BR112021010119A2

BR112021010119A2 - Processo, produto, composição substancialmente não aquosa, formulação farmacêutica, kit de partes, produto de combinação, processo para preparação de um produto de combinação, método de tratamento de uma afecção, e, uso

Info

Publication number: BR112021010119A2
Application number: BR112021010119-5A
Authority: BR
Inventors: Per Håkan Agvald; Leif Christofer Adding; Kristofer Bo Ingemar Nilsson; Anna Lena Elisabeth Minidis; Johan Salman MALMBERG; Alexander Bogdan Emil Minidis
Original assignee: Attgeno Ab
Priority date: 2018-11-27
Filing date: 2019-11-27
Publication date: 2021-09-28
Also published as: MX2021006065A; EP3886834B1; EP4450069A2; EP3886834A1; GB2579240B; CN113164427A; GB2579240A; KR20210116450A; JP2022513153A; GB201819298D0; AU2019390693A1; IL283318A; WO2020109420A1; CA3121045A1; US20220002223A1

Abstract

processo, produto, composição substancialmente não aquosa, formulação farmacêutica, kit de partes, produto de combinação, processo para preparação de um produto de combinação, método de tratamento de uma afecção, e, uso. a presente invenção refere-se a um processo inovador para a síntese de propanodióis mono- e bis-nitrosilados, bem como composições e formulações farmacêuticas inovadoras que compreendem os ditos compostos. o processo ocorre reagindo um propanodiol correspondente que não é nitrosilado com uma fonte de nitrito, opcionalmente na presença de um ácido adequado. em que, quando a fonte de nitrito é um nitrito orgânico, a etapa de reação é realizada em um solvente orgânico adequado e quando a fonte de nitrito é um nitrito inorgânico, a etapa de reação é realizada em uma mistura de solvente bifásico que compreende uma fase aquosa e uma fase não aquosa. a invenção também refere-se a métodos de tratamento de uma afecção em que a administração de óxido nítrico (no) tem um efeito benéfico administrando os ditos compostos, composições ou formulações.

Description

1 / 62 PROCESSO, PRODUTO, COMPOSIÇÃO SUBSTANCIALMENTE NÃO AQUOSA, FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA, KIT DE PARTES, PRODUTO DE COMBINAÇÃO, PROCESSO PARA PREPARAÇÃO DE UM PRODUTO DE COMBINAÇÃO, MÉTODO DE TRATAMENTO DE UMA AFECÇÃO, E, USO

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção se refere a um processo inovador para a síntese de propanodióis mono- e bis-nitrosilados, bem como composições e formulações farmacêuticas inovadoras que compreendem os ditos compostos. A invenção também se refere a métodos de tratamento de uma afecção em que a administração de óxido nítrico (NO) tem um efeito benéfico pela administração dos ditos compostos, composições ou formulações.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] A listagem ou discussão neste relatório descritivo de um documento aparentemente publicado anteriormente não deve ser necessariamente interpretada como um reconhecimento de que o documento é parte do estado da técnica ou do conhecimento geral comum.

[003] A hipertensão pulmonar (PH) era, até recentemente, definida como um aumento na pressão arterial pulmonar média (mPAP) igual ou superior a 25 mmHg em repouso e ela pode ser dividida em formas crônicas de desenvolvimento mais lento (PH) e hipertensão pulmonar aguda (aPH). Esta definição foi recentemente atualizada para ser um aumento na pressão arterial pulmonar média (mPAP) igual ou superior a 20 mmHg em repouso em combinação com um valor de unidades Wood > 3. Na aPH, a constrição aguda induzida dos vasos pulmonares aumenta rapidamente a mPAP; pode ser induzida como uma resposta a uma variedade de condições, tal como cirurgia de grande porte (por exemplo, cirurgia cardíaca), embolia pulmonar e sepse. Na aPH, nenhuma adaptação do coração direito foi desenvolvida, o que aumenta o risco de insuficiência cardíaca direita. Além disso, os pacientes

2 / 62 normalmente estão gravemente enfermos da afecção que desencadeou a aPH e normalmente têm pressão arterial sistêmica criticamente baixa. Em pacientes com as formas mais crônicas de PH, a aPH pode se sobrepor à PH crônica, levando a uma alta pressão deletéria, resultando em insuficiência cardíaca direita e morte. A hipertensão pulmonar aguda é um vasto problema que causa morte desordenada e sofrimento a milhões de pessoas no mundo e, como o diagnóstico geralmente exige cateterismo cardíaco direito e faltam tratamentos seletivos para o pulmão eficientes, a extensão total do problema não é registrada nem conhecida.

[004] Em condições normais, o coração direito recebe sangue desoxigenado da circulação sistêmica e bombeia o sangue pelos pulmões, onde o débito cardíaco da circulação pulmonar é igual ao volume de sangue circulando em todos os outros órgãos do corpo. Apesar da alta taxa de fluxo pelos pulmões, a pressão arterial na circulação pulmonar é apenas um quinto daquela na circulação sistêmica. A baixa resistência na circulação pulmonar é atribuída à grande área de seção transversal das artérias pulmonares e que os vasos pulmonares são muito mais curtos do que os vasos sistêmicos. O coração esquerdo é uma bomba forte (trabalhando contra uma pressão alta) que faz o sangue fluir na circulação sistêmica, por exemplo, para o fígado, estômago, rins e o próprio coração e é do conhecimento comum que a pressão alta na circulação sistêmica pode causar muitos problemas de saúde, incluindo insuficiência cardíaca, derrame e doença renal.

[005] Muitos fatores fisiológicos influenciam o complexo controle do fluxo sanguíneo na circulação sistêmica e pulmonar. Os vasos sanguíneos na circulação sistêmica estão normalmente em um estado de vasoconstrição (pequenos músculos na parede do vaso contraem o vaso), enquanto os vasos sanguíneos na circulação pulmonar estão sob constante vasodilatação (isto é, vasos relaxados e alargados), mantendo assim a resistência muito baixa a fluxo sanguíneo e resultante pressão sanguínea muito baixa em comparação

3 / 62 com a circulação sistêmica.

[006] Em uma variedade de doenças potencialmente fatais e após grandes cirurgias, a resposta fisiopatológica com uma intensa reação inflamatória altera o estado fisiológico dos vasos sanguíneos sistêmicos e pulmonares. Essas alterações geralmente resultam em uma condição em que os vasos sanguíneos sistêmicos se dilatam repentinamente e uma pressão sanguínea sistêmica criticamente baixa (hipotensão sistêmica) se desenvolve, o que pode diminuir o fluxo sanguíneo para os órgãos vitais, tais como cérebro, coração, fígado e rim. Em paralelo, paradoxalmente, os vasos sanguíneos pulmonares se contraem abruptamente, levando à hipertensão pulmonar aguda e insuficiência cardíaca direita, que reduzem o débito cardíaco e agravam ainda mais a hipotensão sistêmica. Esses pacientes criticamente enfermos e hemodinâmicos instáveis normalmente precisam ser tratados em unidades de terapia intensiva, onde a missão desafiadora é equilibrar as terapias medicamentosas com uso de vasopressores e fármacos de fortalecimento do coração para restaurar a pressão arterial sistêmica e fármacos vasodilatadores pulmonares para atenuar a hipertensão pulmonar aguda potencialmente fatal.

[007] A PH aguda é frequentemente subdiagnosticada, e o tratamento costuma ser tardio (Rosenkranz, Stephan et al., European Heart Journal, 37 (12), 942 a 954 (2016)). A razão para a aPH ser tão fatal é que o coração direito é uma bomba fraca que normalmente funciona contra uma pressão baixa e corre o risco de falhar (insuficiência cardíaca direita) se a pressão média na circulação pulmonar atingir rapidamente > 40 mmHg. A HP aguda é uma afecção crítica distinta e não deve ser confundida com hipertensão pulmonar crônica (Tiller, D et al., PLoS One, 8 (3), e59225 (2013)). Em doenças crônicas, quando a pressão na circulação pulmonar ao longo do tempo aumenta gradualmente, o coração direito se adapta e aumenta de tamanho e força e pressões de saída muito mais altas podem ser

4 / 62 sustentadas. Mesmo pessoas com boa saúde que, por exemplo, contraem uma infecção, um êmbolo pulmonar (coágulo de sangue no pulmão) ou se submetem a uma grande cirurgia, podem desenvolver aPH com complicações que se agravam.

[008] A hipertensão pulmonar aguda é um problema enorme que causa morte dolorosa e prematura e sofrimento a milhões de pessoas no mundo e, como faltam diagnósticos e tratamentos adequados, a extensão total do problema não é registrada nem conhecida.

[009] As opções de tratamento para os pacientes que desenvolvem aPH são severamente limitadas atualmente. A razão para isso é que os pacientes geralmente apresentam pressão arterial sistêmica criticamente baixa. As tentativas de tratamento com fármacos vasodilatadores intravenosos (i.v.) geralmente levam à hipotensão sistêmica letal, uma vez que os fármacos disponíveis hoje passam pelo pulmão (normalmente <30 s) e “extravasam” para a circulação sistêmica. Portanto, o fármaco intravenoso ideal para tratar aPH deve apenas dilatar os vasos pulmonares e não ter efeito na circulação sistêmica. Até o momento, não existem no mercado fármacos vasodilatadores intravenosos seletivos para o pulmão.

[0010] Para superar os efeitos colaterais sistêmicos dos fármacos vasodilatadores administrados por via intravenosa, foi desenvolvida a administração por inalação de óxido nítrico ou prostaciclina. Infelizmente, esses fármacos, mesmo se eficazes em alguns casos, são frequentemente insuficientes porque muitas vezes são inativados antes de atingir os vasos pulmonares-alvo. Outra grande desvantagem dos fármacos inalados usados hoje é que a administração por inalação é mais complicada do que administrar uma infusão intravenosa de fármacos. A complexidade da administração de óxido nítrico inalado é tão considerável que a equipe médica precisa de treinamento especial e, portanto, muitos hospitais nem mesmo tem o equipamento devido ao alto custo associado.

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[0011] O óxido nítrico (NO) é uma molécula importante em vários sistemas biológicos. É produzido continuamente no pulmão e pode ser medido em níveis de ppb (partes por bilhão) no gás expirado. A descoberta do NO endógeno no ar exalado e a sua utilização como um marcador de diagnóstico de inflamação datam do início dos anos 90 (consultar, por exemplo, WO 93/05709 e WO 95/02181). Hoje, a importância do NO endógeno é amplamente reconhecida, conforme evidenciado pela disponibilidade comercial de um analisador de NO clínico (NIOX®, o primeiro analisador de NO feito especialmente para uso clínico de rotina em pacientes asmáticos, fabricado pela AEROCRINE AB, Solna, Suécia).

[0012] Desde esses primeiros experimentos, tornou-se geralmente reconhecido que o óxido nítrico (NO) endógeno é de importância crítica como um mediador da vasodilatação nos vasos sanguíneos. Em particular, o óxido nítrico desempenha um papel importante na modulação do tônus vascular pulmonar para otimizar a correspondência ventilação-perfusão em adultos humanos saudáveis (isto é, combinar o ar que atinge os alvéolos com o sangue que atinge os alvéolos através dos capilares, de modo que o oxigênio fornecido por meio de ventilação seja apenas suficiente para saturar totalmente o sangue; consultar, por exemplo, Persson et al., Acta Physiol. Scand., 1990, 140, 449 a 457). Medir o NO na respiração exalada é uma boa maneira de monitorar as alterações na produção de NO endógeno ou na eliminação no pulmão (Gustafsson et al., Biochem. Biophys. Res. Comum., 1991, 181, 852 a 857).

[0013] Uma vez que os distúrbios da combinação ventilação-perfusão e pressão arterial da artéria pulmonar aumentada são características da embolia pulmonar, o NO inalado foi testado como um tratamento potencial. Por exemplo, US 5.670.177 descreve um método para tratar ou prevenir isquemia que compreende administrar a um paciente por uma via intravascular uma mistura gasosa que compreende NO e dióxido de carbono

6 / 62 em que o NO está presente em uma quantidade eficaz para tratar ou prevenir isquemia. O documento US 6.103.769 divulga um método semelhante, com a diferença de que é usada uma solução salina saturada com NO.

[0014] Além disso, as misturas de óxido nítrico/oxigênio são usadas como uma mistura de gás de último recurso em cuidados intensivos para promover a dilatação capilar e pulmonar para tratar a hipertensão pulmonar primária em pacientes neonatais e aspiração pós-mecônio relacionada a defeitos congênitos (consultar Barrington et al., Cochrane Database Syst. Rev., 2001, 4, CD000399 e Chotigeat et al., J. Med. Assoc. Thai., 2007, 90, 266 a 271). Da mesma forma, o NO é administrado como terapia de resgate em pacientes com insuficiência ventricular direita aguda secundária a embolia pulmonar (Summerfield et al., Respir. Care., 2011, 57, 444 a 448). O NO inalado também é aprovado na Europa e no Japão para o tratamento da hipertensão pulmonar aguda em pacientes de cirurgia cardíaca.

[0015] Como uma alternativa para fornecer NO como um gás ou dissolvido em solução, outros investigaram o uso de compostos de entrega de NO. Por exemplo, WO 94/16740 descreve o uso de compostos de entrega de NO, tais como S -nitrosotiois, tionitritos, sidnoniminas, furoxanos, nitratos orgânicos, nitroprussiato, nitroglicerina, compostos de ferro-nitrosila, etc, para o tratamento ou prevenção de lesão hepática alcoólica.

[0016] Atualmente, os nitratos são usados para tratar os sintomas de angina (dor no peito). Os nitratos atuam relaxando os vasos sanguíneos e aumentando o suprimento de sangue e oxigênio para o coração, ao mesmo tempo que reduz sua carga de trabalho. Exemplos de fármacos de nitrato disponíveis atualmente incluem: a) Nitroglicerina (trinitrato de glicerila) (1,2,3-propantriol- nitrato), que hoje é administrado principalmente por via sublingual para conter um ataque agudo de angina. No entanto, fortes dores de cabeça e tonturas devido ao efeito vasodilatador rápido e geral são frequentemente

7 / 62 encontrados como efeitos colaterais. Concentrados de nitroglicerina de infusão também estão disponíveis e são diluídos em glicose isotônica ou soro fisiológico para infusão intravenosa.

[0017] b) Mononitrato de isosorbida (1,4:3,6-dianidro-D-glucitol-5- nitrato), que é administrado como profilático contra angina pectoris. O desenvolvimento de tolerância é um problema em regimes de tratamento de longo prazo. Os efeitos colaterais frequentes incluem dor de cabeça e tontura, como os encontrados com nitroglicerina.

[0018] c) Dinitrato de isosorbida (1,4:3,6-dianidro-D-glucitol-2,5- nitrato), que é administrado de forma aguda e profilática contra angina pectoris e a insuficiência cardíaca.

[0019] d) Os nitratos de pentaeritritila, um grupo de nitratos orgânicos, são conhecidos por exercerem efeitos antioxidantes e antiaterogênicos de longo prazo por mecanismos atualmente não identificados. O tetranitrato de pentaeritritila foi investigado no contexto da tolerância ao nitrato, um desenvolvimento indesejado na terapia com nitrato e testado experimentalmente na hipertensão pulmonar.

[0020] Vários desses compostos de nitrato, bem como outros compostos de nitrato e nitrito, foram testados in vivo e constatados como geradores de NO. Por exemplo, trinitrato de glicerila, nitrito de etila, nitrato de isobutila, nitrito de isobutila, nitrito de isoamila e nitrito de butila foram testados em um modelo de coelho e constatou-se que fornecem uma correlação significativa entre a geração in vivo de NO e os efeitos sobre a pressão arterial (Cederqvist et al., Biochem. Pharmacol., 1994, 47, 1.047 a

1.053).

[0021] Consequentemente, foi sugerido que certos nitritos orgânicos têm utilidade no tratamento da impotência masculina e disfunção erétil por meio de administração tópica ou intracavernosa ao pênis (consultar US

5.646.181).

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[0022] Relativamente recentemente, o papel dos nitratos e nitritos na dieta foi reavaliado, particularmente porque a produção endógena de NO no sistema arginina-óxido nítrico e seu papel na defesa do hospedeiro foram descobertos (Larsen et al., N. Eng. J. Med, 2006, 355, 2.792 a 2.793). Portanto, L-arginina e ésteres da mesma, tais como etil-, metil- e butil-L- arginina, têm sido usados para aumentar a produção endógena de NO.

[0023] O documento WO 2006/031191 descreve composições e métodos para uso na entrega terapêutica de óxido nítrico gasoso. Tais composições para a entrega de NO gasoso compreendem um composto capaz de formar uma ligação reversível ou associação a NO, tal como álcoois, carboidratos e proteínas.

[0024] O documento WO 2007/106034 descreve métodos para produção de nitritos orgânicos a partir de um composto que é um álcool mono/poli-hídrico ou um derivado de aldeído ou cetona do mesmo. Os métodos envolvem a desaeração de uma solução aquosa do dito composto, seguida pela purga com óxido nítrico gasoso (NO).

[0025] Nilsson, K.F. et al., Biochem Pharmacol., 82 (3), 248 a 259 (2011) discute a formação e identificação de novos nitritos orgânicos bioativos.

[0026] Apesar dos avanços recentes, existem várias desvantagens associadas aos compostos, composições e métodos de preparação da técnica anterior.

[0027] Por exemplo, entre os compostos e composições atualmente disponíveis, muitos estão associados a propriedades indesejáveis ou efeitos colaterais, tais como problemas de toxicidade, ação tardia, ação irreversível ou ação prolongada, etc. Um problema particular, frequentemente encontrado ao administrar um composto doador de NO na forma de uma infusão, é a produção de metemoglobina (metHb).

[0028] Além disso, nitritos orgânicos conhecidos e seu uso

9 / 62 terapêutico estão frequentemente associados a problemas provavelmente devido a impurezas e produtos de degradação presentes nas composições. Também é difícil preparar formulações farmacêuticas que contêm nitritos orgânicos, pois as etapas de mistura e os veículos usados podem desencadear uma degradação adicional.

[0029] Além disso, o uso de óxido nítrico e oxigênio inalados apresenta problemas significativos devido à produção de dióxido de nitrogênio, que deve ser monitorada continuamente durante a administração.

[0030] Alguns métodos de preparação da técnica anterior fornecem apenas uma concentração relativamente baixa de nitrito orgânico em solução aquosa, o que significa que as propriedades de armazenamento e transporte de tais formulações são frequentemente insatisfatórias.

[0031] Além disso, os métodos de preparação da técnica anterior resultam em quantidades significativas de gás de NO e nitrito inorgânico dissolvido em solução, além do nitrito orgânico desejado. Devido às propriedades altamente reativas do NO, é necessário manusear e armazenar a solução com cuidado para evitar decomposição repentina e espontânea. Também é provável que o gás de NO reaja com os materiais plásticos no recipiente de armazenamento.

[0032] Além disso, a presença de nitritos inorgânicos aumenta a fração de metHb do sangue, o que é um efeito colateral limitante da dose.

[0033] Existe, portanto, uma necessidade significativa e urgente de um método para a preparação de compostos de entrega de NO e composições que compreendem os mesmos que supere uma ou mais das desvantagens associadas aos métodos de preparação e composições da técnica anterior. Também existe a necessidade de um método que permita o uso de compostos e composições obtidos a partir de tais processos.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

[0034] Os presentes inventores constataram inesperadamente um

10 / 62 processo para a preparação de um composto de entrega de NO que supera uma ou mais das desvantagens associadas aos métodos de preparação da técnica anterior.

[0035] Por exemplo, o processo da invenção fornece uma concentração relativamente alta dos compostos da invenção em solução, fornecendo assim facilidade de manuseio e minimizando os volumes de armazenamento e os custos de transporte. Além disso, o processo da invenção não resulta em gás de óxido nítrico dissolvido ou nitrito inorgânico, minimizando assim o risco de decomposição repentina e espontânea e reduzindo o potencial de efeitos colaterais quando o produto do processo é usado em terapia. O processo da invenção também resulta na produção de apenas níveis muito baixos de outras impurezas.

[0036] Além disso, os presentes inventores constataram que tais processos podem entregar composições quimicamente estáveis, não aquosas e formulações que compreendem estes compostos, que podem permitir o transporte e armazenamento convenientes antes do uso terapêutico. Além disso, os presentes inventores desenvolveram um meio conveniente para o uso de tais composições e formulações através da administração em combinação com um tampão aquoso adequado.

PROCESSOS

[0037] De acordo com um primeiro aspecto da presente invenção, é fornecido um processo para a preparação de uma composição que compreende um ou mais compostos de fórmula I (I) em que: em que R1, R2 e R3 representam, cada um independentemente, H ou -NO;

11 / 62 n é 0 ou 1; em que quando n é 0, então R1 é H, e quando n é 1, o R2 é H; e desde que pelo menos um dentre R1, R2 e R3 represente -NO, o dito processo que compreende a etapa de: (i) reagir um composto correspondente de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H com uma fonte de nitrito, opcionalmente na presença de um ácido adequado, em que: (a) quando a fonte de nitrito é um nitrito orgânico, a etapa (i) é realizada em um solvente orgânico adequado; e (b) quando a fonte de nitrito é um nitrito inorgânico, a etapa (i) é realizada em uma mistura de solvente bifásico que compreende uma fase aquosa e uma fase não aquosa, cujo processo pode ser doravante denominado “processo da invenção” ou semelhante.

[0038] Para evitar dúvidas, o produto do processo da invenção (isto é, o composto de fórmula I) também pode (ou em vez disso) ser denominado um 1,2-propanodiol ou 1,3-propanodiol mono- e bis-nitrosilado (ou uma mistura de tais compostos, isto é, uma composição que compreende um ou mais 1,2- ou 1,3-propanodiol mono- ou bis-nitrosilados).

[0039] Para evitar dúvidas, o composto correspondente de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H, pode ser denominado um 1,2- propanodiol e/ou 1,3-propanodiol correspondente (isto é, correspondente à estrutura do produto desejado). Dito de outra forma, o composto correspondente de fórmula I pode ser um composto de acordo com a fórmula (Ia) conforme definido abaixo.

12 / 62 (Ia)

[0040] Para evitar dúvidas, onde o número inteiro (n ou 1-n) relacionado aos átomos de oxigênio é 0, nenhum átomo de oxigênio está presente e o substituinte R1 e R2 (e o H correspondente no composto de fórmula (Ia)) está ligado ao respectivo carbono.

[0041] O versado na técnica entenderá que as referências neste documento ao processo da invenção (ou, de forma semelhante, a “processos da invenção” ou semelhantes) incluirão referências a todas as modalidades e características particulares das mesmas.

[0042] Salvo indicação em contrário, todos os termos técnicos e científicos usados neste documento têm o mesmo significado normalmente entendido por um indivíduo versado na técnica a quem esta invenção pertence.

[0043] Todas as modalidades da invenção e recursos específicos mencionados no presente documento podem ser tomados isoladamente ou em combinação com quaisquer outras modalidades e/ou recursos específicos mencionados no presente documento (descrevendo, assim, modalidades mais específicas e recursos específicos, conforme divulgado no presente documento) sem se afastar da divulgação da invenção.

[0044] Conforme usado neste documento, o termo “compreende” terá seu significado usual na técnica, indicando que o componente inclui, mas não está limitado às características relevantes (isto é, incluindo, entre outras coisas). Como tal, o termo “compreende” incluirá referências ao componente que consiste essencialmente na substância relevante (ou nas substâncias relevantes).

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[0045] Conforme usado neste documento, a menos que especificado de outra forma, os termos “consiste essencialmente em” e “consistindo essencialmente em” se referem ao componente relevante sendo formado por pelo menos 80% (por exemplo, pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos 95%, tal como pelo menos 99%) da substância especificada (ou das substâncias especificadas), de acordo com a medida pertinente (por exemplo, em peso do mesmo). Os termos “consiste essencialmente em” e “consistindo essencialmente em” podem ser substituídos por “consiste em” e “consistindo em”, respectivamente.

[0046] Para evitar dúvidas, o termo “compreende” também incluirá referências ao componente que consiste na substância relevante (ou nas substâncias relevantes).

[0047] Como tal, o versado na técnica entenderá que as referências à preparação de uma composição que compreende um ou mais compostos de fórmula (I) irão se referir à preparação de uma composição que contém, como uma parte constituinte, uma quantidade de um ou mais compostos cuja estrutura é definida na fórmula I, opcionalmente em conjunto com outros compostos. O processo da invenção também pode ser denominado um processo para preparar compostos de fórmula I (isto é, um processo para preparar um ou mais compostos de fórmula I).

[0048] O versado entenderá que as referências ao processo sendo um processo para a preparação de compostos de fórmula I serão entendidas como indicativas de que o processo da invenção pode resultar na preparação de um ou mais tipos de composto, cada um conforme descrito pela fórmula I, conforme definido neste documento (por exemplo, quando mais de um desses compostos está presente, como uma mistura dos mesmos).

[0049] Como tal, o versado na técnica também entenderá que os compostos formados no processo da invenção podem assumir a forma de uma mistura de cada mono-nitrito e os produtos di-nitrito, com as quantidades

14 / 62 relativas de cada variando dependendo da concentração de compostos de fórmula I.

[0050] Em particular, o processo da invenção pode permitir a preparação de uma composição em que pelo menos 50% em peso, 60% em peso, 70% em peso ou 80% em peso (tal como pelo menos 90% em peso ou pelo menos 99% em peso, por exemplo, pelo menos 99,9% em peso) dos compostos de fórmula I são mononitrosilados, de modo que R1, R2 e R3 representem cada um independentemente H ou -NO, desde que um dentre R1, R2 ou R3 represente -NO e os outros grupos representem H.

[0051] Em particular, o processo da invenção pode resultar na preparação da composição que compreende um ou mais compostos de fórmula I juntamente com um ou mais compostos correspondentes de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H (isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3- propanodiol, por exemplo, material de partida de 1,2-propanodiol e/ou 1,3- propanodiol não reagido) e, opcionalmente, outros compostos.

[0052] Em certas modalidades, o processo da invenção pode ser um processo para preparar uma composição que consiste essencialmente em um ou mais compostos de fórmula I e um ou mais compostos correspondentes de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H (isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3-propanodiol; por exemplo, como uma mistura dos mesmos).

[0053] O versado na técnica entenderá que o termo “reagir” se refere a reunir os componentes relevantes de uma maneira (por exemplo, em estado e meio adequados) de modo que ocorra uma reação química. Em particular, a referência à reação do material de partida (isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3- propanodiol) com uma fonte de nitrito se refere a uma reação química entre o material de partida e o nitrito (isto é, o nitrito fornecido pela fonte de nitrito).

[0054] O versado compreenderá que a referência a “uma fonte de nitrito” pode, em vez disso, se referir simplesmente a “nitrito”, pois é o nitrito fornecido pela fonte de nitrito que sofre reação química. Como tal, as

15 / 62 referências a uma fonte de nitrito serão entendidas como se referindo a um composto que fornece, para reação, uma porção química de nitrito (que pode estar presente na forma iônica ou ligada covalentemente, dependendo da fonte de nitrito presente). A fonte de nitrito pode, portanto, ser denominada uma fonte de nitrito reativo (ou capaz de reagir) (ou porção química de nitrito). Para evitar dúvidas, a fonte de nitrito pode ser um nitrito inorgânico ou um nitrito orgânico.

[0055] Conforme indicado neste documento, quando a fonte de nitrito é um nitrito orgânico, a etapa (i) é realizada em um solvente orgânico adequado.

[0056] O versado compreenderá que vários nitritos orgânicos podem ser usados no processo da invenção, tais como nitritos de alquila.

[0057] Nitritos de alquila particulares que podem ser mencionados incluem nitrito de etila, nitritos de propila, nitritos de butila e nitritos de pentila. Em modalidades particulares, o nitrito de alquila é nitrito de n-butila, nitrito de isobutila ou nitrito de terc-butila, tal como nitrito de terc-butila.

[0058] Quando a fonte de nitrito é um nitrito orgânico, o versado será capaz de selecionar um solvente adequado. Por exemplo, os solventes adequados podem incluir aqueles referidos neste documento como componentes orgânicos adequados de um sistema de solvente bifásico e misturas dos mesmos.

[0059] Para evitar dúvidas, a menos que especificado de outra forma, as referências ao processo da invenção sendo realizado em um solvente orgânico adequado não indicam que outros solventes não orgânicos, tais como água, possam estar presentes.

[0060] Em uma modalidade particular, quando o processo da invenção é realizado em um solvente orgânico adequado, o solvente pode ser essencialmente livre de água (o que pode ser referido como sendo “livre de água” ou “seco”), o que pode indicar que o solvente contém menos do que

16 / 62 cerca de 1% (por exemplo, menos do que cerca de 0,1%, tal como menos do que cerca de 0,01%) em peso de água.

[0061] O termo “cerca de” é definido, neste documento, como significando que o valor definido pode desviar em ± 10%, tal como em ± 5%, por exemplo em ± 4%, ± 3%, ± 2% ou ± 1%. O termo “cerca de” pode ser removido de todo o relatório descritivo sem se afastar do ensinamento da invenção.

[0062] Conforme indicado neste documento, quando a fonte de nitrito é um nitrito inorgânico, a etapa (i) é realizada em uma mistura de solvente bifásico que compreende uma fase aquosa e uma fase não aquosa.

[0063] O versado compreenderá que o termo “mistura de solvente bifásica”, tal como usado neste documento, se refere a um sistema composto por dois solventes ou misturas de solventes que não se misturam para formar uma única fase de solvente, mas em vez disso estão presentes como duas fases distintas (isto é, não misturadas).

[0064] Quando tais misturas de solventes compreendem água e um solvente orgânico (ou mistura de solventes orgânicos), pode-se dizer que tais sistemas de solventes compreendem uma “fase aquosa” e uma “fase orgânica”. Para evitar dúvidas, o termo bifásico não indica que substâncias que formam outras fases, tais como substâncias que formam uma fase sólida, podem estar presentes além do sistema de solvente (ou seja, outras fases também podem estar presentes).

[0065] Fontes particulares de nitritos inorgânicos que podem ser mencionadas incluem nitritos de metais, tais como nitritos de metais alcalinos e nitritos de metais alcalino-terrosos. Os líquidos iônicos também podem ser uma fonte adequada de nitritos inorgânicos.

[0066] Para evitar dúvidas, o termo metal alcalino assume seu significado usual na técnica, ou seja, referindo-se a elementos e cátions do grupo 1 da IUPAC, incluindo lítio, sódio, potássio, rubídio, césio e frâncio.

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[0067] Para evitar dúvidas, o termo metal alcalino-terroso assume o seu significado usual na técnica, ou seja, referindo-se a elementos e cátions do grupo 2 da IUPAC, incluindo berílio, magnésio, cálcio, estrôncio, bário e rádio.

[0068] Mais particularmente nitritos inorgânicos que podem ser mencionados incluem nitritos de metais alcalinos, tais como nitrito de lítio, nitrito de sódio e nitrito de potássio. Em uma modalidade particular, a fonte de nitrito é nitrito de sódio.

[0069] Alternativamente, o nitrito de metal pode ser um nitrito de metal alcalino-terroso, tal como nitrito de lítio, nitrito de magnésio ou nitrito de cálcio.

[0070] Para evitar dúvidas, o versado compreenderá que a fase não aquosa no sistema de solvente bifásico pode ser um solvente orgânico, que pode, portanto, ser denominado uma fase orgânica.

[0071] O versado será capaz de selecionar um solvente não aquoso (isto é, orgânico) adequado com base nas propriedades das fases aquosas. Por exemplo, quando a fase aquosa tem um certo nível de substâncias dissolvidas nela (por exemplo, sólidos iônicos, tais como sais), uma ampla faixa de solventes orgânicos pode ser selecionada a fim de formar um sistema de solvente bifásico.

[0072] Em modalidades particulares, a fase não aquosa consiste em um solvente orgânico imiscível em água. Em modalidades mais particulares, o solvente orgânico imiscível em água é um solvente orgânico aprótico.

[0073] Solventes orgânicos imiscíveis em água particulares (isto é, solventes particulares que formam a fase não aquosa) que podem ser mencionados incluem éteres (por exemplo, éter terc-butil metílico, éter ciclopentil metílico, tetra-hidrofurano metílico, éter dietílico, éter di- isopropílico) e diclorometano (DCM).

[0074] Mais particularmente solventes orgânicos imiscíveis em água

18 / 62 (isto é, solventes particulares que formam a fase não aquosa) que podem ser mencionados incluem diclorometano, éter dietílico e éter terc-butilmetílico. Em modalidades mais particulares, o solvente orgânico imiscível em água é éter terc-butil metílico.

[0075] Em certas modalidades que podem ser mencionadas, a mistura de solventes pode compreender compostos em excesso de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H (isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3-propanodiol). Para evitar dúvidas, em tais circunstâncias, o 1,2-propanodiol e/ou 1,3- propanodiol (isto é, os compostos de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H) podem estar presentes como um solvente (por exemplo, um componente de uma mistura de solventes) e um reagente. Como tal, em modalidades particulares, o processo é um processo para preparar compostos de fórmula I como uma solução nos compostos correspondentes de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H, isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3- propanodiol (por exemplo, na forma de uma mistura que compreende 1,2- propanodiol e/ou 1,3-propanodiol, conforme apropriado). Em certas modalidades, quando a fonte de nitrito é um nitrito orgânico, o solvente pode consistir essencialmente em compostos de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H (isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3-propanodiol). Ou seja, os compostos de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H, podem atuar como solvente e como reagente.

[0076] Em uma modalidade alternativa, quando a fonte de nitrito é um nitrito inorgânico, a etapa (i) pode ser realizada em um único solvente, em que o solvente pode consistir essencialmente em compostos de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H (isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3- propanodiol). Ou seja, os compostos de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H, podem atuar como solvente e como reagente.

[0077] Em modalidades alternativas, o processo da invenção pode ser realizado com um excesso de nitrito em relação ao material de partida da

19 / 62 fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H (isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3-propanodiol).

[0078] Conforme usado neste documento, o termo “excesso” terá seu significado usual na técnica, ou seja, indicando que o componente está presente em uma quantidade maior do que estequiométrica para a reação na qual é um reagente.

[0079] Conforme indicado neste documento, o processo da invenção (em particular, a reação entre os componentes) é opcionalmente realizado na presença de um ácido adequado.

[0080] Os processos particulares da invenção que podem ser mencionados incluem aqueles em que a etapa de reação do material de partida (isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3-propanodiol) com uma fonte de nitrito é realizada na presença de um ácido adequado.

[0081] Ácidos particulares que podem ser mencionados como ácidos adequados incluem ácidos de Brønsted (isto é, ácidos doadores de prótons), mais particularmente em que tais ácidos podem ser denominados ácidos fortes.

[0082] Para evitar dúvidas, o termo “ácido forte” assume seu significado usual na técnica, referindo-se aos ácidos de Brønsted cuja dissociação é substancialmente completa em solução aquosa em equilíbrio. Em particular, as referências a ácidos fortes podem se referir a ácidos de Brønsted com um pKa (em água) menor que cerca de 5 (por exemplo, menor que cerca de 4,8). Para evitar dúvidas, para ácidos multipróticos, tais como o ácido sulfúrico, o termo ácido forte se refere à dissociação do primeiro próton.

[0083] Certos ácidos fortes que podem ser mencionados incluem aqueles com um pKa (em água) menor que cerca de 1, tal como menor que cerca de 0 (por exemplo, menor que cerca de -1 ou -2). Por exemplo, os ácidos fortes que podem ser mencionados incluem aqueles com um pKa (em água) de cerca de -3. O versado entenderá que os ácidos adequados podem

20 / 62 incluir ácidos não nucleofílicos, como conhecido pelos versados na técnica.

[0084] Os ácidos adequados particulares que podem ser mencionados incluem ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido trifluoroacético e ácido acético.

[0085] Os ácidos adequados mais particulares que podem ser mencionados incluem ácidos minerais (por exemplo, ácidos minerais fortes), tais como o ácido sulfúrico.

[0086] O versado será capaz de selecionar quantidades adequadas de reagentes para usar no processo da invenção dentro dos ensinamentos da presente invenção. Por exemplo, a razão (isto é, a razão molar) do composto correspondente de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H para nitrito para ácido (quando presente) pode ser cerca de 1: de cerca de 1 a cerca de 5: a cerca de 0,5 a cerca de 3,5, por exemplo cerca de 1: de cerca de 1 a cerca de 3: de cerca de 0,5 a cerca de 2 (tal como cerca de 1:4:2,7, ou cerca de 1:2:0,95, ou cerca de 1:2:1). Para evitar dúvidas, quando um ácido adequado não está presente, as razões entre o composto correspondente de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H e nitrito podem ainda ser aplicáveis.

[0087] Em modalidades particulares, a etapa do processo (i) é realizada a uma temperatura de cerca de -30 °C a cerca de 5 °C, tal como de cerca de -30 °C a cerca de 0 °C, por exemplo de cerca de -30 °C a cerca de - 10 °C, de preferência de cerca de -25 °C a cerca de -15 °C.

[0088] Em modalidades particulares, a etapa (i) do processo é realizada sob uma atmosfera inerte, tal como uma atmosfera de nitrogênio ou argônio, de preferência uma atmosfera de argônio. Além disso, em modalidades particulares, quaisquer etapas do processo podem ser realizadas sob uma atmosfera inerte, tal como uma atmosfera de nitrogênio ou argônio, de preferência uma atmosfera de argônio.

[0089] Os processos particulares da invenção que podem ser mencionados, particularmente nos quais um sistema de solvente bifásico é

21 / 62 usado, incluem aqueles em que o processo compreende ainda, após (por exemplo, diretamente em seguida) a etapa (i), a etapa de: (ii) remover substancialmente toda a fase aquosa (isto é, remover substancialmente toda a água) da mistura de solventes.

[0090] O versado observará que a fase aquosa pode ser removida da mistura de solventes por qualquer processo adequado e usando qualquer equipamento adequado como conhecido na técnica (por exemplo, usando um funil de separação ou aparelho semelhante).

[0091] Conforme usado neste documento, a menos que especificado de outra forma, o termo “substancialmente todos” se refere a pelo menos 80% (por exemplo, pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos 95%, tal como pelo menos 99%) da substância especificada (ou substâncias especificadas), de acordo com a medida relevante (por exemplo, em peso da mesma).

[0092] O versado na técnica também compreenderá que as referências a “remover substancialmente toda a fase aquosa da mistura de solvente” podem ser substituídas por referências a “remover parte ou toda a fase aquosa da mistura de solvente” ou simplesmente “remover a fase aquosa da mistura de solventes”.

[0093] Para evitar dúvidas, no contexto da sua remoção, o termo fase aquosa se refere à fase (separada) formada a partir de água e componentes nela dissolvidos.

[0094] Os processos particulares da invenção que podem ser mencionados, particularmente nos quais um sistema de solvente bifásico é usado, incluem aqueles em que o processo compreende ainda, após (por exemplo, diretamente em seguida) a etapa (i), as etapas de (na sequência mostrada): (ii) remover parte ou toda (por exemplo, substancialmente toda) a fase aquosa (isto é, água);

22 / 62 (iii) lavar a fase orgânica restante com uma ou mais fases aquosas adicionais; (iv) opcionalmente, repetir as etapas (ii) e (iii) uma ou mais vezes.

[0095] Outros processos da invenção que podem ser mencionados, particularmente em que um sistema de solvente bifásico é usado, incluem aqueles em que o processo compreende ainda, após (por exemplo, diretamente em seguida) a etapa (i), as etapas de (na sequência mostrada): (ii) remover parte ou toda (por exemplo, substancialmente toda) a fase aquosa (isto é, água); (iii) lavar a fase orgânica restante com uma ou mais fases aquosas adicionais; (iv) opcionalmente repetir as etapas (ii) e (iii) uma ou mais vezes; (v) opcionalmente reduzir (isto é, reduzir a quantidade/volume de) a fase orgânica, tal como por remoção de parte ou substancialmente todo o solvente orgânico imiscível em água (por exemplo, solvente orgânico diferente de 1,2 propanodiol e/ou 1,3-propanodiol), e (vi) opcionalmente secar o produto, em que as etapas (ii) a (vi) podem ser realizadas em qualquer ordem, desde que as etapas (ii) a (iv) sejam realizadas antes das etapas (v) e (vi).

[0096] Em modalidades particulares, as etapas do processo (ii) a (iv) podem ser realizadas a uma temperatura de cerca de -20 °C a cerca de 5 °C, tal como de cerca de -10 °C a cerca de 5 °C.

[0097] Em modalidades particulares, a etapa do processo (v) pode ser realizada a uma temperatura de cerca de 0 °C a cerca de 30 °C, tal como de cerca de 10 °C a cerca de 30 °C, por exemplo de cerca de 15 °C a cerca de 30 °C.

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[0098] Em modalidades particulares, a etapa do processo (v) é realizada por não mais do que 6 horas, por exemplo, não mais do que 5 horas, de preferência não mais do que 4 horas.

[0099] Em modalidades particulares, cada uma das etapas (ii) a (vi) é realizada, tal como em que essas etapas são realizadas na ordem indicada.

[00100] Para evitar dúvidas, o versado compreenderá que a lavagem da fase orgânica restante com uma ou mais fases aquosas adicionais se refere a etapas que compreendem: adicionar uma porção adicional de solvente aquoso (por exemplo, água); misturar com a fase orgânica (separada) (por exemplo, agitando e/ou sacudindo em conjunto); e remover substancialmente toda a fase aquosa e, opcionalmente, repetir as ditas etapas uma ou mais vezes.

[00101] O versado entenderá que a etapa (iii) pode ser realizada por qualquer processo adequado e usando qualquer equipamento adequado conhecido na técnica (por exemplo, usando um funil de separação).

[00102] O versado entenderá que a etapa (v) pode ser realizada por qualquer processo adequado e usando qualquer equipamento adequado conhecido na técnica (por exemplo, por evaporação sob pressão reduzida).

[00103] No contexto da etapa (v), as referências à remoção de parte da fase orgânica podem se referir, em particular, à remoção de substancialmente todo o solvente orgânico imiscível em água, conforme definido neste documento. Mais particularmente, a remoção do solvente orgânico imiscível em água pode se referir à remoção de pelo menos 99% (tal como pelo menos 99,5%, 99,9% ou, em particular, 99,99%) em peso do solvente orgânico imiscível em água.

[00104] Tal remoção do solvente orgânico imiscível em água também pode se referir à remoção de modo que o produto após essa remoção contenha menos de 1% (tal como menos de 0,5%, 0,1%, por exemplo, menos de 0,05%, menos de 0,01%) em peso do solvente orgânico imiscível em água.

[00105] Para evitar dúvidas, no contexto da etapa (v), as referências à

24 / 62 remoção da fase orgânica, tais como o solvente orgânico imiscível em água, se referem à remoção de qualquer um desses solventes conforme definido neste documento (por exemplo, a remoção de diclorometano ou éter terc- butilmetílico). Quando outros solventes orgânicos estão presentes (tais como aqueles que não são imiscíveis em água, por exemplo, excesso de 1,2- propanodiol e/ou 1,3-propanodiol atuando como um solvente), uma porção de tais solventes também pode ser removida (por exemplo, juntamente com um solvente orgânico imiscível em água).

[00106] No contexto das etapas (vi), as referências à secagem do produto referem-se à remoção de água do material remanescente após as etapas anteriores. Essa remoção de água pode se referir à remoção de modo que o produto após essa secagem contenha menos de 1% (tal como menos de 0,5% ou menos de 0,1%, por exemplo, menos de 0,05% ou menos de 0,01%) em peso de água.

[00107] O versado entenderá que a etapa (vi) pode ser realizada por qualquer processo adequado e usando qualquer equipamento adequado conhecido na técnica (por exemplo, por contato da fase orgânica restante com um agente de secagem adequado, tal como sulfato de sódio anidro, sulfato de magnésio anidro e/ou peneiras moleculares).

[00108] Os processos particulares da invenção que podem ser mencionados incluem aqueles em que o processo compreende ainda a etapa (por exemplo, após a etapa (i) e, se presente, outras etapas conforme descrito neste documento) de adicionar uma quantidade adicional do composto correspondente de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H (isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3-propanodiol), de modo que a mistura combinada de um ou mais compostos de fórmula I e compostos correspondentes de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H (isto é, 1,2-propanodiol e/ou 1,3- propanodiol) compreenda de cerca de 0,01% a cerca de 9% (por exemplo, cerca de 0,01% a cerca de 5%, tal como cerca de 3% a cerca de 5%, ou cerca

25 / 62 de 5% a cerca de 7%) em peso de um ou mais dos compostos da invenção.

[00109] Conforme destacado acima, todas as modalidades da invenção e recursos específicos mencionados no presente documento podem ser considerados de forma isolada ou em combinação com quaisquer outras modalidades e/ou recursos específicos mencionados no presente documento (descrevendo, assim, modalidades mais particulares e recursos particulares, conforme divulgado no presente documento) sem se afastar da divulgação da invenção.

[00110] Por exemplo: a etapa do processo (i) sendo realizada a uma temperatura de cerca de -30 °C a cerca de 5 °C pode ser combinada com a característica das etapas do processo (ii) a (iv) podem ser realizadas a uma temperatura de cerca de -20 °C a cerca de 5 °C; a característica da etapa (v) do processo sendo realizada a uma temperatura de cerca de 0 °C a cerca de 30 °C; e/ou a característica da etapa (v) do processo sendo realizada por não mais do que 6 horas.

[00111] Os processos mais particulares que podem ser mencionados incluem aqueles em que os parâmetros especificados estão de acordo com os exemplos fornecidos neste documento.

[00112] Um produto particular do processo da invenção é um composto de acordo com a fórmula (II) (II) em que R2 e R3 representam cada um independentemente H ou -NO, desde que pelo menos um dentre R2 e R3 represente -NO, em que o processo compreende a etapa de reação de 1,2-propanodiol (isto é, o material de partida) com uma fonte de nitrito, nas condições descritas neste documento (incluindo todas as modalidades das mesmas).

[00113] Existem dois enantiômeros do composto de acordo com a

26 / 62 fórmula (II), sendo a forma R e S conforme representado abaixo: (II) forma R (II) forma S

[00114] Um outro produto particular do processo da invenção é um composto de acordo com a fórmula (III) conforme representado abaixo: (III) em que R1 e R3 cada um independentemente representam H ou -NO, desde que pelo menos um dentre R1 e R3 represente -NO, em que o processo compreende a etapa de reação de 1,3-propanodiol com uma fonte de nitrito.

[00115] Os dois processos particulares descritos acima para a produção de compostos de acordo com a fórmula (II) e (III) podem ser realizados em conjunto ou independentemente um do outro.

[00116] Com base na ocorrência da natureza bifásica da mistura de reação, a adição opcional de um catalisador de transferência de fase (PTC) pode auxiliar a formação do produto. PTCs comuns são, por exemplo, porém sem limitação, íons tetra-alquilamônio, tais como Me4N+, Et4N+, Bu4N+ ou Bu3(N+)CH2PHCl, com contra-íons tais como = Cl-, Br-, HSO4-, ou outros tipos de PTCs alquilamônio, tais como Aliquat® 336, em quantidades subestequiométricas de <1 equivalente, por exemplo, mas não exclusivamente, na faixa de cerca de 0,05 a cerca de 40% molar, tal como cerca de 0,1 a cerca de 30% em mol, por exemplo, de cerca de 0,1 a cerca de 20% molar.

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[00117] Um outro produto particular do processo da invenção é um composto de acordo com a fórmula (IV) conforme representado abaixo R4

O

O R5 (IV) em que R4 e R5 cada um independentemente representam H ou -NO, desde que pelo menos um dentre R4 e R5 represente -NO.

[00118] Um processo particular da invenção, portanto, é para a preparação de uma composição que compreende um ou mais compostos de fórmula IV R4

O

O R5 (IV) em que R4 e R5 cada um independentemente representam H ou -NO, desde que pelo menos um dentre R4 e R5 represente -NO, o dito processo que compreende a etapa de: (i) reagir 1,2-propanodiol com uma fonte de nitrito, opcionalmente na presença de um ácido adequado, em que: (a) quando a fonte de nitrito é um nitrito orgânico, a etapa (i) é realizada em um solvente orgânico adequado; e (b) quando a fonte de nitrito é um nitrito inorgânico, a etapa (i) é realizada em uma mistura de solvente bifásico que compreende uma fase aquosa e uma fase não aquosa.

[00119] Qualquer uma das etapas do processo descritas neste documento pode ser combinada com o processo particular descrito acima em relação à fórmula (IV) e modalidades particulares são descritas abaixo.

[00120] Em um processo particular, o nitrito inorgânico é um nitrito de metal, opcionalmente em que o nitrito de metal é um nitrito de metal alcalino ou um nitrito de metal alcalino-terroso, preferivelmente um nitrito de metal

28 / 62 alcalino.

[00121] Em uma modalidade particular, o nitrito de metal alcalino é nitrito de sódio.

[00122] Em uma outra modalidade particular, o nitrito orgânico é um nitrito de alquila, tal como nitrito de terc-butila.

[00123] Em um processo particular, o ácido adequado é um ácido forte, como um ácido mineral forte (por exemplo, ácido sulfúrico).

[00124] Em uma modalidade particular, a fase não aquosa compreende um solvente orgânico imiscível em água, tal como um solvente orgânico aprótico imiscível em água.

[00125] Em uma modalidade, o solvente orgânico imiscível em água é diclorometano.

[00126] Em um processo particular, a mistura de solventes compreende ainda 1,2-propanodiol em excesso.

[00127] Em um outro processo particular, após a etapa (i), o processo compreende ainda a etapa de: (ii) remover substancialmente toda a fase aquosa da mistura de solventes.

[00128] Em uma modalidade, após a etapa (i), o processo compreende ainda a etapa (ou as estapas) de: (ii) remover parte ou toda (por exemplo, substancialmente toda) a fase aquosa (isto é, de água); (iii) lavar a fase orgânica restante com uma ou mais fases aquosas adicionais; (iv) opcionalmente repetir as etapas (ii) e (iii) uma ou mais vezes; (v) reduzir opcional (isto é, reduzir a quantidade/volume de) a fase orgânica,

29 / 62 e (vi) opcionalmente secar o produto, em que as etapas (ii) a (vi) podem ser realizadas em qualquer ordem, desde que as etapas (ii) a (iv) sejam realizadas antes das etapas (v) e (vi).

[00129] Em uma modalidade particular, o processo compreende ainda a etapa de adicionar uma quantidade adicional de 1,2-propanodiol, de modo que a mistura combinada de um ou mais compostos de fórmula I e 1,2- propanodiol compreenda de cerca de 0,01% a cerca de 9% em peso de um ou mais compostos de fórmula IV.

PRODUTOS E COMPOSIÇÕES

[00130] Em um segundo aspecto da invenção, é fornecido um produto preparado com uso (tal como um produto obtido ou obtenível por) do processo da invenção (isto é, produzido de acordo com o primeiro aspecto da invenção, incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas), cujos produtos podem ser denominados a seguir como “compostos da invenção”.

[00131] Os compostos da invenção podem conter um átomo de carbono assimétrico conforme descrito acima e, portanto, exibirão isomerismo óptico. Os vários estereoisômeros podem ser isolados por separação de uma mistura racêmica ou outra mistura dos compostos com uso de técnicas convencionais, por exemplo, cristalização fracionada ou HPLC. Alternativamente, os isômeros ópticos desejados podem ser feitos por reação dos materiais de partida opticamente ativos apropriados sob condições que não causarão racemização (isto é, um método de “pool quiral”), por reação do material de partida apropriado com um “auxiliar quiral” que pode ser posteriormente removido em um estágio adequado, por derivatização (isto é, uma resolução, incluindo uma resolução dinâmica); por exemplo, com um ácido homoquiral seguido por separação dos derivados diastereoméricos por

30 / 62 meios convencionais, tais como cromatografia, ou por reação com um reagente quiral apropriado ou catalisador quiral sob condições conhecidas pelo versado. Todos os estereoisômeros e misturas dos mesmos estão incluídos no escopo da invenção.

[00132] Os processos da invenção permitem vantajosamente a preparação de composições substancialmente não aquosas que compreendem um ou mais compostos da invenção. Em particular, os processos da invenção permitem concentrações relativamente altas de um ou mais compostos da invenção na composição, proporcionando assim facilidade de manuseio e minimizando os volumes de armazenamento e custos de transporte.

[00133] Consequentemente, em um terceiro aspecto da invenção, é fornecida uma composição substancialmente não aquosa que compreende: (a) um ou mais compostos de fórmula I conforme definidos neste documento; e (b) um ou mais compostos correspondentes de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H (por exemplo, 1,2-propanodiol e/ou 1,3- propanodiol), cujas composições podem ser denominadas doravante “as composições substancialmente não aquosas da invenção”.

[00134] O versado compreenderá que as referências feitas neste documento a composições substancialmente não aquosas da invenção incluirão referências a todas as modalidades e formas particulares das mesmas.

[00135] Conforme usado neste documento, as referências a “substancialmente não aquoso” se referem ao componente que compreende menos de 1% (tal como menos de 0,5% ou menos de 0,1%, por exemplo, menos de 0,05%, menos de 0,01%) em peso de água.

[00136] Composições substancialmente não aquosas particulares da invenção que podem ser mencionadas incluem aquelas em que a composição

31 / 62 compreende de cerca de 0,01% a cerca de 9% (por exemplo, cerca de 0,01% a cerca de 5%, tal como cerca de 3% a cerca de 5%, ou cerca de 5% a cerca de 7%) em peso de um ou mais dos compostos da invenção (isto é, compostos de fórmula I).

[00137] Composições substancialmente não aquosas particulares da invenção que podem ser mencionadas incluem aquelas em que a composição compreende um composto de acordo com a fórmula (II). Preferencialmente, o composto de acordo com a fórmula (II) é a forma S.

[00138] A forma S do composto de acordo com a fórmula (II) é preferencial porque tem uma taxa de metabolismo mais elevada do que a forma R. Além disso, a forma S tem uma rota de degradação metabólica diferente, o que resulta em metabólitos que são menos tóxicos do que aqueles da forma R.

[00139] Composições substancialmente não aquosas particulares da invenção que podem ser mencionadas incluem aquelas em que a composição compreende um composto de acordo com a fórmula (III).

[00140] Preferencialmente, o composto de acordo com a fórmula (II) é a forma S, embora seja previsto que o produto é uma mistura das formas S e R da fórmula (II) com a forma S estando preferencialmente presente em um excesso enantiomérico (ee).

[00141] Em modalidades particulares, quando o produto do processo é um composto de acordo com a fórmula (II), o composto de acordo com a fórmula (II) pode estar em um excesso enantiomérico da forma S do composto. Ou seja, mais de 50% de ee do produto está na forma S, tal como mais de ou igual a 60% de ee, 70% de ee, 80% de ee, 90% de ee, 95% de ee ou 98% de ee do produto é a forma S.

[00142] A fim de chegar a um excesso enantiomérico da forma S do composto (II), em uma modalidade o material de partida (isto é, o 1-2 propanodiol) pode estar presente em um excesso enantiomérico da forma S.

32 / 62 Ou seja, maior ou igual a 50% de ee do material de partida (isto é, o 1-2 propanodiol) está na forma S, tal como mais de ou igual a 60% de ee, 70% de ee, 80% de ee, 90% de ee, 95% de ee ou 98% de ee do material de partida é a forma S.

[00143] Em uma modalidade em que o produto é um composto mono- nitrosilado de acordo com a fórmula (II), mais do que 50% em peso do produto é nitrosilado na posição 2 (isto é, R2 é -NO), tal como entre cerca de 55% em peso e cerca de 80% em peso é nitrosilado na posição 2, por exemplo entre cerca de 55% em peso e 75% em peso.

[00144] Composições substancialmente não aquosas particulares da invenção que podem ser mencionadas incluem aquelas em que a composição consiste essencialmente em um ou mais compostos de fórmula I e compostos correspondentes de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H (isto é, 1, 2-propanodiol e/ou 1,3-propanodiol).

[00145] Em particular, quando o material de partida é 1,2-propanodiol, então as composições substancialmente não aquosas da invenção podem compreender (ou, particularmente, consistir essencialmente em ou, mais particularmente, consistir em) um ou mais compostos de fórmula II e 1,2- propanodiol.

[00146] Igualmente, quando o material de partida é 1,3-propanodiol, então as composições substancialmente não aquosas da invenção podem compreender (ou, particularmente, consistir essencialmente em ou, mais particularmente, consistir em) um ou mais compostos de fórmula III e 1,3- propanodiol.

[00147] Pelo termo “consistir essencialmente em”, entende-se que pelo menos 90% em peso da característica definida está presente, tal como pelo menos 95% em peso, 96% em peso, 97% em peso, 98% em peso ou 99% em peso da característica definida está presente.

[00148] Além disso, composições substancialmente não aquosas

33 / 62 particulares da invenção que podem ser mencionadas incluem aquelas em que a composição compreende (ou, particularmente, consiste essencialmente em ou, mais particularmente, consiste em) um ou mais compostos de fórmula (II) e (III) junto com 1,2-propanodiol e 1,3-propanodiol.

[00149] Composições substancialmente não aquosas particulares da invenção que podem ser mencionadas incluem aquelas em que a composição é substancialmente livre de óxido nítrico dissolvido.

[00150] Pelo termo “substancialmente livre”, entende-se que as composições não aquosas da invenção compreendem menos de 5% em peso, 4% em peso, 3% em peso, 2% em peso ou 1% em peso de óxido nítrico dissolvido, tal como menos de 0,5% em peso ou 0,1% em peso.

[00151] Além disso, composições substancialmente não aquosas particulares da invenção podem compreender: (a) um ou mais compostos de fórmula IV R4

O

O R5 (IV) em que R4 e R5 cada um independentemente representa H ou - NO, desde que pelo menos um dentre R4 e R5 represente -NO; e (b) 1,2-propanodiol.

[00152] Os compostos da invenção e composições substancialmente não aquosas da invenção são úteis como produtos farmacêuticos. Tais compostos podem ser administrados sozinhos ou podem ser administrados através de composições/formulações farmacêuticas conhecidas.

[00153] Consequentemente, em um quarto aspecto, é fornecida uma formulação farmacêutica que compreende uma composição substancialmente não aquosa da invenção e, opcionalmente, um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis, cujas formulações podem ser doravante denominadas “formulações farmacêuticas da invenção”.

34 / 62

[00154] O versado compreenderá que as referências feitas neste documento às formulações farmacêuticas da invenção incluirão referências a todas as modalidades e formas particulares das mesmas.

[00155] Conforme usado no presente documento, o termo excipientes farmaceuticamente aceitáveis inclui referências aos veículos, adjuvantes, carreadores, diluentes, agentes de ajuste de pH e de tampão, agentes de ajuste de tonicidade, estabilizadores, agentes umectantes e semelhantes. Em particular, tais excipientes podem incluir adjuvantes, diluentes ou carreadores.

[00156] As formulações farmacêuticas particulares da invenção que podem ser mencionadas incluem aquelas em que a formulação farmacêutica compreende pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável.

[00157] As formulações farmacêuticas particulares da invenção que podem ser mencionadas incluem aquelas em que um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis são substancialmente não aquosos.

[00158] Para evitar dúvidas, as referências feitas neste documento a compostos da invenção que são para usos particulares (e, similarmente, para usos e métodos de uso relacionados a compostos da invenção) também podem se aplicar a composições e formulações farmacêuticas que compreendem compostos da invenção, conforme descrito neste documento.

[00159] Foi surpreendentemente constatado que os compostos da invenção podem ser administrados a um paciente (isto é, um sujeito) em conjunto com um tampão aquoso adequado. Em particular, constatou-se inesperadamente que os compostos da invenção são adequadamente estáveis (por exemplo, existindo sem degradação significativa durante pelo menos 15 minutos) em tampões aquosos, mais particularmente em que o tampão aquoso é não nucleofílico e fracamente básico.

[00160] De acordo com um quinto aspecto da invenção, é fornecido um kit de partes que compreende: (A) uma formulação farmacêutica da invenção (isto é, no

35 / 62 quarto aspecto da invenção, incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas); e (B) um tampão aquoso adequado, em que os componentes (A) e (B) são fornecidos em uma forma adequada para administração um com o outro, cujos kits de partes são doravante referidos como “kits de partes da invenção”.

[00161] As modalidades particulares que podem ser mencionadas incluem aquelas em que o tampão é não nucleofílico e fracamente básico.

[00162] As modalidades mais específicas que podem ser mencionadas incluem aquelas em que o tampão tem um pH de cerca de 7,1 a cerca de 10 (por exemplo, cerca de 8 ou cerca de 9,2), tal como um tampão de carbonato (por exemplo, NaHCO3, que pode estar a um pH de cerca de 7,4 ou cerca de 8,0) ou um tampão de fosfato fisiológico (opcionalmente a um pH de 8), ou uma mistura dos mesmos. A solução salina fisiológica também pode ser usada como um tampão.

[00163] Em particular, o tampão pode ser um tampão conforme usado no Exemplo 5, conforme descrito abaixo neste documento, tal como um tampão carbonato com pH 9,2 ou um tampão fosfato com pH 8,0 (por exemplo, um tampão 0,154 molar), ou um tampão NaHCO3 com pH 8,0.

[00164] De acordo com um sexto aspecto da invenção, é fornecido um produto de combinação formado misturando: (A) uma formulação farmacêutica da invenção (isto é, no quarto aspecto da invenção, incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas); e (B) um tampão aquoso adequado conforme definido no quinto aspecto da invenção (incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas), cujo produto de combinação é referido a seguir como “o

36 / 62 produto de combinação da invenção”.

[00165] De acordo com um sétimo aspecto da invenção, é fornecido um processo para preparar um produto de combinação da invenção (isto é, no sexto aspecto da invenção, incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas), que compreende a etapa de misturar: (A) uma formulação farmacêutica da invenção (isto é, no quarto aspecto da invenção, incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas); e (B) um tampão aquoso adequado conforme definido no quinto aspecto da invenção (incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas).

[00166] Os kits de partes e produtos de combinação particulares da invenção que podem ser mencionados incluem aqueles em que a razão entre a formulação farmacêutica da invenção e o tampão aquoso adequado é de cerca de 1:2 a 1:99, ou de cerca de 3:7 a 1:99 (por exemplo, cerca de 1:3 a 1:99) em volume.

[00167] Alternativamente, os kits de partes da invenção que podem ser mencionados incluem aqueles em que o kit contém instruções para a mistura dos componentes (por exemplo, antes da administração, tal como usando técnicas conforme descrito neste documento), de modo que a razão entre a formulação farmacêutica da invenção e o tampão aquoso adequado seja de cerca de 3:7 a 1:99 (por exemplo, cerca de 1:3 a 1:99) em volume.

USOS MÉDICOS

[00168] Conforme discutido anteriormente, os compostos da invenção, composições não aquosas da invenção, formulações farmacêuticas da invenção e, portanto, kits de partes e produtos de combinação que compreendem os mesmos, são úteis no tratamento de afecções em que a administração de NO tem um efeito benéfico.

[00169] De acordo com um oitavo aspecto da invenção, é fornecida

37 / 62 uma composição não aquosa conforme definido anteriormente (isto é, no terceiro aspecto da invenção, incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas), uma formulação farmacêutica conforme definido anteriormente (isto é, no quarto aspecto da invenção, incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas), um kit de partes conforme definido anteriormente (isto é, no quinto aspecto da invenção, incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas), ou um produto de combinação conforme definido anteriormente (isto é, no sexto aspecto da invenção, incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas) para uso no tratamento de uma afecção em que a administração de NO tem um efeito benéfico.

[00170] Em um oitavo aspecto alternativo da invenção, é fornecido um método de tratamento de uma afecção em que a administração de NO tem um efeito benéfico que compreende a administração a um paciente em necessidade do mesmo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma formulação farmacêutica da invenção ou um produto de combinação da invenção.

[00171] Em outro oitavo aspecto alternativo da invenção, é fornecido um método de tratamento de uma afecção em que a administração de NO tem um efeito benéfico que compreende a administração a um paciente em necessidade do mesmo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de componentes: (A) uma formulação farmacêutica da invenção (isto é, no quarto aspecto da invenção, incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas); e (B) um tampão aquoso adequado conforme definido no quinto aspecto da invenção (incluindo todas as modalidades e características particulares nas mesmas).

[00172] Métodos particulares que podem ser mencionados incluem

38 / 62 aqueles em que a mistura dos componentes (A) e (B) é realizada imediatamente antes da administração ao paciente, tal como por coadministração dos mesmos.

[00173] Os inventores constataram que a administração dos compostos da invenção pode causar danos às células sanguíneas por meio de hemólise devido ao estresse osmótico e esses efeitos podem ser controlados, ou evitados, pela administração do composto da invenção em um tampão aquoso adequado.

[00174] Métodos mais específicos que podem ser mencionados incluem aqueles em que a mistura é realizada por um processo de fluxo misto, por exemplo, ocorrendo no momento de administração ao paciente. Métodos ainda mais específicos que podem ser mencionados incluem aqueles em que o processo de fluxo misto é a infusão intravenosa com uso de um conector de sítio em Y.

[00175] O versado compreenderá que as referências ao tratamento de uma adecção específica (ou, similarmente, ao tratamento dessa afecção) assumem os seus significados normais no campo da medicina. Em particular, os termos podem se referir ao alcance de uma redução na gravidade de um ou mais sintomas clínicos e/ou sinais associados à afecção. Por exemplo, no caso de embolia pulmonar, o termo pode se referir ao alcance de redução na gravidade da dor no peito, falta de ar e/ou hipertensão pulmonar por meio de vasodilatação.

[00176] Conforme usado neste documento, as referências a pacientes se referirão a um sujeito vivo sendo tratado, incluindo pacientes mamíferos (por exemplo, ser humano). Em particular, o termo paciente pode se referir a um sujeito humano. O termo paciente também pode se referir a animais (por exemplo, mamíferos), tais como animais de estimação (por exemplo, gatos e, em particular, cães), gado e cavalos.

[00177] Conforme usado neste documento, o termo quantidade eficaz

39 / 62 se referirá a uma quantidade de um composto que confere um efeito terapêutico ao paciente tratado. O efeito pode ser objetivo (isto é, mensurável por algum ensaio ou marcador) ou subjetivo (isto é, o sujeito dá uma indicação de e/ou sente um efeito).

[00178] Conforme indicado neste documento, as formulações farmacêuticas da invenção podem ser úteis no tratamento de uma afecção em que a administração de NO tem um efeito benéfico.

[00179] Afecções particulares que podem ser mencionadas incluem aquelas selecionadas a partir do grupo que consiste em: vasoconstrição pulmonar aguda de diferentes gêneses; hipertensão pulmonar de diferentes gêneses, incluindo hipertensão primária e hipertensão secundária; afecções de diferentes gêneses com necessidade de vasodilatação; hipertensão sistêmica de diferentes gêneses; vasoconstrição regional de diferentes gêneses; vasoconstrição local de diferentes gêneses; insuficiência cardíaca aguda (com ou sem fração de ejeção preservada (ICFEP)); doença cardíaca coronária; infarto do miocárdio; doença isquêmica do coração; angina pectoris; angina instável; arritmia cardíaca; hipertensão pulmonar aguda em pacientes de cirurgia cardíaca; acidose; inflamação das vias respiratórias; fibrose cística; DPOC; síndrome dos cílios imóveis; inflamação do pulmão; fibrose pulmonar; síndrome da dificuldade respiratória do adulto; edema agudo de pulmão; doença aguda das montanhas; asma; bronquite; hipóxia de diferentes gêneses; derrame; vasoconstrição cerebral; inflamação do trato gastrointestinal; disfunção gastrointestinal; complicação gastrointestinal; IBD; doença de Crohn; colite ulcerosa; doença hepática; doença do pâncreas; inflamação da bexiga do trato uretral; inflamação da pele; úlceras diabéticas; neuropatia diabética; psoríase; inflamação de diferentes gêneses; cicatrização de feridas; proteção de órgãos em condições de isquemia-reperfusão; transplante de órgão; transplante de tecido; transplante de célula; doença renal aguda; relaxamento do útero; relaxamento do colo do útero; doença do olho,

40 / 62 tal como glaucoma e afecções em que o relaxamento do músculo liso é necessário.

[00180] Afecções mais particulares que podem ser mencionadas são hipertensão pulmonar de diferentes gêneses, incluindo hipertensão primária e hipertensão secundária, insuficiência cardíaca aguda (com ou sem fração de ejeção preservada (HFpEF)). Por exemplo. A afecção pode ser hipertensão pulmonar resultante de cirurgia.

[00181] A hipertensão pulmonar é definida como um aumento na pressão arterial pulmonar média (mPAP) igual ou superior a 20 mmHg em repouso em combinação com um valor de unidades Wood > 3.

[00182] O versado será capaz de determinar como as formulações farmacêuticas, juntamente com tampões adequados, conforme descrito neste documento, podem ser administradas no tratamento. Em particular, tais combinações de formulações farmacêuticas e tampões, conforme descrito neste documento, podem ser administradas por via intravenosa ou intra- arterial.

[00183] O versado será capaz de determinar uma dose adequada de ingredientes ativos a serem usados no tratamento com base na natureza da formulação (por exemplo, a combinação de formulação farmacêutica e tampão adequado conforme descrito neste documento) usada, a afecção a ser tratada e o estado (por exemplo, estado de doença) do paciente. Por exemplo, quando administrada por via intravenosa ou intra-arterial a um adulto humano, uma dose adequada pode ser de cerca de 0,5 a cerca de 3.000 nmol/kg/min, tal como cerca de 1 a cerca de 3.000 nmol/kg/min, por exemplo, de cerca de 5 a cerca de 3.000 nmol/kg/min do composto (ou dos compostos) de fórmula I. Tais doses podem ser administradas por infusão (contínua ou pulsada), tal como infusão durante um período de tempo prolongado (por exemplo, 1 a 2 horas ou mesmo até uma semana), ou podem ser administradas como uma dose única (bolus) (tal como uma dose única ou uma dose única

41 / 62 por intervenção de tratamento, tal como uma dose única conforme necessário, ou uma dose única em cada período de 24 horas durante o tratamento).

[00184] O versado compreenderá que a temperatura na qual as formulações da invenção (isto é, composições farmacêuticas que compreendem compostos de fórmula I) são formadas e/ou administradas no tratamento (isto é, administradas a um sujeito) pode ser a do ambiente em que a administração ocorre (isto é, temperatura ambiente) ou pode ser controlada. Por exemplo, tais formulações podem ser formadas e/ou administradas à temperatura ambiente ou a uma temperatura reduzida (isto é, uma temperatura que está abaixo da temperatura ambiente), tal como de cerca de 0 a cerca de 25 °C.

[00185] Em modalidades particulares, os compostos de fórmula (II) são de particular importância para uso em humanos e os compostos de fórmula (III) são de particular importância para uso em aplicações veterinárias.

[00186] Sem desejar se limitar pela teoria, acredita-se que, após administração a um paciente, os compostos de fórmula I sejam hidrolisados para liberar óxido nítrico, que fornece o efeito terapêutico desejado. Acredita- se que os processos descritos neste documento inesperadamente permitem a preparação de uma composição concentrada e estável adequada que compreende os ingredientes ativos necessários. Além disso, acredita-se que um certo tipo de tampão tenha sido inesperadamente descoberto para permitir a administração segura de tais composições sem degradação significativa do ingrediente ativo (dos ingredientes ativos).

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[00187] Figura 1: Mostra os resultados de uma análise da estabilidade das composições da invenção em várias soluções tampão conforme descrito no Exemplo 5 neste documento.

[00188] Figura 2: Mostra os resultados de um estudo in vivo que compara os efeitos das composições da invenção no tratamento em

42 / 62 comparação ao óxido nítrico inalado, conforme descrito no Exemplo 6 neste documento. Alteração na pressão arterial pulmonar média (MPAP, painel a) e resistência vascular pulmonar (PVR, painel c) e pressão arterial média (MAP, painel b), resistência vascular sistêmica (SVR, painel d) e concentração de metemoglobina em porcos anestesiados e ventilados mecanicamente submetidos a infusão intravenosa de PDNO (15, 30, 45 e 60 nmol kg-1 min-1 em um fluxo carreador de bicarbonato de sódio [50 mg ml-1; a uma taxa de infusão de 10 vezes a taxa de infusão de PDNO]; n = 6) ou inalação de NO (5, 10, 20 e 40 ppm; n = 7) durante a infusão intravenosa do vasoconstritor pulmonar U46619 (60 a 150 ng kg-1 min-1). A dose de NO inalado foi convertida em nmol kg-1 min-1. O eixo x está na escala logarítmica. Os dados são apresentados como mediana e faixa interquartil. * indica um efeito estatisticamente significativo da dose indicada de apenas U46619 em cada fármaco. φ indica uma diferença estatística entre o PDNO a 45 nmol kg-1 min- 1 e o NO inalado a 5 ppm, isto é, uma quantidade comparável de entrega de NO.

[00189] A Figura 3 mostra os resultados do uso de 1,2-PDNO-R, 1,2- PDNO-S e 1,3-PDNO para diminuir a pressão arterial sistêmica e pulmonar média, com o procedimento experimental descrito no Exemplo 13.

EXEMPLOS

[00190] A invenção é ilustrada por meio dos exemplos a seguir, que não se destinam a limitar o escopo geral da invenção.

ABREVIAÇÕES

[00191] aq aquoso conc concentração GC cromatografia gasosa RMN ressonância magnética nuclear equiv. equivalente(s) rel. vol. volume(s) relativo(s)

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PROCEDIMENTOS GERAIS

[00192] Os materiais de partida e os reagentes químicos especificados nas preparações descritas abaixo estão comercialmente disponíveis junto a vários fornecedores, tais como a Sigma Aldrich.

[00193] Todos os experimentos de RMN foram realizados a 298K em um instrumento Bruker 500 MHz AVI equipado com uma sonda-cabeça QNP com gradientes Z com uso do software Bruker Topspin 2.1. Os sinais se referem a CHCl3 residual a 7,27 ppm, a menos que indicado de outra forma.

ENSAIOS DE ESTABILIDADE

[00194] Os ensaios das amostras de estabilidade foram realizados por GC/FID, sob as condições a seguir. 1,4-dioxano foi usado como Padrão Interno (IS; aproximadamente 0,50 mg/ml em CH3CN).

[00195] Coluna de GC: Rxi-5Sil MS, 20 m × 0,18 mm, 0,72 µm Gás carreador: Hélio Entrada: 200 °C, razão de divisão 30:1 Fluxo constante: 1,0 ml/min Perfil de temperatura do forno: 40 °C (3 min), 10 °C/min, 250 °C (3 min) FID: temp 300 °C; H2 fluxo de 30 ml/min, Fluxo de ar: 400 ml/min, fluxo auxiliar (N2) 25 ml/min

ESTUDOS IN VIVO

[00196] Antes do experimento, a aprovação ética foi recebida do comitê regional de ética animal de Linköping (Linköping, Suécia; número de aprovação 953). O manejo anestésico, a instrumentação cirúrgica e os métodos de medição foram descritos recentemente (Dogan et al. 2018, Sadeghi et al. 2018).

[00197] Em resumo, 8 porcos machos e fêmeas (um cruzamento entre as raças Swedish country, Hampshire e Yorkshire; de 3 a 4 meses de idade; peso corporal médio de 27 kg, faixa de 21 a 34 kg) foram pré-medicados com

44 / 62 azaperona na fazenda e transportados para o laboratório. No laboratório, a anestesia foi induzida com uma mistura de tiletamina, zolazepam e azaperona (injeção intramuscular). O propofol foi administrado por um cateter venoso periférico em uma veia da orelha, se necessário. Doses em bolus de atropina e cefuroxima foram administradas por via intravenosa. Os animais foram intubados por via endotraqueal e ventilados mecanicamente (5 cm H2O em pressão expiratória final positiva, ventilação por minuto ajustada para normoventilação). A anestesia geral foi mantida com propofol e fentanila por meio de infusões intravenosas contínuas e doses adicionais em bolus foram administradas, se necessário. As soluções de acetato de Ringer e glicose foram administradas continuamente por via intravenosa para substituir a perda de fluido. A heparina foi administrada em bolus intravenoso após a instrumentação cirúrgica. Após os experimentos, os animais foram exterminados com anestesia geral com injeção de propofol seguida de injeção intravenosa rápida de cloreto de potássio (40 mmol), e a assistolia foi confirmada.

[00198] Os animais foram instrumentados com um cateter arterial na artéria carótida direita para medição da pressão arterial sistêmica e frequência cardíaca, e para amostragem de sangue arterial. Uma bainha foi colocada na veia jugular externa direita para introdução de um cateter arterial pulmonar. Este cateter foi usado para medição contínua da pressão arterial pulmonar, débito cardíaco semicontínuo e pressão pulmonar em cunha intermitente. Um cateter venoso central foi inserido na veia jugular externa esquerda para administração de fármacos e fluidos. Todas as administrações de fluidos e fármacos foram feitas por seringa motorizada ou bombas de gotejamento. A bexiga urinária foi cateterizada. Gases, pressões e volumes respiratórios foram medidos no tubo endotraqueal. As variáveis respiratórias e hemodinâmicas foram medidas por um Datex AS/3 (Helsinki, Finlândia) e os dados foram coletados por um sistema informatizado (MP150/Acknowledge

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3.9.1, sistemas BIOPAC, Goleta, CA, EUA). Os gases sanguíneos e a concentração de metemoglobina foram medidos por uma máquina de gases sanguíneos (GEM 4000, Instrumental Laboratory, Lexington, Massachusetts, EUA). As resistências pulmonar e vascular sistêmica foram calculadas com fórmula padrão. Após a instrumentação cirúrgica, seguiu-se um período de 1 hora sem intervenção.

[00199] Os dados foram apresentados como mediana e faixa interquartil devido à distribuição não normal. A dose ppm de NO inalado foi convertida em dose em nmol kg-1 min-1 com uso da lei dos gases ideais e ventilação por minuto, e assumindo a absorção total de NO no pulmão. Os dados do fármaco foram analisados com o teste de Friedman com o teste de classificação sinalizada de Wilcoxon para comparações múltiplas post-hoc. Os testes Mann Whitney U foram usados para comparar os fármacos na dose máxima e na dose de entrega de NO semelhante (45 nmol kg-1 min-1 de PDNO e 5 ppm de NO inalado). Um valor P crítico de 0,05 foi usado e ajustado pelo procedimento step-up de Benjamini-Hochberg em comparações múltiplas. EXEMPLO 1 - PREPARAÇÃO DE 1-(NITROSO-OXI)-PROPAN-2-OL, 2- (NITROSO-OXI)-PROPAN-1-OL E 1,2-BIS(NITROSO-OXI)PROPANO

COM NITRITO DE SÓDIO

[00200] 1,2-propanodiol (15 ml, 205 mmol), água (100 ml), diclorometano (200 ml) e nitrito de sódio (57 g, 826 mmol) foram adicionados a um frasco de fundo redondo de três gargalos de 500 ml. A mistura foi resfriada até 0 °C com um banho de gelo. Ácido sulfúrico concentrado (30 ml, 546 mmol) e água (30 ml) foram adicionados a um funil de gotejamento e resfriados a 5 °C em um refrigerador. O funil foi adaptado ao frasco de fundo redondo e o ácido adicionado à mistura de nitrito durante duas horas. A mistura foi agitada com um ímã por 20 minutos e então vertida em um funil de separação junto com mais diclorometano (100 ml) e água (100

46 / 62 ml). A fase orgânica foi separada e seca com sulfato de sódio e reduzida em um rotavapor para produzir uma mistura de 1,2-propanodiol (3% em peso), 1- (nitroso-oxi)-propan-2-ol (23% em peso) 2-(nitroso-oxi)-propan-1-ol (13% em peso) e 1,2-bis(nitroso-oxi)propano (57% em peso). EXEMPLO 2 - PREPARAÇÃO DE 1-(NITROSO-OXI)-PROPAN-2-OL, 2- (NITROSO-OXI)-PROPAN-1-OL E 1,2-BIS(NITROSO-OXI)PROPANO

COM NITRITO DE SÓDIO

[00201] 1,2-propandiol (20 ml, 273,4 mmol), água (60 ml), diclorometano (120 ml) e nitrito de sódio (37,72 g, 546,7 mmol) foram adicionados a um reator de 0,5 equipado com um agitador e enxaguado com nitrogênio e mantido durante o curso da seguinte reação sob nitrogênio. A mistura foi resfriada abaixo de 5 °C por resfriamento do manto a 0 °C. Ácido sulfúrico concentrado (26,3 g, 260,1 mmol) e água foram adicionados a um funil de gotejamento. O funil foi anexado (ao reator e o ácido foi adicionado à mistura de nitrito durante 33 minutos. A mistura foi agitada durante 54 minutos e depois vertida em um frasco contendo uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (100 ml). A mistura foi transferida para um funil de separação e a fase orgânica foi lavada. A fase aquosa foi descartada e a fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio adicional (100 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de magnésio e depois transferida para um frasco de fundo redondo de 1 l juntamente com 1,2- propandiol (120 ml, 1640 mmol). A solução foi reduzida em um rotavapor sob pressão reduzida até o diclorometano ser removido. A remoção de diclorometano foi monitorada por RMN. Foi obtida uma solução límpida (134 g) que contém 1,2-propandiol (82,8% em peso), 1-(nitroso-oxi)-propan-2-ol (10,4% em peso), 2-nitroso-oxi)-propan-1-ol (6% em peso) e 1,2-bis(nitroso- oxi)propano (0,8% em peso). 1

[00202] H-RMN, δ ppm: 5,61 (br s 1H), 4,75-5,58 (m, 2H), 4,11 (br s, 1H), 3,90-3,87 (m, 1H), 3,83-3,69 (m, 2H), 3,60 (dd, J = 3,0, 11,2 Hz, 1H),

47 / 62 3,38 (dd, J = 7,9, 11,2 Hz, 1H), 1,47 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,39 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,26 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,15 (d, J = 6,3 Hz, 3H), sinais para CH e CH2 do 1,2-bis(nitroso-oxi)propano estavam abaixo do limite de detecção. EXEMPLO 3 - PREPARAÇÃO DE 1-(NITROSO-OXI)-PROPAN-2-OL, 2- (NITROSO-OXI)-PROPAN-1-OL E 1,2-BIS(NITROSO-OXI)PROPANO COM NITRITO DE TERC-BUTILA

[00203] Nitrito de terc-butila (2 ml, 15,1 mmol) foi adicionado a um frasco de fundo redondo com 1,2-propanodiol (11 ml, 150,3 mmol) e a solução obtida foi agitada à temperatura ambiente. 1 ml da solução de reação foi então misturada com 7,5 ml de 1,2-propanodiol. EXEMPLO 4 - ESTABILIDADE DE MISTURAS NÃO AQUOSAS DE 1- (NITROSO-OXI)-PROPAN-2-OL, 2-(NITROSO-OXI)-PROPAN-1-OL E 1,2-PROPANODIOL

[00204] Três concentrações diferentes de 1-(nitroso-oxi)-propan-2-ol e 2-(nitroso-oxi)-propan-1-ol em 1,2-propanodiol foram preparadas e armazenadas em um refrigerador (5 °C) e congelador (- 20 °C). Alíquotas de cada solução foram retiradas periodicamente e analisadas por GC para determinar a concentração de 1-(nitroso-oxi)-propan-2-ol e 2-(nitroso- oxi)-propan-1-ol.

[00205] Os resultados da análise de GC são mostrados na tabela abaixo (coluna: Rxi-5Sil MS, 20 m x 0,18 mm, espessura do filme de 0,36; carreador: He; Entrada: 250 °C, razão de divisão 100:1; fluxo constante: 1,0 ml/min; perfil de temperatura do forno: 40 °C (3 min), 10 °C/min, 80 °C (0 min), 30 °C/min, 250 °C (3 min); FID: 300 °C, fluxo de H2 30 ml/min, fluxo de ar 400 ml/min, fluxo auxiliar (N2) 25 ml/min; padrão interno: 1,1,1,3,5,5,5- heptametil trisiloxano):

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[00206] Nota: nenhum aumento de pressão foi observado para nenhuma das amostras. EXEMPLO 5 - ESTABILIDADE DE SOLUÇÕES AQUOSAS TAMPONADAS DE 1-(NITROSO-OXI)-PROPAN-2-OL E 2-(NITROSO- OXI)-PROPAN-1-OL (PDNO) E 1,2-PROPANODIOL (PD)

[00207] 100 µl da amostra de estabilidade foram adicionados a um frasco de GC. 400 µl de uma solução PD/Tampão (1:9) e 400 µl de CH3CN foram adicionados. Em seguida, foram adicionados 500 µl de CH2Cl2 e a

49 / 62 mistura extraída por agitação suave durante 1 min. 500 µl da fase orgânica (fase inferior) foram transferidos para outro frasco de GC e 50 µl de IS adicionados. O extrato foi analisado por GC/FID de acordo com as condições acima.

[00208] Curvas de calibração para 1-nitrito e 2-nitrito, respectivamente, foram construídas. A razão da área do pico (Nitrito/IS) vs. quantidade de nitrito foi traçada. Soluções de estoque de PDNO/PD em alta concentração foram usadas para a preparação dos padrões. Foram calculadas as concentrações de nitritos em % em p/p.

[00209] Os resultados obtidos são apresentados na tabela abaixo e na Figura 1.

*Com base em valores conhecidos.

EXEMPLO 6 - ESTUDOS IN VIVO

[00210] Após a coleta de dados de linha de base, hipertensão pulmonar estável foi induzida por infusão intravenosa contínua do tromboxano A2- mimético 9,11-didesoxi-9α, 11α-metanoepoxi PGF2α (U46619, Cayman Chemical, Michigan, EUA; fornecido em acetato de metila e diluído em NaCl 0,9% para uma concentração final de 30 µg ml-1; 60 a 150 ng kg-1 min-1 para uma pressão arterial pulmonar média alvo de 35 a 45 mmHg). Depois disso, uma infusão intravenosa contínua de PDNO em doses crescentes (15, 30, 45 e 60 nmol kg-1 min-1) em um fluxo carreador de uma solução de bicarbonato de sódio (50 mg ml-1; pH aproximadamente 8; Fresenius Kabi, Uppsala, Suécia; taxa de infusão 10 vezes a taxa de infusão de PDNO) ou inalação de NO (5, 10, 20 e 40 ppm; entregue no membro inspiratório de um ventilador Servo

50 / 62 300 com uma unidade de dosagem de NO inalado [Siemens-Elema, Estocolmo, Suécia] de um tanque de 1.000 ppm em nitrogênio) em um projeto cruzado não randomizado com um período de suspensão de 30 minutos entre os fármacos. A dosagem correta de NO inalado foi verificada com um analisador de NO. Cada dose foi administrada por 5 a 10 min. Os dados hemodinâmicos e respiratórios foram extraídos e o sangue arterial foi amostrado, no último minuto de cada dose.

[00211] A infusão intravenosa de U46619 induziu hipertensão pulmonar estável com pressão arterial pulmonar média de 43 (37 a 48) mmHg e 43 (41 a 46) mmHg, e resistência vascular pulmonar de 8,3 (6,7 a 11,7) mmHg min l-1 e 9,8 (7,7 a 12,5) mmHg min l-1, antes da inalação de NO e infusão de PDNO, respectivamente. Tanto o NO inalado quanto o PDNO infundido por via intravenosa reduziram significativamente a pressão arterial pulmonar e a resistência vascular, mas o PDNO diminuiu a pressão arterial pulmonar média de forma mais eficiente (inclinação mais acentuada) do que o NO inalado, e o PDNO diminuiu a resistência vascular pulmonar significativamente mais em comparação com o NO inalado em uma dosagem comparável (conforme mostrado na Figura 2). Nenhum fármaco afetou significativamente a pressão arterial média e a resistência vascular sistêmica, mas a resistência vascular sistêmica foi ligeiramente menor no grupo PDNO em comparação com o grupo NO inalado em uma dose comparável (Figura 2). Ambos os fármacos diminuíram significativamente a razão entre as resistências vasculares pulmonares e sistêmicas e, nas doses mais altas, essa razão foi ligeiramente menor no grupo de NO inalado em comparação com o grupo de PDNO (dados não mostrados). O débito cardíaco diminuiu ligeiramente por U46619, mas nenhum fármaco alterou significativamente o débito cardíaco (dados não mostrados). Nenhum fármaco afetou significativamente a concentração de metemoglobina, mas houve tendência de aumento no grupo de NO inalado e parecia que a concentração de

51 / 62 metemoglobina estava associada à dose de NO entregue (Figura 2). A pressão arterial parcial de oxigênio foi ligeiramente diminuída por U46619, e ambos os fármacos aumentaram essa variável para o normal (dados não mostrados). EXEMPLO 7 - PREPARAÇÃO SEM SOLVENTE DE 1-(NITROSO-OXI)- PROPAN-2-OL, 2-(NITROSO-OXI)-PROPAN-1-OL E 1,2-BIS(NITROSO- OXI)PROPANO COM NITRITO DE SÓDIO

[00212] Água (30 ml) e nitrito de sódio (19,01 g, 272,8 mmol) foram adicionados a um frasco de fundo redondo de três gargalos de 100 ml, enxaguados com nitrogênio e resfriados a 1 °C em um banho de água resfriado com um resfriador externo. Foi adicionado 1,2-propanodiol (10 ml, 136,7 mmol). Ácido sulfúrico concentrado (7 ml, 127,4 mmol) e água (20 ml) foram pré-resfriados à temperatura ambiente e adicionados gota a gota durante uma hora por meio de um funil de gotejamento. Durante a adição, a camada de água formou uma pasta fluida espessa e uma segunda camada verde foi formada. Antes de se completar a adição de ácido (5 ml remanescentes) o frasco foi removido do banho de resfriamento e a camada verde foi decantada para um funil de separação e lavada 2 x com uma solução saturada aquosa de NaHCO3. A camada verde desbotou para amarelo e após a separação foi seca sobre Na2SO4 e filtrada através de um filtro de seringa (Acrodisc® 13 mm, 0,45 µM SUPOR®) para render 1,1 g de mistura de aproximadamente 0,25/0,1/1 de 1-(nitroso-oxi)-propan-2-ol/2-(nitroso-oxi)- propan-1-ol/1,2-bis(nitroso-oxi)propano. Nenhum material de partida 1,2- propanodiol pôde ser detectado dentro dos limites de sensibilidade de RMN. 1

[00213] H-RMN, δ ppm: 5,81-5,76 (m, br, 1,0 H), 5,63 (br, 0,1 H), 4,93 (br, 2,08 H), 4,73-4,65 (br, m, 0,47 H), 4,14 (br, 0,19 H), 3,84-3,77 (br, m, 0,22 H), 1,49 - 1,48 (br, m, 3,21 H), 1,43 (br, 0,51 H), 1,28 (br, 0,72 H). EXEMPLO 8 - PREPARAÇÃO DE (2S)-1-(NITROSO-OXI)-PROPAN-2- OL, (2S)-2-(NITROSO-OXI)-PROPAN-2-OL E (2S)-1,2-BIS(NITROSO- OXI)PROPANO

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[00214] (S)-1,2-propanodiol (5 ml, 66,97 mmol), água (15 ml), diclorometano (30 ml) e nitrito de sódio (9,34 g, 134 mmol) foram adicionados a um frasco de fundo redondo de três gargalos de 100 ml, enxaguados com nitrogênio e resfriados a 1 °C em um banho de água resfriado com um resfriador externo. Ácido sulfúrico concentrado (3,5 ml, 63,69 mmol) e água (10 ml) foram pré-resfriados à temperatura ambiente e adicionados gota a gota por meio de uma bomba de seringa durante 1h. Após a adição, a mistura foi agitada durante 60 minutos adicionais. Após a separação das duas camadas, a camada de DCM foi diluída com DCM adicional (15 ml) e lavada com NaHCO3 sat. aq. (15 ml), seguido por salmoura (15 ml), depois seca sobre Na2SO4, filtrada em um filtro de vidro sinterizado e reduzida in vacuo. O resíduo foi retomado novamente em 30 ml de DCM, lavado com 1,4% em p/p de solução aq. de bicarbonato, e depois seco sobre Na2SO4, filtrado sobre um filtro de vidro sinterizado e reduzido in vacuo para gerar 1 g de mistura de produtos. A mistura de consistia em (2S)- 1,2-propanodiol (3%), (2S)-1-(nitroso-oxi)-propan-2-ol (23%), (2S)-2- (nitroso-oxi)-propano-1-ol (14%) e (2S)-1,2-bis(nitroso-oxi)propano (60%) com base em RMN. 1

[00215] H-RMN, δ ppm: 5,83-5,74 (m, 1,0 H), 5,66-5,57 (br, 0,22 H), 4,99-4,85 (br, 1,98 H), 4,76-4,59 (br, 0,77 H), 4,17- 4,07 (br, 0,38 H), 3,86- 3,73 (br, 0,40 H), 1,8-1,6 (br, 0,97 H), 1,48 (d, J = 6,7 Hz, 3,12 H), 1,40 (d, J = 6,6 Hz, 0,63 H), 1,28 (d, J = 6,5 Hz, 1,15 H). EXEMPLO 9 - PREPARAÇÃO DE (2R)-1-(NITROSO-OXI)-PROPAN-2- OL, (2R)-2-(NITROSO-OXI)-PROPAN-2-OL E (2R)-1,2-BIS(NITROSO- OXI)PROPANO

[00216] (R)-1,2-propanodiol (5 ml, 66,97 mmol), água (15 ml), diclorometano (30 ml) e nitrito de sódio (9,34 g, 134 mmol) foram adicionados a um frasco de fundo redondo de três gargalos de 100 ml, enxaguado com nitrogênio e resfriado a 1 °C em um banho de água resfriado

53 / 62 com um resfriador externo. Ácido sulfúrico concentrado (3,5 ml, 63,69 mmol) e água (10 ml) foram pré-resfriados à temperatura ambiente e adicionados gota a gota por meio de uma bomba de seringa durante 1h. Após a adição, a mistura foi agitada durante 55 minutos adicionais. Após a separação das duas camadas, a camada de DCM foi diluída com DCM adicional (10 ml) e lavada com NaHCO3 aquoso saturado (20 ml), em seguida, seca sobre Na2SO4, filtrada em um filtro de vidro sinterizado e reduzida in vacuo. A mistura consistia em (2R)-1,2-propanodiol (17%), (2R)-1-(nitroso-oxi)-propan-2-ol (16%), (2R)-2-(nitroso-oxi)-propano-1-ol (7%) e (2R)-1,2-bis(nitroso-oxi) propano (59%) com base em RMN. 1

[00217] H-RMN, δ ppm: 5,83-5,74 (m, 1,0 H), 5,66-5,57 (br, 0,12 H), 4,99-4,85 (br, 2,10 H), 4,76-4,59 (br, 0,53 H), 4,17- 4,07 (br, 0,24 H), 3,86- 3,73 (br, 0,28 H), 2,4-2,1 (br, 0,38 H), 1,48 (d, J = 6,8 Hz, 3,20 H), 1,40 (br, 0,56 H), 1,28 (br (d), 0,88 H). EXEMPLO 10 - PREPARAÇÃO DE 1-(NITROSO-OXI)PROPAN-3-OL E 1,3-BIS(NITROSO-OXI)PROPANO

[00218] 1,3-propanodiol (2,5 g, 32,86 mmol), água (7 ml), diclorometano (15 ml) e nitrito de sódio (4,53 g, 65,7 mmol) foram adicionados a um frasco de fundo redondo de 100 ml, enxaguado com nitrogênio e resfriado a 0 °C por 15 min em banho de água resfriado com resfriador externo. Ácido sulfúrico concentrado (1,7 ml, 31,2 mmol) e água (5 ml) foram pré-resfriados à temperatura ambiente e adicionados gota a gota durante 5 minutos. Após a adição, a mistura foi agitada durante 60 minutos adicionais a 0 °C. As duas camadas foram então separadas, e a fase orgânica foi diluída com DCM adicional (10 ml), lavada com solução aquosa saturada de NaHCO3 (2X 25 ml), seca sobre MgSO4, filtrada sobre um filtro de vidro sinterizado. Finalmente, 1,3-propanodiol (16,4 g 216 mmol) foi adicionado à fase orgânica seguido pela remoção de DCM in vacuo. Com base em RMN, a mistura (18,1 g) continha 1,3-propandiol (86,9% em peso), 1-(nitroso-oxi)-

54 / 62 propan-3-ol (11,8% em peso) e 1,3-bis(nitroso-oxi)propano (1,3% em peso).

[00219] 1H-RMN, δ 4,76-4,88 (m, 2H), 3,83 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 3,73 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 2,79 (s, 1H), 2,18 (quinteto, J = 6,3 Hz, 2H), 1,99 (quinteto, J = 6,2 Hz, 2H), 1,80 (quinteto, J = 5,7 Hz, 2H). EXEMPLO 11 - PROCESSO AMPLIADO PARA A PREPARAÇÃO DE 1- (NITROSO-OXI)-PROPAN-2-OL, 2-(NITROSO-OXI)-PROPAN-1-OL E 1,2-BIS(NITROSO-OXI)PROPANO COM NITRITO DE SÓDIO

11.1 PRODUTOS QUÍMICOS USADOS

[00220] Os materiais de partida foram adquiridos da lista de fornecedores na tabela abaixo. A menos que indicado em contrário, os produtos químicos foram usados como recebidos sem purificação adicional. Lista de produtos químicos e Grau Fornecedor solventes usados Produto Químico/Solvente 1,2-Propanodiol EMPROVE® ESSENTIAL Ph. Merck Eur. ou BP ou USP, ≥99% Nitrito de sódio Está em conformidade com ACS, VWR, Acros USP ou Ph atual. Eur., ≥ 97% Ácido sulfúrico ≥95,0, conforme ACS, USP ou VWR, Acros Ph atual. Eur. TBME Está em conformidade com ACS, VWR, Acros USP ou Ph Eur. atual, ≥ 99% Bicarbonato de Sódio Está em conformidade com ACS, VWR, Acros USP ou Ph Eur. atual. Sulfato de magnésio USP, seco VWR, Acros Argônio 4,8 ou superior Linde AG, Westfalen AG

11.2 PROCEDIMENTO GERAL PARA A SÍNTESE DE PDNO COM USO DE DCM COMO SOLVENTE (PROCESSO DE ORIGEM)

[00221] Um frasco de fundo redondo foi equipado com um agitador e funil de gotejamento. Água (3,0 veq.) foi adicionada e nitrito de sódio (2,0 eq.) foi carregado para o frasco. A solução foi resfriada (0 °C) e PD (1,0 eq.) e DCM (6 veq.) também foram adicionados. Durante o resfriamento adicional, uma solução de ácido sulfúrico (1,0 eq. H2SO4, 2,0 veq. água) foi preparada. A solução de ácido sulfúrico foi ainda adicionada gota a gota à mistura de reação enquanto se mantinha a mistura de reação entre 0 °C e 5 °C. Após adição completa do ácido, a solução foi ainda agitada durante 1 h para completar a reação.

55 / 62

[00222] Em seguida, a reação foi arrefecida com solução de NaHCO3 saturado (6.0 rel. vol.). As fases foram separadas e a camada orgânica foi ainda lavada com solução de NaHCO3 (6.0 rel. vol.). A fase orgânica foi seca sobre MgSO 4, filtrada, diluída com PD e concentrada sob pressão reduzida com uso de um evaporador rotativo (temperatura do banho de água 40 °C).

[00223] O produto foi obtido como um líquido ligeiramente amarelado.

11.3 SÍNTESE GERAL DE PDNO COM USO DE TBME COMO

SOLVENTE

[00224] Um frasco de fundo redondo foi equipado com agitador e funil de gotejamento. Argônio foi liberado por vários minutos. Uma solução diluída de ácido sulfúrico (1,0 eq. H2SO4, 2.0 rel. vol. água) foi preparado antecipadamente e pré-resfriado (-30 °C). Água foi adicionada ao frasco (3,0 rel. vol.). Nitrito de sódio (2,0 equiv.) foi adicionado à água. TBME (7,5 rel. vol.) foi adicionado. Propanodiol (1,0 equiv) foi adicionado e a mistura de reação foi resfriada (-20 °C) exaguando constantemente com argônio. A mistura de reação foi bem agitada enquanto se adicionava gota a gota o ácido sulfúrico pré-resfriado. A temperatura da reação foi monitorada durante toda a adição do ácido. Após a adição, a mistura de reação foi ainda agitada (30 a 60 min) à temperatura fria (-20 °C). Em seguida, a mistura de reação foi deixada aquecer (-5 °C). A reação foi interrompida arrefecendo bruscamente com solução de NaHCO3 saturado (6.0 rel. vol.). As fases foram separadas. A camada orgânica foi ainda lavada com solução de NaHCO3 saturado até um valor de pH de 7 a 8 ser obtido. A fase orgânica foi então seca sobre MgSO 4. A solução bruta de PDNO foi diluída com PD (3 rel. vol.) e posteriormente concentrada sob pressão reduzida à temperatura ambiente (25 °C).

[00225] A solução bruta de PDNO foi ainda purificada com uso de um aparelho de evaporação de tubo vertical.

[00226] PDNO foi obtido como um líquido ligeiramente amarelado.

11.4 SÍNTESE DETALHADA DE PDNO COM USO DE TBME COMO

56 / 62

SOLVENTE

[00227] O processo foi projetado para produzir aprox. 7,5 l de solução de PDNO a 7% com uma síntese (uma “execução”). A síntese foi realizada várias vezes, para resultar no tamanho de lote desejado. A análise de GC foi usada em cada execução única para determinação de pureza. As execuções que estão dentro das especificações para os compostos orgânicos relacionados podem ser combinadas para produzir um lote. Todo o lote de PDNO bruto foi então purificado. Após a purificação, a solução de PDNO forte foi então diluída com PD para produzir a concentração desejada (geralmente solução de PDNO a 7%).

[00228] Um reator de parede dupla adequado (60 l) foi equipado com “agitador de copo” específico, funil de gotejamento e anexo para argônio. O reator foi enxaguado por 5 min a 10 min com uma corrente de argônio constante. Água (3,0 l) foi adicionada ao reator. Nitrito de sódio (2,0 equiv., 1886 g) foi adicionado através do reator. A reação foi ainda agitada até que todo o sal fosse dissolvido. 1,2-propanodiol (1,0 equiv., 1040 g, 1l) foi adicionado, seguido por éter terc-butilmetílico (7,5 rel. Vol., 7,5 l). A mistura de reação foi então resfriada por agitação contínua e fluxo de argônio a uma temperatura de reação interna de -20 °C. Enquanto isso, ácido sulfúrico (1,0 equiv., 1340 g, 728 ml) foi diluído com água (2,0 l) e resfriado a -30 °C. Depois de atingir uma temperatura de reação interna de -20 °C, o ácido diluído foi adicionado gota a gota à mistura de reação com agitação vigorosa.

[00229] A velocidade de agitação foi variada durante a adição do ácido. Começando com aprox. 350 rpm até uma velocidade de agitação mais lenta no final da reação (aprox. 180 rpm). Esta variação da velocidade de agitação é devido ao sistema de reação de duas fases e à lenta precipitação do sulfato de sódio pelo progresso posterior da reação (devido à adição de mais e mais ácido sulfúrico).

[00230] Durante toda a adição do ácido sulfúrico, a temperatura da

57 / 62 reação foi monitorada. A temperatura idealmente deve estar na faixa de (-20 ± 3) °C. Além disso, a reação foi agitada durante 30 a 60 min a (-20 ± 3) °C.

[00231] A reação foi deixada aquecer até -5 °C até 0 °C. A reação foi interrompida pela adição de solução de NaHCO3 saturado (6,0 rel. vol. 6,0 l) seguido pela adição de água (10 l). As fases foram separadas e a camada orgânica foi transferida para um reator de parede dupla separado e resfriada a 0 °C até -5 °C. A camada orgânica foi lavada várias vezes (aproximadamente 2 a 3 vezes) com solução de NaHCO3 saturado (4,0 rel. vol., 4,0 l). O valor de pH da fase aquosa foi monitorado após cada etapa de lavagem. O valor do pH era cerca de 7 a 8. As fases da água foram descartadas. A camada orgânica foi seca sobre MgSO4 e filtrada sobre um papel de filtro Whatman.

[00232] O PDNO bruto (solução em TBME) foi diluído pela adição de mais PD (3,0 rel. Vol., 3,0 l). Este PDNO bruto foi transferido para um evaporador rotativo e concentrado sob pressão reduzida. A temperatura do banho de água durante a evaporação foi mantida a uma temperatura máxima de 25 °C. A evaporação da quantidade principal de TBME foi removida em uma faixa de tempo entre 1,5 h e 2,0 h.

[00233] A evaporação dos solventes orgânicos poderia, então, ser continuada em uma temperatura de banho de água em (0 ± 2) °C por várias horas com uso de uma bomba de alto vácuo (durante o desenvolvimento, a pureza de PDNO foi monitorada nessas condições, e durante um período de 6 h a pureza do produto não foi afetada).

11.5 PURIFICAÇÃO ADICIONAL DA SOLUÇÃO BRUTA DE PDNO

[00234] A purificação final da solução de PDNO foi feita por evaporação em tubo vertical. A solução de PDNO foi destilada sob alto vácuo com um fino vapor contínuo de PDNO a 0 °C. O tanque de armazenamento para a solução “bruta” de PDNO foi resfriado a 0 °C. Toda a destilação foi realizada a 0 °C. O tanque de armazenamento para o PDNO “purificado” também foi resfriado a -10 °C até 0 °C. Após cada execução da evaporação de

58 / 62 todo o PDNO em lote, o solvente orgânico residual (TBME) pode ser verificado por meio de GC. Esta evaporação foi continuada até que o limite desejado para os solventes residuais fosse alcançado. No caso do PDNO, o limite para o solvente residual é de 1.000 ppm.

11.6 PREPARAÇÃO DA DILUIÇÃO FINAL

[00235] Após a purificação, o PDNO foi ainda diluído para atingir a concentração favorecida. A primeira etapa foi filtrar a solução de PDNO em uma ampola de vidro limpo por meio do filtro Whatman. Além disso, o ensaio da solução de PDNO foi determinado por meio de q-RMN. A quantidade de PD para diluição pode ser calculada. O PD foi filtrado primeiro em um filtro Whatman. A diluição final pode ser feita à temperatura ambiente. A quantidade calculada de PD foi adicionada à solução de PDNO (ou vice- versa). A mistura resultante foi agitada durante vários minutos para obter uma solução homogênea. A solução final de PDNO foi colocada nas ampolas do produto.

[00236] PDNO (7,5 kg; solução a 7%) foi produzido como um líquido ligeiramente amarelado. EXEMPLO 12 - EFEITOS HEMODINÂMICOS DE PDNO INTRAVENOSO: INFLUÊNCIA DE VÁRIAS SOLUÇÕES

CARREADORAS EM PORCOS ANESTESIADOS

[00237] Foi estudada a influência de várias soluções carreadoras nos efeitos hemodinâmicos dos mononitritos orgânicos de 1,2-propanodiol (PDNO), administrados por via intravenosa em porcos anestesiados.

[00238] Antes do experimento, a aprovação ética foi recebida do comitê regional de ética animal de Linköping (Linköping, Suécia; número de aprovação 953). O estudo foi realizado em conformidade com a Diretiva 2010/63/EU relativa à proteção dos animais usados para fins científicos. Dois porcos domésticos saudáveis de 3 meses de idade (um cruzamento entre as raças Swedish country, Hampshire e Yorkshire; um peso corporal de 26 e 27

59 / 62 kg) foram incluídos no estudo.

[00239] Os animais foram pré-medicados com azaperona na fazenda e transportados para o laboratório. No laboratório, a anestesia foi induzida com uma mistura de tiletamina, zolazepam e azaperona (injeção intramuscular). O propofol foi administrado por um cateter venoso periférico em uma veia da orelha, se necessário. Doses em bolus de atropina e cefuroxima foram administradas por via intravenosa. Os animais foram intubados por via endotraqueal e ventilados mecanicamente (5 cm H2O em pressão expiratória final positiva, ventilação por minuto ajustada para normoventilação). A anestesia geral foi mantida com propofol e fentanila por meio de infusões intravenosas contínuas e doses adicionais em bolus foram dadas, se necessário. As soluções de acetato de Ringer e glicose foram administradas continuamente por via intravenosa para substituir a perda de fluido. A heparina foi administrada em bolus intravenoso após a instrumentação cirúrgica. Após os experimentos, os animais foram exterminados com anestesia geral com injeção de propofol seguida de injeção intravenosa rápida de cloreto de potássio (40 mmol), e a assistolia foi confirmada.

[00240] Os animais foram instrumentados com um cateter arterial na artéria carótida direita para medição da pressão arterial sistêmica e frequência cardíaca. Uma bainha foi colocada na veia jugular externa direita para introdução de um cateter arterial pulmonar. Este cateter foi usado para medição contínua da pressão arterial pulmonar e débito cardíaco semicontínuo. Um cateter venoso central foi inserido na veia jugular externa esquerda para administração de fármacos e fluidos. Todas as administrações de fluidos e fármacos foram feitas por seringa motorizada ou bombas de gotejamento. A bexiga urinária foi cateterizada. As variáveis hemodinâmicas foram medidas por um Datex AS/3 (Helsinki, Finlândia) e os dados foram coletados por um sistema computadorizado (MP150/Acknowledge 3.9.1, sistemas BIOPAC, Goleta, CA, EUA). Após a instrumentação cirúrgica,

60 / 62 seguiu-se pelo menos um período de 1 hora livre de intervenção.

[00241] Infusões intravenosas de PDNO foram administradas (Institutos de Pesquisa da Suécia, Södertälje, Suécia) a 30 nmol kg-1 min-1 por 15 min em um fluxo de carreador, a uma taxa de infusão 9 vezes a taxa de infusão de PDNO, de bicarbonato de sódio (14 mg ml-1; pH 7,4 ou 8,0), tampão fosfato fisiológico a pH 8 ou solução salina fisiológica. Produtos químicos padrão foram usados para produzir as soluções carreadoras. O efeito hemodinâmico foi medido no final de cada infusão.

[00242] Os resultados são mostrados na tabela abaixo. Os valores de linha de base antes de cada combinação intravenosa de PDNO e solução carreadora eram normais para porcos saudáveis e anestesiados. O PDNO intravenoso em uma solução carreadora de tampão de bicarbonato em pH 8 diminuiu a pressão arterial sistêmica média (MAP) e a pressão arterial pulmonar média (MPAP) em -11 ± 1,2 mmHg e -2,4 ± 0,8 mmHg, respectivamente, enquanto o PDNO intravenoso em uma solução carreadora de soro fisiológico diminuiu a MAP e a MPAP em -6,9 ± 2,5 mmHg e -2,4 ± 0,1 mmHg. PDNO intravenoso em combinação com tampão bicarbonato em pH 7,4 e tampão fosfato fisiológico em pH 8 teve efeitos semelhantes sobre MAP e MPAP como solução salina fisiológica. A frequência cardíaca e o débito cardíaco semicontínuo foram apenas ligeiramente afetados pelas infusões.

[00243] Variáveis hemodinâmicas em suínos anestesiados e ventilados mecanicamente submetidos a repetidas infusões intravenosas de PDNO a 30 nmol kg-1 min-1 em combinação com várias soluções carreadoras (n = 2 por solução carreadora).

HR PDNO a 30 nmol kg-1 min-1 em MAP MPAP CCO (batidas min- soluções carreadoras (mmHg) (mmHg) 1 (l min-1) ) Linha de base 66,5 ± 1,0 18,9 ± 2,8 86 ± 1 4,5 ± 0,6 Tampão de bicarbonato em pH 8,0 55,5 ± 2,2 16,5 ± 1,9 93 ± 11 4,4 ± 0,1 Linha de base 67,5 ± 2,8 20,7 ± 1,7 81 ± 6 3,8 ± 0,5 Solução salina fisiológica 60,6 ± 0,3 18,3 ± 1,8 83 ± 8 3,9 ± 0,4 Linha de base 65,6 ± 1,1 20,6 ± 2,0 76 ± 1 3,6 ± 0,1

61 / 62 Tampão de fosfato em 59,0 ± 0,7 18,0 ± 1,6 82 ± 7 3,8 ± 0,2 pH 8 Linha de base 68,3 ± 4,0 20,8 ± 1,8 77 ± 1 3,4 ± 0,1 Tampão de bicarbonato em pH 7,4 61,0 ± 5,9 17,2 ± 1,6 81 ± 5 3,6 ± 0,1

[00244] Os dados são apresentados como médias e desvios-padrão.

[00245] Pressão arterial sistêmica média (MAP), pressão arterial pulmonar média (MPAP), frequência cardíaca (HR), débito cardíaco semicontínuo (CCO).

[00246] PDNO intravenoso em combinação com uma solução carreadora de tampão bicarbonato em pH 8 produziu maiores efeitos hemodinâmicos em comparação com soluções carreadoras de solução salina fisiológica, tampão fosfato fisiológico e tampão bicarbonato em pH 7,4. EXEMPLO 13 - INVESTIGAÇÃO FARMACOLÓGICA DE 1,2-PDNO-R, 1,2-PDNO-S E 1,3-PDNO EM PORCOS ANESTESIADOS

[00247] Antes do experimento, a aprovação ética foi recebida do comitê regional de ética animal de Linköping (Linköping, Suécia; número de aprovação 953). Em resumo, 2 porcos macho e fêmea (um cruzamento entre as raças Swedish country, Hampshire e Yorkshire; de 3 a 4 meses de idade; 24 a 26 kg) foram pré-medicados com azaperona na fazenda e transportados para o laboratório. No laboratório, a anestesia foi induzida com uma mistura de tiletamina, zolazepam e azaperona (injeção intramuscular). O propofol foi administrado por um cateter venoso periférico em uma veia da orelha, se necessário. Doses em bolus de atropina e cefuroxima foram administradas por via intravenosa. Os animais foram intubados por via endotraqueal e ventilados mecanicamente (5 cm H2O em pressão expiratória final positiva, ventilação por minuto ajustada para normoventilação). A anestesia geral foi mantida com propofol e fentanila por meio de infusões intravenosas contínuas e doses adicionais em bolus foram administradas, se necessário. As soluções de acetato de Ringer e glicose foram administradas continuamente por via intravenosa para substituir a perda de fluido. A heparina foi administrada em bolus intravenoso após a instrumentação cirúrgica. Após os experimentos, os

62 / 62 animais foram exterminados com anestesia geral com injeção de propofol seguida de injeção intravenosa rápida de cloreto de potássio (40 mmol), e a assistolia foi confirmada.

[00248] Os animais foram instrumentados com um cateter arterial na artéria carótida direita para medição da pressão arterial sistêmica e frequência cardíaca. Uma bainha foi colocada na veia jugular externa direita para introdução de um cateter arterial pulmonar. Este cateter foi usado para medição contínua da pressão arterial pulmonar, débito cardíaco semicontínuo e pressão pulmonar em cunha intermitente. Um cateter venoso central foi inserido na veia jugular externa esquerda para administração de fármacos e fluidos. Todas as administrações de fluidos e fármacos foram feitas por seringa motorizada ou bombas de gotejamento. A bexiga urinária foi cateterizada. Gases, pressões e volumes respiratórios foram medidos no tubo endotraqueal. As variáveis respiratórias e hemodinâmicas foram medidas por um Datex AS/3 (Helsinki, Finlândia) e os dados foram coletados por um sistema informatizado (MP100 ou MP150/Acknowledge 3.9.1, sistemas BIOPAC, Goleta, CA, EUA). Após a instrumentação cirúrgica, seguiu-se um período de 1 hora sem intervenção.

[00249] Após a coleta de dados de linha de base, uma infusão intravenosa de 10 a 15 min de 1,2-PDNO-R (43 nmol kg-1 min-1), 1,2-PDNO- S (43 nmol kg-1 min-1) e 1,3-PDNO (30 nmol kg-1 min-1) foi administrada em um fluxo de carreador de uma solução de bicarbonato de sódio (14 mg ml-1; pH aproximadamente 8; taxa de infusão 9 vezes a taxa de infusão de PDNO). Os dados hemodinâmicos e respiratórios foram extraídos ao final de cada dose.

[00250] 1,2-PDNO-R, 1,2-PDNO-S e 1,3-PDNO reduziram a pressão arterial média sistêmica e pulmonar, que são mostradas na figura 3. A conclusão é que 1,2-PDNO-R, 1,2-PDNO-S e 1,3-PDNO causam vasodilatação sistêmica e pulmonar e, portanto, apresentam capacidade vasodilatadora.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Processo, caracterizado pelo fato de que é para a preparação de uma composição que compreende um ou mais compostos de fórmula I (I) em que R1, R2 e R3 representam, cada um independentemente, H ou -NO, em que n é 0 ou 1; em que quando n é 0, R1 é H; e em que quando n é 1, R2 é H desde que pelo menos um dentre R1, R2 e R3 represente -NO, o dito processo que compreende a etapa de: (i) reagir um composto correspondente de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H com uma fonte de nitrito, opcionalmente na presença de um ácido adequado, em que: (a) quando a fonte de nitrito é um nitrito orgânico, a etapa (i) é realizada em um solvente orgânico adequado; e (b) quando a fonte de nitrito é um nitrito inorgânico, a etapa (i) é realizada em uma mistura de solvente bifásico que compreende uma fase aquosa e uma fase não aquosa.

2. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que nitrito inorgânico é um nitrito de metal.

3. Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o nitrito de metal é um nitrito de metal alcalino ou um nitrito de metal alcalino-terroso.

4. Processo de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que o nitrito de metal é um nitrito de metal alcalino.

5. Processo de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o nitrito de metal alcalino é nitrito de sódio.

6. Processo de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o nitrito orgânico é um nitrito de alquila.

7. Processo de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o nitrito de alquila é nitrito de terc-butila.

8. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que o ácido adequado é um ácido forte, tal como um ácido mineral forte.

9. Processo de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que o ácido mineral forte é ácido sulfúrico.

10. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que a fase não aquosa compreende um solvente orgânico imiscível em água, tal como um solvente orgânico aprótico imiscível em água.

11. Processo de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o solvente orgânico imiscível em água é diclorometano ou éter terc-butilmetílico.

12. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que a mistura de solventes compreende ainda excesso de um composto de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H.

13. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que após a etapa (i), o processo compreende ainda a etapa de: (ii) remover substancialmente toda a fase aquosa da mistura de solventes.

14. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que após a etapa (i), o processo compreende ainda a(s) etapa(s) de: (ii) remover parte ou toda (por exemplo, substancialmente toda) a fase aquosa (isto é, água); (iii) lavar a fase orgânica restante com uma ou mais fases aquosas adicionais; (iv) opcionalmente repetir as etapas (ii) e (iii) uma ou mais vezes; (v) opcionalmente reduzir (isto é, reduzir a quantidade/volume de) a fase orgânica, e (vi) opcionalmente secar o produto, em que as etapas (ii) a (vi) podem ser realizadas em qualquer ordem, desde que as etapas (ii) a (iv) sejam realizadas antes das etapas (v) e (vi).

15. Processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que o processo compreende ainda a etapa de adicionar uma quantidade adicional de um composto de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H, de modo que a mistura combinada do um ou mais compostos de fórmula I e um composto de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H compreenda de cerca de 0,01% a cerca de 9% em peso de um ou mais compostos de fórmula I.

16. Produto, caracterizado pelo fato de que é obtido ou obtenível por um processo de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15.

17. Composição substancialmente não aquosa, caracterizada pelo fato de que compreende: (a) um ou mais compostos de fórmula I

(I) em que R1, R2 e R3 representam, cada um independentemente, H ou -NO, em que n é 0 ou 1; e em que quando n é 0, R1 é H; e em que quando n é 1, R2 é H desde que pelo menos um dentre R1, R2 e R3 represente -NO; e (b) um composto de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H.

18. Composição de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que a composição compreende de cerca de 0,01% a cerca de 9% em peso de um ou mais compostos de fórmula I.

19. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 17 e 18, caracterizada pelo fato de que a composição é substancialmente livre de óxido nítrico dissolvido.

20. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 17 a 19, caracterizada pelo fato de que a composição consiste essencialmente no um ou mais compostos de fórmula I e em um composto de fórmula I, mas em que R1, R2 e R3 representam H.

21. Formulação farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 17 a 20, e opcionalmente um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

22. Formulação farmacêutica de acordo com a reivindicação 21, caracterizada pelo fato de que um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis são não aquosos.

23. Kit de partes, caracterizado pelo fato de que compreende: (A) uma formulação farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 e 22; e (B) um tampão aquoso adequado, em que os componentes (A) e (B) são fornecidos em uma forma adequada para administração um com o outro.

24. Produto de combinação, caracterizado pelo fato de que é formado misturando: (A) uma formulação farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 e 22; e (B) um tampão aquoso adequado.

25. Kit de partes de acordo com a reivindicação 23, ou um produto de combinação de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que a razão entre a formulação farmacêutica e o tampão adequado é de cerca de 3:7 a cerca de 1:99 em volume.

26. Kit de partes de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 e 25, ou um produto de combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 24 e 25, caracterizado pelo fato de que o tampão é não nucleofílico e fracamente básico.

27. Kit de partes de acordo com qualquer uma das reivindicações 23, 25 e 26, ou um produto de combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 24 a 26, caracterizado pelo fato de que o tampão mantém um pH de cerca de 7,1 a cerca de 10.

28. Kit de partes de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 e 25 a 27, ou um produto de combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 24 a 27, caracterizado pelo fato de que o tampão é um tampão de carbonato ou um tampão de fosfato, ou uma mistura dos mesmos.

29. Processo para preparação de um produto de combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 24 e 26 a 28, caracterizado pelo fato de que compreende a etapa de misturar: (A) uma formulação farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 e 22; e (B) um tampão aquoso adequado de acordo com qualquer uma das reivindicações 26 a 28.

30. Composição de acordo com qualquer uma das reivindicações 17 a 20, uma formulação farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 e 22, um kit de partes de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 e 25 a 28, ou um produto de combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 24 a 28, caracterizada pelo fato de que é para uso no tratamento de uma afecção em que a administração de NO tem um efeito benéfico.

31. Método de tratamento de uma afecção, caracterizado pelo fato de que a administração de NO tem um efeito benéfico que compreende a administração a um paciente em necessidade do mesmo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma formulação farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 e 22, ou um produto de combinação de acordo com qualquer uma das reivindicações 24 a 28.

32. Método de tratamento de uma afecção, caracterizado pelo fato de que a administração de NO tem um efeito benéfico que compreende a administração a um paciente em necessidade do mesmo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de componentes: (A) uma formulação farmacêutica de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 e 22; e (B) um tampão aquoso adequado de acordo com qualquer uma das reivindicações 25 a 28, em que os componentes (A) e (B) são misturados antes da administração.

33. Uso de acordo com a reivindicação 30, ou método de acordo com qualquer uma das reivindicações 31 e 32, caracterizado pelo fato de que a afecção é selecionada a partir do grupo que consiste em: vasoconstrição pulmonar aguda de diferentes gêneses; hipertensão pulmonar de diferentes gêneses, incluindo hipertensão primária e hipertensão secundária; afecções de diferentes gêneses com necessidade de vasodilatação; hipertensão sistêmica de diferentes gêneses; vasoconstrição regional de diferentes gêneses; vasoconstrição local de diferentes gêneses; insuficiência cardíaca aguda (com ou sem fração de ejeção preservada (ICFEP)); doença cardíaca coronária; infarto do miocárdio; doença isquêmica do coração; angina pectoris; angina instável; arritmia cardíaca; hipertensão pulmonar aguda em pacientes de cirurgia cardíaca; acidose; inflamação das vias respiratórias; fibrose cística; DPOC; síndrome dos cílios imóveis; inflamação do pulmão; fibrose pulmonar; síndrome da dificuldade respiratória do adulto; edema agudo de pulmão; doença aguda das montanhas; asma; bronquite; hipóxia de diferentes gêneses; derrame; vasoconstrição cerebral; inflamação do trato gastrointestinal; disfunção gastrointestinal; complicação gastrointestinal; IBD; doença de Crohn; colite ulcerosa; doença hepática; doença do pâncreas; inflamação da bexiga do trato uretral; inflamação da pele; úlceras diabéticas; neuropatia diabética; psoríase; inflamação de diferentes gêneses; cicatrização de feridas; proteção de órgãos em condições de isquemia-reperfusão; transplante de órgão; transplante de tecido; transplante de célula; doença renal aguda; relaxamento do útero; relaxamento do colo do útero; e condições em que o relaxamento do músculo liso é necessário.

34. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 32 e 33, caracterizado pelo fato de que a mistura dos componentes (A) e (B) é realizada imediatamente antes da administração ao paciente, tal como por coadministração dos mesmos.

35. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 32 a 34, caracterizado pelo fato de que a mistura é realizada por um processo de fluxo misto.

36. Método de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que o processo de fluxo misto ocorre no momento de administração dos componentes ao paciente.

37. Uso de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que a afecção é selecionada a partir do grupo que consiste em hipertensão pulmonar de diferentes gêneses, incluindo hipertensão primária e hipertensão secundária; e insuficiência cardíaca aguda (com ou sem fração de ejeção preservada (ICFEP)).