BR112020024179A2 - Terapia de combinação para tratar infecção por vírus da hepatite b - Google Patents

Terapia de combinação para tratar infecção por vírus da hepatite b Download PDF

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BR112020024179A2
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Odile Bonnin
Kara Carter
Julie Montegut
Cendrine Lemoine
Xavier Marniquet
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Abstract

a invenção refere-se a métodos de tratar uma infecção pelo vírus da hepatite b (hbv) em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista da superfamília do receptor de fator de necrose tumoral (tnfrsf) (por exemplo, um anticorpo agonístico dirigido contra o receptor, um agonista de tnfrsf solúvel incluindo, mas não se limitando ao seu ligante natural ou um fragmento de ambos) e um interferon (ifn) ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por hbv no indivíduo são fornecidos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “TERA-
PIA DE COMBINAÇÃO PARA TRATAR INFECÇÃO POR VÍRUS DA HEPATITE B”. CAMPO DE INVENÇÃO
[001] A presente invenção refere-se a métodos para o tratamento da infecção pelo vírus da hepatite B (HBV) em um indivíduo.
FUNDAMENTOS
[002] HBV infecta mais de 300 milhões de pessoas em todo o mundo e é uma causa comum de doença hepática e câncer de fígado. (Liang (2009) Hepatology 49:S13.). HBV é um pequeno vírus de DNA com características incomuns semelhantes aos retrovírus, que se re- plica por meio de um intermediário de RNA (RNA pré-genômico) e po- de se integrar ao genoma do hospedeiro. As características únicas do ciclo de replicação do HBV conferem uma capacidade distinta do vírus de persistir nas células infectadas. A infecção por HBV leva a um am- plo espectro de doenças hepáticas que variam de aguda (incluindo in- suficiência hepática fulminante) a hepatite crônica, cirrose e carcinoma hepatocelular. A infecção por HBV aguda pode ser assintomática ou apresentar hepatite aguda sintomática. 90-95% das crianças e 5% - 10% de adultos infectados com o HBV são incapazes de eliminar o vírus e tornam-se cronicamente infectados. Muitas pessoas cronica- mente infectadas têm doença hepática leve com pouca ou nenhuma morbidade ou mortalidade em longo prazo. Outros indivíduos com in- fecção por HBV crônica desenvolvem doença ativa, que pode progre- dir para cirrose e câncer de fígado. Esses pacientes requerem monito- ramento cuidadoso e justificam intervenção terapêutica.
[003] Novos métodos para tratar infecção por HBV por meio da modulação da infecção por HBV em uma célula são necessários. Em particular, são necessários métodos para interromper eficazmente a carga viral de HBV de células infectadas por HBV, reduzindo a trans-
crição de DNA de HBV circular covalentemente fechado em células infectadas por HBV e/ou reduzindo a quantidade de RNA de HBV pré- genômico em células infectadas por HBV.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[004] A presente invenção é baseada na descoberta de novos métodos para o tratamento de infecção por HBV em um indivíduo usando uma combinação de um agonista da superfamília do receptor de fator de necrose tumoral (TNFRSF) (por exemplo, um anticorpo agonístico dirigido contra um membro do TNFRSF, um agonista de TNFRSF solúvel incluindo, mas não limitado ao seu ligante natural) ou um fragmento funcional do mesmo, e um agente interferon (IFN) ou um fragmento funcional do mesmo. Os novos métodos descritos neste documento são úteis para reduzir a transcrição de DNA circular cova- lentemente fechado (cccDNA) em RNA pré-genômico (pgRNA) em uma célula infectada por HBV, que por sua vez reduz a produção de proteína de HBV pela célula infectada por HBV e, finalmente, reduz carga viral da célula infectada pelo HBV.
[005] Em um aspecto, é fornecida uma combinação de um ago- nista da superfamília do receptor de fator de necrose tumoral (TNFRSF) ou um fragmento funcional do mesmo e um agente interfe- ron (IFN) ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamen- to de uma infecção por HBV.
[006] Em uma modalidade particular, o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de linfotoxina alfa 3, um ago- nista do receptor de linfotoxina beta, um agonista do mediador de en- trada do vírus da herpes, um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose, um agonista de agrupamen- to de fator de diferenciação 40, um agonista de CD27, um agonista de CD30, um agonista de 4-1BB, um ativador de receptor de agonista de fator nuclear κB, um agonista de Troy e um agonista do receptor de OX40, ou fragmentos funcionais dos mesmos.
[007] Em uma modalidade particular, o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo consistindo em CD40L, LTα3, LIGHT e TWEAK ou fragmentos funcio- nais dos mesmos. Em uma modalidade particular, o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo consistindo em CD40L, LIGHT e TWEAK, ou fragmentos fun- cionais dos mesmos.
[008] Em uma modalidade particular, o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é um agonista de CD40 ou um fra- gmento funcional do mesmo selecionado a partir do grupo consistindo em um ligante de CD40 (CD40L) ou um fragmento funcional do mes- mo, um anticorpo anti-CD40 agonístico, um fragmento funcional do mesmo ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo, e uma proteína de fusão compreendendo um ligante de CD40 ou um fragmento funci- onal do mesmo. Em uma modalidade particular, o CD40L é CD40L he- xamérico ou CD40L trimérico.
[009] Em uma modalidade particular, o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é um polipeptídeo ou um fragmento funcional do mesmo, um anticorpo ou um fragmento funcional do mesmo, ou um fragmento de ligação a antígeno do mesmo.
[010] Em uma modalidade particular, o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é fornecido como uma proteína de fusão compreendendo o referido agonista de TNFRSF ou um fragmen- to funcional do mesmo.
[011] Em uma modalidade particular, o agente IFN ou um frag- mento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo consistindo em um agente IFN Tipo I, um agente IFN Tipo II e um agente IFN Tipo III, ou fragmentos funcionais dos mesmos.
[012] Em uma modalidade específica, o agente IFN ou um frag- mento funcional do mesmo é IFNα, IFNβ, IFNγ ou IFNλ, ou fragmentos funcionais dos mesmos. Em uma modalidade particular, o agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo é IFNβ ou IFNγ ou fragmentos funcionais dos mesmos. Em uma modalidade particular, o agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo é IFNβ, ou um fragmento funci- onal do mesmo. Em uma modalidade particular, o agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo é IFNα, ou um fragmento funcional do mesmo.
[013] Em uma modalidade particular, o agente IFN ou um frag- mento funcional do mesmo é fornecido como uma proteína de fusão compreendendo o referido agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo.
[014] Em uma modalidade particular, o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e o agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo são fornecidos como uma proteína de fusão imu- noestimulatória bifuncional compreendendo o referido agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, o referido agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[015] Em uma modalidade particular, o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e o agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo são compreendidos em uma única composição farmacêutica.
[016] Em uma modalidade particular, o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e o agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo estão compreendidos em composições farmacêu- ticas distintas.
[017] Em outro aspecto, uma composição farmacêutica que com- preende: um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN Tipo II, um fragmento funcional de um agen-
te IFN Tipo II, um agente IFN Tipo III ou um fragmento funcional de um agente IFN Tipo III.
[018] Em outro aspecto, um método de tratar uma infecção por HBV e/ou um ou mais sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF (por exemplo, um anti- corpo agonístico dirigido contra um membro do TNFRSF, um agonista de TNFRSF solúvel incluindo, mas não limitado ao seu ligante natural) ou um fragmento funcional do mesmo, e um agente IFN ou um frag- mento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[019] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: (i) um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de linfotoxina alfa 3 (LTα3) (TNFRSF1A, TNFRSF1B ou TNFRSF14) (por exemplo, LTα3), um agonista do receptor de linfotoxina beta (LTβ) (TNFRSF3) (por exem- plo, LIGHT ou LTβ), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) (por exemplo, LIGHT), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) (por exemplo, TWEAK também conhecido como TNFSF12), um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) (por exemplo, CD40L), um agonista de CD27
(TNFRSF7) (por exemplo, CD70), um agonista de CD30 (TNFRSF8), um agonista de 4-1BB (CD137, TNFRSF9), um ativador do receptor de agonista de fator nuclear κB (RANK, TNFRSF11A), um agonista de Troy (TNFRSF19) e um agonista do receptor de OX40 (TNFRSF4) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[020] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: (i) um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de linfotoxina alfa 3 (LTα3) (TNFRSF1A, TNFRSF1B ou TNFRSF14) (por exemplo, LTα3), um agonista do receptor de linfotoxina beta (LTβ) (TNFRSF3) (por exem- plo, LIGHT ou LTβ), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) (LIGHT), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) (por exemplo, TWEAK também conhecido como TNFSF12), um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) (CD40L), um agonista de CD27 (TNFRSF7) (CD70), um agonista de CD30 (TNFRSF8), um agonista de 4-1BB (CD137, TNFRSF9), um agonista do ativador de receptor de fator nu- clear κB (RANK, TNFRSF11A), um agonista de Troy (TNFRSF19) e um agonista do receptor de OX40 (TNFRSF4) ou um fragmento funci- onal do mesmo; e (ii) um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[021] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: (i) um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de linfotoxina alfa 3 (LTα3) (TNFRSF1A, TNFRSF1B ou TNFRSF14) (por exemplo, LTα3), um agonista do receptor de linfotoxina beta (LTβ) (TNFRSF3) (por exem- plo, LIGHT ou LTβ), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) (por exemplo, LIGHT), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) (por exemplo, TWEAK também conhecido como TNFSF12), um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) (por exemplo, CD40L), um agonista de CD27 (TNFRSF7) (por exemplo, CD70), um agonista de CD30 (TNFRSF8), um agonista do ativador de receptor de fator nuclear κB (RANK, TNFRSF11A), um agonista de Troy (TNFRSF19), e um agonista do receptor de OX40 (TNFRSF4) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[022] De acordo com uma modalidade particular, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de: (i) um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de linfotoxina alfa 3 (LTα3) (TNFRSF1A, TNFRSF1B ou TNFRSF14) (por exemplo, LTα3), um agonista do receptor de linfotoxina beta (LTβ) (TNFRSF3) (por exem- plo, LIGHT ou LTβ), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) (LIGHT), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) (por exemplo, TWEAK também conhecido como TNFSF12), um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) (CD40L), um agonista de CD27 (TNFRSF7) (CD70), um agonista de CD30 (TNFRSF8), um agonista do ativador de receptor de fator nuclear κB (RANK, TNFRSF11A), um agonista de Troy (TNFRSF19) e um agonista do receptor de OX40 (TNFRSF4) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da re-
ferida combinação para preparar um medicamento para tratar uma in- fecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[023] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo; e um IFN tipo I, ou um fragmento funcional de um IFN tipo I, ou um IFN tipo II, ou um fragmento funcio- nal de um IFN tipo II, ou um IFN tipo III, ou um fragmento funcional de um IFN tipo III, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[024] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo; e um IFN Tipo I, ou um fragmento funcional de um IFN Tipo I, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[025] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo; e um IFN do tipo II, ou um frag- mento funcional de um IFN do tipo II, ou um IFN do tipo III, ou um fra- gmento funcional de um IFN do tipo III, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o refe- rido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[026] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF se- lecionado a partir do grupo consistindo em agonista do receptor de LTα3, agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A), agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e agonista do agrupamento de fator de dife- renciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mes- mo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para di- minuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[027] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em agonista do re- ceptor de LTα3, agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A), agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) e agonista do agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tra- tamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[028] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em agonista do re- ceptor de LTα3, agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A), agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[029] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em LTα3, TWEAK, LIGHT e CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no trata- mento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para prepa- rar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para di- minuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido.
[030] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF se- lecionado a partir do grupo consistindo em agonista do receptor de LTα3, agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A), agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) e agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tra- tamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[031] Em uma modalidade particular, método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreenden- do administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em agonista do re- ceptor de LTα3, agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[032] Em uma modalidade particular, o método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreenden- do administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em agonista do re- ceptor de LTα3, agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) ou um fragmen- to funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo,
é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[033] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um ago- nista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A), um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combina- ção para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para dimi- nuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é forneci- da. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[034] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) e um ago- nista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A), ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[035] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e um agonista de indutor fraco de re- ceptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A), ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modali- dade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[036] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em LTα3, TWEAK e LIGHT ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe-
rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[037] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF se- lecionado a partir do grupo consistindo em agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da her- pes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um ago- nista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um frag- mento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[038] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um ago- nista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5)
ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um frag- mento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[039] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[040] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em CD40L,
TWEAK e LIGHT ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no trata- mento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para prepa- rar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para di- minuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido.
[041] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento fun- cional do mesmo, e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[042] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de CD40L ou um fra- gmento funcional do mesmo e um agente IFN ou um fragmento funci- onal do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da re- ferida combinação para preparar um medicamento para tratar uma in- fecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[043] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A), e em particular TWEAK, ou um fragmento funcional do mesmo, e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[044] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) ou agonista do mediador de entrada do vírus da her- pes (HVEM ou TNFRSF14) e, em particular, LIGHT, ou um fragmento funcional do mesmo, e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[045] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) e, em particular, LIGHT, ou um fragmento funcional do mesmo, e um IFN agente ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indi- víduo, é fornecido.
[046] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e, em particular, LIGHT, ou um fragmento funcional do mesmo, e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[047] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um frag- mento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[048] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[049] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[050] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonis- ta de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funci- onal do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[051] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em agonista do receptor de LTα3, um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5), ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[052] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em agonista do receptor de LTα3, um agonista do media- dor de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonis- ta de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista do fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[053] De acordo com uma modalidade particular, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indiví- duo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indi- víduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a par- tir do grupo consistindo em LTα3, TWEAK, LIGHT e CD40L ou um fra- gmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funci- onal do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[054] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um frag- mento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[055] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do re- ceptor de LTβ (TNFRSF3), e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[056] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do me- diador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[057] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em LTα3, TWEAK e LIGHT ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[058] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fato de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferencia- ção 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o refe- rido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[059] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um ago- nista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[060] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do mediador de entrada do vírus da her- pes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um ago- nista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[061] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em TWEAK, LIGHT e CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[062] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um frag- mento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[063] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do re- ceptor de LTβ (TNFRSF3) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[064] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do me- diador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[065] De acordo com uma modalidade particular, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indiví- duo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indi- víduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a par- tir do grupo consistindo em LTα3, TWEAK, e LIGHT ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combina- ção para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para dimi- nuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é forneci- da. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[066] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferencia- ção 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o refe- rido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[067] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne-
cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um ago- nista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[068] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e os sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do mediador de entrada do vírus da her- pes (HVEM ou TNFRSF14), um fator de necrose tumoral agonista do receptor fraco indutor de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[069] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em TWEAK, LIGHT e CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[070] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um frag- mento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[071] De acordo com uma modalidade particular, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indiví- duo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indi- víduo uma combinação de CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[072] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tu- moral de apoptose (TNFRSF12A), e em particular TWEAK, ou um fra- gmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[073] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), e em particular LIGHT, ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN sele- cionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmen- to funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[074] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), e em par- ticular LIGHT, ou um agonista funcional fragmento do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o refe- rido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[075] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do mediador de entrada do vírus da her- pes (HVEM ou TNFRSF14) e, em particular, LIGHT, ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indi- víduo, é fornecido.
[076] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFNλ selecionado a partir do grupo consistindo em IL-28 e IL-29 ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[077] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec-
ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFNλ selecionado a partir do grupo consistindo em IL-28 e IL-29 ou um fragmento funcio- nal do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[078] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo um agonista de indu- tor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e, em particular, TWEAK, ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFNλ selecionado a partir do grupo consistindo em IL-28 e IL-29 ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[079] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo um agonista do re-
ceptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), e em particular LIGHT, ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFNλ selecionado a partir do grupo consistindo em IL-28 e IL-29 ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indi- víduo, é fornecido.
[080] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), e em particular LIGHT, ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFNλ selecionado a partir do grupo consistindo em IL-28 e IL-29 ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[081] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou
TNFRSF14) e, em particular, LIGHT, ou um agonista funcional frag- mento do mesmo; e um agente IFNλ selecionado a partir do grupo consistindo em IL-28 e IL-29 ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indi- víduo, é fornecido.
[082] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e IFNɣ ou um frag- mento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[083] De acordo com uma modalidade particular, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indiví- duo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indi- víduo uma combinação de CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e IFNɣ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[084] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tu- moral de apoptose (TNFRSF12A), e em particular TWEAK, ou um fra- gmento funcional do mesmo; e IFNɣ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[085] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), e em particular LIGHT, ou um fragmento funcional do mesmo; e IFNɣ ou um fragmen- to funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por
HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[086] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) e, em par- ticular, LIGHT, ou um agonista funcional fragmento do mesmo; e IFNɣ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o refe- rido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[087] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do mediador de entrada do vírus da her- pes (HVEM ou TNFRSF14), e em particular LIGHT ou um fragmento funcional do mesmo; e IFNɣ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV,
e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indi- víduo, é fornecido.
[088] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTα3 ou um fragmento funcional do mes- mo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tra- tamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[089] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de LTα3 ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[090] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTα3 ou um fragmento funcional do mes- mo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tra- tamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[091] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de LTα3 ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[092] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de indutor fraco de receptor tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e
IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[093] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de TWEAK ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[094] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de indutor fraco de receptor tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[095] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de TWEAK ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[096] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) ou um agonista do medi- ador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) ou um fra- gmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[097] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[098] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do mediador de entrada do vírus da her- pes (HVEM ou TNFRSF14) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[099] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de LIGHT ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[100] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) ou um agonista do medi- ador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) ou um fra- gmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[101] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec-
ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[102] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do mediador de entrada do vírus da her- pes (HVEM ou TNFRSF14) ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[103] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em ne- cessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de LIGHT ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNɣ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[104] Em outro aspecto, o método de tratar uma infecção por HBV e sintomas relacionados a HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma composição farmacêutica que compreende um agonista de TNFRSF ou um frag- mento funcional do mesmo, e administrar ao indivíduo uma composi- ção farmacêutica compreendendo um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[105] Em outro aspecto, um agonista de TNFRSF ou um frag- mento funcional do mesmo para uso no tratamento de um ou mais sin- tomas de infecção por HBV em um indivíduo, em combinação com um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa-
ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[106] Em outro aspecto, um agente IFN ou um fragmento funcio- nal do mesmo para uso no tratamento de um ou mais sintomas de in- fecção por HBV em um indivíduo, em combinação com um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, é fornecido. De acor- do com o referido aspecto, o uso da referida combinação para prepa- rar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para di- minuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido.
[107] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) pelo menos um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o re- ferido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medi- camento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[108] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agru- pamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um frag- mento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em um IFN tipo I, um IFN tipo II, e um IFN tipo III ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de in- fecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in-
fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[109] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista de LTβ (TNFRSF3), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em um IFN tipo I, um IFN tipo II, e um IFN tipo III ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combi- nação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[110] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferencia- ção 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em um IFN tipo I, um IFN tipo II, e um IFN tipo III ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[111] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em
LTα3, TWEAK, LIGHT e CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em um IFN tipo I, um IFN tipo II, e um IFN tipo III ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[112] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonis- ta de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) é fornecido um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um frag- mento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indi- víduo, é fornecido.
[113] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) é fornecido um agente IFN sele- cionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infec- ção por HBV. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[114] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista do fator de necrose tumoral receptor fraco indutor de apoptose (TNFRSF12A) agonista e um agonista de agrupamento de fator de di- ferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) é fornecido um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[115] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em LTα3, TWEAK, LIGHT e CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) é fornecido um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funci- onal do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV. De acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[116] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferencia- ção 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) é fornecido um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV. De acordo com o referi- do aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[117] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferencia- ção 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) é fornecido um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV. De acordo com o referi- do aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[118] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor de tipo de fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um ago- nista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) é fornecido um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de in- fecção por HBV. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[119] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em TWEAK, LIGHT e CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) é fornecido um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα, IFNβ, IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV. De acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[120] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um frag- mento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[121] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis-
tindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fa- tor de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[122] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apop- tose (TNFRSF12A) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de in- fecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido
[123] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em LTα3, TWEAK e LIGHT ou um fragmento funcional do mes- mo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no trata- mento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[124] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferencia- ção 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[125] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRS F12A) agonista e um agonista de agrupamento de fator de diferencia- ção 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[126] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonis-
ta de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[127] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em TWEAK, LIGHT e CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNα e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[128] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em agonista do receptor de LTα3, um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um frag- mento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[129] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em agonista do receptor de LTα3, um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fa- tor de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, pa- ra uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[130] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do receptor de LTα3, um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apop- tose (TNFRSF12A) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de in- fecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[131] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em LTα3, TWEAK e LIGHT ou um fragmento funcional do mes- mo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no trata- mento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medica-
mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[132] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consistindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferencia- ção 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[133] Em uma modalidade particular, a combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonista de agrupamento de fator de diferencia- ção 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[134] Em uma modalidade particular, a combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes
(HVEM ou TNFRSF14), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e um agonis- ta de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[135] Em uma modalidade particular, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF selecionado a partir do grupo consis- tindo em TWEAK, LIGHT e CD40L ou um fragmento funcional do mesmo; e (ii) um agente IFN selecionado a partir do grupo consistindo em IFNγ e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[136] Em outro aspecto, uma combinação de (i) pelo menos um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, e (ii) pelo menos um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para uso no tratamento de infecção por HBV, reduzindo a quantidade de RNA de HBV pré-genômico em uma célula infectada com HBV é fornecida. De acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[137] Em outro aspecto, um método de tratar uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de TNFRSF e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[138] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção ou em combinação com qualquer outra modalidade da inven- ção, a transcrição de DNA circular covalentemente fechado (ccc) para gerar RNA pré-genômico (pg) é inibida em células infectadas do indi- víduo .
[139] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção ou em combinação com qualquer outra modalidade da inven- ção, a combinação do agonista de TNFRSF e o agente IFN ou frag- mento funcional do mesmo inibe sinergicamente a transcrição de pgRNA em células infectadas do indivíduo.
[140] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção ou em combinação com qualquer outra modalidade da inven- ção, a liberação de e-antígeno de hepatite B (HBeAg) de células infec- tadas com HBV no indivíduo é inibida.
[141] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção ou em combinação com qualquer outra modalidade da inven- ção, a combinação do agonista de TNFRSF e o agente IFN ou frag- mento funcional do mesmo inibe sinergicamente a liberação de HBeAg de células infectadas.
[142] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção ou em combinação com qualquer outra modalidade da inven- ção, a combinação do agonista de TNFRSF e o agente IFN ou frag- mento funcional do mesmo estimula a via IFN no indivíduo.
[143] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, um nível de biomarcador da via IFN é aumentado no indiví- duo, em que o referido biomarcador é selecionado a partir do grupo consistindo em quimiocina 9 do motivo CXC (CXCL9), quimiocina 10 do motivo CXC (CXCL10) e quimiocina 11 do motivo CXC (CXCL11).
[144] Em uma modalidade particular, a combinação do agonista de TNFRSF e o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo aumen- ta sinergicamente o nível de biomarcador da via IFN no indivíduo.
[145] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o biomarcador é a quimiocina 10 do motivo C-X-C (CXCL10).
[146] Em uma modalidade particular, a combinação do agonista de TNFRSF e o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo aumen- ta sinergicamente o nível do biomarcador CXCL10 no indivíduo.
[147] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, a combinação do agonista de TNFRSF e o agente IFN ou fra- gmento funcional do mesmo estimula sinergicamente a liberação de CXCL10 no indivíduo.
[148] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, as células infectadas são hepatócitos.
[149] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do receptor de LTα3 (TNFRSF1A, TNFRSF1B ou TNFRSF14) (por exemplo, LTα3), um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) (por exemplo, LIGHT ou LTβ), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) (por exemplo, LIGHT), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de ne- crose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) (por exemplo, TWEAK tam- bém conhecido como TNFSF12), um agonista de agrupamento de fa- tor de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) (por exemplo, CD40L), um agonista de CD27 (TNFRSF7) (por exemplo, CD70), um agonista de CD30 (TNFRSF8), um agonista de 4-1BB (CD137, TNFRSF9), um agonista de ativador do receptor de fator nuclear κB (RANK, TNFRSF11A), um agonista de Troy (TNFRSF19) e um agonista do re- ceptor de OX40 (TNFRSF4).
[150] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do receptor de linfotoxina alfa 3 (LTα3) (TNFRSF1A, TNFRSF1B ou TNFRSF14), um agonista do receptor de linfotoxina beta LTβ (TNFRSF3) (por exemplo, LIGHT ou LTβ), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) (LIGHT), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) (por exemplo, TWEAK também conhecido como TNFSF12), um agonista de agrupa- mento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) (CD40L), um agonista de CD27 (TNFRSF7), um agonista de CD30 (TNFRSF8), um agonista de 4-1BB (CD137, TNFRSF9), um agonista do ativador de receptor de fator nuclear κB (RANK, TNFRSF11A), um agonista de Troy (TNFRSF19) e um agonista do receptor de OX40 (TNFRSF4).
[151] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo consis- tindo em um agonista do receptor de linfotoxina alfa 3 (LTα3) (TNFRSF1A, TNFRSF1B ou TNFRSF14) (por exemplo, LTα3), um agonista do receptor de linfotoxina beta LTβ (TNFRSF3) (por exemplo, LIGHT ou LTβ), um agonista do mediador de entrada do vírus da her- pes (HVEM ou TNFRSF14) (por exemplo, LIGHT), um agonista do re- ceptor fraco de fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) (por exemplo, TWEAK também conhecido como TNFSF12), um ago- nista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) (por exemplo, CD40L), um agonista de CD27 (TNFRSF7) (por exem- plo, CD70), um agonista de CD30 (TNFRSF8), um agonista do ativa- dor de receptor de fator nuclear κB (RANK, TNFRSF11A), um agonista de Troy (TNFRSF19) e um agonista do receptor de OX40 (TNFRSF4).
[152] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF é selecionado a partir do grupo consis-
tindo em um agonista do receptor de linfotoxina alfa 3 (LTα3) (TNFRSF1A, TNFRSF1B ou TNFRSF14), um agonista do receptor de linfotoxina beta LTβ (TNFRSF3) (por exemplo, LIGHT ou LTβ), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) (LIGHT), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) (por exemplo, TWEAK também conhecido como TNFSF12), um agonista de agrupa- mento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) (CD40L), um agonista de CD27 (TNFRSF7), um agonista de CD30 (TNFRSF8), um agonista do ativador de receptor de fator nuclear κB (RANK, TNFRSF11A), um agonista de Troy (TNFRSF19) e um agonista do re- ceptor de OX40 (TNFRSF4).
[153] O agonista de TNFRSF ou fragmento funcional do mesmo, de acordo com a invenção, pode ser fornecido como uma proteína de fusão compreendendo o referido agonista de TNFRSF ou um fragmen- to funcional do mesmo.
[154] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF é um agonista de CD40 selecionado a partir do grupo consistindo em um ligante de CD40 (CD40L), ou um fragmento funcional do mesmo, um anticorpo anti-CD40 agonístico ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo e uma proteína de fusão compreendendo um ligante de CD40, ou um fragmento funcional do mesmo.
[155] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF compreende ou consiste em TWEAK ou um fragmento funcional do mesmo. Em particular, o agonista de TNFRSF é uma proteína de fusão compreendendo TWEAK ou um fra- gmento funcional do mesmo.
[156] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF compreende ou consiste em LIGHT,
ou um fragmento funcional do mesmo. Em particular, o agonista de TNFRSF é uma proteína de fusão compreendendo LIGHT ou um fra- gmento funcional do mesmo.
[157] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF compreende ou consiste em CD40L, ou um fragmento funcional do mesmo. Em particular, o agonista de TNFRSF é uma proteína de fusão compreendendo CD40L ou um fra- gmento funcional do mesmo.
[158] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o CD40L é CD40L hexamérico ou CD40L trimérico.
[159] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, a proteína de fusão está uma proteína de fusão imunoestimu- latória bifuncional que compreende um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento fun- cional do mesmo e um ligante.
[160] De acordo com uma modalidade particular, o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e o agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo são fornecidos como uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional compreendendo o referido ago- nista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[161] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo consistindo em um IFN Tipo I, um IFN Tipo II e um IFN Tipo III.
[162] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é IFNα, IFNβ, IFNγ ou IFNλ.
[163] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é IFNβ ou
IFNγ.
[164] De acordo com uma modalidade particular, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é fornecido como uma proteína de fu- são compreendendo o referido agente IFN ou fragmento funcional do mesmo.
[165] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é IFNβ. Em particular, IFNβ é fornecido como uma proteína de fusão compreen- dendo IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo.
[166] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é IFNα. Em particular, IFNα é fornecido como uma proteína de fusão compreen- dendo IFNα ou um fragmento funcional do mesmo.
[167] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é IFNλ. Em particular, IFNλ é fornecido como uma proteína de fusão compreen- dendo IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo.
[168] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é IFNγ. Em particular, IFNγ é fornecido como uma proteína de fusão compreen- dendo IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo.
[169] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN é fornecido como uma proteína de fusão.
[170] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, a proteína de fusão é uma proteína de fusão imunoestimulató- ria bifuncional.
[171] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, a proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional compreen- de ainda um agonista de TNFRSF ou fragmento funcional do mesmo.
[172] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in-
venção, o agonista de TNFRSF ou fragmento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo consistindo em CD40L, LTα3, LIGHT e/ou TWEAK.
[173] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF ou fragmento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo consistindo em CD40L, LIGHT e/ou TWEAK.
[174] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF é um polipeptídeo, um anticorpo ou um fragmento de ligação a antígeno do mesmo.
[175] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o polipeptídeo TNFRSF, anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo é fornecido diretamente ao indivíduo.
[176] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o polipeptídeo TNFRSF, anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo é fornecido como uma proteína de fusão imunoes- timulatória bifuncional.
[177] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o polipeptídeo TNFRSF, anticorpo ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo é expresso a partir de um polinucleotídeo forneci- do ao indivíduo.
[178] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é fornecido diretamente ao indivíduo.
[179] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é fornecido como uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional.
[180] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é expresso a partir de um polinucleotídeo fornecido ao indivíduo.
[181] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: (i) um agonista do receptor de linfotoxina alfa 3 (LTα3) (TNFRSF1A, TNFRSF1B ou TNFRSF14), um agonista do receptor de linfotoxina beta (LTβ) (TNFRSF3) (por exemplo, LIGHT ou LTβ), um agonista do mediador de entrada do ví- rus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) (LIGHT), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) (por exemplo, TWEAK, também conhecido como TNFSF12), um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) (CD40L), um agonista de CD27 (TNFRSF7) (CD70), um agonista de CD30 (TNFRSF8), um agonista de 4-1BB (CD137, TNFRSF9), um agonista do ativador de receptor de fator nu- clear κB (RANK, TNFRSF11A), um agonista de Troy (TNFRSF19) e um agonista do receptor de OX40 (TNFRSF4); e (ii) um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[182] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: um agonista de TNFRSF; e um IFN Tipo I, ou um fragmento funcional de um IFN Tipo I para dimi- nuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é forneci- do.
[183] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: um agonista de TNFRSF; e um IFN tipo II, um fragmento funcional de um IFN tipo II, um IFN tipo III, ou um fragmento funcional de um IFN tipo III, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[184] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: LTα3, LIGHT e/ou TWEAK; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[185] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: CD40L; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[186] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: um agonista de TNFRSF; e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[187] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: LTα3, LIGHT e/ou TWEAK; e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[188] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: CD40L; e IFNα ou um frag- mento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[189] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: um agonista de TNFRSF; e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[190] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: LTα3, LIGHT e/ou TWEAK; e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[191] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: CD40L; e IFNβ ou um frag- mento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[192] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: um agonista de TNFRSF; e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[193] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: LTα3, LIGHT e/ou TWEAK; e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[194] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: CD40L; e IFNγ ou um frag- mento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[195] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: um agonista de TNFRSF; e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[196] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: LTα3, LIGHT e/ou TWEAK; e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[197] Em outro aspecto, um método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreendendo admi- nistrar ao indivíduo uma combinação de: CD40L; e IFNλ ou um frag- mento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[198] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar uma infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, com- preendendo: administrar ao indivíduo um composto farmacêutico posi- ção compreendendo um agonista de TNFRSF; e administrar ao indiví- duo uma composição farmacêutica compreendendo um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo.
[199] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, as composições farmacêuticas são administradas sequenci- almente.
[200] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, as composições farmacêuticas são administradas concomitan- temente.
[201] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF e o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo são administrados em uma única composição farmacêutica.
[202] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, o agonista de TNFRSF e o agente IFN ou fragmento funcional do mesmo estão compreendidos em composições farmacêuticas dis- tintas.
[203] Em outro aspecto da invenção, um agonista de TNFRSF para uso no tratamento de um ou mais sintomas de infecção por HBV em um indivíduo, em combinação com um agente IFN ou um fragmen- to funcional do mesmo, é fornecido.
[204] Em outro aspecto da invenção, um agente IFN ou um frag- mento funcional do mesmo para uso no tratamento de um ou mais sin- tomas de infecção por HBV em um indivíduo, em combinação com um agonista de TNFRSF, é fornecido.
[205] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) e IFNα ou um fragmento funcional para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[206] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de CD40L e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[207] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) e IFNβ ou um fragmento funcional para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infec- ção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspec- to, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[208] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de CD40L e IFNβ ou um fragmento funcional dos mesmos para diminuir um ou mais sinto- mas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a referida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[209] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) e INFγ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sinto- mas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o refe- rido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[210] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) e IL28 ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo. De acordo com a referida modalida- de, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a referida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[211] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de CD40L e IL28 ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[212] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen-
dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de agrupamento de fator de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) e IL29 ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[213] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de CD40L e IL29 ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[214] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTα3 e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[215] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de LTα3 e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[216] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de indutor fraco do receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo para di- minuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[217] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de TWEAK e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[218] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) ou um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[219] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[220] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[221] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de LIGHT e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[222] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTα3 e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[223] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de LTα3 e IFN a ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[224] Em outro aspecto da invenção, um método de tratamento infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, com- preendendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de indutor fraco do receptor do tipo fator de necrose tumoral de apop- tose (TNFRSF12A) e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa-
ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[225] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de TWEAK e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[226] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) ou um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[227] Em uma modalidade particular, o método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreenden- do administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do recep- tor de LTβ (TNFRSF3) e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indi- víduo, é fornecido.
[228] Em uma modalidade particular, método de tratar infecção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreenden- do administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do medi- ador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o refe- rido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido as- pecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[229] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de LIGHT e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[230] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTα3 e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é for- necido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou pa- ra diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[231] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de LTα3 e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[232] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista de indutor fraco do receptor do tipo fator de necrose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo para di- minuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tra- tamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[233] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de TWEAK e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[234] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) ou um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[235] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do receptor de LTβ (TNFRSF3) e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[236] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14) e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sinto- mas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o refe- rido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[237] Em uma modalidade particular, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de LIGHT e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com a refe- rida modalidade, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com a refe- rida modalidade, o uso da referida combinação para preparar um me- dicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas s de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[238] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de Ig-TWEAK e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sinto- mas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o refe- rido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[239] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de Ig-CD40L e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sinto- mas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o refe- rido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[240] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de Ig-LTα3 e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido. De acordo com o refe- rido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o referido as- pecto, o uso da referida combinação para preparar um medicamento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sin- tomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[241] Em outro aspecto da invenção, um método de tratar infec- ção por HBV em um indivíduo em necessidade do mesmo, compreen- dendo administrar ao indivíduo uma combinação de Ig-LIGHT e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo para diminuir um ou mais sinto- mas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecida. De acordo com o referido aspecto, a referida combinação para uso no tratamento de uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de in- fecção por HBV no indivíduo, é fornecida. Ainda de acordo com o refe- rido aspecto, o uso da referida combinação para preparar um medica- mento para tratar uma infecção por HBV, e/ou para diminuir um ou mais sintomas de infecção por HBV no indivíduo, é fornecido.
[242] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: um agonista de TNFRSF; e um IFN do tipo II, um fragmento funcional de um IFN do tipo II, um IFN do tipo III ou um fragmento funcional de um IFN do tipo III, é fornecida.
[243] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: um agonista de TNFRSF; e um IFN Tipo I, ou um fragmento funcional de um IFN Tipo I, é fornecida.
[244] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: LTα3, LIGHT e/ou TWEAK; e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo, é fornecida.
[245] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu-
tica que compreende: um agonista de TNFRSF; e IFNα ou um frag- mento funcional do mesmo, é fornecida.
[246] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: LTα3, LIGHT e/ou TWEAK; e IFNα ou um frag- mento funcional do mesmo, é fornecida.
[247] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: um CD40L; e IFNα ou um fragmento funcional do mesmo, é fornecida.
[248] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: um agonista de TNFRSF; e IFNβ ou um frag- mento funcional do mesmo, é fornecida.
[249] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: LTα3, LIGHT e/ou TWEAK; e IFNβ ou um frag- mento funcional do mesmo, é fornecida.
[250] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: um CD40L; e IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo, é fornecida.
[251] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: um agonista de TNFRSF; e IFNγ ou um frag- mento funcional do mesmo, é fornecida.
[252] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: LTα3, LIGHT e/ou TWEAK; e IFNγ ou um frag- mento funcional do mesmo, é fornecida.
[253] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: um CD40L; e IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo, é fornecida.
[254] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: um agonista de TNFRSF; e IFNλ ou um frag- mento funcional do mesmo, é fornecida.
[255] Em um outro aspecto da invenção, uma composição farma-
cêutica compreendendo: LTα3, LIGHT e/ou TWEAK; e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, é fornecido.
[256] Em outro aspecto da invenção, uma composição farmacêu- tica que compreende: um CD40L; e IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo, é fornecido.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[257] O anterior e outras características e vantagens da presente invenção serão mais completamente compreendidas a partir da se- guinte descrição detalhada de modalidades ilustrativas tomadas em conjunto com os desenhos anexos.
[258] Fig. 1A - Fig. 1B representa graficamente a redução sinér- gica da liberação de e-antígeno de hepatite B (HBeAg) usando uma combinação de interferon beta (IFNβ) e agrupamento de ligante de di- ferenciação 40 (CD40L) ou uma combinação de interferon alfa (IFNα) e agrupamento de ligante de diferenciação 40 (CD40L) em hepatócitos humanos primários infectados com o vírus da hepatite B (HBV). Os hepatócitos humanos primários foram analisados 8 dias após a infec- ção e foram tratados com IFNα, IFNβ e/ou CD40L no dia 2 e no dia 6. IFNα, 1000 U; IFNβ, 100 U; CD40L, 150 ng/mL. A Fig. 1A representa esquematicamente a linha do tempo do experimento. A Fig. 1B mostra graficamente os níveis de Hbe Ag com diferentes agentes.
[259] Fig. 2A - Fig. 2B mostram o efeito de IFNβ e CD40L na transcrição do DNA circular fechado (cccDNA) em RNA pré-genômico (pgRNA) em hepatócitos primários infectados com HBV. A Fig. 2A re- presenta esquematicamente o esboço do ensaio. A Fig. 2B mostra graficamente que a estimulação de curto prazo foi suficiente para re- duzir significativamente a transcrição de pgRNA.
[260] Fig. 3A - Fig. 3B mostram os efeitos de IFNβ e CD40L nas vias de sinalização.
[261] A Fig. 3A representa graficamente a liberação de CXCL10 na via IFN, demonstrando que uma combinação de IFNβ e CD40L aumenta sinergicamente a via IFN. A Fig. 3B representa graficamente a liberação de IL8 na via inflamatória, demonstrando que IFNβ e CD40L não aumentam sinergicamente a via inflamatória.
[262] Fig. 4A - Fig. 4B mostram os efeitos de diferentes tipos de IFN na liberação de CXCL10. A Fig. 4A representa graficamente os efeitos de diferentes membros da família TNF em combinação com diferentes tipos de IFN. A Fig. 4B representa graficamente o efeito si- nérgico da coestimulação de hepatócitos com CD40L e interferons do Tipo III (IL28 e IL29).
[263] Fig. 5 representa graficamente os efeitos sinérgicos media- dos por vários agonistas de CD40 em combinação com IFNγ na libera- ção de CXCL10. Especificamente, a Fig. 5 mostra os efeitos de CD40L hexamérico (hCD40L), CD40L trimérico (tCD40L) e anticorpo agonísti- co anti-CD40 (α-CD40) na liberação de CXCL10.
[264] Fig. 6A - Fig. 6B representam graficamente a potência dos efeitos sinérgicos de CD40L em combinação com IFNβ. A Fig. 6A mostra os efeitos de CD40L em combinação com IFNβ na liberação de CXCL10; As caixas marcadas com hash representam pontos satura- dos. A Fig. 6B mostra o efeito de CD40L em combinação com IFNβ na liberação de IL8.
[265] Fig. 7A - Fig. 7F representam graficamente efeitos sinérgi- cos de CD40L em combinação com IFNβ, conforme medido por análi- se transcriptômica em pontos de tempo selecionados. É expresso em Fragmentos Por Quilobase de Éxon por Milhão de Fragmentos Mape- ados (FPKM). A Fig. 7A mostra os efeitos de CD40L em combinação com IFNβ na expressão de mRNA CXCL10. A Fig. 7B mostra os efei- tos de CD40L em combinação com IFNβ na expressão de mRNA CXCL8/IL8. A Fig. 7C mostra os efeitos de CD40L em combinação com IFNβ na expressão de mRNA CXCL9. A Fig. 7D mostra os efeitos de CD40L em combinação com IFNβ na expressão de mRNA CXCL11. A Fig. 7E mostra os efeitos de CD40L em combinação com IFNβ na expressão de mRNA CXCL3. A Fig. 7F mostra os efeitos de CD40L em combinação com IFNβ na expressão de mRNA CCL20.
[266] Fig. 8 representa graficamente os efeitos sinérgicos de CD40L em combinação com IFNβ na liberação de CXCL10 de hepató- citos humanos primários. A liberação de CXCL10 foi avaliada no dia 3 e no dia 7 após a estimulação de hepatócitos humanos primários (PHHs) infectados ou não por HBV.
[267] Fig. 9A - Fig. 9B representam graficamente os efeitos si- nérgicos de Ig-Tweak (Fig. 9A) e Ig-LIGHT (Fig. 9B) em combinação com IFNβ na liberação de CXCL10 em hepatócitos (células HepaRG). Fig. 9C - Fig. 9D representam graficamente o efeito funcional de Ig- Tweak (Fig. 9C) e Ig-LIGHT (Fig. 9D) na via NFkB em células A549. Fig. 9E - Fig. 9F representam graficamente o reforço do efeito antiviral induzido por IFNb por Ig-Tweak (Fig. 9E) e Ig-LIGHT (Fig. 9F) em combinação com IFNb (Interferon beta) em hepatócitos primários in- fectados por HBV. NS: não estimulado; NT: Não tratado.
[268] Fig. 10A - Fig. 10B representam graficamente o efeito de três moléculas de Duocina na ativação da via NFκB mediada por CD40L (Fig. 10A) e do ensaio repórter da via JAK/STAT mediada por IFN Tipo I (Fig. 10B). As Duocinas incluem uma fusão IFNβ-IgG1 Fc- CD40L (IFNb-Ig-CD40L), uma fusão IFNβ-CD40L com um ligante sim- ples (IFNb-CD40L) e uma fusão IFNβ- Zíper de Leucina (LZ)-CD40L (IFNb-LZ-CD40L).
[269] Fig. 11A - Fig. 11B representam graficamente o efeito das moléculas de Duocina na liberação de CXCL10 dos hepatócitos (célu- las hepaRG). Fig. 11A mostra os efeitos de três moléculas diferentes de Duocina sozinhas na liberação de CXCL10. A Fig. 11B mostra o efeito de uma Duocina em combinação com um anticorpo antagonista anti-CD40L.
[270] Fig. 12 representa graficamente o efeito das moléculas de Duocina na liberação de CXCL10 dos hepatócitos (células HepaRG). A Duocina é a fusão IFNβ-IgG1 Fc-Tweak (IFNb-Ig-Tweak). Vvide: vetor vazio.
[271] Fig. 13 representa graficamente o efeito das moléculas de Duocina na liberação de CXCL10 dos hepatócitos. As Duocinas inclu- em fusão IFNβ-IgG1 Fc-Light (IFNb-Ig-Light) e uma fusão IFNβ-Zíper de leucina (LZ)-Light (IFNb-LZ-Light). Vvide: vetor vazio.
[272] Fig. 14A - Fig. 14B representam graficamente a persistên- cia de viremia e antígenos virais em vários pontos de tempo até 49 di- as após a injeção de um vírus adeno-associado (AAV)/HBV em ca- mundongos. A Fig. 14A mostra os níveis de DNA de HBV no soro. A Fig. 14B mostra os níveis de antígeno de HBV no soro.
[273] Fig. 15 representa a formação de cccDNA em um modelo AAV/HBV.
[274] Fig. 16 representa graficamente os efeitos sinérgicos de mCD40L em combinação com mIFNβ na liberação de CXCL10 em modelo murino in vivo. “MIX-mCD40L”: combinação de mIFNb e mCD40L.
[275] Fig. 17A representa graficamente a atividade de mIFNb-Fc- mIgG1 murino recombinante na via do interferon usando células du- plas brutas de IFN repórter. A Fig. 17B representa graficamente a ati- vidade de Fc-mIgG1-mCD40L murino recombinante na via NFkB indu- zida por CD40 em células repórter HEK-CD40. A Fig. 17C representa graficamente a dosagem de ELISA de mIFNb-Fc-mIgG1 no soro de camundongos administrados com 0,84 µg da proteína recombinante. A Fig. 17D representa graficamente a dosagem de Fc-mIgG1-mCD40L no soro amostrado em momentos diferentes após a administração de camundongos com 30 µg da proteína recombinante.
[276] Fig. 18 representa atividades antivirais de uma proteína de fusão murina compreendendo interferon beta (mIFNb-Fc-mIgG1) e uma proteína de fusão murina compreendendo CD40L (Fc-mIgG1- mCD40L) sozinha ou em combinação no modelo de camundongo transduzido com AAV/HBV. São mostrados o projeto do estudo e gru- pos de estudo (Fig. 18A) e parâmetros virais em cada momento de amostragem. Proteína viral de sangue periférico HBe-Ag (Fig. 18B), viremia: nível de HBV DNA no sangue periférico (Fig. 18C) e nível de HBV DNA no fígado (Fig. 18D) são expressos como valores individuais com média +/- sem. pgRNA de HBV do fígado (Fig. 18E) é expresso como dados individuais de alteração de dobra com média geométrica.
[277] Fig. 19A - Fig. 19C representam graficamente a atividade funcional da proteína de fusão IFNa-huIgG1-huCD40L em células HEK-Blue-CD40 (Fig. 19A), células HEK-Blue-IFNa/b (Fig. 19B) e na infecção por HBV (liberação de Hbe) de hepatócitos primários (Fig. 19C). IFNa: Interferon alfa.
DESCRIÇÃO DETALHADA
[278] A presente invenção é baseada em parte na descoberta de uma terapia de combinação que inibe sinergicamente a transcrição do vírus da hepatite B (HBV) DNA circular covalentemente fechado (cccDNA) em RNA pré-genômico (pgRNA) em células infectadas com HBV, inibe sinergicamente a liberação de e-antígeno de hepatite B (HBeAg) de células infectadas com HBV e aumenta sinergicamente a via IFN em hepatócitos não infectados e infectados com HBV, em par- ticular em hepatócitos humanos primários não infectados e infectados com HBV. Terapias de combinação compreendendo a administração de um agonista de TNFRSF (por exemplo, um anticorpo agonístico dirigido contra um membro do TNFRSF, um agonista de TNFRSF so- lúvel incluindo, mas não limitado ao seu ligante natural) ou um frag- mento funcional do mesmo e um agente de interferon (IFN) ou um fra-
gmento funcional do mesmo a uma célula infectada com HBV, ou indi- víduo infectado com HBV, são fornecidos.
[279] A divulgação pode ser mais facilmente compreendida à luz dos termos selecionados definidos abaixo.
[280] Tal como aqui utilizado, um "agonista de TNFRSF" refere- se a um composto (por exemplo, uma proteína, uma proteína de fusão, um polipeptídeo, um anticorpo, um fragmento de ligação a antígeno de um anticorpo ou semelhante) que ativa um TNFRSF. Por exemplo, um agonista de TNFRSF pode ser um anticorpo agonístico dirigido contra um membro do TNFRSF, um agonista de TNFRSF solúvel incluindo, mas não limitado ao seu ligante natural ou um fragmento funcional do mesmo.
[281] Conforme usado neste documento, o termo "anticorpo" re- fere-se a moléculas de imunoglobulina compreendendo quatro cadeias polipeptídicas, duas cadeias pesadas (H) e duas cadeias leves (L) in- terligadas por ligações dissulfeto, bem como multímeros das mesmas (por exemplo, IgM). Cada cadeia pesada compreende uma região va- riável de cadeia pesada (abreviada como VH ou VH) e uma região constante de cadeia pesada (CH ou CH). A região constante de cadeia pesada compreende três domínios, CH1, CH2 e CH3. Cada cadeia leve compreende uma região variável de cadeia leve (abreviada como VL) e uma região constante de cadeia leve (CL ou CL). A região cons- tante de cadeia leve compreende um domínio (CL1). As regiões VH e VL podem ser subdivididas em regiões de hipervariabilidade, denomi- nadas regiões determinantes de complementaridade (CDRs), interca- ladas com regiões que são mais conservadas, denominadas regiões estruturais (FR). Cada VH e VL é composta de três CDRs e quatro FRs, arranjadas do terminal amino para o terminal carbóxi na seguinte ordem: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
[282] Conforme usado neste documento, o termo "ligante" refere-
se a qualquer substância capaz de se ligar, ou de ser ligada, a outra substância. Um ligante pode ser um peptídeo, um polipeptídeo, uma proteína, um aptâmero, um polissacarídeo, uma molécula de açúcar, um carboidrato, um lipídeo, um oligonucleotídeo, um polinucleotídeo, uma molécula sintética, uma molécula inorgânica, uma molécula orgâ- nica e qualquer combinação disso.
[283] Conforme usado neste documento, o termo "fragmento fun- cional" refere-se a um fragmento de uma substância que retém uma ou mais atividades funcionais da substância original. Por exemplo, um fragmento funcional de um agonista de TNFRSF refere-se a um frag- mento de um agonista de TNFRSF que retém uma função do agonista de TNFRSF como aqui descrito, por exemplo, ele ativa um TNFRSF alvo. Um fragmento funcional de um interferon refere-se a um frag- mento de um interferon que retém uma função IFN como aqui descrito, por exemplo, medeia a sinalização da via IFN.
[284] Como usado aqui, "vírus da hepatite B" ou "HBV" refere-se ao vírus de DNA de filamento duplo que causa a hepatite B, que per- tence a uma família de vírus de DNA intimamente relacionados cha- mados Hepadnavírus. Hepadnavírus têm uma forte preferência para infectar células do fígado, mas pequenas quantidades de DNA hepad- naviral podem ser encontradas nos rins, pâncreas e células mononu- cleares. No entanto, a infecção nesses sítios não está associada a do- ença hepática extra.
[285] O vírion de HBV, isto é, a partícula de Dane, consiste em um envelope lipídico externo e um núcleo de nucleocapsídeo icosaé- drico composto de proteína. O nucleocapsídeo envolve o DNA viral e um DNA polimerase que possui atividade de transcriptase reversa se- melhante aos retrovírus. O envelope externo contém proteínas embu- tidas que estão envolvidas na ligação viral e na entrada em células suscetíveis. O vírus é um dos menores vírus animais com envelope,
com um diâmetro de vírion de 42 nm, mas existem formas pleomórfi- cas, incluindo corpos filamentosos e esféricos sem núcleo. Essas par- tículas não são infecciosas e são compostas do lipídio e da proteína que faz parte da superfície do vírion, que é chamado de antígeno de superfície (HBsAg), e é produzido em excesso durante o ciclo de vida do vírus. O HBV compreende HBsAg, HBcAg (e sua variante de emenda HBeAg), DNA polimerase e Hbx. O HBV é um dos poucos ví- rus não retrovirais conhecidos que empregam a transcrição reversa como parte de seu processo de replicação.
[286] O nucleocapsídeo de HBV contém um DNA circular de 3,2 kb relativamente pequeno e parcialmente dúplex, polimerase viral e proteína núcleo. O genoma tem apenas quatro quadros de leitura abertos longos. A região pré-S-S (pré-superfície-superfície) do genoma codifica os três antígenos de superfície viral por iniciação diferencial da tradução em cada um dos três códons de iniciação em quadro.
[287] A proteína mais abundante do HBV é a proteína S de 24 kD (que é conhecida como HBsAg). A região pré-C-C (pré-núcleo-núcleo) codifica HBcAg (antígeno núcleo de HBV) e HBeAg (HBV e-antígeno). O HBeAg não é necessário para a replicação viral e não desempenha nenhum papel na montagem viral. A região de codificação P é especí- fica para a polimerase viral, uma enzima multifuncional envolvida na síntese de DNA e encapsidação de RNA. O quadro de leitura aberto X codifica a proteína X viral (HBx), que modula a transdução do sinal da célula hospedeira e pode afetar direta e indiretamente a expressão do gene viral e do hospedeiro.
[288] Acredita-se que o ciclo de vida do HBV comece quando o vírus se liga à membrana da célula hospedeira por meio de suas prote- ínas de envelope. Foi sugerido que o HBV se liga a um receptor na membrana plasmática que é predominantemente expresso em hepa- tócitos humanos por meio do domínio pré-S1 da proteína de envelope grande como uma etapa inicial na infecção por HBV. No entanto, a na- tureza do receptor permanece controversa. Em seguida, a membrana viral se funde com a membrana celular e o genoma viral é liberado nas células.
[289] A replicação de HBV pode ser regulada por uma variedade de fatores, incluindo hormônios, fatores de crescimento e citocinas. Depois que o genoma viral atinge o núcleo, a polimerase viral converte o genoma parcial do DNA de filamento duplo (dsDNA) em DNA circular covalentemente fechado (cccDNA). Este DNA é transcrito pelo hospe- deiro RNA Pol-II, e o DNA resultante é o molde para a propagação posterior de RNA pré-genômico e RNA subgenômico.
[290] O RNA pré-genômico é bifuncional, servindo tanto como molde para a síntese de DNA viral quanto como mensageiro para tra- dução pré-C, C e P. Os RNAs subgenômicos funcionam exclusivamen- te para a tradução da proteína de envelope e X. Todo o RNA viral é transportado para o citoplasma, onde sua tradução produz o envelope viral, o núcleo e as proteínas da polimerase, bem como o HBx e o HBcAg.
[291] Partículas de núcleo de HBV são montadas no citosol e, durante este processo, uma única molécula de RNA pré-genômico é incorporada ao núcleo viral de montagem. Uma vez que o RNA viral é encapsidado, a transcrição reversa começa. A síntese das dois fila- mentos de DNA viral é sequencial. O primeiro filamento de DNA é feito a partir do modelo de RNA encapsidado; durante ou após a síntese deste filamento, o modelo de RNA é degradado e a síntese do segun- do filamento de DNA prossegue, com o uso do primeiro filamento de DNA recém-feito como modelo. Alguns núcleos que carregam o ge- noma maduro são transportados de volta ao núcleo, onde seus geno- mas de DNA recém-cunhados podem ser convertidos em cccDNA pa- ra manter um grupamento intranuclear estável de modelos transcricio-
nais.
[292] As proteínas do antígeno de superfície de HBV (HBsAg) são inicialmente sintetizadas e polimerizadas no retículo endoplasmá- tico rugoso. Essas proteínas são transportadas para os compartimen- tos pós-ER e pré-Golgi, onde ocorre o brotamento do nucleocapsídeo. O vírion HBV montado e as partículas subvirais são transportados para o Golgi para posterior modificação dos glicanos das proteínas de su- perfície e, em seguida, são secretados para fora da célula hospedeira para terminar o ciclo de vida.
[293] Em modalidades particulares, os métodos e composições aqui descritos podem ser usados para inibir sinergicamente a liberação de HBeAg de células infectadas por HBV e/ou aumentar sinergicamen- te a via IFN em células infectadas por HBV (por exemplo, hepatócitos). Conforme usado neste documento, os termos "sinergicamente" e "si- nérgico" referem-se a um efeito que é mediado por dois ou mais com- ponentes (por exemplo, um agonista de TNFRSF e um IFN ou frag- mento funcional do mesmo) que é maior do que o efeito adicionado de cada componente usado separadamente. Um efeito sinérgico pode ser de cerca de 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% ou 100% ou mais do que o efeito adicionado dos componentes individualmente.
[294] Em modalidades particulares, os métodos e composições aqui descritos podem ser usados para tratar infecção por HBV. Con- forme usado neste documento, "tratar infecção por HBV" e "tratamento de infecção por HBV" refere-se a um ou mais dentre: (i) redução da carga viral/título viral de HBV (isto é, redução do número de partículas virais infecciosas por mL); (ii) reduzir a transcrição de cccDNA; (iii) re- duzir o nível de RNA pré-genômico nas células; (iv) diminuir um ou mais distúrbios relacionados ao HBV; e (v) diminuir um ou mais sinto- mas relacionados a HBV em um indivíduo.
[295] Em modalidades particulares, os métodos e composições aqui descritos podem ser usados para reduzir a carga viral de HBV/título viral de uma célula infectada por HBV. A carga viral/título viral do HBV pode ser reduzido em cerca de 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% ou 100% em comparação com uma célula infectada com HBV não tratada.
[296] Em modalidades particulares, os métodos e composições aqui descritos podem ser usados para reduzir a transcrição de cccDNA de HBV em uma célula infectada por HBV. A transcrição de cccDNA pode ser reduzida em cerca de 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% ou 100% em comparação com uma célula infectada com HBV não trata- da.
[297] Em modalidades particulares, os métodos e composições aqui descritos podem ser usados para reduzir o nível de RNA de HBV pré-genômico em uma célula infectada por HBV. Os níveis de RNA de HBV pré-genômico podem ser reduzidos em cerca de 5%, 10%, 15%, 20%, 25%, 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% ou 100% em comparação com uma célula infec- tada com HBV não tratada.
[298] Conforme usado neste documento, um "distúrbio relaciona- do ao HBV" refere-se a um distúrbio que resulta da infecção de um in- divíduo pelo HBV. Os distúrbios relacionados ao HBV incluem, mas não estão limitados a hepatite aguda, hepatite crônica, hepatite ictéri- ca, hepatite fulminante, hepatite subfulminante e sintomas e/ou com- plicações decorrentes de qualquer um desses distúrbios.
[299] Conforme usado neste documento, um “sintoma relaciona- do ao HBV”, um “sintoma de infecção pelo HBV” ou uma “complicação relacionada ao HBV” inclui uma ou mais disfunções físicas relaciona-
das à infecção pelo HBV. Os sintomas e complicações do HBV inclu- em, mas não estão limitados a, cirrose, carcinoma hepatocelular (HCC), glomerulonefrite membranosa (MGN), morte, vasculite necroti- zante aguda (poliarterite nodosa), glomerulonefrite membranosa, acro- dermatite papular da infância (síndrome de Gianotti-Crosti), Nefropatia associada ao HBV (por exemplo, glomerulonefrite membranosa), dis- túrbios hematológicos imunomediados (por exemplo, crioglobulinemia mista essencial, anemia aplástica), hipertensão portal, ascite, encefa- lopatia, icterícia, prurido, fezes claras, esteatorréia, poliarterite nodosa, doença glomerular, Níveis anormais de ALT, níveis anormais de AST, níveis anormais de fosfatase alcalina, níveis aumentados de bilirrubi- na, anorexia, mal-estar, febre, náuseas, vômitos e semelhantes.
[300] Conforme usado neste documento, um "agente de interfe- ron" ou "IFN" refere-se a uma citocina, ou seu derivado, que é tipica- mente produzida e liberada por células em resposta à presença de um patógeno ou uma célula tumoral. IFNs incluem IFNs tipo I (por exem- plo, IFNα, IFNβ, IFNɛ, IFNк, IFN IFN e IFN), IFNs tipo II (por exemplo, IFNγ) e IFNs tipo III (por exemplo, IFNλ1, IFNλ2 a nd IFNλ3).
[301] De acordo com certas modalidades exemplares, uma tera- pia de combinação aqui descrita utiliza um ou mais de um IFN de comprimento total, uma variante modificada do mesmo (por exemplo, uma variante modificada quimicamente (por exemplo, PEGuilada) ou muteína), ou um fragmento biologicamente ativo do mesmo, que retém uma ou mais atividades de sinalização de um IFN de comprimento to- tal. Em certas modalidades, o agente IFN é um agente IFN humano.
[302] Em certas modalidades, uma terapia de combinação aqui descrita utiliza um ou mais de um IFNα, um fragmento de IFNα, um IFNβ, um fragmento de IFNβ, um IFNγ, um fragmento de IFNγ, um IFNλ ou um Fragmento IFNλ.
[303] Em outras modalidades exemplares, uma terapia de combi-
nação aqui descrita utiliza um ou mais de um IFNα, um fragmento de IFNα, um IFNβ, um fragmento de IFNβ, um IFNγ, um fragmento de IFNγ, um IFNλ ou um fragmento de IFNλ que faz parte de uma proteí- na de fusão, como, por exemplo, uma proteína de fusão imunoestimu- latória bifuncional (por exemplo, um agonista de TNFRSF/IFN Duoci- na). Em ainda outras modalidades exemplares, uma terapia de combi- nação aqui descrita utiliza um ou mais de um IFNα, um fragmento de IFNα, um IFNβ, um fragmento de IFNβ, um IFNγ, um fragmento de IFNγ, um IFNλ ou um fragmento de IFNλ que é expresso por uma se- quência de ácido nucleico.
[304] Em certas modalidades, o nível de expressão de um ou mais biomarcadores da via de sinalização de IFN é alterado, isto é, regulado positivamente ou regulado negativamente, em uma célula infectada por HBV tratada com uma terapia de combinação aqui des- crita (por exemplo, uma combinação de um agonista de TNFRSF e um agente IFN ou fragmento do mesmo). De acordo com certas modali- dades exemplares, o nível de expressão de um ou mais biomarcado- res da via IFN é regulado positivamente em uma célula infectada por HBV tratada com uma terapia de combinação aqui descrita (por exem- plo, uma combinação de um agonista de TNFRSF ou fragmento do mesmo e um IFN ou fragmento do mesmo).
[305] De acordo com certas modalidades, um biomarcador da via IFN adequado apresentado neste documento é uma quimiocina, por exemplo, uma quimiocina C-X-C, selecionada a partir do grupo que consiste em CXCL9, CXCL10 e CXCL11. Em certas modalidades exemplares, um biomarcador adequado induzido pela via IFN é CXCL9, CXCL10 e/ou CXCL11 e também o gene estimulado por inter- feron ISG20.
[306] Tal como aqui utilizado, um fator de necrose tumoral (ligan- te) membro da superfamília (ou TNFSF) refere-se a uma proteína per-
tencente a uma superfamília de ligantes de proteína que compartilham um domínio de homologia de TNF extracelular (THD) (Bremer ISRN Oncology (2013), Artigo ID 371854, 25 páginas, acesso online: dx.doi.org/10.1155/2013/371854). O THD desencadeia a formação de homotrímeros não covalentes.
Ligantes de TNF são tipicamente ex- pressos como proteínas transmembranares do tipo II, mas a maioria pode ser submetida a processamento proteolítico em um ligante solú- vel.
Ligantes de TNF exercem sua função biológica ligante-se a mem- bros do TNFRSF e ativando-os.
TNFRSFs são tipicamente expressos como proteínas transmembranares triméricas do tipo I e contêm de um a seis domínios ricos em cisteína (CRDs) em seu domínio extracelular.
Uma função importante da superfamília do TNF é o fornecimento de sinais coestimulatórios em estágios distintos de uma resposta imune.
Alguns ligantes têm a capacidade de se ligar e ativar diferentes recep- tores (por exemplo, LTα3 que se liga e ativa TNFRSF1A, TNFRSF1B e TNFRSF14 e LIGHT (TNFSF14) que se liga e ativa TNFRSF3 e TNFRSF14). Membros da família de genes TNFSF exemplares são citados abaixo na Tabela 1, derivados do HUGO Gene Nomenclature Committee (HGNC) (vide, Gray et al.
Nucleic Acids Res. 43: D1079- 1085 (2015); HGNC Database, HUGO Gene Nomenclature Committee (HGNC), EMBL Outstation - Hinxton, European Bioinformatics Institute, Wellcome Trust Genome Campus, Hinxton, Cambridgeshire, CB10 1SD, UK www.genenames.org). O símbolo aprovado denota o símbolo HGNC aplicado a um gene específico e o nome aprovado corresponde à grafia completa do gene.
Símbolos anteriores denota qualquer sím- bolo anterior usado pelo HGNC para se referir a um determinado gene.
Sinônimos referem-se a nomes alternativos e sinônimos de um deter- minado gene.
Tabela 1. Membros da família de genes TNFSF exemplares.
Símbolo Nome Aprovado Símbolo Anterior Sinônimo Aprovado TNF Fator de necrose tu- TNFA TNFSF2, DIF, TNF moral LTA Linfotoxina alfa TNFB LT, TNFSF1 LTB Linfotoxina beta TNFC TNFSF3, p33 TNFSF4 Membro da super- TXGP1 OX-40L, família de TNF 4 gp34,CD252 CD40LG Ligante CD40 TNFSF5, HIGM1, CD40L, TRAP, IMD3 gp39, hCD40L, CD154 FASLG Ligante Fas TNFSF6, APT1LG1 FasL, CD178 CD70 Molécula de CD70 TNFSF7, CD27L CD27L TNFSF8 Membro da super- CD153 família de TNF 8 TNFSF9 Membro da super- 4-1BB-L família de TNF 9 TNFSF10 Membro da super- TRAIL, Apo-2L, família de TNF 10 TL2, CD253 TNFSF11 Membro da super- TRANCE, RANKL, família de TNF 11 OPGL, ODF, CD254 TNFSF12 Membro da super- TWEAK, DR3LG, família de TNF 12 APO3L TNFSF13 Membro da super- APRIL, CD256 família de TNF 13 TNFSF13B Membro da super- TNFSF20 BAFF, THANK, família de TNF 13B BLYS, TALL-1, TALL1, CD257 TNFSF14 Membro da super- LIGHT, LT, HVEM- família de TNF 14 L, CD258 TNFSF15 Membro da super- TL1, VEGI, TL1A, família de TNF 15 VEGI192A, MGC129934, MGC129935
TNFSF18 Membro da super- AITRL, TL6, família de TNF 18 hGITRL EDA ectodisplasina A ED1, EDA2, ODT1 EDA1, XLHED, HED, XHED, ED1- A1, ED1-A2, EDA- A1, EDA-A2 Tabela 2. Membros da família de genes TNFRSF exemplares. a Nome Aprovado Símbolo An- Sinônimo terior EDAR receptor de ectodis- ED3, DL ED5, EDA3, Edar, plasina A ED1R, EDA1R TNFRSF1A Membro da super- TNFR1 TNF-R, TNFAR, família do receptor TNFR60, TNF-R-I, de TNF 1A CD120a, TNF-R55 TNFRSF1B Membro da super- TNFR2 TNFBR, TNFR80, TNF- família do receptor R75, TNF-R-II, p75, de TNF 1B CD120b LBTR Receptor de linfoto- D12S370 TNF-R-III, TNFCR, xina beta TNFRSF3, TNFR2-RP, TNFR-RP TNFRSF4 Membro da super- TXGP1L ACT35, OX40, CD134 família do receptor de TNF 4 CD40 Molécula de CD40 TNFRSF5 p50, Bp50 FAS Receptor de morte APT1, FAS1, CD95, APO-1 de superfície celular TNFRSF6 Fas TNFRSF6b Membro da super- DcR3, DCR3, TR6, M68 família do receptor de TNF 6b CD27 Molécula de CD27 TNFRSF7 S152, Tp55 TNFRSF8 Membro da super- CD30, KI-1 família do receptor D1S166E de TNF 8 TNFRSF9 Membro da super- ILA CD137, 4-1BB família do receptor de TNF 9 TNFRSF10a Membro da super- DR4, Apo2, TRAILR-1, família do receptor CD261, TRAILR1 de TNF 10a TNFRSF10b Membro da super- DR5, KILLER, TRICK2A, família do receptor TRAIL-R2, TRICKB, de TNF 10b CD262, TRAILR2 TNFRSF10c Membro da super- DcR1, TRAILR3, LIT, família do receptor TRID, CD263 de TNF 10c TNFRSF10d Membro da super- DcR2, TRUNDD, família do receptor TRAILR4, CD264 de TNF 10d TNFRSF11a Membro da super- PDB2, RANK, CD265, FEO família do receptor LOH18CR1 de TNF 11a TNFRSF11b Membro da super- OPG OCIF, TR1 família do receptor de TNF 11b TNFRSF12A Membro da super- FN14, TweakR, CD266 família do receptor de TNF 12A TNFRSF13B Membro da super- TACI, CD267, IGAD2 família do receptor de TNF 13B TNFRSF13C Membro da super- BAFFR, CD268 família do receptor de TNF 13C TNFRSF14 Membro da super- HVEM, ATAR, TR2, família do receptor LIGHTR, HVEA, CD270 de TNF 14 NGFR Receptor de fator de TNFRSF16, p75NTR, crescimento de nervo CD271 TNFRSF17 Membro da super- BCMA BCM, CD269,
família do receptor TNFRSF13A de TNF 17 TNFRSF18 Membro da super- AITR, GITR, CD357 família do receptor de TNF 18 TNFRSF19 Membro da super- TAJ-alpha, TROY, TAJ, família do receptor TRADE de TNF 19 RELT RELT, receptor de TNFRSF19L FLJ14993
TNF TNFRSF21 Membro da super- DR6, CD358 família do receptor de TNF 21 TNFRSF25 Membro da super- TNFRSF12 DR3, TRAMP, WSL-1, família do receptor LARD, WSL-LR, DDR3, de TNF 25 TR3, APO-3 EDA2R Receptor de ectodis- XEDAR, EDAA2R, EDA- plasina A2 A2R, TNFRSF27
[307] Conforme usado neste documento, um "agonista de TNFRSF" refere-se a um composto (por exemplo, uma proteína, uma proteína de fusão, um polipeptídeo, um anticorpo, um fragmento de ligação a antígeno de um anticorpo ou semelhante) que ativa um TNFRSF, por exemplo, um TNFRSF listado na Tabela 2. A Tabela 2 é derivada do HGNC, como para a Tabela 1 acima. Por exemplo, um agonista de TNFRSF pode ser um anticorpo agonístico dirigido contra um membro do TNFRSF, um agonista de TNFRSF solúvel incluindo, mas não limitado ao seu ligante natural ou um fragmento funcional do mesmo.
[308] Em certas modalidades exemplares, um agonista de TNFRSF inclui, mas não está limitado a, um agonista dos receptores LTα3 (TNFRSF1A, TNFRSF1B ou TNFRSF14), um agonista do recep- tor de LTβ (TNFRSF3) (por exemplo, LIGHT ou LTβ), um agonista do mediador de entrada do vírus da herpes (HVEM ou TNFRSF14)
(LIGHT), um agonista de indutor fraco de receptor do tipo fator de ne- crose tumoral de apoptose (TNFRSF12A) (por exemplo, TWEAK tam- bém conhecido como TNFSF12), um agonista de agrupamento de fa- tor de diferenciação 40 (CD40, TNFRSF5) (CD40L), um agonista de CD27 (TNFRSF7) (CD70), um agonista de CD30 (TNFRSF8), um agonista de 4-1BB (CD137, TNFRSF9), um agonista do ativador de receptor de fator nuclear κB (RANK, TNFRSF11A), um agonista de Troy (TNFRSF19) e um agonista do receptor de OX40 (TNFRSF4).
[309] De acordo com certas modalidades exemplares, uma tera- pia de combinação aqui descrita utiliza um ou mais de um anticorpo agonístico dirigido contra um receptor de TNF, um agonista de TNFRSF solúvel incluindo, mas não limitado ao seu ligante natural, ou variante modificada (por exemplo, muteína) ou fragmento biologica- mente ativo de qualquer um, que retém uma ou mais atividades de si- nalização de um agonista de TNFRSF de comprimento total ou solú- vel.
[310] Em certas modalidades, uma terapia de combinação aqui descrita utiliza um ou mais agonistas de TNFRSF. De acordo com cer- tas modalidades exemplares, um agonista de TNFRSF é fornecido como um multímero (por exemplo, um dímero, um trímero, um tetrâ- mero, pentâmero, hexâmero, um heptâmero, um octâmero ou seme- lhante) ou como uma proteína de fusão, por exemplo, uma proteína de fusão compreendendo um agonista de TNFRSF e um agente IFN ou um fragmento biologicamente ativo de um agente IFN (vide, por exem- plo, Tabela 3 para exemplos de proteínas de fusão adequadas). Em outras modalidades, um agonista de TNFRSF é fornecido como um anticorpo agonístico ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo.
[311] Em certas modalidades, uma terapia de combinação aqui descrita utiliza um ou mais agonistas TNFRSF selecionados de CD40L, TWEAK, LIGHT e LTα3. Em certas modalidades exemplares,
uma terapia de combinação aqui descrita utiliza um ou mais agonistas de CD40 que é um CD40L multimérico, por exemplo, um CD40L he- xamérico, um CD40L trimérico ou semelhantes. Em outras modalida- des exemplares, uma terapia de combinação aqui descrita utiliza um ou mais anticorpos agonísticos anti-CD40. Exemplos de anticorpos agonísticos anti-CD40 adequados incluem, mas não estão limitados a, CP-870.893 (Pfizer/Roche), SGN-40 (Seattle Genetics), ADC-1013 (Janssen/Alligator BioSciences), Chi Lob 7/4 (University of Southamp- ton), dacetuzmumab (Seattle Genetics), APX005M (Apexigen, Inc.), 3G5 (Celldex) e CDX-1140 (Celldex). Em ainda outras modalidades exemplares, uma terapia de combinação aqui descrita utiliza um ou mais agonistas de CD40, tais como proteínas de fusão CD40L/IFNb, por exemplo, proteínas de fusão imunoestimuladoras bifuncionais (por exemplo, CD40L/IFN Duocinas (vide, por exemplo, WO 2016/113395, aqui incorporado por referência na sua totalidade para todos os efei- tos)). Em ainda outras modalidades exemplares, uma terapia de com- binação aqui descrita utiliza um ou mais agonistas de CD40 expressos por uma sequência de ácido nucleico. O termo "proteína de fusão", tal como aqui utilizado, geralmente refere-se a uma proteína criada pela união de dois ou mais peptídeos ou proteínas distintas, resultando em uma única proteína com uma ou mais propriedades funcionais deriva- das de cada uma das proteínas originais. Uma proteína de fusão abrange complexos monoméricos e multiméricos, por exemplo, diméri- cos, triméricos, tetraméricos ou semelhantes, de proteínas de fusão distintas.
[312] Em certas modalidades exemplares, uma proteína de fusão tem a fórmula geral: An-L-Bm (Fórmula I) em que A é um agonista de TNFRSF ou um fragmento fun- cional do mesmo, B é um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo e L compreende, ou alternativamente consiste em, um ligante. Em certas modalidades, duas ou mais proteínas de fusão de Fórmula I podem ser ligadas entre si por meio de um ou mais ligantes adicionais "L".
[313] "n", conforme usado em An, refere-se a 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ou mais agonistas de TNFRSF ou fragmentos funcionais dos mesmos que podem estar associados a um ou mais ligantes "L." Em certas mo- dalidades, dois ou mais agonistas de TNFRSF ou fragmentos funcio- nais dos mesmos estão associados a um único ligante. Em outras mo- dalidades, dois ou mais agonistas TNFRSF ou fragmentos funcionais dos mesmos são complexados um com o outro (por exemplo, como um oligômero) e um ou mais dos agonistas TNFRSF complexados ou fragmentos funcionais dos mesmos estão associados a um ou mais ligantes. Em ainda outras modalidades, um agonista de TNFRSF indi- vidual ou fragmento funcional do mesmo está associado a um único ligante.
[314] "m", como usado em Bm, refere-se a 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ou mais agentes IFN ou fragmentos funcionais dos mesmos, em que "m" pode estar associado a dois ou mais ligantes ou fragmentos ou varian- tes dos mesmos que podem estar associados a um ou mais ligantes “L.” Em certas modalidades, dois ou mais ligantes ou fragmentos ou variantes dos mesmos estão associados a um único ligante. Em outras modalidades, dois ou mais ligantes ou fragmentos ou variantes dos mesmos são complexados um com o outro (por exemplo, como um oligômero), e um ou mais dos ligantes complexados ou fragmentos ou variantes dos mesmos estão associados a um ou mais ligantes. Em ainda outras modalidades, um ligante individual ou fragmento ou vari- ante do mesmo está associado a um único ligante.
[315] O termo "ligante" ou "L", conforme usado neste documento, refere-se a qualquer porção que une covalentemente um ou mais An a um ou mais Bm. Em modalidades exemplares, um ligante é um ligante peptídico. O termo "ligante peptídico", tal como aqui utilizado, refere-se a um peptídeo adaptado para ligar dois ou mais ligantes ou fragmentos ou variantes dos mesmos. Um ligante peptídico pode ter qualquer comprimento, ou seja, compreender qualquer número de resíduos de aminoácidos. Um ligante é tipicamente longo o suficiente para fornecer um grau adequado de flexibilidade para evitar que as porções ligadas interfiram com a atividade umas das outras, por exemplo, a capacida- de de um ligante de multimerizar e/ou se ligar a um receptor. Em mo- dalidades exemplares, o ligante é ou compreende um domínio Fc (por exemplo, um domínio Fc de IgG1 ou IgG3 humano) ou fragmento do mesmo. Em outras modalidades, o ligante é Gly-Ser ou um ligante Gly- Ser-Thr composto por múltiplos resíduos de glicina, serina e, quando aplicável, treonina. Em outras modalidades, o ligante é uma combina- ção de um domínio Fc ou um fragmento do mesmo e um ligante Gly- Ser ou um ligante Gly-Ser-Thr. As sequências do ligante peptídico de acordo com certas modalidades exemplares são apresentadas na Ta- bela 3.
[316] L pode ainda compreender um domínio de multimerização permitindo a multimerização da proteína de fusão. Nesses casos, L pode compreender um ligante peptídico, no qual o domínio de multi- merização foi inserido. Em uma modalidade alternativa, L pode com- preender dois ligantes peptídicos, em que os dois ligantes peptídicos podem ser iguais ou diferentes. Em ainda outra modalidade, um domí- nio de multimerização representa o ligante peptídico compreendido por L.
[317] A multimerização pode ocorrer por interação não covalente e/ou interação covalente, em particular através de uma ou mais liga- ções dissulfeto ou pelo alinhamento de múltiplas sequências de codifi- cação da mesma molécula, entre múltiplos (por exemplo, 2, 3, 4 ou mais) domínios de multimerização.
[318] Domínios de multimerização adequados são conhecidos por um versado na técnica e incluem, por exemplo, um motivo de tri- merização de tenascina, um domínio de trimerização de collectina e estreptavidina e domínios de dimerização, como um domínio de cadeia pesada de IgE 2 (EHD2), um domínio de cadeia pesada de IgM 2 (MHD2), um domínio de cadeia pesada de IgG 3 (GHD3), um domínio de cadeia pesada de IgA 3 (AHD2), um domínio de cadeia pesada de IgD 3 (DHD3), um domínio de cadeia pesada de IgE 4 (EHD4), um domínio de cadeia pesada de IgM 4 (MHD4), um domínio Fc, um do- mínio de dimerização de uteroglobina e um domínio zíper de leucina (LZ).
[319] Em uma modalidade particular, uma proteína de fusão pode ser uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional compreen- dendo o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, o agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[320] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[321] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende CD40L ou um fragmento funcional do mes- mo, um IFNα ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[322] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende CD40L ou um fragmento funcional do mes- mo, um IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[323] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in-
venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende CD40L ou um fragmento funcional do mes- mo, um IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[324] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende CD40L ou um fragmento funcional do mes- mo, um IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[325] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende TWEAK ou um fragmento funcional do mesmo, um IFNα ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[326] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende TWEAK ou um fragmento funcional do mesmo, um IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[327] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende TWEAK ou um fragmento funcional do mesmo, um IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[328] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende TWEAK ou um fragmento funcional do mesmo, um IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[329] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende LIGHT ou um fragmento funcional do mes- mo, um IFNα ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[330] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende LIGHT ou um fragmento funcional do mes-
mo, um IFNβ ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[331] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende LIGHT ou um fragmento funcional do mes- mo, um IFNγ ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[332] Em uma modalidade de qualquer um dos aspectos da in- venção, uma proteína de fusão imunoestimulatória bifuncional é uma proteína que compreende LIGHT ou um fragmento funcional do mes- mo, um IFNλ ou um fragmento funcional do mesmo e um ligante.
[333] Tal como aqui utilizado, um "Duocina" refere-se a uma pro- teína de fusão compreendendo uma, duas ou mais citocinas. As se- quências de Duocinas e seus componentes de acordo com certas mo- dalidades exemplares são apresentadas na Tabela 3.
[334] Tabela 3. Sequências de moléculas Duocina exemplares e seus componentes. As sequências em negrito correspondem a ligan- tes e as sequências em itálico correspondem a peptídeos de sinal. Duocina/Seus componentes Sequência IFNβ MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEY- (SEQ ID NO: 1) CLKDRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVEN- LLANVYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAW-
TIVRVEILRNFYFINRLTGYLRN Forma solúvel de CD40L MQKGDQNPQIAAHVISE- (SEQ ID NO: 2) ASSKTTSVLQWAEKGYYTMSNNLVTLENGKQLTVKRQGLYYIYAQVTFCSNRE- ASSQAPFIASLCLKSPGRFERILLRAANTHSSAKPCGQQSIHLGGVFELQP-
GASVFVNVTDPSQVSHGTGFTSFGLLKL Forma solúvel de TWEAK MKGRKTRARRAIAAHYEVHPRPGQDGAQAGVDGTVSGWEEARINS- (SEQ ID NO: 3) SSPLRYNRQIGEFIVTRAGLYYLYCQVHFDEGKAVYLKLDLLVDGVLALRCLEEFSA-
TAASSLGPQLRLCQVSGLLALRPGSSLRIRTLPWAHLKAAPFLTYFGLFQVH Forma solúvel de LIGHT DGPAGSWEQLIQERRSHEVNPAAHLTGANSSLTGSGGPLLWETQLGLAFLRGL- (SEQ ID NO: 4) SYHDGALVVTKAGYYYIYSKVQLGGVGCPLGLASTITHGLYKRTPRYPEELELL- VSQQSPCGRATSSSRVWWDSSFLGGVVHLEAGEKVVVRVLDERLVRLRDGTR-
SYFGAFMV Domínio Fc de ligante peptídi- DDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPE- co IgG1 VKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSN- (SEQ ID NO: 5) KALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE- WESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHN-
HYTQKSLSLSPGK Ligante peptídico Gly-Ser-Thr (SEQ ID NO: 6)
(SEQID NO: 7) SGGTSGSTSGTGS (SEQ ID NO: 27) SGGTSGSTSGTGST (SEQ ID NO: 28) GGGGSGGGGSGGGGS
GSPAPDPAPDPSG Ligante peptídico incorporando VSSIEKKIEEITSQIIQISNEITLIRNEIAQIKQ um domínio de zipper de leucina de multimerização (SEQ ID NO: 8) IFNβ-IgG1 FC-CD40L humano MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLK- (ou IFNb-Ig-CD40L ou IFNb- DRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLAN- Fc-CD40L nas Figuras) VYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIV- (SEQ ID NO: 9) RVEILRNFYFINRLTGYLRNSGGTSGSTSGTGSDDKTHTCPPCPAPELL- GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTK- PREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS- KAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY- KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHN- HYTQKSLSLSPGKSGGTSGSTSGTGSTMQKGDQNPQIAAHVISEASSKTTS- VLQWAEKGYYTMSNNLVTLENGKQLTVKRQGLYYIYAQVTFCSN- REASSQAPFIASLCLKSPGRFERILLRAANTHSSAKPCGQQSIHLGGVFELQPGAS-
VFVNVTDPSQVSHGTGFTSFGLLKL IFNβ-Ligante-CD40L humano MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLK- (ou IFNb-CD40L nas Figuras) DRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLAN- VYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIV- (SEQ ID NO: 10) RVEILRNFYFINRLTGYLRNSGGTSGSTSGTGSTMQKGDQNPQIAAHVISEASSKT- TSVLQWAEKGYYTMSNNLVTLENGKQLTVKRQGLYYIYAQVTFCSN- REASSQAPFIASLCLKSPGRFERILLRAANTHSSAKPCGQQSIHLGGVFELQPGAS-
VFVNVTDPSQVSHGTGFTSFGLLKL IFNβ-LZ-CD40L humano (ou MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLK- IFNb-LZ-CD40L nas Figuras) DRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLAN- (LZ = zíper de leucina) VYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIV- (SEQ ID NO: 11) RVEILRNFYFINRLTGYLRNSGGTSGSTSGTGSTVSSIEKKIEEITSQIIQISNEIT- LIRNEIAQIKQMQKGDQNPQIAAHVISEASSKTTSVLQWAEKGYYTMSNNLVT- LENGKQLTVKRQGLYYIYAQVTFCSNREASSQAPFIASLCLKSPGRFERILL-
RAANTHSSAKPCGQQSIHLGGVFELQPGASVFVNVTDPSQVSHGTGFTSFGLLKL IFNβ-IgG1 FC-TWEAK hu- MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLK- mano (ou IFNb-Ig-TWEAK ou DRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLAN- hIFNb-LhIgG1-LhTweak nas VYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIV- Figuras) RVEILRNFYFINRLTGYLRNSGGTSGSTSGTGSDDKTHTCPPCPAPELL- (SEQ ID NO: 12) GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTK- PREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS- KAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY- KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHN- HYTQKSLSLSPGKSGGTSGSTSGTGSTMKGRKTRARRAIAAHYEVHPRPGQD- GAQAGVDGTVSGWEEARINSSSPLRYNRQIGEFIVTRAGLYYLYCQVHFDEGKA- VYLKLDLLVDGVLALRCLEEFSATAASSLGPQLRLCQVSGLLALRPGSSLRIRT-
LPWAHLKAAPFLTYFGLFQVH IFNβ-Ligante-TWEAK humano MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLK- (ou IFNb-TWEAK nas Figuras) DRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLAN-
VYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIV- (SEQ ID NO: 13) RVEILRNFYFINRLTGYLRNSGGTSGSTSGTGSTMKGRKTRARRAIAAHYEVH- PRPGQDGAQAGVDGTVSGWEEARINSSSPLRYNRQIGEFIVTRAGLYYLYCQVHF- DEGKAVYLKLDLLVDGVLALRCLEEFSATAASSLGPQLRLCQVSGLLALRPGSSLR-
IRTLPWAHLKAAPFLTYFGLFQVH IFNβ-LZ-TWEAK humano (ou MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLK- IFNb-LZ-TWEAK nas Figuras) DRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLAN- (SEQ ID NO: 14) VYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIV- RVEILRNFYFINRLTGYLRNSGGTSGSTSGTGSTVSSIEKKIEEITSQIIQISNEIT- LIRNEIAQIKQMKGRKTRARRAIAAHYEVHPRPGQDGAQAGVDGTVSGWEEA- RINSSSPLRYNRQIGEFIVTRAGLYYLYCQVHFDEGKAVYLKLDLLVDGVLAL- RCLEEFSATAASSLGPQLRLCQVSGLLALRPGSSLRIRTLPWAHLKAAPFLTY-
FGLFQVH IFNβ-IgG1 FC-LIGHT humano MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLK- (ou IFNb-Ig-LIGHT ou hIFNb- DRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLAN- LhIgG1-LhLight nas Figuras) VYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIV- (SEQ ID NO: 15) RVEILRNFYFINRLTGYLRNSGGTSGSTSGTGSDDKTHTCPPCPAPELL- GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTK- PREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS- KAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY- KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHN- HYTQKSLSLSPGKSGGTSGSTSGTGSTDGPAGSWEQLIQERRSHEVNPAAHLT- GANSSLTGSGGPLLWETQLGLAFLRGLSYHDGALVVTKA- GYYYIYSKVQLGGVGCPLGLASTITHGLYKRTPRYPEELELLVSQQSPCGRATS-
SSRVWWDSSFLGGVVHLEAGEKVVVRVLDERLVRLRDGTRSYFGAFMV IFNβ-Ligante-LIGHT humano MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLK- (ou IFNb-LIGHT nas Figuras) DRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLAN- VYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIV- (SEQ ID NO: 16) RVEILRNFYFINRLTGYLRNSGGTSGSTSGTGSTDGPAGSWEQLIQERRSHEVN- PAAHLTGANSSLTGSGGPLLWETQLGLAFLRGLSYHDGALVVTKA- GYYYIYSKVQLGGVGCPLGLASTITHGLYKRTPRYPEELELLVSQQSPCGRATS-
SSRVWWDSSFLGGVVHLEAGEKVVVRVLDERLVRLRDGTRSYFGAFMV IFNβ-LZ-LIGHT humano (ou MTNKCLLQIALLLCFSTTALSMSYNLLGFLQRSSNFQCQKLLWQLNGRLEYCLK- IFNb-LZ-LIGHT nas Figuras) DRMNFDIPEEIKQLQQFQKEDAALTIYEMLQNIFAIFRQDSSSTGWNETIVENLLAN- VYHQINHLKTVLEEKLEKEDFTRGKLMSSLHLKRYYGRILHYLKAKEYSHCAWTIV- (SEQ ID NO: 17) RVEILRNFYFINRLTGYLRNSGGTSGSTSGTGSTVSSIEKKIEEITSQIIQISNEIT- LIRNEIAQIKQDGPAGSWEQLIQERRSHEVNPAAHLTGANSSLTGSGGPLLWETQL- GLAFLRGLSYHDGALVVTKAGYYYIYSKVQLGGVGCPLGLASTITHGLYKRT- PRYPEELELLVSQQSPCGRATSSSRVWWDSSFLGGVVHLEAGEKVVVRV-
LDERLVRLRDGTRSYFGAFMV huIgG1-Fc-tweak (Ig-Tweak ou MTNKCLLQIALLLCFSTTALSSGGTSGSTSGTGSDDKTHTCPPCPAPELL- LhIgG1-LhTweak no texto e GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTK- figuras) PREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS- KAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY- KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHN- (SEQ ID NO: 18) HYTQKSLSLSPGKSGGTSGSTSGTGSTMKGRKTRARRAIAAHYEVHPRPGQD- GAQAGVDGTVSGWEEARINSSSPLRYNRQIGEFIVTRAGLYYLYCQVHFDEGKA- VYLKLDLLVDGVLALRCLEEFSATAASSLGPQLRLCQVSGLLALRPGSSLRIRT-
LPWAHLKAAPFLTYFGLFQVH huIgG1-Fc-Light (Ig-Light ou MTNKCLLQIALLLCFSTTALSSGGTSGSTSGTGSDDKTHTCPPCPAPELL- LhIgG1-LhLight no texto e fig- GGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTK- uras) PREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS- KAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY- KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHN- (SEQ ID NO: 19) HYTQKSLSLSPGKSGGTSGSTSGTGSTDGPAGSWEQLIQERRSHEVNPAAH- GANSSLTGSGGPLLWETQLGLAFLRGLSYHDGALVVTKA- GYYYIYSKVQLGGVGCPLGLASTITHGLYKRTPRYPEELELLVSQQSPCGRATS-
SSRVWWDSSFLGGVVHLEAGEKVVVRVLDERLVRLRDGTRSYFGAFMV mIFNb_Fc-mIgG1 MNNRWILHAAFLLCFSTTALSINYKQLQLQERTNIRKCQELLEQLNGKINLTYRAD- FKIPMEMTEKMQKSYTAFAIQEMLQNVFLVFRNNFSSTGWNETIVVRLLDEL- (SEQ ID NO: 20) HQQTVFLKTVLEEKQEERLTWEMSSTALHLKSYYWRVQRYLKLMKYN- SYAWMVVRAEIFRNFLIIRRLTRNFQNSGGTSGSTSGTGSVRSGCKPCICTVPE- VSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDD- VEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEK- TISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAE- NYKNTQPIMDTDGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLS-
HSPG Fc-mIgG1_mCD40L MNNRWILHAAFLLCFSTTALSSGGTSGSTSGTGSVRSGCKPCICTVPEVSS- VFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDD- VEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEK- (SEQ ID NO: 21) TISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAE- NYKNTQPIMDTDGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLS- HSPGKSGGTSGSTSGTGSTMQRGDEDPQIAAHVVSEANSNAASVLQWAK- KGYYTMKSNLVMLENGKQLTVKREGLYYVYTQVTFCSNREPSSQRPFIV-
GLWLKPSSGSERILLKAANTHSSSQLCEQQSVHLGGVFELQAGASVFV
NVTEASQVIHRVGFSSFGLLKL Fc-mIgG1 MNNRWILHAAFLLCFSTTALSSGGTSGSTSGTGSVRSGCKPCICTVPEVSS- VFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDD- (SEQ ID NO: 22) VEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEK- TISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAE- NYKNTQPIMDTDGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLS-
HSPGK Forma solúvel de mCD40L MQRGDEDPQIAAHVVSEANSNAASVLQWAKKGYYTMKSNLVMLENGKQLT- VKREGLYYVYTQVTFCSNREPSSQRPFIVGLWLKPSSGSERILLKAANTHS- (SEQ ID NO: 23) SSQLCEQQSVHLGGVFELQAGASVFVNVTEASQVIHRVGFSSFGLLKL mIFNb MNNRWILHAAFLLCFSTTALSINYKQLQLQERTNIRKCQELLEQLNGKINLTYRAD- FKIPMEMTEKMQKSYTAFAIQEMLQNVFLVFRNNFSSTGWNETIVVRLLDEL- (SEQ ID NO: 24) HQQTVFLKTVLEEKQEERLTWEMSSTALHLKSYYWRVQRYLKLMKYN-
SYAWMVVRAEIFRNFLIIRRLTRNFQN IFNa-G4S-huIgG1-LN2- MALTFALLVALLVLSCKSSCSVGCDLPQTHSLGSRRTLMLLAQMRKISLFSCLKD- huCD40L RHDFGFPQEEFGNQFQKAETIPVLHEMIQQIFNLFSTKDSSAAWDETLLD- (IFNa-huIgG1-hu-CD40 no texto KFYTELYQQLNDLEACVIQGVGVTETPLMKEDSILAVRKYFQRITLYLKEKKYSPCA- e figuras) WEVVRAEIMRSFSLSTNLQESLRSKEGGGGSGGGGSGGGGSDKTHTCPPCPA- PELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHN- AKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTIS- (SEQ ID NO: 25) KAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNY- KTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHN- HYTQKSLSLSPGKGSPAPDPAPDPSGMQKGDQNPQIAAHVISEASSKTTS-
VLQWAEKGYYTMSNNLVTLENGKQLTVKRQGLYYIYAQVTFCSN- REASSQAPFIASLCLKSPGRFERILLRAANTHSSAKPCGQQSIHLGGVFELQPGAS-
VFVNVTDPSQVSHGTGFTSFGLLKL Lz-Light MSGGTSGSTSGTGSTVSSIEKKIEEITSQIIQISNEITLIRNEIAQIKQDGPAGS- (SEQ ID NO: 26) WEQLIQERRSHEVNPAAHLTGANSSLTGSGGPLLWETQLGLAFLRGLSYHDGAL- VVTKAGYYYIYSKVQLGGVGCPLGLASTITHGLYKRTPRYPEELELL- VSQQSPCGRATSSSRVWWDSSFLGGVVHLEAGEKVVVRVLDER VRLRDGTR-
SYFGAFMV Peptídeo sinal 1 MTNKCLLQIALLLCFSTTALS (SEQ ID NO: 29) Peptídeo sinal 2 MNNRWILHAAFLLCFSTTALS (SEQ ID NO: 30) Peptídeo sinal 3 MALTFALLVALLVLSCKS (SEQ ID NO: 31) Peptídeo sinal 4 MSGGTSGSTSGTGST (SEQ ID NO: 32) IFNα2a MALTFALLVALLVLSCKSSCSVGCDLPQTHSLGSRRTLMLLAQMRKISLFSCLKD- (SEQ ID NO: 33) RHDFGFPQEEFGNQFQKAETIPVLHEMIQQIFNLFSTKDSSAAWDETLLD- KFYTELYQQLNDLEACVIQGVGVTETPLMKEDSILAVRKYFQRITLYLKEKKYSPCA-
WEVVRAEIMRSFSLSTNLQESLRSKE
[335] Os componentes apresentados na tabela 3 acima podem ser usados para preparar um medicamento ou composição farmacêu- tica como aqui divulgado.
[336] Em modalidades preferidas, os agentes ativos consistem em polipeptídeos derivados daqueles especificados na Tabela 3 aci- ma, e especialmente dos polipeptídeos de SEQ IDs NO. 1, 2, 3, 4, 5, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26 e 33 acima, e são desprovidos de qualquer peptídeo sinal quando são usa- dos para tratar uma infecção por HBV. De fato, os peptídeos sinal que estão inicialmente presentes nas sequências dos polipeptídeos quan- do estes são sintetizados são então clivados.
[337] Tabela 4. Correspondência entre os nomes dos construtos usados nas figuras (ou no texto) e SEQ ID NOs Fig. NO Nome do construto nas figuras SEQ ID NO IFNb-Ig-CD40L SEQ ID NO: 9 Fig. 10A/B IFNb-CD40L SEQ ID NO: 10 IFNb-LZ-CD40L SEQ ID NO: 11 IFNb-Fc-CD40L (IFNb-Ig-CD40L) SEQ ID NO: 9 Fig. 11A IFNb-CD40L SEQ ID NO: 10
IFNb-LZ-CD40L SEQ ID NO: 11 Fig. 11B duocina SEQ ID NO: 9 hIFNb1 SEQ ID NO: 1 Fig. 9A Ig-Tweak SEQ ID NO: 18 hIFNb1 SEQ ID NO: 1 Fig. 9B Ig-LIGHT SEQ ID NO: 19 hIFNb1 SEQ ID NO: 1 Fig. 12 LhIgG1-LhTweak (Ig-Tweak) SEQ ID NO: 18 hIFNb-LhIgG1-LhTweak (IFNb-Ig-Tweak) SEQ ID NO: 12 hIFNb1 SEQ ID NO: 1 LhIgG1-LhLight (Ig-Light) SEQ ID NO: 19 Fig. 13 hIFNb-LhIgG1-LhLight (IFNb-Ig-Light) SEQ ID NO: 15 Lz-Light SEQ ID NO: 26 IFNb-LZ-Light seq ID N0: 17 mIFNb_Fc-mIgG1 SEQ ID NO: 20 Fig. 17 and Fig. 18 Fc-mIgG1_mCD40L SEQ ID NO: 21 Fc-mIgG1 SEQ ID NO: 22 Fig. 19 IFNa-huIgG1-hu-CD40L SEQ ID NO: 25 Ácidos nucleicos e vetores de expressão
[338] Em um aspecto, uma combinação de polinucleotídeos que codificam um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e um agente IFN ou fragmento funcional do mesmo é forneci- da. Métodos para fazer uma combinação de agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e um agente IFN ou um fragmento funcional do mesmo compreendendo a expressão desses polinucleotí- deos também são fornecidos.
[339] Polinucleotídeos que codificam um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, conforme divulgado neste documento, são tipicamente inseridos em um vetor de expressão para introdução em células hospedeiras que podem ser usadas para produzir a quanti- dade desejada de anticorpos reivindicados, ou imunoadesinas. Con- sequentemente, em certos aspectos, a invenção fornece vetores de expressão compreendendo polinucleotídeos aqui divulgados e células hospedeiras compreendendo esses vetores e polinucleotídeos.
[340] O termo "vetor" ou "vetor de expressão" é usado neste do- cumento para os fins do relatório descritivo e das reivindicações, para significar vetores usados de acordo com a presente invenção como um veículo para introduzir e expressar um gene desejado em uma célula. Como conhecido dos especialistas na técnica, tais vetores podem ser facilmente selecionados a partir do grupo que consiste em plasmídeos, fagos, vírus e retrovírus. Em geral, os vetores compatíveis com a pre- sente invenção compreenderão um marcador de seleção, sítios de res- trição apropriados para facilitar a clonagem do gene desejado e a ca- pacidade de entrar e/ou replicar em células eucarióticas ou procarióti- cas.
[341] Numerosos sistemas de vetores de expressão podem ser empregados para os fins desta invenção. Por exemplo, uma classe de vetor utiliza elementos de DNA que são derivados de vírus animais, tais como vírus do papiloma bovino, vírus polioma, adenovírus, vírus vaccinia, baculovírus, retrovírus (RSV, MMTV ou MOMLV) ou vírus SV40. Outros envolvem o uso de sistemas policistrônicos com sítios internos de ligação ao ribossomo. Além disso, as células que integra- ram o DNA em seus cromossomos podem ser selecionadas pela intro- dução de um ou mais marcadores que permitem a seleção de células hospedeiras transfectadas. O marcador pode fornecer prototrofia para um hospedeiro auxotrófico, resistência a biocidas (por exemplo, anti- bióticos) ou resistência a metais pesados, como cobre. O gene marca- dor selecionável pode ser diretamente ligado às sequências de DNA a serem expressas ou introduzido na mesma célula por cotransforma-
ção. Elementos adicionais também podem ser necessários para a sín- tese ideal de mRNA. Esses elementos podem incluir sequências de sinal, sinais de emenda, bem como promotores transcricionais, intensi- ficadores e sinais de terminação. Em algumas modalidades, os genes da região variável clonados são inseridos em um vetor de expressão juntamente com os genes da região constante de cadeia pesada e le- ve (tais como genes humanos) sintetizados como discutido acima.
[342] Em outras modalidades, um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento fun- cional de um agente IFN, conforme descrito neste documento, pode ser expresso usando construtos policistrônicos. Em tais sistemas de expressão, vários produtos gênicos de interesse, como agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, podem ser produzidos a partir de um único cons- truto policistrônico. Estes sistemas usam vantajosamente um sítio de entrada de ribossomo interno (IRES) para fornecer níveis relativamen- te altos de polipeptídeos em células hospedeiras eucarióticas. As se- quências IRES compatíveis são divulgadas na Pat. No. 6.193.980, que é aqui incorporada por referência. Os versados na técnica apreciarão que tais sistemas de expressão podem ser usados para produzir efi- cazmente a gama completa de polipeptídeos divulgados no presente pedido.
[343] Mais geralmente, uma vez que um vetor ou sequência de DNA que codifica um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN da presente divulgação foi preparado, o vetor de expressão pode ser introduzido em um célula hospedeira. Ou seja, a célula hospedeira pode ser transformada. A introdução do plasmídeo na célula hospedei- ra pode ser realizada por várias técnicas bem conhecidas dos versa- dos na técnica. Estes incluem, mas não estão limitados a, transfecção
(incluindo eletroforese e eletroporação), fusão de protoplastos, precipi- tação de fosfato de cálcio, fusão celular com DNA envelopado, micro- injeção e infecção com vírus intacto. Vide, por exemplo, Ridgway, A. A. G. “Mammalian Expression Vetors” Capítulo 24.2, pp. 470-472 Vetors, Rodriguez e Denhardt, Eds. (Butterworths, Boston, MA 1988). As célu- las transformadas são cultivadas em condições apropriadas para a produção das cadeias leves e cadeias pesadas e testadas quanto à síntese de proteínas de cadeia pesada e/ou leve. Técnicas de ensaio exemplares incluem ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA), radioimunoensaio (RIA) ou análise de classificação de células ativadas por fluorescência (FACS), imunohistoquímica e semelhantes.
[344] Conforme usado neste documento, o termo "transformação" deve ser usado em um sentido amplo para se referir à introdução de DNA em uma célula hospedeira receptora que muda o genótipo e, consequentemente, resulta em uma mudança na célula receptora.
[345] Junto com essas mesmas linhagens, "células hospedeiras" referem-se a células que foram transformadas com vetores construí- dos usando técnicas de DNA recombinante e codificando pelo menos um gene heterólogo. Em descrições de processos para isolamento de polipeptídeos de hospedeiros recombinantes, os termos "célula" e "cul- tura de células" são usados indistintamente para denotar a fonte de anticorpo, a menos que seja claramente especificado de outra forma. Em outras palavras, a recuperação do polipeptídeo das "células" pode significar tanto a partir de células inteiras giradas para baixo, quanto da cultura de células contendo o meio e as células suspensas.
[346] Em uma modalidade, a linhagem celular hospedeira usada para a expressão de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funci- onal do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN é de origem eucariótica ou procariótica. Em uma modali- dade, a linhagem celular hospedeira usada para a expressão de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agen- te IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN é de origem bac- teriana. Em uma modalidade, a linhagem celular hospedeira usada pa- ra expressão de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN é de origem mamífera; aqueles versados na técnica podem de- terminar linhagens celulares hospedeiras específicas que são mais adequadas para o produto do gene desejado a ser expresso nas mesmas. As linhagens celulares hospedeiras exemplares incluem, mas não estão limitadas a, DG44 e DUXB11 (linhagens de ovário de hamster chinês, DHFR menos), HELA (carcinoma cervical humano), CVI (linhagem de rim de macaco), COS (um derivado de CVI com an- tígeno T SV40), R1610 (fibroblasto de hamster chinês) BALBC/3T3 (fibroblasto de camundongo), HAK (linhagem de rim de hamster), SP2/O (mieloma de camundongo), BFA-1c1BPT (células endoteliais bovinas), RAJI (linfócito humano), 293 (rim humano). Em uma modali- dade, a linhagem de células fornece glicosilação alterada, por exem- plo, afucosilação, do anticorpo expresso a partir dele (por exemplo, PER.C6® (Crucell) ou linhagens celulares CHO knock-out FUT8 (célu- las POTELLIGENTTM) (Biowa, Princeton, NJ)). Em uma modalidade, células NS0 podem ser usadas. As linhagens celulares hospedeiras estão normalmente disponíveis em serviços comerciais, American Tis- sue Culture Collection ou na literatura publicada.
[347] A produção in vitro permite o aumento em escala para dar grandes quantidades dos agonistas de TNFRSF desejados ou um fra- gmento funcional do mesmo, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs. Técnicas para cultivo de células de mamíferos sob condições de cultu- ra de tecidos são conhecidas na técnica e incluem cultura em suspen- são homogênea, por exemplo, em um reator de transporte aéreo ou em um reator agitador contínuo, ou cultura de células imobilizadas ou aprisionadas, por exemplo, em fibras ocas, microcápsulas, em agarose microesferas ou cartuchos de cerâmica. Se necessário e/ou desejado, uma solução de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, pode ser purificado pelos métodos habituais de cromatografia, por exemplo, filtração em gel, cromatografia de troca iônica, cromatografia sobre DEAE-celulose e/ou cromatografia de (imuno) afinidade.
[348] Um ou mais genes que codificam agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs também podem ser expressos em células de não mamíferos, como bactérias ou leveduras ou células vegetais. A este respeito, será apreciado que vários micro-organismos unicelulares não mamíferos, tais como bactérias, também podem ser transformados; isto é, aqueles que podem ser cultivados em culturas ou fermentação. As bactérias, que são suscetíveis à transformação, incluem membros de enterobac- teriaceae, como cepas de Escherichia coli ou Salmonella; Bacillaceae, como Bacillus subtilis; Pneumococo; Streptococcus e Haemophilus influenzae. Será ainda apreciado que, quando expresso em bactérias, agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs podem se tornar parte de corpos de inclusão. Os agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou um fragmento funcional de IFNs devem ser isolados e purificados.
[349] Além de procariotos, micróbios eucarióticos também podem ser usados. Saccharomyces cerevisiae, ou fermento de padeiro co- mum, é o mais comumente usado entre os micro-organismos eucarió- ticos, embora uma série de outras cepas esteja comumente disponível. Para expressão em Saccharomyces, o plasmídeo YRp7, por exemplo, (Stinchcomb et al., Nature, 282: 39 (1979); Kingsman et al., Gene, 7: 141 (1979); Tschemper et al., Gene, 10: 157 (1980)) é comumente usado. Este plasmídeo já contém o gene TRP1 que fornece um mar- cador de seleção para uma cepa mutante de levedura sem a capaci- dade de crescer em triptofano, por exemplo, ATCC No. 44076 ou PEP4-1 (Jones, Genetics, 85:12 (1977)). A presença da lesão trp1 como uma característica do genoma da célula hospedeira de levedura fornece então um ambiente eficaz para detectar a transformação por crescimento na ausência de triptofano. Vetores Terapêuticos
[350] Uma sequência de ácido nucleico que codifica um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, pode ser inserida em um vetor e usada como um vetor terapêutico, por exemplo, um vetor que expressa um TNFRSF agonista ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN. A cons- trução de construtos de expressão funcionais adequados e vetores de expressão terapêuticos é conhecida por aqueles versados na técnica.
[351] Vetores terapêuticos podem ser entregues a um indivíduo, por exemplo, por injeção intravenosa, administração local (vide Paten- te US No. 5.328.470) ou por injeção estereotáxica (vide, por exemplo, Chen et al., PNAS 91: 3054-3057 (1994)). A preparação farmacêutica de um vetor terapêutico pode incluir o vetor em um diluente aceitável.
[352] Um agonista de TNFRSF - ou um fragmento funcional - do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um ácido nu- cleico que codifica o agente IFN, pode ser incorporado em um constru- to de gene para ser usado como parte de um protocolo de terapia para entregar ácidos nucleicos que codificam um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN. Vetores de expressão para transfecção in vivo e expressão de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcio- nal do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agen-
te IFN são fornecidos.
[353] Construtos de expressão de tais componentes podem ser administrados em qualquer veículo biologicamente eficaz, por exem- plo, qualquer formulação ou composição capaz de entregar eficazmen- te a sequência de ácido nucleico do componente às células in vivo, como são conhecidos por aqueles versados na técnica. As aborda- gens incluem, mas não estão limitadas a, inserção da sequência de ácido nucleico em questão em vetores virais incluindo, mas não limita- do a, retrovírus recombinantes, adenovírus, vírus adeno-associado e vírus da herpes simplex-1, plasmídeos bacterianos ou eucarióticos re- combinantes e semelhantes.
[354] Vetores retrovirais e vetores virais adeno-associados po- dem ser usados como um sistema de entrega recombinante para a transferência de sequências de ácido nucleico exógenas in vivo, parti- cularmente em humanos. Tais vetores fornecem entrega eficiente de genes em células e os ácidos nucleicos transferidos podem ser inte- grados de forma estável no DNA cromossômico do hospedeiro.
[355] O desenvolvimento de linhagens celulares especializadas (denominadas "células de empacotamento") que produzem apenas retrovírus defeituosos de replicação aumentou a utilidade dos retroví- rus para terapia gênica, e retrovírus defeituosos são caracterizados para uso em transferência gênica para fins de terapia gênica (para um revisão vide, por exemplo, Miller, Blood 76: 271-78 (1990)). Um retroví- rus com defeito de replicação pode ser empacotado em vírions que podem ser usados para infectar uma célula alvo através do uso de um vírus auxiliar por técnicas padrão. Os protocolos para a produção de retrovírus recombinantes e para a infecção de células in vitro ou in vivo com tais vírus podem ser encontrados em Current Protocols in Molecu- lar Biology, Ausubel, et al., (Eds.) Greene Publishing Associates, (1989), Seções 9.10-9.14, e outros manuais de laboratório padrão.
Exemplos não limitativos de retrovírus adequados incluem pLJ, pZIP, pWE e pEM, que são conhecidos pelos versados na técnica. Exemplos de linhagens de vírus de empacotamento adequadas incluem *Crip, *Cre, *2 e *Am. (vide, por exemplo, Eglitis, et al., Science 230: 1395- 1398 (1985); Danos e Mulligan, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 6460- 6464 (1988); Wilson, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 3014-3018 (1988); Armentano, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87: 6141-6145 (1990); Huber, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 8039-8043 (1991); Ferry, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 8377-8381 (1991); Cho- wdhury, et al., Science 254: 1802-1805 (1991); van Beusechem, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 7640-7644 (1992); Kay, et al., Human Gene Therapy 3: 641-647 (1992); Dai, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89: 10892-10895 (1992); Hwu, et al., J. Immunol. 150: 4104-4115 (1993); Patente US No. 4.868.116; Pat. No. 4.980.286; Pedido PCT WO 89/07136; Pedido PCT WO 89/02 468; Pedido PCT WO 89/05345; e Pedido PCT WO 92/07573).
[356] Em outra modalidade, vetores de entrega derivados de adenovírus são fornecidos. O genoma de um adenovírus pode ser manipulado de modo que codifique e expresse um produto gênico de interesse, mas é inativado em termos de sua capacidade de se replicar em um ciclo de vida viral lítico normal. Vide, por exemplo, Berkner, et al., BioTechniques 6: 616 (1988); Rosenfeld, et al., Science 252: 431- 434 (1991); e Rosenfeld, et al., Cell 68: 143-155 (1992). Os vetores adenovirais adequados derivados da cepa de adenovírus Ad tipo 5 d1324 ou outras cepas de adenovírus (por exemplo, Ad2, Ad3, Ad7 etc.) são conhecidos pelos versados na técnica. Os adenovírus re- combinantes podem ser vantajosos em certas circunstâncias porque eles não são capazes de infectar células que não se dividem e podem ser usados para infectar uma ampla variedade de tipos de células, in- cluindo células epiteliais (Rosenfeld, et al. (1992), supra). Além disso,
a partícula de vírus é relativamente estável e passível de purificação e concentração e, como acima, pode ser modificada de modo a afetar o espectro de infecciosidade. Além disso, o DNA adenoviral introduzido (e o DNA estranho nele contido) não é integrado ao genoma de uma célula hospedeira, mas permanece epissomal, evitando assim possí- veis problemas que podem ocorrer como resultado de mutagênese inserível in situ, onde o DNA introduzido se torna integrado ao hospe- deiro genoma (por exemplo, DNA retroviral). Além disso, a capacidade de transporte do genoma adenoviral para DNA estranho é grande (até 8 quilobases) em relação a outros vetores de entrega (Berkner, et al. (1998), supra; Haj-Ahmand e Graham, J. Virol. 57: 267 (1986)).
[357] Ainda outro sistema de vetor viral útil para a entrega de uma sequência de ácido nucleico que codifica um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, é o vírus adeno-associado (AAV). AAV é um vírus defeituoso de ocorrência natural que requer outro vírus, como um adenovírus ou um vírus da herpes, como um ví- rus auxiliar para uma replicação eficiente e um ciclo de vida produtivo. (Para uma revisão, vide Muzyczka, et al., Curr. Topics in Micro. And Immunol. 158: 97-129 (1992)). É também um dos poucos vírus que podem integrar seu DNA em células que não se dividem e exibe uma alta frequência de integração estável (vide por exemplo, Flotte, et al., Am. J. Respir. Cell. Mol. Biol. 7 : 349-356 (1992); Samulski, et al., J. Virol. 63: 3822-3828 (1989); e McLaughlin, et al., J. Virol. 62: 1963- 1973 (1989)). Vetores contendo tão pouco quanto 300 pares de bases de AAV podem ser empacotados e podem ser integrados. O espaço para DNA exógeno é limitado a cerca de 4,5 kb. Um vetor AAV tal co- mo descrito em Tratschin, et al., Mol. Cell. Biol. 5: 3251-3260 (1985) pode ser usado para introduzir DNA nas células. Uma variedade de ácidos nucleicos foi introduzido em diferentes tipos de células usando vetores AAV (vide por exemplo Hermonat, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 81: 6466-6470 (1984); Tratschin, et al., Mol. Cell. Biol. 4: 2072- 2081 (1985); Wondisford, et al., Mol. Endocrinol. 2: 32-39 (1988); Trat- schin, et al., J. Virol. 51: 611-619 (1984); e Flotte, et al., J. Biol. Chem. 268: 3781-3790 (1993)).
[358] Além dos métodos de transferência virais, métodos não vi- rais também podem ser empregados para causar a expressão de uma sequência de ácido nucleico que codifica um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN no tecido de um assunto. A maioria dos métodos não virais de transferência de genes depende de mecanis- mos normais usados por células de mamíferos para a captação e transporte intracelular de macromoléculas. Em algumas modalidades, os sistemas de entrega não viral dependem de vias endocíticas para a absorção do gene em questão pela célula alvo. Os sistemas de entre- ga exemplares deste tipo incluem sistemas derivados de lipossomas, conjugados de polilisina e envelopes virais artificiais. Outras modalida- des incluem sistemas de injeção de plasmídeo, tais como são descri- tos em Meuli, et al., J. Invest. Dermatol. 116 (1): 131-135 (2001); Co- hen, et al., Gene Ther 7 (22): 1896-905 (2000); ou Tam, et al., Gene Ther. 7 (21): 1867-74 (2000).
[359] Em ambientes clínicos, os sistemas de distribuição podem ser introduzidos em um indivíduo por qualquer um de uma série de métodos, cada um dos quais é familiar na técnica. Por exemplo, uma preparação farmacêutica do sistema de distribuição pode ser introdu- zida sistemicamente, por exemplo, por injeção intravenosa. A transdu- ção específica da proteína nas células alvo ocorre predominantemente a partir da especificidade da transfecção fornecida pelo veículo de en- trega, expressão do tipo de célula ou tipo de tecido devido às sequên- cias regulatórias da transcrição que controlam a expressão do gene receptor, ou uma combinação dos mesmos. Em outras modalidades, a entrega inicial do gene recombinante é mais limitada, sendo a introdu- ção no animal bastante localizada. Por exemplo, o veículo de entrega pode ser introduzido por cateter (vide, Patente U.S. No. 5.328.470) ou por injeção estereotáxica (por exemplo, Chen, et al., PNAS 9 1: 3054- 3057 (1994)).
[360] A preparação farmacêutica do construto terapêutico pode consistir essencialmente no sistema de entrega em um diluente acei- tável, ou pode compreender uma matriz de liberação lenta na qual o veículo de entrega está embutido. Alternativamente, onde o sistema de entrega completo pode ser produzido intacto a partir de células recom- binantes, por exemplo, vetores retrovirais, a preparação farmacêutica pode compreender uma ou mais células que produzem o sistema de entrega. Métodos de Tratamento
[361] Em um aspecto, a invenção fornece métodos de tratamento de um paciente em necessidade do mesmo (por exemplo, um paciente infectado com HBV), compreendendo administrar uma quantidade efi- caz de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo ou uma sequência de ácido nucleico (por exemplo, mRNA) que codifi- ca um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, e uma quantidade eficaz de um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, ou uma sequência de ácido nucleico (por exemplo, mRNA) que codifica um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, conforme divulgado neste documento. Em certas modali- dades, a presente divulgação fornece kits e métodos para o tratamento de distúrbios e/ou sintomas, por exemplo, distúrbios relacionados ao HBV e/ou sintomas relacionados ao HBV, em um indivíduo mamífero em necessidade de tal tratamento. Em certas modalidades exempla- res, o indivíduo é um humano.
[362] Os agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que os codificam, da divulgação atual são úteis em uma série de aplicações diferentes. Por exemplo, em uma modalidade, os agonistas de TNFRSF em questão ou um fragmento funcional do mesmo, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que os codificam, são úteis para reduzir a liberação de HBeAg de uma célula infectada por HBV. Em outra modalidade, os agonistas de TNFRSF em questão ou um fragmento funcional do mesmo, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que os codificam, são úteis para reduzir a transcrição de pgRNA de cccDNA em uma célula infectada por HBV.
[363] Em outra modalidade, os agonistas de TNFRSF em ques- tão ou um fragmento funcional do mesmo, IFNs ou fragmentos funcio- nais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que os codificam, são úteis para reduzir um ou mais sintomas e/ou complicações associadas à infecção por HBV, como aqui descrito (infra).
[364] Em certas modalidades, os agonistas TNFRSF em questão ou um fragmento funcional do mesmo, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que os codificam, são úteis para reduzir um ou mais distúrbios, sintomas e/ou complicações asso- ciadas à infecção por HBV crônico, por exemplo, inflamação crônica do fígado (hepatite crônica), levando à cirrose por um período de vá- rios anos; carcinoma hepatocelular (HCC); desenvolvimento de glome- rulonefrite membranosa (GNM); risco de morte; vasculite necrosante aguda (poliarterite nodosa), glomerulonefrite membranosa e acroder- matite papular da infância (síndrome de Gianotti-Crosti); nefropatia as- sociada a HBV (por exemplo, glomerulonefrite membranosa); distúr- bios hematológicos imunomediados (por exemplo, crioglobulinemia mista essencial, anemia aplástica); e similar.
[365] Em certas modalidades, os agonistas de TNFRSF em ques- tão ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos fun- cionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que os codificam, são úteis para reduzir um ou mais sintomas e/ou complicações associ- adas à infecção por HBV aguda, por exemplo, hepatite viral aguda (que começa com problemas de saúde geral, perda de apetite, náu- seas, vômitos, dores no corpo, febre leve e urina escura e, em segui- da, progride para o desenvolvimento de icterícia, insuficiência hepática fulminante e/ou doença do soro síndrome semelhante); perda de apeti- te; dores articulares e musculares; febre baixa; dor de estômago; náu- sea; vômito; icterícia; estômago inchado; e similar.
[366] Por conseguinte, esta divulgação também refere-se a um método de tratar um ou mais distúrbios, sintomas e/ou complicações associadas à infecção por HBV em um ser humano ou outro animal, administrando a tal humano ou animal uma quantidade eficaz não tóxi- ca de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, ou se- quências de ácido nucleico que os codificam. Um especialista na téc- nica seria capaz, por experimentação de rotina, de determinar qual quantidade eficaz e não tóxica de um agonista de TNFRSF ou um fra- gmento funcional do mesmo e um agente IFN ou um fragmento funci- onal de um agente IFN, ou sequências de ácido nucleico que os codifi- cam, seria com o propósito de tratar infecção por HBV.
[367] Por exemplo, uma quantidade terapeuticamente ativa de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, da presente divulgação pode variar de acordo com fatores como o estágio da do- ença (por exemplo, aguda vs. crônico), idade, sexo, complicações mé- dicas (por exemplo, coinfecção por HIV, condições ou doenças imu- nossuprimidas) e peso do indivíduo e a capacidade do TNFRSF ago-
nista ou um fragmento funcional do mesmo e agente IFN ou um frag- mento funcional do agente IFN para induzir uma resposta desejada no indivíduo. O regime de dosagem pode ser ajustado para fornecer a resposta terapêutica ótima. Por exemplo, várias doses divididas po- dem ser administradas diariamente, ou a dose pode ser proporcional- mente reduzida conforme indicado pelas exigências da situação tera- pêutica.
[368] Em geral, as composições fornecidas na divulgação atual podem ser usadas para tratar profilaticamente células não infectadas ou tratar terapeuticamente quaisquer células infectadas por HBV com- preendendo um marcador antigênico que permite o direcionamento das células infectadas por HBV por um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e um agente IFN ou fragmento funcio- nal de um agente IFN. Composições Farmacêuticas e Administração das Mesmas
[369] Métodos de preparar e administrar agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcio- nais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que os codificam, da divulgação atual a um indivíduo são bem conhecidos ou podem ser facilmente determinados por aqueles versado na técnica usando esta especificação e o conhecimento na técnica como um guia. A via de administração dos agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que os codificam, da presente divulgação podem ser oral, parenteral, por inalação ou tópica. O termo parenteral, conforme usado aqui, inclui administração intravenosa, intra-arterial, intraperito- neal, intramuscular, subcutânea, retal ou vaginal. Embora todas essas formas de administração sejam claramente contempladas como es- tando dentro do escopo da presente divulgação, uma forma de admi- nistração seria uma solução para injeção, em particular para injeção intravenosa ou intra-arterial ou gotejamento. Normalmente, uma com- posição farmacêutica adequada para injeção pode compreender um tampão (por exemplo, acetato, fosfato ou tampão de citrato), um sur- factante (por exemplo, polissorbato), opcionalmente um agente estabi- lizador (por exemplo, albumina humana), etc. Em algumas modalida- des, os agonistas TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, IFNs ou um fragmento funcional de IFNs, ou sequências de ácido nu- cleico que os codificam, podem ser entregues diretamente no sítio da população celular adversa (por exemplo, o fígado), aumentando assim a exposição do tecido doente ao agente terapêutico.
[370] Em certas modalidades, a administração de agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs ou sequências de ácido nucleico que os codificam, conforme descrito neste documento, é sequencial, por exemplo, a ad- ministração de uma dose de agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo ou uma sequência de ácido nucleico que o codifi- ca, é seguido pela administração de uma dose de agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN ou uma sequência de ácido nu- cleico que o codifica, ou administração de uma dose de agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN ou uma sequência de ácido nucleico que o codifica, é seguida pela administração de uma dose de agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo ou uma sequência de ácido nucleico que o codifica.
[371] Em certas modalidades, uma dose de agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e uma dose de agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, ou sequências de ácido nucleico que os codificam, são administradas concomitantemente, por exemplo, em doses separadas administradas próximas em termos de tempo, ou na mesma dose (por exemplo, como uma mistura ou como um Duocina).
[372] As preparações para administração parenteral incluem so- luções aquosas ou não aquosas estéreis, suspensões e emulsões.
Exemplos de solventes não aquosos são propilenoglicol, polietilenogli- col, óleos vegetais, como azeite, e ésteres orgânicos injetáveis, como oleato de etila.
Os veículos aquosos incluem água, soluções alcoóli- cas/aquosas, emulsões ou suspensões, incluindo solução salina e meio tamponado.
Nas composições e métodos da divulgação atual, os veículos farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limita- dos a, 0,01-0,1 M, por exemplo, 0,05 M de tampão de fosfato ou 0,8% de solução salina.
Outros veículos parenterais comuns incluem solu- ções de fosfato de sódio, dextrose de Ringer, dextrose e cloreto de sódio, Ringer com lactato ou óleos fixos.
Os veículos intravenosos in- cluem reforçadores de fluidos e nutrientes, reforçadores de eletrólitos, como aqueles baseados em dextrose de Ringer e semelhantes.
Con- servantes e outros aditivos também podem estar presentes, tais como, por exemplo, antimicrobianos, antioxidantes, agentes quelantes e ga- ses inertes e semelhantes.
Mais particularmente, as composições far- macêuticas adequadas para uso injetável incluem soluções aquosas estéreis (quando solúveis em água) ou dispersões e pós estéreis para a preparação extemporânea de soluções ou dispersões injetáveis es- téreis.
Em tais casos, a composição deve ser estéril e deve ser fluida na medida em que exista fácil seringabilidade.
Deve ser estável nas condições de fabricação e armazenamento e normalmente será pre- servada contra a ação contaminante de micro-organismos, como bac- térias e fungos.
O veículo pode ser um solvente ou meio de dispersão contendo, por exemplo, água, etanol, poliol (por exemplo, glicerol, pro- pilenoglicol e polietilenoglicol líquido e semelhantes) e suas misturas adequadas.
A fluidez adequada pode ser mantida, por exemplo, pelo uso de um revestimento como a lecitina, pela manutenção do tamanho de partícula necessário no caso de dispersão e pelo uso de surfactan-
tes.
[373] A prevenção da ação de micro-organismos pode ser alcan- çada por vários agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal e semelhan- tes. Em muitos casos, os agentes isotônicos serão incluídos, por exemplo, açúcares, poliálcoois, tais como manitol, sorbitol ou cloreto de sódio na composição. A absorção prolongada das composições in- jetáveis pode ser conseguida incluindo na composição um agente que retarda a absorção, por exemplo, monoestearato de alumínio e gelati- na.
[374] Em qualquer caso, soluções injetáveis estéreis podem ser preparadas incorporando um composto ativo (por exemplo, um agonis- ta de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou fragmentos funcionais de um agente IFN, ou uma sequência de ácido nucleico que codifica qualquer deles, por si só ou em combina- ção com outros agentes ativos) na quantidade necessária em um sol- vente apropriado com um ou uma combinação de ingredientes enume- rados aqui, conforme necessário, seguido por esterilização por filtra- ção. Geralmente, as dispersões são preparadas incorporando o com- posto ativo em um veículo estéril, que contém um meio de dispersão básico e os outros ingredientes necessários daqueles enumerados acima. No caso de pós estéreis para a preparação de soluções injetá- veis estéreis, métodos exemplares de preparação incluem secagem a vácuo e liofilização, que produz um pó de um ingrediente ativo mais qualquer ingrediente adicional desejado de uma solução previamente esterilizada por filtração deste. As preparações para injeções são pro- cessadas, colocadas em recipientes, tais como ampolas, sacos, garra- fas, seringas ou frascos e seladas sob condições assépticas de acordo com métodos conhecidos na técnica. Além disso, as preparações po- dem ser embaladas e vendidas na forma de um kit. Tais artigos de manufatura terão tipicamente rótulos ou bulas indicando que as com- posições associadas são úteis para o tratamento de um indivíduo que sofre de infecção por HBV.
[375] Doses eficazes das composições da presente divulgação, para o tratamento das condições relacionadas à infecção por HBV descritas acima variam dependendo de muitos fatores diferentes, in- cluindo meios de administração, sítio alvo, estado fisiológico do paci- ente, se o paciente é humano ou animal, outros medicamentos admi- nistrados e se o tratamento é profilático ou terapêutico. Normalmente, o paciente é um humano, mas mamíferos não humanos, incluindo mamíferos transgênicos, também podem ser tratados. As dosagens de tratamento podem ser tituladas usando métodos de rotina conhecidos pelos versados na técnica para otimizar a segurança e eficácia.
[376] Para imunização passiva com um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, a dosagem pode variar, por exemplo, de cerca de 0,0001 a cerca de 100 mg/kg, e mais geralmente cerca de 0,01 a cerca de 5 mg/kg (por exemplo, cerca de 0,02 mg/kg, cerca de 0,25 mg/kg, cerca de 0,5 mg/kg, cerca de 0,75 mg/kg, cerca de 1 mg/kg, cerca de 2 mg/kg, etc.), de o peso corporal do hospedeiro. Por exemplo, as dosagens podem ser de cerca de 1 mg/kg de peso corpo- ral ou cerca de 10 mg/kg de peso corporal ou dentro da faixa de cerca de 1 a cerca de 10 mg/kg, por exemplo, pelo menos cerca de 1 mg/kg. Doses intermediárias nas faixas acima também se destinam a estar dentro do escopo da divulgação atual. Indivíduos podem ser adminis- trados com tais doses diariamente, em dias alternativos, semanalmen- te ou de acordo com qualquer outro esquema determinado por análise empírica. Um exemplo de tratamento envolve a administração em múl- tiplas dosagens ao longo de um período prolongado, por exemplo, de pelo menos seis meses. Os regimes de tratamento exemplares adicio-
nais implicam a administração cerca de uma vez a cada duas sema- nas ou cerca de uma vez por mês ou cerca de uma vez a cada 3 a 6 meses. Cronogramas de dosagem exemplares incluem cerca de 1 a cerca de 10 mg/kg ou cerca de 15 mg/kg em dias consecutivos, cerca de 30 mg/kg em dias alternados ou cerca de 60 mg/kg semanalmente.
[377] Agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que expressam qualquer um destes, podem ser admi- nistrados em múltiplas ocasiões. Os intervalos entre dosagens únicas podem ser semanais, mensais ou anuais. Os intervalos também po- dem ser irregulares, conforme indicado pela medição dos níveis san- guíneos de agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs no paciente. Alterna- tivamente, agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs ou sequências de ácido nucleico que expressam qualquer um destes podem ser adminis- trados como uma formulação de liberação sustentada, em que caso seja necessária uma administração menos frequente. A dosagem e a frequência variam dependendo da meia-vida dos agonistas de TNFRSF ou de um fragmento funcional do mesmo, IFNs ou fragmen- tos funcionais de IFNs no paciente.
[378] Como discutido anteriormente, um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, da presente divulgação pode ser adminis- trado em uma quantidade farmaceuticamente eficaz para o tratamento in vivo de distúrbios de mamíferos. A este respeito, será apreciado que, conforme divulgado, um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou um fragmento funcional de um agente IFN, será formulado para facilitar a administração e promover a estabilidade do agente ativo.
[379] Uma composição farmacêutica de acordo com a presente divulgação pode compreender um veículo estéril, não tóxico e farma- ceuticamente aceitável, como solução salina fisiológica, tampões não tóxicos, conservantes e semelhantes. Uma quantidade farmaceutica- mente eficaz de um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, um agente IFN ou fragmento funcional de um agente IFN é uma quantidade suficiente para mediar um ou mais de: uma redução da liberação de HBeAg de uma célula infectada por HBV; uma redução da transcrição de pgRNA em uma célula infectada com HBV; e uma estimulação da via de sinalização do agente IFN em uma célula infec- tada. Obviamente, as composições farmacêuticas da presente divul- gação podem ser administradas em doses únicas ou múltiplas para fornecer uma quantidade farmaceuticamente eficaz do agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, agente IFN ou frag- mento funcional do agente IFN.
[380] De acordo com o escopo da presente divulgação, agonistas de TNFRSF (por exemplo, um anticorpo agonístico direcionado contra um membro do TNFRSF, um agonista de TNFRSF solúvel incluindo, mas não limitado ao seu ligante natural), ou um fragmento funcional do mesmo, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que expressam qualquer um deles, podem ser adminis- trados a um humano ou outro animal de acordo com os métodos de tratamento acima mencionados em uma quantidade suficiente para produzir um efeito terapêutico. Os agonistas de TNFRSF ou um frag- mento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que expressam qualquer um deles, podem ser administrados a tal humano ou outro animal em uma forma de dosagem convencional preparada combinando os agonistas de TNFRSF (por exemplo, um anticorpo agonístico dirigido contra um membro do TNFRSF, um agonista de TNFRSF solúvel incluindo, mas não limitado ao seu ligante natural), ou um fragmento funcional do mesmo, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que expressam qualquer um deles, com um veículo ou diluente convencional farmaceuticamente aceitável de acordo com técnicas conhecidas. Será reconhecido por um versado na técnica que a forma e o caráter do veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável são ditados pela quantidade de ingrediente ativo com o qual ele deve ser combinado, a via de administração e outras variáveis bem conhe- cidas. Os versados na técnica apreciarão ainda que um coquetel com- preendendo uma ou mais espécies de agonistas de TNFRSF ou um fragmento funcional dos mesmos, IFNs ou fragmentos funcionais de IFNs, ou sequências de ácido nucleico que expressam qualquer um deles, descrito na presente divulgação pode provar ser eficaz.
[381] Deve ser entendido que os métodos descritos nesta divul- gação não estão limitados a métodos particulares e condições experi- mentais divulgadas neste documento, pois tais métodos e condições podem variar. Também deve ser entendido que a terminologia usada neste documento tem o propósito de descrever modalidades particula- res apenas e não se destina a ser limitante.
[382] Além disso, os experimentos aqui descritos, a menos que indicado de outra forma, usam técnicas convencionais de biologia mo- lecular e celular e técnicas imunológicas dentro da habilidade na técni- ca. Essas técnicas são bem conhecidas do trabalhador especializado e são totalmente explicadas na literatura. Vide, por exemplo, Ausubel, et al., Ed., Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons, Inc., NY, NY (1987-2008), incluindo todos os suplementos, Molecular Cloning: A Laboratory Manual (Quarta Edição) por MR Green e J. Sambrook e Harlow et al., Antibodies: A Laboratory Manual, Capítulo 14, Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor (2013, 2ª edi- ção).
[383] A menos que definido de outra forma, os termos científicos e técnicos usados neste documento têm os significados que são co- mumente compreendidos por aqueles versados na técnica. No caso de qualquer ambiguidade latente, as definições fornecidas aqui têm pre- cedência sobre qualquer dicionário ou definição extrínseca. A menos que exigido de outra forma pelo contexto, os termos singulares devem incluir pluralidades e os termos plurais devem incluir o singular. O uso de “ou” significa “e/ou” a menos que indicado de outra forma. O uso do termo "incluindo", bem como outras formas, como "inclui" e "incluído", não é limitativo.
[384] Geralmente, a nomenclatura usada em conexão com célula e tecido de cultura, biologia molecular, imunologia, microbiologia, ge- nética e proteína e química de ácido nucleico e hibridização aqui des- critas são bem conhecidas e comumente usadas na técnica. Os méto- dos e técnicas fornecidos neste documento são geralmente realizados de acordo com métodos convencionais bem conhecidos na técnica e conforme descrito em várias referências gerais e mais específicas que são citadas e discutidas ao longo da presente especificação, a menos que indicado de outra forma. As reações enzimáticas e as técnicas de purificação são realizadas de acordo com as especificações do fabri- cante, como comumente realizado na técnica ou conforme descrito neste documento. As nomenclaturas usadas em conexão com, e os procedimentos de laboratório e técnicas de, química analítica, química orgânica sintética e química medicinal e farmacêutica aqui descritos são aqueles bem conhecidos e comumente usados na técnica. As téc- nicas padrão são usadas para sínteses químicas, análises químicas, preparação farmacêutica, formulação e distribuição e tratamento de pacientes.
[385] O conteúdo dos artigos, patentes e pedidos de patentes e todos os outros documentos e informações disponíveis eletronicamen-
te mencionados ou citados aqui, são incorporados por referência em sua totalidade na mesma medida como se cada publicação individual fosse específica e individualmente indicada a ser incorporada por refe- rência. Os requerentes se reservam o direito de incorporar fisicamente a este pedido todo e qualquer material e informação de qualquer um desses artigos, patentes, pedidos de patente ou outros documentos físicos e eletrônicos.
[386] Embora a presente invenção tenha sido descrita com refe- rência às modalidades específicas da mesma, deve ser entendido por aqueles versados na técnica que várias alterações podem ser feitas e equivalentes podem ser substituídos sem se afastar do verdadeiro es- pírito e escopo da invenção usando esta divulgação como um guia. Tendo agora descrito certas modalidades em detalhes, o mesmo será mais claramente entendido por referência aos exemplos a seguir, que são incluídos para fins de ilustração apenas e não se destinam a ser limitantes.
EXEMPLO I Controle Sinérgico de Infecção por HBV por Citocinas Liberação de HBeAg
[387] O efeito de IFNβ e CD40L na infecção por HBV em hepató- citos primários foi investigado. Células de hepatócitos humanos primá- rios (PHH) foram semeadas em placas de 24 poços (~ 350.000 célu- las/poço) em meio William’s E GlutaMAX suplementado com 10% de soro fetal de bezerro (FCS), insulina e hidrocortisona + penicili- na/estreptomicina. Quatro horas depois, as células foram enxaguadas e o meio foi trocado novamente no dia seguinte. As células foram in- fectadas 24 horas depois com 1.000 equivalentes de genoma viral (vge)/célula na presença de PEG 8000 a 4%. 16 horas após a infec- ção, as células foram lavadas 3 vezes com PBS. Dois dias após a in- fecção, as células foram mantidas não estimuladas, estimuladas com
IFNα (Pbl assay Science #11100-1, 1000U/ml), IFNβ (Ensaio Pbl Sci- ence #1349872, 100U/ml), CD40L (Enzo #ALX-522-110, 150 ng/ml) ou uma combinação de CD40L com IFNα ou IFNβ. Quatro dias depois, o meio foi removido e as células foram estimuladas novamente nas mesmas condições. Dois dias após a segunda estimulação, os sobre- nadantes da cultura foram coletados e mantidos a -80 ºC. Os níveis de antígeno e HBV (HBeAg) no sobrenadante da cultura celular foram medidos usando ELISA conforme descrito pelo fabricante e os resulta- dos expressos como Unidade Chinesa Nacional (HBeAg CLIA 96T/K: CL0312-2 Autobio).
[388] IFNα, usado como referência, reduziu o nível de Hbe secre- tado em cerca de 60%. O IFNβ foi mais potente e reduziu a liberação de Hbe em 85%. Curiosamente, CD40L sozinho não foi muito ativo, mas potencializou o efeito de IFNα ou IFNβ. A combinação CD40L- IFNβ atingiu 95% de inibição (Figuras 1A e 1B). Consequentemente, uma combinação de IFNβ e CD40L reduziu sinergicamente a liberação de HBeAg. Transcrição de pgRNA
[389] O RNA pré-genômico de HBV (pgRNA) é transcrito a partir do cccDNA seguido pela transcrição reversa para formar o DNA circu- lar relaxado (RcDNA) que é encapsidado para formar novos vírions. Assim, o pgRNA é um intermediário chave no ciclo de vida do vírus.
[390] O efeito de IFNβ e CD40L na transcrição de pgRNA de cccDNA foi avaliado em células PHH (Figuras 2A e 2B).
[391] Seis dias após a infecção, as células PHH foram mantidas não estimuladas, estimuladas com IFNb (ensaio pbl #13498723, 100U/ml), CD40L (Enzo #ALX-522-110, 150ng/ml) ou combinação de CD40L e IFNb.
[392] Dois dias após a estimulação, RNA total foi extraído de cé- lulas PHH infectadas com HBV usando o kit NucleoSpin® 96 RNA
(Macherey-Nagel, 740741.4) de acordo com as instruções do fabrican- te. Os modelos de cDNA foram sintetizados e obtidos após a transcri- ção reversa usando o kit de síntese de cDNA SuperScript® VILOTM (Invitrogen). qPCR foi realizada usando o TaqMan® Fast Universal PCR MasterMix (Applied Biosystems) com os seguintes iniciadores e sonda para pgRNA: (direto: GCCTTAGAGTCTCCTGAGCA (SEQ ID NO: 34) e reverso: GAGGGAGTTCTTCTTCTAGG (SEQ ID NO: 35) e AGTGTGGA TTCGCACTCCTCCAGC (SEQ ID NO: 36) como uma sonda). O gene GUSB (Hs99999908-m1), foi selecionado como gene de manutenção para o ensaio. As placas foram executadas no Quan- tStudio 12K Flex (Applied Biosystems). Os resultados são expressos em vezes alteração RQ [2-ΔΔCt]. RQ: valor de quantificação relativo.
[393] Os resultados indicam que 2 dias de tratamento com IFNβ foram suficientes para reduzir em 64% a quantidade de pgRNA nas células. Nessas condições, CD40L sozinho não teve efeito. Surpreen- dentemente, no entanto, CD40L reforçou o efeito do IFNβ para atingir 88% de inibição. Efeito Sinérgico nas Vias de Sinalização
[394] O efeito de IFNβ e CD40L nas vias de sinalização foi de- terminado em células PHH (Figuras 3A e 3B). Os efeitos na via de si- nalização de IFN foram avaliados pela detecção da liberação do bio- marcador CXCL10 (Figura 3A), e os efeitos na via inflamatória foram avaliados pela detecção da liberação de IL8 (Figura 3B). IFNβ e CD40L foram determinados para aumentar sinergicamente a sinaliza- ção na via IFN, mas não aumentaram a sinalização na via inflamatória.
[395] Outros membros da família TNF foram testados com vários IFNs (Figuras 4A e 4B). As células de hepatoma HepaRG foram se- meadas em placas de 24 poços (aproximadamente 250.000 célu- las/poço) em meio William’s E GlutaMAX suplementado com 10% de FCS, insulina e hidrocortisona + P/S. Seis horas depois, as células fo-
ram enxaguadas e mantidas não estimuladas ou estimuladas durante a noite com as citocinas indicadas (TWEAK (Enzo, ALX-522-021, 1 µg/ml final) + Anti-Flag-M2 monoclonal de camundongo (Sigma, F- 3165, 1 µg/ml final], LTα3 (Enzo, ALX-522-034, 1 µg/ml final), CD40L (Enzo #ALX-522-110, 150ng/ml final), CD137L (Enzo, ALX-522-111, 1 µg/ml final); IFNβ-1a (ensaio pbl #13498723, 100U/ml final], IFNγ (Mil- lipore #IF-002, 20ng/ml), IL28 e IL29 R&D). O sobrenadante foi então coletado e CXCL10 foi quantificado por ELISA, conforme descrito pe- los fabricantes (BioLegend 439904).
[396] Os resultados indicaram que, como CD40L, LTα3 e Tweak (mas não 4 1-BB/CD137L que é um controle negativo porque seu re- ceptor não é expresso), sinergicamente aumentaram a liberação de CXCL10 induzida não apenas por IFNβ, mas também pelo interferon Tipo II (IFNγ) (Figura 4A). Além disso, a coestimulação de hepatócitos com CD40L e interferons tipo III (IL28 e IL29) também foi capaz de aumentar sinergicamente a via do interferon (Figura 4B).
[397] Juntos, esses resultados indicam que a sinergia resulta da ativação de vias comuns ao TNFRSF e aos Receptores de IFN.
[398] CD40 poderia ser estimulado de diferentes maneiras, por CD40L solúvel (uma forma trimérica - 1 µg/ml), por CD40L de mem- brana (que é mimetizado aqui pela forma hexamérica de CD40L - 1 µg/ml) e também por anticorpos anti-CD40 agonístico (CP-870.893, Pfizer/Roche - 1 µg/ml).
[399] Para entender se a sinergia poderia ser induzida, as células HepaRG foram mantidas não estimuladas ou estimuladas durante a noite com as citocinas ou anticorpos indicados, isoladamente ou na presença de IFNβ. O sobrenadante foi então coletado após estimula- ção durante a noite e CXCL10 quantificado por ELISA como descrito anteriormente.
[400] Os resultados indicaram que, exceto para IFNβ, nenhum dos estímulos foi capaz de induzir CXCL10 como um único agente. No entanto, a adição de IFNβ a CD40L trimérico, CD40L hexamérico ou um anticorpo anti-CD40 agonístico aumentou a liberação de CXCL10 (Figura 5). Esses resultados mostram que vários mecanismos para ativar CD40 levam ao aumento da via IFNβ.
[401] Os efeitos sinérgicos de CD40L e IFNβ podem ter efeitos variados em diferentes vias de sinalização. As células de hepatoma HepaRG foram semeadas em placas de 24 poços (aproximadamente
250.000 células/poço) em meio William’s E GlutaMAX suplementado com 10% de FCS, insulina e hidrocortisona + P/S. Seis horas mais tar- de, as células foram enxaguadas e mantidas não estimuladas ou esti- muladas com uma dose eficaz de CD40L na presença ou ausência de IFNβ (100U/ml). CXCL10 e IL8 e foram quantificados por ELISA a par- tir de sobrenadantes coletados após estimulação durante a noite. A quantificação de CXCL10 e IL8 foi realizada conforme descrito pelos fabricantes. Para CXCL10: BioLegend 439904 - Para IL8: Conjunto ELISA iL8 humano pronto: eBiosciences Ref 88-8086-88.
[402] Os resultados indicaram que o CD40L aumentou a via IFN, começando com 1 ng/ml de CD40L (Figura 6A). Curiosamente, IL8, que é induzida por CD40L de uma forma dependente da dose, não foi aumentada, mas sim reduzida por IFNβ (Figura 6B). Esses resultados indicam que a coestimulação de hepatócitos com CD40L e IFNβ esti- mula sinergicamente a via IFN enquanto reduz a liberação da citocina inflamatória IL8.
[403] A sinergia de CD40L e IFNβ foi ainda testada para determi- nar se a sinergia ocorreu no nível do mRNA ou no nível pós-tradução, e se outros genes estimulados por interferon também foram reforçados pela combinação (diferente de CXCL10).
[404] Para este propósito, a análise de RNAseq foi realizada em células HepaRG. As células HepaRG foram estimuladas com CD40L,
IFNβ ou uma combinação de ambas as citocinas de forma cinética de 30 minutos a 24 horas. As células foram coletadas, lavadas e peletiza- das. Os péletes celulares foram lisados por adição de tampão QIAzol. RNA foi extraído com um kit RNeasy (Qiagen), quantificado por Xpose (ng/μl) e qualidade, integridade (RIN) foi controlada por um bioanalisa- dor Agilent. As bibliotecas foram produzidas usando o kit TruSeq Stranded Total RNA LT (com Ribo-Zero Gold) da Illumina e o sequen- ciamento de RNA foi feito no aparelho NextSeq 500 usando o kit Nex- tSeq 500 High Output.
[405] A análise de mRNA de CXCL10 indicou que sua expressão foi induzida por IFNβ e foi sinergicamente induzida pela combinação começando 2 horas após a estimulação (Figura 7A). Curiosamente, o efeito sinérgico foi observado para outros genes estimulados por inter- feron, como CXCL9 e CXCL11 (Figuras 7C e 7D).
[406] A análise de mRNA de CXCL8/IL8 indicou que ele foi ape- nas induzido por CD40L e a combinação reduziu sua expressão (Figu- ra 7B). Essa redução também foi observada com outras quimiocinas induzidas por CD40L, como CXCL3 ou CCL20 (Figuras 7E e 7F).
[407] Juntos, esses resultados confirmam que a coestimulação de hepatócitos com CD40L e IFNβ impulsiona a via IFN, mas não a via inflamatória induzida por CD40L.
[408] O reforço da via IFN também foi observado em células PHH. As células foram plaqueadas em placas de 96 poços (aproxima- damente 350.000 células/poço) em meio William’s E GlutaMAX suple- mentado com 10% de FCS, insulina e hidrocortisona + P/S. 24 horas depois, as células foram enxaguadas, o meio foi trocado e Matrigel foi adicionado. No dia seguinte, as células foram infectadas ou não com
1.000 equivalentes do genoma viral (vge)/célula na presença de PEG 8000 a 4%. 16 horas após a infecção, as células foram lavadas 3 ve- zes com PBS, foram mantidas não estimuladas (NS), estimuladas com
IFNβ (ensaio de pbl #1349872, 100U), CD40L (Enzo #ALX-522-110, 150 ng/ml) ou uma combinação de CD40L e IFNβ. 3 dias depois (d3), o meio foi coletado e as células foram estimuladas novamente nas mesmas condições. 4 dias depois, após a segunda estimulação (d7), os sobrenadantes da cultura foram coletados novamente e a liberação de CXCL10 foi avaliada por AlphaLISA hCXCL10: Perkin Elmer: AL259F.
[409] Os resultados indicaram que IFNΒ, mas não CD40L, indu- ziu CXCL10 em hepatócitos primários e coestimulação com ligante CD40L reforçou sua liberação após uma ou duas estimulações e em células infectadas com HBV ou não infectadas (Figura 8).
[410] Membros da família TNF diferentes de CD40L podem traba- lhar sinergicamente com IFNβ. Os construtos foram projetados para expressar a parte extracelular de Tweak humano ou LIGHT humano fundido com a região Fc de IgG1 humano (Ig-Tweak, SEQ ID NO: 18 e Ig-Light, SEQ ID NO.19, respectivamente). Essas fusões foram clona- das em um vetor de expressão. Após a transfecção em células HEK, os sobrenadantes foram coletados e usados para estimular células HepaRG como descrito anteriormente. Como controles, as células fo- ram transfectadas com um vetor vazio ou com um plasmídeo que codi- fica para IFNβ. Após estimulação durante a noite, os sobrenadantes foram coletados para avaliação de CXCL10. Os resultados indicaram que IFNβ sozinho, mas não LIGHT ou TWEAK sozinho, foi capaz de induzir a liberação de CXCL10. Esta liberação foi reforçada quando as células foram coestimuladas com IFNβ e TWEAK (Figura 9A) ou LIGHT (Figura 9B). Esses resultados também indicaram que tais com- binações também poderiam desempenhar um papel importante no aumento sinérgico da resposta imune inata anti-HBV em hepatócitos.
[411] Para gerar proteínas a serem usadas para demonstrar ain- da os efeitos sinérgicos do agonismo de TNFR e tratamento com IFN em células infectadas com HBV, Ig-Tweak (SEQ ID NO: 18) e Ig-Light (SEQ ID NO: 19) foram produzidos. Após purificação em colunas de proteína A, a atividade dessas proteínas foi avaliada em um efeito de dose em células duplas A549 (InvivoGen, Catálogo #a549d-nfis), que expressam naturalmente os receptores LTbR e TweakR. Estas células são projetadas para monitorar a ativação da via NFkB quantificando a atividade do gene repórter SEAP, secretado no sobrenadante, usando QUANTI-Blue™ (um reagente de detecção SEAP (QUANTI-Blue™ rep-qb1 InvivoGen)). Resultados indicam que ambas as moléculas ati- vam a via NFkB de uma maneira dependente da dose (Fig. 9C e Fig. 9D).
[412] Proteínas Ig-Tweak (SEQ ID NO: 18) e Ig-Light (SEQ ID NO: 19) foram então avaliadas em combinação com IFNb em hepató- citos primários infectados por HBV, conforme descrito anteriormente. As células foram infectadas, mantidas sem tratamento (NT), tratadas com IFNb (100U), Ig-Light (1µg/ml) ou Ig-Tweak (1µg/ml) ou com uma combinação de IFNb (100U) + Ig-Light (1µg/ml)) ou IFNb (100U) + Ig- Tweak (1 µg/ml). Os resultados mostram que tanto Ig-Tweak (Fig. 9E) quanto Ig-Light (Fig. 9F) foram capazes de aumentar o efeito antiviral induzido por IFNb.
[413] O uso de uma única molécula para eliciar os efeitos sinérgi- cos da combinação de CD40L e IFNβ foi investigado. Para este fim, três Duocinas foram projetadas e clonadas em pCDNA3. IFNβ (no N- terminal) foi ligado ao domínio extracelular de CD40L (C-terminal) por um ligante que compreende a parte Fc de IgG1 humana (IFNβ-Ig- CD40L ou SEQ ID NO: 9), usando um ligante Gly -Ser-Thr (IFNβ- CD40L ou SEQ ID NO: 10), ou um ligante compreendendo um domínio de zíper de leucina (IFNβ-LZ-CD40L ou SEQ ID NO: 11) (Vide Tabela 3). Os construtos foram transitoriamente transfectados em células HEK. 48 horas após a transfecção, o sobrenadante foi coletado e adi-
cionado em células HEK-Blue™ CD40L (InvivoGen Cat. #: Hkb-cd40) ou células HEK-Blue™ IFN-α/β (InvivoGen, Cat. #: Hkb-ifnab). Estas células são projetadas especificamente para monitorar, respectiva- mente, a ativação da via NFκB por CD40L ou da via JAK-STAT induzi- da por IFNs tipo I. Após estimulação, a expressão do gene repórter SEAP (sob o controle dos promotores NFκB ou JAK/STAT) foi detec- tada. SEAP foi secretado no sobrenadante e detectado usando QUANTI-Blue™ (um reagente de detecção SEAP (QUANTI-BlueTM rep-qb1 InvivoGen)).
[414] Os resultados indicaram que as células repórter HEK-Blue- CD40L (Figura 10A), mas não as células repórter HEK-Blue-IFN (Figu- ra 10B), foram capazes de responder ao CD40L recombinante. Ape- nas as células repórter HEK-Blue-IFN respondem ao IFNβ. Curiosa- mente, a estimulação dessas células com meio coletado de células transfectadas com HEK indicou que todas as Duocinas foram capazes de estimular ambas as células repórter. Como controles negativos, o sobrenadante das células transfectadas com o vetor vazio não estimu- lou as células, e o sobrenadante das células transfectadas com IFNβ só foi capaz de estimular células repórter HEK-Blue-IFN.
[415] Os resultados indicaram que as fusões de CD40L-IFNβ, independentemente do ligante, ainda estavam ativas em seus respec- tivos receptores.
[416] As moléculas de Duocina foram então testadas em células de hepatócitos não repórteres (HepaRG) e a liberação de CXCL10 foi avaliada. Para este fim e além das três Duocinas mencionadas acima, duas outras Duocinas foram projetadas e clonadas em pCDNA3. IFNβ (no N-terminal) foi ligado ao domínio extracelular de TWEAK (C- terminal) por um ligante compreendendo a parte Fc de IgG1 humana (IFNβ-Ig-TWEAK ou SEQ ID NO: 12), IFNβ (no N-terminal) foi ligado ao domínio extracelular de LIGHT (C-terminal) por um ligante compre-
endendo a parte Fc de IgG1 humana (IFNβ-Ig-LIGHT ou SEQ ID NO: 15), ou por um ligante compreendendo um zíper de leucina (IFNβ-LZ- LIGHT ou SEQ ID NO: 17) (Vide Tabela 3). Os sobrenadantes coleta- dos de células transfectadas com HEK foram usados para estimular células de hepatócitos (HepaRG). Após estimulação durante a noite, CXCL10 foi avaliado no sobrenadante por ELISA. Os resultados indi- cam que todas as Duocinas são capazes de induzir a liberação de CXCL10 e esta indução é aumentada em comparação com a estimu- lação com IFNβ sozinho (Figuras 11A, 12 e 13). Curiosamente, quan- do a estimulação foi realizada na presença de um anticorpo antagonis- ta anti-CD40L (mabg-h40l-3, InvivoGen) que neutraliza a ação do CD40L, a liberação de CXCL10 foi altamente reduzida (Figura 11B). Isso confirma que o CD40L dentro da Duocina ainda é capaz de siner- gizar com o IFNβ para aumentar a via IFN.
[417] Para avaliar o efeito de uma proteína de fusão compreen- dendo interferon tipo I e CD40L, uma duocina codificando IFNa (termi- nal amino) e CD40L (terminal carbóxi) ligado por um ligante compre- endendo a parte hu-IgG1-Fc (IFNa-huIgG1-hu-CD40L; SEQ ID NO: 25) foi construída. As células HEK foram transitoriamente transfecta- das e as proteínas purificadas em colunas de proteína A. As proteínas foram avaliadas em células HEK-Blue™ CD40L (Fig. 19 A; InvivoGen Cat. #: Hkb-cd40) ou células HEK-Blue™ IFN-α/β (Fig 19B; InvivoGen, Cat. #: Hkb-ifnab) conforme descrito anteriormente. Os resultados indi- cam que a duocina é capaz de induzir a liberação de SEAP de uma maneira dependente da dose em células repórter CD40 (Fig. 19 A) e IFNa/b (Fig. 19 B), demonstrando que os domínios CD40L e IFN são ativos.
[418] A duocina foi então avaliada em hepatócitos humanos pri- mários infectados por HBV (Fig. 19C), conforme descrito anteriormen- te. As células foram infectadas e depois mantidas sem tratamento
(NS), tratadas com IFNa recombinante (ensaio pbl #11100-1, 100U), megaCD40L (Enzo #ALX-522-110, 100ng/ml) ou com uma combina- ção de ambas as moléculas. Paralelamente, as células foram tratadas com a duocina em um efeito de dose. Os resultados mostram que CD40L aumenta o efeito antiviral induzido por IFNa e que a duocina é altamente ativa na infecção por HBV, pois reduziu a liberação de Hbe de uma maneira dependente da dose com um IC50 em torno de 3 ng/ml.
EXEMPLO II Modelos de Camundongos Quiméricos de Fígado Humano
[419] Como o único alvo celular natural da infecção e replicação por HBV é o hepatócito humano, o modelo de camundongo quimérico de fígado humano é adequado para estudar a infecção por HBV in vivo e para avaliar agentes hospedeiros antivirais diretos e dirigidos por hepatócitos (Dandri et al. Best Pract Res Clin Gastroenterol. Jun 2017; 31 (3): 273-279). Tal modelo é baseado em dois requisitos: 1) hepató- citos endógenos murinos são danificados para criar o espaço para os hepatócitos transplantados reconstituírem o fígado de camundongo e 2) a resposta imune do hospedeiro é abolida para permitir a sobrevi- vência dos hepatócitos xenogênicos transplantados.
[420] Vários camundongos quiméricos foram desenvolvidos para estudar a patogênese do HBV e terapias potenciais (Giersch K et al. Sci Rep. 16 Jun 2017; 7 (1): 3757; Tsuge et al. Virus Antimicrob Agents Chemother. Jun 2017; 61 ( 6): e00183-17; Bissig et al. J Clin Invest. Março de 2010; 120 (3): 924-30; e Kosaka et al. Biochem Bi- ophys Res Commun. 8 de novembro de 2013; 441 (1): 230-5). Os ca- mundongos uPA-SCID transplantados com hepatócitos humanos es- tão disponíveis comercialmente (KMT Hepatech, Inc., Edmonton, Ca- nadá).
[421] Modelos de camundongos quiméricos de fígado humano podem ser usados para testar o IFNβ-CD40L aqui descrito. Modelos de camundongos quiméricos de fígado humano têm vários recursos úteis. Os camundongos uPa-SCID são altamente imunodeficientes, com o gene ativador do plasminogênio do tipo uroquinase (uPA) de camundongo sob o controle do intensificador/promotor de albumina de camundongo (Giersch K et al. E Tsuge et al.). Os camundongos FRG são altamente imunodeficientes, tendo Fah -/- knock-out para fumarila- cetoacetato hidrolase (Bissig et al.). Os camundongos TK-NOG são altamente imunodeficientes e expressam um transgene da timidina quinase do vírus da herpes Simplex-1 (HSVtk) conduzido pelo intensi- ficador/promotor da albumina de camundongo em seu fígado) (Kosaka et al.).
[422] Logo após o nascimento para camundongos uPA-SCID ou após indução de danos aos hepatócitos murinos (remoção à base de 2-(2-nitro-4-trifluoro-metil-benzoil)-1,3 ciclohexanodiona (NTBC) para camundongos FRG ou injeção de Ganciclovir para camundongos TK- NOG), a injeção intraesplênica de hepatócitos humanos primários é realizada para repovoamento de fígado de hepatócitos humanos.
[423] O nível de quimerismo pode ser monitorado pela determi- nação dos níveis de albumina sérica humana (HSA) e/ou α1- antitripsina humana (hAAT), que podem variar de 20% a 70% depen- dendo do modelo e da variabilidade interindividual. Após um período de 6 a 8 semanas, os camundongos podem ser infectados com HBV natural e todo o ciclo de vida viral é iniciado, incluindo a entrada, a formação de cccDNA e a replicação e disseminação do vírus. Este modelo de camundongo quimérico de fígado humano também permite o estudo dos efeitos antivirais diretos, devido ao estado de imunodefi- ciência desses camundongos, das drogas humanas, usando várias leituras virais, incluindo níveis e modulação de cccDNA. Exemplo III
Modelo de Vírus AAV/HBV Quimérico
[424] Os efeitos sinérgicos de CD40L em combinação com IFNβ foram determinados em um modelo de camundongo in vivo por ensaio de liberação de CXCL10 no soro. Para esse efeito, camundongos C57/B6J foram injetados com 106 Unidades de IFNβ murino (8234- MB/CF), 100 µg de CD40L (ALX-52-120-000) ou a sua combinação. Um grupo de camundongos foi injetado com 50 µg de LPS como con- trole positivo. Isso demonstra que, quando administrado in vivo em camundongos não infectados, a combinação potencializou sinergica- mente a via IFN, conforme mostrado no nível plasmático CXCL10 (Fi- gura 16). CXCL10 será usado como um biomarcador farmacodinâmico para definir o regime de tratamento ideal (doses e frequência de admi- nistração).
[425] Camundongos transduzidos com AAV/HBV são baseados na entrada de HBV mediada por vetor viral em hepatócitos murinos. Partículas virais de AAV são injetadas por via intravenosa em camun- dongos imunocompetentes, e as partículas entregam o genoma do HBV diretamente nos hepatócitos. Muitas células infectadas expres- sam o antígeno HBV c (HBc), refletindo que a replicação do HBV ocor- re nessas células. Essa replicação viral é iniciada logo após a infec- ção, conforme demonstrado pelos níveis de antígenos HBV e e s (HBe e HBs) no plasma que já estão elevados e em um platô 21 dias após a infecção. O nível de DNA do HBV circulante também é muito alto, re- fletindo a produção de vírions. Este estágio de replicação alta e estável recapitula a fase imunotolerante observada em pacientes (Dion et al. (2013) J Virol. May; 87 (10): 5554-63 e Yang et al. (2014) Cell Mol Immunol. Jan; 11 (1): 71-8). Um trabalho recente demonstrou que to- dos os intermediários virais estão presentes neste modelo, incluindo a produção de cccDNA, como mostrado no Southern blot (Lucifora et al. (2017) Antiviral Res. Set; 145: 14-19). A quantificação deste cccDNA permanece difícil e os protocolos ainda estão em otimização. Id.
[426] O modelo AAV/HBV imunocompetente descrito aqui permi- te o estudo da modulação imunológica e efeitos antivirais diretos da combinação IFNβ-CD40L. Nesse caso, as leituras serão os parâme- tros virais e também a produção específica do HBV Ag-Anticorpo, que são os mesmos parâmetros usados na clínica.
[427] Um protocolo padrão é o seguinte. Todos os experimentos in vivo são feitos de acordo com os regulamentos franceses e euro- peus sobre bem-estar animal e recomendações do Serviço de Saúde Pública, e todos os protocolos são revisados e aprovados pelo comitê institucional de cuidado animal da Sanofi. Todos os animais são aloja- dos em um ambiente livre de patógenos específicos nas instalações de animais da Sanofi, Marcy l’Etoile, França. Camundongos fêmeas C57BL6/J de oito semanas de idade (Charles River, Les Oncins, Saint- Germain Nuelles, França) recebem uma injeção intravenosa de 5 x 1010 genomas virais/camundongo de partículas virais AAV8-HBV. Após 28 dias após a injeção, os camundongos são atribuídos aleatoriamen- te, usando os níveis plasmáticos de HBs-Ag, nas diferentes coortes de tratamento. Durante o período de tratamento, são realizadas coletas de sangue semanais para monitoramento dos parâmetros virais circu- lantes (HBV-Ag e DNA). (Vide Figuras 14A-14B e 15.) Após o período de tratamento, geralmente entre 2 a 4 semanas, os camundongos são sacrificados, o sangue é coletado e pedaços de fígado são congelados em nitrogênio líquido e mantidos a -80 ºC antes do processamento posterior. Os níveis de antígeno de HBV (HBs, Hbe) são avaliados por ELISA (kit AutoBio de acordo com as instruções do fabricante (Auto- Bio, China)). A carga viral no soro e no fígado é avaliada por PCR. O nível de pgRNA de HBV no fígado é medido por qRT-PCR. Extração de DNA de biópsias hepáticas, seguida por digestão tripla (enzimas Xma1, Xho1 e T5), conforme descrito por Lucifora et al. permitiria a quantificação de cccDNA.
[428] Dependendo do modelo, camundongos AAV/HBV ou Hu- Hep, quatro a oito semanas após a infecção dos camundongos com HBV, os camundongos serão tratados 3 vezes por semana com veícu- lo, IFNβ, CD40L (ou anticorpo agonístico anti-CD40, FKG450) e uma combinação de ambos os agentes. Amostras de sangue serão coleta- das uma vez por semana e, no ponto final, sangue e tecidos hepáticos serão coletados. Diferentes leituras serão avaliadas, incluindo parâme- tros de HBV (Hbe Ag e Hbs Ag circulantes, cccDNA e pgRNA no fíga- do), bem como parâmetros do hospedeiro, incluindo liberação de cito- cinas, seroconversão e enzimas hepáticas (por exemplo, AST e ALT). Exemplo IV Modelo de Vírus AAV/HBV Quimérico
[429] Para realizar o experimento in vivo, ferramentas murinas compatíveis com o tratamento crônico foram geradas. Molécula mI- FNb-Fc-mIgG1 (SEQ ID NO: 20) e mIgG1-Fc-mCD40L (SEQ ID NO: 21), bem como moléculas Fc-mIgG1 (SEQ ID NO: 22) foram projeta- das e clonadas em um vetor de expressão. Após a superexpressão transitória, as proteínas foram purificadas usando colunas de proteína A e, em seguida, testadas de uma maneira dependente da dose em células repórter para demonstrar sua atividade. mIFNb-Fc-mIgG1 foi testado em RAW-Dual™ IRF (via IFN) e macrófagos de camundongo repórter MIP-2 (NF-kB) (Invivogen, Catálogo #rawd-ismip). Após a es- timulação, a expressão do gene repórter lucia (sob o controle dos promotores JAK/STAT) foi detectada. Lucia foi secretado no sobrena- dante e detectado usando QUANTI-luc™ (um reagente de detecção de lucia (QUANTI-Luc™ rep-qlc1, InvivoGen)). Os resultados mostram que mIFNb-Fc-mIgG1 foi ativo e induziu de uma maneira dependente da dose a ativação da via IRF (Fig. 17A). A molécula Fc-mIgG1- mCD40L foi testada em células HEK-Blue-CD40 conforme descrito an-
teriormente. Os resultados mostram que Fc-mIgG1-mCD40L foi ativo e induzida de uma maneira dependente da dose a liberação de SEAP (Fig. 17B).
[430] Para demonstrar sua respectiva biodisponibilidade, 0,84 µg de mIFNb-Fc-mIgG1 e 30 µg de Fc-mIgG1-mCD40L foram administra- dos IP e amostras de sangue coletadas em diferentes pontos de tem- po. Circulante mIFNb-Fc-mIgG1 foi quantificado usando um kit ELISA de acordo com as instruções do fabricante (Verikine Mouse IFNb Elisa Kit, 42400-1). Para a quantificação Fc-mIgG1-mCD40L: placas de 96 poços foram revestidas durante a noite a 4 ºC com 100 µl de proteína quimérica Fc CD40/TNFRSF5 de camundongo recombinante, consis- tindo no domínio extracelular de CD40 murino fundido à parte Fc de IgG1 humana (rmCD40-Fc; 215-CD-050, R&D Systems) a 0,1 µg/ml em carbonato de sódio (0,05 M, pH = 9,6, C-3041, Sigma). Após esva- ziar por inversão, as placas foram então incubadas durante 1 hora a 37 ºC com PBS - 0,05% Tween20 - 1% leite seguido por lavagem com PBS-0,05% Tween20. Amostras e controles (100 µl de diluições de 1/10) foram então incubados durante 90 minutos a 37 ºC seguido por 3 lavagens (PBS - 0,05% Tween20) e incubação com um anticorpo IgG1 anticamundongo secundário (1/20 000, ab97240, Abcam) (em PBS - 0,05% Tween20 - 1% leite). Após 3 lavagens com PBS - 0,05% Tween2, TMB (tetrametilbenzidina) foi adicionado e as placas incuba- das durante 20 minutos no escuro. A reação foi interrompida pela adi- ção de HCl a 1N. As placas foram lidas a 450-650 nm com um Ensight (Perkin Elmer).
[431] A análise farmacocinética indicou que a molécula mIFNb- Fc-mIgG1 (Fig. 17C) e mIgG1-Fc-mCD40L (Fig. 17D) circularam no sangue por pelo menos 6 horas após a administração. Ambas as mo- léculas circularam com um nível detectável pelo menos 6h após a ad- ministração (Fig. 17 C&D).
[432] Para avaliação in vivo, os camundongos receberam uma injeção intravenosa de 5,10 ^ 10 equivalente do genoma/camundongo de partículas virais AAV8-HBV ou PBS como controle para animais não infectados. Após 14 dias após a injeção (dpi), os camundongos foram distribuídos aleatoriamente em diferentes coortes de tratamento, usando o nível de parâmetros virais do sangue periférico (DNA e Antí- genos de HBV). Cinco grupos foram criados com um total de 12 ca- mundongos para o grupo não infectado e 18 camundongos para cada tratamento nos grupos infectados como segue: Não-infectado_Fc- mIgG1 (45 µg/kg); AAV/HBV_Fc-mIgG1 (45 µg/kg); AAV/HBV_Fc- mIgG1 (0,25 µg/kg); AAV/HBV_Fc-mIgG1-mCD40L (45 µg/kg); AAV/HBV_Combi (mIFN-Fc-mIgG1 (0,25 µg/kg) + Fc-mIgG1-mCD40L (45 µg/kg). Os tratamentos foram administrados duas vezes por sema- na por injeção intraperitoneal (10 mL/kg). Após 2 semanas e 4 sema- nas de tratamento, respectivamente a 28 e 42 dpi, alguns camundon- gos de cada grupo foram sacrificados e sangue, fígado e baço foram coletados. Soro, plasma e pedaços de fígado foram congelados em nitrogênio líquido e mantidos a -80ºC antes do processamento adicio- nal. O nível de antígeno de HBV (Hbe-Ag) foi avaliado por ELISA (kit Autobio de acordo com as instruções do fabricante (AutoBio, China)). A carga viral no soro e no fígado foi avaliada usando técnicas de ddPCR. O nível de pgRNA de HBV no fígado foi medido por qRT-PCR.
[433] A injeção de partículas virais de AAV/HBV levou a uma ex- pressão alta e estável do vírus de HBV, conforme mostrado pelo acompanhamento dos níveis de Hbe-Ag e de DNA de HBV no sangue periférico (Fig. 18B e C), bem como de ácidos nucleicos de HBV no fígado tecido (HBV DNA e pgRNA - Fig. 18 D e E).
[434] mIFN-Fc-mIgG1 e Fc-mIgG1-mCD40L administrados isola- damente, duas vezes por semana, reduziram o nível de DNA de HBV tanto no sangue periférico quanto no tecido hepático (Fig. 18 C e D).
Nenhum efeito dessas moléculas sozinhas foi detectado na proteína viral HBe-Ag ou no nível de pgRNA de HBV (Fig.18 B e E).
[435] A combinação de mIFN-Fc-mIgG1 e Fc-mIgG1-mCD40L demonstrou um efeito de redução sinérgica nas leituras de carga viral, conforme mostrado pela forte diminuição do sangue periférico e do te- cido hepático HBV DNA (Fig. 18 C e D). Além disso, a combinação atingiu uma queda na secreção de Hbe-Ag e na expressão de pgRNA (Fig. 18B e E). Equivalentes
[436] A divulgação pode ser realizada em outras formas específi- cas sem se afastar do espírito ou das características essenciais da mesma. As modalidades anteriores devem, portanto, ser consideradas em todos os aspectos ilustrativos, em vez de limitantes da divulgação. O escopo da divulgação é, portanto, indicado pelas reivindicações anexas, em vez da descrição anterior, e todas as alterações que vêm dentro do significado e faixa de equivalência das reivindicações, por- tanto, se destinam a ser aqui abrangidas.

Claims (18)

REIVINDICAÇÕES
1. Combinação de um agonista da superfamília do receptor de fator de necrose tumoral (TNFRSF) ou um fragmento funcional do mesmo e um agente interferon (IFN) ou um fragmento funcional do mesmo, caracterizada pelo fato de que é para uso no tratamento de uma infecção por HBV.
2. Combinação para seu uso, de acordo com a reivindica- ção 1, caracterizada pelo fato de que o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo que consiste em um agonista do receptor de linfotoxina alfa 3, um agonista do receptor de linfotoxina beta, um agonista do mediador de entrada de herpesvírus, um indutor fraco do receptor do tipo fator de necrose tumoral de agonista de apoptose, um agrupamento de agonista de fa- tor de diferenciação 40, um agonista de CD27, um agonista de CD30, um agonista de 4-1BB, um ativador de receptor de agonista de fator nuclear κB, um agonista de Troy e um agonista de receptor OX40, ou fragmentos funcionais dos mesmos.
3. Combinação para seu uso, de acordo com a reivindica- ção 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo que consiste em CD40L, LTα3, LIGHT e TWEAK, ou fragmentos funcionais dos mesmos.
4. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo que consiste em CD40L, LIGHT e TWEAK, ou fragmentos funcionais dos mesmos.
5. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é um agonista de
CD40 ou um fragmento funcional do mesmo selecionado a partir do grupo que consiste em um ligante de CD40 (CD40L) ou um fragmento funcional do mesmo, um anticorpo anti-CD40 agonístico, um fragmen- to funcional do mesmo ou fragmento de ligação a antígeno do mesmo, e uma proteína de fusão compreendendo um ligante de CD40 ou um fragmento funcional do mesmo.
6. Combinação para seu uso, de acordo com a reivindica- ção 5, caracterizada pelo fato de que o CD40L é CD40L hexamérico ou CD40L trimérico.
7. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é um polipeptídeo ou um fragmento funcional do mesmo, um anticorpo ou um fragmento funcional do mesmo, ou um fragmento de ligação a antígeno do mes- mo.
8. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que o agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo é fornecido como uma proteína de fusão compreendendo o referido agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo.
9. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de que o agente de IFN ou um fragmento funcional do mesmo é selecionado a partir do grupo que consiste em um agente de IFN Tipo I, um agente de IFN Tipo II e um agente de IFN Tipo III, ou fragmentos funcionais dos mesmos.
10. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada pelo fato de que o agente de IFN ou um fragmento funcional do mesmo é IFNα, IFNβ, IFNγ ou IFNλ, ou fragmentos funcionais dos mesmos.
11. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que o agen- te de IFN ou um fragmento funcional do mesmo é IFNβ ou IFNγ ou fragmentos funcionais dos mesmos.
12. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizada pelo fato de que o agen- te de IFN ou um fragmento funcional do mesmo é IFNβ, ou um frag- mento funcional do mesmo.
13. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que o agen- te de IFN ou um fragmento funcional do mesmo é IFNα, ou um frag- mento funcional do mesmo.
14. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizada pelo fato de que o agen- te de IFN ou um fragmento funcional do mesmo é fornecido como uma proteína de fusão compreendendo o referido agente de IFN ou um fra- gmento funcional do mesmo.
15. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada pelo fato de que o ago- nista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e o agente de IFN ou um fragmento funcional do mesmo são fornecidos como uma proteína de fusão imunoestimuladora bifuncional compreendendo o referido agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo, o referido agente de IFN ou um fragmento funcional do mesmo e um li- gante.
16. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada pelo fato de que o ago- nista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e o agente de IFN ou um fragmento funcional do mesmo estão compreendidos em uma única composição farmacêutica.
17. Combinação para seu uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada pelo fato de que o ago- nista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo e o agente de IFN ou um fragmento funcional do mesmo estão compreendidos em composições farmacêuticas distintas.
18. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende: um agonista de TNFRSF ou um fragmento funcional do mesmo; e um agente de IFN Tipo II, um fragmento funcional de um agente de IFN Tipo II, um agente de IFN Tipo III ou um fragmento fun- cional de um agente de IFN Tipo III.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4980286A (en) 1985-07-05 1990-12-25 Whitehead Institute For Biomedical Research In vivo introduction and expression of foreign genetic material in epithelial cells
IL79289A (en) 1985-07-05 1992-01-15 Whitehead Biomedical Inst Introduction and expression of foreign genetic material into keratinocytes using a recombinant retrovirus
JP3015383B2 (ja) 1987-09-11 2000-03-06 ホワイトヘツド・インスチチユート・フオー・バイオメデイカル・リサーチ 形質導入した線維芽およびそれらの使用
WO1989005345A1 (en) 1987-12-11 1989-06-15 Whitehead Institute For Biomedical Research Genetic modification of endothelial cells
JP2917998B2 (ja) 1988-02-05 1999-07-12 ホワイトヘッド・インスティチュート・フォー・バイオメディカル・リサーチ 修飾された肝細胞およびその用途
US5328470A (en) 1989-03-31 1994-07-12 The Regents Of The University Of Michigan Treatment of diseases by site-specific instillation of cells or site-specific transformation of cells and kits therefor
DK0568537T3 (da) 1990-10-31 1998-09-23 Whitehead Biomedical Inst Genetisk modificering af endotelceller
JPH07503851A (ja) * 1992-02-10 1995-04-27 インターフェロン・サイエンシズ、インコーポレイテッド 改良インターフェロン及びヒトの末梢血液白血球からのその製造方法
GB9524973D0 (en) 1995-12-06 1996-02-07 Lynxvale Ltd Viral vectors
MX2008013993A (es) * 2006-05-03 2009-05-11 Univ Colorado Combinación adyuvante sinergistica de anticuerpo agonista de cd40/interferona tipo 1, conjugados que la contienen y uso de los mismos como un terapeutico para aumentar la inmunidad celular.
US9272029B2 (en) * 2009-03-26 2016-03-01 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Interferon lambada-antibody complexes
US20140004079A1 (en) * 2012-06-21 2014-01-02 Agency For Science, Technology And Research In vivo dendritic cell therapeutic adjuvant
EP3586874A1 (en) * 2012-08-14 2020-01-01 IBC Pharmaceuticals, Inc. T-cell redirecting bispecific antibodies for treatment of disease
WO2016112983A1 (en) 2015-01-15 2016-07-21 Biontech Ag Cytokine fusion proteins
WO2018087345A1 (en) * 2016-11-14 2018-05-17 F. Hoffmann-La Roche Ag COMBINATION THERAPY OF AN HBsAg INHIBITOR, A NUCLEOS(T)IDE ANALOGUE AND AN INTERFERON
CN106701825A (zh) * 2016-11-17 2017-05-24 中国科学院生物物理研究所 腺病毒疫苗Ad‑LIGHT‑HBsAg及其用于治疗慢性乙肝的用途

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