BR112020024509A2 - métodos de aplicação foliar de uma composição, de controle de pragas de plantas em uma planta ou parte da planta e/ou indução de resistência a uma praga de plantas em uma planta ou parte da planta e de controle ou prevenção de danos por pragas em um material de propagação da planta, uma planta, parte de uma planta e/ou órgão da planta. - Google Patents

Abstract

MÉTODOS DE APLICAÇÃO FOLIAR DE UMA COMPOSIÇÃO, DE CONTROLE DE PRAGAS DE PLANTAS EM UMA PLANTA OU PARTE DA PLANTA E/OU INDUÇÃO DE RESISTÊNCIA A UMA PRAGA DE PLANTAS EM UMA PLANTA OU PARTE DA PLANTA E DE CONTROLE OU PREVENÇÃO DE DANOS POR PRAGASEM UM MATERIAL DE PROPAGAÇÃO DA PLANTA, UMA PLANTA, PARTEDE UMA PLANTA E/OU ÓRGÃO DA PLANTA. Um método de controlo ou prevenção de danos patogênicos e/ou danos por pragas em um material de propagação da planta, uma planta, parte de uma planta e/ou órgão da planta, compreendendo aplicação na planta, parte da planta, órgão da planta, material de propagação da planta ou uma sua área circundante de um agente fitoprotetor compreendendo uma enzima e um fungicida.

Description

MÉTODOS DE APLICAÇÃO FOLIAR DE UMA COMPOSIÇÃO, DE CONTROLE DE PRAGAS DE PLANTAS EM UMA PLANTA OU PARTE DA PLANTA E/OU INDUÇÃO DE RESISTÊNCIA A UMA PRAGA DE PLANTAS EM UMA PLANTA OU PARTE DA PLANTA E DE CONTROLE OU PREVENÇÃO DE DANOS POR PRAGAS EM UM MATERIAL DE PROPAGAÇÃO DA PLANTA, UMA PLANTA, PARTE DE UMA PLANTA E/OU ÓRGÃO DA PLANTA REFERÊNCIA A UMA LISTAGEM DE SEQUÊNCIAS

[001] Este pedido contém uma Listagem de Sequências em forma legível por computador, que é incorporada aqui por referência.

ANTECEDENTES

[002] Devido a populações crescentes e correspondentes demandas por fazendas mais eficientes e produtivas permanece uma necessidade de novos métodos para proteção de culturas e plantas de doença e pragas evitando deste modo desperdício e perda econômica enquanto se melhoram os rendimentos das culturas e se assegura um fornecimento alimentar global suficiente.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO REIVINDICADA

[003] A presente invenção proporciona métodos para controlo ou prevenção de danos patogênicos e/ou danos por pragas em um material de propagação da planta, uma planta, parte de uma planta e/ou órgão da planta, compreendendo aplicação na planta, parte da planta, órgão da planta, material de propagação da planta ou uma sua área circundante de um agente fitoprotetor compreendendo uma enzima e um fungicida.

[004] A aplicação de um certo agente fitoprotetor compreendendo combinações de uma enzima e um fungicida pode intensificar o espectro de ação no que diz respeito à praga a ser controlada, p.ex., a praga fúngica. Por exemplo, a aplicação de um agente compreendendo combinação de enzima e um fungicida pode causar um aumento na ação fungicida do agente que seria maior do que aquela esperada de cada componente quando usado sozinho. Isto permite, por um lado, uma ampliação substancial do espectro de pragas que podem ser controladas e, por outro lado, economias de uso melhoradas através de taxas de aplicação mais baixas. No entanto, para além da ação mais do que aditiva real no que diz respeito ao controle de pragas, os métodos da invenção podem ter propriedades vantajosas adicionais que podem ser também descritas, em um sentido mais amplo, como atividade benéfica. Exemplos de tais propriedades vantajosas podem incluir: uma ampliação do espectro de atividade; uma redução na taxa de aplicação do(s) ingrediente(s) ativo(s); controle adequado de pragas com o auxílio das composições de acordo com a invenção, por vezes mesmo a uma taxa de aplicação à qual os compostos individuais são totalmente ineficazes; comportamento vantajoso durante a formulação e/ou após aplicação, por exemplo após trituração, peneiração, emulsificação, dissolução ou distribuição; estabilidade aumentada no armazenamento; estabilidade melhorada à luz; degradabilidade mais vantajosa; comportamento toxicológico e/ou ecotoxicológico melhorado; características melhoradas das plantas úteis incluindo: emergência, rendimento das culturas, sistema radicular mais desenvolvido, aumento do perfilhamento, aumento na altura das plantas, lâmina foliar maior, menos folhas basais mortas, perfilhos mais fortes, cor mais verde das folgas, menos fertilizantes necessários, menos sementes necessárias, perfilhos mais produtivos, floração precoce, maturação precoce dos grãos, menos verso da planta (acamamento), crescimento aumentado dos rebentos, vigor melhorado das plantas e germinação precoce; ou quaisquer outras vantagens familiares a um perito na técnica.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[005] Esta descrição não se destina a ser um catálogo detalhado de todos os modos diferentes nos quais a invenção pode ser implementada ou de todas as características que podem ser adicionadas à presente invenção. Por exemplo, as características ilustradas no que diz respeito a uma modalidade podem ser incorporadas em outras modalidades e as características ilustradas no que diz respeito a uma modalidade particular podem ser eliminadas dessa modalidade. Adicionalmente, numerosas variações e adições às várias modalidades sugeridas aqui que não se afastam da presente invenção serão aparentes aos peritos na técnica a luz da presente divulgação. Consequentemente, a seguinte descrição se destina a ilustrar algumas modalidades particulares da invenção e não a especificar exaustivamente todas as suas permutações, combinações e variações.

[006] A terminologia usada aqui é para propósito somente de descrever modalidades particulares e não se destina a ser limitante da invenção.

[007] A não ser que de outro modo definidos, todos os termos (incluindo termos técnicos e científicos) usados aqui têm o mesmo significado como comumente entendido por um perito na técnica à qual esta invenção pertence. Será adicionalmente entendido que os termos, tais como aqueles definidos em dicionários comumente usados, devem ser interpretados como tendo um significado que é consistente com seu significado no contexto do relatório descritivo e técnica relevante e não devem ser interpretados em um sentido idealizado ou excessivamente formal a não ser que expressamente assim definido aqui. Por questões de brevidade e/ou clareza, as funções ou construções bem conhecidas podem não ser descritas em detalhe.

[008] Como usado aqui, as formas singulares “um”, “uma”, e “o/a” se destinam a incluir também as formas plurais, a não ser que o contexto indique claramente de outro modo.

[009] Como usado aqui, os termos “acaricida” e “antiácaros” se referem a um agente ou combinação de agentes cuja aplicação é tóxica para um acarídeo (i.e., mata um acarídeo, inibe o crescimento de um acarídeo e/ou inibe a reprodução de um acarídeo).

[0010] Como usado aqui, o termo “transportador agricolamente aceitável” se refere a uma substância ou composição que pode ser usada para entregar um agente fitoprotetor a uma planta, parte da planta ou meio de crescimento da planta (p.ex., solo) sem causar/ter um efeito indevidamente adverso no crescimento e/ou rendimento da planta. Como usado aqui, o termo “transportador compatível com folhagem” se refere a um material que pode ser foliarmente aplicado a uma planta ou parte da planta sem causar/ter um efeito indevidamente adverso na planta, parte da planta, crescimento da planta, saúde da planta ou similares. Como usado aqui, o termo “transportador compatível com semente” se refere a um material que pode ser aplicado a uma semente sem causar/ter um efeito indevidamente adverso na semente, na planta que cresce a partir da semente, germinação da semente ou similares. Como usado aqui, o termo “transportador compatível com solo” se refere a um material que pode ser adicionado a um solo sem causar/ter um efeito indevidamente adverso no crescimento da planta, estrutura do solo, drenagem do solo ou similares.

[0011] Como usado aqui, o termo “e/ou” se destina a incluir qualquer um dos e todas as combinações de um ou mais dos itens listados associados, bem como a ausência de combinações quando interpretadas na alternativa (“ou”). Assim, a frase “A, B e/ou C” é para ser interpretada como “A, A e B, AeBeC,AeC,B,BeCouC”.

[0012] Como usado aqui, os termos “associado a”, “em associação a” e “associado ao mesmo”, quando usados em referência a uma relação entre uma composição da presente divulgação e uma planta ou parte da planta, se referem a pelo menos uma justaposição ou extrema proximidade da composição e da planta ou parte da planta. Uma tal justaposição ou extrema proximidade pode ser obtida por contato ou aplicação de uma composição diretamente à planta ou parte da planta e/ou por aplicação da composição ao meio de crescimento da planta (p.ex., solo) no qual a planta ou parte da planta crescerá (ou está correntemente crescendo). De acordo com algumas modalidades, uma composição é aplicada como um revestimento à superfície externa da planta ou parte da planta. De acordo com algumas modalidades, uma composição é aplicada ao solo no, próximo do ou rodeando o local no qual a planta ou parte da planta crescerá (ou está correntemente crescendo).

[0013] Como usado aqui, o termo “aquoso” se refere a uma composição que contém mais do que uma quantidade vestigial de água (i.e., mais do que 0,5% de água em peso, com base no peso total da composição).

[0014] Como usado aqui, o termo “dispersante” se refere a um agente ou combinação de agentes, cuja aplicação reduz a coesão de partículas similares, a tensão superficial de um líquido, a tensão interfacial entre dois líquidos e/ou a tensão interfacial entre um líquido e um sólido.

[0015] Como usado aqui, os termos “quantidade eficaz”, “concentração eficaz” e “quantidade/concentração eficaz” se referem a uma quantidade ou concentração que é suficiente para causar um efeito desejado (p.ex, gravidade da doença reduzida) “O valor absoluto da quantidade/concentração que é suficiente para causar o efeito desejado pode ser afetado por fatores tais como o tipo e magnitude de efeito desejado, o tipo, tamanho e volume do material ao qual a composição será aplicada, o(s) tipo(s) de agente(s) fitoprotetor(es) na composição, a quantidade de agente fitoprotetor na composição, a estabilidade do agente fitoprotetor na composição e as condições de armazenamento (p.ex., temperatura, umidade relativa, duração). Os peritos na técnica entenderão como selecionar uma quantidade/concentração eficaz usando experiências de resposta à dose de rotina.

[0016] Como usado aqui, o termo “folhagem” se refere àquelas porções de uma planta que normalmente crescem acima do solo, incluindo, mas não se limitando a, folhas, caules, hastes, flores, corpos frutíferos e frutos.

[0017] Como usado aqui, os termos “aplicação foliar” e “foliarmente aplicado” se referem à aplicação da composição da presente divulgação à folhagem de uma planta (p.ex., às folhas da planta). A aplicação pode ser efetuada por quaisquer meios adequados, incluindo, mas não se limitando a, pulverização da planta com a composição da presente invenção. Em algumas modalidades, a composição da presente divulgação é aplicada às folhas, hastes e/ou caule da planta e não às flores, corpos frutíferos ou frutos da planta.

[0018] Como usado aqui, os termos “fungicida” e “antifungos” se referem a um agente ou combinação de agentes, cuja aplicação é tóxica para um fungo, mata um fungo, inibe o crescimento de um fungo, inibe a reprodução de um fungo, inibe e/ou previne a formação de esporos por um fungo e/ou inibe ou previne a atividade patogênica por um fungo.

[0019] Como usado aqui, o termo “isômero” inclui todos os estereoisômeros dos compostos e/ou moléculas aos quais se refere, incluindo enantiômeros e diastereômeros, assim como todos os confôrmeros, rotâmeros e tautômeros, a não ser que de outro modo indicado. Os compostos e/ou moléculas divulgados aqui incluem todos os enantiômeros em forma levorrotatória ou dextrorrotatória substancialmente pura, ou em uma mistura racêmica, ou em qualquer razão de enantiômeros. Onde as modalidades divulgam um (D)-enantiômero, essa modalidade inclui também o (L)- enantiômero; onde as modalidades divulgam um (L)-enantiômero, essa modalidade inclui também o (D)-enantiômero. Onde as modalidades divulgam um (+)-enantiômero, essa modalidade inclui também o (-)- enantiômero; onde as modalidades divulgtam um (-)-enantiômero, essa modalidade inclui também o (+)-enantiômero. Onde as modalidades divulgam um (S)-enantiômero, essa modalidade inclui também o (R)-enantiômero; onde as modalidades divultam um (R)-enantiômero, essa modalidade inclui também o (S)-enantiômero. As modalidades se destinam a incluir quaisquer diastereômeros dos compostos e/ou moléculas referidos aqui em forma diastereomericamente pura e na forma de mistura em todas as razões. A não ser que a estereoquímica seja explicitamente indicada em uma estrutura química ou nome químico, a estrutura química ou nome químico se destina a abranger todos os possíveis estereoisômeros, confôrmeros, rotâmeros e tautômeros de compostos e/ou moléculas ilustrados.

[0020] Como usado aqui, os termos “nematicida” e “antinematódeos” se referem a um agente ou combinação de agentes, cuja aplicação é tóxica para um nematódeo, mata um nematódeo, inibe o crescimento de um nematódeo, inibe a reprodução de um nematódeo e/ou inibe ou previne a atividade patogênica por um nematódeo.

[0021] Como usado aqui, o termo “não aquoso” se refere a uma composição que compreende não mais do que uma quantidade vestigial de água (1.e., não mais do que 0,5% de água em peso, com base no peso total da composição).

[0022] Como usado aqui, o termo “nutriente” se refere a um composto ou elemento útil para nutrição de uma planta (p.ex., vitaminas, macrominerais, micronutrientes, minerais vestigiais, ácidos orgânicos, etc. que são necessários para o crescimento e/ou desenvolvimento da planta).

[0023] Como usado aqui, os termos “percentagem de identidade”, “% de identidade” e “por cento idêntico” se referem à relação de duas ou mais sequências de nucleotídeos ou aminoácidos, que podem ser calculada por (1) comparação de duas sequências otimamente alinhadas ao longo de uma janela de comparação, (ii) determinação do número de posições nas quais a base de ácido nucleico idêntico (para sequências de nucleotídeos) ou resíduo de aminoácido (para proteínas) ocorre em ambas as sequências para originar o número de posições compatíveis, (il) divisão do número de posições compatíveis pelo número total de posições na janela de comparação e, depois, (iv) multiplicação deste quociente por 100% para originar a percentagem de identidade. Se a “percentagem de identidade” estiver sendo calculada em relação a uma sequência de referência sem uma janela de comparação particular sendo especificada, então a percentagem de identidade é determinada por divisão do número de posições compatíveis ao longo da região de alinhamento pelo comprimento total da sequência de referência. Conformemente, para propósitos da presente invenção, quando duas sequências (consulta e submetida) estão otimamente alinhadas (com permissão para lacunas em seu alinhamento), a “percentagem de identidade” para a sequência de consulta é igual ao número de posições idênticas entre as duas sequências dividido pelo número total de posições na sequência de consulta ao longo de seu comprimento (ou uma janela de comparação), que é depois multiplicado por 100%.

[0024] Como usado aqui, o termo “praga” inclui qualquer organismo ou vírus que afeta negativamente uma planta, incluindo, mas não se limitando a, organismos e vírus que disseminam doença, danificam plantas hospedeiras e/ou competem quanto a nutrientes do solo. O termo “praga” engloba organismos e vírus que são conhecidos por se associarem a plantas e por causarem um efeito prejudicial à saúde e/ou vigor da planta. As pragas de plantas incluem, mas não estão limitadas a, pragas microbianas, preferencialmente bactérias e/ou fungos, incluindo oomicetos.

[0025] Como usado aqui, os termos “pesticida” e “antipragas” se referem a agentes ou combinações de agentes cuja aplicação pode incluir um fungicida ou ter propriedades fungicidas.

[0026] Como usado aqui, o termo “planta” inclui todas as populações de plantas, incluindo, mas não se limitando a, plantas agrícolas, hortícolas e silvícolas. O termo “planta” engloba plantas obtidas por métodos de melhoramento e otimização convencionais (p.ex., seleção auxiliada por marcadores) e plantas obtidas por manipulação genética, incluindo cultivares protegíveis e não protegíveis pelos direitos dos cultivadores de plantas.

[0027] Como usado aqui, o termo “célula da planta” se refere a uma célula de uma planta intacta, uma célula retirada de uma planta ou uma célula derivada de uma célula retirada de uma planta. Assim, o termo “célula da planta” inclui células dentro de sementes, culturas em suspensão, embriões, regiões “meristemáticas, tecido caloso, folhas, rebentos, gametófitos, esporófitos, pólen e micrósporos.

[0028] Como usado aqui, o termo “parte da planta” se refere a qualquer parte de uma planta, incluindo células e tecidos derivados de plantas. Assim, o termo “parte da planta” pode se referir a qualquer um dos componentes ou órgãos da planta (p.ex., folhas, hastes, raízes, etc.), tecidos da planta, células da planta e sementes. Exemplos de partes da planta incluem, mas não estão limitados a, anteras, embriões, flores, frutos, corpos frutíferos, folhas, óvulos, pólen, rizomas, raízes, sementes, rebentos, hastes e tubérculos, bem como troncos, porta-enxertos, protoplastos, calos e similares.

[0029] Como usado aqui, o termo “material de propagação da planta” se refere a uma parte da planta a partir da qual uma planta inteira pode ser gerada. Exemplos de materiais de propagação da planta incluem, mas não estão limitados a, cortes (p.ex., folhas, hastes), rizomas, sementes, tubérculos e células/tecidos que podem ser cultivados em uma planta inteira.

[0030] Embora certos aspectos da presente divulgação sejam doravante descritos com referência a suas modalidades será entendido pelos peritos técnica que várias mudanças na forma e detalhes podem ser feitas aí sem se afastar do espírito e escopo da presente divulgação como definidos pelas reivindicações.

[0031] SEQ ID NO: | é uma GH18 quitinase de Streptomyces griseus, tendo uma sequência de aminoácidos: MFKLHRPRARLRALAAAACTA

ALGATLLGVAGMSPAGATPAAQSAASPAAAEAAPTAAGDKVIGYFT NWGTYDRNYHVKNIETSGSADKLTHINYAFGNVIGGKCTIGDSYADY EKAYTADQSVYDGVADTWDQPLRGNFNQLRKLKKLHPDLKILWSFGG WTWSGGFGQAAQNPAAFAKSCRDLVEDPRWADVFDGIDIDWEYPN ACGLTCDTSGRDAYGNLLGELRKSFGTDLVTSAITADGSDGGKIDAV DYAGAAKHLDWYLPMTYDFFGAWEAKGPTAPHSPLTSYPGVPTEGF NSDAAISKLKSLGIPPEKLLLGIGFYGRGWTGVTRSEPGGSATGAAAG TYEAGIEDYRVLKNSCPATGKVAGTAYAHCGTDWWSYDTPETIGSK MNYKNEQGLGGTFFWELSGDTGNGELIKAIR.

[0032] As composições da presente divulgação podem compreender qualquer(quaisquer) transportador(es) agricolamente adequado(s), incluindo, mas não se limitando a, transportadores compatíveis com folhagem, transportadores compatíveis com semente e transportadores compatíveis com solo. A seleção de materiais transportadores apropriados dependerá da(s) aplicação(ões) pretendida(s) e dos elementos presentes na composição. Em algumas — modalidades, o(s) material(ais) transportador(es) será(ão) selecionado(s) para proporcionar uma composição na forma de um líquido, gel, pasta semifluida ou sólido. Em algumas modalidades, o transportador consistirá essencialmente em ou consistirá em um ou mais compostos estabilizantes.

[0033] Em algumas modalidades, a composição compreende um ou mais transportadores sólidos. De acordo com algumas modalidades, a composição compreende um ou mais pós (p.ex, pós molháveis) e/ou grânulos. Exemplos não limitantes de transportadores sólidos incluem argilas (p.ex., argilas de atapulgita, argila de montmorilonita, etc.), pós e grânulos à base de turfa, pós liofilizados, pós secos por pulverização, pós liofilizados por pulverização e suas combinações. Em algumas modalidades, a composição compreende um ou mais transportadores líquidos e/ou em gel. De acordo com algumas modalidades, a composição compreende um ou mais solventes não aquosos. De acordo com algumas modalidades, a composição compreende um ou mais solventes aquosos (p.ex., água).

[0034] Podem ser produzidas composições da presente divulgação compreendendo granulados não polvilhantes, p.ex., como divulgado em US 4,106,99]1 e US 4,661,452 e podem ser opcionalmente revestidas por métodos conhecidos na técnica. Exemplos de materiais de revestimento cerosos são produtos de poli(óxido de etileno) (polietilenoglicol, PEG) com pesos molares médios de 1000 a 20000; nonilfenóis etoxilados tendo de 16 a 50 unidades de óxido de etileno; álcoois graxos etoxilados nos quais o álcool contém de 12 a átomos de carbono e nos quais existem 15 a 80 unidades de óxido de etileno; álcoois graxos; ácidos graxos; e mono e di e triglicerídeos de ácidos graxos. Exemplos de materiais de revestimento formadores de filme adequados para aplicação por técnicas de leito fluidizado são dados em GB

1483591. As composições da presente divulgação compreendendo preparações de enzimas líquidas podem, por exemplo, ser estabilizadas por adição de um poliol tal como propilenoglicol, um açúcar ou álcool de açúcar, ácido láctico ou ácido bórico de acordo com métodos estabelecidos. As composições da presente divulgação compreendendo enzimas podem ser preparadas de acordo com o método divulgado em EP 238,216.

[0035] As composições da presente divulgação podem ser formuladas como um grânulo, por exemplo como um cogrânulo que combina uma ou mais enzimas. Cada enzima estará então presente em mais grânulos assegurando uma distribuição mais uniforme das enzimas em, por exemplo, um detergente. Isto também reduz a segregação física das diferentes enzimas devido a diferentes tamanhos de partículas.

[0036] Uma modalidade da composição da presente divulgação se relaciona com um grânulo/partícula de enzimas compreendendo uma enzima. O grânulo é composto por um núcleo e, opcionalmente, um ou mais revestimentos (camadas externas) rodeando o núcleo.

[0037] Tipicamente, o tamanho do grânulo/partícula, medido como diâmetro esférico equivalente (tamanho médio das partículas baseado em volume), do grânulo é 20-2000 um, particularmente 50-1500 um, 100-1500 um ou 250-1200 um.

[0038] O núcleo pode incluir materiais adicionais tais como enchimentos, materiais de fibra (celulose ou fibras sintéticas), agentes estabilizantes, agentes solubilizantes, agentes de suspensão, agentes reguladores da viscosidade, esferas de luz, plastificantes, sais, lubrificantes e fragrâncias. O núcleo pode incluir aglutinantes, tais como polímero sintético, cera, gordura ou carboidrato. O núcleo pode compreender um sal de um cátion multivalente, um agente redutor, um antioxidante, um catalisador da decomposição de peróxidos e/ou um componente de tampão ácido, tipicamente como uma combinação homogênea. O núcleo pode consistir em uma partícula inerte com uma enzima absorvida na mesma ou aplicada na superfície, p.ex., por revestimento em leito fluidizado. O núcleo pode ter um diâmetro de 20-2000 um, particularmente 50-1500 um, 100-1500 um ou 250- 1200 um.

[0039] O núcleo pode ser preparado por granulação de uma combinação dos ingredientes, p.ex., por um método compreendendo técnicas de granulação tais como cristalização, precipitação, revestimento em recipiente, revestimento em leito fluidizado, aglomeração em leito fluidizado, atomização rotativa, extrusão, perolação, esferonização, métodos de redução do tamanho, granulação por tambor e/ou granulação por elevado cisalhamento. Métodos para preparação do núcleo podem ser encontrados no Handbook of Powder Technology; Particle size enlargement por C. E. Capes; Volume 1; 1980; Elsevier. Os métodos de preparação incluem tecnologias conhecidas de formulação de rações e grânulos, p.ex.: a) Produtos secos por pulverização, em que uma solução contendo enzima líquida é atomizada em uma torre de secagem por pulverização para formar gotículas pequenas que durante o seu trajeto para baixo na torre de secagem secam para formar um material particulado contendo enzima. Partículas muito pequenas podem ser produzidas deste modo (Michael S. Showell (editor); Powdered detergents; Surfactant Science Series; 1998; vol. 71; páginas 140-142; Marcel Dekker).

b) Produtos em camada, em que a enzima é revestida como uma camada em torno de uma partícula de núcleo inerte pré-formada, em que uma solução contendo enzima é atomizada, tipicamente em um aparelho de leito fluidizado em que as partículas de núcleo pré-formadas são fluidizadas, e a solução contendo enzima adere às partículas de núcleo e seca para deixar uma camada de enzima seca na superfície da partícula de núcleo. As partículas de um tamanho desejado podem ser obtidas deste modo se uma partícula de núcleo útil do tamanho desejado puder ser encontrada. Este tipo de produto é descrito em, p.ex., WO 97/23606 c) Partículas de núcleo absorvidas, em que, em vez do revestimento da enzima como uma camada em torno do núcleo, a enzima é absorvida sobre a e/ou na superfície do núcleo. Um tal processo é descrito em WO 97/39116.

d) Produtos de extrusão ou peletizados, em que uma pasta contendo enzima é prensada em péletes ou sob pressão é extrudada através de uma pequena abertura e cortada em partículas que são subsequentemente secas. Tais partículas têm usualmente um tamanho considerável porque o material no qual a abertura de extrusão é feita (usualmente uma placa com orifícios perfurados) define um limite na queda de pressão permissível através da abertura de extrusão. Igualmente, pressões de extrusão muito elevadas quando se usa uma pequena abertura aumentam a geração de calor na pasta enzimática, que é prejudicial à enzima (ver também Michael S. Showell (editor); Powdered detergents; Surfactant Science Series; 1998; vol. 71; páginas 140-142; Marcel Dekker).

e) Produtos perolizados, em que um pó contendo enzima é suspenso em cera fundida e a suspensão é pulverizada, p.ex., através de um atomizador de disco rotativo, em uma câmara de resfriamento onde as gotículas solidificam rapidamente (Michael S. Showell (editor); Powdered detergents; Surfactant Science Series; 1998; volume 71; páginas 140-142; Marcel Dekker). O produto obtido é um em que a enzima está uniformemente distribuída ao longo de um material inerte em vez de estar concentrada em sua superfície. Igualmente, US 4,016,040 e US 4,713,245 são documentos se relacionando com esta técnica; N Produtos de granulação de misturador, em que um líquido é adicionado a uma composição de pó seco de, p.ex., componentes de granulação convencionais, sendo a enzima introduzida através do líquido ou do pó ou ambos. O líquido e o pó são misturados e, à medida que a umidade do líquido é absorvida no pó seco, os componentes do pó seco começarão a aderir e aglomerar e partículas se acumularão, formando granulados compreendendo a enzima. Um tal processo é descrito em US 4,106,991 e documentos relacionados EP 170360, EP 304332, EP 304331, WO 90/09440 e WO 90/09428. Em um produto particular deste processo em que vários misturadores de elevado cisalhamento podem ser usados como granuladores, os granulados consistindo em enzima como enzima, enchimentos e aglutinantes, etc. são misturados com fibras de celulose para reforçar as partículas para dar o assim chamado granulado T. As partículas reforçadas, sendo mais robustas, liberam menos poeira enzimática.

g) Redução de tamanho, em que os núcleos são produzidos por moagem ou esmagamento de partículas maiores, péletes, pastilhas, briquetes, etc. contendo a enzima. A fração de partícula de núcleo desejada é obtida por peneiração do produto moído ou esmagado. As partículas sobre e subdimensionadas podem ser recicladas. A redução de tamanho é descrita em (Martin Rhodes (editor); Principles of Powder Technology, 1990; Capítulo 10; John Wiley & Sons); h) Granulação de leito fluidizado. A granulação de leito fluidizado envolve suspensão de particulados em uma corrente de ar e pulverização de um líquido nas partículas fluidizadas através de bocais. As partículas atingidas por gotículas de pulverização ficam úmidas e se tornam pegajosas. As partículas pegajosas colidem com outras partículas e aderem às mesmas e formam um grânulo; i) Os núcleos podem ser sujeitos a secagem, tal como em um secador de leito fluidizado. A secagem ocorre preferencialmente a uma temperatura de produto de 25 a 90 ºC. Para algumas modalidades da composição da presente divulgação compreendendo uma enzima é importante que os núcleos compreendendo a enzima contenham uma baixa quantidade de água antes do revestimento. Se enzimas sensíveis à água forem revestidas antes de a água excessiva ser removida, esta será aprisionada no núcleo e pode afetar a atividade da enzima negativamente. Após secagem, os núcleos contêm preferencialmente 0,1-10% p/p de água.

[0040] O núcleo do grânulo/partícula de enzimas pode estar rodeado por pelo menos um revestimento, p.ex., para melhorar a estabilidade no armazenamento, para reduzir a formação de poeira durante o manuseamento ou para colorir o grânulo. O(s) revestimento(s) opcional(ais) pode(m) incluir um revestimento de sal ou outros materiais de revestimento adequados, tais como polietilenoglicol (PEG), celulose de hidroxipropilmetila (MHPC) e álcool polivinílico (PVA). Exemplos de grânulos de enzimas com múltiplos revestimentos são mostrados em WO 93/07263 e WO 97/23606.

[0041] O revestimento pode ser aplicado em uma quantidade de pelo menos 0,1% em peso do núcleo, p.ex., pelo menos 0,5%, 1% ou 5%. À quantidade pode ser no máximo 100%, 70%, 50%, 40% ou 30%. O revestimento tem preferencialmente pelo menos 0,1 um de espessura, particularmente pelo menos 0,5 um, pelo menos 1 um ou pelo menos 5 um. Em uma modalidade particular, a espessura do revestimento está abaixo de 100 um. Em uma modalidade mais particular, a espessura do revestimento está abaixo de 60 um. Em uma modalidade ainda mais particular, a espessura total do revestimento está abaixo de 40 um. Em algumas modalidades, o revestimento encapsula substancialmente a unidade de núcleo por formação de uma camada substancialmente contínua. Uma camada substancialmente contínua é para ser entendida como um revestimento tendo poucos ou nenhuns orifícios, tal que a unidade nuclear que está encapsulando/rodeando tenha poucas ou nenhumas áreas não revestidas. A camada ou revestimento deve ter em particular espessura homogênea.

[0042] O revestimento pode conter adicionalmente outros materiais como conhecido na técnica, p.ex., enchimentos, agentes antiaderentes, pigmentos, corantes, plastificantes e/ou aglutinantes, tais como dióxido de titânio, caulim, carbonato de cálcio ou talco.

[0043] Um revestimento de sal pode compreender pelo menos 60% em peso p/p de um sal, p.ex., pelo menos 65%, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90%, pelo menos 95% ou pelo menos 99% em peso p/p. O sal pode ser adicionado a partir de uma solução de sal onde o sal está completamente dissolvido ou a partir de uma suspensão de sal onde as partículas finas são menores do que 50 um, tal como menores do que 10 um ou menores do que 5 um. O revestimento de sal pode compreender um único sal ou uma mistura de dois ou mais sais. O sal pode ser solúvel em água, em particular tendo uma solubilidade de pelo menos 0,1 grama em 100 g de água a 20 ºC, preferencialmente pelo menos 0,5 g por 100 g de água, p.ex., pelo menos 1 g por 100 g de água, p.ex., pelo menos 5 g por 100 g de água.

[0044] O sal pode ser um sal inorgânico, p.ex., sais de sulfato, sulfito, fosfato, fosfonato, nitrato, cloreto ou carbonato ou sais de ácidos orgânicos simples (menos do que 10 átomos de carbono, p.ex., 6 ou menos átomos de carbono) tais como citrato, malonato ou acetato. Exemplos de cátions em estes sais são íons de metais alcalinos ou metais alcalinoterrosos, o fon de amônio ou íons de metais da primeira série de transição, tais como sódio,

potássio, magnésio, cálcio, zinco ou alumínio. Exemplos de ânions incluem cloreto, brometo, iodeto, sulfato, sulfito, bissulfito, tiossulfato, fosfato, fosfato monobásico, fosfato dibásico, hipofosfito, pirofosfato de di-hidrogênio, tetraborato, borato, carbonato, bicarbonato, metassilicato, citrato, malato, maleato, malonato, succinato, lactato, formato, acetato, butirato, propionato, benzoato, tartarato, ascorbato ou gliconato. Em particular podem ser usados sais de metais alcalinos ou metais alcalinoterrosos de sulfato, sulfito, fosfato, fosfonato, nitrato, cloreto ou carbonato ou sais de ácidos orgânicos simples tais como citrato, malonato ou acetato.

[0045] O sal no revestimento pode ter uma umidade constante a 20 ºC acima de 60%, particularmente acima de 70%, acima de 80% ou acima de 85%, ou pode ser outra forma hidratada de um tal sal (p.ex., anidrato). O revestimento de sal pode ser como descrito em WO 00/01793 ou WO 2006/034710.

[0046] Exemplos específicos de sais adequados são NaCl (CH>x»x c=76%), Na;CO; (CH “c=92%), NaNO; (CH -«c=73%), Na2HPO, (CH c=95%), Na;PO, (CHs -«c=92%), NHCI (CHx “c = 79,5%), (NH)HPO, (CHx «c = 93,0%), NHH/POs (CHx «< = 93,1%), (NHJ):SOs (CHx «c=81,1%), KCl (CHx»x «c=85%), KHPOs (CH2x “«c=92%), KH:POs (CH2x c=96,5%), KNO;3 (CH «c=93,5%), Na3SOas (CH “c=93%), K2SO4 (CH2o c=98%), KHSOs (CH “«c=86%), MgSOs (CH “«c=90%), ZnSOs (CH c=90%) e citrato de sódio (CH; «c=86%). Outros exemplos incluem NaH7/PO:,, (NHa)H3PO,, CuSO4, Mg(NO3;), e acetato de magnésio.

[0047] O sal pode estar em forma anidra ou pode ser um sal hidratado, ie., um sal cristalino hidratado com água(s) de cristalização ligada(s), tal como descrito em WO 99/32595. Exemplos específicos incluem sulfato de sódio anidro (NaSOs), sulfato de magnésio anidro (MgSO;,y), sulfato de magnésio hepta-hidratado (MgSO,47H,O), sulfato de zinco hepta-hidratado (ZnSO47H,7O), fosfato de sódio dibásico hepta-hidratado (Na;HPO,7H,0O),

nitrato de magnésio hexa-hidratado (Mg(NO3)2(6H20O)), citrato de sódio di- hidratado e acetato de magnésio tetra-hidratado.

[0048] Preferencialmente, o sal é aplicado como uma solução do sal, p.ex., usando um leito fluidizado.

[0049] Assim, em um aspecto adicional, uma composição usada nos métodos da presente divulgação compreende um grânulo, que compreende: (a) um núcleo compreendendo uma enzima e (b) opcionalmente um revestimento consistindo em uma ou mais camada(s) rodeando o núcleo.

[0050] Em algumas modalidades, as composições da presente divulgação são aplicadas a uma taxa de cerca de 0,5 a cerca de 100 mililitros e/ou gramas de composição por planta. De acordo com algumas modalidades, uma ou mais composições da presente divulgação é/são aplicada(s) em uma quantidade suficiente para assegurar que cada planta é tratada com cerca de/pelo menos 0,05, 0,1, 0,125, 0,15, 0,175, 0,2, 0,225, 0,2,5, 0,275, 0,3, 0,325, 0,35, 0,375, 0,4, 0,425, 0,45, 0,475, 0,5, 0,55, 0,6, 0,65, 0,7, 0,75, 0,8, 0,85, 0,9, 0,95, 1, 1,25, 1,5, 1,75, 2, 2,25, 2,5, 2,75, 3, 3,25, 3,5, 3,75, 4, 4,25, 4,5, 4,75, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 ou 100 mililitros e/ou gramas de composição. De acordo com algumas modalidades, uma ou mais composições da presente divulgação é/são aplicada(s) em uma quantidade suficiente para assegurar que uma média de cerca de/pelo menos 0,05, 0,1, 0,125, 0,15, 0,175, 0,2, 0,225, 0,2,5, 0,275, 0,3, 0,325, 0,35, 0,375, 0,4, 0,425, 0,45, 0,475, 0,5, 0,55, 0,6, 0,65, 0,7, 0,75, 0,8, 0,85, 0,9, 0,95, 1, 1,25, 1,5, 1,75, 2, 2,25, 2,5, 2,75, 3, 3,25, 3,5, 3,75, 4, 4,25, 4,5, 4,75 ou 5 mililitros e/ou gramas de composição é aplicada a cada planta.

[0051] Em algumas modalidades, as composições da presente divulgação são aplicadas a uma taxa de cerca de 0,5 a cerca de 100 mililitros e/ou gramas de composição por acre de culturas tratadas. De acordo com algumas modalidades, uma ou mais composições da presente divulgação é/são aplicada(s) em uma quantidade suficiente para assegurar que cada acre de culturas tratadas é tratado com cerca de/pelo menos 0,05, 0,1, 0,125, 0,15, 0,175, 0,2, 0,225, 0,2,5, 0,275, 0,3, 0,325, 0,35, 0,375, 0,4, 0,425, 0,45, 0,475, 0,5, 0,55, 0,6, 0,65, 0,7, 0,75, 0,8, 0,85, 0,9, 0,95, 1, 1,25, 1,5, 1,75, 2, 2,25, 2,5, 2,75, 3, 3,25, 3,5, 3,75, 4, 4,25, 4,5, 4,75, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 ou 100 mililitros e/ou gramas de composição. De acordo com algumas modalidades, uma ou mais composições da presente divulgação é/são aplicada(s) em uma quantidade suficiente para assegurar que uma média de cerca de/pelo menos 0,05, 0,1, 0,125, 0,15, 0,175, 0,2, 0,225, 0,2,5, 0,275, 0,3, 0,325, 0,35, 0,375, 0,4, 0,425, 0,45, 0,475, 0,5, 0,55, 0,6, 0,65, 0,7, 0,75, 0,8, 0,85, 0,9, 0,95, 1, 1,25, 1,5, 1,75, 2, 2,25, 2,5, 2,75, 3, 3,25, 3,5, 3,75, 4, 4,25, 4,5, 4,75 ou 5 mililitros e/ou gramas de composição é aplicada a cada acre de culturas tratadas.

[0052] Em algumas modalidades, as composições da presente divulgação são aplicadas a uma taxa de cerca de 0,5 a cerca de 100 mililitros e/ou gramas de composição por acre de meios de crescimento da planta. De acordo com algumas modalidades, uma ou mais composições da presente divulgação é/são aplicada(s) em uma quantidade suficiente para assegurar que cada acre de meios de crescimento da planta é tratado com cerca de/pelo menos 0,05, 0,1, 0,125, 0,15, 0,175, 0,2, 0,225, 0,2,5, 0,275, 0,3, 0,325, 0,35, 0,375, 0,4, 0,425, 0,45, 0,475, 0,5, 0,55, 0,6, 0,65, 0,7, 0,75, 0,8, 0,85, 0,9, 0,95, 1, 1,25, 1,5, 1,75, 2, 2,25, 2,5, 2,75, 3, 3,25, 3,5, 3,75, 4, 4,25, 4,5, 4,75, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 ou 100 mililitros e/ou gramas de composição. De acordo com algumas modalidades, uma ou mais composições da presente divulgação é/são aplicada(s) em uma quantidade suficiente para assegurar que uma média de cerca de/pelo menos 0,05, 0,1, 0,125, 0,15, 0,175, 0,2, 0,225, 0,2,5, 0,275, 0,3, 0,325, 0,35, 0,375, 0,4, 0,425, 0,45, 0,475, 0,5, 0,55, 0,6, 0,65, 0,7, 0,75, 0,8, 0,85, 0,9, 0,95, 1, 1,25, 1,5, 1,75, 2, 2,25, 2,5, 2,75, 3, 3,25, 3,5, 3,75, 4, 4,25, 4,5, 4,75, 5, 10,

20, 30, 40, 50, 100, 500, 1,000, 5,000 ou 10,000 mililitros e/ou gramas de composição é aplicada a cada acre de meios de crescimento da planta.

[0053] Em algumas modalidades, as composições da presente divulgação são aplicadas 1, 2, 3, 4, 5, 6,7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71,72,73,74,75,76,77,78,79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 e/ou 100 ou mais dias após plantio.

[0054] Em algumas modalidades, a composição compreende uma enzima derivada de uma estirpe selecionada do grupo Alicyclobacillus, Arthrobacter, Aspergillus (tais como Aspergillus oryzae), Bacillus (tais como Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus clausii, Bacillus licheniformis, Bacillus mojavensis e Bacillus pumilus), Dichomitus squalens, Fusarium oxysporum, Janibacter, Lysobacter, Meripilus giganteus, Nocardiopsis prasina, Pyrococcus furiosus, Rhizomucor miehei, Saccharomonospora viridis, Saccharothrix australiensis, Saccharothrix variisporea, Streptomyces (tais como Streptomyces violaceoruber) Streptosporangium — albidum, Thermoascus aurantiacus, Trichoderma reesei e Zophobas atratus.

[0055] As culturas de plantas úteis a serem protegidas pela presente invenção compreendem tipicamente, por exemplo, as seguintes espécies de plantas: cereais, por exemplo trigo, cevada, centeio, aveia, arroz, maís ou sorgo; beterraba, por exemplo beterraba-sacarina ou -forrageira; fruta, por exemplo fruta pomoidea, fruta com caroço e fruta macia, por exemplo maçãs, peras, ameixas, pêssegos, amêndoas, cerejas ou bagas, por exemplo morangos, framboesas e amoras; leguminosas, por exemplo feijões, lentilhas, ervilhas ou grãos de soja, culturas oleaginosas, por exemplo colza, mostarda, papoilas, azeitonas, girassóis, coco, plantas de óleo de rícino, cacau ou amendoim; cucurbitáceas, por exemplo abóboras, pepinos ou melões; plantas de fibra, por exemplo algodão, linho, cânhamo ou juta; citrinos, por exemplo laranjas, limões, toranja ou tangerinas; legumes e hortaliças, por exemplo espinafre, alface, aspargos, brássica (p.ex., repolho, brócolis e couve-flor), cenouras, cebolas, tomates, batatas ou pimentões; Lauraceae, por exemplo abacate, Cinnamonium ou cânfora; ou tabaco, nozes, café, berinjelas, cana-de- açúcar, chá, pimenta, videiras, lúpulos, Musaceae, plantas de látex ou plantas ornamentais (tais como plantas domésticas usadas em jardinagem externa ou paisagismo).

[0056] A presente invenção pode ser usada para proteger contra pragas fúngicas tais como, mas não se limitando a, antracnose (Colletotrichum coccodes), podridão corky ou marrom da raiz (Pyrencochaeta Iycopersici), míldio e requeima (Phytophthora infestans), queima precoce (Alternaria solani), podridão da coroa de Fusarium (Fusarium oxysporum), murcha de Fusarium (Fusarium oxyporum), mancha cinza das folhas (Stemphylium solani), bolor cinza (Botrytis cinera), queima gomosa do caule (Didymella bryoniae), ferrugem (Fusarium graminearum), bolor das folhas (Fulviablva), podridão de Phoma (Phoma destructiva), oídio (Leveillula taurica), Puccinia spp. (P. recondita, P. striiformis, P. hordei), Pyricularia Spp., crosta ou gomose (Cladosporium cucumerinum), podridão do caule de Sclerotinia (Sclerotinia scleotiorum), mancha das folhas de Septoria (Septoria Iycopersica), Septoria nodorum, ferrugem da bainha (Rhizoctonia solani), mancha de fuligem (Gloeodes pomigena) e síndrome da morte súbita (Fusarium virguliforme), entre outras pragas fúngicas. Preferencialmente, a presente invenção é usada para proteger contra Colletotricum, Fusarium, Phytophthora, —Pythiumy —Rhizoctonia e/ou Sclerotiniazz O mais preferencialmente, a invenção é usada para controlar Fusarium Ou Phytophthora.

[0057] Em algumas modalidades, as composições da presente invenção compreendem uma ou mais estrobilurinas, tais como azoxistrobina,

coumetoxistrobina, coumoxistrobina, dimoxistrobina, enestroburina, fluoxastrobina, cresoxim-metila, metominostrobina, orissastrobina, picoxistrobina, piraclostrobina, pirametostrobina, piraoxistrobina, piribencarbe, trifloxistrobina, éster de metila de ácido 2-[2-(2,5-dimetil- fenoximetil)-fenil]-3-metoxi-acrílico e 2-(2-(3-(2,6-diclorofenil)-1-metil- alilidenoamino-oximetil)-fenil)-2-metoxi-imino-N-metil-acetamida;

carboxamidas, tais como carboxanilidas (p.ex., benalaxil, benalaxil-M, benodanil, bixafeno, boscalida, carboxina, fenfuram, fen-hexamida, flutolanil, fluxapiroxade, furametpir, isopirazam, isotianil, quiralaxil, mepronil, metalaxil, metalaxil-M (mefenoxam), ofurace, oxadixil, oxicarboxina, penflufeno, pentiopirade, sedaxano, tecloftalam, tifluzamida, tiadinil, 2- amino-4-metil-tiazol-S-carboxanilida, — N-(4'-trifluorometiltiobifenil-2-i1)-3- difluorometil-1-metil-1 H-pirazol-4-carboxamida, — N-(2-(1,3,3-trimetilbutil)- fenil)-1,3-dimetil-5-fluoro-1 H-pirazol-4-carboxamida), morfolidas carboxílicas (p.ex., dimetomorfe, flumorfe, pirimorfe), amidas de ácido benzoico (p.ex, flumetover, fluopicoliday fluopiram, zoxamida), carpropamida, diciclomete, mandiproamida, oxitetraciclina, siltiofam e amida de ácido N-(6-metoxi-piridin-3-il)ciclopropanocarboxílico; azóis, tais como triazóis (pex., azaconazol, Dbitertanol, bromuconazol, ciproconazol, difenoconazol, diniconazol, diniconazol-M, epoxiconazol, fenbuconazol, fluquinconazol, flusilazol, flutriafol, hexaconazol, imibenconazol, ipconazol, metconazol, — miclobutanil, — oxpoconazol, — paclobutrazol, — penconazol, propiconazol, —protioconazol, simeconazol, tebuconazol, tetraconazol, triadimefona, triadimenol, triticonazol, uniconazol) e imidazóis (p.ex., ciazofamida, imazalil, pefurazoato, procloraz, triflumizol); compostos heterocíclicos, tais como piridinas (p.ex., fluazinam, pirifenox (cf.D1b), 3-[5- (4-cloro-fenil)-2,3-dimetil-isoxazolidin-3-il]-piridina, 3-[5-(4-metil-fenil)-2,3- dimetil-isoxazolidin-3-il]-piridina), pirimidinas (p.ex., bupirimato, ciprodinil, diflumetorim, fenarimol, ferimzona, mepanipirim, nitrapirina, nuarimol,

pirimetanil), piperazinas (p.ex., triforina), pirróis (p.ex., fenpiclonil, fludioxonil), morfeolinas (p.ex., aldimorfe, dodemorfe, dodemorfe-acetato, fenpropimorfe, tridemorfe), piperidinas (p.ex., fenpropidina), dicarboximidas (p.ex., fluoroimida, iprodiona, procimidona, vinclozolina), heterociclos com 5 membros não aromáticos (p.ex, famoxadona, fenamidona, flutianil, octilinona, probenazol, éster de S-alila de ácido 5-amino-2-isopropil-3-0x0-4- orto-tolil-2,3-di-hidro-pirazol-1-carbotioico), acibenzolar-S-metila, ametoctradina, amissulbrom, anilazina, blasticidina-S, captafol, captano, quinometionato, — dazomete, —debacarbe, diclomezina,y difenzoquate, difenzoquate-metilsulfato, fenoxanil, Folpete, ácido oxolínico, piperalina, proquinazida, piroquilona, quinoxifeno, triazóxido, triciclazol, 2-butóxi-6- iodo-3-propilecromen-4-ona, S-cloro-1-(4,6-dimetóxi-pirimidin-2-11)-2-metil- 1H-benzoimidazol e 5-cloro-7-(4-metilpiperidin-1-11)-6-(2,4,6-trifluorofenil)- [1,2,4]triazolo-[1,5-a]pirimidina; benzimidazóis, tais como carbendazim; e outras substâncias ativas, tais como guanidinas (p.ex., guanidina, dodina, base livre de dodina, guazatina, guazatina-acetato, iminoctadina), iminoctadina- triacetato e iminoctadina-tris(albesilato); antibióticos (p.ex., casugamicina, hidrocloreto-hidrato — de —casugamiícina, estreptomicina, polioxina e validamicina A); derivados de nitrofenila (p.ex., binapacrila, diclorano, dinobutona, — dinocape, nitrotal-isopropila, —tecnazem); compostos organometálicos (p.ex., sais de fentina, tais como fentina-acetato, cloreto de fentina, hidróxido de fentina); compostos de heterociclila contendo enxofre (p.ex., ditianona, isoprotiolano); compostos organofosforosos (p.ex, edifenfos, fosetil, fosetil-alumínio, iprobenfos, ácido fosforoso e seus sais, pirazofos, tolclofos-metila); compostos organoclorados (p.ex., clorotalonil, diclofluanida, diclorofeno, flussulfamida, hexaclorobenzeno, pencicurona, pentaclorfenol e seus sais, ftalida, quintozeno, tiofanato-metila, tiofanato, tolilfluanida, N-(4-cloro-2-nitro-fenil)-N-etil-4-metil-benzenossulfonamida) e substâncias ativas inorgânicas (p.ex., mistura de Bordeaux, acetato de cobre,

hidróxido de cobre, oxicloreto de cobre, sulfato de cobre básico, enxofre) e suas combinações. Em algumas modalidades, as composições da presente divulgação compreendem acibenzolar-S-metila, azoxistrobina, benalaxil, bixafeno, boscalida, carbendazim, ciproconazol, dimetomorfe, epoxiconazol, fludioxonil, fluopiram, fluoxastrobina, flutianil, flutolanil, fluxapiroxade, fosetil-Al, ipconazol, isopirazam, cresoxim-metila, mefenoxam, metalaxil, metconazol, — miclobutanil, — orisastrobina, — penflufeno, —pentiopirade, picoxistrobina, propiconazol, protioconazol, piraclostrobina, sedaxano, siltiofam, tebuconazol, tiabendazol, tifluzamida, tiofanato, tolclofos-metila, trifloxistrobina e triticonazol. Em algumas modalidades, as composições da presente — divulgação — compreendem .— azoxistrobina,y —piraclostrobina, fluoxastrobina, trifloxistrobina, ipconazol, protioconazol, sedaxano, fludioxonil, metalaxil, mefenoxam, tiabendazol, fluxapiroxade e/ou fluopiram. Em algumas modalidades, as composições da presente divulgação compreendem um ou mais hidrocarbonetos aromáticos, benzimidazóis, carboxamidas, amidas de ácido carboxílico, morfolinas, fenilamidas, fosfonatos, inibidores externos de quinona (p.ex., estrobilurinas), tiazolidinas, tiofanatos, carboxamidas de tiofeno e/ou triazóis.

[0058] A presente invenção é adicionalmente descrita pelos seguintes parágrafos numerados:

[0059] Parágrafo [1]. Um método compreendendo aplicação foliar de uma composição compreendendo uma quantidade eficaz de um agente fitoprotetor a uma planta e/ou parte da planta.

[0060] Parágrafo [2]. Um método de controle de pragas de plantas em uma planta ou parte da planta e/ou indução de resistência a uma praga de plantas em uma planta ou parte da planta, compreendendo aplicação de uma quantidade eficaz de uma composição compreendendo um agente fitoprotetor à planta ou parte da planta.

[0061] Parágrafo [3]. O método de controle ou prevenção de danos por pragas em um material de propagação da planta, uma planta, parte de uma planta e/ou órgão da planta, compreendendo aplicação na planta, parte da planta, órgão da planta, material de propagação da planta ou uma sua área circundante de uma quantidade eficaz de uma composição compreendendo um agente fitoprotetor.

[0062] Parágrafo [4]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-3, em que o agente fitoprotetor compreende uma enzima.

[0063] Parágrafo [5]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-3, em que o agente fitoprotetor compreende um polipeptídeo tendo pelo menos 70%, 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99%, 99,5% ou 100% de identidade de sequências com uma sequência selecionada do grupo SEQID NO: |.

[0064] Parágrafo [6]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-3, em que o agente fitoprotetor compreende: a. uma enzima, tendo opcionalmente atividade de degradação de quitina, quitina desacetilase, quitosanase, quitinase, cutinase, beta- glucanase, beta-1 4-glucanase, beta-1,3-glucanase, lipase, polissacarídeo lítico mono-oxigenase, radical de cobre oxidase, oxidorredutase, protease, haloperoxidase, peroxigenase, degradação de manose, alfa-manosidase, expansina e/ou poligalactose-aminidase, opcionalmente derivada de uma estirpe selecionada do grupo Alicyclobacillus, Arthrobacter, Aspergillus oryzae, Bacillus (tais como Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus clausii, Bacillus licheniformis, Bacillus mojavensis e Bacillus pumilus), Dichomitus squalens, Fusarium oxysporum, Janibacter, Lysobacter, Meripilus giganteus, Nocardiopsis — prasina, — Pyrococcus —furiosusó, Rhizomucor miehei, Saccharomonospora viridisó, Saccharothrix australiensis, Saccharothrix variisporea, Streptomyces (tais como Streptomyces violaceoruber), Streptosporangium albidum, Thermoascus aurantiacus, Trichoderma reesei e

Zophobas atratus; e b. um fungicida, opcionalmente um ou mais hidrocarbonetos aromáticos benzimidazóis, benzotiadiazol, carboxamidas, amidas de ácido carboxílico, morfolinas, fenilamidas, fosfonatos, inibidores externos de quinona, tiazolidinas, tiofanatos, tiofeno carboxamidas e/ou triazóis.

[0065] Parágrafo [7]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-6, em que o agente fitoprotetor compreende adicionalmente um ou mais acaricidas, inseticidas e/ou nematicidas, opcionalmente um ou mais carbamatos, diamidas, lactonas macrocíclicas, neonicotinoides, organofosfatos, fenilpirazóis, piretrinas, espinosinas, piretroides sintéticos, ácidos tetrônicos e/ou ácidos tetrâmicos.

[0066] Parágrafo [8]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-7, em que a parte da planta é folhagem.

[0067] Parágrafo [9]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-8, em que o agente fitoprotetor está em uma quantidade/concentração de cerca de 0,0001 a cerca de 95% ou mais (em peso) da composição, por exemplo cerca de 0,0001, 0,0002, 0,0003, 0,0004, 0,0005, 0,0006, 0,0007, 0,0008, 0,0009, 0,001, 0,0015, 0,002, 0,0025, 0,003, 0,0035, 0,004, 0,0045, 0,005, 0,0055, 0,006, 0,0065, 0,007, 0,0075, 0,008, 0,0085, 0,009, 0,0095, 0,01, 0,015, 0,02, 0,025, 0,03, 0,035, 0,04, 0,045, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,02, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1 a cerca de 1, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95% (em peso) da composição.

[0068] Parágrafo [10]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-9, em que a composição compreende adicionalmente um transportador agricolamente aceitável, por exemplo, um transportador compatível com folhagem, um transportador compatível com semente e/ou um transportador compatível com solo, em que o transportador compreende um líquido, gel, pasta semifluida ou sólido, opcionalmente:

um ou mais monossacarídeos, opcionalmente arabinose, frutose e/ou glucose;

um ou mais dissacarídeos, opcionalmente maltose, sacarose e/ou trealose;

uma ou mais maltodextrinas, opcionalmente uma ou mais maltodextrinas (p.ex, uma ou mais maltodextrinas (cada uma e/ou coletivamente) tendo um valor de DEV de cerca de 15 a cerca de 20);

um ou mais álcoois de açúcar, opcionalmente arabitol, manitol, sorbitol e/ou xilitol;

um ou mais ácidos húmicos, opcionalmente humato de potássio e/ou humato de sódio;

um ou mais ácidos fúlvicos, opcionalmente fulvato de potássio e/ou fulvato de sódio;

um ou mais polímeros higroscópicos, opcionalmente uma ou mais albuminas, alginatos, celuloses, gomas (p.ex., goma de celulose, goma guar, goma arábica, goma de combretum, goma xantana), celuloses de metila, náilons, pectinas, ácidos poliacrílicos, policarbonatos, polietilenoglicóis (PEG), polietileniminas (PED), polilactídeos, polimetilacrilatos (PMA), poliuretanos, álcoois polivinílicos (PVA), polivinilpirrolidonas (PVP), propilenoglicóis, celuloses de carboximetila de sódio e/ou amidos;

um ou mais componentes de controle da oxidação, opcionalmente um ou mais antioxidantes (p.ex., ácido ascórbico, palmitato de ascorbila, estearato de ascorbila, ascorbato de cálcio, um ou mais carotenoides, ácido lipoico, um ou mais compostos fenólicos (p.ex., um ou mais flavonoides, flavonas e/ou flavonóis), ascorbato de potássio, ascorbato de sódio, um ou mais tióis (p.ex., glutationa, ácido lipoico e/ou cisteína de N- acetila), um ou mais tocoferóis, um ou mais tocotrienóis, ubiquinona e/ou ácido úrico) e/ou um ou mais sequestradores de oxigênio, opcionalmente ácido ascórbico e/ou hidrogenocarbonato de sódio; e/ou um ou mais protetores contra UV, opcionalmente um ou mais lignossulfitos.

[0069] Parágrafo [11]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-10, em que a composição compreende adicionalmente um ou mais gastropodicidas, opcionalmente um ou mais fosfatos de ferro, metaldeídos, metiocarbs e/ou sais; um ou mais herbicidas, opcionalmente um ou mais inibidores de acetil CoA carboxilase (ACCase), inibidores de acetolactato sintase (ALS), inibidores de ácido aceto-hidróxi sintase (AHAS), inibidores de fotossistema II, inibidores de fotossistema 1, inibidores de protoporfirinogênio oxidase (PPO ou Protox), inibidores da biossíntese de carotenoides, inibidor de chiquimato-3-fosfato de enolpiruvila (EPSP) sintase, inibidor de glutamina sintetase, inibidor de di-hidropteroato sintetase, inibidores de mitose, inibidores de 4-hidroxifenil-piruvato-dioxigenase —(4-HPPD), —auxinas sintéticas, sais de herbicida de auxina, inibidores do transporte de auxina e/ou inibidores de ácido nucleico; um ou mais rodenticidas, opcionalmente Dbrodifacoum, bromadiolona, —brometalina, colecalciferol, clorofacinona, difetialona, difacinona, estricnina, varfarina e/ou fosfeto de zinco; e/ou um ou mais virucidas.

[0070] Parágrafo [12]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-11, em que a composição compreende adicionalmente um ou mais flavonoides, opcionalmente: uma ou mais antocianidinas, opcionalmente cianidina, delfinidina, malvidina, pelargonidina, peonidina e/ou petunidina; uma ou mais antoxantinas, opcionalmente uma ou mais flavonas, tais como apigenina, baicaleína, crisina, 7,8-di-hidroflavona,

diosmina, flavoxato, 6—hidroxiflavona, luteolina, escutelareína, tangeritina e/ou wogonina; e/ou flavonóis, tais como amurensina, astragalina, azaleatina, azaleína, fisetina, furanoflavonóis galangina, gossipetina, 3-hidroxiflavona, hiperosídeo, icariína, isoquercetina, caempferida, caempferitrina, caempferol, isor-hamnetina, morina, miricetina, miricitrina, natsudaidaína, paquipodol, piranoflavonois quercetina, quericitina, ramnazina, ramnetina, robinina, rutina, espiraeosídeo, troxerrutina e/ou zantoramnina;

uma ou mais flavanonas, opcionalmente butina, eriodictiol, hesperetina, hesperidina, homoeriodictiol, isossacuranetina, naringenina, naringina, pinocembrina, poncirina, sacuranetina, sacuranina e/ou esterubina;

um ou mais flavanonóis, opcionalmente di-hidrocaempferol e/ou taxifolina; flavanos, tais como flavan-3-óis (p.ex., catequina (C), 3-galato de catequina (Cg), epicatequinas (EC), epigalocatequina (EGC), 3-galato de epicatequina (ECg), 3-galato de epigalcatequina (EGCg), epiafzelequina, fisetinidol, — galocatequina (GC), 3-galato de galcatequina (GCg), guibourtinidol, mesquitol, robinetinidol, teaflavin-3-galato, teaflavin-3'- galato, teflavin-3,3'-digalato, tearubigina), flavan-4-6is (p.ex., apiforol e/ou luteoforol) e/ou flavan-3,4-dióis (p.ex., leucocianidina, leucodelfinidina, leucofisetinidina, — leucomalvidina, = luecopelargonidina, — leucopeonidina, leucorrobinetinidina, melacacidina e/ou teracacidina); e/ou um ou mais isoflavonoides, opcionalmente, uma ou mais isoflavonas, tais como biocanina A, daidzeína, formononetina, genisteína e/ou gliciteína; isoflavanos, tais como equol, ioncocarpano e/ou laxiflo-orano; isoflavandióis; isoflavenos, tais como asglabreno, haginina D e/ou 2- metoxijudaicina; coumestanos, tais como coumestrol, plicadina e/ou wedelolactona; pterocarpanos; e/ou roetonoides; e/ou um ou mais neoflavonoides, opcionalmente calofilolida, coutareagenina, dalbergicromeno, dalbergina e/ou nivetina; e/ou um ou mais pterocarpanos, opcionalmente bitucarpina A,

bitucarpina B, eribraedina A, eribraedina B, eritrabissina II, ertirabissina-l, ericristagalina, glicinol, gliceolidinas, gliceolinas, glicirrizol, maaquiaína, medicarpina, morisianina, orientanol, faseolina, pisatina, estriatina e/ou trifolirizina.

[0071] Parágrafo [13]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-12, em que a composição compreende adicionalmente um ou mais tensoativos aniônicos solúveis em água e/ou um ou mais tensoativos aniônicos insolúveis em água, opcionalmente: um ou mais tensoativos aniônicos selecionados do grupo consistindo em carboxilatos de alquila (p.ex., estearato de sódio), sulfatos de alquila (p.ex., lauril sulfato de alquila, lauril sulfato de sódio), sulfatos de éter de alquila, sulfatos de éter de amido de alquila, sulfatos de poliéter de alquilarila, sulfatos de alquilarila, sulfonatos de alquilarila, sulfonatos de alquila, sulfonatos de amida de alquila, sulfonatos de alquilarila, sulfonatos de benzeno de alquila, sulfonato de difenilóxido de alquila, sulfonatos de alfaolefina, sulfonatos de naftaleno de alquila, sulfonatos de parafina, sulfossuccinatos de alquila, sulfossuccinatos de éter de alquila, sulfossuccinatos de alquilamida, sulfossuccinamatos de alquila, sulfoacetatos de alquila, fosfatos de alquila, fosfatos de éter de alquila, sarconsinatos de acila, isetionatos de acila, tauratos de N-acila, N-acil-N-alquiltauratos, sulfonatos de benzeno, sulfonatos de cumeno, sulfossuccinato de sódio de dioctila, sulfossuccinatos etoxilados, sulfonatos de lignina, sulfonatos de alquilbenzeno lineares, sulfatos de monoglicerídeo, perfluorobutanossulfonato, perfluoro-octanossulfonato, éster de fosfato, polímeros acrílicos de estireno, sulfonatos de tolueno e sulfonatos de xileno.

[0072] Parágrafo [14]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-13, em que a composição compreende adicionalmente um ou mais tensoativos catiônicos, opcionalmente: sais de alquiltrimetilamônio (p.ex., brometo de trimetilamônio de cetila, cloreto de trimetilamônio de cetila), cloreto de cetilpiridínio, cloreto de benzalcônio, cloreto de benzetônio, 5-bromo-S-nitro-

1,3-dioxano, cloreto de dimetildioctadecilamônio, brometo de cetrimônio, brometo de dioctadecildimetilamônio e/ou di-hidrocloreto de octenidina.

[0073] Parágrafo [15]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-14, em que a composição compreende adicionalmente um ou mais tensoativos não iônicos solúveis em água e/ou um ou mais tensoativos não iônicos insolúveis em água, opcionalmente: etoxilatos de álcool, alcanolamidas, condensados de alcanolamina, ésteres de ácido carboxílico, álcool cetoestearílico, álcool cetílico, cocamida DEA, óxidos de dodecildimetilamina, etanolamidas, etoxilatos de éster de glicerol e ésteres de glicol, polímeros de óxido de etileno, copolímeros de óxido de etileno-óxido de propileno, éteres de alquila de glucosídeo, éteres de alquila de glicerol, ésteres de glicerol, éteres de alquila de glicol (p.ex., éteres de alquila de polioxietilenoglicol, éteres de alquila de polioxipropilenoglicol), éteres de alquilfenol de glicol (p.ex., éteres de alquilfenol de polioxietilenoglicol), ésteres de glicol, monolaurina, éteres de monododecila de pentaetilenoglicol, poloxâmero, poliaminas, polirricinoleato de poliglicerol, polissorbato, ácidos graxos polioxietilenados, mercaptanos polioxietilenados, polioxipropilenoglicóis — polioxietilenados, — ésteres de alquila de polioxietilenoglicol sorbitana, copolímeros — de — polietilenoglicol- polipropilenoglicol, éteres de octilfenol de polioxietilenoglicol, pinolidonas de polivinila, poliglicosídeos de alquila à base de açúcar, sulfoanilamidas, etoxilatos de álcool de ácido graxo de sorbitana, etoxilatos de éster de ácido graxo de sorbitana, éster de ácido graxo de sorbitana e/ou glicóis acetilênicos terciários.

[0074] Parágrafo [16]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-15, em que a composição compreende adicionalmente um ou mais tensoativos zwitteriônicos, — opcionalmente: — 3-[(3-Colamidopropil)dimetilamônio]-1- propanossulfonato, cocamidopropil — betaína, hidroxissultaána — de cocamidopropila, fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilcolina e/ou uma ou mais esfingomielinas.

[0075] Parágrafo [17]. O método de acordo qualquer uma das reivindicações 1-16, em que a composição compreende adicionalmente um ou mais sabões e/ou tensoativos de organossilicone, opcionalmente: um ou mais sais de metais alcalinos de ácidos graxos.

[0076] Parágrafo [18]. Um método de qualquer um dos parágrafos 1- 9, em que a composição compreende um grânulo compreendendo uma ou mais enzimas, opcionalmente em que o grânulo tem um tamanho médio de partículas de 20-2000 um de diâmetro esférico equivalente.

[0077] Parágrafo [19]. Um método do parágrafo 18, em que a composição compreende um núcleo e opcionalmente um ou mais revestimentos rodeando o núcleo, em que o núcleo compreende opcionalmente: um ou mais materiais adicionais tais como enchimentos, materiais de fibra (celulose ou fibras sintéticas), agentes estabilizantes, agentes solubilizantes, agentes de suspensão, agentes de regulação da viscosidade, esferas de luz, plastificantes, sais, lubrificantes e fragrâncias; um ou mais aglutinantes, tais como polímero sintético, cera, gordura ou carboidrato; um ou mais de um sal de um cátion multivalente, um agente redutor, um antioxidante, um catalisador da decomposição de peróxido e/ou um componente de tampão ácido, opcionalmente como uma combinação homogênea; uma ou mais de uma partícula inerte com uma enzima absorvida na mesma ou aplicada na superfície, por exemplo, por revestimento em leito fluidizado.

[0078] Parágrafo [20]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-19, em que a gravidade da infestação de pragas e/ou danos por pragas são reduzidos em pelo menos cerca de 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%,

40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ou 100% em comparação com uma planta que não teve o agente fitoprotetor aplicado.

[0079] Parágrafo [21]. O método de qualquer um dos parágrafos 1-20, em que a composição é aplicada 1, 2, 3, 4, 5, 6,7, 8,9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69,70, 71,72, 73, 74,75,76, 77,78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 e/ou 100 dias ou mais após plantio.

EXEMPLOS

[0080] Os seguintes exemplos não se destinam a ser um catálogo detalhado de todos os modos diferentes nos quais a presente divulgação pode ser implantada ou de todas as características que podem ser adicionadas à presente divulgação. Os sujeitos peritos na técnica apreciarão que numerosas variações e adições às várias modalidades podem ser feitas sem se afastar da presente divulgação. Consequentemente, as seguintes descrições se destinam a ilustrar algumas modalidades particulares da invenção e não a especificar exaustivamente todas as suas permutações, combinações e variações.

[0081] Nos seguintes exemplos, a Composição 1 compreende uma enzima tendo a sequência de polipeptídeos de SEQ ID NO: 1. Em um ou mais exemplos, a Composição 1 e/ou uma ou mais outras composições compreendem uma enzima tendo atividade de degradação de quitina, quitina desacetilase, quitosanase, quitinase, cutinase, beta-glucanase, beta-1,4- glucanase, beta-1,3-glucanase, lipase, polissacarídeo lítico mono-oxigenase, radical de cobre oxidase, oxidorredutase, protease, haloperoxidase, peroxigenase, degradação de manose, alfa-manosidase, expansina e/ou poligalactose-aminidase. Em um ou mais exemplos, a composição e/ou fungicida compreendem um fungicida de estrobilurina, um fungicida inibidor da biossíntese de esteróis, um fungicida inibidor de succinato desidrogenase, um fungicida de cobre, um fungicida de fenilamina e/ou um fungicida de ftalimida. Em um ou mais exemplos, a composição e/ou fungicida compreendem azoxistrobina, piraclostrobina, trifloxistrobina, protioconazol, tebuconazol, espiroxamina, boscalida, bixafeno, cobre, metalaxil e/ou clorotalonil.. Em um ou mais exemplos, o patógeno e/ou esporos compreendem sordariomicetos, Hypocreales, omicetos, Peronosporales, teliomiícetos, — Uredinales, — dotideomicetos, — Pleosporales, — Fusarium graminearum, Fusarium oxysporum, Fusarium virguliforme, Phytophthora infestans, Puccinia graminis e/ou Septoria nodorum. Exemplo 1: Clonagem de DNA e Expressão Enzimática

[0082] Enzimas experimentais foram clonadas em B. subtilis ou A. oryzae usando métodos padrão (referência?). As enzimas clonadas em B. subtilis foram tipicamente clonadas em grelha com um marcador de 6- Histidinas N-terminal para facilitar a purificação. A expressão para as estirpes de B. subtilis foi realizada da seguinte maneira: as culturas foram inoculadas em LBPSG + 6cam e incubadas durante a noite. Uma única colônia isolada foi selecionada para inocular 5 mL de LB + 6cam ou meio similar e incubada a 37 ºC durante 5 h com agitação a 225 rpm. 1 mL de cultura foi depois usado para inocular 400-3000 mL de 10R-av-30CS, Cal-18 + cam ou meio similar em um frasco de agitação com defletores e incubado durante 3 dias a 26 - 30 ºC, agitando a 225 - 250 rpm. A expressão para estirpes de A. oryzae foi realizada da seguinte maneira: 1 mL de cultura de esporos foi usado para inocular 800 - 1200 mL de YP + glucose a 2%, meio Dap4C, e incubado a 30 ºC durante 5 dias com agitação a 80 rpm. As culturas foram coletadas por centrifugação a 10000 rpm durante 30 minutos e esterilizadas por filtração usando um filtro PES de 0,2 um (VWRº). A expressão foi avaliada por SDS- PAGE. Exemplo 2: Purificação Enzimática

[0083] Os caldos esterilizados por filtração foram purificados usando métodos padrão. Brevemente, enzimas marcadas com His6 foram purificadas por cromatografia de afinidade de Ni (IMAC) usando uma coluna His-trap Excel de 5 mL (GEº Life Sciences) de acordo com protocolos padrão, eluindo com imidazol a 800 mM. A enzima purificada foi submetida a troca de tampões em HEPES a 50 mM, NaCl a 100 mM pH 7,0 ou Tris a 20 mM, pH 7,0 usando coluna Sephadex G25 (GEº Life Sciences). As enzimas sem uma marcação de His6 foram tipicamente purificadas usando cromatografia de interação hidrofóbica (HIC). Sulfato de amônio a 1,8 M foi em primeiro lugar adicionado ao caldo, depois a solução foi aplicada a uma coluna de fenil sepharose de 5 mL antes de eluir com um gradiente de passos de etanol a 50%. A enzima eluída foi dessalinizada como descrito acima. A purificação foi avaliada por SDS-PAGE e a concentração foi determinada por análise A280 ou Qubit de acordo com os protocolos do fabricante. Exemplo 3: Preparação de Esporos Fúngicos a) Preparação de suspensão de esporos de Fusarium virguliforme

[0084] Placas V8 com metade da força de F. virguliforme (isolado 37592) foram cultivadas durante 10 dias à temperatura ambiente sob iluminação fluorescente. Uma suspensão de esporos foi preparada por inundação da placa com 2 mL de meio M9. Os esporos foram suavemente raspados da superfície, filtrados através de 2 camadas de gaze estéril, e a concentração de esporos foi determinada usando um hemocitômetro. À suspensão final de esporos foi ajustada até 1x10º esporos por mL usando meio M9.

b) Preparação de suspensão de esporos de Fusarium graminearum

[0085] Uma suspensão de esporos de Fusarium graminearum foi preparada por inoculação de 50 mL de meio CMC (celulose de carboximetila g, NHANO; 1 g, KH3,PO, 1 g, MgSO,s 7H,0 0,5 g, extrato de levedura 1 g, água destilada 1 L e sulfato de estreptomicina 0,2 g adicionados ao meio resfriado) com placas PDA com 5 dias de idade de F. graminearum (isolado 8-13). Os frascos Erlenmeyer ventilados de 125 mL inoculados foram incubados a 24 ºC a 200 rpm durante 7 dias. Após 7 dias, a cultura foi filtrada através de 2 camadas de gaze estéril e centrifugada durante 5 mins a 2000 rpm. O sobrenadante foi removido e os esporos foram ressuspensos em meio MO9. A concentração de esporos foi enumerada usando um hemocitômetro e a concentração foi ajustada usando M9 até 1,5 x 10º esporos por mL. c) Septoria nodorum

[0086] Placas V8 com força total de S. nodorum foram cultivadas durante 17 dias à temperatura ambiente sob iluminação fluorescente. Uma suspensão de esporos foi preparada por inundação da placa com 2 mL de meio M9. Os esporos foram suavemente raspados da superfície, filtrados através de 2 camadas de gaze estéril, e a concentração de esporos foi determinada usando um hemocitômetro. A suspensão final de esporos foi ajustada até 1x10” esporos por mL usando meio M9. Exemplo 4: Ensaio de Visualização de Elevado Conteúdo para Germinação e/ou Crescimento Reduzidos de Esporos Fúngicos

[0087] Todos os fungicidas químicos testados foram preparados a partir de estoques de DMSO a 10 mM, e todas as amostras de enzima foram dessalinizadas e submetidas a troca de tampões para a formulação de meio M9. As amostras de teste, seja enzima sozinha ou em combinação com fungicidas químicos, foram constituídas a uma concentração de 2X e foram transferidas para uma placa de ensaio de 384 poços. Um volume igual de esporos de patógenos de teste diluídos na formulação de meio M9 para 15,000 esporos/mL foi depois adicionado. Após uma incubação de 48 horas à temperatura ambiente, uma solução fixadora/corante constituída por metanol a 95%, ácido acético glacial a 5% e 5 - 10 uM de SytoBC ou corante fluorescente FUNI1 foi adicionada às amostras de teste.

Após uma incubação adicional à temperatura ambiente de —2 horas, as placas de ensaio de 384 poços foram visualizadas usando um sistema de análise de elevado conteúdo InCell 2200. As imagens foram cortadas em ImageJ para remover as bordas do poço, e as imagens cortadas foram analisadas para detectar o comprimento das hifas através da intensidade fluorescente usando software de análise de imagens de desenvolvedor GE”. A percentagem de inibição do crescimento de hifas foi calculada por normalização de todas as amostras de teste para um controle negativo não tratado ou para um controle contendo uma concentração equivalente de fungicida químico que a amostra de teste e para um controle de inibição positivo consistindo em ciclo-heximida a 100 ugmL.

As concentrações da enzima em estas experiências variaram de 10 ug/mL a 1 mg/mL.

Os resultados com protioconazol como o fungicida químico, onde o organismo fúngico alvo F. graminearum é denotado G e F. virguliforme é denotado V, são mostrados na Tabela 1 e Tabela 2. Tabela 1: J% de redução micelial A “ nao t —— : i ; F tina Dao ki om i L tosanas: mosanoso

Ze de redução micelial

CN " |» | eta 16 glucanase | e basisguenso | * | Pla Lala ota 1 fr glucaness [OT huitina beta-L6-glucanosiliransferase Tabela 2: Jo de redução micelial [| xy Jureiseens 805 Pla raras E Nr E E pat Mal 2-manosidase 7 G 32,9 | as etegueanss | ac À fa 16 glucanase ' | ao far 1 A-poligalactosaminidase ' Log =| 33 Ma 1 4 poligalactosaminidase : J-ace a as G | 56 eta N-acetil hexosaminidase an — Hoxmloxdas Le = 68 [ao — bfaTápoligalactosaminidase

[0088] A eficácia aditiva de enzimas e fungicida químico foi identificada por titulação da enzima a uma concentração fixa de fungicida. Uma diluição em série de enzima entre a concentração final de 1 ugémL e 1 mg/mL foi usada para determinar as concentrações enzimáticas inibidoras, e a eficácia aditiva foi quantificada por comparação dos valores de ECso dos tratamentos enzimáticos sozinhos com os tratamentos enzimáticos + químicos. Uma combinação enzima/química exibindo uma concentração ECso pelo menos 2 vezes mais baixa em combinação com a química do que a enzima sozinha foi considerada como exibindo atividade maior do que aditiva. Os resultados são mostrados na Tabela 3. Tabela 3: SC Enzi 1Cso mais Atividade ENE química | Fungicida Químico " (mg/mL) beta-L,6-glucanase 0403 | >05 Protioconazola20uM 0,02048 0,2278 — Protioconazol a 0,2 uM lalfa-1,6-mananase 0,08056 0,1162 — Protioconazol a 20 uM 0,1032 0,08444 — Protioconazol a 20 uM 0,36 — Protioconazol a 0,2 uM quitinase IFusarium graminearum] — >0,5 —| 036 —Protioconazola20uM 0204 | >05 — Protioconazola0,2uM 0,02817 — Protioconazol a 20 uM [Galactosaminogalactanase 0.124 | >0S ProtioconseolaD2uM fá 0,02086 0,02581 — Benomil a 0,25 uM 0,002 — Protioconazol a 20 uM —. 0.009 — Protioconazola 20 uM P 0,001486 Protioconazol a 20 uM beta-N-acetil-hexosaminidase 01586 | >05S Protioconazola02uM 0182 | >05s — Protioconazola0,2 uM [Galactosaminogalactanase 0,06 — Fluopiram a 0,5 uM [Fusarium virguliforme | 0,03 | 002 —Benomila025uM lalfa-1,6-glucanase 0167 | >05 Protioconazola0,2uM lalfa-1,4- 0092 | >05s Protioconazola0,2uM poligalactosaminidase 0,511 — Protioconazol a 20 uM — Fusariim graminearim| — >05 | — 021 — Proioconazala20 uM >. 0,06519 — Benomil a 0,25 uM beta-1,6-glucanase 035 | >05S Protioconazola0,2uM E 0.194 — Protioconazol a 20 uM

0.185 — Protioconazol a 20 uM 02505 | >05 —Protioconazola0,2 uM 0,005 — Clorotalonil a 5 uM tina Fusarium virguliforme | 002 | >05 —Fluopirama0.SuM ns Fusarium virguliforme | 002 | 005 —Benomila0,SuM 01825 | >05 —Protioconazola0,2 uM 01332 | >05 —Protioconazola0,2 uM beta-1,6-glucanase 0,086 — Protioconazol a 20 uM 0192 | >05 —Protioconazola20 uM 0285 | >05 — Protioconazola0,2uM

(mg/mL) praca EE SR SR nani Exemplo 5: Ensaio de Viabilidade de Células MTT para Germinação e/ou Crescimento Reduzidos de Esporos Fúngicos

[0089] Os ensaios foram levados a cabo em tubos de microcentrífuga de 1,5 mL. Os fungicidas indicados foram dissolvidos em DMSO a uma concentração de estoque de 1 mg/mL. As enzimas foram dessalinizadas em tampão MES a 50 mM, pH 6,0 usando uma coluna Sephadex G25 de 200 mL com caudal de 9,5 mL/min antes da adição ao ensaio de germinação. O ensaio de germinação consistiu em meio de caldo de batata dextrose, fungicida à concentração ICsy ou nenhum fungicida, com ou sem enzima a uma concentração de 200 ug/mL, e esporos fúngicos a um título de 10º/mL em um volume final de 400 uL. A mistura reacional sem fungicida serviu como um controle de inibição negativo, e uma mistura reacional contendo ácido de manase a 0,2 mg/mL ou M-PEG (1,2-propanodiol) a 20 mg/mL serviu como um controle de inibição positivo. A mistura de germinação de esporos foi incubada a 27 ºC durante 3 dias. No final do período de incubação, 200 uL de corante brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-11)-2,5-difeniltetrazólio (MTT) foram adicionados aos 400 uL existentes de cultura de ensaio e foram incubados durante outras 3 horas a 27 ºC no escuro. Os tubos foram depois centrifugados, e os sobrenadantes foram descartados. Ao resíduo deixado nos tubos, 200 uL de DMSO foram adicionados para dissolver o formazano formado pelas células fúngicas vivas. Os tubos foram agitados com vórtex e centrifugados novamente. 100 uL do sobrenadante de cada tubo foram transferidos para um poço separado em uma placa de microtitulação de 96 poços e a absorvância foi medida a 540 nm. A inibição da germinação e crescimento fúngicos por enzimas foi determinada em relação ao controle não inibido para amostras sem fungicida químico e em relação às culturas 50%

inibidas para amostras contendo cada um dos fungicidas químicos testados.

Os resultados são mostrados na Tabela 4 e Tabela 5. Tabela 4: [Enima | Atividade === | FungoAlvo | Fungicida | 9% deinibição | BA — Elucose oxidase combinação BC — bombinação Hextranase BG brotense BH — combinação E. verficiloides ——henhum — | 099 | BI — Combinação BJ — Combinação BN luitinaso [Bo uitinase NE verriciloides — > protioconazol =| 10 | |. verticilloides — — proioconazol —| —986 | BP fra elueaneso Tabela 5: [22 e O E ae 906

BS — quitinase BT — beta1,4-quitinase BV — beta-1,6-glucanase BW — pifa1,2-manosidase BX — Qquitosanase BY — quitosanase Exemplo 6: Ensaio de Viabilidade de Células MTT para Determinação de IC5o para Fungicidas Químicos

[0090] As concentrações que resultam em uma inibição de 50% da germinação e crescimento (ICso) para os fungicidas químicos antracol (propinebe), protioconazol e trifloxistrobina foram determinadas para esporos fúngicos de Fusarium verticilloides, Colletotrichum gleosporoides ou ambos. Os ensaios foram realizados como descrito no Exemplo 5, com as seguintes exceções. Cada fungicida foi dissolvido em DMSO à concentração de 1 mg/mL, depois adicionado ao ensaio de germinação às concentrações finais de 0, 0,01, 0,02, 0,04, 0,06, 0,08 mg/mL. As concentrações de ajuste de ICso são mostradas na Tabela 6. Tabela 6: Concentrações ICs, para vários fungicidas químicos em F. verticilloides e C. gleosporoides

[0091] A descrição detalhada anterior foi dada somente para facilitar a compreensão e nenhumas limitações desnecessárias devem ser entendidas a partir da mesma pois as modificações serão óbvias para os peritos na técnica. Não é uma admissão que qualquer informação proporcionada aqui seja técnica prévia ou relevante para as invenções presentemente reivindicadas ou que qualquer publicação especificamente ou implicitamente mencionada seja técnica prévia.

[0092] A não ser que definidos de outro modo, todos os termos técnicos e científicos usados aqui têm o mesmo significado como comumente entendido por um perito na técnica à qual esta invenção pertence.

[0093] Embora a invenção tenha sido descrita em conexão com suas modalidades específicas será entendido que é capaz de modificações adicionais e que este pedido se destina a cobrir quaisquer variações, usos ou adaptações da invenção seguindo, em geral, os princípios da invenção e incluindo tais desvios a partir da presente divulgação que se enquadram dentro da prática conhecida ou habitual dentro da técnica à qual a invenção se refere e como possa ser aplicada às características essenciais anteriormente descritas e como se segue no escopo das reivindicações anexas.

Claims (21)

REIVINDICAÇÕES

1. Método de aplicação foliar de uma composição caracterizado pelo fato de compreender uma quantidade eficaz de um agente fitoprotetor a uma planta e/ou parte da planta.

2. Método de controle de pragas de plantas em uma planta ou parte da planta e/ou indução de resistência a uma praga de plantas em uma planta ou parte da planta, caracterizado por compreender aplicação de uma quantidade eficaz de uma composição compreendendo um agente fitoprotetor à planta ou parte da planta.

3. Método de controle ou prevenção de danos por pragas em um material de propagação da planta, uma planta, parte de uma planta e/ou órgão da planta, caracterizado por compreender aplicação na planta, parte da planta, órgão da planta, material de propagação da planta ou uma sua área circundante de uma quantidade eficaz de uma composição compreendendo um agente fitoprotetor.

4. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por o agente fitoprotetor compreender uma enzima.

5. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por o agente fitoprotetor compreender um polipeptídeo tendo pelo menos 70%, 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99%, 99,5% ou 100% de identidade de sequências com uma sequência selecionada do grupo SEQ ID NO: 1.

6. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por o agente fitoprotetor compreender: a. uma enzima, tendo opcionalmente atividade de degradação de quitina, quitina desacetilase, quitosanase, quitinase, cutinase, beta- glucanase, beta-1,4-glucanase, beta-1,3-glucanase, lipase, polissacarídeo lítico mono-oxigenase, radical de cobre oxidase, oxidorredutase, protease,

haloperoxidase, peroxigenase, degradação de manose, alfa-manosidase, expansina e/ou poligalactose-aminidase, opcionalmente derivada de uma estirpe selecionada do grupo Alicyclobacillus, Arthrobacter, Aspergillus oryzae, Bacillus (tais como Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus clausii, Bacillus licheniformis, Bacillus mojavensis e Bacillus pumilus), Dichomitus squalens, Fusarium oxysporum, Janibacter, Lysobacter, Meripilus giganteus, Nocardiopsis — prasina, — Pyrococcus —furiosusó, Rhizomucor “miehei, Saccharomonospora viridisó, Saccharothrix australiensis, Saccharothrix variisporea, Streptomyces (tais como Streptomyces violaceoruber), Streptosporangium albidum, Thermoascus aurantiacus, Trichoderma reesei e Zophobas atratus; e b. um fungicida, opcionalmente um ou mais hidrocarbonetos aromáticos benzimidazóis, benzotiadiazol, carboxamidas, amidas de ácido carboxílico, morfolinas, fenilamidas, fosfonatos, inibidores externos de quinona, tiazolidinas, tiofanatos, tiofeno carboxamidas e/ou triazóis.

7. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por o agente fitoprotetor compreender adicionalmente um ou mais acaricidas, inseticidas e/ou nematicidas, opcionalmente um ou mais carbamatos, diamidas, lactonas macrocíclicas, neonicotinoides, organofosfatos, fenilpirazóis, piretrinas, espinosinas, piretroides sintéticos, ácidos tetrônicos e/ou ácidos tetrâmicos.

8. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado por a parte da planta ser folhagem.

9. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado por o agente fitoprotetor estar em uma quantidade/concentração de cerca de 0,0001 a cerca de 95% ou mais (em peso) da composição, por exemplo cerca de 0,0001, 0,0002, 0,0003, 0,0004, 0,0005, 0,0006, 0,0007, 0,0008, 0,0009, 0,001, 0,0015, 0,002, 0,0025, 0,003, 0,0035, 0,004, 0,0045, 0,005, 0,0055, 0,006, 0,0065, 0,007, 0,0075, 0,008,

0,0085, 0,009, 0,0095, 0,01, 0,015, 0,02, 0,025, 0,03, 0,035, 0,04, 0,045, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,02, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1 a cerca de 1, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95% (em peso) da composição.

10. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado por a composição compreender adicionalmente um transportador agricolamente aceitável, por exemplo, um transportador compatível com folhagem, um transportador compatível com semente e/ou um transportador compatível com solo, em que o transportador compreende um líquido, gel, pasta semifluida ou sólido, opcionalmente: um ou mais monossacarídeos, opcionalmente arabinose, frutose e/ou glucose; um ou mais dissacarídeos, opcionalmente maltose, sacarose e/ou trealose; uma ou mais maltodextrinas, opcionalmente uma ou mais maltodextrinas (p.ex, uma ou mais maltodextrinas (cada uma e/ou coletivamente) tendo um valor de DEV de cerca de 15 a cerca de 20); um ou mais álcoois de açúcar, opcionalmente arabitol, manitol, sorbitol e/ou xilitol; um ou mais ácidos húmicos, opcionalmente humato de potássio e/ou humato de sódio; um ou mais ácidos fúlvicos, opcionalmente fulvato de potássio e/ou fulvato de sódio; um ou mais polímeros higroscópicos, opcionalmente uma ou mais albuminas, alginatos, celuloses, gomas (p.ex., goma de celulose, goma guar, goma arábica, goma de combretum, goma xantana), celuloses de metila, náilons, pectinas, ácidos poliacrílicos, policarbonatos, polietilenoglicóis

(PEG), polietileniminas (PED), polilactídeos, polimetilacrilatos (PMA), poliuretanos, álcoois polivinílios (PVA), polivinilpirrolidonas (PVP), propilenoglicóis, celuloses de carboximetila de sódio e/ou amidos; um ou mais componentes de controle da oxidação, opcionalmente um ou mais antioxidantes (p.ex., ácido ascórbico, palmitato de ascorbila, estearato de ascorbila, ascorbato de cálcio, um ou mais carotenoides, ácido lipoico, um ou mais compostos fenólicos (p.ex., um ou mais flavonoides, flavonas e/ou flavonóis), ascorbato de potássio, ascorbato de sódio, um ou mais tióis (p.ex., glutationa, ácido lipoico e/ou cisteína de N- acetila), um ou mais tocoferóis, um ou mais tocotrienóis, ubiquinona e/ou ácido úrico) e/ou um ou mais sequestradores de oxigênio, opcionalmente ácido ascórbico e/ou hidrogenocarbonato de sódio; e/ou um ou mais protetores contra UV, opcionalmente um ou mais lignossulfitos.

11. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizado por a composição compreender adicionalmente um ou mais gastropodicidas, opcionalmente um ou mais fosfatos de ferro, metaldeídos, metiocarbs e/ou sais; um ou mais herbicidas, opcionalmente um ou mais inibidores de acetil CoA carboxilase (ACCase), inibidores de acetolactato sintase (ALS), inibidores de ácido aceto-hidróxi sintase (AHAS), inibidores de fotossistema II, inibidores de fotossistema 1, inibidores de protoporfirinogênio oxidase (PPO ou Protox), inibidores da biossíntese de carotenoides, inibidor de chiquimato-3-fosfato de enolpiruvila (EPSP) sintase, inibidor de glutamina sintetase, inibidor de di-hidropteroato sintetase, inibidores de mitose, inibidores de 4-hidroxifenil-piruvato-dioxigenase (4-HPPD), auxinas sintéticas, sais de herbicida de auxina, inibidores do transporte de auxina e/ou inibidores de ácido nucleico; um ou mais rodenticidas, opcionalmente brodifacoum,

bromadiolona, —brometalina, colecalciferol, clorofacinona, difetialona, difacinona, estricnina, varfarina e/ou fosfeto de zinco; e/ou um ou mais virucidas.

12. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizado por a composição compreender adicionalmente um ou mais flavonoides, opcionalmente: uma ou mais antocianidinas, opcionalmente cianidina, delfinidina, malvidina, pelargonidina, peonidina e/ou petunidina; uma ou mais antoxantinas, opcionalmente uma ou mais flavonas, tais como apigenina, baicaleína, crisina, 7,8-di-hidroflavona, diosmina, flavoxato, 6—hidroxiflavona, luteolina, escutelareína, tangeritina e/ou wogonina; e/ou flavonóis, tais como amurensina, astragalina, azaleatina, azaleína, fisetina, furanoflavonóis galangina, gossipetina, 3-hidroxiflavona, hiperosídeo, icariína, isoquercetina, caempferida, caempferitrina, caempferol, isor-hamnetina, morina, miricetina, miricitrina, natsudaidaína, paquipodol, piranoflavonois quercetina, quericitina, ramnazina, ramnetina, robinina, rutina, espiraeosídeo, troxerrutina e/ou zantoramnina; uma ou mais flavanonas, opcionalmente butina, eriodictiol, hesperetina, hesperidina, homoeriodictiol, isossacuranetina, naringenina, naringina, pinocembrina, poncirina, sacuranetina, sacuranina e/ou esterubina; um ou mais flavanonóis, opcionalmente di-hidrocaempferol e/ou taxifolina; flavanos, tais como flavan-3-6is (p.ex., catequina (C), 3-galato de catequina (Cg), epicatequinas (EC), epigalocatequina (EGC), 3-galato de epicatequina (ECg), 3-galato de epigalcatequina (EGCg), epiafzelequina, fisetinidol, galocatequina (GC), 3-galato de galcatequina (GCg), guibourtinidol, mesquitol, robinetinidol, teaflavin-3-galato, teaflavin-3"- galato, teflavin-3,3'-digalato, tearubigina), flavan-4-6is (p.ex., apiforol e/ou luteoforol) e/ou flavan-3,4-dióis (p.ex., leucocianidina, leucodelfinidina, leucofisetinidina, = leucomalvidina, luecopelargonidina, —leucopeonidina,

leucorrobinetinidina, melacacidina e/ou teracacidina); e/ou um ou mais isoflavonoides, opcionalmente, uma ou mais isoflavonas, tais como biocanina A, daidzeína, formononetina, genisteína e/ou gliciteína; isoflavanos, tais como equol, ioncocarpano e/ou laxiflo-orano; isoflavandióis; isoflavenos, tais como asglabreno, haginina D e/ou 2- metoxijudaicina; coumestanos, tais como coumestrol, plicadina e/ou wedelolactona; pterocarpanos; e/ou roetonoides; e/ou um ou mais neoflavonoides, opcionalmente calofilolida, coutareagenina, dalbergicromeno, dalbergina e/ou nivetina; e/ou um ou mais pterocarpanos, opcionalmente bitucarpina A, bitucarpina B, eribraedina A, eribraedina B, eritrabissina II, ertirabissina-l1, ericristagalina, glicinol, gliceolidinas, gliceolinas, glicirrizol, maaquiaína, medicarpina, morisianina, orientanol, faseolina, pisatina, estriatina e/ou trifolirizina.

13. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado por a composição compreender adicionalmente um ou mais tensoativos aniônicos solúveis em água e/ou um ou mais tensoativos aniônicos insolúveis em água, opcionalmente: um ou mais tensoativos aniônicos selecionados do grupo consistindo em carboxilatos de alquila (p.ex., estearato de sódio), sulfatos de alquila (p.ex., lauril sulfato de alquila, lauril sulfato de sódio), sulfatos de éter de alquila, sulfatos de éter de amido de alquila, sulfatos de poliéter de alquilarila, sulfatos de alquilarila, sulfonatos de alquilarila, sulfonatos de alquila, sulfonatos de amida de alquila, sulfonatos de alquilarila, sulfonatos de benzeno de alquila, sulfonato de difenilóxido de alquila, sulfonatos de alfaolefina, sulfonatos de naftaleno de alquila, sulfonatos de parafina, sulfossuccinatos de alquila, sulfossuccinatos de éter de alquila, sulfossuccinatos de alquilamida, sulfossuccinamatos de alquila, sulfoacetatos de alquila, fosfatos de alquila, fosfatos de éter de alquila, sarconsinatos de acila, isetionatos de acila, tauratos de N-acila, N-acil-N-

alquiltauratos, sulfonatos de benzeno, sulfonatos de cumeno, sulfossuccinato de sódio de dioctila, sulfossuccinatos etoxilados, sulfonatos de lignina, sulfonatos de alquilbenzeno lineares, sulfatos de monoglicerídeo, perfluorobutanossulfonato, perfluoro-octanossulfonato, éster de fosfato, polímeros acrílicos de estireno, sulfonatos de tolueno e sulfonatos de xileno.

14. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizado por a composição compreender adicionalmente um ou mais tensoativos catiônicos, opcionalmente: sais de alquiltrimetilamônio (p.ex., brometo de trimetilamônio de cetila, cloreto de trimetilamônio de cetila), cloreto de cetilpiridínio, cloreto de benzalcônio, cloreto de benzetônio, S-bromo-5-nitro-1,3-dioxano, cloreto de dimetildioctadecilamônio, brometo de cetrimônio, brometo de dioctadecildimetilamônio e/ou di-hidrocloreto de octenidina.

15. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações | a 14, caracterizado por a composição compreender adicionalmente um ou mais tensoativos não iônicos solúveis em água e/ou um ou mais tensoativos não iônicos insolúveis em água, opcionalmente: etoxilatos de álcool, alcanolamidas, condensados de alcanolamina, ésteres de ácido carboxílico, álcool cetoestearílico, álcool cetílico, cocamida DEA, óxidos de dodecildimetilamina, etanolamidas, etoxilatos de éster de glicerol e ésteres de glicol, polímeros de óxido de etileno, copolímeros de óxido de etileno-óxido de propileno, éteres de alquila de glucosídeo, éteres de alquila de glicerol, ésteres de glicerol, éteres de alquila de glicol (p.ex., éteres de alquila de polioxietilenoglicol, éteres de alquila de polioxipropilenoglicol), éteres de alquilfenol de glicol (p.ex., éteres de alquilfenol de polioxietilenoglicol), ésteres de glicol, monolaurina, éteres de monododecila de pentaetilenoglicol, poloxâmero, poliaminas, polirricinoleato de poliglicerol, polissorbato, ácidos graxos polioxietilenados, mercaptanos polioxietilenados, polioxipropilenoglicóis — polioxietilenados, — ésteres de alquila de polioxietilenoglicol sorbitana, — copolímeros — de — polietilenoglicol- polipropilenoglicol, éteres de octilfenol de polioxietilenoglicol, pinolidonas de polivinila, poliglicosídeos de alquila à base de açúcar, sulfoanilamidas, etoxilatos de álcool de ácido graxo de sorbitana, etoxilatos de éster de ácido graxo de sorbitana, éster de ácido graxo de sorbitana e/ou glicóis acetilênicos terciários.

16. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado por a composição compreender adicionalmente um ou mais tensoativos zwitteriônicos, opcionalmente: 3-[(3- Colamidopropil)dimetilamônio]-1-propanossulfonato, cocamidopropil betaína, hidroxissultaína de cocamidopropila, fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilcolina e/ou uma ou mais esfingomielinas.

17. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizado por a composição compreender adicionalmente um ou mais sabões e/ou tensoativos de organossilicone, opcionalmente: um ou mais sais de metais alcalinos de ácidos graxos.

18. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado por a composição compreender um grânulo compreendendo uma ou mais enzimas, opcionalmente em que o grânulo tem um tamanho médio de partículas de 20-2000 um de diâmetro esférico equivalente.

19. Método de acordo com a reivindicação 18, caracterizado por a composição compreender um núcleo e opcionalmente um ou mais revestimentos rodeando o núcleo, em que o núcleo compreende opcionalmente: um ou mais materiais adicionais tais como enchimentos, materiais de fibra (celulose ou fibras sintéticas), agentes estabilizantes, agentes solubilizantes, agentes de suspensão, agentes de regulação da viscosidade, esferas de luz, plastificantes, sais, lubrificantes e fragrâncias; um ou mais aglutinantes, tais como polímero sintético, cera,

gordura ou carboidrato; um ou mais de um sal de um cátion multivalente, um agente redutor, um antioxidante, um catalisador da decomposição de peróxido e/ou um componente de tampão ácido, opcionalmente como uma combinação homogênea; uma ou mais de uma partícula inerte com uma enzima absorvida na mesma ou aplicada na superfície, por exemplo, por revestimento em leito fluidizado.

20. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, caracterizado por a gravidade da infestação de pragas e/ou danos por pragas serem reduzidos em pelo menos cerca de 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ou 100% em comparação com uma planta que não teve o agente fitoprotetor aplicado.

21. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado por a composição ser aplicada 1, 2, 3, 4, 5, 6,7, 8, 9, 10, 11, 12,13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69,70, 71,72,73, 74,75,76,77, 78,79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 e/ou 100 ou mais dias após plantio.