BR112012003643B1

BR112012003643B1 - composição alimentícia antibacteriana, usos de uma composição e kit

Info

Publication number: BR112012003643B1
Application number: BR112012003643-2A
Authority: BR
Inventors: Loïc Renard
Original assignee: Nutrivercell
Priority date: 2009-08-21
Filing date: 2010-04-01
Publication date: 2021-01-05
Also published as: US20120214781A1; EP2467151B1; EP2467151A1; PL2467151T3; DK2467151T3; BR112012003643A2; US9636365B2; ES2603745T3; CA2771325A1; FR2949197B1; FR2949197A1; BR112012003643B8; CA2771325C; WO2011020957A1

Abstract

COMPOSIÇÃO ALIMENTÍCIA ANTIBACTERIANA, COMPLEMENTO ALIMENTAR, MEDICAMENTO, USO DE UMA COMPOSIÇÃO, MÉTODO DE TRATAMENTO, KIT E COMPOSIÇÃO A presente invenção trata de uma composição alimentícia antibacteriana que compreende um extrato de Propolis e um extrato de oxicoco (cranberry) Vaccinium macrocarpon.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção trata de uma composição alimentícia antibacteriana que compreende um extrato de Propolis e um extrato de Vaccinium macrocarpon. A presente invenção trata mais particularmente de uma composição alimentícia antibacteriana destinada ao tratamento das infecções bacterianas agudas ou crônicas. A presente invenção trata também da associação de um extrato de Propolis ou de uma composição que compreende um extrato de Propolis e um extrato de Vaccinium macrocarpon, com certas classes de antibióticos.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] As infecções urinárias são extremamente frequentes. Elas ocupam, após as infecções respiratórias, o segundo lugar entre os motivos de consulta e de prescrição de antibióticos. Elas são facilmente recidivantes em particular na mulher e nos portadores de bexiga neurogênica. O agente microbiano responsável por mais de 90% dessas infecções urinárias é Escherichia coli, bactéria comensal do tubo digestivo que pode se tornar patogênica por aquisição de ilhotas de patogenicidade.

[003] Seu tratamento pela terapêutica clássica, e em particular pelo uso de antibióticos, generalizou-se, mas se mostra, porém, cada vez menos satisfatória, devido à resistência crescente das bactérias a esses agentes antibióticos.

[004] Para resolver esse problema, uma das soluções consiste em diminuir a população bacteriana por mecanismos muito diferentes dos mecanismos dos antibióticos e que agem, portanto, de modo independente da resistência e da virulência das bactérias.

[005] O Vaccinium macrocarpon é uma planta frutífera que corresponde ao oxicoco (cranberry) ou arando vermelho. O extrato de oxicoco Vaccinium macrocarponé conhecido por suas propriedades de antiadesão bacteriana que foi utilizado no tratamento de várias infecções urinárias para combater o desenvolvimento das bactérias. O consumo de suco de oxicoco Vaccinium macrocarpon teria a capacidade de prevenir as infecções urinárias (JP Lavigne, Clin. Microbiol. Infect. 2007, p1-5). A empresa Tournay comercializa extratos com a denominação Exocyan®, caracterizados por seu teor de proantocianidinas (PAC), padronizado para valores de 10 a 50% de acordo com o método de medida Vanilina.

[006] O pedido de patente EP 1 902 721 descreve a associação de um extrato de Vaccinium macrocarpon e de um agente antibacteriano urinário contra as bactérias Gram+ e Gram- em uma composição destinada a combater as infecções urinárias e ser seletiva para não fazer desaparecer a flora bacteriana normalmente presente na uretra.

[007] As propriedades ao mesmo tempo bacteriostáticas e bactericidas da Propolis sobre diversas cepas microbianas, e em particular sobre Escherichia colisão também conhecidas.

[008] Três complementos nutricionais destinados ao tratamento das infecções urinárias são comercializados com os nomes Urimel pela Famille Mary, "Biophyto.com infection Urinaire gènes urinaires fréquentes récidivantes" pela Biophyto.com e Uriprop pela empresa Laboratoire Lax e compreendem um extrato de oxicoco associado a um extrato de Propolis, sem mais precisão.

[009] O clínico carece atualmente de informações, no entanto essenciais, de um lado, sobre a proveniência dos extratos e seu tratamento ou transformação, que condicionam em grande parte a atividade do complemento alimentar, e de outro lado, sobre os teores nos princípios ativos essenciais de cada um desses extratos. O clínico carece finalmente também de informações sobre as consequências da associação desses extratos. Essa falta de informações de fato limita o uso que pode ser feito desses extratos, limitando consequentemente esse uso a produtos pouco caracterizados que não atendem à regulamentação dos complementos alimentares em vigor.

[010] A presente invenção tem, ao contrário, por objetivo propor complementos alimentares caracterizados e reprodutíveis, que permitam um uso na prática cotidiana, e em particular que dêem ao clínico, ao médico, a possibilidade de prescrever um tratamento do tipo complemento alimentar, sozinho ou em associação com um tratamento terapêutico clássico a fim de aumentar sua eficácia ou de recuperar sua eficácia original.

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO

[011] Assim, um primeiro objetivo da presente invenção consiste em propor uma composição que não possua os inconvenientes conhecidos do estado da técnica mencionados acima.

[012] Outro objetivo da presente invenção é propor uma composição antibacteriana cuja eficácia sobre o tratamento e/ou a prevenção das infecções bacterianas agudas ou crônicas, e em particular sobre o tratamento das infecções urinárias, seja melhorada.

[013] Outro objetivo da presente invenção é propor uma composição que permita corrigir um eventual déficit de zinco e de ferro que pode se apresentar respectivamente no homem e na mulher.

[014] Outro objetivo da presente invenção é propor uma composição que permita melhorar a biodisponibilidade da vitamina C em doses nutricionais evitando assim um superconsumo de vitamina C.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[015] A presente invenção tem como objeto uma composição alimentícia antibacteriana que compreende um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon e um extrato de Propolis em que: - o extrato de Propolis compreende ácido cafeico, ácido ferúlico, galangina e pinocembrina, - o extrato de oxicoco Vaccinium macrocarponcontém uma proporção em peso de proantocianidinas (PAC) superior ou igual a 10%, de preferência superior a 10%, vantajosamente compreendida entre 20 e 50%, em que a referida proporção é medida pelo método de dosagem pela Vanilina, e a composição possui uma razão em peso extrato de Propolis:extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon compreendida entre 1:2 e 2:1.

[016] A Propolis designa toda uma série de substâncias resinosas, gomosas e balsâmicas, de consistência viscosa, recolhidas em certas partes, em particular os brotos e as cascas, de vegetais pelas abelhas que as levam para a colmeia e as modificam em parte com a adição de suas próprias secreções salivares e de cera. Esses vegetais são principalmente árvores tais como pinheiros, abetos, epicéas, choupos, amieiros, chorões, castanheiras-da índia, bétulas, ameixeiras, freixos, carvalhos ou ainda olmos.

[017] Por extrato de Propolis, entende-se uma forma de Propolis que pode ser utilizada. Ela pode, portanto, ser não transformada ou tratada, ou então transformada em presença em particular de um excipiente apropriado, por exemplo, caroba, amido ou derivado de amido, por exemplo, maltodextrina. A Propolis pode em particular apresentar-se na forma de um pó. Para isso, a Propolis pode ser misturada a uma solução hidroalcoólica à qual é adicionado um excipiente, tal como a maltodextrina ou o pó de caroba, como suporte. A mistura assim obtida é evaporada e depois secada. Um extrato de Propolis que compreende 18% de Propolis e 82% de pó de caroba é também comercializado com o nome Propolis PPM 18 pela LUSTREL. Outro exemplo de extrato de Propolis que compreende 60% de Propolis e 40% de caroba é comercializado pela empresa CLAUDINE VALLEE.

[018] Em um modo de realização preferido, o teor em peso de extrato de Propolis na composição de acordo com a presente invenção está compreendido entre 10 e 80%, de preferência entre 30 e 70%.

[019] O extrato de oxicoco Vaccinium macrocarponé de preferência obtido por um processo de concentração do conjunto das frações polifenólicas do suco de oxicoco Vaccinium macrocarpon.

[020] O suco de oxicoco Vaccinium macrocarponé tirado de uma fruta cultivada essencialmente no norte dos Estados Unidos, bem como no Canadá. Esse suco de cor vermelho escuro e de sabor adstringente é rico em polifenóis e em particular em proantocianidinas em forma livre glicosilada (galactosídea, ramnosídea, glicosídea) ou esterificada (galato) como, por exemplo, a prodelfinidina, a propetunidina, a promalvidina ou a procianidina. Esses compostos existem em geral em forma polimerizada (dímeros com hexâmeros) e possuem um encadeamento de tipo A ou de tipo B de acordo com os dois esquemas a seguir, que correspondem às estruturas de um dímero de tipo B e de um dímero de tipo A:

a) dímero de tipo B b) dímero de tipo A

[021] O processo de concentração e de isolamento das frações polifenólicas do suco de oxicoco Vaccinium macrocarpon consiste em particular em eliminar as substâncias inertes tais como fibras, açúcares e acides de fruta do suco de oxicoco Vaccinium macrocarpon por cromatografia com resina trocadora de íons. Esse processo fixa os polifenóis e deixa assim não adsorvidas todas as substâncias inertes presentes no suco.

[022] A resina trocadora de íons consiste de preferência em uma resina polimérica não iônica, tal como a resina comercializada com a denominação Amberlite® XAD 16 HP pela ROHM & HAAS. Essa resina é constituída de um copolímero estireno/divinlbenzeno reticulado alifático e se apresenta em forma de esferas brancas translúcidas que retêm umidade (62-70 %). Ela possui uma superfície específica de 800 m2/g e uma porosidade de > 0,55 ml/ml. Esse tipo de resina é neutro e é apropriado para qualquer zona de pH. O tamanho dos poros em volume é de aproximadamente 1,082 ml/g e a o tamanho médio dos poros é de aproximadamente 100 A.

[023] Outras resinas tais como as resinas Amberlite XAD 4, Amberlite XAD 16 ou Amberlite XAD 2 comercializadas pela ROHM & HAAS também podem ser utilizadas.

[024] Procede-se a seguir a uma eluição dos polifenóis. O etanol permite eluir progressivamente os polifenóis sem alterá-los e a coleta do eluente é realizada até o desaparecimento da cor violeta no eluato. É realizada de preferência uma dosagem dos polifenóis no eluato para certificar-se de que a totalidade dos polifenóis foi realmente eluída.

[025] De acordo com uma modalidade particular do processo, o enxague da coluna é efetuado com água para eliminar os compostos não retidos pela resina. O enxague da coluna é interrompido quando a taxa de matéria seca no eluato for inferior a 1 %.

[026] O eluato pode ser submetido uma liofilização ou uma atomização permitindo assim obter um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon em forma de um pó.

[027] A proporção de proantocianidinas (PAC) do extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon é medida pelo método de dosagem pela Vanilina.

[028] O princípio dessa dosagem se baseia na fixação do aldeído da vanilina no carbono 6 do ciclo A da catequina para formar um complexo cromóforo vermelho que absorve a 500 nm. A vanilina reage com os monômeros catéquicos e as unidades terminais das PAC ao passo que ela não reage com as unidades intermediárias das PAC uma vez que seu carbono 6, sítio de fixação da vanilina, fica retido na ligação monômero-monômero (C4-C6).

[029] São pesados x mg de extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon (aproximadamente 20 mg para um pó ou 50 mg para um líquido) que é diluído em 100 ml de água a pH 2 (sendo que o pH é ajustado com ácido clorídrico (HCI) a 37% utilizando um pHmetro). 1 ml de solução de extrato de oxicoco Vaccinium macrocarponé introduzido em um tubo de ensaio de 15 ml com tampa de rosquear. A esse volume são adicionados sucessivamente entre 3 e 12 ml de reagente vanílico que compreende 4 % de vanilina em metanol e entre 3 e 12 ml de ácido clorídrico concentrado a 37% (HCI) (BURNS 1971 ). A solução obtida é agitada durante 20 min a 30<C em um banho-maria. Após 20 min, mede-se a absorvência A a 500 nm da solução, utilizando como líquido de compensação uma solução idêntica à solução cuja absorvência A foi medida e na qual o reagente vanílico é substituído por metanol puro. É preparada uma série padrão utilizando a catequina. Para isso, são preparadas 3 soluções de catequina pesando respectivamente 5 mg, 10 mg e 15 mg que são introduzidos em um balão graduado de 100 ml de metanol, sendo que cada uma dessas 3 soluções é estável durante um dia. A dosagem do padrão é efetuada em 1 ml de cada uma das soluções da série padrão procedendo da mesma maneira que para a amostra. O teor em proantocianidinas totais expresso em equivalente catequina para 100 g de pó de extrato de oxicoco Vaccinium macrocarponé calculado pela seguinte fórmula: [proantocianidinas]% = (100x [eq.catequina])/(x/0,1) em que: - [proantocianidinas] teor de proantocianidinas, - [eq.catequina] obtida pela determinação da equação da curva de absorção a 500 nm da solução que compreende o extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon por regressão linear, - x: massa de extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon

[030] Um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon que compreende 20% de PAC é também comercializado com o nome Exocyan CRAN 20S pela Tournay Biotechnologies.

[031] Em um modo de realização particular, o teor em peso de extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon na composição de acordo com a presente invenção está compreendido entre 10 e 80%, de preferência entre 25 e 70%.

[032] Em outro modo de realização, a composição de acordo com a presente invenção compreende igualmente um composto escolhido no grupo constituído pelos ativos farmacêuticos, os ingredientes alimentícios e os nutrientes.

[033] Em um modo de realização preferido, o ingrediente alimentício é escolhido no grupo constituído pelo zinco e seus derivados.

[034] Em um modo de realização preferido, os derivados do zinco são escolhidos entre os sais de zinco, tais como o citrato de zinco, o óxido de zinco, o sulfato de zinco, o acetato de zinco ou o gluconato de zinco.

[035] Em um modo de realização preferido, o teor em peso de zinco ou de um de seus derivados na composição de acordo com a presente invenção está compreendido entre 0,01 e 2%, de preferência entre 0,1 e 1,5%.

[036] Em outro modo de realização preferido, o ingrediente alimentício é escolhido no grupo constituído pelo ferro e seus derivados.

[037] Em um modo de realização preferido, os derivados do ferro são escolhidos entre os sais de ferro, tais como o sulfato de ferro, o lactato de ferro, o gluconato de ferro, o cloreto de ferro ou o fumarato de ferro.

[038] Em um modo de realização preferido, o teor em peso de ferro ou de um de seus derivados na composição de acordo com a presente invenção está compreendido entre 0,05 e 3%, de preferência entre 0,5 e 2,5%.

[039] Em outro modo de realização, o ingrediente alimentício é escolhido no grupo constituído pelo ácido ascórbico comumente denominado vitamina C e seus derivados.

[040] Em um modo de realização preferido, os derivados de vitamina C são escolhidos entre os sais de ácido ascórbico, tais como o ascorbato de cálcio, o ascorbato de magnésio, o ascorbato de potássio ou o ascorbato de sódio.

[041] Em um modo de realização preferido, o sal de ácido ascórbico é o ascorbato de cálcio.

[042] Em um modo de realização preferido, o teor em peso de vitamina C ou de um de seus derivados na composição de acordo com a presente invenção está compreendido entre 1 e 10%, de preferência entre 2 e 8%.

[043] Os teores em peso na composição de acordo com a presente invenção de zinco e seus derivados, de ferro e seus derivados bem como de vitamina C e seus derivados respeitam os aportes diários recomendados para cada um deles. A composição de acordo com a presente invenção caracterizada por esses teores em peso pode representar assim entre 50 e 85% dos aportes diários recomendados de zinco, ferro ou vitamina C.

[044] A composição de acordo com a presente invenção pode compreender ainda um excipiente ou um vetor inerte, não tóxico. Podem ser citados como excipiente inerte os açúcares como a lactose ou a frutose, a celulose, o carbonato de cálcio, o fosfato tricálcico, o fosfato de magnésio, o estearato de cálcio, o estearato de magnésio, o talco ou a sílica coloidal (Aerosil (R) 100 ou Aerosil (R) 200 comercializado pela Degussa). Como vetores, podem ser citados ainda compostos que favorecem a excreção urinária como, por exemplo, o extrato de fumária ou o extrato de Orthosiphon.

[045] A composição de acordo com a presente invenção pode igualmente compreender um composto escolhido no grupo constituído pelos polióis como a glicerina ou o sorbitol, os corantes, os edulcorantes como a sucralose ou os ativos aromáticos como os aromas de fruta.

[046] A composição de acordo com a presente invenção apresenta-se em forma sólida ou líquida.

[047] Em um modo de realização particular, a composição de acordo com a presente invenção apresenta-se em forma de pó, de cápsulas, de cápsulas, de gomas de mascar, de granulados, de grânulos, de comprimidos, de pílulas, de pastilhas, de comprimidos ou de tabletes. A realização galênica é efetuada em condições de temperaturas e de pressão que respeitam a integridade dos ingredientes utilizados e a bioatividade dos ingredientes ativos.

[048] As composições de acordo com a presente invenção destinam-se em primeiro lugar a desenvolver um efeito fisiológico favorável em pessoas que sofrem ou são sujeitas a infecções bacterianas, bem como as que apresentam bactérias assintomáticas ou que apresentam um risco de bactérias assintomáticas, em particular as mulheres grávidas, as mulheres idosas, os homens que sofrem de adenoma da próstata, as pessoas com deficiência ou as pessoas após um ato diagnóstico médico ou uma intervenção cirúrgica. Esse efeito fisiológico tem um efeito favorável que permite prevenir e/ou limitar essas infecções ou essas bactérias. Os efeitos fisiológicos mais marcantes são a inibição do crescimento bacteriano, um efeito bactericida ou bacteriostática, um efeito de diminuição da aderência das bactérias, em particular das enterobactérias.

[049] De acordo com uma modalidade da presente invenção, a composição tem um efeito chamado "bacterioflush". Entende-se por efeito chamado "bacterioflush" ou efeito chamado "descarga" todo efeito pelo qual as bactérias são eliminadas do organismo pelas vias naturais.

[050] As composições de acordo com a presente invenção são particularmente úteis em pessoas acometidas de infecções vesicais ou urinárias, por exemplo, a mulher com risco ou anterioridade de cistites, em particular grávida, o homem acometido de adenoma benigno da próstata, em particular de mais de 50 anos, bem como as pessoas acometidas de infecções bucais, gástricas e/ou respiratórias ou ainda as pessoas que sofrem de estases urinárias, em particular as pessoas idosas ou deficientes.

[051] O efeito antiaderencial é particularmente interessante para intervir cedo durante uma infecção e diminuir a carga bacteriana pelo efeito de eliminação das bactérias, ou ainda para diminuir o risco de aparecimento de uma infecção no sujeito sensível. A composição pode também ter um efeito de diminuição da virulência das bactérias com pili do tipo P, por diminuição da expressão desses pili.

[052] Em um modo realização particular, a composição de acordo com a presente invenção permite diminuir a expressão de genes de virulência das cepas bacterianas uropatógenas e, portanto, diminuir a virulência dessas cepas. Por exemplo, a composição de acordo com a presente invenção permite diminuir a expressão do gene papG3.

[053] Um segundo objeto do presente pedido trata, portanto, do uso de uma composição de acordo com a presente invenção para diminuir a expressão dos genes de virulência de bactérias com pili do tipo P, em particular das bactérias uropatógenas, e mais particularmente Escherichia Coli.

[054] A composição de acordo com a presente invenção caracteriza-se, em particular, por um efeito antiaderencial que se mantém no tempo, até 24h. Uma das explicações avançadas para explicar esse efeito e a potencialização do efeito antiaderencial dos PAC presentes no extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon pelo extrato do extrato de Propolis.

[055] A presente invenção trata também de uma composição que compreende um extrato de Propolis e um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon, para uma administração simultânea, separada ou escalonada no tempo, para o tratamento e/ou a prevenção das infecções bacterianas agudas ou crônicas ou das bactérias assintomáticas, e em particular das infecções vesicais ou urinárias.

[056] A presente invenção trata também de um método de tratamento que compreende a administração separada, simultânea ou escalonada no tempo, por via oral em um mamífero, em particular um humano, de uma composição que compreende um extrato de Propolis e de uma composição que compreende um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon, para o tratamento e/ou a prevenção das infecções bacterianas agudas ou crônicas ou das bactérias assintomáticas, e em particular das infecções vesicais ou urinárias.

[057] A presente invenção prevê de fato também o uso de uma composição que compreende um extrato de Propolis para anteceder, complementar e/ou suceder o uso de uma composição que compreende um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon.

[058] Em um modo de realização particular, a presente invenção pode apresentar-se na forma de um kit que compreende: - uma primeira composição que compreende um extrato de Propolis, - uma segunda composição que compreende um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon.

[059] De acordo com a dose administrada, as composições podem também ter um efeito farmacológico.

[060] Um terceiro objeto do presente pedido trata de um complemento alimentar ou de um medicamento que compreende uma composição de acordo com a presente invenção para o tratamento e/ou a prevenção das infecções bacterianas agudas ou crônicas ou das bactérias assintomáticas.

[061] Em um modo de realização preferido, o complemento alimentar ou o medicamento de acordo com a presente invenção destina-se ao tratamento e/ou à prevenção das infecções vesicais ou das infecções urinárias.

[062] Em outro modo de realização preferido, o complemento alimentar ou o medicamento de acordo com a presente invenção destina-se ao tratamento e/ou à prevenção das infecções bucais, gástricas ou respiratórias.

[063] Em outro modo de realização preferido, o complemento alimentar ou o medicamento de acordo com a presente invenção destina-se ao tratamento e/ou à prevenção das infecções vesicais ou urinárias associadas a um eventual déficit de zinco no homem, em particular no homem de mais de cinquenta anos, em particular acometido de adenoma benigno da próstata.

[064] Em outro modo de realização preferido, o complemento alimentar ou o medicamento de acordo com a presente invenção destina-se ao tratamento e/ou à prevenção das infecções vesicais ou urinárias associadas a um eventual déficit de ferro na mulher, em particular na mulher de risco ou anterioridade de cistites e em particular na mulher grávida.

[065] Em outro modo de realização preferido, o complemento alimentar ou o medicamento de acordo com a presente invenção destina-se ao tratamento e/ou à prevenção das estases urinárias nas pessoas idosas ou deficientes.

[066] Em outro modo de realização preferido, o complemento alimentar ou o medicamento de acordo com a presente invenção destina-se ao tratamento e/ou à prevenção das infecções bacterianas agudas ou crônicas e ao reforço do sistema imunológico.

[067] Um quarto objeto do presente pedido trata dos métodos de tratamento que compreendem a administração por via oral em um mamífero, em particular um humano, de uma composição de acordo com a presente invenção para o tratamento e/ou a prevenção das infecções bacterianas agudas ou crônicas ou das bactérias assintomáticas.

[068] Em um modo de realização preferido, o método de tratamento compreende a administração por via oral de uma composição de acordo com a presente invenção para o tratamento e/ou a prevenção das infecções vesicais ou das infecções urinárias.

[069] Em um modo de realização preferido, o método de tratamento compreende a administração por via oral de uma composição de acordo com a presente invenção para o tratamento e/ou a prevenção das infecções bucais, gástricas ou respiratórias.

[070] Em um modo de realização preferido, o método de tratamento compreende a administração por via oral de uma composição de acordo com a presente invenção para o tratamento e/ou a prevenção das infecções urinárias ou vesicais associadas a um eventual déficit de zinco no homem em particular no homem de mais de cinquenta anos, acometido em particular de adenoma benigno da próstata.

[071] Em um modo de realização preferido, o método de tratamento compreende a administração por via oral de uma composição de acordo com a presente invenção para o tratamento e/ou a prevenção das infecções urinárias ou vesicais associadas a um eventual déficit de ferro na mulher, em particular na mulher de risco ou anterioridade de cistites, em particular na mulher grávida.

[072] Em um modo de realização preferido, o método de tratamento compreende a administração por via oral de uma composição de acordo com a presente invenção para o tratamento e/ou a prevenção das estases urinárias nas pessoas idosas ou deficientes.

[073] Em um modo de realização preferido, o método de tratamento compreende a administração por via oral de uma composição de acordo com a presente invenção para o tratamento e/ou a prevenção das infecções bacterianas agudas ou crônicas e o reforço do sistema imunológico.

[074] Esse tratamento pode ser associado a um tratamento terapêutico antibacteriano, em particular à administração de um antibiótico, tais como ofloxacina (fluoroquinolona), ceftriaxona e cefixima (cefalosporina), as β- lactaminas e a nitrofuradantina. A presente invenção tem, portanto, por objeto o uso da composição de acordo com a presente invenção para anteceder, complementar e/ou suceder um tratamento terapêutico antibacteriano. Isso significa que o clínico prescreve ao paciente que tem necessidade de consumi- lo o complemento alimentar ou o medicamento de acordo com a presente invenção como tratamento antes, durante e/ou depois da condução de um tratamento com antibacteriano, por exemplo, com antibiótico.

[075] A presente invenção tem também por objeto um tratamento chamado flash, que consiste em participar da eliminação dos germes que resistem à ATB (antibioterapia) e também em diminuir de modo significativo a população bacteriana por um efeito Flush (efeito descarga). As bactérias são evacuadas pelas vias naturais e a expressão filogenética do sistema de adesão e mais particularmente a expressão de virulência dos Pili de tipo P é diminuída.

[076] É administrada uma dose diária eficaz da composição de acordo com a presente invenção. Por dose diária eficaz, entende-se uma dose da composição de acordo com a presente invenção consumida em um período de 24 horas.

[077] Por dose diária eficaz, entende-se em particular uma quantidade de composição de acordo com a presente invenção que compreende entre 300 e 1200 mg de extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon e entre 400 e 2000 mg de extrato de Propolis.

[078] A presente invenção tem ainda por objeto uma composição que compreende um extrato de Propolis e um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon e um princípio ativo farmacêutica, por exemplo, antibacteriano, antibiótico, antioxidante como a vitamina C e seus derivados ou um ingrediente alimentício como o zinco, o ferro e seus derivados ou um nutriente, para uma administração simultânea, separada ou escalonada no tempo.

[079] Outro objeto do presente pedido trata de um kit que compreende: - uma primeira composição que compreende um extrato de Propolis e um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon, de acordo com a presente invenção - uma segunda composição que compreende um princípio ativo farmacêutico por exemplo antibacteriano, antibiótico, antioxidante como a vitamina C e seus derivados ou um ingrediente alimentício como o zinco, o ferro e seus derivados ou um nutriente.

[080] As diferentes características apresentadas para o extrato de Propolis e o extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon aplicam-se igualmente ao kit de acordo com a presente invenção citado anteriormente.

[081] As diferentes características apresentadas para o zinco e seus derivados, o ferro e seus derivados e a vitamina C e seus derivados aplicam-se igualmente ao kit de acordo com a presente invenção citado anteriormente.

[082] No contexto da associação da composição de acordo com a presente invenção com diferentes antibióticos, foi descoberto um efeito de sinergia da Propolis na ausência de oxicoco Vaccinium macrocarpon com certas classes de antibióticos, e em particular os que são utilizados em patologia urinária. Essa sinergia permite melhorar a atividade antibacteriana do antibiótico, sem ter de aumentar a quantidade administrada.

[083] Essa sinergia permite, portanto, limita e mesmo diminuir, no caso de um tratamento terapêutico antibacteriano, e em particular no caso de um tratamento de infecções urinárias, a dose de antibióticos administrada bem como a frequência de administração no paciente. Ela permite reduzir os riscos de desenvolvimento de resistência a esses antibióticos nesse paciente.

[084] A presente invenção tem, portanto, por outro objeto uma composição antibacteriana que compreende um extrato de Propolis e um agente antibiótico, para uma administração simultânea, separada ou escalonada no tempo.

[085] No sentido da presente invenção, “simultânea” significa que os dois ativos são administrados pela mesma via ao mesmo tempo (eles são, por exemplo, misturados), “separada” significa que eles são por vias diferentes ou em lugares diferentes, e “escalonada no tempo” significa que eles são administrados separadamente em momentos diferentes.

[086] As diferentes características apresentadas para o extrato de Propolis aplicam-se igualmente à presente invenção citada anteriormente.

[087] Na presente invenção, sempre que se fala de antibiótico, deve-se entender qualquer agente antibiótico que possa ser escolhido dentre o conjunto das classes de antibióticos conhecidas, e em particular dentre as classes de antibióticos utilizadas em patologia urinária, e para as quais a associação com a Propolis e/ou o oxicoco Vaccinium macrocarpon se mostra útil. Podem ser vantajosamente citadas as cefalosporinas e mais particularmente as cefalosporinas de terceira geração como a ceftriaxona ou a cefixima e as fluoroquinolonas como a ofloxacina. Podem também ser citadas as β-lactaminas e a nitrofuradantina.

[088] As diferentes características apresentadas referentes às formas que a composição pode assumir bem como os compostos adicionais aplicam-se igualmente à presente invenção.

[089] Outro objeto da presente invenção é tal composição para o tratamento e/ou a prevenção das infecções bacterianas agudas ou crônicas ou das bactérias assintomáticas, e em particular das infecções vesicais ou urinárias.

[090] Outro objeto da presente invenção é um método de tratamento antibacteriano que compreende a administração em um mamífero, em particular um humano, de tal composição para o tratamento e/ou a prevenção das infecções bacterianas agudas ou crônicas ou das bactérias assintomáticas, e em particular das infecções vesicais ou urinárias.

[091] A presente invenção tem, portanto, por objeto o uso de uma composição que compreende um extrato de Propolis para anteceder, complementar e/ou suceder um tratamento antibiótico. Isso significa que o clínico prescreve ao paciente que precisa consumi-lo a composição que compreende o extrato de Propolis como tratamento antes, durante e/ou após a condução de um tratamento antibiótico.

[092] Em um modo de realização particular, a presente invenção pode apresentar-se na forma de um kit que compreende: - uma primeira composição que compreende um extrato de Propolis, - um agente antibiótico.

[093] As diferentes características apresentadas para o extrato de Propolis e o agente antibiótico bem como aquelas que se referem às formas que a composição pode assumir aplicam-se igualmente à presente invenção citada anteriormente.

[094] As presentes invenções e seus diferentes modos de realização serão mais bem compreendidas com a leitura dos exemplos a seguir.

Esses exemplos são dados a título indicativo, sem caráter limitativo.

[095] A figura 1 representa as quantidades de pinocembrina e galangina presentes no extrato de Propolis medidas em urinas humanas após um regime de 6 e 8 cápsulas que compreendem uma composição de acordo com a presente invenção.

[096] A figura 2 representa o efeito de uma composição de acordo com a presente invenção sobre a expressão do gene papG3 de uma cepa de E.coliuropatogênica.

[097] A figura 3 representa uma curva de atividade bactericida da Propolis e da ceftriaxona.

[098] A figura 4 representa uma curva de atividade bactericida da Propolis e da cefixima. EXEMPLO 1 PRODUÇÃO DE UM EXTRATO DE OXICOCO VACCINIUM MACROCARPON

[099] Um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon que compreende pelo menos 20% de PAC é obtido de acordo com o exemplo 1 do pedido de patente EP 1 913 951. EXEMPLO 2 PRODUÇÃO DE UM EXTRATO DE PROPOLIS

[0100] Depois de ter coletado a Propolis bruta, ela é submetida a uma purificação, a fim de eliminar a cera, a madeira ou os pedaços de insetos eventuais.

[0101] Essa fase de purificação é realizada, em particular, por uma limpeza por solventes apropriados, tal como álcool. Em seguida, a Propolis assim purificada é colocada em solução hidroalcoólica, filtrada, evaporada e depois secada.

[0102] Ela é depois triturada e misturada com de pó de caroba como suporte. O extrato de Propolis assim obtido apresenta-se na forma de um pó micronizado de cor bege que contém 18% de matéria ativa. EXEMPLO 3 CÁPSULAS - Extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon 0,150 g - Extrato de Propolis(2) 0,250 g (1) Exocyan CRAN 20S comercializado pela Tournay Biotechnologies (2) Propolis PPM 18 comercializado pela Lustrel

[0103] A composição de acordo com o exemplo 3 apresenta-se em forma de pó e está condicionada em cápsulas. EXEMPLO 4 PÓ EM SACHÊ (1 DOSE) - Extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon 0,3 g - Extrato de Propolis(2) 0,5 g - Vitamina C 0,060 g (1) Exocyan CRAN 20S comercializado pela Tournay Biotechnologies (2) Propolis PPM 18 comercializado pela Lustrel

[0104] O pó está condicionado em sachê (1 dose) e a posologia de uso é de 2 a 4 sachês por dia durante 2 a 7 dias.

[0105] O pó pode igualmente ser condicionado em cápsulas e a posologia de uso é de 2 a 4 cápsulas por dia durante 2 a 7 dias, a ser renovada se necessário. EXEMPLO 5 CÁPSULAS - Extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon 0,150 g - Extrato de Propolis(2) 0,250 g - Vitamina C 0,030 g (1) Exocyan CRAN 20S comercializado pela Tournay Biotechnologies (2) Propolis PPM 18 comercializado pela Lustrel

[0106] A composição de acordo com o exemplo 5 apresenta-se em forma de pó e está condicionada em cápsulas e a posologia de uso é de 2 a 4 cápsulas por dia durante o período de risco, a ser renovada se necessário. EXEMPLOS 6 E 7 COMPOSIÇÕES DESTINADAS AO TRATAMENTO E/OU À PREVENÇÃO DAS INFECÇÕES VESICAIS E DAS DEFICIÊNCIAS DE ZINCO NO HOMEM

(1) Exocyan CRAN 20S comercializado pela Tournay Biotechnologies (2) Propolis PPM 18 comercializado pela Lustrel

[0107] A composição de acordo com o exemplo 6 apresenta-se em forma de pó e está condicionada em sachês (1 dose) ou em cápsulas.

[0108] A posologia de uso de sachês (1 dose) é de 2 a 4 sachês por dia durante 2 a 7 dias.

[0109] A posologia de uso em cápsulas é de 2 a 4 cápsulas por dia, a ser renovada se necessário.

[0110] A composição de acordo com o exemplo 7 apresenta-se em forma de pó e está condicionada em cápsulas.

[0111] A posologia de uso em tratamento flash é de 4 a 8 cápsulas durante um período máximo de uma semana.

[0112] A posologia de uso em tratamento preventivo é de 2 a 4 cápsulas durante um período de 15 dias, a ser renovada se necessário. EXEMPLOS 8 E 9 COMPOSIÇÕES DESTINADAS AO TRATAMENTO E/OU À PREVENÇÃO DAS INFECÇÕES URINÁRIAS E DAS DEFICIÊNCIAS DE FERRO NA MULHER

[0113] A composição de acordo com o exemplo 8 apresenta-se em forma de pó e está condicionada em sachês (1 dose) ou em cápsulas.

[0114] A posologia de uso em sachês (1 dose) é de 2 a 4 sachês por dia durante 2 a 7 dias.

[0115] A posologia de uso em cápsulas é de 2 a 4 cápsulas por dia, a ser renovada se necessário.

[0116] A composição de acordo com o exemplo 9 apresenta-se em forma de pó e está condicionada em cápsulas.

[0117] A posologia de uso em tratamento flash é de 4 a 8 cápsulas durante um período máximo de uma semana.

[0118] A posologia de uso em tratamento preventivo é de 2 a 4 cápsulas durante um período de 15 dias, a ser renovada se necessário. EXEMPLOS 10 E 11 CÁPSULAS

(1) Exocyan CRAN 20S comercializado pela Tournay Biotechnologies (2) Extrato de Propolis a 60% de Propolis puro comercializado pela empresa Claudine Vallée

[0119] A posologia de uso da composição de acordo com o exemplo 10 é de 4 cápsulas por dia durante 5 a 10 dias em uso de ataque e de 2 cápsulas por dia durante 10 dias a ser renovada regularmente em uso de manutenção.

[0120] A posologia de uso da composição de acordo com o exemplo 11 é de 4 cápsulas por dia durante 5 a 10 dias em uso de ataque e de 2 cápsulas por dia durante 10 dias a ser renovada regularmente em uso de manutenção. EXEMPLO 12 QUANTIFICAÇÃO DOS POLIFENÓIS DE PROPOLISEM URINAS HUMANAS APÓS INGESTÃO DE UMA COMPOSIÇÃO DE ACORDO COM INVENÇÃO

[0121] Dois voluntários sadios com mais de 18 anos, com contracepção eficaz e que seguiram uma alimentação normal, foram submetidos a um regime que compreende a ingestão de cápsulas de acordo com a composição do exemplo 3. Foram seguidos dois regimes: - ingestão de 6 cápsulas, - ingestão de 8 cápsulas.

[0122] A ingestão de cápsulas é efetuada pela manhã às 8h e as urinas foram coletadas por micção em um frasco estéril antes ingestão, 1-6h após a ingestão, 12h após a ingestão e 24h após a ingestão.

[0123] As urinas coletadas são hidrolisadas por hidrólise enzimática (glucuronidase e sulfatase), e em seguida os polifenóis são extraídos e purificados em Sep-Pack.

[0124] Os polifenóis da Propolis como a pinocembrina e a galangina são depois caracterizados e dosados.

[0125] Os resultados são apresentados na tabela 1 a seguir bem como na figura 1.

[0126] Esses resultados mostram que a ação na Propolis presente na composição de acordo com a presente invenção ocorre efetivamente no sistema urinário humano e demonstra assim a conveniência do uso da composição de acordo com a presente invenção para focalizar o tratamento de patologias urinárias. EXEMPLO 13 ESTUDO DO EFEITO ANTIADERENCIAL DE UMA COMPOSIÇÃO DE ACORDO COM INVENÇÃO

[0127] Quatro voluntários sadios com mais de 18 anos, com contracepção eficaz, que seguiram uma alimentação normal e que não receberam um tratamento antibiótico nas duas semanas anteriores e ao longo do estudo foram submetidos a um regime que compreende a ingestão de cápsulas de acordo com a composição do exemplo 3.

[0128] Foram seguidos dois regimes: - ingestão de 4 cápsulas para 2 voluntários, - ingestão de 6 cápsulas para os 2 outros voluntários.

[0129] A ingestão de cápsulas é efetuada pela manhã às 8h e as urinas foram coletadas por micção em um frasco estéril antes da ingestão, 1-6h após a ingestão, 12h após a ingestão para os 2 voluntários que ingeriram 6 cápsulas e 24h após a ingestão.

[0130] Os 2 voluntários que ingeriram 4 cápsulas tiveram, portanto, 3 coletas urinárias (H0, H1-6 e H24), ou seja, 6 urinas para serem analisadas para esse regime. Se houve diferentes micções (entre 1 e 6h após a ingestão), elas foram misturadas no mesmo frasco.

[0131] Os 2 voluntários que ingeriram 6 cápsulas tiveram, portanto, 4 coletas urinárias (H0, H1-6, H12 e H24), ou seja, 8 urinas para serem analisadas para esse regime. Se houve diferentes micções (entre 1 e 6h após a ingestão), elas foram misturadas no mesmo frasco.

[0132] Diferentes parâmetros biológicos e fisico-químicos das amostras de urinas foram determinados por meio do sistema Multistix®. Uma abundância de leucócitos e/ou de hemácias e/ou uma positividade aos nitritos teriam acarretado a exclusão da amostra de urinas. Essas amostras foram então refrigeradas a +4°C, centrifugadas a 4000g durante 15 minutos a +4°C, e depois imediatamente armazenadas a 20°C.

[0133] Uma cepa de E. coliuropatogênica anteriormente isolada das urinas de um paciente com uma infecção urinária foi selecionada: NECS19923 que possuía fímbrias de tipo P (papG) e pili de tipo-1. Essa cepa foi previamente modificada geneticamente por inserção de um plasmídeo que porta o gene codifica para a GFP (green fluorescence protein).

[0134] Experiências de adesão foram realizadas em linhagens de células uroteliais de tipo T24 de origem humana (ATCC HTB-4), adaptadas de Di Martino e al. As bactérias foram colocadas em presença das urinas dos voluntários sadios em um meio de cultura contendo 5% de Luria Bertani (5% (v/v)) durante uma noite a 37°C sob agitação. As bactérias foram depois centrifugadas e ressuspensas a uma concentração de 108 CFU/ ml em um meio de McCoy, e colocadas em seguida em contato com uma monocamada de células uroteliais T24 e incubadas 3h a 37°C. Após 6 lavagens com PBS (Fosfato Buffered Saline), as células foram fixadas com metanol. As lâminas foram examinadas em seguida com um microscópio de fluorescência, as bactérias foram então visualizadas em verde. O número médio de bactérias aderentes por célula foi determinado examinando 100 células uroteliais e representa um índice de adesão. Esse índice é expresso como a mediana de 4 testes independentes.

[0135] Os resultados são apresentados na tabela 2 a seguir:

[0136] Esses resultados mostram que a composição de acordo com a presente invenção apresenta uma atividade antiaderencial contra E.Coli "imediata" e também que essa atividade se mantém ao longo do tempo, até 24h. EXEMPLO 14 ESTUDO EX VIVO DA INFLUÊNCIA DE UMA COMPOSIÇÃO DE ACORDO COM A INVENÇÃO SOBRE A VIRULÊNCIA DE UMA CEPA DE E.COLI UROPATOGÊNICA

[0137] Dois voluntários sadios com mais de 18 anos, com contracepção eficaz, que seguiram uma alimentação normal e que não receberam um tratamento antibiótico nas duas semanas anteriores e ao longo do estudo foram submetidos a um regime que compreende a ingestão de cápsulas de acordo com a composição do exemplo 3.

[0138] Foram seguidos 3 regimes: - ingestão de 4 cápsulas, - ingestão de 6 cápsulas, - ingestão de 8 cápsulas.

[0139] A ingestão de cápsulas é efetuada pela manhã às 8h e as urinas foram coletadas por micção em um frasco estéril antes da ingestão, 1-6h após a ingestão, 12h após a ingestão e 24h após a ingestão.

[0140] Os 2 voluntários tiveram, portanto, 4 coletas urinárias (H0, H1-6, H12 e H24), ou seja, 8 urinas para serem analisadas para esse regime. Se houve diferentes micções (entre 1 e 6h após a ingestão), elas foram misturadas no mesmo frasco.

[0141] Diferentes parâmetros biológicos e fisico-químicos das amostras de urinas foram determinados por meio do sistema Multistix®. Uma abundância de leucócitos e/ou de hemácias e/ou uma positividade aos nitritos teriam acarretado a exclusão da amostra de urinas. Essas amostras foram então refrigeradas a +4°C, centrifugadas a 4000g durante 15 minutos a +4°C, e depois imediatamente armazenadas a 20°C. Foi respeitado um período de "wash-out" de uma semana entre as mudanças de regime.

[0142] Uma cepa de E. coli uropatogênica anteriormente isolada das urinas de um paciente com uma infecção urinária foi selecionada: NECS19923 que possuía fímbrias de tipo P (papG) e pili de tipo-1. Essa cepa foi previamente modificada geneticamente por inserção de um plasmídeo que porta o gene codifica para a GFP (green fluorescence protein).

[0143] O estudo in vivo da citotoxidade de E. coli foi realizado no modelo Caenorhabditis elegans de acordo com o método descrito por Kurz e al. com exceção dos vermes utilizados que é uma linhagem de mutante Fer-15, que possuem uma fertilidade dependente da temperatura ambiente. Os mutantes Fer-15 são fornecidos pelo Caenorhabditis Genetics Center (USA). Para sincronizar o crescimento dos nematódeos, os ovos foram coletados utilizando o método do hipoclorito. Geloses NGM (Nematode Growth Medium) foram inoculados com 10 μl de uma cultura de 18h de E. colicolocadas em presença da composição de acordo com o exemplo 3. Essas geloses foram depois incubadas a 37°C durante 8-10 h, e depois inoculadas com nematódeos no estágio larvar L4 (20 a 30 por gelose). As geloses foram depois incubadas a 25°C e cada dia o número de vermes vivos foi contado no estereomicroscópio (Leica MS5). Essas experiências permitiram estabelecer curvas de sobre (DL50: Tempo de meia-vida e Tempo de vida) e demonstraram a presença, a ausência ou a diminuição da virulência (citotoxidade) das cepas de E. coli. Para cada experiência, as cepas foram testadas por meio de 3 experiências independentes e essas experiências foram repetidas 4 vezes para cada teste. Um nematódeo é considerado morto quando ele deixa de responder ao toque por uma ose metálica. Os vermes que vieram se colar contra a parede das caixas de Petri e que morreram foram excluídos da análise. Para comparar os tempos de vida dos nematódeos entre os diferentes regimes, foi aplicado o modelo de regressão de Cox. A fim de efetuar comparações por par, foi utilizado um log rank test. As análises foram efetuadas graças ao software SAS®/ETS release 9.1 (SAS Institute Inc, Cary, NC, USA).

[0144] Os resultados são apresentados na tabela 3 a seguir

[0145] Os resultados mostram que a composição de acordo com a presente invenção permite reduzir a virulência de uma cepa de E.coli e também que essa atividade se mantém ao longo do tempo. EXEMPLO 15 AVALIAÇÃO DA EXPRESSÃO DO GENE PAPG3 SOB O EFEITO DE UMA COMPOSIÇÃO DE ACORDO COM A INVENÇÃO

[0146] Uma cepa de Escherichia coli uropatogênica isolada durante uma infecção urinária foi isolada no laboratório da equipe INSERM Espri 6: trata- se de uma cepa sensível aos antibióticos: NECC8531 18, papG3+, filotipo B2.

[0147] As urinas de voluntários sadios com mais de 18 anos, com contracepção eficaz, que seguiram uma alimentação normal e que não receberam um tratamento antibiótico nas duas semanas anteriores e ao longo do estudo foram coletadas após os seguintes regimes: - placebo - 4 cápsulas, 1-6h após ingestão - 4 cápsulas, 12h após ingestão, - 8 cápsulas, 1-6h após ingestão, - 8 cápsulas, 24h após ingestão, e cada cápsula corresponde à composição de acordo com o exemplo 3.

[0148] A cultura da cepa de E. coli nas diferentes urinas recolhidas após os diferentes regimes é efetuada durante 18h a 37°C sob agitação.

[0149] O nível de expressão do gene papG3 foi determinado por Tempo Real Quantitativo RT-PCR (Real Time - Polymerase Chain Reaction). A expressão dos transcritos foi normalizada com o gene doméstico que codifica para a GAPDH (Glyceraldehyde-3 Fosfato Deshydrogenase) medido em cada amostra. Para prevenir a degradação dos NRAm extraídos após a lise celular (o que pode alterar a expressão dos genes), os ARN totais foram isolados em um ambiente livre de RNAse utilizando o kit RNeasy Protect Mini (Qiagen, Hilden, Germany) de acordo com as recomendações do fornecedor. A integridade, a pureza e a concentração dos NRAm extraídos foram medidas por espectrofotometria a 260 nm. O ARN purificado foi conservado em água estéril sem RNase nos tubos Eppendorf de congelamento. A quantificação das amostras foi efetuada em um LC480 (Roche) utilizando o kit QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit (Qiagen, Hilden, Germany). O gene doméstico gapdh é utilizado como uma referência da experiência e porque ele possui um nível de expressão constante nas condições utilizadas. A eficácia da amplificação do gene alvo e do gene de referência foi determinada a partir da amplificação de uma série de diluição das amostras e as condições PCR foram otimizadas até a obtenção de uma eficácia comparável entre as séries (eficácia = 2). As amplificações do gapdh e de papG3 foram realizadas em tubos separados utilizando a mesma quantidade de aRN totais. As quantidades de NRAm de cada gene foram determinadas pela comparação dos limiares de amplificação (CT).

[0150] Os resultados foram expressos por uma sob/sobre- expressão de papG3 em relação à expressão desse gene em condições normais (E. coli nas urinas sem PAC) e são apresentados na figura 2.

[0151] Em relação à expressão do gene papG3 detectada na cepa de E. coli posto em contato com urinas de controle, esse mesmo gene é: - cerca de 70% (69%) menos expresso na cepa de E. coli posta em contato com urinas com 8 cápsulas de composição de acordo com a presente invenção coletadas após 1-6h, - cerca de 50% (47%) menos expresso na cepa de E. coli posta em contato com urinas com 8 cápsulas de composição de acordo com a presente invenção coletadas após 24h, - 35% menos expresso na cepa de E. coli posta em contato com urinas com 4 cápsulas de composição de acordo com a presente invenção coletadas após 1-6h, - cerca de 20% menos expresso (18%) na cepa de E. coli posta em contato com urinas com 4 cápsulas de composição de acordo com a presente invenção coletadas após 24h.

[0152] Esses resultados mostram que a composição de acordo com a presente invenção permite diminuir a expressão do gene papG3 e que essa atividade se mantém ao longo do tempo. Eles confirmam assim o efeito da composição de acordo com a presente invenção sobre a diminuição da virulência de E. coli. EXEMPLO 16 ESTUDO IN VITRODO EFEITO ANTIBACTERIANO DE UMA COMPOSIÇÃO DE ACORDO COM A PRESENTE INVENÇÃO E DA SINERGIA COM DIFERENTES AGENTES ANTIBIÓTICOS UTILIZADOS EM PATOLOGIA URINÁRIA

[0153] Seis cepas d'Escherichia coli de origens diferentes (cistites, pielonefrites agudas, portador crônico urinário), de sensibilidades diferentes aos principais antibióticos habitualmente utilizados nas infecções urinárias e de virulências diferentes foram selecionadas no banco de cepas do laboratório da equipe INSERM Espri 26: - 2 cepas sensíveis aos ATB: NECS892841 e NECS30090 - 2 cepas resistentes às quinolonas: NECS858785 e NECS864598 - 2 cepas secretoras de BLSE: NEC892420 e NEC1 18564

[0154] Foram avaliadas três composições: - uma composição que compreende pó de Propolis com maltodextrina - uma composição que compreende pó de Propolis com maltodextrina e PAC de tipo A - uma composição que compreende maltodextrina

[0155] Foram estudados três antibióticos: - ofloxacina - ceftriaxona - cefixima

[0156] O estudo in vitro do efeito antibacteriano divide-se em duas etapas: - uma etapa de determinação da Concentração Mínima Inibidora (CMI) de cada composição (faixa de concentrações estudadas: 0,5 a 5196 mg/L) e do antibiótico por método de diluição em meio líquido de acordo com as recomendações do CA-SFM (Comitê de Antibiograma da Sociedade Francesa de Microbiologia). - uma etapa de determinação DA CMI DO antibiótico em presença de cada composição em concentração sub-inibidora (120 ou 250 mg/L em função das cepas) (faixa de concentrações estudadas: 0,5 a 512 mg/L) por método de diluição em meio líquido de acordo com as recomendações do CA-SFM.

[0157] A totalidade dos tubos foi colocada em estufa a 37°C sem agitação durante 1 noite.

[0158] A CMI50 é a menor concentração de antibiótico que inibe qualquer cultura visível de uma cepa bacteriana após 18 horas de cultura a 37°C.

[0159] Para a ofloxacina, uma CMI> 1 mg/l equivale a uma cepa resistente.

[0160] Para a ceftriaxona, uma CMI> 2mg/l equivale a uma cepa resistente.

[0161] Para a cefixima, uma CMI> 2mg/l equivale a uma cepa resistente.

[0162] A sensibilidade ou a resistência à ofloxacina, à ceftriaxona ou à cefixima é interpretada em função das recomendações do CA-SFM.

[0163] Os resultados são apresentados nas tabelas 4, 5 e 6 a seguir:

S: cepa sensível aos antibióticos comumente testados contra E. coli; OFX R: cepa resistente à ofloxacina; BLSE: cepa produtora de b- lactamase com espectro estendido.

S: cepa sensível aos antibióticos comumente testados contra E. coli;

[0164] OFX R: cepa resistente à ofloxacina; BLSE: cepa produtora de b-lactamase com espectro estendido.

[0165] Os resultados mostram que a Propolis permite melhorar a atividade de cada um dos antibióticos avaliados e demonstra assim um efeito sinérgico claro da Propolis com as 2 classes de antibióticos (cefalosporina, fluoroquinolona) aos quais os antibióticos avaliados pertencem.

[0166] Além disso, esses resultados mostram igualmente que os PAC de tipo A não prejudicam a sinergia de atividade entre a Propolis e o antibiótico. EXEMPLO 17 ESTUDO COMPLEMENTAR DA SINERGIA ENTRE PROPOLISE DIFERENTES AGENTES ANTIBIÓTICOS UTILIZADOS EM PATOLOGIA URINÁRIA - CURVAS DE ATIVIDADE BACTERICIDA

[0167] Uma cepa de Escherichia Coli isolada durante uma infecção urinária foi selecionada no banco do laboratório da equipe INSERM Espri 26: cepa sensível aos antibióticos NECS892841.

[0168] Foram avaliadas duas composições: - uma composição que compreende pó de Propolis com maltodextrina - uma composição que compreende maltodextrina (controle)

[0169] 2 antibióticos foram avaliados: - ceftriaxona (CRO) - cefixima (CFM)

[0170] O estabelecimento do efeito antibacteriano de cada composição associada à ceftriaxona baseia-se nas seguintes experiências.

[0171] As experiências foram realizadas 20 ml de Mueller-Hinton sob agitação a 37°C. Cada composição foi avaliada a 1 x a CMI (256 mg/L), a ceftriaxona a 0,5x a CMI (0.5 mg/L) e as amostras foram espalhadas para uma contagem das colônias (CFU) a 0, 1, 2, 3, 5, 6 e 24h. Uma redução >3-log em relação ao inóculo original após 24h será considerada bactericida.

[0172] O estabelecimento do efeito antibacteriano de cada composição associada à cefixima baseia-se nas seguintes experiências.

[0173] As experiências foram realizadas 20 ml de Mueller-Hinton sob agitação a 37°C. Cada composição foi avaliada a 1 x a CMI (256 mg/L), a cefixima a 0.5x a CMI (0.5 mg/L) e as amostras foram espalhadas para uma contagem das colônias (CFU) a 0, 1, 2, 3, 5, 6 e 24h. Uma redução >3-log em relação ao inóculo original a 24h será considerada bactericida.

[0174] A contagem das colônias bacterianas (CFU) foi realizada após 18 horas de cultura a 37°C.

[0175] As curvas de atividade bactericida são apresentadas nas figuras 3 e 4.

[0176] As curvas de atividade bactericida das figuras 3 e 4 permitem confirmar a sinergia de atividade entre a Propolis e cada um dos antibióticos avaliados.

Claims

1. COMPOSIÇÃO ALIMENTÍCIA ANTIBACTERIANA, caracterizada por compreender um extrato de oxicoco (cranberry) Vaccinium macrocarpon e um extrato de Propolis, em que: - o extrato de Propolis compreende ácido cafeico, ácido ferúlico, galangina e pinocembrina; - o extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon contém uma proporção em peso de proantocianidinas (PAC) superior ou igual a 10%, preferivelmente superior a 10%, mais preferivelmente compreendida entre 20 e 50%, em que a referida proporção é medida pelo método de dosagem pela Vanilina; e a composição possui uma razão em peso de extrato de Propolis:extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon compreendida entre 1:2 e 2:1.

2. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo teor em peso de extrato de Propolis estar compreendido entre 10 e 80%, preferivelmente entre 30 e 70%.

3. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 2, caracterizada pelo extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon ser obtido por um processo de concentração e de isolamento das frações polifenólicas do suco de oxicoco Vaccinium macrocarpon.

4. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo teor em peso de extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon estar compreendido entre 10 e 80%, preferivelmente entre 25 e 70%.

5. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada por compreender igualmente um composto selecionado do grupo constituído pelos ativos farmacêuticos, os ingredientes alimentícios e os nutrientes.

6. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo ingrediente alimentício ser selecionado do grupo constituído pelo zinco e seus derivados.

7. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelos derivados de zinco serem selecionados entre os sais de zinco.

8. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 a 7, caracterizada pelo teor em peso de zinco ou de um de seus derivados estar compreendido entre 0,01% e 2%, de preferência entre 0,1% e 1,5%.

9. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo ingrediente alimentício ser selecionado do grupo constituído pelo ferro e seus derivados.

10. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelos derivados do ferro serem selecionados dentre os sais de ferro.

11. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 9 a 10, caracterizada pelo teor em peso de ferro ou de um de seus derivados estar compreendido entre 0,05% e 3%, preferivelmente entre 0,5% e 2,5%.

12. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo ingrediente alimentício ser selecionado do grupo constituído pela vitamina C e seus derivados.

13. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelos derivados da vitamina C serem selecionados dentre os sais de ácido ascórbico.

14. COMPOSIÇÃO, de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pelo sal de ácido ascórbico ser o ascorbato de cálcio.

15. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 12 a 14, caracterizada pelo teor em peso de vitamina C ou de um de seus derivados estar compreendido entre 1% e 10%, preferivelmente entre 2% e 8%.

16. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada por compreender igualmente um composto selecionado do grupo constituído por açúcares, polióis, corantes, edulcorantes ou ativos aromáticos.

17. COMPOSIÇÃO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizada por se apresentar sob a forma sólida ou líquida.

18. USO DE UMA COMPOSIÇÃO, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado por ser para diminuir a expressão dos genes de virulência das bactérias com pili do tipo P.

19. USO, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado pela bactéria ser Escherichia Coli.

20. USO DE UMA COMPOSIÇÃO, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizado por ser para fabricação de um medicamento de administração oral para tratar e/ou prevenir infecções bacterianas agudas ou crônicas ou das bactérias assintomáticas.

21. KIT, caracterizado por compreender: - uma primeira composição que compreende um extrato de Propolis e um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 17; - uma segunda composição que compreende um princípio ativo farmacêutico, em particular antibiótico ou antioxidante como a vitamina C e seus derivados ou um ingrediente alimentício como o zinco, o ferro e seus derivados ou um nutriente.

22. KIT, de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo antibiótico ser uma cefalosporina ou uma fluoroquinolona.

23. KIT, de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo antibiótico ser selecionado do grupo que consiste em ceftriaxona, cefixima e ofloxacina.