BR112021003529A2 - derivados de tetra-hidropiridopirimidina como moduladores de ahr - Google Patents

Abstract

“derivados de tetra-hidropiridopirimidina como moduladores de ahr”. a presente divulgação se refere a compostos da fórmula (i) que são adequados como moduladores de ahr, em particular, inibidores de ahr. a divulgação também se refere a composições que compreendem os ditos compostos e uso dos ditos compostos ou composições em tratamento, em particular, no tratamento contra câncer. a divulgação se refere, também, a métodos para preparar os ditos compostos.

Description

“DERIVADOS DE TETRA-HIDROPIRIDOPIRIMIDINA COMO MODULADORES DE AHR”

[0001] A presente invenção se refere a compostos da fórmula geral (I), conforme descrito e definido no presente documento, a métodos para preparar os ditos compostos, a composições farmacêuticas e combinações que compreendem os ditos compostos e a utilização dos ditos compostos e composições farmacêuticas para o tratamento ou prevenção de doenças, em particular, câncer ou afecções com funções imunológicas desreguladas ou outras afecções associadas à sinalização de AHR aberrante, como um único agente ou em combinação com outros ingredientes ativos. Esses compostos também podem ser úteis na expansão de células-tronco hematopoiéticas (HSCs) e no uso de HSCs em transplantes autólogos ou alogênicos para o tratamento de pacientes com doenças imunológicas e autoimunes hereditárias e diversos distúrbios hematopoiéticos.

ANTECEDENTES

[0002] O receptor de hidrocarboneto de arila (AhR) é um fator ativado por ligante que pertence à família da família hélice-alça-hélice- Per/ARNT/Sim básica. Após a ligação do ligante no citoplasma, o AhR se dissocia de seu complexo com Hsp90 e com a proteína que interage com o AhR, XAP2, permitindo que o AhR ligado seja translocado para o núcleo. No núcleo, o AhR dimeriza com o translocador nuclear de AhR (ARNT) que, em seguida, se liga a elementos de resposta xenobiótica (XREs), promovendo a regulação ascendente ou descendente de vários genes-alvo em muitos tecidos diferentes. O AhR é mais conhecido por se ligar a toxinas ambientais e induzir vários membros da família do citocromo P450, incluindo CYP1A1, CYP1A2 e CYP1B1, necessários para sua eliminação. A ativação do AhR por xenobióticos demonstrou que esse receptor exerce uma função em uma variedade de processos fisiológicos, incluindo embriogênese, tumorigênese e inflamação (Esser & Rannug, Pharmacol Rev, 2015, 67:259; Roman et al., Pharmacol Ther, 2018, 185:50).

[0003] O AhR é expresso em muitos tipos de células imunes, incluindo células dendríticas, macrófagos, células T, células NK e células B e exerce uma função importante na imunorregulação (Quintana & Sherr, Pharmacol Rev, 2013, 65:1148; Nguyen et al., Front Immunol, 2014, 5:551). Os efeitos tóxicos/adversos dos agonistas AhR exógenos clássicos, tais como 2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina (TCDD) são bem conhecidos e incluem imunossupressão profunda e início de malignidade (Esser et al., Trends Immunol, 2009, 30:447; Feng et al., Biochimica et Biophysica Acta, 2013, 1836:197). Os efeitos fisiológicos dos agonistas de AhR nas células imunes incluem a promoção da geração de células T reguladoras (Treg) (Pot, Swiss Med Wkly, 2012, 142:w13592) e a modulação da diferenciação e ativação de célula Th17 (Baricza et al., Cell Mol Life Sci, 2016, 73:95). O AhR também modula a função de células apresentadoras de antígeno, tais como células dendríticas e macrófagos. A ativação do AhR diminui a expressão do complexo principal de histocompatibilidade de classe II e moléculas coestimuladoras e, também, a produção de citocinas polarizantes Th1 e Th17 por células dendríticas (Mezrich et al., J Immunol, 2010, 185:3190; Nguyen et al., Proc Natl Acad Sci EUA, 2010, 107:19961; Quintana et al., 2010 Proc Natl Acad Sci EUA, 107:20768). Na verdade, a ativação do AhR aumenta a capacidade das DCs de promover a diferenciação de Tregs (Jurado-Manzano et al., 2017, Immunol Lett, 190:84).

[0004] Além dos xenobióticos, o AhR também pode ligar produtos metabólicos da degradação do triptofano, incluindo quinurenina (KYN) e ácido quinurênico (KYNA). A Indoleamina 2,3 dioxigenase 1 e 2 (IDO1/IDO2) e a triptofano 2,3-dioxigenase 2 (TDO2) catalisam a etapa de comprometimento da via metabólica KYN e são expressas em células imunes (IDO1) e em uma variedade de células cancerosas (IDO1 e TDO2)(Pilotte et al., Proc Nat Acad Sci, 2012, 109:2497). Os inibidores de IDO1 se mostrado interessantes como possíveis novos tratamentos para estimular o sistema imunológico a reconhecer e eliminar as células cancerosas (Cheong & Sun,

Trends Pharmacol Sci, 2018, 39:307). Tradicionalmente, o efeito imunossupressor da IDO1 tem sido atribuído principalmente aos níveis reduzidos de triptofano, que ativa a quinase GCN2 (controle geral non- derepressible 2) e inibe a proliferação/ativação de células T tanto em linfonodos de drenagem de tumor quanto em linfonodos tumorais ambiente. Mais recentemente, observou-se que parte da eficácia dos inibidores de IDO pode ser o resultar da produção diminuída de agonistas AhR. Demonstrou-se que esses agonistas de AhR gerados elicitam uma faixa de efeitos em células imunológicas que incluem a regulação crescente da IDO1 em células dendríticas (Julliard et al., Front Immunol, 2014, 5:458), inibição da proliferação de células T (Frumento et al., J Exp Med, 2002; 196:459; Terness et al., J Exp Med, 2002; 196: 447; Opitz et al., Nature, 2011, 478:197) e regulação crescente da expressão de PD-1 em linfócitos citotóxicos T (Liu et al., Cancer Cell, 2018; 33:480). Conforme destacado acima, a IDO1 não é a única fonte de agonistas endógenos de AhR. A TDO2 é predominantemente expressa no fígado, porém também é expressa constitutivamente em alguns tipos de câncer, a saber, glioma maligno, carcinoma hepatocelular, melanoma, bexiga, mama, pulmão e câncer colorretal (Opitz et al., Nature, 2011, 478:197; Pilotte et al., Proc Nat Acad Sci, 2012, 109:2497; D’Amato et al., Cancer Res, 2015, 75(21):4651; Hsu et al., Oncotarget, 2016, 7(19): 27584; Chen et al., Dis Markers, 2016, 2016:8169724). Esses dados sugerem que os antagonistas de AhR podem ter eficácia maior que os inibidores seletivos de IDO-1, pois eles atenuam a sinalização do agonista AhR endógeno, independentemente de sua fonte.

[0005] Além de seus efeitos sobre as células imunológicas, esses agonistas endógenos também foram implicados na progressão do câncer por meio de efeitos diretos no tumor. Por exemplo, a KYN aumenta a sobrevivência e migração de células de glioblastoma humano (Opitz et al., Nature, 2011, 478:197). Diversos outros estudos também implicam o AhR na progressão do câncer na ausência de ligantes ambientais. A proteína repressora de AhR (AHRR) atua como um gene supressor de tumor em diversos cânceres humanos (Zudaire et al., J Clin Invest, 2008, 118:640). A expressão de AhR e a atividade "constitutiva" (conduzida por um ligante endógeno) em células de câncer de mama se correlacionam com a agressividade do tumor (Schlezinger et al., Biol Chem, 2006, 387:1175; Yang et al., J Cell Biochem, 2008, 104:402) e controlam a expressão de genes associados à invasão tumoral (Yang et al., Oncogene, 2005, 24:7869). A expressão de AhR ectópico em células epiteliais mamárias humanas não malignas induz uma transição de epitelial para mesenquimal e um aumento > 50% nas taxas de crescimento celular (Brooks & Eltom, Curr Cancer Drug Targets, 2011, 11:654) nas mudanças de gene induzido por knockdown de AhR em linhagens de células de câncer de mama humano consistentes com uma reversão de células mesenquimais a epiteliais para um fenótipo menos agressivo (Narasimhan et al., Int J Mol Sci, 2018, 19:1388). Antagonistas de AhR ou o knockdown de AhR mostraram reduzir a proliferação, sobrevivência, capacidade de invasão e migração de células de câncer de mama humano em cultura (Parks et al., Mol Pharmacol, 2014, 86:593; D’Amato et al., Cancer Res, 2015, 75(21):4651; Narasimhan et al., Int J Mol Sci, 2018, 19:1388) e para reduzir a sobrevivência de células de glioblastoma (Gramatzki et al., Oncogene, 2009, 28:2593; Opitz et al., Nature, 2011, 478:197; Guastella et al., J Neuro- oncol, 2018, in press). Por fim, os antagonistas de AhR bloqueiam a formação de esferas tumorais (Stanford et al., Mol Cancer Res, 2016, 14:696) que são formadas por células-tronco cancerosas (CSCs), um subconjunto de células tumorais que conduzem a iniciação, progressão e metástase de tumores.

[0006] Desse modo, os agonistas de AhR liberados de células imunes e de células tumorais atuam de forma autócrina e parácrina para promover o crescimento do tumor. Os agentes que reduzem ou bloqueiam esses efeitos podem, portanto, ser úteis no tratamento contra câncer e/ou afecções com funções imunológicas desreguladas.

[0007] O documento nº WO2017/202816 se refere a compostos e composições para o tratamento ou profilaxia de câncer ou condições com respostas imunes desreguladas ou outros distúrbios associados à sinalização aberrante de AhR. Em particular, o documento nº WO2017/202816, entre, se refere a compostos heterocíclicos com capacidade para inibir a função de AhR.

[0008] O documento nº WO2010/059401 se refere a compostos e composições para expandir o número de células CD34+ para transplante. Em particular, o documento nº WO 2010/059401 se refere, inter alia, a compostos heterocíclicos com capacidade para regular negativamente a atividade e/ou expressão de AhR.

[0009] O documento nº WO2012/015914 se refere a composições e a métodos para modular a atividade do AhR. Em particular, o documento nº WO2012/015914 se refere, inter alia, a compostos heterocíclicos que modulam a atividade do AhR para uso em composições terapêuticas a fim de inibir a proliferação de células cancerosas e invasão e metástase de células tumorais.

SUMÁRIO DA DIVULGAÇÃO

[0010] A presente divulgação fornece compostos de pirimidina de fórmula geral (I) que inibem o AhR. A divulgação é resumida nos seguintes parágrafos:

[0011] 1. Um composto da Fórmula (I) (I)

[0012] em que:

[0013] Y é um anel com 5 ou 6 membros que compreende opcionalmente 1, 2 ou 3 heteroátomos selecionados a partir de N, O e S substituídos por R5 e R6;

[0014] R1 é H, C1-3 alquila, (-CH2)pCN, -COC1-3 alquila, -CO(CH2)qNR7R8, -SO2C1-3 alquila, -SO2NR7R8, -(CH2)qPh, -C(O)Z;

[0015] R2 é H ou C1-3 alquila;

[0016] R3 é H ou C1-3 alquila;

[0017] R4 é uma heteroarila com 9 ou 10 membros com pelo menos um heteroátomo selecionado a partir de N, O ou S (tal como Indol-3-ila ou Benzimidazol-2-ila), com substituintes R9 e R10;

[0018] R5 é H, hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN, C1-3 alquila, -CO(CH2)qNR7R8, -SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8,

[0019] R6 é H, hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN, C1-3 alquila, -CO(CH2)qNR7R8, -SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8,

[0020] R7 é H ou C1-3 alquila, tal como -CH3;

[0021] R8 é H ou C1-3 alquila, tal como -CH3;

[0022] R9 é H, hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN ou um grupo C1-3 alquila, -CO(CH2)q NR7R8, -SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8,

[0023] R10 é H, hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN, C1-3 alquila, -CO(CH2)qNR7R8, -SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8,

[0024] R11 é H ou C1-3 alquila (tal como -CH3);

[0025] X é NR11 ou O;

[0026] Z é uma heteroarila com 5 ou 6 membros com pelo menos um heteroátomo selecionado a partir de N, O e S, por exemplo, 1 ou 2 nitrogênios, em que a dita heteroarila porta opcionalmente um ou dois substituintes selecionados a partir de hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN, C1-3 alquila;

[0027] b é um número inteiro 1 ou 2 (por exemplo, 1);

[0028] n é um número inteiro 1 ou 2;

[0029] m é um número inteiro 1 ou 2;

[0030] p é um número inteiro 1, 2 ou 3 (tal como 1);

[0031] q é 0, 1, 2 ou 3 (tal como 0 ou 1),

[0032] ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma.

[0033] 2. Um composto da Fórmula (II) (II)

[0034] em que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6, b, m e n são definidos acima para compostos da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[0035] 3. Um composto da Fórmula (III): (III)

[0036] em que e X, R1, R2, R3, R4, R5, R6, b, m e n são definidos acima para compostos da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[0037] 4. Um composto de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 3 em que n é 2.

[0038] 5. Um composto de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 3, em que n é 1.

[0039] 6. Um composto de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 5, em que m é 2.

[0040] 7. Um composto de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 5, em que m é 1.

[0041] 8. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 3, da Fórmula (IV): (IV)

[0042] em que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6 e b são definidos acima para os compostos de fórmula (I) ou para um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0043] 9. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 3, da Fórmula (V): (V)

[0044] em que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6 e b são definidos acima para os compostos de fórmula (I) ou para um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0045] 10. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 3, da Fórmula (VI): (VI)

[0046] em que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6 e b são definidos acima para os compostos de fórmula (I) ou para um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0047] 11. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 3, da Fórmula (VII): (VII)

[0048] em que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6 e b são definidos acima para os compostos de fórmula (I) ou para um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0049] 12. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 11, em que R1 é selecionado independentemente a partir de H, CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(O)CH3, C(O)NH2, - C(O)NHCH3. -C(O)N(CH3)2, -CH2CN, -SO2NH2, -SO2CH3, -SO2N(CH3)2, - CH2Ph, -C(O)1-Me-Pirazol-5-ila.

[0050] 13. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 11, em que R1 é selecionado independentemente a partir de H, CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, -C(O)NH2, -C(O)NHCH3. - C(O)N(CH3)2, -CH2CN, -SO2NH2, -SO2CH3, -SO2N(CH3)2, -CH2Ph, -C(O)1-Me- Pirazol-5-ila.

[0051] 14. Um composto, de acordo com o parágrafo 14, em que R1 é selecionado a partir de H, -CH2CN, -SO2CH3 e -SO2N(CH3)2, - C(O)N(CH3)2.

[0052] 15. Um composto, de acordo com os parágrafos 13 ou 14, em que R1 é H.

[0053] 16. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 11, em que R1 é C1-3 alquila.

[0054] 17. Um composto de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 16, em que R2 é H ou -CH3.

[0055] 18. Um composto, de acordo com a reivindicação 17, em que R2 é H.

[0056] 19. Um composto de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 18, em que R3 é H ou -CH3.

[0057] 20. Um composto, de acordo com a reivindicação 19, em que R3 é H.

[0058] 21. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 18, em que R4 é selecionado a partir de indolila (tal como indol-3-ila, em particular, 5-fluoro-1H-indol-3-ila) e benzimidazolila (tal como benzimidazol-2-ila), em que cada um porta independentemente R9 e R10.

[0059] 22. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 21, em que R5 é selecionado de H, F, Cl, CN e -CH3.

[0060] 23. Um composto, de acordo com o parágrafo 22, em que R5 é H.

[0061] 24. Um composto, de acordo com o parágrafo 22, em que R5 é F.

[0062] 25. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 24, em que R6 é H, F, Cl, CN ou -CH3.

[0063] 26. Um composto, de acordo com o parágrafo 25, em que R6 é H.

[0064] 27. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 26, em que R 7 é selecionado a partir de H e -CH3;

[0065] 28. Um composto, de acordo com o parágrafo 27, em que R7 é -CH3.

[0066] 29. Um composto, de acordo com o parágrafo 27, em que R7 é H.

[0067] 30. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 29, em que R8 é selecionado a partir de H e -CH3.

[0068] 31. Um composto, de acordo com o parágrafo 30, em que R8 é H.

[0069] 32. Um composto, de acordo com o parágrafo 30, em que R8 é -CH3.

[0070] 33. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 32, em que R9 é H ou F.

[0071] 34. Um composto, de acordo com o parágrafo 33, em que R9 é H.

[0072] 35. Um composto, de acordo com o parágrafo 33, em que R9 é F.

[0073] 36. Um composto de acordo com qualquer um dentre os parágrafos 1 a 35, em que R10 é H.

[0074] 37. Um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 36, em que R11 é H.

[0075] 38. Um composto de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 37, em que b é 1.

[0076] 39. Um composto de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 38, em que p é 1.

[0077] 40. Um composto de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 39, em que q é 1.

[0078] 41. Um composto de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 39, em que q é 0.

[0079] 42. Uma composição farmacêutica que compreende um composto, de acordo com qualquer um parágrafos 1 a 41 e um excipiente, diluente ou carreador.

[0080] 43. Um composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 41, ou uma composição farmacêutica de acordo com o parágrafo 42, para uso no tratamento.

[0081] 44. Um composto ou composição para uso, de acordo com o parágrafo 43, para uso no tratamento contra câncer.

[0082] 45. Um método para tratar um paciente que compreende administrar uma quantidade eficaz de um composto, conforme definido em qualquer um dos parágrafos 1 a 41 ou uma composição, conforme definido no parágrafo 42.

[0083] 46. Uso de um composto, de acordo com qualquer um dos parágrafos 1 a 41, ou uma composição de acordo com o parágrafo 42, para a fabricação de um medicamento para o tratamento contra câncer.

[0084] Em uma modalidade, m é 1 e n é 1. Em uma modalidade, m é 1 e n é 2. Em uma modalidade, m é 2 e n é 1. Em uma modalidade, m é 2 e n é 2.

[0085] Em uma modalidade, Y é pirimidina, incluindo pirimidina substituída por R5 e R6.

[0086] Em uma modalidade, Z não é substituído.

[0087] Em particular, verificou-se surpreendentemente que os compostos da presente invenção inibem com eficácia o AhR. Os ditos compostos são úteis para o tratamento ou profilaxia contra afecções em que os ligantes exógenos e endógenos de AhR induzem respostas imunes desreguladas, por exemplo: proliferação celular descontrolado, proliferação e/ou sobrevivência de células tumorais, imunossupressão. Essa desregulação pode ser observada no contexto de câncer, respostas imunes celulares inadequadas e respostas inflamatórias celulares inadequadas.

[0088] Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação são úteis no tratamento contra câncer, por exemplo, tumores líquidos e/ou sólidos e/ou metástases dos mesmos. Exemplos de cânceres incluem câncer de cabeça e pescoço (tais como tumores cerebrais e metástases cerebrais), câncer de tórax incluindo câncer de pulmão de células não pequenas e células pequenas, câncer gastrointestinal (incluindo estômago, esofágico, cólon e colorretal), câncer do trato biliar, câncer pancreático, câncer de fígado, câncer endócrino, câncer de mama, câncer de ovário, câncer de bexiga, câncer de rim, câncer de próstata, câncer ósseo e câncer de pele.

[0089] Em uma modalidade, o câncer é um câncer epitelial. Em uma modalidade, o câncer é um sarcoma. Em uma modalidade, o câncer é metastático.

DIVULGAÇÃO DETALHADA

[0090] Um anel com 5 ou 6 membros, por exemplo, que compreende opcionalmente 1, 2 ou 3 heteroátomos selecionados a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, se refere a um anel saturado, parcialmente saturado ou aromático que contém 5 ou 6 átomos, incluindo todos os átomos são de carbono ou em que há 1, 2 ou 3 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, por exemplo, ciclopentadieno, fenila, tiofeno, furano, pirrol, pirazol, imidazol, oxazol, tiazol,

isotiazol, triazol, piridina, pirazina, triazina, tiazina, oxazina, ciclopentano, ciclo- hexano, pirrolidina, pirrolina, pirazolidina, imidazolina, tetra-hidrofurano, tetra- hidrotiofeno, piperidina, piperazina, tetra-hidrrapirano, tiano, tiopirano, morfolina ou tiomorfolina.

[0091] Em uma modalidade, o anel tem 5 membros.

[0092] Em uma modalidade, o anel tem 6 membros.

[0093] Em uma modalidade, o anel com 5 ou 6 membros é insaturado ou aromático.

[0094] Em uma modalidade, o anel com 5 ou 6 membros é selecionado a partir de ciclopentadieno, fenila, piridina e pirazina, tal como fenila e piridina.

[0095] C1-3 alquila, conforme usado no presente documento se refere a alquila de cadeia linear ou ramificada, por exemplo metila, etila, propila ou isopropila.

[0096] Halogênio, conforme usado no presente documento, inclui flúor, cloro, bromo ou iodo.

[0097] CO representa carbonila.

[0098] A heteroarila com 9 ou 10 membros, conforme empregado no presente documento, se refere a um sistema de anel bicíclico que contém 9 ou 10 átomos, em que pelo menos um anel é aromático e pelo menos um anel contém um heteroátomo, por exemplo, que contém 1, 2, 3 ou 4 heteroátomos selecionados independentemente a partir de nitrogênio, oxigênio e enxofre, tal como indolina, indol, isoindol, indolizina, indazol, benzimidazol, azaindol, pirazolopirimidina, purina, benzofurano, isobenzofurano, benzotiofeno, benzoisooxazol, benzoisotiazol, benzimidazol, benzotetraiazol, adenisoquinolino, dioquinolino, quinolinoquinol, dioquinolidolino, dioquinolquinol, dioquinolidolinoquinol, quinoxalina, ftalazina, cinolina, natriridina, piridopirimidina, piridopirazina, piridopirazina, pteridina, cromeno, isocromeno, cromenona, benzoxazina, quinolinona e isoquinolinona.

[0099] Em uma modalidade, a heteroarila de 9 ou 10 membros é selecionada de indolilila e benzimidazolila, tal como indol-3-ila ou benzimidazol-2-ila.

[0100] A heteroarila com 5 ou 6 membros, conforme empregado no presente documento, é um anel que contém 5 ou 6 átomos, em que pelo menos um átomo é um heteroátomo, por exemplo, selecionado a partir de nitrogênio, oxigênio ou enxofre, tal como pirrol, pirazol, imidazol, tiofeno, oxazol, isotiazol, tiazol, piridina, piridazina, pirimidina, pirazina, triazina, tiopirano, oxazina e tiazina, tais como pirrol, pirazol e piridina e pirimidina.

[0101] Os compostos da presente divulgação podem ser preparados pelos métodos descritos no presente documento. A ROTA GENÉRICA 1 pode ser empregada para produzir determinados compostos da presente divulgação: em que

[0102] L1 e L2 são grupos de saída, por exemplo, halogênio, tal como cloro;

[0103] L3 é um grupo de saída, por exemplo, ácido borônico;

[0104] P1 é um grupos de proteção, por exemplo, Boc; e

[0105] R4 e Y são definidos acima para os compostos da fórmula (I).

[0106] A ROTA GENÉRICA 2 pode ser empregada para produzir determinados compostos da presente divulgação:

[0107] L1 e L2 são grupos de saída, por exemplo, halogênio, tal como cloro;

[0108] L3 é um grupo de saída, por exemplo, ácido borônico;

[0109] L4 é um grupo de saída, por exemplo, halogênio, tal como bromo;

[0110] P1 é um grupos de proteção, por exemplo, Boc; e

[0111] R1, R4 e Y são definidos acima para os compostos da fórmula (I).

[0112] Um exemplo de uma base impedida estericamente é trietilamina, que pode ser empregada na etapa 1 do esquema 1 e na etapa 3 do esquema 2 com triptamina.

[0113] Um tampão adequado na etapa 2 do esquema 1 é ácido aril borônico e carbonato de potássio, por exemplo, em um solvente, tal como dioxano e água.

[0114] Os agentes de acoplamento podem precisar que a reação sob nitrogênio seja realizada. Os agentes de acoplamento adequado na 2 do esquema 1 e etapa 4 do esquema 2 incluem dicloro de bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio (II).

[0115] A desproteção na etapa 3 do esquema 1 e na etapa 1 do esquema 2 pode ser efetuada com o uso, por exemplo, de TFA, em particular, em diclorometano.

[0116] A etapa 2 do esquema 2 pode ser realizada na presença de uma base orgânica impedida estericamente, tal como trietilamina. Um solvente aprótico polar adequado para a reação é o diclorometano.

[0117] Os grupos de proteção podem ser necessários para proteger grupos quimicamente sensíveis durante uma ou mais das reações descritas acima, para garantir que o processo seja eficiente. Desse modo, caso desejado ou caso seja necessário, os compostos intermediários podem ser protegidos pelo uso de grupos de proteção convencionais. Os grupos de proteção e os meios para remoção destes são descritos em “Protective Groups in Organic Synthesis”, por Theodora W. Greene and Peter G.M. Wuts, published by John Wiley & Sons Inc; 4 a Edição Revisada, 2006, ISBN-10: 0471697540.

[0118] Exemplos de sais do composto da presente divulgação incluem todos os sais farmaceuticamente aceitáveis, tais como, sem limitação, sais de adição de ácido de ácidos minerais fortes, como sais de HCl e HBr e sais de adição de ácidos orgânicos fortes, como um sal de ácido metanossulfônico.

[0119] A presente divulgação se estende a solvatos dos compostos divulgados no presente documento. Exemplos de solvatos incluem hidratos.

[0120] Intermediários inovadores são um aspecto da invenção.

[0121] Um outro aspecto da presente divulgação são os métodos de preparação dos compostos divulgados no presente documento.

[0122] Além disso, no presente documento é fornecida uma composição farmacêutica que compreende um composto, de acordo com a presente divulgação, e um excipiente, diluente ou carreador. Uma discussão minuciosa de carreadores farmaceuticamente aceitáveis está disponível em Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company, N.J. 1991).

[0123] As composições farmacêuticas da presente divulgação podem ser administradas por qualquer número de rotas, incluindo, porém sem limitação, oral, intravenosa, intramuscular, intra-arterial, intramedular, intratecal, intraventricular, transdérmica, transcutânea (por exemplo, consultar o documento nº WO98/20734), rotas subcutânea, intraperitoneal, intranasal, enteral, tópica, sublingual, intravaginal ou retal. Hidroaspersões também podem ser usados para administrar as composições farmacêuticas da invenção.

[0124] Em uma modalidade, as composições terapêuticas podem ser preparadas como produtos injetáveis, tais como soluções ou suspensões líquidas. Formas sólidas adequadas para solução, ou suspensão, em veículos líquidos antes da invenção também podem ser preparadas. Os líquidos adequados para reconstituição de tais formas sólidas (incluindo sólidos liofilizados) podem ser selecionados a partir de soluções aquosas, por exemplo, solução salina, dextrose ou água para injeção e semelhantes. Em uma modalidade, a formulação líquida reconstituída é isotônica.

[0125] Em uma modalidade, a composição farmacêutica de acordo com a presente divulgação é fornecida como um comprimido ou uma cápsula para administração oral.

TRATAMENTO

[0126] A presente divulgação também se refere a métodos para tratar um paciente que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente divulgação (ou uma composição farmacêutica que compreende o mesmo), por exemplo, para o tratamento contra câncer.

[0127] Além disso, é fornecido um composto, de acordo com a presente divulgação (ou uma composição farmacêutica compreendendo o mesmo), para uso em tratamento, por exemplo, para uso no tratamento contra câncer.

[0128] Em um aspecto adicional, é fornecido um composto da presente divulgação (ou uma composição farmacêutica que compreende o mesmo) para uso na fabricação de um medicamento para o tratamento contra câncer.

[0129] Em uma modalidade, o câncer é um câncer epitelial, por exemplo, selecionado a partir de câncer de fígado (tal como carcinoma hepatocelular), câncer do trato biliar, câncer de mama (tal como câncer de mama não ER+), câncer de próstata, câncer colorretal, câncer de ovário, câncer cervical, câncer de pulmão, câncer gástrico, pancreático, câncer ósseo, câncer de bexiga, câncer de cabeça e pescoço, câncer de tireoide, câncer de pele, câncer renal e câncer de esôfago, por exemplo, câncer gástrico.

[0130] Em uma modalidade, o câncer é selecionado a partir do grupo que compreende carcinoma hepatocelular,

colangiocarcinoma, câncer de mama, câncer de próstata, câncer colorretal, câncer de ovário, câncer de pulmão, câncer gástrico, câncer de pâncreas e de esôfago.

[0131] Em uma modalidade, o câncer do ducto biliar está em uma localização selecionada a partir de dutos biliares intra-hepáticos, ducto hepático esquerdo, ducto hepático direito, ducto hepático comum, ducto cístico, ducto biliar comum, ampola de Vater e combinações das mesmas.

[0132] Em uma modalidade, o câncer do ducto biliar está em um ducto biliar intra-hepático. Em uma modalidade, o câncer do ducto biliar está em um ducto hepático esquerdo. Em uma modalidade, o câncer do ducto biliar está em um ducto hepático direito. Em uma modalidade, o câncer do ducto biliar está em um ducto hepático comum. Em uma modalidade, o câncer do ducto biliar está em um ducto cístico. Em uma modalidade, o câncer do ducto biliar está em um ducto biliar comum. Em uma modalidade, o câncer do ducto biliar está em uma ampola de Vater. Em uma modalidade, o câncer epitelial é um carcinoma.

[0133] Em uma modalidade, o tratamento, acordo com a divulgação, é terapia adjuvante, por exemplo, após a cirurgia.

[0134] Em uma modalidade, a terapia de acordo com a divulgação é o tratamento neoadjuvante, por exemplo, para encolher um tumor antes da cirurgia.

[0135] Em uma modalidade, o tumor é um tumor sólido. Em uma modalidade, o câncer é um câncer primário, câncer secundário, metástase ou combinação dos mesmos. Em uma modalidade, o tratamento, acordo com a presente divulgação, é adequado para o tratamento contra tumores secundários. Em uma modalidade, o câncer é câncer metastático. Em uma modalidade, o tratamento, de acordo com a presente divulgação é adequado para o tratamento contra câncer primário e metástases. Em uma modalidade, o tratamento, acordo com a presente divulgação, é adequado para o tratamento contra câncer secundário e metástases. Em uma modalidade, o tratamento, de acordo com a presente divulgação, é adequado para o tratamento contra câncer primário, câncer secundário e metástases.

[0136] Em uma modalidade, o tratamento, de acordo com a presente divulgação, é adequado para o tratamento contra células cancerosas em um nódulo linfático.

[0137] Em uma modalidade, o câncer de fígado é câncer de fígado primário. Em uma modalidade, o câncer de fígado é câncer de fígado secundário. Em uma modalidade, o câncer de fígado está em estágio 1, 2, 3A, 3B, 3C, 4A ou 4B.

[0138] Em uma modalidade, o câncer gástrico está em estágio 0, I, II, III ou IV.

[0139] A quantidade terapeuticamente eficaz precisa para um indivíduo humano dependerá da gravidade do estado da doença, da saúde geral do indivíduo, da idade, peso e sexo do sujeito, dieta, tempo e frequência de administração, combinação de fármacos (ou combinações de fármacos), sensibilidades de reação e tolerância/resposta à terapia. Essa quantidade pode ser determinada por experimentação rotineira e está ao critério do médico. De modo geral, uma quantidade terapeuticamente eficaz será de 0,01 mg/kg a 1000 mg/kg, por exemplo 0,1 mg/kg a 500 mg/kg. As composições farmacêuticas podem ser convenientemente apresentadas em formas de dosagem unitária que contêm uma quantidade predeterminada de um agente ativo da invenção por dose.

TERAPIA DE COMBINAÇÃO

[0140] Em uma modalidade, o composto da presente divulgação é empregado em terapia de combinação, por exemplo, em que a terapia adicional é uma terapia anticâncer.

[0141] Em uma modalidade, a terapia anticâncer é uma quimioterapia.

[0142] O agente quimioterapêutico e a quimioterapia ou agente citotóxico são empregados de modo intercambiável no presente documento, salvo quando o contexto indicar de outro modo.

[0143] Quimioterapia, conforme empregada no presente documento, deve se referir a agentes ou fármacos químicos antineoplásticos específicos que são “seletivamente” destrutivos a células e tecidos malignos, por exemplo, agentes alquilantes, antimetabóitos, incluindo inibidores de timidilato sintase, antraciclinas, agentes antimicrotúbulo, incluindo alcaloides vegetais, inibidores de topoisomerase, inibidores de parp e outros agentes antitumorais. Seletivamente, nesse contexto, é usado livremente, pois, evidentemente, muitos desses agentes têm efeitos colaterais graves.

[0144] A dose preferencial pode ser escolhida pelo praticante com base na natureza do câncer que será tratado.

[0145] Exemplos de agentes alquilantes, que podem ser empregados no método da presente divulgação incluem um agente alquilante selecionado a partir de mostardas nitrogenadas, nitrosoureas, tetrazinas, aziridinas, platinas e derivados e agentes alquilantes não clássicos.

[0146] Agente quimioterapêutico que contém platina (também denominado de platinas) inclui, por exemplo, cisplatina, carboplatina, oxaliplatina, satraplatina, picoplatina, nedaplatina, triplatina e lipoplatina (uma versão lipossômica de cisplatina), em particular, cisplatina, carboplatina e oxaliplatina.

[0147] A dose para cistplatina varia de aproximadamente 20 a aproximadamente 270 mg/m² dependendo do câncer exatamente. Frequentemente, a dose está na faixa de aproximadamente 70 a aproximadamente 100 mg/m2.

[0148] Mostradas nitrogenadas incluem mecloretamina, ciclofosfamida, melfalano, clorambucila, ifosfamida e busulfano.

[0149] Nitrosoureias incluem N-Nitroso-N-metilureia (MNU), carmustina (BCNU), lomustina (CCNU) e semustina (MeCCNU), fotemustina e estreptozotocina. As tetrazinas incluem dacarbazina, mitozolomida e temozolomida.

[0150] Aziridinas incluem tiotepa, mitomicina e diaziquona (AZQ).

[0151] Exemplos de antimetabólitos, que podem ser utilizados no método da presente divulgação incluem antifolatos (por exemplo, metotrexato e pemetrexede), análogos de purina (por exemplo, tiopurinas, tais como azatiopurina, mercaptopurina, tiopurina, fludarabina (incluindo a forma de fosfato), pentostatina e cladribina), análogos de pirimidina (por exemplo, fluoropirimidinas, tais como 5-fluorouracila e profármacos das mesmas, tais como capecitabina [Xeloda®]), floxuridina, gencitabina, citarabina, decitabina, cloridrato de raltitrexede (tomudex), cladribina e 6-azauracila.

[0152] Os exemplos de antraciclinas, que podem ser empregados no método da presente divulgação, incluem daunorubicina (Daunomicina), daunorubicina (lipossomal), doxorubicina (Adriamicina), doxorubicina (lipossomal), epirubicina, idarubicina, valrubicina (usado atualmente para tratar apenas câncer de bexiga) e mitoxantrona um análogo de antraciclina, em particular, doxorubicina.

[0153] Exemplos de agentes antimicrotúbulos que podem ser utilizados no método da presente divulgação incluem alcaloides da vinca e taxanos.

[0154] Alcaloides de vinca incluem produtos naturais, por exemplo vincristina e vinblastina e, também, alcaloides de vinca semissintéticos, por exemplo, vinorelbina, vindesina e vinflunina

[0155] Taxanos incluem paclitaxel, docetaxel, abraxano, carbazitaxel e derivados dos mesmos. Derivados de taxanos, conforme empregados no presente documento, incluem reformulações de taxanas como taxol, por exemplo, em formulações micelares, derivados também incluem derivados químicos em que a química sintética é empregada para modificar um material inicial que é um taxano.

[0156] Inibidores da topoisomerase que podem ser utilizados em um método da presente divulgação incluem inibidores de topoisomerase tipo I, inibidores da topoisomerase tipo II e venenos de topoisomerase tipo II. Os inibidores do tipo I incluem topotecano, irinotecano, indotecano e indimitecano. Os inibidores de tipo II incluem genisteína e ICRF 193 que têm a seguinte estrutura: .

[0157] Venenos do tipo II incluem ansacrina, etoposídeo, fosfato de etoposídeo, teniposídeo e doxorrubicina e fluoroquinolonas.

[0158] Em uma modalidade, uma combinação de agentes quimioterapêuticos empregados é, por exemplo, uma platina e 5-FU ou um pró-fármaco dos mesmos, por exemplo, cisplatina ou oxaplatina e capecitabina ou a gencitabina, tal como FOLFOX.

[0159] Em uma modalidade, a quimioterapia compreende uma combinação de agentes de quimioterapia, em particular, agentes quimioterapêuticos citotóxicos.

[0160] Em uma modalidade, a combinação de quimioterapias compreende uma platina, tal como cisplatina, e fluorouracila ou capecitabina.

[0161] Em uma modalidade, a combinação de quimioterapias em capecitabina e oxaliplatina (Xelox).

[0162] Em uma modalidade, a quimioterapia é uma combinação de ácido folínico e 5-FU, opcionalmente em combinação com oxaliplatina.

[0163] Em uma modalidade, a quimioterapia é uma combinação de ácido folínico, 5-FU e irinotecano (FOLFIRI), opcionalmente em combinação com oxaliplatina (FOLFIRINOX). O regime consiste em: irinotecano (180 mg/m² IV durante 90 minutos) concomitantemente com ácido folínico (400 mg/m² [ou 2 x 250 mg/m²] IV em 120 minutos); seguido de fluorouracila (bolo IV a 400 a 500 mg/m²) e, em seguida, fluorouracila (2.400 a

3.000 mg/m² de infusão intravenosa durante 46 horas). Esse ciclo é tipicamente repetido a cada duas semanas. As dosagens mostradas acima podem variar de ciclo para ciclo.

[0164] Em uma modalidade, a combinação de quimioterapias utiliza um inibidor de microtúbulos, por exemplo, sulfato de vincristina, epotilona A, N-[2-[(4-Hidroxifenil)amino]-3-piridinil]-4- metoxibenzenossulfonamida (ABT-751), um agente quimioterapêutico derivado de taxol, por exemplo, paclitaxel, abraxano ou docetaxel, ou uma combinação dos mesmos.

[0165] Em uma modalidade, a combinação de quimioterapia compreende um antimetabólito, tal como capecitabina (xeloda), fosfato de fludarabina, fludarabina (fludara), decitabina, raltitrexedo (tomudex), cloridrato de gemcitabina e cladribina.

[0166] Em uma modalidade, uma combinação terapêutica anticâncer emprega um inibidor de mTor. Exemplos de inibidores de mTor incluem: everolimo (RAD001), WYE-354, KU-0063794, papamicina (Sirolimus), Temsirolimus, Deforolimus (MK-8669), AZD8055 e BEZ235(NVP- BEZ235).

[0167] Em uma modalidade, uma combinação terapêutica anticâncer emprega um inibidor de MEK. Exemplos de inibidores de MEK incluem: AS703026, CI-1040 (PD184352), AZD6244 (Selumetinib), PD318088, PD0325901, AZD8330, PD98059, U0126-EtOH, BIX 02189 ou BIX

02188.

[0168] Em uma modalidade, a combinação de quimioterapia emprega um inibidor de AKT. Exemplos de inibidores de AKT incluem: MK-2206 e AT7867.

[0169] Em uma modalidade, a terapia anticâncer um inibidor de aurora quinase. Exemplos de inibidores da aurora quinase incluem: Inibidor I da Aurora A, VX-680, AZD1152-HQPA (Barasertib), Mesilato SNS- 314, PHA-680632, ZM-447439, CCT129202 e Hesperadina.

[0170] Em uma modalidade, a combinação de quimioterapia emprega um inibidor p38, por exemplo, conforme revelado no documento nº WO2010/038086, tal como N-[4-({4-[3-(3-terc-Butil-1-p-tolil-1H- pirazol-5-il)ureido]naftalen-1-iloxi}metil)piridin-2-il]-2-metoxiacetamida.

[0171] Em uma modalidade, a combinação utiliza um inibidor de Bcl-2. Exemplos de inibidores de Bcl-2 incluem: mesilato de obatoclax, ABT-737, ABT-263 (navitoclax) e TW-37.

[0172] Em uma modalidade, a combinação de quimioterapia compreende ganciclovir, que pode auxiliar no controle de respostas imunológicas e/ou vasculação de tumor.

[0173] Em uma modalidade, a terapia anticâncer inclui um inibidor de PARP.

[0174] Em uma modalidade, a terapia anticâncer inclui um inibidor de metabolismo de câncer com inibição específica da atividade da enzima DHODH.

[0175] Em uma modalidade, uma ou mais terapias utilizadas no método do presente documento são metronômicas, isto é, um tratamento contínuo ou frequente com baixas doses de fármacos anticâncer, frequentemente administrados junto de outros métodos de terapia.

[0176] Em uma modalidade, é fornecido o uso de múltiplos ciclos de tratamento (tais como quimioterapia), por exemplo, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8.

[0177] “Compreendendo” no contexto do presente relatório descritivo deve significar “incluindo”. Quando tecnicamente apropriado, as modalidades da invenção podem ser combinadas.

[0178] As modalidades são descritas no presente documento como compreendendo determinados recursos/elementos. A divulgação também se estende a modalidades separadas que consistem ou consistem essencialmente nas ditas características/elementos.

[0179] Referências técnicas, tais como patentes e pedidos, são incorporadas ao presente documento a título de referência.

[0180] Quaisquer modalidades citadas explícita e especificamente no presente documento podem formar a base de um termo de responsabilidade ou isoladamente ou em combinação com uma ou mais modalidades adicionais.

[0181] O presente pedido reivindica prioridade sob o documento SG10201807244X depositado em 24 de agosto de 2018 e incorporado no presente documento a título de referência. O presente pedido pode ser usado como a base para fazer correções.

[0182] A invenção será descrita agora com referência aos exemplos a seguir, que são apenas ilustrativos e não devem ser interpretados como limitativos do escopo da presente invenção.

EXEMPLOS MÉTODO GERAL A (TRIPTAMINA)

[0183] Um frasco ou reacti-vial de fundo redondo adequado foi carregado com haleto de arila (1 equivalente), triptamina (1,1 equivalente), IPA (10 ml/mmol) e trietilamina (2 equivalentes) e aquecido a 100 C durante 3 horas (reação monitorada por análise de UPLC). Mediante resfriamento, a mistura de reação foi evaporada até secura, e o resíduo resultante foi particionado entre acetato de etila e água. A fase orgânica foi separada e lavada sequencialmente com solução saturada de bicarbonato, água, salmoura, depois seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada. A purificação, caso necessária, foi realizada por cromatografia ou trituração. MÉTODO GERAL B (SUZUKI)

[0184] Um frasco ou reacti-vial de fundo redondo adequado foi carregado com haleto de arila (1 equivalente), ácido aril borônico (1,5 a 2,0 equivalentes), carbonato de potássio (1,5 a 2,0 equivalentes), dioxano/água ([5:1] cerca de 60 em volume). O espaço vazio foi lavado com gás nitrogênio, em seguida, foi adicionado dicloreto de [1,1′-Bis (difenilfosfino) ferroceno] dicloropaládio (II) (0,2 a 0,3 equivalente). A mistura de reação foi aquecida sob nitrogênio a 100 C durante 2 a 24 horas até conclusão, conforme determinado pela análise de UPLC. A mistura de reação foi evaporada até secura e aplicada a uma coluna de sílica como uma pasta em DCM; ou pré-absorvido em celite, que foi carregado em uma unidade de carga seca e colocado em série com um cartucho de sílica. O produto desejado foi eluído com um gradiente de acetato de etila em hexano, por vezes pode ser necessário um eluente mais polar de metanol (0 a 10%) em acetato de etila. Pode ser necessária cromatografia adicional em sílica eluindo com amônia 7 M em metanol (0 a 10%) em DCM. A trituração com éter dietílico e a filtração subsequente proporcionaram o produto desejado. MÉTODO GERAL C (TFA DE BOC)

[0185] TFA (0,2 a 0,5 ml) foi adicionado a uma solução de composto BOC (20-200 mg) em DCM (3 a 10 ml). Uma vez concluída, conforme avaliado por UPLC, a mistura de reação foi carregada em um cartucho de resina SCX (0,5 g ou 1,0 g). O cartucho foi lavado com metanol (10 ml). O produto foi eluído como a base livre, eluindo com amônia 7 M em metanol (10 ml). O material de base livre foi evaporado, triturado com éter e recolhido por filtração. Secado em um dessecador < 10 mbar. EXEMPLO 1 PREPARAÇÃO DE 1-(4-((2-(1H- INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-IL)ETAN-1-ONA

ETAPA 1 CLORIDRATO DE 2,4-DICLORO-5,6,7,8- TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA

[0186] A uma solução de 2,4-dicloro-5,6-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(8H)carboxilato de t-butila (5,2 g) em DCM (10 ml) foi adicionado HCl (4 N em dioxano) (4 ml). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente. Após a conclusão (reação monitorada por TLC), o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. Em seguida, o sólido obtido foi triturado sucessivamente com acetato de etila, em seguida, éter dietílico e seco para produzir o produto desejado como um sólido bege (3,5 g, 85%)

[0187] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 0,79 minutos, m/z 204/206/208 [MH]-

[0188] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 3,00 (t, J=6,15 Hz, 2 H) 3,43 (t, J=6,16 Hz, 2 H) 4,35 (s, 2 H) 10,08 (br s, 2 H) ETAPA 2 (2,4-DICLORO-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)ETAN-1-ONA

[0189] Trietilamina (60 µl, 2 equivalentes) foi adicionada a uma suspensão de cloridrato de 2,4-dicloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina (50 mg, 1 equivalente) em DCM (500 µl). Após agitação durante alguns minutos, foi adicionado anidrido acético (30 µl, 1,5 equivalente). A mistura se tornou turva. Após a conclusão (reação monitorada por análise de UPLC), DCM foi adicionado seguido de água. Em seguida, a fase orgânica isolada foi seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada, para fornecer o produto desejado tão bruto quanto um sólido (46 mg, 90%).

[0190] UPLC-MS (Método ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,75 minuto, m/z 246/248/250 [M+H]+

[0191] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 2,15 - 2,21 (m, 3 H) 2,80 - 2,86 (m, 1 H) 2,87 - 2,94 (m, 1 H) 3,73 - 3,80 (m, 1 H) 3,86 - 3,94 (m, 1 H) 4,62 - 4,69 (m, 1 H) 4,76 - 4,83 (m, 1 H) (Todos os picos são duplicados devido à presença de rotâmeros) ETAPA 3 1-(4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- CLORO-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)ETAN-1-ONA

[0192] Preparada de acordo com o método geral A com o uso de 1-(2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-7(6H)-il)etan-1-ona (46 mg) para fornecer o produto desejado tão bruto quanto um sólido laranja (69 mg, 100%)

[0193] UPLC-MS (Método ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,92 minuto, m/z 370/371 [M+H]+ 1H

[0194] RMN de (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d +queda de METANOL-d4) δ ppm 7,48-7,60 (m, 1H), 7,30-7,36 (m, 1H), 7,08- 7,16 (m, 1H), 6,98-7,07 (m, 2H), 4,26-4,55 (m, 2H), 3,60-3,72 (m, 2H), 3,30- 3,34 (m, 2H), 2,94-3,07 (m, 2H), 2,08-2,16 (m, 2H), 1,93-2,08 (m, 3H) ETAPA 4 1-(4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)ETAN- 1-ONA

[0195] Preparada de acordo com o método geral B com o uso de 1-(4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidin-7(6H)-il)etan-1-ona (84 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3-borônico (80 mg) para gerar o produto desejado como um sólido branco (45 mg, 46%).

[0196] UPLC-MS (Método ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,40 minuto, m/z 431,2 [M+H]+

[0197] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,64 com desacoplamento de próton

[0198] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (br s, 1H), 9,34 (t, J=1,8 Hz, 1H), 8,68 (t, J=2,4 Hz, 1H), 8,26-8,45 (m, 1H), 7,60 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,33-7,37 (m, 1H), 7,29-7,32 (m, 1H), 7,22 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,04-7,11 (m, 1H), 6,98 (ddd, J=7,8, 7,0, 1,0 Hz, 1H), 4,53 (br d, J=13,8 Hz, 2H), 3,77-3,85 (m, 2H), 3,73-3,78 (m, 2H), 3,04 (br t, J=7,5 Hz, 2H), 2,53 (br s, 1H), 2,42 (br t, J=5,5 Hz, 1H), 2,12 (d, J=6,5 Hz, 3H). EXEMPLO 2 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-7-(METILSULFONIL)-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 2,4-DICLORO-7-(METILSULFONIL)-5,6,7,8- TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA

[0199] Trietilamina (60 µl, 2 equivalentes) foi adicionada a uma suspensão de cloridrato de 2,4-dicloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina (50 mg, 1 equivalente) em DCM (500 µl). Após agitação durante alguns minutos, foi adicionado cloreto de metilsulfonila (25 µl, 1,5 equivalente). A mistura se tornou turva. Após a conclusão (reação monitorada por análise de UPLC), DCM foi adicionado seguido de água. Em seguida, a fase orgânica foi seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada para fornecer o produto desejado como um sólido (57 mg, 98%). UPLC-MS (Método ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,83 minuto, m/z 282/284 [M+H]+

[0200] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 4,36-4,60 (m, 2H), 3,70-3,70 (m, 1H), 3,57-3,67 (m, 2H), 2,94-3,01 (m, 2H) ETAPA 2 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-CLORO-7- (METILSULFONIL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0201] Preparada de acordo com o método geral A, com o uso de 2,4-dicloro-7-(metilsulfonil)-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidina (57 mg) para produzir o produto desejado tão bruto quanto um sólido laranja (78 mg, 95%). UPLC-MS (Método ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,97 minuto, m/z 406/408 [M+H]+

[0202] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d + queda de METANOL-d4) δ ppm 7,51-7,63 (m, 1H), 7,32-7,39 (m, 1H), 7,12-7,20 (m, 1H), 7,04-7,10 (m, 1H), 6,99-7,03 (m, 1H), 3,61-3,82 (m, 2H), 3,37-3,54 (m, 2H), 2,98-3,10 (m, 2H), 2,82-2,84 (m, 2H), 2,78-2,81 (m, 3H), 2,15-2,25 (m, 2H). ETAPA 3 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-7-(METILSULFONIL)-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0203] Preparada de acordo com o método geral B, com o uso de N-(2-(1H-indol-3-il)etil)-2-cloro-7-(metilsulfonil)-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-amina (78 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3-borônico (60 mg) para fornecer o produto desejado como sólido branco (58 mg, 62%).

[0204] UPLC-MS (Método ácido, 4 minutos): temperatura 1,58 minuto, m/z 467,1 [M+H]+

[0205] RMN de 19 F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm -

127,59 com desacoplamento de próton

[0206] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (br d, J=1,3 Hz, 1H), 9,33 (t, J=1,8 Hz, 1H), 8,69 (d, J=2,8 Hz, 1H), 8,30-8,35 (m, 1H), 7,61 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,38 (t, J=5,9 Hz, 1H), 7,34 (dt, J=8,1, 1,0 Hz, 1H), 7,22 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,07 (ddd, J=8,1, 6,8, 1,1 Hz, 1H), 6,98 (ddd, J=7,8, 7,0, 1,0 Hz, 1H), 4,27 (s, 1H), 3,75-3,89 (m, 2H), 3,52 (t, J=5,9 Hz, 1H), 2,97-3,13 (m, 5H), 2,58 (br t, J=5,9 Hz, 1H). EXEMPLO 3 PREPARAÇÃO DE 5-(4-((2-(1H- INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-7-(CIANOMETIL)-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-2-IL)NICOTINONITRILA ETAPA 1 2-(2,4-DICLORO-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)ACETONITRILA

[0207] Trietilamina (1,4 ml, 2,5 equivalentes) foi adicionada a uma suspensão de cloridrato de 2,4-dicloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina (0,99 mg, 1 equivalente) em DCM (500 µl). Após agitação durante alguns minutos, foi adicionado bromoacetonitrila (315 µl, 1,5 equivalente). Após a conclusão (reação monitorada por análise de UPLC),

DCM foi adicionado seguido de água. A fase orgânica foi, então, seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada para fornecer um óleo pegajoso. A purificação em sílica, eluindo com um gradiente de metanol 0 a 5% em DCM, forneceu o produto impuro desejado como uma espuma (540 mg).

[0208] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,86 minutos, m/z 243 [M+H]+

[0209] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm o nº de RMN de 1H foi executado nesse estágio. ETAPA 2 2-(4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- CLORO-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)ACETONITRILA

[0210] Preparada de acordo com o método geral A, com o uso de 2-(2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-7(6H)-il)acetonitrila (500 mg). Purificação em sílica (cartucho de coluna Telos 20 g), eluindo com um gradiente de metanol 0 a 5% em DCM para fornecer o produto desejado, como um sólido amarelo pálido (249 mg). UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,98 minutos, m/z 367 [M+H]+

[0211] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d + queda de METANOL-d4) δ ppm 8,04-8,21 (m, 1H), 7,57-7,70 (m, 1H), 7,35-7,44 (m, 1H), 7,20-7,26 (m,1H), 7,11-7,18 (m, 1H), 7,04-7,09 (m, 1H), 4,74-4,94 (m, 1H), 3,81-3,90 (m, 2H), 3,68-3,68 (m, 1H), 3,64-3,69 (m, 1H), 3,58-3,62 (m, 2H), 3,06-3,14 (m, 2H), 2,78-2,84 (m, 2H), 2,13-2,27 (m, 2H). ETAPA 3 5-(4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-7- (CIANOMETIL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-2- IL)NICOTINONITRILA

[0212] Preparada de acordo com o método geral B, com o uso de 2-(4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidin-7(6H)-il)acetonitrila (120 mg) e ácido 5-ciano-3-piridinil borônico (70 mg) para fornecer o produto desejado como um sólido bege (57 mg, 40%).

[0213] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,47 minuto, m/z 428 [M+H]+

[0214] RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,70-10,95 (m, 1H), 9,20-9,39 (m, 1H), 8,61-8,82 (m, 1H), 8,23-8,38 (m, 1H), 7,53-7,68 (m, 1H), 7,28-7,47 (m, 2H), 7,16-7,24 (m, 1H), 7,02-7,11 (m, 1H), 6,92-7,01 (m, 1H), 3,92-4,05 (m, 2H), 3,73-3,85 (m, 2H), 3,56-3,65 (m, 2H), 2,99-3,10 (m, 2H), 2,78-2,90 (m, 2H). EXEMPLO 4 PREPARAÇÃO DE 2-(4-((2-(1H- INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)ACETONITRILA ETAPA 3 2-(4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-7(6H)- IL)ACETONITRILA

[0215] Preparada de acordo com o método geral B, com o uso de 2-(4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidin-7(6H)-il)acetonitrila (120 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3-borônico (70 mg) para fornecer o produto desejado como um sólido branco (10 mg, 7%).

[0216] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,55 minuto, m/z 435 [M+H]+

[0217] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 8,68-8,87 (m, 1H), 8,05-8,16 (m, 1H), 7,90-8,01 (m, 1H), 6,71-6,82 (m, 1H), 6,41-6,52 (m, 1H), 6,19-6,30 (m, 3H), 3,06-3,14 (m, 4H), 2,82-2,89 (m, 2H), 2,63-2,75 (m, 3H), 2,27-2,35 (m, 2H), 2,05-2,16 (m, 2H), 1,65-1,76 (m,

2H). EXEMPLO 5 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-7-ISOPROPIL-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 2,4-DICLORO-7-ISOPROPIL-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA

[0218] Trietilamina (1 ml, 2 equivalentes) foi adicionada a uma suspensão de cloridrato de 2,4-dicloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina (0,9 g, 1 equivalente) em DCM (20 ml). Após agitação durante 10 a 15 minutos à temperatura ambiente, foi adicionado ácido acético (630 µl, 3 equivalente), seguido de acetona (540 µl). A agitação continuou durante 10 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,24 g, 1,6 equivalente). Após 1 dia, a mistura de reação foi diluída com DCM e foi lavada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio. A fase orgânica foi, então, seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada para fornecer um óleo marrom. A purificação em sílica (cartucho Telos 40g) eluindo com um gradiente de acetato de etila 0 a 50% em hexano proporcionou o produto desejado como um óleo amarelo (536 mg, 54%).

[0219] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,01 minuto, m/z 246/248 [M+H]+

[0220] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 3,73-3,78 (m, 2H), 2,90-3,03 (m, 1H), 2,80-2,85 (m, 4H), 1,08-1,16 (m, 6H). ETAPA 2 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-CLORO-7- ISOPROPIL-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0221] Preparada de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-7-isopropil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina (150 mg). A purificação em sílica (cartucho Telos 4 g), eluindo com um gradiente de MeOH 0 a 5% em DCM, proporcionou o produto desejado como uma espuma bege (160 mg, 90%). UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,72 minutos, m/z 370/372 [M+H]+

[0222] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d + queda de METANOL-d4) δ ppm 7,98-8,10 (m, 1H), 7,63-7,68 (m, 1H), 7,38-7,43 (m, 1H), 7,21-7,26 (m, 1H), 7,12-7,18 (m, 1H), 7,03-7,06 (m, 1H), 4,71-4,79 (m, 1H), 3,81-3,88 (m, 2H), 3,55-3,59 (m, 2H), 3,06-3,13 (m, 2H), 2,84-2,92 (m, 1H), 2,70-2,75 (m, 2H), 2,14-2,20 (m, 2H), 1,08-1,12 (m, 6H) ETAPA 3 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-7-ISOPROPIL-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDINA-4-AMINA

[0223] Preparada de acordo com o método geral B, usando N-(2-(1H-indol-3-il)etil)-2-cloro-7-isopropil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidin-4-amina (65 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3-borônico (60 mg) para fornecer o produto desejado como um sólido branco (50 mg, 66%).

[0224] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,07 minuto, m/z 431,2 [M+H]+

[0225] RMN de 19 F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,79 com desacoplamento de próton

[0226] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (br d, J=1,5 Hz, 1H), 9,32 (t, J=1,8 Hz, 1H), 8,66 (d, J=2,8 Hz, 1H), 8,24-8,37 (m, 1H), 7,61 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,35 (dt, J=8,0, 0,9 Hz, 1H), 7,21 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,14 (br t, J=5,8 Hz, 1H), 7,08 (ddd, J=8,1, 7,0, 1,3 Hz, 1H), 6,98 (ddd, J=8,0, 7,0, 1,1 Hz, 1H), 3,72-3,83 (m, 1H), 3,54 (s, 1H), 2,99-3,09 (m, 1H), 2,91 (dt, J=13,1, 6,4 Hz, 1H), 2,76 (br t, J=5,6 Hz, 1H), 2,42 (br t, J=5,5 Hz, 1H), 1,08 (d, J=6,5 Hz, 1H). EXEMPLO 6 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-7-METIL-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 2,4-DICLORO-7-METIL-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA

[0227] Trietilamina (1,1 ml, 2 equivalentes) foi adicionada a uma suspensão de cloridrato de 2,4-dicloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina (1,0 g, 1 equivalente) em DCM (20 ml). Após agitação durante 10 a 15 minutos à temperatura ambiente, foi adicionado ácido acético (720 µl, 3 equivalentes), seguido de solução de formaldeído (37% em peso em H2O) (720 µl). A agitação continuou durante 10 minutos antes da adição de triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,41 g, 1,6 equivalente). Após 3 horas, a mistura de reação foi diluída com DCM e foi lavada com uma solução saturada de bicarbonato de sódio. A fase orgânica foi, então, seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada para fornecer um óleo marrom (1,08 g). A purificação em sílica (cartucho Telos 40 g) eluindo com um gradiente de acetato de etila 5 a 100% em hexano, proporcionou o produto desejado como um óleo amarelo (677 mg, 68%).

[0228] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 0,83 minuto, m/z 218/220/222 [M+H]+

[0229] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 3,60-3,63 (m, 2H), 2,83-2,88 (m, 2H), 2,73-2,78 (m, 2H), 2,47-2,51 (m, 3H). ETAPA 2 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-CLORO-7- METIL-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0230] Preparada de acordo com o método geral A, com o uso de 2,4-dicloro-7-metil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina (150 mg). A purificação em sílica (cartucho Telos 4 g), eluindo com um gradiente de MeOH 5 a 10% em DCM, proporcionou o produto desejado como uma espuma bege (175 mg, 74%). UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,71 minutos, m/z 342/344 [M+H]+

[0231] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d + queda de METANOL-d4) δ ppm 7,61-7,68 (m, 1H), 7,36-7,44 (m, 1H), 7,21-7,26 (m, 1H), 7,12-7,18 (m, 1H), 7,03-7,06 (m, 1H), 4,72-4,80 (m, 1H), 3,81-3,88 (m, 2H), 3,41-3,44 (m, 2H), 3,07-3,13 (m, 2H), 2,61-2,67 (m, 2H), 2,41-2,45 (m, 3H), 2,15-2,21 (m, 2H).

ETAPA 3 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-7-METIL-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDINA-4-AMINA

[0232] Preparada de acordo com o método geral B, com o uso de N-(2-(1H-indol-3-il)etil)-2-cloro-7-metil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-amina (70 mg) e de ácido 5-fluoropiridina-3- borônico (70 mg) para gerar o produto desejado como um sólido bege (50 mg, 60%).

[0233] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,04 minuto, m/z 403,2 [M+H]+

[0234] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,76 com desacoplamento de próton

[0235] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (br s, 1H), 9,32 (s, 1H), 8,66 (d, J=2,8 Hz, 1H), 8,27-8,38 (m, 1H), 7,61 (d, J=7,5 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,21 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,17 (br t, J=5,5 Hz, 1H), 7,07 (t, J=7,2 Hz, 1H), 6,94-7,01 (m, 1H), 3,69-3,87 (m, 2H), 3,40 (s, 2H), 3,04 (br t, J=7,5 Hz, 2H), 2,64-2,69 (m, 2H), 2,43-2,48 (m, 2H), 2,37 (s, 3H). EXEMPLO 7 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(PIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDIN-4-

AMINA

ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETILL)AMINO)-2- CLORO-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-6(5H)-CARBOXILATO DE T-

BUTILA

[0236] Preparado de acordo com o método geral A, com o uso de 2,4-dicloro-7,8-di-hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de t-butila (410 mg) para gerar o produto desejado como um sólido (630 mg,> 100%)

[0237] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,21 minuto, m/z 428/430 [M+H]+

[0238] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 7,97-8,18 (m, 1H), 7,59-7,68 (m, 1H), 7,34-7,44 (m, 1H), 7,19-7,26 (m, 1H), 7,11-7,18 (m, 1H), 7,05-7,09 (m, 1H), 4,09-4,17 (m, 2H), 3,79-3,90 (m, 2H), 3,59-3,68 (m, 2H), 3,04-3,15 (m, 2H), 2,70-2,80 (m, 2H), 1,46-1,52 (m, 9H). ETAPA 2 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- (PIRIDIN-3-IL)-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-6(5H)-CARBOXILATO DE T-BUTILA

[0239] Preparado de acordo com o método geral B, com o uso de 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-7,8-di-hidropirido[4,3- d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de t-butila (200 mg) e de ácido piridina-3- borônico (80 mg) para fornecer o produto desejado como um resíduo (70 mg, 30%).

[0240] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,21 minuto, m/z 471,2 [M+H]+

[0241] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 9,64 (d, J=1,8 Hz, 1H), 8,61-8,72 (m, 2H), 8,12 (br s, 1H), 7,65 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,35-7,45 (m, 2H), 7,21-7,27 (m, 1H), 7,16 (td, J=7,5, 1,0 Hz, 1H), 7,06-7,14 (m, 1H), 4,55-4,64 (m, 1H), 4,06-4,18 (m, 2H), 3,95-4,05 (m, 2H), 3,69-3,75 (m, 2H), 3,18 (br t, J=5,9 Hz, 2H), 2,84-2,92 (m, 2H), 1,48-1,55 (m, 9H). Melhor interpretação

ETAPA 3 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(PIRIDIN-3-IL)- 5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0242] HCl 5 N em IPA (2 ml) foi adicionado a uma solução de 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(piridin-3-il)-7,8-di-hidropirido[4,3- d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de t-butila (70 mg) em DCM (10 ml). Um sólido transiente se formou, e a cor da mistura de reação escureceu. Após 18 horas, o DCM foi evaporado, e o resíduo IPA foi diluído com metanol/água [1:1] (2 ml). A mistura foi carregada em um cartucho SCX de 0,5 g e lavada com metanol/água [1:1] (10 ml), em seguida, metanol (2x 10 ml). O produto foi eluído como a base livre, eluindo com amônia 7 M em metanol (10 ml). O material de base livre foi evaporado, em seguida, purificado em sílica, eluindo com um gradiente de amônia 7 M em metanol (1 a 10%) em DCM, para gerar o produto desejado como um sólido branco (30 mg, 54%). UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 0,95 minutos, m/z 371,2 [M+H]+

[0243] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (br s, 1H), 9,47 (dd, J=2,1, 0,9 Hz, 1H), 8,64 (dd, J=4,8, 1,8 Hz, 1H), 8,57 (dt, J=8,1, 1,9 Hz, 1H), 7,61 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,48 (ddd, J=7,9, 4,8, 0,9 Hz, 1H), 7,35 (dt, J=8,0, 0,9 Hz, 1H), 7,21 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,08 (ddd, J=8,1, 7,1, 1,1 Hz, 1H), 6,99 (ddd, J=7,9, 6,9, 1,0 Hz, 1H), 6,91 (t, J=5,6 Hz, 1H), 3,71-3,82 (m, 1H), 3,57 (s, 1H), 3,02-3,07 (m, 2H), 2,99 (t, J=5,6 Hz, 2H), 2,64 (br t, J=5,6 Hz, 2H). EXEMPLO 8 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDIN-4-AMINA

ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- CLORO-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-CARBOXILATO DE T-

BUTILA

[0244] Preparado de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de t- butila (470 mg) e purificação por trituração com DCM, para gerar o produto desejado como um sólido bege (370 mg, 55%).

[0245] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,22 minuto, m/z 428,2/430,2 [M+H]+

[0246] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,82 (br s, 1H), 7,65 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,54 (br s, 1H), 7,34 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,07 (td, J=7,5, 1,0 Hz, 1H), 6,98 (td, J=7,5, 1,0 Hz, 1H), 4,27 (br s, 2H), 3,49-3,70 (m, 4H), 2,95 (t, J=13,8 Hz, 2H), 2,36 (br t, J=5,8 Hz, 2H), 1,39-1,49 (m, 9H). ETAPA 2 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5-

FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)- CARBOXILATO DE T-BUTILA

[0247] Preparado de acordo com o método geral B, com o uso de 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de t-butila (160 mg) e de ácido 5-fluoropiridina-3- borônico (90 mg) para gerar o produto desejado como um resíduo (85 mg, 46%).

[0248] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 2,16 minutos, m/z 489,2 [M+H]+

[0249] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (s, 1H), 9,33 (t, J=1,5 Hz, 1H), 8,68 (d, J=2,8 Hz, 1H), 8,24-8,38 (m, 1H), 7,60 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,34 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,30 (br s, 1H), 7,21 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,07 (td, J=7,5, 1,0 Hz, 1H), 6,92-7,00 (m, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,74-3,87 (m, 2H), 3,65 (br t, J=5,4 Hz, 2H), 3,04 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,45 (br t, J=5,5 Hz, 2H), 1,35-1,54 (m, 9H). ETAPA 3 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-

AMINA

[0250] HCl 5 N em IPA (5 ml) foi adicionado a uma solução de 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de t-butila (80 mg) em metanol (5 ml). A cor da mistura de reação escureceu. Após 18 horas, a mistura de reação foi evaporada. Resina SCX solta (1 g) foi adicionada seguida por água (5 ml) e metanol (5 ml). Girar até mistura durante aproximadamente 10 minutos, depois, colocar em um tubo com frita e deixar drenar. O cartucho SCX então formado foi lavado com metanol/água [1:1] (10 ml), em seguida, metanol (2 x 10 ml). O produto foi eluído como a base livre, eluindo com amônia 7 M em metanol (20 ml). O material de base livre foi evaporado, em seguida, triturado com éter dietílico e filtrado para a fim de o produto desejado como um sólido marrom (35 mg, 54%). UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,61 minuto, m/z 389,2 [M+H]+

[0251] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,75 com desacoplamento de próton

[0252] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,86 (s, 1H), 9,32 (t, J=1,5 Hz, 1H), 8,67 (d, J=3,0 Hz, 1H), 8,26-8,39 (m, 1H), 7,62 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,22 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,15 (br t, J=5,6 Hz, 1H), 7,05-7,10 (m, 1H), 6,91-7,01 (m, 1H), 3,74-3,85 (m, 2H), 3,72 (s, 2H), 2,90-3,09 (m, 4H), 2,75-2,85 (m, 1H), 2,33 (br t, J=5,5 Hz, 2H). EXEMPLO 9 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(PIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-

AMINA ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- (PIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-CARBOXILATO DE T-BUTILA

[0253] Preparado de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(6H)-carboxilato de t-butila (200 mg) e ácido piridina-3-borônico (100 mg) para gerar o produto desejado como um resíduo (110 mg, 46%).

[0254] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,15 minuto, m/z 471,2 [M+H]+

[0255] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (s, 1H), 9,36-9,53 (m, 1H), 8,65 (dd, J=4,8, 1,8 Hz, 1H), 8,57 (dt, J=8,0, 1,9 Hz,

1H), 7,60 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,45-7,53 (m, 1H), 7,35 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,22 (d, J=2,3 Hz, 2H), 7,04-7,13 (m, 1H), 6,89-7,01 (m, 1H), 4,40 (s, 2H), 3,76-3,85 (m, 2H), 3,65 (br t, J=5,1 Hz, 2H), 3,05 (br t, J=7,5 Hz, 2H), 2,45 (br t, J=5,5 Hz, 2H), 1,37-1,53 (m, 9H). ETAPA 2 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(PIRIDIN-3-IL)- 5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0256] HCl 5 N em IPA (3 ml) foi adicionado a uma solução de 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(piridin-3-il)-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de t-butila (100 mg) em metanol (1 ml). A cor da mistura de reação escureceu. Após 18 horas, a mistura de reação foi evaporada. Resina SCX solta (1 g) foi adicionada seguida por água (5 ml) e metanol (10 ml). Girar até mistura durante aproximadamente 10 minutos, depois, colocar em um tubo com frita e deixar drenar. O cartucho SCX então formado foi lavado com metanol/água [1:1] (10 ml), em seguida, metanol (2 x 10 ml). O produto foi eluído como a base livre, eluindo com amônia 7 M em metanol (20 ml). O material de base livre foi evaporado, em seguida, triturado com éter dietílico e filtrado para gerar o produto desejado como um sólido branco (41 mg, 52%). UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,46 minuto, m/z 371,2 [M+H]+

[0257] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,86 (s, 1H), 9,46 (dd, J=2,0, 0,8 Hz, 1H), 8,64 (dd, J=4,8, 1,8 Hz, 1H), 8,56 (dt, J=8,0, 1,9 Hz, 1H), 7,61 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,48 (ddd, J=8,0, 4,8, 0,8 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,22 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,04-7,11 (m, 2H), 6,99 (td, J=7,5, 0,9 Hz, 1H), 3,74-3,84 (m, 2H), 3,72 (s, 2H), 2,95-3,09 (m, 5H), 2,33 (br t, J=4,6 Hz, 2H). EXEMPLO 10 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(PIRIDIN-3-IL)-6,7-DI-HIDRO-5H-PIRROL[3,4-D]PIRIMIDIN-4-

AMINA

ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- CLORO-5,7-DI-HIDRO-6H-PIRROL[3,4-D]PIRIMIDINA-6-CARBOXILATO DE T-BUTILA

[0258] Preparado de acordo com o método geral A, com o uso de 2,4-dicloro-5,7-di-hidro-6H-pirrol[3,4-d]pirimidina-6-carboxilato de t-butila (630 mg) e de processamento adicionalmente por evaporação, trituração com água, coleta por filtração e secagem para gerar o produto desejado como um sólido branco (900 mg, quantitativo). Agilent LC-MS (ácido rápido 4 minutos após): temperatura ambiente 2,26 minutos, m/z 414.2/416.2 [M+H]+

[0259] RMN de 1H (400 MHz, CLOROFÓRMIO-d) δ ppm 8,05-8,33 (m, 1H), 7,64 (dd, J=7,9, 3,1 Hz, 1H), 7,35-7,50 (m, 1H), 7,25 (q, J=6,9 Hz, 1H), 7,12-7,20 (m, 1H), 7,06 (dd, J=15,2, 2,1 Hz, 1H), 4,74-4,87 (m, 1H), 4,42-4,57 (m, 2H), 4,18-4,33 (m, 2H), 3,73-3,92 (m, 2H), 3,05-3,15 (m, 2H), 1,51 (d, J=1,8 Hz, 9H). ETAPA 2 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- (PIRIDIN-3-IL)-5,7-DI-HIDRO-6H-PIRROL[3,4-D]PIRIMIDINA-6- CARBOXILATO DE T-BUTILA

[0260] Preparado de acordo com o método geral B, com o uso de 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,7-di-hidro-6H- pirrol[3,4- d]pirimidina-6-carboxilato de t-butila (130 mg) e ácido piridina-3-borônico (90 mg) para gerar o produto desejado como um sólido branco (100 mg, 68%).

[0261] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,08 minuto, m/z 457,2 [M+H]+

[0262] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (s, 1H), 9,46 (s, 1H), 8,66 (dd, J=4,8, 1,5 Hz, 1H), 8,56 (ddt, J=7,9, 3,9, 2,0 Hz, 1H), 7,63-7,72 (m, 1H), 7,59 (br d, J=7,8 Hz, 1H), 7,45-7,52 (m, 1H), 7,35 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,22 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,03-7,13 (m, 1H), 6,99 (td, J=7,4, 1,0 Hz, 1H), 4,45 (br dd, J=19,2, 12,9 Hz, 4H), 3,79 (q, J=6,4 Hz, 2H), 3,05 (t, J=7,4 Hz, 2H), 1,44-1,56 (m, 9H). ETAPA 3 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(PIRIDIN-3-IL)- 6,7-DI-HIDRO-5H- PIRROL[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0263] HCl 5 N em IPA (5 ml) foi adicionado a uma solução de 4--((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(piridin-3-il)-5,7-di-hidro-6H- pirrol[3,4-d]pirimidina-6-carboxilato de t-butila (70 mg) em metanol (3 ml). A cor da mistura de reação escureceu, porém permaneceu heterogênea. DCM (3 ml) foi adicionado para auxiliar a solubilidade. Após 18 horas, a mistura de reação foi evaporada, carregada em um cartucho de resina SCX (1 g) em metanol/água [1:1]. O cartucho SCX, então, formado foi lavado com metanol/água [1:1] (10 ml), em seguida, metanol (2 x 10 ml). O produto foi eluído como a base livre, eluindo com amônia 7 M em metanol (20 ml). O material de base livre foi evaporado, em seguida, triturado com éter dietílico e filtrado para gerar o produto desejado como um sólido branco (30 mg, 55%).

[0264] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,40 minuto, m/z 357,2 [M+H]+

[0265] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (br s, 1H), 9,48 (dd, J=2,3, 0,8 Hz, 1H), 8,65 (dd, J=4,8, 1,8 Hz, 1H), 8,58 (dt, J=8,2, 1,8 Hz, 1H), 7,61 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,49 (ddd, J=7,8, 4,8, 0,9 Hz, 1H), 7,30-7,41 (m, 2H), 7,22 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,08 (td, J=7,5, 1,3 Hz, 1H), 6,99 (td, J=7,4, 1,0 Hz, 1H), 4,41-4,56 (m, 1H), 3,92-4,07 (m, 4H), 3,73-3,84 (m, 2H), 3,05 (t, J=7,5 Hz, 2H). EXEMPLO 11 PREPARAÇÃO DE 4-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETOXI)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDINA

ETAPA 1 4-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETÓXI)-2-CLORO-5,8-DI- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIM-IDINA-7(6H)-CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0266] Hidreto de sódio a 60% em óleo (70 mg, 1,6 equivalente) foi adicionado a uma solução de triptofol (210 mg, 1,1 equivalente) em THF (8 ml), observar evolução de gás. Após 10 minutos, foi adicionada uma solução de 2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (360 mg) em THF (8 ml). Agitar à temperatura ambiente por 2 dias. A mistura de reação foi extinta com água e extraída em acetato de etila. A fase orgânica foi seca em sulfato de sódio e, em seguida, evaporada para gerar uma pasta fluida. Purificação com o uso de Biotage (cartucho de 10 g) eluindo com um gradiente de MeOH (0 a 5%) em DCM, para obter o produto desejado como uma goma de laranja (140 mg) em mistura 1:3 com triptofol. UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,33 minuto, m/z 429/431 [M+H]+

[0267] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 8,16 (br s, 1H), 7,69 (d, J=7,3 Hz, 1H), 7,35-7,41 (m, 1H), 7,20-7,25 (m, 1H), 7,11- 7,19 (m, 1H), 7,05-7,10 (m, 1H), 4,63-4,71 (m, 2H), 4,48-4,55 (m, 2H), 3,59-

3,69 (m, 2H), 3,22-3,31 (m, 2H), 2,56-2,65 (m, 2H), 1,50 (s, 9H). ETAPA 2 4-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETOXI)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0268] Preparado de acordo com o método geral B, usando 4-(2-(1H-indol-3-il)etoxi)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(6H)-carboxilato de terca-butila:triptofol [1:3] (140 mg) e ácido 5-fluoropiridina- 3-borônico (80 mg) para gerar o produto desejado como um resíduo (20 mg, 26%).

[0269] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,38 minuto, m/z 490,3 [M+H]+

[0270] RMN de 19F (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm - 125,54 com desacoplamento de próton

[0271] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 9,39 (s, 1H), 8,57 (d, J=2,5 Hz, 1H), 8,53 (br d, J=9,3 Hz, 1H), 8,20 (br s, 1H), 7,66 (d, J=8,3 Hz, 1H), 7,37-7,41 (m, 1H), 7,21 (td, J=7,5, 1,3 Hz, 1H), 7,12-7,18 (m, 2H), 4,81 (t, J=6,8 Hz, 2H), 4,61 (s, 2H), 3,72 (t, J=5,8 Hz, 2H), 3,33 (t, J=6,7 Hz, 2H), 2,74 (br t, J=5,5 Hz, 2H), 1,54 (s, 9H). ETAPA 3 4-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETOXI)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA

[0272] Preparada de acordo com o método geral C, usando 4-(2-(1H-indol-3-il)etoxi)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (20 mg) para gerar o produto desejado como um resíduo (16 mg, 100%).

[0273] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,35 minuto, m/z 390,2 [M+H]+

[0274] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,34 com desacoplamento de próton

[0275] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,88 (br s, 1H), 9,31 (t, J=1,6 Hz, 1H), 8,70 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,29-8,41 (m, 1H),

7,61 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,26 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,08 (td, J=7,5, 1,1 Hz, 1H), 6,99 (td, J=7,5, 1,0 Hz, 1H), 4,76 (t, J=6,9 Hz, 2H), 3,84 (s, 2H), 3,22 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,97 (t, J=5,8 Hz, 2H), 2,53 (br s, 2H). Trocável de 1H não observado. EXEMPLO 12 PREPARAÇÃO DE 4-((2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-N,N-DIMETIL-5,8-DI- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-SULFONAMIDA ETAPA 1 2,4-DICLORO-N,N-DIMETIL-5,8-DI- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-SULFONAMIDA

[0276] Trietilamina (115 µl, 2 equivalentes) Foi adicionada a uma suspensão de cloridrato de 2,4-dicloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina (100 mg, 1 equivalente) em DCM (1 ml). Após agitação durante alguns minutos, foi adicionado cloreto de dimetilsulfamoíla (70 µl, 1,5 equivalente). A mistura se tornou turva. Após a conclusão (reação monitorada por análise de UPLC), DCM foi adicionado seguido de água. A fase orgânica foi, então, seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada, para gerar o produto desejado como um sólido (130 mg, 100%).

[0277] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,93 minuto, m/z 311/313[M+H]+

[0278] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 4,39 (s, 2H), 3,57-3,64 (m, 2H), 2,90-2,95 (m, 2H), 2,86 (s, 6H). ETAPA 2 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- CLORO-N,N-DIMETIL-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-

SULFONAMIDA

[0279] Preparada de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-N,N-dimetil-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- sulfonamida (130 mg) para gerar o produto desejado após purificação usando Biotage (coluna Telos 10 g, Hexano-EtOAc Eluente 5 a 30 a 50%) como um sólido branco (107 mg, 59%)

[0280] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,03 minuto, m/z 435 [M+H]+

[0281] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 8,04- 8,22 (m, 1H), 7,60-7,65 (m, 1H), 7,38-7,44 (m, 1H), 7,21-7,26 (m, 1H), 7,11- 7,17 (m, 1H), 7,05-7,08 (m, 1H), 4,79-4,88 (m, 1H), 4,19 (s, 2H), 3,81-3,89 (m, 2H), 3,48-3,54 (m, 2H), 3,07-3,14 (m, 2H), 2,84 (s, 6H), 2,17-2,25 (m, 2H) ETAPA 3 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-N,N-DIMETIL-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA- 7(6H)-SULFONAMIDA

[0282] Preparada de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-N,N-dimetil-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-sulfonamida (105 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3-borônico (60 mg) para gerar o produto desejado como um sólido branco (66 mg, 62%).

[0283] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,71 minuto, m/z 496,2 [M+H]+

[0284] RMN de 19 F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm -

127,63 com desacoplamento de próton

[0285] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (s, 1H), 9,33 (t, J=1,6 Hz, 1H), 8,68 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,26-8,44 (m, 1H), 7,60 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,29-7,41 (m, 2H), 7,22 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,08 (td, J=7,6, 1,1 Hz, 1H), 6,98 (td, J=7,4, 1,0 Hz, 1H), 4,27 (s, 2H), 3,73-3,87 (m, 2H), 3,58 (t, J=5,8 Hz, 2H), 3,05 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,77-2,86 (s, 6H), 2,52-2,56 (m, 2H) EXEMPLO 13 PREPARAÇÃO DE 4-((2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-N,N-DIMETIL-5,8-DI- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-CARBOXAMIDA ETAPA 1 2,4-DICLORO-N,N-DIMETIL-5,8-DI- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-CARBOXAMIDA

[0286] Trietilamina (115 µl, 2 equivalentes) Foi adicionada a uma suspensão de cloridrato de 2,4-dicloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina (100 mg, 1 equivalente) em DCM (1 ml). Após agitação durante alguns minutos, foi adicionado cloreto de dimetilcarbamoíla (80 µl, 1,5 equivalente). A mistura se tornou turva. Após a conclusão (reação monitorada por análise de UPLC), DCM foi adicionado seguido de água. A fase orgânica foi, então, seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada, para gerar o produto desejado como um óleo laranja claro (115 mg, 100%).

[0287] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,84 minuto, m/z 275/277 [M+H]+

[0288] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 4,42 (s, 2H), 3,53 (s, 2H), 2,88 (m, 8H). ETAPA 2 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- CLORO-N,N-DIMETIL-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-

CARBOXAMIDA

[0289] Preparada de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-N,N-dimetil-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxamida (114 mg) para gerar o produto desejado após purificação usando Biotage (coluna Telos 4 g, Hexano-EtOAc Eluente 50 a 100%) como espuma (137 mg, 83%)

[0290] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,97 minuto, m/z 399/401 [M+H]+

[0291] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 7,99- 8,20 (m, 1H), 7,61-7,67 (m, 1H), 7,36-7,43 (m, 1H), 7,19-7,26 (m, 1H), 7,10- 7,17 (m, 1H), 7,03-7,08 (m, 1H), 4,25 (s, 1H), 3,84 (d, J=5,8 Hz, 1H), 3,58 (d, J=5,6 Hz, 1H), 3,42-3,48 (m, 1H), 3,07-3,13 (m, 1H), 2,97-3,03 (m, 1H), 2,80- 2,87 (m, 6H), 2,19-2,25 (m, 1H), 1,23-1,30 (m, 1H). ETAPA 3 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-N,N-DIMETIL-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA- 7(6H)-CARBOXAMIDA

[0292] Preparada de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-N,N-dimetil-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxamida (135 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3-borônico (60 mg) para gerar o produto desejado como um sólido branco (30 mg, 20%).

[0293] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos):

temperatura ambiente 1,44 minuto, m/z 460,3 [M+H]+

[0294] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,71 com desacoplamento de próton

[0295] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (s, 1H), 9,33 (t, J=1,6 Hz, 1H), 8,67 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,28-8,39 (m, 1H), 7,60 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,26 (t, J=5,7 Hz, 1H), 7,22 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,07 (td, J=7,6, 1,1 Hz, 1H), 6,94-7,03 (m, 1H), 4,22 (s, 2H), 3,75-3,87 (m, 2H), 3,46 (t, J=5,6 Hz, 2H), 3,04 (t, J=7,6 Hz, 2H), 2,81 (s, 6H) 2H sob DMSO. EXEMPLO 14 PREPARAÇÃO DE 4-((2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-N-METIL-5,8-DI- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-CARBOXAMIDA ETAPA 1 2,4-DICLORO-N-METIL-5,8-DI- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-CARBOXAMIDA

[0296] Trietilamina (120 µl, 2 equivalentes) Foi adicionada a uma suspensão de cloridrato de 2,4-dicloro-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidina (100 mg, 1 equivalente) em DCM (1 ml). Após agitação durante alguns minutos, foi adicionado cloreto de N-metilcarbamoíla

(40 mg, 1,5 equivalente). A mistura se tornou turva. Após a conclusão (reação monitorada por análise de UPLC), DCM foi adicionado seguido de água. A fase orgânica foi, então, seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada, para gerar o produto desejado como uma espuma amarela pálida (98 mg, 91%).

[0297] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,75 minuto, m/z 261/263 [M+H]+

[0298] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 4,69- 4,80 (m, 1H), 4,57 (s, 2H), 3,73 (s, 2H), 2,85 (d, J=4,5 Hz, 5H). ETAPA 2 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- CLORO-N-METIL-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-

CARBOXAMIDA

[0299] Preparada de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-N-metil-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)- carboxamida (98 mg) para gerar o produto desejado após purificação usando Biotage (coluna Telos 10 g, DCM-MeOH Eluente 0 a 5 a 20%), seguido por trituração em DCM como um sólido (74 mg, 51%). UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,91 minuto, m/z 385 [M+H]+

[0300] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,74-10,87 (m, 1H), 7,61-7,68 (m, 1H), 7,45-7,54 (m, 1H), 7,31-7,36 (m, 1H), 7,14-7,21 (m, 1H), 7,02-7,10 (m, 1H), 6,94-7,01 (m, 1H), 6,58-6,68 (m, 1H), 4,18-4,30 (m, 2H), 3,49-3,66 (m, 4H), 2,89-3,00 (m, 2H), 2,56-2,63 (m, 3H), 2,27-2,36 (m, 2H). ETAPA 3 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-N-METIL-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA- 7(6H)-CARBOXAMIDA

[0301] Preparada de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-N-metil-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxamida (70 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3-borônico (50 mg) para gerar o produto desejado como um sólido esbranquiçado (48 mg, 62%).

[0302] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,44 minuto, m/z 446,3 [M+H]+

[0303] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,64 com desacoplamento de próton

[0304] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (s, 1H), 9,33 (t, J=1,6 Hz, 1H), 8,68 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,26-8,41 (m, 1H), 7,60 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,34 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,28 (t, J=5,6 Hz, 1H), 7,21 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,07 (td, J=7,6, 1,1 Hz, 1H), 6,97 (td, J=7,4, 1,0 Hz, 1H), 6,68 (q, J=3,9 Hz, 1H), 4,39 (s, 2H), 3,73-3,87 (m, 2H), 3,63 (t, J=5,6 Hz, 2H), 3,04 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,61 (d, J=4,4 Hz, 3H), 2,42 (br t, J=5,5 Hz, 2H). EXEMPLO 15 PREPARAÇÃO DE (4-((2-(1H-INDOL- 3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)(1-METIL-1H-PIRAZOL-5-IL)METANONA ETAPA 1 (2,4-DICLORO-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)(1-METIL-1H-PIRAZOL-5-IL)METANONA

[0305] Uma suspensão de ácido 2-metil-2H-pirazol-3- carboxílico (105 mg, 1 equivalente), CDI (200 mg, 1,5 equivalente) em DCM (10 ml) foi agitada durante 1 hora à temperatura ambiente sob atmosfera de N 2. Em seguida, cloridrato de 2,4-dicloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina (200 mg, 1 equivalente) e trietilamina (175 µl, 1,5 equivalente) foram adicionados, e a mistura de reação foi agitado durante a noite. Após a conclusão (reação monitorada por análise de UPLC), DCM foi adicionado seguido de água. A fase orgânica foi, então, seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada, para gerar o produto desejado após purificação usando Biotage (coluna Telos 10 g, DCM- MeOH Eluente 0 a 5%) como um sólido branco (208 mg, obtido como produto bruto). Dois picos foram vistos por UPLC com a mesma massa

[0306] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,84 e 0,88 minuto, m/z 312/314 [M+H]+

[0307] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm ETAPA 2 (4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-CLORO- 5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)(1-METIL-1H-PIRAZOL-5- IL)METANONA

[0308] Preparada de acordo com o método geral A, usando (2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-7(6H)-il)(1-metil-1H- pirazol-5-il)metanona (200 mg) para gerar o produto desejado após purificação usando Biotage (coluna Telos 10 g, DCM-MeOH Eluente 0 a 5%) como uma espuma amarela (150 mg, obtido como produto bruto). UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,96 minuto, m/z 436 [M+H]+

[0309] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 8,32 (br s, 1H), 7,56-7,63 (m, 1H), 7,44-7,52 (m, 1H), 7,36-7,42 (m, 1H), 7,18-7,25 (m, 1H), 7,08-7,16 (m, 1H), 7,04-7,08 (m, 1H), 4,59-4,76 (m, 2H), 3,75-4,05 (m, 7H), 3,04-3,15 (m, 2H), 2,12-2,37 (m, 2H) trocável de 2H não observado ETAPA 3 (4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)(1- METIL-1H-PIRAZOL-5-IL)METANONA

[0310] Preparada de acordo com o método geral B, usando (4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-

7(6H)-il)(1-metil-1H-pirazol-5-il)metanona (150 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3- borônico (90 mg). Foi isolada e devolvida 3 vezes para alcançar a conversão completa, a fim de gerar o produto desejado como um sólido branco (6 mg, 4%).

[0311] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,69 minuto, m/z 497,3 [M+H]+

[0312] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,62 com desacoplamento de próton

[0313] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,84 (s, 1H), 9,23-9,40 (m, 1H), 8,68 (br s, 1H), 8,25-8,42 (m, 1H), 7,60 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,54 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,29-7,43 (m, 2H), 7,23 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,04- 7,10 (m, 1H), 6,95-7,01 (m, 1H), 6,54-6,68 (m, 1H), 4,56-4,76 (m, 2H), 3,71- 4,01 (m, 7H), 3,05 (br t, J=7,5 Hz, 2H), 2,56 (br s, 2H). EXEMPLO 16 PREPARAÇÃO DE 1-(4-((2-(1H- INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)-IL)-2-AMINOETAN-1-ONA ETAPA 1 (2-(2,4-DICLORO-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-

D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)-2-OXOETIL)CARBAMATO DE TERC-BUTILA

[0314] Um reacti-vial foi carregado com cloridrato de 2,4-dicloro-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina (200 mg, 1 equivalente), BocGlyOH (146 mg, 1 equivalente), Et3N (120 µl, 1,1 equivalente) e DCM (4 ml). A essa suspensão T3P (50% em EtOAc) (500 µl, 2 equivalentes) foi adicionado lentamente, e a mistura de reação foi aquecida a 40 ºC. Após a conclusão (reação monitorada por análise de UPLC), EtOAc foi adicionado seguido de água. Em seguida, a fase orgânica foi lavada com salmoura e seca em sulfato de sódio, filtrada e evaporada, para gerar o produto desejado como uma espuma amarela (415 mg, 92%). O produto foi usado na próxima etapa sem qualquer purificação adicional

[0315] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,03 minuto, m/z 305/307 (-tBu) 261 (-Boc) [M+H]+

[0316] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 5,34- 5,52 (m, 1H), 4,83 (s, 1H), 4,61 (s, 1H), 3,88-4,12 (m, 3H), 3,67-3,81 (m, 1H), 2,80-2,99 (m, 2H), 1,44-1,48 (m, 9H) ETAPA 2 (2-(4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- CLORO-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)-2- OXOETIL)CARBAMATO DE TERC-BUTILA

[0317] Preparado de acordo com o método geral A, usando (2-(2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidin-7(6H)-il)-2- oxoetil)carbamato de terc-butila (415 mg) para gerar o produto desejado após purificação usando Biotage (coluna Telos 20 g, DCM-MeOH Eluente 0 a 5%) como uma espuma amarela (246 mg). Outro lote (236) que continha o produto e o regioisômero correspondente (20%) também foi isolado. UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,10 minuto, m/z 485/487 [M+H]+

[0318] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d ) δ ppm 8,11- 8,27 (m, 1H), 7,54-7,65 (m, 1H), 7,40 (br d, J=8,2 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,09- 7,17 (m, 1H), 7,06 (d, J=2,0 Hz, 1H), 5,32-5,57 (m, 1H), 4,72-4,94 (m, 1H), 4,59 (s, 1H), 4,35 (s, 1H), 3,93-4,04 (m, 2H), 3,74-3,90 (m, 3H), 3,49-3,59 (m, 1H),

3,10 (s, 2H), 2,13 (s, 2H), 1,46 (s, 9H). ETAPA 3 (2-(4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)-2- OXOETIL)CARBAMATO DE TERC-BUTILA

[0319] Preparado de acordo com o método geral B, usando (2-(4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidin-7(6H)-il)-2-oxoetil)carbamato de terc-butila (240 mg) e ácido 5- fluoropiridina-3-borônico (140 mg). Para gerar produto desejado como um sólido castanho-amarelado (170 mg, 62%).

[0320] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,83 minuto, m/z 546,2 [M+H]+

[0321] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,64 com desacoplamento de próton

[0322] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,78-10,87 (m, 1H), 9,30-9,35 (m, 1H), 8,64-8,70 (m, 1H), 8,28-8,36 (m, 1H), 7,58 (s, 1H), 7,34 (d, J=8,0 Hz, 2H), 7,21 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,07 (s, 1H), 6,93- 7,00 (m, 1H), 6,78-6,88 (m, 1H), 4,51 (br s, 2H), 3,86-3,98 (m, 2H), 3,71-3,85 (m, 4H), 3,34-3,44 (m, 2H), 2,99-3,09 (m, 2H), 1,39 (s, 9H) ETAPA 4 1-(4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-7(6H)-IL)-2- AMINOETAN-1-ONA

[0323] Preparado de acordo com o método geral C, usando (2-(4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-5,8 -di- hidropirido[3,4-d]pirimidin-7(6H)-il)-2-oxoetil)carbamato de terc-butila (160 mg) para gerar o produto desejado como um resíduo (58 mg, 50%).

[0324] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,25 minuto, m/z 446,3 [M+H]+

[0325] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,64 com desacoplamento de próton

[0326] RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm

10,75-10,90 (m, 1H), 9,28-9,38 (m, 1H), 8,62-8,71 (m, 1H), 8,27-8,38 (m, 1H), 7,54-7,63 (m, 1H), 7,26-7,39 (m, 2H), 7,17-7,24 (m, 1H), 7,02-7,11 (m, 1H), 6,92-7,00 (m, 1H), 4,53 (br s, 2H), 3,62-3,85 (m, 4H), 3,41-3,53 (m, 2H), 2,98- 3,08 (m, 2H), 2,37-2,46 (m, 1H), 1,64-1,94 (m, 2H) trocável de 1H não observado. EXEMPLO 17 PREPARAÇÃO TANTO DE N-(2-(1H- INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-6,7,8,9-TETRA-HIDRO-5H- PIRIMIDO[4,5-D]AZEPIN-4-AMINA (EXEMPLO 17A) QUANTO DE N-(2-(1H- INDOL-3-IL)ETIL)-7-ETIL-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-6,7,8,9-TETRA-HIDRO- 5H-PIRIMIDO[4,5-D]AZEPIN-4-AMINA (EXEMPLO 17b) ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- CLORO-5,6,8,9-TETRA-HIDRO-7H-PIRIMIDO[4,5-D]AZEPINA-7-

CARBOXILATO DE BENZILA

[0327] Preparado de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-5,6,8,9-tetra-hidro-7H-pirimido[4,5-d]azepina-7-carboxilato de benzila (270 mg) para gerar o produto desejado e regioisômero correspondente após purificação usando Biotage (coluna Telos 10 g, Hexano- EtOAc Eluente 10 a 50 a 70%) como um sólido branco (227 mg, obtido como produto em bruto).

[0328] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,12 (78%) e 1,19 (21%) minuto, m/z 476/478 [M+H]+

[0329] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,72-10,86 (m, 1H), 7,59-7,70 (m, 1H), 7,42-7,54 (m, 1H), 7,25-7,41 (m, 6H), 7,13-7,20 (m, 1H), 7,02-7,10 (m, 1H), 6,93-7,02 (m, 1H), 5,10 (s, 2H), 3,46-3,69 (m, 6H), 2,85-3,01 (m, 4H), 2,62-2,73 (m, 2H) ETAPA 2 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,8,9-TETRA-HIDRO-7H-PIRIMIDO[4,5-D]AZEPINA- 7-CARBOXILATO DE BENZILA

[0330] Preparado de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,6,8,9-tetra-hidro-7H- pirimido[4,5-d]azepina-7-carboxilato de benzila (227 mg) para gerar o produto desejado como um filme seco (80 mg, 30%). UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,12 minuto, m/z 537,2 [M+H]+

[0331] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm: 9,42 (br s, 1H), 8,52-8,69 (m, 1H), 8,14-9,00 (m, 3H), 7,51-7,68 (m, 1H), 7,31-7,47 (m, 7H), 7,00-7,26 (m, 3H), 5,06-5,29 (m, 2H), 3,95-4,09 (m, 2H), 3,76-3,93 (m, 2H), 3,40-3,91 (m, 4H), 3,12-3,30 (m, 2H), 2,45-2,70 (m, 2H) ETAPA 3 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-7-ETIL-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-6,7,8,9-TETRA-HIDRO-5H-PIRIMIDO[4,5-D]AZEPIN-4- AMINA E N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-6,7,8,9- TETRA-HIDRO-5H- PIRIMIDO[4,5-D]AZEPIN-4-AMINA

[0332] Uma pasta fluida de 10% de paládio em carbono (20 mg) em etanol (2 ml) foi adicionada, sob nitrogênio a uma solução de 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-5,6,8,9-tetra-hidro-7H- pirimido[4,5-d]azepina-7-carboxilato de benzila (60 mg) em THF (2 ml) e etanol

(8 ml). A mistura foi hidrogenada a 1 atm durante 24 horas. O catalisador foi removido por filtração através de um plugue de celite e lavado com mais etano. O filtrado foi evaporado até um volume mínimo e foi carregado diretamente em um cartucho SCX (0,5 g) sob gravidade. O cartucho foi lavado com metanol (10 ml) e, em seguida, eluído com amônia 7 M em metanol (10 ml). A fração eluída foi evaporada. A purificação em sílica (cartucho de 4 g), eluindo com um gradiente de amônia 7 M em metanol (0 a 10%) em DCM, gerou N-(2-(1H- indol-3-il)etil)-2-(5- fluoropiridin-3-il)-6,7,8,9-tetra-hidro-5H-pirimido[4,5- d]azepin-4-amina (8 mg, 18%) e N-(2-(1H-indol- 3-il)etil)-7-etil-2-(5-fluoropiridin- 3-il)-6,7,8,9-tetra-hidro-5H-pirimido[4,5-d]azepin-4-amina (18 mg, 40%). DADOS PARA N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-6,7,8,9-TETRA-HIDRO-5H-PIRIMIDO[4,5-D]AZEPIN-4- AMINA (EXEMPLO 17a)

[0333] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,20 minuto, m/z 403,3 [M+H]+

[0334] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,80 com desacoplamento de próton

[0335] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 10,83 (br s, 1H), 9,34 (t, J=1,6 Hz, 1H), 8,66 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,26-8,41 (m, 1H), 7,59 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,24 (t, J=5,5 Hz, 1H), 7,20 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,04-7,11 (m, 1H), 6,92-7,02 (m, 1H), 3,69-3,81 (m, 2H), 2,99-3,09 (m, 2H), 2,92-2,99 (m, 2H), 2,82-2,89 (m, 2H), 2,70-2,81 (m, 4H) (trocável de 1H não observado). DADOS PARA N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-7-ETIL-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-6,7,8,9-TETRA-HIDRO-5H-PIRIMIDO[4,5-D]AZEPIN-4- AMINA (EXEMPLO 17b)

[0336] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,25 minuto, m/z 431,3 [M+H]+

[0337] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,78 com desacoplamento de próton

[0338] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 10,83 (s, 1H), 9,34 (t, J=1,6 Hz, 1H), 8,66 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,26-8,39 (m, 1H), 7,58 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,34 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,29 (t, J=5,5 Hz, 1H), 7,20 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,07 (td, J=7,5, 1,1 Hz, 1H), 6,93-7,03 (m, 1H), 3,66-3,85 (m, 2H), 2,99-3,08 (m, 2H), 2,91-2,99 (m, 2H), 2,70-2,79 (m, 2H), 2,57-2,66 (m, 2H), 2,53 (br d, J=3,4 Hz, 2H), 2,49 (br s, 2H), 1,03 (t, J=7,2 Hz, 3H)

[0339] RMN de 19F (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm - 127,82 com desacoplamento de próton

[0340] RMN de 1H (CDCl3-d) δ ppm: 9,46 (t, J=1,6 Hz, 1H), 8,55 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,35-8,42 (m, 1H), 8,22 (br s, 1H), 7,60 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,42 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,23 (td, J=7,6, 1,1 Hz, 1H), 7,05-7,16 (m, 2H), 5,09 (br s, 1H), 3,96 (q, J=6,4 Hz, 2H), 2,54-3,47 (m, 12H), 1,23-1,51 (m, 3H). EXEMPLO 18 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-7-BENZIL-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-8,8-DIMETIL-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA (EXEMPLO 18A) E N-(2-(1H- INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-8,8-DIMETIL-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA (EXEMPLO 18b).

ETAPA 1: 4-((1-METOXI-2-METIL-1-OXOPROPAN-2- IL)AMINO)BUTANOATO DE METILA

[0341] Uma solução de 2-amino-2-metilpropanoato de metila (500 mg, 3,25 mmol) em dicloroetano foi agitada à temperatura ambiente, em seguida, trietilamina (1,6 equivalente, 5,2 mmol), Na (OAc)3BH (2,5 equivalentes, 8,1 mmol) e 4-oxobutanoato de metila (0,9 equivalente, 2,9 mmol) foram adicionados sob N2, e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 18 horas. A mistura de reação foi extinta com solução de NaHCO3 durante 30 minutos, em seguida, a solução aquosa foi extraída duas vezes com DCM. A solução orgânica foi seca em Na2SO4 e evaporada sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica usando acetato de etila em hexano como fase móvel para fornecer 4-((1-metoxi-2-metil-1-oxopropan-2-

il)amino)butanoato de metila (0,466 g, 74%) como um óleo amarelado. UPLC- MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 0,84 minuto, m/z 218,2 [M+H]+

[0342] RMN de 1H (DMSO-d6) δ ppm: 3,60 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 2,29-2,39 (m, 4H), 1,54-1,64 (m, 2H), 1,17 (t, J=7,0 Hz, 6H) ETAPA 2: 4-(BENZIL(1-METOXI-2-METIL-1- OXOPROPAN-2-IL)AMINO)BUTANOATO DE METILA

[0343] Uma solução de 4-((1-metoxi-2-metil-1- oxopropan-2-il)amino)butanoato de metila (466 mg, 2,15 mmol) em acetona foi agitada e desgaseificada à temperatura ambiente sob N 2, em seguida, carbonato de potássio (1,2 equivalente, 2,6 mmol) e brometo de benzila (1,5 equivalente, 3,2 mmol) foram adicionados, e a mistura resultante foi agitada a 70 ºC durante 72 horas. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida, e o resíduo foi diluído em água e extraído duas vezes com EtOAc. A solução orgânica foi lavada com salmoura, seca em Na 2SO4 e evaporada sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna sobre gel de sílica usando acetato de etila em hexano como fase móvel para gerar 4- (benzil(1-metoxi-2-metil-1-oxopropan-2-il)amino)butanoato de metila (0,59 g, 89 %) como um óleo amarelado. UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,26 minuto, m/z 308,1 [M+H]+

[0344] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 7,32-7,38 (m, 2H), 7,29 (t, J=7,6 Hz, 2H), 7,18 (s, 1H), 3,74 (s, 2H), 3,63 (s, 3H), 3,51 (s, 3H), 2,53-2,59 (m, 2H), 2,16 (t, J=7,2 Hz, 2H), 1,39 (quin, J=7,3 Hz, 2H), 1,28 (s, 6H) ETAPA 3: 1-BENZIL-2,2-DIMETIL-3-OXOPIPERIDINA-4-

CARBOXILATO DE METILA

[0345] Uma solução de 4-(benzil(1-metoxi-2-metil-1- oxopropan-2-il)amino)butanoato de metila (590 mg, 1,92 mmol) em THF foi agitada à temperatura ambiente com terc-butóxido de potássio (2,0 equivalentes, 3,84 mmol) durante 1 hora. A mistura de reação foi extinta com solução de NaHCO3 durante 30 minutos e extraída duas vezes com EtOAc. A solução orgânica foi lavada com salmoura, seca em Na 2SO4 e evaporada sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica usando acetato de etil em hexano como fase móvel para gerar 1-benzil-2,2-dimetil-3-oxopiperidina-4-carboxilato de metila (0,4 g, 76%) como um óleo (85 % de pureza por UPLCMS).

[0346] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,41 minuto, m/z 276,2 [M+H]+

[0347] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 7,25-7,37 (m, 6H), 3,71 (s, 3H), 3,65 (s, 1H), 2,44 (s, 3H), 2,05-2,10 (m, 2H), 1,33 (s, 6H) ETAPA 4: 7-BENZIL-8,8-DIMETIL-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-2,4(1H, 3H)-DIONA

[0348] A uma solução de 1-benzil-2,2-dimetil-3- oxopiperidina-4-carboxilato de metila (400 mg, 1,45 mmol) em etanol foram adicionados terc-butóxido de potássio (2,5 equivalente, 3,64 mmol) e ureia (2,5 equivalente, 3,64 mmol), e a mistura resultante foi agitada sob refluxo durante 18 horas. A mistura de reação foi extinta com água, e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído em água e extraído duas vezes com EtOAc. A solução orgânica foi lavada com salmoura, seca em Na 2SO4 e evaporada sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em coluna de gel de sílica usando acetato de etila em hexano como fase móvel para fornecer 7-benzil-8,8-dimetil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4- d]pirimidina-2, 4 (1H, 3H)-diona (0,2 g, 48%) como um óleo (80% de pureza por UPLCMS). UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 0,95 minuto, m/z 286,2 [M+H]+

[0349] Não houve relato de RMN. ETAPA 5: 7-BENZIL-2,4-DICLORO-8,8-DIMETIL-5,6,7,8- TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA

[0350] Uma solução de 7-benzil-8,8-dimetil-5,6,7,8-

tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina-2,4(1H,3H)-diona (200 mg, 0,7 mmol) em POCl3 (30 em volume, 3,65 ml) na presença de DMF catalítica foi agitada a 85 ºC sob N2 durante 18 horas. A mistura de reação foi extinta por adição lenta de água e agitada 15 minutos. A solução aquosa foi extraída com EtOAc 3 vezes, em seguida, a solução orgânica foi lavada duas vezes com solução de NaHCO3 e uma vez com salmoura. A solução orgânica foi seca em Na2SO4 e evaporada sob pressão reduzida para gerar 7-Benzil-2,4-dicloro-8,8-dimetil- 5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina (44 mg, 20%) como um óleo amarelo (87% de pureza por UPLCMS).

[0351] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,46 minuto, m/z 322,1 [M+H]+ ETAPA 6: N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-7-BENZIL-2- CLORO-8,8-DIMETIL-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN 4- AMINA (MÉTODO GERAL A)

[0352] Preparado de acordo com o método geral A, usando 7-Benzil-2,4-dicloro-8,8-dimetil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidina (44 mg) para gerar N-(2-(1H-indol-3-il)etil)-7-benzil-2-cloro-8,8-dimetil-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-amina (48 mg, 77%) como uma goma marrom (67% de pureza por UPLCMS, 26% de triptamina ainda presente).

[0353] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,43 minuto, m/z 446,2 [M+H]+

[0354] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 10,81 (br s, 1H), 7,27-7,35 (m, 6H), 6,92-7,09 (m, 5H), 3,67 (s, 2H), 3,53-3,63 (m, 2H), 2,91-2,97 (m, 2H), 2,84-2,91 (m, 2H), 2,77-2,84 (m, 2H), 1,39 (s, 6H) ETAPA 7: N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-7-BENZIL-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-8,8-DIMETIL-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDIN-4-AMINA (EXEMPLO 18a)

[0355] Preparado de acordo com o método geral B, usando N-(2-(1H-indol-3-il)etil)-7-benzil-2-cloro-8,8-dimetil-5,6,7,8-tetra- hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-amina (48 mg) para gerar N-(2-(1H-indol-3-il)etil)-7-

benzil-2-(5-fluoropiridin-3-il)-8,8-dimetil-5,6,7,8-tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin- 4-amina (48 mg, 77%) como uma espuma.

[0356] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,39 minuto, m/z 507,3 [M+H]+

[0357] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,78 com desacoplamento de próton

[0358] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 10,82 (s, 1H), 9,39 (t, J=1,6 Hz, 1H), 8,67 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,36-8,41 (m, 1H), 7,60 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,31-7,42 (m, 5H), 7,18-7,31 (m, 2H), 7,04-7,12 (m, 2H), 6,91-7,04 (m, 1H), 3,74-3,83 (m, 2H), 3,72 (s, 2H), 2,98-3,07 (m, 2H), 1,51 (s, 6H) ETAPA 8: N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-8,8-DIMETIL-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDIN-4-AMINA (EXEMPLO 18b)

[0359] Uma pasta fluida de 10% de paládio sobre carbono (20 mg) em etanol (2 ml) foi adicionada, sob nitrogênio a uma solução de N-(2-(1H-indol-3-il)etil)-7-benzil-2-(5-fluoropiridin-3-il)-8,8-dimetil-5,6,7,8- tetra-hidropirido[3,4-d]pirimidin-4-amina (22 mg) em THF (2 ml) e etanol (8 ml). A mistura foi hidrogenada a 1 atm durante 24 horas. O catalisador foi removido por filtração através de um plugue de celite e lavado com mais etano. O filtrado foi evaporado até secura. A purificação em sílica (cartucho de 4 g), eluindo com um gradiente de amônia 7 M em metanol (0 a 5%) em DCM, gerou o produto como um vidro incolor (8 mg, 44%).

[0360] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,43 minuto, m/z 417,3 [M+H]+

[0361] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,84 com desacoplamento de próton

[0362] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 10,83 (s, 1H), 9,36 (t, J=1,6 Hz, 1H), 8,66 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,29-8,43 (m, 1H), 7,62 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,22 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,02-7,12

(m, 2H), 6,98 (td, J=7,4, 0,9 Hz, 1H), 3,66-3,91 (m, 2H), 3,01-3,08 (m, 2H), 2,98 (br t, J=5,7 Hz, 2H), 2,30-2,40 (m, 2H), 1,39 (s, 6H) (trocável de 1H não observado). EXEMPLO 19 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H- BENZO[D]IMIDAZOL-2-IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 4-((2-(1H-BENZO[D]IMIDAZOL-2- IL)ETIL)AMINO)-2-CLORO-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0363] Preparado de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc- butila (300 mg) e 2-(1H-2-benzoimidazolil)-etilamina (160 mg, 1 equivalente) para gerar o produto desejado e o regioisômero correspondente (8%) após purificação com o uso de Biotage (coluna Telos 20 g, DCM-MeoH Eluente 0 a 5%) como um sólido amarelo (226 mg, 53%).

[0364] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,86 minuto, m/z 429/431 [M+H]+

[0365] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 7,48- 7,65 (m, 2H), 7,22-7,27 (m, 2H), 4,37-4,47 (m, 2H), 3,99-4,10 (m, 2H), 3,63- 3,73 (m, 2H), 3,19-3,27 (m, 2H), 2,34-2,47 (m, 2H), 1,41-1,49 (m, 9H) (trocável de 2H não observado). ETAPA 2 4-((2-(1H-BENZO[D]IMIDAZOL-2- IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDINA-7(6H)-CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0366] Preparado de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (220 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3- borônico (140 mg) para gerar o produto desejado como um resíduo (130 mg, 50%).

[0367] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,90 minuto, m/z 490,2 [M+H]+

[0368] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,69 com desacoplamento de próton

[0369] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12,23-12,31 (m, 1H), 9,29-9,36 (m, 1H), 8,63-8,69 (m, 1H), 8,35-8,44 (m, 1H), 7,49-7,57 (m, 1H), 7,31-7,43 (m, 2H), 7,04-7,15 (m, 2H), 4,35-4,46 (m, 2H), 3,91-4,02 (m, 2H), 3,59-3,70 (m, 2H), 3,18-3,22 (m, 2H), 2,40-2,47 (m, 2H), 1,41-1,49 (m, 9H) ETAPA 3 N-(2-(1H-BENZO[D]IMIDAZOL-2-IL)ETIL)-2- (5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-4-

AMINA

[0370] Preparado de acordo com o método geral C, com o uso de 4-((2-(1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)- 5,8 -di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (120 mg) para proporcionar o produto desejado (70 mg, 73%).

[0371] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,22 minuto, m/z 390,2 [M+H]+

[0372] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,81 com desacoplamento de próton

[0373] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12,17-12,35 (m, 1H), 9,28-9,37 (m, 1H), 8,61-8,67 (m, 1H), 8,33-8,42 (m, 1H), 7,47-7,59 (m, 1H), 7,33-7,45 (m, 1H), 7,15-7,23 (m, 1H), 7,05-7,14 (m, 2H), 3,96 (br d, J=5,9 Hz, 2H), 3,71 (s, 2H), 3,19 (t, J=7,2 Hz, 2H), 2,98 (t, J=5,7 Hz, 2H), 2,68-2,92 (m, 1H), 2,28-2,38 (m, 2H). EXEMPLO 20 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(5-METILPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- METILPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0374] Preparado de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(6H)-carboxilato de terc-butila (180 mg) e ácido 5-metilpiridina-3-borônico (100 mg), para gerar o produto desejado como um resíduo (60 mg, 30%).

[0375] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,66 minuto, m/z 485,3 [M+H]+

[0376] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,80-10,88 (m, 1H), 9,24-9,32 (m, 1H), 8,46-8,52 (m, 1H), 8,36-8,43 (m, 1H),

7,57-7,63 (m, 1H), 7,32-7,38 (m, 1H), 7,21 (d, J=2,1 Hz, 2H), 7,03-7,11 (m, 1H), 6,93-7,00 (m, 1H), 4,34-4,45 (m, 2H), 3,73-3,85 (m, 2H), 3,60-3,69 (m, 2H), 3,00-3,09 (m, 2H), 2,41-2,46 (m, 2H), 2,35-2,39 (m, 3H), 1,44 (s, 9H) ETAPA 2 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- METILPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0377] Preparada de acordo com o método geral C, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-metilpiridin-3-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (50 mg), para gerar o produto desejado (22 mg, 50%). UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,55 minuto, m/z 385,2 [M+H]+

[0378] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,78-10,89 (m, 1H), 9,22-9,31 (m, 1H), 8,43-8,53 (m, 1H), 8,34-8,43 (m, 1H), 7,58-7,65 (m, 1H), 7,31-7,39 (m, 1H), 7,18-7,23 (m, 1H), 6,93-7,12 (m, 3H), 3,73 (br s, 4H), 2,89-3,15 (m, 4H), 2,26-2,43 (m, 5H) (trocável de 1H não observado). EXEMPLO 21 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3- D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-6(5H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0379] Preparado de acordo com o método geral B, 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-7,8-di-hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)- carboxilato de terc-butila (230 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3-borônico (90 mg) para gerar o produto desejado como um resíduo (130 mg, 49%).

[0380] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,29 minuto, m/z 489 [M+H]+

[0381] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,96 com desacoplamento de próton

[0382] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 9,41- 9,47 (m, 1H), 8,50-8,55 (m, 1H), 8,33-8,41 (m, 1H), 8,05-8,14 (m, 1H), 7,60- 7,65 (m, 1H), 7,37-7,42 (m, 1H), 7,20-7,26 (m, 1H), 7,12-7,18 (m, 1H), 7,07- 7,11 (m, 1H), 4,52-4,66 (m, 1H), 4,07-4,18 (m, 2H), 3,93-4,02 (m, 2H), 3,66- 3,75 (m, 2H), 3,10-3,21 (m, 2H), 2,81-2,90 (m, 2H), 1,50 (s, 9H) ETAPA 2 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDIN-4-

AMINA

[0383] HCl 5 N em IPA (2 ml) foi adicionado a uma solução de 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-7,8-di- hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc-butila (130 mg) em DCM (5 ml). A cor da mistura de reação escureceu. Após 7 horas, a mistura de reação foi evaporada. Resina SCX solta (0,5 g) foi adicionada seguida por água/metanol/acetonitrila. Girar até mistura durante aproximadamente 10 minutos, depois, colocar em um tubo com frita e deixar drenar. O cartucho SCX então formado foi lavado com metanol (10 ml). O produto foi eluído como a base livre, eluindo com amônia 7 M em metanol (10 ml), em seguida, DCM:amônia 7 M em metanol. O material de base livre foi evaporado, em seguida, triturado com éter dietílico e filtrado para gerar o produto desejado como um sólido branco (55 mg, 53%). UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,61 minuto, m/z 389 [M+H]+

[0384] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6 +D2O) δ ppm 9,21 (s, 1H), 8,59 (d, J=2,8 Hz, 1H), 8,21-8,30 (m, 1H), 7,53-7,61 (m, 1H), 7,28-7,36 (m, 1H), 7,15 (s, 1H), 7,00-7,09 (m, 1H), 6,91-6,99 (m, 1H), 3,70-3,79 (m, 2H), 3,59 (s, 2H), 2,94-3,08 (m, 4H), 2,64-2,73 (m, 2H) EXEMPLO 22 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(5-CLOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- CLOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)- CARBOXILATO D TERC-BUTILA

[0385] Preparado de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(6H)-carboxilato de terc-butila (180 mg) e ácido 5-cloropiridina-3-borônico (110 mg), para gerar o produto desejado como um resíduo (90 mg, 40%).

[0386] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 2,27 minuto, m/z 505,2/507,2 [M+H]+

[0387] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,79-10,89 (m, 1H), 9,34-9,41 (m, 1H), 8,69-8,75 (m, 1H), 8,55-8,61 (m, 1H), 7,57-7,63 (m, 1H), 7,27-7,38 (m, 2H), 7,18-7,24 (m, 1H), 7,03-7,11 (m, 1H), 6,95-7,02 (m, 1H), 4,36-4,44 (m, 2H), 3,74-3,83 (m, 2H), 3,60-3,68 (m, 2H), 3,00-3,09 (m, 2H), 2,41-2,47 (m, 2H), 1,44 (s, 9H) ETAPA 2 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- CLOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-

AMINA

[0388] Preparado de acordo com o método geral C, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-cloropiridin-3-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (85 mg) para obter o produto desejado (45 mg, 65%).

[0389] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,73 minuto, m/z 405,2/407,2 [M+H]+

[0390] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,79-10,88 (m, 1H), 9,37 (d, J=1,4 Hz, 1H), 8,67-8,74 (m, 1H), 8,54-8,61 (m, 1H), 7,58-7,66 (m, 1H), 7,31-7,38 (m, 1H), 7,20 (d, J=1,6 Hz, 1H), 7,04-7,14 (m, 2H), 6,96-7,03 (m, 1H), 3,71 (s, 4H), 2,96-3,09 (m, 4H), 2,71-2,91 (m, 1H), 2,28- 2,38 (m, 2H) EXEMPLO 23 PREPARAÇÃO DE 5-(4-((2-(1H- INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-2- IL)NICOTINONITRILA ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- CYANOPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0391] Preparado de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina- 7(6H)-carboxilato de terc-butila (180 mg) e ácido 5-cianopiridina-3-borônico (105 mg), para gerar o produto desejado como um resíduo (100 mg, 50%).

[0392] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 2,12 minuto, m/z 496,3 [M+H]+

[0393] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,76-10,85 (m, 1H), 9,63 (d, J=2,0 Hz, 1H), 9,10 (d, J=2,1 Hz, 1H), 8,88 (s, 1H), 7,56-7,62 (m, 1H), 7,32 (s, 2H), 7,18-7,22 (m, 1H), 7,03-7,09 (m, 1H), 6,96- 7,02 (m, 1H), 4,35-4,45 (m, 2H), 3,75-3,85 (m, 2H), 3,59-3,69 (m, 2H), 2,99- 3,07 (m, 2H), 2,40-2,48 (m, 2H), 1,44 (s, 9H) ETAPA 2 5-(4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)- 5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-2-IL) NICOTINONITRILA

[0394] Preparado de acordo com o método geral C, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-cianopiridin-3-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (90 mg), para obter o produto desejado (33 mg, 45%). UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,57 minuto, m/z 396,2 [M+H]+

[0395] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,79-10,85 (m, 1H), 9,61-9,67 (m, 1H), 9,06-9,12 (m, 1H), 8,83-8,90 (m, 1H), 7,57-7,65 (m, 1H), 7,30-7,37 (m, 1H), 7,17-7,23 (m, 1H), 7,11-7,17 (m, 1H), 7,03-7,10 (m, 1H), 6,96-7,03 (m, 1H), 3,75-3,85 (m, 2H), 3,72 (s, 2H), 2,96-3,07 (m, 4H), 2,68-2,85 (m, 1H), 2,30-2,37 (m, 2H) EXEMPLO 24 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-6,7-DI-HIDRO-5H-PIRROL[3,4-D]PIRIMIDINA-4-AMINA ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,7-DI-HIDRO-6H-PIRROL[3,4-D]PIRIMIDINA-6-

CARBOXILATO DE T-BUTILA

[0396] Preparado de acordo com o método geral B, com o uso de 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-5,7-di-hidro-6H-pirrol[3,4- d]pirimidina-6-carboxilato de t-butila (520 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3- borônico (400 mg) para gerar o produto desejado como um sólido branco (550 mg, 90%).

[0397] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 2,00 minutos, m/z 475,2 [M+H]+

[0398] RMN de 19F(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,18 -127,56 (1F, d) com desacoplamento de próton (rotâmeros)

[0399] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 10,82 (s, 1H), 9,31 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,68 (d, J=2,8 Hz, 1H), 8,31 (ddt, J=8,4, 3,3, 1,6 Hz, 1H), 7,72 (br d, J=3,3 Hz, 1H), 7,59 (br d, J=7,9 Hz, 1H), 7,34 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,21 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,03-7,11 (m, 1H), 6,94-7,02 (m, 1H), 4,71-4,81 (m, 1H), 4,37-4,53 (m, 4H), 3,78 (q, J=6,4 Hz, 2H), 3,03 (br t, J=7,5 Hz, 2H), 1,48 (d, J=4,8 Hz, 9H). (rotâmeros) ETAPA 2 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-6,7-DI-HIDRO-5H-PIRROL[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0400] TFA (3,0 ml) foi adicionado a uma solução de 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-5,7-di-hidro-6H-pirrol[3,4- d]pirimidina-6-carboxilato de t-butila (540 mg) em DCM (20 ml). Uma vez concluída, conforme avaliado por UPLC, a mistura de reação foi evaporada e, em seguida, dividida entre amônia aquosa a 10% e acetato de etila. A fase orgânica foi separada e evaporada. O material de base livre foi evaporado, em seguida, triturado sequencialmente com éter dietílico, depois com DCM e filtrado para obter o produto desejado como um sólido branco (270 mg, 62%).

[0401] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,02 minuto, m/z 375,2 [M+H]+

[0402] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,72 com desacoplamento de próton

[0403] RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83 (br s, 1H), 9,34 (s, 1H), 8,67 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,30-8,41 (m, 1H), 7,61 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,43 (br t, J=5,6 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,21 (d, J=1,9 Hz, 1H), 7,08 (t, J=7,3 Hz, 1H), 6,94-7,03 (m, 1H), 3,98 (br d, J=5,6 Hz, 4H), 3,71-3,87 (m, 2H), 2,99-3,10 (m, 2H). trocável de 1H não observado EXEMPLO 25 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-6-(METILSULFONIL)-6,7-DI-HIDRO-5H-PIRROL[3,4- D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-6-(METILSULFONIL)-6,7-DI-HIDRO-5H-PIRROL[3,4- D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0404] Cloreto de metanossulfonila (50 µl) foi adicionado a uma suspensão de N-(2-(1H-indol-3-il)etil)-2-(5-fluoropiridin-3-il)- 6,7-di-hidro-5H-pirrol[3,4-d]pirimidin-4-amina (90 mg) em DCM (10 ml), com trietilamina (300 µl). Após 2 horas, foi adicionado amoníaco aquoso a 33% (1 ml). A mistura de reação foi evaporada e purificada em um cartucho de sílica eluindo com um gradiente de metanol (0-2%) em DCM. O produto foi purificado adicionalmente em um cartucho de sílica eluindo com um gradiente de acetato de etila (10-80%) em hexano. A trituração em éter e filtrada para proporcionar o produto desejado como um sólido branco (50 mg, 45%).

[0405] UPLC-MS (Método Ácido, 4 minutos): temperatura ambiente 1,61 minuto, m/z 453,2 [M+H]+

[0406] RMN de 19 F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,45 com desacoplamento de próton

[0407] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,84 (br s, 1H), 9,33 (t, J=1,5 Hz, 1H), 8,70 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,30-8,37 (m, 1H), 7,74-7,78 (m, 1H), 7,59 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,34 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,24 (d, J=2,3 Hz, 1H), 7,04-7,11 (m, 1H), 6,94-7,02 (m, 1H), 4,44-4,63 (m, 4H), 3,77-3,84 (m, 2H), 2,99-3,11 (m, 5H). EXEMPLO 26 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- METILPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2- CLORO-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-6(5H)-CARBOXILATO DE T-

BUTILA

[0408] Preparado de acordo com o método geral A, com o uso de 2,4-dicloro-7,8-di-hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de t-butila (410 mg) para gerar o produto desejado como um sólido (630 mg,> 100%)

[0409] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos):

temperatura ambiente 1,21 minuto, m/z 428/430 [M+H]+

[0410] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 7,97- 8,18 (m, 1H), 7,59-7,68 (m, 1H), 7,34-7,44 (m, 1H), 7,19-7,26 (m, 1H), 7,11- 7,18 (m, 1H), 7,05-7,09 (m, 1H), 4,09-4,17 (m, 2H), 3,79-3,90 (m, 2H), 3,59- 3,68 (m, 2H), 3,04-3,15 (m, 2H), 2,70-2,80 (m, 2H), 1,46-1,52 (m, 9H). ETAPA 2 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- METILPIRIDIN-3-IL)-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-6(5H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0411] Preparado de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-7,8-di-hidropirido[4,3-d]pirimidina- 6(5H)-carboxilato de t-butila (180 mg) e ácido 5-metilpiridina-3-borônico (100 mg) para gerar o produto desejado como uma espuma com cor creme (100 mg, 49%).

[0412] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,04 minuto, m/z 485 [M+H]+

[0413] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 9,35- 9,39 (m, 1H), 8,81-8,88 (m, 1H), 8,50-8,54 (m, 1H), 8,26-8,37 (m, 1H), 7,56- 7,62 (m, 1H), 7,35-7,41 (m, 1H), 7,16-7,23 (m, 1H), 7,08-7,15 (m, 2H), 4,12- 4,19 (m, 2H), 3,93-4,02 (m, 2H), 3,67-3,75 (m, 2H), 3,11-3,22 (m, 2H), 2,86- 2,94 (m, 2H), 2,53 (s, 3H), 1,50 (s, 9H) (trocável de 2H não observado). ETAPA 3 N-(2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- METILPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

[0414] Preparado de acordo com o método geral C, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-metilpiridin-3-il)-7,8-di- hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc-butila (100 mg), para gerar o produto desejado como um sólido branco (26 mg, 56%).

[0415] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,53 minuto, m/z 385 [M+H]+

[0416] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,78-10,90 (m, 1H), 9,23-9,32 (m, 1H), 8,44-8,51 (m, 1H), 8,35-8,44 (m, 1H),

7,56-7,67 (m, 1H), 7,30-7,41 (m, 1H), 7,16-7,25 (m, 1H), 7,02-7,13 (m, 1H), 6,94-7,01 (m, 1H), 6,84-6,93 (m, 1H), 3,70-3,83 (m, 2H), 3,56 (s, 2H), 3,00-3,09 (m, 2H), 2,93-3,00 (m, 2H), 2,63 (br s, 2H), 2,37 (s, 3H) (trocável de 1H não observado). EXEMPLO 27 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(5-CLOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3- D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 4-((2-(1H-INDOL-3-IL)ETIL)AMINO)-2-(5- CLOROPIRIDIN-3-IL)-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-6(5H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0417] Preparado de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-cloro-7,8-di-hidropirido[4,3-d]pirimidina- 6(5H)-carboxilato (180 mg) e ácido 5-cloropiridina-3-borônico (100 mg) para gerar o produto desejado como um resíduo (130 mg, 53%).

[0418] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,21 minuto, m/z 505/507 [M+H]+

[0419] RMN de 1H (400 MHz, CDCl3-d) δ ppm 9,44- 9,46 (m, 1H), 8,61-8,65 (m, 1H), 7,59-7,65 (m, 1H), 7,35-7,43 (m, 3H), 7,08- 7,08 (m, 1H), 6,89 (s, 1H), 6,62-6,69 (m, 1H), 6,11-6,20 (m, 1H), 4,12-4,15 (m, 2H), 3,99-4,02 (m, 2H), 3,69-3,72 (m, 2H), 3,14-3,18 (m, 2H), 2,95-2,98 (m, 2H), 1,49-1,50 (m, 9H)

ETAPA 2 TETRA-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDIN-4-

AMINA

[0420] Preparada de acordo com o método geral C, usando 4-((2-(1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-cloropiridin-3-il)-7,8-di- hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc-butila (130 mg), a fim de obter o produto desejado como um sólido branco (50 mg, 48%).

[0421] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,73 minuto, m/z 405/407 [M+H]+

[0422] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,77-10,90 (m, 1H), 9,34-9,42 (m, 1H), 8,68-8,73 (m, 1H), 8,56-8,61 (m, 1H), 7,57-7,65 (m, 1H), 7,31-7,38 (m, 1H), 7,17-7,23 (m, 1H), 7,03-7,12 (m, 1H), 6,94-7,03 (m, 2H), 3,71-3,82 (m, 2H), 3,55 (s, 2H), 2,92-3,08 (m, 4H), 2,59-2,65 (m, 2H) (trocável de 1H não observado). EXEMPLO 28 PREPARAÇÃO DE N-(2-(1H- BENZO[D]IMIDAZOL-2-IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 4-((2-(1H-BENZO[D]IMIDAZOL-2- IL)ETIL)AMINO)-2-CLORO-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-6(5H)-

CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0423] Preparado de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-7,8-di-hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc- butila (200 mg) e 2-(1H-2-benzoimidazolil)-etilamina (105 mg, 1 equivalente) para gerar o produto desejado após filtração e enxágue com DCM como um sólido branco (105 mg, 37%).

[0424] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,85 minuto, m/z 429/431 [M+H]+

[0425] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7,50- 7,67 (m, 2H), 7,37-7,45 (m, 1H), 7,05-7,18 (m, 2H), 4,16 (s, 2H), 3,74-3,87 (m, 2H), 3,57 (s, 2H), 3,07-3,17 (m, 2H), 2,56-2,65 (m, 2H), 1,41 (s, 9H) (trocável de 1H não observado). ETAPA 2 4-((2-(1H-BENZO[D]IMIDAZOL-2- IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3- D]PIRIMIDINA-6(5H)-CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0426] Preparado de acordo com o método geral B, usando 4-((2-(1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)amino)-2-cloro-7,8-di-hidropirido[4,3- d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc-butila (100 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3- borônico (70 mg) para gerar o produto desejado (60 mg, 75%).

[0427] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 0,90 minuto, m/z 490 [M+H]+

[0428] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,69 com desacoplamento de próton

[0429] RMN de 1 H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12,21-12,31 (m, 1H), 9,31-9,36 (m, 1H), 8,66 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,35-8,43 (m, 1H), 7,50-7,57 (m, 1H), 7,33-7,42 (m, 2H), 7,07-7,13 (m, 2H), 4,25 (s, 2H), 3,93- 4,02 (m, 2H), 3,60-3,68 (m, 2H), 3,16-3,24 (m, 2H), 2,69-2,77 (m, 2H), 1,43 (s, 9H) ETAPA 3 N-(2-(1H-BENZO[D]IMIDAZOL-2-IL)ETIL)-2- (5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-4-

AMINA

[0430] Preparada de acordo com o método geral C, usando 4-((2-(1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-7,8-di- hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc-butila (55 mg) para obter o produto desejado como um sólido esbranquiçado (25 mg, 58%).

[0431] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,22 minuto, m/z 390 [M+H]+

[0432] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 127,82 com desacoplamento de próton

[0433] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12,17-12,36 (m, 1H), 9,33 (s, 1H), 8,64 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,32-8,45 (m, 1H), 7,47-7,58 (m, 1H), 7,36-7,44 (m, 1H), 7,01-7,16 (m, 3H), 3,88-4,02 (m, 2H), 3,55 (s, 2H), 3,12-3,26 (m, 2H), 2,89-3,03 (m, 2H), 2,59-2,67 (m, 2H) (trocável de 1H não observado). EXEMPLO 29 PREPARAÇÃO DE N-(2-(6-FLUORO- 1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

ETAPA 1 2-CLORO-4-((2-(6-FLUORO-1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0434] Preparado de acordo com o método geral A, com o uso de 2,4-dicloro-5,6-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(8H)-carboxilato de t-butila (250 mg) e de cloridrato de 2-(6-fluoro-1H-indol-3-il)etamina (176 mg, 1 equivalente). A purificação por trituração com DCM gerou o produto desejado como um sólido branco (110 mg, 30%). UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,23 minuto, m/z 446/448 [M+H]+

[0435] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 122,42 com desacoplamento de próton

[0436] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,84-10,93 (m, 1H), 7,60-7,67 (m, 1H), 7,49-7,58 (m, 1H), 7,15-7,20 (m, 1H), 7,06-7,13 (m, 1H), 6,79-6,87 (m, 1H), 4,26 (br s, 2H), 3,53-3,65 (m, 4H), 2,89- 2,96 (m, 2H), 2,30-2,40 (m, 2H), 1,42 (s, 9H) ETAPA 2 4-((2-(6-FLUORO-1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDINA-7(6H)-CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0437] Preparado de acordo com o método geral B, usando 2-cloro-4-((2-(6-fluoro-1H-indol-3-il)etil)amino)-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (105 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3- borônico (65 mg) para gerar o produto desejado como um sólido (55 mg, 74%).

[0438] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,26 minuto, m/z 507 [M+H]+

[0439] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 122,49/-127,68 com desacoplamento de próton

[0440] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,86-10,93 (m, 1H), 9,26-9,33 (m, 1H), 8,64-8,70 (m, 1H), 8,25-8,32 (m, 1H), 7,52-7,58 (m, 2H), 7,18-7,22 (m, 1H), 7,06-7,13 (m, 1H), 6,77-6,85 (m, 1H), 4,37-4,44 (m, 2H), 3,74-3,83 (m, 2H), 3,60-3,68 (m,2H), 2,98-3,06 (m,2H), 2,39-

2,46 (m, 2H), 1,44 (s, 9H) ETAPA 3 1N-(2-(6-FLUORO-1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-4-

AMINA

[0441] Preparado de acordo com o método geral C, usando 4-((2-(6-fluoro-1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (55 mg) para obter o produto desejado como um sólido marrom (14 mg, 32%).

[0442] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,65 minuto, m/z 407 [M+H]+

[0443] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 122,48, -127,80 com desacoplamento de próton

[0444] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,83-10,95 (m, 1H), 9,24-9,33 (m, 1H), 8,60-8,68 (m, 1H), 8,21-8,32 (m, 1H), 7,53-7,62 (m, 1H), 7,17-7,23 (m, 1H), 7,04-7,14 (m, 2H), 6,76-6,87 (m, 1H), 3,67-3,85 (m, 4H), 2,95-3,08 (m, 4H), 2,28-2,40 (m, 2H) (trocável de 1H não observado). EXEMPLO 30 PREPARAÇÃO DE N-(2-(5-FLUORO- 1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDIN-4-AMINA

ETAPA 1 2-CLORO-4-((2-(5-FLUORO-1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-7(6H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0445] Preparado de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-5,8-di-hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc- butila (250 mg) e cloridrato de 2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)etanamina (176 mg, 1 equivalente). A purificação por trituração com DCM proporcionou o produto desejado como um sólido branco (157 mg, 43%).

[0446] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,22 minuto, m/z 446/448 [M+H]+

[0447] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 125,70 com desacoplamento de próton

[0448] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,88-10,97 (m, 1H), 7,49-7,65 (m, 1H), 7,38-7,46 (m, 1H), 7,38-7,46 (m, 1H), 7,29-7,35 (m, 1H), 7,23-7,29 (m, 1H), 6,85-6,95 (m, 1H), 4,19-4,31 (m, 2H), 3,57 (br d, J=5,9 Hz, 4H), 2,85-2,98 (m, 2H), 2,30-2,41 (m, 2H), 1,42 (s, 9H)

ETAPA 2 4-((2-(5-FLUORO-1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,8-DI-HIDROPIRIDO[3,4- D]PIRIMIDINA-7(6H)-CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0449] Preparado de acordo com o método geral B, usando 2-cloro-4-((2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)etil)amino)-5,8-di-hidropirido[3,4- d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (150 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3- borônico (120 mg) para gerar o produto desejado como um sólido branco (100 mg, 59%).

[0450] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,29 minuto, m/z 507 [M+H]+

[0451] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 125,66/-127,62 com desacoplamento de próton

[0452] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,89-10,96 (m, 1H), 9,25-9,31 (m, 1H), 8,63-8,69 (m, 1H), 8,24-8,32 (m, 1H), 7,24-7,34 (m, 4H), 6,84-6,93 (m, 1H), 4,35-4,43 (m, 2H), 3,72-3,84 (m, 2H), 3,60-3,68 (m, 2H), 2,95-3,04 (m, 2H), 2,41-2,46 (m, 2H), 1,44 (s, 9H) ETAPA 3 N-(2-(5-FLUORO-1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[3,4-D]PIRIMIDINA-4-

AMINA

[0453] Preparado de acordo com o método geral C, usando 4-((2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-5,8-di- hidropirido[3,4-d]pirimidina-7(6H)-carboxilato de terc-butila (100 mg) para obter o produto desejado como um sólido branco (23 mg, 28%).

[0454] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,63 minuto, m/z 407 [M+H]+

[0455] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 125,66/ -127,78 com desacoplamento de próton

[0456] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,92 (br s, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,64 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,22-8,32 (m, 1H), 7,26-7,34 (m, 3H), 7,06 (s, 1H), 6,89 (s, 1H), 3,77 (br d, J=7,0 Hz, 2H), 3,64-3,73 (m, 2H),

3,17 (d, J=5,1 Hz, 3H), 2,88-3,10 (m, 6H), 2,32 (br s, 4H) EXEMPLO 31 PREPARAÇÃO DE N-(2-(6-FLUORO-1H- INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA- HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDIN-4-AMINA ETAPA 1 2-CLORO-4-((2-(6-FLUORO-1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-7,8-DI-HIDROPIRIDO [4,3-D]PIRIMIDINA-6(5H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0457] Preparado de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-7,8-di-hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc- butila (250 mg) e cloridrato de 2-(6-fluoro-1H-indol-3-il)etanamina (176 mg, 1 equivalente). A purificação com o uso de Biotage (Telos 12 g DCM/MeOH Eluente 0 a 5%) gerou o produto desejado como uma espuma bege (346 mg, 94%) (que contém 10% de regioisômero).

[0458] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,22 minuto, m/z 446/448 [M+H]+

[0459] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 122,41 com desacoplamento de próton

[0460] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm

10,84-10,93 (m, 1H), 7,61-7,68 (m, 1H), 7,48-7,58 (m, 1H), 7,16-7,20 (m, 1H), 7,07-7,14 (m, 1H), 6,84 (br dd, J=2,3, 1,1 Hz, 1H), 4,16 (s, 2H), 3,52-3,64 (m, 4H), 2,88-2,98 (m, 2H), 2,55-2,65 (m, 2H), 1,43 (s, 9H) ETAPA 2 4-((2-(6-FLUORO-1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3- D]PIRIMIDINA-6(5H)-CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0461] Preparado de acordo com o método geral B, usando 2-cloro-4-((2-(6-fluoro-1H-indol-3-il)etil)amino)-7,8-di-hidropirido[4,3- d]pirimidina-6(5H)-carboxilato (160 mg) de terc-butila e ácido 5-fluoropiridina-3- borônico (120 mg) para gerar o produto desejado como um sólido branco (160 mg, 88%).

[0462] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,30 minuto, m/z 507 [M+H]+

[0463] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 122,48, -127,66 com desacoplamento de próton

[0464] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,85-10,96 (m,1H), 9,29 (s,1H), 8,62-8,70 (m,1H), 8,24-8,33 (m,1H), 7,51-7,60 (m,1H), 7,25-7,38 (m, 1H), 7,17-7,24 (m,1H), 7,06-7,13 (m,1H), 6,75-6,87 (m,1H), 4,25 (s,2H), 3,72-3,85 (m,2H), 3,59-3,69 (m,2H), 2,98-3,09 (m,2H), 2,68-2,77 (m,2H), 1,45 (s,9H) ETAPA 3 N-(2-(6-FLUORO-1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-4-

AMINA

[0465] Preparado de acordo com o método geral C, usando 4-((2-(6-fluoro-1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-7,8-di- hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc-butila (160 mg) para gerar o produto desejado como um sólido branco (17 mg, 14%).

[0466] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,63 minuto, m/z 407 [M+H]+

[0467] RMN de 19 F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm -

122,50 / -127,82 com desacoplamento de próton

[0468] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,89 (br s, 1H), 9,29 (s, 1H), 8,65 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,23-8,32 (m, 1H), 7,51-7,61 (m, 1H), 7,20 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,10 (dd, J=10,2, 2,3 Hz, 1H), 6,97 (t, J=5,5 Hz, 1H), 6,82 (s, 1H), 3,76 (br d, J=7,3 Hz, 2H), 3,55 (s, 2H), 2,88-3,06 (m, 5H), 2,61-2,68 (m, 2H). EXEMPLO 32 N-(2-(5-FLUORO-1H-INDOL-3- IL)ETIL)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3- D]PIRIMIDINA-4-AMINA ETAPA 1 2-CLORO-4-((2-(5-FLUORO-1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-6(5H)- CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0469] Preparado de acordo com o método geral A, usando 2,4-dicloro-7,8-di-hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc- butila (250 mg) e cloridrato de 2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)etanamina (176 mg, 1 equivalente). A purificação usando Biotage (Telos 12 g, DCM/MeOH Eluente 0 a 5%) gerou o produto desejado como uma espuma bege (348 mg, 95%) (contém 10% de regioisômero).

[0470] UPLC-MS (Método Ácido, 2 minutos): temperatura ambiente 1,21 minuto, m/z 446/448 [M+H]+

[0471] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 125,67 com desacoplamento de próton

[0472] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,88-10,96 (m, 1H), 7,48-7,63 (m, 1H), 7,39-7,46 (m, 1H), 7,30-7,35 (m, 1H), 7,26 (d, J=2,3 Hz, 1H), 6,86-6,94 (m, 1H), 4,16 (s, 2H), 3,58 (br d, J=5,9 Hz, 4H), 2,86-2,95 (m, 2H), 2,56-2,64 (m, 2H), 1,40-1,46 (m, 9H) ETAPA 2 4-((2-(5-FLUORO-1H-INDOL-3- IL)ETIL)AMINO)-2-(5-FLUOROPIRIDIN-3-IL)-7,8-DI-HIDROPIRIDO[4,3- D]PIRIMIDINA-6(5H)-CARBOXILATO DE TERC-BUTILA

[0473] Preparado de acordo com o método geral B, usando 2-cloro-4-((2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)etil)amino)-7,8-di-hidropirido[4,3- d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc-butila (160 mg) e ácido 5-fluoropiridina-3- borônico (120 mg) para gerar o produto desejado como um sólido branco (150 mg, 82%).

[0474] UPLC-MS (Método Básico, 2 minutos): temperatura ambiente 1,29 minuto, m/z 507 [M+H]+

[0475] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 125,64, -127,61 com desacoplamento de próton

[0476] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,89-10,97 (m, 1H), 9,26-9,32 (m, 1H), 8,63-8,68 (m, 1H), 8,24-8,32 (m, 1H), 7,22-7,36 (m, 4H), 6,83-6,94 (m, 1H), 4,19-4,30 (m, 2H), 3,72-3,84 (m, 2H), 3,58-3,69 (m, 2H), 2,97-3,05 (m, 2H), 2,69-2,78 (m, 2H), 1,45 (s, 9H) ETAPA 3 N-(2-(5-FLUORO-1H-INDOL-3-IL)ETIL)-2-(5- FLUOROPIRIDIN-3-IL)-5,6,7,8-TETRA-HIDROPIRIDO[4,3-D]PIRIMIDINA-4-

AMINA

[0477] Preparado de acordo com o método geral C,

usando 4-((2-(5-fluoro-1H-indol-3-il)etil)amino)-2-(5-fluoropiridin-3-il)-7,8-di- hidropirido[4,3-d]pirimidina-6(5H)-carboxilato de terc-butila (150 mg) para fornecer o produto desejado como um sólido branco (11 mg, 9%).

[0478] UPLC-MS (Método Básico, 4 minutos): temperatura ambiente 1,61 minuto, m/z 407 [M+H]+

[0479] RMN de 19F (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm - 125,66 / -127,78 com desacoplamento de próton

[0480] RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,92 (br s, 1H), 9,29 (t, J=1,6 Hz, 1H), 8,64 (d, J=2,9 Hz, 1H), 8,23-8,33 (m, 1H), 7,23-7,35 (m, 3H), 6,83-6,98 (m, 2H), 3,75 (br d, J=7,7 Hz, 2H), 3,55 (s, 2H), 2,87-3,08 (m, 6H), 2,57-2,68 (m, 3H)

[0481] Os exemplos foram testados em ensaios biológicos selecionados duas ou mais vezes. Os dados foram relatados como a média aritmética dos valores de pIC50 (-log10IC50), em que IC50 é definido como a concentração do composto que produz uma inibição de 50% da resposta do agonista (KYNA).

[0482] A atividade in vitro dos compostos da presente invenção foi avaliada nos seguintes ensaios: ENSAIO IN VITRO 1: ANTAGONISMO DE AhR EM CÉLULAS U937 (ENSAIO PROMEGA P450-GLO™)

[0483] O antagonismo de AhR foi avaliado em células U937 (linhagem celular de linhagemgem mieloide derivada de um linfoma histiocítico humano). ). O ligante se liga ao AhR no citoplasma, e o complexo AhR-ligante se transloca para o núcleo e forma um heterodímero com o translocador nuclear AhR (Arnt). Esse complexo se liga ao elemento de resposta xenobiótica (XRE) na região 5’ a montante do promotor CYP1A1, aumentando a expressão de CYP1A1. A atividade do CYP1A1 é subsequentemente determinada avaliando-se a conversão de Luciferina-CEE em luciferina, que por sua vez reage com a luciferase para produzir luz. A quantidade de luz produzida é diretamente proporcional à atividade do citocromo P450.

[0484] As células U937 em meio livre de soro Ultraculture (Lonza) foram colocadas em uma placa de cultura de tecidos de 96 poços de fundo redondo a 100.000 células por poço. Sete concentrações do composto de teste (final [DMSO] a 1%) foram adicionadas e incubadas durante 10 minutos antes da adição de 300 µM de KYNA. Em seguida, as placas foram colocadas em uma incubadora a 37 ºC, ≥ 85% de umidade, 5% de CO2 durante 24 horas. Após aspiração do sobrenadante, a Luciferina-CEE de substrato CYP1A1 ([Final] 83 µM) foi adicionado e incubado durante 3 horas antes da reação ser interrompida pela adição de reagente de detecção de luciferina e luminescência foi lida após 20 minutos. ENSAIO IN VITRO 2: ENSAIO DE INIBIÇÃO DE CYP1A1

[0485] A atividade inibitória direta de CYP1A1 dos compostos de teste também foi avaliada usando o sistema de ensaio Promega P450-Glo™. Sete concentrações do composto de teste foram adicionadas a uma placa com 96 poços de ½ área branca. Os bactossomas Cypex CYP1A1 ([final] 0,5 pmol) e Luciferina-CEE de substrato CYP1A1 ([final] 30 µM) foram preparados em tampão de fosfato de potássio 0,1 M e incubado com compostos de teste a 37 ºC durante 5 minutos. Em seguida, o NADPH 0,2 mM foi adicionado às placas e incubado a 37 ºC, durante 10 minutos. A reação foi interrompida adicionando-se reagente de detecção de luciferina, e a luminescência foi lida após 20 minutos.

RESULTADOS

Exemplo U937 cyp1A1 Exemplo U937 cyp1A1 nº pIC50 pIC50 nº pIC50 pIC50 1 8,80 6,00 18b 7,70 5,90 2 8,90 6,20 19 5,50 5,10 3 8,20 6,80 20 7,60 6,40 4 8,20 6,10 21 7,70 6,40 5 8,00 6,40 22 8,00 6,50 6 8,30 6,50 23 8,00 6,70 7 8,00 6,70 24 7,90 6,60 8 7,80 7,00 25 8,30 6,20 9 7,70 6,60 26 8,21 7,2 10 7,90 6,80 27 8,35 7,2 11 8,50 6,40 28 <5,0 5,5 12 9,00 6,10 29 8,10 6,7 13 8,50 5,70 30 7,58 6,5 14 8,90 6,10 31 8,29 7,2 15 8,70 6,00 32 8,22 7,1 16 8,20 7,00 17a 7,60 6,20 17b 7,80 6,10 18a 8,30 6,20

Claims (28)

REIVINDICAÇÕES

1. Composto da Fórmula (I) (I) caracterizado pelo fato de que: Y é um anel com 5 ou 6 membros que compreende opcionalmente 1, 2 ou 3 heteroátomos selecionados a partir de N, O e S substituído por R5 e R6; R1 é H, C1-3 alquila, (-CH2)pCN, -COC1-3 alquila, - CO(CH2)qNR7R8, -SO2C1-3 alquila, ´-SO2NR7R8, -(CH2)qPh, -, -C(O)Z; R2 é H ou C1-3 alquila; R3 é H ou C1-3 alquila; R4 é uma heteroarila com 9 ou 10 membros com pelo menos um heteroátomo selecionado a partir de N, O ou S (Indol-3-ila ou Benzimidazol-2-ila), com substituintes R9 e R10; R5 é H, hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN ou um grupo C1-3 alquila, -CO(CH2)qNR7R8, ´-SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8; R6 é hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN ou um grupo C1-3 alquila, -CO(CH2)qNR7R8, ´-SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8; R7 é H ou C1-3 alquila, tal como -CH3; R8 é H ou C1-3 alquila, tal como -CH3; R9 é H, hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN ou um grupo

C1-3 alquila, -CO(CH2)q NR7R8, ´- SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8, R10 é H, hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN ou um grupo C1-3 alquila, -CO(CH2)q NR7R8, ´-SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8; R11 é H ou C1-3 alquila, tal como -CH3; X é NR11 ou O; Z é uma heteroarila com 5 ou 6 membros (isto é, com pelo menos um heteroátomo selecionado a partir de N, O e S, por exemplo, 1 ou 2 nitrogênios) que porta opcionalmente um ou dois substituintes selecionados a partir de hidróxi, halogênio (tais como F, Cl), CN, C1-3 alquila; b é um número inteiro 1 ou 2; n é um número inteiro 1 ou 2; m é um número inteiro 1 ou 2; p é um número inteiro 1, 2 ou 3; q é 0, 1, 2 ou 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma.

2. Composto da Fórmula (II) (II) caracterizado pelo fato de que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6, b, n e m são definidos acima para compostos da Fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

3. Composto da Fórmula (III): (III) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6, b, n e m são definidos acima para compostos da Fórmula (I).

4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que n é 2.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que n é 1.

6. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que m é 2.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que m é 1.

8. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, da Fórmula (IV):

(IV) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6 e b são definidos acima para compostos da Fórmula (I).

9. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, da Fórmula (V): (V) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6 e b são definidos acima para compostos da Fórmula (I). 10 Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, da Fórmula (VI):

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6 e b são definidos acima para compostos da Fórmula (I).

11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, da Fórmula (VII): (VII) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que X, R1, R2, R3, R4, R5, R6 e b são definidos acima para compostos da Fórmula (I).

12. Composto da Fórmula (VII), de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que R 2 é H.

13. Composto da Fórmula (VII), de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 ou 12, caracterizado pelo fato de que R3 é H.

14. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado pelo fato de que R 1 é selecionado independentemente a partir de H, CH3, -CH2CH3, -CH2CH2CH3, -CH(CH3)2, - C(O)NH2, -C(O)NHCH3. -C(O)N(CH3)2, -CH2CN, -SO2NH2, -SO2CH3, - SO2N(CH3)2, -CH2Ph, e -C(O)1-Me-Pirazol-5-ila.

15. Composto, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que R1 é selecionado a partir de H, -CH2CN, ´-SO2CH3, -SO2N(CH3)2 e -C(O)N(CH3)2.

16. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado pelo fato de que R2 é H ou -CH3.

17. Composto, de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato de que R2 é H.

18. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado pelo fato de que R 3 é H ou -CH3.

19. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18, caracterizado pelo fato de que R 4 é selecionado a partir de indolila (tal como indol-3-ila) e benzimidazolila (tal como benzimidazol-2-ila).

20. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, caracterizado pelo fato de que R5 é selecionado a partir de H, Fl, Cl, CN e -CH3.

21. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado pelo fato de que R 6 é H, Fl, Cl, CN ou -CH3.

22. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado pelo fato de que R 7 é selecionado a partir de H e -CH3.

23. Composto, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que R7 é -CH3.

24. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 23, caracterizado pelo fato de que R8 é selecionado a partir de H e -CH3.

25. Composto, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que R8 é H.

26. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 25, caracterizado pelo fato de que R 11 é H.

27. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 26, e um excipiente, diluente ou carreador.

28. Composto da Fórmula (I) (I) caracterizado pelo fato de que: Y é um anel com 5 ou 6 membros que compreende opcionalmente 1, 2 ou 3 heteroátomos selecionados a partir de N, O e S substituídos por R5 e R6; R1 é H, C1-3 alquila, (-CH2)pCN, -COC1-3 alquila, - CO(CH2)qNR7R8, -SO2C1-3 alquila, -SO2NR7R8, -(CH2)qPh, -, -C(O)Z; R2 é H ou C1-3 alquila; R3 é H ou C1-3 alquila; R4 é uma heteroarila com 9 ou 10 membros com pelo menos um heteroátomo selecionado a partir de N, O ou S (Indol-3-ila ou Benzimidazol-2-ila), com substituintes R9 e R10; R5 é H, hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN ou um grupo C1-3 alquila, -CO(CH2)qNR7R8, -SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8; R6 é hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN ou um grupo

C1-3 alquila, -CO(CH2)qNR7R8, -SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8; R7 é H ou C1-3 alquila, tal como -CH3; R8 é H ou C1-3 alquila, tal como -CH3; R9 é H, hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN ou um grupo C1-3 alquila, -CO(CH2)q NR7R8, - SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8, R10 é H, hidróxi, halogênio (tal como F, Cl), CN ou um grupo C1-3 alquila, -CO(CH2)q NR7R8, -SO2C1-3 alquila, -SO2 NR7R8; R11 é H ou C1-3 alquila, tal como -CH3; X é NR11 ou O; Z é uma heteroarila com 5 ou 6 membros (isto é, com pelo menos um heteroátomo selecionado a partir de N, O e S, por exemplo, 1 ou 2 nitrogênios) que porta opcionalmente um ou dois substituintes selecionados a partir de hidróxi, halogênio (tais como F, Cl), CN, C1-3 alquila; b é um número inteiro 1 ou 2; n é um número inteiro 1 ou 2; m é um número inteiro 1 ou 2; p é um número inteiro 1, 2 ou 3; q é 0, 1, 2 ou 3, ou um sal farmaceuticamente aceitável da mesma para uso em tratamento.