수 있고, 따라서, 데이터는 푸시카테니박터 속의 박테리아가 염증 병태의 치료에 유용할 수 있음을 시사한다.

본 발명자들은 푸시카테니박터 속의 박테리아가 부티레이트를 생산할 수 있음을 처음으로 입증하였다. 부티르산 나트륨은 자폐증 마우스 모델에서 사회적 행동 결핍을 약화시키는 것으로 알려져 있어, 자폐 스펙트럼 장애를 치료 또는 예방하는 데 특히 효과적일 수 있다.

실시예 4 - 뇌에서 유전자 발현에 대한 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과

요약

이 연구는 뇌에서 관심 있는 특정 유전자의 발현에 대한 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과를 조사했다. 옥시토신계(옥시토신 수용체 및 바소프레신 수용체), 내분비계(미네랄로코르티코이드(Nr3c1); 글루코코르티코이드 수용체(Nr3c2); 코르티코스테론 방출 인자(CRF) 및 수용체; 뇌 유래 신경영양 인자(BDNF)), 면역계(Il-6, TNF-α, TLR-4); 및 신경전달물질 시스템(NMDA 수용체 2A(Grin2A); NMDA 수용체 2B(Grin2B); GABAA 수용체 서브유닛 A2; GABAB 수용체 서브유닛 B1; 세로토닌 2C)에 대한 마커의 mRNA 수준은 정서적 반응에 관여하는 변연계의 주요 뇌 영역인, 편도체, 해마 및 전전두엽 피질(PFC)에서 평가했다.

재료 및 방법

방법

수컷 BALB/c 마우스는 연속 6일 동안 1×10⁹ CFU의 푸시카테니박터 사카리보란스를 경구 위관영양법(200㎕ 부피)으로 투여받았다. 7일차에 동물을 안락사시켰다. 뇌를 신속하게 절제하고, 해부하고, 각 뇌 영역을 드라이아이스에서 급속 동결하고 추가 분석을 위해 -80℃에 보관했다. 총 RNA는 mirVana™ miRNA 단리 키트(Ambion/Llife technologies, 영국 페이즐리 소재)를 사용하여 추출하고, 제조업체의 권장에 따라 DNase 처리했다(Turbo DNA-free, Ambion/life technologies). RNA는 NanoDrop™ 분광광도계(Thermo Fisher Scientific Inc., 미국 델라웨어주 윌밍턴 소재)를 사용하여 정량했다. RNA 품질은 Agilent Bioanalyzer(Agilent, 영국 스톡포트 소재)를 사용하여 제조업체의 절차에 따라 평가하고 RNA 무결성 수(RIN)를 계산했다. RIN 값이 7 초과인 RNA를 후속 실험에 사용했다. RNA는 Applied Biosystems High Capacity cDNA 키트(Applied Biosystems, 영국 워링톤 소재)를 제조업체의 지시에 따라 사용하여 cDNA로 역전사시켰다. 간단히 말해서, Multiscribe 역전사효소(50 U/㎕)를 RT 마스터 믹스의 일부로서 첨가하고, 25℃에서 10분, 37℃에서 2시간, 85℃에서 5분 동안 인큐베이션하고 4℃에서 보관했다. 정량적 PCR은 β-액틴을 내인성 대조군으로 사용하면서, Applied Biosystems에 의해 설계된 마우스 특이적 표적 유전자에 대한 프로브(6 카복시 플루오레세인 - FAM)를 사용하여 수행했다. 증폭 반응은 1㎕ cDNA, 5㎕의 2X PCR 마스터 믹스(Roche) 및 900nM의 각 프라이머를 함유했고, RNase가 없는 물을 첨가하여 총 10㎕가 되도록 했다. 모든 반응은 LightCycler®480 시스템에서 96웰 플레이트를 사용하여 3반복으로 수행했다. 열 사이클링 조건은 55 주기 동안 제조업체(Roche)에서 권장한 바와 같았다. 앰플리콘 오염을 확인하기 위해, 각 실행에는 사용된 각 프로브에 대한 3반복에서 주형 대조군을 함유하지 않았다. 주기 역치(Ct) 값을 기록했다. 데이터는 β-액틴을 사용하여 정규화했고, 2-ΔΔCT 방법을 사용하여 변환시켰고, 대조군에 대한 배수 변화로서 제시했다.

결과

도 4에 도시된 바와 같이, 비히클 대조군 처리에 비해, 푸시카테니박터 사카리보란스로 처리된 마우스에서는 테스트된 유전자로부터 편도체에서 BDNF(A), Grin2a(B) 및 글루코코르티코이드 수용체(C) 발현의 유의적인 증가 및 CRFR2(D) 및 IL-6(E) 발현 증가 경향, 및 PFC에서 TLR-4(F) 발현의 유의적인 증가 및 BDNF(G)의 발현 증가 경향이 관찰되었다. 이는 푸시카테니박터 속의 박테리아가 뇌에서 단백질의 발현 수준을 조절할 수 있어, 자폐증과 같은 CNS 질환, 장애 또는 병태의 치료 또는 예방에 유용할 수 있음을 나타낸다.

BDNF는 뉴런 분화 및 생존을 향상시키는 것으로 밝혀진 신경영양성 성장 인자이다. 따라서, 푸시카테니박터 속의 박테리아는 CNS 질환, 장애 또는 병태의 치료 또는 예방에 있어서 신경 세포 생존을 향상시키는 방법에 특히 유용할 수 있다.

글루코코르티코이드는 항염증, 항증식, 항세포사멸 및 항혈관형성 역할을 갖고 있다. 따라서, 푸시카테니박터 속의 박테리아가 뇌에서 글루코코르티코이드 수용체 발현을 증가시키는 능력은 치료법에, 특히 푸시카테니박터 속의 박테리아가 CNS 질환, 장애 또는 병태를 치료 또는 예방하는 데 유용할 수 있음을 나타낸다.

실시예 5 - 자폐 스펙트럼 장애 모델의 행동에 대한 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과

요약

이 연구는 자폐 스펙트럼 장애의 환경 동물 모델(모체 면역 활성화 모델) 및 유전자 동물 모델(BTBR 마우스 계통) 둘 모두에서 상동적 행동(구슬 파묻기), 사회적 행동(식품 선호의 사회적 전달, 암컷 스니핑 테스트, 3-챔버 사회적 상호작용 테스트), 및 우울증/급성 스트레스(강제 수영 테스트)를 비롯한 다수의 행동 판독에 대한 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과를 조사했다.

BTBR 마우스는 기본 유전자 성분이 있는 특발성 자폐증 모델을 나타내기 때문에 선택했다. 이 마우스는 사교성 및 사회적 인지의 결핍, 불안 증가, 그루밍 증가와 같은 상동적 행동과 함께 심각한 자폐증과 유사한 행동을 보인다. 행동 프로필 외에도, BTBR 마우스는 대장 및 소장의 증가된 투과성, 장기적인 장 운동성 및 장내 세로토닌 생성 감소를 나타내며, 이는 종합적으로 위장계의 기능장애를 시사한다[52]. BTBR 마우스 모델은 강력한 자폐증 유사 표현형을 나타내는 근친교배 유전자 변형된 마우스를 사용한다. 이 계통에서 사회적 행동의 결함, 반복적인 행동의 증가 및 불안-관련 행동의 증가가 보고되었다[53]. 이 강력한 행동 표현형으로 인해 BTBR 마우스는 자폐증 관련 행동의 치료를 위한 새로운 치료제의 효능을 평가하는 이상적인 동물 모델이다. 살아있는 박테리아 균주에 의한 이러한 증상의 완화는 또한 다른 정신병 또는 신경계 질환의 치료에서 박테리아 균주의 효능을 나타낼 수 있다.

MIA 마우스 모델은 자손의 자폐 스펙트럼 장애의 핵심 증상을 촉발하기 위해 임신한 마우스의 환경 면역 도전을 사용한다. MIA 마우스는 전형적으로 상동적 행동(그루밍 및 구슬 파묻기 테스트에서 확인됨) 및 사회적 의사소통 결핍(사회적 놀이, 3-챔버 사회적 상호작용 및 음식 선호도 테스트의 사회적 전달에 의해 확인됨)을 표시한다. 자손은 자폐증의 3가지 핵심 증상(의사소통 감소; 사교성 감소; 및 반복적이거나 상동성 행동 증가)을 표시하는 바, 치료제 투여가 자폐 스펙트럼 장애 및 실제로 다수의 다른 신경학적 장애와 연관된 행동 표현형을 완화할 수 있는지 여부를 결정하는 적합한 모델을 제공한다. 동물 모델에서 행동 표현형의 변경은 근본적인 생물학적 또는 생리학적 메커니즘에 대한 이해와 관계없이 잠재적으로 임상적 관련 개입을 나타낸다는 것이 잘 확립되어 있다[54].

종합적으로, BTBR 및 MIA는 자폐증과 유사한 표현형에 기여할 수 있는 미생물총-장-뇌 축의 조절장애의 적절한 모델을 나타낸다.

재료 및 방법

BTBR 마우스 모델

BTBR 동물은 형제 자매 짝짓기로 집에서 사육했다. 이들 동물의 수컷 새끼는 3주령에 어미로부터 분리시켰고 푸시카테니박터 사카리보란스 또는 대조군의 매일 투여는 8주령에 시작했다. 11주령에 행동을 시작했다. 대조군 연령 일치 C57/Bl6 그룹은 기준 대조군으로서 포함되었다.

MIA 마우스 모델

암컷 C57/Bl6 마우스(8주령) 및 연령이 일치하는 수컷을 Harlan UK에서 구입했다. 1주일 순응 후에 이 동물들을 교배시켰다. 배아 12.5일차에 암컷은 모체 면역 체계를 활성화하기 위해 바이러스 모방 폴리-IC 주사 또는 식염수 비히클 주사를 투여받았다. 이들 동물의 수컷 새끼는 3주령에 어미로부터 분리시켰고 살아 있는 생물치료제 또는 대조군의 매일 투여는 8주령에 시작했다. 11주령에 행동을 시작했다.

구슬 파묻기

마우스를 새로운 플렉시글라스 케이지(35 × 28 × 18.5 cm, L × W × H)에 개별적으로 넣고 톱밥(5-10 cm)과 그 위에 20개의 구슬을 채웠다(5개의 줄 또는 구슬을 벽과 2cm 띠우고 2cm 간격으로 일정하게 배치함). 30분 후, 표면의 2/3가 넘게 파묻힌 구슬의 수를 계수했다. 파묻힌 구슬의 수가 많을수록 상동적 행동이 고조된 상태, 또는 높은 불안 수준(네오포비아)을 나타낸다.

사회적 행동

사회적 테스트 장치는 직사각형의 3 챔버 상자였다. 각 챔버는 20cm L×40cm W×22cm H였다. 분할 벽에는 각 챔버에 접근할 수 있도록 작은 원형 구멍(직경 5cm)을 만들었다. 막대 사이에 코 접촉을 허용하지만 싸움을 방지하는, 바닥 직경이 10cm, 높이가 13cm이고 막대 간격이 1.2cm인, 동일한 철사 컵 모양의 케이지 2개를 각 양측 챔버 내에 좌우 대칭 위치에 놓았다. 테스트는 각각 10분씩 3단계로 진행된다: 1) 순응 2) 마우스 대 물체 3) 새로운 마우스 대 친숙한 마우스. Ethovision 소프트웨어(3.1 버전, Noldus, TrackSys, 영국 노팅엄 소재)를 사용한 추가 매개변수 분석을 위해 천장 카메라를 사용하여 실험을 비디오로 녹화했다. 첫 번째 단계에서 테스트 마우스는 중간 챔버에 넣고 10분 순응 기간 동안, 내부에 빈 작은 와이어 케이지가 있는 전체 상자를 탐색하도록 했다. 순응 기간 후, 둘 모두 와이어 컵 같은 케이지 내에 에워싼, 한쪽 챔버에 물체를 넣고 다른 쪽 챔버에는 친숙하지 않은 동종의 수컷 마우스(테스트 대상체와 사전 접촉 없음)를 넣어둔 채, 짧은 간격 동안 테스트 마우스를 테스트 상자에서 꺼냈다. 2단계 동안, 테스트 마우스는 중앙 챔버에 넣었고 10분 동안 전체 상자를 탐색하도록 했다. 각 챔버에서 물체 또는 마우스를 탐색하는 데 소요된 시간의 양 및 각 챔버에 진입 횟수를 평가했다. 왼쪽 대 오른쪽 챔버에서 친숙하지 않은 마우스의 위치는 실험마다 체계적으로 교대시켰다. 진입은 하나의 챔버에 4개의 발 모두가 있는 것으로서 정의했다. 제3 단계 동안, 물체를 새로운 마우스 역할을 하는 친숙하지 않은 마우스로 대체했고, 다른 챔버에는 2단계에 사용된 마우스를 그대로 유지하여, 이제 친숙한 마우스로서 역할을 하게 했다. 모든 실험 후에 모든 챔버와 컵 모양의 와이어 케이지는 10% 에탄올로 세척하고 건조하고 몇 분 동안 환기시켜 후각 단서 편향을 방지하고 적절히 소독되게 했다. 전체 활동장소에 순응한 초기 10분 동안 타고난 측면 선호도의 결여가 확인되었다. 대조군 동물은 무생물보다 동종 마우스에 더 관심이 있다(사교성). 비슷한 맥락에서 대조군 동물은 이미 상호작용을 한 적이 있는 마우스보다 새롭고 생소한 마우스와 상호작용하는 데 더 많은 시간을 보낸다. 여기에 사용된 일부 동물 모델은 이 사회적 패러다임에 결핍을 갖고 있다.

강제 수영

마우스를 15cm 깊이의 물(25 ± 0.5℃)이 들어 있는 투명한 유리 실린더(24 x 21cm 직경)에 개별적으로 넣었다. 물은 각 동물마다 교환했다. 테스트는 6분 동안 진행했고, 삼각대에 고정된 숫자 카메라를 사용하여 실험을 비디오로 녹화했다; 데이터는 비디오(Video Media Player 소프트웨어)를 사용하여 2회 더 채점했고 조건을 알지 못하는 실험자가 평균을 냈다. 부동 잠복기를 채점했다. 부동 시간(초)은 테스트의 마지막 4분 동안 측정했고, 부동은 머리를 물 위로 유지하기 위한 약간의 움직임을 제외한 움직임의 완전한 부재로서 정의했다. 부동의 증가는 동물이 그 상황을 체념했기 때문에(학습된 무력감) 우울증 같은 행동의 증가를 의미한다.

방법

동물에게 PBS 또는 PBS 중 10⁹ cfu/㎖로 제조된 푸시카테니박터 사카리보란스를 매일 경구 위관영양법으로 투여했다. 행동 평가 내내 매일 투약을 계속했다.

결과

도 5a에 도시된 바와 같이, 푸시카테니박터 사카리보란스로 처리된 BTBR 마우스는 비히클 대조군에 비해 상동적 관련 행동을 유의적으로 감소시킴을 보여주었다. 박테리아 처리는 질환 증상이 없는 대조 마우스에 필적하는 상동적 관련 행동(즉, 파묻은 구슬 수)을 초래했다.

도 6은 MIA 마우스가 비사회적 자극 챔버보다 동물 챔버에서 훨씬 더 많은 시간을 보냈기 때문에 푸시카테니박터 사카리보란스에 의한 치료가 MIA 모델에서 더 많은 사회적 행동을 초래했음을 보여준다(도 6e). BTBR 및 MIA 모델 둘 모두에서 마우스는 친숙한 동물 챔버보다 새로운 동물 챔버에서 훨씬 더 많은 시간을 보냈다(도 6d 및 f). 이들 데이터는 푸시카테니박터 사카리보란스에 의한 치료 후 나타낸 사회적 행동이 무질환 대조 마우스와 비슷하다는 것을 보여준다.

푸시카테니박터 사카리보란스에 의한 치료는 또한 우울증 유사 행동에 긍정적인 효과를 나타냈다. BTBR 및 MIA 마우스는 둘 모두 도 7에 제시된 바와 같이, 강제 수영 테스트에서 훨씬 적은 부동 시간을 나타내었다.

결론적으로, 푸시카테니박터 사카리보란스는 BTBR 및 MIA 마우스 모델 둘 모두에서 상동적, 사회적 행동 및 우울증 유사 행동의 치료에 효과적인 것으로 나타났다. 자폐증 마우스 모델에서 행동적 및 생물학적 표현형을 반전시키는 치료법은 인간 질환에 대해 효과적일 것으로 예상된다.

자폐 스펙트럼 장애를 치료하기 위한 의약품의 임상 개발에 관한 EMA 지침은, 질환의 이질성으로 인해, 단일 화합물을 이용하여 모든 핵심 증상에 유의미한 효과를 달성하는 것이 불가능할 수 있으며, 따라서, 적어도 하나의 핵심 증상에 대해 단기간 효능이 입증되어야 한다고 명시한다. 푸시카테니박터 사카리보란스는 자폐 스펙트럼 장애의 적어도 하나의 핵심 증상에 대한 효과적인 치료를 보여주었으므로, 인간 질환에 대해 효과적일 것으로 예상할 수 있다. 유사하게, 다른 중추신경계 장애 또는 병태는 여러 가지 다른 증상을 갖는 복잡한 병리를 표시하며 승인된 치료법이 거의 없다. 따라서, 효과적인 치료는 중추신경계 질환 또는 장애의 모든 증상을 치료할 필요는 없다는 것으로 이해된다. 치료는 중추신경계 질환 또는 장애와 연관된 증상 중 하나를 치료한다면 치료적으로 유용한 것으로 간주될 수 있다.

결론적으로, 이러한 결과는 푸시카테니박터 속의 박테리아가 자폐 스펙트럼 장애의 치료 또는 예방에 유용할 수 있음을 나타낸다.

실시예 6 - 자폐 스펙트럼 장애 모델에서 장 운동성 및 위장 투과성에 대한 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과

요약

이 연구는 BTBR 및 MIA 자폐 스펙트럼 모델 둘 모두에서 장 운동성 및 투과성에 대한 푸시카테니박터 사카리보란스의 효과를 조사했다.

재료 및 방법

마우스 모델

BTBR 및 MIA 마우스 모델은 실시예 6에 기재된 바와 같이 생성 및 유지시켰다.

장 운동성을 평가하는 방법

이 절차는 장의 운동성을 결정하기 위해 주어진 양의 무독성 유색 마커(Carmin Red)의 경구 투여를 수반한다. 1차 유색 분변 덩어리의 배설 시간은 '전체 내장 통과 시간'으로 기록되며 전체 내장에서 연동 운동성의 지표로 사용된다. 마우스는 새로운 케이지에 적응할 수 있도록 검정 3 시간 전에 단독 수용한다. 카민 레드 염료(마우스당 0.5% 메틸셀룰로스에 6% 카민 레드 100 내지 200 ㎕)를 위관 영양법으로 경구 투여한다. 각 케이지는 10분마다 육안으로 조사한다. 1차 유색 덩어리(빨간색)의 시간을 기록한다. 1차 유색 덩어리가 출현한 후, 마우스는 정상적인 수용 조건으로 되돌려 보낸다.

위장 투과성 평가 방법

방법은 실시예 1에 기재된 바와 같이 수행했다.

결과

도 8에 제시된 바와 같이, 푸시카테니박터 사카리보란스는 BTBR 및 MIA 모델 모두에서 장 운동성을 감소시킬 수 있었다. 푸시카테니박터 사카리보란스로의 치료는 또한 회장과 결장의 투과성 감소를 야기한다(도 9). 이러한 결과는 푸시카테니박터 사카리보란스가 위장 시스템의 기능장애와 관련된 MIA 모델에서 관찰되는 연장된 장 운동성 및 증가된 위장 투과성을 반전시킬 수 있음을 입증한다. 따라서, 특정 이론에 얽매임이 없이, 푸시카테니박터 사카리보란스는 위장 시스템의 기능장애를 교정하여 자폐 스펙트럼 장애를 치료하는데 있어서 특히 효과적일 수 있다.

데이터는 푸시카테니박터 속의 박테리아가 자폐 스펙트럼 장애의 치료 또는 예방, 특히 자폐 스펙트럼 장애와 연관된 위장 기능장애의 치료 또는 예방에 유용할 수 있음을 시사한다.

서열

서열번호 1 - 16S 리보솜 RNA의 푸시카테니박터 사카리보란스 유전자, 부분 서열, 균주: HT03-11(AB698910)

서열번호 2 - 16S 리보솜 RNA의 푸시카테니박터 사카리보란스 유전자, 부분 서열, 균주: KO-38

서열번호 3 - 16S 리보솜 RNA의 푸시카테니박터 사카리보란스 유전자, 부분 서열, 균주: TT-111

실시형태

1. 치료법에 사용하기 위한 푸시카테니박터(Fusicatenibacter) 속의 살아있는 박테리아 균주를 포함하는, 조성물.

2. 중추신경계 질환, 장애 또는 병태, 장 장벽 기능 손상, 장 투과성 증가와 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 및 심혈관 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는, 조성물.

3. 중추신경계 질환, 장애 또는 병태, 장 장벽 기능 손상, 장 투과성 증가를 특징으로 하는 질환, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 서열번호 1, 2 또는 3에 대해 적어도 95% 서열 유사성을 갖는 16s rRNA 서열을 갖는 박테리아 균주를 포함하는, 조성물.

4. 실시형태 3에 있어서, 박테리아 균주가 서열번호 1, 2, 또는 3에 대해 적어도 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 유사한 16s rRNA 서열을 갖는, 조성물.

5. 실시형태 2 내지 4 중 어느 한 실시형태에 있어서, 박테리아 균주는 살아있는 것인, 조성물.

6. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 조성물은 손상된 장 장벽 기능을 갖는 것으로 식별된 환자의 치료에 사용하기 위한 것인, 사용하기 위한 조성물.

7. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 중추신경계 질환 또는 장애는 미생물총-장-뇌 축에 의해 매개되는 것인, 사용하기 위한 조성물.

8. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 조성물은 미생물총-장-뇌 축을 조절하는 방법에 사용하기 위한 것인, 사용하기 위한 조성물.

9. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 조성물은 신경퇴행성 질환, 신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 것인, 사용하기 위한 조성물.

10. 실시형태 9에 있어서, 신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태는 자폐 스펙트럼 장애(ASD); 아동 발달 장애; 강박 장애(OCD); 주요 우울 장애; 우울증; 계절성 정동 장애; 불안 장애; 만성 피로 증후군(근통성 뇌척수염); 스트레스 장애; 외상 후 스트레스 장애; 정신분열 스펙트럼 장애; 정신분열증; 양극성 장애; 정신병; 기분 장애; 만성 통증; 길랑-바레(Guillain-Barre) 증후군 및 수막염, 치매, 예를 들어, 루이소체, 혈관 및 전두측두엽 치매; 원발성 진행성 실어증; 가벼운 인지 장애; HIV 관련 인지 장애 및 피질기저 변성으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 사용하기 위한 조성물.

11. 자폐 스펙트럼 장애를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는, 조성물.

12. 실시형태 11에 있어서, 조성물이 자폐증을 감소 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 것인, 사용하기 위한 조성물.

13. 실시형태 12에 있어서, 조성물이 상동적, 반복적, 강박적 및/또는 불안 행동을 예방, 감소 또는 완화시키는 것인, 사용하기 위한 조성물.

14. 실시형태 1 내지 9에 있어서, 조성물은 신경퇴행성 질환의 치료 또는 예방 방법에 사용하기 위한 것인, 사용하기 위한 조성물.

15. 실시형태 14에 있어서, 신경퇴행성 질환은 진행성 핵상 마비, 진행성 핵상 마비, 스틸-리차드슨-올제프스키 증후군, 정상압 수두증, 혈관 또는 동맥경화성 파킨슨증 및 약물 유발 파킨슨증을 포함하는 파킨슨병; 벤슨 증후군을 포함한 알츠하이머병; 다발성 경화증; 헌팅턴 병; 근위축성 측삭 경화증; 루게릭병; 운동 염증성 뉴런 질환; 프리온병; 척수소뇌 운동실조 및 척수성 근위축증으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 사용하기 위한 조성물.

16. 실시형태 1 내지 9에 있어서, 조성물은 염증 질환을 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 것인, 사용하기 위한 조성물.

17. 실시형태 16에 있어서, 염증 질환은 염증성 장 질환, 패혈증 및 급성 폐 손상인, 사용하기 위한 조성물.

18. 실시형태 1 내지 9에 있어서, 조성물은 대사 질환을 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 것인, 사용하기 위한 조성물.

19. 실시형태 1 내지 9에 있어서, 조성물은 심혈관 질환을 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 것인, 사용하기 위한 조성물.

20. 실시형태 19에 있어서, 심혈관 질환은 죽상동맥경화증, 고혈압, 관상동맥 질환, 협심증 및 심근경색증, 심장 부정맥, 심부전, 판막성 심장 질환, 심낭 질환, 뇌졸중, 고혈압성 심장 질환, 류마티스성 심장 질환, 심근병증, 선천성 심장 질환, 심장염, 대동맥류, 말초 동맥 질환, 혈전색전성 질환, 또는 정맥 혈전증인, 사용하기 위한 조성물.

21. 실시형태 1 내지 9에 있어서, 조성물은 장 투과성 증가와 연관된 질환을 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 것인, 사용하기 위한 조성물.

22. 실시형태 21에 있어서, 장 투과성 증가와 연관된 질환은 위궤양, 감염성 설사, 과민성 대장 증후군, 기능성 GI 질환, 염증성 장 질환, 체강 질환 및 암(식도, 결장직장), 식품 알레르기, 급성 염증(패혈증, 전신 염증 반응 증후군(SIRS), 다발성 장기 부전), 비만, 대사 질환(예를 들어, NAFLD 및 NASH, 2형 진성 당뇨병 또는 심혈관 질환) 및 만성 염증(예를 들어, 관절염)인 것인, 사용하기 위한 조성물.

23. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 조성물은 클로스트리듐 디피실리(Clostridium difficile) 감염을 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이 아닌, 사용하기 위한 조성물.

24. 실시형태 1 내지 23에 있어서, 박테리아 균주는 박테리아 종 푸시카테니박터 사카리보란스의 16s rRNA 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 동일한 16s rRNA 서열을 갖는 것인, 사용하기 위한 조성물.

25. 실시형태 1 내지 23 중 임의의 실시형태에 있어서, 박테리아 균주는 서열번호 1, 2 또는 3에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 동일한 16s rRNA 서열을 갖는 것인, 사용하기 위한 조성물.

26. 실시형태 1 내지 25에 있어서, 박테리아 균주가 푸시카테니박터 사카리보란스 종인, 사용하기 위한 조성물.

27. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 조성물은 경구 투여용인 조성물.

28. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 조성물은 하나 이상의 약제학적으로 허용 가능한 부형제 또는 담체를 포함하는 것인, 사용하기 위한 조성물.

29. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 박테리아 균주는 생존 가능한 것인, 사용하기 위한 조성물.

30. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 박테리아 균주는 동결건조된 것인, 사용하기 위한 조성물.

31. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 박테리아 균주는 장에 부분적으로 또는 전체적으로 집락화 가능한 것인, 사용하기 위한 조성물.

32. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 조성물은 푸시카테니박터의 단일 종을 포함하는 것인, 사용하기 위한 조성물.

33. 임의의 선행하는 실시형태에 있어서, 조성물은 푸시카테니박터의 단일 균주를 포함하는 것인, 사용하기 위한 조성물.

34. 실시형태 1 내지 32에 있어서, 미생물 컨소시엄의 일부로서 후시카테니박터 박테리아 균주를 포함하는 것인, 사용하기 위한 조성물.

35. 임의의 선행하는 실시형태에 사용하기 위한, 임의의 선행하는 실시형태의 조성물을 포함하는 식품.

36. 임의의 선행하는 실시형태에 사용하기 위한, 임의의 선행하는 실시형태의 조성물을 포함하는 백신 조성물.

37. 푸시카테니박터 속의 살아있는 박테리아 균주를 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는 질환을 치료 또는 예방하는 방법.

38. 질환의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 사용되는 푸시카테니박터 속의 살아있는 박테리아 균주의 용도.

39. 푸시카테니박터 속의 살아있는 박테리아 균주를 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 중추신경계 질환, 장 투과성 증가와 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환을 치료 또는 예방하는 방법.

40. 중추신경계 질환, 장 투과성 증가와 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 사용되는 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주의 용도.

41. 실시형태 40에 있어서, 박테리아 균주가 살아있는 것인, 용도.

42. 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는 조성물을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 것을 포함하는, 자폐증을 치료 또는 예방하는 방법.

43. 자폐증의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 약제의 제조에 사용되는 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주의 용도.

44. 실시형태 1 내지 34 중 어느 하나를 사용하기 위한, 실시형태 43의 어느 하나의 세포를 포함하는, 조성물.

45. 실시형태 44에 있어서, 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 포함하는, 조성물.

참고문헌

SEQUENCE LISTING <110> 4D PHARMA RESEARCH LIMITED <120> COMPOSITIONS COMPRISING BACTERIAL STRAINS <130> P078201WO <140> <141> 2020-05-18 <160> 3 <170> SeqWin2010, version 1.0 <210> 1 <211> 1423 <212> DNA <213> Fusicatenibacter saccharivorans (strain: HT03-11) <400> 1 tggctcagga tgaacgctgg cggcgtgctt aacacatgca agtcgagcga agcagttaag 60 aagattyttc ggatgattct tgactgactg agcggcggac gggtgagtaa cgcgtgggtg 120 acctgcccca taccggggga taacagctgg aaacggctgc taataccgca taagcgcaca 180 gagctgcatg gctcggtgtg aaaaactccg gtggtatggg atgggcccgc gtctgattag 240 gcagttggcg gggtaacggc ccaccaaacc gacgatcagt agccggcctg agagggcgac 300 cggccacatt gggactgaga cacggcccaa actcctacgg gaggcagcag tggggaatat 360 tgcacaatgg gggaaaccct gatgcagcga cgccgcgtga gcgaagaagt atttcggtat 420 gtaaagctct atcagcaggg aagataatga cggtacctga ctaagaagcc ccggctaact 480 acgtgccagc agccgcggta atacgtaggg ggcaagcgtt atccggattt actgggtgta 540 aagggagcgt agacggcaag gcaagtctga tgtgaaaacc cagggcttaa ccctgggact 600 gcattggaaa ctgtctggct cgagtgccgg agaggtaagc ggaattccta gtgtagcggt 660 gaaatgcgta gatattagga agaacaccag tggcgaaggc ggcttactgg acggtaactg 720 acgttgaggc tcgaaagcgt ggggagcaaa caggattaga taccctggta gtccacgccg 780 taaacgatga atgctaggtg ttggggagca aagctcttcg gtgccgccgc aaacgcatta 840 agcattccac ctggggagta cgttcgcaag aatgaaactc aaaggaattg acggggaccc 900 gcacaagcgg tggagcatgt ggtttaattc gaagcaacgc gaagaacctt accaggtctt 960 gacatcccga tgaccggccc gtaacggggc cttctcttcg gagcattgga gacaggtggt 1020 gcatggttgt cgtcagctcg tgtcgtgaga tgttgggtta agtcccgcaa cgagcgcaac 1080 ccttatcctc agtagccagc aggtaaagct gggcactctg tggagactgc cagggataac 1140 ctggaggaag gtggggatga cgtcaaatca tcatgcccct tatgatctgg gctacacacg 1200 tgctacaatg gcgtaaacaa agggaggcaa agccgcgagg tggagcaaat cccaaaaata 1260 acgtctcagt tcggactgca gtctgcaact cgactgcacg aagctggaat cgctagtaat 1320 cgcgaatcag aatgtcgcgg tgaatacgtt cccgggtctt gtacacaccg cccgtcacac 1380 catgggagtt ggtaacgccc gaagtcagtg acccaacctt tta 1423 <210> 2 <211> 1392 <212> DNA <213> Fusicatenibacter saccharivorans (strain: KO-38) <400> 2 ttgactgagc ggcggacggg tgagtaacgc gtgggtgacc tgccccatac cgggggataa 60 cagctggaaa cggctgctaa taccgcataa gcgcacagag ctgcatggct cggtgtgaaa 120 aactccggtg gtatgggatg ggcccgcgtc tgattaggca gttggcgggg taacggccca 180 ccaaaccgac gatcagtagc cggcctgaga gggcgaccgg ccacattggg actgagacac 240 ggcccaaact cctacgggag gcagcagtgg ggaatattgc acaatggggg aaaccctgat 300 gcagcgacgc cgcgtgagcg aagaagtatt tcggtatgta aagctctatc agcagggaag 360 ataatgacgg tacctgacta agaagccccg gctaactacg tgccagcagc cgcggtaata 420 cgtagggggc aagcgttatc cggatttact gggtgtaaag ggagcgtaga cggcaaggca 480 agtctgatgt gaaaacccag ggcttaaccc tgggactgca ttggaaactg tctggctcga 540 gtgccggaga ggtaagcgga attcctagtg tagcggtgaa atgcgtagat attaggaaga 600 acaccagtgg cgaaggcggc ttactggacg gtaactgacg ttgaggctcg aaagcgtggg 660 gagcaaacag gattagatac cctggtagtc cacgccgtaa acgatgaatg ctaggtgttg 720 gggagcaaag ctcttcggtg ccgccgcaaa cgcattaagc attccacctg gggagtacgt 780 tcgcaagaat gaaactcaaa ggaattgacg gggacccgca caagcggtgg agcatgtggt 840 ttaattcgaa gcaacgcgaa gaaccttacc aggtcttgac atcccgatga ccggcccgta 900 acggggcctt ctcttcggag cattggagac aggtggtgca tggttgtcgt cagctcgtgt 960 cgtgagatgt tgggttaagt cccgcaacga gcgcaaccct tatcctcagt agccagcagg 1020 taaagctggg cactctgtgg agactgccag ggataacctg gaggaaggtg gggatgacgt 1080 caaatcatca tgccccttat gatctgggct acacacgtgc tacaatggcg taaacaaagg 1140 gaggcaaagc cgcgaggtgg agcaaatccc aaaaataacg tctcagttcg gactgcagtc 1200 tgcaactcga ctgcacgaag ctggaatcgc tagtaatcgc gaatcagaat gtcgcggtga 1260 atacgttccc gggtcttgta cacaccgccc gtcacaccat gggagttggt aacgcccgaa 1320 gtcagtgacc caacctttta ggagggagct gccgaaggcg ggactgataa ctggggtgaa 1380 gtcgtaacaa gg 1392 <210> 3 <211> 1508 <212> DNA <213> Fusicatenibacter saccharivorans (strain TT-111) <400> 3 gctcaggatg aacgctggcg gcgtgcttaa cacatgcaag tcgagcgaag cagttaagaa 60 gattyttcgg atgattttta actgactgag cggcggacgg gtgagtaacg cgtgggtgac 120 ctgccccata ccgggggata acagctggaa acggctgcta ataccgcata agcgcacaga 180 gctgcatggc tcggtgtgaa aaactccggt ggtatgggat gggcccgcgt ctgattaggc 240 agttggcggg gtaacggccc accaaaccga cgatcagtag ccggcctgag agggcgaccg 300 gccacattgg gactgagaca cggcccaaac tcctacggga ggcagcagtg gggaatattg 360 cacaatgggg gaaaccctga tgcagcgacg ccgcgtgagc gaagaagtat ttcggtatgt 420 aaagctctat cagcagggaa gataatgacg gtacctgact aagaagcccc ggctaactac 480 gtgccagcag ccgcggtaat acgtaggggg caagcgttat ccggatttac tgggtgtaaa 540 gggagcgtag acggcaaggc aagtctgatg tgaaaaccca gggcttaacc ctgggactgc 600 attggaaact gtctggctcg agtgccggag aggtaagcgg aattcctagt gtagcggtga 660 aatgcgtaga tattaggaag aacaccagtg gcgaaggcgg cttactggac ggtaactgac 720 gttgaggctc gaaagcgtgg ggagcaaaca ggattagata ccctggtagt ccacgccgta 780 aacgatgaat gctaggtgtt ggggagcaaa gctcttcggt gccgccgcaa acgcattaag 840 cattccacct ggggagtacg ttcgcaagaa tgaaactcaa aggaattgac ggggacccgc 900 acaagcggtg gagcatgtgg tttaattcga agcaacgcga agaaccttac caggtcttga 960 catcccgatg accggcccgt aacggggcct tctcttcgga gcattggaga caggtggtgc 1020 atggttgtcg tcagctcgtg tcgtgagatg ttgggttaag tcccgcaacg agcgcaaccc 1080 ttatcctcag tagccagcag gtaaagctgg gcactctgtg gagactgcca gggataacct 1140 ggaggaaggt ggggatgacg tcaaatcatc atgcccctta tgatctgggc tacacacgtg 1200 ctacaatggc gtaaacaaag ggaggcaaag ccgcgaggtg gagcaaatcc caaaaataac 1260 gtctcagttc ggactgcagt ctgcaactcg actgcacgaa gctggaatcg ctagtaatcg 1320 cgaatcagaa tgtcgcggtg aatacgttcc cgggtcttgt acacaccgcc cgtcacacca 1380 tgggagttgg taacgcccga agtcagtgac ccaaccgttt acggagggag ctgccgaagg 1440 cgggactgat aactggggtg aagtcgtaac aaggtagccg tatcggaagg tgcggctgga 1500 tcacctcc 1508

Claims (15)

1. 치료법에 사용하기 위한 푸시카테니박터(Fusicatenibacter) 속의 살아있는 박테리아 균주를 포함하는, 조성물.
2. 중추신경계 질환, 장애 또는 병태, 장 장벽 기능 손상, 장 투과성 증가와 연관된 질환, 염증성 질환, 대사 질환 및 심혈관 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한, 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는 조성물.
3. 중추신경계 질환, 장애 또는 병태, 장 장벽 기능 손상, 장 투과성 증가를 특징으로 하는 질환, 염증성 질환, 대사 질환 또는 심혈관 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한, 서열번호 1, 2 또는 3에 대해 적어도 95% 서열 유사성을 갖는 16s rRNA 서열을 갖는 박테리아 균주를 포함하는 조성물.
4. 제2항 또는 제3항에 있어서, 상기 박테리아 균주는 살아있는 것인, 조성물.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
   a. 상기 조성물이 손상된 장 장벽 기능을 갖는 것으로 식별된 환자의 치료에 사용하기 위한 것; 및/또는
   b. 상기 중추신경계 질환 또는 장애가 미생물총-장-뇌 축에 의해 매개되는 것; 및/또는
   c. 상기 조성물이 상기 미생물총-장-뇌 축을 조절하는 방법에 사용하기 위한 것인, 사용하기 위한 조성물.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 신경퇴행성 질환, 신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 것이고; 선택적으로
   a. 상기 신경발달 장애 또는 신경정신병적 병태는 자폐 스펙트럼 장애(ASD); 아동 발달 장애; 강박 장애(OCD); 주요 우울 장애; 우울증; 계절성 정동 장애; 불안 장애; 만성 피로 증후군(근통성 뇌척수염); 스트레스 장애; 외상 후 스트레스 장애; 정신분열 스펙트럼 장애(schizophrenia spectrum disorder); 정신분열증(schizophrenia); 양극성 장애; 정신병; 기분 장애; 만성 통증; 길랑-바레(Guillain-

   

   ) 증후군 및 수막염, 치매, 예를 들어, 루이소체, 혈관 및 전두측두엽 치매; 원발성 진행성 실어증; 가벼운 인지 장애; HIV 관련 인지 장애 및 피질기저 변성으로 이루어진 군으로부터 선택되거나; 또는
   b. 상기 신경퇴행성 질환은 진행성 핵상 마비, 진행성 핵상 마비, 스틸-리차드슨-올제프스키 증후군, 정상압 수두증, 혈관 또는 동맥경화성 파킨슨증 및 약물 유발 파킨슨증을 포함하는 파킨슨병; 벤슨 증후군을 포함한 알츠하이머병; 다발성 경화증; 헌팅턴 병; 근위축성 측삭 경화증; 루게릭병; 운동 염증성 뉴런 질환; 프리온병; 척수소뇌 운동실조 및 척수성 근위축증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것인, 사용하기 위한 조성물.
7. 자폐 스펙트럼 장애를 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한, 푸시카테니박터 속의 박테리아 균주를 포함하는 조성물.
8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 장 투과성 증가와 연관된 질환을 치료 또는 예방하는 방법에 사용하기 위한 것이고,
   선택적으로, 장 투과성 증가와 연관된 상기 질환은 위궤양, 감염성 설사, 과민성 대장 증후군, 기능성 GI 질환, 염증성 장 질환, 체강 질환 및 암(식도, 결장직장), 식품 알레르기, 급성 염증(패혈증, 전신 염증 반응 증후군(SIRS), 다발성 장기 부전), 비만, 대사 질환(예를 들어, NAFLD 및 NASH, 2형 진성 당뇨병 또는 심혈관 질환) 및 만성 염증(예를 들어, 관절염)인 것인, 사용하기 위한 조성물.
9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물은 클로스트리듐 디피실리(Clostridium difficile) 감염을 치료 또는 예방하는 데 사용하기 위한 것이 아닌, 사용하기 위한 조성물.
10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 박테리아 균주는,
    a. 서열번호 1, 2, 또는 3에 대해 적어도 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 유사하거나, 또는
    b. 박테리아 종 푸시카테니박터 사카리보란스(Fusicatenibacter saccharivorans)의 16s rRNA 서열에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 동일하거나; 또는
    서열번호 1, 2, 또는 3에 대해 적어도 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8% 또는 99.9% 동일한
    16s rRNA 서열을 갖는, 사용하기 위한 조성물.
11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 박테리아 균주가 푸시카테니박터 사카리보란스 종인, 사용하기 위한 조성물.
12. 임의의 선행하는 청구항에 있어서,
    a. 상기 조성물은 경구 투여용이고;
    b. 상기 조성물은 하나 이상의 약제학적으로 허용 가능한 부형제 또는 담체를 포함하고;
    c. 상기 박테리아 균주는 생존 가능하고;
    d. 상기 박테리아 균주는 동결건조되고; 그리고/또는
    e. 상기 박테리아 균주는 장에 부분적으로 또는 전체적으로 집락화 가능한 것인, 조성물.
13. 임의의 선행하는 청구항에 있어서, 상기 조성물은,
    a. 푸시카테니박터의 단일 종;
    b. 푸시카테니박터의 단일 균주; 또는
    c. 미생물 컨소시엄의 일부로서 상기 푸시카테니박터 박테리아 균주
    를 포함하는, 사용하기 위한 조성물.
14. 임의의 선행하는 청구항에 사용하기 위한, 임의의 선행하는 청구항의 조성물을 포함하는 식품 또는 백신.
15. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 사용하기 위한 제14항 중 어느 한 항의 세포를 포함하는 조성물로서, 선택적으로 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 포함하는, 조성물.

Images