BR112021009381A2 - compostos espiro heterocíclicos como inibidores de receptor de am2 - Google Patents

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Abstract

Trata-se de compostos da fórmula (I) e de sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos: em que HET, R1, R2, R3, R4, R5, L, L1, X1, X2, X3 e q são conforme definido no presente documento. Os compostos são inibidores de receptor de adrenomedulina de subtipo 2 (AM2). Também são revelados os compostos para uso no tratamento de doenças moduladas por AM2, incluindo doenças proliferativas, como câncer; composições farmacêuticas que compreendem os compostos; métodos para preparar os compostos; e intermediários úteis na preparação dos compostos.

Description

Relatório descritivo da patente de invenção para COMPOSTOS
ESPIRO HETEROCÍCLICOS COMO INIBIDORES DE RECEPTOR DE AM2
[0001] Esta invenção refere-se a compostos que são inibidores de receptor de AM2 e ao uso dos compostos como agentes terapêuticos no tratamento de afecções mediadas por AM2, por exemplo, no tratamento de distúrbios proliferativos, incluindo cânceres como câncer pancreático. Também são reveladas composições farmacêuticas que compreendem os compostos.
ANTECEDENTES
[0002] A adrenomedulina (AM) é um hormônio com funções fisiológicas importantes, incluindo a regulação da pressão arterial. No entanto, a AM é desregulada em várias doenças e está implicada no desenvolvimento e progressão de uma ampla gama de cânceres, por exemplo, câncer pancreático (a Adrenomedulina é induzida por hipóxia e aumenta a invasão de células cancerosas pancreáticas. Keleg S, Kayed H, Jiang X, Penzel R, Giese T, Büchler MW, Friess H, Kleeff J. Int. J. Cancer. 1º de julho de 2007;121(1):21 32; Adrenomedullin and cancer. Zudaire E, Mart nez A, Cuttitta F. Regulatory Peptides. 15 de abril de 2003;112(1 3):175 183; Adrenomedullin, a Multifunctional Regulatory Peptide. Hinson JP, Kapas S, Smith DM. Endocrine reviews. 2000;21(2):138 167).
[0003] Há dois complexos receptores de superfície celular para adrenomedulina, receptor de adrenomedulina subtipo 1 (AM 1) e receptor de adrenomedulina subtipo 2 (AM2). Esses receptores são estruturas heteroméricas que compreendem um receptor acoplado à proteína G (GPCR) e uma proteína acessória conhecida como uma Proteína Modificadora da Atividade do Receptor (RAMP). Mais especificamente, o receptor de AM1 é formado como um complexo do receptor semelhante à calcitonina (CLR) e RAMP2. O receptor de AM2 é formado por CLR e RAMP3. O receptor de AM1 tem um alto grau de seletividade para AM sobre o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP). Em contrapartida, o receptor de AM2mostra menos especificidade para AM, tendo afinidade con ider el com CGRP (Hay et al. J. Mol. Neuroscience 2004;22(1 2):105 113). O CGRP do receptor de CLR/RAMP1 é um receptor de alta afinidade com o peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), porém o mesmo também se liga à AM com menor afinidade (Hay et al. Pharmacological discrimination of calcitonin receptor: receptor activity- modifying protein complexes. Mol. Pharmacol. 2005;67:1655 1665; Poyner et al. International Union of Pharmacology. XXXII. The mammalian calcitonin gene-related peptides, adrenomedullin, amylin, and calcitonin receptors. Pharmacol. Rev. 2002;54:233 246).
[0004] Embora AM1 e AM2 compartilhem os mesmos GPCR, CLR, os efeitos dos dois receptores são totalmente diferentes. A adrenomedulina medeia funções fisiológicas importantes através do receptor de AM1, incluindo a regulação de pressão sanguínea (Biological action of Adrenomedullin. Horio T & Yoshihara F. In: Nishikimi T. (eds); Adrenomedullin in Cardiovascular Disease. Springer, 2005, ISBN-10 0-387- 25404-8: DOI.org/10.1007/0-387-25405-6_5).
[0005] Em contrapartida, o receptor de AM2 está envolvido em inúmeras ações pró-tumorigênicas por meio de vários mecanismos diferentes, incluindo: estimulação da proliferação de células cancerosas, proteção da apoptose induzida por estresse, promoção da angiogênese e aumento da invasividade tumoral.
[0006] A adrenomedulina secretada por tumores leva à regulação positiva do receptor de AM2 em tecidos hospedeiros que circundam tumores. Acredita-se que a expressão de tecido hospedeiro de AM2 é um fator importante no mecanismo por meio do qual os tumores promovem a angiogênese e evadem as defesas do hospedeiro. Isso foi demonstrado em tumores pancreáticos em que a expressão de AM2 aumenta com o grau de gravidade do tumor. Estudos mostraram que a redução na expressão de AM2 em tumores ou no hospedeiro, ou antagonismo dos receptores com peptídeos ou anticorpos leva à redução do crescimento de células cancerosas in-vitro e in-vivo (Ishikawa T et al. Adrenomedullin antagonist suppresses in-vivo growth of human pancreatic cancer cells in SCID mice by suppressing angiogenesis. Oncogene. 27 de fevereiro de 2003;22(8):1238 1242; Antolino et al. Pancreatic Cancer Can be Detected by Adrenomedullin in New Onset Diabetes Patients (PaCANOD). https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02456051; Antolino et al. Adrenomedullin in pancreatic carcinoma: A case-control study of 22 patients. Faculty of Medicine and Psychology, Sapienza University of Rome, Roma, Itália: DOI 10.15761/ICST.1000175).
[0007] O alvejamento de adrenomedulina e de seus receptores demonstrou ser eficaz em experimentos de xenoenxerto animal. A injeção local do antagonista do peptídeo AM (AM22-52) diretamente nos tumores em um modelo de câncer pancreático reduziu o tamanho do tumor significativamente em comparação aos controles (O antagonista de adrenomedulina suprime o crescimento in-vivo de células de câncer pancreático humano em camundongos SCID pela supressão de angiogênese. Ishikawa T et al. Oncogene. 2003;22:1238 1242: DOI
10.1038/sj.onc.1206207).
[0008] As células pancreáticas que superexpressam AM, implantadas em camundongos, produziram tumores significativamente maiores, e as células cuja expressão de AM nativa foi submetida a knockdown, apresentaram tumores menores. Além disso, metástases em animais com células submetidas a knockdown de AM estavam quase ausentes (Ishikawa T et al. 2003).
[0009] Em cânceres humanos, os receptores de AM2 são regulados positivamente em tecidos hospedeiros que circundam tumores. O documento nº WO2008/132453 revela um anticorpo monoclonal de camundongo para hRAMP3 de volume tumoral reduzido em um modelo de camundongo, sugerindo interferência com os mecanismos de ação conhecidos de AM em tumores.
[0010] Em ensaios clínicos, níveis elevados de AM sérica foram observados em pacientes com carcinoma pancreático em comparação aos controles, independentemente de estágio de tumor, diferenciação, operabilidade e presença de diabetes (A Star of Connection Between Pancreatic Cancer and Diabetes: Adrenomedullin. Görgülü K et al. Journal of the Pancreas. 2015;16(5):408 412). A AM sérica elevada é, portanto, geralmente considerada um indicador de mau prognóstico em câncer pancreático.
[0011] Níveis elevados de AM sérica acompanhados por desenvolvimento atípico de diabetes tipo 2 também mostraram ser preditivos de câncer pancreático em fase inicial (Kaafarani I et al. Targeting adrenomedullin receptors with systemic delivery of neutralizing antibodies inhibits tumour angiogenesis and suppresses growth of human tumour xenografts in mice. FASEB J. 22 de junho de 2009: DOI:10.1096/fj.08- 127852).
[0012] Consequentemente, a inibição do receptor de AM2 é um alvo atrativo para o tratamento de condições proliferativas como câncer, por exemplo, no tratamento de câncer pancreático. O receptor de AM2 pode exercer uma função na regulação de proliferação e/ou apoptose celular e/ou na mediação de interações com tecidos hospedeiros incluindo migração celular e metástase.
[0013] O câncer pancreático é uma doença devastadora que mata a maioria dos pacientes dentro de 6 meses após o diagnóstico. A taxa de sobrevivência em um ano de menos de 20% no câncer pancreático é compatível com a maioria dos pacientes que são diagnosticados na primeira apresentação com doença avançada, ponto em que não há terapia eficaz de prolongamento da vida. Quando o diagnóstico é precoce, a ressecção cirúrgica é a opção de tratamento preferida e a ressecção do tumor geralmente é seguida de quimioterapia (por exemplo, terapias citotóxicas, incluindo gencitabina ou 5-fluorouracila e um inibidor da tirosina quinase do receptor EGF, erlotinibe). No entanto, devido à dificuldade no diagnóstico precoce, a maioria das terapias e estratégias de manejo atuais se concentra na quimioterapia de suporte com expectativa de extensão de vida muito limitada. Além disso, o câncer pancreático é altamente incomum a partir de uma perspectiva imunológica, o que significa que as abordagens atuais para terapias imuno-oncológicas, como os inibidores de PDL-1, são amplamente ineficazes contra o câncer pancreático (From bench to bedside a comprehensive review of pancreatic cancer immunotherapy. Kunk PR, Bauer TW, Slingluff CL, Rahma OE. Journal for ImmunoTherapy of Cancer. 2016;4:14: DOI 10.1186/s40425-016-0119-z; Recent Advancements in Pancreatic Cancer Immunotherapy. Ma Y et al. Cancer Research Frontiers. Maio de 2016;2(2):252 276: DOI 10.17980/2016.252). Portanto, existe uma necessidade por novos tratamentos para câncer pancreático.
[0014] O documento nº WO 2008/127584 descreve certos compostos que são indicados como antagonistas de CGRP (Peptídeo Relacionado ao Gene da Calcitonina), úteis no tratamento de enxaquecas e dores de cabeça.
[0015] Certos inibidores do receptor de AM2 de peptídeo e anticorpo são conhecidos como AM22 52 (Robinson et al. J. Pharmacology and Exp. Therapeutics. 2009;331(2):513 521).
[0016] O documento nº WO 2018/211275, publicado após a data de prioridade desse pedido, descreve compostos que são inibidores do receptor de AM2.
[0017] Entretanto, existe uma necessidade por novos agentes que sejam inibidores do receptor de AM2. Adequadamente, um inibidor de AM2 será seletivo para o receptor de AM2 e, em particular, exibirá pouco ou nenhum efeito sobre o receptor de AM1 relacionado. Espera-se que um receptor de AM2 seletivo forneça um efeito terapêutico benéfico, por exemplo, um efeito anticâncer, enquanto tem pouco ou nenhum efeito sobre os efeitos fisiológicos mediados pelo receptor de AM1.
BREVE SUMÁRIO DA REVELAÇÃO
[0018] De acordo com a presente invenção, é fornecido um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (I) em que HET é uma heterociclila saturada ou parcialmente saturada de 4 a 9 membros que contém 1 heteroátomo de nitrogênio de anel e opcionalmente 1 heteroátomo de anel adicional selecionado dentre O, S e N; L está ausente ou é -C(RA)2-; cada RA é independentemente selecionado dentre: H e C 1-3 alquila; X1 é N ou CR6;
X2 e X3 são cada um, independentemente, N ou CH, desde que não mais do que um dentre X1, X2 e X3 seja N; L1 é ausente ou é selecionado dentre: -O- e -N(R7)- R1 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C1-6 haloalquila e Q1-L2-, em que a dita C1-6 alquila, C2-6 alquenila ou C2-6 alquinila é opcionalmente substituída por um ou mais de R 8; Q1 é selecionado dentre: C3-12 cicloalquila, C3-12 cicloalquenila, heterociclila de 4 a 12 membros, C6-10 arila e heteroarila de 5 a 10 membros, em que a dita cicloalquila, cicloalquenila e heterociclila é opcionalmente substituída por um ou mais de R 9, e em que a dita arila e heteroarila são opcionalmente substituídas por um ou mais de R10; L2 é ausente ou é selecionado dentre: C 1-6 alquileno, C2-6 alquenileno e C2-6 alquinileno, em que L2 é opcionalmente substituído por um ou mais de R11 R2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, =O, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e -ORA12, ou um grupo R2 forma uma ponte de C1-6 alquileno entre o anel átomo ao qual o grupo R2 está fixado e outro átomo de anel disponível em HET; R3 é selecionado dentre: H e C1-4 alquila, e R4 e R5 são, cada um, independentemente, selecionados dentre: H, C1-4 alquila e C1-4 haloalquila, ou R4 e R5, em conjunto com o carbono ao qual os mesmos estão fixados, formam uma C3-6 cicloalquila; R6 é selecionado dentre: H, halo, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila; R7 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila e - ORA1;
R, R e R são, cada um, independentemente selecionados dentre: halo, =O, =NRA2, =NORA2, -CN, -NO2, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, -OR16, -S(O)xR16 (em que x é 0, 1 ou 2), -NR16RB2, -C(O)R16, -OC(O)R16, -C(O)OR16, -NRB2C(O)R16, - NRB2C(O)OR16, -C(O)NR16RB2, -OC(O)NR16RB2, -NRB2SO2R16, -SO2NR16RB2, -NRA2C(O)NR16RB2, -NRA2C(=NRA2)RB2, -C(=NRA2)RB2, -C(=NRA2)NRA2RB2, - NRA2C(=NRA2)NRA2RB2, -NRA2C(=NCN)NRA2RB2, -ONRA2RB2 e -NRA2ORB2, em que a dita C1-6 alquila, C2-6 alquenila e C2-6 alquinila são opcionalmente substituídas por 1 ou mais de R 12, e em que R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais de R18; R10 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, -CN, -NO2, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C1-6 haloalquila, -L4-Q3, -OR17, -S(O)xR17 (em que x é 0, 1 ou 2), -NR17RB3, - C(O)R17, -OC(O)R17, -C(O)OR17, -NRB3C(O)R17, -NRB3C(O)OR17, - C(O)NR17RB3, -OC(O)NR17RB3, -NRB3SO2R17, -SO2NR17RB3, - NRA3C(O)NR17RB3, -NRA3C(=NRA3)RA3, -C(=NRA3)RB3, -C(=NRA3)NRA3RB3, - NRA3C(=NRA3)NRA3RB3, -NRA3C(=NCN)NRA3RB3, -ONRA3RB3 e -NRA3ORB3, em que a dita C1-6 alquila, C2-6 alquenila e C2-6 alquinila são opcionalmente substituídas por 1 ou mais de R 13, e em que R17 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais de R19; Q2 e Q3 são, em cada ocorrência, independentemente selecionados dentre: C3-12 cicloalquila, C3-12 cicloalquil-C1-3 alquila, C3-12 cicloalquenila, C3-12 cicloalquenil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 12 membros,
heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 12 membros, C6-10 arila, C6-10 aril-C1-3 alquila, heteroarila de 5 a 10 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 a 10 membros, em que a dita C3-12 cicloalquila, C3-12 cicloalquil-C1-3 alquila, C3-12 cicloalquenila, C3-12 cicloalquenil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 12 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 12 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais de R14, e em que a dita C6-10 arila, C6-10 aril-C1-3 alquila, heteroarila de 5 a 10 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 a 10 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais de R15; L3 e L4 estão independentemente ausentes ou são independentemente selecionados dentre: -O-, -CH2O-, -NRA4-,- CH2NRA4-, - S(O)x-, -CH2S(O)x- (em que x é 0, 1 ou 2), -C(=O)-, -CH2C(=O)-, -NRA4C(=O)- , -CH2NRA4C(=O)-, -C(=O)NRA4-, -CH2C(=O)NRA4-, -S(O)2NRA4-, - CH2S(O)2NRA4-,-NRA4S(O)2-, CH2NRA4S(O)2-, -OC(=O)-, -CH2OC(=O)-, - C(=O)O- e -CH2-C(=O)O-; R12, R13, R14, R18 e R19 são, em cada ocorrência, independentemente selecionados dentre: halo, =O, -CN, -NO2, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -L5-Q4, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)RA5, -OC(O)RA5, -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, - NRB5C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5, -NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5; em que a dita C1-4 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, =O, -CN, -ORA6, -NRA6RB6 e -SO2RA6; R15 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, -CN, -NO2, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -L6-Q5, -ORA7, - S(O)2RA7, -NRA7RB7, -C(O)RA7, -OC(O)RA7, -C(O)ORA7, -NRB7C(O)RA7, - NRB7C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7, -NRB7SO2RA7 e -SO2NRA7RB7; em que a dita C1-4 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA8, -NRA8RB8 e -SO2RA8;
Q e Q são, em cada ocorrência, independentemente selecionados dentre: fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros, heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros, C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1- 3 alquila, heterociclila de 4 a 6 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 6 membros, em que a dita C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 6 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 6 membros de Q4 e Q5 são, cada uma, independentemente e opcionalmente substituídas por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, halo, =O, -CN, -ORA9, -NRA9RB9, -SO2RA9 e C1-4 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA10, -NRA10RB10 e -SO2RA10, e em que a dita fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros de Q4 e Q5 são, cada uma, independente e opcionalmente substituídas por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -CN, -ORA9, - NRA9RB9, -SO2RA9 e C1-4 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA10, -NRA10RB10 e -SO2RA10; L5 e L6 estão independentemente ausentes ou são independentemente selecionados dentre: -O-, -NRA11-, -S(O)2-, -C(=O)-, - NRA11C(=O)-, -C(=O)NRA11-, -S(O)2NRA11-, -NRA11S(O)2-, -OC(=O)- e - C(=O)O-; RA1, RA2, RB2, RA3, RB3, RA4, RA5, RB5, RA6, RB6, RA7, RB7, RA8, RB8, RA9, RB9, RA10, RB10, RA11 e RA12 são, cada um, independentemente, selecionados dentre: H, C1-4 alquila e C1-4 haloalquila, ou qualquer -NRA2RB2, -NR16RB2, -NRA3RB3, -NR17RB3, -NRA5RB5, -NRA6RB6, -NRA7RB7, -NRA8RB8, -NRA9RB9 e -NRA10RB10 dentro de um substituinte pode formar uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a dita heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, =O, C 1-4 alquila e C1-4 haloalquila; e q é um número inteiro selecionado dentre 0, 1, 2, 3 e 4.
[0019] Também é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[0020] Também é fornecido um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso como um medicamento. Em algumas modalidades, o composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, se destina ao uso no tratamento de uma doença ou afecção médica mediada por receptores de subtipo 2 de receptor de adrenomedulina (AM2).
[0021] Também é fornecido um método de tratamento de uma doença ou afecção médica mediada por AM2 em um sujeito com necessidade do mesmo, sendo que o método compreende administrar ao sujeito uma quantidade eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[0022] Em certas modalidades, os compostos da invenção se destinam ao uso no tratamento de doenças proliferativas, por exemplo, câncer. Em certas modalidades, um composto da invenção se destina ao uso na prevenção ou inibição de progressão de câncer, por exemplo, prevenindo ou inibindo a migração de células cancerosas e/ou prevenindo ou inibindo a metástase do câncer.
[0023] É também fornecido um composto da invenção para uso no tratamento de um câncer em que AM e ou AM2 é implicada no desenvolvimento ou progressão do câncer. Por exemplo, em algumas modalidades, um composto da invenção pode se destinar ao uso no tratamento de um câncer selecionado dentre: câncer pancreático, colorretal, de mama e de pulmão. Em uma modalidade específica, um composto da invenção se destina ao uso no tratamento de câncer pancreático. Em certas modalidades, um composto da invenção se destina ao uso no tratamento de um paciente com um câncer, por exemplo, câncer pancreático, em que a expressão de AM, AM2, CLR e/ou RAMP3 no paciente é elevada em comparação aos controles. Por exemplo, o paciente pode ter níveis séricos elevados de AM, AM2, CLR e/ou RAMP3.
[0024] Os compostos da invenção podem ser usados individualmente ou em combinação com um ou mais agentes anticancerígenos e/ou radioterapia, conforme descrito no presente documento.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[0025] A Figura 1 mostra o efeito de um composto, SHF-1041, exemplificado no presente documento, no modelo de camundongo de xenoenxerto descrito nos Exemplos. Os camundongos foram inoculados com células CFPAC-1 (células derivadas de um adenocarcinoma ductal (ex. ATCC)). A figura mostra a % de crescimento de volume tumoral em comparação ao controle após 24 dias de dosagem intraperitoneal (i.p.) uma vez ao dia de SHF-1041 em doses de 5 mg/kg, 10 mg/kg e 20 mg/kg.
DESCRIÇÃO DETALHADA Definições
[0026] Exceto onde especificado em contrário, os termos a seguir usados no relatório descritivo e nas reivindicações têm os seguintes significados apresentados abaixo.
[0027] O ermo ra ar o ra amen o e referem a q alq er indício de sucesso no tratamento ou melhora de uma doença, patologia ou afecção, incluindo qualquer parâmetro objetivo ou subjetivo, como redução; remissão; diminuição de sintomas ou tornar a patologia ou afecção mais tolerável para o paciente; desaceleração da taxa de degeneração ou declínio; tornar o ponto final da degeneração menos debilitante; melhorar o bem-estar físico ou mental de um paciente. Por exemplo, certos métodos no presente documento tratam câncer diminuindo um sintoma de câncer. Os sintomas de câncer poderiam ser conhecidos ou podem ser determinados por uma pessoa versada na técnica. O termo "tratar" e conjugações do mesmo incluem a prevenção de uma patologia, afecção ou doença (por exemplo, prevenção do desenvolvimento de um ou mais sintomas de um câncer associado à AM2.
[0028] O termo "associado" ou "associado a" no contexto de uma substância ou atividade ou função da substância associada a uma doença (por exemplo, câncer) significa que a doença (por exemplo, câncer) é causada por (no todo ou em parte), ou um sintoma da doença é causado (no todo ou em parte) pela substância ou atividade ou função da substância. Por exemplo, um sintoma de uma doença ou afecção associada à atividade de via de receptor de AM2 pode ser um sintoma que resulta (total ou parcialmente) de um aumento no nível de atividade da via de proteína de AM2. Como usado no presente documento, o que é descrito como associado a uma doença, se um agente causador, poderia ser um alvo para o tratamento da doença. Por exemplo, uma doença associada a um aumento no nível de atividade de AM2, pode ser tratada com um agente (por exemplo, composto conforme descrito no presente documento]) eficaz para diminuir o nível de atividade de AM2.
[0029] Conforme definido no presente documento, o termo "inibição", "inibir", "inibindo" e similares em referência a uma interação proteína-inibidor (por exemplo, antagonista) significa que afeta negativamente (por exemplo, diminui) o nível de atividade ou função da via proteica da proteína (por exemplo, um componente da AM2) em relação ao nível de atividade ou função da via proteica na ausência do inibidor). Em algumas modalidades, inibição se refere à redução de uma doença ou sintomas de doença (por exemplo, câncer associado a um nível aumentado de atividade de AM2. Em algumas modalidades, inibição se refere a uma redução no nível de atividade de uma via de transdução de sinal ou via de sinalização associada à AM2. Dessa forma, a inibição pode incluir, pelo menos em parte, bloquear parcial ou totalmente a estimulação, diminuir, prevenir ou retardar a ativação, ou inativar, dessensibilizar ou regular negativamente a transdução de sinal ou atividade enzimática ou a quantidade de uma proteína (por exemplo, o receptor de AM 2). A inibição pode incluir, pelo menos em parte, diminuir parcial ou totalmente a estimulação, diminuir a ativação ou desativar, dessensibilizar ou regular negativamente a transdução de sinal ou atividade enzimática ou a quantidade de uma proteína (por exemplo, um componente de uma via de proteína AM2) que pode modular o nível de outra proteína ou modular a sobrevivência celular, a proliferação celular ou a motilidade celular em relação a um controle sem doença.
[0030] Ao longo da descrição e das reivindicações desse relatório descritivo, as palavras "compreende" e "contém" e variações das mesmas significam "incluindo, porém sem limitação", e não se destinam a (e não excluem) outras porções químicas, aditivos, componentes, números inteiros ou etapas. Ao longo da descrição e das reivindicações desse relatório descritivo, o singular abrange o plural, exceto onde contexto exigir em contrário. Em particular, quando o artigo indefinido é usado, o relatório descritivo deve ser entendido como contemplando a pluralidade, bem como a singularidade, exceto onde o contexto exigir em contrário.
[0031] O termo "halo" ou "halogênio" se refere a um dos halogênios, grupo 17 da tabela periódica. Em particular, o termo se refere a flúor, cloro, bromo e iodo. De preferência, o termo se refere a flúor ou cloro.
[0032] O termo Cm-n se refere a um grupo com m a n átomos de carbono.
[0033] O termo "C1-6 alquila" se refere a uma cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada contendo 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono, por exemplo, metila, etila, n-propila, iso-propila, n-butila, iso-butila, sec-butila, terc-butila, n-pentila e n-hexila. "C1-4 alquila" se refere, de modo similar, a tais grupos contendo até 4 átomos de carbono. Os grupos alquileno são grupos alquila divalentes e podem também ser lineares ou ramificados e têm dois pontos de fixação ao restante da molécula. Além disso, um grupo alquileno pode, por exemplo, corresponder a um dos grupos alquila mencionados nesse parágrafo. Por exemplo, C 1-6 alquileno pode ser CH2-, -CH2CH2-, -CH2CH(CH3)-, -CH2CH2CH2- ou -CH2CH(CH3)CH2-. Os grupos alquila e alquileno podem ser não substituídos ou substituídos por um ou mais substituintes. Substituintes possíveis são descritos no presente documento. Por exemplo, os substituintes de um grupo alquila ou alquileno podem ser halogênio, por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo, OH, C 1-C4 alcóxi, -NR'R'' amino, em que R' e R'' são independentemente H ou alquila. Outros substituintes para o grupo alquila podem ser alternativamente usados.
[0034] O termo "C1-6 haloalquila", por exemplo "C1-4 haloalquila", se refere a uma cadeia de hidrocarboneto substituída por pelo menos um átomo de halogênio independentemente escolhido em cada ocorrência, por exemplo, flúor, cloro, bromo e iodo. O átomo de halogênio pode estar presente em qualquer posição na cadeia de hidrocarboneto. Por exemplo, C1-6 haloalquila pode se referir à clorometila, fluorometila, trifluorometila, cloroetila, por exemplo, 1-clorometila e 2-cloroetila, tricloroetila, por exemplo, 1,2,2-tricloroetila, 2,2,2-tricloroetila, fluoroetila, por exemplo, 1-fluorometila e 2-fluoroetila, trifluoroetila, por exemplo, 1,2,2- trifluoroetila e 2,2,2-trifluoroetila, cloropropila, tricloropropila, fluoropropila, trifluoropropila. Um grupo haloalquila pode ser, por exemplo, -CX3, -CHX2, - CH2CX3, -CH2CHX2 ou -CX(CH3)CH3 em que X é um halo (por exemplo, F, Cl, Br ou I). Um grupo fluoroalquila, ou seja, uma cadeia de hidrocarboneto substituída por pelo menos um átomo de flúor (por exemplo, -CF3, -CHF2, - CH2CF3 ou -CH2CHF2).
[0035] O termo "C2-6 alquenila" inclui uma cadeia de hidrocarboneto ramificada ou linear contendo pelo menos uma ligação dupla e que tem 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono. A ligação dupla (ou ligações duplas) pode estar presente como o isômero E ou Z. A ligação dupla pode ser qualquer posição possível da cadeia de hidrocarboneto. Por exemplo, a "C2-6 alquenila" pode ser etenila, propenila, butenila, butadienila, pentenila, pentadienila, hexenila e hexadienila. Os grupos alquenileno são grupos alquenila divalentes e podem também ser lineares ou ramificados e têm dois pontos de fixação ao restante da molécula. Além disso, um grupo alquenileno pode, por exemplo, corresponder a um dos grupos alquenila mencionados nesse parágrafo. Por exemplo, alquenileno pode ser CH=CH-, - CH2CH=CH-, -CH(CH3)CH=CH- ou -CH2CH=CH-. Os grupos alquenila e alquenileno podem ser não substituídos ou substituídos por um ou mais substituintes. Substituintes possíveis são descritos no presente documento. Por exemplo, os substituintes podem ser aqueles descritos acima como substituintes de grupos alquila.
[0036] O termo "C2-6 alquinila" inclui uma cadeia de hidrocarboneto ramificado ou linear contendo pelo menos uma ligação tripla e tendo 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono. A ligação tripla pode ser qualquer posição possível da cadeia de hidrocarboneto. Por exemplo, a "C2-6 alquinila" pode ser etinila, propinila, butinila, pentinila e hexinila. Os grupos alquinileno são grupos alquinila divalentes e podem também ser lineares ou ramificados e têm dois pontos de fixação ao restante da molécula. Além disso, um grupo alquinileno pode, por exemplo, corresponder a um dos grupos alquinila mencionados nesse parágrafo. Por exemplo, alquinileno pode ser C C-, - CH2C C-, -CH2C CCH2-, -CH(CH3)CH C- ou -CH2C CCH3. Os grupos alquinila e alquinileno podem ser não substituídos ou substituídos por um ou mais substituintes. Substituintes possíveis são descritos no presente documento. Por exemplo, os substituintes podem ser aqueles descritos acima como substituintes de grupos alquila.
[0037] O termo "C3-12 cicloalquila" inclui um sistema de anel hidrocarboneto saturado contendo 3 a 12 átomos de carbono. O grupo cicloalquila pode ser monocíclico ou um sistema de anel hidrocarboneto saturado monocíclico ou fundido, em ponte ou espiro. O termo "C 3-6 cicloalquila" inclui um sistema de anel hidrocarboneto saturado contendo 4, 5 ou 6 átomos de carbono. Por exemplo, a C 3-C12 cicloalquila pode ser ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila, biciclo[1.1.1]pentano, biciclo[2.1.1]hexano, biciclo[2.2.1]heptano (norbornano), biciclo[2.2.2]octano ou triciclo[3.3.1.1]decano (adamantila). Por exemplo, a "C 3-C6 cicloalquila" pode ser ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila, biciclo[2.1.1]hexano ou biciclo[1.1.1]pentano. Adequadamente, a "C 3-C6 cicloalquila" pode ser ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila ou cicloexila.
[0038] O termo "C3-12 cicloalquenila" inclui um sistema de anel hidrocarboneto contendo 3 a 12 átomos de carbono e pelo menos uma ligação dupla (por exemplo, 1 ou 2 ligações duplas). O grupo cicloalquenila pode ser monocíclico ou um sistema de anel hidrocarboneto monocíclico ou fundido, em ponte ou espiro. Por exemplo, C 3-12 cicloalquenila pode ser ciclobutenila, ciclopentenila, cicloexenila,
[0039] O termo "heterociclila", "heterocíclico" ou "heterociclo" inclui um sistema de anel não aromático saturado ou parcialmente saturado monocíclico ou fundido, em ponte, ou heterocíclico bicíclico espiro. Os anéis heterocíclicos monocíclicos podem conter de cerca de 3 a 12 (adequadamente de 3 a 7) átomos no anel, com de 1 a 5 (adequadamente 1, 2 ou 3) heteroátomos selecionados dentre nitrogênio, oxigênio ou enxofre no anel. Os heterociclos bicíclicos podem conter átomos de 7 a 12 membros no anel. Os anéis heterocíclicos bicíclicos podem ser sistemas de anéis fundidos, espiro ou em ponte.
O grupo heterociclila pode ser um grupo monocíclico ou bicíclico saturado ou parcialmente saturado não aromático de 3 a 12, por exemplo, de 3 a 9 (por exemplo, de 3 a 7) membros que compreende 1, 2 ou 3 heteroátomos independentemente selecionados dentre O, S e N no sistema de anel (em outras palavras, 1, 2 ou 3 dos átomos que formam o sistema de anel são selecionados dentre O, S e N). Por parcialmente saturado entende-se que o anel pode compreender uma ou duas ligações duplas.
Isso se aplica particularmente a anéis monocíclicos com 5 a 7 membros.
A ligação dupla estará tipicamente entre dois átomos de carbono, porém pode estar entre um átomo de carbono e um átomo de nitrogênio.
Os sistemas bicíclicos podem ser espiro-fundidos, ou seja, em que os anéis estão ligados uns aos outros através de um único átomo de carbono; vicinalmente fundido, ou seja, em que os anéis estão ligados uns aos outros através de dois átomos de carbono ou nitrogênio adjacentes; ou os mesmos podem compartilhar uma cabeça de ponte, ou seja, os anéis estão ligados uns aos outros através de dois átomos de carbono ou nitrogênio não adjacentes (um sistema de anel em ponte). Exemplos de grupos heterocíclicos incluem éteres cíclicos, como oxiranila, oxetanila, tetraidrofuranila, dioxanila e éteres cíclicos substituídos.
Os heterociclos que compreendem pelo menos um nitrogênio em uma posição do anel incluem, por exemplo, azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, tetraidrotriazinila, tetraidropirazolila, tetraidropiridinila, homopiperidinila, homopiperazinila, 2,5-diaza-biciclo[2.2.1]heptanila e similares.
Enxofre típico contendo heterociclos incluem tetraidrotienila, di- hidro-1,3-ditiol, tetraidro-2H-tiopirano e hexaidrotiepina.
Outros heterociclos incluem di-hidro oxatiolila, tetraidro oxazolila, tetraidro-oxadiazolila, tetraidrodioxazolila, tetraidro-oxatiazolila, hexaidrotriazinila, tetraidro oxazinila, tetraidropirimidinila, dioxolinila, octaidrobenzofuranila, octaidrobenzimidazolila e octaidrobenzotiazolila.
Para heterociclos contendo enxofre, os heterociclos de enxofre oxidados contendo grupos SO ou SO 2 estão também incluídos. Exemplos incluem as formas de sulfóxido e sulfona de tetraidrotienila e tiomorfolinila como 1,1-dióxido de tetraidrotieno e 1,1- dióxido de tiomorfolinila. Um valor adequado para um grupo heterociclila que contém 1 ou 2 oxo (=O), por exemplo, 2 oxopirrolidinila, 2-oxoimidazolidinila, 2-oxopiperidinila, 2,5-dioxopirrolidinila, 2,5-dioxoimidazolidinila ou 2,6- dioxopiperidinila. Grupos heterociclila específicos são heterociclilas monocíclicas saturadas de 3 a 7 membros contendo 1, 2 ou 3 heteroátomos selecionados dentre nitrogênio, oxigênio ou enxofre, por exemplo, azetidinila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila, pirrolidinila, morfolinila, tetraidrotienila, 1,1- dióxido de tetraidrotienila, tiomorfolinila, 1,1-dióxido de tiomorfolinila, piperidinila, homopiperidinila, piperazinila ou homopiperazinila. Como o versado na técnica avaliará, qualquer heterociclo pode estar ligado a outro grupo por meio de qualquer átomo adequado, como por meio de um átomo de carbono ou nitrogênio. Por exemplo, o termo "piperidino" ou "morfolino" se refere a um anel piperidin-1-ila ou morfolin-4-ila que está ligado por meio do nitrogênio do anel.
[0040] O termo "sistemas de anéis em ponte" inclui sistemas de anéis em que dois anéis compartilham mais de dois átomos, consultar, por exemplo, Advanced Organic Chemistry, por Jerry March, 4a Edição, Wiley Interscience, páginas 131-133, 1992. Adequadamente, a ponte é formada entre dois átomos de carbono ou nitrogênio não adjacentes no sistema de anel. A ponte que conecta os átomos da cabeça de ponte pode ser uma ligação ou compreende um ou mais átomos. Exemplos de sistemas de anel heterociclila em ponte incluem, aza-biciclo[2.2.1]heptano, 2-oxa-5- azabiciclo[2.2.1]heptano, aza-biciclo[2.2.2]octano, aza-biciclo[3.2.1]octano e quinuclidina.
[0041] O termo "sistemas de anéis bicíclicos espiro" inclui sistemas de anéis em que dois sistemas de anéis compartilham um átomo de carbono espiro comum, ou seja, o anel heterocíclico está ligado a um anel carbocíclico ou heterocíclico adicional através de um único átomo de carbono espiro comum. Exemplos de sistemas de anéis espiro incluem 3,8-diaza- biciclo[3.2.1]octano, 2,5-diaza-biciclo[2.2.1]heptano, 6-azaspiro[3.4]octano, 2-oxa-6-azaspiro[3.4]octano, 2-azaspiro[3.3]heptano, 2-oxa-6- azaspiro[3.3]heptano, 6-oxa-2-azaspiro[3.4]octano, 2,7-diaza- espiro[4.4]nonano, 2-azaspiro[3.5]nonano, 2-oxa-7-azaspiro[3.5]nonano e 2- oxa-6-azaspiro[3.5]nonano.
[0042] "Heterociclil-Cm-n alquila" inclui um grupo heterociclila covalentemente fixado a um grupo C m-n alquileno, ambos os quais são definidos no presente documento; e em que o grupo Heterociclil-Cm-n alquila está ligado ao restante da molécula por meio de um átomo de carbono no grupo alquileno. Os grupos " aril-Cm-n alquila", "heteroaril-Cm-n alquila" e "cicloalquil-Cm-n alquila" são definidos da mesma maneira.
[0043] "-Cm-n alquila substituída por NRR" e "Cm-n alquila substituída por OR" se referem, de modo similar, a um grupo NRR o OR co alen emen e fi ado a m gr po C m-n alquileno e em que o grupo está ligado ao restante da molécula por meio de um átomo de carbono no grupo alquileno.
[0044] O termo "aromático" quando aplicado a um substituinte como um todo inclui um sistema de único anel ou anel policíclico com 4n + 2 el ron em m i ema conj gado den ro do anel o i ema de anel em q e odo o omo q e con rib em para o i ema conjugado estão no mesmo plano.
[0045] O termo "arila" inclui um sistema de anel hidrocarboneto arom ico. O i ema de anel em 4n +2 el ron em m i ema conj gado dentro de um anel em que todos os átomos que contribuem para o sistema conj gado e o no mesmo plano. Por exemplo, a "arila" pode ser fenila e naftila. O próprio sistema de anel pode ser substituído por outros grupos.
[0046] O termo "heteroarila" inclui um anel mono ou bicíclico aromático que incorpora um ou mais (por exemplo, 1-4, particularmente 1, 2 ou 3) heteroátomos selecionados dentre nitrogênio, oxigênio ou enxofre. O anel o i ema de anel em 4n + 2 el ron em m i ema conj gado em q e odo o omo q e con rib em para o i ema conj gado e o no mesmo plano.
[0047] Exemplos de grupos heteroarila são grupos monocíclicos e bicíclicos contendo de cinco a doze membros no anel, e mais geralmente de cinco a dez membros no anel. O grupo heteroarila pode ser, por exemplo, um anel monocíclico de 5 ou 6 membros ou um anel bicíclico de 9 ou 10 membros, por exemplo, uma estrutura bicíclica formada a partir de anéis fundidos de cinco e seis membros ou dois anéis fundidos de seis membros. Cada anel pode conter até cerca de quatro heteroátomos tipicamente selecionados dentre nitrogênio, enxofre e oxigênio. Tipicamente, o anel heteroarila conterá até 3 heteroátomos, mais geralmente até 2, por exemplo, um único heteroátomo. Em uma modalidade, o anel heteroarila contém pelo menos um átomo de nitrogênio no anel. Os átomos de nitrogênio nos anéis heteroarila podem ser básicos, como no caso de um imidazol ou piridina, ou essencialmente não básicos como no caso de um nitrogênio indol ou pirrol. Em geral, o número de átomos de nitrogênio básicos presentes no grupo heteroarila, incluindo quaisquer substituintes de grupo amino do anel, será menor que cinco.
[0048] Exemplos de heterorila incluem furila, pirrolila, tienila, oxazolila, isoxazolila, imidazolila, pirazolila, tiazolila, isotiazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, triazolila, tetrazolila, piridila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, 1,3,5-triazenila, benzofuranila, indolila, isoindolila, benzotienila, benzoxazolila, benzimidazolila, benzotiazolila, benzotiazolila, indazolila, purinila, benzofurazanila, quinolila, isoquinolila, quinazolinila, quinoxalinila, cinolinila, pteridinila, naftiridinila, carbazolila, fenazinila, benzisoquinolinila,
piridopirazinila, tieno[2,3-b]furanila, 2H-furo[3,2-b]-piranila, 1H-pirazolo[4,3- d]-oxazolila, 4H-imidazo[4,5-d]tiazolila, pirazino[2,3-d]piridazinila, imidazo[2,1-b]tiazolila e imidazo[1,2-b][1,2,4]triazinila. Exemplos de grupos heteroarila que compreendem pelo menos um nitrogênio em uma posição de anel incluem pirrolila, oxazolila, isoxazolila, imidazolila, pirazolila, fiazolila, isotiazolila, oxadiazolila, tiadiazolila, triazolila, tetrazolila, piridila, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, 1,3,5-triazenila, indolila, isoindolila, benzoxazolila, benzimidazolila, benzotiazolila, benzotiazolila, indazolila, purinila, benzofurazanila, quinolila, isoquinolila, quinazolinila, quinoxalinila, cinolinila e p eridinila. He eroarila abrange amb m i ema de an i bi o policíclicos parcialmente aromáticos em que pelo menos um anel é um anel aromático e um ou mais dos outros anéis consistem em um anel não aromático, saturado ou parcialmente saturado, desde que pelo menos um anel contenha um ou mais heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre. Exemplos de grupos heteroarila parcialmente aromáticos incluem, por exemplo, tetraidroisoquinolinila, tetraidroquinolinila, 2-oxo-1,2,3,4-tetraidroquinolinila, di-hidrobenzotienila, di-hidrobenzofuranila, 2,3-di-hidro-benzo[1,4]dioxinila, benzo[1,3]dioxolila, 2,2-dioxo-1,3-di-hidro-2- benzotienila, 4,5,6,7-tetraidrobenzofuranila, indolinila, 1,2,3,4-tetraidro-1,8- naftiridinila, 1,2,3,4-tetraidropirido[2,3-b]pirazinila e 3,4-di-hidro-2H- pirido[3,2-b][1,4]oxazinila.
[0049] Exemplos de grupos heteroarila de cinco membros incluem, porém sem limitação, grupos pirrolila, furanila, tienila, imidazolila, furazanila, oxazolila, oxadiazolila, oxatriazolila, isoxazolila, tiazolila, isotiazolila, pirazolila, triazolila e tetrazolila.
[0050] Exemplos de grupos heteroarila de seis membros incluem, mas sem limitação, piridila, pirazinila, piridazinila, pirimidinila e triazinila.
[0051] Exemplos específicos de grupos heteroarila bicíclicos contendo um anel de seis membros fundido com um anel de cinco membros incluem, porém sem limitação, grupos benzofuranila, benzotiofenila, benzimidazolila, benzoxazolila, benzisoxazolila, benzotiazolila, benzisotiazolila, isobenzofuranila, indolila, isoindolila, indolizinila, indolinila, isoindolinila, purinila (por exemplo, adeninila, guaninila), indazolila, benzodioxolila, pirrolopiridina e pirazolopiridinila.
[0052] Exemplos específicos de grupos heteroarila bicíclicos contendo dois anéis de seis membros fundidos incluem, porém sem limitação, grupos quinolinila, isoquinolinila, cromanila, tiocromanila, cromenila, isocromenila, cromanila, isocromanila, benzodioxanila, quinolizinila, benzoxazinila, benzodiazinila, piridopiridinila, quinoxalinila, quinazolinila, cinolinila, ftalazinila, naftiridinila e pteridinila.
[0053] O ermo o o o =O como ado no pre en e documento, significa um oxigênio que é duplamente ligado a um átomo de carbono.
[0054] O ermo opcionalmen e b i do incl i gr pos, estruturas, ou moléculas que são substituídas e aquelas que não são substituídas.
[0055] Quando os substituintes opcionais forem selecionados a partir de "um ou mais" grupos, deve-se entender que essa definição inclui todos os substituintes que são selecionados a partir de um dos grupos especificados ou os substituintes que são selecionados a partir de dois ou mais dos grupos especificados.
[0056] Quando uma porção é substituída, a mesma pode ser substituída em qualquer ponto da porção em que quimicamente possível e consistente com os requisitos de valência atômica. A porção química pode ser substituída por um ou mais substituintes, por exemplo, 1, 2, 3 ou 4 substituintes; opcionalmente há 1 ou 2 substituintes em um grupo. Quando há dois ou mais substituintes, os substituintes podem ser iguais ou diferentes.
[0057] Os substituintes estão presentes apenas em posições em que são quimicamente possíveis, sendo o versado na técnica capaz de decidir (experimentalmente ou teoricamente) sem esforço indevido quais substituições são quimicamente possíveis e quais não são.
[0058] Substituição orto, meta e para são termos bem compreendidos na técnica. Para a ausência de dúvida, a substituição "orto" é um padrão de substituição em que os carbonos adjacentes têm um substituinte, seja um grupo simples, por exemplo o grupo flúor no exemplo abaixo, ou outras porções da molécula, conforme indicado pela ligação que termina em " ".
.
[0059] A substituição "meta" é um padrão de substituição em que dois substituintes estão em carbonos, um carbono removido um do outro, ou seja, com um único átomo de carbono entre os carbonos substituídos. Em outras palavras, há um substituinte no segundo átomo distante do outro átomo com outro substituinte. Por exemplo, os grupos abaixo são meta substituídos: .
[0060] A substituição "para" é um padrão de substituição em que dois substituintes estão em carbonos, dois carbonos removidos um do outro, ou seja, com dois átomos de carbono entre os carbonos substituídos. Em outras palavras, há um substituinte no terceiro átomo distante do outro átomo com outro substituinte. Por exemplo, os grupos abaixo são para substituídos: .
[0061] Uma referência a um grupo -NRR q e forma ma heterociclila de 4 a 6 membros se refere a R e R' juntamente com o átomo de nitrogênio ao qual estão fixados formando um grupo heterociclila de 4 a 6 membros. Por exemplo, um -NRR' como um grupo -NRA2RB2, -NR16RB2, - NRA3RB3, -NR17RB3, -NRA5RB5, -NRA6RB6, -NRA7RB7, -NRA8RB8, -NRA9RB9 e - NRA10RB10 pode formar: .
[0062] De modo similar, um grupo -NRR' dentro de um substituinte pode formar uma heterociclila de 4 a 6 membros ligada à carbonila, por exemplo, um grupo -C(O)NRR' pode formar:
[0063] Os grupos -NRR' dentro dos substituintes como - OC(O)NRR', -SO2NRR', -NRC(O)NRR', -C(=NRA5)NRR', -NRC(=NR)NRR', e -NRC(=NCN)NRR', podem formar, de modo similar, uma heterociclila de 4 a 6 membros dentro de tais substituintes.
[0064] HET é uma heterociclila saturada ou parcialmente saturada de 4 a 9 membros que contém 1 heteroátomo de nitrogênio de anel e opcionalmente 1 heteroátomo de anel adicional selecionado dentre O, S e N. A referência à heterociclila "que contém 1 nitrogênio de anel" se refere ao grupo N(R ) em HET. Consequentemente, HET contém opcionalmente 1 heteroátomo de anel adicional além de N(R 3).
[0065] A referência a um grupo R2 que forma uma ponte de C1- 6 alquileno entre o átomo de anel ao qual o grupo R 2 está fixado e outro átomo de anel disponível em HET inclui, por exemplo: , em que A é C1-6 alquileno, por exemplo, C1-4 alquileno.
[0066] A ponte de alquileno (por exemplo, -A- acima) pode ser de cadeia linear ou ramificada, por exemplo, -CH2-, -CH2CH2-, -CH(CH3)- ou -C(CH3)2-. Adequadamente, A é metileno ou etileno. Pode ser que A seja C 2- 4 alquileno, particularmente quando HET é um anel de 7, 8 ou 9 membros. Quando a ponte de alquileno é mostrada como -A- no presente documento como em, por exemplo: os átomos de carbono terminal da ponte de alquileno são ligados a 2 átomos de anel disponíveis diferentes em HET. De preferência, a ponte de alquileno é fixada a átomos de anel não adjacentes em HET. Exceto onde especificado em contrário, em que um grupo R 2 forma uma ponte de alquileno em HET, q permanece um número inteiro selecionado dentre: 0, 1,
2, 3 e 4 (ou seja, HET é opcionalmente substituído por até 4 grupos R 2 nos sistemas de anéis em ponte).
[0067] Conforme será reconhecido, a referência a HET "que contém 1 heteroátomo de nitrogênio de anel" está se referindo ao grupo NR 3. Em certas modalidades, HET é opcionalmente 1 heteroátomo de anel adicional selecionado dentre O, S e N além do grupo NR3.
[0068] A fra e compo o da in en o ignifica aq ele compostos que são revelados no presente documento, tanto de modo geral como específico. Consequentemente, os compostos da invenção incluem compostos das fórmulas (I) (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII) e os compostos nos Exemplos.
[0069] Uma ligação que termina em um " " o * " representa que a ligação está conectada a outro átomo que não é mostrado na estrutura. Uma ligação que termina dentro de uma estrutura cíclica e não termina em um átomo da estrutura do anel representa que a ligação pode estar conectada a qualquer um dos átomos na estrutura do anel quando permitido pela valência.
[0070] Os recursos, números inteiros, características, compostos, porções químicas ou grupos descritos em conjunto com um aspecto, modalidade, ou exemplo específicos da invenção devem ser entendidos como aplicáveis a qualquer outro aspecto, modalidade ou exemplo descritos neste documento, exceto quando incompatível com o mesmo. Todas as características reveladas nesse relatório descritivo (incluindo quaisquer reivindicações anexas, resumo e desenhos), e/ou todas as etapas de qualquer método ou processo assim revelado, podem ser combinadas em qualquer combinação, exceto combinações em que pelo menos algumas dessas características e/ou etapas são mutuamente exclusivas. A invenção não é restringida aos detalhes de quaisquer modalidades anteriormente mencionadas. A invenção se estende a qualquer inovadora, ou qualquer combinação inovadora, das características reveladas nesse relatório descritivo (incluindo quaisquer reivindicações anexas, resumo e desenhos), ou a qualquer inovadora, ou qualquer combinação inovadora, das etapas de qualquer método ou processo então revelado.
[0071] A atenção do leitor é voltada para todos os artigos e documentos que são arquivados simultaneamente ou anteriores a esse relatório descritivo em conjunto com esse pedido e que estão abertos à inspeção pública com esse relatório descritivo, e o conteúdo de todos esses artigos e documentos estão incorporados no presente documento a título de referência.
[0072] Os vários grupos funcionais e substituintes que constituem os compostos da presente invenção~ são tipicamente selecionados de modo que o peso molecular do composto não exceda 1000. Mais geralmente, o peso molecular do composto será menor que 750, por exemplo, menor que 700, ou menor que 650, ou menor que 600, ou menor que 550. Com mais preferência, o peso molecular é menor que 585 e, por exemplo, é 575 ou menos.
[0073] As características adequadas ou preferidas de quaisquer compostos da presente invenção também podem ser características adequadas de qualquer outro aspecto.
[0074] A invenção contempla sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da invenção. Esses podem incluir os sais de adição ácidos e básicos dos compostos. Esses podem ser sais de adição ácidos e básicos dos compostos.
[0075] Os sais de adição ácidos adequados são formados a partir de ácidos que formam sais não tóxicos. Exemplos incluem os sais de acetato, aspartato, benzoato, besilato, bicarbonato/carbonato, bissulfato/sulfato, borato, cansilato, citrato, edisilato, esilato, formato,
fumarato, gliceptato, gliconato, glicuronato, hexafluorofosfato, hibenzato, cloridrato/cloreto, bromidrato/brometo, iodidrato/iodeto, isetionato, lactato, malato, maleato, malonato, mesilato, metilsulfato, naftilato, 1,5- naftalenodissulfonato, 2-napsilato, nicotinato, nitrato, orotato, oxalato, palmitato, pamoato, fosfato/hidrogenofosfato/di-hidrogenofosfato, sacarato, estearato, succinato, tartrato, tosilato e trifluoroacetato.
[0076] Os sais básicos adequados são formados a partir de bases que formam sais não tóxicos. Exemplos incluem os sais de alumínio, arginina, benzatina, cálcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnésio, meglumina, olamina, potássio, sódio, trometamina e zinco. Hemissais de ácidos e bases podem também ser formados, por exemplo, sais de hemissulfato e hemicálcio. Para uma análise sobre sais adequados, consultar "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" por Stahl e Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemanha, 2002).
[0077] Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da invenção podem ser preparados, por exemplo, por um ou mais dos seguintes métodos: (i) reagir o composto da invenção com o ácido ou base desejado; (ii) remover um grupo protetor lábil a ácido ou base de um precursor adequado do composto da invenção ou por abertura do anel de um precursor cíclico adequado, por exemplo, uma lactona ou lactama, usando o ácido ou base desejado; ou (iii) converter um sal do composto da invenção em outro por reação com um ácido ou base adequado ou por meio de uma coluna de troca iônica adequada.
[0078] Esses métodos são tipicamente realizados em solução. O sal resultante pode se precipitar e ser coletado por filtração ou pode ser recuperado por evaporação do solvente. O grau de ionização no sal resultante pode variar de completamente ionizado a quase não ionizado.
[0079] Os compostos que têm a mesma fórmula molecular, porém se diferenciam na natureza ou sequência de ligação de seus átomos ou na disposição de seus átomo no e pa o o denominado i mero . Os isômeros que se diferem na disposição de seus átomos no espaço são denominado e ereoi mero . O e ereoi mero q e n o o imagen e pelhada n do o ro o denominado dia ere mero e aq ele que são imagens espelhadas não sobreponíveis uns dos outros são denominado enan i mero . Q ando m compo o i er m cen ro assimétrico, por exemplo, é ligado a quatro grupos diferentes, um par de enantiômeros é possível. Um enantiômero pode ser caracterizado pela configuração absoluta de seu centro assimétrico e é descrito pelas regras de sequenciamento R e S de Cahn e Prelog, ou pela maneira na qual a molécula gira o plano de luz polarizada e designado como dextrorrotatório ou levorrotatório (ou seja, como isômeros (+) ou (-) respectivamente). Um composto quiral pode existir tanto como um enantiômero individual quanto como uma mistura do mesmo. Uma mistura contendo proporções iguais dos enan i mero denominada ma mi ra rac mica . Q ando m compo o da invenção tem dois ou mais estereocentros, qualquer combinação de estereoisômeros (R) e (S) é contemplada. A combinação de estereoisômeros (R) e (S) pode resultar em uma mistura diastereomérica ou um único diastereoisômero. Os compostos da invenção podem estar presentes como um único estereoisômero ou podem ser misturas de estereoisômeros, por exemplo, misturas racêmicas e outras misturas enantioméricas e misturas diastereoméricas. Quando a mistura é uma mistura de enantiômeros, o excesso enantiomérico pode ser qualquer um daqueles revelados acima. Quando o composto é um único estereoisômero, os compostos podem conter ainda outros diastereoisômeros ou enantiômeros como impurezas. Então,
um único estereoisômero não tem necessariamente um excesso enantiomérico (e.e.) ou excesso diastereomérico (d.e.) de 100%, porém poderia ter um e.e. ou d.e. de cerca de pelo menos 85%, por exemplo, pelo menos 90%, pelo menos 95% ou pelo menos 99%.
[0080] Os compostos desta invenção podem ter um ou mais centros assimétricos; portanto, tais compostos podem ser produzidos como estereoisômeros (R) ou (S) individuais ou como misturas dos mesmos. Exceto onde indicado em contrário, a descrição ou designação de um composto específico no relatório descritivo e revindicações se destina a incluir tanto enantiômeros individuais como misturas, racêmicas ou de outro modo, dos mesmos. Os métodos para a determinação de estereoquímica e a separação de estereoisômeros são bem conhecidos na técnica (consultar a di c o no cap lo 4 de Ad anced Organic Chemi r , 4a edi o J. March, John Wiley and Sons, Nova Iorque, 2001), por exemplo, pela síntese de materiais de partida opticamente ativos ou pela resolução de uma forma racêmica. Alguns dos compostos da invenção podem ter centros isoméricos geométricos (isômeros E e Z). Deve ser entendido que a presente invenção abrange todos os diastereoisômeros e isômeros geométricos ópticos e misturas dos mesmos que têm atividade inibitória de AM2.
[0081] Os isômeros Z/E (por exemplo, cis/trans) podem ser separados por técnicas convencionais bem conhecidas pelos versados na técnica, por exemplo, cromatografia e cristalização fracionada.
[0082] As técnicas convencionais para a preparação/isolamento de enantiômeros individuais, quando necessário, incluem a síntese quiral de um precursor opticamente puro adequado ou a resolução do racemato (ou o racemato de um sal ou derivado) usando, por exemplo, cromatografia líquida de alta pressão quiral (HPLC). Dessa forma, os compostos quirais da invenção (e precursores quirais dos mesmos) podem ser obtidos de forma enantiomericamente enriquecida usando cromatografia, tipicamente HPLC, em uma resina assimétrica com uma fase móvel que consiste em um hidrocarboneto, tipicamente heptano ou hexano, contendo de 0 a 50% por volume de isopropanol, tipicamente de 2% a 20%, e para exemplos específicos, 0 a 5% por volume de uma alquilamina, por exemplo, 0,1% de dietilamina. A concentração do eluato produz a mistura enriquecida.
[0083] Alternativamente, o racemato (ou um precursor racêmico) pode ser reagido com um composto opticamente ativo adequado, por exemplo, um álcool, ou, no caso em que o composto da invenção contém uma porção química ácida ou básica, uma base ou ácido como 1- feniletilamina ou ácido tartárico. A mistura diastereomérica resultante pode ser separada por cromatografia e/ou cristalização fracionada e um ou ambos os diastereoisômeros convertidos no enantiômero (ou enantiômeros) puro correspondente por meios bem conhecidos por um versado na técnica.
[0084] Quando qualquer racemato se cristaliza, cristais de dois tipos diferentes são possíveis. O primeiro tipo é o composto racêmico (racemato verdadeiro) referido acima, em que uma forma homogênea de cristal é produzida contendo ambos os enantiômeros em quantidades equimolares. O segundo tipo é a mistura racêmica ou conglomerado em que duas formas de cristal são produzidas em quantidades equimolares, cada uma, compreendendo um único enantiômero.
[0085] Embora ambas as formas de cristal presentes em uma mistura racêmica tenham propriedades físicas idênticas, as mesmas podem ter propriedades físicas diferentes em comparação com o racemato verdadeiro. As misturas racêmicas podem ser separadas por técnicas convencionais conhecidas pelos versados na técnica - consultar, por exemplo, "Stereochemistry of Organic Compounds" por E. L. Eliel e S. H. Wilen (Wiley, 1994).
[0086] Os compostos e sais descritos nesse relatório descritivo podem ser isotopicamente marcados (ou "radiomarcados"). Consequentemente, um ou mais átomos são substituídos por um átomo que tem uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa tipicamente encontrado na natureza. Exemplos de radionuclídeos que podem ser incorporados incluem 2H (também escrito como "D" para deutério), 3H ( amb m e cri o como "T para r io), 11 C, 13 C, 14 15 17 18 13 15 18 36 123 25 32 35 C, O, O, O, N, N, F, Cl, I, I, P, S e similares. O radionuclídeo que é usado dependerá da aplicação específica daquele derivado radiomarcado. Por exemplo, para ensaios de competição in vitro, 3 14 H ou C são frequentemente úteis. Para aplicações de imagem por rádio, 11 18 C ou F são geralmente úteis. Em algumas modalidades, o radionuclídeo 3 14 é H. Em algumas modalidades, o radionuclídeo é C. Em algumas 11 modalidades, o radionuclídeo é C. E em algumas modalidades, o radionuclídeo é 18F.
[0087] Os compostos isotopicamente marcados podem geralmente ser preparados por técnicas convencionais conhecidas pelos versados na técnica ou por processos análogos àqueles descritos usando um reagente isotopicamente marcado adequado em vez do reagente não marcado anteriormente empregado.
[0088] A substituição seletiva de hidrogênio por deutério em um composto pode modular o metabolismo do composto, as propriedades de PK/PD do composto e/ou a toxicidade do composto. Por exemplo, a deuteração pode aumentar a meia-vida ou reduzir a depuração do composto in-vivo. A deuteração pode também inibir a formação de metabólitos tóxicos, melhorando assim a segurança e a tolerabilidade. Será entendido que a invenção abrange derivados deuterados de compostos da fórmula (I). Como usado no presente documento, o termo derivados deuterados se refere a compostos da invenção, em que em uma posição específica, pelo menos um átomo de hidrogênio é substituído por deutério. Por exemplo, um ou mais átomos de hidrogênio em um grupo C1-4-alquila podem ser substituídos por deutério para formar um grupo C1-4-alquila deuterado.
[0089] Certos compostos da invenção podem existir em formas solvatadas bem como não solvatadas como, por exemplo, em formas hidratadas. Será entendido que a invenção abrange todas essas formas solvatadas que têm atividade inibitória de AM2.
[0090] Será também entendido que certos compostos da invenção podem exibir polimorfismo, e que a invenção abrange todas essas formas que têm atividade inibitória de AM2.
[0091] Os compostos da invenção podem existir em várias formas tautoméricas diferentes e referências a compostos da invenção incluem todas essas formas. A título de esclarecimento, quando um composto pode existir em uma dentre várias formas tautoméricas, e apenas um é especificamente descrito ou mostrado, todas as outras são, no entanto, abrangidas por compostos da invenção. Exemplos de formas tautoméricas incluem formas ceto-, enol- e enolato, como, por exemplo, nos seguintes pares tautoméricos: ceto/enol (ilustrados abaixo), imina/enamina, amida/iminoálcool, amidina/amidina, nitroso/oxima, tiocetona/enetiol e nitro/aci-nitro.
[0092] Os efeitos in-vivo de um composto da invenção podem ser exercidos em parte por um ou mais metabólitos que são formados dentro do corpo humano ou animal após a administração de um composto da invenção.
[0093] Será adicionalmente entendido que um pró-fármaco farmaceuticamente aceitável adequado de um composto da fórmula (I)
também forma um aspecto da presente invenção. Consequentemente, os compostos da invenção abrangem formas de pró-fármaco dos compostos e os compostos da invenção podem ser administrados sob a forma de um pró- fármaco (ou seja, um composto que é decomposto no corpo humano ou animal para liberar um composto da invenção). Um pró-fármaco pode ser usado para alterar as propriedades físicas e/ou as propriedades farmacocinéticas de um composto da invenção. Um pró-fármaco pode ser formado quando o composto da invenção contém um grupo ou substituinte adequado ao qual um grupo modificador de propriedade pode ser fixado. Exemplos de pró-fármacos incluem derivados de éster cliváveis in-vivo que podem ser formados em um grupo carbóxi ou um grupo hidróxi em um composto da invenção e derivados de amida cliváveis in-vivo que podem ser formados em um grupo carbóxi ou um grupo amino em um composto da invenção.
[0094] Consequentemente, a presente invenção inclui aqueles compostos da invenção, conforme definido no presente documento quando disponibilizado por síntese orgânica e quando disponibilizado no corpo humano ou animal por meio de clivagem de um pró-fármaco do mesmo. Consequentemente, a presente invenção inclui aqueles compostos da fórmula (I) que são produzidos por meio de síntese orgânica e também tais compostos que são produzidos no corpo humano ou animal por meio de metabolismo de um composto precursor, que é um composto da fórmula (I) podem ser um composto sinteticamente produzido ou um composto metabolicamente produzido.
[0095] Um pró-fármaco farmaceuticamente aceitável adequado de um composto da invenção é um que se baseia no julgamento médico razoável como sendo adequado para administração ao corpo humano ou animal sem atividades farmacológicas indesejáveis e sem toxicidade indevida.
[0096] Várias formas de pró-fármaco foram descritas, por exemplo, nos seguintes documentos:- a) Methods in Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, editado por K. Widder, et al. (Academic Press, 1985); b) Design of Pro-drugs, editado por H. Bundgaard, (Elsevier, 1985); c) A Textbook of Drug Design and Development, editado por Krogsgaard-Larsen e H. Bundgaard, capítulo 5 "Design and Application of Pro-drugs", por H. Bundgaard p. 113-191 (1991); d) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1-38 (1992); e) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988); f) N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull., 32, 692 (1984); g) T. Higuchi e V. Stella, "Pro-Drugs as Novel Delivery Systems", A.C.S. Symposium Series, Volume 14; e h) E. Roche (editor), "Bioreversible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987.
[0097] Um pró-fármaco farmaceuticamente aceitável adequado de um composto da fórmula I que tem um grupo carbóxi é, por exemplo, um éster clivável in-vivo do mesmo. Um éster clivável in-vivo de um composto da invenção contendo um grupo carbóxi é, por exemplo, um éster farmaceuticamente aceitável que é clivado no corpo humano ou animal para produzir o ácido original. Os ésteres farmaceuticamente aceitáveis adequados para carbóxi incluem ésteres C1-6 alquila como metila, etila e terc- butila, ésteres C1-6 alcoximetila como ésteres de metoximetila, ésteres de C 1- 6 alcanoiloximetila como ésteres de pivaloiloximetila, ésteres de 3-ftalidila, ésteres de C3-8 cicloalquilcarboniloxi- C1-6 alquila como ésteres de ciclopentilcarboniloximetila e 1- cicloexilcarboniloxietila, ésteres de 2-oxo-1,3-dioxolenilmetila como ésteres de 5-metil-2- oxo-1,3-dioxolen-4-ilmetila e ésteres de C1-6 alcoxicarbonilóxi- C1-6 alquila como ésteres de metoxicarboniloximetila e 1-metoxicarboniloxietila.
[0098] Um pró-fármaco farmaceuticamente aceitável adequado de um composto da invenção que tem um grupo hidróxi é, por exemplo, um éster ou éter clivável in-vivo do mesmo. Um éster ou éter clivável in-vivo de um composto da invenção contendo um grupo hidróxi é, por exemplo, um éster ou éter farmaceuticamente aceitável que é clivado no corpo humano ou animal para produzir o composto hidróxi original. Grupos formadores de éster farmaceuticamente aceitáveis adequados para um grupo hidróxi incluem ésteres inorgânicos como ésteres de fosfato (incluindo ésteres cíclicos fosforamídicos). Grupos formadores de éster farmaceuticamente aceitáveis adequados adicionais que formam grupos para um grupo hidróxi incluem grupos C 1-10 alcanoíla como grupos acetila, benzoíla, fenilacetila e benzoíla e fenilacetila substituídos, grupos C 1-10 alcoxicarbonila como etoxicarbonila, grupos N,N (C1-6 alquil)2carbamoíla, 2- dialquilaminoacetila e 2-carboxiacetila. Exemplos de substituintes de anel nos grupos fenilacetila e benzoíla incluem aminometila, N-alquilaminometila, N,N-dialquilaminometila, morfolinometila, piperazin-1-ilmetila e 4-(C1-4 alquil)piperazin-1-ilmetila. Grupos formadores de éter farmaceuticamente aceitáveis adequados para um grupo hidróxi incluem grupos α-aciloxialquila como grupos acetoximetila e pivaloiloximetila.
[0099] Um pró-fármaco farmaceuticamente aceitável adequado de um composto da invenção que tem um grupo carbóxi é, por exemplo, uma amida clivável in-vivo-do mesmo, por exemplo, uma amida formada com uma amina como amônia, uma C1-4 alquilamina como metilamina, uma (C1-4 alquil)2amina como dimetilamina, N-etil-N-metilamina ou dietilamina, um C1-4 alcóxi- C2-4 alquilamina como 2-metoxietilamina, uma fenil-C1-4 alquilamina como benzilamina e aminoácidos como glicina ou um éster da mesma.
[00100] Um pró-fármaco farmaceuticamente aceitável adequado de um composto da invenção que tem um grupo amino é, por exemplo, um derivado de amida ou carbamato clivável in-vivo do mesmo. Amidas farmaceuticamente aceitáveis adequadas de um grupo amino incluem, por exemplo, uma amida formada com grupos C 1-10 alcanoíla como grupos acetila, benzoíla, fenilacetila e benzoíla e fenilacetila substituída. Exemplos de substituintes de anel nos grupos fenilacetila e benzoíla incluem aminometila, N-alquilaminometila, N,N-dialquilaminometila, morfolinometila, piperazin-1-ilmetila e 4-(C1-4 alquil)piperazin-1-ilmetila. Carbamatos farmaceuticamente aceitáveis adequados de um grupo amino incluem, por exemplo, grupos aciloxialcoxicarbonila e benziloxicarbonila.
COMPOSTOS
[00101] Os parágrafos seguintes são aplicáveis aos compostos da invenção.
[00102] Em certas modalidades, o composto de fórmula (I) HET é ligado ao grupo -L-N(C(=O)L1R1)- na fórmula (I) por meio de um átomo de carbono de anel em HET.
[00103] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (II), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
(II) em que A é um número inteiro selecionado dentre 0, 1 e 2; B é um número inteiro selecionado dentre 1, 2, 3 e 4.
[00104] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (III), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (III) em que b é um número inteiro selecionado dentre 1, 2 e 3.
[00105] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (IV), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
(IV) em que b é um número inteiro selecionado dentre 1, 2 e 3.
[00106] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (V), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (V)
[00107] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (VI), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (VI)
[00108] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (VII), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
(VII) em que R810 é selecionado dentre: C1-6 alquila, C1-6 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, R820 e R830 são, cada, independentemente selecionados dentre: halo, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, ou R820 e R830 juntamente com o átomo de carbono ao qual estão fixados formam uma C3-6 cicloalquila ou heterociclila de 4 a 7 membros que contém 1 ou 2 heteroátomos selecionados dentre O, S e N, em que a dita C3-6 cicloalquila ou heterociclila de 4 a 7 membros é opcionalmente substituída por um ou mais R 9.
[00109] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (VIII), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (VIII)
[00110] Em certas modalidades, em qualquer um dos compostos da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), R 4 é H ou C1- 3 alquila e R5 é H.
[00111] Em certas modalidades, em qualquer um dos compostos da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), R 4 é H ou metila e R5 é H.
[00112] Em certas modalidades, em qualquer um dos compostos da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), R4 é C1-3 alquila (por exemplo, metila) e R5 é H.
[00113] Em certas modalidades, em qualquer um dos compostos da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), R 4 e R5 são H.
[00114] Em certas modalidades, em qualquer um dos compostos da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), R 3 é H.
[00115] Em certas modalidades, em qualquer um dos compostos da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), q é 0, 1 ou 2 e R2 é C1-3 alquila (por exemplo, metila).
[00116] Em certas modalidades, em qualquer um dos compostos da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), q é 0.
[00117] Em certas modalidades, em qualquer um dos compostos da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), X 2 e X3 são CH e X1 é CR6 ou N.
[00118] Em certas modalidades, em qualquer um dos compostos da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), X 1, X2 e X3 são CH.
[00119] Em certas modalidades, os compostos da invenção incluem, por exemplo, compostos das fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, em que, exceto onde especificado em contrário, cada um dentre R 1, R2, R3, R4, R5, X1, X2, X3, L, L1, HET e q tem qualquer um dos significados definidos anteriormente ou em qualquer um dos parágrafos (1) a (117) mais adiante neste documento:-
1. HET é um anel heterociclila saturado ou parcialmente saturado de 4 a 7 membros que contém 1 heteroátomo de nitrogênio de anel e opcionalmente 1 heteroátomo de anel adicional selecionado dentre O e N, em que HET está ligado ao restante da fórmula (I) por meio de um átomo de carbono de anel em HET.
2. HET é um anel heterociclila saturado de 4 a 7 membros que contém 1 heteroátomo de nitrogênio de anel e opcionalmente 1 heteroátomo de anel adicional selecionado dentre O e N, em que HET está ligado ao restante da fórmula (I) por meio de um átomo de carbono de anel em HET.
3. HET é um anel heterociclila parcialmente saturado de 4 a 7 membros que contém 1 heteroátomo de nitrogênio de anel e opcionalmente 1 heteroátomo de anel adicional selecionado dentre O e N, em que HET está ligado ao restante da fórmula (I) por meio de um átomo de carbono de anel em HET.
4. HET é um anel heterociclila saturado de 4 a 7 membros que contém 1 heteroátomo de nitrogênio de anel (ou seja, NR3), em que HET está ligado ao restante da fórmula (I) por meio de um átomo de carbono de anel em HET.
5. HET é um anel heterociclila parcialmente saturado de 4 a 7 membros que contém 1 heteroátomo de nitrogênio de anel (ou seja, NR 3), em que HET está ligado ao restante da fórmula (I) por meio de um átomo de carbono de anel em HET.
6. HET é selecionado dentre: azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, homopiperidinila, homopiperazinila e homomorfolinila, em que: (i) HET está ligado ao restante da fórmula (I) por meio de um átomo de carbono de anel em HET; (ii) o átomo (ou átomos) de nitrogênio de anel em HET é substituído por R3; e (iii) HET é opcionalmente substituída por 1, 2, 3 ou 4 R 2, ou um grupo R2 forma uma ponte de C1-4 alquileno entre o átomo de anel ao qual o grupo R2 está fixado e outro átomo de anel disponível em HET.
7. HET é selecionado dentre: azetidinila, pirrolidinila, piperidinila e homopiperidinila, em que: (i) HET está ligado ao restante da fórmula (I) por meio de um átomo de carbono de anel em HET; (ii) o átomo de nitrogênio de anel em HET é substituído por R 3; e (iii) HET é opcionalmente substituída por 1, 2, 3 ou 4 R 2, ou um grupo R2 forma uma ponte de C1-4 alquileno entre o átomo de anel ao qual o grupo R2 está fixado e outro átomo de anel disponível em HET.
8. HET é homopiperidinila, em que: (i) HET está ligado ao restante da fórmula (I) por meio de um átomo de carbono de anel em HET; (ii) o átomo de nitrogênio de anel em HET é substituído por R 3; e (iii) HET é opcionalmente substituída por 1, 2, 3 ou 4 R2, ou um grupo R2 forma uma ponte de C1-4 alquileno entre o átomo de anel ao qual o grupo R2 está fixado e outro átomo de anel disponível em HET.
9. HET é: em que a é um número inteiro selecionado dentre 0, 1 e 2 (adequadamente, a é 1 ou 2), b é um número inteiro selecionado dentre 1, 2, 3 e 4, e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
10. HET é:
em que a é um número inteiro selecionado dentre 0, 1 e 2, b é um número inteiro selecionado dentre 1, 2, 3 e 4, a soma a+b é de 2 a 7, e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
11. HET é: em que b é um número inteiro selecionado dentre 1, 2, 3 e 4, e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
12. HET é: em que b é um número inteiro selecionado dentre 2, 3 e 4, e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
13. HET é selecionado dentre em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
14. HET é em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
15. HET é selecionado dentre: em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
16. HET é selecionado dentre: em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
17. HET é selecionado dentre:
em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
18. HET é em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
19. HET é em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
20. HET é selecionado dentre em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
21. HET é selecionado dentre:
em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
22. HET é selecionado dentre: em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
23. HET é
24. HET é selecionado dentre:
em que A é C1-4 alquileno (de preferência, C2-4 alquileno), e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
25. HET é selecionado dentre: em que A é C1-4 alquileno (de preferência, C2-4 alquileno), e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
26. HET é em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
27. HET é em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
28. HET é: em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
29. HET é selecionado dentre: em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
30. HET é selecionado dentre:
em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
31. HET é selecionado dentre: em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
32. HET é selecionado dentre: em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
33. HET é selecionado dentre: em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
34. Het é: em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
35. HET é:
em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
36. HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (31) acima; R3 é H ou metila; q é um número inteiro selecionado dentre 0, 1 e 2; e R2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: C 1-3 alquila (por exemplo, metila).
37. HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (31) acima; R3 é H; q é um número inteiro selecionado dentre 0, 1 e 2; e R2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: C 1-3 alquila (por exemplo, metila).
38. HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (31) acima; R3 é H; e q é 0
39. R2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: =O e C1-4 alquila.
40. R2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: C1-3 alquila.
41. q é um número inteiro selecionado dentre 0, 1 e 2.
42. q é 0.
43. R3 é selecionado dentre: H e C1-3 alquila.
44. R3 é selecionado dentre: H e metila.
45. R3 é H.
46. L está ausente ou -CH2-.
47. L está ausente.
48. L é -CH2-.
49. L está ausente e HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (38) acima.
50. L é -CH2- e HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (38) acima.
51. L é -C(RA)2- (por exemplo, -CH2-) e HET é selecionado dentre: em que A é C1-4 alquileno, e * mostra o ponto de fixação a L.
52. R1 é selecionado dentre: C1-6 alquila, C1-6 haloalquila e Q1- L2-, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais de R 8; Q1 é selecionado dentre: C3-12 cicloalquila, heterociclila saturada ou parcialmente saturada de 4 a 12 membros que contém 1 ou 2 heteroátomos de anel selecionados dentre O, S e N, em que a dita cicloalquila e heterociclila são opcionalmente substituídas por um ou mais de R9, L2 está ausente ou é selecionado de C1-4 alquileno; R8 e R9 são, em cada ocorrência, independentemente, selecionados dentre: halo, =O, -CN, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C1-6 haloalquila, -L3- Q2, -OR16, -SO2R16, -NR16RB2, -C(O)R 16, -OC(O)R16, -C(O)OR16, - NRB2C(O)R16, -NRB2C(O)OR16, -C(O)NR16RB2, -NRB2SO2R16, -SO2NR16RB2 e -NRA2C(O)NR16RB2,
em que as ditas C1-6 alquila e C2-6 alquenila são opcionalmente substituídas por 1 ou mais R12, e em que R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais de R18; Q2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 7 membros, heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 7 membros, fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros, em que as ditas C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 7 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 7 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais R 14, e em que a dita fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais de R15; L3 está ausente ou é selecionado dentre: -O-, -CH2O-*, -NRA4-, - CH2NRA4-*, -SO2-, -CH2SO2-*, -C(=O)-, -CH2C(=O)-*, -NRA4C(=O)-, - CH2NRA4C(=O)-*, -C(=O)NRA4-, -CH2C(=O)NRA4-*, -S(O)2NRA4-, - CH2S(O)2NRA4-*, -NRA4S(O)2-, -CH2NRA4S(O)2-*, -OC(=O)-, -CH2OC(=O)-*, - C(=O)O- e -CH2-C(=O)O-*, em que * mostra o ponto de fixação a -Q2; R12, R14 e R18 são, cada um, independentemente selecionados dentre: halo, =O, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -L5-Q4, -ORA5, - S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)RA5, -OC(O)RA5, -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, - C(O)NRA5RB5, -NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5; R15 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre:
halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -L6-Q5, -ORA7, -S(O)2RA7, -NRA7RB7, -C(O)RA7, -OC(O)RA7, -C(O)ORA7, -NRB7C(O)RA7, -C(O)NRA7RB7, - NRB7SO2RA7 e -SO2NRA7RB7, em que a dita C1-4 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA8, -NRA8RB8 e -SO2RA8; Q4 e Q5 são, em cada ocorrência, independentemente selecionados dentre: fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros, heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros, C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1- 3 alquila, heterociclila de 4 a 6 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 6 membros, em que as ditas C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 6 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 6 membros de Q4 e Q5 são, cada uma, independente e opcionalmente substituídas por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, halo e =O, e em que as ditas fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila- 5 ou 6 membros de Q4 e Q5 são, cada um, independente opcionalmente substituídas por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -CN, -ORA9, -NRA9RB9 e -SO2RA9; L5 e L6 estão independentemente ausentes ou são independentemente selecionados dentre: -O-, -NRA11-, -S(O)2-, -C(=O)-, - NRA11C(=O)-, -C(=O)NRA11-, -S(O)2NRA11-, -NRA11S(O)2-, -OC(=O)- e - C(=O)O-.
53. R1 é selecionado dentre: C1-6 alquila, C1-6 haloalquila e Q1- L2-, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais de R 8;
Q é selecionado dentre: C3-12 cicloalquila, heterociclila saturada ou parcialmente saturada de 4 a 12 membros que contém 1 ou 2 heteroátomos de anel selecionados dentre O, S e N, em que a dita cicloalquila e heterociclila são opcionalmente substituídas por um ou mais de R9, L2 está ausente ou é selecionado de C1-4 alquileno; R8 e R9 são, em cada ocorrência, independentemente, selecionados dentre: halo, =O, -CN, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, -OR16A, - SO2R16, -NR16ARB2, -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2, -SO2NR16ARB2 e -C(O)OR16A, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5, em que R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -OC(O)RA5, -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5, - NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5, R16A é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C1-6 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -S(O)2RA5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e - SO2NRA5RB5, e C2-6 alquila substituída por 1 substituinte selecionado dentre: - ORA5 e -NRA5RB5; Q2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 7 membros, heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 7 membros, fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros,
em que dita heterociclila de 4 a 7 membros tem 1 ou 2 heteroátomos selecionados dentre O, S e N, em que as ditas C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 7 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 7 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais R 14, e em que a dita fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais de R15; L3 está ausente ou é selecionado dentre: -O-, -NRA4-, -SO2-, - C(=O)-, -NRA4C(=O)-, -C(=O)NRA4-, -S(O)2NRA4- e -NRA4S(O)2-; R14 e são, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, =O, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e -SO2NRA5RB5; e R15 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA7, -S(O)2RA7, - NRA7RB7, -C(O)RA7, -C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7 e -SO2NRA7RB7.
54. R1 é selecionado dentre: C1-6 alquila, C1-6 haloalquila e Q1- L2-, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais de R 8; Q1 é selecionado dentre: C3-12 cicloalquila, heterociclila saturada ou parcialmente saturada de 4 a 7 membros que contém 1 ou 2 heteroátomos de anel selecionados dentre O, S e N, em que a dita cicloalquila e heterociclila são opcionalmente substituídas por um ou mais de R9, L2 está ausente ou é selecionado de C1-4 alquileno; R8 e R9 são, em cada ocorrência, independentemente, selecionados dentre:
halo, =O, -CN, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, -OR16A, - SO2R16, -NR16ARB2, -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2, -SO2NR16ARB2 e -C(O)OR16A, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5, em que R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -OC(O)RA5, -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5, - NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5, R16A é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C1-6 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -S(O)2RA5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e - SO2NRA5RB5, e C2-6 alquila substituída por 1 substituinte selecionado dentre: - ORA5 e -NRA5RB5; Q2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, Q7, Q7-C1-3 alquila, fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros, em que Q7 é selecionado dentre: azetidinila, oxetanila, pirrolidinila, tetraidrofuranila, piperidinila, piperazinila, tetraidropiranila e morfolinila, em que a dita C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, Q7 e Q7-C1-3 alquila são opcionalmente substituídas por um ou mais de R 14, e em que a dita fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais de R15;
L é ausente ou é selecionado dentre: -O-, -NRA4-, -SO2-, -C(=O)- 3 , -NRA4C(=O)-, -C(=O)NRA4-, -S(O)2NRA4-, -NRA4S(O)2- e C(O)O-; R14 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, =O, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e -SO2NRA5RB5; e R15 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA7, -S(O)2RA7, - NRA7RB7, -C(O)RA7, -C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7 e -SO2NRA7RB7.
55. R1 é selecionado dentre: C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C3- 6 cicloalquila e heterociclila saturada de 4 a 7 membros que contém 1 ou 2 heteroátomos selecionados dentre O, S e N; em que dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados dentre: halo, e -ORA5, em que as ditas C3-6 cicloalquila e heterociclila saturada de 4 a 7 membros são opcionalmente substituídas por 1 ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, =O, C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, - L3-Q2, -C(O)RA2 e -C(O)NRA2RB2, L3 está ausente ou é, -C(=O)-, Q2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, Q7, Q7-C1-3 alquila, fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros, em que Q7 é selecionado dentre: azetidinila, oxetanila, pirrolidinila, tetraidrofuranila, piperidinila, piperazinila, tetraidropiranila e morfolinila, em que as ditas C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 6 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 6 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, =O, C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, - C(O)RA5 e -C(O)NRA5RB5, em que as ditas fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA7 e -NRA7RB7.
56. R1 é selecionado dentre: C1-6 alquila, -C1-4 alquil-CN, -C1- 4 alquil-ORA2, C1-6 haloalquila, C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 6 membros, heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 6 membros, fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros; em que a dita heterociclila de 4 a 6 membros é selecionada dentre: azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, oxetanila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila e morfolinila, em que a dita heteroarila de 5 ou 6 membros é selecionada dentre: furila, pirrolila, tienila, oxazolila, isoxazolila, imidazolila, pirazolila, tiazolila, isotiazolila, piridila, piridazinila, pirimidinila e pirazinila, em que a dita C3-6 cicloalquila, é opcionalmente substituída por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: =O, halo, C1-4 alquila e C1-4 haloalquila, em que a dita heterociclila é opcionalmente substituída por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: =O, halo, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -C(O)RA5 e -C(O)NRA5RB5, em que a dita fenila ou heteroarila é opcionalmente substituída por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5 e -NRA5RB5.
57. R1 é selecionado dentre: C1-4 alquila e C1-4 haloalquila, em que a dita C1-4 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes (por exemplo, 1 ou 2) selecionados dentre: halo, -CN, -ORA2 e -NRA2RB2.
58. R1 é C3-6 cicloalquila opcionalmente substituída por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, e =O.
59. R1 é selecionado dentre: azetidinila, pirrolidinila, piperidinila e piperazinila, em que a dita azetidinila, pirrolidinila, piperidinila ou piperazinila está ligada ao grupo -L1-C(O)- por um átomo de carbono de anel e em que o átomo de nitrogênio de anel na azetidinila, pirrolidinila, piperidinila ou piperazinila é opcionalmente substituído por um grupo selecionado dentre: C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -C2-4 alquil-ORA5, -C2-4 alquil- NRA5RB5, -C1-4 alquil-C(O)NRA5RB5, -C1-4 alquil-C(O)ORA5, -S(O)2RB5, - C(O)R16A, -C(O)NR16ARB2 e R191; e a dita azetidinila, pirrolidinila, piperidinila ou piperazinila é opcionalmente substituída em um carbono de anel por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, =O, C 1-4 alquila e C1-4 haloalquila; R191 é selecionado dentre: C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila-, azetidinil-C1-3 alquila-, pirrolidinil-C1-3 alquila-, piperidinil-C1-3 alquila- , piperazinil-C1-3 alquila-, morfolinil-C1-3 alquila-, fenila, fenil-C1-3 alquila-, pirazolila, piridila, pirimidila, pirazinila, piridazinila, pirazolil-C1-3 alquila-, piridil-C1-3 alquila-, pirimidil-C1-3 alquila-, pirazinil-C1-3 alquila- e piridazinil-C1- 3 alquila-; R16A é selecionado dentre: H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, azetidinil-C1-3 alquila-, pirrolidinil-C1-3 alquila-, piperidinil-C1-3 alquila-, piperazinil-C1-3 alquila-, fenila, fenil-C1-3 alquila-, pirazolila, piridila, pirimidila, pirazinila, piridazinila, pirazolil-C1-3 alquila-,
piridil-C1-3 alquila-, pirimidil-C1-3 alquila-, pirazinil-C1-3 alquila- e piridazinil-C1- 3 alquila- (por exemplo, pode ser que R16A não seja H); em que R191 e R16A são, cada um, independente e opcionalmente substituídos por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes independentemente selecionados dentre: halo, C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5 e -C(O)NRA5RB5.
60. L1 está ausente e R1 é selecionado dentre: azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila e morfolinila, em que a dita azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila está ligada ao grupo -C(O)- por um átomo de nitrogênio de anel; e em que a dita azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila ou morfolinila é opcionalmente substituída em um carbono de anel por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, =O, C1-4 alquila e C1-4 haloalquila.
61. R1 é uma heterociclila de 4 a 7 membros, por exemplo, uma heterociclila de 4 a 7 membros saturada selecionada dentre: azetidinila, oxetanila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, homopiperidinila e homopiperazinila, cada uma das quais é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes (por exemplo, 1 ou 2) selecionados dentre: halo, C 1-4 alquila, C1- 4 haloalquila, =O, -C(O)R16A, -C(O)OR16A, -C(O)NRA2RB2, -SO2R16A, -SO2Q22, -SO2CH2Q22, -C(O)Q22, -C(O)CH2Q22, -C(O)NRA4Q22, -C(O)NRA4CH2Q22, - SO2NRA2RB2, -SO2NRA4Q22 e -SO2NRA4CH2Q22; R16A é selecionado dentre: H, C1-4 alquila e C1-4 alquila substituídas por -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, - C(O)NRA5RB5 (por exemplo, pode ser que R 16A não seja H), Q22 é selecionado dentre: C3-6 cicloalquila, azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, fenila e heteroarila de 5 ou 6 membros,
em que Q é opcionalmente substituído por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5.
62. R1 é selecionado dentre: fenila ou uma heteroarila de 5 ou 6 membros que contém nitrogênio de anel e opcionalmente 1, ou 2 heteroátomos independentemente selecionados dentre: O, S e N, e em que R1 é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes (por exemplo 1, 2 ou 3) selecionados dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA3, - NRA3RB3 e -SO2RA3.
63. R1 é selecionado dentre: fenila, tienila, furanila, pirrolila, imidazolila, pirazolila, oxazolila, isoxazol, tiazolila, isotiazolila, piridila, pirimidila e pirazinila, cada uma das quais é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes (por exemplo 1, 2 ou 3) selecionados dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA3, -NRA3RB3 e -SO2RA3.
64. R1 é um grupo da fórmula: em que R810 é selecionado dentre: halo, -ORA2, -NRA2RB2, -CN, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila; R820 é selecionado dentre: halo, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, Q10, Q11 e Q12; R830 é selecionado dentre: halo, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila; ou R820 e R830 juntamente com o átomo de carbono ao qual estão fixados formam uma C3-6 cicloalquila ou heterociclila de 4 a 12 membros, em que a dita C3-6 cicloalquila ou heterociclila de 4 a 12 membros são, cada uma, independentemente opcionalmente substituídas por um ou mais R9.
Q é selecionado dentre: C3-6 cicloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, Q11 é selecionado dentre: heterociclila de 4 a 12 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 12 membros, Q12 é selecionado dentre: fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros, e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros; em que Q10 e Q11 são, cada um, independente e opcionalmente substituídos por um ou mais R9, e em que Q12 é opcionalmente substituído por um ou mais R 10.
65. R1 é um grupo da fórmula: em que R810 é selecionado dentre: halo, -ORA2, -NRA2RB2, -CN, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila; R820 e R830 são independentemente selecionados dentre: halo, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila; ou R820 e R830 juntamente com o átomo de carbono ao qual estão ligados formam ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila, oxetanila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila, azetidinila, pirrolidinila ou piperidinila, cada ou que é opcionalmente substituída por um ou mais (por exemplo 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: =O, halo, C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, - ORA2, -NRA2RB2, -SO2RA2, -C(O)RA2, -C(O)ORA2, -C(O)NRA2RB2, e - SO2NRA2RB2.
66. R1 é um grupo da fórmula:
em que R810 é selecionado dentre: halo, -ORA2, -NRA2RB2, -CN, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila; e R820 e R830 são independentemente selecionados dentre: halo, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila.
67. R1 é selecionado dentre: em que * mostra o ponto de fixação ao grupo -L1-C(O)-.
68. R1 é selecionado dentre:
em que A é C1-6 alquileno; R21 em cada ocorrência é independentemente selecionado dentre: halo, =O, -OH, -OC1-4 alquila, C1-4 alquila e C1-4 haloalquila; R81 é selecionado dentre: H, C1-4 alquila, C2-4 alquenila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, em que a dita C1-4 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes independentemente selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -NRA5RB5, -SO2RA5 e C3-6 cicloalquila; R91 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, -SO2R16, -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2, -SO2NR16ARB2 e -C(O)OR16A, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5, R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, - C(O)RA5, -OC(O)RA5, -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5, - NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5,
16A R é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C1-6 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -S(O)2RA5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e - SO2NRA5RB5, e C2-6 alquila substituída por 1 substituinte selecionado dentre: - ORA5 e -NRA5RB5; Q2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 6 membros, heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 6 membros, fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros, em que a dita heterociclila de 4 a 6 membros contém 1 ou 2 heteroátomos selecionados dentre: O, S e N, em que as ditas C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 6 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 6 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais R 14, e em que a dita fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais de R15; L3 é ausente ou é selecionado dentre: -SO2-, -C(=O)-, *- C(=O)NRA4-, *-S(O)2NRA4-, -NRA4S(O)2- e *-C(O)O-, em que * indica o ponto de fixação ao nitrogênio de anel em R 1; R14, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e -SO2NRA5RB5; e R15, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA7, -S(O)2RA7, -NRA7RB7, -C(O)RA7, -C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7 e -SO2NRA7RB7; e q1 é um número inteiro selecionado dentre: 0, 1, 2, 3 e 4;
desde que, quando L estiver ausente, Q2 seja ligado ao átomo 3 de nitrogênio de anel em R 1 por meio de um átomo de carbono de anel em Q2.
69. R1 é selecionado dentre: em que R21, R81, R91 e q1 são, conforme definido em (68) acima.
70. R1 é: em que R21, R81, R91 e q1 são, conforme definido em (68) acima.
71. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (70), em que: R91 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, -SO2R16, -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2, -SO2NR16ARB2 e -C(O)OR16A, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5, R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -
A5 A5 C(O)R , -OC(O)R , -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5, - NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5, R16A é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C1-6 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -S(O)2RA5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e - SO2NRA5RB5, e C2-6 alquila substituída por 1 substituinte selecionado dentre: - ORA5 e -NRA5RB5 Q2 é selecionado dentre: Q6, Q6-C1-3 alquileno, Q7, Q7-C1-3 alquileno, Q8 e Q8-C1-3 alquileno, em que Q6 é C3-6 cicloalquila; Q7 é selecionado dentre: azetidinila, oxetanila, tetra- hidrofuranila, tetra-hidropiranila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, homopiperidinila e homopiperazinila; Q8 é selecionado dentre: fenila, pirrolila, furanila, tienila, imidazolila, oxazolila, oxadiazolila, isoxazolila, tiazolila, isotiazolila, pirazolila, piridila, pirazinila, piridazinila e pirimidinila; em que o dito Q6, Q6-C1-3 alquileno, Q7 e Q7-C1-3 alquileno são, cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 de R14, e Q8 e Q8-C1-3 alquileno- são, cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 de R 15; L3 é ausente ou é selecionado dentre: -SO2-, -C(=O)-, *- C(=O)NRA4-, *-S(O)2NRA4- e *-C(O)O-, em que * indica o ponto de fixação ao nitrogênio de anel em R1; R14, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e -SO2NRA5RB5; e
R , em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA7, -S(O)2RA7, -NRA7RB7, -C(O)RA7, -C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7 e -SO2NRA7RB7; desde que, quando L3 estiver ausente, Q2 seja ligado ao átomo de nitrogênio de anel em R 1 por meio de um átomo de carbono de anel em Q2.
72. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (70), em que: R91 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, -SO2R16, -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2, -SO2NR16ARB2 e -C(O)OR16A, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5, R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5 e -NRA5RB5, R16A é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C1-6 alquila substituída por 1 substituinte selecionado dentre: - CN, e -S(O)2RA5, e C2-6 alquila substituída por 1 substituinte selecionado dentre: - ORA5 e -NRA5RB5 Q2 é selecionado dentre: Q6, Q6-C1-3 alquileno, Q7, Q7-C1-3 alquileno, Q8 e Q8-C1-3 alquileno, em que Q6 é C3-6 cicloalquila;
Q é selecionado dentre: azetidinila, oxetanila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, homopiperidinila e homopiperazinila; Q8 é selecionado dentre: fenila, pirrolila, furanila, tienila, imidazolila, oxazolila, oxadiazolila, isoxazolila, tiazolila, isotiazolila, pirazolila, piridila, pirazinila, piridazinila e pirimidinila; em que os ditos Q6, Q6-C1-3 alquileno- são, cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 R 141, os ditos Q7 e Q7-C1-3 alquileno- são, cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 R 142, e os ditos Q8 e Q8- C1-3 alquileno- são, cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 R 15; L3 é ausente ou é selecionado dentre: -SO2-, -C(=O)-, *- C(=O)NRA4- e *-S(O)2NRA4-, em que * indica o ponto de fixação ao nitrogênio de anel em R1; R141, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O e C1-4 alquila; R142, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, - C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e -SO2NRA5RB5; e R15, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA7, -S(O)2RA7, -NRA7RB7, -C(O)RA7, -C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7 e -SO2NRA7RB7; desde que, quando L3 estiver ausente, Q2 seja ligado ao átomo de nitrogênio de anel em R 1 por meio de um átomo de carbono de anel em Q2.
73. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (72), em que L3 está ausente ou é -C(O)-.
74. R é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (73), em que R21, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O e C1-4 alquila.
75. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (74), em que q1 é 0.
76. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (75), em que R81 é selecionado dentre: H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila.
77. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (75), em que R81 é selecionado dentre: C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila.
78. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (75), em que R81 é C1-4 alquila (por exemplo, metila ou etila).
79. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (75), em que R81 é H.
80. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (79), em que R91 é H ou é selecionado dentre:
em que * indica o ponto de fixação do grupo R91 ao nitrogênio de anel em R1.
81. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (80), em que R91 não é H.
82. R1 é conforme definido em qualquer um dentre (68) a (80), em que R91 é H.
83. L1 está ausente e R1 é selecionado dentre: em que R21, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O e C1-4 alquila; R91 é conforme definido em (71), (72), (80), (81) ou (82); e q1 é um número inteiro selecionado dentre 0, 1, 2, 3 e 4.
84. R1 é selecionado dentre:
em que * mostra o ponto de fixação a -L1-C(O)-.
85. R1 é selecionado dentre:
em que * mostra o ponto de fixação a -L1-C(O)-
86. R1 é
87. L1 está ausente.
88. L1 é -O-.
89. L1 é -N(R7)-.
90. L1 está ausente e R1 é conforme definido em qualquer um dentre (52) a (86).
91. L1 é -O- e R1 é conforme definido em qualquer um dentre (52) a (59), (61) a (82) ou (84) a (86) acima.
92. L1 é -N(R7)- e HET é conforme definido em qualquer um dentre (52) a (58), (61) a (82) ou (84) a (86) acima.
93. R4 é selecionado dentre: H e C1-3 alquila e R5 é H.
94. R4 é C1-3 alquila (por exemplo, R4 é um exemplo de metila) e R5 é H.
95. R e R em conjunto com o carbono ao qual os mesmos estão ligados formam uma C3-6 cicloalquila, por exemplo, ciclopropila ou ciclobutila.
96. R4 e R5 são ambos C1-4 alquila.
97. R4 e R5 são ambos metila.
98. R4 e R5 são ambos H.
99. X1 é N.
100. X1 é CR6
101. X1 é CR6 e R6 é selecionado dentre: H, halo, C1-4 alquila e C1-4 haloalquila.
102. X1 é CR6 e R6 é selecionado dentre: halo, C1-4 alquila e C1- 4 haloalquila.
103. X1 é CR6 e R6 é selecionado dentre: H, fluoro, metila, etila e CF3.
104. X1 é CR6 e R6 é selecionado dentre: F, metila, etila ou CF3.
105. X1 é CR6 e R6 é selecionado dentre: halo e C1-4 alquila.
106. X1 é CR6 e R6 é selecionado dentre: H e C1-4 alquila.
107. X1 é CR6 e R6 é H.
108. X1 é CR6 e R6 é C1-4 alquila.
109. X1 é CR6 e R6 é metila.
110. X1 é CR6 e R6 é halo.
111. X1 é CR6 e R6 é fluoro.
112. é: .
113. é: .
114. é: .
115. é: .
116. é: .
117. é: .
[00120] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), em que: HET é selecionado dentre:
em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto; R3 é H ou C1-3 alquila (de preferência, R3 é H); R2 é C1-3 alquila; q é 0, 1 ou 2 (de preferência, q é 0); L e L1 estão ausentes; R1 é conforme definido em qualquer um dentre (52) a (86) acima; e R4, R5, X1, X2 e X3 são conforme definido para a fórmula (I).
[00121] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), em que: HET é selecionado dentre: em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto;
R é H ou C1-3 alquila (de preferência, R3 é H); 3 R2 é C1-3 alquila; q é 0, 1 ou 2 (de preferência, q é 0); L e L1 estão ausentes; R1 é conforme definido em qualquer um dentre (52) a (86) acima; e R4, R5, X1, X2 e X3 são conforme definido para a fórmula (I).
[00122] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), em que: R1 é conforme definido em (54) acima; L e L1 estão ausentes; HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (38) acima; e R4, R5, X1, X2 e X3 são conforme definido para a fórmula (I).
[00123] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), em que: R1 é conforme definido em (61) acima; L e L1 estão ausentes; HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (38) acima; e R4, R5, X1, X2 e X3 são conforme definido para a fórmula (I).
[00124] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), em que: R1 é conforme definido em (68) acima; L e L1 estão ausentes; HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (38) acima; e R4, R5, X1, X2 e X3 são conforme definido para a fórmula (I).
[00125] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), em que: R1 é conforme definido em (69) acima; L e L1 estão ausentes; HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (38) acima; e R4, R5, X1, X2 e X3 são conforme definido para a fórmula (I).
[00126] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), em que: R1 é conforme definido em (84) acima; L e L1 estão ausentes; HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (38) acima; e R4, R5, X1, X2 e X3 são conforme definido para a fórmula (I).
[00127] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), em que: R1 é selecionado dentre: R91 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, -SO2R16, -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2, -SO2NR16ARB2 e -C(O)OR16A, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5, R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -
A5 A5 C(O)R , -OC(O)R , -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5, - NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5, R16A é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C1-6 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -S(O)2RA5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e - SO2NRA5RB5, e C2-6 alquila substituída por 1 substituinte selecionado dentre: - ORA5 e -NRA5RB5; Q2 é selecionado dentre: Q6, Q6-C1-3 alquileno, Q7, Q7-C1-3 alquileno, Q8 e Q8-C1-3 alquileno, em que Q6 é C3-6 cicloalquila; Q7 é selecionado dentre: azetidinila, oxetanila, tetra- hidrofuranila, tetra-hidropiranila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, homopiperidinila e homopiperazinila; Q8 é selecionado dentre: fenila, pirrolila, furanila, tienila, imidazolila, oxazolila, oxadiazolila, isoxazolila, tiazolila, isotiazolila, pirazolila, piridila, pirazinila, piridazinila e pirimidinila; em que o dito Q6, Q6-C1-3 alquileno, Q7 e Q7-C1-3 alquileno são, cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 de R 14, e Q8 e Q8-C1-3 alquileno- são, cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 de R 15; L3 é ausente ou é selecionado dentre: -SO2-, -C(=O)-, *- C(=O)NRA4-, *-S(O)2NRA4- e *-C(O)O-, em que * indica o ponto de fixação ao nitrogênio de anel em R1; R14, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e -SO2NRA5RB5; e
R , em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA7, -S(O)2RA7, -NRA7RB7, -C(O)RA7, -C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7 e -SO2NRA7RB7; desde que, quando L3 estiver ausente, Q2 seja ligado ao átomo de nitrogênio de anel em R 1 por meio de um átomo de carbono de anel em Q2; R21, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O e C1-4 alquila; R81 é selecionado dentre: H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila; L e L1 estão ausentes; HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (38) acima; q1 é um número inteiro selecionado dentre 0, 1 e 2; e R4, R5, X1, X2 e X3 são conforme definido para a fórmula (I).
[00128] Adequadamente, nessa modalidade, L3 está ausente ou é -C(=O)-.
[00129] Adequadamente, nessa modalidade, R 81 é selecionado dentre: C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila.
[00130] Adequadamente, nessa modalidade, R 81 é selecionado dentre: C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3alquila; e L3 está ausente ou é -C(=O)-.
[00131] Pode ser que, nessa modalidade, R81 não seja H.
[00132] Pode ser que, nessa modalidade, R81 seja H.
[00133] Pode ser que, nessa modalidade, R91 não seja H.
[00134] Pode ser que, nessa modalidade, R91 seja H.
[00135] Adequadamente, nessa modalidade, R 91 é selecionado dentre: -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2; R16 é C1-4 alquila; R16A é selecionado dentre: H e C1-4 alquila; e RB2 é selecionado dentre: H e C1-4 alquila.
[00136] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), em que: R1 é terc-butila; L e L1 estão ausentes; HET é conforme definido em qualquer um dentre (1) a (38) acima; e R4, R5, X1, X2 e X3 são conforme definido para a fórmula (I).
[00137] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), em que o grupo: .
[00138] Em certas modalidades, é fornecido um composto da fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) ou (VIII), em que o grupo: é .
[00139] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (IIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IIa) em que a é um número inteiro selecionado dentre 0, 1 e 2; b é um número inteiro selecionado dentre 1, 2, 3 e 4; e R1, R2, R3, R4, R5, L1, X1, X2, X3 e q são conforme definido para a fórmula (I).
[00140] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (IIIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (IIIa) em que b é um número inteiro selecionado dentre 1, 2, 3 e 4; e R1, R2, R3, R4, R5, L1, X1, X2, X3 e q são conforme definido para a fórmula (I) (incluindo qualquer um dos valores em (1) a (117) acima).
[00141] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (Va), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (Va) em que R1, R2, R3, R4, R5, L1, X1, X2, X3 e q são conforme definido para a fórmula (I) (incluindo qualquer um dos valores em (1) a (117) acima).
[00142] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (VIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (VIa) em que R1, R2, R3, R4, R5, X1, X2, X3 e q são conforme definido para a fórmula (I) (incluindo qualquer um dos valores em (1) a (117) acima)
[00143] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (VIIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
(VIIa) em que R1, R2, R3, R4, R5, X1, X2, X3 e q são conforme definido para a fórmula (I) e R810, R820 e R830 são conforme definido para a fórmula (VII) (incluindo qualquer um dos valores em (1) a (117) acima).
[00144] Em certas modalidades, o composto da fórmula (I) é um composto de acordo com a fórmula (VIIIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (VIIIa) em que R2, R3, R4, R5, X1, X2, X3 e q são conforme definido para a fórmula (I) (incluindo qualquer um dos valores em (1) a (117) acima)
[00145] Em certas modalidades, em um composto da fórmula (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (V), (Va), (VI) ou (VIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, R1 é selecionado dentre:
R é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, 91
-SO2R16, -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2, -SO2NR16ARB2 e -C(O)OR16A, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5, R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, - C(O)RA5, -OC(O)RA5, -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5, - NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5, R16A é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C1-6 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -S(O)2RA5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e - SO2NRA5RB5, e C2-6 alquila substituída por 1 substituinte selecionado dentre: - ORA5 e -NRA5RB5 Q2 é selecionado dentre: Q6, Q6-C1-3 alquileno, Q7, Q7-C1-3 alquileno, Q8 e Q8-C1-3 alquileno, em que Q6 é C3-6 cicloalquila; Q7 é selecionado dentre: azetidinila, oxetanila, tetra- hidrofuranila, tetra-hidropiranila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, homopiperidinila e homopiperazinila; Q8 é selecionado dentre: fenila, pirrolila, furanila, tienila, imidazolila, oxazolila, oxadiazolila, isoxazolila, tiazolila, isotiazolila, pirazolila, piridila, pirazinila, piridazinila e pirimidinila;
em que o dito Q , Q -C1-3 alquileno, Q7 e Q7-C1-3 alquileno são, 6 6 cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 de R 14, e Q8 e Q8-C1-3 alquileno- são, cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 de R 15; L3 é ausente ou é selecionado dentre: -SO2-, -C(=O)-, *- C(=O)NRA4-, *-S(O)2NRA4- e *-C(O)O-, em que * indica o ponto de fixação ao nitrogênio de anel em R1; R14, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e -SO2NRA5RB5; e R15, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA7, -S(O)2RA7, -NRA7RB7, -C(O)RA7, -C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7 e -SO2NRA7RB7; desde que, quando L3 estiver ausente, Q2 seja ligado ao átomo de nitrogênio de anel em R 1 por meio de um átomo de carbono de anel em Q2; R21, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O e C1-4 alquila; R81 é selecionado dentre: H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila; e q1 é um número inteiro selecionado dentre 0, 1 e 2.
[00146] Adequadamente, nessas modalidades dos compostos da fórmula (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (V), (Va), (VI) e (VIa), L3 está ausente ou é -C(=O)-.
[00147] Adequadamente, nessas modalidades dos compostos da fórmula (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (V), (Va), (VI) e (VIa), R 81 é selecionado dentre: C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3alquila (por exemplo, R81 é metila ou etila).
[00148] Adequadamente, nessas modalidades dos compostos da fórmula (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (V), (Va), (VI) e (VIa), R 81 é selecionado dentre: C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3alquila; e L3 está ausente ou é -C(=O)-.
[00149] Pode ser que, nessas modalidades dos compostos da fórmula (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (V), (Va), (VI) e (VIa), R 91 não seja H.
[00150] Pode ser que, nessas modalidades dos compostos da fórmula (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (V), (Va), (VI) e (VIa), R91 seja H.
[00151] Pode ser que, nessas modalidades dos compostos da fórmula (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (V), (Va), (VI) e (VIa), R 91 seja selecionado dentre: -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2; R16 seja C1-4 alquila; R16A seja selecionado dentre: H e C1-4 alquila; e RB2 seja selecionado dentre: H e C1-4 alquila
[00152] Em certas modalidades, em um composto da fórmula (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (V), (Va), (VI) ou (VIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, R1 é selecionado dentre: C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C3-6 cicloalquila e heterociclila de 4 a 7 membros que contém 1 ou 2 heteroátomos de anel selecionados dentre O, S e N; em que as ditas C1-6 alquila, C3-6 cicloalquila e heterociclila de 4 a 7 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, =O, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquil -OH, -O(C1-4 alquila), -C(=O)(C1-4 alquila), -C(=O)NH(C1-4 alquila), -C(=O)N(C1-4 alquila)2, Q20, Q20-C(=O)-, Q20NHC(=O)-, Q20N(C1-4 alquil)C(=O)-, Q20 é selecionado dentre, C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-CH2-, heterociclila de 4-7 membros, heterociclil-CH2- de 4-7 membros, heteroarila de 5 ou 6 membros, heteroaril-CH2- de 5 ou 6 membros, fenila e benzila, em que as ditas C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-CH2-, heterociclila de 4-7 membros, heterociclil-CH2- de 4-7 membros em Q20 são opcionalmente substituídas por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, =O, C 1- 4 alquila e C1-4 haloalquila; e em que as ditas heteroarila de 5 ou 6 membros, heteroaril-CH2- de 5 ou 6 membros, fenila e benzila são opcionalmente substituídas por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, C 1-4 alquila e C1-4 haloalquila.
[00153] Adequadamente, nessa modalidade, L1 está ausente. Adequadamente, nessa modalidade, q é 0.
[00154] Em certas modalidades, em um composto da fórmula (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (V), (Va), (VI) ou (VIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, R1 é selecionado dentre: C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C3-6 cicloalquila e heterociclila, em que a dita heterociclila é selecionada dentre pirrolidinila, piperidinila, piperazinila e tetraidropiranila; em que as ditas C1-6 alquila, C3-6 cicloalquila e heterociclila são opcionalmente substituídas por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, - OH, -O(C1-4 alquila), -C(=O)(C1-4 alquila), -C(=O)NH(C1-4 alquila), - C(=O)N(C1-4 alquila)2, Q21, Q21-C(=O)-, Q21NHC(=O)-, Q21N(C1-4 alquil)C(=O)-, Q21 é selecionado dentre: heterociclila, heterociclil-CH2-, heteroarila de 5 ou 6 membros, heteroaril-CH2- de 5 ou 6 membros, fenila, benzila, em que a heterociclila representada por Q21 é selecionada dentre: pirrolidinila, piperidinila, piperazinila e tetraidropiranila; e em que Q21 é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, C1-4 alquila e C1-4 haloalquila.
[00155] Adequadamente, nessa modalidade, L1 está ausente. Adequadamente, nessa modalidade, q é 0.
[00156] Em certas modalidades, em um composto da fórmula (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (V), (Va), (VI) e (VIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: R1 é conforme definido em qualquer um dentre (52) a (86) acima; R2 é C1-3 alquila ou =O; R3 é H;
X1, X2 e X3 são CH; R4 é H ou C1-3 alquila, R5 é H; e q é um número inteiro selecionado dentre: 0, 1 e 2.
[00157] Adequadamente, nessas modalidades, q é 0.
[00158] Em certas modalidades, em um composto da fórmula (VII) e (VIIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: R810 é selecionado dentre C1-6 alquila, C1-6 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, R820 e R830 são, cada, independentemente selecionados dentre: halo, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, ou R820 e R830 juntamente com o átomo de carbono ao qual estão fixados formam uma C3-6 cicloalquila ou heterociclila de 4 a 7 membros selecionada dentre: azetidinila, oxetanila, tetraidrofuranila, tetraidropiranila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, homopiperidinila e homopiperazinila, cada uma das quais é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes (por exemplo 1 ou 2) selecionados dentre: halo, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, =O, -C(O)R16A, -C(O)OR16A, - C(O)NRA2RB2, -SO2R16A, -SO2Q22, -SO2CH2Q22, -C(O)Q22, -C(O)CH2Q22, - C(O)NRB2Q22, -C(O)NRB2CH2Q22, -SO2NRA2RB2, -SO2NRB2Q22 e - SO2NRB2CH2Q22. R16A é selecionado dentre: C1-4 alquila e C1-4 alquila substituída por -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5, Q22 é selecionado dentre: C3-6 cicloalquila, azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, fenila e heteroarila de 5 ou 6 membros,
em que Q é opcionalmente substituído por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5.
[00159] Em certas modalidades, em um composto da fórmula (VII) e (VIIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: R81 é selecionado dentre: C1-6 alquila e C1-6 haloalquila; e R82 e R83 são, cada um, independentemente selecionados dentre: halo, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila.
[00160] Em certas modalidades, em um composto da fórmula (VII) e (VIIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, R 81, R82 e R83 são, cada um, independentemente selecionados dentre: halo, C 1-6 alquila e C1-6 haloalquila.
[00161] Em certas modalidades, em um composto da fórmula (VII) e (VIIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, o grupo C(R81)(R82)(R83) é terc-butila.
[00162] Em certas modalidades, em um composto da fórmula (VII), (VIIa), (VIII) ou (VIIIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito no presente documento, pode ser que X1, X2 e X3 sejam CH.
[00163] Em certas modalidades, em um composto da fórmula (VII), (VIIa), (VIII) ou (VIIIa), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito no presente documento, pode ser que: R2 seja C1-3 alquila ou =O; R3 seja H; X1, X2 e X3 sejam CH; R4 seja H ou C1-3 alquila; R5 seja H; e q seja um número inteiro selecionado dentre: 0, 1 e 2 (por exemplo, q é 0).
[00164] Em outra modalidade, é fornecido um composto selecionado dentre a Lista 1, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou pró- fármaco do mesmo: Lista 1 e .
[00165] Em outra modalidade, é fornecido um composto selecionado dentre qualquer um dos Exemplos no presente documento, ou um sal farmaceuticamente aceitável, ou pró-fármaco do mesmo.
[00166] Os compostos específicos da invenção são aqueles que têm uma pIC50 maior ou igual a 7, quando testados no ensaio de competição de cAMP de receptor de AM2 / Agonista-Antagonista descrito nos Exemplos.
COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS
[00167] De acordo com outro aspecto, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica que compreende um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[00168] Os procedimentos convencionais para a seleção e a preparação de composições farmacêuticas adequadas são descritos, por exemplo, em "Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs", M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988.
[00169] As composições da invenção podem estar sob uma forma adequada para uso oral (por exemplo, como comprimidos, pastilhas, cápsulas duras ou macias, suspensões aquosas ou oleosas, emulsões, pós ou grânulos dispersíveis, xaropes ou elixires), para uso tópico (por exemplo, como cremes, pomadas, géis ou soluções ou suspensões aquosas ou oleosas), para administração por inalação (por exemplo, como um pó finamente dividido ou um aerossol líquido), para administração por insuflação (por exemplo, como um pó finamente dividido) ou para administração parenteral (por exemplo, como uma solução aquosa ou oleosa estéril para dosagem intravenosa, subcutânea, intramuscular ou intraperitoneal ou como um supositório para dosagem retal).
[00170] As composições da invenção podem ser obtidas por procedimentos convencionais usando excipientes farmacêuticos convencionais, bem conhecidos na técnica. Dessa forma, as composições destinadas para uso oral podem conter, por exemplo, um ou mais agentes corantes, adoçantes, flavorizantes e/ou conservantes.
[00171] Uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção para uso na terapia de uma afecção é uma quantidade suficiente para aliviar sintomaticamente em um animal de sangue quente, particularmente em um ser humano, os sintomas da afecção ou para retardar a progressão da afecção.
[00172] A quantidade de ingrediente ativo que é combinada com um ou mais excipientes para produzir uma forma de dosagem única irão necessariamente variar dependendo do hospedeiro tratado e da via de administração específica. Por exemplo, uma formulação destinada para administração oral a seres humanos conterá, em geral, por exemplo, de 0,1 mg a 0,5 g de agente ativo (mais adequadamente de 0,5 a 100 mg, por exemplo, de 1 a 30 mg) composto com uma quantidade adequada e conveniente de excipientes que pode variar de cerca de 5 a cerca de 98 por cento, em peso, da composição total.
[00173] O tamanho da dose para propósitos terapêuticos ou profiláticos de um composto da invenção variará naturalmente de acordo com a natureza e a gravidade das afecções, a idade e o sexo do animal ou paciente e da via de administração, de acordo com princípios de medicina bem conhecidos.
[00174] Com o uso de um composto da invenção para propósitos terapêuticos ou profiláticos, o mesmo será administrado de modo que uma faixa diária na faixa, por exemplo, uma dose diária selecionada dentre 0,1 mg/kg a 100 mg/kg, 1 mg/kg a 750 mg/kg, 1 mg/kg a 600 mg/kg, 1 mg/kg a 550 mg/kg, 1 mg/kg a 75 mg/kg, 1 mg/kg a 50 mg/kg, 1 mg/kg a 20 mg/kg ou 5 mg/kg a 10 mg/kg de peso corporal seja recebida, administrada se necessário em doses divididas. Em geral, doses menores serão administradas quando uma via parenteral é empregada. Dessa forma, por exemplo, para administração intravenosa, subcutânea, intramuscular ou intraperitoneal, uma dose na faixa, por exemplo, de 0,1 mg/kg a 30 mg/kg de peso corporal será geralmente usada. Em certas modalidades, o composto da invenção é administrado por via intravenosa, por exemplo, em uma dose diária de 1 mg/kg a 750 mg/kg, 1 mg/kg a 600 mg/kg, 1 mg/kg a 550 mg/kg, ou 5 mg/kg a 550 mg/kg, por exemplo, em cerca de 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 175, 180, 200, 225, 250, 275, 300, 350, 400, 450, 500, 540, 550 ou 575 mg/kg. De modo similar, para administração por inalação, será usada uma dose na faixa, por exemplo, de 0,05 mg/kg a 25 mg/kg de peso corporal. Adequadamente, o composto da invenção é administrado por via oral, por exemplo, sob a forma de um tablete, ou forma de dosagem em cápsula. A dose diária administrada por via oral pode ser, por exemplo, uma dose diária total selecionada dentre 1 mg a 1000 mg, 5 mg a 1000 mg, 10 mg a 750 mg ou 25 mg a 500 mg. Tipicamente, as formas de dosagem unitária conterão cerca de 0,5 mg a 0,5 g de um composto dessa invenção. Em uma modalidade específica, o composto da invenção é administrado por via parenteral, por exemplo, por administração intravenosa. Em outra modalidade específica, o composto da invenção é administrado por via oral.
USOS E APLICAÇÕES TERAPÊUTICAS
[00175] De acordo com outro aspecto, a presente invenção fornece um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso como um medicamento.
[00176] Um aspecto adicional da invenção fornece um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de uma doença ou afecção médica mediada por receptores de subtipo 2 de receptor de adrenomedulina (AM2).
[00177] É também fornecido o uso de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo na fabricação de um medicamento para o tratamento de uma doença ou afecção médica mediada por AM2.
[00178] Também é fornecido um método de tratamento de uma doença ou afecção médica mediada por AM2 em um sujeito com necessidade do mesmo, sendo que o método compreende administrar ao sujeito uma quantidade eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00179] Nas seguintes seções do pedido, é feita referência a um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento de certas doenças ou afecções. Será entendido que qualquer referência no presente documento a um composto para um uso específico também se destina a uma referência a (i) o uso do composto da invenção, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para o tratamento daquela doença ou afecção; e (ii) um método de tratamento da doença ou afecção em um sujeito, sendo que o método compreende administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto da invenção, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00180] A doença de afecção médica mediada por AM2 pode ser qualquer uma das doenças ou afecções médicas mencionadas nesse pedido, por exemplo, uma doença proliferativa, particularmente câncer.
[00181] O sujeito ao qual o composto da invenção é administrado pode ser um mamífero de sangue quente, por exemplo, ser humano ou animal. Em modalidades específicas, o sujeito ou paciente é um ser humano. Em outras modalidades, o sujeito é um animal, por exemplo, um rato, camundongo, cão, gato, um primata ou um cavalo.
[00182] A associação de AM e do receptor de AM2 a doenças em seres humanos e animais é apresentada nos Antecedentes da Invenção. Essa revelação e as referências associadas fornecem suporte adicional para os usos terapêuticos dos compostos da invenção. Como tal, as referências de suporte que associam AM, o receptor de AM2 e sua inibição também fazem parte da revelação da utilidade dos compostos da invenção no tratamento e prevenção das afecções médicas descritas no presente documento.
[00183] A função de AM2 tem funções distintas em doenças como câncer. Consequentemente, a inibição de AM2 pode ser vantajosa. O receptor de AM2 é um complexo formado pelo GPCR, receptor semelhante à calcitonina (CLR) e RAMP3. O receptor de AM1 relacionado é formado por CLR e RAMP2 e medeia várias funções fisiológicas importantes incluindo pressão sanguínea. Consequentemente, é preferencial que um composto da invenção iniba seletivamente AM2 e tenha pouco ou nenhum efeito sobre a função de AM1.
[00184] RAMP1 e RAMP3 também interagem com o receptor de calcitonina (CTR) para formar dois receptores de amilina funcionais (receptores de AMY). CTR e RAMP1 formam o receptor de AMY 1 , enquanto CTR e RAMP3 formam o receptor de AMY 3. A amilina tem funções importantes no controle glicêmico, em virtude de sua cossecreção com insulina em resposta a mudanças na glicose sanguínea, e suas funções específicas para retardar aumentos na glicose sérica retardando o esvaziamento gástrico, retardando a liberação de enzimas digestivas e bile, e aumentando a sensação de saciedade para reduzir ou inibir a ingestão adicional de alimentos.
A mesma também reduz a secreção de glucagon, reduzindo assim a produção de nova glicose e sua liberação na corrente sanguínea.
A amilina é também conhecida por estimular a formação óssea por efeitos anabólicos diretos sobre os osteoblastos.
Essas funções são obtidas por ações da Amilina sobre os receptores de amilina.
Desses, acredita-se que a AMY1R e AMY3R sejam responsáveis por essas funções homeostáticas.
O receptor de AMY2 (formado por CTR e RAMP2) não é conhecido por ter funções fisiológicas de significância.
O bloqueio do controle da glicose sanguínea não é uma função desejável e, em pacientes com câncer, a redução do apetite e a falha em manter os níveis normais de glicose sanguínea poderiam ser vistos como efeitos indesejáveis em um fármaco.
Consequentemente, os compostos preferenciais da invenção inibem seletivamente AM2 sobre AMY1 e/ou AMY3. Espera-se que compostos específicos da invenção forneçam antagonistas de AM2 potentes adequados para uso terapêutico, com pouco ou nenhum efeito antagonístico sobre o receptor de AM1 devido à sua função importante na regulação da pressão sanguínea.
Adequadamente, os compostos da invenção têm pouco ou nenhum efeito sobre o receptor de CTR/RAMP3 AMY 3 que está envolvido na regulação fisiológica de metabolismo de energia.
[00185] Nas modalidades, um composto da invenção é 10 vezes, 50 vezes ou 100 vezes mais ativo contra AM2 em comparação com uma ou mais dentre AM1, AMY1 e/ou AMY3. Em certas modalidades, o composto da invenção inibe seletivamente AM2 em comparação com AM1 e/ou AMY3. Por exemplo, a IC50 de um composto da invenção no ensaio baseado em células de AM2 descrito nos Exemplos é 10 vezes, 50 vezes ou 100 vezes menor que a IC50 em um ou mais ensaios correspondentes que usam linhagens celulares que expressam receptores de AM 1, AMY1 ou AMY3.
[00186] Adequadamente, os compostos da invenção inibem seletivamente o receptor de AM2 sobre outros receptores aos quais a AM se liga, por exemplo, exibindo seletividade de 5 vezes, 10 vezes, 50 vezes ou 100 vezes para o receptor de AM2 sobre outros receptores aos quais a AM se liga. Doenças Proliferativas
[00187] Um aspecto adicional da invenção fornece um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso no tratamento de uma doença proliferativa. A doença proliferativa pode ser maligna ou não maligna.
[00188] AM2 é positivamente regulado e exerce uma função essencial em câncer primário e metástase. Consequentemente, em uma modalidade, é fornecido um composto da invenção para uso no tratamento de câncer, que pode ser não metastático ou metastático. O câncer é adequadamente um tumor sólido, entretanto, um composto da invenção pode também ser útil no tratamento de cânceres hematológicos ("líquidos") e efeitos associados a tais cânceres. Há evidências de que os cânceres hematológicos expressam AM e que sua função na estimulação da angiogênese é importante na progressão da doença (Kocemba K et al. The hypoxia target adrenomedullin is aberrantly expressed in multiple myeloma and promotes angiogenesis, Leukemia. 2013;27:1729 1737: DOI
10.1038/leu.2013.76). A inibição de AM2 no microambiente de um tumor pode ser benéfica na prevenção ou inibição de angiogênese e na progressão da doença associada a um câncer como mieloma múltiplo.
[00189] Os compostos da invenção podem ser úteis no tratamento e/ou prevenção de, por exemplo: Carcinoma, incluindo, por exemplo, tumores derivados de epitélios escamosos estratificados (carcinomas de células escamosas) e tumores que surgem dentro de órgãos ou glândulas (adenocarcinomas). Exemplos incluem carcinoma de mama, cólon, pulmão, próstata, ovário, esôfago (incluindo, porém sem limitação, adenocarcinoma de esôfago e carcinoma de células escamosas), carcinoma de mama tipo basal, carcinoma de células basais (uma forma de câncer de pele), carcinoma de células escamosas (vários tecidos), carcinoma de cabeça e pescoço (incluindo, porém sem limitação, carcinomas de células escamosas), carcinoma de estômago (incluindo, porém sem limitação, adenocarcinoma de estômago, tumor estromal gastrointestinal), carcinoma de células de anel de sinete, carcinoma de bexiga (incluindo carcinoma de células transicionais (uma neoplasia maligna da bexiga)), carcinoma broncogênico, carcinoma colorretal (incluindo, porém sem limitação, carcinoma de cólon e carcinoma retal), carcinoma anal, carcinoma gástrico, carcinoma de pulmão (incluindo, porém sem limitação, carcinoma de células pequenas e carcinoma de células não pequenas de pulmão, adenocarcinoma de pulmão, carcinoma de células escamosas, carcinoma de células grandes, carcinoma bronquioloalveolar e mesotelioma), tumoures neuroendócrinos (incluindo, porém sem limitação, carcinoides do trato gastrointestinal, mama, e outros órgãos), carcinoma adrenocortical, carcinoma de tireoide, carcinoma pancreático, carcinoma de mama (incluindo, porém sem limitação, carcinoma ductal, carcinoma lobular, câncer de mama inflamatório, carcinoma de células claras, carcinoma mucinoso), carcinoma de ovário (incluindo, porém sem limitação, carcinoma epitelial de ovário ou tumor de superfície epitelial-estromal incluindo tumor seroso, tumor endometrioide e cistadenocarcinoma mucinoso, tumor estromal de cordão sexual), carcinoma de fígado e ducto biliar (incluindo, porém sem limitação, carcinoma hepatocelular, colangiocarcinoma e hemangioma), carcinoma de próstata, adenocarcinoma, tumores cerebrais (incluindo, porém sem limitação, glioma, glioblastoma e meduloblastoma), tumores de células germinativas, carcinoma de glândula sudorípara, carcinoma de glândula sebácea, carcinoma papilar, adenocarcinoma papilar, cistadenocarcinoma, carcinoma renal (incluindo, porém sem limitação, carcinoma de células renais, carcinoma de células claras e tumor de Wilm), carcinoma medular, carcinoma ductal in situ ou carcinoma de ducto biliar, coriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrionário, carcinoma cervical, carcinoma uterino (incluindo, porém sem limitação, adenocarcinoma endometrial, carcinoma seroso papilar uterino, carcinoma de células claras uterino, sarcomas uterinos e leiomiossarcomas, tumores mullerianos mistos), carcinoma testicular, carcinoma osteogênico, carcinoma epitelial, carcinoma sarcomatoide, carcinoma nasofaringeal, carcinoma laringeal; carcinoma escamoso oral e orofaríngeo; Sarcomas, incluindo: osteossarcoma e sarcoma osteogênico (osso); condrossarcoma (cartilagem); leiomiossarcoma (músculo liso); rabdomiossarcoma (músculo esquelético); sarcoma mesotelial e mesotelioma (revestimento membranoso de cavidades corporais); fibrossarcoma (tecido fibroso); angiossarcoma e hemangioendotelioma (vasos sanguíneos); lipossarcoma (tecido adiposo); glioma e astrocitoma (tecido conjuntivo neurogênico encontrado no cérebro); mixossarcoma (tecido conjuntivo embrionário primitivo); cordoma, endoteliossarcoma, linfangiossarcoma, linfangioendoteliossarcoma, sinovioma, sarcoma de
Ewing, tumor mesenquimal e mesodérmico misto (tipos mistos de tecido conjuntivo) e outros sarcomas de tecidos moles; Tumores sólidos do sistema nervoso incluindo meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma, meningioma, neuroblastoma e schwannoma; Melanoma, melanoma uveal e retinoblastoma; Mieloma e mieloma múltiplo; Tumores hematopoiéticos, incluindo: leucemia mieloide e granulocítica (malignidade da série de leucócitos mieloides e granulocíticos); leucemia linfática, linfocítica e linfoblástica (malignidade da série de células sanguíneas linfoides e linfocíticas); policitemia vera e eritremia (malignidade de vários produtos de células sanguíneas, porém com glóbulos vermelhos predominantes); mielofibrose; e Linfomas, incluindo: Linfomas Hodgkin e Não Hodgkin.
[00190] Em uma modalidade, um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo se destina ao uso no tratamento de um tumor sólido, por exemplo, qualquer um dos tumores sólidos mencionados acima. Em uma modalidade específica, um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo se destina ao uso no tratamento de um câncer selecionado dentre: câncer pancreático, colorretal, de mama, de pulmão e de ossos.
[00191] Em outra modalidade, o composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, se destina ao uso no tratamento de câncer de próstata dependente de hormônio.
[00192] Em outra modalidade, o composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, se destina ao uso no tratamento de um câncer de mama selecionado dentre câncer de mama Luminal A (positivo para receptor de hormônio (positivo para receptor de estrogênio e/ou receptor de progesterona), negativo para HER2 e baixos teores da proteína Ki-67); câncer de mama Luminal B (positivo para receptor de hormônio (positivo para receptor de estrogênio e/ou receptor de progesterona), e positivo para HER2 ou negativo para HER2 com altos níveis de Ki-67); câncer de mama triplo negativo (ou seja, o tumor é negativo para receptor de estrogênio, negativo para receptor de progesterona e negativo para HER2); câncer de mama positivo para HER2 ou câncer de mama normal (classificações conforme definido na Tabela 1 de Dai et al. Am. J. Cancer Research. 2015;5(10):2929 2943).
[00193] Em uma modalidade, um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo se destina ao uso no tratamento de um câncer selecionado dentre: câncer pancreático, câncer de mama triplo negativo (ou seja, o tumor é negativo para receptor de estrogênio, negativo para receptor de progesterona e negativo para HER2), câncer de próstata refratário a hormônios e câncer de pulmão de células não pequenas.
[00194] Nas modalidades, os compostos da invenção fornecem um efeito anticâncer sobre um câncer (por exemplo, qualquer um dos cânceres revelados no presente documento) selecionado dentre um ou mais de um efeito antiproliferativo, um efeito pró-apoptótico, um efeito antimitótico, um efeito antiangiogênico, inibição de migração celular, inibição ou prevenção de invasão de tumor e/ou prevenção ou inibição de metástase.
[00195] Os compostos da invenção podem ser usados para prevenir ou inibir a progressão de um câncer. Um composto da invenção pode se destinar ao uso para desacelerar, retardar ou parar a progressão de câncer. O progresso de um câncer é tipicamente determinado pela atribuição de um estágio ao câncer. O estadiamento é tipicamente realizado atribuindo- se um número de I a IV ao câncer, sendo I um câncer isolado e IV um estágio avançado da doença, em que o câncer se espalhou para outros órgãos. O estágio geralmente leva em consideração o tamanho do tumor, se o mesmo invadiu órgãos adjacentes, o número de linfonodos para os quais se espalhou e se o câncer apresentou metástase. A prevenção ou inibição da progressão do câncer é particularmente importante para prevenir o espalhamento do câncer, por exemplo, a progressão do Estágio I para o Estágio II, em que o câncer se espalha localmente, ou a progressão do Estágio III para o Estágio IV, em que o câncer desenvolve metástase para outros órgãos.
[00196] Pode ser que um composto da invenção se destine ao uso no tratamento de um câncer em que o câncer é um câncer primário, que pode ser um segundo câncer primário.
[00197] Pode ser que um composto da invenção se destine ao uso na prevenção ou inibição de ocorrência de um segundo câncer primário.
[00198] Pode ser que um composto da invenção se destine ao uso no tratamento de um câncer em que o câncer é refratário (resistente) à quimioterapia e/ou radioterapia. O câncer pode ser resistente no início do tratamento ou pode se tornar resistente durante o tratamento.
[00199] Pode ser que um composto da invenção se destine ao uso no tratamento de um câncer em que o câncer é um câncer recorrente, que pode ser local, regional ou distante. Um câncer recorrente é um câncer que retorna após o tratamento inicial e após um período de tempo durante o qual o câncer não pode ser detectado. O mesmo câncer pode retornar no mesmo tecido ou em uma parte diferente do corpo.
[00200] Pode ser que um composto da invenção se destine ao uso na prevenção ou inibição de recorrência de um câncer.
[00201] Pode ser que um composto da invenção se destine ao uso no tratamento de um câncer em que o câncer é um câncer metastático ou secundário.
[00202] Pode ser que um composto da invenção se destine ao uso na prevenção ou inibição de metástase de câncer. O tratamento de um câncer metastático pode ser igual ou diferente da terapia anteriormente usada para tratar o tumor primário. Por exemplo, em certas modalidades, um tumor primário pode ser ressecado cirurgicamente e um composto da invenção se destina ao uso na prevenção do espalhamento de células cancerosas que podem permanecer após a cirurgia, ou que podem já ter escapado do tumor primário. Em outras modalidades, o tumor primário pode ser tratado usando radioterapia. Em ainda outras modalidades, o tumor primário pode ser tratado por quimioterapia. As terapias de combinação são comumente usadas para tratar o câncer para aprimorar o tratamento e, tipicamente, maximizar a duração e a profundidade da remissão. Qualquer uma das terapias de combinação reveladas no presente documento pode ser usada com um composto da invenção.
[00203] Quando o tumor primário já desenvolveu metástase e um tumor secundário se estabeleceu, um composto da invenção pode ser usado para tratar o tumor secundário. Isso pode envolver o tratamento do tumor secundário e a prevenção da metástase desse tumor secundário. A referência a metástases no presente documento pretende abranger a metástase de qualquer um dos tumores revelados no presente documento. Em geral, o tumor secundário estará em um tecido diferente daquele do tumor primário. Por exemplo, o tumor secundário pode ser um tumor secundário no osso. Em uma modalidade específica, um composto da invenção se destina ao uso no tratamento de um tumor secundário no osso, por exemplo, para uso no tratamento de um tumor ósseo secundário, em que o tumor primário é um tumor de mama ou próstata. Tumores Pancreáticos
[00204] Em uma modalidade, um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo se destina ao uso no tratamento de um tumor pancreático, especialmente, um tumor pancreático maligno. O termo "tumor pancreático" abrange tumores exócrinos e endócrinos que podem ser benignos ou malignos. Os tumores exócrinos são as formas mais prevalentes de câncer de pâncreas e representam cerca de 95% dos casos. Os cânceres exócrinos incluem, por exemplo, adenocarcinomas ductais (PDAC), carcinoma de células acinares, tumores papilares (por exemplo, neoplasia papilar-mucinosa intraductal (IPMN)), tumores mucinosos (por exemplo, cistadenocarcinoma mucinoso), tumores sólidos e tumores serosos. Os tumores endócrinos pancreáticos são raros e se desenvolvem como resultado de anormalidades nas células das ilhotas dentro do pâncreas. Exemplos de Os tumores endócrinos pancreáticos incluem gastrinoma (Síndrome de Zollinger-Ellison), glucagonoma, insulinoma, somatostatinoma, VIPoma (Síndrome de Verner-Morrison), tumor de células de ilhotas não funcionais e neoplasia endócrina múltipla tipo 1 (MEN1 também conhecida como Síndrome de Wermer). Em uma modalidade específica, o composto se destina ao uso no tratamento de câncer pancreático, particularmente um câncer pancreático selecionado dentre: adenocarcinoma ductal pancreático, adenocarcinoma pancreático, carcinoma de células acinares, neoplasia mucinosa papilar intraductal com carcinoma invasivo, neoplasia cística mucinosa com carcinoma invasivo, carcinoma de células das ilhotas e tumores neuroendócrinos. Em uma modalidade específica, o câncer pancreático é adenocarcinoma pancreático.
[00205] Pode ser que o composto da invenção se destine ao uso no tratamento de câncer pancreático em um paciente em que o tumor é ressecável. Nessa modalidade, um composto da invenção é administrado ao paciente como uma terapia adjuvante após ressecção cirúrgica do tumor.
[00206] Em algumas modalidades, os compostos da invenção se destinam ao uso no tratamento de câncer pancreático de estágio inicial. Em algumas modalidades, o câncer pancreático é câncer pancreático de estágio tardio. Em algumas modalidades, o câncer pancreático é câncer pancreático avançado. Em algumas modalidades, o câncer pancreático é câncer pancreático localmente avançado. Em algumas modalidades, o câncer pancreático é câncer pancreático recorrente. Em algumas modalidades, o câncer pancreático é câncer pancreático não metastático. Em algumas modalidades, o câncer pancreático é câncer pancreático metastático. Em algumas modalidades, o câncer pancreático é um câncer pancreático primário. Em algumas modalidades, o tumor pancreático primário desenvolveu metástase. Em algumas modalidades, o câncer pancreático tem recorrência após a remissão. Em algumas modalidades, o câncer pancreático é câncer pancreático progressivo. Em algumas modalidades, o câncer pancreático é câncer pancreático em remissão.
[00207] Em algumas modalidades, o tratamento de câncer pancreático é um tratamento adjuvante. Um tratamento adjuvante pode ser aquele em que o paciente tem histórico de câncer pancreático e geralmente (mas não necessariamente) responsivo a uma terapia, que inclui, porém sem limitação, ressecção cirúrgica, radioterapia e/ou quimioterapia; entretanto, devido ao seu histórico de câncer, o paciente é considerado em risco de desenvolvimento da doença. Tratamento ou administração no contexto adjuvante se refere a um modo subsequente de tratamento.
[00208] Em algumas modalidades, o tratamento de câncer pancreático pode ser um tratamento neoadjuvante. Por "neoadjuvante" entende-se que um composto da invenção se destina ao uso no tratamento do paciente antes de uma terapia primária/definitiva para o câncer pancreático. Em algumas modalidades, os compostos da invenção se destinam ao uso no tratamento de câncer pancreático em um paciente, em que o paciente não foi anteriormente tratado para câncer pancreático.
[00209] Em algumas modalidades, os compostos da invenção se destinam ao uso no tratamento de câncer pancreático em um paciente que foi anteriormente tratado, ou está sendo concomitantemente tratado, para o câncer pancreático. O tratamento anterior ou concomitante pode incluir um agente de quimioterapia, por exemplo, um tratamento selecionado dentre: gencitabina, gencitabina com Nab-pacli a el (Abra ane ); 5- fluorouracila (5-FU), capecitabina, o tratamento de combinação com FOLFIRINOX (leucovorina, 5-FU, irinotecano e oxaliplatina), uma combinação de oxaliplatina e 5-FU (também conhecida como FOLFOX) e uma combinação de gencitabina e capecitabina. Em algumas modalidades, o tratamento anterior compreende gencitabina e/ou erlotinibe. Em algumas modalidades, o tratamento anterior compreende 5-FU.
[00210] Em algumas modalidades, um composto da invenção se destina ao uso no tratamento de segunda ou terceira linha de um paciente com câncer pancreático. Por exemplo, em que o paciente foi anteriormente tratado com uma primeira e/ou segunda terapia que falhou ou substancialmente falhou.
[00211] Pode ser que o composto da invenção se destine ao uso no tratamento de câncer pancreático que é refratário à quimioterapia convencional, por exemplo, no tratamento de câncer pancreático refratário à gencitabina e/ou 5FU.
[00212] Em algumas modalidades, um composto da invenção é usado em combinação com outro agente anticâncer no tratamento de câncer pancreático. Qualquer tratamento de combinação revelado no presente documento pode ser usado.
[00213] Nas modalidades, os compostos da invenção se destinam ao uso no tratamento de câncer pancreático em um paciente, em que o paciente desenvolveu diabetes tipo 2 atípico. Síndrome de Sézary
[00214] A síndrome de Sézary é um linfoma cutâneo de células T raro. O mesmo é um câncer agressivo caracterizado por lesões de pele, incluindo eritrodermia pruriginosa disseminada e a presença de células T cancerosas (células de Sézary) no sangue, pele e/ou linfonodos. Os sujeitos com síndrome de Sézary também têm linfonodos aumentados
(linfadenopatia). O prognóstico para pacientes com diagnóstico de síndrome de Sézary é ruim, com uma taxa de sobrevivência de 5 anos de 30 a 40% (Agar et al. J. Clin. Oncol., 2010; 28:4730e9).
[00215] Tratamentos atuais para síndrome de Sézary são limitados e incluem agentes de quimioterapia convencionais (por exemplo, antimetabólitos como gencitabina, metotrexato ou pentostatina; inibidores de topoisomerase como doxorrubicina e formas lipossomais da mesma como doxil; inibidores de angiogênese como lenalidomida; e agentes alquilantes como ciclofosfamida); retinoides (por exemplo, bexaroteno); inibidores de HDAC (por exemplo, romidepsina ou vorinostat); imunoterapias, incluindo anticorpos anti-CD52 (por exemplo, alentuzumabe); conjugados anticorpo- fármaco (por exemplo, brentuximabe vedotina); terapia com interferon-α ou interlucina-2 (por exemplo, denileucina difitox); fototerapia ou radioterapia. Existe uma necessidade por novos tratamentos para síndrome de Sézary.
[00216] Prasad et. al. (Journal of Investigative Dermatology, 2016, 136, 1490-1499) identificaram certas mutações pontuais somáticas e variações somáticas de número de cópias, incluindo duplicação de RAMP3. Conforme discutido no presente documento, RAMP3 é também um componente do receptor de AM2. Conforme ilustrado nos Exemplos, no presente documento, os inventores identificaram que compostos inibidores de receptor de AM2 são eficazes na redução da viabilidade de células de Sézary. Portanto, os compostos da invenção podem ser eficazes como um tratamento para síndrome de Sézary.
[00217] Consequentemente, é também fornecido um composto da invenção ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento ou prevenção de síndrome de Sézary. Também é fornecido um método de tratamento ou prevenção de síndrome de Sézary em um sujeito, sendo que o método compreende administrar ao sujeito uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
[00218] Em certas modalidades, o composto da invenção é usado como uma monoterapia para tratar síndrome de Sézary. Em certas outras modalidades, o composto da invenção é usado em combinação com outro agente terapêutico, por exemplo, um ou mais agentes anticâncer e/ou radioterapias descritos no presente documento. Em modalidades específicas, o composto da invenção é usado em combinação com um ou mais tratamentos existentes para síndrome de Sézary, incluindo um ou mais dos tratamentos para síndrome de Sézary descritos acima. Doença Proliferativa Benigna
[00219] Um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo da invenção pode se destinar ao uso no tratamento de uma doença proliferativa benigna. A doença benigna pode ser um tumor benigno, por exemplo hemangiomas, adenoma hepatocelular, hemangioma cavernoso, hiperplasia nodular focal, neuromas acústicos, neurofibroma, adenoma de ducto biliar, cistanoma de ducto biliar, fibroma, lipomas, leiomiomas, mesoteliomas, teratomas, mixomas, hiperplasia nodular regenerativa, tracoma, granulomas piogênicos, pintas, miomas uterinos, adenomas da tireoide, adenomas adrenocorticais ou adenomas hipofisários Seleção de Pacientes e Biomarcadores
[00220] A AM sérica é regulada positivamente em vários tipos de câncer, por exemplo, câncer pancreático humano. AM é também regulada positivamente em seções de tecido de pacientes com câncer pancreático, em comparação com tecido normal e pancreatite. Adicionalmente, o receptor de AM2, ou componentes do mesmo (ou seja, CLR e/ou RAMP3) são expressos na maioria de tumores pancreáticos (Keleg et al. 2007). Pacientes com câncer pancreático apresentam aumento do número de exossomas secretados contendo AM. As evidências sugerem que esses exossomas con endo AM ca am a di f n o da c l la paraneopl ica q e e frequentemente associada ao desenvolvimento de câncer pancreático (Javeed et al 2015). Consequentemente, espera-se que um composto da invenção seja benéfico no tratamento de um câncer, por exemplo, câncer pancreático, em que AM é regulada positivamente em uma amostra biológica em comparação com uma amostra de referência. A amostra biológica pode ser, por exemplo, uma amostra de soro ou uma amostra de tecido, por exemplo, uma biópsia de tumor.
[00221] Espera-se que um composto da invenção seja benéfico no tratamento de um câncer, por exemplo, câncer pancreático, em que AM 2 é regulada positivamente em uma amostra biológica em comparação com uma amostra de referência. Espera-se que um composto da invenção seja benéfico no tratamento de um câncer, por exemplo, câncer pancreático, em que os componentes de AM2; ou seja, CLR e/ou RAMP3 são regulados positivamente em uma amostra biológica em comparação com uma amostra de referência, seja independentemente ou em conjunto. A amostra biológica pode ser, por exemplo, uma amostra de soro ou uma amostra de tecido, por exemplo, uma biópsia de tumor. Adicionalmente, no caso de RAMP3, cuja expressão é elevada no tecido saudável que circunda os tumores (Brekhman, V et al., The FASEB Journal.2011; 25(1): 55-65), a amostra de tecido pode ser de tecido saudável imediatamente circundante ao tecido tumoral. Esse tecido pode não exibir outros sinais de condição cancerosa ou pré-cancerosa, além da elevação de expressão de RAMP3 em relação a uma amostra de referência.
[00222] Visto que a expressão elevada de AM, AM2, CLR e/ou RAMP3 em comparação aos controles pode ser indicativa de um câncer, particularmente câncer pancreático em estágio inicial, os pacientes podem ser subdivididos em grupos distintos e clinicamente úteis com base em seus perfis de expressão gênica. Em particular, a expressão elevada de um ou mais desses biomarcadores é preditiva de responsividade terapêutica a compostos da invenção. A capacidade de determinar os pacientes que responderão bem ao tratamento com os compostos da invenção permite que o tratamento adequado seja administrado a cada paciente de maneira eficiente, sem a necessidade de tentativas e erros demorados e os efeitos colaterais associados de tratamento desnecessário, inadequado ou intempestivo.
[00223] Consequentemente, a invenção fornece um método de prever ou determinar a responsividade terapêutica a tratamento com compostos da invenção, compreendendo as etapas de: (a) analisar uma amostra biológica obtida de um sujeito para determinar os níveis de expressão de um ou mais biomarcadores, em que os biomarcadores são selecionados dentre AM e/ou AM2 e/ou CLR e/ou RAMP3; e (b) comparar os níveis de expressão dos biomarcadores determinados em (a) com um ou mais valores de referência, em que um aumento nos níveis de expressão do um ou mais biomarcadores na amostra (ou amostras) do sujeito em comparação com o um ou mais valores de referência é indicativo de responsividade terapêutica a tratamento com compostos da invenção e/ou é indicativo da presença de um câncer, por exemplo, câncer pancreático em estágio inicial.
[00224] Será entendido que qualquer um dos biomarcadores indicativo de um câncer, por exemplo, câncer pancreático em estágio inicial, que é AM e/ou AM2 e/ou CLR e/ou RAMP3 podem ser selecionados para análise, seja independentemente ou em combinação, para determinar a responsividade terapêutica a compostos da invenção.
[00225] Normalmente, o nível de expressão de AM em uma amostra (por exemplo, uma amostra de soro ou uma amostra de tumor) será analisado e comparado com um ou mais valores de referência. De preferência, o nível de expressão de AM e/ou AM2 em uma amostra (por exemplo, uma amostra de soro ou uma amostra de tumor) será analisado e comparado com um ou mais valores de referência. De preferência, o nível de expressão de AM em uma amostra de soro será analisado e comparado com um ou mais valores de referência.
[00226] Igualmente, o nível de expressão de componentes de receptor de AM2, CLR ou RAMP3 em uma amostra (por exemplo, uma amostra de tumor ou células tumorais circulantes) será analisado e comparado com um ou mais valores de referência. Adicionalmente, O DNA do tumor isento de células tumorais circulantes pode ser analisado para determinar a presença de DNA tumoral isento de células tumorais circulantes que codificam AM, AM2, CLR ou RAMP3, o que pode revelar ou fornecer indicação antecipada de expressão potencial de um ou mais biomarcadores.
[00227] Um aumento nos níveis de expressão do um ou mais biomarcadores na amostra (ou amostras) do sujeito em comparação com o um ou mais valores de referência é preditivo de sensibilidade e/ou responsividade terapêutica a compostos da invenção. De preferência, um aumento nos níveis de expressão de AM em uma amostra de soro de um sujeito em comparação com um ou mais valores de referência é preditivo de sensibilidade e/ou responsividade terapêutica a compostos da invenção. De preferência, um aumento nos níveis de expressão de AM2 em uma amostra de soro de um sujeito em comparação com um ou mais valores de referência é preditivo de sensibilidade e/ou responsividade terapêutica a compostos da invenção. Com mais preferência, um aumento nos níveis de expressão de AM e AM2 em uma amostra de soro ou uma amostra de tumor de um sujeito em comparação com um ou mais valores de referência é preditivo de sensibilidade e/ou responsividade terapêutica a compostos da invenção. Biomarcadores
[00228] Ao longo dessa descrição, diz-se que os biomarcadores na amostra biológica (ou amostras biológicas) do sujeito são diferencialmente expressos e indicativos de, por exemplo, câncer pancreático em estágio inicial, em que seus níveis de expressão são significativamente regulados positivamente em comparação com um ou mais valores de referência.
Dependendo do biomarcador individual, o câncer pancreático em estágio inicial pode ser diagnosticado em uma amostra biológica por um aumento no nível de expressão, escalonado em relação à média da amostra e variância da amostra, em relação àquelas de uma ou mais amostras de controle ou um ou mais valores de referência.
Claramente, a variação na sensibilidade de biomarcadores individuais, sujeito e amostras significa que diferentes níveis de confiança são atribuídos a cada biomarcador.
Pode-se dizer que os biomarcadores da invenção são significativamente regulados positivamente (ou elevados) quando, após o escalonamento dos níveis de expressão do biomarcador em relação à média de amostra e variância de amostra, os mesmos exibem uma valor de 2-fold change em comparação com uma ou mais amostras de controle ou uma ou mais valores de referência.
De preferência, os ditos biomarcadores exibirão um valor de 3-fold change ou mais em comparação com uma ou mais amostras de controle ou um ou mais valores de referência.
Com mais preferência, os biomarcadores da invenção exibirão um valor de 4-fold change ou mais em comparação com uma ou mais amostras de controle ou um ou mais valores de referência.
Ou seja, no caso de nível de expressão aumentado (regulação positiva em relação a valores de referência), o nível de biomarcador será mais que o dobro do valor de referência ou aquele observado na uma ou mais amostras de controle.
De preferência, o nível de biomarcador será mais de 3 vezes o nível do um ou mais valores de referência ou aquele na uma ou mais amostras de controle.
Com mais preferência, o nível de biomarcador será mais de 4 vezes o nível do um ou mais valores de referência ou aquele na uma ou mais amostras de controle. Sequências de Referência de Biomarcador • AM
[00229] Como usado no presente documento, "AM" designa "adrenomedulina". Uma sequência de referência de transcrição de mRNA de AM humano de comprimento total está disponível a partir do banco de dados de GenBank sob o número de acesso NM_001124, versão NM_001124.2. AM2
[00230] Como usado no presente documento, "AM2" designa o "receptor de adrenomedulina de subtipo 2". Uma sequência de referência de transcrito de mRNA de AM2 humano de comprimento total está disponível a partir do banco de dados de GenBank sob o número de acesso NM_001253845, versão NM_001253845.1. • CLR
[00231] Como usado no presente documento, "CLR" designa o "receptor semelhante à calcitonina". Uma sequência de referência de variante 1 de transcrito de mRNA de CLR humano de comprimento total está disponível a partir do banco de dados de NCBI-GenBank sob o número de acesso NM_005795, versão NM_005795.5. Uma sequência de referência de variante 2 de transcrito de mRNA de CLR humano de comprimento total está disponível a partir do banco de dados de GenBank sob o número de acesso NM_214095, versão NM_214095.1. RAMP3
[00232] Como usado no presente documento, "RAMP3" designa a "proteína 3 modificadora de atividade de receptor". Uma sequência de referência de transcrito de mRNA de RAMP3 humano de comprimento total está disponível a partir do banco de dados de NCBI-GenBank sob o número de acesso NM_005856, versão NM_005856.2.
[00233] Todos os números de acesso e versão das sequências de referência de biomarcadores revelados no presente documento foram obtidos a partir do banco de dados NCBI-GenBank (Flat File Release 218.0) disponível em https://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/. Valores de Referência
[00234] Ao longo dessa descrição, o termo "valor de referência" pode se referir a um valor de referência predeterminado, por exemplo, especificando um intervalo de confiança ou valor limite para o diagnóstico ou previsão da suscetibilidade de um sujeito ao câncer pancreático em estágio inicial. De preferência, "valor de referência" pode se referir a um valor de referência predeterminado, especificando um intervalo de confiança ou valor limite para a previsão de sensibilidade e/ou responsividade terapêutica a um composto da invenção. Alternativamente, o valor de referência pode ser derivado do nível de expressão de um biomarcador ou biomarcadores corre ponden e em ma amo ra biol gica do con role', por e emplo, m controle positivo (por exemplo, canceroso ou pré-canceroso conhecido) ou negativo (por exemplo, saudável). Além disso, o valor de referência pode ser um padr o in erno' o fai a de padr e in erno , por e emplo, ma concentração conhecida de uma proteína, transcrito, marcador ou composto. Alternativamente, o valor de referência pode ser um controle técnico interno para a calibração de valores de expressão ou para validar a qualidade da amostra ou técnicas de medição. Isso pode envolver a medição de um ou vários transcritos dentro da amostra que são conhecidos por serem expressos constitutivamente ou expressos em um nível conhecido. Consequentemente, seria rotineiro para o versado na técnica aplicar essas técnicas conhecidas individualmente ou em combinação, para quantificar o nível de biomarcador em uma amostra em relação a padrões ou outros transcritos ou proteínas ou para validar a qualidade da amostra biológica, o ensaio ou análise estatística.
Amostras Biológicas
[00235] Tipicamente, a amostra biológica da invenção será selecionada dentre uma amostra de soro, uma amostra de tecido ou uma amostra de tecido tumoral. Normalmente, a amostra biológica da invenção será uma amostra de soro. Os níveis elevados de expressão de AM e/ou AM2 podem ser detectáveis no soro de um sujeito com câncer pancreático em estágio inicial. Os níveis de expressão elevados de expressão de AM e/ou AM2 e/ou CLR e/ou RAMP3 podem ser detectáveis nas células de uma amostra tumoral de um sujeito com um câncer, por exemplo, câncer pancreático em estágio inicial. Essas células podem ser, por exemplo, derivadas de uma biópsia de um tumor ou podem ser células tumorais circulantes. De modo similar, O DNA de tumor isento de células tumorais circulantes pode ser analisado de forma útil quanto à presença de DNA que codifica qualquer um dentre o um ou mais biomarcadores, em particular aquele dentre os componentes de receptor de AM2, CLR e/ou RAMP3, que podem indicar ou prever a expressão potencial do um ou mais biomarcadores. No caso de expressão de RAMP3, níveis elevados de RAMP3, indicativos de um câncer, por exemplo, câncer pancreático em estágio inicial, podem ser detectáveis em uma amostra de tecido coletada da área que circunda o tecido tumoral de um sujeito com câncer pancreático em estágio inicial. Tal tecido pode ser, de outro modo, assintomático.
[00236] Adequadamente, os métodos da invenção podem fazer uso de uma faixa de amostras biológicas coletadas de um sujeito para determinar o nível de expressão de um biomarcador selecionado dentre AM e/ou AM2 e/ou CLR e/ou RAMP3.
[00237] Os níveis elevados de expressão de AM e/ou AM2 em amostras de soro e/ou tecido e/ou tecido tumoral em comparação com um ou mais valores de referência ou amostras de soro e/ou tecido e/ou tecido tumoral de referência são indicativos de câncer pancreático em estágio inicial. Os níveis elevados de expressão de CLR e/ou RAMP3 em amostras de tecido tumoral em comparação com um ou mais valores de referência ou amostras de tecido tumoral de referência são indicativos de câncer pancreático em estágio inicial. Níveis elevados de expressão de AM e/ou AM 2 e/ou CLR e/ou RAMP3 em uma amostra biológica em comparação com um ou mais valores de referência ou amostras biológicas de referência podem ser adequadamente discernidos no nível de transcrito (mRNA) e/ou proteína. Mais convenientemente, níveis elevados de expressão de AM e/ou AM 2 e/ou CLR e/ou RAMP3 em amostras biológicas em comparação com um ou mais valores de referência ou amostras biológicas de controle são detectáveis no nível de transcrito (mRNA).
[00238] Adequadamente, os biomarcadores são selecionados do grupo que consiste em: proteína biomarcadora; e molécula de ácido nucleico que codifica a proteína biomarcadora. É preferencial que o biomarcador seja uma molécula de ácido nucleico, e particularmente preferencial que seja uma molécula de mRNA.
[00239] É preferencial que os níveis dos biomarcadores na amostra biológica sejam investigados usando parceiros de ligação específicos. Adequadamente, os parceiros de ligação podem ser selecionados do grupo que consiste em: ácidos nucleicos complementares; aptâmeros; anticorpos ou fragmentos de anticorpo. Classes adequadas de parceiros de ligação para qualquer biomarcador serão evidentes para os versados na técnica.
[00240] Adequadamente, os níveis dos biomarcadores na amostra biológica podem ser detectados por avaliação direta de ligação entre as moléculas alvo e os parceiros de ligação.
[00241] Convenientemente, os níveis dos biomarcadores na amostra biológica são detectados usando uma porção química repórter fixada a um parceiro de ligação. De preferência, a porção química repórter é selecionada dentre o grupo que consiste em: fluoróforos; substratos cromogênicos; e enzimas cromogênicas. Parceiros de Ligação
[00242] Os níveis de expressão dos biomarcadores em uma amostra biológica podem ser investigados usando parceiros de ligação que se ligam ou se hibridizam especificamente aos biomarcadores ou um fragmento dos mesmos. Em relação à presente invenção, o ermo parceiro de liga o pode incl ir q ai q er ligan e , q e m capacidade de e ligar especificamente ao biomarcador e/ou nucleotídeo ou variantes de peptídeo relevante dos mesmos com alta afinidade. Os ditos ligantes incluem, porém sem limitação, ácidos nucleicos (DNA ou RNA), proteínas, peptídeos, anticorpos, conjugados de anticorpo, sondas de afinidade sintéticas, carboidratos, lipídeos, moléculas artificiais ou moléculas orgânicas pequenas como fármacos. Em certas modalidades, os parceiros de ligação podem ser selecionados do grupo que compreende: ácidos nucleicos complementares; aptâmeros; anticorpos ou fragmentos de anticorpo. No caso de detecção de mRNAs, ácidos nucleicos representam parceiros de ligação altamente adequados.
[00243] No contexto da invenção, um parceiro de ligação que se liga especificamente a um biomarcador deve ser considerado como exigindo que o parceiro de ligação tenha capacidade de se ligar a pelo menos um desses biomarcadores de maneira que possa ser distinguida da ligação não específica a moléculas que não são biomarcadores. Uma distinção adequada, por exemplo, pode ser baseada em diferenças distinguíveis na magnitude de tal ligação.
[00244] Em modalidades preferenciais dos métodos da invenção, o biomarcador é um ácido nucleico, de preferência, uma molécula de mRNA e o parceiro de ligação é selecionado dentre o grupo que compreende; ácidos nucleicos ou aptâmeros complementares.
[00245] Adequadamente, o parceiro de ligação pode ser uma molécula de ácido nucleico (tipicamente DNA, porém pode ser RNA) que tem uma sequência que é complementar à sequência do mRNA ou cDNA relevante contra o qual é alvejado. Tal ácido nucleico é geralmente chamado de ma onda' (o m rep r er o m oligo) e a eq ncia complemen ar qual se liga é geralmente chamada do al o'. A hibridi a o onda-alvo é geralmente detectada e quantificada pela detecção de alvos marcados com fluoróforo, prata ou quimioluminescência para determinar a abundância relativa de sequências de ácido nucleico no alvo.
[00246] As sondas podem ter de 25 a 1000 nucleotídeos de comprimento. Entretanto, comprimentos de 30 a 100 nucleotídeos são preferidos, e sondas de cerca de 50 nucleotídeos de comprimento são comumente usadas com sucesso na análise completa do transcriptoma.
[00247] Embora a determinação de sondas adequadas possa ser difícil, por exemplo, em arranjos muito complexos, existem muitas fontes comerciais de arranjos de transcriptoma completos disponíveis e é rotina desenvolver arranjos personalizados para detectar qualquer determinado conjunto de mRNAs específicos usando informações de sequência publicamente disponíveis. Fontes comerciais de microarranjos para análise de transciptoma incluem Illumina e Affymetrix.
[00248] Será entendido que sequências de sondas de nucleotídeos eficazes podem ser rotineiramente projetadas para qualquer região de sequência dos transcritos de biomarcador de AM (NM_001124.2), AM2 (NM_001253845.1), CLR (variante 1 de CLR: NM_005795.5, variante 2 de CLR: NM_214095.1) ou RAMP3 (NM_005856.2) ou uma variante da mesma especificamente para detectar e medir a expressão da mesma. O versado na técnica entenderá que a eficácia das sondas específicas escolhidas irá variar, entre outras coisas, de acordo com a plataforma usada para medir a abundância de transcrito, a região de sequência à qual a sonda se liga e as condições de hibridização empregadas.
[00249] Alternativamente, o biomarcador pode ser uma proteína, e o parceiro de ligação pode ser adequadamente selecionadas do grupo que compreende; anticorpos, conjugados de anticorpo, fragmentos de anticorpo ou aptâmeros. Tal parceiro de ligação terá capacidade de se ligar especificamente a uma proteína de AM, AM 2, CLR ou RAMP3 para detectar e medir a expressão da mesma.
[00250] Os polinucleotídeos que codificam qualquer um dos parceiros de ligação específicos de biomarcadores da invenção referidos acima podem ser moléculas de ácido nucleico isoladas e/ou purificadas e podem ser moléculas de RNA ou DNA.
[00251] Ao longo dessa descrição, o termo "polinucleotídeo", como usado no presente documento se refere a um polímero de desoxirribonucleotídeo ou ribonucleotídeo sob a forma de fita simples ou dupla, ou senso ou antissenso, e abrange análogos de nucleotídeos de ocorrência natural que hibridizam a ácidos nucleicos de maneira similar a nucleotídeos de ocorrência natural. Tais polinucleotídeos podem ser derivados de Homo sapiens, ou podem ser sintéticos ou podem ser derivados de qualquer outro organismo.
[00252] Comumente, sequências de polipeptídeos e polinucleotídeos usados como parceiros de ligação na presente invenção podem ser isolados ou purificados. Por "purificado" entende-se que os mesmos são substancialmente isentos de outros componentes celulares ou material ou meio de cultura. "Isolado" significa que os mesmos podem também ser isentos de sequências de ocorrência natural que flanqueiam a sequência nativa, por exemplo, no caso de molécula de ácido nucleico, isolado pode significar que é isento de sequências reguladoras 5' e 3'.
[00253] Em modalidades preferenciais dos métodos da invenção, o ácido nucleico é mRNA. Há várias técnicas adequadas conhecidas na técnica para a medição quantitativa de níveis de transcrito de mRNA em uma determinada amostra biológica. Essas técnicas incluem, por m em limi a o; "Nor hern blo ing de RNA, Rea o em Cadeia de Polimerase em Tempo Real (RTPCR), Reação em Cadeia de Polimerase Quantitativa (qPCR), PCR digital (dPCR), PCR multiplex, Reação em Cadeia da Polimerase Quantitativa com Transcrição Reversa (RT-qPCR) ou por análise de alto rendimento como microarranjo de hibridização, Sequenciamento de Próxima Geração (NGS) ou por quantificação direta de mRNA, por exemplo, por sequenciamento "Nanopore". Alternativamente, tecnologias "baseadas em etiqueta" podem ser usadas, incluindo, porém sem limitação, Análise Serial de Expressão Gênica (SAGE). Comumente, os níveis de transcrito de mRNA de biomarcador em uma determinada amostra biológica podem ser determinados por hibridização a sondas de nucleotídeos complementares específicos em um microarranjo de hibridização ou "chip", por tecnologia Bead Array Microarray ou por RNA-Seq em que os dados de sequência são combinados com um genoma de referência ou sequências de referência.
[00254] Em uma modalidade preferencial, em que o ácido nucleico é mRNA, a presente invenção fornece um método de prever ou determinar a responsividade terapêutica a transcrição com os compostos da invenção, em que os níveis de transcrito (ou transcritos) de biomarcador são determinados por PCR. Uma variedade de tecnologias baseadas em amplificação por PCR adequadas é bem conhecida na técnica. As aplicações de PCR são rotineiras na técnica e o versado na técnica terá capacidade de selecionar polimerases, tampões, porções químicas repórter e condições de reação adequadas. De preferência, a abundância de transcrito de mRNA será determinada por qPCR, dPCR ou PCR multiplex. As sequências iniciadoras de nucleotídeos podem ser rotineiramente projetadas para qualquer região de sequência dos transcritos de biomarcador de AM (NM_001124.2), AM2 (NM_001253845.1), CLR (variante 1 de CLR: NM_005795.5, variante 2 de CLR: NM_214095.1) ou RAMP3 (NM_005856.2) ou uma variante da mesma, por métodos que são bem conhecidos na técnica. Consequentemente, o versado na técnica entenderá que iniciadores eficazes podem ser projetados para regiões diferentes do transcrito ou cDNA de biomarcadores selecionados dentre AM, AM2, CLR ou RAMP3, e que a eficácia dos iniciadores específicos escolhidos variará, entre outras coisas, de acordo com a região selecionada, a plataforma usada para medir a abundância de transcrito, a amostra biológica e as condições de hibridização empregadas. Portanto, será entendido que, desde que permitam a amplificação específica do cDNA relevante, em princípio os iniciadores que alvejam qualquer região do transcrito podem ser usados de acordo com a presente invenção. Entretanto, os versados na técnica reconhecerão que com a projeção de sequências iniciadoras adequadas para detectar a expressão de biomarcador, é necessário que as sequências iniciadoras tenham capacidade de se ligar seletiva e especificamente às sequências de cDNA de biomarcadores correspondentes à AM (NM_001124.2), AM 2 (NM_001253845.1), CLR (variante 1 de CLR: NM_005795.5, variante 2 de CLR: NM_214095.1) ou RAMP3 (NM_005856.2) ou fragmentos ou variantes da mesma. Os parceiros de ligação adequados são, de preferência, iniciadores de ácido nucleico adaptados para se ligarem especificamente aos transcritos de cDNA de biomarcadores, como discutido acima. Dependendo da amostra envolvida, de preferência, serão fornecidos iniciadores que alvejam especificamente AM, AM2, CLR ou RAMP3.
[00255] Muitas técnicas diferentes conhecidas na técnica são adequadas para detectar a ligação da sequência alvo e para triagem com alto rendimento e análise de interações de proteínas. De acordo com a presente invenção, técnicas adequadas incluem (independentemente ou em combinação), porém sem limitação; co-imunoprecipitação, complementação de fluorescência bimolecular (BiFC), sistema de vetor único baseado em recombinase de dupla expressão (DERB), eletroforese de afinidade, ensaios de pull-down, transferência de marcador, sistemas de duplos híbridos em levedura, exibição de fagos, reticulação in-vivo, purificação de afinidade em tandem (TAP), ensaios ChIP, reticulação química seguida de espectrometria de massa MALDI de alta massa, experimento de interação strep-proteína (SPINE), imunoprecipitação quantitativa combinada com knockdown (QUICK), ensaio de ligação de proximidade (PLA), interferometria de biocamada, interferometria de dupla polarização (DPI), dispersão estática de luz (SLS), dispersão dinâmica de luz (DLS), ressonância plasmônica de superfície (SPR), espectroscopia de correlação de fluorescência, transferência ressonante de energia por fluorescência (FRET), calorimetria de titulação isotérmica (ITC), termoforese em microescala (MST), ensaio de imunoprecipitação da cromatina, ensaio de mudança de mobilidade eletroforética, ensaio de pull-down, ensaio de captura e detecção em microplaca, ensaio repórter, ensaio de proteção de RNase, colocalização FISH/ISH, microarranjos, arranjos de microesferas ou detecção baseada em nanofios de silício (SiNW). Quando os níveis de proteína do biomarcador forem quantificados, de preferência, as interações entre o parceiro de ligação e a proteína de biomarcador serão analisadas usando anticorpos com um repórter fluorescente fixado.
[00256] Em certas modalidades da invenção, o nível de expressão de um biomarcador específico pode ser detectado por avaliação direta de ligação do biomarcador ao seu parceiro de ligação. Exemplos adequados de tais métodos de acordo com essa modalidade da invenção podem utilizar técnicas como espectroscopia de eletroimpedância (EIS) para avaliar diretamente a ligação de parceiros de ligação (por exemplo, anticorpos) a biomarcadores alvo (por exemplo, proteínas biomarcadoras).
[00257] Em certas modalidades da invenção, o parceiro de ligação pode ser um anticorpo, conjugado de anticorpo ou fragmento de anticorpo, e a detecção das moléculas alvo utiliza um método imunológico. Em certas modalidades dos métodos ou dispositivos, o método imunológico pode ser um ensaio de imunossorvente ligado à enzima (ELISA) ou utilizar um dispositivo de fluxo lateral.
[00258] Um método da invenção pode compreender adicionalmente a quantificação da quantidade da molécula alvo indicativa de expressão dos biomarcadores presentes na amostra biológica de um sujeito. Os métodos adequados da invenção, em que a quantidade da molécula alvo presente foi quantificada, e o volume da amostra de paciente é conhecido, pode compreender adicionalmente a determinação da concentração das moléculas alvo presentes na amostra de paciente que pode ser usada como a base de uma avaliação qualitativa da condição do sujeito, que, por sua vez, pode ser usada para sugerir um curso de tratamento adequado para o sujeito, por exemplo, tratamento com um ou mais dos compostos da invenção. Porções químicas repórter
[00259] Em certas modalidades da presente invenção, os níveis de expressão da proteína em uma amostra biológica podem ser determinados. Em alguns casos, pode ser possível determinar diretamente a expressão, por exemplo, conforme com GFP ou por ação enzimática da proteína de interesse (POI) para gerar um sinal óptico detectável. Entretanto, em alguns casos, a mesma pode ser escolhida para determinar a expressão física, por exemplo, por sondagem de anticorpo, e depende de um teste separado para verificar se a expressão física é acompanhada pela função necessária.
[00260] Em certas modalidades da invenção, os níveis de expressão de um biomarcador específico serão detectáveis em uma amostra biológica por um método de triagem de alto rendimento, por exemplo, dependendo da detecção de um sinal óptico, por exemplo, usando porções químicas repórter. Com esse propósito, pode ser necessário que o parceiro de ligação específico incorpore uma etiqueta, ou seja marcado com uma etiqueta removível, que permite a detecção da expressão. Tal etiqueta pode ser, por exemplo, uma molécula repórter de fluorescência. Tal etiqueta pode fornecer um marcador adequado para visualização de expressão de biomarcador, visto que sua expressão pode ser simples e diretamente analisada por medição de fluorescência in-vitro ou em um arranjo. Alternativamente, o mesmo pode ser uma enzima que pode ser usada para gerar um sinal óptico. As etiquetas usadas para detecção de expressão podem também ser etiquetas de antígeno peptídico. De modo similar, as porções químicas repórter podem ser selecionadas dentre o grupo que consiste em fluoróforos; substratos cromogênicos; e enzimas cromogênicas. Outros tipos de marcadores podem ser usados para marcar um parceiro de ligação de ácido nucleico, incluindo moléculas corantes orgânicas, rótulos radioativos e rótulos de spin que podem ser moléculas pequenas.
[00261] Convenientemente, os níveis de um biomarcador ou vários biomarcadores podem ser quantificados medindo-se a hibridização específica de uma sonda de nucleotídeo complementar ao biomarcador de interesse sob condições de alta estringência ou estringência muito alta.
[00262] Convenientemente, a hibridização sonda-biomarcador pode ser detectada e quantificada pela detecção de sondas marcadas com fluoróforo, prata ou quimioluminescência para determinar a abundância relativa de sequências de ácido nucleico na amostra. Alternativamente, os níveis de abundância de transcrito de mRNA de biomarcador podem ser determinados diretamente por tecnologias de sequenciamento de RNA ou sequenciamento nanopore.
[00263] Os métodos da invenção podem fazer uso de moléculas selecionadas do grupo que consiste em: a proteína biomarcadora; e ácido nucleico que codifica a proteína biomarcadora. Nucleotídeos e Condições de Hibridização
[00264] Ao longo dessa descrição, o termo "polinucleotídeo", como usado no presente documento se refere a um polímero de desoxirribonucleotídeo ou ribonucleotídeo sob a forma de fita simples ou dupla, ou senso ou antissenso, e abrange análogos de nucleotídeos de ocorrência natural que hibridizam a ácidos nucleicos de maneira similar a nucleotídeos de ocorrência natural.
[00265] O versado na técnica consideraria rotina projetar sequências de sonda de nucleotídeos para qualquer região de sequência dos transcritos de biomarcadores ou sequências de cDNA correspondentes à AM (NM_001124.2), AM2 (NM_001253845.1), CLR (variante 1 de CLR: NM_005795.5, variante 2 de CLR: NM_214095.1) ou RAMP3 (NM_005856.2) ou um fragmento ou variante da mesma. Esse é também o caso com iniciadores de nucleotídeo usados quando a detecção de níveis de expressão é determinada por tecnologia baseada em PCR.
[00266] Naturalmente, os versados na técnica reconhecerão que com a projeção de sequências de sondas adequadas para detectar a expressão de biomarcador, é necessário que as sequências de sondas tenham capacidade de se ligar seletiva e especificamente aos transcritos ou sequências de cDNA de biomarcadores correspondentes à AM (NM_001124.2), AM2 (NM_001253845.1), CLR (variante 1 de CLR: NM_005795.5, variante 2 de CLR: NM_214095.1) ou RAMP3 (NM_005856.2) ou fragmentos ou variantes da mesma. Portanto, a sequência de sondas será hibridizável àquela sequência de nucleotídeos, de preferência, sob condições estringentes, com mais preferência, condições de estringência muito alta. O termo "condições estringentes" pode ser entendido para descrever um conjunto de condições para hibridização e lavagem e uma variedade de condições de hibridização estringentes será familiar para o leitor com habilidade. A hibridização de uma molécula de ácido nucleico ocorre quando duas moléculas de ácido nucleico complementares são submetidas a uma quantidade de ligação de hidrogênio entre si, conhecida como pareamento de bases de Watson-Crick. A estringência de hibridização pode variar de acordo com as condições ambientais (ou seja, químicas/físicas/biológicas) que circundam os ácidos nucleicos, temperatura, a natureza do método de hibridização e a composição e comprimento das moléculas de ácido nucleico usadas. Os cálculos referentes às condições de hibridização necessárias para atingir determinados graus de estringência específicos são discutidos em Sambrook et al. (2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY); e Tijssen (1993, Laboratory Techniques in Biochemistry and Molecular Biology—Hybridization with Nucleic Acid Probes Part I, Capítulo 2, Elsevier, NY). A Tm é a temperatura em que 50% de uma determinada fita de uma molécula de ácido nucleico é hibridizada à sua fita complementar.
[00267] Em qualquer uma das referências no presente documento a condições de hibridização, os seguintes são exemplificativos e não limitativos: Estringência Muito Alta (permite a hibridização de sequências que compartilham pelo menos 90% de identidade) Hibridização: 5x SSC a 65 °C por 16 horas Lavar Duas vezes: 2x SSC à temperatura ambiente (RT) por 15 minutos cada Lavar Duas vezes: 0,5x SSC a 65 °C por 20 minutos cada
Alta Estringência (permite a hibridização de sequências que compartilham pelo menos 80% de identidade) Hibridização: 5x-6x SSC a 65 °C-70 °C por 16-20 horas Lavar Duas vezes: 2x SSC à RT por 5-20 minutos cada Lavar Duas vezes: 1x SSC a 55 °C-70 °C por 30 minutos cada Baixa Estringência (permite a hibridização de sequências que compartilham pelo menos 50% de identidade) Hibridização: 6x SSC à RT até 55 °C por 16-20 horas Lavar pelo menos duas vezes: 2x-3x SSC à RT até 55 C por 20- 30 minutos cada.
[00268] Em um aspecto adicional, a presente invenção se refere a um método de tratamento ou prevenção de câncer em um sujeito, sendo que o dito método compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um inibidor de AM2, por exemplo, um composto da invenção, ao dito sujeito, em que o dito sujeito tem um câncer associado à expressão de AM e/ou CLR e/ou RAMP3. Sem se ater à teoria, é possível que a expressão de AM por um tumor possa interagir com receptores de AM2 no tecido saudável resultando, por exemplo, em metástase e/ou angiogênese e progressão do câncer. Consequentemente, a expressão de AM e/ou CLR e/ou RAMP3 pode estar no tumor ou em tecidos saudáveis, por exemplo, em tecidos saudáveis que circundam um tumor.
[00269] Opcionalmente, o método pode compreender determinar os níveis de AM e/ou CLR e/ou RAMP3 em uma amostra biológica do dito sujeito, e administrar um composto da invenção ao dito sujeito quando o nível de AM e/ou CLR e/ou RAMP3 é determinado para ser expresso ou expresso em níveis aumentados na amostra biológica em relação a um ou mais valores de referência.
[00270] Em um aspecto adicional, a presente invenção se refere a um método de identificar um sujeito que tem maior probabilidade de responsividade ou sensibilidade a um inibidor de AM 2, por exemplo, um composto da invenção, que compreende determinar o nível de um ou mais dentre AM, CLR e RAMP3 em uma amostra biológica do indivíduo; em que níveis aumentados de AM, CLR e/ou RAMP3 em comparação com um ou mais valores de referência indica uma maior probabilidade de responsividade ou sensibilidade a um inibidor de AM 2 no sujeito. Terapias de Combinação
[00271] Os compostos da invenção podem ser usados individualmente para fornecer um efeito terapêutico. Os compostos da invenção podem também ser usados em combinação com um ou mais agentes anticâncer adicionais e/ou radioterapia.
[00272] Tal quimioterapia pode incluir uma ou mais das seguintes categorias de agentes anticâncer: (i) fármacos antiproliferativos/antineoplásicos e combinações dos mesmos, como agentes alquilantes (por exemplo, cisplatina, oxaliplatina, carboplatina, ciclofosfamida, mostarda de nitrogênio, mostarda de uracila, bendamustina, melfalano, clorambucila, clormetina, bussulfano, temozolamida, nitrosoureias, ifosamida, melfalano, pipobroman, trietileno-melamina, trietilenotiofosforamina, carmustina, lomustina, estroptozocina e dacarbazina); antimetabólitos (por exemplo, gencitabina e antifolatos como fluoropirimidinas como 5-fluorouracila e tegafur, raltitrexede, metotrexato, pemetrexed, arabinosideo de citosina, floxuridina, citarabina, 6- mercaptopurina, 6-tioguanina, fosfato de fludarabina, pentostatina e gencitabina e hidroxiureia); antibióticos (por exemplo, antraciclinas como adriamicina, bleomicina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina e mitramicina); agentes antimitóticos (por exemplo, vinca alcaloides como vincristina, vinblastina, vindesina e vinorelbina e taxoides como taxol e taxotere e inibidores de poloquinase); inibidores de proteassoma, por exemplo, carfilzomibe e bortezomibe; terapia com interferon; e inibidores de topoisomerase (por exemplo, epipodofilotoxinas como etoposido e teniposido, ansacrina, topotecano, irinotecano, mitoxantrona e camptotecina);bleomcina, dactinomicina, daunorrubicina, doxorrubicina, epirrubicina, idarrubicina, ara- C, pacli a el (Ta ol ), nab pacli a el (paclitaxel ligado à albumina), docetaxel, mitramicina, desoxicoformicina, mitomicina-C, L-asparaginase, interferons (especialmente IFN-alfa), etoposido, teniposido, Agentes desmetilantes de DNA, (por exemplo, azacitidina ou decitabina); e inibidores de histona desacetilase (HDAC) (por exemplo, vorinostat, MS-275, panobinostat, romidepsina, ácido valproico, mocetinostat (MGCD0103) e pracinostat SB939); (ii) agentes citostáticos como antiestrógenos (por exemplo, tamoxifeno, fulvestrant, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno e iodoxifeno), antiandrógenos (por exemplo, bicalutamida, flutamida, nilutamida e acetato de ciproterona), antagonistas de LHRH ou agonistas de LHRH (por exemplo, goserelina, leuprorelina e buserelina), progestogênios (por exemplo, acetato de megestrol), inibidores de aromatase (por exemplo, como anastrozol, letrozol, vorazol e exemestano) e inibidores de 5 -redutase como finasterida; e navelbeno, CPT-ll, anastrazol, letrazol, capecitabina, reloxafina, ciclofosfamida, ifosamida e droloxafina; (iii) agentes anti-invasão, por exemplo, dasatinibe e bosutinibe (SKI-606), e inibidores de metaloproteinase, inibidores da função do receptor do ativador do plasminogênio da uroquinase ou anticorpos para Heparanase; (iv) inibidores de função de fator de crescimento: por exemplo, tais inibidores incluem anticorpos de fator de crescimento e anticorpos de receptor de fator de crescimento, por exemplo, o anticorpo anti-erbB2 ra mabe [Hercep in ], o an icorpo an i-EGFR panitumumabe, o anticorpo anti-erbB1 cetuximabe, inibidores de tirosina quinase, por exemplo, inibidores da família de fatores de crescimento epidérmico (por exemplo, inibidores de tirosina quinase da família EGFR como gefitinibe, erlotinibe, 6- acrilamido-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropoxi)-quinazolin-4- amina (CI 1033), afatinibe, vandetanibe, osimertinibe e rociletinibe) inibidores de tirosina quinase erbB2 como lapatinibe)e anticorpos para moléculas coestimulatórias como CTLA-4, 4-lBB e PD-l, ou anticorpos para citocinas (IL-I0, TGF-beta); inibidores da família do fator de crescimento de hepatócitos; inibidores da família do fator de crescimento de insulina; moduladores de reguladores de proteína de apoptose celular (por exemplo, inibidores de Bcl-2); inibidores da família do fator de crescimento derivado de plaquetas como imatinibe e/ou nilotinibe (AMN107); inibidores de serina/treonina quinases (por exemplo, inibidores de sinalização Ras/Raf como inibidores de farnesil transferase, sorafenibe, tipifarnibe e lonafarnibe), inibidores da sinalização celular através de MEK e/ou AKT quinases, inibidores de c-kit, inibidores de abl quinase, inibidores de PI3 quinase, inibidores de Plt3 quinase, inibidores de CSF-1R quinase, receptor IGF, inibidores de quinase, por exemplo, dalotuzumabe; inibidores de aurora quinase e inibidores da quinase dependente de ciclina como inibidores de CDK2 e/ou CDK4; antagonistas de CCR2, CCR4 ou CCR6; inibidores de RAF quinase como aqueles descritos nos documentos nº WO2006043090, nº WO2009077766, nº WO2011092469 ou nº WO2015075483; e inibidores de Hedgehog, por exemplo, vismodegib. (v) agentes antiangiogênicos, como aqueles que inibem os efeitos do fator de crescimento endotelial vascular, [por exemplo, o anticorpo de fator de crescimento de células endoteliais antivasculares bevacizumabe (A a in )]; alidomida; lenalidomida; e, por e emplo, m inibidor da iro ina quinase do receptor de VEGF, como vandetanibe, vatalanibe, sunitinibe, axitinibe, pazopanibe e cabozantinibe;
(vi) abordagens de terapia gênica, incluindo, por exemplo, abordagens para substituir genes aberrantes, como p53 aberrante ou BRCA1 ou BRCA2 aberrante; (vii) abordagens de imunoterapia, incluindo, por exemplo, terapia com anticorpos como alentuzumabe, rituximabe, ibritumomabe i e ano (Ze alin ) e ofa m mabe; in erferon como in erferon ; interleucinas como IL-2 (aldesleucina); inibidores de interleucina, por exemplo, inibidores de IRAK4; vacinas contra câncer incluindo vacinas profiláticas e de tratamento como vacinas contra HPV, por exemplo, Gardasil, Cervarix, Oncophage e Sipuleucel-T (Provenge); gp100; vacinas baseadas em células dendríticas (como Ad.p53 DC); moduladores do receptor tipo toll, por exemplo, agonistas TLR-7 ou TLR-9; moduladores PD-1, PD-L1, PD-L2 e CTL4-A (por exemplo, Nivolumabe), anticorpos e vacinas; outros inibidores de IDO (como indoximod); anticorpos monoclonais anti-PD-1 (como MK-3475 e nivolumabe); anticorpos monoclonais anti-PDL1 (como MEDI-4736 e RG- 7446); anticorpos monoclonais anti-PDL2; e anticorpos anti-CTLA-4 (como ipilumumabe), terapias com células CAR-T; e (viii) agentes citotóxicos, por exemplo, fludaribina (fludara), cladribina, pentostatina (NipentTM); (ix) terapias alvejadas, por exemplo, inibidores de PI3K, por exemplo, idelalisib e perifosina; miméticos de SMAC (segundo ativador derivado de mitocôndria de caspases), também conhecido como antagonistas de Inibidor de Proteínas da Apoptose (IAP) (antagonistas de IAP). Esses agentes atuam para suprimir IAPs, por exemplo, XIAP, cIAP1 e cIAP2, e assim restabelecer as vias apoptóticas celulares.
Miméticos de SMAC específicos incluem Birinapant (TL32711, TetraLogic Pharmaceuticals), LCL161 (Novartis), AEG40730 (Aegera Therapeutics), SM-164 (University of Michigan), LBW242 (Novartis), ML101 (Sanford- Burnham Medical Research Institute), AT-406 (Ascenta
Therapeutics/University of Michigan), GDC-0917 (Genentech), AEG35156 (Aegera Therapeutic), e HGS1029 (Human Genome Sciences); e agentes que alvejam o sistema ubiquitina proteassoma (UPS), por exemplo, bortezomib, carfilzomib, marizomib (NPI-0052) e MLN9708; um antagonista de CXCR4, por exemplo, plerixafor ou BL-8040; (x) Inibidores de PARP, por exemplo, niraparibe (MK-4827), talazoparibe (BMN-673), veliparibe (ABT-888); olaparibe, CEP 9722, e BGB- 290 (xi) receptores de antígenos quiméricos, vacinas anticâncer e inibidor de arginase; (xii) agentes que degradam hialuronano, por exemplo, a enzima hialuronidase PEGPH20
[00273] O agente anticâncer adicional pode ser um único agente ou um ou mais dos agentes adicionais mencionados no presente documento.
[00274] Os agentes anticâncer específicos que podem ser usados em conjunto com um composto da invenção incluem, por exemplo, erlotinibe, cabozantinibe, bevacizumabe, dalotuzumabe, olaparibe, PEGPH20, vismodegib, paclitaxel (incluindo nab paclitaxel), gencitabina, oxaliplatina, irinotecano, leucovorina e 5-fluorouracila. Em algumas modalidades, o agente anticâncer adicional selecionado dentre capecitabina, gencitabina e 5-fluorouracila (5FU).
[00275] Tal tratamento de combinação pode ser realizado por meio da dosagem simultânea, sequencial ou separada dos componentes individuais do tratamento. Tais produtos de combinação empregam os compostos dessa invenção dentro de uma faixa de dosagem terapeuticamente eficaz descrita anteriormente e o outro agente farmaceuticamente ativo dentro de sua faixa de dosagem aprovada.
[00276] No pre en e doc men o, q ando o ermo "combina o é usado, deve ser entendido que esse se refere à administração simultânea,
separada ou sequencial. Em um aspecto da invenção, "combinação" se refere à administração simultânea. Em outro aspecto da invenção, "combinação" se refere à administração separada. Em um aspecto adicional da invenção, "combinação" se refere à administração sequencial. Quando a administração é sequencial ou separada, o atraso na administração do segundo componente não deve ser tal que perca o efeito benéfico da combinação.
[00277] Em algumas modalidades em que um tratamento de combinação é usado, a quantidade do composto da invenção e a quantidade do outro agente farmaceuticamente ativo (ou agentes farmaceuticamente ativos) são, quando combinadas, terapeuticamente eficazes para tratar um distúrbio alvejado no paciente. Nesse contexto, as quantidades combinadas são "quantidade terapeuticamente eficaz" se forem, quando combinadas, suficientes para reduzir ou aliviar completamente os sintomas ou outros efeitos prejudiciais do distúrbio; curar o distúrbio; reverter, parar completamente ou retardar o progresso do distúrbio; ou reduzir o risco de agravamento do distúrbio. Tipicamente, tais quantidades podem ser determinadas por um versado na técnica, por exemplo, começando com a faixa de dosagem descrita nesse relatório descritivo para o composto da invenção e uma faixa (ou faixas) de dosagem aprovada ou de outra modo publicada do outro composto farmaceuticamente ativo (ou compostos farmaceuticamente ativos) .
[00278] De acordo com um aspecto adicional da invenção, é fornecido um composto da invenção como definido anteriormente e um agente anticâncer adicional conforme definido anteriormente, para uso no tratamento conjunto de câncer.
[00279] De acordo com um aspecto adicional da invenção, é fornecido um produto farmacêutico que compreende um composto da invenção como definido anteriormente e um agente anticâncer adicional conforme definido anteriormente, para o tratamento conjunto de câncer.
[00280] De acordo com um aspecto adicional da invenção, é fornecido um método de tratamento de um sujeito humano ou animal que sofre de um câncer que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo simultaneamente, sequencialmente ou separadamente com um agente anticâncer adicional, conforme definido anteriormente.
[00281] De acordo com um aspecto adicional da invenção, é fornecido um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para uso simultaneamente, sequencialmente ou separadamente com um agente anticâncer adicional, conforme definido anteriormente, no tratamento de um câncer.
[00282] O composto da invenção pode também ser usado em combinação com radioterapia. Tratamentos de radioterapia adequados incluem, por exemplo, terapia com raios X, terapia com feixe de prótons ou terapias com feixe de elétrons. A radioterapia pode também abranger o uso 131 de agentes radionuclídeos, por exemplo, I, 32P, 90 Y, 89 Sr, 153 Sm ou 223 Ra. Tais terapias com radionuclídeos são bem conhecidas e estão disponíveis comercialmente.
[00283] De acordo com um aspecto adicional da invenção, é fornecido um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, conforme anteriormente definido para uso no tratamento de câncer em conjunto com radioterapia.
[00284] De acordo com um aspecto adicional da invenção, é fornecido um método de tratamento de um sujeito humano ou animal que sofre de um câncer que compreende administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo simultaneamente, sequencialmente ou separadamente com radioterapia. Ensaios Biológicos
[00285] Os efeitos biológicos dos compostos podem ser avaliados usando um ou mais dos ensaios descritos no presente documento nos Exemplos. Síntese
[00286] Na descrição dos métodos sintéticos descritos abaixo e nos métodos sintéticos referenciados que são usados para preparar os materiais de partida, deve ser entendido que todas as condições de reação propostas, incluindo a escolha do solvente, atmosfera de reação, temperatura de reação, duração do experimento e procedimentos de trabalho, podem ser selecionados por um versado na técnica.
[00287] Será entendido por um versado na técnica de síntese orgânica que a funcionalidade presente em várias porções da molécula deve ser compatível com os reagentes e condições de reação utilizadas.
[00288] Os materiais de partida necessários podem ser obtidos por procedimentos padrão de química orgânica. A preparação de tais materiais de partida é descrita em conjunto com as seguintes variantes representativas do processo e nos Exemplos anexos. Alternativamente, os materiais de partida necessários podem ser obtidos por procedimentos análogos àqueles ilustrados, os quais estão dentro da habilidade comum de um químico orgânico.
[00289] Será entendido que durante a síntese dos compostos da invenção nos processos definidos abaixo, ou durante a síntese de certos materiais de partida, pode ser desejado proteger certos grupos substituintes para impedir a reação indesejada. O químico experiente entenderá quando tal proteção é necessária e como esses grupos de proteção podem ser colocados no lugar e, posteriormente, removidos.
[00290] Para exemplos de grupos protetores, consultar um dos m io e o gerai no a n o, por e emplo, Pro ec i e Gro p in Organic Synthesis' por Theodora Green (publicador: John Wiley & Sons). Os grupos protetores podem ser removidos por qualquer método conveniente descrito na literatura ou conhecido pelo químico com habilidade como adequado para a remoção do grupo protetor em questão, sendo que tais métodos são escolhidos para efetuar a remoção do grupo protetor com o mínimo de perturbação dos grupos em outro lugar na molécula.
[00291] Dessa forma, se os reagentes incluírem, por exemplo, grupos como amino, carbóxi ou hidróxi, pode ser desejado proteger o grupo em algumas das reações mencionadas no presente documento.
[00292] A título de exemplo, um grupo protetor adequado para um grupo amino ou alquilamino é, por exemplo, um grupo acila, por exemplo, um grupo alcanoíla, como acetila ou trifluoroacetila, um grupo alcoxicarbonila, por exemplo, um grupo metoxicarbonila, etoxicarbonila ou t- butoxicarbonila, um grupo arilmetoxicarbonila, por exemplo, benziloxicarbonila, ou um grupo aroíla, por exemplo, benzoíla. As condições de desproteção para os grupos protetores acima variam necessariamente com a escolha do grupo protetor. Dessa forma, por exemplo, um grupo acila como um grupo alcanoíla ou alcoxicarbonila ou um grupo aroíla pode ser removido, por exemplo, por hidrólise com uma base adequada como um hidróxido de metal alcalino, por exemplo, hidróxido de lítio ou sódio. Alternativamente, um grupo acila como um grupo terc-butoxicarbonila pode ser removido, por exemplo, por tratamento com um ácido adequado como ácido clorídrico, sulfúrico ou fosfórico ou ácido trifluoroacético e um grupo arilmetoxicarbonila como um grupo benziloxicarbonila pode ser removido, por exemplo, por hidrogenação através de um catalisador como paládio em carbono, ou por tratamento com um ácido de Lewis, por exemplo, BF 3.OEt2. Um grupo protetor alternativo adequado para um grupo amino primário é, por exemplo, um grupo ftaloíla que pode ser removido por tratamento com uma alquilamina, por exemplo, dimetilaminopropilamina, ou com hidrazina.
[00293] Um grupo protetor adequado para um grupo hidróxi é, por exemplo, um grupo acila, por exemplo, um grupo alcanoíla como acetila, um grupo aroíla, por exemplo, benzoíla, ou um grupo arilmetila, por exemplo, benzila. As condições de desproteção para os grupos protetores acima variarão necessariamente com a escolha do grupo protetor. Dessa forma, por exemplo, um grupo acila como um grupo alcanoíla ou aroíla pode ser removido, por exemplo, por hidrólise com uma base adequada como um hidróxido de metal alcalino, por exemplo, hidróxido de lítio ou sódio ou amônia. Alternativamente, um grupo arilmetila como um grupo benzila pode ser removido, por exemplo, por hidrogenação através de um catalisador como paládio em carbono.
[00294] Um grupo protetor adequado para um grupo carbóxi é, por exemplo, um grupo de esterificação, por exemplo, um grupo metila ou etila que pode ser removido, por exemplo, por hidrólise com uma base, como hidróxido de sódio, ou, por exemplo, um grupo t-butila que pode ser removido, por exemplo, por tratamento com um ácido, por exemplo, um ácido orgânico, como ácido trifluoroacético, ou, por exemplo, um grupo benzila que pode ser removido, por exemplo, por hidrogenação através de um catalisador, como paládio em carbono.
[00295] As resinas também podem ser usadas como um grupo protetor. Rotas Sintéticas Gerais
[00296] É também fornecido um processo para a preparação de um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, sendo que o processo compreende acoplar um composto da fórmula (IX), ou um sal do mesmo:
(IX) em que HET, R1, R2, R3, R4, R5, L, L1 e q têm qualquer um dos significados definidos no presente documento, exceto que qualquer grupo funcional é protegido se necessário, com um composto da fórmula (X), ou um sal do mesmo: (X) em que X1, X2 e X3 têm qualquer um dos significados definidos no presente documento, exceto que qualquer grupo funcional é protegido, se necessário; e opcionalmente, depois disso, realizar um ou mais dos seguintes procedimentos: converter um composto da fórmula (I) em outro composto da fórmula (I) remover quaisquer grupos protetores formar um sal farmaceuticamente aceitável.
[00297] Em uma modalidade, no composto da fórmula (X), X 2 e X3 são CH; e X1 é CR6, em que R6 tem qualquer um dos significados definidos no presente documento (por exemplo, R 6 é H), exceto que qualquer grupo funcional é protegido, se necessário.
[00298] A reação de acoplamento pode ser realizada usando métodos bem conhecidos, por exemplo, pela reação do ácido da fórmula (IX), ou um derivado ativado do mesmo, com a amina da fórmula (X) na presença de um agente de acoplamento adequado, por exemplo: uma carbodiimida (por exemplo, dicicloexilcarbodiimida (DCC), ou cloridrato de N-etil-N -(3- dimetilaminopropil)carbodiimida (EDCl)) opcionalmente em combinação com um aditivo como hidroxibenzotriazol (HOBt) ou 1-hidroxi7-azabenzotriazol (HOAt); um sal de urônio ou amônio, por exemplo, hexafluorofosfato de 1- [bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridínio3-óxido, (HATU), hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilurônio (HBTU) ou tetrafluoroborato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilamônio (TBTU).
[00299] O ácido da fórmula (IX) pode ser ativado, por exemplo, pela formação de um haleto ácido. Quando o composto da fórmula (IX) está sob a forma de um haleto ácido, pode ser possível reagir o composto diretamente com amina da fórmula (X) sem a necessidade de um agente de acoplamento.
[00300] A reação é adequadamente realizada em um solvente adequado (por exemplo, DMF) e na presença de uma base, de preferência, uma amina terciária como N,N-di-isopropiletilamina.
[00301] Os compostos da fórmula (IX) e (X) podem ser preparados com o uso de métodos análogos àqueles descritos nos Exemplos.
[00302] É também fornecido um processo para a preparação de um composto da fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, sendo que o processo compreende acoplar um composto da fórmula (XI), ou um sal do mesmo:
(XI) em que HET, R2, R3, R4, R5, L, X1, X2, X3 e q têm qualquer um dos significados definidos no presente documento, exceto que qualquer grupo funcional é protegido, se necessário, com um composto da fórmula com um ácido da fórmula: R1L1C(O)OH ou um derivado ativado do mesmo (por exemplo, um haleto ácido), em que R1 e L1 têm qualquer um dos significados definidos no presente documento, exceto que qualquer grupo funcional é protegido, se necessário; e, depois disso, realizar um ou mais dos seguintes procedimentos: converter um composto da fórmula (I) em outro composto da fórmula (I) remover quaisquer grupos protetores formar um sal farmaceuticamente aceitável.
[00303] Adequadamente, L está ausente.
[00304] O acoplamento pode ser realizado com o uso de métodos análogos àqueles descritos acima para o acoplamento dos compostos das fórmulas (IX) e (X).
[00305] A reação é adequadamente realizada na presença de um solvente, por exemplo, um solvente prótico polar como N,N- dimetilformamida. A reação é adequadamente realizada na presença de uma base de amina orgânica terciária como N,N-di-isopropiletilamina. Os compostos da fórmula (XI) podem ser preparados com o uso de condições análogas àquelas descritas nos Exemplos. Os compostos da fórmula
R L C(O)R'' estão comercialmente disponíveis ou podem ser preparados usando métodos bem conhecidos.
[00306] Os compostos da fórmula (I) em que R 3 é H podem ser preparados pela desproteção de um composto da fórmula (XII), ou um sal do mesmo: (XII) em que HET, R1, R2, R3, R4, R5, L, L1, X1, X2, X3 e q têm qualquer um dos significados definidos no presente documento; e Pg é um grupo protetor amino.
[00307] Os grupos protetores amino adequados incluem, por exemplo, aqueles revelados no presente documento como terc- butoxicarbonila (BOC), benziloxicarbonila (CBz) e 9-fluorenilmetoxicarbonila (Fmoc). De preferência, Pg é BOC. O grupo protetor amino pode ser removido por métodos convencionais, por exemplo, tratamento com um ácido ou base adequado.
[00308] Certos intermediários descritos no presente documento são inovadores e formam um aspecto adicional da invenção. Consequentemente, é também fornecido um composto da fórmula (IX), (XI) ou (XII).
[00309] Em algumas modalidades, o composto da fórmula (IX) é um composto da fórmula (IXa):
(IXa) em que R1, R2, R3, R4, R5, L, L1 e q têm qualquer um dos significados definidos no presente documento, exceto que qualquer grupo funcional é protegido, se necessário.
[00310] Em algumas modalidades, o composto da fórmula (IX) é um composto da fórmula (IXb): (IXb) em que R1, R2, R3, R4, R5 e q têm qualquer um dos significados definidos no presente documento, exceto que qualquer grupo funcional é protegido, se necessário.
[00311] Em algumas modalidades, o composto da fórmula (IX) é um composto da fórmula (IXc):
(IXc) em que R1, R2, R3, R4, R5 e q têm qualquer um dos significados definidos no presente documento, exceto que qualquer grupo funcional é protegido, se necessário; e Pg é um grupo protetor amino conforme definido no presente documento (por exemplo, BOC).
[00312] Em algumas modalidades, o composto da fórmula (XI) é um composto da fórmula (XIa):
em que R2, R3, R4, R5, L e q têm qualquer um dos significados definidos no presente documento, exceto que qualquer grupo funcional é protegido, se necessário; e Pg é um grupo protetor amino, conforme definido no presente documento (por exemplo, BOC).
[00313] Em algumas modalidades, o composto da fórmula (XII) é um composto da fórmula (XIIa):
(XIIa) em que R1, R2, R3, R4, R5, L, L1, X1, X2, X3 e q têm qualquer um dos significados definidos no presente documento e Pg é um grupo protetor amino conforme definido no presente documento (por exemplo, BOC).
[00314] Em certas modalidades, nos compostos da fórmula (IX), (IXa), (IXb), (IXc) (XI), (XIa), (XII) e (XIIa), L e L 1 estão ausentes.
[00315] Em certas modalidades, nos compostos da fórmula (IX), (IXa), (XII) e (XIIa), R1 tem qualquer um dos valores definidos em (52) a (86) acima.
[00316] Em certas modalidades, nos compostos da fórmula (XI) e (XII), HET tem qualquer um dos valores definidos em (1) a (38) acima.
[00317] Em certas modalidades, nos compostos da fórmula (XI), (XIa), (XII) e (XIIa) é: .
EXEMPLOS Abreviações: BINAP 2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftila Bn benzila Boc terc-butoxicarbonila CBz benziloxicarbonila CPME éter ciclopentilmetílico DCM diclorometano DEA - dietilamina DIEA N,N-di-isopropiletilamina DIPA -di-isopropilamina DMAc - dimetilacetamida DMF N,N-dimetilformamida DMP periodinano de Dess Martin DMSO sulfóxido de dimetila EDCI Sal cloridrato de 1-etil-3-(3- dimetilaminopropil)carbodiimida ee excesso enantiomérico eq. equivalente (ou equivalentes) Reagente de Ghosez 1-cloro-N,N,2-trimetil-1-propenilamina HATU - 3-óxido hexafluorofosfato de 1- [bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridínio HOAt 1-hidroxi-7-azabenotriazol HPLC cromatografia líquida de alta eficiência IPA isopropanol LC-MS cromatógrafo líquido-espectrômetro de massa LDA - di-isopropilamida de lítio MeCN acetonitrila MS espectrometria de massa NBS N-bromosuccinimida NMM - N-metilmorfolina NMR ressonância magnética nuclear o/n de um dia para o outro Pd/C paládio-em-carbono Piv pivaloíla Prep preparativo pTSA ácido p-tolueno sulfônico Py piridina rt tempo de retenção RT temperatura ambiente SEM trimetilsililetoximetila SPE extração em fase sólida Su succinimida TBAB - brometo de tetrabutilamônio TEA - trietilamina TFA ácido trifluoroacético TFAA - anidrido trifluoroacético
THF tetraidrofurano TLC Cromatografia em Camada Delgada Reagentes e Condições
[00318] A menos que as sínteses sejam fornecidas, os reagentes e os materiais de partida foram obtidos de fontes comerciais. Todas as reações, exceto onde especificado em contrário, foram realizadas sob uma atmosfera inerte de nitrogênio ou argônio. Nomes de Composto
[00319] Os compostos exemplificados foram denominados usando ChemDraw Ultra 12.0 junto à CambridgeSoft. Outros compostos, particularmente reagentes comerciais, usam nomes gerados por ChemDraw Ultra 12.0 ou nomes comumente encontrados em bancos de dados e catálogos online. Métodos Analíticos
[00320] Método 1: (5-95AB_R_220&254): Instrumento: SHIMADZU LC-MS-2020; Coluna: Kinetex® 30 x 2,1 mm, 5 µm S/N: H17- 247175; Tempo de Execução: 1,55 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 5%. Gradiente: B a 5-95% com A 0,8 min, retenção em B a 95% a 1,21 min; B a 5% em 1,21 min e retenção em B a 5% a 1,55 min em 1,5 ml/min, 50 oC.
[00321] Método 2: (5-95AB_R_220&254.M): Instrumento: Agilent 1200\G6110A; Coluna: Chromolith® Flash RP-18e 25 x 2,0 mm; Tempo de Execução: 1,50 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 5%. Gradiente: B a 5-95% com A 0,8 min, retenção em B a 95% a 1,20 min; B a 5% em 1,21 min e retenção em B a 5% a 1,50 min em 1,5 ml/min, 50 oC.
[00322] Método 3: (WUXIAB00.M): Instrumento: Agilent 1200 LC & Agilen 6110 MSD; Col na: Agilen ZORBAX 5 m SB-Aq, 2,1 x 50 mm;
Tempo de Execução: 4,50 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 0% a 0,5 min. Gradiente: B a 0-80% com A 3,4 min. Gradiente: B a 80-100% com A 3,9 min; B a 0% em 3,91 min e retenção em B a 0% a 4,50 min em 0- 3,91 min, fluidez: 1,5 ml/min; 3,91-4,5min, fluidez: 0,6 ml/min; 50 oC.
[00323] Método 4: (0-60AB_4MIN_220&254.lcm): Instrumento: SHIMADZU LC-MS-2020; Coluna: Kinetex® 30 x 2,1 mm, 5 µm S/N: H17- 247175; Tempo de Execução: 1,55 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 0%. Gradiente: B a 0-60% com A 3 min, retenção em B a 60% a 3,5 min; B a 0% em 3,51 min e retenção em B a 0% a 4,00 min em 0,8 ml/min, 50 oC.
[00324] Método 5: (0-60AB_0_R_220&254.lcm): Instrumento: SHIMADZU LC-MS-2020; Coluna: Kinetex® 30 x 2,1 mm, 5 µm S/N: H17- 247175; Tempo de Execução: 1,55 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 0%. Gradiente: B a 0-60% com A 0,6 min, retenção em B a 60% a 1,21 min; B a 0% em 1,21 min e retenção em B a 0% a 1,55 min em 1,5 ml/min, 50 oC.
[00325] Método 6: (5-95AB_4 min_220&254): Instrumento: SHIMADZU LC-MS-2020; Coluna: Kinetex® 30 x 2,1 mm, 5 µm S/N: H17- 247175; Tempo de Execução: 1,55 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 5%. Gradiente: B a 5-95% com A 3,0 min, retenção em B a 95% a 3,5 min; B a 5% em 3,51 min e retenção em B a 5% a 4,00 min em 0,8 ml/min, 50 oC.
[00326] Método 7: (5-95AB_R_220&254_50): Instrumento: SHIMADZU LC-MS-2020; Coluna: Chromolith® Flash RP-18E 25-2 MM; Tempo de Execução: 1,55 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v)
B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 5%. Gradiente: B a 5-95% com A 0,8 min, retenção em B a 95% a 1,21 min; B a 5% em 1,21 min e retenção em B a 5% a 1,55 min em 1,5 ml/min, 50 oC.
[00327] Método 8: (WUXIAB10.M): Instrumento: Agilent 1200 LC & Agilent 6110 MSD; Coluna: Agilent ZORBAX 5 m SB-Aq, 2,1 x 50 mm; Tempo de Execução: 4,50 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 10% a 0,5 min. Gradiente: B a 10-100% com A 3,4 min, retenção em B a 100% a 3,9 min; B a 10% em 3,91 min e retenção em B a 10% a 4,50 min em 0-3,91 min, fluidez: 0,8 ml/min; 3,91-4,5 min, fluidez: 1,0 ml/min; 50 oC.
[00328] Método 9: (WUXIAB01.M): Instrumento: Agilent 1200 LC & Agilen 6110 MSD; Col na: Agilen ZORBAX 5 m SB-Aq, 2,1 x 50 mm; Tempo de Execução: 4,50 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 1% a 0,5 min. Gradiente: B a 1-90% com A 3,4 min. Gradiente: B a 90-100% com A 3,9 min; B a 1% em 3,91 min e retenção em B a 1% a 4,50 min em 0- 3,91 min, fluidez: 0,8 ml/min; 3,91-4,5 min, fluidez: 1,0 ml/min; 50 oC.
[00329] Método 10: (5-95CD_R_220&254_POS): Instrumento: SHIMADZU LC-MS-2020; Coluna: Xbridge C18 30 x 3,0 mm, 5 µm; Tempo de Execução: 1,50 min; Solventes A) hidróxido de amônio a 0,025% em água（v/v）B) acetonitrila. O gradiente é executado com B a 5%. Gradiente: B a 5-95% com A 1,2 min, retenção em B a 95% a 1,60 min; B a 5% em 1,61 min e retenção em B a 5% a 2,0 min em 2,0 ml/min, 40 oC.
[00330] Método 11: (5-95AB_R_220&254_50): Instrumento: Agilent 1200\G6110A; Coluna: Kinetexat 5 µm EVO C18 30 x 2,1 mm; Tempo de Execução: 1,50 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 5%.
Gradiente: B a 5-95% com A 0,8 min, retenção em B a 95% a 1,20 min; B a 5% em 1,21 min e retenção em B a 5% a 1,50 min em 1,5 ml/min, 50 oC.
[00331] Método 12: (0-60AB_R_220&254): Instrumento: SHIMADZU LC-MS-2020; Coluna: Chromolith® Flash RP-18E 25-2 MM; Tempo de Execução: 1,5 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 0%. Gradiente: B a 0-60% com A 0,8 min, retenção em B a 60% a 1,21 min; B a 5% em 1,21 min e retenção em B a 5% a 1,55 min em 1,5 ml/min, 50 oC.
[00332] Método 13: (0-60AB_0_R_220&254): Instrumento: Agilent 1100\G1956A; Coluna: Kinetex® 5 µm EVO C18 30 x 2,1 mm; Tempo de Execução: 1,5 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 0%. Gradiente: B a 0-60% com A 0,8 min, retenção em B a 60% a 1,21 min; B a 5% em 1,21 min e retenção em B a 5% a 1,5 min em 1,5 ml/min, 50 oC.
[00333] Método 14: (5-95AB_4MIN_220&254): Instrumento: Agilent 1200\G6110A; Coluna: Kinetex@ 5 µm EVO C18 30 x 2,1 mm; Tempo de Execução: 4,0 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,01875% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 5%. Gradiente: B a 5-95% com A 3,0 min, retenção em B a 95% a 3,5 min; B a 5% em 3,51 min e retenção em B a 5% a 4,00 min em 0,8 ml/min, 50 oC.
[00334] Método 15: (0-60AB_4MIN_220&254): Instrumento: Agilent 1200\G6410B; Coluna: Zorbax Extend C-18, 2,1 x 50 mm, 5 µm; Tempo de Execução: 4,0 min; Solventes A) TFA a 0,0375% em água (v/v) B) TFA a 0,0188% em acetonitrila (v/v). O gradiente é executado com B a 10%. Gradiente: B a 10-80% com A 4,2 min. Gradiente: B a 80-90% com A 5,3 min; B a 10% em 5,31 min e retenção em B a 10% a 7 min em 1 ml/min, 40 oC.
[00335] Método 16: (5-95CD_4MIN_220&254_POS): Instrumento: SHIMADZU LC-MS-2020; Coluna: Kinetex® EVO C18 2,1 x 30 mm, 5 µm; Tempo de Execução: 4,0 min; Solventes A) hidróxido de amônio a 0,025% em água（v/v）B) acetonitrila. O gradiente é executado com B a 5%. Gradiente: B a 5-95% com A 3,0 min, retenção em B a 95% a 3,5 min; B a 5% em 3,51 min e retenção em B a 5% a 4,0 min em 0,8 ml/min, 40 oC.
[00336] Método 17: (10-80CD_2MIN_220&254): Instrumento: Agilent 1200\G6110A; Coluna: XBridge C18 2,1 x 50 mm, 5 µm; Tempo de Execução: 2,0 min; Solventes A) hidróxido de amônio a 0,025% em água（v/v）B) acetonitrila. O gradiente é executado com B a 10%. Gradiente: B a 10-80% com A 1,2 min, retenção em B a 95% a 1,6 min; B a 10% em 1,61 min e retenção em B a 10% a 2,0 min em 1,2 ml/min, 40 oC.
[00337] Uma análise de cromatografia de fluido supercrítico (SFC) foi realizada em um instrumento Shimadzu LC-30AD. Coluna: kromasil 3-Cellucoat 50 × 4,6 mm, tamanho de partícula de 3 µm. Método: solvente de fase móvel A: dióxido de carbono, solvente de fase B: metanol (DEA a 0,05%), B em A de 0% a 95%, fluidez: 3,0 ml/min; comprimento de onda: 220nm • NMR
[00338] Todos os espectros de RMN foram obtidos usando espectrômetros Bruker Avance 400 MHz que executam o Processador ACD/Spectrus. Síntese de Intermediário A
Esquema 1 1-((2-(Trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridina 1.2
[00339] Uma solução de 7-azaindol 1.1 (95 g, 804 mmol) em dimetilformamida (500 ml) foi resfriada até 0 °C e, então, hidreto de sódio (38,6 g, 965 mmol) foi adicionado em várias porções pequenas, mantendo a temperatura interna abaixo de 10 °C. A suspensão foi agitada a 0-5 °C por 1 h. Cloreto de 2-(trimetilsilil)etoximetila (171 ml, 965 mmol) foi, então, adicionado por gotejamento a 5-10 °C. A suspensão amarela foi agitada à temperatura ambiente por 18 h. A mistura foi bruscamente arrefecida por adição lenta de água até que a efervescência cessasse, então, diluída até um total de 1,5 l com mais água. Essa mistura foi extraída com acetato de etila (2 x 1,5 l). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (2 x 1 l) e salmoura (2 x 1 l), então, secos com sulfato de magnésio e evaporados para fornecer o composto 1.2 como um óleo âmbar (199 g, 99% de rendimento, 96% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 300 MHz): -0,08 (s, 1H), 0,89 (m, 2H), 3,52 (m, 2H), 5,68 (s, 2H), 6,50 (dd, 1H), 7,08 (dd, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,90 (dd, 1H), 8,33 (dd, 1H). LC-MS (249 [M+H]+). 3,3-Dibromo-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirrolo[2,3- b]piridin-2(3H)-ona 1.3
[00340] Uma suspensão mecanicamente agitada de tribrometo de piridínio (646 g, 2,02 mol) em 1,4-dioxano (900 ml) foi resfriada até 10-15 °C usado um banho de gelo/água, e uma solução de 1.2 (100 g, 403,2 mmol) em 1,4-dioxano (500 ml) foi adicionada por gotejamento (NOTA: nenhuma exotermia significativa é observada, porém a reação é mantida fria para minimizar a formação de subprodutos poliméricos). Após agitação por 2 h a 10-15 °C, a mistura foi particionada entre água (1,5 l) e acetato de etila (1,5 l). A camada de acetato de etila foi coletada e lavada com água (2 x 1 l), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (1 l), solução de tiossulfato de sódio (solução 1M, 1 l) e salmoura (2 x 1 l). A camada de acetato de etila foi seca com sulfato de magnésio e evaporada para fornecer o composto 1.3 (144 g, 85% de rendimento, 89% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 300 MHz): - 0,03 (s, 9H), 0,97 (dd, 2H), 3,70 (dd, 2H), 5,32 (s, 2H), 7,15 (dd, 1H), 7,87 (dd, 1H), 8,30 (dd, 1H). LC-MS (421, 423, 425 [M+H]+). 1-((2-(Trimetilsilil)etoxi)metil)-1H-pirrolo[2,3-b]piridin-2(3H)-ona
1.4
[00341] A uma solução mecanicamente agitada de 1.3 (144 g, 341 mmol) em tetraidrofurano (2 l) foi adicionada solução aquosa saturada de cloreto de amônio (0,5 l). A suspensão foi resfriada em um banho de gelo/sal/água até 5-10 °C, e pó de zinco (223 g, 3,41 mol) foi, então, adicionado em porções. Após a adição de metade do zinco, a temperatura interna atingir seu pico a 24 °C, e nenhuma exotermia significativa adicional foi observada após a adição do zinco restante. Após agitação por 2h à temperatura ambiente, a mistura foi filtrada através de um filtro de Celite® para remover o excesso de zinco, lavagem com acetato de etila (1 l). O filtrado foi diluído em água (1,2 l), efetuando a precipitação de sais de brometo de zinco. Essa suspensão foi filtrada através de um filtro adicional de Celite®, a camada orgânica foi separada do filtrado e lavada com água (0,8 l) e salmoura (2 x 0,8 l), seca com sulfato de magnésio e evaporada para render um óleo vermelho escuro. O material cru foi purificado por cromatografia em dry-flash (acetato de etila a 0-30% em heptano) para fornecer o composto 1.4 (53,7 g, 55% de rendimento, 88% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 300 MHz): -0,03 (s, 9H), 0,98 (dd, 2H), 3,59 (s, 2H), 3,69 (dd, 2H), 5,25 (s, 2H), 6,97 (dd, 1H), 7,50 (dd, 1H), 8,22 (d, 1H). LC-MS (265 [M+H]+). (4-Nitro-1,2-fenileno)dimetanol 1.8
[00342] Uma solução mecanicamente agitada de complexo borano-tetraidrofurano (1M em THF, 1,23 l, 1,23 mol) foi resfriada até 0 °C. Uma solução de ácido 4-nitroftálico (100 g, 472 mmol) em tetraidrofurano (1 l) foi adicionada por gotejamento durante um período de ca. 45 min, mantendo a temperatura interna abaixo de 10 °C. O banho de resfriamento foi, então, removido, e a mistura agitada de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura agitada foi, então, novamente resfriada até 0 °C, e metanol lentamente adicionado para destruir o excesso de borano (até que efervescência não fosse mais observada). A mistura foi concentrada até 25- 30% de volume e, então, diluída para 1 l pela adição de água. A mistura foi ajustada para pH 10 pela adição de hidróxido de sódio aquoso 2M e, então, extraída com acetato de etila (5 x 1 l). Os extratos orgânicos combinados foram secos com sulfato de magnésio e evaporados para fornecer o composto 1.8 (85,5 g, 98% de rendimento, 98% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 300 MHz): 4,60 (m, 4H), 5,44 (q, 2H), 7,67 (d, 1H), 8,09 (dd, 1H), 8,23 (dd, 1H). LC-MS (182 [M-H]-).
1,2-Bis(bromometil)-4-nitrobenzeno 1.9
[00343] Uma suspensão do diol 1.8 (95,5 g, 522 mmol) em dioxano (2 l) foi resfriada até 0 °C, e tribrometo fosforoso (54 ml, 574 mmol) adicionado por gotejamento. O resfriamento foi, então, removido, e a mistura deixada em agitação de um dia para o outro à temperatura ambiente. A mistura foi, então, derramada cuidadosamente em uma solução agitada de bicarbonato de sódio saturado (1,5 l) e extraída com acetato de etila (3 x 1 l). Os extratos orgânicos foram secos com sulfato de magnésio e evaporados para fornecer o composto 1.9 (154 g, 96% de rendimento, 98% de pureza). 1 H RMN (CDCl3, 300 MHz): 4,66 (s, 2H), 4,67 (s, 2H), 7,56 (d, 1H), 8,16 (dd, 1H), 8,25 (d, 1H). 5-Nitro-1'-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1,3-di-hidroespiro[indeno- 2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-2'(1'H)-ona 1.5
[00344] A uma solução mecanicamente agitada de composto
1.4 (55 g, 208 mmol) em dimetilformamida (1,65 l) foi adicionado 1.9 (70,8 g, 229 mmol). Carbonato de césio (238 g, 729 mmol) foi, então, adicionado em uma porção. Essa suspensão foi agitada por 16 h à temperatura ambiente, então, filtrada através de um filtro de Celite®, lavagem com torta do filtro com acetato de etila (2 l). O filtrado foi lavado com água (3 x 1 l) e salmoura (1 l), então, seco com sulfato de magnésio e evaporado em um óleo vermelho escuro (96 g). Esse foi purificado por cromatografia em dry flash (eluindo com 9:1 heptano/acetato de etila, seguido de 17:3 heptano/acetato de etila, 8:2 heptano/acetato de etila, 3:1 heptano/acetato de etila, 7:3 heptano/acetato de etila e 13:7 heptano/acetato de etila) para render um pó amarelo/laranja (60,1 g), que foi triturado com éter dietílico para produzir o composto 1.5 (45 g, 53% de rendimento, 97% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 300 MHz): -0,01 (s, 9H), 0,99 (dd, 2H), 3,18 (dd, 2H), 3,71 (m, 4H), 5,30 (s, 2H), 6,88 (dd, 2H), 7,08 (dd, 1H), 7,43 (d, 1H), 8,09 (m, 2H), 8,23 (dd, 1H). LC-MS (411 [M+H]+).
5-Amino-1'-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-1,3-di-hidroespiro[indeno- 2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-2'(1'H)-ona 1.6
[00345] A uma solução mecanicamente agitada de 1.5 (70 g, 170,3 mmol) em tetraidrofurano (1,1 l) foi adicionada solução de cloreto de amônio saturado (300 ml), seguido de pó de zinco (111 g, 1,70 mol), adicionado em três porções. A temperatura interna aumentou inicialmente de 22 °C para 33 °C, então, resfriando lentamente por 1 h até a temperatura ambiente. A análise LC-MS após 2,5 h indicou uma mistura de produto e hidroxilamina/intermediários nitrosos. Um adicional de 35 g de pó de zinco e 100 ml de cloreto de amônio saturado foram adicionados. Após mais 3,5 h, a redução foi concluída. A mistura foi filtrada através de um filtro de Celite®, lavagem da torta do filtro com acetato de etila (1 l). O filtrado foi lavado com água (3 x 1 l), seco com sulfato de magnésio e evaporado para render um sólido laranja, que foi triturado com éter dietílico para render fornecer o composto 1.6 como um pó amarelo pálido (48,8 g). A repurificação dos licores de trituração por cromatografia flash (eluindo 1:1 heptano/acetato de etila), e uma trituração adicional com éter dietílico rendeu mais 3 g de 1.6, rendendo um total de 51,8 g de composto 1.6 (80% de rendimento, 95% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 300 MHz): -0,02 (s, 9H), 0,98 (m, 2H), 2,91 (d, 2H), 3,56 (dd, 2H), 3,69 (m, 2H), 5,29 (s, 2H), 6,59 (m, 2H), 6,82 (dd, 1H), 7,02 (d, 1H), 7,09 (dd, 1H), 8,18 (dd, 1H). LC-MS (382 [M+H]+). Intermediário A 5-Amino-1,3-di-hidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-2 (1'H)-ona
[00346] Uma solução de 1.6 (51,8 g, 136 mmol) em cloreto de hidrogênio recém-preparado em metanol [preparado a uma concentração de aproximadamente 15% (p/v)] foi aquecida até refluxo por 6 h. Uma vez que a reação foi concluída, o aquecimento foi interrompido, e a solução deixada resfriar até a temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura foi concentrada in vacuo em um líquido laranja espesso, então, diluída com 300 ml de água, e o pH ajustado para 9 com solução saturada de carbonato de sódio. A mistura foi extraída com diclorometano (3 x 500 ml), e 9:1 diclorometano/metanol (3 x 500 ml). Os orgânicos combinados foram secos com sulfato de magnésio e evaporados em um sólido laranja, que foi triturado com 2:1 diclorometano/acetato de etila (ca. 60 ml) para fornecer o Intermediário A como um pó laranja pálido (21,5 g, 63% de rendimento, 97% de pureza). 1H RMN (DMSO-d6, 300 MHz): 2,84 (dd, 2H), 3,18 (dd, 2H), 4,94 (s, NH2), 6,41 (m, 2H), 6,81 (dd, 1H), 6,86 (d, 1H), 7,08 (dd, 1H), 8,01 (dd, 1H), 11,03 (s, NH). LC-MS Método 10: rt 0,751 (252 [M+H]+). Síntese de Intermediário B Esquema 2
[00347] Uma solução de brometo de 3,5- bis(trifluorometil)benzila (5,00 g, 17,0 mmol) e cinconidina (5,50 g, 17,8 mmol) em isopropanol foi aquecida a refluxo por 3,5 h. Após o resfriamento até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi lentamente derramada em éter dietílico (250 ml) com agitação. Os sólidos precipitados foram filtrados e lavados com éter dietílico (150 ml) e pentano (100 ml) para produzir o composto 2.1 (8,60 g, 84%). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,48 (m, 1H), 1,91 (m, 1H), 2,12 (m, 1H), 2,31 (m, 2H), 2,76 (s, l, 1H), 3,41 (t, 1H), 3,50 (dd, 1H), 3,71 (m, 1H), 4,02 (t, 1H), 4,58 (m, 1H), 5,03 (d, 1H), 5,19 (m, 2H), 5,37 (d, 1H), 5,71 (ddd, 1H), 6,67 (s, 1H), 7,98 (dddd, 2H), 8,15 (dd, 1H), 8,27 (s, 1H), 8,34 (d, 1H), 8,98 (d, 1H); [ ]D23 = -139,5° (c 8,9, MeOH).
Esquema 3 N-terc-Butil-3-metil-piridin-2-amina 3.2
[00348] Uma mistura do composto 3.1 (20,00 g, 116 mmol) e terc-butóxido de sódio (22,35 g, 232 mmol) em tolueno (200 ml) foi desgaseificada sob vácuo e purgada com nitrogênio três vezes. 2- Metilpropan-2-amina (12,75 g, 174 mmol), Pd2(dba)3 (266 mg, 0,29 mmol) e BINAP (434 mg, 0,70 mmol) foram adicionados a 25 °C, e a mistura foi desgaseificada sob vácuo e purgada com nitrogênio três vezes. A mistura foi agitada a 25 °C por 10 min e, então, aquecida até 100 °C com agitação por 16 h sob nitrogênio. A mistura foi derramada em água (400 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 400 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (2 x 400 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi dissolvido com acetato de etila (200 ml) e derramado em água (200 ml). A mistura foi ajustada para pH 3 pela adição de ácido clorídrico 1M e extraída com acetato de etila (2 x 200 ml). As fases orgânicas foram descartadas, e a fase aquosa ajustada para pH 9 com bicarbonato de sódio aquoso saturado. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila (3 × 200 ml). As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (200 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o produto cru foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, diluído com éter de petróleo: acetato de etila =1:0 a 50:1 para fornecer o composto 3.2 (28,30 g, 73% de rendimento, 98,9% de pureza) como um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,50 (s, 9H), 2,04 (s, 3H), 4,00 (s l, 1H), 6,44 6,48 (m, 1H), 7,17 (dd, 1H), 8,00 (d, 1H). LC-MS Método 1: rt 0,214 min (165,2 [M+H]+). 1-terc-Butil-2-hidroxi-pirrolo[2,3-b]piridina-3-carboxilato de metila 3.3
[00349] A uma solução de composto 3.2 (27,5 g, 167 mmol) em tetraidrofurano (150 ml) foi adicionado n-BuLi 2,5 M (73,67 ml, 184 mmol) por gotejamento sob nitrogênio a -40 °C. A mistura foi agitada a -10 °C por 0,5 h. Então, cloroformiato de metila (17,40 g, 184 mmol) foi adicionado lentamente à mistura a -40 °C. A mistura foi agitada a 10 °C por 1,5 h. A temperatura de reação da reação foi mantida a -40 °C e n-BuLi 2,5 M (46,88 ml, 117 mmol) foi adicionado por gotejamento. A mistura foi agitada a -40 °C por 0,5 h. Di- isopropilamina (23,72 g, 234 mmol) foi adicionada à mistura sob nitrogênio a -40 °C, e seguido de n-BuLi 2,5 M (107,16 ml, 267 mmol). A mistura foi agitada a -40 °C por 0,5 h, e, então, a 20 °C por mais 10 h. Após o término da reação, a mistura foi resfriada até 0 °C e cloroformiato de metila (20,57 g, 218 mmol) adicionado. A mistura foi agitada a 0 °C por 1 h. A mistura foi ajustada até pH 3~4 pela adição de ácido clorídrico 1 M. A mistura foi extraída com acetato de etila (2 x 200 ml). Os extratos foram combinados, lavados com salmoura (100 ml) e secos com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, diluído com éter de petróleo:acetato de etila = 100:1 a 50:1 para produzir o composto 3.3 como um sólido vermelho (36 g, 78% de rendimento, 97% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,92 (s, 9H), 3,96 (s, 3H), 7,08 (dd, 1H), 7,89 (d, 1H), 8,14 (dd, 1H), 11,80 (s l, 1H). LC-MS Método 1: rt 0,887 min, (249,1 [M+H]+).
Esquema 4 4-Nitrobenzeno-1,2-dicarboxilato de dimetila 4.1
[00350] A uma solução de ácido 4-nitroftálico (50,0 g, 237 mmol) em metanol (500 ml) foi adicionado ácido metanossulfônico (34,14 g, 355 mmol). A mistura foi agitada a 80 °C por 16 h. A mistura foi concentrada sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila (500 ml). A solução foi lavada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (2 x 500 ml), salmoura (500 ml) e seca com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 4.1 (102,0 g, cru) foi obtido como um sólido amarelo. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 3,97 (d, 6H), 7,86 (d, 2H), 8,41 (dd, 1H), 6,64 (d, 1H). 4-Aminobenzeno-1,2-dicarboxilato de dimetila 4.2
[00351] A uma solução de composto 4.1 (37 g, 155 mmol) em metanol (500 ml) foi adicionado Pd/C a 10% (2 g) sob nitrogênio. Então, a mistura foi desgaseificada sob vácuo e purgada três vezes com hidrogênio. A mistura resultante foi agitada a 20 °C por 10 h. A mistura de reação foi filtrada, e o líquido filtrado foi concentrado a vácuo para fornecer o composto
4.2 (30 g, cru) como um sólido amarelo. 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 3,78 (s, 3H), 3,84 (s, 3H), 6,66 6,70 (m, 2H), 7,62 (d, 1H). LC-MS Método 1: rt 0,723 min, (178,1, [M-OMe+H]+; 232,1 (M+Na)+).
4-(Dibenzilamino)benzeno-1,2-dicarboxilato de dimetila 4.3
[00352] A uma solução de composto 4.2 (90,0 g, 430 mmol) em dimetilacetamida (500 ml) foi adicionado iodeto (12,9 g, 86,0 mmol), carbonato de potássio (208,10 g, 1,51 mol) e cloreto de benzila (163,4 g, 1,29 mol). A mistura foi agitada a 90 °C por 15 h. A mistura de reação foi filtrada, e o filtrado derramado em água (1 l). A mistura extraída com acetato de etila (3 x 1 l). As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (3 x 1 l) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, triturado com éter de petróleo:acetato de etila = 50:1~25:1 para fornecer o composto
4.3 (180,0 g, 97% de rendimento) como um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3, 400 MH ) 3,95 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 4,62 (s, 4H), 6,74 (dd, 1H), 6,83 (d, 1H), 7,20 (d, 4H), 7,28 7,35 (m, 4H), 7,36 7,38 (m, 2H), 7,74 (d, 1H). LC- MS Método 1: rt 1,038 min, (390,3 [M+H]+). [4-(Dibenzilamino)-2-(hidroximetil)fenil]metanol 4.4
[00353] A uma solução de composto 4.3 (44,0 g, 113 mmol) em tetraidrofurano (500 ml) foi adicionado hidreto de lítio de alumínio (7,74 g, 204 mmol) em porções por 1 h a -20 °C e a mistura agitada a 10 °C por 16 h. A reação foi bruscamente arrefecida por resfriamento da mistura até 0 °C e adição de água (10 ml), hidróxido de sódio aquoso a 10% (10 ml), água (10 ml) e sulfato de sódio (50 g). A mistura foi filtrada, e o filtrado coletado. A torta do filtro foi lavada com tetraidrofurano (5 x 100 ml). As fases orgânicas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida para fornecer o composto
4.4 (35,2 g, 93% de rendimento) como um sólido amarelo-claro. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 2,97 (s l, 2H), 4,57 (s, 2H), 4,59 (s, 2H), 4,69 (s, 4 H), 6,65 (dd, 1H), 6,77 (d, 1H), 7,12(d, 1H), 7,24 7,27 (d, 2H), 7,28 7,29 (m, 2H), 7,33 7,39 (m, 6H). LC-MS Método 1: rt 0,855 min, (334,1 [M+H]+). [4-(Dibenzilamino)-2-(hidroximetil)fenil]metanol 4.5
[00354] Uma solução de cloreto de tionila (83,1 g, 698 mmol) em acetonitrila (228 ml) foi resfriada até 0 °C, e o composto 4.4 (76,0 g, 228 mmol) foi adicionado em porções, mantendo ao mesmo tempo a temperatura interna abaixo de 18 °C. A mistura de reação foi agitada a 25 °C por 10 min. A mistura foi diluída com MTBE (1 l), e permaneceu em repouso por 2 h a 0 °C. Os cristais foram coletados por filtração e secos sob vácuo para render o composto 4.5 (68,0 g, 74% de rendimento, sal HCl) como um sólido amarelo. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) 4,43 4,77(m, 8H), 6,62 6,63 (m, 1H), 6,87 (s, 1H), 7,22 7,32 (m, 11H). LC-MS Método 1: rt 1,012 min, (352,2 [M+H]+).
Esquema 5 (R)-1'-(terc-Butil)-5-(dibenzilamino)-1,3-di-hidroespiro[indeno- 2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-2'(1'H)-ona 5.1
[00355] A uma solução de NaOH (72 g, 1,80 mol) em água (60 ml) à temperatura ambiente foi adicionado tolueno (130 ml) e o composto 4.5 (4,7 g, 12,08 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente enquanto borbulha argônio através da solução por 5 min. O composto 3.3 (3,00 g, 12,1 mmol) foi adicionado em três porções por 10 min. Argônio continuou a ser borbulhado através da agitação de solução por 15 min e o composto 2.1 (700 mg, 1,2 mmol) foi adicionado em uma porção à temperatura ambiente. Essa mistura foi agitada à temperatura ambiente durante por 3 h sob argônio borbulhante. Água (~300 ml) foi adicionada [nota: reação exotérmica] e a mistura agitada por ~15 min enquanto aquece até a temperatura ambiente. As duas camadas foram separadas e a camada aquosa extraída com acetato de etila. Os extratos combinados foram lavados com água, secos com MgSO4, filtrados e evaporados para render o produto cru de ~90% de pureza, 83% de ee. Esse produto foi dissolvido em tolueno (60 ml) a 60 oC. Uma vez totalmente dissolvida, a mistura foi aquecida até a temperatura ambiente e MeOH (180 ml) foi adicionado. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 16 h, e os cristais resultantes foram coletados por filtração e lavados com MeOH para render o produto (61%, 96% de ee). O produto foi recristalizado usando tolueno (50 ml) e MeOH (120 ml) para render o composto 5.1 (3,1 g, 52% de rendimento, >99% de ee ). 1H RMN (CDCl3, 400 MH ) 8,14 (m, 1H), 7,30 (m, 10H), 7,05 (m, 2H), 6,78 (m, 1H), 6,67 (s, l, 2H), 4,67 (s, l, 4H), 3,48 (d, 2H), 2,87 (dd, 2H), 1,82 (s, 9H); LC-MS Método 1: rt 1,215 min, (488,27 [M+H]+);. HPLC Quiral: Coluna Phenomenex® Lux 3 µm Celulose-1; nhexano:isopropanol, 95:5; fluidez = 1,0 ml/min; detecção a 254 nm. (3R)-5'-(Dibenzilamino)espiro[1H-pirrolo[2,3-b]piridina-3,2'- indano]-2-ona 5.2
[00356] O composto 5.1 (26,8 g, 55,0 mmol) foi dissolvido com ácido metanossulfônico (67,00 ml) a 20 °C e tolueno (10 ml) adicionado. A mistura resultante foi agitada a 90 °C por 3 h. A LC-MS mostrou que o material de partida foi completamente consumido e a MS desejada foi detectada. A mistura foi derramada em água (100 ml) e ajustada para pH 10 com carbonato de sódio. A mistura foi extraída com acetato de etila (3 x 100 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (100 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, triturado com éter de petróleo:acetato de etila = 5:1 a 0:1 para fornecer o composto 5.2 como um sólido amarelo (20 g, 83% de rendimento). 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) 2,96 (d, 2H), 3,22 (d, 2H), 4,67 (s, 4H), 6,54 (dd, 1H), 6,63 (s, 1H), 6,68 (dd, 1H), 6,98 (d, 1H), 7,19 7,35 (m, 11H), 8,09 (d, 1H), 11,03 (s, 1H). LC-MS Método 2: rt 0,884 min, (432,2 [M+H]+). Intermediário B (R)-5-Amino-1,3-di-hidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]- 2'(1'H)-ona
[00357] A uma solução de composto 5.2 (20 g, 46,35 mmol) em metanol (200 ml) foi adicionado Pd/C a 10% (1,5 g) e ácido metanossulfônico (7,15 g, 74,4 mmol). A mistura foi desgaseificada sob vácuo e purgada três vezes com hidrogênio. A mistura foi agitada a 20 °C por 16 h sob balão de hidrogênio, filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida para render um resíduo. O resíduo foi dissolvido com tetraidrofurano (100 ml), carbonato de sódio aquoso saturado adicionado até pH=8 e a mistura filtrada para render um sólido rosa. O sólido foi dissolvido com tetraidrofurano (100 ml), seco com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o Intermediário B (10,78 g, 83% de rendimento, 90,2% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo-claro. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) 2,92 (dd, 2H), 3,33 (dd, 2H), 4,95 (s, 2H), 6,44 6,48 (m, 2H), 6,84 6,92 (m, 2H), 7,13 (d, 1H), 8,05 (d, 1H), 11,04 (s, 1H). LC-MS Método 10: rt 0,751 min, (252,11 [M+H]+); chiral HPLC: Coluna Phenomenex® Lux 3 µm Celulose-1; n hexano:isopropanol, 40:60; fluidez =0,5 mL/min; detecção a 220 nm.
Esquema 6 Carboxilato de 3-[(2-metoxi-2-oxo-etil)amino]piperidina-1-terc- butila 6.2
[00358] Uma mistura do composto 6.1 (1,00 g, 5,02 mmol), 2- aminoacetato de metila (756 mg, 6,02 mmol, sal HCl) e acetato de sódio (617 mg, 7,53 mmol) em metanol (10 ml) foi agitada a 20 °C por 2 h, cianoboroidreto de sódio (946 mg, 15,06 mmol) foi adicionado e a agitação continuou por 12 h. A mistura de reação foi derramada em água (50 ml), extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (2 x 40 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 10:1~1:1, para fornecer o composto 6.2 (580 mg, 42% de rendimento) como um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,46 (s, 9H), 1,63 1,80 (m, 3H), 1,87 1,96 (m, 1H), 2,43 3,04 (m, 3H), 3,41 3,53 (m, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,75 3,82 (m, 1H), 3,84 4,11 (m, 1H). 3-(N-(2-metoxi-2-oxoetil)pivalamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila 6.3
[00359] A uma solução do composto 6.2 (580 mg, 2,13 mmol) e DIEA (1,48 ml, 8,52 mmol) em diclorometano (6 ml) foi adicionado cloreto de
2,2-dimetilpropanoíla (308 mg, 2,56 mmol) por gotejamento a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 30 min sob nitrogênio, derramada em água (40 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 40 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (3 x 40 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 20:1~5:1, para fornecer o composto 6.3 (580 mg, 76% de rendimento) como um sólido branco. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,32 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,50 1,62 (m, 2H), 1,75 1,84 (m, 1H), 1,97 2,05 (m, 1H), 2,44 2,75 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,75 3,95 (m, 2H), 3,97 4,09 (m, 1H), 4,12 4,35 (m, 2H). Ácido 2-(N-(1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-3- il)pivalamido)acético 6.4
[00360] A uma solução de composto 6.3 (300 g, 0,84 mmol) em tetraidrofurano (3 ml) e metanol (2 ml) foi adicionada uma solução de hidróxido de lítio monoidratado (141 g, 3,37 mmol) em água (1 ml) a 20 °C. Então, a mistura resultante foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (20 ml) e lavada com acetato de etila (20 ml). A fase aquosa foi ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (2 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 6.4 (280 mg, 97% de rendimento) foi obtido como uma goma incolor. 1H RMN (CDCl3, 400 MH ) 1,33 (s, 9H), 1,47 (s, 9H), 1,51 1,67 (m, 2H), 1,74 1,84 (m, 1H), 1,96 2,04 (m, 1H), 2,44 2,80 (m, 2H), 3,90 (q, 2H), 3,99 4,09 (m, 1H), 4,13 4,34 (m, 2H). 3-(N-(2-oxo-2-((2'-oxo-1,1',2',3-tetra-hidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b] piridina]-5-il)amino)etil)pivalamido)piperidina-1-carboxilato de terc-butila 6.5
[00361] A uma solução do composto 6.4 (68 mg, 0,20 mmol), EDCI (50 mg, 0,26 mmol) e HOAt (35 mg, 0,26 mmol) em DMF (1,5 ml) foi adicionado DIEA (90 mg, 0,70 mmol) a 20 °C. O Intermediário A (50 mg, 0,20 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada a 20 °C por 12 h. A mistura de reação foi adicionada à água (15 ml) e filtrada. O precipitado foi lavado com água (10 ml), dissolvido com MeCN (20 ml) e concentrada a vácuo para render o composto 6.5 (84 mg, 66% de rendimento, 90,1% de pureza) como um sólido amarelo. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz) 1,22 (s, 9H), 1,39 (s, 9H), 1,62 1,91 (m, 4H), 2,51 2,54 (m, 4H), 3,05 (t, 2H), 3,76 4,00 (m, 4H), 4,01 4,17 (m, 1H), 6,85 (dd, 1H), 7,10 7,24 (m, 2H), 7,31 (t, 1H), 7,66 (d, 1H), 8,06 (dd, 1H), 9,92 (s, 1H), 11,08 (s, 1H). LC-MS Método 6: rt 2,302 min, [M+Na]+=598,4. Exemplo 1 N-(2-Oxo-2-((2'-oxo-1,1',2',3-tetra-hidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b] piridin]-5-il)amino)etil)-N-(piperidin-3-il)pivalamida
[00362] A uma solução do composto 6.5 (70 mg, 0,12 mmol) em diclorometano (2 ml) foi adicionado brometo de zinco (274 mg, 1,22 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 16 h. A mistura de reação foi dissolvida em metanol (20 ml). Carbonato de sódio aquoso saturado foi adicionado à mistura até pH=8. Então, a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (4 x 40 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (3 x 30 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v), solvente B: MeCN]; B%: 29-59%, 12 min). Após a liofilização, o Exemplo 1 foi obtido como um sólido branco (14 mg, 24% de rendimento, 100% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,34 (s, 9H),
1,56 1,76 (m, 2H), 1,78 1,86 (m, 1H), 1,94 2,02 (m, 1H), 2,46 (td, 1H), 2,69 (t, 1H), 2,88 2,97 (m, 1H), 3,06 (dd, 2H), 3,11 3,18 (m, 1H), 3,51 (dd, 2H), 3,92 4,09 (m, 2H), 4,16 4,27 (m, 1H), 6,88 (dd, 1H), 7,12 (dd, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,34 7,40 (m, 1H), 7,55 (s, 1H), 8,05 (dd, 1H). LC-MS Método 16: rt 1,891 min, [M+H]+ 476,3.
Esquema 7 3-((2-Etoxi-2-oxoetil)amino)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc- butila 7.2
[00363] A uma solução de (S)-3-amino-1-boc-piperidina (7.1) (800 mg, 3,99 mmol) e trietilamina (0,7 ml) em tetraidrofurano (6 ml) foi adicionado 2-bromoacetato de etila (700 mg, 4,19 mmol). A mistura foi agitada a 15 °C por 16 h, derramada em água (50 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (100 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica, (éter de petróleo:acetato de etila = 5:1 a 2:1) para fornecer o composto 7.2 (1,00 g, 87% de rendimento) como um óleo incolor. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,19 1,30 (m, 4H), 1,38 (s, 9H), 1,54 1,65 (m, 2H), 1,83 1,86 (m, 1H), 2,47
2,50 (m, 3H), 3,33 3,43 (m, 2H), 3,70 (dt, 1H), 3,78 4,02 (m, 1H), 4,12 (q, 2H). 3-(N-(2-etoxi-2-oxoetil)pivalamido)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila 7.3
[00364] A uma solução de composto 7.2 (280 mg, 0,98 mmol) em diclorometano (5 ml) foram adicionados di-isopropiletilamina (253 mg, 1,96 mmol) e cloreto de pivaloíla (141 mg, 1,17 mmol). A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, diluída com diclorometano (20 ml) e lavada com água (20 ml). A mistura de reação foi seca com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 7.3 (360 mg, 99% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,25 (t, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,53 - 1,56 (m, 2H), 1,78 1,80 (m, 1H), 2,01 2,03 (m, 1H), 2,46 2,52 (m, 1H), 2,58 2,68 (m, 1H), 3,84 (d, 2H), 4,05 4,14 (m, 2H), 4,17 (q, 2H), 4,24 4,27 (m, 1H). Ácido (S)-2-(N-(1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-3- il)pivalamido)acético 7.4
[00365] A uma solução de composto 7.3 (360 mg, 0,97 mmol) em metanol (10 ml) e água (2 ml) foi adicionado hidróxido de lítio hidratado (122 mg, 2,92 mmol). A mistura foi agitada a 20 °C por 1 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 20 ml). As fases aquosas foram ajustadas para pH 3-4 com ácido clorídrico 1 M e extraídas com acetato de etila (2 x 50 ml). As fases orgânicas foram combinadas e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 7.4 (300 mg, 90% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3, 400 MH ) 1,33 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,59 - 1,68 (m, 2H), 1,79 1,83 (m, 1H), 1,99 2,05 (m, 1H), 2,56 2,74 (m, 2H), 3,85 3,98 (m, 2H), 4,02 4,22 (m, 3H).
3-(N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo [2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)pivalamido)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila 7.5
[00366] A uma solução do composto 7.4 (80 mg, 0,23 mmol) e do Intermediário B (59 mg, 0,23 mmol) em DMF (2 ml) foram adicionados EDCI (90 mg, 0,47 mmol), HOAt (64 mg, 0,47 mmol) e di-isopropiletilamina (60 mg, 0,47 mmol). A mistura foi agitada a 20 °C por 2 h, diluída com acetato de etila (25 ml) e lavada com água (20 ml). A mistura de reação foi seca com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Gemini 150 x 25 mm. 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (hidróxido de amônia a 0,05% v/v), solvente B: MeCN]; B%: 42-72%, 12 min). Após a extração com acetato de etila, o composto 7.5 (50 mg, 37% de rendimento, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco. 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,34 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,54 1,57 (m, 1H), 1,79 1,82 (m, 2H), 2,01 2,04 (m, 1H), 2,61 2,72 (m, 1H), 2,83 2,93 (m, 1H), 3,07 (dd, 2H), 3,52 (dd, 2H), 4,03 4,25 (m, 4H), 4,28 4,31 (m, 1H), 6,88 (dd, 1H), 7,13 (dd, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,56 (s, 1H), 8,05 (dd, 1H). Exemplo 2 N-(2-Oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetra-hidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3-il)pivalamida
[00367] A uma solução de composto 7.5 (50 mg, 0,087 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado brometo de zinco (293 mg, 1,30 mmol). A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, diluída com metanol (5 ml), ajustada para pH 8-9 com bicarbonato de sódio aquoso saturado e extraída com acetato de etila (3 x 25 ml). As fases orgânicas foram combinadas e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 10-40%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 2 (5,6 mg, sal de TFA, 98,6% de pureza) foi obtido como um sólido amarelo. 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,33 (s, 9H), 1,84 - 2,10 (m, 4H), 2,92 (t, 1H), 3,08 (d, 2H), 3,36 (m, 1H), 3,49 3,53 (m, 2H), 3,58 3,59 (m, 1H), 4,10 4,20 (m, 2H), 4,65 4,71 (m, 2H), 6,89 (dd, 1H), 7,14 (dd, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,40 (d, 1H), 7,54 (s, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS Método 8: rt 1,941 min, (476 [M+H]+), 98,6% de pureza. Exemplo 3 N-(2-Oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetra-hidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((R)-piperidin-3-il)pivalamida
[00368] O Exemplo 3 foi preparado a partir de (R)-3-amino-1- boc-piperidina de maneira análoga ao Exemplo 2. O composto final foi purificado por HPLC-prep (coluna: Boston pH-lex 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 18-38%, 8 min). Após a liofilização, o Exemplo 3 foi obtido como um sólido branco (58 mg, sal de TFA, 64% de rendimento, 96,5% de pureza, 94,31% de ee). 1H RMN (CD3OD, 400 MH ) 1,33 (s, 9H), 1,77 2,15 (m, 4H), 2,85 2,95 (m, 1H), 3,06 3,10 (dd, 2H), 3,15 3,26 (m, 1H), 3,33 3,40 (m, 1H), 3,48 3,58 (m, 3H), 3,98 4,42 (m, 3H), 6,91 (dd, 1H), 7,16 7,17 (m, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,34 7,36 (m, 1H), 7,59 (s, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS Método 6: rt 1,355 min, [M+H]+=476,3.
Síntese de Intermediário C Esquema 8 Carboxilato de (3S)-3-[(2-etoxi-2-oxo-etil)-(2,2,2- trifluoroacetil)amino]piperidina-1- terc-butila 8.1
[00369] A uma solução de composto 7.2 (3,50 g, 12,22 mmol) e DIEA (3,95 g, 30,56 mmol) em diclorometano (40 ml) foi adicionado anidrido trifluoroacético (3,08 g, 14,67 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 0,5 h, derramada em água (60 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 40 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com ácido clorídrico 0,1 M (40 ml) e salmoura (2 x 40 ml),) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado com coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 20:1 a 5:1, para render o composto 8.1 como um óleo amarelo (3,60 g, 77% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,29 (t, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,52 1,59 (m, 2H), 1,77 1,82 (m, 1H), 2,01 2,09 (m, 1H), 2,53 (t, 1H), 2,68 (t, 1H), 3,83 3,93 (m, 1H), 3,96 4,14 (m, 4H), 4,23 4,29 (m, 2H). Ácido 2-[[(3S)-1-terc-butoxicarbonil-3-piperidil]-(2,2,2- trifluoroacetil)amino]acético 8.2
[00370] A uma solução de composto 8.1 (3,60 g, 9,41 mmol) em metanol (30 ml) foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio (377 g, 9,41 mmol) em água (10 ml) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (60 ml) e lavada com acetato de etila (80 ml). A fase aquosa foi ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M e extraída com acetato de etila (3 x 80 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (60 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 8.2 foi obtido como uma goma amarela (1,70 g, 51% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,46 (s, 9H), 1,54 1,63 (m, 2H), 1,76 1,84 (m, 1H), 1,93 2,04 (m, 1H), 2,49 2,80 (m, 2H), 3,85 3,93 (m, 1H), 3,96 4,12 (m, 3H), 4,17 4,25 (m, 1H). 3-(2,2,2-Trifluoro-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetra- hidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5- il)amino)etil)acetamido)piperidina-1-(S)-carboxilato de terc-butila 8.3
[00371] A uma solução do composto 8.2 (627 mg, 1,77 mmol), EDCI (441 mg, 2,30 mmol) e HOAt (313 mg, 2,30 mmol) em DMF (10 ml) foi adicionado DIEA (687 mg, 5,31 mmol) e Intermediário B (445 mg, 1,77 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (40 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 40 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (3 x 40 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado com coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 10:1 a 1:3, para render o composto 8.3 (910 mg, 98% de pureza) como um sólido amarelo. 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,43 1,49 (m, 9H), 1,51 1,58 (m, 1H), 1,74 1,91 (m, 2H), 2,01 2,09 (m, 1H), 2,61 2,76 (m, 1H), 2,87 3,00 (m, 1H), 3,02 3,14 (m, 2H), 3,52 (dd, 2H), 3,82 3,93 (m, 1H), 3,96 4,06 (m, 1H), 4,20 4,39 (m, 3H), 6,88 (dd, 1H), 7,10 7,18 (m, 1H), .7,20 7,28 (m, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,57 (d, 1H), 8,05 (d, 1H). LC-MS Método 1: rt 0,916 min, (588,3 [M+H]+). Intermediário C (3S)-3-[[2-Oxo-2-[[(3R)-2-oxospiro[1H-pirrolo[2,3-b]piridina-3,2'- indano]-5'- il]amino]etil]amino]piperidina-1-carboxilato de terc-butila
[00372] A uma mistura do composto 8.3 (1,30 g, 1,52 mmol) em metanol (20 ml) e água (6 ml) foi adicionado carbonato de potássio (632 mg, 4,57 mmol) a 20 °C.
A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, diluída com acetato de etila (30 ml) e derramada em água (30 ml). Ácido clorídrico 1 M foi adicionado até o pH=3. A fase orgânica foi removida.
A fase aquosa foi basificada com bicarbonato de sódio até pH=8 e extraída com acetato de etila (3 x 30 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (2 x 30 ml) e secas com sulfato de sódio anidro.
Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado com coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 5:1 a 0:1 para render o Intermediário C como um sólido branco (6,50 mg, 86% de rendimento, 99,5% de pureza). 1 H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,39 1,53 (m, 11H), 1,69 1,80 (m, 1H), 1,96 2,01 (m, 1H), 2,53 2,62 (m, 1H), 2,70 2,93 (m, 1H), 2,94 3,03 (m, 1H), 3,08 (dd, 2H), 3,45 (s, 2H), 3,52 (dd, 2H), 3,66 3,82 (m, 1H), 3,86 4,02 (m, 1H), 6,88 (dd, 1H), 7,15 (dd, 1H), .7,25 (d, 1H), 7,42 (d, 1H), 7,60 (s, 1H), 8,05 (dd, 1H). LC-MS Método 1: rt 0,699 min, (492,2 [M+H]+). Rota Geral A
Esquema 9
[00373] Etapa 1a: A uma solução do ácido carboxílico (1,5~2,0 eq.) em DMF (1~5 ml) foram adicionados EDCI (1,5~2,0 eq.), HOAt (1,5~2,0 eq.) e DIEA (1,5~2,0 eq.) à temperatura ambiente. Então, o Intermediário C (25 70 mg, 0,075 0,105 mmol, 1 eq.) foi adicionado. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 2~16 h. TLC ou LC-MS detectou a reação. Quando a reação foi concluída, a mistura foi derramada em água (10 ml) e extraída com acetato de etila (20 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com ácido clorídrico 1 M (10 ml), salmoura (10 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o produto cru foi usado diretamente na próxima etapa ou purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica.
[00374] Etapa 1b: A uma solução do ácido carboxílico (2,0~4,0 eq.) em diclorometano (1~5 ml) foi adicionado o Reagente de Ghosez (1- cloro-N,N,2-trimetil-1-propenilamina) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada por 4 h e adicionada a uma solução de Intermediário C (25 70 mg, 0,075 0,105 mmol) e TEA (4,0~8,0 eq.) a 0 oC. A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 16 h. TLC ou LC-MS detectou a reação. Quando a reação foi concluída, a mistura foi derramada em água (10 ml) e extraída com acetato de etila (20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com ácido clorídrico 1M (10 ml), salmoura (10 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o produto cru foi usado diretamente na próxima etapa ou purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica.
[00375] Etapa 2: O produto da Etapa 1 em uma solução de TFA/DCM (1/5, 1~5 ml) foi agitado por 0,5~2 h. A reação foi monitorada por TLC ou LC-MS. Quando a reação foi concluída, a mistura foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado com HPLC-prep e liofilização para fornecer o produto final. Exemplo 4
N-(2-Oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo [2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3- il)biciclo[1.1.1]pentano-1-carboxamida
[00376] A Rota Geral A, usando o Intermediário C (40 mg) e Etapa 1a, após a mesma o produto foi usado sem purificação adicional. Purificação após a Etapa 2 por coluna de HPLC-prep: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 12-42%, 10 min). Após a liofilização, o Exemplo 4 foi obtido como um sólido branco (27 mg, 56% de rendimento, sal de TFA, 99,7% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,84 1,93 (m, 4H), 2,15 2,31 (m, 6H), 2,41 2,52 (m, 1H), 2,88 2,92 (m, 1H), 3,06 3,18 (m, 3H), 3,35 3,56 (m, 4H), 3,99 4,18 (m, 1H), 4,39 4,57 (m, 2H), 6,91 6,93 (m, 1H), 7,15 7,27 (m, 2H), 7,40 7,42 (m, 1H), 7,52 7,58 (m, 1H), 8,05 8,07 (m, 1H). LC-MS Método 4: rt 1,884 min, (486,1[M+H]+). Exemplo 5 N-(2-Oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetra-hidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3- il)ciclopentanocarboxamida
[00377] A Rota Geral A, usando o Intermediário C (40 mg) e Etapa 1a, após a mesma o produto foi usado sem purificação adicional.
Purificação após a Etapa 2 por coluna de HPLC-prep: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 12-42%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 5 foi obtido como um sólido branco (27 mg, 42% de rendimento, sal de TFA, 95,6% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,59 2,02 (m, 12H), 2,85 2,93 (m, 1,5H), 3,05 3,17 (m, 3,5H), 3,33 3,55 (m, 4H), 4,03 4,19 (m, 1H), 4,34 4,51 (m, 2H), 6,89 6,93 (m, 1H), 7,15 7,26 (m, 2H), 7,40 (t, 1H), 7,55 (d, 1H), 8,06 (d,1H). LC-MS Método 4: rt1,973 min, (488,2 [M+H]+). Exemplo 6 2-Fluoro-2-metil-N-[2-oxo-2-[[(3R)-2-oxoespiro[1H-pirrolo[2,3- b]piridina -3,2'-indano]-5'-il]amino]etil]-N-[(3S)-3-piperidil]propanamida
[00378] A Rota Geral A, usando o Intermediário C (40 mg) e Etapa 1b, após a mesma o produto foi usado sem purificação adicional. Purificação após a Etapa 2 por coluna de HPLC-prep: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 5 35%, 10 min). Após a liofilização, o Exemplo 6 foi obtido como um sólido branco (20 mg, 40% de rendimento, sal de TFA, 99,3% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,55 1,73 (m, 6H), 1,77 2,13 (m, 4H), 2,85 2,96 (m, 1H), 3,04 3,13 (m, 2H), 3,14 3,28 (m, 1H), 3,32 3,37 (m, 1H), 3,46 3,60 (m, 3H), 4,04 4,21 (m, 1H), 4,35 4,48 (m, 1,5H), 4,68 4,79 (m, 0,5H), 6,87 6,94 (m, 1H), 7,13 7,21 (m, 1H), 7,21 7,27 (m, 1H), 7,34 7,44 (m, 1H), 7,51 7,59 (m, 1H), 8,05 (dd, 1H). LC- MS Método 6: rt 1,519 min, (480,3 [M+H]+). Exemplo 7
N-(2-Oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3-il)-1- (trifluorometil)ciclopropanocarboxamida
[00379] A Rota Geral A, usando o Intermediário C (40 mg) e Etapa 1b, após a mesma o produto foi usado sem purificação adicional. Purificação após a Etapa 2 por coluna de HPLC-prep: Boston Prime C18 150 x 30 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 12-42%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 7 foi obtido como um sólido branco (23 mg, 44% de rendimento, sal de TFA, 99,2% de pureza). 1 H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,33 1,46 (m, 4H), 1,88 2,01 (m, 4H), 2,91 2,99 (m, 1H), 3,03 3,25 (m, 3H), 3,36 3,57 (m, 4H), 4,05 4,25 (m, 1,5H), 4,62 4,78 (m, 1,5H), 6,92 (dd, 1H), 7,18 (d, 1H), 7,23 7,31 (m, 1H), 7,41 (d, 1H), 7,52 7,71 (m, 1H), 8,08 (dd, 1H). LC-MS Método 8: rt 1,944 min, (528,2 [M+H]+). Exemplo 8 1-Metil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno- 2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3- il)ciclobutanocarboxamida
[00380] A Rota Geral A, usando o Intermediário C (40 mg) e Etapa 1b, após a mesma o produto foi usado sem purificação adicional. Purificação após a Etapa 2 por coluna de HPLC-prep: Boston Prime C18 150 x 30 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 12-42%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 8 foi obtido como um sólido branco (12 mg, 22% de rendimento, sal de TFA, 99,1% de pureza). 1 H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,46 1,52 (d, 3H), 1,68 2,09 (m, 8H), 2,46 2,60 (m, 2H), 2,90 (t, 1H), 3,05 3,19 (m, 3H), 3,32 3,58 (m, 4H), 3,89 4,15 (m, 3H), 6,89 (dd, 1H), 7,22 (t, 1H), 7,26 (t, 1H), 7,45 (t, 1H), 7,59 (d, 1H), 8,06 (d, 1H). LC-MS Método 6: rt 1,570 min, (488,3 [M+H]+). Exemplo 9 3,3,3-Trifluoro-2,2-dimetil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)- piperidin-3-il)propanamida
[00381] A Rota Geral A, usando o Intermediário C (40 mg) e Etapa 1b, após a mesma o produto foi usado sem purificação adicional. Purificação após a Etapa 2 por coluna de HPLC-prep: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 12-42%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 9 foi obtido como um sólido branco (30 mg, 38% de rendimento, sal de TFA, 100% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,59 (s, 6H), 1,73 1,89 (m, 1H), 1,91 2,13 (m, 3H), 2,91 (td, 1H), 3,09 (dd, 2H), 3,21 3,29 (m, 1H), 3,33 3,38 (m, 1H), 3,46 3,61 (m, 3H), 4,00 4,48 (m, 3H), 6,90 (dd, 1H), 7,15 (dd, 1H), 7,24
(d, 1H), 7,40 (dd, 1H), 7,55(s, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS Método 4: rt 1,988 min, (430,1 [M+H]+). Exemplo 10 2-Ciano-2-metil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)- piperidin-3-il)propenamida
[00382] A Rota Geral A, usando o Intermediário C (60 mg) e Etapa 1b, após a mesma o produto foi usado sem purificação adicional. Purificação após a Etapa 2 por coluna de HPLC-prep: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%: 5 35%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 10 foi obtido como um sólido branco (14 mg, 38% de rendimento, sal de TFA, 97,2% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,58 1,73 (m, 6H), 1,82 2,29 (m, 4H), 2,85 3,00 (m, 1H), 3,08 (d, 2H), 3,18 3,29 (m, 1H), 3,34 3,44 (m, 1H), 3,52 (dd, 2H), 3,57 3,74 (m, 1H), 4,00 4,29 (m, 2H), 4,50 4,72 (m, 1H), 6,90 (dd, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,36 7,44 (m, 1H), 7,49 7,61 (m, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS Método 4: rt 1,764 min, [M+H]+ 487,1. Exemplo 11 2-Metoxi-2-metil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)- piperidin-3-il)propenamida
[00383] A Rota Geral A, usando o Intermediário C (60 mg) e Etapa 1b, após a mesma o produto foi usado sem purificação adicional.
Purificação após a Etapa 2 por coluna de HPLC-prep: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%: 5 35%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 11 foi obtido como um sólido branco (31 mg, 53% de rendimento, sal de TFA, 98,3% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,35 1,52 (m, 6H), 1,75 2,18 (m, 4H), 2,91 (t, 1H), 3,01 3,24 (m, 4H), 3,34 3,42 (m, 3H), 3,47 3,66 (m, 3H), 3,90 4,28 (m, 2H), 4,65 4,77 (m, 0,5H), 5,24 5,33 (m, 0,5H), 6,90 (t, 1H), 7,11 7,29 (m, 2H), 7,39 (d, 1H), 7,56 (d, 1H), 8,06 (d, 1H). LC-MS Método 6: rt 1,499 min, [M+H]+. Rota Geral B
Esquema 10 3-(N-(2-etoxi-2-oxoetil)-1- (trifluorometil)ciclobutanocarboxamido) piperidina-1-carboxilato de (S)-ter- butila 10.2a
[00384] A uma solução de ácido 1- (trifluorometil)ciclobutanocarboxílico (10.1a) (150 mg, 0,89 mmol) em diclorometano (4 ml) foram adicionados cloreto de oxalila (0,2 ml) e DMF (6,39 mg, 0,087 mmol). A mistura foi agitada a 15 °C por 1 h e concentrada a 15 °C. O resíduo foi dissolvido com diclorometano (2 ml) e adicionado a uma solução de composto 7.2 (150 mg, 0,52 mmol) e trietilamina (0,3 ml) em diclorometano (4 ml) a 0 °C. A mistura foi agitada a 15 °C por 2 h, derramada em água (40 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 40 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (100 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, (éter de petróleo:acetato de etila = 10:1~3:1) para produzir o composto 10.2a como um sólido branco (130 mg, 57% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,29 (t, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,50 1,60 (m, 2H), 1,74 1,95 (m, 2H), 1,99 2,18 (m, 2H), 2,43 2,67 (m, 4H), 2,72 2,86 (m, 2H), 3,44 3,50 (m, 1H), 3,90 3,99 (m, 2H), 4,06 4,35 (m, 4H). Ácido (S)-2-(N-(1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-3-il)-1- (trifluorometil)ciclobutanocarboxamido)acético 10.3a
[00385] A uma solução de composto 10.2a (130 mg, 0,31 mmol) em metanol (3 ml) e água (1 ml) foi adicionado hidróxido de sódio (62 mg,
1,54 mmol). A mistura foi agitada a 15 °C por 6 h, ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 10.3a foi obtido como um sólido branco (110 mg, 87% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,46 (s, 9H), 1,50 1,58 (m, 2H), 1,73 1,81 (m, 1H), 1,83 1,93 (m, 1H), 1,95 2,02 (m, 1H), 2,12 2,17 (m, 1H), 2,43 2,84 (m, 6H), 3,43 3,51 (m, 1H), 4,00 (s, 2H), 4,10 4,35 (m, 2H). 3-(N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo [2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-1- (trifluorometil)ciclobutanocarboxamido)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc- butila 10.4a
[00386] A uma solução do composto 10.3a (100 mg, 0,24 mmol) em DMF (2 ml) foram adicionados DIEA (79 mg, 0,61 mmol), HOAt (43 mg, 0,32 mmol), EDCI (61 mg, 0,32 mmol) e o Intermediário B (61 mg, 0,24 mmol). A mistura foi agitada a 25 °C por 2 h, derramada em água (50 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 100 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (100 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 10.4a foi obtido como um sólido amarelo-claro (130 mg, cru). Método LC-MS 10: rt 0,981 min, (664,4 [M+Na]+). Exemplo 12
N-(2-Oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetra-hidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3-il)-1- (trifluorometil)ciclobutanocarboxamida 10.5a
[00387] A uma solução de composto 10.4a (100 mg, 0,16 mmol) em diclorometano (10 ml) foi adicionado TFA (1 ml). A mistura foi agitada a 25 °C por 30 min e concentrada sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC prep. (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 15 45%, 5 min). Após a liofilização, o composto 10.5a foi obtido como um sólido branco (89,10 mg, 84,9% de rendimento, sal de TFA, 97,4% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,72 2,24 (m, 6H), 2,51 2,68 (m, 2H), 2,75 2,96 (m, 3H), 3,08 3,16 (m, 2H), 3,19 3,22 (m, 0,5H), 3,34 3,40 (m, 1H), 3,51 3,57 (m, 3H), 3,63 3,67 (m, 0,5H), 3,85 3,96 (m, 1H), 4,09 4,28 (m, 2H), 6,92 (dd, 1H), 7,17 7,19 (m, 1H), 7,25 7,30 (m, 1H), 7,40 7,44 (m, 1H), 7,55 7,64 (m, 1H), 8,07 8,08 (m, 1H). LC-MS Método 4: rt 2,001 min, (542,1[M+H]+). 3-(N-(2-etoxi-2-oxoetil)-4,4,4-trifluoro-2,2-dimetilbutanamido) piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila 10.2b
[00388] A uma solução de ácido 4,4,4-trifluoro-2,2-dimetil- butanoico (10.1b) (370 mg, 2,17 mmol) em DCM (4 ml) foi adicionada 1-cloro- N,N,2-trimetil-prop-1-en-1-amina (406 mg, 3,04 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 4 h e adicionada a uma solução do composto 7.2 (623 mg, 2,17 mmol) e trietilamina (660 mg, 6,52 mmol) em DCM (6 ml) a 20 °C. A mistura resultante foi agitada a 20 °C por 2 h, derramada em água (10 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas por salmoura (2 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC- prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%: 52-82%, 9 min). Após a liofilização, o composto 10.2b foi obtido como um óleo incolor (35 mg, 3% de rendimento, 92% de pureza). Método LC-MS 1: rt 1,006 min, [M+Na]+ 461,3. Acetato de (S)-2-(N-(1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-3-il)-4,4,4- trifluoro-2,2-dimetil butanamido) sódio 10.3b
[00389] A uma solução do composto 10.2b (35 mg, 0,080 mmol) em metanol (1,5 ml) e água (0,5 ml) foi adicionado hidróxido de sódio (6,39 mg, 0,16 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, ajustada para pH 8 com 1 M de ácido clorídrico e concentrada sob vácuo para produzir o composto 10.3b (sal de Na) (35 mg, cru) como um sólido amarelo, que foi usado diretamente na próxima etapa. Método LC-MS 1: rt 0,881 min, [M+H]+ 433,1
3-(4,4,4-Trifluoro-2,2-dimetil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5- il)amino)etil)butanamido)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila 10.4b
[00390] A uma solução do composto 10.3b (sal de Na) (35 mg, 0,081 mmol), EDCI (23 mg, 0,12 mmol) e HOAt (16 mg, 0,12 mmol) em DMF (1 ml) foi adicionado DIEA (21 mg, 0,16 mmol) seguido de Intermediário B (20 mg, 0,081 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas por ácido clorídrico 0,1 M (20 ml) e salmoura (4 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por TLC-prep (acetato de etila) para fornecer o composto 10.4b como um sólido branco (20 mg, 37% de rendimento, 96,7% de pureza). Método LC-MS 1: rt 0,947 min, [M+H]+
644. Exemplo 13 4,4,4-Trifluoro-2,2-dimetil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)- piperidin-3-il)butanamida 10.5b
[00391] A uma solução de composto 10.4b (20 mg, 0,031 mmol) em DCM (2 ml) foi adicionado ácido trifluoroacético (320 µl) a 20 °C. A mistura foi agitada por 30 min e concentrada a vácuo para render um resíduo, que foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%: 12-42%, 9 min). Após a liofilização, o composto 10.5b foi obtido como um sólido branco-sujo (5 mg, 23% de rendimento, sal de TFA, 96,7% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,43 (s, 6H), 1,73 1,89 (m, 1H), 1,92 2,13 (m, 3H), 2,58 2,76 (m, 2H), 2,91 (t, 1H), 3,09 (dd, 2H), 3,33 3,40 (m, 2H), 3,45 3,59 (m, 3H), 3,90 4,49 (m, 3H), 6,89 (dd, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,40 (d, 1H), 7,56 (s, 1H), 8,06 (d, 1H). LC-MS (Long acidic método 3): rt Método 9: 2,445 min, [M+H]+ 544,3. Ácido carboxílico 10.1c foi preparado de acordo com o Esquema 10A e usado na síntese do Exemplo 14 pela Rota Geral B Esquema 10A 4-Etiltetraidro-2H-piran-4-carboxilato de metila 10A.2
[00392] A uma solução de composto 10A.1 (3,00 g, 20,8 mmol) em THF (30 ml) foi adicionado LDA 2 M (13,53 ml) por gotejamento a -70 °C sob nitrogênio. A mistura foi agitada a -70 °C por 1 h sob nitrogênio. Iodoetano (4,87 g, 31,2 mmol) foi adicionado na mistura por gotejamento a - 70 °C. A mistura resultante foi agitada a -70 °C por 30 min, deixada aquecer até 20 °C e agitada por mais 2 h. A mistura de reação foi derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 ml) e secas sobre sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 1:0~5:1 para fornecer o composto 10A.2 como um óleo incolor (3,50 g, 98% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 0,79 (t, 3H), 1,41 1,50 (m, 2H), 1,55 (q, 2H), 2,04 (dd, 2H), 3,40 (td, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,80 (dt, 2H). Ácido 4-etiltetraidropiran-4-carboxílico 10.1c
[00393] A uma solução de composto 10A.2 (3,50 g, 20,3 mmol) em metanol (30 ml) foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio (813 g, 20,3 mmol) em água (10 ml) a 20 °C. A mistura foi aquecida até 80 °C e agitada por 16 h. A mesma foi derramada em água (20 ml), ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M, e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto
10.1c foi obtido como um sólido branco (2,10 g, 65% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 0,90 (t, 3H), 1,47 1,57 (m, 2H), 1,63 (q, 2H), 2,06 (dd, 2H), 3,52 (td, 2H), 3,87 (dt, 2H). (3S)-3-[(2-Etoxi-2-oxo-etil)-(4-etiltetraidropiran-4- carbonil)amino] piperidina-1-carboxilato de terc-butila 10.2c
[00394] A uma solução de composto 10.1c (414,3 mg, 2,62 mmol) e DMF (7,66 mg, 0,10 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado cloreto de tionila (1,87 g, 15,7 mmol) a 20 °C e agitado por 1 h. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dissolvido com diclorometano (3 ml) e adicionado em uma solução de composto 7.2 (300 mg, 1,05 mmol) e trietilamina (636 mg, 6,29 mmol) em diclorometano (3 ml)
a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 2 h, derramada em água (30 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 30 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas por ácido clorídrico 0,1 M (30 ml), salmoura (2 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 20:1~1:3 para fornecer o composto 10.2c como um óleo incolor (90 mg, 17% de rendimento, 83,2% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 0,95 (t, 3H), 1,29 (t, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,59 1,80 (m, 9H), 1,89 -1,98 (m, 1H), 2,11 2,30 (m, 2H), 2,42 2,80 (m, 2H), 3,59 3,71 (m, 2H), 3,76 3,96 (m, 4H), 3,98 4,08 (m, 1H), 4,19 (q, 2H). Ácido 2-[[(3S)-1-terc-butoxicarbonil-3-piperidil]-(4- etiltetraidropiran-4-carbonil)amino]acético 10.3c
[00395] A uma solução de composto 10.2c (90 mg, 0,18 mmol) em metanol (3 ml) foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio (35 g, 0,88 mmol) em água (1 ml) a 20 °C. A mistura foi agitada por 2 h, derramada em água (20 ml), acidificada até pH 4 com ácido clorídrico 1 M, e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas por salmoura (2 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 10.3c foi obtido como uma goma amarela (70 mg, 95% de rendimento, 95,1% de pureza). Método LC-MS 1: rt 0,864 min, (421,2 [M+Na]+). 3-(4-Etil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno- 2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)tetraidro-2H-piran-4- carboxamido)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila 10.4c
[00396] A uma solução do composto 10.3c (70 mg, 0,18 mmol), EDCI (50 mg, 0,26 mmol) e HOAt (36 mg, 0,26 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionado DIEA (68 mg, 0,53 mmol) seguido de Intermediário B (44 mg, 0,18 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (10 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas por ácido clorídrico 0,1 M (20 ml), salmoura (2 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 10.4c foi obtido como um sólido amarelo (90 mg, 73% de rendimento, 90,3% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 0,96 (t, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,51 1,62 (m, 3H), 1,70 1,84 (m, 4H), 1,89 1,97 (m, 1H), 2,15 2,22 (m, 1H), 2,25 2,35 (m, 1H), 2,56 2,75 (m, 1H), 2,87 2,98 (m, 1H), 3,07 (dd, 2H), 3,52 (dd, 2H), 3,63 3,84 (m, 4H), 3,92 4,11 (m, 4H), 4,20 (d, 1H), 6,88 (dd, 1H), 7,14 (dd, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,37 (dd, 1H), 7,58 (s, 1H), 8,05 (dd, 1H). LC-MS Método 1: rt 0,934 min, (632,4 [M+H]+). Exemplo 14 4-Etil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno- 2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3-il)tetraidro-2H- piran-4-carboxamida 10.5c
[00397] A uma solução de composto 10.4c (70 mg, 0,11 mmol) em diclorometano (2 ml) foi adicionado TFA (0,4 ml) a 20 °C, a mistura agitada por 30 min e concentrada sob vácuo.
O resíduo foi purificado por HPLC prep. (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 10-40%, 10 min). Após a liofilização, o composto 10.5c foi obtido como um sólido branco (41 mg, 57% de rendimento, sal de TFA, 99,8% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 0,93 (t, 3H), 1,51 1,66 (m, 2H), 1,70 2,11 (m, 6H), 2,12 2,27 (m, 2H), 2,91 (td, 1H), 3,09 (dd, 2H), 3,15 3,30 (m, 1H), 3,34 3,40 (m, 1H), 3,46 3,57 (m, 3H), 3,63 (q, 2H), 3,72 3,84 (m, 2H), 3,91 4,60 (m, 3H), 6,91 (dd, 1H), 7,17 (d, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 7,56 (s, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS Método 4: rt 1,820 min, (532,2 [M+H]+). Síntese de Intermediários D e E
Esquema 11 (2-Etoxi-2-oxoetil)carbamoil)-4-metilpiperidina-1-carboxilato de 4-((1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-3-ila) 11.2a
[00398] A uma solução de composto 11.1a (730 mg, 2,63 mmol) em diclorometano (8 ml) foram adicionados DMF (19 mg, 0,26 mmol) e cloreto de tionila (1,91 ml). A mistura foi agitada a 15 °C por 1 h e concentrada. O resíduo foi dissolvido em diclorometano (5 ml) e adicionado a uma solução de composto 7.2 (660 mg, 2,30 mmol) e trietilamina (727 mg, 7,18 mmol) em diclorometano (5 ml). A mistura foi agitada a 10 °C por 32 h, derramada em água (50 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia flash reversa [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN] B%: 0~95 % para produzir o composto 11.2a como um óleo incolor (400 mg, 30% de rendimento, 93,9% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,27 (t, 3H), 1,34 (s, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,51 1,60 (m, 6H), 1,78 1,95 (m, 2H), 2,13 2,25 (m, 2H), 2,53 2,68 (m, 2H), 3,29 (s l, 2H), 3,74 3,95 (m, 4H), 3,95 4,05 (m, 1H), 4,18 (q, 2H), 5,12 (s, 2H), 7,31 - 7,36 (m, 5H). Ácido (S)-2-(1-((benziloxi)carbonil)-N-(1-(terc- butoxicarbonil)piperidin-3-il)-4-metilpiperidina-4-carboxamido)acético 11.3a
[00399] A uma solução de composto 11.2a (760 mg, 1,39 mmol) em tetraidrofurano (3 ml), metanol (0,5 ml) e água (0,5 ml) foi adicionado hidróxido de sódio (111 mg, 2,79 mmol). A mistura foi agitada a 70 °C por 30 min, ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 11.3a foi obtido como um óleo amarelo-claro (720 mg, 96% de rendimento, 95,7% de pureza). Método LC-MS 1: rt 0,848 min, (518,4 [M+H]+). 4-(((S)-1-(terc-Butoxicarbonil)piperidin-3-il)(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo- 1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5- il)amino)etil)carbamoil)-4-metilpiperidina-1-carboxilato de benzila 11.4a
[00400] A uma solução do composto 11.3a (720 mg, 1,39 mmol) em DMF (10 ml) foram adicionados DIEA (539 mg, 4,17 mmol, 3 eq.), HOAt (246 mg, 1,81 mmol, 1,3 eq.), EDCI (347 mg, 1,81 mmol, 1,3 eq.) e o Intermediário B (400 mg, 1,59 mmol). A mistura foi agitada a 25 °C por 16 h, derramada em água (50 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (3 x 40 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,225%), solvente B: MeCN]; B%: 45-75%, 10 min). Após a extração com acetato de etila (3 x 50 ml), o composto 11.4a foi obtido como um sólido branco (460 mg, 44% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,39 (s, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,50 1,61 (m, 3H), 1,81 - 1,90 (m, 3H), 2,14 2,27 (m, 2H), 2,60 2,95 (m, 2H), 3,03 (dd, 2H), 3,30 3,36 (m, 2H), 3,62 (dd, 2H), 3,75 3,88 (m, 2H), 3,93 4,04 (m, 2H), 4,06 4,20 (m, 3H), 5,12 (s, 2H), 6,84 (dd, 1H), 7,10 (dd, 1H), 7,17 7,19 (m, 1H), 7,21 7,26 (m, 1H), 7,33 7,36 (m, 5H), 7,50 (s l, 1H), 8,07 8,09 (m, 1H), 8,62 9,00 (m, 2H).
Intermediário D 3-(4-Metil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)piperidina-4- carboxamido)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila
[00401] A uma solução de composto 11.4a (500 mg, 0,67 mmol) em metanol (5 ml) foi adicionado TFA (76 mg, 0,67 mmol) e Pd/C a 10% (50 mg). A mistura foi desgaseificada e purgada com hidrogênio três vezes e agitada a 25 °C por 16 h sob um balão de hidrogênio. O catalisador foi removido por filtração, e o filtrado foi concentrado para produzir o Intermediário D como um sólido branco (410 mg, 99% de rendimento, 99,3% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,45 (s, 3H), 1,49 (s, 9H), 1,55 1,84 (m, 6H), 1,97 (m, 1H), 2,41 (d, 1H), 2,44 3,06 (m, 4H), 3,11 (d, 2H),3,25 3,31 (m, 1H), 3,38 3,41 (m, 1H), 3,54 (dd, 2H), 4,03 4,21 (m, 5H), 6,91 (dd, 1H), 7,16 (dd, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,40 (d, 1H), 7,65 (s, 1H), 8,08 (dd, 1H). LC-MS Método 1: rt 0,744 min, (617,5 [M+H]+). Exemplo 15 4-Metil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno- 2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3-il)piperidina-4- carboxamida
[00402] A uma solução de composto Intermediário D (40 mg, 0,065 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado TFA (0,5 ml). A mistura foi agitada a 25 °C por 30 min, concentrada e o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 10-27%, 7 min). Após a liofilização, o Exemplo 15 foi obtido como um sólido branco (21 mg, 43% de rendimento, sal de bis-TFA, 99,0% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,46 (s, 3H), 1,70 - 2,05 (m, 6H), 2,36 - 2,41 (m, 2H), 2,91 - 2,96 (m, 1H), 3,10 (dd, 2H), 3,17 - 3,31 (m, 5H), 3,38 - 3,41 (m, 1H), 3,53 (dd, 3H), 4,11 - 4,47 (m, 3H), 6,91 (dd, 1H), 7,16 (dd, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 7,60 (s, 1H), 8,08 (dd, 1H). LC-MS Método 6: rt 1,013 min, (517,3 [M+H]+). Intermediário E
[00403] Os procedimentos descritos em detalhes acima foram aplicados à síntese análoga do Intermediário E, para o qual os dados e os principais detalhes do procedimento são fornecidos abaixo. 4-[[(3S)-1-terc-Butoxicarbonil-3-piperidil]-(2-etoxi-2-oxo- etil)carbamoil]-4-etil-piperidina-1-carboxilato de benzila 11.2b
[00404] A purificação final por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 12:1~3:1 forneceu o composto 11.2b como um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3, 400 MH ) 0,96 (t, 3H), 1,27 (t, 3H), 1,44 1,47 (m, 9H), 1,55 1,80 (m, 9H), 1,89 1,94 (m, 1H), 2,20 -2,32 (m, 2H), 2,51 2,69 (m, 2H), 3,10 3,30 (m, 2H), 3,86 4,03 (m, 5H), 4,20 (q, 2H), 5,12 (s, 2H), 7,28 7,38 (m, 5H).
Ácido 2-[(1-benziloxicarbonil-4-etil-piperidina-4-carbonil)-[(3S)- 1-terc-butoxicarbonil-3-piperidil]amino]acético 11.3b
[00405] O cru 11.3b foi obtido como um sólido amarelo. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 0,94 (t, 3H), 1,38 1,47 (m, 12H), 1,56 1,75 (m, 5H), 1,93 (dd, 2H), 2,23 (dd, 2H), 2,50 2,75 (m, 2H), 3,05 3,25 (m, 2H), 3,83 4,05 (m, 5H), 5,12 (s, 2H), 7,28 7,38 (m, 5H). 4-[[(3S)-1-terc-Butoxicarbonil-3-piperidil]-[2-oxo-2-[[(3R)-2- oxoespiro[1H-pirrolo[2,3-b]piridina-3,2'-indano]-5'-il]amino]etil]carbamoil]-4- etil-piperidina-1-carboxilato de benzila 11.4b
[00406] A purificação por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 3:1~0:1 forneceu o composto 11.4b como um óleo amarelo. 1H RMN (CDCl3, 400 MH ) 0,94 (t, 3H), 1,40 1,47 (m, 12H), 1,66 1,94 (m, 7H), 2,23 2,36 (m, 2H), 2,50 2,70 (m, 1H), 2,99 3,08 (m, 3H), 3,15 3,25 (m, 2H), 3,58 3,64 (m, 2H), 3,95 4,11 (m, 5H), 5,11 (s, 2H), 6,82 (dd, 1H), 7,09 (dd, 1H), 7,15 7,17 (m, 1H), 7,29 7,37 (m, 5H), 7,44 7,52 (m, 1H), 8,02 (s, 1H), 8,06 (d, 1H), 8,81 (s l, 1H). Intermediário E
(3S)-3-[(4-Etilpiperidina-4-carbonil)-[2-oxo-2-[[(3R)-2- oxoespiro[1H-pirrolo[2,3-b]piridina-3,2'-indano]-5'- il]amino]etil]amino]piperidina-1- carboxilato de terc-butila
[00407] O Intermediário E foi isolado, sem purificação, como um óleo amarelo. Rota Geral C Esquema 12 Exemplo 16 1-Acetil-4-metil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)- piperidin-3-il)piperidina-4-carboxamida 12.2a
[00408] A uma solução de ácido acético (10 mg, 0,16 mmol) em DMF (1 ml) foram adicionados di-isopropiletilamina (52 mg, 0,40 mmol), EDCI (32 mg, 0,16 mmol) e HOAt (22 mg, 0,16 mmol). O Intermediário D (50 mg,
0,81 mmol) foi adicionado, e a mistura agitada a 20 °C por 12 h, bruscamente arrefecida com água (10 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 12.1a foi obtido como um óleo amarelo, que foi dissolvido em diclorometano (1 ml) e ácido trifluoroacético (0,2 ml) adicionado. A mistura foi agitada a 20 °C por 5 min, concentrada a vácuo e o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 15-32%, 7 min). Após a liofilização, o composto 12.2a (24 mg, 45% de rendimento, sal de TFA, 100% de pureza) foi obtido como um sólido branco. 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,41 (s, 3H), 1,53 - 1,58 (m, 2H), 1,78 - 1,90 (m, 1H), 1,97 - 2,15 (m, 6H), 2,17 - 2,30 (m, 2H), 2,91 - 2,97 (m, 1H), 3,10 (dd, 2H), 3,16 - 3,30 (m, 2H), 3,38 (d, 1H), 3,47 - 3,57 (m, 4H), 3,68 - 3,71 (m, 1H), 3,97 - 4,52 (m, 4H), 6,91 (dd, 1H), 7,16 - 7,18 (m, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,40 - 7,43 (m, 1H), 7,57 (s, 1H), 8,07 (dd, 1H). LC-MS Método 4: rt 1,777 min, (559,2 [M+H]+). Exemplo 17 4-Metil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indene- 2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-1-picolinoil-N-((S)-piperidin-3- il)piperidina-4- carboxamida 12.2b
[00409] O composto 12.2b foi preparado de acordo com a Rota Geral C, com o uso do método descrito para o composto 12.2a e começando do Intermediário D (50 mg). O composto 12.1b foi usado diretamente, sem purificação. A purificação final por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 17-34%, 7 min) e a liofilização produziram 12.2b como um sólido branco (23 mg, 34% de rendimento, sal de TFA, 100,0% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,44 (s, 3H), 1,56 1,71 (m, 2H), 1,80 1,91 (m, 1H), 1,96 2,21 (m, 4H), 2,29 2,37 (m, 1H), 2,93 (t, 1H), 3,11 (d, 2H), 3,35 3,60 (m, 8H), 4,00 4,55 (m, 4H), 6,92 (dd, 1H), 7,17 7,19 (m, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,41 (d, 1H), 7,53 7,61 (m, 3H), 7,98 (td, 1H), 8,08 (dd, 1H), 8,60 (d, 1H). LC-MS Método 4: rt 1,860 min, (622,2 [M+H]+). Exemplo 18 4-Metil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno- 2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-1-(2-(piperazin-1-il)acetil)-N-((S)- piperidin-3-il)piperidina-4-carboxamida 12.2c
[00410] O composto 12.2c foi preparado de acordo com a Rota Geral C, com o uso do método descrito para o composto 12.2a e começando do Intermediário D (50 mg). O composto 12.1c foi usado diretamente, sem purificação. A purificação final por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 1-27%, 10 min) e a liofilização produziram 12.2c como um sólido branco (29 mg, 36% de rendimento, sal de tris-TFA, 97,6% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,40 (s, 3H), 1,48 1,64 (m, 2H), 1,82 2,10 (m, 4H), 2,14 2,31 (m, 2H), 2,86 2,98 (m, 1H), 3,07 3,26 (m, 7H), 3,35 3,64 (m, 11H), 3,70 4,21 (m, 5H), 4,33 4,56 (m, 1H), 6,89
6,92 (m, 1H), 7,16 7,25 (m, 2H), 7,35 7,40 (m, 1H), 7,55 7,59 (m, 1H), 8,05 (d, 1H). LC-MS Método 4: rt 1,472 min, (643,3 [M+H]+). Exemplo 19 1-Acetil-4-etil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)- piperidin-3-il)piperidina-4-carboxamida
[00411] O composto do título foi preparado de acordo com a Rota Geral C, com o uso do método descrito para o composto 12.2a, começando do Intermediário E. A purificação final por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Luna C18 250 x 50 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 7 32%, 10 min) e a liofilização produziram o produto como um sólido branco (sal de TFA). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 0,90 0,99 (m, 3H), 1,39 1,57 (m, 2H), 1,69 1,88 (m, 3H), 1,96 2,13 (m, 6H), 2,20 2,40 (m, 2H), 2,89 2,94 (m, 1H), 3,14 3,11 (m, 3H), 3,32 3,35 (m, 5H), 3,51 3,55 (m, 2H), 3,65 3,77 (m, 1H), 3,95 4,60 (m, 3H), 6,89 (dd, 1H), 7,14 (dd, 1H), 7,20 7,27 (m, 1H), 7,35 7,43 (m, 1H), 7,49 7,60 (m, 1H), 8,05 (dd, 1H). LC-MS Método 8: rt 1,955 min, (573,3 [M+H]+). Rota Geral D
Esquema 13 3-(4-Metil-1-(metilcarbamoil)-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)piperidina-4- carboxamido)piperidina-1-carboxilato de (S)-terc-butila 13.1a
[00412] A uma solução do Intermediário D (70 mg, 0,11 mmol) e trietilamina (46 mg, 0,45 mmol) em THF (1,5 ml) foi adicionado trifosgênio (30 mg, 0,10 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 30 min. A 0 °C, metilamina (31 mg, 0,45 mmol, sal HCl) e trietilamina (57 mg, 0,57 mmol) foram adicionados. A mistura foi agitada a 20 °C por 10 min, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (2 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 33 50%, 7 min) para render o composto 13.1a como um sólido branco (35 mg, 41% de rendimento, 89,9% de pureza). Método LC-MS 1: rt 0,801 min, (674,2[M+H]+). Exemplo 20 N1,4-Dimetil-N4-[2-oxo-2-[[(3R)-2-oxoespiro[1H-pirrolo[2,3- b]piridina-3,2'-indano]-5'-il]amino]etil]-N4-[(3S)-3-piperidil]piperidina-1,4- dicarboxamida 13.2a
[00413] A uma solução de composto 13.1a (35 mg, 0,052 mmol) em diclorometano (1 ml) foi adicionado TFA (0,1 ml). A mistura foi agitada a 25 °C por 30 min, concentrada e o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 6-33%, 10 min). A liofilização produziu o composto 13.2a como um sólido branco (13 mg, 43% de rendimento, sal de TFA, 98,6% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,38 (s, 3H), 1,45 1,61 (m, 2H), 1,73 1,91 (m, 1H), 1,95 - 2,51 (m, 5H), 2,70 (s, 3H), 2,86 2,97 (m, 1H), 3,08 (d, 2H), 3,17 - 3,29 (m, 3H), 3,36 - 3,40 (m, 1H), 3,47 3,67 (m, 5H), 4,07 4,43 (m, 3H), 6,90 (t, 1H), 7,16 (d, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 7,55 (s, 1H), 8,05 (d, 1H). LC-MS Método 6: rt 1,457 min, (574,4[M+H]+). Exemplo 21 4-Metil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno- 2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3-il)-1-(pirrolidina-1- carbonil)piperidina-4-carboxamida 13.2b
[00414] O composto 13.2b foi preparado de acordo com a Rota Geral D, com o uso do método descrito para o composto 13.2a e com o uso de pirrolidina como o componente de amina (RR'NH). A purificação final por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 3 39%, 10 min) e a liofilização produziram o composto 13.2b como um sólido branco (23 mg, 56% de rendimento, sal de TFA, 100% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,38 (s, 3H), 1,50 1,66 (m, 2H), 1,76 1,96 (m, 6H), 2,02 2,16 (m, 4H), 2,92 (t, 1H), 3,08 (d, 2H), 3,16 3,25 (m, 3H), 3,35 3,48 (m, 6H) 3,49 3,55 (m, 4H), 4,12 4,41 (m, 3H), 6,87 6,91 (m, 1H), 7,14 (d, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 7,55 (s, 1H), 8,02 8,07 (m, 1H). LC-MS Método 4: rt 2,028 min, (614,2[M+H]+). Rota Geral E Esquema 14 3-(N-(2-etoxi-2-oxoetil)pirrolidina-1-carboxamido)piperidina-1- carboxilato de (S)-terc-butila 14.1a
[00415] A uma solução do composto 7.2 (150 mg, 0,52 mmol) e trietilamina (185 mg, 1,83 mmol) em tetraidrofurano (6 ml) foi adicionada uma solução de trifosgênio (155 mg, 0,52 mmol) em tetraidrofurano (1 ml) a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C por 30 min. Pirrolidina (149 mg, 2,10 mmol), então, trietilamina (159 mg, 1,57 mmol) foram adicionados a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 2 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com ácido clorídrico 1M (20 ml) e salmoura (2 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por coluna de gel de sílica, (éter de petróleo:acetato de etila = 20:1~1:2) para fornecer o composto 14.1a como um óleo incolor (175 mg, 69% de rendimento, 79,1% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,27 (t, 3H), 1,45 (s, 9H), 1,49 1,61 (m, 2H), 1,72 1,75 (m, 1H), 1,81 1,87 (m, 4H), 1,98 (d, 1H), 2,54 (t, 1H), 2,73 (t, 1H), 3,35 3,41 (m, 5H), 3,47 3,51 (m, 1H), 3,80 3,99 (q, 2H), 4,03 4,09 (m, 1H), 4,18 (q, 2H). Ácido (S)-2-(N-(1-(terc-butoxicarbonil)piperidin-3-il)pirrolidina-1- carboxamido)acético 14.2a
[00416] A uma solução do composto 14.1a (175 mg, 0,36 mmol) em metanol (4,5 ml) foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio (58 g, 1,44 mmol) em água (1,5 ml) a 20 °C. A mistura foi agitada por 1 h, derramada em água (20 ml), ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M, e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 14.2a foi obtido como um sólido branco (143 mg, 88% de rendimento, 79,1% de pureza). Método LC- MS 1: rt 0,818 min, (356,2 [M+H]+).
3-(N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indene-2,3'- pirrolo [2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)pirrolidina-1-carboxamido)piperidina-1- carboxilato de (S)-terc-butila 14.3a
[00417] A uma solução do composto 14.2a (80 mg, 0,18 mmol), EDCI (51 mg, 0,27 mmol) e HOAt (36 mg, 0,27 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionado DIEA (69,03 mg, 0,53 mmol) seguido de Intermediário B (45 mg, 0,18 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (20 ml), ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (50 ml) e secas sobre sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 14.3a foi obtido como um sólido branco (100 mg, 70% de rendimento, 73,7% de pureza). Método LC-MS 1 rt 0,829 min, (589,4 [M+H]+). Exemplo 22 N-(2-Oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo [2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3-il)pirrolidina-1- carboxamida 14.4a
[00418] A uma solução do composto 14.3a (50 mg, 0,085 mmol) em DCM (6 ml) foi adicionado brometo de zinco (478 g, 2,12 mmol). A mistura foi agitada por 15 h, derramada em água (20 ml), ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M, e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%: 5 35%, 9 min). Após a liofilização, o composto 14.4a foi obtido como um sólido amarelo (7 mg, 14% de rendimento, sal de TFA, 98,5% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,78 1,94 (m, 6H), 2,03 2,06 (m, 2H), 2,89 (t, 1H), 3,08 (dd, 2H), 3,09 (t, 1H), 3,31 3,33 (m, 1H), 3,37 3,40 (m, 4H), 3,48 3,55 (m, 3H), 3,91 3,97 (m, 1H), 4,11 (s, 2H), 6,90 (dd, 1H), 7,16 (dd, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 7,55 (s, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS Método 4 rt 1,817 min, (489,1 [M+H]+). 4-Acetilpiperazina-1-carboxilato de terc-butila
[00419] A uma solução de piperazina-1-carboxilato de terc- butila (1,00 g, 5,37 mmol) e trietilamina (815 g, 8,05 mmol) em DCM (10 ml) foi adicionado cloreto de acetila (464 mg, 5,91 mmol) por gotejamento a 0 °C. A mistura foi agitada a 0 °C por 1 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com ácido clorídrico 1 M (20 ml), bicarbonato de sódio saturado (20 ml). A fase orgânica resultante foi lavada com salmoura (50 ml) e seca com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto do título foi obtido como um óleo incolor (1,40 g) e usado sem purificação adicional. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,47 (s, 9H), 2,22 (s, 3H), 3,39 3,44 (m, 6H), 3,57 3,60 (m, 2H).
[00420] Sal de cloridrato de 1-acetilpiperazina
4-Acetilpiperazina-1-carboxilato de terc-butila (1,40 g, 6,13 mmol) em HCl/dioxano 4 M (20 ml) foi agitado a 20 °C por 1 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida para render o composto do título como um sólido branco (1,00 g, 99% de rendimento, sal HCl). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 2,16 (s, 3H), 2,22 2,30 (m, 4H), 3,82 3,84 (m, 4H). Exemplo 23 4-Acetil-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno- 2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-piperidin-3-il)piperazina-1- carboxamida 14.4b
[00421] O composto 14.4b foi preparado de acordo com a Rota Geral E, com o uso de 1-acetilpiperazina como RR'NH e os procedimentos detalhados para o composto 14.4a. O produto final foi purificado por HPLC- prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%: 2 32%, 9 min), seguido de liofilização para produzir o composto 14.4b como uma goma amarela (sal de TFA, 96,8% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,81 2,04 (m, 4H), 2,10 (s, 3H), 2,89 (t, 1H), 3,11 (dd, 2H), 3,16 3,26 (m, 4H), 3,33 3,34 (m, 2H), 3,48 3,61 (m, 7H), 3,87 3,93 (m, 1H), 4,13 (s, 2H), 6,89 (dd, 1H), 7,15 (dd, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,38 7,40 (m, 1H), 7,56 (s, 1H), 8,06 (d, 1H). LC-MS (ácido longo método 1): rt 1,795 min, (546,2 [M+H]+).
Esquema 15 (3S)-3-[(2-Etoxi-2-oxo-etil)amino]pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila 15.2
[00422] A uma solução do composto 15.1 (1,00 g, 5,37 mmol) em THF (15 ml) foi adicionado 2-bromoacetato de etila (986 mg, 5,91 mmol) seguido de trietilamina (1,36 g, 13,42 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (60 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (2 x 60 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 20:1~1:1, para fornecer o composto 15.2 como um óleo incolor (1,04 g, 71% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,29 (t, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,72 1,79 (m, 1H), 1,96 2,05 (m, 1H), 3,05 3,20 (m, 1H), 3,28 3,39 (m, 2H), 3,39 3,43 (m, 2H), 3,44 3,56 (m, 2H), 4,19 (q, 2H). (3S)-3-[2,2-Dimetilpropanoil-(2-etoxi-2-oxo- etil)amino]pirrolidina-1-carboxilato de terc-butila 15.3
[00423] A uma solução de composto 15.2 (500 mg, 1,84 mmol) em diclorometano (8 ml) foi adicionado DIEA (711 mg, 5,51 mmol) seguido de cloreto de 2,2-dimetilpropanoíla (266 mg, 2,20 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (50 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 40 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com ácido clorídrico 0,2 M (2 x 40 ml), bicarbonato de sódio saturado (40 ml) e salmoura (2 x 50 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 15.3 foi obtido como uma goma amarela (610 mg, 93% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,29 (t, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,47 (s, 9H), 1,87 2,01 (m, 1H), 2,10 2,19 (m, 1H), 3,15 (dd, 1H), 3,22 3,36 (m, 1H), 3,44 3,71 (m, 2H), 3,72 3,86 (m, 1H), 3,87 4,01 (m, 1H), 4,19 (q, 2H), 4,81 4,93 (m, 1H). Ácido 2-[[(3S)-1-terc-butoxicarbonilpirrolidin-3-il]-(2,2- dimetilpropanoil)amino]acético 15.4
[00424] A uma solução de composto 15.3 (300 mg, 0,84 mmol) em metanol (5 ml) foi adicionada uma solução de hidróxido de lítio hidratado (177 mg, 4,21 mmol) em água (2 ml). A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, diluída em água (30 ml) e extraída com acetato de etila (30 ml). A fase aquosa foi ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M e extraída com acetato de etila (3 x 30 ml). As fases orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura (2 x 40 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 15.4 foi obtido como uma goma amarela (270 mg, 98% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,34 (s, 9H), 1,47 (s, 9H), 1,91 2,04 (m, 1H), 2,11 2,18 (m, 1H), 3,14 3,24 (m, 1H), 3,25 3,36 (m, 1H), 3,48 3,75 (m, 2H), 3,91 (q, 2H), 4,81 4,92 (m, 1H). (3S)-3-[2,2-Dimetilpropanoil-[2-oxo-2-[(2-oxoespiro[1H- pirrolo[2,3-b] piridina-3,2'-indano]-5'-il)amino]etil]amino]pirrolidina-1- carboxilato de terc-butila 15.5
[00425] A uma solução do composto 15.4 (82 mg, 0,25 mmol), EDCI (69 mg, 0,36 mmol) e HOAt (42 mg, 0,31 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionado DIEA (123 mg, 0,96 mmol) seguido de Intermediário A (60 mg, 0,24 mmol) a 20 °C. Então, a mistura foi agitada a 25 °C por 6 h, derramada em água (20 ml) e filtrada. A torta do filtro foi dissolvida em acetato de etila (20 ml) e seca com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 15.5 foi obtido como um sólido amarelo (80 mg, 51% de rendimento). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,34 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 2,06 2,25 (m, 2H), 3,08 (dd, 2H), 3,34 3,41 (m, 2H), 3,47 3,59 (m, 3H), 3,64 (dd, 1H), 3,95 4,08 (m, 2H), 4,92 5,06 (m, 1H), 6,88 (dd, 1H), 7,12 (dd, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,57 (s, 1H), 8,05 (dd, 1H). Exemplo 24 N-(2-Oxo-2-((2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)-N-((S)-pirrolidin-3-il)pivalamida
[00426] A uma solução do composto 15.5 (80 mg, 0,12 mmol) em diclorometano (2 ml) foi adicionado brometo de zinco (412 mg, 1,83 mmol) a 20 °C e agitado por 20 h. A mistura foi dissolvida em metanol (20 ml), derramada em bicarbonato de sódio saturado (20 ml) e extraída com acetato de etila (8 x 40 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (40 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Boston pH- lex 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 18-38%, 8 min) e HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 18-48%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 24 (27 mg, 38% de rendimento, sal de TFA, 99,3% de pureza) foi obtido como um sólido branco. 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,29 (s, 9H), 2,15 2,30 (m, 1H), 2,37 2,51 (m, 1H), 3,03 3,06 (m, 3H), 3,38 3,75 (m, 5H), 3,87 4,72 (m, 3H), 6,87 6,94 (m, 1H), 7,14 7,20 (m, 1H), 7,25 (d,
1H), 7,35 7,42 (m, 1H), 7,59 (s, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS Método 6: rt 1,385 min, (462,1 [M+H]+).
Esquema 16 3-[(2-Etoxi-2-oxo-etil)amino]azepano-1-carboxilato de terc-butila
16.2
[00427] A uma solução de composto 16.1 (200 mg, 0,93 mmol) em THF (2 ml) foram adicionados trietilamina (284 mg, 2,80 mmol) e 2- bromoacetato de etila (172 mg, 1,03 mmol). A mistura foi agitada a 30 °C por 12 h, derramada em água (10 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 30:1~5:1, para render o composto
16.2 como um óleo amarelo (180 mg, 64% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,28 (t, 3H), 1,45 1,47 (m, 9H), 1,51 1,63 (m, 2H), 1,72 1,89 (m, 4H), 2,61 2,91 (m, 2H), 3,11 3,20 (m, 1H), 3,45 3,49 (m, 2H), 3,54 3,80 (m, 2H), 4,20 (q, 2H). 3-[2,2-Dimetilpropanoil-(2-etoxi-2-oxo-etil)amino]azepano-1- carboxilato de terc-butila 16.3
[00428] A uma solução de composto 16.2 (180 mg, 0,60 mmol) em diclorometano (2 ml) foram adicionados dimetilformamida (387 mg, 3,00 mmol) e cloreto de pivaloíla (94 mg, 0,78 mmol). A mistura foi agitada a 25 °C por 12 h, derramada em água (10 ml) e extraída com diclorometano (3 x 20 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (3 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 16.3 foi obtido como um óleo amarelo (220 mg, cru). 3-[2,2-Dimetilpropanoil-(2-etoxi-2-oxo-etil)amino]azepano-1- carboxilato de terc-butila 16.4
[00429] A uma solução de composto 16.3 (220 mg, 0,57 mmol) em metanol (2 ml) foi adicionada a solução de hidróxido de lítio hidratado (120 mg, 2,86 mmol) em água (2 ml). A mistura foi agitada a 25 °C por 2 h, diluída em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 30 ml). As camadas orgânicas foram descartadas. Então, a fase aquosa foi acidificada por ácido clorídrico 1M (5 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 30 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (3 x 30 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 16.4 foi obtido como um óleo amarelo (180 mg, cru). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,34 (s, 9H), 1,47 (s, 9H), 1,58 1,69 (m, 2H), 1,78 1,91 (m, 4H), 3,15 3,35 (m, 2H), 3,41 3,50 (m, 1H), 3,85 3,93 (m, 3H), 4,22 4,32 (m, 1H). 3-(N-(2-oxo-2-((2'-oxo-1,1',2',3-tetra-hidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b] piridin]-5-il)amino)etil)pivalamido)azepano-1-carboxilato de terc-butila 16.5
[00430] A uma solução de composto 16.4 (100 mg, 0,28 mmol) em DMF (2 ml) foram adicionados di-isopropiletilamina (142 mg, 1,40 mmol), EDCI (81 mg, 0,42 mmol) e HOAt (58 mg, 0,42 mmol). Então, o Intermediário A (71 mg, 0,28 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada a
25 °C por 12 h. A reação foi bruscamente arrefecida com água (10 ml), e a mistura extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (3 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por TLC-prep (éter de petróleo: acetato de etila = 0:1) para render o composto
16.5 como um sólido amarelo (102 mg, 61% de rendimento, 99,2% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,39 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,59 1,67 (m, 2H), 1,83 1,97 (m, 4H), 2,99 3,09 (m, 2H), 3,15 3,40 (m, 2H), 3,58 3,66 (m, 3H), 3,87 4,01 (m, 2H), 4,15 4,40 (m, 2H), 6,81 6,84 (m, 1H), 7,05 7,10 (m, 1H), 7,17 7,20 (m, 1H), 7,22 7,25 (m, 1H), 7,46 7,67 (m, 1H), 7,87 7,93 (m, 1H), 8,09 8,13 (m, 1H), 8,91 9,01 (m, 1H). LC-MS Método 7: rt 0,953 min, (590,4 [M+H]+). Exemplo 25 N-(Azepan-3-il)-N-(2-oxo-2-((2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)pivalamida
[00431] A uma solução do composto 16.5 (100 mg, 0,17 mmol) em diclorometano (2 ml) foi adicionado brometo de zinco (573 mg, 2,54 mmol) e a mistura foi agitada a 25 °C por 12 h. A mistura foi dissolvida com metanol (2 ml) e água (10 ml) adicionada. A mistura foi basificada com bicarbonato de sódio saturado (3 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (3 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 23-53%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 25 foi obtido como um sólido branco (30 mg, 30% de rendimento, sal de TFA, 99,7% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,28 (s, 9H), 1,35 1,55 (m, 1H), 1,77 1,87 (m, 1H), 1,90 2,05 (m, 3H), 2,17 2,20 (m, 1H), 2,83 3,00 (m, 1H), 3,11 (d, 2H), 3,33 3,34 (m, 1H), 3,40 3,46 (m, 1H), 3,48 3,55 (m, 4H), 3,75 3,90 (m, 1H), 4,21 (d, 1H), 6,87 6,91 (m, 1H), 7,13 7,20 (m, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,35 7,40 (m, 1H), 7,58 (d, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS rt 2,068 min, (490,3 [M+H]+).
Esquema 17 4-Aminoazepano-1-carboxilato de terc-butila 17.1
[00432] A uma solução do composto 17.1 (500 mg, 2,34 mmol) e hidróxido de amônio aquoso a 25% (2,46 g, 17,58 mmol) em metanol (10 ml) foi adicionado Pd/C a 10% (80 mg). A mistura foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio três vezes. A mistura resultante foi agitada a 20 °C por 12 h sob uma atmosfera de hidrogênio (15 psi). A mistura foi diluída com metanol (30 ml), filtrada, e o filtrado concentrado a vácuo para render o composto 17.2 como um óleo amarelo (480 mg, 95% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,47 (s, 9H), 1,51 1,66 (m, 3H), 1,73 1,95 (m, 3H), 2,87 2,96 (m, 1H), 3,12 3,35 (m, 2H), 3,39 3,44 (m, 1H), 3,49 3,60 (m, 1H). 4-[(2-Etoxi-2-oxo-etil)amino]azepano-1-carboxilato de terc-butila
17.3
[00433] A uma solução de 4-aminoazepano-1-carboxilato de terc-butila 17.2 (250 mg, 1,17 mmol) e trietilamina (295 g, 2,92 mmol) em tetraidrofurano (4 ml) foi adicionado 2-bromoacetato de etila (214 mg, 1,28 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (2 x 20 ml), secas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (éter de petróleo:acetato de etila = 5:1 a 0:1) para produzir o composto 17.3 como um óleo amarelo (210 mg, 59,9% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,29 (t, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,49 1,57 (m, 2H), 1,70 1,95 (m, 4H), 2,57 2,64 (m, 1H), 3,18 3,40 (m, 2H), 3,41 (s, 2H), 3,43 3,57 (m, 2H), 4,20 (q, 2H). 4-[2,2-Dimetilpropanoil-(2-etoxi-2-oxo-etil)amino]azepano-1- carboxilato de terc-butila 17.4
[00434] A uma solução do composto 17.3 (210 mg, 0,70 mmol) e N,N-di-isopropiletilamina (226 ml, 1,75 mmol) em diclorometano (3 ml) foi adicionado cloreto de 2,2-dimetilpropanoíla (101 mg, 0,84 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com ácido clorídrico 0.2M (30 ml) e salmoura (2 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. A filtração e a concentração produziram o composto 17.4 como uma goma amarela (260 mg, 97% de rendimento, 100% de pureza). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,27 1,28(m, 3H), 1,30 (d, 9H), 1,48 (d, 9H), 1,57 1,72 (m, 3H), 1,85 1,92 (m, 1H), 1,98 2,03 (m, 1H), 2,09 2,20 (m, 1H), 3,09 3,19 (m, 1H), 3,38 3,50 (m, 2H), 3,59 3,83 (m, 3H), 4,12 4,21 (m, 3H). Ácido 2-[(1-terc-butoxicarbonilazepan-4-il)-(2,2- dimetilpropanoil)amino]acético 17.5
[00435] A uma solução de 17.4 (260 mg, 0,68 mmol) em metanol (3 ml) foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio (162 mg, 4,06 mmol) em água (1 ml). A mistura foi agitada a 20 °C por 4 h, derramada em água (30 ml) e lavada com acetato de etila (30 ml). A fase aquosa foi acidificada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M e extraída com acetato de etila (3 x 40 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (2 x 40 ml), secas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas a vácuo para produzir o composto 17.5 como uma goma amarela (210 mg, 0,59 mmol, 87% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,31 (d, 9H), 1,48 (s, 9H), 1,66 1,97 (m, 5H), 2,09 2,20 (m, 1H), 3,07 3,15 (m, 1H), 3,40 3,50 (m, 2H), 3,63 3,95 (m, 3H), 4,12 4,24 (m, 1H). 4-(N-(2-oxo-2-((2'-oxo-1,1',2',3-tetra-hidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b] piridin]-5-il)amino)etil)pivalamido)azepano-1-carboxilato de terc-butila 17.6
[00436] A uma solução do composto 17.5 (104 mg, 0,29 mmol), EDCI (80 mg, 0,42 mmol) e HOAt (49 mg, 0,36 mmol) em N,N- dimetilformamida (2 ml) foi adicionada N,N-di-isopropiletilamina (126 mg, 0,98 mmol) e o Intermediário A (70 mg, 0,28 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 3 h, derramada em água (20 ml) e filtrada. O precipitado foi coletado por filtração, dissolvido em acetato de etila (40 ml) e seco com sulfato de sódio anidro. A filtração e a concentração a vácuo produziram o composto 17.6 como um sólido amarelo (140 mg, 77% de rendimento, 90% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,32 (d, 9H), 1,48 (d, 9H), 1,93 1,69 (m, 4H), 2,12 2,04 (m, 1H), 2,28 2,16 (m, 1H),. 3,06 (dd, 2H), 3,20 3,12 (m, 1H), 3,44 3,35 (m, 1H), 3,51 (dd, 2H), 3,75 3,57 (m, 2H), 4,03 3,87 (m, 2H), 4,30 4,17 (m, 1H), 6,88 (dd, 1H), 7,12 (dd, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,40 7,38 (m, 1H), 7,56 (d, 1H), 8,05 (dd, 1H).
[00437] Método LC-MS 1: rt 0,946 min, (612 [M+Na]+). Exemplo 26
N-(Azepan-4-il)-N-(2-oxo-2-((2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)pivalamida
[00438] A uma solução de composto 17.6 (140 mg, 0,21 mmol) em diclorometano (3 ml) foi adicionado brometo de zinco (723 mg, 3,21 mmol). A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, dissolvida em metanol (15 ml), derramada em bicarbonato de sódio saturado (30 ml) e extraída com acetato de etila (8 x 40 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (40 ml), secas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC prep. (coluna: Phenomenex Synergi C18 150 x 25 mm, 10 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,1%), solvente B: MeCN]; B%: 10 40%, 9 min) para produzir o Exemplo 26 como um sólido branco (32 mg, 25% de rendimento, sal de TFA, 98,7% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,32 (s, 9H), 1,99 1,79 (m, 2H), 2,25 2,04 (m, 3H), 2,38 2,26 (m, 1H), 3,08 (dd, 2H), 3,28 3,15 (m, 2H), 3,37 3,34 (m, 1H), 3,46 3,39 (m, 1H), 3,52 (dd, 2H), 4,01 (s l, 2H), 4,44 (s l, 1H), 6,91 (dd, 1H), 7,17 (d, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,38 (t, 1H), 7,57 (d, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS Método 1: rt 0,717 min.
[00439] Nota para os Exemplos 27, 28 e 29: A estereoquímica relativa é indicada por ligações em negrito e tracejadas, e a estereoquímica absoluta é indicada por ligações em negrito triangulares e tracejadas. Dessa forma, a estereoquímica ao redor dos anéis piperidina é relativa e a estereoquímica derivada do Intermediário B é absoluta. Embora um isômero seja ilustrado, os Exemplos 27, 28 e 29 são misturas de diastereômeros. A estereoquímica relativa é denotada nos nomes de composto por S* e R*.
Esquema 18 3-((2-Metoxi-2-oxoetil)amino)-5-metilpiperidina-1-carboxilato de (3S*,5S*)-terc-butila 18.2
[00440] A uma solução do composto 18.1 (200 mg, 0,94 mmol) em metanol (5 ml) foi adicionado Pd/C a 10% (10 mg), acetato de sódio (192 mg, 2,34 mmol) e 2-aminoacetato de metila (235 mg, 1,88 mmol, sal HCl). A mistura foi desgaseificada e purgada com hidrogênio três vezes e agitada a 25 °C por 16 h sob um balão de hidrogênio. O catalisador foi removido por filtração e o filtrado foi derramado em água (20 ml). Ácido clorídrico 1 M (10 ml) foi adicionado e a mistura aquosa lavada com acetato de etila (2 x 20 ml). A fase aquosa foi ajustada para pH 8 com carbonato de sódio e extraída com acetato de etila (2 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (20 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, apenas o composto de isômero rac-trans 18.2 foi obtido como um óleo amarelo (150 mg, 56% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 0,89 (d, 3H), 1,30 1,38 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,71 1,76 (m, 1H), 1,92 1,98 (m, 1H), 2,25 2,50 (m, 1H), 2,80 (s l, 1H), 3,00 3,23 (m, 1H), 3,39 3,60 (m, 3H), 3,73 (s, 3H), 3,80 3,93 (m, 1H). 3-(N-(2-Metoxi-2-oxoetil)pivalamido)-5-metilpiperidina-1- carboxilato de (3S*,5S*)-terc-butila 18.3
[00441] A uma solução de composto 18.2 (170 mg, 0,59 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado DIEA (192 mg, 1,48 mmol) de cloreto de pivaloíla (143 mg, 1,19 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada a 25 °C por 1 h, bruscamente arrefecida pela adição de água (50 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 30 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 18.3 foi obtido como um óleo amarelo (218 mg, cru). Ácido 2-(N-((3S*,5S*)-1-(terc-butoxicarbonil)-5-metilpiperidin-3- il)pivalamido)acético 18.4
[00442] A uma solução de composto 18.3 (210 mg, 0,57 mmol) em metanol (6 ml) e água (2 ml) foi adicionado hidróxido de sódio (45 mg, 1,13 mmol). A mistura foi agitada a 25 °C por 16 h, derramada em água (30 ml) e lavada com diclorometano (20 ml). A fase aquosa foi acidificada com ácido clorídrico 1M (10 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 30 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (20 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 18.4 foi obtido como um óleo amarelo (200 mg, 99% de rendimento. 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,08 (dd, 3H), 1,34 (s, 9H), 1,45 (m, 10H), 1,78 1,86 (m, 2H), 2,13 2,18 (m, 1H), 2,67 2,87 (m, 2H), 3,81 3,85 (m, 1H), 3,93 3,99 (m, 1H), 4,16 4,32 (m, 2H). 3-Metil-5-(N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5- il)amino)etil)pivalamido)piperidina-1-carboxilato de (3S*,5S*)-terc-butila 18.5
[00443] A uma solução do composto 18.4 (180 mg, 0,50 mmol) em DMF (5 ml) foram adicionados DIEA (163 mg, 1,26 mmol), HOAt (89 mg, 0,66 mmol), EDCI (126 mg, 0,66 mmol) e o Intermediário B (127 mg, 0,50 mmol). A mistura foi agitada a 25 °C por 1 h. A mistura de reação foi bruscamente arrefecida pela adição de água (50 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 30 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 10:1~1:1 para fornecer o composto 18.5 como um sólido branco (170 mg, 54% de rendimento, 95,1% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,09 (d, 3H), 1,35 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,75 1,88 (m, 1H), 1,95 2,05 (m, 1H), 2,09 2,18 (m, 1H), 2,86 2,96 (m, 2H), 3,08 (dd, 2H), 3,52 (dd, 2H), 3,79 3,87 (m, 1H), 4,01 (s l, 2H), 4,28 4,41 (m, 2H), 6,88 (dd, 1H), 7,13 (dd, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,36 7,38 (m, 1H), 7,56 (s, 1H), 8,05 (dd, 1H). LCMS Método 1: rt 0,975 min, (590,2 [M+H]+). Exemplo 27 N-((3S*,5S*)-5-Metilpiperidin-3-il)-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo- 1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5- il)amino)etil)pivalamida
[00444] A uma solução do composto 18.5 (80 mg, 0,14 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado cloreto de tionila (458 mg, 2,03 mmol). A mistura foi agitada a 25 °C por 16 h. reação foi bruscamente arrefecida pela adição de água (50 ml) e a mistura ajustada para pH 10 com pó de carbonato de sódio. A suspensão foi extraída com acetato de etila (2 x 30 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%:
10-40%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 27 foi obtido como um sólido branco (24 mg, 29% de rendimento, sal de TFA, 97,1% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,05 1,26 (m, 3H), 1,33 (s, 9H), 1,57 1,94 (m, 1H), 2,05 2,22 (m, 1H), 2,26 2,64 (m, 1H), 3,06 3,11 (m, 2H), 3,12 3,30 (m, 2H), 3,42 3,60 (m, 3H), 3,89 4,84 (m, 4H), 6,89 (dd, 1H), 7,15 (dd, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,35 7,43 (m, 1H), 7,57 (d, 1H), 8,06 (dd, 1H). LCMS Método 4: rt 1,964 min, (490,2 [M+H]+). Exemplo 28 N-((3S*,6S*)-6-Metilpiperidin-3-il)-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo- 1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5- il)amino)etil)pivalamida
[00445] O alvo foi preparado com o uso dos procedimentos descritos para o Exemplo 27, começando de carboxilato de 2-metil-2- propanil 2-metil-5-oxo-1-piperidina. A purificação final por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%: 12-42%, 9 min) forneceu o Exemplo 28 como um sólido branco (40 mg, 39% de rendimento, sal de TFA, 98,8% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,32 1,34 (m, 12H), 1,59 1,63 (m, 1H), 2,02 2,12 (m, 3H), 3,10 (dd, 2H), 3,18 3,22 (m, 1H), 3,48 3,57 (m, 3H), 3,96 4,21 (m, 2H), 4,33 4,77 (m, 2H), 6,89 (dd, 1H), 7,15 (d, 1H), 7,23 (d, 1H), 7,39 (dd, 1H), 7,59 (d, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS Método 4: rt 1,87 min, (490,2 [M+H]+).
Esquema 19 5-((2-Etoxi-2-oxoetil)amino)-2-metilpiperidina-1-carboxilato de (2R*,5S*)-benzila 19.2
[00446] A uma solução de composto 19.1 (300 mg, 1,21 mmol) em tetraidrofurano (6 ml) foi adicionado trietilamina (183 mg, 1,81 mmol) e 2- bromoacetato de etila (222 mg, 1,33 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 15 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 1:0 a 1:1 para render o composto 19.2 como um óleo incolor (301 mg, 74% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,15 (d, 3H), 1,27 (t, 3H), 1,40 1,57 (m, 2H), 1,66 1,85 (m, 2H), 2,44 2,67 (m, 2H), 2,96 3,23 (m, 1H), 3,45 (s, 2H), 4,06 4,24 (m, 3H), 4,38 4,54 (m, 1H), 5,14 (s, 2H), 7,28 7,41 (m, 5H). 5-(N-(2-etoxi-2-oxoetil)pivalamido)-2-metilpiperidina-1- carboxilato de (2R*,5S*)-benzila 19.3
[00447] A uma solução do composto 19.2 (300 mg, 0,90 mmol) e trietilamina (272 ml, 2,69 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado cloreto de pivaloíla (195 mg, 1,61 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 2 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 1:0 a 1:1, para render o composto
19.3 como um óleo incolor (240 mg, 64% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,16 1,21 (m, 3H), 1,24 1,33 (m, 12H), 1,64 1,88 (m, 4H), 2,81 2,99 (m, 1H), 3,74 4,08 (m, 3H), 4,14 4,26 (m, 3H), 4,39 4,60 (m, 1H), 5,00 5,24 (m, 2H), 7,29 7,41 (m, 5H). Ácido 2-(N-((3S*,6R*)-1-((benziloxi)carbonil)-6-metilpiperidin-3- il)pivalamido)acético 19.4
[00448] A uma solução do composto 19.3 (210 mg, 0,50 mmol) em metanol (4,5 ml) foi adicionada uma solução de hidróxido de sódio (110 g, 2,75 mmol) em água (1,5 ml) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 1 h, derramada em água (20 ml), o pH ajustado para pH 4 com ácido clorídrico e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (20 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 19.4 foi obtido como um sólido branco (140 mg, 71% de rendimento). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,20 1,33 (m, 12H), 1,65 2,03 (m, 4H), 2,96 3,16 (m, 1H), 3,90 4,22 (m, 4H), 4,42 4,50 (m, 1H), 5,05 5,20 (m, 2H), 7,21 7,42 (m, 5H). 2-Metil-5-(N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3- tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5- il)amino)etil)pivalamido)piperidina-1-carboxilato de (2R*,5S*)-benzila 19.5
[00449] A uma solução do composto 19.4 (70 mg, 0,18 mmol), EDCI (52 mg, 0,27 mmol) e HOAt (37 mg, 0,27 mmol) em DMF (2 ml) foi adicionada N,N-di-isopropiletilamina (93 mg, 0,72 mmol) seguido de Intermediário B (45 mg, 0,17 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com ácido clorídrico 0,1 M (20 ml), salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 1:0 a 1:5 para render o composto 19.5 como um sólido branco (74 mg, 66% de rendimento, 99,7% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,22 1,34 (m, 12H), 1,67 1,89 (m, 3H), 2,01 2,08 (m, 1H), 3,01 3,19 (m, 3H), 3,52 (dd, 2H), 3,97 4,11 (m, 3H), 4,18 4,27 (m, 1H), 4,40 4,50 (m, 1H), 5,00 5,23 (m, 2H), 6,88 (dd, 1H), 7,12 (d, 1H), 7,22 (d, 1H), 7,27 7,40 (m, 6H), 7,56 (s, 1H), 8,05 (dd, 1H). LC-MS Método 1: rt 0,929 min, (624,4 [M+H]+). Exemplo 29 N-((3S*,6R*)-6-Metilpiperidin-3-il)-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo- 1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5- il)amino)etil)pivalamida
[00450] A uma solução de composto 19.5 (74 mg, 0,12 mmol) e ácido trifluoroacético (14 mg, 0,12 mmol) em metanol (3 ml) foi adicionado Pd/C a 10% (20 mg). A mistura foi desgaseificada sob vácuo e purgada com hidrogênio três vezes. A mistura resultante foi agitada a 20 °C por 3 h sob um balão de hidrogênio (15 psi). O catalisador foi removido por filtração e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por HPLC prep. (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%: 10-40%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 29 foi obtido como um sólido branco (23 mg, 33% de rendimento, sal de TFA, 99,1% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,32 (s, 9H), 1,42 (d, 3H), 1,82 2,24 (m, 4H), 3,09 (dd, 2H), 3,35 3,42 (m, 1H), 3,46 3,62 (m, 4H), 3,90 4,58 (m, 3H), 6,90 (dd, 1H), 7,16 (dd, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,38 (d, 1H), 7,59 (s, 1H), 8,06 (dd, 1H). LC-MS Método 4: rt 1,996 min, (490,2 [M+H]+).
Esquema 20 6-Oxo-2-azabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxilato de terc-butila
20.2
[00451] A uma solução do composto 20.1 (200 mg, 0,94 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado periodinano de Dess Martin (477 mg, 1,13 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 1 h, derramada em sulfito de sódio aquoso saturado (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com bicarbonato de sódio aquoso saturado (20 ml) e salmoura (2 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 1:0 a 10:1, para render o composto 20.2 como um sólido branco amarelo (129 mg, 65% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,46 (s, 9H), 1,72 (d, 1H), 1,85 1,95 (m, 1H), 2,01 (dd, 1H), 2,18 2,27 (m, 1H), 2,84 (s, 1H), 3,06 3,26 (m, 1H), 3,43 3,49 (m, 1H), 4,04 4,34 (m, 1H).
6-((2-Metoxi-2-oxoetil)amino)-2-azabiciclo[2.2.1]heptano-2- carboxilato de terc-butila 20.3
[00452] A uma solução do composto 20.2 (129 mg, 0,61 mmol) e acetato de sódio (110 mg, 1,34 mmol) em metanol (3 ml) foi adicionado Pd/C a 10% (20 mg) e cloridrato de éster metílico de glicina (109 mg, 1,22 mmol) a 20 °C. A mistura foi desgaseificada e purgada com hidrogênio três vezes e agitada a 25 °C por 16 h sob um balão de hidrogênio (15 psi). O catalisador foi removido por filtração e o filtrado foi derramado em água (20 ml). A mistura foi ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M e extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). A fase aquosa foi ajustada para pH 10 com carbonato de sódio aquoso saturado. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (2 x 50 ml). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 20.3 foi obtido como um sólido branco (155 mg, 89% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 0,91 (dt, 1H), 1,11 1,53 (m, 10H), 1,62 1,71 (m, 1H), 2,04 2,14 (m, 1H), 2,40 2,51 (m, 1H), 2,99 (dd, 1H), 3,08 3,21 (m, 1H), 3,25 3,45 (m, 2H), 3,53 3,78 (m, 4H), 4,20 & 4,30 (s, 1H). 6-(N-(2-metoxi-2-oxoetil)pivalamido)-2- azabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxilato de terc-butila 20.4
[00453] A uma solução do composto 20.3 (155 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (165 ml, 1,64 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado cloreto de pivaloíla (13 mg, 1,09 mmol) a 0 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 50 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com ácido clorídrico 1M (20 ml) e salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 1:0 a 5:1 para render o composto 20.4 como um óleo amarelo (179 mg, 89% de rendimento). 1H
RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,28 1,33 (m, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,52 1,61 (m, 3H), 2,07 2,18 (m, 1H), 2,52 2,66 (m, 1H), 2,93 3,06 (m, 1H), 3,30 3,65 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 4,20 & 4,30 (s, 1H), 4,60 (s, 2H). Ácido 2-(N-(2-(terc-butoxicarbonil)-2-azabiciclo[2.2.1]heptan-6- il)pivalamido)acético 20.5
[00454] A uma solução do composto 20.4 (179 mg, 0,49 mmol) em metanol (4,5 ml) foi adicionado hidróxido de sódio (78 mg, 1,94 mmol) em água (1,5 ml) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 15 h, derramada em água (20 ml) e ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio anidro. Após a filtração e a concentração, o composto 20.5 foi isolado como um óleo incolor (145 mg, 84% de rendimento. 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,26 1,34 (m, 9H), 1,40 1,49 (m, 9H), 1,50 1,66 (m, 2H), 1,68 1,79 (m, 1H), 2,05 2,19 (m, 1H), 2,61 (s, 1H), 2,98 3,17 (m, 1H), 3,34 3,43 (m, 1H), 4,01 4,20 (m, 1H), 4,22 4,38 (m, 1H), 4,60 4,78 (m, 2H). 6-(N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)pivalamido)-2-azabiciclo[2.2.1]heptano-2- carboxilato de terc-butila 20.6
[00455] A uma solução de 20.5 (145 mg, 0,41 mmol), EDCI (117,64 mg, 0,61 mmol) e HOAt (84 mg, 0,61 mmol) em DMF (4 ml) foi adicionado DIEA (211 mg, 1,64 mmol) e Intermediário B (113 mg, 0,45 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 4 h, derramada em água (20 ml) e extraída com acetato de etila (3 x 20 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com ácido clorídrico 1M (20 ml) e salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto
20.6 foi obtido como um sólido branco (210 mg, 87% de rendimento, 94,4% de pureza). Método LC-MS 1: rt 0,908 min, (588,3 [M+H]+). Exemplo 30
N-(2-Azabiciclo[2.2.1]heptan-6-il)-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo- 1,1',2',3-tetraidroespiro[indene-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5- il)amino)etil)pivalamida
[00456] A uma solução do composto 20.6 (100 mg, 0,17 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado brometo de zinco (958 mg, 4,25 mmol) a 20 °C. A mistura foi agitada a 20 °C por 12 h. A mistura foi agitada a 20 oC por 12 h e os voláteis removidos a vácuo. O resíduo foi dissolvido em metanol (10 ml) e derramado em água (10 ml). A suspensão foi ajustada para pH 10 com carbonato de sódio aquoso saturado e extraída com acetato de etila (5 x 50 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, secas com sulfato de sódio anidro, filtradas e concentradas sob vácuo. O resíduo foi purificado por HPLC prep. (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%: 12-42%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 30 foi obtido como um sólido branco-sujo (30 mg, 28% de rendimento, sal de TFA, 96,3% de pureza). 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,28 1,34 (m, 9H), 1,66 1,80 (m, 2H), 1,95 2,02 (m, 1H), 2,10 2,23 (m, 1H), 2,73 (s, 1H), 3,07 3,20 (m, 3H), 3,31 3,34 (m, 1H), 3,52 (dd, 2H), 4,03 4,11 (m, 1H), 4,25 4,88 (m, 2H), 4,65 & 4,62 (s, 1H), 6,91 (dd, 1H), 7,17 (d, 1H), 7,28 (d, 1H), 7,42 (t, 1H), 7,62 (d, 1H), 8,07 (dd, 1H). LC-MS Método 4: rt 1,988 min, (488,2 [M+H]+).
Esquema 21 2-((2-Etoxi-2-oxoetil)amino)-8-azabiciclo[3.2.1]octano-8- carboxilato de terc-butila 21.2
[00457] A uma solução de composto 21.1 (150 mg, 0,66 mmol) em tetraidrofurano (3 ml) foram adicionados trietilamina (80 mg, 0,80 mmol) e 2-bromoacetato de etila (122 mg, 0,73 mmol). A mistura foi agitada a 25 °C por 16 h, derramada em água (10 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 10 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (20 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 21.2 foi obtido como um óleo amarelo (188 mg, cru). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,28 (t, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,65 2,05 (m, 8H), 3,43 (s, 2H), 3,98 4,33 (m, 5H). 2-(N-(2-etoxi-2-oxoetil)pivalamido)-8-azabiciclo[3.2.1]octano-8- carboxilato de terc-butila 21.3
[00458] A uma solução de composto 21.2 (188 mg, 0,60 mmol) em diclorometano (3 ml) foram adicionados DIEA (101 mg, 0,78 mmol) e cloreto de pivaloíla (87 mg, 0,72 mmol). A mistura foi agitada a 25 °C por 1 h, derramada em água (10 ml) e extraída com acetato de etila (2 x 20 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (50 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto
21.3 foi obtido como um óleo amarelo (207 mg, cru). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,25 (t, 3H), 1,35 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,83 1,98 (m, 8H), 3,87 (d, 1H), 4,16 4,23 (m, 3H), 4,35 4,40 (m, 3H). Ácido 2-(N-(8-(terc-butoxicarbonil)-8-azabiciclo[3.2.1]octan-2- il)pivalamido)acético 21.4
[00459] A uma solução de composto 21.3 (200 mg, 0,50 mmol) em metanol (4 ml) e água (2 ml) foi adicionado hidróxido de sódio (81 mg, 2,02 mmol). A mistura foi agitada a 20 °C por 15 h, derramada em água (10 ml), ajustada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M e extraída com acetato de etila (3 x 10 ml) As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (10 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o composto 21.4 foi obtido como um óleo amarelo (99 mg, cru). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,36 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,82 2,01 (m, 8H), 3,95 4,53 (m, 5H). 2-(N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo-1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'- pirrolo[2,3-b]piridin]-5-il)amino)etil)pivalamido)-8-azabiciclo[3.2.1]octano-8- carboxilato de terc-butila 21.5
[00460] A uma solução do composto 21.4 (80 mg, 0,22 mmol) em DMF (2 ml) foram adicionados DIEA (70 mg, 0,54 mmol), EDCI (50 mg, 0,26 mmol), HOAt (35 mg, 0,26 mmol) e o Intermediário B (56 mg, 0,22 mmol). A mistura foi agitada a 25 °C por 1 h, derramada em água (10 ml), acidificada para pH 4 com ácido clorídrico 1 M e extraída com acetato de etila (3 x 10 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lavadas com salmoura (3 x 20 ml) e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica, eluindo com éter de petróleo:acetato de etila = 10:1~5:1, para produzir o composto
21.5 como um sólido amarelo (86 mg, 66% de rendimento). 1H RMN (CDCl3, 400 MHz) 1,40 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 1,68 2,05 (m, 8H), 3,00 3,07 (m, 2H), 3,59 3,69 (m, 2H), 4,13 4,53 (m, 5H), 6,80 6,84 (m, 1H), 7,05
7,10 (m, 1H), 7,16 7,24 (m, 2H), 7,41 7,65 (m, 1H), 8,11 (d, 1H), 8,46 (s l, 1H). Exemplos 31A e 31B N-(8-Azabiciclo[3.2.1]octan-2-il)-N-(2-oxo-2-(((R)-2'-oxo- 1,1',2',3-tetraidroespiro[indeno-2,3'-pirrolo[2,3-b]piridin]-5- il)amino)etil)pivalamida
[00461] A uma solução do composto 21.5 (106 mg, 0,18 mmol) em diclorometano (5 ml) foi adicionado cloreto de tionila (595 mg, 2,64 mmol). A mistura foi agitada a 25 °C por 12 h, derramada em salmoura (10 ml), ajustada para pH 10 com carbonato de sódio aquoso saturado e extraída com acetato de etila/metanol a 5:1 (6 x 20 ml). As camadas orgânicas foram combinadas e secas com sulfato de sódio. Após a filtração e a concentração, o resíduo foi purificado por HPLC-prep (coluna: Luna C18 150 x 25 mm, 5 µm; fase móvel: [solvente A: água (TFA a 0,075%), solvente B: MeCN]; B%: 10-40%, 9 min). Após a liofilização, o Exemplo 31A (26 mg, 24% de rendimento, sal de TFA, 97,2% de pureza) o primeiro pico (diastereoisômero), tempo de retenção de LCMS mais curto e o Exemplo 31B (12 mg, 14% de rendimento, sal de TFA, 98,5% de pureza) o segundo pico (diastereoisômero), tempo de retenção de LCMS mais longo foram obtidos como sólidos brancos. Exemplo 31A 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,32 (s, 9H), 1,83 2,15 (m, 8H), 3,09 (dd, 2H), 3,52 (dd, 2H), 4,03 (d, 1H), 4,07 4,17 (m, 1H), 4,39 4,42 (m ,1H), 4,59 (d, 1H), 4,72 4,81 (m, 1H), 6,89 (dd, 1H), 7,16 (d, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,36 (t, 1H), 7,56 (d, 1H), 8,06 (dd, 1H). LCMS (Método 6): rt 1,588 min, (502,3 [M+H]+).
[00462] Exemplo 31B 1H RMN (CD3OD, 400 MHz) 1,31 (s, 9H), 1,60 1,64 (m, 1H), 1,90 2,26 (m, 7H), 3,14 (dd, 2H), 3,53 (dd, 2H), 3,64 3,67 (m, 1H), 4,02 4,09 (m, 1H), 4,27 4,37 (m, 1H), 4,46 (d, 1H), 4,62 (d, 1H), 6,89 (dd, 1H), 7,17 (dd, 1H), 7,28 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 7,62 (s, 1H), 8,06 (dd, 1H). LCMS (Método 6): rt 1,671 min, (502,3 [M+H]+). Ensaios Biológicos
[00463] Os seguintes ensaios podem ser usados para medir os efeitos dos compostos da presente invenção. cAMP / Ensaios de competição Agonista-Antagonista em linhagens celulares
[00464] Os compostos foram avaliados quanto à sua capacidade de inibir elevações induzidas por ligante de cAMP, usando o ensaio de cAMP Perkin Elmer LANCE usando células comercialmente disponíveis que expressam um receptor específico de interesse usando o seguinte procedimento geral: Preparação do composto Os compostos foram preparados em sulfóxido de dimetila (DMSO - 99,9% puro) (Sigma Aldrich, Cat #: D4540) adicionados aos estoques de pó para produzir uma solução 20 mM (DMSO a 100%) que foi sonicada a 37 oC por 10 minutos até dissolver completamente os compostos. Os estoques 20 mM foram diluídos adicionalmente em DMSO para produzir uma solução 2 mM que foi sonicada a 37 oC por 10 minutos. Os estoques 2 mM foram dissolvidos em tampão de ensaio/estimulação para produzir uma ol o de 400 M q e foi onicada a 37 oC por 10 minutos para todos os ensaios cAMP. Todos os estoques foram armazenados a -20 oC. Então, uma diluição serial (Fator de diluição: 10) foi realizada para obter as concentrações experimentais desejadas. Protocolo de ensaio
Ensaios de competição foram realizados de acordo com as instruções do fabricante usando o kit de ensaio cAMP LANCE® TR-FRET (Perkin Elmer, Ca #: AD0264). A dil i e eriai (3 l/po o) da mol c la foram plaqueadas em uma OptiPlate de 384 poços (Perkin Elmer, Cat #: 6007299) em duplicata.
Os controles adequados (estimulação a 100%: For colina e e im la o a 0%: Con role de e c lo) (6 l/po o) foram incluídos em cada placa para normalização de dados.
Após a adição de compo o, 6 l de c lulas que superexpressam o receptor acoplado à proteína G/solução de anticorpo Alexa Fluor (diluição a 1:100) foram adicionados em cada poço a uma densidade desejada de 2500 células/poço.
As linhagens celulares de superexpressão foram adquiridas junto à DiscoveRx, Birmingham, UK.
Após girar a placa a 1000 rpm por 1 minuto e turbilhonar brevemente, as células foram pré-incubadas com os compostos por 30 min o empera ra ambien e (cober o ). En o, 3 l do ligan e peptídico equivalente (dose de EC 50) foram adicionados a todos os poços, exceto o veículo e controles de forscolina.
A placa foi então girada para baixo a 1000 rpm durante 1 minuto e, uma vez terminada, foi agitada submetida a vórtice e coberta.
As células foram estimuladas na presença dos ligantes por 15 min o empera ra ambien e.
Ap a e im la o, 12 l de mi ra de detecção (Quelato de Európio, estreptavidina/solução traçadora de cAMP biotinilada) foram adicionados a todos os poços e incubados por 60 minutos à temperatura ambiente.
A placa foi, então, lida no leitor de placa Enspire multimode Plate (Perkin Elmer), em; uma excitação de 320/340nm e uma emissão de 615/665nm foram registradas.
Ensaio/Tampão de Estimulação (30 ml) - pH 7,4 28 ml de solução salina balanceada de Hank (+MgCl2 , +CaCl2) (Thermo Fisher Cat #:14170112) 150 µl de HEPES (1M) (Thermo Fisher Cat #:15630080)
400 µl de Estabilizante (DTPA) BSA Purificado (7,5%) (Perkin Elmer, Cat #: CR84-100) 60 µl de IBMX (250 mM) (Sigma Aldrich, Cat #: I5879) cAMP específico/ Ensaios de competição de Agonista- Antagonista
[00465] Os seguintes ensaios específicos foram realizados usando o procedimento acima Inibição de Receptor de AM2
[00466] A capacidade de um composto para inibir a ativação de cAMP induzida por AM em células que expressam receptor de AM2 (células 1321N1 transfectadas com CALCRL + RAMP3, proveniente do número de catálogo DiscoverX 95-0169C6) foi avaliada usando o protocolo acima.
[00467] A atividade de compostos nesse ensaio foi apresentada na Tabela 4. Inibição de Receptor de AM1
[00468] A capacidade de um composto para inibir a ativação induzida por AM de células que expressam receptor de AM 1 (células CHO- K1 transfectadas com CALCRL + RAMP2, proveniente do número de catálogo DiscoverX 93-0270C2) foi avaliada usando o protocolo geral acima.
[00469] Os compostos testados nesse ensaio geralmente exibiram uma pIC50 na faixa de 5 a 5,7. Inibição de Receptor de AMY3
[00470] A capacidade de um composto para inibir a ativação induzida por AMY de células que expressam AMY 3R (células 1321N1 transfectadas com CALCR + RAMP-3 proveniente do número de catálogo DiscoverX 95-0166C6) foi avaliada usando o protocolo geral acima.
[00471] Os compostos testados nesse ensaio geralmente exibiram uma pIC50 na faixa de 3,5 a 6,6. Ensaios de viabilidade celular
[00472] Ensaios de viabilidade celular foram realizados de acordo com as instruções do fabricante usando o kit RealTime-Glo MT Cell Viability Assay (Promega, Cat #: G9712). Esses ensaios demonstraram a capacidade dos compostos de teste (3 µM) para inibir a sobrevivência e o crescimento celular entre 40% e 70%.
[00473] Todas as linhagens celulares foram adquiridas junto à ATCC Virginia, EUA (Tabela 1). As células foram inoculadas a uma densidade desejada em meio de crescimento completo em placas brancas de 96 poços de fundo transparente (Corning, Cat #: 3610). As placas foram incubadas por 15 min à temperatura ambiente (para garantir a decantação uniforme das células) antes de serem incubadas de um dia para o outro a 37 °C em CO2 a 5%. No dia seguinte, os reagentes do kit de ensaio de viabilidade (enzima e substrato) foram equilibrados em banho-maria a 37 °C em conjunto com o meio de crescimento subideal (tampão de ensaio) por 10- 15 min. Uma solução de reagente foi, então, produzida contendo 1:1000 de cada reagente no meio de crescimento subideal de cada linhagem celular (turbilhonar bem antes do uso). O meio de crescimento completo foi, então, removido dos poços e substituído por 100 µl da solução reagente. As placas foram, então, incubadas a 37 °C em CO2 a 5% por pelo menos 1 hora antes de ler a linha de base não tratada. Os reagentes foram substituídos a cada 3 dias, os poços foram lavados uma vez com PBS e reagentes frescos foram adicionados como acima para maior duração dos tratamentos. Após a leitura da linha de base, os poços foram tratados com a concentração adequada de moléculas de teste e as placas foram centrifugadas a 110 x g por 1 min para garantir poços com distribuição uniforme de composto e, então, incubadas a 37 °C em CO2 a 5%. As placas foram tratadas uma vez ao dia (por 9 dias) após medições de luminescência serem realizadas usando o leitor de placa Enspire multimode (Perkin Elmer).
Tabela 1: Linhagens celulares e meio de crescimento completo correspondente, meio subideal e densidade de inoculação Linhagem Meio de Crescimento Meio Subideal Densidade de celular Completo Inoculação (por poço) MDA-MB- RPMI + FBS a 10% RPMI + FBS a 1% 2,000 231 (Sigma) (Sigma) 178-2 BMA DMEM + FBS a 10% DMEM + FBS a 2% 2,000 (Gibco) + (Gibco) + HEPES 0,01 M HEPES 0,01 M ASPC-1 RPMI + FBS a 15% RPMI + FBS a 5% 2,000 (Gibco) (Gibco) BxPC-3 RPMI + FBS a 10% RPMI + FBS a 5% 2,000 (Gibco) (Gibco) Capan-2 McCoy's + FBS a 10% McCoy's + FBS a 2,000 (Sigma) 5% (Sigma) CFPAC-1 DMEM + FBS a 10% DMEM + FBS a 5% 2,000 (Gibco) (Gibco) HPAF-II RPMI + FBS a 10% RPMI + FBS a 5% 2,000 (Gibco) (Gibco) Panc10.05 RPMI + FBS a 15% RPMI + FBS a 5% 2,000 (Gibco) (Gibco) SW1990 DMEM + FBS a 10% DMEM + FBS a 1% 2,000 (Gibco) (Gibco) Efeitos in vivo: Modelo de Camundongo de Xenoenxerto
[00474] A eficácia in vivo de um composto pode ser avaliada com o uso do seguinte modelo de camundongo de xenoenxerto Inoculação de Tumor
[00475] Todas as linhagens celulares usadas nos experimentos in vivo foram adquiridas junto à ATCC Virginia, EUA (Tabela 2). As células foram cultivadas em meio de crescimento completo em T500 TripleFlasks (Thermo Fisher, Cat #: 132913). Quando 80-90% de confluência foi alcançada, as células foram separadas dos frascos usando tampão de dissociação TrypLE Express Enzyme (Thermo Fisher, Cat #: 12605). As células foram contadas usando Countess II Automated Cell Counter e, então, foram centrifugadas em 110 x g por 5 min.
O pélete foi ressuspenso no volume adequado de PBS gelado (dependendo do número de células). Para garantir a inoculação do tumor, as células (500 µl) foram misturadas com 500 µl de matrigel gelado (Corning, Cat #: 354234) usando pontas de pipeta resfriadas (pipetar lentamente para garantir a mistura uniforme e impedir a formação de bolhas de ar no matrigel). Matrigel/suspensão de células e seringas foram mantidas no gelo antes da injeção em camundongos. 100 µl de suspensão de células (5x106 células em PBS a 50% + Matrigel 50%) foram injetados por via subcutânea em camundongos nus Balb/c fêmeas de 27 semanas de idade para cada experimento (10 grupos de tratamento e 10 grupos de controle de veículo). Tabela 2: Linhagens celulares e meio de crescimento completo correspondente Linhagem celular Meio de Crescimento Completo MDA-MB-231 RPMI + FBS a 10% (Sigma) Capan-2 McCoy's + FBS a 10% (Sigma) CFPAC-1 DMEM + FBS a 10% (Gibco) HPAF-II RPMI + FBS a 10% (Gibco) Panc10.05 RPMI + FBS a 15% (Gibco) Preparação do Composto
[00476] Compostos em pó foram diluídos em DMSO a 100% (Sigma Aldrich, Cat #: D4540) de acordo com a seguinte fórmula: 𝑀 𝑓 𝑚 𝑚 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑜𝑓 𝐷𝑀𝑆𝑂 0.06 . 𝑚 /𝑚
[00477] Os compostos foram, então, sonicados a 37 °C por 10 min. Então, o volume adequado de solvente (Tabela 4) foi adicionado para produzir uma solução de DMSO a 6%/solvente a 94% de acordo com a seguinte fórmula: 𝑀 𝑓 𝑚 𝑚 𝑉𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑜𝑓 𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡 0.94 . 𝑚 /𝑚
[00478] Os compostos foram, então, sonicados a 37 °C por 10 min. Tabela 3: Formulação de solvente composto Reagente Razão Kolliphor HS15 1 (peso em g) Kollisolv PCGE400 3 (volume em ml) PBS 6 (volume em ml) Tratamento in vivo com compostos de teste
[00479] Antes do tratamento, cada composto de frasco é diluído com parte igual do solvente resultando em 4 mg/ml de composto em DMSO a 3% e, então, sonicado a 37 °C por 10 min. Os camundongos são adequadamente tratados diariamente por via intraperitoneal com 100 µl de tratamento (20 mg/kg) ou controle de veículo. Doses, por exemplo, de 5 mg/kg ou 10 mg/kg de composto de teste podem também ser usadas. O tamanho do tumor e os pesos de camundongos são medidos uma vez por semana. Dados Biológicos
[00480] Os compostos mostrados na Tabela 4 exibiram a seguinte atividade no ensaio LANCE cAMP de AM2 descrito acima. Tabela 4
Número de Protocolo D2 de Exemplo AM2: pIC50 (M) 1 7,84 2 8,52 3 6,13 4 6,6 5 6,77 6 5,08 7 6,02 8 6,84 9 7,36 10 7,3 11 7,07 12 6,58 13 7,2 14 6,54 15 7,3 16 6,95 17 7,73 18 7,17 19 7,85 20 7,25 21 7,56 22 6,61 23 5,54 24 6,88 25 6,89 26 6,32
Número de Protocolo D2 de Exemplo AM2: pIC50 (M) 27 7,29 28 6,73 29 6,75 30 5,52 31A 6,5 31B 6,7 Dados de Xenoenxerto In Vivo
[00481] O composto SHF-1041, um dos compostos exemplificados no presente documento, foi testado no modelo de xenoenxerto de camundongo descrito acima, em que os camundongos foram inoculados com células CFPAC-1 (células derivadas de um adenocarcinoma ductal (ex. ATCC)). O composto de teste SHF-1041 foi administrado a grupos de camundongos de tratamento por via intraperitoneal uma vez ao dia em doses de 5 mg/kg, 10 mg/kg e 20mg/kg. O efeito sobre a % de crescimento do volume do tumor em comparação com o grupo de controle após 24 dias de dosagem de SHF-1041 é ilustrado na Figura 1. Em uma dose de 5 mg/kg, SHF-1041 inibiu o crescimento de volume de tumor em 42% em comparação com o grupo de controle. Viabilidade de Células de Sézary
[00482] O efeito do composto SHF-1038 inibidor de receptor de AM2 sobre a viabilidade das células de Sézary foi testado. SHF-1038 é um inibidor de receptor de AM2 de molécula pequena que está fora do escopo das reivindicações da invenção, porém tem uma pIC50 no ensaio de D2 de AM2 descrito no presente documento de > 8.
[00483] Uma suspensão de células de Sézary HUT-78 foi inoculada em placas de 48 poços em DMEM com soro fetal de bezerro a 2%
(2500 células/ml, 1 ml/poço). As células foram tratadas diariamente com um composto de inibidor de receptor de AM2 (SHF-1038) a uma concentração final de 3 µM (ou controle de veículo) por 9 dias. O meio fresco (800 µl por poço) foi substituído suavemente a cada 3 dias. As células foram contadas nos dias 5, 7 e 9 usando método de exclusão com azul de tripano. 10 µl de suspensão de células foram adicionados a 10 µl de azul de tripano. Essa mistura foi transferida para uma lâmina de contagem descartável e contada usando Countess II Automated Cell-Counter (Thermo Fisher). A viabilidade celular para cada condição de tratamento foi normalizada para células tratadas com veículo como 100% viável.
[00484] O composto de teste SHF-1038 reduziu a viabilidade celular em 68% após o período de tratamento de 9 dias.

Claims (35)

REIVINDICAÇÕES
1. Composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: (I) caracterizado pelo fato de que HET é uma heterociclila saturada ou parcialmente saturada de 4 a 9 membros que contém 1 heteroátomo de nitrogênio de anel e opcionalmente 1 heteroátomo de anel adicional selecionado dentre O, S e N; L está ausente ou é -C(RA)2-; cada RA é independentemente selecionado dentre H e C 1-3 alquila; X1 é N ou CR6; X2 e X3 são, cada um, independentemente, N ou CH, desde que não mais do que um dentre X1, X2 e X3 seja N; L1 está ausente ou é selecionado dentre: -O- e -N(R7)- R1 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C1-6 haloalquila e Q1-L2-, em que a dita C1-6 alquila, C2-6 alquenila ou C2-6 alquinila é opcionalmente substituída por um ou mais de R 8; Q1 é selecionado dentre: C3-12 cicloalquila, C3-12 cicloalquenila, heterociclila de 4 a 12 membros, C6-10 arila e heteroarila de 5 a 10 membros, em que a dita cicloalquila, cicloalquenila e heterociclila é opcionalmente substituída por um ou mais de R 9, e em que a dita arila e heteroarila são opcionalmente substituídas por um ou mais de R10;
L2 está ausente ou é selecionado dentre: C 1-6 alquileno, C2-6 alquenileno e C2-6 alquinileno, em que L2 é opcionalmente substituído por um ou mais de R11; R2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, =O, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e -ORA12, ou um grupo R2 forma uma ponte de C1-6 alquileno entre o átomo de anel ao qual o grupo R2 está fixado e outro átomo de anel disponível em HET; R3 é selecionado dentre: H e C1-4 alquila, e R4 e R5 são, cada um, independentemente, selecionados dentre: H, C1-4 alquila e C1-4 haloalquila, ou R4 e R5, em conjunto com o carbono ao qual os mesmos estão fixados, formam uma C3-6 cicloalquila; R6 é selecionado dentre: H, halo, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila; R7 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila e -ORA1; R8, R9 e R11 são, cada um, independentemente selecionados dentre: halo, =O, =NRA2, =NORA2, -CN, -NO2, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, -OR16, -S(O)xR16 (em que x é 0, 1 ou 2), -NR16RB2, -C(O)R16, -OC(O)R16, -C(O)OR16, -NRB2C(O)R16, - NRB2C(O)OR16, -C(O)NR16RB2, -OC(O)NR16RB2, -NRB2SO2R16, -SO2NR16RB2, -NRA2C(O)NR16RB2, -NRA2C(=NRA2)RB2, -C(=NRA2)RB2, -C(=NRA2)NRA2RB2, - NRA2C(=NRA2)NRA2RB2, -NRA2C(=NCN)NRA2RB2, -ONRA2RB2 e -NRA2ORB2, em que a dita C1-6 alquila, C2-6 alquenila e C2-6 alquinila são opcionalmente substituídas por 1 ou mais de R 12, e em que R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais de R18;
R10 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, CN, NO2, C1-6 alquila, C2-6 alquenila, C2-6 alquinila, C1-6 haloalquila, -L4-Q3, -OR17, -S(O)xR17 (em que x é 0, 1 ou 2), -NR17RB3, - C(O)R17, -OC(O)R17, -C(O)OR17, -NRB3C(O)R17, -NRB3C(O)OR17, - C(O)NR17RB3, -OC(O)NR17RB3, -NRB3SO2R17, -SO2NR17RB3, - NRA3C(O)NR17RB3, -NRA3C(=NRA3)RA3, -C(=NRA3)RB3, -C(=NRA3)NRA3RB3, - NRA3C(=NRA3)NRA3RB3, -NRA3C(=NCN)NRA3RB3, -ONRA3RB3 e -NRA3ORB3, em que a dita C1-6 alquila, C2-6 alquenila e C2-6 alquinila são opcionalmente substituídas por 1 ou mais de R 13, e em que R17 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais de R19; Q2 e Q3 são, em cada ocorrência, independentemente selecionados dentre: C3-12 cicloalquila, C3-12 cicloalquil-C1-3 alquila, C3-12 cicloalquenila, C3-12 cicloalquenil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 12 membros, heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 12 membros, C6-10 arila, C6-10 aril-C1-3 alquila, heteroarila de 5 a 10 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 a 10 membros, em que a dita C3-12 cicloalquila, C3-12 cicloalquil-C1-3 alquila, C3-12 cicloalquenila, C3-12 cicloalquenil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 12 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 12 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais de R14, e em que a dita C6-10 arila, C6-10 aril-C1-3 alquila, heteroarila de 5 a 10 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 a 10 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais de R15; L3 e L4 estão independentemente ausentes ou são independentemente selecionados dentre: -O-, -CH2O-, -NRA4-, - CH2NRA4-, - S(O)x-, -CH2S(O)x- (em que x é 0, 1 ou 2), -C(=O)-, -CH2C(=O)-, -NRA4C(=O)- , - CH2NRA4C(=O)-, -C(=O)NRA4-, -CH2C(=O)NRA4-, -S(O)2NRA4-, -
CH2S(O)2NRA4-, -NRA4S(O)2-, CH2NRA4S(O)2-, -OC(=O)-, -CH2OC(=O)-, - C(=O)O- e -CH2-C(=O)O-; R12, R13, R14, R18 e R19 são, em cada ocorrência, independentemente selecionados dentre: halo, =O, -CN, -NO2, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -L5-Q4, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)RA5, -OC(O)RA5, -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, - NRB5C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5, -NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5; em que a dita C1-4 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, =O, -CN, -ORA6, -NRA6RB6 e -SO2RA6; R15 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, -CN, -NO2, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -L6-Q5, -ORA7, - S(O)2RA7, -NRA7RB7, -C(O)RA7, -OC(O)RA7, -C(O)ORA7, -NRB7C(O)RA7, - NRB7C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7, -NRB7SO2RA7 e -SO2NRA7RB7; em que a dita C1-4 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA8, -NRA8RB8 e -SO2RA8; Q4 e Q5 são, em cada ocorrência, independentemente selecionados dentre: fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros, heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros, C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1- 3 alquila, heterociclila de 4 a 6 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 6 membros, em que a dita C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, heterociclila de 4 a 6 membros e heterociclil-C1-3 alquila de 4 a 6 membros de Q4 e Q5 são, cada uma, independentemente e opcionalmente substituídas por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, halo, =O, -CN, -ORA9, -NRA9RB9, -SO2RA9 e C1-4 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA10, -NRA10RB10 e -SO2RA10, e em que a dita fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros de Q4 e Q5 são, cada uma, independente e opcionalmente substituídas por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -CN, -ORA9, - NRA9RB9, -SO2RA9 e C1-4 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA10, -NRA10RB10 e -SO2RA10; L5 e L6 estão independentemente ausentes ou são independentemente selecionados dentre: -O-, -NRA11-, -S(O)2-, -C(=O)-, - NRA11C(=O)-, -C(=O)NRA11-, -S(O)2NRA11-, -NRA11S(O)2-, -OC(=O)- e - C(=O)O-; RA1, RA2, RB2, RA3, RB3, RA4, RA5, RB5, RA6, RB6, RA7, RB7, RA8, RB8, RA9, RB9, RA10, RB10, A11 e RA12 são, cada um, independentemente, selecionados dentre: H, C1-4 alquila e C1-4 haloalquila, ou qualquer -NRA2RB2, -NR16RB2, -NRA3RB3, -NR17RB3, -NRA5RB5, -NRA6RB6, -NRA7RB7, -NRA8RB8, -NRA9RB9 e -NRA10RB10 dentro de um substituinte pode formar uma heterociclila de 4 a 6 membros, em que a dita heterociclila de 4 a 6 membros é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, =O, C 1-4 alquila e C1-4 haloalquila; e q é um número inteiro selecionado dentre 0, 1, 2, 3 e 4.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que L está ausente.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que L1 está ausente.
4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que R4 é selecionado dentre: H e C1-4 alquila, e R5 é H; opcionalmente, em que R4 e R5 são, ambos, H.
5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que X 1, X2 e X3 são CH.
6. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que HET é selecionado dentre: em que A é C1-4 alquileno e * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que HET é: em que * mostra o ponto de fixação ao restante do composto.
8. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que R 2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: =O e C1-4 alquila; opcionalmente, em que q é 0, 1 ou 2.
9. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que q é 0.
10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que R 3 é H.
11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que R1 é selecionado dentre: C1-6 alquila, C1-6 haloalquila e Q1-L2-, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais de R 8; Q1 é selecionado dentre: C3-12 cicloalquila, heterociclila saturada ou parcialmente saturada de 4 a 7 membros que contém 1 ou 2 heteroátomos de anel selecionados dentre O, S e N, em que a dita cicloalquila e heterociclila são opcionalmente substituídas por um ou mais de R9, L2 está ausente ou é selecionado de C1-4 alquileno; R8 e R9 são, em cada ocorrência, independentemente selecionados dentre: halo, =O, -CN, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, - OR16A, -SO2R16, -NR16ARB2, -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2, -SO2NR16ARB2 e - C(O)OR16A, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5, em que R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -OC(O)RA5, -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5, - NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5, R16A é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, C1-6 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -S(O)2RA5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e - SO2NRA5RB5, e C2-6 alquila substituída por 1 substituinte selecionado dentre: - ORA5 e -NRA5RB5;
Q2 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, Q7, Q7-C1-3 alquila, fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros, em que Q7 é selecionado dentre azetidinila, oxetanila, pirrolidinila, tetra-hidrofuranila, piperidinila, piperazinila, tetra-hidropiranila e morfolinila, em que a dita C3-6 cicloalquila, C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila, Q7 e Q7-C1-3 alquila são opcionalmente substituídas por um ou mais de R 14, e em que a dita fenila, fenil-C1-3 alquila, heteroarila de 5 ou 6 membros e heteroaril-C1-3 alquila de 5 ou 6 membros são opcionalmente substituídas por um ou mais de R15; L3 está ausente ou é selecionado dentre: -O-, -NRA4-, -SO2-, - C(=O)-, -NRA4C(=O)-, -C(=O)NRA4-, -S(O)2NRA4-, -NRA4S(O)2- e –C(=O)O-; R14 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, =O, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e -SO2NRA5RB5; e R15 é, em cada ocorrência, independentemente selecionado dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA7, -S(O)2RA7, - NRA7RB7, -C(O)RA7, -C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7 e -SO2NRA7RB7.
12. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que R 1 é uma heterociclila de 4 a 7 membros, por exemplo, uma heterociclila de 4 a 7 membros saturada selecionada dentre: azetidinila, oxetanila, tetra-hidrofuranila, tetra- hidropiranila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, homopiperidinila e homopiperazinila, cada uma das quais é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes (por exemplo, 1 ou 2) selecionados dentre: halo, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, =O, -C(O)R16A, -C(O)OR16A, - C(O)NRA2RB2, -SO2R16A, -SO2Q22, -SO2CH2Q22, -C(O)Q22, -C(O)CH2Q22, - C(O)NRB2Q22, -C(O)NRB2CH2Q22, -SO2NRA2RB2, -SO2NRB2Q22 e - SO2NRB2CH2Q22; R16A é selecionado dentre: C1-4 alquila e C1-4 alquila substituída por -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5, Q22 é selecionado dentre: C3-6 cicloalquila, azetidinila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, fenila e heteroarila de 5 ou 6 membros, em que Q22 é opcionalmente substituído por um ou mais (por exemplo, 1 ou 2) substituintes selecionados dentre: halo, C 1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5.
13. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que R 1 é: R91 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila, -L3-Q2, -SO2R16, -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2, -SO2NR16ARB2 e -C(O)OR16A, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, -C(O)NRA5RB5 e -C(O)ORA5, R16 é selecionado dentre: H, C1-6 alquila e C1-6 haloalquila, em que a dita C1-6 alquila é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -ORA5, -S(O)2RA5, -NRA5RB5, - C(O)RA5, -OC(O)RA5, -C(O)ORA5, -NRB5C(O)RA5, -C(O)NRA5RB5, - NRB5SO2RA5 e -SO2NRA5RB5, R16A é selecionado dentre: H, C1-6 alquila, C1-6 haloalquila,
C1-6 alquila substituída por 1 ou 2 substituintes selecionados dentre: halo, -CN, -S(O)2RA5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e - SO2NRA5RB5, e C2-6 alquila substituída por 1 substituinte selecionado dentre: - ORA5 e -NRA5RB5; Q2 é selecionado dentre: Q6, Q6-C1-3 alquileno, Q7, Q7-C1-3 alquileno, Q8 e Q8-C1-3 alquileno, em que Q6 é C3-6 cicloalquila; Q7 é selecionado dentre: azetidinila, oxetanila, tetra- hidrofuranila, tetra-hidropiranila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, morfolinila, tiomorfolinila, homopiperidinila e homopiperazinila; Q8 é selecionado dentre: fenila, pirrolila, furanila, tienila, imidazolila, oxazolila, oxadiazolila, isoxazolila, tiazolila, isotiazolila, pirazolila, piridila, pirazinila, piridazinila e pirimidinila; em que o dito Q6, Q6-C1-3 alquileno, Q7 e Q7-C1-3 alquileno são, cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 de R 14, e Q8 e Q8-C1-3 alquileno- são, cada um, opcionalmente substituídos por 1 a 4 de R 15; L3 está ausente ou é selecionado dentre: -SO2-, -C(=O)-, *- C(=O)NRA4-, *-S(O)2NRA4- e *-C(=O)O-, em que * indica o ponto de fixação ao nitrogênio de anel em R1; R14, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA5, -S(O)2RA5, - NRA5RB5, -C(O)RA5, -C(O)ORA5, -C(O)NRA5RB5 e -SO2NRA5RB5; e R15, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, -CN, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila, -ORA7, -S(O)2RA7, -NRA7RB7, -C(O)RA7, -C(O)ORA7, -C(O)NRA7RB7 e -SO2NRA7RB7;
desde que, quando L3 estiver ausente, Q2 seja ligado ao átomo de nitrogênio de anel em R 1 por meio de um átomo de carbono de anel em Q2; R21, em cada ocorrência, é independentemente selecionado dentre: halo, =O e C1-4 alquila; R81 é selecionado dentre: H, C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila; e q1 é um número inteiro selecionado dentre 0, 1 e 2.
14. Composto, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que R81 é selecionado dentre: C1-4 alquila, C1-4 haloalquila e C3-6 cicloalquil-C1-3 alquila.
15. Composto, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que R81 é metila ou etila.
16. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 15, caracterizado pelo fato de que L3 está ausente ou é - C(=O)-.
17. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 16, caracterizado pelo fato de que q1 é 0.
18. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, caracterizado pelo fato de que R 91 não é H.
19. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, caracterizado pelo fato de que R 91 é H.
20. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, caracterizado pelo fato de que R 91 é selecionado dentre: -C(O)R16, -C(O)NR16ARB2; R16 é C1-4 alquila; R16A é selecionado dentre: H e C1-4 alquila; e RB2 é selecionado dentre: H e C1-4 alquila.
21. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que R 1 é C1-6 alquila.
22. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado pelo fato de que R 1 é terc-butila.
23. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 22, caracterizado pelo fato de que o grupo da fórmula: é .
24. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 23, caracterizado pelo fato de que X 1, X2 e X3 são CH.
25. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado dentre qualquer um dos compostos mostrados na Lista 1 do relatório descritivo, ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.
26. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 25, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
27. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 25, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que se destina ao uso como um medicamento.
28. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 25, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que se destina ao uso no tratamento de uma doença ou afecção médica mediada por receptores de subtipo 2 de receptor de adrenomedulina (AM2).
29. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 25, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que se destina ao uso no tratamento de uma doença proliferativa, particularmente um câncer; opcionalmente, em que o câncer é selecionado dentre: câncer pancreático, câncer colorretal, câncer de mama, câncer pulmonar e um câncer ósseo.
30. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 25, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que se destina ao uso no tratamento de síndrome de Sézary.
31. Método de tratamento de uma doença ou afecção médica mediada por AM2 em um sujeito com necessidade do mesmo, sendo que o método é caracterizado pelo fato de que compreende administrar ao sujeito uma quantidade eficaz de um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 25, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
32. Método, de acordo a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que a doença é uma doença proliferativa, particularmente um câncer; opcionalmente, em que o câncer é selecionado dentre câncer pancreático, câncer colorretal, câncer de mama, câncer pulmonar e um câncer ósseo.
33. Composto para uso, de acordo com a reivindicação 28 ou 29, ou método, de acordo com a reivindicação 31 ou 32, sendo que o composto é caracterizado pelo fato de que é administrado a um sujeito com expressão elevada de AM, AM2, CLR e/ou RAMP3 em comparação aos controles; por exemplo, quando o sujeito tem níveis de expressão elevados de AM ou AM2 em uma amostra de soro.
34. Composto para uso ou método, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 28 a 33, sendo que o composto é caracterizado pelo fato de que é administrado em combinação com um ou mais agentes anticâncer adicionais e/ou radioterapia.
35. Composto caracterizado pelo fato de que é selecionado dentre um composto da fórmula (IX), (XI) ou (XII):
(IX)
(XI)
(XII) em que HET, R1, R2, R4, R5, L, L1, X1, X2, X3 e q são conforme definido na reivindicação 1; R33 é R3, conforme definido na reivindicação 1, ou R 33 é um grupo de proteção de amino (por exemplo, BOC); e Pg é um grupo de proteção de amino (por exemplo, BOC).
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