BR112020009290A2 - derivados de pirimidina para a prevenção e tratamento de infecções bacterianas - Google Patents

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Cécile Oury
Bernard Pirotte
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Abstract

A presente invenção refere-se a derivados de pirimidina de fórmula (I), opcionalmente com um isótopo detectável, composição farmacêutica e método de preparação desses. Derivados de pirimidina para uso no tratamento ou prevenção de infecção bacteriana em um mamífero hospedeiro necessitado de tal tratamento ou prevenção e uso como inibidores da formação de biofilme sobre uma superfície de biomaterial ou dispositivo médico, particularmente de um dispositivo cardiovascular tal como válvulas cardíacas protéticas ou marcapassos. Derivados de pirimidina para uso como radiomarcador no diagnóstico ou prognóstico de infecção bacteriana em um mamífero hospedeiro.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERI-
VADOS DE PIRIMIDINA PARA A PREVENÇÃO E TRATAMENTO DE INFECÇÕES BACTERIANAS". CAMPO DA INVENÇÃO
[001] A presente invenção se refere a derivados de pirimidina, opcionalmente com um isótopo detectável, sua composição farmacêu- tica e um método de preparação dos mesmos. A presente invenção também se refere a derivados de pirimidina para uso na prevenção e tratamento de infecção bacteriana e seu uso na inibição da formação de biofilme.
[002] Finalmente, a presente invenção fornece derivados de piri- midina opcionalmente com um isótopo detectável para uso como radi- omarcador no diagnóstico ou prognóstico de infecção bacteriana
INTRODUÇÃO
[003] As bactérias são frequentemente incriminadas em infec- ções relacionadas à assistência médica (incluindo infecções relaciona- das a dispositivos médicos), causando aumento da morbidade e mor- talidade dos pacientes e colocando um enorme ônus financeiro nos serviços de saúde. A situação tem se tornado crítica, porque as bacté- rias estão se tornando cada vez mais resistentes a antibióticos que pertencem a várias classes, tais como Penicilinas, Carbapenêmicos, Cefalosporinas, Quinolonas, aminoglicosídeos e Glicopeptídeos e um número crescente de infecções está se tornando difícil de curar.
[004] A crescente resistência aos antibióticos é uma preocupação crescente de saúde pública devido às limitadas opções de tratamento disponíveis para essas infecções graves. De acordo com a Organiza- ção Mundial da Saúde, <<a resistência aos antibióticos é hoje uma das maiores ameaças à saúde, segurança alimentar e desenvolvimento global. A resistência aos antibióticos pode afetar qualquer pessoa, de qualquer idade, em qualquer país. A resistência aos antibióticos ocorre naturalmente, mas o uso indevido de antibióticos em humanos e ani- mais está acelerando o processo. A resistência aos antibióticos leva a internações mais longas, custos médicos mais elevados e aumento da mortalidade.>>
[005] Na Europa, a resistência aos antibióticos causa aproxima- damente 25.000 mortes por ano e 2,5 milhões de dias extras no hospi- tal (Fonte: Center for Disease Control and Prevention, Global Health). É estimado que a carga clínica associada à resistência antimicrobiana custe aproximadamente 1,5 bilhões de euros por ano.
[006] Por exemplo, em 15 países europeus, mais de 10% das infecções por Staphylococcus aureus (S. aureus) na corrente sanguíi- nea são causadas por cepas resistentes à meticilina (MRSA), com vá- rios desses países apresentando taxas de resistência próximas a 50% (European Centre for Disease Prevention and Control Antimicrobial Resistance Interactive Database) (EARS-NET)).
[007] MRSA é epidêmico em algumas regiões do mundo.
[008] Portanto, há uma necessidade urgente na técnica de uma nova terapia antibacteriana.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[009] Surpreendentemente descobriu-se derivados de pirimidina, opcionalmente com um isótopo detectável que possuem atividade an- tibacteriana e podem ser usados no tratamento ou prevenção de infec- ção bacteriana em um mamífero hospedeiro e no tratamento e/ou pre- venção de contaminação e infecção bacteriana.
[0010] Os derivados de pirimidinas, opcionalmente com um isóto- po detectável, também podem ser usados como radiomarcadores no diagnóstico ou prognóstico de infecção bacteriana.
[0011] Também foi descoberto que tais derivados de pirimidina podem ser usados em um método para controlar o crescimento bacte- riano na formação de biofilme em estágio inicial, tal como as etapas 1 ou 2 ou para matar bactérias em todas as etapas da formação de bio- filme, incluindo a última etapa 3, em que o biofilme atingiu seu estágio de maturação de formação da matriz e inicia o desprendimento da su- perfície com a consequente disseminação de bactérias para outros locais.
DESCRIÇÃO DETALHADA
[0012] Em um primeiro aspecto, a invenção fornece derivados de pirimidina representados pela fórmula (|) R$ Rs Rê Na dy HR
NA e IS R 0) ou seus isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceutica- mente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou profármacos; em que: X' e X? são independentemente N, CH, CRº em que R$ é C1-.6 alquila, C2.6 alquenila, C2.6 alquinila, com a exceção de que se um de X' ou X? for igual a N, então o X* ou X? remanescentes são sele- cionados entre CH, CRº; Y é -O- ou -S-; R' e R? são independentemente C1-6 alquila, C2.6 alquenila, C>2-6 alquinila, Ca-6 cicloalquila, arila, aril- C1-.6 alguila em que a porção alquila ou cicloalquila é opcionalmente mono ou poli-substituída com OH um halogênio, e a porção arila é opcionalmente mono ou poli- substituída com um halogênio, -C1-6 alguila, - C1-6 alcóxi, -OH, -NO,, - CN, -NH2, -NHRºô, -N(Rº)2, -COOH, -COOR?, -CONH2, -CONHRº, -
CON(Rº)2, -SO2NH>2, -SO2NHR:$ ou -SO2N(R$)>; Rô, R1, Rà, Ré e R7 são independentemente H, um halogê- nio, C1-6 alquila, C1-6 alcóxi -OH, -NO>, -CN, -NH2, -NHRº, -N(Rô)2, - COOH, -COOR, -CONH>2, -CONHR3, -CON) 2, -CON(Rº)2, -SO2NH,>, - SO2NHR$ ou -SO2N(Rº),.
[0013] Dentro do seu escopo, a invenção inclui todos os isômeros ópticos de derivados de pirimidina de fórmula (!), alguns dos quais são opticamente ativos e também suas misturas incluindo suas misturas racêmicas, mas também suas formas polimórficas.
[0014] A expressão "C1.« alquila", como usada aqui, sozinha ou em combinação, se refere a uma cadeia de hidrocarboneto saturada linear ou ramiíificada que possui 1 a 6 átomos de carbono, tal como por exemplo metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, sec-butila, isobutila, terc-butila, n-pentila, 2-metilbutila, 3- metilbutila, n-hexilay 4- metilpentila, neopentila, n-hexila, 1,2-dimetilpropila, 2,2-dimetilpropila, 1,2,2-trimetilpropila e semelhantes.
[0015] A expressão "C>.6-alquenila", como usada aqui, sozinha ou em combinação, se refere a uma cadeia de hidrocarboneto insaturada linear ou ramificada que possui 2 a 6 átomos de carbono com pelo menos uma ligação dupla de carbono-carbono, tal como por exemplo, vinila, alila , 1-butenila, 2-butenila, isobutenila, 1-pentenila, 2-pentenila, 3-metil-1-butenila, 1-metil-2-butenila, 2,3-dimetil-2-butenila, 1-hexenila, 2-hexenila, 3-hexenila e semelhantes.
[0016] A expressão "Ca..-alquinila", como usada aqui, sozinha ou em combinação, se refere a uma cadeia de hidrocarboneto insaturada linear ou ramificada que possui 2 a 6 átomos de carbono com pelo menos uma ligação tripla de carbono-carbono, tal como por exemplo acetilenila, propinila, 1-butinila, 2-butinila, 1-pentinila, 2-pentinila, 3- metil-1-butinila, 1-hexinila, 2-hexinila, 3-hexenila e semelhantes.
[0017] A expressão "C3.6 cicloalquila" como usada aqui, sozinha ou em combinação, se refere a um radical de um hidrocarboneto cíclico saturado que possui 3 a 6 átomos de carbono, tal como ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila ou ciclo-hexila.
[0018] A expressão "arila" como usada aqui, sozinha ou em com- binação, se refere a um anel aromático monocíclico ou policíclico que possui 6 a 20 átomos de carbono, tal como fenila, antracenila, naftila e semelhantes.
[0019] A expressão "C1.6 alcóxi", como usada aqui, sozinha ou em combinação, se refere a um substituinte monovalente linear ou ramifi- cado que compreendendo um grupo C1-6 alquila ligado através de um oxigênio do éter que possui sua ligação de valência livre a partir do oxigênio do éter e que possui 1 a 6 átomos de carbono, por exemplo, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, butóxi, pentóxi.
[0020] A expressão "-CN", como usada aqui, se refere a uma liga- ção tripla de carbono-nitrogênio.
[0021] A expressão halogênio, como usada aqui, se refere a flúor, cloro, bromo ou iodo.
[0022] Os sais aceitáveis incluem sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou, opcionalmente, os sais de amônia alquilada tais como clorídrico, bromídrico, iodídrico, fosfórico, sulfúrico, trifluoracético, tricloroacético, oxálico, maleico, pirúvico, malônico, succínico, cítrico, tartárico, fumá- rico, mandélico, benzoico, cinâmico, metanossulfônico, etanossulfôni- co, ácido pícrico e similares e incluem ácidos relacionados aos sais farmaceuticamente aceitáveis listados no Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2 (1977) e aqui incorporados por referência ou lítio, sódio, potássio, magnésio e semelhantes.
[0023] A expressão profármaco foi definida em Burger's Medicinal Chemistry and Drug discovery (5º edição 1995) como compostos que sofrem biotransformação antes de exibir seus efeitos farmacológicos.
A expressão profármaco como aqui utilizada se refere, portanto, a um análogo ou a um derivado de um composto de fórmula geral (1) que compreende porções bio-hidrolisáveis, tais como funções éster bio- hidrolisáveis, funções carbamato bio-hidrolisáveis, ureidos bio- hidrolisáveis e semelhantes obtidos sob condições biológicas. Os pro- fármacos podem ser preparados usando métodos bem conhecidos, tais como aqueles descritos na química medicinal de Burger's Medici- nal Chemistry and Drug Discovery (1995)172-178, 949-982 (Manfred E.Wolff).
[0024] Em uma modalidade, a invenção se refere a derivados de pirimidina compreendendo um grupo imidazol e são representados pe- la fórmula (1) em que X' é CH ou CRº e X? é N; ou um sal ou profárma- co aceitável da mesma; os ditos derivados de pirimidina que compre- endem um grupo imidazol também podem ser chamados derivados de purina.
[0025] Derivados de piridina preferidos que compreendem um gru- po imidazol compreendem um grupo fenilciclopropila como ilustrado na fórmula (IV) “Oo (IV) tal como por exemplo 9-metil-N-((1R,2S)-2-fenilciclopropil)-2-(propiltio) -9H-purin-6-amina (2c); ou isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido aceitáveis farmaceuticamente aceitáveis, sais de me- tais farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou pro- fármaco dos mesmos.
[0026] Os derivados de pirimidina mais preferidos com um grupo imidazol compreendem um grupo 3,4-difluorofenilciclopropila, como ilustrado na fórmula ||
DO F (1)
[0027] Os derivados de pirimidina com um grupo imidazol mais preferidos são substituídos por um grupo 3,4- difluorfenilciclopropilamino como ilustrado, por exemplo, na fórmula (11) F (1) e são, por exemplo: N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (1c); 9-metil-N-((1R,28S)-2-fenilciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin- 6-amina (2c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (3c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-propil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (4c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-isopropil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (5c); 9-ciclopropil-N-((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (6c); 9-butil-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil|)ciclopropil)-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (7c); 9-(Sec-butil)-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (8c); 9-(terc-butil)-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (9c);
9-ciclobutil-N-((1R,2S)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (10c);
N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-pentil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (11c);
9-ciclopentil-N-((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (12c);
N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil|)ciclopropil)-9-hexil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (13c);
9-ciclohexil-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (14c);
9-alil-N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropi!)-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (15c);
2-(6-(((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)amino)-2- (propiltio)-9H-purin-9-il)etano! (16c);
N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-(prop-2-in-1-i1)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (17c);
N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9- (2,2,2-trifluoroetil)-9H-purin-6-amina (18c);
(18,2R,38,4R)-4-(6-(((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)amino)-2-(propiltio)-9H-purin- — 9-il)ciclopentano- 1,2,3-triol (19d);
N-((1R,28)-2-(3 ,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(etiltio)-9-metil- 9H-purin-6-amina (20c);
N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(etiltio)-9H- purin-6-amina (21c);
N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil|)ciclopropil)-9-metil-2-(metiltio)- 9H-purin-6-amina (22c);
cloridrato — de N-((1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- metil-2-propóxi-9H-purin-6-amina (23t.HCI]);
N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(metiltio)-
9H-purin-6-amina (24c); 2-(butiltio)-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil- 9H-purin-6-amina (25c); 2-(butiltio)-N-((1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil- 9H-purin-6-amina (26c); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
[0028] Os derivados de pirimidina que compreendem um grupo imidazol mais preferidos são: N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (1c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (3c); 9-alil-N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (15c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-(prop-2-in-1-i1)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (17c); (18,2R,38,4R)-4-(6-(((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)amino)-2-(propiltio)-9H-purin- — 9-il)ciclopentano- 1,2,3-triol (19d); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil|)ciclopropil)-9-metil-2-(metiltio)- 9H-purin-6-amina (22c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(metiltio)- 9H-purin-6-amina (24c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(etiltio)-9-metil- 9H-purin-6-amina (20c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(etiltio)-9H- purin-6-amina (21c); 2-(butiltio)-N-((1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-
9H-purin-6-amina (25c); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
[0029] Em outra modalidade, a invenção se refere a derivados de pirimidina que compreendem um grupo pirazol e são representados pela fórmula (1) em que X* é N e X? é CH ou CR$; ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceuticamente acei- táveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
[0030] Os derivados de pirimidina preferidos que compreendem um grupo pirazol são substituídos por um grupo 3,4- difluorofenilciclopropila, os derivados de pirimidina mais preferidos que compreendem um grupo pirazol são substituídos por um grupo 3,4- difluorofenilciclopropilamino, tal como por exemplo: N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-metil-6- (metiltio)-1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina(27Kk); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6- (etiltio)-1-metil -1H-pirazol[3,4-0pirimidin-4-amina (28x.HCI); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6- (propiltio)-l-metil-1H-pirazol|[3,4- apirimidin-4-amina (29x.HCI); N-(((1S, 2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(metiltio)- 1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (30k); cloridrato de N -(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1- etil-6-(etiltio)-1 H-pirazol[3,4-apirimidin-4-amina (31x.HCI); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1- etil-6-(propiltio)-1 H-pirazol[3,4-a]pirimidin-4-amina (32x.HCI); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1- isopropil-6-(metiltio)-1 H-pirazol[3,4-a]pirimidin-4-amina (33k. HCI); cloridrato de N -(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6-
(metiltio)-1-propil-1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (34k.HCI); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
[0031] Os derivados de pirimidina que compreendem um grupo pirazol mais preferidos são: N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-metil-6- (metiltio)-1 H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina(27Kk); N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(metiltio)- 1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (30k); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6- (etiltio)-1-metil-1 H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (28x.HCI); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1- isopropil-6-(metiltio)-1 H-pirazol[3,4-0pirimidin-4-amina (33k.HCI); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
[0032] Em outra modalidade, a invenção se refere a derivados de pirimidina que compreendem um grupo pirro|l e são representados pela fórmula (1) em que X' e X? são CH ou CR: ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
[0033] Os derivados de pirimidina preferidos que compreendem um grupo pirrol, compreendem um grupo 3, ,4-difluorfenilciclopropila. Os derivados de pirimidina mais preferidos que compreendem um grupo pirrol compreendem um grupo 3, 4-difluorfenilciclopropilamina.
[0034] Os derivados de pirimidina mais preferidos que compreen- dem um grupo pirrol são o cloriddato — de N((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-7-etil-2-(metiltio)-7 H-pirrol[2,3-a]pirimidin-4-
amina (35pHCI); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adi- ção de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuti- camente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
[0035] Em um aspecto adicional, a invenção também se refere a derivados de pirimidina de acordo com a fórmula (|) ou seu sal aceitá- vel, que compreendem pelo menos um isótopo detectável.
[0036] Um derivado de pirimidina preferido de acordo com a fór- mula (Il) compreende pelo menos um isótopo detectável selecionado entre 3H, 18F, 19, Cc, BE, ne, 7SBr, 76Br, 120, 123, 1251, 131, 15Q e 3N.
[0037] Outro derivado de pirimidina preferido de acordo com a fórmula (1) compreende um isótopo detectável selecionado entre H, 18F, 1%, E, ue e 123.
[0038] Outro derivado de pirimidina mais preferido de acordo com a fórmula (|) ou seu sal compreende o isótopo detectável selecionado entre !?F e !'C.
[0039] Um derivado de pirimidina mais preferido de acordo com a fórmula (1) ou seu sal compreende o isótopo detectável **F
[0040] Derivados ou isômeros de pirimidina preferidos, suas mistu- ras racêmicas, sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquila- da; compreendendo pelo menos um isótopo detectável também com- preende um grupo fenilciclopropila (IV), “O (IV).
[0041] O derivado de pirimidina mais preferido que compreende pelo menos um isótopo detectável, também compreende um grupo 3, ,4-difluorfenilciclopropilamina.
[0042] Em outro aspecto, a invenção também se refere a um método de preparação de um derivado de pirimidina representado pela fórmula (1).
[0043] O derivado de pirimidina e seu sal aceitável são preparados de acordo com as seguintes vias químicas:
[0044] Na primeira modalidade, o derivado de pirimidina de acordo com a fórmula (|) ou seus sais aceitáveis e que compreendem um gru- po imidazol ou que correspondem a derivados de purina, são feitos de acordo com uma via química comum geral que compreende primeiro: uma preparação de um produto de partida, uma 2, 6-di- halogeniopirimidin-5-amina 2-substituída (Xh), tal como, por exemplo, uma 4, 6-dicloropirimidin-5-amina 2-substituída, de acordo com o es- quema 1 e depois reagir o produto de partida com reagentes de acor- do com as seguintes etapas ib a ilib no esquema 2. A via química geral é comum para o derivado de pirimidina com o grupo imidazol que pos- sui -Y- igual a -S- ou -O-. A formação de 3 intermediários Xa, Xb, Xc em que Ri, R?, Rô, R4, Rº, Rº e R? como definidos na fórmula (1), são fornecidos sucessivamente ao longo das 3 etapas ib a iiib.
[0045] Finalmente, o derivado de pirimidina com um grupo imi- dazol e com -Y- = -O- é diferenciado por uma via química adicional que permite a conversão do derivado tioéter de pirimidina (em que Y é S) em um derivado de éter de pirimidina (Y = O) correspondente ( es- quema 3).
1. Preparação do produto de partida: 4,6-di-halogeniopirimidin-5- aminas 2-substituídas tal como, por exemplo, 4,6-di-cloropirimidin-5- aminas 2-substituídas de acordo com a seguinte via química:
oH oH oH Lo TORA" AO HS” “Nº or Ss Nº “oH Ss Nº “OH xe xf e —* EE RIA e e REGA CI xh xg Esquema 1 em que R' é como definido acima na fórmula (1).
[0046] Uma 4, 6-di-halogeno-5-nitropirimidina Xg 2-substituída, tal como por exemplo 4,6-dicloro-S5-nitropirimidina 2-substituída, foi obtida pela reação do ácido tiobarbitúrico com o haleto R'hal em meio alcali- no aquoso, tal como KOH (etapa ia) a uma temperatura entre 20ºC e 100ºC, seguida de uma reação de nitração usando ácido nítrico na presença de outro ácido, tal como ácido acético, em baixa temperatu- ra, que varia entre -20ºC a temperatura ambiente (etapa iia ) e uma substituição nucleofílica aromática em uma temperatura que varia en- tre -20ºC a 100ºC, usando uma base orgânica, tal como por exemplo, dietilamina, 2,6 lutidina ou semelhantes, com um haleto de fosforila, tal como cloreto de fosforila (etapa iiia).
[0047] A 4,6-di-halogênio-S-nitropirimidina Xg 2-substituída foi en- tão reduzida em temperatura ambiente com ferro em meio ácido, tal como, por exemplo, ácido acético, para obter a 4,6-di- halogeniopirimidin-5-amina Xh 2-substituída correspondente, tal como, por exemplo, 4,6-dicloropirimidin-5-amina 2-substituída (etapa iva). 2º reação do produto de partida com reagentes de acordo com as se- guintes etapas ib a ivb
Cc CI a OO a O a OO Pena RAN NH RENO
R R x xa xb R&
SO
NH Ro Rg DS
LS R ON N
R R xe
R E O e NH R SDS R Rg DS DIOS Ns EDS K SN W K SN o R o R oH
IX OM Ho Ho xc xd Esquema 2
[0048] Em uma primeira etapa (ib)) 6-halogenopirimidina-4,5- diaminas (Xa) Nº 2-dissubstituídas, tais como, por exemplo, 6- cloropirimidina-4,5-diaminas Nº,2-dissubstituídas são obtidas pela rea- ção de RºNH2 com a 4,6-dihalogeniopirimidin-5-amina 2-substituída (Xh), tal como, por exemplo, 4,6-dicloropirimidin-5-amina 2-substituída e é realizada em um álcool tal como metanol em uma temperatura de, por exemplo, 100ºC.
[0049] A primeira etapa é seguida por uma reação de fechamento do anel do intermediário Xa por meio de um ortoformiato de trialquila, tal como o ortoformiato de trietila, realizada em uma temperatura de, por exemplo, 130ºC, na presença de um ácido tal como, por exemplo,
o ácido acético (etapa iib) para obter os intermediários corresponden- tes 6-halogênio-9H-purinas 2,9-dissubstituídas (Xb) tais como, por exemplo, 6-cloro-9H-purinas 2,9-dissubstituídas.
[0050] Na etapa iiib, (ciclopropil-9H-purin-6-aminas (Xc) 2,9- dissubstituídas N-((R3-R7)-fenil substituída são obtidas pela substitui- ção nucleofílica do átomo de halogênio, preferivelmente, um átomo de cloro do intermediário Xb por uma fenilciclopropilamina (R*-R”)- substituída em uma temperatura de, por exemplo, 90ºC.
[0051] No caso de uma acetonida de um intermediário pentano-1, 2,3-triol, a desproteção ocorreu em condições hidroalcóolicas ácidas para fornecer um pentano-1,2,3-triol Xd (etapa ivb). A reação é reali- zada em temperatura ambiente. 3º conversão do derivado tioéter (Y = S) de pirimidina no derivado éter (Y= O) de pirimidina correspondente: nº Rº RR Fo. í Fed. : “O , R A —> R O —> & ÁS RA a RA NÃ AZ W Í R So R2 R R xt À 4 o Esquema 3
[0052] Os compostos Xt, Xu e Xv que correspondem ao derivado de pirimidina que compreende, respectivamente, um grupo imidazol (Xt), um grupo pirazol (Xu) e um pirrol (Xv), podem ser obtidos em du- as etapas, a partir do composto metiltio Xc, Xk e Xp correspondentes (esquema 3).
[0053] A primeira reação consiste na oxidação do átomo de enxo- fre dessa função tioéter, resultando em um grupo metilsulfonila (etapa ic) realizada em temperatura ambiente ou sob aquecimento.
[0054] A substituição de Xq, Xr e Xs por um alcoolato levou aos derivados éteres Xt, Xu e Xv (etapa iic) realizada em uma temperatura entre 10ºC e 80ºC.
[0055] Alternativamente, os compostos Xw, Xx, Xy que corres- pondem a derivados de pirimidina de fórmula (1) compreendendo res- pectivamente um grupo imidazol, um pirazol ou um pirrol e em que Y é igual a S e R' é diferente de -CH3, podem ser obtidos de acordo com esquema 3bis. Ele corresponde a uma conversão de derivado de piri- midina substituído com metilsulfanila em que Y é S e R' é um grupo metila em outros derivados de pirimidina substituídos com alquilsulfani- la em que Y é S e R' é diferente de um grupo metila. A conversão é realizada em duas etapas. Uma primeira etapa que começa a partir de um composto metiltio correspondente Xc, Xk, Xp é uma reação de oxidação do átomo de enxofre da função tioéter, resultando em um grupo metilsulfonila (etapa ic) realizada em temperatura ambiente ou sob aquecimento, como no esquema 3.
RR Rê Rê Aa, +e Oo, 2 DE ac SAO o OURO | R 0º o R Rº nº x x x Xp xs x Esquema 3 bis
[0056] A segunda etapa (iiic no esquema 3 bis) é uma reação de substituição do grupo metilsulfonila em Xq, Xr, Xs com um alquiltiol levando aos derivados substituídos por alquilsulfanila Xw, Xx, Xy em que R' é diferente de -CH3. A reação de substituição é realizada em uma temperatura entre 10ºC e 100ºC.
[0057] Na segunda modalidade, a preparação do derivado de piri- midina que compreende um grupo pirazol e representado pela fórmula (1) em que Xº é N e X? é CH ou CR$; ou um sal aceitável do mesmo é geralmente feita de acordo com a seguinte via química:
OH OH Cc o De RO O AOS HST NT “ow ET NT MOH DESTINO Xe xi je nº Fe. a R R R? Xxk ES Esquema 4 em que R', R?, Rô, Rº, Rº, Ré e R como definidos na fórmula geral (!).
[0058] Após a reação entre o ácido tiobarbitúrico e o haleto de R' em uma temperatura de, por exemplo, 80ºC (etapa id), a pirimidina 4,6-diol Xe 2-substituída é reagida com haleto de fosforila, tal como por exemplo, cloreto de fosforila na presença de DMF em uma tempe- ratura entre 0ºC e 110ºC para obter o 4,6-dicloropirimidino-5- carbaldeído Xi 2-substituído correspondente (etapa iid).
[0059] A reação de fechamento do anel de Xi por meio de uma hidrazina substituída forneceu a 1H-pirazolo[3,4-a]pirimidina Xj em uma temperatura entre -80ºC e 20ºC (etapa iiid).
[0060] A conversão adicional do derivado tioéter (Y = S de) pirimi- dina em um derivado éter (Y = O) de pirimidina (Xu) correspondente pode ser feita de acordo com o esquema 3 como descrito acima.
[0061] Alternativamente, os derivados de pirimidina de fórmula (1) que compreendem um grupo pirazol podem ser preparados de acordo com o esquema 4bis, em que as etapas (id) e (iid) são idênticas ao esquema 4, mas o fechamento do anel de Xi é realizado na etapa (vd) por um hidrazina não substituída para fornecer uma 1H-pirazolo[3,4- dlpirimidina não alquilada Xi' não alquilada em uma temperatura entre
-80ºC e 20ºC (etapa vd), seguida na etapa vid por uma N-alquilação para fornecer Xj em uma temperatura entre 0ºC e 80ºC, oH OH co EI O. O —d O ns 'oH RA? oH RAE cl Xe xi |“ nº OX cl e “ OO == IO —— TO mo OR Re A Xxk x x Esquema 4 bis
[0062] Na terceira modalidade, a preparação dos derivados de pi- rimidina que compreendem um grupo pirrol e representados pela fór- mula (1) em que X' e X? são CH ou CRº ou seus sais aceitáveis é ge- ralmente feita de acordo com a seguinte via química: OH OH oH ie ns iie ns sem —r Ne Tr AO x xm
JF Rê AX ci GI R * xo ” xn Xp Esquema 5 em que R', R?, Rô, R%, Rº, Ré e R como definidos na fórmula geral (!).
[0063] A 6-amino-4-hidroxipirimidina XI 2-substituída foi obtida pe- la reação de 6-amino-2-mercaptopirimidin-4-0l com o haleto de R' em meio alcalino em uma temperatura entre 70ºC e 110ºC (etapa ie).
[0064] XI é convertido em 7H-pirrol [2,3-d] pirimidina Xm corres- pondente por meio de um halogênio-acetaldeído, tal como cloroacetal- deído, em uma temperatura entre 60ºC e 100ºC (etapa iie).
[0065] Uma substituição nucleofílica aromática usando haleto de fosforila, tal como por exemplo cloreto de fosforila em uma temperatu- ra entre 0ºC e 110ºC, é então obtida para dar Xn (etapa iiie), seguida por uma N-alquilação para dar Xo (etapa ive) em uma temperatura en- tre 0ºC e 100ºC.
[0066] (Ciclopropil-7 H-pirrol[2,3-a]pirimidin-4-aminas — (Xp) 2,7- dissubstituídas N-((R?-R7)-fenil substituída foram obtidas pela substi- tuição nucleofílica do átomo de cloro de Xo pela fenilciciopropilamina apropriada em uma temperatura entre 40ºC e 90ºC(etapa ve).
[0067] Alternativamente, o derivado de pirimidina que compreende um grupo pirrol e é representado pela fórmula (1) em que X* e X? são CH ou CRº, pode ser fornecido de acordo com o esquema 5bis, em que as etapas ie a liie são idênticas ao esquema 5, mas a substituição nucleofílica do átomo de halogênio, tal como, por exemplo, o átomo de cloro em Xn, é realizada com uma fenilciclopropilamina (R*-R')- substituída em uma temperatura entre 40ºC e 90ºC (etapa vie) forne- cer Xo', seguido pela N-alquilação com um haleto de R? em uma tem- peratura entre 0ºC e 100ºC (etapa viie) para fornecer Xp
OH OH oH Ss e NO jie ns Fem O ss — O x xm | Rº (3 OX E o
R R R xp xo Esquema 5bis
[0068] A conversão adicional do derivado tioéter (Y = S) de pirimi- dina em um correspondente derivado éter (Y = 0) pirimidina (Xv) pode ser feita de acordo com o esquema 3 descrito acima.
[0069] As mesmas reações são usadas para a preparação de de- rivados de pirimidina representados pela fórmula (1) ou seu sal aceitá- vel que compreendem pelo menos um isótopo detectável, com incor- poração do isótopo detectável como a última etapa. Tal incorporação do isótopo detectável ou etapa de marcação é bem conhecida por aqueles versados na técnica e é descrita na técnica, por exemplo, em Lanstrom et al Acta. Chem. Scand 1999, 53.651.
[0070] Em um segundo aspecto, a invenção fornece um deri- vado de pirimidina de fórmula (|) ou seu sal ou profármaco aceitá- vel, para uso no tratamento ou prevenção de infecção bacteriana em um mamífero hospedeiro que necessite de tal tratamento ou prevenção.
[0071] A expressão "infecção bacteriana", como usada aqui, ge- ralmente se refere à presença de bactérias indesejáveis e, embora primariamente relacionada à invasão de um corpo, tecidos ou células do corpo por bactérias, é usado de forma alternativa aqui para também se referir a incrustações bacterianas (que normalmente se refere a contaminação indesejada em superfícies, tais como biossensor, im- plantes cardiovasculares, cateteres, lentes de contato e ferramentas cirúrgicas) ou outros tipos de contaminação (como em alimentos, ra- ções e outros produtos líquidos).
[0072] A fonte de contaminação ou infecção bacteriana pode ser diversa.
[0073] As infecções causadas por bactérias Gram-positivas repre- sentam um grande ônus para a saúde pública, não apenas em termos de morbidade e mortalidade, mas também em termos de aumento de gastos no manuseio de pacientes e na implementação de medidas de controle de infecções. Staphylococcus aureus e enterococos são bac- térias estabelecidas no ambiente hospitalar e sua resistência frequente a múltiplos fármacos complica a terapia.
[0074] O Staphylococcus aureus é uma bactéria importante res- ponsável por uma ampla gama de manifestações clínicas que variam de infecções cutâneas relativamente benignas a condições que amea- çam a vida, tais como endocardite e osteomielite. É também uma bac- téria comensal (colonizando aproximadamente 30% da população hu- mana).
[0075] Duas mudanças importantes na epidemiologia do S. aureus ocorreram desde os anos 90: uma epidemia de infecções da pele e dos tecidos moles associadas à comunidade (em grande parte causa- da por cepas específicas de S. aureus [MRSA] resistentes à meticilina) e um aumento no número infecções associadas aos serviços de saúde (especialmente endocardite infecciosa e infecções por dispositivos pro- téticos).
[0076] O surgimento da resistência a antibióticos glicopeptídicos encontrada na cepa denominada S. aureus com resistência intermedi- ária a glicopeptídeos (GISA) é outra fonte de grande preocupação, porque, especialmente em hospitais, essa classe de antibióticos, parti-
cularmente à vancomicina, é um dos principais recursos para comba- ter infecções causadas por cepas de Staphylococcus aureus resisten- tes à meticiliha (MRSA). Embora a prevalência de GISA seja relativa- mente baixa (representando aproximadamente 1,3% de todos os iso- lados de MRSA testados), a mortalidade devida a infecções por GISA é muito alta (cerca de 70%), especialmente entre pacientes hospitali- zados em departamentos de alto risco, tais como unidades de terapia intensiva (UTI).
[0077] Os estafilococos coagulase-negativos (CONS) são as bacté- rias mais frequentes da flora normal da pele. Essas bactérias são con- taminantes comuns em amostras clínicas e são reconhecidas como agentes de infecção clinicamente significativa, incluindo bacteremia e endocardite. Os pacientes com risco particular de infecção por CONS incluem aqueles com dispositivos protéticos, marcapassos, cateteres intravasculares e hospedeiros imunocomprometidos.
[0078] Os estafilococos coagulase-negativos representam aproxi- madamente um terço dos isolados da corrente sanguínea em unidades de terapia intensiva, tornando esses organismos a causa mais comum de infecção nosocomial da corrente sanguínea.
[0079] As espécies enterocócicas podem causar uma variedade de infecções, incluindo infecções do trato urinário, bacteremia, endo- cardite e meningite. Os enterococos são relativamente resistentes aos efeitos de morte dos agentes ativos na parede celular (penicilina, am- picilina e vancomicina) e são impermeáveis aos aminoglicosídeos.
[0080] Os enterococos resistentes à vancomicina (VRE) são uma causa cada vez mais comum e difícil de tratar de infecção adquirida em hospital.
[0081] Várias epidemias de infecção por VRE foram descritas em diversos ambientes hospitalares (por exemplo, unidades de terapia intensiva médica e cirúrgica e enfermarias clínicas e pediátricas) e,
como o Staphylococcus aureus resistente à meticilina, o VRE é endê- mico em muitos hospitais grandes.
[0082] O Streptococcus agalactiae beta-hemolítico (Estreptococos do Grupo B, GBS) é outra bactéria Gram-positiva. A bactéria pode causar sepse e/ou meningite em crianças recém-nascidas. É também uma causa importante de morbidade e mortalidade em idosos e em adultos imunocomprometidos. As complicações da infecção incluem sepse, pneumonia, osteomielite, endocardite e infecções do trato uri- nário.
[0083] Além da medicina humana, animais de companhia, tais co- mo gatos, cães e cavalos, também podem ser colonizados e infecta- dos por MRSA, sem adaptação ao hospedeiro e, portanto, podem atu- ar como reservatórios de infecções humanas. As bactérias também podem desenvolver resistência distinta quando hospedadas por ani- mais.
[0084] Em modalidades particulares, a infecção bacteriana é uma infecção por bactérias Gram-positivas. Em outras modalidades particu- lares, a infecção bacteriana é uma infecção por Staphylococcus au- reus e/ou enterococos e/ou estreptococos.
[0085] Em modalidades particulares, a infecção bacteriana é cau- sada por uma bactéria que é resistente aos agentes antibacterianos tradicionais. Em modalidades particulares adicionais, a infecção bacte- riana é causada por um ou mais de S. aureus resistentes à meticilina (MRSA), S. epidermidis resistentes à meticiliha (MRSE), S. aureus com resistência intermediária a glicopeptídeo (GISA), estafilococos coagulase-negativos (CONS) ), enterococos resistentes à vancomicina (VRE), Streptococcus agalactiae beta-hemolítico (Streptococcus do Grupo B, GBS).
[0086] Por infecção bacteriana, é entendido particularmente infec- ção bacteriana Gram-positiva, tal como por exemplo pneumonia, septi-
cemia, endocardite, osteomielite, meningite, infecções do trato urinário, pele e tecidos moles. A fonte de infecção bacteriana pode ser diversa e pode ser causada, por exemplo, pelo uso de implantes de biomateri- ais.
[0087] Por biomateriais, ou implante de biomaterial, é entendido todo material estranho implantável para uso clínico em mamíferos hospedeiros, tal como articulações protéticas, marcapassos, cardio- versores-desfibriladores implantáveis, cateteres intravasculares ou uri- nários, stent incluindo stent coronário, válvulas cardíacas protéticas, biopróteses, lentes intra-oculares, implantes dentários, implantes ma- mários, tubos endotraqueais, tubos de gastrostomia e semelhantes.
[0088] Por mamífero hospedeiro, é entendido preferivelmente um humano, mas também um animal que necessite de tratamento ou pre- venção de tratamento bacteriano.
[0089] Por prevenção de infecção bacteriana, é entendida uma redução no risco de adquirir infecção ou redução ou inibição da recor- rência da infecção. Por exemplo, os derivados de pirimidina podem ser administrados como prevenção antes de um tratamento cirúrgico para prevenir a infecção.
[0090] Na primeira modalidade, os derivados de pirimidina para uso no tratamento ou prevenção de infecção bacteriana são derivados de pirimidina que compreendem um grupo imidazol em que X' é CH ou CR? e X? é N na fórmula (1).
[0091] Surpreendentemente, descobriu-se que os referidos deriva- dos de pirimidina que compreendem um grupo imidazol, preferivelmen- te com a presença de um grupo difluorfenilciclopropila, exibem ativida- de antibiótica.
[0092] Derivados de pirimidina preferidos e mais preferidos que compreendem um grupo imidazol ou seu sal ou profármaco aceitável, para uso no tratamento ou prevenção de infecção bacteriana são os descritos no primeiro aspecto da invenção.
[0093] Em outra modalidade, os derivados de pirimidina para uso no tratamento ou prevenção de infecção bacteriana são derivados de pirimidina que compreendem um grupo pirazol em que X é Ne Xº é CH ou CRº na fórmula (1).
[0094] Novamente, os ditos derivados de pirimidina que compre- endem um grupo pirazol, preferivelmente com a presença de um grupo difluorfenilciclopropila, também exibem atividade antibiótica surpreen- dente.
[0095] Derivados de pirimidina preferidos e mais preferidos que compreendem um grupo pirazol ou isômeros, suas misturas racêmi- cas, sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou profármaco dos mesmos, para uso no tratamento ou prevenção de in- fecção bacteriana são aqueles descritos no primeiro aspecto da inven- ção.
[0096] Em outra modalidade, os derivados de pirimidina para uso no tratamento ou prevenção de infecção bacteriana são derivados de pirimidina que compreendem um grupo pirrol em que X'? e X? são CH ou CRº na fórmula (1).
[0097] Novamente, os ditos derivados de pirimidina que compre- endem um grupo pirrol, preferivelmente com a presença de um grupo difluorfenilciclopropila, também exibem atividade antibiótica surpreen- dente.
[0098] Derivados de pirimidina preferidos e mais preferidos que compreendem um grupo pirrol ou seu sal ou profármaco aceitável, pa- ra utilização no tratamento ou prevenção de infecção bacteriana são aqueles descritos no primeiro aspecto da invenção.
[0099] Em modalidades particulares, os derivados de pirimidina de acordo com a invenção são administrados ao paciente durante vários dias (especialmente em caso de prevenção). Os derivados de pirimidi- na podem ser administrados isoladamente ou como uma composição farmacêutica, com doses não tóxicas inferiores a 3 g por dia.
[00100] Um outro aspecto preferido da invenção é uma compo- sição farmacêutica de derivado de pirimidina de fórmula (|) ou isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido far- maceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou profármaco dos mes- mos; para uso na prevenção ou tratamento de infecção bacteria- na.
[00101] A composição farmacêutica pode ser um pó seco ou uma composição líquida com compatibilidade fisiológica. As composições incluem, além do derivado de pirimidina, substâncias auxiliares, con- servantes, solventes e/ou agentes moduladores de viscosidade. Por solvente, é entendido, por exemplo, água, solução salina ou qualquer outra solução fisiológica, etanol, glicerol, óleo tal como óleo vegetal ou uma mistura dos mesmos. Por agente modulador da viscosidade en- tende-se, por exemplo, carboximetilcelulose.
[00102] O derivado de pirimidina da presente invenção exibe seus efeitos através da administração oral, intravenosa, intravascular, in- tramuscular, parentérica ou tópica, e pode ser adicionalmente usado em uma composição para administração parentérica, particularmente uma composição de injeção ou em uma composição para administra- ção tópica. Também pode ser carregado em nanopartículas para apli- cações de nanomedicina ou PEGuilado para melhorar sua biodisponi- bilidade, particularmente quando usado em uma composição em ae- rossol. Uma composição em aerossol é, por exemplo, uma solução, uma suspensão, uma mistura de pó micronizado e semelhantes. À composição é administrada através do uso de um nebulizador, um ina- lador de dose calibrada ou um inalador de pó seco ou qualquer dispo-
sitivo projetado para tal administração.
[00103] “Exemplos de composições galênicas incluem comprimidos, cápsulas, pós, pílulas, xaropes, gomas mastigáveis, grânulos e seme- lhantes. Estes podem ser produzidos através de técnicas bem conhe- cidas e com o uso de aditivos típicos, tais como excipientes, lubrifican- tes e aglutinantes.
[00104] Substâncias auxiliares e composições farmacêuticas ade- quadas são descritas em Remington's Pharmaceutical Sciences, 16º ed., 1980, Mack Publishing Co., editado por Oslo et al. Tipicamente, uma quantidade apropriada de um sal farmaceuticamente aceitável é usada na composição para tornar a composição isotônica. Exemplos de substâncias farmaceuticamente aceitáveis incluem solução salina, solução de Ringer e solução de dextrose. O pH da solução é preferi- velmente de cerca de 5 a cerca de 8, e mais preferencialmente de cer- ca de 7 a cerca de 7,5.
[00105] Um outro aspecto adicional da invenção é um método de tratamento ou prevenção de infecção bacteriana em um mamí- fero hospedeiro que necessite desse tratamento ou prevenção. O método compreende a administração ao hospedeiro de uma quantida- de eficaz do derivado de pirimidina, como definido na fórmula (1) ou isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceu- ticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou profármaco; preferivelmente um derivado de pirimidina que é substituído por um grupo difluorfenilciclopropila; tais como, por exemplo, aqueles selecionados no primeiro aspecto da invenção; e mais preferivelmente um derivado de pirimidina seleciona- do do grupo: N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (1c); 9-alil-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfeni|)ciclopropil)-2-(propiltio)-
9H-purin-6-amina (15c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-(prop-2-in-1-i1)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (17c); (18,2R,3S,4R)-4-(6-(((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)amino)-2-(propiltio)-9H-purin- — 9-il)ciclopentano- 1,2,3-triol (19d); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil|)ciclopropil)-9-metil-2-(metiltio)- 9H-purin-6-amina (22c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(metiltio)- 9H-purin-6-amina (24c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(etiltio)-9-metil- 9H-purin-6-amina (20c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(etiltio)-9H- purin-6-amina (21c); 2-(butiltio)-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil- 9H-purin-6-amina (25c); N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-metil-6- (metiltio)-1 H-pirazol[3,4-dpirimidin-4-amina(27K); N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(metiltio)- 1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (30k); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6- (etiltio)-1-metil -1H-pirazol[3,4-a]pirimidin-4-amina (28x.HCI); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1- isopropil-6-(metiltio)-1H-pirazol[3,4-0pirimidin-4-amina (33k.HCI); cloridrato de N-((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-7-etil- 2-(metiltio)-7 H-pirrol[2,3-dpirimidin-4-amina (35p.HCI); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
[00106] Em ainda outros aspectos, a invenção fornece o uso de derivados de pirimidina de fórmula (1) ou isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia al- quilada ou profármaco como inibidor da formação de biofilme em uma superfície de um implante de biomaterial em um mamífero hospedeiro.
[00107] Mais particularmente, a invenção fornece derivados de pi- rimidina de fórmula (1) ou isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metal farma- ceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou profármaco dos mesmos; para uso na prevenção de uma infecção bacteriana, em que o dito derivado de pirimidina é aplicado à superfície de um implan- te de biomaterial. Em modalidades particulares, a infecção é uma in- fecção de infecções relacionadas ao implante (isto é, causada pela presença do implante). Do mesmo modo, a invenção fornece o uso dos derivados da invenção, como aqui descrito, para a prevenção e tratamento de contaminação ou incrustações bacterianas, tal como de um implante. Será entendido que, ao longo da descrição, está prevista o uso dos derivados para estes diferentes aspectos in vivo, ex vivo e in vitro.
[00108] Implantes de biomateriais tais como, por exemplo, marca- passos e cardioversores-desfibriladores implantáveis [CDI]) podem ser infectados, com uma taxa de infecções que varia entre 0,8 a 5,7%.
[00109] A infecção pode envolver a bolsa subcutânea que contém o implante de biomaterial ou segmento subcutâneo dos eletrodos. Tam- bém pode ocorrer infecção mais profunda que envolve a porção trans- venosa do eletrodo, geralmente com bacteremia associada e/ou infec- ção endovascular. Isso implica que os pacientes que possuem tais im- plantes sofrem de doenças relacionadas a eles.
[00110] Oimplante e/ou bolsa em si pode ser fonte de infecção, ge-
ralmente devido à contaminação no momento da implantação, ou pode ser secundária a bacteremia de uma fonte diferente.
[00111] A contaminação peri-operatória da bolsa do marcapasso com a flora da pele parece ser a fonte mais comum de infecção subcu- tânea.
[00112] Por exemplo, a endocardite infecciosa relacionada ao im- plante cardíaco (CDRIE) é uma condição com risco de vida, com inci- dência crescente devido ao número crescente de implantes (81.000 implantes de marcapasso por ano na Europa).
[00113] O Staphylococcus aureus e os estafilococos coagulase- negativos (geralmente Staphylococcus epidermidis) causam 65 a 75% das infecções da bolsa do gerador e até 89% das endocardites relaci- onadas ao dispositivo. Os episódios que surgem dentro de duas se- manas após o implante são mais provavelmente devidos ao S. aureus.
[00114] O tratamento bem-sucedido de um implante de biomaterial infectado, independentemente do componente envolvido, geralmente requer a remoção do implante e a administração de antibióticos direci- onados às bactérias causadoras. É importante ressaltar que a terapia médica sozinha está associada a alta mortalidade e risco de recorrên- cia.
[00115] A endocardite valvar protética (PVE) é uma infecção grave com consequências potencialmente fatais.
[00116] As bactérias podem atingir a prótese valvar por contamina- ção direta no intraoperatório ou através de disseminação hematogêni- ca nos primeiros dias e semanas após a cirurgia. As bactérias têm acesso direto à interface prótese-anel e ao tecido perivalvular ao longo das vias de sutura porque o anel de costura da válvula, o anel cardía- co e as suturas de ancoragem não são endotelizadas logo após o im- plante da válvula. As estruturas da válvula são revestidas com proteí- nas do hospedeiro, tais como fibronectina e fibrinogênio, às quais as bactérias podem aderir e iniciar a infecção.
[00117] As bactérias mais frequentemente encontradas no início da PVE (dentro de dois meses após o implante) são S. aureus e estafilo- cocos coagulase-negativos.
[00118] As bactérias mais frequentemente encontradas na PVE tar- dia (dois meses após o implante valvar) são estreptococos e S. au- reus, seguidos por estafilococos coagulase-negativos e enterococos.
[00119] Os estafilococos coagulase-negativos que causam PVE du- rante o primeiro ano após a cirurgia são quase exclusivamente Sta- phylococcus epidermidis. Entre 84 e 87 por cento das ditas bactérias são resistentes à meticilina e, portanto, resistentes a todos os antibióti- cos beta-lactâmicos.
[00120] A infecção articular peri-protética (PJI) é outra patogênese que ocorre em 1 a 2% das cirurgias de substituição articular e é uma das principais causas de falha da artroplastia.
[00121] Os biofilmes desempenham um papel importante na pato- gênese das PJlI. As bactérias dentro do biofilme se tornam resistentes à terapia; como resultado, a terapia antibacteriana geralmente não é bem-sucedida, a menos que o biofilme seja fisicamente interrompido ou removido por debridamento cirúrgico.
[00122] As infecções articulares protéticas têm as seguintes carac- terísticas. As infecções de início precoce geralmente são adquiridas durante o implante e geralmente são causadas por bactérias virulen- tas, como Staphylococcus aureus ou infecções mistas. As infecções de início tardio também são geralmente adquiridas durante o implante. Consistente com a apresentação indolente, as infecções tardias são geralmente causadas por bactérias menos virulentas, como estafiloco- cos coagulase-negativos ou enterococos. As infecções de início tardio resultantes de semeadura hematogênica são tipicamente agudas e frequentemente devidas a S. aureus ou estreptococos beta hemolíti-
cos.
[00123] A presente invenção permite inibir a infecção articular peri- protética (PJIs) sem cirurgia. Em modalidades particulares, o implante é tratado com os derivados de pirimidina da invenção antes da implan- tação. Adicionalmente ou alternativamente, o paciente recebe os deri- vados de pirimidina da invenção para prevenir ou tratar a infecção.
[00124] Em aspectos adicionais, a invenção fornece o uso de derivados de pirimidina de fórmula (1) ou seus sais como inibidor da formação de biofilme em uma superfície de um dispositivo médico suscetível de ser usado como implante de biomaterial ou não.
[00125] Em modalidades particulares, a formação de biofilme é causada por bactérias Gram-positivas.
[00126] Por dispositivo médico, é entendido particularmente qual- quer instrumento, dispositivo de ferramenta, por exemplo, dispositivo cirúrgico, agulha, tubo, luvas e semelhantes relacionados à medicina ou à prática da medicina humana ou veterinária, ou pretendidos para o uso para curar, tratar ou prevenir uma doença, tais como, por exemplo, um oxigenador, câmaras de bomba peristálticas, membranas renais e semelhantes; produtos médicos tais como curativos, preenchimentos de tecidos moles, preenchimentos de canais radiculares, lentes de contato, bolsa de sangue; mas também biomateriais que precisam ser estéreis para serem introduzidos no mamífero hospedeiro.
[00127] —Preferivelmente, os derivados de pirimidina de fórmula (1) ou seu sal ou profármaco aceitáveis estão carregando um grupo difluo- rfenilciclopropila; e são mais preferivelmente N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (1c); 9-alil-N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfeni!)ciclopropi!)-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (15c);
N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-(prop-2-in-1-i1)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (17c); (18,2R,38,4R)-4-(6-(((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)amino)-2-(propiltio)-9H-purin- — 9-il)ciclopentano- 1,2,3-triol (19d); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2-(metiltio)- 9H-purin-6-amina (22c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(metiltio)- 9H-purin-6-amina (24c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(etiltio)-9-metil- 9H-purin-6-amina (20c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil|)ciclopropil)-9-etil-2-(etiltio)-9H- purin-6-amina (21c); 2-(butiltio)-N-((1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil- 9H-purin-6-amina (25c); N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-metil-6- (metiltio)-1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina(27Kk); N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(metiltio)- 1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (30k); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6- (etiltio)-1-metil -1H-pirazol[3,4-dpirimidin-4-amina (28x.HCI); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1- isopropil-6-(metiltio)-1 H-pirazol[3,4-0pirimidin-4-amina (33k.HCI); cloridrato de N-((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-7-etil- 2-(metiltio)-7 H-pirrol[2,3-a]pirimidin-4-amina (35p.HCI); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
[00128] O inibidor de biofilme sobre uma superfície mais preferido é N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2-(propiltio)-9H-purin-
6-amina (1c) como ilustrado:
NO
NOS N F nO) ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
[00129] Dispositivos médicos e implantes de biomateriais são sus- cetíveis à colonização bacteriana e podem ser infectados, respectiva- mente, por uma formação de biofilme bacteriano, quando usados fora do corpo humano ou de animal ou dentro do corpo humano ou animal.
[00130] Para evitar ter que remover o implante de biomaterial infec- tado do hospedeiro ou evitar uma administração adicional ao hospe- deiro de uma alta dose de antibióticos para inibir a infecção bacteriana, surpreendentemente foi descoberto que a aplicação do derivado de pirimidina de fórmula (Il) ou seus sais aceitáveis diretamente na super- fície do dispositivo médico ou do implante de biomaterial, evita a con- taminação bacteriana.
[00131] Essa aplicação pode ser realizada, por várias técnicas bem conhecidas, tais como por exemplo mergulhar a superfície a ser reves- tida ou pulverizar a superfície com derivados de pirimidina de fórmula (1) ou seus sais ou com uma composição farmacêutica que compreen- de derivados de pirimidina de fórmula (1) ou isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada.
[00132] Por superfície, entende-se qualquer tipo de superfície, tal como superfície de borracha ou plástico, como por exemplo, superfície de polietileno, polipropileno, poliuretano, cloreto de polivinila, polivinil- pirrolidona, politetrafluoretileno, silicone ou semelhantes ou copolíime-
ros, mas também e preferivelmente superfícies metálicas, tais como aço inoxidável, prata, ouro, titânio, ligas metálicas de carbono pirolítico e semelhantes. Também pode ser usado em superfícies bio- absorvíveis ou biomateriais, tais como próteses biológicas ou dispositi- vos que são feitos de material biológico, tal como por exemplo, válvula cardíaca porcina ou pericárdio bovino.
[00133] Por inibição de biofilme em uma superfície, entende-se a inibição da formação de biofilme bacteriano em todas as etapas de sua formação, começando pela prevenção ou inibição da aderência de bactérias na superfície na etapa 1, mas também e principalmente por uma inibição no crescimento, multiplicação de bactérias, formação de micro-colônias na superfície na etapa 2. Por inibição do biofilme, tam- bém é entendida a inibição da matriz na etapa de maturação 3 e inibi- ção da dispersão de bactérias da matriz em uma etapa de coloniza- ção. Por inibição do biofilme, entende-se matar bactérias em todas as etapas da formação do biofilme.
[00134] Um outro aspecto de acordo com a invenção é um mé- todo para matar ou prevenir o crescimento bacteriano durante a formação de biofilme em uma superfície.
[00135] O método compreende a aplicação de derivados de pirimi- dina de fórmula (1) ou isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adi- ção de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metais farmaceuti- camente aceitáveis ou sais de amônia alquilada; em uma superfície, seja em uma etapa de prevenção, reduzindo a aderência e a sobrevi- vência de bactérias no substrato ou em um estágio onde o biofilme já esteja presente, ou mesmo em uma etapa de maturação com uma formação de matriz, em que uma arquitetura mais complexa do biofil- me é estabelecida, protegendo as bactérias como uma barreira ao agente antibacteriano convencional.
[00136] Fatores que tornam as bactérias especialmente capazes de sobreviver em vários biomateriais ou dispositivos médicos incluem adesão e produção de um biofilme.
[00137] Um estágio inicial da formação do biofilme é a fixa ção/aderência à superfície, que é mais forte em condições de tensão de cisalhamento. Uma proteína responsável principalmente por essa adesão é o polissacarídeo adesina intercelular (PIA), que permite que as bactérias se liguem entre si e com as superfícies, criando o biofil- me. O segundo estágio da formação do biofilme é o desenvolvimento de uma estrutura e ecossistema comunitário, o que dá origem a um biofilme maduro. O estágio final é o descolamento da superfície, com consequente dispersão para outros locais. Em todas as etapas da for- mação do biofilme, um sistema de comunicação entre bactérias de- pendente de quórum (Q.S), que medeia a comunicação de célula a célula, está envolvido.
[00138] As bactérias do biofilme produzem substâncias poliméricas extracelulares (EPS) que consistem principalmente em polissacaríi- deos, ácidos nucléicos (DNA extracelular) e proteínas, que as prote- gem de ameaças externas, incluindo componentes do sistema imuno- lógico e antimicrobianos. Além disso, as bactérias no biofilme apresen- tam um metabolismo diminuído, tornando-as menos suscetíveis a anti- bióticos; isso se deve ao fato de que a maioria dos antimicrobianos exige um certo grau de atividade celular para ser eficaz. Outro fator que reforça essa resistência é a difusão prejudicada dos antibióticos por todo o biofilme, devido à presença da barreira da matriz de EPS.
[00139] É bem sabido que no biofilme há uma maior taxa de troca de plasmídeos, aumentando as chances de desenvolver resistência natural e induzida aos antimicrobianos.
[00140] As estratégias que foram desenvolvidas para eliminar os biofilmes visam três etapas diferentes na formação do biofilme: inibi- ção do estágio inicial, isto é, a adesão de bactérias às superfícies; in-
terrupção da arquitetura do biofilme durante o processo de maturação ou na etapa 2; inibição do sistema Q.S ou etapa 3.
[00141] Devido à alta resistência desses biofilmes aos antibióticos, há uma necessidade crescente de controle e prevenção do crescimen- to microbiano e formação de biofilmes no estágio 2 para evitar a remo- ção do implante de biomaterial do hospedeiro, juntamente com um longo tratamento com antibióticos.
[00142] O método para matar bactérias ou prevenir o crescimento bacteriano em uma superfície é geralmente aplicado ao implante de biomaterial ou a qualquer dispositivo médico, implantável ou não.
[00143] Os implantes de biomateriais ou dispositivos médicos são preferivelmente de material estranho implantável para uso clínico em mamíferos hospedeiros, tais como dispositivos protéticos, marcapas- sos, cardioversores-desfibriladores implantáveis, cateteres intravascu- lares, stent coronário, válvulas cardíacas, lentes intraoculares e seme- lhantes, mas incluem outros dispositivos médicos não implantáveis que precisam ser estéreis, tais como, por exemplo, curativos para feri- das, enchimentos de tecidos moles contendo anestésicos locais, en- chimentos de canais radiculares com substâncias medicinais auxiliares e semelhantes.
[00144] O método de matar bactérias ou prevenir o crescimento bacteriano também pode ser aplicado à superfície de um dispositivo experimental ou cirúrgico que necessite de tal tratamento antibacteria- no. Praticamente o método pode ser aplicado e não está limitado a qualquer dispositivo, ferramenta, instrumento, relacionado à medicina ou à prática de medicina humana ou veterinária, ou destinado ao uso para curar, tratar ou prevenir uma doença.
[00145] Ainda em um aspecto adicional, a presente invenção fornece derivados de pirimidina de fórmula (|) ou seu sal, opcio- nalmente compreendendo um marcador detectável, para uso no diagnóstico ou prognóstico de infecção bacteriana em um mamí- fero hospedeiro.
[00146] A expressão "marcador detectável", como usada aqui, se refere a qualquer tipo de marcador que seja detectável e, portanto, permita a determinação da presença do derivado de pirimidina. Em modalidades particulares, o marcador é um isótopo que permite o uso do derivado de pirimidina como um radiomarcador.
[00147] A presente invenção também fornece uma composição farmacêutica que compreende os derivados de pirimidina de fórmula (1) ou seus sais, opcionalmente compreendendo um marcador detectá- vel, para uso no diagnóstico ou prognóstico de infecção bacteriana em um mamífero hospedeiro.
[00148] Surpreendentemente, descobriu-se que derivados de piri- midina de fórmula (|) ou uma composição dos mesmos, que compre- endem opcionalmente um átomo isotópico detectável, podem ser utili- zados para detectar uma infecção bacteriana em um mamífero hospe- deiro; tal como, por exemplo, para o diagnóstico de endocardite, uma doença desenvolvida após uma cirurgia protética da válvula. De fato, os derivados de pirimidina de acordo com a invenção ou suas compo- sições que compreendem um marcador detectável podem identificar uma infecção bacteriana no hospedeiro e podem ser absorvidos por uma célula bacteriana. Derivados de pirimidina ou suas composições podem, por exemplo, ser utilizados como radiomarcador para imagens in vivo.
[00149] Geralmente, o método de detecção usado no diagnóstico dependerá da natureza do marcador. Por exemplo, para fins de ima- gem in vivo, o derivado de pirimidina compreenderá um radiomarcador e o tipo de instrumento de detecção dependerá do radiomarcador. Por exemplo, o derivado de pirimidina que compreende opcionalmente pe- lo menos um isótopo detectável de acordo com a invenção, pode ser detectado usando imagem beta, gama, pósitron ou raios-x, em que, por exemplo, a irradiação beta ou gama é fornecida pelo isótopo rele- vante e é detectada em um comprimento de onda apropriado.
[00150] O derivado de pirimidina que compreende opcionalmente um isótopo detectável pode ser usado, por exemplo, com imagem de raios-X, espectroscopia de ressonância magnética (MRS) ou imagem (MRI), ultrassonografia, tomografia por emissão de pósitrons (PET) e tomografia computadorizada de emissão única (SPECT).
[00151] O derivado de pirimidina detectável pode ser detectado através do isótopo *º*F ou *ºC ou uma combinação dos mesmos para MRS/ MRI por técnicas de química orgânica bem conhecidas.
[00152] Outro derivado de pirimidina detectável também pode com- preender um isótopo selecionado entre *ºF, *'C, 7SBr, ?*Br ou 1? ou uma combinação dos mesmos para técnicas de PET.
[00153] Outros derivados de pirimidina detectáveis compreendem um isótopo selecionado entre *º%F ou *'C ou uma combinação dos mesmos para imagem de PET in vivo, conforme descrito em Bengt Langstrom em Acta Chemica Scandinavia, 53: 651-669 (1999) ou no jornal Nuclear Medicine 58(7):1094-1099(2017) A.M.J. Paans em https://cds.cern.ch/record/1005065/files/p363.pdf
[00154] O derivado de pirimidina também pode compreender 1?%| e 131] para SPECT como descrito por Kulkarni, Int. J. Rad. Appl. & Inst (part B) 18:64 (1991).
[00155] O derivado de pirimidina também pode ser detectável com tecnécio-99m (Tc). A modificação do derivado de pirimidina para introduzir um ligante que se ligue a tais íons de metal pode ser realiza- da por um especialista na técnica. A preparação de derivados detectá- veis de º"Tc é bem conhecida na técnica (Zhuang in Nuclear Medici- ne & Biology 26 (2):217-24 (1999).
[00156] Um derivado de pirimidina preferido de fórmula (|) ou isô-
meros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceuti- camente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada para uso como radiomarcador, tal como no diagnóstico ou prognóstico de infecção bacteriana, compreende um grupo fenilciclopropila, conforme ilustrado na fórmula (IV).
O (IV).
[00157] Os derivado de pirimidina mais preferidos de fórmula (1) ou isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceu- ticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada, tal como para uso como radiomarcador, compreendem um grupo difluorfenilciclopropila.
[00158] Os derivado de pirimidina mais preferidos de fórmula (1) ou isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceu- ticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada, para uso como radiomarcador, compreen- dem um grupo 3,4-difluorfenilciclopropila como ilustrado na fórmula (II).
[00159] Por radiomarcador, é entendido um derivado de pirimidina em que um ou mais átomos são substituídos por um radionuclídeo ou isótopo a ser usado como marcador para explorar células, tecidos ou fluidos de um mamífero hospedeiro e identificar a presença e a impor- tância de uma infecção bacteriana no hospedeiro, por exemplo. na su- perfície de uma válvula protética.
[00160] Por radionuclídeo ou isótopo entende-se, por exemplo, 3H, 18FE, 19º, "E, BC, "e, 7SBr, 76Br, 120] , 123, 1251, 131, 15O, SN,
[00161] Por radiomarcador, também é entendido um derivado de pirimidina associado a um agente de contraste, como, por exemplo, um agente de contraste de MRI ou marcadores de MR para imagens por Ressonância Magnética (MRI); ou agente de contraste usado em imagens de ultrassom intensificadas com contraste.
[00162] O derivado de pirimidina ou sua composição usado como radiomarcador é administrado localmente ou sistemicamente por ina- lação, ingestão ou injeção ou através de um reservatório implantado no mamífero hospedeiro em uma dose que é relevante para um dispo- sitivo de imagem selecionado. A administração pode ser oral, parente- ral, tópica, retal, nasal, vaginal.
[00163] Por via parenteral, entende-se por via subcutânea, intrave- nosa, intra-arterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular e seme- lhantes.
[00164] Os níveis de administração da dose ao hospedeiro depen- dem de sua idade, peso, estado geral de saúde, sexo, tempo de admi- nistração, forma de administração e similares e são bem conhecidos por aqueles versados na técnica. Eles podem variar entre 0,001 ug/kg/dia e 10.000 mg/kg/ dia, de acordo com a técnica de imagem selecionada.
[00165] Uma imagem in vivo resultante da infecção bacteriana do mamífero hospedeiro é fornecida, por exemplo, na posição da válvula protética.
[00166] Outras aplicações dos derivados de pirimidina da presente invenção incluem o monitoramento da contaminação bacteriana em amostras, tal como em amostras biológicas. Amostras típicas onde is- so é de interesse são água, sangue, carne etc. Descrição resumida das Figuras
[00167] A Figura 1 ilustra a inibição da formação de biofilme de Staphylococcus aureus (Xen29-ATCC 12600) (etapa 2) em meio con- tendo as moléculas testadas 2329 (1c), 2348 (3c), 2412 (15c), 2452 (17c) em uma concentração de 10 mM em comparação com o meio contendo o veículo sozinho como controle (CTRL).
[00168] A Figura 2 ilustra o efeito de um tratamento de 24 horas com diferentes concentrações da molécula 2329 (1c) em um biofilme maduro (etapa 3: biofilme de 24 horas) de S.epidermidis. A biomassa do biofilme de S.epidermidis, corada com cristal violeta, é proporcional à absorbância do corante a 570 nm
[00169] A Figura 3 ilustra a cinética de inibição da formação de bio- filme de Staphylococcus aureus (XKen29-ATCC 12600) (etapa 2) em meio contendo a molécula de pirazol 2666 (28x.HCI) e a molécula de purina 2511 (24c) a uma concentração de 20 mM em comparação com o meio que contém o veículo sozinho como controle (Ctrl).
[00170] A invenção será ilustrada daqui por diante pelos seguintes exemplos não limitantes.
1. Preparação de derivados de pirimidina: Exemplo 1: Síntese de N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- metil-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (1c) 6-Cloro-N-metil-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (1a)
CI e As NE
H
[00171] 4,6-dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvido em metanol (2 mL) e suplementado com uma solução de metilamina 33% p/p em metanol (0,76 mL, 6,3 mmol). A mistura de re- ação foi introduzida em um vaso selado e aquecida a 100ºC por 1 h. Após concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resí- duo foi purificado por cromatografia em coluna em sílica-gel.
[00172] Rendimento: 96%.
[00173] Ponto de fusão: 119-121ºC.
[00174] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,64 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,87 (d, J=4,5 Hz, 3H, NHCH;), 2,96 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2C0H3), 4,71 (s, 2H, NH2), 7,01 (q, J=4,4
Hz, 1H, NHCH;3).
[00175] *C RMN (DMSO-d]) õ 133 (SCH2CH2CH3), 22,6 (SCH2CH2CH3), 27,8 (NHCH3), 32,1 (SCH2CH2CH3), 120,0 (C-5), 137,1 (C-6), 153,2 (CH), 155,4 (C-2). 6-Cloro-9-metil-2-(propiltio)-9H-purina (1b) Cl NOSTAN, AO?
[00176] Uma solução de (1a) (233,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e do ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi puri- ficado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00177] Rendimento: 77%.
[00178] Ponto de fusão: 75-78ºC.
[00179] HRMN (DMSO-ds) 5 1,01 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,74 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,18 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CHs), 3,79 (s, 3H, NCH;3), 8,48 (s, 1H, 8-H),
[00180] *C RMN (DMSO-d]) 53 132 (SCH2CH2CH3), 22,0 (SCH2CH2CH3), 29,9 (NCH3), 32,6 (SCH2CH2CH3), 127,9 (C-5), 147,0 (C-8), 148,7 (C-6), 153,2 (C-4), 163,9 (C-2). N-((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2-(propiltio)-9H-purin- 6-amina (1c) NOSEAN, F AE)
[00181] Uma solução de (1b) (122,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,2S)- 2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL ) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após destilação da acetonitrila e trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por croma- tografia de coluna em sílica-gel.
[00182] Rendimento: 42%.
[00183] Ponto de fusão: 94-96ºC.
[00184] 'H RMN (CDCI3) 5 0,93 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,32 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,65 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH;), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 3,02(m,2H,SCH2CH2CH3), 3,12 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,76 (s, 3H, NCH;3), 5,98 (bs, 1H, NH), 6,97 (m, 1H, 6'-H), 7,07 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,59 (s, 1H, 8-H),
[00185] *C RMN (CDCi3) 3 134 (SCH2CH2CH;) 16,2 (NHCH(CH2)CHPh), 22,8 (SCH2CH2CH3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 29,7 (NCH3), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,4 (NHCH(CH2)CHPh), 115,5 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,4 (C-5), 122,6 (C-6'), 137,9 (C-1'), 139,5 (C-8), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2- 151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,8 (C-4), 154,5 (C-6), 165,6 (C-2). Exemplo 2: Síntese de 9-metil-N-((1R,2S)-2-fenilciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (2c) 9-Metil-N-((1 R,2S)-2-fenilciclopropil)-2-(propiltio)-9 H-purin-6-amina (2c)
NOSEN AO?
[00186] “Uma solução de (1b) (122,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,2S)-2-fenilciciopropanamina (56,0 mg, 1,1 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 4 h. Após a destilação dos solventes sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00187] Rendimento: 27%.
[00188] Ponto de fusão: 171-172,5ºC,
[00189] 'H RMN (CDCI3) 5 0,88 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;),
1,33 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,60 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH;), 2,13 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,92 (m, 1H, SCH2CH2CH3), 3,06 (m, 1H, SCH2CH2CH3), 3,22 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,75 (s, 3H, NCH;3), 5,97 (bs, 1H, NH), 7,19 (m, 3H, 2'-H/4'-H/6"-H), 7,30 (m, 2H, 3'- H/5'-H), 7,58 (s, 1H, 8-H),
[00190] *C RMN (CDC) 3 133 (SCHCH2CH3;) 16,8 (NHCH(CH2)CHPh), 22,8 (SCH2CH2CH3), 25,7 (NHCH(CH2)CHPh), 29,7 (NCH3), 33,3 (SCH2CH2CH3), 33,5 (NHCH(CH2)CHPh), 117,4 (C- 5), 126,0 (C-4'), 126,2 (C-2'/0-6'), 128,3 (C-3'/0-5'), 139,5 (C-8), 140,9 (C-1'), 150,8 (C-4), 154,6 (C-6), 165,6 (C-2). Exemplo 3: síntese de N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- etil-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (3c) 6-Cloro-Nº-etil-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (3a) fe] e
AN NO
[00191] 4,6-Dicloro-2-(propiltio )pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em uma solução de etilamina 2,0 M em metanol (3,2 mL, 6,4 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 1 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de co- luna em sílica-gel
[00192] Rendimento: 77%.
[00193] Ponto de fusão: 96-98ºC.
[00194] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,16 (t J=7,2 Hz, 3H, NHCH2CH;3), 1,63 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,94 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,37 (m, 2H, NHCH2CH;3), 4,75 (s, 2H, NH2), 6,95 (t, J=4,8 Hz, 1H, NHCH2CH;),
[00195] *C RMN (DMSO-d;]) 53 133 (SCH2CH2CH3), 14,3 (NHCH2CH3), 22,7 (SCH2CHxCH3), 321 (SCH2CH2CH3), 35,7
(NHCH2CH3), 119,8 (C-5), 137,3 (C-6), 152,5 (C-4), 155,3 (C-2). 6-Cloro-9-etil-2-(propiltio)-9H-purina (3b) foi] W2N
NI LL
[00196] Uma solução de (3a) (247,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e do ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi puri- ficado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00197] Rendimento: 77%.
[00198] Ponto de fusão: 96-97,5ºC.
[00199] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,01 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 144 (t J=7,3 Hz, 3H, NCHCHs), 1,74 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,17 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2C0H3), 4,24 (q, J=7,3 Hz, 2H, NCH2CH;3), 8,56 (s, 1H, 8-H).
[00200] *C RMN (DMSO-d;]) 5 132 (SCH2CH2CH3), 14,6 (NCH2CH3), 22,0 (SCH2CH2CH3), 32,6 (SCH2CH2CH3;) 39,9 (NCH2CH3), 128,1 (C-5), 146,0 (C-8), 148,8 (C-6), 152,7 (C-4), 163,8 (0-2). N((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(propiltio)-9H-purin-6- amina (3c) W-N
IO LL
[00201] “Uma solução de (3b) (129,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00202] Rendimento: 43%.
[00203] Ponto de fusão: 109,5-111,5ºC,
[00204] 1H RMN (CDCI3) 5 0,94 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCHCH2CHs), 1,32 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,50 (t, J=7,3 Hz, 3H, NCH2CH;), 1,67 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,03 (m, 2H, SCH2CH2CH3), 3,12 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,18 (q, J=7,3 Hz, 2H, NCH2CH;3), 5,90 (bs, 1H, NH), 6,99 (m, 1H, 6-H), 7,08 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,63 (s, 1H, 8-H),
[00205] ºC RMN (CDCI3) 5 13,4 (SCH2CH2CH3), 15,5 (NCH2CH3), 16,1 (NHCH(CH2)CHPh), 22,9 (SCH2CH2CH;), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 38,7 (NCH2CH3), 115,6 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,6 (C-5), 122,7 (C-6'), 137,9 (C-1'), 138,5 (C-8), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,3 (C-4), 154,5 (C-6), 165,4 (C-2). Exemplo 4: síntese de N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- propil-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (4c) 6-Cloro-Nº-propil-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (4a) Cl e
AN NO
[00206] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com n-propilamina (370,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 30 min. Após a concentração da mis- tura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por croma- tografia de coluna em sílica-gel
[00207] Rendimento: 91%.
[00208] “Ponto de fusão: 100-102ºC.
[002090] '*H RMN (DMSO-ds) 3 091 (t J=74 Hz, 3H, NHCH2CH2CHs;3), 0,95 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CH;3), 1,56 (h, J=7,3 Hz, 2H, NHCH2CH2CHs3), 1,64 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,93 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,32 (m, 2H, NHCH2CH2CH3), 4,76 (s, 2H, NH), 6,96 (t, J=4,8 Hz, 1H, NHCH2CH2CH;3),
[00210] *C RMN (DMSO-ds]) 5 11,5] (NHCH2CH2CH3)I 013,3 (SCH2CH2CH3), 21,9 (NHCH2CH2CH3), 22,8 (SCH2CH2CH3), 32,1 (SCH2CH2CH3), 42,7 (NHCH2CH2C0H3), 119,8 (C-5), 137,3 (C-6), 152,6 (C-4), 155,2 (C-2), 6-Cloro-9-propil-2-(propiltio)-9H-purina (4b) cl W2—N
O m
[00211] Uma solução de (4a) (261,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00212] Rendimento: 94%.
[00213] Ponto de fusão: líquido.
[00214] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,85 (t, J=7,4 Hz, 3H, NCH2CH2CH;), 1,01 (t, J=74 Hz, 3H, SCHICH2CH3), 1,74 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,86 (h, J=7,3 Hz, 2H, NCH2CH2CH3), 3,17 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 4,18 (t, J=7,0 Hz, 2H, NCH2CH2CH3), 8,55 (s, 1H, 8-H),
[00215] *C RMN (DMSO-ds) 5 10,9 (NCH2CH2CH3), 13,2 (SCH2CH2CH3), 22,1 (SCH2CH2CH3), 22,3 (NCH2CH2CH3), 32,6 (SCH2CH2CH3), 45,3 (NCH2CH2CH3), 128,0 (C-5), 146,4 (C-8), 148,9 (C-6), 152,9 (C-4), 163,8 (C-2).
N-((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-propil-2-(propiltio)-9H-purin- 6-amina (4c) ro W—N O '
[00216] Uma solução de (4b) (136,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00217] Rendimento: 45%.
[00218] Ponto de fusão: 97-99ºC.
[00219] 'H RMN (CDCi) 3d 09 (t J=74 Hz 6H, NCH2CH2CH3/SCH2CH2C0H;3), 1,32 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,67 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,90 (h, J=7,4 Hz, 2H, NCH2CH2CH;), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,03 (m, 2H, SCH2CH2CH3), 3,11 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,09 (t, J=7,1 Hz, 2H, NCH2CH2CH;3), 5,86 (bs, 1H, NH), 7,00 (m, 1H, 6-H), 7,09 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,61 (s, 1H, 8-H),
[00220] *C RMN (CDCl) õ 112 (NCH2CH2CH3), 13,4 (SCH2CH2CH3), 15,7 (NHCH(CH2)CHPh), 22,9 (SCH2CH2CH3), 23,3 (NCH2CH2CH3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 45,3 (NCH2CH2CH3), 115,6 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,6 (C-5), 122,7 (C-6'), 137,9 (C-1'), 139,0 (0-8), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,5 (C-4), 154,5 (C-6), 165,4 (C-2). Exemplo 5: síntese de N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- isopropil-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (5c) 6-Cloro-N-isopropil-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (5a)
C e" Os
[00221] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com isopropilamina (370,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 90 min. Após a concentração da mis- tura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por croma- tografia de coluna em sílica-gel.
[00222] — Rendimento: 95%.
[00223] Ponto de fusão: 81-83ºC.
[00224] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,95 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCHCH2CH;), 1,19 (d, J=6,5 Hz, 6H, NHCH(CH3)2), 1,63 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,93 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 4,16 (m, 1H, NHCH(CH3)2), 4,81 (s, 2H, NH2), 6,69 (d, J=6,9 Hz, 1H, NHCH(CH;3)>2),
[00225] *C RMN (DMSO-ds) 53 133 (SCH2CH2CH3), 22,2 (NHCH(CH3):), 22,8 (SCH2CH2CH3), 32,1 (SCH2CH2CH3), 42,6 (NHCH(CH;3)2), 119,7 (C-5), 137,3 (C-6), 151,7 (CH), 155,1 (C-2). 6-Cloro-9-isopropil-2-(propiltio)-9H-purina (5b) foi]
NOS N O
[00226] Uma solução de (5a) (261,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00227] Rendimento: 37%.
[00228] “Ponto de fusão: 121-122,5ºC,
[00229] 1H RMN (DMSO-ds)õ 1,01 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCHCH2CH;), 1,56 (d, J=6,8 Hz, 6H, NCH(CH3)2), 1,74 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CHs3), 3,16 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 4,80 (hept, J=6,8 Hz, 1H, NCH(CH3)2), 8,62 (s, 1H, 8-H),
[00230] *C RMN (DMSO-ds) 53 133 (SCH2CH2CH3), 21,7 (NCH(CH3)), 22,1 (SCH2CH2CH3) 32,6 (SCH2CH2CH3) 47,9 (NCH(CH3)2), 128,4 (C-5), 144,7 (C-8), 148,9 (C-6), 152,3 (C4), 163,5 (C-2). N-((1R,28)-2-(3,4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-isopropil-2-(propiltio)-9H- burin-6-amina (5c) W-N SNS i
[00231] Uma solução de (5b) (136,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00232] Rendimento: 47%.
[00233] Ponto de fusão: 98,5-100,5ºC,
[00234] 'H RMN (CDCI3) 5 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,31 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,58 (dd, J=6,8 Hz/1,6 Hz, 6H, NCH(CH;3)2), 1,68 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,08 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,04 (m, 2H, SCH2CH2CH3), 3,10 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,77 (hept, J=6,8 Hz, 1H, NCH(CH3)2), 5,95 (bs, 1H, NH), 7,00 (m, 1H, 6-H), 7,09 (m, 2H, 2-H/5'-H), 7,68 (s, 1H, 8-H),
[00235] '*C RMN (CDC) à3 135 (SCH.CH2CH3), 16,0 (NHCH(CH2)CHPh), 22,6 (NCH(CH3)2), 22,9 (SCH2CH2CH3), 25,2
(NHCH(CH2)CHPh), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 47,0 (NCH(CH3)2), 115,7 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,9 (C-5), 122,8 (C-6'), 136,7 (C-8), 137,9 (C-1'), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, 0-3'), 150,0 (C-4), 154,6 (C-6), 165,1 (C-2). Exemplo 6: síntese de 9-ciclopropil-N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (6c) 6-Cloro-Nº-ciclopropil-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (6a) foi]
O NÃ b
[00236] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com ciclopropilamina (360,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 30 min. Após a concentração da mis- tura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por croma- tografia de coluna em sílica-gel
[00237] Rendimento: 92%.
[00238] Ponto de fusão: 96-98ºC.
[00239] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,49 (s, 2H, NHCH(CH2)2), 0,73 (d, J=5,7 Hz, 2H, NHCH(CH>2)2), 0,95 (t, J=7,1 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,66 (h, J=7,0 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,80 (m, 1H, NHCH(CH>2)2), 2,97 (t, J=6,9 Hz, 2H, SCHXCH2CH3), 4,74 (s, 2H, NH2), 7,09 (s, 1H, NHCH(CH>2)>2),
[00240] *C RMN (DMSO-ds) ô 62 (NHCH(CH2))), 13,3 (SCH2CH2CH3), 22,8 (SCH2CH2CH3), 24,1 (NHCH(CH2))), 32,2 (SCH2CH2CH3), 120,0 (C-5), 137,3 (0-6), 153,4 (C-4), 155,2 (C-2). 6-Cloro-9-ciclopropil-2-(propiltio)-9H-purina (6b)
foi]
NOS N AO
[00241] “Uma solução de (6a) (259,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e do ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi puri- ficado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00242] "Rendimento: 58%.
[00243] Ponto de fusão: 128,5-130ºC.
[00244] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,02 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,09 (m, 2H, NCH(CH2)2), 1,16 (m, 2H, NCH(CH2)2), 1,75 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,17 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,55 (m, 1H, NCH(CH>2)2), 8,52 (s, 1H, 8-H).
[00245] *C RMN (DMSO-ds) ôõ 54 (NCH(CH2))) 133 (SCH2CH2CH3), 221 (SCH2CH2CH3), 25,6 (NCH(CH2))), 32,7 (SCH2CH2CH3), 128,2 (C-5), 146,7 (C-8), 148,8 (C-6), 153,9 (C-4), 163,9 (C-2). 9-Ciclopropil-N-((1R,2S)-2-(3, 4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H- purin-6-amina (6c)
NOS N F O
[00246] Uma solução de (6b) (135,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina trietilamina sob vácuo, o resíduo foi pu-
rificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00247] Rendimento: 40%.
[00248] Ponto de fusão: 137-139ºC.
[00249] 1H RMN (CDCI3) 5 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,10 (m, 2H, NCH(CH2)2), 1,43 (m, 2H, NCH(CH2)2), 1,31 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,68 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH;3), 2,08 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,08 (m, 2H, SCH2CH2CH3), 3,10 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,38 (tt, J=7,1 Hz/3,9 Hz, 1H, NCH(CH2)2), 5,88 (bs, 1H, NH), 6,99 (m, 1H, 6-H), 7,08 (m, 2H, 2'-H/5'-H), 7,61 (s, 1H, 8- H).
[00250] ºC RMN (CDCI3) 5 5,9 (NCH(CH>2)2), 13,5 (SCH2CH2CH3), 16,1 (NHCH(CH2)CHPh), 22,9 (SCH2CH2CH;), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 25,3 (NCH(CH>2)2), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 115,6 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,4 (C-5), 122,7 (C-6'), 137,9 (C-1'), 139,4 (C-8),147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 151,6 (C-4), 154,4 (C-6), 165,6 (C-2). Exemplo 7 síntese de 9-butil-N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (7c)
[00251] — Nº-Butil-6-cloro-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (7a) Cl e
NE NOS
[00252] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com n-butilamina (460,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 30 min. Após a concentração da mis- tura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por croma- tografia de coluna em sílica-gel
[00253] “Rendimento: 95%.
[00254] — Ponto de fusão: líquido.
[00255] '*H RMN (DMSO-ds) 3 091 (t J=74 Hz, 3H, NHCH2CH2CH2CH3), 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH20H3), 1,35 (h, J=7,4 Hz, 2H, NHCHCH2CH2CH3), 1,55 (p, J=7,5 Hz, 2H, NHCH2CH2CH2CH3), 1,64 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,95 (t, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,37 (m, 2H, NHCH2CH2CH2CH3), 4,76 (s, 2H, NH2), 6,94 (t, J=5,2 Hz, 1H, NHCH2CH2CH2CH;3),
[00256] *C RMN (DMSO-d;) ô 133 (SCH2CH2CH3), 13,7 (NHCH2CH2CH2CH3), 19,6(NHCH2CH2CH2C0H3), 22,8 (SCH2CH2CH;3), 30,8 (NHCH2CH2CH2CH;), 32,1 (SCH2CH2CH;), 40,6 (NHCH2CH2CH2CH3), 119,8 (0-5), 137,3 (C-6), 152,6 (C-4), 155,2 (C- 2). 9-Butil-6-cloro-2-(propiltio)-9H-purina (7b) Cc
NOS N
AO 1
[00257] “Uma solução de (7a) (275,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00258] “Rendimento: 72%.
[00259] — Ponto de fusão: líquido.
[00260] '*H RMN (DMSO-d;s) 5 0,90 (t J=74 Hz 3H, NCH2CH2CH2C0H3), 1,01 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2C0H3), 1,26 (h, J=74 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH3), 1,74 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,83 (p, J=7,2 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH3), 3,16 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCHCHCH3), 4,22 (t J=71 Hz 2H, NCHCH2CH2CH3), 8,56 (s, 1H, 8-H),
[00261] *C RMN (DMSO-d]) 53 132 (SCH2CH2CH3), 13,3
(NCH2CH2CH2CH3), 19,2 (NCH2CH2CH2C0H3), 22,1 (SCH2CH2CH;), 30,9 (NCH2CH2CH2CH;), 32,6 (SCH2CH2CH;3), 43,3 (NCH2CH2CH2CH3), 127,9 (C-5), 146,3 (C-8), 148,9 (C-6), 152,8 (C-4), 163,8 (C-2). 9-Butil-N-((1R,2S)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin- 6-amina (7c)
NOR N F
IDO 2
[00262] Uma solução de (7b) (143,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00263] Rendimento: 61%.
[00264] Ponto de fusão: 85-87ºC.
[00265] 'H RMN (CDCI3) õ 0,95 (m, 6H, NCH2CH2CH20H3/SCH2CH2C0H;), 1,33 (m, 4H, NCH2CH2CH2CH3yNHCH(CH2)JCHPh), 1,68 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2C Ha), 1,86 (p, J=7,3 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH3), 2,10 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,08 (m, 2H, SCH2CH2CH3), 3,13 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,14 (t, J=7,1 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH3), 6,19 (bs, 1H, NH), 6,99 (m, 1H, 6-H), 7,08 (m, 2H, 2'-H/5'-H), 7,64 (s, 1H, 8-H),
[00266] ºC RMN (CDCI3) 5 13,5 (SCH2CH2CH3/NCH2CH2CH2CH:), 16,0 (NHCH(CH2)CHPh), 19,8 (NCH2CH2CH2C Hs), 22,9 (SCH2CH2CH3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 31,9 (NCH2CH2CH2CH;), 33,2 (SCH2CH2CH;), 33,4 (NHCH(CH2)CHPh), 43,5 (NCH2CH2CH2CH3), 115,7 (d, J=17 Hz, 0-2"), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'),
117,5 (C-5), 122,7 (C-6'), 136,5 (C-8), 137,9 (C-1'), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,4 (C-4), 154,3 (C-6), 165,8 (C-2). Exemplo 8: síntese de 9-(sec-butil)-N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (8c) Nº-(sec-Butil)-6-cloro-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (8a) foi] e
AN NH A
[00267] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com sec-butilamina (460,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 90 min. Após a concentração da mis- tura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por croma- tografia de coluna em sílica-gel.
[00268] “Rendimento: 81%.
[00269] — Ponto de fusão: líquido.
[00270] 'H RMN (DMSO-ds) õ 087 (t J=74 Hz, 3H, NHCH(CH3)CH2CH;3), 0,95 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH20H3), 1,15 (d, J=6,6 Hz, 3H, NHCH(CH3)CH2CHs3), 1,53 (m, 2H, NHCH(CH3)CH2CH;3), 1,64 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,93 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2C0H3), 4,01 (hept, J=6,6 Hz, 1H, NHCH(CH3)JCH2CH3), 4,81 (s, 2H, NH>2), 6,64 (d, J=7,5 Hz, 1H, NHCH(CH3)CH2CH;3),
[00271] “CC RMN (DMSO-ds) 5 10,5 (NHCH(CH3)CH2CH3), 13,3 (SCH2CH2CH3), 19,8 (NHCH(CH3)JCH2CH3), 22,8 (SCH2CH2C0H3), 28,6 (NHCH(CH3)CH2CH;), 32,1 (SCH2CH2CH;3), 47,9 (NHCH(CH3)JCH2CH3), 119,7 (C-5), 137,3 (C-6), 152,0 (C-4), 155,0 (C- 2). 9-(sec-Butil)-6-cloro-2-(propiltio)-9H-purina (8b)
CI NOS N SS
[00272] “Uma solução de (8a) (275,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 4 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00273] Rendimento: 39%.
[00274] Ponto de fusão: 64-66ºC.
[00275] '*H RMN (DMSO-d;) 5 0,74 (t J=74 Hz, 3H, NCH(CH3)CH2CH;3), 1,01 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CH3), 1,57 (d, J=6,9 Hz, 3H, NCH(CH3;)JCH2CH3), 1,74 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,95 (m, 2H, NCH(CH3)JCH2CH3), 3,15 (m, 2H, SCH2CH2C0H3), 4,57 (m, 1H, NCH(CH3)CH2CH3), 8,63 (s, 1H, 8-H),
[00276] **C RMN (DMSO-ds) à 10,5 (NCH(CH3)CH2CH3), 13,3 (SCH2CH2CH3), 19,8 (NCH(CH3)CH2CH3), 22,1 (SCH2CH2CH3), 28,3 (NCH(CH3)CH2CH3), 32,6 (SCH2CH2CH3), 53,6 (NCH(CH3)CH2CH;), 128,2 (C-5), 145,1 (C-8), 149,0 (C-6), 152,5 (C-4), 163,6 (C-2). 9-(sec-Butil)- N-((1R,2S)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H- purin-6-amina (8c)
SO NOS N F AO
[00277] Uma solução de( 8b) (143,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 4 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina trietilamina sob vácuo, o resíduo foi pu-
rificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00278] “Rendimento: 66%.
[00279] Ponto de fusão: 68-71ºC.
[00280] 'H RMN (CDCl3) à 0,85 (td, J=7,4 Hz/1,6 Hz, 3H, NCH(CH3)CH2CH;3), 0,96 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,33 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,57 (d, J=6,9 Hz, 3H, NCH(CH3)CH2CH3), 1,69 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,95 (m, 2H, NCH(CH3)CH2CH3), 2,10 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,03 (m, 2H, SCH2CH2CH;3), 3,11 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,52 (m, 1H, NCH(CH3)CH2CH3), 6,12 (bs, 1H, NH), 7,00 (m, 1H, 6-H), 7,10 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,67 (s, 1H, 8-H),
[00281] *C RMN (CDCls) 5 10,7 (NCH(CH3)CH2CH3), 13,5 (SCH2CH2CH3), 15,9 (NHCH(CH2)CHPh), 20,6 (NCH(CH3)CH2CH;), 22,9 (SCH2CH2CH;), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 29,5 (NCH(CH3)CH2CH3), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 53,0 (NCH(CH3)JCH2CH3), 115,8 (d, J=17 Hz, 0-2"), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,3 (C-5), 122,8 (C-6'), 137,0 (C-8), 137,9 (C-1'), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,3 (C-4), 154,4 (C-6), 165,1 (C-2). Exemplo 9: síntese de 9-(terc-butil)-N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (9c) Nº-(terc-Butil)-6-cloro-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (9a) foi] e
OX
[00282] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com terc-butilamina (460,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 24 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel
[00283] “Rendimento: 88%.
[00284] Ponto de fusão: 88-89ºC.
[00285] 1H RMN (DMSO-ds) õ 0,95 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,43 (s, 9H, NHC(CH;3)3), 1,62 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH;3), 2,95 (t, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 4,91 (bs, 2H, NH2), 6,19 (s, 1H, NHC(CH3)3),
[00286] *C RMN (DMSO-d]) 5 133 (SCH2CH2CH3), 22,9 (SCH2CH2CH3), 28,5 (NHC(CH3)s), 31,9 (SCH2CH2CH3), 51,9 (NHC(CH3)3), 120,3 (C-5), 137,6 (C-6), 152,1 (C-4), 154,5 (C-2). 9-(terc-Butil)-6-cloro-2-(propiltio)-9H-purina (9b) Cl
NOS N O
[00287] “Uma solução de (9a) (275,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 10 h. Após a destilação do ácido acético e do ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi puri- ficado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00288] “Rendimento: 41%.
[00289] — Ponto de fusão: 116-117ºC.
[00290] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,02 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,74 (m, 11H, SCHCH2CH3/NC(CH3)3), 3,14 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 8,54 (s, 1H, 8-H),
[00291] *C RMN (DMSO-d;) 53 133 (SCH2CH2CH3), 221 (SCH2CH2CH3), 28,38 (NC(CH3)s, 32,7 (SCH2CH2CH3), 58,0 (NC(CH3)3), 129,0 (C-5), 144,2 (C-8), 149,3 (C-6), 152,6 (C-4), 162,9 (C-2). 9-(terc-Butil)- N-((1R,2S)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H- burin-6-amina (9c)
O
N AE i
[00292] “Uma solução de (9b) (143,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 2 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina trietilamina sob vácuo, o resíduo foi pu- rificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00293] “Rendimento: 56%.
[00294] “Ponto de fusão: 125-128ºC.
[00295] 1H RMN (CDCI3) 5 1,01 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,29 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,77 (m, 11H, SCH2CH2CH3y/NC(CH3)3), 2,08 (m, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 3,06 (m, 3H, SCH2CH2CH3/NHCH(CH2)CHPh), 5,95 (bs, 1H, NH), 7,08 (m, 2H, 5'-H/6"-H), 7,17 (m, 1H, 2-H), 7,70 (s, 1H, 8-H),
[00296] *C RMN (CDCl)) õ 136 (SCHCH2CH3), 15,6 (NHCH(CH2)CHPh), 23,1 (SCH2CH2CH3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 29,0 (NC(CH3)s), 33,0 (NHCH(CH2)CHPh), 33,2 (SCH2CH2CH3), 57,1 (NC(CH3)3), 116,2 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 118,9 (C-5), 123,1 (C-6'), 136,5 (C-8), 137,8 (C-1'), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd, 247 HzZ/13 Hz, C-3'), 150,7 (C44), 154,9 (C-6), 164,3 (C-2). Exemplo 10: síntese de 9-ciclobutil-N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (10c) 6-Cloro-Nº-ciclobutil-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (10a)
C e sê S
[00297] —4,6-Dicloro-2-(propiltio )pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com ciclobutilamina (440,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 1 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel.
[00298] “Rendimento: 96%.
[00299] — Ponto de fusão: 73-75,5ºC.
[00300] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,96 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,63 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,72 (m, 2H, NHCH(CH2)3), 1,95 (m, 2H, NHCH(CH2)3), 2,29 (m, 2H, NHCH(CH2)3), 2,94 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 4,38 (h, J=8,0 Hz, 1H, NHCH(CH>2)3), 4,80 (s, 2H, NH2), 7,11 (d, J=6,3 Hz, 1H, NHCH(CH>2)3),
[00301] *C RMN (DMSO-d;s) ô 133 (SCH2CH2CH3), 14,9 (NHCH(CH2);s), 22,7 (SCH2CH2CH3), 30,2 (NHCH(CH2)s), 32,1 (SCH2CH2CH3), 46,3 (NHCH(CH2)3), 119,7 (C-5), 137,4 (C-6), 151,5 (C-4), 155,1 (C-2). 6-Cloro-9-ciclobutil-2-(propiltio)-9H-purina (10b) fel]
NOS N AOS &
[00302] “Uma solução de (10a) (273,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e do ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi puri-
ficado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00303] Rendimento: 62%.
[00304] Ponto de fusão: 89-91,5ºC.
[00305] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,02 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,75 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,90 (m, 2H, NCH(CH2)3), 2,47 (m, 2H, NCH(CH2)3), 2,73 (m, 2H, NCH(CH2)3), 3,17 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2C0H3), 5,03 (p, J=8,6 Hz, 1H, NCH(CH>2)3), 8,66 (s, 1H, 8-H).
[00306] *C RMN (DMSO-d;) ô 133 (SCH2CH2CH3), 14,8 (NCH(CH2)s), 221 (SCH2CHxCH;), 29,2 (NCH(CH2);), 32,7 (SCH2CH2CH3), 48,8 (NCH(CH>2)3), 128,3 (C-5), 145,1 (C-8), 148,9 (C- 6), 152,5 (C-4), 163,7 (C-2). 9-Ciclobutil-N-((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H- burin-6-amina (10c)
O NOS N F O &
[00307] “Uma solução de (10b) (142,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 2 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina trietilamina sob vácuo, o resíduo foi pu- rificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00308] “Rendimento: 76%,
[00309] Ponto de fusão: 143-145ºC,
[00310] 'H RMN (CDCI3) 5 0,96 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,32 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,70 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH;), 1,95 (m, 2H, NCH(CH2)3), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,56 (m, 2H, NCH(CH2);s), 2,664 (m, 2H, NCH(CH2);s), 3,04 (m, 2H, SCH2CH2CH3), 3,10 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,95 (p, J=8,6 Hz,
1H, NCH(CH>2)3), 6,06 (bs, 1H, NH), 7,00 (m, 1H, 6-H), 7,09 (m, 2H, 2'- HI5'-H), 7,74 (s, 1H, 8-H).
[00311] ºC RMN (CDCI3) 5 13,5 (SCH2CH2CH3), 15,3 (NCH(CH2)3), 16,0 (NHCH(CH2)CHPh), 22,9 (SCH2CH2CH;), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 30,5 (NCH(CH>2)3), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 48,8 (NCH(CH2)3), 115,8 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,5 (0-5), 122,8 (C-6'), 137,3 (C-8), 137,8 (C-1'), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,4 (C-4), 154,5 (C-6), 165,2 (C-2). Exemplo 11: síntese de N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- pentil-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (11c) 6-Cloro-N-pentil-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (11a) fe] e
AN NO
[00312] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com n-pentilamina (550,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC for 30 min, Após a concentração da mistu- ra de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por croma- tografia de coluna em sílica-gel.
[00313] “Rendimento: 96%.
[00314] Ponto de fusão: 68-69ºC.
[00315] 'H RMN (DMSO-ds) 5 0,87 (t J=7,0 Hz, 3H, NHCH2CH2CH2CH2CH3), 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2C0H3), 1,30 (m, 4H, NHCH2CH2CH:CH2CH3), 1,55 (p, J=7,8 Hz, 2H, NHCH2CH2CH2CH2CHs3), 1,63 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CHs3), 2,94 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,34 (m, 2H, NHCH2CH2CH2CH2C0H;3), 4,75 (s, 2H, NH2), 6,95 (t, J=5,2 Hz, 1H, NHCH2CH2CH2CH2CH;3).
[00316] *C RMN (DMSO-d]) 53 133 (SCH2CH2CH3), 13,9
(NHCH2CH2CH2CH2CH3), — 21,9 —(NHCH2CH2CH2CH2C0H3), 22,8 (SCH2CH2CH;), 28,3 (NHCH2CH2CH2CH2CH;3), 28,7 (NHCH2CH2CH2CH2CH;3), 32,1 (SCH2CH2CH3), 40,8 (NHCH2CH2CH2CH2CH3), 119,8 (C-5), 137,3 (C-6), 152,6 (C-4), 155,2 (C-2). 6-Cloro-9-pentil-2-(propiltio)-9H-purina (11b)
CI W-N SAR
[00317] “Uma solução de (11a) (289,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00318] Rendimento: 87%.
[00319] Ponto de fusão: líquido.
[00320] '*H RMN (DMSO-d]s 53 0,85 (t J=7,3 Hz, 3H, NCH2CH2CH2CH2C0H3), 1,02 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CH3), 1,23 (m, 2H, NCH2CH2CH2CH2C0H3), 1,31 (m, 2H, NCH2CH2CH2C0H2CH3), 1,75 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3) 1,86 (p, J=7,2 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH2C0H3), 3,17 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH20H3), 4,22 (t, J=7,1 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH2C0H3), 8,56 (s, 1H, 8-H).
[00321] *C RMN (DMSO-ds) ô 133 (SCHCH2CH3), 13,7 (NCH2CH2CH2CH2CH;3), 21,5 (NCH2CH2CH2CH2CH;), 22,1 (SCH2CH2CH3), 28,1 (NCH2CH2CH2CH2CH;), 28,5 (NCH2CH2CH2CH2CH;3), 32,6 (SCH2CH2CH3), 43,6 (NCH2CH2CH2CH2C0H3), 127,9 (C-5), 146,3 (C-8), 148,9 (C-6), 152,8 (C-4), 163,8 (C-2). N-((1R,28)-2-(3,4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-pentil-2-(propiltio)-9H-purin-
6-amina (11c)
WN ES
[00322] “Uma solução de (11b) (150,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 3 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina trietilamina sob vácuo, o resíduo foi pu- rificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00323] “Rendimento: 83%.
[00324] Ponto de fusão: 98-100,5ºC.
[00325] '*H RMN (CDCl) 3 0,89 (t J=72 Hz 3H, NCH2CH2CH2CH2C0H;3), 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CH;3), 1,32 (m, 6H, NCHCH2CH2CH2CH3NHCH(CH2)CHPh), 1,68 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,87 (p, J=7,3 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH2C0H3), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,04 (m, 2H, SCH2CH2CH3), 3,10 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,12 (t, J=7,2 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH2CH;3), 5,97 (bs, 1H, NH), 7,00 (m, 1H, 6'-H), 7,09 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,60 (s, 1H, 8- H).
[00326] *C RMN (CDCls) 3 135 (SCHCH2CH3), 13,9 (NCH2CH2CH2CH2CH;), 16,0 (NHCH(CH2)CHPh), 22,2 (NCH2CH2CH2CH2CH3), 22,9 (SCH2CH2CH;3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 28,7 (NCH2CH2CH2CH2CH;), 29,7 (NCH2CH2CH2CH2CH;3), 33,2 (SCH2CH2CH;), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 43,7 (NCH2CH2CH2CH2CH3), 115,7 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,5 (C-5), 122,7 (C-6'), 137,9 (C-1'), 139,0 (C-8), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd,
247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,5 (C-4), 154,6 (C-6), 165,4 (C-2). Exemplo — 12: síntese de 9-ciclopentil-N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (12c) 6-Cloro-Nº-ciclopentil-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (12a)
C e Aos
[00327] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com ciclopentilamina (536,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 2 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel.
[00328] “Rendimento: 95%.
[00329] Ponto de fusão: 86-88ºC.
[00330] 1H RMN (DMSO-ds) õ 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CH;), 1,49 (m, 2H, NHCH(CH2)4), 1,55 (m, 2H, NHCH(CH2)4), 1,64 (m, 2H, SCH2CH2CHs), 1,70 (m, 2H, NHCH(CH2)4), 1,96 (m, 2H, NHCH(CH2)4), 2,94 (t J=7,2 Hz, 2H, SCH.CH2CH3), 4,25 (h, J=6,7 Hz, 1H, NHCH(CH2)2a), 4,83 (s, 2H, NH2), 6,76 (d, J=6,3 Hz, 1H, NHCH(CH>2)4).
[00331] *C RMN (DMSO-d;]) ô 133 (SCH2CH2CH3), 22,9 (SCH2CH2CH3), 23,5 (NHCH(CH2)s)), 321 (SCH2CH2CH3), 32,2 (NHCH(CH32)24), 52,7 (NHCH(CH2)2), 119,9 (C-5), 137,2 (C-6), 152,0 (C- 4), 155,0 (C-2). 6-Cloro-9-ciclopentil-2-(propiltio)-9H-purina (12b) foi]
NOS N a
[00332] “Uma solução de (12a) (287,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00333] Rendimento: 37%.
[00334] Ponto de fusão: 81-83ºC.
[00335] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,01 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,74 (m, 4H, SCH2CH2CH3/NCH(CH2)4), 1,90 (m, 2H, NCH(CH2)2), 2,06 (m, 2H, NCH(CH2)4), 2,19 (m, 2H, NCH(CH2)4), 3,16 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2C0H3), 4,90 (p, J=7,6 Hz, 1H, NCH(CH>2)4), 8,59 (s, 1H, 8- H).
[00336] *C RMN (DMSO-ds) 3 132 (SCH2CH2CH3), 221 (SCH2CH2CH3), 23,8 (NCH(CH2)), 31,5 (NCH(CH2)s), 32,6 (SCH2CH2CH3), 56,4 (NCH(CH>2)4), 128,5 (C-5), 145,2 (C-8), 148,9 (C- 6), 152,5 (C-4), 163,5 (C-2). 9-Ciclopentil-N-((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H- purin-6-amina (12c)
NOS N F O
[00337] Uma solução de (12b) (149,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 3 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00338] Rendimento: 35%.
[00339] Ponto de fusão: 112-114ºC.
[00340] 1H RMN (CDCI3) 5 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCHCH2CHs), 1,31 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,68 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH;), 1,79 (m, 2H, NCH(CH2)a), 1,94 (m, 2H, NCH(CH2)a), 1,99 (m, 2H, NCH(CH2)a), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH)JCHPh), 2,26 (m, 2H, NCH(CH2)a), 3,04 (m, 2H, SCH2CHxCH3) 3,10 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,84 (p, J=7,4 Hz, 1H, NCH(CH2)a), 5,92 (bs, 1H, NH), 7,00 (m, 1H, 6º-H), 7,09 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,65 (s, 1H, 8-H),
[00341] *C RMN (CDCl)) àd 135 (SCHCH2CH3), 16,0 (NHCH(CH2)CHPh), 22,9 (SCH2CH2CH3), 24,1 (NCH(CH2)a), 25,3 (NHCH(CH2)CHPh), 32,6 (NCH(CH>2)a), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 56,0 (NCH(CH>2)a), 115,7 (d, J=17 Hz, 0-2"), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,9 (C-5), 122,8 (C-6'), 137,4 (C-8), 137,9 (C-1'), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,0 (C-4), 154,6 (C-6), 165,0 (C-2). Exemplo 13: síntese de N-((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- hexil-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (13c) 6-Cloro-Nº-hexil-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (13a) fe] e
AN NOIS
[00342] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com n-hexilamina (638,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC for 1 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel
[00343] Rendimento: 85%.
[00344] Ponto de fusão: 54-57ºC.
[00345] '*H RMN (DMSO-ds) 5 087 (t J=64 Hz 3H, NHCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 0,95 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CH;),
1,29 (m, 6H, NHCH2CH2CH2CH2CH2CH3), 1,54 (p, J=6,9 Hz, 2H, NHCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 1,63 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH;), 294 (t J=72 Hz 2H, SCHCHCH;, 3,34 (m, 2H, NHCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 4,76 (s, 2H, NH2), 6,95 (t, J=4,9 Hz, 1H, NHCH2CH2CH2CH2CH2CH3),
[00346] *C RMN (DMSO-ds õô3 133 (SCHCH2CH;), 13, 9(NHCH2CH2CH2CH2CH2CH3), 22,1 (NHCH2CH2CH2CH2CH2CH;3), 228 (SCH2CH2CH3), 261 (NHCH2CH2CH2CH2CH2CH3), 28,6 (NHCH2CH2CH2CH2CH2CH3), 31,0 (NHCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 32,1 (SCH2CH2CH3), 40,9 (NHCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 119,8 (C-5), 137,3 (C-6), 152,6 (C-4), 155,2 (C-2). 6-Cloro-9-hexil-2-(propiltio)-9H-purina (13b) Cl
NOS N Sea
[00347] Uma solução de (13a) (303,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00348] “Rendimento: 90%.
[00349] — Ponto de fusão: líquido.
[00350] '*H RMN (DMSO-ds) 53 0,83 (t J=68 Hz, 3H, NCH2CH2CH2CH2C0H2C0H3), 1,01 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2C0H;3), 1,25 (m, 6H, NCH2CH2CH2CH.CH2CH3), 1,74 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,84 (p, J=7,2 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 3,16 (t J=7,2 Hz, 2H, SCHICH2CH3) 4,21 (t J=71 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH2CH2CH3), 8,56 (s, 1H, 8-H).
[00351] *C RMN (DMSO-d;) ôõ 133 (SCH2CH2CH3), 13,8
(NCH2CH2CH2CH2CH2CH3), 21,9 (NCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 22,1 (SCH2CH2CH;), 25,5 (NCH2CH2CH2CH2CH2CH3), 28,8 (NCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 30,5 (NCH2CH2CH2CH2CH20H3), 32,6 (SCH2CH2CH3), 43,6 (NCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 127,9 (C-5), 146,3 (C-8), 148,9 (C-6), 152,8 (C-4), 163,8 (C-2). N-((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-hexil-2-(propiltio)-9H-purin- 6-amina (13c
NOS N F RO
[00352] Uma solução de(13b) (157,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00353] “Rendimento: 60%.
[00354] Ponto de fusão: 84-86ºC.
[00355] 1H RMN (CDCI3) 5 0,88 (m, 3H, NCH2CH2CH2CH2CH2C Hs), 0,95 (t J=74 Hz 3H, SCHCHICH;), 1,380 (m, 8H, NCH2CH2CH2CH2CH2CH3/NHCH(CH2)CHPh), 1,68 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,86 (m, 2H, NCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,08 (m, 2H, SCHxCH2CH3), 3,10 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,12 (t, J=7,2 Hz, 2H, NCH2CH2CH2CH2CH2CHs3), 5,96 (bs, 1H, NH), 6,99 (m, 1H, 6-H), 7,09 (m, 2H, 2'-H/5'-H), 7,60 (s, 1H, 8-H),
[00356] *C RMN (CDCl)) 3 135 (SCHCH2CH3), 14,0 (NCH2CH2CH2CH2CH2CH;3), 16,0 (NHCH(CH2)CHPh), 22,5
(NCH2CH2CH2CH2CH2CH3), 22,9 (SCH2CH2CH;3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 26,3 (NCH2CH2CH2CH2CH2CH3), 29,9 (NCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 31,2 (NCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 33,2 (SCH2CH2CHs), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 43,7 (NCH2CH2CH2CH2CH2C0H3), 115,7 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,5 (C-5), 122,7 (C-6'), 137,9 (C-1'), 139,0 (C-8), 147,9- 149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,5 (C-4), 154,6 (C-6), 165,4 (C-2). Exemplo 14: síntese de 9-ciclohexil-N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (14c) 6-Cloro-N-ciclohexil-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (14a)
C DO OX
[00357] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com ciclohexilamina (625,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC for 1 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel.
[00358] “Rendimento: 91%.
[00359] — Ponto de fusão: 90-93ºC.
[00360] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,96 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,22 (m, 5H, NHCH(CH2)s), 1,64 (m, 3H, SCH2CH2CH3/NHCH(CH2)s), 1,75 (m, 2H, NHCH(CH2)s), 1,93 (m, 2H, NHCH(CH2)s), 2,92 (t, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,84 (m, 1H, NHCH(CH2)s), 4,82 (s, 2H, NH), 6,68 (d, J=7,1 Hz, 1H, NHCH(CH>2)s).
[00361] *C RMN (DMSO-ds) 5 134 (SCHCH2CH3), 23,0 (SCH2CH2CH3), 24,8 (NHCH(CH2)s), 25,3 (NHCH(CH2)s) 32,1
(SCH2CH2CH3), 32,3 (NHCH(CH>2)s), 49,9 (NHCH(CH2)s), 119,7 (C-5), 137,4 (0-6), 151,6 (C4), 155,0 (C-2). 6-Cloro-9-ciclohexil-2-(propiltio)-9H-purina (14b) foi]
NOSN
[00362] Uma solução de (14a) (301,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 2 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00363] Rendimento: 62%.
[00364] Ponto de fusão: 93-95ºC.
[00365] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,02 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,25 (m, 1H, NOCH(CH2)s), 1,44 (m, 2H, NCH(CH2)s), 1,75 (m, 3H, SCH2CH2CH3/NCH(CH2)s), 1,87 (m, 2H, NCH(CH2)s), 1,99 (m, 4H, NCH(CH32)s), 3,15 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2C0H3), 4,41 (m, 1H, NCH(CH2)s), 8,61 (s, 1H, 8-H),
[00366] *C RMN (DMSO-ds]) 3 133 (SCH2CH2CH3), 22,2 (SCH2CH2CH3), 24,8 (NCH(CH2)s, 25,0 (NCH(CH2)s) 31,7 (NCH(CH2)s), 32,7 (SCH2CH2CH3), 55,0 (NCH(CH2)s), 128,3 (C-5), 144,8 (C-8), 149,0 (C-6), 152,3 (C-4), 163,5 (C-2). 9-Ciclohexil-N-((1R,2S)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H- burin-6-amina (14c)
TOS NOS N F E
[00367] Uma solução de (14b) (156,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00368] Rendimento: 84%.
[00369] — Ponto de fusão: 85-88ºC.
[00370] 'H RMN (CDCI3) 5 0,94 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCHCH2CHs), 1,30 (m, 3H, NHCH(CH2)CHPR/NCH(CH2)s), 1,49 (m, 2H, NCH(CH2)s), 1,68 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,79 (m, 3H, NCH(CH2)s) 1,92 (m, 2H, NCH(CH2)s), 2,08 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,14 (m, 2H, NCH(CH2)s),) 3,08 (m, 2H, SCH3CH2CH3) 3,11 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,36 (m, 1H, NCH(CH>2)s), 5,98 (bs, 1H, NH), 6,99 (m, 1H, 6'-H), 7,08 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,67 (s, 1H, 8-H),
[00371] *C RMN (CDCi3) 3 135 (SCH2CH2CH3), 161 (NHCH(CH2)CHPh), 23,0 (SCH2CH2CH3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 25,3 (NCH(CH2)s), 25,6 (NCH(CH2)s), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 54,2 (NCH(CH2)s), 115,6 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,7 (C-5), 122,7 (C-6'), 137,0 (C-8), 138,0 (C-1'), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,5 (C-4), 154,6 (C-6), 165,0 (C-2). Exemplo 15: síntese de 9-alil-N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (15c) Nº-Alil-6-cloro-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (15a) foi] e
ANE OA
[00372] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com alilamina (360,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacra- do e aquecida a 100ºC por 30 min. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00373] Rendimento: 92%.
[00374] Ponto de fusão: 55-57ºC.
[00375] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,94 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,62 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,93 (t J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CHs3), 4,02 (tt, J=5,4 Hz/1,5 Hz, 2H, NHCH2CHCH>2), 4,80 (s, 2H, NH2), 5,11 (da, J=10,3 Hz/1,4 Hz, 1H, NHCH2CHCH,2), 5,18 (da, J=17,2 HzZ/1,5 Hz, 1H, NHCH2CHCH>2), 5,92 (ddt, J=17,1 Hz/10,4 Hz/5,3 Hz, 1H, NHCH2CHCH>2), 7,15 (t, J=5,4 Hz, 1H, NHCH2CHCH>).
[00376] *C RMN (DMSO-d;s) 5 133 (SCHCH2CH3), 22,7 (SCH2CH2CH3), 32,1 (SCH2CH2CH3), 43,1 (NHCH2CHCH2), 115,6 (NHCH2CHCH>2), 120,0 (C-5), 135,0 (NHCH2CHCH>2), 137,5 (C-6), 152,3 (C-4), 155,2 (C-2). 9-alil-6-cloro-2-(propiltio)-9H-purina (15b) foi]
NOS N
IO |
[00377] Uma solução de(15a) (259,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 2 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00378] “Rendimento: 89%.
[00379] Ponto de fusão: 47,5-49,5ºC.
[00380] 1H RMN (DMSO-ds) õ 1,00 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,73 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,15 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 4,87 (dt, J=5,5 Hz/1,3 Hz, 2H, NCH2CHCH>2), 5,13 (dd,
J=17,1 Hz/1,3 Hz, 1H, NCH2OCHCH>2), 5,24 (dd, J=10,3 Hz/1,3 Hz, 1H, NCH2CHCH>2), 6,07 (m, 1H, NCH2CHCH>2), 8,52 (s, 1H, 8-H).
[00381] *C RMN (DMSO-d]) 5 132 (SCH2CH2CH3), 22,0 (SCH2CH2CH3), 32,6 (SCH2CH2CH3), 45,7 (NCH2CHCH2), 118,2 (NCH2CHCH2), 127,9 (C-5), 132,4 (NCH2CHCH2), 146,2 (C-8), 149,0 (C-6), 152,7 (C-4), 164,1 (C-2). 9-Alil-N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin-6- amina (15c)
NOS N F IX) |
[00382] “Uma solução de (15b) (135,0 mg, 0,5 mmol) em acetoniítrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00383] “Rendimento: 89%.
[00384] Ponto de fusão: líquido.
[00385] 'H RMN (CDCI3) 5 0,94 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,32 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,66 (h, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH;), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,04 (m, 2H, SCH2CH2CH;3), 3,12 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,74 (d, J=5,9 Hz, 2H, NCH2CHCH;>2), 5,23 (dd, J=17,1 Hz/1,0 Hz, 1H, NCH2CHCH>2), 5,30 (dd, J=10,2 Hz/1,0 Hz, 1H, NCH2CHCH>2), 6,01 (m, 2H, NCH2CHCH2/NH), 6,99 (m, 1H, 6º-H), 7,08 (m, 2H, 2'-H/5'-H), 7,62 (s, 1H, 8-H),
[003868] '*C RMN (CDCl) 5 134 (SCH2CH2CH3), 16,1 (NHCH(CH2)CHPh), 22,8 (SCH2CH2CH3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 45,6 (NCH2CHCH>),
115,6 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,3 (C-5), 119,0 (NCH2CHCH2), 122,7 (C-6'), 132,0 (NCH2CHCH>2), 137,9 (C-1"), 138,7 (0-8), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,3 (C-4), 154,6 (C-6), 165,7 (C-2). Exemplo 16: síntese de 2-(6-(((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)amino)-2-(propiltio)-9H-purin-9-il) etanol (16c) 2-((5-Amino-6-cloro-2-(propiltio)pirimidin-4-il)amino)etanol (16a) foi] e SAN NOS!
[00387] —4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com 2-aminoetanol (385,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 30 min. Após a concentração da mis- tura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por croma- tografia de coluna em sílica-gel.
[00388] “Rendimento: 79%.
[00389] Ponto de fusão: 99-102ºC.
[00390] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,63 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,93 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,43 (d, J=5,7 Hz, 2H, NHCH2CH2OH), 3,55 (d, J=5,7 Hz, 2H, NHCH2CH2OH), 4,78 (t, J=5,5 Hz, 1H, NHCH2CH2O0H), 4,80 (s, 2H, NH2), 7,03 (t, J=5,2 Hz, 1H, NHCH2CH2OH).
[00391] *C RMN (DMSO-d]) 53 133 (SCH2CH2CH3), 22,7 (SCH2CH2CH3), 32,1 (SCH2CH2CH3), 43,7 (NHCH2CH20H), 59,2 (NHCH2CH2O0H), 120,0 (C-5), 137,4 (C-6), 152,7 (C-4), 155,1 (C-2). 2-(6-Cloro-2-(propiltio)-9H-purin-9-il)etanol (16b)
fel]
NOS N IO ( OH
[00392] “Uma solução de (16a) (263,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 4 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00393] Rendimento: 57%.
[00394] Ponto de fusão: 81-83ºC.
[00395] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,01 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CH;), 1,73 (h, J=74 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,17 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CHs3), 3,78 (q, J=5,4 Hz, 2H, NCH2CH2OH), 4,26 (t, J=5,4 Hz, 2H, NCH2CH2OH), 4,99 (t, J=5,6 Hz, 1H, OH), 8,48 (s, 1H, 8-H).
[0039686] *C RMN (DMSO-d]) 53 132 (SCH2CH2CH3), 22,0 (SCH2CH2CH3), 32,6 (SCH2CH2CH3), 46,5 (NCH2CH2O0H), 58,7 (NCH2CH2O0H), 128,0 (C-5), 146,8 (C-8), 148,7 (C-6), 153,0 (C-4), 163,7 (C-2). 2-(6-(((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)amino)-2-(propiltio)-9 H- purin-9-il)etano! (16c
NOS N F
IO a
[00397] “Uma solução de (16b) (137,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00398] “Rendimento: 42%.
[00399] Ponto de fusão: 81-83ºC.
[00400] 1H RMN (CDCI3) 5 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,32 (my 2H, NHCH(CH2JCHPh), 1,66 (bh, J=7,3 Hz, 3H, OHI/SCH2CH2CH3), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,01 (m, 2H, SCH2CH2CH3), 3,11 (bs, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 4,02 (m, 2H, NCH2CH2OH), 4,29 (m, 2H, NCH2CH2OH), 6,05 (bs, 1H, NH), 7,00 (m, 1H, 6:-H), 7,09 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,61 (s, 1H, 8-H).
[00401] *C RMN (CDCi3) 3 134 (SCHCH2CH3) 15,9 (NHCH(CH2)CHPh), 22,6 (SCH2CH2CH3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 33,1 (SCH2CH2CH3), 33,2 (NHCH(CH2)CHPh), 48,2 (NCH2CH2O0H), 61,6 (NCH2CH2O0H), 115,7 (d, J=17 Hz, 0-2"), 117,0 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,7 (C-5), 122,7 (C-6'), 137,7 (C-1'), 139,7 (C-8), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,1 (C-4), 154,6 (C-6), 165,8 (C-2). Exemplo 17: síntese de cloridrato de N(1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-9-(prop-2-in-1-il)-2-(propiltio)-9H-purin-6- amina (17c.HCI) 6-Cloro-Nº-(prop-2-in-1-il)-2-(propiltio)pirimidina-4,5-diamina (17a) fel] e
AN NOS
[00402] 4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com propargilamina (347,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 3 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel.
[00403] Rendimento: 78%.
[00404] “Ponto de fusão: 90-92ºC.
[00405] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,96 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,66 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CHxCH3), 2,97 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,15 (t, J=2,4 Hz, 1H, NHCH2CCH), 4,16 (dd, J=4,8 Hz/2,3 Hz, 2H, NHCH2CCH), 4,83 (s, 2H, NH2), 7,41 (t, J=4,7 Hz, 1H, NHCH2CCH).
[00406] *C RMN (DMSO-d;) ôõ 133 (SCH2CH2CH3), 22,7 (SCH2CH2CH3), 30,1 (NHCH.CCH) 32,2 (SCH2CH2CH3) 73,1 (NHCH2CCH), 81,1 (NHCH2CCH), 120,3 (C-5), 137,9 (C-6), 151,8 (C- 4), 155,1 (C-2). 6-Cloro-9-(prop-2-in-1-il)-2-(propiltio)- 9H-purina (17b) foi]
NOS N
AXO 4
[00407] “Uma solução de (17a) (258,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 2 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00408] “Rendimento: 62%.
[00409] — Ponto de fusão: 68-70ºC.
[00410] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,01 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,75 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,19 (t J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,57 (t, J=2,5 Hz, 1H, NCH2CCH), 5,13 (d, J=2,5 Hz, 2H, NCH2CCH), 8,58 (s, 1H, 8-H),
[00411] *C RMN (DMSO-ds) 5 132 (SCH2CH2CH3), 22,0 (SCH2CH2CH3), 32,7 (SCH2CH2CH3), 331 (NCHXCCH) 76,6 (NCH2CCH), 77,2 (NCH2CCH), 127,9 (C-5), 145,5 (C-8), 149,1 (C-6),
152,3 (C-4), 164,4 (C-2). N-((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-(prop-2-in-1-i1)-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (17c) W-N OO | Le
[00412] Uma solução de (17b) (134,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 4 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00413] Rendimento: 86%.
[00414] Ponto de fusão: 72-74ºC.
[00415] 1H RMN (CDCI3) 5 0,94 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,33 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,65 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH;), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 2,50 (t, J=2,6 Hz, 1H, NCH2CCH), 3,03 (m, 2H, SCH2CH2CH3), 3,12 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,90 (d, J=2,6 Hz, 2H, NCH2CCH), 6,00 (bs, 1H, NH), 6,98 (m, 1H, 6'-H), 7,08 (m, 2H, 2'-H/5'-H), 7,84 (s, 1H, 8-H),
[00416] *C RMN (CDCls) õ 134 (SCHCH2CH3), 16,1 (NHCH(CH2)CHPh), 22,8 (SCH2CH2CH3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 32,8 (NCH2CCH), 33,2 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 74,9 (NCH2CCH), 76,1 (NCH2CCH), 115,6 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,9 (d, J=17 Hz, O-5'), 117,3 (C-5), 122,6 (C-6'), 137,8 (C-1'), 138,1 (C- 8), 147,9-149,9 (dd, 246 Hz/13 Hz, C4'), 149,2-151,2 (dd, 247 Hz2/13 Hz, C-3'), 149,9 (C-4), 154,6 (C-6), 166,0 (C-2). cloridrato de N-((1R,2S)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-(prop-2-in-1- iI)-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (17c.HCI)
am SO W2—N
IO =
[00417] Auma solução de (17c) (200,0 mg, 0,5 mmol) em éter dietí- lico (5 mL) foi adicionada por gotejamento uma solução saturada de HCI em éter dietílico. O precipitado resultante do composto do título foi coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco.
[00418] “Rendimento: 99%.
[00419] Ponto de fusão: 178-180ºC. Exemplo 18: síntese de N-((1R,28S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9-(2,2,2-trifluoroetil)-9H-purin-6-amina (18c) 6-Cloro-2-(propiltio)-Nº-(2,2 2-trifluoroetil)pirimidina-4,5-diamina (18a) fe] e
AN NX
[00420] —4,6-Dicloro-2-(propiltio )pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com 2,2,2- trifluoroetanamina (625,0 mg, 6,3 mmol). A mistura de reação foi intro- duzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 24 h. Após a con- centração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi pu- rificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00421] Rendimento: 76%.
[00422] — Ponto de fusão: 107-109ºC.
[00423] 1H RMN (DMSO-ds) õ 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs;), 1,63 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCHCH2CH3), 2,95 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 4,29 (m, 2H, NHCH2CF3), 4,95 (s, 2H, NH2), 7,53 (s, 1H, NHCH2CF3).
[00424] *C RMN (DMSO-d;]) 5 132 (SCH2CH2CH3), 22,6 (SCH2CH2CH3), 32,1 (SCH2CH2CH3), 41,2 (q, J=33 Hz, NHCH2CF3),
120,5 (C-5), 122,7-126,0 (m, NHCH2CF3), 138,8 (C-6), 151,9 (C-4), 154,8 (C-2). 6-Cloro-2-(propiltio)-9-(2,2,2-trifluoroetil)-9H-purina (18b foi]
NOS N AO? À FF
[00425] “Uma solução de (18a) (301,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 2 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00426] Rendimento: 48%.
[00427] Ponto de fusão: 140-143ºC.
[00428] 1H RMN (DMSO-ds) 1,00 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,73 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 3,19 (t J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 5,27 (q, J=9,2 Hz, 2H, NCH2CF3), 8,60 (s, 1H, 8-H).
[00429] *C RMN (DMSO-d]) 53 131 (SCH2CH2CH3), 22,0 (SCH2CH2CH3), 32,6 (SCH2CH2C0H3), 43,9 (q, J=35 Hz, NCH2CF3), 123,4 (q, J=280 Hz, NCH2CF3), 127,6 (C-5), 146,2 (C-8), 149,6 (C-6), 152,9 (C-4), 165,2 (C-2). N-((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9-(2,2,2- trifluoroetil)-9H-purin-6-amina (18c)
NOS N F O : a
E
[00430] Uma solução de (18b) (156,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4-
difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00431] Rendimento: 89%.
[00432] Ponto de fusão: 102-104ºC.
[00433] 'H RMN (CDCI3) 5 0,95 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,34 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,67 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH;), 2,11 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,03 (m, 2H, SCH2CH2CH;3), 3,10 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,73 (qd, J=8,5 Hz/3,1 Hz, 2H, NCH2CF3), 6,06 (bs, 1H, NH), 6,99 (m, 1H, 6'-H), 7,09 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,70 (s, 1H, 8- H).
[00434] *C RMN (CDCl) 3 134 (SCHCH2CH3), 15,9 (NHCH(CH2)CHPh), 22,7 (SCH2CH2CH3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 33,2 (SCHXCH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 44,0 (q, J=36 Hz, NCH2CF3), 115,7 (d, J=17 Hz, C-2'), 116,8 (C-5), 117,0 (d, J=17 Hz, C- 5'), 122,7 (C-6'), 122,8 (q, J=279 Hz, CF3), 137,7 (C-1"), 138,2 (C-8), 148,0-150,0 (dd, J=246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,2-151,2 (dd, J=247 Hz2/13 Hz, C-3'), 150,6 (C-4), 154,7 (C-6), 166,8 (C-2). Exemplo 19: síntese de (1S,2R,3S,4R)-4-(6-(((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)amino)-2-(propiltio)-9H-purin-9- il)ciclopentan-1,2,3-triol (19d) (BaRA4S,6R,6aS)-6-((5-Amino-6-cloro-2-(propiltio )pirimidin-4-i)amino)- 2,2-dimetiltetraidro-3aH-ciclopenta[a[1,3]dioxol-4-01 (19a) fel] e sn NH Ho o
[00435] —4,6-Dicloro-2-(propiltio)pirimidin-5-amina (0,5 g, 2,1 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com
(3aR,4S,6R,6aS)-6-amino-2,2-dimetiltetraidro-3aH- ciclopenta[a][1,3]dioxol-4-01 (1,1 g, 6,3 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 12 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00436] Rendimento: 90%.
[00437] Ponto de fusão: ND.
[00438] 1H RMN (DMSO-ds)õ 0,96 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,21 (s, 3H, C(CH3)2), 1,36 (s, 3H, C(CH3)2), 1,64 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 1,71 (m, 1H, 5'-H), 2,22 (m, 1H, 5'-H), 2,98 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 4,06 (bs, 1H, 4'-H), 4,26 (bs, 1H, 6-H), 4,41 (d, J=5,9 Hz, 1H, 3a'-H), 4,51 (d, J=6,0 Hz, 1H, 6a'-H), 4,70 (s, 2H, NH>2), 5,27 (d, J=3,1 Hz, 1H, OH), 6,63 (d, J=7,1 Hz, 1H, NH),
[00439] *C RMN (DMSO-ds) 53 133 (SCH.CH2CH3), 22,9 (SCH2CH2CH3), 24,1 (C(CH3)2), 26,5 (C(CH3)2), 32,1 (SCH2CH2CH;), 35,9 (C-5'), 57,2 (C-6'), 75,3 (C4'), 84,5 (C-6a'), 85,7 (3a'), 109,7 (C(CH3)2), 119,7 (0-5), 136,6 (C-6), 152,4 (C-4), 155,9 (C-2). (B3aR4S,6R,6aS)-6-(6-Cloro-2-(propiltio)-9H-purin-9-i1)-2,2- dimetiltetraidro-3aH-ciclopenta[a[1,3]dioxol-4-01 (19b) foi]
NOS TN AO) O
XX Ho
[00440] Uma solução de (19a) (375,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 10 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00441] Rendimento: 23%.
[00442] — Ponto de fusão: ND.
[00443] 1H RMN (DMSO-ds) õ 1,02 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,25 (s, 3H, C(CH3)2), 1,45 (s, 3H, C(CH3)2), 1,75 (h, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,25 (m, 1H, 5'-H), 2,51 (m, 1H, 5'-H), 3,16 (t, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 4,18 (bs, 1H, 4'-H), 4,56 (d, J=6,2 Hz, 1H, 3a'-H), 4,86 (m, 1H, 6-H), 5,04 (dd, J=6,1 Hz/1,9 Hz, 1H, 6a'-H), 5,47 (bs, 1H, OH), 8,59 (s, 1H, 8-H),
[00444] *C RMN (DMSO-ds) 53 133 (SCH2CH2CH3), 22,2 (SCH2CH2CH3), 24,3 (C(CH3)2), 26,6 (C(CH3)2), 32,7 (SCH2CH2CH;3), 36,4 (C-5'), 60,4 (C-6'), 74,6 (C4'), 83,9 (C-6a'), 86,1 (C-3a'), 110,9 (C(CH3)2), 128,1 (C-5), 146,0 (C-8), 148,9 (C-6), 152,7 (C-4), 163,9 (C- 2). (BaR4S,6R,6aS)-6-(6-(((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)>amino)-2- (propiltio)-9H-purin-9-il)-2,2-dimetiltetraidro-3aH- ciclopenta[a][1,3]dioxol-4-01] (19c)
O N IDO O
XX Ho
[00445] “Uma solução de (19b) (193,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00446] “Rendimento: 91%.
[00447] Ponto de fusão: ND.
[00448] 1H RMN (CDCI3) 5 0,90 (t, J=7,4 Hz, 3H, SCHCH2CHs), 1,32 (s, 3H, C(CH3)2), 1,34 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,51 (s, 3H, C(CH3)2), 1,61 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,09 (m, 1H,
NHCH(CH2)CHPh), 2,13 (m, 1H, 5"-H, 296 (m, 3H, 5"- HISCH2CH2CH3), 3,13 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,42 (m, 1H, 4"-H), 4,74 (m, 1H, 6"-H), 4,79 (d, J=5,3 Hz, 1H, 3a"-H), 4,98 (d, J=5,3 Hz, 1H, 6a"-H), 5,99 (bs, 1H, OH), 6,03 (bs, 1H, NH), 6,93 (m, 1H, 6'-H), 7,05 (m, 2H, 2'-H/5'-H), 7,67 (s, 1H, 8-H).
[00449] *C RMN (CDCi) 3 133 (SCHCH2CH;), 16,2 (NHCH(CH2)CHPh), 22,6 (SCH2CH2CH3), 24,5 (C(CH3)2), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 27,1 (C(CH3)-), 33,2 (SCH2CH2CH3s), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 38,8 (C-5"), 64,0 (C-6"), 76,0 (C-4"), 86,2 (C-6a"), 88,0 (C-3a"), 111,4 (C(CH3)2), 115,3 (d, J=17 Hz, C-2'), 117,0 (d, J=17 Hz, C-5'), 118,3 (C-5), 122,4 (C-6'), 137,7 (C-1'), 139,8 (C-8), 148,0- 150,0 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,3-151,3 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,5 (C-4), 154,7 (C-6), 165,7 (C-2). 18,2R,3S 4R)-4-(6-(((1R,2S)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)amino)-2- (propiltio)-9H-purin-9-il)ciclopentano-1,2,3-triol (19d)
O F AA. E HO or
[00450] — Uma solução de (19c) (259,0 mg, 0,5 mmol) em metanol (2 mL) e 12N HCI (1 mL) foi agitada em temperatura ambiente por 2 h. Após a destilação dos solventes sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00451] — Rendimento: 76%.
[00452] — Ponto de fusão: 92-94ºC.
[00453] 1H RMN (CDCI3) 5 0,87 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCHCH2CHs), 1,34 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,59 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH;), 2,10 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,14 (m, 1H, 5"-H), 2,71 (bs, 1H, 3"- OH), 2,83 (m, 1H, SCH.CH2CH3), 2,98 (m, 2H, 5"-H'SCH2xCH2CH;3),
3,12 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,14 (m, 1H, 3"-H), 4,27 (m, 1H, 1"- H), 4,47 (bs, 1H, 2"-OH), 4,56 (m, 1H, 4"-H), 4,76 (m, 1H, 2"-H), 4,98 (bs, 1H, 1"-OH), 6,16 (bs, 1H, NH), 6,93 (m, 1H, 6'-H), 7,04 (m, 2H, 2'- HIS'-H), 7,59 (s, 1H, 8-H),
[00454] *C RMN (CDCi) 3 132 (SCHCH2CH;) 16,2 (NHCH(CH2)CHPh), 22,5 (SCH2CH2CH3), 25,2 (NHCH(CH2)CHPh), 33,1 (SCH2CH2CH3), 33,3 (NHCH(CH2)CHPh), 35,8 (C-5"), 61,5 (C-4"), 74,8 (C-1"), 76,9 (C-2"), 78,0 (0-3"), 115,3 (d, J=17 Hz, 0-2"), 117,0 (d, J=17 Hz, C-5'), 118,3 (0-5), 122,3 (C-6'), 137,8 (C-1'), 139,0 (C-8), 148,0-150,0 (dd, 246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,3-151,3 (dd, 247 Hz/13 Hz, C-3'), 149,3 (C-4), 154,6 (C-6), 165,8 (C-2). Exemplo 20: síntese de N-((1R,28S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (etiltio)-9-metil-9H-purin-6-amina (20c) 2-(Etiltio)pirimidina-4,6-diol (20e)
OH o Aê OH
[00455] Ácido 2-tiobarbitúrico (2,5 g, 17,4 mmol) foi dissolvido em KOH 10% (25 mL) e suplementado com iodeto de etila (1,63 mL, 20,0 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 80ºC por 1 h. Depois de resfriar em um banho de gelo a 5ºC, a mistura foi acidificada pela adição de ácido clorídrico 6N e o precipitado resultante foi filtrado e lavado com éter dietílico.
[00456] Rendimento: 69%.
[00457] Ponto de fusão: >300ºC.
[00458] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,28 (t, J=7,3 Hz, 3H, CH), 3,08 (q, J=7,3 Hz, 2H, SCH2), 5,12 (s, 1H, CH), 11,68 (bs, 2H, OH).
[00459] ºC RMN (DMSO-ds) 5 14,6 (SCH3), 24,0 (CH2), 85,6 (CH), 158,1 (C-4/C-6), 162,8 (C-2). 2-(Etiltio)-S-nitropirimidina-4,6-diol (20f)
OH
N SE Aê OH
[00460] AG6 mL de ácido acético resfriado a 5ºC em um banho de gelo foram adicionados ácido nítrico fumegante (2,5 mL) e (20€) (1,8 g, 10,5 mmol). Depois de 1 hora de agitação em temperatura ambiente, a mistura foi resfriada até 5ºC em um banho de gelo, água (50 mL) foi adicionada e o precipitado resultante foi filtrado.
[00461] Rendimento: 69%.
[00462] Ponto de fusão: 210-213ºC (decomposição).
[00463] 1H RMN (DMSO-ds) ô 1,31 (t, J=7,3 Hz, 3H, CHs), 3,17 (q, J=7,3 Hz, 2H, SCH>),
[00464] ºC RMN (DMSO-d6s) 5 14,4 (CH3), 24,7 (SCH2), 117,4 (C- 5), 158,9 (C-4/C-6), 164,0 (C-2). 4 6-Dicloro-2-(etiltio)-5-nitropirimidina (209) fe]
O AN fe)
[00465] A uma solução de (20f) (1,5 g, 6,9 mmol) em POCI3 (10 mL) resfriada até 5ºC em um banho de gelo foi adicionada por gotejamento 2,6-lutidina (2,5 mL). Depois de 2 horas com agitação a 80ºC, a mistu- ra foi vertida sobre gelo picado e extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). As camadas orgânicas foram lavadas com água e com uma solu- ção aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e acetato de etila foi evaporado até secar sob vácuo. O resíduo oleoso resultante foi usado sem purificação adicional na próxima etapa (20h).
[00466] Rendimento: 85%.
[00467] Ponto de fusão: óleo.
[00468] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,35 (t, J=7,3 Hz, 3H, CHs), 3,18 (q, J=7,3 Hz, 2H, SCH>),
[00469] ºC RMN (DMSO-d6s) 5 14,0 (CH3), 25,3 (SCH>2), 149,1 (C-
4/C-6), 154,5 (C-5), 165,4 (C-2). 4, 6-Dicloro-2-(etiltio)pirimidin-5-amina (20h) Cc e Aê fe]
[00470] A uma solução de (20g) (1,0 g, 3,9 mmol) em metanol (10 mL) e ácido acético (4 mL) foi adicionado pó de ferro (1,07 g, 19,5 mmol). Depois de 1 hora de agitação em temperatura ambiente, aceta- to de etila (50 mL) foi adicionado e a suspensão foi filtrada. O filtrado foi lavado com água e com uma solução aquosa saturada de hidroge- nocarbonato de sódio e a camada orgânica foi evaporada até secar sob vácuo. Água foi adicionada ao resíduo e o precipitado resultante foi filtrado.
[00471] Rendimento: 86%.
[00472] Ponto de fusão: 48-50ºC.
[00473] 1H RMN (DMSO-ds) ô 1,28 (t, J=7,3 Hz, 3H, CHs), 3,02 (q, J=7,3 Hz, 2H, SCH2), 5,90 (s, 2H, NH>).
[00474] ºC RMN (DMSO-d6s) 5 14,3 (CH3), 24,9 (SCH>2), 133,5 (C- 5), 143,7 (C-4/C-6), 153,8 (C-2). 6-Cloro-2-(etiltio)- Ni-metilpirimidina-4,5-diamina (20a) foi] e
AN NÓ H
[00475] —4,6-Dicloro-2-(etiltio)pirimidin-5-amina (20h) (0,5 9, 2,2 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com uma so- lução de metilamina 33% p/p em metanol (0,80 mL, 6,6 mmol). A mis- tura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 1 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vá- cuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00476] Rendimento: 87%.
[00477] Ponto de fusão: 112-114ºC.
[00478] 1H RMN (DMSO-ds) ô 1,27 (t, J=7,2 Hz, 3H, CHs), 2,87 (d, J=3,8 Hz, 3H, NHCH;3), 2,97 (q, J=7,2 Hz, 2H, SCH2), 4,70 (s, 2H, NH>2), 7,00 (s, 1H, NH),
[00479] *º*C RMN (DMSO-ds) 5 14,9 (CH3), 24,5 (SCH2), 27,8 (NHCH;3), 120,1 (C-5), 137,2 (C-6), 153,3 (C-4), 155,4 (C-2). 6-Cloro-2-(etiltio)-9-metil-9H-purina (20b Cl
NOS ATO?
[00480] “Uma solução de (20a) (219,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00481] Rendimento: 86%.
[00482] Ponto de fusão: 89-100ºC.
[00483] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,37 (t, J=7,3 Hz, 3H, CH), 3,20 (q, J=7,3 Hz, 2H, SCH2), 3,79 (s, 3H, NCH;), 8,48 (s, 1H, CH),
[00484] *º*C RMN (DMSO-ds) 5 14,3 (CH3), 25,2 (SCH2), 30,0 (NCH;3), 127,9 (C-5), 147,0 (C-8), 148,8 (C-6), 153,2 (C-4), 163,8 (C-2). N-((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-2-(etiltio)-9-metil-9H-purin-6- amina (20c) NÓSEAN, F ATZ?
[00485] “Uma solução de (20b) (114,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00486] Rendimento: 89%.
[00487] Ponto de fusão: 116-118,5ºC.
[00488] 1H RMN (CDCI3)õ 1,25 (t, J=7,3 Hz, 3H, CH), 1,32 (m, 2H, NHCH(CH2)JCHPh), 2,09 (ddd, J=9,5 Hz/6,3 Hz2/32 Hz, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 302 (m, 2H, SCH2), 3,12 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,76 (s, 3H, NCH;3), 5,96 (bs, 1H, NH), 6,97 (m, 1H, 6:-H), 7,07 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,60 (s, 1H, 8-H).
[00489] *%C RMN (CDCl3) 5 14,9 (CH3), 16,3 (NHCH(CH2)CHPh), 25,4 (NHCH(CH2)JCHPh), 25,7 (SCH»), 29,8 (NCH3) 33,5 (NHCH(CH2)CHPh), 115,6 (d, J=17 Hz, C-2'), 117,1 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,6 (C-5), 122,7 (0-6), 138,1 (C-1'), 139,7 (C-8), 148,0-150,0 (dd, J=246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,3-151,3 (dd, J=247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,9 (C-4), 154,7 (C-6), 165,6 (C-2). Exemplo 21: síntese de N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- etil-2-(etiltio)-9H-purin-6-amina (21c) 6-Cloro-N-etil-2-(etiltio)pirimidina-4,5-diamina (21a) fe] e Aê O
[00490] —4,6-Dicloro-2-(etiltio)pirimidin-5-amina (20h) (0,5 9, 2,2 mmol) foi dissolvida em uma solução de etilamina 2,0 M em metanol (3,3 mL, 6,6 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC for 1 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel.
[00491] Rendimento: 91%.
[00492] Ponto de fusão: 93-95ºC.
[00493] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,16 (t, J=7,2 Hz, 3H, NHCH2CH;), 1,27 (t, J=7,2 Hz, 3H, SCH2CH;3), 2,96 (q, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH;3), 3,38 (p, J=6,1 Hz, 2H, NHCH2CH3), 4,74 (s, 2H, NH>2), 6,93 (s, 1H, NH),
[00494] SC RMN (DMSO-d6s) 5 14,4 (NHCH2CH3), 15,0 (SCH2CH;3), 24,5 (SCH2CH3), 35,8 (NHCH2CH3), 119,9 (C-5), 137,3 (C-6), 152,6 (C-4), 155,2 (C-2). 6-Cloro-9-etil-2-(etiltio)-9H-purina (21b) Cc WoN
ATO LL
[00495] “Uma solução de (21a) (233,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00496] “Rendimento: 91%.
[00497] Ponto de fusão: 64-66ºC.
[00498] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,37 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH;), 1,45 (t, J=7,3 Hz, 3H, NCH2CHs3), 3,19 (q, J=7,3 Hz, 2H, SCH>2), 4,25 (q, J=7,3 Hz, 2H, NCH2), 8,56 (s, 1H, CH),
[00499] ҼC RMN (DMSO-ds) 5 14,3 (SCH2CH3), 14,7 (NCH2CH;), 25,2 (SCH>2), 39,0 (NCH>2), 128,1 (C-5), 146,1 (C-8), 148,9 (C-6), 152,7 (C-4), 163,7 (C-2). N-((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(etiltio)-9H-purin-6- amina (21c) W2-N
ATO LL
[00500] Uma solução de (21b) (121,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00501] — Rendimento: 96%.
[00502] — Ponto de fusão: 107,5-109,5ºC.
[00503] 1H RMN (CDCl3) 5 1,26 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH;3), 1,32 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,50 (t, J=7,3 Hz, 3H, NCH2CH3), 2,08 (ddd, J=9,5 Hz/6,4 Hz2/3,3 Hz, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 3,03 (m, 2H, SCH2CH3), 3,11 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,19 (q, J=7,3 Hz, 2H, NCH2CH;3), 5,94 (bs, 1H, NH), 6,98 (m, 1H, 6'-H), 7,08 (m, 2H, 2:-H/5"- H), 7,63 (s, 1H, 8-H),
[00504] *%C RMN (CDCI3) 5 14,9 (SCH2CH3), 15,7 (NCH2CH3), 16,3 (NHCH(CH2)CHPh), 25,4 (NHCH(CH2)CHPh), 25,7 (SCH2CH3), 33,5 (NHCH(CH2)CHPh), 38,8 (NCH2CH3), 115,7 (d, J=17 Hz, C-2'), 117,0 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,8 (0-5), 122,8 (C-6'), 138,1 (C-1'), 138,6 (C-8), 148,0-150,0 (dd, J=246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,3-151,3 (dd, J=247 Hz2/13 Hz, C-3'), 150,4 (C-4), 154,7 (C-6), 165,3 (C-2). Exemplo 22: síntese de N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- metil-2-(metiltio)-9H-purin-6-amina (22c) 2-(Metiltio)pirimidina-4,6-diol (22e)
OH & SN OH
[00505] Ácido tiobarbitúrico (2,5 g, 17,4 mmol) foi dissolvido em KOH 10% (25 mL) e suplementado com iodeto de etila (1,25 mL, 20,0 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 80ºC por 1 h. Depois de resfriar em um banho de gelo a 5ºC, a mistura foi acidificada pela adição de ácido clorídrico 6N e o precipitado resultante foi filtrado e lavado com éter dietílico.
[00506] Rendimento: 77%.
[00507] Ponto de fusão: >300ºC.
[00508] 1H RMN (DMSO-d6s) 5 2,46 (s, 3H, SCHs), 5,13 (s, 1H, CH), 11,71 (bs, 2H, OH),
[00509] ºC RMN (DMSO-ds) 5 12,7 (SCH3), 85,5 (CH), 158,9 (C- 4/C-6), 163,5 (C-2). 2-(Metiltio)-5-nitropirimidina-4,6-diol (22f)
OH e SON oH
[00510] AG6 mL de ácido acético resfriado a 5ºC em um banho de gelo foram adicionados ácido nítrico fumegante (2,5 mL) e (226) (2,0 9g, 12,6 mmol). Depois de 1 hora de agitação em temperatura ambiente, a mistura foi resfriada até 5ºC em um banho de gelo, água (50 mL) foi adicionada e o precipitado resultante foi filtrado.
[00511] Rendimento: 67%.
[00512] — Ponto de fusão: 220-221ºC (decomposição).
[00513] 1H RMN(DMSO-ds) 5 2,56 (s, 3H, SCH;).
[00514] ҼC RMN (DMSO-ds) 5 13,2 (SCH3), 117,4 (C-5), 158,7 (C- 4/C-6), 164,6 (C-2). 4, 6-Dicloro-2-(metiltio)-5-nitropirimidina (22g) Cl
N SE SN fe
[00515] A uma solução de (22f) (1,5 g, 7,4 mmol) in POCI3 (10 mL) resfriada até 5ºC em um banho de gelo foi adicionada por gotejamento 2,6-lutidina (2,5 mL). Depois de 2 horas com agitação a 80ºC, a mistu- ra foi vertida sobre gelo picado e o precipitado resultante foi filtrado.
[00516] Rendimento: 92%.
[00517] Ponto de fusão: 63-64ºC.
[00518] 1H RMN (DMSO-d6s) 5 2,56 (s, 3H, SCH;),
[00519] ҼC RMN (DMSO-d6s) 5 13,5 (SCH3), 149,0 (C-4/C-6), 154,5 (C-5), 166,1 (C-2). 4 6-Dicloro-2-(metiltio)pirimidin-5-amina (22h) foi] oe SS Cc
[00520] A uma solução de (22g) (1,0 g, 4,2 mmol) em metanol (10 mL) e ácido acético (4 mL) foi adicionado pó de ferro (1,07 g, 19,5 mmol). Depois de 1 hora de agitação em temperatura ambiente, aceta- to de etila (50 mL) foi adicionada e a suspensão foi filtrada. O filtrado foi lavado com água e com uma solução aquosa saturada de hidroge- nocarbonato de sódio e a camada orgânica foi evaporado até secar sob vácuo. Água foi adicionada ao resíduo e o precipitado resultante foi filtrado.
[00521] — Rendimento: 95%.
[00522] — Ponto de fusão: 105-108"ºC.
[00523] 1H RMN (DMSO-ds) 5 2,45 (s, 3H, SCH3), 5,90 (s, 2H, NH2),
[00524] ºC RMN (DMSO-ds) 5 13,8 (SCH3), 133,4 (C-5), 143,7 (C- 4/C-6), 154,4 (C-2). 6-Cloro-Nº-metil-2-(metiltio)pirimidina-4,5-diamina (22a) foi] e" SANÊ Nó
[00525] —4,6-Dicloro-2-(metiltio)pirimidin-5-amina (22h) (0,5 9, 24 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com uma so- lução de metilamina 33% p/p em metanol (0,87 mL, 7,2 mmol). A mis- tura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 1 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vá- cuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00526] Rendimento: 82%.
[00527] — Ponto de fusão: 141-143ºC.
[00528] HRMN(DMSO-d6s) 5 2,38 (s, 3H, SCH;), 2,88 (d, J=3,0 Hz, 3H, NHCH;3), 4,70 (s, 2H, NH2), 7,01 (s, 1H, NH),
[00529] ҼC RMN (DMSO-ds) 5 13,5 (SCH3), 27,8 (NHCH3), 120,1 (C-5), 137,2 (C-6), 153,3 (C-4), 155,9 (C-2). 6-Cloro-9-metil-2-(metiltio)-9H-purina (22b) cl
NOS N SO)
[00530] Uma solução de (22a) (205,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00531] — Rendimento: 92%.
[00532] — Ponto de fusão: 140-142ºC.
[00533] 1H RMN (DMSO-ds) 5 2,61 (s, 3H, SCHs3), 3,80 (s, 3H, NCH;), 8,49 (s, 1H, CH),
[00534] ºC RMN (DMSO-ds) 5 14,1 (SCH3), 30,0 (NCH3), 127,9 (C- 5), 147,0 (C-8), 148,8 (C-6), 153,2 (C-4), 164,4 (C-2). N-((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2-(metiltio)-9H-purin- 6-amina (22c)
NOS N F AO
[00535] “Uma solução de (22b) (107,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00536] Rendimento: 80%.
[00537] Ponto de fusão: 156-159ºC.
[00538] 1H RMN (CDCI3) 5 1,33 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 2,09 (m, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 2,45 (s, 3H, SCH3), 3,12 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,77 (s, 3H, NCH3), 5,95 (bs, 1H, NH), 7,00 (m, 1H, 6-H), 7,09 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,60 (s, 1H, 8-H).
[00539] 13C RMN (CDCI3) 5 14,5 (SCH3), 16,1 (NHCH(CH2)CHPh), 25,4 (NHCH(CH2)CHPh), 29,8 (NCH3), 33,4 (NHCH(CH2)CHPh), 115,9 (d, J=17 Hz, 0-2"), 117,0 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,5 (C-5), 122,9 (C-6'), 137,9 (C-1'), 139,7 (C-8), 148,0-150,0 (dd, J=246 Hz/13 Hz, C4'), 149,3-151,3 (dd, J=247 Hz/13 Hz, C-3'), 151,0 (C-4), 154,7 (C-6), 166,0 (C-2). Exemplo 23: síntese de cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2-propóxi-9H-purin-6-amina (23t.HCI) N-((1R,2S8)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2-(metilsulfonil)-9H- purin-6-amina (23qg)
NOSEN F
O oo V
[00540] “Uma solução de (22c) (125,0 mg, 0,36 mmol) em cloreto de metileno (10 mL) foi resfriada até 5ºC em um banho de gelo e suple- mentada com ácido 3-cloroperbenzoico (140,0 mg, 0,80 mmol). Depois de agitar em temperatura ambiente for 4 horas, a mistura foi lavada com uma solução de NaOH 0,1 M (2 x 10 mL). A camada orgânica foi seca, filtrada e o cloreto de metileno foi evaporado até secar sob vá- cuo. O resíduo foi suspenso em acetato de etila e filtrado.
[00541] Rendimento: 88%.
[00542] — Ponto de fusão: 206-208,5ºC.
[00543] 1H RMN (CDCI3) 5 1,38 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 2,17 (td, J=80 Hz/3,3 Hz, 1H, NHCH(CH2JCHPh), 3,08 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,19 (s, 3H, SO2CH;3), 3,91 (s, 3H, NCH;3), 6,49 (bs, 1H, NH), 7,11 (m, 3H, 2:-H/5'-H/6"-H), 7,88 (s, 1H, 8-H),
[00544] *C RMN (CDCl) àô 15,7 (NHCH(CH2)JCHPh), 25,4 (NHCH(CH2)CHPh), 30,5 (NCH3), 33,1 (NHCH(CH2)CHPh), 39,4 (SO2CH3), 115,8 (d, J=16 Hz, C-2'), 117,3 (d, J=17 Hz, C-5'), 120,9 (C- 5), 123,3 (C-6'), 137,3 (C-1'), 143,0 (C-8), 148,5-149,9 (dd, J=247 Hz/12 Hz, C-4'), 149,7-151,1 (dd, J=248 Hz/13 Hz, C-3'), 149,2 (C-4), 155,7 (C-6). N-((1R,28)-2-(3,4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2-propóxi-9H-purin-6- amina (23t) NOSAN, F
ATO
[00545] — Sódio foi dissolvido em propan-1-ol (3 mL) em um banho de gelo e (23q) (150,0 mg, 0,40 mmol) foi adicionado. Depois de agitar em temperatura ambiente por 3 horas, a mistura foi fracionada entre água (50 mL) e diclorometano (2 x 50 mL). As camadas orgânicas fo- ram secas e evaporadas até secar sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel e o óleo resultante utilizado na próxima etapa (23t.HCI) sem purificação adicional.
[00546] Rendimento: 73%.
[00547] 1H RMN (CDCl3) 5 0,94 (t, J=7,5 Hz, 3H, OCH2CH2CH;), 1,30 (dt, J=7,5 Hz/6,2 Hz, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 1,39 (ddd, J=9,7 Hz/5,9 Hz/4,7 Hz, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 1,75 (h, J=7,3 Hz, 2H, OCH2CH2CH3), 2,10 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,16 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,74 (s, 3H, NCH;3), 4,18 (m, 2H, OCH2CH2CH;s),
6,86 (bs, 1H, NH), 6,94 (m, 1H, 6-H), 7,07 (m, 2H, 2'-H/5'-H), 7,57 (s, 1H, 8-H),
[00548] *C RMN (CDCls)) ô 105 (OCH2CH2CH3), 16,2 (NHCH(CH2)CHPh), 22,4 (OCH2CH2CH3), 25,1 (NHCH(CH2)CHPh), 29,8 (NCH3), 33,6 (NHCH(CH2)CHPh), 69,3 (OCH2CH2CH3), 115,4 (C- 5), 115,7 (C-2'), 117,0 (C-5'), 122,6 (C-6'), 138,3 (C-1'), 139,1 (C-8), 148,0-149,9 (C-4'), 149,4-151,3 (C-3'), 151,7 (C-4), 156,1 (C-6), 162,6 (C-2). cloridrato de N-((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2- propóxi-9H-purin-6-amina (23t.HCI) am SO NOSAN, F
TO
[00549] Auma solução de (23t) (90,0 mg, 0,25 mmol) em éter dietí- lico (5 mL) foi adicionada por gotejamento uma solução saturada de HCI em éter dietílico. O precipitado resultante do composto do título foi coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco.
[00550] Rendimento: 95%.
[00551] — Ponto de fusão: 199-202ºC. Exemplo 24: síntese de N-((1R,28S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- etil-2-(metiltio)-9H-purin-6-amina (24c) 6-Cloro-Nº-etil-2-(metiltio)pirimidina-4,5-diamina (24a) fe] e
SN O
[00552] — 4,6-Dicloro-2-(metiltio)pirimidin-5-amina (22h) (0,5 g, 24 mmol) foi dissolvida em Uma solução de etilamina 2,0 M em metanol (3,6 mL, 7,2 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 1 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel.
[00553] Rendimento: 86%.
[00554] — Ponto de fusão: 120-122ºC.
[00555] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,16 (t, J=7,2 Hz, 3H, CH3), 2,37 (s, 3H, SCH;3), 3,38 (qd, J=7,2 Hz/5,3 Hz, 2H, NCH2), 4,76 (s, 2H, NH>), 6,94 (t, J=4,8 Hz, 1H, NH).
[00556] ºC RMN (DMSO-ds) 5 13,5 (SCHs3), 14,3 (CH3), 35,7 (NCH>2), 119,8 (C-5), 137,2 (C-6), 152,4 (C-4), 155,7 (C-2). 6-Cloro-9-etil-2-(metiltio)-9H-purina (24b) foi] W2—N
SO CL
[00557] Uma solução de (24a) (219,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00558] "Rendimento: 77%.
[00559] Ponto de fusão: 99,5-101,5ºC,
[00560] *H RMN (DMSO-ds) 5 1,45 (t, J=7,3 Hz, 3H, CH), 2,60 (s, 3H, SCHs;3), 4,25 (q, J=7,3 Hz, 2H, NCH>2), 8,57 (s, 1H, CH),
[00561] 3% RMN (DMSO-ds) 5 14,1 (SCH3), 14,7 (CH3), 39,0 (NCH>2), 128,0 (C-5), 146,0 (C-8), 148,8 (C-6), 152,7 (C-4), 164,3 (C-2). N((1R,28)-2-(3 4-Difluorfenil|)ciclopropil)-9-etil-2-(metiltio)-9H-purin-6- amina (24c) W-N AO"
LL
[00562] Uma solução de (24b) (114,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00563] Rendimento: 38%.
[00564] — Ponto de fusão: 126-127,5ºC.
[00565] 'H RMN (CDCl3) 5 1,31 (td, J=8,0 Hz/6,9 Hz/4,0 Hz, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,51 (t, J=7,3 Hz, 3H, CH), 2,08 (td, J=8,1 Hz/6,7 Hz/3,2 Hz, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,45 (s, 3H, SCH;3), 3,11 (bs, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,20 (q, J=7,3 Hz, 2H, NCH2), 5,97 (bs, 1H, NH), 7,01 (m, 1H, 6t-H), 7,10 (m, 2H, 2:-H/5'-H), 7,64 (s, 1H, 8-H),
[00566] '**C RMN (CDCIs) 5 14,6 (SCH3), 15,6 (CH3), 16,1 (NHCH(CH2)CHPh), 25,4 (NHCH(CH2)CHPh), 33,4 (NHCH(CH2)CHPh), 38,8 (NCH2), 115,9 (d, J=17 Hz, C-2'), 117,0 (d, J=17 Hz, 0-5"), 117,7 (C-5), 123,0 (C-6'), 138,0 (C-1'), 138,6 (C-8), 148,0-150,0 (dd, J=246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,3-151,3 (dd, J=247 Hz2/13 Hz, C-3'), 150,4 (C-4), 154,7 (C-6), 165,8 (C-2). Exemplo 25: síntese de 2-(butiltio)-N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-9H-purin-6-amina (25c) 2-(Butiltio)pirimidina-4,6-diol (25€)
OH
O AN oH
[00567] Ácido tiobarbitúrico (2,5 g, 17,4 mmol) foi dissolvida em KOH 10% (25 mL) e suplementada com iodeto de butila (2,27 mL, 20,0 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 80ºC por 1 h. Depois de resfriar em um banho de gelo a 5ºC, a mistura foi acidificada pela adição de ácido clorídrico 8N e o precipitado resultante foi filtrado e lavado com éter dietílico.
[00568] Rendimento: 72%.
[00569] — Ponto de fusão: >300ºC.
[00570] '*H RMN (DMSO-d;])0 3 0,90 (t J=74 Hz, 3H, SCH2CH2CH2C0H;3), 1,38 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 1,60 (p, J=74 Hz, 2H, SCHCH:CH2CH3), 3,09 (t J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH2C0H3), 5,12 (s, 1H, CH), 11,64 (bs, 2H, OH).
[00571] *C RMN (DMSO-ds) à 13,5 (SCH2CH2CH2CH3), 21,3 (SCH2CH2CH2CH3), 29,2 (SCH2CH2CH2C0H3), 30,8 (SCH2CH2CH2C Hs), 85,6 (CH), 158,1 (C-4/C-6), 162,9 (C-2). 2-(Butiltio)-5-nitropirimidina-4,6-diol (25f)
OH
O ANN oH
[00572] AG6 mL de ácido acético resfriado a 5ºC em um banho de gelo foram adicionados ácido nítrico fumegante (2,5 mL) e (256) (2,0 g, 10,0 mmol). Depois de 1 hora de agitação em temperatura ambiente, a mistura foi resfriada até 5ºC em um banho de gelo, água (50 mL) foi adicionada e o precipitado resultante foi filtrado.
[00573] “Rendimento: 68%.
[00574] Ponto de fusão: 178-179,5ºC (decomposição).
[00575] '*H RMN (DMSO-ds) 53 0,90 (t J=74 Hz, 3H, SCH2CH2CH2C0H;3), 1,39 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 1,63 (p, J=74 Hz, 2H, SCHCHXCH2CH3), 3,18 (t J=7,3 Hz, 2H, SCHCH2CH2CH;3),
[00576] *C RMN (DMSO-ds) à 13,5 (SCH2CH2CH2CH3), 21,2 (SCH2CH2CH2CH3), 29,9 (SCH2CH2CH2C0H3), 30,5 (SCH2CH2CH2C Hs), 117,5 (C-5), 158,9 (C-4/C-6), 164,2 (C-2). 2-(Butiltio)-4,6-dicloro-5-nitropirimidina (25g) Cl
O ANN Cc
[00577] A uma solução de (25f) (1,5 g, 6,1 mmol) in POCI3 (10 mL) resfriada até 5ºC em um banho de gelo foi adicionada por gotejamento 2,6-lutidina (2,5 mL). Depois de 2 horas com agitação a 80ºC, a mistu- ra foi vertida sobre gelo picado e extraída com acetato de etila (3 x 50 mL). As camadas orgânicas foram lavado com água e com uma solu- ção aquosa saturada de hidrogenocarbonato de sódio e acetato de etila foi evaporado até secar sob vácuo. O resíduo oleoso resultante foi usado sem purificação adicional na próxima etapa (25h).
[00578] “Rendimento: 92%.
[00579] — Ponto de fusão: óleo.
[00580] '*H RMN (DMSO-ds) 3 0,90 (t J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CH2CH;3), 1,39 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 1,65 (p, J=74 Hz, 2H, SCHICH:CH2CH3), 317 (t J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH;3),
[00581] **C RMN (DMSO-ds) à 134 (SCH2CH2CH2CH3), 21,2 (SCH2CH2CH2CH3), 30,2 (SCH2CH2CH2CH3), 30,3 (SCH2CH2CH2CHs), 149,0 (C-4/C-6), 154,7 (C-5), 165,6 (C-2). 2-(Butiltio)-4,6-dicloropirimidin-5-amina (25h) Cl e AA fe
[00582] A uma solução de (25g) (1 9, 3,5 mmol) em metanol (10 mL) e ácido acético (4 mL) foi adicionado ferro em pó (0,78 9, 14,0 mmol). Depois de 1 hora de agitação em temperatura ambiente, aceta- to de etila (50 mL) foi adicionada e a suspensão foi filtrada. O filtrado foi lavado com água e com uma solução aquosa saturada de hidroge- nocarbonato de sódio e a camada orgânica foi evaporado até secar sob vácuo. O resíduo oleoso resultante foi usado sem purificação adi- cional na próxima etapa (25a).
[00583] “Rendimento: 97%.
[00584] — Ponto de fusão: óleo.
[00585] '*H RMN (DMSO-ds) 5 0,90 (t J=74 Hz 3H, SCH2CH2CH2CH3), 1,39 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 1,61 (p, J=74 Hz, 2H, SCHCH:CH2CH3), 3,03 (t J=7,2 Hz, 2H, SCHxCH2CH2CH3), 5,88 (s, 2H, NH2),
[00586] *C RMN (DMSO-ds) 5 13,5 (SCH2CHxCH2CH3), 21,3 (SCH2CH2CH2CH3), 30,2 (SCH2CH2CH2C0H3), 30,7 (SCH2CH2CH2C0Hs), 133,5 (C-5), 143,7 (C4/C-6), 154,0 (C-2). 2-(Butilio)-6-cloro-2-Nº-metilpirimidina-4,5-diamina (25a) fe] e ANÃê Nó
[00587] — 2-(Butiltio)-4,6-dicloropirimidin-5-amina (25h) (0,5 9g, 2,0 mmol) foi dissolvida em metanol (2 mL) e suplementada com uma so- lução de metilamina 33% p/p em metanol (0,73 mL, 6,0 mmol). A mis- tura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 1 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vá- cuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00588] Rendimento: 87%.
[00589] — Ponto de fusão: óleo.
[00590] '*H RMN (DMSO-ds) 5 089 (t J=74 Hz 3H, SCH2CH2CH2CH;3), 1,38 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 1,61 (p, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 2,87 (d, J=4,5 Hz, 3H, NHCH;), 2,98 (t, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH2C0H3), 4,69 (s, 2H, NH2), 6,99 (q, J=4,4 Hz, 1H, NHCH;3),
[00591] *C RMN (DMSO-ds) à 13,6 (SCH2CH2CH2CH3), 21,5 (SCH2CH2CH2C0H3), 27,8 (NHCH3), 29,8 (SCHICH2CH2CH3), 31,4 (SCH2CH2CH2CH3), 120,0 (C-5), 137,2 (C-6), 153,3 (C-4), 155,5 (C-2). 2-(Butiltio)-6-cloro-9-metil-9H-purina (25b)
foi]
NOSTN AO
[00592] Uma solução de (25a) (247,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00593] Rendimento: 76%.
[00594] — Ponto de fusão: 56-58ºC.
[00595] '*H RMN (DMSO-d;]) 3 0,93 (t J=74 Hz, 3H, SCH2CH2C0H2C0H3), 1,44 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH20H2CH3), 1,70 (p, J=74 Hz, 2H, SCH2CH;CH2CH3) 3,20 (t J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 3,79 (s, 3H, NCH;3), 8,48 (s, 1H, CH),
[00598] **C RMN (DMSO-ds) à 13,5 (SCH2CH2CH2CH3), 21,4 (SCH2CH2CH2CH3), 30,0 (NCH3), 30,3 (SCH2CH2CH2CH3), 30,8 (SCH2CH2CH2CH3), 127,9 (C-5), 147,0 (C-8), 148,8 (0-6), 153,2 (C-4), 163,9 (C-2). 2-(Butiltio)- N-((1 R,2S)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-9H-purin-6- amina (25c)
CO NOSEN F ATO
[00597] “Uma solução de (25b) (128,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00598] “Rendimento: 66%.
[00599] Ponto de fusão: 98-100ºC.
[00600] '*H RMN (CDCi) 53 0,89 (t J=74 Hz, 3H, SCH2CH2CH2C0H;3), 1,33 (m, 4H, NHCH(CH2)CHPh/SCH2CH2C0H2CH3), 1,62 (p, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CHxCH2CH3), 2,09 (ddd, J=9,5 Hz/6,4 Hz/3,2 Hz, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 3,02 (m, 1H, SCH2CH2CH2CH;), 3,11 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh/SCH2CH2CH2CH3), 3,76 (s, 3H, NCH;), 5,92 (bs, 1H, NH), 6,98 (m, 1H, 6-H), 7,07 (m, 2H, 2'-H/5'-H), 7,59 (s, 1H, 8-H),
[00601] *C RMN (CDCI) ô 139 (SCHCHCH2CH3), 16,3 (NHCH(CH2)CHPh), 221 (SCH2CH2CH2CH;3), 25,3 (NHCH(CH2)CHPh), 29,8 (NCH3), 31,1 (SCH2CH2CH2CH3), 31,8 (SCH2CH2CH2CH3), 33,5 (NHCH(CH2)CHPh), 115,7 (d, J=17 Hz, C-2'), 117,1 (d, J=17 Hz, 0-5"), 117,6 (C-5), 122,8 (C-6'), 138,0 (C-1'), 139,7 (C-8), 148,0-150,0 (dd, J=246 Hz/13 Hz, C-4'), 149,4-151,4 (dd, J=247 Hz/13 Hz, C-3'), 150,8 (C-4), 154,7 (C-6), 165,6 (C-2). Exemplo 26: síntese de 2-(butiltio)-N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-9H-purin-6-amina (26c) 2-(Butiltio)-6-cloro-Nº-etilpirimidina-4,5-diamina (26a) [ei]
OE ANA nO
[00602] 4,6-Dicloro-2-(etiltio)pirimidin-5-amina (25h) (0,5 9, 2,0 mmol) foi dissolvida em Uma solução de etilamina 2,0 M em metanol (3,0 mL, 6,0 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 100ºC por 1 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel
[00603] Rendimento: 91%.
[00604] Ponto de fusão: 80-82ºC.
[00605] '*H RMN (DMSO-ds) 53 0,89 (t J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CH2C0H;3), 1,16 (t, J=7,1 Hz, 3H, NHCH2CH;3), 1,38 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2C0H2C0H3), 1,60 (p, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 2,96 (t, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 3,38 (p, J=7,0 Hz, 2H, NHCH2CH;3), 4,74 (s, 2H, NH2), 6,95 (t, J=4,7 Hz, 1H, NHCH2CH;3),
[006068] *º*C RMN (DMSO-ds) 5 13,5 (SCHXCH2CH2CH3), 14,4 (NHCH2CH3), 21,5 (SCH2CH2CH2CH;3), 29,8 (SCH2CH20H2C0H3), 31,5 (SCH2CH2CH2CH3), 35,7 (NHCH2CHs,, 119,8 (C-5), 137,3 (C-6), 152,5 (C-4), 155,4 (C-2). 2-(Butiltio)-6-cloro-9-etil-9H-purina (26b) foi]
WN ATE LL
[00607] “Uma solução de (26a) (261,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (2,5 mL) e ortoformiato de trietila (2,5 mL, 15 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purifica- do por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00608] “Rendimento: 70%.
[00609] — Ponto de fusão: 69-71ºC.
[00610] '*H RMN (DMSO-d;]) 3 0,93 (t J=74 Hz, 3H, SCH2CH2CH2C0H;3), 1,45 (m, 5H, SCH2CH2CH2CH3NCH2C0H;3), 1,70 (p, J=74 Hz, 2H, SCHCHCH2CH3), 3,19 (t J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH2C0H3), 4,25 (q, J=7,3 Hz, 2H, NCH2CH;3), 8,56 (s, 1H, CH),
[00611] *C RMN (DMSO-ds) 5 13,5 (SCH2CH2CH2CH3), 14,7 (NCH2CH3), 21,4 (SCH2CH2CH2C0H3), 30,3 (SCH2CH2CH2C0H3), 30,8 (SCH2CH2CH2CH3), 39,0 (NCH2CH3), 128,1 (C-5), 146,0 (C-8), 148,9 (C-6), 152,7 (C-4), 163,8 (C-2). 2-(Butiltio)- N-((1R,2S)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-9H-purin-6- amina (26c)
ERA W-N ATO LL
[00612] Uma solução de (26b) (135,0 mg, 0,5 mmol) em acetoniítrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00613] Rendimento: 56%.
[00614] Ponto de fusão: 92-94ºC.
[00615] '*H RMN (CDCl)) 3 0,89 (t J=74 Hz 3H, SCH2CH2CH2C0H3), 1,31 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 1,36 (m, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 1,50 (t, J=7,3 Hz, 3H, NCH2CH3), 1,63 (p, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH2C0H3), 2,09 (ddd, J=9,5 Hz/6,6 Hz/3,2 Hz, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,02 (m, 1H, SCH2CH2CH2CH3), 3,10 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh/" SCH2CH2CH20H3), 4,18 (q, J=7,3 Hz, 2H, NCH2CH;3), 5,93 (bs, 1H, NH), 6,99 (m, 1H, 6'-H), 7,08 (m, 2H, 2-H/5"- H), 7,63 (s, 1H, 8-H).
[00616] *C RMN (CDC) 5 139 (SCHCH2CH2CH3), 15,6 (NCH2CH3), 16,2 (NHCH(CH2)CHPh), 22,1 (SCH2CH2CH2CH3), 25,4 (NHCH(CH2)CHPh), 311 (SCH2CH2CH2CHs3), 31,8 (SCH2CH2CH2CH3), 33,5 (NHCH(CH2)CHPh), 38,8 (NCH2CH3), 115,8 (d, J=17 Hz, C-2'), 117,1 (d, J=17 Hz, C-5'), 117,8 (C-5), 122,9 (C-6'), 138,1 (C-1'), 138,6 (C-8), 148,2-150,1 (dd, J=246 Hz/12 Hz, C-4'), 149,4-151,4 (dd, J=235 Hz/10 Hz, C-3'), 150,3 (C-4), 154,7 (C-6), 165,6 (C-2). Exemplo 27: síntese de N-((1R,28)-2-(3,4-difluorofenil)ciclopropil)- 1-metil-6-(metiltio)-1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (27k) 4, 6-Dicloro-2-(metiltio)pirimidina-5S-carbaldeido (27i)
cl o
OO SEO N DEC
[00617] POCI3;(3,2mL)foiresfriado até 5ºC em um banho de gelo e suplementado por gotejamento com dimetilformamida (20 mL, 215 mmol). 2-(Metiltio)pirimidina-4,6-diol (22e) (5 g, 31,6 mmol) foi então adicionado em porções e a mistura foi agitada a 100ºC por 20 h. À mistura foi vertida sobre gelo picado e extraída com CH2Cl2 (3 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secas e evaporadas até secar sob Vácuo.
[00618] Rendimento: 52%.
[00619] Ponto de fusão: 87-89ºC.
[00620] 1H RMN (DMSO-ds) 5 2,57 (s, 3H, SCH3), 10,07 (s, 1H, COH),
[00621] *C RMN (DMSO-d6s) 5 13,3 (SCH3), 112,9 (C-5), 159,3 (C- 4/C-6), 168,2 (0-2), 186,6 (COH). 4-cloro-6-(metiltio)-1 H-pirazolo[3 4-dpirimidina (27i") foi] Ds
NOS
[00622] A uma suspensão de (27i) (2,5 g, 11,2 mmol) in TF (25 mL) resfriada até 5ºC em um banho de gelo, foram adicionados por gote- jamento mono-hidrato de hidrazina (0,65 mL, 13 mmol) e trietilamina (1,8 mL, 13 mmol). Depois de 1 hora de agitação a 5ºC, a mistura foi evaporada até secar sob vácuo e o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel.
[00623] “Rendimento: 95%.
[00624] Ponto de fusão: >300ºC.
[00625] 1H RMN (DMSO-ds) 5 2,59 (s, 3H, SCH;), 8,32 (s, 1H, CH), 14,25 (bs, 1H, NH).
[00626] SC RMN (DMSO-ds) 5 13,9 (SCH3), 109,6 (C-3a), 133,1 (C-
3), 152,9-155,4 (C-4/C-7a), 168,7 (C-6). 4-cloro-1-metil-6-(metiltio)-1H-pirazolo[3,4-a]pirimidina (27j) cl
NS ISO
[00627] A uma solução de (27i') (1,0 g, 5,0 mmol) em acetonitrila (10 mL) resfriada até 5ºC em um banho de gelo, foram adicionados NaH (144 mg, 6,0 mmol) e iodometano (0,47 mL, 7,5 mmol), Depois de 3 horas com agitação a 50ºC, a acetonitrila foi evaporado até secar sob vácuo e o resíduo foi fracionado entre água (50 mL) e diclorome- tano (2 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secas e evaporadas até secar sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de co- luna em sílica-gel.
[00628] “Rendimento: 82%.
[00629] Ponto de fusão: 85-87ºC.
[00630] 'H RMN (DMSO-ds) 5 2,63 (s, 3H, SCH3), 4,00 (s, 3H, NCH;), 8,34 (s, 1H, CH),
[00631] ºC RMN (DMSO-ds) 5 13,9 (SCH3), 34,0 (NCH3), 110,0 (C- 3a), 132,3 (C-3), 152,9 (C-4), 153,5 (C-7a), 168,8 (C-6). N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-metil-6-(metiltio)-1 H- pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (27k) ro
NOS F AE
[00632] Uma solução de (27j) (107,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00633] Rendimento: 84%.
[00634] Ponto de fusão: 128,5-130ºC.
[00635] —*H RMN (CDCI3) 5 1,40 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 2,17 (s, 1H, NHCH(CH2JCHPh), 2,55 (s, 3H, SCH;3) 3,10 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,95 (s, 3H, NCH3), 5,87 (bs, 1H, NH), 6,87 (m, 2H, 2'-H/6-H), 7,12 (q, J=8,7 Hz, 1H, 5-H), 7,59 (s, 1H, 3-H),
[00636] ºC RMN (CDCl3) 5 14,2 (SCHs3), 18,3 (NHCH(CH2)CHPh), 25,6 (NHCH(CH2)CHPh), 33,8 (NCH3), 34,9 (NHCH(CH2)CHPh), 97,8 (C-3a), 114,6 (C-2'), 117,4 (C-5'), 121,7 (C-6'), 132,0 (C-3), 136,8 (C- 1"), 149,7-150,8 (C-3'/0-4'), 154,8 (C-7a), 169,2 (C-6). Exemplo 28: síntese de cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-6-(etiltio)-1-metil-1H-pirazolo[3,4- djpirimidin-4-amina (28x.HCI) N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-metil-6-(metilsulfonil)-1H- pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (28r)
NOS F
OO oo V
[00637] “Uma solução de (27j) (125,0 mg, 0,36 mmol) em cloreto de metileno (10 mL) foi resfriada até 5ºC em um banho de gelo e suple- mentada com ácido 3-cloroperbenzoico (140,0 mg, 0,80 mmol). Depois de agitar em temperatura ambiente por 4 horas, a mistura foi lavada com uma solução de NaOH 0,1 M (2 x 10 mL). A camada orgânica foi seca, filtrada e o cloreto de metileno foi evaporado até secar sob vá- cuo. O resíduo oleoso resultante foi usado sem purificação adicional na próxima etapa (28x).
[00638] “Rendimento: 58%.
[00639] — Ponto de fusão: óleo.
[00640] 1H RMN (CDCI3) 5 1,50 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 2,23 (s,
1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,18 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,34 (s, 3H, SO2CH;3), 4,07 (s, 3H, NCH;3), 6,48 (s, 1H, NH), 6,86 (m, 2H, 2'-H/6"-H), 7,15 (s, 1H, 5'-H), 7,75 (s, 1H, 3-H).
[00641] '**C RMN (CDCls) 5 183 (NHCH(CH.)CHPh), 26,1 (NHCH(CH2)CHPh), 34,4 (NCH3), 35,1 (NHCH(CH2)CHPh), 39,1 (SO2CH3), 100,5 (C-3a), 114,5 (C-2'), 117,9 (C-5'), 121,8 (C-6'), 133,0 (C-3), 136,0 (C-1'), 150,1 (C-3'/0C4'), 153,4 (C-7a), 159,5 (CH4), 162,4 (C-6). cloridrato de N-((1R,2S)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-6-(etiltio)-1-metil- 1H-pirazolo[3 ,4-a]pirimidin-4-amina (28x.HCI) am SO
OO As nó N
[00642] “Uma solução de (28r) (150,0 mg, 0,40 mmol) em THF (6 mL) foi suplementada com etanotiol (0,06 mL, 0,80 mmol) e K2CO;z3 (110,0 mg, 0,80 mmol). Depois de agitar em temperatura ambiente por 24 horas, THF foi evaporado até secar sob vácuo e o resíduo foi purifi- cado por cromatografia de coluna em sílica-gel. O óleo resultante foi dissolvido em éter dietílico (10 mL) e suplementado por gotejamento com uma solução saturada de HCl em éter dietílico. O precipitado do composto do título foi coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco.
[00643] Rendimento: 67%.
[00644] Ponto de fusão: 164-168ºC.
[00645] 1H RMN (CDCl3) 5 1,46 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH;3), 1,52 (d, J=6,0 Hz, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 1,69 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,37 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,09 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,33 (q, J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH3), 4,00 (s, 3H, NCH;), 6,84 (d, J=7,0 Hz, 1H, 6'-H), 6,89 (t, J=8,5 Hz, 1H, 2-H), 7,15 (q, J=8,4 Hz, 1H, 5-H), 7,73 (s, 1H, 3-H), 10,48 (bs, 1H, NH).
[00646] *C RMN (CDCi)º õ 141 (SCHCH3), 17,6 (NHCH(CH2)CHPh), 25,5 (NHCH(CH2)CHPh), 25,9 (SCH2CH3), 34,5 (NCH;3), 35,3 (NHCH(CH2)CHPh), 96,3 (C-3a), 114,8 (C-2'), 118,1 (C- 5'), 122,1 (C-6'), 135,5 (C-3), 135,3 (C-1'), 148,9-150,1 (C-4'), 150,3- 151,4 (C-3'), 151,7 (C-4), 154,2 (C-7a), 160,8 (C-6). Exemplo 29: síntese de cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-6-(propiltio)-1-metil-1H-pirazolo[3,4- dJjpirimidin-4-amina (29x.HCI) cloridrato de N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-metil-6- (propiltio)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (29x.HCI) nm SO pó
MNODEONÕ N
[00647] Uma solução de (28r) (150,0 mg, 0,40 mmol) em THF (6 mL) foi suplementada com propanotiol (0,07 mL, 0,80 mmol) e KCO;3 (110,0 mg, 0,80 mmol). Depois de agitar em temperatura ambiente por 24 horas, THF foi evaporado até secar sob vácuo e o resíduo foi purifi- cado por cromatografia de coluna em sílica-gel. O óleo resultante foi dissolvido em éter dietílico (10 mL) e suplementado por gotejamento com uma solução saturada de HCl em éter dietílico. O precipitado do composto do título foi coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco.
[00648] “Rendimento: 66%.
[00649] — Ponto de fusão: 110-115ºC.
[00650] 1H RMN (CDCI3) 5 1,08 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CHs), 1,51 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 1,68 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 1,82 (h, J=7,0 Hz, 2H, SCH2CH2CH;3), 2,36 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,09 (m, 1H, NHCH(CH2)JCHPh/SCH2CH2CH3), 3,29 (t J=6,8 Hz, 1H, SCH2CH2CH3), 4,00 (s, 3H, NCH;), 6,84 (d, J=5,9 Hz, 1H, 6-H), 6,89 (t, J=8,5 Hz, 1H, 2-H), 7,15 (q, J=8,5 Hz, 1H, 5'-H), 7,73 (s, 1H, 3-H),
10,37 (bs, 1H, NH),
[00651] *C RMN (CDCi3) 3 135 (SCHCH2CH3), 17,6 (NHCH(CH2)CHPh), 22,3 (SCH2CH2CH3), 25,5 (NHCH(CH2)CHPh), 33,3 (SCH2CH2CH3), 34,4 (NCH3), 35,3 (NHCH(CH2)CHPh), 96,3 (C- 3a), 114,8 (C-2'), 118,1 (C-5'), 122,1 (C-6'), 135,1 (C-3), 135,6 (C-1'), 148,9-150,1 (C-4'), 150,4-151,4 (C-3'), 151,8 (C-4), 154,3 (C-7a), 160,9 (C-6). Exemplo 30: síntese de cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(metiltio)-1H-pirazolo[3,4- dJjpirimidin-4-amina (30k.HCI) 4-cloro-1-etil-6-(metiltio)-1 H-pirazolo[3,4-a]pirimidina (30j) [ei]
DS LC
[00652] A uma solução de (27i') (1,0 g, 5,0 mmol) em acetonitrila (10 mL) resfriada até 5ºC em um banho de gelo, foram adicionados NaH (144 mg, 6,0 mmol) e iodoetano (0,60 mL, 7,5 mmol). Depois de 3 horas com agitação a 50ºC, a acetonitrila foi evaporada até secar sob vácuo e o resíduo foi fracionado entre água (50 mL) e diclorometano (2 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secas e evaporadas até secar sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00653] Rendimento: 77%.
[00654] “Ponto de fusão: 92-93,5ºC.
[00655] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,43 (t, J=7,2 Hz, 3H, NCH2CH;), 2,62 (s, 3H, SCH3), 4,42 (q, J=7,2 Hz, 2H, NCH2CH;3), 8,34 (s, 1H, CH).
[00656] ºC RMN (DMSO-ds) 5 13,9 (SCH3), 14,4 (NCH2CH3), 42,2 (NCH2CH3), 110,1 (C-3a), 132,3 (C-3), 153,0 (C-4/C-7a), 168,7 (C-6). cloridrato de N-((1R,2S)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(metiltio)- 1H-pirazolo[3,4-a]|pirimidin-4-amina (30k.HCI)
em O Dx TOO |
LC
[00657] Uma solução de (30j) (114,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel. O óleo resultante foi dissolvido em éter dietílico (10 mL) e suplementado por gotejamento com uma solução saturada de HCI em éter dietílico. O precipitado do composto do título foi coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco.
[00658] “Rendimento: 54%.
[00659] — Ponto de fusão: 176-180ºC.
[006680] '*H RMN (CDCl) õ3 1,51 (t J=738 Hz 4H, NHCH(CH2)CHPh/NCH2CH;3), 1,69 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,37 (s, 1H, NHCH(CH2JCHPh), 2,71 (s, 3H, SCH3), 3,09 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,41 (m, 2H, NCH2CH;3), 6,85 (d, J=6,8 Hz, 1H, 6"- H), 6,89 (t, J=8,6 Hz, 1H, 2-H), 7,16 (q, J=8,4 Hz, 1H, 5-H), 7,75 (s, 1H, 3-H), 10,55 (s, 1H, NH).
[00661] ºC RMN (CDCI3) à 14,0 (SCH3), 14,7 (NCH2CH3), 17,7 (NHCH(CH2)CHPh), 25,4 (NHCH(CH2)CHPh), 35,3 (NHCH(CH2)CHPh), 43,0 (NCH2CHs3), 96,3 (C-3a), 114,8 (C-2'), 118,1 (C-5'), 122,1 (C-6'), 135,2 (C-3), 135,5 (C-1'), 148,9-150,1 (C-4'), 150,3-151,5 (C-3'), 151,0 (C-7a), 154,2 (C-4), 160,8 (C-6). Exemplo 31: síntese de cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(etiltio)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin- 4-amina (31x.HCI) N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(metilsulfonil)-1H- pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (31r)
Dx OO | 07 “o LC
[00662] Uma solução de (30k) (125,0 mg, 0,35 mmol) em cloreto de metileno (10 mL) foi resfriada até 5ºC em um banho de gelo e suple- mentada com ácido 3-cloroperbenzoico (140,0 mg, 0,80 mmol). Depois de agitar em temperatura ambiente por 4 horas, a mistura foi lavada com uma solução de NaOH 0,1 M (2 x 10 mL). A camada orgânica foi seca e filtrada, o cloreto de metileno foi evaporado até secar sob vá- cuo e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica- gel.
[00663] Rendimento: 87%.
[00664] — Ponto de fusão: 95-100ºC (decomposição).
[00665] H RMN (CDCI3) õ 1,51 (m, 5H, NHCH(CH2)CHPh/NCH2CH;3), 2,24 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,20 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,33 (s, 3H, SO2CH;3), 4,53 (m, 2H, NCH2CH;), 6,58 (bs, 1H, NH), 6,90 (m, 2H, 2-H/6-H), 7,15 (m, 1H, 5-H), 7,75 (s, 1H, 3-H).
[0066] *C RMN (CDCi;) õd 149 (NCHCH3) 17,9 (NHCH(CH2)CHPh), 25,7 (NHCH(CH2)CHPh), 34,5 (NHCH(CH2)CHPh), 39,2 (SO2CH3), 42,8 (NCH2CH3), 99,5 (C-3a), 114,8 (C-2'), 118,2 (C-5'), 122,1 (C-6'), 131,7 (0-3), 135,7 (C-1), 148,9-150,1 (C-4'), 150,3-151,5 (C-3'), 152,8 (C-7a), 159,3 (C-4), 162,3 (C-6). cloridrato de N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(etiltio)- 1H-pirazolo[3 4-apirimidin-4-amina (31x.HCI) am O
OE F ADE No
LL
[00667] Uma solução de (31r) (150,0 mg, 0,38 mmol) em THF (6 mL) foi suplementada com etanotiol (0,06 mL, 0,80 mmol) e K2CO;3 (110,0 mg, 0,80 mmol). Depois de agitar em temperatura ambiente for 24 horas, THF foi evaporado até secar sob vácuo e o resíduo foi purifi- cado por cromatografia de coluna em sílica-gel. O óleo resultante foi dissolvido em éter dietílico (10 mL) e suplementado por gotejamento com uma solução saturada de HCl em éter dietílico. O precipitado do composto do título foi coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco.
[00668] Rendimento: 64%.
[00669] Ponto de fusão: 168-172ºC.
[00670] HRMN (CDCI3)ô 1,45 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCH2CHs), 1,51 (t, J=7,2 Hz 4H, NCHCH3/NHCH(CH2JCHPh) 1,69 (s 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,37 (s, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 3,09 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,32 (q, J=7,1 Hz, 2H, SCH2CH3), 4,40 (hept, J=6,9 Hz, 2H, NCH2CH;3), 6,85 (d, J=6,2 Hz, 1H, 6-H), 6,89 (t, J=8,8 Hz, 1H, 2-H), 7,15 (q, J=8,5 Hz, 1H, 5'-H), 7,74 (s, 1H, 3-H), 10,49 (bs, 1H, NH).
[00671] ºC RMN (CDCI3) 5 14,1 (SCH2CH3), 14,7 (NCH2CH3), 17,6 (NHCH(CH2)CHPh), 25,4 (NHCH(CH2)CHPh), 25,9 (SCH2CH3), 35,3 (NHCH(CH2)CHPh), 43,0 (NCH2CH3), 100,1 (C-3a), 114,8 (C-2'), 118,1 (C-5'), 122,1 (C-6'), 135,2 (0-3), 135,6 (C-1'), 148,9-150,1 (C-4'), 150,3-151,4 (C-3'), 151,1 (C-4), 154,2 (C-7a), 160,4 (C-6). Exemplo 32: síntese de cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(propiltio)-1H-pirazolo[3,4- djpirimidin-4-amina (32x.HCI) cloridrato de N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6- (propiltio)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (32x.HCI)
eum OE
BS F ANE no
LL
[00672] Uma solução de (31r) (150,0 mg, 0,38 mmol) em THF (6 mL) foi suplementada com propanotiol (0,07 mL, 0,80 mmol) e K2COz3 (110,0 mg, 0,80 mmol). Depois de agitar em temperatura ambiente por 24 horas, THF foi evaporado até secar sob vácuo e o resíduo foi purifi- cado por cromatografia de coluna em sílica-gel. O óleo resultante foi dissolvido em éter dietílico (10 mL) e suplementado por gotejamento com uma solução saturada de HCl em éter dietílico. O precipitado do composto do título foi coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco.
[00673] “Rendimento: 62%.
[00674] Ponto de fusão: 150-154ºC.
[00675] 'H RMN (CDCI3) 5 1,08 (t, J=7,3 Hz, 3H, SCHCH2CHs;), 1,51 (t, J=7,3 Hz, 4H, NCH2CH3y/NHCH(CH2)CHPh), 1,69 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 1,82 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 2,37 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,08 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 3,28 (t, J=7,1 Hz, 2H, SCH2CH2CH3), 4,39 (hept, J=6,9 Hz, 2H, NCH2CH;3), 6,85 (d, J=7,0 Hz, 1H, 6t-H), 6,89 (t, J=8,8 Hz, 1H, 2:-H), 7,15 (q, J=8,4 Hz, 1H, 5-H), 7,73 (s, 1H, 3-H), 10,50 (bs, 1H, NH).
[00676] ºC RMN (CDCI3) 5 13,5 (SCH2CH2CH3), 14,7 (NCH2CH3), 17,6 (NHCH(CH2)CHPh), 22,3 (SCH2CH2CHs;), 25,4 (NHCH(CH2)CHPh), 33,3 (SCH2CH2CH3), 35,3 (NHCH(CH2)CHPh), 43,0 (NCH2CH3), 96,3 (C-3a), 114,8 (C-2'), 118,1 (C-5'), 122,1 (C-6'), 135,2 (C-3), 141,3 (C-1'), 149,2-150,4 (C4'), 150,3-151,4 (C-3'), 151,1 (C-4), 154,2 (C-7a), 160,6 (C-6). Exemplo 33: síntese de cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-1-isopropil-6-(metiltio)-1H-pirazolo[3,4- djpirimidin-4-amina (33k.HCI)
4-cloro-1-isopropil-6-(metiltio)-1 H-pirazolo[3,4-d]pirimidina (33j) foi]
NO SFR EO
[00677] A uma solução de (27i') (1,0 g, 5,0 mmol) em acetonitrila (10 mL) resfriada até 5ºC em um banho de gelo, foram adicionados NaH (144 mg, 6,0 mmol) e 2-iodopropano (0,75 mL, 7,5 mmol). Depois de 3 horas com agitação a 50ºC, a acetonitrila foi evaporada até secar sob vácuo e o resíduo foi fracionado entre água (50 mL) e diclorome- tano (2 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secas e evaporar até secar sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00678] “Rendimento: 73%.
[00679] Ponto de fusão: 114-115,5ºC.
[00680] 'H RMN (DMSO-ds) 5 1,50 (d, J=6,5 Hz, 6H, CH(CH;3)2), 2,62 (s, 3H, SCHs3), 5,07 (hept, J=6,6 Hz, 1H, CH(CH3)2), 8,33 (s, 1H, CH),
[00681] ºC RMN (DMSO-d6s) 5 14,4 (SCH3), 22,1 (CH(CH3)2), 49,9 (CH(CH3)2), 110,7 (C-3a), 132,6 (C-3), 153,0-153,4 (C-4/C-7a), 169,0 (C-6). cloridrato de —N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1-isopropil-6- (metiltio)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (33k.HCI) esmo O
NOS F AO
[00682] “Uma solução de (33j) (121,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel. O óleo resultante foi dissolvido em éter dietílico (10 mL) e suplementado por gotejamento com uma solução saturada de HCl em éter dietílico. O precipitado do composto do título foi coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco.
[00683] Rendimento: 87%.
[00684] Ponto de fusão: 159-163ºC.
[00685] '*H RMN (CDCl)) ô 1,50 (q, J=67 Hz 1H, NHCH(CH2)CHPh), 1,54 (d, J=6,7 Hz, 3H, NCH(CHs3)2), 1,55 (d, J=6,7 Hz, 3H, NCH(CH3)2), 1,70 (ddd, J=104 HzZ/66 Hz/4,5 Hz, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,37 (ddd, J=97 HzZ/64 Hz2/31 Hz, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,71 (s, 3H, SCH3), 3,09 (da, J=7,3 Hz/3,2 Hz, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 5,08 (hept, J=6,7 Hz, 1H, NCH(CH3)2), 6,84 (d, J=8,4 Hz, 1H, 6-H), 6,89 (m, 1H, 2'-H), 7,16 (dt, J=9,6 Hz/8,4 Hz, 1H, 5'-H), 7,75 (s, 1H, 3-H), 10,57 (s, 1H, NH).
[00686] ºC RMN (CDCI3) 5 14,0 (SCH3), 17,7 (NHCH(CH2)CHPh), 21,9 (CH(CH3)2), 25,4 (NHCH(CH2)CHPh), 35,2 (NHCH(CH2)CHPh), 50,1 (CH(CH3)2), 96,3 (C-3a), 114,7 (C-2'), 118,1 (C-5'), 122,0 (C-6'), 135,0 (C-3), 135,6 (C-1'), 148,9-150,1 (C-4'), 150,3-151,5 (C-3'), 150,4 (C-7a), 154,1 (C-4), 160,4 (C-6). Exemplo 34: síntese de cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-6-(metiltio)-1-propil-1H-pirazolo[3,4- dJjpirimidin-4-amina (34k.HCI) 4-Cloro-1-propil-6-(metiltio)-1-propil-1H-pirazolo[3,4-a]pirimidina (34j)
CI NO SFR
ATO =
[00687] A uma solução de (27i') (1,0 g, 5,0 mmol) em acetonitrila (10 mL) resfriada até 5ºC em um banho de gelo, foram adicionados NaH (144 mg, 6,0 mmol) e 1-iodopropano (0,73 mL, 7,5 mmol). Depois de 3 horas com agitação a 50ºC, a acetonitrila foi evaporada até secar sob vácuo e o resíduo foi fracionada entre água (50 mL) e diclorome- tano (2 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secas e evaporadas até secar sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de co- luna em sílica-gel.
[00688] Rendimento: 78%.
[00689] Ponto de fusão: 41-43ºC.
[00690] 1H RMN (DMSO-ds) 5 0,83 (t, J=6,0 Hz, 3H, NCH2CH2CHs), 1,88 (h, J=6,1 Hz, 2H, NCH2CH2CH3), 2,62 (s, 3H, SCH;3), 4,35 (t, J=6,2 Hz, 2H, NCH2CH2CH;3), 8,35 (s, 1H, CH).
[00691] ºC RMN (DMSO-ds) 5 11,0 (NCH2CH2CH3), 13,9 (SCH;3), 22,2 (NCH2CH2CH3), 48,6 (NCH2CH2CH3), 110,0 (C-3a), 132,4 (C-3), 153,0 (C-4), 153,5 (C-7a), 168,7 (C-6). cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6-(metiltio)-1- propil-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina (34k.HCI) aum SO DESA So F Sos. =
[00692] “Uma solução de (34j) (121,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (93,0 mg, 0,55 mmol) e trietilamina (0,13 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel. O óleo resultante foi dissolvido em éter dietílico (10 mL) e suplementado por gotejamento com uma solução saturada de HCI em éter dietílico. O precipitado do composto do título foi coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco.
[00693] “Rendimento: 76%.
[00694] Ponto de fusão: 155-159ºC.
[00695] 'H RMN (CDCl3) 5 0,93 (t, J=7,4 Hz, 3H, NCH2XCH2CH;), 1,51 (q, J=6,7 Hz 1H, NHCH(CH2CHPh), 1,69 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 1,94 (h, J=7,3 Hz, 2H, NCH2CH2CH;3), 2,38 (ddd, J=9,6 Hz/6,4 HzZ/3,0 Hz, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 2,71 (s, 3H, SCH;), 3,09 (dd, J=6,7 Hz/3,5 Hz, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,32 (m, 2H, NCH2CH2CH3), 6,85 (d, J=8,3 Hz, 1H, 6'-H), 6,89 (m, 1H, 2-H), 7,16 (m, 1H, 5'-H), 7,75 (s, 1H, 3-H), 10,57 (s, 1H, NH).
[00696] ºC RMN (CDCI3) 5 11,3 (NCH2CH2CH3), 14,0 (SCH3), 17,6 (NHCH(CH2)CHPh), 22,8 (NCH2CH2CH3), 25,4 (NHCH(CH2)CHPh), 35,3 (NHCH(CH2)CHPh), 49,5 (NCH2CH2CH3), 96,1 (C-3a), 114,8 (C- 2'), 118,1 (C-5'), 122,0 (C-6'), 135,2 (C-3), 135,5 (C-1'), 148,9-150,1 (C-4'), 150,3-151,5 (C-3'), 151,5 (C-7a), 154,2 (C-4), 160,8 (C-6). Exemplo 35: síntese de cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-7-etil-2-(metiltio)-7 H-pirrol[2,3-d]pirimidin- 4-amina (35p.HCI) 6-Amino-2-(metiltio)pirimidin-4-01 (351)
OH 2
SON NH
[00697] —6-Amino-2-mercaptopirimidin-4-01 (2,5 g, 17,5 mmol) foi dis- solvido em KOH 10% (25 mL) e suplementado com iodeto de etila (1,25 mL, 20,0 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 80ºC por 1 h. Depois de resfriar em um banho de gelo a 5ºC, a mistura foi acidificada pela adição de ácido clorídrico 6N e o precipitado resultante foi filtrado e seco.
[00698] “Rendimento: 95%.
[00699] Ponto de fusão: 261-264ºC.
[00700] HRMN (DMSO-ds) 5 2,42 (s, 3H, SCHs), 4,90 (s, 1H, CH), 6,44 (s, 2H, NH2), 11,47 (s, 1H, OH).
[00701] ºC RMN (DMSO-ds) 5 12,6 (SCH3), 81,2 (C-5), 163,6 (C-2), 164,3 (C-6).
2-(Metiltio)-7 H-pirrol[2,3-d]pirimidin-4-01] (35m)
OH Da
[00702] A uma suspensão de 351 (1,57 g, 10,0 mmol) em água (40 mL) foram adicionados acetato de sódio (2,0 g, 24,5 mmol) e uma so- lução aquosa de cloracetaldeído 50% (2 mL, 14,2 mmol). Depois de 1 hora a 80ºC, a mistura de reação foi resfriada em um banho de gelo a 5ºC e o precipitado resultante foi filtrado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00703] “Rendimento: 45%.
[00704] Ponto de fusão: >300ºC.
[00705] 'H RMN (DMSO-d6s) 5 2,52 (s, 3H, SCH;3), 6,36 (m, 1H, 5- H), 6,91 (m, 1H, 6-H), 11,75 (s, 1H, NH), 12,03 (s, 1H, OH).
[00706] "ºC RMN (DMSO-ds) 5 12,8 (SCH3), 102,0 (C-5), 104,2 (C- 4a), 119,3 (0-6), 148,3 (C-7a), 154,2 (C-2), 158,8 (C-4). 4-Cloro-2-(metiltio)-7 H-pirrol[2,3-d]pirimidina (35n) foi] Da
[00707] A uma solução de (35m) (1,0 g, 5,5 mmol) em POCI3 (10 mL) resfriada até 5ºC em um banho de gelo foi adicionada por goteja- mento dietilanilina (1,0 mL, 6,2 mmol). Depois de 2 horas com agitação a 80ºC, a mistura foi vertida sobre gelo picado e o precipitado resultan- te foi filtrado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00708] “Rendimento: 33%.
[00709] Ponto de fusão: 206-208ºC.
[00710] 1H RMN (DMSO-ds) 5 2,56 (s, 3H, SCH;3), 6,52 (s, 1H, 5-H), 7,52 (s, 1H, 6-H), 12,39 (s, 1H, NH).
[00711] ºC RMN (DMSO-ds) 5 13,8 (SCH3), 99,0 (C-5), 113,2 (C- 4a), 126,9 (C-6), 150,4-152,7 (C-4/C-7a), 162,7 (C-2).
N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(metiltio)-7 H-pirrol[2,3- dlpirimidin-4-amina (350")
NOS F IO
[00712] Uma solução de (35n) (200,0 mg, 1,0 mmol) em acetonitrila (5 mL) foi suplementada com (1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropanamina (340,0 mg, 2,0 mmol) e trietilamina (0,30 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 1 h. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00713] Rendimento: 15%.
[00714] Ponto de fusão: 208-211ºC.
[00715] 1H RMN (DMSO-ds) 5 1,34 (m, 2H, NHCH(CH2)CHPh), 2,03 (s, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 2,30 (s, 3H, SCH;3), 3,03 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 6,40 (s, 1H, 5-H), 6,93 (s, 1H, 2-H), 7,08 (s, 1H, 6- H), 7,33 (m, 2H, 6-H/5'-H), 7,84 (s, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 11,40 (s, 1H, NH).
[00716] ºC RMN (CDClI3) 5 13,3 (SCH3), 99,5 (C-5), 112,1 (Ca), 117,0 (C-5'), 119,9 (C-2'), 122,9 (C-6'), 139,6 (C-1'), 147,0-148,3 (C-4'), 148,6-150,0 (C-3'), 162,3 (C-2). cloridrato de N-((1R,2S)-2-(3 4-difluorfenil|)ciclopropi!)-7-etil-2-(metiltio)- 7H-pirrol[2,3-dpirimidin-4-amina (35p.HCI) esmo O
DB LL
[00717] Auma solução de (350') (166,0 mg, 0,5 mmol) em acetoni- trila (10 mL) resfriada até 5ºC em um banho de gelo, foram adiciona- dos NaH (15 mg, 0,6 mmol) e iodoetano (0,060 mL, 0,75 mmol). De-
pois de 1 hora de agitação a 50ºC, a acetonitrila foi evaporado até se- car sob vácuo e o resíduo foi fracionado entre água (50 mL) e dicloro- metano (2 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secas e evaporadas até secar sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de co- luna em sílica-gel. O óleo resultante foi dissolvido em éter dietílico (10 mL) e suplementado por gotejamento com uma solução saturada de HCI em éter dietílico. O precipitado do composto do título foi coletado por filtração, lavado com éter dietílico e seco.
[00718] “Rendimento: 74%.
[00719] Ponto de fusão: 189-194ºC.
[00720] '*H RMN (CDCl) 3 146 (t J=738 Hz 4H, NHCH(CH2)JCHPRh/NCH2C0H3), 1,66 (m, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 2,30 (m, 1H, NHCH(CH2)JCHPh), 2,70 (s, 3H, SCH3), 3,09 (m, 1H, NHCH(CH2)CHPh), 4,22 (q, J=7,3 Hz, 2H, NCH2CH3), 6,35 (d, J=3,4 Hz, 1H, 5-H), 6,81 (d, J=8,3 Hz, 1H, 6-H), 6,87 (m, 1H, 2'-H), 6,90 (d, J=3,6 Hz, 1H, 6-H), 7,13 (q, J=8,5 Hz, 1H, 5'-H), 9,99 (s, 1H, NH).
[00721] “ºC RMN (CDCI3) à 14,0 (SCH3), 15,5 (NCH2CH3), 17,9 (NHCH(CH2)CHPh),25,7 (NHCH(CH2)CHPh), 35,2 (NHCH(CH2)CHPh), 40,3 (NCH2CH;3), 98,1 (C-4a), 103,4 (C-5), 114,8 (0-2), 117,8 (C-5'), 122,0 (C-6'), 125,4 (C-6), 136,4 (C-1'), 148,3 (7a), 149,1-151,1 (C-3'/0-4'), 153,4 (C-4), 155,9 (C-2).
2. Exemplos de derivados de pirimidinas para uso na prevenção e tratamento de infecção bacteriana Exemplo 1: Efeitos antibacterianos das moléculas 2329, 2348, 2412, 2452 e 2461 sobre S. epidermidis: determinação da Concen- tração Inibitória Mínima (CIM).
[00722] As moléculas 2329, 2348, 2452 e 2461 correspondem, res- pectivamente às seguintes formulações:
O RD
NES F OO F IE) as W 2329 (1c) 2348 (3c)
[00723] 2329 é N-((1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (também chamado de 1c acima)
[00724] 2348 é N((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (também chamado de 3c acima)
SO ro E F
O F ANA W NO AZ V os Ds Ho ou 2412 (15c) 2461 (19d)
[00725] 2412 é 9-ali-N((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (também chamado de 15c)
[00726] 2461 é (18,2R,3S 4R)-4-(6-(((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)amino)-2-(propiltio)-9H-purin-9-il)ciclopentano- 1,2,3-triol (também chamado de 19d). W-N
IE —= 2452 (17c)
[00727] 2452 é N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-(prop-2- in-1-i1)-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (também chamado de 17c).
[00728] A Concentração Inibitória Mínima (CIM) das moléculas 2329, 2348, 2412, 2452 e 2461 foi determinada em Staphylococcus epidermidis (ATCC 35984, também conhecido como RP62A), de acor-
do com as recomendações do EUCAST (European Committee on An- timicrobial Susceptibility Testing).
[00729] Resumidamente, uma única colônia cultivada em uma placa de Agar Tríptico de Soja (TSA) foi suspensa novamente e cultivada em Caldo Tríptico de Soja (TSB) durante a noite (O/N) em condições ae- róbicas (37ºC com agitação a 220 rpm), no dia seguinte um inóculo 1:50 em caldo Mueller-Hinton (MHB) foi incubado em condições aeró- bicas por 3 horas e um inóculo com diluição de 1:100, que correspon- de a 3x10º CFU/ml, foi incubado na presença ou na ausência de dife- rentes concentrações das moléculas em DMSO 1% (veículo). Após o crescimento O/N, a OD de cada cultura foi medida em 600 nm em um espectrofotômetro (ODsoo). A CIM representa a concentração na qual não há crescimento visível de bactérias, ou seja, AOD a 600nm igual a zero (amostra em branco é o meio sozinho).
[00730] A CIM para as moléculas 2329, 2348 e 2461 contra o S. epidermidis (ATCC 35984) é igual a 20 uM, enquanto está acima de 50 UM para as moléculas 2412 e 2452. Exemplo 2: Efeitos antibacterianos das moléculas 2329, 2348, 2412, 2452 e 2461 em S. aureus: determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM).
[00731] Experimentos adicionais são conduzidas usando diferentes cepas de S. aureus, como cepas bacterianas Gram-positivas clinica- mente relevantes: S. aureus ATCC 25904, S. aureus ATCC BAA-1556 resistente a meticilina (MRSA), S. aureus Mu-50 (ATCC 700695) com resistência intermediária aos glicopeptídeos (GISA), a fim de determi- nar a Concentração Inibitória Mínima (CIM), que é a concentração mí- nima necessária para impedir o crescimento bacteriano. A cepa biolu- minescente S. aureus Xen29 (ATCC 12600) também foi usada. Essa cepa é derivada da cepa parental S. aureus ATCC 12600, um isolado de líquido pleural, também designado como NCTC8532. S. aureus
Xen29 possui uma cópia estável do operon luxABCDE modificado de Photorhabdus luminescens em um único sítio de integração no cro- mossomo bacteriano.
[00732] Uma única colônia selecionada das diferentes cepas de S. aureus é suspensa novamente e cultivada em caldo de infusão cére- bro coração (BHI) durante a noite (O/N) em condições aeróbicas (37ºC com agitação a 220 rpm), no dia seguinte um inóculo 1:100 em caldo de Mueller-Hinton (MHB) é incubado em condições aeróbicas por 3 horas (OD = 0,08-0,1) e um inóculo com diluição 1:300, que corres- ponde a 3x10º CFU/ml, é incubado na presença ou ausência de dife- rentes concentrações das moléculas testadas em DMSO 1%. Após o crescimento O/N, a OD de cada cultura foi medida a 600 nm (ODçoo) em um espectrofotômetro (Victor 3-Perkin Elmer). A CIM representa a concentração na qual não há crescimento visível de bactérias, isto é, AOD a 600nm igual a zero (amostra em branco é o meio sozinho). CIM para 2329, 2348, 2412, 2452 e 2461 contra S. aureus ATCC 25904 e Xen29 (ATCC 12600) são iguais a 20-25 UM. A molécula 2329 é a mais potente contra o S. aureus resistente à meticiliha (MRSA) ATCC BAA-1556, com uma CIM igual a 20 uM, enquanto que as moléculas 2348 e 2461 tinham uma CIM de 25 UM e a CIM para as moléculas 2412 e 2452 está compreendida entre 2 a 25 e 50 uM. A CIM da molé- cula 2329 contra o S. aureus Mu-50 (ATCC 700695) com resistência intermediária aos glicopeptídeos (GISA) está entre 25 e 30 uM, en- quanto que está acima de 50 UM para as moléculas 2348, 2412 e
2452. Exemplo 3: Efeitos antibacterianos das moléculas 2329, 2348, 2412, 2452 e 2461 em E. faecalis: determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM)
[00733] Outras experiências foram realizadas usando a cepa bacte- riana Gram-positiva clinicamente relevante de E. faecalis ATCC BAA-
2365 resistente à vancomicina (VRE), a fim de determinar a Concen- tração Inibitória Mínima (CIM), que é a concentração mínima necessá- ria para impedir o crescimento bacteriano.
[00734] Uma única colônia selecionada a partir de E. faecalis VRE é suspensa novamente e cultivada no caldo de infusão cérebro-coração (BHI) durante a noite (O/N) em condições aeróbicas (37ºC com agita- ção a 220 rpm), no dia seguinte um inóculo 1:100 em caldo de Mueller- Hinton (MHB) é incubado em condições aeróbicas por 3 horas (OD = 0,08-0,1) e um inóculo com diluição 1:300, que corresponde a 3x105 CFU/ml, é incubado na presença ou ausência de diferentes concentra- ções das moléculas testadas em DMSO 1%. Após o crescimento O/N, a OD de cada cultura foi medida a 600 nm (ODçoo) em um espectrofo- tômetro (Victor 3-Perkin Elmer). A CIM representa a concentração na qual não há crescimento visível de bactérias, isto é, AOD a 600nm igual a zero (amostra em branco é o meio sozinho). A CIM para as mo- léculas 2329 e 2461 contra E. faecalis ATCC BAA-2365 resistente à vancomicina (VRE) foi igual a 25 mM, enquanto está acima de 50 uM para as moléculas 2348, 2412 e 2452.
[00735] Os resultados de todos os experimentos estão ilustrados na Tabela 1.
midis Tabela 1. MIC: concentração inibitória mínima de derivados de pirimi- dina determinada em caldo de Mueller-Hinton (MHB) contra MRSA: S. aureus resistente à meticilina; GISA: S. aureus com resistência inter-
mediária aos glicopeptídeos; VRE: E. faecalis resistente à vancomici- na; MIC é expressa em uM. nd: não determinado. Exemplo 4: uso das moléculas 2329, 2348 como inibidores da formação de biofilme de S. aureus.
[00736] S&S aureus bioluminescente (Xen29, Perkin Elmer- (ATCC 12600)) é cultivado durante a noite em meio TSB, antes de ser diluído 100 vezes em TSB fresco e incubado aerobicamente a 37ºC até a cul- tura bacteriana atingir uma ODgeoo de 0,6 (que corresponde a aproxi- madamente 1-3 x 108 CFU/ml). As culturas de bactérias são então dilu- ídas para 1 x 10º CFU/ml em TSB fresco. Alíquotas de 600 ul de sus- pensões de bactérias diluídas são distribuídas em cada poço de uma placa de 48 poços. As bactérias são deixadas aderir por 3 horas sob condições estáticas a 37 *º C. Após a remoção do meio, os poços são lavados 2 vezes com PBS para eliminar bactérias planctônicas e pre- enchidos novamente com TSB suplementado com glicose a 0,5%
[00737] As moléculas 2329 ou 2348 são então adicionadas em uma concentração final de 10 uM. A formação de biofilme é fotografada a cada 60 minutos, durante 13 horas, usando um sistema de câmera IVIS (Xenogen Corp. ) A emissão total de fótons de cada poço é quan- tificada usando o pacote de programas Living Image (Xenogen Corp.).
[00738] Na figura 1, a formação de biofilme é representada como a intensidade do sinal de fótons por unidade de superfície. As moléculas 2329 e 2348 impediram totalmente a formação de biofilme quando usadas na dose de 10 uM. Exemplo 5: uso das moléculas 2412 e 2452 para retardar a forma- ção de biofilme de S. aureus.
[00739] OS. aureus bioluminescente (XKen29, Perkin Elmer- (ATCC 12600)) é cultivado durante a noite em meio TSB, antes de ser diluído 100 vezes em TSB fresco e incubado aerobicamente a 37ºC até a cul- tura bacteriana atingir uma ODçeoo de 0,6 (que corresponde a aproxi-
madamente 1-3 x 108 CFU/ml). As culturas de bactérias são então dilu- ídas para 1 x 10º CFU/ml em TSB fresco. Alíquotas de 600 ul de sus- pensões de bactérias diluídas são distribuídas em cada poço de uma placa de 48 poços. As bactérias são deixadas aderir por 3 horas sob condições estáticas a 37 *º C. Após a remoção do meio, os poços são lavados 2 vezes com PBS para eliminar bactérias planctônicas e pre- enchidos novamente com TSB suplementado com glicose a 0,5%.
[00740] As moléculas 2412 ou 2452 são então adicionadas a uma concentração final de 10 mM. A formação de biofilme é fotografada a cada 60 minutos, durante 13 horas, usando um sistema de câmera IVIS (Xenogen Corp. ) A emissão total de fótons de cada poço é quan- tificada usando o pacote de programas Living Image (Xenogen Corp.).
[00741] Na figura 1, a formação de biofilme é representada como a intensidade do sinal de fótons por unidade de superfície. As moléculas 2412 e 2452 são capazes de retardar a formação de biofilme quando usadas na dose de 10 uM em comparação com o controle com veículo (DMSO 1%). Exemplo 6: Efeito da molécula 2329 sobre o biofilme maduro de S. epidermidis (ATCC 35984)
[00742] Em outro experimento, deixou-se que 0,5 x 10º CFU/ml de células de S. epidermidis aderissem por 4 horas e deixou-se a forma- ção de biofilme por mais 24 horas na presença de glicose 0,25%, nes- te ponto tratou-se o biofilme com diferentes concentrações da molécu- la 2329 por 24 h em TSB com 0,25% de glicose e determinou-se a bi- omassa do biofilme usando a coloração com cristal violeta.
[00743] Paraa análise do biofilme, primeiro lavou-se o biofilme 3 vezes com NaCl 0,9% para eliminar todas as bactérias planctônicas, antes da incubação com uma solução de coloração Crystal Violet 1% em H20O destilada (dH2O).
[00744] Os poços são lavados 3 vezes com dH2O para eliminar o cristal violeta não ligado. 400 ul de ácido acético 10% são então adi- cionados e incubados em temperatura ambiente por 10 minutos. A ab- sorbância é medida em triplicata a 570 nm, refletindo a biomassa total do biofilme. A Figura 2 mostra que 2329 80UuM poderia reduzir o biofil- me maduro de 24 horas de S. epidermidis. Exemplo 7: Efeitos antibacterianos das moléculas de pirazolopi- rimidina 2539, 2544, 2666 2676, 2693, 2783, 2784 e 2782 e das mo- léculas de purina 2498, 2511, 2525, 2527, 2833 e 2840 sobre Sta- phylococcus epidermidis (S. epidermidis- (A TCC 35984)) também chamado MRSE: determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM).
[00745] As moléculas de pirazolopirimidina 2539, 2544, 2666, 2676, 2693, 2783, 2784 e 2782 correspondem às seguintes formulações: Oo OO SAN N SON 5 2539 (27K) 2544 (30k)
[00746] 2539 é N-((1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1-metil-6- (metiltio)-1 H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina / (também chamado de 27k acima);
[00747] 2544 é N(1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6- (metiltio)-1 H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-amina / (também chamado de 30k acima).
am NO aum SO
NÓS F NOSFR F
AO DO À d- 2666 (28x.HC]) 2676 (33k.HCI])
[00748] 2666 é cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4-
difluorfenil)ciclopropil)-6-(etiltio)-1-metil-1 H-pirazolo[3,4-a]pirimidin-4- amina (também chamado de 28x.HCI acima);
[00749] 2676 é cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-1-isopropil-6-(metiltio)-1 H-pirazolo[3,4- dlpirimidin-4-amina ((também chamado de 33k.HCI acima). en SO
O F
SN SS 2693 (34k.HCI)
[00750] 2693 é cloridrato de N((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-6-(metiltio)-1-propil-1 H-pirazolo[3,4-apirimidin- 4-amina (também chamado 34k.HCI acima).
nm am
N Í N A N une N Lo V 2783 (31x HC) 2782 (29x.HCI)
[00751] 2783 é cloridrato de N-((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-6-(etiltio)-1-etil-1 H-pirazolo[3,4-d]pirimidin-4- amina (também chamado 31x.HCI acima);
[00752] 2782 é cloridrato de N((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)-6-(propiltio)-1-metil-1 H-pirazolo[3,4-a]pirimidin- 4-amina (também chamado 29x.HCI acima).
em OE
OS F uv Nê N
LC 2784 (32x.HCI)
[00753] 2784 é cloridrato de N((1R,28)-2-(3,4-
difluorfenil)ciclopropil)-6-(propiltio)-1-etil-1 H-pirazolo[3,4-d0]pirimidin-4- amina (também chamado 32x.HCI acima).
[00754] As moléculas de purina 2498, 2511, 2525, 2527, 2833 e 2840 correspondem às seguintes formulações:
NOS N F OS F IO SAN é 2498 (22c) 2511 (24c)
[00755] 2498 é N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2- (metiltio)-9H-purin-6-amina (também chamado 22c acima);
[00756] 2511 é N((1R,2S8)2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2- (metiltio)-9H-purin-6-amina (também chamado 24c acima).
O RDI kN OO F AO? AN 2525 (20c) 2527 (21c)
[00757] 2525 é N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(etiltio)-9- metil-9H-purin-6-amina (também chamado 20c acima);
[00758] 2527 é N((1R,2S)-2-(3/4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2- (etiltio)-9H-purin-6-amina (também chamado 21c acima). AO i AO i À Lt 2833 (25c) 2840 (26c)
[00759] 2833 é 2-(butiltio)-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)- 9-metil-9H-purin-6-amina (também chamado 25c acima);
[00760] 2840 é 2-(butiltio)-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-
9-etil-9H-purin-6-amina (também chamado 26c acima).
[00761] A Concentração Inibitória Mínima (CIM) das moléculas de pirazolopirimidina 2539, 2544, 2666,2676, 2693, 2783, 2784 e 2782 e das moléculas de purina 2498, 2511, 2525, 2527, 2833 e 2840 foi de- terminada em S. epidermidis (ATCC 35984, também conhecido como RP62A ou MRSE), de acordo com as recomendações do EUCAST (European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing).
[00762] Resumidamente, uma única colônia cultivada em uma placa de ágar foi suspensa novamente e cultivada em meio Triptic Soy Broth (TSB) durante a noite (O/N) em condições aeróbicas (37ºC com agita- ção a 220 rpm), no dia seguinte um inóculo 1:50 em caldo de Mueller- Hinton (MHB) foi incubado em condições aeróbicas por 3 horas (OD = 0,08-0,1) e um inóculo com diluição de 1:300, que corresponde a 3 x 10º CFU/ml, foi incubado na presença ou ausência de diferentes con- centrações de cada uma das moléculas em DMSO 1% (veículo). Após o crescimento O/N, a OD de cada cultura foi medida em 600 nm (ODs00) em um espectrofotômetro (Victor 3 - Perkin Elmer). A CIM re- presenta a concentração na qual não há crescimento visível de bacté- rias, isto é, AOD a 600 nm igual a zero (amostra em branco é o meio sozinho).
[00763] As moléculas de pirazolopirimidina 2539, 2544, 2666 e 2676 e as moléculas de purina 2498, 2511, 2525, 2527 e 2833 foram capazes de inibir o crescimento de MRSE no meio MHB. Os valores de CIM são relatados na Tabela 2. As moléculas de pirazolopirimidina 2693, 2782, 2783 e 2784 e as moléculas de purina 2511 e 2840 foram inativas contra S. epidermidis até com 100 uM. Exemplo 8: Efeitos antibacterianos das moléculas de pirazolopi- rimidina 2539, 2544, 2666 2676, 2693, 2783, 2784 e 2782 e das mo- léculas de purina 2498, 2511, 2525, 2527, 2833 e 2840 sobre Sta- bphylococcus aureus (S. aureus): determinação da Concentração |ni-
bitória Mínima (CIM).
[00764] Experimentos adicionais são realizados usando diferentes cepas de S. aureus, como as cepas bacterianas Gram-positivas clini- camente relevantes: S. aureus resistentes à meticiliha (MRSA) ATCC BAA-1556 e S. aureus Xen29 (Perkin Elmer ATCC 12600).
[00765] Para determinar a CIM das moléculas acima mencionadas sobre MRSA ou sobre Xen29, uma única colônia de MRSA ou Xen29 é suspensa novamente e cultivada em caldo de infusão cérebro coração (BHI) durante a noite (O/N) em condições aeróbicas (37ºC com agita- ção a 220 rpm); no dia seguinte um inóculo 1:100 em caldo de Mueller- Hinton (MHB) foi incubado em condições aeróbicas por 3 horas (OD = 0,08-0,1) e um inóculo com diluição de 1:300, que corresponde a 3 x 10º CFU/ml, foi incubado na presença ou ausência de diferentes con- centrações de cada uma das moléculas em DMSO 1% (veículo). Após o crescimento O/N, a OD de cada cultura foi medida em 600 nm (ODg00o) em um espectrofotômetro (Victor 3 - Perkin Elmer). A CIM re- presenta a concentração na qual não há crescimento visível de bacté- rias, isto é, AOD a 600 nm igual a zero (amostra em branco é o meio sozinho).
[00766] As moléculas de pirazolopirimidina 2539, 2544, 2666, 2676, 2693, 2783, 2782, 2784 e as moléculas de purina 2498, 2511, 2525, 2527, 2833 e 2840 foram ativas contra MRSA (ATCC BAA-1556), en- quanto as moléculas 2539, 2544, 2666, 2498, 2511, 2525 e 2527 fo- ram capazes de inibir o crescimento de Xen29 (ATCC 12600). Os valo- res de CIM dessas moléculas contra essas cepas de S. aureus são relatadas na Tabela 2.
[2408 felnls em em | 6 [30 | so] [2517 [efnls[ em [eres [| >100 | so Tso] 2525 [C/Nis| cmo | cm | ao | 26 | so [257 [ejnis| cmem crer | 25 | 25 | so | [2840 Te ns erecHecHZer.| crers | >100 [ 50 | na | Tabela 2. Valores de CIM de derivados de pirimidina , expressos em UM como determinados em meio MHB contra cepas Gram-positivas MRSE, MRSA e Xen29. (nd: não determinado). Todas as moléculas foram testadas até uma concentração de 100uM. Exemplo 9: Uso da molécula de pirazolopirimidina 2666 e da mo- lécula de purina 2511 como inibidores da formação de biofilme de Staphylococcus aureus (Xen29-ATCC 12600):
[00767] SS. aureus bioluminescente foi cultivado O/N em meio TSB, antes de ser diluído 100 vezes em TSB fresco e incubado em condi- ções aeróbicas a 37ºC até a cultura bacteriana atingir uma ODçoo de 0,6 (que corresponde a aproximadamente 1-3 x 10º CFU/ml). As cultu- ras de bactérias foram então diluídas para 1 x 10º CFU/ml em TSB fresco e alíquotas de 600 ul foram distribuídas em cada poço de uma placa de 48 poços. As bactérias foram deixadas aderir por 3 horas sob condições estáticas a 37ºC. Após a remoção do meio, os poços foram lavados 2 vezes com PBS para eliminar bactérias planctônicas e pre- enchidos novamente com TSB suplementado com glicose 0,5%. As moléculas 2666 e 2511 foram então adicionadas em uma concentra- ção final de 20 uM. A formação de biofilme é fotografada a cada 60 minutos, durante 13 horas, usando um sistema de câmera IVIS (Xeno- gen Corp.) A emissão total de fótons de cada poço (fóton/ segundo:
p/s) é então quantificada usando o pacote de programas Living Image (XKenogen Corp.).
[00768] A Figura3 mostra a cinética de inibição da formação de bio- filme de Staphylococcus aureus (XKen29-ATCC 12600) (etapa 2) pela molécula de pirazolopirimidina 2666 e a molécula de purina 2511 a 20 UM em comparação com a formação de biofilme na presença do con- trole com veículo (Ctrl).
[00769] A formação do biofilme é proporcional à intensidade do si- nal de fótons por segundo (radiação) irradiado a partir de cada poço. As moléculas 2666 e 2511 inibiram o crescimento do biofilme quando usadas a 20 uM. Exemplo 10: uso da molécula de pirazolopirimidina 2666 como agente bactericida contra MRSA e das moléculas de purina 2329 e 2833 como agentes bactericidas respectivamente contra MRSA e MRSE.
[00770] Foideterminada a Concentração Bactericida Mínima (MBC) da molécula de pirazolopirimidina 2666 para a cepa MRSA e a MBC das moléculas de purina 2329 e 2833 para as cepas MRSA e a MRSE, respectivamente.
[00771] Para determinar a MBC, as bactérias foram cultivadas da mesma maneira que para a determinação de CIM na presença da mo- lécula de pirazolopirimidina 2666 para MRSA ou na presença da molé- cula de purina 2833 para MRSE ou 2329 para MRSA. Em 24 horas, as bactérias foram plaqueadas em placas de ágar TSB pelo método de microdiluição em caldo e as colônias formadas nas placas foram con- tadas no dia seguinte.
[00772] MBC representa a menor concentração na qual 99,9% das bactérias do inóculo inicial são mortas ao longo de 24 horas.
[00773] AMBC da molécula 2666 e 2329 para MRSA foi de 40 UM, enquanto que a MBC de 2833 para MRSE foi de 50 UM, o que corres-
ponde a apenas cerca de 2 vezes a sua CIM.
3. Comparação de derivados de pirimidina de acordo com a pre- sente invenção com as purinas descritas no WO2009/034386.
[00774] Foram sintetizadas 2 moléculas (25, 81) a partir de exem- plos de WO2009/034386. Neste pedido de patente, é descrita a capa- cidade destas 2 moléculas de inibir a enzima Murl de E. faecalis, E. faecium e S. aureus. As 2 moléculas foram capazes de inibir a ativida- de enzimática das isoenzimas Murl de E. faecalis e. faecium com me- tade das concentrações inibitórias máximas (IC5o9) iguais a 2 e 5 UM, respectivamente (Tabela 9 de WO2009/ 034386). Em contraste, IC5so > 400 uM é relatada contra a isozima Murl de S. aureus para as 2 molé- culas, indicando uma falha na inibição da enzima Murl dessa cepa bacteriana. WO2009/034386 não relata nenhum outro teste que de- monstre a eficácia antibacteriana dessas moléculas de purina.
[00775] Não foiencontrada atividade antibacteriana dessas molécu- las contra as duas cepas de S. aureus testadas, cepas resistentes à meticiliha (MRSA, ATCC BAA-1556) e Xen29 (Perkin Elmer-ATCC 12600) nem contra S. epidermidis (MRSE ATCC 35984).
[00776] As moléculas foram sintetizadas de acordo com uma via química semelhante àquela descrita na presente invenção, com a ex- ceção de que a substituição nucleofílica do átomo de cloro em Xb é realizada por outra amina. CI RºnH Da i OE: RÃ z No TT, RÃ q, Xxb Xz
[00777] Quando R' = CH3, os compostos Xz" alcóxi-substituídos correspondentes em que Y = O foram fornecidos a partir de Xz de acordo com o esquema 6 abaixo:
RH Rn AN 2 NO —. DDS — Nos R2 o R2 R2 xz x xz” Esquema 6
[00778] As moléculas foram sintetizadas de acordo com uma via química semelhante como descrita na presente invenção, com a exce- ção de que a substituição nucleofílica do átomo de cloro em Xb é reali- zada por outra amina. Exemplo 1: 2-(butiltio)-9-(3-cloro-2,6-difluorobenzil)-9H-purin-6- amina (362) NH,
NOR N ATO À fi
F
[00779] 362 (molécula 25 no WO2009/034386) foi sintetizada de acordo com uma via química semelhante à descrita na presente inven- ção, com a exceção de que a substituição nucleofílica do átomo de cloro em Xb é realizada com outra amina Rº -NH>2, amônia no presente exemplo. 2-(Butiltio)-6-cloro-Nº-(3-cloro-2 6-difluorobenzil)pirimidina-4,5-diamina (36a) foi] e
AN NH F cl
O
[00780] —2-(Butiltio)-4,6-dicloropirimidin-5-amina (25h) (0,5 9g, 2,0 mmol) foi dissolvida em metanol (10 mL) e suplementada com 3-cloro- 2,6-difluorobenzilamina (0,78 mL, 6,0 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 130ºC por 2 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00781] Rendimento: 77%.
[00782] Ponto de fusão: 148-150ºC.
[00783] '*H RMN (DMSO-ds) 5 0,88 (t J=7,3 Hz, 3H, SCH2CH2CH2CH;3), 1,37 (h, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 1,58 (p, J=7,3 Hz, 2H, SCH2CHxCH2CH3), 2,97 (t J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 4,65 (d, J=4,5 Hz, 2H, NHCH>2), 4,83 (s, 2H, NH), 7,20 (t, J=8,9 Hz, 1H, 5-H), 7,34 (s, 1H, NH), 7,62 (q, J=8,6 Hz, 1H, 4- H).
[00784] *C RMN (DMSO-ds) 5 13,5 (SCH2CH2CH2CH3), 21,4 (SCH2CH2CH2C0H3), 29,7 (SCH2CH2CH2C0H3), 31,2 (SCH2CH2CH2CH3), 33,4 (NCH>2), 112,6 (C-5'), 115,4 (C-3'), 116,0 (C-1'), 120,2 (C-5), 130,0 (C-4'), 137,7 (C-6), 151,8 (C-4), 155,1 (C-2), 155,2-157,2 (C-6'), 158,7- 160,6 (C-2'). 2-(Butiltio)-6-cloro-9-(3-cloro-2,6-difluorobenzil)-9H-purina (36b) Cc
NOS N AO À f-
F
[00785] Uma solução de (36a) (393,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (3,0 mL) e ortoformiato de trietila (3,0 mL, 18 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 4 h. Após a destilação do ácido acético e do ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi puri- ficado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00786] “Rendimento: 59%.
[00787] Ponto de fusão: 109-111ºC.
[00788] 'H RMN (DMSO-ds) 5 0,90 (t J=74 Hz 3H, SCH2CH2CH2CH3), 1,40 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 1,62 (p,
J=7,3 Hz, 2H, SCHCHCH2CH3), 3,11 (t J=7,2 Hz, 2H, SCHCH2CH2CH3), 5,57 (s, 2H, NCH>2), 7,22 (td, J=9,1 Hz/1,5 Hz, 1H, 5'-H), 7,69 (td, J=8,8 Hz/5,8 Hz, 1H, 4'-H), 8,66 (s, 1H, 8-H),
[00789] *C RMN (DMSO-ds) 5 13,5 (SCH2CH2CH2CH3), 21,3 (SCH2CH2CH2CH3), 30,2 (SCH2CH2CH2C0H3), 30,6 (SCH2CH2CH2CH3), 36,1 (NCH>2), 112,9 (C-5'), 113,1 (C-1"), 115,7 (C-3'), 127,7 (0-5), 131,3 (C-4'), 149,1 (0-4), 152,5 (C-6), 155,3-156,7 (C-6'), 158,8-160,2 (C-2'), 164,4 (C-2). 2-(Butiltio)-9-(3-cloro-2 6-difluorobenzil)-9H-purin-6-amina (362) NH?
NOS N ATO À ci
FE
[00790] Amônia foi borbulhada por 5 minutos em uma solução de (36b) (200,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (2,5 mL) colocada em um vaso lacrado. A mistura foi aquecida a 110ºC por 3 horas. Após a des- tilação da acetonitrila e da amônia sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00791] Rendimento: 29%.
[00792] Ponto de fusão: 133,5-135,5ºC.
[00793] A conformidade e a pureza de 36z foram atestadas pela espectroscopia por RMN e análise elementar e estão relatadas aqui:
[007924] 'H RMN (DMSO-ds) 5 088 (t J=74 Hz, 3H, SCH2CH2CH2C0H;3), 1,38 (h, J=7,4 Hz, 2H, SCH2CH2CH2CH3), 1,57 (p, J=7,3 Hz, 2H, SCHCH:CH2CH3), 3,00 (t J=7,2 Hz, 2H, SCH2CH2CH2C0H3), 5,42 (s, 2H, NCH2), 7,20 (t, J=8,8 Hz, 1H, 5-H), 7,28 (s, 2H, NH2), 7,66 (m, 1H, 4'-H), 8,11 (s, 1H, 8-H).
[00795] *C RMN (DMSO-ds) 5 13,6 (SCH2CH2CH2CH3), 21,3 (SCH2CH2CH2C0H3), 29,5 (SCH2CH2CH2C0H3), 31,1 (SCH2CH2C0H2C0Hs), 35,4 (NCH2), 112,8 (C-5'), 113,9 (C-1'), 115,6 (C-3'), 116,2 (C-5), 130,9
(C-4'), 149,9 (C-4), 155,2-156,7 (C-6'), 155,4 (C-6), 158,8-160,2 (C-2'), 163,8 (C-2).
[00796] Anal. teórica (CisHi6sCIF2NsS): C, 50,06; H, 4,20; N, 18,25; S, 8,35, Encontrado: C, 49,84; H, 4,25; N, 18,09; S, 7,93.
[00797] A molécula 362 foi testada quanto à sua potencial atividade antibacteriana, pela determinação da sua concentração inibitória mií- nima (CIM) de acordo com os protocolos recomendados pelo EUCAST para avaliar a eficácia dos antibióticos contra as cepas bacterianas. Em resumo, a CIM em MRSA (ATCC BAA-1556) ou em Xen29 (Perkin Elmer-ATCC 12600) para 36z (molécula 25 em WO02009/034386) foi determinada pela cultura de uma única colônia de MRSA ou Xen29 em caldo de infusão de cérebro coração (BHI) durante a noite (O/N) em condições aeróbicas (37ºC com agitação a 220 rpm), enquanto que a CIM para MRSE (ATCC 35984) foi determinada cultivando MRSE em TSB O/N. No dia seguinte, um inóculo de 1:100 em caldo de Mueller- Hinton (MHB) é incubado em condições aeróbicas por 3 horas (OD = 0,08-0,1) e um inóculo com diluição de 1:300, correspondente a 3 x 10º CFU/ml, é incubado na presença ou ausência de diferentes con- centrações das moléculas testadas em DMSO 1%. Após o crescimen- to O/N, a OD de cada cultura foi medida em 600 nm (ODsoo) em um espectrofotômetro (Victor 3-Perkin Elmer). A CIM representa a concen- tração na qual não há crescimento visível de bactérias, isto é, AOD a 600 nm igual a zero (amostra em branco é o meio sozinho). Nenhuma atividade antibacteriana contra as cepas MRSA (ATCC BAA-1556), Xen29 (Perkin Elmer-ATCC 12600 ou MRSE (ATCC 35984) foi encon- trada quando a molécula foi usada em concentrações de até 200 uM. Exemplo 2: 2-butóxi-9-(3-cloro-2,6-difluorobenzil)-N-(piridin-3- ilmetil)-9 H-purin-6-amina (372Z").
T Prá
HN
NOS N AO | el
F
[00798] 37zZ" (molecula 81 em WO2009/034386) foi sintetizada de acordo com uma via química semelhante como descrita na presente invenção, com a exceção de que a substituição nucleofílica do átomo de cloro sobre Xb é realizada com outra amina Rº-NH> (3- (aminometil)piridina no presente Exemplo). 6-Cloro-Nº-(3-cloro-2,6-difluorobenzil)-2-(metiltio)pirimidina-4,5-diamina (37a) Cl
O
SON NH F fe
O
[00799] 4,6-Dicloro-2-(metiltio)pirimidin-5-amina (22h) (0,5 g, 2,4 mmol) foi dissolvida em metanol (10 mL) e suplementada com 3-cloro- 2,6-difluorobenzilamina (0,78 mL, 6,0 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 130ºC for 2 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00800] Rendimento: 96%.
[00801] Ponto de fusão: 207-212ºC.
[00802] 1H RMN (DMSO-ds) 5 2,36 (s, 3H, SCHs), 4,65 (d, J=5,0 Hz, 2H, NHCH>2), 4,85 (s, 2H, NH2), 7,19 (td, J=9,0 HzZ/1,1 Hz, 1H, 5-H), 7,38 (t, J=5,1 Hz, 1H, NH), 7,62 (td, J=8,7 Hz/5,7 Hz, 1H, 4'-H),
[00803] OC RMN (DMSO-ds) 5 13,4 (SCH3), 33,4 (NHCH>2), 112,6
(C-5'), 115,4 (C-3'), 116,1 (C-1'), 120,2 (C-5), 129,9 (C-4'), 137,7 (C-6), 151,8 (C-4), 155,5 (C-2), 155,5-156,9 (C-6'), 159,0-160,4 (C-2'). 6-Cloro-9-(3-cloro-2,6-difluorobenzil)-2-(metiltio)-9H-purina (37b) foi]
WN DO : Cl
FE
[00804] “Uma solução de (37a) (351,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (3,0 mL) e ortoformiato de trietila (3,0 mL, 18 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 4 horas. Após a destilação do ácido acético e ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi puri- ficado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00805] “Rendimento: 68%.
[00806] Ponto de fusão: 167-169,5ºC.
[00807] 1H RMN (DMSO-ds) 5 2,51 (s, 3H, SCH3), 5,57 (s, 2H, NCH2), 7,23 (td, J=9,0 Hz/1,1 Hz, 1H, 5'-H), 7,69 (td, J=8,8 Hz/5,8 Hz, 1H, 4'-H), 8,67 (s, 1H, 8-H),
[00808] 1%C RMN (DMSO-ds) 5 13,8 (SCHs3), 36,1 (NCH2), 112,9 (C- 5'), 113,0 (C-1'), 115,6 (C-3'), 127,6 (C-5), 131,3 (C-4'), 149,1 (C-4), 152,5 (C-6), 155,4-156,8 (C-6'), 158,8-160,2 (C-2'), 164,8 (C-2). 9-(3-Cloro-2,6-difluorobenzil)-2-(metiltio)- N-(piridin-3-ilmetil)-9H-purin- 6-amina (37z) " Pá
HN W2N
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[00809] “Uma solução de (37b) (180,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila
(3 mL) foi suplementada com 3-(aminometil)piridina (0,10 mL, 1,0 mmol) e trietilamina (0,10 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 5 horas. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vá- cuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00810] Rendimento: 92%.
[00811] Ponto de fusão: 149-151ºC.
[00812] 'H RMN (CDCl3) 5 2,54 (s, 3H, SCH3), 4,84 (bs, 2H, NHCH,2), 5,39 (s, 2H, NCH>2), 6,17 (bs, 1H, NHCH>2), 6,91 (t, J=8,8 Hz, 1H, 5"-H), 7,23 (dd, J=7,7 Hz/4,8 Hz, 1H, 5-H), 7,39 (td, J=8,6 Hz/5,8 Hz, 1H, 4"-H), 7,70 (m, 2H, 8-H/6'-H), 8,51 (dd, J=4,7 Hz/1,3 Hz, 1H, 4'-H), 8,62 (d, J=1,6 Hz, 1H, 2'-H),
[00813] ºC RMN (CDCl3) à 14,5 (SCH3), 35,3 (NCH2), 42,1 (NHCH>2), 112,4 (C-5"), 113,3 (C-1"), 117,3 (C-3"/C-5), 123,6 (C-5'), 131,3 (C-4"), 134,4 (C-1'), 135,7 (C-6/C-6'), 138,8 (C-8), 149,0 (C-4'), 149,5 (C-2'), 153,9 (C-4), 156,2-157,7 (C-6"), 159,1-160,6 (C-2"), 166,4 (C-2). 9-(3-Cloro-2,6-difluorobenzil)-2-(metilsulfonil)- N-(piridin-3-ilmetil)-9H- purin-6-amina (37Z') . Prá
HN
WN OO R Cl 0% AS
F
[00814] “Uma solução de (37z) (250,0 mg, 0,58 mmol) em cloreto de metileno (10 mL) foi resfriada até 5ºC em um banho de gelo e suple- mentada com ácido 3-cloroperbenzoico (225,0 mg, 1,30 mmol). Depois de agitar em temperatura ambiente por 2 horas, a mistura foi lavada com uma solução de NaOH 0,1 M (2 x 10 mL). A camada orgânica foi seca, filtrada e o cloreto de metileno foi evaporado até secar sob vá-
cuo. O resíduo foi utilizado na próxima etapa (37Z") sem purificação adicional.
[00815] Rendimento: 72%. 2-Butóxi-9-(3-cloro-2 ,6-difluorobenzil)-N-(piridin-3-ilmetil)-9H-purin-6- amina (372Z") . Prá
HN
NOSN A O | Cc!
F
[00816] Sódio metálico (46,0 mg, 2 mmol) foi dissolvido em butan-1- ol (3 mL) em um banho de gelo e (372Z') (150,0 mg, 0,32 mmol) foi adi- cionado. Depois de agitar em temperatura ambiente por 3 horas, a mistura foi fracionada entre água (50 mL) e diclorometano (2 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secas e evaporadas até secar sob vá- cuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00817] Rendimento: 78%.
[00818] Ponto de fusão: 143-145ºC
[00819] A conformidade e a pureza de compound 37Z" foi atestada pela espectroscopia por RMN:
[00820] '*H RMN (CDCl) 3 097 (t J=74 Hz 3H, OCH2CH2CH2CHs), 1,49 (h, J=7,4 Hz, 2H, OCH2CH2CH2CH3), 1,78 (p, J=7,3 Hz, 2H, OCH2CH;CH2CH3), 4,34 (t J=68 Hz, 2H, OCH2CH2CH2CH3), 4,85 (bs, 2H, NHCH>2), 5,36 (s, 2H, NCOH2), 5,75 (bs, 1H, NHCH>2), 6,92 (td, J=8,9 Hz/1,5 Hz, 1H, 5"-H), 7,24 (dd, J=7,8 Hz/4,8 Hz, 1H, 5'-H), 7,39 (td, J=8,6 Hz/5,7 Hz, 1H, 4"-H), 7,63 (s, 1H, 8-H), 7,69 (d, J=7,9 Hz, 1H, 6:-H), 8,52 (dd, J=4,8 Hz/1,4 Hz, 1H, 4'-H), 8,62 (d, J=1,8 Hz, 1H, 2-H),
[00821] *C RMN (CDCIs) 3 141 (OCHCH2CH2CH3), 19,4
(OCH2CH2CH2CH3), 31,2 (OCH2CH2CH2CH3), 35,1 (NCH>2), 42,1 (NHCH>2), 67,5 (OCH2CH2CH2C0H3), 112,4 (C-5"), 113,4 (C-1"), 117,3 (C-3"/C-5), 123,6 (C-5'), 131,3 (C-4"), 134,3 (C-1'), 135,6 (C-6/C-6'), 138,4 (C-8), 149,1 (C-4'), 149,5 (C-2'), 151,5 (C-4), 155,5 (C-6), 156,2- 157,7 (C-6"), 159,2-160,6 (C-2"), 162,5 (C-2).
[00822] Anal. teórica (Ca2H21CIF2N6O): C, 57,58; H, 4,61; N, 18,31, Encontrado: C, 57,19; H, 4,68; N, 18,07.
[00823] A molécula 37zZ" foi testada quanto à sua potencial ativida- de antibacteriana, pela determinação da sua concentração inibitória mínima de acordo com os protocolos recomendados pelo EUCAST para avaliar a eficácia dos antibióticos contra as cepas bacterianas. Em resumo, a CIM em MRSA (ATCC BAA-1556) ou em Xen29 (Perkin Elmer-ATCC 12600) para 37" (molécula 81 em W02009/034386) foi determinada pela cultura de uma única colônia de MRSA ou Xen29 em caldo de infusão de cérebro coração (BHI) durante a noite (O/N) em condições aeróbicas (37ºC com agitação a 220 rpm), enquanto que a CIM para MRSE (ATCC 35984) foi determinada cultivando MRSE em TSB O/N. No dia seguinte, um inóculo de 1:100 em caldo de Mueller- Hinton (MHB) é incubado em condições aeróbicas por 3 horas (OD = 0,08-0,1) e um inóculo com diluição de 1:300, correspondente a 3 x 105 CFU/ml, é incubado na presença ou ausência de diferentes con- centrações das moléculas testadas em DMSO 1%. Após o crescimen- to O/N, a OD de cada cultura foi medida em 600 nm (ODsoo) em um espectrofotômetro (Victor 3-Perkin Elmer). A CIM representa a concen- tração na qual não há crescimento visível de bactérias, isto é, AOD a 600 nm igual a zero (amostra em branco é o meio sozinho). NENHU- MA atividade antibacteriana contra as cepas MRSA (ATCC BAA- 1556), Xen29 (Perkin Elmer-ATCC 12600 ou MRSE (ATCC 35984) foi encontrada quando a molécula foi usada em concentrações de até 200 uM.
Exemplo 3: 2-butóxi-N-ciclopropil-9-(2,6-difluoro-3-metilbenzil)-9H- purin-6-amina (382") me
WE N A KO | Ha
F
[00824] Foram sintetizados 38z" (molécula 129 em WOZ2009/034386) que está carregando um anel ciclopropila acoplado ao átomo de nitrogênio ligado na posição 6 do anel heterocíclico. À estrutura química desse composto é a mais estreitamente relacionada com aquela dos compostos descritos no presente pedido. 6-Cloro-Nº-(2 6-difluoro-3-metilbenzil)-2-(metiltio)birimidina-4,5-diamina (38a) Cc e"
SN NH EF bos
[00825] —4,6-Dicloro-2-(metiltio)pirimidin-5-amina (22h) (0,5 g, 24 mmol) foi dissolvida em metanol (10 mL) e suplementada com 2,6- difluoro-3-metilbenzilamina (0,80 mL, 6,0 mmol). A mistura de reação foi introduzida em um vaso lacrado e aquecida a 130ºC por 2 h. Após a concentração da mistura de reação até secar sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00826] Rendimento: 95%.
[00827] Ponto de fusão: 190-192ºC.
[00828] HRMN(DMSO-d6s) 5 2,21 (s, 3H, CH3), 2,38 (s, 3H, SCH;), 4,61 (d, J=4,8 Hz, 2H, NHCH>2), 4,85 (s, 2H, NH2), 7,01 (t, J=8,8 Hz, 1H, 5'-H), 7,27 (m, 2H, NHCH2/4'-H).
[00829] ºC RMN (DMSO-ds) 5 13,4 (SCH3), 13,8 (CH3), 33,1 (NHCH>2), 110,8 (C-5'), 113,4 (C-1'), 120,1 (C-5), 120,2 (C-3'), 130,8 (C-4'), 137,5 (C-6), 151,8 (C-4), 155,5 (C-2), 158,5-159,9 (C-2'//C-6'). 6-Cloro-9-(2,6-difluoro-3-metilbenzil)-2-(metiltio)-9H-purina (38b) foi] NOSFAN,
OO F
[00830] “Uma solução de (38a) (331,0 mg, 1 mmol) em ácido acético (3,0 mL) e ortoformiato de trietila (3,0 mL, 18 mmol) foi aquecida em uma temperatura de 130ºC sob refluxo por 3 horas. Após a destilação do ácido acético e do ortoformiato de trietila sob vácuo, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel
[00831] Rendimento: 66%.
[00832] Ponto de fusão: 124-126ºC.
[00833] 1H RMN (DMSO-ds)õ 2,19 (s, 3H, CH), 2,52 (s, 3H, SCH;), 5,52 (s, 2H, NCH2), 7,05 (t, J=8,9 Hz, 1H, 5'-H), 7,34 (q, J=8,4 Hz, 1H, 4'-H), 8,63 (s, 1H, 8-H)
[00834] CC RMN (DMSO-ds) 5 13,6 (CH3), 13,8 (SCH3), 35,9 (NCH>2), 110,6 (C-1'), 111,1 (m, C-5'), 120,6 (C-3'), 127,6 (C-5), 132,2 (C-4'), 149,0 (C-4), 152,5 (C-6), 158,3-159,7 (C-2'/0-6'), 164,7 (C-2). N-Ciclopropil-9-(2,6-difluoro-3-metilbenzil)-2-(metiltio)-9H-purin-6- amina (382) ne NOSEAN,
OS E
[00835] “Uma solução de (38b) (170,0 mg, 0,5 mmol) em acetonitrila (3 mL) foi suplementada com ciclopropilamina (0,07 mL, 1,0 mmol) e trietilamina (0,10 mL) e depois aquecida a 90ºC sob refluxo por 5 ho- ras. Após a destilação da acetonitrila e da trietilamina sob vácuo, o re- síduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00836] Rendimento: 86%.
[00837] Ponto de fusão: 150-152ºC.
[00838] 1H RMN (CDCI3) 5 0,60 (m, 2H, CH(CH2)2), 0,86 (m, 2H, CH(CH2)2), 2,23 (s, 3H, CH3), 2,60 (s, 3H, SCH;), 3,06 (bs, 1H, CH(CH2)2), 5,36 (s, 2H, NCH2), 5,77 (bs, 1H, NH), 6,83 (t, J=8,3 Hz, 1H, 5'-H), 7,14 (q, J=8,3 Hz, 1H, 4'-H), 7,66 (s, 1H, 8-H),
[00839] ºC RMN (CDCl3) 5 7,6 (CH(CH2)2), 14,3 (CH3), 14,6 (SCH3), 24,4 (CH(CH2)2), 35,1 (NCH>2), 111,1 (C-5'), 111,2 (C-1"), 117,1 (C-5), 121,1 (0-3'), 132,0 (C4'), 138,8 (C-8), 155,2 (C-4), 159,0-160,4 (C-2'/0-6'), 166,0 (C-2). N-Ciclopropil-9-(2,6-difluoro-3-metilbenzil)-2-(metilsulfonil)-9H-purin-6- amina (382') me
NOS N
O FR 0 “o - >»
F
[00840] “Uma solução de (382) (195,0 mg, 0,54 mmol) em cloreto de metileno (10 mL) foi resfriada até 5ºC em um banho de gelo e suple- mentada com ácido 3-cloroperbenzoico (208,0 mg, 1,20 mmol). Depois de agitar em temperatura ambiente por 2 horas, a mistura foi lavada com uma solução de NaOH 0,1 M (2 x 10 mL). A camada orgânica foi seca, filtrada e o cloreto de metileno foi evaporado até secar sob vá- cuo. O resíduo foi usado na próxima etapa (382") sem purificação adi- cional.
[00841] Rendimento: 69%. 2-Butóxi-N-ciclopropil-9-(2,6-difluoro-3-metilbenzil)-9H-purin-6-amina
(38z") me
RW N ATO À / F
[00842] Sódio metálico (46,0 mg, 2 mmol) foi dissolvida em butan-1- ol (3 mL) em um banho de gelo e (37zZ') (150,0 mg, 0,38 mmol) foi adi- cionado. Depois de agitar em temperatura ambiente por 3 horas, a mistura foi fracionada entre água (50 mL) e diclorometano (2 x 50 mL). As camadas orgânicas foram secas e evaporadas até secar sob vá- cuo. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel.
[00843] “Rendimento: 75%.
[00844] Ponto de fusão: 123-125ºC.
[00845] A conformidade e a pureza do composto 382Z" foi atestada pela espectroscopia por RMN e análise elementar e estão relaciona- das depois:
[00846] 1H RMN (CDCI3) 5 0,60 (m, 2H, CH(CHz2)2), 0,86 (m, 2H, CH(CH2)2), 0,98 (t, J=7,4 Hz, 3H, OCH2CH2CH2C0H;3), 1,50 (h, J=7,4 Hz, 2H, OCH2CH2CH2CH3), 1,81 (p, J=7,0 Hz, 2H, OCH2CH2CH2CH;), 2,23 (s, 3H, CH;3), 3,06 (bs, 1H, CH(CH>2)2), 4,38 (t, J=6,9 Hz, 2H, OCHCH2CH2CH3), 5,32 (s, 2H, NCH2), 5,75 (bs, 1H, NH), 6,83 (td, J=8,7 Hz/1,1 Hz, 1H, 5'-H), 7,14 (q, J=8,3 Hz, 1H, 4'-H), 7,59 (s, 1H, 8- H),,
[008417] *“C RMN (CDCk õ 76 (CH(CH)), 14,1 (OCH2CH2CH2CH3), 14,3 (CH3), 194 (OCH2CH2CH2CH3), 24,2 (CH(CH2):), — 31,2 (OCH2CH2xCH2CH3;), 34,8 (NCH>), 67,2 (OCH2CH2CH2CH3), 111,0 (C-5'), 111,3 (C-1'), 115,8 (C-5), 121,2 (C- 3'), 132,0 (C4'), 138,4 (C-8), 156,8 (C-4), 158,7-160,6 (C-2'/C-6'), 160,7 (C-2),
[00848] Anal. teórica (CooH23F2N5sO): C, 62,00; H, 5,98; N, 18,08, Encontrado: C, 61,97; H, 6,07; N, 18,03.
[00849] A molécula 38zZ" foi testada quanto à sua potencial ativida- de antibacteriana, pela determinação de uma eventual concentração inibitória mínima de acordo com os protocolos recomendados pelo EUCAST para avaliar a eficácia dos antibióticos contra as cepas bac- terianas. Em resumo, a CIM em MRSA (ATCC BAA-1556) ou em Xen29 (Perkin Elmer-ATCC 12600) para 382" (molécula 129 em WO02009/034386) foi determinada pela cultura de uma única colônia de MRSA ou Xen29 em caldo de infusão de cérebro coração (BHI) duran- te a noite (O/N) em condições aeróbicas (37ºC com agitação a 220 rpm), enquanto que a CIM para MRSE (ATCC 35984) foi determinada cultivando MRSE em TSB O/N. No dia seguinte, um inóculo de 1:100 em caldo de Mueller-Hinton (MHB) é incubado em condições aeróbi- cas por 3 horas (OD = 0,08-0,1) e um inóculo com diluição de 1:300, correspondente a 3 x 10º CFU/ml, é incubado na presença ou ausên- cia de diferentes concentrações das moléculas testadas em DMSO 1%. Após o crescimento O/N, a OD de cada cultura foi medida em 600 nm (ODgsoo) em um espectrofotômetro (Victor 3-Perkin Elmer). A CIM representa a concentração na qual não há crescimento visível de bac- térias, isto é, AOD a 600 nm igual a zero (amostra em branco é o meio sozinho). NENHUMA atividade antibacteriana contra as cepas MRSA (ATCC BAA-1556), Xen29 (Perkin ElmMer-ATCC 12600 ou MRSE (ATCC 35984) foi encontrada quando a molécula foi usada em con- centrações de até 200 uM.

Claims (40)

REIVINDICAÇÕES
1. Derivado de pirimidina, caracterizado pelo fato de que é que apresenta a fórmula (1) Rã Rô Pv HR a R$ AZ N R? ou seus isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente acei- táveis ou sais de amônia alquilada ou profármacos; em que: X' e X? são independentemente N, CH, CRº em que R$ é C1-6 alquila, C2.6 alquenila, C2.6 alquinila, com a exceção de que se um de X' ou X? for igual a N, então o X' ou X? remanescentes são sele- cionados entre CH, CR?; Y é -O- ou -S-; R' e R? são independentemente C1-6 alquila, C2.6 alquenila, C2.6 alquinila, C3a.6 cicloalquila, arila, aril- C1.6 alguila em que a porção alquila ou cicloalquila é opcionalmente mono ou poli-substituída com OH um halogênio e a porção arila é opcionalmente mono ou poli- substituída com um halogênio, -C1-6 alquila, - C1-.6 alcóxi, -OH, -NO,, - CN, -NH2, -NHR8, -N(R8)2, -COOH, -COORô, -CONH2, -CONHR!, - CON(Rº)2, -SO2NH>2, -SO2NHR:$ ou -SO2N(R$)>; R?, R1, Rà, R$ e R7 são independentemente H, um halogê- nio, C1-6 alquila, C1.6 alcóxi -OH, -NO>, -CN, -NH>, -NHR8, -N(R8)2 , - COOH, -COORº, -CONH2, -CONHR3, -CON) 2, -CON(Rº)2, -SO2NH,>, - SO2NHR: ou -SO2N(Rº)2.
2. Derivado de pirimidina de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende pelo menos um isótopo detectável.
3. Derivado de pirimidina de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o isótopo detectável é selecionado en- tre 3H, 18F, 1º, E, BE, e, 7SBr, 7T6Br, 1201, 123, 1251, 131, 150 e SN.
4. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que Rº e R' são hidro- gênios e Rº e Rº são, independentemente, um halogênio.
5. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que X* é CH ou CRê e X?éN.
6. Derivado de pirimidina de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que compreende uma N-(2-fenilciclopropil)- 9H-purin-6-amina representada pela fórmula (V)
HN O .. H (V)
7. Derivados de pirimidina de acordo com a reivindicação 5 ou 6, caracterizados pelo fato de que são selecionados entre: N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (1c); 9-metil-N-((1R,2S)-2-fenilciclopropil)-2-(propiltio)-9H-purin- 6-amina (2c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (3c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-propil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (4c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-isopropil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (5c);
9-ciclopropil-N-((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (6c);
9-butil-N-((1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil|)ciclopropil)-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (7c);
9-(Sec-butil)-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (8c);
9-(terc-butil)-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (9c);
9-ciclobutil-N-((1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (10c);
N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-pentil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (11c);
9-ciclopentil-N-((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (12c);
N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil|)ciclopropil)-9-hexil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (13c);
9-ciclohexil-N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (14c);
9-alil-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (15c);
2-(6-(((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)amino)-2- (propiltio)-9H-purin-9-il)etano! (16c);
N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-(prop-2-in-1-i1)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (17c);
N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)-9- (2,2,2-trifluoroetil)-9H-purin-6-amina (18c);
(18,2R,38,4R)-4-(6-(((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)amino)-2-(propiltio)-9H-purin- — 9-il)ciclopentano- 1,2,3-triol (19d);
N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(etiltio)-9-metil-
9H-purin-6-amina (20c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(etiltio)-9H- purin-6-amina (21c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil|)ciclopropil)-9-metil-2-(metiltio)- 9H-purin-6-amina (22c); cloridrato — de N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9- metil-2-propóxi-9H-purin-6-amina (23t.HCI); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(metiltio)- 9H-purin-6-amina (24c); 2-(butiltio)-N-((1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil- 9H-purin-6-amina (25c); 2-(butiltio)-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil- 9H-purin-6-amina (26c); ou seus isômeros, suas misturas racêmicas, sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente acei- táveis ou sais de amônia alquilada ou profármacos;
8. Derivados de pirimidina de acordo com a reivindicação 5 ou 7, caracterizados pelo fato de que são selecionados entre: N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (1c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (3c); 9-alil-N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(propiltio)- 9H-purin-6-amina (15c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-(prop-2-in-1-i1)-2- (propiltio)-9H-purin-6-amina (17c); (18,2R,3S,4R)-4-(6-(((1R,28)-2-(3,4- difluorfenil)ciclopropil)amino)-2-(propiltio)-9H-purin- — 9-il)ciclopentano- 1,2,3-triol (19d); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil|)ciclopropil)-9-metil-2-(metiltio)-
9H-purin-6-amina (22c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(metiltio)- 9H-purin-6-amina (24c); N-((1R,28)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-2-(etiltio)-9-metil- 9H-purin-6-amina (20c); N-((1R,28)-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-9-etil-2-(etiltio)-9 H- purin-6-amina (21c); 2-(butiltio)-N-((1R,2S8)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil- 9H-purin-6-amina (25c); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
9. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 8, caracterizado pelo fato de que é N-((1R,2S)-2- (3,4-difluorfenil)ciclopropil)-9-metil-2-(propiltio)-9H-purin-6-amina (1c).
10. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que X' é Ne XP é CH ou CRº.
11. Derivado de pirimidina de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que é selecionado entre: N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-metil-6- (metiltio)-1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (27kK); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6- (etiltio)-1-metil -1 H-pirazol[3,4-d0]pirimidin-4-amina (28x.HCI); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6- (propiltio)-l-metil-1H-pirazol[3,4- apirimidin-4-amina (29x.HCI); N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(metiltio)- 1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (30Kk); cloridrato de N -(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1- etil-6-(etiltio)-1 H-pirazol[3,4-apirimidin-4-amina (31x.HCI);
cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1- etil-S-(propiltio)-1 H-pirazol[3,4-a]pirimidin-4-amina (32x.HCI); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1- isopropil-6-(metiltio)-1 H-pirazol[3,4-a]pirimidin-4-amina (33k. HCI); cloridrato de N -(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6- (metiltio)-1-propil-1H-pirazol[3 ,4-0]pirimidin-4-amina (34k.HCI); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
12. Derivado de pirimidina de acordo com a reivindicação ou 11, caracterizado pelo fato de que é selecionado entre: N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-metil-6- (metiltio)-1H-pirazol[3,4-dpirimidin-4-amina(27k); N-(((1S,2R))-2-(3 4-difluorfenil)ciclopropil)-1-etil-6-(metiltio)- 1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (30K); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-6- (etiltio)-1-metil-1H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (28x.HCI); cloridrato de N-(((1S,2R))-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-1- isopropil-6-(metiltio)-1 H-pirazol[3,4-d]pirimidin-4-amina (33k.HCI); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma- ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
13. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que X* e X? são CH ou CRº?.
14. Derivado de pirimidina de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que é: cloridrato de N-((1R,2S)-2-(3,4-difluorfenil)ciclopropil)-7-etil- 2-(metiltio)-7 H-pirrol[2,3-a]pirimidin-4-amina (35p.HCI); ou seus isômeros, misturas racêmicas, sais de adição de ácido farma-
ceuticamente aceitáveis, sais de metal farmaceuticamente aceitáveis ou sais de amônia alquilada ou seus profármacos.
15. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de que Rº e R' são H e Rº e Rº são flúor.
16. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado pelo fato de que é para uso em terapia.
17. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizado pelo fato de que é para uso no tratamento ou na prevenção de infecção bacteriana em um mamiífe- ro hospedeiro necessitado de tal tratamento ou prevenção.
18. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um derivado de pirimidina como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 15 em combinação com um diluente, adju- vante e/ou veículo farmaceuticamente aceitáveis.
19. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um derivado de pirimidina como definido na reivindi- cação 18 para uso no tratamento ou na prevenção de infecção bacte- riana em um mamífero hospedeiro necessitado de tal tratamento ou prevenção, preferivelmente para infecção bacteriana causada por bac- térias Gram-positivas.
20. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado pelo fato de que é para uso em um método de prevenção de infecção bacteriana em um mamífero hospedeiro, em que o dito método compreende aplicar o dito derivado de pirimidina sobre a superfície de um implante de biomaterial antes da implantação do dito implante no dito mamífero hospedeiro.
21. Uso de um derivado de pirimidina como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 15 ex vivo caracterizado pelo fato de que é para a inibição da formação de biofilme sobre uma superfície de um dispositivo médico, preferivelmente para a prevenção ou trata- mento de contaminação bacteriana por bactérias Gram-positivas.
22. Método para matar ou impedir o crescimento bacteriano na formação de biofilme, caracterizado pelo fato de que compreende aplicar sobre a superfície de um dispositivo médico, uma quantidade eficaz de derivados de pirimidina como definidos em qualquer uma das reivindicações 1 a 15.
23. Método de acordo com a reivindicação 22, caracteriza- do pelo fato de que o dispositivo médico é um dispositivo cardiovascu- lar, preferivelmente uma válvula cardíaca protética.
24. Método de acordo com a reivindicação 22, caracteriza- do pelo fato de que o dispositivo médico é um dispositivo cardiovascu- lar, preferivelmente um marcapasso.
25. Método de preparação de derivados de pirimidina de fórmula (1) de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 a 9 em que X' é CH ou CR3, X? é N, o dito método caracterizado pelo fato de que compreende as seguintes etapas: hal hai hal ã 1 NH, à NH, - N Rg N hai Ni Rs NH ss, Rs NONO Rº Rn Xh Xa xb Rê R$ NH As RTNAN » nº hd, &. Re xe 1) Preparação de uma 4,6-di-halogenioropirimidin-5-amina (Xh) 2-substituída como produto de partida; 2) reagir a 4,6-di-halogenioropirimidin-5-amina (Xh) 2- substituída (Xh) com R2NH>z para obter um intermediário (Xa) em que
R? é como definido na fórmula (1); 3) reagir o intermediário (XKa) com ortoformiato de trialquila sob aquecimento na presença de um ácido para obter o intermediário 6—halogeno-9H-purina 2,9-dissubstituído (Xb); 4) substituir o átomo do halogênio do intermediário (Xb) por uma fenilciclopropilamina (R?-R”)-substituída sob aquecimento para obter um derivado de pirimidina de fórmula (1) em que Y é S (Xc); e opcionalmente formar um sal ou profármaco farmaceuticamente aceitáveis desse.
26. Método de acordo com a reivindicação 25, caracteriza- do pelo fato de que o produto de partida (Xh) é obtido por: oH oH oH N -- N - N no; HS N OH R s N OH Rº Ss N OH xe xf o N VR NO; - N PR NH; Rº Ss N hal R Ss N hal xg xn 1) reagir o ácido tiobarbitúrico com haleto de R* sob aque- cimento para obter uma pirimidin-4,6-diol (Xe) 2-substituída; 2) reagir a pirimidin-4,6-diol (Xe) 2-substituída sob resfria- mento com ácido nítrico para obter o intermediário (Xf), seguido pela substituição nucleofílica na presença de uma base orgânica para for- necer uma 4,6-di-halogênio-S-nitropirimidina (Xg) 2-substituída; 3) reduzir a 4,6-di-halogênio-S-nitropirimidina (Xg) 2- substituída para uma 4,6-di-halogeniopirimidina-5-amina (Xh) 2- substituída.
27. Método de acordo com a reivindicação 25, caracteriza- do pelo fato de que compreende ainda uma reação de conversão de um grupo tioéter de Xc em que Y é S na função éter correspondente (Y=O) para obter um derivado de pirimidina de fórmula (|) em que Y é
O (Xt); Rô
NH nó A | Y Rº NÃ N Rº R? xt e opcionalmente, formar um sal ou profármaco farmaceuticamente aceitáveis.
28. Método de acordo com a reivindicação 26, caracteriza- do pelo fato de que compreende uma reação de conversão que com- preende: nº ” nº
OLX OLX OS s NS — . ES — s 7 JASON
OX ADO OI Í R Do Rx RR Rº xe xa xw 1) uma primeira reação de oxidação da função tioéter de (Xc) por um perácido para fornecer um grupo metilsulfonila em um in- termediário (Xq) e 2) uma reação adicional de substituição nucleofílica do in- termediário (Xq) com um alquil tiol para fornecer derivados de pirimidi- na de fórmula (|) em que Y é S e Rº não é metila (Xw).
29. Método de preparação de derivados de pirimidina de fórmula (1) em que X' é N e X? é CH ou CRº de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, o dito método caracterizado pelo fato de que compreende as seguintes etapas: oH na o hai Sm J À "N > N H - — N Y à! Rg Nor Rg "Nº Sha Ri" N xe x ”
x 8 e ' 1) reagir o ácido tiobarbitúrico com haleto de R* sob aque- cimento para obter uma pirimidin-4,6-diol (Xe) 2-substituída; 2) reagir a pirimidin-4,6-diol (Xe) 2-substituída (Xe) com um haleto de fosforila na presença de DMF para obter o 4,6-di- halogeniopirimidina-5-carbaldeído (Xi) 2-substituído; 3) reagir sob resfriamento o 4,6-di-halogeniopirimidina-5- carbaldeído (Xi) 2-substituído com uma hidrazina não substituída para fornecer 1H-pirazolo[3,4-dpirimidina (Xi) não alquilada, seguida por uma alquilação com um haleto de R? para fornecer o intermediário (Xj) e uma substituição nucleofílica com uma fenilciclopropilamina Rº-R' substituída para fornecer (Xk); e opcionalmente, formar um sal ou profármaco farmaceuticamente aceitáveis.
30. Método de acordo com a reivindicação 29, caracteriza- do pelo fato de que ainda compreende uma reação de conversão de um grupo tioéter de Xk (Y=S) na função éster correspondente (Y=O) para obter os derivados de pirimidina de fórmula (|) em que Y é O (Xu); Rô Rº NH Rô NÃ é
R R Xu e opcionalmente, formar um sal ou profármaco farmaceuticamente aceitáveis.
31. Método de preparação de acordo com a reivindicação 29, caracterizado pelo fato de que compreende uma reação de con-
versão que compreende: Rº Rº Rº | R2 0 R2 R R? xk x x uma primeira reação de oxidação da função tioéter de (Xk) por um pe- rácido para fornecer um grupo metilsulfonila em um intermediário (Xr) e uma reação adicional de substituição nucleofílica com um alquil tiol para fornecer derivados de pirimidina de fórmula (I) em que Yé Se R' não é metila (Xx); e opcionalmente, formar um sal ou profármaco farmaceuticamente aceitáveis.
32. Método de preparação de derivados de pirimidina de fórmula (|) em que X' e X? são CH ou CRº de acordo com a reivindica- ção 13 ou 14, caracterizado pelo fato de que o dito método compreen- de as seguintes etapas: .. ou H hai N — nº ns N ns Na: Rs dyda, om Rd, — a dl, b "o xr a ano . Ú de —— RAÇA o A sa R 1 R R 1) reagir sob aquecimento uma 6-amino-4-hidroxipirimidino- 2-tiol com um haleto de R' em meio alcalino para fornecer um 6- aminopirimidin-4-0l (XI) 2-substituído; 2) converter o 6-aminopirimidina-4-0| (XI) 2-substituído (XI) com halogenioacetaldeído sob aquecimento para fornecer um 7H- pirrol[2,3-a]pirimidin-4-01 (Xm) 2-substituído; 3) reagir (Xm) com haleto de fosforila sob aquecimento para fornecer 4-halogênio-7H-pirrol[2,3-d]pirimidina (Xn) 2-substituída.
4) substituir o átomo de halogênio de (Xn) com fenilciclo- propil amina (R?-R”)-substituída para fornecer Xo', seguido por uma alquilação com um haleto de R? em meio alcalino para fornecer (Xp); e opcionalmente, formar um sal ou profármaco farmaceuticamente aceitáveis.
33. Método de acordo com a reivindicação 32, caracteriza- do pelo fato de que compreende uma reação de conversão de um gru- po tioéter de (Xp) em que Y é S na função éter correspondente (Y=O) para obter os derivados de pirimidina de fórmula (|) em que Y é O (Xv); R3:
R R Xv e opcionalmente, formar um sal ou profármaco farmaceuticamente aceitáveis.
34. Método de acordo com a reivindicação 32, caratceriza- do pelo fato de que compreende uma reação de conversão que com- preende : R Rº R | R2 oo R R R Xp xs x uma primeira reação de oxidação da função tioéter de (Xp) por um pe- rácido para fornecer um grupo metilsulfonila em um intermediário (Xs) e uma reação adicional de substituição nucleofílica com um alquil tiol para fornecer derivados de pirimidina de fórmula (I) em que Yé Se R? não é metila (Xy); e opcionalmente, formar um sal ou profármaco farmaceuticamente aceitáveis.
35. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado pelo fato de que compreende um marcador para uso no diagnóstico ou prognóstico de uma infecção bacteriana.
36. Derivado de pirimidina de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que compreende pelo menos um isótopo detectável selecionado entre ?H, 18F, 1ºF, 11C, 4C e 2.
37. Derivado de pirimidina de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que compreende pelo menos um isótopo detectável selecionado entre **F e !'C.
38. Derivado de pirimidina de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que compreende pelo menos um isótopo detectável **F.
39. Derivado de pirimidina de acordo com qualquer uma das reivindicações 17, 20, 35 a 38, caracterizado pelo fato de a infec- ção ou contaminação bacteriana é causada por bactérias Gram- positivas.
40. Derivado de pirimidina de acordo com a reivindicação 39, caracterizado pelo fato de que a infecção ou contaminação é cau- sada por um ou mais de S. aureus resistente à meticilina (MRSA), S. epidermidis resistente à meticiliha (MRSE), S. aureus com resistência intermediária aos glicopeptídeos (GISA), estafilococos Coagulase- negativos (CONS), enterococos resistente a vancomicina (VRE), Strep- tococcus agalactiae beta-hemolítico (Group B Streptococcus, GBS).
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