BR112020006294A2

BR112020006294A2 - composto com atividade inibidora da erk quinase e seu uso

Info

Publication number: BR112020006294A2
Application number: BR112020006294-4A
Authority: BR
Inventors: Lei Li; Meiyu Geng; Ying Huang; Jian Ding; Qiong Zhang; Min Huang; Shuai TANG; Ning Shen; Yi Chen
Original assignee: Shanghai Haihe Pharmaceutical Co., Ltd.; Shanghai Institute Of Materia Medica, Chinese Academy Of Sciences
Priority date: 2017-09-30
Filing date: 2018-09-29
Publication date: 2020-10-06
Also published as: ZA202001823B; JP7216105B2; MX2020003240A; CA3080623A1; SG11202002968UA; AU2018339722A1; AU2018339722B2; US20200247781A1; KR20200078510A; EP3702354A1; CN109863147A; JP2020536120A; US11465984B2; EP3702354A4; WO2019062949A1; EP3702354B1; NZ763197A; EA202090888A1; IL273655B1; IL273655A

Abstract

A invenção se refere a um composto de fórmula (I) em que as variáveis são como definidas no relatório descritivo. O composto é um inibidor de uma ERK quinase, por exemplo, ERK1 e/ou ERK2 quinase. A invenção também se refere ao uso do composto e a um método para preparar o composto, e a uma composição farmacêutica contendo o composto.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para: “COMPOSTO COM ATIVIDADE INIBIDORA DA ERK QUINASE E SEU USO” Campo da Invenção

[001] A invenção pertence ao campo da química farmacêutica. Especificamente, a invenção se refere a novos compostos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, e uma composição farmacêutica compreendendo os referidos compostos ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, que são úteis como moduladores da via da quinase regulada por sinal extracelular (ERK), em particular como inibidores da ERK quinases como ERK1 e/ou ERK2 quinase.

Antecedentes da Invenção

[002] A via Ras-Raf-MEK-ERK é uma via de sinalização da proteína quinase ativada por mitogênio (MAPK) e regula várias funções, como proliferação, diferenciação e apoptose das células. Mutações dessa via estão presentes em mais de um terço de todos os cânceres humanos. Portanto, as proteínas nodais nesse caminho se tornaram um ponto importante para o desenvolvimento de medicamentos anti-câncer direcionados nos últimos anos. Os inibidores específicos de B-Raf vemurafenib e dabrafenib foram aprovados pelo FDA dos EUA para o tratamento de melanoma em 2011 e 2013, respectivamente. O inibidor da MEK1/2 trametinib foi aprovado pelo FDA dos EUA para o tratamento do melanoma em 2013. A combinação de vemurafenib e o inibidor da MEK cobimetinib foi aprovada pelo FDA dos EUA para o tratamento do melanoma mutante B-Raf V600E ou V600K em 2015. O FDA dos EUA também aprovou a combinação de dabrafenibe e trametinibe para o tratamento de câncer de pulmão de células não pequenas mutantes B-Raf V600E em

2017. No entanto, existem limitações para a inibição desses nós da via a montante. Os tumores podem rapidamente se tornar resistentes aos inibidores de B-Raf e MEK, e os mecanismos da resistência incluem uma variedade de maneiras, como mutação pontual, alteração da forma multimérica de proteínas e alteração do comprimento da proteína da cadeia peptídica. Este é um grande desafio para o desenvolvimento da próxima geração de medicamentos contra Raf e MEK. Enquanto isso, como um nó-chave terminal do MAPK, o ERK ativado pode transmitir sinais extracelulares para o núcleo celular, promover a fosforilação de proteínas alvo citoplasmáticas ou regular a atividade de outras proteínas quinases, regulando assim a expressão gênica. É indubitavelmente importante no desenvolvimento de medicamentos antitumorais. Especialmente quando a maioria das terapias atuais de direcionamento a montante da MAPK eventualmente mostrar resistência a medicamentos, os inibidores de ERK provavelmente se tornarão um meio terapêutico mais eficaz por serem menos propensos a gerar resistência adquirida a medicamentos. Desde que o ERK foi descoberto na década de 1990, houve muitas pesquisas extensivas e intensivas sobre ele, mas até o momento nenhum inibidor do ERK foi aprovado para comercialização como produtos farmacêuticos. Atualmente, o inibidor altamente seletivo de ERK, o BVD-523 (Ulixertinib), no ensaio clínico de Fase 2, está no nível líder mundial. No início de 2017, é relatado que o BVD-523 na dose de 600 mg duas vezes ao dia mostrou segurança aceitável em pacientes e produziu uma eficácia duradoura em pacientes com melanoma com mutação NRAS e tumores sólidos com BRAF V600 e mutantes não V600 (incluindo melanoma glioblastoma multiforme, câncer metastático cerebral, adenocarcinoma da vesícula biliar e tumor de cabeça e gargalo). Esses dados apóiam ainda mais o desenvolvimento clínico dos inibidores da ERK.

[003] Em conclusão, pode-se esperar que os inibidores de ERK isolados ou em combinação tenham amplas perspectivas no campo antitumoral, e o desenvolvimento de um novo inibidor de ERK é urgentemente necessário nesse campo. O pedido de patente WO 2017/114510A1 divulga uma série de inibidores de ERK, mas os inventores do presente pedido descobriram que, no referido pedido de patente, alguns compostos, especialmente aqueles com estrutura de , tinham uma baixa estabilidade química e geram facilmente impurezas, especialmente sob condições alcalinas, cujas propriedades desses compostos trazem certas dificuldades ao desenvolvimento de medicamentos; e alguns compostos com a estrutura de , em que R é amino, carboxila ou amido etc., embora ativos em testes preliminares in vitro, apresentavam parâmetros farmacocinéticos insatisfatórios, o que traz certas dificuldades ao desenvolvimento do medicamento. Em resumo, uma avaliação abrangente (por exemplo, em termos de estabilidade química e/ou propriedades farmacocinéticas, etc.) revelou que alguns compostos divulgados no pedido de patente WO 2017/114510A1 mostraram dificuldades no desenvolvimento do medicamento. Portanto, é necessário procurar compostos altamente seletivos com atividade inibidora da ERK quinase, que sejam mais adequados para o desenvolvimento de medicamentos, por meio de avaliação abrangente.

Descrição da Invenção

[004] Através de muitas pesquisas experimentais, os inventores finalmente constataram que os compostos que possuem a estrutura do núcleo e em que R3 é halogênio, alquila não substituído, haloalquila, alquila deuterado ou similares tinham uma boa estabilidade química, além de melhor solubilidade e permeabilidade, todos mostraram inibição da atividade de ERK quinase nos ensaios enzimáticos e celulares, e tinha bons parâmetros farmacocinéticos; portanto, eram particularmente adequados para o desenvolvimento de fármacos.

Modalidades

[005] Em um aspecto, a invenção fornece novos inibidores de ERK quinase. Especificamente, a invenção fornece as seguintes modalidades.

[006] Modalidade 1. Um composto de fórmula (I), ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, (I) em que X1 é selecionado do grupo que consiste em CR9a e N; X2 é selecionado do grupo que consiste em CR9b e N; X3 é selecionado do grupo que consiste em CR9c e N; e no máximo um de X1, X2 e X3 é N;

Y1 e Y2 são cada um selecionados independentemente do grupo que consiste em CR9' e N;

R9a, R9b e R9c são cada um independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H, D, halo,

-OH, ciano, alquila opcionalmente substituído, alcoxi opcionalmente substituído, alquilcarbonila opcionalmente substituído, alcoxicarbonila opcionalmente substituído,

cicloalquila opcionalmente substituído, amino, mono- ou di-

(alquil)amino opcionalmente substituído e -CONRaRb;

R9' é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo,

cicloalquil opcionalmente substituído, amino, mono- ou di-

(alquil)amino e CONRaRb;

R1 é selecionado do grupo que consiste em H e D;

R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila opcionalmente substituído, cicloalquila opcionalmente substituído, heterociclila opcionalmente substituído, arila opcionalmente substituído e heteroarila opcionalmente substituído ou R2 junto com X1 forma heterociclila opcionalmente substituído;

R3 é selecionado do grupo que consiste em halo e alquila opcionalmente substituído;

R4 é selecionado do grupo que consiste em H, D,

alquila opcionalmente substituído, alcoxi opcionalmente substituído, -CO(CR10R11)mR12, -SO2(CR10R11)mR12,

-CONR13(CR10R11)mR12, -COO(CR10R11)mR12, -CR13R13'(CR10R11)mR12 e alquil C1-8 carbonila; em que m é 0, 1, 2 ou 3, e em que

R10 e R11 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D, halo, alquila opcionalmente substituído e alcoxi opcionalmente substituído; ou R10 e R11 são unidos para formar cicloalquila, cicloalquenila, arila,

heteroarila e heterociclila opcionalmente substituídos; e

R12 é cada um independentemente selecionado do grupo que consiste em H, alquila opcionalmente substituído,

cicloalquila opcionalmente substituído, heterociclila opcionalmente substituído, arila opcionalmente substituído e heteroarila opcionalmente substituído; e

R13 e R13' são cada um independentemente selecionados a partir do grupo que contém H e alquila opcionalmente substituído; ou R13 e R13' juntamente com o carbono adjacente forma cicloalquila, cicloalquenila e heterociclila opcionalmente substituídos;

R5 , R6 , R7 e R8 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em -H, -D, halo, -OH,

amino, ciano, alquila opcionalmente substituído, alcoxi opcionalmente substituído, -(CH2)0-3CONRaRb, -(CH2)0-3COOH,

cicloalquila opcionalmente substituído e heterociclila opcionalmente substituído; ou quaisquer dois de R5, R6, R7 e R8 , juntamente com o carbono adjacente, formam cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila e heterociclila opcionalmente substituídos; e Ra e Rb são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D e alquila opcionalmente substituído.

[007] Em que os substituintes opcionais são selecionados independentemente do grupo que consiste em deutério (D), halo, -OH, mercapto, ciano, -CD3, alquila C1-C6, alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila de 3 a 8 membros, arila, heterociclila com 3 a 8 membros, heteroarila, aril-alquila C1-C6, heteroaril-alquila C1-C6, haloalquila C1-C6, -O-alquila C1-C6, -O-alquenila C2-C6, -O-alquil C1-C6 fenila, alquil C1-C6 OH, alquila C1-C6 SH, alquila C1-C6 O-alquila C1-C6, O-haloalquila C1-C6, NH2, alquila C1-C6 NH2, N(alquila C1-C6)2, NH(alquila C1-C6), N(alquila C1-C6)(alquila C1-C6 fenila), NH(alquila C1-C6 fenila), nitro, C(O)-OH, C(O)O-alquila C1-C6, -CONRiRii (em que Ri e Rii são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D e alquila C1-C6), NHC(O)(alquila C1-C6), NHC(O)(fenila), N(alquila C1-C6)C(O)(alquil C1-C6), N(alquila C1-C6)C(O)(fenila), C(O)alquila C1-C6, -C(O)- heteroarila com 5 a 7 membros), C(O)alquila C1-C6 fenila, C(O)haloalquila C1-C6, OC(O)alquil C1-C6, -S(O)2-alquila

C1-C6, -S(O)-alquila C1-C6, -S(O)2-fenila, -S(O)2-haloalquila C1-C6, -S(O)2NH2, S(O)2NH(alquil C1-C6), S(O)2NH(fenila), -NHS(O)2(alquil C1-C6), -NHS(O)2(fenila) e NHS(O)2(haloalquila C1-C6), em que cada um dos referidos alquila, cicloalquila, fenila, arila, heterociclila e heteroarila é opcionalmente ainda substituído por um ou mais substituintes selecionados do grupo que consiste em halo, -OH, -NH2, cicloalquila, heterociclila de 3 a 8 membros, alquila C1-C4, haloalquila C1-C4, -O-alquila C1-C4, -alquila C1-C4 OH, -alquila C1-C4 O-alquila C1-C4, O- haloalquila C1-C4, ciano, nitro, -C(O)-OH, C(O)O-alquila C1-C6, CON(alquila C1-C6)2, CONH(alquila C1-C6), CONH2, NHC(O)(alquila C1-C6), NH(alquila C1-C6)C(O)(alquila C1-C6), -SO2(alquila C1-C6), -SO2(fenila), -SO2(haloalquila C1-C6), -SO2NH2, SO2NH(alquila C1-C6), SO2NH(fenila), -NHSO2(alquila C1-C6), -NHSO2(fenila) e NHSO2(haloalquila C1-C6), desde que o composto não seja 2-(2-cloropiridin-3-il) -1-(7-fluoro-2-(hidroximetil)-5-(2-(isopropilamino) pirimidin-4-il)indolin-1-il)etan-1-ona

[008] Modalidade 2. O composto de acordo com a Modalidade 1, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado por: X1 é selecionado do grupo que consiste em CR9a e N; X2 é selecionado do grupo que consiste em CR9b e N;

X3 é selecionado do grupo que consiste em CR9c e N; e no máximo um de X1, X2 e X3 é N;

R9a, R9b e R9c são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D, halo, -OH,

ciano, alquila C1-3 opcionalmente substituído, alcoxila C1-3 opcionalmente substituído, alquila C1-3 carbonila opcionalmente substituído, alquila C1-3 carbonila opcionalmente substituído, alcoxila C1-3 carbonila opcionalmente substituído, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituído, amino, mono- ou di-(alquila C1-3)amino opcionalmente substituído e -CONRaRb;

R9' é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo,

-OH, ciano, alquila C1-3 opcionalmente substituído, alcoxila

C1-3 opcionalmente substituído, alquila C1-3 carbonila opcionalmente substituído, alquila C1-3 carbonila opcionalmente substituído, alcoxila C1-3 carbonila opcionalmente substituído, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituído, amino, mono- ou di-(alquila C1-3)amino opcionalmente substituído e CONRaRb;

R1 é selecionado do grupo que consiste em H e D;

R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-8 opcionalmente substituído, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituído, heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituído, arila de 6 a 12 membros opcionalmente substituído e heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituído, como heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituído, como heteroaril de 5 a 7 membros, ou R2 em conjunto com X1 forma heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituído;

R3 é selecionado do grupo que consiste em halo e alquila C1-8 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D e halo;

R4 é selecionado do grupo que consiste em H, D,

alquila C1-8 opcionalmente substituído, alcoxila C1-8 opcionalmente substituído, -CO(CR10R11)mR12, -SO2(CR10R11)mR12,

-CONR13(CR10R11)mR12, -COO(CR10R11)mR12, -CR13R13'(CR10R11)mR12 e alquila C1-8 carbonila; em que m é 0, 1, 2 ou 3, e em que

R10 e R11 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D, halo, alquila C1-8 opcionalmente substituído e alcoxila C1-8 opcionalmente substituído, ou

R10 e R11 são unidos para formar cicloalquila,

cicloalquenila, arila, heteroarila e heterociclila; e

R12 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, alquila C1-3 opcionalmente substituído, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituído,

heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituído,

arila de 6 a 12 membros opcionalmente substituído e arila de 6 a 12 membros opcionalmente substituído e heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituído, como heteroarilo com 5 a 7 membros; e R13 e R13' são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila C1-3 opcionalmente substituído; ou R13 e R13' juntamente com o carbono adjacente formam cicloalquila C3-8 opcionalmente substituído, cicloalquenila C4-8 e heterociclila C5-8; R5 , R6 , R7 e R8 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em -H, -D, halo, -OH, amino, ciano, alquila C1-3 opcionalmente substituído, alcoxila C1-3 opcionalmente substituído, -(CH2)0-3CONRaRb, -(CH2)0-3COOH, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituído e heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituído; ou quaisquer dois de R5, R6, R7 e R8, juntamente com o carbono adjacente, formam cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila e heterociclila opcionalmente substituídos; e Ra e Rb são cada um selecionados independentemente do grupo que consiste em H, D e alquila C1-3 opcionalmente substituído.

[009] Modalidade 3. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 a 2, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado por: o composto ser representado pela fórmula Ia, Ib, Ic ou Id: , , , R9a, R9b e R9c são cada um independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H, D, alquila C1-3, haloalquila C1-3, alcoxila C1-3, -OH, ciano, halo, amino, mono- ou di-(alquil C1-3)amino, alquil C1-3 carbonila, alcoxil C1-3 carbonila e cicloalquila C3-8; de um modo preferido, R9a, R9b e R9c são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D e alquila C1-3; de um modo mais preferido, R9a, R9b e R9c são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H e D; e outras variáveis são como definidas na Modalidade 1 ou

2.

[0010] Modalidade 4. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 a 3, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado por: Y1 é CR9', Y2 é CR9' e em que R9' é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo e alquila C1-3; de um modo mais preferido, Y1 é CR9', Y2 é CR9' e em que R9' é H, D, F ou metila; ou Y1 é CR9', Y2 é N e em que R9' é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo e alquila C1-3; de um modo mais preferido, Y1 é CR9', Y2 é N e em que R9' é H, D, F ou metila; ou Y1 é N, Y2 é CR9' e em que R9' é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo e alquila C1-3; de um modo mais preferido, Y1 é N, Y2 é CR9' e em que R9' é H, D, F ou metila; ou Y1 é N e Y2 é N.

[0011] Modalidade 5. O composto de acordo com a Modalidade 1, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado por: o composto ser representado pela fórmula Ie: Ie em que as variáveis são como definidas na reivindicação 1.

[0012] Modalidade 6. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1, 2 e 5, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado por: X1 ser selecionado do grupo que consiste em CR9a e N, em que R9a é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo, -OH, ciano, alquila C1-3, haloalquila C1-3, alcoxila C1-3, alquil C1-3 carbonila, alcoxil C1-3 carbonila, cicloalquila C3-8, amino e mono- ou di-(alquil C1-3)amino; de um modo preferido, X1 é selecionado do grupo que consiste em CR9a e N, em que R9a é selecionado do grupo que consiste em H, D e alquila C1-3; de um modo mais preferido, X1 é selecionado do grupo que consiste em CH, CD e N.

[0013] Modalidade 7. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 e 5, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que: R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-6 opcionalmente substituído, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituído, heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituído e heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituído, como heteroaril de 5 a 7 membros, em que o substituinte opcional é um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, hidroxila, -CD3, alquila C1-6 e hidroxialquila C1-6, de um modo preferido é um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, hidroxil, -CD3, -CH3 e -CH2OH; ou R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-6 opcionalmente substituído com um ou mais hidroxila, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituído com um ou mais hidroxila, heterociclila de 3 a 8 membros e heteroarila de 5 a 12 membros, como heteroarila de 5 a 7 membros opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir de -CD3, alquila C1-6 e hidroxialquila C1-6; ou R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila

HN C1-4, , , , , , , N e , que são opcionalmente substituídos por um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, hidroxila, alquila C1-4, -CD3 e hidroxialquila C1-4, de um modo preferido com um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, hidroxil, -CH3, -CD3 e -CH2OH; ou R2 é selecionado do grupo que consiste em isopropila, CF2H , OH , OH , OH , , OH , OH , O, O ,

N N

N HO OH N , HO , O N , O N, NO e NO ; ou R2 é selecionado do grupo que consiste em e ; ou R2 é selecionado do grupo que consiste em OH e D3C N N .

[0014] Modalidade 8. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 a 7, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado por: R3 ser selecionado do grupo constituído por halo e alquila C1-6 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D e halo; ou R3 é selecionado do grupo que consiste em halo e alquil C1-3 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D e halo; ou R3 é selecionado do grupo que consiste em halo e alquila C1-6; ou R3 é selecionado do grupo que consiste em fluoro, cloro, bromo, iodo, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH2CH3, -CF3, -CHF2, CF3CH2- e CD3-; ou R3 é selecionado do grupo que consiste em flúor, cloro e -CH3; ou R3 é flúor.

[0015] Modalidade 9. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 a 8, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que: R4 é selecionado do grupo que consiste em -CO(CR10R11)mR12 e -CR13R13'(CR10R11)mR12; em que m é 0, 1, 2 ou 3, e em que R10 e R11 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D e alquila C1-4 opcionalmente substituído com hidroxila; R12 é cada um independentemente selecionado do grupo que consiste em arila com 6 a 12 membros opcionalmente substituído e heteroarila com 5 a 12 membros opcionalmente substituído, como heteroarila com 5 a 7 membros; R13 e R13' são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, alquila C1-3 e haloalquila C1-3.

[0016] Modalidade 10. O composto de acordo com a Modalidade 9, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que: R12 é cada um independentemente selecionado do grupo consistindo em aril de 6 a 12 membros opcionalmente substituído e heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituído, como heteroarila de 5 a 7 membros, em que o substituinte opcional é um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, alquil C1-4, ciano e heterociclil C3-8-(CH2)0-4- (por exemplo, morfolinila, como morfolino, piperazinila, tetra- hidropiranila, como tetra-hidropiran-4-ila, morfolinilmetila, como morfolinometila ou piperazinilmetila); ou R12 é selecionado do grupo que consiste em fenila opcionalmente substituído e piridinila opcionalmente substituído, como piridin-3-ila, em que o substituinte opcional é um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, alquil C1-4 (por exemplo, metila ou etila), ciano e heterociclil

C3-8-(CH2)0-4- (por exemplo, morfolinila, como morfolino,

piperazinila, tetra-hidropiranila, como tetra-hidropiran-4-

ila, morfolinilmetila, como morfolinometila ou piperazinilmetila);

ou R12 é selecionado do grupo que consiste em

, em que Rc é selecionado do grupo que consiste em halo como flúor ou cloro, alquila C1-4 como metila,

, , e ;

, em que Rd é selecionado do grupo que consiste em H, alquila C1-4, como metila ou etila e ;

, em que Re é selecionado do grupo que consiste em halo, como flúor e cloro, e p é 1 ou 2; e

, em que Rf é selecionado do grupo que consiste em , , e .

[0017] Modalidade 11. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 a 8, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado por: R4 ser selecionado do grupo constituído por -CO(CR10R11)mR12, em que m é 0, 1, 2 ou 3, e em que R10 e R11 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H; e R12 é selecionado do grupo que consiste em

[0018] Modalidade 12. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 a 8, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado por: R4 ser selecionado do grupo constituído por -CO(CR10R11)mR12, em que m é 0, 1, 2 ou 3, e em que R10 e R11 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H; R12 é selecionado do grupo que consiste em 2-cianofenila, 5-cloro-2-fluorofenila, 2-cloro- 3-fluorofenila, 2-cloro-4-fluorofenila, 2-cloro-5- fluorofenila, 2,5-difluorofenila, 3-cloropiridin-2-ila, 6- cloropiridin-2-ila, 3-cloropiridin-4-ila ou 4-cloropiridin- 3-ila.

[0019] Modalidade 13. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 a 12, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que: R5 , R6 , R7 e R8 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em -H, -D, halo, -OH, amino, ciano, alquila C1-6 opcionalmente substituído, alcoxila C1-6 opcionalmente substituído, -(CH2)0-3CONRaRb, -(CH2)0-3COOH, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituído e heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituído, em que o substituinte opcional é um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, -OH, O-alquila C1-6 e NH2 e em que Ra e Rb são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D e alquila C1-3; ou R5 , R6 , R7 e R8 são cada um independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em H e alquila C1-6 opcionalmente substituído por hidroxila ou O-alquila C1-6;

ou R5 e R6 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila C1-6; e R7 e R8 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila C1-6 opcionalmente substituído com hidroxila ou O-alquila C1-6; ou R5 , R6 , R7 e R8 são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em -H, -CH3 e -CH2OH; ou R5, R6 e R7 são H e R8 é H, -CH3 ou -CH2OH.

[0020] Modalidade 14. Um composto selecionado do grupo que consiste nos Exemplos P1 a P20, P23 a P25, P28 a P51, P53 a P64:

N F HN N

O P1 N

OH N Cl P1 P2 P3

P4 P5 P6 P7

N F

HN O P8

N

N OH Cl P8

N F HN

O P9

N N

N N P9 Cl

P10

P11

P12

P13

P14

P15

P16

N F HN N

O P17

N N

N P17 F P18 P19 P20 P23 P24

P25

P28

P29

P30

P31

P32

P33

P34

N F HN

O P35 N N

N N Cl

HO P35 P36 P37 P38 P39

P40 e P41

P42 e P43

P44

P45

P46

P47

P48

P49

P50

P51

P53

(racemato)

P54

P55

P56

P57

P58

P59

P60

P61 P62 e P63 P64 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0021] Em outro aspecto, a invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo os novos compostos acima, usos dos novos compostos acima e métodos para tratamento usando os novos compostos acima.

[0022] Modalidade 15. O composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso como medicamento.

[0023] Modalidade 16. Uma composição farmacêutica, compreendendo o composto de acordo com qualquer uma das

Modalidades 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e opcionalmente um veículo farmaceuticamente aceitável.

[0024] Modalidade 17. Uso do composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, na fabricação de um medicamento para prevenção e/ou tratamento de uma doença relacionada a uma ERK quinase, ou utilização do composto de acordo com qualquer uma das Modalidades 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso como um produto como um inibidor da ERK quinase.

[0025] Modalidade 18. Método não terapêutico de inibir uma atividade da ERK quinase, compreendendo o contato de uma quantidade eficaz do composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com uma ERK quinase, inibindo assim a ERK quinase.

[0026] Em outro aspecto, a invenção fornece intermediários (por exemplo, intermediários 1 a 82, particularmente intermediário 25, aqui divulgados) e métodos (por exemplo, os métodos mostrados nas Figuras 1 a 4, particularmente o método mostrado na Figura 3) para preparar o novos compostos acima.

[0027] Modalidade 19. O composto (4-(7- fluoroindolin-5-il)piridin-2-il)(1-metil-1H-pirazol-5-il) carbamato de t-butila representado pela fórmula:

N

F BocN

N NH

N ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0028] Modalidade 20. Um método para preparar o composto de fórmula (I) de acordo com a Modalidade 1, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, o referido composto de fórmula (I) é o composto de fórmula C3:

N R3 HN X1

O R2

N (CR10R11)mR12 X1 = N ou C; X1 = N C; C3 C3 em que X1, R2, R3, R10, R11, R12 e m são como definidos na Modalidade 1, compreendendo as etapas de: (a) submeter o composto de fórmula C1

N R3 Boc/HN X1 R2

NH X1 = XN ou C; 1 = N C; C1C1

O HO (CR10R11)mR12 e o composto à reação de acoplamento de amida, para dar o composto da fórmula C2,

N R3 Boc/HN X1

O R2

N (CR1 0R11) X11 == N ou C;C; mR12 C2 ; e (b) quando o composto de fórmula C2 é protegido por Boc, desproteger o mesmo, para dar o composto de fórmula C3,

N R3 HN X1

O R2

N (CR10R11)mR12 X1X= 1=NNouC; C; C3 .

[0029] Modalidade 21. O método de acordo com a Modalidade 20, em que a reação de acoplamento de amida é realizada na presença de um agente de condensação e uma base em um solvente inerte.

[0030] Modalidade 22. O método de acordo com a Modalidade 20, em que a desproteção é realizada na presença de um ácido em um solvente inerte.

[0031] Modalidade 23. O método de acordo com a Modalidade 21 ou 22, em que o solvente inerte é selecionado do grupo que consiste em acetato de etila, tetra- hidrofurano, metiltetra-hidrofurano, acetonitrila, dimetilsulfóxido, N,N-dimetilformamida, diclorometano, 1,2- dicloroetano, N-metil-2-pirolidona, ou uma combinação dos mesmos.

[0032] Modalidade 24. O método de acordo com a Modalidade 21, em que o agente de condensação é um ou mais selecionados do grupo que consiste em 1- hidroxilbenzotriazol (HOBT), 1-hidroxil-7-azobenzotriazol (HOAT), benzotriazol-1-il-oxitripirrolidino- hexafluorofosfato de fosfônio (PyBOP), benzotriazol-1- iloxitris(dimetilamino)hexafluorofosfato de fosfônio (BOP), 1,1-carbonildi-imidazol (CDI), anidrido de 1- propilfosfônico (T3P), 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) (EDC · HCl), N,N-diciclo-hexilcarbodiimida (DCC), anidrido acético, cloreto de acetila, cloreto de oxalila, O-(7- azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-hexafluorofosfato (HATU) e hexafluorofosfato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'- tetrametilurônio (HBTU).

[0033] Modalidade 25. O método de acordo com a Modalidade 21, em que a base é uma ou mais selecionadas do grupo que consiste em trietilamina, DIPEA, piridina, 2,4- dimetilpiridina, NaOH, KOH, LiOH, Na2CO3, K2CO3, NaHCO3, Cs2CO3, Na3PO4 ou K3PO4.

[0034] Modalidade 26. O método de acordo com a Modalidade 20, em que a reação de acoplamento de amida é realizada a uma temperatura desde a temperatura ambiente até o refluxo por 0,5 a 24 h.

[0035] Modalidade 27. O método de acordo com a Modalidade 22, em que o ácido é um ou mais selecionados do grupo que consiste em ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido trifluoroacético, ácido acético, ácido fórmico e ácido fosfórico.

[0036] Modalidade 28. O método de acordo com a Modalidade 20, em que a desprotecção é realizada a uma temperatura de -10°C a 80°C por 0,5 a 24 h.

Definições

[0037] Os termos e símbolos a seguir usados no presente pedido têm o significado descrito abaixo, a menos que especificado de outra forma no contexto.

[0038] Um traço (“-”) que não está entre duas letras ou símbolos indica um ponto de ligação de um substituinte. Por exemplo, -O(alquila C1-3) se refere a alquila C1-3 que está ligado ao restante da molécula através de um átomo de oxigênio. No entanto, quando o ponto de ligação de um substituinte é aparente para as pessoas versadas na técnica, por exemplo, para um substituinte halogênio, o traço "-" pode ser omitido.

[0039] Quando um grupo carrega uma linha ondulada “ ”, a linha ondulada indica o ponto de ligação do grupo ao restante da molécula.

[0040] Como usado aqui, o termo "alquila" se refere a um radical hidrocarboneto monovalente saturado de cadeia linear ou ramificada com 1 a 8 átomos de carbono, como 1 a 6 átomos de carbono, como 1 a 4 átomos de carbono, como 1, 2 ou 3 átomos de carbono. Por exemplo, "alquila C1-8" se refere a alquila com 1 a 8 átomos de carbono. Da mesma forma, "alquila C1-4" se refere a alquila com 1 a 4 átomos de carbono e "alquila C1-3" se refere a alquila com 1 a 3 átomos de carbono. Exemplos de alquila incluem, mas não estão limitados a, metila ("Me"), etila ("Et"), n-propila ("n-Pr"), isoproila ("i-Pr"), n-butila ("n-Bu"), isobutila ("i-Bu"), sec-butila ("s-Bu"), t-butil ("t-Bu"), etc. Se o termo "alquila" é usado sozinho ou como parte de outro grupo como haloalquila, alcoxila etc., esta definição se aplica.

[0041] Como usado aqui, o termo "alquenila" se refere a um radical hidrocarboneto monovalente de cadeia linear ou ramificada com 2 a 8 átomos de carbono, como 2 a

6 átomos de carbono, por exemplo 2, 3 ou 4 átomos de carbono, e contendo um ou mais, por exemplo 1, 2 ou 3, ligações duplas carbono-carbono (C=C). Por exemplo, "alquenila C2-6" indica alquenila com 2 a 6 átomos de carbono e contendo 1 ou 2, de um modo preferido 1, ligações duplas carbono-carbono. Da mesma forma, "alquenila C2-3" denota alquenila tendo de 2 a 3 átomos de carbono e contendo 1 ligação dupla carbono-carbono. Exemplos de alquenila incluem, mas não estão limitados a, etenila, 2- propenila e 2-butenila.

[0042] Como usado aqui, o termo "alquinila" se refere a um radical hidrocarboneto monovalente de cadeia linear ou ramificada com 2 a 8 átomos de carbono, como 2 a 6 átomos de carbono, como 2 a 4 átomos de carbono, e contendo um ou mais, por exemplo 1, 2 ou 3, ligações triplas carbono-carbono (C≡C). Por exemplo, "alquinila C2-6" se refere a alquinila tendo de 2 a 6 átomos de carbono e contendo 1 ou 2, de um modo preferido 1, ligações triplas carbono-carbono. Da mesma forma, "alquinila C2-3" se refere a alquinila com 2 a 3 átomos de carbono e contendo 1 ligação tripla carbono-carbono. Exemplos de alquinila incluem, mas não estão limitados a, etinila, 2-propinila e 2-butinila.

[0043] Como usado aqui, o termo "alcoxila" se refere ao grupo -O-alquila, em que alquila é como definido acima. Por exemplo, "alcoxila C1-8" se refere a -O-alquila C1-8, isto é, alcoxila com 1 a 8 átomos de carbono. Da mesma forma, "alcoxila C1-3" se refere a -O-alquila C1-3, isto é, alcoxila com 1 a 3 átomos de carbono. Exemplos de alcoxila incluem, mas não estão limitados a, metoxi, etoxi, n- propoxi, isopropoxi, n-butoxi, isobutoxi, t-butoxi, pentoxi e hexoxi etc. Se o termo "alcoxila" é usado sozinho ou como parte de outro grupo, essa definição se aplica.

[0044] Como usado aqui, o termo "halo" ou "halogênio" se refere a flúor (F), cloro (Cl), bromo (Br) e iodo (I), de um modo preferido flúor e cloro, de um modo mais preferido flúor.

[0045] Como usado aqui, o termo "haloalquila" se refere a alquila como aqui definido, em que um ou mais átomos de hidrogênio, por exemplo 1, 2, 3, 4 ou 5 átomos de hidrogênio, são substituídos por halogênio e quando mais de um átomo de hidrogênio é substituído por um átomo de halogênio, os referidos átomos de halogênio podem ser iguais ou diferentes um do outro. Exemplos de haloalquila incluem, mas não estão limitados a, -CF3, -CHF2 e -CH2CF3 etc.

[0046] Como usado aqui, o termo "hidroxila" se refere ao grupo –OH.

[0047] Como usado aqui, o termo "mercapto" se refere ao grupo –SH.

[0048] Como usado aqui, o termo "ciano" se refere ao grupo -CN.

[0049] Como usado aqui, o termo "carboxila" se refere ao grupo –C(O)-OH, e também pode ser representado por -COOH.

[0050] Como usado aqui, o termo "carbonila" se refere ao grupo –C(O)- e também pode ser representado por -CO-.

[0051] Como usado aqui, o termo "hidrogênio" se refere ao grupo -H.

[0052] Como usado aqui, o símbolo "D" se refere ao deutério.

[0053] Como usado aqui, o termo "amino" se refere ao grupo –NH2.

[0054] Como usado aqui, o termo "alquilamino" ou "mono-alquilamino" se refere ao grupo alquil-NH-, em que alquila é como aqui definido.

[0055] Como usado aqui, o termo "di-alquilamino" se refere ao grupo (alquil)2-N-, em que alquila é como aqui definido.

[0056] Como usado aqui, o termo "alquilcarbonila" se refere a alquila ligado a outro grupo através de carbonila, isto é, alquil-C(O)-, em que alquila é como aqui definido.

[0057] Como usado aqui, o termo "alcoxicarbonila" se refere a alcoxila ligado a outro grupo através de carbonila, isto é, alcoxil-C(O)-, em que alcoxila é como aqui definido.

[0058] Como usado aqui, o termo "oxo" se refere ao grupo =O.

[0059] Como usado aqui, o termo "nitro" se refere ao grupo –NO2.

[0060] Como usado aqui, o termo "cicloalquila" se refere a um radical hidrocarboneto monocíclico ou bicíclico saturado, monovalente, com 3 a 12 átomos de carbono no anel, como de 3 a 8 átomos de carbono no anel, como de 3 a 6 átomos de carbono no anel. Por exemplo, "cicloalquila C3-8" se refere a cicloalquila com 3 a 8 átomos de carbono no anel. Da mesma forma, "cicloalquila C3-6" se refere a cicloalquila com 3 a 6 átomos de carbono no anel. Exemplos de cicloalquila incluem, mas não estão limitados a, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila e ciclo-octila.

[0061] Como usado aqui, o termo "cicloalquenila" se refere a cicloalquila como aqui definido, contendo uma ou mais ligações duplas, como 1, 2, 3 ou 4 ligações duplas, cujo anel não é aromático. Por exemplo, "cicloalquenila C3-8" se refere a cicloalquenila com 3 a 8 átomos de carbono no anel. Da mesma forma, "cicloalquenila C3-6" se refere a cicloalquenila com 3 a 6 átomos de carbono no anel.

Exemplos de cicloalquenila incluem, mas não se limitam a ciclopropenila, ciclobutenila, ciclopentenila, ciclo- hexenila, ciclo-heptenila e ciclo-octenila.

[0062] Como usado aqui, o termo "heterociclila" ou "heterocíclico" ou "heterociclo" se refere a anéis não aromáticos monocíclicos, bicíclicos ou tricíclicos, saturados e parcialmente insaturados, com 3 a 20 átomos no anel, como de 3 a 12 átomos no anel, como de 3 a 8 átomos no anel, como de 3 a 6 átomos no anel, que contêm pelo menos um átomo de carbono além de 1 a 4, como 1 a 3, como 1 ou 2, como 1, heteroátomos selecionados do grupo que consiste em O, S e N. Em um exemplo, o referido “heterociclila” ou “heterocíclico” ou “heterociclo” é monocíclico e possui de 3 a 8 átomos no anel, como 3, 4, 5 ou 6 átomos no anel, que contêm pelo menos um átomo de carbono além de 1 a 4, como 1 a 3, como 1 ou 2, como 1, heteroátomos selecionados do grupo que consiste em O, S e N. Em um exemplo, o referido "heterociclila" ou "heterocíclico" ou "heterociclo" contém 0, 1, 2 ou 3 ligações duplas. Qualquer heteroátomo de nitrogênio ou enxofre pode ser opcionalmente oxidado (por exemplo, NO, SO, SO2) e qualquer heteroátomo de nitrogênio pode ser opcionalmente quaternizado (por exemplo, [NR4]+Cl-, [NR4]+OH-). O heterociclila possuindo de 3 a 8 átomos no anel também é referido simplesmente como heterociclila de 3 a 8 membros, e heterociclila possuindo outros números de átomos de carbono pode ser igualmente abreviado.

Exemplos de heterociclila incluem, entre outros, oxiranila,

aziridinila, ti-iranila, azetidinila, oxetanila, tietanila,

1,2-ditietanila, 1,3-ditietanila, pirrolidinila

(pirrolidin-1-ila, pirrolidin-2-ila, pirrolidina-3-ila),

di-hidro-1H-pirrolila, di-hidrofuranila, tetra-

hidrofuranila (por exemplo, tetra-hidrofuran-2-ila, tetra-

hidrofuran-3-ila, tetra-hidrofuran-4-ila), di-hidrotienila,

tetra-hidrotienila, imidazolidinila, piperidinila, piperin

-1-ila, piperazin-2-ila, piperazin-3-ila, piperazin-4-ila),

isoquinolinila, tetra-hidroisoquinolinila, morfolinila (por exemplo, morfolino (isto é, morfolin-1-ila), morfolin-2-

ila, morfolin-3-ila), tiomorfolinila, 1,1-dioxo-

tiomorfolinila, di-hidropiranila, tetra-hidropiranila (por exemplo, tetra-hidropiran-2-ila, tetra-hidropiran-3-ila,

tetra-hidropiran-4-ila), hexa-hidrotiopiranila, hexa-

hidropirimidila, oxazitanila, oxazitanila, oxazitanila,

homopiperazinila, homopiperidinila, azepanila, oxepanila,

tiepanila, azepinila, oxazepanila, diazepanila, 1,4-

diazepanila, diazepinila, tiazepinila, tiazepanila, tetra-

hidrotiopiranila, oxazolidinila, tiazolidinila,

isotiazolidinila, 1,1-dioxoisotiazolidonila,

oxazolidinonila, imidazolidinonila, 4,5,6,7-tetra-hidro

[2H]indazolila, tetra-hidrobenzimidazolila, 4,5,6,7-tetra-

hidrobenzo[d]-1,6-di-hidroimidazo[4,5-d]pirrolo[2,3-b]

piridinila, tiazinila, oxazinila, tiadiazinila,

oxadiazinila, ditiazinila, dioxazinila, oxatiazinila,

tiatriazinila, oxatrazinila, ditiadiazinidila,

imidazolinila, tidiazinilididimidina, pirrolinila, 2-

pirrolinila, 3-pirrolinila, indolinila, tiopiranila, 2H-

piranila, 4H-piranila, dioxanila, 1,3-dioxolanila,

pirazolinila, pirazolidinila, ditianila, ditiolanila,

pirimidinonila, pirimidindionila, pirimidin-2,4-dionila,

piperazinonila, piperazindionila, pirazolidinila,

imidazolinila, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanila, 3,6-

diazabiciclo[3.1.1]heptanila, 6-azabiciclo[3.1.1]heptanila,

3-azabiciclo[3.1.1]heptanila, 3-azabiciclo[4.1.0]heptanila,

azabiciclo[2.2.2]hexanila, 2-azabiciclo[3.2.1]octanila, 8-

azabiciclo[3.2.1]octanila, 2-azabiciclo[2.2.2]octanila, 8-

azabiciclo[2.2.2]octanila, 7-oxabiciclo[2.2.1]heptanila,

azaspiro[3.5]nonanila, azaspiro[2.5]octanila,

azaspiro[4.5]decanila, 1-azaspiro[4.5]decan-2-onila,

azaspiro[5.5]undecanila, tetra-hidroindolila, octa-

hidroindolila, tetra-hidroisoindolila, tetra-

hidroindazolila, 1,1-dioxo-hexa-hidrotiopiranila.

Exemplos de heterociclila de 5 membros contendo átomo de enxofre ou oxigênio e de 1 a 3 átomos de nitrogênio são: tiazolila,

incluindo N-óxido de tiazol-2-ila e tiazol-2-ila;

tiadiazolila, incluindo 1,3,4-tiadiazol-5-ila e 1,2,4- tiadiazol-5-ila; oxazolila, como oxazol-2-ila; e oxadiazolila, como 1,3,4-oxadiazol-5-ila e 1,2,4-oxadiazol- 5-ila. Exemplos de heterociclila de 5 membros contendo de 2 a 4 átomos de nitrogênio incluem: imidazolila, como imidazol-2-ila; triazolila, como 1,3,4-triazol-5-ila, 1,2,3-triazol-5-ila, 1,2,4-triazol-5-ila; e tetrazolila, como 1H-tetrazol-5-ila. Exemplos de heterociclila de 5 membros benzo-fundidos são: benzoxazol-2-ila, benzotiazol- 2-ila e benzimidazol-2-ila. Exemplos de heterociclila de 6 membros contendo de 1 a 3 átomos de nitrogênio e opcionalmente átomos de enxofre ou oxigênio são: piridinila, como piridin-2-ila, piridin-3-ila e piridin-4- ila; pirimidinila, como pirimidin-2-ila e pirimidin-4-ila; triazinila, como 1,3,4-triazin-2-ila e 1,3,5-triazin-4-ila; piridazinila, especialmente piridazin-3-ila; e pirazinila.

Outros exemplos de heterocíclico são N-óxido de piridina e N-óxido de piridazina, bem como piridinila, pirimidin-2- ila, pirimidin-4-ila, piridazinila e 1,3,4-triazin-2-ila.

[0063] Como usado aqui, o termo "hidroxialquila" se refere a alquila substituído por hidroxila, isto é, -alquil-OH, em que alquila é como aqui definido. Exemplos do referido grupo incluem, mas não se limitam a hidroximetila, hidroxietila (como 2-hidroxietila, 1- hidroxietila), hidroxipropila (como 1-hidroxiprop-2-ila, 1-

hidroxiprop-3-ila, 1-hidroxiprop-1-ila etc.), hidroxibutila (como 4-hidroxibut-2-ila etc.).

[0064] Como usado aqui, o termo "arila" se refere a um radical hidrocarboneto carbocíclico que consiste em um anel ou anéis fundidos, em que pelo menos um anel é aromático e tendo de 6 a 14 átomos de carbono no anel, como de 6 a 12 átomos de carbono no anel, como de 6 a 10 átomos de carbono no anel. Exemplos de arila incluem, mas não se limitam a fenila, naftila, 1,2,3,4-tetra-hidronaftila, indenila, de um modo preferido fenila e naftila.

[0065] Como usado aqui, o termo "heteroarila" se refere a: - um radical de hidrocarboneto aromático monocíclico com 5, 6 ou 7 átomos no anel, como tendo 6 átomos no anel, e contendo um ou mais, como 1, 2 ou 3, como 1 ou 2, heteroátomos no anel selecionados independentemente do grupo que consiste em N, O e S (por exemplo, N) no anel, com os átomos restantes do anel sendo átomos de carbono; e - um radical de hidrocarboneto aromático bicíclico com 8 a 12 átomos no anel, como 9 ou 10 átomos no anel, e contendo um ou mais, como 1, 2, 3 ou 4, como 1 ou 2, heteroátomos no anel independentemente do grupo que consiste em N, O e S (por exemplo, N) nos anéis, com os átomos restantes do anel sendo átomos de carbono, em que pelo menos um dos anéis é aromático.

[0066] Quando o número total de átomos de S e O no grupo heteroarila excede 1, esses heteroátomos não são adjacentes um ao outro.

[0067] O grupo heteroarila também inclui aqueles em que o heteroátomo N ocorre como N-óxido, como N-óxidos de pirimidinila.

[0068] Em algumas modalidades, o heteroarila acima, no qual o(s) heteroátomo(s) no(s) anel(is) é átomo(s) N é definido aqui como "heteroarila contendo nitrogênio". O heteroarila contendo nitrogênio também inclui aqueles em que o heteroátomo N ocorre como N-óxido, tal como N-óxidos de piridila. Por exemplo, o heteroarila contendo nitrogênio é um heteroarila monocíclico com 5 átomos no anel e contendo 1 ou 2 heteroátomos N no anel, com os demais átomos no anel sendo átomos de carbono; e como outro exemplo, o heteroarila contendo nitrogênio é um heteroarila monocíclico com 6 átomos no anel e contendo 1, 2 ou 3 heteroátomos no anel, com os átomos restantes no anel sendo átomos de carbono.

[0069] Exemplos de heteroarila incluem, mas não estão limitados a, piridila (como piridin-2-ila, piridin-3- ila, piridin-4-ila, piridin-5-ila, piridin-6-ila), N-óxido de piridila; pirazinila; pirimidinila; pirazolila (como pirazol-5-ila, pirazol-1-ila, pirazol-2-ila, pirazol-3-ila, pirazol-4-ila); imidazolila; oxazolila; isoxazolila;

tiazolila; isotiazolila; tiadiazolila; tetrazolila; triazolila; tienila; furila; piranila; pirrolila; piridazinila; benzo[d]tiazolila; bezodioxolila, como benzo[d][1,3]dioxolila; benzoxazolila, como benzo[d]oxazolila; imidazopiridila, como imidazo[1,2- a]piridila; triazolopiridila, como [1,2,4]triazolo[4,3- a]piridila e [1,2,4]triazolo[1,5-a]piridila; indazolila, 2H-indazolila; pirrolopirimidinila, como pirrolo[3,4- d]pirimidinila, 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidinila; pirazolopirimidinila, como pirazolo[1,5-a]pirimidinila; tetrazolopiridila, como tetrazolo[1,5-a]piridila; benzotienila; benzofurila; benzoimidazolinila; indolila; indolinila; purinila, como 9H-purinila e 7H-purinila; quinolinila; isoquinolinila; 1,2,3,4-tetra- hidroquinolinila; e 5,6,7,8-tetra-hidroisoquinolinila.

[0070] Exemplos do heteroarila contendo nitrogênio incluem, mas não estão limitados a, pirrolila; pirazolila; imidazolila; piridila; pirazinila; pirimidinila, N-óxido de pirimidinila; piridazinila; pirrolopirimidinila, como pirrolo[3,4-d]pirimidinila, 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidinila; purinila, como 9H-purinila e 7H-purinila; quinolinila; indolila; e indazolila.

[0071] Como usado aqui, "arila" ou "aromático" segue a regra de Hückel, em que o número de elétrons p é igual a 4n + 2, em que n é zero ou qualquer número inteiro positivo até 6.

[0072] Como usado aqui, o termo "opcional" ou "opcionalmente" significa que o padrão, evento ou circunstância de substituição descrito posteriormente pode ou não ocorrer, e que a descrição inclui casos em que o padrão de substituição ocorre e casos em que não ocorre.

Por exemplo, "alquila opcionalmente substituído" abrange "alquila não substituído" e "alquila substituído", conforme aqui definido. Será entendido pelas pessoas versadas na técnica, em relação a qualquer grupo que contenha um ou mais substituintes, que esses grupos não se destinam a introduzir nenhum padrão de substituição ou substituição que seja estereicamente impraticável, quimicamente incorreto, sinteticamente inviável e/ou inerentemente instável.

[0073] Como usado neste documento, o termo "substituído" ou "substituído com ……" significa que um ou mais átomos de hidrogênio no átomo ou grupo designado são substituídos por um ou mais substituintes selecionados no grupo indicado de substituintes, desde que a valêncianormal do átomo designado não seja excedida. Quando um substituinte é oxo (isto é, =O), dois hidrogênios em um único átomo são substituídos pelo oxo. Combinações de substituintes e/ou variáveis são permitidas apenas se tais combinações resultarem em um composto quimicamente correto e estável.

Um composto quimicamente correto e estável significa um composto que é suficientemente robusto para sobreviver ao isolamento de uma mistura de reação para a identificação da estrutura química do composto e subsequentemente para ser preparado em uma formulação com pelo menos uma utilidade prática.

Por exemplo, nas circunstâncias em que os substituintes não são indicados especificamente, o termo "substituído" ou "substituído por

......", Como usado aqui, significa que um ou mais átomos de hidrogênio em um determinado átomo ou grupo são substituídos independentemente por um ou mais, por exemplo

1, 2, 3 ou 4 substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em deutério (D), halo, OH, mercapto,

ciano, -CD3, -alquila C1-C6 (de um modo preferido –alquila

C1-3), alquenila C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila (de um modo preferido cicloalquila com 3 a 8 membros), arila,

heterociclila (de um modo preferido heterociclila com 3 a 8 membros), heteroarila, arilalquila C1-C6, heteroarilalquila

C1-C6, haloalquila C1-C6, O-alquila C1-C6 (de um modo preferido –O-alquila C1-C3), -O-alquenila C2-C6, O-alquil

C1-C6 fenila, -alquila C1-C6 OH (de um modo preferido –

alquila C1-C4 OH), -alquila C1-C6 SH, -alquila C1-C6

O-alquila C1-C6, O-haloalquila C1-C6, NH2, alquila C1-C6 N-

alquila C1-C3 NH2), N(alquila C1-C6)2 (de um modo preferido

N(alquila C1-C3)2), NH(alquila C1-C6) (de um modo preferido

NH(alquila C1-C3)), N(alquila C1-C6)(alquil C1-C6 fenila),

NH(alquil C1-C6 fenila), nitro, C(O)-OH, C(O)O-alquila C1-C6

(de um modo preferido C(O)O-alquila C1-C3), -CONRiRii (em que Ri e Rii são selecionados do grupo que consiste em H, D e alquila C1-C6, de um modo preferido alquila C1-C3),

NHC(O)(alquila C1-C6), NHC(O)(fenila), N(alquila C1 -

C6)C(O)(alquila C1-C6), N(alquila C1-C6)C(O)(fenila),

C(O)alquila C1-C6, C(O)heteroarila (de um modo preferido

C(O)-heteroarila de 5 a 7 membros), C(O)alquil C1-C6 fenila,

C(O)haloalquila C1-C6, OC(O)alquila C1-C6 (de um modo preferido OC(O)alquila C1-C3), -S(O)2-alquila C1-C6, -

S(O)-alquila C1-C6, -S(O)2-fenila, -S(O)2-haloalquila

C1-C6, -S(O)2NH2, S(O)2NH(alquila C1-C6), S(O)2NH(fenila), -

NHS(O)2(alquila C1-C6), -NHS(O)2(fenila) e

NHS(O)2(haloalquila C1-C6), em que o referido alquila,

cicloalquila, fenila, arila, heterociclila e heteroarila são cada um opcionalmente substituído ainda com um ou mais substituintes selecionados do grupo que consiste em halo,

-OH, -NH2, cicloalquila, heterociclila de 3 a 8 membros,

alquila C1-C4, haloalquila C1-C4, -O-alquila C1-C4,

-alquila C1-C4 OH, -alquila C1-C4-O-alquila C1-C4, O-

haloalquila C1-C4, ciano, nitro, -C(O)-OH, C(O)O-alquila

C1-C6, CON(alquila C1-C6)2, CONH(alquila C1-C6), CONH2,

NHC(O)(alquila C1-C6), NH(alquila C1-C6)C(O)(alquila C1-C6),

-SO2(alquila C1-C6), -SO2(fenila), -SO2(haloalquila C1-C6), -SO2NH2, SO2NH(alquila C1-C6), SO2NH(fenila), -NHSO2(alquila C1-C6), -NHSO2(fenila) e NHSO2(haloalquila C1-C6). Quando um átomo ou grupo é substituído por mais de um substituinte, os substituintes podem ser iguais ou diferentes.

[0074] Como aqui utilizado, o termo "farmaceuticamente aceitável" significa não tóxico, biologicamente tolerável e adequado para administração a um indivíduo.

[0075] Como aqui utilizado, o termo "sal farmaceuticamente aceitável" se refere a um sal de adição de base ou ácido do composto de fórmula (I) que é não tóxico, biologicamente tolerável e adequado para administração a um indivíduo. O "sal farmaceuticamente aceitável" inclui, mas não está limitado a, sais de adição de ácido formados pelo composto de fórmula (I) com um ácido inorgânico, como cloridrato, bromidrato, carbonato, bicarbonato, fosfato, sulfato, sulfito, nitrato e semelhantes, bem como com um ácido orgânico, como formato, acetato, malato, maleato, fumarato, tartarato, succinato, citrato, lactato, metanossulfonato, p-toluenossulfonato, 2- hidroxietanossulfonato, benzoato, salicilato, estearato e sais com ácido alcano-dicarboxílico da fórmula HOOC-(CH2)n- COOH (em que n é 0 a 4), etc. Além disso, "sal farmaceuticamente aceitável" inclui sais de adição de base formados pelo composto de fórmula (I) portando uma fração ácida com um cátion farmaceuticamente aceitável, como sódio, potássio, cálcio, alumínio, lítio e amônio.

[0076] Além disso, se um composto aqui descrito for obtido como um sal de adição de ácido, a base livre pode ser obtida basificando uma solução do sal de adição de ácido. Por outro lado, se o produto for uma base livre, um sal de adição de ácido, particularmente um sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável, pode ser produzido dissolvendo a base livre em um solvente adequado e tratando a solução com um ácido, de acordo com os procedimentos convencionais para a preparação sais de adição de ácido de compostos básicos. As pessoas versadas na técnica serão capazes de determinar, sem experimentação indevida, uma variedade de métodos sintéticos, que são utilizados para preparar sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, não tóxicos.

[0077] Os compostos da invenção podem existir na forma de solvatos. O termo "solvatos" significa formas de adição de solvente que contêm quantidades estequiométricas ou não estequiométricas de solvente. Se o solvente é água, o solvato formado é um hidrato e, quando o solvente é álcool, o solvato formado é um alcoolato. Os hidratos são formados pela combinação de uma ou mais moléculas de água com uma molécula da substância na qual a água retém seu estado molecular como H2O. Essa combinação pode formar um ou mais tipos de hidratos, por exemplo, hemi-hidratos, mono-hidrato e di-hidrato.

[0078] Como aqui utilizado, o termo "pró-fármaco" se refere a um composto ativo ou inativo que será quimicamente modificado para formar os compostos da invenção por efeitos fisiológicos in vivo, como hidrólise, metabolismo e similares, mediante administração a um indivíduo. A adequação e as técnicas envolvidas na preparação e utilização de um pró-fármaco são bem conhecidas das pessoas versadas na técnica. Os pró-fármacos exemplares são, por exemplo, ésteres de ácidos carboxílicos livres, derivados S-acil de tióis e derivados O-acil de álcoois ou fenóis. Os pró-fármacos adequados são geralmente derivados de éster farmaceuticamente aceitáveis que são conversíveis sob condições fisiológicas por solvólise no ácido carboxílico parental, por exemplo, ésteres alquílicos inferiores, ésteres cicloalquílicos, ésteres alquenílicos inferiores, ésteres benzílicos, ésteres alquílicos inferiores mono ou di-substituídos, tais como ésteres alquílicos w- (amino, mono- ou di-alquila inferior) amino, carboxila, alcoxicarbonila inferior), ésteres alquílicos de a- (alcanoiloxi inferior, alcoxilcarbonila inferior ou di- alquilaminocarbonila) inferior, por exemplo, éster pivaloiloximetílico e semelhantes, que são convencionais na técnica.

[0079] Será reconhecido pelas pessoas versadas na técnica que alguns dos compostos de fórmula (I) podem conter um ou mais centros quirais e, portanto, existem em duas ou mais formas estereoisoméricas. Assim, os compostos da invenção podem existir como estereoisômeros individuais (por exemplo, enantiômeros, diastereômeros) e misturas dos mesmos em qualquer proporção, como racematos e, quando apropriado, como tautômeros e isômeros geométricos.

[0080] Como usado aqui, o termo "estereoisômero" se refere a compostos que possuem a mesma constituição química, mas são diferentes no arranjo espacial dos átomos ou grupos. Os estereoisômeros incluem enantiômeros, diastereômeros, conformadores e similares.

[0081] Como usado aqui, o termo "enantiômero" se refere a dois estereoisômeros de um composto que são imagens invertidas não superponíveis em espelho.

[0082] Como usado aqui, o termo "diastereômero" se refere a estereoisômeros que possuem dois ou mais centros quirais e cujas moléculas não são imagens espelhadas uma da outra. Os diastereômeros têm propriedades físicas diferentes, por exemplo, pontos de fusão, pontos de ebulição, propriedades espectrais ou atividades biológicas.

As misturas de diastereômeros podem ser separadas sob procedimentos analíticos de alta resolução, como eletroforese e cromatografia, como HPLC.

[0083] As definições e convenções estereoquímicas aqui utilizadas seguem S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, Nova Iorque; e Eliel, E. e Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., Nova York, 1994. Muitos compostos orgânicos existem em formas opticamente ativas, ou seja, eles têm a capacidade de girar o plano de luz polarizada no plano. Na descrição de um composto opticamente ativo, os prefixos D e L, ou R e S, são usados para denotar a configuração absoluta da molécula em torno de seu(s) centro(s) quiral(is). Os prefixos d e l ou (+) e (-) são empregados para designar o sinal de rotação da luz polarizada por plano pelo composto, com (-) ou l significando que o composto é levorrotatório. Um composto prefixado com (+) ou d é dextrorrotatório. Para uma dada estrutura química, esses estereoisômeros são idênticos, exceto que são imagens espelhadas um do outro. Um estereoisômero específico também pode ser chamado de enantiômero, e uma mistura desses isômeros é frequentemente chamada de mistura enantiomérica.

Uma mistura 50:50 de enantiômeros é referida como mistura racêmica ou racemato, que pode ocorrer quando não houve seleção estereoquímica ou estereoespecificidade em uma reação ou processo químico. Os termos "mistura racêmica" e "racemato" se referem a uma mistura equimolar de duas espécies enantioméricas, desprovidas de atividade óptica.

[0084] Os racematos podem ser usados como tal ou podem ser resolvidos em seus isômeros individuais. A resolução pode proporcionar compostos estereoquimicamente puros ou misturas enriquecidas em um ou mais isômeros. Os métodos para separação de isômeros são bem conhecidos (conforme, Allinger N. L. e Eliel E. L. em "Topics in Stereochemistry", Vol. 6, Wiley Interscience, 1971) e incluem métodos físicos como cromatografia usando um adsorvente quiral. Isômeros individuais podem ser preparados na forma quiral a partir de precursores quirais.

Alternativamente, os isômeros individuais podem ser separados quimicamente de uma mistura, formando sais diastereoméricos com um ácido quiral (como os enantiômeros individuais de ácido 10-canforossulfônico, ácido canfórico, ácido alfa-bromocanfórico, ácido tartárico, ácido diacetiltartárico, ácido málico, pirrolidona-5-carboxílico, e similares), cristalizando fracionariamente os sais e, em seguida, liberando uma ou ambas as bases resolvidas, repetindo opcionalmente o processo, de modo a obter uma ou ambas substancialmente livres da outra, ou seja, em uma forma que possua pureza de, por exemplo, pelo menos 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% ou 99,5% em peso do estereoisômero desejado. Alternativamente, os racematos podem ser ligados covalentemente a um composto quiral (auxiliar) para produzir diastereômeros que podem ser separados por cromatografia ou por cristalização fracionária, após o qual o auxiliar quiral é quimicamente removido para proporcionar os enantiômeros puros, como é conhecido pelas pessoas versadas na técnica.

[0085] Como usado aqui, o termo "conformador" se refere a um isômero formado devido à posição espacial diferente de um átomo ou grupo em torno de uma ligação simples em uma molécula de composto covalente, como o conformador de meia cadeira e o conformador de envelope de ciclopentano.

[0086] Como aqui utilizado, o termo "tautômero" ou "forma tautomérica" se refere a isômeros estruturais de diferentes energias que são interconversíveis por meio de uma barreira de baixa energia. Por exemplo, os tautômeros de prótons (também conhecidos como tautômeros prototrópicos) incluem interconversões via migração de um próton, como isomerizações de ceto-enol e imina-enamina. Os tautômeros de valência incluem interconversões por reorganização de alguns dos elétrons de ligação.

[0087] Como usado aqui, o termo "isômero geométrico" é um isômero causado pela incapacidade de uma ligação dupla ou de uma ligação simples de átomos de carbono do anel girar livremente e também é conhecido como isômeros cis e trans. O isômero cis ocorre quando os substituintes estão localizados no mesmo lado de um plano e o isômero trans ocorre quando os substituintes estão localizados no lado oposto de um plano.

[0088] Como usado neste documento, os termos "tratando", "tratar" ou "tratamento" de uma doença se referem à administração de uma ou mais substâncias farmacêuticas, especialmente um composto de fórmula (I) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito aqui a um indivíduo que tem a doença ou tem um sintoma da doença, com o objetivo de curar, aliviar, alterar, remediar, melhorar ou afetar a doença ou os sintomas da doença. Em algumas modalidades, a doença é câncer.

[0089] Como usado aqui, os termos "prevenindo", "prevenir" ou "prevenção" de uma doença se referem à administração de uma ou mais substâncias farmacêuticas, especialmente um composto de fórmula (I) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito aqui a um indivíduo que tem uma predisposição para a doença, com o objetivo de impedir o desenvolvimento da doença no indivíduo. Em algumas modalidades, a doença é uma doença associada a uma ERK quinase, como ERK1 e/ou ERK2 quinase.

Em outras modalidades, a doença é uma doença associada a alta expressão ou alta atividade de uma ERK quinase, como

ERK1 e/ou ERK2 quinase. Em outras modalidades, a doença é câncer ou tumor.

[0090] Como usado aqui, os termos "câncer", "carcinoma" e "tumor" se referem a uma condição fisiológica tipicamente caracterizada por proliferação celular desregulada em mamíferos. Exemplos de câncer incluem blastoma, glioma, sarcoma, seminoma, glioblastoma, melanoma, leucemia e neoplasias mielóides ou linfóides.

Exemplos mais específicos de câncer incluem câncer de células escamosas (por exemplo, câncer epitelial de células escamosas) e câncer de pulmão, incluindo câncer de células pequenas, câncer de células não pequenas (NSCLC), adenocarcinoma de pulmão e câncer de células escamosas do pulmão. Os cânceres adicionais incluem câncer de pele, queratoacantoma, carcinoma folicular, leucemia de células cabeludas, cavidade bucal, câncer de faringe, câncer de lábio, língua, câncer de boca, câncer de glândula salivar, câncer de esôfago, câncer de laringe, câncer hepatocelular, câncer de estômago, câncer gastrointestinal, câncer de intestino delgado, câncer de intestino grosso, câncer de pâncreas, câncer de colo do útero, câncer de ovário, câncer de bexiga, hepatoma, câncer de mama, câncer de cólon, câncer retal, câncer colorretal, câncer do sistema geniturinário, câncer do trato biliar, adenocarcinoma da vesícula biliar, câncer de tireóide, câncer papilar, câncer endometrial, câncer uterino, câncer de glândula salivar, câncer renal, câncer de próstata, câncer testicular, câncer vulvar, câncer peritoneal, câncer anal, câncer peniano, câncer ósseo, mieloma múltiplo, linfoma de células B, câncer do sistema nervoso central, câncer de cérebro, câncer de cabeça e gargalo, linfoma de Hodgkin. Os exemplos também incluem distúrbios mieloproliferativos, como policitemia vera, trombocitemia essencial, mielofibrose, como mielofibrose primária, leucemia mielóide aguda e leucemia mielóide crônica (LMC).

[0091] Os termos "tratar", "entrar em contato" e "reagir" no contexto de uma reação química, significam adicionar ou misturar dois ou mais reagentes sob condições apropriadas para produzir o produto indicado e/ou desejado.

Deve-se considerar que a reação que produz o produto indicado e/ou desejado pode não necessariamente resultar diretamente da combinação de dois reagentes que foram adicionados inicialmente, ou seja, pode haver um ou mais intermediários que são produzidos na mistura que acabam levando à formação do produto indicado e/ou desejado.

[0092] Como usado aqui, o termo "quantidade eficaz" se refere a uma quantidade suficiente para geralmente trazer um efeito benéfico em um indivíduo. A quantidade eficaz dos compostos da invenção pode ser determinada por métodos convencionais (como modelagem, estudos de aumento de dose ou ensaios clínicos) e levando em consideração fatores de influência convencionais (como o modo de administração, a farmacocinética do composto, a gravidade e curso da doença, histórico médico do indivíduo, estado de saúde do indivíduo e resposta a medicamentos).

[0093] O termo "inibição", "inibitório" ou "inibir" indica uma diminuição na atividade de linha de base de uma atividade ou processo biológico. O termo "inibição da atividade ERK" ou "inibir a atividade ERK" se refere a uma diminuição na atividade da ERK como uma resposta direta ou indireta à presença do composto de fórmula (I) e/ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito aqui, em relação à atividade de ERK na ausência do composto de fórmula (I) e/ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

A diminuição da atividade pode ser devida à interação direta do composto de fórmula (I) e/ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo sob o ponto de vista farmacêutico descrito aqui com ERK, ou devido à interação do composto de fórmula (I) e/ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo descrito aqui, com um ou mais outros fatores que por sua vez afetam a atividade da ERK.

[0094] Como usado aqui, o termo "indivíduo" se refere a mamíferos e não mamíferos. Mamíferos significa qualquer membro da classe de mamíferos, incluindo, entre outros, seres humanos; primatas não humanos, como chimpanzés e outros macacos e espécies de macacos; animais de fazenda como gado, cavalos, ovelhas, cabras e suínos; animais domésticos como coelhos, cães e gatos; animais de laboratório incluindo roedores, como ratos, camundongos e porquinhos da índia; e similares. Exemplos de não mamíferos incluem, mas não estão limitados a, pássaros e similares. O termo "indivíduo" não indica uma idade ou sexo específico.

Em algumas modalidades, o indivíduo é um humano.

[0095] Em geral, o termo "cerca de" é usado aqui para modificar um valor numérico acima e abaixo do valor declarado por uma variação de 20%.

[0096] Os termos técnicos e científicos aqui utilizados e não definidos especificamente têm o significado comumente entendido pelas pessoas versadas na técnica a que a invenção se refere.

Métodos Gerais de Síntese

[0097] Os compostos de fórmula (I) de acordo com a invenção, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, podem ser preparados por uma variedade de métodos, incluindo os indicados abaixo, aqueles exemplificados nos exemplos, ou métodos análogos aos mesmos. Esquemas sintéticos gerais adequados são representados abaixo. As condições de reação adequadas para cada etapa da reação são conhecidas das pessoas versadas na técnica. Os materiais de partida para a preparação estão disponíveis comercialmente ou podem ser preparados utilizando métodos indicados abaixo ou análogos aos mesmos, ou bem conhecidos das pessoas versadas na técnica. Variáveis nas fórmulas gerais têm o mesmo significado acima, a menos que indicado de outra forma.

[0098] Os métodos gerais de síntese para a preparação dos compostos da invenção são mostrados nas Figuras 1 a 4.

[0099] A Figura 1 mostra o esquema sintético geral A para a síntese dos compostos da invenção.

[00100] A Figura 2 mostra o esquema sintético geral B para a síntese dos compostos da invenção.

[00101] A Figura 3 mostra o esquema sintético geral C para a síntese dos compostos da invenção.

[00102] A Figura 4 mostra o esquema sintético geral D para a síntese dos compostos da invenção.

[00103] Nesses esquemas, é bem entendido que os grupos de proteção para grupos sensíveis ou reativos (por exemplo, amino, hidroxila e carboxila) são utilizados, quando necessário, de acordo com princípios ou química comuns para evitar reações químicas indesejadas. Os grupos protetores são tratados de acordo com métodos padrão de síntese orgânica (T. W. Greenee e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 5ª Edição, Wiley,

Nova York 2014.). Estes grupos são removidos em uma fase conveniente de síntese de um composto utilizando métodos bem conhecidos das pessoas versadas na técnica. A seleção do processo, as condições de reação e a sequência de desempenho devem estar de acordo com a preparação dos compostos de fórmula (I).

[00104] Exemplos de grupos protetores de amino incluem carbamatos, amidas, grupos alquila e arila, iminas, bem como muitos derivados de N-heteroátomo que podem ser removidos para regenerar o grupo amina desejado. Grupos protetores de amino específicos são Pmb (p-metoxibenzila), Boc (t-butiloxicarbonila), Fmoc (9- fluorenilmetiloxicarbonila) e Cbz (carbobenziloxi). Outros exemplos desses grupos são encontrados em T. W. Greene e P.

G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 3ª Edição, John Wiley & Sons, Inc., 1999.

[00105] Exemplos de grupos protetores de hidroxila incluem grupos tetra-hidropiraniloxi, benzoíla, acetoxi, carbamoiloxi, benzila e sililéteres (por exemplo, TBS, TBDPS). Outros exemplos desses grupos são encontrados em T.

W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 3ª Edição, John Wiley & Sons, Inc., 1999.

[00106] Exemplos de grupos protetores de carboxila incluem grupos éster e grupos heterociclila. Os derivados éster do grupo ácido carboxílico podem ser empregados para bloquear ou proteger o grupo ácido carboxílico enquanto as reações são realizadas em outros grupos funcionais do composto. Exemplos de tais grupos éster incluem arilalquila substituído, incluindo benzilas substituídos, como 4- nitrobenzila, 4-metoxibenzila, 3,4-dimetoxibenzila, 2,4- dimetoxibenzila, 2,4,6-trimetoxibenzila, 2,4,6- trimetoxibenzila, 2,4,6-trimetilbenzila, pentametilbenzila, 3,4-metilenodioxibenzila; ésteres de alquila ou alquila substituídos, como metila, etila, t-butilalila ou t-amila, trifenilmetila (tritila), 4-metoxitritila, 4,4'- dimetoxitritila, 4,4',4"-trimetoxitritila, 2-fenilprop-2- ila; tioésteres, tais como tioéster de t-butila; ésteres de silil como ésteres de trimetilsilila, ésteres de t- butildimetilsilila (TBSO) e similares. Mais exemplos desses grupos são encontrados em T. W. Greene e P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 5ª Edição, Wiley, Nova York, 2014.

[00107] As pessoas versadas na técnica reconhecerão se um estereocentro está presente nos compostos de fórmula (I). Por conseguinte, quando um composto é desejado como um único enantiômero ou diastereômero, pode ser obtido por síntese estereoespecífica ou por resolução do produto final ou qualquer intermediário apropriado. A resolução do produto final, intermediários ou materiais de partida pode ser realizada usando qualquer método apropriado conhecido na técnica. Ver, por exemplo, E.L. Eliel, S.H. Wilen e L.N.

Mander, "Stereochemistry of Organic Compounds" (Wiley- Interscience, 1994).

[00108] Nos métodos da Figura 3 e Modalidade 20, a preparação do Composto C2 é alcançada por reação de acoplamento de amida do Composto C1 com o ácido carboxílico

O HO (CR10R11)mR12 .

[00109] De um modo preferido, a reação de acoplamento de amida é realizada em um solvente inerte. De um modo mais preferido, a reação de acoplamento de amida é realizada na presença de um agente de condensação e uma base em um solvente inerte.

[00110] O solvente inerte é de um modo preferido selecionado do grupo que consiste em acetato de etila, tetra-hidrofurano, metiltetra-hidrofurano, acetonitrila, dimetilsulfóxido, N,N-dimetilformamida, diclorometano, 1,2- dicloroetano, N-metil-2-pirolidona, ou uma combinação dos mesmos.

[00111] O agente de condensação é de um modo preferido um ou mais selecionados do grupo que consiste em 1-hidroxilbenzotriazol (HOBT), 1-hidroxil-7-azobenzotriazol (HOAT), hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il- oxitripirrolidino-fosfônio (PyBOP), hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfônio (BOP), 1,1-

carbonildiimidazol (CDI), anidrido 1-propilfosfônico (T3P), cloridrato de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodi-imida (EDC · HCl), N,N-diciclo-hexilcarbodi-imida (DCC), anidrido acético, cloreto de acetila, cloreto de oxalila, hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'- tetrametilurônio (HATU) e hexafluorofosfato de O- (benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio (HBTU) e é de um modo mais preferido T3P.

[00112] A base é de um modo preferido uma ou mais selecionadas do grupo que consiste em trietilamina, DIPEA, piridina, 2,4-dimetilpiridina, NaOH, KOH, LiOH, Na2CO3, K2CO3, NaHCO3, Cs2CO3, Na3PO4 ou K3PO4; e é de um modo mais preferido DIPEA.

[00113] De um modo preferido, a reação de acoplamento de amida é realizada a uma temperatura desde a temperatura ambiente até o refluxo.

[00114] De um modo preferido, a reação de acoplamento de amida é realizada por 0,5 a 24 h.

[00115] Nos métodos da Figura 3 e Modalidade 20, quando o Composto C2 é protegido por Boc, o Composto C2 pode ser submetido à desprotecção para dar o Composto C3.

[00116] De um modo preferido, a desprotecção é realizada em um solvente inerte. O solvente inerte é de um modo preferido selecionado do grupo que consiste em acetato de etila, tetra-hidrofurano, metiltetra-hidrofurano,

acetonitrila, dimetilsulfóxido, N,N-dimetilformamida, diclorometano, 1,2-dicloroetano, N-metil-2-pirolidona, ou uma combinação dos mesmos.

[00117] De um modo preferido, a desprotecção é realizada na presença de um ácido. O ácido é de um modo preferido um ou mais selecionados do grupo que consiste em ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido trifluoroacético, ácido acético, ácido fórmico e ácido fosfórico.

[00118] De um modo preferido, a desprotecção é realizada a uma temperatura de -10°C a 80°C.

[00119] De um modo preferido, a desproteção é realizada durante 0,5 a 24 h.

Utilidade e Administração

[00120] Os compostos da invenção são úteis para o tratamento de uma doença associada a uma ERK quinase, como ERK1 e/ou ERK2 quinase, por exemplo, uma doença associada a alta expressão ou alta atividade de uma ERK quinase, como ERK1 e/ou ERK2 quinase, como tumor e câncer. Mais especificamente, o tumor e o câncer são selecionados do grupo que consiste em, por exemplo, blastoma, glioma, sarcoma, seminoma, glioblastoma, melanoma, leucemia e neoplasias mielóides ou linfóides. Exemplos mais específicos de câncer incluem câncer de células escamosas (por exemplo, câncer epitelial de células escamosas) e câncer de pulmão, incluindo câncer de células pequenas,

câncer de células não pequenas (NSCLC), adenocarcinoma de pulmão e câncer de células escamosas do pulmão.

Os cânceres adicionais incluem câncer de pele, queratoacantoma,

carcinoma folicular, leucemia de células cabeludas,

cavidade bucal, câncer de faringe, câncer de lábio, língua,

câncer de boca, câncer de glândula salivar, câncer de esôfago, câncer de laringe, câncer hepatocelular, câncer de estômago, câncer gastrointestinal, câncer de intestino delgado, câncer de intestino grosso, câncer de pâncreas,

câncer de colo do útero, câncer de ovário, câncer de bexiga, hepatoma, câncer de mama, câncer de cólon, câncer retal, câncer colorretal, câncer do sistema geniturinário,

câncer do trato biliar, adenocarcinoma da vesícula biliar,

câncer de tireóide, câncer papilar, câncer endometrial,

câncer uterino, câncer de glândula salivar, câncer renal,

câncer de próstata, câncer testicular, câncer vulvar,

câncer peritoneal, câncer anal, câncer peniano, câncer ósseo, mieloma múltiplo, linfoma de células B, câncer do sistema nervoso central, câncer de cérebro, câncer de cabeça e gargalo, linfoma de Hodgkin.

Os exemplos também incluem distúrbios mieloproliferativos, como policitemia vera, trombocitemia essencial, mielofibrose, como mielofibrose primária, leucemia mielóide aguda e leucemia mielóide crônica (LMC).

[00121] Os compostos da invenção podem ser administrados a um indivíduo como uma composição farmacêutica, que pode opcionalmente compreender um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[00122] Os compostos da invenção podem ser administrados por várias vias conhecidas, incluindo administração oral, retal, intragástrica, intracraniana e parentérica, por exemplo, vias de administração intravenosa, intramuscular, intranasal, intradérmica, subcutânea e similares. As administrações oral, intranasal e parentérica são particularmente preferidas. Dependendo da via de administração, são necessárias diferentes formulações farmacêuticas e algumas delas podem exigir que revestimentos protetores sejam aplicados à formulação do medicamento para evitar a degradação de um composto da invenção, por exemplo, no trato digestivo.

[00123] Os compostos da invenção podem ser formulados como xarope, solução para infusão ou injeção, spray, comprimido, cápsula, loção, lipossomo, supositório e similares.

[00124] Formas farmacêuticas preferidas particulares para a administração dos compostos da invenção são formas adequadas para uso injetável e incluem soluções ou dispersões aquosas estéreis e pós estéreis para a preparação extemporânea de soluções ou dispersões estéreis injetáveis. Em todos os casos, a solução final ou a forma de dispersão deve ser estéril e fluida. Tipicamente, essa solução ou dispersão incluirá um solvente ou meio de dispersão, contendo, por exemplo, soluções aquosas tamponadas com água, por exemplo, tampões biocompatíveis, etanol, poliol, como glicerol, propilenoglicol, polietilenoglicol, suas misturas adequadas, tensoativos ou óleos vegetais. Os compostos da invenção também podem ser formulados em lipossomas, em particular para administração parentérica. Os lipossomas oferecem a vantagem de aumentar a meia-vida na circulação, se comparado ao medicamento livre, e uma liberação mais prolongada e uniforme do medicamento em anexo.

[00125] A esterilização de soluções de infusão ou injeção pode ser realizada por quaisquer técnicas reconhecidas na técnica, incluindo mas não se limitando à adição de conservantes, tais como agentes antibacterianos ou antifúngicos, por exemplo, parabenos, clorobutanol, fenol, ácido sórbico ou timerosal. Além disso, agentes isotônicos, como açúcares ou sais, em particular cloreto de sódio, podem ser incorporados em soluções de infusão ou injeção.

[00126] A produção de soluções injetáveis estéreis contendo um ou mais dos compostos da invenção é realizada incorporando o respectivo composto na quantidade necessária no solvente apropriado com vários ingredientes enumerados acima, conforme necessário, seguido de esterilização. Para obter um pó estéril, as soluções acima são secas a vácuo ou liofilizadas, conforme necessário. Os diluentes preferidos da presente invenção são a água, tampões fisiológicos aceitáveis, soluções salinas fisiológicas aceitáveis ou soluções salinas. Os veículos preferidos são a manteiga de cacau e o vitebesol.

[00127] Os excipientes que podem ser utilizados com as várias formas farmacêuticas dos compostos da invenção podem ser selecionados da seguinte lista não limitativa: a) aglutinantes, tais como lactose, manitol, sorbitol cristalino, fosfatos dibásicos, açúcares, celulose microcristalina, carboximetil celulose, hidroxietil celulose, polivinil pirrolidona e semelhantes; b) lubrificantes, tais como estearato de magnésio, talco, estearato de cálcio, estearato de zinco, ácido esteárico, óleo vegetal hidrogenado, leucina, glicerídeos e estearil fumaratos de sódio, c) desintegrantes, tais como amidos, croscarmelose, metilcelulose de sódio, ágar, bentonita, ácido algínico, carboximetil celulose, polivinil pirrolidona e similares.

[00128] Em uma modalidade, a formulação é para administração oral e a formulação compreende um ou mais ou todos os seguintes ingredientes: amido pré-gelatinizado,

talco, povidona K30, croscarmelose sódica, estearil fumarato de sódio, gelatina, dióxido de titânio, sorbitol, citrato monossódico, xantana goma, dióxido de titânio, agente aromatizante, benzoato de sódio e sacarina sódica.

[00129] Em uma modalidade, os compostos da invenção são administrados por via intranasal, podem ser administrados na forma de um inalador de pó seco ou um spray de aerossol a partir de um recipiente pressurizado, bomba, spray ou nebulizador com o uso de um propulsor adequado, por exemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluoroetano, um hidrofluoroalcano, como 1,1,1,2-tetrafluoroetano (HFA 134A™) ou 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropano (HFA 227EA™), dióxido de carbono, ou outro gás adequado. O recipiente pressurizado, bomba, spray ou nebulizador pode conter uma solução ou suspensão dos compostos da invenção, por exemplo, usando uma mistura de etanol e propulsor como solvente, que pode conter adicionalmente um lubrificante, por exemplo, trioleato de sorbitano.

[00130] A dosagem típica dos compostos da invenção estará na faixa de 0,001 a 1000 mg/kg de peso corporal/dia.

A dosagem diária pode ser administrada em uma dose única ou em várias doses divididas. A dosagem apropriada é determinada pelo médico assistente, conforme apropriado, dependendo do tipo e da gravidade da doença a ser tratada,

do estado de saúde e do histórico médico anterior do indivíduo, do co-medicamento, do composto específico a ser administrado e da via de administração. Se desejado, a dosagem dos compostos da invenção pode ir além da referida faixa de dosagem.

[00131] Entende-se que dentro do escopo da invenção, um recurso técnico definido nas soluções técnicas individuais acima pode ser combinado com um recurso técnico especificamente descrito abaixo (por exemplo, nos Exemplos) para formar uma solução técnica nova ou preferida. Tais soluções técnicas não são reiteradas uma a uma neste documento devido ao tamanho do pedido.

[00132] A fórmula deve ser considerada quando houver uma discrepância entre o nome químico de qualquer composto da invenção e sua fórmula, a menos que a fórmula esteja obviamente errada.

[00133] Como será claramente entendido pelas pessoas versadas na técnica, nem todos os átomos de hidrogênio são explicitamente representados nas fórmulas estruturais de alguns compostos da invenção por uma questão de simplicidade. Quando um átomo de carbono ou um átomo de nitrogênio em um composto tem uma valência vaga, significa que o hidrogênio não descrito explicitamente está presente lá. Por exemplo, o composto do Exemplo P12 é representado

N F N N O N N F

N P12 F pela fórmula abaixo, em que um átomo de hidrogênio é omitido no átomo de nitrogênio entre o anel pirimidina e o anel pirazol. As pessoas versadas na técnica podem entender que a referida fórmula representa o mesmo

N F HN N O N N F

N P12 F composto que a fórmula .

Breve Descrição das Figuras

[00134] A Figura 1 mostra o esquema sintético geral A para a síntese dos compostos da invenção, em que variáveis individuais são como aqui definidas.

[00135] A Figura 2 mostra o esquema sintético geral B para a síntese dos compostos da invenção, em que variáveis individuais são como aqui definidas.

[00136] A Figura 3 mostra o esquema sintético geral C para a síntese dos compostos da invenção, em que variáveis individuais são como aqui definidas.

[00137] A Figura 4 mostra o esquema sintético geral D para a síntese dos compostos da invenção, em que variáveis individuais são como aqui definidas.

Exemplos

[00138] Os exemplos a seguir são meramente fornecidos para ilustração da invenção e não devem ser interpretados para limitar o escopo da invenção.

[00139] Os procedimentos experimentais nos exemplos a seguir, nos quais as condições específicas não são indicadas, podem ser realizados nas condições convencionais para tais reações ou nas condições recomendadas pelos fabricantes. Salvo indicação em contrário, as percentagens e as partes são indicadas em peso.

[00140] Os materiais e reagentes usados nos exemplos a seguir estão disponíveis comercialmente, a menos que especificado de outra forma.

[00141] Nos exemplos a seguir, os espectros de 1H- RMN foram registrados usando o espectrômetro de ressonância magnética nuclear Bluker AVHD 400 MHz ou Bluker AVHD 500 MHz, os espectros de 13C-RMN foram registrados usando o espectrômetro de ressonância magnética nuclear Bluker AVHD 500 MHz ou Bluker AVHD 600 MHz, com desvio químico mostrado em d (ppm); os espectros de massa foram registrados usando o espectrômetro de massa Waters UPLC Classe H + QDa (ESI) e Agilent 1260_6120 (ESI); e a separação por HPLC preparativa de fase reversa foi realizada usando o sistema de purificação totalmente automático guiado por Waters UV (coluna OBD Xbridge Prep C185 µm).

[00142] As abreviações usadas nos exemplos têm os seguintes significados:

iPrOH isopropanol

EtOH etanol

DCM diclorometano

TFA ou CF3COOH ácido trifluoroacético

MeOH metanol

NaOH hidróxido de sódio

HCl cloreto de hidrogênio ou ácido clorídrico

TEA trietilamina

Ni Raney níquel de Raney dioxano dioxaciclohexano

NaH hidreto de sódio

H2 O água

Pd/C paládio/carvão

H2 hidrogênio gasoso

N2 gás nitrogênio

HATU hexafluorofosfato de O-(7-

azabenzotriazol-1-il)-

N,N,N',N’-tetrametilurônio

DMF N,N-dimetilformamida

THF tetra-hidrofurano

Boc2O dicarbonato de di-t-butila

Boc t-butoxicarbonila

NBS N-bromossuccinimida

NCS N-clorossuccimimida

NIS N-iodossuccimimida

MeCN ou CH3CN acetonitrila

DIPEA ou DIEA N,N-di-isopropiletilamina

NaBH4 borohidreto de sódio

AcOH ácido acético

Ac2O anidrido acético

AcCl cloreto de acetila

NaBH3CN ou NaBH3(CN) cianoboro-hidreto de sódio

K2CO3 carbonato de potássio

Cs2CO3 carbonato de césio

NaHCO3 bicarbonato de sódio nBuLi n-butil-lítio

LiAlH4 hidreto de alumínio e lítio

Pd(dppf)Cl2 ou PdCl2(dppf) dicloreto de 1,1’-bis

(difenilfosfato) ferroceno]

paládio (II)

PdCl2(PPh3)2 dicloreto de bis

(trifenilfosfina) paládio

(II)

KOAc acetato de potássio

Fumaronitrila fumaronitrila

P(nBu)3 tri-n-butilfosfina

LDA di-isopropilamida de lítio

LiOH hidróxido de lítio

MeI iodometano

EtI iodoetano

(CH2O)n paraforma

HCO2H ou FA ácido fórmico

CH3COCl cloreto de acetila

HPLC cromatografia líquida de alta eficiência

CH3COOK ou AcOK acetato de potássio t-BuONa t-butóxido de sódio

DMSO dimetilsulfóxido h hora(s)

min minuto(s)

DMAP 4-dimetilamiopiridina

RT temperatura ambiente

T3 P anidrido 1-propilfosfônico

DMEA N,N-dimetiletanolamina

POCl3 oxicloreto de fósforo

°C graus centígrados

EA acetato de etila

Bu4NBr3 tribrometo de tetra-n-

butilamônio

CuI iodeto cuproso

Mg magnésio

Py piridina

TLC cromatografia em camada fina

LCMS cromatografia líquida-

espectrometria de massa

TBS t-butildimetilsilano

TBSCl cloreto de t-

butildimetilsilila

BPin2 bis(pinacolato)diboro

PE éter de petróleo

MW micro-ondas

DEA dietilamina

HEP n-heptano

IPA isopropanol

HEX n-hexano

Síntese de intermediários

Intermediário 4: Síntese de 7-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-

1,3,2-dioxaborolan-2-il)indolina (4)

Etapa 1. Síntese de 7-fluoroindolina (2)

[00143] Em um balão de fundo redondo seco de 50 mL, o Composto 1 (5000 mg, 37 mmol) e AcOH (30 mL) foram adicionados à temperatura ambiente e NaBH3CN (5813 mg, 92,49 mmol) foi adicionado em porções a 0 °C. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. Depois que a reação foi concluída como detectado por placa de TLC, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada com 100 mL de água e ajustada para pH = 9 com solução aquosa de hidróxido de sódio a 2 mol/L a 0 ºC. A mistura foi agitada durante 1 hora, depois aquecida a 25 °C e agitada durante 1 hora. A mistura foi extraída com acetato de etila, seca e filtrada. O filtrado foi evaporado até à secura. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila/éter de petróleo = 1/50 a 1/10) para dar origem ao Intermediário 2 7-fluoroindolina (4,0 g, sólido esbranquiçado). Rendimento: 78,4%. LCMS: m/z 138,1 (M + H).

Etapa 2. Síntese de 5-bromo-7-fluoroindolina (3) Método I:

[00144] NBS (5,2 g, 29,19 mmol) foi adicionado lentamente à solução do Intermediário 2 (4,0 g, 29,19 mmol) em acetonitrila (100 mL) em um balão de fundo redondo seco de 50 mL a 0 ºC. A mistura foi então aquecida até à temperatura ambiente e agitada durante 2 h. Após a reação estar completa, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada com 100 mL de água e extraída com acetato de etila (150 mL × 3). A fase orgânica combinada foi lavada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e salmoura saturada (100 mL × 1), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:8) para dar o Intermediário 3 (5,0 g, sólido roxo claro). Rendimento: 80,6%. LCMS: m/z 215,9 (M + H).

Método II:

[00145] Em um balão de 100 mL em banho de água gelada, foram adicionados o Composto 2 (9,8 g, 0,072 mol) e diclorometano (100 mL) e adicionou-se em porções tribrometo de tetra-n-butilamônio (34,5 g, 0,072 mol). A mistura foi naturalmente aquecida até à temperatura ambiente e agitada à temperatura ambiente durante 4 h. Após a reação estar completa, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada lentamente com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio para ajustar o pH a 6 a 7 e foi extraída com acetato de etila (50 mL × 4). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:15) para dar o composto 3 5-bromo-7- fluoroindolina (9,5 g, sólido esbranquiçado). LCMS: m/z 215,9 (M + H).

Etapa 3. Síntese de 7-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-indolina (4)

[00146] Em um balão seco de 50 ml de gargalo único, Intermediário 3 (600 mg, 2,777 mmol), bis(pinacolato) diboro (1410 mg, 5,554 mmol), Pd(dppf)Cl2 (243 mg, 0,333 mmol), acetato de potássio (545 mg, 5,554 mmol) e 1,4-dioxano (4 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A mistura foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes e aquecida a 110 ºC com agitação sob nitrogênio gasoso por 3 h. Depois que a reação foi concluída como detectado por LCMS, a reação foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (EA/PE = 2% a 10%) para dar o Intermediário 4, 7-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il) -2,3-di-hidro-1H-indol (600 mg, sólido amarelo).

Rendimento: 82,1%. Pureza: cerca de 90%. LCMS: m/z 264,1 (M + H).

Intermediário 7: Síntese de 4-bromo-N-(1-metil-1H-pirazol- 5-il)piridin-2-amina (7) 6 7

[00147] Em um balão de fundo redondo de 250 mL seco, composto 6 (4,2 g, 23,86 mmol), composto 5 (2,8 g, 28,83 mmol), t-butóxido de sódio (4,6 g, 47,8 mmol) e DMSO (60 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A mistura foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes e agitada sob refluxo a 125 ºC por 24 h. Depois que a reação foi concluída como detectada por LC/MS, a reação foi extraída com EA (50 mL × 3), lavada com solução salina saturada (30 mL) e depois foi seca e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (PE:EA = 3:7) para dar o Intermediário 7 (2,1 g, sólido amarelo claro). Rendimento: 40%. LCMS: m/z 253,0/255,0 (M + H).

Intermediário 8: Síntese de t-butil (4-bromopiridin-2-il) (1-metil-1H-pirazol-5-il)carbamato (8)

[00148] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, foram adicionados o Intermediário 7 (500 mg, 1,976 mmol), DMAP (67 mg, 0,593 mmol), DIPEA (766 mg, 5,928 mmol) e DMF (5 mL) à temperatura ambiente. Após dissolução com agitação à temperatura ambiente, Boc2O (1299 mg, 5,928 mmol) foi adicionado lentamente e reagiu à temperatura ambiente por 3 h. Após a reação estar completa, a reação foi extraída com EA. A fase orgânica combinada foi lavada com solução salina saturada, seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila/éter de petróleo = 15/85 a 70/30) para dar o Intermediário 8 (626 mg, sólido amarelo claro). Rendimento: 88%. LCMS: m/z 352,9 (M + H).

Intermediário 13: Síntese de 1-(5-(2-bromopirimidin-4-il)- 7-fluoroindolin-1-il)-2-(2-cloropiridin-3-il)etan-1-ona (13)

Etapa 1. Síntese de 1-(5-bromo-7-fluoroindolin-1-il)-2-(2- cloropiridin-3-il)etan-1-ona (10)

[00149] Em um balão de fundo redondo seco de 250 mL, N,N-dimetilformamida (10 mL), Intermediário 3 (1,7 g, 0,0079 mol), Composto 9 (1,23 g, 0,007 mol) e N,N-di- isopropiletilamina (3,69 g, 0,028 mol) à temperatura ambiente. A mistura foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes e foi gradualmente aquecida a 50 °C. Adicionou-se anidrido 1-propilfosfônico (56 mL, solução a 50% em acetato de etila) e reagiu durante 0,5 h. Depois que a reação foi concluída como detectado por TLC, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi vertido em água gelada para precipitar. O sólido foi filtrado para dar o Intermediário 10 (2,7 g, sólido amarelo pálido).

Rendimento: 93%. LCMS: m/z 368,8/370,8 (M + H).

Etapa 2. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-5- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)indolina-1-il) etan-1-ona (11)

[00150] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, Intermediário 10 (2 g, 0,0054 mol), bis(pinacolato)diboro (2,0 g, 0,0079 mol), acetato de potássio (1,59 g, 0,016 mol) e 1,4-dioxano (36 mL) foi adicionado. A mistura foi purgada com nitrogênio gasoso uma vez e foi adicionada com Pd(dppf)Cl2 (442 mg, 0,0005 mol). A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, aquecida a 90 °C e agitada por 4 h. Depois que a reação foi concluída como detectado por LCMS, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:3) para dar o Intermediário 11 (1,5 g, sólido amarelo pálido).

Rendimento: 68%. LCMS: m/z 417,1 (M + H).

Etapa 3. Síntese de 1-(5-(2-bromopirimidin-4-il)-7- fluoroindolin-1-il)-2-(2-cloropiridin-3-il)etan-1-ona (13)

[00151] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, Intermediário 11 (200 mg, 0,48 mmol), 2,4-dibromopirimidina (126 mg, 0,53 mmol), carbonato de potássio (200 mg, 1,44 mmol), dicloreto de (1,1-bis(difenilfosfino)ferroceno) paládio (II) (70 mg, 0,096 mmol) e o solvente misto de 1,4- dioxano e água (4:1, 10,0 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, aquecida a 60 °C e agitada por 2 h. Após a reação estar completa, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada com 100 mL de água e extraída com acetato de etila (150 mL × 3). As fases orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida.

O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:1) para dar o produto 13 (140 mg, sólido amarelo claro). Rendimento: 65,0%. LCMS: m/z 446,8 (M + H).

Intermediário 17: Síntese de 4-cloro-N-(1-metil-1H-pirazol- 5-il)pirimidin-2-amina (17)

Etapa 1. Síntese de 2-(1-metil-1H-pirazol-5-il)amino- pirimidin-4(3H)-ona (16)

[00152] Em um balão de fundo redondo seco de 50 mL, foram adicionados o Composto 14 (7,8 g, 80 mmol), o Composto 15 (5,72 g, 40 mmol) e ácido trimetilacético (28,6 g). A mistura foi aquecida lentamente a 150 °C com agitação e reagiu durante 40 h. Depois que a reação foi concluída como detectado por LCMS, a reação foi reduzida à temperatura ambiente e adicionada com 30 mL de diclorometano e 5 mL de metanol para dissolver completamente a mistura de reação, seguida pela adição de gel de sílica. A purificação por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (diclorometano: metanol = 3:2) deu o Intermediário 16 (5 g, sólido amarelo). Rendimento: 65,8%. LCMS: m/z 191,9 (M + H).

Etapa 2. Síntese de 4-cloro-N-(1-metil-1H-pirazol-5-il) pirimidin-2-amina (17)

[00153] Em um balão de fundo redondo de 250 mL seco, o Intermediário 16 (5 g, 26,1 mmol), oxicloreto de fósforo (10 mL, 109,2 mmol) e acetonitrila (100,0 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi aquecida a 100 °C e agitada por 2 h. Após a reação estar completa, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, extinta por adição de 100 mL de água e extraída com acetato de etila (60 mL × 3). A fase orgânica combinada foi lavada com solução salina saturada (40 mL × 2), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 3:2) para dar o Intermediário 17 (2,9 g, sólido amarelo pálido).

Rendimento: 53,7%. LCMS: m/z 209,9 (M + H).

[00154] 1H-RMN (CDCl3, 400 MHz): 8,27 (d, J = 5,2Hz, 1H), 7,53 (br, 1H), 7,48 (d, J = 5,2Hz, 1H), 6,80 (d, J = 5,6Hz, 1H), 6,28 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H).

Intermediário 23: Síntese de 1-(7-cloro-5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)indolin-1-il)-2-(2- cloropiridina-3-il)etan-1-ona (23)

Etapa 1. Síntese de 1-(5-bromo-indolin-1-il)etan-1-ona (19)

[00155] Em um balão de fundo redondo seco de 50 mL, foram adicionados Composto 18 (1500 mg, 7,57 mmol), DCM (20 mL), Et3N (1915 mg, 18,93 mmol) e DMAP (30 mg) à temperatura ambiente e cloreto de acetila (1188 mg, 15,14 mmol) foi adicionado em porções a 0 ºC. Após a adição, a reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 h, e foi vertida em água a 0 °C e agitada por 1 h. A reação foi extraída com DCM, seca e filtrada. O filtrado foi evaporado até à secura para dar o Intermediário 19 (1,75 g, sólido amarelo). Rendimento: 96,3%. LCMS: m/z 240,0/242,0 (M + H).

Etapa 2. 1-(5-bromo-7-cloro-indolin-1-il)etan-1-ona (20)

[00156] Em um balão de fundo redondo de 50 mL seco, foram adicionados o Intermediário 19 (1600 mg, 14,58 mmol), acetonitrila (30 mL) e NCS (979 mg, 7,33 mmol) à temperatura ambiente. Após a adição, a reação foi então agitada a 70 °C por 18 h, vertida em água (20 mL), extraída com EA, seca e filtrada. O filtrado foi evaporado até à secura. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila/éter de petróleo = 1/50 a 1/10) para dar o Intermediário 20 (1,2 g, líquido amarelo).

Rendimento: 65,6%. LCMS: m/z 274,0/276,0 (M + H).

Etapa 3. Síntese de 5-bromo-7-cloro-indolina (21)

[00157] Em um balão de gargalo único de 50 mL seco, o Intermediário 20 (1200 mg, 4,37 mmol), hidróxido de lítio monohidratado (550 mg, 13,11 mmol), bem como metanol (15 mL) e água (8 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A mistura foi aquecida a 70 °C com agitação e reagiu durante 18 h. Depois que a reação foi concluída como detectado por LCMS, a reação foi extraída com EA, lavada, seca e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (EA/PE = 2% a 10%) para dar o Intermediário 21 (700 mg, sólido amarelo). Rendimento: 68,9%. Pureza: cerca de 80%. LCMS: m/z 232,0 (M + H).

Etapa 4. Síntese de 7-cloro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-indolina (22)

[00158] Em um balão seco de 50 ml de gargalo único, Intermediário 21 (600 mg, 2,581 mmol), bis(pinacolato) diboro (852 mg, 3,354 mmol), Pd(dppf)Cl2 (188 mg, 0,251 mmol), acetato de potássio (329 mg, 3,354 mmol) e 1,4-dioxano (5 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A mistura foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, aquecida a 100 °C com agitação e reagiu durante 3 h.

Depois que a reação foi concluída como detectado por LCMS, a reação foi filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (EA/PE = 2% a 10%) para dar o Intermediário 22 (480 mg, sólido amarelo). Rendimento: 66,67%. Pureza: cerca de 80%. LCMS: m/z 280,1 (M + H).

Etapa 5. Síntese do Intermediário 1-(7-cloro-5-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)indolin-1-il)-2-(2- cloropiridin-3-il)etan-1-ona (23)

[00159] Em um balão de decolagem seco de 25 mL, Intermediário 22 (440 mg, 1,574 mmol), Composto 9 (540 mg, 3,147 mmol), Et3N (318 mg, 3,147 mmol), HATU (1193 mg, 3,147 mmol) e THF (8 mL) foram adicionados à temperatura ambiente e agitados sob gás nigrogênio a 32 °C por 18 h.

Depois que a reação foi concluída como detectado por LCMS, a reação foi extraída com EA, lavada com água, seca e evaporada até a secura. O produto bruto foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (EA/PE 10 a 40%) para dar o Intermediário 23 (290 mg, sólido amarelo). Rendimento: 42,58%. LCMS: m/z 434,1 (M + H).

Intermediário 31: Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7- metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) indolina-1-il)etan-1-ona (31)

Etapa 1. Síntese de 7-metilindolina (28)

[00160] Em um balão de fundo redondo de 250 mL seco, o Composto 27 7-metil-1H-indol (2,0 g, 15,27 mmol), cianoboro-hidreto de sódio (2,9 g, 45,81 mmol) e ácido acético glacial (40 mL) foram adicionados a 0 °C. A reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 3 h.

Depois que a reação foi concluída como detectada pela placa de TLC, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada com 100 mL de água, ajustada com solução aquosa de hidróxido de sódio a 2 mol/L a pH 9, foi extraída com acetato de etila (100 mL × 3). A fase orgânica combinada foi lavada com solução salina saturada (100 mL), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado com cromatografia em coluna flash com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:5) para dar o intermediário 28 7-metilindolina (1,5 g, sólido esbranquiçado). Rendimento: 75,3%. LCMS: m/z 134,1 (M + H).

Etapa 2. Síntese de 5-bromo-7-metilindolina (29) Br Bu4NBr3, DCM

NH NH 28 29

[00161] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, foram adicionados intermediário 28 7-metilindolina (120 mg, 0,902 mmol), tribrometo de tetra-n-butilamônio (464 mg, 0,902 mmol) e diclorometano (10,0 mL) à temperatura ambiente. A reação foi agitada por 30 minutos. Depois que a reação foi concluída como detectado por LCMS, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada com 100 mL de água e extraída com acetato de etila (150 mL × 3). A fase orgânica combinada foi lavada com solução salina saturada (100 mL), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:5) para dar o Intermediário 29 5-bromo-7- metilindolina (200 mg, sólido roxo claro). Rendimento: 80,6%. LCMS: m/z 211,9 (M + H).

Etapa 3. Síntese de 1-(5-bromo-7-metilindolin-1-il)-2-(2- cloropiridin-3-il)etan-1-ona (30)

[00162] Em um balão seco de fundo redondo de 100 mL, Intermediário 29 (80 mg, 0,38 mmol), Composto 9 ácido 2- (2-cloropiridin-3-il)acético (67 mg, 0,38 mmol), N,N-di- isopropiletilamina (0,25 mL, 1,52 mmol), solução de T3P (1,208 g, 50% (em peso) em acetato de etila (1,9 mmol)) e N,N-dimetilformamida (5,0 mL) foram adicionados. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 30 minutos. Após a reação estar completa, a reação foi adicionada com 100 mL de água e extraída com acetato de etila (150 mL × 3). A fase orgânica combinada foi lavada com solução salina saturada (100 mL × 6), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida.

O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila: éter de petróleo = 1:5) para dar o Intermediário 30 1-(5- bromo-7-metilindolin-1-il)-2-(2-cloropiridina-3-il)etan-1- ona (50 mg, sólido esbranquiçado). Rendimento: 36,3%. LCMS: m/z 364,8 (M + H).

Etapa 4. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-metil-5- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)indolina-1-il) etan-1-ona (31)

[00163] Em um balão seco de fundo redondo de 100 mL, Intermediário 30 1-(5-bromo-7-metilindolin-1-il)-2-(2- cloropiridin-3-il)etan-1-ona (400 mg, 1,09 mmol), dicloreto de bis(pinacolato)diboro (1,38 g, 5,43 mmol), acetato de potássio (233 mg, 3,27 mmol), dicloreto de 1,1-bis (difenilfosfino)ferroceno)paládio (II) (70 mg, 0,11 mmol) e 1,4-dioxano (20,0 mL) foram adicionados à temperatura ambiente, purgou-se com nitrogênio gasoso cinco vezes, aqueceu-se a 90 °C e agitou-se durante a noite. Depois que a reação foi concluída como detectado por LCMS, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada com 100 mL de água e extraída com acetato de etila (150 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:10) para dar o Intermediário 31 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-metil-5-

(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)indolin-1-il) etan-1-ona (200 mg, sólido branco). Rendimento: 44,0%.

LCMS: m/z 413,0 (M + H).

Intermediário 53: Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7- fluoro-2-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)indolin-1-il)etan-1-ona Etapa 1. Síntese de 2-(3-fluoro-2-nitrofenil)-3-oxobutirato de etila (47)

[00164] Em um balão seco de fundo redondo de 100 mL, acetoacetato de etila (46) (6,1 g, 0,047 mol), carbonato de potássio (8,7 g, 0,063 mol), 1,3-difluoro-2-nitrobenzeno (5 g, 0,031 mol), N,N-dimetilformamida (20 mL) foram adicionados sequencialmente à temperatura ambiente, aquecidos a 50 °C e agitados por 2 h. Depois que a reação foi completada como monitorada por TLC, a reação foi diluída por adição de água (100 mL) e extraída com acetato de etila (80 mL × 3). A fase orgânica combinada foi lavada com solução salina saturada (300 mL × 3), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (acetato de etila:éter de petróleo = 1:100) para dar 2-(3- fluoro-2-nitrofenil)-3-oxobutirato de etila 47 (2,8 g, óleo amarelo pálido). Rendimento: 33%. 1H RMN (CDCl3, 300 MHz): 13,07 (s, 1H), 7,58-7,40 (m, 1H), 7,30-7,19 (m, 1H), 7,16- 7,01 (m, 1H), 4,31-4,00 (m, 2H ), 1,87 (s, 3H), 1,18 (t, J = 7,2 Hz, 3H).

Etapa 2. Síntese de 1-(3-fluoro-2-nitrofenil)propan-2-ona (48)

[00165] Em um balão de fundo redondo de 100 mL seco, foram adicionados 2-(3-fluoro-2-nitrofenil)-3-oxobutirato de etila (2,8 g, 0,01 mol), ácido acético (20 mL), ácido sulfúrico a 50% (20 mL) à temperatura ambiente, aqueceu a

100 °C e agitou-se durante 4 h. Depois que a reação foi completada como monitorada por TLC, a reação foi diluída por adição de água (100 mL) e extraída com acetato de etila (80 mL × 3). A fase orgânica combinada foi lavada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (200 mL × 2), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Purificação por cromatografia em coluna sobre sílica gel (acetato de etila:éter de petróleo = 1:5) para dar 1-(3-fluoro-2- nitrofenil)propan-2-ona 48 (1,86 g, óleo amarelo claro).

Rendimento: 91%. 1H RMN (DMSO-d6, 300 MHz): 7,73-7,63 (m, 1H), 7,57-7,48 (m, 1H), 7,31 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 4,13 (s, 3H), 2,51 (s, 2H).

Etapa 3. Síntese de 7-fluoro-2-metil-1H-indol (49)

[00166] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, água destilada (32 mL) e hidrosulfito de sódio (13,2 g, 0,076 mol) foram adicionados sequencialmente e, em seguida, a solução de 1-(3-fluoro-2-nitrofenil)propan-2-ona (1,5 g, 0,0076 mmol) em 1,4-dioxano (3,4 mL) foi adicionado gota a gota. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 2 h. Depois que a reação foi completada como monitorada por

TLC, a reação foi diluída por adição de água (80 mL) e extraída com acetato de etila (60 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida.

A purificação por cromatografia em coluna sobre sílica gel (éter de petróleo puro) deu 7-fluoro-2-metil-1H-indol 49 (250 mg, sólido branco). Rendimento: 22%. 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz): 11,34 (s, 1H), 7,21 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 6,93- 6,72 (m, 2H), 6,19 (s, 1H), 2,39 (s, 3H).

Etapa 4. Síntese de 7-fluoro-2-metilindolina (50)

[00167] Em um balão seco de fundo redondo de 100 mL em banho de gelo, 7-fluoro-2-metil-1H-indol 49 (1,8 g, 12,08 mmol), ácido acético (20 mL), cianoboro-hidreto de sódio (2,28 g, 36,19 mmol) foram sequencialmente adicionados. A reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 2 h. Depois que a reação foi completada como monitorada por TLC, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. Foi adicionado acetato de etila (100 mL) ao resíduo para dissolvê-lo. A solução foi lavada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (80 mL × 3), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (acetato de etila:éter de petróleo = 1:70) para dar 7- fluoro-2-metilindolina 50 (1,4 g, óleo incolor).

Rendimento: 77%. LCMS: m/z 152,1 (M + H).

Etapa 5. Síntese de 5-bromo-7-fluoro-2-metilindolina (51)

[00168] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL em banho de gelo, 7-fluoro-2-metilindolina 50 (1,4 g, 9,27 mmol), acetonitrila (20 mL), N-bromossuccinimida (1,65 g, 9,27 mmol) foram adicionados sequencialmente. A reação foi gradualmente aquecida até a temperatura ambiente e agitada por 2 h. Depois que a reação foi completada como monitorada por TLC, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila: éter de petróleo = 1:70) para dar o produto 5-bromo-7-fluoro-2-metilindolina 51 (1,5 g, óleo amarelo claro). Rendimento: 71%. LCMS: m/z 229,9/231,9 (M + H).

Etapa 6. Síntese de 1-(5-bromo-7-fluoro-2-metilindolin-1- il)-2-(2-cloropiridin-3-il)etan-1-ona (52)

[00169] Em um balão seco de fundo redondo de 100 mL, ácido 5-bromo-7-fluoro-2-metilindolina 7 (1,0 g, 4,35 mmol), ácido 2-(2-cloropiridin-3-il)acético (748 mg, 4,35 mmol), N,N-dimetilformamida (10 mL), N,N-di- isopropiletilamina (2,24 g, 17,36 mmol) foram adicionados sequencialmente à temperatura ambiente, purgados com nitrogênio gasoso três vezes, aquecidos a 50 °C, adicionados com anidrido 1-propilfosfônico (26 mL, solução a 50% em acetato de etila) e agitada por 0,5 h. Depois que a reação foi completada como monitorada por TLC, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi vertido em água gelada. O sólido precipitou e foi filtrado. O bolo do filtro foi seco para dar 1-(5-bromo-7-fluoro-2- metilindolin-1-il)-2-(2-cloropiridin-3-il)etan-1-ona 52 (1,5 g, marrom claro sólido). Rendimento: 90%. LCMS: m/z 382,8/384,8 (M + H).

Etapa 7. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-2- metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) indolin-1-il)etan-1-ona (53)

[00170] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL,

1-(5-bromo-7-fluoro-2-metilindolin-1-il)-2-(2-cloropiridin-

3-il)etan-1-ona (52) (500 mg, 1,3 mmol), bis(pinacolato)

diboro (496 mg, 1,95 mmol), acetato de potássio (383 mg,

3,9 mmol) e 1,4-dioxano (20 mL) foram adicionados sequencialmente à temperatura ambiente, purgados com nitrogênio gasoso uma vez, adicionado com complexo dicloreto de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio

(II) diclorometano (10,6 mg, 0,013 mol), purgado com nitrogênio gasoso três vezes, aquecido a 90 °C e agitado por 3 h.

Depois que a reação foi concluída como monitorada por LCMS, a reação foi concentrada sob pressão reduzida.

O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (acetato de etila:éter de petróleo = 1:3) para dar

2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-2-metil-5-(4,4,5,5-

tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)indolin-1-il)etan-1-ona

53 (450 mg, óleo incolor). Rendimento: 80%. LCMS: m/z 430,9

(M + H).

Intermediário 70: Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1- (4,7-difluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)indolin-1-il)etan-1-ona (70) Etapa 1. Síntese de 5-bromo-4,7-difluoro-1H-indol (67)

[00171] Adicionou-se brometo de vinilmagnésio (45,6 mL, 45,6 mmol) em tetra-hidrofurano (50 mL). A mistura foi arrefecida a -78 °C sob nitrogênio gasoso e foi adicionada gota a gota com o Composto 66 (3,9 g, 15,2 mmol, dissolvido em 50 mL de tetra-hidrofurano). Após a conclusão da adição, a reação foi agitada por 2 h. Depois de concluída a reação, a reação foi lentamente adicionada com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (20 mL) e foi extraída com acetato de etila (20 mL × 3). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:8) para dar 5-bromo-4,7-difluoro-1H-indol 67 (1,47 g, óleo amarelo claro). Rendimento: 38,7%.

[00172] 1H RMN (CD3OD, 300 MHz): 7,29 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 7,01-6,97 (m, 1H), 6,60-6,54 (m, 1H).

Etapa 2. Síntese de 5-bromo-4,7-difluoro-indolina (68)

[00173] Em um balão de fundo redondo de 50 mL em banho de água gelada, o Composto 67 (1,45 g, 6,28 mmol) e ácido acético glacial (20 mL) foram adicionados sequencialmente e cianoboro-hidreto de sódio (0,87 g, 12,6 mol) foi adicionado em porções ao longo de aproximadamente 30 minutos. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. Após a reação estar completa, a reação foi resfriada em banho de água gelada, foi lentamente adicionada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio para ajustar o pH a 6 a 7 e foi extraída com acetato de etila (10 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo =

1:6) para dar 5-bromo-4,7-difluoro-indolina 68 (0,43 g, óleo amarelo claro). Rendimento: 30,0%. LCMS: m/z 234,0/236,0 (M + H).

Etapa 3. Síntese de 1-(5-bromo-4,7-difluoro-indolin-1-il)- 2-(2-cloropiridin-3-il)etan-1-ona (69)

[00174] Em um balão de 100 mL, Composto 68 (0,43 mg, 0,185 mol), acetato de etila (10 mL), Composto 9 (0,35 g, 2,04 mmol), T3P (solução a 50% em acetato de etila, P/P, 2,83 g, 3,71 mmol), di-isopropiletilamina (0,48 g, 3,71 mmol) foram adicionados sequencialmente à temperatura ambiente. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. Depois de concluída a reação, a reação foi lentamente adicionada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio para ajustar o pH a 6 a 7 e foi extraída com acetato de etila (10 mL × 4). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:3) para dar 1-(5-bromo-4,7-difluoro-indolin-1- il)-2-(2-cloropiridin-3-il)etan-1-ona 69 (0,56 g, óleo amarelo claro). Rendimento: 78,2%. LCMS: m/z 386,9/388,9 (M + H).

Etapa 4. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(4,7- difluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) indolin-1-il)etan-1-ona (70)

[00175] Composto 69 (0,27 g, 0,69 mmol), bis (pinacolato)diboro (0,23 g, 0,89 mol), acetato de potássio (0,10 g, 1,02 mmol), dicloreto de (1,1'-bis(difenil fosfino)ferroceno)paládio (II) foram adicionados sequencialmente (0,028 g, 0,89 mmol) em 1,4-dioxano (10 mL) em um balão de fundo redondo seco de 100 mL. A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, aquecida a 90 °C e agitada por 16 h. Depois de concluída a reação, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:3) para dar o produto bruto 2-(2-cloropiridin-3-il)-1- (4,7-difluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)indolin-1-il)etan-1-ona 70 (0,18 g, sólido amarelo claro). LCMS: m/z 434,7/436,8 (M + H).

Intermediário 77: Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1- (6,7-difluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)indolin-1-il)etan-1-ona (77) Etapa 1. Síntese de 4-bromo-2,3-difluoro-6-iodofenilamina (72)

[00176] Em um balão de fundo redondo de 100 mL, o composto 71 (0,85 g, 4,1 mmol), ácido acético glacial (15 mL), N-iodosuccinimida (0,97 g, 4,31 mmol) foram adicionados sequencialmente. Após a conclusão da adição, a reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 h. Depois de concluída a reação, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi adicionado com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio para ajustar o pH para 6 a 7 e extraído com acetato de etila (20 mL × 3). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:10) para dar 4-bromo-2,3-difluoro-6-iodofenilamina 72 (1,30 g, sólido amarelo claro). Rendimento: 95%. LCMS: m/z 333,9/335,8 (M + H).

Etapa 2. Síntese de 4-bromo-2,3-difluoro-6- ((trimetilsilil)etinil)fenilamina (73)

[00177] Em um balão de fundo redondo de 100 mL, Composto 72 (1,30 g, 3,91 mmol), trietilamina (20 mL), iodeto cuproso (37,2 mg, 0,20 mol), etiniltrimetilsilano (460 mg, 4,69 mmol), dicloreto de bis(trifenilfosfina) paládio (II) foram adicionados sequencialmente (137 mg, 0,20 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. Depois de concluída a reação, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:10) para dar 4-bromo-2,3-difluoro-6-((trimetilsilil)etinil) fenilamina 73 (1,02 g, óleo amarelo pálido). Rendimento:

86,2%. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 7,32 (d, J = 7,2, 1H), 5,86 (s, 2H), 0,25 (s, 9H).

Etapa 3. Síntese de 5-bromo-6,7-difluoro-1H-indol (74)

[00178] Em um balão em forma de berinjela de 50 mL, foram adicionados o composto 73 (0,85 g, 2,80 mmol), N,N- dimetilformamida (2 mL), iodeto cuproso (1,07 g, 5,61 mmol). A reação foi aquecida a 100 °C sob gás nitrogênio e agitada por 4 h. Após a reação estar completa, a reação foi resfriada à temperatura ambiente, adicionada com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:6) para dar 5-bromo-6,7-difluoro-1H-indol 74 (560 mg, óleo amarelo claro). Rendimento: 86%. 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 12,46 (s, 1H), 7,74-7,70 (m, 1H), 7,51 (s, 1H), 3,36 (d, J = 5,6 Hz, 1H).

Etapa 4. Síntese de 5-bromo-6,7-difluoro-indolina (75)

[00179] Em um balão de fundo redondo de 50 mL em banho de água gelada, o Composto 74 (0,56 g, 2,42 mmol) e ácido acético glacial (10 mL) foram adicionados sequencialmente e cianoboro-hidreto de sódio (0,35 g, 4,85 mmol) foi adicionado em porções durante cerca de 30 minutos. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. Após a reação estar completa, a reação foi colocada em banho de água gelada, adicionada lentamente com solução saturada de bicarbonato de sódio para ajustar o pH a 6 a 7 e depois extraída com acetato de etila (10 mL × 3).

A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:6) para dar o produto bruto 5-bromo-6,7- difluoro-indolina 75 (0,23 g) como um óleo amarelo claro.

LCMS: m/z 233,9/235,9 (M + H); RT = 1,470 min (2,5 min).

Etapa 5. Síntese de 1-(5-bromo-6,7-difluoro-indolin-1-il)- 2-(2-cloropiridin-3-il)etan-1-ona (76)

[00180] Em um balão de 100 mL, Composto 75 (0,23 mg, 0,99 mmol), acetato de etila (10 mL), Composto 9 (0,20 g, 1,18 mmol), T3P (solução a 50% em acetato de etila, P/P, 1,26 g, 1,98 mmol), di-isopropiletilamina (0,38 g, 2,96 mmol) foram adicionados sequencialmente à temperatura ambiente. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 3 h. Depois de concluída a reação, a reação foi lentamente adicionada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio para ajustar o pH a 6 a 7 e extraída com acetato de etila (10 mL × 4). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:3) para dar 1-(5-bromo-6,7-difluoro-indolin-1-il)-2-(2- cloropiridin-3-il)etan-1-ona 76 (0,10 g, óleo amarelo claro). Rendimento: 26,2%. LCMS: m/z 386,9/388,9 (M + H); RT = 1,427 min (2,5 min).

Etapa 6. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(6,7- difluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) indolin-1-il)etan-1-ona (77)

[00181] Composto 76 (0,10 g, 0,26 mmol), bis (pinacolato)diboro (0,079 g, 0,31 mmol), acetato de potássio (0,038 g, 0,39 mmol), dicloreto de 1,1-bis (difenilfosfino)ferroceno)paládio(II) (0,011 g, 0,013 mmol) foram adicionados sequencialmente em 1,4-dioxano (10 ml) em um balão de fundo redondo seco de 50 mL. A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, aquecida a 90 °C e agitada por 5 h. Depois de concluída a reação, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:3) para dar o produto bruto 2-(2-cloropiridin-3-il)-1- (6,7-difluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)indolin-1-il)etan-1-ona 77 (0,065 g, sólido amarelo claro). LCMS: m/z 435,1/437,1 (M + H).

Intermediário 89: Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7- fluoro-3-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)indolin-1-il)etan-1-ona (89)

Etapa 1. Síntese de 7-fluoro-3-metil-1H-indol (85)

[00182] O composto 84 (200,0 mg, 1,23 mmol) foi adicionado a tetra-hidrofurano (15 mL). A mistura foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, resfriada a 0 °C e adicionada com hidreto de alumínio e lítio (140,0 mg, 3,69 mmol). Depois de completada a adição, a reação foi naturalmente aquecida até a temperatura ambiente e agitada por 2 h. Após a reação estar completa, a reação foi adicionada gota a gota com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (20 mL × 3). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:8) para dar 7-fluoro-3-metil-1H-indol 85 (130,0 mg, óleo amarelo claro). Rendimento: 71,0%.

[00183] 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 11,21 (s, 1H), 7,29 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,17 (s, 1H), 6,97-6,87 (m, 2H).

Etapa 2. Síntese de 7-fluoro-3-metil-indolina (86)

[00184] Em um balão de fundo redondo de 50 mL em banho de água gelada, o Composto 85 (819,0 mg, 5,49 mmol) e ácido acético glacial (20 mL) foram adicionados sequencialmente e adicionados em prótons com cianoboro- hidreto de sódio (691,0 mg, 10,99 mol) por cerca de 30 minutos. A reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 16 h. Após a reação estar completa, a reação foi resfriada em banho de água gelada, lentamente adicionada com solução saturada de bicarbonato de sódio para ajustar o pH a 6 a 7 e extraída com acetato de etila (10 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:6) para dar 7-fluoro-3-metil-indolina 86 (49,0 mg, óleo amarelo claro).

LCMS: m/z 152,0 (M + H).

Etapa 3. Síntese de 5-bromo-7-fluoro-3-metil-indolina (87)

[00185] Em um balão de 50 mL em banho de água gelada, foram adicionados o composto 86 (49,0 mg, 0,324 mmol) e diclorometano (5 mL) e adicionou-se N- bromossuccinimida (63 mg, 0,356 mmol) em porções. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 4 h. Após a reação estar completa, a reação foi concentrada à temperatura ambiente sob pressão reduzida, lentamente adicionada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio para ajustar o pH a 6 a 7 e extraída com acetato de etila (10 mL × 4). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:5) para dar 5-bromo-7-fluoro-3-metil-indolina 87 (61,0 mg, sólido amarelo claro). Rendimento: 82,0%. LCMS: m/z 229,8/231,8 (M + H).

Etapa 4. Síntese de 1-(5-bromo-7-fluoro-3-metil-indolin-1- il)-2-(2-cloropiridin-3-il)etan-1-ona (88)

[00186] Em um balão de 50 mL, Composto 87 (61,0 mg, 0,266 mol), acetato de etila (5 mL), T3P (solução a 50% em acetato de etila, P/P, 406,0 mg, 0,53 mmol), di- isopropiletilamina (103,0 mg, 0,80 mmol) foram adicionados sequencialmente à temperatura ambiente. A reação foi agitada por 3 h. Depois de concluída a reação, a reação foi lentamente adicionada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio para ajustar o pH a 6 a 7 e foi extraída com acetato de etila (10 mL × 4). Os solventes foram removidos da fase orgânica combinada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:3) para dar 1-(5-bromo-7-fluoro-3-metil-indolin-1-il)-2-(2- cloropiridin-3-il)etan-1-ona 88 (79,0 mg, óleo amarelo claro). Rendimento: 78,0%. LCMS: m/z 382,5/384,6 (M + H).

Etapa 5. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-3- metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) indolin-1-il)etan-1-ona (89)

[00187] Composto 88 (45,0 mg, 0,12 mmol), bis (pinacolato)diboro (36,0 mg, 0,14 mmol), acetato de potássio (17,3 mg, 0,18 mmol), dicloreto de 1,1-bis (difenilfosfina)ferroceno)paládio (II) (4,8 mg, 0,0058 mmol) foram adicionados sequencialmente a 1,4- dioxano (10 ml) em um balão de fundo redondo seco de 50 ml.

A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, aquecida a 90 °C e agitada por 3 h. Depois de concluída a reação, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila: éter de petróleo = 1:3) para dar 2-(2-cloropiridin-3-il)-1- (7-fluoro-3-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)indolin-1-il)etan-1-ona 89 (36,0 mg, sólido castanho claro). Rendimento: 76,0%. LCMS: m/z 430,8/432,8 (M + H).

Intermediário 57: Síntese de ácido 2-(2-cloro-4-fluoro- piridin-3-il)acético (57)

Etapa 1. Síntese de 2-(2-cloro-4-fluoropiridin-3-il) acetato de etila (56)

[00188] Em um balão de fundo redondo de 50 mL, Composto 54 (1,0 g, 5,71 mmol), diclorometano (25 mL), N,N- dimetilformamida (1 mL) foram adicionados sequencialmente à temperatura ambiente e, em seguida, a solução de cloreto de oxalila (0,90 g, 7,14 mmol) em diclorometano (10 mL) foi adicionada gota a gota. Após a conclusão da adição, a reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h e foi concentrada sob pressão reduzida. 15 mL de tetra- hidrofurano anidro foram adicionados ao resíduo. A mistura foi adicionada gota a gota à solução de Composto 55 (solução 2M em n-hexano, 5,2 mL, 10,3 mmol) e trietilamina (1,04 g, 10,3 mmol) em acetonitrila e tetra-hidrofurano

(20 mL:20 mL) em banho de água gelada. Em seguida, a reação foi agitada a 0 °C por 1 h, depois colocada no compartimento de congelamento do refrigerador por 16 h, diluída por adição de acetato de etila (100 mL) e lavada com água. A fase orgânica foi ajustada com 0,5 mmol/L de ácido clorídrico a pH 4 a 5, agitada à temperatura ambiente por 5 minutos, depois ajustada com solução aquosa de hidróxido de sódio a 1 mol/L a pH 8 a 9, lavada com salmoura saturada, seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrado. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida.

O resíduo resultante foi dissolvido em 20 mL de etanol, adicionado com trietilamina (692 mg, 6,85 mmol), adicionado em porções com benzoato de prata (197 mg, 0,86 mmol) à temperatura ambiente, agitado por 10 minutos, aquecido a 80 °C, agitado por 10 minutos e resfriado à temperatura ambiente. Após filtração por sucção, o filtrado foi concentrado. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:7) para dar 2-(2-cloro-4- fluoropiridin-3-il)acetato de etila 56 (250 mg, óleo incolor). Rendimento: 20,0%. LCMS: m/z 217,8/219,8 (M + H).

Etapa 2. Síntese do ácido 2-(2-cloro-4-fluoro-piridin-3-il) acético (57)

[00189] À temperatura ambiente, o Composto 56 (250 mg, 1,15 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (10 mL) e adicionado com solução aquosa de hidróxido de lítio (10 mL, 0,5 mol/L). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. Depois que a reação foi concluída como detectado por LCMS, foi adicionado acetato de etila (10 mL). A fase aquosa foi ajustada com ácido clorídrico diluído a 0,5 mol/L para pH 3 a 4. Após filtração por sucção, o bolo do filtro foi lavado com água e seco para dar ácido 2-(2-cloro-4-fluoro-piridin-3-il) acético 57 (220 mg, óleo bruto, amarelo claro). LCMS: m/z 189,9/191,9 (M + H).

[00190] Os intermediários 65 e 83 foram obtidos analogamente à preparação do intermediário 57 a partir dos materiais de partida correspondentes listados na tabela abaixo: No. do Material de Estrutura do Dados analíticos intermediário partida intermediário LCMS: m/z 152,1 65 (M+H) LCMS: m/z 171,9 (M+H) 83

Intermediário 82: Síntese de ácido 3-(2-cloropiridin-3-il) propiônico (82) Etapa 1. Síntese de (E)-3-(2-cloropiridin-3-il)acrilato de etila (80)

[00191] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL em banho de gelo, foram adicionados o Composto 79 (634 mg, 4,46 mmol), tetra-hidrofurano (50 mL), hidreto de sódio (357 mg, 8,93 mmol). A reação foi agitada em banho de gelo por 0,5 h, adicionada com o composto 78 (1000 mg, 4,46 mmol), aquecida gradualmente até a temperatura ambiente e agitada por 1 h. A reação foi realizada sob monitoramento por LCMS, extinta com solução aquosa saturada de cloreto de amônio e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). A fase orgânica foi seca e concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (éter de petróleo:acetato de etila = 5:1) para dar (E)-3-(2-cloropiridin-3-il)acrilato de etila 80

(300 mg, sólido branco). Rendimento: 20%. LCMS: m/z 212,0 (M + H).

Etapa 2. Síntese de 3-(2-cloropiridin-3-il)propionato de etila (81)

[00192] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, Composto 80 (300 mg, 1,4 mmol), metanol (12 mL), água (3 mL), cloreto cuproso (140 mg, 1,4 mmol), boro-hidreto de sódio (54 mg, 1,4 mmol) foram adicionados à temperatura ambiente. Após a reação ter sido agitada a 0 °C por 1 h, foi adicionado boro-hidreto de sódio adicional (54 mg, 1,4 mmol). A reação foi gradualmente aquecida até a temperatura ambiente e agitada por 1 h. A fração foi completada como monitorada por LCMS. A reação foi extinta com água gelada e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). A fase orgânica foi seca e concentrada. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (éter de petróleo:acetato de etila = 5:1) para dar 3-(2-cloropiridin-3-il)propionato de etila 81 (260 mg, sólido branco). Rendimento: 86%. LCMS: m/z 214,0 (M + H).

Etapa 3. Síntese do ácido 3-(2-cloropiridin-3-il) propiônico (82)

[00193] Em um balão seco de fundo redondo de 100 mL, o Composto 81 (260 mg, 1,21 mmol), hidróxido de lítio monohidratado (153 mg, 3,64 mmol), tetra-hidrofurano (20 mL), metanol (4 mL) e água (4 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi agitada por 2 h. Depois que a reação foi completada como monitorada por TLC, a reação foi concentrada e liofilizada para dar o ácido 3- (2-cloropiridin-3-il)propiônico 82 (300 mg, sólido branco), que foi usado diretamente na próxima etapa sem purificação.

LCMS: m/z 185,9 (M + H).

Exemplo: Exemplo P1: Síntese do Composto 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-5- (2-((1-hidroxiprop-2-il)amino)pirimidin-4-il)indolin-1-il) etan-1-ona (P1)

[00194] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, foram adicionados o Intermediário 13 (100 mg, 0,22 mmol), DL-aminopropanol (84 mg, 1,10 mmol) e DMSO (0,5 mL) à temperatura ambiente. A reação foi aquecida a 90 °C e agitada por 1 h. Após a reação estar completa, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada com 100 mL de água e extraída com acetato de etila (150 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida.

O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila) para dar o produto P1 (10 mg, sólido branco).

Rendimento: 10,0%. LCMS: m/z 441,9 (M + H).

[00195] 1H-RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 8,334 (s, 1H), 8,333 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,76 (m, 3H), 7,84 (m, 1H), 7,83 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 7,43 (dd, J = 7,6 Hz, 5,2 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,71 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 4,29 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 4,08 (s, 2H), 3,50 (m, 1H), 3,31 (m, 2H), 3,23 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 1,16 (d, J = 6,4 Hz, 2H).

[00196] Os exemplos P2 a P7 foram obtidos analogamente à preparação do Exemplo P1 de acordo com o esquema geral A, como mostrado na Figura 1 do Intermediário 13 e as aminas correspondentes.

Ex.

Estrutura Nome Dados analíticos P2 2-(2- 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ cloropiridin- 8,34 (d, J = 2,8 Hz, 2H), 3-il)-1-(7- 7,98 – 7,75 (m, 3H), 7,43 fluoro-5-(2- (dd, J = 7,4, 4,8 Hz, 1H), ((2- 7,16 (d, J = 5,2 Hz, 1H), hidroxietil) 7,07 (t, J = 5,6 Hz, 1H), amino) 4,70 (s, 0H), 4,29 (t, J = pirimidin-4- 7,9 Hz, 2H), 4,08 (s, 2H), il)indolin-1- 3,55 (s, 2H), 3,42 (s, 1H), il)etan-1-ona 3,23 (t, J = 7,9 Hz, 2H). LCMS: m/z 427,9 (M+H). P3 2-(2- 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δ cloropiridin- 8,36-8,31 (m, 2H), 7,92-7,87 3-il)-1-(7- (m, 2H), 7,81 (d, J = 12,3 fluoro-5-(2- Hz, 1H), 7,43 (dd, J = 7,5, ((4- 4,8 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 5,2 hidroxiciclo- Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,0 Hz, hexil)amino) 1H), 4,56 (s, 1H), 4,29 (t, J pirimidin-4- = 7,9 Hz, 2H), 4,08 (s, 2H), il)indolin-1- 3,73 (s, 1H), 3,41 (s, 1H), il)etan-1-ona 3,23 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 1,95-1,81 (m, 4H), 1,35-1,20 (m, 4H). LCMS: m/z 481,6. P4 2-(2- 1H-NMR (DMSO-d , 400 MHz): δ 6 cloropiridin- 8,34 (d, J = 4,7 Hz, 2H), 3-il)-1-(7- 7,93 – 7,79 (m, 3H), 7,43 fluoro-5-(2- (dd, J = 7,4, 4,7 Hz, 1H), ((3- 7,14 (t, J = 5,3 Hz, 3H), hidroxiciclo 4,44 (s, 1H), 4,28 (t, J = pentil)amino) 7,8 Hz, 2H), 4,22 (s, 1H), pirimidin-4- 4,13 (s, 1H), 4,07 (s, 2H), il)indolin-1- 3,58 (s, 0H), 3,25 – 3,20 (m, il)etan-1-ona 1H), 1,91 (s, 2H), 1,68 (s, 4H), 1,48 (d, J = 6,0 Hz, 2H). LCMS: m/z 467,9 (M+H). P5 2-(2- 1H-NMR (CDCl , 400 MHz): δ 3 cloropiridin- 8,33 (br, 2H), 7,77-7,68 (m, 3-il)-1-(7- 3H), 7,24 (s, 1H), 6,94 (d, J fluoro-5-(2 - = 4,76 Hz, 1H), 4,33 (t, J = ((tetra- 7,8 Hz, 2H), 4,15 (br, 1H), hidro-2H- 4,07-3,95 (m, 4H), 3,61 (t, J piran-4- = 11,0 Hz, 2H), 3,20 (t, J = il)amino) 7,8 Hz, 2H), 2,13-2,04 (m, pirimidin-4- 2H), 1,67-1,57 (m, 2H). il)indolin-1- LCMS: m/z 454,0 (M+H). il)etan-1-ona

P6 2-(2- 1H-NMR (CDCl3, 400 MHz): δ cloropiridin- 8,33 (br,2H), 7,79-7,68 (m, 3-il)-1-(7- 3H), 7,24 (s, 1H), 6,97 (d, J fluoro-5-(2- = 4,68 Hz, 1H), 4,69 (br, ((tetra- 1H), 4,34 (t, J = 7,72 Hz, hidrofuran-3- 2H), 4,08-4,02 (m, 2H), 3,99 il)amino) (s, 2H), 3,94-3,86 (m, 1H), pirimidin-4- 3,79 (dd, J = 3,0 Hz, 9,1Hz, il)indolin-1- 1H), 3,20 (t, J = 7,70 Hz, il)etan-1-ona 2H), 2,43-2,32 (m, 1H), 2,00- 1,91 (m, 1H). LCMS: m/z 454,0 (M+H). P7 2-(2- 1H-NMR (DMSO-d , 400 MHz): δ 6 cloropiridin- 8,36-8,30 (m, 2H), 7,93-7,86 3-il)-1-(7- (m, 2H), 7,84 (d, J = 12,7 fluoro-5-(2- Hz, 1H), 7,45 (dd, J = 7,5 ((4- Hz, 4,8 Hz, 1H), 7,12 (d, J = hidroxibutan- 5,1 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,1 2-il)amino) Hz, 1H), 4,42 (br, 1H), 4,30 pirimidin-4- (t, J = 7,92 Hz, 2H), 4,16 il)indolin-1- (br, 1H), 4,07 (s, 2H), 3,53- il)etan-1-ona 3,49 (m, 2H), 3,24 (t, J = 7,84 Hz, 2H), 1,79-1,68 (m, 1H), 1,68-1,57 (m, 1H), 1,17 (d, J = 6,3 Hz, 3H). LCMS: m/z 456,0 (M+H). Exemplo P8:

Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-5-(2-((1-

hidroxiprop-2-il)amino)piridin-4-il)indolin-1-il)etan-1-ona

(P8)

Etapa 1. Síntese de 2-((4-bromopiridin-2-il)amino)propan-1-

ol (24)

[00197] Em um frasco para micro-ondas seco de 20 mL, dimetilsulfóxido (8 mL), Composto 4-bromo-2-fluoropiridina (1 g, 0,0057 mol), Composto 2-aminopropanol (0,65 g, 0,0085 mol) e N,N-di-isopropiletilamina (1,1 g, 0,0085 mol) foram adicionados. A reação foi aquecida a 140 °C e agitada por 0,5 h. Depois que a reação foi completada como monitorado por LCMS, a reação foi vertida em água (10 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL × 3). A fase orgânica combinada foi lavada com solução salina saturada (10 mL × 3), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia flash com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:1) para dar o Composto 24 2-((4-bromopiridin-2-il)amino)propan-1-ol (0,8 g, sólido amarelo). Rendimento: 61%. LCMS: m/z 230,8/232,8 (M + H).

Etapa 2. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-5- (2-((1-hidroxiprop-2-il)amino)piridin-4-il)indolin-1-il) etan-1-ona (P8)

[00198] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, Intermediário 24 (0,05 g, 0,00021 mol), K2CO3 (0,058 g,

0,00042 mol), Intermediário 11 (0,108 g, 0,00026 mol), Pd(dppf)Cl2 (15 mg, 0,000021 mol), 1,4-dioxano (20 mL) e água destilada (2 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A mistura foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, aquecida a 80 °C e agitada por 5 h sob nitrogênio gasoso. Depois de concluída a reação, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O produto em bruto foi purificado por cromatografia em camada fina (acetato de etila) para dar o Composto P8 (0,04 g, sólido branco).

Rendimento: 43%. LCMS: m/z 440,7 (M + H).

[00199] 1H-RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 8,34 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,45 - 7,40 (m, 2H), 6,96 (br s, 1H), 6,88 (br s, 1H), 4,91 (br s, 1H), 4,28 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 4,08 (s, 2H), 4,05-3,96 (m, 1H), 3,52-3,44 (m, 1H), 3,37 (s, 1H), 3,22 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 1,15 (d, J = 6,5 Hz, 3H).

[00200] Os exemplos P10 a P16, P32, P34, P36, P44, P47 a 51, P53 e P58 a 59 foram obtidos analogamente à preparação do Exemplo P8 de acordo com o esquema geral B, como mostrado na Figura 2 do Intermediário 11, 53 ou um intermediário de borato análogo ao Intermediário 11.

Ex.

Estrutura Nome Dados analíticos 2-(2- 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6)

cloropiridin-3- δ 9,43 (s, 1H), 8,47 (d, il)-1-(7- J = 5,2 Hz, 1H), 8,31 fluoro-5-(2 - (dd, J = 4,8, 1,8 Hz, ((1-metil-1H- 1H), 7,89 (s, 1H), 7,87 pirazol-5- – 7,71 (m, 2H), 7,46 – il)amino) 7,36 (m, 2H), 7,34 (d, J P10 pirimidin-4- = 1,8 Hz, 1H), 6,24 (d, il)indolin-1- J = 1,7 Hz, 1H), 4,26 il)etan-1-ona (t, J = 7,9 Hz, 2H), 4,04 (s, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,20 (t, J = 7,8 Hz, 2H). LCMS: m/z 464,1(M+H). 1-(7-cloro-5- 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d ) 6 (2-((1-metil- δ 9,44 (s, 1H), 8,47 (d, 1H-pirazol-5- J = 5,2 Hz, 1H), 8,31 il)amino) (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, pirimidin-4- 1H), 8,00 (d, J = 2,3 il)indolin-1- Hz, 2H), 7,88 – 7,80 (m, il)-2-(2- 1H), 7,50 – 7,37 (m, P11 cloropiridin-3- 2H), 7,33 (d, J = 1,5 il)etan-1-ona Hz, 1H), 6,23 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 4,26 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 4,07 (s, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,17 (t, J = 7,5 Hz, 2H). LCMS:m/z 482,0 (M+H). 2-(2,4- 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d ) 6 difluorofenil)- δ 9,44 (s, 1H), 8,47 (d, 1-(7-fluoro-5- J = 5,2 Hz, 1H), 8,31 (2-((1-metil- (dd, J = 4,6, 1,5 Hz, 1H-pirazol-5- 1H), 8,00 (d, J = 2,3 il)amino) Hz, 2H), 7,88 – 7,80 (m, pirimidin-4- 1H), 7,50 – 7,37 (m, P12 il)indolin-1- 2H), 7,33 (d, J = 1,5 il)etan-1-ona Hz, 1H), 6,23 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 4,26 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 4,07 (s, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,17 (t, J = 7,5 Hz, 2H). LCMS: m/z 482,0 (M+H).

2-(2- 1H NMR (DMSO-d6, 400 cloropiridin-3- MHz): δ 9,41 (s, 1H), il)-1-(7-metil- 8,46 (d, J = 5,2 Hz, 5-(2-((1-metil- 1H), 8,35 (d, J = 4,5 1H-pirazol-5- Hz, 1H), 7,94 – 7,75 (m, il)amino) 3H), 7,51 – 7,32 (m, P13 pirimidin-4- 3H), 6,28 (s, 1H), 4,25 il)indolin-1- (t, J = 7,7 Hz, 2H), il)etan-1-ona 4,11 (s, 3H), 3,70 (s, 3H), 3,15 (s, 2H), 2,20 (s, 3H). LCMS: m/z 460,2 (M+H). 1-(7-cloro-5- 1H NMR (600 MHz, DMSO-d ) 6 (2-((1-metil- δ 8,83 (s, 1H), 8,35 (d, 1H-pirazol-5- J = 4,5 Hz, 1H), 8,16 il)amino) (d, J = 5,1 Hz, 1H), piridin-4- 7,88 (d, J = 7,4 Hz, il)indolin-1- 1H), 7,62 (s, 1H), 7,55 il)-2-(2- (s, 1H), 7,48 – 7,41 (m, P14 cloropiridin-3- 1H), 7,34 (s, 1H), 7,09 il)etan-1-ona (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,28 (s, 1H), 4,28 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 4,11 (s, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,20 (t, J = 7,3 Hz, 2H). LCMS: m/z 479,1 (M+H). 2-(2-cloro-5- 1H-NMR (CD OD, 400 MHz) δ 3 fluoropiridin- 8,47 (d, J = 5,2, 1H), 3-il)-1-(7- 8,28(d, J = 2,8 Hz, 1H), fluoro-5-(2- 7,93(s, 1H), 7,86 (d, J ((1-metil-1H- = 12,8 Hz, 1H), 7,77 pirazol-5- (dd, J = 8,4 Hz, 2,8 Hz, il)amino) 1H), 7,49 (s, 1H), 7,39 P15 pirimidin-4- (d, J = 5,2 Hz, 1H), il)indolin-1- 6,36 (s, 1H), 4,37 (t, J il)etan-1-ona = 8,0 Hz, 2H), 4,15 (s, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,28 (t, J = 7,6 Hz, 2H). LCMS: m/z 481,9/483,9 (M+H).

2-(2- 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) cloropiridin-3- δ 8,85 (s, 1H), 8,35 (d, il)-1-(7- J = 4,0 Hz, 1H), 8,17 fluoro-2-metil- (d, J = 5,2 Hz, 1H), 5-(2-((1-metil- 7,90 (d, J = 7,2 Hz, 1H-pirazol-5- 1H), 7,53 (s, 1H), 7,48- il)amino) 7,41 (m, 2H), 7,36 (s, piridin-4- 1H), 7,10 (d, J = 5,2 il)indolin-1- Hz, 1H), 7,02 (s, 1H), P16 il)etan-1-ona 6,28 (s, 1H), 4,97-4,89 (m, 1H), 4,19 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 3,98 (d, J (racemato) = 17,2 Hz, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,55 (dd, J = 9,2 Hz,16,8 Hz, 1H), 2,73 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 1,28 (d, J = 6,0 Hz, 3H). LCMS: m/z 476,9 (M+H). 2-(2- 1H-NMR (DMSO, 400 MHz):

cloropiridin-3- 9,46 (s, 1H), 8,53 (d, J il)-1-(7- = 5,2 Hz, 1H), 8,35 (d, fluoro-2-metil- J = 4,4 Hz, 1H), 7,96 5-(2-((1-metil- (s, 1H), 7,93-7,83 (m, 1H-pirazol-5- 2H), 7,49-7,35 (m, 3H), il)amino) 6,28 (s, 1H), 4,99-4,90 pirimidin-4- (m, 1H), 4,20 (d, J = P32 il)indolin-1- 16,4 Hz, 1H), 3,98 (d, J il)etan-1-ona = 16,8 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,57 (dd, J = 8,8 Hz, 16,8 Hz, 1H), 2,74 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 1,29 (d, J = 6,4 Hz, 3H). LCMS: m/z 478,0 (M+H). 2-(5-cloro-2- 1H-NMR (CD3OD, 400 MHz):

fluorofenil)-1- 8,46 (d, J = 5,2, 1H), (7-fluoro-5-(2- 7,90 (s, 1H), 7,84 (d, J ((1-metil-1H- = 13,2, 1H), 7,48 (d, J pirazol-5- = 2,4 Hz, 1H), 7,39 (dd, il)amino) J = 10,4 Hz, 6,4 Hz, pirimidin-4- 1H), 7,38 (d, J = 5,6 P34 il)indolin-1- Hz, 1H), 7,33 (m, 1H), il)etan-1-ona 6,36 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,33 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 4,02 (s, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,27 (t, J = 8,0 Hz, 2H). LCMS: m/z 480,5/482,6 (M+H).

2-(2-cloro-4- 1H NMR (CD3OD, 400 MHz): fluorofenil)-1- 8,47 (d, J = 5,2, 1H), (7-fluoro-5-(2- 7,91 (s, 1H), 7,86 (d, J ((1-metil-1H- = 12,4 Hz, 1H), 7,48 (s, pirazol-5- 1H), 7,44 (t, J = 8,4 il)amino) Hz, 1H), 7,39 (d, J = pirimidin-4- 5,6 Hz, 1H), 7,27 (dd, J P36 il)indolin-1- = 11,2 Hz, 2,8 Hz, 1H), il)etan-1-ona 7,10 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 6,35 (s, 1H), 4,34 (t, J = 8 Hz, 2H), 4,08 (s, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,26 (t, J = 8 Hz, 2H). LCMS: m/z 480,8/482,8 (M+H). 2-(2- 1H NMR (CD OD, 400 MHz): 3 cloropiridin-3- 8,34 (d, J = 4,4 Hz, il)-1-(7- 1H), 7,97(d, J = 6 Hz, fluoro-5-(2- 1H), 7,90 (d, J = 7,6 ((3- Hz, 1H), 7,52 (s, 1H), hidroxiciclo 7,44-7,39 (m, 2H), 6,96- butil)amino) 6,93(m, 1H), 6,82 (s, piridin-4- 1H), 4,50-4,49 (m, 0,5 il)indolin-1- H), 4,37 (t, J = 8 Hz, P53 il)etan-1-ona 2H), 4,33-4,27 (m, 0,5 H),4,14 (s, 2H), 4,09- 4,05 (m, 1H), 3,84-3,79 (racemato) (m, 1H), 3,29 (t, J = 8 Hz, 2H), 2,88-2,87 (m, 2H), 2,42-2,34 (m, 2H), 1,89-1,87 (m, 2H). LCMS: m/z 452,8/454,9 (M+H). 2-(2- 1H NMR (DMSO_d , 300 6 cloropiridin-3- MHz): 9,51 (s, 1H), 8,65 il)-1-(7- (s,1H),8,34 (s, 1H), fluoro-5-(6- 7,87(d, J = 6,6 Hz, 1H), ((1-metil-1H- 7,80 (s, 1H), 7,73(d, J pirazol-5- = 12,3 Hz, P44 il)amino) 1H),7,41(s,2H),7,14(s, pirimidin-4- 1H),6,33(s,1H), 4,28(t, il)indolin-1- J = 7,2 Hz, 2H), 4,07(s, il)etan-1-ona 2H),3,68(s, 3H),3,23(t, J = 7,2 Hz, 2H) LCMS: m/z 463,8/465,9 (M+H).

2-(2- 1H NMR (DMSO-d6, 400 cloropiridin-3- MHz): 9,36 (s, 1H), 8,39 il)-1-(7- (s, 1H), 8,35 (d, J = fluoro-5-(5- 4,4 Hz, 1H), 7,89 (d, J metil-2-((1- = 7,6 Hz, 1H), 7,46-7,37 metil-1H- (m, 3H), 7,32 (s, 1H), P47 pirazol-5- 6,24 (s, 1H), 4,29 (t, J il)amino) = 7,6 Hz, 2H), 4,09 (s, pirimidin-4- 2H), 3,68 (s, 3H), 3,22 il)indolin-1- (t, J = 8,4 Hz, 2H), il)etan-1-ona 2,25(s, 3H). LCMS: m/z 478,0/480,0 (M+H) 2-(2- 1H NMR (DMSO-d , 400 6 cloropiridin-3- MHz): 9,34 (s, 1H), 8,39 il)-1-(7- (s, 1H), 8,35 (d, J = fluoro-2-metil- 4,8 Hz, 1H), 7,90 (d, J 5-(5-metil-2- = 7,2 Hz, 1H), 7,49 (s, ((1-metil-1H- 1H), 7,44-7,39 (m, 2H), pirazol-5- 7,33 (s, 1H), 6,25 (s, il)amino) 1H), 4,94 (t, J = 7,2 pirimidin-4- Hz, 1H), 4,20 (d, J = P48 il)indolin-1- 16,8 Hz, 1H), 3,98 (d, J il)etan-1-ona = 16,8 Hz, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,59-3,53 (m, 1H), 2,71(d, J = 16,4 Hz, 1H), 2,26 (s, 3H), 1,29 (d, J = 6,0 Hz, 3H). LCMS: m/z 492,1/494,1 (M+H).

2-(2- 1H NMR (DMSO-d6, 400 cloropiridin-3- MHz): 9,34 (s, 1H), il)-1-(7- 8,39(s, 1H), 8,35 (d, J fluoro-2- = 4,4 Hz, 1H), 7,87 (d, (metoximetil)- J = 7,2 Hz, 1H), 7,46- 5-(5-metil-2- 7,40 (m, 3H), 7,33 (s, ((1-metil-1H- 1H), 6,24 (s, 1H), 5,01 pirazol-5- (m, 1H), 4,20 (t, J = P49 il)amino) 16,8 Hz, 2H), 3,69 (s, pirimidin-4- 3H), 3,54-3,48 (m, 1H), il)indolin-1- 3,35 (d, J = 6,0 Hz, il)etan-1-ona 2H), 3,31 (s, 3H), 2,86 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 2,25(s, 3H). LCMS: m/z 522,1/524,1 (M+H).

2-(2- 1H-NMR (CD3OD, 400 MHz): cloropiridin-3- δ 8,49 (d, J = 5,6 Hz, il)-1-(4,7- 1H), 8,33 (d, J = 4,8 difluoro-5-(2- Hz, 1H), 7,89-7,83(m, ((1-metil-1H- 2H), 7,46-7,38 (m, 3H), P50 pirazol-5- 7,35(s, 1H), 4,43 (t, J il)amino) = 8,0 Hz, 2H), 4,14 (s, pirimidin-4- 2H), 3,78 (s, 3H), 3,29 il)indolin-1- (t, J = 8,0, 2H). il)etan-1-ona LCMS: m/z 482,0/484,0 (M+H). 2-(2- 1H NMR (CD OD, 400 MHz): 3 cloropiridin-3- δ 8,52 (s,1H), 8,35 il)-1-(6,7- (s,1H), 7,90(d, J = 8,0 difluoro-5-(2- Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), ((1-metil-1H- 7,54 (s, 1H), 7,45 (s, pirazol-5- 1H), 7,35 (s, 1H), 6,44 P51 il)amino) (s, 1H), 4,40 (t, J = pirimidin-4- 8,0 Hz, 2H), 4,17 (s, il)indolin-1- 2H), 3,81 (s, 3H), 3,26 il)etan-1-ona (t, J = 8,0 Hz, 2H). LCMS: m/z 481,6/483,6 (M+H). 2-(2- 1H NMR (400 MHz, CDCl ) δ 3 cloropiridin-3- 8,35(d, J = 4,0 Hz, 1H), il)-1-(7- 8,20 (s, 1H), 7,75 (d, J fluoro-2- = 7,4 Hz, 1H), 7,56 (s, (metoximetil)- 1H), 7,27 – 7,20 (m, 5-(2-((1-metil- 4H), 7,03 (d, J = 5,3 1H-pirazol-5- Hz, 1H), 6,72 (s, 1H), il)amino) 6,24 (s, 1H), 5,05 (d, J P58 piridin-4- = 7,6 Hz, 1H), 4,05 (s, il)indolin-1- 2H), 3,84 (s, 3H), 3,58 il)etan-1-ona – 3,51 (m, 1H), 3,47- 3,41 (m, 2H), 3,37 (s, 3H), 2,93 (d, J = 16,3 Hz, 1H). LCMS: m/z 507,1/509,1 (M+H).

2-(2- 1H NMR (CD3OD, 400 MHz): cloropiridin-3- δ 8,33 (d, J = 3,6 Hz, il)-1-(7- 1H), 8,14 (d, J = 5,6 fluoro-3-metil- Hz, 1H), 7,88 (d, J = 5-(2-((1-metil- 6,4 Hz,1H), 7,48 (s, 1H-pirazol-5- 2H), 7,44-7,39 (m, 2H), il)amino) 7,11 (d, J = 5,6 Hz,1H), piridin-4- 6,99 (s, 1H), 6,28 (s, P59 il)indolin-1- 1H), 4,53 (t, J = 8,4 il)etan-1-ona Hz, 1H), 4,14 (s, 2H), 3,91-3,87 (m, 1H),3,76 (s,3H), 3,61-3,59 (m, 1H),1,42 (d, J = 6,8 Hz, 3H). LCMS: m/z 477,0/479,0 (M+H). Exemplo P9: Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-5-(2-((1- metil-1H-pirazol-5-il)amino)piridin-4-il)indolin-1-il) etan-1-ona (P9) Etapa 1. Síntese de (4-(7-fluoroindolin-5-il)piridin-2-il) (1-metil-1H-pirazol-5-il)carbamato de t-butila (25)

[00201] Método I: Em um balão de fundo redondo seco de 50 mL, Intermediário 4 (600 mg, 2,279 mmol), 1,4-dioxano

(4 mL) e água (0,8 mL), Intermediário 8 (563 mg, 1,559 mmol), Pd(dppf)Cl2 (167 mg, 0,2279 mmol) e bicarbonato de sódio (383 mg, 4,56 mmol) foram adicionados à temperatura ambiente. A mistura foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, aquecida a 75 °C e agitada por 2 h. Após a reação estar completa, a reação foi filtrada a quente. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida para dar o produto bruto, que foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila/éter de petróleo = 1/5 a 3/1) para dar o intermediário 25 (4-(7-fluoroindolin-5-il) piridin-2-il)(1-metil-1H-pirazol-5-il)carbamato de t-butila (620 mg, sólido). Rendimento: 60,45%. 1H NMR (400 MHz, DMSO) d 8,27 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,49 (dd, J = 5,2, 1,6 Hz, 1H), 7,43 (s , 1H), 7,41 - 7,36 (m, 2H), 6,18 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,14 (s, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,57 (t, J = 8,8 Hz, 2H) , 3,08 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 1,41 (s, 9H) .LCMS: m/z 410,2 (M + H).

[00202] Método II: À temperatura ambiente, em um balão de fundo redondo seco de 250 mL, Intermediário 8 (0,984 g, 2,80 mmol), Intermediário 4 (0,88 g, 2,90 mol), trietilamina (1,19 g, 12 mmol), 1,4-dioxano (15 mL), água destilada (3 mL) foi adicionada sequencialmente e, em seguida, foi adicionado Pd(dppf)Cl2 (240 mg, 0,3 mol). A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes,

aquecida a 70 °C e agitada por 16 h. Depois que a reação foi concluída como monitorada por LCMS, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:3 ~ 1:5) para dar o intermediário 25 (4-(7-fluoroindolin-5-il) piridin-2-il)(1-metil-1H-pirazol-5-il)carbamato de t-butila (1,0 g, sólido). Rendimento de 88%. LCMS: m/z 410,1 (M + H).

[00203] Método III: Em um balão de fundo redondo (50 mL), Intermediário 8 (1,80 g), Intermediário 4 (2,15 g), metiltetra-hidrofurano (15 mL), trietilamina (2,06 g), água pura (3,6 g) e Pd(ddpf)Cl2 (1,25 g) foram adicionados sequencialmente. A mistura foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes e reagiu por cerca de 15 h, mantendo a temperatura entre 65 e 75 ºC. Depois que a reação foi concluída como detectado por HPLC, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi adicionado com MTBE e água da torneira para dissolver com agitação. A solução foi filtrada com sucção em diatomita. O bolo do filtro foi lavado. O filtrado combinado foi estratificado. A camada orgânica foi lavada com água da torneira duas vezes. A camada orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi adicionado gota a gota com n- heptano e agitado a temperatura reduzida. Após filtração por sucção sob pressão reduzida, o bolo do filtro foi lavado com éster metil-t-butílico e seco em estufa sob pressão reduzida para dar o Intermediário 25 (4-(7- fluoroindolin-5-il)piridin-2-il)(1-metil-1H-pirazol-5-il) carbamato de t-butila 1,72 g. LCMS: m/z 410,1 (M + H).

Etapa 2: Síntese de (4-(1-(2-(2-cloropiridin-3-il)acetil)- 7-fluoroindolin-5-il)piridin-2-il)(1-metil-1H-pirazol-5-il) carbamato de t-butila (26)

[00204] Método I: Em um balão seco de fundo redondo de 25 mL, o Composto 9 ácido 2-cloropiridin-3-acético (493 mg, 2,876 mmol), Ac2O (285 mg, 2,80 mmol) e THF (3 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi realizada a 75 °C por 1 h e adicionada com o Intermediário 25 adicional (620 mg, 1,514 mmol), THF (2 mL), DMF (1 mL) e piridina (240 mg, 3,028 mmol). A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, aquecida a 70 °C e agitada por 3 h. Depois de concluída a reação, a reação foi adicionada com metanol (2 mL) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel com sistema eluente (acetato de etila/éter de petróleo = 1/4 a DCM: MeOH = 30/1) para dar o Intermediário 26 (400 mg, sólido amarelo claro). Rendimento: 46,9%. LCMS: m/z 564,2 (M + H).

[00205] Método II: Em um balão de fundo redondo de 1000 mL, Composto 25 (1,682 g, 4,1 mmol), di- isopropiletilamina (2,121 g, 16,4 mmol), Composto 9 (0,843 g, 4,9 mol), acetato de etila (20 mL), 1- propilfosfônico anidrido (solução a 50% em acetato de etilo, 6,54 g, 10 mmol) foram adicionados sequencialmente à temperatura ambiente. Após a conclusão da adição, a reação foi agitada à temperatura ambiente por 5 h. Depois que a reação foi completada como monitorada por LCMS, a reação foi neutralizada para pH 7 a 8 por adição de solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada com sucção. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar (4-(1-(2-(2- cloropiridin-3-il)acetil)-7-fluoroindolin-5-il)piridin-2- il)(1-metil-1H-pirazol-5-il)carbamato de t-butila (26) (2,033 g, óleo amarelo pálido, produto bruto). LCMS: m/z 562,5/564,5 (M + H).

Etapa 3. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-5- (2-((1-metil-1H-pirazol-5-il)amino)piridin-4-il)indolin-1- il)etan-1-ona (P9)

[00206] Método I: Em um balão de gargalo único de 25 mL seco, o Intermediário 26 (350 mg, 0,622 mmol), TFA (709 mg, 6,22 mmol), acetonitrila (5 mL) e H2O (0,5 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi agitada a 40 °C sob gás nitrogênio por 8 h. Depois que a reação foi concluída como detectado por LCMS, o produto bruto foi purificado por cromatografia líquida preparativa para dar o produto P9 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro- 5-(2-((1-metil-1H-pirazol-5-il)amino)piridin-4-il)indolin- 1-il)etan-1-ona (135 mg, sólido amarelo). Rendimento: 46,9%. LCMS: m/z 463,1 (M + H).

[00207] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 8,82 (s, 1H), 8,35 (dd, J = 4,8, 1,6 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,88 (dd, J = 7,2, 1,2 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,45 - 7,41 (m, 2H), 7,34 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,28 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 4,28 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 4,08 (s, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,21 (t, J = 8,0 Hz, 2H).

[00208] Método II: Em um balão de fundo redondo seco de 50 mL, foram adicionados sequencialmente diclorometano (15 mL) e Intermediário 26 (2,033 g, 3,6 mmol) e, em seguida, foi adicionado lentamente ácido trifluoroacético (4 mL). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Depois que a reação foi completada como monitorada por LCMS, foi adicionada gota a gota solução aquosa saturada de carbonato de sódio para ajustar o pH para 7 a

8. A reação estratificou e foi extraída com diclorometano (50 mL × 3). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. A suspensão resultante foi adicionada com água (20 mL) sob agitação e agitada em banho de gelo por 1 a 2 h. Após a filtração por sucção, o bolo do filtro foi lavado com água (10 mL) uma vez e seco em estufa sob pressão reduzida para dar P9 (2-(2-cloropiridin-3-il)-1- (7-fluoro-5-(2)-((1-metil-1H-pirazol-5-il)amino)piridin-4- il)indolin-1-il)etan-1-ona) 1,63 g. LCMS: m/z 463,1 (M + H).

[00209] Os exemplos P45 a 46 e P61 foram obtidos analogamente à preparação do Exemplo P9 de acordo com o esquema geral C, como mostrado na Figura 3, utilizando o Intermediário 25 ou intermediários semelhantes.

Ex.

Estrutura Nome Dados analíticos P45 1-(7-fluoro- 1H NMR (DMSO-d , 400 MHz): δ 6 5-(2-((1- 8,81 (s, 1H), 8,38 (d, J = metil-1H- 4,8 Hz, 1H), 8,17 – 8,12 pirazol-5- (m, 2H), 7,67 (s, 1H), 7,48 il)amino) (s, 1H), 7,41 (d, J = 12,2 piridin-4- Hz, 1H), 7,34 (d, J = 2,0 il)indolin- Hz, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,09 1-il)-2-(2- (dd, J = 5,4, 1,5 Hz, 1H), metilpiridin 7,01 (s, 1H), 6,27 (d, J = -3-il)etan- 1,8 Hz, 1H), 4,26 (t, J = 1-ona 8,0 Hz, 2H), 4,01 (s, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,22 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 2,44 (s, 3H). LCMS: m/z 443,0 (M+H). P46 2-(2- 1H-NMR (DMSO-d , 400 MHz): δ 6 cloropiridin 8,83 (s, 1H), 8,35 (d, J = -3-il)-1-(7- 4,8 Hz, 1H), 8,17 (d, J = fluoro-5-(2- 5,2 Hz, 1H), 7,88 (d, J = ((1- 7,2 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), (deuterio 7,46–7,43 (m, 2H), 7,35 (s, metil)-1H- 1H), 7,10 (d, J = 5,6 Hz, pirazol-5- 1H), 7,02 (s, 1H), 6,28 (s, il)amino) 1H), 4,29 (t, J = 8,0 Hz, piridin-4- 2H), 4,08 (s, 2H), 3,23 (t, il)indolin- J = 7,6 Hz, 2H). 1-il)etan-1- LCMS: m/z 466,0/468,0 ona (M+H). P61 2-(2- 1H NMR (400 MHz, DMSO-d ) δ 6 cloropiridin 8,34 (d, J = 4,6 Hz, 1H), -3-il)-1-(5- 8,04 (d, J = 5,2 Hz, 1H), (2- 7,88 (d, J = 7,4 Hz, 1H), (ciclopropil 7,51 (s, 1H), 7,45-7,40 (m, amino) 2H), 6,93-6,78 (m, 3H), piridin-4- 4,27 (t, J = 7,6 Hz, 2H), il)-7-fluoro 4,07 (s, 2H), 3,22 (t, J = indolin-1- 7,6 Hz, 2H), 2,59-2,55 (m, il)etan-1- 1H), 0,73-0,71 (m, 2H), ona 0,47-0,42 (m, 2H). LCMS: m/z 422,9(M+H). Exemplo P17:

Síntese de 1-(7-fluoro-5-(2-((1-metil-1H-pirazol-5-il)

amino)pirimidin-4-il)indolin-1-il)-2-(2-fluorofenil)etan-1-

ona (P17)

Etapa 1. Síntese de N-4-(7-fluoroindolin-5-il)-N-(1-metil- 1H-pirazol-5-il)pirimidin-2-ilamina (32)

[00210] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, Composto 4 7-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)indolina (900 mg, 3,80 mmol), Composto 17 4-cloro-N-(1-metil-1H-pirazol-5-il)pirimidin-2-amina (800 mg, 3,80 mmol), carbonato de potássio (1,1 g, 7,60 mmol), (1,1-bis(dicloreto de difenilfosfino) ferroceno)paládio (II) (278 mg, 0,38 mmol) e 1,4-dioxano (20,0 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi purgada com gás nitrogênio cinco vezes, aquecida a 80 °C e agitada durante a noite. Após a reação estar completa, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada com 100 mL de água e extraída com acetato de etila (150 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:10) para dar o Intermediário 32 N-4-(7-fluoroindolin-5-il)-N- (1-metil-1H-pirazol-5-il)pirimidin-2-ilamina (150 mg, sólido branco). Rendimento: 12,0%. LCMS: m/z 311,0 (M + H).

Etapa 2. Síntese de 1-(7-fluoro-5-(2-((1-metil-1H-pirazol- 5-il)amino)pirimidin-4-il)indolin-1-il)-2-(2-fluorofenil) etan-1-ona (P17)

[00211] Em um balão de fundo redondo de 100 mL seco, o Composto 32 N-4-(7-fluoroindolin-5-il)-N-(1-metil-1H- pirazol-5-il)pirimidin-2-ilamina (50 mg, 0,16 mmol), Composto 33 ácido 2-(2-fluorofenil)acético (25 mg, 0,16 mmol), N,N-di-isopropiletilamina (0,1 mL, 0,64 mmol), solução de anidrido 1-propilfosfônico (407 mg, 50% (% em peso)) em acetato de etila (0,64 mmol) e N,N- dimetilformamida (1,0 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi agitada por 30 minutos. Após a conclusão da reação, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada com 100 mL de água e extraída com acetato de etila (150 mL × 3). A fase orgânica combinada foi lavada com solução salina saturada (50 mL × 5), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:1) para obter o produto P17 1-(7-fluoro-5-(2-((1-metil-1H- pirazol-5-il))amino)pirimidin-4-il)indolin-1-il)-2-(2- fluorofenil)etan-1-ona (16,7 mg, sólido amarelo claro).

Rendimento: 20,0%. LCMS: m/z 447,0 (M + H).

[00212] 1H RMN (DMSO-d6, 400 MHz): d 9,48 (s, 1H), 8,51 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,83 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,41-7,31 (m, 3H), 7,19 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 6,29 (s, 1H), 4,26 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 3,98 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,23 (t, J = 8,0 Hz, 2H).

[00213] Os exemplos P18 a P20, P23 a P25, P28 a 31, P33, P37 a 39 e P54 a 57 foram obtidos de acordo com o esquema geral C, como mostrado na Figura 3, utilizando o Intermediário 32 ou intermediários similares.

Ex. Estrutura Nome Dados analíticos 2-(2- 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): clorofenil)- δ 9,46 (s, 1H), 8,51 (d, J 1-(7-fluoro- = 5,2 Hz, 1H), 7,92 (s, 5-(2-((1- 1H), 7,83 (d, J = 12 Hz, metil-1H- 1H), 7,46-7,41 (m, 3H), pirazol-5- 7,37 (s, 1H), 7,33-7,30 P18 il)amino) (m, 2H), 6,28 (s, 1H), pirimidin-4- 4,27 (t, J = 8,0 Hz, 2H), il)indolin- 4,04 (s, 2H), 3,70 (s, 1-il)etan-1- 4H), 3,21 (d, J = 7,6 Hz, ona 3H). LCMS: m/z 462,9 (M+H).

2-(4- 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz): clorofenil)- δ 9,46 (s, 1H), 8,50 (d, J 1-(7-fluoro- = 5,6 Hz, 1H), 7,90 (s, 5-(2-((1- 1H), 7,82 (d, J = 12,8 Hz, metil-1H- 1H), 7,47 (d, J = 5,2 Hz, pirazol-5- 1H), 7,40 (d, J = 8,4 Hz, P19 il)amino) 2H), 7,39 (s, 1H), 7,33 pirimidin-4- (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,28 il)indolin- (s, 1H), 4,23 (t, J = 8,0 1-il)etan-1- Hz, 2H), 3,95 (s, 2H), ona 3,70 (s, 3H), 3,20 (t, J = 8,0 Hz, 3H). LCMS: m/z 462,9 (M+H). 2-(2-cloro- 1H-NMR (DMSO-d , 400 MHz) δ 6 5- 9,48 (s, 1H), 8,52 (d, J = metilpiridin 5,2 Hz, 1H), 8,18 (s, 1H), -3-il)-1-(7- 7,94 (s, 1H), 7,85 (d, J = fluoro-5-(2- 12,8 Hz, 1H), 7,71 (s, ((1-metil- 1H), 7,47 (d, J = 5,2 Hz, 1H-pirazol- 1H), 7,38 (d, J = 2,0 Hz, P20 5-il)amino) 1H), 6,29 (s, 1H), 4,30 pirimidin-4- (t, J = 7,6 Hz, 2H), 4,03 il)indolin- (s,2H), 3,71 (s, 3H), 3,24 1-il)etan-1- (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,31 ona (s, 3H). LCMS: m/z 477,9/479,9 (M+H). 2-(3- 1H-NMR (DMSO-d6, 400 MHz) δ clorofenil)- 9,49 (s, 1H), 8,52 (d, J = 1-(7-fluoro- 5,2 Hz, 1H), 7,91 (s, 1H), 5-(2-((1- 7,83 (d, J = 12,4 Hz, 1H), metil-1H- 7,47 (d, J = 5,2 Hz, 1H), pirazol-5- 7,41–7,32 (m, 4H), 7,27 P23 il)amino) (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,30 pirimidin-4- (s, 1H), 4,24 (t, J = 8,0 il)indolin- Hz, 2H), 3,97 (s, 2H), 1-il)etan-1- 3,71 (s, 3H), 3,21 (t, J = ona 8,0 Hz, 2H). LCMS: m/z 462,9 (M+H). 2-(2- 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6) δ bromofenil)- 9,46 (s, 1H), 8,51 (d, J = 1-(7-fluoro- 5,2 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 5-(2–((1- 7,84 (d, J = 12,6 Hz, 1H), metil-1H- 7,65 – 7,60 (m, 1H), 7,46 pirazol-5- (d, J = 5,3 Hz, 1H), 7,44 il)amino) – 7,34 (m, 2H), 7,23 (td, P24 pirimidin-4- J = 7,7, 1,8 Hz, 1H), 6,27 il)indolin- (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,28 1-il)etan-1- (t, J = 7,9 Hz, 2H), 4,03 ona (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,23 (t, J = 7,9 Hz, 2H). LCMS: m/z 507,0/509,0 (M+H).

1-(7-fluoro- 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5-(2 –((1- 9,46 (s, 1H), 8,51 (d, J = metil-1H- 5,2 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H), pirazol-5- 7,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), il)amino) 7,47 (d, J = 5,3 Hz, 1H), pirimidin-4- 7,42 – 7,32 (m, 3H), 7,17 P25 il)indolin- – 6,92 (m, 1H), 6,28 (d, J 1-il)-2-(2- = 1,8 Hz, 1H), 4,28 (t, J iodofenil) = 8,0 Hz, 2H), 4,01 (s, etan-1-ona 2H), 3,70 (s, 3H), 3,23 (t, J = 8,0 Hz, 2H). LCMS: m/z 555,0 (M+H). 2-(3- 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ cloropiridin 8,81 (s, 1H), 8,48 (dd, J -2-il)-1-(7- = 4,8, 1,4 Hz, 1H), 8,16 fluoro-5-(2- (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,94 ((1-metil- (dd, J = 8,2, 1,4 Hz, 1H), 1H-pirazol- 7,48 (s, 1H), 7,45 – 7,36 5-il)amino) (m, 2H), 7,34(d, J = 2,0 P28 piridin-4- Hz, 1H), 7,09 (dd, J = il)indolin- 5,4, 1,6 Hz, 1H), 7,01 (s, 1-il)etan-1- 1H), 6,27(d, J = 2,0 Hz, ona 1H), 4,25 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 4,22 (s, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,20 (t, J = 8,0 Hz, 2H). LCMS: m/z 463,0 (M+H). 2-(6- 1H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ cloropiridin 8,83 (s, 1H), 8,16 (d, J = -2-il)-1-(7- 5,2 Hz, 1H), 7,85 (t, J = fluoro-5-(2- 8,0 Hz, 1H), 7,48 (s, 1H), ((1-metil- 7,41 (dd, J = 7,6, 5,2 Hz, 1H-pirazol- 1H), (m, 2H), 7,34(d, J = 5-il)amino) 2,0 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = P29 piridin-4- 5,4, 1,6 Hz, 1H), 7,01 (s, il)indolin- 1H), 6,27(d, J = 2,0 Hz, 1-il)etan-1- 1H), 4,25 (t, J = 8,0 Hz, ona 2H), 4,11 (s, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,20 (t, J = 8,0 Hz, 2H). LCMS: m/z 463,0 (M+H).

2-(2-(7- 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): fluoro-5-(2- δ 9,46 (s, 1H), 8,51 (d, J ((1-metil- = 5,2 Hz, 1H), 7,93 (s, 1H-pirazol- 1H), 7,84 (d, J = 12 Hz, 5-il)amino) 1H), 7,69 (td, J = 7,6, pirimidin-4- 1,6 Hz, 1H), 7,54 (d, J = il)indolin- 7,2 Hz, 1H), 7,51-7,44 (m, P30 1-il)-2- 2H), 7,37 (d, J = 2,0 Hz, oxoetil) 1H), 6,28 (d, J = 2,0 Hz, benzonitrila 1H), 4,31 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 4,18 (s, 2H), 3,70 (s, 4H), 3,24 (t, J = 8,0 Hz, 2H). LCMS: m/z 454 (M+H). 2-(2- 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz):

clorofenil)- δ8,81 (s, 1H), 8,16 (d, J 1-(7-fluoro- = 5,6 Hz, 1H), 7,49 (s, 5-(2-((1- 1H), 7,47–7,39 (m, 3H), metil-1H- 7,35–7,27 (m, 3H), 7,09 pirazol-5- (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,01 P31 il)amino) (s, 1H), 6,27 (s, 1H), piridin-4- 4,25 (t, J = 8,0 Hz, 2H), il)indolin- 4,03 (s, 2H), 3,68 (s, 1-il)etan-1- 3H), 3,21 (t, J = 7,8 Hz, ona 2H). LCMS: m/z 462,0 (M+H) 2-(2-cloro- 1H NMR (CD3OD, 400 MHz):

4- 8,47 (d, J = 5,2 Hz, 1H), fluoropiridi 8,37 (t, J = 5,6 Hz, 1H), n-3-il)-1- 7,93 (s,1H), 7,86 (d, J = (7-fluoro-5- 12,8 Hz, 1H), 7,51 (s, (2-((1- 1H), 7,40 (d, J = 5,2 Hz, P33 metil-1H- 1H), 7,31 (t, J = 5,6 Hz, pirazol-5- 1H), 6,39 (s, 1H), 4,40 il)amino) (t, J = 7,6 Hz, 2H), 4,19 pirimidin-4- (s, 2H), 3,79 (s, 3H), il)indolin- 3,30 (t, J = 7,6 Hz, 2H). 1-il)etan-1- LCMS: m/z 481,9/483,9 ona (M+H). 2-(3- 1H NMR (CD3OD, 400 MHz):

cloropiridin 8,58 (s, 1H), 8,47 (d, J = -4-il)-1-(7- 4,8Hz, 2H), 7,92 (s, 1H), fluoro-5-(2- 7,87 (d, J = 13,2 Hz, 1H), ((1-metil- 7,51-7,48 (m, 2H), 7,39 1H-pirazol- (d, J = 5,2 Hz, 1H), 6,39 P37 5-il)amino) (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,36 pirimidin-4- (t, J = 8 Hz, 2H), 4,19 il)indolin- (s, 2H), 3,78 (s, 3H), 1-il)etan-1- 3,28 (t, J = 8 Hz, 2H). ona LCMS: m/z 463,9/466,0 (M+H).

2-(2-cloro- 1H NMR (CD3OD, 400 MHz): 5- 8,47 (d, J = 5,6 Hz, 1H), fluorofenil) 7,92 (s, 1H), 7,87 (d, J = -1-(7- 12,4 Hz, 1H), 7,49 (d, J = fluoro-5-(2- 2,0 Hz, 1H), 7,44 (dd, J = ((1-metil- 8,8 Hz,3,6 Hz, 1H), 7,39 1H-pirazol- (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,24 5-il)amino) (dd, J = 8,8 Hz,2,8 Hz, P38 pirimidin-4- 1H), 7,08 (t, J = 8 Hz, il)indolin- 1H), 6,35 (d, J = 2 Hz, 1-il)etan-1- 2H), 4,35 (t, J = 8 Hz, ona 2H), 4,10 (s, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,26 (t, J = 7,2 Hz, 2H). LCMS: m/z 481,0/482,9 (M+H) 2-(2,5- 1H NMR (CD OD, 400 MHz): 3 difluoro 8,46 (d, J = 4,0 Hz, 1H), fenil)-1-(7- 7,90 (s, 1H), 7,87 (d, J = fluoro-5-(2- 12,4 Hz, 1H), 7,48 (d, J = ((1-metil- 2,0 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 1H-pirazol- 5,6 Hz, 1H), 7,16-7,10 (m, P39 5-il)amino) 1H), 7,08-7,04 (m, 1H), pirimidin-4- 6,35 (d, J = 2,0 Hz, 1H), il)indolin- 4,33 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 1-il)etan-1- 4,02 (s, 2H), 3,78 (s, ona 3H), 3,26 (t, J = 8,0 Hz, 2H) LCMS: m/z 465,0 (M+H) 2-(2-cloro- 1H NMR (400 MHz, DMSO)

3- δ9,47 (s, 1H), ), 8,51 (d, fluorofenil) J = 5,2 Hz, 1H), 7,92(s, -1-(7- 1H), 7,84(d, J = 12,6 Hz, fluoro-5-(2- 1H), 7,46 (d, J = 5,2 Hz, ((1-metil- 1H), 7,40-7,33(m, 3H), P54 1H-pirazol- 7,31-7,26(m, 1H), 6,28 (d, 5-il)amino) J = 1,5 Hz, 1H), 4,28 (t, pirimidin-4- J = 7,8 Hz, 2H), 4,11 (s, il)indolin- 2H), 3,70 (s, 3H), 3,23 1-il)etan-1- (t, J = 7,8 Hz, 2H). LCMS: ona m/z 480,9 (M+H).

3-(2- 1H NMR (400 MHz, DMSO) cloropiridin δ8,82 (s, 1H), 8,28 (d, J -3-il)-1-(7- = 3,2 Hz, 1H), 8,16 (d, J fluoro-5-(2- = 5,6 Hz, 1H), 7,87 (d, J ((1-metil- = 7,0 Hz, 1H), 7,46 (s, 1H-pirazol- 1H), 7,44-7,37 (m, 2H), 5-il)amino) 7,34 (s, 1H), 7,08 (d, J = P55 piridin-4- 5,6 Hz, 1H), 7,00 (s, 1H), il)indolin- 6,27(s, 1H), 4,16 (t, J = 1-il)propan- 7,8 Hz, 2H), 3,68 (s, 3H), 1-ona 3,14 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 3,06-2,98 (m, 2H), 2,92- 2,85(m, 2H), LCMS: m/z 476,9 (M+H) 2-(4- 1H NMR (400 MHz, DMSO) cloropiridin δ9,47 (s, 1H), 8,57 (s, -3-il)-1-(7- 1H), 8,51 (d, J = 5,2 Hz, fluoro-5-(2- 1H), 8,47 (d, J = 4,8 Hz, ((1-metil- 1H), 7,93 (s, 1H), 7,84 1H-pirazol- (d, J = 12,4 Hz, 1H), 7,57 5-il)amino) (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,47 P56 pirimidin-4- (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,37 il)indolin- (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,27 1-il)etan-1- (d, J = 1,2 Hz, 1H), 4,31 ona (t, J = 8,0 Hz, 2H), 4,11 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,25 (t, J = 7,6 Hz, 2H). LCMS: m/z 463,9 (M+H).

1-(7-fluoro- 1H NMR (400 MHz, DMSO) 5-(2-((1- δ8,83 (s, 1H), 8,46 (d, J metil-1H- = 4,4 Hz, 1H), 8,17 (d, J pirazol-5- = 7,2 Hz, 1H), 7,61 (d, J il)amino) = 7,4 Hz, 1H), 7,50 (s, piridin-4- 1H), 7,42 (d, J = 12,01 il)indolin- Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 1-il)-2-(2- 7,20-7,17 (m, 1H), 7,09 (tetra- (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,01 P57 hidro-2H- (s, 1H), 6,27 (s, 1H), piran-4- 4,27 (t, J = 7,8 Hz, 2H), il)piridin- 4,05 (s, 2H), 3,93-3,89 3-il)etan-1- (m, 2H), 3,69 (s, 3H), ona 3,23 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 3,04-2,98 (m, 1H), 1,94- 1,84(m, 2H), 1,58-1,55(m, 2H). LCMS: m/z 513,0 (M+H). Exemplo P35:

Etapa 1. Síntese de 1-metil-5-nitro-1H-pirazol-3- carboxilato de metila (59)

[00214] Em um balão de fundo redondo de 100 mL em banho de água gelada, foram adicionados sequencialmente o Composto 58 (5,0 g, 12,74 mmol), carbonato de potássio (1,94 g, 14,0 mmol), N,N-dimetilformamida (50 mL) e solução de iodometano (3,80 g, 26,75 mmol) em N,N-dimetilformamida (10 mL) foi adicionada gota a gota. Depois de completada a adição gota a gota, a reação foi agitada por 16 h. Depois de concluída a reação, a reação foi adicionada com água (150 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL × 3). A fase orgânica combinada foi lavada com solução salina saturada (30 mL × 3), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida.

O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:20) para dar 1-metil-5-nitro-1H-pirazol-3- carboxilato de metila 59 (1,0 g, sólido branco).

Rendimento: 17,0%. LCMS: m/z 185,9 (M + H) Etapa 2. Síntese de 5-amino-1-metil-1H-pirazol-3- carboxilato de metila (60)

[00215] À temperatura ambiente, o Composto 59 (200 mg, 1,081 mmol) foi dissolvido em metanol (10 mL) e adicionado com Pd/C (10%, 90 mg). A reação foi agitada por 4 h sob 1 atm de gás hidrogênio. Depois que a reação foi completada como monitorada por LCMS, a reação foi filtrada com sucção. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar 5-amino-1-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de metila 60 (145 mg, óleo amarelo claro). Rendimento: 87,0%. LCMS: m/z 156 (M + H).

Etapa 3. Síntese de 5-((4-bromopiridin-2-il)amino)-1-metil- 1H-pirazol-3-carboxilato de metila (61)

[00216] À temperatura ambiente, em um balão de fundo redondo de 50 mL, o Composto 60 (650 mg, 4,19 mmol) e N,N- dimetilformamida (10 mL) foram adicionados sequencialmente, e hidreto de sódio (335 mg, 8,38 mmol) foi adicionado em porções. A reação foi agitada por 0,5 h, adicionada com 2- bromo-4-fluoropiridina (1,47 g, 8,387 mmol) e agitada por 16 h. Depois que a reação foi completada como monitorada por LCMS, a reação foi adicionada com água (30 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL × 5). A fase orgânica combinada foi lavada com solução salina saturada (20 mL × 3), seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 1:4) para dar 5-((4-bromopiridin-2-il)amino)-metil-1H-pirazol-3- carboxilato de metila 61 (130 mg, sólido amarelo pálido).

Rendimento: 10%. LCMS: m/z 310,9/312,9 (M + H).

Etapa 4. Síntese de (5-((4-bromopiridin-2-il)amino)-1- metil-1H-pirazol-3-il)metanol (62)

[00217] À temperatura ambiente, o Composto 61 (130 mg, 0,418 mmol) foi dissolvido em metanol anidro

(25 mL) e adicionado em porções com boro-hidreto de sódio (156 mg, 4,18 mmol). Após a conclusão da adição, a reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 h e foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna com sistema eluente (acetato de etila:éter de petróleo = 4:1) para dar (5-((4- bromopiridin-2-il)amino)-1-metil-1H-pirazol-3-il)metanol 62 (100 mg, goma branca). Rendimento: 85%. LCMS: m/z 282,9/284,9 (M + H).

Etapa 5. Síntese de N-(3-(((t-butildimetilsilil)oxi)metil) -1-metil-1H-pirazol-5-il)-N-(4-bromopiridin-2-il)amina (63)

[00218] Em um balão de fundo redondo de 50 mL, Composto 62 (100 mg, 0,355 mmol), cloreto de t- butildimetilsilila (532 mg, 3,55 mmol), trietilamina (358 mg, 3,55 mmol), 4-dimetilamiopridina (4,33 mg, 0,036 mmol), foram adicionados sequencialmente diclorometano (10 mL) temperatura ambiente. A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes e agitada à temperatura ambiente por 16 h. Após a reação estar completa, a reação foi adicionada com água (30 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida.

O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila: éter de petróleo = 1:5) para dar N-(3-(((t- butildimetilsilil)oxi)metil)-1-metil-1H-pirazol-5-il)-N- (4-bromopiridin-2-il)-amina 63 (50 mg, óleo amarelo claro).

Rendimento: 33,0%. LCMS: m/z 396,9/398,9 (M + H).

Etapa 6. Síntese de 1-(5-(2-((3-(((t-butildimetilsilil) oxi)metil)-1-metil-1H-pirazol-5-il)amino)piridin-4-il))7- fluoroindolin-1-il)-2-(2-cloropiridin-3-il)etan-1-ona (64)

[00219] Em um balão de fundo redondo de 50 mL, Composto 63 (50 mg, 0,126 mmol), 1,4-dioxano (10 mL), PdCl2(dppf) (9,2 mg, 0,0126 mmol), carbonato de potássio (26,1 mg, 0,189 mmol), o composto 11 (52,5 mg, 0,126 mmol) foi adicionado sequencialmente à temperatura ambiente. A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, aquecida a 80 °C e agitada por 3 h. Depois de concluída a reação, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel com sistema eluente (acetato de etila: éter de petróleo = 5:1) para dar 1-(5-(2-((3-(((t- butildimetilsilil)oxi)metil)))-1-metil-1H-pirazol-5-il) amino)piridin-4-il)-7-fluoroindolin-1-il)-2-(2- cloropiridin-3-il)etan-1-ona 64 (60 mg, óleo amarelo pálido). Rendimento: 78,5%. LCMS: m/z 606,5/608,5, (M + H) Etapa 7. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-5- (2-((3-(hidroximetil)-1-metil-1H-pirazol-5-il)amino) piridin-4-il)indolin-1-il)etan-1-ona (P35)

[00220] Em um balão de 50 mL, Composto 64 (60 mg, 0,099 mmol), ácido trifluoroacético (2 mL), diclorometano (10 mL) foram adicionados sequencialmente à temperatura ambiente. A reação foi agitada à temperatura ambiente durante 1 h. Depois de concluída a reação, a reação foi concentrada sob pressão reduzida, adicionada lentamente com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (15 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL × 5). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia líquida preparativa (coluna: -Gemini-C18 150 x 21,2 mm, 5 um; fase móvel: ACN-H2O (0,1% FA), gradiente: 10 a 60) para dar 2- (2-cloropiridina-3-il)-1-(7-fluoro-5-(2-((3-(hidroximetil) -1-metil-1H-pirazol-5-il)amino)piridin-4-il)indolin-1-il) etan-1-ona P35 (12 mg, sólido amarelo pálido). Rendimento: 25%.

[00221] 1H-RMN (CD3OD, 400 MHz): 8,33 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,44-7,38 (m, 2H), 7,12 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,31 (s, 1H), 4,56 (s, 2H), 4,37 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 4,14 (s, 2H), 3,73 (s, 3H), 3,28 (t, J = 7,2 Hz, 2H). LCMS: m/z 492,9/494,9 (M + H) Exemplo P60: Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-5-(2-((1- metil-1H-pirazol-5-il)amino)piridin-4-il)indolin-1-il)-2- hidroxietano-1-ona (P60) Etapa 1. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-2- hidroxilacetato de etila (91)

[00222] Em um balão seco de fundo redondo de 250 mL em banho de gelo, foram adicionados o composto 90 (6,0 g, 0,031 mol), tetra-hidrofurano (100 mL), complexo cloreto de isopropilmagnésio - cloreto de lítio (31 mL, 40,3 mol). A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes, naturalmente aquecida à temperatura ambiente e agitada por 3 h. A reação foi resfriada em banho de água gelada, adicionada com o Composto 2 (3,2 g, 0,031 mol), gradualmente aquecida à temperatura ambiente, agitada por 2 h, extinta com cloreto de amônio saturado (100 mL) e extraída com acetato de etila (80 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida.

O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna sobre sílica gel (acetato de etila:éter de petróleo = 1:10) para dar 2-(2-cloropiridin-3-il)-2-hidroxilacetato de etila 91 (1,4 g, óleo amarelo pálido). Rendimento: 21%.

LCMS: m/z 216,0 (M + H).

Etapa 2. Síntese de 2-((t-butildimetilsilil)oxi)-2-(2- cloropiridin-3-il)acetato de etila (92)

[00223] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, Composto 91 (800 mg, 3,7 mmol), diclorometano (50 mL), cloreto de t-butildimetilsilila (2796 mg, 18,5 mmol), 4- dimetilamiopridina (452 mg, 3,7 mmol), trietilamina (3740 mg, 37,0 mmol) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi purgada com nitrogênio gasoso três vezes e agitada à temperatura ambiente por 18 h. Após a reação estar completa, a reação foi extinta por adição de água gelada (100 mL) e extraída com diclorometano (60 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etila: éter de petróleo = 1:20) para dar 2-((t-butildimetilsilil) oxi)-2-(2-cloropiridin-3-il)acetato de etila 92 (640 mg, óleo incolor). Rendimento: 52%. LCMS: m/z 330,0 (M + H).

Etapa 3. Síntese do ácido 2-((t-butildimetilsilil)oxi)-2- (2-cloropiridin-3-il)acético (93)

[00224] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL, Composto 92 (640 mg, 1,94 mmol), hidróxido de lítio monohidratado (244 mg, 5,81 mmol), tetra-hidrofurano (20 mL), água (4 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi agitada por 2 h e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e ajustado com solução aquosa de ácido clorídrico 1 N para pH 7. O sólido precipitado, foi filtrado e seco para dar ácido 2- ((t-butildimetilsilil)oxi)-2-(2-cloropiridin-3-il)acético 93 (180 mg, sólido branco). Rendimento: 31%. LCMS: m/z 302,0 (M + H).

Etapa 4. Síntese de N-(4-(1-(2-((t-butildimetilsilil)oxi)- 2-(2-cloropiridin-3-il)acetil)-7-fluoroindol-5-il)) piridin-2-il)-N-(1-metil-1H-pirazol-5-il)carbamato de t- butila (94)

[00225] Em um balão de fundo redondo seco de 100 mL em banho de gelo, foram adicionados o Composto 93 (243 mg, 0,6 mmol), Composto 25 (180 mg, 0,6 mmol), oxicloreto de fósforo (273 mg, 1,8 mmol) e piridina (20 mL). O motivo foi gradualmente aquecido até a temperatura ambiente, agitado por 3 h, diluído por adição de água gelada (50 mL) e extraído com acetato de etila (50 mL × 3). A fase orgânica combinada foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado com TLC preparativa (acetato de etila:éter de petróleo = 1:3) para dar N-(4-(1-(2-((t- butildimetilsilil))oxi)-2-(2-cloropiridin-3-il)acetil)-7- fluoroindol-5-il)piridin-2-il)-N-(1-metil-1H-pirazol-5-il) carbamato de t-butila 94 (250 mg). Rendimento: 61%. LCMS: m/z 692,5 (M + H).

Etapa 5. Síntese de 2-((t-butildimetilsilil)oxi)-2-(2- cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-5-(2-((1-metil-1H-pirazol- 5-il)amino)piridin-4-il)indolin-1-il)etan-1-ona (95)

[00226] Em um balão de fundo redondo de 100 mL seco, o Composto 94 (250 mg, 0,36 mmol), diclorometano (20 mL) e ácido trifluoroacético (5 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi agitada à temperatura ambiente por 2 h, resfriada em banho de gelo, neutralizada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (50 mL) e extraída com diclorometano (30 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para dar 2-((t-butildimetilsilil)oxi)-2-(2-cloropiridin-3- il)-1-(7-fluoro-5-(2-((1-metil-1H-pirazol-5-il)amino) piridin-4-il)indolin-1-il)etan-1-ona 95 (200 mg, óleo incolor). Rendimento: 93%. LCMS: m/z 593,1 (M + H) Etapa 6. Síntese de 2-(2-cloropiridin-3-il)-1-(7-fluoro-5- (2-((1-metil-1H-pirazol-5-il)amino)piridin-4-il)indolin-1- il)-2-hidroxietano-1-ona (P60)

[00227] Em um balão de fundo redondo de 100 mL seco, o Composto 95 (200 mg, 0,34 mmol), tetra-hidrofurano (4 mL), fluoreto de tetrabutilamônio (solução 1N em THF, 4 mL) foram adicionados à temperatura ambiente. A reação foi agitada à temperatura ambiente por 1 h, diluída com água (50 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL × 3). A fase orgânica combinada foi seca sobre sulfato de sódio anidro e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (acetato de etila: éter de petróleo = 1:20) para dar 2-(2-cloropiridin-3-il)- 1-(7-fluoro-5-(2-((1-metil-1H-pirazol-5-il)amino)piridin-4-

il)indolin-1-il)-2-hidroxietan-1-ona P60 (120 mg, sólido branco), que foi recristalizado a partir de acetato de etila:n-hexano = 1:2 para dar 2-(2-cloropiridin-3-il)-1- (7-fluoro-5-(2-((1-metil-1H-pirazol-5-il)amino)piridin-4- il)indolin-1-il)-2-hidroxietan-1-ona P60 (55 mg, sólido branco). Rendimento: 34%.

[00228] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 8,82 (s, 1H), 8,38 (dd, J = 2,0, 4,8 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 8,02 (dd, J = 2,0, 7,6 Hz, 1H), 7,55-7,47 (m, 2H), 7,41 (d, J = 12 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = 1,2, 5,2 Hz, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,63 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,27 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 4,42- 4,33 (m, 1H), 4,24-4,14 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,27-3,20 (m, 1H).

[00229] LCMS: m/z 479,0 (M + H).

[00230] O Exemplo P64 foi obtido analogamente à preparação do Exemplo 60 usando intermediários semelhantes ao Intermediário 25.

Ex. Estrutura Nome Dados analíticos

2-(2- 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ cloropiridin 8,82 (s, 1H), 8,38 (dd, J = -3-il)-1-(7- 1,6, 4,8 Hz, 1H), 8,16 (d, fluoro-5-(2- J = 5,2 Hz, 1H), 8,02 (dd, ((1-deuterio J = 1,6, 7,6 Hz, 1H), 7,53 metil-1H- (dd, J = 4,8, 7,6 Hz, 1H), pirazol-5- 7,49 (s, 1H), 7,41 (d, J = il)amino) 12 Hz, 1H), 7,34 (d, J = P64 piridin-4- 1,2 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = il)indolin- 1,2, 5,2 Hz, 1H), 7,01 (s, 1-il)-2- 1H), 6,63 (d, J = 6,4 Hz, hidroxi 1H), 6,27 (d, J = 1,2 Hz, etan-1-ona 1H), 5,77 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 4,39-4,35 (m, 1H), 4,24-4,17 (m, 1H), 3,27- 3,20 (m, 1H). LCMS: m/z 482,0 (M+H). Etapa 7: Preparação dos compostos P62 e P63 por resolução do composto P60

[00231] Condições de resolução: - Coluna quiral: AD-H, 0,46 cm I.D. X 15 cm L - Fase móvel: HEP: IPA (0,1% DEA) = 60:40 - Taxa de fluxo: 0,5 mL - Comprimento de onda de detecção: UV 254 nm - Temperatura da coluna: 25 °C

[00232] O composto que foi eluído primeiro (Pico 1) foi numerado P62.

[00233] 1H NMR (400 MHz, DMSO) d 8,81 (s, 1H), 8,38 (dd, J = 4,8, 1,8 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,02 (dd, J = 7,6, 1,6 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 7,6, 4,8 Hz, 1H),

7,48 (s, 1H), 7,40 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 1,8 Hz, 1H) , 7,09 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 7,00 (s, 1H), 6,61 (s, 1H), 6,27 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 4,37-4,41 (m, 1H), 4,26 - 4,14 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,22 (dd, J = 13,4, 7,2 Hz, 2H).

[00234] LCMS: m/z 479,0 (M + H).

[00235] O composto que foi eluído em segundo (Pico 2) foi numerado P63.

[00236] 1H NMR (400 MHz, DMSO) d 8,81 (s, 1H), 8,38 (dd, J = 4,8, 1,8 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 8,02 (dd, J = 7,6, 1,8 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 7,6, 4,8 Hz, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,40 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,09 (dd, J = 5,4, 1,6 Hz, 1H), 7,00 (s, 1H), 6,61 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 6,27 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 5,77 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,43 - 4,35 (m, 1H), 4,25-4,15 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,22 (dd, J = 13,4, 7,2 Hz, 2H).

[00237] LCMS: m/z 479,0 (M + H).

Exemplos P40 e P41. Preparação dos compostos P40 e P41 por resolução do composto P53

[00238] Condições de resolução: - Coluna quiral: chiralpak-OJ, 0,46 cm I.D. × 25 cm L

- Fase móvel: HEX-EtOH (0,2% DEA) = 50:50 - Taxa de fluxo: 0,8 mL - Comprimento de onda de detecção: UV 214/254 nm - Temperatura da coluna: 40 °C

[00239] O composto que foi eluído primeiro (Pico 1) foi numerado P40.

[00240] 1H RMN (CD3OD, 400 MHz): 8,34 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,44-7,38 (m, 2H), 6,94-6,92 (m, 1H), 6,79 (s, 1H), 4,51-4,48 (m, 1H), 4,37 (t, J = 8 Hz, 2H), 4,30- 4,27 (m, 1H), 4,14 (s, 2H), 3,28 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 2,41-2,38 (m, 2H), 2,35-2,31 (m, 2H).

[00241] LCMS: m/z 452,8/454,9 (M + H)

[00242] O composto que foi eluído em segundo (Pico 2) foi numerado P41.

[00243] 1H RMN (CD3OD, 400 MHz): 8,33 (d, J = 4,8 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 6 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,43-7,40 (m, 2H), 6,96 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 6,84 (s, 1H), 4,37 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 4,14 (s, 2H), 4,10 -4,03 (m, 1H), 3,85-3,77 (m, 1H), 3,29 (t, J = 8 Hz, 2H), 2,91-2,85 (m, 2H), 1,92-1,85 (m, 2H).

[00244] LCMS: m/z 452,8/454,9 (M + H) Exemplos P42 e P43. Preparação dos compostos P42 e P43 por resolução do composto P16

[00245] Condições de resolução: - Coluna quiral: JO, 0,46 cm D.I. * 25 cm L - Fase móvel: n-hexano:etanol (0,2% de dietilamina) = 50:50 - Taxa de fluxo: 0,8 mL - Comprimento de onda de detecção: UV 214/254 nm - Temperatura da coluna: 40 °C

[00246] O composto que foi eluído primeiro (Pico 1) foi numerado P42.

[00247] 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d 8,82 (s, 1H), 8,34 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 7,89 (d, J = 7,6 Hz , 1H), 7,52 (s, 1H), 7,49-7,41 (m, 2H), 7,34 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,28 (s, 1H), 4,97-4,89 (m, 1H), 4,18 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 3,96 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,57-3,51 (m, 1H), 2,72 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 1,27 (d, J = 6,4 Hz, 3H).

LCMS: m/z 476,9 (M + H).

[00248] O composto que foi eluído em segundo (Pico 2) foi numerado P43.

[00249] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) d 8,82 (s, 1H), 8,34 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,89

(d, J = 6,8 Hz , 1H), 7,52 (s, 1H), 7,48-7,41 (m, 2H), 7,34 (s, 1H), 7,10 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 4,98-4,89 (m, 1H), 4,18 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 3,96 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,57-3,51 (m, 1H), 2,72 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 1,27 (d, J = 6,4 Hz, 3H).

[00250] LCMS: m/z 476,9 (M + H).

Exemplo de Efeito I: Ensaio de Estabilidade Química

1. Meios e condições de detecção utilizados no ensaio de estabilidade química

[00251] Método de detecção: cromatografia líquida de alta eficiência (UPLC)

[00252] Condições cromatográficas: - Sistema: Sistema de cromatografia líquida de alta eficiência, incluindo bomba, injetor automático de amostras, detector e forno de coluna Coluna: Waters Acquity UPLC BEH C18 (2,1 * 50 mm, 1,7 µm) Detector: Detector PDA Comprimento de onda de detecção: 225 nm Fase móvel: A: ácido trifluoroacético a 0,05% em água B: acetonitrila Gradiente: tempo (min) A% B% 0 95 5 15 50 50 16 20 80 19 20 80

- Taxa de fluxo: 0,4 ml/min - Temperatura da coluna: 40°C - Volume de injeção: 2µl

2. Estudo sobre a estabilidade química dos compostos da invenção (1) Formulação de soluções de teste Composto P9

[00253] O composto P9 foi formulado como soluções em diferentes sistemas tampão a uma concentração de 0,2 mg/ml usando PEG400 como co-solvente. Essas soluções foram usadas para estudo de estabilidade química. As soluções com vários valores de pH foram formuladas da seguinte forma: Tipo de pH Sistema de solvente soluções encontrado 10% PEG400 + 90% tampão fosfato Solução, pH pH 7,4, ajustado com ácido 7,43 7,4 fosfórico diluído para pH 7,4 10% PEG400 + 90% tampão fosfato Solução, pH pH 6,8, ajustado com ácido 6,81 6,8 fosfórico diluído para pH 6,8 Solução, pH 10% PEG400 + 90% solução de HCl 1,99 2,0 pH 2,0

[00254] Condições para o ensaio de estabilidade química: as soluções do Composto P9 com vários valores de pH foram armazenadas a 37 ºC por 24 h. O conteúdo do Composto P9 foi determinado por HPLC às 0, 4, 8, 12, 14 e 24 h.

(2) Resultados obtidos no ensaio de estabilidade química do composto Composto P9 em soluções com vários valores de pH Solução do Composto P9, pH 7,4

Tempo 0 h 4 h 8 h 12 h 14 h 24 h porcentagem (%) relativa para a áreda do pico 100,0 100,3 101,4 100,9 101,3 101,1 do composto no ponto original Porcentagem (%) da área do pico 0,72 0,67 0,65 0,67 0,71 0,74 das impurezas totais Solução do Composto P9, pH 6,8 Time 0 h 4 h 8 h 12 h 14 h 24 h porcentagem (%) relativa para a áreda do pico 100,0 101,0 101,4 101,6 100,8 101,7 do composto no ponto original Porcentagem (%) da área do pico 0,75 0,69 0,71 0,71 0,68 0,68 das impurezas totais Solução do Composto P9, pH 2,0 Time 0 h 4 h 8 h 12 h 14 h 24 h porcentagem (%) relativa para a área do pico do 100,0 100,1 101,0 100,6 100,6 101,0 composto no ponto original Porcentagem (%) da área do pico 0,84 0,85 0,85 0,85 0,84 0,85 das impurezas totais (3) Conclusão

[00255] Os resultados deste estudo mostraram que as impurezas não aumentaram significativamente após o armazenamento do Composto P9 nas soluções com pH 2,0, pH 6,8 e pH 7,4 a 37ºC por 24 h, e o Composto P9 apresentou boa estabilidade química.

3. Estudo sobre a estabilidade química do composto de referência

[00256] Similarmente, a estabilidade química do Composto A107 de WO 2017/114510 A1 em soluções com pH 1,2, pH 6,8, pH 7,4 foi estudada usando o método acima.

(1) Formulação de soluções do Composto A107 (1.1) Formulação da solução do composto A107 (pH 1,2): - Composição da solução: 10% PEG400 + 5% Solutol HS-15 + 85% pH 1,2 ácido clorídrico diluído - Concentração: 0,2 mg/ml - Método de formulação: O composto A107 foi pesado, adicionado com PEG400 e Solutol HS-15 na quantidade especificada acima e agitado em vórtice para proporcionar uma solução clara. A referida solução foi adicionada com ácido clorídrico diluído pH 1,2 na quantidade especificada acima e misturada uniformemente.

(1.2) Formulação da solução do composto A107 (pH 6,8): - Composição da solução: 10% PEG400 + 5% Solutol HS-15 + 85% tampão fosfato pH 6,8 - Concentração: 0,2 mg/ml - Método de formulação: O composto A107 foi pesado, adicionado com PEG400 e Solutol HS-15 na quantidade especificada acima e agitado em vórtice para proporcionar uma solução clara. A referida solução foi adicionada com tampão fosfato pH 6,8 na quantidade especificada acima e misturada uniformemente.

(1.3) Formulação da solução do composto A107 (pH7.4):

- Composição da solução: 10% PEG400 + 5% Solutol HS-15 + 85% pH 7,4 tampão fosfato - Concentração: 0,2 mg/ml - Método de formulação: O composto A107 foi pesado, adicionado com PEG400 e Solutol HS-15 na quantidade especificada acima e agitado em vórtice para proporcionar uma solução clara. A referida solução foi adicionada com tampão fosfato pH 7,4 na quantidade especificada acima e misturada uniformemente.

(2) Resultados obtidos no ensaio de estabilidade química do composto A107 a vários valores de pH: Solução do composto A107, pH 7,4 Tempo 0 h 2 h 4 h 6 h 8 h 24 h porcentagem (%) relativa para a área do pico do 100,00 98,32 97,42 95,86 94,98 84,39 composto no ponto original Porcentagem (%) da área do pico 0,48 2,15 3,05 4,6 5,48 16,02 das impurezas totais Solução do composto A107, pH 6,8 Tempo 0h 2h 4h 6h 8h 24h porcentagem (%) relativa para a área do pico do 100,00 99,52 99,23 98,74 98,47 95,24 composto no ponto original Porcentagem (%) da área do pico 0,39 0,87 1,16 1,65 1,91 5,13 das impurezas totais Solução do composto A107, pH 2,0 Tempo 0 h 2 h 4 h 6 h 8 h 24 h porcentagem (%) relativa para a área do pico do 100,00 99,94 99,90 99,83 99,79 99,27 composto no ponto original Porcentagem (%) da área do pico 0,35 0,41 0,45 0,52 0,56 1,08 das impurezas totais

[00257] Os resultados na tabela acima mostraram que as impurezas aumentaram significativamente após o armazenamento do Composto A107 do documento WO 2017/114510 A1 em soluções com pH 1,2, pH 6,8 e pH 7,4 a 37 ºC por 24 h, e o Composto A107 apresentou uma fraca estabilidade química sob condições ácidas, neutras e ligeiramente alcalinas.

Exemplo de efeito II: Ensaio de atividade enzimática in vitro

[00258] A metade da atividade inibidora dos compostos da invenção contra a ERK2 quinase (valor de IC50) foi determinada neste exemplo.

(1) Materiais e instrumentos: Enzima: quinase extracelular regulada por sinal ERK2 quinase (PV3595, Invitrogen) Kit: Kit de teste de proteína quinase Z'-LYTE® - peptídeo Ser/Thr 3 (PV3176, Invitrogen) Componentes do kit: O substrato Z´-LYTE™ Peptídeo Ser/Thr 3 (PV3200) O substrato de fosforilação Z´- LYTE™ Fosfo-peptídeo Ser/Thr 3 (PV3215)

5X tampão de quinase: HEPES 250 mM (pH 7,5), MgCl2 50 mM, EGTA 5 mM, BRIJ-35 a 0,05% (PV3189, Invitrogen) ATP (PV3227, Invitrogen) Reagente de desenvolvimento A (PV3295, Invitrogen) Tampão de desenvolvimento (P3127, Invitrogen) Reagente de parada (P3094, Invitrogen) Leitor de microplacas: O leitor de microplacas multimodo PerkinElmer EnVision® Microplaca: microplaca preta rasa de 384 poços (6008269, PerkinElmer) (2) Protocolo de ensaio:

[00259] O substrato Z'-LYTE™ Ser/Thr 3 Peptídeo, o substrato de fosforilação Z´-LYTE™ Ser/Thr3 Fosfo-peptídeo, 1X tampão quinase (5X tampão quinase foi diluído com água ultra pura por cinco vezes), ATP, o reagente de desenvolvimento A, tampão de desenvolvimento, reagente de parada foram balanceados para a temperatura ambiente para uso. As concentrações de triagem para detectar o efeito dos compostos da invenção na atividade da ERK quinase foram sete diluições em série de três vezes a partir de 1 µM (de

0,2 µM para o controle positivo da droga) usando DMSO a 4% como co-solvente. 5 µL de sistema enzimático (HEPES 50 mM, pH 7,5, EGTA 1 mM, MgCl2 10 mM, Brij-35 a 0,01%, substrato 4 uM, enzima 0,8 ng/µL), 2,5 µL de composto, 2,5 µL de 400 µM de ATP foram adicionados a 384 poços microplaca, seguida de incubação em temperatura ambiente por 60 minutos no escuro. Após a conclusão da reação, 5 µl do agente de desenvolvimento (Reagente de Desenvolvimento A) diluído com o tampão de desenvolvimento (Tampão de Desenvolvimento) foram adicionados a todos os poços de reação, seguidos de incubação em temperatura ambiente por 60 minutos no escuro.

5 mL do agente final foram adicionados a cada poço para finalizar a reação. A fluorescência foi determinada usando o leitor de microplacas multimodo PerkinElmer EnVision® (comprimento de onda de excitação 400 nm, comprimento de onda de emissão 460 nm e 528 nm).

[00260] A taxa de inibição de cada poço foi calculada a partir de poço de substrato de fosforilação a 100% e poço de substrato de fosforilação a 0% usando o método de análise de dados abaixo: % de fosforilação = 1 - {(taxa de emissão × F100% – C100%)/[C0% – C100% + taxa de emissão × (F100% - F0%)]} × 100

% de inibição = 100 × (1 - % de fosforilação do poço do composto de teste/% de fosforilação do controle de inibição de 0% em que: taxa de emissão = emissão de fluorescência da amostra a 445 nm/emissão de fluorescência da amostra a 520 nm F100% = emissão média de fluorescência do poço de controle do substrato de fosforilação a 100% a 520 nm F0% = emissão média de fluorescência do poço de controle do substrato de fosforilação a 0% a 520 nm C100% = emissão média de fluorescência do poço de controle do substrato de fosforilação a 100% a 445 nm C0% = emissão média de fluorescência do poço de controle do substrato de fosforilação a 0% a 445 nm

[00261] Os testes foram realizados em duplicado. Os valores de IC50 foram calculados a partir da inibição da quinase pelos compostos de teste em uma faixa de diferentes concentrações.

(3) Resultados

[00262] Os dados da atividade de inibição dos compostos da invenção sobre a atividade da ERK2 quinase (IC50) foram listados na tabela abaixo, em que: A: representou que o IC50 do composto era menor ou igual a 10 nM;

B: representou que o IC50 do composto era maior que 10 nM e menor que 100 nM; C: representou que o IC50 do composto era maior ou igual a 100 nM e menor que 1 µM.

Os dados da atividade de inibição dos compostos da invenção na atividade da quinase ERK2 No. do composto IC50 de ERK2 P1 C P2 B P3 B P4 B P5 A P6 B P7 B P8 C P9 A P10 A P11 B P12 B P13 C P14 B P17 B P18 A P19 C P28 B P29 B P30 B P31 A P32 A P33 B P34 B P35 B P36 B P37 B P38 B P39 C P40 B P41 B P43 B P44 B P45 A P46 A P47 A P48 A

P49 A P50 C P53 C P54 B P55 B P56 B P57 C P58 A P61 B

[00263] Mais especificamente, os valores de IC50 dos compostos P5, P9, P10, P18, P42, P59 e P60 neste exemplo foram 8,2 nM, 3,3 nM, 6,1 nM, 3,0 nM, 2,7nM, 4,8nM e 10nM, respectivamente.

Exemplo de Efeito III: Estudo de Células In vitro

[00264] A atividade inibidora do Composto P9 da invenção e dos compostos representativos do documento WO 2017/114510 A1 na proliferação da linhagem celular A375 de melanoma humano (valor de IC50) foi determinada neste Exemplo.

(1) Materiais e instrumentos: Célula: linhagem celular de melanoma humano A375 (CRL- 1619™, ATCC) Reagente de detecção: sulforhodamina B SRB (S9012, Sigma) Microplaca: microplaca de 96 poços (3599, Corning) Leitor de microplacas: leitor de microplacas de comprimento total de onda (SpectraMax 190, Molecular Devices) (2) Protocolo de ensaio:

[00265] As células em fase de crescimento logarítmico foram semeadas em densidade apropriada (3500/poço) em microplacas de 96 poços no volume de 90 µL por poço. Após a incubação em uma incubadora de CO2 a 37 ºC durante a noite, 10 µL do composto em várias concentrações ou solução salina para controle médio foram adicionados em triplicado e incubados por 72 h, e um poço em branco foi colocado. Após o término da ação, o líquido da cultura foi removido das células e foi adicionado ácido tricloroacético a 10% (p/v) (100 µL/poço) para fixação a 4 ºC por 1 h, seguido de cinco lavagens com água destilada. Após secagem em estufa, 100 µL de solução SRB (4 mg/mL, dissolvido em ácido glacial a 1%) foram adicionados a cada poço. Após incubação para coloração à temperatura ambiente por 15 minutos, o SRB não ligado foi removido por cinco lavagens com ácido glacial a 1%. As microplacas foram secas em estufa e foram adicionados 150 µL de solução de Tris 10 mM a cada poço. A densidade óptica (valor de DO) no comprimento de onda de 560 nm foi medida usando um leitor de microplacas de comprimento de onda completo SpectraMax

190. A taxa de inibição do fármaco no crescimento das células tumorais foi calculada de acordo com a seguinte fórmula:

[00266] Os valores de IC50 foram obtidos por regressão com método de quatro parâmetros, utilizando o software conectado ao leitor de microplacas. O ensaio foi repetido duas vezes.

[00267] Os resultados do teste foram listados na tabela abaixo.Comparação dos dados de atividade baseada em células entre os compostos representativos do documento WO 2017/114510 A1 e o composto P9 da invenção Composto IC50 contra célula A375 (µM) Composto A1 de WO 2017/114510 A1 6,10 Composto A179 de WO 2017/114510 A1 0,957 Composto A205 de WO 2017/114510 A1 2,70 Composto A200 de WO 2017/114510 A1 7,80 Composto A180 de WO 2017/114510 A1 > 10,0 Composto P9 da invenção 0,363

[00268] Os resultados do ensaio mostraram que o composto P9 da invenção tinha uma atividade significativamente maior do que os compostos representativos do documento WO 2017/114510 A1.

Exemplo de Efeito IV: Estudo de Permeabilidade

[00269] A permeabilidade do Composto P9 da invenção e do Composto A107 de WO 2017/114510 A1 foi determinada utilizando o modelo de absorção de droga in vitro de células Caco-2 neste Exemplo.

(1) Materiais e instrumentos:

Célula: câncer intestinal humano Caco2 (HTB-37, ATCC)

Placa de Petri: placa de 10 cm (430167, Corning)

Microplaca Millicell-24

(PSHT010R5, Millipore)

Tampão: PBS (14190, Invitrogen)

HEPES (H0887, Sigma)

HBSS (H8264, Sigma)

Substâncias relacionadas à cultura de células:

meio DMEM de alta glicose (L0103-

500, Biowest)

soro bovino fetal (S1810-500,

Biowest)

tripsina (255200-056, Invitrogen)

aminoácido não essencial (M7145,

Sigma)

penicilina e estreptomicina (B-

13234, GIBCO)

piruvato de sódio (11360-070,

Invitrogen)

L-glutamina (25030-081,

Invitrogen)

Reagentes relevantes: fluoresceína (L0144, Sigma)

propranolol (P831800, Sigma)

colchicina (C9754, Sigma)

atenolol (A7655, Sigma)

Instrumentos: cromatografia líquida (Waters Acquity UPLC classe I, Waters) espectrometria de massa (Waters xevo TQ-S MS/MS, Waters) ohmímetro (Millicell-ERS, Thermo) leitor de microplacas (Infinite Pro, Tecan) (2) Protocolo de ensaio: Estabelecimento do modelo de monocamada de células Caco-2 1) As células Caco-2 foram revividas e incubadas em uma placa de Petri de 10 cm em uma incubadora de 5 a 6% de CO2 e 95% de UR a 37 ºC. O meio era DMEM com alto índice de glicose e suplementado com 10% de soro fetal bovino, 1% de glutamina, 1% de aminoácido não essencial, 100 U/mL de penicilina e 100 µg/mL de estreptomicina.

2) Quando a célula cresceu para 80 a 90% de confluência, as células foram digeridas com tripsina e centrifugadas. O sobrenadante foi descartado. As células foram ressuspensas em 6 ml de meio completo e contadas três vezes.

3) As células foram coletadas por centrifugação a 1000 rpm por 5 minutos e diluídas em suspensão. As células foram semeadas em microplaca Millicell-24 poços na concentração de 2 × 105/mL no volume de 400 µL por poço. 800 µL do líquido da cultura foram adicionados ao lado do substrato para incubação em uma incubadora de CO2 a 5% a 37ºC.

4) O meio foi substituído 72 h após a semeadura das células e depois a cada dois dias. As células foram incubadas por 21 dias.

Avaliação de células monocamada Caco-2 1) Após 21 dias de incubação, a integridade das células da monocamada Caco-2 em cada poço foi avaliada medindo a resistência elétrica através da membrana durante o crescimento celular.

2) Inspeção de vazamento de marcador

[00270] A integridade da monocamada de células Caco-2 foi verificada pelo marcador fluorescente Lucifer Yellow. No dia 21 do crescimento da monocamada celular, 200 µL de Lucifer Yellow (100 µg/ml) foram adicionados ao lado superior (lado apical, lado AP) da camada celular e 800 µL de líquido HBSS foram adicionados ao lado basal (lado basolateral, lado BL). Após incubação em incubadora de CO2 a 5% a 37 ºC por 1,5 h, a amostra foi coletada e a absorbância foi medida no comprimento de onda 485 a 535 nm. A quantidade de vazamento foi calculada e geralmente não superior a 0,4%. A solução HBSS em branco foi usada como controle em branco.

Experiência de transporte bilateral

[00271] Nas mesmas condições, determinou-se simultaneamente o transporte de fármacos do lado superior (lado apical, lado AP) → lado basal (lado basolateral, lado BL) e do lado BL → lado AP da camada de células Caco-2.

1) Os líquidos mãe dos compostos foram preparados em DMSO a uma concentração de 10 mM.

2) O licor mãe foi diluído com solução HBSS até 20 µm de concentração de trabalho.

3) As células foram lavadas três vezes com HBSS e o valor de TEER foi medido com um potenciômetro celular.

4) Composto de referência ou composto de teste e HBSS foram adicionados a ambos os lados das células a 400 µL/poço no lado AP e 800 µL/poço no lado BL, respectivamente.

5) As amostras foram coletadas respectivamente do lado AP e do lado BL após incubação em incubadora de CO2 a 5% a 37ºC por 1,5 h.

(3) Análise de dados:

[00272] Os aparentes coeficientes de permeabilidade Papp dos medicamentos em todo o modelo de células Caco-2 foram calculados de acordo com a seguinte fórmula (1): Papp = (VA/(Área × Tempo)) × ([medicamento]aceitador/[medicamento]doador inicial) (1) em que VA é o volume no lado do aceitador, Área é a área do filme (cm2), Tempo é o tempo de reação, [medicamento]aceitador é a concentração do medicamento no lado aceitador e

[medicamento]doador inicial é a concentração do medicamento no lado doador.

[00273] Os resultados do teste foram listados na tabela abaixo: Composto A107 de Composto P9 da invenção WO 2017/114510 A1 Coeficiente de De A para B = 23,69 × permeabilidad De A para B = 1,54 × 10-6 cm/s 10-6 cm/s e aparente (Caco-2) Taxa de 26,2 1,3 efluxo

[00274] A partir dos resultados do ensaio dos parâmetros de permeabilidade, observou-se que o Composto P9 da invenção tinha um coeficiente de permeabilidade aparente significativamente mais alto (Papp, Apical a Basal) do que o Composto A107 de WO 2017/114510 A1 no ensaio de permeabilidade de Caco-2. Sabe-se que um medicamento é acreditado para ter boa permeabilidade se tiver Papp > 2 × 10-6 (ver, por exemplo, Journal of Pharmacological and Toxicological Methods 44 (2000) 235 a 249). O coeficiente de permeabilidade aparente do Composto P9 foi significativamente mais alto que este índice, mas o do Composto A107 foi mais baixo que este índice. Além disso, o Composto A107 teve uma taxa de efluxo mais alta, enquanto a taxa de efluxo do composto P9 foi menor. Assim, o composto P9 tem uma melhor permeabilidade e espera-se que tenha uma melhor propriedade de absorção intestinal e um melhor grau de absorção oral in vivo.

Exemplo de efeito V: Ensaio de solubilidade

[00275] A solubilidade termodinâmica dos compostos da invenção foi determinada neste exemplo.

(1) Reagentes e Materiais: No. de catálogo/No. da Nome Fornecedor batelada DPBS Corning R21-031-CV HBSS Sigma RNBC5907 ACN Merck JA054630 SinoPharm NaOH 20120515 Group SinoPharm HCl 20160503 Group Microplaca de 384 Greiner B16093FV poços DMSO Merck K42958652 225 (2) instrumentos e equipamentos: Nome Fonte Termomisturador Eppendorf Centrífuga Centrífuga Eppendorf 5424R, Eppendorf Centrífuga Centrífuga Eppendorf 5810R, Eppendorf Selador de placas Selador de placas Loc, Agilent Oscilador Oscilador digital IKA MS3, IKA Cromatógrafo Sistema Waters ACQUITY Classe, Waters líquido Medidor de pH Sartorius PB-10, Sartorius Gerador de vórtice Gerador de vórtice digital MS3, IKA Balança analítica Balança analítica Sartorius MSE125P-100-DA Waters ACQUITY XEVO TQ-S (fonte ESI), Sistema MS/MS Waters (3) Protocolo de ensaio:

[00276] Veículo em branco com diferentes valores de pH: - pH 7,4: DPBS - pH 6,8: 9900 µL de HBSS + 100 µL de HEPS + 5 µL de NaOH 2N - pH 7,4: DPBS ajustado com HCl 2N para pH 2,0

[00277] Incubação: - Cerca de 3 mg do composto foram pesados, adicionados com 500 µL de veículo em branco e agitados a 37ºC por 24h.

[00278] Tratamento de amostra: - Após a incubação, as amostras foram centrifugadas por 30 minutos e o sobrenadante foi transferido para um novo tubo de EP e posteriormente centrifugado por 30 minutos.

- Após a centrifugação, as amostras foram diluídas 100 vezes com ACN/H2O (V/V, 1:1).

- A faixa de concentração linear de 12,5 nM a 1 mM foi configurada com ACN/H2O (V/V, 1:1).

[00279] Análise biológica: - Todas as amostras foram misturadas com água na proporção 1:1 em volume, centrifugadas a 4000 rpm por 5 minutos e analisadas por LC-MS/MS.

[00280] Métodos de análise: - Condições de cromatografia: Coluna de análise: Acquity BEH C18 (1,7 µm; 2,1 x 50 mm, Waters) Fase móvel A: 0,1% FA em H2O Fase móvel B: 0,1% FA em CAN/MEOH (9:1, V/V) Gradiente: como mostrado na tabela abaixo tempo (h) Taxa de A% B% Curva (h) fluxo (mL/min) original 0,5 80 20 original 1,2 0,5 40 60 6 1,5 0,5 10 90 6 2,0 0,5 80 20 1

[00281] Sistema MS/MS - O modo de monitoramento de reação múltipla (MRM) foi usado: Modo de Composto MRM ionização Composto P9 da invenção ESI, positivo 463,047 > 307,588 (4) Resultados: Solubilidade Solubilidade máxima Solubilidade No. do Composto máxima em pH em pH 6.8 HBSS/HEPES máxima em pH 2,0 PBS (uM) 10mM/BSA 0,1% (uM) 7,4 PBS (uM) Composto A65 de 43,0 ± 2,33 31,7 ± 0,229 11,9 ± 1,36 WO 2017/114510 A1 Composto A107 de 1011 ± 11,2 4,53 ± 1,13 2,53 ± 0,175 WO 2017/114510 A1 Composto P9 da 2847± 62 267± 3 544± 5,3 invenção

[00282] Os resultados acima mostraram que, nos três valores de pH examinados, o composto P9 da invenção tinha uma solubilidade muito maior do que os compostos de WO 2017/114510 A1 e era vantajoso para a formulação em um medicamento.

Exemplo de Efeito VI: Estudo Farmacocinético em Modelo Animal

[00283] Os parâmetros farmacocinéticos do Composto P9 da invenção e os compostos representativos do documento

WO 2017/114510 A1 em ratinhos foram determinados neste Exemplo.

(1) Protocolo de farmacocinética in vivo para administração intravenosa (IV) e oral (PO) única em camundongos ICR (1.1) Formulação de substâncias em estudo

[00284] A concentração durante a formulação das substâncias de teste foi calculada com base em base livre pura.

Injeção intravenosa (IV)

[00285] A substância de teste foi pesada com precisão e adicionada com os excipientes (5% de DMSO + 5% de Solutol + 90% de solução salina) nas quantidades especificadas. Após dissolução completa, a solução de dosagem para injeção intravenosa foi obtida na concentração de 0,2 mg/mL.

Administração oral por gavagem (PO)

[00286] O composto de teste foi pesado com precisão e adicionado com os excipientes (0,4% de metilcelulose (viscosidade: 400 cps)) na quantidade especificada. Após mistura suficiente, a solução de dosagem para administração oral foi obtida na concentração de 1 mg/mL.

(1.2) Recepção e adaptação de animais

[00287] Quarenta camundongos ICR SPF machos foram adquiridos do Laboratório Xipuer-Bikai Laboratory Animal Co., Ltd. e 30 camundongos ICR saudáveis normais passaram no exame físico e foram utilizados neste estudo. Peso do animal: 20,12 a 25,56 g.

(1.3) Administração de animais

[00288] As experiências foram realizadas nos 30 ratos machos ICR, como mostrado na tabela abaixo.

Concentração Dosagem de Volume de Número de de Modo de Grupo administração administação animais M administração administração mg/kg mL/kg mg/mL Injeção 1 15 1 0,2 5 intravenosa Administração 2 15 10 1 10 oral por gavagem* * Todos os animais foram submetidos a jejum de 10 a 14 horas antes da administração e alimentados duas horas após a administração.

(1.4) Coleta e tratamento de amostras

[00289] O sangue foi coletado pela órbita ou por punção cardíaca após a eutanásia por dióxido de carbono (CO2). Foram coletados cerca de 0,20 mililitro (mL) de sangue para cada amostra com heparina sódica como agente anticoagulante. As amostras foram colocadas em gelo após a coleta.

[00290] Pontos de tempo de coleta de sangue nos grupos de administração intravenosa e oral: antes da administração, bem como 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h e 24 h após a administração, como mostrado na tabela abaixo.

Antes da 5 15 30 IV e PO 1 h 2 h 4 h 6 h 8h 24 h administração minutos minutos minutos 3 camun-

X X dongos 3 camun-

X X dongos

3 camun-

X X dongos 3 camun-

X X dongos

[00291] As amostras de sangue foram colocadas no gelo após a coleta. O plasma foi separado por centrifugação (condições de centrifugação: 8000 rpm, 6 minutos, 2 a 8ºC).

O plasma coletado foi armazenado a -80ºC para análise.

[00292] As amostras biológicas das substâncias testadas foram analisadas por LC-MS/MS. O método de análise utilizado foi descrito em (1.7). O LLOQ para a detecção das amostras foi de 1 ng/mL. A análise da amostra para curva padrão e controle de qualidade também foi realizada durante a detecção de substâncias em teste.

(1.5) Eliminação de aminal

[00293] Após o término do experimento, todos os animais foram sacrificados de acordo com o POP institucional.

(1.6) Análise farmacocinética

[00294] Os parâmetros farmacocinéticos foram calculados a partir dos dados de concentração sanguínea do medicamento, usando o WinNonlin 7.0 para fornecer parâmetros como AUC0-t, AUC0-∞, MRT0-∞, Cmax, Tmax e T1/2, e os desvios médio e padrão dos mesmos.

[00295] Para as amostras com concentrações abaixo do limite inferior de quantificação, ao calcular os parâmetros farmacocinéticos, as amostras coletadas antes da Cmax devem ser calculadas como zero e as amostras coletadas nos pontos após a Cmax devem ser calculadas como abaixo do limite de qualificação (BLQ).

(1.7) Método de análise a. Instrumentos e Equipamentos LC-MS/MS

[00296] Sistema de cromatografia líquida de alta eficiência (Waters, ACQUITY UPLC), incluindo gerenciador de solvente binário (gerenciador de solvente binário ACQUITY UPLC), gerenciador de amostras (autoamostrador ACQUITY UPLC Mod.), organizador de amostras de alta eficiência (organizador de amostras ACQUTIY UPLC), forno de coluna de alta temperatura (Aquecedor de coluna ACQUITY UPLC HT).

[00297] Espectrômetro de massa (API 4000, Applied Biosystems), fonte de ionização por eletropulverização (ESI), analisador de massa em quadrupolo em tandem.

[00298] O sistema de processamento de dados foi o software Analyst (Applied Biosystems, versão de software nº

1.5.1).

[00299] Balança micro-analítica (XP26, METTLER TOLEDO Instruments (Shanghai) Co., Ltd.); oscilador de vórtice (SI-A256, Scientific Industries, Inc.); centrífuga refrigerada de alta velocidade para mesa pequena (5417R, Eppendorf); máquina de água ultrapura (Millipore); pipeta (Eppendorf).

Reagentes

[00300] Metanol (Burdick & Jackson, HPLC), acetonitrila (Burdick & Jackson, HPLC), ácido fórmico (J&K), água ultrapura.

b. Condições de LC-MS/MS

[00301] As condições de cromatografia líquida são as seguintes: - coluna: ACQUITY UPLC HSS T3 1,8 µm (50 mm × 2,10 mm) - na fase móvel: tempo A (%) B (%) (minutos) 0,00 80 20 0,40 10 90 0,80 10 90 0,81 80 20 1,20 80 20 A: ácido fórmico aquoso a 0,1% B: ácido fórmico a 0,1% em metanol - Temperatura da coluna: 40°C - Temperatura do amostrador automático: 4°C - Taxa de fluxo: 500µL/min - Volume de injeção: 1µL

[00302] As condições de espectrometria de massa são as seguintes: - Modo de varredura: modo de monitoramento de reação múltipla de íons positivos - Fonte de íons: fonte ESI - Modo de pulverização: eletropulverização

- Resolução Q1: Unidade - Resolução Q3: Unidade - Gás de pulverização (Gás 1): 65 psi - Gás de aquecimento (Gás2): 65 psi - Gás de cortina (CUR): 35 psi - Gás de colisão (CAD): 10 - Tensão da fonte de íons (IS): 5500 v - Temperatura da fonte de íons (TEM): 550°C c. Formulação de amostras para curva padrão e amostras para controle de qualidade

[00303] Uma quantidade de substância de teste foi pesada, adicionada com metanol para dissolvê-la completamente para preparar uma solução estoque com uma concentração de 569.000 ng/mL. Uma quantidade da solução estoque foi tomada e diluída com metanol a uma solução de trabalho com uma concentração de 200.000 ng/mL. A solução padrão de 200.000 ng/mL foi adicionada ao plasma em branco na proporção de 1:39 para preparar a amostra para a curva padrão com uma concentração de 5.000 ng/mL. A amostra da curva padrão de 5.000 ng/mL foi diluída sequencialmente com plasma em branco para obter 1.000, 500, 100, 50, 10, 5, 1 ng/mL de amostras de curva padrão e amostras de controle de qualidade de 800, 200, 2,5 ng/mL. O processo de formulação específico foi mostrado na Tabela I.

Tabela I. Formulação de amostras para curva padrão e CQ

Volume Volume Volume Amostra Amostra Concentração do Concentração tomado final padrão tomada tomada (ng/mL) veículo final (ng/mL) (µL) (µL) (µL) STD-PRE NA 200.000 20 780 800 5.000 STD-7 STD-PRE 5.000 100 400 500 1.000 STD-6 STD-7 1.000 200 200 400 500 STD-5 STD-6 500 100 400 500 100 STD-4 STD-5 100 200 200 400 50 STD-3 STD-4 50 100 400 500 10 STD-2 STD-3 10 200 200 400 5 STD-1 STD-2 5 100 400 500 1 DQC STD-PRE 5.000 5 45 50 500 QCH STD-PRE 5.000 80 420 500 800 QCM QCH 800 100 300 400 200 QCL STD-2 5 100 100 200 2,5

[00304] Solução de trabalho do padrão interno: Pipetar uma quantidade de solução mãe de tolbutamida com uma concentração de 767.000 ng/mL para um balão volumétrico, completar o volume com metanol e misturar bem para obter a solução de trabalho do padrão interno.

d. Tratamento da amostra de plasma

[00305] Amostra de 50 µL (amostras para curva padrão/amostras para controle de qualidade/amostras biológicas) foi coletada em um tubo de centrífuga de 1,5 mL, adicionado com 250 µL de solução do padrão interno (adicionada com o mesmo volume de metanol, em vez do padrão interno, para controle em branco) e bem misturado pelo vórtice. A mistura foi centrifugada a 14.000 rpm durante 5 minutos. 200 µL do sobrenadante foram coletados e adicionados à placa de amostra de 96 poços correspondente para análise por LC-MS/MS.

(2) Resultados

[00306] Os dados farmacocinéticos dos compostos representativos do documento WO 2017/114510 A1 e do composto P9 da invenção foram comparados como se segue.

Composto Parâmetros farmacocinéticos Composto A1 de WO 2017/114510 nAUC0-t/(ng·h/ mL, po): 145,0 A1 CLz/(L/hr/kg): 4,81 F/(%, po): 70,07 Composto A35 de WO nAUC0-t/(ng·h/ mL, po): 66,97 2017/114510 A1 CLz/(L/hr/kg): 4,69 F/(%, po): 32,07 Composto A179 de WO nAUC0-t/(ng·h/ mL, po): 0,00 2017/114510 A1 CLz/(L/hr/kg): 60,11 F/(%, po): 0,00 Composto A114 de WO nAUC0-t/(ng·h/ mL, po): 180,44 2017/114510 A1 CLz/(L/hr/kg): 2,61 F/(%, po): 49,46 Composto P9 da invenção nAUC0-t/(ng·h/ mL, po): 1696,3 CLz/(L/hr/kg): 0,36 F/(%, po): 60,55

[00307] A partir dos resultados medidos dos parâmetros farmacocinéticos in vivo nesses camundongos, foi observado que o composto P9 da invenção tinha uma área significativamente maior sob a curva (AUC), menor depuração in vivo (CLz) e melhor biodisponibilidade nos camundongos, em comparação com o compostos de WO 2017/114510 A1. Assim, espera-se que este composto tenha uma melhor absorção após administração oral e melhor capacidade de farmacológica (druggability).

Exemplo de Formulação I

[00308] Uma quantidade de Composto P9 foi pesada com precisão, adicionada com 5% de DMSO + 5% de Solutol + 90% de solução salina ou similar, para dissolvê-lo completamente para dar a solução de dosagem com uma concentração de 0,2 mg/mL, a qual foi filtrada estéril para administração de injeção intravenosa.

Exemplo de Formulação II

[00309] Uma quantidade de Composto P9 foi pesada com precisão, adicionada com 0,4% de metilcelulose (viscosidade: 400 cps) ao volume final. Após mistura suficiente, a solução de dosagem para administração oral foi obtida na concentração de 1 mg/mL.

[00310] Todos os documentos mencionados na presente divulgação são incorporados aqui por referência na sua totalidade, como se estivessem listados individualmente.

Note-se que, com base na presente divulgação, várias alterações ou modificações da invenção são óbvias para as pessoas versadas na técnica, e essas formas equivalentes também se enquadram no escopo definido pelas reivindicações anexas a este pedido.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto de Fórmula (I), ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, (I) caracterizado pelo fato de que, X1 é selecionado do grupo que consiste em CR9a e N; X2 é selecionado do grupo que consiste em CR9b e N; X3 é selecionado do grupo que consiste em CR9c e N; e no máximo um de X1, X2 e X3 é N; Y1 e Y2 são, cada um, selecionados independentemente do grupo que consiste em CR9' e N; R9a, R9b e R9c são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D, halo, -OH, ciano, alquila opcionalmente substituída, alcoxila opcionalmente substituída, alquilcarbonila opcionalmente substituído, alcoxilcarbonila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, amino, mono- ou di- (alquil) amino opcionalmente substituída e -CONRaRb; R9' é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo,

-OH, ciano, alquila opcionalmente substituída, alcoxila opcionalmente substituída, alquilcarbonila opcionalmente substituíd, alcoxilcarbonila opcionalmente substituída,

cicloalquila opcionalmente substituída, amino, mono- ou di-

(alquil)amino opcionalmente substituído e CONRaRb;

R1 é selecionado do grupo que consiste em H e D;

R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila opcionalmente substituída, cicloalquila opcionalmente substituída, heterociclila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída e heteroarila opcionalmente substituída ou R2 junto com X1 formam heterociclila opcionalmente substituída;

R3 é selecionado do grupo que consiste em halo e alquila opcionalmente substituída;

R4 é selecionado do grupo que consiste em H, D,

alquila opcionalmente substituída, alcoxila opcionalmente substituída, -CO(CR10R11)mR12, -SO2(CR10R11)mR12,

-CONR13(CR10R11)mR12, -COO(CR10R11)mR12, -CR13R13'(CR10R11)mR12 e alquilacarbonila C1-8 -; em que m é 0, 1, 2 ou 3, e em que

R10 e R11 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D, halo, alquila opcionalmente substituída e alcoxila opcionalmente substituída; ou R10 e

R11 são unidos para formar cicloalquila, cicloalquenila,

arila, heteroarila e heterociclila opcionalmente substituídas; e

R12 é, cada um, independentemente selecionado do grupo que consiste em H, alquila opcionalmente substituída,

cicloalquila opcionalmente substituída, heterociclila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída e heteroarila opcionalmente substituída; e

R13 e R13' são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila opcionalmente substituída; ou R13 e R13' juntamente com a forma adjacente de carbono formam cicloalquila, cicloalquenila e heterociclila opcionalmente substituídas;

R5 , R6 , R7 e R8 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em -H, -D, halo, -OH,

amino, ciano, alquila opcionalmente substituída, alcoxila opcionalmente substituída, -(CH2)0-3CONRaRb, -(CH2)0-3COOH,

cicloalquila opcionalmente substituída e heterociclila opcionalmente substituída; ou quaisquer dois de R5, R6, R7 e

R8, juntamente com o carbono adjacente formam cicloalquila,

cicloalquenila, arila, heteroarila e heterociclila opcionalmente substituídass; e

Ra e Rb são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D e alquila opcionalmente substituída;

em que o substituinte opcional é selecionado independentemente do grupo que consiste em deutério (D),

halo, -OH, mercapto, ciano, -CD3, -alquila C1-C6, alquenila

C2-C6, alquinila C2-C6, cicloalquila de 3 a 8 membros,

arila, heterociclila de 3 a 8 membros, heteroarila,

arilalquila C1-C6, heteroarila-alquila C1-C6, haloalquila

C1-C6, -O-alquila C1-C6, -O-alquenila C2-C6, -O-alquilfenila

C1-C6, alquila C1-C6-OH, alquila C1-C6-SH, alquila C1-C6-O-

alquila C1-C6, O-haloalquila C1-C6-, NH2, alquila C1-C6-NH2,

N(alquila C1-C6)2, NH(alquila C1-C6), N(alquila

C1-C6)(alquila C1-C6-fenila), NH(alquilfenila C1-C6-), nitro,

C(O)-OH, C(O)O-alquila C1-C6, -CONRiRii (em que Ri e Rii são, cada um, independentemente selecionados a partir de H,

D e alquila C1-C6), NHC(O)(alquila C1-C6), NHC(O)(fenila),

N(alquila C1-C6)C(O)(alquila C1-C6), N(alquila C1 -

C6)C(O)(fenila), C(O)alquila C1-C6, C(O)-heteroarila de 5 a

7 membros, C(O)alquilfenila C1-C6, C(O)haloalquila C1-C6,

OC(O)alquila C1-C6, -S(O)2-alquila C1-C6, -S(O)-alquila C1-

C6 , -S(O)2-fenila, -S(O)2-haloalquila C1-C6, -S(O)2NH2,

S(O)2NH(alquila C1-C6), S(O)2NH(fenila), -NHS(O)2(alquila

C1-C6), -NHS(O)2(fenila) e NHS(O)2(haloalquila C1-C6-), em que cada um das referidas alquila, cicloalquila, fenila,

arila, heterociclila e heteroarila é opcionalmente ainda substituída por um ou mais substituintes selecionados do grupo que consiste em halo, -OH, -NH2, cicloalquila,

heterociclila de 3 a 8 membros, alquila C1-C4, haloalquila

C1-C4-, -O-alquila C1-C4, alquila C1-C4-OH, alquila C1-C4-O-

alquila C1-C4, O-haloalquila C1-C4, ciano, nitro, -C(O)-OH,

C(O)O-alquila C1-C6, CON(alquila C1-C6)2, CONH(alquila C1-C6), CONH2, NHC(O)(alquila C1-C6), NH(alquila C1-C6)C(O)(alquila C1-C6), -SO2(alquila C1-C6), -SO2(fenila), -SO2(haloalquila C1-C6), -SO2NH2, SO2NH(alquila C1-C6), SO2NH(fenila), -NHSO2(alquila C1-C6), -NHSO2(fenila) e NHSO2 (haloalquila C1-C6), desde que o composto não seja 2-(2-cloropiridin-3-il)- 1-(7-fluoro-2-(hidroxilmetil)-5-(2-(isopropilamino) pirimidin-4-il)indolin-1-il)etan-1-ona

2. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que X1 é selecionado do grupo que consiste em CR9a e N; X2 é selecionado do grupo que consiste em CR9b e N; X3 é selecionado do grupo que consiste em CR9c e N; e no máximo um de X1, X2 e X3 é N; Y1 e Y2 são, cada um, selecionados independentemente do grupo que consiste em CR9' e N; R9a, R9b e R9c são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D, halo, -OH, ciano, alquila C1-3 opcionalmente substituída, alcoxila C1-3 opcionalmente substituída, alquilcarbonila C1-3 opcionalmente substituída, alcoxicarbonila C1-3 opcionalmente substituída, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, amino, mono- ou di- (alquila C1-3)amino opcionalmente substituído e -CONRaRb;

R9' é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo,

-OH, ciano, alquila C1-3 opcionalmente substituída, alcoxila

C1-3 opcionalmente substituída, alquilcarbonila C1-3 opcionalmente substituída, , alcoxicarbonila C1-3 opcionalmente substituída, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, amino, mono- ou di- (alquila C1-3)amino opcionalmente substituído e CONRaRb;

R1 é selecionado do grupo que consiste em H e D;

R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-8 opcionalmente substituída, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituída, arila de 6 a 12 membros opcionalmente substituída e heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituída, tal como heteroarila de 5 a 7 membros, ou R2 em conjunto com X1 formam heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituída;

R3 é selecionado do grupo que consiste em halo e alquila C1-8 opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D e halo;

R4 é selecionado do grupo que consiste em H, D,

alquila C1-8 opcionalmente substituída, alcoxila C1-8 opcionalmente substituída, -CO(CR10R11)mR12, -SO2(CR10R11)mR12,

-CONR13(CR10R11)mR12, -COO(CR10R11)mR12, -CR13R13'(CR10R11)mR12 e alquilcarbonila C1-8; em que m é 0, 1, 2 ou 3, e em que

R10 e R11 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D, halo, alquila C1-8 opcionalmente substituíd e alcoxila C1-8 opcionalmente substituída, ou R10 e R11 são unidos para formar cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila e heterociclila opcionalmente substituídas; e

R12 é, cada um, independentemente selecionado do grupo que consiste em H, alquila C1-3 opcionalmente substituída,

cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituída, arila de 6 a 12 membros opcionalmente substituída e heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituída, tal como heteroarila com

5 a 7 membros; e

R13 e R13' são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila C1-3 opcionalmente substituída; ou R13 e R13' juntamente com o carbono adjacente formam cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, cicloalquenila C4-8 e heterociclila C5-8;

amino, ciano, alquila C1-3 opcionalmente substituída,

alcoxila C1-3 opcionalmente substituída, -(CH2)0-3CONRaRb ,

-(CH2)0-3COOH, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída e heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituída; ou quaisquer dois de R5, R6, R7 e R8, juntamente com o carbono adjacente, formam cicloalquila, cicloalquenila, arila, heteroarila e heterociclila opcionalmente substituídas; e Ra e Rb são, cada um, selecionados independentemente do grupo que consiste em H, D e alquila C1-3 opcionalmente substituída.

3. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o composto é representado pela fórmula Ia, Ib, Ic ou Id: , , , ; R9a, R9b e R9c são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D, alquil C1-3, haloalquila C1-3, alcoxila C1-3, -OH, ciano, halo, amino, mono- ou di-(alquila C1-3)amino , alquilcarbonila C1-3-, alcoxicarbonila C1-3 e cicloalquila C3-8; preferencialmenre, R9a, R9b e R9c são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D e alquila C1-3; mais preferencialmente, R9a, R9b e R9c são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H e D; e outras variáveis são conforme definidas em qualquer uma das reivindicações 1 ou 2.

4. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que Y1 é CR9', Y2 é CR9' e em que R9' é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo e alquila C1-3; mais preferencialmente, Y1 é CR9', Y2 é CR9' e em que R9' é H, D, F ou metila; ou Y1 é CR9', Y2 é N e em que R9' é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo e alquila C1-3; mais preferencialmente, Y1 é CR9', Y2 é N e em que R9' é H, D, F ou metila; ou Y1 é N, Y2 é CR9' e em que R9' é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo e alquila C1-3; mais preferencialmente, Y1 é N, Y2 é CR9' e em que R9' é H, D, F ou metila; ou

Y1 é N e Y2 é N.

5. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é representado pela fórmula Ie: Ie em que as variáveis são conforme definidas na reivindicação 1.

6. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2 e 5, caracterizado pelo fato de que X1 é selecionado do grupo que consiste em CR9a e N, em que R9a é selecionado do grupo que consiste em H, D, halo, -OH, ciano, alquila C1-3, haloalquila C1-3, alcoxila C1-3, alquilcarbonila C1-3, alcoxcarbonila C1-3, cicloalquila C3-8, amino e mono- ou di-(alquila C1-3)amino; preferencialmente, X1 é selecionado do grupo que consiste em CR9a e N, em que R9a é selecionado do grupo que consiste em H, D e alquila C1-3; mais preferencialmente, X1 é selecionado do grupo que consiste em CH, CD e N.

7. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 5, caracterizado pelo fato de que R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-6 opcionalmente substituída, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída, heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituída e heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituída, tal como heteroarila de 5 a 7 membros, em que o substituinte opcional é um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, hidroxila, -CD3, alquila C1-6 e hidroxialquila C1-6, preferencialmente é um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, hidroxila, -CD3, -CH3 e -CH2OH; ou R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-6 opcionalmente substituída com um ou mais hidroxila, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída com um ou mais hidroxila, heterociclila de 3 a 8 membros e heteroarila de 5 a 12 membros, tal como heteroarila de 5 a 7 membros opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados a partir de -CD3, alquila C1-6 e hidroxialquila

C1-6; ou R2 é selecionado do grupo que consiste em alquila

HN C1-4, , , , , , , N e , que são opcionalmente substituídos por um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, hidroxila, alquila C1-4, -CD3 e hidroxialquila C1-4, preferencialmente com um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, hidroxila, -CH3, -CD3 e -CH2OH; ou R2 é selecionado do grupo que consiste em isopropila, CF2H , OH , OH , OH , , OH , OH , O , O ,

N

N HO OH N , HO , O N , O N, NO e NO ; ou R2 é selecionado do grupo que consiste em e ; ou

R2 é selecionado do grupo que consiste em OH e D3C N N .

8. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que R3 é selecionado do grupo que consiste em halo e alquila C1-6 opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D e halo; ou R3 é selecionado do grupo que consiste em halo e alquila C1-3 opcionalmente substituída com um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D e halo; ou R3 é selecionado do grupo que consiste em halo e alquila C1-6; ou R3 é selecionado do grupo que consiste em flúor, cloro, bromo, iodo, -CH3, -CH2CH3, -CH(CH3)2, -CH2CH2CH3, -CF3, -CHF2, CF3CH2- e CD3-; ou R3 é selecionado do grupo que consiste em flúor, cloro e -CH3; ou R3 é flúor.

9. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que R4 é selecionado do grupo que consiste em -CO(CR10R11)mR12 e -CR13R13'(CR10R11)mR12; em que m é 0, 1, 2 ou 3, e em que R10 e R11 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D e alquila C1-4 opcionalmente substituída com hidroxila; R12 é, cada um, independentemente selecionado do grupo que consiste em arila de 6 a 12 membros opcionalmente substituída e heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituída, tal como heteroarila de 5 a 7 membros; R13 e R13' são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H, alquila C1-3 e haloalquila C1-3.

10. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que R12 é, cada um, independentemente selecionado do grupo que consiste em arila de 6 a 12 membros opcionalmente substituída e heteroarila de 5 a 12 membros opcionalmente substituída, tal como heteroarila de 5 a 7 membros, em que o substituinte opcional é um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, alquila C1-4, ciano e heterociclila C3-8-(CH2)0-4- (por exemplo, morfolinila, tal como morfolino, piperazinila,

tetra-hidropiranila, tal como tetra-hidropiran-4-ila,

morfolinilmetila, tal como morfolinometila ou piperazinilmetila);

ou R12 é selecionado do grupo que consiste em fenila opcionalmente substituída e piridinila opcionalmente substituída, tal como piridin-3-ila, em que o substituinte opcional é um ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo que consiste em D, halo, alquila

C1-4 (por exemplo, metila ou etila), ciano e heterociclila

C3-8-(CH2)0-4- (por exemplo, morfolinila, tal como morfolino,

piperazinila, tetra-hidropiranila, tal como tetra-

hidropiran-4-ila, morfolinilmetila, tal como morfolinometila ou piperazinilmetila);

ou R12 é selecionado do grupo que consiste em

, em que Rc é selecionado do grupo que consiste em halo, tal como flúor ou cloro, alquila C1-4, tal como metila, , , e ;

, em que Rd é selecionado do grupo que consiste em H, alquila C1-4, tal como metila ou etila e ;

, em que Re é selecionado do grupo que consiste em halo, tal como flúor e cloro, e p é 1 ou 2; e , em que Rf é selecionado do grupo que consiste em , , e .

11. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que R4 é selecionado do grupo que consiste em -CO(CR10R11)mR12, em que m é 0, 1, 2 ou 3, e em que R10 e R11 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H; e R12 é selecionado do grupo que consiste em .

12. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que R4 é selecionado do grupo que consiste em -CO(CR10R11)mR12, em que m é 0, 1, 2 ou 3, e em que R10 e R11 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H; R12 é selecionado do grupo que consiste em 2-cianofenila, 5-cloro-2-fluorofenila, 2-cloro-3- fluorofenila, 2-cloro-4-fluorofenila, 2-cloro-5- fluorofenila, 2,5-difluorofenila, 3-cloropiridin-2-ila, 6- cloropiridin-2-ila, 3-cloropiridin-4-ila ou 4-cloropiridin- 3-ila.

13. Composto ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizado pelo fato de que R5 , R6 , R7 e R8 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em -H, -D, halo, -OH, amino, ciano, alquila C1-6 opcionalmente substituída, alcoxila C1-6 opcionalmente substituída, -(CH2)0-3CONRaRb , -(CH2)0-3COOH, cicloalquila C3-8 opcionalmente substituída e heterociclila de 3 a 8 membros opcionalmente substituída, em que o substituinte opcional é um ou mais substituinte selecionado independentemente do grupo que consiste em D, -OH, O-alquila C1-6 e NH2 e em que Ra e Rb são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em H, D e alquila C1-3; ou R5, R6, R7 e R8 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila C1-6 opcionalmente substituída com hidroxila ou O-alquila C1-6; ou R5 e R6 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila C1-6; e R7 e R8 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila C1-6 opcionalmente substituída com hidroxila ou O-alquila C1-6; ou R5, R6, R7 e R8 são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em -H, -CH3 e -CH2OH; ou R5, R6 e R7 são H e R8 é H, -CH3 ou -CH2OH.

14. Composto caracterizado pelo fato de ser selecionado do grupo que consiste nos Exemplos P1 a P20, P23 a P25, P28 a P51, P53 a P64 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

15. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de ser para uso como um medicamento.

16. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de compreender o composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e opcionalmente um veículo farmaceuticamente aceitável.

17. Uso do composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser para fabricação de um medicamento para prevenção e/ou tratamento de uma doença relacionada a uma ERK quinase, ou uso do composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso como um produto como um inibidor da ERK quinase.

18. Método não terapêutico de inibição da atividade da ERK quinase caracterizado pelo fato de compreender o contato de uma quantidade eficaz do composto conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 14, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com uma ERK quinase, inibindo assim a ERK quinase.

19. Composto caracterizado pelo fato de ser (4-(7- fluoroindolin-5-il)piridin-2-il)(1-metil-1H-pirazol-5-il) carbamato de t-butila representado pela fórmula:

N

F BocN

N NH

20. Método para preparar o composto de fórmula (I) conforme definido na reivindicação 1, ou um estereoisômero, racemato, isômero geométrico, tautômero, pró-fármaco, hidrato, solvato ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, o referido composto de fórmula (I) sendo o composto de fórmula C3: X1 = N ou C; em que X1 , R2 , R3 , R10, R11, R12 e m são conforme definidos na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de compreender as etapas de: (a) submeter o composto de fórmula C1 X1 = N ou C;

O HO (CR10R11)mR12 e o composto à reação de acoplamento de amida, para obter o composto da fórmula C2,

X1 = N ou C; ; e (b) quando o composto de C2 é protegido por Boc, desproteger o mesmo, para obter o composto de fórmula C3, X1 = N ou C; .

21. Método, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a reação de acoplamento de amida é realizada na presença de um agente de condensação e uma base em um solvente inerte.

22. Método, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a desproteção é realizada na presença de um ácido em um solvente inerte.

23. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 ou 22, caracterizado pelo fato de que o solvente inerte é selecionado do grupo que consiste em acetato de etila, tetra-hidrofurano, metiltetra- hidrofurano, acetonitrila, dimetilsulfóxido, N,N- dimetilformamida, diclorometano, 1,2-dicloroetano, N-

metil-2-pirolidona, ou uma combinação dos mesmos.

24. Método, de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o agente de condensação é um ou mais selecionados do grupo que consiste em 1- hidroxilbenzotriazol (HOBT), 1-hidroxil-7-azobenzotriazol (HOAT), hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il- oxitripirrolidino-fosfônio (PyBOP), hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitris(dimetilamino)fosfônio (BOP), 1,1- carbonildiimidazol (CDI), anidrido 1-propilfosfônico (T3P), hidroclorato de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodi- imida (EDC · HCl), N,N-diciclo-hexilcarbodi-imida (DCC), anidrido acético, cloreto de acetila, cloreto de oxalila, hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'- tetrametilurônio (HATU) e hexafluorofosfato de O- (benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio (HBTU).

25. Método, de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que a base é uma ou mais selecionadas do grupo que consiste em trietilamina, DIPEA, piridina, 2,4-dimetilpiridina, NaOH, KOH, LiOH, Na2CO3, K2CO3, NaHCO3, Cs2CO3, Na3PO4 ou K3PO4.

26. Método, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a reação de acoplamento de amida é realizada a uma temperatura desde a temperatura ambiente até o refluxo por 0,5 a 24h.

27. Método, de acordo com a reivindicação 22,

caracterizado pelo fato de que o ácido é um ou mais selecionados do grupo que consiste em ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido trifluoroacético, ácido acético, ácido fórmico e ácido fosfórico.

28. Método, de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a desproteção é realizada a uma temperatura de -10°C a 80°C por 0,5 a 24h.