BR112021009548A2 - composição líquida estável que compreende proteína - Google Patents

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Kyung Hee JOO
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Abstract

COMPOSIÇÃO LÍQUIDA ESTÁVEL QUE COMPREENDE PROTEÍNA. É revelada uma formulação líquida estável de uma proteína. É fornecida uma composição de proteína líquida que compreende uma proteína e que está livre de um tampão e/ou que compreende histidina e um método para a preparação da mesma.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “COMPOSIÇÃO LÍQUIDA ESTÁVEL QUE COMPREENDE PROTEÍNA” Campo Técnico
[001] A presente revelação se refere a uma formulação líquida estável de uma proteína e a uma composição líquida que compreende uma proteína, e livre de um tampão e/ou que compreende histidina, e um método de preparação da mesma.
Fundamentos da Técnica
[002] Um fármaco de anticorpo, que pode ser projetado para direcionamento, tem a vantagem de resultar em menos efeitos colaterais do que drogas de proteína geral e maiores efeitos terapêuticos, mesmo quando usado em pequenas doses. No entanto, para exercer tais efeitos, os fármacos de anticorpos requerem inevitavelmente grandes pesos moleculares e estruturas complexas. Esses recursos estruturais podem levar à instabilidade física/química, o que pode resultar na inibição da atividade dos fármacos de anticorpos. Assim, foi necessário desenvolver uma formulação adequada para esse fim.
[003] Em um fármaco de anticorpo, o anticorpo pode se tornar instável devido a vários fatores, tais como temperatura, pH, tampão, excipiente de concentração e semelhantes. A fim de desenvolver uma formulação que seja capaz de reduzir a instabilidade e aumentar a qualidade medicinal dos fármacos com anticorpos, foram feitas tentativas de modificação do tampão, otimização do pH, adição de estabilizador e assim por diante.
[004] O denosumabe é comercializado como dois produtos comerciais: um com o nome comercial de Prolia® para o tratamento da osteoporose; e o outro com o nome comercial de Xgeva® para a terapia do câncer. As indicações para cada produto também são diferentes.
Prolia® é um anticorpo formulado líquido com 60 mg/ml de denosumabe, pH 5,2, 17 mM de tampão de ácido acético glacial, 4,7% de sorbitol e 0,01% de polissorbato 20.
Xgeva® é um anticorpo formulado líquido com 70 mg/ml de denosumabe, pH 5,2, 18 mM de tampão de ácido acético glacial, 4,6% de sorbitol e 0,01% de polissorbato 20.
Embora contenham os mesmos ingredientes, os dois produtos diferem um do outro no que diz respeito à proporção da composição, incluindo o conteúdo de anticorpos e semelhantes. No caso dos dois produtos do Denosumabe, é necessário minimizar a instabilidade causada pela diferença na concentração do anticorpo. Como Prolia® é administrado duas vezes por ano e o período de administração relativamente longo exige uma formulação mais estável, foi desenvolvida a formulação mais estável do fármaco.
Descrição Detalhada da Invenção Problema Técnico
[005] Consequentemente, a presente revelação fornece uma composição farmacêutica líquida estável de uma proteína.
[006] Uma modalidade fornece uma composição líquida de uma proteína que compreende uma proteína, tem um pH em uma faixa de 5 a 7 e não compreende (está livre de) pelo menos um selecionado do grupo que consiste em acetato, succinato e glutamato, ou não inclui um tampão.
A composição líquida pode compreender adicionalmente histidina. A composição líquida pode compreender adicionalmente um tensoativo. A composição líquida pode ser uma composição líquida aquosa.
[007] Em uma modalidade, a composição líquida pode: (1) compreender uma proteína, por exemplo, um anticorpo como um anticorpo anti-RANKL, (2) ter um pH de 5 a 7, e (3-1) ser livre de acetato.
[008] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode: (1) compreender uma proteína, por exemplo, um anticorpo como um anticorpo anti-RANKL, (2) ter um pH de 5 a 7, e
(3-2) ser livre de succinato.
[009] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode: (1) compreender uma proteína, por exemplo, um anticorpo como um anticorpo anti-RANKL, (2) ter um pH de 5 a 7, e (3-3) ser livre de ambos um acetato e um succinato.
[0010] A composição líquida pode ser livre de glutamato. A composição líquida pode compreender adicionalmente histidina.
[0011] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode: (1) compreender uma proteína, por exemplo, um anticorpo como um anticorpo anti-RANKL, (2) ter um pH de 5 a 7, e (3-4) ser livre de um tampão. Neste contexto, a composição líquida pode ser livre de histidina.
[0012] A composição líquida pode ser uma composição líquida aquosa.
[0013] A composição líquida pode compreender adicionalmente pelo menos um selecionado do grupo que consiste em um açúcar, um derivado de açúcar (um ácido de açúcar, um poliol, como um álcool de açúcar, etc.), um aminoácido, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e similares, além da proteína ou da proteína e da histidina
(se contida). Na composição líquida fornecida na presente revelação, o pelo menos um selecionado do grupo de um açúcar, um derivado de açúcar, um aminoácido, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e similares podem servir como um estabilizador e/ou um agente de tonicidade.
[0014] Em uma modalidade, quando a composição líquida compreende pelo menos um açúcar (por exemplo, pelo menos um selecionado do grupo que consiste em trealose, sacarose, manose e maltose), a concentração dos mesmos pode estar em uma faixa de 1 a 15% (p/v), 3 a 15% (p/v), 5 a 15% (p/v), 7 a 15% (p/v), 1 a 10% (p/v), 3 a 10% (p/v), 5 a 10% (p/v), 7 a 10% (p/v), 1 a 7% (p/v), 2 a 7% (p/v), 3 a 7% (p/v), 4 a 7% (p/v), 1 a 5% (p/v), 2 a 5% (p/v), 3 a 5% (p/v), ou 4 a 5% (p/v), 4,5 a 5% (p/v) (por exemplo, cerca de 4,7% (p/v)), ou 7,8 a 8,2% (p/v) (por exemplo, cerca de 7,8% (p/v), cerca de 7,9% (p/v), cerca de 8% (p/v), cerca de 8,1% (p/v) ou cerca de 8,2% (p/v)), com base na composição líquida total; quando a composição líquida compreende pelo menos um álcool de açúcar (por exemplo, pelo menos um selecionado do grupo que consiste em sorbitol e manitol), a concentração dos mesmos pode estar em uma faixa de 1 a 10% (p/v), 2,5 a 10% (p/v), 3 a 10% (p/v), 3,5 a 10% (p/v), 4 a 10% (p/v), 1 a 8% (p/v), 2,5 a 8% (p/v), 3 a
8% (p/v), 3,5 a 8% (p/v), 4 a 8% (p/v), 1 a 6% (p/v), 2,5 a 6% (p/v), 3 a 6% (p/v), 3,5 a 6% (p/v), 4 a 6% (p/v), 4 a 5,5% (p/v), 4 a 5% (p/v), 4,2 a 4,8 (p/v) ou 4,4 a 4,7 (p/v) (por exemplo, cerca de 4,4% (p/v)), cerca de 4,5% (p/v), cerca de 4,6% (p/v) ou cerca de 4,7% (p/v) com base na composição líquida total; quando a composição líquida compreende pelo menos um aminoácido (por exemplo, pelo menos um selecionado do grupo que consiste em arginina (Arg), lisina (Lys), prolina (Pro), glicina (Gly), alanina (Ala), metionina (Met), serina (Ser) e sais farmaceuticamente aceitáveis dos aminoácidos), a concentração dos mesmos pode estar em uma faixa de 0,1 a 300 mM, 0,5 a 300 mM, 1 a 300 mM, 5 a 300 mM, 10 a 300 mM, 30 a 300 mM , 50 a 300 mM, 80 a 300 mM, 100 a 300 mM, 120 a 300 mM, 0,1 a 250 mM, 0,5 a 250 mM, 1 a 250 mM, 5 a 250 mM, 10 a 250 mM, 30 a 250 mM, 50 a 250 mM, 80 a 250 mM, 100 a 250 mM, 120 a 250 mM, 0,1 a 200 mM, 0,5 a 200 mM, 1 a 200 mM, 5 a 200 mM, 10 a 200 mM, 30 a 200 mM, 50 a 200 mM, 80 a 200 mM, 100 a 200 mM, 120 a 200 mM, 0,1 a 160 mM , 0,5 a 160 mM, 1 a 160 mM, 5 a 160 mM, 10 a 160 mM, 30 a 160 mM, 50 a 160 mM, 80 a 160 mM, 100 a 160 mM, 120 a 160 mM ou 130 a 150 mM.
[0015] Em uma modalidade, a composição líquida pode compreender adicionalmente um tensoativo. Quando a composição líquida compreende um tensoativo, o tensoativo pode ser usado em uma concentração na faixa de 0,001 a 1% (p/v), 0,001 a 0,5% (p/v), 0,001 a 0,1% (p/v), 0,001 a 0,05% (p/v), 0,005 a 1% (p/v), 0,005 a 0,5% (p/v), 0,005 a 0,1% (p/v), 0,005 a 0,05% (p/v), ou 0,008 a 0,02% (p/v), com base na composição líquida total. O tensoativo pode ser qualquer um que pode ser convencionalmente usado em uma formulação de proteína. Por exemplo, o tensoativo pode compreender pelo menos um selecionado de tensoativos não iônicos.
[0016] Outra modalidade fornece uma composição farmacêutica que compreende a composição líquida. A composição farmacêutica possui a atividade farmacológica correspondente à atividade da proteína contida na composição líquida.
[0017] Na composição líquida ou na composição farmacêutica, por exemplo, a proteína pode ter um peso molecular de 10 a 500 kDa, 10 a 400 kDa, 10 a 300 kDa, 10 a 200 kDa ou 10 a 150 kDa. Em uma modalidade, a proteína pode ser um antagonista de RANKL (ativador do receptor do ligante kappa-B do fator nuclear) (por exemplo, anticorpo anti-RANKL), por exemplo, denosumabe (peso molecular de cerca de 147 kDa; por exemplo, PROLIA® ou XGEVA® ), mas não se limita aos mesmos. Quando a proteína é um antagonista de RANKL (por exemplo, anticorpo anti-RANKL), por exemplo, denosumabe, a composição farmacêutica pode ser aplicada ao tratamento de osteoporose e/ou câncer/metástase do câncer.
[0018] Outra modalidade fornece um método para estabilizar uma proteína ou para preparar uma composição líquida estável de uma proteína, em que o método compreende uma etapa de mistura da proteína na composição descrita acima.
Solução Técnica
[0019] A presente revelação fornece uma composição farmacêutica líquida estável de uma proteína e um método de preparação da mesma.
[0020] Uma modalidade fornece uma composição de proteína líquida que compreende uma proteína, tem um pH em uma faixa de 5 a 7 e está livre de pelo menos um selecionado do grupo que consiste em acetato, succinato e glutamato, ou não inclui um tampão. A composição líquida pode compreender adicionalmente histidina. A composição líquida pode compreender adicionalmente um tensoativo. A composição líquida pode ser uma composição líquida aquosa.
[0021] Em uma modalidade, a composição líquida pode: (1) compreender uma proteína, por exemplo, um anticorpo como um anticorpo anti-RANKL, (2) ter um pH de 5 a 7, e
(3-1) ser livre de acetato.
[0022] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode: (1) compreender uma proteína, por exemplo, um anticorpo como um anticorpo anti-RANKL, (2) ter um pH de 5 a 7, e (3-2) ser livre de succinato.
[0023] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode: (1) compreender uma proteína, por exemplo, um anticorpo como um anticorpo anti-RANKL, (2) ter um pH de 5 a 7, e (3-3) ser livre de ambos um acetato e um succinato.
[0024] A composição líquida pode ser livre de glutamato.
[0025] A composição líquida pode compreender adicionalmente histidina.
[0026] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode: (1) compreender uma proteína, por exemplo, um anticorpo como um anticorpo anti-RANKL, (2) ter um pH de 5 a 7, e (3-4) ser livre de um tampão. Neste contexto, a composição líquida pode ser livre de histidina.
[0027] A composição líquida pode ser uma composição líquida aquosa.
[0028] A composição líquida pode ter um pH em uma faixa de 4 a 8, por exemplo, 4,5 a 7, 4,8 a 7, 5 a 7, 5,2 a 7, 4,5 a 6,8, 4,8 a 6,8, 5 a 6,8, 5,2 a 6,8, 4,5 a 6,5, 4,8 a 6,5, 5 a 6,5, 5,2 a 6,5, 4,5 a 6,3, 4,8 a 6,3, 5 a 6,3, 5,2 a 6,3, 4,5 a 6, 4,8 a 6, 5 a 6, 5,2 a 6, 4,5 a 5,8, 4,8 a 5,8, 5 a 5,8, 5,2 a 5,8, 4,5 a 5,6, 4,8 a 5,6, 5 a 5,6, 5,2 a 5,6, 4,9 a 5,5, 4,9, 5,0, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, ou 5,5.
[0029] A composição líquida de uma proteína fornecida na presente revelação pode ser livre de um ou ambos de um acetato e um succinato, pode também ser livre de um glutamato e/ou pode compreender histidina, em que o pH, que é um dos importantes fatores que afetam a estabilidade da proteína, podem ser mantidos dentro da faixa adequada declarada acima e a proteína na composição pode ser de excelente estabilidade (por exemplo, excelentes indicadores de estabilidade de proteína, como alto peso molecular (% HMW), % variante de carga (por exemplo, quantidade de variante ácida (% ácida)).
[0030] Como usado no presente documento, a descrição como “a composição líquida de uma proteína fornecida pela presente revelação é livre do ingrediente A” pretende significar que a composição não compreende o ingrediente A (o ingrediente A está ausente na composição) ou não compreende substancialmente o ingrediente A (o ingrediente A está substancialmente ausente na composição). A este respeito, a descrição “ingrediente A não está substancialmente compreendido ou está ausente na composição” pode ser entendida como “ingrediente A não está compreendido (ou está ausente) em absoluto” ou “ingrediente A está compreendido (ou está presente) em uma quantidade que é muito pequena para permitir a exibição da função farmacêutica pretendida ou para ser detectada na composição líquida de uma proteína.
Em uma modalidade, o termo “livre do ingrediente A” pode significar que o ingrediente A não é detectado por um método convencional.
[0031] A seguir, uma descrição detalhada será dada da composição líquida fornecida pela presente revelação:
1. Proteína
[0032] Na composição líquida fornecida pela presente revelação, a proteína pode ser um fármaco de proteína, por exemplo, uma proteína, por exemplo, um anticorpo, com um peso molecular de 10 a 500 kDa, 10 a 400 kDa, 10 a 300 kDa, 10 a 200 kDa ou 10 a 150 kDa.
[0033] Qualquer anticorpo pode ser usado, desde que tenha duas cadeias pesadas conectadas uma à outra por ligações de dissulfeto, em que cada cadeia pesada está conectada à respectiva cadeia leve por uma ligação de dissulfeto. O anticorpo pode ser de ocorrência natural ou um sintetizado de forma recombinante/química (obtido de forma não natural). Como usado no presente documento, o termo “anticorpo” destina-se a abranger, sem limitação, qualquer anticorpo convencional e/ou um fragmento de ligação ao antígeno ou cadeia única do mesmo, qualquer proteína ou molécula de peptídeo que compreende pelo menos uma porção de uma molécula de imunoglobulina com uma atividade biológica de ligação a um antígeno. Assim, o anticorpo pode compreender um anticorpo de domínio único ou um fragmento do mesmo, por exemplo, uma região de determinação de complementaridade (CDR) em uma cadeia pesada ou cadeia leve de um anticorpo de domínio único ou uma porção de ligação ao ligante deste, uma cadeia pesada ou região variável da cadeia leve, uma região constante da cadeia pesada ou da cadeia leve, uma região de arcabouço (FR) e/ou qualquer porção da mesma e/ou pelo menos uma porção de uma proteína de ligação. Em uma modalidade, o anticorpo pode ser um anticorpo monoclonal.
Em uma modalidade, o anticorpo pode ser um anticorpo derivado de animal, um anticorpo quimérico, um anticorpo humanizado ou um anticorpo humano. Em uma modalidade, o anticorpo pode incluir um anticorpo mono-, bi- ou multiespecífico.
[0034] Em uma modalidade, a proteína pode ser um antagonista de RANKL (ativador do receptor do ligante kappa-B do fator nuclear) (por exemplo, anticorpo anti- RANKL), por exemplo, denosumabe (peso molecular: de cerca de 147 kDa; por exemplo, PROLIA® ou XGEVA®), mas não se limita aos mesmos. Quando a proteína é um antagonista de RANKL (por exemplo, anticorpo anti-RANKL), por exemplo, denosumabe, a composição farmacêutica pode ser aplicada ao tratamento de osteoporose e/ou câncer.
[0035] A proteína contida na composição líquida pode ser de ocorrência natural ou não natural, por exemplo, pode ser produzida de uma maneira recombinante ou sintética.
[0036] A composição líquida pode compreender a proteína em uma concentração de 5 mg/ml a 300 mg/ml, 5 mg/ml a 250 mg/ml, 5 mg/ml a 200 mg/ml, 5 mg/ml a 150 mg/ml, 5 mg/ml a 125 mg/ml, 5 mg/ml a 100 mg/ml, 5 mg/ml a 90 mg/ml, 5 mg/ml a 80 mg/ml, 5 mg/ml a 70 mg/ml, 5 mg/ml a 60 mg/ml, 10 mg/ml a 300 mg/ml, 10 mg/ml a 250 mg/ml, 10 mg/ml a 200 mg/ml, 10 mg/ml a 150 mg/ml, 10 mg/ml a 125 mg/ml, 10 mg/ml a 100 mg/ml, 10 mg/ml a 90 mg/ml, 10 mg/ml a 80 mg/ml, 10 mg/ml a 70 mg/ml, 10 mg/ml a 60 mg/ml, 20 mg/ml a 300 mg/ml, 20 mg/ml a 250 mg/ml, 20 mg/ml a 200 mg/ml, 20 mg/ml a 150 mg/ml, 20 mg/ml a 125 mg/ml, 20 mg/ml a 100 mg/ml, 20 mg/ml a 90 mg/ml, 20 mg/ml a 80 mg/ml, 20 mg/ml a 70 mg/ml, 20 mg/ml a 60 mg/ml, 30 mg/ml a 300 mg/ml, 30 mg/ml a 250 mg/ml, 30 mg/ml a 200 mg/ml, 30 mg/ml a 150 mg/ml, 30 mg/ml a 125 mg/ml, 30 mg/ml a 100 mg/ml, 30 mg/ml a 90 mg/ml, 30 mg/ml a 80 mg/ml, 30 mg/ml a 70 mg/ml, 30 mg/ml a 60 mg/ml, 40 mg/ml a 300 mg/ml, 40 mg/ml a 250 mg/ml, 40 mg/ml a 200 mg/ml, 40 mg/ml a 150 mg/ml, 40 mg/ml a 125 mg/ml, 40 mg/ml a 100 mg/ml, 40 mg/ml a 90 mg/ml, 40 mg/ml a 80 mg/ml, 40 mg/ml a 70 mg/ml, 40 mg/ml a 60 mg/ml, 50 mg/ml a 300 mg/ml, 50 mg/ml a 250 mg/ml, 50 mg/ml a 200 mg/ml, 50 mg/ml a 150 mg/ml, 50 mg/ml a 125 mg/ml, 50 mg/ml a 100 mg/ml, 50 mg/ml a 90 mg/ml, 50 mg/ml a 80 mg/ml, 50 mg/ml a 70 mg/ml, 50 mg/ml a 60 mg/ml, 60 mg/ml a 300 mg/ml, 60 mg/ml a 250 mg/ml, 60 mg/ml a 200 mg/ml, 60 mg/ml a 150 mg/ml, 60 mg/ml a 125 mg/ml, 60 mg/ml a 100 mg/ml, 60 mg/ml a 90 mg/ml, 60 mg/ml a 80 mg/ml, ou 60 mg/ml a 70 mg/ml, por exemplo, a uma concentração de 50 mg/ml, 55 mg/ml, 60 mg/ml, 65 mg/ml, 70 mg/ml, 75 mg/ml, ou 80 mg/ml.
2. Tampão
[0037] A composição líquida fornecida na presente revelação pode estar livre de um tampão. Em uma modalidade, o tampão que não está incluído (é excluído) da composição líquida pode ser pelo menos um dos tampões usados convencionalmente com uma capacidade de tamponamento. Por exemplo, o tampão que não está compreendido na composição líquida pode compreender pelo menos um selecionado do grupo que consiste em (1) pelo menos um ácido selecionado a partir de ácido fosfórico, ácido acético, ácido cítrico, ácido succínico e ácido carbônico, e suas formas iônicas (por exemplo, fosfato, acetato, citrato, succinato, carbonato, etc.); (2) sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos (por exemplo, sal de sódio, sal de potássio, etc.), (3) pelo menos um aminoácido selecionado a partir de ácido glutâmico e ácido aspártico e suas formas iônicas (por exemplo, glutamato, aspartato, etc.), e (4) sais farmaceuticamente aceitáveis dos aminoácidos (por exemplo, sal de cloridrato, etc.).
[0038] A menos que indicado de outra forma na presente revelação, os ácidos de (1) e/ou os aminoácidos de (3) e as formas iônicas dos mesmos têm significados equivalentes entre si ou podem ser usados indistintamente.
[0039] A composição líquida pode não compreender pelo menos um selecionado do grupo que consiste em: ácido fosfórico, ácido acético (por exemplo, ácido acético glacial), ácido cítrico, ácido succínico, ácido carbônico, formas iônicas (por exemplo, fosfato, acetato, citrato, succinato, carbonato, etc.) dos ácidos (ácido fosfórico, ácido acético, ácido cítrico, ácido succínico,
ácido carbônico, etc.), sais farmaceuticamente aceitáveis (por exemplo, sal de sódio, sal de potássio, etc.) dos ácidos (ácido fosfórico, ácido acético, ácido cítrico, ácido succínico e ácido carbônico); e ácido aspártico, ácido glutâmico, formas iônicas (por exemplo, glutamato, aspartato, etc.) dos aminoácidos (ácido aspártico, ácido glutâmico) e sais farmaceuticamente aceitáveis (por exemplo, sal de cloridrato, etc.) dos aminoácidos (ácido aspártico, ácido glutâmico). O aminoácido que não está incluído na composição líquida pode não ser um aminoácido presente na proteína, mas um aminoácido livre.
[0040] Em uma modalidade, a composição líquida pode ser livre de ácido acético e/ou acetato.
[0041] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode ser livre de ácido succínico e/ou succinato.
[0042] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode ser livre de ácido acético, acetato, ácido succínico e/ou succinato.
[0043] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode ser livre de ácido glutâmico e/ou glutamato.
[0044] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode ser livre de ácido acético, acetato, ácido glutâmico e/ou glutamato.
[0045] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode ser livre de ácido succínico, succinato,
ácido glutâmico e/ou glutamato.
[0046] Em uma outra modalidade, a composição líquida pode ser livre de ácido acético, acetato, ácido succínico, succinato, ácido glutâmico e/ou glutamato.
[0047] Em outra modalidade, a composição líquida pode ser livre de ácido acético, acetato, ácido succínico, succinato, ácido glutâmico, glutamato, ácido fosfórico, fosfato, ácido cítrico, citrato, ácido carbônico, carbonato, ácido aspártico e aspartato.
3. Histidina
[0048] A composição líquida fornecida na presente revelação pode compreender histidina. Na composição líquida, a histidina pode funcionar como um tampão. Na composição líquida, a histidina também pode funcionar como um estabilizador para a proteína. Por exemplo, a histidina pode suprimir uma variante ácida da proteína (inibição da formação de uma variante ácida) ou servir como um inibidor de variantes ácidas da proteína. Na composição líquida, a histidina pode suprimir as variantes ácidas da proteína (inibir a formação de uma variante ácida, reduzir a % de incremento ácido). Além disso, a histidina pode ter o efeito de inibir a agregação de proteínas (por exemplo, inibir a formação de alto peso molecular (HMW), reduzir o incremento de % HMW). Portanto, a composição líquida pode compreender histidina como um tampão e/ou um inibidor de variantes ácidas e/ou um inibidor de agregação de proteína.
[0049] Na composição líquida, a histidina pode estar na forma de aminoácido livre isolada (isto é, não é um resíduo de histidina da proteína).
[0050] Se a composição líquida compreende histidina, a concentração de histidina na composição líquida pode estar em uma faixa de 1 a 100 mM, 1 a 70 mM, 1 a 50 mM, 1 a 40 mM, 1 a 30 mM, 1 a 25 mM, 1 a 22 mM, 1 a 20 mM, 5 a 100 mM, 5 a 70 mM, 5 a 50 mM, 5 a 40 mM, 5 a 30 mM, 5 a 25 mM, 5 a 22 mM, 5 a 20 mM, 10 a 100 mM, 10 a 70 mM, 10 a 50 mM, 10 a 40 mM , 10 a 30 mM, 10 a 25 mM, 10 a 22 mM, 10 a 20 mM, 14 a 100 mM, 14 a 70 mM, 14 a 50 mM, 14 a 40 mM, 14 a 30 mM, 14 a 25 mM, 14 a 22 mM, 14 a 20 mM, 16 a 100 mM, 16 a 70 mM, 16 a 50 mM, 16 a 40 mM, 16 a 30 mM, 16 a 25 mM, 16 a 22 mM ou 16 a 20 mM; por exemplo, 16 mM, 17 mM, 18 mM, 19 mM ou 20 mM.
4. Açúcar, Derivado de Açúcar e/ou Aminoácido
[0051] A composição líquida pode compreender pelo menos um selecionado do grupo que consiste em açúcares, derivados de açúcar e aminoácidos.
[0052] O pelo menos um selecionado do grupo que consiste em açúcares, derivados de açúcar e aminoácidos pode servir como um estabilizador e/ou um agente de tonicidade para a proteína na composição líquida, mas não está limitado aos mesmos. A este respeito, o aminoácido que pode ser compreendido como um estabilizador e/ou um agente de tonicidade pode ser pelo menos um aminoácido, exceto para histidina (isto é, o aminoácido pode não incluir histidina).
(1) Açúcar e derivados de açúcar (ácido de açúcar, poliol, como álcool de açúcar)
[0053] Em uma modalidade, o açúcar pode ser pelo menos um selecionado do grupo que consiste em um monossacarídeo, um dissacarídeo, um oligossacarídeo e um polissacarídeo, mas não está limitado aos mesmos. O monossacarídeo pode ser pelo menos um selecionado do grupo que consiste em glicose, frutose, galactose, manose e semelhantes, mas não está limitado aos mesmos. O dissacarídeo pode ser pelo menos um selecionado do grupo que consiste em sacarose, lactose, maltose, trealose e similares, mas não está limitado aos mesmos. O oligossacarídeo pode ser pelo menos um selecionado do grupo que consiste em fruto-oligossacarídeo, galacto- oligossacarídeo, mananoligossacarídeo e similares, mas não está limitado aos mesmos. O polissacarídeo pode ser pelo menos um selecionado do grupo que consiste em amido, glicogênio, celulose, quitina, pectina e similares, mas não está limitado aos mesmos.
[0054] O ácido de açúcar pode ser pelo menos um selecionado do grupo que consiste em ácido aldônico (ácido glicérico, etc.), ácido ulosônico (ácido neuramínico, etc.), ácido urônico (ácido glucurônico, etc.), ácido aldárico (ácido tartárico, etc.), e similares, mas não está limitado aos mesmos.
[0055] O álcool de açúcar pode ser pelo menos um selecionado do grupo que consiste em glicerol, eritritol, treitol, arabitol, xilitol, ribitol, manitol, sorbitol, galactitol, fucitol, iditol, inositol, volemitol, isomalte, maltitol, maltotitol, lactetraol, maltotitol, maltotitol, poliglicitol e similares, mas não está limitado aos mesmos.
[0056] Em uma modalidade, a composição líquida pode compreender pelo menos um açúcar ou álcool de açúcar selecionado do grupo que consiste em trealose, sacarose, manose, sorbitol, maltose, manitol e similares (por exemplo, pelo menos um selecionado do grupo que consiste em sorbitol, sacarose, trealose e similares).
[0057] Em uma modalidade, quando a composição líquida compreende pelo menos um açúcar (por exemplo, pelo menos um selecionado do grupo que consiste em trealose, sacarose, manose e maltose), a concentração dos mesmos pode estar em uma faixa de 1 a 15% (p/v), 3 a 15% (p/v), 5 a 15% (p/v), 7 a 15% (p/v), 1 a 10% (p/v), 3 a 10% (p/v), 5 a 10% (p/v), 7 a 10% (p/v), 1 a 7% (p/v), 2 a 7% (p/v), 3 a 7% (p/v), 4 a 7% (p/v), 1 a 5% (p/v), 2 a 5% (p/v), 3 a 5% (p/v), 4 a 5% (p/v), 4.5 a 5% (p/v) (por exemplo, cerca de 4,7% (p/v)) ou 7,8 a 8,2% (p/v) (por exemplo, cerca de 8% (p/v)) (por exemplo, trealose ou sacarose pode estar contida em uma quantidade de 7,8 a 8,2% (p/v) (por exemplo, cerca de 7,8% (p/v), cerca de 7,9% (p/v), cerca de 8% (p/v), cerca de 8,1% (p/v), ou cerca de 8,2% (p/v))), com base na composição líquida total; e quando a composição líquida compreende pelo menos um álcool de açúcar (por exemplo, pelo menos um selecionado do grupo que consiste em sorbitol e manitol), a concentração dos mesmos pode estar em uma faixa de 1 a 10% (p/v), 2,5 a 10% (p/v), 3 a 10% (p/v), 3,5 a 10% (p/v), 4 a 10% (p/v), 1 a 8% (p/v), 2,5 a 8% (p/v), 3 a 8% (p/v), 3,5 a 8% (p/v), 4 a 8% (p/v), 1 a 6% (p/v), 2,5 a 6% (p/v), 3 a 6% (p/v), 3,5 a 6% (p/v), 4 a 6% (p/v), 4 a 5,5% (p/v), 4 a 5% (p/v), 4,2 a 4,8 (p/v) ou 4,4 a 4,7 (p/v) (por exemplo, cerca de 4,4% (p/v), cerca de 4,5% (p/v), cerca de 4,6% (p/v)) ou cerca de 4,7% (p/v)), com base na composição líquida total.
[0058] Em uma modalidade, a composição líquida pode compreender: pelo menos um açúcar selecionado do grupo que consiste em trealose, sacarose, manose e maltose a uma concentração de 1 a 15% (p/v), 3 a 15% (p/v), 5 a 15% (p/v), 7 a 15% (p/v), 1 a 10% (p/v), 3 a 10% (p/v), 5 a 10% (p/v), 7 a 10% (p/v), 1 a 7% (p/v), 2 a 7% (p/v), 3 a 7% (p/v), 4 a 7% (p/v), 1 a 5% (p/v), 2 a 5% (p/v), 3 a 5% (p/v), ou 4 a 5% (p/v), 4,5 a 5% (p/v) (por exemplo, cerca de 4,7% (p/v)), ou 7,8 a 8,2% (p/v) (por exemplo, cerca de 7,8% (p/v), cerca de 7,9% (p/v), cerca de 8% (p/v), cerca de 8,1% (p/v) ou cerca de 8,2% (p/v)), com base na composição líquida total dos mesmos; pelo menos um álcool de açúcar selecionado do grupo que consiste em sorbitol e manitol a uma concentração de 1 a 10% (p/v), 2,5 a 10% (p/v), 3 a 10% (p/v), 3,5 a 10% (p/v), 4 a 10% (p/v), 1 a 8% (p/v), 2,5 a 8% (p/v), 3 a 8% (p/v), 3,5 a 8% (p/v), 4 a 8% (p/v), 1 a 6% (p/v), 2,5 a 6% (p/v), 3 a 6% (p/v), 3,5 a 6% (p/v), 4 a 6% (p/v), 4 a 5,5% (p/v), 4 a 5% (p/v), 4,2 a 4,8 (p/v) ou 4,4 a 4,7 (p/v) (por exemplo, cerca de 4,4% (p/v), cerca de 4,5% (p/v), cerca de 4,6% (p/v)) ou cerca de 4,7% (p/v)), com base na composição líquida total dos mesmos; ou uma combinação dos mesmos.
[0059] Mais particularmente, a composição líquida pode compreender: trealose ou sacarose a uma concentração de 1 a 15% (p/v), 3 a 15% (p/v), 4 a 15% (p/v), 5 a 15% (p/v), 7 a 15% (p/v), 1 a 10% (p/v), 3 a 10% (p/v), 4 a 10% (p/v), 5 a 10% (p/v), 7 a 10% (p/v), 1 a 7% (p/v), 3 a 7% (p/v), 4 a 7% (p/v), 1 a 5% (p/v), 3 a 5% (p/v), 4 a 5% (p/v), 4,2 a 5% (p/v), 4,5 a 5% (p/v), 7 a 9% (p/v), 7 a 8,5% (p/v), 7 a 8,2% (p/v), 7,5 a 9% (p/v), 7,5 a 8,5% (p/v), 7,5 a 8,2% (p/v), 7,8 a 9% (p/v), 7,8 a 8,5% (p/v), 7,8 a 8,2% (p/v), 4,7(p/v), 7,8% (p/v), 7,9% (p/v), 8% (p/v), 8,1% (p/v), ou 8,2% (p/v), com base na composição líquida total da mesma; sorbitol a uma concentração de 1 a 10% (p/v), 2,5 a 10% (p/v), 3 a 10% (p/v), 3,5 a 10% (p/v), 4 a 10% (p/v), 1 a 8% (p/v), 2,5 a 8% (p/v), 3 a 8% (p/v), 3,5 a 8% (p/v), 4 a 8% (p/v), 1 a 6% (p/v), 2,5 a 6% (p/v), 3 a 6% (p/v), 3,5 a 6% (p/v), 4 a 6% (p/v), 4 a 5,5% (p/v), 4 a 5,2% (p/v), 4 a 5% (p/v), 4 a 4,8% (p/v), 4,1 a 5,5% (p/v), 4,1 a 5,2% (p/v), 4,1 a 5% (p/v), 4,1 a 4,8% (p/v), 4,1 a 4,7% (p/v), 4,2 a 5,5% (p/v), 4,2 a 5,2% (p/v), 4,2 a 5% (p/v), 4,2 a 4,8% (p/v), 4,2 a 4,7% (p/v), 4,4% (p/v), 4,5% (p/v), 4,6% (p/v), ou 4,7% (p/v), com base na composição líquida total da mesma; ou uma combinação dos mesmos.
(2) Aminoácido
[0060] Conforme usado na presente revelação, o termo “aminoácido” pode se referir a pelo menos um selecionado a partir do aminoácido per se, uma forma iônica do mesmo e um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. O aminoácido pode estar na forma L, forma D ou em uma mistura racêmica e, por exemplo, pode estar na forma L, mas não está limitado à mesma.
[0061] O aminoácido que é compreendido como um estabilizador e/ou um agente de tonicidade pode ser pelo menos um selecionado a partir de aminoácidos, exceto histidina e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
Por exemplo, o aminoácido pode ser pelo menos um selecionado do grupo que consiste em alanina (Ala), arginina (Arg), asparagina (Asn), ácido aspártico (Asp), glutamina (Gln), ácido glutâmico (Glu), glicina (Gly), isoleucina (Ile), leucina (Leu), lisina (Lys), metionina (Met), fenilalanina (Phe), prolina (Pro), serina (Ser), treonina (Thr), triptofano (Trp), tirosina (Tyr), valina (Val), cisteína (Cys) e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos (por exemplo, sal de cloridrato, sal de acetil aminoácido, etc.). O aminoácido pode não ser um aminoácido presente na proteína fornecida na presente revelação, mas um aminoácido livre.
[0062] Em uma modalidade, o aminoácido pode incluir pelo menos um selecionado do grupo que consiste em arginina (Arg), lisina (Lys), prolina (Pro), glicina (Gly), alanina (Ala), metionina (Met), serina (Ser), e sais farmaceuticamente aceitáveis dos aminoácidos (por exemplo, sal de cloridrato, sal de acetil aminoácido,
etc.).
[0063] Em uma modalidade, a composição líquida pode compreender pelo menos um aminoácido (exceto histidina; por exemplo, pelo menos um selecionado do grupo que consiste em arginina (Arg), lisina (Lys), prolina (Pro), glicina (Gly), alanina (Ala), metionina (Met), serina (Ser) e sais farmaceuticamente aceitáveis dos aminoácidos). A respeito disso, a concentração do aminoácido na composição líquida pode ser 0,1 a 300 mM, 0,5 a 300 mM, 1 a 300 mM, 5 a 300 mM, 10 a 300 mM, 30 a 300 mM, 50 a 300 mM, 80 a 300 mM, 100 a 300 mM, 120 a 300 mM, 0,1 a 250 mM, 0,5 a 250 mM, 1 a 250 mM, 5 a 250 mM, 10 a 250 mM, 30 a 250 mM, 50 a 250 mM, 80 a 250 mM, 100 a 250 mM, 120 a 250 mM, 0,1 a 200 mM, 0,5 a 200 mM, 1 a 200 mM, 5 a 200 mM, 10 a 200 mM, 30 a 200 mM, 50 a 200 mM, 80 a 200 mM, 100 a 200 mM, 120 a 200 mM, 0,1 a 160 mM, 0,5 a 160 mM, 1 a 160 mM, 5 a 160 mM, 10 a 160 mM, 30 a 160 mM, 50 a 160 mM, 80 a 160 mM, 100 a 160 mM, 120 a 160 mM, ou 130 a 150 mM.
[0064] Em uma modalidade, a composição líquida pode compreender pelo menos um aminoácido selecionado do grupo que consiste em arginina (Arg), lisina (Lys), prolina (Pro), glicina (Gly), alanina (Ala), metionina (Met), serina (Ser) e sais farmaceuticamente aceitáveis dos aminoácidos a uma concentração de 80 a 200 mM, 100 a
200 mM, 130 a 200 mM, 80 a 150 mM, 100 a 150 mM ou 120 a 160 mM.
[0065] Mais especificamente, a composição líquida pode compreender arginina (Arg) ou cloridrato de arginina (Arg-HCl) a uma concentração de 80 a 200 mM, 100 a 200 mM, 120 a 200 mM, 80 a 160 mM, 100 a 160 mM, 120 a 160 mM, 120 a 155 mM, 120 a 150 mM, 120 a 145 mM, 130 a 160 mM, 130 a 155 mM, 130 a 150 mM, 130 a 145 mM, 130 a 142 mM, 135 a 160 mM, 135 a 155 mM, 135 a 150 mM, 135 a 145 mM, 135 a 142 mM, 138 a 160 mM, 138 a 155 mM, 138 a 150 mM, 138 a 145 mM, 138 a 142 mM ou 140 mM.
5. Cloreto de sódio e outros ingredientes
[0066] Em uma modalidade, a composição líquida pode ser livre de cloreto de sódio. O cloreto de sódio pode funcionar como um estabilizador e/ou agente de tonicidade. Em outra modalidade, a composição líquida pode compreender ainda cloreto de sódio além do açúcar, o derivado de açúcar e/ou o aminoácido descrito acima. Em outra modalidade, a composição líquida não compreende cloreto de sódio sozinho, como um estabilizador e/ou um agente de tonicidade. Ou seja, quando a composição líquida compreende cloreto de sódio, pelo menos um selecionado a partir de um açúcar, um derivado de açúcar (ácido de açúcar, poliol, como álcool de açúcar), um aminoácido e um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
como descrito acima, também pode estar compreendido na composição líquida.
[0067] Em outra modalidade, a composição líquida pode não compreender polietilenoglicol (por exemplo, PEG3350), um derivado de ciclodextrina (por exemplo, sulfobutiléter-β-ciclodextrina) e semelhantes, como um estabilizador.
6. Tensoativo
[0068] Em uma modalidade, a composição líquida pode compreender adicionalmente um tensoativo. Dado na composição líquida, o tensoativo pode estar compreendido a uma concentração de 0,001 a 1% (p/v), 0,001 a 0,5% (p/v), 0,001 a 0,1% (p/v), 0,001 a 0,05% (p/v), 0,005 a 1% (p/v), 0,005 a 0,5% (p/v), 0,005 a 0,1% (p/v), 0,005 a 0,05% (p/v), ou 0,008 a 0,02% (p/v), com base na composição líquida total.
[0069] O tensoativo pode ser qualquer tensoativo que seja farmaceuticamente aceitável e capaz de dispersar uniformemente uma proteína em um meio de composição líquido. O tensoativo pode ser um tensoativo não iônico, por exemplo, pelo menos um selecionado do grupo que consiste em polissorbatos (por exemplo, polissorbato 20 (polioxietileno (20) monolaurato de sorbitano), polissorbato 40 (polioxietileno (20) monopalmitato de sorbitano), polissorbato 60 (monoestearato de polioxietileno (20) sorbitano), polissorbato 80 (monooleato de polioxietileno (20) sorbitano); o número (20) após o polioxietileno indica um número total de unidades de oxietileno (- (CH2CH2O) -)), um poloxâmero (PEO-PPO- Copolímero PEO; PEO: poli(óxido de etileno), PPO: poli(óxido de propileno)), um polietileno- polipropileno glicol, um composto de polioxietileno (por exemplo, estearato de polioxietileno, éter alquílico de polioxietileno (alquil: C1-C30), um polioxietileno monolauril éter, um copolímero de alquilfenil polioxietileno (alquil: C1-C30) etc.), dodecilsulfato de sódio (SDS) e similares. Por exemplo, o tensoativo pode ser um polissorbato (por exemplo, polissorbato 20).
7. Composição Líquida
[0070] A composição líquida pode compreender uma proteína; um açúcar, um derivado de açúcar e/ou um aminoácido; histidina (se compreendida) e um tensoativo (se compreendido) na respectiva concentração acima mencionada e o equilíbrio de um meio aquoso (por exemplo, água (água purificada), uma solução salina, uma solução de injeção, etc.)
[0071] A composição líquida fornecida na presente revelação pode ser isotônica com um corpo vivo. Por exemplo, a composição líquida pode ter uma pressão osmótica em uma faixa de cerca de 200 mOsm/kg a cerca de
450 mOsm/kg, cerca de 200 mOsm/kg a cerca de 400 mOsm/kg, cerca de 200 mOsm/kg a cerca de 350 mOsm/kg, cerca de 200 mOsm/kg a cerca de 330 mOsm/kg, cerca de 250 mOsm/kg a cerca de 450 mOsm/kg, cerca de 250 mOsm/kg a cerca de 400 mOsm/kg, cerca de 250 mOsm/kg a cerca de 350 mOsm/kg, cerca de 250 mOsm/kg a cerca de 330 mOsm/kg, cerca de 270 mOsm/kg a cerca de 450 mOsm/kg, cerca de 270 mOsm/kg a cerca de 400 mOsm/kg, 270 mOsm/kg a cerca de 350 mOsm/kg, 270 mOsm/kg a cerca de 330 mOsm/kg, cerca de 300 mOsm/kg a cerca de 450 mOsm/kg, cerca de 300 mOsm/kg a cerca de 400 mOsm/kg, cerca de 300 mOsm/kg a cerca de 350 mOsm/kg, ou cerca de 300 mOsm/kg a cerca de 330 mOsm/kg, mas sem limitações às mesmas. A pressão osmótica pode ser ajustada pelo estabilizador.
[0072] A composição líquida fornecida na presente revelação pode ter uma condutividade elétrica em uma faixa de cerca de 0 mS/cm ou maior (ou maior que 0 mS/cm), cerca de 0,0001 mS/cm ou maior, ou cerca de 0,001 mS/cm ou maior, por exemplo, cerca de 0 mS/cm a cerca de 10 mS/cm, cerca de 0 mS/cm a cerca de 7 mS/cm, 0 mS/cm a cerca de 5 mS/cm, cerca de 0 mS/cm a cerca de 2,5 mS/cm, cerca de 0 mS/cm a cerca de 1 mS/cm, cerca de 0 mS/cm a cerca de 0,5 mS/cm, cerca de 0 mS/cm a cerca de 0,1 mS/cm, cerca de 0 mS/cm a cerca de 0,05 mS/cm, mais de cerca de 0 mS/cm e cerca de 10 mS/cm ou menos, mais de cerca de 0 mS/cm e cerca de 7 mS/cm ou menos, mais que 0 mS/cm e cerca de 5 mS/cm ou menos, mais que cerca de 0 mS/cm e cerca de 2,5 mS/cm ou menos, mais que cerca de 0 mS/cm e cerca de 1 mS/cm ou menos, mais que cerca de 0 mS/cm e cerca de 0,5 mS/cm ou menos, mais que cerca de 0 mS/cm e cerca de 0,1 mS/cm ou menos, cerca de mais de 0 mS/cm e cerca de 0,05 mS/cm ou menos, cerca de 0,0001 mS/cm a cerca de 10 mS/cm, cerca de 0,0001 mS/cm a cerca de 7 mS/cm, 0,0001 mS/cm a cerca de 5 mS/cm, cerca de 0,0001 mS/cm a cerca de 2,5 mS/cm, cerca de 0,0001 mS/cm a cerca de 1 mS/cm, cerca de 0,0001 mS/cm a cerca de 0,5 mS/cm, cerca de 0,0001 mS/cm a cerca de 0,1 mS/cm, cerca de 0,0001 mS/cm a cerca de 0,05 mS/cm, cerca de 0,001 mS/cm a cerca de 10 mS/cm, cerca de 0,001 mS/cm a cerca de 7 mS/cm, 0,001 mS/cm a cerca de 5 mS/cm, cerca de 0,001 mS/cm a cerca de 2,5 mS/cm, 0,001 mS/cm a cerca de 1 mS/cm, cerca de 0.001 mS/cm a cerca de 0,5 mS/cm, cerca de 0,001 mS/cm a cerca de 0,1 mS/cm, ou cerca de 0,001 mS/cm a cerca de 0,05 mS/cm.
[0073] A composição líquida fornecida pela presente revelação pode ser mantida de forma estável por 4 semanas ou mais em alta temperatura de cerca de 40 ºC.
[0074] Como usado no presente documento, a expressão “excelente estabilidade” ou “mantida de forma estável” em associação com a composição líquida significa que a proteína na composição retém a estrutura e/ou propriedades físicas, químicas e/ou biológicas da mesma durante o armazenamento (por exemplo, baixo peso molecular alto, baixa taxa de agregação de proteína, baixa taxa de degradação de proteína e/ou baixa quantidade de variante ácida, durante o armazenamento).
Várias análises para avaliar a estabilidade da proteína são bem conhecidas no campo relacionado. A composição líquida fornecida na presente revelação, que está livre de um tampão ou compreende histidina, pode exibir um baixo peso molecular alto (taxa de agregação de proteína) e/ou uma quantidade de variante ácida baixa (taxa de variantes ácidas), em comparação com o caso que compreende um tampão diferente de histidina, por exemplo, compreendendo um acetato ou um succinato.
[0075] Por exemplo, quando a composição líquida fornecida na presente revelação compreende uma proteína (anticorpo) a uma concentração de 60 mg/ml, 70 mg/ml ou 80 mg/ml, variação na quantidade de agregado de proteína ou taxa de agregação (alto peso molecular % (p/v);% HMW) durante o armazenamento a 40 ºC por uma semana ou mais, por exemplo, uma, duas, três ou quatro semanas (por exemplo, a variação pode se referir a Δ% HMW; % HMW na semana 4 - % HMW na semana 0 (inicial)) pode ser cerca de 5% ou menos, por exemplo, cerca de 4,5% ou menos, cerca de 4% ou menos, cerca de 3,5% ou menos, cerca de 3% ou menos, cerca de 2,5% ou menos, cerca de 2% ou menos, cerca de 1,5% ou menos, cerca de 1% ou menos, cerca de 0,9% ou menos, cerca de 0,8% ou menos, cerca de 0,7% ou menos, cerca de 0,65% ou menos, cerca de 0,6% ou menos, cerca de 0,55 % ou menos, cerca de 0,5% ou menos, cerca de 0,45% ou menos, ou cerca de 0,4% ou menos, conforme medido por SEC convencional (cromatografia por exclusão de tamanho), mas não está limitado a isso.
[0076] Em outra modalidade, quando a composição líquida fornecida na presente revelação compreende uma proteína (anticorpo) a uma concentração de 60 mg/ml, 70 mg/ml ou 80 mg/ml, variação na quantidade de agregado de proteína ou taxa de agregação (Alto Peso Molecular % (p/v);% HMW) durante o armazenamento a 40 ºC por uma semana ou mais, por exemplo, uma, duas, três ou quatro semanas (por exemplo, a variação pode se referir a Δ% HMW; % HMW na semana 4 - % HMW na semana 0 (inicial)) pode ser inferior ao de uma composição líquida que é idêntica à composição líquida da presente revelação, exceto por compreender pelo menos um selecionado de um acetato, um succinato e um glutamato como um tampão e/ou não compreendendo histidina, em cerca de 0,01% ou mais, cerca de 0,5% ou mais, cerca de 0,1% ou mais, cerca de 0,15% ou mais, cerca de 0,2% ou mais, cerca de 0,25% ou mais, cerca de 0,3% ou mais, cerca de 0,35% ou mais, cerca de 0,4% ou mais, cerca de 0,45% ou mais, cerca de 0,5% ou mais, cerca de 0,55% ou mais, cerca de 0,6% ou maior, cerca de 0,65% ou mais, cerca de 0,7% ou mais, cerca de 0,75% ou mais, cerca de 0,8% ou mais, cerca de 0,85% ou mais, cerca de 0,9% ou mais, cerca de 0,95% ou mais, ou cerca de 1% ou mais , por exemplo, em cerca de 0,01% a cerca de 2%, cerca de 0,05% a cerca de 2%, cerca de 0,1% a cerca de 2%, cerca de 0,15% a cerca de 2%, cerca de 0,2% a cerca de 2%, cerca de 0,25% a cerca de 2%, cerca de 0,3% a cerca de 2%, cerca de 0,35% a cerca de 2%, cerca de 0,4% a cerca de 2%, cerca de 0,45% a cerca de 2%, cerca de 0,5% a cerca de 2%, cerca de 0,55% a cerca de 2% , cerca de 0,6% a cerca de 2%, cerca de 0,65% a cerca de 2%, cerca de 0,7% a cerca de 2%, 0,75% a cerca de 2%, 0,8% a cerca de 2%, 0,85% a cerca de 2%, 0,9% a cerca de 2%, 0,95% a cerca de 2% ou 1% a cerca de 2%, conforme medido por SEC convencional (cromatografia por exclusão de tamanho), mas não se limita aos mesmos.
[0077] Em outra modalidade, quando a composição líquida fornecida na presente revelação compreende uma proteína (anticorpo) com um teor de 60 mg/ml, 70 mg/ml ou 80 mg/ml, variação na quantidade de variante ácida (% ácido) durante o armazenamento a 40 ºC por uma semana ou mais, por exemplo, uma, duas, três ou quatro semanas, por exemplo, a variação pode se referir a Δ% ácida; % Ácida na semana 4 - % ácida na semana 0 (inicial)) pode ser cerca de 30,0% ou menos, cerca de 28,0% ou menos, cerca de 25,0% ou menos, cerca de 23% ou menos, cerca de 20% ou menos, cerca de 18% ou menos, cerca de 15% ou menos, cerca de 13% ou menos, cerca de 10% ou menos, cerca de 9% ou menos, cerca de 8% ou menos, cerca de 7,5% ou menos, cerca de 7,2% ou menos, cerca de 7% ou menos , cerca de 6,9% ou menos, cerca de 6,8% ou menos, cerca de 6,7% ou menos, cerca de 6,6% ou menos, cerca de 6,5% ou menos, cerca de 6,4% ou menos, cerca de 6,3% ou menos, cerca de 6,2% ou menos, cerca de 6,1% ou menos, cerca de 6,0% ou menos, cerca de 5,9% ou menos, cerca de 5,8% ou menos, cerca de 5,7% ou menos, cerca de 5,6% ou menos, cerca de 5,5% ou menos, cerca de 5,4% ou menos, cerca de 5,3% ou menos, cerca de 5,2% ou menos, cerca de 5,1% ou menos, ou cerca de 5,0% ou menos, conforme medido por CEX convencional (cromatografia de troca catiônica), mas não limitado aos mesmos.
[0078] Em outra modalidade, quando a composição líquida fornecida na presente revelação compreende uma proteína (anticorpo) a uma concentração de 60 mg/ml, 70 mg/ml ou 80 mg/ml, variação na quantidade de variante ácida (% Ácida) durante o armazenamento a 40 ºC por uma semana ou mais, por exemplo, uma, duas, três ou quatro semanas (por exemplo, a variação pode se referir a Δ%
Ácida; % Ácida na semana 4 - % Ácida na semana 0
(inicial)), que é inferior ao de uma composição líquida que é idêntica à composição líquida da presente revelação, exceto por compreender pelo menos um selecionado de um acetato, um succinato e um glutamato como um tampão e/ou não compreendendo histidina, em cerca de 0,01% ou mais, cerca de 0,5% ou mais, cerca de 0,1% ou mais, cerca de 0,15% ou mais, cerca de 0,2% ou mais,
cerca de 0,25% ou mais, cerca de 0,3% ou mais, cerca de
0,35% ou mais, cerca de 0,4% ou mais, cerca de 0,45% ou mais, cerca de 0,5% ou mais, cerca de 0,55% ou mais,
cerca de 0,6% ou mais, cerca de 0,65% ou mais, cerca de
0,7% ou mais, cerca de 0,75% ou mais, cerca de 0,8% ou mais, cerca de 0,85% ou mais, cerca de 0,9% ou mais,
cerca de 0,95% ou mais, ou cerca de 1% ou mais, por exemplo, cerca de 0,01% a cerca de 2%, cerca de 0,05% a cerca de 2%, cerca de 0,1% a cerca de 2%, cerca de 0,15%
a cerca de 2%, cerca de 0,2% a cerca de 2%, cerca de
0,25% a cerca de 2%, cerca de 0,3% a cerca de 2%, cerca de 0,35% a cerca de 2%, cerca de 0.4% a cerca de 2%,
cerca de 0,45% a cerca de 2%, cerca de 0,5% a cerca de
2%, cerca de 0,55% a cerca de 2%, cerca de 0,6% a cerca de 2%, cerca de 0,65% a cerca de 2%, cerca de 0,7% a cerca de 2%, 0,75% a cerca de 2%, 0,8% a cerca de 2%,
0,85% a cerca de 2%, 0,9% a cerca de 2%, 0,95% a cerca de 2%, ou 1% a cerca de 2%, conforme medido por SEC convencional (cromatografia por exclusão de tamanho), mas não se limita aos mesmos.
8. Composição Farmacêutica
[0079] Outra modalidade fornece uma composição farmacêutica que compreende a composição líquida. Quando a composição líquida compreende, por exemplo, um anticorpo anti-RANKL como a proteína, a composição farmacêutica pode ter um efeito profilático ou terapêutico na osteoporose, câncer ou metástase de câncer (por exemplo, metástase óssea de câncer). Portanto, uma modalidade fornece uma composição farmacêutica que compreende a composição líquida, para prevenção ou tratamento de osteoporose, câncer ou metástase de câncer (por exemplo, metástase óssea de câncer).
[0080] A composição líquida ou a composição farmacêutica pode ser administrada a mamíferos, incluindo seres humanos.
[0081] A composição líquida ou a composição farmacêutica pode ser administrada oralmente ou parenteralmente. Para administração parenteral (por exemplo, injeção), uma via de administração pode ser selecionada a partir das vias intravenosa, subcutânea, intramuscular, intraperitoneal, intradérmica, local,
intranasal, intrapulmonar, intrarectal e intratumoral e assim por diante.
[0082] Em uma modalidade, dado que a composição líquida compreende um anticorpo anti-RANKL, a composição líquida ou a composição farmacêutica pode ser administrada por via intravenosa ou subcutânea.
[0083] A composição líquida ou a composição farmacêutica podem ser preparadas em formulações adequadas para as vias de administração.
[0084] A composição líquida ou a composição farmacêutica pode compreender um carreador farmaceuticamente aceitável. O termo “carreador farmaceuticamente aceitável”, como usado no presente documento, pode referir-se a pelo menos um selecionado de enchimentos sólidos, semissólidos ou líquidos, diluentes, materiais de encapsulação, auxiliares de formulação e qualquer excipiente convencional, que são todos não tóxicos.
9. Método para Estabilização de Proteína ou Método para Preparação de Composição Líquida Estabilizada de Proteína
[0085] Outra modalidade fornece um método para estabilizar uma proteína ou para preparar uma composição líquida estabilizada de uma proteína, em que o método compreende uma etapa de mistura dos ingredientes descritos acima.
[0086] Uma modalidade fornece um método para estabilizar uma proteína ou para preparar uma composição líquida estabilizada de uma proteína, em que o método compreende uma etapa de mistura: (1) da proteína com um açúcar, um derivado de açúcar e/ou um aminoácido; ou (2) da proteína com um açúcar, um derivado de açúcar e/ou um aminoácido, e histidina.
[0087] Quando compreende a etapa (1), o método pode não compreender a mistura de pelo menos um selecionado de um acetato, um succinato e um glutamato, ou a mistura de um tampão. O método que compreende a etapa (1) ou a etapa (2), pode ainda compreender a mistura de um tensoativo.
[0088] Os tipos e quantidades de ingredientes individuais usados no método de estabilização de uma proteína ou na preparação de uma composição líquida aquosa estabilizada de uma proteína são conforme descrito acima.
Efeito da Invenção
[0089] Para formulações de fármacos de uma proteína, como um anticorpo, a otimização é feita em relação aos tipos e concentrações de tampões, tipos e concentrações de estabilizadores e valores de pH,
alcançando assim formulações de fármacos de proteínas com estabilidade aprimorada dos fármacos de proteína.
Breve Descrição dos Desenhos
[0090] A Figura 1a é um gráfico que mostra Δ% HMW média em formulações de proteína líquida a 40 ºC durante quatro semanas, conforme medido no Exemplo 1.2, em que o painel esquerdo mostra Δ% HMW média de acordo com os tipos de tampão e o painel direito mostra Δ% HMW média de acordo com tipos de estabilizador, e na Figura 1c, as linhas pontilhadas indicam Δ% HMW média (0,69%) da formulação de PROLIA®.
[0091] A Figura 1b é um gráfico que mostra Δ% Ácida média em formulações de proteína líquida a 40 ºC durante quatro semanas, conforme medido no Exemplo 1.2, em que o painel esquerdo mostra Δ% Ácida média de acordo com os tipos de tampão e o painel direito mostra Δ% Ácida média de acordo com tipos de estabilizador.
[0092] A Figura 2a é um gráfico que mostra Δ% HMW média em formulações de proteína líquida a 40 ºC durante quatro semanas, conforme medido no Exemplo 2.2, em que o painel esquerdo mostra Δ% HMW média de acordo com as concentrações do fármaco de proteína, o painel do meio mostra Δ% HMW média de acordo com os tipos de tampão, e o painel direito mostra Δ% HMW média de acordo com tipos de estabilizador.
[0093] A Figura 2b é um gráfico que mostra Δ% Ácida média em formulações de proteína líquida a 40 ºC durante quatro semanas, conforme medido no Exemplo 2.2, em que o painel esquerdo mostra Δ% Ácida média de acordo com as concentrações do fármaco de proteína, o painel do meio mostra Δ% Ácida média de acordo com os tipos de tampão, e o painel direito mostra Δ% Ácida média de acordo com tipos de estabilizador.
[0094] A Figura 3 é um gráfico que mostra Δ% HMW média em formulações de proteína líquida a 40 ºC por quatro semanas de acordo com as concentrações da fármaco de proteína, tipos de tampão, tipos de estabilizador e pH, conforme medido no Exemplo 3.
Modo para Invenção
[0095] Uma melhor compreensão da presente revelação pode ser obtida através dos seguintes exemplos que são apresentados para ilustrar, mas não devem ser interpretados como limitantes da presente revelação.
EXEMPLO 1: Seleção do Tampão/Estabilizador 1,1. Preparação da Formulação Líquida
[0096] Formulações líquidas com um pH de 5,2 e compreendendo 60 mg/ml de denosumabe (Nº de Acesso DB06643), que é um anticorpo monoclonal humano anti- RANKL, como um fármaco de proteína, 0,01% de polissorbato 20 (PS20), tampões e estabilizadores conforme indicado na
Tabela 1 abaixo, foram preparadas.
Tabela 1 N°. Padrão Tampão Estabilizador 1-3 Ácido acético (17 mM) 4,7% de Sorbitol 1 Ácido acético (17 mM) 4,7% de Sorbitol 2 Ácido acético (17 mM) 4,7% de Sorbitol 3 Ácido acético (17 mM) 4,7% de Sorbitol 4 Ácido acético (17 mM) 8% de Sacarose 5 Ácido acético (17 mM) 8% de Trealose 6 Ácido acético (17 mM) 140 mM de Arginina-HCl 7 Ácido acético (17 mM) 0,8% de NaCl 8 Succinato (17 mM) 4,7% de Sorbitol 9 Succinato (17 mM) 8% de Sacarose 10 Succinato (17 mM) 8% de Trealose 11 Succinato (17 mM) 140 mM de Arginina-HCl 12 Succinato (17 mM) 0,8% de NaCl 13 Histidina (17 mM) 4,7% de Sorbitol 14 Histidina (17 mM) 8% de Sacarose 15 Histidina (17 mM) 8% de Trealose 16 Histidina (17 mM) 140 mM de Arginina-HCl 17 Histidina (17 mM) 0,8% de NaCl 18 Sem tampão 4,7% de Sorbitol 19 Sem tampão 8% de Sacarose 20 Sem tampão 8% de Trealose 21 Sem tampão 140 mM de Arginina-HCl 22 Sem tampão 0,8% de NaCl (1-3: formulações com a mesma composição que PROLIA®; %: p/v) 1,2. Medição de %HMW e %Ácida (condição a 40 °C)
[0097] A fim de testar a estabilidade das formulações líquidas (denosumabe 60 mg/ml, pH 5,2) compreendendo várias combinações de tampões/estabilizadores, preparadas no Exemplo 1.1, as formulações líquidas foram armazenadas a 40 ºC por quatro semanas, e alto peso molecular (% HMW) e quantidades de variantes ácidas (% Ácida) nas formulações líquidas foram medidas por SEC (cromatografia por exclusão por tamanho) e CEX (cromatografia de troca catiônica), respectivamente. Em detalhe, %HMW foi medida usando SEC (cromatografia por exclusão de tamanho) e % Ácida foi medida usando CEX (cromatografia de troca catiônica).
[0098] Em mais detalhes, SEC (cromatografia de exclusão de tamanho) foi conduzida usando o sistema de HPLC de Waters de acordo com o manual do fabricante. Um total de três picos são separados de acordo com o tempo de retenção (pesos moleculares das proteínas). Os três picos correspondem a um pico HMW, um pico de monômero e um pico LMW na ordem de tempos de retenção curtos (grandes pesos moleculares). A substância detectada antes do monômero é definida como HMW. % HMW foi medida usando o HPLC (aliança do módulo de separação Waters 2695) e a coluna (Tosoh, TSK-gel G3000 SWXL) a uma taxa de fluxo de 0,7 ml/min. sob um tempo de execução de injeção de 24 min (% HMW = ÁreaHMW/ÁreaTOTAL x 100).
[0099] Além disso, CEX (cromatografia de troca catiônica) foi conduzida usando o sistema de HPLC de Waters de acordo com o manual do fabricante. Um total de três picos são separados de acordo com os tempos de retenção (cargas de proteína). Os três picos correspondem a um pico ácido, um pico principal e um pico básico na ordem de tempos de retenção curtos. Uma substância detectada antes do pico principal é definida como o pico ácido. %Ácida foi medida usando o HPLC (aliança do módulo de separação Waters 2695) e a coluna (coluna Thermo Scientific, Propac WCX-10) a uma taxa de fluxo de 1,0 ml/min sob um tempo de execução de injeção de 32 min (% Ácida = ÁreaÁcida/ÁreaTOTAL x 100).
[00100] % HMW (% de alto peso molecular): % HMW = {área de HMW/área de (HMW + monômero + LMW)}*100; % Ácida: razão de variantes ácidas (% Ácida = {área de ácida/área de (ácida + principal + básica)}*100).
[00101] Os resultados estão resumidos na Tabela 2 para % HMW (% HMW na semana 0, % HMW na semana 4) e Δ% HMW (% HMW na semana 4 - % HMW na semana 0) e na Tabela 3 para % Ácida (% Ácida na semana 0, % Ácida na semana 4) e Δ% Ácida (% Ácida na semana 4 - % Ácida na semana 0): Tabela 2 %HMW Tampão N°. (N°. 1~17: Estabilizador Semana Semana 4 Padrão 17 mM) 0 % HMW Δ% HMW
N°. Tampão Estabilizador %HMW 0,44 1,14 0,69 Ácido 4,7% de 1-3 N=3, N=3, N=3, acético Sorbitol SD:0,04 SD:0,07 SD:0,09 Ácido 4,7% de 1 0,47 1,07 0,60 acético Sorbitol Ácido 4,7% de 2 0,47 1,12 0,65 acético Sorbitol Ácido 4,7% de 3 0,39 1,22 0,83 acético Sorbitol Ácido 4 8% de Sacarose 0,40 1,15 0,75 acético Ácido 5 8% de Trealose 0,43 0,87 0,44 acético Ácido 140 mM de 6 0,41 1,34 0,93 acético Arginina-HCl Ácido 7 0,8% de NaCl 0,46 2,03 1,57 acético 4,7% de 8 Succinato 0,42 1,24 0,82 Sorbitol 9 Succinato 8% de Sacarose 0,41 1,34 0,93 10 Succinato 8% de Trealose 0,43 1,29 0,86 140 mM de 11 Succinato 0,40 1,74 1,34 Arginina-HCl 12 Succinato 0,8% de NaCl 0,47 2,40 1,93 4,7% de 13 Histidina 0,40 0,87 0,47 Sorbitol 14 Histidina 8% de Sacarose 0,40 0,83 0,43 15 Histidina 8% de Trealose 0,40 0,89 0,49 140 mM de 16 Histidina 0,28 1,17 0,89 Arginina-HCl 17 Histidina 0,8% de NaCl 0,42 1,84 1,42 4,7% de 18 Sem tampão 0,53 1,02 0,49 Sorbitol 19 Sem tampão 8% de Sacarose 0,51 0,99 0,48 20 Sem tampão 8% de Trealose 0,50 1,06 0,56 21 Sem tampão 140 mM de 0,39 1,15 0,76
N°. Tampão Estabilizador %HMW Arginina-HCl 22 Sem tampão 0,8% de NaCl 0,50 1,85 1,35
[00102] (1-3: formulações com a mesma composição que PROLIA®) Tabela 3 Padrão % Ácida N°. Tampão (N°. Semana 4 Estabilizador Semana 1~17: 17mM) 0 Δ% % Ácida Ácida 17,62 25,31 7,69 Ácido 1-3 Sorbitol N=3, N=3, N=3, acético SD:0,13 SD:0,24 SD:0,06 Ácido 1 Sorbitol 17,78 25,42 7,64 acético Ácido 2 Sorbitol 17,46 25,53 8,07 acético Ácido 3 Sorbitol 17,62 24,97 7,35 acético Ácido 4 Sacarose 18,39 25,19 6,8 acético Ácido 5 Trealose 18,01 24,9 6,89 acético Ácido 6 Arginina-HCl 17,23 23,72 6,49 acético Ácido 7 NaCl 17,59 24,36 6,77 acético 8 Succinato Sorbitol 18,3 29,32 11,02 9 Succinato Sacarose 17,91 29,26 11,35 10 Succinato Trealose 17,95 28,29 10,34 11 Succinato Arginina-HCl 17,19 25,16 7,97 12 Succinato NaCl 18,21 26,87 8,66 13 Histidina Sorbitol 18,11 23,93 5,82 14 Histidina Sacarose 17,27 23,81 6,54 15 Histidina Trealose 18,14 24,01 5,87
Padrão % Ácida N°. Tampão (N°. Semana 4 Estabilizador Semana 1~17: 17mM) 0 Δ% % Ácida Ácida 16 Histidina Arginina-HCl 17,94 23,71 5,77 17 Histidina NaCl 17,76 24,67 6,91 18 Sem tampão Sorbitol 18,7 23,78 5,08 19 Sem tampão Sacarose 17,88 25,11 7,23 20 Sem tampão Trealose 18,45 25,35 6,9 21 Sem tampão Arginina-HCl 17,5 24,24 6,74 22 Sem tampão NaCl 18,4 24,08 5,68 (1-3: formulações com a mesma composição que PROLIA®)
[00103] Além disso, Δ% HMW média durante quatro semanas está representada nas Figuras 1a e 1c (Δ% HMW; esquerda: Δ% HMW média de acordo com os tipos de tampão, direita: Δ% HMW média de acordo com os tipos do estabilizador, linhas pontilhadas da Figura 1c: Δ% HMW média (0,69%) da formulação de PROLIA®) e Δ% Ácida média por quatro semanas é representado na Figura 1b (Δ% Ácida; esquerda: Δ% Ácida média de acordo com os tipos de tampão, direita: Δ% Ácida média de acordo com os tipos do estabilizador).
[00104] Sob a condição de denosumabe 60 mg/ml e pH 5,2, como é entendido a partir dos dados das Tabelas 2 e 3 e Figuras 1a e 1b, as formulações 13-17, que compreendem histidina como um tampão e as formulações 18- 22, que são livres de um tampão, apresentaram menor Δ%
HMW e/ou menor Δ% Ácida, em comparação com as formulações 1-12, que incluíram um ácido acético ou um succinato como tampão. Δ% HMW inferior e/ou Δ% Ácida inferior foi medida nas formulações contendo sorbitol, sacarose, trealose ou Arg, especificamente nas formulações contendo sorbitol, sacarose ou trealose e, mais especificamente, nas formulações contendo sorbitol como estabilizador. Estes resultados demonstram que as formulações que compreendem histidina como um tampão ou são livres de um tampão e compreendem sorbitol, sacarose, trealose ou Arg como um estabilizador permitem que o fármaco de proteína seja mais estável, em comparação com uma formulação contendo um ácido acético ou um succinato como tampão.
[00105] Os valores médios de alto peso molecular (% HMW) e quantidades de variantes ácidas (% Ácida) nas formulações compreendendo vários estabilizadores (sorbitol, sacarose, trealose, Arg ou NaCl) listados nas Tabelas 2 e 3 estão resumidos na Tabela 4, abaixo: Tabela 4 % HMW Média % Ácida Média Média Tampão (N°. Semana 4 Semana 4 de 1~17: 17 mM) Semana Semana Padrão 0 % Δ% 0 % Δ% HMW HMW Ácida Ácida Ácido 1-7 0,43 1,31 0,88 17,77 24,70 6,93 acético 8-12 Succinato 0,43 1,60 1,18 17,91 27,78 9,87 13-17 Histidina 0,38 1,12 0,74 17,84 24,03 6,18
% HMW Média % Ácida Média Média Tampão (N°. Semana 4 Semana 4 de 1~17: 17 mM) Semana Semana Padrão 0 % Δ% 0 % Δ% HMW HMW Ácida Ácida 18-22 Sem tampão 0,49 1,21 0,73 18,19 24,51 6,33
[00106] Sob as condições de denosumabe de 60 mg/ml e pH 5,2, como pode ser vista na Tabela 4, as formulações 13-17, que compreendem histidina como um tampão e as formulações 18-22, que são livres de um tampão, apresentaram menor Δ% HMW média e/ou menor Δ% Ácida média, em comparação com as formulações 1-12, que compreendem um ácido acético ou um succinato como tampão.
Estes resultados demonstram claramente que as formulações que compreendem histidina como tampão ou não contêm tampão permitem que o fármaco de proteína seja mais estável.
EXEMPLO 2: Estabilidade Dependente do Teor de Fármaco de Proteína 2,1. Preparação da Formulação Líquida
[00107] Foram preparadas formulações líquidas com pH 5,2, que compreendem o anticorpo monoclonal humano anti-RANKL denosumabe a uma concentração de 60 mg/ml, 70 mg/ml ou 80 mg/ml, polissorbato 20 a 0,01% (PS20), um tampão (acetato ou histidina) e um estabilizador (sorbitol, sacarose ou trealose), conforme listado na
Tabela 5.
Tabela 5 N°. Conc. De Tampão Estabilizador Padrão Proteína 4,7% de 1-3 Sorbitol Ácido 8,0% de 4 acético Sacarose 8,0% de 5 Trealose 60 mg/ml 4,7% de 6 Sorbitol 8,0% de 7 Histidina Sacarose 8,0% de 8 Trealose 4,7% de 9-11 Sorbitol Ácido 8,0% de 12 acético Sacarose 8,0% de 13 Trealose 70 mg/ml 4,7% de 14 Sorbitol 8,0% de 15 Histidina Sacarose 8,0% de 16 Trealose 4,7% de 17 Sorbitol Ácido 8,0% de 18 acético Sacarose 80 mg/ml 8,0% de 19 Trealose 4,7% de 20 Histidina Sorbitol
N°. Conc. De Tampão Estabilizador 8,0% de 21 Sacarose 8,0% de 22 Trealose 23-25 60 mg/ml Prolia® (1-3: formulações com a mesma composição de PROLIA®; 9- 11: formulações com composição similar à do Xgeva®; %: p/v)
2.2. Medição de %HMW e %Ácida (condição a 40 °C)
[00108] A fim de testar a estabilidade das formulações líquidas (pH 5,2) que compreendem várias concentrações do fármaco de proteína (denosumabe) e várias combinações de tampões/estabilizadores, preparadas no Exemplo 2.1, as formulações líquidas foram medidas para agregação de proteínas e quantidades de variantes ácidas com referência ao Exemplo 1.2 ao ser armazenado a 40 ºC por quatro semanas.
[00109] As medições estão resumidas na Tabela 6 para % HMW (% HMW na semana 0, % HMW na semana 4) e Δ% HMW (% HMW na semana 4 - % HMW na semana 0) e na Tabela 7 para % Ácida (% Ácida na semana 0, % Ácida na semana 4) e Δ% Ácida (% Ácida na semana 4 - % Ácida na semana 0): Tabela 6 Padrão Conc. De % HMW Tampão Estabilizador N°. Proteína Semana Semana 4
0 % Δ%
HMW HMW 0,43 0,86 0,43 4,7% de N=3, N=3, N=3, 1 a 3 Sorbitol SD: SD: SD: 0,03 0,03 0,02 Ácido 8,0% de 4 acético 0,43 0,93 0,50 Sacarose 8,0% de 5 0,45 1,05 0,60 Trealose 60 mg/ml 1-5 Média 0,44 0,95 0,51 4,7% de 6 0,41 0,66 0,25 Sorbitol 8,0% de 7 0,44 0,74 0,30 Histidina Sacarose 8,0% de 8 0,46 0,74 0,28 Trealose 6-8 Média 0,44 0,71 0,28 0,47 1,04 0,57 4,7% de N=3, N=3, N=3, 9-11 Sorbitol SD: SD: SD: 0,04 0,05 0,08 Ácido 8,0% de 12 acético 0,47 1,05 0,58 Sacarose 8,0% de 13 0,46 0,98 0,52 Trealose 70 mg/ml 9-13 Média 0,47 1,02 0,56 4,7% de 14 0,53 0,79 0,26 Sorbitol 8,0% de 15 0,48 0,81 0,33 Histidina Sacarose 8,0% de 16 0,48 0,78 0,30 Trealose 14-16 Média 0,50 0,79 0,30 4,7% de 17 0,51 1,16 0,65 Sorbitol Ácido 8,0% de 18 80 mg/ml 0,49 1,24 0,75 acético Sacarose 8,0% de 19 0,51 1,26 0,75 Trealose
% HMW Padrão Conc. De Semana 4 Tampão Estabilizador Semana N°. Proteína 0 % Δ%
HMW HMW 17-19 Média 0,50 1,22 0,72 4,7% de 20 0,51 0,84 0,33 Sorbitol 8,0% de 21 0,53 1,01 0,48 Histidina Sacarose 8,0% de 22 0,48 0,88 0,40 Trealose 20-22 Média 0,51 0,91 0,40 0,61 0,98 0,36 23-25 60 mg/ml N=3, N=3, N=3, Prolia® SD: SD: SD: 0,01 0,07 0,08 (1-3: formulações com a mesma composição que PROLIA®; 9- 11: formulações com a composição similar àquela de Xgeva®) Tabela 7 % Ácida Padrão Conc. De Semana 4 Tampão Estabilizador Semana N°. Proteína 0 % Δ% Ácida Ácida 18,36 24,32 5,96 4,7% de N=3, N=3, N=3, 1-3 Sorbitol SD: SD: SD: 0,09 0,10 0,17 Ácido 8,0% de 4 acético 18,37 24,27 5,90 60 mg/ml Sacarose 8,0% de 5 18,21 23,70 5,49 Trealose 1-5 Média 18,31 24,10 5,78 4,7% de 6 Histidina 17,96 23,31 5,35 Sorbitol
% Ácida Padrão Conc.
De Semana 4 Tampão Estabilizador Semana N°. Proteína 0 % Δ% Ácida Ácida 8,0% de 7 17,62 23,71 6,09 Sacarose 8,0% de 8 18,27 23,57 5,30 Trealose 6-8 Média 17,95 23,53 5,58 18,18 24,36 6,18 4,7% de N=3, N=3, N=3, 9-11 Sorbitol SD: SD: SD: 0,12 0,52 0,41 Ácido 8,0% de 12 acético 18,01 23,68 5,67 Sacarose 8,0% de 13 18,39 24,13 5,74 Trealose 70 mg/ml 9-13 Média 18,19 24,06 5,86 4,7% de 14 18,18 23,18 5,00 Sorbitol 8,0% de 15 18,49 23,86 5,37 Histidina Sacarose 8,0% de 16 18,37 23,28 4,91 Trealose 14-16 Média 18,35 23,44 5,09 4,7% de 17 18,19 24,19 6,00 Sorbitol 8,0% de 18 Ácido 17,94 24,93 6,99 Sacarose acético 8,0% de 19 17,98 23,76 5,78 Trealose 17-19 Média 18,04 24,29 6,26 80 mg/ml 4,7% de 20 18,04 23,25 5,21 Sorbitol 8,0% de 21 18,16 24,00 5,84 Histidina Sacarose 8,0% de 22 18,06 23,10 5,04 Trealose 20-22 Média 18,09 23,45 5,36
% Ácida Padrão Conc. De Semana 4 Tampão Estabilizador Semana N°. Proteína 0 % Δ% Ácida Ácida 20,24 27,86 7,62 23-25 60 mg/ml N=3, N=3, N=3, Prolia® SD: SD: SD: 0,20 0,85 0,67 (1-3: formulações com a mesma composição que PROLIA®; 9- 11: formulações com a composição similar àquela de Xgeva®)
[00110] Além disso, Δ% HMW média durante quatro semanas está representada na Figura 2a (Δ% HMW; esquerda: Δ% HMW média de acordo com as concentrações do fármaco de proteína, meio: Δ% HMW média de acordo com os tipos de tampão, direita: Δ% HMW média de acordo com os tipos de estabilizador) e Δ% Ácida média por quatro semanas é representado na Figura 2b (Δ% Ácida; esquerda: Δ% Ácida média de acordo com as concentrações do fármaco de proteína, meio: Δ% Ácida média de acordo com os tipos de tampão, direita: Δ% Ácida média de acordo com os tipos de estabilizador).
[00111] Conforme mostrado nas Tabelas 6 e 7 e nas Figuras 2a e 2b, no seu conjunto, as formulações que contém histidina como tampão garantiram maior estabilidade do fármaco de proteína, em comparação com as formulações que contém ácido acético. Inter alia, a formulação que compreende o fármaco de proteína (denosumabe) a uma concentração de 60 mg/ml e que compreende histidina como tampão e sorbitol como estabilizador demonstrou apresentar a estabilidade mais elevada do fármaco de proteína em particular. Além disso, como pode ser visto nos dados de valor médio das Tabelas 6 e 7, as formulações que compreendem histidina como um tampão têm valores médios de Δ% HMW e Δ% Ácida mais baixos em todas as concentrações do fármaco de proteína, especificamente, a 60 mg/ml ou 70 mg/ml do fármaco de proteína, em comparação com as formulações que compreendem ácido acético. Mais especificamente, a Δ%HMW média das formulações que compreendem histidina como tampão foi de cerca de 0,33%, enquanto a Δ% HMW média das formulações que compreendem ácido acético foi de 0,59%.
Além disso, a Δ% Ácida média das formulações que compreendem histidina como tampão foi de cerca de 5,35%, enquanto a Δ% Ácida média das formulações que compreendem ácido acético foi de 5,97%. Estes resultados demonstram que as formulações que compreendem histidina como um tampão são significativamente baixas em Δ% HMW e Δ% Ácida e superiores em termos de estabilidade da formulação em todas as concentrações de fármaco de proteína testadas, particularmente a 60 mg/ml ou 70 mg/ml, em comparação com as formulações que compreendem ácido acético.
EXEMPLO 3: Estabilidade dependendo da Concentração do Estabilizador, Concentração do Tampão, pH e Concentração do Fármaco de Proteína
[00112] Foram preparadas formulações líquidas que compreendem o anticorpo monoclonal humano anti-RANKL denosumabe como um fármaco de proteína, histidina como um tampão, sorbitol como um estabilizador e 0,01% de polissorbato 20 (PS20) conforme listado na Tabela 8, abaixo.
Tabela 8 Conc. Conc. Conc. Padrão Conc. De Tampão de pH Estabilizador Tensoativo N°. Proteína Histidina (%) (%) (mM) 1 4,0 10 2 5,5 4,9 3 4,0 30 4 5,5 50 mg/ml 5 4,0 10 6 5,5 5,5 7 4,0 30 8 5,5 9 4,0 0,01 10 10 5,5 4,9 11 4,0 30 12 5,5 80 mg/ml 13 4,0 10 14 5,5 5,5 15 4,0 30 16 5,5 17 65 mg/ml 5,2 20 4,75
Padrão Conc. De pH Conc. Conc. Conc. 18 4,75 19 4,75 (Na Tabela 8, % significa % (p/v))
[00113] As formulações líquidas assim preparadas foram medidas para Δ% HMW e Δ% Ácida com referência ao Exemplo 1.2, enquanto eram armazenadas a 40 ºC por quatro semanas,
[00114] Os resultados estão resumidos na Tabela 9 para % HMW (% HMW na semana 0, % HMW na semana 4) e Δ% HMW (% HMW na semana 4 - % HMW na semana 0) e na Tabela 10 para % Ácida (% Ácida na semana 0, % Ácida na semana 4) e Δ% Ácida (% Ácida na semana 4 - % Ácida na semana 0): Tabela 9 % HMW Conc. Conc. Padr Tampão Conc. Conc. 4 De 0 ão pH de Estabiliza Tensoati semanas Proteí N°. Histidi dor (%) vo (%) seman na as % Δ% na (mM)
HMW HMW 0,4 0,2 1 4,0 0,27 8 1 10 0,4 0,1 2 5,5 0,28 4, 5 7 50 9 0,5 0,3 3 4,0 0,01 0,27 mg/ml 8 1 30 0,6 0,3 4 5,5 0,26 2 6 5, 0,5 0,2 5 10 4,0 0,31 5 1 0
% HMW Conc. Conc. Padr Tampão Conc. Conc. 4 De 0 ão pH de Estabiliza Tensoati semanas Proteí N°. Histidi dor (%) vo (%) seman na as % Δ% na (mM)
HMW HMW 0,5 0,2 6 5,5 0,32 4 2 0,6 0,3 7 4,0 0,33 4 1 30 0,6 0,2 8 5,5 0,33 2 9 0,7 0,4 9 4,0 0,31 2 1 10 0,7 0,3 10 5,5 0,32 4, 1 9 9 0,9 0,6 11 4,0 0,31 3 2 30 0,9 0,5 12 5,5 0,31 80 0 9 mg/ml 0,9 0,5 13 4,0 0,40 1 1 10 0,9 0,5 14 5,5 0,40 5, 3 3 5 0,9 0,5 15 4,0 0,39 5 6 30 0,8 0,5 16 5,5 0,39 9 0 17 4,75 0,7 0,3 18 4,75 0 7 0,33 N=3 N=3 65 5, N=3, 20 , , mg/ml 2 SD: 19 4,75 SD: SD: 0,00 0,0 0,0 1 1 Tabela 10 Padr Conc. Conc. Conc. Conc. % Ácida ão De pH Tampão Estabiliza Tensoat 0 4 N°. Proteí de dor (%) ivo (%) seman semanas na Histidi as % Δ% na (mM) Áci Áci da da 20, 3,7 1 4,0 16,98 73 5 10 20, 3,7 2 5,5 16,78 4, 54 6 9 21, 3,9 3 4,0 17,29 20 1 30 20, 3,4 4 5,5 17,31 50 72 1 mg/ml 20, 3,0 5 4,0 17,56 63 7 10 21, 4,8 6 5,5 16,27 5, 12 5 5 21, 4,0 7 4,0 17,58 64 6 30 21, 4,6 8 5,5 17,08 70 2 20, 3,9 9 4,0 16,79 69 0 10 0,01 21, 3,9 10 5,5 17,20 4, 11 1 9 21, 4,2 11 4,0 16,84 11 7 30 20, 3,6 12 5,5 17,33 80 98 5 mg/ml 21, 4,4 13 4,0 17,21 68 7 10 21, 4,8 14 5,5 16,61 5, 42 1 5 21, 4,6 15 4,0 17,28 93 5 30 21, 3,9 16 5,5 17,36 33 7 17 4,75 20, 3,5 18 4,75 17,10 60 0 65 5, N=3, N=3 N=3 20 mg/ml 2 SD: , , 19 4,75 0,49 SD: SD: 0,2 0,5
% Ácida Conc. Conc. 4 Padr Tampão Conc. Conc. De 0 semanas ão pH de Estabiliza Tensoat Proteí N°. Histidi dor (%) ivo (%) seman % Δ% na as na (mM) Áci Áci da da 2 5
[00115] A Δ% HMW média de acordo com a concentração de proteína, concentração de tampão, concentração de estabilizador e pH por quatro semanas, como mostrado nas Tabelas 9 e 10, são representados na Figura 3. Como pode ser visto na Figura 3, dentro da faixa testada, a estabilidade da proteína foi aumentada com a diminuição da concentração do tampão e da concentração do fármaco da proteína na formulação. As concentrações do estabilizador e os valores de pH mostraram ter um nível equivalente de estabilidade da proteína em todos as faixas testadas.
EXEMPLO 4: Ensaio de Atividade de Denosumabe em Formulação Líquida
[00116] Foram preparadas formulações líquidas com pH 5,2, que compreendiam 60 mg/ml de denosumabe e 0,01% (p/v) de polissorbato 20 e compreendiam um tampão e um estabilizador conforme listado na Tabela 11. A fim de avaliar a atividade do ingrediente farmaceuticamente ativo denosumabe, as formulações foram medidas para %RBA (Atividade de Ligação Relativa) e %RP (Atividade de
Potência Relativa) de denosumabe contra RANKL ao ser armazenado a 40 ºC por quatro semanas.
[00117] %RP (Potência Relativa) foi medida da seguinte forma: Denosumabe e RANKL foram carregados sequencialmente em placas de 96 poços, seguidos por células RANK 293 (célula HEK 293 que expressa uma luciferase e um receptor RANK). Após a incubação, a % RP foi analisada usando o leitor multi-identificação EnVision® (PerkinElmer, 2015).
[00118] % RBA (Atividade de Ligação Relativa) foi medida da seguinte forma: As placas de 96 poços MaxiSorp (Nunc) foram revestidas com RANKL e bloqueadas, seguido de carregamento de denosumabe nas mesmas. Posteriormente, as placas foram tratadas com um anticorpo secundário e, em seguida, tratadas sequencialmente com uma solução de substância TMB ELISA e uma solução de parada. % RBA foi analisada usando um leitor de microplaca (SpectraMax 190).
[00119] Na Tabela 11, as medições a 40 ºC de % RBA na semana 0 (inicial) e na semana 4 e a variação das mesmas (Δ% RBA) durante 4 semanas, e % RP na semana 0 (inicial) e na semana 4 e a variação das mesmas (Δ % RP) por 4 semanas nas formulações de proteína líquida são resumidas: Tabela 11
RANKL Neutralização Inicia Inicia Estabilizado 4 semanas 4 semanas Tampão l l r % % % % RBA % RP % RP
RBA ΔRBA ΔRP 105 0 99 0 105 [N=3 [N=3 99 [N=3 [N=3 4,7% (p/v) [N=3, , , [N=3, , , Sorbitol SD:1] SD:3 SD:3 SD:0] SD:2 SD:2 17 mM de ] ] ] ] ácido acético 102 -4 91 -6 106 [N=3 [N=3 97 [N=3 [N=3 8,0% (p/v) [N=3, , , [N=3, , , Trealose SD:5] SD:2 SD:2 SD:1] SD:4 SD:4 ] ] ] ] 107 2 106 5 105 [N=3 [N=3 101 [N=3 [N=3 4,7% (p/v) [N=3, , , [N=3, , , Sorbitol SD:3] SD:1 SD:1 SD:8] SD:5 SD:5 17 mM de ] ] ] ] histidin a 111 4 100 8 107 [N=3 [N=3 92 [N=3 [N=3 8,0% (p/v) [N=3, , , [N=3, , , Trealose SD:5] SD:3 SD:3 SD:4] SD:2 SD:2 ] ] ] ] 100 -5 104 -1 105 [N=3 [N=3 105 [N=3 [N=3 Prolia® [N=3, , , [N=3, , , SD:5] SD:2 SD:2 SD:2] SD:0 SD:0 ] ] ] ]
[00120] Conforme mostrado na Tabela 11, as formulações que compreendem histidina como tampão retiveram a atividade (função) da proteína (denosumabe) muito bem por um período de tempo relativamente longo (4 semanas), mesmo sob a condição de estresse de 40 ºC.

Claims (50)

REIVINDICAÇÕES
1. Composição líquida, caracterizada pelo fato de que compreende um anticorpo anti-RANKL, tem um pH de 5 a 7 e está livre de um acetato.
2. Composição líquida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que está livre de um succinato.
3. Composição líquida, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que está livre de glutamato.
4. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que compreende histidina.
5. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que compreende 1 a 70 mM de histidina.
6. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que compreende histidina como um inibidor de agregação de proteína e/ou inibidor de variantes ácidas.
7. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que, conforme medido após armazenamento a 40 ºC por quatro semanas, a composição líquida tem variação em alto peso molecular (Δ% HMW) de 5,0% ou menos; ou tem variação em alto peso molecular (Δ% HMW) inferior em pelo menos 0,05% do que aquela da mesma composição, com a exceção de compreender pelo menos um selecionado do grupo que consiste em um acetato, um succinato e um glutamato, e/ou estar livre de histidina.
8. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que, conforme medido após armazenamento a 40 ºC por quatro semanas, a composição líquida tem variação na quantidade de variante ácida (Δ% Ácida) de 25,0% ou menos; ou tem variação na quantidade de variante ácida (Δ% Ácida) inferior em pelo menos 0,05% do que aquela da mesma composição, com a exceção de compreender pelo menos um selecionado do grupo que consiste em um acetato, um succinato e um glutamato, e/ou estar livre de histidina.
9. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de que compreende pelo menos um aminoácido selecionado do grupo que consiste em alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, glutamina, glicina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina, valina, cisteína e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
10. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada pelo fato de que compreende 0,1 mM a 300 mM de aminoácido.
11. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que compreende pelo menos um açúcar ou álcool de açúcar selecionado do grupo que consiste em glicose, frutose, galactose, manose, sacarose, lactose, maltose, trealose, fruto-oligossacarídeo, galacto-oligossacarídeo, mananoligossacarídeo, amido, glicogênio, celulose, quitina, pectina, ácido aldônico, ácido ulosônico, ácido urônico, ácido aldárico, glicerol, eritritol, treitol, arabitol, xilitol, ribitol, manitol, sorbitol, galactitol, fucitol, iditol, inositol, isomaitol, volemitol, lactitol, maltotritol, maltotetraitol e poliglicitol.
12. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizada pelo fato de que compreende 1 a 15% (p/v) de açúcar ou 1 a 10% (p/v) de álcool de açúcar com base na composição total.
13. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada pelo fato de que compreende um tensoativo.
14. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizada pelo fato de que compreende polissorbato 20, polissorbato 80 ou uma combinação dos mesmos, como um tensoativo.
15. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada pelo fato de que compreende 0,001 a 1% (p/v) de tensoativo com base na composição total.
16. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada pelo fato de que compreende 50 mg/ml a 80 mg/ml de anticorpo anti-RANKL.
17. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizada pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL é denosumabe.
18. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizada pelo fato de que é aplicável tanto a um agente de injeção que compreende 60 mg/ml de anticorpo anti-RANKL quanto a um agente de injeção que compreende 70 mg/ml de anticorpo anti-RANKL.
19. Composição líquida caracterizada pelo fato de que compreende um anticorpo anti-RANKL, tem um pH de 5 a 7 e está livre de um succinato.
20. Composição líquida, de acordo com a reivindicação 19, caracterizada pelo fato de que está livre de um acetato.
21. Composição líquida, de acordo com a reivindicação 19 ou 20, caracterizada pelo fato de que está livre de glutamato.
22. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 21, caracterizada pelo fato de que compreende histidina.
23. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 22, caracterizada pelo fato de que compreende 1 a 70 mM de histidina.
24. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 23, caracterizada pelo fato de que compreende histidina como um inibidor de agregação de proteína e/ou inibidor de variantes ácidas.
25. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 24, caracterizada pelo fato de que, conforme medido após armazenamento a 40 ºC por quatro semanas, a composição líquida tem variação em alto peso molecular (Δ% HMW) de 5,0% ou menos; ou tem variação em alto peso molecular (Δ% HMW) inferior em pelo menos 0,05% do que aquele da mesma composição, com a exceção de compreender pelo menos um selecionado do grupo que consiste em um acetato, um succinato e um glutamato, e/ou estar livre de histidina.
26. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 25, caracterizada pelo fato de que, conforme medido após armazenamento a 40 ºC por quatro semanas, a composição líquida tem variação na quantidade de variante ácida (Δ% Ácida) de 25,0% ou menos; ou tem variação na quantidade de variante ácida
(Δ% Ácida) inferior em pelo menos 0,05% do que aquela da mesma composição, com a exceção de compreender pelo menos um selecionado do grupo que consiste em um acetato, um succinato e um glutamato, e/ou estar livre de histidina.
27. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 26, caracterizada pelo fato de que compreende pelo menos um aminoácido selecionado do grupo que consiste em alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, glutamina, glicina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina, valina, cisteína e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
28. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 27, caracterizada pelo fato de que compreende 0,1 mM a 300 mM de aminoácido.
29. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 28, caracterizada pelo fato de que compreende pelo menos um açúcar ou álcool de açúcar selecionado do grupo que consiste em glicose, frutose, galactose, manose, sacarose, lactose, maltose, trealose, fruto-oligossacarídeo, galacto-oligossacarídeo, mananoligossacarídeo, amido, glicogênio, celulose, quitina, pectina, ácido aldônico, ácido ulosônico, ácido urônico, ácido aldárico, glicerol, eritritol, treitol, arabitol, xilitol, ribitol, manitol, sorbitol,
galactitol, fucitol, iditol, inositol, isomaitol, volemitol, lactitol, maltotritol, maltotetraitol e poliglicitol.
30. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 29, caracterizada pelo fato de que compreende 1 a 15% (p/v) de açúcar ou 1 a 10% (p/v) de álcool de açúcar com base na composição total.
31. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 30, caracterizada pelo fato de que compreende um tensoativo.
32. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 31, caracterizada pelo fato de que compreende polissorbato 20, polissorbato 80 ou uma combinação dos mesmos, como um tensoativo.
33. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 32, caracterizada pelo fato de que compreende 0,001 a 1 % (p/v) de tensoativo com base na composição total.
34. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 33, caracterizada pelo fato de que compreende 50 mg/ml a 80 mg/ml de anticorpo anti- RANKL.
35. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 34, caracterizada pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL é denosumabe.
36. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 35, caracterizada pelo fato de que é aplicável tanto a um agente de injeção que compreende 60 mg/ml de anticorpo anti-RANKL quanto a um agente de injeção que compreende 70 mg/ml de anticorpo anti-RANKL.
37. Composição líquida, caracterizada pelo fato de que compreende um anticorpo anti-RANKL, tem um pH de 5 a 7 e está livre de um tampão.
38. Composição líquida, de acordo com a reivindicação 37, caracterizada pelo fato de que está livre de histidina.
39. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 ou 38, caracterizada pelo fato de que, conforme medido após armazenamento a 40 ºC por quatro semanas, a composição líquida tem variação em alto peso molecular (Δ% HMW) de 5,0% ou menos; ou tem variação em alto peso molecular (Δ% HMW) inferior em pelo menos 0,05% do que aquela da mesma composição, com a exceção de compreender pelo menos um selecionado do grupo que consiste em um acetato, um succinato e um glutamato, e/ou estar livre de histidina.
40. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 39, caracterizada pelo fato de que, conforme medido após armazenamento a 40 ºC por quatro semanas, a composição líquida tem variação na quantidade de variante ácida (Δ% Ácida) de 25,0% ou menos; ou tem variação na quantidade de variante ácida (Δ% Ácida) inferior em pelo menos 0,05% do que aquela da mesma composição, com a exceção de compreender pelo menos um selecionado do grupo que consiste em um acetato, um succinato e um glutamato, e/ou estar livre de histidina.
41. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 40, caracterizada pelo fato de que compreende pelo menos um aminoácido selecionado do grupo que consiste em alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, glutamina, glicina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina, valina, cisteína e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
42. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 41, caracterizada pelo fato de que compreende 0,1 mM a 300 mM de aminoácido.
43. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 42, caracterizada pelo fato de que compreende pelo menos um açúcar ou álcool de açúcar selecionado do grupo que consiste em glicose, frutose, galactose, manose, sacarose, lactose, maltose, trealose, fruto- oligossacarídeo, galacto-oligossacarídeo, mananoligossacarídeo, amido, glicogênio, celulose,
quitina, pectina, ácido aldônico, ácido ulosônico, ácido urônico, ácido aldárico, glicerol, eritritol, treitol, arabitol, xilitol, ribitol, manitol, sorbitol, galactitol, fucitol, iditol, inositol, isomaitol, volemitol, lactitol, maltotritol, maltotetraitol e poliglicitol.
44. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 43, caracterizada pelo fato de que compreende 1 a 15% (p/v) de açúcar ou 1 a 10% (p/v) de álcool de açúcar com base na composição total.
45. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 44, caracterizada pelo fato de que compreende um tensoativo.
46. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 45, caracterizada pelo fato de que compreende polissorbato 20, polissorbato 80 ou uma combinação dos mesmos, como um tensoativo.
47. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 46, caracterizada pelo fato de que compreende 0,001 a 1 % (p/v) de tensoativo com base na composição total.
48. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 47, caracterizada pelo fato de que compreende 50 mg/ml a 80 mg/ml de anticorpo anti- RANKL.
49. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 48, caracterizada pelo fato de que o anticorpo anti-RANKL é denosumabe.
50. Composição líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 49, caracterizada pelo fato de que é aplicável tanto a um agente de injeção que compreende 60 mg/ml de anticorpo anti-RANKL quanto a um agente de injeção que compreende 70 mg/ml de anticorpo anti-RANKL.
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