BR112017019845B1

BR112017019845B1 - Novas composições antivirais para o tratamento da gripe

Info

Publication number: BR112017019845B1
Application number: BR112017019845-2A
Authority: BR
Inventors: Manuel Rosa-Calatrava; Olivier Terrier; Julien Textoris; Guy Boivin; Mario PIZZORNO
Original assignee: Universite Claude Bernard Lyon 1; Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm); Hospices Civils De Lyon; Universite Laval
Priority date: 2015-03-19
Filing date: 2016-03-18
Publication date: 2023-03-21
Also published as: CA2979784C; WO2016146836A3; IL254548A0; KR102646962B1; FR3033701A1; KR20180006370A; JP6884112B2; EP3270968C0; JP2018508587A; IL254548B; CN107743402A; WO2016146836A2; BR112017019845A2; HK1249430A1; CA2979784A1; US20180042937A1; US11351180B2; CN113876781A; FR3033701B1; EP3270968A2

Abstract

NOVAS COMPOSIÇÕES ANTIVIRAIS PARA O TRATAMENTO DA GRIPE. A presente invenção se refere a uma composição farmacêutica ou veterinária para a sua utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção pelos vírus influenza. Tal composição é caracterizada por conter, em um veículo farmacêutico apropriado, pelo menos um composto selecionado dentre Etilefrina e Diltiazem.

Description

[001] A invenção se refere a composições para uso no tratamento de infecções virais relacionadas a vírus da gripe, em seres humanos e animais.

[002] Os vírus responsáveis pela gripe são os vírus influenza, que são divididos em três tipos: A, B e C. Localizados na superfície dos vírus estão duas glicoproteínas que desempenham um papel importante na infecção de células do organismo infectado: hemaglutinina (HA) e neuraminidase (NA). Existem vários subtipos de vírus da influenza A de acordo com a natureza das glicoproteínas HA e NA na sua superfície: 16 tipos de HA e 9 tipos de NA foram identificados em vírus que circulam no mundo animal, principalmente entre aves marinhas migratórias. Os vírus influenza podem assim ser definidos pelo tipo de proteína na sua superfície.

[003] Nos seres humanos, os vírus que circulam durante várias décadas são subtipos H1N1, H2N2 e H3N2, com transmissão ocasional entre espécies, principalmente de animal para homem, de vírus aviários H5N1, H7N7, H7N9, H5N2 e H9N2. Conforme demonstrado pelo recente surgimento de um novo vírus pandêmico da gripe H1N1 de origem porcina, aviária e humana (vírus recombinante porcino, aviário e humano), os vírus influenza A são uma séria ameaça para a saúde pública. As pandemias de gripe são o resultado, particularmente, de mudanças antigênicas correspondentes ao aparecimento de vírus com novas glicoproteínas de superfície (HA e NA) na população humana. Estas mudanças permitem a transmissão direta em seres humanos de vírus animais, principalmente vírus aviários, o que é o caso de epidemias de H5N1 aviário altamente patogênico desde 2003 na Ásia, ou das epidemias de gripe H7N7 na Holanda em 2003 e de H7N9 no Sudeste Asiático em 2013. As alterações antigênicos são o resultado do rearranjo genético entre vírus aviários, porcinos e humanos, com porcos desempenhando o papel intermediário do hospedeiro, por exemplo. Este rearranjo genético foi particularmente a fonte da pandemia de gripe H1N1 em 2009. Além disso, as epidemias de gripe sazonal, que são particularmente o resultado do desvio genética (aparência de mutações nas glicoproteínas de superfície) são uma das principais causas do aumento da morbidade e mortalidade, principalmente na população humana, especialmente nos jovens, idosos, imunossuprimidos e aqueles com doença cardiopulmonar.

[004] A vacinação continua a ser o pilar da prevenção da gripe. No entanto, quando um novo vírus aparece, um período de 6 a 9 meses é necessário para se desenvolver e entregar uma nova vacina, e o uso de medicamentos antivirais deve ser considerado para tratamento e/ou prevenção. Os antivirais comuns são inibidores do canal M2, como inibidores de amantadina e neuraminidase, como zanamivir e oseltamivir.

[005] O uso destas drogas é limitado pela aparência recorrente de resistência, particularmente observada para o vírus pandêmico H1N1. Além disso, não é impossível que novos vírus emergentes já sejam resistentes a essas moléculas. Finalmente, a maioria dessas moléculas não pode ser administrada sistematicamente, o que representa um problema no caso de infecções graves.

[006] Parece, portanto, necessário desenvolver ou identificar novos compostos antivirais que sejam mais efetivos e que tenham um amplo espectro de ação. Uma solução para o desenvolvimento de novas moléculas terapêuticas de amplo espectro é identificar moléculas com ação nas vias celulares e fatores que os vírus visam realizar seu ciclo de replicação. Esta estratégia, apresentada no artigo de Josset et al. (PLoS One, 2010), permitiu identificar uma primeira série de moléculas com atividade antiviral inesperada, como as moléculas apresentadas no pedido de patente FR 2 953 410.

[007] No contexto da presente invenção, várias moléculas foram selecionadas e avaliadas em um teste celular de infecção viral e em um modelo murino in vivo. Determinadas moléculas tiveram um efeito antiviral não apenas em uma cepa influenza A do subtipo H1N1, mas também em uma cepa do subtipo H3N2. Os compostos selecionados foram descritos inicialmente como ingredientes ativos no tratamento de patologias bastante diferentes das infecções virais. Inesperadamente, agora foi demonstrado que certos desses compostos possuem atividade antiviral, em particular contra vários subtipos do vírus influenza A.

SUMARIO DA INVENÇÃO

[008] A invenção se refere a composições farmacêuticas ou veterinárias para uso na prevenção e/ou tratamento de infecções por vírus influenza, compreendendo pelo menos um composto selecionado de etilefrina e diltiazem.

[009] Estas composições farmacêuticas ou veterinárias podem vantajosamente compreender adicionalmente pelo menos um outro agente antiviral e/ou agente antibacteriano. Estas composições podem estar na forma de produtos de combinação para uso simultâneo, separado ou sequencial em terapia humana ou veterinária, em particular na prevenção e/ou tratamento de infecções com vírus influenza.

[0010] A invenção também se refere a composições farmacêuticas ou veterinárias que compreendem pelo menos um agente antiviral em combinação com pelo menos um composto selecionado de diltiazem e etilefrina, ou uma combinação de ambos.

[0011] De acordo com um aspecto preferido da invenção, estas composições farmacêuticas ou veterinárias estão em uma forma de dosagem particular destinada a administração por inalação.

[0012] A invenção também se refere a composições farmacêuticas ou veterinárias compreendendo, em um veículo farmacêutico adequado, uma combinação de diltiazem e etilefrina.

FIGURAS

[0013] FIG. 1. (A) protocolo experimental; Avaliação in vitro do efeito antiviral de compostos conhecidos por sua atividade antiviral (1B: ribavirina, monensina) e os compostos lanatosídeo C (1C) e diltiazem e etilefrina (1D) em células A549 infectadas com vírus H1N1 pdm09. A linha sólida representa a produção normalizada de vírus (porcentagem) como função da concentração dos compostos (μM). A linha pontilhada representa a viabilidade celular normalizada (porcentagem) como função da concentração dos compostos (μM).

[0014] FIG. 2. Avaliação in vitro do efeito antiviral da etilefrina em células A549 infectadas com o vírus H3N2. A linha contínua (pontos redondos) representa a produção normalizada de vírus (porcentagem) em função da concentração de etilefrina (μM). A linha pontilhada (pontos quadrados) representa a viabilidade celular normalizada (porcentagem) em função da concentração de etilefrina (μM).

[0015] FIG. 3. Avaliação in vitro do efeito antiviral da etilefrina (A) e do diltiazem (B), em combinação com o oseltamivir, nas células A549 infectadas com o vírus H1N1 p1m1. O gráfico representa a produção normalizada de vírus (porcentagem) para cada condição.

[0016] FIG. 4. Avaliação in vivo da toxicidade das seguintes moléculas: oseltamivir, monensina, diltiazem, etilefrina e isoxicam. O controle de "salina" indica o peso de camundongos tratados com PBS. A curva representa a mudança de peso (ganho/perda de peso expressa em porcentagem) dos vários grupos de camundongos ao longo do tempo.

[0017] FIG. 5. Avaliação in vivo do efeito antiviral dos compostos oseltamivir, monensina, diltiazem, etilefrina e isoxicam, administrados antes da infecção por H1N1 dos camundongos: (A) protocolo experimental; (B) Taxa de sobrevivência ao longo do tempo, até 14 dias após a infecção; (C) Perda de peso observada ao longo do tempo; (D) Título do vírus medido nos pulmões de camundongos infectados aos 5 dias após a infecção.

[0018] FIG. 6. Avaliação in vivo do efeito antiviral dos compostos oseltamivir e diltiazem, administrados 24 horas após a infecção por H1N1 dos camundongos. Protocolo experimental (A); Taxa de sobrevivência ao longo do tempo, após o tratamento in vivo com PBS sozinho "Salina" (B), Oseltamivir (C) e Diltiazem (D) administrados 24 horas após a infecção por H1N1 dos camundongos.

[0019] FIG. 7. Avaliação in vitro do efeito antiviral do diltiazem em combinação com outros agentes antivirais em células A549 infectadas com vírus H1N1 pdm09. (A) Protocolo de tratamento de células pós-infecção; (B) Resultados obtidos para a combinação de diltiazem e oseltamivir, (C) Resultados obtidos para a combinação de diltiazem e monensina.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0020] A presente invenção se refere a uma composição farmacêutica ou veterinária para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza, caracterizada por compreender, em um veículo farmacêutico adequado, pelo menos um composto selecionado de etilefrina, diltiazem e seus derivados.

[0021] Estes compostos são conhecidos para utilização em outras aplicações terapêuticas não relacionadas com a atividade antiviral contra vírus influenza em seres humanos ou animais. Agora é demonstrado que estes compostos, inesperadamente, têm atividade antiviral contra vários subtipos do vírus influenza A.

[0022] Diltiazem é comumente usado para tratar angina, pressão alta, isquemia miocárdica e taquicardia. Diltiazem é um poderoso vasodilatador.

[0023] Vários pedidos de patente descrevem métodos para a produção de diltiazem (EP 0728751, EP 0561861) e derivados de diltiazem (EP 0450705, EP 0355395).

[0024] Esta molécula, um membro da família de benzotiazepinas, tem a seguinte fórmula estrutural química:

[0025] Diltiazem age retardando a entrada de cálcio transmembranar na fibra do músculo miocárdico e na fibra do músculo liso vascular e, assim, diminui a concentração de cálcio intracelular atingindo as proteínas contráteis. Diltiazem reduz assim o trabalho cardíaco e retarda a taxa ventricular.

[0026] O pedido de patente WO 87/07508 descreve a utilização de compostos terapêuticos que inibem o influxo de cálcio na célula, tal como diltiazem, em combinação com outros agentes antivirais para o tratamento de infecções virais relacionadas com citomegalovírus e herpes.

[0027] O pedido de patente WO 2011/126071 descreve a utilização de compostos terapêuticos que inibem o influxo de cálcio na célula, tal como diltiazem, para o tratamento de infecções virais, particularmente as relacionadas com vírus influenza. Mais especificamente, esse pedido indica que o diltiazem pode inibir a interação entre um vírus e canais de cálcio, e assim bloquear a entrada do vírus nas células.

[0028] Pelo contrário, na presente invenção, mostra-se que o diltiazem atua de maneira geral nas células alvo, modificando fortemente a expressão gênica nestas células e, por isso, induzindo um estado celular global desfavorável à infecção viral. De fato, e como apresentado em detalhes adicionais na introdução aos exemplos, as moléculas selecionadas estão associadas aos perfis de expressão de genes celulares que são o oposto daqueles característicos de um estado infeccioso. Além disso, WO 2011/126071 propõe uma concentração de diltiazem mais de 100 vezes maior do que as concentrações propostas no presente pedido.

[0029] As quantidades de diltiazem convencionalmente utilizadas em seres humanos são de preferência entre 200 e 300 mg/dia, para um regime de dosagem típico, quando o diltiazem está em forma de comprimido.

[0030] Diltiazem está disponível em várias formas de dosagem, tais como pó para solução injectável (CN 102657621) ou preparações farmacêuticas para inalação (WO 02/094238, US 4.605.552).

[0031] No contexto da presente invenção, o termo "diltiazem" significa diltiazem em todas as suas formas, particularmente na forma de sais, e o termo "derivado de diltiazem" significa todas as moléculas derivadas da fórmula (1) apresentada acima, tendo a mesma atividade biológica, particularmente a mesma atividade antiviral, sendo a atividade antiviral obtida por um estado celular global desfavorável à infecção viral, agindo na expressão de um certo número de genes de células alvo.

[0032] A etilefrina foi descrita como um estimulante cardíaco e é comumente utilizada como agente anti-hipotensivo, principalmente no tratamento de hipotensão ortostática neurológica e cardiovascular do sistema endócrino ou de origem metabólica. O seu uso foi particularmente descrito no pedido de patente EP 0162320.

[0033] A etilefrina aumenta o débito cardíaco, o volume sistólico e o retorno venoso e aumenta a pressão venosa central e a pressão arterial, através de um efeito simpaticomimético direto nos receptores alfa-1 e beta- adrenérgicos, pela ação inotrópica positiva. Além disso, aumenta o tônus venoso e leva a um aumento no volume sanguíneo circulante.

[0034] É uma amina simpaticomimética da série de 3- hidroxi-feniletanolamina com a fórmula estrutural química:

[0035] As quantidades convencionalmente utilizadas em seres humanos são de preferência cerca de 30 mg/dia, geralmente administradas em três doses.

[0036] Etilefrina está disponível em várias formas de dosagem, tais como na forma de soluções líquidas injetáveis, soluções líquidas orais e comprimidos.

[0037] Os modos de administração por inalação também foram descritos para outros agonistas de receptores beta-adrenérgicos.

[0038] No contexto da presente invenção, o termo "etilefrina" significa a etilefrina em todas as suas formas, particularmente na forma de sais, e o termo "derivados de etilefrina" significa todas as moléculas derivadas da fórmula (2) apresentada acima, tendo a mesma atividade biológica, particularmente a mesma atividade antiviral, sendo a referida atividade antiviral obtida por um estado celular global desfavorável à infecção viral, agindo na expressão de um certo número de genes de células alvo.

[0039] De acordo com a invenção, os vírus influenza são vírus do tipo A que possuem seres humanos ou animais como hospedeiro. Os termos "vírus da gripe" e "vírus influenza" são utilizados de forma intercambiável no pedido e indicam os mesmos vírus.

[0040] A expressão "infecção por vírus influenza" deve ser entendida como uma infecção gerada pela presença de pelo menos um vírus influenza conhecido, tendo o vírus infectado o indivíduo ou o animal ou sendo capaz de infectar o indivíduo ou o animal, ao qual a composição é administrada.

[0041] De acordo com a invenção, o termo "veículo farmacêutico adequado" designa veículos ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis de acordo com a invenção, isto é, veículos ou excipientes cuja administração a um indivíduo ou a um animal não é acompanhada de efeitos deletérios significativos e que são bem conhecidos para uma pessoa versada na técnica.

[0042] Em particular, as composições da presente invenção são utilizadas para a prevenção e/ou tratamento de infecções com vírus influenza A. Vantajosamente, as composições da presente invenção têm um amplo espectro de ação contra os vários subtipos de vírus influenza A.

[0043] Em uma modalidade, as composições da presente invenção são utilizadas para a prevenção e tratamento de infecções com vírus do tipo A que circulam principalmente em seres humanos e animais.

[0044] Existem vários subtipos de vírus influenza A de acordo com a natureza das glicoproteínas HA e NA em sua superfície. De acordo com um aspecto particular, o vírus influenza é um vírus de tipo A selecionado dos subtipos H1N1, H2N2, H3N2, H5N1, H7N7, H7N9, H5N2 e H9N2.

[0045] A invenção se refere assim à prevenção e/ou tratamento de infecções com vírus influenza em humanos, isto é, a uma composição farmacêutica para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0046] A invenção também se refere à prevenção e/ou tratamento de infecções com vírus influenza em animais, em particular de pecuária, como porcos, cavalos e aves. Mais particularmente, a invenção se refere à prevenção e/ou tratamento de infecções com vírus influenza em aves, e mais particularmente em galinhas, patos, gansos e perus. A invenção também se relaciona com a prevenção e tratamento de infecções com vírus influenza em outros animais, como, por exemplo, cavalos, gatos, cachorros e felinos. De acordo com este aspecto, a invenção se refere assim a uma composição veterinária para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0047] As composições de acordo com a invenção são, em particular, destinadas a serem utilizadas na prevenção da infecção por vírus influenza.

[0048] O termo "prevenção" se refere ao fato de prevenir, ou pelo menos diminuir, a probabilidade de aparecimento de uma infecção em um organismo humano ou animal por pelo menos um vírus influenza. Ao administrar pelo menos uma composição de acordo com a invenção, as células humanas ou animais do organismo tornam-se mais resistentes e são menos propensas a serem infectadas pelo vírus.

[0049] As composições de acordo com a invenção também podem ser destinadas ao uso no tratamento da infecção por vírus influenza.

[0050] O termo "tratamento" se refere ao fato de combater a infecção com pelo menos um vírus influenza em um organismo humano ou animal. Ao administrar pelo menos uma composição de acordo com a invenção, o nível de infecção viral no organismo diminuirá gradualmente e desaparecerá completamente. O termo "tratamento" também se refere ao fato de aliviar os sintomas associados à infecção viral (febre, fadiga, etc.).

[0051] De acordo com um primeiro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende uma quantidade eficaz de diltiazem ou um seu derivado, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0052] De acordo com um segundo aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende uma quantidade eficaz de etilefrina ou um seu derivado, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0053] De acordo com um terceiro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende uma combinação de diltiazem e etilefrina ou seus derivados, para uso na prevenção e/ou tratamento de infecção com um ou mais vírus influenza.

[0054] Esta combinação compreende a mesma quantidade de cada composto (composição a 50/50 em peso) ou quantidades desiguais de cada composto, tais como 90% de diltiazem e 10% de etilefrina, 80% de diltiazem e 20% de etilefrina, 70% de diltiazem e 30% de etilefrina, 60% de diltiazem e 40% de etilefrina, 40% de diltiazem e 60% de etilefrina, 30% de diltiazem e 70% de etilefrina, 20% de diltiazem e 80% de etilefrina, ou mesmo 10% de diltiazem e 90% de etilefrina.

[0055] De acordo com um aspecto particular da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária para utilização como descrito acima é caracterizada por compreender adicionalmente outro agente antiviral.

[0056] De fato, diltiazem e etilefrina ou suas misturas podem ser empregadas em terapia isolada ou em combinação com pelo menos um outro agente ativo. Estes podem ser compostos para aumentar a atividade dos compostos ou outros agentes ativos conhecidos para serem utilizados como agentes antivirais no tratamento da infecção por vírus influenza.

[0057] Em particular, o agente antiviral tem uma atividade inibidora direta nos vírus influenza, isto é, inibe a replicação ou impede a penetração ou a propagação de pelo menos um vírus influenza em um organismo infectado.

[0058] Tais agentes ativos são bem conhecidos por uma pessoa versada na técnica e comercialmente disponíveis ou são descritos em trabalhos de referência, tais como o banco de dados de drogas publicado por Vidal (Le Dictionnaire Vidal).

[0059] De acordo com um primeiro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem e um agente antiviral, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0060] De acordo com um segundo aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende etilefrina e um agente antiviral, para utilização na prevenção e/ou tratamento da infecção por vírus influenza.

[0061] De acordo com um terceiro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende uma combinação de diltiazem e etilefrina, e um agente antiviral, para uso na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0062] Em particular, este agente antiviral é selecionado a partir de agentes virais que têm uma ação inibidora direta sobre os vírus, como o oseltamivir (também chamado Tamiflu), zanamivir, peramivir, amantadina, rimantadina, ribavirina e arbidol.

[0063] Este agente antiviral também pode ser selecionado a partir de agentes ativos nas células, induzindo estados celulares globais desfavoráveis a infecção viral, tais como monensina, midodrina, desglimidodrina, rilmenidina, harmol, dímeros de harmol e brinzolamida.

[0064] De acordo com um aspecto preferido da invenção, este agente antiviral é monensina, uma molécula com atividade quelante de cálcio no meio extracelular.

[0065] Este agente antiviral também pode ser selecionado de: • inibidores da polimerase viral (por exemplo, T705); • inibidores de nucleoproteínas; • inibidores da hemaglutinina; • inibidores da neuraminidase; • NS1, M1, M2, Pb1-F2, inibidores da proteína NEP;

[0066] Este agente antiviral também pode ser selecionado de: • sialidases recombinantes (por exemplo, DAS181); • inibidores de NFKB; • inibidores HSP90; e • inibidores da proteína quinasa celular Mek, Erk ou PKC.

[0067] Entende-se que este agente antiviral será utilizado nas quantidades necessárias para ter uma ação antiviral, sendo esta quantidade designada como "eficaz", sendo esta proporção facilmente determinada por uma pessoa na técnica.

[0068] De acordo com outro aspecto preferido da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, em combinação com oseltamivir, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0069] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, em combinação com zanamivir, para uso na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0070] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, em combinação com peramivir, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0071] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, em combinação com amantadina, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0072] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, em combinação com rimantadina, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0073] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, em combinação com ribavirina, para utilização na prevenção e/ou tratamento da infecção por vírus influenza.

[0074] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, em associação com arbidol, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0075] De acordo com outro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem e monensina, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0076] De acordo com outro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, monensina e oseltamivir, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0077] De acordo com outro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, monensina e zanamivir, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0078] De acordo com outro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, monensina e peramivir, para utilização na prevenção e/ou tratamento da infecção por vírus influenza.

[0079] De acordo com outro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, monensina e amantadina, para utilização na prevenção e/ou tratamento da infecção por vírus influenza.

[0080] De acordo com outro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, monensina e rimantadina, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0081] De acordo com outro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, monensina e ribavirina, para utilização na prevenção e/ou tratamento da infecção por vírus influenza.

[0082] De acordo com outro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, monensina e arbidol, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0083] De acordo com um segundo aspecto preferido da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende etilefrina, em combinação com oseltamivir, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0084] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende etilefrina, em combinação com zanamivir, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0085] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende etilefrina, em combinação com peramivir, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0086] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende etilefrina, em combinação com amantadina, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0087] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende a etilefrina, em combinação com a rimantadina, para utilização na prevenção e/ou tratamento da infecção por vírus influenza.

[0088] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende etilefrina, em combinação com ribavirina, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0089] De acordo com um aspecto particular, a composição farmacêutica ou veterinária compreende etilefrina, em combinação com arbidol, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0090] De acordo com outro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende etilefrina e monensina, para utilização na prevenção e/ou tratamento da infecção por vírus influenza.

[0091] De acordo com um terceiro aspecto preferido da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende uma combinação de diltiazem e etilefrina, em combinação com oseltamivir, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0092] A composição farmacêutica ou veterinária para utilização de acordo com a invenção também pode compreender pelo menos um agente antibacteriano. Tal agente será, em particular, um antibiótico, destinado a prevenir as superinfecções bacterianas observadas de forma clássica em complicações de infecções com vírus influenza.

[0093] De acordo com um primeiro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende diltiazem, em combinação com pelo menos um agente antibacteriano, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0094] De acordo com um segundo aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende etilefrina, em combinação com pelo menos um agente antibacteriano, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0095] De acordo com um terceiro aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende uma combinação de diltiazem e etilefrina, em combinação com pelo menos um agente antibacteriano, para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza.

[0096] De acordo com um quarto aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende uma combinação de diltiazem e etilefrina, em combinação com um agente antiviral, particularmente o oseltamivir e pelo menos um agente antibacteriano, para uso na prevenção e/ou tratamento da infecção por vírus influenza.

[0097] De acordo com um quinto aspecto da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária compreende uma combinação de diltiazem e monensina, em combinação com um agente antiviral, tal como uma das combinações mencionadas acima, e pelo menos um agente antibacteriano, para uso na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza. Produto combinado

[0098] A presente invenção também se refere a um produto combinado compreendendo pelo menos um composto selecionado de etilefrina e diltiazem e pelo menos um agente antiviral e/ou agente antibacteriano, para utilização simultânea, separada ou sequencial, para prevenir e/ou tratar infecção por vírus influenza, em seres humanos ou animais.

[0099] De acordo com uma modalidade, o produto de combinação compreende diltiazem e pelo menos um agente antiviral tal como oseltamivir ou monensina.

[00100] De acordo com outra modalidade, o produto de combinação compreende etilefrina e pelo menos um agente antiviral tal como oseltamivir ou monensina.

[00101] De acordo com outra modalidade, o produto de combinação compreende uma combinação de diltiazem e etilefrina e pelo menos um agente antiviral tal como oseltamivir ou monensina.

[00102] De acordo com outra modalidade, o produto de combinação compreende diltiazem e pelo menos um agente antibacteriano.

[00103] De acordo com outra modalidade, o produto de combinação compreende etilefrina e pelo menos um agente antibacteriano.

[00104] De acordo com outra modalidade, o produto de combinação compreende uma combinação de diltiazem e etilefrina e pelo menos um agente antibacteriano.

[00105] De acordo com outra modalidade, o produto de combinação compreende diltiazem, pelo menos um agente antiviral e pelo menos um agente antibacteriano.

[00106] De acordo com outra modalidade, o produto de combinação compreende etilefrina, pelo menos um agente antiviral e pelo menos um agente antibacteriano.

[00107] De acordo com outra modalidade, o produto de combinação compreende uma combinação de diltiazem e etilefrina, pelo menos um agente antiviral e pelo menos um agente antibacteriano.

[00108] Os agentes antivirais, particularmente tendo uma ação inibidora contra os vírus influenza, são bem conhecidos para uma pessoa versada na técnica e serão, particularmente, selecionados dos seguintes agentes: • oseltamivir, zanamivir, peramivir, amantadina, rimantadina, ribavirina e arbidol; • midodrina, desglimidodrina, rilmenidina, harmol, dímeros de harmol, brinzolamida e monensina; • inibidores da polimerase viral (por exemplo, T705); • inibidores de nucleoproteínas; • inibidores da hemaglutinina; • inibidores da neuraminidase; • inibidores da proteína NS1, M1, M2, NEP, Pb1-F2; • sialidases recombinantes (por exemplo, DAS181); • inibidores de NFKB; • inibidores HSP90; e • inibidores da proteína quinasa celular Mek, Erk ou PKC.

[00109] A invenção se refere também a um produto combinado compreendendo pelo menos um composto selecionado de etilefrina e diltiazem e pelo menos um outro agente antiviral e/ou agente antibacteriano, para utilização simultânea, separada ou sequencial, para prevenir e/ou tratar infecções com vírus influenza.

[00110] A invenção também se refere a um método terapêutico para prevenir e/ou tratar infecção por vírus influenza (vírus da gripe) em seres humanos, em que a um paciente é administrada uma quantidade eficaz de um composto selecionado de etilefrina e diltiazem, ou uma mistura de ambos, opcionalmente em combinação com outro composto antiviral e/ou um composto antibacteriano.

[00111] A invenção também se refere a um método terapêutico para prevenir e/ou tratar a infecção por vírus influenza em animais, em que a um animal é administrada uma quantidade eficaz de um composto selecionado de etilefrina e diltiazem, opcionalmente em combinação com outro composto antiviral e/ou um antibacteriano composto. Vantajosamente, o animal é um animal de fazenda, como, por exemplo, um porco, um cavalo ou mesmo uma galinha ou um animal de estimação (cão, gato, etc.).

Formulação das composições farmacêuticas ou veterinárias

[00112] De acordo com um aspecto preferido da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária para utilização na prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza é caracterizada por estar em uma forma de dosagem destinada a administração por inalação.

[00113] O termo "inalação" indica a absorção pelo trato respiratório. Trata-se, em particular, de um método de absorção de compostos terapêuticos de certas substâncias sob a forma de gás, microgotas ou pó em suspensão.

[00114] A administração de composições farmacêuticas ou veterinárias por inalação, isto é, pelas rotas nasal e/ou oral, é bem conhecida de uma pessoa versada na técnica.

[00115] Podem se distinguir dois tipos de administração por inalação: • administração por insuflação quando as composições estão em pó, e • administração por nebulização quando as composições estão na forma de aerossol (suspensão) ou na forma de soluções pressurizadas, por exemplo, soluções aquosas. Neste caso, o uso de um nebulizador ou um pulverizador será recomendado para administrar a composição farmacêutica ou veterinária.

[00116] A forma de dosagem considerada aqui é assim selecionada de um pó, uma suspensão aquosa de gotículas ou uma solução pressurizada.

Composições farmacêuticas ou veterinárias

[00117] A presente invenção também se refere a uma composição farmacêutica ou veterinária compreendendo, em um veículo farmacêutico adequado, pelo menos um agente antiviral em combinação com pelo menos um composto selecionado de etilefrina e diltiazem, ou uma combinação de ambos.

[00118] De acordo com um aspecto preferido, o agente antiviral é selecionado a partir de agentes antivirais bem conhecidos para uma pessoa versada na técnica e convencionalmente utilizado para prevenir ou tratar a gripe, particularmente possuindo uma ação inibidora direta contra vírus influenza, ou seja, inibindo a replicação ou prevenção da penetração ou propagação de pelo menos um vírus influenza em um organismo infectado.

[00119] O agente antiviral é particularmente selecionado de oseltamivir, zanamivir, peramivir, amantadina, rimantadina, ribavirina e arbidol.

[00120] Este agente antiviral também pode ser selecionado a partir de agentes ativos nas células, induzindo estados celulares globais desfavoráveis a infecção viral, tais como midodrina, desglimidodrina, rilmenidina, harmol, dímeros de harmol, brinzolamida e monensina.

[00121] Este agente antiviral também pode ser selecionado de: • inibidores da polimerase viral (por exemplo, T705); • inibidores de nucleoproteínas; • inibidores da hemaglutinina; • inibidores da neuraminidase; • inibidores da proteína NS1, M1, M2, NEP, Pb1-F2;

[00122] Este agente antiviral também pode ser selecionado de: • sialidases recombinantes (por exemplo, DAS181); • inibidores de NFKB; • inibidores HSP90; e • inibidores da proteína quinasa celular Mek, Erk ou PKC.

[00123] De acordo com um aspecto preferido, o agente antiviral é oseltamivir. De acordo com outro aspecto preferido, o agente antiviral é monensina.

[00124] A invenção se refere especificamente a: • uma composição farmacêutica ou veterinária compreendendo, em um veículo farmacêutico adequado, pelo menos um agente antiviral com diltiazem; e • uma composição farmacêutica ou veterinária compreendendo, em um veículo farmacêutico adequado, pelo menos um agente antiviral com etilefrina; e • uma composição farmacêutica ou veterinária compreendendo, em um veículo farmacêutico adequado, pelo menos um agente antiviral com etilefrina e diltiazem.

[00125] Este agente antiviral será de preferência selecionado daqueles listados no presente pedido, e será particularmente oseltamivir ou monensina.

[00126] Entende-se que todas as combinações de dois, três ou quatro compostos ativos mencionados acima são composições farmacêuticas ou veterinárias de acordo com a invenção.

[00127] De acordo com outro aspecto ainda, a composição farmacêutica ou veterinária de acordo com a invenção compreende, em um veículo farmacêutico adequado, uma combinação de diltiazem e etilefrina.

[00128] Como indicado acima, qualquer combinação de diltiazem e etilefrina compreende a mesma quantidade de cada composto (composição a 50/50 em peso) ou quantidades desiguais de cada composto, tais como 90% de diltiazem e 10% de etilefrina, 80% de diltiazem e 20% de etilefrina, 70% de diltiazem e 30% de etilefrina, 60% de diltiazem e 40% de etilefrina, 40% de diltiazem e 60% de etilefrina, 30% de diltiazem e 70% de etilefrina, 20% de diltiazem e 80% de etilefrina, ou mesmo 10% de diltiazem e 90% de etilefrina.

[00129] Entende-se que, na presente descrição, todos os compostos mencionados estão presentes nas composições farmacêuticas ou veterinárias em quantidades eficazes, isto é, em quantidades que produzem o efeito antiviral esperado.As quantidades eficazes podem ser facilmente determinadas por uma pessoa versada na técnica.

[00130] As composições farmacêuticas ou veterinárias da presente invenção são adequadas para administração oral, sublingual, subcutânea, intramuscular, intravenosa, transdérmica, ocular, local ou retal, em que o composto ativo pode ser administrado em formas de dosagem unitárias, misturadas com excipientes farmacêuticos convencionais, a animais ou seres humanos.

[00131] Formas de dosagem unitárias adequadas incluem formas orais, tais como comprimidos, cápsulas de gelatina, pós, grânulos e soluções ou suspensões orais; formas de dosagem sublingual e bucal; formas de dosagem subcutânea, intramuscular, intravenosa, intranasal ou intraocular; e formas de dosagem retal.

[00132] Quando uma composição sólida é preparada sob a forma de comprimido, o principal composto ativo é misturado com um veículo farmacêutico adequado, tal como gelatina, amido, lactose, estearato de magnésio, talco, goma arábica ou semelhantes. Os comprimidos podem ser revestidos com sacarose ou outras substâncias adequadas, ou então podem ser tratados de modo a ter uma atividade sustentada ou retardada e a liberar continuamente uma quantidade predeterminada de ingrediente ativo.

[00133] Uma preparação em cápsulas de gelatina é obtida misturando o composto ativo com um diluente e despejando a mistura resultante em cápsulas de gelatina mole ou dura.

[00134] Uma preparação em forma de xarope ou elixir pode conter o composto ativo juntamente com um edulcorante, um antiséptico, bem como um agente aromatizante e um corante adequado.

[00135] Os pós ou grânulos dispersáveis em água podem conter o composto ativo em mistura com dispersão ou agentes molhantes, ou agentes de suspensão, bem como com corretores de sabor ou edulcorantes.

[00136] De acordo com um aspecto preferido da invenção, a composição farmacêutica ou veterinária está em uma forma de dosagem destinada a administração local, tal como administração através das membranas mucosas do trato respiratório, isto é, administração por inalação.

EXEMPLOS Introdução

[00137] Estudos da resposta transcriptômica celular durante a infecção por influenza revelaram as vias de sinalização invocadas e/ou desviadas durante a infecção, in vitro em células em cultura. Isso possibilitou a caracterização de "assinaturas transcriptômicas" in vitro específicas de infecção com vários vírus influenza humano e aviário (Josset et al., PLoS One, 2010; Terrier et al., Virol J, 2011; Terrier et al., J Gen Virol, 2013).

[00138] Esta mesma estratégia foi aplicada a amostras de células in vivo, derivadas de lavagens nasais de 9 pacientes, a fim de caracterizar as assinaturas in vivo da infecção com o vírus pandêmico H1N1 (pdm09). Essas assinaturas transcriptômicas foram obtidas na Affymetrix Fluidics Station 450, por meio de várias ferramentas de análise de bioinformática. Após o rastreio "in silico" em bancos de dados públicos, como Connectivity Map (Broad Institute, MIT), 34 moléculas foram selecionadas, incluindo, entre outros, etilefrina, diltiazem, monensina, lanatosídeo C e isoxicam. Essas moléculas foram avaliadas quanto à sua atividade antiviral em um modelo de célula de infecção in vitro, na linhagem celular epitelial de pulmão humano A549, e depois in vivo em um modelo murino infeccioso.

Exemplo 1. Avaliação in vitro do efeito antiviral de vários compostos selecionados em células A549 infectadas com H1N1. Protocolo detalhado de cultura e infecção: A. Cultura de células A549 humanas

[00139] As células A549 (carcinoma do pulmão) são mantidas no meio Eagle Eagle modificado por Dulbecco (DMEM, BioWhittaker) suplementado com soro fetal de vitelo a 10% (v/v), L-glutamina 2 mM, penicilina 100 U/mL e estreptomicina 100 μg/mL, em uma incubadora a 37 °C, em uma atmosfera saturada de umidade contendo 5% de CO2. Na confluência, as células são separadas do suporte por tratamento com tripsina-EDTA e são ressemeadas em um balão de cultura contendo 15 mL de meio fresco. Três dias antes da etapa de infecção, 0,75 • 106 células são distribuídas em frascos de 25 cm2 (T25) em meio com 10% de soro de vitelo fetal de forma a obter uma confluência de 70 a 80% durante a infecção.

B. Infecção de células por vírus influenza representativos

[00140] As células são infectadas com os vários vírus influenza com uma multiplicidade de infecção (MOI) de 0,1 em DMEM, 2 mM de L-glutamina, 100 U/mL de penicilina, 100 μg/mL de estreptomicina e 0,5 μg/mL de tripsina.

[00141] Os vírus utilizados são as estirpes H1N1 (A/Pdm/09) e H3N2 (A/Moscow/10/99) do vírus influenza humana A.

C. Pré-tratamento e tratamento

[00142] As moléculas foram testadas em células A549 com uma confluência de 70 a 80%. As células foram incubadas durante 6 h com várias concentrações de moléculas, depois foram infectadas com os vários vírus durante 1 h e foram retornadas à presença das moléculas, nas mesmas concentrações.

D. Medidas

[00143] Um teste de citotoxicidade e um teste de quantificação de vírus foram realizados após 48 h de incubação a 37 °C sob 5% de CO2. A citotoxicidade das várias moléculas é determinada em cada teste em uma placa de células não infectadas por um teste de viabilidade (ensaio MTS, Promega). Este teste se baseia na medição da atividade metabólica das células, que transforma um substrato (MTS tetrazolium) em um produto (formazan) que é solúvel no meio e cuja absorbância medida a 490 nm é um reflexo proporcional do número de células vivas. A razão da absorbância em cada poço para a absorbância média dos poços contendo células de controle (não tratadas com as moléculas) é calculada e mostrada nos diagramas como indicação de viabilidade celular (viabilidade celular relativa).

[00144] O efeito sobre a produção de vírus é estimado pela determinação de títulos infecciosos (TCID50/mL, 50% de dose infecciosa) realizada em células MDCK, sendo os títulos calculados de acordo com a técnica de Reed e Muench. A proporção do título infeccioso em cada condição foi expressa como uma função do título infeccioso medido na condição de controle E. Resultados

[00145] O protocolo de pré-tratamento e tratamento de células é mostrado esquematicamente na FIG. 1A. Várias concentrações foram testadas. As células são pré-tratadas durante 6 horas com as várias moléculas testadas e depois submetidas a infecção com o vírus H1N1 p1m1, durante 1 hora. O tratamento com as várias moléculas testadas é então repetido durante 48 horas. As medidas realizadas no final do tratamento, como descrito acima, permitem determinar a concentração inibidora mediana (IC50), dependente da produção de vírus em função das várias concentrações testadas.

[00146] A FIG. 1B mostra os resultados obtidos para as seguintes moléculas: ribavirina, monensina, lanatosídeo C, diltiazem e etilefrina. Como esperado, os compostos conhecidos por sua atividade antiviral - ribavirina e monensina - induzem uma diminuição significativa na produção de vírus normalizados. Mais surpreendentemente, diltiazem e etilefrina também causam uma diminuição significativa na produção de vírus normalizados. Entre os compostos selecionados, como descrito na introdução, o lanatosídeo C foi testado para avaliar sua atividade antiviral - os resultados obtidos não permitiram confirmar a atividade antiviral desse composto.

Exemplo 2. Avaliação in vitro do efeito antiviral da etilefrina em células A549 infectadas com o subtipo de vírus H3N2.

[00147] O protocolo de pré-tratamento e tratamento é mostrado esquematicamente na FIG. 1A e as condições experimentais são as mesmas descritas no Exemplo 1. O vírus H3N2 utilizado para a infecção é a estirpe A/Moscow/10/99 (H3N2).

[00148] A FIG. 2 mostra que os efeitos antivirais da etilefrina são significativos a partir da menor concentração testada e permitem inibir completamente a produção de vírus com etilefrina 0,018 μM.

Exemplo 3. Avaliação in vitro do efeito antiviral de (A) etilefrina e (B) diltiazem, em combinação com oseltamivir, em células A549 infectadas com vírus H1N1 pdm09.

[00149] O protocolo de pré-tratamento e tratamento é mostrado esquematicamente na FIG. 1A, e as condições experimentais são as mesmas que as descritas no Exemplo 1.

[00150] Como esperado, o oseltamivir diminui significativamente a produção de vírus para cerca de 40% (Figuras 3A e 3B). As combinações de etilefrina e oseltamivir funcionam muito melhor do que os compostos isoladamente, em ambas as concentrações de etilefrina testadas.

[00151] A combinação de 0,9 nM de oseltamivir e diltiazem é mais eficaz do que os compostos isolados. Os melhores resultados são obtidos com diltiazem sozinho a uma concentração de 9 nM.

Exemplo 4. Avaliação in vivo em camundongos da toxicidade das seguintes moléculas: oseltamivir, monensina, diltiazem, etilefrina e isoxicam.

[00152] O controle "Salina" designa camundongos não tratados, tendo sido tratado com PBS.

[00153] As seguintes quantidades diárias foram administradas por gavagem aos camundongos: - oseltamivir: 10 mg/kg/dia - etilefrina: 3 mg/kg/dia - diltiazem: 90 mg/kg/dia

[00154] O composto com a maior toxicidade celular é oseltamivir, sendo esta toxicidade aceitável, no entanto, os camundongos mantêm um aumento de peso durante o tratamento. Diltiazem (diamantes) e etilefrina (estrelas) são claramente não tóxicos nas doses administradas.

Exemplo 5. Avaliação in vivo do efeito antiviral dos compostos oseltamivir, monensina, diltiazem, etilefrina e isoxicam em camundongos B57BL/6 infectados: (A) protocolo de administração; (B) Taxa de sobrevivência ao longo do tempo, até 14 dias após a infecção; (C) Perda de peso observada ao longo do tempo; (D) Título de vírus nos pulmões.

[00155] Os camundongos B57BL/6 (idade 7 a 8 semanas) são tratados por gavagem antes (dia -1), no dia e 3 dias após a infecção com o vírus H1N1 pdm09, de acordo com o protocolo mostrado esquematicamente na FIG. 5A.

[00156] Os seguintes parâmetros são avaliados ao longo do tempo: FIG. 5B: taxa de sobrevivência ao longo do tempo, até 14 dias após a infecção; FIG. 5C: perda e ganho de peso observados ao longo do tempo; FIG. 5D: título viral nos pulmões de camundongos infectados e tratados.

[00157] A etilefrina (representada por estrelas) e o diltiazem (representado por diamantes) permitem a sobrevivência máxima dos camundongos infectados, isto é, 70% e 90% de sobrevivência aos 14 dias, respectivamente, o que é um resultado melhor do que o obtido para oseltamivir (60% de sobrevivência; representado por círculos).

Exemplo 6. Avaliação in vivo do efeito antiviral dos compostos oseltamivir e diltiazem administrados 24 horas após a infecção dos camundongos com vírus H1N1 pdm09: taxa de sobrevivência ao longo do tempo, até 14 dias após a infecção.

[00158] Os camundongos B57BL/6 (idade 7 a 8 semanas) são tratados por sonda após infecção com o vírus H1N1 p1m1, de acordo com o protocolo mostrado esquematicamente na FIG. 6A. A taxa de sobrevivência ao longo do tempo é medida para camundongos infectados que não recebem tratamento (Figura 6B); tratado com oseltamivir (figura 6C); e tratados com diltiazem (figura 6D). A taxa de sobrevivência dos camundongos tratados com oseltamivir e dos tratados com diltiazem é de 100%.

Exemplo 7. Avaliação in vitro do efeito antiviral do diltiazem em combinação com oseltamivir em células A549 infectadas com vírus H1N1 pdm09 (Figura 7).

[00159] O protocolo de tratamento de células pós- infecção é mostrado esquematicamente na FIG. 7A. As células são submetidas a infecção com o vírus H1N1 pdm09 durante 1 hora e depois são tratadas a partir das 6 h após a infecção por 48 horas ou não são tratadas (medida de controle: Ctrl). As medidas realizadas no final do tratamento, como descrito acima, permitem determinar o efeito dos tratamentos na produção de vírus.

[00160] As FIGS. 7B e 7C mostram os resultados obtidos para as combinações diltiazem e oseltamivir, e diltiazem e monensina, respectivamente.

[00161] Em condições de tratamento pós-infecção, oseltamivir (10 nM) diminui significativamente a produção de vírus para um valor diminuído de cerca de 55% em relação ao valor de controle, e diltiazem (9 μM) diminui significativamente o título viral relativo em cerca de 20% em relação ao valor de controle.

[00162] A combinação de diltiazem e oseltamivir desempenha muito melhor do que os compostos sozinhos, uma vez que diminui significativamente a produção de vírus em 70% em relação ao valor de controle. Assim, os efeitos do oseltamivir são potenciados pela presença de diltiazem.

[00163] Em condições de tratamento pós-infecção, a monensina (6 μM) é extremamente eficaz, uma vez que diminui significativamente a produção de vírus em cerca de 72% em relação ao valor de controle. Como indicado acima, diltiazem (9 μM) diminui a produção de vírus em cerca de 20%.

[00164] A combinação de diltiazem e monensina é mais eficaz do que os compostos sozinhos, uma vez que diminui significativamente a produção de vírus em cerca de 82% em relação ao valor de controle. Assim, os efeitos da monensina são potencializados pela presença de diltiazem. REFERÊNCIAS Patentes - FR 2 953 410 - EP 0162320 - EP 0728751 - EP 0561861 - EP 0450705 - EP 0355395 - WO 87/07508 - WO 2011/126071 - CN 102657621 - WO 02/094238 - US 4.605.552 Literatura científica - Josset L, Textoris J, Loriod B, Ferraris O, Moules V, Lina B, N’guyen C, Diaz JJ, Rosa-Calatrava M. “Gene expression signature-based screening identifies new broadly effective influenza A antivirals.” PLoS One. 2010 Oct 4;5(10). - Terrier O, Josset L, Textoris J, Marcel V, Cartet G, Ferraris O, N’guyen C, Lina B, Diaz JJ, Bourdon JC, Rosa- Calatrava M. “Cellular transcriptional profiling in human lung epithelial cells infected by different subtypes of influenza A viruses reveals an overall down-regulation of the host p53 pathway.” Virol J. 2011 Jun 8;8:285. - Terrier O, Textoris J, Carron C, Marcel V, Bourdon JC, Rosa-Calatrava M. “Host microRNA molecular signatures associated with human H1N1 and H3N2 influenza A viruses reveal an unanticipated antiviral ativity for miR-146a.” J Gen Virol. 2013 May;94(Pt 5):985-95.

Claims

1. Uso de uma composição farmacêutica ou veterinária caracterizado pelo fato de ser para preparar um medicamento para a prevenção e/ou tratamento de infecção por vírus influenza, em que a referida composição compreende, em um veículo farmacêutico adequado, diltiazem e pelo menos um outro agente antiviral selecionado dentre oseltamivir e zanamivir.

2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que os vírus influenza são selecionados dentre vírus do tipo A, tais como os subtipos H1N1, H2N2, H3N2, H5N1, H7N7 e H7N9.

3. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a referida composição está em uma forma de dosagem destinada à administração por inalação.

4. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o pelo menos outro agente antiviral é oseltamivir.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o pelo menos outro agente antiviral é zanamivir.

6. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 5, caracterizado pelo fato de que a referida composição compreende ainda pelo menos um agente antibacteriano.

7. Uso de um produto de combinação que compreende diltiazem e pelo menos um agente antiviral selecionado dentre oseltamivir e zanamivir caracterizado pelo fato de que é para a preparação de um medicamento para prevenir e/ou tratar infecção por vírus influenza, em que os componentes do referido produto de combinação são usados simultaneamente, separadamente ou sequencialmente.

8. Uso de um produto de combinação, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um agente antiviral é oseltamivir.

9. Uso de um produto de combinação, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o pelo menos um agente antiviral é zanamivir.

10. Uso de um produto de combinação, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 9, caracterizado pelo fato de que compreende adicionalmente um agente antibacteriano.

11. Uso de um produto de combinação compreendendo diltiazem e pelo menos um agente antibacteriano, caracterizado pelo fato de que é para a preparação de um medicamento para prevenir e/ou tratar a infecção com vírus influenza, em que os componentes do referido produto de combinação são usados simultaneamente, separadamente ou sequencialmente.

12. Composição farmacêutica ou veterinária caracterizada pelo fato de que compreende, em um veículo farmacêutico adequado, pelo menos um agente antiviral selecionado dentre oseltamivir e zanamivir, em combinação com diltiazem.

13. Composição farmacêutica ou veterinária, de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que o agente antiviral é oseltamivir.

14. Composição farmacêutica ou veterinária, de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que o agente antiviral é zanamivir.

15. Composição farmacêutica ou veterinária, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 12 a 14, caracterizada pelo fato de que está em uma forma de dosagem destinada a administração por inalação.