BR112020010805B1 - Compostos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, respectivos usos e composição farmacêutica - Google Patents

Compostos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, respectivos usos e composição farmacêutica Download PDF

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William F. Brubaker
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David Lapointe
Mike E. Lizarzaburu
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Abstract

a presente divulgação fornece análogos de pró-drogas de creatina e suas composições úteis para o tratamento de deficiências de creatina.

Description

RELATÓRIO DESCRITIVO REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS
[0001] Este pedido reivindica prioridade ao Pedido Provisório U.S. 62/593.731, depositado em 1 de dezembro de 2017, cujas divulgações são aqui incorporadas por referência em sua totalidade para todos os fins.
CAMPO DA DIVULGAÇÃO
[0002] Esta divulgação descreve pró-drogas de creatina permeáveis à membrana ou sais, solvatos, tautômeros ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis das mesmas, composições farmacêuticas compreendendo as referidas pró-drogas de creatina e métodos de tratamento de doenças, incluindo, sem limitação, isquemia, insuficiência cardíaca, distúrbios neurodegenerativos e distúrbios genéticos que afetam o sistema de creatina quinase. Em algumas modalidades, esta divulgação descreve o tratamento de uma doença genética que afeta o sistema de creatina quinase, como, por exemplo, um distúrbio transportador de creatina ou um distúrbio de síntese de creatina compreendendo administrar pró-drogas de creatina ou um sal, solvato, tautômero ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável das mesmas ou composições farmacêuticas das mesmas.
FUNDAMENTOS DA DIVULGAÇÃO
[0003] A creatina, um derivado de aminoácido de ocorrência natural, desempenha um papel importante no metabolismo da energia celular. A creatina, quando fosforilada pela creatina quinase com um adenosina trifosfato (ATP), forma uma fosfocreatina de alta energia (fosfato de creatina), que é uma importante reserva de energia celular, e um adenosina difosfato (ADP). A fosforilação pela creatina quinase é reversível, portanto a fosfocreatina ajuda a fornecer energia às células do corpo, aumentando a formação de ATP, conforme necessário. Essa interação mantém a concentração de ATP em um nível constante nos momentos de seu consumo intenso. Por exemplo, durante o trabalho celular, é de vital importância reabastecer os ATPs o mais rápido possível. Aproximadamente > 95% da creatina total do corpo humano está localizada no músculo esquelético e no cérebro.
[0004] O sistema de creatina quinase tem um papel duplo no funcionamento do metabolismo energético intracelular como um tampão de energia para restaurar os níveis de ATP desprovido em sítios de alta hidrólise de ATP e transferir energia na forma de fosfocreatina das mitocôndrias para outras partes da célula por um processo envolvendo transportadores de energia intermediários, várias reações enzimáticas e difusão através de várias estruturas intracelulares.
[0005] Sabe-se que a disfunção no metabolismo energético pode causar muitas doenças. Particularmente, a perda de ATP celular devido à privação de oxigênio e glicose durante a isquemia é uma causa da morte do tecido. A fosfocreatina representa uma reserva de fosfato macroérgico na manutenção do potencial de membrana, ativação de metabólitos ou atividade contrativa de uma célula. Ele mantém o nível de ATP junto com um aumento no consumo de energia em uma célula, ou seja, restaura um resíduo de orto-fosfato no ADP. A fosfocreatina e a creatina também são reguladoras alostéricas dos processos celulares. O sistema de creatina quinase é um mecanismo bioquímico essencial que impede a depleção de ATP nas células de mamíferos. O nível de fosfocreatina em uma célula é um importante preditor de resistência ao insulto isquêmico, e os estoques remanescentes de fosfato de creatina estão correlacionados com a extensão do dano tecidual. Assim, a creatina pode ser usada no tratamento de isquemia cardíaca e cerebral, degeneração neuronal (por exemplo, doença de Parkinson, doença de Alzheimer e doença de Huntington), distúrbios do desenvolvimento associados à deficiência de creatina, viabilidade de transplante de órgãos e fadiga muscular e outras doenças relacionadas à deficiência de creatina. Atualmente, há melhorias clínicas significativas no tratamento de defeitos de biossíntese de creatina, mas não de transporte de creatina, uma vez que a captação de creatina, especialmente no cérebro, é altamente dependente do transportador de creatina. Na literatura, acredita-se que o transportador de creatina desempenhe vários papéis: captação de creatina no BBB, captação e transferência de creatina dentro e entre as células cerebrais e captação e recaptação da creatina nas sinapses neuronais. Devido a desafios na absorção e captação gastrointestinal no cérebro e nas células cerebrais, o tratamento dos distúrbios da biossíntese requer altas doses de creatina. Para o uso efetivo da creatina, as composições produzidas atualmente requerem consumo em uma quantidade de até 20 g por dia. Essas altas doses de creatina podem levar a consequências negativas para o organismo, como distúrbios da troca de nitrogênio, distúrbios gastrointestinais, diarreia etc. Alguns estudos clínicos baseados no uso de creatina suplementada por aminoácidos como L-arginina e L-glicina não mostraram melhora das características clínicas no acompanhamento a longo prazo de pacientes com defeito no transporte de creatina. Esta suplementação dos aminoácidos precursores da síntese também pode levar ao acúmulo do ácido guanidinoacético intermediário que pode ser neurotóxico. Isso também poderia contribuir para a falta de melhora dos aspectos clínicos no tratamento. Na deficiência de transportador de creatina, a creatina e/ou a fosfocreatina não podem acessar o cérebro através do BBB e, uma vez no cérebro, não podem ser absorvidas pelas células cerebrais. Assim, estratégias terapêuticas bem-sucedidas ainda precisam ser descobertas para tratar o defeito do transportador de creatina.
[0006] A suplementação de creatina aumenta os níveis intracelulares de fosfato de creatina (Harris et al., Clinical Sci 1992, 83, 367-74). A creatina atravessa facilmente a barreira hematoencefálica em indivíduos saudáveis através do transportador ativo de creatina, SLC6A8 e os níveis de creatina cerebral podem ser aumentados via administração oral (Dechent et al., Am J Physiol 1999, 277, R698-704). A suplementação prolongada de creatina pode elevar os pools celulares de fosfato de creatina e aumentar a resistência à isquemia tecidual e fadiga muscular.
[0007] Algumas evidências clínicas estão disponíveis de que a reposição de creatina é eficaz para distúrbios autossômicos recessivos da síntese de creatina. Pacientes com deficiência de arginina:glicina amidinotransferase (AGAT) e deficiência de guanidinoacetato metiltransferase (GAMT) tratados com suplementação de creatina ou ornitina mostraram melhora nas convulsões, incapacidade intelectual e resultados de desenvolvimento (ver: Stockler-Ipsiroglu et al. Mol. Genet. Metab. 2014, 111, 16-25 and Bianchi, et al. 2007, ambos aqui incorporados em sua totalidade para todos os fins).
[0008] Assim, embora a administração de creatina possa ter alguma utilidade terapêutica, uma molécula de creatina modificada que é mais estável e mais permeável aos tecidos de barreira e membranas celulares independentes do transportador de creatina teria maior valor terapêutico, especialmente para pacientes com defeito no transportador de creatina.
SUMÁRIO DA DIVULGAÇÃO
[0009] As pró-drogas de creatina da presente divulgação são projetadas para entrar nas células por difusão passiva ou transporte ativo independente do transportador de creatina e para liberar creatina no citoplasma celular. Essas pró-drogas também podem atravessar tecidos barreira importantes, como a mucosa intestinal, a barreira hematoencefálica e a barreira placentária. Devido à capacidade de passar através das membranas biológicas, as pró-drogas da creatina podem restaurar e manter a homeostase da energia nas células desprovidas de ATP através do sistema de creatina quinase, e restaurar rapidamente os níveis de ATP para proteger os tecidos contra estresse isquêmico adicional. As pró-drogas de creatina da presente divulgação também podem ser usadas para fornecer concentrações sistêmicas sustentadas de creatina.
[0010] Numa modalidade, um composto da presente divulgação tem a estrutura da Fórmula (I):
[0011] ou um sal ou solvato aceitável farmaceuticamente do mesmo; em que:
[0012] R é -CH3, -CH2D, -CHD2, ou -CD3;
[0013] R1 é alquil linear ou ramificado, alquenil, aril ou heteroaril linear ou ramificado, em que R1 é opcionalmente substituído por R4;
[0014] R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5;
[0015] R3 é -C(O)OR6, ou -alquil(OH);
[0016] ou alternativamente, R2 e R3 juntos são um grupo alquileno que, com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 5 a 6 membros em que o anel de 5 a 6 membros é opcionalmente substituído por oxo;
[0017] R4 é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[0018] R5 é alquil linear ou ramificado; e
[0019] R6 é H, é alquil linear ou ramificado,
[0020] ou alternativamente, R6 e R1 juntos são um grupo alquileno ou um grupo alquenileno que, com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 12 a 25 membros, em que 1, 2, 3 ou 4 -CH2- as unidades que compõem o grupo alquileno ou o grupo alquenileno são opcionalmente substituídas por um heteroátomo selecionado de -O-, -S- ou -N-, desde que nenhum -CH2- adjacente seja substituído; em que o grupo alquileno ou o grupo alquenileno é opcionalmente substituído por um ou mais R4; e
[0021] em que dois R4 no mesmo carbono ou carbono adjacente podem formar um anel fundido ou espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel fundido ou espiro heterocíclico de 3 a 6 membros.
[0022] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R é -CH3 ou -CD3.
[0023] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R1 é -C6-C20 alquil ou -C6-C20 alquenil. Em algumas modalidades, R1 é -C6-C18 alquil ou -C6-C18 alquenil. Em outras modalidades, R1 é piridil.
[0024] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R2 é hidrogênio. Em algumas modalidades, R2 é -C(O)OR5.
[0025] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R5 é -C1-C6 alquil linear ou ramificado.
[0026] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R3 é -C(O)OR6. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R6 é H ou C1-C8 alquil linear ou ramificado.
[0027] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R6 e R1 juntos são um grupo alquileno ou um grupo alquenileno que, com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 12 a 25 membros, em que 1, 2, 3 ou 4 -CH2- as unidades que compõem o grupo alquileno ou o grupo alquenileno são opcionalmente substituídas por um heteroátomo selecionado de -O-, -S- ou -N-, desde que nenhum -CH2- adjacente seja substituído; em que o grupo alquileno ou o grupo alquenileno é opcionalmente substituído por um ou mais R4. Numa modalidade, R6 e R1 juntos são um grupo alquileno não substituído ou um grupo alquenileno não substituído com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 13 a 24 membros.
[0028] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é um sal farmaceuticamente aceitável selecionado do sal de sódio, sal de potássio, sal de lítio, sal do ácido clorídrico, sal do ácido fórmico, sal do ácido trifluoroacético, sal do ácido acético ou sal do ácido tricloroacético/2 lítio.
[0029] Numa modalidade do composto da Fórmula (I), o composto tem a estrutura da Fórmula (II):
[0030] ou um sal ou solvato aceitável farmaceuticamente do mesmo; em que:
[0031] R é -CH3, -CH2D, -CHD2, ou -CD3;
[0032] R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5;
[0033] R1 é alquil linear ou ramificado ou alquenil linear ou ramificado, em que R1 é opcionalmente substituído por R4;
[0034] R4 é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[0035] X em cada ocorrência é cada um independentemente -C(R5a)2-C(R5a)2-, - CH(R5a)-CH(R5a)-, -C(R5a)=C(R5a)-, -O-C(R5a)2-, -O-CH(R5a)-, -C(R5a)2-O-, ou - CH(R5a)-O-;
[0036] Y é -C(R5a)2-, -CH(R5a)-, -C(R5a)2-C(R5a)2-, -CH(R5a)-CH(R5a)-, - C(R5a)=C(R5a)-, -C(R5a)2-O-, ou -CH(R5a)-O-;
[0037] n é 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8, em que quando n é 2, Y é -C(R5a)2-C(R5a)2-, - CH(R5a)-CH(R5a)-, -C(R5a)=C(R5a)-, -C(R5a)2-O-, ou -CH(R5a)-O-;
[0038] R5 é H ou alquil linear ou ramificado; e
[0039] R5 é H, halogênio, -OH, -OR5, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[0040] em que dois R5a no mesmo carbono ou carbono adjacente podem formar um anel fundido ou espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel fundido ou espiro heterocíclico de 3 a 6 membros.
[0041] Numa modalidade do composto de Fórmula (II), pelo menos um de X é -C(R5a)2- C(R5a)2-, -CH(R5a)-CH(R5a)-, ou -C(R5a)=C(R5a)-, em que R5a é H ou -C1-C6 alquil; e em que dois R5a no mesmo carbono ou carbono adjacente podem formar um anel fundido ou espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel fundido ou espiro heterocíclico de 3 a 6 membros. Numa modalidade, X é -CH2CH2-, -CH=CH-, -O-CH2-, ou -CH2-O-.
[0042] Numa modalidade do composto de Fórmula (II), Y é -C(R5a)2-, -CH(R5a)-, - C(R5a)2-C(R5a)2-, -CH(R5a)-CH(R5a)-, ou -C(R5a)=C(R5a)-, em que R5a é H ou -C1-C6 alquil; e em que dois R5a no mesmo carbono ou no carbono adjacente pode formar um anel fundido ou espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel fundido ou espiro heterocíclico de 3 a 6 membros. Numa modalidade, Y é -C(R5a)2-, -CH(R5a)-; -C(R5a)2-C(R5a)2-, - CH(R5a)-CH(R5a)-, -CH2-, -CH2CH2-, -CH=CH-, , em que, R5a é -C1-C6 alquil linear ou ramificado
[0043] Numa modalidade do composto de Fórmula (II), R é -CH3 ou -CD3.
[0044] Numa modalidade do composto de Fórmula (II), R2 é hidrogênio.
[0045] Numa modalidade do composto de Fórmula (II), o composto é um sal farmaceuticamente aceitável selecionado do sal de sódio, sal de potássio, sal de lítio, sal do ácido clorídrico, sal do ácido fórmico, sal do ácido trifluoroacético, sal do ácido acético ou sal do ácido tricloroacético/2 lítio.
[0046] Numa modalidade dos compostos de Fórmula (I), o composto tem a estrutura de Fórmula (I-A):
[0047] ou um sal ou solvato aceitável farmaceuticamente do mesmo; em que:
[0048] R é -CH3, -CH2D, -CHD2, ou -CD3;
[0049] R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5;
[0050] R3 é -C(O)OR6, ou -alquil(OH);
[0051] ou alternativamente, R2 e R3 juntos são um grupo alquileno que, com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 5 a 6 membros em que o anel de 5 a 6 membros é opcionalmente substituído por oxo;
[0052] R4 é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[0053] R4a, R4b, R4c, e R4d, cada um independentemente, é H, halogênio, -OH, - OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[0054] R5 é alquil linear ou ramificado; e
[0055] R6a e R1 juntos são um grupo alquileno ou um grupo alquenileno que, com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 12 a 25 membros, em que 1, 2, 3 ou 4 -CH2- as unidades que compõem o grupo alquileno ou o grupo alquenileno são opcionalmente substituídas por um heteroátomo selecionado de -O-, -S- ou -N-, desde que nenhum -CH2- adjacente seja substituído; em que o grupo alquileno ou o grupo alquenileno é opcionalmente substituído por um ou mais R4; e
[0056] em que, R4a e R4b ou R4c e R4d juntos podem formar um anel espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel espiro heterocíclico de 3 a 6 membros; ou
[0057] em que R4b e R4c juntos podem formar um anel cicloalquil fundido de 3 a 6 membros ou um anel heterocíclico fundido de 3 a 6 membros.
[0058] Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), R4a é -C1-C6 alquil. Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), R4b é -C1-C6 alquil. Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), R4c é -C1-C6 alquil. Numa modalidade do composto de Fórmula (IA), R4b, R4c, e R4d é H. Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), R4b e R4d é H.
[0059] Numa modalidade do composto de Fórmula (IA), R4a e R4b juntos formam um anel espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel espiro heterocíclico de 3 a 6 membros. Em algumas modalidades, R4a e R4b juntos formam Numa modalidade do composto de Fórmula (IA), R4b e R4c juntos formam um anel cicloalquil fundido de 3 a 6 membros ou um anel heterocíclico fundido de 3 a 6 membros. Em algumas modalidades, R4b e R4c juntos formam
[0060] Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), R é -CH3 ou -CD3.
[0061] Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), R2 é hidrogênio.
[0062] Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), o composto é um sal farmaceuticamente aceitável selecionado do sal de sódio, sal de potássio, sal de lítio, sal do ácido clorídrico, sal do ácido fórmico, sal do ácido trifluoroacético, sal do ácido acético ou sal do ácido tricloroacético/2 lítio.
[0063] Numa modalidade dos compostos de Fórmula (I), o composto tem a estrutura de Fórmula (III):
[0064] ou um sal ou solvato aceitável farmaceuticamente do mesmo; em que:
[0065] R é CH3, CH2D, CHD2, ou CD3;
[0066] R1 é alquil linear ou ramificado, ou alquenil linear ou ramificado;
[0067] R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5;
[0068] R5 é H ou alquil linear ou ramificado;
[0069] R5a é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -Ci- C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[0070] em que dois R5a no mesmo carbono ou carbono adjacente podem formar um anel fundido ou espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel fundido ou espiro heterocíclico de 3 a 6 membros;
[0071] n é 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ou 11; e
[0072] p é 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, ou 8.
[0073] Numa modalidade do composto de Fórmula (III-A), R é -CH3 ou -CD3.
[0074] Numa modalidade do composto de Fórmula (III-A), R2 é H.
[0075] Numa modalidade do composto de Fórmula (III-A), n é 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7.
[0076] Numa modalidade do composto de Fórmula (III-A), p é 0, 1 ou 2.
[0077] Numa modalidade do composto de Fórmula (III-A), R5a é -C1-C6 alquil.
[0078] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela A, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela B, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela C, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), (I-A), (II), (III) e/ou (III-A), o composto é selecionado da Tabela D, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), (I-A), (II), (III) e/ou (III-A), o composto é selecionado da Tabela E. Numa modalidade do composto de Fórmula ( I), o composto é selecionado da Tabela S1. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela S2.
[0079] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), (I-A), (II), (III) e/ou (III-A), o composto é selecionado de: , ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
[0080] em que R é -CH3 ou -CD3 e R2 é H.
[0081] Numa modalidade da presente divulgação, é fornecida uma composição farmacêutica compreendendo um análogo de creatina ou uma pró-droga de creatina da presente divulgação. Numa modalidade, o análogo de creatina ou a pró-droga de creatina é um composto de Fórmula (I), (IA), (II), (III) e/ou (III-A), ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um transportador farmaceuticamente aceitável.
[0082] Numa modalidade da presente divulgação, é fornecido um método de administração de creatina ou creatina deuterada a um paciente em necessidade do mesmo. No método divulgado neste documento, é administrada uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), (IA), (II), (III) e/ou (III-A), ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo a um paciente em necessidade do mesmo.
[0083] Numa modalidade da presente divulgação, é fornecido um método de tratamento da deficiência de creatina em um paciente em necessidade do mesmo. No método divulgado neste documento, é administrada uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), (IA), (II), (III) e/ou (III-A), ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo a um paciente em necessidade do mesmo.
[0084] Numa modalidade, a deficiência de creatina compreende uma doença ou condição associada à disfunção do transportador de creatina. Em outra modalidade, a deficiência de creatina compreende uma doença ou condição associada ao distúrbio de síntese de creatina.
[0085] Numa modalidade da presente divulgação, é fornecido um método de tratamento de uma doença em um paciente em necessidade do mesmo. No método divulgado neste documento, é administrada uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), (IA), (II), (III) e/ou (III-A), ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo a um paciente em necessidade do mesmo, em que a doença é isquemia, estresse oxidativo, doença neurodegenerativa, lesão de reperfusão isquêmica, doença cardiovascular, doença genética que afeta o sistema creatina quinase, esclerose múltipla, distúrbio psicótico ou fadiga muscular. Numa modalidade, a doença genética que afeta o sistema de creatina quinase é um distúrbio transportador de creatina ou um distúrbio de síntese de creatina.
[0086] Em uma modalidade da presente divulgação, um método para intensificar a força muscular em um paciente que compreende administrar a um paciente que precisa dessa intensificação uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de Fórmula (I), (IA), (II), (III) e/ou (III-A), ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo.
BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS
[0087] A Fig. 1 é um gráfico dos dados de um estudo de dose única comparando níveis de d3-creatina e d3-creatinina no plasma e cérebro de camundongos CrT KO tratados com composto 15 e medidos por 8 h. Cr =d3-creatina; CRN=d3-creatinina.
[0088] A Fig. 2 é um gráfico dos dados de um estudo de doses múltiplas comparando níveis de d3-creatina e d3-creatinina no cérebro de primatas não humanos, medidos após um total de 7 infusões de composto 14 administrados q.d. (uma vez por dia). Cr=d3-creatina; CRN=d3-creatinina.
[0089] A Fig. 3 mostra a concentração de d3-creatina no cérebro ao longo do tempo após a administração de 10 mg / kg de IV do composto 14 ou do composto 15 aos camundongos.
[0090] A Fig. 4 mostra a concentração de d3-creatinina no cérebro ao longo do tempo após a administração de 10 mg / kg de IV do composto 14 ou do composto 15 aos camundongos.
DESCRIÇÕES DETALHADAS DA DIVULGAÇÃO
[0091] Definições
[0092] Também, os termos “um” e “uma” não denotam uma limitação de quantidade, mas em vez disso denotam a presença de pelo menos um dos itens referenciados. O termo "ou" ou "e/ou" é usado como uma palavra de função para indicar que duas palavras ou expressões devem ser tomadas juntas ou individualmente. Os termos "compreendendo", "tendo", "incluindo" e "contendo" devem ser interpretados como termos abertos (ou seja, "incluindo, mas não limitado a"). Os pontos finais de todas as faixas direcionadas para o mesmo componente ou propriedade são inclusivos e combináveis independentemente.
[0093] O termo "cerca de" e/ou "aproximadamente" pode ser usado em conjunto com valores e/ou intervalos numéricos. O termo "cerca de" é entendido como significando esses valores próximos a um valor recitado. Por exemplo, “cerca de 40 [unidades]” pode significar dentro de ± 25% de 40 (por exemplo, de 30 a 50), dentro de ± 20%, ± 15%, ± 10%, ± 9%, ± 8%, ± 7 %, ± 6%, ± 5%, ± 4%, ± 3%, ± 2%, ± 1%, menos que ± 1%, ou qualquer outro valor ou intervalo de valores aí contidos ou abaixo. Além disso, as frases “menos que cerca de [um valor]” ou “maior que cerca de [um valor]” devem ser entendidas em vista da definição do termo “cerca de” proporcionado aqui. Os termos "cerca de" e "aproximadamente" podem ser usados de forma intercambiável.
[0094] O termo "presente(s) composto(s)" ou "composto(s) da presente divulgação" refere- se a compostos abrangidos por fórmulas estruturais divulgadas neste documento e inclui qualquer subgênero e compostos específicos dentro dessas fórmulas cuja estrutura é aqui divulgada. Os compostos podem ser identificados por sua estrutura química e/ou nome químico. Os compostos aqui descritos podem conter um ou mais centros quirais e/ou ligações duplas e, portanto, podem existir como estereoisômeros, como isômeros de ligação dupla (isto é, isômeros geométricos), enantiômeros ou diastereômeros. Por conseguinte, as estruturas químicas aqui representadas abrangem todos os enantiômeros e estereoisômeros possíveis dos compostos ilustrados, incluindo a forma estereoisomericamente pura (por exemplo, geometricamente pura, enantiomericamente pura ou diastereomericamente pura) e misturas enantioméricas e estereoisoméricas. As misturas enantioméricas e estereoisoméricas podem ser resolvidas em seus enantiômeros ou estereoisômeros componentes, utilizando técnicas de separação ou técnicas de síntese quiral bem conhecidas do versados. Os compostos também podem existir em várias formas tautoméricas, incluindo a forma enol, a forma ceto e misturas dos mesmos. Por conseguinte, as estruturas químicas aqui representadas abrangem todas as formas tautoméricas possíveis dos compostos ilustrados. Os compostos descritos também incluem compostos marcados isotopicamente em que um ou mais átomos têm uma massa atômica diferente da massa atômica convencionalmente encontrada na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos da divulgação incluem, mas não estão limitados a, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, etc. Os compostos podem existir em formas não solvatadas, bem como em formas solvatadas, incluindo formas hidratadas e como N-óxidos. Em geral, os compostos podem ser hidratados, solvatados ou N-óxidos. Certos compostos podem existir em múltiplas formas cristalinas ou amorfas. Em geral, todas as formas físicas são equivalentes para os usos contemplados neste documento e destinam-se a estar dentro do escopo da presente divulgação. Além disso, deve ser entendido, quando estruturas parciais dos compostos são ilustradas, que colchetes indicam o ponto de ligação da estrutura parcial ao restante da molécula.
[0095] Um "estereoisômero" refere-se a um composto feito dos mesmos átomos ligados pelas mesmas ligações, mas que possuem diferentes estruturas tridimensionais, que não são intercambiáveis. A presente divulgação contempla vários estereoisômeros e misturas dos mesmos e inclui “enantiômeros”, que se refere a dois estereoisômeros cujas moléculas são imagens espelhadas não sobreponíveis uma da outra.
[0096] Os compostos da divulgação também podem existir em várias formas tautoméricas, e a representação aqui apresentada de um tautômero é apenas por conveniência e também é entendida como abrangendo outros tautômeros da forma mostrada. O termo "tautômero", como utilizado neste documento, refere-se a isômeros que se alteram entre si com grande facilidade, para que possam existir juntos em equilíbrio. Por conseguinte, as estruturas químicas aqui representadas abrangem todas as formas tautoméricas possíveis dos compostos ilustrados.
[0097] Um traço ("-") que não está entre duas letras ou símbolos é usado para indicar um ponto de ligação para uma fração ou substituinte. Por exemplo, -CONH2 é anexado através do átomo de carbono.
[0098] "Alquil", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical hidrocarboneto monovalente cíclico, ramificado, de cadeia linear ou cíclica, derivado da remoção de um átomo de hidrogênio de um único átomo de carbono de um alcano parental. O termo "alquil" inclui "cicloalquil", conforme aqui definido abaixo. Grupos alquil típicos incluem, mas não estão limitados a, metil; etil; propis, tais como propan-1-il, propan-2-il (isopropil), ciclopropan-1-il, etc.; butanis, como butan-1-il, butan-2-il (sec-butil), 2-metil- propan-1-il (isobutil), 2-metil-propan-2-il (t-butil), ciclobutan-1-il etc.; e semelhantes. Em algumas modalidades, um grupo alquil compreende de 1 a 20 átomos de carbono (C1-C20 alquil). Em outras modalidades, um grupo alquil compreende de 1 a 10 átomos de carbono (C1-C10 alquil). Em ainda outras modalidades, um grupo alquil compreende de 1 a 6 átomos de carbono (C1-C6 alquil). C1-C6 alquil também é conhecido como "alquil inferior".
[0099] Note-se que quando um grupo alquil é ainda conectado a outro átomo, ele se torna um grupo "alquileno". Em outras palavras, o termo "alquileno" refere-se a um alquil divalente. Por exemplo, -CH2CH3 é um etil, enquanto -CH2CH2- é um etileno. Ou seja, "alquileno", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical hidrocarboneto divalente saturado ou insaturado, ramificado, de cadeia linear ou cíclica derivado da remoção de dois átomos de hidrogênio de um único átomo de carbono ou dois átomos de carbono diferentes de um alcano, alqueno ou alquino parental. O termo "alquileno" inclui "cicloalquileno", conforme aqui definido abaixo. O termo "alquileno" destina-se especificamente a incluir grupos com qualquer grau ou nível de saturação, isto é, grupos com ligações carbono-carbono exclusivamente simples, grupos com uma ou mais ligações carbono-carbono duplas, grupos com uma ou mais ligações carbono-carbono triplas e grupos com misturas de ligações carbono-carbono simples, duplas e triplas. Em algumas modalidades, um grupo alquileno compreende de 1 a 20 átomos de carbono (C1-C20 alquileno). Em outras modalidades, um grupo alquileno compreende de 1 a 10 átomos de carbono (C1-C10 alquileno). Em ainda outras modalidades, um grupo alquileno compreende de 1 a 6 átomos de carbono (C1-C6 alquileno).
[00100] "Alquenil", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical hidrocarboneto monovalente cíclico, de cadeia linear ou ramificada, insaturado, tendo pelo menos uma ligação dupla carbono-carbono derivada da remoção de um átomo de hidrogênio de um único átomo de carbono de um alqueno parental. O termo "alquenil" inclui "cicloalquenil", conforme aqui definido abaixo. O grupo pode estar na conformação cis ou trans sobre a(s) ligação(ões) dupla(s). Grupos alquenil típicos incluem, mas não estão limitados a, etenil; propenis, como prop-1-en-1-il, prop-1-en-2-il, prop-2-en-1-il (alil), prop- 2-en-2-il, cicloprop-1- en-1-il; cicloprop-2-en-1-il; butenis, como but-1-en-1-il, but-1-en-2- il, 2-metil-prop-1-en-1-il, but-2-en-1-il, but-2 -en-1-il, but-2-en-2-il, buta-1,3-dien-1-il, buta-1,3-dien-2-il, ciclobut-1-en-1-il, ciclobut-1-en-3-il, ciclobuta-1,3-dien-1-il, etc.; e semelhantes.
[00101] "Alquinil", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical hidrocarboneto monovalente cíclico, de cadeia linear ou ramificada, insaturado, tendo pelo menos uma ligação tripla carbono-carbono derivada da remoção de um átomo de hidrogênio de um único átomo de carbono de um alquino parental. Grupos alquinil típicos incluem, mas não estão limitados a, etinil; propinis, tais como prop-1-in-1-il, prop-2-in-1-il, etc.; butinis, como but-1-in-1-il, but-1-in-3-il, but-3-in-1-il, etc.; e semelhantes.
[00102] "Alcoxi", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical da fórmula -O-R199, onde R199 alquil ou alquil substituído, conforme aqui definido.
[00103] "Acil" por si só ou como parte de outro substituinte refere-se a um radical - C(O)R200, onde R200 é hidrogênio, alquil, alquil substituído, aril, aril substituído, arilalquil, arilalquil substituído, heteroalquil, heteroalquil substituído, heteroarilalquil ou heteroarilalquil substituído, como aqui definido. Exemplos representativos incluem, mas não estão limitados a, formil, acetil, ciclo-hexilcarbonil, ciclo-hexilmetilcarbonil, benzoil, benzilcarbonil e semelhantes.
[00104] "Aril", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um grupo hidrocarboneto aromático monovalente derivado da remoção de um átomo de hidrogênio de um único átomo de carbono de um sistema de anel aromático original, conforme aqui definido. Grupos aril típicos incluem, mas não estão limitados a, grupos derivados de aceantrileno, acenaftileno, acefenantrileno, antraceno, azuleno, benzeno, criseno, coroneno, fluoranteno, fluoreno, hexaceno, hexafeno, hexaleno, as-indaceno, s-indaceno, indano, indeno, naftaleno, octaceno, octafeno, octaleno, ovaleno, penta-2,4-dieno, pentaceno, pentaleno, pentafeno, perileno, fenaleno, fenantreno, piceno, pleiadeno, pireno, pirantireno, rubiceno, trifenileno, trinftaleno e semelhantes. Em algumas modalidades, um grupo aril compreende de 6 a 20 átomos de carbono (C6-C20 aril). Em outras modalidades, um grupo aril compreende de 6 a 15 átomos de carbono (C6-C15 aril). Ainda em outras modalidades, um grupo aril compreende de 6 a 15 átomos de carbono (C6-C10 aril).
[00105] "Arilalquil", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um grupo alquil acíclico no qual um dos átomos de hidrogênio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3 é substituído por um grupo aril, conforme definido aqui. Ou seja, arilalquil também pode ser considerado como um alquil substituído por aril. Grupos arilalquil típicos incluem, mas não estão limitados a, benzil, 2-feniletan-1- il, 2-fenileten-1-il, naftilmetil, 2-naftiletan-1-il, 2-naftileten-1-il, nafobenzil, 2 - naftofeniletan-1-ilo e semelhantes. Onde se pretendem frações alquil específicas, é utilizada a nomenclatura arilalquil, arilalquenil e/ou arilalquininil. Em algumas modalidades, um grupo arilalquil é (C6-C30) arilalquil, por exemplo, a fração alquil, alquenil ou alquinil do grupo arilalquil é (C1-C10) alquil e a fração aril é (C6-C20) aril. Em outras modalidades, um grupo arilalquil é (C6-C20) arilalquil, por exemplo,a fração alquil, alquenil ou alquinil do grupo arilalquil é (C1-C8) alquil e a fração aril é (C6-C12) aril. Em ainda outras modalidades, um grupo arilalquil é (C6-C15) arilalquil, por exemplo, a fração alquil, alquenil ou alquinil do grupo arilalquil é (C1-C5) alquil e a fração aril é (C6-C10) aril.
[00106] "Carbocíclico" ou "Carbociclil", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical hidrocarboneto monovalente cíclico, não saturado ou parcialmente aromático, incluindo cicloalquil, cicloalquenil e cicloalquinil, conforme aqui definido. Grupos carbociclil típicos incluem, mas não estão limitados a, grupos derivados de ciclopropano, ciclobutano, ciclopentano, ciclo-hexano e semelhantes. Em algumas modalidades, o grupo cicloalquil compreende de 3 a 10 átomos de anel (C3-C10 cicloalquil). Em outras modalidades, o grupo cicloalquil compreende de 3 a 7 átomos de anel (C3-C7 cicloalquil). O carbociclil pode ainda ser substituído por um ou mais heteroátomos, incluindo, mas não limitado a, N, P, O, S e Si, que se ligam aos átomos de carbono do cicloalquil via ligação monovalente ou multivalente.
[00107] "Heteroalquil", isoladamente ou como parte de outros substituintes, refere-se a grupos alquil, nos quais um ou mais átomos de carbono são substituídos, independentemente um do outro, pelos mesmos ou diferentes heteroátomos ou grupos heteroatômicos. Heteroátomos ou grupos heteroatômicos típicos que podem substituir os átomos de carbono incluem, mas não estão limitados a, -O-, -S-, -N-, -Si-, -NH-, -S(O)-, - S(O)2-, -S(O)NH-, -S(O)2NH- e semelhantes e combinações dos mesmos. Os heteroátomos ou grupos heteroatômicos podem ser colocados em qualquer posição interior do grupo alquil. Grupos heteroatômicos típicos que podem ser incluídos nesses grupos incluem, mas não estão limitados a, -O-, -S-, -O-O-, -S-S-, -O-S-, -NR201R202-, =N-N=, -N=N-, -N=NNR203R204, -PR205-, -P(O)2-, -POR206-, -O-P(O)2-, -SO-, -SO2-, -SnR207R208- e semelhantes, onde R201, R202, R203, R204, R205, R206, R207 e R208 são independentemente hidrogênio, alquil, alquil substituído, aril, aril substituído, arilalquil, arilalquil substituído, cicloalquil, cicloalquil substituído, cicloalquil substituído, ciclo-heteroalquil, ciclo-heteroalquil substituído, heteroalquil, heteroalquil, heteroaril substituído, heteroarilalquil ou heteroarilalquil substituído.
[00108] "Heterocíclico" ou "Heterociclil", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical carbocíclico no qual um ou mais átomos de carbono são substituídos independentemente pelo mesmo ou diferente heteroátomo. O heterociclil pode ainda ser substituído por um ou mais heteroátomos, incluindo, mas não limitado a, N, P, O, S e Si, que se ligam aos átomos de carbono do heterociclil via ligação monovalente ou multivalente. Heteroátomos típicos para substituir o(s) átomo(s) de carbono incluem, mas não estão limitados a, N, P, O, S, Si, etc. Grupos heterociclil típicos incluem, mas não estão limitados a, grupos derivados de epóxidos, azirinas, ti-iranos, imidazolidina, morfolina, piperazina, piperidina, pirazolidina, pirrolidona, quinuclidina e semelhantes. Em algumas modalidades, o grupo heterociclil compreende de 3 a 10 átomos de anel (heterociclil de 310 membros). Em outras modalidades, o grupo heterociclil compreende de 5 a 7 átomos de anel (heterociclil de 5-7 membros). Um grupo ciclo-heteroalquil pode ser substituído em um heteroátomo, por exemplo, um átomo de nitrogênio, com um grupo alquil (C1-C6) Como exemplos específicos, N-metil-imidazolidinil, N-metil-morfolinil, N-metil-piperazinil, N- metil-piperidinil, N-metil-pirazolidinil e N-metil-pirrolidinil estão incluídos na definição de "heterociclil". Um grupo heterociclil pode ser ligado ao restante da molécula via um átomo de carbono do anel ou um heteroátomo do anel. Como utilizado neste documento, o heterociclil inclui um resíduo de glicose, um resíduo de nucleosídeo e um resíduo de ácido ascórbico.
[00109] "Halo", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical - F, -Cl, -Br ou -I.
[00110] "Heteroaril", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um radical heteroaromático monovalente derivado da remoção de um átomo de hidrogênio de um único átomo de um sistema de anel heteroaromático parental, conforme aqui definido. Grupos heteroaril típicos incluem, mas não estão limitados a, grupos derivados de acridina, β-carbolina, cromano, cromeno, cinolina, furano, imidazol, indazol, indol, indolina, indolizina, isobenzofurano, isocromeno, isoindol, isoindolina, isoquinolina, isotiazol, isoxazol, naftiridina, oxadiazol, oxazol, perimidina, fenantridina, fenantrolina, fenazina, ftalazina, pteridina, purina, pirano, pirazina, pirazol, piridazina, piridina, pirimidina, pirrol, pirrolizina, quinazolina, quinolina, quinolizina, quinoxalina, tetrazol, tiadiazol, tiazol, tiofeno, triazol, xanteno e semelhantes. Em algumas modalidades, o grupo heteroaril compreende de 5 a 20 átomos de anel (heteroaril de 5-20 membros). Em outras modalidades, o grupo heteroaril compreende de 5 a 10 átomos de anel (heteroaril de 5 a 10 membros). Grupos heteroaril exemplificativos incluem aqueles derivados de furano, tiofeno, pirrol, benzotiofeno, benzofurano, benzimidazol, indol, piridina, pirazol, quinolina, imidazol, oxazol, isoxazol e pirazina.
[00111] "Heteroarilalquil", por si só ou como parte de outro substituinte, refere-se a um grupo alquil acíclico no qual um dos átomos de hidrogênio ligado a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3 c, é substituído por um grupo heteroaril. Onde se pretendem frações alquil específicas, é utilizada a nomenclatura heteroarilalquil, heteroarilalcenil e/ou heteroarilalquinil. Em algumas modalidades, o grupo heteroarilalquil é um heteroarilalquil de 6-21 membros, por exemplo, a fração alquil, alquenil ou alquinil do heteroarilalquil é (C1-C6) alquil e a fração heteroaril é um heteroaril de 5-15 membros. Em outras modalidades, o heteroarilalquil é um heteroarilalquil de 6-13 membros, por exemplo, a fração alquil, alquenil ou alquinil é (C1-C3) alquil e a fração heteroaril é um heteroaril de 5 a 10 membros.
[00112] Uma "amida" refere-se a um composto orgânico que contém o grupo funcional que consiste em um grupo carbonil ligado a um átomo de nitrogênio. Por exemplo, um grupo amida pode ser representado pela seguinte fórmula estrutural:
[00113] Um grupo "lactama" é uma amida cíclica. Ou seja, uma lactama é uma amida com a fórmula estrutural acima em que R e R' ou R e R”, tomados em conjunto com os átomos de carbono e nitrogênio aos quais estão ligados, formam um grupo cíclico opcionalmente substituído.
[00114] Um "éster" refere-se a um composto orgânico derivado da reação/condensação de um oxácido com um composto hidroxil. Por exemplo, um grupo amida pode ser representado pela seguinte fórmula estrutural:
[00115] Um grupo "lactona" é um éster cíclico. Ou seja, uma lactona é um éster com a fórmula estrutural acima em que R e R', tomados em conjunto com os átomos de carbono e oxigênio aos quais estão ligados, formam um grupo cíclico opcionalmente substituído que pode ser saturado, insaturado ou aromático.
[00116] Uma "ureia" ou "carbamida" refere-se a um composto orgânico com a seguinte fórmula estrutural:
[00117] Uma ureia cíclica é uma ureia com a fórmula estrutural acima na qual quaisquer dois de Ra, Rb, Rc, e Rd, tomados em conjunto com os átomos de carbono e nitrogênio aos quais estão ligados, formam um grupo cíclico opcionalmente substituído que pode ser saturado, insaturado ou aromático.
[00118] Um "carbonato" refere-se a um composto orgânico com a seguinte fórmula estrutural:
[00119] Um carbonato cíclico é um carbonato com a fórmula estrutural acima em que R' e R" tomados em conjunto com os átomos de carbono e oxigênio aos quais estão ligados, formam um grupo cíclico opcionalmente substituído que pode ser saturado, insaturado ou aromático.
[00120] Um "carbamato" refere-se a um composto orgânico com a seguinte fórmula estrutural:
[00121] Um carbamato cíclico é um carbamato com a fórmula estrutural acima em que dois de Ra e Rb, ou Ra e Rc, tomados em conjunto com os átomos de carbono e nitrogênio/oxigênio aos quais estão ligados, formam um grupo cíclico opcionalmente substituído que pode ser saturado, insaturado ou aromático.
[00122] "Hidrocarboneto" refere-se a um composto orgânico que consiste em hidrogênio e carbono. Os hidrocarbonetos podem ser lineares, ramificados ou cíclicos; e incluem arenos, alcanos, alquenos, cicloalcanos, alquinos e etc. O termo "hidrocarboneto substituído" refere-se a um hidrocarboneto em que um átomo de carbono ou hidrogênio é substituído por um átomo que não é carbono ou hidrogênio. Os hidrocarbonetos substituídos incluem arenos substituídos, alcanos substituídos, heteroalcanos, alquenos substituídos, heteroalquenos, cicloalcanos substituídos, heterocicloalcanos, alquinos substituídos e etc.
[00123] "Pró-droga" refere-se a um derivado de um agente terapeuticamente ativo que será convertido no agente ativo in vivo. Ou seja, uma pró-droga é um precursor de uma droga.
[00124] Como utilizado neste documento, "análogo de creatina" inclui "pró-droga de creatina", que é uma pró-droga de creatina.
[00125] "Grupo protetor" refere-se a um agrupamento de átomos que, quando conectado a um grupo funcional reativo em uma molécula, máscara, reduz ou impede a reatividade do grupo funcional. Exemplos de grupos de proteção podem ser encontrados em Green et al., “Protective Groups in Organic Chemistry”, (Wiley, 2nd ed. 1991) and Harrison et al., “Compendium of Synthetic Organic Methods”, Vols. 1-8 (John Wiley and Sons, 19711996). Grupos protetores de amino representativos incluem, mas não estão limitados a, formil, acetil, trifluoroacetil, benzil, benziloxicarbonil ("CBZ") terc-butoxicarbonil ("Boc"), trimetilsilil ("TMS"), 2-trimetilsilil-etanossulfonil ("SES"), grupos tritil e tritil substituído, aliloxicarbonil, 9-fluorenilmetiloxicarbonil ("FMOC"), nitro-veratrililoxicarbonil ("NVOC") e semelhantes. Grupos protetores de hidroxil representativos incluem, mas não estão limitados a, aqueles em que o grupo hidroxil é acilado ou alquilado, como benzil e éteres tritílicos, bem como éteres alquílicos, éteres tetra-hidropiranílicos, éteres trialquilsilílicos e éteres alílicos.
[00126] " Sal" refere-se a um sal de um composto, que possui a atividade farmacológica desejada do composto original. Tais sais incluem: (1) sais de adição de ácido, formados com ácidos inorgânicos, tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e semelhantes; ou formados com ácidos orgânicos como ácido fórmico, ácido acético, ácido trifluoroacético, ácido propiônico, ácido hexanoico, ácido ciclopentanopropônico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido lático, ácido malônico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil)benzoico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido 1,2-etano-dissulfônico, ácido 2-hidroxietanossulfônico, ácido benzenossulfônico, ácido 4-clorobenzenossulfônico, ácido 2-naftalenossulfônico, ácido 4-toluenossulfônico, ácido canforossulfônico, ácido 4- metilbiciclo[2.2.2]-oct-2-eno-1-carboxílico, ácido gluco-heptônico, ácido 3-fenilpropiônico, ácido trimetilacético, ácido butilacético terciário, ácido lauril sulfúrico, ácido glucônico, ácido glutâmico, ácido hidroxinaftóico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido mucônico e semelhantes; ou (2) sais formados quando um próton acídico presente no composto original é substituído por um íon metálico, por exemplo, um íon de metal alcalino (por exemplo, lítio, sódio, potássio), um íon alcalino-terroso (por exemplo, cálcio, magnésio), ou um íon de alumínio; ou coordena com uma base orgânica, tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, N-metilglucamina e semelhantes. Em algumas modalidades, os sais incluem Na2PO4H.
[00127] " Solvato" significa um composto formado por solvatação (a combinação de moléculas de solvente com moléculas ou íons do soluto) ou um agregado que consiste em um íon ou molécula de soluto, ou seja, um composto da presente divulgação, com uma ou mais moléculas solventes. Quando a água é o solvente, o solvato correspondente é "hidrato".
[00128] Por "farmaceuticamente aceitável" entende-se um material que não é biológico ou de outro modo indesejável, isto é, o material pode ser incorporado a uma composição farmacêutica administrada a um paciente sem causar efeitos biológicos indesejáveis significativos ou interagir de maneira deletéria com qualquer um dos outros componentes da composição em que está contida. Quando o termo "farmaceuticamente aceitável" é usado para se referir a um transportador ou excipiente farmacêutico, está implícito que o veículo ou excipiente atendeu aos padrões exigidos de testes toxicológicos e de fabricação ou que está incluído no Guia de Ingredientes Inativos preparado pela U.S. Food and Drug administration.
[00129] "N-óxido", também conhecido como óxido de amina-N-óxido, significa um composto que deriva de um composto da presente divulgação via oxidação de um grupo amina do composto da presente divulgação. Um N-óxido normalmente contém o grupo funcional R3N+-O- (as vezes escrito como R3N=O ou R3NO).
[00130] O termo "substituído" prevê e permite especificamente uma ou mais substituições que são comuns na técnica. Contudo, é geralmente entendido pelos versado na técnica que os substituintes devem ser selecionados de modo a não afetar adversamente as características úteis do composto ou interferir adversamente na sua função. Substituintes adequados podem incluir, por exemplo, grupos halogênio, grupos perfluoroalquil, grupos perfluoroalcoxi, grupos alquil, grupos alquenil, grupos alquinil, grupos hidroxi, grupos oxo, grupos mercapto, grupos alquiltio, grupos alcoxi, grupos aril ou heteroaril, grupos ariloxi ou heteroariloxi, grupos arilalquil ou heteroarilalquil, grupos arilalcoxi ou heteroarilalcoxi, grupos amino, grupos alquil e dialquilamino, grupos carbamoil, grupos alquilcarbonil, grupos carboxil, grupos alcoxicarbonil, grupos alquilaminocarbonil, grupos dialquilamino carbonil, grupos arilcarbonil, grupos ariloxicarbonil, grupos alquilssulfonil, grupos arilssulfonil, grupos cicloalquil, grupos ciano, grupos C1-C6 alquiltio, grupos ariltio, grupos nitro, grupos ceto, grupos acil, grupos boronato ou boronil, grupos fosfato ou fosfonil, grupos sulfamil, grupos sulfonil, grupos sulfinil e combinações dos mesmos. No caso de combinações substituídas, como "arilalquil substituído", o grupo aril ou alquil pode ser substituído ou os grupos aril e alquil podem ser substituídos por um ou mais substituintes. Além disso, em alguns casos, substituintes adequados podem combinar para formar um ou mais anéis, como é conhecido pelos versados na técnica.
[00131] O termo "opcionalmente substituído" indica a presença ou ausência do grupo substituinte. Por exemplo, alquil opcionalmente substituído inclui alquil não substituído e alquil substituído. Os substituintes usados para substituir um grupo especificado podem ser ainda mais substituídos, tipicamente com um ou mais dos mesmos ou diferentes grupos selecionados dentre os vários grupos especificados acima.
[00132] Grupos substituintes úteis para substituir átomos de carbono saturados no grupo ou radical especificado incluem, mas não estão limitados a -Ra, halo, -O-, =O, -ORb, -SRb, -S-, =S, -NRcRc, =NRb, =N-ORb, tri-halometil, -CF3, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -NO2, =N2, -N3, -S(O)2Rb, -S(O)2NRb, -S(O)2O-, -S(O)2ORb, -OS(O)2Rb, -OS(O)2O-, -OS(O)2ORb, - b - b b b b bb - -P(O)(O )2, -P(O)(OR )(O ), -P(O)(OR )(OR ), -C(O)R , -C(S)R , -C(NR )R , -C(O)O , - b b cc b cc b b - C(O)OR , -C(S)OR , -C(O)NR R , -C(NR )NR R , -OC(O)R , -OC(S)R , -OC(O)O , - b b bb bb b - b b OC(O)OR , -OC(S)OR , -NR C(O)R , -NR C(S)R , -NR C(O)O , -NR C(O)OR , - b b b cc b b b b b cc a NR C(S)OR , -NR C(O)NR R , -NR C(NR )R e -NR C(NR )NR R , onde R é selecionado do grupo que consiste em alquil, cicloalquil, heteroalquil, ciclo-heteroalquil, aril, arilalquil, heteroaril e heteroarilalquil; cada Rb é independentemente hidrogênio ou Ra; e cada Rc é independentemente Rb ou, alternativamente, os dois Rcs podem ser tomados em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados formam um ciclo-heteroalquil de 4, 5, 6 ou 7 membros que pode opcionalmente incluir de 1 a 4 do mesmo ou de outros heteroátomos adicionais selecionados do grupo que consiste em O, N e S. Como exemplos específicos, -NRcRc pretendem incluir -NH2, -NH-alquil, N-pirrolidinil e N-morfolinil. Como outro exemplo específico, um alquil substituído deve incluir -alquileno-O-alquil, - alquileno-heteroaril, -alquileno-ciclo-heteroalquil, -alquileno-C(O)ORb, -alquileno- C(O)NRbRb, e -CH2-CH2-C(O)-CH3. O um ou mais grupos substituintes, tomados em conjunto com os átomos aos quais estão ligados, podem formar um anel cíclico incluindo cicloalquil e ciclo-heteroalquil.
[00133] Da mesma forma, grupos substituintes úteis para substituir átomos de carbono insaturados no grupo ou radical especificado incluem, mas não estão limitados a - Ra, halo, -O-, -ORb, -SRb, -S-, -NRcRc, tri-halometil, -CF3, -CN, -OCN, -SCN, -NO, -NO2, - N3, -S(O)2Rb, -S(O)2O-, -S(O)2ORb, -OS(O)2Rb, -OS(O)2O-, -OS(O)2ORb, -P(O)(O-)2, - b - b b b b bb - b P(O)(OR )(O ), -P(O)(OR )(OR ), -C(O)R , -C(S)R , -C(NR )R , -C(O)O , -C(O)OR , - b cc b cc b b - b C(S)OR , -C(O)NR R , -C(NR )NR R , -OC(O)R , -OC(S)R , -OC(O)O , -OC(O)OR , - bb bbbb -b bb b OC(S)OR , -NR C(O)R , -NR C(S)R , -NR C(O)O , -NR C(O)OR , -NR C(S)OR , - b cc b b b b b cc a b c NR C(O)NR R , -NR C(NR )R e -NR C(NR )NR R , onde R , R e R são como previamente definidos.
[00134] Grupos substituintes úteis para substituir átomos de nitrogênio em grupos heteroalquil e ciclo-heteroalquil incluem, mas não estão limitados a -Ra, -O-, -ORb, -SRb, - S-, -NRcRc, tri-halometil, -CF3, -CN, -NO, -NO2, -S(O)2Rb, -S(O)2O-, -S(O)2ORb, - OS(O)2Rb, -OS(O)2O-, -OS(O)2ORb, -P(O)(O-)2, -P(O)(ORb)(O-), -P(O)(ORb)(ORb), - b b b b b b cc b cc C(O)R , -C(S)R , -C(NR )R , -C(O)OR , -C(S)OR , -C(O)NR R , -C(NR )NR R , - b b b bb bb bb b OC(O)R , -OC(S)R , -OC(O)OR , -OC(S)OR , -NR C(O)R , -NR C(S)R , -NR C(O)OR , b b b cc b b b b b cc a b c -NR C(S)OR , -NR C(O)NR R , -NR C(NR )R e -NR C(NR )NR R , onde R , R e R são como definidos anteriormente.
[00135] O termo "aminoácido" refere-se a compostos orgânicos que contêm um grupo amino (NH2), um grupo carboxil (COOH) e qualquer um dos vários grupos laterais. Por exemplo, os vinte e dois aminoácidos que são naturalmente incorporados em polipeptídeos (também conhecidos como aminoácidos naturais ou aminoácidos de ocorrência natural) têm a fórmula estrutural NH2CHRCOOH, em que R é uma fração incluindo hidrogênio, fração de hidrocarboneto opcionalmente substituído, etc. Sabe-se que certos aminoácidos possuem dois estereoisômeros designados como aminoácidos L e D. Os aminoácidos como aqui mencionados incluem isômero L, isômero D ou uma mistura dos mesmos. Além disso, qualquer um dos aminoácidos L, D ou mistos pode ainda conter centros estereoisoméricos adicionais em suas estruturas. Os grupos amino e carboxil podem estar localizados nas posições alfa, beta, gama, delta ou outras posições. Os aminoácidos adequados para a presente divulgação podem ser aminoácidos de ocorrência natural ou aminoácidos de ocorrência não natural (por exemplo, sintéticos). Exemplos dos aminoácidos incluem, mas não estão limitados a, alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, ácido glutâmico, glutamina, glicina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina, valina, selenocisteína, pirrolisina, piroglutamato e quaisquer derivados dos mesmos.
[00136] O termo "grupo peptidil", como utilizado neste documento, denota uma fração orgânica derivada de um ou mais aminoácidos, pela remoção de um átomo de hidrogênio do grupo NH2 e/ou OH do(s) aminoácido(s). Quando o grupo peptidil é derivado de um único aminoácido, é um grupo monopeptidil. Quando o grupo peptidil é derivado de uma molécula de múltiplos aminoácidos, é um grupo multipeptidil, por exemplo, dipeptidil ou tripeptidil. Os aminoácidos em um grupo multipeptidil estão ligados entre si por meio de ligações amida. O termo "dipeptídeo", como utilizado neste documento, denota uma molécula contendo dois aminoácidos unidos por uma única ligação amida, enquanto o termo "tripeptídeo", como utilizado neste documento, denota uma molécula contendo três aminoácidos unidos por duas ligações amida.
[00137] "Grupo de saída" refere-se a um átomo ou um grupo capaz de ser deslocado por um nucleófilo e inclui halogênio, como cloro, bromo, flúor e iodo, alcoxicarbonil (por exemplo, acetoxi), ariloxicarbonil, mesiloxi, tosiloxi, trifluorometanossulfoniloxi, ariloxi (por exemplo, 2,4-dinitrofenoxi), metoxi, N, O-dimetil-hidroxilamino e semelhantes.
[00138] " Sistema de creatina quinase" inclui, mas não está limitado ao transportador de creatina, creatina, creatina quinase, fosfato de creatina e transporte de energia intracelular de creatina, creatina quinase e/ou fosfato de creatina. O sistema de creatina quinase inclui sistemas de creatina quinase mitocondrial e citoplasmática. Afetar o sistema de creatina quinase refere-se ao transporte, síntese, metabolismo, translocação e afins dos compostos e proteínas que compreendem o sistema de creatina quinase.
[00139] Por "liberação imediata" ou "liberação instantânea", entende-se uma liberação convencional ou não modificada na qual mais ou igual a cerca de 75% do agente ativo é liberado dentro de duas horas após a administração, especificamente dentro de uma hora após a administração.
[00140] Por "liberação sustentada", entende-se uma forma de dosagem na qual a liberação do agente ativo é controlada ou modificada durante um período de tempo. Sustentado pode significar, por exemplo, liberação prolongada, controlada, atrasada, temporizada ou pulsada em um determinado momento. Alternativamente, controlado pode significar que a liberação do agente ativo é prolongada por mais tempo do que seria em uma forma de dosagem de liberação imediata, por exemplo, pelo menos por várias horas.
[00141] Por "quantidade eficaz" ou "quantidade terapeuticamente eficaz" significa a quantidade do presente composto que, quando administrada a um paciente para tratamento de uma doença, como a relacionada à Deficiência de Transportador de Creatina, é suficiente para efetuar esse tratamento para a doença. A "quantidade eficaz" ou "quantidade terapeuticamente eficaz" variará dependendo do agente ativo, da doença e sua gravidade, e da idade, peso e outras condições do paciente a ser tratado.
[00142] Os termos "tratar" e "tratamento", como utilizados neste documento, referem- se a uma abordagem para obter resultados benéficos ou desejados, incluindo resultados clínicos. Para os fins desta divulgação, os resultados clínicos benéficos ou desejados incluem, mas não estão limitados a, um ou mais dos seguintes itens: diminuir a gravidade e/ou a frequência de um ou mais sintomas resultantes da doença, diminuir a extensão da doença, estabilizar a doença (por exemplo, prevenindo ou atrasando o agravamento da doença), atrasando ou retardando a progressão da doença, melhorando o estado da doença, aumentando a produção, a captação e a retenção de creatina, a fosfocreatina (por exemplo, aumentando a produção intracelular de creatina) e restaurando os níveis de creatina/fosofocreatina, ATP intracelular e outras proteínas na regulação dos níveis de creatina/fosfocreatina no corpo, especialmente no cérebro, músculos esqueléticos e coração, diminuindo a dose de um ou mais outros medicamentos necessários para tratar a doença e/ou aumentando a qualidade de vida. "Tratar" um paciente com um composto ou composição aqui descrito inclui o gerenciamento de um indivíduo para inibir ou causar regressão de uma doença ou condição.
[00143] "Profilaxia" ou "tratamento profilático" "ou tratamento preventivo" refere-se à prevenção da ocorrência de sintomas e/ou sua causa subjacente, por exemplo, prevenção de uma doença ou condição em um paciente suscetível ao desenvolvimento de uma doença ou condição (por exemplo, em risco mais alto, como resultado de predisposição genética, fatores ambientais, doenças ou distúrbios predisponentes ou semelhantes). A profilaxia inclui, por exemplo, miopatia por GNE, deficiência de arginina:glicina amidinotransferase (AGAT) e deficiência de guanidinoacetato metiltransferase (GAMT), na qual alterações crônicas da doença nos músculos são irreversíveis e para as quais dados de modelo animal sugerem benefício do tratamento na profilaxia.
[00144] "Doença" refere-se a uma doença, distúrbio, condição, sintoma ou indicação.
[00145] "Composição farmacêutica" refere-se a pelo menos um composto da divulgação e pelo menos um veículo farmaceuticamente aceitável, com o qual o pelo menos um composto da divulgação é administrado a um paciente, em contato com um tecido ou órgão ou em contato com uma célula. "Farmaceuticamente aceitável" refere-se a aprovado ou aprovável por uma agência reguladora do governo federal ou estadual ou listado na Farmacopeia dos EUA ou em outra farmacopeia geralmente reconhecida para uso em animais e, mais particularmente, em seres humanos.
[00146] " Sal farmaceuticamente aceitável" refere-se a um sal de um composto, que possui a atividade farmacológica desejada do composto original. Tais sais incluem: (1) sais de adição de ácido, formados com ácidos inorgânicos, tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e semelhantes; ou formados com ácidos orgânicos como ácido acético, ácido propiônico, ácido hexanoico, ácido ciclopentanopropônico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido lático, ácido malônico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil)benzoico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido 1,2-etano-dissulfônico, ácido 2- hidroxietanossulfônico, ácido benzenossulfônico, ácido 4-clorobenzenossulfônico, ácido 2- naftalenossulfônico, ácido 4-toluenossulfônico, ácido canforossulfônico, ácido 4- metilbiciclo[2.2.2]-oct-2-eno-1-carboxílico, ácido gluco-heptônico, ácido 3-fenilpropiônico, ácido trimetilacético, ácido butilacético terciário, ácido lauril sulfúrico, ácido glucônico, ácido glutâmico, ácido hidroxinaftóico, ácido salicílico, ácido esteárico, ácido mucônico e semelhantes; e (2) sais formados quando um próton acídico presente no composto original é substituído por um íon metálico, por exemplo, um íon de metal alcalino, um íon alcalino- terroso, ou um íon de alumínio; ou coordena com uma base orgânica, tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, N-metilglucamina e semelhantes. Em certas modalidades, um sal farmaceuticamente aceitável é o sal cloridrato.
[00147] "Veículo farmaceuticamente aceitável" refere-se a um diluente farmaceuticamente aceitável, um adjuvante farmaceuticamente aceitável, um excipiente farmaceuticamente aceitável, um transportador farmaceuticamente aceitável ou uma combinação de qualquer um dos anteriores, com os quais um composto da divulgação pode ser administrado a um paciente e que faz não destruir a atividade farmacológica da mesma e que não é tóxico quando administrado em doses suficientes para fornecer uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto.
[00148] O termo "transportador" refere-se a um diluente, adjuvante, excipiente ou veículo com o qual um composto é administrado.
[00149] O termo "paciente" refere-se a um animal, por exemplo, um mamífero e inclui, mas não está limitado a, humano, bovino, cavalo, felino, canino, roedor ou primata. De preferência, o paciente é humano.
[00150] "AUC" é a área sob uma curva que representa a concentração de um composto ou metabolito do mesmo em um fluido biológico em um paciente em função do tempo após a administração do composto ao paciente. Em certas modalidades, o composto pode ser uma pró-droga e o metabolito pode ser uma droga. Exemplos de fluidos biológicos incluem plasma e sangue. A AUC pode ser determinada medindo a concentração de um composto ou metabolito do mesmo em um fluido biológico, como o plasma ou o sangue, usando métodos como cromatografia líquida-espectrometria de massa em tandem (LC- MS/MS), em vários intervalos de tempo, e calculando a área sob a curva de concentração versus tempo no plasma. Os métodos adequados para calcular a AUC a partir de uma curva de concentração de droga versus tempo são bem conhecidos na técnica. Como relevante para a divulgação, uma AUC para uma droga ou metabolito da mesma pode ser determinada medindo ao longo do tempo a concentração da droga no plasma, sangue ou outro fluido ou tecido biológico de um paciente após a administração de um composto correspondente da divulgação ao paciente.
[00151] "Biodisponibilidade" refere-se à taxa e quantidade de uma droga que atinge a circulação sistêmica de um paciente após a administração da droga ou pró-droga do mesmo ao paciente e pode ser determinado avaliando, por exemplo, o perfil de concentração versus tempo no plasma ou no sangue de uma droga. Os parâmetros úteis para caracterizar uma curva de concentração versus tempo no plasma ou no sangue incluem a área sob a curva (AUC),o tempo até a concentração máxima (Tmax), e a concentração máxima da droga (Cmax), onde Cmax é a concentração máxima de uma droga no plasma ou no sangue de um paciente após a administração de uma dose da droga ou forma da droga ao paciente, e Tmax é o tempo para a concentração máxima (Cmax) de uma droga no plasma ou sangue de um paciente após a administração de uma dose da droga ou forma de droga ao paciente.
[00152] "Cmax"; é a concentração máxima de um medicamento no plasma ou no sangue de um paciente após a administração de uma dose da droga ou pró-droga ao paciente.
[00153] "Tmax" é o tempo até a concentração máxima (pico) (Cmax) de uma droga no plasma ou no sangue de um paciente após a administração de uma dose da droga ou pró- droga ao paciente.
[00154] Modalidades dos Compostos
[00155] Defeito do transportador de creatina (CTD) é um erro inato do metabolismo da creatina, no qual a creatina não é transportada adequadamente para o cérebro e os músculos devido a transportadores de creatina com defeito. CTD é um distúrbio recessivo ligado ao X causado por mutações no gene SLC6A8. Estima-se que existam 50.000 pacientes com DTC no mundo desenvolvido, com mulheres tendo o fenótipo leve a grave. As características clínicas típicas incluem déficits no CNS, como convulsões, incapacidade intelectual progressiva, autismo, atrasos na fala/linguagem, atrasos motores graves e problemas comportamentais. Os déficits não relacionados ao CNS incluem hipotonia muscular e hipotrofia.
[00156] Para abordar o CTD e a infinidade de condições frequentemente associadas, as pró-drogas de creatina da presente divulgação foram projetadas para atravessar tecidos barreira importantes, como a mucosa intestinal, a barreira hematoencefálica e a barreira placentária. Devido à capacidade de passar através das membranas biológicas, as pró-drogas da creatina podem restaurar e manter a homeostase da energia nas células desprovidas de ATP através do sistema de creatina quinase, e restaurar rapidamente os níveis de ATP para proteger os tecidos contra estresse isquêmico adicional. Por conseguinte, sem estar vinculado a nenhuma teoria, as pró-drogas de creatina da presente divulgação teriam uma energia livre mais alta ou uma menor afinidade pela creatina quinase e serão capazes de regenerar o ATP sob condições mais severas de depleção de energia. As pró-drogas de creatina da presente divulgação também podem ser usadas para fornecer concentrações sistêmicas sustentadas de creatina. Assim, as pró-drogas aqui divulgadas podem ser eficazes no tratamento de CTD e nas condições associadas provocadas por disfunção no metabolismo energético.
[00157] Em um aspecto, a presente divulgação é direcionada a análogos de creatina que são convertidos, pelo menos em parte, em creatina após administração a um paciente. A presente divulgação é direcionada, em alguns aspectos, a análogos de creatina deuterados que serão liberados em parte, a creatina deuterada após administração a um paciente. A presente divulgação abrange análogos de creatina ou pró-drogas de creatina que podem ser deuterados ou não deuterados. Numa modalidade, os análogos de creatina deuterados ou pró- drogas de creatina deuterados têm atividade in vivo e in vitro comparável à dos análogos de creatina não deuterados correspondentes ou pró-drogas de creatina não deuterados correspondentes. A deuteração dos análogos da creatina ou das pró-drogas de creatina é particularmente útil na quantificação e análise da atividade in vivo do análogo ou da pró- droga e seu destino devido à capacidade de separar seu efeito da creatina não deuterada endógena e creatinina. Assim, em algumas modalidades, a deuteração do composto da presente divulgação é para melhorar a detecção e quantificação do efeito do composto e não necessariamente para modificar e/ou intensificar a eficácia do composto.
[00158] Em uma modalidade da presente divulgação, os análogos da creatina compreendem uma cadeia de amida de ácido graxo, que pode ser referida como amida de creatina de ácido graxo ou denotada como FAA-Cr.
[00159] Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação são quimicamente e metabolicamente estáveis em circulação. Em outra modalidade, os compostos da presente divulgação são capazes de atravessar a barreira hematoencefálica. Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação podem entrar em neurônios, células gliais, astrócitos e/ou oligodendritos no cérebro e liberar creatina ou creatina deuterada. Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação não ciclizam substancialmente em creatinina após administração a um paciente em necessidade do mesmo. Em uma modalidade, o composto da presente divulgação produz menos creatinina in vivo por ciclização quando comparado a condições in vitro.
[00160] Numa modalidade, os compostos da presente divulgação favorecem a liberação de creatina no cérebro sobre a ciclização em creatinina. Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação liberam quantidades maiores de creatina no cérebro quando comparadas com pró-drogas de creatina conhecidas anteriormente, quando administrados na mesma equivalência molar. Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação fornecem quantidades menores de subproduto de creatinina ciclizada quando administrados a um sujeito em necessidade do mesmo, em comparação com pró- drogas de creatina conhecidas anteriormente, quando administrados na mesma equivalência molar. Numa modalidade, os compostos da presente divulgação liberam mais creatina no cérebro do que a quantidade de creatinina liberada no cérebro. Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação fornecem maior concentração de creatina no cérebro do que a concentração de creatinina no cérebro. Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação fornecem maior concentração de creatina no plasma do que a concentração de creatinina no plasma.
[00161] Sem estar vinculado a nenhuma teoria em particular, foi descoberto que a administração dos compostos da presente divulgação favorece a liberação de creatina no cérebro de um sujeito em tratamento. Esta via desejada é altamente dominante sobre a reação lateral ciclizante indesejável que leva à formação de creatinina. Como tal, acredita-se que os compostos pró-drogas aqui descritos sejam eficazes no tratamento de CTD.
[00162] Numa modalidade, um composto da presente divulgação tem a estrutura da Fórmula (I):
[00163] ou um sal ou solvato aceitável farmaceuticamente do mesmo; em que:
[00164] R é -CH3, -CH2D, -CHD2, ou -CD3;
[00165] R1 é alquil linear ou ramificado, alquenil, aril ou heteroaril linear ou ramificado, em que R1 é opcionalmente substituído por R4;
[00166] R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5;
[00167] R3 é -C(O)OR6, ou -alquil(OH);
[00168] ou alternativamente, R2 e R3 juntos são um grupo alquileno que, com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 5 a 6 membros em que o anel de 5 a 6 membros é opcionalmente substituído por oxo;
[00169] R4 é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[00170] R5 é alquil linear ou ramificado; e
[00171] R6 é H, é alquil linear ou ramificado,
[00172] ou alternativamente, R6 e R1 juntos são um grupo alquileno ou um grupo alquenileno que, com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 12 a 25 membros, em que 1, 2, 3 ou 4 -CH2- as unidades que compõem o grupo alquileno ou o grupo alquenileno são opcionalmente substituídas por um heteroátomo selecionado de -O-, -S- ou -N-, desde que nenhum -CH2- adjacente seja substituído; em que o grupo alquileno ou o grupo alquenileno é opcionalmente substituído por um ou mais R4; e
[00173] em que dois R4 no mesmo carbono ou carbono adjacente podem formar um anel fundido ou espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel fundido ou espiro heterocíclico de 3 a 6 membros.
[00174] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R é -CH3 ou -CD3.
[00175] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R1 é -C6-C20 alquil ou C6 C20 alquenil. Em algumas modalidades, R1 é C6-C18 alquil ou -C6-C18 alquenil. Em outras modalidades, R1 é piridil.
[00176] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R2 é hidrogênio. Em algumas modalidades, R2 é -C(O)OR5.
[00177] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R5 é C1-C6 alquil linear ou ramificado.
[00178] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R3 é -C(O)OR6. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R6 é H ou C1-C8 alquil linear ou ramificado.
[00179] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), R6 e R1 juntos são um grupo alquileno ou um grupo alquenileno que, com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 12 a 25 membros, em que 1, 2, 3 ou 4 -CH2- as unidades que compõem o grupo alquileno ou o grupo alquenileno são opcionalmente substituídas por um heteroátomo selecionado de -O-, -S- ou -N-, desde que nenhum -CH2- adjacente seja substituído; em que o grupo alquileno ou o grupo alquenileno é opcionalmente substituído por um ou mais R4. Numa modalidade, R6 e R1 juntos são um grupo alquileno não substituído ou um grupo alquenileno não substituído que forma um anel de 13 a 24 membros com os átomos aos quais estão ligados.
[00180] Em uma modalidade do composto de Fórmula (I), R4 é halogênio, -OH, - O(C1-C6 alquil), oxo, -NH2, -NH(C1-C6 alquil), -N(C1-C6 alquil)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil. Em algumas modalidades, R4 é halogênio, -OH, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil. Em algumas modalidades, R4 é -C1-C6 alquil linear ou ramificado.
[00181] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), dois R4 no mesmo carbono formam um anel espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel espiro heterocíclico de 3 a 6 membros.
[00182] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), dois R4 no carbono adjacente formam um anel cicloalquil fundido de 3 a 6 membros ou um anel heterocíclico fundido de 3 a 6 membros.
[00183] Em uma modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é um sal farmaceuticamente aceitável selecionado de sal de sódio, sal de potássio, sal de lítio, sal de Na2PO4H, sal do ácido clorídrico, sal do ácido fórmico, sal do ácido trifluoroacético, sal do ácido acético ou sal do ácido tricloroacético/2 lítio. Numa modalidade, o sal farmaceuticamente aceitável de Fórmula (I) pode ser um hidrato.
[00184] Numa modalidade, R é CH3. Numa outra modalidade, R é CD3.
[00185] Numa modalidade, R1 é C1-C20 alquil ou C2-C20 alquenil. Numa modalidade, R1 é C6-C20 alquil ou C6-C20 alquenil. Numa modalidade, R1 é um C6-C20 alquil. Em uma modalidade, R1 é um alquil linear ou ramificado, opcionalmente substituído, selecionado de C6-alquil, C7-alquil, C8-alquil, C9-alquil, C10-alquil, C11-alquil, C12- alquil, C13-alquil, C14- alquil, C15-alquil, C16-alquil, C17-alquil, C18-alquil, C19-alquil ou C20-alquil. Em uma modalidade, R1 é um alquil linear selecionado de C6-alquil, C7- alquil, C8-alquil, C9-alquil, C10-alquil, C11-alquil, C12-alquil, C13-alquil, C14- alquil, C15-alquil, C16-alquil, C17-alquil, C18-alquil, C19-alquil ou C20-alquil. Em outras modalidades, R1 é um alquil linear não substituído selecionado de C6-alquil, C7-alquil, C8- alquil, C9-alquil, C10-alquil, C11-alquil, C12-alquil, C13-alquil, C14- alquil, C15-alquil, C16-alquil, C17-alquil, C18-alquil, C19-alquil ou C20-alquil.
[00186] Numa modalidade, R1 é um C6-C20 alquenil. Em uma modalidade, R1 é um alquenil linear ou ramificado, opcionalmente substituído, selecionado de C6-alquenil, C7- alquenil, C8-alquenil, C9-alquenil, C10-alquenil, C11-alquenil, C12-alquenil, C13-alquenil, C14-alquenil, C15-alquenil, C16-alquenil, C17-alquenil, C18-alquenil, C19-alquenil ou C20-alquenil. Em outra modalidade, R1 é um alquenil linear selecionado de C6-alquenil, C7- alquenil, C8-alquenil, C9-alquenil, C10-alquenil, C11-alquenil, C12-alquenil, C13-alquenil, C14-alquenil, C15-alquenil, C16-alquenil, C17-alquenil, C18-alquenil, C19-alquenil ou C20-alquenil. Em outras modalidades, R1 é um alquenil linear não substituído selecionado de C6-alquenil, C7-alquenil, C8-alquenil, C9-alquenil, C10-alquenil, C11-alquenil, C12- alquenil, C13-alquenil, C14-alquenil, C15-alquenil, C16-alquenil, C17-alquenil, C18- alquenil, C19-alquenil ou C20-alquenil.
[00187] Em algumas modalidades, quando R1 é alquenil, o alquenil pode conter 1 a 10 ligações duplas. Numa modalidade, quando R1 é alquenil, o alquenil pode conter 1, 2, 3 ou 4 ligações duplas. Numa modalidade, quando R1 é alquenil contendo múltiplas ligações duplas, pode assumir a forma E ou Z ou uma mistura das mesmas. Em algumas modalidades, quando R1 é alquenil contendo várias ligações duplas, todas as ligações duplas estão na orientação Z.
[00188] Numa modalidade, R1 é um aril ou um heteroaril. Numa modalidade, R1 é um aril. Numa modalidade, R1 é um fenil opcionalmente substituído por R4.
[00189] Numa modalidade, R1 é um heteroaril. Em algumas modalidades, R1 é um heteroaril de 5 ou 6 membros contendo pelo menos um átomo de nitrogênio. Numa modalidade, R1 é um piridil opcionalmente substituído por R4. Em outra modalidade, R1 é selecionado de Numa modalidade, R1 é
[00190] Numa modalidade, R2 é hidrogênio. Em outra modalidade, R2 é -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5.
[00191] Em uma modalidade, R2 é -C(O)OR5. Em outra modalidade, R2 é -C(O)OR5 onde R5 é C1-C6 alquil linear ou ramificado. Em algumas modalidades, R2 é - C(O)OC(CH3)3.
[00192] Em uma modalidade, R2 é -C(O)NHR5. Em outra modalidade, R2 é - C(O)NHR5 onde R5 é C1-C6 alquil linear ou ramificado.
[00193] Em uma modalidade, R2 é -C(O)R1. Em uma modalidade, R2 é -C(O)R1 onde R1 é C6-C20 alquil ou C6-C20 alquenil. Em uma modalidade, R2 é -C(O)R1 onde R1 um C6-C20 alquenil. Em uma modalidade, R2 é -C(O)R1 onde R1 é um alquil linear ou ramificado opcionalmente substituído selecionado dentre C6-alquil, C7-alquil, C8-alquil, C9-alquil, C10-alquil, C11-alquil, C12 -alquil, C13-alquil, C14-alquil, C15-alquil, C16- alquil, C17-alquil, C18-alquil, C19-alquil ou C20-alquil. Em uma modalidade, R2 é -C(O)R1 onde R1 é um alquil linear selecionado de C6-alquil, C7-alquil, C8-alquil, C9-alquil, C10- alquil, C11-alquil, C12-alquil, C13-alquil, C14- alquil, C15-alquil, C16-alquil, C17-alquil, C18-alquil, C19-alquil ou C20-alquil. Em uma outra modalidades, R2 é -C(O)R1 onde R1 é um alquil linear não substituído selecionado de C6-alquil, C7-alquil, C8-alquil, C9-alquil, C10-alquil, C11-alquil, C12-alquil, C13-alquil, C14- alquil, C15-alquil, C16-alquil, C17- alquil, C18-alquil, C19-alquil ou C20-alquil.
[00194] Em uma modalidade, R2 é -C(O)R1 onde R1 é um C6-C20 alquenil. Em uma modalidade, R2 é -C(O)R1 onde R1 é um alquenil linear ou ramificado, opcionalmente substituído, selecionado de C6-alquenil, C7-alquenil, C8-alquenil, C9-alquenil, C10- alquenil, C11-alquenil, C12-alquenil, C13-alquenil, C14-alquenil, C15-alquenil, C16- alquenil, C17-alquenil, C18-alquenil, C19-alquenil ou C20-alquenil. Em outra modalidade, R2 é -C(O)R1 onde R1 é um alquenil linear selecionado de C6-alquenil, C7-alquenil, C8- alquenil, C9-alquenil, C10-alquenil, C11-alquenil, C12-alquenil, C13-alquenil, C14- alquenil, C15-alquenil, C16-alquenil, C17-alquenil, C18-alquenil, C19-alquenil ou C20- alquenil. Em outras modalidades, R2 é -C(O)R1 onde R1 é um alquenil linear não substituído selecionado de C6-alquenil, C7-alquenil, C8-alquenil, C9-alquenil, C10-alquenil, C11- alquenil, C12-alquenil, C13-alquenil, C14-alquenil, C15-alquenil, C16-alquenil, C17- alquenil, C18-alquenil, C19-alquenil ou C20-alquenil.
[00195] Em algumas modalidades, R2 é -C(O)R1 onde R1 é alquenil R1 contém 1 a 10 ligações duplas. Em uma modalidade, R2 é -C(O)R1 onde R1é alquenil e R1 pode conter 1, 2, 3 ou 4 ligações duplas. Em uma modalidade, R2 é -C(O)R1 onde R1 é alquenil contendo múltiplas ligações duplas, cada uma na forma E ou Z ou uma mistura das mesmas. Em algumas modalidades, R2 é -C(O)R1 onde R1 é alquenil contendo múltiplas ligações duplas, todas as ligações duplas estão na orientação Z.
[00196] Numa modalidade, R3 é -C(O)OR6. Em outra modalidade, R3 é -C(O)OR6, onde R6 é H ou um alquil linear ou ramificado. Em uma modalidade, R3 é -C(O)OR6, onde R6 é H. Em algumas modalidades, R3 é -C(O)OR6, onde R6 é um alquil linear ou ramificado. Em algumas modalidades, R3 é -C(O)OR6, onde R6 é um C1-C10 alquil linear ou ramificado. Numa modalidade, R3 é -C(O)OR6, onde R6 é um C1-C8 alquil linear ou ramificado. Em algumas modalidades, R6 é um alquil linear selecionado de C1-alquil, C2-alquil, C3-alquil, C4-alquil, C5-alquil, C6-alquil, C7-alquil, C8-alquil, C9-alquil ou C10- alquil. Em uma modalidade, R3 é -C(O)OR6, onde R6 é um alquil ramificado selecionado de C3-alquil, C4- alquil, C5-alquil, C6-alquil, C7-alquil, C8-alquil, C9-alquil ou C10-alquil. Em uma modalidade, R3 é -C(O)OR6, onde R6 é metil, etil, propil, isopropil, n-butil, t-butil, n-pentil, n-hexil, n-heptil ou n-octil.
[00197] Em uma modalidade, R3 é -C(O)OR6, onde R6 é um Em uma modalidade, R3 é -C(O)OCH2OC(O)R5, onde R5 é um C1-C6 alquil linear ou ramificado. Em outra modalidade, R3 é -C(O)OCH2OC(O)R5, onde R5 é um alquil linear selecionado de C1 alquil, C2-alquil, C3-alquil, C4-alquil, C5-alquil ou C6-alquil. Numa modalidade, R3 é -C(O)OCH2OC(O)R5, onde R5 é metil. Em outra modalidade, R3 é -C(O)OCH2OC(O)R5, onde R5 é um alquil ramificado selecionado de C3-alquil, C4-alquil, C5-alquil ou C6-alquil.
[00198] Numa modalidade, R3 é -C(O)OR6, onde R6 é um
[00199] Em outra modalidade, R3 é -alquileno-(OH). Numa modalidade, R3 é - (alquileno C1-C10) - (OH). Numa modalidade, R3 é -(C1 alquileno)-(OH), -(C2 alquileno)- (OH), -(C3 alquileno)-(OH), -(C4 alquileno)-(OH), -(C5 alquileno)-(OH), -(C6 alquileno)- (OH), -(C7 alquileno)-(OH), -(C8 alquileno)-(OH), -(C9 alquileno)-(OH), ou -(C10 alquileno)-(OH). Numa modalidade, R3 é -metileno-(OH).
[00200] Numa modalidade, R2 e R3 são grupos alquileno e juntos formam um anel de 5 a 6 membros opcionalmente substituído por oxo. Numa modalidade, R2 e R3 são grupos alquileno e juntos formam um anel de 5 membros opcionalmente substituído por oxo. Em outra modalidade, R2 e R3 são grupos alquileno e juntos formam um anel de 6 membros opcionalmente substituído por oxo. Numa modalidade, R2 e R3 juntos formam
[00201] Numa modalidade, os compostos de Fórmula (I) estão presentes como sais farmaceuticamente aceitáveis. Numa modalidade, os compostos de Fórmula (I) são sais de sódio. Em uma outra modalidade, os compostos de Fórmula (I) são sais de lítio. Em uma outra modalidade, os compostos de Fórmula (I) são sais de ácido clorídrico. Em uma outra modalidade, os compostos de Fórmula (I) são dois sais de lítio (sal TCA/2Li) do ácido tricloroacético.
[00202] Numa modalidade do composto da Fórmula (I), o composto tem a estrutura da Fórmula (II):
[00203] ou um sal ou solvato aceitável farmaceuticamente do mesmo; em que:
[00204] R é CH3, CH2D, CHD2, ou CD3;
[00205] R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5;
[00206] R1 é alquil linear ou ramificado ou alquenil linear ou ramificado, em que R1 é opcionalmente substituído por R4;
[00207] R4 é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[00208] X em cada ocorrência é independentemente -C(R5a)2-C(R5a)2-, -CH(R5a)- CH(R5a)-, -C(R5a)=C(R5a)-, -O-C(R5a)2-, -O-CH(R5a)-, -C(R5a)2-O-, ou -CH(R5a)-O-;
[00209] Y é -C(R5a)2-; -CH(R5a)-; -C(R5a)2-C(R5a)2-, -CH(R5a)-CH(R5a)-, - C(R5a)=C(R5a)-, -C(R5a)2-O-, ou -CH(R5a)-O-;
[00210] n é 3, 4, 5 ou 6, em que quando n é 3, Y é -CH(R5a)-CH(R5a)-, - C(R5a)=C(R5a)-, ou -CH(R5a)-O-;
[00211] R5 é H ou alquil linear ou ramificado;
[00212] R5a é H, halogênio, -OH, -OR5, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil; e
[00213] em que dois R5a no mesmo carbono ou carbono adjacente podem formar um anel fundido ou espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel fundido ou espiro heterocíclico de 3 a 6 membros.
[00214] Em uma modalidade do composto de Fórmula (II), pelo menos um de X é - C(R5a)2-C(R5a)2-, -CH(R5a)-CH(R5a)-, ou -C(R5a)=C(R5a)-, em que R5a é H ou -C1-C6 alquil; e em que, dois R5a no mesmo carbono ou carbono adjacente pode formar um anel cicloalquil com 3 a 6 membros fundido ou espiro ou um anel heterocíclico com 3 a 6 membros fundido ou espiro Em algumas modalidades, X é -CH2CH2-, -CH=CH-, -O-CH2- , ou -CH2-O-.
[00215] Em uma modalidade do composto de Fórmula (II), Y é -C(R5a)2-, - CH(R5a)-; -C(R5a)2-C(R5a)2-, -CH(R5a)-CH(R5a)-, ou -C(R5a)=C(R5a)-, em que R5a é H ou -C1-C6 alquil; e em que dois R5a no mesmo carbono ou no carbono adjacente pode formar um anel fundido ou espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel fundido ou espiro heterocíclico de 3 a 6 membros. Em algumas modalidades, Y é -CH2-, -CH2CH2-, ou - CH=CH-. Em outras modalidades, Y é -C(R5a)2-, -CH(R5a)-; -C(R5a)2-C(R5a)2-, - CH(R5a)-CH(R5a)-, -CH2-, -CH2CH2-, -CH=CH-, ; em que, R5a é -C1-C6 alquil linear ou ramificado.
[00216] Numa modalidade do composto de Fórmula (II), R é -CH3 ou -CD3.
[00217] Numa modalidade do composto de Fórmula (II), R2 é hidrogênio.
[00218] Em uma modalidade do composto de Fórmula (II), o composto é um sal farmaceuticamente aceitável selecionado de sal de sódio, sal de potássio, sal de lítio, sal de Na2PO4H, sal do ácido clorídrico, sal do ácido fórmico, sal do ácido trifluoroacético, sal do ácido acético ou sal do ácido tricloroacético/2 lítio. Numa modalidade, o sal farmaceuticamente aceitável de Fórmula (II) pode ser um hidrato.
[00219] Numa modalidade dos compostos de Fórmula (I), o composto tem a estrutura de Fórmula (I-A):
[00220] ou um sal ou solvato aceitável farmaceuticamente do mesmo; em que:
[00221] R é -CH3, -CH2D, -CHD2, ou -CD3;
[00222] R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5;
[00223] R3 é -C(O)OR6, ou -alquil(OH);
[00224] ou alternativamente, R2 e R3 juntos são um grupo alquileno que, com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 5 a 6 membros em que o anel de 5 a 6 membros é opcionalmente substituído por oxo;
[00225] R4 é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[00226] R4a, R4b, R4c, e R4d, cada um independentemente, é H, halogênio, -OH, - OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[00227] R5 é alquil linear ou ramificado; e
[00228] R6a e R1 juntos são um grupo alquileno ou um grupo alquenileno que, com os átomos aos quais estão ligados, forma um anel de 12 a 25 membros, em que 1, 2, 3 ou 4 -CH2- as unidades que compõem o grupo alquileno ou o grupo alquenileno são opcionalmente substituídas por um heteroátomo selecionado de -O-, -S- ou -N-, desde que nenhum -CH2- adjacente seja substituído; em que o grupo alquileno ou o grupo alquenileno é opcionalmente substituído por um ou mais R4; e
[00229] em que, R4a e R4b ou R4c e R4d juntos podem formar um anel espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel espiro heterocíclico de 3 a 6 membros; ou
[00230] em que R4b e R4c juntos podem formar um anel cicloalquil fundido de 3 a 6 membros ou um anel heterocíclico fundido de 3 a 6 membros.
[00231] Como aqui descrito, qualquer uma das modalidades descritas para a Fórmula (I) pode ser aplicada ao composto de Fórmula (I-A).
[00232] Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), R4a é -C1-C6 alquil. Em algumas modalidades, R4a é -C1-C6 alquil e R4b, R4c, e R4d é H. Em outras modalidades, R4a e R4b é -C1-C6 alquil e R4c e R4d é H. Em outra modalidade, R4a e R4c é -C1-C6 alquil e R4b e R4d é H.
[00233] Em uma modalidade do composto de Fórmula (I-A), R4b é -C1-C6 alquil. Em algumas modalidades, R4b é -C1-C6 alquil e R4a, R4c, e R4d é H. Numa modalidade, R4a, R4b, R4c, e R4d, cada um independentemente, é H.
[00234] Numa modalidade do composto de Fórmula (IA), R4a e R4b juntos formam um anel espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel espiro heterocíclico de 3 a 6 membros. Em algumas modalidades, R4a e R4b juntos formam ou
[00235] Numa modalidade do composto de Fórmula (IA), R4b e R4c juntos formam um anel cicloalquil fundido de 3 a 6 membros ou um anel heterocíclico fundido de 3 a 6 membros. Em algumas modalidades, R4b e R4c juntos formam ou
[00236] Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), R é -CH3 ou -CD3.
[00237] Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), R2 é hidrogênio.
[00238] Numa modalidade do composto de Fórmula (I-A), o composto é um sal farmaceuticamente aceitável selecionado do sal de sódio, sal de potássio, sal de lítio, sal do ácido clorídrico, sal do ácido fórmico, sal do ácido trifluoroacético, sal do ácido acético ou sal do ácido tricloroacético/2 lítio. Em uma modalidade do composto de Fórmula (I-A), o composto é um sal farmaceuticamente aceitável selecionado do sal de sódio, sal de lítio, sal do ácido clorídrico, sal do ácido fórmico, sal do ácido trifluoroacético, sal do ácido acético ou sal do ácido tricloroacético/2 lítio.
[00239] Numa modalidade dos compostos de Fórmula (I), o composto tem a estrutura de Fórmula (III):
[00240] ou um sal ou solvato aceitável farmaceuticamente do mesmo; em que:
[00241] R é CH3, CH2D, CHD2, ou CD3;
[00242] R1 é alquil linear ou ramificado, ou alquenil linear ou ramificado;
[00243] R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5;
[00244] R5 é H ou alquil linear ou ramificado;
[00245] R5a é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -Ci- C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil;
[00246] n é 0, 1, 2, 3, 4 ou 5; e
[00247] p é 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, ou 8.
[00248] Numa modalidade do composto de Fórmula (III), R éCH3 ou CD3.
[00249] Numa modalidade do composto de Fórmula (III), R2 é H.
[00250] Numa modalidade do composto de Fórmula (III), n é 1. Em algumas modalidades, n é 2. Numa modalidade, n é 3.
[00251] Numa modalidade do composto de Fórmula (III), p é 0, 1 ou 2.
[00252] Numa modalidade dos compostos de Fórmula (I), o composto tem a estrutura de Fórmula (III-A):
[00253] ou um sal ou solvato aceitável farmaceuticamente do mesmo; em que:
[00254] R é -CH3, -CH2D, -CHD2, ou -CD3;
[00255] R1 é alquil linear ou ramificado, ou alquenil linear ou ramificado;
[00256] R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5;
[00257] R5 é H ou alquil linear ou ramificado;
[00258] R5a é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -Ci- C6 alquil, ou -Ci-Cβ haloalquil;
[00259] em que dois R5a no mesmo carbono ou carbono adjacente podem formar um anel fundido ou espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel fundido ou espiro heterocíclico de 3 a 6 membros;
[00260] n é 0, i, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, i0 ou ii; e
[00261] p é 0, i, 2, 3, 4, 5, 6, 7, ou 8.
[00262] Numa modalidade do composto de Fórmula (III-A), R é -CH3 ou -CD3.
[00263] Numa modalidade do composto de Fórmula (III-A), R2 é H.
[00264] Numa modalidade do composto de Fórmula (III-A), n é 0, i, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ou i0. Em algumas modalidades, n é 0, i, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, ou 9. Em outras modalidades, n é 0, i, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8. Em uma modalidade, n é 0, i, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7.
[00265] Numa modalidade do composto de Fórmula (III-A), p é 0, i, 2, 3, ou 4. Numa modalidade, p é 0, i ou 2.
[00266] Numa modalidade do composto de Fórmula (III-A), R5 é -C1-C6 alquil linear ou ramificado.
[00267]
[00268] Em uma modalidade do composto de Fórmula (III-A), R5a é halogênio, - OH, -O(C1-C6 alquil), oxo, -NH2, -NH(C1-C6 alquil), -N(CI-C6 alquil)2, -NO2, -CF3, -C1C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil. Em algumas modalidades, R5a é halogênio, -OH, -C1-C6 alquil, ou -C1-C6 haloalquil. Em outras modalidades, R5a é -C1-C6 aquil. Em algumas modalidades, R5a é -C1-C6 alquil linear ou ramificado.
[00269] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), (IA), (II), (III) e/ou (III-A), o composto é selecionado de: um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,
[00270] em que R é -CH3 ou -CD3 e R2 é H.
[00271] Em uma modalidade do composto de Fórmula (III) o (III-A), o composto é um sal farmaceuticamente aceitável selecionado de sal de sódio, sal de potássio, sal de lítio, sal de Na2PO4H, sal do ácido clorídrico, sal do ácido fórmico, sal do ácido trifluoroacético, sal do ácido acético ou sal do ácido tricloroacético/2 lítio. Numa modalidade, o sal farmaceuticamente aceitável de Fórmula (III) ou (III-A) pode ser um hidrato.
[00272] Numa modalidade de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela A, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
[00273] Numa modalidade de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela B, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
[00274] Numa modalidade de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela C, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
[00275] Numa modalidade de Fórmula (I), (IA), (II), (III) e/ou (III-A), o composto é selecionado da Tabela D, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
[00276] Numa modalidade de Fórmula (I), (IA), (II), (III) e/ou (III-A), o composto é selecionado da Tabela E:
[00277] Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela S1. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela S2. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela 2A, 2B, ou 2C. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela 2B. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela 3A ou 3B. Numa modalidade do composto de Fórmula (I), o composto é selecionado da Tabela 3B.
[00278] Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação são projetados para aumentar a liberação de creatina durante a clivagem de pró-drogas. Em outra modalidade, os compostos da presente divulgação são projetados para minimizar a ciclização em creatinina, que é um metabólito sem saída.
[00279] Em algumas modalidades dos compostos de fórmula (I), R3 é -C(O)OR6, onde R6 é um alquil linear ou ramificado melhorou o cruzamento e/ou absorção de BBB pelos neurônios/células gliais no cérebro por: 1) proteção da carga negativa do ácido correspondente (COOH) no pH fisiológico, 2) aumento da hidrofobicidade do composto e/ou 3) proteção do composto do efluxo através do BBB e/ou dos neurônios/células da glia no cérebro.
[00280] Em uma modalidade, sem estar vinculado a nenhuma teoria, a clivagem dos compostos da presente divulgação com cadeias de amidas de ácidos graxos R1 alquil ou alquenil na fórmula (I)) pode ser mediada por enzimas de hidrólise de amida de ácidos graxos (FAAH) ( FAAH1/2), expresso predominantemente no cérebro. Em outras modalidades, a clivagem dos compostos da presente divulgação pode ser mediada por outras enzimas.
[00281] Os compostos da presente divulgação compreendendo um ou mais átomos de deutério, em uma modalidade, podem ser úteis para facilitar a detecção e diferenciação da creatina endógena nos tecidos.
[00282] Modalidades de composições e vias de administração
[00283] Um composto da presente divulgação pode ser formulado como uma composição farmacêutica. Em uma modalidade, tal composição compreende um composto da presente divulgação ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo. Numa modalidade, a composição compreende ainda um transportador farmaceuticamente aceitável ou um veículo farmaceuticamente aceitável. Em certas modalidades, uma composição farmacêutica pode incluir mais de um composto da presente divulgação. Veículos farmaceuticamente aceitáveis incluem diluentes, adjuvantes, excipientes e transportadores.
[00284] As composições farmacêuticas podem ser produzidas usando procedimentos padrão (ver, por exemplo, “Remington's The Science and Practice of Pharmacy,” 21st edition, Lippincott, Williams & Wilcox, 2005, aqui incorporado por referência em sua totalidade). As composições farmacêuticas podem ser fabricadas por meio de processos convencionais de mistura, dissolução, granulação, fabricação de drageias, levigações, emulsificação, encapsulamento, aprisionamento ou liofilização. As composições farmacêuticas podem ser formuladas de maneira convencional usando um ou mais transportadores, diluentes, excipientes ou auxiliares fisiologicamente aceitáveis, que facilitam o processamento dos compostos aqui divulgados em preparações, que podem ser usadas farmaceuticamente. A formulação adequada pode depender, em parte, da via de administração.
[00285] Em uma modalidade, as composições farmacêuticas podem fornecer concentrações plasmáticas terapêuticas de um composto da presente divulgação (uma pró- droga de creatina), creatina ou creatina deuterada após administração a um paciente. A pró- fração de um pró-droga de creatina pode ser clivada in vivo quimicamente e/ou enzimaticamente para liberar creatina. Uma ou mais enzimas presentes no lúmen intestinal, tecido intestinal, sangue, fígado, cérebro ou qualquer outro tecido adequado de um mamífero podem clivar enzimaticamente a pró-fração das pró-drogas administradas. Por exemplo, a pró-fração pode ser clivada após absorção pelo trato gastrointestinal (por exemplo, no tecido intestinal, sangue, fígado ou outro tecido adequado de um mamífero). Em certas modalidades, uma creatina permanece conjugada à pró-fração durante o trânsito através da barreira da mucosa intestinal para fornecer proteção contra o metabolismo pré-sistêmico. Em certas modalidades, uma pró-droga de creatina não é essencialmente metabolizada para liberar a creatina correspondente dentro dos enterócitos, mas é metabolizado na droga parental dentro da circulação sistêmica. A clivagem da pró-fração de uma pró-roga de creatina após absorção pelo trato gastrointestinal pode permitir que a pró-droga seja absorvida na circulação sistêmica, seja por transporte ativo, difusão passiva ou por uma combinação de processos ativos e passivos.
[00286] As pró-drogas de creatina podem permanecer intactas até após a passagem da pró-droga através de uma barreira biológica, como a barreira hematoencefálica. Em certas modalidades, as pró-drogas fornecidas pela presente divulgação podem ser parcialmente clivadas, por exemplo, uma ou mais, mas não todas, as pró-frações podem ser clivadas antes da passagem por uma barreira biológica ou antes de serem absorvidas por uma célula, tecido ou órgão. As pró-drogas da creatina podem permanecer intactas na circulação sistêmica e ser absorvidas pelas células de um órgão, passivamente ou por mecanismos de transporte ativos. Em certas modalidades, uma pró-droga de creatina será lipofílica e pode translocar passivamente através das membranas celulares. Após a captação celular, a pró-droga da creatina pode ser clivada quimicamente e/ou enzimaticamente para liberar o composto correspondente no citoplasma celular, resultando em um aumento na concentração intracelular do composto. Em certas modalidades, uma pró-droga de creatina pode ser permeável a membranas intracelulares, como a membrana mitocondrial, facilitando assim a distribuição de uma pró-droga, e após a clivagem da pró-fração ou pró-frações e o composto da presente divulgação, a uma organela intracelular, como mitocôndria.
[00287] Em uma modalidade, uma composição farmacêutica ou a presente divulgação pode incluir um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis, incluindo excipientes, adjuvantes, transportadores, diluentes, aglutinantes, lubrificantes, desintegrantes, corantes, estabilizadores, tensoativos, enchimentos, tampões, espessantes, emulsificantes, umectantes agentes e semelhantes. Os veículos podem ser selecionados para alterar a porosidade e permeabilidade de uma composição farmacêutica, alterar as propriedades de hidratação e desintegração, controlar a hidratação, melhorar a capacidade de fabricação, etc.
[00288] Em certas modalidades, uma composição farmacêutica da presente divulgação pode incluir um adjuvante que facilita a absorção de um composto da divulgação através do epitélio gastrointestinal. Tais intensificadores podem, por exemplo, abrir as junções apertadas no trato gastrointestinal ou modificar o efeito de componentes celulares, tais como glicoproteína-p e semelhantes. Os intensificadores adequados podem incluir sais de metais alcalinos do ácido salicílico, como salicilato de sódio, caprílico ou ácido cáprico, como caprilato de sódio ou caprato de sódio, e semelhantes. Os intensificadores podem incluir, por exemplo, sais biliares, como desoxicolato de sódio. Vários moduladores de glicoproteína-p são descritos na Patente U.S. 5.112.817 e Pat. U.S. 5.643.909. Vários compostos e materiais para intensificar a absorção são descritos na Pat. U.S. 5.824.638 e Pedido U.S. 2006/0046962. Outros adjuvantes que intensificam a permeabilidade das membranas celulares incluem resorcinol, tensoativos, polietileno glicol e ácidos biliares.
[00289] Em certas modalidades, uma composição farmacêutica da presente divulgação pode incluir um adjuvante que reduz a degradação enzimática de um composto da divulgação. A microencapsulação utilizando microesferas proteinoides, lipossomas, polissacarídeos ou semelhantes, também pode ser eficaz na redução da degradação enzimática dos compostos administrados.
[00290] A composição farmacêutica da presente divulgação pode ser administrada por quaisquer vias adequadas, que incluem, mas não estão limitadas a administrar por via oral, parenteral, intravenosa, intra-arterial, intracoronária, pericardial, perivascular, intramuscular, subcutânea, intradérmica, intraperitoneal, intra-articular, intramuscular, intraperitoneal, intranasal, epidural, sublingual, intranasal, intracerebral, intravaginal, transdermal, retal, por spray de inalação, retal ou topicamente em formulações de unidades de dosagem contendo transportadores, adjuvantes e veículos convencionais não tóxicos farmaceuticamente aceitáveis, como desejados.
[00291] Em certas modalidades, uma composição farmacêutica da presente divulgação pode ser formulada para administração oral. As composições farmacêuticas formuladas para administração oral podem fornecer a absorção de um composto da presente divulgação em todo o trato gastrointestinal, ou em uma região ou regiões particulares do trato gastrointestinal. Em certas modalidades, uma composição farmacêutica pode ser formulada para melhorar a absorção de um composto da presente divulgação a partir do trato gastrointestinal superior e, em certas modalidades, a partir do intestino delgado. Tais composições podem ser preparadas de uma maneira conhecida na técnica farmacêutica e podem ainda compreender, além de um composto da presente divulgação, um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis, intensificadores de permeabilidade e/ou um segundo agente terapêutico.
[00292] Em certas modalidades, uma composição farmacêutica da presente divulgação pode ainda compreender substâncias para melhorar, modular e/ou controlar a liberação, biodisponibilidade, eficácia terapêutica, potência terapêutica, estabilidade e semelhantes. Por exemplo, para aumentar a eficácia terapêutica, um composto da divulgação pode ser coadministrado com um ou mais agentes ativos para aumentar a absorção ou difusão de um composto da divulgação a partir do trato gastrointestinal ou para inibir a degradação do medicamento na circulação sistêmica. Em certas modalidades, um composto da divulgação pode ser coadministrado com agentes ativos com efeitos farmacológicos que aumentam a eficácia terapêutica de um composto da divulgação.
[00293] As composições farmacêuticas da presente divulgação podem assumir a forma de soluções, suspensões, emulsões, comprimidos, pílulas, peletes, cápsulas, cápsulas contendo líquidos, pós, formulações de liberação sustentada, supositórios, emulsões, aerossóis, sprays, suspensões ou qualquer outra forma adequado para uso. As composições farmacêuticas para administração oral podem estar na forma de comprimidos, pastilhas, suspensões aquosas ou oleosas, grânulos, pós, emulsões, cápsulas, xaropes ou elixires, por exemplo. As composições administradas oralmente podem conter um ou mais agentes opcionais, por exemplo, agentes adoçantes, como frutose, aspartame ou sacarina, agentes aromatizantes, como hortelã-pimenta, óleo de wintergreen ou agentes corantes de cereja e agentes de conservação, para fornecer uma preparação farmaceuticamente palatável. Além disso, quando na forma de comprimido ou pílula, as composições podem ser revestidas para retardar a desintegração e absorção no trato gastrointestinal, proporcionando assim uma ação sustentada por um período prolongado de tempo. As composições orais podem incluir veículos padrão, como manitol, lactose, amido, estearato de magnésio, sacarina sódica, celulose, carbonato de magnésio, etc. Esses veículos podem ser de grau farmacêutico. Para preparações líquidas orais, como, por exemplo, suspensões, elixires e soluções, transportadores, excipientes ou diluentes adequados incluem água, solução salina, alquilenoglicóis (por exemplo, propileno glicol), óleos de polialquileno glicóis (por exemplo, polietileno glicol), álcoois, tampões levemente acídicos entre pH 4 e pH 6 (por exemplo, acetato, citrato, ascorbato entre cerca de 5 mM a cerca de 50 mM), etc. Adicionalmente, podem ser adicionados agentes aromatizantes, conservantes, corantes, sais biliares, acilcarnitinas e semelhantes.
[00294] Quando um composto da presente divulgação é acídico, ele pode ser incluído em qualquer uma das formulações descritas acima como o ácido livre, um sal farmaceuticamente aceitável, um solvato ou um hidrato. Os sais farmaceuticamente aceitáveis retêm substancialmente a atividade do ácido livre, podem ser preparados por reação com bases e tendem a ser mais solúveis em solventes aquosos e outros solventes próticos do que a forma de ácido livre correspondente. Em algumas modalidades, sais de sódio de um composto da presente divulgação são utilizados nas formulações descritas acima.
[00295] As composições farmacêuticas da presente divulgação podem ser formuladas para administração parenteral, incluindo administração por injeção, por exemplo, em uma veia (intravenosa), uma artéria (intra-arterialmente), um músculo (intramuscular), sob a pele (subcutânea ou em uma formulação de depósito), para o pericárdio, para as artérias coronárias, ou usado como uma solução para distribuição a um tecido ou órgão, por exemplo, uso em uma máquina de circulação extracorpórea ou para banhar tecidos ou órgãos de transplante. As composições injetáveis podem ser composições farmacêuticas para qualquer via de administração injetável, incluindo, entre outras, intravenosa, intra-arterial, intracoronariana, pericárdica, perivascular, intramuscular, subcutânea, intradérmica, intraperitoneal e intra-articular. Em certas modalidades, uma composição farmacêutica injetável pode ser uma composição farmaceuticamente apropriada para administração diretamente no coração, pericárdio ou artérias coronárias.
[00296] As composições farmacêuticas da presente divulgação adequadas para administração parenteral podem compreender um ou mais compostos da presente divulgação em combinação com um ou mais veículos isotônicos aquosos, miscíveis em água ou não aquosos estéreis farmaceuticamente aceitáveis. As composições farmacêuticas para uso parenteral podem incluir substâncias que aumentam e mantêm a solubilidade da droga, como agentes complexantes e agentes de superfície, compostos que tornam a solução isotônica ou pH fisiológico próximo, como cloreto de sódio, dextrose e glicerina, substâncias que intensificam a estabilidade química de uma solução como antioxidantes, gases inertes, agentes quelantes e tampões, substâncias que intensificam a estabilidade química e física, substâncias que minimizam a autoagregação ou agregação induzida por interface, substâncias que minimizam a interação de proteínas com interfaces, conservantes, incluindo agentes antimicrobianos, agentes de suspensão, agentes emulsificantes e combinações de qualquer um dos anteriores. As composições farmacêuticas para administração parenteral podem ser formuladas como soluções, suspensões, emulsões, lipossomas, microesferas, nanossistemas e pó para serem reconstituídos como soluções. As preparações parenterais são descritas em “Remington, The Science and Practice of Pharmacy,” 21st edition, Lippincott, Williams & Wilkins, Chapter 41-42, pages 802-849, 2005.
[00297] Em certas modalidades, uma composição farmacêutica da presente divulgação pode ser formulada para banhar tecidos ou órgãos de transplante antes, durante ou após o trânsito para um destinatário pretendido. Tais composições podem ser utilizadas antes ou durante a preparação de um tecido ou órgão para transplante. Em certas modalidades, uma composição farmacêutica pode ser uma solução cardioplégica administrada durante cirurgia cardíaca. Em certas modalidades, uma composição farmacêutica pode ser usada, por exemplo, em conjunto com uma máquina de circulação extracorpórea para fornecer a composição farmacêutica ao coração. Tais composições farmacêuticas podem ser utilizadas durante os estágios de indução, manutenção ou reperfusão da cirurgia cardíaca (ver, por exemplo, Chang et al., Masui 2003, 52(4), 356-62; Ibrahim et al., Eur. J. Cardiothorac Surg 1999, 15(1), 75-83; von Oppell et al., J Thorac Cardiovasc Surg. 1991, 102(3), 405-12; e Ji et al., J. Extra Corpor Technol 2002, 34(2), 107-10). Em certas modalidades, uma composição farmacêutica pode ser fornecida através de um dispositivo mecânico, como uma bomba ou um perfusor (ver, por exemplo, Hou and March, J Invasive Cardiol 2003, 15(1), 13-7; Maisch et al., Am. J Cardiol 2001, 88(11), 1323-6; e Macris and Igo, Clin Cardiol 1999, 22(1, Suppl 1), 136-9).
[00298] Para distribuição prolongada, uma composição farmacêutica da presente divulgação pode ser fornecida como uma preparação de depósito, para administração por implantação, por exemplo, injeção subcutânea, intradérmica ou intramuscular. Assim, em certas modalidades, uma composição farmacêutica pode ser formulada com materiais poliméricos ou hidrofóbicos adequados, por exemplo, como uma emulsão em um óleo farmaceuticamente aceitável, resinas de troca iônica ou como um derivado moderadamente solúvel, por exemplo, como uma forma de sal pouco solúvel de um composto da presente divulgação.
[00299] As composições farmacêuticas da presente divulgação podem ser formuladas de modo a fornecer liberação imediata, sustentada ou retardada de um composto da presente divulgação após administração ao paciente, empregando procedimentos conhecidos na técnica (ver, por exemplo, Allen et al., “Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems,” 8th ed., Lippincott, Williams & Wilkins, August 2004), que é incorporado por referência em sua totalidade.
[00300] Modalidades de formas de dosagem
[00301] As composições farmacêuticas da presente divulgação podem ser formuladas em uma forma de dosagem unitária. A forma de dosagem unitária refere-se a uma unidade fisicamente distinta adequada como uma dose unitária para pacientes em tratamento, com cada unidade contendo uma quantidade predeterminada de um composto da presente divulgação calculada para produzir um efeito terapêutico pretendido. Uma forma de dosagem unitária pode ser para uma dose diária única ou uma de várias doses diárias, por exemplo, 2 a 4 vezes por dia. Quando várias doses diárias são usadas, a dose unitária pode ser igual ou diferente para cada dose. Uma ou mais formas de dosagem podem compreender uma dose, que pode ser administrada a um paciente em um único momento ou durante um intervalo de tempo.
[00302] As composições farmacêuticas da presente divulgação podem ser usadas em formas de dosagem que proporcionam liberação imediata e/ou liberação sustentada de um composto da presente divulgação. O tipo apropriado de forma de dosagem pode depender da doença, distúrbio ou condição a ser tratada e do método de administração. Por exemplo, para o tratamento de condições isquêmicas agudas, como insuficiência cardíaca ou acidente vascular cerebral, o uso de uma composição farmacêutica de liberação imediata ou forma de dosagem administrada parenteralmente pode ser apropriado. Para o tratamento de distúrbios neurodegenerativas crônicas, a composição farmacêutica de liberação controlada ou a forma de dosagem administrada por via oral pode ser apropriada.
[00303] Em certas modalidades, uma forma de dosagem pode ser adaptada para ser administrada a um paciente uma vez, duas, três vezes ou mais frequentemente por dia. A dosagem pode ser fornecida isoladamente ou em combinação com outros medicamentos e pode continuar pelo tempo necessário para o tratamento eficaz da doença, distúrbio ou condição.
[00304] As composições farmacêuticas da presente divulgação compreendendo uma pró-droga de creatina da presente divulgação podem ser formuladas para liberação imediata para administração parenteral, administração oral ou por qualquer outra via de administração apropriada.
[00305] Os sistemas controlados de distribuição de drogas podem ser projetados para distribuir uma droga de maneira que o nível de droga seja mantido dentro das janelas terapêuticas e os níveis sanguíneos eficazes e seguros sejam mantidos por um período, desde que o sistema continue a distribuir a droga a uma taxa específica. A administração controlada de droga pode produzir níveis sanguíneos substancialmente constantes de uma droga em comparação com as flutuações observadas nas formas de dosagem de liberação imediata. Para algumas drogas, manter uma corrente sanguínea constante e uma concentração de tecido durante o curso da terapia é o modo mais desejável de tratamento. A liberação imediata dessas drogas pode fazer com que os níveis sanguíneos atinjam um pico acima do nível necessário para obter a resposta desejada, que desperdiça a droga e pode causar ou exacerbar efeitos colaterais tóxicos. A distribuição controlada de drogas pode resultar em uma terapia ideal, e não apenas pode reduzir a frequência da administração, como também pode reduzir a gravidade dos efeitos colaterais. Exemplos de formas de dosagem de liberação controlada incluem sistemas controlados por dissolução, sistemas controlados por difusão, resinas de troca iônica, sistemas osmoticamente controlados, sistemas de matriz erodíveis, formulações independentes de pH, sistemas de retenção gástrica e semelhantes.
[00306] Em certas modalidades, uma forma de dosagem oral da presente divulgação pode ser uma forma de dosagem de liberação controlada. As tecnologias de distribuição controlada podem melhorar a absorção de uma droga em uma região ou regiões particulares do trato gastrointestinal. A forma de dosagem oral apropriada para uma composição farmacêutica específica desta divulgação pode depender, pelo menos em parte, das propriedades de absorção gastrointestinal do composto da divulgação, da estabilidade do composto da presente divulgação no trato gastrointestinal, da farmacocinética do composto da divulgação e do perfil terapêutico pretendido. Uma forma de dosagem oral de liberação controlada apropriada pode ser selecionada para um determinado composto da divulgação. Por exemplo, formas de dosagem oral de retenção gástrica podem ser apropriadas para compostos absorvidos principalmente do trato gastrointestinal superior, e formas de dosagem oral de liberação sustentada podem ser apropriadas para compostos absorvidos principalmente do trato gastrointestinal inferior.
[00307] Certos compostos são absorvidos principalmente pelo intestino delgado. Em geral, os compostos atravessam o comprimento do intestino delgado em cerca de 3 a 5 horas. Para compostos que não são facilmente absorvidos pelo intestino delgado ou que não se dissolvem facilmente, a janela para absorção do agente ativo no intestino delgado pode ser muito curta para proporcionar o efeito terapêutico desejado. As formas de dosagem de retenção gástrica, isto é, formas de dosagem que são projetadas para serem retidas no estômago por um período prolongado de tempo, podem aumentar a biodisponibilidade de medicamentos que são mais facilmente absorvidos pelo trato gastrointestinal superior. O tempo de permanência de uma forma de dosagem convencional no estômago é de 1 a 3 horas. Após a passagem do estômago, existe uma janela de biodisponibilidade de aproximadamente 3 a 5 horas antes da forma de dosagem atingir o cólon. No entanto, se a forma de dosagem for mantida no estômago, a droga pode ser liberada antes de atingir o intestino delgado e entrará no intestino em solução, em um estado no qual possa ser absorvido mais rapidamente. Outro uso de formas de dosagem de retenção gástrica é melhorar a biodisponibilidade de uma droga instável às condições básicas do intestino (ver, por exemplo, Hwang et al., Critical Reviews in Therapeutic Drug Carrier Systems, 1998, 15, 243-284). Para intensificar a absorção da droga pelo trato gastrointestinal superior, várias formas de dosagem de retenção gástrica foram desenvolvidas. Os exemplos incluem hidrogéis (ver, por exemplo, Pedido U.S. 2003/0008007), matrizes flutuantes (ver, por exemplo, Pedido U.S. 2006/0013876), folhas de polímero (ver, por exemplo, Pedido U.S. 2005/0249798), espumas microcelulares (ver, por exemplo, Pedido U.S. 2005/0202090) e formas de dosagem intumescentes (ver, por exemplo, Pedido U.S. 2005/0019409; Pat. U.S. 6.797.283; Pedido U.S. 2006/0045865; Pedido U.S. 2004/0219186; Pat. U.S. 6.723.340; Pat. U.S. 6.476.006; Pat. U.S. 6.120.803; Pat. U.S. 6.548.083; Pat. U.S. 6.635.280; Pat. U.S. 5.780.057). Os polímeros bioadesivos também podem fornecer um veículo para distribuição controlada de drogas em várias superfícies mucosas, além da mucosa gástrica (ver, por exemplo, Pat. U.S. 6.235.313; Pat. U.S. 6.207.197; Pedido U.S. 2006/0045865 e Pedido U.S. 2005/0064027). As resinas de troca iônica demonstraram prolongar a retenção gástrica, potencialmente por adesão.
[00308] Num sistema de intumescimento e expansão, as formas de dosagem que intumescem e alteram a densidade em relação ao conteúdo gástrico circundante podem ser retidas no estômago por mais tempo do que uma forma de dosagem convencional. Uma forma de dosagem pode absorver água e intumescer para formar uma superfície externa gelatinosa e flutuar na superfície da superfície do conteúdo gástrico, mantendo a integridade antes de liberar uma droga. Materiais gordurosos podem ser adicionados para impedir a umectação e melhorar a flutuação quando a hidratação e o intumescimento são insuficientes. Os materiais que liberam gases também podem ser incorporados para reduzir a densidade de uma forma de dosagem de retenção gástrica. O intumescimento também pode aumentar significativamente o tamanho de uma forma de dosagem e, assim, impedir a descarga da forma de dosagem sólida intumescida e não desintegrada através do piloro para o intestino delgado. As formas de dosagem intumescentes podem ser formadas encapsulando uma droga contendo um núcleo e um agente intumescente ou combinando uma droga, um agente intumescente e um ou mais polímeros erodíveis.
[00309] As formas de dosagem de retenção gástrica também podem estar na forma de uma folha fina dobrada contendo uma droga e polímero difusível insolúvel em água que se abre no estômago para seu tamanho e forma originais, que são suficientemente grandes para impedir ou inibir a passagem da dosagem expandida de através do esfíncter pilórico.
[00310] As formas de dosagem de retenção gástrica flutuantes e vivas podem ser projetadas para prender gases dentro de núcleos encapsulados vedados que podem flutuar no conteúdo gástrico e, assim, serem retidos no estômago por um longo período, por exemplo, 9 a 12 horas. Devido ao efeito de flutuabilidade, esses sistemas podem fornecer uma camada protetora que evita o refluxo do conteúdo gástrico na região esofágica e também podem ser usados para dispositivos de liberação controlada. Um sistema flutuante pode, por exemplo, conter núcleos ocos contendo droga revestida com uma membrana protetora. O ar retido nos núcleos flutua a dosagem no conteúdo gástrico até que os ingredientes solúveis sejam liberados e o sistema entre em colapso. Em outros sistemas flutuantes, os núcleos contêm substâncias medicamentosas e químicas capazes de gerar gases quando ativadas. Por exemplo, núcleos revestidos, contendo carbonato e/ou bicarbonato, podem gerar dióxido de carbono na reação com ácido clorídrico no estômago ou incorporar ácido orgânico no sistema. O gás gerado pela reação é retido para flutuar na forma de dosagem. A forma de dosagem inflada mais tarde entra em colapso e limpa o estômago quando o gás gerado penetra lentamente através do revestimento protetor.
[00311] Os polímeros bioadesivos também podem fornecer um veículo para distribuição controlada de drogas em várias superfícies mucosas, além da mucosa gástrica (ver, por exemplo, Pat. U.S. 6.235.313; e Pat. U.S. 6.207.197). Um sistema bioadesivo pode ser projetado pela incorporação de uma droga e outros excipientes dentro de um polímero bioadesivo. Na ingestão, o polímero hidrata e adere à membrana mucosa do trato gastrointestinal. Polímeros bioadesivos podem ser selecionados que aderem a uma região ou regiões desejadas do trato gastrointestinal. Polímeros bioadesivos podem ser selecionados para distribuição otimizada para regiões-alvo do trato gastrointestinal, incluindo estômago e intestino delgado. Pensa-se que o mecanismo da adesão seja através da formação de ligações eletrostáticas e hidrogênio no limite polímero-muco. Os Pedidos U.S. 2006/0045865 e 2005/0064027 divulgam sistemas de administração de bioadesivos que são úteis para distribuição de drogas tanto no trato gastrointestinal superior quanto no inferior.
[00312] As resinas de troca iônica demonstraram prolongar a retenção gástrica, potencialmente por adesão.
[00313] As formas de dosagem oral de retenção gástrica podem ser usadas apropriadamente para distribuição de drogas que são absorvidas principalmente pelo trato gastrointestinal superior. Por exemplo, certos compostos da presente divulgação podem exibir absorção colônica limitada e ser absorvidos principalmente do trato gastrointestinal superior. Assim, as formas de dosagem que liberam o composto da presente divulgação no trato gastrointestinal superior e/ou retardam o trânsito da forma de dosagem através do trato gastrointestinal superior tenderão a aumentar a biodisponibilidade oral do composto da divulgação. Outras formas de pró-drogas de creatina aqui divulgadas podem ser usadas adequadamente com formas de dosagem de retenção gástrica.
[00314] As matrizes poliméricas também foram usadas para obter liberação controlada da droga por um período prolongado de tempo. Essa liberação sustentada ou controlada pode ser alcançada limitando a taxa pela qual o fluido gástrico circundante pode se difundir através da matriz e alcançar a droga, dissolver a droga e difundir novamente com a droga dissolvida ou usando uma matriz que corroa lentamente, expondo continuamente a droga fresca para o fluido circundante. Divulgações de matrizes poliméricas que funcionam por esses métodos são encontradas, por exemplo, em Skinner, Pat. U.S. 6.210.710 e 6.217.903; Pat. U.S. 5.451.409; Pat. U.S. 5.945.125; Publicação Internacional PCT WO 96/26718; Pat. U.S. 4.915.952; Pat. U.S. 5.328.942; Pat. U.S. 5.783.212; Pat. U.S. 6.120.803; e Pat. U.S. 6.090.411.
[00315] Outros dispositivos de distribuição de droga que permanecem no estômago por longos períodos de tempo incluem, por exemplo, reservatórios de hidrogel contendo partículas (Pat. U.S. 4.871.548); polímeros de hidroxipropilmetilcelulose intumescíveis (Pat. U.S. 4.871.548); polímeros bioerodíveis planares (Pat. U.S. 4.767.627); pluralidade de braços de retenção compressíveis (Pat. U.S. 5.443.843); partículas de polímero reticuladas hidrofílicas e intumescidas em água (Pat. U.S. 5.007.790); e hidrogéis de polivinilpirrolidona reticulada com albumina (Park et al., J. Controlled Release 1992, 19, 131-134).
[00316] Em certas modalidades, as composições farmacêuticas da presente divulgação podem ser praticadas com várias formas de dosagem diferentes, que podem ser adaptadas para fornecer liberação sustentada do composto da presente divulgação mediante administração oral. As formas de dosagem oral de liberação sustentada podem ser usadas para liberar drogas por um período prolongado e são úteis quando se deseja que uma droga ou forma de droga seja distribuída ao trato gastrointestinal inferior. As formas de dosagem oral de liberação sustentada incluem sistemas controlados por difusão, como dispositivos de reservatório e dispositivos matriciais, sistemas controlados por dissolução, sistemas osmóticos e sistemas controlados por erosão. As formas de dosagem oral de liberação sustentada e os métodos de preparação dos mesmos são bem conhecidos na técnica (ver, por exemplo, "Remington's Pharmaceutical Sciences," Lippincott, Williams & Wilkins, 21st edition, 2005, Chapters 46 and 47; Langer, Science 1990, 249, 1527-1533; and Rosoff, "Controlled Release of Drugs," 1989, Chapter 2).
[00317] As formas de dosagem oral de liberação sustentada incluem qualquer forma de dosagem oral que mantenha concentrações terapêuticas de uma droga em um fluido biológico, como plasma, sangue, líquido cefalorraquidiano ou em um tecido ou órgão por um período de tempo prolongado. As formas de dosagem oral de liberação sustentada incluem sistemas controlados por difusão, como dispositivos de reservatório e dispositivos matriciais, sistemas controlados por dissolução, sistemas osmóticos e sistemas controlados por erosão. As formas de dosagem oral de liberação sustentada e os métodos de preparação dos mesmos são bem conhecidos na técnica (ver, por exemplo, "Remington's: The Science and Practice of Pharmacy," Lippincott, Williams & Wilkins, 21st edition, 2005, Chapters 46 and 47; Langer, Science 1990, 249, 1527-1533; and Rosoff, "Controlled Release of Drugs," 1989, Chapter 2).
[00318] Em sistemas controlados por difusão, um polímero insolúvel em água controla o fluxo de fluido e a saída subsequente da droga dissolvida da forma de dosagem. Os processos de difusão e dissolução estão envolvidos na liberação da droga a partir da forma de dosagem. Nos dispositivos de reservatório, um núcleo que compreende uma droga é revestido com o polímero e, nos sistemas da matriz, a droga é dispersa por toda a matriz. Polímeros de celulose como etilcelulose ou acetato de celulose podem ser usados em dispositivos de reservatório. Exemplos de materiais úteis em sistemas matriciais incluem metacrilatos, acrilatos, polietileno, copolímeros de ácido acrílico, cloreto de polivinil, álcoois polivinílicos de alto peso molecular, derivados de celulose e compostos gordurosos, como ácidos graxos, glicéridos e cera de carnaúba.
[00319] Nos sistemas controlados por dissolução, a taxa de dissolução da droga é controlada por polímeros lentamente solúveis ou por microencapsulação. Uma vez dissolvido o revestimento, a droga fica disponível para dissolução. Variando a espessura e/ou a composição do revestimento ou revestimentos, a taxa de liberação da droga pode ser controlada. Em alguns sistemas controlados por dissolução, uma fração da dose total pode compreender um componente de liberação imediata. Os sistemas controlados por dissolução incluem sistemas de dissolução encapsulados/reservatórios e sistemas de dissolução matricial. Os sistemas de dissolução encapsulados podem ser preparados revestindo partículas ou grânulos de droga com polímeros lentamente solúveis de diferentes espessuras ou por microencapsulação. Exemplos de materiais de revestimento úteis em sistemas controlados por dissolução incluem gelatina, cera de carnaúba, goma-laca, ftalato de acetato de celulose e butirato de acetato de celulose. Os dispositivos de dissolução da matriz podem ser preparados, por exemplo, comprimindo uma droga com um transportador polimérico lentamente solúvel na forma de comprimido.
[00320] A taxa de liberação da droga a partir de sistemas de bomba osmótica é determinada pelo influxo de fluido através de uma membrana semipermeável para um reservatório, que contém um agente osmótico. O medicamento é misturado com o agente ou está localizado em um reservatório. A forma de dosagem contém um ou mais orifícios pequenos a partir dos quais a droga dissolvida é bombeada a uma taxa determinada pela taxa de entrada de água devido à pressão osmótica. À medida que a pressão osmótica dentro da forma de dosagem aumenta, a droga é liberada através do(s) orifício(s). A taxa de liberação é constante e pode ser controlada dentro de limites apertados, produzindo concentrações relativamente constantes no plasma e/ou no sangue da droga. Os sistemas de bomba osmótica podem fornecer uma liberação constante da droga, independentemente do ambiente do trato gastrointestinal. A taxa de liberação da droga pode ser modificada alterando o agente osmótico e os tamanhos de um ou mais orifícios.
[00321] A liberação da droga a partir de sistemas controlados pela erosão é determinada pela taxa de erosão de uma matriz transportadora. A droga é dispersa por todo o polímero e a taxa de liberação da droga depende da taxa de erosão do polímero. O polímero contendo droga pode degradar-se a partir do volume e/ou da superfície da forma de dosagem.
[00322] As formas de dosagem oral de liberação sustentada podem estar em qualquer forma apropriada para administração oral, como, por exemplo, na forma de comprimidos, pílulas ou grânulos. Os grânulos podem ser cheios em cápsulas, comprimidos em comprimidos ou incluídos em uma suspensão líquida. As formas de dosagem oral de liberação sustentada podem adicionalmente incluir um revestimento externo para fornecer, por exemplo, proteção ácida, facilidade de deglutição, sabor, identificação e semelhantes.
[00323] Em certas modalidades, as formas de dosagem oral de liberação sustentada podem compreender uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente divulgação e um veículo farmaceuticamente aceitável. Em certas modalidades, uma forma de dosagem oral de liberação sustentada pode compreender menos que uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente divulgação e um veículo farmaceuticamente eficaz. As formas de dosagem oral de liberação sustentada múltipla, cada forma de dosagem compreendendo menos que uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da divulgação, podem ser administradas em um único momento ou durante um período de tempo para fornecer uma dose ou regime terapeuticamente eficaz para o tratamento de uma doença em um paciente associado a uma disfunção no metabolismo energético, como, por exemplo, isquemia, estresse oxidativo, doença neurodegenerativa, incluindo esclerose lateral amiotrófica (ALS), doença de Huntington, doença de Parkinson ou doença de Alzheimer, lesão por reperfusão isquêmica, doença cardiovascular, esclerose múltipla (EM), um distúrbio psicótico, uma doença genética que afeta o sistema da creatina quinase ou fadiga muscular.
[00324] As formas de dosagem oral de liberação sustentada da presente divulgação podem liberar um composto da divulgação da forma de dosagem para facilitar a capacidade dos compostos da divulgação serem absorvidos de uma região apropriada do trato gastrointestinal, por exemplo, no intestino delgado ou no cólon. Em certas modalidades, uma dosagem oral de liberação sustentada pode liberar um composto da presente divulgação da forma de dosagem durante um período de pelo menos cerca de 4 horas, pelo menos cerca de 8 horas, pelo menos cerca de 12 horas, pelo menos cerca de 16 horas, pelo menos cerca de 20 horas e, em certas modalidades, pelo menos cerca de 24 horas. Em certas modalidades, uma forma de dosagem oral de liberação sustentada pode liberar um composto da divulgação da forma de dosagem em um padrão de distribuição de cerca de 0% em peso a cerca de 20% em peso em cerca de 0 a cerca de 4 horas, cerca de 20% em peso a cerca de 50% em peso em cerca de 0 a cerca de 8 horas, cerca de 55% em peso a cerca de 85% em peso em cerca de 0 a cerca de 14 horas e cerca de 80% em peso a cerca de 100% em peso em cerca de 0 a cerca de 24 horas. Em certas modalidades, uma forma de dosagem oral de liberação sustentada pode liberar um composto de Fórmula (I) e/ou Fórmula (II) da forma de dosagem em um padrão de distribuição de cerca de 0% em peso a cerca de 20% em peso em cerca de 0 a cerca de 4 horas, cerca de 20% em peso a cerca de 50% em peso em cerca de 0 a cerca de 8 horas, cerca de 55% em peso a cerca de 85% em peso em cerca de 0 a cerca de 14 horas e cerca de 80% em peso a cerca de 100% em peso em cerca de 0 a cerca de 20 horas. Em certas modalidades, uma forma de dosagem oral de liberação sustentada pode liberar um composto da presente divulgação da forma de dosagem em um padrão de distribuição de cerca de 0% em peso a cerca de 20% em peso em cerca de 0 a cerca de 2 horas, cerca de 20% em peso a cerca de 50% em peso em cerca de 0 a cerca de 4 horas, cerca de 55% em peso a cerca de 85% em peso em cerca de 0 a cerca de 7 horas e cerca de 80% em peso a cerca de 100% em peso em cerca de 0 a cerca de 8 horas.
[00325] As formas de dosagem oral de liberação sustentada compreendendo um composto da presente divulgação podem fornecer uma concentração do composto correspondente da presente divulgação no plasma, sangue ou tecido de um paciente ao longo do tempo, após administração oral ao paciente. O perfil de concentração de um composto da presente divulgação pode exibir uma AUC que é proporcional à dose do composto correspondente da presente divulgação.
[00326] Independentemente da forma específica de forma de dosagem oral de liberação controlada usada, um composto da presente divulgação pode ser liberado de uma forma de dosagem administrada por via oral durante um período de tempo suficiente para fornecer concentrações terapêuticas prolongadas do composto da presente divulgação no plasma e/ou sangue de um paciente. Após a administração oral, uma forma de dosagem compreendendo um composto da presente divulgação pode fornecer uma concentração terapeuticamente eficaz do composto correspondente da presente divulgação no plasma e/ou sangue de um paciente por um período contínuo de pelo menos cerca de 4 horas, de pelo menos cerca de 8 horas, por pelo menos cerca de 12 horas, por pelo menos cerca de 16 horas e em certas modalidades, por pelo menos cerca de 20 horas após a administração oral da forma de dosagem ao paciente. Os períodos de tempo contínuos durante os quais uma concentração terapeuticamente eficaz de um composto da presente divulgação é mantida pode ser a mesma ou diferente. O período contínuo de tempo durante o qual uma concentração plasmática terapeuticamente eficaz de um composto da presente divulgação é mantida pode começar logo após a administração oral ou após um intervalo de tempo.
[00327] Em certas modalidades, uma dosagem oral para tratamento de uma doença, distúrbio ou condição em um paciente pode compreender um composto da presente divulgação, em que a forma de dosagem oral é adaptada para fornecer, após uma única administração da forma de dosagem oral ao paciente, uma concentração terapeuticamente eficaz do composto correspondente da presente divulgação no plasma do paciente por um primeiro período de tempo contínuo selecionado de pelo menos cerca de 4 horas, pelo menos cerca de 8 horas, pelo menos cerca de 12 horas e pelo menos cerca de 16 horas e pelo menos cerca de 20 horas.
[00328] Modalidades das Utilidades dos Compostos Presentes (Pró-Drogas de Creatina)
[00329] O sistema de creatina quinase (creatina-fosfato de creatina) tem várias funções na manutenção da homeostase da energia intracelular (ver, por exemplo, Walsh et al., J Physiol, 2001, 537, 971-978). A fosfocreatina atua como um tampão de energia temporal em locais intracelulares de translocação de alta energia que opera quando a taxa de utilização de ATP é maior que a taxa de produção de ATP pela respiração mitocondrial. A creatina quinase mitocondrial permite que a ligação fosfato de alta energia do ATP recém- sintetizado seja transferida para a creatina, gerando assim fosfocreatina, que é muito mais estável que o ATP. A fosfocreatina pode se difundir por uma célula e sua ligação de fosfato de alta energia pode ser usada para regenerar o ATP do ADP em sítios de utilização de energia pesada, onde outras enzimas da creatinaquinase estão estrategicamente posicionadas. Esses sítios incluem membranas que se envolvem no transporte de íons, regiões axonais envolvidas no transporte de material ao longo de microtúbulos de e para terminações pré- sinápticas e terminações pré-sinápticas, nas quais é necessária energia para a neurotransmissão. Os neurônios sintetizam creatina, mas também dependem fortemente do transporte de creatina para os neurônios via Creatine Transporter, no entanto, a quantidade de creatina pode ser severamente esgotada durante a lesão. Tal como acontece com os músculos esquelético e cardíaco, as reservas de creatina neuronal podem, em certa medida, ser aumentadas pela suplementação oral de creatina. O sistema de creatina quinase também serve como um mecanismo de transporte espacial intracelular de energia. Nesse papel de transportador de energia, a energia gerada pelo sistema ATP-ADP nas mitocôndrias é acoplada ao sistema creatina-fosfato de creatina no citosol, que por sua vez é acoplado a sistemas ATP-ADP extra mitocondriais em sítios de alta transdução de energia intracelular. Acredita-se também que o sistema creatina-fosfato de creatina atue como um sensor ADP de baixo limiar que mantém as taxas de concentração de ATP-ADP em sítios subcelulares em que a creatina-quinase está funcionalmente acoplada às vias consumidora de ATP e produtoras de ATP. Por exemplo, foi demonstrado que a creatina pode reagir com ATP derivado da respiração mitocondrial em uma reação catalisada pela creatina quinase mitocondrial e funcionalmente acoplada à translocase de nucleotídeo de adenina, resultando em um aumento na concentração local de ADP e na estimulação da respiração mitocondrial. O sistema de creatina quinase é, portanto, particularmente importante na manutenção da homeostase energética, incluindo a homeostase ATP, em células, tecidos e órgãos com requisitos de alto consumo de energia, como neurônios e músculos.
[00330] Os compostos da presente divulgação, em uma modalidade, são projetados para transportar através da barreira hematoencefálica (BBB) e para os neurônios e glia do cérebro por difusão passiva ou mecanismo de transporte ativo, separados do transportador de creatina. Em algumas modalidades, o composto da presente divulgação, após a captação nas células, liberará creatina ou creatina deuterada se a pró-droga for deuterado. Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação são úteis na distribuição de creatina ao cérebro de um paciente com deficiência de transportador de creatina (CTD), que se caracteriza por ter uma deficiência geral de creatina e fosfocreatina.
[00331] Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação podem fornecer maior concentração de creatina (ou creatina deuterada) para os tecidos alvo, porque os compostos da presente divulgação melhoraram a captação e a absorção quando administrados a um sujeito em necessidade do mesmo, quando comparados à administração de análogos de creatina conhecidos anteriormente ou creatina não protegida. Em algumas modalidades, a captação e absorção aprimoradas podem ser úteis no tratamento ou melhoria de condições ou doenças em que a expressão ou atividade do transportador de creatina é sobrerregulada. Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação, quando administrados a um paciente, podem contrariar ou compensar os efeitos da atividade do transportador de creatina com sobrerregulação, fornecendo creatina ao sujeito em necessidade do mesmo, o que é facilitado pelos compostos das melhores propriedades de captação e absorção da divulgação. Um transportador de creatina não funcional ou com sobrerregulação pode causar ineficiência ou ineficácia nadistribuição de creatina ao cérebro.
[00332] Os pacientes com DTC não têm transporte de creatina e, portanto, são incapazes de importar creatina de fontes exógenas ou trocar creatina de sítios de síntese para sítios de consumo no cérebro. A creatina se converte em fosfocreatina como armazenamento de energia do ATP. Durante o aumento da demanda de energia, o ATP re-sintetizou a partir da fosfocreatina por meio de reação reversível. A administração de creatina ou fosfocreatina restauraria ou melhoraria o sistema de armazenamento de energia nos pacientes.
[00333] Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação são capazes de ser transportados e absorvidos primeiro pelos neurônios e / ou células da glia ou semelhantes; em seguida, subsequentemente, os compostos da presente divulgação podem liberar creatina (ou creatina deuterada) diretamente para o cérebro ou as células alvo onde a distribuição de creatina é necessária.
[00334] Em uma modalidade, os compostos da presente divulgação e composições farmacêuticas, como aqui descritos, podem ser úteis no tratamento de doenças, distúrbios ou condições em um paciente associado a uma disfunção no metabolismo energético. Em certas modalidades, a disfunção no metabolismo energético compreende a depleção na concentração intracelular de ATP, uma diminuição da concentração intracelular de creatina e fosfato de creatina, uma diminuição da razão de concentração intracelular de fosfato de creatina para ATP e/ou uma disfunção no sistema de creatina quinase em um tecido ou órgão afetado pela doença. Em certas modalidades, uma disfunção no metabolismo energético compreende uma concentração intracelular diminuída de ATP em um tecido ou órgão afetado pela doença. Em certas modalidades, uma disfunção no metabolismo energético compreende uma concentração reduzida de creatina intracelular e fosfato de creatina em um tecido ou órgão afetado pela doença. Em certas modalidades, a disfunção no metabolismo energético compreende uma disfunção no sistema da creatina quinase e/ou outra via de energia intracelular em um tecido ou órgão afetado pela doença. Em certas modalidades, uma doença associada a uma disfunção no metabolismo energético é selecionada de isquemia, estresse oxidativo, doença neurodegenerativa, lesão por reperfusão isquêmica, doença cardiovascular, esclerose múltipla, doença psicótica e fadiga muscular. Em certas modalidades, o tratamento de uma doença compreende efetuar homeostase energética em um tecido ou órgão afetado pela doença.
[00335] Os compostos da invenção e composições farmacêuticas dos mesmos podem ser utilizados para tratar uma doença em um paciente associado ao estresse oxidativo, administrando a um paciente em necessidade desse tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da invenção ou uma composição farmacêutica do mesmo. Em certas modalidades, o estresse oxidativo está associado à isquemia ou a um distúrbio neurodegenerativo. Os métodos da invenção incluem o tratamento de um tecido ou órgão estressado por oxidação, entrando em contato com o tecido ou órgão com um composto da invenção ou uma composição farmacêutica do mesmo.
[00336] Os compostos e composições farmacêuticas da invenção podem ser úteis no tratamento de doenças, distúrbios ou condições nas quais um rápido aumento nos níveis de creatina intracelular tem um efeito terapêutico.
[00337] Em uma modalidade da presente divulgação, os compostos descritos neste documento podem ser utilizados para o tratamento de deficiências de creatina, administrando uma quantidade eficaz do composto da presente divulgação, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um paciente em necessidade de tal tratamento. Em outra modalidade, o método compreende administrar um composto da presente divulgação, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, a um paciente e necessidade de tal tratamento; em que após a administração, o composto, ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, fornece continuamente uma quantidade terapeuticamente eficaz de creatina por mais de cerca de 4 horas. Em algumas modalidades, as doenças, distúrbios ou condições associadas à deficiência de creatina são isquemia, lesão de reperfusão isquêmica, transplante de perfusão, doenças neurodegenerativas, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, doença de Huntington, esclerose lateral amiotrófica, esclerose lateral amiotrófica (ALS), síndromes de deficiência de creatina cerebral (CCDS), incluindo disfunção do transportador de creatina e distúrbios da biossíntese de creatina, esclerose múltipla, distúrbios psicóticos, esquizofrenia, transtorno bipolar, ansiedade, epilepsia incluindo epilepsia mioclônica e convulsões incluindo convulsões com manifestações clínicas nos músculos, distrofia muscular, miopatia associada a doenças mitocondriais, como miopatia mitocondrial, doenças genéticas que afetam o sistema creatinaquinase, fadiga muscular, força muscular, viabilidade de órgãos e células ou doenças relacionadas à regulação do nível de glicose. Como utilizado neste documento, "distrofia muscular" refere-se a doenças musculares que são tipicamente caracterizadas por fraqueza progressiva do músculo esquelético, defeitos nas proteínas musculares e morte de células e tecidos musculares. A distrofia muscular geralmente enfraquece o sistema músculo- esquelético e dificulta a locomoção. Exemplos de distrofias musculares incluem, entre outros, distrofia muscular de Becker, distrofia muscular congênita, distrofia muscular de Duchenne, distrofia muscular distal, distrofia muscular de Emery-Dreifuss, distrofia muscular de Emery-Dreifuss, distrofia muscular facioescapulo-umeral, distrofia muscular de cinturão de membros, distrofia muscular miotecnológica, distrofia muscular miotônica, distrofia muscular oculofaríngea, ou qualquer combinação das mesmas. Mais detalhes podem ser encontrados na publicação de patente US 8202852, cujo conteúdo é incorporado por referência.
[00338] O termo "síndrome da deficiência de creatina cerebral" inclui um distúrbio caracterizado por um erro inato na síntese de creatina ou por um erro inato no transporte de creatina. Numa modalidade, a síndrome de deficiência de creatina cerebral inclui distúrbios de biossíntese de creatina (deficiências de AGAT e GAMT) e distúrbios de transportador de creatina. A função de transporte de creatina aberrante no cérebro pode causar ao sujeito uma baixa concentração de creatina no cérebro de um sujeito devido à disfunção do transportador de creatina. Nesse distúrbio, acredita-se que o metabolismo energético prejudicado esteja associado à disfunção de aprendizado prejudicada, função cognitiva e síndrome neurológica, como atraso no desenvolvimento, epilepsia leve e comprometimento expressivo grave da linguagem. Por exemplo, a disfunção do transportador de creatina pode levar a síndromes de deficiência de creatina cerebral (CCDS), que incluem um grupo de erros inatos da biossíntese de creatina e transporte através das membranas celulares. Essas doenças estão associadas a características neurológicas graves: retardo mental, atraso expressivo na fala e na linguagem, distúrbio generalizado do desenvolvimento, autismo, distúrbio do espectro autista, comportamento autístico, síndrome de Asperger, transtorno do déficit de atenção e hiperatividade (ADHD), epilepsia incluindo epilepsia mioclônica e convulsões, incluindo convulsões com manifestações clínicas no músculo. Eles são caracterizados por uma deficiência de creatina no cérebro e distúrbios metabólicos no sistema nervoso, uma vez que a creatina está envolvida no sistema energético da fosfocreatina celular. A única maneira de tratar os pacientes é restaurar o pool de creatina cerebral, trazendo creatina para o cérebro e, mais especificamente, para as células-alvo. A ausência de transportadores funcionais de creatina na barreira hematoencefálica (BBB) pode impedir a entrada de creatina no cérebro, afetando as funções cognitivas. Por exemplo, os aminoácidos da creatina e o complexo fosfocreatina-Mg mostram atividade neuroprotetora em modelos animais in vivo de acidente vascular cerebral, isquemia ou hipóxia. Além disso, um tratamento de 9 semanas com ciclocreatina como tratamento em camundongos knockout para Creatine Transporter SLC6A8 resultou em um aumento nos sinais 31P-MRS de ciclocreatina e fosfociclociclina, bem como na normalização dos resultados dos testes comportamentais.
[00339] Como as células cerebrais são o alvo final da distribuição de creatina, é imperativo que ele tenha que atravessar a barreira hematoencefálica (BBB), se deslocar para o espaço intersticial e penetrar nas células cerebrais alvo. A creatina não difunde facilmente através das membranas biológicas por si só, mas atravessa o BBB de forma eficiente através do processo de transporte ativo mediado por Creatine Transporter SLC6A8. Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação podem passar o BBB e/ou ser liberados dentro das células alvo como creatina livre.
[00340] Em algumas modalidades, os presentes compostos são estáveis em fluidos biológicos, para entrar nas células por difusão passiva ou transporte ativo e liberar a creatina ou análogo de creatina correspondente no citoplasma celular. Esses análogos de pró-drogas também podem atravessar tecidos barreira importantes, como a mucosa intestinal, a barreira hematoencefálica e a barreira placentária. Devido à capacidade de passar através das membranas biológicas, essas pró-drogas podem restaurar e manter a homeostase da energia nas células desprovidas de ATP através do sistema de creatina quinase, e restaurar os níveis de ATP para homeostase energética normal e para proteger os tecidos de mais estresse isquêmico.
[00341] Em outras modalidades, o método pode fornecer continuamente uma quantidade terapeuticamente eficaz de creatina por um período de cerca de 1 hora a cerca de 2, cerca de 3, cerca de 4, cerca de 5, cerca de 6, cerca de 7, cerca de 8, cerca de 9, cerca de 10, cerca de 11, cerca de 12, cerca de 13, cerca de 14, cerca de 15, cerca de 16, cerca de 17, cerca de 18, cerca de 19, cerca de 20, cerca de 21, cerca de 22, cerca de 23 ou cerca de 24 horas.
[00342] Em algumas modalidades, o método aqui divulgado pode fornecer acúmulo de creatina ou d3-creatina no cérebro na mesma razão de vezes do número de doses, por exemplo, 7 doses diárias levarão a um aumento de 7 vezes da creatina ou d3-creatina no cérebro.
[00343] Numa modalidade, a quantidade terapeuticamente eficaz refere-se à quantidade administrada ao paciente. Em ainda outra modalidade, a quantidade terapeuticamente eficaz refere-se à quantidade distribuída ao tecido muscular do indivíduo. Os compostos da presente divulgação, após administração, são convertidos em creatina in vivo. Ou seja, os presentes compostos, após administração, são metabolizados em um ou mais compostos na via da creatina ou derivados dos mesmos (incluindo a própria creatina).
[00344] Compostos da presente divulgação e das presentes composições podem ser úteis no tratamento de doenças, distúrbios ou condições em um paciente associado a uma disfunção no metabolismo energético. Em certas modalidades, uma doença associada a uma disfunção no metabolismo energético é selecionada de isquemia, estresse oxidativo, doença neurodegenerativa, lesão por reperfusão isquêmica, doença cardiovascular, esclerose múltipla, doença psicótica e fadiga muscular. Em certas modalidades, o tratamento de uma doença compreende efetuar homeostase energética em um tecido ou órgão afetado pela doença.
[00345] Isquemia
[00346] Os compostos e composições farmacêuticas da invenção podem ser utilizados para tratar doenças isquêmicas agudas ou crônicas, distúrbios ou condições. Isquemia é um desequilíbrio no suprimento e na demanda de oxigênio em uma célula, tecido ou órgão. A isquemia é caracterizada por hipóxia, incluindo anóxia, insuficiência de substratos metabólicos para a bioenergética celular normal e acúmulo de resíduos metabólicos. A isquemia em um tecido ou órgão pode ser causada por uma insuficiência vascular como arteriosclerose, trombose, embolia, torção ou compressão, hipotensão como choque ou hemorragia, aumento da massa de tecido (hipertrofia), aumento da carga de trabalho (taquicardia, exercício) e/ou pelo estresse tecidual diminuído, como dilatação cardíaca. A isquemia também pode resultar de trauma ou procedimentos cirúrgicos. Dependendo da gravidade e duração da lesão, a isquemia pode levar a uma perda reversível da função celular ou a morte celular irreversível. Diferentes tipos de células têm limiares diferentes para lesões isquêmicas, dependendo, pelo menos em parte, dos requisitos de energia celular dos tecidos ou órgãos afetados. Células parenquimatosas como neurônios (3-4 minutos), músculos cardíacos, hepatócitos, células tubulares renais, epitélio gastrointestinal (20-80 minutos) e fibroblastos, epiderme e músculo esquelético (horas) são mais suscetíveis à lesão isquêmica do que as células estromais. Vários estudos sugerem uma correlação entre a capacidade funcional do sistema de creatina quinase e a tolerância isquêmica de um determinado tecido e indicam que estratégias para melhorar a capacidade funcional do sistema de creatina quinase podem ser eficazes para melhorar a tolerância isquêmica no tecido (ver, por exemplo, Wyss and Kaddurah-Daouk, Physiological Reviews, 2000, 80(3), 1107-1213, que é incorporado por referência aqui na sua totalidade). Por exemplo, a suplementação oral de creatina inibe a liberação do citocromo C mitocondrial e a ativação da caspase-3 a jusante, resultando em neuroproteção isquêmica. Associada à inibição da liberação do citocromo C e à ativação da caspase-3 e à neuroproteção, a administração de creatina inibe a depleção de ATP mediada por isquemia.
[00347] Os compostos e composições farmacêuticas da invenção podem ser utilizados para tratar isquemia aguda ou crônica. Em certas modalidades, um composto ou composição pode ser particularmente útil no tratamento agudo ou emergencial de isquemia em tecidos ou órgãos caracterizados por alta demanda de energia, como cérebro, neurônios, coração, pulmão, rim ou intestino.
[00348] Os altos requisitos de energia comparados às baixas reservas de energia tornam o cérebro particularmente vulnerável a condições hipóxicas. Embora o cérebro constitua apenas uma pequena fração do peso corporal total (cerca de 2%), é responsável por uma porcentagem desproporcionalmente grande do consumo de O2 (cerca de 20%). Sob condições fisiológicas, a demanda intensificada de O2 é rápida e adequadamente compensada por um aumento no fluxo sanguíneo cerebral. Quanto maior a duração da hipóxia/isquemia, maiores e mais difusas as áreas do cérebro afetadas. A área mais vulnerável a danos isquêmicos é o tronco cerebral, hipocampo e córtex cerebral. A lesão progride e eventualmente se torna irreversível, exceto se a oxigenação não for restaurada. A morte celular aguda ocorre principalmente por necrose, mas a hipóxia também causa apoptose tardia. Além disso, a liberação de glutamato pelos neurônios pré-sinápticos pode aumentar ainda mais o influxo de Ca2+ e resultar em colapso catastrófico nas células pós- sinápticas. Se a isquemia não for muito grave, as células podem suprimir algumas funções, como síntese proteica e atividade elétrica espontânea, em um processo chamado penumbra, que pode ser revertido desde que o suprimento de O2 seja retomado. No entanto, o processo de restaurar os níveis de oxigênio no tecido isquemicamente estressado, por exemplo, reperfusão, também pode induzir a morte celular irreversível, principalmente através da geração de espécies reativas de oxigênio e infiltração inflamatória de células.
[00349] O neurônio é limitado por sua disponibilidade de substratos geradores de energia, sendo limitado ao uso principalmente de glicose, corpos cetônicos ou lactato. O neurônio não produz ou armazena corpos de glicose ou cetona e não pode sobreviver por um período significativo de tempo sem um substrato que é absorvido e usado direta ou indiretamente da corrente sanguínea. Assim, um suprimento constante de um substrato gerador de energia deve estar presente no sangue o tempo todo, em uma quantidade suficiente para suprir todo o cérebro e o resto do corpo com substratos geradores de energia. As células cerebrais requerem uma concentração de cerca de 5 mM de glicose (ou equivalente) para manter sua taxa ideal de fosforilação oxidativa para produzir ATP. Os nutrientes entram nas células passando através da membrana celular. A distribuição de nutrientes frequentemente depende de mecanismos externos às membranas celulares, como ingestão oral, absorção, transporte circulatório e fluxo intersticial. Uma vez localizados na vizinhança da célula, os processos específicos da membrana desempenham um papel no transporte de nutrientes sequencialmente através da barreira hematoencefálica e, em seguida, no interior da célula e em várias organelas subcelulares. O transporte de nutrientes é possibilitado pela quebra de ATP por ATPases. Os gradientes de Na+ criados pelas ATPases Na+/ K+ podem ser usados pelas células para transportar moléculas de nutrientes através das membranas celulares.
[00350] A falta de oxigênio ou glicose impede ou limita a capacidade dos neurônios de sintetizar o ATP. O sistema intracelular de creatina/fosfocreatina pode, em certa medida, compensar a falta de oxigênio ou glicose. A creatina quinase catalisa a síntese de fosfocreatina a partir da creatina no tecido cerebral normal. Sob condições de depleção de ATP, a fosfocreatina pode doar seu grupo fosfato ao ADP para ressintetizar o ATP. No entanto, o teor de fosfocreatina neuronal é limitado após a anóxia completa ou a fosfocreatina de isquemia também ser rapidamente esgotada. Acredita-se que a depleção de ATP bloqueie as Na+/K+ ATPases, fazendo com que os neurônios despolarizem e percam o potencial da membrana.
[00351] Os níveis de oxigênio esgotado têm várias outras consequências na bioenergética celular e na função que podem levar à morte celular. Por exemplo, a bioenergética disfuncional também envolve homeostase prejudicada do cálcio. A regulação do cálcio desempenha um papel central no bom funcionamento e sobrevivência dos neurônios. As bombas de cálcio, localizadas nas membranas celulares, usam ATP para transportar íons de cálcio para fora do neurônio. A atividade adequada da bomba de cálcio é essencial na manutenção da homeostase do retículo neuronal, mitocondrial e endoplasmático. Alterações na função da bomba de cálcio modulam a atividade enzimática dentro de uma célula e também desempenham um papel crítico no desencadeamento da transição da permeabilidade mitocondrial, que pode levar à morte celular. Por exemplo, acredita-se que o metabolismo intracelular de Ca2+ contribua para a morte celular na doença de Alzheimer. Por exemplo, sob condições de estresse oxidativo, a produção de radicais livres de oxigênio excede os mecanismos de proteção endógena aos radicais livres. Isso prejudica o metabolismo e a função neuronal por danos diretos dos radicais livres em importantes biomoléculas celulares, incluindo lipídeos da membrana, ácidos nucleicos e proteínas funcionais; e por modulação de vias críticas de transdução de sinal. A função neural depende da transmissão de impulsos elétricos entre as células. Esta atividade depende das ações precisas de múltiplas proteínas de membrana, cada uma suspensa em uma bicamada fosfolipídica. A atividade ideal desse microambiente dinâmico de membrana depende do status exato e da composição química dos constituintes lipídicos. Na falta do ambiente fosfolipídico apropriado, as proteínas, enzimas e receptores do canal celular não são capazes de atingir níveis sustentados de função ideal. Além disso, o estresse oxidativo e/ou metabolismo anormal do metil podem reduzir a fluidez da bicamada lipídica membranosa com subsequentes efeitos adversos sobre as proteínas funcionais incorporadas. A bioenergética disfuncional também pode afetar adversamente a passagem de elétrons de alta energia ao longo da cadeia respiratória.
[00352] A apoptose refere-se ao processo que requer energia de morte celular programada, quando uma célula nervosa individual, em circunstâncias apropriadas, inicia um processo que leva à morte celular. Alguns dos mecanismos discutidos acima podem iniciar vias apoptóticas, incluindo estresse oxidativo, sobrecarga de cálcio, deficiência de energia celular, retirada de fator trófico e processamento anormal de proteínas precursoras de amiloides. Na isquemia, os neurônios na região do tecido cerebral que são mais gravemente afetados pela lesão hipóxica morrem rapidamente por necrose, enquanto os neurônios expostos a graus menores de hipóxia morrem por apoptose. A mudança da morte celular necrótica para morte celular apoptótica está associada ao aumento dos níveis de ATP intra celular. Foi demonstrado que a suplementação de creatina pode resultar em uma maior capacidade de tamponar os níveis de ATP e reduzir a morte celular e, assim, fornecer proteção contra danos anóxicos e isquêmicos (Balestrino et al., Amino Acids, 2002, 23, 221-229; and Zhu et al., J Neurosci 2004, 24(26), 5909-5912, each of which is incorporated by reference herein in its entirety).
[00353] Em certas modalidades, os compostos e composições farmacêuticas da invenção podem ser usados para tratar uma doença cardiovascular, incluindo isquemia cerebral (acidente vascular cerebral) e isquemia do miocárdio (infarto do coração). A doença cardíaca isquêmica, como causa subjacente de muitos casos de infarto agudo do miocárdio, insuficiência cardíaca congestiva, arritmias e morte cardíaca súbita, é uma das principais causas de morbimortalidade em todos os países industrializados. Nos Estados Unidos, a doença cardíaca isquêmica causa quase 20% de todas as mortes (.600.000 mortes a cada ano), com muitas dessas mortes ocorrendo antes do paciente chegar ao hospital. Estima-se que 1,1 milhão de americanos terão um infarto agudo do miocárdio novo ou recorrente a cada ano, e muitos sobreviventes sofrerão morbidade duradoura, com progressão para insuficiência cardíaca e morte. À medida que a população envelhece e as comorbidades como obesidade e diabetes se tornam mais prevalentes, é provável que a carga de saúde pública causada por doenças cardíacas isquêmicas aumente.
[00354] A bioenergética celular ideal depende de: (1) distribuição adequada de oxigênio e substratos às mitocôndrias; (2) a capacidade oxidativa das mitocôndrias; (3) quantidades adequadas de fosfato de alta energia e a razão fosfato de creatina/ATP; (4) transferência eficiente de energia das mitocôndrias para sítios de utilização de energia; (5) regulação local adequada das razões ATP/ADP próximas às ATPases; e (6) sinalização de feedback eficiente dos sítios de utilização para manter a homeostase energética na célula. Foram encontrados defeitos nessas vias energéticas cardíacas em doenças cardiovasculares, como cardiomiopatias dilatadas e hipertróficas de várias origens, defeitos de condução cardíaca e cardiopatias isquêmicas (Saks et al., J Physiol 2006, 571.2, 253-273; Ventura- Clapier et al., J Physiol 2003, 555.1, 1-13; and Ingwall and Weiss, Circ Res 2004, 95, 135-145, cada um dos quais é incorporado por referência aqui na sua totalidade). Uma redução na razão de fosfato de creatina/ATP é consistentemente relatada na insuficiência cardíaca humana e insuficiência cardíaca experimental, mesmo em cargas de trabalho moderadas. A creatina, o transportador de creatina, o fosfato de creatina e o ATP são significativamente reduzidos e a diminuição na razão fosfato de creatina/ATP é um preditor de mortalidade em insuficiência cardíaca congênita. Além disso, uma sobrerregulação da expressão da proteína transportadora de creatina foi demonstrada em modelos experimentais de doenças cardíacas, bem como na insuficiência do miocárdio humano, indicando que os níveis geralmente mais baixos de fosfato de creatina e creatina medidos em corações com insuficiência estão relacionados à capacidade de transportador de creatina sobrerregulado.
[00355] As doenças cardiovasculares incluem hipertensão, insuficiência cardíaca, como insuficiência cardíaca congestiva ou cardíaca após infarto do miocárdio, arritmia, disfunção diastólica, como disfunção diastólica do ventrículo esquerdo, insuficiência cardíaca diastólica ou comprometimento do enchimento diastólico, disfunção sistólica, isquemia, como isquemia miocárdica, cardiomiopatia como cardiomiopatia hipertrófica e cardiomiopatia dilatada, morte súbita cardíaca, fibrose miocárdica, fibrose vascular, complacência arterial prejudicada, lesões necróticas do miocárdio, dano vascular no coração, inflamação vascular no coração, infarto do miocárdio, incluindo tanto infarto agudo pós- miocárdico quanto condições crônicas pós-infarto do miocárdio, angioplastia coronária, hipertrofia ventricular esquerda, fração de ejeção diminuída, trombose coronária, lesões cardíacas, hipertrofia da parede vascular no coração, espessamento endotelial, miocardite e doença arterial coronariana, como necrose fibrinoide ou artérias coronárias. A hipertrofia ventricular devido à hipertensão arterial sistêmica associada à cardiopatia isquêmica coronariana é reconhecida como o principal fator de risco para morte súbita, insuficiência cardíaca pós-infarto e ruptura cardíaca. Pacientes com hipertrofia ventricular esquerda grave são particularmente suscetíveis a hipóxia ou isquemia.
[00356] Os efeitos neuroprotetores dos compostos da invenção podem ser determinados usando modelos animais de isquemia cerebral, como os descritos, por exemplo, em Cimino et al., Neurotoxicol 2005, 26(5), 9929-33; Konstas et al., Neurocrit Care 2006, 4(2), 168-78; Wasterlain et al., Neurology 1993, 43(11), 2303-10; and Zhu et al., J Neuroscience 2004, 24(26), 5909-5912.
[00357] Lesão por Reperfusão Isquêmica
[00358] Lesão por reperfusão é dano ao tecido quando o suprimento sanguíneo retorna ao tecido após um período de isquemia. A ausência em um tecido ou órgão de oxigênio e nutrientes do sangue cria uma condição na qual a restauração da circulação resulta em inflamação e danos oxidativos do oxigênio, em vez de restauração da função normal. O dano da lesão de reperfusão isquêmica é devido em parte à resposta inflamatória do tecido danificado. A reperfusão contribui para a cascata isquêmica no cérebro, que está envolvida em acidente vascular cerebral e trauma cerebral. Acredita-se que crises repetidas de isquemia e reperfusão sejam um fator que leva à formação e falha na cicatrização de feridas crônicas, como úlceras de pressão e úlceras nos pés diabéticos (Mustoe, Am J Surgery 2004, 187(5), S65-S70, que é incorporado por referência aqui na sua totalidade). Em certas modalidades, os métodos e composições da divulgação podem proteger os músculos e órgãos, como, por exemplo, o coração, fígado, rim, cérebro, pulmão, baço e órgãos esteroidogênicos, por exemplo, tireoide, glândulas suprarrenais e gônadas, de danos como resultado de lesão por isquemia e reperfusão.
[00359] A isquemia seguida de reperfusão é uma das principais causas de lesão muscular esquelética e cardíaca em mamíferos. A isquemia é causada por uma redução no oxigênio fornecido aos tecidos ou órgãos como resultado da redução do fluxo sanguíneo e pode levar à disfunção orgânica. O suprimento sanguíneo reduzido pode resultar de oclusão ou desvio de sangue devido à trombose dos vasos, como infarto do miocárdio, estenose, lesão acidental dos vasos ou procedimentos cirúrgicos. O restabelecimento subsequente de um suprimento adequado de sangue oxigenado para o tecido ou órgão pode resultar em dano aumentado, um processo conhecido como lesão de reperfusão de isquemia ou lesão de reperfusão de oclusão. As complicações decorrentes da lesão de reperfusão de isquemia incluem acidente vascular cerebral, infarto do miocárdio fatal ou não fatal, remodelação miocárdica, aneurismas, doença vascular periférica, necrose tecidual, insuficiência renal, e perda pós-cirúrgica do tônus muscular.
[00360] A restauração do fluxo sanguíneo coronário após um período transitório de isquemia (reperfusão), embora necessária para a sobrevivência de miócitos e para restaurar o metabolismo aeróbico, introduz uma série separada de estresses que podem agravar a lesão celular. As espécies reativas de oxigênio geradas durante a reperfusão danificam proteínas e estruturas de membrana nos cardiomiócitos e podem ativar as vias de transdução de sinal que levam à apoptose. A adesão dos leucócitos às células endoteliais isquêmicas pode obstruir os capilares e liberar mediadores inflamatórios. Na reperfusão, o influxo de complemento ativado, catecolaminas e outras moléculas sinalizadoras contidas no plasma ou elaboradas localmente na parede do miocárdio também pode influenciar o curso dos eventos nas células do miocárdio. Assim como as consequências diretas da isquemia, a lesão por reperfusão é uma característica importante das síndromes coronárias agudas. Essa lesão ocorre espontaneamente, como resultado da fibrinólise das tromboses coronárias e como consequência das drogas fibrinolíticas da angioplastia aguda, tratamentos que agora são comumente usados para abrir vasos ocluídos.
[00361] Em certas modalidades, os compostos da invenção e composições dos mesmos podem ser utilizados para tratar uma condição associada à lesão de reperfusão isquêmica ou reduzir a lesão de reperfusão isquêmica. A lesão de reperfusão isquêmica pode estar associada à privação de oxigênio, ativação de neutrófilos e/ou produção de mieloperoxidase. A lesão de reperfusão isquêmica pode ser o resultado de vários estados de doença ou pode ser induzida iatrogenicamente, por exemplo, por coágulos sanguíneos, estenose ou cirurgia.
[00362] Em certas modalidades, os compostos da invenção e composições dos mesmos podem ser utilizados para tratar acidente vascular cerebral, infarto do miocárdio fatal ou não fatal, doença vascular periférica, necrose tecidual e insuficiência renal e perda pós-cirúrgica do tônus muscular resultante de lesão de reperfusão isquêmica. Em certas modalidades, os métodos e composições da invenção reduzem ou mitigam a extensão da lesão de reperfusão isquêmica.
[00363] Em certas modalidades, os compostos da invenção e suas composições podem ser utilizados para tratar, reduzir ou prevenir lesões de reperfusão isquêmica associadas à oclusão ou desvio de sangue devido à estenose, trombose, lesão acidental de vasos ou procedimentos cirúrgicos.
[00364] Em certas modalidades, os compostos da invenção e composições dos mesmos também podem ser usados para tratar qualquer outra condição associada à reperfusão isquêmica, como infarto do miocárdio, acidente vascular cerebral, claudicação intermitente, doença arterial periférica, síndrome coronariana aguda, doença cardiovascular e dano muscular como resultado de oclusão de um vaso sanguíneo.
[00365] Em certas modalidades, os compostos da invenção e composições dos mesmos podem ser utilizados para tratar lesões de reperfusão associadas a infarto do miocárdio, estenose, pelo menos um coágulo sanguíneo, acidente vascular cerebral, claudicação intermitente, doença arterial periférica, síndrome coronariana aguda, doença cardiovascular ou dano muscular, como resultado da oclusão de um vaso sanguíneo.
[00366] Em certas modalidades, os compostos da invenção e composições do mesmos podem ser utilizados em conjunto com cirurgia cardíaca, por exemplo, em ou com soluções cardioplégicas para prevenir ou minimizar lesões de isquemia ou reperfusão no miocárdio. Em certas modalidades, os métodos e composições podem ser usados com uma máquina de circulação extracorpórea durante cirurgia cardíaca para prevenir ou reduzir a lesão de reperfusão isquêmica no miocárdio.
[00367] Em certas modalidades, os métodos e composições da invenção podem proteger os músculos e órgãos, como, por exemplo, o coração, fígado, rim, cérebro, pulmão, baço e órgãos esteroidogênicos, por exemplo, tireoide, glândulas suprarrenais e gônadas, de danos como resultado de lesão por isquemia e reperfusão.
[00368] Os compostos e composições farmacêuticas da invenção podem ser utilizados para tratar lesões de reperfusão isquêmica em um tecido ou órgão entrando em contato com o tecido ou órgão com uma quantidade eficaz do composto ou da composição farmacêutica. O tecido ou órgão pode estar em um paciente ou fora dele, isto é, extracorpóreo. O tecido ou órgão pode ser um tecido ou órgão de transplante e o composto ou a composição farmacêutica pode ser contatado com o tecido ou órgão de transplante antes da remoção, durante o trânsito, durante o transplante e/ou após o tecido ou órgão ser transplantado no receptor.
[00369] Em certas modalidades, compostos ou composições farmacêuticas da invenção podem ser utilizados para tratar lesões de perfusão isquêmica causadas por cirurgia, como cirurgia cardíaca. Um composto ou uma composição farmacêutica pode ser administrada antes, durante e/ou após a cirurgia. Em certas modalidades, um composto ou uma composição farmacêutica da invenção pode ser usada para tratar lesão de reperfusão isquêmica no músculo, incluindo músculo cardíaco, músculo esquelético ou músculo liso, e em certas modalidades, para tratar lesão de reperfusão isquêmica em um órgão como o coração, pulmão, rim, baço, fígado, neurônio ou cérebro. Um composto da invenção ou uma composição farmacêutica do mesmo pode ser administrado antes, durante e/ou após a cirurgia.
[00370] Em certas modalidades, os compostos da invenção ou composições farmacêuticas da invenção podem ser utilizados para tratar lesões por perfusão isquêmica em um músculo, incluindo músculo cardíaco, músculo esquelético e músculo liso.
[00371] A eficácia de um composto da invenção no tratamento de lesão por reperfusão isquêmica pode ser avaliada usando modelos animais e em ensaios clínicos. Exemplos de métodos úteis para avaliar a eficácia no tratamento de lesão por reperfusão isquêmica são divulgados, por exemplo, em Prass et al., J Cereb Blood Flow Metab 2007, 27(3), 452-459; Arya et al., Life Sci 2006, 79(1), 38-44; Lee et al., Eur. J. Pharmacol 2005, 523(1-3), 101-108; e Pedido U.S. 2004/0038891. Métodos úteis para avaliar a perfusão/reperfusão de transplante são descritos, por exemplo, em Ross et al., Am J. Physiol-Lung Cellular Mol. Physiol. 2000, 279(3), L528-536.
[00372] Perfusão de transplante
[00373] Em certas modalidades, os compostos da invenção ou composições farmacêuticas dos mesmos podem ser utilizados para aumentar a viabilidade de transplantes de órgãos perfundindo os órgãos com um composto da invenção ou composições farmacêuticas dos mesmos. Espera-se que níveis aumentados de fosfato de creatina previnam ou minimizem os danos isquêmicos em um órgão. A perfusão com uma pró-droga de creatina durante a remoção do órgão, após a remoção de um órgão doador, durante o implante e/ou após o transplante de órgão, pode aumentar a viabilidade do órgão, especialmente um órgão metabolicamente ativo, como o coração ou o pâncreas, e assim reduzir taxas de rejeição e/ou aumentar a janela de tempo para transplantes de órgãos.
[00374] Em certas modalidades, os compostos da invenção e composições dos mesmos podem ser utilizados para tratar, prevenir ou reduzir a lesão de reperfusão de isquemia em tecidos ou órgãos extracorpóreos. Tecido ou órgãos extracorpóreos são tecidos ou órgãos que não estão em um indivíduo (também denominado ex vivo), como no transplante. Para o transplante de tecidos e órgãos, os tecidos e órgãos doados removidos também são suscetíveis a lesões de reperfusão durante a remoção, durante o transporte, durante o implante e após o transplante em um receptor. Os métodos e composições podem ser utilizados para aumentar a viabilidade de um tecido ou órgão transplantável, por exemplo, suplementando soluções usadas para manter ou preservar tecidos ou órgãos transplantáveis. Por exemplo, os métodos e composições podem ser utilizados para banhar o tecido ou órgão transplantável durante o transporte ou podem ser colocados em contato com o tecido ou órgão transplantável antes, durante ou após o transplante.
[00375] Doenças neurodegenerativas
[00376] As doenças neurodegenerativas que caracterizam a morte celular podem ser categorizadas como agudas, por exemplo, acidente vascular cerebral, lesão cerebral traumática, lesão medular e crônica, por exemplo, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença de Parkinson e doença de Alzheimer. Embora essas doenças tenham causas diferentes e afetem populações neuronais diferentes, elas compartilham comprometimento semelhante no metabolismo energético intracelular. Por exemplo, a concentração intracelular de ATP é diminuída, resultando no acúmulo cistólico de Ca2+ e no estímulo da formação de espécies prontamente de oxigênio. Ca2+ e espécies reativas de oxigênio, por sua vez, podem desencadear a morte celular apoptótica. Para esses distúrbios, o comprometimento do metabolismo da creatina cerebral também é evidente, refletido na redução da concentração total de creatina, da concentração de fosfato de creatina, da atividade da creatina quinase e/ou do teor do transportador de creatina (ver, por exemplo, Wyss and Kaddurah-Daouk, Physiol Rev 2000, 80, 1107-1213; Tarnopolsky and Beal, Ann Neurol 2001, 49, 561-574; e Butterfield and Kanski, Mech Ageing Dev 2001, 122, 945-962, cada um dos quais é incorporado por referência aqui na sua totalidade).
[00377] As doenças neurodegenerativas agudas e crônicas são doenças associadas a alta morbimortalidade e poucas opções estão disponíveis para seu tratamento. Uma característica de muitas doenças neurodegenerativas, que incluem acidente vascular cerebral, trauma cerebral, lesão medular, esclerose lateral amiotrófica, doença de Huntington, doença de Alzheimer e doença de Parkinson, é a morte das células neuronais. A morte celular ocorre por necrose ou apoptose. A morte celular necrótica no sistema nervoso central segue isquemia aguda ou lesão traumática no cérebro ou medula espinhal. Ocorre em áreas mais afetadas pelo colapso bioquímico abrupto, o que leva à geração de radicais livres e excitotoxinas. O inchaço mitocondrial e nuclear, a dissolução das organelas e a condensação da cromatina ao redor do núcleo são seguidas pela ruptura das membranas nucleares e citoplasmáticas e pela degradação do DNA por cortes enzimáticos aleatórios. A morte celular apoptótica pode ser uma característica de doenças neurológicas agudas e crônicas. A apoptose ocorre em áreas que não são severamente afetadas por uma lesão. Por exemplo, após a isquemia, ocorre morte celular necrótica no núcleo da lesão, onde a hipóxia é mais grave e apoptose ocorre na penumbra, onde o fluxo sanguíneo colateral reduz o grau de hipóxia. A morte celular apoptótica também é um componente da lesão que aparece após lesão cerebral ou medular. Nas doenças neurodegenerativas crônicas, a apoptose é a forma predominante de morte celular. Na apoptose, uma cascata bioquímica ativa proteases que destroem moléculas necessárias para a sobrevivência celular e outras que mediam um programa de morte celular. As caspases contribuem direta e indiretamente para as alterações morfológicas da célula durante a apoptose (Friedlander, N Engl J Med 2003, 348(14), 1365-75). Foi demonstrado que a suplementação oral de creatina inibe a liberação do citocromo C mitocondrial e a ativação a jusante da caspase-3, e a inibição da depleção de ATP das cascatas de morte celular mediadas pela caspase na isquemia cerebral (ZZhu et al., J Neurosci 2004, 24(26), 5909-5912) indicando que a manipulação do sistema de creatina quinase pode ser eficaz no controle da morte celular apoptótica em doenças neurodegenerativas crônicas.
[00378] A administração de creatina mostra efeitos neuroprotetores, particularmente em modelos animais da doença de Parkinson, doença de Huntington e ALS (Wyss and Schulze, Neuroscience 2002, 112(2), 243-260, que é incorporada por referência aqui na íntegra) e é reconhecido que o nível de estresse oxidativo pode ser um determinante da determinação metabólica em uma variedade de doenças neurodegenerativas. As hipóteses atuais sobre os mecanismos de neuroproteção mediada por creatina incluem armazenamento de energia intensificado, bem como estabilização do poro da transição da permeabilidade mitocondrial pela conformação octomérica da creatina quinase. Portanto, acredita-se que níveis mais altos de creatina intracelular melhoram o status bioenergético geral de uma célula, tornando a célula mais resistente a lesões.
[00379] Doença de Parkinson
[00380] A doença de Parkinson é um distúrbio degenerativo do sistema nervoso lentamente progressivo, caracterizado por tremor quando os músculos estão em repouso (tremor em repouso), lentidão dos movimentos voluntários e aumento do tônus muscular (rigidez). Na doença de Parkinson, as células nervosas nos gânglios da base, por exemplo, substância negra, degeneram e, assim, reduzem a produção de dopamina e o número de conexões entre as células nervosas nos gânglios da base. Como resultado, os gânglios da base são incapazes de suavizar o movimento muscular e coordenar alterações na postura, levando a tremor, incoordenação e movimento reduzido e lento (bradicinesia) (Blandini et al., Mol. Neurobiol. 1996, 12, 73-94).
[00381] Acredita-se que o estresse oxidativo possa ser um fator na deterioração metabólica observada no tecido da doença de Parkinson (Ebadi et al., Prog Neurobiol 1996, 48, 1-19; Jenner and Olanow, Ann Neurol 1998, 44 Suppl 1, S72-S84; and Sun and Chen, J Biomed Sci 1998, 5, 401-414, cada um dos quais é incorporado por referência aqui na sua totalidade) e a suplementação de creatina demonstrou exibir efeitos neuroprotetores (Matthews et al., Exp Neurol, 1999, 157, 142-149, que é incorporado por referência aqui na sua totalidade).
[00382] A eficácia da administração de um composto da invenção para o tratamento da doença de Parkinson pode ser avaliada usando modelos animais e humanos da doença de Parkinson e estudos clínicos. São conhecidos modelos animais e humanos da doença de Parkinson (ver, por exemplo, O'Neil et al., CNS Drug Rev. 2005, 11(1), 77-96; Faulkner et al., Ann. Pharmacother. 2003, 37(2), 282-6; Olson et al., Am. J. Med. 1997, 102(1), 60-6; Van Blercom et al., Clin Neuropharmacol. 2004, 27(3), 124-8; Cho et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 2006, 341, 6-12; Emborg, J. Neuro. Meth. 2004, 139, 121-143; Tolwani et al., Lab Anim Sci 1999, 49(4), 363-71; Hirsch et al., J Neural Transm Suppl 2003, 65, 89100; Orth and Tabrizi, Mov Disord 2003, 18(7), 729-37; Betarbet et al., Bioessays 2002, 24(4), 308-18; e McGeer and McGeer, Neurobiol Aging 2007, 28(5), 639-647).
[00383] Doença de Alzheimer
[00384] A doença de Alzheimer é uma perda progressiva da função mental caracterizada pela degeneração do tecido cerebral, incluindo a perda de células nervosas e o desenvolvimento de placas senis e emaranhados neurofibrilares. Na doença de Alzheimer, partes do cérebro degeneram, destruindo células nervosas e reduzindo a capacidade de resposta dos neurônios em manutenção aos neurotransmissores. Anormalidades no tecido cerebral consistem em placas senis ou neuríticas, por exemplo, aglomerados de células nervosas mortas contendo uma proteína insolúvel anormal chamada amiloide e emaranhados neurofibrilares, fios torcidos de proteínas insolúveis na célula nervosa.
[00385] Acredita-se que o estresse oxidativo possa ser um fator na deterioração metabólica observada no tecido da doença de Alzheimer, com a creatina quinase sendo um dos alvos do dano oxidativo (Pratico et al., FASEB J 1998, 12, 1777-1783; Smith et al., J Neurochem 1998, 70, 2212-2215; and Yatin et al., Neurochem Res 1999, 24, 427-435, cada um dos quais é incorporado por referência aqui na sua totalidade) e os estudos mostraram uma correlação entre os níveis intracelulares de fosfato de creatina e o progresso da demência (Pettegrew et al., Neurobiol Aging 1994, 15, 117-132, que é incorporado por referência aqui na sua totalidade).
[00386] A eficácia da administração de um composto da invenção para o tratamento da doença de Alzheimer pode ser avaliada usando modelos animais e humanos da doença de Alzheimer e estudos clínicos. Modelos animais úteis para avaliar a eficácia de compostos para o tratamento da doença de Alzheimer são divulgados, por exemplo, em Van Dam and De Dyn, Nature Revs Drug Disc 2006, 5, 956-970; Simpkins et al., Ann NY Acad Sci, 2005, 1052, 233-242; Higgins and Jacobsen, Behav Pharmacol 2003, 14(5-6), 419-38; Janus and Westaway, Physiol Behav 2001, 73(5), 873-86; and Conn, ed., "Handbook of Models in Human Aging," 2006, Elsevier Science & Technology.
[00387] Doença de Huntington
[00388] A doença de Huntington é um distúrbio neurodegenerativo autossômico dominante, no qual ocorre morte celular específica no neostriatum e no córtex (Martin, N Engl J Med 1999, 340, 1970-80, que é incorporado por referência aqui na sua totalidade). O início geralmente ocorre durante a quarta ou quinta década de vida, com uma sobrevida média no início da idade de 14 a 20 anos. A doença de Huntington é fatal e não existe tratamento eficaz. Os sintomas incluem um distúrbio característico do movimento (coreia de Huntington), disfunção cognitiva e sintomas psiquiátricos. A doença é causada por uma mutação que codifica uma expansão anormal das repetições de poliglutamina codificadas em CAG na proteína huntingtina. Vários estudos sugerem que há um comprometimento progressivo do metabolismo energético, possivelmente resultante de dano mitocondrial causado pelo estresse oxidativo como consequência da geração de radicais livres. Estudos pré-clínicos em modelos animais da doença de Huntington documentaram os efeitos neuroprotetores da administração de creatina. Por exemplo, a neuroproteção por creatina está associada a níveis mais altos de fosfato de creatina e creatina e níveis reduzidos de lactato no cérebro, consistentes com a produção melhorada de energia (veja Ryu et al., Pharmacology & Therapeutics 2005, 108(2), 193-207, que é incorporado por referência aqui na sua totalidade).
[00389] A eficácia da administração de um composto da invenção para o tratamento da doença de Huntington pode ser avaliada usando modelos animais e humanos da doença de Huntington e estudos clínicos. Os modelos animais da doença de Huntington são divulgados, por exemplo, em Riess and Hoersten, U.S. Application No. 2007/0044162; Rubinsztein, Trends in Genetics, 2002, 18(4), 202-209; Matthews et al., J. Neuroscience 1998, 18(1), 156-63; Tadros et al., Pharmacol Biochem Behav 2005, 82(3), 574-82, e na Pat. U.S. 6.706.764 e o Pedido U.S. 2002/0161049, 2004/0106680 e 2007/0044162. Um ensaio clínico controlado por placebo que avalia a eficácia da suplementação de creatina no tratamento da doença de Huntington é divulgado em Verbessem et al., Neurology 2003, 61, 925-230.
[00390] Esclerose lateral amiotrófica (ALS)
[00391] A esclerose lateral amiotrófica (ALS) é um distúrbio neurodegenerativo progressivo caracterizado pela perda progressiva e específica de neurônios motores no cérebro, tronco cerebral e medula espinhal (Rowland and Schneider, N Engl J Med 2001, 344, 1688-1700, que é incorporada por referência aqui na sua totalidade). A ALS começa com a fraqueza, geralmente nas mãos e com menos frequência nos pés, que geralmente progride para cima de um braço ou perna. Com o tempo, a fraqueza aumenta e a espasticidade se desenvolve caracterizada por espasmos e contrações musculares, seguidos por espasmos musculares e possivelmente tremores. A idade média de início é de 55 anos e a expectativa média de vida após o início clínico é de 4 anos. O único tratamento reconhecido para ALS é o riluzol, que pode prolongar a sobrevida em apenas cerca de três meses. Foi demonstrado que a creatina oral fornece efeitos neuroprotetores em um modelo animal transgênico de ALS (Klivenyi et al., Nat Med 1999, 5, 347-50, que é incorporado por referência aqui na sua totalidade).
[00392] A eficácia da administração de um composto da invenção para o tratamento de ALS pode ser avaliada usando modelos animais e humanos de ALS e estudos clínicos. Os modelos de doenças naturais de ALS incluem modelos de camundongos (degeneração dos neurônios motores, neuropatia motora progressiva e wobbler) e o modelo canino de atrofia muscular espinhal hereditária canina (Pioro and Mitsumoto, Clin Neurosci, 19954996, 3(6), 375-85). Modelos animais de ALS produzidos experimentalmente e produzidos por engenharia genética também podem ser úteis na avaliação da eficácia terapêutica (ver, por exemplo, Doble and Kennelu, Amyotroph Lateral Scler Other Motor Neuron Disord. 2000, 1(5), 301-12; Grieb, Folia Neuropathol. 2004, 42(4), 239-48; Price et al., Rev Neurol (Paris), 1997, 153(8-9), 484-95; and Klivenyi et al., Nat Med 1999, 5, 34750). Especificamente, o modelo de camundongo SOD1-G93A é um modelo reconhecido para ALS. Exemplos de protocolos de ensaios clínicos úteis na avaliação do tratamento de ALS são descritos, por exemplo, em Mitsumoto, Amyotroph Lateral Scler Other Motor Neuron Disord. 2001, 2 Suppl 1, S10-S14; Meininger, Neurodegener Dis 2005, 2, 208-14; and Ludolph and Sperfeld, Neurodegener Dis. 2005, 2(3-4), 215-9.
[00393] Esclerose múltipla
[00394] A esclerose múltipla (MS) é uma doença inflamatória autoimune multifacetada do sistema nervoso central causada por um ataque autoimune contra as folhas de mielina axonal isolantes do sistema nervoso central. A desmielinização leva à quebra da condução e à doença grave, com destruição dos axônios locais e morte celular neuronal irreversível. Os sintomas de MS são altamente variados, com cada paciente individual exibindo um padrão particular de distúrbios motores, sensíveis e sensoriais. A MS é tipificada patologicamente por múltiplos focos inflamatórios, placas de desmielinização, gliose e patologia axonal no cérebro e medula espinhal, os quais contribuem para as manifestações clínicas de incapacidade neurológica (ver, por exemplo, Wingerchuk, Lab Invest 2001, 81, 263-281; e Virley, NeruoRx 2005, 2(4), 638-649). Embora os eventos causais que precipitam a doença não sejam totalmente compreendidos, a maioria das evidências implica uma etiologia autoimune juntamente com fatores ambientais, bem como predisposições genéticas específicas. O comprometimento funcional, a incapacidade e a deficiência são expressos como paralisia, distúrbios sensoriais e octintivos, espasticidade, tremor, falta de coordenação e comprometimento visual, que afetam a qualidade de vida do indivíduo. O curso clínico de MS pode variar de indivíduo para indivíduo, mas invariavelmente a doença pode ser categorizada em três formas: remitente-recorrente, progressivo secundário e progressivo primário. Vários estudos implicam a disfunção do metabolismo do fosfato de creatina com a etiologia e os sintomas da doença (Minderhoud et al., Arch Neurol 1992, 49(2), 161-5; He et al., Radiology 2005, 234(1), 211-7; Tartaglia et al., Arch Neurology 2004, 61(2), 201-207; Duong et al., J Neurol 2007, Apr. 20; e Ju et al., Magnetic Res Imaging 2004, 22, 427-429), embora a ingestão de creatina por si só não pareça ser eficaz na melhoria da capacidade de exercício em indivíduos com MS (Lambert et al., Arch Phys Med Rehab 2003, 84 ( 8), 1206-1210).
[00395] A avaliação da eficácia do tratamento da MS em ensaios clínicos pode ser realizada usando ferramentas como a Expanded Disability Status Scale (Kurtzke, Neurology 1983, 33, 1444-1452) e o MS Functional Composite (Fischer et al., Mult Scler, 1999, 5, 244-250), bem como carga de lesão por ressonância magnética, biomarcadores e qualidade de vida autorreferida (ver, por exemplo, Kapoor, Cur Opinion Neurol 2006, 19, 255-259). Os modelos animais de MS que demonstraram ser úteis para identificar e validar potenciais terapêuticas incluem modelos experimentais de roedores de encefalomielite auto- imune/alérgica (EAE) que simulam as manifestações clínicas e patológicas da MS (Werkerle and Kurschus, Drug Discovery Today: Disease Models, Nervous System Disorders, 2006, 3(4), 359-367; Gijbels et al., Neurosci Res Commun 2000, 26, 193-206; and Hofstetter et al., J Immunol 2002, 169, 117-125), e modelos de EAE de primatas não humanos ('t Hart et al., Immunol Today 2000, 21, 290-297).
[00396] Transtornos psicóticos
[00397] Em certas modalidades, os compostos da invenção ou suas composições farmacêuticas podem ser utilizados para tratar distúrbios psicóticos, como, por exemplo, esquizofrenia, distúrbio bipolar e ansiedade.
[00398] Esquizofrenia
[00399] A esquizofrenia é um distúrbio cerebral crônico, grave e incapacitante que afeta cerca de um por cento das pessoas em todo o mundo, incluindo 3,2 milhões de americanos. A esquizofrenia abrange um grupo de distúrbios neuropsiquiátricos caracterizados por disfunções do processo de pensamento, como delírios, alucinações e extensa retirada dos interesses do paciente de outras pessoas. A esquizofrenia inclui os subtipos de esquizofrenia paranoica caracterizados por uma preocupação com delírios ou alucinações auditivas, esquizofrenia hebefrênica ou desorganizada, caracterizada por fala desorganizada, comportamento desorganizado e emoções vagas ou inapropriadas; esquizofrenia catatônica dominada por sintomas físicos como imobilidade, atividade motora excessiva ou suposição de posturas bizarras; esquizofrenia indiferenciada caracterizada por uma combinação de sintomas característicos dos outros subtipos; e esquizofrenia residual na qual uma pessoa não está atualmente com sintomas positivos, mas manifesta sintomas negativos e/ou cognitivos de esquizofrenia (consulte as classificações DSM-IV-TR 295.30 (tipo paranoico), 295.10 (tipo desorganizado), 295.20 (tipo catatônico), 295,90 (tipo indiferenciado) e 295,60 (tipo residual); Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4 th Edition, American Psychiatric Association, 297-319, 2005). A esquizofrenia inclui esses e outros transtornos psicóticos intimamente associados, como transtorno esquizofreniforme, transtorno esquizoafetivo, transtorno delirante, distúrbio psicótico breve, transtorno psicótico compartilhado, transtorno psicótico devido a uma condição médica geral, transtorno psicótico induzido por substância e transtornos psicóticos não especificados (DSM-IV-TR, 4 th Edition, pp. 297-344, American Psychiatric Association, 2005).
[00400] Os sintomas da esquizofrenia podem ser classificados como positivos, negativos ou cognitivos. Os sintomas positivos da esquizofrenia incluem ilusão e alucinação, que podem ser medidos usando, por exemplo, a Escala de Síndrome Positiva e Negativa (PANSS) (Kay et al., Schizophrenia Bulletin 1987, 13, 261-276). Os sintomas negativos da esquizofrenia incluem embotamento por afeto, anergia, alogia e retraimento social, que podem ser medidos, por exemplo, usando (Escalas para Avaliação de Sintomas Negativos (SANS) (Andreasen, 1983, Escalas para Avaliação de Sintomas Negativos (SANS), Iowa City, Iowa). Os sintomas cognitivos da esquizofrenia incluem comprometimento na obtenção da organização e uso do conhecimento intelectual que pode ser medido usando a subescala cognitiva da Escala de Síndrome Positiva e Negativa (subescala cognitiva PANSS) (Lindenmayer et al., J Nerv Ment Dis 1994, 182, 631-638) ou avaliando a capacidade de executar tarefas cognitivas, como, por exemplo, o Teste de Classificação de Cartões de Wisconsin (ver, por exemplo, Green et al., Am J Psychiatry 1992, 149, 162-67; and Koren et al., Schizophr Bull 2006, 32(2), 310-26).
[00401] Vários estudos apoiam uma correlação de esquizofrenia com uma disfunção no metabolismo cerebral de fosfato de alta energia (Fukuzako, World J Biol Psychiatry 2001, 2(2), 70-82; and Gangadhar et al., Prog Neuro-Psychopharmacology & Biological Psychiatry 2006, 30, 910-913. Pacientes que sofrem de esquizofrenia exibem níveis mais baixos de fosfocreatina nas regiões frontal esquerda e direita do cérebro, que são altamente correlacionadas com as subescalas de hostilidade-suspeita e avaliação de ansiedade- depressão (Deicken et al., Biol Psychiatry 1994, 36(8), 503-510; Volz et al., Biol Psychiatry 1998, 44, 399-404; and Volz et al., Biol Psychiatry 2000, 47, 954-961). A suplementação de creatina tem sido proposta para o tratamento da esquizofrenia (ver, por exemplo, Lyoo et al., Psychiatry Res: Neuroimaging 2003, 123, 87-100).
[00402] A eficácia das pró-drogas de creatina e composições farmacêuticas das mesmas para o tratamento da esquizofrenia pode ser determinada por métodos conhecidos dos versados na técnica. Por exemplo, sintomas negativos, positivos e/ou cognitivos da esquizofrenia podem ser medidos antes e após o tratamento do paciente. A redução desses sintomas indica que a condição do paciente melhorou. A melhoria nos sintomas da esquizofrenia pode ser avaliada usando, por exemplo, a Escala de Avaliação de Sintomas Negativos (SANS), Escala de Sintomas Positivos e Negativos (PANSS) (ver, por exemplo, Andreasen, 1983, Escalas para a Avaliação de Sintomas Negativos (SANS), Iowa City, Iowa; e Kay et al., Schizophrenia Bulletin 1987, 13, 261-276), e usando testes de déficits cognitivos, como o Wisconsin Card Sorting Test (WCST) e outras medidas da função cognitiva (ver, por exemplo, Keshavan et al., Schizophr Res 2004, 70(2-3), 187-194; Rush, Handbook of Psychiatric Measures, American Psychiatric Publishing 2000; Sajatovic and Ramirez, Rating Scales in Mental Health, 2nd ed, Lexi-Comp, 2003, Keefe, et al., Schizophr Res. 2004, 68(2-3), 283-97; and Keefe et al., Neuropsychopharmacology, 19 Apr. 2006.
[00403] A eficácia das pró-drogas da creatina e composições farmacêuticas das mesmas pode ser avaliada usando modelos animais de distúrbios esquizofrênicos (ver, por exemplo, Geyer and Moghaddam, in "Neuropsychopharmacology," Davis et al., Ed., Chapter 50, 689-701, American College of Neuropsychopharmacology, 2002). Por exemplo, os testes de comportamento de resposta de evitação condicionada (CAR) e de catalepsia em ratos demonstram ser úteis na previsão da atividade antipsicótica e da responsabilidade pelo efeito de EPS, respectivamente (Wadenberg et al., Neuropsychopharmacology, 2001, 25, 633-641).
[00404] Doença Bipolar
[00405] O transtorno bipolar é uma condição psiquiátrica caracterizada por períodos de humor extremo. O humor pode ocorrer em um espectro que varia de depressão (por exemplo, sentimentos persistentes de tristeza, ansiedade, culpa, raiva, isolamento e/ou desesperança, distúrbios no sono e apetite, fadiga e perda de interesse em atividades geralmente apreciadas, problemas de concentração, solidão, autoaversão, apatia ou indiferença, despersonalização, perda de interesse em atividade sexual, timidez ou ansiedade social, irritabilidade, dor crônica, falta de motivação e ideação mórbida/suicida) à mania (por exemplo, exaltação, euforia, irritação, e/ou suspeita). O distúrbio bipolar é definido e categorizado no Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4 th Ed., Text Revision (DSM-IV-TR), American Psychiatric Assoc., 200, pages 382-401. O distúrbio bipolar inclui distúrbio bipolar I, distúrbio bipolar II, ciclotimia e distúrbio bipolar não especificado de outra forma.
[00406] Demonstra-se que pacientes com depressão bipolar apresentam metabolismo cerebral de fosfato de alta energia, caracterizado por níveis reduzidos de fosfocreatina e creatina quinase (Kato et al., J Affect Disord 1994, 31(2), 125-33; and Segal et al., Eur Neuropsychopharmacology 2007, 17, 194-198) possivelmente envolvendo metabolismo da energia mitocondrial (Stork and Renshaw, Molecular Psychiatry 2005, 10, 900-919).
[00407] O tratamento do transtorno bipolar pode ser avaliado em ensaios clínicos usando escalas de avaliação, como a Escala de Classificação de Depressão de Montgomery-Asberg, a Escala de Depressão de Hamilton, a Escala de Depressão de Raskin, os critérios de Feighner e/ou o Escore da Escala de Impressão Global Clínica (Gijsman et al., Am J Psychiatry 2004, 161, 1537-1547).
[00408] Ansiedade
[00409] A ansiedade é definido e categorizado no Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, 4 th Ed., Text Revision (DSM-IV-TR), American Psychiatric Assoc., 200, pages 429-484. Os transtornos de ansiedade incluem ataque de pânico, agorafobia, transtorno do pânico sem agorafobia, agorafobia sem histórico de transtorno do pânico, fobia específica, fobia social, transtorno obsessivo-compulsivo, transtorno de estresse pós- traumático, transtorno de estresse agudo, transtorno de ansiedade generalizada, transtorno de ansiedade devido a um tratamento médico geral transtorno de ansiedade induzido por substância e transtorno de ansiedade não especificado de outra forma. Trabalhos recentes documentaram uma correlação de níveis reduzidos de creatina/fosfocreatina no centrum semiovale (uma região representativa da substância branca cerebral) com a gravidade da ansiedade (Coplan et al., Neuroimaging, 2006, 147, 27-39).
[00410] Modelos animais úteis para avaliar o tratamento da ansiedade incluem sobressalto potencializado pelo medo (Brown et al., J Experimental Psychol, 1951, 41, 317-327), elevated plus-maze (Pellow et al., J Neurosci. Methods 1985, 14, 149-167; e Hogg, Pharmacol Biochem Behavior 1996, 54(1), 21-20), e comportamento potencializado pelo medo no labirinto em cruz elevado (Korte and De Boer, Eur J Pharmacol 2003, 463, 163-175). São conhecidos modelos animais de ansiedade em animais (Toh, Eur J. Pharmacol 2003, 463, 177-184), assim como outros modelos animais sensíveis a agentes anti-ansiedade (Martin, Acta Psychiatr Scand Suppl 1998, 393, 74-80).
[00411] Em ensaios clínicos, a eficácia pode ser avaliada usando procedimentos psicológicos para induzir ansiedade experimental aplicada a voluntários saudáveis e pacientes com transtornos de ansiedade (ver, por exemplo, Graeff et al., Brazilian J Medical Biological Res 2003, 36, 421-32) ou selecionando pacientes com base na entrevista clínica estruturada para distúrbios do eixo I do DSM-IV, conforme descrito por First et al., Structured Clinical Interview for DSM-IV Axis I Disorders, Patient Edition (SCIDIP), Version 2. Biometrics Research, New York State Psychiatric Institute, New York, 1995. Qualquer uma de várias escalas pode ser usada para avaliar a ansiedade e a eficácia do tratamento, incluindo, por exemplo, Penn State Worry Questionnaire (Behar et al., J Behav Ther Exp Psychiatr 2003, 34, 25-43), the Hamilton Anxiety and Depression Scales, the Spielberger State-Trait Anxiety Inventory, and the Liebowitz Social Anxiety Scale (Hamilton, J Clin Psychiatry 1980, 41, 21-24; Spielberger and Vagg, J Personality Assess 1984, 48, 95-97; and Liebowitz, J Clin Psychiatry 1993, 51, 31-35 (Suppl.)).
[00412] Doenças genéticas que afetam o sistema de síntese e transporte de creatina
[00413] O pool de creatina intracelular é mantido pela captação de creatina da dieta e pela síntese endógena de creatina. Muitos tecidos, especialmente o cérebro, fígado e pâncreas, contêm o transporte de creatina dependente de Na+-Cl- (SLC6A8), responsável pelo transporte ativo de creatina através da membrana plasmática. A biossíntese de creatina envolve a ação de duas enzimas: L-arginina:glicina amidinotransferase (AGAT) e guanidinoacetato transferase (GAMT). O AGAT catalisa a transferência do grupo amidino da arginina para a glicina para gerar ornitina e guanidinoacetato. O acetato de guanidino é metilado no grupo amidino pelo GAMT para dar creatina (ver, por exemplo, Wyss and Kaddurah-Daouk, Phys Rev 2000, 80, 1107-213).
[00414] Em humanos, dois erros genéticos na biossíntese de creatina e um no transportador de creatina são conhecidos e envolvem deficiências de AGAT, GAMT e transportador de creatina (Schulze, Cell Biochem, 2003, 244(1-2), 143-50; Sykut-Cegielska et al., Acta Biochimica Polonica 2004, 51(4), 875-882). Pacientes com distúrbios da síntese de creatina apresentam depleção sistêmica de creatina e fosfato de creatina. Os pacientes afetados com deficiência de AGAT podem apresentar retardo mental e motor, atraso grave no desenvolvimento da fala e convulsões febris (Item et al., Am J Hum Genet. 2001, 69, 1127-1133). Os pacientes afetados com deficiência de GAMT podem apresentar atraso no desenvolvimento com ausência de fala ativa, autismo com autolesão, sintomas piramidais extras e epilepsia (Stromberger et al., J Inherit Metab Dis 2003, 26, 299-308). Pacientes com deficiência de transportador de creatina exibem depleção intracelular de creatina e fosfato de creatina. O gene que codifica o transportador de creatina está localizado no cromossomo X, e os pacientes do sexo masculino afetados apresentam retardo mental leve a grave, com as mulheres afetadas com uma apresentação mais leve (Salomons et al., J. Inherit Metab Dis 2003, 26, 309-18; Rosenberg et al., Am J Hum Genet. 2004, 75, 97-105; deGrauw et al., Neuropediatrics 2002, 33(5), 232-238; Clark et al., Hum Genet, 2006, April).
[00415] A suplementação de creatina em doses de cerca de 350 mg a 2 g/kg de peso corporal por dia demonstrou ser eficaz na resolução dos sintomas clínicos das deficiências de AGAT ou GAMT (ver, por exemplo, Schulze, Cell Biochem, 2003, 244(1-2), 143-50). No entanto, diferentemente dos pacientes com deficiência de GAMT e AGAT, em pacientes com deficiência de transportador de creatina, a suplementação de creatina por via oral não resulta em aumento dos níveis de creatina no cérebro (ver Stockler-Ipsiroglu et al., in Physician's Guide to the Treatment and Follow up of Metabolic Diseases, eds Blau et al., Springer Verlag, 2004).
[00416] Fadiga muscular
[00417] Durante o exercício de alta intensidade, a hidrólise do ATP é inicialmente tamponada pelo fosfato de creatina através da reação da creatina quinase (Kongas and van Beek, 2nd Int. Conf. Systems Biol 2001, Los Angeles Calif., Omnipress, Madison, Wis., 198-207; and Walsh et al., J Physiol 2001, 537.3, 971-78, cada um dos quais é incorporado por referência aqui na sua totalidade). Durante o exercício, enquanto o fosfato de creatina está disponível instantaneamente para a regeneração do ATP, a glicólise é induzida com um atraso de alguns segundos e a estimulação da fosforilação oxidativa mitocondrial é adiada ainda mais. Como as reservas de fosfato de creatina no músculo são limitadas, durante o exercício de alta intensidade, o fosfato de creatina é esgotado em cerca de 10 segundos. Foi proposto que o desempenho muscular pode ser intensificado aumentando as reservas musculares de fosfato de creatina e, assim, retardando a depleção de fosfato de creatina. Embora a suplementação de creatina e/ou fosfato de creatina possa melhorar o desempenho muscular em exercícios intermitentes supra-máximos, não há indicação de que a suplementação intensifique o desempenho de resistência. Por outro lado, a injeção intravenosa de fosfato de creatina parece melhorar a tolerância ao exercício durante exercícios submáximos prolongados (Clark, J. Athletic Train, 1997, 32, 45-51, que é incorporado por referência aqui na sua totalidade).
[00418] Fortalecimento Muscular
[00419] A suplementação de creatina na dieta em indivíduos saudáveis normais tem efeitos colaterais benéficos na função muscular e, como tal, seu uso por atletas amadores e profissionais aumentou. Existem evidências que sugerem que a suplementação de creatina pode melhorar o desempenho muscular geral, aumentando a reserva muscular de fosfato de creatina, que é a fonte de energia mais importante para a regeneração imediata do ATP nos primeiros segundos de exercício intenso, acelerando a restauração do fosfato de creatina durante os períodos de recuperação e diminuindo a degradação dos nucleotídeos de adenosina e possivelmente também o acúmulo de lactato durante o exercício (ver, por exemplo, Wyss and Kaddurah-Daouk, Physiol Rev 2000, 80(3), 1107-1213).
[00420] No entanto, em indivíduos saudáveis normais, o uso contínuo e prolongado de creatina falha em manter a creatina e fosfato de creatina elevados no músculo (ver, por exemplo, Juhn et al., Clin J Sport Med 1998, 8, 286-297; Terjung et al., Med Sci Sports Exerc 2000, 32, 706-717; e Vandenberghe et al., J Appl Physiol 1997, 83, 2055-2063, cada um dos quais é incorporado por referência aqui na sua totalidade), possivelmente como resultado da sobrerregulação da atividade transportadora de creatina e do teor de proteína transportadora (Snow and Murphy, Mol Cell Biochem 2001, 224(1-2), 169-181, que é incorporado por referência aqui na sua totalidade). Assim, as pró-drogas de creatina da invenção, independentemente do transportador de creatina, podem ser utilizados para manter, restaurar e/ou aumentar a força muscular em um mamífero e, em particular, em um humano.
[00421] A eficácia da administração de um composto da invenção para manter, restaurar e/ou aumentar a força muscular pode ser avaliada usando modelos animais e humanos e estudos clínicos. Modelos animais que podem ser utilizados para avaliação da força muscular são divulgados, por exemplo, em Wirth et al., J Applied Physiol 2003, 95, 402-412 and Timson, J. Appl Physiol 1990, 69(6), 1935-1945. A força muscular pode ser avaliada em seres humanos usando métodos divulgados, por exemplo, em Oster, Pedido U.S. 2007/0032750, Pedido U.S. 2007/0012105, e/ou usando outros métodos conhecidos dos versados na técnica.
[00422] Viabilidade de órgãos e células
[00423] Em certas modalidades, o isolamento de tipos viáveis de células cerebrais, musculares, pancreáticas ou outros para pesquisa ou transplante celular pode ser aprimorado através da perfusão de células e/ou contato de células com um meio de isolamento ou crescimento contendo uma pró-droga de creatina ou análogo de fosfato de creatina. Em certas modalidades, a viabilidade de um órgão ou célula de tecido pode ser melhorada contatando o órgão ou célula de tecido com uma quantidade eficaz de um composto da invenção ou uma composição farmacêutica do mesmo.
[00424] Doenças relacionadas à regulação do nível de glicose
[00425] A administração de fosfato de creatina reduz os níveis de glicose no plasma e, portanto, pode ser útil no tratamento de doenças relacionadas à regulação do nível de glicose, como hiperglicemia, diabetes dependente ou independente de insulina e doenças relacionadas secundárias ao diabetes (Pedido U.S. 2005/0256134).
[00426] A eficácia da administração de um composto da invenção para o tratamento de doenças relacionadas à regulação do nível de glicose pode ser avaliada usando modelos animais e humanos e estudos clínicos. Os compostos podem ser administrados a animais, como ratos, coelhos ou macacos, e as concentrações plasmáticas de glicose são determinadas em vários momentos (ver, por exemplo, Pedido U.S. 2003/0232793). A eficácia de compostos para o tratamento de diabetes independente ou dependente de insulina e doenças relacionadas secundárias ao diabetes pode ser avaliada usando modelos animais de diabetes, como divulgado, por exemplo, em Shafrir, "Animal Models of Diabetes," Ed., 2007, CRC Press; Mordes et al., "Animal Models of Diabetes," 2001, Harwood Academic Press; Mathe, Diabete Metab 1995, 21(2), 106-111; and Rees and Alcolado, Diabetic Med. 2005, 22, 359-370.
[00427] Modalidades da dosagem e administração dos presentes compostos
[00428] Os compostos da presente divulgação ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou solvatos farmaceuticamente aceitáveis de qualquer um dos anteriores podem ser administrados para tratar doenças ou distúrbios como aqui descrito.
[00429] A quantidade de um composto da invenção que será eficaz no tratamento de uma doença, distúrbio ou condição específica divulgada neste documento dependerá da natureza da doença, distúrbio ou condição e pode ser determinada por técnicas clínicas padrão conhecidas na técnica. Além disso, ensaios in vitro ou in vivo podem opcionalmente ser empregados para ajudar a identificar faixas de dosagem ideais. A quantidade de um composto administrado pode depender, entre outros fatores, do paciente em tratamento, do peso do paciente, da saúde do paciente, da doença em tratamento, da gravidade da aflição, da via de administração, da potência do composto e do julgamento do médico prescritor.
[00430] Para administração sistêmica, uma dose terapeuticamente eficaz pode ser estimada inicialmente a partir de ensaios in vitro. Por exemplo, uma dose pode ser formulada em modelos animais para alcançar uma faixa de concentração de composição circulante benéfica. As doses iniciais também podem ser estimadas a partir de dados in vivo, por exemplo, modelos animais, utilizando técnicas conhecidas na técnica. Tal informação pode ser usada para determinar com maior precisão as doses úteis em seres humanos. Um versado na técnica pode otimizar a administração a humanos com base em dados de animais.
[00431] A creatina ocorre naturalmente no corpo humano e é parcialmente sintetizada pelo rim, pâncreas e fígado (aproximadamente 1-2 gramas por dia) e parcialmente ingerida com alimentos (aproximadamente 1-5 gramas por dia). As células ativamente absorvem creatina através do transportador de creatina. Dentro de uma célula, a creatina quinase fosforila a creatina para formar um pool de fosfato de creatina que pode atuar como um tampão de energia temporal e espacial.
[00432] A creatina, o fosfato de creatina e análogos dos mesmos podem ser administrados em doses altas sem efeitos colaterais adversos. Por exemplo, a creatina mono- hidratada foi administrada a atletas e fisiculturistas em quantidades que variam de 2 a 3 g/dia e o fosfato de creatina foi administrado a pacientes com doenças cardíacas por injeção intravenosa de até 8 g/dia, sem efeitos colaterais adversos. Os animais alimentados com uma dieta contendo até 1% de ciclocreatina também não exibem efeitos adversos (ver, por exemplo, Griffiths and Walker, J. Biol. Chem. 1976, 251(7), 2049-2054; Annesley et al., J Biol Chem 1978, 253(22), 8120-25; Lillie et al., Cancer Res 1993, 53, 3172-78; and Griffiths, J Biol Chem 1976, 251(7), 2049-54).
[00433] Em certas modalidades, uma dose terapeuticamente eficaz de um composto da invenção pode compreender de cerca de 1 mg equivalentes a cerca de 20.000 mg equivalentes de um análogo de fosfato de creatina por dia, de cerca de 100 mg equivalentes a cerca de 12.000 mg equivalentes de análogo de fosfato de creatina por dia, de cerca de 1.000 mg equivalentes a cerca de 10.000 mg equivalentes de análogo de fosfato de creatina por dia, e em certas modalidades, de cerca de 4.000 mg equivalentes a cerca de 8.000 mg equivalentes de análogo de fosfato de creatina por dia.
[00434] Uma dose pode ser administrada em uma forma de dosagem única ou em várias formas de dosagem. Quando são utilizadas múltiplas formas de dosagem, a quantidade de composto contido dentro de cada forma de dosagem pode ser a mesma ou diferente. A quantidade de um composto da invenção contida em uma dose pode depender da via de administração e se a doença, distúrbio ou condição em um paciente é efetivamente tratada por administração aguda, crônica ou uma combinação de administração aguda e crônica.
[00435] Em certas modalidades, uma dose administrada é menor que uma dose tóxica. A toxicidade das composições aqui descritas pode ser determinada por procedimentos farmacêuticos padrão em culturas celulares ou animais experimentais, por exemplo, determinando o LD50 (a dose letal para 50% da população) ou o LD100 (a dose letal para 100% da população) A razão da dose entre o efeito tóxico e terapêutico é o índice terapêutico. Em certas modalidades, uma composição farmacêutica pode exibir um alto índice terapêutico. Os dados obtidos a partir desses ensaios de cultura de células e estudos em animais podem ser usados na formulação de uma faixa de dosagem que não é tóxica para uso em humanos. Uma dose de uma composição farmacêutica da invenção pode estar dentro de uma faixa de concentrações circulantes, por exemplo no sangue, plasma ou sistema nervoso central, que incluem a dose eficaz e que exibe pouca ou nenhuma toxicidade. Uma dose pode variar dentro desta faixa dependendo da forma de dosagem empregada e a via de administração utilizada.
[00436] Durante o tratamento, uma e esquema de dosagem pode fornecer níveis suficientes ou estáveis de uma quantidade eficaz de creatina e fosfato de creatina para tratar uma doença. Em certas modalidades, uma dose crescente pode ser administrada.
[00437] Em uma modalidade, a presente divulgação fornece uma composição farmacêutica de liberação sustentada compreendendo um composto da presente divulgação ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que a liberação do composto da presente divulgação, creatina ou creatina deuterada é sobre um período de cerca de 4 horas ou mais. Em outras modalidades, a liberação do composto ocorre durante um período de cerca de 5, cerca de 6, cerca de 7, cerca de 8, cerca de 9, cerca de 10, cerca de 11, cerca de 12, cerca de 13, cerca de 14, cerca de 15, cerca de 16, cerca de 17, cerca de 18, cerca de 19, cerca de 20, cerca de 21, cerca de 22, cerca de 23 ou cerca de 24 horas.
[00438] Em outra modalidade, a presente divulgação fornece uma composição farmacêutica de liberação sustentada compreendendo um composto da presente divulgação ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que o efeito farmacológico dos compostos da presente divulgação, creatina ou creatina deuterada dura cerca de 4 horas ou mais após administração da composição. Em outras modalidades, o efeito farmacológico do composto dura cerca de 5, cerca de 6, cerca de 7, cerca de 8, cerca de 9, cerca de 10, cerca de 11, cerca de 12, cerca de 13, cerca de 14, cerca de 15, cerca de 16, cerca de 17, cerca de 18, cerca de 19, cerca de 20, cerca de 21, cerca de 22, cerca de 23 ou cerca de 24 horas.
[00439] Em outra modalidade, a presente divulgação fornece uma composição farmacêutica de liberação sustentada compreendendo um composto da presente divulgação ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo; em que a composição, após administração, fornece uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto por cerca de 4 horas ou mais. Em outras modalidades, a composição fornece uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto por cerca de 5, cerca de 6, cerca de 7, cerca de 8, cerca de 9, cerca de 10, cerca de 11, cerca de 12, cerca de 13, cerca de 14, cerca de 15, cerca de 16, cerca de 17, cerca de 18, cerca de 19, cerca de 20, cerca de 21, cerca de 22, cerca de 23 ou cerca de 24 horas.
[00440] Em certas modalidades, um composto da presente divulgação ou uma composição farmacêutica do mesmo pode ser administrado como uma dose simples, única ou cronicamente. Por crônica, entende-se que os métodos e composições da divulgação são praticados mais de uma vez para um determinado indivíduo. Por exemplo, a administração crônica pode ser várias doses de uma composição farmacêutica administrada a um animal, incluindo um indivíduo, diariamente, duas vezes ao dia ou com mais ou menos frequência, como será evidente para os versados na técnica. Em outra modalidade, os métodos e composições são praticados agudamente. Por aguda significa que os métodos e composições da divulgação são praticados em um período próximo ou contemporâneo ao evento isquêmico ou oclusivo. Por exemplo, a administração aguda pode ser uma dose única ou múltiplas doses de uma composição farmacêutica administrada no início de um evento isquêmico ou oclusivo, como infarto agudo do miocárdio, após a manifestação precoce de um evento isquêmico ou oclusivo, como, por exemplo, um AVC, ou antes, durante ou após um procedimento cirúrgico. Um período próximo ou contemporâneo de um evento isquêmico ou oclusivo variará de acordo com o evento isquêmico, mas pode ser, por exemplo, cerca de 30 minutos após a ocorrência dos sintomas de infarto do miocárdio, acidente vascular cerebral ou claudicação intermitente. Em certas modalidades, a administração aguda é a administração dentro de uma hora após o evento isquêmico. Em certas modalidades, a administração aguda é a administração dentro de cerca de 2 horas, cerca de 6 horas, cerca de 10 horas, cerca de 12 horas, cerca de 15 horas ou cerca de 24 horas após um evento isquêmico.
[00441] Em certas modalidades, um composto da presente divulgação ou uma composição farmacêutica do mesmo pode ser administrado cronicamente. Em certas modalidades, a administração crônica pode incluir várias injeções intravenosas administradas periodicamente durante um único dia. Em certas modalidades, a administração crônica pode incluir uma injeção intravenosa administrada como um bolus ou como uma infusão contínua diariamente, a cada dois dias, a cada 3 a 15 dias, a cada 5 a 10 dias e, em certas modalidades, a cada 10 dias.
[00442] Em certas modalidades, um composto da presente divulgação, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriores, pode ser utilizado em terapia de combinação com pelo menos um outro agente terapêutico. Um composto da presente divulgação e outro(s) agente(s) terapêutico(s) pode atuar de forma aditiva ou, e em certas modalidades, sinergicamente. Em algumas modalidades, um composto da presente divulgação pode ser administrado simultaneamente com a administração de outro agente terapêutico, como por exemplo, um composto para o tratamento de uma doença associada a uma disfunção no metabolismo energético; tratar fadiga muscular; intensificar a força e a resistência muscular; aumentar a viabilidade de transplantes de órgãos; e melhorar a viabilidade de células isoladas. Em algumas modalidades, um composto da presente divulgação, um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriores pode ser administrado antes ou após a administração de outro agente terapêutico, como, por exemplo, um composto para o tratamento de um doença associada a uma disfunção no metabolismo energético, como CCDS/CTD, isquemia, hipertrofia ventricular, uma doença neurodegenerativa como ALS, doença de Huntington, doença de Parkinson ou doença de Alzheimer, dano isquêmico relacionado à cirurgia e dano tecidual por reperfusão; tratamento de esclerose múltipla (MS), tratamento de um distúrbio psicótico como esquizofrenia, distúrbio bipolar ou ansiedade; tratar fadiga muscular; intensificar a força e resistência muscular; aumentar a viabilidade de transplantes de órgãos; e melhorar a viabilidade de células isoladas.
[00443] Modalidades de um uso combinatório
[00444] Em certas modalidades, um composto da invenção, um sal, solvato, tautômero ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo ou um solvato farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriores, pode ser utilizado em terapia de combinação com pelo menos um outro agente terapêutico. Um composto da invenção e outro(s) agente(s) terapêutico(s) pode atuar de forma aditiva ou, e em certas modalidades, sinergicamente. Em algumas modalidades, um composto da invenção pode ser administrado simultaneamente com a administração de outro agente terapêutico, como por exemplo, um composto para o tratamento de uma doença associada a uma disfunção no metabolismo energético; tratar fadiga muscular; intensificar a força e a resistência muscular; aumentar a viabilidade de transplantes de órgãos; e melhorar a viabilidade de células isoladas. Em algumas modalidades, um composto da presente invenção, um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos anteriores pode ser administrado antes ou após a administração de outro agente terapêutico, como, por exemplo, um composto para o tratamento de um doença associada a uma disfunção no metabolismo energético, como CCDS/CTD, isquemia, hipertrofia ventricular, uma doença neurodegenerativa como ALS, doença de Huntington, doença de Parkinson ou doença de Alzheimer, dano isquêmico relacionado à cirurgia e dano tecidual por reperfusão; tratamento de esclerose múltipla (MS), tratamento de um distúrbio psicótico como esquizofrenia, distúrbio bipolar ou ansiedade; tratar fadiga muscular; intensificar a força e resistência muscular; aumentar a viabilidade de transplantes de órgãos; e melhorar a viabilidade de células isoladas.
[00445] As composições farmacêuticas da invenção podem incluir, além de um ou mais compostos da invenção, um ou mais agentes terapêuticos eficazes para o tratamento dos mesmos ou diferentes distúrbios, condições ou doenças.
[00446] Os métodos da invenção incluem administrar um ou mais compostos ou composições farmacêuticas da invenção e um ou mais outros agentes terapêuticos, desde que a administração combinada não iniba a eficácia terapêutica de um ou mais compostos da invenção e/ou não produza efeitos adversos da combinação.
[00447] Em certas modalidades, as composições da invenção podem ser administradas simultaneamente com a administração de outro agente terapêutico, que pode fazer parte da mesma composição farmacêutica ou forma de dosagem que ou em uma composição ou forma de dosagem diferente daquela que contém os compostos da invenção. Em certas modalidades, os compostos da invenção podem ser administrados antes ou após a administração de outro agente terapêutico. Em certas modalidades da terapia combinada, a terapia combinada compreende alternar entre a administração de uma composição da invenção e uma composição compreendendo outro agente terapêutico, por exemplo, para minimizar os efeitos colaterais adversos associados a um determinado medicamento. Quando um composto da invenção é administrado concomitantemente com outro agente terapêutico que potencialmente pode produzir efeitos colaterais adversos, incluindo, mas não limitado a, toxicidade, o agente terapêutico pode ser vantajosamente administrado em uma dose abaixo do limiar em que o efeito colateral adverso é provocado.
[00448] Em certas modalidades, os compostos ou composições farmacêuticas da invenção incluem ou podem ser administrados a um paciente juntamente com outro composto para o tratamento da doença de Parkinson, como amantadina, benztropina, bromocriptina, levodopa, pergolida, pramipexol, ropinirol, selegilina, tri-hexifenidil ou uma combinação de qualquer um dos anteriores.
[00449] Em certas modalidades, os compostos ou composições farmacêuticas da invenção incluem ou podem ser administrados a um paciente juntamente com outro composto para o tratamento da doença de Alzheimer, como donepezil, galantamina, memantina, rivastigmina, tacrina ou uma combinação de qualquer um dos anteriores.
[00450] Em certas modalidades, os compostos ou composições farmacêuticas da invenção incluem ou podem ser administrados a um paciente juntamente com outro composto para o tratamento de ALS, como o riluzol.
[00451] Em certas modalidades, os compostos ou composições farmacêuticas da invenção incluem ou podem ser administrados a um paciente juntamente com outro composto para o tratamento de acidente vascular cerebral isquêmico, como aspirina, nimodipina, clopidogrel, pravastatina, heparina não fracionada, eptifibatida, bloqueador β, angiotensina inibidor da enzima de conversão (ACE), enoxaparina ou uma combinação de qualquer um dos anteriores.
[00452] Em certas modalidades, os compostos ou composições farmacêuticas da invenção incluem ou podem ser administrados a um paciente juntamente com outro composto para o tratamento de cardiomiopatia isquêmica ou doença cardíaca isquêmica, como inibidores de ACE, como ramipril, captopril e lisinopril; bloqueadores n, tais como acebutolol, atenolol, betaxolol, bisoprolol, carteolol, nadolol, penbutolol, propranolol, timolol, metoprolol, carvedilol e aldosterona; diuréticos; digitoxina ou uma combinação de qualquer um dos anteriores.
[00453] Em certas modalidades, os compostos ou composições farmacêuticas da invenção incluem ou podem ser administrados a um paciente em conjunto com outro composto para o tratamento de uma doença cardiovascular, como diluentes de sangue, agentes redutores de colesterol, agentes antiplaquetários, vasodilatadores, β-bloqueadores, bloqueadores da angiotensina, digitálicos e seus derivados ou combinações de qualquer um dos anteriores.
[00454] Em certas modalidades, os compostos ou composições farmacêuticas da invenção incluem ou podem ser administrados a um paciente juntamente com outro composto para o tratamento de MS. Exemplos de drogas úteis para o tratamento de MS incluem corticosteroides como metilprednisolona; IFN-β como IFN-β1a e IFN-β1b; acetato de glatiramer (Copaxone®); anticorpos monoclonais que se ligam à integrina do antígeno-4 (VLA-4) muito tardio (Tysabri®), como o natalizumabe; agentes imunomoduladores, tais como modulador de fosfato esfogosogos-1 FTY 720 e inibidores de COX-2, como BW755c, piroxicam e fenidona; e tratamentos neuroprotetores incluindo inibidores da excitotoxicidade do glutamato e iNOS, sequestrantes de radicais livres e bloqueadores de canais catiônicos; memantina; antagonistas de AMPA como topiramato; e antagonistas de NMDA no local da glicina (Virley, NeruoRx 2005, 2(4), 638-649, and references therein; e Pedido U.S. 2004/0102525).
[00455] Em certas modalidades, os compostos ou composições farmacêuticas da invenção incluem ou podem ser administrados a um paciente juntamente com outro composto para o tratamento de esquizofrenia. Exemplos de agentes antipsicóticos úteis no tratamento da esquizofrenia incluem, mas não estão limitados a, acetofenazina, alseroxilona, amitriptilina, aripiprazol, astemizol, benzquinamida, carfenazina, clormezanona, clorpromazina, clorprotixeno, clozapina, desipramina, droperidix, aloperidolupidina, droperidix, aloperidol, oxapina, mesoridazina, molindona, olanzapina, ondansetrona, perfenazina, pimozida, proclorperazina, prociclidina, promazina, propiomazina, quetiapina, remoxiprida, reserpina, risperidona, sertindol, sulpirida, terfenadina, trietidazina e trietilprazina. Outros agentes antipsicóticos úteis para o tratamento dos sintomas da esquizofrenia incluem amisulprida, balaperidona, blonanserina, butaperazina, carfenazina, eplavanserina, iloperidona, lamictal, onsanetant, paliperidona, perospirona, piperacetazina, racloprida, remoxiprida, sarizotan, zonepiazidona, agonistas de serotonina e dopamina (5HT/D2), como asenapina e bifeprunox; antagonistas da neurocinina 3, como talnetante e osanetante; AMPAquinas, como CX-516, galantamina, memantina, modafinil, ocaperidona e tolcapona; e a-aminoácidos, como D-serina, D-alanina, D-cicloserina e N-metilglicina.
[00456] Em certas modalidades, compostos ou composições farmacêuticas da invenção incluem ou podem ser administrados a um paciente juntamente com outro composto para o tratamento de distúrbios bipolares, como aripiprazol, carbamazepina, clonazepam, clonidina, lamotrigina, quetiapina, verapamil e ziprasidona.
[00457] Em certas modalidades, compostos ou composições farmacêuticas da invenção incluem ou podem ser administrados a um paciente juntamente com outro composto para o tratamento da ansiedade, como alprazolam, atenolol, busipirona, clordiazepoxida, clonidina, clorazepate, diazepam, doxepina, escitalopram, halazepam, hidroxizina, lorazepam, proclorperazina, nadolol, oxazepam, paroxetina, proclorperazina, trifluoperazina e venlafaxina.
EXEMPLOS
[00458] Os exemplos seguintes descrevem em detalhe ensaios para a caracterização de compostos da invenção e utilizações de compostos da invenção. Será evidente para os versados na técnica que muitas modificações, tanto em materiais quanto em métodos, podem ser praticadas sem se afastar do escopo da divulgação.
[00459] Experimental Geral
[00460] Os espectros de NMR dos compostos foram adquiridos a 400 MHz (1H) a 25°C. Os espectros de 1H NMR foram processados com ampliação de linha de 0,3 Hz, a menos que especificado de outra forma. Para análise por LC-MS, foi utilizado um Waters XBridge C18 4,6 x 50 mm, 3,5 mm, a uma temperatura de 45°C e a uma taxa de fluxo de 1,8 mL/min, injeção de 10 mL, fase móvel: A = água com 0,05% de NH4HCO3, B = acetonitrila; tempo de retenção indicado em minutos. Detalhes do método: (I) é executado em uma bomba binária G1312A™ com detector de matriz de diodos UV/Vis G1315D e espectrômetro de massa Agilent 6110™ no modo de eletropulverização por íons positivos e negativos com detecção UV em 214 e 254 nm com um gradiente de 5 a 95% B em um gradiente linear de 1,3 min (II) retém 1,4 min a 95% B (III) diminui de 95-5% B em um gradiente linear de 0,1 min (IV) retém 0,3 min a 5% B. O progresso da reação foi monitorado por cromatografia em camada fina em placas de vidro revestidas com sílica gel usando luz UV e/ou tratamento com iodo para visualizar. A purificação cromatográfica flash de fase normal foi realizada em uma Biotage com uma taxa de fluxo variável de 5 a 100 mL/min. Os picos foram detectados por absorção de UV com comprimento de onda variável (200360 nm). A cromatografia preparativa de fase reversa foi realizada usando um manipulador de líquidos Waters 2767 equipado com bombas binárias Waters 2545 operadas usando o software MassLynx 4.1. A detecção foi realizada usando Waters 2489 UV-Vis e Waters 3100 Mass. (I) gradiente de 5-95% B em um gradiente linear de 5 min (II) mantém por 4 min a 95% B (III) diminui de 95-5% B em um gradiente linear de 0,2 min (IV) mantém por 3 min a 5% B. Para Prep-HPLC, uma Agela Durasher Prep C18 10μm 21,5 x 250mm foi usada a uma temperatura de 25°C e a uma taxa de fluxo de 30 mL/min, injeção de 1000 mL, fase móvel: A = água com NH4HCO3, a 0,05%, fase móvel B = acetonitrila.
[00461] Tabela S1. Informação de estrutura de compostos sintetizados (Exemplos 1 7) A contagem de carbono *R1 inclui o carbono carbonil ao qual R1 está ligado.
[00462] Exemplo 1: Síntese de SódioN-(metil-d3)-N-(N- oleoilcarbamimidoil)glicinato (Composto 1)
[00463] Síntese de B-1
[00464] Etapa 1: Síntese de metil 2-[(4-nitrofenil)sulfonilamino] acetato. Um frasco B-1 de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foi carregado com cloridrato de éster metílico de metil glicina (10,5 g, 84 mmol) e piridina (80 mL). A mistura foi resfriada a 0°C e cloreto de 4-nitrobenzenossulfonil (18,6 g, 84 mmol) foi adicionado em porções, mantendo a mistura abaixo de 10°C. A reação foi então deixada aquecer até rt com agitação durante a noite. Após 18 h, a mistura de reação foi vertida em água (500 mL). Formou-se um precipitado que foi filtrado e seco sob vácuo. O material foi usado como é na próxima etapa. Quantidade obtida: 16,6 g, 61 mmol, 72% de rendimento. 1H NMR (CHLOROFORM-d) δ: 8,33-8,41 (m, J = 8,9 Hz, 2H), 8,03-8,11 (m, J = 8,9 Hz, 2H), 5,21 (br. S., 1H), 3,89 (s, 2H), 3,68 (s, 3H).
[00465] Etapa 2:Síntese de metil 2-[(4-nitrofenil)sulfonil- (trideuteriometil)amino]acetato. Um fraco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foi carregado com metil 2-[(4- nitrofenil)sulfonilamino]acetato (16,4 g, 60 mmol), DMF (240 mL) e CD3I (3,7 mL, 60 mmol). A esta mistura à rt foi adicionado Cs2CO3 (19,5 g, 60 mmol) e a reação foi deixada 45 min. LCMS mostrou consumo de material de partida. A mistura de reação foi vertida em água (1000 mL), extraída com EtOAc (3 x 500 mL), as fases orgânicas combinadas foram lavadas com LiCl (500 mL), secas (Na2SO4) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O material foi usado como é na próxima etapa. Quantidade obtida: 18,0 g, 60 mmol, ~ 100% de rendimento. 1H NMR (CHLOROFORM-d) δ: 8.38 (d, J=9.0 Hz, 2H), 8.02 (d, J=9.0 Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 3.67 (s, 3H). (NMR mostrou alguma DMF).
[00466] Etapa 3: Síntese de metil 2-[terc- butoxicarbonil(trideuteriometil)amino]acetato. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foi carregado com metil 2-[(4- nitrofenil)sulfonil-(trideuteriometil)amino]acetato (17,5 g, 60 mmol), Cs2CO3 (39,0 g, 120 mmol) acetonitrila (100 mL) e THF (10 mL). A esta solução foi adicionado tiofenol (25 mL, 240 mmol) e a reação foi aquecida a 45°C por 90 min. LCMS e TLC mostrou consumo de material de partida. A mistura de reação foi diluída com MTBE (500 mL) e extraída com água (5 x 100 mL). Os extratos de água combinados foram então lavados com MTBE (500 mL). Em seguida, à mistura de água foi adicionado DCM (500 mL) seguido por BOC2O (26,2 g, 120 mmol). A mistura de reação bifásica foi agitada vigorosamente durante a noite. As fases foram separadas, a fase aquosa foi extraída com DCM (250 mL x 5), as fases orgânicas combinadas secas (Na2SO4) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O material foi purificado por cromatografia usando um cartucho de sílica de 120 g eluindo com heptano-EtOAc, gradiente de 0 a 30% de EtOAc. Quantidade obtida: 10 g, 48,5 mmol, 81% de rendimento. 1H NMR (CHLOROFORM-d) δ: 3,99 (s, 1H), 3,91 (s, 1H), 3,75 (d, J = 2,9 Hz, 3H), 1,44 (s, 4H), 1,48 (s, 5H).
[00467] Etapa 4: Síntese de metil 2-(trideuteriometilamino)acetato.HCl (B-1). Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com metil 2- [terc-butoxicarbonil(trideuteriometil)amino]acetato (10,3 g, 50 mmol) e DCM seco (50 mL). A esta mistura foram adicionados 50 mL de HCl (4,0 M em dioxano). Após 1 h, a TLC mostrou consumo de SM. A mistura foi vertida em MTBE (500 mL) e o precipitado resultante foi filtrado e seco sob vácuo. O material foi usado como é na próxima etapa. Quantidade obtida: 5,4 g, 38 mmol, 76% de rendimento. 1H NMR (METHANOL-d4) δ: 3,97 (s, 2H), 3,85 (s, 3H).
[00468] Etapa A: Síntese de C-2
[00469] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foi adicionado C-1 (1,1 g, 5,5 mmol), cloreto de oleoil (1,5 g, 5 mmol) e DIPEA (1,3 g, 10 mmol) em diclorometano (30 mL) A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2h. A mistura foi então lavada com salmoura (80 mL), seca (Na2SO4) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O material foi purificado por cromatografia usando um cartucho de 20 g de sílica eluindo com PE-EA, gradiente de 0% a 15% de acetato de etil. Para dar C-2 como um óleo incolor: 2,1 g, 4,6 mmol, 90% de rendimento. ES LC- MS m/z = 455,7 (M+H+).
[00470] Etapa B: Síntese de C-3
[00471] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foram adicionados C-2 (2,1 g, 4,6 mmol), B-1 (723 mg, 5,1 mmol), HgCl2 (1,4 g, 5,1 mmol) e Et3N (1,4 g 13,8 mmol) em DMF (15 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2h. Depois de adicionar 50 ml de EA, a mistura foi lavada com salmoura (80 ml x3), seca (Na2SO4) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O material foi purificado por cromatografia usando um cartucho de 20 g de sílica eluindo com PE-EA, gradiente de 0% a 15% de acetato de etil para dar C-3 como um óleo amarelo: 2 g, 3,90 mmol, 85% de rendimento. ES LC-MS m/z = 513,7 (M+H+).
[00472] Etapa C: Síntese de C-4
[00473] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e a entrada de nitrogênio foi carregada com C-3 (2,0 g, 3,9 mmol) e LiOH.H2O (195 mg, 4,4 mmol) em 20 ml de (THF:H2O = 6:1). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e depois concentrada sob pressão reduzida. Após adição de 20 ml de água, a mistura, HCl (1N) foi adicionada até pH = 5. Em seguida, foram adicionados 50 ml de EA e a mistura foi lavada com salmoura (50 ml), seca (Na2SO4) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O material foi purificado por cromatografia usando um cartucho de 20 g de sílica eluindo com PE-EA, gradiente 0% a 30% de acetato de etil. Isto deu C-4 como um óleo amarelo: 1,7 g, 3,4 mmol, 75% de rendimento. ES LC-MS m/z = 499,6 (M+H+).
[00474] Etapa D: Síntese de C-5
[00475] A um frasco equipado com uma barra de agitação foi adicionado C-4 (700 mg, 1,4 mmol) em 15 ml de HCl 1,4-dioxano (4N). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foi então adicionado 5 ml de THF e purificado por HPLC para dar o composto C-5 como um sólido branco: 150 mg, 0,37 mmol, 33% de rendimento. ES LC-MS m/z = 399,7 (M+H+).
[00476] Etapa E: Síntese de SódioN-(metil-d3)-N-(N-oleoilcarbamimidoil)glicinato (Composto 1)
[00477] A um frasco equipado com uma barra de agitação foi adicionado C-5 (150 mg, 0,37 mmol) e NaOH (20 mg, 0,41 mmol) em 15 ml de água. A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 0,5h. O solvente foi removido num liofilizador para dar sódio N- (metil-d3)-N-(N-oleoilcarbamimidoil)glicinato (Composto 1) como um sólido branco: 70 mg, 0,16 mmol, 50% de rendimento. ES LC-MS m/z = 399,7 (M+H+). NMR (400 MHz, d6- DMSO): 5,27-5,35 (2H, m), 3,70-4,00 (1H, br), 3,42-3,58 (1H, br), 2,02-2,14 (2H, m), 1,90-2,02 ( 4H, m), 1,40-1,55 (2H, m), 1,15-1,35 (20H, m), 0,85 (3H, t, J = 6,2 Hz).
[00478] Exemplo 2: Síntese de cloridrato de (Z)-heptil-2-(1-trideuteriometil-3- oleoilguanidino)acetato (Composto 2)
[00479] Etapa 1: Síntese de D-2
[00480] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foi adicionado D-1 (846 mg, 2,82 mmol), (Z)-terc- butilamino(metiltio)metilenocarbamato (447 mg, 2,35 mmol, C-1), e DIPEA (909 mg, 7,05 mmol) em diclorometano (20 mL). A mistura foi agitada em temperatura ambiente por 2h. A mistura foi então lavada com salmoura (80 mL), seca (Na2SO4) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia usando um cartucho de sílica de 20 g eluindo com PE-EA, gradiente de 0% a 15% de acetato de etil, para dar D-2 como um óleo incolor: 846 mg, 1,86 mmol, 79% de rendimento. ES LC-MS m/z = 455,4 (M+H+).
[00481] Etapa 2: Síntese de D-3
[00482] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foi adicionado D-2 (846 mg, 1,86 mmol), cloridrato de metil 2- (trideuteriometilamino)acetato (265 mg, 1,86 mmol), HgCl2 (505 mg, 1,86 mmol) e DIPEA (720 mg, 5,58 mmol) em DMF (15 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 2h, altura em que 50 ml de H2O foram adicionados e a mistura foi extraída com acetato de etil (30 ml x3), lavada com salmoura (80 ml x3), seca (Na2SO4) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O material bruto foi purificado por cromatografia usando um cartucho de sílica de 20 g eluindo com PE-EA, gradiente de 0% a 15% de acetato de etil, para dar D-3 como um óleo incolor: 850 mg, 1,66 mmol, 89% de rendimento. ES LC-MS m/z = 513,4 (M+H+).
[00483] Etapa 3: Síntese de D-4
[00484] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e a entrada de nitrogênio foi adicionado D-3 (850 mg, 1,66 mmol) e LiOH.H2O (350 mg, 8,30 mmol) em 20 ml de (THF:H2O = 6:1). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e depois concentrada sob pressão reduzida. Após adição de 20 ml de água, a mistura foi acidificada com HCl (1N) até pH = 5 e foi extraída com acetato de etil, lavada com salmoura (50 mL), seca (Na2SO4) e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida para dar origem a D-4 bruto como um óleo amarelo: 800 mg. ES LC-MS m/z = 499,4 (M+H+).
[00485] Etapa 4: Síntese de D-5
[00486] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e contendo D-4 (800 mg em bruto da etapa 3) em DMF (15 ml) foram adicionados 1-1- iodoheptano (375 mg, 1,66 mmol) e K2CO3 (343 mg, 2,49 mmol). A mistura foi agitada a 50°C por 3 horas. A mistura resultante foi vertida em água (60 ml) e extraída com EA (3 x 30 ml). O extrato orgânico combinado foi lavado com salmoura (2 x 20 ml), seco sobre MgSO4 e concentrado. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia flash (PE: EA de 1: 0 a 1: 1) para dar D-5 como um óleo incolor: 620 mg, 1,04 mmol, 63% de rendimento. ES LC-MS m/z =597,4 (M+H) +.
[00487] Etapa 5: Síntese de D-5
[00488] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi adicionado D-5 (500 mg, 0,84 mmol), 6 ml de DCM e TFA (3 ml). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Depois de concluída a reação, o solvente e o TFA extra foram removidos e o resíduo bruto foi purificado por Prep-HPLC usando condições aditivas de TFA padrão. As frações obtidas por Prep-HPLC foram combinadas e HCl (aq. 1 M, 6 ml) foi adicionado. A solução foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos e liofilizada para dar cloridrato de (Z)-heptil 2-(1-trideuteriometil-3-oleoilguanidino)acetato (Composto 2) como um sólido branco: 105 mg, 0,20 mmol, 23% de rendimento. ES LC-MS m/z = 497,4 (M-HCl+H) +. NMR (400 MHz, d6-DMSO): 11,08-11,02 (1H, m), 9,33-9,19 (2H, s), 5,375,32 (2H, m), 4,62-4,41 (2H, m), 4,11-4,09 ( 2H, t, J = 6,2 Hz), 1,98 (4H, m), 1,59-1,57 (4H, m), 1,26-1,24 (30H, m), 0,86-0,84 (3H, t, J = 4,6 Hz).
[00489] Exemplo 3 : Síntese de N-(trideuteriometil)-N-(N- undecanoilcarbamimidoil)glicina (Composto 3) e sal de Sódio 2-(1-trideuteriometil)-3- undecanoilguanidino) acetato (Composto 4)
[00490] Etapa 1: Síntese de E-1
[00491] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi adicionado (Z)-terc-butilamino(metiltio)metilenocarbamato (2,5 g, 13,15 mmol) e N,N-D- di-isopropiletilamina (4,24 g, 32,89 mmol) em diclorometano (100 mL). À mistura foi então adicionado gota a gota cloreto de undecanoil (4,03 g, 19,73 mmol) em DCM (2 mL) à temperatura ambiente e durante a noite. Uma vez concluída a reação, adicionou-se DCM (200 mL) e lavou-se com água (60 mL x 3), salmoura (60 mL), secou-se e evaporou-se. O produto bruto foi purificado por SGC (PE: EA/20: 1) para dar (Z)-terc- butilmetiltio(undecanamido)metilenocarbamato (E-1) (4,56 g, 12,74 mmol, 96% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 359,2 (M+H+).
[00492] Etapa 2: Síntese de E-2
[00493] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi adicionado cloridrato de (Z)-terc-butilmetiltio(undecanamido)metilenocarbamato (1,7 g, 4,75 mmol), cloridrato de metil 2-[terc-butoxicarbonil(trideuteriometil)amino]acetato (B-1, veja o Exemplo 1) (810 mg, 5,70 mmol) e trietilamina (1,44 g, 14,25 mmol) em DMF (50 mL). À reação foi então adicionado cloreto de mercúrio (II) (1,41 g, 5,22 mmol). A mistura foi agitada à RT durante a noite, altura em que foi adicionado acetato de etil (200 mL), lavada com água (3 x 60 mL), salmoura (60 mL), seca e evaporada para dar (Z)-metil 2-(2-(terc- butoxicarbonil)-1-trideuteriometil-3-undecanoilguanidino)acetato (E-2) (1,9 g, 4,56 mmol, rendimento de 101%) como um sólido amarelado pálido que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ES LC-MS m/z =417,0 (M+H+).
[00494] Etapa 3: Síntese de E-3
[00495] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi adicionado (Z)-metil 2-(2-(terc-butoxicarbonil)-1- trideuteriometil-3-undecanoilguanidino) acetato (1,9 g, 4,56 mmol) e hidrato de hidróxido de lítio (798 mg, 19 mmol) em THF:MeOH:H2O (1:1:1, 209 mL) e foi agitado à RT durante 2 h. A mistura foi então evaporada, foi adicionada água (20 mL), extraída com diclorometano (2x10 mL), ajustada para pH = 6 com 1N de HCl, extraída com acetato de etil (3x50 mL), seca e evaporada para dar ácido (Z)-2-(2-(terc-butoxicarbonil)-1-trideuteriometil-3-undecanoilguanidino)acetato (E-3) (1,12 g, 2,78 mmol, 58% de rendimento) como um óleo incolor que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação adicional. ES LC-MS m/z = 403,3 (M+H+).
[00496] Etapa 4: Síntese de N-(trideuteriometil)-N-(Nundecanoilcarbamimidolil)glicina (Composto 3)
[00497] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e carregado com ácido (Z)-metil 2-(2-(terc-butoxicarbonil)-1-trideuteriometil-3- undecanoilguanidino)acetato (880 mg, 2,18 mmol) em diclorometano (5 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (3 mL). A mistura foi agitada à RT durante 2 h. A reação foi então evaporada, dissolvida em AcCN (8 mL), ajustada para pH = 7 com K2CO3aquoso, foi adicionado DMF (10 mL), filtrada e purificada por cromatografia flash (SNAP C18, 40 G) eluindo com água-AcCN (gradiente de 0% a 69% de AcCN) para dar ácido 2-(1- trideuteriometil-3-undecanoilguanidino)acético (Composto 3) como um sólido branco (286 mg, 0,94 mmol, 43% de rendimento).
[00498] Etapa 5: Síntese de Sódio 2-(1-trideuteriometil)-3- undecanoilguanidino)acetato (Composto 4)
[00499] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e carregado com ácido 2-(1-trideuteriometil -3-undecanoilguanidino)acético (130 mg, 0,43 mmol) em AcCN (10 mL) foram adicionados gota a gota 0,43 mL de NaOH 1M. A mistura formou uma suspensão após 5 minutos e a reação foi agitada à RT por 30 minutos. À reação foi então adicionada água (30 mL) e liofilizada para dar sal de sódio do ácido 2-(1- trideuteriometil-3-undecanoilguanidino)acético (Composto 4) como um sólido branco (133,8 mg, 0,41 mmol, rendimento de 91%). ES LC-MS m/z = 303,2 (M+H+). 1H NMR (DIMETIL SULFÓXIDO-d) δ: 3,85 (s, 1H), 3,47 (s, 1H), 2,06 (s, 2H), 1,48 (s, 2H), 1,23 (s, 14H), 0,87 (t, J = 13,6 Hz, 3H).
[00500] Exemplo 4: Síntese de cloridrato de Heptil N-(metil-d3)-N- (N- undecanoilcarbamimidilil)glicinato (composto 5)
[00501] A um frasco equipado com uma barra de agitação foi adicionado F-1(425 mg, 0,85 mmol), sintetizado de acordo com o Exemplo 2, em 25 ml de HCl 1,4-Dioxano (4N). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h e concentrada sob pressão reduzida. Ao resíduo foram adicionados 5 ml de THF e purificados por HPLC. No topo das frações purificadas foram adicionados 0,1 ml de HCl (1 N) e liofilizados para dar o composto do título (Composto 5) como um sólido branco: 150 mg, 0,38 mmol, 44% de rendimento. ES LC-MS m/z = 401,7 (M+H+). NMR (400 MHz, d6-DMSO): 10,8-11,4 (1H, br), 9,10-9,40 (2H, m), 4,30-4,75 (2H, m), 4,10 (2H, t, J = 6,2 Hz), 1,42 -1,66 (4H, m), 1,10-1,40 (24H, m), 0,82-0,92 (6H, m).
[00502] Exemplo 5: Síntese de tetradecanoilcarbamimidoil)glicina (Composto 6) e tetradecanoilguanidino)acetato (Composto 7)
[00503] Etapa 1: Síntese de N-(trideuteriometil)-N-(Ntetradecanoilcarbamimidolil)glicina (Composto 6)
[00504] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e carregado com (Z)-metil 2-(2-(terc-butoxicarbonil)-1-trideuteriometil-3- tetradecanoilguanidino)acetato (1,0 g, 2,2 mmol, G-1), sintetizado de acordo com o Exemplo 3, em tertra-hidrofurano (20 ml) foi adicionada uma solução de LiOH.H2O (275 mg, 6,6 mmol) em H2O (10 ml). A mistura foi agitada durante 1,0 h à RT. Após a reação, o solvente foi removido sob vácuo e a solução aquosa residual foi acidificada para pH = 4 com solução de HC1 IN a 0°C, e depois extraída com acetato de etil (3x30 ml). O extrato orgânico combinado foi lavado com salmoura seco sobre MgSO4 e concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia flash (éter de petróleo: acetato de etil de 50 a 100%) para proporcionar ácido (Z)-2-(2-(terc-butoxicarbonil)-1-trideuteriometil-3- tetradecanoilguanidino)acético (460 mg, 1,04 mmol, Composto 6, 47% de rendimento) como um óleo incolor. ES LC-MS m/z = 445,3 (M+H+).
[00505] Etapa 2: Síntese de lítio 2-(1-trideuteriometil-3- tetradecanoilguanidino)acetato (Composto 7)
[00506] A um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com ácido 2-(1-trideuteriometil-3-tetradecanoilguanidino)acético (80,0 mg, 0,23 mmol; Composto 6) e H2O (20 ml). A esta solução foi adicionado LiOH.H2O (8,4 mg, 0,20 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos e depois extraída com diclorometano (10 ml x 2). A fase aquosa foi separada e liofilizada para dar lítio 2-(1- trideuteriometil-3-tetradecanoilguanidino) acetato (52 mg, 0,148 mmol, Composto 7, rendimento de 64,3%) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 345,3 (M-Li+2H) +. 1H NMR (400 MHz, d6-DMSO): δ: 3,80-4,10 (br, 1H), 3,45-3,60 (br, 1H), 2,07 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,42-1,53 (m, 2H), 1,15-1,30 (m, 20H), 0,85 (t, J = 6,8 Hz, 3H).
[00507] Exemplo 6 : Síntese de sal de cloreto de hidrogênio e 2-(1-trideuteriometil)- 3-undecanoilguanidino)acetato (Composto 8)
[00508] Etapa 1: Síntese de H-1
[00509] Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com ácido 2-(1- trideuteriometil-3-undecanoilguanidino)acético (400 mg, 0,995 mmol), Composto E-3 sintetizado de acordo com o Exemplo 3 e carbonato de potássio (275 mg, 1,99 mmol) em N,N-dimetilformamida (4 mL) foi adicionado gota a gota iodoetano (233 mg, 1,493 mmol). A reação foi agitada à RT por 1,5 h. A reação foi adicionada acetato de etil (60 mL), lavada com água (20 mL x 3) e salmoura (20 mL), seca e evaporada, purificada por Prep-TLC (PE: EA/4: 1) para dar (Z)-etil 2-(2-(terc-butoxicarbonil)-1-trideuteriometil- 3-undecanoilguanidino)acetato (270 mg, 0,628 mmol, 62% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 431,0 (M+H+).
[00510] Etapa 2: Síntese de sal de cloreto de hidrogênio de 2-(1-trideuteriometil)-3- undecanoilguanidino)acetato (Composto 8)
[00511] Ao frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi adicionado (Z)-etil 2-(2-(terc-butoxicarbonil)-1-trideuteriometil-3- undecanoilguanidino)acetato (270 mg, 0,628 mmol; Composto H-1) em HCl/dioxano (5 mL). A reação foi agitada a 35°C por 1 h. A reação foi então evaporada, dissolvida em acetonitrila (1 mL) e água (2,5 mL), purificada por Prep-HPLC (ácido fórmico), foi adicionado aquoso de cloreto de hidrogênio (2 mL, 1 N) e liofilizado para obter sal de cloreto de hidrogênio de Etil 2-(1-trideuteriometil)-3-undecanoilguanidino)acetato (62,8 mg, 0,171 mmol, Composto 8, rendimento de 30%) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 331,3 (M+H+). 1H NMR (DIMETIL SULFÓXIDO-d) δ: 11,20-11,12 (m, 1H), 9,21 (br s, 2H), 4,59-4,37 (m, 2H), 4,18-4,13 (m, 2H), 2,50 (m, 2H)), 1,53 (m, 2H), 1,24-1,20 (m, 17H), 0,87-0,84 (m, 3H).
[00512] Exemplo 7: Síntese de (N-(N-(2-hidroxietil)-N-trideuteriometil carbamimidoil)undecanamida (Composto 9)
[00513] Etapa 1: Síntese de J-2
[00514] A uma solução de metil 2-(terc-butoxicarbonil(trideuteriometil) amino)acetato (5,0 g, 24,3 mmol, consulte Exemplo 1, síntese de B-1 como referência) em 30 mL de THF foi adicionado LiBH4 (18 mL, 1M em THF) a 0°C e a mistura foi agitada à rt durante a noite. A mistura de reação foi extinta com HCOOH para pH = 6. O solvente foi removido e a solução aquosa residual foi extraída com EtOAc (3 x 30 ml). Depois a fase orgânica combinada foi seca sobre Na2SO4 e concentrada para proporcionar terc-butil 2- hidroxietil(trideuteriometil)carbamato (3,76 g, 87% de rendimento; Composto J-2) como um óleo sem cor. ES LC-MS m/z = 201 (M+Na+).
[00515] Etapa 2: Síntese de J-3
[00516] Uma mistura de terc-butil 2-hidroxietil(trideuteriometil)carbamato (3,76 g, 21,1 mmol) em HCl (10 ml, 4 M em dioxano) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A mistura resultante foi concentrada em 2-(trideuteriometilamino)etanol (2,45 g, 100% de rendimento; Composto J-3) como um óleo incolor usado diretamente para a próxima etapa.
[00517] Etapa 3: Síntese de J-4
[00518] A uma solução de terc-butil metiltio(undecanamido) metilenocarbamato (700 mg, 1,96 mmol), Composto E-1 sintetizada de acordo com o Exemplo 3 e 2-(trideuteriometil amino)etanol (313 mg, 2,74 mmol; Composto J-3) em 15 mL de DMF foi adicionado HgCl2 (533 mg, 1,96 mmol) e DIPEA (759 mg, 5,88 mmol) e a mistura foi agitada a 25°C por 3 horas. Foram adicionados 50 mL de EA e a mistura foi lavada com água (3x50 mL). Em seguida, a fase orgânica foi seca sobre Na2SO4 e concentrada para dar terc-butil ((2- hidroxietil)(trideuteriometil)amino)(undecanamido) metilenocarbamato (758 mg, bruto, dissolvido em 2 mL de EA) como um sólido (Composto J-4). ES LC-MS m/z = 389 (M+H)+.
[00519] Etapa 4: Síntese de (N-(N-(2-hidroxietil)-N-trideuteriometil carbamimidoil)undecanamida (Composto 9)
[00520] Uma mistura de terc-butil ((2-hidroxietil)(trideuteriometil) amino)(undecanamido)metilenocarbamato (758 mg, bruto, dissolvido em 2 mL de EA; Composto J-4) em TFA (15 ml) foi agitada a 40°C por 4 h. A mistura resultante foi concentrada e o resíduo foi purificado por Prep-HPLC (condição TFA). O produto foi convertido em um sal HCL adicionando HCl 1 N para dar sal HCl (N- (N-(2-hidroxietil)-N- trideuteriometil carbamimidoil)undecanamida) (39,5 mg, 7% de rendimento, Composto 9) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 289 (M+H)+. 1H NMR (MeOD) δ: 1H NMR (400 MHz, MeOD): δ 3,82-.384 (m, 2H), 3,68 (brs, 2H), 2,53 (brs, 2H), 1,69 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 1,32-1,36 (m, 14H), 0,92 (t, J = 6,4 Hz, 3H).
[00521] Procedimentos Gerais para Compostos Macrocíclicos
[00522] O exemplo PDT pode ser preparado usando técnicas químicas padrão nos solventes apropriados (Esquema 1). Por exemplo, o intermediário 3 pode ser preparado formando primeiro o cloreto ácido de 1 usando condições padrão seguidas pela adição do intermediário 2. A remoção do grupo 4-nitrofenilsulfonil usando carbonato de césio com sulfeto de fenil deu o intermediário 4. O acoplamento de SM-1 adequadamente protegido (Boc ou Cbz) ao SM-2 com um reagente de acoplamento padrão, como o HATU, com uma base de amina como DIPEA deu 5, que então poderiam ser acoplados a 4 usando cloreto de mercúrio e a base de amina como TEA para dar o intermediário 6. Uma reação de metátese de fechamento do anel usando um catalisador apropriado, como o catalisador de rutênio Grubb II e o intermediário 6 em condições diluídas, deu o intermediário 7. Submeter o intermediário 7 ao catalisador apropriado, tal como Pd / C ou PtO2, sob uma atmosfera de gás hidrogênio, deu Exemplo PDT quando um grupo Cbz foi usado ou o Intermediário 7 quando um grupo protetor de Boc foi empregado. O intermediário 7 contendo um grupo protetor Boc pode ser facilmente convertido no Exemplo PDT por tratamento com TFA ou HCl 1N em Dioxano.
[00523] Esquema 1. Síntese geral
[00524] Procedimento Geral para o Intermediário 2 (Esquema 1)
[00525] Intermediário 2 pode ser preparado (se não estiver comercialmente disponível) usando várias técnicas químicas padrão, dependendo de X. Abaixo estão exemplos de variedade de síntese do Intermediário 2.
[00526] Procedimento Geral para o Intermediário 2-1
[00527] Intermediário 2-1 pode ser preparado usando técnicas químicas padrão nos solventes apropriados. Por exemplo, SM-3 pode ser convertido no reagente de Grignard correspondente por tratamento com metal de magnésio a temperatura elevada que pode então ser reagida com a cetona ou aldeído apropriado para dar 2-1.
[00528] Procedimento Geral para o Intermediário 2-2
[00529] Intermediário 2-2 pode ser preparado usando técnicas químicas padrão nos solventes apropriados. Por exemplo, o SM-3 pode ser convertido no reagente de Grignard por tratamento com metal de magnésio e iodo a temperatura elevada, que pode ser reagida com o epóxido apropriado na presença de iodeto de cobre na temperatura apropriada para dar 2-2.
[00530] Procedimento Geral para o Intermediário 2-3
[00531] Intermediário 2-3 pode ser preparado usando técnicas químicas padrão nos solventes apropriados. Por exemplo, o intermediário 2-3 pode ser preparado usando uma reação de Kulinkovich reagindo SM-6 com Etil Grignard (SM-7) na presença de titânio (IV) a baixa temperatura
[00532] Exemplo 7: Síntese de dicloridrato de 5-imino-4-trideuteriometilguanidino- 17-dimetil-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (composto K)
[00533] Etapa a: Síntese do composto Ka.
[00534] O composto Ka foi sintetizado de acordo com o Exemplo 10, etapa 3, partindo de (Z)-terc-butil amino(metiltio)metilenocarbamato e ácido dec-9-enóico. Ver também, Exemplo 29, etapa 1, iniciando de terc-butil (Z)-(amino (metiltio)metileno)carbamato em vez de benzil (Z)-(amino(metiltio)metileno)carbamato.
[00535] Etapa b: Síntese do Composto K-b
[00536] Uma mistura de ácido 2-(N-trideuteriometilguanidino-4- nitrofenilsulfonamido)acético (3,78 g, 13,6 mmoL) em cloreto de tionil (20 mL) e diclorometano (20 mL) foi agitada a 60 °C por 1h. O orgânico combinado foi concentrado. Em seguida, o composto resultante foi dissolvido em diclorometano (40 mL) e but-3-en-2- ol (980 mg, 13,6 mmoL), trietilamina (4,12 g, 40,8 mmoL) foi adicionada e a mistura resultantefoi agitada à rt por 1h. Foi adicionada água (50 mL) e a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por flash (éter de petróleo: Etil acetato/5:1) para proporcionar but-3-en-2-il 2-(N- trideuteriometilguanidino-4-nitrofenilsulfonamido)acetato (3,6 g, 80% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 332,1(M+H+).
[00537] Uma mistura de but-3-en-2-il 2-(N-trideuteriometilguanidino-4- nitrofenilsulfonamido)acetato (3,6 g, 10,87 mmoL), p-Tiocresol (1,61 g, 13 mmoL), carbonato de césio (5,31 g, 16,3 mmoL) em acetonitrila (50 mL) e tetra-hidrofurano (5 mL) foi agitada a 45 ° C por 1,5 h. A mistura de reação foi filtrada, os filtrados foram concentrados, o resíduo foi purificado por cromatografia (Metanol: Diclorometano/5:1) para proporcionar but-3-en-2-il 2-(trideuteriometilguanidino)acetato (K-b, 1 g, 63% de rendimento) como um líquido amarelo. 1H NMR (DMSO-d) δ:5,91-5,83 (m, 1H), 5,325,10 (m, 2H), 3,25 (s, 2H), 1,26-1,25(m, 3H).
[00538] Etapa 1: Síntese do Composto K-1. Uma mistura de (Z)-tert-butil-dec-9- enamido (metiltio)metilenocarbamato (2,3 g, 6,7 mmoL), Composto Kb (982 mg, 6,7 mmoL) e uma solução de trietilamina (2,03 g, 20,1 mmoL) em N,N-dimetilformamida (35 mL) foi agitada à temperatura ambiente. Foi adicionada uma mistura de dicloreto de mercúrio (2,18 g, 8,04 mmoL), a mistura foi agitada à rt durante a noite. Foi adicionada água (40 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etil (40 mL x 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por flash (éter de petróleo: acetato de etil 5: 1) para fornecer (Z)-but-3-en-2-il-2-(2-(terc- butoxicarbonil)-3-dec-9-enoil -1-trideuteriometilguanidino)acetato (Composto K-1; 2,7 g, 91% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 441,3 (M+H+).
[00539] Etapa 2: Síntese do Composto K-2. Uma mistura de Composto K-1 (953 mg, 2,17 mmoL) e Grubbs (II) (183 mg, 0,217 mmoL) em diclorometano (950 mL) foi agitada a 50°C por 2 h. O orgânico combinado foi concentrado. O resíduo foi purificado por flash (éter de petróleo: acetato de etil 5:1) para proporcionar (Z)-terc-butil-((E)-4- trideuteriometilguanidino-17-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadec-15-en-5- ilideno)carbamato (Composto K-2; 693 mg, 77% de rendimento) como um óleo amarelo pálido. ES LC-MS m/z = 413,2 (M+H+).
[00540] Etapa 3 : Síntese do Composto K-3. Uma mistura de Composto K-2 (310 mg, 0,75 mmoL) e óxido de platina (IV) (31 mg, 10%) em acetato de etil (10 mL) foi agitada sob balão de H2 por 2 h. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados. O resíduo foi purificado por flash (éter de petróleo: acetato de etil 3:1) para proporcionar (Z)- terc-butil-4-trideuteriometilguanidino-17-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo- heptadecan-5-ilidenocarbamato (Composto K-3; 93 mg, 30% de rendimento) como um óleo amarelo pálido. ES LC-MS m/z = 415,2 (M+H+).
[00541] Etapa 4: Síntese do Composto K-4. Uma mistura de Composto K-3 (100 mg, 0,24 mmoL) em diclorometano (4 mL) e ácido trifluoroacético (1 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. O orgânico combinado concentrado. O resíduo foi dissolvido com metanol purificado por Pré-HPLC(FA) para proporcionar 5-imino-4- trideuteriometilguanidino-17-dimetil-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (Composto K-4; 48 mg, 63% de rendimento) como um óleo branco. ES LC-MS m/z = 314,2 (M+H+).
[00542] Etapa 5: Síntese do Composto K
[00543] Uma mistura de Composto K-4 (120 mg, 0,38 mmoL) em água (50 mL) e acetonitrila (4 mL). O pH da solução foi ajustado para 4-5 com ácido clorídrico (1 N). A solução foi liofilizada a vácuo para proporcionar dicloridrato de 5-imino-4- trideuteriometilguanidino-17-dimetil-1-oxa-4,6-diazacicloheptadecano-2,7-diona (Composto K; 90 mg, 75% de rendimento) como um óleo branco. ES LC-MS m/z = 314,2(M+H+). 1H NMR (DMSO-d) δ :11,46 (s, 1H), 9,38 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 5,27 (1H, AB, J=18,1 Hz), 4,90-5,03 (m, 1H), 4,35 (1H, AB, J= 19,0Hz), 2,66-2,81 (m, 1H), 2,25-2,40 (m, 1H), 1,43-1,45 (m, 4H), 1,21 (3H, d, J= 6,3Hz), 1,20-1,35 (m, 12H).
[00544] Exemplo 8: Síntese do sal de ácido clorídrico de 17-etil-5-imino-4- trideuteriometil-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (Composto L)
[00545] Síntese do Composto 1.
[00546] Etapa a-1: Uma mistura de 2-aminoacetato de etil (64 g, 288 mmoL) em piridina (140 mL) foi agitada a 0°C, uma mistura de cloreto de 4-nitrobenzeno-1-sulfonil (40 g, 288 mmoL) em piridina (60 mL) foi adicionado gota a gota, a mistura resultante foi agitada a 0°C durante 1 h. O resíduo foi purificado por recristalização para proporcionar etil 2-(4- nitrofenilsulfonamido)acetato (70 g, 63% de rendimento) como um sólido amarelo. ES LC- MS m/z = 289,2(M+H+).
[00547] Etapa a-2: Uma mistura de etil 2-(4-nitrofenilsulfonamido)acetato (30 g, 104,1 mmoL), Carbonato de césio(51 g, 156,2 mmoL) e uma solução de iodometano-d3(16,6 g, 114,6 mmoL) em N,N-Dimetilformamida (75 mL) foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. Verteu asolução de reação em água gelada (500 mL) e filtrouse para proporcionar etil 2-(N-trideuteriometilguanidino-4- nitrofenilsulfonamido)acetato (30 g, 94% de rendimento). ES LC-MS m/z = 328,3 (M+Na+).
[00548] Etapa a-3: Uma mistura de etil 2-(N-trideuteriometilguanidino-4- nitrofenilsulfonamido) acetato (40 g, 131,1 mmoL) em tetra-hidrofurano (80 mL) foi agitada a rt, uma solução de mono-hidrato de hidróxido de lítio(10,5 g, 262,2 mmoL) em água (40 mL) foi adicionada, a mistura resultante foi agitada à rt durante 1 h. O orgânico combinado foi concentrado, o pH da solução foi ajustado para 4-5 com ácido clorídrico(1N). A mistura foi extraída com diclorometano (150 mL x 3), o orgânico combinado foi seco sobre ssulfato de sódio anidro e concentrado para proporcionar ácido 2-(N-trideuteriometilguanidino-4- nitrofenilsulfonamido)acético (33 g, 91% de rendimento, 1). 1H NMR (DMSO-d) δ:12,9(s, 1H), 8,38-8,42(m, 2H), 8,04-8,08(m, 2H), 3,99(s, 1H).
[00549]
[00550] Etapa 1: Síntese do Composto L-1. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com ácido 2-[(4-nitrofenil)sulfonil- (trideuteriometil)amino]acético (2 g, 7,22 mmol) em DCM (18 mL) foi adicionado SOCL2 (18 mL) a banho de gelo e refluiu a 60°C por 1 hora. A reação foi evaporada, dissolvida em DCM (30 mL). A uma solução de pent-1-en-3-ol (652 mg, 7,58 mmol) e trietilamina (2,19 g, 21,66 mmol) em DCM (15 mL) foi adicionada gota a gota no banho de gelo e depois agitada à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi adicionada DCM (100 mL), lavada com água (40 mL x 3) e salmoura (40 mL), seca e evaporada, purificada por cromatografia flash (40 G) eluindo com (PE: EA/0% -18%), para obter pent-1-en-3-il-2-(N- trideuteriometil-4-nitrofenilsulfonamido)acetato (Composto L-1; 2,78 g, 7,55 mmol, 108% de rendimento) como um sólido amarelo pálido. ES LC-MS m/z =368,0 (M+Na+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 8,36-8,33 (m, 2H), 8,01-7,98 (m, 2H), 5,31-5,30 (m, 1H), 5,21-5,17 (m, 2H), 5,09-5,07 (m, 1H), 4,10 (s, 2H), 1,42-1,34 (m, 2H), 0,89-0,84 (m, 3H).
[00551] Etapa 2: Síntese do Composto L-2. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com o Composto L-1 (2,78 g, 7,55 mmol) e Cs2CO3 (5,2 g, 16,12 mmol) em ACN:THF (10:1, 80 mL) foi adicionado 4-metilbenzenotiol (2 g, 16,12 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 45°C por 1,5 h. A mistura foi filtrada, evaporada, purificada por SGC (PE:EA/10:1 para DCM:MeOH/10:1) para dar pent- 1-en-3-il-2-(trideuteriometilamino)acetato (Composto L -2; 910 mg, 5,68 mmol, 71% de rendimento) como um óleo amarelo pálido. O produto em bruto foi utilizado diretamente na etapa seguinte sem purificação.
[00552] Etapa 3: Síntese do Composto L-3. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato (1,69 g, 4,74 mmol, K-a, ver Exemplo 7), Composto L-2 (910 mg, 5,68 mmol) e TEA (958 mg, 9,48 mmol) em DMF (35 mL) foi adicionado HgCl2 (1420 mg, 5,21 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas. A reação foi adicionada EA (100 mL), lavada com água (30 mL x 3) e salmoura (30 mL), seca e evaporada, purificada por cromatografia flash (40 G) eluindo com (PE:EA/0%-20%) para dar (Z)-pent-1-en-3-il-2-(2-(terc-butoxicarbonil)-3-dec-9-enoil- 1-trideuteriometilguanidino) acetato (Composto L-3; 1,54 g, 3,38 mmol, 71% de rendimento) como um óleo incolor. ES LC-MS m/z = 455,1 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,95 (br s, 1H), 5,8-5,7 (m, 2H), 5,27-5,13 (m, 2H), 5,01-4,91 (m, 2H), 4,16 (s, 2H), 2,21 (br s, 2H), 2,02-1,97 (m, 2H), 1,63-1,52 (m, 2H), 1,49 (s, 2H), 1,33 (s, 10H), 1,25 (s, 8H), 0,87- 0,83 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[00553] Etapa 4: Síntese do Composto L-4. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com o Composto L-3 (1,54 g, 3,38 mmol) em DCM (1200 mL) foi adicionado Grubbs (II) (575 mg, 0,67 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 50°C com árgon por 2 horas. A reação foi resfriada à temperatura ambiente, extinta com etoxieteno (10 mL), evaporada, purificada por cromatografia flash (20 G) eluindo com (PE:EA/0% -25%) para dar (Z)-terc-butil-((E)-17-etil-4- trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazacicloheptadec-15-en-5-ilideno)carbamato (Composto L-4; 1220 mg, 2,86 mmol, 86% de rendimento) como um óleo castanho claro. ES LC-MS m/z = 427,2 (M+H+).
[00554] Etapa 5: Síntese do Composto L-5. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com o Composto L-4 (500 mg, 1,17 mmol) em acetato de etil (10 mL) foi adicionado óxido platínico (51 mg) à temperatura ambiente. A reação foi agitada à temperatura ambiente com hidrogênio por 3 h. A reação foi filtrada, evaporada, purificada por pré-HPLC (FA) para dar (Z)-benzil-((E)-14-butil-4- trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclotetradec-11-en-5-ilideno) carbamato (Composto L-5; 400 mg, 0,93 mmol, 36% de rendimento) como um sólido branco pálido. ES LC-MS m/z = 429,2 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,87 (s, 1H), 4,82-4,81 (d, J= 4,8 Hz, 1H), 4,20-4,02 (m, 2H), 2,24-2,13 (m, 2H), 1,54- 1,49 (m, 5H), 1,40-1,35 (m, 9H), 1,23 (s, 2H), 0,85-0,81 (t, J= 7,2 Hz, 3H).
[00555] Etapa 6: Síntese do Composto L-6. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com o Composto L-5 (250 mg, 0,58 mmol) em DCM (6 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (2 mL), agitado à rt durante 1 hora. A reação foi evaporada, dissolvida em ACN (3 mL), purificada por pré-HPLC (FA), liofilizada para dar 18-etil-5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6-diazaciclo-octadecano-2,7-diona (Composto L-6; 90 mg, 0,27 mmol, 47% de rendimento) como um sólido branco. ES LC- MS m/z = 329,2 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ : 10,75 (br s, 1H), 9,43-9,21 (br s, 1H), 4,82 (s, 2H), 4,39 (br s, 1H), 2,41 (s, 1H), 1,57 -1,51 (m, 6H), 1,25 (s, 12H), 0,86-0,82 (t, J=7,6 Hz, 3H).
[00556] Etapa 7: Síntese do Composto L
[00557] Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com o Composto L-6 (90 mg, 0,27 mmol) em ACN (5 mL) e água (5 mL) foi adicionada até 1 N de HCl (0,5 mL), agitada à temperatura ambiente 0,5 hora. A reação foi liofilizada para obter sal de ácido clorídrico de 17-etil-5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (Composto L; 84,5 mg, 0,25 mmol, 97%) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 329,2 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 11,30 (s, 1H), 9,40-9,23 (m, 2H), 5,24-5,20 (m, 1H), 4,85-4,84 (m, 1H), 4,43-4,38 (m, 1H), 2,69 (m, 1H), 2,31 (s, 1H), 1,58-1,51 (m, 6H), 1,26 (s, 12H), 0,87-0,83 (t, J = 7,2 Hz, 3H).
[00558] Exemplo 9 : Síntese de 5-imino-4-trideuteriometilguanidino-18-metil-1-oxa- 4,6-diazaciclooctadecano-2,7-diona (Composto M)
[00559] Síntese de M-a
[00560] Etapa a: pent-4-en-2-il 2-(N-trideuteriometil-4- nitrofenilsulfonamido)acetato. Uma mistura de ácido 2-(N-trideuteriometil-4- nitrofenilsulfonamido)acético (2,2 g, 7,94 mmol) e dicloreto sulfuroso (20 ml) em diclorometano (20 ml) foi aquecida a 60°C e agitada por 2 hs. A mistura foi concentrada, o resíduo foi dissolvido com diclorometano (20 ml) que foi adicionado a uma mistura de pent- 4-en-2-ol (750 mg, 8.72 mmol) e trietilamina (2 g, 19,85 mmol) em diclorometano (20 ml) em água gelada e depois agitada à rt por 1 h. Foi adicionada água (40 ml) e a mistura foi extraída com diclorometano (40 ml x 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo:acetato de etil = 5:1) para proporcionar pent-4-en-2-il 2-(N-trideuteriometil-4- nitrofenilsulfonamido) acetato (1,983 g, 72%) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 368,1 (M+Na+).
[00561] Etapa b : Síntese de M-a. Uma mistura de pent-4-en-2-il 2-(N- trideuteriometil-4-nitrofenilsulfonamido)acetato (1,983 g, 5,75 mmol), 4-metilbenzenotiol (1,43 g, 11,5 mmol) e Carbonato de césio (3,75 g, 11,5 mmol) em acetonitrila (30 ml) e tetra- hidrofurano (3 ml) foi agitada a 45°C durante 2 hs. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia (diclorometano:metanol = 10:1 com hidróxido de amônio a 0,1%) para proporcionar pent-4- en-2-il 2- (trideuteriometilamino)acetato (713 mg, 78%) como um líquidoamarelo. ES LC- MS m/z = 161,3 (M+H+).
[00562] Síntese de M: O composto M-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 7, etapas 1 e 2, começando com (Z)-terc-butil-dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato (Ka, ver Exemplo 7) e pent-4 -en-2-il-2-(trideuteriometilguanidino) (M-a). O Composto M-1 foi obtido como um óleo amarelo pálido (743 mg, 53% de rendimento). ES LC-MS m/z = 427,2 (M+H+).
[00563] Etapa 1: Síntese do Composto M-2. Uma mistura de Composto M-1 (500 mg, 1,17 mmoL) e paládio a 10% em carbono (80 mg, 20%) em etanol (5 mL) foi agitada sob balão de H2 por 2 h. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados para proporcionar (Z)-tert-butil-4-trideuteriometilguanidino-18-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6- diazaciclo-octadecan-5-ilidenocarbamato (Composto M -2; 454 mg, 90% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 429,3 (M+H+).
[00564] Etapa 2: Síntese do Composto M
[00565] Uma mistura de Composto M-2 (716 mg, 1,67 mmoL) em HCl/dioxano (15 mL) foi agitada à rt durante a noite. O orgânico combinado concentrado. O resíduo foi dissolvido com metanol purificado por Pré-HPLC (FA) para proporcionar 5-imino-4- trideuteriometilguanidino-18-metil-1-oxa-4,6-diazaciclooctadecano-2,7-diona (Composto M; 280 mg, 51% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 329,2 (M+H+).1H NMR (DMSO-d) δ:9,4-10,2 (br, 1H), 7,0-7,8 (br, 1H), 4,80-4,92 (m, 2H), 3,85 (1H, AB, J= 17,5 Hz), 1,95- 2,15 (m, 2H), 1,40-1,60 (m, 4H), 1,18 (3H, dr, J= 6,3Hz), 1,15-1,35 (m, 14H).
[00566] Exemplo 10: Síntese de 18-etil-5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclooctadecano-2,7-diona (Composto N)
[00567] Etapa 1. Síntese do Composto N-1. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foi carregado com 5-bromopent-1-eno (10 g, 67,11 mmol), magnésio (2,42 g, 100,67 mmol) e iodo (5 grânulos) em tetra- hidrofurano (seco, 100 mL). A mistura foi agitada a 60°C por duas horas. A reação foi resfriada à temperatura ambiente ("solução B"). A uma solução de propionaldeído (3,89 g, 67,11 mmol) em THF (seco, 50 mL) foi adicionada solução B gota a gota a -30°C. Em seguida, a reação foi agitada a -30°C por 30 minutos. A reação foi aquecida à temperatura ambiente por 2 horas e extinta com solução sat. de cloreto de amônio aquoso (60 mL), extraída com acetato de etil (80 mL x 3), lavada com água (60 mL x 1) e salmoura (60 mL), seca e evaporada, destilada sob vácuo a 124°C (banho de óleo) para dar oct-7-en-3-ol (Composto N-1; 1,77 g, 14,04 mmol, 26% de rendimento) como um óleo incolor. 1H NMR (DMSO-d6) δ:5,83-5,76 (m, 1H), 5,02-4,91 (m, 2H), 4,26 (d, J= 5,2 Hz, 1H), 3,31-3,28 (m, 1H), 2,06- 1,97 (m, 2H), 1,47-1,22 (m, 6H), 0,88-0,81 (m, 3H).
[00568] Etapa 2. Síntese do Composto N-2. O Composto N-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8, etapas 1 e 2, partindo do ácido 2-[(4-nitrofenil)sulfonil- (trideuteriometil)amino]acético e do Composto N-1. O Composto N-2 (oct-7-en-3-il-2- (trideuteriometilamino)acetato) foi obtido como um óleo marrom pálido (1,7 g, 8,42 mmol, 51% de rendimento). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,80-5,74 (m, 1H), 5,02-4,92 (m, 2H), 4,79-4,76 (m, 1H), 3,26 (br s, 2H), 2,04-1,97 (m, 3H), 1,57-1,44 (m, 4H), 1,38-1,29 (m, 2H), 0,85-0,80 (m, 3H).
[00569] Etapa 3. Síntese do Composto N-3. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com ácido oct-7-enoico (1 g, 7,04 mmol) e HUTU (4,01 g, 10,56 mmol) em diclorometano (15 mL) foi adicionado gota a gota (Z)-benzil- amino(metiltio)metilenocarbamato (1,40 g, 7,39 mmol) e DIPEA (1,82 g, 14,08 mmol) em DCM (10 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. A reação foi adicionada DCM (100 mL), lavada com água (30 mL x 3) e salmoura (40 mL), seca e evaporada, purificada por cromatografia flash (40 G) eluindo com (PE:EA/0% -18%), para dar (Z)-terc-butil-metiltio(oct-7-enamido)metilenocarbamato (Composto N-3; 1,72 g, 8,04 mmol, 77% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 215,1 (M-99+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 11,15 (s, 1H), 5,79-5,75 (m, 1H), 5,02-4,92 (m, 2H), 2,34-2,31 (t, J= 7,2 Hz, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,01-1,97 (m, 2H), 1,52-1,49 (m, 2H), 1,42 (S, 9H), 1,36-1,26 (m, 4H).
[00570] Etapa 4. Síntese do Composto N-4. O Composto N-4 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8, etapas 3 e 4, partindo do Composto N-2 e Composto N-3. (Z)-benzil-((E)- 14-butil-4-trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclotetradec-11-en-5-ilideno) carbamato (Composto N-4; 900 mg, 2,45 mmol, 78% de rendimento) como um óleo incolor. ES LC-MS m/z = 441,4 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,85 (br s, 1H), 5,29-5,27 (m, 2H), 4,73 (br s, 1H), 4,19-4,09 (m, 2H), 2,18 (s, 2H), 2,00-1,96 (m, 4H), 1,48-1,15 (m, 21H), 0,85-0,81 (t, J=7,6 Hz, 3H).
[00571] Etapa 5. Síntese do Composto N-5. O Composto N-5 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto N-4. (Z)-Benzil-((E)-14-butil-4-trideuteriometil- 2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclotetradec-11-en-5-ilideno) carbamato (280 mg, 0,63 mmol, 69% de rendimento) como um óleo incolor. ES LC-MS m/z = 443,4 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,93-9,92 (d, J=6 Hz, 1H), 4,77-4,75 (t, J= 5,6 Hz, 1H), 4,24-4,00 (m, 2H), 2,24-2,17 ( m, 2H), 1,57-1,10 (m, 29H), 0,85-0,81 (t, J= 7,6 Hz, 3H).
[00572] Etapa 6. Síntese do Composto N
[00573] O Composto N foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto N-5. 18-Etil-5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclooctadecano-2,7-diona (Composto N; 140,2 mg, 0,408 mmol, 59% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 343,2 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,80 (br s, 1H), 7,39 (br s, 1H), 4,90-4,86 (d, J=18 Hz, 1H), 4,77-4,74 (t, J=6 Hz, 1H), 3,94-3,90 (d, J= 17,2 Hz, 1H), 2,10-2,05 (q, J= 6,4 Hz, 2H), 1,58-1,50 (m, 6H), 1,25 (s, 14H), 0,86-0,81 (t, J= 7,6 Hz, 3H).
[00574] Exemplo 11: Síntese de 16-etil-5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclo-hexadecano-2,7-dionae (Composto O) Etapa 1
[00575] Etapa 1. Síntese do Composto O-1. O Composto O-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 10, etapas 1 e 2, partindo de 4-bromobut-1-eno. O Hept-6-en-3-il-2- (trideuteriometilamino)acetato (Composto O-1; 0,9 g, 4,79 mmol, 85% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo pálido.
[00576] Etapa 2. Síntese do Composto O-2. O composto O-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 10, etapa 3, partindo de (Z)-terc-butil amino(metiltio)metilenocarbamato e ácido hept-6-enóico. (Z)-terc-Butil hept-6-enamido(metilthio)metilenocarbamato (Composto O-2; 4,4 g, 94% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 201,1 (M-Boc+H+).
[00577] Etapa 3. Síntese do Composto O-3. O Composto O-3 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8, etapas 3 e 4, partindo do Composto O-1 e Composto O-2. (Z)-terc-Butil- ((E)-16-etil-4-trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-hexadec-12-en-5- ilideno)carbamato (Composto O- 3; 380 mg, 81% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo. ES LC-MS m/z = 413(M+1).
[00578] Etapa 4. Síntese do Composto O-4. Composto O-4 como sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto O-3. (Z)-terc-Butil-16-etil-4- trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-hexadecan-5-ilidenocarbamato (Composto O-4; 320 mg, 98% de rendimento) como um óleo marrom. ES LC-MS m/z = 415 (M+1).
[00579] Etapa 5. Síntese do Composto O
[00580] O Composto O foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto O-4. 16-etil-5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6-diazaciclo- hexadecano-2,7-diona (Composto O;80 mg, 33% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 315 (M+1).
[00581] Exemplo 12: Síntese de 5-imino-4-trideuterometil, 16-metil -1-oxa-4,6- diazaciclo-hexadecano-2,7-diona (Composto P)
[00582] Etapa 1. Síntese de P-1. 2-Metiloxirano (3,5 g, 60 mmol) foi adicionado gota a gota ao brometo de alilmagnésio (1 M em Et2O, 90 mL, 90 mmol), seguido de CuI (1,14 g, 6 mmol) a -78°C e agitado por 2,5 h a esta temperatura. A mistura de reação foi aquecida à temperatura ambiente e NH4Cl sat. aq. (100 mL) foi adicionado e a fase orgânica foi separada. Os orgânicos foram combinados, secos (MgSO4) e concentrados in vácuo para proporcionar hex-5-en-2-ol (Composto P-1) como um óleo: 3,5 g, 58% de rendimento, ES LCMS m/z = 115,3 (M + H+). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 5,93 - 5,69 (m, 1H), 5,11 - 4,84 (m, 2H), 4,37 (t, J = 4,2 Hz, 1H), 3,58 (dt, J = 11,6, 5,7 Hz, 1H), 2,18-1,86 (m, 2H), 1,48-1,24 (m, 2H), 1,18-1,10 (m, 2H), 1,03 (dd, J = 8,7, 6,2 Hz, 3H).
[00583] Etapa 2. Síntese de P-2. O Composto P-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8, etapas 1 e 2, partindo do ácido 2-[(4-nitrofenil)sulfonil- (trideuteriometil)amino]acético e do Composto P-1. hex-5-en-2-il 2- (metilmetilamino)acetato (Composto P-2; 1,0 g, 100 % de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo. ES LC-MS m/z = 175,1 (M+H+).
[00584] Etapa 3. Síntese de P-3. O Composto P-3 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8, etapas 3 e 4, partindo do Composto P-2 e Composto O-2. (Z)-terc-butil-((E)-4- trideuterometil, 16-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclohexadec-12-en-5- ilideno)carbamato (Composto P- 3; 400 mg, 36% de rendimento) foi obtido como um óleo amarelo. ES LC-MS m/z = 399,2 (M+H+).
[00585] Etapa 4. Síntese de P-4. O Composto P-4 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto P-3 usando Pd/C (20%). (Z)-terc-Butil-4- trideuterometil,16-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-hexadecan-5-ilidenocarbamato (Composto P-4; 300 mg, 75% de rendimento) como um sólido amarelo. ES LC-MS m/z = 401,3 (M+H+).
[00586] Etapa 5. Síntese do Composto P
[00587] O Composto P foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto P-4. Foi obtido 5-amino-4-trideuterometil, 16-metil-1-oxa-4,6- diazaciclo-hexadecano-2,7-diona (Composto P; 100 mg, 44% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 301,2 (M+H+). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,82 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 5,17 - 4,89 (m, 1H), 4,68 (d, J = 17,3 Hz, 1H), 4,03 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 2,24 - 1,91 (m, 2H), 1,50 (d, J = 36,5 Hz, 4H), 1,28 - 0,99 (m, 13H).
[00588] Exemplo 13: Síntese de cloridrato de (R)-5-imino-4,17-dimetil-1-oxa-4,6- diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (Composto Q)
[00589] Em geral, o Composto Q foi sintetizado de acordo com o Exemplo 12, partindo de (S)-2-metiloxirano em vez de 2-metiloxirano e 4-bromobut-1-eno em vez de brometo de alilmagnésio. Composto Q-1, (Z)-terc-butil-((R,E)-4-trideuterometil, 17-metil- 2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadec-12-en-5- ilideno) carbamato, foi obtido como um óleo amarelo (800 mg, 88% de rendimento). ES LC-MS m/z = 413,2 (M+H+).
[00590] Etapa 1. Síntese do Composto Q-2. O Composto Q-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto Q-1 usando Pd/C (20%). (R,Z)-terc-Butil-4- trideuterometil,17-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadecan-5-ilidenecarbamato (Composto Q-2; 750 mg, 94% de rendimento) foi obtido como um sólido amarelo. ES LC- MS m/z = 415,3 (M+H+).
[00591] Etapa 2. Síntese do Composto Q.
[00592] O Composto Q foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto Q-2. Cloridrato de (R)-5-imino-4,17-dimetil-1-oxa-4,6- diazacicloheptadecano-2,7-diona (Composto Q; 340 mg, 60% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 315,2 (M+H+). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11,43 (s, 1H), 9,31 (d, J = 55,0 Hz, 2H), 5,25 (d, J = 19,1 Hz, 1H), 4,96 (s, 1H), 4,35 (d, J = 18,8 Hz, 1H), 2,72 (s, 1H), 2,33 (s, 1H), 1,51 (s, 4H), 1,37 - 1,04 (m, 15H).
[00593] Exemplo 14: Síntese de 5-imino-4-metil-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano- 2,7-diona formato (Composto R)
[00594] Em geral, o Composto R foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8, partindo de N-metil-N-((4-nitrofenil)sulfonil)glicina em vez de ácido 2-[(4-nitrofenil)sulfonil- (trideuteriometil)amino]acético e hex-5-en-1-ol em vez de pent-1-en-3-ol e depois O-2 em vez de (Z)-terc-butil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato na etapa 3. O Composto R- 1, (Z)-terc-butil-((E)-4-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazacicloheptadec-12-en-5- ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo preto (878 mg, 81%). ES LC-MS m/z = 396,3 (M+H+).
[00595] Etapa 1. Síntese do Composto R-2. O Composto R-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto R-1 usando Pd/C (20%). (Z)-terc-Butil 4-metil-2,7- dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadecan-5-ilidenocarbamato (Composto R-2; 660 mg, 75%) foi obtido como um sólido amarelo. ES LC-MS m/z = 398,3 (M+H+).
[00596] Etapa 2. Síntese do Composto R.
[00597] O Composto R foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto R-2. 5-Imino-4-metil-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7- diona (Composto R; 102 mg, 45%) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 298,2 (M+H+).1H NMR (DMSO-d) δ:8,16 (s, 0,4 H), 4,32 (s, 2 H), 4,15-4,12 (t, 2 H), 2,92 (s, 3 H), 2,04-2,00 (t, 2 H), 1,55-1,51 (t, 4 H), 1,30-1,24 (m, 12 H).
[00598] Exemplo 15: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-15-metil-1-oxa-4,6- diazaciclopentadecano-2,7-diona (Composto S)
[00599] Em geral, o Composto S foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando pent-4-en-2-ol em vez de pent-1-en-3-ol na etapa 1 e O-2 em vez de (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato na etapa 3. Composto S-1, (Z)-terc-butil-((E)-4- trideuteriometil-15-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclopentadec-12-en-5- ilideno)carbamato, foi obtido como um sólido amarelo (1,112 g, 75%). ES LC-MS m/z = 385,3 (M+H+).
[00600] Etapa 1. Síntese do Composto S-2. O Composto S-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto S-1 usando Pd/C (20%). (Z)-terc-Butil-4- trideuteriometil-15-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclopentadecan-5-ylidenecarbamato (Composto S-2; 1,047 g, 94%) foi obtido como um sólido amarelo. ES LC-MS m/z = 387,3 (M+H+).
[00601] Etapa 2. Síntese do Composto S
[00602] O Composto S foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto S-2. 5-Imino-4-trideuteriometil-15-metil-1-oxa-4,6- diazaciclopentadecano-2,7-diona (Composto S; 148 mg, 59%) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 287,2 (M+H+).1H NMR (DMSO-d) δ:5,00-4,95 (t,1 H), 4,54-4,50 (m,1 H), 3,95-3,91 (m, 1 H), 2,06-1,94 (t, 2 H), 1,58 -1,47 (t, 4 H), 1,30-1,16 (t, 11 H).
[00603] Exemplo 16: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometilguanidino-1-oxa-4,6- diazaciclononadecano-2,7-diona formato (Composto T)
[00604] Síntese de T-a
[00605] `Uma mistura de (Z)-terc-butil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato (1,96 g, 5,37 mmoL; K-a) pent-4-enil 2-(trideuteriometilguanidino)acetato (1,1 g, 6,87 mmoL) e uma solução de trietilamina (1,74 g, 17,2 mmoL) em N,N-Dimetilformamida (30 mL) foi agitado à temperatura ambiente. Uma mistura de dicloreto de mercúrio (1,7 g, 6,3 mL) foi adicionado, a mistura foi agitada à rt durante a noite. Água (40 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com etil acetato (40 mL x 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. Oresíduo foi purificado foi flash (Éter de petróleo: Etil acetato/5:1) para proporcionar (E)-pent-4-enil 2-(2-(terc- butoxicarbonil)-3-dec-9-enoil-1-trideuteriometilguanidino)acetato (2,39 g, 92% rendimento, T-a) como um sólido b ranco. ES LC-MS m/z = 455,3 (M+H+).
[00606] Síntese de T
[00607] Em geral, o Composto T foi sintetizado de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 8. O composto T-1, (E)-terc-butil ((E)-4-trideuteriometilguanidino-2,7- dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclononadec-15-en-5-ilideno)carbamato, foi sintetizado a partir de Composto T-a de acordo com o Exemplo 8, etapa 4 e obtido como um óleo amarelo pálido (892 mg, 40% de rendimento). ES LC-MS m/z = 426,3 (M+H+).
[00608] Etapa 1. Síntese do Composto T-2. O Composto T-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto T-1 usando Pd/C (20%). (E)-terc-Butil-4- trideuteriometilguanidino-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclononadecan-5-ilidenocarbamato (Composto T-2; 300 mg, 34% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC- MS m/z = 428,3(M+H+).
[00609] Etapa 2. Síntese do Composto T
[00610] O Composto T foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto T-2. 5-Imino-4-trideuteriometilguanidino-1-oxa-4,6- diazaciclononadecano-2,7-diona (Composto T; 65 mg, 28% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 329,2(M+H+). 1H NMR (DMSO-d) δ: 9,3-10,0 (br, 1H), 7,1-7,7 (br, 1H), 4,25 (s, 2H), 4,08 (2H, t, J = 6,3 Hz), 2,06 (2H, t, J = 7,7 Hz), 1,531,62 (m, 2H), 1,44-1,53 (m, 2H), 1,20-1,36 (m, 16H).
[00611] Exemplo 17: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-17,17-dimetil-1-oxa-4,6- diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (Composto U)
[00612] Em geral, o Composto U-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando 2-metil-hept-6-en-2-ol em vez de pent-1-en-3-ol e usando (Z)-benzil hept-6-enamido (metiltio)metilenocarbamato em vez de (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato.
[00613] 2-Metilhept-6-en-2-ol: Agitou-se uma mistura de 5-bromopent-1-eno (10,0 g, 67,5 mmol), magnésio (3,24 g, 135 mmol) e iodo-traço em tetra-hidrofurano seco (200 ml) a 60 graus abaixo de nitrogênio por 2 h. Resfriando até rt, foi adicionada acetona (7,83 g, 135 mmol) e a mistura foi agitada à rt durante a noite. Uma solução saturada de cloreto de amônio e a mistura foi extraída com acetato de etil (200 ml * 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por destilação a pressão reduzida para proporcionar 2-metil-hept-6-en-2-ol (4,0 g, 46%) como um óleo incolor. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,75-5,83 (m, 1 H), 4,92-5,03 (m, 2 H), 1,97-2,0 (m, 2 H), 1,35-1,41 (m, 4 H), 1,19 (s, 6 H).
[00614] (Z)-benzil-hept-6-enamido(metiltio)metilenocarbamato pode ser preparado de acordo com o Exemplo 29 utilizando um procedimento semelhante ao do Composto GG- 1 substituindo o ácido dec-9-enóico pelo ácido hep-6-enóico.
[00615] Composto U-1, (Z)-benzil ((E)-4-trideuteriometil-17,17-dimetil-2,7-dioxo- 1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadec-12-en-5-ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo amarelo (600 mg, 79%). ES LC-MS m/z = 461,3 (M+H+).
[00616] O Composto U foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, partindo do Composto U-1 usando Pd/C (20%). 5-amino-4-trideuteriometil-17,17-dimetil-1-oxa-4,6- diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (Composto U; 75 mg, 35%) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 329,3 (M+H+).1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,89 (ds, 1H), 7,45 (ds, 1 H), 4,27 (s, 2 H), 2,05-2,08 (m, 2 H), 1,75-1,80 (m, 2 H), 1,50-1,55 (m, 2 H), 1,47 (s, 6 H), 1,25-1,38 (m, 12 H).
[00617] Exemplo 18: Síntese de 15-etil-5-imino-4-(metil-d3)-1-oxa-4,6- diazaciclopentadecano-2,7-diona (Composto V)
[00618] Em geral, o Composto V foi sintetizado de acordo com o Exemplo 11 usando ácido hex-5-enóico em vez de ácido hept-6-enóico na etapa 2. O Composto V-1 foi obtido como um óleo marrom (0,9 g, 2,26 mmol, rendimento: 74,0%). ES LC-MS m/z = 399,3 (M+H) +.
[00619] Etapa 1. Síntese do Composto V-2. O Composto V-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto V-1. O Composto V-2 foi obtido como um óleo amarelo pálido (0,82 g, 2,05 mmol, rendimento: 96,1%). ES LC-MS m/z = 401,3 (M+H) +.
[00620] Etapa 2. Síntese do Composto V.
[00621] O Composto V foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, partindo do Composto V-2 (375 mg, 1,25 mmol, rendimento: 62,5%). ES LC-MS m/z = 301,2 (M+H) + .
[00622] Exemplo 19: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-15-propil-1-oxa-4,6- diazaciclopentadecano-2,7-diona (Composto W)
[00623] Em geral, o Composto W-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando hept-1-en-4-ol em vez de pent-1-en-3-ol e usando benzil (Z)-(hept-6- enamido(metiltio) metileno)carbamato (ver Exemplo 17) em vez de (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto W-1, (Z)-benzil ((E)-4-trideuteriometil- 2,7-dioxo-15-propil-1-oxa-4,6-diazaciclopentadec-12-en-5-ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo amarelo (880 mg, 93%). ES LC-MS m/z = 447,3 (M+H+).
[00624] O Composto W foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, partindo do Composto W-1 usando Pd/C (20%). 5-Imino-4-trideuteriometil-15-propil-1-oxa-4,6- diazaciclopentadecano-2,7-diona (Composto W; 130 mg, 46%) foi obtida como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 315,3 (M+H+).1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,77 (ds, 1 H), 7,39 (ds, 1 H), 4,92 (s, 1 H), 4,57-4,60 (m, 1 H), 3,95-3,99 (m, 1 H), 1,98-2,06 (m, 2 H), 1,44-1,57 (m, 6 H), 1,19-1,30 (m, 10 H), 0,87 (t, J = 7,2 Hz, 3 H).
[00625] Exemplo 20: Síntese de 5-imino-15,15-dimetil-4-(metil-d3)-1-oxa-4,6- diazaciclopentadecano-2,7-diona (Composto X)
[00626] Em geral, o Composto X-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando 2-metil-hept-6-en-2-ol (ver Exemplo 17) em vez de pent-1-en-3-ol e usando benzil (Z)- ((metiltio)(pent-4-enamido)metileno)carbamato em vez de (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto X-1 foi obtido como um óleo amarelo (2,2 g, 50%). ES LC-MS m/z = 433 [M+H+].
[00627] Benzil (Z)-((metiltio)(pent-4-enamido)metileno)carbamato: Uma mistura de benzil (Z)-(amino(metiltio)metileno)carbamato (3,5 g, 15,6 mmol), ácido pent-4-enoic (1,6 g, 15,6 mmol), HATU (7,11 g, 18,72 mmol) e N,N-di-isopropil-etilamina (4,0 g, 31,2 mmol) em diclorometano (60 ml) foram agitados à temperatura ambiente durante a noite. Foi adicionada água (50 ml) e a mistura foi extraída com diclorometano (60 ml * 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo: acetato de etil = 20:1) para proporcionar benzil (Z)-((metiltio)(pent-4-enamido)metileno)carbamato (4,6 g, 94%) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 307 [M+H+].
[00628] O Composto X foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, partindo do Composto X-1 usando Pd/C (20%). O Composto X foi obtido como um sólido amarelo (0,2 g, 13%). ES LC-MS m/z = 301,3 [M+H+]. 1HNMR (DMSO-d6, 400MHz) • : 9,84 (br s, 1H), 7,34 (bs, 1H), 4,24 (m, 2H), 2,50 (m, 2H), 2,02 (m, 2H), 1,78 (br s, 2H) 1,47 (s, 6H) 1,34 (br s, 1H)1,29-1,22 (m, 8H).
[00629] Exemplo 21: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazacicloicosano-2,7-diona formato (Composto Y)
[00630] Em geral, o Composto Y foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando hex-5-enil 2-(trideuteriometilamino)acetato em vez de L-2 e usando (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato (ver Exemplo 7) em vez de (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto Y-1, (Z)-terc-butil ((Z)-4- trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazacicloicos-15-en-5-ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo amarelo (1,29 g, 90%). ES LC-MS m/z = 441,3 (M+H+).
[00631] Hex-5-enil 2-(trideuteriometilamino)acetato: uma mistura de hex-5-enil 2- (N-trideuteriometil-4-nitrofenilsulfonamido)acetato (2,4 g, 6,69 mmol), 4-metilbenzenotiol (1,66 g, 13,38 mmol) e carbonato de césio (4,36 g, 13,38 mmol) em acetonitrila (30 ml) e tetra-hidrofurano (3 ml) foi agitado a 45°C por 2 hs. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia (diclorometano:metanol = 10:1 com hidróxido de amônio a 0,1%) para proporcionar hex-5- enil 2- (trideuteriometilamino)acetato (900 mg, 77%) como um óleo amarelo. ES LC-MS m/z = 175,2 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,75-5,85 (m, 1 H), 4,94-5,95 (m, 2 H), 4,06 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,01-2,07 (m, 2 H), 1,55-1,62 (m, 2 H), 1,36-1,49 (m, 2 H).
[00632] Etapa 1. Síntese do Composto Y-2. O Composto Y-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto Y-1 usando Pd/C (20%). (Z)-terc-Butil 4-4- trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazacicloicosan-5-ilidenecarbamato (Composto Y-2; 1,1 g, 85%) foi obtido como um óleo amarelo. ES LC-MS m/z = 443,4 (M+H+).
[00633] Etapa 2. Síntese do Composto Y
[00634] O Composto Y foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto Y-2. 5-Imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6-diazacicloicosano-2,7- diona formato (Composto Y; 100 mg, 30%) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 343,3 (M+H+).1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,5 (bs, 1 H), 8,15 (bs, 1 H), 4,28 (s, 2 H), 4,06 (t, J = 6,0 Hz, 2 H), 2,04-2,08 ( m, 2 H), 1,55-1,59 (m, 2 H), 1,47-1,51 (m, 2 H), 1,26-1,35 (m, 18 H).
[00635] Exemplo 22: Síntese de (S)-5-imino-4-trideuteriometil-18-metil-1-oxa-4,6- diazaciclooctadecano-2,7-diona (composto Za) e (R)-5-imino-4-trideuteriometil-18-metil- 1-oxa-4,6-diazaciclooctadecano-2, 7-diona (Composto Zb)
[00636] Em geral, o Composto Z-1 e Z-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando (S)-oct-7-en-2-ol ou (R)-oct-7-en-2-ol, respectivamente, em vez de pent-1-en-3-ol e usando (Z)-benzil hept-6-enamido(metiltio)metilenocarbamato (ver Exemplo 17) em vez de (Z)-terc-butil dec-9-enamido (metiltio) metilenocarbamato. Composto Z-1, (Z)-benzil ((S,E)-4-trideuteriometil-18-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclooctadec-12-en-5- ilideno)carbamato, foi obtido como um sólido amarelo (490 mg, 65%). ES LC-MS m/z = 461,5 (M+H+). Composto Z-2, (Z)-benzil ((R,E)-4-trideuteriometil-18-metil-2,7-dioxo-1- oxa-4,6-diazaciclooctadec-12-en-5-ilideno)carbamato, foi obtido como um sólido marrom pálido (830 mg, 1,8 mmol, 94% de rendimento). ES LC-MS m/z =461,2 (M+H+).
[00637] (S)-oct-7-en-2-ol: Uma mistura de 5-bromopent-1-eno (14,9 g, 100 mmol), magnésio (4,8 g, 200 mmol) e 20 gotas em tetra-hidrofurano seco (300 ml) foi agitado a 60 graus por 2 hs. Resfriando até -30°C, foi adicionado iodeto de cobre (950 mg, 5 mmol) e (S)-2-metiloxirano (5,8 g, 100 mmol) foi adicionado gota a gota, depois a mistura foi agitada por 2 h. Foi adicionada uma solução saturada de cloreto de amônia (500 ml) e a mistura foi extraída com acetato de etil (300 ml*3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada para proporcionar (S)-oct- 7-en-2-ol (10 g, 78%) como um óleo amarelo para a próxima etapa. 1H NMR (DMSO-d) δ: 5,79-5,9 (m, 1 H), 4,92-5,07 (m, 2 H), 3,56-3,60 (m, 1 H), 2,00-2,03 (m, 2 H), 1,15 -1,35 (m, 6 H), 1,03 (d, J = 6,4 Hz, 3 H).
[00638] (R)-oct-7-en-2-ol: Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foi carregado com 5-bromopent-1-eno (15 g, 100,67 mmol) , magnésio (3,62 g, 151,01 mmol) e iodo (5 grânulos) em tetra-hidrofurano (seco, 100 mL). A mistura foi agitada a 60°C por duas horas. A reação foi resfriada à temperatura ambiente e obtida a solução B. A uma solução de (S)-2-metiloxirano (5,84 g, 100,67 mmol) e iodeto de cobre (3,22 g, 50,34 mmol) em THF (seco, 50 mL) foi adicionada solução B gota a gota a -30°C. Em seguida, a reação foi agitada a -30°C por 30 minutos. A reação foi aquecida à temperatura ambiente por 2 horas e extinta com cloreto de amônio aquoso Sat. (60 mL), extraído com acetato de etil (80 mL x 3), lavada com água (60 mL x 1) e salmoura (60 mL), seca e evaporada, destilada sob vácuo a 124 °C (banho de óleo) para dar (R)-oct- 7-en-2-ol (9 g, rendimento de 70%) como um óleo amarelado pálido. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,85-5,74 (m, 1H), 5,09-4,92 (m, 2H), 4,32 (d, J= 4,8Hz, 2H), 3,57-3,53 (m, 1H), 2,041,99 (m, 2H), 1,37-1,24 (m, 6H), 1,24 (s, 3H).
[00639] O Composto Za foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, partindo do Composto Z-1 usando Pd/C (20%). (S)-5-Imino-4-trideuteriometil-18-metil-1-oxa-4,6- diazaciclooctadecano-2,7-diona (Composto Za; 137 mg, 40%) foi obtida como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 329,5 (M+H)+. 1H NMR (DMSO-d) δ: 4,85-4,91 (m, 2 H), 3,83-3,84 (d, J = 17,6 Hz, 1 H), 2.00-2,14 (m, 2 H), 1,50-1,58 (m, 2 H), 1,22-1,34 (m, 14 H), 1,19 (d, J = 6,4 Hz, 3 H).
[00640] O Composto Zb foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, começando no Composto Z-2. (R)-5-imino-4-trideuteriometil-18-metil-1-oxa-4,6- diazaciclooctadecano-2,7-diona (Composto Zb; 261,9 mg, 0,796 mmol, 44% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 329,2 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d) δ: 9,80 (br s, 1H), 7,38 (br s, 1H), 4,85 (t, J=7,6 Hz, 2H) 3,85 (d, J=17,6 Hz, 1H), 2,10- 2,01 (m, 2H), 1,54-1,48 (m, 4H), 1,27-1,16 (m, 17H).
[00641] Exemplo 23: Síntese de 8-imino-7-trideuteriometil-4-oxa-7,9-diazaspiro [2.16]nonadecano-5,10-diona formato (Composto AA)
[00642] Em geral, o Composto AA-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando 1- (pent-4-enil)ciclopropanol em vez de pent-1-en-3-ol e usando (Z)-benzil hept-6- enamido(metiltio)metilenocarbamato (ver Exemplo 17) em vez de (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto AA-1, (Z)-benzil ((E)-7- trideuteriometil-5,10-dioxo-4-oxa-7,9-diazaspiro [2.16]nonadec-15-en-8- ilideno)carbamato, foi obtido como um sólido amarelo (800 mg, 90%). ES LC-MS m/z = 459,3 (M+H+).
[00643] 1-(Pent-4-enil)ciclopropanol: Uma mistura de metil hex-5-enoato (2,56 g, 20 mmol) e isopropóxido de titânio (IV) (7,95 g, 28 mmol) em tetra-hidrofurano seco (60 ml) foi agitada a 0 grau, uma solução de Brometo de etilmagnésio (56 ml, 56 mmol, 1,0 M em tetra-hidrofurano) foi adicionada gota a gota ao longo de 30 min. após adição, a mistura foi agitada à rt durante a noite. Foi adicionado ácido clorídrico 1 N e a mistura foi extraída com acetato de etil (50 ml * 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada para proporcionar 1-(pent-4-enil)ciclopropanol (2,3 g, 91%) como um óleo amarelo. 1H NMR (DMSO-d) δ: 5,76-5,84 (m, 1 H), 4,92-5,03 (m, 2 H), 2,02-2,07 (m, 2 H), 1,49-1,57 (m, 2 H), 1,41 -1,45 (m, 2 H), 0,50-0,53 (m, 2 H), 0,28-031 (m, 2 H).
[00644] O Composto AA foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, partindo do Composto AA-1 usando Pd/C (20%). O 8-Imino-7-trideuteriometil-4-oxa-7,9- diazaspiro[2.16]nonadecano-5,10-diona formato (Composto AA; 200 mg, 35%) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 327,3 (M+H)+. 1H NMR (DMSO-d) δ: 4,28 (s, 2H), 2,03-2,07 (m, 2H), 1,63-1,67 (m, 2H), 1,51-1,56 (m, 2H), 1,39-1,44 (m, 2H), 1,20-1,35 (m, 10H), 0,80-0,84 (m, 2H), 0,63-0,66 (m, 2H).
[00645] Exemplo 24: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometilguanidino-1-oxa-4,6- diazaciclotetradecano-2,7-diona formato (Composto BB)
[00646] Em geral, o Composto BB foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando but-3-enil 2-(trideuteriometilguanidino)acetato (ver Exemplo 26) em vez de L-2 e usando (Z)-tert-butil hex-5-enamido (metiltio)metilenocarbamato em vez de (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto BB-1, (Z)-terc-butil ((E)-4- trideuteriometilguanidino-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclotetradec-11-en-5- ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo amarelo pálido (604 mg, 97% de rendimento). ES LC-MS m/z = 356,2 (M+H+).
[00647] (Z)-terc-butil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato: Uma mistura de (Z)-benzilamino (metiltio) metilenocarbamato (1,8 g, 9,65 mmoL), 1- [Bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b] piridínio 3-óxido hexafluorofosfato(4 g, 10,5 mmoL) e uma solução de ácido hex-5-enóico (1 g, 8,77 mmol), N,N-Di- isopropiletilamina (2,25 g, 17,54 mmoL) em diclorometano (50 mL) foi agitada à rt por 2h. Água (50 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com diclorometano (50 mL *3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por flash (éter de petróleo : etil acetato / 10:1) para proporcionar (Z)- terc-butil hex-5-enamido(metiltio)metilenocarbamato (1,54 g, 61% de rendimento) como um sólido branco . ES LC-MS m/z = 287,1(M+H+).
[00648] Etapa 1. Síntese do Composto BB-2. O composto BB-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto BB-1 usando Pd/C (20%). terc-Butil 4- trideuteriometilguanidino-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclotetradecan-5-ilidenocarbamato (Composto BB-2; 260 mg, 47% de rendimento) como um óleo branco. ES LC-MS m/z = 359,2(M+H+).
[00649] Etapa 2. Síntese do Composto BB.
[00650] O Composto BB foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto BB-2. 5-Imino-4-trideuteriometilguanidino-1-oxa-4,6- diazaciclotetradecano-2,7-diona (Composto BB; 90 mg, 50% de rendimento) foi obtido como um óleo branco. ES LC-MS m/z = 259,1(M+H+).1H NMR (DMSO-d) δ:9,5-10,2 (br, 1H), 7,2-7,8 (br, 1H), 4,22 (s, 2H), 4,15 (2H, t, J = 4,7 Hz), 2,06 (2H, t, J = 5,9 Hz), 1,281,62 (m, 8H), 1,10-1,20 (m, 2H).
[00651] Exemplo 25: Síntese de 14-butil-5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4, 6- diazaciclotetradecano-2,7-diona (Composto CC)
[00652] Em geral, o Composto CC-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando oct-1-en-4-ol em vez de pent-1-en-3-ol e usando (Z)-benzil hex-5-enamido (metiltio)metilenocarbamato em vez de (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto CC-1, (Z)-benzil ((E)-14-butil-4- trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4, 6-diazaciclotetradec-11-en-5-ilideno) carbamato, foi obtido como um óleo incolor (930 mg, 2,09 mmol, 79% de rendimento). ES LC-MS m/z = 447,1 (M+H+). 1H NMR (DIMETIL SULFÓXIDO-d6) δ: 9,81 (s, 1H), 7,39-7,30 (m, 5H), 5,21-5,20 (m, 2H), 4,95-4,85 (m, 3H), 4,44 (br s, 1H)), 4,18 (br s, 1H), 4,05-4,00 (m, 2H), 2,36 (br s, 1H), 2,16-1,98 (m, 8H), 1,69-1,51 (m, 4H), 1,29-1,15 (m, 8H), 0,87-0,84 (m, 3H).
[00653] Oct-1-en-4-ol: Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foi carregado com pentanal (10 g, 116,28 mmol) em tetra- hidrofurano (seco, 100 mL). A mistura foi adicionada gota a gota de brometo de alilmagnésio (116,28 mmol) em tetra-hidrofurano (120 mL) a -30°C. A reação foi aquecida à temperatura ambiente por 2 horas e extinta com cloreto de amônio aquoso Sat. (60 mL), extraído com acetato de etil (80 mL x 3), lavada com água (60 mL x 1) e salmoura (60 mL), seca e evaporada, destilada sob vácuo a 124 °C (banho de óleo) para dar oct-1-en-4-ol (5,1 g, 34% de rendimento) como um óleo incolor. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,85-5,78 (m, 1H), 5,044,96 (m, 2H), 4,40-4,39 (m, 1H), 3,44-3,43 (m, 1H), 2,11-2,07 (m, 2H), 1,37-1,20 (m, 6H), 0,88-0,81 (m, 3H).
[00654] (Z)-Benzil hex-5-enamido (metiltio) metilenocarbamato: Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com ácido hex-5-enóico (800 mg, 7,02 mmol) e HUTU (4 g, 10,53 mmol) em diclorometano (15 mL) foi adicionado gota a gota (Z)-benzil amino (metiltio)metilenocarbamato (1,65 g, 7,37 mmol) e DIPEA (1,81 g, 14,04 mmol) em DCM (5 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi agitada à RT durante 1 h. A reação foi adicionada DCM (100 mL), lavada com água (30 mL x 3) e salmoura (40 mL), seca e evaporada, purificada por cromatografia flash (40 G) eluindo com (PE:EA/0% -18%), para dar (Z) -benzil hex-5-enamido (metiltio) metilenocarbamato (1,8 g, 5,63 mmol, 80% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 321,0 (M+H+). 1H NMR (DIMETIL SULFÓXIDO-d6) δ: 11,20 (s, 1H), 7,40-7,32 (m, 5H), 5,80-5,74 (m, 1H), 5,08- 4,96 (m, 4H), 2,36-2,33 (t, J=14,8 Hz, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,04-1,98 (m, 2H), 1,62-1,55 (m, 2H).
[00655] O Composto CC foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, começando no Composto CC-1. 14-Butil-5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclotetradecano-2,7-diona (Composto CC; 319,1 mg, 1,02 mmol, 46% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 315,1 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,74 (br s, 1H), 7,39 (br s, 1H), 4,80-4,78 (t, J=5,6 Hz, 1H), 4,53-4,90 (m, 1H), 3,93- 3,89 (m, 1H), 2,18-2,13 (m, 1H), 1,96-1,90 (m, 1H), 1,70-1,64 (m, 2H), 1,54-1,44 (m, 2H), 1,33-1,05 (m, 12H), 0,87-0,84 (t, J=13,6 Hz, 3H).
[00656] Exemplo 26: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclopentadecano-2,7-diona (Composto DD)
[00657] Em geral, o Composto DD foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando but-3-enil 2-(trideuteriometilamino)acetato em vez de L-2 e usando (Z)-terc-butil het-6- enamido(metiltio)metilenocarbamato (ver Exemplo 17) em vez de (Z)-terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato. O composto DD-1, (Z)-terc-butil ((E)-4- trideuteriometil-2, 7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclopentadec-12-en-5-ilideno) carbamato, foi obtido como um óleo amarelo pálido (600 mg, 1,62 mmol), 75% de rendimento). ES LC- MS m/z = 371,1 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d) δ: 9,78 (br s, 1H), 5,36-5,34 (m, 2H), 4,17-4,03 (m, 4H), 2,29-2,28 (m, 2H), 2,26-2,09 (m, 2H), 1,98-1,95 (m, 2H), 1,50-1,32 (m, 13H).
[00658] But-3-enil 2-(trideuteriometilamino)acetato foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9 descrito para síntese do Composto M-a usando but-3-en-1-ol em vez de pent-4- en-2-ol, para fornecer but-3 -enil 2-(N-trideuteriometil-4-nitrofenilsulfonamido) acetato, que foi convertido em but-3-enil 2-(trideuteriometilamino)acetato. But-3-enil 2-(N- trideuteriometil-4-nitrofenilssulfonamido) acetato foi obtido como um sólido amarelado pálido (1,6 g, 4,83 mmol, 67% de rendimento). ES LC-MS m/z =332,0 (M+H+), 349,0 (M+H2O+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 8,43-8,40 (m, 2H), 8,09-8,06 (m, 2H), 5,76-5,69 (m, 1H), 5,11-5,03 (m, 2H), 4,12 (s, 2H), 4,06-4,03 (t, J=6,4Hz, 2H), 2,29-2,24 (q, J=6,8 Hz 2H). Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com but-3-enil 2-(N-trideuteriometil-4-nitrofenilsulfonamido) acetato (2,1 g, 6,34 mmol) e Cs2CO3 (4,12 g, 12,69 mmol) em ACN:THF (10:1, 80 mL) foi adicionado 4- metilbenzenotiol (1,57 g, 12,69 mmol) à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 45 °C por 1,5 h. A mistura foi filtrada, evaporada, purificada por SGC (PE: EA/10:1 -^ DCM:MeOH/10:1) para obter but-3-enil 2-(trideuteriometilamino) acetato (930 mg, 6,37 mmol) 46% de rendimento) como um óleo amarelado claro. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,835,73 (m, 1H), 5,13-5,03 (m, 2H), 4,11-4,06 (m, 2H), 3,02 (s, 2H), 2,36-2,31 (m, 2H), 1,92 (s, 1H).
[00659] Etapa 1. Síntese do Composto DD-2. O Composto DD-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto DD-1. (Z)-terc-Butil 4-trideuteriometil-2,7- dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclopentadecan-5-ilidenocarbamato foi obtido como um óleo incolor (Composto DD-2; 210 mg, 0,78 mmol, 34% de rendimento). ES LC-MS m/z = 373,2 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d) δ: 9,88 (s, 1H), 4,19 (s, 4H), 2,19-2,17 (m, 2H), 1,52-1,50 (m, 4H), 1,36-1,31 (m, 17H).
[00660] Etapa 2. Síntese do Composto DD
[00661] O Composto DD foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto DD-2. 5-Imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclopentadecano-2,7-diona como um sólido branco (Composto DD; 80,2 mg, 0,29 mmol, 37% de rendimento). ES LC-MS m/z = 273,1 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d) δ: 9,67 (br s, 1H), 7,37 (br s, 1H), 4,23-4,14 (m, 4H), 2,01-1,98 (t, J=6,4 Hz 2H), 1,59 (s, 2H), 1,50-1,46 (m, 2H), 1,29-1,25 (m, 8H).
[00662] Exemplo 27: Síntese de diazaciclotridecano-2,7-diona (Composto EE)
[00663] Em geral, o Composto EE-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 (Z)-benzil metiltio(pent-4- de (Z) -terc-butil dec-9- (Z)-benzil ((E)-14-butil-4- trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4, 6-diazaciclotetradec-11-en-5-ilideno) carbamato, foi obtido como um óleo incolor (270 mg, 0,72 mmol, 53% de rendimento). ES LC-MS m/z = 377,1 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,89 (s, 1H), 7,39-7,29 (m, 5H), 5,32-5,16 (m, 2H), 4,92 (s, 2H), 4,26 (s, 4H), 2,23 -2,15 (m, 6H).
[00664] O Composto EE foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, começando no Composto EE-1. A 5-amino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclotridecano-2,7-diona (Composto EE; 69,7 mg, 0,28 mmol, 41% de rendimento) foi obtida como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 245,1 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,64 (br s, 1H), 7,40 (br s, 1H), 4,22-4,05 (m, 2H), 4,05 (s, 2H), 2,07-2,04 (m, 2H), 1,701,64 (m, 2H), 1,53-1,40 (m, 4H), 1,25-1,20 (m, 2H).
[00665] Exemplo 28: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclotridecano-2,7-diona (Composto FF)
[00666] Em geral, o Composto FF-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando non-1-en-4-ol em vez de pent-1-en-3-ol e usando (Z)-benzil metiltio(pent-4- enamido) metilenocarbamato (ver Exemplo 20) em vez de (Z) -terc-butil dec-9- enamido(metiltio)metilenocarbamato. O composto FF-1, (Z)-benzil ((E)-4-trideuteriometil- 2,7-dioxo-13-pentil-1-oxa-4,6-diazaciclotridec-10-en-5-ilideno) carbamato, foi obtido como um sólido amarelo pálido (600 mg, 1,34 mmol, 67% de rendimento). ES LC-MS m/z = 447,1 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,90 (s, 1H), 7,36-7,29 (m, 5H), 5,28-5,21 (m, 2H), 4,974,86 (m, 3H), 4,45-4,06 (m, 2H), 2,29-1,96 (m, 6H), 1,48-1,47 (d, J=4,4 Hz, 2H), 1,23 (s, 7H), 0,86-0,83 (t, J=6,8 Hz, 3H).
[00667] Non-1-en-4-ol: a um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com hexanal (10 g, 100 mmol) em tetra-hidrofurano (100 mL) foi adicionado gota a gota brometo de alilmagnésio (100 mL, 100 mmol) a -20°C. Depois a mistura foi aquecida até a temperatura ambiente durante 2 horas. A reação foi extinta com cloreto de amônio aquoso (60 mL), extraída com acetato de etil (100 mLx3), lavada com água (60 mL x 3) e salmoura (60 mL), seca e evaporada em bruto. O produto bruto foi destilado com banho de óleo (110 ~ 120 °C) para obter non-1-en-4-ol (5 g, 35,21 mmol, 35% de rendimento) como um óleo incolor. 1H NMR (CDCl3) δ: 5,85-5,79 (m, 1H), 5,02-4,96 (m, 2H), 4,42-4,40 (m, 1H), 3,46-3,42 (m, 1 H), 2,11-2,08 (q, J=6 Hz, 2H), 1,40-1,25 (m, 8H), 0,87-0,80 (m, 3H).
[00668] O Composto FF foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, começando no Composto FF-1. A 5-amino-4-trideuteriometil-13-pentil-1-oxa-4,6- diazaciclotridecano-2,7-diona (Composto FF; 239,7 mg, 0,763 mmol, 56% de rendimento) foi obtida como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 315,2 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,61 (br s, 1H), 7,40 (br s, 1H), 4,94-4,90 (m, 1H), 4,37 (d, J=16,4 Hz, 1H), 3,78 (m, J=16,8 Hz 1H), 2,49-2,18 (m, 1H), 1,91-1,85 (m, 1H), 1,71-1,04 (m, 16H), 0,86-0,83 (t, J=13,6 Hz, 3H).
[00669] Exemplo 29: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometilguanidino-18-dimetil-1- oxa-4,6-diazaciclooctadecano-2,7-diona (Composto GG)
[00670] Etapa 1. Uma mistura de (Z)-benzil amino(metiltio)metilenocarbamato (1 g, 5,88 mmoL), 1-[Bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridínio 3-óxido hexafluorofosfato (2,68 g, 7,05 mmoL) e uma solução de ácido dec-9-enoico (1,45 g, 6,47 mmol), N,N-Di-isopropiletilamina (1,52 g, 11,76 mmoL) em diclorometano (35 mL) foi agitada a rt por 2h. Água (40 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com diclorometano (40 mL *3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por flash (éter de petróleo : etil acetato / 10:1) para proporcionar (Z)-benzil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato (GG-1, 1,88 g, 86% de rendimento) como sólido branco . ES LC-MS m/z = 377,1 (M+H+).
[00671] Etapa 2. Uma mistura de Composto GG-1 (1,88 g, 5 mmoL), 2-metilpent-4- en-2-il 2- (trideuteriometilguanidino)acetato (820 mg, 4,7 mmoL) e uma solução de trietilamina (1,42 g, 14,1 mmoL) em N,N-Dimetilformamida (40 mL) foi agitada à rt. Uma mistura de dicloreto de mercúrio (1,4 g, 5,2 mmoL) foi adicionada, a mistura foi agitada à rt durante a noite. Água (40 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com etil acetato (40 mL x 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. Oresíduo foi purificado por flash (éter de petróleo: Etil acetato/5:1) para fornecer (Z)-2-metilpent-4-en-2-il 2-(2-(benziloxicarbonil)-3-dec-9-enoil-1- trideuteriometilguanidino)acetato (GG-2, 1,8 g, 72% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 503,3 (M+H+).
[00672] Etapa 3. Uma mistura de Composto GG-2 (1 g, 2 mmoL) e Grubbs (II) (170 mg, 0,2 mmoL) em diclorometano (1 L) foi agitada a 50 °C por 2 h. O orgânico combinado foi concentrado. O resíduo foi purificado por flash (éter de petróleo: Etil acetato/5:1) para fornecer (Z)-benzil ((E)-4--trideuteriomethylguanidino-18-dimetil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6- diazaciclo-octadec-14-en-5-ilideno)carbamato (750 mg, 79% de rendimento) como óleo amarelo pálido. ES LC-MS m/z = 475,2 (M+H+).
[00673] Etapa 4. Síntese do Composto GG
[00674] O Composto GG foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, começando no Composto GG-1. 5-imino-4-trideuteriometilguanidino-18-dimetil-1-oxa-4,6- diazaciclooctadecano-2,7-diona (Composto GG; 40 mg, 25% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 343,2 (M+H+).1H NMR (DMSO-d) δ:9,4-10,1 (br, 1H), 7,0-7,7 (br, 1H), 4,28 (s, 2H), 2,06 (2H, t, J=7,0 Hz), 1,70-1,82 (m, 2H), 1,46-1,55 (m,2H), 1,38 (s, 6H), 1,20-1,5 (m, 16H).
[00675] Exemplo 30: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-16,16-Dimetil-1-oxa- 4,6-diazaciclo-hexadecano-2,7-diona (Composto HH)
[00676] Em geral, o Composto HH-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando 2-metil-hept-6-en-2-ol (ver Exemplo 17) em vez de pent-1-en-3-ol e usando (Z)- benzil hex-5-enamido(metiltio)metilenocarbamatover Exemplo 25 em vez de (Z)-terc-butil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato. Composto HH-1, (Z)-benzil ((E)-4- trideuteriometil-16,16-dimetil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-hexadec-11-en-5- ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo amarelo (600 mg, 71% de rendimento). ES LC- MS m/z = 447 (M+1).
[00677] O Composto HH foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, começando no Composto HH-1. 5-Imino-4-trideuteriometil-16,16-Dimetil-1-oxa-4,6- diazaciclo-hexadecano-2,7-diona (155 mg, 37% de rendimento) foi obtida como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 315 (M+1). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,94 (s, 1H), 7,38 (s, 1H), 4,30 (s, 2H), 2,15 - 2,03 (m, 2H), 1,81 (s, 2H), 1,53 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 1,36 (s, 6H), 1,20 (t, J = 24,5 Hz, 10H).
[00678] Exemplo 31: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometilguanidino-17-metil-1- oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7-diona formato (Composto JJ) .
[00679] Em geral, o Composto JJ-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando hept-6-en-2-il 2-(trideuteriometilguanidino)acetato em vez do Composto L-2 e usando (Z)- benzil-hept-6-enamido-(metiltio)-metilenocarbamato (ver Exemplo 17) em vez de (Z)-terc- butil dec-9-enamido (metiltio)metilenocarbamato. O Composto JJ-1, (Z)-benzil ((E)-4- trideuteriometilguanidino-17-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadec-12-en-5- ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo amarelo pálido (500 mg, 53% de rendimento). ES LC-MS m/z = 447,2 (M+H+).
[00680] Hept-6-en-2-il 2-(trideuteriometilguanidino)acetato : Uma mistura de hept-6- en-2-il 2-(N-trideuteriometilguanidino-4-nitrofenilsulfonamido)acetato (2,04g, 5,47 mmoL), p-tiocresol (814 mg, 6,56 mmoL), carbonato de césio (2,67 g, 8,2 mmoL) em acetonitrila (20 mL) e tetra-hidrofuran (2 mL) foi agitada a 45 °C por 1,5 h. A mistura de reação foi filtrada, os filtrados foram concentrados, o resíduo foi purificado por cromatografia (Metanol: Diclorometano/5:1) para proporcionar hept-6-en-2-il 2- (trideuteriometilguanidino)acetato (1 g, 97% de rendimento) com um líquido amarelo. 1H NMR (DMSO-d) δ:5,79-5,74 (m, 1H), 5,02-4,84 (m, 2H), 3,21 (s, 2H), 2,38 (s, 1H), 2,031,98 (m, 2H), 1,52-1,33 (m, 4H), 1,15 (s, 3H).
[00681] O Composto JJ foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, partindo do Composto JJ-1 usando Pd/C (20%). 5-Imino-4-trideuteriometilguanidino-17-metil-1- oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7-diona formato (Composto JJ; 310 mg, 44% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 315,2(M+H+).1H NMR (DMSO-d) δ:9,3-10,2 (br, 1H), 7,0-7,8 (br, 1H), 4,92-5,00 (m, 1H), 4,88 (1H, AB, J = 17,6 Hz), 3,26 ( 1H, AB, J = 17,7 Hz), 1,92-2,12 (m, 2H), 1,40-1,58 (m, 4H), 1,20-1,35 (m, 12H), 1,17 (3H, d, J = 6,4 Hz).
[00682] Exemplo 32: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometilguanidino-17-metil-1- oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7-diona formato (Composto KK)
[00683] Em geral, o Composto KK-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando hept-6-en-2-il 2-(trideuteriometilguanidino)acetato (ver Exemplo 31) em vez do Composto L-2 e usando (Z)-benzilmetiltio (non-8-enamido)metilenocarbamato em vez de (Z)-terc-butil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto KK-1, (E)-benzil ((E)-4-trideuteriometilguanidino-19-metil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclononadec-14-en-5- ilideno)carbamato, foi obtido como um líquido amarelo pálido (557 mg, 59% de rendimento). ES LC-MS m/z = 475,3 (M+H+).
[00684] Síntese de (Z)-Benzil metiltio(non-8-enamido)metilenocarbamato: Uma mistura de (Z)-benzil amino(metiltio)metilenocarbamato (1,44 g, 6,4 mmoL), 1- [Bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridínio 3-óxido hexafluorofosfato (1,65 g, 7,68 mmoL) e uma solução ácido non-8-enóico (1 g, 6,4 mmol), N,N-di- isopropiletilamina (2,92 g, 7,68 mmoL) em diclorometano (30 mL) foi agitada a rt por 2h. Água (60 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com diclorometano ( 60 mL *3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por flash (éter de petróleo: acetato de etil /10:1) para fornecer (Z)- benzil metiltio(non-8-enamido)metilenocarbamato (1,82 g,78% de rendimento) como um sólido branco . ES LC-MS m/z = 385,1(M+Na+).
[00685] O Composto KK foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, partindo do Composto KK-1 usando Pd/C (20%). 5-Imino-4-trideuteriometilguanidino-19-dimetil-1- oxa-4,6-diazaciclononadecano-2,7-dionaformato (Composto KK; 180 mg, 57% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 343,2(M+H+). 1H NMR (DMSO-d) δ:9,3-10,1 (br, 1H), 7,1-7,8 (br, 1H), 4,81-4,91 (m, 1H), 4,75 (1H, AB, J = 17,1 Hz), 3,78 ( 1H, AB, J = 17,4Hz), 1,98-2,15 (m, 2H), 1,40-1,60 (m, 4H), 1,17 (3H, d, J = 6,3Hz), 1,19-1,35 (m, 16H).
[00686] Exemplo 33: Síntese de (16S,17S)-5-imino-4-trideuterio metil-16, 17- dimetil-2,7-diona formato (Composto LL)
[00687] Em geral, o Composto LL-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando (2R,3S)-2,3-dimetilhept-6-en--il 2-(trideuteriometilguanidino)acetato em vez do Composto L-2 e usando (Z)-benzil-hex-5-enamido(metiltio)metilenocarbamato (ver Exemplo 25) em vez de (Z)-terc-butil dec-9-enamido (metiltio)metilenocarbamato. Composto LL-1, (Z)-benzil ((16S, 17S,Z)-4-trideuterio metil-16, 17-dimetil-2, 7-dioxo-1- oxa-4, 6-diazaciclo-heptadec-11-en-5-ilideno) carbamato, foi obtido como um líquido incolor (1,16 g, 99% de rendimento). ES LC-MS m/z = 461,2 (M+H+).
[00688] Síntese de (2R,3S)-2,3-dimetil-hept-6-enil-2-(trideuteriometilguanidino) acetato:
[00689] Etapa a. A uma suspensão agitada de doses de Mg (1,94 g, 81,1 mmoL) em tetra-hidrofurano (200 mL), 5-bromopent-1-eno (10 g, 67,57 mmoL), foi adicionado iodo (um pouco) e a reação foi iniciada ocasionalmente aquecendo com uma pistola de calor e após 10 min de agitação a esta temperatura. Uma solução de (2R,3S)-2,3-dimetiloxirano (4,86 g, 67,57 mmoL) em tetra-hidrofurano(50 mL) foi adicionada gota a gota. A mistura resultante foi agitada a -30 °C durante 2 h. Foi adicionado cloreto de amônio saturado e a mistura com acetato de etil (200 mL x 3). O orgânico combinado foi lavado com salmoura seco sobre sulfato de sódio anidro, concentrado e destilado para proporcionar (2S, 3S)-3- metiloct-7-en-2-ol (LL-a, 4,15 g, 43% de rendimento) como um amarelo líquido. 1H NMR (DMSO-d) δ:5,80-5,78 (m, 1H), 5,01-4,91 (m, 2 H), 4,25 (s, 1H), 3,5 (s, 1H), 2,01-1,98 (m, 2H), 1,41-1,29 (m,4H), 0,99-0,98 (m, 3H), 0,80-0,78 (m,3H).
[00690] Etapa b. Uma mistura de ácido 2-(N-trideuteriometilguanidino-4- nitrofenilsulfonamido)acético (3 g, 10,8mmoL) em cloreto de tionil (25 mL) e diclorometano (25 mL) foi agitada a 60 °C por 1h. O orgânico combinado foi concentrado. Em seguida, o composto resultante foi dissolvido em diclorometano (50 mL) e (2S,3S)-3-metiloct-7-en-2- ol (1,85 g, 13 mmoL), trietilamina(3,28 g, 32,5 mmoL) foi adicionada e a mistura resultante foi agitada à rt durante 1 h. Água (50 mL) foi adicionada e a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por flash (éter de petróleo: Etil acetato/5:1) para fornecer (2R,3S)-3-metiloct-7-en-2-il 2- (N-trideuteriometilguanidino-4-nitrofenilsulfonamido)acetato (LL-b, 2,89 g, 66% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 424,1(M+Na+).
[00691] Etapa c. Uma mistura de (2R,3S)-3-metiloct-7-en-2-il 2-(N- trideuteriometilguanidino-4-nitrofenilsulfonamido)acetato (2,89 g, 7,2 mmoL),p-tiocresol (1,07 mg, 8,65 mmoL), carbonato de césio (3,52 g, 10,8 mmoL) em a cetonitrila(40 mL) e tetra-hidrofurano (4 mL) foi agitado a 45 °C por 1,5 h. A mistura de reação foi filtrada, os filtrados foram concentrados, o resíduo foi purificado por cromatografia (Metanol: Diclorometano/5:1) para fornecer (2S,3R) -2,3-dimetil-hept-6-enil 2- (trideuteriometilguanidino)acetato (LL-c, 1,2 g, 80% de rendimento) como um líquido amarelo. 1H NMR (DMSO-d) δ:5,79-5,75 (m,1H), 5,02-4,92 (m, 2H), 4,81-3,21 (m, 1H), 2,00-1,99 (m,2H), 1,98 (s,1H), 1,72-1,50 (m, 1H), 1,37-1,31 (m,3H), 1,31-1,30 (m, 3H), 0,86-0,84 (m,3H).
[00692] Síntese do Composto LL. O Composto LL foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, partindo do Composto LL-1 (mistura). (16S, 17S)-5-Imino-4-trideuterio metil-16, 17-dimetil-2,7-diona (mistura Composto LL; 188 mg, 46% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 329,2(M+H+). 1H NMR (DMSO-d) δ:9,4- 10,1 (br, 1H), 7,1-7,7 (br, 1H), 4,92-5,01 (m, 1H), 4,80 (1H, AB, J = 17,5 Hz), 3,86 ( 1H, AB, J = 17,6Hz), 1,94-2,12 (m, 2H), 1,12 (3H, d, J = 6,6Hz), 0,86 (3H, d, J = 6,9Hz), 1,041,64 (m, 5H)
[00693] Exemplo 34: Síntese de 8-imino-7-trideuteriometil-4-oxa-7,9-diazaspiro [2.17]icosano-5,10-diona (Composto MM)
[00694] Em geral, o Composto MM-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando 1- (pent-4-enil)ciclopropil 2-(trideuteriometilamino)acetato (ver Exemplo 23) em vez do Composto L-2 e usando (Z)-benzilmetiltio(oct-7-enamido)metilenocarbamato em vez de (Z)-terc-butil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto MM-1, (Z)- benzil ((E)-7-trideuteriometil-5,10-dioxo-4-oxa-7,9-diazaspiro[2.17]icos-16-en-8- ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo amarelo (900 mg, 81% de rendimento). ES LC- MS m/z = 473 (M+1).
[00695] (Z)-Benzil metiltio(oct-7-enamido)metilenocarbamato: Uma mistura de (Z)- benzilamino(metiltio)metilenocarbamato (1,7 g, 7,74 mmol), ácido oct-7-enoico (1,0 g, 7,04 mmol), HATU (3,2 g, 8,45 mmol) e TEA (2,9 ml, 21,12 mmol) em diclorometano (20 ml) à rt durante a noite. Foi adicionada água (50 ml) e a mistura foi extraída com diclorometano (50 ml x 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo:acetato de etil = 10:1) para fornecer (Z)-benzil metiltio(oct-7-enamido)metilenocarbamato (1,9 g, 77% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 349(M+1).
[00696] O Composto MM foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, partindo do Composto MM-1 usando Pd/C (20%). 8-Imino-7-trideuteriometil-4-oxa-7,9- diazaspiro[2.17]icosano-5,10-diona (Composto MM; 101,7 mg, 31% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 341 (M+1). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,79 (s, 1H), 7,74 - 6,95 (m, 1H), 4,33 (s, 2H), 2,14-1,95 (m, 2H), 1,74-1,61 (m, 2H), 1,57-1,47 (m, 2H), 1,30 (t, J = 19,8 Hz, 14H), 0,80 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 0,64 (q, J = 5,9 Hz, 2H).
[00697] Exemplo 35: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-16-ciclopropil-1-oxa- 4,6-diazaciclo-hexadecano-2,7-diona (Composto NN)
[00698] Em geral, o Composto NN-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando 1- (pent-4-enil)ciclopropil 2-(trideuteriometilamino)acetato (ver Exemplo 23) em vez do Composto L-2 e usando (Z)-benzil-hex-5-enamido-(metiltio)-metilenocarbamato (ver Exemplo 25) em vez de (Z)-terc-butil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato. Composto NN-1, (Z)-benzil ((E)-4-trideuteriometil-16-ciclopropil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6- diazaciclo-hexadec-11-en-5-ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo incolor (370 mg, 0,83 mmol, 91% de rendimento). ES LC-MS m/z = 445,3 (M+H+).
[00699] O Composto NN foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, começando no Composto NN-1. 5-Imino-4-trideuteriometil-16-ciclopropil-1-oxa-4,6- diazaciclo-hexadecano-2,7-diona (Composto NN; 145 mg, 0,46 mmol, 57% de rendimento) foi obtida como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 313,2 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,83 (br s, 1H), 7,40 (br s, 1H), 4,25 (br s, 1H), 2,12-2,09 (t, J=6,0 Hz, 2H), 1,70-1,62 (m, 4H), 1,43-1,41 (m, 2H), 1,26 (s, 6H), 1,18-1,17 (m, 2H), 0,80-0,78 (d, J=6,4 Hz, 3H), 0,64-0,60 (t, J=6,0 Hz, 2H).
[00700] Exemplo 36: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-16-ciclopropil-1-oxa- 4,6-diazaciclo-hexadecano-2,7-diona (Composto OO)
[00701] Em geral, o Composto OO-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando 1- (pent-4-enil)ciclopropil 2-(trideuteriometilamino)acetato (ver Exemplo 23) em vez do Composto L-2 e usando (Z)-benzil metiltio(pent-4-enamido)metilenocarbamato (ver Exemplo 20) em vez de (Z)-terc-butil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto OO-1, (Z)-benzil ((E)-4-trideuteriometil-15-ciclopropil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6- diazaciclopentadec-10-en-5-ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo incolor (644 mg, 1,49 mmol, 80% de rendimento). ES LC-MS m/z = 431 (M+H+). 1H NMR (DIMETIL SULFÓXIDO-d6) δ: 9,99 (s, 1H), 7,38-7,31 (m, 5H), 5,37-5,36 (m, 2H), 4,95 (m, 2H), 4,16 (s, 2H), 2,22 (m, 4H), 2,00-1,98 (s, 2H), 1,49 (s, 2H), 1,23 (s, 2H), 0,81 (m, 2H), 0,66 (m, 2H).
[00702] O Composto OO foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1, começando no Composto OO-1. 5-Imino-4-trideuteriometil-15-ciclopropil-1-oxa-4,6- diazaciclopentadecano-2,7-diona formato (268 mg, 0,90 mmol, 60% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 299,2 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 4,20 (s, 2H), 2,07-2,04 (m, 2H), 1,67-1,63 (m, 2H), 1,51-1,48 (m, 2H), 1,41-1,40 (m, 2H), 1,29-1,24 (m, 6H), 0,81-0,78 (m, 2H), 0,64-0,60 (m, 2H).
[00703] Exemplo 37: Síntese de cloridrato de (S)-5-imino-17-metil-4-(metil-d3)-1- oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (Composto PP)
[00704] Etapa 1. Síntese de PP-1. (S)-2-metiloxirano (2,1 mL, 30 mmol) foi dissolvido em 70 mL de THF anidro sob uma atmosfera de árgon. À solução foi adicionado CuBr (214 mg, 1,5 mmol) e foi resfriado a 0°C. Adicionou-se, gota a gota, durante 15 minutos, brometo de 3-Butenilmagnésio (0,5 M em THF, 70 mL, 35 mmol) à mistura da reação com agitação. Depois de finalizada a adição, deixou-se a mistura de reação aquecer até a temperatura ambiente durante 30 minutos. Depois que a reação foi julgada concluída pelo LCMS, NH4Cl sat. aq. (100 mL) foi adicionado e a fase orgânica foi separada. Os orgânicos foram combinados, secos (MgSO4) e concentrados sob vácuo para proporcionar (S)-hept-6-en-2-ol em bruto. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel com um gradiente de 5% a 40% de acetato de etil em hexanos para produzir (S)-hept-6- en-2-ol puro (Composto PP-1) como um óleo incolor: 2,42 g, 70% de rendimento, ES LCMS m/z = 115,3 (M+H+). 1H NMR (400 MHz, CHLOROFORM-d) δ ppm 5,82 (ddt, J = 17,03, 10,26, 6,68, 6,68 Hz, 1 H) 5,02 (dq, J = 17,16, 1,73 Hz, 1 H) 4,96 (ddt, J = 10,20, 2,16, 1,10, 1,10 Hz, 1 H) 3,76 - 3,87 (m, 1 H) 2,02 - 2,16 (m, 2 H) 1,36 - 1,57 (m, 6 H) 1,20 (d, J = 6,02 Hz, 3 H)
[00705] Etapa 2. Síntese de PP-2. O Composto PP-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8, etapas 1 e 2, partindo do ácido 2-[(4-nitrofenil)sulfonil- (trideuteriometil)amino]acético e do Composto PP-1. (S)-hept-6-en-2-il (metil-d3)glicinato (Composto PP-2; 0,87 g, 42% de rendimento) foi obtido como um óleo. ES LC-MS m/z = 189,1 (M+H+).
[00706] Etapa 3. Síntese de PP-3. O composto PP-3 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8, etapas 3 e 4, partindo do Composto PP-2 e Composto O-2. terc-Butil ((S,5Z,12E)-17-metil-4-(metil-d3)-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadec-12-en-5- ilideno)carbamato (Composto PP-3; 675 mg, 64% de rendimento) foi obtido como um óleo. ES LC-MS m/z = 413,3 (M+H+).
[00707] Etapa 4. Síntese do Composto PP.
[00708] O Composto PP foi sintetizado de acordo com o Exemplo 13, etapa 1 e etapa 2 do Composto PP-3 usando Pd/C (10%) na etapa 1. Cloridrato de (S)-5-imino-17-metil-4- (metil-d3)-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (Composto PP; 193 mg, 88% de rendimento) foi obtido como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 315,2 (M+H+). 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11,43 (s, 1H), 9,31 (d, J = 55,0 Hz, 2H), 5,25 (d, J = 19,1 Hz, 1H), 4,96 (s, 1H), 4,35 (d, J = 18,8 Hz, 1H), 2,72 (s, 1H), 2,33 (s, 1H), 1,51 (s, 4H), 1,37 - 1,04 (m, 15H).
[00709] Exemplo 38: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclooctadecano-2,7-diona (Composto QQ)
[00710]
[00711] Em geral, o Composto QQ-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando but-3-enil 2-(trideuteriometilamino)acetato (ver Exemplo 26) em vez de L-2 e usando terc-butil (Z)-(dec-9-enamido(metiltio)metileno)carbamato (ver Exemplo 7) em vez de (Z)-terc-butil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto QQ-1, (Z)-terc- butil ((E)-4-trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclooctadec-15-en-5- ilideno)carbamato, foi obtido como um óleo preto (2,165 g, 80%). ES LC-MS m/z = 413,4 (M+H+).
[00712] Etapa 1. Síntese do Composto QQ-2. O Composto QQ-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto QQ-1 usando Pd/C (20%). (Z)-terc-Butil 4- trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclooctadecan-5-ilidenocarbamato foi obtido como um óleo amarelo (Composto QQ-2; 1,3 g, 60%). ES LC-MS m/z = 415,4 (M+H+).
[00713] Etapa 2. Síntese do Composto QQ
[00714] O Composto QQ foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto QQ-2. 5-Imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclooctadecano-2,7-diona foi obtido como um sólido branco (Composto QQ; 510 mg, 52%). ES LC-MS m/z = 315,4 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d) δ:4,35 (s,2 H), 4,10-4,07 (t,2 H), 2,07-2,03 (t, 2 H), 1,60-1,59 (m, 2H), 1,52-1,49 ( t, 2 H), 1,30-1,26 (t, 14 H).
[00715] Exemplo 39: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6-diazaciclo- hexadecano-2,7-diona (Composto RR) e sal de ácido fórmico de 5-imino-4- trideuteriometil-1-oxa-4,6-diazaciclo-hexadecano-2,7-diona (Composto SS)
[00716] Em geral, o Composto RR-1 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando pent-4-enil 2-(trideuteriometilamino)acetato em vez de L-2 e usando (Z)-terc-butil het-6-enamido(metiltio)metilenocarbamato (ver Exemplo 10) em vez de (Z)-terc-butil dec- 9-enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto RR-1, (Z)-terc-butil ((E)-4- trideuteriometil-2, 7-dioxo-1-oxa-4, 6-diazaciclo-hexadec-12-en-5-ilideno) carbamato, foi obtido como um óleo incolor (290 mg, 0,75 mmol, 59% de rendimento). ES LC-MS m/z = 385,3 (M+H+).
[00717] Síntese de pent-4-enil 2-(trideuteriometilamino) acetato
[00718] Etapa a. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação e entrada de nitrogênio foi carregado com CDI (4,4 g, 27,14 mmol) em TBME (15 mL) foi aquecido a ~ 40 °C. Uma solução de ácido 2-(terc-butoxicarbonilamino) acético (5 g, 28,57 mmol) em TBME (20 mL) foi preparada e adicionada à pasta. Após 0,5 hora, foi adicionado gota a gota pent-4-en-1-ol (2,33 g, 27,14 mmol) durante 20 minutos. A reação foi agitada a 40 °C por 2 horas. A reação foi resfriada à temperatura ambiente, adicionou-se HCl 1 N de solução (12 mL), separada e a camada orgânica foi lavada com HCl 1 N de solução (12 mL x 1) e água (12 mL x 1), seca e evaporada para dar pent-4-enil 2-(terc-butoxicarbonilamino) acetato (4,3 g, 17,7 mmol, 60%) como um óleo incolor. ES LC-MS m/z = 144,2 (M-99+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,8505,74 (m, 1H), 5,05-4,99 (m, 3H), 4,16-4,12 (t, J=6,8 Hz, 2H), 3,88 (s, 2H), 2,13- 2,08 (m, 2H), 1,76-1,71 (q, J= 6,8 Hz, 2H), 1,43 (s, 9H).
[00719] Etapa b. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com hidrogênio de sódio (1,5 g, 39,51 mmol) em THF: DMF (10:1, 45 mL) foi agitado em banho de gelo por 20 minutos. Em seguida, a reação foi adicionada gota a gota pent-4-enil 2-(terc-butoxicarbonilamino)acetato (4,8 g, 19,75 mmol) em THF: DMF (10:1, 2 mL) em banho de gelo por 15 minutos. Em seguida, foi adicionado gota a gota iodeto de deutério (8,6 g, 59,26 mmol) em banho de gelo. A reação foi aquecida a RT e agitada por 2 horas. A reação foi adicionada água gota a gota (20 mL) em banho de gelo e foi adicionado acetato de etil (150 mL), separado e lavado com água (30 mL x 2) e salmoura (30 mL), seco e evaporado, purificado por SGC (PE:EA/90:1) para dar pent-4-enil 2- (terc-butoxicarbonil (trideuteriometil) amino) acetato (1,6 g, 6,15 mmol, 31%) como um óleo amarelado pálido. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,84-5,77 (m, 1H), 5,05-4,97 (m, 2H), 4,10-4,04 (m, 2H), 3,953,92 (t, J=4,8 Hz, 2H), 2,10-2,05 (m, 2H), 1,69-1,64 (m, 2H), 1,39-1,33 (m, 9H).
[00720] Etapa c. Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com pent-4-enil 2-(terc-butoxicarbonil (trideuteriometil) amino) acetato (1,6 g, 6,15 mmol) em HCl/dioxano (20 mL) foi agitado à temperatura ambiente 2 h. A mistura foi evaporada para dar pent-4-enil 2-(trideuteriometilamino)acetato (1,5 g, 7,65 mmol, 125% de rendimento) como um sólido branco. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,57 (br s, 2H), 5,85-5,75 (m, 1H), 5,07-4,96 (m, 2H), 4,18-4,13 (t, J=7,2 Hz, 2H), 3,92 (s, 2H), 2,12-2,07 (q, J=6,8 Hz, 2H), 1,72-1,65 (m, 3H).
[00721] Etapa 1. Síntese do Composto RR-2. O Composto RR-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto RR-1. (Z)-terc-butil 4-trideuteriometil-2, 7- dioxo-1-oxa-4, 6-diazaciclo-hexadecan-5-ilidenocarbamato foi obtido como um sólido branco (Composto RR-2; 380 mg, 0,75 mmol, 131% de rendimento). O produto em bruto foi utilizado diretamente na etapa seguinte sem purificação. ES LC-MS m/z = 387,3 (M+H+).
[00722] Etapa 2. Síntese do Composto RR e Composto SS
[00723] Um frasco de fundo redondo equipado com uma barra de agitação foi carregado com o Composto RR-2 (380 mg, 0,75 mmol) em DCM (4 mL) foi adicionado ácido trifluoroacético (1 mL), agitado à temperatura ambiente por 1 hora. A reação foi evaporada, dissolvida em THF (3 mL), purificada por pré-HPLC (FA), liofilizada para dar sal de ácido fórmico de 5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4, 6-diazaciclo-hexadecano-2, 7- diona (Composto SS; 151,6 mg, 0,53 mmol, 51% de rendimento) como um sólido branco ES LC-MS m/z = 287,3 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 10,58 (br s, 1H), 9,42-9,24 (m, 2H), 4,54 (s, 2H), 4,19 (s, 2H), 1,59 (s, 4H), 1,25-1,19 (m, 12H) e 5-imino-4-trideuteriometil- 1-oxa-4, 6-diazaciclo-hexadecano-2, 7-diona (base livre) (Composto RR; 55,4 mg, 0,19 mmol, 18% de rendimento) como um branco sólido. ES LC-MS m/z = 287,3 (M+H+). 1H NMR (DMSO-d6) δ: 9,82 (br s, 1H), 7,41 (br s, 1H), 4,35 (s, 2H), 4,16-4,13 (t, J=4,8 Hz, 2H), 2,10-2,07 (t, J=6,0 Hz, 2H), 1,56-1,51 (q, J=6,0 Hz, 4H), 1,26-1,18 (m, 10H).
[00724] Exemplo 40: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-17-ciclobutano-1-oxa- 4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7-diona formato (Composto TT)
[00725] Etapa 1. Uma mistura de ácido 2-(N-trideuteriometil-4- nitrofenilsulfonamido)acético (2,8 g, 10 mmol) e dicloreto sulfuroso (50 ml) em diclorometano (50 ml) foi aquecido a 60 graus e agitado por 2 hs. A mistura foi concentrada, o resíduo foi dissolvido com diclorometano (50 ml) que foi adicionado a uma mistura de 1- (but-3-enil)ciclobutanol (1,27 g, 10 mmol) e trietilamina (2,02 g, 20 mmol) em diclorometano (50 ml) em água gelada e depois agitada à temperatura ambiente por 1 h. Foi adicionada água (50 ml) e a mistura foi extraída com diclorometano (50 ml x 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo: acetato de etila = 10:1) para proporcionar 1-(but-3-enil)ciclobutil 2-(N-trideuteriometil-4-nitrofenilsulfonamido)acetato (TT-1;2,43 g, 6 3%) como um óleo amarelo. ES LC-MS m/z = 407,7(M+Na+).
[00726] Etapa 2. Uma mistura de Composto TT-1 (2,43 g, 6,3 mmol), 4- metilbenzenotiol (1,56 g, 12,6 mmol) e Carbonato de césio (4,11 g, 12,6 mmol) em acetonitrila (30 ml) e tetra-hidrofurano (3 ml) foi agitada a 45 graus por 2 hs. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia (diclorometano: metanol = 10:1 com hidróxido de amônio a 0,1%) para proporcionar 1-(but-3-enil)ciclobutil 2-(trideuteriometilamino)acetato (TT-2; 1,06 g, 84%) como um óleo amarelo. 1H NMR (DMSO-d) δ: 5,03-4,93 (m, 2 H), 3,37 (s, 2 H), 2,32-2,29 (m, 2 H), 2,27-2,22 (m, 2 H), 2,21-2,17 (m, 4 H), 2,038-2,031 (m, 1 H), 1,83 (m, 1 H), 1,65 (m, 1 H).
[00727] Etapa 3. Uma mistura de (Z)-benzil amino(metiltio)metilenocarbamato (3,15 g,14,1 mmol), ácido oct-7-enóico (2 g, 14,1 mmol), O-(7-Azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'- tetrametilurônio hexafluorofosfato (6,43 g, 16,9 mmol) e N,N-Di-isopropil-etilamina (3,64 g, 28,2 mmol) em diclorometano (50 ml) foi agitada a rt durante a noite. Foi adicionada água (50 ml) e a mistura foi extraída com diclorometano (60 ml * 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo:acetato de etila = 10:1) para proporcionar (Z)-benzil metiltio(oct-7-enamido)metilenocarbamato (TT-3; 4,43 g, 90%) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 370,8(M+Na+).
[00728] Etapa 4. Uma mistura de Composto TT-3 (1,4 g, 4 mmol), Composto TT-2 (805 mg, 4 mmol) e trietilamina (808 mg, 8 mmol) em N,N-Dimetilformamida (20 ml) foi agitada à temperatura ambiente, cloreto de mercúrio (II) (1,08 g, 4 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada durante a noite. Foi adicionada água (100 ml) e a mistura foi extraída com acetato de etil (50 ml x 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo: acetato de etil = 5:1) para proporcionar (Z)-1-(pent-4-enil)ciclobutano 2-(2- (benziloxicarbonil)-1-trideuteriometilguanidino-3-oct-7-enoilguanidino)acetato (TT-4; 1,5 g, 75%) como um óleo incolor. ES LC-MS m/z = 522,8 (M+Na+).
[00729] Etapa 5. Uma mistura de Composto TT-4 (1,7 g, 3,6 mmol) e Grubbs II (305 mg, 0,36 mmol) em diclorometano (1500 ml) foi agitada a 50 graus por 2 h sob N2, resfriamento à rt, etoxieteno (5 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 30 min. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo:acetato de etil = 5:1) para proporcionar (Z)-benzil ((E)-4-trideuteriometil-17-ciclobutano-2,7-dioxo- 1-oxa-4,6-diazacicloheptadec-12-en-5-ilideno)carbamato (TT-5; 533 mg, 33%) como um óleoamarelo. ES LC-MS m/z = 473,7 (M+H+).
[00730] Etapa 6. Síntese do Composto TT
[00731] Uma mistura de Composto TT-5 (533 mg, 1,13 mmol) e Pd/C (106 mg, 20%) em etanol (10 ml) foi agitada à rt sob balão H2 durante a noite. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados. O resíduo foi purificado por pré-HPLC (40% de acetonitrila em água com 0,2% de ácido fórmico) para proporcionar 5-imino-4- trideuteriometil-17-ciclobutano-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (54 mg, 11%) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 341,4 (M+H)+. 1H NMR (DMSO-d) δ: 4,31 (s, 2 H), 2,22-2,17 (m, 2 H), 2,13-2,08 (m, 2 H), 2,05-2,02 (m, 2 H), 1.87-1,83 (m, 2 H), 1,781,75 (m, 1 H), 1,64-1,61 (m, 1 H), 1,53-1,49 (m, 2 H), 1,28-1,22 (m,12 H).
[00732] Exemplo 41: Síntese de 10-imino-9-trideuteriometil-2,6-dioxa-9,11- diazaspiro[4.16]henicosano-7,12-diona (Composto UU)
[00733] Etapa 1. A uma suspensão agitada de magnésio (6,1 g, 251 mmol) em tetra- hidrofurano (30 ml), foi adicionado 4-bromobut-1-eno (3,0 g, 22,2 mmol) e a reação foi iniciada por aquecimento ocasional com uma pistola de calor. O restante de 4-bromobut-1- eno (30,0 g, 222 mmol) foi adicionado gota a gota à temperatura de efluxo após 1 h de agitação a esta temperatura. arrefecendo a 0 graus, foi adicionada gota a gota uma solução de di-hidrofurano-3(2H)-ona (17,2 g, 200 mmol) em tetra-hidrofurano (140 ml). Após aquecimento ao refluxo durante 1 h, a mistura foi vertida em cloreto de amôniasat. aq./gelo 1:1. A mistura foi extraída com acetato de etil (300 ml*3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por uma coluna vigreux curta para proporcionar 3-(but-3-enil)tetra-hidrofuran-3-ol (UU-1; 9,4 g, 33%) como um óleo amarelo. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,81-5,87 (m, 1 H), 4,92-5,04 (m, 2 H), 4,61 (ds, 1 H), 3,71-3,84 (m, 2 H), 3,42-3,52 (m, 2 H), 2,09-2,16 (m, 2 H), 1,721,79 (m, 2 H), 1,58-1,62 (m, 2 H).
[00734] Etapa 2. Uma mistura de ácido 2-(N-trideuteriometil-4- nitrofenilsulfonamido)acético (2,77 g, 10 mmol) e dicloreto sulfuroso (15 ml) em diclorometano (15 ml) foram aquecidos a 60 graus e agitados por 2 hs. A mistura foi concentrada, o resíduo foi dissolvido com diclorometano (50 ml) que foi adicionado a uma mistura de Composto UU-1 (1,7 g, 12 mmol) e trietilamina (3,03 g, 30 mmol) em diclorometano (20 ml) em gelo-água e depois agitada à temperatura ambiente por 1 h. Foi adicionada água (50 ml) e a mistura foi extraída com diclorometano (50 ml * 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo: acetato de etil = 5:1) para proporcionar 3-(but-3-enil)tetra-hidrofuran-3-il 2-(N-trideuteriometil-4- nitrofenilsulfonamido)acetato (UU-2; 3,2 g, 80%) como um óleo incolor. ES LC-MS m/z = 423,7 (M+Na+).
[00735] Etapa 3. Uma mistura de Composto UU-2 (3,12 g, 7,78 mmol), 4- metilbenzenotiol (1,93 g, 15,56 mmol) e Carbonato de césio (5,07 g, 5,56 mmol) em acetonitrila (40 ml) e tetra-hidrofurano (4 ml) foi agitada a 45 graus por 2 hs. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia (diclorometano:metanol = 10:1 com hidróxido de amônio a 0,1%) para proporcionar 3-(but-3-enil)tetra-hidrofuran-3-il 2- (trideuteriometilamino)acetato (UU-3; 1,3 g, 77%) como um óleo vermelho. 1H NMR (DMSO-d6) δ: 5,81-5,87 (m, 1 H), 4,925,04 (m, 2 H), 4,61 (s, 1 H), 3,72-3,84 (m, 2 H), 3,42-3,52 (m, 2 H), 2,09-2,16 (m, 2 H), 1,72-1,79 (m, 2 H), 1,60 (t, J = 8,0 Hz, 2 H).
[00736] Etapa 4. Uma mistura de (Z)-benzil metiltio(oct-7- enamido)metilenocarbamato (2,09 g, 6,0 mmol), Composto UU-3 (1,3 g, 6,0 mmol) e trietilamina (1,21 g, 12 mmol) em N,N-Dimetilformamida (30 ml) foi agitada à temperatura ambiente, foi adicionado cloreto de Mercúrio (II) (1,82 g, 6,6 mmol) e a mistura foi agitada por 2 horas. Foi adicionada água (150 ml) e a mistura foi extraída com acetato de etil (50 ml * 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo:acetato de etil = 5:1) para proporcionar (Z)-3-(but-3-enil)tetra-hidrofuran-3-il 2-(2-(benziloxicarbonil)-1- trideuteriometil-3- oct-7-enoilguanidino)acetato (UU-4; 2,7 g, 90%) como um óleo amarelo. ES LC-MS m/z = 516,8 (M+H+).
[00737] Etapa 5. Uma mistura de Composto UU-4 (2,0 g, 3,9 mmol) e Grubbs II (330 mg, 0,39 mmol) em diclorometano (2 L) foi agitada a 50 graus por 2 h sob N2,O resfriamento à temperatura ambiente, etoxieteno (5 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 0,5 h. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por Pré-TLC (éter de petróleo:acetato de etil = 1:1) para proporcionar (Z)-benzil ((E)-9-trideuteriometil-7,12-dioxo-2,6-dioxa- 9,11-diazaspiro[4.16]henicos-18-en-10-ilideno)carbamato (UU-5; 1,5 g, 78%) como um óleo amarelo. ES LC-MS m/z = 488,8 (M+H+).
[00738] Etapa 6. Síntese de Composto UU
[00739] Uma mistura de (Z)-benzil ((E)-9-trideuteriometil-7,12-dioxo-2,6-dioxa- 9,11-diazaspiro[4.16]henicos-18-en-10-ilideno)carbamato (740 mg, 1,51 mmol) e Pd/C (150 mg, 20%) em etanol10 ml) foram agitados à rt sob balão de H2 durante a noite. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados. O resíduo foi purificado por pré-HPLC (20-50% de acetonitrila em água com 0,2% de ácido fórmico) para proporcionar 10-imino- 9-trideuteriometil-2,6-dioxa-9,11-diazaspiro[4.16]henicosane-7,12-diona (Composto UU; 350 mg, 65%) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 356,9 (M+H)+. 1H NMR (DMSO- d) δ: 4,44 (d, J = 17,6 Hz, 1 H), 4,30 (d, J = 17,6 Hz, 1 H), 3,97 (d, J = 10,0 Hz, 2 H), 3,763,79 (m, 2 H), 3,62 (d, J = 10,0 Hz, 1 H), 2,23-2,30 (m, 1 H), 1,85-2,09 (m, 5 H), 1,50-1,55 (m, 2 H) 1,23-127 (m, 12 H).
[00740] Exemplo 41: Síntese de 5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclotetracosano-2,7-diona formato (Composto VV)
[00741] Etapa 1. Uma mistura de ácido dec-9-enóico (1,7 g, 10 mmol) em tetra- hidrofurano (40 ml) foi agitada a 0 oC, foi adicionado lentamente hidreto de alumínio e lítio (760 mg, 20 mmol). A mistura foi agitada à rt durante a noite. Foi adicionada água e a mistura foi filtrada, os filtrados foram extraídos com acetato de etil (50 ml x 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada para produzir dec-9-en-1-ol (VV-1; 1,0 g, 64%) como um óleo incolor. 1H NMR (CDCl3) δ: 5,77-5,86 (s, 1 H), 4,93-5,03 (m, 2 H), 3,65 (t, J = 6,4 Hz, 2 H), 2,03-2,08 (m, 2 H), 1,54-1,64 (m 2 H), 1,26-1,45 (m, 10 H).
[00742] Etapa 2. Uma mistura de ácido 2-(N-trideuteriometil-4- nitrofenilsulfonamido)acético (1,77 g, 6,4mmol) e dicloreto sulfuroso (20 ml) em diclorometano (20 ml) foram aquecidos a 60 graus e agitados por 2 hs. A mistura foi concentrada, o resíduo foi dissolvido com diclorometano (20 ml) que foi adicionado a uma mistura de dec-9-en-1-ol (1 g, 6,4 mmol) e trietilamina (1,29 g, 12,8 mmol) em diclorometano ( 30 ml) em água gelada e depois agitada à temperatura ambiente por 1 h. Foi adicionada água (50 ml) e a mistura foi extraída com diclorometano (50 ml * 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo:acetato de etil = 10:1) para proporcionar dec-9-enil 2-(N-trideuteriometil-4-nitrofenilsulfonamido)acetato (VV-2; 1,4 g, 53%) como um óleo amarelo. ES LC-MS m/z = 438,1 (M+Na+).
[00743] Etapa 3. Uma mistura de Composto VV-2 (1,4 g, 3,37 mmol), 4- metilbenzenotiol (837 mg, 6,75 mmol) e Carbonato de césio (2,19 g, 6,75 mmol) em aetonitrila (20 ml) e tetra-hidrofurano (2 ml) foi agitada a 45 graus por 2 hs. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados. O resíduo foi purificado por cromatografia (diclorometano:metanol = 10:1 com hidróxido de amônio a 0,1%) para proporcionar dec-9-enil 2- (trideuteriometilamino)acetato ( VV-3; 660 mg, 85%) como um óleo amarelo. 1H NMR (DMSO-d) δ: 4.92-5,01 (m, 2 H), 4,01-4,05 (m, 2 H), 1,99-2,01 (m, 2 H), 1,54-1,56 (m, 2 H), 1,26-1,33 (m, 11 H).
[00744] Etapa 4. Uma mistura de Composto GG-1 (1,08 g, 2,87 mmol, ver Exemplo 29), Composto VV-3 (660 mg, 2,87 mmol) e trietilamina (580 mg, 5,74 mmol) em N,N- Dimetilformamida (15 ml) foi agitada à temperatura ambiente, foi adicionado cloreto de Mercúrio (932 mg, 3,4 mmol) e a mistura foi agitada durante a noite. Foi adicionada água (100 ml) e a mistura foi extraída com acetato de etil (50 ml * 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo: acetato de etil = 8:1) para fornecer (Z)-dec-9-enil 2-(2- (benziloxicarbonil)-3-dec-9-enoil-1- trideuteriometilguanidino)acetato (VV-4; 1,35 g, 84%) como um óleo incolor. ES LC-MS m/z = 559,4 (M+H+).
[00745] Etapa 5. Uma mistura de Composto VV-4 (1,35 g, 2,42 mmol) e Grubbs II (205 mg, 0,242 mmol) em diclorometano (1350 ml) foi agitada a 50 graus por 2 h sob N2, resfriamento à rt, etoxieteno (5 ml) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 30 min. A mistura foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia (éter de petróleo:acetato de etil = 5:1) para proporcionar (Z)-benzil ((E)-4-trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6- diazaciclotetracos-15-en-5-ilideno)carbamato (VV-5; 1,0 g, 78%) como um sólido amarelo. ES LC-MS m/z = 531,4 (M+H+).
[00746] Etapa 6. Síntese do Composto VV
[00747] Uma mistura de Composto VV-5 (500 mg, 0,94 mmol) e Pd/C (100 mg, 20%) em etanol (10 ml) foi agitada à rt sob balão de H2 durante a noite. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados. O resíduo foi purificado por pré-HPLC (40% de acetonitrila em água com 0,2% de ácido fórmico) para proporcionar 5-imino-4- trideuteriometil-1-oxa-4,6-diazaciclotetracosano-2,7-diona formato (130 mg, 35%) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 399,4 (M+H)+. 1H NMR (DMSO-d) δ: 4,19 (s, 2 H), 4,02-4,05 (m, 2 H), 1,99-2,06 (m, 2 H), 1,53-1,57 (m, 2 H), 1,45-1,48 (m, 2 H), 1,18-1,27 (m, 26 H).
[00748] Exemplo 42: Síntese de 10-imino-9-trideuteriometilguanidino -6-oxa-9,11- diazaspiro[4.16]henicosano-7,12-diona formato (Composto WW)
[00749] Etapa 1. A uma suspensão agitada de aparas de Mg (7,14 g, 297,6 mmoL) em Tetra-hidrofurano (20 mL), 4-bromobut-1-eno(3 g, 22,5 mmoL) foi adicionado e a reação foi iniciada por aquecimento ocasional com uma pistola de calor. O restante do 4-bromobut- 1-eno(30 g, 225,5 mmoL) foi adicionado gota a gota à temperatura de refluxo e após 10 min de agitação a esta temperatura. Uma solução de ciclopentanona(20,8 g, 248 mmoL) em Tetra-hidrofurano (140 mL) foi adicionada gota a gota. Após aquecimento ao refluxo por 1h. Foi adicionado cloreto de amônio saturado e a mistura com acetato de etil (200 mL x 3).O orgânico combinado foi lavado com salmoura seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado para proporcionar 1-(but-3-enil)ciclopentanol (WW-1; 4,7 g, 13% de rendimento) como um líquido amarelo. 1H NMR (DMSO-d) δ:5,87-5,80 (m, 1H), 5,014,88 (m, 2H), 4,00 (s, 1H), 2,14-2,08 (m, 2H), 1,69-1,66(m, 2H), 1,54-1,46 (m, 6H), 1,431,38 (m, 2H).
[00750] Etapa 2. Uma mistura de ácido 2-(N-trideuteriometilguanidino-4- nitrofenilsulfonamido)acético (2,77 g, 10 mmoL) em cloreto de tionil(15 mL) e diclorometano(15 mL) foi agitada a 60 °C por 1h. O orgânico combinado foi concentrado. Em seguida, o composto resultante foi dissolvido em diclorometano (30 mL) e o Composto WW-1 (1,54 g, 11 mmoL), trietilamina(3,03 g, 30 mmoL) foi adicionado e a misturaresultante foi agitada à rt durante 1 h. Foi adicionada água (50 mL) e a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi purificado por flash(éter de petróleo : Etil acetato/5:1) para fornecer 1-(but-3- enil)ciclopentil 2-(N-trideuteriometilguanidino-4-nitrofenilsulfonamido)acetato (WW-2; 2,83 g, 71 % de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 422,4(M+Na+).
[00751] Etapa 3. Uma mistura de Composto WW-2 (5,7 g, 14,32 mmoL), p- Tiocresol(2,1 g, 17,18 mmoL), carbonato de césio (7 g, 21,5 mmoL) em acetonitrila (70 mL) e tetra-hidrofurano (7 mL) foi agitada a 45 ° C por 1,5 h. A mistura de reação foi filtrada, os filtrados foram concentrados, o resíduo foi purificado por cromatografia (Metanol: Diclorometano/5:1) para proporcionar 1- (but-3-enil) ciclopentil 2- (trideuteriometilguanidino)acetato (WW-3; 2,6 g, 87% de rendimento) como um líquido amarelo. 1H NMR (DMSO-d) δ:5,82-5,75 (m, 1H), 5,02-4,91 (m, 2H), 3,15 (s, 2H), 2,051,99 (m, 6H), 1,67-1,54 (m, 6H).
[00752] Etapa 4. Uma mistura de (Z)-benzil metiltio(oct-7- enamido)metilenocarbamato (3 g, 8,62 mmoL), Composto WW-3 (1,84 g, 8,62 mmoL) e uma solução de trietilamina (1,74 g, 17,24 mmoL) em N,N-Dimetilformamida (40 mL) foi agitada à rt. Uma mistura de dicloreto de mercúrio (2,8 g, 10,34 mmoL) foi agitada, a mistura foi agitada à rt por 2 h. Áagua (200 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com acetato de etil (200 mL x 3), a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. o resíduo foi purificado por cromatografia(Éter de petróleo: Etilacetato/5:1) para proporcionar (Z)-1-(but-3-enil)ciclopentil 2- (2-(benziloxicarbonil)-1- trideuteriometilguanidino-3-oct-7-enoilguanidino)acetato (WW-4; 4,14 g, 93% de rendimento) como um líquido branco. ES LC-MS m/z = 515,6 (M+H+).
[00753] Etapa 5. Uma mistura de Composto WW-4 (1 g, 1.95 mmoL) e Grubbs(II) (165 mg, 0,195 mmoL) em diclorometano (1 L) foi agitada a 50 °C por 2 h. O orgânico combinado foi concentrado. O resíduo foi purificado por flash para proporcionar (Éter de petróleo : Etil acetato/ 10:1) para propocionar (Z)-benzil ((E)-9-trideuteriometilguanidino- 7,12-dioxo-6-oxa-9,11-diazaspiro[4.16]henicos-18-en-10-ilideno)carbamato (WW-5; 800 g, 84% de rendimento) como um óleo amarelo. ES LC-MS m/z = 487,2 (M+H+).
[00754] Etapa. 6. Síntese do Composto WW
[00755] Uma mistura de Composto WW-5 (745 mg, 1,5 mmoL) e Paládio a 10% em Carbono (150 mg, 20%) em etanol (10 mL) foi agitada sob balão de H2 por 2 h. A mistura de reação foi filtrada e os filtrados foram concentrados. O resíduo foi purificado por Pré- HPLC(FA) para proporcionar 10-imino-9-trideuteriometilguanidino-6-oxa-9,11- diazaspiro[4.16]henicosano-7,12-diona formato (Composto WW; 210 mg, 40% de rendimento) como um sólido branco. ES LC-MS m/z = 355,2(M+H+).1H NMR (DMSO-d) δ:10,0-9,5 (s, 1H), 7,75-7,25 (s, 1H), 4,30 (s, 1H), 2,08-2,04 (m, 4H), 1,86 (s, 1H), 1,651,49 (m, 8H), 1,24-1,22 (m, 12H).
[00756] Exemplo 43: Síntese de cloridrato de 5-imino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclo-heptadecano-2,7-diona (Composto 15)
[00757] Em geral, o Composto 15 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 8 usando hex-5-enil 2-(trideuteriometilamino)acetato (ver Exemplo 21) em vez de L-2 e usando terc- butil (Z)-(hept-6-enamido(metiltio)metileno)carbamato (ver Exemplo 11) em vez de (Z)- terc-butil dec-9-enamido(metiltio)metilenocarbamato. O Composto 15-1, (Z)-terc-butil ((E)- 4-trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazacicloheptadec-12-en-5-ilideno), foi obtido como um óleo amarelo (5,2 g, 93%). ES LC-MS m/z = 399,3 (M+H+).1H NMR (CD3Cl-d4) δ: 5,32-5,36 (m, 2 H), 4,19-4,23 (m, 2 H), 4,11-4,15 (m, 2 H), 2,28 (s, 2 H), 2,0-2,05 (m, 4 H), 1,59-1,68 (m, 4 H), 1,50 (s, 9 H), 1,29-1,47 (m, 4 H).
[00758] Etapa 1. Síntese do Composto 15-2. O Composto 15-2 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 1 do Composto 15-1 usando Pd/C (20%). (Z)-terc-Butil 4- trideuteriometil-2,7-dioxo-1-oxa-4,6-diazaciclo-heptadecan-5-ilidenocarbamato foi obtido como um óleo amarelo (Composto 15-2; 4,0 g, 76%). ES LC-MS m/z = 401,3 (M+H+).1H NMR (CD3Cl-d4) δ: 4,13-4,24 (m, 4 H), 2,32-2,36 (m, 2 H), 1,55-1,75 (m, 4 H), 1,50 (s, 9 H), 1,26-1,47 (m, 12 H).
[00759] Etapa 2. Síntese do Composto 15
[00760] O Composto 15 foi sintetizado de acordo com o Exemplo 9, etapa 2, começando no Composto 15-2. O cloridrato de 5-amino-4-trideuteriometil-1-oxa-4,6- diazaciclo-heptadecano-2,7-diona foi obtido como um sólido branco (Composto 15; 60 mg, 42%). ES LC-MS m/z = 301,1 (M+H+).1H NMR (DMSO-d6) δ: 11,57 (ds, 1 H), 9,37 (ds, 1 H), 9,29 (ds, 1 H), 4,82 (s, 2 H), 4,14-4,18 (m, 2 H) 1,52-1,58 (m, 4 H), 1,26-1,40 (m, 14 H).
[00761] Os procedimentos padrão e transformação química e métodos relacionados são bem conhecidos dos versados na técnica, e esses métodos e procedimentos foram descritos, por exemplo, em referências padrão como Fiesers' Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York, NY, 2002; Organic Reactions, vols. 1-83, John Wiley and Sons, New York, NY, 2006; March J. and Smith M., Advanced Organic Chemistry, 6th ed., John Wiley and Sons, New York, NY; and Larock R.C., Comprehensive Organic Transformations, Wiley-VCH Publishers, New York, 1999. Todos os textos e referências aqui citados são incorporados por referência na sua totalidade.
[00762] As reações utilizando compostos com grupos funcionais podem ser realizadas em compostos com grupos funcionais que podem ser protegidos. Por exemplo, os grupos funcionais de guanidina podem ser instáveis sob certas condições e, portanto, precisam ser protegidos. Um composto "protegido ou derivados significa derivados de um composto em que um ou mais sítios ou sítios reativos ou grupos funcionais são bloqueados com grupos de proteção. Os derivados protegidos são úteis na preparação dos compostos da presente divulgação ou em si mesmos; os derivados protegidos podem ser o agente biologicamente ativo. Um exemplo de um texto abrangente que lista grupos de proteção adequados pode ser encontrado em T. W. Greene, Protecting Groups in Organic Synthesis, 3rd edition, John Wiley & Sons, Inc. 1999.
[00763] Outras pró-drogas de creatina podem ser sintetizadas usando o procedimento descrito acima pela seleção do material de partida apropriado.
[00764] Exemplo 44: Determinação da clivagem enzimática de pró-drogas in vitro
[00765] Para as pró-drogas de creatina, é geralmente desejável que a pró-droga permaneça intacta (isto é, não clivada) enquanto estiver na circulação sistêmica e seja clivada (isto é, para liberar a droga parental) no tecido alvo. Um nível útil de estabilidade pode pelo menos em parte ser determinado pelo mecanismo e farmacocinética da pró-droga. Um nível útil de labilidade pode pelo menos em parte também ser determinado pela farmacocinética da pró-droga e da droga parental (por exemplo, creatina) na circulação sistêmica e/ou no trato gastrointestinal, se administrado por via oral. Em geral, pró-drogas que são mais estáveis no trato gastrointestinal (como pode ser avaliado pela estabilidade no fluido gástrico simulado, fluido intestinal simulado, frações S9 intestinais, pancreatina ou ensaios de lavagem colônica) e são mais instáveis no plasma de camundongo, plasma de rato, plasma humano, camundongo, rato e/ou fígado humano S9, microssomas hepáticos e/ou preparações de hepatócitos podem ser úteis como uma pró-droga administrada por via oral. Em geral, pró-drogas que são mais estáveis no plasma de camundongo, plasma de rato, plasma humano, camundongo, rato e/ou fígado humano S9, microssomas hepáticos e/ou preparações de hepatócitos e que são mais lábeis em homogenatos de células de tecido alvo ou preparações isoladas de células de tecido alvo, como cérebro, músculo e frações S9, podem ser úteis como pró-drogas administradas sistemicamente e/ou podem ser mais eficazes na liberação de uma pró-droga no tecido alvo. Em geral, as pró-drogas que são mais estáveis em diferentes tampões fisiológicos de pH podem ser mais úteis como pró-drogas. Em geral, as pró-drogas que são mais lábeis nos homogenatos das células-alvo do tecido e/ou nas preparações do isolado das células do tecido-alvo, tais como frações do cérebro, músculo e S9, podem ser clivados intracelularmente para liberar a droga parental para um tecido-alvo. Os resultados de testes, como os descritos neste exemplo, para determinar a clivagem enzimática ou química de pró-drogas in vitro podem ser utilizados para selecionar pró- drogas para testes in vivo.
[00766] As estabilidades das pró-drogas de creatina podem ser avaliadas em um ou mais sistemas in vitro usando uma variedade de preparações seguindo métodos conhecidos na técnica. As condições experimentais úteis para os estudos in vitro estão descritas na Tabela 1. A pró-droga é adicionada a cada preparação em triplicado. Tabela 1: Condições Padrãoa para Pró-droga em Estudos de Estabilidade In Vitro e Metabolismo aFaixa de teste típica fornecida, a faixa pode ser excedida dependendo do uso clínico pretendido da pró-droga; bSistema gerador de NADPH, por exemplo, NADP+ 1,3 mM, glicose-6-fosfato 3,3 mM, 0,4 U/mL de glicose-6-fosfato desidrogenase, cloridrato de magnésio 3,3 mM e 0,95 mg/mL de fosfato de potássio, pH 7,4; cExemplos: homogenato de tecido cerebral, homogenato de tecido muscular; dO ensaio pode ser realizado com e sem adição de fluorofosfonato de di-isopropil (DIFP, inibidor de serina protease) para determinar se a degradação é mediada por uma serina protease, por exemplo, carboxilesterase (CES)
[00767] A estabilidade química das pró-drogas de creatina em solução salina tamponada com fosfato (PBS), fluido intestinal simulado (SIF) sem pancreatina, fluido gástrico simulado (SGF) sem pepsina foi determinada por LC-UV, LC-CAD, LC-UV-CAD ou LC-MS/MS, conforme apropriado. As pró-drogas de creatina da presente divulgação (50 μM) foram incubadas a 37 °C, de acordo com os protocolos descritos, e os níveis de pró- drogas foram comparados entre t = 0, t = 15, t = 60 et = 120 minutos por área de pico para determinar a porcentagem restante em t = 120 minutos (2h). A estabilidade metabólica das pró-drogas foi testada em ensaios padrão de microssomas de plasma e fígado de diferentes espécies (humanos e camundongos mostrados), incluindo ratos, cães e macacos cynomolgus. Ver Tabelas 2A-2C.
[00768] A maioria das pró-drogas de creatina testadas mostrou boa estabilidade química e metabólica (Tabelas 2A-2C). As pró-drogas de creatina com ligação éster em COOH mostraram tendência a serem menos estáveis que as pró-drogas de creatina com COOH livre na estabilidade plasmática e dos microssomas, ensaios de PBS e SIF.
[00769] Protocolo de estabilidade de PBS, SIF e SGF para triagem:
[00770] As pró-drogas (50 μM) foram incubadas em PBS, FaSSIF (biorelevante) ou FaSSGF (Biorelevant) a 37 °C. Em pontos de tempo selecionados (por exemplo, 0, 15, 60 e 120 min), as amostras foram transferidas para frascos e imediatamente analisadas quanto à área do pico de pró-drogas usando LC-UV-CAD.
[00771] Protocolo de estabilidade plasmática para macrociclos de triagem iniciais (Método A):
[00772] O plasma congelado foi descongelado colocando-o rapidamente a 37°C e centrifugado a 3.000 rpm por 8 minutos para remover coágulos. Em seguida, o sobrenadante foi pipetado e reunido como plasma a ser usado no experimento. O plasma foi colocado em gelo até ser utilizado. Os compostos de teste e a solução de pico de compostos de referência foram preparados como uma solução de pico de compostos de teste de 2,5 mM A: Adicione 20 μL de solução estoque de compostos de teste de 10 mM a 60 μL de DMSO. A solução de pico B 0,1 mM foi preparada: Adicione 40 μL da solução de pico A a 960 μL de tampão fosfato de sódio 0,05 mM com BSA a 0,5%. Em seguida, foram adicionados 10 μL da solução de pico B pré-aquecida aos poços designados para todos os pontos no tempo (0, 5, 15, 30, 60, 120 min). Durante 0 min, 400 μL de ACN contendo IS foram adicionados aos poços da placa de 0 min e depois 90 μL de plasma foram adicionados. 90 μL de plasma pré- aquecido foram adicionados aos poços designados para os pontos de tempo (0, 5, 15, 30, 60, 120 min) e o tempo foi iniciado. Aos 5, 15, 30, 60, 120 min, 400 μL de ACN contendo IS foram adicionados aos poços das placas correspondentes, respectivamente, para parar a reação. Após a extinção, as placas foram agitadas usando o vibrador (IKA, MTS 2/4) por 10 min (600 rpm/min) e depois centrifugadas a 5594 g por 15 min (Thermo Multifuge x 3R). 50 μL do sobrenadante foram transferidos de cada poço para uma placa de amostra de 96 poços contendo 120 μL de água ultra pura (Millipore, ZMQS50F01) e analisados por LC/MS.
[00773] Protocolo de estabilidade plasmática (Método B):
[00774] O plasma congelado foi descongelado em banho-maria a 37°C e, se necessário, ajustado para pH = 7,4 e depois pré-aquecido em uma incubadora a 37°C. O artigo de teste foi dissolvido em 10% DMSO/água e introduzido no plasma pré-plaqueado em placas de 96 poços a uma concentração final de 1 μM. Incubações distintas foram realizadas a 37°C e incluíram 5 pontos no tempo: t = 0, 2, 5, 15 e 30 min. As amostras foram batidas com volume 4x, água gelada a 20%/80% acetonitrila e centrifugadas a 4000 g por 10 min. O sobrenadante foi seco e reconstituído com água e analisado por LC-MS/MS. A meia- vida em minutos foi calculada.
[00775] Protocolo para estabilidade microssômica:
[00776] Para o composto de referência, foi preparada uma solução de injeção de 500 μM: adicione 10 μL de solução-mãe DMSO 10 mM a 190 μL de ACN. Foi preparada uma solução de pico de 1,5 μM em microssomas (0,75 mg/mL): adicione 1,5 μL de solução de pico 500 μM e 18,75 μL de microssomas de fígado 20 mg/mL em 479,75 μL de Tampão 0,1M de tampão de fosfato de potássio, EDTA 1,0 mM, pH 7,4 no gelo. Para o composto de teste, foi preparada uma solução de pico de 5 mM: adicione 10 μL de solução-mãe DMSO 10 mM a 10 μL de ACN. E depois foi preparada uma solução de pico de 15 μM em microssomas (0,75 mg/mL): adicione 1,5 μL de solução de pico 5 mM e 18,75 μL de microssomas de fígado 20 mg/mL em 479,75 μL de Tampão de fosfato de potássio 0,1 M, EDTA 1,0 mM, pH 7,4 no gelo. A solução estoque de NADPH (6 mM) foi preparada dissolvendo NADPH em tampão 0,1 M de tampão de fosfato de potássio, EDTA 1,0 mM, pH 7,4. 30 μL de solução de pico de 1,5 μM contendo solução de microssomas de 0,75 mg/mL foram dispensados nas placas de ensaio designadas para diferentes momentos (0-, 5, 10-, 20-, 30-min, 60-min, 60-min sem NADPH) no gelo. Durante 0 min, foram adicionados 135 μL de ACN contendo IS aos poços da placa de 0 min e depois foram adicionados 15 μL da solução de estoque NADPH (6 mM). 15 μL de solução de estoque de NADPH (6 mM) foram adicionados às amostras designadas como 0-, 5-, 10-, 20-, 30-min, 60-min; foram adicionados 15 μL de tampão 0,1 M de tampão de fosfato de potássio, EDTA 1,0 mM, pH 7,4, às amostras designadas como 60 minutos sem NADPH. Aos 5 min, 10 min, 20 min e 30 min, 60 min foram adicionados 135 μL de ACN contendo IS aos poços das placas correspondentes, respectivamente, para parar a reação. Após a extinção, as placas foram agitadas usando o vibrador (IKA, MTS 2/4) por 10 min (600 rpm/min) e depois centrifugadas a 5594 g por 15 min (Thermo Multifuge x 3R). 50 μL do sobrenadante de cada poço foram transferidos para uma placa de amostra de 96 poços contendo 50 μL de água ultra pura (Millipore, ZMQS50F01) e analisados por LC/MS.
[00777] Tabela S2. Estruturas
[00778] Tabela 2A: Estabilidade das pró-drogas de creatina *R6 quando Na, Li ou K. **Livre = base livre. ***NT = não testado. **** quando R1 é alquil ou alquenil, a contagem de carbono inclui o carbono carbonil ao qual R1 está ligado.
[00779] Tabela 2B: Estabilidade das pró-drogas de creatina
[00780] Tabela 2C: Estabilidade das pró-drogas de creatina
[00781] Exemplo 45: Determinação in vitro da liberação de creatina a partir de pró- drogas (liberação de d3-creatina)
[00782] Para avaliar a capacidade das pró-drogas de liberar creatina, e liberar preferencialmente a creatina da ciclização indesejada para a creatinina, as pró-drogas marcadas com d3 (grupo metil marcado com deutério) são incubadas com homogenatos cerebrais (por exemplo, camundongo, humano) especialmente preparados para preservar a atividade da FAAH ou com rFAAH para estudo de clivagem direta. O uso de pró-droga marcadas com d3 é essencial para distinguir a creatina derivada de pró-droga (d3-creatina) das altas concentrações de creatina endógena (não marcada). As incubações (37 oC) são realizadas em Tris 10 mM, pH 7,4, sacarose 0,25 M, EDTA 1 mM e DTT 1 mM para BH; Tris 125 mM, pH 9,0, EDTA 1 mM para clivagem direta com rFAAH para otimizar a atividade de FAAH. As pró-drogas são testadas em concentrações finais de 20 μM e 200 μM. Aproximadamente 3-4 mg de homogenato são usados para cada reação. O cofator (NADPH) é incluído em uma concentração final de 1 mM. A atividade de FAAH é confirmada pela conversão de 7-amino-4-metil-cumarina-araquidonamida em 7-amino-4- metil-cumarina por ensaio fluorescente. Os controles negativos incluem incubações sem homogenato de cérebro/rFAAH (mas com NADPH) ou homogenato de cérebro inativado por calor/rFAAH a 65 °C para avaliar a clivagem não enzimática de pró-drogas nas condições do ensaio e inibidor de FAAH PF044578845 na concentração de 1 μM. As incubações das pró-drogas são preparadas por adição de 8 μL da solução de estoque de pró- droga (500 ou 5000 μM em DMSO ou DMSO/metanol) para o ensaio tamponado, seguido pela adição de homogenato cerebral/rFAAH. Em momentos selecionados (por exemplo, 0, 30, 60 e 180 min), alíquotas de 45 μL são removidas e as reações são encerradas pela adição de 180 μL de acetonitrila gelada (80% ACN/20% água). As amostras são centrifugadas a 15890 xg por 10 minutos a 4 °C, seguidas de transferência dos sobrenadantes para armazenamento a -20 °C na pendência da análise LC-MS/MS. Os sobrenadantes da amostra são analisados por LC-MS/MS para determinação dos níveis de d3-pró-droga, d3-creatina e d3-creatinina.
[00783] As pró-drogas de creatina deuteradas foram testadas em 3 ensaios in vitro diferentes para avaliar a liberação e ciclização de d3-creatina (d3-Cr) para formar d3- creatinina (d3-Crn). Estes ensaios foram 1) clivagem direta com a enzima FAAH humana recombinante (rFAAH), 2) clivagem em homogenatos do cérebro de camundongos (MBH) e 3) homogenatos do cérebro humano (HBH).
[00784] A eficiência da clivagem das pró-drogas de creatina foi determinada pela porcentagem da liberação líquida de d3-Cr em μM (reação positiva subtraída do controle negativo de nenhum homogenato cerebral/rFAAH ou homogenato de cérebro inativado/rFAAH) sobre a concentração nominal de entrada de pró-droga 200 μM às 3h. A propensão à ciclização da creatinina foi determinada pela porcentagem de d3-Crn gerada em μM em reação positiva sobre a concentração nominal de entrada de pró-droga de 200 μM às 3h. Consulte as Tabelas 3A-3B.
[00785] Com base nos resultados in vitro, as pró-drogas de creatina da presente divulgação podem ser categorizados em 2 grupos. O primeiro grupo contém pró-drogas de creatina com cadeias de amidas de ácidos graxos entre C11 a C18 (na posição R1 na fórmula (I)) e com COOH livre não modificado (na posição R3 na fórmula (I)) geralmente liberam uma quantidade significativa de d3-Cr (> 23 %) e ciclização mínima de d3-Crn. O segundo grupo contém pró-drogas de creatina com cadeias amidas de ácidos graxos de C20 ou inferiores a C9 ou piridil e com COOH ligado ao éster alifático geralmente liberam pequena quantidade de d3-Cr (Composto 8, 10-HCl e 12-HCl, Tabela 3A) e predominantemente ciclizado em creatinina. Esses dados são consistentes com os dados de estabilidade metabólica e química nas Tabelas 2A-2C.
[00786] O estudoin Vitro de pró-drogas lineares de creatina (onde R1 e R6juntos não formam um anel), como os mostrados nas Tabelas 3A-3B, é instrutivo na avaliação do desenvolvimento de pró-drogas macrocíclicoas eficazes de creatina (onde R1 e R6 juntos formas um anel). Sem estar vinculado a nenhuma teoria, as pró-drogas lineares da creatina que mostram alta liberação de d3-Cr e minimizam a ciclização de d3-Crn pode indicar que uma pró-droga macrocíclica de creatina correspondente seria um bom candidato para alta liberação in vivo de creatina (ver Tabela 3B). Uma pró-droga macrocíclica de creatina que corresponde a uma pró-droga linear de creatina é uma pró-droga de macrociclo quando clivada no éster forneceria a pró-droga de creatina linear ou análogos intimamente relacionados (por exemplo, análogos hidroxilados) das pró-droga de creatina lineares.
[00787] As pró-drogas de creatina lineares são geralmente mais estáveis do que as pró-drogas correspondentes de creatina macrocílica nas condições de estudo in vitro de rFAAH. Por conseguinte, os inventores podem usar os dados de liberação de creatina obtidos a partir das pró-drogas lineares de creatina para orientar o desenvolvimento das pró-drogas macrocíclicas de creatina.
[00788] Tabela 3A: Liberação e ciclização In vitro d3-creatina (d3-Cr) para formar d3-creatinina (d3-Crn) *NT = não testado. **R1 is alquil ou alqunil, a contagem de carbono inclui o carbono carbonil ao qual R1 está ligado
[00789] Tabela 3B. LiberaçãoIn vitro d3-creatina (d3-Cr)
[00790] Exemplo 46: Captação de pró-droga de creatina in vitro e liberação de d3- creatina em culturas de células.
[00791] Procedimentos para células ARPE-19 (Tabela 4A)
[00792] As células ARPE-19 (#CRL-2302) foram obtidas da ATCC e semeadas a 350.000 células/poço em placas de 6 poços no dia anterior ao experimento de captação. As pró-drogas de creatina serão dissolvidas em solvente apropriado (ou seja, DMSO) na concentração de estoque de 5-10 mM e incubadas em 2,4 mL de meio sem soro (DMEM:F12 (ATCC:30-2006) por poço, nas concentrações finais de 10 μM e 50 μM por 1h e 6h a 370C/5% de CO2. Alterações morfológicas indicativas de viabilidade celular serão avaliadas por microscópios. Além disso, as pró-drogas serão incubadas apenas em meio sem soro (sem células) nas mesmas condições para determinar a estabilidade química.
[00793] No final da incubação, o sobrenadante será coletado de cada poço para avaliar a recuperação das pró-drogas. As células são então lavadas 3X com PBS. As placas, as pró- drogas no sobrenadante, as pró-drogas em meio sem soro são armazenadas a -80 °C até a colheita (dentro de 5 dias). No dia da extração, 130 uL de tampão de lise (Tris 10 mM, pH 7,4) com inibidores de protease isentos de EDTA são adicionados a cada poço e as células são removidas usando um raspador de células. Os lisados são ainda homogeneizados usando um pilão de mão e depois centrifugados a 16.000 g, 40 °C, por 10 minutos para coletar a fração do citosol. Os peletes serão armazenados a -80 0C até análises posteriores. Um volume 4X de solução de parada (80% ACN/20% água) será adicionado à fração citosol, sobrenadante e meio. As amostras serão centrifugadas a 15.890 g (13.000 rpm) a 4 °C por 10 min. O sobrenadante será coletado e armazenado a -80 °C dentro de 5 dias antes da análise por LC-MS/MS. As soluções de dosagem para cada pró-droga (10 μM) serão testadas para verificar a concentração. As células sozinhas com o veículo servirão como controles para avaliar o sinal de fundo para LC-MS/MS. Serão realizados dois experimentos independentes.
[00794] Nove pró-drogas de creatina amida de ácidos graxos foram testadas em células ARPE-19 humanas para avaliar a captação de pró-drogas e a liberação de d3-Cr no interior das células. Incubou-se 50 μM de pró-droga em meio de cultura com as células e as células foram colhidas às 6 h. A quantificação das pró-drogas, d3-Cr (d3-creatina) e d3-Crn (d3-creatinina) na fração do citosol foi corrigida para a concentração total de proteínas. Consulte Tabela 4A.
[00795] As pró-drogas de creatina amida de ácidos graxos com COOH livre apresentaram captação e liberação de d3-Cr nas células ARPE-19, enquanto as pró-drogas de piridil-Cr e pró-drogas de amida de ácido graxo com éster alifático ligado ao grupo COOH liberaram pequena quantidade de d3-Cr, consistente com dados de clivagem in vitro para esta subclasse de pró-drogas.
[00796] Tabela 4A. Captação de pró-droga de creatinain vitro e liberação de d3- creatina
[00797] Procedimentos para captação de pró-droga de creatina in vitro e liberação de creatina d3 em culturas de células: neurônios deficientes em fenocélulas CrT (Tabela 4B)
[00798] Human neurons were obtained by differentiation of iPSC-derived neural stem cells for 14 days. Os iPSCs foram obtidos da Phenocell Corporation. Neurons were cultured and differentiated to Day 10 and then frozen in liquid nitrogen. Os neurônios foram descongelados e substituídos a 1 x 106 por poço de células viáveis em placas revestidas com poli-ornitina/laminina em 2 ml de meio por poço. A diferenciação no meio Neuro1 completo com 2 ng/ml de FGF2 foi realizada por 4 dias adicionais com uma mudança completa do meio (90% do meio) no Dia 12. A activina A (concentração final de 20 ng/ml) foi introduzida nas culturas no Dia 11 e Dia 13.No dia do experimento (Dia 14), as pró-drogas (50 μM) foram incubadas com neurônios por 2 horas a 37 °C/5%CO2 em meio Neuro1 completo com 2 ng/ml de FGF2. Paralelamente, os compostos foram incubados apenas em meio para avaliar a estabilidade química da pró-droga e dos metabólitos parentais. At the end of the 2 hour incubation, supernatants were collected and frozen at -80 C. Neurons in 6 well plates were washed gently 3x with HBSS and frozen at -80 °C. Cell lysates were obtained by addition of 130 μl/well 10 mM Tris pH 7.4 with complete Mini protease inhibitors and scraping of wells. As placas foram mantidas em gelo durante o processamento. Os lisados foram homogeneizados à mão brevemente com um pilão verde em tubos de centrífuga de 1,5 ml e depois agitados em vórtex a alta velocidade durante 5 segundos. Os lisados foram centrifugados a 13.000 g, 10 minutos, 4C e os sobrenadantes (fração do citosol) foram transferidos para um novo tubo. Uma solução de colisão constituída de 80% de acetonitrila e 20% de água com bucetina, d5-Cr (padrão interno) foi adicionada no volume 4:1 ao volume para 50 ul de todas as amostras para um volume total de 250 μL. Em seguida, a placa foi centrifugada a 4000 rpm, 10 minutos, 40°C. As amostras foram transferidas para uma nova placa e congeladas a -80°C antes da análise por LC-MS/MS (Tabela 4B).
[00799] Tabela 4B. Captação de pró-droga de creatinain vitro e liberação de d3- creatina BLOQ = abaixo do limite de quantificação
[00800] Os Exemplos 45 e 46 demonstram evidências de que uma série de pró-drogas de creatina amida de ácidos graxos pode ser clivada e liberar d3-Cr in vitro e transportada para células humanas.
[00801] Exemplo 47: Estudos em animais in vivo
[00802] Uma pró-droga de creatina é administrada como uma injeção intravenosa em bolus a grupos de três a seis camundongos CD1 machos adultos a uma dose apropriada de pró-droga equivalente a creatina por kg de peso corporal. Os animais estão conscientes no momento do experimento. As amostras de sangue (0,3 mL) são obtidas através de uma cânula da veia jugular em intervalos de 8 horas após a administração IV. O sangue é processado no plasma e o plasma é congelado imediatamente a -80 °C até ser analisado por LC-MS/MS. Também podem ser coletadas amostras do CSF ou de outro fluido biológico apropriado. Os cérebros foram coletados e congelados instantaneamente em nitrogênio líquido. Os cérebros foram homogeneizados em tampão KPI 100 mM com um coquetel de anti-proteases no mesmo dia da preparação da amostra necessária para a análise LC-MS/MS.
[00803] Várias pró-drogas com grupo COOH livre e ligação éster e macrociclos foram selecionados para dosagem IV em estudo em animais para avaliar a liberação de PK e d3-Cr no cérebro in vivo. As pró-drogas foram doseadas por IV em camundongos CrT KO a 10, 15 ou 25 mg/kg em estudos com animais. Homogenatos de cérebro de camundongo (MBH) foram preparados a partir de cérebros coletados de camundongos após a administração. Os níveis de pró-droga, d3-Cr e d3-Crn foram quantificados no cérebro e expressos na concentração cerebral (para pró-drogas de macrociclo) ou AUC (para pró-drogas lineares) ao longo do tempo. Muito poucas pró-drogas foram detectadas no MBH. Surpreendentemente, a dosagem de ésteres FAA-Cr (Compostos 5, 8FB, 10-12 e 14CP4) levou a uma quantidade significativa de d3-Cr e d3-Crn nos cérebros de camundongos CrT KO, enquanto as pró-drogas de ácidos livres de FAA-Cr dos correspondentes ésteres (Compostos 4 e 13) não pareciam cruzar BBB e, portanto, nenhum d3-Cr/d3-Crn detectado no cérebro.
[00804] A administração concomitante de Composto 8 (sal de HCl) e bloqueador transportador de creatina, ácido beta-guanidinopropiônico (GPA) não alterou os níveis de d3-Cr nos cérebros de ratos WT em comparação com a dosagem do Composto 8 sozinho, indicando que a captação do Composto 8 não era dependente do transportador de creatina.
[00805] Coletivamente, os dados in vivo demonstraram que os ésteres de FAA-Cr eram capazes de fornecer uma razão de liberação favorável de d3-Cr/d3-Crn, apesar do fato de que esses compostos predominantemente ciclavam em d3-Crn in vitro. Curiosamente, os ésteres de FAA-Cr com um comprimento total combinado da cadeia FAA e da cadeia de éster alifático de C13 ou C14 (Compostos 8, 12 e 14) geraram níveis mais altos de liberação de d3-Cr em comparação com outros ésteres de FAA-Cr.
[00806] Tabela 5. Captaçãoin vivo de d3-creatina no cérebro * BQL (abaixo do limite de quantificação): pró-droga = 41,2 ng/mL; d3-Cr = 13,7 ng/mL; d3-Crn = 1,5 ng/mL
[00807] O Exemplo 41 também forneceu dados para apoiar que as pró-drogas de creatina amida de ácidos graxos da presente divulgação, como o Composto 5, 8-FB, 10, 11, 12, 14 pode liberar d3-Cr os cérebros de camundongos CrT KO. Isso é surpreendente, dado que os estudos in vitro no Exemplo 9 mostraram que os compostos éster (Compostos 8, 10- HCl e 12-HCl, Tabela 3) levaram a ciclização predominantemente de creatinina, mas aparentemente uma razão d3-Cr/d3-Crn favorável in vivo. Sem estarem vinculados a nenhuma teoria, as pró-drogas de creatina da presente divulgação projetadas para ter permeabilidade intensificada da membrana celular independente do transportador de creatina podem distribuir e liberar creatina de maneira mais eficiente e eficaz nas células cerebrais onde é mais necessário.
[00808] Exemplo 48: Distribuição de creatina ao cérebro de camundongo CrT KO após tratamento com o Composto 15
[00809] As concentrações plasmáticas e cerebrais de creatina e creatinina foram medidas em camundongos CrT KO após tratamento com o Composto 15 (Fig. 1). Como mostrado na Fig. 1, a concentração de creatina no cérebro (Cr) foi superior à concentração no plasma. A proporção de [creatina]Cérebro:[creatina]Plasma pode ser um parâmetro útil para um desenvolvimento clínico bem-sucedido de pró-drogas de creatina para o tratamento de DTC e condições relacionadas. É importante ressaltar que os níveis de creatina foram superiores aos níveis de creatinina (CRN) em camundongos tratados com o composto 15.
[00810] Exemplo 49. Distribuição da d3-creatina ao cérebro do camundongo
[00811] As concentrações cerebrais de d3-creatina e d3-creatinina foram medidas em camundongos CrT KO após 10 mg / kg de dose única em dose única em bolus IV dos compostos 14 e 15 (Figs. 3 e 4). Como mostrado na Fig. 3, a concentração de d3-creatina no cérebro foi maior após a administração do composto 15 em comparação com o composto 14. Especificamente, às 8 h após a administração, a concentração de d3-creatina no cérebro era 4 vezes maior para o composto 15 (3729 ± 523 ng / mL) em comparação com o composto 14(812 ± 289 ng/mL) (Fig. 3). No entanto, a concentração cerebral de d3-creatinina não foi significativamente diferente entre o composto 14 e o composto 15 (Fig. 4), o que é indicativo de uma maior proporção de d3-creatina para d3-creatinina com o composto 15 em comparação com o composto 14. Sem estar ligado a nenhuma teoria, a pró-droga de composto 15 macrocíclico reduz a ciclização da d3-creatina em d3-creatinina quando comparada à pró-droga de composto 14 .
[00812] A concentração de d3-creatina no cérebro de camundongos CrT KO também foi medida para outros compostos divulgados no presente pedido, como mostrado na Tabela 6. As concentrações de pró-drogas d3-creatina, d3-creatinina e creatina são medidas por LC- MS/MS. A amostra do cérebro é homogeneizada com 4x (peso a volume) de tampão KPI 100 mM contendo anti-proteases e anti-fosfatases (se necessário). 50 μl de homogenato cerebral são então des-proteinizados usando 4x volume/volume de uma solução contendo 80% de acetonitrila e 20% de água com bucetina, d5-Cr (padrão interno). A placa é então girada a 4000 rpm, 10 minutos, 4°C e as amostras são transferidas para uma nova placa para bioanálise. Cada analito em cada amostra foi quantificado contra uma curva na biomatriz correspondente usando um padrão autêntico.
[00813] Tabela 6. Concentração de d3-Creatina no cérebro de camundongos CrT KO NT = não testado
[00814] As pró-drogas do macrociclo testados mostraram baixa ou nenhuma quantidade de d3-creatinina no cérebro às 8 h. Sem estar vinculado a nenhuma teoria, esses resultados mostram que o design dessas pró-drogas apoia a clivagem em favor da d3-creatina sobre a ciclização (ou resulta em redução da ciclização).
[00815] Exemplo 50: Estudo de dosagem de repetição dos níveis de creatina no cérebro de primatas não humanos
[00816] Os cérebros de primatas não humanos (NHP) foram doseados com o Composto 8 (120 mg / kg) e o Composto 14 (18 mg/kg) durante um período de sete dias (a infusão iv fornece q.d.). A Fig. 2 mostra que a administração repetida aumenta dramaticamente os níveis de d3-creatina (d3-Cr) de maneira linear e homogênea em todas as regiões cerebrais testadas. Além disso, a resposta plana de d3-creatina não sugere perda significativa do composto 14 devido à ciclização da d3-creatinina durante o período de tratamento e nenhum efluxo significativo para fora do cérebro. Assim, sem qualquer teoria, o Composto 14 pode ser útil como uma opção para superar os CTD com base no aumento dos níveis de d3-creatina com formação mínima de d3-creatinina indesejada (d3-CRN). A Tabela 7 mostra os níveis de d3-Cr após 1 dose diária de infusão e após 7 doses diárias de infusões dos Compostos 8 e 14.
[00817] Tabela 7. Concentração de d3-creatina no cérebro do NHP
[00818] A menos que definido o contrário, todos os termos técnicos e científicos usados têm o mesmo significado como comumente compreendido por um versado na técnica ao qual pertence esta divulgação. Embora quaisquer métodos e materiais similares ou equivalentes àqueles descritos neste documento possam ser usados na prática ou teste da presente divulgação, os métodos e materiais exemplificativos não limitativos são descritos aqui.
[00819] Todas as publicações e pedidos de patente mencionados no relatório descritivo são indicativos do nível dos versados na técnica a que esta divulgação se refere. Todas as publicações e pedidos de patente são aqui incorporados por referência para todos os fins, na mesma medida em que cada publicação ou pedido de patente individual foi específico e individualmente indicado para ser incorporado por referência. Nada aqui deve ser interpretado como uma admissão de que a presente divulgação não é intitulada para preceder tal publicação em virtude de divulgação prévia.
[00820] Muitas modificações e outras modalidades das divulgações aqui apresentadas virão à mente de um versado na técnica à qual estas divulgações pertencem tendo o benefício dos ensinamentos apresentados nas descrições anteriores e nos desenhos associados. Portanto, é para ser entendido que as divulgações não são limitadas às modalidades específicas divulgadas e que modificações e outras modalidades se destinam a ser incluídas dentro do escopo das reivindicações anexas. Embora termos específicos sejam aqui empregados, eles são usados em um sentido genérico e descritivo e não para fins de limitação.
[00821] Embora a divulgação tenha sido descrita em conjunto com modalidades específicas da mesma, será entendido que a mesma é capaz de modificações adicionais e este pedido se destina a cobrir todas as variações, usos ou adaptações da divulgação seguindo, em geral, os princípios da divulgação incluindo tais afastamentos da presente divulgação que estão dentro da prática conhecida ou habitual na técnica a qual a divulgação pertence e pode ser aplicada a recursos essenciais apresentados no presente documento e a seguir no escopo das reivindicações anexas.

Claims (30)

1. Composto, que tem a estrutura da Fórmula (III-A): ou um sal aceitável farmaceuticamente do mesmo, caracterizado pelo fato de que: R é -CH3, -CH2D, -CHD2, ou -CD3; R1 é alquil linear ou ramificado, ou alquenil linear ou ramificado; R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)R1 ou -C(O)OR5; R5 é H ou alquil linear ou ramificado; R5a é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil ou -C1-C6 haloalquil; n é 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ou 11; e p é 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8.
2. Composto, de acordo com a Reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que R é -CH3 ou -CD3.
3. Composto, de acordo com a Reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que R2 é H.
4. Composto, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 3, caracterizado pelo fato de que n é 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7.
5. Composto, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 4, caracterizado pelo fato de que p é 0, 1 ou 2.
6. Composto, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 1 a 5, caracterizado pelo fato de que R5a é -C1-C6 alquil.
7. Composto, da Fórmula (I): ou um sal aceitável farmaceuticamente do mesmo, caracterizado pelo fato de que: R é -CH3, -CH2D, -CHD2 ou -CD3; R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)(alquil linear ou ramificado), -C(O)(alquenil linear ou ramificado), ou -C(O)OR5; R3 é -C(O)OR6; R4 é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil ou -C1-C6 haloalquil; R5 é alquil linear ou ramificado; R1 e R6 juntos são um grupo alquileno ou um grupo alquenileno que, com os átomos aos quais estão ligados, formam um anel de 12 a 25 membros, em que 1, 2, 3 ou 4 unidades -CH2- constituem o grupo alquileno ou o grupo alquenileno é opcionalmente substituído por um heteroátomo selecionado de -O-, -S- ou -N-, desde que nenhum -CH2- adjacente seja substituído; em que o grupo alquileno ou o grupo alquenileno é opcionalmente substituído por um ou mais R4.
8. Composto, de acordo com a Reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que: a) R é -CH3 ou -CD3; ou b) R2 é hidrogênio.
9. Composto, de acordo com a Reivindicação 7 ou 8, caracterizado pelo fato de que R6 e R1 juntos são um grupo alquileno ou um grupo alquenileno que, com os átomos aos quais estão ligados, formam um anel de 13 a 24 membros, em que 1, 2, 3 ou 4 -CH2- as unidades que compõem o grupo alquileno ou o grupo alquenileno são opcionalmente substituídas por um heteroátomo selecionado a partir de -O-, -S- ou - N-, desde que nenhum -CH2- adjacente seja substituído; em que o grupo alquileno ou o grupo alquenileno é opcionalmente substituído por um ou mais R4.
10. Composto, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 7 a 9, caracterizado pelo fato de que o composto é um sal farmaceuticamente aceitável selecionado a partir de sal de sódio, sal de potássio, sal de lítio, sal de Na2PO4H, sal de ácido clorídrico, sal de ácido fórmico, sal de ácido trifluoroacético, sal de ácido acético ou sal de ácido tricloroacético/2 lítio.
11. Composto, de acordo com a Reivindicação 7, em que o composto tem a estrutura da Fórmula (II): ou um sal aceitável farmaceuticamente do mesmo, caracterizado pelo fato de que: R é -CH3, -CH2D, -CHD2, ou -CD3; R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)(alquil linear ou ramificado), -C(O)(alquenil linear ou ramificado), ou -C(O)OR5; em que - C(O)(alquil linear ou ramificado) e -C(O)(alquenil linear ou ramificado) é opcionalmente substituído por R4; R4 é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil ou -C1-C6 haloalquil; X em cada ocorrência é independentemente -C(R5a)2-C(R5a)2- , -CH(R5a)-CH(R5a)-, -C(R5a)=C(R5a)-, -O-C(R5a)2-, -O-CH(R5a)-, -C(R5a)2-O- ou -CH(R5a)-O-; Y é -C(R5a)2-, -CH(R5a)-, -C(R5a)2-C(R5a)2-, -CH(R5a)-CH(R5a)-, -C(R5a)=C(R5a)-, -C(R5a)2-O- ou -CH(R5a)-O-; n é 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8, em que quando n é 2, Y é C(R5a)2- C(R5a)2-, -CH(R5a)-CH(R5a)-, -C(R5a)=C(R5a)-, -C(R5a)2-O- ou -CH(R5a)-O-; R5 é H ou alquil linear ou ramificado; e R5a é H, halogênio, -OH, -OR5, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, - CF3, -C1-C6 alquil ou -C1-C6 haloalquil.
12. Composto, de acordo com a Reivindicação 7, em que o composto tem a estrutura da Fórmula (I-A): ou um sal aceitável farmaceuticamente do mesmo, caracterizado pelo fato de que: R é -CH3, -CH2D, -CHD2 ou -CD3; R2 é hidrogênio, -C(O)NHR5, -C(O)(alquil linear ou ramificado), -C(O)(alquenil linear ou ramificado), ou -C(O)OR5; R4 é halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil ou -C1-C6 haloalquil; R4a, R4b, R4c e R4d, cada um independentemente, é H, halogênio, -OH, -OR5, oxo, -NH2, -NHR5, -N(R5)2, -NO2, -CF3, -C1-C6 alquil ou -C1-C6 haloalquil; R5 é alquil linear ou ramificado; R6a e R1 juntos é um grupo alquileno ou um grupo alquenileno que, com os átomos aos quais estão ligados, formam um anel de 12 a 25 membros, em que 1, 2, 3 ou 4 -CH2- as unidades que compõem o grupo alquileno ou o grupo alquenileno são opcionalmente substituídas por um heteroátomo selecionado a partir de -O-, -S- ou - N-, desde que nenhum -CH2- adjacente seja substituído; em que o grupo alquileno ou o grupo alquenileno é opcionalmente substituído por um ou mais R4; e em que, R4a e R4b ou R4c e R4d juntos podem formar um anel espiro cicloalquil de 3 a 6 membros ou um anel espiro heterocíclico de 3 a 6 membros; ou em que R4b e R4c juntos podem formar um anel cicloalquil fundido de 3 a 6 membros ou um anel heterocíclico fundido de 3 a 6 membros.
13. Composto, de acordo com a Reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que R4a é -C1-C6 alquil.
14. Composto, de acordo com a Reivindicação 12 ou 13, caracterizado pelo fato de que R4b, R4c e R4d são H.
15. Composto, de acordo com a Reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado de: ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.
16. Composto, de acordo com a Reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado de: ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.
17. Composto, de acordo com a Reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado de: em que FA é ácido fórmico (HCOOH).
18. Composto, de acordo com a Reivindicação fato de que é selecionado de: , ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que R é -CH3 ou -CD3 e R2 é H.
19. Composto, caracterizado pelo fato de que tem a estrutura: ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
20. Composto, de acordo com a Reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que o composto é um sal de ácido clorídrico de
21. Composto, caracterizado pelo fato de que tem a estrutura: ; ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos; ou
22. Composição Farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, conforme definido em qualquer uma das Reivindicações de 1 a 21, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e um carreador farmaceuticamente aceitável.
23. Uso de Composto, conforme definido em qualquer uma das Reivindicações de 1 a 21, ou de Sal Farmaceuticamente Aceitável do Mesmo, caracterizado pelo fato de que é no fabrico de medicamentos para distribuir creatina ou creatina deuterada.
24. Uso de Composto, conforme definido em qualquer uma das Reivindicações de 1 a 21, ou de Sal Farmaceuticamente Aceitável do Mesmo, caracterizado pelo fato de que é no fabrico de medicamentos para tratar a deficiência de creatina.
25. Uso de Composto, de acordo com a Reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que a deficiência de creatina compreende uma doença ou condição associada à deficiência do transportador de creatina.
26. Uso de Composto, de acordo com a Reivindicação 24, caracterizado pelo fato de que a deficiência de creatina compreende uma doença ou condição associada ao distúrbio de síntese de creatina.
27. Uso de Composto, conforme definido em qualquer uma das Reivindicações de 1 a 21, ou de Sal Farmaceuticamente Aceitável do Mesmo, caracterizado pelo fato de que é no fabrico de medicamentos para tratar uma doença; em que a doença é isquemia, estresse oxidativo, uma doença neurodegenerativa, lesão de reperfusão isquêmica, uma doença cardiovascular, uma doença genética que afeta o sistema de creatina quinase, esclerose múltipla, um distúrbio psicótico ou fadiga muscular.
28. Uso de Composto, de acordo com a Reivindicação 27, caracterizado pelo fato de que a doença genética que afeta o sistema de creatina quinase é um distúrbio transportador de creatina ou um distúrbio de síntese de creatina.
29. Uso de Composto, de acordo com a Reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que o distúrbio transportador de creatina é deficiência do transportador de creatina.
30. Uso de Composto, conforme definido em qualquer uma das Reivindicações de 1 a 21, ou de Sal Farmaceuticamente Aceitável do Mesmo, caracterizado pelo fato de que é no fabrico de medicamentos para intensificar a força muscular.
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