BR112017005050B1 - Composições farmacêuticas líquidas, nebulizador e usos da composição farmacêutica líquida - Google Patents

Abstract

A presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica líquida apropriada para administração por inalação, que compreende um diluente e uma suspensão de partículas de 9,10- dimetóxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetra-hidro-2H-pirimido[6,1-a] isoquinolin-4-ona (RPL554) ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis. Também é descrita uma composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção para uso no tratamento de corpo humano ou animal.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção refere-se a uma composição farmacêutica líquida que compreende uma droga respiratória.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] As propriedades tóxico-cinéticas de composições farmacêuticas líquidas são imprevisíveis. É importante que um ingrediente farmacêutico ativo (API) seja formulado corretamente, de forma a fornecer dosagem segura, eficaz e controlada quando a composição for fornecida a um paciente. Este é particularmente o caso de composições inaladas. Além disso, as composições farmacêuticas líquidas devem possuir estabilidade confiável a longo prazo para garantir que o perfil de dosagem da composição seja mantido após a armazenagem. Isso evita a administração de dosagens incorretas. As composições farmacêuticas devem também ser formuladas de maneira que a administração não seja desagradável para pacientes, por exemplo, com relação ao sabor e à acidez.

[003] RPL554 (9,10-dimetóxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetra-hidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona) é um inibidor duplo de PDE3/PDE4, descrito em WO 00/58308 (também denominado, às vezes, RPL554). Como inibidor de PDE3/PDE4 combinado, RPL554 possui atividade anti-inflamatória e bronquiodilatadora e é útil no tratamento de distúrbios respiratórios como asma e doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD). A estrutura de RPL554 é exibida abaixo.

[004] Frequentemente é preferível administrar RPL554 por via inalatória, devido à sua eficácia no tratamento de distúrbios respiratórios. Um método eficaz de administração é a nebulização. Franciosi et al descrevem uma solução de RPL554 em um tampão de citrato e fosfato (Efficacy and safety of RPL554, a dual PDE3 and PDE4 inhibitor, in healthy volunteers and in patients with asthma or chronic obstructive pulmonary disease: findings from four clinical trials, The Lancet: Respiratory Medicine 11/2013; 1 (9): 714-27. DOI: 10.1016/S2213-2600 (13) 70187-5).

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO

[005] É uma descoberta surpreendente da presente invenção que a composição ideal para inalação que compreende RPL554 é uma composição farmacêutica líquida que compreende uma suspensão de partículas de RPL554. Foram descobertas suspensões de RPL554 que possuem propriedades altamente desejáveis para ambientes clínicos. Descobriu-se que diversos benefícios estão associados a uma composição farmacêutica líquida que compreende um diluente e uma suspensão de partículas de RPL554 ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

[006] A composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção possui propriedades grandemente aprimoradas com relação às formulações anteriores, por exemplo, em comparação com uma formulação de solução de RPL554. Com relação às propriedades tóxico-cinéticas, descobriu-se que a formulação de suspensão possui características de liberação retardada em comparação com as de uma solução. Isso pode reduzir a quantidade de tratamentos que precisam ser administrados a pacientes. Também se descobriu que a suspensão permite a administração de dosagem muito maior de RPL554, como se pode observar a partir dos valores AUC e Cmax de plasma. Isso pode também reduzir a frequência de administrações necessárias.

[007] A composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção também exibe excelente estabilidade e as composições não exibem degradação após doze meses sob condições ambiente (25 °C), nem após seis meses sob condições aceleradas (40 °C). Observa-se degradação em composição de solução comparável sob as mesmas condições. As composições podem não exibir degradação após doze meses sob condições ambiente (25 °C/umidade relativa de 60%), nem após seis meses sob condições aceleradas (40 °C/umidade relativa de 75%).

[008] Consequentemente, a presente invenção fornece uma composição farmacêutica líquida que compreende um diluente e uma suspensão de partículas de 9,10-dimetóxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N-carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetra-hidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (RPL554) ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

[009] A presente invenção também fornece uma composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção para uso no tratamento de corpo humano ou animal. Uma composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção pode ser utilizada no tratamento ou prevenção de doenças ou condições selecionadas a partir de asma, asma alérgica, febre do feno, rinite alérgica, bronquite, enfisema, bronquiectase, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), síndrome de tensão respiratória em adultos (ARDS), asma resistente a esteroides, asma severa, asma pediátrica, fibrose cística, fibrose pulmonar, doença pulmonar intersticial, distúrbios da pele, dermatite atópica, psoríase, inflamação ocular, isquemia cerebral, doenças inflamatórias e doenças autoimunes.

[0010] Tipicamente, a mencionada doença ou condição é asma ou COPD, mais tipicamente COPD.

[0011] A presente invenção também fornece um método de tratamento ou prevenção de doenças ou condições conforme definido no presente em pacientes, em que o método compreende a administração ao mencionado paciente de quantidade eficaz de uma composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0012] Figura 1: a concentração de provocação (PC) de acetilcolina que produziu cumulativamente aumento de 50% da resistência total das vias aéreas (acetilcolina RL PC50) em animais tratados com solução salina ou formulação de solução de RPL554. Após 2 e 5 h: acetilcolina RL PC50 foi transformada de forma logarítmica para fins de análise estatística. Teste t post hoc dos dados não transformados exibiu diferenças entre os grupos e a solução salina. * Análise não paramétrica realmente exibiu diferença significativa entre 2 h (1 mg/ml de solução de RPL554, P = 0,0190 não ajustado) e 5 h (2,5 mg/ml de solução, P = 0,0095 não ajustado) em comparação com o grupo salino. Valores N = 6, 4, 4; 4, 4 da esquerda para a direita. (Obs.: controle após 5 h não plotado).

[0013] Figura 2: acetilcolina RL PC50 em animais tratados com veículo ou a formulação de suspensão de RPL554: momentos 2 e 5 h: acetilcolina RL PC50 foi transformada de forma logarítmica para fins de análise estatística (quadro superior). Análise não paramétrica realmente exibiu diferença significativa entre 2 h (10 mg/ml de suspensão de RPL554, P = 0,0268 não ajustado) em comparação com o grupo controle veículo. Reanálise dos dados por meio de combinação dos dados de veículo (2 + 5 h) revelou broncoproteção significativa geral (P = 0,0016) que foi refletida por um grau significativo de broncoproteção com 2,5 mg/ml de suspensão de RPL554 (2,52 vezes (1-5,72), P < 0,05 e 10 mg/ml de suspensão de RPL554 (4,67 vezes (211), *P < 0,05) em comparação com o veículo. No momento após cinco horas, 10 mg/ml de suspensão de RPL554 causaram grau significativo de broncoproteção (2,77 vezes (1,3-6,0), *P < 0,05). (N = 8, 4, 4, 3, 6, esquerda para a direita) (quadro inferior).

[0014] A Figura 3 exibe as concentrações médias de RPL554 em plasma de voluntários humanos saudáveis após a administração (i) da formulação de suspensão ou (ii) da formulação de solução por meio de nebulizador em nível de dose nominal de cerca de 1,5 mg.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0015] As partículas de RPL554 podem ser de qualquer tamanho apropriado para uso em uma composição farmacêutica líquida apropriada para inalação. Tipicamente, as partículas de RPL554 são partículas micronizadas. As partículas de RPL554 podem, por exemplo, ter valor Dv50 (tamanho médio de partícula em volume) menor ou igual a 10 μm ou de cerca de 0,1 μm a cerca de 8 μm.

[0016] Tipicamente, as partículas possuem distribuição de tamanho de partículas com valor Dv50 de cerca de 0,2 μm a cerca de 5 μm. Mais tipicamente, as partículas de RPL554 possuem distribuição de tamanho de partículas com valor Dv50 de cerca de 0,7 μm a cerca de 3,0 μm. As partículas de RPL554 podem ter, por exemplo, distribuição de tamanho de partículas com valor Dv50 de 0,9 μm a 1,7 μm ou, alternativamente, de 1,7 μm a 2,7 μm. Frequentemente, as partículas de RPL554 possuem distribuição de tamanho de partículas com valor Dv50 de cerca de 1,1 μm a cerca de 2,6 μm.

[0017] O valor Dv50 é o tamanho de partícula médio para distribuição de volume. Metade do volume das partículas é compreendido, portanto, em partículas que possuem diâmetros menores que o valor Dv50 e metade do volume das partículas é compreendido em partículas que possuem diâmetros maiores que o valor Dv50. Esta é uma forma bem conhecida de descrição das distribuições de tamanho de partículas.

[0018] As partículas possuem tipicamente distribuição de tamanho de partículas com valor Dv10 de cerca de 0,4 μm a cerca de 1.0 μm. As partículas possuem tipicamente distribuição de tamanho de partículas com valor Dv90 de cerca de 2,0 μm a cerca de 4.0 μm. O valor DV10 reflete o diâmetro de partícula no qual 10% do volume da amostra encontram-se em partículas que possuem diâmetro de partícula menor que o valor Dv10. O valor Dv90 reflete o diâmetro de partícula no qual 90% do volume da amostra encontram-se em partículas que possuem diâmetro de partícula menor que o valor Dv90.

[0019] O método utilizado para medir o valor Dv50 é tipicamente a difração a laser. As partículas de RPL554 possuem, por exemplo, distribuição de tamanho de partículas com valor Dv50 de cerca de 0,2 μm a cerca de 5 μm, medida por meio de difração a laser. A análise de distribuição do tamanho de partículas pode ser realizada por meio de difração a laser utilizando o Malvern Spraytec em conjunto com uma célula de dispersão úmida. Tipicamente, os parâmetros do instrumento para o Malvern Spraytec são os seguintes: - partícula: partícula opaca padrão; - partícula de índice de refração: 1,50; - índice de refração (imaginário): 0,50; - densidade de partícula: 1,00; - índice de refração de dispersante: 1,33; - unidade de controle: 1000 rpm; - tipo de medição: temporizada; - tempo de amostragem inicial: 30 s; - obscurecimento: 20-30%; e - dispersante: 1% polissorbato 20 em água deionizada.

[0020] As partículas de RPL554 podem ser produzidas por meio de qualquer processo de redução de tamanhos ou processo de produção controlada por tamanho de partículas farmaceuticamente aceitável. As partículas podem ser produzidas, por exemplo, por meio de secagem por pulverização de uma solução de RPL554, por meio de cristalização controlada ou por meio de redução de tamanho de uma forma sólida de RPL554, por exemplo, por meio de moagem a jato de ar, micronização mecânica ou moagem de meios.

[0021] A concentração de partículas de RPL554 na composição farmacêutica líquida é tipicamente de cerca de 0,01 mg/ml a cerca de 40 mg/ml. Mais tipicamente, a concentração de partículas de RPL554 na composição farmacêutica líquida é de cerca de 0,1 mg/ml a cerca de 20 mg/ml. A concentração de partículas de RPL554 na composição farmacêutica líquida pode ser tipicamente de cerca de 0,01 mg/ml a cerca de 5 mg/ml ou de 0,1 mg/ml a 5 mg/ml. A concentração de partículas de RPL554 na composição farmacêutica líquida pode, por exemplo, ser de 0,1 mg/ml a 6 mg/ml.

[0022] Preferencialmente, o pH da solução é de cerca de 6 a cerca de 8, de maior preferência cerca de 6,5 a cerca de 7.

[0023] A composição farmacêutica líquida pode compreender adicionalmente um ou mais tensoativos. Os tensoativos são tensoativos farmaceuticamente aceitáveis. Os tensoativos podem ser tensoativos não iônicos, tensoativos aniônicos, tensoativos catiônicos ou tensoativos zwitteriônicos. Preferencialmente, um ou mais tensoativos são selecionados a partir de um ou mais tensoativos não iônicos.

[0024] Um ou mais tensoativos são tipicamente selecionados a partir de alquil éteres de polioxietileno glicol, alquil éteres de polioxipropileno glicol, alquil éteres de glicosídeos, octilfenol éteres de polioxietileno glicol, alquilfenol éteres de polioxietileno glicol, alquil ésteres de glicerol, alquil ésteres de polioxietileno glicol sorbitano (polissorbatos), alquil ésteres de sorbitano, cocamida MEA, cocamida DEA, óxido de dodecildimetilamina, copolímeros de bloco de polietileno glicol e polipropileno glicol (poloxâmeros) e amina de sebo polietoxilada (POEA).

[0025] Preferencialmente, um ou mais tensoativos são selecionados a partir de alquil ésteres de polioxietileno glicol sorbitano, tais como polissorbato 20 (monolaurato de polioxietileno (20) sorbitano), polissorbato 40 (monopalmitato de polioxietileno (20) sorbitano), polissorbato 60 (monoestearato de polioxietileno (20) sorbitano), polissorbato 80 (mono- oleato de polioxietileno (20) sorbitano) e alquil ésteres de sorbitano, tais como monolaurato de sorbitano, monopalmitato de sorbitano, monoestearato de sorbitano, triestearato de sorbitano e mono-oleato de sorbitano.

[0026] A concentração total de um ou mais tensoativos é tipicamente de cerca de 0,01 mg/ml a cerca de 2 mg/ml. A composição frequentemente compreende dois ou mais tensoativos, tais como um polissorbato e um tensoativo Span.

[0027] Tipicamente, a composição farmacêutica líquida compreende adicionalmente um ou mais tampões. Os tampões são tampões farmaceuticamente aceitáveis. Os tampões podem ser quaisquer tampões apropriados para uso em composição farmacêutica líquida apropriada para inalação. Um ou mais tampões são tipicamente selecionados a partir de tampões de citrato ou fosfato. Os tampões de citrato incluem ácido cítrico, citrato de sódio e suas misturas. Tampões de fosfato incluem ácido fosfórico, fosfato monossódico, fosfato de sódio dibásico e suas misturas.

[0028] A concentração total de um ou mais tampões é tipicamente de cerca de 5 mg/ml a cerca de 40 mg/ml. A composição frequentemente compreende dois ou mais componentes tampões, tais como dois sais de fosfato, como sais de fosfato de sódio.

[0029] A composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção pode compreender: (a) as partículas de RLP554 em concentração de cerca de 0,01 mg/ml a cerca de 40 mg/ml; (b) um ou mais tensoativos em concentração de cerca de 0,01 mg/ml a cerca de 5 mg/ml; e (c) um tampão em concentração de cerca de 5 mg/ml a cerca de 25 mg/ml.

[0030] A composição farmacêutica líquida compreende ainda tipicamente um ajustador da tonicidade. O ajustador da tonicidade pode ser qualquer ajustador da tonicidade farmaceuticamente aceitável. Exemplos de ajustadores da tonicidade incluem sais não tóxicos simples como haletos de metais alcalinos, tais como cloreto de sódio e iodeto de potássio. Tipicamente, o ajustador da tonicidade é cloreto de sódio. A concentração do ajustador de tonicidade dependerá da quantidade necessária para atingir a tonicidade desejada, tal como a isotonicidade no corpo ou nos pulmões. A concentração do ajustador de tonicidade é tipicamente de cerca de 2 mg/ml a cerca de 8 mg/ml e, mais tipicamente, cerca de 3,5 mg/ml a 6 mg/ml.

[0031] A composição farmacêutica líquida pode compreender outros componentes. Alternativamente, outros componentes podem ser excluídos. Em alguns casos, a composição farmacêutica líquida não compreende agonista receptor e2-adrenérgico ou antagonista receptor muscarínico (ou não compreende mais de 0,1% em peso total de um agonista receptor e2-adrenérgico e antagonista receptor muscarínico).

[0032] O diluente pode ser qualquer diluente farmaceuticamente aceitável. O diluente é apropriado para administração por meio de inalação. Exemplos de diluentes apropriados incluem água, etanol e glicerol. O diluente é preferencialmente água. O diluente é preferencialmente estéril.

[0033] A composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção compreende tipicamente: a. as partículas de RLP554 em concentração de 0,01 mg/ml a 40 mg/ml; b. um alquil éster de polioxietileno glicol sorbitano em concentração de 0,1 mg/ml to 2 mg/ml; c. um alquil éster de sorbitano em concentração de 0,01 mg/ml a 0,1 mg/ml; d. um primeiro componente tampão de fosfato sob concentração de 5 mg/ml a 10 mg/ml; e. um segundo componente tampão de fosfato sob concentração de 5 mg/ml a 10 mg/ml; e f. ajustador de tonicidade sob concentração de 2 mg/ml a 8 mg/ml.

[0034] A composição farmacêutica líquida pode compreender, por exemplo: a. as partículas de RLP554 em concentração de 0,05 mg/ml a 25 mg/ml; b. monolaurato de polioxietileno (20) sorbitano (Polissorbato 20, Tween 20) sob concentração de 0,1 mg/ml a 2 mg/ml; c. monolaurato de sorbitano (Span 20) sob concentração de 0,01 mg/ml a 0,1 mg/ml; d. mono-hidrato de fosfato monossódico sob concentração de 5 mg/ml a 10 mg/ml; e. fosfato de sódio dibásico anidro sob concentração de 5 mg/ml a 10 mg/ml; e f. cloreto de sódio sob concentração de 2 mg/ml a 8 mg/ml.

[0035] Tipicamente, a composição farmacêutica líquida é apropriada para administração por meio de nebulizador.

[0036] A presente invenção também fornece um nebulizador que compreende uma composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção. O nebulizador é tipicamente carregado com a composição farmacêutica líquida. O nebulizador tipicamente compreende cerca de 1 ml a cerca de 200 ml, mais tipicamente de 1 ml a 20 ml da composição farmacêutica líquida.

[0037] Os nebulizadores utilizam ar comprimido para transformar a composição farmacêutica líquida em aerossol que é inalado no trato respiratório do paciente. Exemplos de nebulizadores incluem um nebulizador de névoa mole, nebulizador de rede de vibração, nebulizador a jato e nebulizador de onda ultrassônica. Dispositivos nebulizadores apropriados incluem Philips I-neb® (Philips), Pari LC Sprint (Pari GmbH), Sistema de Fornecimento Pulmonar AERx® (Aradigm Corp.) e o Nebulizador Reutilizável Pari LC Plus (Pari GmbH).

[0038] A presente invenção também fornece uma composição farmacêutica líquida para uso no tratamento de corpo humano ou animal. A composição é conforme definido no presente. A composição farmacêutica líquida destina-se tipicamente a uso no tratamento de corpo humano ou animal, em que o tratamento compreende administração por meio de inalação.

[0039] As composições de acordo com a presente invenção permitem a liberação retardada de RPL554 no fluxo sanguíneo. A concentração de plasma de RPL554 após um certo período aumenta, portanto, com relação ao uso de composições conhecidas de RPL554. Tipicamente, a concentração de RPL554 no plasma sanguíneo é maior ou igual a 1 ng/ml em um tempo maior ou igual a quatro horas após a administração de uma dose nebulizada da composição. A dose nebulizada é tipicamente de 0,02 mg/kg a 0,6 mg/kg. A dose nebulizada pode ser, por exemplo, de 0,2 mg/kg a 0,6 mg/kg. A presente invenção fornece, por exemplo, uma composição farmacêutica líquida conforme definido no presente para uso no tratamento de corpo humano ou animal, em que a concentração de RPL554 no plasma sanguíneo é maior ou igual a 1 ng/ml em tempo maior ou igual a quatro horas após a administração de uma dose nebulizada de 0,2 mg/kg a 0,6 mg/kg por meio de inalação da composição nebulizada de acordo com a presente invenção. A concentração de RPL554 no plasma sanguíneo é tipicamente maior ou igual a 1 ng/ml em um tempo maior ou igual a três, quatro ou cinco horas após a administração de uma dose nebulizada da composição.

[0040] A presente invenção também fornece um método de tratamento ou prevenção de doenças ou condições conforme definido no presente em pacientes, em que o método compreende a administração ao mencionado paciente de quantidade eficaz de uma composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção. Tipicamente, o método destina-se ao tratamento de uma doença ou condição. A doença ou condição é tipicamente selecionada a partir de asma, asma alérgica, febre do feno, rinite alérgica, bronquite, enfisema, bronquiectase, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), síndrome de tensão respiratória em adultos (ARDS), asma resistente a esteroides, asma severa, asma pediátrica, fibrose cística, fibrose pulmonar, doença pulmonar intersticial, distúrbios da pele, dermatite atópica, psoríase, inflamação ocular, isquemia cerebral e doenças autoimunes. Preferencialmente, o método compreende o tratamento de asma ou doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), de maior preferência COPD.

[0041] Uma quantidade eficaz de RPL554 é tipicamente de cerca de 0,01 mg/kg a 50 mg/kg para uma dose única. Uma quantidade eficaz de RPL554 é frequentemente de cerca de 0,01 mg/kg a 1 mg/kg para uma dose única. Quantidade eficaz pode ser, por exemplo, dose de cerca de 0,1 mg a cerca de 500 mg, cerca de 0,1 mg a 100 mg, preferencialmente cerca de 0,1 mg a cerca de 6 mg. Uma quantidade eficaz pode ser de 0,1 mg a 12 mg. Uma dose única de RPL554 pode ser de 0,5 mg a 3 mg, por exemplo cerca de 1,5 mg. As doses podem ser administradas diariamente. A dose de RPL554 pode ser, por exemplo, de 0,01 mg/kg/dia a 50 mg/kg/dia, tipicamente de 0,01 mg/kg/dia a 10 mg/kg/dia ou de 0,01 mg/kg/dia a 1 mg/kg/dia. Essas doses são tipicamente a dose nominal emitida pelo inalador. A composição farmacêutica líquida pode ser administrada uma, duas ou três vezes por dia, ou pode ser administrada duas, três, quatro ou cinco vezes por semana. A composição pode ser administrada com a frequência necessária para o paciente.

[0042] Quantidade eficaz pode ser dose de cerca de 0,1 mg a cerca de 500 mg, cerca de 0,1 mg a 100 mg, preferencialmente cerca de 0,5 mg a cerca de 6 mg. Uma quantidade eficaz pode ser de 0,1 mg a 12 mg. Uma dose isolada de RPL554 pode ser de 0,5 mg a 24 mg, que pode ser administrada pelo nebulizador. Uma dose única de RPL554 pode ser de 0,5 mg a 6 mg, por exemplo cerca de 1,5 mg. As doses podem ser administradas uma, duas ou três vezes por dia. A dose de RPL554 pode ser, por exemplo, de 0,1 mg/dia a 50 mg/dia, tipicamente de 1,5 mg/dia a 18 mg/dia. Essas doses são tipicamente a dose nominal emitida pelo inalador. A composição farmacêutica líquida pode ser administrada uma, duas ou três vezes por dia, ou pode ser administrada duas, três, quatro ou cinco vezes por semana. A composição pode ser administrada com a frequência necessária para o paciente.

[0043] É uma descoberta surpreendente da presente invenção que uma formulação de suspensão de RPL554 permite a administração de altas doses de RPL554 a pacientes sem aumento concomitante do risco cardiovascular. A composição farmacêutica líquida é, portanto, apropriada para uso no tratamento de pacientes que sofrem de distúrbios cardiovasculares ou encontram-se em risco de sofrer distúrbios cardiovasculares.

[0044] A composição pode ser utilizada, por exemplo, para o tratamento de doença ou condição conforme definido acima em pacientes que sofrem de vulnerabilidade cardiovascular. Pacientes que sofrem de vulnerabilidade cardiovascular são tipicamente aqueles em risco maior de eventos adversos decorrentes da taquicardia ou hipertensão. Mais tipicamente, pacientes que sofrem de vulnerabilidade cardiovascular são aqueles que sofrem de condição cardíaca pré-existente ou condição que seria agravada por taquicardia ou hipertensão. Esses pacientes incluem os que sofrem de doença das artérias coronarianas, cardiomiopatia, hipertensão, doença cardíaca hipertensiva, parada cardíaca, arritmia, disritmia cardíaca, endocardite, miocardite, doença cardíaca valvular e apoplexia. Também são incluídos pacientes que sofreram ataque cardíaco.

[0045] A presente invenção é descrita com mais detalhes pelos Exemplos a seguir.

EXEMPLOS EXEMPLO 1

[0046] Formulação e estabilidade de formulação de suspensão de RPL554:

[0047] Composições farmacêuticas líquidas de acordo com a presente invenção foram produzidas com as formulações definidas nas Tabelas 1 e 2 abaixo.TABELA 1

[0048] Formulação da variante 1a (0,4 mg/ml):

TABELA 2

[0049] Formulação da variante 1b (20,0 mg/ml):

[0050] O teste foi realizado em duplicata. Os parâmetros principais do método são os seguintes: - fase móvel: acetonitrila: água: TFA (45: 55: 0,1); - coluna: Waters X-Bridge fenil, 3,5 μm, 150 x 4,6 mm; - velocidade de fluxo: 1,5 ml/min; - volume de injeção: 10 μl; - detecção: UV a 254 nm; - tempo de condução: 6 minutos; e - concentração de padrão e amostra: 0,1 mg/ml.

[0051] A variante 1a foi armazenada sob condições de (i) temperatura de 25 °C e umidade relativa de 60% ou (ii) temperatura de 40 °C e umidade relativa de 75%. A aparência, pH, teste, impurezas e distribuição de tamanho de partículas (PSD) foram medidos inicialmente, após um mês, após dois meses e após seis meses (seis meses somente para as condições de 25 °C e umidade relativa de 60%). A quantidade de impurezas foi medida por meio de HPLC com o tempo de retenção relativo (RRT) da impureza indicada.

[0052] Os resultados são exibidos nas Tabelas 3 e 4 abaixo.TABELA 3

[0053] Estabilidade da variante 1a sob condições: 25 °C/60% de umidade relativa:

TABELA 4

[0054] Estabilidade da variante 1a sob condições: 40 °C/75% de umidade relativa:

[0055] A variante 1b foi armazenada sob condições de (i) temperatura de 25 °C e umidade relativa de 60% ou (ii) temperatura de 40 °C e umidade relativa de 75%. A aparência, pH, impurezas e distribuição de tamanho de partículas (PSD) foram medidos inicialmente, após um mês e após dois meses. A quantidade de impurezas foi medida por meio de HPLC com o tempo de retenção relativo (RRT) da impureza indicada.

[0056] Os resultados são exibidos nas Tabelas 5 e 6 abaixo. TABELA 5

[0057] Estabilidade da variante 1b sob condições: 25 °C/60% de umidade relativa:

TABELA 6

[0058] Estabilidade da variante 1b sob condições: 40 °C/75% de umidade relativa:

[0059] Como se pode observar nas Tabelas 3 a 6, a composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção exibe excelente estabilidade a longo prazo sem variação significativa do pH ou da quantidade de impurezas presentes. Essa estabilidade chega a ser observada após dois meses a 40 °C.

EXEMPLO COMPARATIVO 1

[0060] Formulação e estabilidade de formulação de solução de RPL554:

[0061] Realizou-se teste de estabilidade similar para a formulação de solução de RPL554. Uma solução de 1,0 mg/ml de RPL554 em uma solução de tampão de fosfato/citrato aquoso sob pH de cerca de 3,2 foi mantida sob condições de temperatura de 25 °C e umidade relativa de 60% por seis meses. A aparência, pH, teste e impurezas presentes foram medidos inicialmente e após seis meses. Os resultados são exibidos na Tabela 7 abaixo.TABELA 7

[0062] Estabilidade da solução de RPL554 sob condições: 25 °C/60% de umidade relativa:

[0063] Embora não haja alterações da aparência da solução, existe aumento significativo da quantidade da impureza com o valor RRT de 0,87. Esta impureza foi identificada como produto de hidrólise de RPL554. A solução de RPL554 é menos estável que a formulação de suspensão de acordo com a presente invenção.

EXEMPLO 2

[0064] Distribuição de tamanho de partículas:

[0065] A distribuição de tamanho de partículas de uma amostra de RPL554 micronizado apropriado para uso em formulações nebulizadas foi avaliada utilizando difração a laser. A análise de distribuição do tamanho de partículas foi realizada por meio de difração a laser utilizando o Malvern Spraytec em conjunto com uma célula de dispersão úmida.

[0066] Os resultados são os seguintes: Dv10 = 0,69 μm; Dv50 = 1,35 μm; Dv90 = 2,5 μm.

EXEMPLO 3

[0067] Formulações:

[0068] Formulações de solução e suspensão de RPL554 foram preparadas conforme segue. Essas formulações foram utilizadas nos Exemplos 4 a 6.

EXEMPLO 4

[0069] Perfil tóxico-cinético em ratos:

[0070] Resumo:

[0071] Ratos Han Wistar (5/sexo/grupo) receberam dose por meio de inalação apenas no nariz uma vez por dia nas doses alvo de 2,4, 8,4 ou 21,6 mg/kg/dia de uma suspensão de RPL554 de acordo com a presente invenção por sete dias consecutivos (grupos 2, 3 e 4). Cinco ratos/sexo/grupo adicionais receberam a suspensão de veículo e agiram como controles (grupo 1). A duração da administração de dose foi de 240 minutos em cada dia. Ao final do período de tratamento, todos os animais sobreviventes sofreram eutanásia e necropsia. Animais satélites (3/sexo/grupo) receberam dose de forma similar e foram sangrados no Dia 7 para análise tóxico-cinética. Um grupo adicional de animais satélites (3/sexo) recebeu dose por meio de inalação apenas no nariz uma vez por dia em dose alvo de 2,4 mg/kg/dia de solução de RPL554 para comparação com a suspensão de RPL554 e foi sangrado no Dia 7 para análise tóxico-cinética (grupo 5). As concentrações médias de aerossol e as doses atingidas são apresentadas na Tabela 8 abaixo.TABELA 8

[0072] Concentrações médias de aerossol e doses atingidas:

[0073] Resultados tóxico-cinéticos:

[0074] O perfil tóxico-cinético da suspensão de RPL554 foi medido em doses diferentes (grupos 2, 3 e 4). Ele foi comparado com o perfil tóxico-cinético da solução de RPL554 conhecida (grupo 5). As dosagens administradas ao grupo 2 e ao grupo 5 são similares. O grupo 1 é o grupo controle.

[0075] Os parâmetros tóxico-cinéticos de RPL554 em forma de suspensão (invenção) ou solução (comparativo) foram avaliados no dia 7 de uma semana de exposição por inalação diária das composições de RPL554 a ratos. Os resultados são exibidos nas Tabelas 10 e 11 abaixo. Os parâmetros medidos são a concentração máxima de RPL554 no plasma sanguíneo dos ratos (Cmax), o tempo decorrido para atingir Cmax (Tmax) e a área sob a curva de dosagem após oito horas (AUC8h).TABELA 10

[0076] Resultados tóxico-cinéticos para ratos machos:

TABELA 11

[0077] Resultados tóxico-cinéticos para fêmeas de ratos:

[0078] Estes resultados demonstram que é possível atingir valores Cmax substancialmente mais altos utilizando a composição farmacêutica líquida de acordo com a presente invenção (por exemplo, grupos 3 e 4) em comparação com uma composição de solução (grupo 5). A dose limitada pela solubilidade viável a partir de uma solução de RPL554 evita que esses valores Cmax sejam atingidos com uma composição de solução. Também se demonstra que as composições de suspensão possuem atraso retardado, com valores Tmax maiores observados para os grupos 2 a 4.

EXEMPLO 5

[0079] Perfil tóxico-cinético em cães:

[0080] O perfil tóxico-cinético de suspensões de RPL554 de acordo com a presente invenção foi avaliado para cães da raça beagle. O projeto do estudo foi conforme definido na Tabela 12 abaixo.TABELA 12

[0081] Projeto do estudo, doses e concentrações nominais:

* Concentração de aerossol calculada considerando duração de exposição de 120 minutos e peso do corpo de 12 kg.

[0082] Os animais receberam a substância de teste, RPL554, por meio de administração por inalação por três dias em cada dose na fase de dose variável (Fase 1), com período de lavagem de pelo menos dois dias entre as doses. Na fase de dose constante (Fase 2), os animais receberam a substância de teste por sete dias consecutivos. Na fase cruzada (Fase 3), os animais receberam a substância de teste como uma única exposição à formulação de suspensão, seguida por dois dias sem dosagem seguidos por uma única exposição à formulação de solução comparativa.

[0083] Resultados tóxico-cinéticos:

[0084] Sete dias após a dosagem a 9,82 mg/kg/dia com a suspensão de RPL554 (grupo 2), os valores Cmax para machos e fêmeas foram de 116 ng/ml e 95,9 ng/ml, respectivamente, e os valores AUC6h para machos e fêmeas foram de 389 ng.h/ml e 289 ng.h/ml, respectivamente.

[0085] Após uma única exposição de suspensão de RPL554 a 0,395 mg/kg, os valores Cmax para machos e fêmeas foram de 13,4 ng/ml e 12,7 ng/ml, respectivamente, e os valores AUC6h para machos e fêmeas foram de 33,9 ng.h/ml e 31,5 ng.h/ml, respectivamente.

[0086] Após uma única exposição de solução de RPL554 a 0,543 mg/kg, os valores Cmax para machos e fêmeas foram de 40,9 ng/ml e 34,2 ng/ml, respectivamente, e os valores AUC6h para machos e fêmeas foram de 74,6 ng.h/ml e 62,8 ng.h/ml, respectivamente.

[0087] Observa-se no presente que é possível atingir altos valores AUC e Cmax utilizando a suspensão de RPL554 de acordo com a presente invenção (por exemplo, 116 ng/ml e 95,9 ng/ml).

[0088] Os resultados tóxico-cinéticos também confirmam que a formulação de suspensão fornece liberação retardada em comparação com a formulação de solução. Isso pode ser observado por meio dos dados do experimento da fase 3 (doses isoladas separadas da formulação de suspensão). Esses dados são apresentados na Tabela 13 abaixo, em que a formulação de solução (dose alvo de 0,5 mg/kg/dia, real 0,543 mg/kg/dia) é comparada com a formulação de suspensão (dose alvo de 0,5 mg/kg/dia, real 0,395 mg/kg/dia). A Tabela 13 exibe concentrações de plasma (ng/ml) ao longo do tempo após o tratamento com uma única dose da suspensão ou uma única dose da solução. Os dois tratamentos foram realizados com dois dias de diferença. São apresentados os dados para todos os três cães: um cão macho (61) e duas fêmeas (62 e 64). BLQ designa concentrações em plasma de menos de 1,00 ng/ml.TABELA 13

[0089] Valores de concentração em plasma de RPL554 (ng/ml) para três cães após uma dose com suspensão de RPL554 e uma solução de RPL554:

[0090] Os dados da Tabela 13 demonstram que a formulação de suspensão de RPL554 gera perfil de liberação mais retardado que a formulação de solução de RPL554. A concentração de RPL554 em plasma, por exemplo, encontra-se abaixo do limite detectável quatro horas após a inalação da formulação de solução para todos os cães, enquanto pelo menos 1,4 ng/ml de RPL554 estão presentes após quatro horas no plasma sanguíneo para todos os cães após a inalação da suspensão.

EXEMPLO 6 FUNÇÃO PULMONAR EM COBAIAS INTRODUÇÃO

[0091] RPL554 causa broncoproteção contra agentes espasmogênicos administrados por via intravenosa quando administrados na forma de pó seco ou quando preparados na forma de solução em solução salina acidificada (pH 2,5). Esse antagonismo funcional (diluição em dobra de 1,5, ou seja, 2,8 vezes) contra metacolina também foi verificado em pacientes asmáticos humanos (Franciosi et al, 2013). Este Exemplo avaliou a broncoproteção fornecida por RPL554 quando apresentado como a nova formulação em suspensão para nebulização.

METODOLOGIA EXPOSIÇÃO À DROGA

[0092] Machos de cobaias Dunkin Hartley (300-400 g) foram colocados em uma câmara de aerossol construída especialmente e exposta a veículo (solução salina a 0,9%, pH 2,5), RPL554 (solução de 2,5 mg/ml) ou RPL554 (solução de 1 mg/ml) por um período de quinze minutos. Aerossóis foram gerados utilizando um Nebulizador Ultrassônico (Ultraneb 99) e utilizou- se velocidade de fluxo de 1 l/min para dirigir a solução nebulizada para uma câmara de aerossol que continha quatro braços que permitem a restrição dos animais com seu trato respiratório superior (ou seja, nariz) protuberando-se para o interior da câmara de aerossol.

[0093] Após esse período de exposição de quinze minutos, permitiu-se a recuperação dos animais e, em seguida, antes da exposição à droga após duas e cinco horas, os animais foram anestesiados com uretano (1,5 g/kg) e realizou-se incisão mediana para expor a traqueia. Realizou-se traqueotomia e uma cânula traqueal foi amarrada no lugar e ligada a um pneumotacógrafo que, por sua vez, foi conectado a um transdutor de pressão Validyne (+ 2 cm H2O) para detecção de fluxo. Alterações do fluxo de ar na respiração foram medidas utilizando um sistema de Registro da Função Pulmonar (LFR, Versão 9, Mumed, Reino Unido) e exibidas em tempo real em um PC. O sinal de fluxo foi integrado para gerar medida do volume corrente.

[0094] Uma cânula foi inserida na cavidade torácica entre o terceiro e o quinto espaço intercostal e conectada ao lado negativo de um transdutor de pressão Validyne (+20 cm H2O). O lado positivo do transdutor de pressão foi conectado ao lado do pneumotacógrafo perto do animal, a fim de obter medição da pressão transpulmonar (TPP: diferença entre a boca e a pressão torácica). Os parâmetros de função pulmonar, resistência total das vias aéreas (RL; cm H2O.s/l) e complacência pulmonar dinâmica (ml/cm H2O) foram derivados de cada medida de fluxo, volume corrente e TPP por meio do método de integração. A artéria carótida foi canulada para medição da pressão sanguínea, respectivamente. Foram estabelecidas curvas de efeito de concentração cumulativas e a concentração de provocação (PC) de acetilcolina que produziu cumulativamente aumento de 50% de RL (PC50).

Exposição a acetilcolina

[0095] A broncoconstrição em acetilcolina (0,25 a 16 mg/ml, quatro segundos de exposição) foi monitorada por duas e cinco horas após a administração de uma solução de RPL554 (1 e 2,5 mg/ml) ou veículo (solução salina acidificada, pH 3,5 ou pH 2,5). Foram gerados aerossóis de acetilcolina com um Nebulizador de Laboratório Aeroneb® (Aerogen Inc.). O fluxo de entrada foi dirigido por meio do pneumotacógrafo para medição da mecânica pulmonar respiratória ou desviado através do nebulizador para fins de fornecimento de droga diretamente para o pulmão (mecânica respiratória não medida durante o período de exposição de quatro segundos).

[0096] Em uma série de experimentos separados, a função pulmonar foi realizada em duas e cinco horas após a inalação da nova formulação de suspensão de RPL554 (2,5 mg/ml e 10 mg/ml) e do veículo.

RESULTADOS PARÂMETROS BÁSICOS

[0097] A resistência pulmonar total básica (RL), complacência pulmonar dinâmica (Cdyn), pressão sanguínea arterial média (BP) e o resultado do nebulizador foram medidos em animais previamente expostos a veículo controle (solução salina, pH 2,5) e formulações de solução de RPL554 (1 mg/ml ou 2,5 mg/ml, Figura 1) e a novas formulações em suspensão de RPL554 (2,5 mg/ml e 10 mg/ml, Figura 2). Os parâmetros respiratórios e cardiovasculares básicos foram realizados antes da exposição a acetilcolina e monitorados por duas e cinco horas após exposição a RPL554 ou solução salina em cobaias anestesiadas.

PARÂMETROS DE FUNÇÃO PULMONAR

[0098] Geralmente, RL representa alterações do diâmetro das vias aéreas nas vias aéreas centrais após a ativação de receptores muscarínicos sobre músculos moles das vias aéreas nessa região do pulmão. Acetilcolina foi selecionada pelo seu curto período de ação.

1. FORMAÇÃO DE SOLUÇÃO DE RPL554

[0099] Acetilcolina administrada a cobaias anestesiadas por via inalatória causou reação bronquioconstritora dependente de dosagem conforme determinado pelas alterações de RL medidas em duas e cinco horas após a exposição à solução salina e RPL554 (solução de 1 mg/ml, 2,5 mg/ml).

1.1 ANÁLISE DE ACETILCOLINA RL PC50

[00100] Análise post hoc da média aritmética demonstrou broncoproteção significativa em duas horas para solução de 1 mg/ml de RPL554 (diferença média = 3,5 (0,11 - 8,83) mg/ml, P = 0,0445) e 2,5 mg/ml após duas horas (4,7 (0,4 - 9) mg/ml, P = 0,0357) e em cinco horas (3,4 (0,9 - 6) mg/ml, P = 0,0133). O grau de broncoproteção foi menos evidente em cinco horas com solução de 1 mg/ml de RPL554 (2,5 (-0,175,2) mg/ml, P = 0,0628).

[00101] Observou-se diferença significativa entre duas horas (1 mg/ml de RPL554, P = 0,0190 não ajustado) e cinco horas (2,5 mg/ml, P = 0,0095 não ajustado) de solução de RPL554 em comparação com o grupo com solução salina (Figura 1).

2. NOVA FORMULAÇÃO DE SUSPENSÃO DE RPL554

[00102] Acetilcolina administrada a cobaias anestesiadas por via inalatória causou bronquioconstrição dependente de dosagem conforme determinado pelas alterações de RL medidas em duas e cinco horas após a exposição à solução salina e suspensão de RPL554 (solução de 2,5 mg/ml e 10 mg/ml). Também se registrou simultaneamente redução dependente da dosagem em complacência pulmonar básica (Cdyn) após concentrações crescentes de acetilcolina em duas e cinco horas após exposição à solução salina ou suspensão de RPL554 (2,5 mg/ml e 10 mg/ml).

2.1 ANÁLISE DE ACETILCOLINA RL PC50

[00103] Análise de variação dos dados transformados por log2 para Acetilcolina RL PC50 revelou efeito de droga geral em duas horas (P = 0,0238). Para o grupo de tempo de duas horas, isso se refletiu por diferença significativa entre a suspensão de 10 mg/ml de RPL554 e o grupo veículo (diferença média de dobra = 2,67 (1,12 - 6,36), P < 0,05). Apesar da maior diferença média entre RPL554 (suspensão de 10 mg/ml) em comparação com veículo em cinco horas e 14 dobras (0,5-400), o amplo intervalo de confiança é a razão pela qual a diferença estatística não foi atingida (Figura 2, quadro superior).

[00104] Os dados de veículo para duas e cinco horas foram combinados e novamente analisados (quadro inferior da Figura 2). Houve efeito de tratamento geral significativo (P = 0,0016) que foi refletido por grau significativo de broncoproteção com 2,5 mg/ml de suspensão de RPL554 (2,52 vezes (1-5,72), P < 0,05) e 10 mg/ml de RPL554 (4,67 vezes (2-11), P < 0,05). Após cinco horas, 10 mg/ml de suspensão de RPL554 causaram grau significativo de broncoproteção (2,77 vezes (1,3-6,0), Figura 2, quadro inferior).

RESUMO

[00105] RPL554 inibiu a bronquioconstrição induzida por acetilcolina administrada por aerossol quando medida em duas e cinco horas após a exposição à droga. As formulações de solução de RPL554 (1 mg/ml, 2,5 mg/ml) e as novas formulações de suspensão de RPL554 (2,5 mg/ml, 10 mg/ml) produziram broncoproteção estatisticamente significativa.

EXEMPLO 7

[00106] Estudo farmacocinético em seres humanos:

[00107] Realizou-se um estudo de fase I aleatorizado duplo cego e controlado por placebo para determinar a segurança, tolerabilidade e farmacocinética de doses inaladas isoladas de formulação de suspensão de RPL554 de acordo com a presente invenção, administrada por nebulizador a pacientes homens saudáveis com idade de 18 a 50 anos, inclusive.

[00108] A dose nominal de formulação de suspensão foi de cerca de 1,5 mg, que é essencialmente equivalente à dose de 0,018 mg/kg previamente demonstrada como sendo bem tolerada em estudos clínicos com a formulação de solução.

[00109] A formulação de suspensão utilizada foi uma suspensão estéril para nebulização contendo 1,5 mg de substância de droga RPL554 micronizada em 5 ml de solução salina tamponada com fosfato sob pH 7, com tensoativos (Tween 20 e Span 2) (conforme descrito no Exemplo 1 acima, mas com concentração diferente de RPL554). A dosagem da suspensão foi realizada utilizando um nebulizador a jato padrão (PARI LC Sprint).

[00110] Amostras de sangue (4 ml em cada momento) foram coletadas em intervalos de tempo apropriados após a administração. Amostras foram coletadas por meio de punção venosa ou cânula residente no antebraço em tubos de heparina de lítio e serão imediatamente resfriadas (banho de gelo). O sangue foi centrifugado em até quinze minutos após a coleta. O plasma foi separado em uma centrífuga refrigerada (cerca de 4 °C) a 1100 g por quinze minutos e transferido para tubos de polipropileno. Foi então medida a concentração do ativo.

[00111] Os resultados médios são apresentados na Figura 3, que exibe as curvas de concentração médias para os pacientes após a administração das formulações de solução ou suspensão. Os resultados da formulação de suspensão foram derivados de um estudo clínico anterior (The Lancet Respiratory Medicine, Volume 1, n° 9, págs. 714-727, novembro de 2013), que utilizou uma solução estéril para nebulização contendo RPL554 dissolvido em solução salina tamponada com fosfato e citrato sob pH 3,2. A quantidade administrada por meio de nebulizador foi tal que a dose de RPL554 nominal foi de 0,018 mg/kg (cerca de 1,26 mg para uma pessoa de 70 kg).

[00112] Parâmetros farmacocinéticos médios medidos durante o estudo são apresentados na Tabela 14 abaixo.TABELA 14

[00113] Os valores da Tabela 14 demonstram que a formulação de suspensão de acordo com a presente invenção possui perfil farmacocinético substancialmente aprimorado em comparação com a formulação de solução comparativa. Particularmente, a área sob a curva (AUC) e a meia vida aumentam significativamente. Isso demonstra que a formulação de suspensão fornece uma forma inesperadamente aprimorada por meio da qual RPL554 pode ser administrado por inalação.

EXEMPLO 8 ESTUDO DE ESTABILIDADE POR DOZE MESES

[00114] Três bateladas da formulação de suspensão de acordo com a presente invenção foram elaboradas com as composições descritas na Tabela 15 abaixo.TABELA 15

TESTES ANALÍTICOS

[00115] Testes analíticos foram realizados após um, três,seis e doze meses de armazenagem das formulações a 25 °C e umidade relativa de 60%. Os resultados em doze meses encontram-se descritos abaixo. Aparência

[00116] O teste de aparência foi realizado visualmente em uma única amostra. A amostra de placebo foi considerada uma solução transparente incolor. As amostras de resistência de 0,5 mg/ml foram uma suspensão amarela clara livre de aglomerados visíveis, enquanto as amostras de resistência de 2,5 mg/ml e 10 mg/ml aparentemente eram suspensões amarelas livres de aglomerados visíveis.

PH

[00117] Realizou-se a determinação do pH sobre uma única amostra. Os resultados são exibidos na Tabela 16.TABELA 16

[00118] Concluiu-se que todas as três formulações ativas e o placebo possuem pH 6,7 após doze meses. Nenhuma alteração foi observada a partir do momento inicial.

TESTE

[00119] O teste foi realizado em duplicata. Os parâmetros principais do método são resumidos conforme segue:

[00120] Os resultados do teste são exibidos na Tabela 17. TABELA 17

[00121] Os resultados de teste para as suspensões ativas de cada resistência após doze meses não exibiram nenhuma alteração com relação ao momento inicial.

SUBSTÂNCIAS RELACIONADAS

[00122] A determinação das substâncias relacionadas foi realizada em duplicata. Os parâmetros principais do método são resumidos a seguir:

[00123] Os resultados da determinação de substâncias relacionadas nas suspensões são apresentados na Tabela 18.TABELA 18

[00124] Resultados da análise de substâncias relacionadas de suspensões de RPL554 (na forma de %LC):

[00125] Lote BN011/14 (0,5 mg/ml) - 25 °C/umidade relative de 60%:

[00126] Lote BN010/14 (2,5 mg/ml) - 25 °C/umidade relative de 60%:

[00127] Lote BN009/14 (10 mg/ml) - 25 °C/umidade relative de 60%:

[00128] Os resultados de substâncias relacionadas para as suspensões ativas de cada resistência após doze meses foram similares ao momento inicial.

[00129] Distribuição de tamanhos de partículas (PSD):

[00130] O método de Distribuição de Tamanhos de Partículas foi realizado utilizando Spraytec com as configurações detalhadas abaixo.

[00131] Propriedades ópticas: partícula: RI (real): 1,50 (partícula opaca padrão); RI (imaginária): 0,50; densidade: 1,00; dispersante (água); dispersante RI: 1,33.

[00132] Dispersante utilizado para análise de amostras: 1% polissorbato 20 em água deionizada.

[00133] Configurações da unidade controladora: velocidade do agitador, 1000 rpm.

[00134] Tempo de medição: tempo de amostragem, 30 s; tempo de fundo, 10 s.

[00135] Os resultados são exibidos na Tabela 19. TABELA 19

[00136] Resultados da determinação de tamanho de partículas por meio de difração a laser de suspensões de RPL554 (em μm):

[00137] Os perfis de distribuição de tamanho de partículas foram similares para todas as três resistências após doze meses e não exibiram nenhuma alteração em comparação com o momento inicial.

[00138] Avaliação microscópica:

[00139] Realizou-se avaliação microscópica por meio de determinação visual das formulações utilizando um microscópio G3. Não foram observados agregados em nenhum dos lotes testados, embora alguns grandes aglomerados soltos fossem ocasionalmente observados para as suspensões a 2,5 mg/ml e 10 mg/ml. A avaliação determinou que não houve alteração em comparação com o momento inicial.

[00140] Velocidade de fornecimento e dose total fornecida:

[00141] A velocidade de fornecimento e a dose total fornecida foram realizadas em três ampolas por batelada. As suspensões foram liberadas e fornecidas utilizando uma combinação de nebulizador PARI LC PLUS® e compressor PARI TurboBOY S®. Os resultados de velocidade de fornecimento e dose total fornecida são apresentados na Tabela 20.TABELA 20

[00142] Resultados da determinação de taxa de fornecimento e dose total fornecida utilizando nebulizador PARI LC PLUS:

[00143] Lote BN011/14 0,5 mg/ml:

[00144] Lote BN010/14 2,5 mg/ml:

[00145] Lote BN009/14 10 mg/ml:

* O teste é o total fornecido.- % Eficiência é a dose real total fornecida/dose teórica fornecida (calculada utilizando a massa fornecida e a resistência de formulação do teste).

[00146] A dose total fornecida e a velocidade de fornecimento para todas as resistências foram similares ao momento inicial. A eficiência de fornecimento de todas as suspensões foi consistente com os momentos anteriores.

[00147] Distribuição de tamanhos de partículas aerodinâmicas (APSD).

[00148] Realizou-se determinação da distribuição de tamanhos de partículas aerodinâmicas (APSD) em três ampolas por lote por condição, utilizando o Dispositivo de Impacto de Nova Geração (NGI). As suspensões foram liberadas e fornecidas utilizando uma combinação de nebulizador PARI LC PLUS® e compressor PARI TurboBOY S®. Os resultados da determinação de APSD são apresentados na Tabela 21. Os resultados foram introduzidos no programa CITDAS (Versão 3.10) para calcular a dose de partículas finas utilizando um valor de corte de 5 μm e os resultados obtidos dos cálculos também são apresentados na Tabela 21.TABELA 21

[00149] Resultados da distribuição de tamanhos de partículas aerodinâmicas por meio de NGI (na forma de mg de RPL554) utilizando o nebulizador PARI LC PLUS:

[00150] Lote BN011/14 (0,5 mg/ml) - 25 °C/umidade relative de 60%:

[00151] Lote BN010/14 (2,5 mg/ml) - 25 °C/umidade relative de 60%:

[00152] Lote BN009/14 (10 mg/ml) - 25 °C/umidade relative de 60%:

* calculado utilizando CITDAS sobre dados não arredondados. Abreviações: FPD: dose de partículas finas; FPF: fração de partículas finas; GSD: distribuição de tamanho geométrico; MMAD: diâmetro aerodinâmico médio em massa; MOC: coletor de micro-orifícios.

ESTABILIDADE APÓS DOZE MESES

[00153] As Tabelas 22 (para 0,5 mg/ml), 23 (para 2,5 mg/ml) e 24 (para 10 mg/ml) abaixo combinam os dados após doze meses descritos acima com os dados correspondentes após um, três e seis meses para as formulações de suspensão de RPL554 de acordo com a presente invenção.

[00154] (Obs.: os picos de impurezas marcados com * nas Tabelas 22, 23 e 24 foram observados como dupla, mas haviam sido observados como pico isolado no momento inicial. Isso provavelmente se deve ao uso de uma nova coluna que forneceu melhor separação e não se acredita ser sinal de degradação).

RESUMO

[00155] As suspensões de RPL554 para nebulização a 0,5 mg/ml (BN011/14), 2,5 mg/ml (BN010/14) e 10 mg/ml (BN009/14) e o placebo associado (BN008/14) foram fabricadas e colocadas em estabilidade a 25 °C/umidade relativa de 60% e testadas após doze meses.

[00156] Os resultados demonstraram que essencialmente não houve alterações em nenhum dos lotes testados após doze meses e confirmaram que as suspensões de RPL554 para nebulização foram estáveis por doze meses a 25 °C/umidade relativa de 60%.TABELA 22

TABELA 23

TABELA 24

EXEMPLO 9

[00157] Análise em seis meses sob condições aceleradas (40 °C/umidade relativa de 75%):

[00158] Os estudos de estabilidade acelerada a 40 °C/umidade relativa de 75% também prosseguiram até o sexto mês. Seus resultados são exibidos na Tabela 25 (para 0,5 mg/ml), Tabela 26 (para 2,5 mg/ml) e Tabela 27 (para 10 mg/ml).

[00159] (Conforme exibido no Exemplo 8, os picos de impurezas marcados com * foram observados como dupla, mas haviam sido observados como pico isolado no momento inicial. Isso provavelmente se deve ao uso de uma nova coluna que forneceu melhor separação e não se acredita ser sinal de degradação).

[00160] Os resultados demonstraram que essencialmente não houve alterações em nenhum dos lotes testados após seis meses e confirmaram que as suspensões de RPL554 para nebulização possuem excelente estabilidade, permanecendo estáveis por seis meses a 40 °C/umidade relativa de 75%. TABELA 25

TABELA 26

TABELA 27

Claims (21)

1. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA LÍQUIDA, apropriada para administração por inalação, caracterizada por compreender um diluente e uma suspensão de partículas de 9,10-dimetóxi-2-(2,4,6-trimetilfenilimino)-3-(N- carbamoil-2-aminoetil)-3,4,6,7-tetra-hidro-2H-pirimido[6,1-a]isoquinolin-4-ona (RPL554) ou um de seus sais farmaceuticamente aceitáveis,em que as partículas de RPL554 possuem uma distribuição de tamanho de partículas com um valor Dv50 (tamanho médio de partícula em volume) de cerca de 0,2 μm a cerca de 5 μm.

2. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelas partículas de RPL554 possuírem uma distribuição de tamanho de partículas com um valor Dv50 de cerca de 0,7 μm a cerca de 2,5 μm.

3. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 2, caracterizada pela concentração de partículas de RPL554 na composição farmacêutica líquida ser de cerca de 0,01 mg/ml a cerca de 40 mg/ml.

4. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pela composição possuir um pH de cerca de 6 a cerca de 8.

5. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada por compreender adicionalmente um ou mais tensoativos.

6. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 5,caracterizada pelos um ou mais tensoativos serem selecionados a partir de um ou mais tensoativos não iônicos.

7. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 6, caracterizada pelos um ou mais tensoativos serem selecionados a partir de alquil ésteres de polioxietileno glicol sorbitano e alquil ésteres de sorbitano.

8. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada por compreender adicionalmente um ou mais tampões.

9. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelos um ou mais tampões serem selecionados a partir de tampões de citrato ou fosfato.

10. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada por compreender: a) as partículas de RPL554 em uma concentração de cerca de 0,01 mg/ml a cerca de 40 mg/ml; b) um ou mais tensoativo(s) em uma concentração de cerca de 0,01 mg/ml a cerca de 5 mg/ml; e c) um tampão em uma concentração de cerca de 5 mg/ml a cerca de 20 mg/ml.

11. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pela composição compreender adicionalmente um ajustador da tonicidade, opcionalmente em que o ajustador da tonicidade é cloreto de sódio.

12. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 11, caracterizada pelo diluente ser água.

13. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada pela composição compreender: a) as partículas de RPL554 em uma concentração de 0,01 mg/ml a 30 mg/ml; b) um alquil éster de polioxietileno glicol sorbitano em uma concentração de 0,1 mg/ml a 2 mg/ml; c) um alquil éster de sorbitano em uma concentração de 0,01 mg/ml a 0,1 mg/ml; d) um primeiro componente tampão de fosfato em uma concentração de 5 mg/ml a 10 mg/ml; e) um segundo componente tampão de fosfato em uma concentração de 5 mg/ml a 10 mg/ml; e f) um ajustador de tonicidade em uma concentração de 2 mg/ml a 8 mg/ml.

14. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizada pela composição compreender: a) as partículas de RPL554 em uma concentração de 0,05 mg/ml a 25 mg/ml; b) monolaurato de polioxietileno (20) sorbitano (Polissorbato 20, Tween 20) em uma concentração de 0,1 mg/ml a 2 mg/ml; c) monolaurato de sorbitano (Span 20) em uma concentração de 0,01 mg/ml a 0,1 mg/ml; d) mono-hidrato de fosfato monossódico em uma concentração de 5 mg/ml a 10 mg/ml; e) fosfato de sódio dibásico anidro em uma concentração de 5 mg/ml a 10 mg/ml; e f) cloreto de sódio em uma concentração de 2 mg/ml a 8 mg/ml.

15. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada por ser apropriada para administração por meio de nebulizador.

16. NEBULIZADOR, caracterizado por compreender uma composição conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 15.

17. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada por ser para o uso no tratamento do corpo humano ou animal.

18. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada por ser para uso no tratamento ou prevenção de uma doença ou condição selecionada a partir de asma, asma alérgica, febre do feno, rinite alérgica, bronquite, enfisema, bronquiectase, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), síndrome de tensão respiratória em adultos (ARDS), asma resistente a esteroides, asma severa, asma pediátrica, fibrose cística, fibrose pulmonar, doença pulmonar intersticial, distúrbios da pele, dermatite atópica, psoríase, inflamação ocular, isquemia cerebral, doenças inflamatórias e doenças autoimunes.

19. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 18, caracterizada pela doença ou condição ser doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD).

20. USO DA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA LÍQUIDA, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado por ser para a fabricação de um medicamento para o tratamento do corpo humano ou animal.

21. USO DA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA LÍQUIDA, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizado por ser para a fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de uma doença ou condição selecionada a partir de asma, asma alérgica, febre do feno, rinite alérgica, bronquite, enfisema, bronquiectase, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), síndrome de tensão respiratória em adultos (ARDS), asma resistente a esteroides, asma severa, asma pediátrica, fibrose cística, fibrose pulmonar, doença pulmonar intersticial, distúrbios da pele, dermatite atópica, psoríase, inflamação ocular, isquemia cerebral, doenças inflamatórias e doenças autoimunes.

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