BR112014026926B1 - uso de uma quantidade eficaz de farinha de semente de uva chardonnay e composição compreendendo a mesma - Google Patents

Abstract

USO TERAPÊUTICO DE PRODUTOS DE SEMENTE DE CHARDONNAY. A presente descrição refere-se a benefícios para a saúde de produtos de semente de Chardonnay.

Description

1. ANTECEDENTES DA INVENÇÃO 1.1 Condições metabólicas

[0001] A obesidade é um fator de risco bem conhecido para o desenvolvimento de muitas doenças muito comuns, tais como aterosclerose, hipertensão, diabetes tipo 2 ((diabetes mellitus não dependente de insulina (DMNDI)), dislipidemia, doença cardíaca coronária, osteoartrite e várias malignidades. Ela também provoca problemas consideráveis através da redução da motilidade e diminuição da qualidade de vida. A incidência de obesidade e, por meio dela, também destas doenças, está aumentando em todo o mundo industrializado.

[0002] O termo obesidade implica um excesso de tecido adiposo. Neste contexto, a obesidade é melhor visualizada como qualquer grau de excesso de adiposidade que confere um risco à saúde. O ponto de corte entre os indivíduos normais e obesos só pode ser aproximado, mas o risco para a saúde transmitida pela obesidade é, provavelmente, uma continuidade com o aumento da adiposidade.

[0003] Mesmo a obesidade leve aumenta o risco de morte prematura e de doenças como a diabetes, dislipidemia, hipertensão, aterosclerose, doença da vesícula biliar e certos tipos de câncer. No mundo ocidental industrializado, a prevalência da obesidade tem aumentado significativamente nas últimas décadas. Devido à alta prevalência da obesidade e suas consequências para a saúde, a sua prevenção e tratamento devem ser uma alta prioridade de saúde pública.

[0004] Quando o consumo de energia excede o gasto, as calorias em excesso são armazenadas predominantemente no tecido adiposo, e se este equilíbrio positivo líquido é prolongado, resulta em obesidade, ou seja, existem dois componentes para o balanço de peso, e uma anormalidade em ambos os lados (consumo ou gasto) pode levar à obesidade. Este processo pode ser neutralizado pelo aumento do gasto de energia (por exemplo, através de exercícios) ou pela diminuição do consumo de energia (por exemplo, através de dieta). Exceto para o exercício, dieta e restrição alimentar, o que não é viável para um grande número de indivíduos, nenhum tratamento convincente para reduzir o peso corporal de forma eficaz e aceitável existe atualmente.

[0005] Uma possível forma de aumentar o gasto de energia é através do aumento da taxa metabólica. Os agentes que atuam por aumento da taxa metabólica podem, assim, serem úteis para tratar a obesidade, mas também para o tratamento de outras condições, tais como aterosclerose, hipertensão, diabetes, especialmente diabetes tipo 2 (diabetes mellitus não dependente de insulina (DMNDI)), dislipidemia, doença coronária do coração, doença da vesícula biliar, osteoartrite e vários tipos de câncer, como de endométrio, mama, próstata e cólon e o risco de morte prematura.

[0006] Assim, seria desejável identificar os agentes que podem aumentar o gasto de energia. De preferência, tais agentes seriam agentes naturais que evitam os efeitos adversos associados com compostos farmacêuticos. 1.2 Bioma do Intestino

[0007] O intestino infantil é estéril antes do nascimento. Após o nascimento, o intestino é rapidamente colonizado por bactérias ambientais até que um bioma denso do intestino seja estabelecido. Os lactentes que nascem de parto normal adquirem bactérias colonizadoras do intestino da flora vaginal e fecal de sua mãe. Em contraste, os lactentes que nascem por cesariana não são expostos à flora vaginal e fecal de sua mãe durante o parto e, assim, desenvolvem um bioma do intestino que é diferente na composição do bioma do intestino de lactentes de parto normal. Essas diferenças na composição do bioma do intestino persistem nos meses imediatamente após o nascimento. Da mesma forma, foram observadas diferenças na composição do bioma do intestino entre os lactentes que são amamentados e aqueles que são alimentados com fórmulas.

[0008] O intestino humano adulto tem cerca de 1013 (10.000.000.000.000) residentes individuais (Backhead, F., et al. (2004) PNAS Volume 101; no 44 pp 15718- 15723) e há três enterotipos consistentes estabelecidos através de muitos antecedentes humanos culturais (Arumugam, M. et al., (2011) Nature Vol. 473 pp. 174-180). O bioma do intestino é influenciado pelos polifenóis com base de plantas na dieta, e acredita-se que os microrganismos convertem os mesmos para estarem biodisponíveis para o hospedeiro humano (Rastmanesh, R. (2011), Chemico-Biol. Interact. Vol. 189 pp.1- 8; Moco, S., F.J. Martin, e S. Rezzi (2012) J. Proteome Res Volume 11, pp 4781-4790). Atuando como um órgão, o bioma do intestino também é responsável pela conversão e produção de vitaminas essenciais, tais como colecalciferol (vitamina D25), biotina (vitamina H), riboflavina (vitamina B2), pantotenato (vitamina B5), ascorbato (vitamina C), tiamina (vitamina B1) e folato (vitamina B9); particularmente em dois (Bacteroides e Prevotella) dos três enterotipos (Bacteroides, Ruminococcus, e Prevotella) descobertos. Alguns polifenóis têm sido descritos como vitaminas, por direito próprio pelo Dr. Norman Hollenberg, professor de Medicina na Harvard Medical School. No entanto, as dietas modernas, particularmente dietas ocidentais, compreendem grandes quantidades de alimentos processados, e podem promover uma composição do bioma do intestino que não consegue converter ou produzir quantidades adequadas ou ideais dessas vitaminas essenciais.

[0009] Assim, seria desejável identificar agentes que podem “preencher as lacunas nutricionais” causadas pelo consumo de alimentos tradicionalmente processados e modular o bioma do intestino humano para alcançar o aperfeiçoamento da saúde. De preferência, tais agentes seriam agentes naturais que evitam os efeitos secundários associados com compostos farmacêuticos.

2. SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0010] A presente descrição se refere aos benefícios para a saúde de produtos de sementes de Chardonnay.

[0011] Em certos aspectos, a presente descrição se refere a um método para aumentar o metabolismo dos lipídeos em um mamífero através da administração ao mamífero de uma quantidade eficaz de produto de semente de Chardonnay para aumentar o metabolismo dos lipídeos nos mamíferos.

[0012] Em certos aspectos, a presente descrição se refere a um método para aumentar a taxa metabólica em um mamífero através da administração de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para aumentar a taxa metabólica do mamífero.

[0013] A presente invenção se refere também a um método para tratar ou prevenir a obesidade, uma doença cardiovascular, uma dislipidemia, uma dislipoproteinemia ou um distúrbio do metabolismo da glicose em um mamífero através da administração a um mamífero de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para tratar ou prevenir a obesidade no mamífero.

[0014] A presente descrição diz respeito ainda a um método de tratamento ou prevenção de uma doença cardiovascular em um mamífero através da administração a um mamífero de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para tratar ou prevenir a referida doença cardiovascular. Em certos aspectos, a doença cardiovascular é a arteriosclerose, aterosclerose, acidente vascular cerebral, isquemia, disfunções do endotélio, doença vascular periférica, doença cardíaca coronária, infarto do miocárdio, infarto cerebral ou reestenose.

[0015] A presente invenção diz ainda respeito a um método de tratamento ou prevenção de uma dislipidemia em um mamífero através da administração a um mamífero de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para tratar ou prevenir a dislipidemia. Em certos aspectos, a dislipidemia é a hiperlipidemia ou baixos níveis sanguíneos de colesterol de lipoproteína de alta densidade (HDL). Em certos aspectos, a hiperlipidemia é selecionada dentre a hipercolesterolemia familiar, hiperlipidemia combinada familiar, níveis ou atividade de lipoproteína de lipase reduzidos ou deficientes, hipertrigliceridemia, hipercolesterolemia, níveis sanguíneos elevados de corpos cetônicos, níveis sanguíneos elevados de colesterol Lp(a), níveis sanguíneos elevados de colesterol de lipoproteínas de baixa densidade (LDL), níveis sanguíneos elevados de colesterol de lipoproteínas de muito baixa densidade (VLDL), e níveis sanguíneos elevados de ácidos graxos não esterificados.

[0016] A presente invenção diz ainda respeito a um método de tratamento ou prevenção de uma dislipoproteinemia em um mamífero através da administração a um mamífero de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para tratar ou prevenir a referida dislipoproteinemia. Em certos aspectos, a dislipoproteinemia é de níveis sanguíneos elevados de LDL, níveis sanguíneos elevados de apolipoproteína B (apo B), níveis sanguíneos elevados de Lp(a), níveis sanguíneos elevados de apo(a), níveis sanguíneos elevados de VLDL, níveis sanguíneos baixos de HDL, níveis ou atividade de lipase lipoprotéica deficientes ou reduzidos, hipoalfalipoproteinemia, anormalidades de lipoproteínas associadas com diabetes, anormalidades de lipoproteínas associadas à obesidade, anormalidades de lipoproteínas associadas com a Doença de Alzheimer, ou hiperlipidemia combinada familiar.

[0017] A presente invenção diz ainda respeito a um método para o tratamento ou prevenção de um distúrbio do metabolismo de glicose em um mamífero através da administração a um mamífero de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para tratar ou prevenir o referido distúrbio do metabolismo da glicose. Em certos aspectos, o distúrbio do metabolismo da glicose é tolerância à glicose comprometida, resistência à insulina, resistência à insulina relacionada com a mama, câncer do cólon ou da próstata, diabetes, pancreatite, hipertensão, doença do ovário policístico, níveis elevados de insulina no sangue ou níveis elevados de glicose no sangue. Em certos aspectos, a diabetes é a diabetes mellitus não dependente de insulina (DMNDI), diabetes mellitus dependente de insulina (DMDI), diabetes mellitus gestacional (DMG), ou diabetes com início na maturidade do jovem (MODY).

[0018] A descrição diz ainda respeito a um método de tratamento ou prevenção da síndrome metabólica em um mamífero através da administração a um mamífero de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para tratar ou prevenir a síndrome metabólica no mamífero.

[0019] Em certos aspectos, uma quantidade que é administrada é eficaz para modular a expressão de um ou mais genes envolvidos na gordura, colesterol, e/ou metabolismo da bílis. Em modalidades específicas, a quantidade é eficaz para aumentar a expressão de ACOX1 no tecido hepático, para aumentar a expressão de CYP51 no tecido hepático, para aumentar a expressão de CYP7al no tecido hepático, para diminuir a expressão de SCD1 no tecido hepático, e/ou para diminuir a expressão de ABCG5 no tecido hepático, por exemplo, pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 50%, ou pelo menos 100%.

[0020] A presente invenção diz ainda respeito a um método para aumentar a quantidade de bactérias Clostridium no intestino de um mamífero através da administração a um mamífero de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para aumentar a quantidade de bactérias Clostridium no intestino do mamífero.

[0021] A presente invenção diz ainda respeito a um método para diminuir a quantidade de bactérias Enterobacteriaceae no intestino de um mamífero através da administração a um mamífero de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para diminuir a quantidade de bactérias Enterobacteriaceae no intestino do mamífero.

[0022] A presente invenção diz ainda respeito a um método de aumentar a quantidade de bactérias do grupo Bacteroides fragilis no intestino de um mamífero através da administração a um mamífero de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para aumentar a quantidade de bactérias do grupo Bacteroides fragilis no intestino do mamífero.

[0023] A presente invenção diz ainda respeito a um método de tratamento ou prevenção de acidose láctica em um mamífero através da administração a um mamífero de uma quantidade de produto de semente de Chardonnay eficaz para tratar ou prevenir a acidose láctica.

[0024] Em certas modalidades dos métodos, um segundo produto de semente de uva ou de casca de uva que não seja um produto de sementes de Chardonnay é administrado ao mamífero. Em certos aspectos, a combinação de produto de sementes de Chardonnay e segundo produto de semente de uva ou de casca de uva fornece um efeito terapêutico ou benefício para a saúde que é maior do que o efeito da administração de apenas o produto de sementes de Chardonnay.

[0025] Em certos aspectos, o produto de sementes de Chardonnay é preparado a partir de sementes que têm um teor de epicatequina de pelo menos 600 mg de epicatequina por 100 g de sementes, ou um teor de epicatequina de pelo menos 700 mg de epicatequina por 100 g de sementes. Em modalidades específicas, o teor de epicatequina varia de 600 a 800 mg/100 g de sementes ou de 650 a 800 mg/100 g de sementes.

[0026] Em certas modalidades, o produto de semente de Chardonnay é incorporado em um produto alimentar ou bebida.

[0027] Em certas modalidades, o produto de semente de Chardonnay é farinha de semente de Chardonnay. Em certas modalidades, o produto de semente de Chardonnay é extrato de semente de Chardonnay. Em certas modalidades, o produto de semente de Chardonnay é de uvas cultivadas em um clima da região de Winkler tipo I, II, III ou IV.

[0028] Em certas modalidades, o mamífero é um animal doméstico, por exemplo, um gato ou um cão. Em outras modalidades dos métodos, o mamífero é um ser humano. Em outras modalidades, o ser humano é um lactente.

[0029] A presente invenção diz ainda respeito a uma fórmula para lactentes que compreende um produto de semente de Chardonnay e métodos de utilização da fórmula para lactentes para promover o desenvolvimento do microbioma do intestino em um lactente. Em certos aspectos, a fórmula para lactentes promove o desenvolvimento da microbiota intestinal quando administrada a um lactente por modulação dos níveis de bactérias intestinais. Em certas modalidades, o lactente nasceu por cesariana. Em certas modalidades, o lactente é alimentado por fórmula.

3. BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0030] FIGURA 1: proteína, gordura, cinzas, carboidratos e teor de fibra alimentar total de sementes (Sd) e cascas (Sk) de Chardonnay (Chr), Cabernet (Cab) e Syrah (Syr).

[0031] FIGURA 2: Composição da dieta dos hamsters no Exemplo 1.

[0032] FIGURA 3: Peso corporal de dietas com sementes por semana dos animais do Exemplo 1.

[0033] FIGURA 4: Peso corporal de dietas com cascas por semana dos animais do Exemplo 1.

[0034] FIGURA 5: Consumo semanal de ração dos animais do Exemplo 1.

[0035] FIGURA 6: Consumo total de ração dos animais do Exemplo 1.

[0036] FIGURA 7: Consumo calórico total dos animais do Exemplo 1.

[0037] FIGURA 8: Níveis plasmáticos de colesterol de lipoproteína de animais do Exemplo 1 no final de quatro semanas.

[0038] FIGURA 9: Níveis de glicose no sangue dos animais do Exemplo 1 no final de quatro semanas.

[0039] FIGURA 10: Pesos dos órgãos dos animais do Exemplo 1 no final de quatro semanas.

[0040] FIGURA 11: Níveis de epicatequina na semente e na casca de diferentes variedades de uva.

[0041] FIGURA 12: Peso corporal, ganho de peso e consumo de ração total dos animais das dietas de alimentação do Exemplo 2 compreendendo 3%, 7% e 10% de farinha de semente de Chardonnay em peso.

[0042] FIGURA 13: VLDL, LDL, HDL e os níveis de colesterol de animais do Exemplo 2 alimentados com extrato etanólico de sementes de Chardonnay (40EtChrSdEx), extrato metanólico de sementes de Chardonnay (MeChrSdEx), resíduo de extrato etanólico de sementes de Chardonnay (40EtChrSdRes), resíduo de extrato metanólico de sementes de Chardonnay (MeChrSdRes), farinha de semente de Chardonnay em 10%, 7% e 3% por peso da dieta (10% ChrSd, 7% ChrSd, e 3% ChrSd, respectivamente), 10% de farinha de semente de Riesling Branco por peso da dieta (10% WRSd), e 10% de farinha de semente de Sauvignon Blanc por peso da dieta (10% SBSD) no final de quatro semanas.

[0043] FIGURA 14: Relação de colesterol LDL/HDL de animais do Exemplo 2 alimentados com extrato etanólico de sementes de Chardonnay (40EtChrSdEx), extrato metanólico de sementes de Chardonnay (MeChrSdEx), resíduo de extrato etanólico de sementes de Chardonnay (40EtChrSdRes), resíduo de extrato metanólico de sementes de Chardonnay (MeChrSdRes), farinha de semente de Chardonnay em 10%, 7% e 3% por peso da dieta (10% ChrSd, 7% ChrSd, e 3% ChrSd, respectivamente), 10% de farinha de semente de Riesling Branco por peso da dieta (10% WRSd), e 10% de farinha de semente de Sauvignon Blanc por peso da dieta (10% SBSD) no final de quatro semanas.

[0044] FIGURA 15: Pesos do Fígado, Adiposo Epididimal (EA), e Adiposo Retroperitoneal (AR) dos animais do Exemplo 2 alimentados com extrato etanólico de sementes de Chardonnay (40EtChrSdEx), extrato metanólico de sementes de Chardonnay (MeChrSdEx), resíduo de extrato etanólico de sementes de Chardonnay (40EtChrSdRes), resíduo de extrato metanólico de sementes de Chardonnay (MeChrSdRes), farinha de semente de Chardonnay em 10%, 7% e 3% por peso da dieta (10% ChrSd, 7% ChrSd, e 3% ChrSd, respectivamente), 10% de farinha de semente de Riesling Branco por peso da dieta (10% WRSd), e 10% de farinha de semente de Sauvignon Blanc por peso da dieta (10% SBSD) no final de quatro semanas.

[0045] FIGURA 16: Expressão do gene adiposo relativo do Exemplo 3.

[0046] FIGURA 17: Expressão do gene hepático relativo do Exemplo 3.

[0047] FIGURA 18: Níveis totais de colesterol de lipoproteína de plasma de animais do Exemplo 4 alimentados com dietas suplementadas com farinha de semente de Chardonnay (CharSdFl), extrato de semente de uva Vitacost® (VC1 e VC7), extrato de semente de uva Mega Natural® BP (BP1, BP7), extrato de semente de uva Leucoselect® (L1, L7), catequina (Cat), e epicatequina (EpiCat) no final de quatro semanas.

[0048] FIGURA 19: Níveis do colesterol VLDL, LDL e HDL dos animais do Exemplo 4 alimentados com dietas suplementadas com farinha de semente de Chardonnay (CharSdFl), extrato de semente de uva Vitacost® (VC1 e VC7), extrato de semente de uva Mega Natural® BP (BP1, BP7), extrato de semente de uva Leucoselect® (L1, L7), catequina (Cat), e epicatequina (EpiCat) no final de quatro semanas.

[0049] FIGURA 20: Níveis totais de bactérias fecais dos animais do Exemplo 5 alimentados com uma dieta de controle, dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Cabernet (RGF + HF), dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Chardonnay (WGF + HF), e dieta de controle rica em gordura (HF).

[0050] FIGURA 21: Níveis de Enterococcus spp. de animais do Exemplo 5 alimentados com uma dieta de controle, dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Cabernet (RGF + HF), dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Chardonnay (WGF + HF), e dieta de controle rica em gordura (HF).

[0051] FIGURA 22: Níveis de Bifidobacterium spp. de animais do Exemplo 5 alimentados com uma dieta de controle, dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Cabernet (RGF + HF), dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Chardonnay (WGF + HF), e dieta de controle rica em gordura (HF).

[0052] FIGURA 23: Níveis de Lactobacillus spp. de animais do Exemplo 5 alimentados com uma dieta de controle, dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Cabernet (RGF + HF), dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Chardonnay (WGF + HF), e dieta de controle rica em gordura (HF).

[0053] FIGURA 24: Níveis de bactérias Clostridium do Grupo IV de animais do Exemplo 5 alimentados com uma dieta de controle, dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Cabernet (RGF + HF), dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Chardonnay (WGF + HF), e dieta de controle rica em gordura (HF).

[0054] FIGURA 25: Níveis de bactérias do grupo Bacteroides fragilis de animais do Exemplo 5 alimentados com uma dieta de controle, dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Cabernet (RGF + HF), dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Chardonnay (WGF + HF), e dieta de controle rica em gordura (HF).

[0055] FIGURA 26: Níveis de Enterobacteriaceae de animais do Exemplo 5 alimentados com uma dieta de controle, dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Cabernet (RGF + HF), dieta rica em gordura suplementada com farinha de semente de Chardonnay (WGF + HF), e dieta de controle rica em gordura (HF). 4. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO 4.1 Produtos de Semente de Chardonnay

[0056] A presente invenção refere-se a produtos de semente de Chardonnay e métodos de tratamento ou prevenção da obesidade e de outras condições que utilizam produtos de semente de Chardonnay. De preferência, os produtos de semente de Chardonnay são produzidos a partir de uvas cultivadas nos climas da região de Winkler tipos I a IV (Jones et al., 2010, J. Am Enol Vitic 61 (3):313-326). Em algumas modalidades, os produtos de semente de Chardonnay são produzidos a partir de uvas cultivadas nos vales da costa do norte da Califórnia, por exemplo, o Vale do Napa e/ou Vale de Sonoma. Em outra modalidade, os produtos de semente de Chardonnay são produzidos a partir de uvas cultivadas em outros vinhedos mais quentes do vale do interior, por exemplo, nos climas da região de Winkler tipos IV a V. Em uma modalidade preferida, o produto de semente de Chardonnay é a partir de uvas em uma zona costeira.

[0057] Em uma modalidade, os produtos de semente de Chardonnay contêm a porção desengordurada da semente de Chardonnay, tais como o repasto do bagaço de Chardonnay, farinha de bagaço de Chardonnay, repasto de semente de Chardonnay, ou, mais preferencialmente, farinha de semente de Chardonnay. Em algumas modalidades, o produto de semente de Chardonnay inclui o conteúdo de sementes desengorduradas de Chardonnay que não são extraídas por um solvente orgânico, por exemplo, não são extraíveis por etanol e/ou metanol. Em certos aspectos, o produto de semente de Chardonnay é preparado a partir de sementes que têm um teor de epicatequina de pelo menos 600 mg de epicatequina por 100 g de sementes ou um teor de epicatequina de pelo menos 700 mg de epicatequina por 100 g de sementes. Em modalidades específicas, o teor de epicatequina varia de 600 a 800 mg/100 g de sementes ou 650 a 800 mg/100 g de sementes.

[0058] Como aqui utilizado, “repasto de semente de Chardonnay” são sementes inteiras moídas e “farinha de semente de Chardonnay” é a semente moída depois que o óleo foi extraído. A farinha de semente de Chardonnay pode ser obtida utilizando a “prensagem a frio”, “prensagem a quente” e os processos de extração com solventes como são conhecidos na técnica, para extrair o óleo das sementes rendendo farinha de semente desengordurada. O repasto ou a farinha podem ser secos até o teor de umidade desejado, utilizando técnicas de secagem convencionais adequadas para a secagem de produtos alimentares.

[0059] O repasto ou a farinha seca é ainda moído sob condições de temperatura ambiente, para formar pó de semente de Chardonnay com partículas de fluxo livre. Em uma modalidade, as partículas de fluxo livre podem variar de um tamanho não superior a 841 mícrons (20 mesh) para um tamanho não superior a 37 mícrons (400 mesh). Em certas modalidades, o tamanho não excede 20 mesh, 40 mesh, 60 mesh, 80 mesh, 100 mesh, 200 mesh, 300 mesh, ou 400 mesh.

[0060] Em um método exemplar, a farinha de semente de Chardonnay é feita através da separação e secagem das sementes de uva de Chardonnay, por exemplo, a partir do bagaço produzido após as uvas Chardonnay serem pressionados para produzir suco de uva (por exemplo, para fazer vinho). As sementes de uva podem ser “prensadas a frio” para desengordurar as mesmas (produzindo o óleo de semente de Chardonnay como um subproduto). As farinhas de semente de uva são moídas do bolo de prensagem após o óleo ser expulso. Em uma modalidade, após a produção de suco de uva, a semente é separada das cascas, limpa, desengordurada mecanicamente, finamente moída e peneirada para criar um pó fluido de 100 mesh (150 mícrons).

[0061] A farinha de semente de Chardonnay também pode ser adquirida a partir de Apres Vin (Yakima, Washington), Botanical Oil Innovations (Spooner, Wisconsin) ou Fruitsmart, Inc. (Grandview, Washington). A farinha de semente de Chardonnay da FruitSmart é um pó fluido de 85 mesh, mas pode ainda ser moída e peneirada para produzir uma farinha com um tamanho de partícula menor.

[0062] Em uma modalidade, cascas, caules e folhas (o restante do bagaço) são removidos a partir das sementes antes da prensagem. A remoção das cascas, caules e folhas permite a prensagem de óleo ideal.

[0063] “Extrato de semente de Chardonnay” é feito por extração com solvente de sementes de Chardonnay com um solvente adequado, tal como etanol ou metanol. Por exemplo, “40EtChrSdEx” é um extrato de semente de Chardonnay feito usando uma solução de etanol a 40% como solvente de extra ção. O processo de extração, além do extrato contendo os componentes solúveis em solventes, também produz um resíduo de sólidos não solúveis. 4.2 Quantidade eficaz

[0064] Em uma modalidade dos métodos da invenção, a quantidade de farinha de semente de Chardonnay consumida como uma porcentagem da dieta diária é de pelo menos 3%, pelo menos 5%, ou pelo menos 8% em massa. Preferencialmente de 5 a 10%, mais preferencialmente 7%, e em algumas modalidades 10% da dieta diária em massa é a farinha de semente de Chardonnay.

[0065] Em uma modalidade dos métodos da invenção, a quantidade de farinha de semente de Chardonnay consumida como uma porcentagem da dieta diária é de pelo menos 3%, pelo menos 5%, ou, pelo menos, 8% das calorias totais consumidas. Preferencialmente de 5 a 10%, mais preferencialmente 7%, e em algumas modalidades 10% da dieta diária são a partir da farinha de semente de Chardonnay.

[0066] Em outra modalidade, a quantidade de farinha de semente de Chardonnay consumida diariamente é de pelo menos l0g, pelo menos 15g, pelo menos20g, pelo menos 25g, pelo menos 30g, pelo menos 35 g, pelo menos 40 g, ou pelo menos 45g. De um modo preferido, 50 g de farinha de semente de Chardonnay é consumido diariamente.

[0067] Em outra modalidade, a quantidade de farinha de semente de Chardonnay consumida diariamente é, pelo menos, 1 colher de sopa, pelo menos 2 colheres de sopa, pelo menos 3 colheres de sopa, pelo menos 4 colheres de sopa, ou, pelo menos 5 colheres de sopa.

[0068] Em outra modalidade, a quantidade de farinha de semente de Chardonnay consumida diariamente em uma relação farinha de semente de Chardonnay:base de peso corporal é de pelo menos 0,2 g/kg, pelo menos 0,5 g/kg, ou pelo menos 0,7 g/kg. De um modo preferido pelo menos lg de farinha de semente de Chardonnay por kg de peso corporal é consumido por dia.

[0069] Em certos aspectos, uma quantidade de farinha de semente de Chardonnay que é administrada é eficaz para modular a expressão de um ou mais genes envolvidos no metabolismo da gordura, colesterol, e/ou biliar. Em modalidades específicas, a quantidade é eficaz para aumentar a expressão de ACOX1 em tecido hepático, para aumentar a expressão de CYP51 em tecido hepático, para aumentar a expressão de CYP7al em tecido hepático, para diminuir a expressão de SCD1 no tecido hepático, e/ou para diminuir a expressão de ABCG5 em tecido hepático, por exemplo, pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 50%, ou pelo menos 100%.

[0070] A farinha de semente de Chardonnay pode ser substituída por repasto de bagaço de Chardonnay, farinha de bagaço, farinha de casca, extrato de semente, ou repasto de sementes nos métodos da invenção. A quantidade de refeição repasto de bagaço de Chardonnay, farinha de bagaço, farinha de casca, extrato de semente, ou repasto de sementes que terá de ser consumida diariamente para alcançar os mesmos benefícios que uma dada quantidade de farinha de semente de Chardonnay pode ser prontamente determinada pelos técnicos especialistas no assunto. Por exemplo, é esperado que um indivíduo precisará consumir cerca de três vezes tanto quanto de farinha de casca de Chardonnay para alcançar os mesmos benefícios que uma dada quantidade de farinha de semente de Chardonnay.

[0071] Em certas modalidades, o produto de semente de Chardonnay, por exemplo, farinha de semente de Chardonnay é tomado pelo menos duas vezes por semana, pelo menos 3 vezes por semana, ou a cada dois dias. De preferência, o produto de semente de Chardonnay é incorporado na dieta diária.

[0072] O produto semente de Chardonnay, por exemplo, a farinha de semente de Chardonnay, pode ser tomado por uma quantidade de tempo suficiente para tratar e/ou prevenir uma condição susceptível de tratamento e/ou prevenção do produto de semente Chardonnay, tal como aqui descrito. O produto de semente de Chardonnay pode ser tomado por pelo menos uma semana, pelo menos 2 semanas, pelo menos 3 semanas, pelo menos um mês, pelo menos 2 meses, pelo menos 3 meses, pelo menos 6 meses, pelo menos um ano, ou indefinidamente.

[0073] Em certas modalidades dos métodos, um segundo produto de semente de uva ou de casca de uva que não seja um produto de sementes de Chardonnay é administrado ao mamífero. Em certos aspectos, a combinação de produto de sementes de Chardonnay e segundo produto de semente de uva ou de casca de uva fornece um efeito terapêutico ou benefício para a saúde que é maior do que o efeito da administração de apenas o produto de sementes de Chardonnay.

[0074] Em outras modalidades, a quantidade de produto de sementes de Chardonnay e a quantidade do segundo produto de sementes de uva ou de pele de uva são selecionadas de modo que o efeito alcançado seja pelo menos o mesmo que o efeito alcançado por uma dada quantidade de produto de sementes Chardonnay administrado sozinho. 4.3 Composições de Semente de Chardonnay

[0075] Os produtos de semente de Chardonnay podem ser incluídos em uma variedade de produtos alimentares, tais como bebidas nutricionais (por exemplo, shakes nutricionais), produtos de panificação (por exemplo, cookies, brownies, bolos, pães, biscoitos, bolachas), pudins, confeitos (ou seja, doces), lanches (por exemplo, pretzels), sorvetes, doces congelados e frescos, ou não- assados, produtos alimentícios extrusados, tais como barras, incluindo barras de dieta ou de energia. O produto de semente de Chardonnay também pode ser fornecido como um suplemento nutricional, ou em forma de comprimido ou na forma de pó para utilização como um aditivo alimentar nutricional.

[0076] Em uma modalidade, o produto de semente de Chardonnay pode ser misturado com outros materiais alimentares secos para uso na preparação de produtos alimentares enriquecidos com produtos de semente de Chardonnay. Materiais alimentares secos incluem, por exemplo, materiais secos que contêm amido, materiais secos que contêm proteínas ou combinações dos mesmos. Materiais adequados contendo amido podem ser derivados a partir de, por exemplo, arroz, milho, soja, girassol, canola, trigo, aveia, centeio, batata, ou qualquer combinação dos mesmos. Materiais secos adequados que contêm proteínas podem ser derivados a partir de, por exemplo, carne, leite, peixe, ou qualquer combinação dos mesmos. Para aplicações de panificação, o produto de semente de Chardonnay usado em uma quantidade que varia de 3% a 15% do material de alimentação seco (por exemplo, farinha de trigo integral ou branca). O alimento seco pode opcionalmente também incluir ingredientes adicionais, tais como vitaminas, minerais fortificantes, sais, cores, aromas, melhoradores de aromas ou adoçantes.

[0077] Produtos de semente de Chardonnay podem ser incorporados em bebidas, carnes processadas, sobremesas congeladas, produtos de confeitaria, produtos do tipo laticínio, composições de molhos, e produtos de grãos de cereais. As bebidas incluem, por exemplo, smoothies, fórmulas infantis, bebidas de suco de fruta, bebidas de iogurte, bebidas de café, cerveja, misturas secas para bebidas, bebidas de fusão de chá, bebidas esportivas, licores de soja, refrigerantes, granizados e misturas de bebidas geladas. Produtos de carne incluem, por exemplo, produtos de frango moído, produtos de presunto com água adicionada, mortadela, cachorros quentes, as franquias, rissóis de frango, nuggets de frango, rissóis de carne, rissóis de peixe, surimi, bacon, carne do almoço, recheios de sanduíches, frios, lanches de carnes, almôndegas, carne seca, fajitas, pedaços de bacon, carnes injetadas, e bratwurst. Produtos de confeitaria incluem, por exemplo, chocolates, mousses, coberturas de chocolate, revestimentos de iogurte, cacau, coberturas, doces, barras energéticas e barras de chocolate. Produtos de sobremesa gelada incluem, por exemplo, sorvete, maltes, shakes, picolés, sorbets, e produtos de pudim congelados. Produtos do tipo laticínios incluem, por exemplo, iogurte, queijo, sorvete, cobertura batida, creme de café, cream cheese, creme de leite, queijo cottage, manteiga, maionese, molhos à base de leite, molhos de salada à base de leite e queijo coalho. Produtos derivados de grão de cereais incluem, por exemplo, pães, muffins, bagels, pastéis, macarrão, biscoitos, panquecas, waffles, biscoitos, semolina, chips, tortillas, bolos, bolachas, cereais de café da manhã (incluindo ambos os cereais prontos-para-comer e cozinhados em casa), pretzels, mixes secos de padaria, torradas, palitos de pão, croutons, recheios, barras energéticas, rosquinhas, bolos, pipocas, tacos, revestimentos fritos, massas, panificação, crostas, brownies, tortas, bolos trufados de soja, crepes, croissants, farinha, e polenta. Composições de molho incluem saladas, pasta de barrar de manteiga de nozes (por exemplo, a pasta de barrar de manteiga de amendoim), marinadas, molhos, salsas, compotas, molhos de queijo, maionese, molho tártaro, húmus de soja, pastas, xaropes de frutas e xaropes de bordo. A composição de molho pode também incluir um agente de suspensão para ajudar a manter a uniformidade da composição. Exemplos de agentes de suspensão adequados incluem polissacarídeos, tais como amido, celulose (por exemplo, celulose microcristalina) e carragenina, e poliuronídeos, tais como a pectina. A gelatina é outro exemplo de um agente de suspensão que também pode ser usado nas composições de bebidas. Exemplos de produtos de alimentos suplementados adicionais preparados utilizando pré-misturas de acordo com a invenção incluem tofu, essência de soja formulada, suplementos de proteína em pó, suplementos de proteína de suco misturável, agentes espumantes, agentes de turvação, alimentos para lactentes, almôndegas sem carne, substitutos da carne, produtos de ovos (por exemplo, ovos mexidos), sopas, ensopados, caldos, alternativas ao leite, produtos de leite de soja, pimenta, misturas de especiarias, polvilho, whiz de soja, cobertura de salada, filmes comestíveis, palitos comestíveis, goma de mascar, pedaços de bacon, pedaços veggie, barreiras de crosta de pizza, torta de soja, feijão sem gás sintético, auxiliares de soja, algodão doce de soja, pedaços de fruta, rolos de pizza, purê de batatas, fibra de proteína de soja fiada, roll-ups de soja, salgadinhos extrudados, condimentos, loções, batatas fritas, produtos de sobremesa de gelatina, suplementos de vitamina, barras nutricionais, bolo seco, misturas de pão ou muffins, misturas secas instantâneas para micro-ondas.

[0078] Em um aspecto particular, o produto de semente de Chardonnay pode ser fornecido como uma barra de energia (adequada para consumo durante a atividade física) ou uma barra de substituição de refeição. A barra de energia ou barra de substituição de refeição também pode conter uma ou mais vitamina, mineral, suplemento alimentar, extratos botânico, ou de plantas ou ervas ou ingredientes conhecidos na técnica ou utilizados em barras energéticas ou barras de substituição de refeição, como um suco de frutas ou extrato, uma erva ou aromatizante de erva, aromatizantes naturais ou artificiais, vitaminas, minerais, extratos que contêm antioxidantes, coenzima Q, ácidos graxos ômega-3, guaraná, cafeína, teobromina, maltodextrina, e proteínas. Em algumas modalidades, a barra de energia ou a barra de substituição de refeição podem ter níveis de energia disponíveis no total de carboidratos/proteína/gordura de 40/30/30, respectivamente.

[0079] As barras de energia e de substituição de refeição podem ser suplementadas para aprimoramento do desempenho atlético, energia mental ou aperfeiçoamento de foco cognitivo e/ou benefício nutricional. Suplementos exemplares incluem, mas não estão limitados a Vinpocetina, Vincamina Ginkgo Biloba, L-Arginina, Acetil-L-Carnitina, Matricária, DMAE (dimetilaminoetanol), DMAE bitartarato, P- clorofenoxiacetato, Vitamina de Complexo B, Ginseng, 5-HTP (5-Hidroxitriptofano), L-Teanina, Androstenediona, L- Glutamina, L-Tirosina, L-glicina; L-lisina; Whey Protein; DHEA (Desidroepiandrosterona).

[0080] Em outro aspecto, o produto de semente de Chardonnay pode ser fornecido em ou adicionado a uma fórmula para lactentes líquida ou em pó. A fórmula para lactentes pode conter uma fonte de proteínas, uma fonte de gordura, e/ou uma fonte de carboidratos. A fonte de proteína pode ser, por exemplo, leite de vaca líquido ou seco, soro de leite coalhado e/ou caseína, ou proteína de soja. A fonte de gordura pode ser, por exemplo, gordura do leite e/ou um ou mais óleos vegetais. A fonte de carboidratos pode ser, por exemplo, lactose, glicose ou sacarose. A fórmula para lactentes pode conter, adicionalmente, uma ou mais vitaminas, e/ou um ou mais minerais. Em uma modalidade, o produto de semente de Chardonnay pode ser adicionado a uma fórmula para lactentes líquida ou em pó disponível comercialmente.

[0081] A composição da semente de Chardonnay também pode conter uma quantidade de um segundo produto de semente de uva ou de casca de uva que não é um produto de semente de Chardonnay. Em algumas modalidades, uma quantidade de produto de semente de Chardonnay é substituída na composição de semente de Chardonnay por uma quantidade do segundo produto de semente de uva ou de casca de uva. A quantidade do produto de semente de uva ou de casca de uva que necessita de ser adicionada à composição de semente de Chardonnay para alcançar os mesmos benefícios que uma dada quantidade de produto de semente de Chardonnay pode ser prontamente determinada pelos técnicos especialistas no assunto. 4.4 Usos terapêuticas de Composições de Farinha de Semente de Chardonnay

[0082] De acordo com a invenção, uma composição da invenção compreendendo uma composição de farinha de semente de Chardonnay é administrada a um indivíduo, preferivelmente um indivíduo humano, em que um aumento no metabolismo lipídico é útil ou desejável. O indivíduo pode estar em necessidade de tratamento ou prevenção de uma doença cardiovascular, uma dislipidemia, um distúrbio do metabolismo da glicose, doença de Alzheimer, Síndrome X, um distúrbio associado à PPAR, septicemia, um distúrbio trombótico, obesidade, pancreatite, hipertensão, uma doença renal, câncer, inflamação, ou impotência.

[0083] Em outro aspecto da invenção, uma composição da invenção compreendendo uma composição de farinha de semente de Chardonnay é administrada a um indivíduo, preferivelmente um indivíduo humano, em que a modulação do bioma do intestino é útil ou desejável. Em uma modalidade, o indivíduo pode estar em necessidade de tratamento ou prevenção de, por exemplo, acidose lática, colite, ou câncer colorretal. Em uma modalidade, o indivíduo é geneticamente suscetível ao câncer do cólon.

[0084] Em uma modalidade, “tratamento” ou “tratar” refere-se a uma melhoria de uma doença ou distúrbio, ou pelo menos um sintoma perceptível dos mesmos. Em outra modalidade, “tratamento” ou “tratar” refere-se a uma melhoria de pelo menos um parâmetro físico mensurável, não necessariamente discernível pelo indivíduo. Em ainda outra modalidade, “tratamento” ou “tratar” refere-se à inibição da progressão de uma doença ou distúrbio, quer fisicamente, por exemplo, estabilização de um sintoma perceptível, fisiologicamente, por exemplo, estabilização de um parâmetro físico, ou ambos. Em ainda outra modalidade, “tratamento” ou “tratar” refere-se a retardar o aparecimento de uma doença ou distúrbio.

[0085] Em certas modalidades, as composições da invenção são administradas a um indivíduo, preferivelmente um humano, como uma medida preventiva contra tais doenças. Tal como aqui utilizado, “prevenção” ou “prevenir” refere- se a uma redução do risco de contrair uma dada doença ou distúrbio. Em um aspecto preferido, as composições da presente invenção são administradas como uma medida preventiva a um indivíduo, de preferência um ser humano com uma predisposição genética para uma doença cardiovascular, uma dislipidemia, um dislipoproteinemia, um distúrbio do metabolismo da glicose, Doença de Alzheimer, Síndrome X, uma distúrbio associado à PPAR, septicemia, um distúrbio trombótico, obesidade, pancreatite, hipertensão, doença renal, câncer, inflamação, ou impotência. Exemplos de tais predisposições genéticas incluem, mas não estão limitadas ao alelo E4 da apolipoproteína E, o que aumenta o risco de Doença de Alzheimer; uma perda de função ou mutação nula na região de codificação ou promotor do gene da lipoproteína lipase (por exemplo, as mutações nas regiões de codificação resultando em substituições D9N e N291S; para uma revisão de mutações genéticas no gene da lipoproteína lipase que aumentam o risco de doenças cardiovasculares, dislipidemias e dislipoproteinemias, ver Hayden and Ma, 1992, Mol. Cell Biochem 113:171-176); e hiperlipidemia familiar combinada e hipercolesterolemia familiar.

[0086] Em outro modo preferido da modalidade, as composições da invenção são administradas como uma medida preventiva a um indivíduo que tem uma predisposição não- genética para uma doença cardiovascular, uma dislipidemia, um dislipoproteinemia, um distúrbio do metabolismo da glicose, Doença de Alzheimer, Síndrome X, um distúrbio associado à PPAR, septicemia, um distúrbio trombótico, obesidade, pancreatite, hipertensão, uma doença renal, câncer, inflamação, ou impotência. Exemplos de tais predisposições não-genéticas incluem, mas não estão limitadas a cirurgia de bypass cardíaca e angioplastia coronária transluminal percutânea, que muitas vezes levam à restenose, uma forma acelerada de aterosclerose; diabetes em mulheres, que muitas vezes leva à doença do ovário policístico; e doença cardiovascular, o que muitas vezes leva à impotência.

[0087] Em certas modalidades, o mamífero consome uma dieta rica em gordura. Em uma modalidade, uma dieta rica em gordura é uma dieta em que pelo menos 30%, 35%, ou 40% do total de calorias diárias são obtidos a partir de gordura.

[0088] Em certas modalidades, um segundo produto de semente de uva de casca de uva que não é a farinha de semente de Chardonnay é administrado ao mamífero para fornecer um efeito que é maior do que o efeito da administração apenas da farinha de semente de Chardonnay. 4.4.1 Dislipidemias

[0089] A presente invenção fornece métodos para o tratamento ou prevenção de uma dislipidemia compreendendo a administração a um indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição de farinha de semente de Chardonnay.

[0090] Tal como aqui utilizado, o termo “dislipidemia” refere-se a distúrbios que levam a ou são manifestados por níveis aberrantes de lipídeos circulantes. Na medida em que os níveis de lipídeos no sangue são muito elevados, as composições da invenção são administradas a um indivíduo para restaurar os níveis normais. Os níveis normais de lipídeos são relatados nos tratados médicos conhecidos pelos técnicos especialistas no assunto. Por exemplo, os níveis sanguíneos recomendados de LDL, HDL, triglicerídeos livres e outros parâmetros relacionados ao metabolismo lipídico podem ser encontradas nos sites da American Heart Association e do National Cholesterol Education Program of the National Heart, Lung and Blood Institute. No presente momento, o nível recomendado de colesterol HDL no sangue é superior a 35 mg/dL; o nível recomendado de colesterol LDL no sangue é inferior a 130 mg/dL; a proporção de colesterol LDL:HDL recomendado no sangue é inferior a 5:1, de preferência 3.5:1; e o nível recomendado de triglicerídeos livres no sangue é inferior a 200 mg/ L.

[0091] Dislipidemias que as composições da farinha de semente de Chardonnay da presente invenção são úteis para prevenir ou tratar incluem, mas não estão limitadas a hiperlipidemia e baixos níveis sanguíneos de colesterol de lipoproteína de alta densidade (HDL). Em certas modalidades, a hiperlipidemia para a prevenção ou tratamento pelos compostos da presente invenção é hipercolesterolemia familiar; hiperlipidemia combinada familiar; níveis ou atividade de lipoproteína lipase deficientes ou reduzidos, incluindo reduções ou deficiências resultantes de mutações na lipoproteína lipase; hipertrigliceridemia; hipercolesterolemia; níveis sanguíneos elevados de corpos cetônicos (por exemplo, ácido butírico β-OH); níveis sanguíneos elevados de colesterol Lp(a); níveis sanguíneos elevados de colesterol de lipoproteína de baixa densidade (LDL); níveis sanguíneos elevados níveis de colesterol de lipoproteína de muito baixa densidade (VLDL), e ); níveis sanguíneos elevados de ácidos graxos não-esterificados.

[0092] A presente invenção fornece ainda métodos para alterar o metabolismo lipídico em um indivíduo, por exemplo, redução de LDL no sangue de um indivíduo, redução dos triglicerídeos livres no sangue de um indivíduo, aumentando a relação de HDL para LDL no sangue de um indivíduo, e inibição da síntese de ácidos graxos saponificados e/ou não saponificados, os referidos métodos compreendendo a administração ao indivíduo de uma composição de farinha de semente de Chardonnay em uma quantidade eficaz que altera o metabolismo lipídico. 4.4.2 Doenças Cardiovasculares

[0093] A presente invenção fornece métodos para o tratamento ou prevenção de uma doença cardiovascular, compreendendo a administração a um indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição de farinha de semente de Chardonnay. Tal como aqui utilizado, o termo “doenças cardiovasculares” refere-se a doenças do coração e sistema circulatório. Estas doenças são frequentemente associadas com dislipoproteinemias e/ou dislipidemias. As doenças cardiovasculares em que as composições da presente invenção são úteis para prevenir ou tratar incluem, mas não estão limitadas a arteriosclerose; aterosclerose; acidente vascular cerebral; isquemia; disfunções endoteliais, nomeadamente as disfunções que afetam a elasticidade dos vasos sanguíneos; doença vascular periférica; doença cardíaca coronária; infarto do miocárdio; infarto cerebral e reestenose. 4.4.3 Dislipoproteinemias

[0094] A presente invenção fornece métodos para o tratamento ou prevenção de uma dislipoproteinemia compreendendo a administração a um indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição de farinha de semente de Chardonnay.

[0095] Tal como aqui utilizado, o termo “dislipoproteinemias” refere-se a distúrbios que levam a ou são manifestados por níveis aberrantes de lipoproteinas circulantes. Na medida em que os níveis de lipoproteínas no sangue são demasiado elevados, as composições da invenção são administradas a um indivíduo para restaurar os níveis normais. Por outro lado, na medida em que os níveis de lipoproteínas no sangue são muito baixos, as composições da invenção são administradas a um indivíduo para restaurar os níveis normais. Os níveis normais de lipoproteínas são relatados nos tratados médicos conhecidos pelos técnicos especialistas no assunto.

[0096] As dislipoproteinemias as quais as composições da presente invenção são úteis para prevenir ou tratar incluem, mas não estão limitadas a níveis sanguíneos elevados de LDL; níveis sanguíneos elevados de apolipoproteína B (apo B); níveis sanguíneos elevados de Lp(a); níveis sanguíneos elevados de apo(a); níveis sanguíneos elevados de VLDL; baixos níveis sanguíneos de HDL; níveis ou atividade de lipoproteína lipase deficientes ou reduzidos, incluindo reduções ou deficiências resultantes de mutações de lipoproteína lipase; hipoalfalipoproteinemia; anomalias lipoproteicas associadas com a diabetes; anormalidades de lipoproteína associadas à obesidade; anomalias lipoproteicas associadas com a Doença de Alzheimer; e hiperlipidemia combinada familiar.

[0097] A presente invenção fornece ainda métodos para reduzir os níveis de apo C-II no sangue de um indivíduo; reduzir os níveis de apo C-III no sangue de um indivíduo; elevar os níveis de proteínas associadas com HDL, incluindo, mas não se limitando a apo A-I, apo A-II, apo A-IV e apo E no sangue de um indivíduo; elevar os níveis de apo E no sangue de um indivíduo, e promover um movimento de triglicerídeos a partir do sangue de um indivíduo, os referidos métodos compreendendo a administração ao indivíduo de uma composição de farinha de semente de Chardonnay em uma quantidade eficaz para provocar a referida redução, elevação ou promoção, respectivamente. 4.4.4 Distúrbios do Metabolismo da Glicose

[0098] A presente invenção fornece métodos para o tratamento ou prevenção de um distúrbio no metabolismo da glicose, que compreende a administração a um indivíduo de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição de farinha de semente de Chardonnay. Tal como aqui utilizado, o termo “distúrbios do metabolismo da glicose” refere-se a distúrbios que levam a ou são manifestados por armazenamento da glicose aberrante e/ou utilização. Na medida em que indícios de metabolismo da glicose {isto é, de insulina no sangue, glicose no sangue) são demasiados elevados, as composições da invenção são administradas a um indivíduo para restaurar os níveis normais. Por outro lado, na medida em que indícios de metabolismo da glicose são demasiado baixos, as composições da invenção são administradas a um indivíduo para restaurar os níveis normais. Indícios normal do metabolismo da glicose são relatados nos tratados médicos conhecidos pelos técnicos especialistas no assunto.

[0099] Distúrbios do metabolismo da glicose os quais as composições da presente invenção são úteis para prevenir ou tratar incluem, mas não estão limitados a à tolerância a glicose enfraquecida; resistência à insulina; resistência à insulina relacionada com o câncer de mama, cólon ou de próstata; diabetes, incluindo, mas não se limitando a diabetes mellitus não dependente de insulina (DMNDI), diabetes mellitus dependente de insulina (DMDI), diabetes mellitus gestacional (DMG), ou diabetes com início na maturidade do jovem (MODY). ; pancreatite; hipertensão; doença do ovário policístico; e altos níveis de insulina no sangue e/ou glicose.

[00100] A presente invenção fornece ainda métodos para alterar o metabolismo da glicose em um indivíduo, por exemplo, para aumentar a sensibilidade à insulina e/ou o consumo de oxigênio de um indivíduo, os referidos métodos compreendendo a administração ao indivíduo de uma composição de farinha de semente de Chardonnay em uma quantidade eficaz para alterar o metabolismo da glicose. 4.4.5 Modulação das Bactérias Intestinais

[00101] Biomas do intestino humano foram classificados em três enterotipos de acordo com as espécies que dominam a população bacteriana. Estes são enterotipos Bacteroides, Ruminococcus, e Prevotella. O enterotipo Bacteroides foi verificado para produzir várias vitaminas, incluindo C e H, enquanto o enterotipo Prevotella foi verificado para produzir ácido fólico e vitamina B1.

[00102] A presente invenção fornece métodos para modular os níveis de bactérias do intestino, que compreende a administração a um indivíduo de uma quantidade de uma composição de farinha de semente de Chardonnay eficaz para modular os níveis de bactérias do intestino. Tal como aqui utilizado, “modular os níveis de bactérias do intestino” refere-se a (i) uma diminuição na quantidade de níveis totais de bactérias do intestino, e/ou (ii) um aumento ou uma diminuição nos níveis de bactérias de um subconjunto do total de bactérias do intestino. Um subconjunto do total de bactérias do intestino pode ser uma única espécie, um gênero, uma família, uma ordem, uma classe, um filo, ou uma combinação de mais de uma das anteriores.

[00103] Pode ser desejável, por exemplo, para modular os níveis de níveis de bactérias do intestino em lactentes nascidos por cesariana, devido ao fato de que a colonização bacteriana do intestino está atrasada em crianças nascidas por cesariana, em comparação aos lactentes nascidos de parto normal. As diferenças na microbiota intestinal podem persistir por até seis meses após o nascimento (Grolund, M. et al, Journal of Pediatric Gastroenterology & Nutrition, (1999), vol. 28 (1):19-25). Por exemplo, lactentes nascidos por cesariana são significativamente menos colonizados por bactérias do grupo Bacteroides fragilis do que os lactentes nascidos de parto vaginal aos 6 meses de idade. Sete dias após o nascimento, os lactentes nascidos por cesariana têm níveis mais elevados de bactérias Enterobacteriaceae Citrobacter spp. e E. coli como porcentagem do total de bactérias do intestino em comparação a lactentes nascidos de parto normal (Pandey, P. et al, J. Biosci (2012) vol 37 (6): 989-998). As composições da farinha de sementes Chardonnay podem ser usadas para aumentar o nível de bactérias do grupo Bacteroides fragilis e Clostridium spp., e diminuir o nível de bactérias Enterobacteriaceae em lactentes nascidos por cesariana, por exemplo, a fim de promover a formação de um bioma do intestino que mais se assemelha ao microbioma intestinal de lactentes nascidos de parto normal.

[00104] As composições da farinha de semente de Chardonnay também podem ser utilizadas para tratar ou prevenir a acidose láctica, reduzindo a quantidade de bactérias produtoras de ácido láctico, por exemplo, Lactobacillus spp., no intestino. As composições da farinha de sementes de Chardonnay também podem ser utilizadas para promover a saúde do cólon, aumentando o nível de Clostridium spp. no intestino. Bactérias Clostridium produzem butirato, que é a fonte de energia preferida na mucosa do cólon. Butirato protege contra colite e câncer colo-retal, e é importante para o desenvolvimento normal das células epiteliais do cólon. Shen, J. et al., Applied and Environmental Microbiology, vol.72:5.232-5.238 (2006).

[00105] As composições da farinha de sementes de Chardonnay também podem ser utilizadas para diminuir os níveis de Bifidobacterium spp. no intestino. No entanto, se a redução do nível de Bifidobacterium spp. não é desejada, mas um outro benefício terapêutico da administração da farinha de semente de Chardonnay for desejado, um suplemento probiótico contendo uma ou mais espécies de Bifidobacterium pode ser administrado ao indivíduo para aumentar os níveis de espécies de Bifidobacterium no trato gastrointestinal do indivíduo. Exemplos de espécies de Bifidobacterium que podem ser administradas em um suplemento probiótico incluem Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, e Bifidobacterium longum. O suplemento probiótico pode incluir espécies bacterianas adicionais, por exemplo, uma ou mais de Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus salivarious, Lactobacillus casei, Lactobacilus paracasei, Lactobacillus rhamnosus, e Streptococcus thermophilus.

[00106] Em uma modalidade, o indivíduo é identificado como tendo um enterotipo que é Bacteroides, Ruminococcus, ou Prevotella. Em uma modalidade, o indivíduo tem um enterotipo Bacteroides. Em uma modalidade, o indivíduo tem um enterotipo Ruminococcus. Em uma modalidade, o indivíduo tem um enterotipo Prevotella. 4.5 Usos terapêuticos de Composições de Extrato de Semente de Chardonnay

[00107] De acordo com a invenção, uma composição da invenção compreendendo uma composição de extrato de semente de Chardonnay é administrada a um indivíduo, preferivelmente um indivíduo humano, para cada um dos usos terapêuticos descritas na Seção 4.4. O extrato de semente de Chardonnay tem efeitos biológicos similares como farinha de semente de Chardonnay (dados não mostrados). A fim de alcançar um benefício que em comparação ao benefício obtido pela utilização de uma quantidade de farinha de semente de Chardonnay, a quantidade de extrato de semente de Chardonnay administrada deve ser uma quantidade tal que fornece de 2 a 5 vezes acima dos níveis de catequinas da quantidade de farinha de semente de Chardonnay. Quantidades específicas de extrato de semente de Chardonnay, que terão de ser consumidas por dia para alcançar os mesmos benefícios que uma dada quantidade de farinha de semente de Chardonnay, podem ser prontamente determinadas pelos técnicos especialistas no assunto. 5. EXEMPLO 1: COMPARAÇÃO DOS BENEFÍCIOS PARA A SAÚDE DE CHARDONNAY PRODUTOS DE SAUVIGNON BLANC E RIESLING BRANCO 5.1 Materiais e Métodos 5.1.1 Hamsters e dietas

[00108] Hamsters machos sírios dourados (-80 g, cepa LVG, Charles River) foram aclimatizados e receberam água e uma dieta de roedor 5001 ad libitum (LabDiet, PMI Internacional; proteína, 239 g/kg; gordura, 50 g/kg; substâncias não-nitrogenadas, 487 g/kg; fibra bruta, 51 g/kg; cinzas, 70 g/kg, energia, 17 MJ kg; e quantidades suficientes de vitaminas e minerais para a manutenção saudável) durante uma semana, antes do início das dietas experimentais. Hamsters foram pesados e distribuídos aleatoriamente em dois grupos de 15 hamsters cada, e foram alimentados com dietas ricas em gordura ad libitum contendo ou 10% (em peso) de farinha de semente de uva ou de farinha de casca de uva de Chardonnay, Cabernet ou Syrah ou de controle (dietas) por 4 semanas. Uvas das quais as farinhas foram produzidas foram cultivadas nos vales da costa do norte da Califórnia. As composições das farinhas são mostradas na Figura 1. Os tratamentos consistiram de 18% de energia como proteína, 43% como carboidratos, e 39% de gordura suplementada com 0,1% de colesterol (Figura 2). GenOil refere-se a um óleo de semente de uva disponível comercialmente a partir de uma variedade de uva não especificada. Os pesos corporais foram registrados semanalmente e a ingestão de alimentos foi monitorada duas vezes por semana. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Uso e Cuidado Animal, Western Regional Research Center, USDA, Albany, CA. 5.1.2 Coleção de Plasma e Tecido

[00109] Os hamsters foram deixados em jejum durante 12 horas e anestesiados com isoflurano (Phoenix Pharmaceutical). O sangue foi coletado por punção cardíaca com seringas previamente lavadas com uma solução de EDTA potássio (15% em peso:v) e o plasma foi separado após a centrifugação a 2000 xg durante 30 minutos a 4°C. Os fígados foram retirados, pesados, e imediatamente congelados em nitrogênio líquido para a análise. 5.1.3 Análise de Biomarcador do Plasma

[00110] O colesterol em lipoproteínas do plasma foi determinado por cromatografia de exclusão de tamanho como anteriormente descrito (German et al, 1996. Res Nutr. 1996; 16: 1239-1249). Triglicerídeos plasmáticos, colesterol total, colesterol livre, e glicose foram determinados por ensaios colorimétricos enzimáticos utilizando um Analisador Clínico Roche Diagnostics/Hitachi 914 com kits de ensaio (Roche Diagnostics e Wako Chemicals). As concentrações plasmáticas de adiponectina (B-bridge International) e insulina (Mercodia) de hamsters privados de alimentação foram determinadas usando kits de imunoensaio de adiponectina e insulina de ratos ultra-sensíveis, como descrito anteriormente (Hung et al, 2009, J. Diabetes 1: 194-206). As concentrações de glicose no sangue em ratos privados de alimentação foram medidas em amostras de veias do rabo usando um OneTouch Ultrameter (LifeScan). 5.1.4 Análise Lipídica hepática

[00111] Amostras de fígado moídas e liofilizadas foram extraídas utilizando um extrator de solvente acelerado (Dionex), a 100°C; 13,8 MPa com 75/25 de hexano/2-propanol. O extrato da amostra foi analisado em um Analisador Clínico Roche Diagnostic/Hitachi 914 (Roche Diagnostics) para determinar triglicerídeos hepáticos, colesterol total e colesterol livre, usando os kits descritos acima. 5.1.5 Análise de Ácidos Biliares Fecais e de Esterol

[00112] As fezes foram recolhidas durante 3 dias consecutivos, imediatamente antes de quando os hamsters foram sacrificados e foram liofilizadas, moídas, e armazenadas a -20°C. Os ácidos biliares e os esterois foram determinados por HPLC como descrito anteriormente (Hong et al, 2007, J Agric Food Chem. 55: 9750-7). 5.1.6 Análise Estatística

[00113] Todos os dados são expressos em média ± SE. As diferenças entre o controle e diferentes grupos de dieta foram determinadas por testes t de Student 2-tailed. Quando as variações de cada grupo eram desiguais, a significância das diferenças foi determinada utilizando o teste de Welch. Os coeficientes de correlação de Pearson foram calculados para investigar as relações de colesterol total do plasma, as concentrações plasmáticas de adiponectina, o colesterol hepático, e as concentrações de triglicerídeos com a expressão dos genes hepáticos (programa de estatística JMP 7, SAS Institute). A significância foi definida em P <0,05. 5.2 Resultados

[00114] Os animais alimentados com farinha de semente de Chardonnay tinham diminuído significativamente o peso em comparação com os animais alimentados com as outras dietas (Figuras 3-4). Os animais alimentados com a dieta de farinha de semente de Chardonnay tiveram um peso médio de cerca de 97 gramas, depois de quatro semanas. Os animais alimentados com a dieta de controle tiveram um peso médio de cerca de 110 gramas após quatro semanas.

[00115] Embora os animais de tratamento com a farinha de sementes Chardonnay pesavam menos que os animais de controle, os animais de tratamento com a farinha de sementes de Chardonnay comeram mais (Figura 5), tanto em termos de volume (Figura 6) quanto de calorias (Figura 7).

[00116] Os animais alimentados com a dieta de farinha de semente de Chardonnary mostraram a maior diminuição no colesterol VLDL (66%) e LDL (50%) (Figura 8). Glicose no sangue apresentou uma ligeira redução (Figura 9).

[00117] A farinha de semente de Chardonnay reduziu o peso do fígado e tecido adiposo epididimal (EA) 30% e 20%em peso, respectivamente (Figura 10).

[00118] Estes dados mostram que a farinha de semente de Chardonnay foi o destaque óbvio dentre os produtos de uva testados. A farinha de casca de Chardonnay mostrou uma tendência semelhante, mas um benefício não tão grande como a farinha de semente de Chardonnay. 6. EXEMPLO 2: COMPARAÇÃO DE BENEFÍCIOS DE SAÚDE DE CHARDONNAY, PRODUTOS DE SAUVIGNON BLANC E RIESLING BRANCO 6.1 Materiais e Métodos 6.1.1 Hamsters e dietas

[00119] Hamsters machos sírios dourados (-80 g, cepa LVG, Charles River) foram aclimatizados e receberam água e uma dieta de roedor 5001 ad libitum (LabDiet, PMI Internacional; proteína, 239 g/kg; gordura, 50 g/kg; substâncias não-nitrogenadas, 487 g/kg; fibra bruta, 51 g/kg; cinzas, 70 g/kg, energia, 17 MJ kg; e quantidades suficientes de vitaminas e minerais para a manutenção saudável) durante uma semana, antes do início das dietas experimentais. Hamsters foram pesados e distribuídos aleatoriamente em 10 grupos de 10 hamsters cada, e foram alimentados com dietas ricas em gordura ad libitum contendo extrato etanólico de semente de Chardonnay, extrato metanólico de semente de Chardonnay, resíduo extraído etanólico de semente de Chardonnay, resíduo extraído metanólico de semente de Chardonnay, 10% (em peso) de farinha de semente de Chardonnay, 10% (em peso) de farinha de semente de Sauvignon Blanc, 10% (em peso) de farinha de sementes Riesling Branco, 7% (em peso) de farinha de semente de Chardonnay, 3% (em peso) de farinha de semente de Chardonnay, ou uma dieta de controle durante 4 semanas. Uvas das quais as farinhas foram produzidas foram cultivadas nos vales da costa do norte da Califórnia. Extratos de etanol e resíduos extraídos foram preparados por um “método de extração de chá” que compreende as seguintes etapas: (1) solvente (1625 ml de etanol a 40% em água destilada) foi adicionado a 325 g de farinha de semente de Chardonnay e agitado a 80°C durante duas horas; (2) a mistura da etapa (1) foi, em seguida, filtrada através de papel de filtro Whatman 1; (3), em seguida, o etanol foi removido a partir do filtrado da etapa (2) sobre um rotovac; (4) a solução da etapa (3) e o bolo do filtro a partir da etapa (2) foram congeladas e liofilizadas para produzir extrato etanólico de sementes de Chardonnay e resíduo extraído etanólico de sementes de Chardonnay, respectivamente. Procedimentos semelhantes foram usadospara produzir extrato metanólico de sementes de Chardonnay e resíduo extraído metanólico de sementes de Chardonnay, respectivamente.

[00120] Os tratamentos consistiram de 18% de energia como proteína, 43% como carboidratos, e 39% de gordura suplementada com 0,1% de colesterol. Os pesos corporais foram registrados semanalmente e a ingestão de alimentos foi monitorada duas vezes por semana. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Uso e Cuidado Animal, Western Regional Research Center, USDA, Albany, CA. 6.1.2 Coleção de Plasma e Tecido

[00121] Os hamsters foram deixados em jejum durante 12 horas e anestesiados com isoflurano (Phoenix Pharmaceutical). O sangue foi coletado por punção cardíaca com seringas previamente lavadas com uma solução de EDTA potássio (15% em peso:v) e o plasma foi separado, após a centrifugação a 2000 xg durante 30 min a 4°C. Os fígados foram retirados, pesados, e imediatamente congelados em nitrogênio líquido para análise. 6.1.3 Análise de Biomarcador do Plasma

[00122] O colesterol em lipoproteínas do plasma foi determinado por cromatografia de exclusão de tamanho como anteriormente descrito (German et al, 1996, Nutr Res. 16: 1239-49). Triglicerídeos plasmáticos, colesterol total, colesterol livre, e glicose foram determinados por ensaios colorimétricos enzimáticos utilizando um Analisador Clínico Roche Diagnostics/Hitachi 914 com kits de ensaio (Roche Diagnostics e Wako Chemicals). As concentrações plasmáticas de adiponectina (B-bridge International) e insulina (Mercodia) de hamsters privados de alimentação foram determinadas usando kits de imunoensaio de adiponectina e insulina de ratos ultra-sensíveis, como descrito anteriormente (Hung et al, 2009, J. Diabetes. 1: 194-206). As concentrações de glicose no sangue em ratos privados de alimentação foram medidas em amostras de veias do rabo usando um OneTouch Ultrameter (LifeScan). 6.1.4 Análise Lipídica Hepática

[00123] Amostras de fígado moídas e liofilizadas foram extraídas utilizando um extrator de solvente acelerado (Dionex), a 100°C; 13,8 MPa com 75/25 de hexano/2-propanol. O extrato da amostra foi analisado em um Analisador Clínico Roche Diagnostic/Hitachi 914 (Roche Diagnostics) para determinar triglicerídeos hepáticos, colesterol total e colesterol livre, usando os kits descritos acima. 6.1.5 Análise de Ácidos Biliares Fecais e de Esterol

[00124] As fezes foram recolhidas durante 3 dias consecutivos, imediatamente antes de quando os hamsters foram sacrificados e foram liofilizadas, moídas, e armazenadas a -20°C. Os ácidos biliares e os esterois foram determinados por HPLC como descrito anteriormente (Hong et al, 2007, Agric Food Chem. 55: 9750-7). 6.1.6 Análise Estatística

[00125] Todos os dados são expressos em média ± SE. As diferenças entre o controle e diferentes grupos de dieta foram determinadas por testes t de Student 2-tailed. Quando as variações de cada grupo eram desiguais, a significância das diferenças foi determinada utilizando o teste de Welch. Os coeficientes de correlação de Pearson foram calculados para investigar as relações de colesterol total do plasma, as concentrações plasmáticas de adiponectina, o colesterol hepático, e as concentrações de triglicerídeos com a expressão dos genes hepáticos (programa de estatística JMP 7, SAS Institute). A significância foi definida em P <0,05. 6.2 Resultados

[00126] Farinha de semente de Chardonnay a 10% em peso da dieta mostrou resultados reprodutíveis com o Exemplo 1. Os animais alimentados com a dieta de farinha de sementes de Chardonnay a 10% em peso da dieta tinham o mínimo de ganho de peso de 35% em uma dieta de gordura em comparação com os animais de controle.

[00127] A farinha de semente de Chardonnay mostrou uma relação dose-resposta. Os animais foram alimentados com 10%, 7% ou 3% de farinha de semente de Chardonnay, como parte da sua dieta durante 4 semanas. O aumento da resposta, indicado como a diferença de peso, foi observado; quanto mais os animais comeram menos peso eles adicionaram (Figura 12).

[00128] Extrato de semente de Chardonnay mostrou algum efeito sobre o peso, mas não tão dramático como a adição direta de farinha de semente de Chardonnay.

[00129] Extratos de sementes de Chardonnay e resíduos de extratos de semente de Chardonnay mostraram algum efeito nos níveis de colesterol (Figura 13) e razão de LDL/HDL (Figura 14), mas não tão dramáticos como a adição direta de farinha de semente de Chardonnay. Do mesmo modo, os extratos de semente de Chardonnay mostraram algum efeito sobre o peso dos órgãos (Figura 15), mas não tão dramático como a adição direta de farinha de semente de Chardonnay.

[00130] Outras farinhas de sementes brancas, por exemplo, Sauvignon Blanc ou Riesling Branco mostraram pouca ou nenhuma diferença nos pesos em comparação com as dietas de controle. Chardonnay tem sido comparado lado a lado com outras quatro variedades, e é claramente um destaque. 7. EXEMPLO 3: EFEITOS DA FARINHA DE SEMENTE DE CHARDONNAY NA ADIPOSE RELATIVA E EXPRESSÃO HEPÁTICA DE GENES 7.1 Materiais e Métodos 7.1.1 Hamsters e dietas

[00131] Hamsters machos sírios dourados (-80 g, cepa LVG, Charles River) foram aclimatizados e receberam água e uma dieta de roedor 5001 ad libitum (LabDiet, PMI Internacional; proteína, 239 g/kg; gordura, 50 g/kg; substâncias não-nitrogenadas, 487 g/kg; fibra bruta, 51 g/kg; cinzas, 70 g/kg, energia, 17 MJ kg; e quantidades suficientes de vitaminas e minerais para a manutenção saudável) durante uma semana, antes do início das dietas experimentais. Hamsters foram pesados e distribuídos aleatoriamente em 2 grupos e alimentados com dietas ricas em gordura ad libitum contendo ou 10% (em peso) de farinha de semente de uva Chardonnay ou uma dieta de controle durante 4 semanas. Uvas das quais as farinhas foram produzidas foram cultivadas nos vales da costa do norte da Califórnia. Os tratamentos consistiram de 18% de energia como proteína, 43% como carboidratos, e 39% de gordura suplementada com 0,1% de colesterol. Os pesos corporais foram registrados semanalmente e a ingestão de alimentos foi monitorada duas vezes por semana. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Uso e Cuidado Animal, Western Regional Research Center, USDA, Albany, CA. 7.1.2 Análise de RNAm

[00132] PCR quantitativa (qPCR) foi usada para medir a expressão de mRNA de genes selecionados da inflamação, colesterol, ácidos biliares, e as vias de ácidos graxos em amostras de tecido adiposo e do fígado de hamsters alimentados ou com a dieta suplementada com farinha de semente de Chardonnay ou a dieta de controle. 7.1.3 Análise Estatística

[00133] Todos os dados são expressos como média ± SD. Médias apresentadas são valores relativos, comparando os níveis de mRNA no tecido adiposo ou do fígado de hamsters alimentados com uma dieta suplementada com farinha de semente de Chardonnay para os níveis de mRNA em tecido adiposo ou do fígado de hamsters alimentados com a dieta de controle. 7.2 Resultados

[00134] Os níveis de expressão gênica relativos comparando a expressão do gene no tecido adiposo a partir de hamsters alimentados com uma dieta suplementada com farinha de semente de Chardonnay para a expressão do gene no tecido adiposo a partir de hamsters alimentados com a dieta de controle são apresentados na Figura 16. Os níveis de expressão gênica relativos comparando a expressão do gene no tecido hepático de hamsters alimentados com uma dieta suplementada com a farinha de semente de Chardonnay para a expressão de genes no tecido hepático de hamsters alimentados com a dieta de controle são apresentados na Figura 17.

[00135] A expressão do gene ACOX1 hepático, CYP51, e CYP7al foi notavelmente elevada em hamsters alimentados com a dieta suplementada com farinha de semente de Chardonnay, enquanto a expressão do gene ABCG5 e SCD1 foi notavelmente diminuída em hamsters alimentados com a dieta suplementada com a farinha de semente de Chardonnay

[00136] ACOX1 está envolvido na regulação da oxidação das gorduras, CYP51 está envolvido na regulação da biossíntese do colesterol, CYP7al está envolvido na regulação da síntese de ácido biliar, SCD1 está envolvido na síntese de gordura, e ABCG5 está envolvido no transporte de colesterol de volta para o intestino. Consequentemente, os resultados sugerem que uma dieta suplementada com a farinha de semente de Chardonnay pode reduzir o colesterol e/ou a re-absorção biliar, conduzindo a níveis reduzidos no fígado. Os resultados sugerem ainda que uma dieta suplementada com farinha de semente de Chardonnay pode reduzir o ganho de peso pela regulação positiva hepática de genes para a oxidação de gordura (ACOX1) e/ou pela regulação negativa da síntese de gordura (SCD1). 8. EXEMPLO 4: COMPARAÇÃO DE BENEFÍCIOS PARA A SAÚDE DE FARINHA DE SEMENTE DE CHARDONNAY E EXTRATO DE SEMENTE DE UVA CHARDONNAY COM EXTRATOS DE SEMENTE DE UVA COMERCIALMENTE DISPONÍVEIS 8.1 Materiais e Métodos 8.1.1 Hamsters e dietas

[00137] Hamsters machos sírios dourados (-80 g, cepa LVG, Charles River) foram aclimatizados e receberam água e uma dieta de roedor 5001 ad libitum (LabDiet, PMI Internacional; proteína, 239 g/kg; gordura, 50 g/kg; substâncias não-nitrogenadas, 487 g/kg; fibra bruta, 51 g/kg; cinzas, 70 g/kg, energia, 17 MJ kg; e quantidades suficientes de vitaminas e minerais para a manutenção saudável) durante uma semana, antes do início das dietas experimentais. Todos os extratos de semente de uva foram caracterizados por métodos de HPLC, e as suas quantidades de alimentação foram ajustadas para proporcionar a mesma quantidade de catequina como um 7% (peso/peso) de farinha de semente de Chardonnay. Hamsters foram pesados e distribuídos aleatoriamente em 10 grupos de 8 hamsters cada, e foram alimentados com dietas ricas em gordura ad libitum contendo 7% (em peso) da farinha de semente de Chardonnay (1 grupo), extrato de semente de uva Vitacost® (2 grupos), extrato de semente de uva Mega Natural® BP (2 grupos), extrato de semente de uva Leucoselect® (2 grupos), catequina (aproximadamente 0,000785 g/g de dieta) (1 grupo), epicatequina (aproximadamente 0,00104 g/g de dieta) (1 grupo), ou uma dieta de controle (1 grupo) durante 4 semanas. Os níveis de catequina foram usados para normalizar cada extrato de semente de uva para a quantidade de farinha de semente de Chardonnay. Epicatequina e catequina foram incluídas na dieta de ração como controles para estes compostos, as quais foram implicadas em outros estudos para serem responsáveis pela regulação da pressão sanguínea e dos lipídeos. Uvas das quais a farinha de semente de Chardonnay foi produzida, foram cultivadas nos vales da costa do norte da Califórnia. Os tratamentos consistiram de 18% de energia como proteína, 43% como carboidratos, e 39% de gordura suplementada com 0,1% de colesterol. Os pesos corporais foram registrados semanalmente e a ingestão de alimentos foi monitorada duas vezes por semana. O estudo foi aprovado pelo Comitê de Uso e Cuidado Animal, Western Regional Research Center, USDA, Albany, CA. 8.1.2 Coleção de Plasma e Tecido

[00138] Os hamsters foram deixados em jejum durante 12 horas e anestesiados com isoflurano (Phoenix Pharmaceutical). O sangue foi coletado por punção cardíaca com seringas previamente lavadas com uma solução de EDTA potássio (15% em peso:v) e o plasma foi separado após a centrifugação a 2000 xg durante 30 minutos a 4°C. Os fígados foram retirados, pesados, e imediatamente congelados em nitrogênio líquido para a análise. 8.1.3 Análise de Biomarcador do Plasma

[00139] O colesterol em lipoproteínas do plasma foi determinado por cromatografia de exclusão de tamanho como anteriormente descrito (German et al, 1996. Res Nutr. 1996; 16: 1239-1249). Triglicerídeos plasmáticos, colesterol total, colesterol livre, e glicose foram determinados por ensaios colorimétricos enzimáticos utilizando um Analisador Clínico Roche Diagnostics/Hitachi 914 com kits de ensaio (Roche Diagnostics e Wako Chemicals). As concentrações plasmáticas de adiponectina (B-bridge International) e insulina (Mercodia) de hamsters privados de alimentação foram determinadas usando kits de imunoensaio de adiponectina e insulina de ratos ultra-sensíveis, como descrito anteriormente (Hung et al, 2009, J. Diabetes 1: 194-206). As concentrações de glicose no sangue em ratos privados de alimentação foram medidas em amostras de veias do rabo usando um OneTouch Ultrameter (LifeScan). 8.1.4 Análise Lipídica Hepática

[00140] Amostras de fígado moídas e liofilizadas foram extraídas utilizando um extrator de solvente acelerado (Dionex), a 100°C; 13,8 MPa com 75/25 de hexano/2-propanol. O extrato da amostra foi analisado em um Analisador Clínico Roche Diagnostic/Hitachi 914 (Roche Diagnostics) para determinar triglicerídeos hepáticos, colesterol total e colesterol livre, usando os kits descritos acima. 8.1.5 Análise de Ácidos Biliares Fecais e de Esterol

[00141] As fezes foram recolhidas durante 3 dias consecutivos, imediatamente antes de quando os hamsters foram sacrificados e foram liofilizadas, moídas, e armazenadas a -20°C. Os ácidos biliares e os esteróis foram determinados por HPLC como descrito anteriormente (Hong et al, 2007, J Agric Food Chem. 55: 9750-7). 8.1.6 Análise Estatística

[00142] Todos os dados são expressos em média ± SE. As diferenças entre o controle e diferentes grupos de dieta foram determinadas por testes t de Student 2-tailed. Quando as variações de cada grupo eram desiguais, a significância das diferenças foi determinada utilizando o teste de Welch. Os coeficientes de correlação de Pearson foram calculados para investigar as relações de colesterol total do plasma, as concentrações plasmáticas de adiponectina, o colesterol hepático, e as concentrações de triglicerídeos com a expressão dos genes hepáticos (programa de estatística JMP 7, SAS Institute). A significância foi definida em P <0,05. 8.2 Resultados

[00143] Os animais alimentados com farinha de semente de Chardonnay tinha diminuído significativamente os níveis plasmáticos de colesterol total e colesterol LDL em comparação com os animais alimentados com dietas suplementadas com extratos de semente de uva disponíveis comercialmente (Figuras 18 e 19), com a exceção de um dos grupos alimentados com uma dieta suplementada com extrato de semente de uva Leucoselect® (L7). Estes dados mostram que a farinha de semente de Chardonnay foi superior a todas menos um dos extratos de sementes de uva comerciais testados para a redução do colesterol total e do colesterol LDL. 9. EXEMPLO 5: EFEITOS DA FARINHA DE SEMENTE DE CHARDONNAY NAS FEZES NÍVEIS DE MICROBIOTA 9.1 Materiais e Métodos 9.1.1 Amostras de fezes

[00144] As fezes foram coletadas dos animais do Exemplo 1 no dia 0 (controle) e no dia 20 (dieta suplementada com farinha de semente de Chardonnay, dieta suplementada com farinha de semente de Cabernet, e dieta de controle com alto teor de gordura). As fezes foram secas e congeladas. 9.1.2 Extração e Quantificação de RNA

[00145] Amostras de fezes congeladas foram adicionadas para 10 volumes de RNA/fer®-ICE (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA) durante pelo menos 24 horas. O RNA total foi preparado utilizando o Kit de Purificação de RNA Total de Fezes (Norgen Biotek Corp., Canadá) seguindo os protocolos do fabricante.

[00146] Quantidade e pureza do RNA isolado foram confirmadas por espectrofotometria (razão A260/A280). O DNAc foi preparado para cada amostra, utilizando 250 ng de RNA total e um kit de reagente PrimeScript™ RT (Takara Bio Inc., Shiga, Japão) de acordo com os protocolos do fabricante.

[00147] PCR em tempo real para a quantificação de expressão de gene rRNA 16S bacteriano intestinal foi realizada utilizando o sistema de PCR em Tempo Real AB 7500 (Applied Biosystems, Foster City, CA, EUA). A amplificação foi realizada em duplicata utilizando SYBR Premix Ex Taq (Takara Bio Inc., Shiga, Japão). As amplificações, utilizando os primers apresentados na Tabela 1 foram realizadas com os seguintes perfis de temperatura: um ciclo a 95°C durante 30 segundos, e 40 ciclos de desnaturação a 95°C durante 5 a 10 segundos, emparelhamento à temperatura ótima a 5 a 15 segundos, e alongamento a 72°C durante 20 segundos. Tabela 1

9.2 Resultados

[00148] Os resultados de-PCR quantitativa em tempo real das amostras fecais dos hamsters alimentados com uma dieta rica em gordura contendo farinha de sementes de Chardonnay ou Cabernet revelaram que a microbiota intestinal foi modulada pelo consumo das farinhas. Os níveis de bactérias medidos totais na matéria fecal de hamsters alimentados com quatro dietas são mostrados na Figura 20. Os níveis medidos de subpopulações de bactérias são mostrados nas Figuras 21-26.

[00149] Amostras fecais de hamsters alimentados com uma dieta rica em gorduras suplementada com farinha de sementes de Chardonnay mostraram níveis significativamente reduzidos de Bifidobacterium spp., Lactobacillus spp., e Enterobacteriaceae, e os níveis de Enterococcus spp aumentaram significativamente., bactérias Clostridium de grupo IV e o grupo de Bacteroides fragilis em comparação com amostras fecais de hamsters alimentados com a dieta de controle rica em gordura.

[00150] Amostras fecais de hamsters alimentados com uma dieta rica em gorduras suplementada com farinha de sementes de Cabernet mostraram níveis significativamente reduzidos de Enterobacteriaceae, e níveis significativamente aumentados de Enterococcus spp, e o grupo Bacteroides fragilis em comparação com amostras fecais de hamsters alimentados com a dieta de controle rica em gordura. 10. MODALIDADES ESPECÍFICAS E INCORPORAÇÃO POR REFERÊNCIA

[00151] Todas as publicações, patentes, pedidos de patentes e outros documentos citados neste pedido são aqui incorporados por referência na sua totalidade para todos os fins na mesma medida como se cada publicação, patente, pedido de patente individuais ou outro documento fossem individualmente indicados para serem incorporados por referência para todos os fins.

[00152] Embora várias modalidades específicas tenham sido ilustradas e descritas, será apreciado que várias modificações podem ser feitas sem se afastar do espírito e escopo da invenção(s).

Claims (10)

1. Uso de uma quantidade eficaz de farinha de semente de uva Chardonnay caracterizado por ser para a fabricação de uma composição para tratamento de síndrome metabólica, redução do peso de um fígado, dislipidemia, aumento do metabolismo lipídico, obesidade, dislipoproteinemia, aumento da quantidade de Bacteroides fragilis no intestino, diminuição da quantidade de bactérias Enterobacteriaceae no intestino, aumento da quantidade de bactérias Clostridium no intestino ou tratamento de acidose láctica em um mamífero em necessidade da mesma.

2. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por reduzir o colesterol.

3. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por aumentar a razão de HDL para LDL.

4. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por reduzir o peso de órgão.

5. Uso, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado por o órgão ser o fígado.

6. Uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por reduzir o peso do tecido adiposo epididimal.

7. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por a farinha de semente de uva Chardonnay ser farinha de semente de uva Chardonnay prensada a frio, farinha de semente de uva Chardonnay prensada a quente, repasto do bagaço de Chardonnay ou farinha do bagaço de Chardonnay.

8. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado por o mamífero ser um ser humano.

9. Uso de uma quantidade eficaz de farinha de semente de uva Chardonnay caracterizado por ser para a fabricação de uma composição para prevenir dislipidemia ou prevenir níveis de dislipoproteinemia no sangue, manter o peso saudável ou manter a saúde do cólon de um mamífero em necessidade da mesma.

10. Composição caracterizada por compreender a farinha de semente de uva Chardonnay direcionada para o uso conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9 e materiais alimentares adequados.

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