BR112013033671B1 - Composições de polipeptídeo de fusão fc livre de arginina e uso - Google Patents

Abstract

COMPOSIÇÕES DE POLIPEPTÍDEO DE FUSÃO FC LIVRE DE ARGININA E USO. A presente invenção refere-se a composições contendo polipeptídeo livre de arginina e a métodos para tratar distúrbios associados com inflamação ou a resposta autoimune. Em particular, o polipeptídeo é etanercepte.

Description

PEDIDOS RELACIONADOS

Este pedido reivindica o benefício de acordo com 35 U.S.C. § 119(e) do pedido provisional US número 61/504.10, depositado em 1° de julho de 2011, o conteúdo do qual é por meio deste incorporado por referência em sua totalidade.

CAMPO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a composições à base de polipep- tídeo terapêuticas.

ANTECEDENTES

Preparações de polipeptídeo terapêuticas são frequentemente armazenadas ante do uso. No entanto, polipeptídeos são instáveis se ar-mazenados em uma forma aquosa por períodos de tempo prolongados, particularmente, na ausência de um agente de estabilização, tal como ar- ginina. Uma alternativa à dependência de armazenamento aquoso é preparar uma forma liofilizada seca de um polipeptídeo, embora a reconstituição de um polipeptídeo seco frequentemente resulta em agregação ou desnaturação.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

Em algumas modalidades, composições de polipeptídeo livres de arginina são fornecidas. Formulações foram identificadas para preparar soluções de polipeptídeo livres de arginina que são estáveis por um período de tempo prolongado. Estas formulações têm vários benefícios em relação a soluções estabilizadas com arginina, incluindo custo reduzido e uma incidência reduzida de efeitos colaterais associados com a presença de argini- na. De modo surpreendente, uma preparação de polipeptídeo aquosa pode ser estabilizada usando uma concentração de sal relativamente alta na ausência de arginina ou outro aminoácido estabilizante (por exemplo, lisina ou glicina ou outro aminoácido estabilizante, por exemplo, um tendo uma carga positiva). composições compreendendo (ou consistindo ou consistindo essencialmente em): um polipeptídeo isolado (por exemplo, um polipeptídeo terapêutico, por exemplo, que compreende um domínio de imunoglobulina); e sal em uma quantidade suficiente para evitar agregação do polipeptídeo, desse modo estabilizando a composição (por exemplo, na ausência de arginina ou outro aminoácido adicionado). Em algumas modalidades, composições fornecidas neste documento são composições aquosas (por exemplo, soluções aquosas). Em algumas modalidades, o polipeptídeo e o sal são fornecidos em água sem um tampão. Em algumas modalidades, a composição compreende um tampão aquoso ou outro solvente (por exemplo, um solvente orgânico). Em algumas modalidades, um ou mais excipientes são incluídos.

Em algumas modalidades, aspectos da invenção se referem a composições de polipeptídeo livres de arginina compreendendo um polipep- tídeo isolado que inclui uma região Fc de uma imunoglobulina humana (por exemplo, IgG1). Em algumas modalidades, aspectos da invenção se referem a composições de polipeptídeo livres de arginina compreendendo um poli- peptídeo isolado que inclui uma porção de ligação a ligante extracelular de um fator de necrose tumoral (TNF) p75 humano. Em algumas modalidades, aspectos da invenção se referem a composições de polipeptídeo livres de arginina compreendendo um polipeptídeo isolado que é uma porção de ligação a ligante extracelular de um receptor de fator de necrose tumoral (TNF) p75 humano fundido à região Fc de uma IgG1 humana.

Em alguns aspectos, são fornecidas neste documento composições compreendendo (ou consistindo ou consistindo essencialmente em): um polipeptídeo isolado que é uma porção de ligação a ligante extracelular de um receptor de fator de necrose tumoral p75 humano fundido à região Fc de uma IgG1 humana; e sal em uma quantidade suficiente para evitar agregação do polipeptídeo, desse modo estabilizando a composição (por exemplo, na ausência de arginina ou outro aminoácido adicionado).. Em algumas modalidades, composições fornecidas neste documento são composições aquosas (por exemplo, soluções aquosas). Em algumas modalidades, a proteína e o sal são fornecidos em água sem um tampão. Em algumas modali- dades, a composição compreende um tampão aquoso ou outro solvente (por exemplo, um solvente orgânico). Em algumas modalidades, um ou mais ex- cipientes são incluídos.

Em alguns aspectos, são fornecidas neste documento composições combinando: um polipeptídeo isolado que é uma porção de ligação a ligante extracelular de um receptor de fator de necrose tumoral p75 humano fundido à região Fc de uma IgG1 humana; tampão aquoso; e sal em uma quantidade suficiente para evitar agregação do polipeptídeo, desse modo formulando uma composição estável.

Em ainda outros aspectos, são fornecidos neste documento métodos compreendendo administrar a um indivíduo uma composição compreendendo: um polipeptídeo isolado que é uma porção de ligação a ligante extracelular de um receptor de fator de necrose tumoral p75 humano fundido à região Fc de uma IgG1 humana; tampão aquoso; e sal em uma quantidade suficiente para evitar agregação do polipeptídeo isolado, desse modo estabilizando a composição.

Em algumas modalidades, uma composição contém menos de 10 mM de aminoácidos livres (por exemplo, arginina, lisina e/ou glicina). Em algumas modalidades, a composição contém menos de 1 mM dos aminoáci- dos livres. Em algumas modalidades, uma composição contém menos de 1 mM de arginina. Em algumas modalidades, uma composição contém menos de 0,5 mM de arginina. Em algumas modalidades, uma composiçaõ contem menos de 0,1 mM, menos de 0,05 mM, menos de 0,01 mM, menos de 0,005 mM ou menos de 0,001 mM de arginina. Em algumas modalidades, a composição não contém aminoácidos livres. Em algumas modalidades, a composição é substancialmente livre de arginina. O polipeptídeo isolado de qualquer uma das composições descritas neste documento compreende, como parte se sua sequência de aminoácidos, resíduos de aminoácido argi- nina. Resíduos de arginina que, junto com outros resíduos de aminoácidos, formam a sequência de aminoácidos de uma proteína não são considerados aminoácidos "livres". Assim, uma composição que "não contém aminoáci- dos" se refere a uma composição que não contém aminoácidos livres, mas pode conter polipeptídeo isolado tendo resíduos de aminoácido arginina como parte de sua sequência de aminoácidos.

Em certas modalidades, as composições descritas neste documento compreendem cerca de 10 mg/ml a cerca de 100 mg/ml do polipeptí- deo isolado. Em algumas modalidades, o polipeptídeo isolado é etanercepte.

Em algumas modalidades, o tampão aquoso está em uma con-centração de menos do que 100 mM, menos do que 50 mM, ou menos do que 25 mM. Em certas modalidades, o tampão aquoso está em uma concentração de cerca de 1 mM a cerca de 15 mM. Em algumas modalidades, o tampão aquoso está em uma concentração de cerca de 1 mM. Em algumas modalidades, o tampão aquoso está em uma concentração de menos do que 1 mM, menos do que 0,5 mM, menos do que 0,25 mM, menos do que 0,1 mM, menos do que 0,05M ou menos do que 0,01M. Em algumas modalidades, o tampão aquoso é fosfato de sódio, histidina, fosfato de potássio, citrato de sódio ou potássio, ácido maleico, acetato de amônio, tris- (hidroximetil)-aminometano (tris), acetato, dietanolamina ou uma combinação dos mesmos. Entretanto, outros tampões podem ser usados (por exemplo, em baixas quantidades), pois os aspectos da invenção não são limitados a este respeito. Em algumas modalidades, as composições descritas neste documento não contêm um tampão aquoso. Nessas modalidades, as proteí-nas na composição são autotamponamento, por exemplo, proteínas mode-radamente concentradas podem ser autotamponamento (por exemplo, em uma solução aquosa sem tampão adicionado).

Em algumas modalidades, o sal está presente em uma concentração acima de 50 mM, ou acima de 100 mM. Em algumas modalidades, o sal está presente em uma concentração de cerca de 120 mM a cerca de 150 mM. Em algumas modalidades, o sal está presente em uma concentração maior que 150 mM, dependendo da quantidade de tampão aquoso presente na solução. Em geral, se a quantidade de tampão aquoso for reduzida na composição, a quantidade de sal, (por exemplo, NaCl) é aumentada a fim de preservar tonicidade e estabilidade térmica da composição. Por exemplo, se tampão aquoso estiver presente em uma composição em uma concentração de menos do que 15 mM, então, o sal pode estar presente na composição em uma concentração maior do que 150 mM. Em algumas modalidades, o sal é cloreto de sódio. O componente de sal de uma composição se refere a sal além do sal presente no tampão aquoso.

Em outras modalidades, qualquer uma das composições descritas neste documento pode compreender um excipiente. O excipiente pode ser sacarose, lactose, glicerol, xilitol, sorbitol, Manitol, maltose, inositol, trea- lose, glicose, albumina de soro bovino (BSA), SA humana ou HA recombi- nante, dextrano, PVA, hidroxipropil metilcelulose (HPMC), polietilenoimina, gelatina, polivinilpirrolidona (PVP), hidroxietilcelulose (HEC), polietileno gli- col, etileno glicol, glicerol, dimetilsulfóxido (DMSO), dimetolformamida (DMF), prolina, L-serina, ácido glutâmico sódico, alanina, glicina, cloridrato de lisina, sarcosina, ácido gama-aminobutírico, Tween®-20, Tween®-80, SDS, polissorbato, copolímero de polioxietileno, fosfato de potássio, acetato de sódio, sulfato de amônio, sulfato de magnésio, sulfato de sódio, trimetila- mina N-óxido, betaína, íons de zinco, íons de cobre, íons de cálcio, íons de manganês, íons de magnésio, CHAPS, sacarose monolaurato, 2-O-beta- manoglicerato ou uma combinação dos mesmos. Outros excipientes podem ser usados, pois os aspectos da invenção não são limitados a este respeito. Em modalidades particulares, o excipiente é sacarose. Em tais modalidades a sacarose pode estar em uma concentração de cerca de 0,5% a cerca de 1,5%. Em certas modalidades, qualquer uma das composições descritas neste documento pode ter uma sacarose em uma concentração de cerca de 1% em peso.

Em algumas modalidades, qualquer uma das composições descritas neste documento pode ter um pH de cerca de 5,5 a cerca de 7,8. Em algumas modalidades, qualquer uma das composições descritas neste documento pode ter um pH de cerca de 5,8 a cerca de 6,5. Em algumas modalidades, uma composição descrita neste documento pode ter um pH de 5,8 a 6,5. Em algumas modalidades, uma composição pode ter um pH de 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4 ou 6,5.

Em uma modalidade, a composição compreende (ou consiste em, ou consiste essencialmente em) 50 mg/ml de etanercepte, fosfato de sódio cerca de 10 mM, cloreto de sódio cerca de 140 mM e cerca de 1% de sacarose, em que o pH da composição é de cerca de pH 6,0 a cerca de pH 7,0.

Em cada uma das modalidades descritas neste documento, a composição é livre de L-arginina adicional (livre de arginina). Isto é, L- arginina não é adicionada ou combinada com o polipeptídeo em nenhuma das composições descritas neste documento. Entretanto, o próprio polipeptí- deo pode conter resíduos de aminoácido arginina, como descrito em outro lugar neste documento.

Qualquer uma das composições descritas neste documento pode ter uma vida de prateleira comercialmente viável de pelo menos 24 meses.

Qualquer uma das composições descritas neste documento pode ser adequada para administração subcutânea (por exemplo, não tóxica, purificada, esterilizada e/ou isotonicidade apropriada).

Além disso, em alguma das composições descritas neste documento, o polipeptídeo isolado pode ser purificado.

Em certas modalidades, as composições descritas podem ser esterilizadas.

Qualquer uma das composições descritas neste documento pode ser usada para tratar artrite reumatoide, artrite psoriática, espondilite an- quilosante, doença de Wegener (granulomatose), doença de Crohn (ou doença intestinal inflamatória), doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), Hepatite C, endometriose, asma, caquexia, psoríase ou dermatite atópica ou outra doença, distúrbio ou condição inflamatória ou relativa a autoimune. As composições podem ser administradas em uma quantidade suficiente para tratar (aliviar sintomas, paralisar ou retardar a progressão) do distúrbio (por exemplo, uma quantidade terapeuticamente eficaz).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Uma forma solúvel comercialmente disponível do receptor TNF fundido a um domínio Fc (TNFR:Fc) é conhecida como etanercepte. Etaner- cepte (nome comercial ENBREL®) interfere com o fator de necrose tumoral (TNF) agindo como um inibidor de TNF. Este polipeptídeo de fusão dimérico consistindo na porção de ligação a ligante extracelular do receptor de fator de necrose tumoral (TNFR) de 75 kilodaltons humano (p75) ligada à proçao Fc da IgG1 humana atualmente é formulado com L-arginina to prevenir agregação do polipeptídeo (ver Patente US 5.447.851 e 7.648.702, incorporada neste documento por referência).

Arginina, embora tolerada pela maioria das pessoas, pode provocar sérios efeitos colaterais em algumas pessoas. Uma severa reação alérgica, chamada anafilaxia, pode ocorrer após injeções de arginina, bem como desconforto estomacal, incluindo náuseas, espasmos estomacais ou um número elevado de evacuações. Outros efeitos colaterais potenciais incluem baixa pressão sanguínea e mudanças em numerosos produtos químicos e eletrólitos no sangue, tal como alto potássio, alto cloreto, baixo sódio, baixo fosfato, alta ureia e nitrogênio no sangue e altos níveis de creatinina. Em teoria, a arginina pode aumentar o risco de sangramento, aumentar os níveis de açúcar no sangue, aumentar os níveis de potássio e pode piorar sintomas da doença falciforme. Por conseguinte, indivíduos com doença de fígado ou rins, ou aqueles usando coagulantes, são precavidos contra o uso de arginina.

Como discutido na Patente US 6.748.702, composições aquosas compreendendo polipeptídeos contendo domínio Fc são consideradas como requerendo L-arginina em concentrações de cerca de 1 mM a cerca de 100 mM para prevenir agregação dos polipeptídeos. Também se acredita ser ela necessária para armazenamento em longo prazo (por exemplo, dois anos ou mais) dessas composições aquosas.

De maneira surpreendente, composições aquosas estáveis (por exemplo, composições farmacêuticas) que são substancialmente livres de L- arginina (por exemplo, não contêm uma quantidade substancial de L- arginina) podem ser preparadas de modo que elas sejam estáveis por um período de dois anos ou mais. Os requerentes concluíram que aumentando a concentração de sal e diminuindo a capacidade tamponamento da compo- sição, ainda é possível fornecer uma composição de polipeptídeo estável a qual pode ser administrada subcutaneamente a um indivíduo. O termo "estável" com respeito a armazenamento de longo prazo é entendido como significando que o polipeptídeo ativo da composição farmacêutica não perde mais de 20%, mais de 15%, mais de 10% ou mais de 5% de sua atividade em relação à atividade da composição no início do armazenamento.

Em algumas modalidades, são fornecidas neste documento composições compreendendo: um polipeptídeo isolado que é uma porção de ligação a ligante extracelular de um receptor de fator de necrose tumoral p75 humano fundido à região Fc de uma IgG1 humana; tampão aquoso; e sal em uma quantidade suficiente para evitar agregação do polipeptídeo, desse modo estabilizando a composição, em que as composições compreendem con-centrações de menos de 1 mM de L-arginina. Em certas outras modalidades, as composições de polipeptídeo contendo Fc são livres ou substancialmente livres de L-arginina. "Substancialmente livre," conforme utilizado neste documento, se refere a uma composição sem aminoácidos livres adicionais, tal como arginina. Será entendido que o próprio polipeptídeo pode compreender o aminoácido arginina em sua estrutura. Em algumas modalidades, uma composição não contém aminoácidos arginina livres.

Como usado aqui, a frase "composição" ou "composições" pode se referir a formulação(ões) compreendendo um polipeptídeo preparado de modo que ele seja adequado para injeção e/ou administração a um indivíduo em necessidade do mesmo. Uma "composição" também pode ser denominada como uma "composição farmacêutica." Em certas modalidades, as composições fornecidas neste documento são substancialmente estéreis e não contêm quaisquer agentes que são indevidamente tóxicos ou infecciosos para o receptor. Além disso, como usada neste documento, uma solução ou composição aquosa pode significar uma preparação fluida (líquida) que contém uma ou mais substâncias químicas dissolvidas em um solvente adequado (por exemplo, água e/ou outro solvente, por exemplo, solvente orgânico) ou mistura de solventes mutuamente miscíveis.

Além disso, como usado aqui, o termo "cerca de" pode significar que pode haver variação na concentração de um componente das composições descritas que pode ser de 5%, 10%, 15% ou até e incluindo 20% do valor dado. Por exemplo, se uma composição tiver cerca de 10 mg/ml de um polipeptídeo contendo domínio Fc , essa composição pode ter entre 8 a 12 mg/ml do polipeptídeo declarado. Em certas modalidades, as composições compreendem cerca de 10 mg/ml a cerca de 100 mg/ml do polipeptídeo. Em modalidades relacionadas, as composições compreendem 50 mg/ml ou cerca de 50 mg/ml do polipeptídeo. As composições podem incluir mais ou menos polipeptídeo, pois os aspectos da invenção não são limitados a este respeito.

Em modalidades particulares o polipeptídeo contendo domínio de Fc é uma forma solúvel do receptor TNF fundido a um domínio Fc (TNFR:Fc). Um TNFR:Fc comercialmente disponível é conhecido como eta- nercepte (Enbrel®, Immunex Corporation) o qual é um polipeptídeo de fusão dimérico consistindo na porção de ligação a ligante extracelular do receptor de fator de necrose tumoral (TNF) de 75 kilodaltons (p75) humano ligada à porção Fc de IgG1 humana. O componente Fc de etanercepte contém o domínio pesado constante 2 (CH2), o domínio pesado constante 3 (CH3) e região de dobradiça, mas não o domínio pesado constante 1 (CH1) de IgG1 humana. Em algumas modalidades, um domínio Fc pode conter um dos domínios descritos acima, embora em outras modalidades, um domínio Fc possa conter todos os domínios descritos acima. Etanercepte é produzido por tecnologia de DNA recombinante em um sistema de expressão de célula de mamífero de Ovário de Hamster Chinês (CHO). Ele consiste em 934 ami- noácidos e tem um peso molecular aparente de aproximadamente 150 kilodaltons (Physicians’ Desk Reference, 2002, Medical Economics Company Inc.).

Outros polipeptídeos contemplados para uso em composições e métodos particulares descritos neste documento incluem sem limitação poli- peptídeos de fusão recombinantes compreendendo pelo menos uma porçao de um domínio Fc de um anticorpo. Um polipeptídeo fundido a um domínio Fc e idêntico a ou substancialmente similar a um dos seguintes polipeptí- deos é adequado para uso na presente composição: um ligante flt3, um li- gante CD40, eritropoietina, trombopoeitina, calcitonina, ligante Fas, ligante para ativador de receptor de NF-capa B (RANKL), ligante de indução de apoptose relativa a fator de necrose tumoral (TNF) (TRAIL), linfopoietina derivada de estroma tímico, fator de estimulação de colônia de granulócito, fator de estimulação de colônia de granulócito-macrófago, fator de crescimento de mastócito, fator de crescimento de célula tronco, fator de crescimento epidérmico, RANTES, hormônio de crescimento, insulina, insulinotropina, fatores de crescimento tipo insulina, hormônio paratireoide, interferons, fatores de crescimento de nervo, glucagon, interleucinas 1 a 18, fatores de estimulação de colônia, linfotoxina-β, fator de necrose tumoral (TNF), fator inibidor de leucemia, oncostatina-M e vários ligantes para moléculas de superfície de célula ELK e Hek (tal como os ligantes para cinases relativas a eph ou LERKS).

Em certas modalidades, os polipeptídeos incluem sem limitação polipeptídeos de fusão recombinantes compreendendo um domínio Fc de um anticorpo mais um receptor para qualquer um dos polipeptídeos acima mencionados ou polipeptídeos substancialmente similares a esses receptores. Estes receptores incluem sem limitação ambas as formas de TNFR (denominadas como p55 e p75), receptores de Interleucina-1 (tipo 1 e 2), receptor de Interleucina-4, receptor de Interleucina-15, receptor de Interleucina-17, receptor de Interleucina-18, receptor de fator de estimulação de colônia gra- nulócito-macrófago, receptor de fator de estimulação de colônia de granuló- cito, receptores para oncostatina-M e fator inibidor de leucemia, ativador de recetor de NF-capa B (RANK), receptores para TRAIL (receptores TRAIL 1, 2, 3 e 4) e receptores que compreendem domínios de morte, tal como Fas ou Receptor de Indução de Apoptose (AIR).

Em outras modalidades, os polipeptídeos incluem sem limitação a antígenos de diferenciação (denominados como polipeptídeos CD) ou seus ligantes ou polipeptídeos substancialmente similares a cada um destes os quais são fundidos a um domínio Fc de um anticorpo. Esses antígenos são divulgados em Leukocyte Typing VI (Proceedings of the VIth International Workshop and Conference, Kishimoto, Kikutani et al., eds., Kobe, Japan, 1996). Polipeptídeos CD similares são divulgados em oficinas subsequentes. Exemplos desses antígenos incluem CD27, CD30, CD39, CD40 e ligantes para os mesmos (ligante CD27, ligante CD30, etc.). Vários dos antígenos CD são membros da família de receptor TNF a qual também inclui ligante 41BB e OX40. Os ligantes são frequentemente membros da família TNF, como são o ligante 41BB e o ligante OX40. Por conseguinte, membros das famílias TNF e TNFR podem ser formulados como descrito neste documento.

Em certas modalidades, polipeptídeos enzimaticamente ativos ou seus ligantes podem ser usados nas composições e métodos descritos neste documento. Exemplos incluem sem limitação polipeptídeos de fusão recombinantes compreendendo um domínio Fc de um anticorpo fundido a todos ou parte dos seguintes polipeptídeos, ou seus ligantes, ou um polipep- tídeo substancialmente similar a um destes: membros da família metalopro- teinase-disintegrina, várioas cinases, glicocerebrosidase, superóxido dismutase, ativador de plasminogênio de tecido, Fator VIII, Fator IX, apolipoproteí- na E, apolipoproteína A-I, globinas, um antagonista IL-2, antitripsina alfa-1, Enzima de Conversão TNF-alfa, ligantes para qualquer uma das enzimas acima mencionada e inúmeras outras enzimas e seus ligantes.

Em algumas modalidades as composições e os métodos descritos neste documento são usados para preparar composições compreendendo anticorpos, anticorpos humanos, anticorpos humanizados, anticorpos quiméricos, por exemplo, anticorpos tendo domínios de imunoglobulina de anticorpo constantes humanos acoplados a um ou mais de domínio de imu- noglobulina de anticorpo variável murino e/ou anticorpos não humanos ou fragmentos dos mesmos. Exemplos específicos de anticorpos adequados para uso nas presentes composições incluem sem limitação anticorpos comercialmente disponíveis, tal como muromonab-CD3 (Orthoclone OKT-3®, Ortho Biotech), abciximab (REOPRO®, Lilly), rituximabe (RITUXAN®, IDEC), dacliximab (ZENAPAX®, Roche Laboratories), basiliximabe (SIMULECT®, Novartis), infliximabe (REMICADE®, Centocor), palivizumabe (SYNAGIS®, MedImmune), trastuzumab (HERCEPTIN®, Genentech), gentuzumabe ozo- gamicina (MYLOTARG™, Wyeth-Ayerst), e alentuzumabe (CAMPATH®, Berlex). Atualmente, cada um dos anteriores está disponível ou como um pó liofilizado requerendo reidratação ou como um concentrado requerendo diluição antes da administração. A presente composição elimina a necessidade de quaisquer manipulações antes da administração, por exemplo, reidra- tação ou diluição, embora preservando estabilidade dos ingredientes ativos durante armazenamento de longo prazo.

Em modalidades particulares, as composições descritas neste documento são usadas para armazenar polipeptídeos compreendendo um anticorpo conjugado a uma substância citotóxica ou luminescente. Essas substâncias incluem sem limitação: derivados de maitansina (tal como DM1); enterotoxinas (tal como enterotoxinas estafilocócicas); isótopos de iodo (tal como iodo-125); isótopos de tecnécio (tal como Tc-99m); fluorcromos de ci- anina (tal como Cy5.5.18); e polipeptídeos inativadores de ribossoma (tal como bouganina, gelonina ou saporina-S6).

Exemplos de anticorpos ou conjugados de anticorpo/citotoxina ou anticorpo/luminóforo contemplados para uso neste documento incluem sem limitação aqueles que reconhecem um ou mais dos seguintes antíge- nos: CD2, CD3, CD4, CD8, CD11a, CD14, CD18, CD20, CD22, CD23, CD25, CD33, CD40, CD44, CD52, CD80 (B7.1), CD86 (B7.2), CD147, receptor de IL-4, IL-5, IL-8, IL-10, IL-2, receptor de IL-4, receptor de IL-6, receptor de IL-13, PDGF-β, VEGF, TGF, TGF-β2, TGF-β1, receptor de EGF, receptor de VEGF, complemento C5, IgE, antígeno tumoral CA125, antígeno tumoral MUC1, antígeno PEM, LCG (o qual é um produto de gene que é expresso em associação com câncer de pulmão), HER-2, uma glicoproteína associada a tumor TAG-72, o antígeno SK-1, epítopos associados a tumor que estão presentes em níveis elevados nos soros de indivíduos com câncer de cólon e/ou pancreático, epítopos ou polipeptídeos associados com câncer expressos em células de câncer de mama, cólon, célula escamosa, próstata, pancreático, pulmão e/ou rim e/ou em células de melanoma, glioma ou neuroblastoma, receptores de TRAIL 1, 2, 3 e 4, o núcleo necrótico de um tu mor, integrina alfa 4 beta 7, a integrina VLA-4, integrinas B2, TNF-α, a molécula de adesão VAP-1, molécula de adesão de célula epitelial (EpCAM), molécula de adesão intercelular 3 (ICAM-3), adesina leucointegrina, a glicopro- teína de plaqueta gp IIb/IIIa, cadeia pesada de miosina cardíaca, hormônio de paratireoide, rNAPc2 (o qual é um inibidor de fator VIIa-fator de tecido), MHC I, antígeno carcinoembriônico (CEA), alfa-fetoproteína (AFP), fator de necrose tumoral (TNF), CTLA-4 (o qual é um antígeno associado a linfócito T citotóxico), receptor Fc-Y-1, HLA-DR 10 beta, antígeno HLA-DR, L-seletina, IFN—Y, Vírus Sincicial Respiratório, vírus da imunodeficiência humana (HIV), vírus da hepatite B (HBV), Streptococcus mutanse Staphylococcus aureus.

Em algumas modalidades, as composições descritas neste documento são usadas para anticorpos anti-idiotípicos, ou polipeptídeos substancialmente similares, incluindo sem limitação anticorpos anti-idiotípicos contra um anticorpo direcionado para o antígeno de tumor gp72; um anticorpo contra o gangliosídeo GD3; ou um anticorpo contra o gangliosídeo GD2.

Em outras modalidades, o polipeptídeo contendo domínio Fc usado nas composições descritas neste documento é produzido por células hospedeiras vivas que expressam o polipeptídeo, tal como hibridomas no caso de anticorpos, ou células hospedeiras que foram geneticamente enge- nheiradas para produzir o polipeptídeo no caso de polipeptídeos de fusão ou anticorpos. Métodos para engenheirar geneticamente células para produzir polipeptídeos são bem conhecidos na arte. Ver, por exemplo, Ausubel et al., eds. (1990), Current Protocols in Molecular Biology (Wiley, New York). Esses métodos incluem introduzir ácidos nucleicos que codificam e permitem expressão do polipeptídeo em células hospedeiras vivas. Estas células hospedeiras podem ser, sem limitação, células bacterianas, células fúngicas ou células animais crescidas em cultura. Células hospedeiras bacterianas incluem, sem limitação células de Escherichia coli. Exemplos de cepas de E. coli adequadas incluem, sem limitação: HB101, DH5α, GM2929, JM109, KW251, NM538, NM539 e qualquer cepa E. coli que deixe de clivar DNA estanho. Células hospedeiras fúngicas que podem ser usadas incluem sem limitação Saccharomyces cerevisiae, Pichia pastoris e Aspergillus cells. Alguns exem- plos de linhagens de células de animal que podem ser uadas são CHO, VERO, BHK, HeLa, Cos, MDCK, 293, 3T3 e W138. Novas linhagens de células de animal podem ser estabelecidas usando métodos bem conhecidos por aqueles versados na arte (por exemplo, por transformação, infecção viral e/ou seleção). Opcionalmente, o polipeptídeo pode ser secretado pelas células hospedeiras para o meio.

Em algumas modalidades, o polipeptídeo contendo domínio Fc expresso é purificado por qualquer método padrão. Quando o polipeptídeo contendo domínio Fc é produzido intracelularmente, os detritos particulados são removidos, por exemplo, por centrifugação ou ultrafiltração. Quando o polipeptídeo é secretado para o meio, sobrenadantes desses sistemas de expressão primeiramente podem ser concentrados usando filtros de concentração de polipeptídeo padrão. Inibidores de protease também podem ser adicionados para inibir proteólise e antibióticos podem ser incluídos para prevenir crescimento de micro-organismos.

Em algumas modalidades, o polipeptídeo contendo domínio Fc é purificado usando, por exemplo, cromatografia de hidroxiapatita, eletroforese em gel, diálise e cromatografia de afinidade e/ou qualquer combinação de técnicas de purificação conhecidas ou ainda a serem descobertas. Por exemplo, proteína A pode ser usada para purificar polipeptídeos contendo domínio Fc que são baseados em cadeias pesadas gama 1, gama 2 ou gama 4 humanas (Lindmark et al., 1983, J. Immunol. Meth. 62:1-13). Proteína G é recomendada para todos os isotipos de camundongo e para gama 3 humana (Guss et al., 1986, EMBO J. 5:1567-1575).

Outras técnicas para purificação de polipeptídeo, tal como fraci-onamento em uma coluna de troca iônica, precipitação de etanol, HPLC de fase reversa, cromatografia em sílica, cromatografia em heparina SEPHA- ROSET™, cromatografia em uma resina de troca aniôca ou catiônica (tal como uma coluna de ácido poliaspártico), cromatofocalização, SDS-PAGE e precipitação de sulfato de amônio, também podem ser utilizadas dependendo da necessidade. Outras técnicas/métodos de purificação de polipeptídeo podem ser usadas.

Em modalidades particulares, as composições descritas neste documento são preparadas combinando, além de um polipeptídeo purificado descrito acima, tampão, sal (por exemplo, NaCl), e um excipiente adicional (por exemplo, sacarose). Em algumas modalidades, as presentes composições compreendem menos de 1 mM de L-arginina, embora em outras modalidades, as composições descritas neste documento sejam livres ou substancialmente livres de arginina (por exemplo, L-arginina). Será entendido por aqueles versados na técnica que a combinação dos vários componentes a serem incluídos na composição pode ser feita em qualquer ordem apropriada, a saber, o tampão pode ser adicionado primeiro, no meio ou por último e o modificador de tonicidade também pode ser adicionado primeiro, no meio ou por último. Será entendido por aqueles versados na técnica que alguns destes produtos químicos podem ser incompatíveis em certas combinações e, por conseguinte, são facilmente substituíveis por produtos químicos diferentes que tenham propriedades similares, mas são compatíveis na mistura pertinente.

Inibidores de agregação reduzem a tendência de um polipeptí- deo a associar em complexos ternários ou quaternários inapropriados ou indesejados. De modo surpreendente, os presentes inventores concluíram que aumentando o sal e diminuindo a capacidade de tampão em uma composição compreendendo um polipeptídeo contendo Fc, não há necessidade de adição de aminoácidos livres (por exemplo, arginina, lisina, glicina). Os polipeptídeos dentro das composições livres de arginina permanecem ativos (eficazes) e podem ser armazenados por pelo menos 24 meses. Em certas modalidades, a concentração de sal é maior que 100 mM, embora em outras modalidades a concentração de sal seja de cerca de 140 mM, ou maior. Sais, usados neste documento, podem incluir sem limitação cloreto de sódio (NaCI), cloreto de potássio (KCl), citrato de sódio (Na3C6H5Or2H2O), sulfato de magnésio (MGSO4), cloreto de cálcio (CaCl), hipoclorito de sódio (Na- ClO), nitrato de sódio (NaNO3), sulfeto de mercúrio (HgS), cromato de sódio (Na2CrO4) e dióxido de magnésio (MgO2). O sal mantém tanto a isotonicida- de quanto a estabilidade térmica da composição, por exemplo, na ausência de arginina (por exemplo, L-arginina).

Agentes de tamponamento mantêm o pH em uma faixa desejada e vários tampões adequados para uso nas composições descritas neste documento incluem sem limitação histidina, fosfato de potássio, citrato de sódio ou potássio, ácido maleico, acetato de amônio, tris-(hidroximetil)- aminometano (tris), várias formas de acetato e dietanolamina. Em certas modalidades, o tampão é fosfato de sódio, pois sua capacidade tampona- mento está em ou perto de pH 6,2. Em algumas modalidades, a concentração do tampão nas composições é de cerca de 25 mM ou menos. Em algumas modalidades, a concentração do tampão é de 25 mM. Em modalidades particulares, a concentração do tampão é de cerca de 10 mM ou menos. Em algumas modalidades, a concentração do tampão é de 10 mM. Tampões são bem conhecidos na técnica e são fabricados por métodos conhecidos e disponíveis de fornecedores comerciais.

Quando o pH da composição é ajustado em ou perto de níveis fisiológicos, o conforto do indivíduo mediante administração é maximizado. Em certas modalidades, o pH é de cerca de 5,8 a 8,4. Em certas modalidades, o pH é de cerca de 6,2 a 7,4. É para ser entendido que o pH pode ser ajustado como necessário para maximizar estabilidade e solubilidade do po- lipeptídeo em uma composição particular e como tal um pH fora das faixas fisiológicas, embora tolerável para o indivíduo, está dentro do escopo da invenção.

Em certas modalidades, excipientes, também denominados como aditivos químicos, cossolutos ou cossolventes, que estabilizam o polipep- tídeo enquanto em solução (também em formas seca ou congelada) são adicionados a uma composição. Exemplos incluem, mas não estão limitados a açúcares/poliois, tal como: sacarose, lactose, glicerol, xilitol, sorbitol, mani- tol, maltose, inositol, trealose, glicose; polímeros, tal como: albumina de soro (albumina de soro bovino (BSA), SA humana or HA recombinante), dextrano, PVA, hidroxipropil metilcelulose (HPMC), polietilenoimina, gelatina, polivinil- pirrolidona (PVP), hidroxietilcelulose (HEC); solventes não aquosos, tal como: álcoois poli-hídricos (por exemplo, PEG, etileno glicol e glicerol), dime- tilsulfóxido (DMSO), dimetolformamida (DMF); aminoácidos, tal como: prolina, L-serina, ácido glutâmico sódico, alanina, glicina, cloridrato de lisina, sar- cosina e ácido gama-aminobutírico; surfactantes, tal como: TWEEN-80™ (polissorbato 80), TWEEN-20™ (polissorbato 20), SDS, polissorbato, copo- límero de polioxietileno; e excipientes diversos, tal como: fosfato de potássio, acetato de sódio, sulfato de amônio, sulfato de magnésio, sulfato de sódio, trimetilamina N-óxido, betaína, íons de metal (por exemplo, zinco, cobre, cálcio, manganês e magnésio), CHAPS, monolaurato, 2-O-beta-manoglicerato ou qualquer combinação dos acima.

Em certas modalidades, a concentração de um ou mais excipi- entes em uma composição descrita neste documento é de cerca de 0,001 a 5 por cento em peso, enquanto em outras modalidades a concentração de um ou mais excipientes é de cerca de 0,1 a 2 por cento em peso. Excipien- tes são bem conhecidos na técnica e são fabricados por métodos conhecidos e disponíveis de fornecedores comerciais. Em algumas modalidades, o excipiente é sacarose. Em outras modalidades, a sacarose está presente na composição em uma concentração de cerca de 1 por cento.

Em uma modalidade particular, uma composição descrita neste documento compreende (ou consiste em, ou consiste essencialmente em) cerca 25 a cerca de 50 mg de TNFR:Fc (por exemplo, etanercepte), cerca de 10 mM a cerca de 50 mM de fosfato de sódio (por exemplo, monobásico e/ou dibásico) cerca de 0,75% a cerca 1,25% de sacarose, cerca de 50 mM a cerca de 150 mM de NaCl a cerca de pH 6,0 a cerca de pH 7,0.

Em outra modalidade, a composição descrita neste documento compreende (ou consiste em, ou consiste essencialmente em) cerca de 50 mg/ml de TNFR:Fc , cerca de 10 mM de fosfato de sódio, cerca de 140 mM de cloreto de sódio e cerca de 1% de sacarose a cerca de pH 6,2.

Em certas modalidades, são fornecidos neste documento métodos para tratar um indivíduo compreendendo administrar ao indivíduo uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição descrita neste documento, em que o indivíduo tem uma doença ou um distúrbio que pode ser beneficamente tratado com um polipeptídeo contendo domínio Fc na composição.

Em algumas modalidades, o polipeptídeo contendo domínio Fc é derivado da mesma espécie de indivíduo que será tratado com a composição. Em modalidades particulares, o indivíduo é um humano necessitando de tratamento. Quando o polipeptídeo contendo domínio Fc da composição é TNFR:Fc, exemplos de doenças ou distúrbios que podem ser tratados incluem, mas não são limtados a, artrite reumatoide, artrite psoriática, espondilite anquilosante, doença de Wegener (granulomatose), doença de Crohn (ou doença intestinal inflamatória), doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD), Hepatite C, endometriose, asma, caquexia, psoríase e dermatite atópica. Doenças e distúrbios adicionais que podem ser tratados com TNFR:Fc incluem aqueles descritos em WO 00/62790, WO 01/62272 e Pedido de Patente US 2001/0021380.

Em outros aspectos, são fornecidas neste documento composições de polipeptídeo tendo armazenamento de longo prazo aperfeiçoado de modo que o ingrediente ativo, por exemplo, um polipeptídeo contendo domínio Fc, seja estável ao longo do curso de armazenamento em estados líquidos (ou congelados). Como utilizada neste documento, a frase "longo prazo" é entendida como significando que a composição pode ser armazenada por três meses ou mais, por seis meses ou mais ou por um ano, ou dois anos, ou mais. Armazenamento de longo prazo também é entendido como significando que a composição é armazenada ou como um líquido a 2-8°C ou é congelada, por exemplo, a -20°C ou mais frio. Em ce rtas modalidades, a composição pode ser congelada e descongelada mais de uma vez. O termo "estável" com respeito a armazenamento de longo prazo é entendido como significando que o polipeptídeo ativo da composição farmacêutica não perde mais de 20%, ou 15% ou mesmo 10% de sua atividade. Em modalidades particulares, o polipeptídeo ativo da composição não perde mais de 5% de sua atividade em relação à atividade da composição no início do armazenamento. Estabilidade de uma composição pode ser avaliada com base em potência, aparência, concentração, pH e oxidação, e pode ser avalaida usando, por exemplo, cromatografia de interação hidrofóbica (HIC), eletroforese capilar- sódio dodecil sulfato (CE-SDS), contadores de partícula líquida de alta precisão (HIAC) e/ou focalização isoelétrica. Outros ensaios de esta-bilidade de proteína são conhecidos na técnica e podem ser usados neste documento.

A dosagem apropriada, ou a quantidade terapeuticamente eficaz, do polipeptídeo contendo domínio Fc das composições dependerá da condição a ser tratada, da severidade da condição, de terapia anterior e do histórico clínico do indivíduo e da resposta ao agente terapêutico. A dose adequada pode ser ajustada de acordo com o julgamento do médico aten- dente, de modo que ela possa ser administrada ao indivíduo uma vez ou por uma série de administrações. A composição pode ser administrada como um único terapêutico ou em combinação com terapias adicionais, conforme necessário.

Em certas modalidades, a quantidade eficaz de polipeptídeo contendo domínio Fc por dose de adulto varia de cerca de 1 a 500 mg/m2 , ou de cerca de 1 a 200 mg/m2 , ou de cerca de 1 a 40 mg/m2 ou cerca de 5 a 25 mg/m2. Alternativamente, uma dose uniforme pode ser administrada, cuja quantidade pode variar de 2 a 500 mg/dose, 2 a 100 mg/dose ou de cerca de 10 a 80 mg/dose. Se a dose for administrada mais de uma vez por semana, uma faixa de dose exemplar é a mesma que as faixas de dose descritas anteriormente ou mais baixa e, de preferência, administrada duas ou mais vezes por semana em uma faixa por dose de 25 a 100 mg/dose. Em outras modalidades, uma dose aceitável para administração por injeção contém de 80 a 100 mg/dose ou, alternativamente, contém 80 mg/dose. A dose pode ser administrada em doses a cada duas semanas, a cada semana ou separadas por várias semanas (por exemplo, 2 a 8). Em uma modalidade particular, TNFR:Fc (etanercepte) é administrado a 25 mg por uma única injeção subcutânea (SC). Outras rotas de administração são contempladas.

Em muitos casos, uma melhoria na condição de um indivíduo será obtida por uma dose de até cerca de 100 mg da composição uma a três vezes por semana durante um período de pelo menos três semanas, embora tratamento por períodos mais longos possa ser necessário para induzir o grau desejado de melhoria. Para condições crônicas incuráveis, o regime pode ser continuado indefinidamente. Para indivíduos pediátricos (idades de 4 a 17), um regime adequado envolve uma dose de 0,4 mg/kg a 5 mg/kg dos polipeptídeos da invenção, administrada uma ou mais vezes por semana.

Em outras modalidades, as composições descritas neste documento são preparadas em uma formulação bruta e como tal os componentes da composição são ajustados de modo que sejam mais altos do que seria requerido para administração e diluídos apropriadamente antes da administração.

Em certas modalidades, as composições descritas neste documento são administradas parenteralmente, por exemplo, subcutaneamente, intramuscularmente, intravenosamente, intraperitoneal, intracerebrospinal, intra-articular, intrasinovial e/ou intratecal. Administração parenteral pode ser por injeção de bolo ou infusão contínua. Composições para injeção podem ser apresentadas em forma de dosagem unitária, por exemplo, em ampolas ou em recipientes de doses múltiplas, com um preservativo adicionado. Além disso, inúmeros enfoques de distribuição de droga recentes foram desenvolvidos e as composições da presente invenção são adequadas para administração usando estes novos métodos, por exemplo,, Inject-ease™, GEN- JECT™, canetas injetoras, tal como GENPEN™, e dispositivos sem agulha, tal como MEDIJECTOR™ e BIOJECTOR™. A presente composição também pode ser adaptadad para métodos de administração ainda a serem descobertos. Ver também Langer, 1990, Science, 249:1527-1533.

Em algumas modalidades, as composições descritas neste documento são formuladas como uma preparação de depósito. Essas composições de longa ação podem ser administradas por implante (por exemplo, subcutaneamente ou intramuscularmente) ou por injeção intramuscular. Assim, por exemplo, as composições podem ser modificadas com materiais poliméricos ou hidrofóbicos adequados (por exemplo, como uma emulsão em um óleo aceitável) ou resinas de troca iônica ou como derivados esparsamente solúveis, por exemplo, como um sal esparsamente solúvel.

Em outras modalidades, as composições descritas neste documento são apresentadas em um frasco, embalagem ou dispositivo dispen- sador o qual pode conter uma ou mais formas de dosagem contendo o ingrediente ativo. Em algumas modalidades, o dispositivo dispensador compreende uma seringa tendo uma única dose da composição líquida pronta para injeção. A seringa pode ser acompanhada por instruções para adminis- tração.

Em outros aspectos, são fornecidos neste documento kits ou re-cipientes os quais contêm uma composição aquosa da invenção. A concen-tração do polipeptídeo na composição aquosa pode variar através de uma ampla faixa. Em certas modalidades, ela varia de cerca de 0,05 a cerca de 10 20.000 microgramas por mililitro (μg/ml) de composição aquosa. O kit também pode ser acompanhado por instruções para uso.

As composições ainda são descritas abaixo a título de exemplos não limitantes.

EXEMPLOS:

Exemplo 1: Uma modalidade de uma composição de polipeptí- deo estável: Tabela 1: Composição de etanercepte.

Exemplo 2: Dados de estabilidade para a composição de poli-peptídeo a -70°C: Tabela 2: Dados de estabilidade para etanercepte a -70°C.

Exemplo 3: Dados de estabilidade para a composição de poli- peptídeo a 5 ± 3°C: Tabela 3: Dados de Estabilidade para Etanercepte a 5 ± 3°C.

EQUIVALENTES E ESCOPO

Aqueles versados na técnica reconhecerão ou serão capazes de confirmar, usando não mais do que experimentação de rotina, muitos equi-valentes às modalidades específicas descritas neste documento. O escopo da presente invenção não se destina a ser limitado pela Descrição acima, mas ao invés disso é como estabelecido nas reivindicações em anexo.

Nas reivindicações, artigos como "um," "uma" e "o/a" podem sig-nificar um ou mais de um, a menos que indicado em contrário ou de outra forma evidente do contexto. Reivindicações ou descrições que incluem "ou" entre um ou mais membros de um grupo são consideradas satisfeitas se um, mais de um ou todos os membros do grupo estão presentes em, são empre-gados em ou de outra forma relevantes para um dado produto ou processo, a menos que indicado em contrário ou de outra forma evidente do contexto. A invenção inclui modalidades nas quais exatamente um membro do grupo está presente em, é empregado em ou de outra forma relevante para um dado produto ou processo. A invenção inclui modalidades nas quais mais de um ou todos os membros do grupo estão presentes em, são empregados em ou de outra forma relevantes para um dado produto ou processo. Além disso, é para ser entendido que a invenção engloba todas as variações, combinações e permutações nas quais uma ou mais limitações, elementos, frases, termos descritivos, etc., de uma ou mais das reivindicações listadas, são introduzidas em outra reivindicação. Por exemplo, qualquer reivindicação que seja dependente de outra reivindicação pode ser modificada para incluir uma ou mais limitações encontradas em qualquer outra reivindicação que seja dependente da mesma reivindicação de base.

Quando elementos são apresentados como listas, por exemplo, em formato de grupo Markush, é para ser entendido que cada subgrupo dos elementos também é divulgado e qualquer(quaisquer) elemento(s) pode(m) ser removido(s) do grupo. Deve ser entendido que, em geral, quando a in-venção ou aspectos da invenção é/são citados como compreendendo ele-mentos, aspectos particulares, etc., certas modalidades da invenção ou as-pectos da invenção consistem, ou consistem essencialmente, nesses ele- mentos, aspectos, etc. Para fins de simplicidade essas modalidades não fo-ram especificamente estabelecidas in haec verba neste documento. Tam-bém é observado que o termo "compreendendo" se destina a ser aberto e permite a inclusão de elementos ou etapas adicionais.

Quando forem dadas faixas, os pontos extremos estão incluídos. Além disso, será entendido que a menos que de outra forma indicado, ou a menos que evidente do contexto e da compreensão de alguém versado na técnica, valores que são expressos como faixas podem assumir qualquer valor específico ou subfaixa dentro das faixas declaradas em modalidades diferentes da invenção, até o décimo da unidade do limite inferior da faixa, a menos que o contexto claramente determine de outra forma.

O termo "cerca de" ou "aproximadamente" pode significar dentro de uma faixa de erro aceitável para o valor particular, conforme determinado por alguém versado na técnica, a qual dependerá em parte de como o valor é medido ou determinado, por exemplo, das limitações do sistema de medi-ção. Por exemplo, "cerca de" pode significar dentro de 1 ou mais de 1 desvio padrão, pela prática na técnica. Alternativamente, "cerca de" pode significar uma faixa de até 20%, até 10%, até 5% ou até 1% de um dado valor. Alter-nativamente, o termo pode significar dentro de uma ordem de grandeza, por exemplo, dentro de 5 vezes ou dentro de 2 vezes, de um valor. Quando valo-res particulares são descritos no pedido e nas reivindicações, a menos que de outro modo afirmado, o termo "cerca de" significa que dentro de uma fai-xa de erro aceitável para o valor particular deve ser assumida.

Além disso, é para ser entendido que qualquer modalidade parti-cular da presente invenção que caia dentro do estado da técnica pode ser explicitamente excluída de qualquer uma ou mais das reivindicações. Uma vez que essas modalidades são consideradas conhecidas de alguém versa-do na técnica, elas podem ser excluídas mesmo se a exclusão não estiver explicitamente estabelecida neste documento. Qualquer modalidade particu-lar dos métodos da invenção pode ser excluída de qualquer uma das reivin-dicações, por qualquer razão, seja ou não relacionada à existência de técni-ca anterior.

Claims (42)

1. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende: um polipeptídeo isolado que é uma porção extracelular de ligação ao ligante de um receptor do fator de necrose tumoral p75 humano fundido à região Fc de um IgG1 humano a uma concentração de cerca de 10 mg/mL a cerca de 100 mg/mL; um poliol ou açúcar; tampão aquoso a uma concentração de cerca de 1 mM a cerca de 15 mM, em que o tampão aquoso é fosfato de sódio, fosfato de potássio, citrato de sódio ou potássio, ácido maleico, acetato de amônio, tris- (hidroximetil)-aminometano (tris), acetato, dietanolamina, ou uma combinação dos mesmos; e sal a uma concentração superior a 100 mM, em que a composição não contém aminoácidos livres e em que a composição é adequada para injeção.

2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o polipeptídeo isolado está presente em uma concentração de cerca de 50 mg/mL.

3. Composição, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que o polipeptídeo isolado é etanercept.

4. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que o tampão aquoso é fosfato de sódio.

5. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que o tampão aquoso está presente em uma concentração de cerca de 10 mM.

6. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que o sal é cloreto de sódio.

7. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que o sal está presente em uma concentração de cerca de 120 mM a cerca de 150 mM.

8. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que o poliol ou açúcar é sacarose, lactose, xilitol, sorbitol, manitol, maltose, inositol, trealose, glicose, monolaurato de sacarose, 2-O-beta-manoglicerato, ou uma combinação dos mesmos.

9. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de que o poliol ou açúcar é sacarose.

10. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizada pelo fato de que o poliol ou açúcar é sacarose a uma concentração de cerca de 0,5% em peso a cerca de 1,5% em peso.

11. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que o pH da composição é de cerca de 5,5 a cerca de 7,8.

12. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende 50 mg/mL de etanercept, cerca de 10 mM de fosfato de sódio, cerca de 140 mM de cloreto de sódio e cerca de 1% de sacarose em peso, em que o pH da composição é de cerca de pH 6,0 a cerca de pH 7,0.

13. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada pelo fato de que a composição é adequada para administração subcutânea.

14. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizada pelo fato de que o polipeptídeo isolado é purificado.

15. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada pelo fato de que a composição é esterilizada.

16. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada pelo fato de que é para uso no tratamento de um distúrbio ou condição inflamatória.

17. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada pelo fato de que é para uso no tratamento de artrite reumatóide.

18. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada pelo fato de que é para uso no tratamento de espondilite anquilosante.

19. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende: um polipeptídeo isolado que é uma porção extracelular de ligação ao ligante de um ser humano de um receptor do fator de necrose tumoral p75 fundido à região Fc de uma IgG1 humana a uma concentração de cerca de 10 mg/mL a cerca de 100 mg/mL; tampão aquoso a uma concentração de cerca de 10 mM, em que o tampão aquoso é fosfato de sódio, fosfato de potássio, citrato de sódio ou potássio, ácido maleico, acetato de amônio, tris-(hidroximetil)- aminometano (tris), acetato, dietanolamina ou uma combinação do mesmo; sal a uma concentração de cerca de 140 mM; e sacarose, em que a composição não contém aminoácidos livres e em que a composição é adequada para injeção.

20. Composição, de acordo com a reivindicação 19, caracterizada pelo fato de que o polipeptídeo isolado está presente em uma concentração de 50 mg/mL.

21. Composição, de acordo com a reivindicação 19 ou 20, caracterizada pelo fato de que o polipeptídeo é etanercept.

22. Composição para administração a um indivíduo, caracterizada pelo fato de que compreende: um polipeptídeo isolado que é uma porção extracelular de ligação ao ligante de um receptor do fator de necrose tumoral p75 humano fundido à região Fc de uma IgG1 humana a uma concentração de cerca de 10 mg/mL a cerca de 100 mg/mL; um poliol ou açúcar; tampão aquoso a uma concentração de cerca de 1 mM a cerca de 15 mM, em que o tampão aquoso é fosfato de sódio, fosfato de potássio, citrato de sódio ou potássio, ácido maleico, acetato de amônio, tris- (hidroximetil)-aminometano (tris), acetato, dietanolamina , ou uma combinação dos mesmos; e sal a uma concentração superior a 100 mM, em que a composição não contém aminoácidos livres e em que a composição é adequada para injeção.

23. Composição, de acordo com a reivindicação 22, caracterizada pelo fato de que o polipeptídeo isolado está presente em uma concentração de cerca de 50 mg/mL.

24. Composição, de acordo com a reivindicação 22 ou 23, caracterizada pelo fato de que o polipeptídeo é etanercept.

25. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22 a 24, caracterizada pelo fato de que o tampão aquoso está presente em uma concentração de cerca de 10 mM.

26. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22 a 25, caracterizada pelo fato de que o sal é cloreto de sódio.

27. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22 a 26, caracterizada pelo fato de que o sal está presente em uma concentração de cerca de 120 mM a cerca de 150 mM.

28. Composição, de acordo com a reivindicação 22, caracterizada pelo fato de que o poliol ou açúcar é sacarose, lactose, xilitol, sorbitol, manitol, maltose, inositol, trealose, glicose, monolaurato de sacarose, 2-O-beta-manoglicerato ou uma combinação dos mesmos.

29. Composição, de acordo com a reivindicação 28, caracterizada pelo fato de que o poliol ou açúcar é sacarose.

30. Composição, de acordo com a reivindicação 29, caracterizada pelo fato de que o poliol ou açúcar é sacarose a uma concentração de cerca de 0,5% em peso a cerca de 1,5% em peso.

31. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22 a 30, caracterizada pelo fato de que o pH da composição é de cerca de 5,5 a cerca de 7,8.

32. Composição, de acordo com a reivindicação 22, caracterizada pelo fato de que a composição compreende 50 mg/mL de etanercept, cerca de 10 mM de fosfato de sódio, cerca de 140 mM de cloreto de sódio e cerca de 1% de sacarose em peso, em que o pH da composição é de cerca de pH 6,0 a cerca de pH 7,0.

33. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22 a 32, caracterizada pelo fato de que a composição é adequada para administração subcutânea.

34. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22 a 33, caracterizada pelo fato de que o polipeptídeo isolado é purificado.

35. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22 a 34, caracterizada pelo fato de que a composição é esterilizada.

36. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 22 a 35, caracterizada pelo fato de que o indivíduo é diagnosticado com uma doença ou distúrbio selecionado de artrite reumatóide, artrite psoriática, espondilite anquilosante, doença de Wegener (granulomatose), doença de Crohn (ou doença inflamatória do intestino), doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), hepatite C, endometriose, asma, caquexia, psoríase ou dermatite atópica.

37. Composição, de acordo com a reivindicação 36, caracterizada pelo fato de que a composição é para administração ao indivíduo em uma quantidade suficiente para tratar a doença ou distúrbio.

38. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 37, caracterizada pelo fato de que a composição está contida em uma seringa.

39. Composição, de acordo com a reivindicação 38, caracterizada pelo fato de que a seringa está contida em um kit.

40. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 37, caracterizada pelo fato de que a composição está contida em um frasco.

41. Composição, de acordo com a reivindicação 40, caracterizada pelo fato de que o frasco está contido em um kit, em que o kit contém ainda uma seringa.

42. Uso de um polipeptídeo isolado, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 35, caracterizado pelo fato de ser para preparação de uma composição para tratar uma doença ou distúrbio.