BR112019017166A2

BR112019017166A2 - 3'-deamino-3'-(2"-pirrolina-1"-il)-5-imino-13-deoxiantraciclinas e métodos de preparação

Info

Publication number: BR112019017166A2
Application number: BR112019017166A
Authority: BR
Inventors: Walsh Gerald; Olson Richard
Original assignee: Monopar Therapeutics Inc
Priority date: 2017-02-16
Filing date: 2018-02-16
Publication date: 2020-04-14
Also published as: EP3582788A1; IL268680A; JP2020507608A; CN110573165B; RU2019128837A3; CA3053417A1; AU2018220520A1; CN110573165A; KR20190117609A; US20180230175A1; IL268680B; US10450340B2; WO2018151872A1; MX2019009733A; RU2019128837A; JP7159177B2

Abstract

a invenção refere-se a derivados de 2-pirrolino-13-deoxiantraciclina, seus usos médicos, e um processo para fabricá-los. uma 2-pirrolino-13-deoxiantraciclina e uma 13-deoxiantraciclina podem ser administradas a um paciente simultaneamente ou sequencialmente em quantidades para produzir um efeito terapêutico sinérgico com potência e eficácia aumentadas, em comparação com a soma dos efeitos de cada droga quando administrada isoladamente. também é proporcionada uma composição ou preparação de uma 2-pirrolino-13-deoxiantraciclina e uma 13-deoxiantraciclina para produzir um potente efeito terapêutico antitumoral.

Description

“3’-DEAMINO-3’-(2-PIRROLINA-1 -IL)-5-IMIN0-13-DEOXIANTRACICLINAS

E MÉTODOS DE PREPARAÇÃO”

Referência Cruzada a Pedido Relacionado [001]Prioridade é reivindicada no Pedido de Patente U.S. 15/434.617, depositado em 16 de fevereiro de 2017, cujos conteúdos completos são aqui incorporados por referência.

Campo Técnico [002]A presente divulgação refere-se a 13-deoxiantraciclinas, e, mais particularmente, a 3'-desamino-3’-(2”-pirrolina-1”-il)-5-imino-13-deóxi antraciclinas e a processos para prepará-los e utilizá-los. A presente descrição também refere-se a combinações sinérgicas de 2-pirrolino-13-deoxiantraciclinas e 13-deoxiantraciclinas.

Antecedentes da Divulgação [003]Doxorrubicina, um antibiótico de antraciclina, é um dos agentes anticancerígenos mais utilizados e muito potentes. Possui amplo espectro de atividade anticâncer, sendo útil no tratamento da leucemia linfoblástica aguda, leucemia mieloblástica aguda, tumor de Wilms, neuroblastoma, sarcomas de partes moles e ósseos, carcinoma de mama, carcinoma de ovário, carcinoma de bexiga de células transicionais, carcinoma de tireóide, carcinoma gástrico, doença de Hodgkin, linfoma maligno e carcinoma broncogênico (bula da doxorrubicina, Pfizer Inc., Nova Iorque, NY). De modo a explorar ainda mais o enorme potencial tumoricida inerente à estrutura dos antibióticos de antraciclina, foram descritos milhares de derivados sintéticos, incluindo os análogos dos mesmos ligados a várias macromoléculas veículoas.

[004]Nagy et al. (Proc. Natl. Acad. Sci. Vol. 93, pp. 2464-2469, 1996) descreveu que a modificação da doxorrubicina (composto I) para 3'-desamino-3’-(2”pirrolina-1”-il)doxorrubicina (composto II; 2-pirrolinodoxorrubicina) aumentou a potência anticancerígena em células cancerosas de camundongos e humanos in

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2/37 vitro 500 a 1000 vezes mais do que a doxorrubicina.

[005]A doxorrubicina entra rapidamente no núcleo de células e liga-se com alta afinidade ao DNA pela intercalação não covalente entre pares de bases, levando à inibição da síntese de biomacromoléculas. É geralmente aceito que os efeitos biológicos da doxorrubicina estão associados à sua capacidade de atuar como um veneno da topoisomerase II (topoll), interrompendo a etapa de religação dessa enzima e formando o complexo clivável de doxorrubicina-DNA-topoll ternário. A 2pirrolino-doxorrubicina parece agir da mesma maneira (Stepankova et al., Biochemical Pharmacology 82:227-235, 2011). Existem apenas pequenas diferenças nas modificações do DNA por essas antraciclinas e consequentes alterações conformacionais no DNA. Da mesma forma, a capacidade de modificações de 2pirrolinodoxorrubicina de DNA para inibir a atividade catalítica da topoisomerase II não difere significativamente da da doxorrubicina. (Stepankova et al., Supra) [006]No entanto, aumentar a potência da doxorrubicina convertendo-a em um composto 2-pirrolina, tornou-a inespecífica para a citotoxicidade. Consequentemente, 2-pirrolinodoxorrubicina é tóxica ou letal a ou abaixo de doses necessárias para um efeito anticancerígeno (Jungwirth, A et al., International Journal of Oncology 10:877-884, 1997; e Szepeshazi, K et al., Clinical Cancer Research, 7:2854-2861,2001). Como resultado, 2-pirrolinodoxorrubicina não tem sido útil como droga para tratar o câncer. Jungwirth et al., Supra e Szepeshazi et al., Supra sugeriram modificar 2-pirrolinadoxoubicina conjugando-a na posição 14 OH com análogos do hormônio que libera o hormônio luteinizante ou somatostatina. No

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3/37 entanto, estas modificações tornaram os compostos resultantes específicos para certos tumores, reduzindo assim a atividade de largo espectro do composto original.

Resumo da Divulgação [007]De acordo com a presente invenção, são proporcionados compostos de antraciclina com uma porção 2-pirrolina que aumenta a potência anticancerígena de um espectro amplo enquanto mantém um bom perfil de segurança e a característica de largo espectro da antraciclina. Em particular, os compostos de acordo com a presente invenção são representados pela fórmula X:

em que:

cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é O ou NH; e

R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina;

sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, as formas deuteradas do mesmo, os pró-drogas do mesmo, os isômeros dos mesmos, os solvatos dos mesmos e as misturas dos mesmos.

[008]De preferência, o composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo que consiste em 2-pirrolino-13-deoxidoxorrubicina, 2pirroli no-13-deoxidaunorrubicina, 2-pirroli no-13-deoxiepirrubicina, 2-pirroli no-13deoxicarminomicina e 2-pirrolino-13-deóxi-idarrubicina e análogos de 5-imino (R5 = NH) dos mesmos.

[009]A presente invenção também refere-se a uma composição farmacêutica

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4/37 que compreende um composto de fórmula X e um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[010]0utro aspecto da presente invenção refere-se a um método para suprimir o crescimento de células que compreende administrar a um mamífero que dele necessite uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula X ou uma composição compreendendo um composto de fórmula X.

[011]A presente invenção refere-se ainda a uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma preparação combinada sinérgica compreendendo um primeiro composto e um segundo composto, em que: o primeiro composto é uma 2-pirrolino-13-deoxiantraciclina tendo a fórmula X:

em que:

cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é O ou NH; e

R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina;

sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, as pró-drogas do mesmo, as formas deuteradas do mesmo, os isômeros dos mesmos, os solvatos dos mesmos e as misturas dos mesmos; e o segundo composto é uma 13-deoxiantraciclina, a referida 13deoxiantraciclina tendo a fórmula:

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em que cada um de R1, R2 e R3 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em H e OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em O e NH; e

R6 é uma porção de açúcar;

sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, pró-droga dos mesmos, as formas deuteradas do mesmo, os isômeros dos mesmos, os solvatos dos mesmos e as misturas dos mesmos;

e em que a quantidade terapeuticamente eficaz da preparação combinada sinérgica suprime o crescimento de células.

[012]Preferivelmente, o primeiro composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo que consiste em 2-pirrolino-13deoxidoxorrubicina, 2-pirroli no-13-deoxidaunorrubicina, 2-pirroli no-13deoxiepirrubicina, 2-pirrolino-13-deoxicarminomicina, e 2-pirrolino-13-deóxiidarrubicina e os análogos de 5-imino dos mesmos e o segundo composto é um derivado de uma antraciclina selecionado a partir do grupo que consiste em 13deoxidoxorrubicina, 13-deoxidaunorrubicina, 13-deoxiepirubicina, 13deoxicarminomicina, 13-deóxi-idarrubicina, 13-deoxianamicina e 13-deoxiamubicina e análogos de 5-imino dos mesmos.

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6/37 [013]Ainda um outro aspecto da presente invenção é uma composição farmacêutica que compreende a preparação combinada sinérgica aqui descrita acima e um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[014]A presente invenção também se refere a um método para suprimir o crescimento de células com uma preparação combinada sinérgica do primeiro composto como definido acima e do segundo composto como definido acima, compreendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz do preparação combinada sinérgica, sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, formas deuteradas do mesmo, pró-drogas do mesmo, isômeros dos mesmos, ou solvatos dos mesmos.

[015]A preparação combinada sinérgica pode ser formulada e administrada em que o segundo composto está presente em uma quantidade que é inferior à sua quantidade terapeuticamente eficaz. A preparação combinada sinérgica pode também ser formulada e administrada em que o primeiro composto está presente em uma quantidade que é inferior à sua quantidade terapeuticamente eficaz. A título de exemplo, quando o segundo composto está presente em uma quantidade que é inferior sua quantidade terapeuticamente eficaz, a razão em peso do segundo composto para o primeiro componente pode tipicamente ser de cerca de 0,005 a cerca de 0,10:1 e mais tipicamente de 0,01 a cerca de 0,10:1. Também, a título de exemplo, quando o primeiro composto está presente em uma quantidade que é inferior à sua quantidade terapeuticamente eficaz, a razão em peso do primeiro composto para o segundo componente pode ser tipicamente de cerca de 0,005 a cerca de 0,10:1 e mais tipicamente de 0,01 a cerca de 0,10:1.

[016]Ainda outros objetivos e vantagens da presente divulgação se tornarão facilmente evidentes pelos especialistas na técnica a partir da seguinte descrição detalhada, em que são mostradas e descritas apenas as modalidades preferidas, simplesmente a título de ilustração do melhor modo. Como será realizado, a

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7/37 divulgação é capaz de outras e diferentes modalidades, e seus vários detalhes são capazes de modificações em vários aspectos óbvios, sem se afastar da divulgação.

Por conseguinte, a descrição deve ser considerada como ilustrativa por natureza e não como restritiva.

Descrição Detalhada da Invenção [017]Embora a descrição seguinte descreva certas modalidades da presente divulgação, deve entender-se que a divulgação não é limitada na sua aplicação aos detalhes das composições e combinações dos compostos descritos nos exemplos e experiências em anexo, uma vez que a divulgação é capaz de outras modalidades e de ser praticada de várias maneiras.

[018]Os compostos de 2-pirrolino-13-deóxi antraciclina empregues de acordo com a presente divulgação têm a seguinte fórmula X:

[019]em que cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH; R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila; R5 é O ou NH; e R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina. As 2-pirrolino13-deoxiantraciclinas mais típicas são 2-pirrolino-13-deoxidoxorrubicina, 2-pirrolino13-deoxidaunorrubicina, 2-pirroli no-13-deoxiepirrubicina, 2-pi rrolino-13deoxicarminomicina e 2-pirrolino-13-deóxi-idarrubicina e análogos de 5-imino dos mesmos (R5 = NH).

[020]0s grupos alquila contêm tipicamente 1 a 6 átomos de carbono e podem ser de cadeia linear ou ramificada. Exemplos de grupos alquila adequados

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8/37 incluem metila, etila, i-propila, n-propila, butila, n-butila, pentila e hexila.

[021]Sais farmaceuticamente aceitáveis referem-se a derivados dos compostos divulgados em que o composto progenitor é modificado preparando os seus sais ácidos. Os compostos desta descrição preparam sais de adição ácidos com uma larga variedade de ácidos orgânicos e inorgânicos e incluem os sais fisiologicamente aceitáveis que são frequentemente usados em química faramcêutica. Sais inorgânicos típicos utilizados para formar esses sais incluem os ácidos clorídrico, bromídrico, iodídrico, nítrico, sulfúrico, fosfórico, hipofosfórico e similares. Sais derivados de ácidos orgânicos, tais como o mono alifático e ácidos dicarboxílicos, ácidos alcônicos substituídos com fenila, ácidos hidroxialalcanóico e hidroxialcandióico, ácidos aromáticos, ácidos sulfônicos alifáticos e aromáticos, também podem ser usados. Tais sais farmaceuticamente aceitáveis incluem assim acetato, fenilacetato, trifluoroacetato, acrilato, ascorbato, benzoato, clorobenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, metilbenzoato e, oacetoxibenzoato, naftaleno-2-benzoato, brometo, isobutirato, fenilbutirato, βhidroxibutirato, butina-1,4-dioato, hexina-1,4-dioato, caprato, caprilato, cloreto, cinamato, citrato, formiato, fumarato, glicolato, heptanoato, hipurato, lactato, malato, hidroximaleato, malonato, mandelato, mesilato, nicotinato, isonicotinato, nitrato, oxalato, ftalato, teraftalato, fosfato, mono-hidrogenofosfato, di-hidrogenofosfato, metafosfato, pirofosfato, propiolato, propionato, fenilpropionato, salicilato, sebacato, succinato, suberato, sulfato, bissulfato, pirossulfato, sulfito, bissulfito, sulfonato, benzeno-sulfonato, p-bromobenzenossulfonato, clorobenzenossulfonato, etanossulfonato, 2-hidroxietanossulfonato, metanossulfonato, naftaleno-1-sulfonato, naftaleno-2-sulfonato, p-tolueno-sulfonato, xilenosulfonato, tartarato e semelhantes.

[022]As formas deuteradas contêm hidrogênio pesado, incluindo deutério e/ou trítio.

[023]Entende-se que os compostos da presente divulgação se referem a

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9/37 todos os isômeros ópticos e estereoisômeros nos vários átomos possíveis da molécula, a menos que especificado de outro modo.

[024]Solvatos refere-se ao composto formado pela interação de um solvente e um soluto e inclui hidratos. Os solvatos são usualmente adutos sólidos cristalinos contendo moléculas de solvente dentro da estrutura cristalina, em proporções estequiométricas ou não estequiométricas.

[025]As formas pró-droga dos compostos contendo várias funções de nitrogênio (amino) podem incluir os seguintes tipos de derivados em que cada grupo R pode ser individualmente hidrogênio, alquila substituída ou não substituída, arila, alquenila, alquinila, heterociclo, alquilarila, aralquila, aralquenila, aralquinila, cicloalquila ou grupos cicloalquenila.

a) Carboxamidas, -NHC(O)R (b) Carbamatos, -NHC(O)OR (c) Carbamatos de (acilóxi)alquila, NHC(O)OROC(O)R (d) Enaminas, -NHCR (= CHCO2R) ou -NHCR (=CHCONR2) (e) Bases de Schiff, -N = CR2.

[026]A síntese e purificação de 13-deoxiantraciclinas são divulgadas nas Patentes U.S. Nos. 5.942.605; 5,948,896; e 7.244.829, que são aqui incorporadas por referência. O processo de conversão de antraciclinas em 2-pirrolina-antraciclinas é divulgado em Nagy et al., Supra e na Patente U.S. No. 6.184.374, que são aqui incorporadas por referência.

[027]Descobriu-se que as formas 13-deóxi da doxorrubicina, daunorrubicina ou outras antraciclinas semelhantes não serão metabolicamente convertidas em formas 13-di-hidro cardiotóxicas, e são, portanto, desprovidas de cardiotoxicidade irreversível cumulativa. Em particular, vide WO99/08687, Pat. U.S. 5.948.896 e 5.942.605 e PCT/US99/04704, cujas divulgações são aqui incorporadas por referência.

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10/37 [028]5-imino-13-deoxidoxorrubicina foi testada em um ensaio clínico de Fase I em pacientes com tumores avançados (Holstein, SA Investigative New Drugs. 2015, 33:594-602). Este composto teve atividade anticancerígena em uma variedade de carcinomas, sarcomas e câncer de bexiga. Além disso, o composto foi bem tolerado com toxicidade relativamente moderada para uma antraciclina. Até agora, não se sabia se esses agentes anticancerígenos de 13-deoxiatraciclina teriam um efeito anticancerígeno melhorado se convertidos em análogos de 2-pirrolino e ao mesmo tempo tivessem um perfil de segurança aceitável. Como notado acima, 2pirrolino-doxorrubicina é muito potente, mas também é tóxico e letal em doses ou perto das que são necessárias para ter eficácia anticancerígena.

[029]2-pirrolino-13-deoxiantraciclinas de fórmula X exibem eficácia anticancerosa, antitumoral e/ou neoplásica, que são úteis para todos os tipos de terapias para o tratamento de cânceres, neoplasmas ou tumores, incluindo leucemia, melanoma, fado, mama, ovário, próstata, estômago, pâncreas, pulmão, rim, cólon e tumores do sistema nervoso central. Os tratamentos da presente divulgação proporcionam métodos de suprimir o crescimento de células normais (tais como células da pele com psoríase), cânceres, tumores e neoplasmas em mamíferos, incluindo humanos, com compostos de fórmula X.

[030]Uma composição farmacêutica da presente divulgação compreende um composto ou compostos de fórmula X, sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, formas deuteradas do mesmo, pró-drogas do mesmo, isômeros dos mesmos e/ou solvatos dos mesmos em um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável. Estas composições farmacêuticas da presente divulgação são úteis na terapia anticâncer e no tratamento de distúrbios proliferativos celulares. Os veículos ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos pelos especialistas na técnica de formulação de compostos na forma de composições farmacêuticas, combinações, misturas e preparações. Um veículo

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11/37 farmaceuticamente aceitável refere-se a um ou mais preenchedores, sólidos ou líquidos compatíveis, diluente ou encapsulantes que são adequados para administração a mamíferos incluindo humanos. As composições farmacêuticas, combinações, misturas e preparações adequadas para administração parentérica são formuladas em uma forma estéril que pode ser uma solução ou suspensão estéril em um diluente ou solvente aceitável.

[031 ]A quantidade de um ingrediente ativo contido na composição farmacêutica pode variar bastante amplamente dependendo de muitos fatores, tais como a via de administração e o veículo. Na presente invenção, uma composição farmacêutica pode conter desde cerca de 0,1 a 1000 mg de um 2-pirrolino-13-deóxi antraciclina de fórmula X por ml ou grama de formulação farmacêutica.

[032]Em um método de uso, um 2-pirrolino-13-deóxi antraciclina de fórmula X, sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, as formas deuteradas do mesmo, pró-drogas do mesmo, isômeros dos mesmos e/ou solvatos dos mesmos administrados a um paciente em necessidade dele em uma dose de cerca de 0,1 mg/m² de área de superfície corporal a cerca de 1000 mg/m² de área de superfície corporal, mais tipicamente de cerca de 10 mg/m² de área de superfície corporal a cerca de 500 mg/m² de área de superfície corporal. As doses de 2-pirrolino-13-deóxi antraciclinas pode ser administrada tão frequentemente quanto necessário. O método atual de administração irá variar de acordo com a formulação, composição, combinação, mistura ou preparação particulares, o câncer particular ou distúrbio celular proliferative a ser tratado e o paciente particular a ser tratado.

[033]A composição pode ser administrada a um paciente de qualquer modo que seja medicamente aceitável, incluindo oralmente, parentericamente, topicamente ou por implantação. A administração oral inclui administrar a composição na forma de comprimidos, cápsulas, pastilhas, suspensões, soluções, emulsões, pós, xaropes e semelhantes. A via preferida de administração é

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12/37 parentérica.

[034]O método e a ordem de administração reais podem variar de acordo com a formulação farmacêutica particular do composto de fórmula X a ser utilizado, o câncer particular a ser tratado, a gravidade do estado de doença a ser tratado e o paciente particular a ser tratado. Os intervalos de dosagem para a administração dos constituintes podem variar com a idade, estado, sexo e extensão da doença no paciente e podem ser determinados por um especialista na técnica.

[035]Exemplos de cânceres tratados de acordo com a presente invenção incluem câncer da mama, câncer da bexiga, sarcoma de Karpi, leucemia tal como leucemia linfoblástica aguda e leucemia mieloblástica aguda, tumor de Wilm, neuroblastoma, linfoma, sarcomas de tecidos moles e ossos, câncer do ovário, câncer da bexiga incluindo câncer da bexiga das células transicionais, câncer da tireóide, carcinoma gástrico, doença de Hodgkin e carcinoma broncogênico.

[036]Para testar se uma 13-deóxi antraciclina podería ser convertida em uma 2-pirrolino-13-deóxi antraciclina, o método de Nagy et al., supra foi utilizado para converter a amina no açúcar em uma porção 3'-deamino-3'-(2”- pirrolina-1 ”-il). Como exemplo, 5-imino-13-deoxidoxorrubicina III foi convertida em 2-pirrolino-5-imino-13deoxidoxorrubicina IV. O composto IV foi testado in vitro e in vivo quanto a atividade e potência anticancerígena. A conversão do composto III no composto IV é mostrada abaixo:

ill jV [037]A conversão de uma 13-deóxi antraciclina em uma 2-pirrolino-13-deóxi

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13/37 antraciclina de fórmula X com potência e eficácia melhoradas é mostrada, a título de exemplo na síntese seguinte e em ensaios biológicos, os quais se destinam a ilustrar, mas não a limitar a presente divulgação.

Exemplo 1 [038]Sal de HCI de 5-imino-13-deoxidoxorrubicina (III, 62,4 mg, 0,1104 mmol) foi dissolvido em 10 ml de dimetilformamida (DMF) e 90 ml de diclorometano em um frasco. O frasco foi purgado com nitrogênio e, em seguida, 4-iodobutiraldeído (0,697 g, 3,535 mmol, 33 equivalentes) foi adicionado gota a gota em 10 ml de diclorometano. Em seguida, N, N-d-iisopropiletilamina (0,152 g, 205 μΙ_, 1,178 mmol, 11 equivalentes) foi adicionado através de uma seringa, e o frasco de reação foi envolvido em folha e deixado em agitação durante 1,25 hora à temperatura ambiente. Após a reação ser completada, conforme medido por cromatografia líquida de alta pressão (HPLC), 20 mL de ácido trifluoroacético a 1% (TFA) foram adicionados em metanol. A solução foi concentrada através de evaporação rotativa até % do seu volume original. Uma solução de éter/hexano (1:5, 100 ml) foi adicionada altura em que se formou um precipitado de púrpura profundo. O sólido foi deixado assentar e o licor-mãe púrpura claro foi decantado por cânula. O sólido restante foi lavado com um volume adicional de 1:5 de éter/hexano e depois seco durante a noite sob alto vácuo em um frasco embrulhado em folha de alumínio. O rendimento de 2-pirrolino-5-imino-13-deoxidoxorrubicina IV foi de 61,0 mg (0,0878 mmol, 79,5%) como um pó púrpura que era 92% puro, medido por HPLC.

Exemplo 2 [039]A potência inibitória do crescimento de 2-pirrolino-5-imino-13deoxidoxorrubicina IV, 5-imino-13-deoxidoxorrubicina III e doxorrubicina I contra diversas linhagens celulares de câncer foi avaliada utilizando o ensaio de fluorescência de resazurina. A potência inibidora do crescimento foi medida como a concentração inibitória de um composto necessário para inibir o crescimento celular

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14/37 em 50% (IC50). As células cancerosas foram semeadas em placas de 96 poços (0,51x10⁴ células/poço) com meio apropriado, incubadas com droga durante 48 horas, e depois tratadas com resazurina (concentração final, 0,01%), um corante azul não fluorescente, por 24 horas. A fluorescência (Ex560nm/Em590nm) foi registrada utilizando um fluoretro de placa multipoço BioTek SynergyHT. Células saudáveis metabolizam a resazurina em resorufina, um corante rosa fluorescente. Assim, a fluorescência é uma proxy para a viabilidade celular e usada para determinar 0 efeito de agentes citotóxicos em culturas de células. Os resultados dos ensaios de atividade citotóxica em cinco linhagens celulares humanas de câncer e uma linhagem celular humana normal estão resumidos na Tabela 1. Contra todas as células cancerosas, 2-pirrolino-5-imino-13-deoxidoxorrubicina IV foi significativamente mais potente do que 0 composto progenitor 5-imino-13deoxidoxorrubicina III, com valores IC50 que eram 13 a 27 vezes inferiores aos de 5imino-13-deoxidoxorrubicina III. A atividade de 2-pirrolino-5-imino-13deoxidoxorrubicina IV também foi maior que a de doxorrubicina I, com valores de IC50 que foram, em média, inferiores aos da doxorrubicina I.

[040]Os compostos foram também testados contra uma linhagem celular normal não cancerígena, fibroblastos humanos normais (HADF). 2-pirrolino-5-imino13-deoxidoxorrubicina IV era metade citotóxico (39,75/18,9) do que doxorrubicina I contra células HADF (normal). Os resultados desses estudos são mostrados na Tabela 1.

[041 ]Os compostos foram ainda testados contra uma linhagem celular de fibrossarcoma uterino, MES-SA, sensível à doxorrubicina (composto I), e contra uma linhagem celular de fibrossarcoma uterino MES-SA/MX2 resistente à doxorrubicina. Esses resultados são mostrados na Tabela 2.

Tabela 1. Atividade antiproliferativa (IC50) do Composto IV, Composto III e Composto I contra linhagens celulares de câncer humano e uma linhagem celular

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15/37 normal utilizando o ensaio de resazurina. Os valores de IC50 são a média (± SEM) de ensaios separados, cada um realizado em triplicado.

Linhagem	Valores IC50 da Droga (μΜ)
	Tipo de célula
Celular	Composto IV Composto III Composto 1
SW-872	Liposarcoma 0.57 ± 0.23 7.38 ±0.45 33.7 ± 7.5 Rhabdomio-
RD	0.44 ±0.13 11.89 ±3.99 0.43 ±0.15 sarcoma
GCT	Histiocitoma 0.175 ±0.015 3.37 ± 0.35 0.279 ± 0.036 Cervical
HeLa	Adenocarcinom 0.467 ±0.104 9.82 ±0.93 0.605 ± 0.095 a Carcinoma do
T47D	0.817±0.561 18±13.7 10.3±7.8 Duto da Mama
Average	0.49 10.09 9.06 Fibroblastos
HADF	dérmicos de 39.75 58.9 18.9 adulto humanos

[042]O composto IV é demonstrado, em média, 20 (10,09/0,49) vezes mais potente do que 0 composto III para inibir 0 crescimento celular de células cancerosas e 18 (9,06/0,49) vezes mais potentes do que 0 composto I. O composto IV, em média, é 81 (39,75/0,49) vezes mais potente contra células cancerosas do que uma linhagem celular normal não cancerosas. O composto III, em média, é apenas 5,8 (58,9/10,09) vezes mais potente contra as células cancerosas do que uma célula do tipo normal e 0 composto I é apenas 2 (18,9/9,06) vezes mais potente. Assim, a seletividade do composto IV para células cancerosas versus células normais mostrou ser 14 (81/5,8) vezes maior em comparação com 0

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16/37 composto III e 40 (81/2) vezes maior em comparação com o composto I. Este resultado foi imprevisto e está em contraste marcado àquele relatado para o composto II (2-pirrolinodoxorrubicina), que tem pouca ou nenhuma seletividade para células cancerosas versus células normais. Ainda mais inesperado e não previsto foi que a selectividade do composto IV para células cancerosas versus células normais é 40 vezes maior em comparação com o composto I (doxorrubicina). Assim, a formação de um análogo de 2-pirrolina de 5-imino-13-deoxidoxorrubicina (III) produziu uma antraciclina mais potente e mais segura em comparação com a formação de um análogo de 2-pirrolina de doxorrubicina (I) que resultou em toxina II altamente potente sem utilidade terapêutica.

Tabela 2. Atividade antiproliferativa (IC50) do Composto IV, Composto III e Composto I contra linhagens celulares de câncer humano sensíveis e resistentes à

doxorrubicina. Os valores de IC50 são a média (± SEM) de 3 ensaios separados, cada um realizado em triplicado.
Linhagem Celular	Tipo de Célula	Valores IC50 da Droga (μΜ)	Composto I
Composto IV	Composto III
MES-SA	Fibrossarcoma Uterino (sensível)	0.76 ±0.16	10.5 ± 1.0	0.55 ±0.08
MES-SA/MX2	Fibrossarcoma Uterino (resistente)	0.66 ±0.003	90	7.8 ±1.8

[043]O composto IV é mais potente do que o composto III e

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17/37 aproximadamente em potência igual ao composto I na cepa de fibrossarcoma sensível à doxorrubicina. No composto I na cepa de fibrossarcoma resistente é 14 (7,8/0,55) vezes menos potente do que na cepa de fibrossarcoma sensível, como é esperado. Por outro lado, o composto IV tem uma potência aproximadamente igual em relação à cepa de fibrossarcoma resistente em comparação com a cepa de fibrossarcoma sensível. Assim, o composto IV é 12 vezes mais potente do que o composto I em uma linhagem celular resistente à antraciclina, indicando que, no tratamento do câncer, o tecido canceroso não se tornará resistente ao composto IV. Esta característica representa uma melhoria significativa no composto IV em relação aos compostos III e I.

Exemplo 3 [044]Para avaliar a atividade de drogas in vivo contra um modelo de sarcoma de crescimento tumoral primário, realizou-se uma experiência utilizando células de fibrossarcoma humano HT1080 disponíveis comercialmente manipuladas para expressar luciferase (HT1080-luc; PerkinElmer). A potência inibitória do Composto III e do Composto IV contra HT1080-luc foi medida in vitro pelos métodos descritos no Exemplo 2. Os IC50 ±SEM (μΜ) para o composto IV foram de 3,51 ± 1,79 e para o composto III foram de 10,0 ±6,1. Os tumores HT1080-luc foram iniciados em camundongos SCID fêmeas com 6 semanas de idade (Harlan) por injeção subcutânea ortotópica de 1x10⁶ células em cada flanco. Após permitir que os tumores se estabelecessem durante 6 dias, os camundongos foram distribuídos aleatoriamente em um de três grupos de tratamento e tratados três vezes por semana por injeção intraperitoneal com composto IV ou composto III, 2,4 mg/kg em soro fisiológico tamponado (PBS) ou veículo (PBS). Os resultados estão apresentados na Tabela 3. Com base nos resultados de imagiologia bioluminescentes in vivo, a progressão do tumor foi significativamente reduzida estatisticamente no dia 20 em camundongos tratados com composto IV em relação

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18/37 aos que receberam tratamento apenas com PBS. A progressão do tumor não foi significativamente reduzida com o composto III. No dia 20 o peso do tumor foi reduzido em 53% com o composto IV enquanto reduzido apenas 36% com o composto III na mesma dose dada. Estes resultados indicam uma eficácia aumentada do composto IV versus composto III em uma dada dose e são consistentes com os resultados in vitro apresentados acima. O composto IV foi bem tolerado pelos camundongos sem mortes e sem sinais evidentes de toxicidade, tais como ptose, lordose, letargia e perda de peso. Isto está em contraste com a 2pirrolinodoxorrubicina, que pode ser letal no seu intervalo de dose eficaz.

Tabela 3. Pesos tumorais médios no dia 20. Asterisco (*) indica uma diminuição significativa dos controles do tratamento com PBS (p < 0,05). Valores são médias + erro padrão da média.

Tratamento:	Peso
Tumoral Médio (g)	SEM
PBS	2.18	±0.48
Composto III (2.4 mg/kg)	1.40	±0.30
Composto IV (2.4 mg/kg)	1.03*	±0.21

[045]Os efeitos terapêuticos antiproliferatives de células de 2-pirrolino-13deoxiantraciclinas de fórmula X são significativamente aumentados combinando-os com 13-deoxiantraciclinas de fórmula Y. Este efeito terapêutico aumentado é o resultado de um sinergismo inesperado entre 2-pirrolino-13- deoxiantraciclinas e 13deoxiantraciclinas. Os compostos de 13-deoxiantraciclina empregues de acordo com a presente divulgação têm a seguinte fórmula Y:

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em que cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH; R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila; R5 é O ou NH; e R6 é açúcar tendo um grupo amina primário ou nenhum grupo amina; sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, formas deuteradas do mesmo, pró-droga dos mesmos, isômeros dos mesmos e/ou solvatos dos mesmos. As 13deoxiartraciclinas mais típicas são 13-deoxidoxorrubicina, 13-deoxidaunorrubicina, 13-deoxiepirrubicina, 13-deoxicarminomicina, 13-deóxi-idarrubicina, 13deoxianamicina e 13-deoxiamubicina e os análogos de 5-imino dos mesmos (R5 = NH).

[046]O grupo alquila na fórmula Y acima é o mesmo descrito acima.

[047]Adicionalmente, o tratamento da presente divulgação empregando a combinação de 2-pirrolino-13-deoxiantraciclinas e 13-deoxiantraciclinas, exibe eficácia anticancerosa, antitumoral e/ou neoplásica, que são úteis para todos os tipos de terapias para o tratamento de distúrbios proliferativos celulares, tais como inflamação, psoríase, cânceres, neoplasmas ou tumores, incluindo tumores de leucemia, melanoma, fígado, mama, ovário, próstata, estômago, pâncreas, pulmão, rim, cólon e sistema nervoso central. O tratamento da presente divulgação proporciona um modo de suprimir o crescimento de cânceres, tumores, neoplasmas e células normais em mamíferos, incluindo humanos.

[048]Uma composição, combinação, mistura ou preparação típica dos constituintes de acordo com a divulgação é um composto de fórmula X, um sal

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20/37 farmaceuticamente aceitável do mesmo, forma deuterada do mesmo, pró-drogas do mesmo, isômero do mesmo e/ou solvato do mesmo combinado com um composto de fórmula Y; respectivo sal farmaceuticamente aceitável, forma deuterada do mesmo, pró-droga do mesmo, isômero do mesmo e/ou solvato do mesmo. Uma composição, combinação, mistura ou preparação mais típica é um 2-pirrolino-13deoxiantraciclina selecionada a partir do grupo que consiste em 2-pirrolino-13deoxidoxorrubicina, 2-pirroli no-13-deoxidaunorrubicina, 2-pirroli no-13deoxiepirrubicina, 2-pirrolino-13-deoxicarminomicina, e 2-pirrolino-13-deóxiidarrubicina e análogos de 5-imino dos mesmos; sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos e/ou solvato dos mesmos e um 13-deoxiantraciclina selecionada a partir do grupo que consiste em 13-deoxidoxorrubicina, 13-deoxidaunorrubicina, 13deoxiepirrubicina, 13-deóxi-idarrubicina, 13-deoxianamicina, 13-deoxicarminomicina, 13-deoxiamubicina e análogos de 5-imino dos mesmos; sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos e/ou solvato dos mesmos.

[049]Os constituintes da composição, combinação, mistura ou preparação podem ser administrados a um paciente simultaneamente, separadamente, sequencialmente ou consecutivamente. Os constituintes podem ser administrados a um paciente de qualquer modo aceitável que seja medicamente aceitável, incluindo oralmente, parentericamente, topicamente ou por implantação. A administração oral inclui a administração dos constituintes das composições, combinações, misturas ou preparações na forma de comprimidos, cápsulas, pastilhas, suspensões, soluções, emulssões, pós, xaropes e semelhantes. A via preferida de administração é parentérica.

[050]0 método e ordem reais de administração dos constituintes podem variar de acordo com a formulação farmacêutica particular da 2-pirrolino-13

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21/37 deoxiantraciclina de fórmula X e a formulação farmacêutica particular de 13deoxiantraciclina de fórmula Y sendo utilizada, o câncer particular ou distúrbio proliferativo celular a ser tratado, a gravidade do estado de doença a ser tratada e o paciente particular a ser tratado. Os intervalos de dosagem para a administração dos constituintes podem variar com a idade, estado, sexo e extensão da doença no paciente e podem ser determinados por um especialista na técnica.

[051]Uma composição farmacêutica da presente divulgação compreende um 2-pirrolino-13-deoxiantraciclina de fórmula X; sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, forma deuterada do mesmo, pró-droga do mesmo, isômero e/ou solvato do mesmo, misturados em conjunto com um 13-deóxi antraciclina de fórmula Y; sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, forma deuterada do mesmo, pró-drogas do mesmo, isômero do mesmo e/ou solvato do mesmo em um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável. Estas composições farmacêuticas da presente divulgação são úteis na terapia anticâncer e no tratamento de distúrbios proliferativos celulares.

[052]Os veículos ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis são bem conhecidos pelos especialistas na técnica de formulação de compostos na forma de composições farmacêuticas, combinações, misturas e preparações. Um veículo farmaceuticamente aceitável refere-se a um ou mais preenchedores, diluentes ou encapsulantes sólidos ou líquidos compatíveis, que sejam adequados para administração a mamíferos incluindo humanos. As composições farmacêuticas, combinações, misturas e preparações adequadas para administração parentérica são formuladas em uma forma estéril que pode ser uma solução ou suspensão estéril em um diluente ou solvente aceitável.

[053]A quantidade de um ingrediente ativo contido na composição farmacêutica pode variar bastante amplamente dependendo de muitos fatores, tais como a via de administração e o veículo. Na presente invenção, uma composição

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22/37 farmacêutica pode conter desde cerca de 0,1 a 1000 mg de uma 2-pirrolino-13deoxiantraciclina de fórmula X; sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, forma deuterada do mesmo, pró-droga do mesmo, isômero e/ou solvato do mesmo e entre cerca de 0,1 e 1000 mg de uma 13-deoxiantraciclina de fórmula Y; sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, forma deuterada do mesmo, pró-droga do mesmo, isômero do mesmo e/ou solvato do mesmo.

[054]No método da divulgação, uma 2-pirrolino-13-deoxiantraciclina de fórmula X; sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, forma deuterada do mesmo, pró-droga do mesmo, isômero do mesmo e/ou solvato do mesmo é administrado a um paciente em necessidade do mesmo em uma dose de cerca de 0,1 mg/m² de superfície corporal a cerca de 1000 mg/m² de área de superfície corporal, mais tipicamente de cerca de 10 mg/m² de área de superfície corporal a cerca de 500 mg/m² de área de superfície corporal, e mais tipicamente pela via parentérica de administração. A 13-deóxi antraciclina de fórmula Y; o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, forma deuterada do mesmo, pró-droga do mesmo, isômero do mesmo e/ou solvato do mesmo da presente divulgação é administrada a um paciente em necessidade do mesmo em uma dose de cerca de 0,1 mg/m² a cerca de 1000 mg/m², mais tipicamente de cerca de 10 mg/m² a cerca de 500 mg/m², e mais tipicamente pela via parenteral de administração. A 2-pirrolino-13deoxiantraciclina e a 13-deoxiantraciclina podem ser administradas em conjunto, em uma composição única, combinação, mistura ou preparação, ou podem ser administradas separadamente em qualquer ordem, sequencialmente em qualquer ordem, ou consecutivamente em qualquer ordem. Quando não administradas em conjunto, o segundo composto é tipicamente administrado dentro de 72 horas após a administração do primeiro composto.

[055]Os efeitos terapêuticos anticancerígenos/antiproliferativos da 2pirrolino-13-deoxiantraciclina são significativamente aumentados pela 13-deóxi

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23/37 antraciclina sem um aumento na toxicidade. Da mesma forma, os efeitos terapêuticos anticancerígenos/antiproliferativos da 13-deoxiantraciclina são significativamente aumentados pela 2-pirrolino-13-deoxiantraciclina sem um aumento na toxicidade. Esta falta de aumento na toxicidade é devido, em parte, ao sinergismo entre os dois tipos de compostos. As doses da 2-pirrolino-13deoxiantraciclina e 13-deóxi antraciclina podem ser administradas tão frequentemente quanto necessário. O método e a ordem de administração reais irão variar de acordo com a formulação, composição, combinação, mistura ou preparação particular, o câncer particular a ser tratado e o paciente particular a ser tratado.

[056]A ação antiproliferativa celular aumentada de uma combinação de uma 2-pirrolino-13-deóxi antraciclina de fórmula X com uma 13-deóxi antraciclina da fórmula Y da presente divulgação é mostrada, a titulo de exemplo, no seguinte teste biológico, que pretende ilustrar, mas não limitar, a presente invenção.

Exemplo 4 [057]Uma linhagem celular de fibrossarcoma, HT1080, foi utilizada para medir os IC50 e IC10 (a concentração inibitória de um composto necessária para inibir o crescimento celular em 10%) do Composto IV e Composto III, como descrito no Exemplo 2. Uma concentração de IC50 representa uma quantidade de composto terapêutico. Um IC10 representa uma quantidade subeficaz não terapêutica de um composto. As células foram passadas e semeadas em 5.000 células/poço em placas de 96 poços e as placas foram incubadas durante 24 horas. Após a incubação, o meio foi mudado e os IC50 e IC10 do composto IV e composto III foram medidos após 48 horas de incubação. Em seguida, mediram-se os IC50 do composto IV na presença do composto III a uma concentração de IC10 e do composto III na presença do composto IV a uma concentração de IC10 após 48 horas de incubação. Após as incubações, 20μΜ de AlamarBIue a 0,1% foi adicionado em 1xPBS para cada poço.

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As placas foram então incubadas durante um período final de 24 horas. As placas foram lidas em um leitor de microplacas com um ex/em de 485/528.

[058]Tabela 4. ICso e ICw (micromolar) do composto IV e Composto III, o ICso do composto IV na presença de um ICw do composto III e o ICso do composto III na

presença de um ICw do composto IV, em células H	T1080 .
	Composto IV	Composto III	Composto IV mais ICwde III	Composto III mais ICwde IV
ICso	12,53	63,7	1,01	1,78
ICw	0,84	5,34	-	-

[059]O composto IV é 12 vezes (12,5/1,01) mais potente na presença de uma quantidade não terapêutica do composto III e o composto III é 35 vezes (63,7/1,78) mais potente na presença de uma quantidade não terapêutica do composto IV. Esses resultados fornecem evidências claras de que os compostos IV e III são sinérgicos entre si. Este resultado é inesperado porque ambos os compostos são antraciclinas e espera-se que funcionem pelo mesmo mecanismo e, portanto, sejam apenas aditivos quando combinados. Isto é, um versado na técnica esperaria que as concentrações de ICw de um composto tivessem pouco ou nenhum efeito na potência do outro composto. Assim, a combinação de ima 2pirrolino-13-deóxi antraciclinas de fórmula X com 13-deóxi antraciclinas de fórmula Y proporciona uma composição melhorada com potência e eficácia aumentadas em relação aos compostos utilizados por eles próprios.

[060]Uma interação sinérgica ocorre quando o efeito farmacológico da administração da combinação de duas drogas é maior do que os efeitos aditivos das duas drogas administradas separadamente. Por exemplo, suponha que a dose de um primeiro medicamento para produzir uma resposta de 30% seja de 100 unidades e a dose de um segundo medicamento para produzir uma resposta de 30% seja de 10 unidades. Se 100 unidades da primeira droga mais 10 unidades da segunda

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25/37 droga produzem uma resposta de 60%, então há um efeito aditivo entre as duas drogas. Contudo, se 100 unidades da primeira droga mais 10 unidades da segunda droga produzem uma resposta de 90%, então há um efeito sinérgico ou supraaditivo entre as duas drogas. Se os compostos interagissem de um modo aditivo, esperaria-se que o IC50 do composto IV diminuísse de 12,53 micromolares para 10 micromolares na presença do composto III a uma concentração de IC10. No entanto, o IC50 do composto IV diminuiu para 1 micromolar. Similarmente, espera-se que o IC50 do composto III diminua de 63,37 micromolares para 50 micromolares na presença do composto IV a uma concentração de IC10. No entanto, o IC50 do composto III diminuiu para 1,78 micromolar. Assim, as 2-pirrolino-13-deóxi antraciclinas de fórmula X e 13-deoxiantraciclinas de fórmula Y da presente divulgação atuam de um modo melhorado ou sinérgicamente entre si para produzir composições, combinações, misturas ou preparações altamente potentes e eficazes para suprimir a crescimento de células cancerosas.

[061 ]De acordo com a presente divulgação, os compostos da presente divulgação podem ser utilizados sozinhos ou em associação apropriada, e também podem ser utilizados em combinação com veículos farmaceuticamente aceitáveis e outros compostos farmaceuticamente ativos. O agente ativo pode estar presente na composição farmacêutica em qualquer quantidade adequada.

[062]Os veículos farmaceuticamente aceitáveis aqui descritos, por exemplo, veículos, adjuvantes, excipientes ou diluentes, são bem conhecidos dos especialistas na técnica. Tipicamente, o veículo farmaceuticamente aceitável é quimicamente inerte aos compostos ativos e não têm efeitos secundários prejudiciais ou toxicidade nas condições de uso. Os veículos farmaceuticamente aceitáveis podem incluir polímeros e matrizes poliméricas.

[063]A escolha do veículo será determinada em parte pelo método particular usado para administrar a composição. Por conseguinte, existe uma grande

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26/37 variedade de formulações adequadas da composição farmacêutica da presente invenção. As seguintes formulações para administração oral, por aerossol, parentérica, subcutânea, intravenosa, intra-arterial, intramuscular, intraperitoneal, intratecal, retal e vaginal são meramente exemplares e não são de modo algum limitativas.

[064]As formulações adequadas para administração oral podem consistir em (a) soluções líquidas, tal como uma quantidade eficaz do composto dissolvido em diluentes, tal como água, solução salina ou sumo de laranja; (b) cápsulas, sachês, comprimidos, pastilhas e trociscos, cada um contendo uma quantidade predeterminada do ingrediente ativo, como sólidos ou grânulos; c) pós; (d) suspensões em um líquido apropriado; e (e) emulsões adequadas. As formulações líquidas podem incluir diluentes, tais como água, ciclodextrina, dimetilsulfóxido e álcoois, por exemplo, etanol, álcool benzílico, propilenoglicol, glicerina e os álcoois de polietileno incluindo polietilenoglicol, com ou sem a adição de um surfactante farmaceuticamente aceitável, agente de suspensão ou agente emulsionante. As formas de cápsula podem ser do tipo comum de gelatina dura ou mole contendo, por exemplo, surfactantes, lubrificantes e preenchedores inertes, tais como lactose, sacarose, fosfato de cálcio e amido de milho. As formas de comprimidos podem incluir um ou mais dos seguintes: lactose, sacarose, manitol, amido de milho, amido de batata, ácido algínico, celulose microcristalina, acácia, gelatina, goma guar, dióxido de silício coloidal, croscarmelose de sódio, talco, estearato de magnésio, estearato de cálcio, estearato de zinco, ácido esteárico e outros excipientes, corantes, diluentes, agentes tamponantes, agentes desintegrantes, agentes umectantes, conservantes, agentes aromatizantes e veículos farmacologicamente compatíveis. As formas de losango podem compreender o ingrediente ativo em um sabor, geralmente sacarose e goma-arábica ou tragacanto, assim como pastilhas que compreendem o ingrediente ativo em uma base inerte, como gelatina e

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27/37 glicerina, ou sacarose e acácia, emulsões e géis contendo a adição ao ingrediente ativo em uma base inerte, tal como gelatina e glicerina, ou sacarose e acádia, emulsões e geles contendo, além do ingrediente ativo, veículos conhecidos na técnica.

[065]Os compostos sozinhos ou em combinação com outros componentes adequados, podem ser feitos em formulações de aerossol para serem administrados por inalação. Estas formulações de aerossol podem ser colocadas em propulsores aceitáveis sob pressão, tais como diclorodifluorometano, propano e nitrogênio. Também podem ser formulados como drogas para preparações não pressurizadas, tais como num nebulizador ou um atomizador.

[066]As formulações adequadas para administração parentérica incluem soluções para injeção estéreis isotônica aquosas e não aquosas, que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos que tornam a formulação isotônica com o sangue do receptor pretendido e suspensões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão, solubilizantes, espessantes, estabilizantes e conservantes. O composto pode ser administrado em um diluente fisiologicamente aceitável em um veículo farmacêutico, tal como um líquido estéril ou mistura de líquidos, incluindo água, solução salina, dextrose aquosa e soluções de açúcar relacionadas, um álcool, tal como etanol, isopropanol ou álcool hexadecílico, glicóis, tais como propilenoglicol ou polietilenoglicol tais como poli (etilenoglicol) 400, glicerol cetais, tais como 2,2-dimetil-1,3-dioxolano-4-metanol, éteres, um óleo, um ácido graxo, um ácido graxo éster ou glicerídeo, ou um glicerídeo de ácido graxo acetilado com ou sem a adição de um surfactante farmaceuticamente aceitável, tal como um sabão ou um detergente, agente de suspensão, tal como pectina, carbômeros, metilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose ou carboximetilcelulose, ou agentes emulsionantes e outros adjuvantes farmacêuticos.

[067]Os óleos, que podem ser utilizados em formulações progenitoras,

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28/37 incluem petróleo, óleos animais, vegetais ou sintéticos. Exemplos específicos de óleos incluem amendoim, soja, gergelim, semente de algodão, milho, azeitona, petrolato e mineral. Ácidos graxos adequados para uso em formulações parentéricas incluem ácido oleico, ácido esteárico e ácido isoestárico. O oleato de etila e o miristato de isopropila são exemplos de ésteres de ácidos graxos adequados. Sabões adequados para uso em formulações parentéricas incluem sais de metal alcalino graxo, amônio e trietanolamina, e detergentes adequados incluem (a) detergentes catiônicos tais como, por exemplo, halogenetos de dimetildialquilamônio e haletos de alquilpiridínio, (b) detergentes aniônicos tais como, por exemplo, sulfonatos de alquila, arila e olefina, sulfatos de alquila, olefina, éter e monoglicerídeo, e sulfossuccinatos, (c) detergentes não aniônicos tais como, por exemplo, ácidos de amina graxa, alcanolamidas de ácido graxo e copolímeros de polipropileno de polioxietileno, (d) detergentes anfotéricos tais como, por exemplo, alquil β-aminopropionatos, e sais de amônio quaternário de 2-alquilimidazolina e (e) misturas dos mesmos.

[068]As formulações progenitoras contêm tipicamente de cerca de 0,5% a cerca de 25% em peso do ingrediente ativo em solução. Conservantes e tampões adequados podem ser utilizados em tais formulações. De modo a minimizar ou eliminar a irritação no local da injeção, tais composições podem conter um ou mais surfactantes não iônicos tendo um equilíbrio hidrófilo-lipófilo (HLB) de cerca de 12 a cerca de 17. A quantidade de surfactante em tais formulações varia de cerca de 5% a cerca de 15% em peso. Surfactantes adequados incluem ésteres de ácidos graxos de polietileno sorbitano, tais como monooleato de sorbitano e os adutos de elevado peso molecular de óxido de etileno com uma base hidrofóbica, formados pela condensação de óxido de propileno com propilenoglicol.

[069]Excipientes farmaceuticamente aceitáveis são também bem conhecidos daqueles que são versados na técnica. A escolha do excipiente será determinada

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29/37 em parte pelo composto particular, bem como pelo método particular usado para administrar a composição. Por conseguinte, existe uma grande variedade de formulações adequadas da composição farmacêutica da presente divulgação. Os seguintes métodos e excipientes são meramente exemplares e não são de forma alguma limitativos. Os excipientes farmaceuticamente aceitáveis preferivelmente não interferem com a ação dos ingredientes ativos e não causam efeitos secundários adversos. Veículos e excipientes adequados incluem solventes tais como água, álcool e propilenoglicol, absorventes sólidos e diluentes, agentes surfactantes, agentes de suspensão, aglutinantes de comprimidos, lubrificantes, aromatizantes e agentes corantes.

[070]As formulações podem ser apresentadas em recipientes unidos de dose unitária ou multidose, tais como ampolas e frascos, e podem ser armazenadas em uma condição seca por congelamento (liofilizada) requerendo apenas a adição do excipiente líquido estéril, por exemplo, água, para injeções, imediatamente antes do uso. Soluções e suspensões para injeção extemporânea podem ser preparadas de pós, grânulos e comprimidos estéreis. Os requisitos para veículos farmacêuticos eficazes para composições injetáveis são bem conhecidos dos especialistas na técnica. Vide Pharmaceutics and Pharmacy Practice, J.B. Lippincott Co., Philadelphia, PA, Banker e Chalmers, Eds., 238-250 (1982) e ASHP Handbook on Injectable Drugs, Toissel, 4^Q ed., 622-630 (1986).

[071 ]As formulações adequadas para administração tópica incluem pastilhas compreendendo o ingrediente ativo em um aroma, normalmente sacarose e acácia ou tragacanto; pastilhas compreendendo o ingrediente ativo em uma base inerte, tal como gelatina e glicerina, ou sacarose e acácia; e enxaguatórios compreendendo o ingrediente ativo em um veículo líquido adequado; bem como cremes, emulsões e geles contendo, em adição ao ingrediente ativo, veículos conhecidos na técnica.

[072]Adicionalmente, as formulações adequadas para administração retal

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30/37 podem ser apresentadas como supositórios misturando com uma variedade de bases, tais como bases emulsionantes ou bases solúveis em água. As formulações adequadas para administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, geles, pastas, espumas ou fórmulas para pulverização contendo, em adição ao ingrediente ativo, veículos conhecidos na técnica como sendo apropriados.

[073]Um versado na técnica apreciará que estão disponíveis métodos adequados de administrar exogenamente um composto da presente divulgação a um animal e, embora possa ser utilizado mais do que uma via para administrar um composto particular, uma via particular pode proporcionar uma reação mais mais imediata e mais eficaz do que outra via.

[074]Modalidades exemplares da presente divulgação incluem:

[075]Modalidade A. A compound representado pela fórmula:

em que:

cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é O ou NH; e

R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina;

sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos e misturas dos mesmos.

[076]Modalidade B. O composto da modalidade A, em que o referido

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31/37 composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo consistindo em 2-pirrolino-13-deoxidioxorubicina, 2-pirrolino-13-deoxidaunorrubicina, 2-pirrolino-13-deoxiepirrubicina, 2-pirrolino-13-deoxicarminomicina, e 2-pirrolino-13deóxi-idarrubicina e análogos de 5-imino dos mesmos.

[077]Modalidade C. Uma composição farmacêutica compreendendo o composto da modalidade A ou B e um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[078]Modalidade D. Um método para suprimir o crescimento de células, compreendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto compreendendo: uma 2pirrolino-13-deóxi antraciclina, tendo a fórmula:

em que:

cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é O ou NH; e

R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina, sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos e misturas dos mesmos.

[079]Modalidade E. O método da modalidade D, em que o referido composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo consistindo em 2Petição 870190079951, de 16/08/2019, pág. 39/84

32/37 pirroli no-13-deoxidoxorrubicina, 2-pi rrolino-13-deoxidaunorrubicina, 2-pirroli no-13deoxiepirrubicina, 2-pirrolino-13-deoxicarminomicina, e 2-pirrolino-13-deóxiidarrubicina e análogos de 5-imino dos mesmos.

[080]Modalidade F. Uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma preparação combinada sinérgica compreendendo um primeiro composto e um segundo composto, em que: o primeiro composto é uma 2-pirrolino-13deoxiantraciclina, tendo a fórmula:

em que:

cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é O ou NH; e

R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina; sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos, e misturas dos mesmos; e o segundo composto é uma 13-deoxiantraciclina tendo a fórmula:

em que

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33/37 cada um de R1, R2 e R3 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em H e OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em O e NH; e

R6 é uma porção de açúcar; sal farmaceuticamente aceitável do memo, forma deuterada do memo, pró-droga do memo, isômero do memo, solvato do memo, e misturas do mesmo; e em que a referida quantidade terapeuticamente eficaz suprime o crescimento de células.

[081]Modalidade G. A preparação combinada sinérgica da modalidade F, em que o referido primeiro composto é um derivado de uma antraciclina selecionado a partir do grupo consistindo em 2-pirrolino-13-deoxidoxorrubicina, 2-pirrolino-13deoxidaunorrubicina, 2-pi rrolino-13-deoxiepirubicina, 2-pirroli no-13deoxicarminomicina, e 2-pirrolino-13-deóxi-idarrubicina e os análogos de 5-imino dos mesmos e o referido segundo composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo que consiste em 13-deoxidoxorrubicina, 13deoxidaunorrubicina, 13-deoxiepirubicina, 13-deoxicarminomicina, 13-deóxiidarrubicina, 13-deoxianamicina e 13-deoxiamubicina e análogos de 5-imino dos mesmos.

[082]Modalidade H. Uma composição farmacêutica compreendendo a preparação combinada sinérgica da Modalidade F ou G e um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável.

[083]Modalidade I. Um método para suprimir o crescimento de células com uma preparação combinada sinérgica de um primeiro composto e um segundo composto, compreendendo administrar a um mamífero em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz da referida preparação combinada sinérgica, sendo o referido primeiro composto uma 2-pirrolino-13-deoxiantraciclina

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34/37 tendo a fórmula:

em que:

cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é O ou NH; e

R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina; sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, formas deuteradas dos mesmos, pródroga dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos e misturas dos mesmos; e o referido segundo composto sendo uma 13-deoxiantraciclina tendo a fórmula:

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em O e NH; e

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35/37

R6 é uma porção de açúcar; sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, forma deuterada do mesmo, pró-droga do mesmo, isômero do mesmo, solvato do mesmo, e misturas do mesmo; e em que a referida quantidade terapeuticamente eficaz suprime o crescimento de células.

[084]Modalidade J. O método da modalidade I, em que o referido primeiro composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo consistindo em 2-pirrolino-13-deoxidoxorrubicina, 2-pirrolino-13-deoxidaunorrubicina, 2-pirrolino-13-deoxiepirrubicina, 2-pirrolino-13-deoxicarminomicina, e 2-pirrolino-13deóxi-idarrubicina e os análogos de 5-imino dos mesmos e o segundo composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo consistindo em 13deoxidoxorrubicina, 13-deoxidaunorrubicina, 13-deoxiepirrubicina, 13deoxicarminomicina, 13-deóxi-idarrubicina, 13-deoxianamicina e 13-deoxiamubicina e análogos de 5-imino dos mesmos.

[085]Modalidade K. A preparação combinada sinérgica da modalidade F ou G em que o referido segundo composto está presente em uma quantidade que é inferior à sua quantidade terapeuticamente eficaz.

[086]Modalidades L. A preparação combinada sinérgica da modalidades K, em que a razão em peso do segundo composto para o primeiro componente é de cerca de 0,005 a cerca de 0,10:1.

[087]Modalidade Μ. A preparação combinada sinérgica da modalidade K, em que a razão em peso do segundo composto para o primeiro componente é de cerca de 0,01 a cerca de 0,10:1.

[088]Modalidade N. A preparação combinada sinérgica da modalidade F ou G em que o referido primeiro composto está presente em uma quantidade que inferior sua quantidade terapeuticamente eficaz.

[089]Modalidade O. A preparação combinada sinérgica da modalidade N, em

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36/37 que a razão em peso do primeiro composto para o segundo componente de cerca de 0,005 a cerca de 0,10:1.

[090]Modalidade P. A preparação combinada sinérgica da modalidade N, em que a razão em peso do primeiro composto para o segundo componente de cerca de 0,01 a cerca de 0,10:1.

[091]Modalidade Q. O método da modalidade I ou J em que o referido segundo composto é administrado em uma quantidade que é inferior à sua quantidade terapeuticamente eficaz.

[092]Modalidade R. O método da modalidade Q, em que a razão em peso do segundo composto para o primeiro componente é de cerca de 0,005 a cerca de 0,10:1.

[093]Modalidade S. O método da modalidade Q, em que a razão em peso do segundo composto para o primeiro componente de cerca de 0,01 a cerca de 0,10:1.

[094]Modalidade T. O método da modalidade I ou J em que o referido segundo composto é administrado em uma quantidade que é menor do que a sua quantidade terapeuticamente eficaz.

[095]Modalidade U. O método da modalidade T, em que a razão em peso do primeiro composto para o segundo componente de cerca de 0,005 a cerca de 0,10:1.

[096]Modalidade V. O método da modalidade Q, em que a razão em peso do primeiro composto para o segundo componente de cerca de 0,01 a cerca de 0,10:1.

[097]O termo “compreendendo” (e suas variações gramaticais) como usado aqui é usado no sentido inclusivo de “ter” ou “incluir” e não no sentido exclusivo de “consistir apenas em”. Os termos “um”, “uma”, “o” e “um” tal como aqui utilizados são entendidos como abrangendo tanto o plural como o singular, salvo indicação em contrário.

[098]A descrição anterior ilustra e descreve a divulgação. Adicionalmente, a

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37/37 divulgação mostra e descreve apenas as modalidades preferidas, mas, como mencionado acima, deve ser entendido que as modalidades preferidas são capazes de serem formadas em várias outras combinações, modificações e ambientes e são capazes de alterações ou modificações dentro do escopo dos conceitos da invenção como aqui expressos, proporcionais aos ensinamentos acima e/ou à habilidade ou conhecimento da técnica relevante. As modalidades aqui descritas acima têm ainda a intenção de explicar os melhores modos conhecidos pelo requerente e para permitir que outras pessoas especializadas na técnica utilizem a divulgação em tais, ou em outras modalidades e com as várias modificações requeridas pelas aplicações ou usos particulares das mesmas. Consequentemente, a descrição não se destina a limitar a invenção à forma aqui divulgada. Além disso, pretende-se que as reivindicações anexas sejam construídas para incluir modalidades alternativas.

[099]Todas as publicações e pedidos de patentes citados nesta especificação são aqui incorporados por referência, e para todo e qualquer fim, como se cada publicação ou pedido de patente individual fosse especificamente e indiviualmente indicado para ser incorporado por referência. No caso de uma inconsistência entre a presente divulgação e qualquer publicação ou pedido de patente aqui incorporado por referência, a presente divulgação controla.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composto representado pela fórmula:

CARACTERIZADO pelo fato de que:

cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é O ou NH; e

R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina; um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-drogas dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos e mistura dos mesmos.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo que consiste em 2-pirrolino-13-deoxidoxorrubicina, 2-pirrolino-13deoxidaunorrubicina, 2-pirroli no-13-deoxiepirrubicina, 2-pi rrolino-13deoxicarminomicina e 2-pirrolino-13-deóxi-idarrubicina e análogos de 5-imino dos mesmos.
3. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende o composto definido na reivindicação 1 e um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável.
4. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende o composto definido na reivindicação 2 e um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável.
5. Método para suprimir o crescimento de células, CARACTERIZADO pelo

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2/7 fato de que compreende administrar a um mamífero em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto compreendendo:

uma 2-pirrolino-13-deóxi antraciclina, ou seus sais ou pró-drogas farmaceuticamente aceitáveis, a referida 2-pirrolino-13-deóxi antraciclina tendo a fórmula:

em que:

cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é O ou NH; e

R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina;

sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos e mistura dos mesmos.
6. Método de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo que consiste em 2-pirrolino-13-deoxidoxorrubicina, 2-pirrolino-13deoxidaunorrubicina, 2-pirroli no-13-deoxiepirrubicina, 2-pi rrolina-13deoxicarminomicina e 2-pirrolino-13-deóxi-idarrubicina e análogos de 5-imino dos mesmos.
7. Quantidade terapeuticamente eficaz de uma preparação combinada sinérgica compreendendo um primeiro composto e um segundo composto, CARACTERIZADA pelo fato de que: o primeiro composto é uma 2-pirrolino-13deoxiantraciclina tendo a fórmula:

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3/7

em que:

cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é O ou NH; e

R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina; sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos, e mistura dos mesmos e o segundo composto é uma 13-deoxiantraciclina tendo a fórmula:

em que cada um de R1, R2 e R3 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em H e OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em O e NH; e

R6 é uma porção de açúcar; sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, forma deuterada do mesmo, pró-droga do mesmo, isômero do mesmo, solvato do mesmo, e mistura do mesmo e

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4/7 em que a referida quantidade terapeuticamente eficaz suprime o crescimento de células.
8. Preparação combinada sinérgica de acordo com a reivindicação 7,

CARACTERIZADA pelo fato de que o referido primeiro composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo que consiste em 2-pirrolino-13deoxidoxorrubicina, 2-pirroli no-13-deoxidaunorrubicina, 2-pirroli no-13deoxiepirrubicina, 2-pirrolino-13-deoxicarminomicina e 2-pirrolino-13-deóxiidarrubicina; sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-drogas dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos e misturas dos mesmos e os análogos de 5-imino dos mesmos e o referido segundo composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo consistindo em 13-deoxidoxorrubicina, 13-deoxiaunorrubicina, 13-deoxiepirrubicina, 13deoxicarminomicina, 13-deóxi-idarrubicina, 13-deoxianamicina e 13-deoxirrubicina e análogos de 5-imino dos mesmos; sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos, e misturas dos mesmos.
9. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende a preparação combinada sinérgica definida na reivindicação 7 e um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável.
10. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de que compreende a preparação combinada sinérgica definida na reivindicação 8 e um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitável.
11. Método para suprimir o crescimento de células com uma preparação combinada sinérgica de um primeiro composto e um segundo composto, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende administrar a um mamífero em necessidade do mesmo uma quantidade terapeuticamente eficaz da referida preparação combinada sinérgica, sendo o referido primeiro composto uma 2

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5/7 pirrolino-13-deoxiantraciclina tendo a fórmula:

em que:

cada R1, R2 e R3 é individualmente H ou OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é O ou NH; e

R6 é 2-pirrolino-daunosamina ou 2-pirrolino-epidaunosamina; sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos, e mistura dos mesmos, e o referido segundo composto sendo uma 13-deoxiantraciclina tendo a fórmula:

em que cada um de R1, R2 e R3 é independentemente selecionado a partir do grupo consistindo em H e OH;

R4 é selecionado a partir do grupo consistindo em H, OH, alquila e O-alquila;

R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em O e NH; e

R6 é uma porção de açúcar; sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, forma deuterada do mesmo, pró-droga do mesmo, isômero do mesmo, solvato do

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6/7 mesmo, e mistura do mesmo e em que a referida quantidade terapeuticamente eficaz suprime o crescimento de células.
12. Método de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido primeiro composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo que consiste em 2-pirrolino-13-deoxidoxorrubicina, 2-pirrolino-13deoxidaunorrubicina, 2-pirroli no-13-deoxiepirrubicina, 2-pi rrolino-13deoxicarminomicina, e 2-pirrolino-13-deóxi-idarrubicina e os análogos de 5-imino dos mesmos; sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos e misturas dos mesmos e o segundo composto é um derivado de uma antraciclina selecionada a partir do grupo que consiste em 13-deoxidoxorrubicina, 13deoxidaunorrubicina, 13-deoxiepirrubicina, 13 -deoxicarminomicina, 13-deóxiidarrubicina, 13-deoxianamicina e 13-deoxirrubicina e análogos de 5-imino dos mesmos; sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos, forma deuterada dos mesmos, pró-droga dos mesmos, isômero dos mesmos, solvato dos mesmos e misturas dos mesmos.
13. Preparação combinada sinérgica definida na reivindicação 7, CARACTERIZADA pelo fato de que o referido segundo composto está presente em uma quantidade que é inferior à sua quantidade terapeuticamente eficaz.
14. Preparação combinada sinérgica de acordo com a reivindicação 13, CARACTERIZADA pelo fato de que a razão em peso do segundo composto para o primeiro componente é de cerca de 0,005 a cerca de 0,10:1.
15. Preparação combinada sinérgica definida na reivindicação 7, CARACTERIZADA pelo fato de que o referido primeiro composto está presente em uma quantidade que é inferior à sua quantidade terapeuticamente eficaz.
16. Preparação combinada sinérgica de acordo com a reivindicação 15,

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7/7

CARACTERIZADA pelo fato de que a razão em peso do primeiro composto para o segundo componente é de cerca de 0,005 a cerca de 0,10:1.
17. Método de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido segundo composto é administrado em uma quantidade que é menor do que a sua quantidade terapeuticamente eficaz.
18. Método de acordo com a reivindicação 17, CARACTERIZADO pelo fato de que a razão em peso do segundo composto para o primeiro componente é de cerca de 0,005 a cerca de 0,10:1.
19. Método de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que o referido segundo composto é administrado em uma quantidade que é menor do que a sua quantidade terapeuticamente eficaz.
20. Método de acordo com a reivindicação 19, CARACTERIZADO pelo fato de que a razão em peso do primeiro composto para o segundo componente é de cerca de 0,005 a cerca de 0,10:1.