BR112020006416A2 - controlar patógenos fúngicos usando estratégia baseada em rnai - Google Patents

controlar patógenos fúngicos usando estratégia baseada em rnai Download PDF

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BR112020006416A2
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Abstract

A presente invenção refere-se a plantas resistentes a patógenos. Em um aspecto, são fornecidas plantas que compreendem um cassete de expressão heterólogo, em que o cassete de expressão compreende um polinucleotídeo que inibe a expressão de um gene de patógeno fúngico e em que a planta tem resistência aumentada a um patógeno fúngico ou a vários patógenos em comparação com uma planta de controle sem o cassete de expressão. Em outro aspecto, contatar uma planta ou uma parte da planta com RNAs de filamento duplo ou pequenos RNAs que inibem a expressão de um gene ou genes-alvo fúngicos de múltiplos patógenos, em que a planta tem resistência aumentada a um patógeno ou a múltiplos patógenos em comparação com plantas de controle que não foram contatadas com os RNAs. Também são fornecidos métodos de produção e cultivo de plantas resistentes a patógenos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “CON- TROLAR PATÓGENOS FÚNGICOS USANDO ESTRATÉGIA BASE- ADA EM RNA/”. REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS DE PATENTES RELACIONA-
DOS
[0001] Este pedido reivindica benefício de prioridade ao Pedido de Patente Provisório U.S. No. 62/573.546, depositado em 17 de outubro de 2017, que é incorporado por referência para todos os fins.
DECLARAÇÃO DOS DIREITOS A INVENÇÕES REALIZADAS SOB PESQUISA E DESENVOLVIMENTO FEDERALMENTE PATROCINA- DOS
[0002] Esta invenção foi feita com o apoio do governo sob o Natio- nal Institutes of Health Grant No. RO1 GMO093008-07 e o prêmio da Na- tional Science Foundation número 1557812. O governo tem certos di- reitos nesta invenção.
LISTAGEM DE SEQUÊNCIAS
[0003] O presente pedido contém uma Lista de Sequências que foi submetida eletronicamente no formato ASCII e é incorporada por refe- rência na sua totalidade. A referida cópia ASCII, criada em 9 de no- vembro de 2018, é denominada 081906-226910PC-1104299 SL.txt e possui 373.786 bytes de tamanho.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[0004] Patógenos e pragas causam doenças em seres humanos, animais e plantas, apresentando sérias ameaças à saúde global e à produção agrícola. Os hospedeiros de animais e plantas também de- senvolveram vários mecanismos imunológicos para combater a infec- ção. Sabe-se há muito tempo que proteínas e metabólitos, como efeto- res de patógenos e pragas (Cui, HT et al., Annual Review of Plant Bio- logy, Vol 66 66, 487-511, doi:10.1146/annurev-arplant-050213-040012 (2015); Stuart, J., Curr Opin Insect Sci 9, 56-61, doi:10.1016/ j.cois.
2015.02.010 (2015)) ou moléculas antimicrobianas dos hospedeiros (Lehrer, RIl e Ganz, T., Current Opinion in Immunology 11, 23-27 (1999); Hegedus, N. e Marx, F., Fungal Biol Rev 26, 132-145, doi:
10.1016/j.fbr.2012.07.002 (2013)), mover de patógenos/pragas para hospedeiros e vice-versa para manipular processos celulares e fun- ções de proteínas no organismo em interação. Recentemente, foi es- tabelecido que pequenos RNAs móveis (SRNAs) podem induzir o silenci- amento de genes em organismos em interação, um fenômeno chamado RNAi de reino cruzado ou RNAi de organismo cruzado (Weiberg, A. et al, Current Opinion in Biotechnology 32, 207-215, doi:10.1016/ j.copbio.2014.12.025 (2015); Wang, M. et al., Curr Opin Plant Biol 38, 133-141, doi:10.1016/j.pbi.2017.05.003 (2017); Buck, AH et al., Nature Communications 5, 5488, doi:10.1038/ncomms6488 (2014)). Mas co- mo esses sSsRNAs móveis viajam através das fronteiras entre os orga- nismos? Dentro dos corpos dos organismos animais, os SsRNAs são transportados entre as células e sistemicamente por uma variedade de mecanismos, incluindo vesículas extracelulares (EVs), proteínas transmembranares específicas, complexos lipoproteínicos de alta den- sidade, junções de gap, e outros mecanismos de transporte (Mittel- brunn, M. e Sanchez-Madrid, F., Nature reviews. Molecular cell biology 13, 328-335, doi:10.1038/nrm3335 (2012)). Na maioria dos sistemas de circulação de animais e fluidos corporais, uma classe de vesículas extracelulares chamadas exossomos desempenha um papel importan- te no tráfego de sSRNA e na imunidade do hospedeiro. Por exemplo, células de mamíferos, como células B, células T ou células dendríti- cas, secretam exossomos contendo sRNA e transportam sSRNAs para células receptoras para modular a imunidade (Robbins, P.D. e Morelli, A.E., Nature reviews. Immunology 14, 195-208, doi:10.1038/nri3622 (2014)). Dentro de uma planta, os SRNAs viajam sistematicamente através da vasculatura ou movem-se de célula em célula, provavel-
mente através de canais citoplasmáticos chamados plasmodesmas (Molnar, A. et al., Science 328, 872-875, doi:10.1126/science.1187959 (2010)). Muito menos se sabe sobre as vias de tráfego de sRNA entre os organismos que interagem. Um caso em questão é o nemátodo gastrointestinal Heligmosomoides polygyrus que secreta exossomos para transportar miRNAs para células de mamíferos para suprimir a imunidade do hospedeiro (Buck, A.H. et al., Nature Communications 5, 5488, doi:10.1038/ncomms6488 (2014)). Por outro lado, o mecanismo pelo qual os SsRNAs são transportados dos hospedeiros para os pató- genos e pragas em interação não é claro.
[0005] No caso de plantas interagindo com seus patógenos e pra- gas, foi observado em muitos patossistemas que sSRNAs derivados de transgenes podem se mover com sucesso das células vegetais e si- lenciar os genes de virulência de seus invasores para inibir a infecção. Esse silenciamento genético induzido pelo hospedeiro tornou-se um método eficaz para a proteção de culturas (Wang, M. et al., Curr Opin Plant Biol 38, 133-141, doi:10.1016/j.pbi.2017.05.003 (2017); Nunes, C. C. e Dean, R. A., Molecular Plant Pathology 13, 519-529, doi:10.1111/ ).1364-3703.2011.00766.x (2012)). No entanto, os estudos de tráfego en- tre reinos de SRNAs endógenos de plantas ainda são limitados e preo- cupam-se principalmente com microRNAs abundantes (mIRNAs) (Zhang, T. et al., Nature plants 2, 16153, doi:10.1038/nplants.2016.153 (2016); Zhu, K. et al, PLoS Genet 13, e1006946, doi:10.1371/ jour- nal.pgen.1006946 (2017)). Provavelmente, isso se deve aos desafios associados à separação e purificação de células patogênicas dos teci- dos infectados.
BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[0006] O presente pedido provê plantas (ou uma célula vegetal, semente, flor, folha, fruta ou outra parte da planta dessas plantas ou alimento processado ou ingrediente alimentar de tais plantas) compre-
endendo um cassete de expressão heterólogo, o cassete de expres- são compreendendo um promotor operacionalmente ligado a um poli- nucleotídeo que inibe a expressão fúngica de um ou mais genes-alvo, conforme listado na Tabela 1 ou Tabela 2, em que a planta aumentou a resistência a um patógeno fúngico em comparação com uma planta de controle sem o cassete de expressão.
[0007] Em algumas modalidades, a planta compreende dois, três, quatro ou mais cassetes de expressão heterólogos, em que cada cas- sete de expressão compreende um polinucleotídeo que inibe a ex pressão fúngica de um gene-alvo fúngico distinto. Em algumas moda- lidades, a planta compreende um ou mais cassetes de expressão he- terólogos para expressar dois, três, quatro ou mais polinucleotídeos que inibem a expressão fúngica de gene-alvo fúngico distinto (por exemplo, dois ou mais genes-alvo fúngicos de uma espécie de pató- geno fúngico).
[0008] Em algumas modalidades, o polinucleotídeo compreende um ácido nucleico antissenso ou RNA inibidor (RNAi) que tem como alvo um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 (incluindo quais- quer sequências estabelecidas aqui) ou um fragmento dos mesmos (por exemplo, uma sequência de pelo menos 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500 ou mais nucle- otídeos contíguos de um gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2). Em al- gumas modalidades, o polinucleotídeo compreende um ácido nucleico tendo uma sequência que é idêntica ou complementar a pelo menos 15, 20, 25, 30, 35, 40 ou mais nucleotídeos contíguos de um gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2. Em algumas modalidades, o polinucleotídeo compreende um ácido nucleico de filamento duplo tendo uma sequên- cia idêntica ou substancialmente semelhante (pelo menos 60%, 65%, 70%, 75%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ou 99% idêntico) a qualquer gene-alvo da Tabela 1 ou Ta-
bela 2 ou um fragmento dos mesmos (por exemplo, pelo menos 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, pelo menos 50, pelo menos pelo menos 60, pelo menos 70, pelo menos 80, pelo menos 90, pelo menos 100, pelo me- nos 150, pelo menos 200, pelo menos 250, pelo menos 300, pelo me- nos 350, pelo menos 400, pelo menos 450, ou pelo menos 500 nucleó- tidos contíguos dos mesmos). Em algumas modalidades, o polinucleo- tídeo compreende uma repetição invertida de um fragmento (por exemplo, pelo menos 15, 20, 25, 30, 35, 40 ou mais nucleotídeos con- tíguos) de qualquer um de um gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, e adicionalmente compreende uma região espaçadora que separa as sequências nucleotídicas repetidas invertidas. Em algumas modalida- des, o polinucleotídeo compreende uma sequência que é idêntica ou substancialmente idêntica (por exemplo, pelo menos 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ou 99% idêntico) a um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, ou um fragmento dos mesmos, ou um complemento dos mesmos.
[0009] O presente pedido também fornece plantas (ou uma célula vegetal, semente, flor, folha, fruto ou outra parte da planta dessas plantas ou alimento processado ou ingrediente alimentar dessas plan- tas) compreendendo um cassete de expressão heterólogo, o cassete de expressão compreendendo um promotor operacionalmente ligado a um polinucleotídeo que inibe a expressão fúngica de um ou mais ge- nes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, em que a planta tem resistência aumentada a um patógeno fúngico em comparação com uma planta de controle sem o cassete de expressão.
[0010] Em algumas modalidades, o patógeno é Botrytis. Em algu- mas modalidades, o patógeno é Botrytis spp. Em algumas modalida- des, o patógeno é B. cinerea. Em algumas modalidades, o patógeno é Verticilium spp. Em algumas modalidades, o patógeno é V. dahilae.
Em algumas modalidades, o patógeno é Sclerotinia spp. Em algumas modalidades, o patógeno é S. sclerotiorum. Em algumas modalidades, o patógeno é Phytophthora spp.
[0011] Em algumas modalidades, o promotor é um promotor indu- zível. Em algumas modalidades, o promotor é induzível por patógenos. Em algumas modalidades, o promotor é induzível ao estresse. Em al- gumas modalidades, o promotor é um promotor constitutivo.
[0012] Em outro aspecto, a presente invenção fornece cassetes de expressão compreendendo: um promotor operacionalmente ligado a um polinucleotídeo que inibe a expressão de um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2. Em algumas modalidades, o promotor é he- terólogo ao polinucleotídeo. Também são fornecidos ácidos nucleicos isolados compreendendo os referidos cassetes de expressão.
[0013] Ainda em outro aspecto, a presente invenção fornece veto- res de expressão compreendendo um cassete de expressão como aqui descrito.
[0014] Em outro aspecto, são fornecidos métodos para fabricar uma planta resistente a patógenos. Em algumas modalidades, o méto- do compreende: Introduzir o ácido nucleico compreendendo um cassete de expressão como aqui descrito em uma pluralidade de plantas; e selecionar uma planta compreendendo o cassete de ex- pressão.
[0015] Em algumas modalidades, o método de preparar uma plan- ta resistente a patógenos compreende: contatar uma planta ou uma parte da planta com um dsRNA ou sRNA dúplex que inibe a expressão fúngica de um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, em que a planta aumentou a resistência a um patógeno fúngico em comparação com uma planta de controle ou uma parte da planta que não foi conta- tada com os RNAs. Em algumas modalidades, os RNAs adicionalmen-
te compreendem um segundo dsRNA ou sRNA dúplex que inibe a ex- pressão fúngica de um segundo gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2. Em algumas modalidades, o método adicionalmente compreende con- tatar a planta com um segundo ou mais dsRNAs ou sRNA dúplex que inibe a expressão de genes ortólogos dos alvos da Tabela 1 ou Tabela 2 de outro patógeno ou vários outros patógenos. Em algumas modali- dades, o dsRNA ou sRNA estão contidos nos lipossomas.
[0016] Em algumas modalidades, o método de fabricação de uma planta resistente a patógenos compreende: contatar uma planta ou uma parte da planta com um construto compreendendo um promotor operacionalmente ligado a um polinucleotídeo que inibe a expressão fúngica de um gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, em que a planta aumentou a resistência a um patógeno fúngico em comparação com uma planta de controle que não foi contatada com o construto. Em al- gumas modalidades, o construto adicionalmente compreende um se- gundo polipeptídeo que inibe a expressão fúngica de um segundo ge- ne-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2. Em algumas modalidades, o método adicionalmente compreende contatar a planta com um segundo cons- truto que compreende um segundo promotor operacionalmente ligado a um segundo polinucleotídeo que inibe um segundo gene-alvo que é um segundo gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 ou um ortólogo do mesmo de outro patógeno ou vários outros patógenos. Em algumas modalidades, o dsRNA ou sRNA estão contidos nos lipossomas.
[0017] Em ainda outro aspecto, são fornecidos métodos para culti- var uma pluralidade de plantas resistentes a patógenos.
[0018] Em outro aspecto, é fornecido lipossoma sintético compre- endendo dsRNA ou sRNA dúplex que têm como alvo um ou mais ge- nes-alvo da Tabela 1 ou 2 a partir de um ou mais patógenos.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[0019] FIGURAS 1A-1D: Os sRNAs endógenos de plantas são exportados para células fúngicas através de vesículas extracelulares (EVs). FIG. 1A, Imagens microscópicas de protoplastos fúngicos purifi- cados isolados de Arabidopsis infectado por B. cinerea usando o mé- todo de purificação sequencial de protoplastos. Barras de escala, 20 um. FIG. 1B, TAS1c-siR483, TAS2-siR453, IGN-siR1 e miRNA166 fo- ram detectados por SsSRNA RT-PCR em protoplasto de B. cinerea (Bcºº) purificado a partir de Arabidopsis infectado por B. cinerea. Para o controle de BcC*! (Ctrl), B. cinerea cultivada misturada com folhas não infectadas foi submetida ao mesmo procedimento. FIG. 1C, TAS1c-siR483, TAS2-siR453, IGN-siR1 e miRNA166 foram detectados em EVWVs isoladas de Arabidopsis com tratamento simulado e infectado por B. cinerea. FIG. 1D, SsRNAs foram detectados nas EVs após o tra- tamento com nuclease microcócica na presença ou ausência de 1% de Triton-X-100. Nas FIGURAS 1B e 1C, TAS1c-siR585 e TAS2-siR710 foram utilizados como controles para TAS 1c-siR483 e TAS2-siR453, respectivamente; IGN-siR107 foi usado como controle para IGN-siR1; MIRNAB82?2 foi usado como controle para miRNA166. Em b-d, os genes de actina de B. cinerea e Arabidopsis foram utilizados como controle. A faixa 'total' indica extratos totais de RNA de folhas inteiras.
[0020] FIGURAS 2A-2F: Vesículas semelhantes a exossomas (ELVs) associadas à tetraspanina estavam envolvidas no transporte de SRNA endógeno da planta. FIG. 2A, os níveis de expressão de TET8 e TETO9 foram induzidos pela infecção por B. cinerea. TET7 e PDF1.2 foram utilizados como controle. Arabidopsis ubiquitin 5 (UBQS) foi utili- zada como controle interno. Os asteriscos indicam a diferença signifi- cativa (teste t bicaudal, P < 0,01). As barras de erro indicam o SD de três repetições técnicas. Resultados semelhantes foram obtidos em pelo menos três repetições biológicas. FIG. 2B, B. cinerea induz o acúmulo de vesículas associadas ao TET8 nos sítios de infecção. As folhas de Arabidopsis que expressam TET8-GFP sob seu promotor nativo foram coradas por 30 minutos com FMA4-64 para mostrar estru- turas de membrana extracelular e a membrana plasmática de células vegetais e fúngicas. Barras de escala, 10 um. FIG. 2C, numerosos ELVs associados a TET8-GFP que isolados do líquido apoplástico de plantas transgênicas TET8-GFP foram observados por microscópio confocal. Barras de escala, 10 um. FIG. 2D, a proteína TET8 marcada com GFP foi acumulada na fração EV. As faixas 'totais' indicam extra- tos de proteínas de folhas inteiras. Mancha RuBisCo foi usada como controle. FIG. 2E, ELVs marcados com TET8-GFP foram absorvidos por células de B. cinerea. O tratamento com Triton-X-100 a 1% elimi- nou os sinais TET8-GFP fora das células fúngicas, mas não eliminou os sinais dentro das células fúngicas. Barras de escala, 10 um. FIG. 2F, SsRNAs endógenos de plantas foram detectados em células de B. cinerea 2 horas após a incubação com ELVs seguidos por 1% de tra- tamento com Triton-X-100. Actina de B. cinerea e Arabidopsis foram usadas como controle.
[0021] FIGURAS 3A-3E: TET8 e TET9 interagem entre si e regu- lam a secreção de sRNA e a imunidade do hospedeiro. FIG. 3A, TET8- CFP com TET9-YFP foram colocalizados em vesículas que se acumu- laram no sítio da infecção por fungos. Barras de escala, 10 um. As FI- GURAS 3B e 3C, o TET8 foi coimunoprecipitado (Co-IP) com o TET9. As proteínas totais (entrada) foram imunoprecipitadas com gel de afi- nidade Anti-FLAG M2. As proteínas marcadas com FLAG ou GFP fo- ram detectadas por Western blot usando anticorpos anti-FLAG e anti- GFP, respectivamente. FIG. 3D, o mutante tet8 e as linhagens amiR- NA-TET9/tet8 (tet8/9) foram mais suscetíveis a B. cinerea do que as plantas do tipo selvagem. Os tamanhos relativos das lesões foram medidos a 2 dpi usando o imageJ. As barras de erro indicam o SD de mais de 10 folhas. Os asteriscos indicam diferença significativa (teste t bicaudal, P < 0,01). FIG. 3E, a expressão de TAS1c-siR483, TAS2-
SIiR453, IGN-siR1 e miRNA166 foi diminuída no protoplasto purificado de B. cinerea (Bcºº') isolado das linhagens tet8 e tet8 amiRNA-TET9 infectadas com B. cinerea (tet8/9) em comparação com as plantas sel- vagens. Para o controle de Bcº*' (Ctrl), B. cinerea cultivada misturada com folhas não infectadas foi submetida ao mesmo procedimento. SRNA Bc-siR3.1 derivado de B. cinerea, o gene Arabidopsis Actin e o gene B. cinerea Actin foram utilizados como controle.
[0022] FIGURAS 4A4C: Os sSRNAs endógenos transferidos das plantas suprimem os genes de virulência de B. cinerea e reduzem a patogenicidade do fungo. FIG. 4A, o mutante triplo dcl2/3/4 exibiu mai- or suscetibilidade à doença por B. cinerea em comparação com as plantas do tipo selvagem. Os tamanhos relativos das lesões foram medidos a 2 dpi usando o imageJ. FIG. 4B, a expressão relativa dos genes-alvo de B. cinerea de TAS1c-siR483 e TAS2-siR453 foi reprimi- da em B. cinerea coletada a partir do mutante triplo dcl2/3/4 em com- paração com a de plantas do tipo selvagem. O gene Actin de B. cine- rea foi utilizado como controle interno. FIG. 4C, cepas mutantes de B. cinerea com deleções nos alvos TAS c-siR483 e TAS2-siR453 apre- sentaram virulência significativamente reduzida nas folhas de Arabi- dopsis. Os tamanhos relativos das lesões foram medidos em 3 dpi usando o imageJ. A biomassa fúngica foi medida por PCR quantitativa. Nas FIGURAS 4B e 4C, as barras de erro indicam o DP de três repeti- ções técnicas da PCR quantitativa. Resultados semelhantes foram ob- tidos em pelo menos três repetições biológicas. Nos ensaios de pató- genos a e c, as barras de erro indicam o DP de mais de 10 folhas. Os asteriscos indicam diferença significativa (teste t bicaudal, P < 0,01).
[0023] FIGURAS 5A e 5B: Pulverização de dsRNAs ou sRNA dú- plex que têm como alvo genes fúngicos das vias de tráfego de vesícu- las em plantas, inibe eficientemente a virulência fúngica e o crescimen- to de B. cinerea (FIG. 5A). A quantificação é mostrada na FIG. 58
[0024] FIGURAS 6A e 6B: (FIG. 6A) Patógenos fúngicos de Scle- rotinia sclerotiorum são capazes de absorver RNAs externos do ambi- ente. (FIG. 6B) SIGS de DCL1/2 ou genes de tráfego de vesículas fún- gicas de S. sclerotiorum inibem a virulência fúngica em plantas.
[0025] FIGURAS 7A e 7B: Representações da parede celular de plantas e fungos. As paredes celulares das plantas (FIG. 7A), compos- tas principalmente por celulose, hemicelulose, pectina e proteínas, po- dem ser digeridas por celulose e macerozima. As paredes celulares fúngicas (FIG. 7B), compostas principalmente de quitina, glucanas e proteínas, podem ser digeridas pela enzima lisante de Trichoderma harzianum.
[0026] FIGURAS 8A-8C: As estruturas e a topologia das tetraspa- ninas vegetais TET8 e TET9 são semelhantes àquelas de CD63 hu- mano. As imagens foram feitas pela ferramenta online Protter (http://molbiol-tools.ca/Protein secondary structure.htm). As cisteínas conservadas, o motivo GCCK/RP (SEQ ID NO. 79) da planta e o moti- vo CCG animal em EC2 (domínio extracelular grande) foram marca- dos. Na planta, também foi marcada uma cisteína conservada em EC1 (pequeno domínio extracelular). Os sítios potenciais de palmitoilação nos domínios transmembranares são indicados com linhagens em zi- gue-zague vermelhas.
[0027] FIG. 9: Caracterização das linhagens knock-down tet8 tet9. Os níveis de transcrição TET9 foram medidos no mutante tet8 de 4 semanas que expressa um construto de miRNA artificial de TET9 e plantas de controle (tipo selvagem [WT] e o mutante tet8). As medi- ções quantitativas de RT-PCR foram normalizadas para os níveis de MRNA de Arabidopsis Actin. Os asteriscos indicam diferença significa- tiva (teste t bicaudal, P < 0,01). Linhagens com forte supressão da ex- pressão de TET9 foram selecionadas para as experiências apresenta- das neste estudo.
[0028] FIG. 10: Análise de enriquecimento da Ontologia Genética (GO) dos genes-alvo de B. cinerea.
[0029] FIGURAS 11A e 11B: A expressão dos genes-alvo de B. cinerea de TAS c-siR483, TAS2-siR453 e IGN-siR1 foi analisada por RT-PCR quantitativa. FIG. 11A, A expressão dos genes-alvo de B. ci- nerea de TAS1c-siR483, TAS2-siR453 e IGN-siR1 foi reduzida em B. cinerea isolado de folhas de Arabidopsis infectadas, em comparação com a cultivada no meio. FIG. 11B, a expressão relativa do gene-alvo de B. cinerea do IGN-siR1 foi reprimida em B. cinerea coletado a partir do mutante triplo dcl2/3/4 em comparação com plantas de tipo selva- gem. Nas FIGURAS 11A e 11B, o gene Actin de B. cinerea foi usado como controle interno. As barras de erro indicam o SD de três réplicas técnicas. Resultados semelhantes foram obtidos em pelo menos três repetições biológicas. Os asteriscos indicam diferença significativa (teste t bicaudal, P < 0,01).
[0030] FIGURAS 12A e 12B: As cepas de mutantes de deleção de B. cinerea vps51A, dent1A e sac1A foram geradas por recombinação homóloga. FIG. 12A, os níveis de expressão de cada gene nas linha- gens mutantes correspondentes foram medidos por RT-PCR. O gene Actin de B. cinerea foi utilizado como controle interno. FIG. 12B Os mutantes Bce-vps51A e Be-dent1A apresentaram taxa de crescimento significativamente reduzida após 4 dias em meio; no entanto, o mutan- te Bc-sac1A não apresentou nenhum defeito de crescimento quando comparado com cepas do tipo selvagem.
[0031] FIGURAS 13A-13C: As plantas com superexpressão no SRNA exibiram diminuição da suscetibilidade da doença para B. cine- rea em comparação com o tipo selvagem. FIG. 13A, a expressão de TAS1c-siR483 e TAS2-siR453 em linhagens de Arabidopsis de supe- rexpressão transgênica foi examinada por análise de Northern blot. U6 usado como controle de carregamento. Linhagens com alta expressão de tasiRNA foram selecionadas para outras experiências. FIG. 13B, ensaios de patógenos de plantas TAS1c-siR4830x e TAS2-siR4530x. Os tamanhos relativos das lesões foram medidos em 3 dpi usando o imageJ. As barras de erro indicam o SD de mais de 10 folhas. FIG. 13C, Bc-VPS51 e Bce-DCTN1 foram suprimidos em plantas TAS1c- siR4830x infectadas em comparação com o tipo selvagem; O Boc- SAC1 foi suprimido nas plantas infectadas TAS2-siR4530x em compa- ração com o tipo selvagem, conforme medido por RT-PCR quantitati- va. O gene Actin de B. cinerea foi utilizado como controle interno. As barras de erro indicam o SD de três réplicas técnicas. Resultados se- melhantes foram obtidos em pelo menos três repetições biológicas. Nas FIGURAS 13B e 13C, os asteriscos indicam diferença significativa (teste t bicaudal, P < 0,01).
[0032] FIGURAS 14A e 14B: As plantas transferem sSRNAs deriva- dos de transgene para células fúngicas por EVs também. FIG. 14A, Bc-DCL1-sRNAs derivados de transgene e os Bc-DCL2-sRNAs foram detectados por SRNA RT-PCR em protoplastos purificados de B. cine- rea (BcCol) de plantas Bc-DCL1/2-RNAi infectadas por B. cinerea, mas não nas plantas tratadas por simulação misturadas com micélio de B. cinerea antes da formação de protoplastos. FIG. 14B, Be-DCL1-sSsRNAs derivados de transgene e Bc-DCL2-sRNAs foram detectados em EVs de plantas Bc-DCL1/2-RNAi de Arabidopsis infectadas por B. cinerea. Os genes At-siR1003 e Actin de B. cinerea e Arabidopsis foram utiliza- dos como controle. A faixa 'total' indica extratos totais de RNA de fo- lhas inteiras.
[0033] FIG. 15: As imagens mostram que muitos fungos podem absorver RNAs nus do ambiente, o que possibilita, por exemplo, o si- lenciamento de genes induzido por spray possível para controlar esses patógenos fúngicos.
[0034] FIGURAS 16A-16C: Imagens mostram que o patógeno o00-
miceto da praga tardia da batata, que causou fome na Irlanda em 1800 - P. infestans - também pode pegar RNAs nus do meio ambiente. Dife- rentes tipos de células têm eficiência de captação diferente.
[0035] FIGURAS 17A-17E: O tratamento com vesículas extracelu- lares isoladas de Arabidopsis suprimiu com eficiência os sintomas da doença do mofo cinza causados por B. cinerea.
[0036] FIG. 18: Imagens mostram que lipossomas contendo Bc- DCL1/2-6sRNAs marcados com fluoresceína foram absorvidos de for- ma eficiente por células de B. cinerea.
[0037] FIG. 19: As imagens mostram que lipossomas aplicados externamente que transportam Bc-DCL1/2-dsRNAs permanecem efi- cazes nas plantas por duas semanas para inibir a virulência de pató- genos nas pétalas das flores.
[0038] FIG. 20: As imagens mostram que dsRNAs protegidos por lipossomas que têm como alvo os genes da via de tráfego VPS51, DCTN1 e SAC1 foram eficazes por até 15 dias.
[0039] FIGURAS 21A e 21B: As imagens mostram que os cistos de Phytophthora infestans absorvem dsRNAs nus e dsRNAs protegi- dos por lipossomas. Barras de escala, 10 um.
[0040] FIG. 22: Um desenho esquemático mostra sistemas de en- trega de lipossomas catiônicos para entrega de siRNA (hidratação por película fina) (Podesta e Kostarelos, Methods Enzymol. 464: 343-54, 2009).
[0041] FIGURAS 23A e 23B: Desenhos e imagens esquemáticos mostram a preparação de lipossomas sSRNA pelo método de extrusão.
DEFINIÇÕES
[0042] O termo "resistente a patógenos" ou "resistência a patóge- nos" refere-se a um aumento na capacidade de uma planta de prevenir ou resistir a infecções por patógenos ou sintomas induzidos por pató- genos. A resistência ao patógeno pode ser uma resistência aumentada em relação a uma espécie ou gênero de patógeno específico (por exemplo, Botrytis), resistência aumentada a múltiplos patógenos ou resistência aumentada a todos os patógenos (por exemplo, resistência sistêmica adquirida). Em algumas modalidades, a resistência de uma planta a um patógeno é "aumentada" quando um ou mais sintomas de infecção por patógenos são reduzidos em relação a um controle (por exemplo, uma planta na qual um polinucleotídeo que inibe a expressão de um gene-alvo de patógeno fúngico não é expressa).
[0043] "Patógenos" incluem, mas não estão limitados a, vírus, bac- térias, nematóides, fungos, oomicetos ou insetos (vide, por exemplo, Agrios, Plant Pathology (Academic Press, San Diego, CA (1988)). Em algumas modalidades, o patógeno é um patógeno fúngico. Em algu- mas modalidades, o patógeno é Botrytis. Em algumas modalidades, o patógeno é Verticilium. Em algumas modalidades, o patógeno é Scle- rotinia. Em algumas modalidades, o patógeno é um patógeno oomice- to.
[0044] O termo "ácido nucleico" ou "polinucleotídeo" refere-se a um polímero de cadeia simples ou dupla de bases deoxirribonucleotí- dicas ou ribonucleotídicas lidas da extremidade 5' para a 3". Os ácidos nucleicos também podem incluir nucleotídeos modificados que permi- tem a leitura correta por uma polimerase e não alteram significativa- mente a expressão de um polipeptídeo codificado por esse ácido nu- cleico.
[0045] A frase "codificação de ácido nucleico" ou "codificação de polinucleotídeo" refere-se a um ácido nucleico que direciona a expres- são de uma proteína ou peptídeo específico. As sequências de ácidos nucleicos incluem tanto a sequência da cadeia de DNA que é transcri- ta em RNA quanto a sequência de RNA que é traduzida em proteína. As sequências de ácidos nucleicos incluem ambas as sequências completas de ácido nucleico, bem como as sequências não completas derivadas das sequências completas. Deve ser ainda entendido que a sequência inclui os códons degenerados da sequência nativa ou se- quências que podem ser introduzidas para fornecer preferência de có- dons em uma célula hospedeira específica.
[0046] Diz-se que duas sequências de ácido nucleico ou polipeptí- deos são "idênticas" se a sequência de nucleotídeos ou resíduos de aminoácidos, respectivamente, nas duas sequências for a mesma quando alinhadas para a correspondência máxima, conforme descrito abaixo. "Porcentagem de identidade de sequência" é determinada comparando duas sequências idealmente alinhadas em uma janela de comparação, em que a porção da sequência de polinucleotídeo ou po- lipeptídeo na janela de comparação pode compreender adições ou de- leções (ou seja, lacunas) em comparação com a sequência de refe- rência (que não inclui adições ou exclusões) para o alinhamento ideal das duas sequências. A porcentagem é calculada determinando o nú- mero de posições nas quais a base de ácido nucleico idêntica ou resí- duo de aminoácido ocorre em ambas as sequências para produzir o número de posições correspondentes, dividindo o número de posições correspondentes pelo número total de posições na janela de compara- ção e multiplicando o resultado por 100 para gerar a porcentagem de identidade de sequência. Quando a porcentagem de identidade de se- quência é usada em referência a proteínas ou peptídeos, reconhece- se que as posições de resíduos que não são idênticas geralmente dife- rem por substituições conservadoras de aminoácidos, em que os resí- duos de aminoácidos são substituídos por outros resíduos de aminoá- cidos com propriedades químicas semelhantes (por exemplo, carga ou hidrofobicidade) e, portanto, não alteram as propriedades funcionais da molécula. Onde as sequências diferem nas substituições conserva- doras, a identidade percentual da sequência pode ser ajustada para cima para corrigir a natureza conservadora da substituição. Os meios para fazer esse ajuste são bem conhecidos dos especialistas na técni- ca. Normalmente, isso envolve marcar uma substituição conservadora como uma incompatibilidade parcial e não completa, aumentando as- sim a identidade da sequência percentual. Assim, por exemplo, onde um aminoácido idêntico recebe uma pontuação de 1 e uma substitui- ção não conservadora recebe uma pontuação de zero, uma substitui- ção conservadora recebe uma pontuação entre zero e 1. A pontuação das substituições conservadoras é calculada de acordo com, por exemplo, o algoritmo de Meyers & Miller, Computer Applic. Biol. Sci. 4:11 17 (1988), por exemplo, conforme implementado no programa PC/GENE (Intelligenetics, Mountain View, Califórnia, EUA).
[0047] O termo "identidade substancial" ou "substancialmente idêntico", conforme usado no contexto de sequências polinucleotídicas ou polipeptídicas, refere-se a uma sequência que possui pelo menos 60% de identidade sequencial tendo uma sequência de referência. Como alternativa, a porcentagem de identidade pode ser qualquer número inteiro de 60% a 100%. Modalidades exemplares incluem pelo menos: 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ou 99%, em comparação a uma sequência de referência usando os programas aqui descritos; de preferência BLAST usando parâmetros padrão, como descrito abaixo. Alguém versado na técnica reconhecerá que esses valores podem ser adequadamente ajustados para determinar a identidade correspondente de proteínas codificadas por duas sequências de nucleotídeos, levando em consi- deração a degenerescência do códon, a similaridade de aminoácidos, o posicionamento da estrutura de leitura e similares.
[0048] Para comparação de sequência, normalmente uma se- quência atua como uma sequência de referência à qual as sequências de teste são comparadas. Ao usar um algoritmo de comparação de sequências, as sequências de teste e referência são inseridas em um computador, as coordenadas de subsequência são designadas, se ne- cessário, e os parâmetros do programa do algoritmo de sequência são designados. Parâmetros de programa padrão podem ser usados ou parâmetros alternativos podem ser designados. O algoritmo de compa- ração de sequências calcula as identidades percentuais das sequên- cias de teste relativas à sequência de referência, com base nos parâ- metros do programa.
[0049] Uma "janela de comparação", como usada aqui, inclui refe- rência a um segmento de qualquer uma das posições contíguas sele- cionadas a partir do grupo que consiste em 20 a 600, geralmente cer- ca de 50 a cerca de 200, mais usualmente cerca de 100 a cerca de 150, em que uma sequência pode ser comparada a uma sequência de referência com o mesmo número de posições contíguas após as duas sequências estarem perfeitamente alinhadas. Os métodos de alinha- mento de sequências para comparação são bem conhecidos na técni- ca. O alinhamento ideal de sequências para comparação pode ser conduzido pelo algoritmo de homologia local de Smith e Waterman Add. APL. Math. 2: 482 (1981), pelo algoritmo de alinhamento de ho- mologia de Needleman e Wunsch Jy. Mol. Biol. 48: 443 (1970), pela pesquisa para o método de similaridade de Pearson e Lipman Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 85: 2444 (1988), por implementações computa- dorizadas desses algoritmos (GAP, BESTFIT, BLAST, FASTA e TFASTA no Wisconsin Genetics Software Package, Genetics Compu- ter Group (GCG), 575 Science Dr., Madison, WI) ou por alinhamento manual e inspeção visual.
[0050] Os algoritmos adequados para determinar a porcentagem de identidade e semelhança de sequência são os algoritmos BLAST e BLAST 2.0, descritos em Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403- 410 e Altschul et al. (1977) Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402, respec- tivamente. O software para realizar análises BLAST está disponível publicamente no site do National Center for Biotechnology Information (NCB]). O algoritmo envolve primeiro a identificação de pares de se- quência de alta pontuação (HSPs), identificando palavras curtas de comprimento W na sequência de consulta, que correspondem ou satis- fazem alguma pontuação limite de valor positivo T quando alinhadas com uma palavra do mesmo comprimento em uma sequência de ban- co de dados.
T é referido como o limite de pontuação da palavra vizi- nha (Altschul et a/., Supra). Esses acertos iniciais de palavras vizinhas atuam como sementes para iniciar pesquisas para encontrar HSPs mais longos que os contenham.
Os acertos da palavra são estendidos em ambas as direções ao longo de cada sequência até o ponto em que a pontuação do alinhamento acumulado pode ser aumentada.
As pontuações acumuladas são calculadas usando, para sequências de nucleotídeos, os parâmetros M (pontuação de recompensa para um par de resíduos correspondentes; sempre > 0) e N (pontuação de pe- nalidade para resíduos incompatíveis; sempre < 0). Para sequências de aminoácidos, uma matriz de pontuação é usada para calcular a pontuação cumulativa.
A extensão dos acertos da palavra em cada direção é interrompida quando: a pontuação do alinhamento acumula- do diminui pela quantidade X do valor máximo alcançado; a pontuação cumulativa chega a zero ou abaixo, devido ao acúmulo de um ou mais alinhamentos de resíduos com pontuação negativa; ou o fim de qual- quer sequência é atingida.
Os parâmetros do algoritmo BLAST W, Te X determinam a sensibilidade e a velocidade do alinhamento.
O pro- grama BLASTN (para sequências de nucleotídeos) usa como padrão um tamanho de palavra (W) de 28, uma expectativa (E) de 10, M=1, N =-2 e uma comparação de ambas as cadeias.
Para sequências de aminoácidos, o programa BLASTP usa como padrão um tamanho de palavra (W) de 3, uma expectativa (E) de 10 e a matriz de pontuação do BLOSUM6?2 (vide Henikoff & Henikoff, Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
EUA
89: 10915 (1989)).
[0051] O algoritmo BLAST também realiza uma análise estatística da semelhança entre duas sequências (vide, por exemplo, Karlin & Al- tschul, Proc. Nat'.. Acad. Sci. USA 90:5873-5787 (1993)). Uma medida de similaridade fornecida pelo algoritmo BLAST é a menor probabili- dade de soma (P(N)), que fornece uma indicação da probabilidade pe- la qual uma correspondência entre duas sequências de nucleotídeos ou aminoácidos ocorreria por acaso. Por exemplo, um ácido nucleico é considerado semelhante a uma sequência de referência se a menor probabilidade de soma em uma comparação do ácido nucleico de tes- te com o ácido nucleico de referência for menor que cerca de 0,01, mais preferivelmente menor que cerca de 10º e mais preferivelmente menor do que cerca de 102º,
[0052] O termo "complementar a" é aqui utilizado para significar que uma sequência polinucleotídica é complementar a toda ou uma porção de uma sequência polinucleotídica de referência. Em algumas modalidades, uma sequência polinucleotídica é complementar a pelo menos 15, pelo menos 20, pelo menos 25, pelo menos 30, pelo menos 40, pelo menos 50, pelo menos 75, pelo menos 100, pelo menos 125, pelo menos 150, pelo menos 175, pelo menos 200 ou mais nucleotí- deos contíguos de uma sequência polinucleotídica de referência. Em algumas modalidades, uma sequência polinucleotídica é "substancial- mente complementar" a uma sequência polinucleotídica de referência se pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos 95% da sequência polinucleotí- dica é complementar à sequência polinucleotídica de referência.
[0053] Uma sequência polinucleotídica é "heteróloga" para um or- ganismo ou uma segunda sequência polinucleotídica se origina de uma espécie estrangeira ou, se da mesma espécie, é modificada de sua forma original. Por exemplo, quando se diz que um promotor está operacionalmente ligado a uma sequência de codificação heteróloga, significa que a sequência de codificação é derivada de uma espécie enquanto que a sequência de promotor é derivada de outra espécie diferente; ou, se ambas são derivadas da mesma espécie, a sequência de codificação não está naturalmente associada ao promotor (por exemplo, é uma sequência de codificação geneticamente modificada, por exemplo, de um gene diferente na mesma espécie ou um alelo de um ecótipo ou variedade).
[0054] Um "cassete de expressão" refere-se a um construto de ácido nucleico, que quando introduzido em uma célula hospedeira, re- sulta na transcrição e/ou tradução de um RNA ou polipeptídeo, respec- tivamente. Construtos antissenso ou construtos de senso que não são ou não podem ser traduzidos são expressamente incluídos nesta defi- nição. Um especialista reconhecerá que a sequência polinucleotídica inserida não precisa ser idêntica, mas pode ser apenas substancial- mente semelhante a uma sequência do gene a partir do qual foi deri- vada.
[0055] O termo "promotor", como aqui utilizado, refere-se a uma sequência de polinucleotídeo capaz de conduzir a transcrição de uma sequência de codificação em uma célula. Assim, os promotores utili- zados nos construtos polinucleotídicos da invenção incluem elementos de controle transcricional de ação cis e sequências reguladoras que estão envolvidas na regulação ou modulação do tempo e/ou taxa de transcrição de um gene. Por exemplo, um promotor pode ser um ele- mento de controle transcricional de ação cis, incluindo um intensifica- dor, um promotor, um terminador de transcrição, uma origem de repli- cação, uma sequência de integração cromossômica, regiões não tra- duzidas 5' e 3' ou uma sequência intrônica, que estão envolvidos na regulação da transcrição. Essas sequências de ação cis geralmente interagem com proteínas ou outras biomoléculas para realizar (li-
gar/desligar, regular, modular, etc.) a transcrição gênica. Um "promotor de plantas" é um promotor capaz de iniciar a transcrição nas células vegetais. Um "promotor constitutivo" é aquele que é capaz de iniciar a transcrição em quase todos os tipos de tecidos, enquanto um "promo- tor específico de tecido" inicia a transcrição apenas em um ou alguns tipos específicos de tecidos. Um "promotor induzível" é aquele que ini- cia a transcrição somente sob condições ambientais particulares ou condições de desenvolvimento.
[0056] O termo "planta" inclui plantas inteiras, órgãos e/ou estrutu- ras vegetativas (por exemplo, folhas, caules e tubérculos), raízes, flo- res e órgãos florais (por exemplo, brácteas, sépalas, pétalas, estames, carpelos, anteras), óvulos (incluindo óvulos e células centrais), semen- tes (incluindo zigoto, embrião, endosperma e revestimento de semen- tes), frutas (por exemplo, ovário maduro), mudas, tecido vegetal (por exemplo, tecido vascular, tecido moído e similares), células (por exemplo, células de guarda, óvulos, tricomas e similares) e descen- dência dos mesmos. A classe de plantas que pode ser usada no mé- todo da invenção é geralmente tão ampla quanto a classe de plantas superiores e inferiores passíveis de técnicas de transformação, inclu- indo angiospermas (plantas monocotiledôneas e dicotiledôneas), gim- nospermas, samambaias e algas multicelulares. Inclui plantas com uma variedade de níveis de ploidia, incluindo aneuploides, poliploides, diplóides, haploides e hemizigotos.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO |. INTRODUÇÃO
[0057] Um número de genes de virulência fúngica foi descoberto. Além disso, verificou-se que o direcionamento (redução) da expressão desses genes-alvo nos fungos reduzirá sua virulência e, assim, permi- tirá o controle deles nas plantas. Em alguns casos, dsRNAs, SsRNAs dúplex, SsSRNAs, moléculas antissenso ou outros polinucleotídeos dire-
cionados a um ou mais desses genes-alvo podem ser contatados com patógenos fúngicos, reduzindo assim a virulência fúngica.
[0058] Assim, um aspecto da presente invenção refere-se ao con- trole de doenças causadas por patógenos agressivos de fungos e o00- micetos silenciando um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela
2. Em algumas modalidades, o silenciamento é alcançado através da geração de plantas transgênicas que expressam construtos antissen- so, RNA de filamento duplo, estruturas em grampo (hairpin) de RNA ou RNA dúplex (por exemplo, RNAi) que têm como alvo um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2. Em algumas modalidades, o silenciamento é alcançado ao contatar (por exemplo, pulverizar) plan- tas com SRNA dúplex ou RNAs de filamento duplo que têm como alvo um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2. Em algumas modalidades, o silenciamento é conseguido entrando contando (por exemplo, pulverizando) plantas com sSRNA dúplex ou RNAs de fila- mento duplo que têm como alvo um ou mais dos genes-alvo de dife- rentes patógenos. Il GENES-ALVO DA TABELA 1 OU TABELA 2
[0059] Em um aspecto, são fornecidos métodos para inibir ou si- lenciar a expressão de um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Ta- bela 2 em fungos. Em algumas modalidades, o método compreende expressar em uma planta um cassete de expressão compreendendo um promotor operacionalmente ligado a um polinucleotídeo que inibe a expressão de um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2. Em algumas modalidades, o método compreende contatar a planta com sRNA dúplex ou RNAs de filamento duplo que inibem um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2. Em algumas modalidades, o polinucleotídeo compreende um ácido nucleico antissenso que é com- plementar a um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 ou um fragmento dos mesmos. Em algumas modalidades, o polinucleotí-
deo compreende sSRNA dúplex ou dsRNAs que têm como alvo um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 ou um fragmento dos mesmos (opcionalmente de diferentes patógenos). Em algumas moda- lidades, a sequência de polinucleotídeo compreende uma repetição invertida de uma sequência direcionada a um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, opcionalmente com um espaçador presente entre as sequências de repetição invertida. Em algumas modalidades, o promotor é um promotor induzível. Em algumas modalidades, o pro- motor é um promotor constitutivamente ativo.
[0060] Em ainda outro aspecto, o cassetes de expressão compre- endendo um promotor operacionalmente ligado a um polinucleotídeo que inibe a expressão em um patógeno de um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, ou ácidos nucleicos isolados compreendendo os referidos cassetes de expressão. Em algumas modalidades, o cas- sete de expressão compreende um promotor operacionalmente ligado a um polinucleotídeo compreendendo um ácido nucleico antissenso que é complementar a um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Ta- bela 2 ou um fragmento dos mesmos. Em algumas modalidades, o cassete de expressão compreende um promotor operacionalmente ligado a um polinucleotídeo compreendendo um ácido nucleico de fi- lamento duplo que tem como alvo um ou mais dos genes-alvo da Ta- bela 1 ou Tabela 2 ou um fragmento dos mesmos. Em algumas moda- lidades, uma planta na qual o cassete de expressão é introduzido tem resistência aumentada ao patógeno em comparação com uma planta de controle sem o cassete de expressão.
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[0061] Em algumas modalidades, o gene do patógeno a ser direci- onado ou silenciado é de um patógeno viral, bacteriano, fúngico, ne- mátodo, oomiceto ou inseto. Em algumas modalidades, o gene-alvo é de um patógeno fúngico. Exemplos de patógenos fúngicos de plantas incluem, entre outros, Botyritis, Verticillium, Magnaporthe, Esclerotinia, Puccinia, Fusarium, Micosphaerella, Blumeria e Melampsora. Vide, por exemplo, Dean et al., Mol Plant Pathol 13: 804 (2012). Em algumas modalidades, o patógeno é Botyritis. Em algumas modalidades, o pa- tógeno é Botyritis cinera. Em algumas modalidades, o patógeno é Ver- ticilium. Em algumas modalidades, o patógeno é V. dahilae. Em algu- mas modalidades, o patógeno é Sclerotinia.
[0062] Em algumas modalidades, um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 são direcionados, silenciados ou inibidos a fim de aumentar a resistência ao patógeno em uma planta, expressando- se na planta ou entrando em contato com a planta, um polinucleotídeo que inibe a expressão do (s) gene (s) alvo do patógeno ou que é com- plementar ao (s) gene (s) alvo (s) ou um fragmento dos mesmos. Em algumas modalidades, o polinucleotídeo compreende um ácido nuclei- co antissenso que é complementar a um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 ou um fragmento dos mesmos. Em algumas mo- dalidades, o polinucleotídeo compreende um ácido nucleico de fila- mento duplo (por exemplo, RNA) que tem como alvo um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, ou seu promotor, ou um fragmen- to dos mesmos. Em algumas modalidades, o polinucleotídeo compre- ende um ácido nucleico de filamento duplo tendo uma sequência idên- tica ou substancialmente semelhante (pelo menos 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92 %, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ou 99% idêntica) a um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 ou um fragmento dos mesmos. Em algumas modalidades, um "frag- mento" de um gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 ou seu promotor compreende uma sequência de pelo menos 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500 ou mais nucleotídeos contíguos do gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 ou promotor (por exemplo, compreende pelo menos (por exemplo, pelo menos 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500 ou mais nucleotídeos contíguos de uma das sequências aqui fornecidas). Em algumas modalidades, o cordão duplo ácido nucleico é um sSRNA dúplex ou um RNA de fila- mento duplo. Silenciamento de gene induzido por hospedeiro
[0063] Em algumas modalidades, os métodos de inibição ou silen- ciamento da expressão em um patógeno fúngico de um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 (por exemplo, RNAs compreen- dendo qualquer uma das SEQ ID NOS: 1-78) utilizam um hospedeiro mecanismo de silenciamento genético induzido (HIGS) para produzir em um RNA inibidor da planta hospedeira que posteriormente se move para o patógeno para inibir a expressão de um gene ou região de pa- tógeno. Em algumas modalidades, o HIGS é usado para produzir RNAs inibidores de uma planta (por exemplo, SsRNAs ou RNA de fila- mento duplo) que têm como alvo um ou mais dos genes-alvo da Tabe- la 1 ou Tabela 2. Em algumas modalidades, em que um patógeno tem mais de um gene-alvo, como mostrado na Tabela 1 ou 2, o HIGS é usado para produzir RNAs inibitórios (por exemplo, SsSRNAs) que têm como alvo dois ou mais dos genes-alvo do patógeno. Em algumas modalidades, o HIGS é usado para produzir RNAs inibitórios (por exemplo, sSsRNAs) contra alvos genéticos de múltiplos patógenos.
[0064] O uso de HIGS para silenciar a expressão de genes de pa- tógenos em plantas é descrito, por exemplo, em Nowara et al. (Plant Cell (2010) 22: 3130-3141); Nunes et al. (Mol Plant Pathol (2012) 13:
519-529); e Govindarajulu et a/. (Plant Biotechnology Journal (2014) 1-9). SRNAs patógenos são descritos, por exemplo, em US 2015/0203865, incorporado aqui por referência.
[0065] A expressão gênica também pode ser suprimida por meio de interferência de RNA (RNAi) (e de fato a cossupressão pode ser considerada um tipo de RNAIi), que utiliza um dsRNA tendo uma se- quência idêntica ou semelhante à sequência do gene-alvo. RNAi é o fenômeno no qual quando um dsRNA tendo uma sequência idêntica ou semelhante àquela do gene-alvo é introduzido em uma célula, as expressões do gene exógeno inserido e do gene endógeno alvo são suprimidas. O dsRNA pode ser formado a partir de dois RNAs com- plementares separados ou pode ser um único RNA com sequências complementares internamente que formam um dsRNA ou RNA em grampo. Embora os detalhes completos do mecanismo do RNAi ainda sejam desconhecidos, considera-se que o dsRNA introduzido seja ini- cialmente clivado em pequenos fragmentos, que então servem como Índices do gene-alvo de alguma maneira, degradando o gene-alvo. Sabe-se também que o RNAi é eficaz em plantas (vide, por exemplo, Chuang, C. F. & Meyerowitz, E. M., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97: 4985 (2000); Waterhouse et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95:13959- 13964 (1998); Tabara et al. Science 282:430-431 (1998); Matthew, Comp Funct. Genom. 5: 240-244 (2004); Lu, et al., Nucleic Acids Re- search 32(21):e171 (2004)). Por exemplo, para obter a supressão da expressão de um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 usando RNAi, um fragmento de gene (por exemplo, de um gene-alvo) em uma orientação repetida invertida com um espaçador pode ser ex- presso em plantas para gerar dsRNA com a sequência de um MRNA codificado por um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 (por exemplo, RNAs compreendendo qualquer um dos SEQ ID NOS: 1-78) ou uma sequência substancialmente semelhante (incluindo aqueles projetados não para traduzir a proteína) ou fragmento da mesma, é introduzida em uma planta ou outro organismo de interesse. As plantas/organismos resultantes podem então ser rastreados quanto a um fenótipo associado à proteína-alvo e/ou monitorando os níveis de RNA no estado estacionário para transcritos que codificam a proteína dos patógenos. Embora os genes usados para RNAi não precisem ser completamente idênticos ao gene-alvo, eles podem ser pelo menos 70%, 80%, 90%, 95% ou mais idênticos à sequência do gene-alvo. Vi- de, por exemplo, Publicação de Patente U.S., No. 2004/0029283, para um exemplo de uma sequência de siRNA não idêntica usada para su- primir a expressão gênica. Os construtos que codificam uma molécula de RNA com uma estrutura de haste-loop que não está relacionada ao gene-alvo e que está posicionada distalmente a uma sequência espe- cífica para o gene de interesse também podem ser usados para inibir a expressão do gene-alvo. Vide, por exemplo, a Publicação de Patente U.S. No. 2003/0221211. O silenciamento de genes em plantas pela expressão de sSRNA dúplex também é descrito, por exemplo, em Lu et al., Nucleic Acids Res. 32 (21): e171 (2004).
[0066] Os polinucleotídeos RNAi podem abranger o RNA alvo completo ou podem corresponder a um fragmento do RNA alvo. Em alguns casos, o fragmento terá menos de 100, 200, 300, 400, 500 600, 700, 800, 900 ou 1.000 nucleotídeos correspondentes à sequência al- vo. Além disso, em algumas modalidades, esses fragmentos têm pelo menos 10, 15, 20, 50, 100, 150, 200 ou mais nucleotídeos de compri- mento. Em alguns casos, os fragmentos para uso no RNAi serão pelo menos substancialmente semelhantes às sequências de codificação para regiões de uma proteína-alvo que não ocorrem em outras proteí- nas do organismo ou podem ser selecionadas para ter a menor seme- lhança possível com outros transcritos do organismo, por exemplo, se- lecionado por comparação com sequências na análise de bancos de dados de sequência disponíveis ao público.
[0067] Os vetores de expressão que expressam continuamente o SIiRNA em células transfectadas de forma transitória e estável foram projetados para expressar RNAs em grampo ou RNAs de filamento duplo, que são processados in vivo em moléculas de siRNAs capazes de realizar silenciamento específico de gene (Brummelkamp et al. Sci- ence 296: 550-553 (2002) e Paddison et a/., Genes & Dev. 16: 948- 958 (2002)). O silenciamento de genes pós-transcricional por dsRNA é discutido em mais detalhes por Hammond et al., Nature Rev Gen 2: 110-119 (2001), Hamilton et al., Science, 286: 950-2. 1999, Fire et al., Nature 391: 806-811 (1998) e Timmons and Fire, Nature 395: 854 (1998).
[0068] Ainda outra maneira de suprimir a expressão de um gene em uma planta é pela expressão recombinante de um microRNA que suprime o gene-alvo. Os microRNAs artificiais são RNAs de filamento simples (por exemplo, entre 18-25 mers, geralmente 21 mers), que normalmente não são encontrados em plantas e são processados a partir de precursores endógenos de miRNA. Suas sequências são pro- jetadas de acordo com os determinantes da seleção do alvo do miRNA da planta, de modo que o microRNA artificial silencia especificamente O (s) gene (s) alvo (s) pretendido (s) e é geralmente descrito em Schwab et al, The Plant Cell 18: 1121-1133 (2006) também como os métodos baseados na Internet de projetar esses microRNAs, conforme descritos aqui. Vide também a publicação de patente U.S. No. 2008/0313773. Silenciamento de Gene Induzido por Spray
[0069] Para evitar a geração de plantas transgênicas, outra manei- ra de suprimir a expressão de um gene em uma planta é pela aplica- ção de dsRNAs de genes patógenos, SsRNAs dúplex ou sSRNAs na su- perfície de uma planta ou parte de uma planta (por exemplo, em uma folha, flor, fruta ou vegetal). Por exemplo, os dsRNA ou sRNA dúplex podem ser pulverizados ou contatados (por exemplo, escovando, mer- gulhando, etc.) na superfície da planta. Os métodos de aplicação de dsRNA e sRNA dúplex em partes externas da planta são descritos, por exemplo, em Wang et al., Nature Plants, 19; 2: 16151 (2016). WO 2013/02560 e em Gan et al., Plant Cell Reports 29: 1261-1268 (2010).
[0070] Em algumas modalidades, RNAs de filamento duplo, SRNAs dúplex ou SsRNAs podem ser aplicados como RNAs nus em uma solução aquosa (por exemplo, água). Em algumas modalidades, esses tratamentos podem ser eficazes por até 8 dias ou mais (vide, por exemplo, Wang et al, Nature Plants, 19; 2: 16151 (2016); Koch A, et al., PLoS Pathog. 13 de outubro de 2016; 12 (10)).
[0071] Em algumas modalidades, dsRNAs ou sRNAs direcionados a genes patógenos podem ser aplicados em lipossomas catiônicos ou em outras nanopartículas lipídicas artificiais que podem proteger molé- culas de RNA e aumentar a eficiência de captação de patógenos. Por exemplo, alguns patógenos eucarióticos, como Botrytis cinerea, po- dem absorver eficientemente vesículas da membrana lipídica dentro de 1-2 horas (vide, por exemplo, a FIG. 2E).
[0072] Um método exemplar de formação de lipossomas catiôni- cos compreendendo dsRNA ou sRNA dúplex: A seguir, em algumas modalidades, a primeira etapa é a formação de complexos de um filme lipídico. Isso pode ser alcançado, por exemplo, misturando DOTAP, colesterol e DSPE-PEG2000 (2:1:0,1). Em seguida, o filme lipídico po- de ser hidratado usando uma solução de RNA (por exemplo, em dex- trose ou sacarose (p/v)) preparada usando dH2O livre de RNase e, fi- nalmente, por sonicação ou extrusão (passe-os por membranas que contêm poros de um determinado tamanho) para redução de tamanho que leva à formação de vesículas lipídicas de PEG com dsRNAs ou SRNA dúplex embutidos. Uma vez carregados nas vesículas lipídicas,
os RNAs não vazam e podem ser contatados com as plantas para pro- teção de longo prazo.
[0073] Em algumas modalidades, dsRNAs ou sRNAs direcionados a genes patógenos podem ser sintetizados em planta e extraídos da planta para uso subsequente em uma planta-alvo. Como um exemplo não limitativo, construtos para a produção de uma ou mais sequências de dsRNA ou sRNA de interesse podem ser introduzidos transitoria- mente em uma planta (por exemplo, N. benthamiana), por exemplo por infiltração com Agrobacterium. As sequências de dsRNA ou sRNA são produzidas pela planta e, em seguida, o RNA é extraído de um ou mais tecidos da planta para extrair as sequências de dsRNA ou SsRNA de interesse. Tecnologia Antissenso e Senso
[0074] Em algumas modalidades, a tecnologia antissenso é usada para silenciar ou inativar um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 em um patógeno fúngico. A sequência de ácido nucleico an- tissenso transformada em plantas será substancialmente idêntica a pelo menos um fragmento do gene a ser silenciado. Em algumas mo- dalidades, a sequência de ácido nucleico antissenso que é transfor- mada em plantas é idêntica ou substancialmente idêntica a um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 no patógeno a ser blo- queado. Em algumas modalidades, a sequência de polinucleotídeo antissenso é complementar a um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 (por exemplo, RNAs compreendendo qualquer uma das SEQ ID NOS: 1-78) do patógeno a ser bloqueado. No entanto, a se- quência não precisa ser perfeitamente idêntica para inibir a expressão. Assim, em algumas modalidades, uma sequência de polinucleotídeo antissenso que é substancialmente complementar (por exemplo, pelo menos 70%, pelo menos 75%, pelo menos 80%, pelo menos 85%, pe- lo menos 90% ou pelo menos 95% complementar) a um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 a serem bloqueados pode ser usada (por exemplo, em um cassete de expressão sob o controle de um promotor heterólogo, que é então transformado em plantas, de modo que o ácido nucleico antissenso seja produzido).
[0075] Em algumas modalidades, uma molécula de ácido nucleico antissenso ou senso compreendendo ou complementar apenas a um fragmento de um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 (por exemplo, RNAs compreendendo qualquer uma das SEQ ID NOS: 1- 78) pode ser útil para produzir uma planta na qual a expressão gênica do patógeno é silenciada. Por exemplo, uma sequência de cerca de 15, 20, 30, 40, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450 ou 500 nu- cleotídeos pode ser usada.
[0076] As moléculas de RNA catalítico ou ribozimas também po- dem ser usadas para inibir a expressão de um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 (por exemplo, RNAs compreendendo qual- quer uma das SEQ ID NOS: 1-78) de um patógeno. É possível projetar ribozimas que especificamente emparelham com praticamente qual- quer RNA alvo e clivam o esqueleto fosfodiéster em um local específi- co, desativando funcionalmente o RNA alvo. Ao realizar essa cliva- gem, a ribozima não é propriamente alterada e, portanto, é capaz de reciclar e clivar outras moléculas, tornando-a uma verdadeira enzima. A inclusão de sequências de ribozimas dentro de RNAs antissenso confere atividade de clivagem de RNA sobre elas, aumentando assim a atividade dos construtos.
[0077] Várias classes de ribozimas foram identificadas. Uma clas- se de ribozimas é derivada de um número de pequenos RNAs circula- res que são capazes de autoclivagem e replicação em plantas. Os RNAs replicam-se sozinhos (RNA viróides) ou com um vírus auxiliar (RNAs satélites). Os exemplos incluem RNAs do abacate sunblotch viroid e os RNAs satélites do vírus do anel circular do tabaco, vírus das faixas transitórias da lucerna, vírus do mosquito do tabaco de veludo, vírus do mosquito do solanum nodiflorum e vírus do mosquito do trevo subterrâneo. A concepção e uso de ribozimas alvo específicas do RNA é descrita em Haseloff et al. Nature, 334: 585-591 (1988).
[0078] Outro método de supressão é a supressão dos sentidos (também conhecida como cossupressão). A introdução de cassetes de expressão nas quais um ácido nucleico está configurado na orientação senso em relação ao promotor demonstrou ser um meio eficaz pelo qual bloquear a transcrição de genes-alvo. Geralmente, onde a inibi- ção da expressão é desejada, ocorre alguma transcrição da sequência introduzida. O efeito pode ocorrer quando a sequência introduzida não contém uma sequência de codificação per se, mas apenas sequências íntron ou não traduzidas homólogas às sequências presentes nos transcritos primários da sequência endógena. A sequência introduzida será geralmente substancialmente idêntica à sequência que se pre- tende reprimir. Essa identidade mínima normalmente será maior que cerca de 65% da sequência do gene-alvo (por exemplo, um ou mais dos genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2), mas uma identidade mais alta pode exercer uma repressão mais eficaz da expressão das se- quências endógenas. Em algumas modalidades, são usadas sequên- cias com identidade substancialmente maior, por exemplo, pelo menos cerca de 80%, pelo menos cerca de 95% ou 100% de identidade. Co- mo na regulação antissenso, o efeito pode ser projetado e testado de modo a não afetar significativamente a expressão de outras proteínas dentro de uma família semelhante de genes que exibem homologia ou homologia substancial.
[0079] Para supressão de senso, a sequência introduzida no cas- sete de expressão, necessitando de identidade menor do que a abso- luta, também não precisa ser de tamanho completo, em relação ao produto primário de transcrição ou ao mMRNA totalmente processado.
Isso pode ser preferido para evitar a produção simultânea de algumas plantas que são superexpressoras. Uma identidade mais alta em uma sequência menor que a completa compensa uma sequência mais lon- ga e menos idêntica. Além disso, a sequência introduzida não precisa ter o mesmo padrão de íntron ou éxon, e a identidade de segmentos não codificantes será igualmente eficaz. Em algumas modalidades, uma sequência dos intervalos de tamanho observados acima para a regulação antissenso é usada, por exemplo, pelo menos cerca de 15, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500 ou mais nucleotídeos. Ill MÉTODOS DE FABRICAÇÃO DE PLANTAS TENDO RESISTÊN-
CIA AO PATOGÊNIO AUMENTADA
[0080] Em outro aspecto, são fornecidos métodos para fabricar plantas com resistência a patógenos aumentada. Em algumas modali- dades, o método compreende: introduzir em uma planta um cassete de expressão heteró- logo compreendendo um promotor operacionalmente ligado a um poli- nucleotídeo que inibe a expressão fúngica de um ou mais dos genes- alvo da Tabela 1 ou Tabela 2; e selecionar uma planta compreendendo o cassete de ex- pressão.
[0081] Em algumas modalidades, o método adicionalmente com- preende introduzir na planta um segundo cassete de expressão hete- rólogo compreendendo um segundo promotor operacionalmente ligado a um segundo polinucleotídeo que inibe a expressão fúngica de um segundo gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2; e selecionar uma planta compreendendo o segundo cassete de expressão.
[0082] Em algumas modalidades, uma planta na qual o cassete de expressão foi introduzido aumentou a resistência ao patógeno em re- lação a uma planta de controle sem o cassete de expressão. Em al-
gumas modalidades, uma planta na qual o cassete de expressão foi introduzido possui resistência aprimorada a um patógeno fúngico (por exemplo, Botyritis ou Verticilium ou Sclerotinia)) em relação a uma planta de controle sem o cassete de expressão.
[0083] Em algumas modalidades, o promotor é heterólogo ao poli- nucleotídeo. Em algumas modalidades, o polinucleotídeo que codifica o alvo resistente ao SRNA está operacionalmente ligado a um promo- tor induzível. Em algumas modalidades, o promotor é induzível por pa- tógenos (por exemplo, um promotor induzível por Botrytis ou Verticil- lium ou Sclerotinia). Em algumas modalidades, o promotor é induzível ao estresse (por exemplo, um promotor induzível ao estresse abiótico).
[0084] Em algumas modalidades, o método compreende: contatar uma pluralidade de plantas com um construto compreendendo um promotor operacionalmente ligado a um polinu- cleotídeo que inibe a expressão fúngica de um gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, em que a planta tem resistência aumentada a um pató- geno em comparação com uma planta de controle que não foi conta- tada com o construto.
[0085] Em algumas modalidades, o método adicionalmente com- preende selecionar uma planta com resistência ao patógeno aumenta- da.
[0086] Em algumas modalidades, o método compreende: contatar uma planta ou parte de uma planta com um dsR- NA, sRNA dúplex ou sSRNAs que tem como alvo um gene-alvo da Ta- bela 1 ou Tabela 2, em que a planta ou parte da planta tem resistência aumentada ao patógeno em comparação com uma planta de controle que não foi contatado com dsRNAs, SsRNAs ou sRNA dúplex.
[0087] Em algumas modalidades, o método compreende contatar a planta ou a parte da planta com dois, três, quatro, cinco ou mais dsRNAs ou sRNAs dúplex (por exemplo, siRNAs) ou sRNAs para atin-
gir dois, três, quatro, cinco, ou mais gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 de um, dois, três ou mais patógenos diferentes.
[0088] [0087] Em algumas modalidades, o dsRNA ou sRNA dúplex (por exemplo, siRNA) ou sRNA é pulverizado ou escovado na planta ou parte da planta (por exemplo, em uma folha, uma fruta ou um vege- tal). Lipossomas e Sistemas de Entrega de Lipossomas Catiônicos
[0089] Lipossomas podem ser usados para entregar dsRNAs ou SRNA dúplexos (por exemplo, siRNAs) ou SsRNAs que têm como alvo um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 ou, alternativamente, uma ou mais (por exemplo, dois ou mais) transcrições do tipo dicer (DCL). Os dsRNAs ou sRNAs dúplex ou SsRNAs podem ser empacota- dos em lipossomas e subsequentemente pulverizados ou de outro modo contatados com as plantas em uma quantidade suficiente para inibir infecção ou patogênese por um patógeno fúngico. Genes DCL fúngicos exemplares são descritos, por exemplo, no Pedido de Patente U.S. No. 14/809.063, que é incorporado por referência. DCLs exempla- res incluem os de Botrytis ou Verticillium, como descrito por exemplo no Pedido de Patente U.S. No. 14/809.063.
[0090] Lipossomas são vesículas constituídas por bicamadas lipí- dicas ordenadas concentricamente que tipicamente encapsulam uma fase aquosa. Os lipossomas se formam quando lipídios, moléculas tendo um grupo principal polar ligado a uma ou mais caudas alifáticas de cadeia longa, tais como fosfolipídios, são expostos à água. Ao en- contrar esse meio, os lipídios se agregam para formar uma estrutura na qual apenas os grupos principais polares são expostos ao meio ex- terno para formar uma concha externa dentro da qual as caudas alifá- ticas são sequestradas. Uma variedade de estruturas lipossômicas pode ser formada usando um ou mais lipídios. Exemplos de estruturas lipossômicas incluem, por exemplo, pequenas vesículas unilamelares
(SUVs), grandes vesículas unilamelares (LUVs) e vesículas multilame- lares (MLVs).
[0091] Os lipossomas catiônicos têm uma estrutura lipossômica com um ou mais grupos catiônicos que fornecem uma carga líquida positiva. Três métodos de entrega de siRNA usando sistemas de en- trega de lipossomas catiônicos são mostrados na FIG. 22. O método 1 inclui as seguintes etapas (vide, por exemplo, Pandi et al., Int J Pharm. 550(1-2):240-250, 2018; Muralidharan et al., J Nanobiotechnology. 14(1):47, 2016; Taruttis et al., Nanoscale. 6(22):13451-6, 2014; e Zou et al., Cancer Gene Ther. 7(5):683-96, 2000): (1) DOTAP e colesterol! (2:1) são dissolvidos em clorofórmio:metano!l (4:1 v/v) e o solvente or- gânico é evaporado sob pressão por 30 min a 40 ºC usando um roto- evaporador. A película lipídica fina resultante é lavada com uma cor- rente de N>? para remover qualquer vestígio do solvente orgânico. (2) O filme lipídico é hidratado em H2O por pipetagem rápida para produzir lipossomas multilamelares grandes (MLVs). Os MLVs são reduzidos a pequenos, por extrusão através de um filtro Anotop 10 de 0,4 um (Whatman, Reino Unido). A solução lipossômica é então incubada à temperatura ambiente por um período mínimo de 30 minutos para permitir a estabilização. (3) Lipossomas e siRNA são diluídos separa- damente em 50% do volume final. O siRNA é adicionado ao lipossoma por pipetagem rápida para evitar altas concentrações localizadas de SIRNA: lipossoma. Isso é bem misturado por pipetagem e vórtice bre- ve. A mistura é então incubada à temperatura ambiente por 20 minutos para permitir a complexação.
[0092] O método 2 inclui as seguintes etapas (vide, por exemplo, Khatri et al., J. Control Release. 182: 45-57, 2014; e Amadio et al. Pharmacol Res. 111: 713-720, 2016): 1) Os lipossomas PEGuilados são preparados usando o mesmo protocolo no Método 1. Resumida- mente, DSPE-PEG2000 (5% em mol) é dissolvido no solvente orgâni-
co com DOTAP e colesterol. O lipossoma PEGuilado é hidratado, re- duzido em tamanho e medido da mesma maneira no Método 1. (2) Li- possomas e siRNA são diluídos separadamente em 50% do volume final. O siRNA é adicionado ao lipossoma por pipetagem rápida para evitar altas concentrações localizadas de siRNA:lipossoma. Isso é bem misturado por pipetagem e vórtice breve. A mistura é então incubada à temperatura ambiente por 20 minutos para que a complexação ocorra.
[0093] O método 3 inclui as seguintes etapas (vide, por exemplo, Kedmi et al., Biomaterials. 31 (26): 6867-75, 2010; Mendez et al., Bio- materials. 35 (35): 9554-61, 2014; e Tagami et al., J. Control Release 151 (2):149-54, 2011): (1) DOTAP, colesterol e DSPE-PEG2000 (2:1:0,1) são dissolvidos em clorofórmio: metanol (4:1, v/v). O solvente orgânico é evaporado sob pressão a 40 ºC por 30 min e o filme lipídico é lavado com N, para remover o solvente residual. (2) O filme lipídico é hidratado usando uma solução de siRNA em dH2O livre de RNase. À quantidade de siRNA usada para hidratar o filme é calculada a partir da taxa de carga. (3) A redução do tamanho é realizada por extrusão através de um filtro Anotop 10 de 0,4 um (Whatman, UK). A solução de lipossoma PEGuilado/siRNA é então incubada à temperatura ambiente por um período mínimo de 30 min para permitir a estabilização. O complexo deve ser mantido em um ambiente estéril para experiências subsequentes de silenciamento de genes.
IV POLINUCLEOTÍDEOS E VETORES DE EXPRESSÃO RECOMBI- NANTE
[0094] O isolamento dos polinucleotídeos da invenção pode ser realizado por várias técnicas. Por exemplo, sondas oligonucleotídicas baseadas nas sequências aqui divulgadas podem ser usadas para identificar o polinucleotídeo desejado em uma biblioteca de cDNA ou DNA genômico de uma espécie de planta desejada. Para construir bi- bliotecas genômicas, grandes segmentos de DNA genômico são gera-
dos por fragmentação aleatória, por exemplo, usando endonucleases de restrição e são ligados ao DNA do vetor para formar concatêmeros que podem ser empacotados no vetor apropriado. Alternativamente, podem ser construídas bibliotecas de cDNA de plantas ou partes de plantas (por exemplo, flores).
[0095] O cDNA ou a biblioteca genômica podem então ser rastre- ados usando uma sonda com base em uma sequência divulgada aqui. As sondas podem ser usadas para hibridar com sequências genômi- cas de DNA ou cDNA para isolar genes homólogos na mesma ou em diferentes espécies de plantas. Alternativamente, os anticorpos criados contra um polipeptídeo podem ser usados para rastrear uma biblioteca de expressão de mRNA.
[0096] Alternativamente, os ácidos nucleicos de interesse podem ser amplificados a partir de amostras de ácidos nucleicos usando téc- nicas de amplificação. Por exemplo, a tecnologia de reação em cadeia polimerase (PCR) para amplificar as sequências dos genes diretamen- te do mMRNA, do cDNA, das bibliotecas genômicas ou das bibliotecas de cDNA. A PCR e outros métodos de amplificação in vitro também podem ser úteis, por exemplo, para clonar sequências de ácidos nu- cleicos que codificam proteínas a serem expressas, para fazer ácidos nucleicos serem usados como sondas para detectar a presença do MRNA desejado em amostras, para sequenciamento de ácido nucleico ou para outros fins. Para uma visão geral da PCR, vide PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications. (Innis, M, Gelfand, D., Sninsky, J. e White, T., eds.), Academic Press, San Diego (1990)
[0097] Os polinucleotídeos também podem ser sintetizados por técnicas conhecidas, como descrito na literatura técnica. Vide, por ex- emplo, Carruthers et al., Cold Spring Harbor Symp. Quant. Biol. 47: 411-418 (1982) e Adams et al., J. Am. Chem. Soc. 105: 661 (1983). Os fragmentos de DNA de filamento duplo podem então ser obtidos sinte-
tizando o filamento complementar e recozendo os filamentos juntos sob condições apropriadas, ou adicionando o filamento complementar usando DNA polimerase tendo uma sequência iniciadora apropriada.
[0098] Uma vez obtida uma sequência de polinucleotídeo que ini- be a expressão do gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 ou um fragmen- to dos mesmos, ela pode ser usada para preparar um cassete de ex- pressão para expressão em uma planta. Em algumas modalidades, a expressão do polinucleotídeo é direcionada por um promotor heterólo- go.
[0099] Qualquer um dos vários meios bem conhecidos na técnica pode ser usado para direcionar a expressão da sequência de polinu- cleotídeo de interesse nas plantas. Qualquer órgão pode ser direcio- nado, como órgãos/estruturas vegetativas (por exemplo, folhas, caules e tubérculos), raízes, flores e órgãos/estruturas florais (por exemplo, brácteas, sépalas, pétalas, estames, carpelos, anteras e óvulos), se- mentes (incluindo embrião, endosperma e revestimento de sementes) e frutas. Alternativamente, a expressão pode ser condicionada a ocor- rer apenas sob certas condições (por exemplo, usando um promotor induzível).
[00100] Por exemplo, um fragmento de promotor de planta pode ser empregado para direcionar a expressão da sequência de polinucleotí- deo de interesse em todos os tecidos de uma planta regenerada. Tais promotores são aqui referidos como promotores "constitutivos" e são ativos sob a maioria das condições e estados ambientais de desenvol- vimento ou diferenciação celular. Exemplos de promotores constituti- vos incluem a região de iniciação da transcrição do vírus do mosaico de couve-flor (CaMV) 358, o promotor 1' ou 2' derivado do T-DNA de Agrobacterium tumafaciens e outras regiões de iniciação da transcri- ção de vários genes de plantas conhecidos pelos versados na técnica.
[00101] —Alternativamente, o promotor da planta pode direcionar a expressão da sequência de polinucleotídeo de interesse em um tecido específico (promotores específicos do tecido) ou pode estar sob con- trole ambiental mais preciso (promotores induzíveis). Exemplos de promotores específicos de tecido sob controle de desenvolvimento in- cluem promotores que iniciam a transcrição apenas em certos tecidos, como folhas ou células protetoras (incluindo, mas não se limitando, aos descritos em WO/2005/085449; Patente U.S. No. 6.653.535; Li et al. Sci China C Life Sci. Abril de 2005;48(2):181-6; Husebye, et al., Plant Physiol, Abril de 2002, Vol. 128, pp. 1180-1188; e Plesch, et al., Gene, Volume 249, Número 1, 16 de maio de 2000, pp. 83-89(7)). Exemplos de condições ambientais que podem afetar a transcrição por promotores induzíveis incluem a presença de um patógeno, condições anaeróbicas, temperatura elevada ou presença de luz.
[00102] Em algumas modalidades, o promotor é um promotor cons- titutivo. Em algumas modalidades, o promotor é um promotor induzí- vel. Em algumas modalidades, o promotor é induzível ao estresse (por exemplo, induzível pelo estresse abiótico). Em algumas modalidades, o promotor é induzível por patógenos. Em algumas modalidades, o promotor é induzido após a infecção por Botyrtis. Exemplos não limita- tivos de promotores induzíveis por patógenos incluem a quinase 1 in- duzida por Botyritis (BIK1) e o gene de defesa da planta PDF1.2. Vide, por exemplo, Penninckx et a/l., Plant Cell 10: 2103-2113 (1998); vide também Veronese et al., Plant Cell 18: 257-273 (2006).
[00103] Em algumas modalidades, uma região de poliadenilação na extremidade 3' da região de codificação pode ser incluída. A região de poliadenilação pode ser derivada de um gene NH3, de uma variedade de outros genes de plantas ou de T-DNA.
[00104] O vetor compreendendo as sequências normalmente com- preende um gene marcador que confere um fenótipo selecionável nas células vegetais. Por exemplo, o marcador pode codificar resistência a biocidas, particularmente resistência a antibióticos, como resistência à canamicina, G418, bleomicina, higromicina ou resistência a herbicidas, como resistência ao clorosluforon ou Basta. V. PRODUÇÃO DE PLANTAS TRANSGÊNICAS
[00105] Como detalhado aqui, modalidades da presente invenção fornecem plantas transgênicas compreendendo cassetes de expres- são recombinantes para expressar uma sequência de polinucleotídeo, como aqui descrito. Em algumas modalidades, é gerada uma planta transgênica que contém uma sequência completa ou parcial de um polinucleotídeo que é derivado de uma espécie diferente das espécies da planta transgênica. Deve-se reconhecer que as plantas transgêni- cas abrangem a planta ou célula vegetal na qual o cassete de expres- são é introduzido, bem como a progênie de tais plantas ou células ve- getais que contêm o cassete de expressão, incluindo a progênie que possui o cassete de expressão integrado de maneira estável em um cromossomo.
[00106] Em algumas modalidades, as plantas transgênicas com- preendendo cassetes de expressão recombinantes para expressar uma sequência polinucleotídica como aqui descrita têm resistência aumentada ou melhorada ao patógeno em comparação com uma plan- ta sem o cassete de expressão recombinante, em que as plantas transgênicas compreendendo cassetes de expressão recombinantes para expressar a sequência polinucleotídica têm aproximadamente o mesmo crescimento que uma planta sem o cassete de expressão re- combinante. Os métodos para determinar o aumento da resistência ao patógeno são descritos, por exemplo, na Seção VI abaixo.
[00107] Um vetor de expressão recombinante como descrito aqui pode ser introduzido no genoma do hospedeiro da planta desejado por uma variedade de técnicas convencionais. Por exemplo, o construto de DNA pode ser introduzido diretamente no DNA genômico da célula vegetal usando técnicas como eletroporação e microinjeção de proto- plastos de células vegetais, ou o construto de DNA pode ser introduzi- do diretamente no tecido vegetal usando métodos balísticos, como o bombardeio de partículas de DNA. Alternativamente, o construto de DNA pode ser combinado com regiões flanqueadoras adequadas de T-DNA e introduzido em um vetor hospedeiro convencional de Agrobacterium tumefaciens. As funções de virulência do hospedeiro Agrobacterium tumefaciens direcionarão a inserção do construto e do marcador adjacente no DNA da célula vegetal quando a célula estiver infectada pela bactéria. Embora a expressão transitória da sequência de polinucleotídeo de interesse seja abrangida pela invenção, geral- mente a expressão do construto da invenção será a partir da inserção de cassetes de expressão no genoma da planta, por exemplo, de mo- do que pelo menos algumas descendentes de plantas também conte- nham o cassete de expressão integrado.
[00108] As técnicas de microinjeção também são úteis para esse fim. Essas técnicas são bem conhecidas na técnica área descritas de- talhadamente na literatura. A introdução de construtos de DNA usando precipitação com polietileno glicol é descrita em Paszkowski et al. EM- BO J. 3: 2717-2722 (1984). As técnicas de eletroporação são descritas em Fromm et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 82: 5824 (1985). Técnicas de transformação balística são descritas em Klein et al. Nature 327: 70-73 (1987).
[00109] As técnicas de transformação mediadas por Agrobacterium tumefaciens, incluindo desarmamento e uso de vetores binários, são bem descritas na literatura científica. Vide, por exemplo, Horsch et al. Science 233: 496-498 (1984) e Fraley et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80: 4803 (1983).
[00110] As células vegetais transformadas derivadas de qualquer uma das técnicas de transformação acima podem ser cultivadas para regenerar uma planta inteira que possui o genótipo transformado e, portanto, o fenótipo desejado, como resistência aprimorada ao pató- geno. Tais técnicas de regeneração dependem da manipulação de certos fito-hormônios em um meio de crescimento de cultura de teci- dos, tipicamente confiando em um marcador de biocida e/ou herbicida que foi introduzido juntamente com as sequências nucleotídicas dese- jadas. A regeneração de plantas a partir de protoplastos cultivados é descrita em Evans et al., Protoplasts Isolation and Culture, Handbook of Plant Cell Culture, pp. 124-176, MacWMillilan Publishing Company, Nova lorque, 1983; e Binding, Regeneration of Plants, Plant Protoplast, pp. 21-73, CRC Press, Boca Raton, 1985. A regeneração também po- de ser obtida a partir de calos vegetais, explantes, órgãos ou partes deles. Tais técnicas de regeneração são descritas geralmente em Klee et al. Ann. Rev. of Plant Phys. 38: 467-486 (1987).
[00111] Depois que o cassete de expressão é incorporado de ma- neira estável em plantas transgênicas e confirmado como operável, ele pode ser introduzido em outras plantas por cruzamento sexual. Qual- quer uma das várias técnicas padrão de criação pode ser usada, de- pendendo das espécies a serem cruzadas.
[00112] Os cassetes de expressão e construtos (por exemplo, an- tissenso e siRNAs) como aqui descritos podem ser usados para confe- rir resistência a patógenos aumentada ou aprimorada em essencial- mente qualquer planta. Assim, a invenção utiliza uma ampla variedade de plantas, incluindo espécies dos gêneros Asparagus, Atropa, Avena, Brassica, Citrus, Citrullus, Capsicum, Cucumis, Cucurbita, Daucus, Fragaria, Glycine, Gossypium, Helianthus, Heterocallis, Hordeum, Hyoscyamus, Lactuca, Linum, Lolium, Lycopersicon, Malus, Manihot, Majorana, Medicago, Nicotiana, Oryza, Panieum, Pannesetum, Per- sea, Pisum, Pyrus, Prunus, Raphanus, Secale, Senecio, Sinapis, So- lanum, Sorghum, Trigonella, Triticum, Vitis, Vigna, e Zea. Em algumas modalidades, a planta é uma planta de tomate. Em algumas modalida- des, a planta é uma planta de vinha, por exemplo, uma espécie do gê- nero Vitis. Em algumas modalidades, a planta é uma planta ornamen- tal. Em algumas modalidades, a planta é uma planta produtora de fru- tas ou vegetais. Em algumas modalidades, a planta é uma monocoti- ledônea. Em algumas modalidades, a planta é uma dicotiledônea.
VI SELEÇÃO PARA PLANTAS COM RESISTÊNCIA A PATOGÊNIO AUMENTADA
[00113] Plantas (ou partes de plantas) com maior resistência a pa- tógenos podem ser selecionadas de várias maneiras. Um versado na técnica reconhecerá que os métodos a seguir são apenas algumas das possibilidades. Um método de seleção de plantas ou partes de plantas (por exemplo, frutas e vegetais) com maior resistência a pató- genos é determinar a resistência de uma planta a um patógeno de planta específico. Os possíveis patógenos incluem, mas não estão |i- mitados a, vírus, bactérias, nematóides, fungos ou insetos (vide, por exemplo, Agrios, Plant Pathology (Academic Press, San Diego, CA) (1988)). Um especialista na técnica reconhecerá que as respostas de resistência das plantas variam dependendo de muitos fatores, incluin- do qual patógeno, composto ou planta é usado. Geralmente, o aumen- to da resistência é medido pela redução ou eliminação dos sintomas da doença (por exemplo, redução no número ou tamanho das lesões ou redução na quantidade de biomassa fúngica na planta ou em uma parte da planta) quando comparada a uma planta de controle. Em al- gumas modalidades, a resistência é aumenta quando o número ou ta- manhos de lesões ou quantidade de biomassa fúngica na planta ou em uma parte da planta diminui em pelo menos cerca de 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% ou mais em relação a um con- trole (por exemplo, em relação a uma planta na qual um polinucleotí- deo heterólogo não foi expresso).
[00114] A resistência aumentada ao patógeno também pode ser determinada medindo o aumento da expressão de um gene ligado operacionalmente a um promotor relacionado à defesa. A medição de tal expressão pode ser medida quantificando o acúmulo de RNA ou produto proteico subsequente (por exemplo, usando técnicas de trans- ferência norte ou oeste, respectivamente (vide, por exemplo, Sambro- ok et al. E Ausubel et a/.).
VII EXEMPLOS Exemplo 1
[00115] Para identificar SRNAs móveis endógenos do hospedeiro da planta e investigar como os SRNAs do hospedeiro entram em célu- las fúngicas em interação, usamos um sistema de interação Arabi- dopsis - B. cinerea que exibe o tráfego bidirecional de SsRNAs e RNAi (Weiberg, A. et al. SRNAs fúngicos suprimem imunidade de plantas ao sequestrar vias de interferência de RNA do hospedeiro. (Science 342, 118-123, doi:10.1126/science.1239705 (2013); Wang, M. et al., Nature plants 2, 16151, doi:10.1038/nplants.2016.151 (2016)). Porque as composições da parede celular de plantas e fungos são diferentes (Cosgrove, DJ, Nature Reviews. Molecular cell biology 6, 850-861, doi:10.1038/nrm1746 (2005); Bowman, S.M. e Free, S.J., Bioessays 28, 799-808, doi: 10.1002/bies.20441 (2006)) (FIGURAS 7A e 7B), de- senvolvemos um método eficiente de purificação sequencial de proto- plastos para isolar células fúngicas puras de tecidos infectados (FIG. 1A). isolados dos protoplastos purificados de B. cinerea e identificaram quase 80 sSRNAs de Arabidopsis hospedeiros em réplicas biológicas usando 10 leituras normalizadas por milhão de leituras totais (RPM) como ponto de corte (Tabela Suplementar 1). Para validar os resulta- dos do sequenciamento profundo e testar se os SRNAs hospedeiros são transportados para as células fúngicas por um processo seletivo ou dependente da concentração (SsRNAs mais abundantes têm maior probabilidade de serem transportados para as células fúngicas), foi realizado o perfil de SsSRNA nos RNAs totais para análise comparativa.
Foi descoberto que, embora os SRNAs mais abundantes tenham maior probabilidade de serem transportados (Tabela Suplementar 2), há uma seleção clara nos sRNAs transferidos.
Entre os SRNAs de Arabidopsis transferidos, cinco eram pouco abundantes (<10 RPM) nas bibliotecas totais de SRNA (Tabela Suplementar 3). Apenas 29 estavam presentes nos cem SRNAs mais abundantes no total de bibliotecas de SsRNA, 16 dos quais eram miRNAs (Tabela Suplementar 2). miR166, miR159 e mMIiR157 estavam entre os SRNAs mais abundantes nas bibliotecas de SRNA de protoplasto de B. cinerea e no total de bibliotecas de SsRNA.
O mais impressionante é que, dos dois pequenos RNAs interferentes de atuação trans (tasiRNAs) gerados a partir do mesmo precursor de MRNA de TAS2, apenas TAS2-siR453 estava presente nas bibliotecas de protoplastos de B. cinerea, apesar de TAS2-siR710 ter leituras 30 vezes maior que TAS2-siR453 nas bibliotecas totais de SsRNA.
Da mesma forma, o TAS1c-siR483, mas não o TAS1c-siR585, foi alta- mente enriquecido nas bibliotecas de SsRNA de protoplasto de B. cine- rea, embora ambos sejam gerados a partir do mesmo precursor de MRNA de TAS1c e pertençam aos 20 sSsRNAs mais abundantes no total de bibliotecas de SRNA (Tabela Suplementar 2 e 3). Além disso, os SRNAs de Arabidopsis que derivaram de uma região intergênica, como IGN-siR1, mas não IGN-siR107, foram altamente enriquecidos nas cé- lulas de B. cinerea, embora o IGN-siR107 ocorra em um nível mais alto no total de bibliotecas de SsRNA (Tabela Suplementar 2 e 3). Estes resultados de sequenciamento profunda foram validados por análise de SsRNA RT-PCR de duas repetições biológicas adicionais (FIG. 1B). Estes resultados sugerem que os SRNAs endógenos do hospedeiro são entregues seletivamente nas células fúngicas e que não são sim- plesmente os SsRNAs mais abundantes que se difundem na célula fún-
gica.
[00116] As vesículas extracelulares (EVs) estão implicadas nas co- municações de sRNA entre células e no transporte sistêmico em sis- temas animais (Colombo, M. et al., Annu Rev Cell Dev Biol 30, 255- 289, doi:10.1146/annurev-cellbio-101512-122326 (2014)). Para testar se a secreção de EV é o mecanismo pelo qual os hospedeiros da plan- ta transferem sSRNAs para as células de B. cinerea, realizamos o perfil de sSsRNAs de EVs isoladas dos fluidos apoplásticos das folhas de Ara- bidopsis usando métodos de filtração e ultracentrifugação diferencial. Em ambas as réplicas biológicas analisadas, o TAS2-siR453 e o TAS1c-siR483 foram acumulados em níveis muito mais altos nas EVs do que o TAS2-siR710 ou o TAS c-siR585 (Tabela Suplementar 2 e 4), consistente com os resultados obtidos na B. cinerea amostras de protoplastos. miRNAs, como miR166, que eram abundantes nas amostras de protoplastos totais e de B. cinerea também foram abun- dantes nas EVs. Por outro lado, os SRNAs, como o miR822, que eram abundantes nas populações totais de SRNA, mas abaixo dos níveis de detecção nas amostras de protoplasto de B. cinerea, foram acumula- dos para um nível muito baixo nas EVs (Tabela Suplementar 2). Além disso, os SRNAs que derivaram da região intergênica, como o IGN- siR1, acumularam-se em um nível muito mais alto nas EVs do que o IGN-siR107 (Tabela Suplementar 2 e 4), indicando uma correlação en- tre as EVs e as amostras de protoplasto de B. cinerea. Estes resulta- dos de sequenciamento profundo foram validados por análise de SRNA RT-PCR de duas repetições biológicas adicionais (FIG. 1C). En- tre os SRNAs de Arabidopsis que foram transferidos para protoplastos de B. cinerea, 36 estavam presentes nas bibliotecas EV, mas 12 SRNAs não estavam (Tabela Suplementar 4). Esses últimos SRNAs podem utilizar uma via independente de EV para entrar nas células fúngicas, ou ainda são dependentes de EV, mas logo abaixo do nível de detecção na fração EV. Para confirmar que esses sSRNAs estão de fato dentro das EVs, em vez de simplesmente se ligarem à superfície, ensaios de proteção de nucleases foram realizados. TAS 1c-siR483 e TAS2-siR453, IGN-siR1 e miRNA1I66 foram protegidos da digestão com nuclease, menos Triton-X-100 que foi adicionado para romper a membrana da EV (FIG. 1D). Esses achados sustentam que as células vegetais utilizam EVs secretadas para transferir SRNAs para células fúngicas e que a secreção é provavelmente mediada pela inclusão se- letiva de SRNAs nas EVs.
[00117] EVs animais são classificados em diferentes categorias, como exossomos, microvesículas desprotegidas e corpos apoptóticos, com base em seus marcadores e origens proteicos específicos (Ma- thivanan, S. et al., J. Proteomics 73, 1907-1920, doi:10.1016/j.jprot.
2010.06.006 (2010)), enquanto as EVs da planta não foram bem defi- nidos. Como os exossomos demonstraram desempenhar um papel importante na transferência de miRNAs entre células animais dentro de um organismo (Colombo, M. et al., Annu Rev Cell Dev Biol 30, 255- 289, doi:10.1146/annurev-cellbio-101512-122326 (2014)) ou mesmo entre organismos em interação, desde parasitas de nematóides até células hospedeiras de mamíferos (Buck, AH et al., Nature Communi- cations 5, 5488, doi:10.1038/ncomms6488 (2014)), hipotetizamos que as plantas também podem empregar vesículas tipo exosoma (ELVs) para transferir SRNAs. As tetrasespaninas, como CD63, CD81 e CD9, são pequenas proteínas de membrana que servem como marcadores exossômicos específicos em células de mamíferos (Mathivanan, S. et al., J. Proteomics 73, 1907-1920, doi:10.1016/j.jprot.2010.06. 006 (2010)). Arabidopsis possui 17 genes semelhantes a TETRASPANINA (TET) (Boavida, LC et al., Plant Physiol 163, 696-712, doi:10.1104/ Pp.113.216598 (2013)), mas a análise de expressão revela que ape- nas dois genes estreitamente relacionados com tetraspanina, TET8 e
TET9 (Boavida, LC et al., Plant Physiol 163, 696-712, doi:10.1104/ pp.113.216598 (2013); Wang, F. et a/., Plant Physiol 169, 2200-2214, doi:10.1104/pp.15.01310 (2015)) são altamente induzidas por infecção por B. cinerea (Ferrari, S. et al.,, Plant Physiol 144, 367-379, doi:10.1104/pp.107.095596 (2007)) (FIG. 2A), sugerindo sua função potencial nas respostas de defesa. A estrutura e a topologia de TET8 e TET9 são mais semelhantes ao marcador de exossomo CD63 em animais (Boavida, LC et al., Plant Physiol 163, 696-712, doi:10.1104/ PPp.113.216598 (2013)) (FIGURAS 8A- 8C).
[00118] Como oTET8 é expresso em um nível muito superior ao TET9 nas folhas e nos sítios de infecção por fungos (Ferrari, S. et al., Plant Physiol 144, 367-379, doi:10.1104/pp.107.095596 (2007)), foca- mos principalmente no TET8 para análises subsequentes. A coloração curta pelo corante lipofílico FM4-64 permite a visualização de estrutu- ras de membrana, como membranas celulares fúngicas e EVs que ocorrem fora da célula vegetal (Nielsen, ME et al., Proc Natl Acad Sci USA 109, 11443-11448, doi:10.1073/pnas.1117596109 (2012)) Em plantas transgênicas que expressam TET8-GFP sob seu promotor na- tivo, houve um acúmulo de TET8-GFP nos sítios de infecção por fun- gos que eram coincidentes com os padrões de coloração de FM4-64 (FIG. 2B). Essas observações sugerem que o TET8 está envolvido nas respostas do hospedeiro à infecção por fungos e que as estrutu- ras/vesículas da membrana associadas ao TET8 provavelmente serão secretadas.
[00119] Para confirmar que as vesículas associadas ao TET8 são secretadas, as vesículas apoplásticas extracelulares de plantas trans- gênicas que expressam TET8-GFP foram isoladas. Numerosas EVs fluorescentes marcados com TET8-GFP (FIG. 2C) foram observados. Consistente com este resultado, uma imunotransferência para GFP revelou a presença de TET8-GFP exclusivamente nos ELVs derivados de plantas TET8-GFP (FIG. 2D). Assim, o TET8 serve como um bom marcador para ELVs de plantas.
[00120] Para testar se os ELVs das plantas podem ser absorvidos por células fúngicas, isolamos as EVs de fluidos de apoplastos con- tendo ELVs marcados com TET8-GFP e os incubamos com células de B. cinerea in vitro. Os sinais de GFP foram claramente observados nas células fúngicas dentro de 2 horas (FIG. 2E). Após o tratamento com 1% de Triton-X-100, uma etapa processual que rompe todos as EVs, mas não as células fúngicas, o sinal GFP ainda é mantido nas células fúngicas (FIG. 2E), indicando que as células B. cinerea são capazes de absorver os ELVs secretados. Consistente com a ocorrência de captação de ELV pelo patógeno fúngico, TAS1c-siR483, TAS2-siR453 e miRNA166 foram detectados dentro das células fúngicas (FIG. 2F). Estes resultados confirmam a conclusão de que os ELVs hospedeiros associados ao TET8 são importantes para a transferência do SRNA do hospedeiro para as células fúngicas.
[00121] As proteínas da tetraspanina geralmente interagem umas com as outras e formam microdomínios de membrana específicos es- senciais para suas funções celulares (Andreu, Z. e Yanez-Mo, M., Frontiers in immunology 5, 442, doi:10.3389/fimmu.2014.00442 ( 2014)). Como o TET9 é o único outro gene de tetraspanina de Arabi- dopsis que é induzido pela infecção por B. cinerea (Ferrari, S. et al., Plant Physiol 144, 367-379, doi:10.1104/pp.107.095596 (2007)) (FIG. 2A), examinamos se o TET8 e o TET9 interagem entre si e funcionam juntos em resposta ao ataque de fungos. De fato, a proteína TET8- CFP foi colocalizada com TET9-YFP nos sítios de infecção fúngica (FIG. 3A). A interação de TET8 com TET9 foi ainda confirmada por coimunoprecipitação recíproca (Co-IP) in vivo (FIGURAS 3B e 3C). Para obter informações sobre o papel fisiológico do TET8 e TET9, de- safiamos os mutantes com perda de função com B. cinerea. O mutante único tet8 apresentou suscetibilidade aumentada à infecção por fungos em comparação com o tipo selvagem (FIG. 3D). O fenótipo suscetível aprimorado foi potencializado no mutante duplo quando o TET9 foi derrubado no pano de fundo do mutante tet8 (FIG. 3D e FIG. 9). Além disso, os níveis de SRNAs hospedeiros transferidos para as células fúngicas foram reduzidos no tet8 e no duplo mutante tet8tet9, mesmo que o nível celular total desses SsRNAs não tenha sido alterado (FIG. 3E). Estes resultados sugerem que os ELVs associados a TET8 e TET9 são importantes para a transferência de SsSRNA do hospedeiro para as células fúngicas e contribuem para as respostas imunes das plantas contra a infecção fúngica.
[00122] — Para determinar se os SRNAs hospedeiros transferidos con- tribuem para a imunidade do hospedeiro e são funcionais nas células fúngicas, primeiro realizamos um teste de infecção no mutante triplo dcl2/3/4 da biogênese do siRNA de Arabidopsis que mostrou uma pro- dução significativamente reduzida de tasiRNA e siRNA heterocromáti- co (Henderson, IR et al., Nat Genet 38, 721-725, doi:10.1038/ng1804 (2006); Gasciolli, V. et al., Curr Biol 15, 1494-1500, doi:10.1016/ j.cub.2005.07.024 (2005)). A suscetibilidade aumentada a B. cinerea foi observada no mutante triplo em comparação com o tipo selvagem (FIG. 4A), sugerindo que esses tasiRNAs hospedeiros transferidos e SIRNAs heterocromáticos provavelmente suprimem a virulência fúngi- ca pelos genes essenciais dos fungos alvo. Foi descoberto que pelo menos dezessete dos SRNAs de Arabidopsis transferidos previram genes-alvo em B. cinerea (Tabela Suplementar 1 e 5). A análise de enriquecimento da ontologia genética desses alvos fúngicos revelou um forte viés em relação às vias de transporte da vesícula (9 de 45 genes) (FIG. 10), sugerindo que o tráfego de vesículas é importante para a virulência fúngica. Realizamos análise funcional em TAS1c- siR483 e TAS2-siR453 e o siRNA mais abundante da região intergêni-
ca IGN-siR1 nas bibliotecas de SRNA de protoplasto de B. cinerea, porque eles mostraram transporte seletivo claro para as células fúngi- cas (FIG. 1B e 1C). TAS1c-siR483 e TAS2-siR453 têm como alvo dois genes de B. cinerea (BC1G 10728 e BC1G 10508) e um gene (BC1T 08464), respectivamente, todos envolvidos nas vias de trans- porte da vesícula. BC1G 10728 codifica uma proteína vacuolar que classifica 51 (Bc-Vps51), que é o homólogo da proteína retrógrada as- sociada a Golgi (GARP)/Vps51 em leveduras e a subunidade Vps51 em mamíferos (Bonifacino, JS e Hierro, A., Trends Cell Biol 21, 159- 167, doi:10.1016/).tcb.2010.11.003 (2011); Luo, L. et al., Mol Biol Cell 22, 2564-2578, doi:10.1091/mbc.E10-06-0493 (2011); Liu, Y. et al. PLoS Pathog 7, e1002305, doi:10.1371/journal.ppat.1002305 (2011)). O VPS 51 desempenha um papel fundamental na virulência de Candi- da albicans, um patógeno fúngico humano Liu, Y. et al., PLoS Pathog 7, 61002305, doi:10.1371/journal.ppat.1002305 (2011)). BC1IG 10508 codifica a subunidade grande do complexo de dinactina (DCTN) Bc- DCTN1, que é o homólogo de Nip 100p em leveduras e p150% em mamíferos (Steinmetz, M. O. e Akxhmanova, A., Trends Biochem Sci 33, 535-545, doi:10.1016/j.tibs.2008.08.006 (2008)). DCTN se liga à cinesina || e à dinina e coordena o tráfego de (Dell, K. R., The Journal of cell biology 160, 291-293, doi:10.1083/jcb.200301040 (2003); Schroer, T. A., Annu Rev Cell Dev Biol 20, 759-779, doi:10.1146/annurev.cellbio.
20.012103.094623 (2004)). BC1T 08464 codifica um supressor de fosfo- inossitida fosfatase semelhante à actina (SAC1) que desempenha um papel importante no tráfego de membrana secretora (Foti, M. et al., Mol Biol Cell 12, 2396-2411 (2001); Guo, S. et al., J Biol Chem 274, 12990-12995 (1999)). IGN-siR1 tem como alvo BC1G 05327, que co- difica a piruvato carboxilase (Bc-PC) que catalisa a formação de oxa- loacetato (OAA), um intermediário importante no ciclo do ácido tricar- boxílico (Plassard, C. and Fransson, P., Fungal Biol Rev 23, 30-39,
doi:10.1016/j.fbr.2009.08.002 (2009)). OAA é um precursor importante de ácidos orgânicos em fungos, como oxalato (Plassard, C. and Frans- son, P., Fungal Biol Rev 23, 30-39, doi:10.1016/j.fbr.2009.08.002 (2009)), e causa sintomas de murcha em plantas infectadas (van Kan, J. A. L., Trends in Plant Science 11, 247-253, doi:10.1016/j.tplants.2006.03.005 (2006)). De fato, esses genes-alvo previstos foram de fato desregula- dos após a infecção (FIG. 11A). A expressão relativa desses genes- alvo previstos para B. cinerea foi claramente elevada em B. cinerea coletada nos sítios de infecção do mutante triplo dcl2/3/4 que reduziu largamente os níveis de tasiRNAs e siRNAs (FIG. 4B e FIG. 11B), su- portando silenciamento específico de genes de fungos por SsRNAs de plantas transferidas.
[00123] Para determinar o papel desses genes-alvo nas vias de trá- fego de vesículas é importante para a patogenicidade de B. cinerea, tentamos gerar cepas mutantes que deletaram esses genes-alvo usando recombinação homóloga. Geramos cepas mutantes de Vps51A, dctn1A e sac1A (FIG. 12A). As cepas mutantes vps51A e detn1A mostraram virulência reduzida em Arabidopsis (FIG. 4C) e crescimento reduzido nos meios (FIG. 12B). A cepa mutante sac1A mostrou virulência reduzida em Arabidopsis (FIG. 4C), mas nenhuma redução óbvia no crescimento no meio (FIG. 12B). Assim, o estudo funcional dos SsRNAs hospedeiros transferidos levou à identificação de uma importante via de virulência essencial para a infecção fúngica - a via de tráfego de fungos.
[00124] Para confirmar ainda o efeito positivo dos SRNAs hospedei- ros transferidos na imunidade da planta hospedeira, linhagens de Ara- bidopsis transgênicas geradas que superexpressam TAS 1c-siR483 ou TAS2-siR453 (FIG. 13A). Ambas as linhagens de superexpressão exi- biram suscetibilidade reduzida a B. cinerea (FIG. 13B). Consistente com os resultados do teste do patógeno, foi observada expressão re-
duzida de genes-alvo de fungos em linhagens de superexpressão in- fectadas por B. cinerea (FIG. 13C). Essas descobertas suportam for- temente que esses sSRNAs hospedeiros transferidos contribuam para a imunidade do hospedeiro.
[00125] Neste estudo, relatamos que os ELVs de plantas desempe- nham um papel essencial no tráfego SRNA de reino entre o Arabi- dopsis hospedeiro da planta e o patógeno fúngico B. cinerea. Arabi- dopsis desenvolveu uma via de exportação de SsRNA mediada por ELV para entregar seus SRNAs endógenos em células de B. cinerea para silenciar genes de fungos envolvidos no tráfego de vesículas e reduzir a virulência de fungos. Embora esse mecanismo de tráfego de SRNA de reino cruzado não tenha permitido a Arabidopsis superar comple- tamente a infecção por B. cinerea, tornou Arabidopsis um dos hospe- deiros menos favoritos de B. cinerea, pois muitas outras plantas são mais suscetíveis a B. cinerea do que Arabidopsis. Estudos funcionais de sSsRNAs móveis do hospedeiro ajudarão a identificar novas vias de virulência e genes nos patógenos e pragas em interação. Além disso, uma vez que SRNAs direcionados a Bc-DCL derivados de transgene foram detectados em frações de EV isoladas de Arabidopsis transgê- nica que expressam o construto de RNAi Bc-DCL (Wang, M. et al., Na- ture plants 2, 16151, doi:10.1038/nplants.2016.151 (2016)) (FIGURAS 14A e 14B), parece que os sSRNAs derivados de transgene também são entregues por vias de tráfego mediadas por ELV. A descoberta de mecanismos de tráfego de SsRNA cruzados mediados por exossomos envolvidos na imunidade de plantas pode ser útil no desenvolvimento de estratégias eficazes para a entrega de RNA protegido por membra- na com o objetivo de melhorar o controle de doenças pré e pós- colheita em espécies de culturas. Métodos e Materiais
[00126] Os materiais vegetais utilizados neste estudo incluem o ecótipo Col-O de Arabidopsis thaliana e Nicotiana benthamiana. Os mutantes Arabidopsis tet8 (Salk 136039), dcl2-1dcl3-1dcl4-2 (dcl2/3/4) e as linhagens TET8pro:: TET8-GFP foram descritos anteriormente (Bo- avida, LC et al, Plant Physiol 163, 696-712, doi:10.1104/pp.
113.216598 (2013); Henderson, |. R. et a/., Nat Genet 38, 721-725, doi:10.1038/ng1804 (2006)). Para uma descrição detalhada das linha- gens transgênicas, vide Métodos online.
[00127] Isolar células fúngicas puras das folhas das plantas in- fectadas. Os protoplastos de B. cinerea foram purificados a partir de folhas infectadas de Arabidopsis usando um método que tira proveito das diferenças entre os componentes da parede celular de plantas e fungos (Cosgrove, DJ, Nature reviews. Molecular cell biology 6, 850- 861, doi:10.1038/nrm1746 (2005); Bowman, S.M. e Free, S.J., Bi- oessays 28, 799-808, doi:10.1002/bies.20441 (2006)). Um protocolo detalhado foi incluído nos Métodos online.
[00128] Isolamento de vesículas extracelulares. Vesículas extra- celulares de plantas foram isoladas de fluidos apoplásticos e purifica- das por ultracentrifugação diferencial (Rutter, B. e Innes, R.W., Plant Physiol, doi:10.1104/pp.16.01253 (2016)). Para uma descrição deta- lhada, vide Métodos.
[00129] Análise de dados Illumina HiSeq de bibliotecas de SRNA. As sequências foram mapeadas para os genomas de Arabi- dopsis (TAIR1IO) ou B. cinerea BO5.10 e apenas as leituras que cor- respondem perfeitamente a cada genoma serão usadas para análises posteriores. Detalhes da clonagem de sRNA e análise de dados HiSeq da ilumina são fornecidos em Métodos.
[00130] Materiais. Os materiais vegetais utilizados neste estudo incluem o ecótipo Arabidopsis thaliana Col-O0 e Nicotiana benthamiana. Os mutantes Arabidopsis tetê (Salk 136039), dcl2-1dcl3-1dcl4-2 (dcl2/3/4) e as linhagens TET8pro::TET8-GFP foram descritos anteri-
ormente (Boavida, LC et al., Plant Physiol, 163, 696-712, doi:10.1104/ pp.113.216598 (2013); Henderson, 1.R. et al., Nat Genet, 38, 721-725, doi:10.1038/ng1804 (2006)). Os construtos TET8 e TET9 marcados com CFP ou YFP foram gerados nos vetores binários pEarleyGate. Para gerar o construto para as linhagens de superexpressão de sSRNA, o precursor de sRNA foi clonado usando uma estrutura principal de miR319 (Schwab, R. et al., Plant Cell, 18, 1121-1133, doi:10.1105/ tpc.105.039834 (2006)) em um vetor de destino pEarleyGate usando LR clonase |1l (Invitrogen). As plantas de Arabidopsis foram transfor- madas utilizando o método de imersão floral com a cepa GV3101 de Agrobacterium tumefaciens transportando os vetores clonados. B. ci- nerea utilizada foi a cepa BO5.10. Para gerar mutantes de nocaute ge- nético alvo de B. cinerea, usamos um método baseado em recombina- ção homóloga para eliminar os genes de B. cinerea descritos anteri- ormente (Levis, C., Fortini, D. & Brygoo, Y., Current genetic, 32, 157- 162 (1997)). Todos os iniciadores estão listados na Tabela Suplemen- tar 6.
[00131] Ensaios de patógenos fúngicos. Os esporos de B. cine- rea foram diluídos em tampão de caldo de sabouraud maltose a 1% até uma concentração final de 10º esporos/ml para inoculação por gota de Arabidopsis com quatro semanas de idade (Wang, M. et al., Nature plants 2, 16151, doi:10.1038/nplants.2016.151 (2016)). Os tamanhos das lesões dos materiais vegetais infectados por B. cinerea foram cal- culados usando o software ImageJ. O conteúdo relativo de DNA fúngi- co (biomassa fúngica) foi quantificado como descrito anteriormente (Wang, M. et al., Nature plants 2, 16151, doi:10.1038/nplants.2016.151 (2016)).
[00132] Isolar células fúngicas puras das folhas das plantas in- fectadas. Os protoplastos de B. cinerea foram purificados a partir de folhas infectadas de Arabidopsis usando um método que tira proveito das diferenças entre os componentes da parede celular de plantas e fungos (Cosgrove, DJ, Nature reviews. Molecular cell biology, 6, 850- 861, doi:10.1038/nrm1746 (2005); Bowman, SM & Free, SJ, Bi- oessays, 28, 799-808, doi:10.1002/bies.20441 (2006)). Após lavagem com água esterilizada para remover esporos não germinados, as fo- lhas foram homogeneizadas por 1 minuto em tampão de isolamento (tampão MOPS a 0,02 M pH 7,2, sacarose 0,2 M) usando um mistura- dor. O homogenato foi centrifugado (1.500 g, 10 minutos) e os péletes foram ressuspensos em 1% de Triton X-100 e depois lavados 3 vezes com tampão de isolamento para remover o conteúdo da planta. As pastilhas foram então processadas para digestão da parede celular da planta, como descrito anteriormente (Yoo, S.D., Cho, YH & Sheen, J., Nature protocols, 2, 1565-1572, doi:10.1038/nprot.2007.199 (2007)), seguido por ressuspensão em 1% de Triton X-100 e lavagem em tam- pão de isolamento 5 vezes para remover o conteúdo da planta. Os protoplastos fúngicos foram isolados por incubação por 2-3 horas em solução de enzima de lisado (enzima de lisado a 2% de Trichoderma harzianum (Sigma) em KCI 0,6 M, CaCl2 a 50 mM). Os protoplastos fúngicos foram filtrados através de uma malha de náilon de 40 um e suavemente revestidos com uma solução de sacarose a 30% para formar uma interface distinta com a suspensão do tecido fúngico e centrifugados a 4 ºC por 10 minutos a 5.000 rpm. Os protoplastos fún- gicos foram coletados da interface da camada de sacarose e da ca- mada de suspensão do tecido. A sacarose foi removida da solução de protoplastos purificada diluindo cinco a dez vezes com tampão SM (sorbitol 1,2 M e MES 0,02 M, pH 6,0) e centrifugando (5.000 rpm por minutos) em um rotor de cabeça angular. O pélete foi ressuspenso em Reagente de Trizol (Invitrogen) para extração de RNA.
[00133] Isolamento de vesícula extracelular. Vesículas extracelu- lares de plantas foram isoladas de fluidos apoplásticos e purificadas por ultracentrifugação (Rutter, B. & Innes, R. W., Plant Physiol, doi:10.1104/pp.16.01253 (2016)). Os fluidos apoplásticos foram extraí- dos das folhas de Arabidopsis por infiltração a vácuo com tampão de infiltração (MES 20 mM, CaCl2z a 2 mM, NaCl a 0,1 M, pH 6,0), depois com baixa centrifugação a 900 g para coletar o infiltrado. Antes da pu- rificação das vesículas, os detritos celulares foram removidos girando a 2.000 g por 30 minutos e filtrando os fluidos apoplásticos através de um filtro de 0,45 um e depois girando a 10.000 g por 30 minutos. Após a remoção de grandes detritos celulares e grandes vesículas por cen- trifugações sucessivas a velocidades crescentes, o pélete de 100.000 g ficou conhecido como (Thery, C. et al., Current protocols in cell bio- logy / editorial board, Juan S. Bonifacino ... [et al.] Capítulo 3, Unidade 3 22, doi:10.1002/0471143030.cb0322s30 (2006)). Assim, o sobrena- dante final foi centrifugado a 100.000 g por 1 hora e o material peleti- zado é lavado com tampão de infiltração filtrado a 100.000 g por 1 ho- ra para coletar vesículas extracelulares.
[00134] Clonagem de sRNA e análise de dados HiSeq de ilumi- na. As bibliotecas de SsRNA foram feitas usando Kits de Prep de Amos- tras de RNA Pequeno Illumina TruSegO e sequenciadas em um siste- ma Illumina HiSeg. Os conjuntos de dados de sequência das bibliote- cas de SRNA (PRJNA407577) foram depositados no banco de dados NCBIL. As leituras de sequenciamento do sSRNA foram pré-processadas com o procedimento de controle de qualidade e ajuste do adaptador usando o fastxtoolkit (http://hnannonlab.cshl.edu/fastx toolkit/ index.html). As sequências foram mapeadas para os genomas de Arabidopsis (TAIR10) ou B. cinerea BO5.10 e apenas as leituras que correspondi- am perfeitamente a cada genoma foram usadas para análises posteri- ores. Após a remoção das leituras mapeadas de tRNA, rRNA, snoRNA e SnRNA, os números de leitura de SRNA em cada biblioteca foram normalizados pelo número total de leituras de SRNA, resultando em leituras por milhão (RPM). Os sRNAs selecionados para análise foram detectados em ambas as repetições biológicas. Para bibliotecas de células B. cinerea purificadas, usando 10 leituras normalizadas por mi- lhão (RPM) de sSRNA como ponto de corte, e os SRNAs selecionados para análise tiveram números de leitura 10 vezes maiores que as bibli- otecas de controle. Para o total de bibliotecas de SsRNA de Arabi- dopsis, o uso de 10 SsSRNA de RPM normalizado é um ponto de corte. Para bibliotecas de vesículas extracelulares de Arabidopsis, o uso de 40 sSRNA de RPM normalizado é um ponto de corte. A predição do ge- ne-alvo de B. cinerea para os SRNAs de Arabidopsis foi realizada co- mo descrito anteriormente (Weiberg, A. et al., Science, 342, 118-123, doi:10.1126/science.1239705 (2013)). A lista de SsRNAs é fornecida na Tabela Suplementar 1-5.
[00135] sRNA e análises de expressão gênica. O RNA foi extraí- do usando o método Trizol. O RNA purificado foi tratado com DNase | e o cDNA do primeiro filamento foi sintetizado a partir do kit Supers- cript Ill (Invitrogen, Carlsbad, CA). A RT-PCR de sRNA foi realizada como descrito anteriormente (Weiberg, A. et al., Science, 342, 118- 123, doi:10.1126/science .1239705 (2013)). A PCR quantitativa foi rea- lizada com o sistema de detecção de PCR em tempo real CFX384 (Bio-Rad) usando a mistura Verde SYBR (Bio-Rad) (Iniciadores são descritos na Tabela Complementar 6). Ao determinar se os SsRNAs es- tavam protegidos dentro das vesículas, as EVs receberam 10 U de tra- tamentos de nuclease microcócica (Thermo Fisher) com ou sem Tri- ton-X-100. Para o tratamento com Triton-X-100, as vesículas foram incubadas com 1% de Triton-X-100 em gelo por 30 minutos antes dos tratamentos com nuclease. O tratamento com nuclease foi realizado a 37 ºC por 15 minutos seguido por isolamento de RNA. A expressão da captação de SRNAs por células de B. cinerea foi determinada por SRNA RT-PCR baseado em ligação, descrito anteriormente (Wang, M.
et al., RNA biology, 1-8, doi:10.1080/15476286.2017.1291112 (2017)). Todas as sequências de iniciadores estão listadas na Tabela Suple- mentar 6.
[00136] Análises de microscopia confocal. Seguindo o protocolo de visualização de membranas e vesículas extracelulares em plantas (Nielsen, ME et al., Proc Natl Acad Sci U.S., 109, 11443-11448, doi: 10.1073/pnas.1117596109 (2012)), sai com ou sem infecção por B. cinerea foram infiltradas em seringa com 10 uM de FM4-64, 30 minu- tos antes do exame. As amostras foram examinadas usando uma lente de imersão ou mergulhadas em água de 40x montada em um micros- cópio confocal Leica TOS SP5 (Leica Microsystems). Para visualiza- ção da fluorescência de GFP associada a ELV em frações de ultracen- trífuga, as pastilhas suspensas foram examinadas usando uma lente de imersão ou mergulhadas em água de 40x montada em um micros- cópio confocal Leica TOS SP5. Para visualização da captação de ELV, os ELVs purificados foram misturados com B. cinerea germinada a 37 ºC por 2 horas após análises confocais. Para o tratamento com Triton- X-100, as células fúngicas incubadas foram lavadas com 1% de Triton- X-100 por 15 minutos para remover associações não específicas. As amostras foram examinadas em uma imersão em água de 40x ou len- te de imersão montada em um microscópio confocal Leica TCS SP5. Tabela Suplementar 1
[00137] Este arquivo contém uma lista de SRNAs endógenos de Arabidopsis que estão presentes nas bibliotecas de SRNA de proto- plastos purificados de B. cinerea do tecido infectado. As leituras nor- malizadas desses SRNAs no EVs e bibliotecas de sSsRNA totais são comparadas. Tabela Suplementar 2
[00138] Esta tabela contém a lista dos 100 principais SRNAs de Arabidopsis que estão presentes nas bibliotecas de sSsRNA totais. As leituras normalizadas desses SRNAs nas bibliotecas de protoplasto de B. cinerea e SRNA de EVs são comparadas. Tabela Suplementar 3
[00139] Esta tabela contém a lista de SsRNA nas bibliotecas de SRNA de protoplasto de B. cinerea purificado que não estão presentes nas 100 principais bibliotecas de SRNA. As leituras normalizadas des- ses SRNAs nas bibliotecas de protoplasto de B. cinerea e SRNA de EVs são comparadas. Tabela Suplementar 4
[00140] Este arquivo contém uma lista de SsRNAs de Arabidopsis presentes em EVs. As leituras normalizadas desses SRNAs no proto- plasto de B. cinerea e nas bibliotecas de SsRNA totais são comparadas. Tabela Suplementar 5
[00141] Estatabela contém a lista de genes de B. cinerea segmen- tados por SsSRNAs endógenos de Arabidopsis que estão presentes nas bibliotecas de SsRNA de protoplastos purificados de B. cinerea.
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Exemplo 2 - Captação de RNA nu e captação de RNA mediada por vesícula
[00142] Muitos fungos podem absorver RNAs nus do ambiente, o que torna o silenciamento de genes induzido por spray possível para controlar esses patógenos fúngicos (FIG. 15). Além disso, Phytophtho- ra infestans, o patógeno oomyceto da praga tardia da batata, que cau- sou fome na Irlanda nos anos 1800, também pode pegar RNAs nus do meio ambiente. Como mostrado nas FIGURAS 16A e 16B, diferentes tipos de células têm eficiência de captação diferente.
[00143] Além disso, o tratamento com vesículas extracelulares iso- ladas de Arabidopsis suprimiu com eficiência os sintomas da doença do mofo cinza causados por B. cinerea. Como mostrado nas FIGURAS 17A-17C, vesículas extracelulares (EVs) extraídas das folhas de Ara- bidopsis infectadas com B. cinerea foram misturadas com esporos de B. cinerea e jogadas nas folhas de tomate (lado direito da folha). Espo- ros não tratados usados como controle (lado esquerdo da folha). As EVs foram quantificados pela concentração de proteína dos VEs. EVs de 5 ng/ul, 10 ng/ul e 100 ng/ul apresentaram forte inibição nos sinto- mas da doença do mofo cinza, e a alta concentração de tratamento de EV (100 ng/ul) pode até suprimir o tamanho da lesão da doença (infec- tada sem EVs) do outro lado das folhas, sugerindo que as EVs podem se mover por longas distâncias dentro do tecido da planta.
[00144] Para confirmar que EVs externas podem trafegar nas fo- lhas, espalhamos apenas os esporos de B. cinerea no lado esquerdo das folhas de Arabidopsis e apenas as EVs de 100 ng/ul no lado direi- to. Foi descoberto que as EVs (100ng/ul) podem reduzir claramente o tamanho da lesão no outro lado das folhas (FIGURAS 17D e 17E). Es- ses resultados sustentam que as EVs podem viajar dentro do tecido da planta, o que aumenta a capacidade de proteção da planta. Exemplo 3 - Captação de RNA mediada por lipossomas
[00145] Para investigar se os fungos podem absorver lipossomas contendo RNA do ambiente, Bc-DCL1/2-d0sRNAs marcados com fluo- resceína direcionado aos genes Bc-DCL1/2 foram sintetizados e os RNAs encapsulados em lipossomas. Os lipossomas foram misturados com células de B. cinerea e os RNAs fluorescentes foram acumulados dentro das células de B. cinerea dentro de 3 h, sugerindo que os lipos- somas podem entregar eficientemente o dsRNA nas células fúngicas. Os sinais de fluorescência permaneceram visíveis nas células de B. cinerea após a lavagem com triton X-100 e tratamento com MNase, confirmando que os RNAs marcados estavam dentro das células fún- gicas. Sinais de fluorescência foram observados em protoplastos de B. cinerea após o tratamento com MNase. Os dsRNAs marcados com lipossomas com fluoresceína foram aplicados nos esporos de B. cine- rea germinados e os protoplastos foram isolados após a cultura por 3 h. Os sinais fluorescentes foram detectados nos protoplastos fúngicos após o tratamento com enzima MNase. Como mostrado na FIG. 18, lipossomas contendo Bc-DCL1/2-dsRNAs marcados com fluoresceína foram absorvidos eficientemente por células de B. cinerea.
Exemplo 4 - Estabilização de RNAs pelos lipossomas
[00146] Os lipossomas contendo dsRNA foram pulverizados primei- ro nas pétalas de rosa e depois desafiados com B. cinerea aos 0, 5,8 e 15 dias após o tratamento com spray de lipossomas. H2O, dsRNAs nus e lipossomas vazios foram utilizados como controle. As fotos fo- ram tiradas 2 dias após a inoculação fúngica (dpi). Foi descoberto que OS lipossomas-dsRNAs permaneceram eficazes por até 15 dias após o tratamento com RNA, enquanto os RNAs nus foram eficazes por até 5 dias. Assim, os lipossomas fornecem uma proteção mais longa do que o dsRNA nu contra a infecção por B. cinerea. O encapsulamento de RNAs com lipossomas protege e estabiliza os RNAs e estende seu período efetivo nas plantas do que os RNAs nus. A FIG. 19 mostra que lipossomas contendo RNAs de filamento duplo e/ou pequenos RNAs foram absorvidos eficientemente por células fúngicas. Os lipossomas aplicados externamente que transportam Bc-DCL1/2-dsRNAs perma- neceram eficazes nas plantas por duas semanas para inibir a virulên- cia do patógeno nas pétalas das flores. A FIG. 20 mostra ainda que dAsRNAs protegidos por lipossomas que direcionam os genes da via de tráfego VPS51, DCTN1 e SAC1 foram eficazes por até 15 dias. Exemplo 5 - Estabilização de lipossomas de RNAs
[00147] dsRNA de PiDCL1 marcado com fluorescência foi aplicado em cistos de P. infestans e sinais fluorescentes foram detectados nas células de P. infestans 12 horas após a cultura em água. Como mos- trado na FIG. 21A, os sinais de fluorescência permaneceram visíveis nas células de P. infestans após o tratamento com MNase. Além disso, o dsRNA de PiDCL1 marcado com fluoresceína foi compactado em lipossoma e aplicado em cistos de P. infestans. Os sinais fluorescen- tes foram detectados nas células de P. infestans 12 horas após a cul- tura em água. Como mostrado na FIG. 21B, os sinais de fluorescência permaneceram visíveis nas células de P. infestans após o tratamento com Triton. Esta experiência mostra que os cistos de Phytophthora infestans absorvem dsRNAs nus e dsRNAs protegidos por lipossomas. Exemplo 6 - Sistemas de entrega de lipossomas catiônicos
[00148] O método 3 do sistema de entrega de lipossomas catiôni- cos para entrega de siRNA é usado em células HeLa. As células HeLa são transfectadas com siPIk1i usando: lipossomas DOTAP:Chol mistu- rados com sIiRNA; lipossomas DOTAP:Chol:DSPE-PEG2000 (5% em mol) misturados com siRNA; ou lipossomas DOTAP:Chol:DSPE- PEG2000 (5% em mol) hidratados com siRNA usando o protocolo de encapsulamento de íons. Os complexos lipossoma/siRNA são prepa- rados em N/P 2:1, 4:1 e 6:1 com uma concentração final de siRNA de 50 nM. A viabilidade celular é avaliada pelo ensaio MTT 48 h após a transferência (Zou et al., Cancer Gene Ther. 7 (5): 683-96, 2000). Exemplo 7 - Método de extrusão para preparar lipossomas de sSRNA
[00149] Lipossomas de sSRNA foram criados para encapsulamento de siRNA usando o método de hidratação de filme lipídico (Podesta e Kostarelos, Methods Enzymol. 464: 343-54, 2009). DOTAP, colesterol! e DSPE-PEG2000 (2:1:0,1) foram dissolvidos em clorofórmio: metanol (4:1, v/v). Depois de misturar os lipídios, o solvente orgânico foi evapo- rado sob cobertura durante 120 min. O filme lipídico foi hidratado usando uma solução de siRNA em dH2O livre de RNase. A quantidade de siRNA usada para hidratar o filme foi calculada a partir da razão de carga (N:P) (FIG. 23A). Após hidratação a 4 ºC durante a noite, o li- possoma bruto foi extrudido por Mini-Extrusora (FIG. 23B). A extrusão de lipossomas foi realizada utilizando uma Mini-Extrusora (Avanti Polar Lipids, Alabaster, EUA). Os lipossomas foram extrudados 11 vezes através de uma membrana de policarbonato de 0,4 um.
LISTAGEM DE SEQUÊNCIA INFORMAL SEQ ID NO: 1 Botrytis cinerea, Be DTCN, BC1G 10508
INFORMAL SEQUENCE LISTING SEQ ID NO: 1 Botrytis cinerea, Be DTCN, BC1G 10508
GCAGGGGTCGGATCAACATGTCTATAAACAAACATATGTACCGGC GTTGATCTCTCCTGCAGACTGCATTTGCACTTGCTTCCCTCTTCCT CCTCCCGTTTCCTGGTCTTCTTICTACAAGCTGCAGGCGAGAGAGA TAACTTCTACGCACCTTCCATATCCCTCACCTCTTCTCTCCCCACA AGTTCGTTCATAATCCTTTCGTCCTGTTGTITTTIGTCTAGCATTACCT TGCAATTCTTAACAACGGCCGATCGTGGACATCAATCAATAAAAAG GACGACAAATCATCTTATAATTATTATCCCAAACTTTCATTGCACAA ATTTGAATTGGATACTCATTTGGCTTTATTCGGAGCGATAAACGTA GAAATTAATCGTATAGGGGCTTTTATCAGACAATCAAGAACGGTGA TTGGCTCACAGCGGTGAATTGTGAGGGGTGGTAATACAGAAAACA AATAGTATAGGGAGTATTTTTGGGTGGATTGTTACCAATGTCTACC ACAAGAATCTCAACACCGAAAAGGTCCCCCAAAAAATCGACTTTTG TCAAAACTGGAATCTTGACCACCAAATCAACGCCCAATCTCAACG CCTCCTATAATTTGGCATTACTACAAGCTTCAGGAGCTACACCCGT TCCTGCATATCCTTCCAATAACGGTCAAAGTTTTGCCCTAAATAAT CCTAGGTCGCAACCGTCTCGACAAGTCTCACTCGCTTCCCTTACC TCGAATTCACTTGCGACAATCCCGGATGCAAGCAAGAGATACCCT CTTTCTACAGTCTTTGATGAGGATATGCCAACAGTAGGCAACATGC CGCCATACACACCTGCTCGAGTTGGCGGTGGACCGGAAGAACTA GAGGTTGGTGATATAGTCGATGTGCCAGGTAACATGTATGGTATC GTCAAATTTGTTGGCAGTGTGCAAGGCAAAAAGGGTGTATTTGCT GGGGTAGAATTAAGTGAAACGTTTGCTTCGAAAGGGAAAAACAAT GGCGATGTCGAAGGAATTCAATACTTTGACACAACCATCGATGGT GCTGGGATTTITTCTTCCAGTCAACAGGGCGAAGAGACGTAGCACC CCTTCGTCGCATGATGAGTCATTTCCCCTTTCACCGGCGTCTCCA TCGATGGGCAATAGGGCTGGGAGATTAGGATCTGAATTAAATGGT CAGCCAACACCTTTGTTACCAAAATTCGGTCAATCTGTTGGTCCAG GCAGAGCGGCAAACCCATATGTCCAAAAAACACGTCCATCCATGG CTACACCTACCACCTCAAGACCGGAATCACCAGTTCGAAGAGCAG CCAATGCCAACCCATCATTAAATACACCTGCACAAAGAGTCCCATC TCGATATGCAAGCCCTGCGCAGGCAAACTTTGGACAGAGCGTTAG AGGAACACAAGATTCTAGAGATCCAAGTAAGAAAGTTGGCTACAC CCCCCGAAATGGCATGAAAACACCAATACCTCCACGAAGTGTTTC TGCACTTGGAACGGGGAATAGACCTGCACCAATGAACTCGATGAA TTTCAGTGATGAAGAGACACCTCCTGCAGAGATTGCACGTACGGC AACAAACGGAAGCGTAGGCTCAGTCTCTTCTTTCAACGCGAAATT ACGTCCAGCATCAAGATCCGCATCGCGTACAACTTCCAGGGCTAC CGACGACGAATTTGAGCGATTGAGAAGTTTGTTAGAAGATCGCGA TAGGGAAATAAAAGAACAGGCTTCTATTATAGAAGACATGGAGAAA ACTCTCAGTGAAGCACAATCGTTGATGGAGAACAATAACGAGAAC GCAAGTGGTAGACATAGTCAGGGAAGTGTGGATGACAAGGACGC AACACAGTTGAGAGCAATAATACGTGAAAAGAACGACAAAATCGC CATGCTGACTGCCGAGTTTGATCAGCATCGAGCTGATTTCAGAAG CACGATAGACACGCTCGAAATGGCCGGTGCGGAAACCGAGCGAG TGTACGACGAGCGCATGCGTGTTCTCGTAATGGAGCTCGATACAA TGCACGAGAATAGTCATGATGTAAAGCACGTTGCTGTACAACTGA AACAGCTAGAAGAGCTCGTTCAGGAGCTCGAGGAAGGTCTTGAA GATGCACGACGTGGTGAAGCCGAAGCTCGGGGAGAAGTTGAGTT CTTGCGTGGAGAGGTTGAAAGAACTCGATCTGAACTCCGCCGCG AGCGAGAGAAGACTGCCGAAGCTCTTAGCAACGCAAATTCTCCTA CGAGCGCAAGTGCGGAAACACATTCCAAAGAGATTGCTCAGAGA GATGACGAGATTCGTGGATTGAAAGCCATCATCCACTCGCTCAGC AGAGATGCCATACCTGATGGGAATTTCTCGGATCATGAGGCAACA CCAAATATTCTACGACCTGGACTAAACCGAAGTCGAACAGAAAGT GCTTCGGTTTCTGAGGAGGAGCGCCGTACTCGGGAAAAGCTAGA GCGAGAAGTGAGTGAGCTTCGTGCTCTCGTCGAAAGCAAAGACAA TAAAGAAGAACAAATGGAGCGCGAGTTGGAGGGATTGCGAAGAG GAAGTGTTAGCAATCCTACTACGCATCGTACTAGTGCCATGAGCA GCGGAACTGTGACTCAGGATAGGAATTCTCTCCAAGACAATAAGA GCACAGTTGTAAGCTGGCGAGAACGTGGTGCCTCAGATGCTCGC CGCTACAATCTGGATTCAATGCCAGAGAATGACAGCTACTCCTCT GCAGCTGAGGATTTCTGTGAATTATGCGAAACCTCAGGTCATGAT GTTCTACATTGCCCGATGTTTGGCCCCAATGGTAACAGCAGCAAT TCTAAGGATGAGTCACCTAAACAGCAACGAACAGGAAAAGACGTT GTCATGGAGGGACTTAAATTATCACCCAAACCTTCTCAAGAAGAAT ACAAACCGGCGCCGTTAGCGCCAGCTAAGAAGTCGCCTGATGCG TCGCCTATCAAGACTGTTCCCAACCTTATGGAACCAGGACCTGCC CCAGGAAAGGAAAGTGGAGTAATCAACATGGATAAATGGTGCGGT GTATGTGAAAGAGATGGACATGACAGTATTGATTGTCCTTTITGAAG ATGCTTTTTAGGAGACTACTGCTTTCGATGTTTCAGGATAAGCAGT CACAACGACGACTTTTTTCATAGATTTTCTITTGTTAATCATAGGCAA GGCCGCATTGCATTGCAGGAGCGTAATCCGTCTGCGATATACCCT TTCGGTTCTCTGTTTGAAGTATGCTTTTCAAGCGATAAGTTTAGAG GGGAAGATGATGTTTTTACGAGGATTGAATGAGATGGATGAATGC AGGCTAAATCGGGGAAGGGGGAGGGAAGACAAACATGAGTTGAA CGGACGTAATGATCATGTAGTATACTTTGTCAAATTAATGATCCAA
ATGCA SEQ ID NO: 2 Sclerotinia sclerotiorum, Ss DTCN, SS1G 04144
ATGTCGACTACAAGAATCTCAACTCCAAAAAGGTCTCCAAAAAAAT CGACATTCACTAAAACAGGAATTCAAGTCACAAAATCAACTCCCAA TCTCGGTGCCTCCTACAATTTGGCTTTATTACAAGCTTCAGGAGCT TCACCGGTTCTTGCACATTTTTCCAATAACGGTCAGGGTTTTGGTC TAAACAATCCTAGGTCGAAGCCATCTCGACAAGTCTCACTCGCAT CCCTTACCTCAAATTCACTGGCGGCAATACCGGATGCTAGTAAAA GATACCCTCTTTCAACCGTTTTTGATGAGGATATGCCACCAGCAG GCAACATGTATACACCTTCTCGAGTTGGTGGTGGGCCCGATGAGT TGGAGGTGGGTGACATAGTTGATGTTCCTGGTAACATGTATGGTA CTGTCAGATTTGTCGGCAGTGTGCAAGGCAAGAAGGGGGTCTTTG CCGGAGTGGAATTGGATGAGATGTTTGCTTCCAAAGGGAAGAACA ATGGTGATGTTGAAGGTCAATCAGTTGGCCCAGGTAGAATTCAAA AAACCCGACCATCGATAGCCACACCAACCACATCACGACCAGAGT CTCCAGTACGAAGAGCAGCCGCTGCTAGGACATCAATAAATGCAC CCGGGCAGAGAGTCCCATCTCGATATGGAAGTCCTGCAGCGGCG AACTTTGGGCAGAACATTAGAGGAGTGCAAGATGCTAGAGACCCA AGCAAGAAAGTCGGTTACGCCCCAACAAATGGCATGAAGACACCA GTCCCTCCACGAAGTGTTTCGGCACTTGGCACAGGGAGTAGACCT GCAGCAATGAACCTCAGTGATGAAGATACACCTTCTGCTGGAATT ACACGGACGGCAACAAACGGGAGTGTGAGCTCAATCTCTTCCTTC AACGCAAAGTTACGACCTGCATCAAGATCCGCCTCGCGTGCGTCC CGAGCTACTGACGACGAGGTCGAGCGATTGAGAGGTCTACTGGA GGAGCGCGATCGGGAAATAAAAGCACAAGCTTCAATCATAGAAGA CATGGAAAAGACTCTTAGTGAAGCTCAGTCACTGATGGAGGACAA CAATGAGAACGCGGGCGGTCATAGAGATAGCCGGGGAAGCATGG AGGACAAAGACGCAGCACAATTGAGAGCAATAATTCGTGAAAAGA ATGAAAAAATCGCCATGCTGACTGCTGAGTTTGATCAGCATCGAG CTGATTTCAGAAGTACAATAGACACACTTGAGATGGCTGGTGCTG AAACCGAAAGAGTCTACGATGAGCGCATGAGTAATCTTGTAATGG AGCTCAGGACGATGCATGAGAACAGTCATGATGTGAAGCATGTTG CTGTACAACTGAAACAGCTAGAAGAGCTTGTTCAGGAGCTITGAGG AAGGTCTTGAAGATGCGCGGCGTGGTGAAGCCGAGGCTCGCGGT GAGGTCGAGTTCTTGCGTGGAGAGGTTGAAAGAACTCGATCTGAG CTTCGTCGTGAGCGGGAGAAAACTGCTGAAGCTCTCAGTAACGCA AATCCTGCTACGGGTGTGGGTGCAGCAACACTTTCTAAAGAGATT GCACAAAGAGATGACGAGATCCGCGGTTTGAAAGCTATCATTCAC TCGCTTAGCCGAGATGCCATACCTGATGGGAATTTCTCGGATCAT GAAAAGACACCAAGTGTTACACGACCAGGGCTACATCGAAGCCGT ACGGAAAGCGCTTCAGCTTCAGAGGAGGAGCGTCTTAGCCGGGA GAAGTTGGAACGAGAAGTGAGCGAACTTCGTGCCGTCGTAGAAA GTAAAGACAGCAAGGAAGAAGAAATGGAGCGTGAGCTAGAGGGG CTACGAAGGGGAAGTGTCAGCAATTCTACTACGCAGCGTACTAGT GCCATTAGCAGTGGAACTGCAACCCAGGATAGAAACTCTGTCCGA GATTCCAAAGGCACAGTTGGAAGCTGGCGGGACCGCGAAGGAAC ATCGGATGTTCACCACCACAACTTGGAGTCAATGCCAGAGATTGA CGGTTACTCTTCAGCAGCGGAGGATTTCTGTGAATTGTGCGAGGC ATCAGGTCATGATGTTCTACATTGCCCCATGTTCGGTCCTAATGGT AATAGTGGCAACTCTAGAGAGGAGTCTCCTAAAGAGCAACGAACA GGAAAAGACGTTGTCATGGAAGGACTCAAACTATCACCCAAACTA GCGCAAGAAGAATACGAACCAGCACCTTTAGCACCAGCCAAGAAG TCGTCTGATGACTCGCCTATTAAAACCATCCCTAACCTCATGGACC CAGGTGCTGCTCCAGGAAAAGCAAGTGGAGTCATCAATATGGACA AATGGTGCGGTGTATGTGAACGAGATGGACATGACAGCATTGACT
GTCCGTTTGAAGATGCATTTTAG SEQ ID NO: 3 Botrytis cinerea, Be VPS51, BC1G 10728
GACACATGCGATATGCAAAGTCTAGAACCTCGAATACTGATTCGA AAAAGACTGGCAATTCCATAAATCTACAGTATATTTTAATCCGCAA CTCATGAATGACTACATTTAATACGAATTACAAACATTCCCTAACG CCAAAATGGCAGCTACGATTCCCCTCTCCACTACAACATGCTTGA CCTCCTCAGAAGCTTTCAAATATCCTCTTCCACAGATTCGTCAATT CCACCGCGATCTCACTACAGAGCTTGACGAGAAAAATGCACGTCT GCGGACACTGGTCGGAGGGAGTTATAGACAATTACTTGGAACCG CCGAGCAAATCTTACAGATGCGACAGGATATTAGTGGAGTAGAGG AAAAGTTAGGCAAAGTAGGAGAAGGATGTGGGAGAAATGTGTTGG TTGGAATGGTTGGCGGATTGGGAAAATTACAGGGAGAAATGAAGA ATGGAAAGAAGGGCGAGGAAATGCGGGTTGTGGCTAAGATGAAG GTATTGGGTATGTGTGGGATTGTGGTTGGGAAGCTCTTGAGGAGA CCAGGGCGAATGGATGGGGATGGTGGGAGAGGGAAGGAATTAGT AGTTGCTGCGAAAGTCTTAGTTTTGAGCCGATTGTTGGCGAAGAG CTTGGAGAATACTGGAGATAAGGAATTCGTTGAAGAAGCGAAGAA GAAGAGGTCGGCTTTGACGAAGCGATTGTTACGCGCAGTTGAAAA GACATTGGTTTCCGTCAAGGATGCTGAAGATAGAGACGATTTGGT ACAGACACTTTGTGCATACAGTCTAGCTACTAGTTCTGGCACCAAA GACGTCTTGCGACATTTCTTAAATGTTCGTGGTGAAGCAATGGCTT TAGCGTTTGACGATGAAGAGGAGTCGAACAAGCAGACCTCAGGT GTCCTACGCGCTTTGGAAATATATACGAGAACTTTACTAGATGTAC AGGCTCTAGTGCCAAGGAGGCTGAGCGAAGCGTTGGCTGTGCTG AAGACGAAACCTTTACTGAAAGATGACAGCATTCGGGAAATGGAG GGATTGAGGTTGGATGTATGTGAGCGGTGGTTTGGCGATGAGATT ATTTACTTCACACCTTATGTCCGGCATGATGATTTGGAAGGGTCAT TGGCGGTTGAAACACTACGAGGTTGGGCGAAGAAAGCGTCAGAA GTGTTACTGGAAGGTTTTACGAAGACTCTTCAAGGGGGATTAGAC TTTAAAGTAGTTGTTGAACTACGAACAAAGATTCTGGAGGTGTGG GTTAGAGATGGAGGCAAAGCAAGGGGATTCGATCCCTCTATACTT CTAAATGGCTTACGAGACGTTATAAACAAACGACTCGTAGAGTTAT TAGAAACTAGAGTTGGCAAACTTCATCTAGTGGGGACAGAGATAG AGTCCACATTAGCAACATGGCAAGAAGGAATCACCGACATACATG CAAGTCTTTGGGACGAAGATATGATGGCAACCGAGCTCAGCAATG GTGGTAACATTTTCAAGCAAGACATACTTGCTCGCACGTTCGGAC GGAACGATGCTGTTTCAAGAGTTGTTAACAGTTTTCACACTTGGAG ACATCTCATCGAGGAAATTGGTACTTATATTGATGAACTGAAGAAA CAAAGATGGGATGATGATTTGGAAGATATGGAAGATGATGAAAGT CTCGAATCACGACAAAACCTTCTTAGCAAGGAAGATCCACAAATG CTACAAGATCATCTCGATTCAAGCTTAGAAAATTCGTTCCAGGAGT TACACGCAAAGATCACTTCACTGGTGGACCAGCAAAAAGATAGTA AACATATCGGGAAAATATCGATATATATTCTCCGAATTCTACGAGA TATCAGAGCAGAATTACCTAGTAACCCTGCACTACAAAAGTTTGGA CTCTCACTTGTCTCATCACTGCACGAAAATCTCGCAGGTATGGTCT CAGAAAACGCCATCTTAGCCCTTGCAAAATCTCTCAAGAAGAAGA AGGTTGCGGGCAGAGCATTATGGGAGGGTACACCGGAACTTCCT GTTCAGCCCTCCCCAGCAACATTCAAATTTTTGAGAGGTTTATCGA CTGCTATGGCTGATGCTGGAGCCGATCTATGGAGCCCTGTTGCC GTCAAAGTGTTGAAAGCGCGTCTGGACACCCAAGTTGAAGACCAA TGGAGTAAGGCTCTAAAAGAAAAAGAGGAAGAGCCTAGCAATGGA ATCTCTGGTTCTCCCACCAATGCTCCCGAAGCAGATGCCGAGGAA AAAGAAGGGGACGCTTCTGCTCCTAATCCTGCTGCTGCTGTAGAA GTAGATGAAGAAAAACAAAAGGATTTACTAAAGCAATCACTGTTCG ATATATCTGTCTTGCAGCAAGCTTTAGAATCACAGTCAGACAATAA GGAGAACAAACTTAAGAACTTAGCGGATGAGGTGGGAGGAAAACT AGATCTCGAGGCGAGGGAAAGGAAACGTATGGTTAATGGCGCGG CGGAGTATTGGAAGAGGTGCAGTCTTTTGTTTGGACTTTTAGCGT AGATTCCAGATGGATGAATTAGTGAGAGGCTTATAATGAATTATAT
TACGAATACTTTACTTTTGAGTATTCA SEQ ID NO: 4 Sclerotinia sclerotiorum, Ss VPS51, SS1G 09028
ATGGCATCTACAACCCTCTCCACAACAACATGCTTCACTTCCTCGG AAGCATTTAAACATCCTCTCCCTCAAATCCGGCAATTCCACCGCGA TCTCACCACCGAACTTGATGAGAAAAACGCACGTCTACGTACACT TGTCGGAGGTAGTTATAGACAATTACTGGGAACCGCTGAACAAAT CCTACAAATGCGCAAGGATATCCGTGAAGTGGAGGAAAAGTTGGG GGAAGTAGGGGAAGGATGTGGAAGAAATGTATTAGTTGGGATGG CTTCTGGATTAGGTAAATTACAGGGAGAAATGAAGAATGGGAAGA AAGGGGAGGAAATAAGGGGATTGGCTAGAATGAAGGGTTTGGGT ATGTGTGGGATTGTGGTTGGGAAACTTTTGAGGAGGCAGGGAAG AGTGGATGGGGAGGGGAGAGGGAAAAGTTTAGTGATTGCTGCGA AAGTTTTGGTTTTGAGTCGGTTGTTGGCGAAGAGTTTGGAGGGTT GTGTGAATAGTGCGGATAGAGAATTTGTTGAGGAGGCAAAGAAGA AGAGGGTGGTTTTGACGAAACGATTGTTACGGGCGGTTGAGAAGA CATTAGTCTCGACCAAGGATGGTGAAGATAGAGAAGACCTGGTAC AGGCTCTTTGCGCGTATAGTCTTGCTACTAGCTCTGGTGCGAAAG ACGTTTTACGACATTTTCTAAATGTCCGAGGGGAAGCAATGGCATT AGCATTCGAAGACGAAGAGGAATCGAACCAGGAGACATCAGGTG TTTTGCGGGCATTGGAAATATATACGAGGACTTTACTTGATGTACA AGCATTGGTACCGAGTAGACTTAGCCAAGCATTGGCTGCGCTGAA GACGAAACCTTTATTGAAAGATGAAAGTATTCGAGATTTGGAGGG ATTGAGATTAGATGTATGTGAGCGGTGGTTTGGTGATGAAATTCTT TACTTTACACCTTATGTTCGACACGATGATTTGGAAGGATCATTAG CCGTTGAGACATTAAGAGGTTGGGCGAAGAAAGCATCAGAGGTAC TACTGGAAGGATTCACAAAGACTCTTCAAGGTGGCTTGGACTTCA AGGTAGTAGTCGAATTACGGACAAAGATATTGGAGGTATGGATAC GGGATGGAGGAAAGGCAAGAGGGTTTGATCCGTCTATACTTCGA GATGGACTGCGAGGTGTTGTTAACGAACGACTTGTAGAGTTATTG GAAACTCGAGTTGGCAAACTTCATCTAGTGGGAACAGAAATAGAA TCCACATTGGCTACATGGGAGAAATGGATTACTGATCATCATGCTA GTCTATGGGATGAAGATATGATGGCAACGGAACTCAGCAATGGAG GTAATATGTTCAAACAAGACATTCTITGCTCGTACCTTTGGACGTAA TGATGCTGTTTCAAGAGTAGTCAACAGTTTTCAGACTTGGAGACAT CTCATCAAGGAAATAGGTACTGTTATTGATGAATTGAAGAAACAAA GATGGGATGATGATTTAGAAGATATCGAAGATGAAGAAAGTCTTG AGTCGCGACAAAATCTTCTTAGTAAGAAAGATCCACAAATGTTGCA AGATCATCTTGATTCAAGCTTAGAAAAAGCTTTTCAGGAGTTACAT ACGAAAATCACGACACTTGTGGAGCAATACAAAGATAGCGAGCAT ATCGGAAAGATATCAATGTATATTTTACGAATTTTACGAGATATCC GAGCAGAGCTACCGACAAATCCATCACTACAACAATTCGGTCTTT CACTGATCCCATTACTACACGAGAGCCTTGCCAGCACAGTTTITCTG AAAACCCTATCTCTTCTCTAGCAAAATCGCTCAAGAAAAAAAAAGT TGCAGGAAGAGCATTATGGGAAGGAACACCGGAACTTCCAATTCA ACCTTCACCTGCTACATTTAAATTTCTTCGTGCTITTATCAAATGCTA TGGCTGATGCTGGAGCAGATCTTTGGAGTCCTATTGCTATTAAGA CTTTGAAAGTACATCTCGATTCCCAAATTAATGAGAAATGGAGCAT AGCCTTGTCAGAGAAGATGGCTAGTAATAAAACAACTACTTCTTCC AGCAATCCACCCGATACTGAAAAATCCGCGGAAACAGAAGAACCA AAAAATGAAGTTCAATCCCCGTTGGATAAAGAAGTAGAAGAAGAAA AAGAAAAAAATCTACTAAAACAATATTTATTCGATATCTTCGTCTTA CAACAAGCTTTAGCGCTACAATCTATACAATTTGGGGATAAGGAAA AGGAAAAGGAAAAAGGGATTATGGGGATGAAAATCAAGAATTTGA GTGATGAGATTGAATTGGAATTGAAGCTTGAGATGCAGGAGAGGA AGAGGGTGGGGAATGGTGCGAGGGAGTATTGGAAGAGGACGGG GCTTTTGTITTGGGTTTTTGGTGTAG
SEQ ID NO: 5 Botrytis cinerea, Be SAC1 BC1G 08464
GATCCACCCACATCCTTCCTCATATGACTTCGATGATAATTACATA GACACTGCCAGTATGCCTGGCCTCGTTCGCAAACTCCTTATCTTITT GCCGCCATCGATGGGTTGATTTTGCAACCAGCAGCGCCAAAAGG CCAACGCCCCGCCCCCGCAACGAAGATCGCATACAAAGATAAGC ATATCGGGCCAGTATTGAGTGATTTGCAGGATCTGGAGGGGTCGT CTGCGAAAAGTTTCGAGGCATTTGGTATTGTCGGTCTCTTGACGG TTTCCAAAAGCTCCTTCCTGATATCGATTACGAAAAGAGAGCAAGT CGCACAAATACAAGGGAAACCTATATATGTTATTACTGAAGTGGCT TTGACCCCATTAAGTTCCAAGAACGAAGCAGAGATCTCGATTGATA GTACGAAAGCGGGGTTATTGAAGAGTAATATCGAGGGGCAGCAT GGCTTGGACGAGAGTGATAGCGAGGATGATGTCGTTAGCGATGA AGTGGAGGACGATACAGCAGTAGAAGCACACAAAAGAACGAGTA GCGTAGCTGAAGATGTGATCTCGAAGAAGGGGGGATATGGAAGA TTTGCTCAAAAATGGTTCTCGAAGAAAGGATGGGCCGTGGACCAG AAGAAGAACCTGGGGATGAGCGCTGAGCCGTATTCCACAGTGGA GCAAGCTTCCAAGGCCACCGATGTACCAGCTACGATTTCAGGAGT CACTGAAGGAAAATCTGATATCTCAATTCCCGATAAGGGCAAGGA AATTGAGGACATTGAAACTCCTGAAAATATTAGCGACATTGCAGAG AGCATGCTGCCAAAATTACTACGAACATCGCAGATATTGTTTGGG GCCTCTCGGAGTTACTACTTTTCTTACGACCATGATATCACAAGAA GTTTGGCAAATAAGAGGAATACAAATTCTGAATTGCCATTGCACAA GGAAGTTGATCCACTCTTCTTCTGGAATCGGCATCTTACTTTACCA TTTATTGATGCTGGCCAGTCTTCTCTTGCCTTGCCTCTTATGCAGG GCTTTGTAGGACAGCGTGCATTTTCAATGGATAGTAATCCACCAAA CCCTGCTATAGGTTCAGACACTGGAAAGACTTCCGTGCAGATGAA GGATATTACAACAAGTAGTTCGGATGAGCAAATTTACACAGCACGT GCTGGTACAGACAAGTCGTATCTATTGACGTTAATATCTAGAAGGT CAGTCAAACGTGCCGGGCTTAGATATTTACGCCGGGGTGTGGAT GAGGACGGCAATACAGCCAATGGCGTGGAAACAGAGCAAATCTTA TCGGATTCTGCTTGGGGCCCTTCGAGTAAGACATATTCGTTCGTT CAGATACGTGGCAGCATTCCCATATTCTTCTCCCAGTCACCTTACT CTTTTAAACCTGTACCTCAAGTTCACCACTCTACCGAAACAAATTA TGAAGCTTTCAAGAAGCATTTTGATAATATAAGTGATCGCTACGGG GCCATTCAAGTGGCTTCCTTGGTGGAGAAGCATGGAAACGAGGC AATAGTCGGTGGAGAGTACGAGAAATTGATGACTCTCCTTAATGT CTCCCGAGCTAGCGAGCTTAGGAAATCCATTGGGTTTGAATGGTT TGATTTCCATGCTATTTGCAAAGGTATGAAATTTGAGAATGTCAGC CTGCTCATGGAAATACTGGACAAGAAGCTTGACTCGTTTTCGCAC ACTGTTGAAACCGATGGGAAACTTGTATCGAAACAGAATGGCGTT TTAAGGACTAACTGTATGGATTGTCTGGATCGAACAAACGTTGTTC AAAGTGCAGTGGCAAAGCGAGCACTTGAAATGCAGTTAAAGAATG AGGGACTAGATGTCACTCTACAAATTGATCAAACTCAACAATGGTT CAATACTTTGTGGGCCGACAATGGTGACGCCATTTCTAAGCAATA CGCTTCTACAGCAGCATTGAAGGGAGACTTTACTCGTACTAGGAA GCGGGATTATAAGGGGGCCATCACAGATATGGGGCTTTCTATCTC CAGATTTTATAGCGGCATTGTAAATGACTACTTCAGTCAAGCTGCC ATTGATTTCCTGCTTGGAAATGTGAGCTATCTITGTITTTTGAAGACTT CGAGGCAAACATGATGAGCGGTGATCCTGGCGTTTCGATGCAAAA AATGAGGCAACAAGCCATTGATGTTTCTCAGAAACTCGTTGTTGCT GACGACCGTGAAGAATTTATTGGAGGATGGACATTTCTCACTCCG CAGGTACCCAATACGATCAAATCTAGTCCTTTTGAGGAATCCGTCC TCCTATTGACAGATGCTGCATTGTATATGTGCAATTTTGATTGGAA TATCGAGAAAGTATCATCTTTCGTGAGAGTGGACTTGAACCAGGT GAACGGCATCAAGTTTGGAACATACATCACGAGTACTTTGTCACAA GCCCAGGCAGATGAGAAGAGGAATGTGGGCTTTGTAATAACTTAT AAGGCTGGTTCAAACGACATTATTCGCGTGAACACGAGATCTATG GCTACGGAATTTCCTTCTTCGAAACTCTCTCTCGAAGACAAAACAT CCACGCCCGCTTCTACATCTACCACCAACTCTGTCGTCGCCCCAA TTGCCGCCGGGTTTGCAAACCTAATCTCAGGTTTACAAAATCAAAG TATAGCGGAACCTAAAGATCTCGTGAAGGTTCTCGCATTCAAGGC TCTACCCTCCAGATCTGCGGTATCAGATGAAGGAGTTAGTGAGGC CGAGCAAGTGAAGAGTGTCTGTGGAGAGATTAGAAGAATGGTTGA GATTGGAAGTATAAGAGAGGCTGGAGAGGAGAGAAAGGATATTGT AGAGGAGGGTACTATCATTAGTTTGGCCGAGGCCAAGAAAAGCAC GGGACTATTCGATGTGCTGGGACATCAGGTGAAGAAACTGGTTTG GGCTTAATGAAAGTGTATCGATACTCGTGCTAGTAATGCTTAGAGC AAAAGAAGCACTTCTTGAAGGATTTACGAATGGAATTGTGGAAGTT GGCAGGGAGGTTAGCGATCGTCAAGAACGGGTATGTGGAATTCA ATTCCATATTGAAGCTGCGAAACTCATTAACTTCAATAGAAGTGGA TGTGTAGATAGACCCGAGTATATGGTATTGGCCAGATAAGTAATTT
TAATGGGGA SEQ ID NO: 6 Sclerotinia sclerotiorum, Ss SAC1, SS1G 10257
ATGCCTGGCCTCGTTCGAAAGCTTCTTATCTTTGCCGCCATTGATG GCTTGATTCTGCAACCAACGGCGCAAAAAGGCCAGCGCCCCGCC CCCGCAACGAAGATCACGTATAAAGATAAGCATGTCGGACCAGCA TCTTATGATTCTCACGATTACGAGGGGCCGTCTGCCAAAGGCTTT GAAGCATTCGGGATTGTCGGTCTCTTGACGGTTTCTAAAAGCTCC TTCTTAATATCGATTACGAAAAGGGAACAAGTCGCACAAATACAAG GAAAACCTATATATGTTATTACTGAAGTAGCTTTGACCCCTCTAGC TTCCAGGATAGAAGCAGAGAACTCGATCAACAAAACAAGAGCGGG ATTGTTAAAGAGTAGTATTGAAGATCATGGATTGGACGACAGTGAT AGTGAGGATGACGAAGTCAATGTTAGTGACGAAGTGGAGGACGAT ACAGCAATAGAAACACATACAAGAACGAGCAGTGTGGCCGAAGAT GTAATTTCGAAGAAGGGAGGGTATGGGAGATTCGCTCAAAAATGG TTCTCGAAGAAAGGATGGGCTGTGGACCAGAAGAGGAACCTGGG AATGAGCACTGAACCGTATGCTGCACGAGAGCAAGATGCCAGGT CTGCCGACGTAGCAGCTACCACTTCAAAGGATGCTGAAGTGGAAC CTGAGGTTTTGATTTCCGATGAGGTCAGGGACATTGAAAATGTTG GAAAGTCTGACAAGGTTAAGAACGTTCAGGATATTGCTGAGAGCA TGCTGCCAAAGTTACTGCGTACGACACAAATATTGTTTGGGACCT CCCGGAGTTACTATTTTTCTTACGATCATGATATCACAAGAAGTTT GGCCAATAAAAGGAACACAAACTCTGAATTGCCATTGCATAAGGA GTCGATCCACTCTTCTTICTGGAACCGACACCTTCTGTTACCATTTA TTGATGCTGGGCAAGCTTCACTTGCCTITGCCTATTATGCAGGGCT TCGTAGGACAACGAGCATTTGTAATGGATAGCAATCCGCCAAAGC CTGTTGTAGGTTCGGACACTGAGAAGACCTCCATGGAACTGAATG AGATCACAACAGATAGTTCGGATGAACAAATCTCCACAGCACGTG TTAGTGCAGATAAGCCATATCTATTGACATTAGTGTCTAGAAGATC GGTTAAGCGTGCCGGGCTTAGATATCTTCGTCGAGGTGTGGATGA GGACGGCAATACCGCCAATGGTGTGGAGACGGAGCAAATTTTAAT
CAGATTCTACTTGGGCTCCTTCAAGTAA SEQ ID NO: 7 Botrytis cinerea, Be VPS52, BC1G 09781
GATACAAAAGCTTTCGAAAGCCGCTTGAGTAAGTAAGAAGGCAAT AAGAGAGGTCCTCGTCCGTGTCGAGATGTGATGCTTGAGTCATTT TCCTGGTATAGCTTCTGCAATCGAGTTCACACTCTACTACTTGATT CAGATTACACCAGGAGTAACACCTCAAGTATTCCATATTAAATACA AACCTTTCCCATCTTAATCTATTGTTGGCGCATGGGGAGAGGAATT AATTGCTTTGCTTTTTGGCCATCAGGATGTGGTCATTAGATCGATT ATCCGGACACACAACACCTTCTGCCTCTCCACCTCCCCCGTTAAA TAGGATCCCAAATCTCCCTCGTCGTCCGAGTCATCTTGTGCCATC CCCAGTTGGTGGTAGACCTCCTTTCAACCCAAGATCGTCTTCCCT GTCGTTAATCTCCAATGACTCTAATTCATCGTTGCTATCATCACGG AGACCCAATGGTTCGAATCTCAAACAAGCAGTCACATCTCCGAAT GTGCCAGATCCTTTGGAGGTTTTGGGAACACTACTGAATAATGGG GAAGAGACAAAATTGCCATCAGCGAAAAGCCCGGGGGCGACAAA TGGGACAGTTGCTCCCATTGAAGAGGAAGACGATGAAGGCGAAT GGGATTTCGGAGGTTTAAGTCTGCAAGACATTGTAGCAGGAGAAC CTCTCGATGTTGAGGATGAGCATGTGTATAAATCTCAAACGCTGG AAGAATATGAGCGCGAGAAAGAGAAGTTTGAAGACCTCCATCGAT CAATTCGCGCCTGCGATGACGTTCTTAATTCAGTCGAGATAAACCT CACAAGCTTTCAAAACGACCTTGCTATGGTATCTGCGGAGATTGA AACTCTGCAAGCACGATCGACGGCTTTGAGTGTAAGGTTGGAAAA TCGCAAAGTAGTAGAGAACGGACTTGGGCCTATAGTGGAGGAGAT CAGTGTCTCTCCAGCTGTCGTTAAAAAAATTGTGGATGGAGCTATA GATGAAGCTTGGGTTCGAGCATTGGCGGAAGTTGAGAAACGATCA AAAGCAATGGATGCTAAATCGAAGGAGCAACGTACTATAAAGGGC GTGAACGATCTTAAGCCTTTACTGGAGAATCTAGTTTCCAAGGCAT TGGAAAGAATCAGAGATTTCCTCGTTGCTCAAGTGAAAGCATTGC GATCGCCCAATATAAATGCACAGATCATTCAGCAACAGCACTTTCT TCGCTATAAGGATTTATATGCATTCTTGCATAGACATCACCCAAAG TTGGCTGAGGAGCTTGGTCAAGCATATATGAATACAATGCGATGG TACTTCCTTAATCAGTTCACGAGGTATTTGAAGGCGTTGGAAAAGA TCAAGCTTCATGTGTTGGACAGATACGATGTGCTCGGATCAGATG ACGGGTCTCGTAAGGCCACTCTTCTTTCAGGATCCAAACAGACAG GTCCACCACACGACGCATTCAATCTAGGTCGACGAATCGACCTTC TCAAGACGCCAAACCAAACTGCACTTCCCTCTITTCTTAGCCGAAG AAGACAAACAAACCCACTATATGGAATTTCCTTTCCGTAACTTCAA CCTCGCACTGATTGATAACGCTTCCGCCGAATACTCCTTITCTTACC TCTTTCTTCTCTCCCTCTCTAAGCTACGCTACCATTTCCCGACACT TCAACTACATCTTCGAACCCACTTTITTCCCTCGGCCAATCTCTCAC CAAATCCCTCATCCACGAGTCCCATGATTGTCTCGGCCTCCTCCT ATGTGTGCGCTTGAATCAACACTTTGCATTTTCCCTTCAACGCCGC AAGATCCCCGCTGTAGATTCCTACATAAATGCAACATCCATGCTCC TCTGGCCACGCTTCCAACTCACAATGGATATCCACTGCGAATCCG TCCGCACCCTAACATCCGCTCTCCCTACCCGCAAACCCTCAGCOTT CGGAACAAGCTAAACAATCTGCAGCTCCACACTTCATGACCCAAC GTTTCGGTCAATTCCTACAGGGTATCTTAGAATTGAGTACGGAAG CGGGAGATGATGAACCTGTAGCGAGTAGTTTGGCAAGATTGAGAG GCGAGATGGAAGCATTTTTGACAAAGTGCGCGGGGGTTATGCCG GATAAGAGGAAGAAGGAACGATTTTTGTTTAATAATTATTCGTTGA TTTTGACAATTGTAGGGGACGTAGAGGGTAAATTAGCCGGGGAAC AAAGGGCGCATTTTGAGGAGCTGAAGAAAGCTTTTGGAGATGGTG TCTGATCCTTCACTTCATTTTGATACTTAATTGGAAGTTTTTGAGCG TGTACACTTATCAAAGCGTATTATTTGATCATGTATTTTGTATTTGT GAAGAGAAACAAAGAACTTTTATTATGGTAGAAATAGAGCCGGAAA
TAATCTATGCTGTGGAAGAAACCA SEQ ID NO: 8 Sclerotinia sclerotiorum, Ss VPS52, SS1G 01875
ATGTGGTCATTAGACCGATTATCTGGACATACAACACCTTCTGCTT CTCCACCTCCACCATTAAATAGGAACCCCAGTCTACCTCGTCGTC CGACTCATCTTGCGCCATTACCAGTCGGCGGTAGACCTCCATTTA ATCCGAGATCCTCTTCCCTATCATTAGTCTCCAATGACTCCAGTAC ATCCTTGCTACCATCGCGGAGACCCAACGGGTCGAACCCCAAACA AGCAGCTACACCACCCAATGTGCCAGATCCTTTAGAGGTTTTAGG AAGAATATTAAACAATGGAGAAGAGGCAAAATCACCACCTGCGAA GGGCTTGGGAGCCATAAATGGAACAGCCGCTCCCATAAGAGAGA AAGATGATGAAGGCGAATGGGACTTCGAAGGTTTAAGTCTACAAG ATATCGTGGCAGAGGAACCTTCTGTCACTGAGGATGAGCATGTAT ATAAATCACAAACACTTGAAGAATATGAGCGTGATATGGATAAGTT TGAAGATCTCCACAGATCGATTCGCGCTTGCGATGATGTCCTAAA TTCCGTCGAAATAAACCTCACCAGCTTTCAGAACGATCTTGCTATG GTTTCTGCGGAGATCGAAACTCTACAAGCACGATCAACGGCGTTG AGTGTACGGTTGGAAAATCGAAAGGTGGTAGAGAATGGACTTGGA CCTATAGTGGAGGAGATCAGCGTCTCCCCAGCCGTCGTTAAGAAG ATTGTGGATGGAGCTATAGATGAAGCTTGGGTTCGAGCATTGGCG GAAATCGAGAAGCGATCAAAGGCTATCGATGCAAAATCAAAGGAA CAACAGAATATAAAGGGGGTTAATGATCTCAAGCCTCTATTGGAG AATCTAGTGTCTAAGGCACTGGAAAGAATCCGAGATTTCCTCGTT GCTCAAGTGAAAGCTTTGCGATCCCCCAATATAAATGCCCAGATTA TTCAACAGCAGCACTTCCTACGTTACAAAGATCTCTATGCTTITCTIT GCATAGACATCACCCAAAATTGGCCGAGGAACTTGGTCAAGCATA TATGAATACGATGCGATGGTACTTTCTCAATCAATTTACACGGTAC GCAAAAGCATTGGAAAAGATCAAGCTCCATGTGTTGGACAGACAC GATGTTCTCGGGTCAGATGATGGATCTCGCAAGACCACGCTCCTC TCCGCGTCTAAACAAACAGGTCCACCACATGATGCATTCAATTTAA GTCGACGAATCGATCTTCTCAAAACCTCCAACGAAATTGCACTGC CGTCCTTTCTAGCAGAAGAAGACAAACAAACTCATTACATGGAATT CCCCTTCCGGAATTTCAACCTCGCCCTAATCGACAACGCTTCCGC CGAATACTCCTTCCTAACCTCATTCTTCTCCCCGTCACTAACCTAC GCAACCATCTCTCGCTACTTCACCTATATCTTCGAACCCACCTTCT CCCTCGGCCAATCGATCACCAAATCCCTCGTCCATGAGTCACACG ATTGTCTTGGTCTCCTCCTGTGCGTGCGTCTTAACCAACATTTTGC ATTTTCTCTCCAGCGCCGGAAAATCCCTGTCGTAGATTCATATATC AACGCAACATCCATGCTCCTCTGGCCGCGCTTCCAACTCACAATG GACACACACTGCGACTCGGTCCGCACCCTGACCTCGGCCCTCCC CACCCGAAAACCATCGGCTTCAGAACAAGCGAAACAATCCGCCGC CCCCCATTTCATGACTCAACGTTTCGGCCAATTTCTTCAGGGCATT TTGGAACTAAGCACGGAAGCTGGAGATGATGAACCCGTGGCGAG TAGTCTAGCGAGACTGAGAAGCGAGATGGAAGCGTTTTTGTCAAA GTGTGCGGCGATTATGCCGGATAAGAGAAAGAAGGAACGATTTTT GTATAATAATTATTCGTTGATATTGACCATTGTGGGGGATGTGGAG GGGAAATTGGCTGGGGAACAGAGGGCGCATTTTGAGGGATTAAA
GAACGCTTTTGGGGAGGGCATTTAA SEQ ID NO: 9 Botrytis cinerea, Be Rgd1p, BC1G 15133
GAGTATTCTCGATTAGACAATTAGAATTCTCGAACAATAGAAGCCG GAGCTCGAGTTCCTCGATCTITTACCTACCTGAAGTCTCTCGATCA GAAGAGTGTCAAATTCCTATGATATCAATGATTATTGAGGATATATT TACAAAATCAAATCTCTTCAATGAATCTCTATCTACCTAAGCAAGTC AATTATGATTGATTACAATTATCGTTGTTGCACGGAATCCAGTCGC ATTTGGTCCCGGTCACTCGTAACAGCAACCACATCGGTATTICGT AGATTCCCGAGTATTGCCTTTACATACCTAAGGAACTTTAAATCCC CCCAACAACAGAATTGACGACAGAATTACTACCATTACAAGTGAAA ACACTCCATGGTACCCAAATACAACAGTCTCATATAGCCATTTGAT CGCAACTCGCATCTTTCATCTACAAAATGTCGTTTGGAGGGGACA TCGGACTCGATACAACATCGTCGTCCAATGCTGCTGGTAATGGCG GCAACCAGGGCGAGACAACTGGAAGACCTGCCACCCCTCAAGAT GCAACCGCAAAAGCAGTTCAAGATGTCACAAGCTCGGAGATTGGA ATATCAACCTTGTTAACCCGACTGAAACAAAGTATTGCTTCCGCAA AGGAATTCGCACTTTTCCTCAAGAAACGGTCCATCATGGAAGAGG AACATTCGAACGGTTTAAAAAAGCTGTGTAAGGCAACCGGGGATA ATATTCGCAGACCAGAGCATCGACACGGATCGTTTCTACAGTCAT ACGAAGAGGTCCTCATTATACACGAGCGAATGGCCGAGAATGGG GCTCAATTTGGCGTGTCTCTACATCAGATGCATGAGGATCTTATCG AAATGGCTTCGAACATAGAGAAGGGCAGAAAGCATTGGAAGAATA CTGGGTTGGCAGCAGAACAACGTGCTGCTGATACCGAAGCTGCC ATGAAGAAGTCGAAGGCGAAGTACGACTCTCTGGCAGACGAGTAT GATAGAGCTCGCACTGGGGACAGGCAACCAGGAAAGATTTTTGG CCTCAAGGGCCCCAAATCGGCAGCGCAACATGAAGAGGACCTTC TTCGCAAAGTCCAGGCTGCCGATGCAGATTATGCGTCCAAGGTAC AAGCTGCGCAAAGCCAACGAACCGAGCTCTGGTCAAAATCAAGAC CTGAGGCTGTGAAAGCTCTAGAAGATCTCATTCAAGAATGCGACT CTGCATTGACATTGCAGATGCAGAAGTTTGCATCCTTTAACGAAAA GCTACTTTTGAGCAATGGCTTGAATATAAGCCCTATCAAAGGAAAA GAGCAAGGGACATTAAATCGCAGTCTCCGTGAAGTTGTTCACGCA ATTGATAATGTTAAAGACCTGAGCAACTACATCAGTAGCTTCTCTG GTAACATGCAGTCCCGGATCACGGAAATCAAATATGAGCGTAATC CGGTTTTGCAACCCGCACAAAATACCGCTCAGCGACAATCGGATC CCAACGCTCTCCAAGCTCGACAAGGACCCGTAATACCACCACAGC CATCTCACCAAGTTCATATGAGCCAACCTTTTAATCAAAGCAGTCC CCCAACTCACCAGCGCGAAAGAAGCTTTAGCCATGGCCCATCTCT TTCGCAACACATCGTTGCACCTGTTGTATCGCCCACTAACCCAATA TCCACCTCTCCCGACTTCAATACCTGGTCACCTCGTGCAGATGGC CCCCCCCAGATATCAACCTTGCCATTTCAGCCACAACCTCAAAAC GAGACACCAATACAACAGACACCACAAAACCCTACAACGCATGCA CCAGTGTCCCATGGCCCATCCTCGGCACCACTATTCGGAGCGGG ATCGGCTCCAGCTCCAGGCAACAGCACTCATCTAGCACCTTTGAA ACCAGTGTTTGGACTCAGCCTCGAGGAACTCTTTGACAGAGATGG CTCTGCTGTTCCAATGATTGTCTACCAGTGTATTCAAGCAGTTGAC CTCTTTGGGCTCGAGGTCGAAGGAATATACCGGCTATCTGGTACC GCATCTCATATAATGAAGATCAAGGCAATGTTCGATAACGACGCAT CTAAGGTGGACTTCCGTAACCCGGAAAGCTTCTTITCACGATGTCA ATAGTGTGGCTGGTCTTCTCAAACAGTTCTTCCGCGAACTCCCAG ACCCTTTATTGACTATCGAGCAATATCCTGCATTTATCGAGGCTGC AAAGCATGATGATGAAATAGTCCGTCGCGACTCTCTACATGCGAT CATCAATGGCCTTCCTGATCCCAATTACGCTACTCTTCGAGCCTTG ACTTTACATTTAAATAGAGTACAGGAGAGTTCGGCATCTAACAGGA TGACTGCAAGCAACTTGGCCATAGTATTTGGCCCTACACTCATGG GTGCTAATTCAGGACCGAACATGTCAGATGCTGGGTGGCAGGTTC GTGTCGTTGACACTATTTTGAAAAACACTTATCAGATATTTGACGA CGACTGAGGCGAAGAAGATTGTCGATTGACTTGAAGAGTTCTTAA CGAGATACCATAGCTGCTCATATTATGAACCTGCCTTTGGAACAGA AACAAGGGCAGGGAATTCCTAGCATCAGACCTCTATTTGCCGACA AGACATTCTAAAGAAAGTACATGCCACTGTATTTCGAATACTATTAT TGTAAGGCACGGGCCTGTTGACAAATATTTACGGTCTATCAAGCG AGTGTACGTCAGGGGGTGGTCTACACCACGATCGATTTTGTAGGG TCATGTGCTCAGCTCTGATGCCAGTATTGGTGCAACTATTGAATCA AAAGGGTACCAAGGTTTCAATACTCGTTAATTTTGGATCACGAAAA
GATCA SEQ ID NO: 10 Sclerotinia sclerotiorum, Ss Rgd1p, SS1G 03990
ATGTCATTTGGAGGGGACACCGGACTTGATTCATCATCGTCGCCC AATATCGTCGGCAATGGCAACAATGGCGAGACAATCGGAAGGCCT GCAACTCCTCAAGATGCAGCCACGAAAGCGGTTCACGATGTTACA AGCTCCGAGGTGATTGAGTCAACCAATTGGAATATCAACCTTGTT GAACCGGTTGAAACAGAGCATTGCTTCCGCAAAGGCAGTCCCCC CCGAACTTTCAACGTCTGCATAGATATGGAGCTGACTTCTTCGAAA CAGGAGTTCGCACTTTTCCTCAAAAAAAGGTCCATAATGGAAGAG GAACATTCGAATGGATTAAAAAAGCTGTGTAAAGCAACTGGAGATA ATATTCGCAAACCAGAGCATCGCCATGGTTCATTCCTGCAGTCATA TGAAGAGATTCTTATTATACACGAGCGAATGGCCGAAAACGGGGC TCAATTTGGCGTGTCTCTACATCAGATGCATGAAGACCTTATTGAA ATGGCTTCGAATATAGAGAAGGGTAGGAAGCACTGGAAAAATACT GGCTTGGCAGCAGAGCAGCGTGCTGCTGACACGGAAGCCGCCAT GAGAAAGTCAAAGGCGAAATATGATAGCTTGGCGGATGAGTACGA CAGAGCTCGCACCGGAGATAGGCAACCGGGCAAGATATTTGGCC TCAAGGGACCTAAATCGGCAGCGCAACATGAAGAGGACCTTCTCC GTAAGGTTCAGGCTGCAGATGCAGATTATGCAGCGAAGGTACAAG CTGCACAAAGCCAGCGCTCTGAGCTCTGGTCAAAGTCAAGACCC GAGGCGGTGAAAGCGCTAGAAGATCTCATTCAGGAGTGTGACTCT GCATTGACATTACAAATGCAGAAATTTGCGTCCTTCAACGAAAAGT TACTTCTTAGCAATGGTTTGAACATAAGCCCTATCAAAGCCAAAGA ACAAGGCACCTCGAATCGTAGTCTGCGTGAAGCTGTTCATGCCAT CGATAACGTTAAAGACCTGAGCAACTACATCAGTAGCTTTGCCGG TAAGGTACCATCACGGGTCACGGAAATAAGATACGAGCGTAACAC GGTCTTGCAACCTGCAGCAAATATTGCCCAACGACAATCAGACCC CAACGCTCTCAACTCTCGACAAGGACCAGGAATATCATCTCAGCA ACCTCATCAGGTGCATGTAAGCCAAACCTTTAACCAAGGCACTCC GCAAACACACCAGCACGAAAGAAGTTTTAGTCACGGCCCCTCTCT TTCGCAACACATCGTTCCAACTGTTGCATCGCCCACGGCGCCAAC ATCCACCTCCCCTGACTTCACCACCTGGTCACCTCGTACAGATGG GCCTCCTCAAATCTCAACATTGCCGTTTCAGCCACTGCCTCAGAA CGAGACAGTTTTGCAACAAACACCACCAAATCCTACGACTCATGC TCCAGCATCCCATGGACCACCTTCGGCACTATTATCTGGACCAGG ACCTCCGGCTTCAGGCAATAATACACATCTAGCGCCTTTGAAACC AGTATTTGGGCTTAGCCTCGAGGAGCTCTTTGAGAGAGATGGCTC TGCTGTTCCTATGATTGTCTATCAATGTATTCAAGCAGTTGACCTC TTTGGGCTCGAGGTTGAAGGGATATACCGACTATCTGACGCATCT AAGGTGGACTTTCGTAACCCTGAAAGCTTCTTCCACGACGTTAATA GTGTCGCTGGCCTTTTGAAGCAGTTTTTTCGAGAGCTCCCAGACC CTCTACTGACTAGTGAACAATACCCCGCATTCATCGAGGCCGCAA AGCATGATGATGAAACAGTCCGTCGCGACTCTCTTCATGCCATCA TTAATGGCCTCCCCGATCCTAACTATGCTACTTTGCGCGCCTTAAC CTTACATTTAAATCGAGTGCAGGAAAGTTCGGCGTCTAACAGGAT GACTGCAAGCAACCTGGCTATTGTATTTGGACCTACTCTCATGGG AGCTAATTCTGGACCAAACATACAAGATGCTGGGTGGCAGGTTCG CGTCATTGACACCATTTTGAACAACACCTATCAGATATTTGATGAC
GACTGA SEQ ID NO: 11 Botrytis cinerea, Bc Ufd1, BC1G 10526
GTTTCCAAGTACAGTACAGTACCACTTCAAGTACATAAACTCAGCG CTCTTCTTGAGATAAAAGGTTAAAGGGTTGCAAGATTTCTTTGATA CATATCATTGGAAATAAAGTATTCCGGATTACATTAGAGGAAGCTC ACTGTAACAGGTTTCTGCTTITGTITGTTCATGGACATGATGGCAGCA ACTCCAGACATTTCTTTGACCTGGTCATCAGTCTATAAAGTCGCCC CAAAAGACAACGTCTCGCTGCCCGGGGACAAGATACTACTACCTC AATCAGCGCTGGAACAACTACTATCGGCATCTACAGTTACGGTGA ATTCTAACACTCGCCCCAGCAATGTTGCATTTGATCCATTCAATCC ATATTCATTGGCAGCCGCTCGCATAGAACAGTCGCAATGGAGAGA TACCCAACAACAACTGCCCCATCCTCTCACCTTTAGGCTGGTCAA CTCGAAGAACGGAAATGTAGTATATGCAGGAATTCGAGAGTTCTC GGCAGATGAAGGAGAAGTTGTCTTAAGCCCATTTITTGCTAGAGGC ATTAGGGATCACTGCGCCCTTACGAAATCCAACACCACCAAGTTC AAAGGTTGAAAGCAGGAGAGGGTCGCCGGATACGCCTATAGATC TTACAGATAACCCTGCAATCGATCTTACGGGTGACGAGATGATAG ACCTTACAGACGAAACCGAAGAACCGGCGCAGATCACTGTACATG CGAAACAATTACCTAAAGGCACATACGTGAGGCTAAGGCCATTGG AGGCTGGTTATAATCCCGAGGATTGGAAATCATTGCTCGAAAAAC ACATGCGAGAAAATTTCACAACTTTAACGAAAGGAGAAATATTGAC GGTTCGAGGTTCAAAGTCGGAGGAATTCCGATTTCTGATTGATAA GTTTGCACCGGAAGGAGATGCAGTTTGCGTTGTTGATACAGATCT AGAGGTCGATATTGAGGCTTTGAATGAAGAGCAGGCTCGGGAAAC CTTGAAGCAAATCATGTCAAAGGCACAAAAAGCTCCAGGAACGGC TCAAGGGAGTTCAATTGGCGGAGAATTAGATCTTTGGAATGCTTT GCAGGGACAGGTCGCAGAAGGTGATTATGTCGACTATACTTTACC TTCATGGGATCGATCAAATGGTCTTGATATTGAGCTTTCACTIGAG GACGATGGTGATGGTGATGTGGAGATATTCATTAGTCCTCAATCA GCCCATCAAAGAGCAAAACCACGGGAGGATGAACATGTTCTCGGA GATTTCTCAAGTGACAAAATCAAGAGAATAACCATACAACAATCAA ATGTGGAATTAGACGGAGCTGATGCTATATTAATTTCTTTATACTG TCGAGGAACTGGAGCAGGCTCTGAGCCACCACATGGACCACGGA AGTATTCCATTAGAGTAAAATCGCTTGAAAAGGGGGCAAGCAATG GGGCCCCAAGCAACCCAATCTCGCTCGAAGAAGATGCCGAAATG CATGGATCTGATGAGGAGCAATGTAAAAATTGTCATCAATGGGTG CCAAAGCGGACAATGATGCTTCATGAGAACTTTTGTCTCCGCAATA ATATCTCATGCCCTCATTGCAATGGCGTCTTTCAGAAGAAATCTTC AGAATGGCTGAATCATTGGCATITGTCCTCATGATTCAGCCCATGG AAATTCCTCAGAAAGCAAAACTAAACACGACTCTATTTTTCACGAA GCTCGACAATGTCCCAATTGCCCTTACGAAGCAACAAATATGAGG GATCTTGCCACTCACCGTACGTCTATTTGTCCTGGCAAGATCATTC TATGTCAATTTTGCCATCTTGAAGTTCCTCAAGAGGGCGACCCCTT CGATCCGTCTCCAGAAAGTCTTATTTCCGGACTTACAGCACACGA GCTTGCAGATGGGGCTCGAACTACGGAATGTCACCTGTGCAGCA AAATTGTTCGACTTCGGGATATGACCACCCATCTTAAACATCACGA ACTCGAAAAGAATAGCCGATTTAAACCAGCCATCTGTAGAAATGCA ATCTGCGGTAGAACTCTGGAGGGCGTTGGTAAGAATGGGGAAGT GGGCGCTGGATCGAGAATGGGCCAAGGACCTGGTAATGATTTGG GTCTTTGCAGTATCTGCTTCGGTCCACTATACGCTAGTATGCACGA CCCATTAGGAAAAGCAATGAAACGCCGCGTGGAACGAAGGTATCT GAGCCAGATGATCACGGGATGCGGCAAGAAATGGTGTACAAACAT CTATTGCAAGACTGCAAGGGCGAAAGAAGCGAATGGGCCTCAGG CAATACTAGCGATGAAAGATGCCCTTCCTCTTATTCAGCCATTAGT AGCCCAAGTAGAGGATAAGACCGAACCGATGCATTTCTGTGTCGA TGAAGGAAACCAGAAGAGAAGAAATCTGGCTGAAATGTTAGCTAT GGAGCCTGGAGGTTGGGAATTGGAGTGGTGTGTTGCGGCTTGTG AAGCAGAAGGTGCAAATCTTGATAAGGCCAGGACATGGTTATCTA ATTGGGCTCCCAAGAAAGCTTGATGTGGTTCAGATCTGGAAGATA TTTTGGTATGGATGAAAGGGATGGAGCATGGCGTGGTACCGATTG CATAAGTAAGGGAGTTCTGGTGGCTGATGACGATATGATATGATA TGATACCAATTTATAGACCCGATTTTGTTGTGCGTACATAAATATAC ATGGTTGGCGTCGCATTAGCTAGAGATAGATCGAACAGATTAAGA
ATTTACTGCTAATACATAAACATATATACATTCTTCA SEQ ID NO: 12 Sclerotinia sclerotiorum, Ss Ufd1, SS1G 04151
ATGGCGGCGACTCCAGATATCTCTTTGAAATGGTCATCAGTCTATA AAGTTGCCTCAAAAGACAGCATATCTCTGCCTGGTGATAAGATACT GTTACCGCAGTCTGCTCTGGAACAGCTATTAGCAGCATCTACGGT TACGGTCAATTCTAACAGCCGCCCAAATAATGTCGCATTCGATCCA TTTAATCCATATTCTTTAGCAGCAGCTCGCATAGAACAGTCGCAAT GGAGAGATACTCAACAGCAACTACCTCATCCTCTCACATTTAGGCT CGTCAATTCAAAGAATGGGAATGTGGTACATGCAGGAATCCGAGA GTTCTCTGCAGATGAGGGAGAAGTTGTCCTGAGCCCATTCTITGCT TGAGGCATTGGGAATCTCTGCGCCCACACGAAAATCTACGCCAAG TCCCAAAGTTGAGAGCGAGAGAGGATCCCCTAGTGCGCCTATAGA CCTTACAGATAACCCTTCGATTGACCTTACACGCGATGAGACGAT AGATCTTACAGATGAAATTGAAGAATCTGCGCAAATCACCGTACAT GCGAAACAGCTATCTAAAGGTACATATGTGAGGTTAAGGCCGTTG GAAGCTGGGTATAATCCTGAGGACTGGAAATCGTTACTAGAAAGA CATTTGCGGGAAAATTTTACAACTTTAACAAATGGAGAAATATTAA CGGTTCGAGGGTCAAAGTCAGAGGAATTTCGATTTTTGATTGACA AACTCGCGCCTGAAGGAGATGGGATTTGTGTTGTIGACACCGATT TAGAGGTCGATATAGAAGCTTTGAATGAGGAACAAGCCCGAGAAA CCTTGAAGCAAATCATGGCAAAGGCACAAAAAGCTCCAGGAACGG CCCAAGGAAGTTCTATCGGTGGAGAATTAGACCTATGGAAAGCTT CGCAAGGACAGATTGCTGAAGGAGATTACGTGGATTATACTTITTAC CTTCATGGGATCGATCAAATGACCTTGAGATTGAGCTGTCGCTCG AGGATGATGGCGATGTGGAGATTTTTATTAGCCCTCAATCAGCTC ATCAAAGAGCAAAACCGCGAGAAGATGAGCATGTTTTTGGAGATT TCTCAGAAAATAAAACCAAGAGGCTCGTCATACAACAATCAGACGT GGAATTAATAGGAGCTGATGCAATACTAATTTCCATATACTTCCGA GGGTCTGGAAGTGAGTCATCACAGGGGTTACGGAAATACTCTCTT AGAGTGAAATCGCTTGAGAAAGGGGCAAGCAATGGATCTTCAAGT AATCCAGTTTCGCCCGAAGAAGATACTGAAATGCATGGATCTGAT GAGGAGCAATGTAAAAATTGCCATCAATGGGTACCGAAGCGGACA ATGATGCTTCATGAAAACTTCTGTCTTCGTAATAATGTCTCATGTC CTCATTGTAACAACGTGTTTCAGAAAAAATCCCAAGAATGGCAGGA TCATTGGCATTGTCCTTATGATTCTTCCTACGGAAATACACCAGCA AGCAAAACCAAACACGATTCTGTATTTICACGAATCCCGCCAATGTC CCAATTGTCCCTATGAAGCAACAAATCTCAGAGATCTTGCTACCCA TCGTACGTCTGTATGTCCCGGCAAGGTTATTCTTITGTCAATTCTGC CATCTCGAAGTCCCCCAAGAAGGCGACCCCTTCGATCCGTCCCCT GAAAGTCTCATATCTGGGCTCACAGCCCACGAGCTCGCTGATGGA GCTCGAACTACGGAATGTCACCTTTGCAGCAGGATCGTTCGACTT CGCGATATGTCCACGCATCTCAAGCACCACGAACTTGAGAAGAAC AATCGATTCAAACCAGACATCTGTAGGAATGTCAACTGTGGTAGAA CTTTGGACGGTGTTGGTAAGAACGGGGAAGTAGGAGCAGGTTCG AGGATGGGTCAAGGACCAGGTAATGATTTGGGTCTTTGTAGTATT TGCTTCGGCCCACTATACGCTAGTATGCACGACCCGTTAGGAAAG GCGATGAAGCGTCGTGTGGAACGAAGATACTTGAGCCAAATAATT ACGGGATGTGGCAAGAAATGGTGTACAAATCTCTATTGTAAGACT GCAAAGACTAAAGACGCCAATGGGCCCCAGGTGGCATTATCGGT AAAAGATGCACTTCCCCTCATTCAACCATTACTAGCCCAATTAGAG GATAAGACCGAACCAATGTATTTCTGTGTGGATGAAGCAAATCAG AAGAGGAGAAATCTGGCGGAAATGTTGGCCATGGAACCAGGAGG TTGGGATCTAGAGTGGTGTGTTGCGGCTTGCGAAGCAGAAGGTC CAAATCTTGATAAAGTCAGGACATGGTTAAGTAATTGGGCTCCAAG
AAAAGCATGA SEQ ID NO: 13 Botrytis cinerea, Bc Integral, BC1G 03606
GGATCGCAACTAACTCTTCTGGAAGGTTCTTGTGGCAATATCAAC CACATGGATCTTCAGTACCACCGCCGTCAAATTGGCTGTGCTITGG GTTATATATGCGAATCTTCACCACGCCCGTTTTCAAGCGATGGGC CGTCTCTTTGATGACCATAGACGTTTGTTTCGGTATCACCTTCTTC GTCGTGTTTTTAACTCATTGCAACCCAGTCTCTCAAGAATGGAACC CTGTTCCACGGGGTTCATGCAGATCTCTAACATTGTCCGAGTTTTC CTCCATCGCTCTCAATCTGGCTCTCGACACGGCAATCATCATTCTC CCTATGCCATGGCTATACAAGCTTCAAATCGCATTAAATCACAAGC TTTTTGTGATGGTCATGTTCAGTTTCGGCTTTGCAACTATTGCCAT CATGTGCTATCGTCTTGAATTGACAGCCCGAAGCCCTTCTGATCC CATGATTGCCATTGCAAGAGTCGGAGTGCTGAGCAATCTCGAGCT TTGGATTGGTATTATTGTTGCCTGCTTACCTACTATGAAACCTTTTG TTAGAGTATATCTCAGACCCAGCCTATCAAAGCTCTCCCAAAAACT TTATGGCAGCCCCACAGTGTCAACAAAAGACGAAAATCCACAACT TCAGCTAAGGAACTTCGGGGGTTCCGGACCTTCACGCCCCCAAAA AAAACAGTAACTACACTGAACTTTCTGAAGCTCCATCTGTGCAGAC AGATACTGACGAGTTGCATCTCGTTCCAAATGAATCATCCAATTTT
GATGCAAATTGTGAATCTAGCAACA SEQ ID NO: 14 Botrytis cinerea, Bc Sec31p, BC1G 03372
GAAGCTTTAAAACATACGATTATTTGATCCTGTTTGAACACGTTTTC TTGAAATTTCAAGCTTGAATGAAACACAACACCAAGTCTATCGGCC AAAGGACCCCTTTGAGATTGCATTGAGCGTTGTCCCATCTCAAGA TTTAACAACTGTTATTCACGAAATCATGCCTCCACCACCACCACCT CCTCCTCCGCCGCCTCCTCCGCCTGGAGGAGCTCCAGGAGGTAT GCCATCCAGACCACCTGCGAAAGTTGCTGCAAATAGAGGCGCACT TTTGTCGGATATCACGAAGGGAAGAGCACTCAAGAAAGCTGTAAC TAACGATCGATCGGCACCGGTAGTAGGCAAAGTATCTAATGGTTC TGGACCTGCGCCAATAGGAGGTGCTCCTCCAGTACCGGGAATGG CAAAACCTCCCGGTGGATTTGGCGCACCGCCAGTACCAGGAGGA AATAGAGCTCGAAGTGATAGTAACCAAGGGAGCAATAATGCGGTT TCGGGGATGGAACAAGCTCCACAGTTAGGAGGAATATTCGCAGG CGGCATGCCCAAGTTGAAGAAACGAGGTGGAGGAGTAGATACTG GCGCAAACCGCGACTCATCGACTGCATCGGAACCAGAATTCTCTG CTCCCAGACCGCCAGGTATGGCTGCTCCCAGACCTCCAACAAATG CAGCTCCGCCTTTGCCATCAGTCCGGCCTCCTCCTCAACCTAGCG CTAGTACTCCCGCATTTGCGCCCTCGGTTGCAAATCTGAGAAAGA CCGGCGGGCCATCTATTTCTCGTCCTGCATCCTCAACCTCTCTCA AGGGGCCACCACCCCCTATTGGCAAAAAACCTCCTCCACCCCCTG GAACTCGAAAGCCATCATCAGCGCTATCAACCCCACCACCACCAC CGCCTCCAGCATTCGCCCCTCCACCTCCTTCTTCAGCACCTCCGC CACCTGTTGCACCTCCACCACCACCTTCCCCAGCTCCACGCCCTC CGAGTAACCCACCTCGATCACATGCACCACCGCCACCACCACCAC CACCACCACCAACATCTCCACCTTCGACTAACGGAGGTAACCCAA GTCTTGCTATACAAGCAACAATTCGTGCTGCTGGCCAAGCATCAC CAATGGGTGCACCACCACCACCACCACCGCCTCCTCCTCCATCTA ATGGGCCTCCCTCTCTCTCGTCGCACAGAACGCCATCTCCGCCC GCGGCACCCCCAGCGGCACCCCCAGCGGCACCAATATCAAGAAG TCAAAGTCAACAAGGAAGAACTCACACAATGGATTCCAGTTCTTAT ACCCTTTCATCAAACGGCAGTTTACCGCAAGCCTCTAGTTCTAGCA GAAGAATCATGATCAATGATCCTCGATGGAAATTTACAGATGAATC GGTATTCCCAAAACCTCGAGATTTTATTGGTGGGCCCAAAAAATAC CGGGCTGGTCGTGGAAGTAGTGTTCCGTTGGATCTGAGTGCTTAC CATTAAGAATTTCGCTTACCAAAAAGAATATAACTCTTCGGATCGT ATTCATGTGTTACCATTATGATTTAAGGCGTTATAGCGGGATATCA TTTAGAATCCGGTAAGGCGGCATCAAGCTATCTGAATTGGGAGTT ATACATCAGGACACTAAAGATCGTCAAAAAATTTCCCCTGAATCGC GAGATGGAGATTGACGAGAGACATCAGCTCACTACCCAGGGTAC CGAGGAGGAAATCGCAGCTATAAATATCACGGGTGATGGGCAAAT TCCACAGTGGAACCTTAAAAGAATGAGTACGGAGAATATTAAACTT
TTGAGATTTATCTTTCTCTTCCTGTGATTTTAACCA SEQ ID NO: 15 Sclerotinia sclerotiorum, Bc Sec31p, SS1G 06679
ATGCCTCCTCCACCTCCTCCACCACCTCCTCCTCCACCGGGATTT GGTGGTCCTCCTCCCCCTCCACCTCCTGGAGGAGCCCCAGGATC GATGCCATCAAGGCCACCTGCGAAGGTCGCTGCCAATAGAGGCG CACTTTTGTCAGATATCACAAAAGGAAGAACACTCAAAAAGGCTGT AACCAACGACAGATCGGCACCAATAGTAGGCAAAGTATCCGGTGG CTCTGGGCAAATGCCAATAGGAGGTGCTCCACCAGTACCTGGAAT GGCAAAACCTCCTGGGGGTTTCGGCGCACCACCCGTACCTGGGG GAAACAGAGCTCGAAGTGACAGTGAACATGGGAACGGCGTGTCT GCAGGAATGGAACAACCTCCACAGTTAGGAGGAATTTTCGCAGGT GGCATGCCCAAGTTAAAGAAACGAGGCGGAGGAGTAGACACTGG CGCAAATCGAGATTCATCATTCACATCAGAACCCGAATTTTCTGCG CCTAAACCACCAGGTATGGCAGCTCCTAGACCTCCAATAAATGCA GCTCCTCCGTTACCATCAGCCCGGCCTCCTCCTCAGCCCAGTCCT TCGGCACCTACATTCGCGCCATCGATTGCCAATTTGCGAAAAACT GCTGGGCCATCAATTTCTCGACCTGCTTCTTCAACTTCTCTCAAGG GACCACCACCTCCTATTGGCAAGAAACCTCCTCCACCTCCTGGGA CTCGAAAGCCATCAGCTTTATCAGCCCCACCACCGCCATCATCAT TCGCACCTCCACCTCCTTCTTCGECCCCTCCACCEGCCTGCTGCAC CGCCGCCACCACCTTCTCCAGCTCCGCGCCCTCCCAGTAACCCA CCTCGAGCACATGCGCCCCCTCCTCCACCAACGTCTCCACCTTCG GCTAATGGAGGTGGTCAGAGTCTTGCTATGCAAGCAGCAATTCGT GCTGCCGGTCAAGCATCACCAATGGGTGCACCCCCTCCACCGCC GCCACCCCCATCTAGTGGACCACCCTCTATATCGTCACACAGAGC GCCATCTCCGCCTGCACCGCCAGCTGCACCAATATCAAGAAGTCA AAGTCAACAACAAGGAAGAACTCACCCAATGGATTCTAGCTCATAT ACTCTATCGTCGAACGGTACCTTACCGAAAACCGCCAGCTCTGAT AGGAGAGTTACAATCAACGATTCTAGATGGAAATTCACCGACGAA TCAGTATTTCCCAAACCTCGGGAGTTTATTGGTGGACCCAAGAAAT ATCGGGCTGGCCGTGGGAGCAGTGTTCCGTTGGATCTTAGTGCTT
TCCATTGA SEQ ID NO: 16 Botrytis cinerea, Be Gyp5p, BC1G 04258
GATATTGTACACGAGCCTCTTCCTGCATTGATTGATTGATIGCTCT TACACATATCCAGTTCATCTCCCACAAAATACCAAGCGGCCGCATT TGGATGCAACATACATACTCACTACCTTCCACTITCACCTACCTACC TACTGACTTAATATACCTTCTTGICATCTTTGATGGCACTGAATAAA GTACCTTCCTATTAAAACTACCTCAACCAGTCCAGTCATTACTACC CACCTTACATCTCGAGAAGCCTCCTTCCTCGATATACATTCTITCTC TTATATTAATGCAAAGATGTCGGAGCACGAACATCAAAAACATCTT TCCGATTCTGAAGAAGATTCCATAATGGAAGAGAGAGAGGAGAAA AAGGGAAAAGACGAGATAGAGGAGAAAGACAAAAAAGACGAGAA AGACGAGATAGAGGAGAAAGAGGAGAAAGAGGAGAAGGAGAAAG ACAAAAAAGACGAGGAAGAGAGAGAGGAGAGAGAGGAGAGAGAA GAGAGAGAAGAGAGAGAGGATACAGTTGATCAGAGTTCTGATCAT GAGAGTGACACCTTCGAGGATGCCAATGATGTTGAAGACATTGCA GACACTCTTACCTCCCCAGTTGAAAGGACAAGATCTTTAACGAAAC GAAGATCATCATCCATTAAGAGCAATACACAAGACCTCAGTACCG ATATCCCATCGGTCCCAACAGTACCACTTCCAGAAACGAATGGCG AAACGAATGACGAACAAATAGAATCCGATAATCCACTACCTAAATC TCCCCTTTTAACATCTCATCGCATGTCCACTACATCCCTACATAAT GTGAATCTCGAAGACGGTGATGATTTTGGATCACCTCCACCACCT CCTCCCGTTTCGAAAGTAGCACCAGAAGATCAACCACCCGAATTA
CCTCCAAAGCCCAATACAATAATTCCAATGCAGGGCCTTTCTGGA GCCCTTCCAGATGTGCCATTCTCACCGCCCCCoTCCTCCTCCTCCC
GCTCCTCCCGCTCCTGCAAACCTCGCTGCGCCAGCACCTGTCAC CAGAAAATTAACCAGCCCATTCTCATGGCTGTCGAGAAATACCTC GGCTCCAAAAGAGAACGTCAAGTCACCGCCATTACCTTCATCTCA CGCAACCGAGCGTAGACATACCGCTTCTTCGATAGCGACCATTAG CAGCAATCCTGAAATGATGGTAAACAAATTGGAGGAGGGTAATGA TACAGATGCCGCGAATGGAGTTAGACGACCTGGGAGGAATAGTTT ACGGGACAGGTTTAAGCTCGTGAGAATGCGAGAAGAGGCTGGAA TAACAGAATTGCCTGAAGAAAAGGATGAAGCAGGCAACACAGCAT TTGGGGGTCTCATTAGGCAGAGTACAAGTCTTGGTTTGGGATTTA CCGCCTCAAATGATGACAAAGACCCTTCTCCCGTATCTCCTGGTC CGCCTACGAGTCCCAACCCAATTAGTGTCAACCCTGCATTAGCCC CCGGTACGGCATCTGGAGTTTCTGCAGGCCCTTCTGCATTGGGTG AATCAGAAGCACCAGTCGATTGGGATTTGTGGCAAAATGTCGTCT GGGAAGGACCAGCTGCGGTAGCAAGAACAAGTGCAGAAGAGCTG AATCACGCTATTGCAACTGGTATACCACATGCTATCAGAGGCGTG GTATGGCAAGTATTGGCGGAGAGTAAGAATGAAGAGCTCGAGGTT GTCTATCGGAATTTGGTCAATCGGGGCACAGACAAGGACAAGGAC AGGATGAGTACATCTAGTGGGACACAAAGCAATGGATCAATCAAG GAGATTGTGGTTTCATCAGCATCATCAATACATTCAGAGAAATCTA CACCCGCTACGACAATCACCAATGGAATGAGATCTCCTTCTCCCC CTAGTGAAAAGGATGTAGCCCAGTCTTTGGCTGAAAAGAAAAAGA AAGCTAAGGAGGATGCGGCGGCATTGACAAAACTCGAGAGAGCC ATAAAGCGGGACTTGGGTGCTCGAACAAGTTATTCAAAATTCGCT GCAAGTGCTGGACTACAAGATGGATTATTCGGTTTATGCAAAGCA TATGCTCTTTATGATGAAGGTGTTGGTTATGCACAAGGCATGAATT TCTTAGTTATGCCTTTGCTTTTCAACATGCCCGAAGAAGAAGCATT CTGTCTATTAGTACGACTTATGAATCAGTATCACCTTCGAGATCTT TTTATTCAGGATATGCCAGGTCTACATAAACATCTTTATCAGTTTGA GAGATTATTAGAAGATTTTGAACCAGCATTGTATTGTCATCTCCAT CGACGTCAGGTCACACCTCACTTATATGCTACGCAATGGTTCCTA ACTCTTTTCGCCTATCGATTTCCATTACAGCTTGTGCTTCGAATTTA CGATCTCATTTTAAGCGAGGGTCTCGAGGCTATTCTCAAATTTGGA ATTGTACTCATGCAAAAGAATGCAGCTCATCTACTCACCCTCCATG ATATGGCTGCATTGACTACGTTCCTGAAAGATCGACTTTTCGATGT TTACATTGATGCTTCACCTITCAGCAGGATCAATTCTAGAATCTGGT TTCTTTGGAAATTCAGGAGCGACTATCGATAAGGAAGTTTATCGAG CAGATCATATGATTCAAGATGCTTGTGCCGTCAAAATTACACCCAA AATGCTGGAAACTTACGCATTAGAATGGGAGGAAAAGACCAAGAT AGAAAAGGATCGTGAAGCAGAATTAGAACACTTGAAATCAACAAAT GTCGCCCTTACACACAAAGTTCGACGTCTGGAAGAAAGAGTCGAA TCTCACGATACGGAGCACGCAGCTTTGGCAACTGAACTTGTITCGG ACTAAGGTCGAAAATCAAGAGATTCATGAAGAAACAGAAGTTCTTA AAGAACAAGTTAAAGAACTGAAAAAAGTAATTGATAAGCTACCGGA AGAAATTGAAGCGAAATTACAGAGTGAGATGGATAGATTGATGAA GAGAAATCAAGAAGTTCATGAAGAAAATCAAAAATTGGAGGATGAA ATGAATGAAATGGAACAAAACTTGGTGGAAACAAAAATGAAATATG CTGAGATGAATGCGGCCCATGAAGCTCTAACTCGTAAATGGACGG ATTTGAGAAAAGCTTTGGGTGATTAATATCGTTACTTTGAGATATC CTAAATTATTAAATACGACTTGTACAGTTCTTCTCAATTGATACCGA TGCCTTTGAAGTTTTTGGGGGGTAGGGGAGAGAGGCGTAAATGC CTATATTGGGGAACGAAGGAACAATGCTCTCGTTTGGAAGCTTGC TGGATTTCTTGCTAGGTGGAGGGGATGATTGGGAATCAATCAGAT TATACAGGTACTGCTGCATTGGTACGCAAATGGTATAGGAATTGG CGTGGGTTGTAAAAGTACCGGAGAAATACTTTGGGTGCTTGCTTG TCTTGTTTCTCTCTCTTTTITTTTAGTCGTTTTAGCGAGTTGTGATGT TGGTAGGAAAGAAATTAAGAAATTATGGACGGGTAGGGGGAGTG GAGAGAGGAAGGGAGGGGGTGAAAGAGGGTGGGGGGAGGGGA
AGAAATAAAAATTAAGAATAAATGATCA SEQ ID NO: 17 Sclerotinia sclerotiorum, Ss Gyp5p, SS1G 10712
ATGTCTGATCACGAGCATCAACAGCATCATTCCGATGCAGAAAAA GATTCAATAATGGAAGAAACAGAGAAGAGGGTTGAGCAGAGTTCG GATCATGAGAGTGACATGTTCGAAGATGCCAACGATGTTGAAGAC CTCACAGATACTCCTACTTCCCCAATTGAGAGAACTAGGTCTTTGA CGAAACGAAGATCATCATCTATTAAGAGCAGTACACAAGATATCAG TAGCGATATTCCATCGGTCCCAACAGTACCACTTCCAGAATCAAAT GGCGAAACGAATGACGAACAATTAGAATCCGATATTCCACCACCT AAATCCCCCCTTTTGACATCCCATCGCATGTCCGCTTCTTCCCTCC ATAATGTAAATCTCGAAGACGGTGATGATTTTGGTTCACCTCCACC ACCTCCTCCACTTTCGAAAGTAGCACCAGAGGAAATGACACCTGA TCAACCACCCGAATTACCACCAAAACCCAGCATAATTACTCCAATG CAAGGTCTTTCTGGAATCCTTCCAGATGTGCCATTCTCACCGCCA CCACCCCCTCCTCCTGCTCCCGCGCCTGCGAATCTTCCTGCGCC CGCACCCGTTACAAGAAAATTAACTAGTCCATTTTCATGGCTTTCA AGAAATACCTCGGCTCCAAAAGAGAACGTAAAATCGTCACCATTG CCCTCACCTCATGCGAATGAGCGAAGACATACCGCTTCCTCGATA GCAACCGTCGGCAGCAGTTCAGAAATGATGCTAAATAAATTGGAG GAGGGCAATGAAACAGATACCACGAATGGGGTCAGACGGCCTGG GAGGAATAGTCTGCGGGACAGATTTAAGCTCGTGAGAATGCGTGA GGAGGCCGGTATTACAGAGTTGCCTGAAGAACAGGACGAGGCAG GCAATATAGCATTTGGAGGACTCATTAGACAGAGTACAACTCTTG GTATGGGCTTTACAGGCTCTCACGACGACAAAGACCACTCACCCA ACGGAGGTGTTCCACCTGCGACTCATAACCCAGTCAGTGTCAATC CAGCATTGGCCCCAGGTACGGCGTCTGGGGTTTCTGCGGGCCCT TCTGCGATGGGTGATCCAGAAGCACCGGTCGACTGGGATTTGTIG GCAGAATGTTGTGTACGAAGGGCCAGCCGCGGTAGCAAGGACAA GTGCAGAAGAACTCAATCAAGCTATCGCAACTGGTATACCGCATG CTATCAGAGGTGTGGTATGGCAAGTTTTGGCAGAAAGTAAGAACG AAGAGCTCGAGGTTCTCTATAGAAGCTTGGTAAATCGAGGTACAG ACAAGGACAAGGACAGGATGAGTACATCTAGCGGAGTACAAAGCA ATGGATCAATAAAGGAGACTGTGGTTTCATCGGCATCGTCGATAC ATTCCGAGAAATCTACCCCGGCAACTACTGTCACCAATGGAATGA GATCTCCCTCTCCGCCGAGCGAGAAAGATGTAGCATTGTCGTTAG CTGAGAAGAAAAAGAAAGCGAAGGAAGATGCAGCGGCTCTGACA AAACTCGAGAGAGCCATCAAGCGAGACTTGGGTGCTCGAACGAG TTATTCAAAATTTGCTGCAAGTGCTGGACTTCAAGATGGATTATTC GGTTTATGCAAGGCATATGCTCTTTATGATGAAGGTGTTGGCTAC GCGCAAGGCATGAACTTTTTAGTTATGCCTCTGCTGTTTAACATGC CTGAAGAAGAAGCATTCTGTCTATTAGTACGACTTATGAATCAGTA TCACCTTAGAGATCTTTTTATTCAGGATATGCCAGGTCTTCATAAG CATCTTTATCAATTCGAGAGATTATTAGAAGATTTCGAACCGGCGT TGTATTGCCACCTCCATCGACGTCAAGTTACACCTCATTTATACGC AACACAATGGTTCCTTACTCTITTTCGCCTATCGTTTCCCATTACAA CTTGTGCTTCGAATTTATGATCTCATTCTTAGCGAAGGTCTTGAGG CAATTCTTAAATTTGGCATCGTACTCATGCAAAAGAATGCGGCCCA CCTTCTTACACTCACTGATATGGCTGCATTAACCACATTCCTTAAG GATCGACTTTTCGATGTITTATATTGATGCTTCTCCTICAGCAGGAT CAATACTGGAAAATGGTTTCTTCGGAAATTCTGGTGCGAGTATTGA TAAAGAAGTTTATCGAGCGGATCATATGATTCAAGATGCTTGTGCT GTCAAGATAACTCCAAAGATGTTAGAAACGTACGCATTAGAATGG GAAGAAAAAACCAAATTGGAGAAAGAACGAGAAGCAGAGTTAGAA AACTTAAATTGACGAATATCTCTCTCACACACAAAGTTCGACGTCT AGAAGAAAGAGTCGAATCTCATGATACCGAGCACGCGGCCTTGG CTACTGAGCTTGTTCGTACTAAAGTCGAAAATCAGGAAATTCATGA AGAGATCGAGACTTTGAGGGAACAAGTTAAGGAGTTAAAAAATGT GATTGAAAAGCAACCTGACGAAATCGAAGCAAAATTACAGAGTGA GATGGATCGATTAATGAAGAGAAATCAAGAAGTACATGAAGAAAAT CAAAAACTCGAGGATGAAATGAATGAAATGGAACAAAATTTGGTG GAAACAAAGATGAAATACGCCGAGATTAATGCAGCTCATGAAGCT
TTGAATCGGAAATGGACGGATTTGAGGAAAGCATTGGGCGATTAA SEQ ID NO: 18 Botrytis cinerea, Be Pan1p, BC1G 09414
GGCTTCAATTGACGTTGAAACATGAATGCTGAATGATGATACGATA CACTTTACTTCAGCCCCTTTAACATTTTGTCGCAAAATCGGTGAAA CTTGGGTTGTATGTATTTGTATATTAAAGATCGCTAAGCCCAGCCT CTATGGTAACAGATTACCTGAGCTTCGTCATTTCGACCCCCGGAC CGTGATCTTCTACCAACCTCGAACCCATTCCTTCAAATAAATGTCA CAAATCTATCTTTCTTCATACCTATTTCTTTTITTGTTCATACTCATAA TGTTTTCGGGTTCGAACTCGTACCTTGGTGGTAACACCGGCCGCC AACCACCACAGCAACCGCAACAACAATATGGTGGTTTCCAGCCAA ACCAAGGTTTCCAACCACAGCAGACTGGTTTCCAGCCACAACAGA CTGGTTTTCAACCTCAACCCACAGGATATGGTAATGCGGCTCCTIT ACAACCCAATTTCACCGGTTATCCACTTCAACCACAGCCTACGGG ATATTCTCAGCCCTCTCAAGCAGGCTTCCCTGGAGGCCAGCAGCA ACAGCAGCAGTTCAACAATGCTCCTCAACAGCAGAACTTCCAAAC GGGAGCTCCCCCAATCCCGCAGATTCCGCAGCAATTCCAGCAGC CTCAACAAACGCAACAGGCTCAACCACCTCCTGCACCTCCTGTGC AGCAACCGCAAGCGACCGGATTTGCTGCAATGGCAGATTCATTTA AACCTGCTGCTGCAGAGCCATCGAAGCCAAGAGGACGCAGAGCC TCCAAGGGGGGAGCAAAGATACCTAGTATACGACTTTCCTTCATT ACAGCCCAAGATCAAGCAAAGTTCGAAACTCTTTTCAAATCCGCTG TTGGGGATGGGCAAACACTTTCTGGGGAGAAATCGAGGGATCTTT TACTACGCTCAAAACTAGACGGGAACTCACTGTCGCAAATATGGA CGCTCGCAGACACTACAAGATCTGGACAGCTACATTTTCCCGAAT TCGCATTGGCTATGTACCTCTGTAATCTCAAGCTAGTCGGCAAGC AGTTACCATCCGTGCTTCCCGATGTTATCAAAAATGAAGTTTCTAG CATGGTGGATATCATAAACTTCGCTATAGATGATGATGCACCAGC GGCAACGAATGCGCCCAGTTTTGATGGTCGACAAAACACCGCGA CACCTCCGACTATCCAACAACCACAGCCAATGGCGTCTAATTCCG CCCTTCTCACTGCGCAAATGACAGGTTACCCTGGACAGCAGAATA ACTTTTCGGGTGGATTTCAACCACAACAAACAGGCTTCCAGGGCC AAATGCAAACTGGCTTTTCTGGACAGCAAGGCGGATTGCAACCTC AGCCAACTGGATATAATCAGATGTCAAACCCTCAAGCAACGGGCT ATAATGGACCGCGCCCTCCAATGCCTCCTATGCCATCTAACTTCA GTTCTCATTTATCTCCGGCTCAGACGGGTATGCAAGGTGGAATGA TCGCGCCATTGAATAGCCAGCCTACAGGAGTCGATGGCCAATGG GGCTTGGTAAATGCGCCAGCCCCCAATATCGATCTATTACATTCC CGGATGATGCCGCAACAGGGTCGAGAACAAGGCAACTTCACCAC GGCTGGTATAACAGGCAATGCTGAAATTCCATGGGGAATTACGAA AGACGAGAAGACCAGATATGATTCCGTTTTCAAAGCTTGGGATGG GTTTGGTAAAGGATATATTAGCGGTGATGTCGCTATTGAAGTTTIT GGGCAGAGTGGTCTCCCGAAGCCTGACCTGGAGCGCGTATGGAC CTTAGCAGATCACGGCAACAAGGGAAAGCTCAACATGGATGAATT CGCGGTTGCCATGCATTTGATTTATCGAAAGCTTAATGGATATCCT CTACCAGCCCAACTACCTCCGGCGCTCATACCCCCTTCCACTCGT AACTTCAATGATTCGATTGGGGCTGTCAAATCTTTACTITCATCAAG AATCTAATTTCCGCAAGAACTCTGGTGCTACCCTTTTGCCACAAAA GACTGGAGTGAGCTACCTCAAAAATCATTCTTTCCGTGGTGATGC TACCCCAGGTCGCACAGGCCGTAAAGACGCTACAGTATACAAAAA TAACGACGATGATGTTGGGTATAAATCTAGTGCTCGTCGCAGACT CGGGGCCTCTTCTCCACGACCTTCGTCTCCGGGATCAACAACTTC CAACGATGACCTTTCACTAGACCAGCTTAGAAAGAAAATCGCGGA GAGACAAGTGATACTGGATGCAATTGATTTCAAGGCCGAAAATGC TGCAGATGAAGATGATGCTCTTGATCGTAAAGATCGTCGTGAAGC AGAGGATCTTTATCACCGCATTCGTCGTATTICAAGAGGATATCGAT GCGCATCCAGACGCATCGTTGCGTAATGTTGATTCCGGCGCCGA GCGTCGTGCTTTGAAAAGACAGTTGCAGACATTGACAGATAAACT TCCAGATATTGCTTCGCGTGTCCGAAGAACGGAAAGAAGCATTGC TGATGCCAAGCTTGAACTATTCCGTCTAAAGGATGCCAAAGCTCA CCCTGGAAGTGCCTCTAGCATTGTTGGAACTGGTCCTGGCGGCG CTATCACCGAATCAGATAGACTCAAAGCAAGAGCCAAGGCTATGA TGCAACAACGTTCTGCTGCTCTCACTGGTAAGAAGATTGAGGCGA GTAATGATGACTTGGATGCGCCAAAACGCCTCGAAGAAGAAAATC TCAAGATTCGAACTGAGAAGGAAAACAACGAGCGCATGGTTCAAG ATGTTGAAGAGAGTGTCCGTGACTTTTCACGAGGACTGGAGGATA GTCTCAAAGATGGTGGTGAGAGCTCGTCCAGTGAGCATGAGAAG AGACGTTGGGAGGATGGGCTAGGTGTTGAGGATGAAGTGAAGGA CTTCATCTTCGATTTGCAAAGGAGCAGCAGGAGTGCCAGAGTTCG AACTGATGATCGCAGCAGAGAGACTCCTCGTACTGAAGCGTCTCA TGCTAGCCCTGCTCCAGCAGCTCGTAGCGAAACTCCATCGTCACA GCCATCATCTACACCAACCCCTGCTGGAGGTTCATACTCACAATA CAAGACTCCTGAAGATAGAGCAGCTTATATCAAGCAACAGGCCGA GAAGCGCATGGCTGAACGTCTAGCTGCTCTIGGTATCAAGGCACC ATCTAAATCTGGAGAAACAACACAACAGAGACTGGAACGTGAAAA GAATGAGCGTGCAGCCAAACTCAGACAAGCAGAAGAGGAAGATG CTAAACGTGAAGCTGAGAGGCAAGCTAGGATCGCTGAAGAGCAG GGTGCACCACCACCTGCCCCCGAGCAACCAAAGGAAACCGCGAA AAAGCCACCTCCACCCCCTTCAAGGAAGGCCGCAAGAAGTGACG CTAGTGAGCGCAAGGCCGAAGAGGAGAGAATCATTAACGAGCAA AAGGCACAAATTATTGCCACAAATGAGCTAGAGGACGATGCTCAA CGACAAGAGGCCGAGCTTGCAAAGGAACGCGAGGCGGCTCAGG CTCGTGTCAAGGCCTTGGAAGACCAAATGAAGGCCGGGAAATTGA AGAAAGAAGAGGAGAAAAAGAAGAGAAAGGCTCTCCAAGCTGAG ACCAAACAACAAGAAGCTCGTCTCGCAGCTCAACGCGCAGAGATT GAAGCCGCACAAGCACGTGAGCGAGAATTGCAACGTCAACTTGAA GCTATTGACGATTCAGATTCATCTGATGATGACGAAGGTCCTGAG CAAGTTACCCCTCAAGCATCAACGCCCACTCAAGGAAGTCAAGAG CTTGAGCGCAAAGAACCTTCTCCACCACCTCCTCCACCTTCAATTC CAGTTGTTGTATCACCAGTCCCTGCTATTGCAACAACAACTAGTCT TCCATCACCAACCCCACAAGTTACTAGCCCTGTTGTCAGCCCTCC AGTCGATACAGAGACCCGCAATCCTTTCTTGAAGAAAATGGCCCA ATCCGGTGACGCATCTACCGCATCTACTGCATCTAACAATCCATTC CATCGTCTTCCTGCTCAAGAGCTTTCTACACCTGCACCAATTCAAG TTCAACCAACAGGTAACAGGCCATCTCGTGTTCGTCCAGAAGAAG ATGATTGGGATGTCGTCGGATCTGACAAAGAGGATGATTCCTCTG ACGATGAAGGACCAGGTGCAGGTGGTGCGCGTCATTTGGCATCG ATCCTTTTCGGAACCATGGCACCTCCTCGCCCATTGTCATCCATG GGTAACGAAGCTACATCTGCGCCTGAATCTCCTGCTGTAGCATCT CCACCAGCGGCAACCCCCCCACCTCCACCAGTACCTAACTTCAAT GCACCGCCACCTCCTCCAATGCCATCAGCCGGTGCGCCAGGTGG TCCTCCACCACCACCTCCTCCTCCACCAGGGATGGGTGCTCCACC TCCACCACCAATGCCACCAATGGGAGGCGCTCCTGCTCCACCAG CAGGTGTACGACCAGCTGGTCTCTTGGGTGAAATCCAGATGGGG CGATCGTTGAAAAAGACACAAACTAAAGACAAGAGTTCAGCTGCT GTTGCTGGAAGGGTTTTGGATTAAATACCTTTCAAATCATTGAGAA GAGACAAGATGAAATGGAGGTTTGTGGTTAGCGAGCCTAAGAACA TGGATTGTATTATAAATTACTITTITGGTTCATAGTATTGGGCAAGGG GGCTTAGGTGTGGAAGGTGCGAAACAGGAAAGATAAGAGACGAG CATAATTTGTAGTCGAAGTAGCAATTTGAAAATATTCGTTCGTTTTG
ATAGTCATTTGATGCACTTATCACCA SEQ ID NO: 19 Sclerotinia sclerotiorum, Ss Pan1p, SS1G 05987
ATGTTTTCGGGTTCGAACTCGTATCTAGGTGGTAATAGTGGCCGG CAACCGCCACAACAACAACCACAGCAACAGCAACAGTATGGCGGT TTTCAGCCAAATCAAGGTTTCCAACCACAACAGACTGGCTTCCAG CCACAACAGACTGGTTTCCAACCTCAACCCACTGGGTACGGAAAC GTCGCTCCTTTGCAACCCAATTTCACAGGTTATCCTCTTCAAGCAC AACCTACAGGATATTCTCAGCCGCCTCAATCAGGGTTTCCCGGAG GCCAGCAGCAGTTCAACAATGCTCCTCAACAGCAGAGCTTCCAGA CGGGAGCTCCGCCAATGCCGCAGATTCCACAACAATTCCAGCAG CAGCCTCAACAAATACAGCAAGCCCAGCCATCTCCAGCAGCTCCC GTGCAGCAACCGCAAGCCACGGGATTTGCAGCGATGGCAGATTC ATTCAAATCTGCTTCAGAACCATCGAAGCCAAGAGGACGCAGAGC CTCTAAGGGTGGAGCAAAGATACCCAGTATAAGACTTTCGTTCATT ACAGCCCAAGATCAAGCGAAGTTTGAAACCCTTTTCAAGTCCGCA GTCGGAGACGGCCAAACATTGTCTGGCGAGAAATCGAGGGATCT CTTACTGCGCTCAAAGTTAGATGGGAACTCATTGTCGCAAATATG GACGCTCGCAGACACTACAAGATCTGGACAATTACATTTCCCCGA GTTCGCATTGGCAATGTACCTTTGCAATCTTAAGCTCGTCGGCAA GTCACTACCCTCGGTACTTCCCGATCAGATCAAGAATGAAGTTTCT AGCATGGTAGATATCATAAATTTTGCTATAGAAGATGATGGGCCAG CAGGAACGAATGCGCCGAGTTTTGATAGTCGACAGAGTACTGCAA CGCCTCCGACTATCCAGCAGCCACAGCCAATGCCGTCAAATTCTG CTTTACTCACTGCGCAAATGACTGGTTTCCCTGGACAGCAAAATAA CTTCTCCGGTGGGTTTCAATCGCAACCGACAGGTTTCCAGAGCTC AATGCAAACTGGCTTTCCTGGGCAGCAAGGAGGATTGCAGCCTCA GCCAACTGGATTCAGTCAGAATATGTCAAACCCTCAAGCAACGGG ATATACTGGACCGCGCCCTCCAATGCCCCCTATGCCATCAAACTT CAGTTCCAATCTGTCTCCTGCTCAGACGGGTATGCAAGGCGGCAT GATTGCTCCGCTGAATAGCCAACCTACAGGAGTCCCAGGTCAATG GGGATTGGTCAATGCGCCTGCAACTGGTTTGCCTAACATCGATCT ACTACAATCTCGGATGATGCCGCAGCAAGGCCGAGAACAAGGCA ATTTTACTACAGCTGGCATAACAGGCAATGCCGTCATTCCATGGG CAGTTACAAAGGAAGAGAAGACTAGGTACGATTCCGTCTTCAAAG CTTGGGATGGATTTGGAAAAGGATTCATTGGTGGTGATGTCGCTA TCGAGGTCTTCGGGCAGAGTGGCCTTGAAAAGCCCGACTTGGAA CGCATCTGGACCTTATCGGATCACGGCAACAAGGGAAAGCTTAAC ATGGATGAATTTGCGGTTGCCATGCATTTGATCTATCGAAAGCTTA ATGGATATCCTCTACCAGCTCAATTACCTCCCGAGCTTGTACCCC CCTCCACTCGTAACTTCAATGATTCAATTGGAGCCGTCAAATCGTT GCTTCATCAAGAATCAGATTTCCGAAAGAATTCTGGCGCGACACTT TTGCCCCAAAAGACTGGACTGAAGAAGAAAGTCAGAGAGAAGCAA GTGTTATTGGACGCGATTGATTTCAAGGACGAAAATGCTGCGGAT GAAGACGATGCCCTTGATCGTAAGGATCGTCGTGAAGCAGAAGAT TTGTATCGTCGCATTCGTCGTATCCAAGAGGACATTGATGCGCAC CCAGACGCTTCATTGCGTAACGTTGACTCCGGCGCCGAGCGTCG TGCCATGAAGAGACAGTTGCAGACATTGACAGATAAACTTCCGGA TATTGCGTCGCGTGTTCGACGAACAGAAAGAAGCATTGCCGATGC AAAGCTTGAACTCTITTCGTCTAAAGGATGCAAAAGCTCACCCTGG AAGTGCTTCCAGCATTGTTGGAACTGGTCCAGGTGGCGCGGTTAC CGAATCAGATAGACTCAAAGCAAGAGCTAAGGCCATGATGCAACA ACGCTCTGCTGCTCTCACTGGCAAGAAGATTGAGATAAGTAATGA TGATTTGGATGCACCAAAACGCCTCGAGGAAGAAAACCTTAAGAT CAGAACCGAGAAGGAAAATAATGAGCGAATGGTTCAAGATGTCGA AGAAAGTGTCCGCGATTTTTCACGGGGTCTGGAGGATAGTCTCAA AGATGGTGGCGAGAGTTCATCTAGCGAGCATGAAAAAAGACGCTG GGAGGATGGGCTCGGTGTTGAAGATGAAGTCAAGGACTTCATCTT TGATTTGCAAAGGAGCAGTAGAAGTGCAAAAGTTAGGACTGACGA TCGCAGTAGGGAGGCTCCCACTGAGACGTCTCGTGTTAGCTCCG CTCCAGCAGCTCGTAGTGAAACTCCATCGTCGCAGCCTTCATCTA CACCAACCCCTTCTGCAGGTACATATTCACAATATAAGACAGCAGA AGATAGAGCAGCGTACATCAAGCAACAGGCAGAGCAGCGCATGG CTGAGCGTCTAGCTGCTCTTGGCATTAGGGCACCTTCTAAACCTG GAGAGACAACACAACAGAGATTGGAGCGTGAGAAGAATGAGCGT GCTGCTAAACTCAAGCAAGCGGAAGAGGAAGATGCTAGACGTGA GGCCGAAAGGCAAGCTAGAATTGCTGAAGAGCAGGGAGTGGCCC CACATACACCGGATCAACCAAAAGAAATTACGAAAAAGCCACCTC CGCCGCCTTCGAGGAAGGCTGCAAGAAGCGACGCTAGTGAACGT AAATTCGAAGAGGATAGAATCCTCAAGGAGCAAAAGTCACAAATTA TTGCCACAAATGAGCTAGAGGACGATGCTCAACGACAAGAAAATG AGCTTGCAAAAGAGCGCGAGGCAGCTCAAGCTCGTGTGAAGGCA TTGGAAGAGCAAATGAAGGCTGGGAAATTGAAGAAAGAAGAGGAA AAGAAGAAGAGAAAGGCTCTACAAGCCGAGACGAAGCAACAAGA AGCTCGTCTTGCAGCTCAACGTGCGGAGATCGAAGCCGCCCAAG CACGTGAGCGGGAATTGCAACGTCAACTGGAAGCTATTGATGATT CAGACTCATCAGATGATGATGAAGGTCCAGAGCAAGTTACTCCTC AAGCGTCAACACCAACTCAGGGGAGCCAAGAATTTGAGCGCAAA GAAGCCTCTCCACCCCCTCCTCCTCCCTCAGTCCCAGTCATTGTA TCACCCGTCCCTGCGGCAGCAACAACAACCAGCCTTCCCCCACC AACCCCACAAGTTACTAGCCCTGTTGTCAGCCCTCCAGCTGAAAC AGAAACCCGCAATCCTTTCCTGAAGAAAATGGCTCAATCTGGTGA TGCTTCTGCCGCATCTACTGCATCTAACAACCCATTCCATCGTCTT CCTTCTCAAGAACTTCCCGCTCCTGCGCCAATTCAGGTTCAGCCA ACAGGTAACAGACCATCTCGTGTCCGTCCAGAAGAGGATGATTGG GACGTTGTTGGATCTGACAAGGAGGATGATTCCTCTGATGATGAA GGACCTGGTGCAGGCGGCGCGCGTCACTTGGCATCGATTCTITIT GGAACCATGGGACCTCCTCGTCCTTTGTCGGCTATGGGCAACGAA GCTACATCCGCACCTCATTCGCCTGCTGCGGCATCTCCACCAGTG GCATCTCCACCACCTCCACCACCCATGCCATCAGCCGGTGCACCA GGCGGTCCACCTCCACCACCTCCTCCTCCGCCACCAGGAATGGG TGCTCCACCTCCACCACCAATGCCTCCCATGGGAGGGGCTCCTG CGGCCCCACCTGCGGGTGGACGACCAGCTGGATTCTTGGGTGAA ATCCAGATGGGGAAAGCTTTGAAGAAGACACAAACTAAGGACAAG
AGTGCAGCTGCTACGGCTGGGCGAGTTTTGGATTAA SEQ ID NO: 20 Botrytis cinerea, Bc Srv2p, BC1G 14507
GGGTGTGGGTGTAGATGAATTAAATGAAGAACATCAGCGTTCCAA GGTAATCCGTATCCATCATATCACATCACATCTCTTCACATCACTC CAATATTCTCTCTTCTATCCTCTCTCTCTCTCTCTCTCCCTCTCCCT CTCTGTCTTCCTCCCCCTCGCCGTCGTCGCTTCATTGTAGGAGAC CTCTTTCTCGTCGCTCCATACCAGTCCCGCAAATCGATAGCTTCTIT CCATTTGCCTGCTAATTACCATTCCATATTACATTATTTATATGCGT AATTAGCAACCTTTTGCCTCCTTCCCCTTGCATTAGCACCACGAAA CATCGAGAACCAGACAGCTCCATTCCCTCAAACAACCTCCTATTC GATCGATCATTCCTTCTTICAACAAGACTTTGGAACAACTACTGCAC TTCAATATGTCTCAACAACCTGAAGCTGTAAATAATATGCATAATTT GACTACGCTCATAAAACGACTCGAAGCCGCAACCTCTCGTCTTGA AGATATAGCTTCCTCTACCATTCCACCACCTGCTTCATCATCCATC CCTCTAATTTCTCCTCCGGCCGAAGCTGCGAAAACAAATGGCACA ACTCCGCCGCCGCCAACGATCCAAACACCAGATATCAAAAAGATC ATCGAGGATCCAATCCCAGGAGTAGTCTCAGAGTTCGATAATTTTA TTCAGGGGGCGGTTAAGAAATATGTTAACTTGAGTGATGAGATTG GAGGGGTTGTTGCGCAGCAGGCATCTAGTGTATTGAAGGCATATG TCGGACAACGAAGATATATTTTGATCACTACAAAGTCAAAGAAACC TGGCATGCAAGATGAACCATTCCAAAAGCTCATCAAACCTCTICAG GATTCATTTACTGCCGTTGATGATATCCGAAAGTCCAATCGTGCAT CTCCATTCTTCAATCATCTCAGTGCTGTTTCTGAAAGTATTGGTGT ACTTGCCTGGGTTACAATGGACAACAAACCATTTAAACATGTCGAT GAATCATTGGGATCTGCTCAATATTACGGAAACAGAGTATTGAAG GAATTTAAGGAGAAAGACCCAAAACAAGTCGAATGGATTCAAGCA TTCTATCAAATCTTTAAAGATCTCAGCGAATATGCTAAGGATAACTT CCCAAACGGTATTCCATGGAATCCAAAGGGTGAAGATTTGGAAGT TGCGATTAAGGATGTAGATGAAAAGGCTCCAGCCCCTCCTGCTCC TCATCCAAAGGCTGCAACTGCTGGAGGTGCCGCACCACCACCAC CCCCTCCACCTCCTCCTCCACCAGTCTTCGATGACATTCCATCAAA GCCAGCACCAAACCAAGCAGATTCAGGTGCTGGACTAGGAGCCG TTTTCTCTGAACTGAATAAAGGAGCAGACGTTACAAAAGGATTGCG CAAAGTGAATGCTGATCAAATGACACATAAAAATCCTTCTTTGAGA GCAGGTGCTACAGTTCCCACCAGAAGTGATAGTCAATCCAGTATT AATTCGAACCGAGGAAAGAGTCCTGCTCCTGGTAAAAAGCCCAAG CCAGAGAGTATGAGAACTAAGAAACCCCCTGTTAAAAAATTGGAG GGTAACAAGTGGTTTATTGAAAACTACGAAAACGAGTCTGAGCCA ATCACAATTGAAGCATCTATTTCACACTCGATCCTCATTTCCCGCT GCTCAAAAACCACTATTATCATTAAAGGAAAAGCAAACGCTATTTC TATTGACAACTCCCCTCGTCTTGCCTTGGTAATTGATAGTCTCGTC TCATCGATTGATGTTATCAAAGCACCAAACTTCGCACTTCAAGTAC TGGGCACATTGCCAACGATTATGATGGATCAAGTTGATGGTGCTC AAATTTACTTGGGGAAGGAGAGTTTGAACACGGAAGTCTTCACGA GTAAATGTAGTAGTGTCAATGTGCTACTTCCAGATTTGGAGAGTGC AGACGGGGAAGGAGATTACAAGGAGGTGCCGTTGCCCGAACAGT TGAGGACTTGGGTGGAGAATGGAAAGGTCAAGAGTGAGATTGTTG AACATGCTGGATAGATTGGTTGAGATGGATTGTGGAGTTTGGGGA GAGGCTCTGGCGAAAACTTGTTGGGGGTGAGGGGTAATGAGATG TGATGGAGAATCTGGGTAGATTTGATATTATAGAGATAGTTGAGTG AAGTTTTATATCATCGCATGTTAGTTGAAGTTTTCAGGCAGAGTAG AAGTCAAAGTTGAATTGTACATATCTATGTATATGTATATCCGAGG CTTGTCTCGCTTTGTTGTITTAGTAGATTTCAAACCGAAGATTTTCTA CTCATCATATCGTGCCGTGTGTTTTATATTGGGCGATGTGTCGTTG
TGCTTTTTCTCTCTCTATCTCTTTTACTTTCAGGGAAATAAATATA SEQ ID NO: 21 Sclerotinia sclerotiorum, Ss Srv2p, SS1G 13327
ATGGCTACAAATAATATGCATAATTTGACGACGCTCATAAAACGAC TCGAAGCCGCGACCTCACGCTTAGAAGATATAGCCTCATCAACTA TTCCCCCTCCCAGTACTCCCAAAACAAATGGTACAACAAGCGTCG CATCTCCTACCGTACAAGCCGCTACTCCTACAGTTGTAGCCCCGA CTATTCAAACCATTATCGAAGATCCAGTTCCTGAATCAATCAGCGA ATTCGATGCTCTAATTCAGGGGCCTGTGAAGAAATATGTTAATCTT AGTGATGAGATTGGTGGGGTCGTTGCGGAACAGGCATCCGGTGT ATTGAAAGCATTTGTCGGGCAGCGAAGATACATTTTAATTACCACG AAGTCGAAGAAACCCGCTATGCAAGATGAACCATTCAAAAAACTC ATCAAACCTACTCAAGATTCATTCTCTGCTGTTGACAAAATTCGAA AGTCTAATCGTGATTCACCGTATTTCATTAATCTCAGTGTTGTTTCG GAAAGTATTGGTGTACTTGCTTGGGTTACAATGGATAATAAACCAT ATAAACATGTTGATGAATCATTGGCATCGGCTCAATACTTTGGAAA TAGATTATTGAAGGAATTCAAGGAGAAAGATCCCAAACAAGTTGAA TGGCTTCAAGCATTTTATCAAATCTTCAAAGAACTTAGCGAATATG CTAAGAATAACTACCCAAATGGTATTCCGTGGAATCCGAAGGGAG CAGATTTAGAAGATGCTATCAACGAAGTAGATTCGAACGCTCCAG CCCCTCCTGCTCCTCACCCAACAGCGACTAGTGGAGGAGCCGCG GCACCACCACCACCTCCTCCTCCTCCTCCTCCACCAGTTTTCGAC GACATTCCAACAAAATCTGCACCAAAGCCAGGAGATGCAAGTGCT GGACTAGGAGCTGTTTTCTCTGAGTTGAATAAGGGAGCAGATGTT ACGAAGGGATTGCGCAAAGTCAATGCTGAACAAATGACACATAAG AATCCATCTTTAAGAGCAGGTGCTACTGTTCCTACTAGAAGTGATA GTCAATCTAGTATTAGTTCGAACCGTGGAAAGAGTCCTGCTCCTG GTAAGAAACCTAAGCCAGAGAGTATGAGAACTAAGAAACCTCCTG TTAAGAAGTTGGAGGGTAACAAGTGGTTTATTGAGAACTACGAAAA TGAATCATCGCCAATTGAAATCGAAGCTTCAATTTCGCATTCGATC CTCATTTCCCGTTGCTCAAAAACTACAATCATGATTAAAGGAAAAG CAAACGCCATTTCCATTGATAATTCCCCTCGTCTTTCCCTAATTATC GAGAGTCTCGTTTCATCAATTGATGTTATTAAAGCACAAAGTTTTG CGCTTCAGGTATTGGGGACATTGCCAACAATTATGATGGATCAGG TTGATGGTGCACAAATTTACCTTGGGAAGGAAAGTTTGAACACGG AAGTTTTCACGAGTAAATGTAGTAGTGTTAATGTACTATTACCGGA TCTGGAAAGTGAAGAGGGTGAGGGTGATTACAAGGAGGTGCCAT TGCCGGAGCAATTGAGGACTTGGATTGAAGATGGGAAGGTTAGAA
GTGAGATTGTGGAACATGCCGGTTAG SEQ ID NO: 22 BC1G 10728
GACACATGCGATATGCAAAGTCTAGAACCTCGAATACTGATTCGA AAAAGACTGGCAATTCCATAAATCTACAGTATATTTTAATCCGCAA CTCATGAATGACTACATTTAATACGAATTACAAACATTCCCTAACG CCAAAATGGCAGCTACGATTCCCCTCTCCACTACAACATGCTTGA CCTCCTCAGAAGCTTTCAAATATCCTCTICCACAGATTCGTCAATT CCACCGCGATCTCACTACAGAGCTTGACGAGAAAAATGCACGTCT GCGGACACTGGTCGGAGGGAGTTATAGACAATTACTTGGAACCG CCGAGCAAATCTTACAGATGCGACAGGATATTAGTGGAGTAGAGG AAAAGTTAGGCAAAGTAGGAGAAGGATGTGGGAGAAATGTGTTGG TTGGAATGGTTGGCGGATTGGGAAAATTACAGGGAGAAATGAAGA ATGGAAAGAAGGGCGAGGAAATGCGGGTTGTGGCTAAGATGAAG GTATTGGGTATGTGTGGGATITGTGGTTGGGAAGCTCTTGAGGAGA CCAGGGCGAATGGATGGGGATGGTGGGAGAGGGAAGGAATTAGT AGTTGCTGCGAAAGTCTTAGTTTTGAGCCGATTGTITGGCGAAGAG CTTGGAGAATACTGGAGATAAGGAATTCGTTGAAGAAGCGAAGAA GAAGAGGTCGGCTTTGACGAAGCGATTGTTACGCGCAGTTGAAAA GACATTGGTTTCCGTCAAGGATGCTGAAGATAGAGACGATTTGGT ACAGACACTTITGTGCATACAGTCTAGCTACTAGTTCTGGCACCAAA GACGTCTTGCGACATTTCTTAAATGTTCGTGGTGAAGCAATGGCTT TAGCGTTTGACGATGAAGAGGAGTCGAACAAGCAGACCTCAGGT GTCCTACGCGCTTTGGAAATATATACGAGAACTTTACTAGATGTAC AGGCTCTAGTGCCAAGGAGGCTGAGCGAAGCGTTGGCTGTGCTG AAGACGAAACCTTTACTGAAAGATGACAGCATTCGGGAAATGGAG GGATTGAGGTTGGATGTATGTGAGCGGTGGTTTGGCGATGAGATT ATTTACTTCACACCTTATGTCCGGCATGATGATTTGGAAGGGTCAT TGGCGGTTGAAACACTACGAGGTTGGGCGAAGAAAGCGTCAGAA GTGTTACTGGAAGGTTTTACGAAGACTCTTCAAGGGGGATTAGAC TTTAAAGTAGTTGTTGAACTACGAACAAAGATTCTGGAGGTGTGG GTTAGAGATGGAGGCAAAGCAAGGGGATTCGATCCCTCTATACTT CTAAATGGCTTACGAGACGTTATAAACAAACGACTCGTAGAGTTAT TAGAAACTAGAGTTGGCAAACTTCATCTAGTGGGGACAGAGATAG AGTCCACATTAGCAACATGGCAAGAAGGAATCACCGACATACATG CAAGTCTTTGGGACGAAGATATGATGGCAACCGAGCTCAGCAATG GTGGTAACATTTTCAAGCAAGACATACTTGCTCGCACGTTCGGAC GGAACGATGCTGTTTCAAGAGTTGTTAACAGTTTITCACACTTGGAG ACATCTCATCGAGGAAATTGGTACTTATATTGATGAACTGAAGAAA CAAAGATGGGATGATGATTTGGAAGATATGGAAGATGATGAAAGT CTCGAATCACGACAAAACCTTCTTAGCAAGGAAGATCCACAAATG CTACAAGATCATCTCGATTCAAGCTTAGAAAATTCGTTCCAGGAGT TACACGCAAAGATCACTITCACTGGTGGACCAGCAAAAAGATAGTA AACATATCGGGAAAATATCGATATATATTCTCCGAATTCTACGAGA TATCAGAGCAGAATTACCTAGTAACCCTGCACTACAAAMAGTTTGGA CTCTCACTTGTCTCATCACTGCACGAAAATCTCGCAGGTATGGTCT CAGAAAACGCCATCTTAGCCCTTGCAAMATCTCTCAAGAAGAAGA AGGTTGCGGGCAGAGCATTATGGGAGGGTACACCGGAACTTCCT GTTCAGCCCTCCCCAGCAACATTCAAATTTTTGAGAGGTTTATCGA CTGCTATGGCTGATGCTGGAGCCGATCTATGGAGCCCTGTTGCC GTCAAAGTGTTGAAAGCGCGTCTGGACACCCAAGTTGAAGACCAA TGGAGTAAGGCTCTAAAAGAAAAAGAGGAAGAGCCTAGCAATGGA ATCTCTGGTTCTCCCACCAATGCTCCCGAAGCAGATGCCGAGGAA AAAGAAGGGGACGCTTCTGCTCCTAATCCTGCTGCTGCTGTAGAA GTAGATGAAGAAAAACAAAAGGATTTACTAAAGCAATCACTGTTCG ATATATCTGTCTTGCAGCAAGCTTTAGAATCACAGTCAGACAATAA GGAGAACAAACTTAAGAACTTAGCGGATGAGGTGGGAGGAAAACT AGATCTCGAGGCGAGGGAAAGGAAACGTATGGTTAATGGCGCGG CGGAGTATTGGAAGAGGTGCAGTCTTTTGTTTGGACTTTTAGCGT AGATTCCAGATGGATGAATTAGTGAGAGGCTTATAATGAATTATAT
TACGAATACTTTACTTTTGAGTATTCA SEQ ID NO: 23 BC1G 10508
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ATGCA SEQ ID NO: 24 BC1G 08464
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TAATGGGGA SEQ ID NO: 25 BC1G 15133
GAGTATTCTCGATTAGACAATTAGAATTCTCGAACAATAGAAGCCG GAGCTCGAGTTCCTCGATCTTTACCTACCTGAAGTCTCTCGATCA GAAGAGTGTCAAATTCCTATGATATCAATGATTATTGAGGATATATT TACAAAATCAAATCTCTTCAATGAATCTCTATCTACCTAAGCAAGTC AATTATGATTGATTACAATTATCGTTGTTGCACGGAATCCAGTCGC ATTTGGTCCCGGTCACTCGTAACAGCAACCACATCGGTATTTCGT AGATTCCCGAGTATTGCCTTTACATACCTAAGGAACTTTAAATCCC CCCAACAACAGAATTGACGACAGAATTACTACCATTACAAGTGAAA ACACTCCATGGTACCCAAATACAACAGTCTCATATAGCCATTTGAT CGCAACTCGCATCTTITCATCTACAAAATGTCGTTTGGAGGGGACA TCGGACTCGATACAACATCGTCGTCCAATGCTGCTGGTAATGGCG GCAACCAGGGCGAGACAACTGGAAGACCTGCCACCCCTCAAGAT GCAACCGCAAAAGCAGTTCAAGATGTCACAAGCTCGGAGATTGGA ATATCAACCTTGTTAACCCGACTGAAACAAAGTATTGCTTCCGCAA AGGAATTCGCACTTTTCCTCAAGAAACGGTCCATCATGGAAGAGG AACATTCGAACGGTTTAAAAAAGCTGTGTAAGGCAACCGGGGATA ATATTCGCAGACCAGAGCATCGACACGGATCGTTTCTACAGTCAT ACGAAGAGGTCCTCATTATACACGAGCGAATGGCCGAGAATGGG GCTCAATTTGGCGTGTCTCTACATCAGATGCATGAGGATCTTATCG AAATGGCTTCGAACATAGAGAAGGGCAGAAAGCATTGGAAGAATA CTGGGTTGGCAGCAGAACAACGTGCTGCTGATACCGAAGCTGCC ATGAAGAAGTCGAAGGCGAAGTACGACTCTCTGGCAGACGAGTAT GATAGAGCTCGCACTGGGGACAGGCAACCAGGAAAGATTTTTGG CCTCAAGGGCCCCAAATCGGCAGCGCAACATGAAGAGGACCTTC TTCGCAAAGTCCAGGCTGCCGATGCAGATTATGCGTCCAAGGTAC AAGCTGCGCAAAGCCAACGAACCGAGCTCTGGTCAAAATCAAGAC CTGAGGCTGTGAAAGCTCTAGAAGATCTCATTCAAGAATGCGACT CTGCATTGACATTGCAGATGCAGAAGTTTGCATCCTTTAACGAAAA GCTACTTTTGAGCAATGGCTTGAATATAAGCCCTATCAAAGGAAAA GAGCAAGGGACATTAAATCGCAGTCTCCGTGAAGTTGTTCACGCA ATTGATAATGTTAAAGACCTGAGCAACTACATCAGTAGCTTCTCTG GTAACATGCAGTCCCGGATCACGGAAATCAAATATGAGCGTAATC CGGTTTTGCAACCCGCACAAAATACCGCTCAGCGACAATCGGATC CCAACGCTCTCCAAGCTCGACAAGGACCCGTAATACCACCACAGC CATCTCACCAAGTTCATATGAGCCAACCTTTTAATCAAAGCAGTCC CCCAACTCACCAGCGCGAAAGAAGCTTTAGCCATGGCCCATCTCT TTCGCAACACATCGTTGCACCTGTITGTATCGCCCACTAACCCAATA TCCACCTCTCCCGACTTCAATACCTGGTCACCTCGTGCAGATGGC CCCCCCCAGATATCAACCTTGCCATTTCAGCCACAACCTCAAAMAC GAGACACCAATACAACAGACACCACAAAACCCTACAACGCATGCA CCAGTGTCCCATGGCCCATCCTCGGCACCACTATTICGGAGCGGG ATCGGCTCCAGCTCCAGGCAACAGCACTCATCTAGCACCTTTGAA ACCAGTGTTTGGACTCAGCCTCGAGGAACTCTTTGACAGAGATGG CTCTGCTGTTCCAATGATTGTCTACCAGTGTATTCAAGCAGTTGAC CTCTTTGGGCTCGAGGTCGAAGGAATATACCGGCTATCTGGTACC GCATCTCATATAATGAAGATCAAGGCAATGTTCGATAACGACGCAT CTAAGGTGGACTTCCGTAACCCGGAAAGCTTCTTTCACGATGTCA ATAGTGTGGCTGGTCTTCTCAAACAGTTCTTCCGCGAACTCCCAG ACCCTTTATTGACTATCGAGCAATATCCTGCATTTATCGAGGCTGC AAAGCATGATGATGAAATAGTCCGTCGCGACTCTCTACATGCGAT CATCAATGGCCTTCCTGATCCCAATTACGCTACTCTTCGAGCCTTG ACTTTACATTTAAATAGAGTACAGGAGAGTTCGGCATCTAACAGGA TGACTGCAAGCAACTTGGCCATAGTATTTGGCCCTACACTCATGG GTGCTAATTCAGGACCGAACATGTCAGATGCTGGGTGGCAGGTTC GTGTCGTTGACACTATTTTGAAAAACACTTATCAGATATTTGACGA CGACTGAGGCGAAGAAGATTGTCGATTGACTTGAAGAGTTCTTAA CGAGATACCATAGCTGCTCATATTATGAACCTGCCTTTGGAACAGA AACAAGGGCAGGGAATTCCTAGCATCAGACCTCTATTTGCCGACA AGACATTCTAAAGAAAGTACATGCCACTGTATTTCGAATACTATTAT TGTAAGGCACGGGCCTGTTGACAAATATTTACGGTCTATCAAGCG AGTGTACGTCAGGGGGTGGTCTACACCACGATCGATTTTGTAGGG TCATGTGCTCAGCTCTGATGCCAGTATTGGTGCAACTATTGAATCA AAAGGGTACCAAGGTTTCAATACTCGTTAATTTTGGATCACGAAAA
GATCA SEQ ID NO: 26 BC1G 09781
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TAATCTATGCTGTGGAAGAAACCA SEQ ID NO: 27 BC1G 05327
GGGTCTATTCACACCTCTCCCTCGATCAATACGACGTCTGCGGCT TCTGCAACCCATTGAGAAAGGTAGAAAAGAGGTTCAAAAAGTCGA GATTCCCCGTGCCTATTCTICCTITCTTCTTCCTGTTCTCCTCCCAC TTTCCTCCGTGTGATACTTCGTCTATATCTACCTCACCCCCTCCCC CTCGAACGCAGATTGTACCGATACCCCAAGTGATTCCGCCGTACC GTGTACGCGTTTTCATTAATTTACCATATCGTATTACCTACCTATTA CCTACTACCTATTACCCATTACCTACTCCCTCCCACCACTACTCGA CTCTACCTGGGTGCGTTGCGATTATATTCTTCTTCTTAGTAGCTCG TTTTACTAGAAAGCTTTCCCACCCACCCAGCTTGAACCCCTCCATT ACCAAGAACTTTAAACGCTACCCATCCATCCTTGGGCCGAACCTA GACCGAAAACCCCTCCGTCCGTTGTGATAAATCCAACGAGCACAG AAGCTCAACAAATACCATCACCGTCCAAATCCCAATCTTCTCAAAC GTTCAGTCATGGCTCACCACGATGAGAAAGGTCCTCATGGAGATG GAGCTTACAGTGAGGTTTTTGAGGAGGGTTCCGACATCAAACACC CACATACCGTCCATCGTATCAGAGCCAACTCCTCTATTATGCAACT GAAGAAGATTCTTGTTGCCAATCGTGGAGAAATTCCTATTCGTATC TTCCGTACAGCCCACGAGCTTTCTCTCCAAACAGTCGCAGTCTTTA GTTATGAGGACCGTCTTAGTATGCACAGGCAGAAGGCCGATGAAG CATATGTTATTGGAAAGCGGGGTCAATACACACCAGTCGGTGCTT ACTTGGCTGGAGATGAAATCATCAAGATTGCTCTCGAACATGGCG TTCAAATGATTCATCCTGGTTATGGTTTCCTITTCTGAAAATGCCGA GTTTGCAAGAAACGTTGAGAAGGCTGGACTTATCTTCGTTGGTCC TTCGCCAACCGTTATCGATGCCCTTGGAGACAAGGTATCTGCCAG AGAAATCGCCATCAAGGCCGGTGTACCAGTCGTTCCAGGTACCGA AGGAGCTGTCGAAAAATTCGAGGATGTAAAGAAATTCACCGATGA ATATGGTTTCCCAATTATCATCAAGGCAGCATATGGAGGTGGTGG ACGTGGTATGCGTGTTGTCCGACAACAAGCAGAACTCGAAGATTC TTTCAACCGTGCCACATCCGAAGCCAAGTCGGCTTTTGGTAATGG AACTGTTTTCGTCGAAAGATTTCTCGACAAACCAAAGCACATTGAG GTACAACTTTTGGGAGATAACCACGGAAACATTGTTCACTTGTACG AACGTGATTGTTCCGTACAACGTAGACATCAAAAGGTGGTAGAAA TCGCACCAGCTAAGGATCTTCCCCAATCAGTTAGAGATAACCTCTT GGCCGATGCTGTCAGACTTGCCAAGTCGGTCAACTACCGCAACG CAGGAACGGCTGAATTCTTGGTTGATCAACAAAACCGTTACTACTT TATCGAAATCAACCCACGTATTCAAGTCGAACATACTATCACCGAA GAGATCACTGGAATTGATCTTATTGCAGCACAAATTCAAATCGCTG CAGGTGCAACCCTTGCTCAATTGGGTCTTACACAAGATCGCATTT CCACCAGAGGTTTTGCTATTCAATGTCGTATCACCACAGAAGATCC ATCCCAGGGATTCTCACCAGATACTGGAAAGATTGAAGTCTATCG TTCAGCTGGTGGTAACGGAGTTCGTCTTGATGGTGGTAATGGATT CGCTGGCGCAGTTATTACTCCTCATTATGATAGTATGTTGGTCAAA TGTACTTGCCAAGGATCTACTTATGAAATTGCTCGAAGAAAGGTCC TTCGTGCTTTGATCGAATTCCGTATTCGTGGTGTCAAGACCAACAT TCCTTTCTTGGCTACTTTACTCACTCATCCTACCTTTATTGACGGTA ACTGCTGGACCACATTCATCGACGATACCCCTGAACTGTTCGATTT GGTCGGTAGTCAAAACCGTGCTCAAAAATTGTTGGCATACCTTGG AGATGTTGCCGTAAACGGAAGTAGCATCAAAGGTCAAATGGGAGA ACCAAAATTCAAGGGTGAAATCATCATGCCAGAACTCTTTGATGAG AGTGGAGCCAAGATTGATACCTCTGTACCATGCAAAAAGGGATGG AGAAACATTCTTCTTGAGGAAGGTCCTGAGGGATTCGCCAAGGCT GTCAGAGCAAACAAAGGATGTCTTCTCATGGACACAACATGGCGT GATGCTCATCAATCGCTTCTTGCTACACGTGTTCGAACAGTTGATC TTTTGAACATTGCAAAGGAGACAAGTCACGCTTACAGCAACTTGTA CAGTTTGGAATGTTGGGGTGGAGCTACTTTCGATGTTGCCATGCG TTTCCTTTATGAAGATCCATGGGACAGACTCAGAAAGATGAGAAA GCTTGTTCCAAACATTCCGTTCCAAATGTTGTTGCGTGGAGCTAAC GGTGTTGCTTACTCTTCATTGCCTGATAATGCTATCTATCACTTCT GTGAGCAAGCAAAGAAACATGGTGTTGATATTTTCAGAGTTTTTGA TGCTTTGAACGATATTGATCAACTTGAGGTTGGTATCAAGGCTGTA CACAAGGCTGGTGGTGTTGTTGAGGGTACAATTTGCTACTCAGGT GACATGTTGAACCCAGCCAAGAAATACAACTTGGAGTACTACTTGT CTTTGGCTGAGAAGCTTGTTGCTCTTAAAATTCACATCTTGGGTGT TAAGGATATGGCTGGTGTTCTTAGACCAAGAGCTGCTACATTGTT GATTGGAGCTCTTCGCAAGAAGTATCCCGATCTTCCAATCCACGT TCATACTCACGACTCTGCCGGAACTGGTGTCGCATCTATGGTTGC TTGCGCTCAAGCAGGTGCTGATGCTGTCGACACTGCTACTGATAG TTTGTCTGGTATGACATCTCAACCAAGTGTTGGAGCTGTCCTTGCT TCATTGGAAGGATCAGAGCTTGACCCAGGCTTGAACGTTCACCAT GTTCGAGCTATCGATACCTACTGGTCTCAACTTCGTCTCATGTACT CACCGTTTGAGGCTGGTTTACACGGACCAGACCCAGACGTGTAC GAGCATGAGATACCCGGTGGTCAATTGACCAACATGATGTTCCAA GCATCTCAACTTGGTCTCGGTGCTCAATGGGCCGAGACAAAGAAA GCTTATGAGCAGGCCAATGACTTACTGGGTGATATCGTCAAGGTC ACTCCAACATCTAAGGTTGTTGGTGACTTGGCACAATTCATGGTTT CCAACAAACTTGACTTCGATTCCGTTCAAGCTAGAGCCAGTGAATT GGATTTCCCAGGTTCCGTTTTGGAATTCTTTGAAGGTTTGATGGGT CAACCATACGGTGGTTTCCCTGAACCATTGAGAACCAATGCTCTC CGTGGCCGACCCAAGCTCGACAAGCGCCCTGGTCTCACTCTITGC GCCACTTGATTTGGCTCAGATCAAGAAAGACATCCATGCTAAATG GGGCAGCGTTACTGAGTGCGATGTTTCAAGTTATGCCATGTACCC TAAGGTCTTTGATGAGTACCGAAAGTTCGTTCAGAAGTACGGTGA TTTGAGTGTTCTTCCAACTAGATATTTCCTCTCGAGACCAGAAATT GGAGAGGAATTCCATGTTGAGTTGGAGAAGGGTAAGGTTTTGATC TTGAAGCTTCTIGCTGTTGGTCCATTGTCAGATACCACCGGACAAA GAGAGGTCTTCTACGAGATGAACGGAGAAGTTCGACAAGTCACAA TTGATGACAACAAGGCAGCTGTTGAGAACACAAGCAGACCAAAGG CCGATCCAGGAGATTCCAGCCAAGTTGGAGCTCCTATGTCAGGTG TTGTCGTTGAGTTGAGAGTCAAGGATGGTGGTGAGGTTAAGAAGG GTGATCCACTTGCTGTCTTGAGTGCCATGAAGATGGAAATGGTTA TCTCTGCACCACATGCTGGTAAGGTCAGCAGTATGCAAATCAAGG AGGGAGATTCAGTTGGAGGTTCTGATCTCATCTGTAAAATTGTCAA GGCAGGAGAGTAAATAGCAAATTTCAGTGTGAATGCAAGTTTTGG AGCGGTTATTATGATATCAGATGTTGCAAGTATTGATGGGATGAAT GGATTATGATTGACAGGTTTAAAGGTTATTGCTTGACCTACTTTTTA TAGAATTATGAATAAGCTTTTATCAATTTCTGGTGTTTTTAGTGTCC TCATGAATTGTATGTAACCTAACATGATGTGAAAATTGAGAGCCAA TGATGTAATACTGCCTCTCGTATACA
SEQ ID NO: 28 BC1G 15423
GGAGAGGCGAGGGAGGGATTACTTGAAGATTATITATACGAAATG ATTTTCCCTATGTTTTGTTCCCGAGATTGTTTTCCTCCATIGCTTTC TTCATTCTTGTAAAACCAAGTTTITTTTTCTITGTTCTACTTTGAGAAA CTTTCTTCAGATATACCTGGCGCTTAAATCTGCAATCCAACAACTA CCCCACCGGCTCTTCACATTTGCCAACCTCGCATATCTCGCATCT ACCCCCTGCATATCATACCAAGTATATAGAAGGTCGAGGTCACAC TGACTCTCACCATAACGAGTCACAATGATCTCCCATCATTTTGAAA GTCTCCCTGTTCCTCCCCTAGAGAATCTCAGCACAGAATATATACT CCAAGAAATTATCGACCACATTGGAAAACTCGCCGATGATCTCCC ACACACCAAGCTCAATTTGTTTCGCAAACAACTCTGGGACATTAGA AATCGGAATGTGGATCCAAAAACACATTTGCGAGGTTTATTGAGA GTGTTTGAAAATACACATACATTCAAACATGCATTTGAGGAACTAG AACCCGGTTTGCAAGCGCAGATTCGTGCGTTTATGGATGATGAAA AGGATGTGAAGGAGGAGGAGATTATGGGCATGGGGAAAGTCAAA GGGGAATTTTTCATTCCGCCATCGCCGGCAGTGAAACATCATITC AAGGAGATGGTCAAGGAGACGGTGAGGGAAAAGGCTCACGAGAA GAAGATGAAGTTGGTGCAGAGTAAAGTGATGAAGAAGATTCAAGA AGCGAAAGAGGAGATTGAAAGAGAGATTGTGGAGGAGGTGGGAG GCCATATCGAGATGATTCAGAAGGTTGAGGACCATGTGGGGGAG TTTTGGGGGAGACATGGTCACTTGGGAGCGTTGCTGAAGAGCAAT GATGTTGTCTCTTTGACTTCAAAACTAGATGCTTCGATGCTTGGAA GTGGGAAATCTCCAAAGATCTGGGAAGATGAGAGAGGAGAGAGG ATCATGGAAGTCCACAAAAATGCCCCGTTTCATAATTGGGGGAAC AGCGTGAAGAATACTCCTCTTTATACCTTTGTTCCTACCACAGTTC TGGGCCTGTCGAATCTGGTCAAGTGGGCTAAAGTCGAGGGTTATA GAGTGAGATGTAGTGGGTACAGACACTCGTGGAGTAATACTTTCT CGCAAGACAAACAGATTTTGGTCAGTATGTTGAACTTGGAGAGTG TGGAAAMAMATCCCGGATGTCATGAGCATTACGAAGGAGAAAGGAG ATGTGGATTTGAATGGAGATGGAGTGATAGATGTCAATGAATTAAA GACGATTGAGTTGGCGCCGAAAATTGAGGGATTGAGTTTGGCGG GGGATGAAAAAGGGAAAATGCTCTGTAGAGTTGGAGCGGCGGTT ACGAATGAACAGTTTAGGAGGTGGGCCGTGGGTCATGGCAAATG GGCCTTGCCGGTGGATGTTATTCTTGTTGAGGTCACAGCAGGTGG CGTCAACGGTCCCATTTGTCACGGCGCCGGTCGTCGTCATCAAAC AGTATCAGATTATGTTCGTGCCATCGAATACATCGATGCAAATGGT GTGCACCGCACCGTGACAAAACCAGCCCATCTCCGCGCCGCAGC TGGTTGTTTCGGACTCCTCGGTATCGTAACCCACATAACACTCCTC CTCTCCCCCATGACATACGCCGTTCTCCGCCCCACCAAACCCGAC ATTGCACTTGCCATCCCCCCTCTCTCCCCTACCGATATCCCCATC GCGCTCCGCAAATCGTGGACCCCAGCCCAATACGCCGATGCGCT GAAAGAGTTTGAAGATAAAGCCAATAATGACTATTACAGCGAATGG TTTTGGTTTACGCGCAGTCAGCAGGCGTGGGTCAATACGTGGAAT GATACGGCGGATGCTGAGGGCGCAGTCGAGTATCCGAGCCCGTT TGATACGTTTGTGCAGTGGGTTCAGGGGTGGGTGGGGAGTGTGT TGACGGGGAGTGAGGTTTTTGGTITTGTTGCCGGGGAGGTGGCAG GCTTGTATCTTGAGTTCTTTTGGGATGGTCGCACTCCCCCCCTTTG AATTCAACGAATTCGAACAAAAGAAAACGGTCGAATACAAAACCG CTCTTCCCAACGGTCTCCATTTCCGTCGCGGCATCCAAAACATGC GAGTCCGCGACCTCGAATTCCAAATCCCCATCCCCTGTCTCCCCA ACGCAACGCCCGATTACACCATCGTCCGACGCGCCTGGTGGGAT ATCATCAACCTCTGCTATCGCGATTCGGAAACGCCGATGCGGCTC ACGCTCGAGTTACGGATCATGGGGGATTCGAATCTGATTATGGCG CCTCAGAGAGGGAATCGCTGGGGCACGGCGAGTATTGAGATTCT GAGTGTGCCCGATGCGGTGAGGGATGAGGAGTGGTTGCCGTTIT GTCAGGAGGTGGTGGATTTGTGGGCGGGGTATAAAGGGAGGATG AGTGTTGATGGGGAAGAGCGGTTGTIGAATGTGAGGCCCCATTG GGCGAAGGAGTGGGAGGGGGTGAAGATTAGAGGGAGGAAGGCG AGGGAGTATGTGAGAGAGGTGGGGTATAGAGAGGAAGTGGGCGA GTTTCGAGCGGTGCTGGGTGAGATTGGGAGGGAGCAGGGGTGG GGGTTGGAGGATTTGAAGGGGAGGTTTAGTAATGAGTTGTGGGAT TATGTGGTTTTTGATGGGATGGAGGGGGGGAAGGTAAAGGGGGG AGAGGGGGTGCAGAATGTTAAGATGGGGAAGGGAAACCCTGTTG TGATGGATGTCGGTGTGGATGTTAAAGAGAACAAAGAGACTAAAC CTCTTGGAGGGGTGGATGGTACAAAAACCACTAGTCCGGAGAATT TAACAGATAACTTGATGTTGGAGAGGAAGGGGAAGGGGAAGGAA CAGGAACAGGAACGGAAACGGGAAATCAAGATCAACGAGGTGGA AAGTGTCGAGTCGAAGGGAGTAGCTAATAACGTAAGCGAGGTGAA GAGTTTGAGTAGTTCTGCTGTGCAGGTGCAGGGGAAGGTGGTTG GGATTCAGGGAGGGAGTCACGCGTGTGGGGTTTIGCCTGTTAGG TTGGGGCGGTAGATGATTGGATTTTTTGGGGGGGGGGGGGTTCT TGTTTTTCTITTTICTTGGAGGAGAAGGGAAGGGTGGGATGGATTCT TTGGTTTGGGGGTTTGGGGACTTGGGACTTGGGGTTGGGGTAGG GAGGGAAGGAAGGAAAGGGAATGAGAAAGGGAATTGGAAGGGGT
GTTTATTA SEQ ID NO: 29 BC1G 09454
GAAACGTGATGATGAAATTAATTCGAATTTCACCAAATGCTATGGA GCTTTCCAAAAATCCGATTTCATCATGTCTITTCTTCGTTCTCCTCAC CTCTATTCTTATCCTTCTITIGTCTATACCTCTCTTCTACCGTACAA AATGGTGGAGGGATGGGCTCGAGCAAGTGTGTTTCAGACGGATT CCAATCAATGCGCTATCAATATCAAGTCTCCCCTCGAACTTCTCCA TGCTATTAACTCCAGTGCTCAGAATATCTCTTTCAAGACCTATTTC CACAATGTCATTCTTCTTAAATCATTTGAAATCACACACCCTAGTTA CCTTACCCATTCCTGAAAAGAAGTTTACGGGGAAAACAATCATTGT CACAGGGAGTAATAGTGGATTGGGACTAGAGGCCGCGAGGTGGT TTGTCCGTCTCGATGCCCAAAAAGTCATCCTTGCCGTCCGCTCCC TCTCAAAAGGTGAAGCTGCACGTCAATCCATCATAAGCAGTACCT CCTGCTCTCCAGACACCCTCGAAGTATGGAATCTCGATCTTTGCT CTCAATCTTCTGTCAGAGAATTCGCGCATCGAGCAAATGCGCTCC CGAGACTTGATGTTTTGGTATCGAATGCTGGAATCTATGTTTTTGA TTTCGAAGTAGCAGAGGAAAATGAAGAGACGATTTGTGTAAATGTA ATTAATACGTTTTTGTTGGCTTTGCTTTTGTTGCCTAAACTGAGGG AAACTAGTATAGAATATGATACGAGGGGGGTAATGACATTCACGG GAAGTTTCGTGCATCATCTTACTACGTTCCCGGAACGGCGAGCCG GGAACGTATTTGAAGAATTGCGAGTGGAGGAAAGAGCAGATATGA AAGATCGATATAATGTGAGTAAACTCATCTCTCTGCTATTTTCCCG AGAACTCGCGTTTGCTCTTCGCGAATCTGAGAGGCGCGGGAGGG AGGGACATGTTGTTGCGAATATTGTTAATCCCGGGTTGGTGGATA CGGAGATTATGAGACATGCGACGGGAGCTACGAAMACATTTGGTGA GGGGAGCGATGAMATTGATGGCGAGAAGTGTTGAGGAGGGGAGT AGGACTTTAGTGCATGCTGCTGGAGGAGAGGAGGAAACGAATGG AATGTATTTGGATGATTGTAAGATTGGGAAAGTATCACCATGGACA ACATCACTCGATGGGATAGCAACCCAAAAAGACATTTGGATGGAA TTATCGCAGGAATTGGAGAAGGTAGAACCAGGTATCATGGGGAAT GTATGAGAGATTTAGATCGAAATTTATACTGCCTTTTGTAATCAATT
CCCATGCCATTGTGTTAAAATTTTGGGCATAAGTAACA SEQ ID NO: 30 BC1G 15945
GAACTTTAAGGCGGAACCCGTATCTCAATCGGCACTAGCCCCAGC AAGAACGAACACACTCCAATCCAATTGGCTTTCGCTGCTCACAAT GATATTTCATGGTGGTCTCGGTGTATTGTCGCAATTCAATTCACCT CATACTCAAACTAATCACCAAGAGCGACTCAATCGACAATTCGATT TGGTCAATCCTTACACCAATGCTTTATGGCAATTTCACGGATCGCT CATAGGAGAATCCAACAGTGACAAAGTATCGGCGGACAATATAAT TGAGAACCGACAGAAGCGACGGATTGGGTGTCCAACGGCTTCTT CCACCTCACTACATGATACGGCGTTTTCCGGCGCATTAGTTGCGA CGATGCCTCCAAAACGAAATGCTTCTGGTGAGCCAAACGGTTCGA ATGCGCCCGTTGCTAAGCACATTAAATCGGAACAACATCCAGAAG AATTCTCAAATACCGTGAAGAAGAAACTGCTGGCATCCACGAGAA CTGGCCAAGCTTGCGACCGTTGTAAGGTTCGCAAGATACGATGCG ATGGATTGGCTGGCGGTTGTTCGCCATGTATCCAAAACCACAACG AGTGTAAAACGACAGATAGAATAACAGGTCGTGCGACATCGCGGG GTTATGTGGAGGGAATCGAACAACAAAATCGAGATCTGCATCTTC GCATTCAGGAATTGGAGCATCGATTGATGCAAGGCGGTGCGGATA TCAAACCGGCGAATGGTTATCAGGATTCGGGATCGGGCCAATATG GTTATGCTCAATCCTCAAATGGCATGCAATCAACATGGAGCTCGA CAGGTCCAGCATATACTTCACCCACTTCAACTACGTCGAACAATG GCCAGCAGCAAGAAACTAATATGTTTCGCGCATTGCCTGCCTATC GCGCTGGATGTATGGGCGATAATTATCTCGGAGTATCGCCTGGCA GTTCTCACTTGAGCGCAATCAAAGGGACGGCTTTGTCGATTITTGG GTATGGAAATTGATATTGCGGACTTCCGTTCAACGGATATGGATG AACCAGATCCTTCGATTTTCCATCCCCAGCTATACAATAAATCATA TCAGTCTTTTATGCAATCGGCTTGGAATGTAAATCCAAGGATTGAA AAGGTTGAATTGCCCGCACGCTCAGAGGCTCTCATTTATGCGGAG TGGTATTTTCGTGTTATTAACCCATACTGTCCTCTACTTCACAGAG GCACTTTCATGAGATTGTTAACTCGCATGTACGACGATCCCAACTT TCGCCCCACGACTGCTGAGAATGTTATTGTTCATATGCTGTTCGC CATCATGTTCTTTCAATACGCGACCAGAAATTGGGAAGATGCCGA ACAACAAGCCAGTTTGAATTCTCAATCAAATACACATTATCATTACT GTCTTGGAATGTTCTATCAACTGGCATGTAGTCACACAGCACAAG ATGTTCAAGCATTGGCCTTGATCTGCTTGCACCTTCGAAACTTTCC TAAGCCGGGAGCCAGTTGGGTGCTTGCAAGAATGGCAATGACTCT TGCTATTGAGCTTGGCCTTCACCGATCAATGAAGAGATGGGCACC TGAATCGAACACGCTTAGTGAGCTCGACATTGAAATGCGCCGACG AACATTTTGGGTCATCCTTGCTGTCAATGTCACTCTTAGCGGCAAG CTTGGCCGTCCAATGCCCCTTCGAAATGAAGATTACGACGTCGAA TGTCCATCACAAATTGATGACGATTACATTCCCGGAGAGGGTATA GATCCACCCAATCCAATAAAATGTAACCATGAGATTGGAATTCAAG GTTTCAAATTGATACCATGCTATTTGGAGCTTTATTCGACTATCTAT TCGATTTCTCGTCAACCAAGTACCTATATTGCAACTGTTAACCGAT TGGAGGCAAAGATTCGTGCTTGGAAAGATGACTTGCCCCCAGAGC TTGTGAACGGAGAGTTGGGACACAATGAACAAGAAGGACGGGTAT TTGCTCTTTATGCTCAATCTTGGTCTCAAGAATTCCGTCTTCTICITT CGCCATCCTTCAGTTTCTATGACCACAGATCCAGATTTCAACGCG GAGAGTATGAGAATTTGTGTAGAGTCTTCCCGCCAAATGTTAGGA GTTGTTCGTCAACTGCAGAAGTATAAGAGCCTTGATACGACTTGG TACAATACCTCAGTTTTTGTTATGGCACTTACTACTACACTTTTTGC CCAATGGGAAAAGCGTGGAGGGACTTCATCAGCTGATTTGGCTGC ATTGAGAGAAGAGATGGATATTTGGTTGGATATTATGGGTGATATA GGTTCACTTCTTGGTTCGGGAACACGGCTTAAGAAAGCTGTGCAA GTTGTCACCGATGGGACACTCGGATTACTAAGTCGAAATTTACCT GCTAAGAATGACAAGAGCTACGCTTCCAATAATAATGCCCAGGAA GAAGTCAGACCTTCGGAGCAAACATCGAATACCAATGGAAATAAT GGTTATCCGGTCAATGCTCAAAACTTTAATTATAATGAACCAACTT CTGCTACGGGGACTGCGCCTACACCTAACTATTCACCCTCCGAAG GTCAAATGTCTCATCAACAAACACCCTATCCAGCAGCAACCCAATA TTCACCATATCTTGAATCGGCTTCTGGTACTTCGGATTTGACATAT GCGCAACCAGAGAATCAAGGTTATGGAGGATATTCGGCCCCAACT AGTGATTCTGTAGAAGCACCATTAATTGCTGCGTTAGCTGCTCAG GCAACGCAGGTCGCCCCTAATACATGGCACAGAAACCCGATCCA GGTCAACACAGCGCCAACACAAGCCTGGCAACATTGGACATCTAC CGTCACAGGTAACCTTGAGCCACAAGAATGTTACTCGGCAAGTGC TCTAATGCAATTAGGAGGAAGAGATATGAGTAATGGCGACACAAC ACAATTGAATACATCGATGGGCGATGTTCAAAGCGGAGGAGTTAG TGAGCCAGGACATTTGGGTGGTCAAGTTTCGGGAGCCATCGCGG GTACTTGGCCGCTTAATCTITTITTGATATTIGGTGTGAATGGTTCGAC GGGTTGATCCTTTITGGCTTITTCTGCTIGTGATTAATTTTCTIGITGCA TATTATGATGGTGGATGGAGATAACCGGCGTCTTAAGGATGGATG GGGAAAGATAGAAAGGCATGGTGCAATGGACGGGCCGGTCGGCT
TACTTGGAGTTATCAGGCGGTGGAAGGGGACTACA SEQ ID NO: 31 BC1G 14887
GAGCAATTATTAGCAATTATCAACTACTTTGGGGGCTGAAAGCCAT TTCAATTCATGAGTAGTGATATGTGAGCATTGGGGCAGAGGAATTT AAGAGTTTGGTCTTITGCAATATGTTGCAGAGGTGAAATTGGAGGTT CAGCCGTCGCATTTCCATTACTTCGCTCCCATCTCAATCCATCCOTC CCGTCCAACTTTTCCACGTCCCACATTCATTCACCGTGGCAAACAA GATCTTTATGCTCTTGCCAGCAGAAACTCGACCATATTTACGTCTG CGAAGCAATATCGACCTCGCCAGCTAATATTTCGCGACCTTGCAT GCAAGCTATTCGCGTTTTGCCATCCAGGCGCAACCACTTTCTITGA CTTTCAGGTGTGCGCGCAACAAACAAGAATTAATTGCTTGCAAAGT CAAGGGGGCTTTATAACTACCAACATCATTAATACGGCGTTGTGTT CTACCGCCGTTGGGTACTTCACGTCTGCCACCACTAGTAAGGGAA CAAAAGGCCGCTTCGAACACATTAATAAATAGTTCGGCTTCCCCTT CGCCTCAACACACAAAAACAAAGTAATCGCACCACAACCTTACAAA GTCTCCTGCTCACGATGGAGGATGACATTCGGGAGCTCCAGCCA GAAGCTGTAGATGCTGCGATTGGTGAAATGAAGATTGAGGAGGG GATTGAGGTCCAGGATTTTGCCAATGGCTTAAATGGATATATTTCT ACTCCTACAGAAATCAAGAGATCTCACTCCAGCACACCGGGTCTT GTAAATTCTCGCTCTCAGACACCGCCCAGAAAGCAAAGCACCAGC CAAACACCAAAATCCGGAGATGAAGAGGAAGAAGAGGTTATTGGC GGTGATATCACCGTCACCGTCGAACCTGGCAAGGCACCGAAGCT ATCGAGAAAATCGTCACAAAAAGTAATCCCTCGACCACCCCCTCT CTTCAACGATCTTCCAGATTCTACAGAGGAGGCAGCTTCGGTATTITT CAGGTAATCAAGGATTGTATTTATGGAGCTAAGCACATGGGAGCT TCAGATCACGATGCGTTGGATTGTGATTGTCCCGAGGAATTCAGC GATGGAAAAAATTATGCCTGCGGAGAGGATTCTGATTGCATTAATC GACTGACCAAAATGGAATGTGGTGGAGGTCATAAAGATTGCAATT GTGGTTTGGATTGTCAGAATCAACGCTTTCAACGCAAACAGTATG CCAAAGTTTCAGTGATCAAGACAGATAAAAAGGGTTACGGTTTAC GCGCAAATACTGATCTACAGCCTGATGATTTCATTTTCGAGTATAT CGGAGAAGTTATTAACGAACCAACGTTTCGACGACGTACTGTCCA ATATGATCAGGAGGGGATCAAGCATTTCTATTTCATGTCTCTCACG AAGCATGAATTCGTGGATGCAACGAAAAAAGGGAATCTAGGTCGA TTTTGCAATCATTCTTGTAATCCAAATTGCTATGTCGATAAGTGGG TGGTCGGAGAAAAGTTGCGCATGGGCATTTTTGCCGAGCGTGCAA TCAAAGCCGGAGAAGAGTTGGTCTTCAATTATAATGTTGATCGATA CGGTGCCGACCCTCAACCTTGCTATTGCGGCGAACCGAATTGTAC CGGATTCATTGGAGGCAAGACTCAAACTGAGCGTGCTACTAAACT TCCTCATGCTACCATTGAAGCTCTTGGTATCGATGATGGTGATGGT TGGGACACAGCTGTTGCCAAGAAACCTCGGAAAAAGAAGACAGGT GAGGATGATGAAGAATATGTCAACAACGTTCAACCCAAGGGGCTC GATGAAAATGGAGTGCGGAAGGTTATGGCAACTCTTATGCAATGC AAAGAAAAATGGATTGCTGTCAAGTTGCTTGGTCGAATCCAACGTT GCGATGATGATAAAGTTCGAAACAGAGTTATACAAATGCACGGTTA TCAAATTCTTCGTACGACCTTGACTACTTGGAAGGAAGACAACAAC GTGATCCTCCAAGTTCTCGACGTCCTTTACAAATTTCCACGACTTA CTCGAAACAAAATTGTTGATTCCAAAATCGAAACAGTTCTAGAAGA ATTCACAACTTCCGAGCATGAAGATGTTGCTTTCGAGTCAAAGAG GCTATTGGAAGCATGGAGCAAATTGGAGCATGCGTATCGAATCCC AAGAAGAGCCCCAACTCTTGTTGCACAAGTATTTGAGCGGCGTCC AGACCAAGTAGAAAAGGTCACTCCATCGCCATCCCCTGTTATITGT CGCCCCTACTGGCCCCCGAAGTGGTGTTCCTCAACGCAACGCCA ATTTCGTTGCCAATCGCTCAATTTCTCGGCGCCCGTTCGTCCCCA TGGTATTACCACCTGGCTGGTTTACTGCGATGGACCAAAACGGAA ATGCTTATTATTACAGTAAGACGGGACAAACAACATGGGAGAGGC CATTTATGCCAGCAGGGGTATCGCCACCACCTCCACCACCCAAGG CAGCTCCAAAGAGTGTGCAAACACAAAAAGCTCTTCAAGATATTAT CGACAGTATTACAAAGGAGCCCTCGACGACTCCGGCACTTTCCTC CCATTCCGCCGAGGGTACACCCAAGGAGAAGAAGAAGAAGCCTG TGGAAAAGTGGCGCTCATTGCCTATCGAGAAGCAGATGAAACTGT ACGAAAATACTTTATTTCCTCACATCAAACACGTAATGCAAAAATAT TCTGGCAAACTTCCCAAGGATGATCTTAAAAAATTCGCCAAGGAAT GTGGAAAGAAGCTCGTGGCTTCTGATTTCAAAAACAATCGCATTG AAGATCCCACAAAGATATCTGACAGAAATCAAAGGAAAGTAAAGC AATATGTGTTTGAATATTTTAAGAAGGCTGTGGAAAAGAAAAGGGA GATGGACGCCAAGCGAGCAGAGAGGAAAAGACGCGAAGCGCAG GCTAAAATCAATGGAAACGGCACGAGTGAAAAGGGGATAAAGCGA GAGAATGTAAATTTGATCAGTAGTCCGGATGTGATTGATAATGAGG ACGTAGAAGTTAACATACCAAGTCCAACCGCATCGCCTAGTGGAC AACTCGAGATGGAGTTGTTGAAGAGGAAGAGGGAAGATGACGAG GAAAGTCCATCGGAGAACAAGAGGGTAAAAGAGGATGATACTGAG AGTGCAACACCAACGGATTCATCTACGCCTCCTCCGCCTCCTCCG CCGCCGCCCGCGEAAGGGATGCCTATGGCAGAGTCGGAAGATCC GGAGATGGCTAATGGCGAGGGAGAGGTGAAAGAAGAAACGGAAG AGGAAAGAGAGTTAAGGATGCAGGAAGAAGATTTAATGAGGGAGA ATGAAGAGGCTATGAAGATGGAAATGGAAGTAGATACTGATGGAA GGTTAAAGGGGAATAATGGTTGTAGTGAGCATATCAATGGTGGAA ATAGTTGTGGGGAAGTCTCAACGGAGGGATGATATTTATTGCCAA TGGAGGGACACAAAATTGGGAACCGCCTGTATCAACATCATCATT ATCTTCATTCAAAAAAAATCATCGGCATCGCATCGCATCGCATCGC ATCAGGGGTCGGTTATATCATATTTATTATATGGATAGGGGAGCGA ACTAAGTGAGTTTGGCGTTTACAATTTCTITCATCTCGTATTGGAGA TCGAGAGATGAACATCATCTTAGATCAAAAGGATAGTTGGAAGGG ATAGTCACAGAACAAATACACCCTGCTATTCCTCATGCATTAAAGG AAAGTAGGCTATTTAGATACTAGGCAGTAAATGGAAATCAAGTGAA
GTGTAATGATAATTATTAATCAAATGGCATTTGTGAAAACTCCA SEQ ID NO: 32
BC1G 07589
GAGTCGTGCCTGTCTGCAAGACTTTATTATTAGTCTTCATTAAATTT AACTCTTTCAAGATATACACTACATACACTACATACTTCAATTTTCA CTTCGCCCAGCCGTTTATACCCATCTTGAAGTTACAGCGAAAACAT ATTTTAATCTATCATTTTATTGCATCTTACAAATAGTCCAATATTTGT TTATACTTTTGTTCTTGTTCTCAAAATCTGCAGGAATGAGCTTGAAT TTTGGACTGACCAATATTAAACCTGTGGCGCCAAAATTTAAATCCG AAAAGGTTCCAAAACAGAGGCCGACTCTATCTAGTAGGACATCCA GTAATGGCCTTCGAATTGGAACACCTGTATCCAAAGTCACTGATG CTCGTGGCAGACTAGCCGTCCCAAGCCCTCCCCCCGAGGCAGGA AAGAAGAGGAAAGAAAGAGAAATCAGCGGAAGCCGCAACACTAAA AGAAACACAACTCTAACCCTTCGAAAAAGCCCCAGTCAACAGCCG TTGACGAGTGATAGCGAGGAAGATGAAGAGATCGCCGTGTCTTCC AAACGGGCCAAGCCGGAAAACATCGAGCCTGATTTGAAGAGGAAT TTGAAGGACAAAAAAGCCTTTTCGACTGAACCCGATAATACGCAA GGCTCTACATGCAGAATGATCCATGCGGCGGATGTCATGATGACG AAACGCACGGCTAAGAGCGGCGAGAAAGTTTGCGATAGGAAGAA GGAAGACGGCGACGCGGTCCTTCTAAGATATCCCAGTGTCAGTC GCAGAGAAAGATACCAACTTATCTCCGAAGGCGAAGTTATTGATC CCGCAGGAGAAGATTTGATCAACCCTTATGACGAGATACCGAAGA TTGTGGAAATTGTCAAGGATGAATATTTGACCGATGAACAAGCAG CGGAGTTCGCACATCCGGAAACGGGTATAATTCGAAAAATCAACA AAGCGACGAACAATATTACCTGGACTCTTTCCAGCGCAAAAAAGC CCCACGACAAAGAGAAAATGAAGGGGCTGTTGCTTGAGTITCAGGA ATGCTGTGGGAGCTTACAATGACGCGCTCAGCACTCTCACTAAAA ATGGATCGCTGGCGAAAAATCTAGAAAACAAGCATTCACTGTCGT CTAAGCTTCTCAAAATGGTTCTCCAGCAAGTTTACGACCGAGCAG TGTCTCCCCAAGTTGACTTGACTAATAAATACCAAAATGGCACGGA TTATGTTTACGGCGAGCTCACATTCCCGTITCATATCCCGAATCCTC AGGGAGGATACTCGCATGAAATCCGATCAAGTTTTCATAGATCTTG GTTCGGGAGTAGGAAATGTCGTCGTGCATGCCGCGCTACAAGTT GGTTGCGAAAGTTGGGGTTGCGAAATAATGCCTAACTGCTGTAAG CTGGCTTCCTTACAACAGACAGAATTTTCCGCACGCTGTAGGGCG TGGGGCCTCAGCGCCGGGTCAGTCAACCTCGAGGAAGGGAATTT CTTGAATAACGAAAACATTCTCAAAGTTATGAAGAGGGCTGATGTT ATCTTGGTTAACAATCAAGTTTTCGCACCTGCTTTGAACCAAAGTC TTGTGAACCTATTCTTGGATTTAAAAGAGGGTTGCAAGATTGTAAG TTTAAAAACTTTCGTACCGGATGGTCACGTTATAAATTCTTACAATG AACACAATCCCATCAATTTATTGCGGGTGGAAAAAAAGACGTACG CGGAAGGCGACGTTAGTTGGCATTCTAATGGAGGGGATTACTACG TTACTACGAAGGACAGCACTATCGTAGCTAAGTATCACCAGACCC CAAAGGATAGAAAGACACGGGGGAGTCGGGTTAGATGATTTTTGA ATTTGAATATACGGTTTCCTTGCACAGTTGATACCATTGGGAAGGT TATTATTGGGTACTTGAGCACGAAGCGATATCACAGCGAGGCAGC
ATAGAGTAGATGTATGGATAAATGTATGTATTTGTAACA SEQ ID NO: 33 BC1G 05475
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GCGCAAACAATTGAAGGGAATACTGAGTGAACAGCGTATCA SEQ ID NO: 35 BC1G 09015
GAGCAAAAAGAAAAGACACTGCCCTTCCTGCGGACAGACTGTGCA TACCGTACACACTACGTCCTACACGCTACTTGCTACTTGCTACTCA CTACTCGTACATAAACACAACGGTGCTAAAGGCAGAGGACCCCAG TCTTCTATTCTTCCAGTCCAGTCGTCCAGTCGTCCAGTCGCCCAG TCGCCCAGTCGCCCAGCCCAGTCAGTCTCCCAGCCCATTCTCCCA CTCGTCCCAGTGCTCCCTCGCACCCTCGCACCCTCACACCCTCAC ACCCTCAGTCACTCACACGCAGTCACTCTCATCAGTCAGTACAGA ATCTAGATCCACTTTITTGTITTCTATAGGCAACGGAAAAGACCTTGG TCATAAACCCCCAACCCTGACCACCCTGACTTTCCTGAGCCACCT CGAATCTCGAAAAGGTACGGGAAACATCAAGCTTTTATCCCATTC GCAGCACCAGCAACCAGTAACGGGAACGTACAGGTACAGGCTTG CAATCCATTCCCCCAAATATTGTTCAACTCCTCTTAGTCTATCTGC AGCCGCAAAGAGACTGACTCTCCATACAATAAAAAAAATACAACAT CCACCGCTATCTTCATTTCACCACTAAACACAATCCACGAGCCATT CCTCGAGATATCTTCCAAACTTCGAATGCAAAAAGAGGAGACCGT CAATTGACGCGCTTGATTTCTGTGGAGAAGAGAAAAAAAAAAGATA TTGACTCTCGAGAGACGCAGATACAGATAGCTTTCCGCTGCATTTT ACTGGGTTCCTATTTACAACGACTTCCCTGTTTACTAGTTATACCC TACGACGGCCATTTGAAATGAGATAGTCTATCGACAAACTCGGCC CTTAAACGGACTGAGCTCAAGGAAAAGCAAAATCCTTTACTCGAG ATTAATTTCTGTCGCTGGCTTTCCCCAGTGACTTITGGTTCCTTATT 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CGAAGCGGATGTCAGTTTTGCCAGGTACTTCCCATGCAAGTGGGC TTGGGGCTAGAACCATCAGCCCTACGGATACTCGAAGAGCCAAAC GTTTATCGACTCATCAAGGAAACCCAACCGTTTCGCCGGGTACAC CGCCAACTCCACAACCTGACTCTTATCCCGCATTTACTCCTCGAG GGTCTTCAAGATCTCCTTCCATGTTACCTAGAAAGGTGCCTACACC TTCATCATCTCGAACTACCCCGGATAGTAACCGTAAGTACAATTCT GCTATTTCAGCTGCGTCGAGTTCAAGCTGTAACACATCTCGAAATA CTGCAGGTTCCTTACAGCCTCGAGTATCGTCACTTGCCCCCACAG CATCAAGGTTACCAACACCTAAGTCACGAAATGTTCATAGCTCCG CTGGCAATAATGAGGAGGAGGATGTTCCGCCAGTTCCCGCGATTC CCAAAGCGTATGAATCCCCCAAAGATTCACCTATCGAAACTCCATT TTTCACCAAGAGGAAATCAAGTATGCCTTTTGATGCTAGTAGTATT AACAGTACTTCAACAAATAGCATTTCTGGTAGGAATTCTGCACGTG AGCCAACTAAGGTTGAACGAGAGCCAAAGAGGTCAAGGCATGCA CCACCCAGCTCGAATTCGGATCTTGAACAGCAAAAACAGAATACC ACGACTCCCAAGAAAAAGAACCTTCAACCACTTCGTCTGCCACCC TTGAATTTGTTACCATTGAGTGCCCCCACGGCTGCAAAGGCTGCG GCCATATCCAATCCTGAGCCCTTACCAAATGGTGCCATTACTCCTC CGCCTAAGCGGACAAATACAAAAACTCCAAGTTCACCCATGACAG CTTCCAAGACCTCATTCTTTTCCCGTCGCAACGAAGACAAATCAGA GCATCATATGCCCAAAATGCGGAGCAATAGCTCTATTCATCATAGA 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GAAAAGATGGGTTGGAGGGGAAGATGAAGGAGGGGAAAAACATT TGTGGGGATGAGGAGGCTCGTTCGAAATAGCTTGTTCGAGGAAG CTTGTTTGCATGTAGGGAGCTTGTTTGTATGGAGACTTTGGTCGC AGTAAATGCAATGCATAGCAAAAGGAAGGAAGCGGGTACGGATTG GAATTGAATGATAGGGAATTGACGAATAGCATTGAGATGAATAAGA
TGAATAAATTA SEQ ID NO: 36 BC1G 03832
GGCCAGCACAATCAATCAATCTCTTGATTTGATTTCCTAATAATCT GATGATGCACTTTGGAGATTCTTGAGATCTCCTGTATGTGAACATC GACTTTTTATCCCGACCATACCAACCCAGTTATCACATATTCAAGC AAACTTTTACCGGTGTATTGATACCCAAGACTTATCTGGGAAGGGA AAATAGTTTGTCGGTAATAGGAGTATCGGCGTATCAATTATCTITG AAGGAAGTGGGTTGTACCAAAAACCACATCAGGTATTCCACCAGA CAATTCGGTACCGCAAAACGAATCTTCTAAAAGGACGGAAACCTT CAATTCACATTACTATTTTACAAAAGCTTGTCGGCCCAACGACAAT GACCAGATGTCTATTCTTTCCATTGAACGCTTTTGTTAATCTACTTC CTTAATCTACACCACTTCCAAAAGTATCCATTCTTCGACGACCCCT CTGCCAACCTGGGATTTCGACATTGTCCAATCTGGACATATACGC TCATTTCCGCGATTTGATTTACAATTAACGCATACCTTTCATGGCTA CTGCGCCAATGACGACAGATCCATCGAGGCTGTCATTCGCAAAGG TTGCCGCTTCAGCTGGGAAGGATAATGTAGCTCTCGCTTCGTTCG CAAAAATTGCTGCTTCTITCAACTTCTGTACGAGATACGAGATCTGA AAACATAGCTCCAACTGTACATAAAAACAAAGACACAAATATGCCT AGTGCTACACGCAATGATACTGGCAGTATGGCCACTCTCAAAGAG ACGGGCACATCGACAAACGATCAATCCTCAAAGAAGAGGACAATT ACCGAGAGCAAACCTACGGCTGCTAAGAAGGAATCGGATTTGGCA GATGCGGTTAAAGCGATGCACATTCGTGATATCACACCAAGCCTT GTTGTAAATGGTTCAGGGATTGCACCTCCAACCCACAAAAGAGAT TTGGGAGAAGGATTCCCAGAAGATCCATTTCAGAGAACAGAATCT GGGTCCGACCTAGGAACGAAGCCTCCAAGTTTGGATGGAAAGAG CATTACCTCAGGCACAACGTTCGCTTTGGACGAGAAGGAGTCTTT ACGTCCCGATGACAGCGCGAGCGTAAAAGCAGCCGAAGATGATG ATACATTTTCTGGTCGCGGTTCCATTGTTGCTGGTTCTAGAATTGG ATCTGAAGCAGCTGCAAGAGCTTATCGTGCACAGTTCTATGAGGC TCCTGATCGACGTAGTATACAACTCATGCAGGAGCGTCAAACTCA GGGCATTGTTACTCCTCAAAGTGGTTCCTCTGGGCAGCAAACCAC GGATGATAAATCCAAGCCGCTTGTAGGCCCATCAGGATCAACTGA AGCAGCATTTACACTCTTCTATCGCCAGACTCCCGACGAAAAGCT TTTGGAGGCATTAGAGTCGCCAAAAGACCGCATCTTTCTCCTTCG TCTCGAGAAGGATGTTATCGAGTTTGTGAAGGACTCCAAGGAACC TTTCATTGATCTCCCACCGTGTAACTCCTTTTGCAGAATGCTGACT CACAAGTTGGCGGATTACTACCACATGACACATCAAGTCGATGCT GTAGTTGGAGCAGTCCGTATTTTCCGAACACCATTTTGCAGGATTC CGCCATCACTAACAAGCATTTCCAATCCTCCTACTACTGGAAATAC CCCACCTCCCAATCTACCTGCAATGAAGATCATGCGTAGAGGTGG TGATGGTGACACTGGACCGAGCCCCTCAAAAGCTACTTCCGAGAC TGGAAGCGATGGCAAGGAAAAGGCACAGTCCGCTAAAGAGAAAC TTTCGCGAGAGGAGCGAGAAGCCGTTTATCTTGCGGCTCGAGAAA GAATTTTCGGCAAAGAAGACAAATCTGGCGAGGCTACACCAGAAA CCGACGAGGGTAACGAGATGTCACGTTCCAGCTCTGTTTCTACAA AGGATAAAGGCAAGAGGGGTAAAGTTGGAAAACAGCGTCGTGAT GACTCTGAAAGCTTCGACGTTCGATCTCAATACACTCCCTACTTTC CACAACAACAAAATCAGCCGGCCTGGATCCCCACCCAGAATTTCG GCGCAATGGGAGTTCAGCAATACAATGGCGTCATGCCAAACAATT ATCAAAACCAGATGCAACCTCAATATGCTCCACCTCCGCAACCATT TAATCCTGCTATGATGAGCAATGGAAACATGCAACCATACAATAAT ATGACACCACCGCAATTTCCTCAGCAAAGTCAGCCACGTTACCAA CCACATAGCGCTCCAATTACGACTTACGGCACACCTGCACAGTCC CCTCAACCTCCCCAACAATGGATTCCACAGAATCAATACCCAGGA GGCCAGTATCAGTCACGAGGACCTGTTGCAGGAGGACCACCTAA CACTATCCCTTACGCTTTTGGACAACTACCCAGCACGGTAAACCC AGCCGATCCCAAAAGTCAACACCCGATTCCGGGAAGTTTCATTAA TAGACATGCCTTCAATCCAAAGACGCAGTCGTTTGTTCCTGGCAG TCAAGGTCTTCCTATCCCGCAGCCCATGTCTCATCATGGATCTCCT CACCATGGTTCCCCACACCATGGATCTCCTCATCTCTCTTACAGCA ACTTCTCTCCACCTCAGCAACAATACGGGGCTGGAATGGGTTATA GCATGGCGAGACAAGGGTCTAATAGCTCTTTACCCTCGTATCATG CATCTCCACACATGGCACATAGACCAATGATGCATCAGAATATGC CGCAAGGTCTTCCTCAAGGCCTTTCCCAAGGTCACCTITCAAGGCT TACCACAAGGTTTGCCACAAGCTATGCCACATGGTATGCCACCAG GAATGCCACAGGGCATGGTTCCAAATGGTCAAGTTGGAAGCCACC TTCCTAACTTTGGCAACCCGGCAACTTTACCTCCAAAGCCTCCAAC TGGTGTTTAGGTGTCTTTTGAGGAATTGCGGATACATTCTGTGATG AATAAACGGTGGCGTATGGTAGCATTGGTGGAGTTAGTGGGAAAT GTGGGCATTAAAACGAAAGTCATTTTAAGTACCTGGTTTATATTGG
CTGATAGACCTATGATTACAAATACAATACATTTGATTACACCA SEQ ID NO: 37 BC1G 09907
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AACTTTCA SEQ ID NO: 38 BC1G 02544
GACGCGCAAGCAATTCCTTTTGATCAATAAGTTGAATGAAAACTCA CTGTCCCCAATACCTCCTTCTGTGTCAAACATCTTTACTCCATCTC TTGTGAGGAAGAAACATCAAAGTTGTCGCAATTGCTTTAACACGAT TGATTCCCCAGCCGCATACATTCCACAGCGAGAGCGCAGATACG GATACGATACCCACACATCTTACTTATCGATACCATCCATAGTCTT TCGAGCTTTGGAAGTTCTATTTAGACAGTTGCTAGTAGTTTCCACG ATCAAACCCTTTGGAAGGCCTTGGGGAGGAGCTCGATTGCGTCCT TCTACAAAACTGAAAGCTGTATAAGACAATTTGAAAAGCAGAGCTG TGGTTGGATGCTGTTATCGACTTGTTTTGAATTGCTTATGACCTCA TGGTTCTCTGATACCGATATTTGAGGAATCCAAGATATCAATCTTA CCCCGGATATTCATTCGACAGGAACAAAGCTTCGTCCCGCTCCAA ATAATACCTCTTGCCATACAAAAATCGTCATTCACGATGGTCACTC GAAAGCCCGTTCCCCAATCTAGCATCCCTTCCAACAACACCTCATT GCCGCCATACCCCATATCCCCAGTTTCTTCCGATCCACATCATATT TCACACCCCGAAAGGAACCACAATGCGATTTATGATAGCTCTACA AATGACCTAGAGCCTAATGTTTGGAATGAAGAGGAGCATTCTCAT CCTGATCCCAAAAGCCTACCTAACGCTTTAAGAGTTGGCCCATCG ACAATCCCTCCCAGGCCTTCTCAGGATATGTTAAAACCCAGTCCC TCAACCACGAACCCATTTTTAAGGAGGCAGCAATCGCAGAGTTCG CAAAGTGCAGCATCCGATGGGAAGGAAAGTAGCGCAGATATCTG GAATGAGCTCACAGAGAAACCCACACAGCCGGCTTATCCACCCCC TCCTCCTCCTGTATCTCAAGTAACTCAACAATTTTCGACCATGGGA GTGTCTGGCCAAGACACGAACCCTTGGCAACCCACCGCGAACGA AAAGCCGCCATTACAAACACCCAGTCTTCAACGCGAAGATTCGGG AAACGAAGCCTGGTCAGGCGCAAATCCTCCAAATATCGTTACCTC TTCTGGCTTGTCTCAAAATTCGCAACATCCAGTTTTAGTAGATATT GATGAACCTGAATCTCCAGCATGGGATGAGGATGATTATGACGAT GGTGAAGAGGAAGAAGGAACGCCAGTCAGCCCCAAGAAGTCTAC GCTACCTACGCACGAAACGCAGGAGATACTAGAAGACCAACATGC ATGGGATTCTACTCCTGGTCAAAGTTCGGATCAATCGCAAACAAT GCCAGTTCAGTCCTCTGGAAATACACAATATTCGAACCCTCCTAC GGAAGGGTGGAATTTGATTGATCATGATCCTATACCGGGGAATTT TCAGCAAAGCGGAGTAGTCGGAGCAGATGGCACAGAGATTTCCA GAATGACCCCTGAAGAAGTTGCTCCAGCACTTCCACCGCGAAACT CTCAAGAACATCCTCCTCCTCAGCCTCCGCGGCCAGTCTTAGTCG CGACAAACACAAGTACAACACCGGCTATGACACCTGATTTATCAG CGGCTGCTCTAAGACAGAAGAAAGAGACGTACGAGATCAAAAAAA TATCTTGGCATGACATCAACGCCCAACACAACCCCAGAATTTCAC CTGTTCTAGTGCAAAATGCAAATGGACCTTGCCCTCTGTTGGCTCT TGTGAATGCTCTGACTTTATCGACACCCGCAAATGTGGAAACTGC TTTAGTGGAGACACTCCGGTCGCGAGAGCAGGTAAGCCTCGGGT TACTGCTTGATGCAGTTTTTGATGAACTCATGTCCGGGCGACGTG GAGATGCTGCACAAGAGCTTCCAGACGTGGGTGATCTCTATTCCT TTCTCCTAACGCTTCATACGGGAATGAACGTGAACCCTCTCTICTT TCCTGTTGATCCTATCCTATCAGTGAATGATCCCAGGAACTCAATG CCACACATTCATCCTGCGCAGCGTGAGAGCTCACTTCCAGGCACA TTTGAGGAGACTCGTGAAATGAAATTATATGGTACTTITCTCTGTGC CTTTGATTCATGGTTGGCTCCCCGAGGAAGAATCGCCTGCATACA TGGCACTCAAAAGATCCGCCAAGTCGTATGAAGATGCACAGAACT TGATGTTCCATGAAGAGGTATTGGAAGAGAAGTTAGCCGCTGAAG GCCTCAGTTTCGAGGAACAAGGGATTCTAGAGGACATTTCGACTA TAAAAGCGTTTTTTATCTCCGCAGCAACTCAGCTTACAGCTCATGG CTTAGATCTCATAACTAAATCTATGAGTCCAGGTGCTGTAGCCATT CTATTTCGAAATGACCACTTCTCCACAATCTTCAAACACCCCACAA CACTTCAACTATTGCAGCTCGTGACAGATTCTGGTTATGCAGGAC ATGCAGAAGTTGTATGGGAAGGCCTTATTGATGTTAATGGAGAAA GGGCCGAGTTCTATTCTGGTGACTTITCGTTTAGTCGGCGGATCCT CTACATTACACCAGGGAAATGAAGAAGGCAACTGGACCACAGTCA CTGGTCGTAGAAATAATAACCGTGTTGAAAATTCACATGATGCACC ATTAGGGAATCAACAAGAATCGCAGAATCACGAGCAAGGTACGAA TGCAGAACAGGAGGATCACGATTTTGCCTTAGCACTGCAACTACA GGAAGAAGAGGACGAGCGGAACCGAAATGAGACCGCCCGAAGG CGAAGAGAATCAGAGCTCTCACAGCAGTACATCGAGCAACAGGGT AGTAGCAACGACACTGGTAATGCCCCTGTCAGTCAGCGAGGCGG CAATGGACGAGGTAGTACCAGAGGCCGTGGAGTCAATGTACCAG TTCGAGGAGGGTCAATTCGTGGTAGTGCTAGTACCCGAGGTCGTC CCGCGATTCCACCTCGCAACAATAATGTTGCCACTCCTGCCGCCG ACCCAGAAGCAGGCATCGATGCACCGCCTCCTACATACGAGCAA GCCGCTACTGAACCGGCTTACCAACCTCCAGATAATCATCCTGCA CATCCAAACGCAGATCCAAGTCGGAGAACAAGTGCTTACACGGCA ACCGCTAATAGTCAACAACGTCCTCCAGCTAATGCCGCAGGTCGC CGTAATACGACTTCCCATAGTGGCATTGGAAGGGGCAGTCAGACA CTCATAGATCAGGTTCCTGGGCGCAGGATCCAAGCCCCAAATCAA GGGCTACCGAACTCCCAGCAGCCAGAAAGGCAGAAGGATTGTAT TGTTATGTGATTATTGCGTTTTATGAATATATGGCAACGATGGATAT GCAATTGGGGCACATTAGTTGAGCGGAATTTGAAGCTAGGCGTTT AGGCAATGGGTATATTGATTTATAAGAAGAAACATATCACGAGCTA CGGTCGATGAGGGGACTTTTCATCATGTACTCATACGCTTTTTTCA AATGGTTAATTTGCGGGCGATAAATAGGAGGATAGACTTGGAGGG TGGTTTGGTGGTTAATAATCAATTTATTAGTATACTTTGAAATTTAT GGACTTCATTTTATGGCAGTATGCCTCTCTCCTGTTCAGACCATAT
CTTTAATTGATCGAGATTGGCAAATCAGACGTATTCCTTCCA SEQ ID NO: 39 BC1G 11528
GCTCTTACTTCTCAAATTATTTGTTTAGTACATTAATTATCATTATG GTAGATTCCACGGACTTTTCTCATTACCATCTTACAGGATGGAATA TAGACGACGACTCCTTATCTTATATTGATCATGATTATTGGGAAGG CGTGCTAAATCAAATAGTCGAATCAGAAATGGGTAGAAAATTATCG GATCTGGATCGAGACAAACTGTTCCACAAAGGCTTTGGCCTCATC AACAACCCACCGCATGGCGATCGTTCAGGACTAAGACGTTACAGC AAATACTCAGAGAGTCGAAGGTTCAAATTTGTGATAAAATGTTTAT GGGATATCACTGCTGGTCGGGATCGTGGTTGTACATTAGACCTTG AAGGTAAGAGACGTAAGACTCGCGATTCAGCAGATAATACACCAT GTGGAAAGGATTTCGGCAACACCATATGCAACATGCCGGTTTCTA CTAGGGGTTTCTTTTCCTTTGTAGTGGCAACATTACACGCTGCCAA AGAATACGCGTCGAAGCGCAGTCAAATTCCAGCTCTTCATCAGTC AATTGAAGTTGATTCAGAAGAAAGACTATCAAAAGAGACTTCTCCA CCTCTGCTAAAAGAAACCTCGAGCAACCAGGAAGAACCAACAATG GATCAACCAATGTCCAGTTCATCAAATGGATTAGACCATTCAAGTG TGGAACAATCAGATGACGATCTTTCAGCGTCGATATCAATTGCATC TGAACAGTCGGAACATTCGACTGGGCAGGGGGAAGTTGTTGAAC CGTTAGCAAATTCATCATGTGGATTGGGACACCTGGGTGAAGAAC AGTTAGAAGTCGATCGTCCAGCATCAATGTCAATTGCATCGGACT CTTCGGAAAATCCAGATGTTGGTCATCCAGAGACAATAGCAGTTA CACCAGGCTCGTCAGAAAAATCAGACAGTGATCGTTCAGCGACAA TATCAATTGCATCGAACCCTTCGGAACAATCAAACAGTGTTCGTCC AGCACCAGTGTCAATTGAATCAGACTCATCGGAACATTCAATTCAG TCGGAGGAAGTTACTGATCTGATAGCACTTGCACCAAACGGATTG GGTCATTCAATTGGGCCTTACCATCCACCACTAGTTGGCATTGATA TTACAGGTCATGGAAGTCTCCTTATCAAGAAAGCCTTCTTAGACAA AAGGACGGAATCGCAAAATGCCCTTCGAGTTTCTTTGAACGTTCTT TGTACACAGTCCAAGGACTACATCCTATGTGGACTAAGATCTTGG GAGGAAGGAGGCCATGTCGAGGGCCAATTGGCTCTTGATATTGTT GGCGTGTGGCTTGAGAAATCAATGCGTCAATATTCTTGTCAAACCT TCATATGTTTCATACACGACCTCGGTGCAGGACAACAATTGGATTT GGAGCAACTTTATAGGGCTGCTGGTGGATTTTCCCTTGTGGCTAG CCGAAGTAAATTCGATTTAGTTCCAAAAGACGCAGTAGTTTCAAAC CAGTCTCAGAACGTTTCGCATAATTCTTCTTCTCATCGGCACGTAT TGCAAATTACGAACCAGAACGTTACTAGTAAGTTCATTGGTCATGA CGGAGCCAGCGCAAGAGAAGTCGAGGAAATTCTAGGATTATCCAT GTCTATCGAGCATTTTGATGGAAAAGAGTACATTGTGTGTAAGCCA CACGCAAATCAAATTCTTGATCGACAGGAACATGTCAATCATGAAA GGTGCCGGATTGGGTTGGAAATTATTAGTATATGGCTTTGGGAAC ATTGGGACGCAAAAAATGACTACATAGATTTGCCGGGGTTCCTTG TTTGTCTGAAAGCATCAAACGATAAGATGGCTTTGGAGGAAATCTA TGAAGCCGCAATACAGTCTATGAGGCGAACAAGGCTGCCATATAC CCAAAAAGCTTTCTTCAATTCAAATTATACCATAGAAGCAGAATCA GGAGCTTAGAAAGATGGATATTITGAATCAATGTCAATCAGGTGGA GCAAGCAACTCATCAGTGATGTATCTTTTGGACATGCCCAATATTA GAAAAGCATGACAATCATCACAAGGAAAAGAATCAATGGCCGAAT
AAACTTTGAACTGTGGCGCTTGAGA SEQ ID NO: 40 BC1G 04218
GAGAAAGCATTGAATTTCATAACAAAATATACTTTTACAAGAGAAG GTTATATTTCAGAAGAACGATTATCCTGTCACTACGGCGATGGAAA ACAAATTAGGTTAGTGTCTACTACGCTTTTIGITTACCCTGTACTGC CGTATCAAAGAAATTACAAGGTATCATAGAAATGCATCCACAAACC TTTGATCTGCTCCGGATGGAGACTAGTCTTCGCAAAATGCAACTAT TCGAGCCTCACGATCCTGTCGTCATCGGCGTCGACCACAATTTGG ATCCTTATTTCAAATCCCAGCATTCATTTTGCCTCTTTCCCAGATTC CCGCCGGAGCTTCAGCTTATGATCTGGGCTGCGGCTGCCGATGA TCGACAGATTGTTCGGATTAAACCTTGCGCCGAGGATGGATCAGG AGAGGAAGGGTTCCGGGGTGATTATACCATGCCGGTGGCTCTGC GCGTTTGTCGCGACTCTAGAAAAGAAGCGCTTAAAAGATACACGG TTATATTCAAAGGTATCCTTCGCAATCCTATTTATTTCAATTATCAG CAAGATTACCTGAGTCTTGTTGGTAGTAGCGCACATGAGCATTTC CAAATTCTATCTGGAGAAGACCATATCATTTCAGAAGAGATCCAAA AGGTCGAAAATGTGTTTTCGATGATTGCTGGTTGTGGAAGTGGTG AGAGCGAGGAAGATGTTTTGACTGAGATATTGGGCATCTGGGATG GTATCAAGCGTCTAGTCATTGCAGAAAGATCGCCAACCTGGTGGG GCACATTCAAGGAGATCTGGTCCGACAAGGAGGTGAAGAGGCTT GCTCGAGACGCCAAAGCTGACCGTATCAGGGAAGGAACTGCGAC TCCAGAATTCCCTCAAGTTCGCATTGTCAAGTTTGATGATGTTCTA GATGCCGTAGCACGAGGTGAGCAACAATCAATGAGCAGTACGAA CGCGACGCTTTCTITTTTTCGACTCGATATTTGAAGCAGATTCTACA TATAACATTAAGAAACAGTCTAAGAAAGCTTTGGAATCAGCATAGG CAAAGAAACAATGTAGCTTGCTTTGGTAACTGTTGGAATAATGCTT TATTCATAGAAACCCATGGAAATAGATGGCGGTGTCAATGAAAGG AAGGTTGAAGCTCTAGTTATCTCATGTGTGGGGCATTGGATGGCT TTTGGTTCAAGAATTATGTAACATAGATCAGCTTTCATTITCAAAGGT TGTCTACATATCATGTATTITTCATGATAATGAAATTACCTCTATATTT CAAGGTTCCAGGCGGTCTTCCGTGTAAAATCGAAAAAAAAAAATTC
TACACATCA SEQ ID NO: 41 BC1G 00860
GCTTCTATTTCCACCACCATCATATTTCACGATCTATAATACTGCGT TCGCTGATTCTATTCAATCTTCCAACTTTGCGATCAAACTGTCAGA TACGATTTCCAAAACAACCCCGCAGCCTTGGAGATTACAACAATAT GGGCTCTTCAAATATAGCTCGAAAGGAGCGGCGCAAAAAACAAAC ACGCTTGACATTCGATCCGATCTCCACCGAAGTGCCTTCAGATTTA GATTTACCTGCCAAAAGCCAAGGACCGTCGCCTGCGAAGGTTAGA TATGAGAGAACAAATGACGGCACATCTGCTGGAAGTGGAGGAAGA ATTACGCGCAGTGGATTGTCTTICAGGATCGCCCTCGAAAGTAACT TTGGATAGGAAAGGAAAATCTGGGGGCAAAGGAAAGAATGCGAG AGATGGAAAAATCGATTTTGGAACATTACCAACGCCTGCGAAAAG CTCGCAGAAAGAGGATATTATTGTTGCAGATGCAGAAGTGACTAG CGGATCACGTCGAAGCACACGAAGTTCAAAAACGACTCCATCGAA GACTACGCCAAAGAAAAGATCGGTAACTTTATCGGATACAAGTGA TGATGGCGTATTCACATCAAACTCAAGACCTTCACAACGCTCTGG CCTATTTAGTCAGAAATCAGCTGCGCCAATAGAAAGTAGTGATGAA TCTGGCGAGGAAGCTGACGAAGATTCTGAGGATGATATACTGCCA TCTTCTACTACGCGTCGACAAGCAACACGGATCGTTCCGCAAGTT GCACTTGAGATTGATTCCGAAGACCCGGATGATGAGCCTCCAACC TCACCCATGAAGAGAAAGCGACCCACCATAATTTCTGACGATGAG GATAGCGTTGTTAGGTCGCCTGCAAAGAGAGCGAGGGTTGTGGA TGAGAGTGATTCGGATGATGATTTGCCGCATATGACTAAGCTATCT AAGACCACCCCCCCTGAATCTGATAGCCCAGCTCCTTCCCCACAA GTTAAACGAAAAGGACCGCCTAGGAAGCACAGAACTGCTAAGCAG AAGCAATTAGAGATTCTCAAACGCAAGCGTGCTGGAGAAAGTAAC CCCATTCTTACAGAATCCGAGTCTGATGAAGAAGAGGTTGGCGGT TTATATGATTCGGGTAGTGATGCATTGACTACATTTGAGGATGAAG AAGAGGAGGAGGTGGAAGAGGAGGTTCAAGAAACGCGCAAACGA AAATCGCCAAAGAAGACTGTACGAGAGAATGAGGATGAGTACGAT TCGGACTTTGTTGATGACGACGATGTTGGCCTTCTTGGAGTACCG GATTATGCTATGATTCCCCTACATCTCACGGCCGCAGCCCACAAA CCTCTCAGAGAACACTTTGTCGAAGCGGTTGAATGGTGTGTTCAA AACAAGATCAATCCAGGTTTCAACCAAAATCTCATGCCCATTTACA AGGCGGCGTGGAATAAGCTCGAAGACGCATACAGTGGATTATCTG GTAGCAAATTTGTTTCTACTTCATGGACTCGTGATTTTACCAAAGG CCTTTATGCCCGTCCCGAATTCATCACCAGGAGACTCGCCCCAGG AGAAGCAATTGATCTATTAGGCGAAGCTAAATGTGAGGCATGTAAT CGTAGGAAGCATATACCAACTTTTGGTATCACATTAAGGGGATCTG CATACCACAAGGATAGCTTAGCCGAGGTAGAGAAAGATGATAGTG ATACTGAGGAAGACGACGAGGAAGATTCTGATGATGAGAAGGACA CGCGGAGTTTGAACAGCAGGGATGAACCTCTACCACCTCAAGACA AAGAGTACATGGTCGGCTCTGTCTGTAAAGAAAATGCCGAAAACG CACACATTCTTATTCATTTGAAGTATGCACTCAACCAATGGGTCAT AGGCAGTCTAGAAAGTCAAGGGCATCTTACGATTGAGAAGCTTGC CAAGAGAGACAAGATGAGTGCAAAGAAGAGACAGAAGGAAGTCA ACGGGATTGTCGATAAGTGGAAGGAGGAGAAAGAAATCAAAGAAT TGTATGGCATCTGGAAACAACAATTGGAGACGGCACAGAATGCCA GTACAACGGGAAGACGATAAGATACCACGTGGTAGCTGAAGGTGT GAATTCGGAGACGAACATGAGAGGAATGGGATTTATGGCACATAA TGGTAGAGAACTGGGAAGATTTTAATGATGCTGGGTAAAGGATCA GGTATTTGGGAGCGAAATATGGAAGCAGCTAGCGATGATTTTGGA ATCATGACTTTGATTCTTCTTCACTITATTTCAGAGTCAGTAATTAG GGATGACTGGGAACAGAATTTTATTAAAATCAGAGATACGGCCTG ATTTTAGATTTAGATATATATCCACATCCAATAGCAAATTATTAACA
ATTCA SEQ ID NO: 42 BC1G 04811
GATCTTTTCAACAAACAAACCACTTTAGGTTCATAATGGTGGCTCT CTGATTAATACGGTTCGCTATCGATTATTCCACTCGAGGAACGCTT GTTGCAGACTTGCGACATCTTACTTTTCTTICTGAACCCCTATTGAC CCTACGATATGGATCTCTAAAGTCTTCGCATTACTCTCTGCATATC TAGTGTCTTTATTATAAGGTTGACGAAATTCACCTTTCCGCGCTTT ACTATTAGGCCCGAATTGATTTCCATCCGTTCGAAAACAATCCTCT CGATAACACAAATCTTGGAGGGTTTGTGGTTACTCTGATCAAACAA ATCAATCATTGTTCTTTTTTAAACACGTGCACTTCACGTGGGCCAT AGATCGAATGCCTCCAATACGTCTTGACGAGAGTGACGACGACTC TGAGCTTTCGGACGTTGACGTAGCTGAGATCGCCAGTGTAGCTCT CTCGGATACCCCAGGATCTACAGTAATTCCAACTGCCACAGGCTT ACCTGGACACGATGAGATGAATAGGAATGTGTCTCCTCCTAGATC TCAGACCATTGCAGCATCATCAAACCCAGAAGAAGATGGTGGAAT GATTGGTCTTGCCACCCGGCCACTGTTCCATGACAAAGGCGATCC ACGAAATAGTGTAAAGGCGGAATCTGAGTCTCCCAAACATACTCG ATTGACCATACAAMAATTCGGGACGTCGAGGCAAGAAGTTATTGTTA TCCACCGAACGGGAGTCTGGAAATAATCCATCCGAACAACCACCG AATACCCTGAAGAGAAAATCATTTCCAAGTGACTCTCCTAATAATG CTTCCACGAGTCCCACAGCACACAGACAGCTTCGTCGTTCAGATC TTGTTACGCCAACGCTAAGACAACCTTCCATAGCGACCTCTGAAC GTCAGTCCATCCGCCACCACGAATCACCATCCAATGCCAAGATCC AAGAAGAAACTGCTCATTTAAGGGAAGTTTTATTGCATGTGTCAAC TGAAGCGACTCAAGAAATATTGAAGGAGCAGTGGAGAAACTTTCT TTTCACGAATGCAAAAGAGTCACACATCACATTCATTCTTCGAGCT GGATTGAAGAATGCTACTCCTAATGTTCTTGGACGAATCTACAACG ACTCTGGTGTCATGAAAGATGCCTTCTTGGAGACTATCACCTCTAA ACAGCCCGTTGTCGCTAGGGTTCTCAAGAGTGCATCTGCAAATCA ACTTGCAGATCTTGTGCCCAGTAAAGTTCTGGATCAGGCGTTATCT GAACGGTTAAAGAGTGTTCCAGCAAAAACGCTCATACGATGGCTA GCTGAGGCTGACAGACTTGGTTACAGTCTTGATGACATCCTGGAT GAGAGCGATGAGACTGTCGTACCAAACATACCGAGTAGGGCGCA AAGTCATGACGCTGATGATGGTGATGATAATGATACAGAAATGATA GATGATGGACAAAAGAAATTGGAAGCCCCTTCTITTGGATCCACTT GTTGCTGAACAGGAACGAATCAGCGCCCTGCAAAAGTCTCAAAAC GATGCCCAAGCAAATCCTCCACGCGAGTTAAGATGCCCCACATGC ACCTATAAGTTTGATACCGTTAGAGGTCATAATTTCCATCGACAGA AGAATATCTGTACTAGAACTCAGCCTCCGGGATTAAAGTTCTATTG TGGTAATTGTGCTCAAGGCTTTACGACCAAGCAAGGAATGCTATAT CATGAAAAGAAGCGTGTTTGTCTTGGGGAAGAAGGAAGTGCAGAC GACGAAACCATTTATCAAGACTACCGAGACGTTGTTTCGAATTCGC CAAATGCTCAATACGGACAGCACCCTGATCACCCACAGACTACAT CATTTGGCAATATCCCTCGCCCACCTCTCCACACTCCAGCATCGC GTTCCAAACATATCGAGGCGATTATTGCTICATCTCCCTGGGACG GCGAGGCTCGTCATTCACCATCTGAATTGCCACCCGAGAAACGTG CTGCTTTAGAAGATGCTCTTCAGAAAATCGAAGAGAAATATCTCGA GGATCAAAGCAAGATTCCCGAGGACTGGACTCCCGAAAGACGAG AAGCACGTCTTATCTCTCTCAAGAATGGAAACGCATCCCGCAAAT CTCAAATCCGCAAACAATTTGGTGTTACTCTTCGTATGCGCGACAG AGATAAAGAGGCAAAGAAGATTCGCGAGGTTTTGGGAGCTAACTC TCCAATGGTGCCTACTGGCATGAACCGAGCTGAATACCGTAATTC ACCAACGGTTGCTGGCTATCCAGTAAATCCTCAGCAGCAAATGCA ACCGAATCAAACACCGGCCAGCATAAGAATGGAGATGGTGGATGT GAGACCTGCTACAGGATTCTCGCCAATCAATGCCCCGCCGCAAAA CCAGCAACACCAGCAACATCAGCAACACCAGCAATATCCGCAAGC ACCACCAGGTCACCACCCAATGCAATATTCAGGTCCACCTCAAGC TCAAGGTTTCCAACAAAGTATTCCGCCTGTATCACAACTTCTGTCG CAGCAACGACCTAGCCAGGACCACCAAATGAGCCCCCTTGGGTA TCAAGGAGCTCCGGAGCAAGCATACAGAGGACCAGAAGATCACG CAAACAAAAGACTCAAGCGTGGATCAAGTGCAGGACTGTCACGAT CAGATGAAGAAAGAAGTAGGCATTTTGCATCAGCTGATTCGACTC CAATGGGTGTGAATGAGACAAGGGTTTCAGGGGGAAGAACTCAG GCTTATAACGGTGCGGGAATGCTCTCTGTGGAAAATCAAAGATCT GTTTCTGCAGGAGCAAATGGTGCTATGATTGAAGGTGAGAGTAGA CCAAACTCTGCAGGCTCAAGTACTGTGCGAAAGAGGGTGCCAGTT GGTGCGTTGCAGAGGCAATGGGAAGCGTTGAATGGCAAGGGGCC GGGTAGGAAGTCGGAGGTTGAAAATAAGGCGGGGAATGTATTAAT GAGTAGTGTGGACGGGAATGAGAAAGCAAATGGACGGGCTGAGG GTGGAAAGTTGGTTATGGGTGGTAAAGGTAAGGAGCCAATGCAC GAGGGAGTTAGGAATGTGGTCGATITTGATTAGTGATGATAGTTCG AGTGAGCGTGGAATTAGGAGACCCAGTGGAGGAGGAAAATAGAC TCCTGGGAGGGGCAGTGAGATCCTGAAGAGATCATACATTTGTTC GATGGAAGCATGGATTTITCATTTTCATTICAAGGCTACTTGCCTTTITT CTTTTATACCTGTTTTTGTCACACAAGCTTTTTTTTTTCTTITCTICAT TCGGAGACCAAGCAAAGGAAAAGAAACAGCGAGATAGGAGACTTA TTGGAATCTACATTACAGAAATGGATAGATGGGAGAAGTGTCAAG AAACGTATTGTATTCTAAATACCTCGGTCTGCTTTTTTCCCTITITITC TTTTTTTCAAAACAGTTTTGATGCGACTCGATGCGATTCGATAAAAT ACAATACGATAGTTGATGATGTCCTTGGCCTACAAGATCGTGGCTT TAAATATCGTATTTTGATGAAGATGCAGAAGAAGAAGATGATGATG ATGATTACTTAGTTAGTTAATACGATGAAATTACTGGATGTTGATTT TCGAGAACATTACAGGAGTTTTTATTGGATGGATGGATGGATGGA TGGATGGATTGTATTTGATAGTGTAGGTAGTGTATAATAGGTCATT AGATAGTACCTACCTAGGTAGGTTGATTGATTAATTGATCACCTCT TCCACCA
SEQ ID NO: 43 BC1G 05162
CAGGAACTATGCATCTTATCGGTGACTITCATTCAGTAAGAAATCCG AGAATGAAATGATTTTGAGCCTCATGAATTGTGTATTAATGGTGAT TCCGTTTGCCGCGCCGTAATCAATATTTAGTCATTTTAAGTCGTTG AGTTTATCATGGACAAATTTTTATTCGACCAACATTTGCGAGATTG CACCATAGTGCAAGAAAAAACAACATGCTTCGAAACTTTITCTCTAT GCTGATCCAGAATACCGAACCACAGTGACCGAAGAGACCCTTCTT GAGGCCGAAGAGTTTGATGATTTTTTGAATCAAAAGGGCAGATTC GAAAACAGAAATCAAGGGTGCATCGGAGGAATTAGACTTATCTTA CAAAGAAATGCAATCCATCCCCATACATTCGAACCCAAGTTTTTAT CTTTACCTAATGGCTTTCATAAAAAGATTGTGGACGCAATGCATCT CCCTCACTCATGGATTGAGACTCTAAGCGCAGTGGGCCCATTTTA CTGGTCTGGATATGAGCAAAACGATAACGATCTTTATCTTCAGATA ATATACCGCAAGAGCGACGTAAAAAAGCCATCCAATGCTCGAAAC TGGGAATTGGTTCTTTCACACTCCCTCAAGACTGGTATCACGAATG CCTTTTTCAAGGGTACGCCTCGGGCTGATGTTACTCAATGTATTAC ATGTCTTCGTCAATGCATCAGTGAGATCGATCACCCTTTATTCCTG CCTGCTCTGGTCTTITTCTITGTGACATTGATTTTGGAGAAGATAAAC GTCACCGAGACAATCGAGAGCGAGTCCGGATCTTAGAAAAACAAG TAGTCGATGCATCCCACATATATGCACATCCAGACTTTACCAAGCG AGATAAAGTCAACCTTTCACAAATCAATAGTGACTITGGTAGATTGC CATAAGAATGTGTTGTGGAAGCGGCCGGAAGGGTATATCACTATT GTACAAAAAATGGAGAAAACATTATACGAGTTCAAAACTTTGTGGC CGGTTGAAAGAAAGGAAAGATTAAAAAAGCTTCAAACAATGATGG AAGGGAGGCTTGAACTGCTTCAGTCTAAGCTTCAGGGAATAAGCA CCCATCGTGAAGTTACAATCTCGAGATTGAAGTTAATTGGGGAGG TGTTGGAAAATTTGGTCTCGCTGGATATCTACAAGCAAGAGAAACA GCGGCAATTCAGTAAATTGCTGAGTCGAAAAACGGCACTTCTAGA GGAAACAAAACAAGAAGAGAGAAGAGAAATGGAGAAAACACAGA GAGATCTAGAAGTAATGCTAGAAACAAGGAAACAGACGACTATGT CATTACTAGGCATTTTGTTTCTACCTGGTACATTTTTTGCAGCAATT TTCAGTACCACATTCTTCAACTTCCAACATGGTGATTATGCGGGAA TCGTCTCTAAGAAATTTTATATTTACTGGGCAGCTACGGTTCCGAC CACTGTAACTTTGTTAGGCATGTGGCTCCTCTGGCAAAGAAGAAC TAAGAAAATGCTAGAGAAGAGAGATGATAAATTTCGGGACCTTGA AGCAAAGAGCAAGAAGGCACGAAACGATATCTITTAAAGAGGAAGA AAAACATTTTAGACCAGTTTGATTCCACAGCTCTTGAATATGTATTT TTCAACTTGGGGTTTTGTTTGCTATAATTTGAAGAAGCGGGTCGCG ATTCGTCCAAACACATAGTCGGTGTCGAAGAAAGATAGCATTACA CCCGATGTAACAGCTTTTGGGGATTGTGGGAAAGATAGTCCAATA CATGATCTTTCGCTGGAAAATTGCAGTACTGACTACACGCAAAGTT GACGATGGTTCATGAGTTGTAACAGGAACTTATTAAAATGATCGAG
CCCA SEQ ID NO: 44 BC1G 06835
GGCCTCAATCTCTCCTTTTCACATATCGTGTCTIGTCTTCTGTTGA AAGTCGGCATTCACAATTTITTTTGGTTCAATCAACTTTTGGTTAATA CATGCATGCATGTAATAGCTGTATCACGCATTTAATTTCGATTCATT CAAAATTACCTCCTTITTGTAAGCATTCCATAAAGGACATGCTCCGT CGAAATAGTTCTAGTCGACCTGTTCGAAGCAAATCAACATTATCAA CCTATCCAAAACACGATTTTGTCGACCCTGAAGAGTCTCGTATGCA TGCTCATGCTGCAGCAATGCATGCTTTCAATAGGGCCCAAGAGAG GAATGGCACTAGTTATGGAAACAGGAACGGTCTTTCACGAAGCAA CACTACAAGTCAAGAAAGTCAATGGCGGCCGAGTCAACAAAATAG TTCTACAAGTCTTGATAACCCAGGGCTCAAGCGTCAGCAGAGTGT TCGATTTGCAGGCCCAAATGCGGTAAAGAGGCGCCAATCAGCGG GGAAAAGGACGGACCCGCCAGCACTGAACCAGAAACTAAGTACT GCTACTTTGGGACCTGTITGTGATGACCACAAATACTCCAGTCCCA GCAGTGTATCGTCCACCCAGTCGTTCTTCTTCAATTGGCAAAGCTT CACTTAACAAATCAGTCGTTCGAGACTACTCTGCTCATAATTACGT TACCAACTTAGATTTCGATGAATACTATACGCAAGAGAACGATGTG GCCTCGACGCCATCTTCATATCGGCGAATCAGAAAGTCGAGGTCT ATGTTCAGCCCCTTGTCAGCGCCAACCAACATCTTCTACAGCAAT GGCAGCCCTGATCGCACCAATTGTTCATCCACTCCGCGGACGCTA GAGAATAATGCTCCATTACGGGCTCCAAAATCAATGAGCTTCCTC CGAGGGGGGCGGGACTATTTCAAATCTACATCGTCTTGCGAAAGA AATGACGATGCCGTCCAAATGGCCAGAGATAGATTTTTIGTITCAAG CCAATCAACAAAGACTTCGGGAGCAGCCATCTTITTCTCTICAGATC GAAGGCACAACGGCAAGAGAAGCCTTTTCGAAAGTCGGTTCGAA GCAGCAGCGGAAAGTCTGCAGCGACATATGATTCGGCCGAATCTA TGAGAGAGGGTGGCCTAAGAGCCAAAGCTCGCAAGGTATCCCAA GGATTAAAGAGCAAACTCCGAAAAGTTTTTGGCCGCAGCAAAGAC GAACCCGTCGCTATCCCTAATCAACAGGTGGATGCCATTGAAACT CACGTTCGAGAATACGCTGGACAATTAGCGTCAGATCATGAGTCG TTCGATGATATTCCTATACCCGATGAGGCCGCATTTGCTCATGTG GCAGCTAGAGTCCCATCATTACGTGCTATTGCTTCAAGCCAGAGA CTCAGATCACAAAGTGGTAGTATTCGTAGCTTACGAAGTGATCATA GTGATGAAAAGTCCAGAGTAACAAGCTGGACCAATAGTACAGCTA ACAATACTGTTACCAGTCAAGGATTGCGTCCTCCGCCTAGCAGAG ACCAAAGACTTTCTATAATCAATGAATCAGGCACGCATATCTCTAA AGCAGCATTTCATCGCCCAAATGTAAAGAATCAACATCCAGCTTAT CCTGCATTTCATCGTCCTGGCTATATCCAATCAATTCGACCAGGAG GTGTAGATAGCGCCAGACTTTGCTCTGCTTIGATGAAGCGTCTCG ACGAGAATAGCCCAGAAGCAATACTCGCAAAGTCAAAGAAAGCCA GCACTGAAACTCTCGGACTTGAGAAAGTACCTAGACAAAGTAGCT CCTTTACCAATACTCTTTCACGGCCCAAGCCATGGATTAGACAGG TACCTCCTGACTGTGACCCAGGAAATCAGAGCCAAAATCAACTTC CTAACGTATACTGTTCGAACAACGCTGGCCCAATACCCGTCACGA GCGGCGAGGAACTACCTGGTCAGGCAATCGACTCTGAGTATCAAT TCAAATCTGCAGGTTTACCATTACATAATCCACAACTTCAAAGCCA AGACGATGTGTTTTCCTCACTCCCAGGATCTAGTCATGGCAACTC CTTTCACCACGGTAGCTCATTTCATGAAGACAACTCATTTCATCAA CGTGCTCACCAGCGTAATTCAAAGTCTGCACACAGACGCCACTTA TCCGATATTGATGCCGCATATGACCCTGTGCAAGACCCTTCAGGT CTCACTCCGCAGCAAGTCGCACAGCGGGACGATCCTATAGTTCCC AAACCAAAAGTTATCCGCGAGGCAAGGTCTGCATTTITTCGGAGGC ACGACATTTGCAATTGACAGAGTCGGAAATACAAGTCCGTATCGT CGCGCTTTGGCGGAAAGCGACAATTCTGCTGCCTACAACGAAGTG AGTATGGCACCGGTAAATGATGACGTTTATAGTGAGAGTGTTTACT CTCGAAGTATTGGCCGTAATCTTTCGGAGGCTATGAGTAGTGATA CATCGGTACCGCTCCCAAATGTCCGTATGCCGTCATTGCCCGTCG ATGGCTCAACTCCCAATGGTGGCGCTGTCATTATCAACAGCACAA CCTATCGTCCAACTCATCCAAGACAGCGAGGTGACAATTCCGGTG GTTCTATTGAGTGGCAAACATGGATGTCGTCTGAAGTGGCAAAGT TGGAAAGACCATCTGAAAACGATCGCGTAAGCGTCAGCAACATCG AACAATCACTATCACCCACGCCTACGATGTCAAACTCCTTTCACAT TGTGCACAGAAGAGAAAAGGCTCAGATGGCTGATGATGATACGGA TATCGCTCAGAAGAAACTTCCTGCTGGTAAACAGCCGCTTGGTCT CATTCAACAGAATCTTAATGCCCAAGTTCTTCTGAAGCCGATTTTITG AAAAATCGCTCGACGACATCTTTGCCTGAAGATGATTTCATTGATA ACTCTAAGCCGTTTAATATTCCTTCTGCACCACCACTTCCTCTTAG ATCGATATTAAGACCAGCACAAAGCAAAACGAGTCTGAAAAGTAC CTCGAACTCTCAACACGCACCAACCCCAAATCCCGTCACTCAAAC CCAGAATCCAAATACCAGCGCTCGCAACGTCTTGCGCAAACGTCT CTCATCTACAACCCTAAGAAGCGCACCAACAACACCTAATCATGG TGTAGAAAAACAATCCCCGAGTACGCGTAATGTACTCCACAAACG AAACGTATCGGAAGCCACGATGAAAAGCGGCAAGAGTATTAGAAG CGTGAAGAGTTTCGATACGAGTGGAAGTCAAAGCCGTAGCTTTAC CACTAGTCCGGCGAAATTGGTCAAGAGGAGTGGGAGACCGGTGT ATAATTTTACGCCGCAGAGTAGTCCGGGTACGGGTATTGGGGCC GCGGTGGAGAGACAGTTTGGGAGTGCGAACGCGAAGCCGAATGC GAATACGAGTGGAGGTTTGTATGGAACGGGGAGATCGAGAGTGA GGGCTGGGGGCAGGGAAMATGAAAGGGTCGGTGGAGGCGGCAC GGATGATGTTTATGGGGTTGAGGGAAGTGGGGTGGGGGATTCGA ATGGGTTGGGGTTGGGGTTGGATCAACAACAGGTGGGTAGTAAA CAGATGGTGGATATGTTTTTGAGTAGTAGACGAAAGAGAATTGCTA GTGTAGGGACGATCGCGGGGGGGAGTATGGGGGGTGATGGGGG TGGGAGGAGTGATGGTGGAATGGATGATGGTGCGGTGTTTCTITA GGCGTGGGGATTGGTGTATGAGTATTGGGAATAGATGAGAGGGT AACGAAGTCATGACTTATGGATTTGGGTGCTTGAGACCAGGATTA GGATTAGGATTATGTATATATTTTTAGCGGGTATATCATGTATTATA CTTGGTGACTCGGTTACTGGGGATTGGAGAATAGAACAATAAAGC GCTTGTGAGAGGGCTGATATAGTATGGATTAGGGTCGATGACATT ACTTTTGCTITITCITTTCTITTTTAGAAMATTAGAGTTTAGTGTAAGT AGACAGCTGGTAGAGTAGTGTAGTGTAGTGCCAGTATGAATGGTA
GTTGAGGTATGGAAAATATTAG SEQ ID NO: 45 BC1G 10526
GTTTCCAAGTACAGTACAGTACCACTTCAAGTACATAAACTCAGCG CTCTTCTTGAGATAAAAGGTTAAAGGGTTGCAAGATTTCTTTGATA CATATCATTGGAAATAAAGTATTCCGGATTACATTAGAGGAAGCTC ACTGTAACAGGTTTCTGCTTTGTTGTTCATGGACATGATGGCAGCA ACTCCAGACATTTCTTTGACCTGGTCATCAGTCTATAAAGTCGCCC CAAAAGACAACGTCTCGCTGCCCGGGGACAAGATACTACTACCTC AATCAGCGCTGGAACAACTACTATCGGCATCTACAGTTACGGTGA ATTCTAACACTCGCCCCAGCAATGTTGCATTTGATCCATTCAATCC ATATTCATTGGCAGCCGCTCGCATAGAACAGTCGCAATGGAGAGA TACCCAACAACAACTGCCCCATCCTCTCACCTITTAGGCTGGTCAA CTCGAAGAACGGAAATGTAGTATATGCAGGAATTCGAGAGTTCTC GGCAGATGAAGGAGAAGTTGTCTTAAGCCCATTTTTGCTAGAGGC ATTAGGGATCACTGCGCCCTTACGAAATCCAACACCACCAAGTTC AAAGGTTGAAAGCAGGAGAGGGTCGCCGGATACGCCTATAGATC TTACAGATAACCCTGCAATCGATCTTACGGGTGACGAGATGATAG ACCTTACAGACGAAACCGAAGAACCGGCGCAGATCACTGTACATG CGAAACAATTACCTAAAGGCACATACGTGAGGCTAAGGCCATTGG AGGCTGGTTATAATCCCGAGGATTGGAAATCATTGCTCGAAAAMAC ACATGCGAGAAAATTTCACAACTTTAACGAAAGGAGAAATATTGAC GGTTCGAGGTTCAAAGTCGGAGGAATTCCGATTTCTGATTGATAA GTTTGCACCGGAAGGAGATGCAGTTTGCGTTGTTGATACAGATCT AGAGGTCGATATTGAGGCTTITGAATGAAGAGCAGGCTCGGGAAAC CTTGAAGCAAATCATGTCAAAGGCACAAAAAGCTCCAGGAACGGC TCAAGGGAGTTCAATTGGCGGAGAATTAGATCTTTGGAATGCTTT GCAGGGACAGGTCGCAGAAGGTGATTATGTCGACTATACTTTACC TTCATGGGATCGATCAAATGGTCTTGATATTGAGCTTTCACTIGAG GACGATGGTGATGGTGATGTGGAGATATTCATTAGTCCTCAATCA GCCCATCAAAGAGCAAAACCACGGGAGGATGAACATGTTCTCGGA GATTTCTCAAGTGACAAAATCAAGAGAATAACCATACAACAATCAA ATGTGGAATTAGACGGAGCTGATGCTATATTAATTTCTITATACTG TCGAGGAACTGGAGCAGGCTCTGAGCCACCACATGGACCACGGA AGTATTCCATTAGAGTAAAATCGCTTGAAAAGGGGGCAAGCAATG GGGCCCCAAGCAACCCAATCTCGCTCGAAGAAGATGCCGAAATG CATGGATCTGATGAGGAGCAATGTAAAAATTGTCATCAATGGGTG CCAAAGCGGACAATGATGCTTCATGAGAACTTTTGTCTCCGCAATA ATATCTCATGCCCTCATTGCAATGGCGTCTTTCAGAAGAAATCTTC AGAATGGCTGAATCATTGGCATTGTCCTCATGATTCAGCCCATGG AAATTCCTCAGAAAGCAAAACTAAACACGACTCTATTTTTCACGAA GCTCGACAATGTCCCAATTGCCCTTACGAAGCAACAAATATGAGG GATCTTGCCACTCACCGTACGTCTATTTGTCCTGGCAAGATCATTC TATGTCAATTTTGCCATCTTGAAGTTCCTCAAGAGGGCGACCCCTT CGATCCGTCTCCAGAAAGTCTTATTTCCGGACTTACAGCACACGA GCTTGCAGATGGGGCTCGAACTACGGAATGTCACCTGTGCAGCA AAATTGTTCGACTTCGGGATATGACCACCCATCTTAAACATCACGA ACTCGAAAAGAATAGCCGATTTAAACCAGCCATCTGTAGAAATGCA ATCTGCGGTAGAACTCTGGAGGGCGTTGGTAAGAATGGGGAAGT GGGCGCTGGATCGAGAATGGGCCAAGGACCTGGTAATGATTTGG GTCTTTGCAGTATCTGCTTCGGTCCACTATACGCTAGTATGCACGA CCCATTAGGAAAAGCAATGAAACGCCGCGTGGAACGAAGGTATCT GAGCCAGATGATCACGGGATGCGGCAAGAAATGGTGTACAAACAT CTATTGCAAGACTGCAAGGGCGAAAGAAGCGAATGGGCCTCAGG CAATACTAGCGATGAAAGATGCCCTTCCTCTTATTICAGCCATTAGT AGCCCAAGTAGAGGATAAGACCGAACCGATGCATTTCTGTGTCGA TGAAGGAAACCAGAAGAGAAGAAATCTGGCTGAAATGTTAGCTAT GGAGCCTGGAGGTTGGGAATTGGAGTGGTGTGTTGCGGCTTGTG AAGCAGAAGGTGCAAATCTTGATAAGGCCAGGACATGGTTATCTA ATTGGGCTCCCAAGAAAGCTTGATGTGGTTCAGATCTGGAAGATA TTTTGGTATGGATGAAAGGGATGGAGCATGGCGTGGTACCGATTG CATAAGTAAGGGAGTTCTGGTGGCTGATGACGATATGATATGATA TGATACCAATTTATAGACCCGATTTTGTTGTGCGTACATAAATATAC ATGGTTGGCGTCGCATTAGCTAGAGATAGATCGAACAGATTAAGA
ATTTACTGCTAATACATAAACATATATACATTCTTCA SEQ ID NO: 46 BC1G 03606
GGATCGCAACTAACTCTTCTGGAAGGTTCTTGTGGCAATATCAAC CACATGGATCTTCAGTACCACCGCCGTCAAATTGGCTGTGCTTGG GTTATATATGCGAATCTTCACCACGCCCGTTTTCAAGCGATGGGC CGTCTCTTTGATGACCATAGACGTTTGTTTCGGTATCACCTTCTTC GTCGTGTTTTTAACTCATTGCAACCCAGTCTCTCAAGAATGGAACC CTGTTCCACGGGGTTCATGCAGATCTCTAACATTGTCCGAGTTTITTC CTCCATCGCTCTCAATCTGGCTCTCGACACGGCAATCATCATTCTC CCTATGCCATGGCTATACAAGCTTCAAATCGCATTAAATCACAAGC TTTITTGTGATGGTCATGTTCAGTTTCGGCTTTGCAACTATTGCCAT CATGTGCTATCGTCTTGAATTGACAGCCCGAAGCCCTTCTGATCC CATGATTGCCATTGCAAGAGTCGGAGTGCTGAGCAATCTCGAGCT TTGGATTGGTATTATTGTTGCCTGCTTACCTACTATGAAACCTTTTG TTAGAGTATATCTCAGACCCAGCCTATCAAAGCTCTCCCAAAAACT TTATGGCAGCCCCACAGTGTCAACAAAAGACGAAAATCCACAACT TCAGCTAAGGAACTTCGGGGGTTCCGGACCTTCACGCCCCCAAAA AAAACAGTAACTACACTGAACTTTCTGAAGCTCCATCTGTGCAGAC AGATACTGACGAGTTGCATCTCGTTCCAAATGAATCATCCAATTTT
GATGCAAATTGTGAATCTAGCAACA SEQ ID NO: 47 BC1G 04443
GCACGGTTGGCTTGCCAAGACTTTCCCACCCACAGAAAGTGCGAT ACTGGAGAATACCCCTGTCAGAGGTACCTCCGGAACCGGGCAGG AAAATTTCCTAGCTACTGTTGCCCACAACAAAAAGACGAAGAGTCA CATCTACAACTTTTTGATTTAAACCTCAAAATACCCATCTGTTATTC TTCCTTTTTTTTTGAACTCCACTCACTTCTTCCTICAAAATGGCCGC CCGTACATTTTCCAGAGTCGCTAGACCAGTTGCACGTCAATTGAC TGCACCAGCACGCAGAACTTTTGTCTCTGCTATCAATGCCTCAGC CAGACCTTCCGCTGCTCGTGCTGTITGTTGGAGCTTCCCAACAAGT CAGAGGTGTAAAGACCATTGACTTTGCTGGCACAAAGGAGAAGGT TTACGAGAGAGCCGACTGGCCAGTTGAGAGACTCCAGGAATACTT CAAGAATGACACAATGGCCATTATTGGTTACGGTTCCCAAGGACA TGCTCAATCTTTGAACATGCGTGATAACGGTCTTAACGTCGTGGTC GGTGTACGAAAGAACGGTCAATCATGGAAGGATGCTCAACAAGAT GGTTGGGTTCCAGGAAAGAACCTCTTCGAGGTCGATGAGGCTATC TCAAAGGGTACCATCATCATGAACTTGCTTITCTGATGCTGCTCAAA GTGAAACTTGGCCAGCACTTAAGCCCCAGATCACCAAGGGAAAGA CTCTTTACTTCTCCCACGGTTTCTCCCCAGTCTTCAAGGACCAAAC CAAGGTCGATGTCCCAACTGACGTTGATGTCATCCTCGTTGCACC AAAGGGATCTGGACGTACCGTCCGAACTCTCTTCCGTGAGGGTC GTGGTATCAACTCTTCCATCGCCGTTTTCCAAGATGTTACCGGTAA GGCACAAGAGAAGGCTATCGCTCTCGGTGTCGGTGTTGGATCTG GATACCTCTACGAGACCACCTTCGAGAAGGAGGTTTACTCCGACT TGTACGGTGAGCGTGGTTGCTTGATGGGTGGTATCCACGGCATGT TCCTCGCACAATACGAGGTTCTCCGTGAGCAAGGTCACAGCCCAA GTGAAGCTTTCAACGAGACTGTTGAGGAGGCTACTCAATCTITGT ACCCATTGATTGGTGCCAACGGTATGGACTGGATGTACGAGGCTT GCTCTACCACTGCTCGTCGTGGTGCTATCGATTGGTCCGGAAAGT TCAAGGATGCTTTGAAGCCAGTCTTCAACGACTTGTATGACTCCGT CAAGACCGGAAAGGAGACTCAAAGATCCCTTGAGTTCAACTCCCA AAAGGATTACCGTGAGAAGTATGAGGCTGAGATGAAGGAGATCCG TGATTTGGAGATCTGGAGAGCAGGAAAGGCTGTCCGTTCCCTCCG TCCTGAAAACAACTAAGTGGATAGTTAATGGGGCCTTITGGGGCTG GAGTTGCATATTTGAAATTGGGCCAATTGTATCATACTCTCATGAC TTTCCGTTTTTTTAATCAACGGTATCTGGAATTAAAAGTTTAAGCCA
TTGAATTCAAAAAAATTATATTTCCAATTGTTTTTATAATTGAC SEQ ID NO: 48 BC1G 12479
GAGCACACCCACTTTCAAAATTTCTTCCAAGTTTTGGATACCTCGA AGTTACATTTCTGGTTATTCTAATAAGTATGGCGCCTTCTCCGGTG ACAGTAAGTCTAAAAGATTTGCAAAGTGGCAATGTTTCCTTCTCAA CACTCGAAGAGGCTTTTGGCCCCGAGTCTITTAGGTATTATACTCG TCAAAGATGTTCCAGAGCCATTCGTAGAGTTAAGACATAGTCTACT CTCATATTCATCTTATCTTGGAAACTTGCCTGAAGCCAGACTAGAG AAAATCGAAAACGCGGCTGCAAAATATCTTACCGGCTGGTCTCGT GGTAAAGAAACTCTAAAAAATGGCCAAGTGGACACACTCAAAGGA TCATACTATGCGAATTGTGCCTTCTACGTCGACCCATCTTTAGCAT GTGCGATTCCTACTCCTGACTTTTCACCCGAAAATTTTCCCGAATA TCTCAGTCCAAATTTATGGCCTGGAGAAATCGTGTTGCCTGGCTT CAAGAGCACATTTGAGAGATTGTGTCGAATTATTATTGACACCGGA GTACTGGTCGCTCGGGCTTGTGACAGATATGCAGAGAAGGAGATT CCAGACTACAAACCTGGATATCTTGAGCACGTTGTAAAAACTTCGA CAACCACTAAAGCACGATTGCTACATTATTTTCCAGCAGAAGCCAA GGACTCTTCTGATGCTCTAGACGATGATTGGTGTGCAACCCATTT GGATCATGGCTGCTTAACTGGACTCACATCAGCTATGTTCATTAAC GAGACTCGCAATCCACCCGTGATTCCAGTATCCTACTCATACCGT CCAACTACCCTTAGCCCTCTTAAGGAGCTTCCTACATCTCCGGAC CCAACTGCGGGACTTTACATTCAATCTCGGAGTGGCGAGACTGTT CAAGTTAAAATTCCCAAAGACTGCATTGCTTTCCAAACGGGGGAG GCCCTCGAGAGAATCACCAAAGGTAAATTCAAGGCAGTTCCTCAC TATGTGAGAGGTGTACGACCAGGAGTTGCAGATGGCGAGAATGA AGGAGGAAGGATTGCGAGAAATACTATTGCCGTCTTTACTCAACC CAACTTGGACGAGATTGTAGACTCAGAGATGGGGATTACTTITGG AGAGTTCGCGAGAGGGGTAGTTGCGAAAAATACAACGAAGTGAG GTTATTCTAACAAATTATTCACAAGTTCATACAAAATACCCAGTACA GCTTTGTTTTTATCTAAATATATTTCATGATGCTCAATGTTTTAGCG AGGGGGTATTGGGGGAAATATTGAGGTGGCGAAGCGCATAACTTT CCAGTATCTCAGCCCAAAGGCCCCCATTTGCCCCCCCAATTTATT GTATCGGATTGGAATTCTTCCGTCCGAGTGAAAAAAAAAGCAATAA CATCCAAGGATGGCGGCGGTACGGGGACATTGGAAGGACGTTCC
AAGACTAGGATCTTTATTTTATTCTGGTGGCAATAACCCCTA SEQ ID NO: 49 BC1G 06676
GCTTGTCTTATCTGATCGATTGATCGGATTTCATTGGTTTICATTC GACAATAGCCATGCGGTCCCGGATGTGACAACTATTTTCGAAGTG TGAGTTCGTATGAAAAGGTGGGCAGGCATGGTATGAAGTAACTGT GCTCCGTATCTATGGGGAAGGACGAGGCGTAGAGGTGGTCCGTT CTTTCTTGTCATATCCTGATATAAATATGTACTCCACGGAAGTCGT GATATGTAGTCTTTGAATACTTTGCCATTCGGTGTGTTCTTTTCCAT TTTGGCTAACGTTGCACATCTCTITTCTITTCTCTIGGAACTTTGAGAT TCGTTTTGATTTTACTGTATTCGTACAAACAGTCGGGAACACAATT CGCTTGACTTAAGAAGATCAGTGTCTTCCAATTCCCCAAACTATGG CTCCCTCCATCGCAGAACTTCCGTCTTCCCCCTCGACTACTGTCA AGGAAGCTCCTATATCTACCACTTCTGGGCGCGGCATCTTCAATG CAGAAGTACAACCTCCGGAAGCCTCTGCAGTTCCAATATGGCAAT CCATCGCTACTCGTCGCCAGCAAGAAATCAACTCTTCTATTCCTTC GGAATGGCTTCTTCCAACAGGCCTCCTCCAATCTAAACGTCCTCT CGATCTAGTAAAAACATGCGGTTTGTTGGATGAAAGAGAGGTGAA GATTGTGTACAGTGCTGCTGTGGATTTGCTCGAGAAAATGAGAAC GAGAGAGTATACAGCTGTGGAAGTTACAACGGCGTTTTGTAAAGC GAGCGCTGTTGCCCATCAAGCGACAAACTGTCTCGCTTGGACGAT GTACCCCAGCGCCCTCTCCCACGCCGCCAAACTCGACGCTCACA TGTCCCTAACCGGGACTCCCATCGGGCCCCTCCATGGTCTTCCCA TCTCCGTAAAAGAACACGTCTACCTCATCGACACACCTTCCACATC TGGTTTCGTAGGCTGGGCCGATAACTTCTGTACTTCCTCTGCCCA AGAAGGAATGTGCATCCAAGTCCTCCGCGACAGCGGCGCAGTCT TTCACGTCAAGACTACTAATCCCCAAGGGCTCATGGCTCTCGAAA CACAATCAAATCTCTATTCAACCACTACCAATCCTCTCAATACCTTC CTCTCCCCAGGTGGTTCATCAGGTGGTGAATCCGCCCTGGTAGC CATGCACGGGTCGATTCTCGGAATTGGCACCGACATCGGAGGGA GCATTCGAAATCCCGCCCTGAGTTGCGGTATCTACGGACTCAAAC CCAGTGTGGCGCGACTTCCACATTCCGGACTCTCCGGCGCACAC GACGGAATGGAAAGTGTGATTGGGGTTGTGGGACCCATTGCTACA TGTTTGGCAGATATGGAACTGTTTTGCAAAACGCTCTTGGATGCG CAGCCCTGGAGACAGGAAGTTGGATTACTACCCATTCCATGGGGA AGTCGCGAAGCTATCGCTGCCGAGAAAGAAGAGAACAGGAAATT GAAAATCGGTATCATATACACTGATGGAGTACATACTCCTCATCCA CCCATTACCCGTGTTCTGCACTCTACGGAGTCAGCACTCAAAGAT GCAGGACATGAAATCATTCCCTICCCAACACATCTGCACTCTCCTA TCGTCTCTACTGTCAATGCATTATACCTCCTAGACAGCGGCGCCG AATATCTTTCCCACCTCTCTCTAACCTCTGAGCCTCCCACCTCATT ACTCCAATGGCTTTTAGAAGAAGAGACCACGAAAAATCGTAGCATT CCCGAACAATGGAAGTTACATAAGGAGAGAAACAGGCTTCAAGAC GCATATGCGAAATTGATGTTGGAAACGGGTGTAGATTGTATCATA GCGCCAGGGGGTGTGACGGTAGCGAATGCACATGAAGAGGCGAA GTACTGGGGATACACGAATGTGTATAACGGGTTAGATCTACCGGT TGCCTGTTTGCCTGCTGGAGAGGTGGAGGAGGGAGATGCGTGGG GCGATGAAAATGAAAATAAAATTGCAAAAACGCATATGGAAGCTCT GTGGGGCCCTGGAAAAGAAGGAGCGCAAAAATATGAAGGAGGAA GTGTAGGATTACAGATTGTTGGAAGGAGGTTGGAGGAGGAAAAG CTATTGAAGATGACCAAAATAATTGAGAGGGACTTGGGATTATCTG GGCCCAACTAGAAGAAAGAACTCGAAGGTAATGTGAAAATGAAGA TTAGAGATCAAATCTGAGATATCGAAGTGATTCAGATTTTTTTAGAA
GAACA SEQ ID NO: 50 BC1G 12472
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TTTCTTATTGGTTTCCA SEQ ID NO: 51 BC1G 02471
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AACTCA SEQ ID NO: 52 BC1G 03511
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TCACCATATCAACTCACAAATTCCAACCGAAACA SEQ ID NO: 54 BC1G 14507
GGGTGTGGGTGTAGATGAATTAAATGAAGAACATCAGCGTTCCAA GGTAATCCGTATCCATCATATCACATCACATCTCTTCACATCACTC CAATATTCTCTCTTCTATCCTCTCTCTCTCTCTCTCTCCCTCTCCCT CTCTGTCTTCCTCCCCCTCGCCGTCGTCGCTTCATTGTAGGAGAC CTCTTTCTCGTCGCTCCATACCAGTCCCGCAAATCGATAGCTTCITT CCATTTGCCTGCTAATTACCATTCCATATTACATTATITATATGCGT AATTAGCAACCTTTTGCCTCCTTCCCCTTGCATTAGCACCACGAAMA CATCGAGAACCAGACAGCTCCATTCCCTCAAACAACCTCCTATTC GATCGATCATTCCTTCTTCAACAAGACTTTGGAACAACTACTGCAC TTCAATATGTCTCAACAACCTGAAGCTGTAAATAATATGCATAATTT GACTACGCTCATAAMAACGACTCGAAGCCGCAACCTCTCGTCTTGA AGATATAGCTTCCTCTACCATTCCACCACCTGCTTCATCATCCATC CCTCTAATTTCTCCTCCGGCCGAAGCTGCGAAAMACAAATGGCACA ACTCCGCCGCCGCCAACGATCCAAACACCAGATATCAAAAAGATC ATCGAGGATCCAATCCCAGGAGTAGTCTCAGAGTTCGATAATTITA TTCAGGGGGCGGTTAAGAMATATGTTAACTTGAGTGATGAGATTG GAGGGGTTGTTGCGCAGCAGGCATCTAGTGTATTGAAGGCATATG TCGGACAACGAAGATATATTTTGATCACTACAAAGTCAAAGAAACC TGGCATGCAAGATGAACCATTCCAAAAGCTCATCAAACCTCTTCAG GATTCATTTACTGCCGTTGATGATATCCGAAAGTCCAATCGTGCAT CTCCATTCTTCAATCATCTCAGTGCTGTTTCTGAAAGTATTGGTGT ACTTGCCTGGGTTACAATGGACAACAAACCATTTAAACATGTCGAT GAATCATTGGGATCTGCTCAATATTACGGAAACAGAGTATTGAAG GAATTTAAGGAGAAAGACCCAAAACAAGTCGAATGGATTCAAGCA TTCTATCAAATCTTTAAAGATCTCAGCGAATATGCTAAGGATAACTT CCCAAACGGTATTCCATGGAATCCAAAGGGTGAAGATTTGGAAGT TGCGATTAAGGATGTAGATGAAAAGGCTCCAGCCCCTCCTGCTCC TCATCCAAAGGCTGCAACTGCTGGAGGTGCCGCACCACCACCAC CCCCETCCACCTCCTCCTCCACCAGTCTTCGATGACATTCCATCAAA GCCAGCACCAAACCAAGCAGATTCAGGTGCTGGACTAGGAGCCG TTTTCTCTGAACTGAATAAAGGAGCAGACGTTACAAAAGGATTGCG CAAAGTGAATGCTGATCAAATGACACATAAAAATCCTTCTTTGAGA GCAGGTGCTACAGTTCCCACCAGAAGTGATAGTCAATCCAGTATT AATTCGAACCGAGGAAAGAGTCCTGCTCCTGGTAAAAAGCCCAAG CCAGAGAGTATGAGAACTAAGAAACCCCCTGTTAAAAAATTGGAG GGTAACAAGTGGTTTATTGAAAACTACGAAAACGAGTCTGAGCCA ATCACAATTGAAGCATCTATTTCACACTCGATCCTCATTTCCCGCT GCTCAAAAACCACTATTATCATTAAAGGAAAAGCAAACGCTATTTC TATTGACAACTCCCCTCGTCTTGCCTTGGTAATTGATAGTCTCGTC TCATCGATTGATGTTATCAAAGCACCAAACTTCGCACTITCAAGTAC TGGGCACATTGCCAACGATTATGATGGATCAAGTTGATGGTGCTC AAATTTACTTGGGGAAGGAGAGTTTGAACACGGAAGTCTTCACGA GTAAATGTAGTAGTGTCAATGTGCTACTTCCAGATTTGGAGAGTGC AGACGGGGAAGGAGATTACAAGGAGGTGCCGTTGCCCGAACAGT TGAGGACTTGGGTGGAGAATGGAAAGGTCAAGAGTGAGATTGTTG AACATGCTGGATAGATTGGTTGAGATGGATTGTGGAGTTTGGGGA GAGGCTCTGGCGAAAACTTGTTGGGGGTGAGGGGTAATGAGATG TGATGGAGAATCTGGGTAGATTTGATATTATAGAGATAGTTGAGTG AAGTTTTATATCATCGCATGTTAGTTGAAGTTTTCAGGCAGAGTAG AAGTCAAAGTTGAATTGTACATATCTATGTATATGTATATCCGAGG CTTGTCTCGCTTTGTTGTTTAGTAGATTTCAAACCGAAGATTTTCTA CTCATCATATCGTGCCGTGTGTITTTATATTIGGGCGATGTGTCGTTG
TGCTTTTTCTCTCTCTATCTCTTTTACTTTCAGGGAAATAAATATA SEQ ID NO: 55 BC1G 09414
GGCTTCAATTGACGTTGAAACATGAATGCTGAATGATGATACGATA CACTTTACTTCAGCCCCTTTAACATTTTGTCGCAAAATCGGTGAAA CTTGGGTTGTATGTATTTGTATATTAAAGATCGCTAAGCCCAGCCT CTATGGTAACAGATTACCTGAGCTTCGTCATTTCGACCCCCGGAC CGTGATCTTCTACCAACCTCGAACCCATTCCTTCAAATAAATGTCA CAAATCTATCTTTCTTCATACCTATTTCTTITTTTTGTTCATACTCATAA TGTTTTCGGGTTCGAACTCGTACCTTGGTGGTAACACCGGCCGCC AACCACCACAGCAACCGCAACAACAATATGGTGGTTTCCAGCCAA ACCAAGGTTTCCAACCACAGCAGACTGGTTTCCAGCCACAACAGA CTGGTTTTCAACCTCAACCCACAGGATATGGTAATGCGGCTCCTIT ACAACCCAATTTCACCGGTTATCCACTTCAACCACAGCCTACGGG ATATTCTCAGCCCTCTCAAGCAGGCTTCCCTGGAGGCCAGCAGCA ACAGCAGCAGTTCAACAATGCTCCTCAACAGCAGAACTTCCAAAC GGGAGCTCCCCCAATCCCGCAGATTCCGCAGCAATTCCAGCAGC CTCAACAAACGCAACAGGCTCAACCACCTCCTGCACCTCCTGTGC AGCAACCGCAAGCGACCGGATTTGCTGCAATGGCAGATTCATTTA AACCTGCTGCTGCAGAGCCATCGAAGCCAAGAGGACGCAGAGCC TCCAAGGGGGGAGCAAAGATACCTAGTATACGACTTTCCTITCATT ACAGCCCAAGATCAAGCAAAGTTCGAAACTCTTTTCAAATCCGCTG TTGGGGATGGGCAAACACTTTCTGGGGAGAAATCGAGGGATCTTT TACTACGCTCAAAACTAGACGGGAACTCACTGTCGCAAATATGGA CGCTCGCAGACACTACAAGATCTGGACAGCTACATTTTCCCGAAT TCGCATTGGCTATGTACCTCTGTAATCTCAAGCTAGTCGGCAAGC AGTTACCATCCGTGCTTCCCGATGTTATCAAAAATGAAGTTTCTAG CATGGTGGATATCATAAACTTCGCTATAGATGATGATGCACCAGC GGCAACGAATGCGCCCAGTTTTGATGGTCGACAAAACACCGCGA CACCTCCGACTATCCAACAACCACAGCCAATGGCGTCTAATTCCG CCCTTCTCACTGCGCAAATGACAGGTTACCCTGGACAGCAGAATA ACTTTTCGGGTGGATTTCAACCACAACAAACAGGCTTCCAGGGCC AAATGCAAACTGGCTTTTCTGGACAGCAAGGCGGATTGCAACCTC AGCCAACTGGATATAATCAGATGTCAAACCCTCAAGCAACGGGCT ATAATGGACCGCGCCCTCCAATGCCTCCTATGCCATCTAACTTCA GTTCTCATTTATCTCCGGCTCAGACGGGTATGCAAGGTGGAATGA TCGCGCCATTGAATAGCCAGCCTACAGGAGTCGATGGCCAATGG GGCTTGGTAAATGCGCCAGCCCCCAATATCGATCTATTACATTCC CGGATGATGCCGCAACAGGGTCGAGAACAAGGCAACTTCACCAC GGCTGGTATAACAGGCAATGCTGAAATTCCATGGGGAATTACGAA AGACGAGAAGACCAGATATGATTCCGTTTTCAAAGCTTGGGATGG GTTTGGTAAAGGATATATTAGCGGTGATGTCGCTATTGAAGTTTIT GGGCAGAGTGGTCTCCCGAAGCCTGACCTGGAGCGCGTATGGAC CTTAGCAGATCACGGCAACAAGGGAAAGCTCAACATGGATGAATT CGCGGTTGCCATGCATTTGATTTATCGAAAGCTTAATGGATATCCT CTACCAGCCCAACTACCTCCGGCGCTCATACCCCCTTCCACTCGT AACTTCAATGATTCGATTGGGGCTGTCAAATCTTTACTTCATCAAG AATCTAATTTCCGCAAGAACTCTGGTGCTACCCTTTTGCCACAAAA GACTGGAGTGAGCTACCTCAAAAATCATTCTTTCCGTGGTGATGC TACCCCAGGTCGCACAGGCCGTAAAGACGCTACAGTATACAAAAA TAACGACGATGATGTTGGGTATAAATCTAGTGCTCGTCGCAGACT CGGGGCCTCTTCTCCACGACCTTCGTCTCCGGGATCAACAACTTC CAACGATGACCTTTCACTAGACCAGCTTAGAAAGAAAATCGCGGA GAGACAAGTGATACTGGATGCAATTGATTTCAAGGCCGAAAATGC TGCAGATGAAGATGATGCTCTTGATCGTAAAGATCGTCGTGAAGC AGAGGATCTTTATCACCGCATTCGTCGTATTCAAGAGGATATCGAT GCGCATCCAGACGCATCGTTGCGTAATGTTGATTCCGGCGCCGA GCGTCGTGCTTTGAAAAGACAGTTGCAGACATTGACAGATAAACT TCCAGATATTGCTTCGCGTGTCCGAAGAACGGAAAGAAGCATTGC TGATGCCAAGCTTGAACTATTCCGTCTAAAGGATGCCAAAGCTCA CCCTGGAAGTGCCTCTAGCATTGTTGGAACTGGTCCTGGCGGCG CTATCACCGAATCAGATAGACTCAAAGCAAGAGCCAAGGCTATGA TGCAACAACGTTCTGCTGCTCTCACTGGTAAGAAGATTGAGGCGA GTAATGATGACTTGGATGCGCCAAAACGCCTCGAAGAAGAAAATC TCAAGATTCGAACTGAGAAGGAAAACAACGAGCGCATGGTTCAAG ATGTTGAAGAGAGTGTCCGTGACTTITTCACGAGGACTGGAGGATA GTCTCAAAGATGGTGGTGAGAGCTCGTCCAGTGAGCATGAGAAG AGACGTTGGGAGGATGGGCTAGGTGTTGAGGATGAAGTGAAGGA CTTCATCTTCGATTTGCAAAGGAGCAGCAGGAGTGCCAGAGTTCG AACTGATGATCGCAGCAGAGAGACTCCTCGTACTGAAGCGTCTCA TGCTAGCCCTGCTCCAGCAGCTCGTAGCGAAACTCCATCGTCACA GCCATCATCTACACCAACCCCTGCTGGAGGTTCATACTCACAATA CAAGACTCCTGAAGATAGAGCAGCTTATATCAAGCAACAGGCCGA GAAGCGCATGGCTGAACGTCTAGCTGCTCTTGGTATCAAGGCACC ATCTAAATCTGGAGAAACAACACAACAGAGACTGGAACGTGAAAA GAATGAGCGTGCAGCCAAACTCAGACAAGCAGAAGAGGAAGATG CTAAACGTGAAGCTGAGAGGCAAGCTAGGATCGCTGAAGAGCAG GGTGCACCACCACCTGCCCCCGAGCAACCAAAGGAAACCGCGAA AAAGCCACCTCCACCCCCTTCAAGGAAGGCCGCAAGAAGTGACG CTAGTGAGCGCAAGGCCGAAGAGGAGAGAATCATTAACGAGCAA AAGGCACAAATTATTGCCACAAATGAGCTAGAGGACGATGCTCAA CGACAAGAGGCCGAGCTTGCAAAGGAACGCGAGGCGGCTCAGG CTCGTGTCAAGGCCTTGGAAGACCAAATGAAGGCCGGGAAATTGA AGAAAGAAGAGGAGAAAAAGAAGAGAAAGGCTCTCCAAGCTGAG ACCAAACAACAAGAAGCTCGTCTCGCAGCTCAACGCGCAGAGATT GAAGCCGCACAAGCACGTGAGCGAGAATTGCAACGTCAACTTGAA GCTATTGACGATTCAGATTCATCTGATGATGACGAAGGTCCTGAG CAAGTTACCCCTCAAGCATCAACGCCCACTCAAGGAAGTCAAGAG CTTGAGCGCAAAGAACCTTCTCCACCACCTCCTCCACCTTCAATTC CAGTTGTTGTATCACCAGTCCCTGCTATTGCAACAACAACTAGTCT TCCATCACCAACCCCACAAGTTACTAGCCCTGTTGTCAGCCCTCC AGTCGATACAGAGACCCGCAATCCTTTCTTGAAGAAAATGGCCCA ATCCGGTGACGCATCTACCGCATCTACTGCATCTAACAATCCATTC CATCGTCTTCCTGCTCAAGAGCTTTCTACACCTGCACCAATTCAAG TTCAACCAACAGGTAACAGGCCATCTCGTGTTCGTCCAGAAGAAG ATGATTGGGATGTCGTCGGATCTGACAAAGAGGATGATTCCTCTG ACGATGAAGGACCAGGTGCAGGTGGTGCGCGTCATTTGGCATCG ATCCTTTTCGGAACCATGGCACCTCCTCGCCCATTGTCATCCATG GGTAACGAAGCTACATCTGCGCCTGAATCTCCTGCTGTAGCATCT CCACCAGCGGCAACCCCCCCACCTCCACCAGTACCTAACTTCAAT GCACCGCCACCTCCTCCAATGCCATCAGCCGGTGCGCCAGGTGGE TCCTCCACCACCACCTCCTCCTCCACCAGGGATGGGTGCTCCACC TCCACCACCAATGCCACCAATGGGAGGCGCTCCTGCTCCACCAG CAGGTGTACGACCAGCTGGTCTCTTGGGTGAAATCCAGATGGGG CGATCGTTGAAAAAGACACAAACTAAAGACAAGAGTTCAGCTGCT GTTGCTGGAAGGGTTTTGGATTAAATACCTTTCAAATCATTGAGAA GAGACAAGATGAAATGGAGGTTTGTGGTTAGCGAGCCTAAGAACA TGGATTGTATTATAAATTACTTTTGGTTCATAGTATTGGGCAAGGG GGCTTAGGTGTGGAAGGTGCGAAACAGGAAAGATAAGAGACGAG CATAATTTGTAGTCGAAGTAGCAATTTGAAAATATTCGTTCGTTTTG
ATAGTCATTTGATGCACTTATCACCA SEQ ID NO: 56 BC1G 04258
GATATTGTACACGAGCCTCTTCCTGCATTGATTGATTGATIGCTCT TACACATATCCAGTTCATCTCCCACAAAATACCAAGCGGCCGCATT TGGATGCAACATACATACTCACTACCTTCCACTTCACCTACCTACC TACTGACTTAATATACCTTCTTGICATCTTTGATGGCACTGAATAAA GTACCTTCCTATTAAAACTACCTCAACCAGTCCAGTCATTACTACC CACCTTACATCTCGAGAAGCCTCCTTCCTCGATATACATTCTICTC TTATATTAATGCAAAGATGTCGGAGCACGAACATCAAAAACATCTT TCCGATTCTGAAGAAGATTCCATAATGGAAGAGAGAGAGGAGAAA AAGGGAAAAGACGAGATAGAGGAGAAAGACAAAAAAGACGAGAA AGACGAGATAGAGGAGAAAGAGGAGAAAGAGGAGAAGGAGAAAG ACAAAAAAGACGAGGAAGAGAGAGAGGAGAGAGAGGAGAGAGAA GAGAGAGAAGAGAGAGAGGATACAGTTGATCAGAGTTCTGATCAT GAGAGTGACACCTTCGAGGATGCCAATGATGTTGAAGACATTGCA GACACTCTTACCTCCCCAGTTGAAAGGACAAGATCTTTAACGAAAC GAAGATCATCATCCATTAAGAGCAATACACAAGACCTCAGTACCG ATATCCCATCGGTCCCAACAGTACCACTTCCAGAAACGAATGGCG AAACGAATGACGAACAAATAGAATCCGATAATCCACTACCTAAATC TCCCCTTTTAACATCTCATCGCATGTCCACTACATCCCTACATAAT GTGAATCTCGAAGACGGTGATGATTITTGGATCACCTCCACCACCT CCTCCCGTTTCGAAAGTAGCACCAGAAGATCAACCACCCGAATTA
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AGAAATAAAAATTAAGAATAAATGATCA SEQ ID NO: 57 BC1G 03372
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TTGAGATTTATCTTTCTCTTCCTGTGATTTTAACCA SEQ ID NO: 58 BC1G 14667
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AACATCGAAAATGCTAGCCCAGAGGTTTTGATAGACAAACCGACG GACTTGGAGGCGACTCCACCTTTGGAAATAAACGAACCTGTTCCG GAGACTGAGCCAGCCAACGTATCTGGTTTTGCAGATCCGTCAGTG GAAACCGAAGAAATACCCATTGTTCCAGATCACGATGTCGATAGT CATACTCAAGTACCCGAAGCAAGCGGTGAAGTTTCCGCGGATGAC TTAGAAATTCCTACAGATTCTGAAGTCATTGAGCCGTTCAATGAAG AGCAAAAAGTTGATGAAGAAACCGAGAATGAACGACTGGCTGAAC ATCCGATCGATCCCCAAGAAACAAATCTGAAAAATGAGGATCGAG AGCCTAACAATGAGGATATTCCTATCGAGAACGCGGAGAGTGTTG CTGAACCATCGAAAGAGGATAAGTCTTCAGAATCAGTTGCGGAGA TCGAGACACCGCACTTGGATTCAAACGATCAAAATGAAGGTTCTG CCGAGGTAGATACAAAGGATTTGGAAACAGAAGCTTTGTATCCCA GCAAGGAAGAGACACCAGACCAGACAGAGGAAGCTGTAGAGCTC TCTAATGATCAAAGTAATCCCAGCCCTATTITTTIGAAACCGATGTAC CCGTTTCGGAGATAGACGACCAAGATGAAAAGCCTGTTGAAGTTG AGGCGAGGGATTTGGAAATGGAAGATGGGGAACATCACAGCGAT GAGGTACCTGAAAAATCTGCGGAGAAACCCTCACAAACCTTACAG GAAGAAAGCGATTCTGAACCGGTTGTCGAAACCGAGACATATGTT CCTGAATCAAACTCTCATGATCAAAATCCAATTGAAAGCGAAGAGA AACTAGCGGAACTTCCTGTTAATCAACTTGTCACTGAGGAGATCTC TAGCGAGCCCAGAGAAGACTCTGAGACCTTACAAGGGAAAAACAT TTCACAATCACCTGTCGAAACTGAGGAACATATTCCCGAGTTGAAC ACTTACGTCGAACCTTCAGTTGAGAACGAGCAACCCCCTAAGGAG CCTGAGGACAGCGAATTTGTTGTCAAGGAACCTGAAAACTTCGAA GACTTGACCCGATCTGTCGAAAATGAAGAAGAGACTTTCGAACCA GAAAACCAGGTATCTAGGAGTGAGAACACACCACTCGAAACCGAA CAAACGGTTCCTCGAGAAAAGACTCCAGTTTTAAATGCTGAATCC GAGATACCGGCGTTTGAGTCAGATGATCAAATGCAAATCCCTGCT GAGAATGAAGAGAAGTCTATGGAACCCGCTCTTAGTGAGCCAGAA GCCGCAGGTTTGGAAATTACAGAGCCACAAGTGAATAATGAAGCT CAGATCACTGAAACATCGCCGCAAGATACTGTTGAGGAGCCGGTG GTTGAGAATCAAATTCCTGTTGTITCCAGAATTGAGCAATGAGACTA GAGGGGTCACCGAAGATCATGAAACTCTTGAAACAGCAGAGCAAC AAGCTGTCGAGGTACCTGTCGAAAAATCAGTCATTGAGAGCCAAC TTGAACTCTCCAACGAAGATAAAAGTATTGAGGACAATGCATCAAC AGAAAATACCCCCGAGCCAGATGTCGTGGACAAACATATTTCTGA TGGGTTTGGATCAAGCGAAGAAGGACAAATCGTAACCGACCATGG AGACGAACCTCTATCAAATGAGAAAGAGATTCTTGATAATTATCAA GAAGAATCGGTTCCTGAAAACGGATCAACTTCTGAGAGTGTAATT CATGAATATTCCAGAGATATCAGAGATGCAGACCAACCAATGGAA ATTGATGAACAGGTTGCGGATACAAGCGGTCAAGATTCAAATCCT CAAAGCCAACCAACATCAGAGGTAGCCATCTATGAAGATCCTGAA 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AAAAATCTGTTGAGTCGATTCGAAAGTGGTGAATCCTCATCTTCAA CGCCTCCGCAACAAGAGCGTTTCAGTATCCCGACATATCAAGACC GTTTCGGCACTTCTCTTCCTCGACCTGCTGATAACAGATCGGTCG GGAAACAGCCTCAATACTTGCAAGAAAGCCAACTCGAAGCTGTGA TGCCGCTTGATCATGGTAGATTTGATCTCATGAGTGAGGAAAGTA GTCCGGTGCAAACTCCTCTTGAAGAGAGGGAACTTCAGTTTGAGA GTGAAGGAAGTAGCGCAGTGCAAACGCCTTTGGAAGGGGAATTT GATTTGGATGGGAGTACAGGTGGGAATGTAAATACAGGAGTACCG AAGAAGAGGAGAAGTAAGAGGGGGAAGAAGAAGGGTAATGGTGG GGGAGGTATTGGTCAGGCTTGAGGGGCAGGAGAAGTAGGATCGA AAAGTTTGAGATGTGGTTAGGGTGGAAATGTGAGTCGGATGACTG ATGGAGAATGAAGAATGATTGATGTTTGATGGTAATGAAAAAGTTG GATAAATATTGGGATTCGCATGAGTTTTTAATAATTTTTGGGGTTTG TTTTTATAAGTAGCGGGTATGCAACTGGGCAGGAGTTTTGATATAA
TGCTCATAGAGATACTATTAATAGTCCAATTTATATTTTCA SEQ ID NO: 59
BC1G 14204
ATGGACATTCCTATGCGTGGCCAAAAGCCGAGCTTCAGCACACCC TTACCAGAAATCCACGTACAAGACTCACACCACCCCGATCGATAT ACCGATAGATACTCAGATCAACACAAATACCATTCTTCCAACTCTT CAAGGGCTGCGCCTGGACCAATGTCTATACCTCACGCGAGAGAG TCTCCTCCTCCTCCTCTACCACCACCTAAATACGTTCCCGATACAG ATAACGGGGGAGATCTTGGGTGGCATTTCGCAAATCAAAACCGGG AACCCGATTGGGCAAGAAATATCCCATCGGTTCCCGCCGGCTCGA GTTTGTATGGGAGCTACAGTCGCAGTAGCATATCAGATGAGCGAC CGGACATTGGACGTCGAGGAAGCTCCAACGCCACTATCACTGTTC ATCCGTCGAAAGATGCGAGCAGCCATGCAATTGCACTGCCAAAAG ACGAAGGCTATTCGAGCCTTTCTGCTTCCAACGCAAGCATTGGGT
CGACACAGTGA SEQ ID NO: 60 BC1G 10316
GCTCATTGATTCTCCATCTTCTACGCTCCTACCTACCCCAAAAACT CTTTCAAACCCCCCCATAACGAGTTACAATGGACCCATATCAGAAT CAAGGTTACGGCGGTAACCAGGGCTGGACTGGTGGTGCATGGAA CCCTGCCCAACATGGGTACAATCCAAACAACAACTGGCCACCACA ACCTCCACAGCCCCCACAGCAACTACTCCCTCCTCCTCCTCAGTA CAATACGCAAGTTGCTTCTTCTCTITTTCTGCTGCGAGAACTGCCAG CGTGTTGCTGCTCCAACTCAGCCAAGCGTTCATGCATATACCACT CGTTTGGCGTTTTTTACGGCACACATCTTGCATCCCACTGTGGCTT CCTACACCCAGGTACCTAACCGCAATCAACACCCGAATTGCTITG CTAGTGATGTACCTCAATCTCAAACAATTGCCCCTACTGGGGGTC ATGGGGGTCATGGGGGTCATGGTCAAGGTACCAATGCCCAGCAG ATTGCACAGCAAGTCATCCAGCAGCAAGGTGGCCAGCAACAGCAT GGTTTCATGCAACAAGCTCCAACCGGACCTGCTGCAGGTGCTGGT ACTCATTACACTGCTGTTACTGGTAGCAGTCATCAATCTGGCTTTA ATCAGCAAGGAAACTACCAAGCTGGTGGTGGTTATGCTCAAAACA ATGCTGCACAACAACATCCTCGCCCAAATGGCCCTCCTAGCAACA CCTCGATGGCTATAATCGGTCCTATTATGCATGCTGGCTCATCTTA CAGCATCGATCCGAACACCGCCATCCCTCTTCCACGATTTCCTCG TCCTACTTTCCAGCTAAATGTCAAGTTTCGTCTTGAACGCTTCCGT CCAGATCCTCCACAGCAGCCTTTTCAGTATGGAATGCCAAATTATC AAGGCTTCAATGCCTACCAATACCCATCGTACATGAATCCCTATCC TAACACTGCCGTCTCCACCTCCACTGGTGGCCCTAAATCCAGGGA CAACATGGAGCTTATATGGTACTACTGGCCAGTTCAGCTCGAGGT TCCTCTCTGGGCTAGAGGTCAGAATACTTTGACTTCCGCACCAGA TATTGGTGCTCAACTCATTCGAGAGGGCATGCAGATCATCAATGG AGAGCGTTGGGGCTTCATCCAGCACCAAGAGAATCCAGAGGGCT TGTGGCACAAGCGACGATCTTACAAGATCCTCGAGTGTCCTGTTC ATGGGATGTACTGGAAGGTCACTGTCTTCGTTCGTCGTGGTTATT
AGGGTATTTTAGAAGGCATTGGGTCAATTTTAAGCCTTGA SEQ ID NO: 61 BC1G 05030
GAAAGAGTCAGCTTGTGTTGGCGCTTGTTTGGGCTTTGCGCAACA TTGCCAGTGTTATACTTCTCATAGCAAATAGCGCAGGTATCAGTTC TGTGAAACCCATCATTCCATAACACTACGGACTGCTTTCTTACTTC TCAAGATGGATATAGAGGCTACTAACAAGCCAGCTTCTCTACCCG CCGCTACGATGCCACCAAGTTTACAATATATACCTGCAGAAATTCG GAGAAAGATATTTATATGTCTGTTGGTTAGTACTGAGCTAGGAGAG GCGTCTTCCATTGACCAACTTGAGGGATATGGAGCCGATGCGAAA TATGGCTTGAGCCCACAGATACTACTCGTCTGCCGCCTTTITCCAT GAAGAAGGTATGGAGATTCTITATGGCTTGAACCAATTCATTATCG AATCACTACCGAGTATACGCATTAAAAGAATGGATGTACTTCATCC GTTCACCATATGCAGTCCTTTGACTCGCTGGGACAACCAACCCAC CACGGATCTCCCAACCCACTCCATTCAAAAGACTCTATTACACAG GAATCAAGCTATTAAATTCGTCAGAAAATGGAGAATAATTTTAAGC GCCAGGCTCTATGAGCCCAGAAGTCGAGATGGACTTGTTGAATTG TGCCGTTTACTGTGCGAGCTGCAGACACTTTCAGGAGGGTCATTA CTGAGGGAGTTAGAAGTATGCATCATTCCCAAGGGTGTCGAAGTC AAATATGGCTACATGAACATGAACGAAATGCGCGAAAGTCTIGTG CCACTGGAGCTGCTACGAAATATACCTATAGTGTCGATTCGAACA GCCAGCATTGATGAGATACCAGACTTTGCATATAGGCATAAGTGG CTTGATACACCACTCGTAACACCGTCAATGCTACCTACCGCATCCT ATCGCCGCCTCCTCATCCACCTCATCCGTGGAAATTCAGAAGTCG AATTGAGTACCAAGATGTTCACTTCTCTTTTGGAGTACACGCAAGC CTTTGAAAGAGATGCCCAATTCAAGAACGCGATGTCCTTGAGCTC CCAAGAGGTAGCCGCTTTGATGCCGAAGCTGCCTGCACTAAGCG AGAATCCGTTCCTCAACAAAGAGTTTCACTCAAAAGAATTGGCTCA CACTATCGAGACTGGTCTACAAAGAGCACGATATATGACCGAGAT CGAAAGTGGAGATATTACCAAGACCACCCAGTTCAAGGAAGAGCG ATCTGTTATCCTGAAATACTTGGAACGTCAGTTCTGCAGGATAAGC CACGCATCCCACGAGCTCATCGACTTTCTCAAATTACAAAAGAGAA AGTGGGGCGTTTTTGATCCTGCTTGTACAAAAAAATACAACGGTTT TGATATGGCGATTTATACTGAGGCCATGGTTCTACTTGAGGACTAC GCCGCGTCATTTATCCGAGAATTAGACGCATCAACGAAAAGAGCA GTGCGCGCGCAATTTGGTCTTTTTGAGCATCGCTACGAGTTAATG GCAAGGGAAGTCAAACTTCAAAAATGTAGGATAGCTTACAACAGA AGAGACCCCATCACGTTTAGAGCAAACTTCCAAGAAGCGGTGAGC GATATGGAGTTGCAGTATCATACCATACTCACGACTAGATCTAAGC TATACGATTGGGACGCTGGTAGCAGTATTCCCGATATCAATATCG CACCGTTGAGCTCATTCGAGGACTGGCAAATTAGATGGGAGATAG AGGAACCAGCAATCACCGCTATAACAGAGGTAGAAGCGCAAAGG ATTCAACAAGATCTTCGCCGCCAGATTGCCCAGAAATGTTTTCTITG CACAGGAGGCAGAAAACAAAGCTCCCGGGGACAACCAGGATTTG GATGCAGCGAATTGTGATGAGGCTCATGACCAGAGCGGGAGCAC TACTGAAAAGGAACTCGAACTTGATATCGCCAATTGGGAGTCTCTA CCATATCATGAAGATGACGAAGTCTCTAAGCTTATCTTACATCTGG ATGAAGAACAGCCTCCACTACCATCTACTGTCGAAGCCCTCATGA ATTCTGACAATGATTCAGAAAATGATTTCTACGAAGAGCTTTTITCAG AGATCGCCCGGAAGACGATAGCTTTTGTTTGGAATCCGAAGACGA CATTGAAGTCGGCGATGACTGTATCGATAGGGACAGGTCTACCCT TCACGACCTACCTTACCCCGGGGACTCTGGAGGTTCTCTATCACA TGTGTTCCCGTGGATGACACTCTCTGAGCTATAATTGCCCAAGTCT TATCGAGGTTGTTATATTTGACCAGAGTTATCTCCGATAATGCTTC TGTAGTCGTATCATCTAAGCCCTTGGTGGATTTATGGGATTATATC CGTTACCACTATGGTTGTAGTAGACCTTAACGGTCCTAGTTGTCCT AATTGATGAACTATGACTCTGTACACTGGATTCTAGAGGATTTGAT GAAGCTGATGGGTGCACCAGTGGGTGCATAGACTGGCGGGACAC
TTCTCAAATTTCAAACGTTTTAACA SEQ ID NO: 62 BC1G 00624
GGTATCGAGGGTCCAAAGTGTGGTCCGTCCGGGTGATGATTATIT TTTTGGCTCTGCCTCATATTAACACTTCCTGCTTCTGTTCGAGCCC ACCATTTGTCTTTCTCGAATTCCTTGCAAAGCATCTCTCTCATCCAT CGAGCGATGTTCTGATAACCTCTTGTGCCTCATTCATCAAGAGCG ATATAAAAACGAGGGAGCAAGAAAAAGAGTTTGATGTTTGATACTT GAATTGAATACCTACCAATCTACCTCCCTCCTCCCAAGCTTACATC TCGACTACGATATCATACCCGAAGTACATATATACCAACGGACCCA TCCAATTTCTCCCTCAAATCTTGAAATTTTATCCTTCGAGCCGGTAT CACACATATCCTTCCTAATCAAAAGATCGACAATATCAAAAATGTTT ACGACGAGTATCTTAACGCTTTTGGCGATAACGACGAGTGTTITIG GTCCAGGCACATACGGTGATTACATACCCGGGATGGAGAGGTGA TAATTTGATTACGAATGAGACTTTTCCTTATGGAATGCAGTGGATG TATCCTTGCGGCGGCATGCCTACTACCACCAACCGCACTCTCTGG CCCATCCACGGCGGCGCCATCTCCGTTCAACCCGGCTGGTTTCA AGGTCACGCCACCGCCTTCTTCTACTTTAATCTCGGATTCGGCAC CGATGGCCCCGACAATGGTCCCCAGAACATGTCTTTCCCCATGAC CTCCGTCATGCAAATCGTCGGCCCTAGCAAAAATCCTTACCCGGG AACCTTCTGTTTGCCTCAGGTGCCATTGCCCGCAAATACGACGGT TAATGTAGGAGATAATGCGACGATTCAGGTCGTGGAGACGGCGAT TCATGGGGCTGCTTTGTATTCTTGCGTAGACATAACCTTCGCACTC CCCGAAGACGTCGCCGAAGTAAACACCTCGAACTGCTTCAACTCC TCCGACATCTCCTTTGCAAACGTCTACACCATCAACGATGCCTCA GCCCCCGGAACTTCCTCCTCCGCCTCCTCCTCCGCATCTCCTTCG CGCTCGCTCTGGGCTGCTAGTCTCGCGAGCGTGCTGGGCATCGC TATGTGGAGTTTCTTGTAGGAGATGCGAGATGGAAAATGATCGGA GAGAAATTTGTAATTTCTGGGAGATTACAAACGAAAGATGGGGAG GGGAGGGGAAGAGAAAAGATGAAAGATAATCAGAAGGAAATTCAA GGAAGCAGAAACAGGCAGCATTGTAGATATGATAAAATATGATAT GATACCACGGGCAGATGATAGACGGACACATCAAGTGAGTGTCC CTGCCTCTATACCCAACAAATCGAGATCGAAATCTCAAACCATGG GAACTGGGAACCGGGAACCGGGAATTGAAGCAGAGCATTCAAGT ACCCAACGAGGAGCTACTTTGCATGTATGTATGAGCACTCAGGCG TTTTATGGCGAGGATTGTGATTGGAAGGAATGATTTTTITATTAATT TCATTTTAATTCTCGAGTTTCGAGTTTCGAGTTTCGATATTCAATTT CTATCTCAATACAATCCAATTCAATACAATCATATCCTTTACTGCGC
A SEQ ID NO: 63 BC1G 15490
GATTTACACGGGATGTGTTGCCCTTCTCCACGACGTCAACAGTTTT CTCGACAAGTAGACAGAAAATCATGACTGAGATCATCCCAATTCCT GAGCCCAAGGGCTGGCCCATTATCAATCATTTGGTAGGGGTCATT GATAACGAGAATCCGACTGAGTCTTTCAAACATCTAGCAGAGCAG TTAGGGAGGATTTACAGGCTTCGTCTGATTAATATACCCATCACAT TTGTTTCTAGCTACAAATATATAAATGAGCTATGTAATGAGAAGAA GTTTCGGAAAGTCCCTGGAGGGATATTTAAGGAATTGCGAGATGC AGCCAACGATGGATTGATCACGGCATATCTTGATGAAGAGAATTG GGGTATCGCCCATCGAGTGCTCATGCCTGCATTTGGACCCTCTGC TGTTCACGGCATGTTCGATGATATGCATGATATTGCCGCCCAGCT CACCATGAAATGGGCCAGGTTAGGCAAGTATGAATCATTTGITCCC AGCTGAGGACTTCACACGTCTCGCGATGGATACTCTGGCATTATG TTCCATGGATTATAGATTCAACAGCTTTTACGGGCGCGAGACACAT CCTTTCCTTGAGGCGATGGCTAGAACACTTCTAAGGTCGCGTTAT CGTGCTCGACGCTTAAATATTCCCATTGTTAAGTTITTTCTATCAACA AGAGACGAAGCAGTGGTATGAAGACATCGCACTCCTGCGGGAAG TTTCGGATAGCATCATACGTCATCGAATTAAACATCCCAGTCCTCG AAAGGATTTAGTCGCTGCTATGTTAACGCACAAGGACCCAATGAC AGGAAAGGTCATGACAGAAAAGAGCACGACTGACAACGCCTTGA GTTTTCTTGTCGCTGGACACGAGACAACTGCGGGACTGCTCTCTT TTACACTGTACTATCTGCTCAAAGATCCTCGGGTCTACAATAAGGC TCGGGAGGATATCGATAATGTAGTTGGAGAAGGCCGCATTCGAGT AGAGCATCTTTCGAAATTACCCTACATCGAAGCAATACTCCGCGA GGTCCTCCGGCTGGAACCACCACTGCCGGTATTTTCGGTCCGTC CTTACGAAGATACCTTGGTCGATGGTCGCTTTCTCGTAAAGAAGG ATGAAGGTTGCGTTCTCCTCCTCAAGCATGCTCATCGCGATAAGG AAGTGTACGGTGAGGATGCGGATGAGTTCCGACCCGAACGTATG CTCGACGAACACTTCAACAAACTCCCACCCGGGGCCTTCAAACCC TTTGGAAATGGACAAAGAGCATGTATTGGCCGAAACTTCGCTCTC CAAGAAGCAAACCTGATGCTCGTCATGCTTCTCCAGAACTTTGAC CTCGCTTTGGATGATCCATCATACGAACTGCAAATCAAACAGACCT TGACCATGAAGCCCAAGAACTTTAAGATTCGGGCTAATTTACGAG ATGGATTGACTCCGATTACACTGCAGCAGCGATTACTCTATGGGA CTTCGACTTTAACAGCAACTCAAGAAGCTCGCAAGGAATTGCGAA ATGTTGCTGCAACGGCTCAATTCAAGCCCTTGACAGTTCTCTATG GATCGAATGCCGGCACTTGTGCACAACTGGCACAACTITCTAGGAT CACATGCTCGTTCCCACGGTTTCAACGCCGTGACTATCGAAACTC TCGACGCCGCAGTGGAAAAAGTACCCAATGACCATCCTGTCATTT TCATCACCACATCCTACGAGGGTCAACCCACAGACAACGCCAAGC GATTTTTCTCTTGGCTAGAGACGTCCTCGGGAAAATTTCTTGACGG TATCAGTTATGCCGTTTATGGTCTTGGACATCATGATTGGGTTTICC ACGTTTCACAAAATTCCTAAGGCCCTGGACGCTCGATTGGAGCAA GCTGGTGGAGAGCGTCTGCTTCCACTCCAACTTGATGATGTTGGT GACTCTGATATTTTTTCCGCCTTTGATACATGGGAGGAAGATGTGT TCTGGCCAACATTGGAGAAGCAGTATGGTGTTATCAACGCGAATC ATGAGAGTCATGATGTTGATGAACTTGATACTAAGCTAGTGAGCCT TCGAAAAACGACCTTGAGCTACTTTGTCTCCGAAGCCCAAGTTGT CAGCTCCAAAATCTTGACTGCCCCTGGTGAGCCAGTCAAGAAACA CCTCGAGATTAAGTTGCCAGCCAACATGCCATATCAAGTCGGGGA TTATCTTCTTACATTACCGAAAAATCCCCCTGAGACAGTCGAACGA GTGTTGAAGCATTTTCAAATCTCTCGCGATACTCAGAACAATACAT TTCCTAGGATTGAATCCTATACTCTCACCACCGTGGAATCAATCGA GTCGTATGTAGAGCTGAGCCATCCCGCCTCGAAAAAGGCCATGG CAGTACTAGTTGACGCTACAAAGAACGAGCAAGTCAAACAAAAGC TACAAGAGATGGCTATGGAACTGTACTCATCTGAGATTGAGAGCA AATACATTTCTGTTCTGGATTTGCTCGAGGCGTTCCCTGGCATTGA ATTATCATTAAATTCATTCTTGGCACTCCTTCCACCACTCAAACTTC GTCAATATTCCATTTCGTCCTCTCCATTGTGGAAACCAAATCACGC CACCTTAACTTTTTCCCTCTTGGATGCGCCGTCACTGGCACACCA AGGACGACATCATGGTGTAGCAACTTCGTATCTCAACTCCTTGCA GAATGGAGATTCCGTCCGCGTTGCCGTCCGACCGTGTCACGATG CTTTCCGACCCCCACTTATCACGGAAGATACTCCTATTATCATGAT CGGCGCCGGTTCCGGCCTTGCACCCTTCCGCGGCTTTATITCAACA ACGATCACTTCTCACTCTCAATGGCGCCAAACTCCCAAAAGCATAT CTATTTCAAGGCTGTCGGGAACCTGGAAACGATGATATCTATGCT GATGATTTATCAACGTGGGAGGATGAAGGGGTTGTCAAAATTCAT CGTGCGTATAGTCGCACACCTGAGAAAGCGGGTGGATATAAGTAT GTACAGGATGTGGTTCTGGGAGAGAGTATGAAGATTGTTGAGTTG TGGAAGGAGGGGGCGAAGTTGTATATTTIGTGGGTCACATAAAATG GGGGAGACTGTCGCAGAAGCGGTGCAGAAGATTCTTTCTGAGGC TGATCTTGTGGAGGGGGAGAATGTGAAGTGGTGGTGGGAGAAGA TGAGGAATGACAGGTATGCAGTTGATGTATTTGATTAGATTATCAG TCGGTATATCCCAAGATAATACTGCATGTAGGCTGGGAAATTTTGA
TGAACA SEQ ID NO: 64 BC1G 14979
GGGTAAGCAGCCCACATAATGAGCATCGTAAATAGACAAATAAAT AATGCCGCATTCAAATGGCTCGCATTGCCGTCAACAGTAATGGAG ACAACCCTCCAGATGCCAACTCTCTTCCTAACCCCCCACGCTTCA ACGTCGAACTACCACCTATATCGTGCTTCATTGAAGACAAAAATGG TAGCCCCACGAGAAAGTTTTTCACGACCCCAGATGAACTCACAAA TCACTTGGAGCGCACCACGCATCACAAGGAGAGGAAATTGTATGT TTTGGAAGGGTTGCCGATTGAATACGTACAGGTGTTAGGGTTACA CTTCAACATAGATGTGGATATTTTIGATTCTCATGCGATGAGAAAG AGTGGGCAATTGAATAAGCTGGAATTTCCAACCAAAATAGGGAAT GAGAAAAAAGTTCGAACTTTTGCTCTGGACCATCCTGAAATTACGA CAAACATTACCCCGCCGCCTGAAGCCAGTGGAGGAGTTGCTGGT GATTTCATGATACCGTGTAAAACGATAGACATATCAGATGAAAGCT GGAATGGAATCAGTGTAAAATTATGTCACGTGACTTTGGTGTGCTT TCCCGGGGAAAATGGGAGTGAAACTTTACTATTGCTTCTCGAAAA CCAGTCGTGGGCGAGAAGAGGCGCCCAATTTCAAACTGCGGGTT ACCACAGTATTCTTGCAAATGCCCTCAAAAGTCTTCCAGAGGGAA AGCAGAAATGGAAACCATCCCGAAAACATGACCCGGCTTTGACTC TAGCAGACGAGATATTCAATTCTATAGAATTGCCGGGTGGCATCC TGGCTTGGGATGACCTCACAGAGATACTTGCTGATATCGTACTCA GACAATGGAAATTTGCCTTGGGCGAGGTAATCGAACATGCATGTG CATCTAGATCGATTCCTTATCACGAAATTCATCAGGTATGTGATCT GATAGAATCTAATATCTGGACTTTGGATCGTACTGAGGCTCTCTGG GGCCCTCATTATGTTGTAAGAGTGGAAGGGTTTAAAAGACTTTTAA AGAAAGCAAAGCGTTATGCACATTTATTTGTGTGGGGACAAATTGT GGAGGAGGGTCTTGAGACAAAGGCCAAAAATGAGAGTGCGACTG ACAATGAGGATGATGACGATACCAGCTCCAGTGCTTCTTCTAAGT CGGGAGTGCATATTCGTGGAGGAGAGACCTTAGATTTGGAAACCC GCCAAAGCATCAATAGAGTGACCTACCTTGGCGGTGTATTACTCC CGTTCTCCATAATCGCGGCAATATTTITCAATGGGTGGGAATTTTCA GCCTGGTGGAGATCAGTTTTITCATATTTTGGGTCATCGCTATTCCA GTATGTATGCTTACAACGGTTTTAATATATGCGGATAGTATTCGGC GAATGACCTTGGAGCAATTTGCTCAACAGTACGGGTCTGATGCAG TGACGGCAGAAGCTGATGATATGGTTACTITCATCAATTTCTGGCA GTGAGATCATTTCATACAAAGTGGGTATTAAAGAACGTCTTAGGTC GCGTATCCCAGGTGTCTGGAATTCACGCAGGGCTGGTTCTICCTC CAGTGTTGGCTATACAGATAGCGATGACAATTCATCCTCTACAGAC AGTACTCAGTTACCTCCAGGTCTATCCATAGATGGCGATTIGTTAG TTCGCAGGAAAAGGAAAAAGGTGTCAAGATCATGGATTTGGCGAT TTTGGAGACGGAAACCTCTGGGTCGAAAATCAGATCCGGAGAATG TCTTGCCATCTCCTAGACATTCGGATCACAATGTATCTTCACCTTC TGCACCTCCTCCGACTTCTCCACCATCCGCGTTTCACCCTATTCG ATCTTCACCACAAATTACACCGGTGAAGCCCATACTTGTTGGAAAT GACCGTCCAGAGTCTCTTACTTCTGATAACTCTCCGACGGCCGGG CCAGCCCCGCCAGAAACACCCCCAGCTAGTCCTCCGTTACCCGA CCCTGACCTATCCATTCCTGACCAAATTATCCCTGAGCCAATAGTT CTTGACCCAGGCTGGAATTTTGGGGGAACCCCTTCAAAGAAATCT AAAAAAGGCAAAAAGACAAGACAACACAGGATTGGATACCTAAAT GATGAATTCGATATCCCAACCCGTCCGAATCCAGCCACTTCTCCA CCACATCCGTCTACACCAGACCCCGCGGGGATACCACTACCTCCA TTGGATTCGGATTCTGATGACTGGCGAGAGCGAGACAGTTCTGAG GGAATACATCCTGAAAGATCTCCATCTCCAGGTCGTGCAGACTCG GATTATGCCACAGATCGTGAACGCCGTTCTTTGGAAAGACGAATG AGAGAAAATGACGACCGAGCACTGACCAGAAGAGGAAGTAGAGA ATATCTAGGCATTGGAGATGAATATGAGCGCATTGTTGAGCGAGA AATCATTTATCGACGCCGGCGCCGATCCGAGCATTCTGTGAAGTC TGAGAGAAAACATGTAATAGAAAAAACGACTGAAAAGCTTGTTGAA GAGCAGGAAAGAAAACATGCGACAGATGATATCGTGAAAGATGAT GATGATGTTCCGGAAGACCGAGGAAGACAACGAAAACGATCTACA GTACGATGGGCACACCGTGGAACTTATTATGATTATCCAAGGCGG CCAACACCCAACACTGATCCTACTGAGATACCATTGCCACCATCC CCAGAAGAACTATCAGAGGAAGAACGAATTAGAATGAAACTAGAG AGAGAGAAACTAGAATACCTTGAGAAGTTGAAGCAAAAAGAACGA CATAGGAGAATGGCGGAGATGGAAGAGGAACACGCAAAAAAGCG AGCGGAAGAGGAATATGCAAGAAGAATAGCCGAAGAAGAATACAA GAAAAAGGCGGCAGAAAGTAGAGCTGCCAAGGGAAAAGATCGAG CCTACTCCCCTGTGGAATCCGATAACAAGGGATTAAAACCAGCGA TAAAGTTCAAGGACGCTGTGGGAAGGAAATTCACGTTCCCATTCC ATTTAGTGTCTACATGGGCTGGAATGGAAGAATTAGTGAAACAAG CCTTCCTTCATGTCGATGTCATTGGGCCTCACGTCAATGAGGGTC ACTACGATCTCCTTGGCCCCACAGGCGAAATCATCCTCCCTCAAG TATGGGAATCAGTTATTGAGCCTGGTTGGTTAATAACTATGCACAT GTGGCCAATGCCGGAGCCGCGAAGGCAAGCACCCGCTCCTATGC CTCCTAAACCAGGGCATCCCGGTAACTTTCCACCTCCTCCTCCTC CACCTGGATTCACAGCACCCCAGCCCGGCGGCCTAATTAGTGGG CCTACTCCGAGAATGAAGAAATCTACGCAGACTGGAGCTTGGGAC TGGGTGGAAGGAGCACGTCACTCGAAATCTCGCAAGAAACAAAAG TCGGCACCGATACGACTTGGGCCTCCTCTACCGCCTTCATTICCOT AGGCCCCCTCCGCCGCCACCEGGCATCTGGAAGACGAGAATCTGA TACAGTCGTCATAATAGAGGATCTGCCGCCAAAAGTTCACAGAAG ACAAACGGGTATGAGCGACAGACATAGACACGGAGCAAGCGGCG GTGGCATAATTGGAGGAGCAGCAAAGCCTAATGAGGAGTTGGGG TGGGTAAGAGCCCTGGGAACCATTGTTGGTGTGAAGCCGGGGAT ACAGGTGAAAAAACGCAGTGGTGGAAGTAGTTCATCGTCGAGTGT TTGATGGGTCGTTGATGAGATGACTGACTGCTCGTAAATTTGAGA
AGCTAAGGTATCAATGGTTGAATGTGTGCCTGCA SEQ ID NO: 65 BC1G 12936
GAAGTATTAATCTCCAACTTTCAGACCATGTGAGGCTTCACGGAAC AACACCTTCGGGTACAAGATTAATACAATGGCAGCCACAGCTTTAT CAGCGTTATTCTCTTTGGAGGGGCAMAACCGCACTCGTTACTGGTG GTACTCGAGGCATTGGACAAGCTGTTTGCTTAGCACTTGCTGAAG CAGGAGCAGATTTGATCTTGATACAGCGTAGTCGTGAGAATCTCG AGACTCAGAAAGCCGTCGAGGCTCTGGGAAGGAAAGCTCCTATAT ACACCGCGGACCTGGCATCGCAGGAAGAGGTCGCCGGCATCACA TCTACTATCCTGAAAGATGGACACTCGATACACATCTTGGTAAATT GTGCTGGGATTCAAAGGCGCCATCCGAGCCACGAGTTTCCGGAT AAAGACTGGAATGAGGTGATCCAAGTCAACCTCAATACTGTCTTTA CCCTCTGTCGCGATGTTGGCGCACACATGTTGAAGCTCGAACCAT CTGCTATTACTGGCCGAAGAGGTAGCATCATCAATTTTGCTAGTCT TCTTACCTTTCAAGGTGGTCTTACTGTTCCAGCATATTCCGCATCG AAAGGCGCGGTGGGACAGCTTACCAAAGCTTTATCGAACGAATGG GCATCGAAAGGAATTAATGTCAATGCGATTGCTCCGGGGTATATT GAGACGGAGATGAATACCGCCTTGTTGGCCAACCCAGAACGATTG AGGAGTATTAGTGAAAGAATACCGGCGGGTCGATGGGGTTCCCC AGATGATTTCAAGGCGAGTGTTGTTTTCTTGGCAAGCAAGGGAAG TGCATATATCTCTGGAGATATTCTCACGGTAGATGGTGGCTGGAT GGGTAGATAAACACTTGTCAGGTTAAAATAATACATTTCTAATTCTA ATTCGACGCTCTTTGACTTTCTGCCGATTTCCTCAATTCTCACGGT
CATCCAAATATTCAGACTCTCCCA SEQ ID NO: 66 BC1G 04424
GTAACAATCAACAAATTTCATCAACCACCAACCCACCACATCCATT CTACAGGTTTGGGGGATTTCTATATCACGTACCGAGACCCCTGGA CGCGTCTTGAGCCATATCTGCTTTITCTGCTTGGTCAAGGCCCTTITT GACAACAAGTACATATAACAATGGTTCTCTTCAAGAGGAAACCAGT GCAATATGCACCCAAGCCACATGTCGAAAATGAAGACACAGAGGT CTGGGTAATTCCTGCTACTGGAGAGTATTTCTTAGAGTATGAACAA TACTTAAGCCGAATGGATTTCTATAGACAGCATAAATTCATTTGCC AGATTTCAGGTCATTCTCAGTTAACATTCTTCGACGCACTCAAGAG TGAGTTGGCAGGCGCACAAGAAGTCGAAGAGGCATTCCCGAATC CATTGAAGCAACCAGTTCTAAGACGTGTACAATTCTCAACTATTTC CCGAATCGATACCTTGGTGGACATTATTTTCGAAGAGTTCAGATCC GATTATTTCCCCGGCGAGGTTGTTACAGTITCATGTGATTACGGGC GATCGACTTACTGGTACCGTAAGAGAAAAAACGCACTTCGGAAGC AAAGTTCTGCCAGATGGCTCACTAAGCGCACCTTTCTCGAGATATT TCGTTAGTCTGGATGGCCGACCAAATGAAGAGGCAGTGGTGGAT GACCAGCATATTACTCGTGATCGCAAGATATTCACAAAGCAAGTTC TGCGATCTTTTATTAAGAAAACCGTTACAAGAGAGGCATGGACCG GCGCGCCTTGGCTGGTGAAGCACGACGTGGCCGCCATTTACAAT ATCGATACCAGGATTCCTCCACATCTTCGATATGAGAGTAAAGCTG CAGAAAGAAAACAAAATCAATCTCAGAAAAAATCGGGAGGGACTG ATTTTGATAATATGATTGGTAGCTTTCATGGAGGAAATGGACCACA AGCTAGACTCCCGGAGTTGAAGCCAGCACCCAAAAGCCATAAAAG CAAGCAGCAACAATCCCAACTAGCAAAGGGTAAGCAGCAGCCATT TTTAGAGCAAGCTCCTTTAAATTTCATCCCTGCACATTTCCCTCCC CATCATTTCTACCCCCAACCCCACCCCAACTACAATCCACCACAAA TTCCATACAATTCTCACCCTCCTCATCCTCCTCAACCCCACCCCAA TTACAATCCCCCTCCTCAAATTCCATTCAATCCTCATCCTCAAACT CCTCCCTTCATGTCTCACACCTTTCAAGTCAATGGACAATCACAAC AAGCGGGACCCCACTTCCAGAATTTTCACAATTCTAGCTTTGCGCT TGCGCCTCTTGCATCGCTTCCTCCGGCTCCTCCTCCACCOGCCTCC TATCAAATACCCAATTGAGGATTTGGAAGTTCCTCCCCGAGTTGAT GGACCGAAACGACCCGATATCAAATACTITTTCGCAAGATAATCCAA TGATGGTGGGAAAACCAAAGGCCGAGGGTAATGGCATTCACATGT CATCGATTGGACAGTTACTGGAGACCTGGGACACTTTGAATGTTT ACTGTCAAATCTTCAAGTTGGACTCATTCACTTTTGATGACTTIGIC GAAGCCTTACAATTTACATCTGAAGATGTAGACTGCGAACTGTTCG TCGAAATTCATTGCGCTGTTTTGAAAATCTTGGTTAATTCTGAAGC CGATGATGGAGAGATGCAAATTCGGTTACGAGAAATAGAGGAGTC AGATGACGAAGAAGAGTCCGATGACGAGGCTAGCGTTGCACCAT CACCTACACCAGAGCCAGAGCCAAAACCCAAAGGGCGCGCTACC AGAAGTAGTCTCGCAAAAGCCGAGGCAGAAGCTTTACAAAAAGCC GCCGAACAACCTCCCGAAGAGCCCGCTGGACCAGTCAACACTCA TCGCGCAGCCGAGATGGAAGATAGTCTTGAGTGGGCCCAGAAGC TAAGAAAACGTGATTTCAAGAATGGTGGCTGGGAAGCTATTATGG TCGGCCTTTTGTATCAACTTTCGAAATACGAGAGATACTTTGCCGC CTGTGAATCACTCCTTGTTGAACTCGCCCCCCTCGATTCGGAGCC AACGCAGGAAACCGCTCGCCTACAGTACGCTAAACTTGACGTTAA CCTTCGTATCAAGGCACTGCAAATTATTTGCATGCTTACGATGGAG ACTAAAGCAATTCGTGGTTACATGGAAGAGAGTAGTGAACACATG ACGGAGCTCCGAAAGGAAAAAATAAAGTACCAGCGTGATAAGAAG GATGCTCATGATGCTCTCAAAAAGCTCAATGAAACGCGCAAAGCA CTCGAACCACCACCCGAGCCAAGTCCAGCGCCAGCTACAGAGAA GCCTGCAGAGAAAGAAGCTTCAGCCAGCGTCAACGGAGATGTGA CTATGGTCGACGCCGAGGATGAAGTTCAGGACTCTCATGGTGATG AAATTATGGACTCAGATGGAGAGGCTCCCCCAACTCGATCATTAC GCCGCGGATTAGATCGAGCAGCAGAACGAAAGCGTAAGCGTGAG GCCGAGCAGGAGAAGAAAGCAAAAGCAGAAGCTGAGCCTAAGGC CCCCAAACAATCTAAGGCCCTCACGAAAGTTCTCAAAGACATCCA AAAATTGCATGATGAGATCAAGCATTGCGAGGAAGAGATTGCCAT TCTCGATAATGACCTCCGAGAGGCTGATTGCCCTCGCACTCGTGT ACTTGGCAAGGATCGATTCTGGAATCGCTATTATTGGTTTGAGCG CAATGGTATGCCATATAGTGGTCTTCCTACCAGCTCTACTGCTGA GGCTGGATATGCCAACGGATGTATCTGGATTCAAGGACCGGATGA TCTTGAGCGCGAAGGTTATATTGAGATGCGACCTGAGTGGCAAGA TGAGTATCGATATAAATTCAACCTGACTGTGCCGGAAAGAAAGGTT ATGGAGGAAGGAAATACTCATGTATTCAATTCTCGTGAATGGGGA TACTATGATGATCCTGAGTCAGTCGAAGGCCTGCTTAATTGGCTT GACGCCCGTGGAAACAACGAGTTGAAACTTCGAAAAGAACTCCAA CTTTACAAGGACAAGATCATCACTCACATGGAAAAGCGCAAGGAG TATCTCAACCCTAGTGATGAAAAGAGTATCGATTCTAGTCACAAGC GAATGTCCACTCGTGGAAAACAACAACCTCATGTTGATCATACAG CTCATCGATGCCTATCCTGGCACAACAATACGGCAATTGAAGAATT AGGTCACTTGCATTCCGATCCACCACGAAATCGTAAGCAAACTAA GAAGGCGGCTCCTATTTTACCACCGGCAATTGAAGAAGAGAGACA AACTAGGAGCGAAGCGGCTAAGAGACAGAGAAAGCGTTAAGTTTT CGGTGTTTTACAGCTTTGAGAATGATAGATCACGAGCGCTCGCAA AATTTACTGGTGCGTTTTGTTCATGGCTATTTCATATAGAAAATOTT GAACGCGCATGGAGTTCATTGGTTCTATGTATTTGAATTTGGCCTT GGGAGGAGTTTATGGGTTTATGGGCTTCAAAAACACATTTGAAGTT GGGAAATAAGGAAATCACAAAAGTCATGGGAGTGCGTGCATATAT GGTATTTTACAAAATGGATTGGTTTGTATTTAGACGGTCTGTGGTG AGGGAAAGCATTGCTTGCGTTGCATTTGGATGGTGTTGGCTGGAT TGTGTTTTGATGGTTAGTTAGCACTGAGAGGGAGCACTGAAGAGA GGAGAGACTGGAGATCTGTTTGTATGGAATGTTATTTGCTICATGA GGGAGCGAGCGAAGAGAGCAGTAGTATAGTGAGTGATGCGAATA
CCCAAAATACATATCAAATT SEQ ID NO: 67 BC1G 14463
GGAACTGTGGGCTTATTCGAGGTCTGCCTCTCTTGCAATTTICTCT CTTCTCTTTATAACTTTTTGATCTAAATTTTCACATCAGCTCTATTCA AACTACATAATTCTCAGGCCACGTGCTACTCTTCATAACTATTATAT CCTATTGGGGGGCGCTGGTCGTCACACTAGTCAAGGTATATTAGT CTTCTTTCTAAAATCTTGATACTATAAGCCTGTCGCCTCACTTTCCA CAATGCAACAACAACCACATAGTATCACCAGAATCAGGATCCAATA AACTTAGCTCCCTTATCCTTTTCGGCTTCCAGTTACCCTTATACTTC ATCACTTCATATCTACATCACTGACGCTTTCATCTTTCAACAATCTT CTGAAGAATTTGATGTCGAAAATGGAGCTTGACGATACATGGGAT CCTGATCCCTTGCCAAGTGGTAGTTCTAGGAACCAATCTCAGCCT CGATTCAAGAGAGAAACATCTCATCACTCTAAGGCACAACCGGAC CCGCAGCATCAATACTACGAACAACCAAAAACATCTCATTCACAAC TCAGAGGTCTGATCGCGCCCATGAAGCTTTATCAAGACTTTTCAG ACGATGGAAGCTCATCTGATGAATATCCTGTCGTCTTGCAACAAC CACAGATTAATAATAAAAGGGTGACAAGTCCCGCTCAACCTGCGA AGGACAGACGGAAGCGACATCAGAGTGAACACCCAAATCGAATTG AACGTGGCCGCACAACAAACGTAGAGGAGGTTATATATGATCACA TCTCAGCGATCCCGCGGTCTCGCAATGAATCCGTTGCCCGCAATG ACGCTCGATATAAGAGTGTTGCAAATGATGTTTTCGAAGAGTATGA AAGTTTCAAAAACACCTCAGCAGTTAGCAGAACATCGGTCGCCCG TAGTCATTCGCTTGCAAGAGACTTGTATGAGGACCAAGGTTATGTT ACAATGAAAGATTACAACCGGCAGTTCGACAAAGAGCCAAGTGTC TTTTCACCTAACAATGCTCAAACTAAGAGGCGCATGAGGGAGGAG TCAACCTACGGATCTATGTCATCTGGTACAGATGCTCATAGAACAG CTGGCCGAAGTCGTCAAGAAAGTTCAAAAGCCAATCGCGAACTAG TCGGTGCACCCAAGAAAAAAAAACGTCATAGTTATTCTCGTGCACA AAGTCTAGCCCCAAGAATCTCAAACGACAATAGCGATGTTCAATAT CTGGGCACTGAAAATGGTATGTACAGTGTCAGAATTCAAAAGCAG GGAAAGAAGCCCCAACTTCGCTCGCCATTATGGCCAAGCTTTGAA TCTGCTGTACCCAAACCTTACTCTGCTAACAGATTGAAAGGGAGA ATTGATAAATCTGCCTCGATGAAGCCACTCCCACATATGCCAAAGA ATCAACCAGTTAGAATCAGATCAGTTGCGTCTGATCGCATACAGAA CTATTCAAGTCAAGCCCGAACGGTTGATTATGGTCTCATTGATGAC GACGATGTTTATGACACACCATTGGAAAATGATCTTCGCCGCAGA TCTAAGTCTCAAGTGAGAGCTCATAATGCTCCCATGAACTTCATAA ATGCTCTACCAAAGTCTAGTGTATTTCGAAGGAAAAACTCCGAAGT CGCAGAACAGGTTCATCAGACTCCATCCAGAGACTCAAATAGATC TAACAATCCGGGCGTCACTATTGATCTCGTTACTCCAGAAAGTACT GTTTATGCCCGCAGTGCAATGCCTTTTATACCTCAGCACTGGACT CCAACAAGGAGAGGCCCAATGAAAGTATCGGCTCCAATGGAGATC TCTGAGCAGGATGGTCTTGGCACTAAAACTGGACAACAACCTGGT CAAAATACTCATCAGCACCAAGTCATTAAATCTAGTCCTAATAATG GACAACAAACTGAAGAAAACATACGACAACGACAAGCAGCCGAGA AGATCATCCGACAAGAACTCAATGCAGATAATGAGGCTTTGCAAG CGGAGCTTTTCGGAGAAGTTATTGGTGAAACTGAGGAAGAAATGA GAGAGCGTGAAGAAGCTAAACGTTTGGAAGCTCAAAGAGTGCGG GAACAAAAAGAGAAGCAAGATCTCATTGATGCTGAGAGGAAGCGA AAGAAGAATGAAGCAAGAGCCAAGAAAGAGAACGAGAGGAAAGC GGCTGAGCAGGCCGAGAAGGAGAAAGAAGCAGCAGCAAAAAAAG CCAAACGTGATGCCGAACGCCATCATCAATCATTGAAGGAGCAAC AGAATGCAGACGAGAGACGTAAGGCGGCAAACAAGTTACTACAAG AGAAGAAAGAAAGAGATTTGGCTGCATCCAAGGTCATCGAGGAAA ATGTCCAAGCTGCAGAAAAAGAAAGAAAAGAGAATGAAGCTAAGT TTGAGCGAATGAAACGACAATTGGAAAAACTTGAGGCGCAAGTTA AAGCAAAATCGATTGCGGAATTGAAGCCTGCGAGAAAGTCTACGG CTTTGGACGGTATCTCGAACAGAGTCAACTCTCAGCCTCCTCAAG TCAGGCTTTCAACAAGCATGGAAATTGACGATGAAAGTTCATTGCC CACTACACAGACCCAAATAACACCTGTAAACGGTACTGATACTTCA CATACAGCAAATACTTCATCTACTCAAGCCACACCTTCAATAATCA CCGAAGTCGAGGATGAAGATTCACTGTTCGTTTCAGACAATCGAA AGACAGTTGTGGAAGCCACTCCAGAACAGCAAATTTCGAATGATC TTCAAAATTTCACTGGGAGCTTTAGTAGTGACTCGACAATTGTTITCA GTCCATAGAGCATGATCGACCTCCTACTAGTATAACTGAGATCTTT GCCAAGACAATTCACAATCCAAGTGGTGACAAGACTCTCGAAGAT AGGGACGCGGAGCGAGAAGCCATTCGAAAAAAAAGAGCAAACGA GAATGCAGCTGCCAAGCAAAAACGAGCAAATTCCATACCCGCAGA GCCAAACCCCGAAATATTTGCTCAAAAGGTTGCTCCACGGGAAGT TTCTAAAGCACCATCGAAAAGCACGCCAAAGAAAAAACGTATCCA GCCGCTAACAAAGGCATTAGGAGATTCCATATTCAGTGTTAAATTA CAGCCTCTAGCCGGACATGAGCCCGAAGGATACGTTCCTCGTGA ACAGTCAGAAGGTTTTCAGAATTTCACTGAGAACTCTTCCACAGAC CTTACAGTCTTGAAACCCCGCCCACTTCCATTGACTTTACCTCCCC CTCTTCCTCCACCAGTAGCATTTACTACTACTTCAATTAGACCAGA AACTCGTCTGATTTCACAAGCAGAGCGAGAGGAAATTGAAGCTAA TCGCCAAAGAGTCCAGGCTGCGGCACAGGCTCGGAAGGAAAATT CGAACAGGGCAAGATTGGAGGGGAGAAAAGCTGCATCTGCGAAG AAGAGAACAGTTGAGTATCGCAAGAGGAAAGAGAAAGAACTCATC GAAGAGGCTCATAAAGAGGGTAGGATATTAGGTAATTCTGAGCTG GAAGCTAGACTTGACAAGTTGATGGAGAAGCGAGAGCGTGAGCA AAAACGAAAGAAAAATCGTGCGGGAGAAAAGGCTTCATTTAACGA ACATGAACATGAACCTCTTTCTAGAATAAATATACTTAACCATTCTA GCATGCCCGCGGCGCAAATCTCATCCTCCGATACTGCCAGTGATT CTAATCAAATTGAAGAAGATGATGATCCTCCGGCTCTAACTCTGAA AGAGCATAAGATTAAAACGGCCGAAATTATGAAAGAACGGGCTCA 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AACAAAACATTTTCTITIGITTGICGTTGTTTCAATGAAAATTATTGA
TACTA SEQ ID NO: 68 BC1G 10235
GACTTTTCTGTCTGTTCTGAATGAATGAAGGAAGAAGCCCTCGCG GATTACGACCCTTTCTCCCATTCTCCCATCCATACACATTAAAATTA ACCATCCCATCCATCCCATCCATCCCACCCATCCCTTGTGAACTCT TTTTCCATTITGCTTTIGCTTTGGTGGAAATAATTAGGATCAGACAG GCAGACTGGCACACAGGCACACAGGCACACAGCCAGCCAGCCAG CCAGCCAGAGCGCGACCACAGGCTGAGATTAAGGAGATAATTTAC TATTCATTTTGCAAATATTGGCCAATATCGGCGCAACTTTATATCGT TTGAACCCTTGGATGGATGGATGTATCTTAGTAAAGTGTCGAATGA TTATTGCTTGCGAAGTGCTCTTTTCCCCGTTGGTCAACAGAAGCGT GGGAGCTCTGCTATATTTGCTTCTTGAGGGTTTGTTCACGGCGCA AATCCTGCACGAAAAAGGAAATCTTTGGAAAGCTGATGTCTTGCTC TACAGTCCCGTTACCCATGGCTTAATGACGATACGATCATCTTTTC GAGATACCCTCTGCGAATGCGACCTTAGACATTCACGAATCGAAG CGGCCGATTTTTAAAGGACCTGTACACATCGATCATCCAACAATAA TTTACATCAAATACAATGGCTGATGATGGGCCACCACCTCCTCCTC CCCCTCATGGCACTCCGCCAAMATCATCCGGTCTGCCGCCGGEG AATTATGACATTTTTATCATTCCACCGCATGCGTCAGGTTCAGGAT TTCTCTATTTACCGTCACTGCAACCAAATGTCAATAGTTTCGTAGC GGGGTTTGCCTCAGCGCTTGTGCTTGTCGCACTAACTTTCATATTA AAACCATTCATGGATACCATGAAAGGAGGTGGAGGGCCAGCAAC CTTGATTCTTATGGTTGCAATTGGGTTGGGAGCTTGGGCACTAGG GCGGATGCAATCGAACGGTGAGACCAGGCCCGGACCAAGTCAAG GATCGGGTGCACCTCCGCATGGTGGATCATATTCAGGTGCCAATG ATAACACATACTCCAATGGATCGACTTCAAGTGGTGGGCCACGAA CTTCAGGAACTGGATTTTCACCTGGATCCACATCAGAGGGGGCTG GGGGTCCTCCACCTAATCCGCAGGCCGGATCTGGCGCAAGAAAA AGATCAAGTGAAGGTTGTGAAGAAACTCCTCCTCCTTCGCCTGAT GCCGGTCCAGAGATGCCGGGCGCAACACCCAGGTACAGTCCTGG CACAACTCCTGGCGCAAACGATGACGCTCGATCGAAAGAAAATGC TTCGAGGACGGCGTGGGAAGAGGCTCGAGAAAGGACGAGAAGG AAGGAAGAGGAGAGAAGGAGGGTAGAGGCCGAGAAGAAGCGAA AGGAGGATTTGGAAAAGAGGTTGAGAGAGTTGCGAGCAAAGGAA GCTCTTGAGCGAGCTGCCCGCGAGAAAAAACAAAGGGACGAACG CGAAGCTAGGGAACAAAAGGAAAGAGAGGAACGAGAAGCCAAGG AACGAAAGGAAGCAGAGGAACGAGAAGCCAAGGAACGAAAGGAA GCAGAGGAACGGGAAGCCAAGGAACGAAGAGATAGGGAAGAGCT GGAAGCTCGGGAGAAGAGAGAACGAGCAGCGCGATGGAAGGAA AGAGAGGAACGTGAAAGGTTGGCAAAATTGGAGAGAGAAGATCAA CAGGCTCGAGAGAGAAAGGCAAAGGAGGACCGCGAAACTCGAGA ACGAATCAAAGCAGAAACAGCGCGAATCAGGGCAGAAGCAAGAG CAAACTACGATAGGAGACTTAAAGAAGAATTGGCTAAGAGGGAAG CTCTAAGGAAAGAAGAAGAAGCCAGGAGGGAAGTTTTAAGGAAG GAAGAGGAAGCCAGGAGGGAAGTTTTAAGGAAGGAAGAGGAGGC CATTAAGAGAGAGCAAGAAAAGTTACGACTAGAAGCTATTGCTAG AGTAGAAGCCGACAAGAAAGCCAGAGCAGACAAAGAAAGGGCAG AGGCGGAGGCAAAAGCAAAGGCGGAAAAGGCAGAGGCGGAGGC AAAAGCAAAGGCGGAAAAGGCAAGAGCTGCTGCGAAAGCATGGG CAGATGCTAAAGCCGCGGCAGCAGCAAAACGTGAGGCCAAAGCC AGAGAAGAGCGCGAGAAGGAAGTAGCGGCGCAAATACGTGAAGT CAAACTTAAGGAGGAGCGCGAGAAAGCAGCCGAAGTAGCAGCTC AAATCAGGGAGCTCAAACTCCAGCAAGAGCGTGAAAGGGCAGCC GAGGTAGAAGCGCAAATAAGAGAAGTCAAACTCCGGGAAGAACG TGAAAAGGCAGCCCTAGCCGCACTCGCAGCGGAACGGAGAAAAC CGAATACTTATTCGAATGCTGGAGTGGGGGAGAGAATAAGCCCGT GGCCAAATGGAAAACCGCCCACAGCAACACCCGCTCCCCCCACT GCCAGCTCGATACCCCGACCTCAAGCACAATCCACCGCATCCAAG AAACCCCCGGTCTCAACTGCAAGAACGTATGCAGGTACCGACAAG GATTCCCAGTCCCACTCACCTTATGCACAATCGCCAAGGCCAACA CGAAAAAAGTCACTCAGTTCCTTGTATTCCGAATCATCATACGCGG CCTCACAATCGACAAGTAGAACTACCCCACCTCCTTCGACACGAG GAGCATATAGCACCAAGGATCCGGACAAGATTGTTATCAAAGGTG TATTCGCATTCAATAACGCATTCCACAAAACCCCCACATCTCAACT TCTATCTGGTGTCGGTTCTGTTACCGACGGACTAATATTAAGAATC ACAACAGAGGGTCTCTITCATTGATGATGATGTACGAGGCGTCGCT CAACGAGAGTGGGATGTCAAAGCATGGACAATGAAACTCGTAGAG GTATGGTGCCCATCTTTCAGACAAGCATCGCGTGTTCCTCCCGCT ACCACAGCGTTTAAAAATCCCGTTCGACGCCTTTGGGGTCTCGAT AAAGAATTGGCAGCAAGTGAAGAAGAAAAAGATACTCTITCTAGTTA GTATGCTGCAACTCTGTCGGGATAATTGTCGCGCTCGTGCCATTT CTAGTTCTTCCACTGGGCATTCTGCTAGTGGTTCTGTCTATTCTGC CAGCTCTTATGCTTCATCTGATACTAGATCGTCTGTTTCATCTGATT ATGCTGATTCCATTGGGTCGTCTAATTCTCCTTATGGTGAGAAATC AAAGAGAACCACTAACCATAATGGCCAGACTGGTGAGAGTAGAAC AGCCGGTCTGCATATTTTIGAGGGCGAGCATTAGGGATCAAGAAGG CAAAAAGTATGTCTTTGTGGTTCAAGAAGGTGAGGCTTGGAAGGT AGCACTAGGATTGCAGAGGTTGAGGAGGGGAACTCAGGTGAGAA GTTTGGGTGTTAGTGGCATGAGTCCGAATGATGCAAAGGCTACAC TGGATAACTTGGGATGGTTTTGAGAGTTGGGGGTGATGGGAAGAT TTCAGAATCTCTGGAATACGCCATGGAATGTGGAGTTTGGAACGC GGAATCGTATCCCTCGGCGAAAAGGGATGCGAGGCGAATCATGA GTCCCGAAAGTCAAATCTAGCATTTACAACACAACGGAAGCATCA GCGATGGAGTTTTTTTTTITITTITITITITTITTIGICTITTITTGITTAAGTITT TTGTGTTTGATACTACAGTATTTTCACTCATCTCAAGGAGTTTATGT GTTTGTTTGCGCACGGGAGCTGTCGAGTTTTAGTTGGAACTITCIT GTGGGAATTTAGAATGGAATTGGGTATCAGTACCTCTTCAATTTTC TGAGGTGTTTGGTTAGAGAGCGTATTGTATGTATCTTGAATACCCG GTTCTGTGCTAAAGTTTGTGGTTTGAAGTATGTTTGTGTGGAATGT
TTGGTAATGAAATGGGATGGGGAGAGGGGGA SEQ ID NO: 69 BC1G 12627
ACTCGTGCGTCTACTGCCACTGCCACTGCTGCTACTTTGCTATTCA ACTTCGCCTCGCCTTTCAATTAAGAATTGTCACTTCGTCGCATCTG AGGCCGGAATGCTAATATCTTCTCGTCATCTTTGAAGCCAATCTCA CTCGTTATCCCGTCCAATTCAGTCGATATATTAAGAGCCTTTGAAG TTCCGATCCAAGAAACCTTTCGTCTATCCATATCGCAAGAGTTCAC TTCTTCACAATGAAGTTCACCCCAGTTTCTGTTGCGCTITCTCAGCG TGGCCGGCGTTGCGATTGCGCAACCCCACAACCATCAACACCGT CATCCAGTTCGAGCAAACAAGGTCGCACGCGACAATGCTGTTGTC TCTGTGACAGAGGTTATGCCAGGTCCAGTCGAGACAGTCTACATG CTTAACGGAAAGGATATCTCTTTGGCCGAAGTACAAGATGGTTTG AAATCTGGAAAATACGTTTTGGTGGGAGACGCTGTCGAAGACGCC CCTTCTGCTACTAACTGGTACACTGCACCCGTATCTGTTGCACCC ACAACATCTGCCGCTACAACCTCTTCCGCAGCTACCTCCACCAGT TCGATCGTCAAGGCTGCTGCAGAGTTCATTGAGGTCTCCTCGTCT TCCACCAAAGCTGCGTACACTTGGAAATCAAGCGCTGCATCAAGC GCTGCATCATCCACTTCAGAATCAAGCTCGGTCGCCTCTGTCTCC TCTACCAGTTCTGCTGCTGCTTCTICCTCCTCCGCCAGCAGCTCC ACTTCCGCCGCAGCCAGCAGCTCTACTTCCTCCAGCAGCGCCGG CAATTGGGCCGACTTCCCAAGTGGCACAATCCCTIGTTCCACTIT CCCATCTGAGTATGGCCCAATCGCTGTCGATTACCTTGGTTTAGAT GGCTGGATCGGTATCCAAAGCACCCCTGGCTACACCACTTCTGCT TCCTCGATCGTTACCATTAACACACTAACCAGCGGTGGATGTGTG AAAGGCGCTTTCTGCTCGTATGCATGCCCAGCGGGATACCAGAAA TCTCAATGGCCTAGCGCACAAGGAAGCACTGGTGAATCCATCGGC GGTCTTTACTGTAACTCCAAGGGAATGCTCGAGTTGTCCCGAACT ACCACCAAGCAACTTTGCACTGCTGGATCTGGATCCGTCAAGGTT GAAAACAAGCTCAGCAGCATTGTTTCTGTTTGCCGTACTGATTACC CTGGTCTCGAGGCTGAAACGGTTCCATTGTCAACCTCCCCTGGCC AAACCTATGACTTGACTTGCCCAGATGCCAGTAACTACTACTCATG GGAAGGACTTCCAACTTCCGCACAATACTACATCAACCCACAAGG AGCTTCTACCTCTGAAGCTTGCGTATGGGGTGAAGCAGGTAAAAA CCTTGGTAACTGGGCTCCTGTCAATGCTGGTGTCGGCAAAGATGC CTCTGGTAACACTTGGTTGTCAATCATCCCTAACACCCCAACCAAC ACATATGGTACCTTGGACTTCACCATCACTATCGAAGGTGATGTCT CCGGAAAATGCTCGTACTCATCTGGAACATACTACAACAATGGTG TTGAGTCCTCAACAGGTTGCACCGTCTCTGTTCTCGCAGGCGGAA CCGCTACATACGTCTTCTCATCATAGGCGCTTGAGTCTCGATTTTC CCTTTTACAAAATTTCCGGTGCACATATTGTTGTITTTCTTTCCGCG CGCATATCCACAATTGCGGCTTATGATCGTTGTAGTCACTTTTTTIT TTTTTCCTTTACACGCCCTCAAGTTATTCTAAGTCTCGGATGTTCG AACTCACGCTCGACTTGCAACGTTCAAACAAATTTGTCAATAAGAT ACCCCCTCCATCCGATCTCTGAATGTACTTCGTGTGGTAACTTTTC CTTTGTAATAAATGTCGCTAATGTTTTTACATTATTGAAGTGGAAGA TATCTGGACGTTGGAATACTACGTTCCAGATGGTTGTTGTAAGCAT GAATGGATTTCTTGAGGGGGTTGGGGCTGTTGGTAGAAAAAAAGG TTGTGTTCTCGGCAGATGAATGTTCATATGGCGAACGGGAAAGCT CTCTTTCCTTGAAGCGATCACCTTGGTTAACTCTITCTATGTATTCG TTACTCATTTTGAAGGAGACGTGCTCCTGGTACAGAGTGCCCCTC TATCCCTACGGCCTTTTTATCAATTTGCCGCAGGCACTCTTGCATA TGTTTTCACACTGGCTACAAATGTTTGGAAGGAGCGCGCACACGA AACAAAAATTACCACCATGTCTCTTTTCTGAGGAGATTTGGTAGAG AGCTATAACACCTGTTGTATGTGGATGTGAATGGAAAATTTGACGG CAGAGGCTGCAGAATATGGTGCATGTATCAATGTAAAGTAGTCTA GTCGGCACAACACAGACAGGGAAAGGGAGATCAGTTACACTCTAC TTATTCTACCTTTTCAAGAAGATGTTGAGAAATTTTTGAGAACAGAA AATTCCAAAAAAACAAAAACAAAAAAACAAGTAAATGGAGCATTCA GATGAAGTGTGTGGCCTTTTTCGTGTATACAGATTAAAATCTCTIT TCGTATCTTATAATTTCTITCATTTTTCTTTCCTGACGATGTTCACAT
ACAACTAACTGTCTTTCTGAATCTGTGAATATGAATA SEQ ID NO: 70 BC1G 09656
GTCCTTTTGTTTCTTCATTCTTTCATTTCAAAATGTATTTTTCITTCIC ATTCTCTCATTGCTTCCGTGCTCTTGGTCTCTGCCGTTCAAGCATA CCCAGGAGTTCAAGCAGATCTTGTTGTTGATATACTAGCTACAGC GACATCTGCAATTGTTTTAGAGACCCCTCCACCTTCGGAAGGGCT TCTTGACAATGTAGGGTTGTTCAAATTCTTCGCAAGAGCCGCGAA GAAGACAACAGCAAAAACCACTGCTAAAACCACTGCTAAAACAAC AGAGGCTGCACCGACAACCCAGAAAACTACAGCTCCAGCAACAAC GCAAAAAACTACAGCCGTGGTGACTACACCCACAACTACCTCGGT GAAAACCACTGAAACACCTACTACCACTTCAATCAAGACTACTTCC ATCCCGACTACGTCATCTATATCCACGAAACCTACGTCTACGTCTA CTTCAACGAGTTCGACTTCGGTTGTAGCACCAAGTAGTACGAGTA CTATCTCCAAATCCTTGATTTCAAGCACCAGCTCAATTCCTACCTC GGTGGCTTCAATTCAGACATCTCAAGTCTCATCTTCCACTGTGTCT CCGATCTCTAGCTCGTCAACATCTAGCTCTTTGGTATCCAGTAAAA GTTCTACTTCTGTAGCTACGTCTTCTCAAATATCAACTTCTAAAACT GGTTCATTGTCCAGTGTTAGTGGAGTCTCCGGATCCATTGTCAGC ACTGGCTCTTTATCATCCCCTACTGTCTCTACTTCGGCTGGTGGGT CTGTTTCTTCTGGAATCAATTCAAAGACTAGTGAATCTCTCACCAG TACTGGATCAGCATCAACAAGAACCGGTTCCATAACGAGCACTGC TTCCGCTTCAGCGAGTGGATCCCTTTCATCTGGAACAGGTTCTAT CACCAGTGGATCTCTCACCAGCACTGGGCCAGTATCATCAGGAAT CAGTTCGAGCTCGATCTCAGGGAGTGGAACTATAACTTCCTCCTC CCGCATCTCCTCCTCCAGCGGTTCCATCTCTITGTTCCGTCTCCAA CACCGTAACAGACATAACCTACTTTGTTTCACCCGCCACCAACAC CCTTGGTTCCGTAACAAAACTTTCCACCATCTCCTCCACCGCCGT CAGAACCATCGGATGTTCTCTCAGCGCCAAAACCGCCACATCCAC CGTCTCCTCCTCCGCATCTATCAGTAAAATCGTCATTCCAACCGG CTATGGAGATCCCATCATGAGCGCCGAAGCCAAAAATGCCGCTTT CTACAAAGCCGGCGTGGCGGGATACTCAAGCCAGCTGAGCGTTT ACAGCGCAGCCTCGACGAGAACAAGCGGGATGACCACAATGGCT TCTGCGACGGGGAGTGCGTCGGGCGTGCAAAGCGGTTCGGGTTC ATCTAGTGCTTTGAGTGCCCCGAGTAGTCTTGCAAGTGGCACGAC GAAGGAAAGTGTAAGTAGTGTTGCTACCACGGATGTTTCGAGTAC TACTAGTGCGCCGGCTACTTCTGAGACGGCTTCCGCCACGGGGT TTGTAGGGGAGATCTCTTCGCTITCTTAATATCTTTTAAGGGGGAGG
TGTGGATATATGAGGGGGCTGGATATTAGCATGGGAATAGATTCA SEQ ID NO: 71 BC1G 07658
GGAATTGATTCATGTATGGGTCATCACCCTTTCCAAATCAAAATAC CCTTGCGAGCAACAAATATATTACCAGTTACCGCCTTGCATACTTC TTTTGTTCATTCAAAATCATCCACAAACAGATTTGATCCAATCCGAT CCAAGCTTTATGACGGGCATAAGCGTTGGATCATGTTTCTAGCCC TTTGGTGAATGCTCCCTTGACTGCCTCCAAAAGCAAAATCTGCTTG TTCGATTCGTGGATGACTGGGATATCTAGTTTCTTGTACACAGATT GAATCTCCACAACTAACCAGTTCATCTAATGGCACAGTGCTAGGT CCCATTCCCCAACTTTTGTATAAGTATCTTTCTCTTGGCCAGTTTG ACTTCGAATTCTTCATCGTTCAAGCAAACGTTTCTTTCTITACCCAT CACATTCATTTACACAGTCCTCGGTGACTATCTACATTCATTACTTC ATTGATTGAAGCTTATCAACAACTTTTCAAATCCAACGCTCATTTTT TCCACCTCACGAAAAACTTCCAAACACTTTTTCCATCAAAATCATC AATCTCAAGATTTTATCATCAAAAATGTCTITTCTCCAAGATCGCCGT TGTGGCTGGTGCCGCTTTTATCTCTGGTGTTGCTGCTCACGGACG TGTCCAAGGTATCACTGCTGATGGTGTITTGGTACGAGGGTTACAA CCCAGCTTTCCAATACGAGCAAGTTGCACCAGTCGTTGCTGGATG GTCCGACCCAACTGATCAATCGAACGGTTTCATTGCACCAGATGC TTATGGTACATCCGACATCATCTGCCACTTGGCCGCTACCAATGC TCAAGGATACGTTAATGTCACTGCCGGAAGTGAGGTTAACTTGCA ATGGACCACCTGGCCCGATTCGCATCACGGTCCAGTCATCGACTA CCTTGCTGCCTGTACTGGAGGTGATTGCACAACTGTTGACAAGAC CACCCTCGGATTCTICAAGATCGATGGTGTAGGACTTATCGATGA TTCCACCGTCCCAGGTACATGGGCATCTGATCAGCTCATCGCCAA CAACAACTCCTGGTCTGTTACCATCCCAGAGTCCTTGGCACCAGG TGGTTACGTTCTCCGCCACGAGATCATCGCACTCCACTCCGCTGA GCAAGCCGATGGAGCTCAAAACTACCCACAATGTATTAACCTTTG GGTTTCCGGCTCTGGATCTGCTGTTCCAGCTAGCGCAGATACCAC TCTCGGTACGGCTCTTTACACCGAGACTGAAGCCGGTGTCAACGT CAACATCTACGCTTCCATTGCTTCATACGATGTCCCAGGTCCTACT CAATGGGCTTCCGCTACTGCTTCCGTTGCTCAAGGTACTTCCGGA GCAGTTGCCACCGGAGCCGCCGTCGTTTCTTICAGCTGCTTCTTCA GCCGCCGCCGTAGCTACCTCAAGCGCCGCTTCATCEGGCCGCTGT TGTCGCCTCTTCCTCCGCTCAAACCAGCGCACAAGTTGCCGCCGT CAGTTCCGCTGCTCCAGTAGCCTCCTCCTCAGCTGTTGCCTCCAG CTCCGTTGCTAGCGTTGCTTCATCAGTTGTTGCCAGTTCCGCTGC ATCAGTTGTTACCTCAGCCCCAGCTGTCACCTCGGCACCTTCAAA CGTTGTCACTGATATGATCACCGACTACGTCACTGTTACTGACGTC GTAACTGTCACCGTTACCGCTGCATAAATTCTGAACCTCTTTGGTT TAAAATCAGCACCTCCTTTTGACTAAAAATCTTTTTGATGATATTTIT GATGGTTTATTTTTGGATCTGATTCGGGCTATCGGGCATAGCTTG GATGGAAAATTTATGAGCCGCATGATGAGTTGGATAGGCTTCATG TCACTTTCTTGTATATATTATGTCCTGTATAAACAGAATTGAACATT
TTTCGA SEQ ID NO: 72
BC1G 02429
GCTTCAAAAAAAGTCGCGTCTCTGCCAAAAAGTTATAAGTTATAAG CTTATTGTAAGCTTTAACTTCCTTTCTCTCCAAGAGCATTAAGCATT AAATTGCGCTCCTTCTTGATTTGCTACTACTCATCATCGAGAGTCT TTCTTTTCCCTTTCAATTTTATTICCCCTCAGGACCTTGGAACGAATT GAAACCGGTCACAATGTCGCTCTTCGGGAACACGAATCAAAACAA GCCGTCGCTCTTTGGTGCACCGCAGACCACAGGAGCGTCTACAG GTGCTAGCACGGGAGGTCTTTITTGGTGGATTGGGAACGACTGCG ACTAGCCAGGCTCCATCAACGGGAGGAATGTTCGGTGGAATGGG TGCTACAAGCCAACCCCAATCGACTGGCGGTCTTTTTGGAGCAAC TACAAGCCAACCTCAATCAACCGGAGGCCTTTTTGGAGGAACGAC TACAAGCCAACCTCAATCAACCGGAGGCCTTTTTGGCGGAACAAC TACAAGCCAACCTCAATCGACTGGCGGTCTTTTTGGAGCAGCCAA ACCTCAACAACAATCAGGGACAGGATCCGGTGGTTTATTTGGAGG ACTTGGAGCAACTCCAGCAGCAACCCAACCACAACAAACAGGCG GTCTTTTTGGTGCGACTACACAACCCCAAACTACAAACAACACAAC TGGAGGTCTCTTTGGTAATTCTTTGGCACAACCACAACAGCAGCC GCAACAAAGTACTGGTGGGCTTTTTGGAAACACAACTACACAACC CAACCCTTCAGGATCAATGTTCGGTCCTACTCCACAAATCCAGCC TCTCTCGCAATCTCGACAACAAAATGGAACCAGCGGTGCCTATTTT GATGCTATATTGGAGAAGAGTCGTAAGAGGGCACACGATGAGGAT TCCTTGGGCTTACAATTAGGTTTGGGGGATATTCGACAGCGCATG AAGAGGCTGGCTCCTAGTACCCAAGATGGCTCTGTCGATGGAAGA GCTCATTACCTATTGGCAGCTTCTGGCGTGGACCCAGGCGCTGC GCTCAGAGATTTGAATCTATTCACCGCTGCCACAGGAAGACTTGA TAGGACAGCACCTGTAGAAGCACCCATTGATGCGGATGTCGAAGC ATACCTTACACGTCTGGAAACCCAAACCACAATGAGCATGATATCT GAAGGGTTGGCACGATCCGTTCGAGATTTCGATGATTITCCTCGAG GAGAATGTTGCTATGGAATGGAGTGCACAGCGCAAGAGAATATAT GAACATTTTGGAATTAAGCCCAGAAGAGAACAAACAACAGGGCCA TCAGTGAGCTTTGCAGCTACAGCTACAGAACCTATGGGCGGTTTIT GGTCGATCAAGACGCGGCAAAGGACTCGCTCCTGGAGCATCTAA AGGGCCTGGAATCCCGCGGGCTAGCGTTTTTGGAAAATCAAGCAT GCAGAGATCTGTTATAGGAGCTATTACTCCAGGAGGAACCGCAAA CCGCACACTTTTTACTGATATAGAGAAAGCAGATACGAATGGGTC AGCACCAGGTCCAAGTGACCGATTCATTCGCGAGAAGCAGGCTC GATATATCGAGAAAGTCCAGAACCTAAATGGTGCTAGACTAAAGA ACCTTCACTACCCAATTGCGAACGAATTCTCAGCTGTTGTAGCCCA AGGTAGCGAACAGCACTCTGCAGATGTTTACAGGGCATACAGATG CTTGATGGAAATCGTTGGTGAAGATCCTGACCCGGACAGACTACA ACTCCCTGGCGCGGTCAAACAGAGACAGTTTGCAGCCGCATACCT GGATGACAATACAAACTCAGCTCAAGCGGCCGATTTGAAAAAGCG GATACTCAGTGGATCACTTCGATTTCTTGAAAAGGAGTTTTTCGAG AATGTAGAAACTATTGTTGCCAAAAACCCCAGGGAAGCACTITGTG GGTGGTAAGCCTAGTCCTCTCACAAAGATCCAGGGTTATGTTCGT CTACGCTCAGCTCGTAAAGACCTTGCTACAGACATCTCCGCTCTA CAAATTGTTAATGACGATTACGTCTGGGCAGTAGTCTTTITATCTTC TGAGATCTGGCCACGTTGAGGAAGCCAATGCTTATGTCCAAGAGA ACAGGGAAGCATTCCGGGTAATTGACCGCAGCTTCATGTTTTACA TCGCAGAATATGCCAATAGCCCAGACAGAAAATTAGGACATGACC TTCAAAATCGCATTCAAAGCGAATACAGTCAGCGAAATCGAATTTC CCCTGAGGGTTCTATAGATCCTTTCAGAATGGCATGCTACAAGATA ATTGGTCGCTGCGAACTCCACGTTCGCGCTCTGGATCAAAACATT GTCCAAAACCAGGATGACTTTGTCTGGATACAGTTITGTCCTTGCG CGCGAAGCCAACCGAGTCGATGAAATTGCCAGCGATGCATATGG ACTCGCAAATGTACAAAAGACATTCAAAGATATTGGCGCCCGGAT GTTTTCCAAGGGAAATGAAAATAGTGGACCATTTAGTGTGTACTTT GTGCTGTTGGTACTTTCAGGCCTATTCGAAGACGCAATCGACCTT CTTTATCGCCATAGTATTTCTGATTGTGTTCATTTCGCCACGGCAC TTGACTTTTACGGCCTGCTTCGAGTCTCAGATCCAGATGTTGCAG AGGGTGGATTCTTAAGTTACACAATAAGACAACAACCTCAGATAGC ATTTGGATTAATGATGGGATTTTACACTGCAGAATTTAGAGCTGCA AATGTCAGCGCTGCCGTGGATTATCTCACCTTGATCTGCCTTAATA GTGACCTCAAAGGCGATGCTGGCTCAAAACAAGTCGCATTGTGCC ACGAAGCTCTCCAAGAGCTGATTTTGGAAAGCAGAGAATTTGCTTT GTTGCTTGGAGATATCAGACAAGACGGAAAGCGCCTAAAGGGAGT TATCGAAGAACGCCTGGAACTCATCAATCTCAGCAGCGCTGATGA TTTCATGAGAACAGTGACGATACAGGCAGGAAGTGTCGCGGATGA CAATGGGCGAACCACTGATGCAGTCCTACTTTATCATTTAGCAGAA GAGTATGACAACGTCGTTACTATCCTTAACAGAGCCCTTAGCGAA GCTATTGCCGTGCCTGTAGGCCATAGCCCGTTGCGATTACAACCA CTCAAGCCAAGGCCTGGAGACAAATCCGGAAGAGAGGCCCATAC CAGTCTCAGTCTTACCTCAATTGATGATCCTTTCGAATTGGCTACC ATCATGACGAAGCTCTACTCAAATAATCGCATGTATCTCAACAAGA TCAAGCAAGAAAACCGCGCAGCTTGTGAGGCTTTGTTAAATATCT GCCGTGCTAAGGAATTTGTTGAAAATAGACAATGGGCTGAAGCAT TAGATGTTGTGCAGAATCTTGACATTCTTCCCTTGAGCGCCGAGG GCAACCCAAGTGCAGTACGAAGTTATGCCACCAAATTTITCATCACT CTCCCAAGAGGTCGCAAACACTATCCCTAGTCTITTTGACATGGAC AGTCTTGTGTTGCAACAACCAAAGAACTTCCCTCATGAATGCCCAA TACGGAGGTAATGAGGGTACCAGACGACTGATGATTAATCAATTG AGACAACAAAACATGGACTTAACGACTTATACCAGTCAATTAAGAT ACAGATTCCCTGCGTCTCTTCATGAAGCTCTTGCGAGGGCTCAAT CGGAGTAAGGGATGAACATATGACATGAGCTTATGAGCTTGAATG TATATTAGAACAGCACAGTGGGAAGAGATTAAAAGGGCATTTTGA GTTTTTATCTGGACGGAACGAAATGAAAACATTGGGGGTCTGTCT ACTACTTTTGTAGTTGATTTTTACAGTTTCTCATGAACAAGTGCATA GATGAAGAATGTATTGTGTTGTCTATTAGAAGATTAATTATGAGTG
GTTAATGAATACAGAATATCGAGATCTCGCTTCCA SEQ ID NO: 73
BC1G 09103
GCAATCAATCATCTAATCGCGACGACAACTTTCAACAATTACCATA TTTCAACAATCATTTGGAATCTTCTGCGATATACATTGAGGAATAAT AACGACCACAGTCTCCGGCTCATGATCGCAAGTAAATCTCAAGAT GGCTGATCAACCACCAGCAATGCAGCATGAGGACTCCATCAGTTC GCAAGATCCTCATTTACATGGCGACAAAGGAAAGACGAAGAGTAG ACGGCCAGCAAATACGGCATTTAGACAACAAAGATTGAAGGCATG GCAACCGATCTTAACACCAAAAACCGTACTCCCATTATTCTTCGCC ATCGGAATCATTTTCGCGCCAATTGGTGGAGGGTTGTTATATGCTA GTAGTGTGGTCCAAGAAATTGTACTCGATTATTCGAAATGCCACAC AGATGCGCCAATCTGCACGGACTACCTCGATACAGGCTCCCTGAT GCCCGATGACAATGTTGAAATGTTTTTCAAAACACCTCACGTATAT GATGGAACTCCTCCGCAATGGTGCAGACAAGATATCAACCAAACA TACTACAACGGCAGTGTTGCGCATGCTACTGTTCCCGCTGTACAA TGCCGGCTCACATTCCCAATCAAATCCGAAATGGAGCCTCCTGTT TTATTCTATTATAAGCTCACCAACTTCTACCAAAATCATCGACGATA TGCTAAGTCCTTCGATTCCGATCAGCTTTCCGGCAAAGCCGTTAC CGCAAGTACCATACATTCTGGTGATTGTACGCCACTCACGACTGT AAATGATAATGGTGTCGACAAGCCATATTATCCTITGTGGTCTAGCA CCAAACTCTGTGTTCAACGATACATTTTCAAGTCCATTCCTACAAA ATGTCGCAAACAGTACTTCAGGTGGCGTAGTCTATCCTATGAAGA ACAACTCGGATGTATCATGGAGTAGTGATAGAGAGCTATATGGTC AAACAAAGTACAACTGGTCGGACGTCATTGTTCCTCCAAATTGGG TTGAGAGATATCCAAACAATTATAGTGACGATTATCATCCCGATCT CGAGAACGATCAAGCATTCCAAGTTTGGATGAGACTGGCTGGTTIT GCCAACATTTAGTAAACTGTTTCAGAGAAATGACGACGATACTATG ACGACTGGACAATATCAAGTCAACATCACACATCTTTTCAATGTTA CCGAATATGGCGGTACTAAATCAATCGTTCTITTCAACCCGTACCGT TATGGGTGGTAAGAATCCTTTCCTAGGTATCGCCTATATCGTTITGTT GGAGGTTTATGTATCCTACTCGGTGCACTTTTCACCGTCACTCATC TTATAAAACCAAGAAAATTGGGCGATCACACATATTTGAGTTGGAA TAACGACAACCCTACAACGGCGACTACCAGTGGACGTGAAATGG GTGCGAGCATGGGATAGACGCTGGATCGATATCGAATCAAAAAMAG GGGACGTGTAAAATAGTGATGGATGATGAGATATGAGGCAGGGTT GTTGTATTCGAACATTTTCTTCTACGTTACCAATGGGCAATATGGC GTCTAGGTATTATGAGCTTTTGATCTGTGCTGCTTTTGAAAAGCAT TCTGCGATGCGAGGAAAAGTGGGTGGAGGGAATCTTITGGCTGGA CTGGGGAATCAATGGGTGCTATGAATATTTTGTGCTCTTATTTTTIT GAATTAGAAAGAAACTTATAACTTTGAAATATACCACAGATGAAAC
TTGTAAAGGCGAATGGACTTCTGGTGTTCTCGAATAGCCAAACATA SEQ ID NO: 74 BC1G 02638
GGATGCATTTCAAGATTGGGATTCCATTCCATCTTCTAGGCAACTA TTACGTCGACCCACCATATTTCCGGCTTTTTGATGAGCAAGGTTAT GTTTCCCGGTAAGAATATATCATTGCCGTCATGGCACCTCCAGCG AAGAGACGGAAGCGTAGTGCCATTGAATCCTCTCCCCATTCCOTCT GAGAACGAGGATAATCAATCAATTCAGGTGAACAAGTTCAAAGGT CGATTGAGCAGTTTGGCACATTCTCCTCCACCAAGATCGAGCTCT TCTGAGCCTGCCCCAAGGTCTATGTCGCAGTCCAGTAATTCTACG AGATCCTCTTCTTTTTTGAAACCTCCAGCAAAAGCGGCCATTCATC CTCACAATGCTGCCCCGGTCTACTTACCAAACCACCGTAAGAAGT CCACTACAAAGAGTCCCAGCACAAGTCCAGAGAAACCAAGAAGTA AAGGAAGAGTTGAGGAAAAGCGGCAGAATGCAGATATTCATACGT TGTTTGCAAGACAATCACAGAGGCAGCAAGCACAAACGGAAGGC GAGACGATACCCAAACAAAGAATCAAGGTTCTTAATTCGAGAGATA TTCAGCAGGAGACCGATTTAATAGACGATTTAATATCAGATGATGA CGATGTGGGAGAGGGTCAAGCGCAAGCAATTAGCATTGTTGGGC AGGCCGCCAAACGGGGACTTGGAAAGAACGTATTCATAAATTCAG GTACAAACACACCCAGCGCCAGTCAAAGATTTGTAAGACCGTCTC AGGCTTCTACAATAGAACATATGGTCGAGGAAGAGGATATACGAC CTTGGGCTGAACGCTTTGGGCCAAATAATCTGGAAGAGCTTGGGG TTCACAAGAAGAAAGTAATGGATGTTCGAACCTGGCTTGATAATGT TATAGGAGGGCGGATGAGACAACGGTTATTGATCTTAAAGGGTGC TGCCGGAACCGGAAAGACGACAACAGTGCAGCTATTAGCGAAAG ATATGGGGTGTGATGTTCTAGAATGGAGGAACCCTGTTGGATCAA TCGATTCCTCAGACGGCTTTCAGTCAATGGCTGCACAATTTGAGG ATTTCATGGGGCGGGGTGGAAAGTTTGGTCAACTAGATTTATTTTIC CGACGATCATGGAGATATTCCAGCAGAAGCAGAAGTAAAACCGTT GGATCAAAGGAAGCAAATTATACTAGTCGAAGAATTTCCAAACACT TTCACGCGTTCTTCAAGTGCCTTGCAATCATTTCGATCTGCGATAC TTCAATACCTTGCATCTAATACTCCTCTITCTTTCAATGTCACACAAT CCTCACTTTAAAAGTGATCCCATCACTCCTGTGGTAATGATTGTAT CAGAAACATTGCTCACAACGACATCAGCGTCTGCAGACAGCTTCA CTGCTCATCGTCTTCTTGGGCCAGAGATTCTTCAGCACCCGGGAG TAGGAGTGATAGAATTCAATTCTATTGCCCCGACCATATTGGCAAA AGCTCTCGAGACTGTAGTACAAAAAGAGTCGAGAAAATCAGGCAG GAGAAAGACACCAGGACCCCAGGTATTGAAAAAGCTTGGGGAGG TGGGCGATATTAGAAGTGCAATTGGCTCTTTGGAGTTTATGTGTCT AAGAGGGGATGTCGATGACTGGGGAGGCAAAGTTGTTTTCGGCA AGGGAAAGAAAACAAGCAAAGATACATCTTTGACAAAAATGGAAG AGGAATCGCTGGAGCTGATCACTCGCCGCGAAGCTAGCTTGGGA ATCTTCCATGCCGTTGGGAAGGTTGTTTACAACAAGCGCGAAGGA AAGGTATCAGGCGATGTGGAATCTTTGCCACACTTTATATCTCATC AATCACGTCCTAAGAAATCTGAAGTAGGCATAAACGAGCTTATCGA CGAGACTGGCACCGACACACCAACCTTCATAGCTGCCCTITCATGA AAATTACATCCTTTCATGTGAAGCACCACCCTCTTCCTTCGAATTC TCATCTCTTGATCACGTCAATGGCTGCATCGATGCCCTCTCTGACA GTGACCTCCTCTGTCCCTCTTGGGACGGTTCCATCCAATCCTCCG GCTTCGGTGGTGGCATAACAGGAACCGGAGGCGACATTCTCCGC CAAGACGAAATGTCCTTTCAAATTGCCGTCCGCGGTATCCTTTTCT CACTCCCTCACCCCGTATCTCGTAAAGCACCTGCAGCAGCGGGG TTCAGAACTGGCAAAACAGGCGATGCGCATAAAATGTTCTATCCC ACCAGTCTCAAACTCTGGCGCATGAAAGAGGAAATGGAAAGTACA CTAGATCTCTGGGTTACACGATTAATAAAAGGAGAAATTGATCCCA CGAGTACGCATGCGTCAAGTATTAAATCTGGCGCTGCAGTATTCG CTCGTCCTAAAGCTGGCACAGTCGAAAGCTGGAAAGTGAAAATCG CCGCACCATTGCCCTCGCAATCAAAATCCAAATCCAGCCTCAACA CTCCAAAAGAAGAAGACAGCCCACCCCTCCTCACCCTCGGCGTCT CCGCTCGTACAGAAATGCTCCTCGAGCGTCTCCCCTACATGATCC AAATCTCCAAATCCAAATCATCCCACCAATCGCGCAACCCATTTTC TTCCTCCTCCTCCTCCTCCTCTTCCACTTCCGCCATCACGAACTTC CAAAACAACCCCCTTCTCGCCTCCCTCTCTAAAATAACAACCTTCA CTGGCATCGGTCCCGCGCAAACCTCCGACGACCCCGCCTCCCTT TCCGATGACGAATCTCCCAATCCCAATACTGAAAATTGGGCCACC GATAAACCAAACGGTAATGGTATGGATACACCTCGGAAGAAGAAG CAAGGCGGGAATATGGGGGTTTTTATGAAGAAGGGAATTGGTAAT CAGAGAGCAATGCCCATGCAGCAGTTGGAGCAGAAATTTGTITITG AGCGATGATGATATTGAGGATGATTGATTGATGATTGGAATCTGGA TTGGGAGTGGGGCCTCAAACGCTTGATGAATATGGGGGTTTTGG GTGATATGCTTGAGGTGTTCGTGGATGAAAGGCATGTGTTTTITAT GATCCGGGATGAGATGGTTTGGTATTTACTTCTTIGTATTGTATTIT GAAAATCAAAATTAACATCGAGTTTCACCGCGTTTCAATTCTITITG
CGCGTTGTCATTCTACAAAATATCAAACTACTTATTTCTATACACA SEQ ID NO: 75 BC1G 02869
GAAGCTCAGAAATTCATCTCACAATATTAATATGCCCTTAAATCGG TAACAATGAAGACGGAATTTAAGTTCTCCAATCTCTTAGGGACTGT TTACAGCCAAGGAAACCTTCTCTTCAGTCCAGATGGATCATGTCTA TTTTCTCCAGTAGGGAACAGAGTCACAGTTTTTGATTTAGTAAATA ATAAGTCACATACACTTCCATTCGCACATCGAAAGAATATAGCACG GTTGGGACTTGCGCCGCGAGGAAACTTATTGCTTITCAGTCGATGA AGATGGCCGCGCGATATTGACCAATGTACCGAGAAGGATTGTCCT TCACCACTTTTCTTITCAAATCAGCTGTATCCGCCATATCGTTTICG CCATCTGGGCGCCATTTCGCTGTGGGAGTTGGACGAATGATCGAA GTATGGCATACACCCTCAACACCGGATACAAATTCAGAAGGGGAG TTAGAGTTTGCGCCATTTGTTAGACACAGAGTATATACCGGTCACT ATGATACTGTTCAAAGCATCGAATGGTCGAGTGATTCTCGTTTITT CCTTAGTGCAGCAAAAGATTTGACAGCCCGGATATGGAGCTTGGA TCCAGAAGAAACCTTTATACCTACTACATTGGCGGGCCACAGAGA AGGTGTTATGGGCGCATGGTTTTCGAAAGATCAGGAGACTATTTA CACTTGTAGTAAGGACGGAGCAGTATTTCAATGGGCGTATATACG GAACCCCAATGCTCCTGAGCCAGAGGATGAGGATGAGGATATGG AAAATCCGGACGACGACTCGCACATGCAATGGAGAATTACGGAGC GACATTACTTCCTACAGAACAACGCTAAGGTCAATTGTGTTGCATA CCATGCCGAAACGAATCTTTTGGTTGCAGGATTCTCGAATGGTGT ATTTGGACTCTACGAAATGCCAGAATTCAACATGATCCATACCTTG AGTATCTCACAAAACGATATTGACTTCGTCACAATTAACAAGTCTG GAGAATGGCTCGCATTTGGAGCCTCAAAGCTGGGGCAACTCTTAG TTTGGGAATGGCAATCAGAATCATATATCTTGAAGCAACAAGGCCA TTTCGATTCAATGAATTCCTTGGTTTACTCCCCAGACGGACAAAAG ATTATCACCACTGCTGACGACGGAAAGATAAAAGTTTGGGATGTG AATACTGGTTTCTGTATAGTCACTTTCACAGAACATACCAGTGGAG TCACGGCTTGTGAATTTGCCAAGAGAGGAAATGTTCTTTITCACATC AAGTCTTGATGGGTCGATAAGAGCATGGGATTTGATAAGATATCG AAATTTCCGTACTTTTACAGCGCCCACTAGACTTITCATTCTCATCC TTAGCAGTTGATCCCAGTGGCGAAGTCGTTTGCGCGGGATCTTTA GATTCTTTCGATATCCATATTTGGTCGGTACAGACTGGTCAATTAC TAGATAGATTATCAGGTCACGAGGGACCTGTATCATCACTAGCTTIT TGCGCCAAATGGAGGTGTAGTAGTAAGTGGAAGTTGGGATCATAC AGTTAGAATTTGGTCTATTTTTGACCGTACACAAACGAGCGAACCG CTTCAACTTCAAGCGGATGTATTAGATGTCGCATTCCGTCCCGATT CACTACAGCTTGCTGTCTCAACACTAGATGGACAGTTGACATTCTG GTCCGTTTCAGAAGCTGAACAACAGTCAGGTGTTGATGGCCGAAG AGACGTTTCAGGTGGTCGAAAAATAACCGACCGAAGAACCGCCG CTAATGCTGCGGGCAACAAAAGTTTCGGGTCCCTTAGATATAGCG CAGACGGATCCTGTGTITCTTGCAGGTGGTAACAGTAAATACATAT GTTTGTATTCTGTAGACTCCCTCGTCTTACTGAAGCGATTTACCGT CAGTGTCAACTTATCCCTATCCGGAACGCAAGAGTTCCTCAACAG CAAACTTTTGACCGAAGGTGGACCAGCCGGTCTTATCGATGAGCA AGGTGAAGCCTCTGACCTCGAAGACCGCATCGATCGATCTCTCCC CGGATCAACCCGCGGTGGAGATCCTTCCGTCCGCAAAAGACTCC CCGAAGTACGCGTTGCCGGCGTGGCTTTCTCTCCCACAGGAAGA TCCTTCTGCGCAGCCTCAACAGAAGGACTCCTCATCTACAGTCTC GACACTATGCCCCTCTTCGACCCCATCGATCTCGATCTCGCCGTC ACCCCCTCCTCCACTCTCCACGTCCTCAACATCGAAAAAGATTAC CTCAAAGCTCTCGTCATGGCATTCCGTCTCAACGAAGCTCCGCTC CTCCGTCAAGTCTTCGAAGGTATCCCACACCCCAACATCGCGCTC GTAGTCGCTGAATTACCAGTCGTTTACATTCCTCGTCTGCTGCGTT TTGTAGCCATGCAAACGGAGGAATCCCCTCATCTGGAATTTIGCTT ACTCTGGGTCCAAGCGATACTCGTTTCCCATGGTCAATGGGTTGG CGAAAATAGAATTCTAGTGGACTCAGAACTAAGAATTGTGGGGAG AGCAGTGGGCAGGATTAGAGACGATTTGAGAAGGCTGGCGGATG AAAATGTTTACATGATTGATTATCTACTTAATCAACCATTAGAAAAG GGAATCGAGGGTACAGATGCAGGGGAGAAGGATGTAGTGGTCAA AGATGTGGATATTAATGATGATGATGATGAGGCGGAATGGATTGG TCTAGATTAGGTTGTATCATATTATATGGAAGGAAAAAAAATTTAAG CTGGTTTTTGTACTCATTTTTGAAAACTTGGTTGTGTGTATTATTAT TGTTGTTCTCGTTGTIGTTGTCGCCTCCCAATTTTGGAAGATCTTG TATATTCGTTGATCAATTATCAGGATGCATACTCTGTCTGCAAATC AACATCAGTCTCGCCAAATTCTCTTTTGCATAAATATTTACATTCCC ATCACAATCTTCACCCCTATCTCTATTCGATGCAGATCCTTCTCTITT CTAGAATAAAAGGTCACTCACTATTAAAATATCATCAGCCGCTTTIT
CTCATCGCTCACA SEQ ID NO: 76 BC1G 09169
GAATTCGAGTGTGATCAGTGCGAGAGTGCCGGCACAATGCAGGT GGGTGGGTGGTACGGAAGACGAAAAAGACACGGCCCGAGGTGA GGCTCATCACGACGCCAACAATTCCATACTGTTGTGAACCTCCAA TAGATGTCTGGGCGTTGCGGTATCCATACGTCCAACTTGCATCTG CGTACGAAGGAATCACATATGCATGAACATGAACATGAACATGAA GTGGCAAGATGGTTGGATCGGGTCAATCAATGGCGCGCATCTATT GACTGTTGCTTGATACAACCGAAAGCCGACATTCTITTAGCGTAAG GGCTACCAAGGTCTGTGCATTGATGGGTACCTCTGGCCAGTCTCG AGCCAGTCCTCCGCATTGCGAATCCTCGCTGTGTCAAGTCGTTCA TATGTAGACATCCGATGTTAACGTGGACTTGCTGTCGATTGACACA AATATATAAACACCTTGGATCATGTGTCGTTCTATCGCCACGCATT TATATCGAGGGGATGTTATTTCCACATCCAAGCTTTGCGGCAGAA AAGAAGTGCTCCTGGCGCACCGAGTCAAGCGTCAGCAGAGTAAG CAGAGTCAGCAAGCAATGGATTATTCAATGGGAGTCTCGTGCGAC CTTATCGGCTGCCAACTTATGCACGTCTTITTCTTCCGAGCAAATGG TTCGACAGGAGCCTTCCTTTTTGCGGAGGCGACAGCGAATGGCAT TTGGGCGCAGTGTCTGCCTATCTGGTAAGCTGATGAAGACGGAGA GTGCAAGGCTGGAGAGTGATGGTGATTTAAGCATCCCATCGCCAT GGTGATTTGACGTAAGAGATCGTTGCTTTCGTTTGATTATCGTIGG TCTTTTTTTCTTGCCTTTTCACTTTCGCAGACAATCATCAATCATCA AAGGTATCATGTCTTCTACGGCATCTTCAAGCGATTCCGATAACAG TAGAAGACGACGCCGACAGGGTCCAAGACCCTCACCACCACCTC CTCCTCCGCCGTTTCAAGGGAACAATAAGAAATCAAAGAAGAGGA ACAAATACGTAGCCCCTCAAGATACGATCGATAAACTTTGGTCTCG ATTCTCGGTATCAAAATTTAGTAAAGCTACAAAAGTTTTACCAAATG CAGCACCTTTTGCGAAGGGCACATCTGCAAAGACCGTTATTGTTC CTCCACCTGGTCCGCAGAACCAGCTCGTTTCCGAAGACTTTGAAA GAGCGGTTCAAGAATGCAGAGCCAAAGTCAAGAAACTTGTTAAAG AATGTAGGCGCGTTAATATGCGGTTTCGCGACGCCAGCTTTGATA TAGACTGGGACTTGAAATGGGAGAAAGGAAATTGTCTAAATACAC TTGATGAAATAAGATTTGAAGTTTGCAAACAGGCTCTTCTCAATCC TACATCCTCCGGGCCGAAGGCCGTCAAGAGAGTTCACGAAATATT CGATAAGCCAACATTCTTAGGAGATAAAATTTCTCCTTCGGATGTC AAACAAGGAAGTCTTGGGGATTGTTGGTTGATGGCTAGTTTGACA GCATTGGCAAATACAGACGACGGAATTCAAAGAATATGTGTTGAAT GGGACACAAAAATTGGGATATATGGTTTTGTGTTCCATCGTGATG GTGAATGGATCATTTCGATCATCGATGACAAGCTCTATCTAAAATC GCCAGATTGGGATTCACCCTCGGTCCACAGGCATCTACTCGAGCA AACTGACCGAGAGGATGTTGAAAAGGATTATCGAAAAACGTATCA AACCGGATCTCAGTCATTATTCTTCGCTCAATGTAAAGATCCAAAT CAAACATGGCTTCCTCTTCTCGAAAAGGCTTACGCTAAAGCACAC GGGGATTTCTITTITCTTTGAGTGGAGGATGGATAGGGGAGGGTCTT GAAGATTTGACAGGAGGCGTAACTACGGAACTTCTTACTTCGGAT ATTCTTGATACCGATGAATTTTGGCATAATGAAATTCTCAAGGTCA ATAAAGAATTCCTTTITTGGTTGCTCTACTGGTCTTCTCGATTACGG TTATGGCAATAGAGATGGAATATCTGAAGGCCATGCATACGTTATT ATGGAGGCTAGAGAGTTATCTACTGGCGAACGTCTCCTAAAATTA CGGAATCCGTGGGGAAAGATCAAAAAAGGTAATTGGGAAGGTCCA TGGTCAGATGGAAGCAAGGAATTCACCCCTGAAGCTCAGATAGAG CTCAACCACAAATTTGGAAACGATAGTGTTTITCTGGATTTCATATC AGGATTTACTACGCAAATATCAACATTTCGATCGCACTCGGTTGTT CATGGACAGTCCTGATTGGAGATTGACCCAAGACTGGGTCAGTGT AGAGGTGCCATGGAGATCCGAGTTTGAACAGAAGTTCACCATAAC GCTTAAGAAGGAATCACCCATAGTTTTGGTTATGAGTCAACTCGAC GACAGGTACTTTATTGGTCTACATGGTCAATACAACTTCAGATTGC AGTTTCGGGTTCATGAGATTAATTCACCCGATGAAGAAGATTATAT CGTCCGAAGCCATGGGAATTATCTTATGAGGCGAAGTGTGGTTGC TGAATTGAAAAGTCTCTCCGCCGGAACATATACAGTATATATGATG GTCATAGCAGAAAGGGATAAGGATCGACAGAGTGTTGAAGATGTC GTTAAAGATGAATTGAGTCAAAGGGAAGATAATGAAAAATTAGCTA AAGTTGGTCTAGCTTACGATCTGGCTCACCAGAAAGGATTGTCTC ATATGGAGTTAAGAATTAAATCCAGAAAGGCTCTAGATAAAGCAAA GGCCCGAGAATCCAGGATTGCTAAACGTAAAGTCCTTTGGGAGAA AAGACACATTGCGCGGGAGATACTAAGGAAGCAAAAGAAGAAGAA TTATGAGAAACGTGAAGGTAAAGCAGCAAAAGATACTGAGTGGGC AAAGGAACAAGAAGAACGTGAGCTAAAGGATCAAGGTGTTCAAAC GGAAGATATTCCAGAAGTTCAAGTCGAGAAACAAGACAAGTCAAT GCAAACCGAAGATCTCAATGAGGAGTCAATGAACACTACAGTTGA TACACAACCCACAAATGAAAGGGACAAAGCAGTACAGACAGAAGG CTTTACACCATCTTCTAATGAGTCCCAGACAACTCCCGTAACTCCA AAGAGTAATGGTTCATCTCCACGTTCACCGTATACGATGATCTCGA GATCCGGATCTAATCGCCGCAAATCACTACCTCCACCTCCAAGCT TTGTTAATCTTCGTAGAAATCCGAGTCGTCCACCAAATCATGGTCG AGGGCCTCCTCCTCCTTCTTCGAAACCAGGTCTATATGTTACTTCG GAGGGGGAGTCAAGTGCAAGTCCTCTTTCGGATTATGATATGTAT AGTGACGATGATCCGACTCTTAAGCCACGAAATCAGTCAACCGAG CCGAAACGCCCAAAGGAAAGGGAGGCTGGTGAAGATGAGCCAGA ACCATGGAATGCGGTTTGTATCGTTGGCTTCAGGGTTTACAGTAA GGATGAAGGACTAGTGCTTACTGTTTGCGAGGAGGGTATGGAGG AAGTGATTGAGTTGAAAGAGGATAGTGAAGCTGGTACTGATGGTG ATGTGGAAGATGCTGAAGATGAAGATTGCCATGAGAAGAAAGGAG GAAATGGGGAAGATTTGAAATTAAAAGATACTGCAGCAGGAAACG ACTCAACACTTTCAGATGTCGCAATCAAAATTGAGCCTGACAAAGA TTTGAATGTCGCTATCTCCAATTCACCTTACGAGATTACTGGAACC TCTTCGTCAGTCAACAATGGCCTTGAAGAAATTCCTACCGAGAAG CAATCCCAAGAAGCCACCAAAATTTTGGAAATAGAGACAAACGGC GACGCTCAGCAGAAGTCGGCTCTTGGGATCTCGGAGGGTGCTAC AGATGATATCGTGAAGGAATCAGATTCTCAATCCGGCATTGCAAC ATCAAGCGCTTCTTCGAACTGCACTTAAAGCTCACACTGATTTTIG TTCAGGTAACATTCAGTGTACAATTCATTCTICAGATCAGTGCACA ATGAAAACAATTTCTCGTTTTTGGAAGCCCCATTTIGATCTTTCAAG CGATTCAGGCAGTCTAGGCGGTCTATGCGAGCTTCTCGGTTITTAT CTTCAGCAAAATCTTCGAACCCGCATGTAGTTCTAGTAATTCTAGT GATTACATTCTCATGACTAATGAAATTTTTCGTAATATCTGTAGGTA GATACAATGATGTTAGTATTATTCCCATCAATGAATATATTCAGACT
ACTCAATCAACACAATTTTCATTGGCCCTTICTCA SEQ ID NO: 77 BC1G 07037
GATCAACAATATCCATGAACGATATCCATGGAGAAGAGAAGAAAA GAACCTTGCCTCCACCACCACCACCTCCACTCTITCACATTGACTC CTCTTGAGTCTTGAGAGTCGAGACATGCGAGACATGGTCGGATAG ACATTAAGCGAAACACCGATGGCGAAAAATTTGATTTTCACAAGCA AAAAACTAGTAAAAGTAGAGGGAAAGCCCAGACAAAATCCGAATT CGATCCGACCCTTTATCTTGAAAATCCTATGCAGAGTAATAGTTAT TCCTATCTTACTAACAAATTCCATCTTCCTATAAGTTAACTATCTGA CTCTCCCTCCTTCTTGATTACTACCAACGAGACATCACACATCATC CTTTTGTTTTGTTTCTGCGATACAAGTACAATAGATCAATACATCAA CACATCCCTACGATATCTTCTTACCCGTTCGAAGCTTCAAAAAAAG GGTCCAAATCTCCAACAAGCACACGACCAAAGGCACACGATCAAA ATGAAGGTCTTTTCTAGCGACTGCAAATTCGATTATTCGTGGGAAG AGGTTTCGACTGCAAACTGGAGAAAGTACTGTCCATGGAATCATA AATCTACTCACGTTATCGCCGTCGATACATTATCCCGACATGTAGA TGCTGACACCGGAATTCTACGCACCGAACGTTTAATTACCTGCCA ACAATCTGCTCCAAAATGGTTACAATCACTCATGGGCGGCAAAGA TACATCCCACGTCTTCGAAACCTCATATGTCGATCCGATTACCAAG AAAGTCACAATGACATCTACCAATCTCACATTTTCCAACATCATCA ATGTGCAAGAAACAGTTGTCTACCAACCCTTATCGGCAAACACAA CACAATTTGTCCAGGCGGCACAGATTACTGCATTATGTGGTGGAT GGCAAAAAGTGAAGAATGCAGTTGAAGACGCGACAGTTACTGCGT TTTCGGAAAATGCACGCAAAGGAAAGGAGGGATTCGAAGCAGTTT TGGCGATGAGCAGGAGGGTATTCAGTGAGGAGAAAATGAGACAA CAACAAGCGGCTACCGTTACTGCATAAAGTTCGAAATTTCAAAGG CGTTTTGAAGAGGGGTTTCCGTGAAGATATTCCGGTTCGGTCCGA GATATACATGATGAGATTCATATCATTTGAATCTCCTCACATCACG ACTGAAACGATTCCTCCCTTGTCCTTTTTCTTCACTICACTITCAACC ATCTCCTCACTTCATTTCGGCATTTACGAGTTITCACATCATTITTAGG AGTTTGGGGATTTTITTATTACAAGTTCCGGTATACAAAAAAGTCCA CTTTCGGAGTTCTAGAAGGCGAAATTCTCGGTTGCGAATTCTATIT TAAGCGCGGCGTTAAAAAAGGATAAATGGGATATTTGGGTTAGGT TGGGTTTTGCTTCAAAAAGACGATTGTCTTTITGTIGTCITIGAATG GAAAAGTTATGATATTCAAAGAAACTTTCATCCTCAACGCTGATGT GGGTTATTGTTACGATACAGATACCCCTTTTTITCCTICTTITCIITTIT TTGCGGTGCTITTTTITITTTCTICTTTGAAGGGGGAGATAAAAATA GATGGATAGATGGGTTGATTTTATAGATGAGGCTGAATAGGGAGA TGATGTAGATAGAGTGAGCGAGTCAGTGGGTGAGAGACTTGAAGA
AAATAAATATTAGATTTTACTTTATA SEQ ID NO: 78 BC1G 10614
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[00150] Entende-se que os exemplos e modalidades descritos nes- te documento são apenas para fins ilustrativos e que várias modifica- ções ou alterações à luz serão sugeridas a pessoas versadas na téc- nica e deverão ser incluídas dentro do espírito e alcance deste pedido e escopo das reivindicações anexadas. Todas as publicações, paten- tes e pedidos de patente aqui mencionados são incorporados por refe- rência na sua totalidade para todos os fins.

Claims (27)

REIVINDICAÇÕES
1. Planta resistente a patógenos caracterizada pelo fato de que compreende um cassete de expressão heterólogo, o cassete de expressão compreendendo um promotor operacionalmente ligado a um polinucleotídeo que inibe a expressão de patógenos fúngicos de um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 ou um fragmento dos mesmos, em que a planta possui aumento da resistência a um pató- geno fúngico em comparação com uma planta de controle sem o cas- sete de expressão.
2. Planta resistente a patógenos, de acordo com a reivindi- cação 1, caracterizada pelo fato de que o patógeno é Botrytis, Verticil- lium, V. dahilae ou Sclerotinia.
3. Planta resistente a patógenos, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 2, caracterizada pelo fato de que o polinu- cleotídeo compreende um ácido nucleico antissenso ou RNA inibidor (RNAi) que tem como alvo um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou Ta- bela 2 ou um fragmento dos mesmos.
4. Planta resistente a patógenos, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que o polinu- cleotídeo compreende um ácido nucleico tendo uma sequência idênti- ca ou complementar a pelo menos 15 nucleotídeos contíguos de um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2.
5. Planta resistente a patógenos, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que o cassete de expressão adicionalmente compreende um segundo polinucleotí- deo que inibe a expressão fúngica de um segundo gene-alvo da Tabe- la 1 ou Tabela 2.
6. Planta resistente a patógenos, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que a planta adicionalmente compreende um segundo cassete de expressão, em que o segundo cassete de expressão compreende um segundo pro- motor operacionalmente ligado a um segundo polinucleotídeo que ini- be a expressão fúngica de um segundo gene-alvo de Tabela 1 ou Ta- bela 2.
7. Planta resistente a patógenos, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a planta é uma espécie dos gêneros Aspargos, Atropa, Avena, Brassica, Citrus, Citrullus, Capsicum, Cucumis, Cucurbita, Daucus, Fragaria, Glycine, Gossypium, Helianthus, Heterocallis, Hordocallis, Hordeum, Hyoscya- mus, Lactuca, Linum, Lolium, Lycopersicon, Malus, Manihot, Majorana, Medicago, Nicotiana, Oryza, Panieum, Pannesetum, Persea, Pisum, Pyrus, Prunus, Raphanus, Secale, Senecio, Solecum Sorgo, Trigonel- la, Triticum, Vitis, Vigna ou Zea.
8. Método caracterizado pelo fato de que é para cultivo de uma pluralidade de plantas resistentes a patógenos, como definidas em qualquer uma das reivindicações 1-7.
9. Método para fabricar uma planta resistente a patógenos, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracteriza- do pelo fato de que compreende introduzir o ácido nucleico compreen- dendo o cassete de expressão em uma pluralidade de plantas; e selecionar uma planta compreendendo o cassete de ex- pressão.
10. Ácido nucleico isolado caracterizado pelo fato de que compreende o cassete de expressão como definido em qualquer uma das reivindicações 1-7.
11. Célula hospedeira, caracterizada pelo fato de que com- preende o ácido nucleico como definido na reivindicação 10.
12. Método para fabricar uma planta resistente a patóge- nos, caracterizado pelo fato de que compreende: contatar uma planta com um construto compreendendo um promotor operacionalmente ligado a um polinucleotídeo que inibe a expressão fúngica de um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, em que a planta tem resistência aumentada a um patógeno fúngico em comparação com uma planta de controle que não foi contatada com o construto.
13. Método, de acordo com a reivindicação 12, caracteriza- do pelo fato de que o patógeno é Botrytis, Verticillium, V. dahilae, Scle- rotinia.
14. Método, de acordo com a reivindicação 12 ou 13, carac- terizado pelo fato de que o polinucleotídeo compreende um ácido nu- cleico antissenso ou RNA inibidor (RNAi) que tem como alvo o gene- alvo da Tabela 1 ou Tabela 2.
15. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 12 a 14, caracterizado pelo fato de que o polinucleotídeo com- preende um ácido nucleico que possui uma sequência idêntica ou complementar a pelo menos 15 nucleotídeos contíguos do gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2.
16. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 12 a 15, caracterizado pelo fato de que o construto adicionalmen- te compreende um segundo polinucleotídeo que inibe a expressão fúngica de um segundo gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2.
17. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 12 a 15, caracterizado pelo fato de que o método adicionalmente compreende contatar a planta com um segundo construto compreen- dendo um segundo promotor operacionalmente ligado a um segundo polinucleotídeo que inibe a expressão fúngica de um segundo gene- alvo de patógeno fúngico da Tabela 1 ou Tabela 2.
18. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 12 a 17, caracterizado pelo fato de que a planta é uma espécie dos gêneros Aspargos, Atropa, Avena, Brassica, Citrus, Citrullus, Cap-
sicum, Cucumis, Cucurbita, Daucus, Fragaria, Glicina, Gossypium, He- lianthus, Heterocallis Hordeum, Hyoscyamus, Lactuca, Linum, Lolium, Lycopersicon, Malus, Manihot, Majorana, Medicago, Nicotiana, Oryza, Panieum, Pannesetum, Pérsia, Pisum, Pyrus, Prunus, Raphanus, Se- cale, Senecio, Sinapis, Solanigon, Sorghella Trago, Triticum, Vitis, Vi- gna ou Zea.
19. Método para aumentar a resistência a patógenos em uma planta ou parte de uma planta, caracterizado pelo fato de que o método compreende: contatar a planta ou a parte da planta com um dsRNA ou RNA (sRNA) dúplex que tem como alvo um gene-alvo do patógeno fúngico da Tabela 1 ou Tabela 2, em que a planta ou parte da planta tem resistência aumentada a um patógeno fúngico em comparação com uma planta de controle ou parte da planta de controle que não foi contatada com os dsRNAs ou sRNA dúplex.
20. Método, de acordo com a reivindicação 19, caracteriza- do pelo fato de que o patógeno é Botrytis, Verticillium, V. dahilae, Scle- rotinia.
21. Método, de acordo com a reivindicação 19 ou 20, carac- terizado pelo fato de que o dsRNA ou sRNA estão contidos dentro nos lipossomas.
22. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 19 a 21, caracterizado pelo fato de que o método adicionalmente compreende contatar a planta ou parte da planta com um segundo dAsRNA ou um segundo conjunto de SRNA dúplex que tem como alvo um segundo gene-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2, ou tem como alvo o gene homólogo em outro patógeno.
23. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 19 a 22, caracterizado pelo fato de que o método compreende contatar a planta ou parte da planta com um ou mais dsRNAs ou
SRNA dúplex que têm como alvo um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 de uma primeira espécie do patógeno fúngico e adicio- nalmente compreende contatar a planta ou a parte da planta com um ou mais dsRNAs ou sRNA dúplex que têm como alvo um ou mais ge- nes-alvo da Tabela 1 ou Tabela 2 a partir de uma segunda espécie de patógeno fúngico.
24. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 19 a 23, caracterizado pelo fato de que o dsRNA ou sRNA dúplex é pulverizado na planta ou na parte da planta.
25. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 19 a 24, caracterizado pelo fato de que a planta é uma espécie dos gêneros Aspargos, Atropa, Avena, Brassica, Citrus, Citrullus, Cap- sicum, Cucumis, Cucurbita, Daucus, Fragaria, Glicina, Gossypium, He- lianthus, Heterocallis Hordeum, Hyoscyamus, Lactuca, Linum, Lolium, Lycopersicon, Malus, Manihot, Majorana, Medicago, Nicotiana, Oryza, Panieum, Pannesetum, Pérsia, Pisum, Pyrus, Prunus, Raphanus, Se- cale, Senecio, Sinapis, Solanigon, Sorghella Trago, Triticum, Vitis, Vi- gna ou Zea.
26. Método, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 19 a 25, caracterizado pelo fato de que a parte da planta é uma folha, uma fruta, um vegetal ou uma flor.
27. Lipossomas sintéticos isolados caracterizados pelo fato de que compreendem dsRNA, sRNAs ou sRNA dúplex que têm como alvo um ou mais genes-alvo da Tabela 1 ou 2.
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