BR112019026711A2

BR112019026711A2 - regimes de dosagem para a administração de análogos de peptídeo semelhante a glucagon- 2 (glp-2)

Info

Publication number: BR112019026711A2
Application number: BR112019026711-5A
Authority: BR
Inventors: Kim SONNE; Ulrik Mouritzen; Peter GLERUP; Palle Bekker JEPPESEN
Original assignee: Zealand Pharma A/S
Priority date: 2017-06-16
Filing date: 2018-06-15
Publication date: 2020-06-30
Also published as: CN111032072A; ES2894629T3; MX2019015054A; SG11201912161SA; IL271245B1; AU2018285580B2; DK3638291T3; MX2023003828A; IL271245A; KR20230035677A; PE20200678A1; IL271245B2; EP3638291B1; RU2019142586A; JP2023036769A; TW201904607A; IL299864A; CL2019003660A1; JP2020523420A; CO2019014028A2

Abstract

Trata-se de regimes de dosagem para a administração de peptídeo semelhante a glucagon-2 (GLP-2) e seu uso médico são revelados, por exemplo, no tratamento e/ou prevenção de distúrbios relacionados a estômago e intestino e para melhorar efeitos colaterais de quimioterapia e terapia de radiação. Regimes de dosagem para a administração de análogos de peptídeo semelhante a glucagon-2 (GLP-2) para induzir o crescimento longitudinal dos intestinos são descritos, por exemplo, para o tratamento de pacientes com síndrome de intestino curto (SBS). Usos médicos para ajustar o volume de suporte parenteral (PS) fornecido a cobaias que recebem tratamento com análogos de GLP-2 em resposta ao tratamento e aos algoritmos para determinar mudanças de volume de PS são também descritos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “REGIMES DE DOSAGEM PARA

A ADMINISTRAÇÃO DE ANÁLOGOS DE PEPTÍDEO SEMELHANTE A GLUCAGON-2 (GLP-2)”

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção refere-se a regimes de dosagem para a administração de análogos de peptídeo semelhante a glucagon-2 (GLP-2) e seu uso médico, por exemplo, no tratamento e/ou prevenção de distúrbios relacionados a estômago e intestino e para melhorar efeitos colaterais de quimioterapia e terapia de radiação. A presente invenção também se refere a regimes de dosagem para a administração de análogos de peptídeo semelhante a glucagon-2 (GLP-2) para induzir crescimento longitudinal dos intestinos, por exemplo, para o tratamento de pacientes com síndrome de intestino curto (SBS). A presente invenção também se refere a usos médicos para ajustar o volume de suporte parenteral (PS) fornecidos a cobaias que recebem tratamento com análogos de GLP-2 em resposta ao tratamento e a algoritmos para determinar mudanças de volume de PS.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] GLP-2 humano é um peptídeo de 33 aminoácidos com a seguinte sequência: Hy-His-Ala-Asp-Gly-Ser-Phe-Ser-Asp-Glu-Met-Asn-Thr-Ile-Leu-Asp-Asn- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Asn-Trp-Leu-Ile-Gln-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-OH. O mesmo é derivado de processamento pós-translacional específico de proglucagon nas células L enderoendócrinas do intestino e em regiões específicas do tronco cerebral. GLP-2 se liga a um único receptor acoplado a proteína G que pertence à família de secretina de glucagon de classe II.

[003] Relatou-se que GLP-2 induz crescimento significativo do epitélio mucosal de intestino delgado por meio do estímulo de proliferação de células-tronco nas criptas, e por inalação de apoptose no vilos (Drucker et al., 1996, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 93: 7911-7916). GLP-2 também tem efeitos de crescimento no cólon. Além disso, GLP-2 inibe esvaziamento gástrico e secreção de ácido gástrico (Wojdemann et al., 1999, J. Clin. Endocrinol. Metab. 84. 2513-2517), intensifica a função de barreira intestinal (Benjamin et al., 2000, Gut 47: 112-119), estimula o transporte de hexose intestinal por meio da regulação ascendente de transportadores de glicose (Cheeseman, 1997, Am. J. Physiol. R1965-71), e aumenta o fluxo sanguíneo intestinal (Guan et al., 2003, Gastroenterology, 125: 136-147). Uma revisão de GLP-2 e suas propriedades está disponível em:http://jn.nutrition.org/content/131/3/709.full.

[004] Foi reconhecido na técnica que análogos receptores de peptídeo semelhante a glucagon-2 têm potencial terapêutico para o tratamento de doenças intestinais. No entanto, o hGLP-2 nativo, um peptídeo gastrointestinal de 33 aminoácidos, não é um útil em um ajuste clínico devido a sua meia-vida muito curta em humanos de cerca de 7 minutos para GLP-2 de comprimento total [1-33] e 27 minutos para GLP-2 truncado [3-33]. Em grande parte, a curta meia-vida é devido à degradação pela enzima dipeptidilpeptidase IV (DPP-IV). Consequentemente, houveram tentativas na técnica de desenvolver agonistas receptores de GLP-2 com melhores características farmacocinéticas, em particular para aprimorar a meia-vida de moléculas de GLP-2. A título de exemplo, análogos de GLP-2 com substituições foram sugeridas tais como, por exemplo, análogos de GLP-2 que contêm substituição de Gly na posição 2 ([hGly2] GLP-2, teduglutídeo) o que aumenta a meia-vida de sete minutos (GLP-2 nativo) a cerca de duas horas. A acilação de fármacos de peptídeo com cadeias de ácido graxo também se provou benéfica para prolongar a circulação sistêmica assim como aumentar a estabilidade enzimática sem prejudicar a potência biológica. No entanto, embora essas tentativas tenham se provado a farmacocinética de análogos de GLP-2, e os mesmos sejam algumas vezes descritos na técnica as "longa ação", deve-se ter em mente que isso é em comparação a hGLP-2 nativo com meias-vidas da ordem de várias horas, em vez de minutos. Isso, por sua vez, significa que os análogos de GLP-2 ainda precisam ser administrados a pacientes uma ou mais vezes por dia.

[005] Há considerável interesse na parte de pacientes e profissionais da saúde no desenvolvimento de peptídeos terapêuticos de baixo custo, longa ação e "amigáveis ao usuário”. No entanto, uma dificuldade principal com a entrega de tais peptídeos terapêuticos é sua curta meia-vida de plasma, principalmente devido à rápida liberação de soro e degradação proteolítica por meio da ação de plasma proteases, necessitando de frequentes injeções, frequentemente diárias. Pacientes desgostam de injeções, o que induz a concordância reduzida e eficácia de fármaco reduzida.

[006] O documento nº WO 2006/117565 (Zealand Pharma A/S) descreve análogos de GLP-2 que compreendem uma de mais substituições como em comparação a [hGly2]GLP-2 e que aprimoraram a atividade biológica in vivo e/ou estabilidade química aprimorada, por exemplo, conforme analisado em ensaios de estabilidade in vitro. Em particular, análogos de GLP-2 são descritos que têm substituições em uma ou mais das posições 8, 16, 24 e/ou 28 da sequência de GLP- 2 de tipo selvagem, opcionalmente, em combinação com substituições adicionais na posição 2 e uma ou mais das posições 3, 5, 7, 10 e 11, e/ou uma deleção de um ou mais dos aminoácidos 31 a 33. Essas substituições também podem ser combinadas com a adição de uma sequência de peptídeo de terminal N ou terminal C. A administração diária ou duas vezes ao dia desses análogos de GLP-2 é também descrita. Dentre as moléculas reveladas no documento nº WO 2006/117565 é glepaglutídeo (ZP1848) que foi projetado para ser estável em formulações líquidas, e é tipicamente administrado por dosagem diária com uso de uma caneta de injeção.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[007] Amplamente, a presente invenção é baseada na constatação surpreendentemente das propriedades farmacocinéticas (PK) e/ou farmacodinâmicas (PD) de análogos de GLP-2, por exemplo, do tipo revelado, no documento nº WO 2006/117565 e WO 2008/056155, permite menos administração frequente do que foi proposto até agora. Experimentos adicionais sugeriram que análogos de GLP-2, tais como ZP1848, tiveram uma meia-vida de cerca de 17 horas que, embora seja significativamente maior do que GLP-2 ou outros análogos de GLP-2, sugeriu que a administração diária deve ser usada no tratamento de pacientes. No entanto, um estudo clínico de Fase 2 em humanos com uso do análogo de GLP-2 ZP1848 foi constatado agora que a meia-vida de plasma terminal da molécula é, de fato entre 5 e 17 dias. A meia-vida de plasma terminal é o tempo necessário para dividir a concentração de plasma por dois depois de alcançar pseudoequilíbrio. Por sua vez, isso sugere surpreendentemente que significativamente dosagem menos frequente dos análogos de GLP-2 da presente invenção seria eficaz, incluindo dosagem semanal de duas vezes por semana. O conteúdo do documento nº WO 2006/117565 e nº WO 2008/056155 são expressamente incorporado em sua totalidade para todos os fins, e em particular, em relação aos análogos de GLP-2 revelados nesses documentos.

[008] Os resultados de estudos adicionais também confirmaram que ambos metabólitos de ZP1848, isto é, ZP2711 e ZP2469, estiveram presentes seguindo sua administração in vivo e são farmacologicamente ativos, com potência in vitro comparável a ZP1848. O nível de plasma de ZP2711 está na mesma faixa que o de ZP1848, enquanto o nível de plasma de ZP2469 é múltiplas vezes mais alto do que o de ZP1848. Consequentemente, ambos os metabólitos podem ser incluídos ao avaliar a exposição sistêmica visto que ambos contribuem para eficácia in vivo. Devido ao alto nível de plasma de ZP2469, esse composto tem níveis de plasma acima do limite de detecção bioanalítico (50 pM para ZP2469, 25 pM para ZP1848 e ZP2711), portanto, é possível determinar a meia-vida do composto ZP2469. Uma meia-vida de plasma terminal entre 5 e 17 dias, conforme mostrado nos exemplos, sugere dosagem de uma ou duas vezes por semana de ZP1848 seria eficaz.

[009] Isso, por sua vez, permite a administração dos análogos de GLP-2 de acordo com a presente invenção, por exemplo, administração de uma ou duas vezes por semana. Alternativa ou adicionalmente, o regime de dosagem dos análogos de GLP-2 da presente invenção pode compreender uma pluralidade ou curso de doses separadas em tempo por 2 dias, 2,5 dias, 3 dias, 3,5 dias, 4 dias, 5 dias, 6 dias, 7 dias, 8 dias, 9 dias, 10 dias, 11 dias ou 12 dias. Em uma modalidade preferencial, as doses são separadas em tempo por 3 dias, 3,5 dias, 4 dias, 5 dias, 6 dias, 7 dias ou 8 dias. Em uma modalidade preferencial, doses são separadas em tempo por 3 dias, 3,5 dias,

4 dias ou 7 dias. Conforme será verificado na técnica, o tempo entre doses pode ser variado em alguma extensão de modo que cada e todas as doses não são separadas precisamente ao mesmo tempo. Isso será frequentemente direcionado sob a discrição do médico. Desse modo, doses podem ser separadas em tempo por uma faixa clinicamente aceitável de tempos, por exemplo, de cerca de 2 dias a cerca de 10 dias, ou de cerca de 3 ou 4 dias a cerca de 7 ou 8 dias. Os resultados do experimento clínico que suportam essas conclusões são incluídos nos exemplos abaixo.

[010] Sem se limitar à teoria, acredita-se atualmente que a longa meia-vida inesperada dos análogos de GLP-2, que permite a dosagem de uma ou duas vezes por semana, pode ser obtida devido à combinação da formação de um depósito subcutâneo e da formação de metabólitos que são lentamente liberadas do depósito subcutâneo e que são também agonísticos no receptor GLP-2. Os presentes inventores acreditam que o depósito subcutâneo é formado na administração de análogos de GLP-2 através de uma reação entre os análogos, isto é, a cauda de lisina, e com ácido hialurônico no compartimento subcutâneo. Esse tipo de depósito não foi visto antes para outros compostos que têm uma cauda de lisina, tais como lixisenatido que tem uma meia-vida de 2 a 4 horas.

[011] Consequentemente, no primeiro aspecto, a presente invenção fornece um análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento e/ou prevenção de um distúrbio relacionado a estômago e intestino em um paciente humano, em que o análogo de GLP-2 é representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e

Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o método compreende administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.

[012] Nesse aspecto da presente invenção, o análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) pode ser usado para o tratamento e/ou prevenção de distúrbios relacionados a estômago e intestino tais como úlceras, distúrbios de ingestão, síndromes de má absorção, síndrome de tripa curta, síndrome de cul-de-sac, doença de intestino inflamatório, esprue celíaco (por exemplo, que surge de enteropatia induzida por glúten ou doença celíaca), esprue tropical, esprue hipogamaglobulinêmico, enterite, enterite regional (doença de Crohn), colite ulcerativa, dano de intestino delgado ou síndrome de intestino curto (SBS). Alternativa ou adicionalmente, o análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) pode ser usado para o tratamento e/ou prevenção de distúrbios relacionados a estômago e intestino tais como enterite de radiação, enterite infecciosa ou pós-infecciosa, ou dano de intestino delgado devido a agentes tóxicos ou outros agentes quimioterapêuticos. Nesse caso, o tratamento com o análogo de GLP-2 opcionalmente pode ser combinado com uma ou mais terapias anticâncer, e pode, portanto, compreender administrar um ou mais agente (ou agentes) quimioterapêutico ao paciente ou tratar o paciente com terapia de radiação.

[013] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento e/ou prevenção de um efeito colateral de quimioterapia ou tratamento de radiação em um paciente humano, em que o análogo de GLP-2 é representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o método compreende administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.

[014] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para aumentar o crescimento longitudinal dos intestinos em um paciente humano, em que o análogo de GLP-2 é representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o método compreende administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.

[015] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento de síndrome de intestino curto (SBS) em uma cobaia humana que recebe um regime de suporte parenteral (PS), sendo que o método compreende: (i) administrar à cobaia um análogo de GLP-2 representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o análogo de GLP-2 é administrado uma ou duas vezes por semana para um tempo suficiente para prolongar e aprimorar a função do intestino delgado à cobaia; (ii) segundo a etapa (i), reduzir uma frequência ou volume do regime de suporte parenteral (PS) em resposta à função aprimorada do intestino delgado; e (iii) repetir opcionalmente as etapas (i) e (ii) em resposta à cobaia que demonstra a função aprimorada ao longo do tempo como resultado de crescimento longitudinal adicional do intestino delgado.

Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um método para o tratamento de síndrome de intestino curto (SBS) em uma cobaia humana que recebe um regime de suporte parenteral (PS), sendo que o método compreende: (i) administrar à cobaia um análogo de GLP-2 representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o análogo de GLP-2 é administrado uma ou duas vezes por semana para um tempo suficiente para prolongar e também aprimorar a função do intestino delgado à cobaia; (ii) segundo a etapa (i), reduzir uma frequência ou volume do regime de suporte parenteral (PS) em resposta à função aprimorada do intestino delgado; e (iii) opcionalmente repetir as etapas (i) e (ii) em resposta à cobaia demonstrando função aprimorada continuada do intestino delgado.

[016] A título de exemplo, o período de tratamento pelo qual o análogo de GLP- 2 é administrado à cobaia pode ser de 18 a 150 semanas, por exemplo, de 18 a 100 semanas, ou de 18 a 52 semanas. No entanto, em outros casos em que o SBS é uma afecção crônica, pacientes podem precisar de tratamento pelo resto de suas vidas.

[017] No presente contexto, o termo “suporte parenteral" ou "PS" inclui o fornecimento de nutrientes e/ou fluidos à cobaia que recebe terapia de GLP-2 como um meio de fornecer à cobaia os nutrientes e/ou fluidos necessários, mas que são instáveis de absorver totalmente devido a sua condição. A determinação da quantidade correta ou volume de PS para fornecer às cobaias com SBS que recebem terapia de GLP-2 é um desafio, devido ao fato de que, se volume de PS não for ajustado de maneira precisa e apropriada, pacientes pode experimentar sobrecarga de fluido, estarem em risco de desidratação e podem não alcançar respostas ideias clínicas à terapia. Isso é também complicado visto que o volume de PS necessário por uma cobaia variará tipicamente durante o curso de terapia de GLP-2 dependendo de sua resposta à terapia. Tipicamente, a avaliação da quantidade de volume de PS necessário pela cobaia à medida que a terapia de GLP-2 progride depende de quanto tempo a terapia continuou e a responsividade de pacientes individuais a isso. Em vista dessa variação, uma avaliação inicial de volume de PS pode ser realizada dentro dos primeiros dias de terapia de GLP-2, e é tipicamente então seguida por uma avaliação semanal durante o primeiro mês, uma avaliação mensal pelos próximos 1 a 3 meses e, em seguida, uma avaliação a cada 3 a 6 meses até que o tratamento seja concluído. Isso é importante visto que as cobaias podem experimentar uma rápida resposta inicial à terapia de GLP-2, aprimorando a função do intestino delgado, por exemplo, mesmo antes de qualquer aumento no comprimento do intestino ser observado. Isso, por sua vez, permite que o volume de PS seja reduzido, evitando assim o risco de efeitos colaterais, tais como sobrecarga de fluido.

[018] Consequentemente, no método acima, a etapa (ii) pode incluir a etapa de (a) determinar o volume de PS necessário pela cobaia nesse ponto no tratamento, (b) comparar o mesmo a um volume de PS de linha de base determinado no início da terapia com o análogo de GLP-2 e (c) reduzindo a frequência ou volume do PS em que a cobaia demonstra função aprimorada do intestino delgado. Opcionalmente, a redução de uma frequência ou volume do suporte parenteral (PS) na etapa (ii) pode ser realizada com uso do algoritmo descrito abaixo.

[019] A título de ilustração da relação entre a quantidade de suporte parenteral necessário pelos pacientes e o grau de aprimoramento na função intestinal, acredita- se atualmente que um aumento de 40% de comprimento do intestino delgado resultaria em pelo menos um aprimoramento adicional de 10% na função ou capacidade de absorção do intestino delgado. Em geral, a terapia de GLP-2 de acordo com a presente invenção causa a função aprimorada ou capacidade de absorção do intestino delgado de pelo menos 10%, com mais preferência, pelo menos 20%, com mais preferência, pelo menos 30% com mais preferência, pelo menos 40%, e, com máxima preferência, pelo menos 50%. Adicional ou alternativamente, a quantidade da redução de suporte parenteral sobre o curso de terapia de GLP-2 é pelo menos 10%, com mais preferência, pelo menos 20%, com mais preferência, pelo menos 30%, com mais preferência, pelo menos 40% e, com máxima preferência, pelo menos 50%. Em uma modalidade preferencial, a redução de suporte parenteral é pelo menos 20%.

[020] Em um aspecto adicional relacionado, a presente invenção aborda um dos desafios que os pacientes e médicos encaram ao iniciar a terapia de GLP-2, ou seja, o ajuste apropriado e individualizado em volume de suporte parenteral (PS) fornecido ao paciente. Isso é importante devido ao fato de que se o volume de PS não é ajustado de maneira precisa e apropriada, pacientes podem experimentar sobrecarga de fluido, riscos de desidratação e podem não obter respostas clínicas ideais com a terapia.

[021] Por exemplo, em um estudo de fase 3 de tratamento de 24 semanas anterior com o análogo de GLP-2 teduglutídeo, uma tentativa de reduzir o volume de nutrição parenteral em 10% por mês foi realizado o mais cedo possível na semana 4 após o início de tratamento, se a saída de urina aumentou em pelo menos 10% da linha de base. Muitos dos pacientes nesse estudo sofreram de sobrecarga de fluido e pararam de beber (Jeppesen et al. 2011, Gut 2011;60:902-914). Em um estudo de fase 3 de seguimento, um estudo de 24 semanas de pacientes com SBS aos quais foi dado teduglutídeo subcutâneo (Jeppesen et al. 2012, Gastroenterology 2012;143:1473–1481), o protocolo permitiu uma redução de volume de suporte parenteral a pelo menos 10%, mas não mais do que 30%, após 2 semanas de tratamento, se a saída de urina aumentar em pelo menos 10% da linha de base. No entanto, nesse estudo, os pacientes também sofreram de sobrecarga de fluido, em particular, no começo do tratamento.

[022] Consequentemente, nesse aspecto, a presente invenção permite avaliação precoce de necessidade de fluido de PS alterado (por exemplo, dentro de alguns dias de terapia inicial de GLP-2) e fornece algoritmos para ajuste de volume de PS durante um curso de terapia de GLP-2. Será verificado pelos elementos versados na técnica que essa abordagem que usa o algoritmo para ajustar o volume de PS fornece um ajuste personalizado do volume de PS para cada paciente. Esse aspecto da presente invenção é aplicável a terapias de GLP-2 que usam os análogos de GLP-2 revelados no presente documento ou que usam análogos de GLP-2 conhecidos em qualquer ponto na técnica, tais como teduglutídeo.

[023] Consequentemente, em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um método para ajustar um volume de suporte parenteral (PS) em uma cobaia humana que recebe uma quantidade ou volume de suporte parenteral a cada semana, sendo que o método compreende calcular um novo volume de PS com uso de um algoritmo no qual um volume de PS por uma semana é calculado subtraindo-se sete vezes o aumento absoluto em volume de urina diária a partir de um volume de linha de base, isto é, volume de PS, na iniciação de terapia de GLP-2, do volume semanal atual de suporte parenteral para fornecer o novo volume de PS para a cobaia. Desse modo, o novo volume de PS (semanal) para a cobaia é igual ao volume atual de PS (semanalmente) menos 7 × aumento absoluto em volume de urina diária a partir de volume de linha de base.

[024] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um método para determinar um volume de suporte parenteral (PS) para uma cobaia humana que recebe terapia de GLP-2, sendo que o método compreende: opcionalmente determinar um volume de urina diário de linha de base no início da terapia de GLP-2; calcular um novo volume de PS (semanalmente) para a cobaia por uma semana vindoura com base em um volume atual de PS (semanalmente) e um volume de urina diário (por exemplo, de uma visita de médico) com uso de um algoritmo no qual o novo volume de PS (semanalmente) para a cobaia é igual ao volume atual de PS (semanalmente) 7 × aumento absoluto em volume de urina diária a partir do volume de linha de base.

[025] Em alguns casos, a etapa de cálculo é realizada se o volume de urina diário for pelo menos 10% mais alto do que volume de urina de linha de base. Esse método pode compreender a etapa adicional de determinar o volume atual de PS (semanalmente) para uso no cálculo do novo volume de PS com uso do algoritmo.

[026] Deve-se entender que, o método pode compreender adicionalmente a etapa de administrar o volume de PS à cobaia. Além disso, o método pode ser repetido, por exemplo, a cada semana, mês ou em visitas do médico, permitindo que o volume de PS seja reduzido em resposta à cobaia que demonstra função aprimorada continuada do intestino delgado. Em uma modalidade, o ajuste do volume de PS resulta em um volume de urina de pelo menos 800 ml/dia (24 horas), tais como pelo menos 1000 ml/dia (24 horas) ou mais. Uma vantagem particular desse método é que os efeitos de tratamento e o juste consequente do volume de PS pode ser realizado muito cedo na terapia de GLP-2, por exemplo, nos primeiros dias de tratamento, que é significativamente mais rápido em comparação a abordagens anteriores. Por exemplo, de acordo com a presente invenção, cobaias podem passar por uma otimização de 0 a 4 semanas, seguida por uma fase de estabilização de 2 a 4 semanas. O algoritmo para reduções de volume de PS pode ser baseado em mudanças de volume de urina medidas durante 48 horas.

[027] Em algumas modalidades desse aspecto da presente invenção, a terapia de GLP-2 pode compreender administração de um análogo de GLP-2 representado pela fórmula revelada no presente documento, em particular, com uso dos exemplos desses análogos de GLP-2. Em uma modalidade preferencial, o análogo de GLP-2 é ZP1848.

[028] Preferencialmente, o método inclui as etapas iniciais de determinar o volume de linha de base e/ou determinar o volume de urina diário. Alguns ou todas as etapas do método podem ser repetidas durante o curso da terapia de GLP-2 recebido pela cobaia. Preferencialmente, a primeira avaliação e a determinação de mudanças nos ajustes de volume de PS é realizado precocemente na terapia de GLP-2, tais como alguns dias após o início da terapia de GLP-2, tal como 2, 3, 4, 5, 6, 7 dias após o início da terapia de GLP-2. Preferencialmente, o tempo entre teste repetido para determinar mudanças nos ajustes de volume de PS é inicialmente semanal e posteriormente cerca de a cada 1 a 3 meses. Por exemplo, em uma modalidade, o método pode ser usado nas semanas 1, 2, 4, 8 e 12 após o começo de tratamento com o análogo de GLP-2, ajustando o volume de PS em resposta aos efeitos de tratamento. O volume de PS semanal administrado deve ser monitorado e ajustado por todo o tratamento com o análogo de GLP-2 (por exemplo, glepaglutídeo) de modo a evitar sobrecarga de fluido. Em geral, à medida que a capacidade de absorção dos intestinos aumenta após o tratamento com o análogo de GLP-2, tipicamente por alongamento ou espessamento do intestino delgado, o volume de PS pode ser diminuído para evitar a sobrecarga de fluido e para aprimorar as necessidades de tratamento do paciente.

[029] Outras condições que podem ser tratados com os análogos de GLP-2 da invenção, ou para os quais os análogos de GLP-2 podem ser úteis de modo profilático ou terapêutico, incluem enterite de radiação, enterite infecciosa ou pós-infecciosa, e dano de intestino delgado devido a agentes tóxicos ou outros agentes quimioterapêuticos. Isso pode precisar de administração do análogo de GLP-2 antes, simultaneamente com ou seguindo um curso de quimioterapia ou terapia de radiação de modo a reduzir efeitos colaterais de quimioterapia tais como diarreia, cólicas abdominais e vômito, e reduzir os consequentes danos estruturais ou funcionais do epitélio intestinal resultante da quimioterapia ou terapia de radiação. Preferencialmente, administração do análogo de GLP-2 de acordo com a invenção é iniciada 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7 dias antes da iniciação da quimioterapia ou ciclo de radiação. Preferencialmente, administração do análogo de GLP-2 de acordo com a invenção é iniciada no dia anterior ou no mesmo dia que o início de tratamento com quimioterapia ou ciclo de radiação e uma ou duas vezes por semana depois disso.

[030] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece o uso de um análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) na fabricação de um medicamento para tratamento e/ou prevenção de um distúrbio relacionado a estômago e intestino em um paciente humano, em que o análogo de GLP-2 é representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o método compreende administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.

[031] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece o uso de um análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) na fabricação de um medicamento para tratamento e/ou prevenção de um efeito colateral de quimioterapia ou tratamento de radiação em um paciente humano, em que o análogo de GLP-2 é representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o método compreende administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.

[032] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um método de tratamento e/ou prevenção de um distúrbio relacionado a estômago e intestino em um paciente humano, sendo que o método compreende administrar ao paciente um quantidade terapeuticamente eficaz de análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o método compreende administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.

[033] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um método de tratamento e/ou prevenção de um efeito colateral de quimioterapia ou tratamento de radiação em um paciente humano, sendo que o método compreende administrar ao paciente um quantidade terapeuticamente eficaz de análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e

[034] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece o uso de um análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) na fabricação de um medicamento para aumentar o crescimento longitudinal dos intestinos em um paciente humano, em que o análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o método compreende administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.

[035] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um método para aumentar o crescimento longitudinal dos intestinos em um paciente humano, sendo que o método compreende administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala-

Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o método compreende administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.

[036] Em todos os aspectos da presente invenção, o método de administrar o análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) compreende opcionalmente administrar uma pluralidade de doses do análogo de GLP-2 ao paciente, em que as doses são separadas em tempo por uma semana ou meia-semana. Em alguns casos, pode ser desejável dividir uma dose total em uma pluralidade de (por exemplo, dois ou três) doses separadas, por exemplo, para administração em locais de injeção separados, por exemplo, espaçando os locais de injeção pelo menos 5 cm de distância.

[037] Preferencialmente, as doses dos análogos de GLP-2 usadas de acordo com a presente invenção estão na faixa entre 0,5 mg e 25 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 1 mg e 20 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 1 mg e 10 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 2 mg e 7 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 5 mg e 7 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, ou opcionalmente entre 2 mg e 5 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana. Em uma modalidade, a dose dos análogos de GLP-2 usadas de acordo com a presente invenção é 10 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana. Em um curso de tratamento, as doses tomadas pelo paciente pode ser tanto o mesmo como diferente de acordo com as instruções do médico.

[038] Preferencialmente, o análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP- 2) são administrados a pacientes por injeção, o mais tipicamente por injeção subcutânea ou injeção intramuscular. Em algumas modalidades preferenciais, o análogo de GLP-2 pode ser administrado com uso de uma caneta de injeção, que permite que pacientes autoadministrem o análogo. Em alguns aspectos, administração do análogo de GLP-2 causa a formação de um depósito subcutâneo a partir do qual o análogo de GLP-2, ou metabólitos do mesmo, são liberados. Sem se desejar se limitar a nenhuma explicação particular, o depósito subcutâneo pode se formar através da interação dos análogos de GLP-2 administrados de acordo com a presente invenção, em particular em que os análogos compreendem uma cauda de lisina (isto é, um grupo Z1 e/ou um grupo Z2), através de uma reação entre os análogos e com ácido hialurônico no compartimento subcutâneo.

[039] Em algumas modalidades da presente invenção, na fórmula acima, X5 é Thr e/ou X11 é Ala. Exemplos desses análogos de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) incluem: ZP1848 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDKKKKKK-NH2 (SEQ ID NO: 1) ZP2949 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDKKK-OH (SEQ ID NO: 2) ZP2711 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDKK-OH (SEQ ID NO: 3) ZP2469 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDK-OH (SEQ ID NO: 4) ZP1857 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITD-NH2 (SEQ ID NO: 5) ZP2530 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITD-OH (SEQ ID NO:

6)

[040] Em algumas modalidades da presente invenção, na fórmula acima X5 é Ser e/ou X11 é Ser. Exemplos desses análogos de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) incluem: ZP1846 H-HGEGSFSSELSTILDALAARDFIAWLIATKITDKKKKKK-NH2 (SEQ ID NO: 7) ZP1855 H-HGEGSFSSELSTILDALAARDFIAWLIATKITD-NH2 (SEQ ID NO: 8) ZP2242 H-HGEGSFSSELSTILDALAARDFIAWLIATKITDK-OH (SEQ ID NO: 9)

[041] Modalidades da presente invenção serão agora descritos a título de exemplo e não limitação. No entanto, vários aspectos adicionais e modalidades da presente invenção serão evidentes aos elementos versados na técnica em vista da presente revelação.

[042] “e/ou” onde for usado no presente documento deve ser tomado como revelação específica de cada um dos dois recursos especificados ou componentes com ou sem o outro. Por exemplo “A e/ou B” deve ser tomado como revelação específica de cada um dentre (i) A, (ii) B e (iii) A e B, exatamente como se cada um é definido individualmente no presente documento.

[043] A menos que o contexto indique claramente o contrário, as descrições e definições dos recursos definidos acima não são limitados a nenhum aspecto ou modalidade particular da invenção e se aplicam igualmente a todos os aspectos e modalidades que são descritos.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO DEFINIÇÕES

[044] A menos que especificado de outro modo, as definições a seguir são fornecidas para termos específicos, que são usados na descrição escrita acima.

[045] Por toda a descrição e reivindicações, os códigos convencionais de uma letra e três letras para aminoácidos naturais são usados. Todos os resíduos de aminoácidos em peptídeos da invenção são preferencialmente da configuração em L. No entanto, aminoácidos de configuração em D também podem estar presentes.

[046] Compostos preferenciais da presente invenção têm pelo menos uma atividade biológica de GLP-2, em particular, em causar crescimento do intestino. Isso pode ser avaliado em ensaios in vivo, por exemplo, conforme descrito nos exemplos, nos quais a massa do intestino, ou uma porção do mesmo é determinado após um animal de teste foi tratado ou exposto a um análogo de GLP-2.

[047] Os análogos de GLP-2 da presente invenção têm uma ou mais substituições, deleções, inversões, ou adições de aminoácidos em comparação com GLP-2 nativo e conforme definido acima. Essa definição também inclui os termos sinônimos mimética de GLP-2 e/ou agonistas de GLP-2. Além disso, o análogo da presente invenção pode ter adicionalmente modificação química de um ou mais de seus grupos laterais de aminoácido, átomos de -carbono, grupo amino terminal, ou grupo de ácido carboxílico terminal. Um modificação química inclui, porém, sem limitação, adicionar porções químicas, criar novas ligações e remover porções químicas. Modificações em grupos laterais de aminoácido incluem, sem limitação, acilação de lisina grupos -amino, N-alquilação de arginina, histidina, ou lisina, alquilação de grupos de ácido carboxílico glutâmico ou aspártico, e deaminação de glutamina ou asparagina. Modificações do amino terminal incluem, sem limitação, as modificações des-amino, alquila N-inferior, alquila N-di-inferior, e N-acila. Modificações do grupo carbóxi terminal incluem, sem limitação, as modificações amida, amida de alquila inferior, amida de dialquila, e éster de alquila inferior. Preferencialmente no presente documento, alquila inferior é C1-C4 alquila. Além disso, um ou mais grupos laterais, ou grupos terminais, podem ser protegidos por grupos protetores conhecidos pelo químico de peptídeo de habilidade comum. O -carbono de um aminoácido pode ser mono- ou di-metilado.

[048] Deve-se entender que os peptídeos da invenção também deve ser fornecido na forma de um sal ou outro derivado. Sais incluem sais farmaceuticamente aceitáveis, tais como sais de adição de ácido e sais básicos. Exemplos de sais de adição de ácido incluem sais de cloridrato, sais de citrato e sais de acetato. Exemplos de sais básicos incluem sais em que o cátion é selecionado dentre metais álcali, tais como sódio e potássio, metais de terras alcalinas, tais como cálcio, e íons de amônio +N (R3) 3(R4), em que R3 e R4 independentemente designa C1-6-alquila opcionalmente substituída, C2-6-alquenila opcionalmente substituída, arila opcionalmente substituída ou heteroarila opcionalmente substituída. Outros exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis são descritos em “Remington’s Pharmaceutical Sciences”,17º edição. Ed. Alfonso R. Gennaro (Ed.), Mark Publishing Company, Easton, PA, E.U.A., 1985 e edições mais recentes, e na Encyclopaedia of Pharmaceutical Technology.

[049] Outros derivados dos análogos de GLP-2 da invenção incluem complexos de coordenação com íons de metal, tais como Mn2+ e Zn2+, ésteres, tais como ésteres hidrolisáveis in vivo, ácidos livres ou bases, hidratos, pró-fármacos ou lipídios. Ésteres podem ser formados entre grupos hidroxila ou ácido carboxílico presentes no composto e um ácido carboxílico apropriado ou parceiro de reação de álcool, com uso de técnicas conhecidas na técnica. Derivados que, assim como pró-fármacos dos compostos são conversíveis in vivo ou in vitro em um dos compostos parentes. Tipicamente, pelo menos uma das atividades biológicas do composto será reduzida na forma de pró-fármaco do composto, e pode ser ativada pela conversão do pró- fármaco para liberar o composto ou um metabólito disso. Exemplos de pró-fármacos incluem o uso de grupos protetores que podem ser removidos in situ que liberam composto ativo ou servem para inibir a liberação do fármaco in vivo.

[050] Z1 e Z2 estão independentemente presentes e/ou ausentes ou uma sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys, isto é, 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 resíduos de Lys. Os resíduos de Lys podem ter tanto configuração em D como configuração em L, mas têm uma configuração em L. Sequências Z particularmente preferenciais são sequências de quatro, cinco ou seis resíduos de lisina consecutivos, e particularmente seis resíduos de lisina consecutivos. Sequências Z exemplificadoras são mostradas no documento nº WO 01/04156. Em determinadas modalidades, Z1 é ausente. Em tais casos, Z2 podem tanto estar presentes como estar ausentes.

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS E ADMINISTRAÇÃO

[051] Os análogos de GLP-2 da presente invenção, ou sais ou derivados dos mesmos, podem ser formulados como composições farmacêuticas preparadas para armazenamento ou administração, e que compreendem uma quantidade terapeuticamente eficaz de um peptídeo de GLP-2 da presente invenção, ou um sal ou derivado do mesmo, em um carreador farmaceuticamente aceitável. De acordo com os regimes de dosagem da presente invenção, os análogos de GLP-2 são administrados a pacientes, por exemplo, um paciente humano, uma ou duas vezes por semana. Desse modo, um curso de administração de acordo com a presente invenção pode conferir administração a um paciente.

[052] Um curso de doses separados em tempo por 2 dias, 2,5 dias, 3 dias, 3.5 dias, 4 dias, 5 dias, 6 dias, 7 dias, 8 dias, 9 dias, 10 dias, 11 dias, 12 dias, 13 dias ou 14 dias, e com mais preferência, separados em tempo por 3 dias, 4 dias, 5 dias, 6 dias, 7 dias ou 8 dias. Em algumas situações, a presente invenção pode conferir administração a um paciente uma dose fixa de por exemplo, 10 mg uma ou duas vezes por semana.

[053] A quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da presente invenção dependerá da rota de administração, o tipo de mamífero a ser tratado, e as características físicas do mamífero específico sob consideração. Esses fatores e sua relação em determinar essa quantidade são conhecidos aos elementos versados na técnica de medicina. Essa quantidade e o método de administração pode ser adaptado para alcançar eficácia ideal de modo a entregar o peptídeo ao intestino grosso, mas dependerá de tais fatores como peso, dieta, medicação concorrente e outros fatores, conhecidos aos elementos versados na técnica de medicina.

[054] Isso está dentro de a invenção para fornecer uma composição farmacêutica, em que o análogo de GLP-2, ou um sal do mesmo está presente em uma quantidade eficaz para tratar ou evitar distúrbios relacionados a estômago e intestino ou para induzir crescimento longitudinal dos intestinos.

[055] Sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da invenção que têm uma porção química ácida podem ser formados com uso de bases orgânicas ou inorgânicas. Sais adequados formados com bases incluem sais de metal, tais como metal álcali ou sais de metal de terras alcalinas, por exemplo, sódio, potássio, ou sais de magnésio; sais de amônia e sais de amina orgânica, tais como aqueles formados com morfolina, tiomorfolina, piperidina, pirrolidina, uma alquilamina mono-, di- ou tri- inferior (por exemplo, etil-terc-butil-, dietil-, diisopropil-, trietil-, tributil- ou dimetilpropilamina), ou um alquilamina mono-, di- ou trihidróxi inferior (por exemplo, mono-, di- ou triethanolamina). Sais internos também pode ser formados. De modo similar, quando um composto da presente invenção contém uma porção química básica, sais pode ser formados com uso de ácidos orgânicos e inorgânicos. Por exemplo, sais pode ser formados a partir dos seguintes ácidos: acético, propiônico, láctico, cítrico, tartárico, succínico, fumárico, maleico, malônico, mandélico, málico, ftálico, clorídrico, hidrobrômico, fosfórico, nítrico, sulfúrico, metanossulfônico, naftalenosssulfônico, benzenossulfônico, toluenossulfônico, e canfossulfônico assim como outros ácidos farmaceuticamente aceitáveis conhecidos. Sais de adição de amino de ácido também pode ser formados com aminoácidos tais como lisina, glicina, ou fenilalanina.

[056] Conforme é evidente a um elemento versado na técnica de medicina, uma “quantidade terapeuticamente eficaz" dos peptídeos ou composições farmacêuticas da presente invenção variará dependendo da idade, peso e espécies mamíferas tratadas, dos compostos particulares empregados, do modo particular de administração e os efeitos desejados e da indicação terapêutica. Devido ao fato de que esses fatores e sua relação em determinar essa quantidade são conhecidos na técnica de medicina, a determinação de níveis de dosagem terapeuticamente eficaz, a quantidade necessária para alcançar o resultado desejado de prevenir e/ou tratar as doenças relacionadas a intestino e estômago descritas no presente documento, assim como outras indicações médicas reveladas no presente documento, para induzir o crescimento longitudinal dos intestinos, estarão dentro do âmbito do elemento versado.

[057] Conforme usado no presente documento, “uma quantidade terapeuticamente eficaz” é aquele que reduz sintomas de uma dada afecção ou patologia, e preferencialmente que normaliza respostas fisiológicas em um indivíduos com a afecção ou patologia. A redução de sintomas ou normalização de respostas fisiológicas pode ser determinada com uso de rotinas de métodos na técnica e podem variar com uma dada afecção ou patologia. Em um aspecto, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais análogos de GLP-2 ou composição farmacêutica que compreende o um ou mais análogos de GLP-2 é uma quantidade que restaura um parâmetro fisiológico mensurável substancialmente ao mesmo valor (preferencialmente a dentro de + 30%, com mais preferência a dentro de + 20%, e ainda com mais preferência, para dentro de 10% do valor) do parâmetro em um indivíduo sem a afecção ou patologia.

[058] Em uma modalidade da invenção, a administração dos compostos ou composição farmacêutica da presente invenção é iniciada em baixos níveis de dosagem, com níveis de dosagem sendo aumentados até que o efeito desejado de prevenção/tratamento da indicação médica relevante, tais como doenças relacionadas a intestino e estômago ou crescimento longitudinal aumentado dos intestinos, seja alcançado. Isso definiria uma quantidade terapeuticamente eficaz. Seja sozinho ou como parte de uma composição farmacêutica, as doses dos análogos de GLP-2 usadas de acordo com a presente invenção estão tipicamente na faixa entre 0,5 mg e 25 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 1 mg e 20 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 1 mg e 10 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 2 mg e 7 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 5 mg e 7 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, ou opcionalmente entre 2 mg e 5 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana. Em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz dos análogos de GLP-2 usados de acordo com a presente invenção é cerca de

10 mg por paciente uma ou duas vezes por semana. No entanto, o elemento versado poderá ajustar essas doses no caso em que um regime de dosagem alternativo de acordo com a revelação no presente documento é selecionado.

[059] Em aspectos da invenção relacionados a obter crescimento longitudinal aumentado dos intestinos, preferencialmente, tratamento com os análogos de GLP-2 da presente invenção aumenta o crescimento intestinal em pelo menos 30% em comparação ao controle, com mais preferência, em pelo menos 40% em comparação ao controle, e com máxima preferência, em pelo menos 50% em comparação ao controle. Em geral, é preferencial que o aumento de crescimento longitudinal seja acompanhado pelo aumento de capacidade de absorção durante e em alguma extensão mesmo depois que o tratamento parou. No tratamento de paciente humano em necessidade de ganhar crescimento longitudinal aumentado dos intestinos, tais como pacientes com síndrome de intestino curto (SBS), geralmente o tratamento durará por pelo menos 1 a 3 anos e pode opcionalmente conferir tratamento uma ou duas vezes por semana ou de acordo com outro dos regimes de tratamento da presente invenção descritos no presente documento.

[060] A classe de pacientes humanos com SBS inclui pacientes que têm falha intestinal de SBS (SBS-IF) e pacientes que estão na borda entre ter insuficiência intestinal de SBS (SBS-II) e falha intestinal de SBS (SBS-IF). Em alguns casos, pacientes que têm falha intestinal de SBS (SBS-IF) são também chamados SBS-PS quando os mesmos são dependentes do suporte parenteral, e os pacientes que têm insuficiência intestinal de SBS (SBS-II) são também chamados não-PS de SBS se os mesmos não estiverem dependendo de suporte parenteral.

[061] O espectro de tipos de paciente com SBS é revisto em Jeppensen, Journal of Parenteral e Enteral Nutrition, 38(1), 8S-13S, maio de 2014, doi:

10.1177/0148607114520994. Uma divisão adicional de SBS tipos de paciente pode ser realizada ao longo das linhas descritas em Schwartz et al., Clinical and Translational Gastroenterology (2016) 7, e142; doi:10.1038/ctg.2015.69. Isso separa pacientes com SBS em respondedores precoces e respondedores tardios/lentos. Sem se limitar à teoria, os presentes inventores acreditam que os respondedores precoces são aqueles que exibem um efeito precoce no tratamento com um análogo de GLP-2 causado por, dentre outros efeitos, um aumento na largura/diâmetro do intestino delgado, embora os respondedores tardios ou lentos são os pacientes que se beneficiam primeiro ou principalmente do tratamento com um análogo de GLP-2 causado por um aumento no comprimento do intestino delgado. A determinação da possibilidade de uma cobaia ser um respondedor precoce ou um respondedor tardio pode ser usada para determinar a duração do regime de tratamento com o análogo de GLP-2, o momento de qualquer decisão clínica para reduzir o suporte parenteral e o intervalo entre teste para determinar se uma redução de suporte parenteral é possível. Consequentemente, em uma modalidade, o paciente é um respondedor tardio ou lento. O comprimento dos intestinos delgados pode ser, por exemplo, medido por varredura por CT (varredura por tomografia computadorizada), MRI (imageamento de ressonância magnética), histologia, medição laparoscópica ou outras medições ou técnicas conhecidas na técnica.

[062] Em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento e/ou prevenção de um paciente que tem insuficiência intestinal de SBS (SBS-II), em que o tratamento previne ou atrasa o desenvolvimento de falha intestinal de SBS (SBS-IF), em que o análogo de GLP-2 é representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; e X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo.

[063] Em algumas modalidades, o método pode compreender administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana e/ou de acordo com qualquer um dos outros regimes de tratamento descritos no presente documento.

[064] Em outros aspectos relacionados, a presente invenção fornece o uso de um análogo de GLP-2 que é representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo, para a fabricação de um medicamento para o tratamento e/ou prevenção de um paciente que tem insuficiência intestinal de SBS (SBS-II), em que o tratamento previne ou atrasa o desenvolvimento de falha intestinal de SBS (SBS-IF).

[065] Em outros aspectos relacionados, a presente invenção fornece um método para tratamento e/ou prevenção de um paciente que tem insuficiência intestinal de SBS, em que o método previne ou atrasa o desenvolvimento de falha intestinal de SBS, em que o análogo de GLP-2 é representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou um sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo.

[066] Para uso terapêutico, o análogo de GLP-2 escolhido é formulado com um carreador que é farmaceuticamente aceitável e é apropriado para entregar o peptídeo pela rota escolhida de administração. Para o propósito da presente invenção, rotas parenterais periféricas incluem rodas intravenosas, intramusculares, subcutâneas, e intraperitoneais de administração. Em uma modalidade, a rota de administração é a rota subcutânea ou administração subcutânea. A presente composição farmacêutica compreende um análogo de GLP-2 da invenção, ou um sal ou derivado dos mesmos e um carreador farmaceuticamente aceitável. Carreadores farmaceuticamente aceitáveis são aqueles usados convencionalmente com fármacos baseados em peptídeo, tais como diluentes, excipientes e similares. Carreadores farmaceuticamente aceitáveis para uso terapêutico são conhecidos na técnica farmacêutica, e são descritos, por exemplo, em Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro edit. 1985). Por exemplo, salino estéril e salino tamponado de fosfato em pH ligeiramente ácido ou fisiológico podem ser usados. Agentes de tamponamento de pH podem ser fosfato, citrato, acetato, tris/hidroximetil)aminometano (TRIS), ácido N-Tris(hidroximetil)metil–3- aminopropanossulfônico (TAPS), bicarbonato de amônio, diethanolamina, histidina, que é um tampão preferencial, arginina, lisina, ou acetato ou misturas dos mesmos. Faixas de tampão preferenciais são pH 4 a 8, pH 6,5 a 8, com mais preferência. pH 7 a 7,5. Conservantes, tais como para, meta, e orto-cresol, metil- e propilparabeno, fenol, álcool de benzila, benzoato de sódio, ácido benzoico, benzil-benzoato, ácido sórbico, ácido propanoico, ésteres de ácido p-hidroxibenzóico podem ser fornecidos na composição farmacêutica. Estabilizantes, que previnem oxidação, deaminação, isomerização, racemização, ciclização, hidrólise de peptídeo, tais como, por exemplo, ácido ascórbico, metionina, trIptofano, EDTA, asparagina, lisina, arginina, glutamina e glicina podem ser fornecidos na composição farmacêutica. Estabilizantes, que previnem agregação, fibrilação e precipitação, tais como sulfato de dodecila de sódio, polietileno glicol, carboximetil celulose, ciclodextrina podem ser fornecidos na composição farmacêutica. Modificadores orgânicos para solubilização ou prevenção de agregação, tais como etanol, ácido acético ou acetato e sais dos mesmos podem ser fornecidos na composição farmacêutica. Marcadores de isotonicidade, tais como sais por exemplo, cloreto de sódio ou carboidratos mais preferenciais, por exemplo, dextrose, manitol, lactose, trealose, sacarose ou misturas dos mesmos podem ser fornecidos na composição farmacêutica.

[067] Detergentes, tais como Tween 20, Tween 80, SDS, Poloxâmeros, por exemplo, F-68 Plurônico, F-127 Plurônico, podem ser fornecidos na composição farmacêutica. Corantes e mesmo agentes flavorizantes podem ser fornecidos na composição farmacêutica. Em outra modalidade, um sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável do análogo de peptídeo de GLP-2 é fornecido. Agentes de suspensão podem ser usados.

[068] Modificadores orgânicos, tais como etanol, butanol terciário, 2-propanol, etanol, glicerol, Polietileno glicol podem ser fornecidos na formulação farmacêutica para liofilização de um produto liofilizado. Agentes de formação de massa e marcadores de isotonicidade tais como, sal por exemplo, cloreto de sódio, carboidratos, por exemplo, dextrose, manitol, lactose, trealose, sacarose ou misturas dos mesmos, aminoácidos, por exemplo, glicina, glutamato, ou excipientes tais como cisteína, lecitina ou albumina de soro humano, ou misturas dos mesmos podem ser fornecidos na composição farmacêutica para liofilização.

[069] As composições farmacêuticas da presente invenção podem ser formuladas e usadas as tabletes, cápsulas ou elixires para administração oral; supositórios para administração retal; preferencialmente, soluções estéreis ou pó estéril ou suspensões para administração injetável; e similares. A dose e método de administração podem ser adaptados para alcançar a eficácia ideal, mas dependerão de tais fatores como peso, dieta, medicação concorrente e outros fatores, que os elementos versados na técnica de medicina reconhecerão.

[070] Quando a administração tiver de ser parenteral, tais como composições farmacêuticas injetáveis intravenosas, subcutâneas ou intramusculares podem ser preparadas em formas convencionais, tais como soluções aquosas ou suspensões; liofilizadas, fórmulas sólidas adequadas para reconstituição imediatamente antes do uso ou suspensão em líquido antes da injeção, ou como emulsões.

[071] Diluentes para reconstituição do produto liofilizado podem ser um tampão adequado da lista acima, água, salino, dextrose, manitol, lactose, trealose, sacarose, lecitina, albumina, glutamato de sódio, cloridrato de cisteína; ou água para injeção com a adição de detergentes, tais como Tween 20, Tween 80, poloxâmeros, por exemplo, F-68 plurônico ou F-127 plurônico, polietileno glicol, e ou com adição de conservantes tais como para-, meta-, e orto-cresol, metila- e propilparabeno, fenol, álcool de benzila, benzoato de sódio, ácido benzoico, benzil-benzoato, ácido sórbico, ácido propanóico, ésteres de ácido p-hidroxibenzóico, e ou com a adição de um modificador orgânico, tais como etanol, ácido acético, ácido cítrico, ácido láctico ou sais dos mesmos.

[072] Adicionalmente, se for desejado, as composições farmacêuticas injetáveis podem conter quantidades menores de substâncias auxiliares não tóxicas, tais como agentes umidificantes, ou agentes de tamponamento de pH. Preparações de acentuação de absorção (por exemplo, lipossomos, detergentes e ácidos orgânicos) podem ser utilizadas.

[073] Em uma modalidade da invenção, os compostos são formulados para administração por infusão, por exemplo, quando usados como suplementos nutricionais líquidos para pacientes em terapia de nutrição parenteral total (por exemplo, neonatais, ou pacientes que sofrem de caquexia ou anorexia), ou, por injeção, por exemplo, de modo subcutâneo, intraperitoneal ou intravenoso, e são consequentemente utilizados como soluções aquosas em forma estéril ou livre de pirogênio e opcionalmente tamponado para pH fisiologicamente tolerável, por exemplo, um pH ligeiramente ácido ou fisiológico. Formulação para administração intramuscular pode ser baseada em soluções ou suspensões em óleo vegetal, por exemplo, óleo de canola, óleo de milho ou óleo de soja. Essas formulações à base de óleo podem ser estabilizados por antioxidantes, por exemplo, BHA (hidroxianisol butilado) e BHT (hidroxitolueno butilado).

[074] Desse modo, os presentes compostos de peptídeo podem ser administrados em um veículo, tais como água destilada ou em salino, salino tamponado por fosfato, 5% de soluções de dextrose ou óleos. A solubilidade do análogo de GLP-2 pode ser intensificada, se for desejado, incorporando-se um intensificador de solubilidade, tais como detergentes e emulsificantes.

[075] O carreador aquoso ou veículo podem ser suplementados para uso como injetáveis com uma quantidade de gelatina que serve para depositar o análogo de GLP-2 no local de injeção ou próximo do mesmo, para sua liberação lenta ao local de ação desejado. Agentes gelificantes alternativos, tais como ácido hialurônico, também podem ser úteis como agentes de depósito.

[076] Em uma modalidade da presente invenção, a formulação compreende a. L-histidina dissolvida em água para obter concentrações finais de 0,5 mM a 300 mM, preferencialmente, de 3 a 200 mM, com máxima preferência, de 20 a 100 mM; b. manitol para obter até 350 mM, preferencialmente, de 30 a 300 mM, com máxima preferência, de 100 mM a 230 mM; e c. ácido acético para obter até 200 mM, preferencialmente, de 0,05 a 100 mM, com máxima preferência, de 0,5 a 50 mM em solução.

[077] Quantidade apropriada de composto terapêutico é adicionado para obter concentrações de 1 a 100 mg/ml, preferencialmente, de 5 a 50 mg/ml, com máxima preferência, de 10 a 30 mg/ml.

[078] pH são ajustados ao pH final de 4 a 8, preferencialmente de 6,5 a 7.5, com máxima preferência, de 6,7 a 7.3. A solução resultante é ajustada ao peso alvo, filtrado estéril e dispensado em cotas apropriadas em frascos para uso farmacêutico. A formulação é adicionalmente processada de acordo com um produto líquido ou com um produto liofilizado.

[079] Em outra modalidade da presente invenção, a formulação compreende a. L-histidina dissolvida em água para obter concentrações finais de 0,5 mM a 300 mM, preferencialmente, de 3 a 200 mM, com máxima preferência, de 20 a 100 mM de L-histidina; b. L-Arginina para obter até 200 mM, preferencialmente, de 0,5 a 100 mM, com máxima preferência, de 5 a 50 mM; c. manitol para obter até 350 mM, preferencialmente, de 30 a 300 mM, com máxima preferência, de 100 mM a 230 mM; e d. ácido acético para obter até 200 mM, preferencialmente, de 0,05 a 100 mM, com máxima preferência, de 0,5 a 50 mM em solução.

[080] Quantidade apropriada de composto terapêutico é adicionado para obter concentrações de 1 a 100 mg/ml, preferencialmente, de 5 a 50 mg/ml, com máxima preferência, de 10 a 30 mg/ml.

[081] pH são ajustados ao pH final de 4 a 8, preferencialmente de 6,5 a 7.5, com máxima preferência, de 6,7 a 7.3. A solução resultante é ajustada ao peso alvo, filtrado estéril e dispensado em cotas apropriadas em frascos para uso farmacêutico. A formulação é adicionalmente processada de acordo com um produto líquido ou com um produto liofilizado.

[082] Em ainda outra modalidade da presente invenção, a formulação compreende a. L-histidina dissolvida em água para obter concentrações finais de até 200 mM, preferencialmente, de 3 a 100 mM, com máxima preferência, de 5 a 50 mM de L- histidina; b. L-Arginina para obter até 200 mM, preferencialmente, de 0,5 a 100 mM, com máxima preferência, de 5 a 50 mM;

c. manitol para obter até 350 mM, preferencialmente, de 30 a 300 mM, com máxima preferência, de 100 mM a 230 mM; e d. ácido acético para obter até 200 mM, preferencialmente, de 0,05 a 100 mM, com máxima preferência, de 0,5 a 50 mM em solução.

[083] Quantidade apropriada de composto terapêutico é adicionado para obter concentrações de 1 a 100 mg/ml, preferencialmente, de 5 a 50 mg/ml, com máxima preferência, de 10 a 30 mg/ml.

[084] pH são ajustados ao pH final de 4 a 8, preferencialmente de 6,5 a 7.5, com máxima preferência, de 6,7 a 7.3. A solução resultante é ajustada ao peso alvo, filtrado estéril e dispensado em cotas apropriadas em frascos para uso farmacêutico. A formulação é adicionalmente processada de acordo com um produto líquido ou com um produto liofilizado.

[085] Em ainda outra modalidade da presente invenção, a formulação compreende a. N-acetato dissolvido em água para obter concentrações finais de até 200 mM, preferencialmente, de 0,5 a 100 mM, com máxima preferência, de 5 a 50 mM de L-histidina; b. manitol para obter até 350 mM, preferencialmente, de 30 a 300 mM, com máxima preferência, de 100 mM a 230 mM.

[086] Quantidade apropriada de composto terapêutico é adicionado para obter concentrações de 1 a 100 mg/ml, preferencialmente, de 5 a 50 mg/ml, com máxima preferência, de 10 a 30 mg/ml.

[087] pH são ajustados ao pH final de 4 a 8, preferencialmente de 6,5 a 7.5, com máxima preferência, de 6,7 a 7.3. A solução resultante é ajustada ao peso alvo, filtrado estéril e dispensado em cotas apropriadas em frascos para uso farmacêutico. A formulação é adicionalmente processada de acordo com um produto líquido ou com um produto liofilizado

[088] Os análogos de GLP-2 da invenção também podem ser formulados como um dispositivo de implantação de liberação lenta para administração estendida ou prolongada do análogo de peptídeo de GLP-2. Tais formulações de liberação prolongada podem estar na forma de um emplastro posicionado externamente no corpo. Exemplos de formulações de liberação prolongada incluem compósitos de polímeros biocompatíveis, tais como ácido (poli)láctico, ácido (poli)láctico-co- glicólico), metilcelulose, ácido hialurônico, ácido siálico, silicato, colágeno, lipossomos e similares. Formulações de liberação prolongada podem ser de interesse particular quando for desejável fornecer uma alta concentração local de um análogo de GLP-2 da invenção.

[089] O análogo de GLP-2 pode ser utilizado na forma de um frasco preenchido estéril ou ampola que contém uma quantidade intestinotrófica do peptídeo, tanto em dose única como em quantidades de múltiplas doses. O frasco ou ampola pode conter o análogo de GLP-2 e o carreador desejado, como uma formulação de administração imediata. Alternativamente, o frasco ou ampola pode conter o peptídeo de GLP-2 em uma forma, tal como uma forma liofilizada, adequada para reconstituição em um carreador adequado, tal como água estéril ou salino tamponado de fosfato.

[090] Os compostos de peptídeo da presente invenção podem ser usados por si só, ou em combinação com compostos que têm um efeito anti-inflamatório. Sem se limitar à teoria, prevê-se que tal tratamento de combinação possa reforçar os efeitos de tratamento benéficos dos presentes análogos de peptídeo.

[091] A dosagem e regime terapêuticos mais apropriados para tratamento de paciente com certeza variarão com a doença ou afecção a ser tratada, e de acordo com os parâmetros do paciente. Sem desejar se limitar a nenhuma teoria particular, espera-se que doses, entre 0.1 e 25 mg por paciente, e duração mais curta ou mais longa ou frequência de tratamento possam produzir resultados terapeuticamente úteis, tais como um aumento estatisticamente significativo particularmente em massa de intestino delgado. Em alguns casos, o regime terapêutico pode incluir a administração de doses de manutenção apropriadas para prevenir regressão de tecido que ocorre seguindo a cessação de tratamento inicial. Os tamanhos de dosagem e regime de dosagem mais apropriados para uso humano podem ser guiados pelos resultados obtidos pela presente invenção, e pode ser confirmados em testes clínicos adicionais.

[092] Uma dosagem e protocolo de tratamento eficazes podem ser determinados por meios convencionais, começando com uma dose baixa em animais de laboratório e, então, aumentando-se uma dosagem enquanto se monitora os efeitos, e também variando-se sistematicamente o regime de dosagem. Inúmeros fatores podem ser levados em consideração por um clínico quando determina uma dosagem ótima para um dado sujeito. Tais considerações são conhecidos ao elementos versado.

[093] Uma dose humana de um peptídeo de GLP-2 de acordo com a invenção pode ser usada em uma dose entre cerca de 0,01 mg/kg e 100 mg/kg de peso corporal, tal como entre cerca de 0,01 mg/kg e 10 mg/kg de peso corporal, por exemplo, entre 10 a 100 g/kg de peso corporal. Em modalidades adicionais, uma dose humana (dose total) de um peptídeo de GLP-2 de acordo com a invenção pode ser de cerca de tal como entre e que inclui 0,1 mg e 25 mg por paciente entre e incluindo 0,5 mg e 20 mg por paciente, tais como entre e incluindo 1 mg e 15 mg por paciente, tais como entre e incluindo 1 mg e 10 mg por paciente uma ou duas vezes por semana ou as uma pluralidade de doses conforme definido no presente documento separados em tempo por 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 ou 14 dias. Em alguns casos, uma dose fixa do peptídeo de GLP-2 de acordo com a invenção pode ser usada de acordo com um padrão de dosagem revelado no presente documento, isto é, uma dose que é o mesmo independentemente do peso corporal do paciente, dada uma ou duas vezes por semana. A título de exemplo, a dose fixa pode ser uma dose de 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9, mg, 10 mg, 11 mg, 12 mg, 13 mg, 14 mg ou 15 mg. Convenientemente, uma dose fixa de 10 mg pode ser usada. O uso de dosagem fixa tem a vantagem de aumentar a aceitação e reduzir o risco de erros de dosagem de paciente, incluindo riscos de cálculo errado de uma dose baseada em peso a ser administrada.

AFECÇÕES MÉDICAS

[094] Os peptídeos da presente invenção são úteis como um agente farmacêutico para prevenir ou tratar um indivíduo que sofre de distúrbios gastrointestinais, incluindo o trato gastrointestinal superior do esôfago administrando- se uma quantidade eficaz de um análogo de GLP-2, ou um sal do mesmo conforme descrito no presente documento. Os distúrbios relacionados a estômago e intestino incluem úlceras de qualquer aetiologia (por exemplo, úlceras peptídicas, úlceras induzidas por fármaco, úlceras relacionadas a infecções ou outros patógenos), distúrbios de ingestão, síndromes de má absorção, síndrome de intestino curto, síndrome de cul-de-sac, doença de intestino inflamatório, esprue celíaco (por exemplo, que surge de enteropatia induzida por glúten ou doença celíaca), esprue tropical, esprue hipogamaglobulinêmico, enterite, colite ulcerativa, dano de intestino delgado, e diarreia/mucosite induzida por quimioterapia (CID).

[095] Conforme mencionado acima, de modo geral, indivíduos que se beneficiariam de massa de intestino delgado aumentada e consequente e/ou manutenção de estrutura e função mucosal de intestino delgado normal são candidatos para tratamento com os presentes análogos de GLP-2. Condições particulares que podem ser tratados com análogo de GLP-2 incluem as várias formas de esprue incluindo esprue celíaco que se resulta de uma reação tóxica a alfa-gliadina de calor e pode ser um resultado de enteropatia induzida por glúten ou doença celíaca, e é marcado por uma perda significativa de vilos do intestino delgado; esprue tropical que se resulta de infecção e é marcado por achatamento parcial dos vilos; esprue hipogamaglobulinêmico que é observado comumente em pacientes com imunodeficiência variável comum ou hipogamaglobulinemia e é marcado por diminuição significativa em altura de vilo. A eficácia terapêutica do tratamento de análogo de GLP-2 pode ser monitorado por biópsia entérica para examinar a morfologia do vilo, por avaliação bioquímica de absorção de nutriente, por ganho de peso de paciente, ou pelo melhoramento dos sintomas associados com essas condições.

[096] Outra afecção particular que pode ser tratada com os análogos de GLP-2 da invenção, ou para a qual os análogos de GLP-2 podem ser úteis de modo terapêutico e/ou profilático é a síndrome de intestino curto (SBS), também conhecida como a síndrome de tripa curta ou simplesmente tripa curta) que se resulta de ressecção cirúrgica, defeito congênito ou perda associada a doença de absorção no intestino no qual pacientes são subsequentemente incapazes de manter fluido, eletrolito, e saldos de nutriente em uma dieta convencional. Apesar de uma adaptação que ocorre geralmente nos dois anos após a ressecção, pacientes com SBS têm captação dietética reduzida e perda de fluido.

[097] Outras afecções que podem ser tratadas com os análogos de GLP-2 da invenção, ou para os quais os análogos de GLP-2 podem ser úteis de modo profilático, incluem adicionalmente à enterite de radiação mencionada acima, enterite infecciosa ou pós-infecciosa, e dano de intestino delgado devido a agentes tóxicos ou quimioterapêuticos de câncer.

[098] Os análogos de GLP-2 também podem ser usados para o tratamento de má nutrição, por exemplo, caquexia e anorexia.

[099] Uma modalidade particular da invenção é relacionada ao uso dos presentes peptídeos para a prevenção e/ou tratamento de danos ou disfunção intestinal. Tal dano e disfunção é um efeito colateral conhecido de tratamento de quimioterapia de câncer. As administração de quimioterapia é frequentemente associada com efeitos colaterais indesejados relacionados ao sistema gastrointestinal tal como mucosite, diarreia, translocação bacteriana, má absorção, cólicas abdominais, sangramento gastrointestinal e vômito. Esses efeitos colaterais são consequências clínicas dos danos estruturais ou funcionais do epitélio intestinal e frequentemente tornam necessário diminuir a dose e frequência de quimioterapia. Administração do presentes análogos de peptídeo de GLP-2 pode intensificar o efeito trófico nas criptas intestinais e fornecem rapidamente novas células para substituir o epitélio intestinal danificado seguindo a quimioterapia. A meta final alcançada administrando-se os presentes peptídeos é para reduzir a morbidade relacionada a danos gastrointestinais de pacientes que passam por tratamento de quimioterapia enquanto cria o regime de quimioterapia mais ideal para o tratamento de câncer. O tratamento profilático ou terapêutico concomitante pode ser fornecido de acordo com a presente invenção a pacientes que passam ou estão prestes a passar por terapia de radiação.

[0100] As células-tronco da mucosa intestinal delgada são particularmente suscetíveis aos efeitos citotóxicos de quimioterapia devido a sua rápida taxa de proliferação (Keefe et al., Gut 2000; 47: 632–7). Os danos induzidos por quimioterapia à mucosa intestinal delgada são clinicamente, frequentemente denominados como mucosite gastrointestinal e são caracterizados por deficiências absorssivas e de barreira do intestino delgado. Por exemplo, Foi mostrado que, os agentes quimioterapêuticos amplamente usados, 5-FU, irinotecano e metotrexato aumentam a apoptose causando atrofia de vilo e hipoplasia de cripta no intestino delgado de roedores (Keefe et al., Gut 47: 632–7, 2000; Gibson et al., J Gastroenterol Hepatol. Set;18(9):1095-1100, 2003; Tamaki et al., J Int Med Res. 31(1):6-16, 2003). Foi mostrado que os agentes quimioterapêuticos aumentam a apoptose em criptas intestinais em 24 horas após a administração e subsequentemente para diminuir a área de vilo, comprimento de cripta, contagem mitótica por cripta, e altura de enterocite três dias após a quimioterapia em humanos (Keefe et al., Gut 2000; 47: 632–7). Desse modo, mudanças estruturais dentro do intestino delgado causam diretamente disfunção intestinal e, em alguns casos, diarreia.

[0101] A mucosite gastrointestinal após quimioterapia de câncer é um problema crescente que é essencialmente não tratável uma vez estabelecida, embora remita gradualmente. Estudos conduzidos com o fármacos de câncer citostático 5-FU e irinotecano comumente usados demonstraram que a quimioterapia eficaz com esses fármacos afeta predominantemente a integridade e função estrutural do intestino delgado embora o cólon seja menos sensível e principalmente responde com formação de múcuo aumentada (Gibson et al., J Gastroenterol Hepatol. Set;18(9):1095-1100, 2003; Tamaki et al., J Int Med Res. 31(1):6-16, 2003).

[0102] Os análogos de GLP-2 inovadores da presente invenção podem ser úteis na prevenção e/ou tratamento de lesão gastrointestinal e efeitos colaterais de agentes quimioterapêuticos. Essa aplicação terapêutica potencialmente importante pode se aplicar a agentes quimioterapêuticos atualmente usados tais como, porém, sem limitação: 5-FU, Altretamina, Bleomicina, Bussulfano, Capecitabino, Carboplatina, Carmustina, Clorambucila, Cisplatina, Cladribina, Crisantaspase, Ciclofosfamida, Citarabina, Dacarbazina, Dactinomicina, Daunorubicina, Docetaxel, Doxorubicina, Epirubicina, Etopósido, Fludarabina, Fluorouracila, Gemcitabina, Hidroxicarbamida, Idarubicina, Ifosfamida, Irinotecano, Doxorubicina lipossomal, Leucovorina, Lomustina, Melfalano, Mercaptopurina, Mesna, Metotrexato, Mitomicina, Mitoxantrona, Oxaliplatina, Paclitaxel, Pemetrexede, Pentostatina, Procarbazina, Raltitrexede, Estreptozocina, Tegafur-uracila, Temozolomida, Tiotepa, Tioguanina/Tioguanina, Topotecano, Treosulfano Vinblastina, Vincristina, Vindesina, Vinorelbina, Bleomicina, Bussulfano, Capecitabina, Carboplatina, Carmustina, Clorambucila, Cisplatina, Cladribina, Crisantaspase, Ciclofosfamida, Citarabina, Dacarbazina, Dactinomicina, Daunorubicina, Docetaxel, Doxorubicina, Epirubicina, Etopósido, Fludarabina, Fluorouracila, Gemcitabina, Hidroxicarbamida, Idarubicina, Ifosfamida, Irinotecano, Doxorubicina lipossomal, Leucovorina, Lomustina, Melfalano, Mercaptopurina, Metotrexato, Mitomicina, Mitoxantrona, Oxaliplatina, Paclitaxel, Pemetrexede, Pentostatina, Procarbazina, Raltitrexede, Estreptozocina, Tegafur- uracila, Temozolomida, Tiotepa, Tioguanina/Tioguanina, Topotecano, Treosulfano, Vinblastina, Vincristina, Vindesina e Vinorelbina.

[0103] Uma modalidade adicional da invenção é relacionada ao uso dos presentes peptídeos para aumentar o crescimento longitudinal dos intestinos em um paciente, por exemplo, em um paciente humano. Conforme mostrado nos Exemplos abaixo, os análogos de GLP-2 da invenção têm capacidade de aumentar o crescimento longitudinal dos intestinos em relação ao controle. Sem se limitar à teoria, acredita-se atualmente que a meia-vida mais longa causa um mais estímulo potente e prolongado dos receptores de GLP-2 que resulta em um crescimento longitudinal aumentado em relação ao do controle. É também possível que a meia-vida de plasma terminal mais longa dos análogos de GLP-2 usados de acordo com a presente invenção causa estímulo mais potente de crescimento longitudinal dos intestinos as em comparação a outros análogos de GLP-2 de técnica anterior para ter meias-vidas relativamente mais curtas.

[0104] Essa capacidade é de valor particular em pacientes com SBS visto que isso causará capacidade de absorção aumentada também depois que o tratamento é parou. Tal paciente seria tratado por pelo menos 1 a 3 anos, tais como pelo menos 1 a 4 anos, tais como 1 a 10 anos, tais como 1 a 20 anos, tais como 1 a 35 anos com o objetivo de induzir o crescimento longitudinal dos intestinos.

[0105] Conforme já descrito no presente documento, pacientes com SBS que estão na borda entre insuficiência intestinal (SBS-II) ou pacientes de SBS-PS e falha intestinal (SBS-IF) ou não-PS de SBS podem ter, portanto, valor particular de ter seus intestinos alongados por um curso de tratamento de 1 a 3 anos, sendo seu risco de falha intestinal diminuído, por exemplo, envolvendo dosagem semanal ou de duas vezes por semana durante o período de tratamento. Isso envolve menos risco para necessidade de catéter central e o risco de sépse associada com seu uso.

[0106] Os riscos de dosagem revelados no presente documento podem ser aplicados ao tratamento de distúrbios relacionados a estômago e intestino, tais como SBS, nos quais é fornecido à cobaia do tratamento o suporte parenteral (PS) enquanto recebe tratamento com os análogos de GLP-2 de acordo com a presente invenção. Suporte parenteral envolve a administração de nutrição e líquido a pacientes cujo trato gastrintestinal é prejudicado ou comprometido, enquanto os mesmos são tratados com análogos de GLP-2. No entanto, um dos desafios que pacientes e médicos enfrentam no curso de terapia de GLP-2 diz respeito à determinação da quantidade ou o volume de PS fornecido à cobaia tratada e ao ajuste apropriado e individualizado da quantidade ou o volume de PS fornecido ao paciente. Em particular, isso é importante devido ao fato de que se a quantidade ou o volume PS não for ajustado de modo apropriado, as cobaias tratadas podem experimentar sobrecarga de fluido, riscos de desidratação e podem não obter respostas clínicas ideais com a terapia. Consequentemente, a presente invenção fornece algoritmos para ajustar da quantidade ou o volume PS durante um curso de tratamento com uso de um análogo de GLP-2 conforme revelado no presente documento.

[0107] Consequentemente, em um aspecto adicional relacionado a tratamento, a presente invenção fornece um análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP- 2) para uso em um método para o tratamento de síndrome de intestino curto (SBS) em uma cobaia humana que recebe um regime de suporte parenteral (PS), sendo que o método compreende: (i) administrar à cobaia um análogo de GLP-2 conforme definido no presente documento, em que o análogo de GLP-2 é administrado uma ou duas vezes por semana por um período de tempo suficiente para prolongar e aprimorar a função do intestino delgado à cobaia; e (ii) segundo a etapa (i), reduzir uma frequência ou quantidade do regime de suporte parenteral (PS) em resposta à função aprimorada do intestino delgado. (iii) opcionalmente repetir as etapas (i) e (ii) em resposta à cobaia demonstrando função aprimorada continuada do intestino delgado.

[0108] A título de exemplo, o intervalo de tempo pelo qual o análogo de GLP-2 é administrado na etapa (i) do método é de 18 a 150 semanas, para 18 a 100 semanas, ou para 18 a 52 semanas.

[0109] Em geral, a quantidade de função aprimorada ou capacidade de absorção do intestino delgado é pelo menos 10%, tal como pelo menos 20%, tal como pelo menos 30% tal como pelo menos 40%, tal como pelo menos 50%. Adicional ou alternativamente, a quantidade da redução de suporte parenteral é pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 30%, pelo menos 40% ou pelo menos 50%. Em uma modalidade preferencial, a redução de suporte parenteral é pelo menos 20%.

[0110] De modo a auxiliar com a determinação da quantidade ou o volume de PS fornecido às cobaias que recebem terapia de GLP-2, em um aspecto adicional, a presente invenção fornece um método para ajustar um suporte parenteral (PS) em uma cobaia humana que recebe uma quantidade ou volume de suporte parenteral a cada semana, sendo que o método compreende calcular uma nova quantidade ou volume de PS com uso de um algoritmo no qual uma quantidade ou volume de PS por uma semana é calculada subtraindo-se sete vezes o aumento absoluto em volume de urina diária de uma linha de base do volume semanal atual de suporte parenteral para fornecer a nova quantidade ou volume de PS para a cobaia. Preferencialmente, o método inclui as etapas iniciais de determinar o volume de linha de base e/ou determinar o volume de urina diário. Alguns ou todas as etapas do método podem ser repetidas durante o curso da terapia de GLP-2 recebido pela cobaia. Preferencialmente, o tempo entre teste repetido para determinar mudanças nos ajustes de volume de PS é cerca de a cada 1 a 3 meses. Por exemplo, em uma modalidade, o método pode ser usado nas semanas 1, 2, 4, 8 e 12 após o começo de tratamento com o análogo de GLP-2, ajustando a quantidade ou volume de PS em resposta aos efeitos de tratamento. A quantidade ou volume semanal de PS semanal administrado deve ser monitorado e ajustado por todo o tratamento com o análogo de GLP-2 (por exemplo, glepaglutídeo) de modo a evitar sobrecarga de fluido. Em geral, à medida que a capacidade de absorção dos intestinos aumenta após o tratamento com o análogo de GLP-2, tipicamente por alongamento ou espessamento do intestino delgado, a quantidade ou volume de PS pode ser diminuído para evitar a sobrecarga de fluido e para aprimorar as necessidades de tratamento do paciente.

EXEMPLOS

[0111] Os exemplos um seguir são fornecidos para ilustrar algumas modalidades da invenção e não são destinados um limitar o escopo da invenção. Os análogos de GLP-2 administrados de acordo com os regimes de dosagem descritos no presente documento podem ser produzidos de acordo com os métodos tais como síntese de peptídeo de fase sólida descritos no documento nº WO 2006/117565, cujo conteúdo é expressamente incorporado a título de referência em sua totalidade. EXEMPLO 1. SÍNTESE DE METABÓLITOS DE ZP1848

[0112] A síntese de peptídeo de fase sólida foi realizada em um Sintetizador de Peptídeo CEM Liberty com uso de química Fmoc padrão. Resina S Ram TentaGel™ (1,33 g; 0,25 mol/g) foi intumescida em DMF (10 ml) antes do uso e transferida entre tubo e recipiente de reação com o uso de DCM e DMF.

ACOPLAMENTO

[0113] Um aminoácido de Fmoc em DMF/DCM (2:1; 0.2 M; 5 ml) foi adicionado à resina em um unidade de micro-ondas CEM Discover junto com COMU/DMF (0,5 M; 2 ml) e DIPEA&DMF (2,0 M; 1 ml). Uma mistura de acoplamento foi aquecida para 75°C por 5 min enquanto nitrogênio foi borbulhada através da mistura. A resina foi então lavada com DMF (4 x 10 ml). Pseudoprolina Fmoc-Phe-Ser(Psi Me,Me,Pro)-OH foi usada para número de aminoácido seis e sete.

DESPROTEÇÃO

[0114] Piperidina/DMF (20%; 10 ml) foi adicionada à resina para desproteção inicial e a mistura foi aquecida por micro-ondas (30 seg.; 40 °C). O vaso de reação foi drenado e uma segunda porção de piperidina/DMF (20%; 10 ml) foi adicionada e aquecida (75 °C; 3 min.) novamente. A resina foi então lavada com DMF (6 x 10 ml).

[0115] A resina foi lavada com EtOH (3 x 10 ml) e Et2O (3 x 10 ml) e seca ao peso constante em temperatura ambiente (r.t.). O peptídeo bruto foi clivado a partir da resina por tratamento com TFA/DODT (95/5; 60 ml, 2 h; t.a.). A maior parte do TFA foi removida em pressão reduzida e o peptídeo bruto foi precipitado e lavado três vezes com dietiléter e seco ao peso constante em temperatura ambiente.

PURIFICAÇÃO DE HPLC DO PEPTÍDEO BRUTO

[0116] O peptídeo bruto foi primeiro purificado para 45% por HPLC de fase reversa preparativa com uso de um PerSeptive Biosystems VISION Workstation equipado com uma coluna Gemini NX 5µ C-18 110A, 10x250 mm e um coletor de fração e executado em 35 ml/min com um gradiente de tampão A (0,1% de TFA, aq.) e tampão B (0,1% de TFA, 90% de MeCN, aq.). Frações foram analisadas por HPLC e MS analítico, e frações relevantes foram agrupadas e liofilizadas. O produto (143 mg) foi purificado uma segunda vez com um C4 Jupiter 2, coluna 12x25 cm, para render 27 mg, com uma pureza de 89% conforme caracterizado por HPLC e MS. Monoisotópico MW calculado = 3377,61, encontrado 3377,57. TABELA 1. COMPOSTOS SINTETIZADOS Composto Sequência

Teduglutídeos H-HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITD-OH ZP1848 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDKKKKKK-NH2 ZP2949 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDKKK-OH ZP2711 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDKK-OH ZP2469 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDK-OH EXEMPLO 2. MEDIÇÕES DE GLP-2R EC50

GERAÇÃO DE LINHAGEM CELULAR QUE EXPRESSA RECEPTORES GLP-2 HUMANOS

[0117] O hGLP2-R foi adquirido de MRC-geneservice, Babraham, Cambridge como um Image clone: 5363415 (11924-I17). Para subclonagem em um vetor de expressão de mamífero, iniciadores para subclonagem foram obtidos da DNA- Technology, Risskov, Dinamarca. Os iniciadores 5’ e 3’ usados para a reação de PCR incluem locais de restrição de terminal para clonagem e o contexto no iniciador 5’ é modificado para um consenso Kozak sem mudar a sequência do produto codificado pelo ORF. Uma reação de PCR padrão foi executada com uso de Image clone 5363415 (11924-I17) como um modelo com os iniciadores mencionados acima e Polymerase Herculase II Fusion em um vol. total de 50 µl. O produto de PCR gerado foi purificado com uso de GFX PCR e kit de purificação banda Gel, diferido com enzimas de restrição e clonado no vetor de expressão de mamífero com uso de Rapid DNA Ligation Kit. A reação de ligação foi transformada em células XL10 Gold Ultracompetent e colônias foram selecionadas para produção de DNA com uso de kit maxi Endofree Plasmid. A análise de sequência subsequente foi conduzida por MWG Eurofins, Alemanha. O clone foi confirmado para ser o receptor hGLP-2, variante de splice rs17681684.

[0118] As células HEK293 foram transfectadas com uso do método de transfecção de Lipofectamina PLUS. No dia anterior da transfecção, células HEK293 foram semeados em dois frascos T75 em uma densidade de 2 x 106 células / frasco T75 em meio de cultura celular sem antibióticos. No dia da transfecção, células foram lavadas com 1x DPBS e o meio foi substiuído por Optimem a um volume de 5 ml / frasco T75 antes da adição de complexos de Lipofectamina-plasmídeo foram adicionados gentilmente e em gotas às células em frascos T75 e substituídos por meio de crescimento após 3 horas e novamente ao meio de crescimento suplementado com 500 µg/ml G418 após 24 horas. Após 4 semanas em seleção de G418, clones foram escolhidos e testados em um ensaio funcional. Um clone foi selecionado para uso em perfilamento de composto. ENSAIO DE EFICÁCIA DE RECEPTOR GLP-2

[0119] O ensaio cAMP AlphaScreen® da Perkin Elmer foi usado para quantificar a resposta de cAMP à ativação do receptor de GLP2. Teduglutídeo foi usado como um composto de referência para ativação de receptor de GLP2. Dados de compostos de teste que evocam um aumento no nível intracelular de cAMP foram normalizados em relação ao controle positivo (Teduglutídeo) e negativo (veículo) para calcular o EC50 e a resposta máxima da curva de resposta de concentração. Os resultados são listados na Tabela 2. TABELA 2: MEDIÇÕES DE GLP-2R EC50 ZP Nº EC50_Avg (nM) EC50_SD (nM) Teduglutídeos 0,03 0,019 ZP1848 0,3 0,14 ZP2949 0,11 0,013 ZP2711 0,072 0,0076 ZP2469 0,052 0,0057 ZP1846 0,26 EXEMPLO 3: PERFILAÇÃO FARMACOCINÉTICA E FARMACODINÂMICA DE ANÁLOGOS DE GLP-2

[0120] Um experimento clínico de fase 2 foi conduzido para determinar o perfil PK de ZP1848 e metabólitos em pacientes humanos com SBS.

MÉTODO

[0121] O estudo foi projetado como um randomizado, cruzado e duplo cego com três diferentes doses de ZP1848 (10 mg, 1 mg, 0,1 mg) em 16 pacientes com SBS.

[0122] O protocolo de estudo foi aprovado pela Agência Médica Dinamarquesa e pelo Comitê Dinarmarquês de Ética de Pesquisa e Saúde.

[0123] Os 18 pacientes com SBS (16 pacientes concluíram o estudo) foram randomizados de modo uniforme e de modo duplo cego a cada uma das seis combinações de nível de dose cruzada: 10 mg/1 mg, 10 mg/0,1 mg, 1 mg/10 mg, 1 mg/0,1 mg, 0,1 mg/10 mg, 0,1 mg/1 mg de ZP1848. Os pacientes foram injetados uma vez ao dia (QD) de modo subcutâneo com as doses acima de ZP1848.

[0124] As amostras sanguíneas para análise de PK foram coletadas em várias visitas de estudo por todo o período de estudo: o estudo compreendeu um 1º estudo de saldo de linha de base (4 dias), um 1º período de tratamento (21 dias) que inclui um 1º estudo de saldo de tratamento (últimos 4 dias de 1º período de tratamento), seguido por um período de lavagem (pelo menos 4 semanas); e um 2º estudo de saldo de linha de base (4 dias), um 2º período de tratamento (21 dias) que inclui um 2º estudo de saldo de tratamento (últimos 4 dias de 2º período de tratamento) e um período de acompanhamento (pelo menos 4 semanas).

[0125] A amostragem de PK foi realizada na visita 11 (1º estudo de saldo de tratamento) e visita 17 (segundo dia de 2º estudo de linha de base - após um período de lavagem), e novamente na visita 25 (2º estudo de saldo de tratamento) e na visita 29 (último dia de período de acompanhamento).

[0126] No dia de visita 11 e visita 25 um perfil PK completo de estado imediato foi investigado. Amostras de PK foram tomadas antes da injeção de ZP1848, e nos seguintes pontos de tempo (+/- 10 minutos) após administração de produto de experimento: 1h, 2h, 4h, 6h, 8h, 10h, 12h e 24h. Cada amostra de PK continha 2 ml de sangue, resultando em um total de 46 ml de sangue extraído para propósitos de PK. A amostra de plasma foi imediatamente armazenada em -80 °C após a amostragem.

[0127] Amostras de plasma foram analisadas após extração de imunoafinidade seguida por espectrometria de massa de cromatografia líquida (LC-MS/MS). Para cada paciente, concentrações de plasma foram usadas para cálculo dos parâmetros farmacocinéticos com uso da abordagem não compartimental em Excel. A meia vida de eliminação de terminal de plasma (T½) foi determinada como ln(2)/ke em que ke é a magnitude da queda da regressão linear de log da concentração de log versus perfil de tempo durante a fase terminal. RESULTADOS:

[0128] Quando ZP1848 é injetado no compartimento SC (subcutâneo), dois metabólitos funcionalmente ativos são formados (ZP2469 e ZP2711, ambos análogos truncados de terminal C de glepaglutídeo, ZP1848). O PK de perfil geral de ZP1848, portanto, compreende o efeito de ZP1848 e seus dois metabólitos principais.

[0129] Ambos os metabólitos são farmacologicamente ativos, conforme mostrado acima, com potência in vitro comparável a ZP1848. O nível de plasma de ZP2711 está na mesma faixa que o de ZP1848, enquanto o nível de plasma de ZP2469 é múltiplas vezes mais alto do que o de ZP1848. Consequentemente, é necessário incluir ambos os metabólitos ao avaliar a exposição sistêmica visto que ambos contribuem para eficácia in vivo.

[0130] Devido ao alto nível de plasma de ZP2469, esse composto tem nível de plasma acima do limite de detecção bioanalítico (50 pM para ZP2469, 25 pM para ZP1848 e ZP2711), portanto, é possível determinar a meia-vida do composto ZP2469. Uma meia-vida de plasma terminal entre 5 e 17 dias, conforme mostrado na tabela, sugere dosagem de uma por semana de ZP1848 seria eficaz. TABELA 3: RESULTADOS DE PK DE EXPERIMENTO CLÍNICO DE FASE 2 Concentraç Meia-vida Cobaia Composto Dia Visita Nº ão (dias) µM

1003 ZP2469 0 25 4490 7,2

1003 ZP2469 32 29 209

1007 ZP2469 0 25 14700 7,2

1007 ZP2469 36 29 460

1008 ZP2469 0 11 6770 9,5

1008 ZP2469 56 17 116

1010 ZP2469 0 11 4340 11

1010 ZP2469 56 17 112

1013 ZP2469 0 25 4940 9,6

1013 ZP2469 35 29 394

1014 ZP2469 0 11 2220 5,2

1014 ZP2469 28 17 52,8

1015 ZP2469 0 11 556 7,9

1015 ZP2469 28 17 56,4

1015 ZP2469 0 25 3640 8,7

1015 ZP2469 32 29 288

1016 ZP2469 0 11 4750 11

1016 ZP2469 49 17 236

1018 ZP2469 0 25 4660 8,7

1018 ZP2469 40 29 195

1020 ZP2469 0 11 1040 12

1020 ZP2469 35 17 133

1013 ZP2711 0 11 131 14

1013 ZP2711 28 17 32,6 1015 ZP2711 0 25 543 10 1015 ZP2711 32 29 61,4 EXEMPLO 4: CRESCIMENTO LONGITUDINAL POR ADMINISTRAÇÃO SUBCUTÂNEA DE ZP1848 PARA CÃES DE RAÇA BEAGLE POR 39 SEMANAS SEGUIDO POR UM PERÍODO DE RECUPERAÇÃO DE 6 SEMANAS

MÉTODO

[0131] ZP1848 (0.25, 1 ou 5 mg/kg/dia) foi dado por 39 semanas de modo subcutâneo a cães de raça Beagle (22 a 24 semanas). Veículo foi usado como o controle. A recuperação de qualquer efeito foi avaliada durante um período de recuperação de 6 semanas. O estudo foi conduzido de acordo com as seções aplicáveis de United Kingdom Animals (Scientific Procedures), Act 1986, Amendment Regulations 2012 (the Act).

[0132] Após 39 semanas, os cães foram sacrificados e todos os animais foram submetidos a uma necropsia detalhada. O comprimento dos intestinos delgado e grosso foram medidos separadamente e registrados em centímetros. O comprimento inteiro do trato gastrointestinal (começando no duodeno e terminando no reto) foi removido e aparado de qualquer mesentério excessivo, tecido conectivo ou adiposo e as medições para o intestino delgado e grosso registradas colocando-se o intestino delgado e intestino grosso em uma superfície limpa e medidos com uma fita métrica. As seções necessárias para histopatologia foram deixadas não abertas e enxaguadas com água. O restante foi aberto, limpo com água, cuidadosamente seco antes da pesagem. Na conclusão das medições de comprimento e peso, o trato gastrointestinal foi processado e fixado em 10% de Formalina Tamponada Neutra, como por prática de necropsia padrão para essa espécie.

RESULTADOS

[0133] Houve um aumento no comprimento de intestino delgado após 39 semanas de tratamento em todas as doses e em ambos os sexos, com a extensão do aumento sendo maior em machos e fêmeas dado 5 mg/kg/dia em que houve um aumento de 46% e 37% em machos e fêmeas, respectivamente. Essa constatação fora parcialmente recuperada pelo final do período de recuperação de seis semanas, com aumentos de 16 e 19% a partir de controles em machos e fêmeas, respectivamente. No mesmo estudo, um aumento de peso de intestino delgado após 39 semanas de tratamento em todas as doses e em ambos os sexos, com a extensão do aumento sendo a maior em machos e fêmeas dados 5 mg/kg/dia em que houve um aumento de 103% e 80% em machos e fêmeas, respectivamente. Essa constatação fora parcialmente recuperada pelo final do período de recuperação de seis semanas, com aumentos de 78 e 34% a partir de controles em machos e fêmeas, respectivamente. EXEMPLO 5: UM TESTE DE GRUPO PARALELO, EM 3 PARTES PARCIALMENTE RANDOMIZADO DE ROTULAÇÃO ABERTA DE FASE 1 PARA AVALIAR O PERFIL FARMACOCINÉTICO DE GLEPAGLUTÍDEO (ZP1848) APÓS

UMA INJEÇÃO INTRAVENOSA ÚNICA E APÓS MÚLTIPLAS INJEÇÕES SUBCUTÂNEAS EM COBAIAS HUMANAS SAUDÁVEIS

[0134] Um experimento clínico de Fase 1 para caracterizar os perfis farmacocinéticos (PK) de glepaglutídeo (ZP1848) e seus metabólitos ativos primários seguindo injeções subcutâneas (SC) de uma vez por semana uma vez ao dia e depois que uma única infusão intravenosa (IV) em cobaias saudáveis foi conduzida. Isso incluiu avaliar os efeitos farmacodinâmicos em níveis de citrulina de plasma seguindo a dosagem SC em cobaias saudáveis. O experimento confirmou a viabilidade de regimes de dosagem nos quais análogos de GLP-2 são administrados a pacientes em regimes de dosagem semanal e compararam regimes de dosagem semanal com dosagem diária. PROJETO DE EXPERIMENTO:

[0135] O projeto de experimento foi um projeto de grupo paralelo em 3 partes parcialmente randomizado de central única para caracterizar ao perfil PK de glepaglutídeo administrado por injeção SC uma vez ao dia por 7 dias (Parte 1), injeção

SC uma vez por semana por 6 semanas (Parte 2), e como uma infusão IV única (Parte 3) em cobaias saudáveis.

[0136] Na Parte 1, cobaias elegíveis foram randomizadas em 1:1 ao Grupo A ou B; na Parte 2, cobaias elegíveis foram randomizadas 1:1 ao Grupo C ou D; foi atribuído a todas as cobaias na Parte 3 (Grupo E) o mesmo nível de dosagem. NÚMERO DE COBAIAS:

[0137] Aproximadamente 75 cobaias macho e fêmea foram admitidas, com 15 cobaias em cada um de 5 grupos de dose, para garantir que pelo menos 12 cobaias completem cada grupo. DIAGNÓSTICO E CRITÉRIO PRINCIPAL PARA INCLUSÃO:

[0138] Cobaias macho e fêmea saudáveis com idade entre 18 e 60 anos, inclusivos, com um índice de massa corporal (BMI) entre 18,0 e 30,0 kg/m2, inclusivos, e preferencialmente, cobaias têm um BMI de ≤ 25,0 kg/m2. PRODUTOS DE TESTE, DOSE, E MODO DE ADMINISTRAÇÃO:

[0139] Glepaglutídeo foi suprido como uma solução aquosa em concentrações de 2 e 10 mg/ml.

[0140] Grupo A: 1 mg de glepaglutídeo uma vez ao dia, dado como injeções SC únicas nos Dias 1 a 7.

[0141] Grupo B: 5 mg de glepaglutídeo uma vez ao dia, dado como injeções SC únicas nos Dias 1 a 7.

[0142] Grupo C: 5 mg de glepaglutídeo uma vez por semana, dado como injeções SC únicas nos Dias 1, 8, 15, 22, 29, e 36.

[0143] Grupo D: 10 mg de glepaglutídeo uma vez por semana, dado como injeções SC únicas nos Dias 1, 8, 15, 22, 29, e 36.

[0144] Grupo E: 1 mg de glepaglutídeo, dado como um infusão IV em uma taxa de 4 mg/h por 15 minutos no Dia 1. Duração de tratamento Duração de Triagem Planejada: aproximadamente 28 dias Duração total (Triagem ao Fim do Experimento):

Grupos A e B: 71 dias Grupos C e D: 100 dias Grupo E: 51 dias Critérios para avaliação: Farmacocinética:

[0145] As amostras sanguíneas foram coletadas para a análise de concentrações de plasma de glepaglutídeo e seus metabólitos ativos primários, ZP2469 (ZP18481-34) e ZP2711 (ZP18481-35); amostras foram avaliadas com uso de métodos analíticos validados. As seguintes estimativas de parâmetro de PK foram calculadas com uso de métodos não compartimentais padrão: meia-vida de eliminação de terminal (t1/2), liberação de corpo total de fármaco após administração de IV (CL; dose IV, fármaco percursor somente), liberação total aparente (CL/F; doses SC, fármaco percursor somente), volume de distribuição em estado imediato (Vss; dose IV, fármaco percursor somente), volume de distribuição aparente em estado imediato (Vss/F; doses SC, fármaco percursor somente), volume de distribuição (Vz; dose IV, fármaco percursor somente), volume de distribuição aparente (Vz/F; doses SC, fármaco percursor somente), concentração de plasma observada máxima (Cmax), área sob a curva de concentração de plasma-tempo (AUC) durante um intervalo de dosagem (AUCτ), AUC de tempo zero ao infinito (AUCinf), AUC de tempo zero ao tempo da última concentração mensurável (AUClast), e tempo da concentração de plasma observada máxima (tmax). Exposição de metabólito (com base em Cmax, AUCτ, e AUCinf) foi determinada para cada grupo como uma razão dos 2 metabólitos ativos primários, ZP2469 (ZP18481-34) e ZP2711 (ZP18481-35), relativo ao fármaco percursor de glepaglutídeo. FARMACODINÂMICA:

[0146] As amostras sanguíneas foram coletadas para a medição de citrulina de plasma (para doses SC somente). MÉTODOS ESTATÍSTICOS: FARMACOCINÉTICA:

[0147] As estimativas de parâmetros de PK para glepaglutídeo, ZP2469 (ZP18481- 34), e ZP2711 (ZP18481-35) foram listadas e resumidas com uso de estatística descritiva padrão. Os parâmetros de PK primários são t1/2 para glepaglutídeo, ZP2469 (ZP18481-34), e ZP2711 (ZP18481-35); e CL (dose IV), CL/F (doses SC), Vss (dose IV), Vss/F (dose SC), Vz (dose IV), e Vz/F (doses SC) para glepaglutídeo. A meia-vida é calculada como LN(2)/ke em que ÷ke é a estimativa da queda da parte de terminal da curva de LN(concentração) versus tempo, com regressões de repetições de valores de LN(concentração) com uso dos últimos três pontos com concentrações diferentes de zero, então os últimos quatro pontos, últimos cinco pontos, etc. Pontos com um valor de concentração de zero não são incluídos. Pontos antes de Cmax não são usados. Para cada regressão, um -R2 Ajustado é computado: -R2 Ajustado=1- ((1-R2)×(n-1))/(n-2); em que n é o número de pontos de dados na regressão e R2 é o quadrado do coeficiente de correlação. ke com uso da regressão com o maior R2 ajustado e, 1). Se o R2 ajustado não melhorar, mas estiver dentro de 0,0001 do maior valor R2 ajustado, a regressão com o maior número de pontos é usada. 2) ke precisa ser calculada a partir de pelo menos três pontos de dados. 3) A queda estimada precisa ser negativa, de modo que seu ke negativo seja positivo. Os resultados dos cálculos realizados com dados preliminares são mostrados na Tabela 4, embora os resultados dos cálculos com conjunto de dados finais completos sejam mostrados na Tabela 5. FARMACODINÂMICA:

[0148] As concentrações de citrulina de plasma e mudanças da linha de base foram listadas e resumidas com uso de estatísticas descritivas. RESULTADOS:

[0149] Resultados iniciais e análise para uma seleção de cobaias admitidas em Grupos A, B, C e D constataram que ZP2469 teve uma meia-vida em horas conforme mostrado na Tabela 4 abaixo. A meia-vida encontrada com uso de dosagem de uma vez por semana suporta a viabilidade de uso de dosagem dos peptídeos de GLP-2 da presente invenção uma vez por semana ou duas vezes por semana.

TABELA 4: RESULTADOS PRELIMINARES DE MEIA-VIDA Sem Doses

1 6 7

Meia-vida ZP2469 Grupo Cobaia Nº (hr)

A 101 20

Uma vez ao dia 104 95

105 76

109 36 110 33

112 87

B 102 94

Uma vez ao dia 103 75

106 108

107 209

108 59

111 139

C 201 38 11

Uma vez por 203 100 17 semana

204 17 16

208 38 32

209 48 40

212 20 22

D 202 56 60

Uma vez por 205 52 55 semana 206 38 74

[0150] Uma vez que o estudo foi concluído, um conjunto de dados final mais completo foi disponibilizado e foi também usado para calcular a meia-vida.

A meia- vida calculada no período de tempo específico de 72 a 168 horas após a dosagem (independentemente do valor -R2 Ajustado e número de pontos de dados) para o metabólito ZP2469 é mostrada na Tabela 5 abaixo.

TABELA 5: RESULTADOS FINAIS DE MEIA-VIDA

Número de doses

1 6 7 Meia vida de ZP2469 no intervalo de 72 a 168 Grupo Cobaia horas após a dose (hr)

A 105 75

1 mg 112 87 uma vez ao 115 94 dia

119 80 125 54

126 57

B 102 42

5 mg 103 168 uma vez ao 106 77 dia

107 101

108 53

111 101 114 34

C 203 329 26

5 mg 204 41 35 uma vez por 208 38 59 semana

209 48 94

212 59 75

213 48 57

214 61 43

216 NA 52

219 217 107

221 45 33

222 39 68

225 NA 47

226 91 65

229 75 452

D 202 66 60

10 mg 205 54 55 uma vez por 206 120 74 semana

207 36 58

210 46 NA 211 35 70

EXEMPLO 6: EFEITOS INTESTINOTRÓFICOS DE GLEPAGLUTÍDEO

SEGUINDO EXPOSIÇÃO CRÔNICA EM RATOS MÉTODOS:

[0151] Ratos Wistar foram dosados de modo subcutâneo (SC) com veículo, 1, 3 e 10 mg/kg ZP1848 em base diária por 26 semanas. Subgrupos adicionais de controle e animais de alta dose foram permitidos a um período de recuperação de 6 semanas seguindo a conclusão do período de dosagem. Subgrupos de controle e animais de alta dose foram permitidos a um período de recuperação de 6 semanas seguindo a conclusão do período de dosagem. O comprimento e o peso dos intestinos delgado e grosso foram medidos em necropsia como indicadores de efeitos intestinotróficos e o trato intestinal foi avaliado histologicamente. RESULTADOS:

[0152] ZP1848 induziu aumentos significativos (p<0.01) relacionados a dose em comprimento e peso dos intestinos delgados em ratos (consultar a Tabela 5). Além disso, o comprimento e peso do intestino grosso foram também ligeiramente aumentados. ZP1848 produziu um aumento relacionado a dose em hiperplasia mucosal do duodeno, jejuno e íleon. De modo interessante, ao fim do período de recuperação, efeitos intestinotróficos significativos estavam ainda presentes nos grupos de alta dose embora recuperação parcial tenha sido observada.

TABELA 6: PORCENTAGEM (%) DE AUMENTO RELATIVO AO GRUPO DE CONTROLE (MACHOS/FÊMEAS) Animais de estudo principal Animais de recuperação Dose (mg/kg) 10 10 Comprimento SI 38/47 39/45 Peso SI 190/238 85/101 SI = intestino delgado CONCLUSÃO:

[0153] Um efeito intestinotrófico relacionado a dose significativo foi observado seguindo 26 semanas de exposição de ZP1848 em ratos. Um efeito similar foi também observado após 7 dias de dosagem em ratos. Em todas as doses no estudo de 26 semanas, o comprimento e peso aumentados, assim como espessamento macroscópico e hipertrofia vilosa, foram observadas em todos os segmentos do intestino delgado. Essas constatações estavam ainda presentes seguindo um período de recuperação de 6 semanas, indicando efeitos intestinotróficos prolongados de glepaglutídeo. EXEMPLO 7: MUDANÇAS ABSOLUTAS DE SAÍDA DE PESO ÚMIDO FECAL ABSOLUTO EM PACIENTES DE SBS-IF/SBS-II

MÉTODO

[0154] O estudo foi projetado como um randomizado, cruzado e duplo cego com três diferentes doses de ZP1848 (10 mg, 1 mg, 0,1 mg) em 16 pacientes com SBS. O protocolo de estudo foi aprovado pela Agência Médica Dinamarquesa e pelo Comitê Dinarmarquês de Ética de Pesquisa e Saúde.

[0155] Os 18 pacientes com SBS foram randomizados de modo uniforme e de modo duplo cego a cada uma das seis combinações de nível de dose cruzada: 10 mg/1 mg, 10 mg/0,1 mg, 1 mg/10 mg, 1 mg/0,1 mg, 0,1 mg/10 mg, 0,1 mg/1 mg de ZP1848. O grupo de pacientes com SBS compreendeu 9 fêmeas, 9 machos; 13 pacientes com SBS-IF e 5 pacientes com SBS-II do mesmo. A idade média foi de 62 anos, comprimento de intestino curto médio foi 110 cm, e dois pacientes com SBS-IF teve > 50% de cólon em continuidade. Os pacientes foram injetados uma vez ao dia de modo subcutâneo com as doses acima de ZP1848.

[0156] O objetivo desse estudo foi avaliar a eficácia de ZP1848 em saída de peso úmido fecal em pacientes com SBS-II e SBS-IF e, desse modo, a mudança absoluta de linha de base em peso úmido de saída fecal conforme medido por estudos de saldo metabólico antes e nos últimos 3 dias de cada período de tratamento. RESULTADOS:

[0157] Dos 18 pacientes randomizados e tratados com ZP1848, 16 completaram o experimento. As mudanças de resultados em saída de peso úmido fecal absoluta (g/dia) são mostradas na Tabela 7 abaixo. Os aprimoramentos foram da mesma magnitude em todos os grupos de paciente, isto é, SBS-II, SBS-IF e pacientes com cólon em continuidade. Isso demonstra que ZP1848 é eficaz para o tratamento de ambas as classes de pacientes com SBS. Além disso, os presentes inventores acreditam que esses resultados sustentam que a terapia de análogos de GLP-2 que usa ZP1848 é eficaz em prevenir ou tratar pacientes com SBS-II que se tornam SBS- IF. TABELA 7: MUDANÇAS DE SAÍDA DE PESO ÚMIDO FECAL ABSOLUTA, SBS-II VS SBS-IF Mudanças de Saída de Peso Úmido Fecal Absoluta 0,1 mg 1 mg 10 mg 1 mg + 10 mg (g/dia) (Meios [95% CI]) 173 -592 -833 -713 II+IF (n=16) [-160, 506] [-913, -272] [-1152, -515] [-935, -490] p=0,274 p=0,002 p=0,0002 p<0,0001

196 -587 -894 -741 IF (n=11) [-301, 693] [-1080, -95] [-1420, -368] [-1079, -402] p=0,3575 p=0,0280 p=0,0072 p=0,0025 -37 -303 -837 -570 II (n=5) [-873, 800] [-1310, 704] [-1495, -178] [-1459, -45] p=0,9094 p=0,4503 p=0,0243 p=0,0393

[0158] Embora a invenção tenha sido descrita em conjunto com as modalidades exemplificativas descritas acima, muitas modificações equivalentes e variações serão evidentes aos elementos versados na técnica quando dada esta revelação. Consequentemente, as modalidades exemplificativas da invenção apresentadas são consideradas como ilustrativas e não limitadoras. Várias mudanças às modalidades descritas podem ser realizadas sem se afastar do espírito e escopo da invenção. Todos os documentos citados no presente documento são expressamente incorporados a título de referência.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento e/ou prevenção de um distúrbio relacionado a estômago e intestino em um paciente humano, caracterizado por o análogo de GLP-2 ser representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou uma sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o método compreende administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.

2. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o distúrbio relacionado a estômago e intestino ser úlceras, distúrbios de ingestão, síndromes de má absorção, síndrome de tripa curta, síndrome de cul-de-sac, doença de intestino inflamatório, esprue celíaco (por exemplo, que aparece da enteropatia induzida por glúten ou doença celíaca), esprue tropical, esprue hipogamaglobulinêmico, enterite, enterite regional (doença de Crohn), colite ulcerativa, dano de intestino delgado, ou síndrome de intestino curto (SBS).

3. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por o distúrbio relacionado a estômago e intestino ser síndrome de intestino curto.

4. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o distúrbio relacionado a estômago e intestino ser enterite de radiação, enterite infecciosa ou pós-infecciosa, ou dano de intestino delgado devido a agentes tóxicos ou outros agentes quimioterapêuticos, ou um efeito colateral de quimioterapia ou tratamento de radiação.

5. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para aumentar o crescimento longitudinal dos intestinos em um paciente humano, caracterizado por o análogo de GLP-2 ser representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou uma sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o método compreende administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.

6. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado por: (a) o intestino ser aumentado em pelo menos 30% em comparação ao controle; e/ou (b) um aumento de capacidade de absorção após o tratamento ter sido parado é obtido; e/ou (c) o paciente humano ser tratado uma ou duas vezes por semana por pelo menos 1 a 3 anos; e/ou (d) o paciente humano ser um paciente que tem falha intestinal de SBS; e/ou (d) o paciente humano ser um paciente que está na borda entre ser um paciente que tem insuficiência intestinal de SBS e falha intestinal de SBS.

7. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizado por o método compreender administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma vez por semana.

8. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado por o método compreender administrar o análogo de GLP-2 ao paciente duas vezes por semana.

9. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18, caracterizado por o método compreender administrar uma pluralidade de doses do análogo de GLP-2 ao paciente, em que as doses são separadas em tempo por uma semana, opcionalmente, em que as doses são administradas ao paciente por 1 a 3 anos.

10. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, caracterizado por o método compreender administrar o análogo de GLP-2 em um dose na faixa entre 0.5 mg e 25 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 1 mg e 20 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 1 mg e 10 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 2 mg e 7 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, opcionalmente entre 5 mg e 7 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana, ou opcionalmente entre 2 mg e 5 mg inclusivo por paciente uma ou duas vezes por semana.

11. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizado por o método compreender administrar o análogo de GLP-2 em uma dose fixa de 5 mg, 6 mg, 7 mg, 8 mg, 9, mg, 10 mg, 11 mg, 12 mg, 13 mg, 14 mg ou 15 mg, uma ou duas vezes por semana.

12. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizado por o método compreender administrar o análogo de GLP-2 em uma dose fixa de 10 mg, uma ou duas vezes por semana.

13. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 22, caracterizado por o método compreender administrar o análogo de GLP-2 por injeção.

14. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por: (a) a dose do análogo de GLP-2 ser dividida em duas ou três doses que são administrados em locais de injeção espacialmente separados; e/ou (b) o método compreender administrar o análogo de GLP-2 por injeção intravenosa, injeção subcutânea ou injeção intramuscular; e/ou (c) administração do análogo de GLP-2 causar a formação de um depósito subcutâneo do qual o análogo de GLP-2, ou metabólitos dos mesmos, são liberados; e/ou (d) o método compreender administrar o análogo de GLP-2 com uso de uma caneta de injeção.

15. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 28, caracterizado por X5 ser Thr e/ou X11 ser Ala.

16. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a

29, caracterizado por ser: ZP1848 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDKKKKKK-NH2, ZP2949 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDKKK-OH, ZP2711 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDKK-OH, ZP2469 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDK-OH, ZP1857 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITD-NH2, ou ZP2530 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITD-OH.

17. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com a reivindicação 16, caracterizado por ser: 1848 H-HGEGTFSSELATILDALAARDFIAWLIATKITDKKKKKK-NH2

18. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado por X5 ser Ser e/ou X11 ser Ser.

19. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14 ou 18, caracterizado por ser: ZP1846 H-HGEGSFSSELSTILDALAARDFIAWLIATKITDKKKKKK-NH2, ZP1855 H-HGEGSFSSELSTILDALAARDFIAWLIATKITD-NH2, ou ZP2242 H-HGEGSFSSELSTILDALAARDFIAWLIATKITDK-OH.

20. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com a reivindicação 19, caracterizado por ser: 1846 H-HGEGSFSSELSTILDALAARDFIAWLIATKITDKKKKKK-NH2

21. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento de síndrome de intestino curto (SBS) em uma cobaia humana que recebe um regime de suporte parenteral (PS), sendo o método caracterizado por compreender: (i) administrar à cobaia um análogo de GLP-2 representado pela fórmula:

R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou uma sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo; e em que o análogo de GLP-2 é administrado uma ou duas vezes por semana para um tempo suficiente para prolongar e aprimorar a função do intestino delgado à cobaia; (ii) segundo a etapa (i), reduzir uma frequência e/ou volume do regime de suporte parenteral (PS) em resposta à função aprimorada do intestino delgado; e (iii) repetir opcionalmente as etapas (i) e (ii) em resposta à cobaia que demonstra a função aprimorada ao longo do tempo como resultado de crescimento adicional do intestino delgado.

22. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com a reivindicação 21, caracterizado por tratamento ser administrado à cobaia para 18 a 150 semanas, para 18 a 100 semanas, ou para 18 a 52 semanas.

23. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com a reivindicação 21 ou 22, caracterizado por o método compreende analisar um volume de PS inicial dentro de dos primeiros dias de terapia de GLP-2, seguido por uma avaliação semanal durante o primeiro mês de terapia de GLP-2, uma avaliação mensal pelos próximos 1 a 3 meses de terapia de GLP-2, e/ou uma avaliação a cada 3 a 6 meses até a terapia de GLP-2 ser concluída.

24. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 23, caracterizado por no método acima, a etapa (ii) compreender as etapas de: (a) determinar o volume de PS necessário pela cobaia no ponto no tratamento, (b) comparar o mesmo a um volume de PS de linha de base determinado no início da terapia de GLP-2 e (c) reduzir a frequência ou volume do PS em que a cobaia demonstra função aprimorada do intestino delgado.

25. Método para ajustar um volume de suporte parenteral (PS) em uma cobaia humana que recebe tratamento com um análogo de GLP-2 para síndrome de intestino curto (SBS) em conjunto com uma quantidade ou volume de suporte parenteral a cada semana, sendo o método caracterizado por compreender: (i) administrar à cobaia um análogo de GLP-2 por um tempo suficiente para crescer e/ou aprimorar a função do intestino delgado à cobaia; (ii) segundo a etapa (i), reduzir uma frequência ou volume do regime de suporte parenteral (PS) em resposta à função aprimorada do intestino delgado; e (iii) repetir opcionalmente as etapas (i) e (ii) em resposta à cobaia que demonstra a função aprimorada ao longo do tempo como resultado de crescimento adicional do intestino delgado; em que, no método acima, a etapa (ii) compreende as etapas de: (a) determinar o volume atual de PS necessário pela cobaia nesse ponto no tratamento; (b) medir um volume de urina atual produzido pela cobaia e comparar o volume de urina atual a um volume de urina de linha de base para determinar um aumento absoluto em produção de urina por dia; e (c) reduzir a frequência e/ou volume do PS em que a cobaia demonstra função aprimorada do intestino delgado conforme indicado por um aumento absoluto na produção de urina por dia; em que o volume de PS semanal reduzido para a cobaia é igual ao volume atual de PS semanal menos 7 vezes o aumento absoluto em volume de urina diário a partir da linha de base.

26. Método, de acordo com a reivindicação 25, caracterizado por a frequência ou volume do PS ser reduzido se o volume de urina diário for pelo menos 10% mais alto do que o volume de urina de linha de base.

27. Método, de acordo com a reivindicação 25 ou 26 caracterizado por compreender adicionalmente a etapa de determinar o volume atual de PS semanal para uso no cálculo do novo volume de PS com uso do algoritmo.

28. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 25 a 27, caracterizado por a terapia de GLP-2 compreender administrar à cobaia um análogo de GLP-2 representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou uma sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo.

29. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 25 a 28, caracterizado por (a) o método compreender administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana; e/ou (b) o método compreender administrar o volume de PS calculado à cobaia; e/ou (c) o método compreender uma etapa inicial de determinar o volume de linha de base e/ou determinar o volume de urina diário à cobaia; e/ou (d) o método compreender repetir a etapa de cálculo com uso do algoritmo em um ou mais pontos durante o curso da terapia de GLP-2 recebida pela cobaia; e/ou (e) o método compreender determinar um volume de linha de base de urina diário no início de terapia de GLP-2 e calcular o novo volume de PS dentro de 2, 3, 4, 5, 6 ou 7 dias após o início da terapia de GLP-2; e/ou (f) o método compreender determinar um volume de linha de base de urina diário no início de terapia de GLP-2 e calcular o novo volume de PS 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7 semanas após o início da terapia de GLP-2; e/ou (g) o risco de efeito adverso de um alto volume de PS ser reduzido, opcionalmente em que o efeito adverso é sobrecarga de fluido.

30. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento e/ou prevenção de um paciente que tem insuficiência intestinal de SBS (SBS-II), caracterizado por o tratamento prevenir ou atrasar o desenvolvimento de falha intestinal de SBS (SBS-IF), em que o análogo de GLP-2 é representado pela fórmula: R1-Z1-His-Gly-Glu-Gly-X5-Phe-Ser-Ser-Glu-Leu-X11-Thr-Ile-Leu-Asp-Ala- Leu-Ala-Ala-Arg-Asp-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-IIe-Ala-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp-Z2-R2 em que: R1 é hidrogênio, C1-4 alquila (por exemplo, metila), acetila, formila, benzoila ou trifluoroacetila; X5 é Ser ou Thr; X11 é Ala ou Ser; R2 é NH2 ou OH; e Z1 e Z2 são independentemente ausentes ou uma sequência de peptídeos de 1 a 6 unidades de aminoácido de Lys; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou derivado do mesmo. administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana e/ou de acordo com qualquer um dos outros regimes de tratamento descrito no presente documento.

31. Análogo de peptídeo semelhante a glucagon 2 (GLP-2) para uso em um método para o tratamento, de acordo com a reivindicação 30, caracterizado por o método compreender administrar o análogo de GLP-2 ao paciente uma ou duas vezes por semana.