BR112017002090B1 - Composição aquosa de fator viii de coagulação e método de estabilizar uma molécula de fviii - Google Patents

Composição aquosa de fator viii de coagulação e método de estabilizar uma molécula de fviii Download PDF

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Abstract

a invenção refere-se a composições de fator viii e seu uso.

Description

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[001] A presente invenção refere-se ao Fator VIII (FVIII), uma proteína encontrada no plasma sanguíneo, que age como um cofator na cascata de reações levando à coagulação sanguínea. Uma deficiência na quantidade de atividade de FVIII no sangue resulta no transtorno de coagulação conhecido como hemofilia A, uma condição hereditária que afeta principalmente os homens. Hemofilia A é correntemente tratada com preparações terapêuticas de FVIII derivadas do plasma humano ou fabricadas usando tecnologia de DNA recombinante. Tais preparações são administradas em resposta a um episódio hemorrágico (terapia sob demanda) ou em intervalos regulares, frequentes para impedir hemorragia descontrolada (profilaxia).
[002] FVIII é conhecido como sendo relativamente instável em preparações terapêuticas. No plasma sanguíneo, FVIII é usualmente com- plexado com uma outra proteína plasmática, fator de von Willebrand (vWF), que está presente no plasma em um excesso molar grande da subunidade VWF para FVIII e acredita-se que proteja FVIII da degradação prematura. Uma outra proteína plasmática circulante, albumina, também pode desempenhar um papel em estabilizar FVIII in vivo. Preparações de FVIII correntemente comercializadas portanto frequentemente contam com o uso de albumina e/ou vWF para estabilizar FVIII durante o processo de fabricação e durante o armazenamento.
[003] A albumina e vWF usados em preparações de FVIII correntemente comercializadas são derivadas do plasma humano sanguíneo, entretanto, e o use de tal material tem certas desvantagens. Um excesso molar grande de albumina comparado a FVIII é tipicamente adicionado de modo a aumentar a estabilidade do FVIII em tais prepara- PPeteitçiãçoão87870022000201206779,1,dede131/20/20/22/022002,0,pápgá.g.1 52/1257 ções, e isto torna mais difícil caracterizar a proteína FVIII propriamente dita nestas preparações. A adição de albumina derivada de ser humano a FVIII também é percebida como sendo uma desvantagem com respeito às preparações de FVIII recombinantemente produzidas. Isto é porque, na ausência de tal albumina adicionada, o risco teórico de transmitir um vírus seria reduzido em preparações de FVIII recombi- nantemente derivadas.
[004] Várias tentativas para formular FVIII sem albumina ou vWF (ou com níveis relativamente baixos destes excipientes) foram descritas. Por exemplo, a Pat. dos EUA No 5.565.427 (EP 508 194) descreve preparações de FVIII que contêm combinações particulares de detergente e aminoácidos, especificamente arginina e glicina, além de exci- pientes tais como cloreto de sódio e sacarose.
[005] A Pat. dos EUA No 5.763.401 (EP 818 204) também descreve uma formulação de FVIII terapêutica sem albumina, compreendendo 15 a 60 mM de sacarose, até 50 mM de NaCl, até 5 mM de cloreto de cálcio, 65 a 400 mM de glicina, e até 50 mM de histidina.
[006] A Pat. dos EUA No 5.733.873 (EP 627 924) de Osterberg (atribuída a Pharmacia & Upjohn) divulga formulações que incluem entre 0,01 e 1 mg/ml de um tensoativo.
[007] Outras tentativas de usar concentrações baixas ou altas de cloreto de sódio também foram descritas. A Pat. dos EUA No 4.877.608 (EP 315 968) divulga formulações com concentrações relativamente baixas de cloreto de sódio, isto é, 0,5 mM a 15 mM de NaCl.
[008] Por outro lado, a Pat. dos EUA No 5.605.884 (EP 0 314 095) mostra o uso de formulações com concentrações relativamente altas de cloreto de sódio.
[009] Outras formulações de FVIII são divulgadas em WO 2010/054238, EP 1 712 223, WO 2000/48635, WO 96/30041, WO 96/22107, WO 2011/027152, EP 2 361 613, EP 0 410 207, EP 0 511 234, US 5565427, EP 0 638 091, EP 0 871 476, EP 0 819 010, US 5874408, US 2005/0256038, US 2008/0064856, WO 2005/058283, WO 2012/037530 e WO 2014/026954. EP 1 712 223 A1 divulga composições de FVIII compreendendo histidina e CaCl2, mas as concentrações combinadas de histidina e Ca2+ nas composições de EP 1 712 223 A1 são muito baixas para conferir a estabilidade de FVIII desejada em solução aquosa.
[0010] Outras formulações de FVIII terapêuticas da técnica anterior geralmente incluem albumina e/ou vWF para o propósito de estabilizar FVIII e portanto não são relevantes para a presente descrição .
[0011] Um problema na preparação de composições de FVIII é fornecer uma solução que é adequada para liofilização e uso depois da reconstituição subsequente. Um critério importante a este respeito é que a solução de FVIII deveria mostrar uma atividade de FVIII estável e não deveria mostrar nenhuma turvação antes da liofilização. Se uma solução de FVIII aquosa for turva antes da liofilização, este é um sinal claro de que uma ou mais substâncias na solução, incluindo FVIII propriamente dita, agregaram. Isto é altamente indesejável, visto que isto é tipicamente uma indicação de proteína desnaturada, que leva à atividade reduzida. Uma segunda questão principal com formulações de FVIII é sua estabilidade depois da liofilização. Sinais de estabilidade deficiente incluem uma atividade remanescente reduzida de FVIII depois da liofilização, armazenamento e reconstituição e a presença de complexos de peso molecular alto de FVIII.
[0012] Portanto, existe uma grande necessidade de composições compreendendo FVIII que não mostram nenhuma turvação ou outra deficiência relevante de qualidade como por exemplo, perda significan- te de atividade antes da liofilização e possuem estabilidade a longo prazo depois da liofilização ao mesmo tempo. Como as necessidades de uma solução estável antes da liofilização e um liofilizado estável em termos de composição podem diferir significativamente, ambas as condições têm que ser consideradas quando desenvolvem tal formulação estável.
[0013] Foi surpreendentemente descoberto agora que isto pode ser obtido por composições de acordo com esta invenção, que compreendem histidina e cálcio em certas concentrações mínimas. Os inventores particularmente descobriram que, com respeito à estabilidade de FVIII, uma concentração mais baixa de histidina pode ser balanceada por concentrações de cálcio mais altas, e vice versa. Isto é, por exemplo, não divulgado em EP 1 712 223 A1, e, consequentemente, as composições descritas neste não antecipam o assunto reivindicado na presente invenção. Especificamente, as concentrações de histidina das composições de EP 1 712 223 A1 são mais baixas do que neces-sário pela reivindicação 1 do presente pedido. As composições da presente invenção têm uma vantagem adicional em que elas estão próximas as condições fisiológicas em termos de osmolaridade. Isto evita irritações ou outros efeitos locais que poderiam ser causados por composições significativamente hiper-osmoláricas que estão presentes em muitas formulações da técnica anterior de Fator VIII.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[0014] A presente invenção refere-se a uma composição aquosa de FVIII, composição esta que pode ser usada para tratar um indivíduo com hemofilia A.
[0015] Os itens (1) a (93) seguintes descrevem vários aspectos e formas de realização da presente invenção:
[0016] (1) Uma composição aquosa de Fator VIII de coagulação, compreendendo:
[0017] a. uma molécula de FVIII;
[0018] b. 40 a 195 mM de um sal de sódio;
[0019] c. histidina;
[0020] d. pelo menos 1 mM de um sal de cálcio; e
[0021] e. um tensoativo;
[0022] em que [His] > 180 mM - 20*[Ca2+], em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio na composição aquosa em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina na composição aquosa em milimol por litro; e em que a osmolaridade da composição é 600 mOsmol/L ou menos.
[0023] (2) Uma composição aquosa de Fator VIII de coagulação, compreendendo:
[0024] a. uma molécula de FVIII;
[0025] b. 40 a 95 mM de um sal de sódio;
[0026] c. histidina;
[0027] d. pelo menos 1 mM de um sal de cálcio; e
[0028] e. um tensoativo;
[0029] em que [His] > 180 mM - 20*[Ca2+], em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio na composição aquosa em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina na composição aquosa em milimol por litro, e em que a osmolaridade da composição é preferencialmente 600 mOsmol/L ou menos.
[0030] (3) Uma composição aquosa de Fator VIII de coagulação, compreendendo:
[0031] a. uma molécula de FVIII;
[0032] b. pelo menos 40 mM de um sal de sódio;
[0033] c. histidina;
[0034] d. sacarose
[0035] e. pelo menos 1 mM de um sal de cálcio; e
[0036] f. um tensoativo;
[0037] em que [His] > 180 mM - 20*[Ca2+], em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio na composição aquosa em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina na composição aquosa em milimol por litro, e em que a osmolaridade da composição é preferencialmente 600 mOsmol/L ou menos.
[0038] (4) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que as fórmulas estão sujeitas à condição de que [His] > 0.
[0039] (5) A composição aquosa de acordo com o item (1) ou (3), em que a concentração do sal de sódio é 50 a 150 mM.
[0040] (6) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração do sal de sódio é 50 a 95 mM.
[0041] (7) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração do sal de sódio é 50 a 75 mM.
[0042] (8) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração do sal de sódio é 60 a 70 mM.
[0043] (9) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração do sal de sódio é cerca de 65 mM.
[0044] (10) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração de histidina é pelo menos 5 mM.
[0045] (11) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração de histidina é pelo menos 10 mM.
[0046] (12) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração de histidina é pelo menos 20 mM.
[0047] (13) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração de histidina é pelo menos 30 mM.
[0048] (14) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração de histidina é pelo menos 40 mM.
[0049] (15) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração de histidina é pelo menos 50 mM.
[0050] (16) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração de histidina é 50 a 150 mM.
[0051] (17) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração de histidina é cerca de 100 mM.
[0052] (18) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição tem um pH de 5 a 9.
[0053] (19) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição tem um pH de 6 a 8.
[0054] (20) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição tem um pH de 6,5 a 7,5.
[0055] (21) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição tem um pH de 6,8 a 7,2.
[0056] (22) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição tem um pH de cerca de 7.
[0057] (23) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição, durante (i) liofilização, (ii) armazenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +25 °C e uma umidade relativa de 40 % por um período de 6 meses, e (iii) reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, mostra uma recuperação de atividade de FVIII:C de pelo menos 80 %, em relação à mesma composição durante (i) a liofilização e, sem armazenamento da composição liofilizada, (ii) reconstituição imediata subsequente em água destilada.
[0058] (24) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição, durante (i) a liofilização, (ii) arma-zenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +25°C e uma umidade relativa de 40 % por um período de 12 meses, e (iii) a reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, mostra uma recuperação de atividade de FVIII:C de pelo menos 80 %, em relação à mesma composição durante (i) a liofilização e, sem armazenamento da composição liofilizada, (ii) reconstituição imediata subsequente em água destilada.
[0059] (25) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição, durante (i) liofilização, (ii) armazenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +25 °C e uma umidade relativa de 40 % por um período de 18 meses, e (iii) reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, mostra uma recuperação de atividade de FVIII:C de pelo menos 80 %, em relação à mesma composição durante (i) a liofilização e, sem armazenamento da composição liofilizada, (ii) reconstituição imediata subsequente em água destilada.
[0060] (26) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição, durante (i) liofilização, (ii) armazenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +25 °C e uma umidade relativa de 40 % por um período de 24 meses, e (iii) reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, mostra uma recuperação de atividade de FVIII:C de pelo menos 80 %, em relação à mesma composição durante (i) a liofilização e, sem armazenamento da composição liofilizada, (ii) reconstituição imediata subsequente em água destilada.
[0061] (27) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição, durante (i) liofilização, (ii) armazenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +25 °C e uma umidade relativa de 40 % por um período de 36 meses, e (iii) reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, mostra uma recuperação de atividade de FVIII:C de pelo menos 80 %, em relação à mesma composição durante (i) a liofilização e, sem ar- mazenamento da composição liofilizada, (ii) reconstituição imediata subsequente em água destilada.
[0062] (28) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição, durante (i) liofilização, (ii) armazenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +40 °C e uma umidade relativa de 60 % por um período de 6 meses, e (iii) reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, mostra uma recuperação de atividade de FVIII:C de pelo menos 80 %, em relação à mesma composição durante (i) a liofilização e, sem armazenamento da composição liofilizada, (ii) reconstituição imediata subsequente em água destilada.
[0063] (29) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição, durante (i) liofilização, (ii) armazenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +40 °C e uma umidade relativa de 60 % por um período de 12 meses, e (iii) reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, mostra uma recuperação de atividade de FVIII:C de pelo menos 80 %, em relação à mesma composição durante (i) a liofilização e, sem armazenamento da composição liofilizada, (ii) reconstituição imediata subsequente em água destilada.
[0064] (30) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição, durante (i) liofilização, (ii) armazenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +40 °C e uma umidade relativa de 60 % por um período de 18 meses, e (iii) reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, mostra uma recuperação de atividade de FVIII:C de pelo menos 80 %, em relação à mesma composição durante (i) a liofilização e, sem armazenamento da composição liofilizada, (ii) reconstituição imediata subsequente em água destilada.
[0065] (31) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição, durante (i) liofilização, (ii) armazenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +40 °C e uma umidade relativa de 60 % por um período de 24 meses, e (iii) reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, mostra uma recuperação de atividade de FVIII:C de pelo menos 80 %, em relação à mesma composição durante (i) a liofilização e, sem armazenamento da composição liofilizada, (ii) reconstituição imediata subsequente em água destilada.
[0066] (32) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição, durante (i) liofilização, (ii) armazenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +25 °C e uma umidade relativa de 40 % por um período de 12 meses, e (iii) reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, tem uma turvação de 18 NTU ou menos.
[0067] (33) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que o sal de cálcio é cloreto de cálcio.
[0068] (34) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que o sal de sódio é cloreto de sódio.
[0069] (35) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição compreende ainda um carboidrato.
[0070] (36) A composição aquosa de acordo com (35) acima, em que o carboidrato é selecionado a partir do grupo consistindo em sacarose, trealose e rafinose.
[0071] (37) A composição aquosa de acordo com (35) ou (36) aci ma, em que o carboidrato é sacarose.
[0072] (38) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (35) a (37) acima*, em que a concentração do carboidrato é 1 a 20 % p/p.
[0073] (39) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (35) a (37) acima, em que a concentração do carboidrato é 2 a 10 % p/p.
[0074] (40) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (35) a (37) acima*, em que a concentração do carboidrato é 3 a 8 % p/p.
[0075] (41) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (35) a (37) acima*, em que a concentração do carboidrato é 4 a 6 % p/p.
[0076] (42) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (35) a (37) acima*, em que a concentração do carboidrato é cerca de 5 % p/p.
[0077] (43) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração do tensoativo é pelo menos 0,001 % v/v.
[0078] (44) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração do tensoativo é 0,001 a 0,1 % v/v.
[0079] (45) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração do tensoativo é 0,002 a 0,2 % v/v.
[0080] (46) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a concentração do tensoativo é 0,005 % v/v.
[0081] (47) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que o tensoativo é um tensoativo que não ocorre na-turalmente.
[0082] (48) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que o tensoativo é polisorbato 80.
[0083] (49) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que o tensoativo é polisorbato 20.
[0084] (50) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição compreende ainda pelo menos um aminoácido exceto histidina.
[0085] (51) A composição aquosa de acordo com (50) acima, em que o pelo menos um aminoácido exceto histidina é selecionado a partir do grupo consistindo em arginina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutâmico, glutamina, lisina, metionina, fenilalanina, leucina, isoleucina e combinações destes.
[0086] (52) A composição aquosa de acordo com (50) acima, em que o pelo menos um aminoácido exceto histidina é arginina.
[0087] (53) A composição aquosa de acordo com (50) acima, em que o pelo menos um aminoácido exceto histidina é asparagina.
[0088] (54) A composição aquosa de acordo com (50) acima, em que o pelo menos um aminoácido exceto histidina é ácido aspártico.
[0089] (55) A composição aquosa de acordo com (50) acima, em que o pelo menos um aminoácido exceto histidina é ácido glutâmico.
[0090] (56) A composição aquosa de acordo com (50) acima, em que o pelo menos um aminoácido exceto histidina é glutamina.
[0091] (57) A composição aquosa de acordo com (50) acima, em que o pelo menos um aminoácido exceto histidina é lisina.
[0092] (58) A composição aquosa de acordo com (50) acima, em que o pelo menos um aminoácido exceto histidina é metionina.
[0093] (59) A composição aquosa de acordo com (50) acima, em que o pelo menos um aminoácido exceto histidina é fenilalanina.
[0094] (60) A composição aquosa de acordo com (50) acima, em que o pelo menos um aminoácido exceto histidina é isoleucina.
[0095] (61) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (50) a (60) acima, em que a concentração de o pelo menos um amino- ácido exceto histidina é pelo menos 0,1 mM.
[0096] (62) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (50) a (60) acima, em que a concentração de o pelo menos um amino- ácido exceto histidina é pelo menos 1 mM.
[0097] (63) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (50) a (60) acima, em que a concentração de o pelo menos um amino- ácido exceto histidina é 5 a 300 mM.
[0098] (64) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (50) a (60) acima, em que a concentração de o pelo menos um amino- ácido exceto histidina é 10 a 200 mM.
[0099] (65) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição compreende ainda pelo menos um antioxidante.
[00100] (66) A composição aquosa de acordo com (65) acima, em que o pelo menos um antioxidante é selecionado a partir do grupo consistindo em glutationa reduzida, metionina, cisteína, sulfato de sódio, vitamina A, vitamina E, ácido ascórbico, ascorbato de sódio e combinações destes.
[00101] (67) A composição aquosa de acordo com (65) acima, em que o pelo menos um antioxidante é glutationa reduzida.
[00102] (68) A composição aquosa de acordo com (65) acima, em que o pelo menos um antioxidante é metionina.
[00103] (69) A composição aquosa de acordo com (65) acima, em que o pelo menos um antioxidante é cisteína.
[00104] (70) A composição aquosa de acordo com (65) acima, em que o pelo menos um antioxidante é sulfato de sódio.
[00105] (71) A composição aquosa de acordo com (65) acima, em que o pelo menos um antioxidante é vitamina A.
[00106] (72) A composição aquosa de acordo com (65) acima, em que o pelo menos um antioxidante é vitamina E.
[00107] (73) A composição aquosa de acordo com (65) acima, em que o pelo menos um antioxidante é ácido ascórbico.
[00108] (74) A composição aquosa de acordo com (65) acima, em que o pelo menos um antioxidante é ascorbato de sódio.
[00109] (75) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (65) a (74) acima, em que a concentração de o pelo menos um antio- xidante é pelo menos 0,05 mM.
[00110] (76) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (65) a (74) acima, em que a concentração de o pelo menos um antio- xidante é 0,05 a 100 mM.
[00111] (77) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (65) a (74) acima, em que a concentração de o pelo menos um antio- xidante é 0,1 a 20 mM.
[00112] (78) A composição aquosa de acordo com qualquer um do (65) a (74) acima, em que a concentração de o pelo menos um antio- xidante é 0,25 a 5 mM.
[00113] (79) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a molécula de Fator VIII é uma molécula de FVIII que não ocorre naturalmente.
[00114] (80) A composição aquosa de acordo com (79), em que a molécula de Fator VIII foi recombinantemente produzida.
[00115] (81) A composição aquosa de acordo com (79) ou (80), em que a molécula de Fator VIII tem um padrão de glicosilação diferente daquele de FVIII derivado de plasma humano.
[00116] (82) A composição aquosa de acordo com um do (79) a (81) acima, em que a molécula de FVIII tem uma sequência de amino- ácido diferente da SEQ ID NO: 1.
[00117] (83) A composição aquosa de acordo com um do (79) a (82) acima, em que a molécula de FVIII é selecionada a partir do grupo consistindo em (i) moléculas de FVIII truncadas ou suprimidas de domínio B, (ii) moléculas de FVIII de cadeia única, (iii) moléculas de FVIII tendo grupos protetivos ou porções extensoras de meia-vida, (iv) proteínas de fusão compreendendo uma sequência de aminoácido de FVIII fundida a uma sequência de aminoácido heteróloga, e (v) combinações destes.
[00118] (84) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a molécula de Fator VIII tem a sequência de aminoácido como mostrado na SEQ ID NO: 2.
[00119] (85) A composição aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes, em que a composição tem uma turvação de 18 NTU ou menos, preferencialmente de 6 NTU ou menos, mais preferencialmente de 3 NTU ou menos.
[00120] (86) A composição aquosa de acordo com o (85) acima, em que a composição, antes da liofilização, tem uma turvação de 18 NTU ou menos, preferencialmente de 6 NTU ou menos, mais preferencialmente de 3 NTU ou menos.
[00121] (87) A composição aquosa de acordo com o (85) acima, em que a composição, durante a liofilização e reconstituição em água destilada, tem uma turvação de 18 NTU ou menos, preferencialmente de 6 NTU ou menos, mais preferencialmente de 3 NTU ou menos.
[00122] (88) Uma composição obtenível liofilizando-se a composi ção aquosa de acordo com qualquer um dos precedentes .
[00123] (89) Uma composição aquosa obtenível reconstituindo-se a composição liofilizada aquosa de acordo com (88) acima com uma solução aquosa.
[00124] (90) A composição aquosa de (89), em que a solução aquosa é selecionada a partir de água destilada, uma solução salina e uma solução compreendendo histidina.
[00125] (91) Um método de estabilizar uma molécula de FVIII, com preendendo misturar os componentes definidos em qualquer um do (1) a (3) acima para obter uma composição aquosa, e liofilizar a composição aquosa.
[00126] (92) O método de (91), em que a composição aquosa obti- da é uma composição de acordo com qualquer um do (1) a (87) precedentes.
[00127] (93) Um método de tratar um transtorno de coagulação sanguínea, compreendendo administrar a um indivíduo uma quantidade farmaceuticamente eficaz da composição do (89) ou (90) precedentes.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[00128] A Figura 1 descreve a relação entre as concentrações de histidina e íons cálcio na composição da presente invenção. A figura resume os resultados de um estudo de formulação líquida (Exemplo 7) com concentrações de histidina e cloreto de cálcio variadas ao passo que os outros excipientes foram mantidos constantes (65 mmol/L de cloreto de sódio, 5 % de sacarose, 0,005 % de Tween® 80). Pontos representam uma turvação acima de um nível limiar de 18 NTU, losangos representam uma solução clara (turvação menor do que ou igual a 18 NTU). O gráfico ilustra que se certas concentrações de his- tidina e íons cálcio são aplicadas, uma solução clara é resultante. A necessidade para uma solução clara é reapresentada por uma fórmula fornecida mais tarde.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO Moléculas de Fator VIII
[00129] Como usado aqui, o termo "Fator VIII" ou "FVIII" refere-se a moléculas tendo pelo menos parte da atividade de coagulação de Fator VIII nativo humano. FVIII humano consiste em 2351 aminoácidos (incluindo um peptídeo de sinal) e 2332 aminoácidos (sem o peptídeo de sinal). "FVIII nativo humano" é a molécula de FVIII derivada de plasma humano tendo a sequência de tamanho natural como mostrado na SEQ ID NO: 1 (aminoácido 1-2332). A estrutura de domínio detalhada, A1-a1-A2-a2-B-a3-A3-C1-C2 tem os resíduos de aminoácido correspondentes (referindo-se à SEQ ID NO 1) : A1 (1-336), a1 (337- 372), A2 (373-710), a2 (711-740), B (741-1648), a3 (1649-1689), A3 (1690-2020), C1 (2021-2173) e C2 (2174-2332).
[00130] A atividade de coagulação da molécula de FVIII pode ser determinada usando um ensaio de coagulação de estágio único (por exemplo, como descrito em Lee et al., Thrombosis Research 30, 511 519 (1983)) ou um ensaio de substrato cromogênico (por exemplo, o kit de teste de FVIII coamático da Chromogenix-Instrumentation Laboratory SpA V. le Monza 338 - 20128 Milano, Italy). Outros detalhes destes ensaios de atividade são descritos infra.
[00131] Preferencialmente, as moléculas de FVIII usadas de acordo com esta invenção têm pelo menos 10 % da atividade molar específica de FVIII nativo humano. O termo "atividade molar específica" refere-se à atividade de coagulação por mol de FVIII e é indicado em "IU/mol de FVIII.
[00132] Em uma modalidade preferida, a molécula de FVIII é uma molécula de FVIII que não ocorre naturalmente. Preferencialmente, a molécula de FVIII que não ocorre naturalmente foi produzida recombi- nantemente. Em uma outra modalidade, a molécula de FVIII foi produzida em cultura celular. Em uma outra modalidade preferida, a molécula de FVIII que não ocorre naturalmente tem um padrão de glicosilação diferente daquele de FVIII derivado de plasma. Ainda em uma outra modalidade, a molécula de FVIII é selecionada a partir do grupo consistindo em (i) moléculas de FVIII truncadas ou suprimidas de domínio B, (ii) moléculas de FVIII de cadeia única, (iii) moléculas de FVIII de cadeia dupla recombinantemente produzidas, (iv) moléculas de FVIII tendo grupos protetivos ou porções extensoras de meia-vida, (v) proteínas de fusão compreendendo uma sequência de aminoácido de FVIII fundida a uma sequência de aminoácido heteróloga, e (vi) combinações destes.
[00133] Os termos "Fator VIII" e "FVIII" são usados sinonimamente aqui. "Composições de Fator VIII" no sentido da presente invenção incluem composições compreendendo FVIII e FVIIIa. FVIIIa tipicamente pode estar presente em quantidades pequenas, por exemplo, cerca de 1 a 2 % de eFVIIIa, referido à quantidade total de proteína FVIII na composição. "FVIII" inclui variações alélicas naturais de FVIII que podem existir e ocorrer de um indivíduo a outro. FVIII pode ser derivado de plasma ou recombinantemente produzido, usando métodos bem conhecidos de produção e purificação. O grau e local de glicosilação, sulfatação de tirosina e outras modificações pós-tradução podem variar, dependendo da célula hospedeira escolhida e suas condições de crescimento.
[00134] O termo FVIII inclui análogos de FVIII. O termo "análogo de FVIII" como usado aqui refere-se a uma molécula de FVIII (de tamanho natural ou truncada/suprimida de domínio B) em que um ou mais aminoácidos foram substituídos ou suprimidos comparado à SEQ ID NO 1 ou, para moléculas de FVII truncadas/suprimidas de domínio B, a parte correspondente da SEQ ID NO 1. Análogos de FVIII não ocorrem em natureza mas são obtidos por manipulação humana.
[00135] As moléculas de Fator VIII incluídas nas composições da presente invenção também podem ser moléculas de FVIII trunca- das/suprimidas de domínio B em que os domínios remanescentes correspondem às sequências como apresentado nos números de amino- ácido 1-740 e 1649-2332 da SEQ ID NO: 1. Outras formas de moléculas de FVIII suprimidas de domínio B têm adicionalmente uma supressão parcial em seu domínio a3, o que leva a moléculas de FVIII de cadeia única.
[00136] Segue-se que estas moléculas de FVIII são moléculas re- combinantes produzidas em células hospedeiras transformadas, prefe-rencialmente de origem mamífera. Entretanto, os domínios remanescentes em um FVIII suprimido de domínio B, (isto é, os três domínios A, os dois domínios C e as regiões a1, a2 e a3) podem diferir levemente por exemplo, cerca de 1 %, 2 %, 3 %, 4 % ou 5 % da respectiva sequência de aminoácido como apresentado na SEQ ID NO 1 (aminoá- cidos 1-740 e 1649-2332).
[00137] As moléculas de FVIII incluídas na composição da presente invenção podem ser moléculas de FVIII de cadeia dupla ou moléculas de FVIII de cadeia única. As moléculas de FVIII incluídas na composição da presente invenção também podem ser fragmentos biologicamente ativos de FVIII, isto é, FVIII em que domínio(s) exceto o domínio B foram suprimidos ou truncados, mas em que a molécula de FVIII na forma suprimida/truncada mantém sua capacidade de suportar a formação de uma atividade de FVIII de coagulação sanguínea pode ser avaliada in vitro usando técnicas bem conhecidas na técnica. Um teste preferido para determinar a atividade de FVIII de acordo com esta in-venção é o ensaio de substrato cromogênico ou o ensaio de estágio único (ver infra). Modificações de aminoácido (substituições, supressões, etc.) podem ser introduzidas nos domínios remanescentes, por exemplo, de modo a modificar a capacidade de ligação do Fator VIII com vários outros componentes tais como por exemplo, Fator de Von Willebrand (vWF), proteína relacionada ao receptor de lipoproteína (LPR) de densidade baixa, vários receptores, outros fatores de coagulação, superfícies celular, etc. ou de modo a introduzir e/ou abolir sítios de glicosilação, etc. Outras mutações que não abolem a atividade de FVIII também podem ser acomodadas em uma molécula/análogo de FVIII para uso em uma composição da presente invenção.
[00138] Análogos de FVIII também incluem moléculas de FVIII, em que um ou mais dos resíduos de aminoácido do polipeptídeo precursor foram suprimidos ou substituídos com outros resíduos de aminoácido, e/ou em que resíduos de aminoácido adicionais foram adicionados ao polipeptídeo de FVIII precursor.
[00139] Além disso, as moléculas/análogos de Fator VIII podem compreender outras modificações por exemplo, no domínio B truncado e/ou em um ou mais dos outros domínios das moléculas ("derivados de FVIII "). Estas outras modificações podem estar na forma de várias moléculas conjugadas à molécula de Fator VIII, tais como por exemplo, compostos poliméricos, compostos peptídicos, compostos derivados de ácido graxo, etc.
[00140] O termo FVIII inclui FVIII glicopeguilado. No presente contexto, o termo "FVIII glicopeguilado" é intencionado a designar uma molécula de Fator VIII (incluindo FVIII de tamanho natural e FVIII trun- cado/suprimido de domínio B) em que um ou mais grupos PEG foram ligados ao polipeptídeo de FVIII por intermédio da(s) cadeia(s) late- ral(is) de polissacarídeo (glicano(s)) do polipeptídeo.
[00141] O termo FVIII inclui moléculas de FVIII tendo grupos prote- tivos ou porções extensoras de meia-vida. Os termos "grupos proteti- vos"/"porções extensoras de meia-vida" é aqui entendido como referindo-se a um ou mais grupos químicos ligados a uma ou mais funcionalidades de cadeia lateral de aminoácido tais como -SH, -OH, - COOH, -CONH2, -NH2, ou uma ou mais estruturas de N- e/ou O- glicano e que podem aumentar a meia-vida circulatória in vivo de várias proteínas/peptídeos terapêuticos quando conjugados a estas pro- teínas/peptídeos. Exemplos de grupos protetivos/porções extensoras de meia-vida incluem: Ácidos graxos biocompatíveis e derivados destes, Hidróxi Alquil Amido (HAS) por exemplo, Hidróxi Etil Amido (HES), Poli (Glyx-Sery)n (Polímero de Aminoácido Homo (HAP)), Ácido hialu- rônico (HA), Polímeros de Heparosana (HEP), Polímeros com base em fosforilcolina (polímero de PC), polímeros de Fleximer® (Mersana Therapeutics, MA, USA), Dextrano, Ácidos poli-siálicos (PSA), polietileno glicol (PEG), um domínio Fc, peptídeos semelhantes a Transferrina, Albumina, Elastina, polímeros XTEN® (Amunix, CA, USA), Peptídeos de ligação a albumina, um fragmento de fator de von Willebrand (fragmento de vWF), um Peptídeo de Terminal Carboxila (peptídeo de CTP, Prolor Biotech, IL), e qualquer combinação destes (ver, por exemplo, McCormick, C.L., A.B. Lowe, e N. Ayres, Water-Soluble Polymers, em Enciclopedia of Polymer Science and Technology. 2002, John Wiley & Sons, Inc.). A maneira de derivação não é crítica e pode ser elucidada a partir dos precedentes.
[00142] As moléculas de FVIII que podem ser usadas de acordo com esta invenção incluem proteínas de fusão compreendendo uma sequência de aminoácido de FVIII fundida a uma sequência de amino- ácido heteróloga, preferencialmente uma sequência de aminoácido extensora de meia-vida. Proteínas de fusão preferidas são proteínas de fusão de Fc e proteínas de fusão de albumina. O termo "proteína de fusão de Fc " é aqui significado como abrangendo FVIII fundido a um domínio Fc que pode ser derivado de qualquer isótipo de anticorpo. Um domínio Fc de IgG frequentemente será preferido devido à meia- vida circulatória relativamente longa de anticorpos de IgG. O domínio Fc além disso pode ser modificado de modo a modular certas funções efetoras tais como por exemplo, ligação ao complemento e/ou ligação a certos receptores de Fc. A fusão de FVIII com um domínio Fc, que tem a capacidade de ligar-se a receptores de FcRn, geralmente resultará em uma meia-vida circulatória prolongada da proteína de fusão comparado à meia-vida do FVIII wt. Segue-se que uma molécula de FVIII para uso na presente invenção também pode ser um derivado de um análogo de FVIII, tal como, por exemplo, uma proteína de fusão de um análogo de FVIII, um análogo de FVIII PEGuilado ou glicopeguila- do, ou um análogo de FVIII conjugado a um polímero de heparosana. O termo "proteína de fusão de albumina" é aqui significado a abranger FVIII fundido a uma sequência de aminoácido de albumina ou um fra-gmento ou derivado desta. A sequência de aminoácido heteróloga po- de ser fundida ao término N ou C de FVIII, ou ela pode ser inserida internamente dentro da sequência de aminoácido de FVIII. A sequência de aminoácido heteróloga pode ser qualquer "polipeptídeo extensor de meia-vida" descrito em WO 2008/077616 A1, a descrição do qual é incorporada aqui por referência.
[00143] Exemplos de moléculas de FVIII para uso em composições da presente invenção compreendem por exemplo as moléculas de FVIII descritas WO 2010/014708, US 2010/0173831, US 2010/0113365, WO 2009/108806, WO 2011/101242, WO 2011/131510, WO 2013/083858, e WO 2004/067566.
[00144] Exemplos de moléculas de FVIII, que podem ser usadas em uma composição da presente invenção incluem o ingrediente ativo de Advate®, Helixate®, Kogenate®, Xyntha® assim como a molécula de FVIII descrita em WO 2008/135501, WO 2009/007451 e a constru- ção designada "dBN(64-53)" da WO 2004/067566. Esta construção tem a sequência de aminoácido mostrada na SEQ ID NO 2.
[00145] A concentração de Fator VIII na composição da presente invenção está tipicamente na faixa de 10 a 10.000 IU/mL. Em formas de realização diferentes, a concentração de moléculas de FVIII nas composições da invenção está na faixa de 10 a 8.000 IU/mL, ou 10 a 5.000 IU/mL, ou 20 a 3.000 IU/mL, ou 50 a 1.500 IU/mL, ou 3.000 IU/mL, ou 2.500 IU/mL, ou 2.000 IU/mL, ou 1.500 IU/mL, ou 1.200 IU/mL, 1.000 IU/mL, ou 800 IU/mL, ou 600 IU/mL, ou 500 IU/mL, ou 400 IU/mL, ou 300 IU/mL, ou 250 IU/mL, ou 200 IU/mL, ou 150 IU/mL, ou 100 IU/mL.
[00146] "Unidade Internacional," ou "IU," é uma unidade de medição da atividade de coagulação sanguínea (potência) de FVIII como medido por um ensaio de atividade de FVIII tal como um ensaio de coagulação de estágio único ou um ensaio de atividade de FVIII de substrato cromogênico usando um padrão calibrado contra uma preparação de padrão internacional calibrada em "IU". Ensaios de coagulação de estágio único são conhecidos na técnica, tais como aqueles descritos em N Lee, Martin L, et al., An Effect of Predilution on Potency Assays of FVIII Concentrates, Thrombosis Research (Pergamon Press Ltd.) 30, 511 519 (1983). Princípio do ensaio de estágio único: O teste é executado como uma versão modificada do ensaio de Tempo de Tromboplastina Parcial ativado (aPTT): Incubação de plasma com fos- folipídeos e um ativador de superfície leva à ativação de fatores do sistema de coagulação intrínseco. A adição de íons cálcio desencadeia a cascata de coagulação. O tempo para a formação de um coágulo de fibrina mensurável é determinado. O ensaio é executado na presença de plasma deficiente de Fator VIII. A capacidade de coagulação do plasma deficiente é restaurada pelo Fator VIII de coagulação incluído na amostra a ser testada. O encurtamento do tempo de coagulação é proporcional à quantidade de Fator VIII presente na amostra. A atividade de Fator VIII de coagulação é quantificada por comparação direta a uma preparação padrão com uma atividade conhecida de Fator VIII em Unidades Internacionais.
[00147] Um outro ensaio padrão é um ensaio de substrato cromo- gênico. Ensaios de substrato cromogênico podem ser adquiridos comercialmente, tais como o kit de teste de FVIII coamático (Chromoge- nix-Instrumentation Laboratory SpA V. le Monza 338 - 20128 Milano, Italy). Princípio do ensaio cromogênico: Na presença de cálcio e fosfo- lipídeo, o Fator X é ativado pelo Fator IXa ao Fator Xa. Esta reação é estimulada pelo Fator VIIIa como cofator. FVIIIa é formado por quanti- dades baixas de trombina na mistura de reação de FVIII na amostra a ser medida. Quando do uso das concentrações ideais de Ca2+, fosfoli- pídeo e Fator IXa e uma quantidade em excesso de Fator X, ativação de Fator X é proporcional à potência do Fator VIII. O Fator X ativado libera o cromóforo pNA do substrato cromogênico S-2765. A liberação de pNA, medida em 405 nm, é portanto proporcional à quantidade de FXa formado, e, portanto, também à atividade de Fator VIII da amostra.
[00148] Secagem por congelamento ou liofilização, a menos que de outro modo indicado pelo contexto em que o mesmo aparece, deve ser usado para denotar um processo de secagem em que uma solução de materiais (isto é, um ingrediente farmacêutico ativo e vários aditivos de formulação ou "excipientes") é convertida em um sólido. Um processo de secagem por congelamento típico consiste em três estágios, "congelamento", "secagem primária" e "secagem secundária". No estágio de congelamento quase toda a água contida é convertida em gelo e solutos em sólidos (cristalinos ou amorfos). No estágio de secagem primária o gelo é removido do produto por sublimação direta que é obtida mantendo-se um gradiente de pressão favorável entre as moléculas de água (gelo) e a atmosfera adjacente. No estágio de secagem secundária a umidade residual é removida do produto por dessorção.
[00149] Se concentrações (p/v) são fornecidas para composições secas por congelamento elas referem-se ao volume diretamente antes da secagem por congelamento.
[00150] A menos que de outro modo observado, termos de porcentagem expressam porcentagens em peso/peso e temperaturas estão na escala de Celsius. Osmolaridade
[00151] A composição de Fator VIII da presente invenção tipicamente tem uma osmolaridade de menos do que 0,6 Osm/L. Isto está mais próximo às condições fisiológicas do que às osmolaridades em muitas formulações da técnica anterior que contêm concentrações altas de cloreto de sódio. Em formas de realização diferentes da invenção, a formulação tem uma osmolaridade abaixo de 0,55 Osm/L, abaixo de 0,5 Osm/L, abaixo de 0,45 Osm/L, ou abaixo de 0,4 Osm/L. Os termos "osmolaridade" e "concentração osmótica" são usados permu- tavelmente aqui.
[00152] Osmolaridade, ou concentração osmótica, é a medida de concentração de soluto, definida como o número de osmoles (Osm) de soluto por litro (L) de solução (osmol/L ou Osm/L). Ao passo que mola- ridade mede o número de moles de soluto por volume unitário de solução, a osmolaridade mede o número de osmoles de partículas de soluto por volume unitário de solução.
[00153] O cálculo teórico de osmolaridade é bem conhecido à pessoa habilitada na técnica. Brevemente, calcula-se para cada componente da solução o produto do coeficiente osmótico f, o número de partículas n nos quais a molécula dissocia-se em água, e a concentração molar, e soma o resultado em todos os componentes. A osmolari- dade de uma solução pode ser calculada a partir da expressão seguinte: Osm/L = ∑i fi ni Ci, onde o índice i representa a identidade de um componente particular; f, é o coeficiente osmótico para um componente particular; n é o número de partículas nos quais a molécula dissocia- se em água; C é a concentração molar do componente. A concentração molar tem alguma dependência de temperatura; para o presente propósito ela é referida como as concentrações a 25 °C.
[00154] Um modo alternativo para avaliar a pressão osmótica que uma solução pode exercer depois da injeção é avaliando-se a osmola- lidade, em que o teor dos componentes é avaliado em relação à massa de solvente. Osmolalidade e osmolaridade podem ser facilmente interconvertidas se a densidade da solução e a massa seca dos com- ponentes dissolvidos são conhecidos. Osmolalidade pode ser medida por vários métodos, o mais comumente depressão do ponto de congelamento.
[00155] Por exemplo, para água, 1 Osmol de um soluto adicionado a 1 kg de água reduz o ponto de congelamento em 1,86 °C. Métodos para medir a osmolalidade de uma solução por depressão do ponto de congelamento são descritos, por exemplo, na Farmacopeia Europeia 2.2.35 e na Farmacopeia dos EUA capítulo 785.
[00156] A tabela abaixo lista os coeficientes osmóticos e o número de partículas n para alguns excipientes importantes. Para outros componentes, um valor de f = 1 fornece uma aproximação suficientemente boa para propósitos práticos, e o valor de n é bem conhecido para essencialmente todos os compostos relevantes para preparações farmacêuticas para uso parenteral.
Figure img0001
[00157] A composição de acordo com a presente invenção compreende um sal de sódio.
[00158] Em uma modalidade a composição da presente invenção contém pelo menos 40 mM de um sal de sódio (por exemplo, NaCl). Em uma série de formas de realização, a composição compreende 40 a 195 mM de um sal de sódio (por exemplo, NaCl), ou 45 a 180 mM, ou 45 a 150 mM, ou 50 a 125 mM ou 50 a 100 mM, ou 60 a 95 mM, ou 60 a 75 mM, por exemplo, cerca de 65 mM. Ainda em uma outra modalidade a concentração de sal de sódio (por exemplo, NaCl) é 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94 ou 95 mM.
[00159] Preferencialmente, o sal de sódio é cloreto de sódio; em uma outra modalidade, o sal é acetato de sódio. Em uma terceira modalidade, a composição da invenção contém uma mistura de cloreto de sódio e acetato de sódio.
[00160] A composição de acordo com a presente invenção compreende ainda um sal de cálcio. O sal de cálcio usado de acordo com a presente invenção é tipicamente solúvel em água de modo que ele dissocia-se em um ou mais íons cálcio e contra-ânions durante a dissolução em uma solução aquosa. O termo "Ca2+" é sinônimo ao termo "íon cálcio".
[00161] Em uma modalidade a concentração de cálcio é definida pela fórmula seguinte, em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina em milimol por litro:
Figure img0002
[00162] Em uma outra modalidade a concentração de cálcio é definida pela fórmula seguinte, em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina em mi- limol por litro:
Figure img0003
[00163] Em uma outra modalidade a concentração de cálcio é definida pela fórmula seguinte, em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina em mi- limol por litro:
Figure img0004
[00164] Em uma outra modalidade a concentração de cálcio é definida pela fórmula seguinte, em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina em mi- limol por litro:
Figure img0005
[00165] As fórmulas acima estão sujeitas à condição de que [Ca2+] > 0. Tipicamente, a composição contém pelo menos 1 mM, preferencialmente pelo menos 2 mM, mais preferencialmente pelo menos 4 mM, o mais preferencialmente pelo menos 5 mM de um sal de cálcio. Em uma outra modalidade a composição contém até 100 mM de um sal de cálcio. Em uma outra modalidade, a composição compreende 1 a 50 mM de um sal de cálcio, ou 2 a 40 mM, ou 3 a 30 mM, ou 4 a 20 mM. Em uma modalidade particular, a composição contém cerca de 10 mM de um sal de cálcio.
[00166] O sal de cálcio pode, por exemplo, ser selecionado a partir do grupo de cloreto de cálcio, acetato de cálcio, gliconato de cálcio, lactato de cálcio, benzoato de cálcio e misturas destes, e outros sais de cálcio solúveis bem conhecidos pela pessoa habilitada na técnica. Em uma modalidade preferida, o sal de cálcio é cloreto de cálcio.
Histidina
[00167] A composição de acordo com a presente invenção compreende histidina, preferencialmente L-histidina.
[00168] Em uma modalidade a concentração de histidina é definida pela fórmula seguinte, em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina em milimol por litro:
Figure img0006
[00169] Em uma outra modalidade a concentração de histidina é definida pela fórmula seguinte, em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina em mi- limol por litro:
Figure img0007
[00170] Em uma outra modalidade a concentração de histidina é definida pela fórmula seguinte, em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina em mi- limol por litro:
Figure img0008
[00171] Em uma outra modalidade a concentração de histidina é definida pela fórmula seguinte, em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina em mi- limol por litro:
Figure img0009
[00172] As fórmulas acima estão sujeitas à condição de que [His] > 0. Tipicamente, a concentração de histidina é pelo menos 5 mM, prefe-rencialmente pelo menos 10 mM, preferencialmente pelo menos 20 mM, preferencialmente 20 a 400 mM, preferencialmente pelo menos 25 mM, preferencialmente 25 a 200 mM, preferencialmente pelo menos 50 mM, preferencialmente 50 a 300 mM, preferencialmente 55 a 170 mM, preferencialmente 60 a 150 mM, preferencialmente 65 a 120 mM, mais preferencialmente 50 a 100 mM, por exemplo, cerca de 100 mM. Ainda em uma outra modalidade a concentração de histidina é 10, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 300 ou 400 mM.
Tensoativo
[00173] A composição de acordo com a presente invenção compreende um tensoativo. Como usado aqui, "tensoativos" refere-se a agentes que protegem a substância ativa de estresse ou dano induzidos por interface ar-para-solução ou interface solução-para-superfície. Pre- ferencialmente, o tensoativo é um tensoativo que não ocorre naturalmente.
[00174] Tensoativos que não ocorrem naturalmente típicos (com exemplos de nomes comerciais fornecidos entre colchetes [ ]) são ésteres de ácido graxo de polioxietileno sorbitano tais como monolaurato de polioxietileno (20) sorbitano [Tween® 20], monopalmitato de polioxi- etileno (20) sorbitano [Tween® 40] ou monooleato de polioxietileno (20) sorbitano [Tween® 80], poloxâmeros tais como copolímero em bloco de polioxipropileno-polioxietileno [Pluronic® F68 / poloxâmero 188], éter octilfenílico de polietileno glicol [Triton® X-100] ou éter dodecílico de polioxietilenoglicol [Brij® 35]. O uso de um tensoativo em composições aquosas é bem conhecido à pessoa habilitada. Por conveniência, referência é feita a Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19a edição, 1995. Em uma modalidade da invenção, a composição compreende monooleato de sorbitano [Tween® 80]. Em certas formas de realização, a composição da presente invenção compreende um ten- soativo que não é sensível à oxidação, por exemplo, alquil sacarídeos. Em uma outra modalidade, o tensoativo é um tensoativo derivado de vegetal, e/ou ele é livre de produtos petroquímicos, e/ou ele foi produzido sem usar produtos petroquímicos.
[00175] Em uma modalidade, a concentração do tensoativo é pelo menos 0,001 % v/v, preferencialmente 0,001 a 0,1 % v/v, preferencialmente 0,002 a 0,3 % v/v, mais preferencialmente 0,003 a 0,1 % v/v, e o mais preferencialmente cerca de 0,005 % v/v. Ainda em uma outra modalidade a concentração do tensoativo é 0,001, 0,002, 0,003, 0,004, 0,005, 0,006, 0,007, 0,008, 0,009, 0,01, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,2, 0,5, 0,7, 0,8, 0,9 ou 1,0 % v/v. Em uma modalidade, a concentração de monooleato de polioxietileno (20) sorbita- no [Tween® 80] é pelo menos 0,001 % v/v, preferencialmente 0,001 a 0,1 % v/v, preferencialmente 0,002 a 0,3 % v/v, mais preferencialmen- te 0,003 a 0,1 % v/v, e o mais preferencialmente cerca de 0,005 % v/v. Tampão
[00176] A composição de acordo com a invenção pode compreender um agente tamponante. Como usado aqui, "agentes tamponantes" ou "tampões" referem-se a agentes que mantêm o pH da preparação em uma faixa onde a administração da preparação (por exemplo, intravenosa ou subcutânea) é normalmente bem tolerada (por exemplo, pH 5 a 9) e, além disso, evitam mudanças de pH e protegem a substância ativa de estresse ou dano induzido por pH durante a liofilização. Exemplos típicos para substâncias usadas como substâncias tampão são por exemplo, carbonato, fosfato, citrato, borato, 2-amino-2- hidroximetil-1,-3-propanodiol [=TRIS], histidina, glicina.
[00177] O tampão (ou agentes tamponantes) pode ser selecionado a partir do grupo consistindo em acetato, benzoato, carbonato, citrato, glicilglicina, Hepes, histidina, glicina, e TRIS, bicina, tricina, succinato, ácido aspártico, ácido glutâmico ou misturas destes. Em uma modalidade da invenção, a concentração da substância tamponante é 1 a 200 mM, tal como, por exemplo, 1 a 150 mM ou 1 a 50 mM ou 1 a 25 mM ou 5 a 20 mM ou 5 a 15 mM.
[00178] A composição da invenção tipicamente tem um pH de 4 a 10. Em uma outra modalidade, a composição tem um pH de 5,0 a 9,0 ou 6,0 a 8,0 ou 6,5 a 7,5 ou 6,8 a 7,2 ou cerca de 7. Em outras formas de realização, o pH da composição é 5,5 ± 0,2, 5,6 ± 0,2, 5,7 ± 0,2, 5,8 ± 0,2, 5,9 ± 0,2, 6,0 ± 0,2, 6,1 ± 0,2, 6,2 ± 0,2, 6,3 ± 0,2, 6,4 ± 0,2, 6,5 ± 0,2, 6,6 ± 0,2, 6,7 ± 0,2, 6,8 ± 0,2, 6,9 ± 0,2, 7,0 ± 0,2, 7,1 ± 0,2, 7,2 ± 0,2, 7,3 ± 0,2, 7,4 ± 0,2, ou 7,5 ± 0,2. Em outras modalidades, o pH da composição é 5,5 ± 0,1, 5,6 ± 0,1, 5,7 ± 0,1, 5,8 ± 0,1, 5,9 ± 0,1, 6,0 ± 0,1, 6,1 ± 0,1, 6,2 ± 0,1, 6,3 ± 0,1, 6,4 ± 0,1, 6,5 ± 0,1, 6,6 ± 0,1, 6,7 ± 0,1, 6,8 ± 0,1, 6,9 ± 0,1, 7,0 ± 0,1, 7,1 ± 0,1, 7,2 ± 0,1, 7,3 ± 0,1, 7,4 ± 0,1, ou 7,5 ± 0,1. Ainda em outras modalidades, o pH da formulação estabilizante é 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 06,9, 7,0, 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5, 7,6, 7,7, 7,8, 7,9, ou 8,0. Carboidratos
[00179] A composição da invenção pode compreender ainda um carboidrato. Como usado aqui, "carboidratos" referem-se a açúcares, tais como mono-, di-, ou polissacarídeos, ou glicanos solúveis em água, incluindo por exemplo frutose, glicose, manose, manitol, sorbose, sorbitol, xilose, maltose, lactose, sacarose, galactose, dextrano, trealose, pululano, dextrina, ciclodextrina, amido solúvel, hidroxietil amido, e carboximetilcelulose podem ser usados.
[00180] O carboidrato pode, por exemplo, ser selecionado a partir do grupo de mono-, di-, ou polissacarídeos (incluindo por exemplo os monossacarídeos frutose, glicose, manose, galactose, os dissacarí- deos lactose, sacarose, trealose, maltose e os polissacarídeos dextra- no, rafinose, estaquiose).
[00181] Em uma modalidade da invenção, a composição de FVIII compreende um ou mais carboidratos do grupo de: sacarose, rafinose, trealose, ou misturas destes. Em uma modalidade, a composição de FVIII compreende um carboidrato em uma concentração de 2 a 10 % p/p, preferencialmente 3 a 8 % p/p, preferencialmente 4 a 6 % p/p e o mais preferencialmente 5 % p/p. Ainda em uma outra modalidade a concentração do carboidrato é 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 % p/p.
[00182] Em formas de realização específicas o carboidrato é sacarose. Em uma modalidade, a composição de FVIII compreende sacarose em uma concentração de 2 a 10 % p/p, preferencialmente 3 a 8 % p/p, preferencialmente 4 a 6 % p/p e o mais preferencialmente 5 % p/p. Ainda em uma outra modalidade a concentração de sacarose é 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 % p/p.
[00183] Em formas de realização específicas o carboidrato é trealo- se. Em uma modalidade, a composição de FVIII compreende trealose em uma concentração de 2 a 10 % p/p, preferencialmente 3 a 8 % p/p, preferencialmente 4 a 6 % p/p e o mais preferencialmente 5 % p/p. Ainda em uma outra modalidade a concentração de trealose é 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 % p/p.
[00184] Em formas de realização específicas o carboidrato é rafino- se. Em uma modalidade, a composição de FVIII compreende rafinose em uma concentração de 2 a 10 % p/p, preferencialmente 3 a 8 % p/p, preferencialmente 4 a 6 % p/p e o mais preferencialmente 5 % p/p. Ainda em uma outra modalidade a concentração de rafinose é 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10 % p/p.
Aminoácidos
[00185] Em uma modalidade a composição da invenção compreende ainda um ou mais aminoácidos exceto histidina. Como usado aqui, "aminoácidos" referem-se a qualquer aminoácido farmaceuticamente aceitável natural ou não natural. Exemplos não limitantes de aminoáci- dos incluem, isoleucina, alanina, leucina, asparagina, lisina, ácido as- pártico, metionina, cisteína, fenilalanina, ácido glutâmico, treonina, glu- tamina, triptofano, glicina, valina, prolina, selenocisteína, serina, tirosi- na, arginina, histidina, ornitina, taurina, e semelhantes. O aminoácido exceto histidina é preferencialmente selecionado a partir do grupo consistindo em arginina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutâmico, glutamina, lisina, metionina, fenilalanina, isoleucina, leucina e combinações destes.
[00186] Em uma modalidade a composição aquosa compreende arginina e isoleucina.
[00187] Em uma modalidade a composição aquosa compreende arginina, ácido glutâmico e fenilalanina.
[00188] Em uma modalidade a composição aquosa compreende arginina, ácido glutâmico, fenilalanina e metionina.
[00189] Em uma modalidade a composição aquosa compreende arginina, isoleucina e metionina.
[00190] Em uma modalidade a composição aquosa compreende glutamina, ácido glutâmico, isoleucina e metionina.
[00191] Em uma modalidade a concentração do aminoácido exceto histidina é pelo menos 0,2 mM, preferencialmente 1 a 300 mM, preferencialmente 5 a 300 mM, preferencialmente 10 a 200 mM, preferencialmente 55 a 150 mM, preferencialmente 25 a 100 mM, preferencialmente 40 a 180 mM, preferencialmente 50 a 90 mM. Ainda em uma outra modalidade a concentração do aminoácido exceto histidina é 0,2, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195 ou 200 mM.
[00192] Em uma modalidade a concentração da arginina é pelo menos 1 mM, preferencialmente 5 a 300 mM, preferencialmente 10 a 200 mM, preferencialmente 55 a 150 mM, preferencialmente 25 a 100 mM, preferencialmente 40 a 180 mM, preferencialmente 50 a 90 mM. Ainda em uma outra modalidade a concentração da arginina é 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195 ou 200 mM.
[00193] Em uma modalidade a concentração da isoleucina é pelo menos 1 mM, preferencialmente 5 a 300 mM, preferencialmente 10 a 200 mM, preferencialmente 55 a 150 mM, preferencialmente 25 a 100 mM, preferencialmente 40 a 180 mM, preferencialmente 50 a 90 mM. Ainda em uma outra modalidade a concentração da isoleucina é 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195 ou 200 mM.
[00194] Em uma modalidade a concentração do ácido glutâmico é pelo menos 1 mM, preferencialmente 5 a 300 mM, preferencialmente 10 a 200 mM, preferencialmente 55 a 150 mM, preferencialmente 25 a 100 mM, preferencialmente 40 a 180 mM, preferencialmente 50 a 90 mM. Ainda em uma outra modalidade a concentração do ácido glutâ- mico é 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195 ou 200 mM.
[00195] Em uma modalidade a concentração da fenilalanina é pelo menos 1 mM, preferencialmente 5 a 200 mM, preferencialmente 10 a 160 mM, preferencialmente 55 a 150 mM, preferencialmente 25 a 100 mM, preferencialmente 40 a 180 mM, preferencialmente 50 a 90 mM. Ainda em uma outra modalidade a concentração da fenilalanina é 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195 ou 200 mM.
Antioxidantes
[00196] A composição da presente invenção pode conter ainda um ou mais antioxidantes. Um "antioxidante" dentro do significado da presente invenção é um composto ou composição farmaceuticamente compatível que desacelera, inibe, interrompe e/ou para os processos de oxidação. Antioxidantes incluem, em particular, as substâncias seguintes: tocoferóis e os ésteres destes, glutationa reduzida, metionina, monotioglicerol, cisteína, homocisteína, cistationina, vitamina A, sesa- mol de óleo de gergelim, benzoato de coniferila de resina benzoína, reina nordiidroguaiética e ácido nordiidroguaiarético (NDGA), galatos (entre outros, galatos de metila, etila, propila, amila, butila, laurila), hi- droxianisol butilado (BHAIBHT, também butil-p-cresol); ácido ascórbico e sais e ésteres destes (por exemplo palmitato de acorbila), eritorbíni- co (ácido isoascorbínico) e sais e ésteres deste, monotioglicerol, sul- foxilato de formaldeído sódico, metabissulfito de sódio, bissulfito de sódio, sulfato de sódio, metabissulfito de potássio, hidroxianisol butila- do, hidroxitolueno butilado (BHT), ácido propiônico. Antioxidantes típicos são tocoferol tal como, por exemplo, a-tocoferol e os ésteres deste, hidroxitolueno butilado e hidroxianisol butilado. Os termo "tocoferol" também inclui ésteres de tocoferol. Um tocoferol conhecido é a- tocoferol. O termo "a-tocoferol" inclui ésteres de a-tocoferol (por exemplo, acetato de a-tocoferol). Em uma modalidade da invenção o antio- xidante é metionina, por exemplo, L-metionina.
[00197] Em uma modalidade, a concentração da antioxidante é pelo menos 0,05 mM, preferencialmente 0,05 a 100 mM, preferencialmente 0,1 a 80 mM, preferencialmente 0,2 a 50 mM, preferencialmente 0,5 a 70 mM, preferencialmente 1 a 25 mM, preferencialmente 0,1 a 20 mM, preferencialmente 0,25 a 1 mM. Ainda em uma outra modalidade a concentração da antioxidante é 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 6,0, 7,0, 8,0, 9,0, 10,0, 11,0, 12,0, 13,0, 14,0, 15,0, 16,0, 17,0, 18,0, 19,0, 20,0, 25,0, 30,0, 35,0, 40,0, 45,0, 50,0, 55,0, 60,0, 65,0, 70,0, 75,0, 80,0, 85,0, 90,0, 95,0 ou 100,0 mM.
[00198] Em uma modalidade, a concentração de metionina é pelo menos 0,05 mM, preferencialmente 0,05 a 100 mM, preferencialmente 0,1 a 80 mM, preferencialmente 0,2 a 50 mM, preferencialmente 0,5 a 70 mM, preferencialmente 1 a 25 mM, preferencialmente 0,1 a 20 mM, preferencialmente 0,25 a 5 mM. Ainda em uma outra modalidade a concentração de metionina é 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 6,0, 7,0, 8,0, 9,0, 10,0, 11,0, 12,0, 13,0, 14,0, 15,0, 16,0, 17,0, 18,0, 19,0, 20,0, 25,0, 30,0, 35,0, 40,0, 45,0, 50,0, 55,0, 60,0, 65,0, 70,0, 75,0, 80,0, 85,0, 90,0, 95,0 ou 100,0 mM.
[00199] Em uma modalidade, a concentração de glutationa é pelo menos 0,05 mM, preferencialmente 0,05 a 100 mM, preferencialmente 0,1 a 80 mM, preferencialmente 0,2 a 50 mM, preferencialmente 0,5 a 70 mM, preferencialmente 1 a 25 mM, preferencialmente 0,1 a 20 mM, preferencialmente 0,25 a 1 mM. Ainda em uma outra modalidade a concentração de glutationa é 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,5, 2,0, 2,5, 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 6,0, 7,0, 8,0, 9,0, 10,0, 11,0, 12,0, 13,0, 14,0, 15,0, 16,0, 17,0, 18,0, 19,0, 20,0, 25,0, 30,0, 35,0, 40,0, 45,0, 50,0, 55,0, 60,0, 65,0, 70,0, 75,0, 80,0, 85,0, 90,0, 95,0 ou 100,0 mM. Agentes estabilizantes
[00200] A composição da presente invenção podem compreender um agente estabilizante. Como usado aqui, um "agente estabilizante" refere-se a um produto químico (outros sinônimos são por exemplo, "co-solvente", "co-soluto", "aditivo químico; "excipiente") que ajuda na estabilização de um agente terapêutico lábil em uma formulação aquosa em estado de solução ou durante o congelamento- descongelamento assim como secagem por congelamento e armazenamento subsequente do liofilizado desidratado. Exemplos de agentes estabilizantes adequados para as formulações e métodos fornecidos aqui incluem, sem limitação, agentes tamponantes (por exemplo, TRIS, HEPES, aminoácidos, etc.), osmólitos (por exemplo, açúcares, álcoois de açúcar, etc.), crioprotetores/lioprotetores (por exemplo, álcoois tais como glicerol, metanol, isopropanol; açúcares tais como sa-carose, xilitol, dextrose, trealose; ácidos carboxílicos e carboxilatos tais como ácido láctico e lactatos, ácido málico e maleatos; PEGs tais como etileno glicol, PEG 200, PEG 2 000, PEG 20 000; Polímeros tais como polivinilpirrolidonas, PVP 12, PVP 17,PVP 30; agentes de volume (por exemplo, aminoácidos, polióis tais como manitol etc.), sais, polímeros, tensoativos, antioxidantes e semelhantes.
[00201] A concentração da agente estabilizante depende da natureza química do agente e pode ser escolhida de acordo com a descrição aqui precedentes.
Estabilidade
[00202] Em uma modalidade específica das composições fornecidas acima, a composição é estável. O termo "estável" como usado aqui significa que a potência da composição, como medido por um ensaio de atividade de FVIII, depois do armazenamento por um período de tempo, é pelo menos 80 % da potência antes do armazenamento. A menos que indicado de outro modo aqui, o teste de estabilidade é realizado como descrito no documento CPMP/ICH/2736/99 da European Medicines Agency intitulado "NOTE FOR GUIDANCE ON STABILITY TESTING: STABILITY TESTING OF NEW DRUG SUBSTANCES AND PRODUCTS" como o de Agosto de 2003.
[00203] Em uma série de modalidadesmodalidades, a composição fornecida aqui durante a liofilização será estável por pelo menos 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48 ou mais meses (25 °C; 40 % d e umidade relativa [RH]). Em uma modalidade preferida, a composição liofilizada será estável por pelo menos 6 meses (25 °C; 40 % de RH). E m um mais modalidade preferida, a composição liofilizada será estável por pelo menos 12 meses (25 °C; 40 % de RH). Em uma outra moda lidade preferida, a composição liofilizada será estável por pelo menos 18 meses (25 °C; 40 % de RH). Em uma outra modalidade preferida, a composição liofilizada será estável por pelo menos 24 meses (25 °C; 40 % de RH). Em uma outra modalidade preferida, a composição liofilizada será estável por pelo menos 36 meses (25 °C; 40 % de RH).
[00204] Em uma modalidade específica das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses, ainda mais preferencialmente por pelo menos 36 meses quando armazenada a 25 °C / 40 % de RH .
[00205] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses, ainda mais preferencialmente por pelo menos 36 meses quando armazenada a 30 °C / 40 % de RH .
[00206] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses quando armazenada a 40 °C / 40 % de RH.
[00207] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses, ainda mais preferencialmente por pelo menos 36 meses quando armazenada a 25 °C / 60 % de RH .
[00208] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses, ainda mais preferencialmente por pelo menos 36 meses quando armazenada a 30 °C / 60 % de RH .
[00209] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses quando armazenada a 40 °C / 60 % de RH.
[00210] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses, ainda mais preferencialmente por pelo menos 36 meses quando armazenada a 25 °C / 65 % de RH .
[00211] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses, ainda mais preferencialmente por pelo menos 36 meses quando armazenada a 30 °C / 65 % de RH .
[00212] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses quando armazenada a 40 °C / 65 % de RH.
[00213] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses, ainda mais preferencialmente por pelo menos 36 meses quando armazenada a 25 °C / 75 % de RH .
[00214] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses, ainda mais preferencialmente por pelo menos 36 meses quando armazenada a 30 °C / 75 % de RH .
[00215] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses quando armazenada a 40 °C / 75 % de RH.
[00216] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses, ainda mais preferencialmente por pelo menos 36 meses quando armazenada a 25 °C / 25 % de RH .
[00217] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses, ainda mais preferencialmente por pelo me- nos 36 meses quando armazenada a 30 °C / 25 % de RH .
[00218] Em uma outra modalidade das composições fornecidas acima, a composição liofilizada é estável por pelo menos 6 meses, preferencialmente por pelo menos 12 meses, mais preferencialmente por pelo menos 24 meses quando armazenada a 40 °C / 25 % de RH.
[00219] Preferencialmente, a quantidade de componentes de peso molecular alto, como determinado por SE-HPLC, depois do armazenamento da composição liofilizada sob uma das condições definidas supra é 3 % ou menos. A quantidade de componentes de peso molecular alto, como determinado por SE-HPLC como descrito nos exemplos deste pedido.
[00220] Em uma modalidade a composição é estável por pelo menos 48 horas, preferencialmente por pelo menos 72 horas, mais preferencialmente por pelo menos 96 horas, o mais preferencialmente por pelo menos uma semana, quando armazenada no estado líquido a 4°C. A composição aquosa tipicamente mantém pelo me nos 80 % de sua atividade de Fator VIII por pelo menos 48 horas, preferencialmente por pelo menos 72 horas, mais preferencialmente por pelo menos 96 horas, o mais preferencialmente por pelo menos um semana, quando armazenada no estado líquido a 2 a 8 °C. Isto aplica-se à composição aquosa antes da liofilização e/ou à composição aquosa depois da liofi- lização e reconstituição em uma solução aquosa, por exemplo, em água destilada.
[00221] Em uma modalidade específica das composições fornecidas acima, a composição mantém pelo menos 85 % de sua atividade de Fator VIII por pelo menos 48 horas, preferencialmente por pelo menos 72 horas, mais preferencialmente por pelo menos 96 horas, o mais preferencialmente por pelo menos uma semana, quando armazenada no estado líquido a 4 °C. Isto aplica-se à composição aquosa antes da liofilização e/ou à composição aquosa depois da liofilização e reconsti- tuição em uma solução aquosa, por exemplo, em água destilada.
[00222] Em uma modalidade específica das composições fornecidas acima, a composição mantém pelo menos 90 % de sua atividade de Fator VIII por pelo menos 48 horas, preferencialmente por pelo menos 72 horas, mais preferencialmente por pelo menos 96 horas, o mais preferencialmente por pelo menos uma semana, quando armazenada no estado líquido a 4 °C. Isto aplica-se à composição aquosa antes da liofilização e/ou à composição aquosa depois da liofilização e reconstituição em uma solução aquosa, por exemplo, em água destilada.
[00223] Em uma modalidade específica da invenção, a composição mostra pouca ou nenhuma turvação, por exemplo, antes da liofilização ou durante a liofilização e reconstituição em água. Como usado aqui, o termo "turvação" refere-se à opalescência de uma solução. A turvação pode ser determinada visualmente ou instrumentalmente, como descrito em Pharm. Eur. 8.0, seção 2.2.1. "Clarity and grade of opalescence of liquids". Qualquer referência à turvação no presente pedido refere-se aos métodos descritos em Pharm. Eur. 8.0, seção 2.2.1. "Clarity and grade of opalescence of liquids".
[00224] Em uma modalidade, a composição da presente invenção tem uma turvação de 18 NTU ou menos. Em uma outra modalidade, a composição da presente invenção tem uma turvação de 6 NTU ou menos. Ainda em uma outra modalidade, a composição da presente invenção tem uma turvação de 3 NTU ou menos. Estes valores de tur- vação são satisfeitos antes da liofilização e depois da liofilização e reconstituição em água destilada.
[00225] Ainda em uma outra modalidade, a composição da presente invenção é clara. No presente pedido, uma composição ou solução é julgada como sendo "clara" quando sua opalescência não é mais pronunciada do que aquela da "suspensão de referência III" descrita em Pharm. Eur. 8.0, seção 2.2.1. "Clarity and grade of opalescence of liquids". Quando referindo-se aqui a uma composição não tendo "nenhuma turvação" ou sendo "livre de turvação", deve ser entendida que a composição é "clara" de acordo com esta definição.
[00226] Preferidas são as composições seguintes (tabela 1) compreendendo: FVIII
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[00227] Ainda preferidas são as composições seguintes (tabela 2) compreendendo:
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[00228] Ainda preferidas são as composições seguintes (tabela 3) compreendendo:
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[00229] Ainda preferidas são as composições seguintes (tabela 4) compreendendo:
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[00230] Ainda preferidas são as composições seguintes (tabela 5) compreendendo:
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[00231] Preferidas são as composições seguintes (tabela 6) com-preendendo:
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[00232] Preferidas são as composições seguintes (tabela 7) com-preendendo:
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[00233] Preferido são as composições seguintes (tabela 8) compreendendo:
Figure img0021
[00234] Preferidas são as composições seguintes (tabela 9) compreendendo:
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[00235] Preferidas são as composições seguintes (tabela 10) compreendendo:
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[00236] Preferidas são as composições seguin tes (tabe a 11) compreend endo:
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[00237] Preferidas são as composições seguintes (tabela 12) compreendendo:
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[00238] Preferidas são as composições seguin tes (tabe a 13) compreend endo:
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[00239] Preferidas são as composições seguintes (tabela 14) compreendendo: FVIII
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[00240] Preferidas são as composições seguintes (tabela 15) com-preendendo:
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[00241] Em uma outra modalidade as composições 70 a 233 com- preendem ainda um tensoativo, por exemplo, monooleato de polioxieti- leno (20) sorbitano [por exemplo, Tween® 80], preferencialmente em uma concentração de pelo menos 0,001 % p/p.
[00242] Em uma outra modalidade as composições 170 a 233 com-preendem ainda um ou mais aminoácidos exceto histidina. O outro aminoácido é selecionado a partir da lista consistindo em arginina, as- paragina, ácido aspártico, ácido glutâmico, glutamina, lisina, metionina, fenilalanina, isoleucina ou misturas destes, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 1 mM.
[00243] Em uma outra modalidade as composições 170 a 233 com-preendem ainda um antioxidante, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 0,05 mM. Exemplos de antioxidantes incluem, mas não são limitados a glutationa reduzida, metionina, cisteína, sulfato de sódio, vitamina A, vitamina E, ácido ascórbico, ascorbato de sódio e misturas destes. Em uma modalidade da invenção o antioxidante é metionina, por exemplo, L-metionina.
[00244] Em uma outra modalidade, as composições 170 a 233 têm um pH de 6,0 a 8,0 ou 6,5 a 7,5 ou 6,8 a 7,2 ou 7.
[00245] Em uma outra modalidade as composições 170 a 233 com-preendem ainda
[00246] a. monooleato de polioxietileno (20) sorbitano [por exemplo, Tween® 80] como um tensoativo, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 0,001 % p/p,
[00247] b. um ou mais aminoácidos exceto histidina selecionados a partir da lista consistindo em arginina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutâmico, glutamina, lisina, metionina, fenilalanina, isoleucina ou misturas destes, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 1 mM,
[00248] c. um antioxidante selecionado a partir da lista consistindo em glutationa reduzida, metionina, cisteína, sulfato de sódio, vitamina A, vitamina E, ácido ascórbico, ascorbato de sódio e misturas deste, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 0,05 mM e
[00249] d. as composições têm um pH de 6,0 a 8,0 ou 6,5 a 7,5 ou 6,8 a 7,2 ou 7.
[00250] Preferidas são as composições seguintes (tabela 16) com-preendendo:
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[00251] Em uma outra modalidade as composições 234 a 297 com-preendem ainda um tensoativo, por exemplo, monooleato de polioxieti- leno (20) sorbitano [por exemplo, Tween® 80], preferencialmente em uma concentração de pelo menos 0,001 % p/p.
[00252] Em uma outra modalidade as composições 234 a 297 com-preendem ainda um ou mais aminoácidos exceto histidina. O outro aminoácido é selecionado a partir da lista consistindo em arginina, as- paragina, ácido aspártico, ácido glutâmico, glutamina, lisina, metionina, fenilalanina, isoleucina ou misturas destes, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 1 mM.
[00253] Em uma outra modalidade as composições 234 a 297 com-preendem ainda um antioxidante, preferencialmente em uma concentração pelo menos 0,05 mM. Exemplos de antioxidantes incluem, mas não são limitados a glutationa reduzida, metionina, cisteína, sulfato de sódio, vitamina A, vitamina E, ácido ascórbico, ascorbato de sódio e misturas deste. Em uma modalidade da invenção o antioxidante é me- tionina, por exemplo, L-metionina.
[00254] Em uma outra modalidade, as composições 234 a 297 têm um pH de 6,0 a 8,0 ou 6,5 a 7,5 ou 6,8 a 7,2 ou 7.
[00255] Em uma outra modalidade as composições 234 a 297 com-preendem ainda
[00256] e. monooleato de polioxietileno (20) sorbitano [por exemplo, Tween® 80] como um tensoativo, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 0,001 % p/p,
[00257] f. um ou mais aminoácidos exceto histidina selecionados a partir da lista consistindo em arginina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutâmico, glutamina, lisina, metionina, fenilalanina, isoleucina ou misturas destes, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 1 mM,
[00258] g. um antioxidante selecionado a partir da lista consistindo em glutationa reduzida, metionina, cisteína, sulfato de sódio, vitamina A, vitamina E, ácido ascórbico, ascorbato de sódio e misturas destes, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 0,05 mM e
[00259] h. as composições têm um pH de 6,0 a 8,0 ou 6,5 a 7,5 ou 6,8 a 7,2 ou 7.
[00260] Preferidas são as composições seguintes (tabela 17) com-preendendo:
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[00261] Em uma outra modalidade as composições 298 a 361 com- preendem ainda um tensoativo, por exemplo, monooleato de polioxieti- leno (20) sorbitano [por exemplo, Tween® 80], preferencialmente em uma concentração de pelo menos 0,001 % p/p.
[00262] Em uma outra modalidade as composições 298 a 361 com-preendem ainda um ou mais aminoácidos exceto histidina. O outro aminoácido é selecionado a partir da lista consistindo em arginina, as- paragina, ácido aspártico, ácido glutâmico, glutamina, lisina, metionina, fenilalanina, isoleucina ou misturas deste, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 1 mM.
[00263] Em uma outra modalidade as composições 298 a 361 com-preendem ainda um antioxidante, preferencialmente em uma concentração pelo menos 0,05 mM. Exemplos de antioxidantes incluem, mas não são limitados a glutationa reduzida, metionina, cisteína, sulfato de sódio, vitamina A, vitamina E, ácido ascórbico, ascorbato de sódio e misturas destes. Em uma modalidade da invenção o antioxidante é metionina, por exemplo, L-metionina.
[00264] Em uma outra modalidade, as composições 298 a 361 têm um pH de 6,0 a 8,0 ou 6,5 a 7,5 ou 6,8 a 7,2 ou 7.
[00265] Em uma outra modalidade as composições 298 a 361 com-preendem ainda
[00266] i. monooleato de polioxietileno (20) sorbitano [por exemplo, Tween® 80] como um tensoativo, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 0,001 % p/p,
[00267] j. um ou mais aminoácidos exceto histidina selecionados a partir da lista consistindo em arginina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutâmico, glutamina, lisina, metionina, fenilalanina, isoleucina ou misturas deste, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 1 mM,
[00268] k. um antioxidante selecionado a partir da lista consistindo em glutationa reduzida, metionina, cisteína, sulfato de sódio, vitamina A, vitamina E, ácido ascórbico, ascorbato de sódio e misturas deste, preferencialmente em uma concentração de pelo menos 0,05 mM e
[00269] l. as composições têm um pH de 6,0 a 8,0 ou 6,5 a 7,5 ou 6,8 a 7,2 ou 7.
[00270] Em uma modalidade específica a invenção refere-se a uma composição obtenível liofilizando-se a composição aquosa descrita precedentes. Em uma outra modalidade, a invenção refere-se a uma composição obtida liofilizando-se a composição aquosa descrita acima.
[00271] Em uma modalidade específica a invenção refere-se a uma composição obtenível reconstituindo-se a composição liofilizada aquosa como descrito acima com um solvente adequado.
[00272] Em uma modalidade específica uma composição é obtenível reconstituindo-se a composição liofilizada aquosa como descrito acima com um solvente adequado, em que o solvente adequado é uma solução aquosa.
[00273] Em uma modalidade específica uma composição é obtenível reconstituindo-se a composição liofilizada aquosa como descrito acima com uma solução aquosa, em que a solução aquosa é selecionada a partir do grupo compreendendo solução de Ringer, solução de Ringer lactato, e qualquer outra solução adequada para aplicação parenteral.
[00274] Em uma modalidade específica uma composição é obtenível reconstituindo-se a composição liofilizada aquosa como descrito acima com uma solução aquosa, em que a solução aquosa é água, preferencialmente "água para injeção".
[00275] Em uma modalidade específica uma composição é obtenível reconstituindo-se a composição liofilizada aquosa como descrito acima com uma solução aquosa, em que a solução aquosa é uma solução de cloreto de sódio.
[00276] Em uma modalidade específica uma composição é obtenível reconstituindo-se a composição liofilizada aquosa como descrito acima com uma solução aquosa, em que a solução aquosa é uma solução de histidina.
[00277] Um outro aspecto da invenção é o uso de uma composição descrita aqui no tratamento de um transtorno de coagulação sanguínea, por exemplo, hemofilia A.
[00278] Em uma modalidade específica das composições fornecidas acima, a composição é formulada para administração subcutânea e/ou intramuscular.
[00279] As composições são administradas oralmente, topicamente, transdermicamente, parenteralmente, por pulverização de inalação, vaginalmente, retalmente ou por injeção intracraniana, preferencialmente parenteralmente. O termo parenteral como usado aqui inclui injeções subcutâneas, técnicas de injeção ou infusão intravenosa, intramuscular, intracisternal. A administração por injeção intravenosa, intradérmica, intramusclar, intramamária, intraperitoneal, intratecal, retrobulbar, intrapulmonar e/ou implantação cirúrgica em um sítio particular também é considerada. Geralmente, composições são essencialmente livres de pirógenos (ver por exemplo, Ph. Eur. 7.0/2.06.08.00), assim como outras impurezas que poderiam ser prejudiciais ao receptor.
EXEMPLOS
[00280] Os exemplos seguintes foram realizados usando uma molécula de FVIII (SEQ ID NO: 2; construção dBN(64-53) descrita em WO 2004/067566). Esta molécula de FVIII será referida como "CSL627" no seguinte. Ensaio de FVIII:C Cromogênico
[00281] O ensaio de FVIII:C cromogênico foi realizado usando o Kit de teste de FVIII coamático (Chromogenix-Instrumentation Laboratory SpA V. le Monza 338 - 20128 Milano, Italy).
[00282] Princípio do ensaio: Na presença de cálcio e fosfolipídeo, o Fator X é ativado pelo Fator IXa ao Fator Xa. Esta reação é estimulada pelo Fator VIIIa como cofator. F VIIIa é formado por quantidades baixas de trombina na mistura de reação de F VIII na amostra a ser medida. Quando do uso das concentrações ideais de Ca2+, fosfolipídeo e Fator IXa e uma quantidade em excesso de Fator X, a ativação of Fator X é proporcional à potência de Fator VIII. O Fator X ativado libera o cromóforo pNA do substrato cromogênico S-2765. A liberação de pNA, medida em 405 nm, é portanto proporcional à quantidade de FXa formado e, portanto, também à atividade de Fator VIII da amostra. O ensaio foi adaptado para ser realizado em analisadores de coagulação automáticos, o Temporizador de Coagulação Behring (BCT) ou o Sistema de Coagulação Behring (BCS), ambos da Siemens Healthcare Diagnostics GmbH, Ludwig-Erhard-Straβe 12, 65760 Eschborn, Germany. Ensaio de coagulação de estágio único
[00283] O ensaio de coagulação de FVIII:C de estágio único foi realizado usando o reagente Pathromtin SL e plasma deficiente de FVIII, ambos da Siemens Healthcare Diagnostics products GmbH, Emil-von- Behring -Str. 76, 35041 Marburg, Germany.
[00284] Princípio do ensaio: O teste é executado como uma versão modificada do ensaio de Tempo de Tromboplastina Parcial ativado (aPTT): Incubação de plasma com fosfolipídeos e um ativador de superfície leva à ativação de fatores do sistema de coagulação intrínseco. A adição de íons cálcio desencadeia a cascata de coagulação. O tempo para a formação de um coágulo de fibrina mensurável é medido. O ensaio é executado na presença de plasma deficiente de Fator VIII. A capacidade de coagulação do plasma deficiente é restaurada pelo Fator VIII de coagulação incluído na amostra a ser testada. O encurtamento do tempo de coagulação é proporcional à quantidade de Fator VIII presente na amostra. A atividade do Fator VIII de coagulação é quantificada por comparação direta a uma preparação padrão com uma atividade conhecida de Fator VIII em Unidades Internacionais.
[00285] O ensaio foi adaptado para ser realizado em analisadores de coagulação automáticos, o Temporizador de Coagulação Behring (BCT) ou Sistema de Coagulação Behring (BCS), ambos da Siemens Healthcare Diagnostics GmbH, Ludwig-Erhard-Straβe 12, 65760 Es chborn, Germany. Componentes de peso molecular alto (HMWC) por HPLC de exclusão por tamanho
[00286] A HPLC de exclusão por tamanho foi realizada usando uma coluna COSMOSIL Diol-300-II 7,5 x 600 mm (Nacalai Tesque, Kyoto, Japan) e detecção de fluorescência em comprimento de onda de excitação de 280 nm e comprimento de onda de emissão de 340 nm. A composição da fase móvel foi 300 mM de NaCl, 20 mM de HEPES, 10 mM de CaCl2 * 2H2O, 0,005 % de Tween® 80, 10 % de Isopropanol, pH 7,0. A eluição foi isocrática em uma taxa de fluxo de 0,5 mL/min na temperatura ambiente durante 75 minutos.
Exemplo 1: Preparação de formulações de FVIII e avaliação das propriedades de solução a seguir da troca de tampão por intermédio de colunas de dessalinização
[00287] CSL627 purificado em uma atividade de FVIII:C (método de substrato cromogênico) de 9500 IU/ml foi formulado nas composições desejadas por troca de tampão por intermédio de colunas de dessali- nização de NAP-25 (GE Healthcare Sephadex™ G 25; Cat. No 170852-01) de acordo com as instruções dos fabricantes. Esta troca de tampão resultou em um fator de diluição de 1,4.
[00288] As composições diferentes depois foram investigadas quanto à sua aparência (turvação) e rendimento em atividade de FVIII:C.
[00289] O rendimento de FVIII:C foi calculado como a porcentagem da quantidade de FVIII:C na composição obtida a seguir da troca de tampão dividida pela quantidade de FVIII:C na solução antes da troca de tampão com ajuste apropriado para diluição pela troca de tampão (fator de diluição 1,4). Tabela 18.
Figure img0041
[00290] * atividade de FVIII:C rendimento determinado por intermé dio de um ensaio de atividade de substrato cromogênico a seguir da troca de tampão por intermédio de colunas de dessalinização Exemplo 2: Preparação de formulações de FVIII e avaliação das propriedades de solução a seguir da troca de tampão por intermédio de colunas de dessalinização.
[00291] As composições diferentes foram obtidas por troca de tampão como descrito no exemplo 1 (atividade de FVIII:C no material de partida foi 9733 IU/mL). As composições foram avaliadas quanto à sua aparência a seguir da troca de tampão. Além disso, as composições depois foram filtradas estéreis (0,22 μm) e avaliadas quanto à sua atividade de FVIII:C diretamente durante a filtração (tempo 0) e a seguir do armazenamento a +2 - +8 °C por 1, 2, 3, 15, 30, e 60 dias e armazenamento a +25 °C e +40 °C por 1, 2 e 3 dias.
[00292] A recuperação (estabilidade) foi calculada como a porcentagem de FVIII:C (Ensaio de atividade de FVIII de substrato cromogê- nico) depois do armazenamento dividida pela atividade de FVIII:C no Tempo 0. A atividade de FVIII:C no Tempo 0 (depois de filtração a 0,22 μm) foi definida como 100 %.
Figure img0042
Figure img0043
Figure img0044
Exemplo 3: Aparência da solução a seguir da troca de tampão por intermédio de colunas de dessalinização.
[00293] As composições diferentes foram obtidas por troca de tampão como descrito no exemplo 1 (atividade de FVIII:C por ensaio de atividade de FVIII de substrato cromogênico no material de partida foi 8317 IU/mL). As composições foram avaliadas quanto à sua aparência a seguir da troca de tampão. Tabela 22
Figure img0045
Figure img0046
Exemplo 4: Rendimento na atividade de FVIII:C e aparência da solução a seguir da troca de tampão por intermédio de colunas de dessalinização e re-cuperação de atividade de FVIII:C durante o armazenamento.
[00294] As composições diferentes foram obtidas por troca de tampão como descrito no exemplo 1 (atividade de FVIII:C no material de partida foi 4780 IU/mL).
[00295] As composições foram avaliadas quanto à sua aparência a seguir da troca de tampão. Além disso, as composições depois foram filtradas estéreis (0,22 μm) e avaliadas quanto à sua atividade de FVIII:C (Ensaio de substrato cromogênico) diretamente durante a filtração (tempo 0) e a seguir do armazenamento a 2 a 8 °C por 1,2 e 3 dias e armazenamento a 25 °C e 40 °C por 3 dias.
[00296] O rendimento do processo de formulação na atividade de FVIII:C foi calculado como a porcentagem de FVIII:C na composição obtida a seguir da troca de tampão dividida pelo FVIII:C na solução antes de troca de tampão com ajuste apropriado para diluições. A recuperação (estabilidade) durante o armazenamento foi calculada como a porcentagem de FVIII:C depois do armazenamento dividida pela atividade de FVIII:C no Tempo 0. A atividade de FVIII:C no Tempo 0 (depois de filtração a 0,22 μm) foi definida como 100 %. Tabela 23
Figure img0047
Exemplo 5: Formação de HMWC (SE-HPLC) em preparações secas por congela-mento durante o armazenamento em temperatura elevada.
[00297] A atividade de FVIII:C e a concentração dos excipientes das formulações deste exemplo foram ajustadas diluindo-se um concentrado de FVIII com soluções tampão apropriadas. As formulações obtidas mostraram concentrações de FVIII:C de 430 a 480 IU/mL. As soluções depois foram dispensadas (2,5 mL) e secas por congelamento. Os liofilizados obtidos foram armazenados a +40 °C e amostras tomadas depois de 1, 3, 6 e 12 meses. Amostras depois foram tomadas das soluções reconstituídas antes e a seguir do armazenamento dos liofilizados e congeladas a -70 °C. HMWC foi determ inado por SE- HPLC nas amostras a seguir do descongelamento em um banho de água (+37 °C).
Figure img0048
Exemplo 6: Ensaio de atividade de substrato cromogênico de FVIII:C e formação de HMWC (SE-HPLC) em preparações secas por congelamento durante o armazenamento em temperatura elevada.
[00298] A atividade de FVIII:C e a concentração dos excipientes foram ajustadas diluindo-se um concentrado de FVIII com soluções tampão apropriadas. As soluções depois foram dispensadas (2,5 mL) e secas por congelamento. Os liofilizados obtidos foram armazenados a +40 °C e as amostras tomadas depois de 1, 3, 6, 1 2, 18 e 24 meses. As amostras foram tomadas das soluções reconstituídas antes e a seguir do armazenamento dos liofilizados e congeladas a -70 °C. HMWC foi determinado nas amostras armazenadas congeladas a seguir do descongelamento em um banho de água (+37 °C).
[00299] A atividade de FVIII:C (Ensaio de atividade de FVIII de substrato cromogênico) foi determinada nas soluções frescas antes da secagem por congelamento e nos liofilizados reconstituídos frescos diretamente a seguir da secagem por congelamento ou depois do armazenamento. A recuperação (estabilidade) foi calculada como a porcentagem de FVIII:C depois do armazenamento dividida pela atividade de FVIII:C no Tempo 0. A atividade de FVIII:C no Tempo 0 (Depois da secagem por congelamento) foi definida como 100 %.
Figure img0049
Figure img0050
Exemplo 7: Preparação de formulações de FVIII e avaliação das propriedades de solução a seguir da troca de tampão por intermédio de colunas de dessalinização.
[00300] CSL627 purificado foi formulado nas composições desejadas por troca de tampão por intermédio de colunas de dessalinização NAP-25 (GE Healthcare Sephadex™ G 25; Cat. No 17-0852-01) de acordo com as instruções dos fabricantes e como descrito no exemplo 1. Subsequentemente, as composições diferentes foram diluídas com base no ensaio de atividade cromogênico para obter uma atividade de FVIII:C (potência) usando um ensaio de atividade de FVIII de substrato cromogênico de cerca de 7000 IU/mL. As composições diferentes depois foram investigadas quanto à sua aparência (turvação).
Figure img0051
Figure img0052
[00301] Os resultados são mostrados graficamente na Figura 1. Pontos representam uma turvação acima de um nível limiar de 18 NTU, losangos representam uma solução clara (turvação menor do que ou igual a 18 NTU). Exemplo 8 Formação de HMWC (SE-HPLC) em preparações secas por congela-mento durante o armazenamento em temperatura elevada.
[00302] A atividade de FVIII:C e a concentração dos excipientes das formulações deste exemplo foram ajustadas diluindo-se um concentrado de FVIII (CSL627) com soluções tampão apropriadas. As formulações obtidas mostraram concentrações de FVIII:C de cerca de 390 a 435 IU/mL. As soluções depois foram dispensadas (2,5 mL) e secas por congelamento. Os liofilizados obtidos foram armazenados a +40 °C e amostras tomadas depois de 1, 3, 6, 9 e 12 meses. Amostras foram tomadas das soluções reconstituídas antes e a seguir do arma-zenamento dos liofilizados e congeladas a -70 °C. H MWC foram de- terminadas por SE-HPLC nas amostras a seguir do descongelamento em um banho de água (+37 °C).
Figure img0053
Exemplo 9 Ensaio de atividade de substrato cromogênico de FVIII:C e formação de HMWC (SE-HPLC) em preparações secas por congelamento durante o armazenamento em temperatura elevada
[00303] A atividade de FVIII:C e a concentração dos excipientes foram ajustadas diluindo-se um concentrado de FVIII (CSL627) com soluções tampão apropriadas. As soluções depois foram dispensadas (2.5 mL) e secas por congelamento. Os liofilizados obtidos foram armazenados a +40 °C e amostras tomadas depois de 1, 3, 6, 9 e 12 meses. Amostras foram tomadas das soluções reconstituídas antes e a seguir do armazenamento dos liofilizados e congeladas a -70 °C. HMWC foi determinado nas amostras armazenadas congeladas a seguir do descongelamento em um banho de água (+37 °C ).
[00304] A atividade de FVIII:C (Ensaio de atividade de FVIII de substrato cromogênico) foi determinada nas soluções frescas antes da secagem por congelamento e nos liofilizados reconstituídos frescos diretamente a seguir da secagem por congelamento ou depois do armazenamento. A recuperação (estabilidade) foi calculada como a porcentagem de FVIII:C depois do armazenamento dividida pela atividade de FVIII:C no Tempo 0. A atividade de FVIII:C no Tempo 0 (Depois da secagem por congelamento) foi definida como 100 %.
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Exemplo 10 Ensaio de atividade de substrato cromogênico de FVIII:C e formação de HMWC (SE-HPLC) em preparações secas por congelamento durante o armazenamento em temperatura elevada.
[00305] A atividade de FVIII:C e a concentração dos excipientes foram ajustadas diluindo-se um concentrado de FVIII (CSL627) com soluções tampão apropriadas. As soluções depois foram dispensadas (2,5 mL) e secas por congelamento. Os liofilizados obtidos foram armazenados a +40 °C e as amostras tomadas depois de 3, 6 e 9 meses. Amostras foram tomadas das soluções reconstituídas antes e a seguir do armazenamento dos liofilizados e congeladas a -70 °C. HMWC foi determinado nas amostras armazenadas congeladas a seguir do descongelamento em um banho de água (+37 °C ).
[00306] A atividade de FVIII:C (Ensaio de atividade de FVIII de substrato cromogênico) foi determinada nas soluções frescas antes da secagem por congelamento e nos liofilizados reconstituídos frescos diretamente a seguir da secagem por congelamento ou depois do armazenamento. A recuperação (estabilidade) foi calculada como a porcentagem de FVIII:C depois do armazenamento dividida pela atividade de FVIII:C no Tempo 0. A atividade de FVIII:C no Tempo 0 (Depois da secagem por congelamento) foi definida como 100 %.
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Claims (22)

1. Composição aquosa de Fator VIII de coagulação, caracterizada pelo fato de que compreende: (a) uma molécula de FVIII que consiste da SEQ ID No: 2; (b) 40 a 195 mM de um sal de sódio; (c) histidina; (d) 1 mM ou mais de um sal de cálcio; e (e) um tensoativo; em que [His] > 180 mM - 20*[Ca2+], em que [Ca2+] é a concentração de íons cálcio na composição aquosa em milimol por litro, e [His] é a concentração de histidina na composição aquosa em milimol por litro, com a condição de que [His] > 0; e em que a osmolaridade da composição é 0,001 to 600 mOsmol/L.
2. Composição aquosa, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a concentração do sal de sódio na composição aquosa é 45 a 95 mM.
3. Composição aquosa, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que [His] é 5 a 200 mM.
4. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que [Ca2+] é 5 a 100 mM.
5. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que o pH da composição aquosa é de 5 a 9.
6. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que a composição, durante: (i) liofilização, (ii) armazenamento da composição liofilizada em uma temperatura de +25°C e uma umidade relativa de 40% por um período de 12 meses, e (iii) reconstituição subsequente da composição liofilizada em água destilada, mostra uma recuperação de atividade de FVIII:C de pelo menos 80%, em relação à mesma composição durante: (i) a liofilização e, sem armazenamento da composição liofilizada, (ii) reconstituição imediata subsequente em água destilada.
7. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a composição aquosa mantém pelo menos 80% de sua atividade de Fator VIII por pelo menos 48 horas, quando armazenada no estado líquido a 4°C.
8. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que o sal de cálcio é cloreto de cálcio.
9. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de que o sal de sódio é cloreto de sódio.
10. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada pelo fato de que a composição compreende ainda um carboidrato.
11. Composição aquosa, de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pelo fato de que o carboidrato é sacarose.
12. Composição aquosa, de acordo com a reivindicação 10 ou 11, caracterizada pelo fato de que a concentração do carboidrato é de 1 a 20% (p/p).
13. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada pelo fato de que a concentração do surfactante é de 0,001 a 0,2% (p/v).
14. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizada pelo fato de que o tensoativo é um tensoativo de ocorrência não natural.
15. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada pelo fato de que a composição compreende ainda pelo menos um aminoácido diferente de histidina.
16. Composição aquosa, de acordo com a reivindicação 15, caracterizada pelo fato de que o referido pelo menos um aminoácido diferente da histidina é selecionado a partir do grupo que consiste em arginina, asparagina, ácido aspártico, ácido glutâmico, glutamina, lisina, metionina, fenilalanina, leucina, isoleucina e combinações dos mesmos.
17. Composição aquosa, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizada pelo fato de que a composição compreende ainda pelo menos um antioxidante.
18. Composição aquosa, de acordo com a reivindicação 17, caracterizada pelo fato de que o referido pelo menos um antioxidante é selecionado do grupo que consiste em glutationa reduzida, metionina, cisteína, sulfito de sódio, vitamina A, vitamina E, ácido ascórbico, ascorbato de sódio e combinações dos mesmos.
19. Composição aquosa, de acordo com a reivindicação 17 ou 18, caracterizada pelo fato de que a concentração do referido pelo menos um antioxidante é de 0,05 a 100 mM.
20. Composição, caracterizada pelo fato de que é obtenível liofilizando-se a composição aquosa, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 19.
21. Composição aquosa de Fator VIII de coagulação, caracterizada pelo fato de que é obtenível reconstituindo-se a composição liofilizada, como definida na reivindicação 20, com uma solução aquosa.
22. Método de estabilizar uma molécula de FVIII, caracterizado pelo fato de que compreende misturar os componentes, como definidos na reivindicação 1, para obter uma composição aquosa, e liofilizar a composição aquosa, em que a molécula de FVIII consiste da SEQ ID No: 2.
BR112017002090-4A 2014-08-04 2015-07-24 Composição aquosa de fator viii de coagulação e método de estabilizar uma molécula de fviii BR112017002090B1 (pt)

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WO (1) WO2016020210A1 (pt)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106279437B (zh) * 2016-08-19 2017-10-31 安源医药科技（上海）有限公司 高糖基化人凝血因子viii融合蛋白及其制备方法与用途
EP3549946A4 (en) 2016-11-29 2020-10-21 Spiber Inc. COMPOSITION OF PROTEIN, ITS PRODUCTION PROCESS AND PROCESS FOR IMPROVING THERMAL STABILITY
WO2018132874A1 (en) * 2017-01-19 2018-07-26 Csl Limited Method of preventing an immune response with alpha- 1 anti-trypsin
AU2018366110B2 (en) 2017-11-07 2024-08-08 Rani Therapeutics, Llc Clotting factor preparations for delivery into tissue of the intestinal tract using a swallowable drug delivery device
CN113105562B (zh) * 2018-09-26 2023-12-01 安源医药科技（上海）有限公司 突变型单链人凝血因子viii在制备融合蛋白中的应用
CN112138149A (zh) * 2019-06-28 2020-12-29 北京基科晟斯医药科技有限公司 重组凝血因子viii制剂
EP4240757A2 (en) 2020-11-09 2023-09-13 Takeda Pharmaceutical Company Limited Purification of fviii from plasma using silicon oxide adsorption

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5605884A (en) 1987-10-29 1997-02-25 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Factor VIII formulations in high ionic strength media
US4877608A (en) 1987-11-09 1989-10-31 Rorer Pharmaceutical Corporation Pharmaceutical plasma protein formulations in low ionic strength media
EP0410207B1 (en) 1989-07-24 1997-01-22 Bayer Corporation Stabilization of highly purified proteins
DE4001451A1 (de) 1990-01-19 1991-08-01 Octapharma Ag Stabile injizierbare loesungen von faktor viii und faktor ix
DE4111393A1 (de) 1991-04-09 1992-10-15 Behringwerke Ag Stabilisierte faktor viii-praeparationen
AU670793B2 (en) 1992-04-30 1996-08-01 Alpha Therapeutic Corporation Improved solubilization and stabilization of factor VIII complex
ATE198277T1 (de) * 1992-10-02 2001-01-15 Genetics Inst Zusammensetzung, welche den koagulationsfaktor viii beinhaltet; verfahren zu deren herstellung und die benutzung eines oberflächenaktiven stoffes als stabilisator
GB9501040D0 (en) 1995-01-19 1995-03-08 Quadrant Holdings Cambridge Dried composition
SE9501189D0 (sv) 1995-03-31 1995-03-31 Pharmacia Ab Protein formulation
US5763401A (en) * 1996-07-12 1998-06-09 Bayer Corporation Stabilized albumin-free recombinant factor VIII preparation having a low sugar content
RU2244556C2 (ru) * 1999-02-22 2005-01-20 Юниверсити Оф Коннектикут Новые не содержащие альбумин составы фактора viii
IL161251A0 (en) 2001-10-10 2004-09-27 Neose Technologies Inc Remodeling and glycoconjugation of peptides
GB0207092D0 (en) 2002-03-26 2002-05-08 Sod Conseils Rech Applic Stable pharmaceutical composition containing factor VIII
US7041635B2 (en) 2003-01-28 2006-05-09 In2Gen Co., Ltd. Factor VIII polypeptide
EP3378470A1 (en) * 2003-12-19 2018-09-26 Novo Nordisk Health Care AG Stabilised compositions of factor vii polypeptides
KR100624013B1 (ko) * 2004-06-25 2006-09-19 주식회사 녹십자홀딩스 동결건조된 알부민 비함유 재조합 사람 혈액응고 제 8인자 제제
US7523304B2 (en) * 2005-11-22 2009-04-21 Ntt Docomo, Inc. Generation of set coverings with free riders, and generation of ordered sets of meeting points, in systems which include, but are not limited to, systems for broadcast encryption and systems for certificate revocation
SI1986612T1 (sl) 2006-02-07 2013-01-31 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Stabilizirana spojina glukocerebrosidaze
TW200806317A (en) 2006-03-20 2008-02-01 Wyeth Corp Methods for reducing protein aggregation
US7982010B2 (en) 2006-03-31 2011-07-19 Baxter International Inc. Factor VIII polymer conjugates
US7985839B2 (en) 2006-03-31 2011-07-26 Baxter International Inc. Factor VIII polymer conjugates
US7645860B2 (en) 2006-03-31 2010-01-12 Baxter Healthcare S.A. Factor VIII polymer conjugates
AU2007245190B2 (en) 2006-03-31 2011-07-21 Takeda Pharmaceutical Company Limited Pegylated factor VIII
KR101542752B1 (ko) 2006-12-22 2015-08-10 체에스엘 베링 게엠베하 연장된 생체내 반감기를 갖는 변형된 응고 인자
CA2671676C (en) 2006-12-27 2014-04-22 Baxter Healthcare Sa Von willebrand factor-and factor viii-polymer conjugates having a releasable linkage
EP1988101A1 (en) 2007-05-04 2008-11-05 Novo Nordisk A/S Improvement of factor VIII polypeptide titers in cell cultures
EP2167526B1 (en) 2007-07-11 2011-03-30 Novo Nordisk A/S Purification of factor viii using a mixed-mode or multimodal resin
WO2009062100A1 (en) 2007-11-09 2009-05-14 Baxter International Inc. Modified recombinant factor viii and von willebrand factor and methods of use
WO2009108806A1 (en) 2008-02-27 2009-09-03 Novo Nordisk A/S Conjugated factor viii molecules
CN102143759A (zh) * 2008-09-03 2011-08-03 奥克塔法马股份有限公司 重组制备的因子ⅷ的新型保护组合物
HUE039906T2 (hu) 2008-10-17 2019-02-28 Baxalta GmbH Alacsony fokú vízben oldható polimer tartalmú módosított vérfaktorok
JP5779780B2 (ja) 2008-11-07 2015-09-16 バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッドＢａｘｔｅｒ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｃｏｒｐ０Ｒａｔｅｄ 第ｖｉｉｉ因子製剤
ES2401965T3 (es) 2009-02-19 2013-04-25 Novo Nordisk A/S Modificación de Factor VIII
US20120093840A1 (en) 2009-04-06 2012-04-19 Novo Nordisk A/S Targeted delivery of factor viii proteins to platelets
GB0915480D0 (en) 2009-09-04 2009-10-07 Arecor Ltd Stable formulation of factor viii
EP2536753B1 (en) 2010-02-16 2017-12-20 Novo Nordisk A/S Factor viii molecules with reduced vwf binding
US9493543B2 (en) 2010-02-16 2016-11-15 Novo Nordisk A/S Factor VIII fusion protein
JP5826772B2 (ja) 2010-02-16 2015-12-02 ノヴォ ノルディスク アー／エス コンジュゲートタンパク質
WO2011131510A2 (en) 2010-04-21 2011-10-27 Novo Nordisk A/S Selective modification of proteins
EP2593130A2 (en) 2010-07-15 2013-05-22 Novo Nordisk A/S Stabilized factor viii variants
MY188828A (en) 2010-09-17 2022-01-06 Takeda Pharmaceuticals Co Stabilization of immunoglobulins through aqueous formulation with histidine at weak acidic to neutral ph
CA2850579A1 (en) * 2011-10-18 2013-04-25 Carsten Horn Method for improving the stability of purified factor viii after reconstitution
CN102580062B (zh) * 2012-03-09 2017-03-08 中国医学科学院输血研究所 人凝血因子VIII与vWF复合物或人凝血因子VIII制剂的干热处理稳定剂
CN104411716B (zh) * 2012-04-24 2018-09-07 诺和诺德股份有限公司 适用于治疗血友病的化合物
JP2015527350A (ja) * 2012-08-13 2015-09-17 ノヴォ ノルディスク アー／エス 第ｖｉｉｉ因子の液体製剤

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