BR112016015156B1

BR112016015156B1 - elemento de teste de diagnóstico, composição de revestimento, método para a fabricação de um elemento de teste de diagnóstico, método para determinar a quantidade de um analito

Info

Publication number: BR112016015156B1
Application number: BR112016015156-9A
Authority: BR
Inventors: Alexander Ibach; Yilmaz Isgoeren
Original assignee: F. Hoffmann-La Roche Ag
Priority date: 2014-01-24
Filing date: 2015-01-22
Publication date: 2021-01-26
Also published as: IL246278A0; WO2015110500A1; AU2015208214C1; RU2016134420A3; US10371697B2; AU2015208214A1; KR101847758B1; CA2936337A1; RU2016134420A; KR20160102291A; RU2723537C2; RU2019103900A3; CA2936337C; JP2020046434A; RU2680140C2; CN105917216B; MX2016009382A; NZ720942A; JP7025398B2; JP2017504020A

Abstract

ELEMENTO DE TESTE DE DIAGNÓSTICO, COMPOSIÇÃO DE REVESTIMENTO, MÉTODO PARA A FABRICAÇÃO DE UM ELEMENTO DE TESTE DE DIAGNÓSTICO, USO DO ELEMENTO DE TESTE DE DIAGNÓSTICO, MÉTODO PARA DETERMINAR A PRESENÇA OU QUANTIDADE DE UM ANALITO, MÉTODO PARA AVALIAR SE UM INDIVÍDUO SOFRE DE UMA DOENÇA E USO DO ELEMENTO DE TESTE. A presente invenção se refere ao campo da fabricação de elementos de teste de diagnóstico. Especificamente, a presente invenção se refere a um elemento de teste de diagnóstico para a determinação de um analito contido em uma amostra de fluido corporal, dito elemento de teste compreende, pelo menos, um campo de teste com, pelo menos, uma camada de detecção e, pelo menos, uma camada de separação, em que dita, pelo menos, uma camada de separação compreende o SiO2 disperso em uma quantidade de cerca de 1,0 a 1,6 g/m2. A presente invenção também se refere a uma composição de revestimento capaz de formar uma camada de separação em um elemento de teste de diagnóstico da presente invenção descrita acima. Além disso, é fornecido um método para a fabricação do elemento de teste de diagnóstico, bem como a utilização do elemento de teste de diagnóstico para a determinação da quantidade (...).

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção se refere ao campo da fabricação de elementos de teste de diagnóstico. Especificamente, a presente invenção se refere a um elemento de teste de diagnóstico para a determinação de um analito contido em uma amostra de fluido corporal, dito elemento de teste compreende, pelo menos, um campo de teste com, pelo menos, uma camada de detecção e, pelo menos, uma camada de separação, em que dita, pelo menos, uma camada de separação compreende o SiO2 disperso em uma quantidade de cerca de 1,0 a 1,6 g/m2. A presente invenção também se refere a uma composição de revestimento capaz de formar uma camada de separação em um elemento de teste de diagnóstico da presente invenção descrito acima. Além disso, é fornecido um método para a fabricação do elemento de teste de diagnóstico, bem como a utilização do elemento de teste de diagnóstico para a determinação da quantidade de um analito, de preferência, a glicose, em uma amostra de um indivíduo.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] No estado da técnica anterior, diversos elementos de teste de diagnóstico são conhecidos que podem ser utilizados para a detecção de um analito em uma amostra de um fluido corporal. Dito analito, por exemplo, pode ser um metabolito, tal como a glicose. A detecção qualitativa e/ou quantitativa do analito pode ser realizada. Os analitos conhecidos, por exemplo, são a glicose, mais especialmente, a glicose, ácido úrico, etanol, e/ou lactato no sangue. Outros tipos de analitos também são, de maneira alternativa ou adicional, detectáveis. O fluido corporal, por exemplo, pode ser o sangue total, plasma sanguíneo, fluido intersticial, saliva, urina, ou outros tipos de fluidos corporais. A presente invenção será agora, sem restringir outras realizações possíveis, essencialmente descritas com referência à detecção de glicose no sangue total.

[003] Os elementos de teste de diagnóstico, em princípio, compreendem, pelo menos, um reagente de detecção para a detecção qualitativa e/ou quantitativa do analito. Um reagente de detecção, em geral deve ser entendido como uma substância química ou uma mistura de substâncias químicas, que, na presença de, pelo menos, um analito, altera, pelo menos, uma propriedade detectável, mais especialmente, uma propriedade fisicamente e/ou quimicamente detectável. De preferência, esta alteração de propriedade especificamente ocorre apenas na presença de, pelo menos, um analito a ser detectado, mas não na presença de outras substâncias. No entanto, na prática, é possível tolerar uma alteração de propriedade não específica dentro de determinados limites, na presença de outras substâncias químicas, cuja presença na amostra do fluido corporal, em geral, é pouco provável e/ou que está presente em apenas uma concentração muito baixa.

[004] Pelo menos, uma alteração de propriedade, por exemplo, pode ser a alteração em uma propriedade oticamente detectável, mais especialmente, uma alteração de cor. Os exemplos de elementos de teste de diagnóstico com os reagentes de detecção ótica são bem conhecidos no estado da técnica anterior. Por exemplo, as publicações DE 196 29 656 A1, DE 196 29 657 A1, WO 2010/052306 ou EP 0.821.234 B1 descrevem os suportes de teste de diagnóstico para a determinação de um analito a partir de sangue total por meio de um sistema de reagente que está presente no suporte e que inclui um reagente de formação de cor. Esse suporte de teste de diagnóstico compreende um campo de teste com um lado de carregamento da amostra, sobre o qual a amostra é adicionada, e um lado de detecção, em que uma alteração oticamente detectável ocorre como um resultado da reação do analito com o sistema de reagentes. O campo de teste é configurado de tal maneira que os eritrócitos presentes na amostra não atingem o lado de detecção. Além disso, o campo de teste possui uma lâmina transparente e uma primeira camada de filme e também uma segunda camada de filme aplicada à primeira camada de filme. A primeira camada localizada na lâmina transparente está em um estado úmido e, por conseguinte, exibe dispersão consideravelmente menos clara do que a segunda camada assentada sobre a mesma. A primeira camada de filme compreende um excipiente cujo índice de refração é próximo do índice de refração da água, enquanto que a segunda camada contém um pigmento que possui um índice de refração de, pelo menos, ou até mesmo superior a 2,0, mais especialmente de, pelo menos, 2,2, a uma concentração de, pelo menos, 25% em peso ou até mesmo superior a 25% em peso, com base na segunda camada seca. Por exemplo, a primeira camada pode compreender um silicato de alumínio e sódio como o excipiente.

[005] No entanto, na prática, os elementos de teste conhecidos do estado da técnica, mais especialmente os elementos de teste que possuem, pelo menos, um campo de teste, apresentam desvantagens e dificuldades técnicas. Uma vez que a composição das camadas de filme pode variar de batelada para batelada, as variações também podem ocorrer durante as medições, por exemplo, devido à alteração de remissão. Atualmente, as curvas em bateladas de calibração específicas são fornecidas denominadas “chaves ROM” em formato eletrônico, para possibilitar uma medida precisa do analito. No entanto, é uma medida bastante complicada para o técnico no assunto aplicar uma curva de calibração para cada indivíduo e para cada batelada. Além disso, existe um risco para a utilização de curvas de calibração erradas devido às confusões.

[006] Uma possibilidade que atualmente é realizada para evitar as confusões e trabalho adicional para a troca da chave ROM que compreende a curva de calibração é armazenar a informação de calibração para os elementos de teste de diagnóstico em cada elemento ou sobre um compartimento que compreende uma pluralidade de elementos de teste a partir da mesma batelada. No entanto, esta medida é de custo intensivo e exige etapas adicionais de produção uma vez que cada elemento de teste necessita ser marcado, por exemplo, por um código de barras ou os elementos de teste de uma batelada precisam ser armazenados em um compartimento marcado com código de barras.

[007] No entanto, existe uma necessidade de medições menos onerosas para a preservação da qualidade de medição dos elementos de teste de diagnóstico que podem ser realizados sem a necessidade de etapas adicionais de produção.

[008] O problema técnico subjacente à presente invenção pode ser considerado como a disponibilização de meios e métodos para cumprir com as necessidades mencionadas acima. Dito problema técnico é solucionado pelas realizações caracterizadas nas reivindicações e abaixo no presente.

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO

[009] Consequentemente, a presente invenção se refere a um elemento de teste de diagnóstico para a determinação de um analito contido em uma amostra de fluido corporal, dito elemento de teste compreende, pelo menos, um campo de teste com, pelo menos, uma camada de detecção e, pelo menos, uma camada de separação, em que dita, pelo menos, uma camada de separação compreende os componentes sólidos saturados de dispersão e SiO2 em uma quantidade de cerca de 1,0 a 1,6 g/m2.

[010] O termo “elemento de teste de diagnóstico” conforme utilizado no presente, se refere a um dispositivo que compreende, pelo menos, um campo de teste para a aplicação e a análise da amostra. Consequentemente, dito campo de teste compreende os reagentes para a análise de uma amostra para a presença ou ausência do analito. Normalmente, tais reagentes compreendem um ou mais agentes de detecção que reconhecem a presença do analito em uma amostra aplicada e que estão adaptados para passar através de, pelo menos, uma alteração detectável de uma propriedade física e/ou química, na presença do analito a ser determinado. Normalmente, as alterações óticas são elicitadas na presença do analito embora outras alterações, tais como as alterações químicas ou alterações eletroquímicas também sejam concebíveis.

[011] Os detalhes em relação aos princípios subjacentes a tais elementos de teste e a sua fabricação podem ser encontrados nas patentes DE 196 29 657 A1, DE 196 29 656 A1, ou EP 0.821.234 B1, que estão incorporadas no presente como referência. Outros elementos de teste previstos, de acordo com a presente invenção, são aqueles descritos nas patentes EP 1.035.919 B1 ou EP 1.035.920 B1, cujos respectivos conteúdos estão incorporados no presente como referência. As camadas do elemento de teste de diagnóstico, de acordo com a presente invenção, em um aspecto, são as camadas de filme e são produzidas a partir de dispersões ou emulsões de formadores de filme poliméricos. Os formadores de filme de dispersão contêm as partículas microscópicas de polímero, insolúveis no líquido do veículo (normalmente a água) e são finamente dispersas no líquido do veículo. Se o líquido for removido através da evaporação durante a formação do filme, em seguida, as partículas se aproximarem e finamente se tocam entre si. As grandes forças que ocorrem neste processo e o ganho de energia de superfície que acompanha a formação do filme resultam nas partículas de crescimento em uma camada de filme substancialmente fechada. De maneira alternativa, também é possível utilizar uma emulsão do formador de filme, em que este é dissolvido em um solvente. O polímero dissolvido está emulsionado em um líquido do veículo que é imiscivel com o solvente. Os ésteres de polivinila, acetatos de polivinila, ésteres poliacrílicos, ácido polimetacrílico, amidas de polivinila, poliamidas e poliestireno são especialmente adequados como polímeros de tais formadores de filme. Além disso, os homopolímeros misturados polimerizados também são adequados, tais como de butadieno, estireno ou éster de ácido maleico.

[012] Em uma realização, a dispersão e/ou dispersão saturada é obtida através de um dos métodos, conforme descrito no presente em outro local ou através de um método conhecido para o técnico no assunto, por exemplo, de Pohl et al., (2005), Chemie Ingenieur Technik 77 (3): 258-262 e da patente EP 2.360.120 A1. Também em uma realização, o grau de dispersão é determinado através de um dos métodos, conforme descrito no presente em outro local ou através de um método conhecido para o técnico no assunto, por exemplo, a partir das referências referidas anteriormente Pohl et al., e patente EP 2.360.120 A1. Em uma realização especial, a saturação de dispersão é determinada por determinação da distribuição de tamanho das partículas distribuídas, em especial, através da medição de difração a laser, ou através da caracterização da dispersão utilizando um analisador de dispersão, em especial, um LUMiSizer® (LUM GmbH, Berlim).

[013] Resulta do precedente que o elemento de teste de diagnóstico da presente invenção pode ser utilizado para determinar a presença ou ausência ou a quantidade de um analito. O termo “quantidade”, conforme utilizado no presente, se refere à quantidade absoluta ou relativa do analito presente em uma amostra aplicada ao elemento de teste de diagnóstico. A quantidade relativa de preferência, de acordo com a presente invenção, é a concentração, isto é, a quantidade em relação ao volume.

[014] O termo “amostra de fluido corporal”, conforme utilizado no presente, em princípio, abrange todos os tipos de fluidos corporais, tais como o sangue e derivados de sangue, urina, saliva, linfa, licor, lágrimas, e similares. A amostra de fluido corporal deve ser conhecida ou suspeita para compreender o analito a ser determinado. Os fluidos corporais conhecidos que compreendem uma pluralidade de analitos diagnosticamente relevantes são o sangue, incluindo o sangue total, plasma e soro, urina, saliva, licor, líquido sinovial, e suor. Normalmente, estão previstos o sangue e seus derivados de plasma e soro, no entanto, de acordo com a presente invenção, como amostras de fluido corporal.

[015] Em especial, o analito que é determinado, de acordo com a presente invenção, é a glicose. Consequentemente, os agentes de detecção típicos para a determinação de glicose como umo analito são as enzimas tais como as desidrogenases de glicose. Normalmente, as desidrogenases de glicose dependente de Fad-, NAD+-, ou PQQ ou seus mutantes, incluindo aquelas descritas na publicação WO 2011/020856 devem ser utilizados. Além disso, os agentes de detecção podem compreender as enzimas que são necessárias para a transferência de redox equivalentes obtidos a partir das desidrogenases de glicose tais como as diaforases e, em especial, uma deidrogenase de lipoamida ou uma deidrogenase de NADH ou um mutante enzimaticamente ativo. Além disso, os reagentes de detecção, de maneira alternativa ou adicional, podem compreender um ou mais mediadores, isto é, as substâncias capazes de transferir as cargas elétricas de uma substância à outra. Mais especialmente, os mediadores podem ser utilizados que são adequados para a transferência de elétrons. Por exemplo, esta substância pode ser a nitrosoanilina. Além disso, os reagentes de detecção, novamente, de maneira alternativa ou adicional, podem compreender, pelo menos, um indicador. Um indicador pode ser entendido como sendo uma substância que, como tal, pode alterar, pelo menos, uma propriedade que pode ser detectada, dependendo em que forma esta substância está presente. Por exemplo, as substâncias que podem ser utilizadas, em uma forma reduzida e uma forma oxidada, podem possuir diferentes propriedades óticas, por exemplo, diferentes propriedades de cores. De maneira alternativa ou adicional, o indicador pode compreender uma substância que, em diferentes estados de carga, possui diferentes propriedades óticas, por exemplo, as diferentes propriedades de cores. Em especial, um indicador previsto, de acordo com a presente invenção, é o ácido 2,18-fosforomolibdico, daqui em diante também referido como ácido fosforomolibdico. Por conseguinte, em geral, um ou mais reagentes de detecção pode ser entendido como sendo uma única substância ou uma mistura de substâncias, por exemplo, conforme explicado acima, uma mistura de, pelo menos, uma enzima, pelo menos, um mediador e, pelo menos, um indicador. Tais reagentes de detecção são conhecidos, em princípio, a partir da técnica anterior, por exemplo, a partir do estado da técnica anterior descrito acima.

[016] O termo “campo de teste”, conforme referido, de acordo com a presente invenção, se refere a uma área do elemento de teste de diagnóstico, que pode ser utilizada para a aplicação e/ou análise da amostra. O elemento de teste pode ser parte do elemento de teste de diagnóstico, ou pode ser o elemento de diagnóstico. Em princípio, o campo de teste possui um lado de aplicação da amostra sobre o qual a amostra de fluido corporal é aplicada e um lado de detecção que possibilita a detecção de uma alteração em uma propriedade ótica e/ou química quando o analito reage com o(s) agente(s) de reação. O campo de teste possui, pelo menos, uma camada de detecção que contém o(s) reagente(s) de detecção. Um sistema que possui uma camada de detecção única pode ser utilizado, ou diversas camadas de detecção podem ser utilizadas que podem ser aplicadas uma sobre a outra, diretamente ou com a interposição de uma ou mais outras camadas. No entanto, preferência especial é dada a um sistema que apenas possui uma única camada de detecção. O termo “camada” deve ser entendido, no contexto da presente invenção, em geral, para significar um elemento em que uma camada de material é aplicada plana para um elemento de suporte ou é formada como um filme independente. A camada pode, mas não necessariamente precisa ser fechada, mas, por exemplo, também pode possuir aberturas. No entanto, preferência especial é dada, conforme será mais especialmente desenvolvido a seguir, para uma realização substancialmente uniforme, de preferência, porosa, mas homogeneamente revestida, homogênea da camada de detecção que possui uma espessura de camada homogênea. A espessura da camada, isto é, a espessura média da camada de detecção, de preferência, é de 3 a 60 μm, mais especialmente, de 5 a 15 μm, por exemplo, de 8 μm.

[017] De acordo com a presente invenção, o campo de teste compreende uma folha transparente na qual uma primeira camada de filme (isto é, a camada de detecção) e uma segunda camada de filme (isto é, a camada de separação) são aplicadas em repouso em cima da outra, nesta ordem. É importante que a primeira camada localizada na folha transparente disperse consideravelmente menor quantidade de luz do que a segunda camada sobrejacente. O lado não revestido da folha transparente é referido como o lado de detecção e o lado da segunda camada, que é oposto ao lado com o qual a segunda camada assenta sobre a primeira é referido como o lado de aplicação da amostra. Como folhas transparentes, as folhas de plástico são levadas em consideração por serem impermeáveis aos líquidos. A folha de policarbonato provou ser especialmente adequada.

[018] O termo “camada de detecção” (ou “primeira camada”) conforme utilizado no presente, se refere a uma camada de filme na área de teste, que compreende o(s) reagente(s) de reação, conforme especificado acima. Além disso, dita camada também deve compreender os compostos de revestimento que contêm os formadores de filmes poliméricos, agentes de dilatação e excipientes fracos de dispersão de luz ou nenhum excipiente. Os excipientes leves são aqueles, de acordo com a presente invenção, cujo índice de refração é próximo do índice de refração da água. O dióxido de silício, silicatos e silicatos de alumínio provaram ser especialmente adequados para este propósito.

[019] O termo “camada de separação” (ou “segunda camada”) conforme utilizado no presente, se refere a uma camada de filme na área de teste que compreende os componentes sólidos saturados de dispersão. Normalmente, ditos componentes sólidos de dispersão-saturada na camada de separação do elemento de teste de diagnóstico, de acordo com a presente invenção, foram obtidos através da dispersão dos componentes sólidos em uma composição de revestimento que forma a camada de separação, até um máximo ser atingido de tal maneira que nenhum aumento na quantidade componentes sólidos da dispersão possa ser observado (estágio de estabilização). A maneira como obter tais composições de revestimento e camadas dispersas é bem conhecida no estado da técnica e estão descritas no presente em outro local com mais detalhes.

[020] Além disso, a camada de separação deve compreender o SiO2 em uma quantidade de cerca de 1,0 a 1,6 g/m2. O termo “cerca de”, no contexto da presente invenção engloba as variações do valor indicado de +/15%, +/- 10%, +/- 5%, +/- 3%, ou +/- 2% +/-1% e o próprio valor indicado. Em algumas realizações, a camada de separação compreende o SiO2 em uma quantidade de cerca de 1,2 a 1,5 g/m2. Em algumas realizações, a camada de separação compreende o SiO2 em uma quantidade de cerca de 1,3 a 1,4 g/m2. Em algumas realizações, a camada de separação compreende o SiO2 em uma quantidade de cerca de 1,4 g/m2. Mais normalmente, a camada de separação pode compreender o SiO2 em uma quantidade de cerca de 1,00 a 1,05 g/m2, 1,00 a 1,10 g/m2, 1,00 a 1,15 g/m2,1,00 a 1,20 g/m2, 1,00 a 1,25 g/m2, 1,00 a 1,30 g/m2, 1,00 a 1,35 g/m2, 1,00 a 1,40 g/m2, 1,00 a 1,45 g/m2, 1,00 a 1,50 g/m2, ou 1,00 a 1,55 g/m2 ou cerca de 1,05 a 1,60 g/m2, 1,10 a 1,60 g/m2, 1,15 a 1,60 g/m2, 1,20 a 1,60 g/m2, 1,25 a 1,60 g/m2, 1,30 a 1,60 g/m2, 1,35 a 1,60 g/m2, 1,40 a 1,60 g/m2 ou 1,45 a 1,60 g/m2. Além disso, a camada de separação requer um agente de dilatação e, em qualquer caso, pelo menos, um pigmento de dispersão de luz forte. Além disso, a segunda camada também pode conter os excipientes não porosos, bem como os excipientes porosos. Através da adição de um agente de dilatação que dilata bem (isto é, uma substância que aumenta o seu volume, quando absorve a água) não apenas são obtidas as camadas que podem ser penetradas de forma relativamente rápida pelo líquido de amostra, mas possuem bons eritrócitos e, além disso, também as propriedades de separação de pigmento de sangue, apesar deste efeito de abertura do agente de dilatação. As propriedades de dilatação deveriam ser tão boas para um teste em que a taxa de formação de cor - tal como, por exemplo, de uma reação de teste de glicose - é principalmente dependente da penetração do líquido de amostragem através da camada, a reação oticamente detectável é mensurável após um máximo de um minuto. Os agentes de dilatação especialmente adequados provaram ser o copolímero anidrido de ácido maleico de éter de metila de vinila, goma de xantano e copolímero de ácido maleico de éter de metila de vinila. Deve ser entendido que uma ou mais camadas de detecção pode ser utilizada de acordo com o elemento de teste de diagnóstico da presente invenção.

[021] De acordo com a presente invenção, a segunda camada deve dispersar a luz muito intensamente. De maneira ideal, o índice de refração dos pigmentos na segunda camada de filme deve ser de, pelo menos, 2,5. Consequentemente, o TiO2 normalmente é adicionado à camada. Por conseguinte, em um aspecto do elemento de teste de diagnóstico da presente invenção, dita, pelo menos, uma camada de separação ainda compreende o TiO2. Em um aspecto típico, dito TiO2 está presente em uma quantidade de cerca de 5,5 a 9,0 g/m2. Mais normalmente, a camada de separação pode compreender o TiO2 em uma quantidade de cerca de 5,5 a 6,0 g/m2, 5,5 a 6,5 g/m2, 5,5 a 7,0 g/m2, 5,5 a 7,5 g/m2, 5,5 a 8,0 g/m2 ou 5,5 a 8,5 g/m2 ou cerca de 6,0 a 9,0 g/m2, 6,5 a 9,0 g/m2, 7,0 a 9,0 g/m2, 7,5 a 9,0 g/m2 ou 8,0 a 9,0 g/m2 ou 8,5 a 9,0 g/m2 ou cerca de 8,0 a 8,3 g/m2, 7,5 a 8,0 g/m2, 7,0 a 8,3 g/m2, 6,5 a 8,3 g/m2, ou 6,0 a 8,3 g/m2. Em algumas realizações, a camada de separação compreende o TiO2 em uma quantidade de cerca de 6,0 a 8,0 g/m2. Em algumas realizações, a camada de separação compreende o TiO2 em uma quantidade de cerca de 7,0 a 8,0 g/m2. Em algumas realizações, a camada de separação compreende o TiO2 em uma quantidade de cerca de 7,5 g/m2. Além disso, é previsto que dito TiO2 está presente em uma quantidade que forma uma proporção entre SiO2 e TiO2 de entre cerca de 0,11 a 0,29, mais em especial, em uma proporção de cerca de 0,12 a 0,27, 0,14 a 0,25, ou 0,16 a 0,20 e, mais em especial, uma proporção de cerca de 0,17, 0,18 ou 0,19.

[022] Além disso, a camada de detecção e a camada de separação, em um aspecto, essencialmente são livres de agentes de oxidação que contêm o ferro. Em um aspecto típico, dito agente de oxidação que contêm o ferro é o ferricianeto de potássio (III).

[023] De uma maneira vantajosa, foi descoberto nos estudos subjacentes à presente invenção que o nível de dispersão de componentes sólidos na camada de separação influencia a cinética de remissão dos elementos de teste de diagnóstico. A fim de minimizar dita influência, foi descoberto que um nível de dispersão forte alcança um estágio saturado (estágio de estabilização), isto é, um nível máximo em que nenhum aumento adicional na dispersão é possível, é adequado para minimizar as diferenças entre a cinética de remissão das bateladas individuais dos elementos de teste. No entanto, aumentar o nível de dispersão dos componentes sólidos por si só apresenta o inconveniente de que as taxas de remissão superiores a 100% podem ser obtidas, se os níveis baixos de analitos, tais como de 0 a 10 mg/dL de glicose, devem ser determinados. Além disso, a cinética também foi abrandada para os níveis elevados de analito no caso da glicose. Foi descoberto que os inconvenientes mencionados acima podem ser evitados através da inclusão de SiO2 em uma quantidade de cerca de 1,0 a 1,6 g/m2 para a camada de separação. Utilizando o SiO2 na quantidade mencionada acima resulta em uma remissão especialmente favorável de 90 a 98% REM, até mesmo em concentrações baixas de glicose de cerca de 10 mg/dL. Uma quantidade ainda maior de SiO2 resulta em remissão reduzida, o que por sua vez iria produzir diferenças menos pronunciadas na remissão entre os níveis elevados de glicose, por exemplo, de 600 mg/dL e os níveis baixos de glicose, por exemplo, de 10 mg/dL. De uma maneira vantajosa, dita remissão favorável resulta a partir da inclusão de SiO2, bem como a partir do grau elevado de dispersão dos componentes sólidos, uma vez que utilizando o SiO2 isoladamente também produz a remissão menos favorável. Outros aprimoramentos podem ser obtidos, evitando o ferricianeto de potássio (III) como um agente de oxidação na camada de detecção e a camada de separação, bem como através da adição de camada de ácido fosforomolibdico como um indicador em uma fase muito tardia à composição de revestimento que forma a camada de detecção e a camada de separação de tal maneira que a hidrólise ou degradação do indicador será impedida. Além disso, foi descoberto que o ajuste do pH da composição de revestimento deve ser realizado antes da adição do indicador. Utilizando as alterações mencionadas acima na camada de detecção e na camada de separação, foi descoberto que a remissão é comparável entre as diferentes bateladas dos elementos de teste de diagnóstico, isto é, estão dentro de uma tolerância de no máximo cerca de +/- 5%. Por conseguinte, graças ao elemento de teste de diagnóstico da presente invenção, não é mais necessário fornecer as curvas de calibração para cada batelada de elementos de teste de diagnóstico, uma vez que dito elemento de teste possibilita a utilização de uma curva de calibração geral para todas as bateladas (tiras de teste de código único e sem código). Além disso, as medições intensivas dos custos e tempo de produção, tais como o armazenamento da informação de calibração em cada elemento de teste de diagnóstico através de um código de barras ou o fornecimento dos elementos de teste de uma batelada na forma de um compartimento marcado podem ser evitadas.

[024] As definições e explicações dos termos fornecidas anteriormente se aplicam, mutatis mutandis, para as realizações descritas abaixo.

[025] No que se segue, são especificadas as realizações particulares do elemento de teste de diagnóstico da presente invenção:

[026] Em uma realização do elemento de teste de diagnóstico da presente invenção, dita, pelo menos, uma camada de separação ainda compreende o TiO2.

[027] Em uma outra realização de dito elemento de teste de diagnóstico, dito TiO2 está presente em uma quantidade de cerca de 5,5 a 9,0 g/m2.

[028] Em ainda uma outra realização de dito elemento de teste de diagnóstico, dito TiO2 está presente em uma quantidade que forma uma proporção entre SiO2 e TiO2 de cerca de 0,11 a 0,29.

[029] Em uma outra realização do elemento de teste de diagnóstico da presente invenção, dita camada de detecção e camada de separação são essencialmente livres de agentes de oxidação que contêm o ferro.

[030] Em uma outra realização de dito elemento de teste de diagnóstico, dito agente de oxidação que contêm o ferro é o ferricianeto de potássio (III).

[031] Em ainda uma realização do elemento de teste de diagnóstico da presente invenção, ditos componentes sólidos saturados de dispersão foram obtidos através da dispersão dos componentes sólidos em uma composição de revestimento que forma a camada de separação, até um máximo ser alcançado de tal maneira que nenhum aumento na quantidade de componentes sólidos dispersos possa ser observado (estágio de estabilização).

[032] A presente invenção também se refere a uma composição de revestimento capaz de formar uma camada de detecção e camada de separação de um elemento de teste de diagnóstico da presente invenção descrito acima.

[033] O termo “composição de revestimento”, conforme utilizado no presente, se refere a uma composição, normalmente uma composição aquosa, que é capaz de formar a camada de separação constituída pelo campo de teste do elemento de teste de diagnóstico. Os componentes típicos de dita camada de separação também estão contidos na composição de revestimento. Além disso, dita composição irá compreender os solventes adequados para ditos componentes bem conhecidos pelos técnicos no assunto, por exemplo, a partir das patentes DE 196.29.657 A1, DE 196.29.656 A1, EP 0.821.234 B1, EP 1.035.919 B1 ou EP 1.035.920 B1 que estão incorporadas no presente como referência. Para ser capaz de formar a camada de separação do elemento de teste de diagnóstico, de acordo com a presente invenção, é previsto que a composição de revestimento da presente invenção compreenda o ácido silícico em uma quantidade de cerca de 2,0 g a 3,5 g por 100 g da composição de revestimento, mais especialmente, em uma quantidade de cerca de 2,1 g a 3,2 g por 100 g da composição de revestimento ou em uma quantidade de cerca de 2,1 g a 2,8 g por 100 g da composição de revestimento e, mais especialmente, em uma quantidade de cerca de 2,45 g por 100 g da composição de revestimento. Em um aspecto típico, dita composição ainda compreende o TiO2 em uma quantidade de cerca de 11,0 g a 18,0 g por 100 g da composição de revestimento, mais especialmente, em uma quantidade de cerca de 12,0 g a 17,0 g por 100 g da composição de revestimento ou em uma quantidade de cerca de 13,0 g a 15,0 g por 100 g da composição de revestimento e, mais especialmente ainda, uma quantidade de 13,6 g por 100 g da composição de revestimento.

[034] Por conseguinte, em uma realização da composição de revestimento da presente invenção, a composição de revestimento da presente invenção compreende o ácido silícico em uma quantidade de cerca de 2,0 g a 3,5 g por 100 g da composição de revestimento.

[035] Além disso, em ainda uma realização da composição de revestimento da presente invenção, dita composição ainda compreende o TiO2 em uma quantidade de cerca de 11,0 g para 18,0 g por 100 g da composição de revestimento.

[036] A presente invenção também se refere a um método para a fabricação de um elemento de teste de diagnóstico da presente invenção que compreende dispersar os componentes sólidos para a camada de separação em uma composição de revestimento (de preferência, uma composição de revestimento útil para a formação da camada de separação do campo de teste constituída pelo elemento de teste de diagnóstico) até um máximo ser alcançado de tal maneira que nenhum aumento em componentes sólidos dispersos ocorra (estágio de estabilização), em que dita composição de revestimento compreende o ácido silícico em uma quantidade de cerca de 2,0 g a 3,5 g por 100 g da composição de revestimento.

[037] O método, de acordo com a presente invenção, engloba um aspecto da produção de uma composição de revestimento capaz de formar a camada de separação constituída na área de teste do elemento de teste de diagnóstico da presente invenção. Para este propósito, especialmente é previsto que os componentes sólidos da camada de separação futuros sejam dispersos até um máximo ser alcançado de tal maneira que nenhum aumento em componentes sólidos dispersos ocorra (estágio de estabilização). Um novo aumento na dispersão dos componentes sólidos irá resultar na agregação e/ou sedimentação de ditos componentes. Desta maneira, a dispersão máxima, isto é, a saturação de dispersão, pode ser determinada por um técnico no assunto sem mais considerações, por exemplo, realizando uma série de testes de dispersões de diferentes graus de saturação. Outros componentes da solução de revestimento, tais como o ácido silícico, podem ser dissolvidos de tal maneira que uma quantidade final de SiO2 de cerca de 1,0 a 1,6 g/m2 pode ser alcançada na camada de separação, por exemplo, em uma quantidade de cerca de 2,0 g a 3,5 g por 100 g da composição de revestimento. Além disso, o TiO2 pode ser dissolvido na composição em um aspecto do método da presente invenção, normalmente em uma quantidade de cerca de 11,0 g a 18,0 g por 100 g da composição de revestimento. Ainda em um aspecto do método, o ferricianeto de potássio como o agente de oxidação deve ser evitado. Caso o ácido fosforomolibdico seja utilizado como um indicador na camada de separação, dito componente é adicionado em um estágio bastante tardio, por exemplo, não superior a 1 dia antes da realização do processo de revestimento, da produção da composição de revestimento de tal maneira que a hidrólise ou degradação possa ser evitada. Em um aspecto, dito ácido fosforomolibdico é adicionado após o pH da composição de revestimento ser ajustado.

[038] De uma maneira similar, a composição de revestimento para a camada de detecção pode ser produzida, isto é, através da dispersão e dissolução dos componentes necessários. Os componentes da solução de revestimento que formam a camada de detecção são aqueles que estão presentes na detecção conforme discutido em outras partes da presente invenção.

[039] A fabricação de elementos de teste de diagnóstico que compreendem os campos de teste que possuem uma estrutura de camadas múltiplas, em princípio, é bem conhecido do técnico no assunto e estão descritos, por exemplo, nas patentes DE 196 29 657 A1, DE 196 29 656 A1 ou de EP 0.821.234 B1 que estão incorporadas no presente como referência. Em um aspecto, uma composição de revestimento para a camada de detecção é aplicada ao campo de teste no primeiro elemento de diagnóstico. Posteriormente, o solvente é removido a partir da composição de revestimento, resultando na formação de uma primeira camada seca, isto é, a camada de detecção. Em uma outra etapa, a composição de revestimento para a camada de separação é aplicada à primeira camada. O solvente é novamente removido, a fim de gerar a segunda camada, isto é, a camada de separação. O solvente pode ser removido a partir da composição de revestimento após a aplicação de dita composição para o campo de teste do elemento de teste de diagnóstico por todas as técnicas conhecidas para a remoção de solventes, incluindo o tratamento térmico, evaporação ou secagem por congelamento.

[040] Em uma realização do método da presente invenção, dito método ainda compreende a adição de ácido fosforomolibdico como indicador para a composição de revestimento.

[041] Em uma realização especial do processo, é previsto que dito ácido fosforomolibdico seja adicionada inferior a 2 dias, inferior a 1 dia, inferior a 6 horas, inferior a 3 horas, inferior a 2 horas ou inferior a 1 hora antes da aplicação da composição de revestimento para o campo de teste do elemento de teste de diagnóstico.

[042] Em ainda uma realização dos métodos mencionados acima, dito ácido fosforomolibdico é adicionado após o ajuste de pH da composição de revestimento.

[043] A presente invenção também se refere a um método para a determinação da presença ou quantidade de um analito em uma amostra de fluido corporal.

[044] Esse método, normalmente, pode compreender as etapas: (a) do contato do elemento de teste de diagnóstico da presente invenção com um fluido corporal suspeito de compreender o analito sob condições adequadas para possibilitar a detecção do analito através do(s) reagente(s) de detecção contido(s) na camada de detecção; (b) da medição de uma alteração em, pelo menos, uma propriedade ótica do reagente indicador nas camadas úmidas sobre o elemento de teste de diagnóstico, em que a presença ou a quantidade do analito na amostra de fluido corporal será determinada.

[045] O termo “contato”, conforme utilizado no presente, significa que a amostra de fluido corporal é aplicada ao veículo de maneira a possibilitar o contato físico da composição da presente invenção constituída pelo veículo e amostra de fluido corporal. Em especial, o contato é realizado durante um tempo e sob condições que são suficientes para possibilitar que o(s) reagente(s) de detecção possa(m) se tornar ativado(s). Por exemplo, se a glicose for determinada como analito, a desidrogenase de glicose deve ser reconstituída, isto é umedecida e dissolvida e, por conseguinte, se tornar biologicamente ativa. As condições adequadas dependem do veículo de diagnóstico e são conhecidas no estado da técnica. A amostra de fluido corporal que pode ser aplicada ao elemento de teste, em um aspecto, pode possuir um volume inferior a 2 microlitros, mais especialmente, inferior a 1 microlitro.

[046] Após a ativação do(s) agente(s) de detecção, por exemplo, a reconstituição da desidrogenase biologicamente ativa, o agente deve se ligar ao seu substrato, isto é, o analito contido na amostra de fluido corporal, e induzir uma alteração detectável, tal como uma conversão do substrato em um dos respectivos equivalentes produtos e redox. Os equivalentes de redox gerados, por exemplo, pela desidrogenase possibilita a determinação da atividade de desidrogenase desde que os equivalentes de redox gerados pela conversão enzimática catalisada pela desidrogenase sejam transferidos pelo agente capaz de provocar uma alteração em, pelo menos, uma propriedade ótica do indicador na presença de equivalentes de redox na composição contida no reagente indicador. A alteração em, pelo menos, uma propriedade ótica do indicador, em seguida, pode ser medida. Dependendo do elemento de teste de diagnóstico, a medição da alteração da propriedade ótica pode ser alcançada através de diversas técnicas conhecidas no estado da técnica. Para detectar a alteração de uma propriedade ótica, tais como a cor, pode ser utilizado um detector ótico espacialmente resolvido. Um detector ótico espacialmente resolvido deve ser entendido como significando um detector ótico que possui uma multiplicidade de sensores óticos que são capazes de gravar as regiões do lado da detecção da camada de detecção, que não são totalmente congruentes. Mais especialmente, o detector ótico espacialmente resolvido pode compreender, pelo menos, um sensor de imagem, isto é, uma matriz de detectores óticos que podem ser unidimensionais ou também bidimensionais. Mais especialmente, o detector ótico, por conseguinte, pode compreender um chip CCD e/ou chip CMOS. Além disso, o detector ótico espacialmente resolvido pode compreender, pelo menos, um elemento ótico para a imagiologia do lado da detecção e/ou a camada de detecção sobre uma superfície sensível à imagem do detector ótico espacialmente resolvido.

[047] Uma alteração em, pelo menos, uma propriedade ótica medida através do método descrito acima é indicativa da presença do analito. Será entendido por um técnico no assunto que, a fim de determinar a quantidade de um analito, pode ser necessário comparar a extensão da alteração da propriedade ótica. Para este propósito, além disso, pode ser necessário comparar um sinal detectado que acompanha a alteração ótica para alterar para os sinais óticos que acompanham as alterações induzidas por quantidades conhecidas de analitos, isto é, os sinais de calibração. A maneira como tal calibração pode ser estabelecida é bem conhecida dos técnicos no assunto.

[048] Em face do exposto, a presente invenção, em geral, contempla a utilização do elemento de teste de diagnóstico da presente invenção para a determinação da quantidade de um analito, de preferência, a glicose, em uma amostra de um indivíduo.

[049] Com base na determinação da quantidade do analito, pode ser avaliado se um indivíduo, por exemplo, um humano, sofre de uma doença ou possui uma predisposição para a mesma. Se o analito for a glicose, o elemento de teste de diagnóstico, por conseguinte, pode ser utilizado para auxiliar o diagnóstico de diabetes ou outras doenças ou distúrbios com o metabolismo enfraquecido da glicose.

[050] Todas as referências citadas nesta especificação estão incorporadas no presente como referência em relação a todo o seu conteúdo descrito e o conteúdo descrito especificamente mencionado na presente invenção.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[051] A Figura 1 mostra a cinética da remissão em diferentes quantidades de glicose no sangue (0 mg/dL de sangue (A); 10 mg/dL de sangue (B); 60 mg/dL de sangue (C); 120 mg/dL de sangue (D); 300 mg/dL sangue (E); 600 mg/dL de sangue (F)) para as composições de revestimento diferentes. Quadrados = MIC; triângulos escuro = NoCode sem OAF, sem K3, dispersos; triângulos claros= NoCode com OAF, sem K3; diamantes = NoCode sem OAF, com K3; cruz = MIC com OAF com K3.

[052] A Figura 2 mostra uma redução na capacidade de absorção (A) e velocidade (B) para a composição de revestimento NoCode sem OAF, sem K3 dispersos vs. não dispersos.

[053] A Figura 3 mostra a relação linear em concentrações baixas de glicose com a porcentagem (%) de remissão. Linha pontilhada = NoCode com OAF, com K3; linha contínua = NoCode com OAF, sem K3.

[054] A Figura 4 mostra a cinética de remissão em diferentes quantidades de glicose no sangue (0 mg/dL de sangue (A); 10 mg/dL de sangue (B), 45 mg/dL de sangue (C); 120 mg/dL de sangue (D); 300 mg/dL sangue (E); 600 mg/dL de sangue (F)) para as composições de revestimento diferentes. Quadrados claros = NoCode com OAF e mais SiO2, sem K3; quadrados escuros = NoCode com OAF e mais SiO2, com K3.

[055] A Figura 5 mostra a cinética da remissão em diferentes quantidades de glicose no sangue (0 mg/dL de sangue (A); 10 mg/dL de sangue (B); 60 mg/dL de sangue (C); 120 mg/dL de sangue (D); 300 mg/dL sangue (E); 600 mg/dL de sangue (F)) para as composições de revestimento diferentes. Quadrados = MIC (sem OAF, com K3); cruz = NoCode com OAF e mais SiO2, sem K3.

[056] A Figura 6 mostra uma curva de calibração Unicode para NoCode com OAF e mais SiO2, sem K3 (A). A precisão da medição é mostrada em (B).

EXEMPLOS

[057] Os seguintes Exemplos meramente são para ilustrar a presente invenção ou dos seus aspectos. No entanto, não devem ser entendidos de nenhuma maneira que limita o âmbito da presente invenção.

EXEMPLO 1 FABRICAÇÃO DE UM ELEMENTO DE TESTE DE DIAGNÓSTICO TABELA 1

[058] Componentes da composição de revestimento aprimorada (MIC-NoCode) para a primeira camada em comparação com uma composição de revestimento convencional (MIC)

[059] Os componentes para a primeira camada foram misturados nas quantidades indicadas na Tabela 1, o pH foi ajustado a 6,75 e a composição foi aplicada a um peso de revestimento por unidade são de 75 g/m2 TABELA 2

[060] Componentes da composição de revestimento aprimorada (MIC-NoCode) para a segunda camada em comparação com uma composição de revestimento convencionall (MIC)

[061] Os componentes para a primeira camada foram misturados nas quantidades indicadas na Tabela 1, o pH foi ajustado a 6,75 e a composição foi aplicada a um peso de revestimento por unidade são de 50 g/m2

[062] Utilizando as composições de revestimento mencionadas acima como composições de revestimento da primeira e segunda camada, a fabricação de elementos de teste de diagnóstico foi essencialmente realizada, conforme descrito nas patentes DE 196 29 657 A1, DE 196 29 656 A1 ou de EP 0.821.234 B1.

EXEMPLO 2 INFLUÊNCIA DO GRAU DE DISPERSÃO DOS COMPONENTES SÓLIDOS E SIO2, NA SEGUNDA CAMADA EM REMISSÃO

[063] A glicose no sangue foi medida em diferentes concentrações (isto é, 0, 10, 60, 120, 300 e 600 mg/dL de sangue) utilizando os elementos de teste de diagnóstico com revestimentos diferentes, a fim de determinar a influência de diversos parâmetros no padrão (MIC) e sistemas de revestimento NoCode em uma análise MIC Accu-Chek-Active. As seguintes combinações foram medidos: - MIC com ferricianeto de potássio (K3); - NoCode com K3 - NoCode sem K3 - NoCode sem K3 disperso

[064] Conforme é evidente a partir dos diagramas apresentados na Figura 1, diferentes graus de dispersão resultaram em diferentes remissões. Uma vez que a dispersão, em geral, varia de batelada para batelada, o efeito mencionado acima do grau de dispersão em um elemento de teste requer a utilização de calibração específica da batelada. A fim de minimizar a influência do grau de dispersão em remissão, um outro revestimento foi utilizado com os componentes sólidos (isto é, no estágio de saturação) altamente dispersos (OAF). - MIC com OAF e com K3

[065] No entanto, utilizando este revestimento, as taxas de remissão em concentrações baixas de glicose (por exemplo, de 0 a 10 mg/dL de glicose no sangue) excederam 100% de tal maneira que a avaliação com a curva de calibração não era mais possível. Além disso, a cinética de remissão foi significativamente reduzida; vide Figura 1.

[066] O grau de dispersão elevado na composição de revestimento também resultou em uma porosidade reduzida no revestimento à seco de tal maneira que a densidade ótica foi aumentada. Isto resulta em um aumento da remissão em amostras de glicose baixa ou de 0 mg/dL no sangue, conforme mencionado anteriormente. Além disso, a velocidade de difusão para o revestimento da glicose foi reduzida. Estes efeitos ainda foram validados através das medições da capacidade de absorção de diferentes revestimentos, isto é, NoCode sem K3 e NoCode sem K3, dispersos; vide Figura 2.

[067] A capacidade de absorção foi reduzida em cerca de 25% e a velocidade de difusão em cerca de 50%; vide Figura 2.

[068] A fim de evitar o aumento indesejado na remissão quando se mede os níveis baixos de glicose no sangue e, a fim de aprimorar a cinética, a quantidade de SiO2 na segunda camada foi aumentada em cerca de 70% a partir de cerca de 0,7 g/m2 para uma quantidade final de 1,0 a 1,6 g/m2. Nos elementos de teste que possuem tais segundas camadas, em especial, os intervalos de remissão bem adequados de 90 a 98% de remissão poderiam ser gerados. Além disso, foi descoberto que um novo aumento em SiO2 resulta na remissão reduzida de tal maneira que as diferenças de remissão entre as amostras de concentração baixa e as amostras de concentração elevada são menos pronunciadas de maneira que o sistema de medição, como tal, se tornaria menos preciso.

[069] Além disso, foi descoberto que utilizando a concentração superior de SiO2 na segunda camada, sem o aumento do grau de dispersão também resulta em uma redução da remissão e uma forte dependência da umidade relativa durante a medição. Por conseguinte, o aumento do grau de dispersão e o aumento de SiO2 na segunda camada devem ser utilizados em combinação, a fim de aprimorar um elemento de teste em relação à calibração independente em batelada.

EXEMPLO 3 INFLUÊNCIA DO ÁCIDO FOSFOMOLÍBDICO E FERRICIANETO DE POTÁSSIO NA REMISSÃO

[070] Ainda foi descoberto que o ácido fosfomolíbdico deve permanecer na composição de revestimento tão curto quanto possível, a fim de evitar a interferência com a medição posterior. Além disso, foi descoberto que o NaOH utilizado para a realização dos ajustes de pH da composição de revestimento deverá ser adicionado antes da adição do ácido fosfomolíbdico, a fim de evitar a hidrólise. A produção da composição de revestimento foi alterada em conformidade. No entanto, mesmo neste caso, foi descoberto que as curvas do código de calibração foram sigmoidais o que torna a diferenciação entre as concentrações elevadas e baixas de glicose no sangue difícil. Além disso, também foi descoberto que o tempo de medição deve ser aumentado.

[071] Foi descoberto que os aspectos mencionados acima foram provocados pelo ferricianeto de potássio (III) (K3) e que os efeitos negativos podem ser superados, evitando dito K3 nas duas camadas do elemento de teste; vide Figura 3.

[072] Um efeito secundário adicional para evitar o K3 foi que a cinética de remissões, em especial, quando se mede a concentrações no intervalo intermediário, por exemplo, de 45 a 120 mg/dL de glicose no sangue, foram significativamente mais rápidas; vide Figura 4.

[073] Na Figura 5, os aprimoramentos realizados em conformidade com a presente invenção, isto é, o NoCode com OAF e mais SiO2, sem K3, são resumidos e comparados com o padrão MIC sem OAF com K3.

[074] A Figura 6 A mostra que a curva de calibração linear decrescente pode ser obtida. Existe remissão suficiente na concentração baixa de glicose e uma diferença adequada entre as concentrações elevadas e baixas de glicose, resultando em boa precisão e variabilidade baixa.

[075] A Figura 6 B mostra a precisão do elemento de teste aprimorado.

Claims

1. ELEMENTO DE TESTE DE DIAGNÓSTICO, para determinar um analito compreendido em uma amostra de fluido corporal, caracterizado pelo dito elemento de teste compreender, pelo menos, um campo de teste com, pelo menos, uma camada de detecção e, pelo menos, uma camada de separação, em que dita pelo menos uma camada de separação compreende SiO2 em uma quantidade de cerca de 1,0 a 1,6 g/m2 e componentes sólidos saturados de dispersão, em que ditos componentes sólidos saturados de dispersão foram obtidos através da dispersão dos componentes sólidos em uma composição de revestimento que forma a camada de separação até um máximo ser alcançado, de tal maneira que nenhum aumento adicional na quantidade de componentes sólidos dispersos possa ser observado (estágio de estabilização).

2. ELEMENTO DE TESTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pela dita pelo menos uma camada de separação ainda compreender TiO2.

3. ELEMENTO DE TESTE, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo dito TiO2 estar presente em uma quantidade de cerca de 5,5 a 9,0 g/m2.

4. ELEMENTO DE TESTE, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo dito TiO2 estar presente em uma quantidade que forma uma proporção de SiO2 e TiO2 de cerca de 0,11 a 0,29.

5. ELEMENTO DE TESTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pela dita camada de detecção e dita camada de separação serem essencialmente livres de agentes de oxidação que contêm o ferro.

6. ELEMENTO DE TESTE, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo dito agente de oxidação que contém o ferro ser o ferricianeto de potássio (III).

7. COMPOSIÇÃO DE REVESTIMENTO, caracterizada por ser capaz de formar uma camada de separação em um elemento de teste de diagnóstico, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6.

8. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pela dita composição compreender o ácido silícico em uma quantidade de 2,0 g a 3,5 g por 100 g de composição de revestimento.

9. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pela dita composição ainda compreender o TiO2 em uma quantidade de 11,0 g a 18,0 g por 100 g de composição de revestimento.

10. MÉTODO PARA A FABRICAÇÃO DE UM ELEMENTO DE TESTE DE DIAGNÓSTICO, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por compreender dispersar os componentes sólidos para a camada de separação em uma composição de revestimento até um máximo ser alcançado, de tal maneira que nenhum aumento ocorra nos componentes sólidos dispersos (estágio de estabilização), em que a dita composição de revestimento compreende o ácido silícico em uma quantidade de 2,0 g a 3,5 g por 100 g de composição de revestimento.

11. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo dito método ainda compreender a adição de ácido fosforomolibdico como indicador para a composição de revestimento.

12. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo dito ácido fosforomolibdico ser adicionado em um tempo inferior a 2 dias, inferior a 1 dia, inferior a 6 horas, inferior a 3 horas, inferior a 2 horas ou inferior a 1 hora antes da aplicação da composição de revestimento ao campo de teste do elemento de teste de diagnóstico.

13. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo dito ácido fosforomolibdico ser adicionado após o ajuste do pH da composição de revestimento.

14. MÉTODO PARA DETERMINAR A QUANTIDADE DE UM ANALITO, em uma amostra de um indivíduo, caracterizado por compreender o uso do elemento de teste de diagnóstico, conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6.

15. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo dito analito ser glicose.