BG107299A - Употреба на lactobacillus casei в имуностимулиращи пептиди - Google Patents
Употреба на lactobacillus casei в имуностимулиращи пептиди Download PDFInfo
- Publication number
- BG107299A BG107299A BG107299A BG10729902A BG107299A BG 107299 A BG107299 A BG 107299A BG 107299 A BG107299 A BG 107299A BG 10729902 A BG10729902 A BG 10729902A BG 107299 A BG107299 A BG 107299A
- Authority
- BG
- Bulgaria
- Prior art keywords
- day
- actimel
- group
- response
- cells
- Prior art date
Links
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 title claims abstract description 19
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 title abstract description 5
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 title abstract description 5
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 title description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 title 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 10
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 claims abstract description 5
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 8
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 230000028993 immune response Effects 0.000 claims description 5
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 4
- 241000725643 Respiratory syncytial virus Species 0.000 claims description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 3
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 3
- 241000709661 Enterovirus Species 0.000 claims description 2
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 claims description 2
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 claims 1
- LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N n-(2-chloroethyl)-n-nitrosomorpholine-4-carboxamide Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)N1CCOCC1 LWGJTAZLEJHCPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 abstract description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 36
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 36
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 36
- 230000004044 response Effects 0.000 description 31
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 23
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 21
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 19
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 16
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 16
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 13
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 12
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 12
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 11
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 11
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 9
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 8
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 8
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 7
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 7
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 7
- 101000738771 Homo sapiens Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Proteins 0.000 description 6
- 102100037422 Receptor-type tyrosine-protein phosphatase C Human genes 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 6
- 241000894007 species Species 0.000 description 6
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 6
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 5
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 4
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 4
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 4
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 4
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 3
- 241000186672 Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus Species 0.000 description 3
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000002957 persistent organic pollutant Substances 0.000 description 3
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 208000007848 Alcoholism Diseases 0.000 description 2
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 2
- 235000004050 Lactobacillus casei DN 114001 Nutrition 0.000 description 2
- 240000006030 Lactobacillus casei DN 114001 Species 0.000 description 2
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 2
- 201000007930 alcohol dependence Diseases 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000546 chi-square test Methods 0.000 description 2
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 238000000034 method Methods 0.000 description 2
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004719 natural immunity Effects 0.000 description 2
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 238000013179 statistical model Methods 0.000 description 2
- 238000000528 statistical test Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 101710098119 Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 1
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 1
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 208000002606 Paramyxoviridae Infections Diseases 0.000 description 1
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 1
- GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J Trypan blue Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].C1=C(S([O-])(=O)=O)C=C2C=C(S([O-])(=O)=O)C(/N=N/C3=CC=C(C=C3C)C=3C=C(C(=CC=3)\N=N\C=3C(=CC4=CC(=CC(N)=C4C=3O)S([O-])(=O)=O)S([O-])(=O)=O)C)=C(O)C2=C1N GLNADSQYFUSGOU-GPTZEZBUSA-J 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 238000002701 cell growth assay Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 238000004163 cytometry Methods 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 229940004208 lactobacillus bulgaricus Drugs 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 235000020845 low-calorie diet Nutrition 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000474 nursing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012887 quadratic function Methods 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000004088 simulation Methods 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002344 surface layer Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000814 tetanus toxoid Drugs 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
- A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/125—Casei
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
- C12R2001/245—Lactobacillus casei
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретението се отнася до употребата на Lactobacillus casei в състав за орално приложение, предназначен за усилване на имунитет, специфичен към патогенни микроорганизми. Съставът може да бъде прилаган като храна или хранителна добавка.
Description
ОБЛАСТ НА ТЕХНИКАТА
Изобретението е свързано с употребата на бактерии на млечната киселина с цел създаване на потенциал за специфична имунна реакция срещу инфекциозен агент.
Бактериите на млечната киселина (LAB) обикновено се използват за производство на ферментирали хранителни продукти, по-специално млечни продукти.
ПРЕДШЕСТВАЩО СЪСТОЯНИЕ НА ТЕХНИКАТА
Ефектът от действието на бактериите на млечната киселина върху здравето, първоначално са предположени в проучванията на Мечников (The prolongation of life. 1st ed. New York: GP Putman’s Sons, 1908) и оттогава са били обект на много изследвания.
Сега е общопризнато, че различните бактерии на млечната киселина могат да играят роля, която благотворно влияе на здравето. Тези бактерии също са известни като ’’протобиотици” име, което означава живи микроорганизми, които когато се приемат в стомаха в достатъчно количество, упражняват положителен ефект върху здравето, който превъзхожда ефекта от обикновените храни. Пробиотичните бактерии, поспециално са описани измежду видовете, принадлежащи към произход
Lactobacillus, Bifidobacterium, Streptococcus и Lactococcus, които обикновено се използват в млечната промишленост.
Счита се, че пробиотиците специално въздействат на нивото на чревната флора посредством забавяне развитието на патогенни микроорганизми, и/или посредством по-пряко действие върху имунната система. Например, наблюдавано е, че приемането в стомаха на пробиотични бактерии, води до намаляване на патогенните бактерии; по отношение на имунната система, и са докладвани различни ефекти; активиране на клетките, участващи в специфични или неспецифични имунни реакции, като лимфоцити и макрофаги, увеличение на нивото на имуноглобини и по-специално на IgA; увеличение на нивото на активиращите имунната система цитокини, и т.н. (за преглед, виж например MEYDANI и НА (Am J ClinNutr, 71, 861-7217, 2000).
Общо казано, изследванията проведени с различни пробиотични бактерии на млечната киселина са с тенденция да заключат, че някои видове или поне някои култури от тези видове, имат имунностимулиращи свойства. От друга страна, механизмът/ите в основата на тези свойства и компонентите от имунната система, които потенциално са включени остават неизвестни. Затова се явява необходимост да се осветлят тези аспекти и поспециално, да се предложат по-целенасочени приложения на различните видове или култури от протобиотични бактерии.
Няколко изследвания проведени с хора и животни предполагат, че бактериите от вида L. casei оказват благоприятен ефект върху здравето, и по-специално положителен ефект върху имунната система.
По-този начин е показано при мишки, че въвеждане в стомаха на ферментирало мляко, съдържащо L. casei култура DN-114 001 увеличава съпротивителната способност срещу инфекция със Salmonella typhimurium [PAUBERT-BRAQUE et al. Int J Immunother, 4:153, (1995)] и веднага се наблюдава активирането на макрофаги и нарастване на циркулиращите IgA.
Културата DN-114 001 бе заложена на 30 декември, 1994 в CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes) [Национална сбирка от култури на микроорганизми], съхранявана в Институт Пастьор, 25 rue du Docteur Roux, в Париж, под номер 1-1518; тази култура и нейните комбинации с ферменти на кисело мляко, прилагани за приготвяне на ферментирали млечни продукти, са описани в РСТ заявката WO 96/20607 от името на COMPAGNIE GERVAIS DANONE.
Едно скорошно изследване проведено върху хора също докладва, че консумацията на ферментирало мляко, съдържащо L. casei култура DA-114 001 предизвиква усилване на съпротивителните способности срещу Salmonella typhimurium. Този ефект се дължи на действие върху неспецифичен естествен имунитет [YOON et al., Int J Immunother; 15, 79-89 (1999)].
ТЕХНИЧЕСКА СЪЩНОСТ HA ИЗОБРЕТЕНИЕТО
Изобретателите са изследвали дали L. casei също има влияние върху придобит имунитет, който за разлика от естествения имунитет, се проявява в специфична имунна реакция срещу даден патогенен агент.
За тази цел, изобретателите са изследвали ефекта от L. casei, въведен орално in vivo, върху ex vivo стимулиране нарастването на Т-клетки като реакция към антигени представители на различни типове общи патогенни агенти: бактериален антиген (тетанус); гъбичен антиген (Candida) и вирусен антиген (грип).
Изследователите са наблюдавали за всеки от изпитваните антигени, че въвеждане в стомаха на L. casei води до увеличение в капацитета за нарастване на Т клетки и по-специално на подпопулации от CD* като реакция на активиране със споменатия антиген. Този ефект се демонстрира по-характерно в случай с антиген на грип.
Обект на настоящото изобретение е употребата на бактериална култура от вида L. casei за изготвяне на състав, който може да се въвежда орално, за да усили специфична системна имунна реакция срещу един патогенен микроорганизъм.
Това усилване на имунната реакция се постига от увеличаване капацитета на нарастване на Т-клетките, специфични за антигените от споменатите патогенни микроорганизми.
ПРИМЕРИ ЗА ИЗПЪЛНЕНИЕ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО
Според едно предпочитано изпълнение на настоящото изобретение, споменатият микроорганизъм е патоген разпространен във въздуха, поспециално патоген на дихателните пътища.
Тези патогени са по-специално бактерии или вируси; измежду тях, ще се споменат например, риновируси, дихателен синцитиален вирус (RSV), и миксовируси (ортомиксовируси като вирусите на грип (грип тип А, В или С), или парамиксовируси и по-специално пара-грипния).
В контекста на приложението на настоящото изобретение, споменатата култура L. casei може да се използва самостоятелно или в комбинация с други бактерии на млечната киселина от вида L. casei или от други видове. Преимуществено културата може да се използва в комбинация с ферменти на кисело мляко, а именно Lactobacillus bulgaricus и Streptococcus thermophilus.
Културата може да се използва под изцяло бактериална форма, която може да бъде жива или не, а също и под формата на бактериален лизат или под формата на бактериални фракции.
За предпочитане, съставът изготвен в контекста на употреба, в съответствие с изобретението да съдържа поне 105, за предпочитане поне Z η Λ , в общия случай между 1x10 и 1.5x10 , клетки на£. casei за ml.
Когато L. casei се използва в комбинация с ферменти на кисело мляко, η споменатия състав също преимуществено включва поне 10 , за 0 Λ предпочитане между 2x10 и 1x10 , клетки S. thermophilus за ml, и поне 5x10 и за предпочитане 4x10 и 2x10 , клетки L. bulgaricus за ml.
Една култура на L. casei, която може да бъде особено подходяща за употреба в настоящото изобретение е CNCM културата 1-1518.
Съставите приготвени в съответствие с изобретението могат да се въвеждат под формата на храни или на хранителни добавки. Те могат да бъдат, например млечни продукти и по-специално ферментирали млечни продукти, включващи поне споменатата култура на L. casei, вариантно комбинирана с други бактерии на млечната киселина, например с ферменти на кисело мляко.
Съставите приготвени в съответствие с настоящото изобретение могат да се използват в контекста на предпазване от и лечение на патологични условия от инфекциозен произход и по-специално от вирусен произход, и по-специално на грип. За предпочитане, за да се получи оптимален ефект, те трябва да се приемат за най-малко една седмица, и за предпочитане за поне десет дни в количество, съответстващо на абсорбирането на поне 107, за предпочитане поне 108, в общия случай между 109 и 1010, клетки на L. casei.
Настоящото изобретение ще бъде по-ясно разбрано с помощта на едно последващо описание, което се отнася до неограничаващи изобретението примери, илюстриращи свойствата на една култура на Lactobacillus casei за усилване специфичната реакция към микробни антигени.
ПРИМЕР 1: ДЕЙСТВИЕ НА LACTOBACILLUS CASEI ВЪРХУ НАРАСТВАНЕТО НА Т-КЛЕТКИ КАТО РЕАКЦИЯ КЪМ АНТИГЕННА СТИМУЛАЦИЯ
За да се изпита ефекта от въвеждане в стомаха на ферментирал млечен продукт, включващ културата на Lactobacillus casei DN-114 001 (CNCM I1518) върху нарастването на Т-клетки като реакция на антигенна симулация бе извършено двойно изследване на сляпо спрямо неутрално вещество (placebo).
Условията на това изследване са както следва:
Индивиди
Към Департамента за инфекциозни заболявания, Болничен център на Вашингтон бяха привлечени 88 здрави индивида от 18 до 50 годишна възраст. Индивиди, имащи клинична история на хепатит или на проблеми с носа, със сърдечносъдови смущения, с имунни или гастроентериологични заболявания, с тежка форма на астма или на захарен диабет, индивиди преминали лечение с антибиотици или имуноподтискащи медикаменти през последните три месеца преди началото на изследването, индивиди страдали от алкохолизъм или с алкохолна зависимост, индивиди с известна непоносимост или свръхчувствителност към млечни продукти, индивиди на ниско калорична диета, такива ваксинирани срещу грип през предходния сезон, а също така и бременни жени и кърмачки, бяха изключени от изследването.
Последователността и условията на изследването бяха одобрени от Комитета за изследвания към Болничен център на Вашингтон, а също и от Борда за проверка на институциите, който контролира изследвания провеждани върху хора.
Избраните индивиди произволно бяха разделени на две групи:
Една група от 47 индивида (26 жени и 21 мъже) получаваше дневно 100 ml ферментирал млечен продукт, съдържащ 2% мазнини, ферменти на кисело мляко (L. Bulgaricus и S. thermophilus) и култура на Lactobacillus casei DN-114 001, който се продава от DANONE под търговската марка ACTIMEL.
Една група от 41 индивиди (22 жени и 19 мъже) получаваше неутрално вещество в продължение на 28 дни: по 100 ml на ден мляко разредено с вода (1/5, обемно) подсилено със захар, за да се постигне калорична стойност еквивалентна на тази на ACTOMEL.
Индивидите от двете групи бяха помолени, за продължителността на изследването, да се въздържат от употреба на кисело мляко или други ферментирали млечни продукти.
Средната (стандартното отклонение е дадено в скоби) възраст на индивидите в група ACTIMEL и групата на неутрално вещество беше съответно 36 (7.3) и 32.7 (7.4).
От всеки индивид от двете групи, преди да започне консумиране на ACTIMEL или неутралното вещество (placebo), беше взета кръвна проба (55 ml) с цел да се определят базовите стойности. На индивидите бяха дадени дати за контролни посещения на 9, 18 и 28 ден като те попълниха кратки въпросници по отношение на тяхното здравословно състояние, възможните странични ефекти, а също за развитието на някакво заболяване, което е възможно да изкриви интерпретацията на резултатите. При всяко посещение за целите на имунологични експерименти се вземаше кръвна проба.
За всяка кръвна проба от даден индивид се извършваха пълно преброяване на кръвните клетки и химически анализ на кръвта. Освен това, с помощта на дебитна цитометрия се извършваше фенотипен анализ на левкоцитите и на техните подгрупи (Т клетки и подгрупи, В клетки, моноцити и NK клетки).
Измерване нарастването на клетките
По долу е описана реакцията в образуването на Т клетки определена ex vivo посредством измерване включването на 3HTdR, при индивидите от групата ACTIMEL и индивидите от групата с неутрално вещество (placebo), по отношение на три микробни антигена: Candida, тетанус и грип.
Приготвяне на клетки:
ml хепаризирана кръв от всеки от взетите образци се обработват по следния начин: епруветката се центрофугира за 10 мин при 1500 об/мин. Плазмата внимателно се прехвърля в надписани криоепруветки и се съхранява при 70°С [sic]. Кръвта се прехвърля в 15 ml епруветка за центрофугиране и се разрежда до 1 : 3 с PBS. В 50 ml епруветка за центрофугиране се добавят 10 ml от Ficell-hypaque и се покриват с 30 ml от разредената кръв. Епруветката се центрофугира за 2 мин при 2000 об/мин. при околна температура. Горният слой от PBS се изтегля и моноядрените клетки се обединяват и прехвърлят в 15 ml епруветка за центрофугиране. Добавят се 10 ml HBSS, разбъркват се и се центрофугират за 10 мин; ** повърхностният слой се изтегля и оформената гранула се суспендира повторно в 2-3 ml HBSS. Добавят се 8 ml HBSS и епруветката се центрофугира при 1500 об/мин. за 5 мин. Тази последователност се повтаря два пъти и възстановените клетки се суспендират отново в 1-2 ml PBS, след което се разбъркват. Клетките се преброяват като се проверява тяхната жизненост посредством изключване с Trypan Blue, като получената е
концентрация се довежда до 2 х 10 /ml.
Приготвяне на антигени:
Антиген на тетанус: приготвянето се извършва в деня на изпитването. Разтвор за съхранение се изготвя посредством разреждане на токсоид на тетанус (CONNAUGHT LABORATORY, Willowdale, Canada) до 1 : 1000 в PBS.
Антигени на Candida albicans: разтвор за съхранение се приготвя посредством разреждане на антигени на Candida albicans (BAYER CO, Elkert, IN) до 1 : 1000 в PBS.
Антигени на грип: разтвор за съхранение се приготвя посредством разреждане на приготвени антигени на вирус на грип (NIBSC, Herts, England) до 1 : 125 в PBS.
Използват се плочки за микротитриране (96 кладенчета). Във всяко кладенче се поставя 100 μΐ от антигенния разтвор и 100 μΐ от клетки при окончателна концентрация от 2 х 105 клетки за кладенче. В контролни кладенчета се поставят 100 μΐ PBS вместо антигенен разтвор. Плочките се инкубират при 37°С, 5% СО2 за 5 дни: 18 часа преди края на инкубацията, се добавят 20 μΐ от 50 pCi/ml 3HTdR (NEW ENGLAND NUCLEAR, Boston, МА). Добивът от клетки от кладенчетата на всяка плочка се получава върху филтри и тези филтри се броят непосредствено в бета-брояч MATRIX 1000 (PACKARD INSTRUMENTS), за да се измери включването на 3HTdR, което се изразява в СРМ (преброявания за минута).
За всеки индивид от групата получила ACTIMEL и за всеки индивид от групата получила неутрално вещество нарастването на клетките се оценява посредством определяне индекса на стимулиране (SI), според следната формула:
SI := Среден CPM стимулирани клетки________________.
Среден СРМ нестимулирани клетки (контролно кладенче)
Статистически анализ
За да се обобщи реакцията на нарастване на Т клетките при подлагане на антиген от всеки вид за всяка от групите от изследването и по всяко време на измерване бяха използвани методите на дескриптивна статистика (средна стойност, стандартно отклонение, медиана). Поради систематичната грешка от разпределение на реакцията на нарастване за данните за нарастване се използва трансформация към натурален логаритъм.
За статистическо моделиране [LITTELL et al. SAS Systems for Mixed Model, North Carolina: SAS Institute Inc. (1996)] се използват вариациите в реакцията на нарастване сравнени с базовата стойност. Модификациите на реакцията на нарастване сравнени с базовата стойност във функция от времето, са представени като се използва метода за изглаждане по крива, както е описано от DIGGLE et al. [Analysis of Longitudinal Data, New York: University Press Inc. 1994].
За да се изследва траекторията на реакцията на нарастване бе разработен смесен линеен модел. Този модел позволява настройване на данните за нарастване към квадратична крива за всяка група от изследването.
Този модел се определя от следното уравнение:
Yijt = aij+ pijT + p2jT2 +eijt,i= 1,...n, j = 1, 2, t= 1,2,3,4, в което:
Yjti отбелязва вариацията в реакцията за нарастване сравнена с базовата стойност за индивид i в продуктова група j във време t като за всяка променлива е приложена трансформация към натурален логаритъм,
Yijt = Log (нарастване във време t) - Log (базова стойност).
ccjj отбелязва прекъсването за индивид i в продуктова група j. То отразява случаен ефект в модела. 0Сц ~ MVN (0, G), G съдържа компонентите на вариантата в диагоналната структура (MVN разпределение на мултинормална променлива).
βlj и β2j са коефициенти на регресия на Т и Т за продуктова група j;
Т е момента на измерване (ден 0, 9, 18, или 28), а Т е квадратичния израз на Т.
Sy е коефициента на грешката:
£jjt ~ MVN ( 0, R) и R = σ Ιη, в което 1п отбелязва матрицата на идентичност пхп.
Бяха извършени статистически тестове за следните хипотези:
а) Тест при който оценения коефициент на регресия е 0.
Но: β lj = 0 към Hi: β lj = 0 (за линеен израз) и Но : β2] = 0 към Hi : $2j = 0 (за квадратичен израз)
Ако β 1 j и 32j не са различни от 0 няма траектория.
Ако P2j е значително различно от 0 налице е квадратична траектория.
Ако само βΐ] е значително различно от нула налице е линейна траектория.
в) Сравнява се дали траекториите на двете групи са идентични.
Но: βΐι = β12 към Hi: βΐι = β12 (за линеен израз) и Но : β2ι = β22 към Hi : β2ι = β22 (за квадратичен израз).
За извършване на анализа бе използван статистически пакет SAS.
Резултати
Таблица I по-долу дава демографските данни по отношение на индивидите и оценката на базовата стойност за нарастване на клетките.
Таблица I
Демографски данни неутрално и базови стойности | Неутрално вещество | ACTIMEL | Сравнение между вещество и ACTIMEL |
Пол Женски | 22 | 26 | Chi-квадратичен тест |
Мъжки | 19 | 21 | р= 0.826 |
Възраст Средна (SD) | (7-)31 | 36.0+/- 7.3 | Т-ТЕСТ |
Медиана | 37 | р= 0.038 | |
Етнос Бял | 26 | 25 | Chi-квадратичен тест |
Черен | 12 | 17 | ОЧАКВАНА |
СТОЙНОСТ ЗА | |||
ДРУГ | 3 | 5 | р = 0.652 |
Левко- Средно (SD) | 5997 | 5810 | Т - тест |
цити | (1451) | (1399) | |
Медиана | 5992 | 5990 | р = 0.540 |
Лимфо- Средно (SD) | 1932 (567) | 2009 (554) | Т-ТЕСТ |
цити | |||
Медиана | 1812 | 1993 | р = 0.519 |
СОЗ+СО4+Средна (SD) | 865 (327) | 907 (325) | Т-тест |
Медиана | 740 | 818 | р = 0.546 |
СОЗ+СО8+Средна (SD) | 469 (205) | 431 (181) | Т-тест |
Медиана | 417 | 403 | р = 0.360 |
CD3+CD25+CpeflHa(SD) | 380 (200) | 408 (182) | Т-тест |
Медиана | 349 | 392 | р = 0.489 |
СОЗ+СО45+Средна (SD) | 1384 (488) | 1411 (434) | Т-тест |
Медиана | 1354 | 1382 | р = 0.783 |
SD = стандартно отклонение.
Нарастване на Т-клетки като реакция на специфични микробни антигени
Средните стойности, стандартните отклонения и медианите на ex vivo нарастването на периферни моноядрени клетки (РВМС) за всяка група (ACTIMEL и неутрално вещество) в различни времена за вземане на пробата, са дадени в таблица 2 по-долу.
Таблица 2
Антиген | Неутрално вещество | ACTIMEL | ||||||
Ден 0 | Ден 0 | Ден 18 | Ден 28 | Ден 0 | Ден 9 | Ден 18 | Ден 28 | |
Candida | ||||||||
Средно | 2.3 | 2.7 | 2.9 | 1.9 | 3.0 | 3.2 | 4.3 | 2.3 |
SD | 2.0 | 3.1 | 4.1 | 1.2 | 3.4 | 3.5 | 5.6 | 2.6 |
Медиана | 1.5 | 1.7 | 1.6 | 1.6 | 1.7 | 1.7 | 2.0 | 1.4 |
Тетанус | ||||||||
Средно | 7.3 | 11.8 | 7.9 | 8.7 | 8.4 | 8.7 | 10.3 | 7.8 |
SD | 7.8 | 12.3 | 8.0 | 8.1 | 15.8 | 10.4 | 11.8 | 8.2 |
МЕДНА | 5.2 | 6.3 | 5.1 | 6.7 | 3.5 | 5.2 | 5.0 | 5.1 |
НА | ||||||||
Грип | ||||||||
Средно | 14.2 | 21.7 | 17.0 | 17.3 | 13.0 | 19.7 | 20.3 | 13.9 |
SD | 11.4 | 19.1 | 19.6 | 15.7 | 12.6 | 17.1 | 16.6 | 12.7 |
Медиана | 11.1 | 16.5 | 9.8 | 12.0 | 9.6 | 16.9 | 17.0 | 11.0 |
SD = стандартно отклонение
Няма значителни различия между двете групи от изследването по отношение базовите стойности (ден 0) за реакцията на нарастване към трите микробни антигена.
На Фигура 1 са показани вариациите в реакцията на нарастване във времето за всеки антиген за двете изследвани групи : Група ACTIMEL: непрекъсната линия; група с неутрално вещество: прекъсната линия.
В Таблица 3 по-долу са дадени резултатите от статистическото моделиране.
Таблица 3
АНТИГ ЕН | ПРОМЕНЛИ ВА | Оценка на Параметъра | Стандартна грешка | Нотест параметър=0 | Сравнение на 2-те криви |
Candida | Placebo Т Гр2 | 0.017 -0.0007 | 0.014 0.0005 | Р=0.232 Р=0.208 | Но: β1ι=β12 Р=0.540 Но: β21=β23 Р=0.458 |
ACTIMEL Т ^2 | 0.028 -0.0012 | 0.013 0.0005 | Р=0.030 Р=0.013 | ||
Тетанус | Placebo Т гр2 | 0.034 -0.0008 | 0.014 0.0005 | Ρ=Ό.Ο22 Р=0.141 | Но: β1ι=β12 Р=0.630 Но: β21=β22 Р=0.626 |
ACTIMEL Т | 0.043 -0.0011 | 0.013 0.0005 | Р=0.001 Р=0.020 | ||
Грип | Placebo Т | 0.022 -0.0004 | 0.017 0.0006 | Р=0.181 Р=0.475 | Но: β1ι=β12 Р=0.045 Но: β2ι=β22 Р=0.027 |
ACTIMEL Т rj-i2 | 0.068 -0.0023 | 0.015 0.0006 | Р=0.0001 Р=0.0001 |
Candida:
В групата ACTIMEL базовата реакция 3.0+/-3.4 в ден 0 нараства до 3.2+3.5 в ден 9 и 4.3+5.6 в ден 18, след което спада до 2.3+2.6 в ден 28 Таблица 2). Коефициентите определени за линейния израз Т и за квадратичния израз Т2 са съответно 0,028 и 0.0012 (Таблица 3). Двете стойности, статистически значително са различни от 0 (съответно, р=О.ОЗО и 0.013). Тези наблюдения внушават, че има значителна положителна тенденция на изменение в реакцията на нарастване на клетките към антигена Candida. Реакцията на нарастване отначало се увеличава, след това намалява както е показано на Фигура 1а.
Групата с неутралното вещество (placebo) за периода на изследването показва малка промяна. Коефициентите на регресия определени за Т и Т са 0.017 и 0.0007. Тези стойности не се различават значително от 0 (съответно, р=0.232 и 0.208). Тези наблюдения показват, че в контролната група няма значима промяна в реакцията на нарастване за периода на изследването. Както е показано на Фигура 1а, кривата за групата с неутрално вещество е по-плоска от тази на групата с ACTIMEL. Въпреки че групата с ACTIMEL показва значителна траектория, в противоположност на групата с неутрално вещество, разликата между двете криви не достига нивото на статистическа значимост (р=0.540 за Т и р=0.458 за Т2, Таблица 3).
Тетанус :
За групата с ACTIMEL, реакцията постепенно нараства от базовото ниво до ден 18, след което спада. Коефициентите на регресия определени за Т и Т2 са съответно 0.043 и 0.0011 (Таблица 3). Тези две стойности за значително различни от 0 (съответно р=0.001 и 0.020). Както в случая при Candida, положителната промяна в реакцията на нарастване при групата с ACTIMEL за периода на провеждане на изследването е значителна. При групата с неутрално вещество, средната стойност нараства от 7.3 в ден 0 до 11.8 в ден 9, след което спада до 7.9 в ден 18 и отново нараства до 8.7 в ден 28 (Фигура 1в). Дори и при незначителен коефициент за израза от втора степен, Т2 (-0.0008, р=0.141, Таблица 3), значимият коефициент определен за Т (0.034, р=0.022, Таблица 3) показва ефект в траекторията. При това, ако групата с ACTIMEL се сравни с групата с неутрално вещество, статистическите тестове не показват някаква значителна разлика между двете криви (р=0.639 и 0.626, съответно за Т и Т ).
Грип:
Групата с ACTIMEL показва по-ясна промяна в сравнение с групата с неутрално вещество. Средната стойност нараства от 13±12.6 в ден 0 до 19.7±17.1 в ден 9 остава на това ниво до ден 18 и спада до 13.9±12.7 в ден 28 (Фигура 1с). Двата коефициента определени за Т и Т значително се различават от 0 (р=0;001). Тези статистически данни означават, че положителната промяна в реакцията за нарастване на клетките по време на изследването е значителна (Таблица 2).
Групата с неутрално вещество показва изменения подобни на тези наблюдавани при тетанус. Средните стойности нарастват до ден 9, спадат до ден 18, и отново нарастват до ден 28, както е показано на Фигура 1с. Двата определени коефициента на регресия не се различават значително от 0 (стойностите за р са съответно 0.181 и 0.475 за Т и Т ), което показва, че няма значителна траектория във вариациите на реакцията за нарастване към антигена на грип.
Когато параметрите определени за група ACTIMEL и групата с неутрално вещество се сравнят, се наблюдават значителни разлики, както за линейните параметри, така и за квадратичните параметри (р=0.045 за Т и р=0.027 за т2) (Таблица 3). Тези заключения показват, че вариациите в реакцията за нарастване на клетките между двете групи от изследването се различават значително.
ПРИМЕР 2: ДЕЙСТВИЕ НА LACTOBACILLUS CASEI ВЪРХУ НАРАСТВАНЕТО НА Т ЛИМФОЦИТНИ ПОДКЛАСОВЕ КАТО РЕАКЦИЯ НА СТИМУЛИРАНЕ С АНТИГЕН НА ГРИП
Точното естество на подклас(ове) Т, който реагира in vitro на микробни антигени не е известно. Предполага се, че или всеки един от специфичните подкласове на Т лимфоцитите, като тези представени от фенотиповете CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+CD25+ и CD3+CD45+ могат да се считат за първично реагиращи, или тези комбинирани подкласове могат да допринасят за общата реакция за нарастване на клетки спрямо усилващи антигени.
При предварително предположение, че специфичните лимфоцитни подкласове са главните реагенти на усилващите антигени, бяха извършени анализи, използващи статистическия модел описан в Пример 1 по-горе, за Т клетки подкласове CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+CD25+ CD3+CD45+ , с цел да се определи дали реакцията за нарастване на клетките постигната за всеки от 4-те подкласа се различава значително между групата с ACTIMEL и групата с неутрално вещество.
В тези анализи, стойностите за реакция за нарастване на клетките, първоначално основани на пълните РМВС, бяха преобразувани, за всеки подклас, в нови стойности изчислени според пълната честота на CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+CD25+ и CD3+CD45+ Т клетки във всяка кръвна проба. След което статистически анализи бяха проведени за всеки подклас, както е описани в Пример 1 по-горе.
Средните стойности, стандартните отклонения и медианите за всяка от групите с ACTIMEL и неутрално вещество, за четири левкоцитни подкласа са дадени в таблица 4 по-долу.
ч»
Таблица 4
Левкоцитен подклас | НЕУТРАЛНО ВЕЩЕСТВО | ACTIMEL | ||||||
Ден 0 | Ден 9 | Ден 18 | Ден 28 | Ден 0 | Ден 9 | Ден 18 | Ден 28 | |
CD3+CD4+ Средно | 101 | 149 | 113 | 125 | 87.4 | 131 | 133 | 107 |
SD | 84.0 | 130 | 117 | 127 | 104 | 90.2 | 112 | 127 |
Медиана | 72.8 | 111 | 74.5 | 91.0 | 63.0 | 103 | 92.0 | 64.5 |
CD3+CD8+ Средно | 192 | 268 | 251 | 251 | 230 | 301 | 365 | 244 |
SD | 155 | 250 | 289 | 336 | 375 | 286 | 554 | 302 |
Медиана | 167 | 218 | 140.5 | 168 | 105 | 180 | 214 | 126 |
CD3+CD25+ Средно | 250 | 377 | 260 | 354 | 177 | 267 | 310 | 270 |
SD | 219 | 374 | 208 | 462 | 139 | 163 | 210 | 305 |
Медиана | 185 | 263 | 228 | 247 | 159 | 262 | 251 | 177 |
CD3+CD45+ Средно | 63.5 | 87.6 | 73.0 | 76.2 | 52.1 | 78.7 | 87.1 | 69.1 |
SD | 54.1 | 70.9 | 81.3 | 79.7 | 72.2 | 56.3 | 79.2 | 95.2 |
Медиана | 47.5 | 66.6 | 43.1 | 51.4 | 34.0 | 64.0 | 67.8 | 41.0 |
SD = Стандартно отклонение
Разликите между базовите стойности на двете групи от изследването не са значими статистически.
Като се използва статистическия модел описан в пример 1 по-горе, за всеки от четирите лимфоцитни подкласа са анализирани вариациите в нарастването на клетките, съответстващо на тези базови стойности като реакция на антиген на грип. На Фигура 2 са показани вариациите в нарастването на клетките по логаритмична скала за всеки от тези подкласове и за всяка от двете групи от изследването.
Резултатите от статистическото моделиране са даден в Таблица 5 по долу.
Таблица 5
Лимфоцитен подклас | Променлива | Оценка на параметъра (SE) | Но тест: параметър= 0 | Сравнение между двете криви |
CD3+CD45+ | Placebo Т Т2 | 0.015 (0.016) -0.0003 (0.0006) | Р=0.352 Р=0.597 | Но: β11=β12 Р=0.015 Но: β21=β22 Р=0.016 |
ACTIMEL Т т2 | 0.071 (0.015) -0.0024 (0.0006) | РС0.001 Р0.001 | ||
CD3+CD25+ | Placebo Т Т2 | 0.024 (0.016) -0.0004 (0.0006) | Р=0.144 Р=0.463 | Но: β1ι=β12 Р=0.031 Но: β2,.β22 Р=0.030 |
ACTIMEL Т | 0.071 (0.015) -0.0022 (0.0006) | Р<0.001 Р0.001 | ||
CD3+CD8+ | Placebo Т гр2 | 0.014(0.017) -0.0003 (0.0006) | Р=0.410 Р=0.671 | Но: β1,.β12 Р=0.013 Н»: β2,.β22 Р=0.012 |
ACTIMEL Т Т2 | 0.070 (0.015) -0.0024 (0.0006) | Р0.001 Р<0.001 | ||
CD3+CD4+ | Placebo Т | 0.022 (0.017) -0.0005 (0.0006) | Р-0.203 Р=0.436 | Н»: β1,.β12 Р=0.028 Ц>: β2„β22 Р=0.024 |
ACTIMEL Т Т2 | 0.072 (0.015) -0.0025 (0.0006) | Р0.001 Р<0.001 |
SE = стандартна грешка
Реакциите за нарастване на клетките за всеки от четирите лимфоцитни подкласа са в съответствие с тези наблюдавани за общите РМВС. По време на излагане на антиген на грип, в група е ACTIMEL се наблюдават значителни вариации и за четирите лимфоцитни подкласа. Тези вариации могат да се представят като квадратични функции на времето.
За четирите подкласа в групата с неутрално вещество се наблюдават малки вариации.
Освен това, разликите между двете групи са значителни за всички левкоцитни подкласа.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Тези резултати показват, че за трите изпитани антигена има увеличение в реакцията за нарастване на клетки, предизвикано от антигенен ускорител, което е по-голямо в групата с ACTIMEL отколкото в групата с неутрално вещество. В случая с антиген на грип, увеличението в групата с ACTIMEL е съществено значително, в сравнение с това наблюдавано в групата с неутрално вещество, както за РВМС, така и за всеки от подкласовете Т-клетки: CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+CD25+ и
CD3+CD45+.
От това става ясно, че употребата на ACTIMEL въведен в разглежданите индивиди, под формата на имунологично иницииране in vivo, води до ex vivo реакция на техните Т клетки към микробни антигени, и поспециално към антигени на грип, която е по-добре изразена от тази наблюдавана при групата с неутрално вещество.
Това увеличаване в реакцията е свързано с честотата и състоянието на активиране на CD3 + Т клетки и техните подкласове, в индивидите от групата на ACTIMEL.
Освен това положителната връзка с наличието на активиращ маркер на CD25, предполага участието на едно in vivo активиране на Т-клетки специфични за грип, изразяващи рецептори CD25 IL-2, които са в състояние да реагират по-ефективно на антигените на грипа. Анализът на подкласовете от Т-клетки също предполага, че реакцията за нарастване на клетки вероятно включва както подклас CD4+, така и CD8+, съответстващи на антигена на грипа. Важността на Т - подклас CD3+/CD8+ при анализа на нарастването на клетки предполага възможността за in vivo иницииране на депо от специфични за грипа CD8+ цитотоксични клетки.
Claims (7)
- ПАТЕНТНИ ПРЕТЕНЦИИ1. Употреба на бактериална култура от вида L. casei за приготвяне на състав, който може да се въведе орално за подсилване на специфична системна имунна реакция срещу патогенни микроорганизми.
- 2. Употреба според претенция 1, характеризираща се с това, че споменатия патогенен микроорганизъм е патоген на дихателните пътища.
- 3. Употреба според всяка една от претенции 1 и 2 , характеризираща се с това, че споменатия патогенен микроорганизъм е вирус подбран от риновируси, дихателен синцитиален вирус и миксовируси.
- 4. Употреба според претенция 3, характеризираща се с това, че споменатият вирус е един грипен вирус.
- 5. Употреба според всяка една от претенции 1 до 4 характеризираща се с това, че споменатата култура/,, casei е CNCM култура 1-1518.
- 6. Употреба според всяка една от претенции 1 до 5, характеризираща се с това, че споменатия състав е под формата на храна или хранителна добавка.
- 7. Употреба според всяка една от претенции от 1 до 6, характеризираща се с това, че споменатия състав е под формата на ферментирал млечен продукт.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
FR0006679A FR2809312B1 (fr) | 2000-05-25 | 2000-05-25 | Utilisation de l. casei dans des compositions immunostimulantes |
PCT/FR2001/001310 WO2001089541A1 (fr) | 2000-05-25 | 2001-04-27 | Utilisation de lactobacillus casei dans des peptides immunostimulantes |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
BG107299A true BG107299A (bg) | 2003-07-31 |
BG65884B1 BG65884B1 (bg) | 2010-04-30 |
Family
ID=8850597
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
BG107299A BG65884B1 (bg) | 2000-05-25 | 2002-11-20 | Употреба на lactobacillus casei в имуностимулиращи пептиди |
Country Status (28)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7604809B2 (bg) |
EP (1) | EP1283714B1 (bg) |
JP (1) | JP2003534284A (bg) |
CN (1) | CN1194707C (bg) |
AR (1) | AR028626A1 (bg) |
AT (1) | ATE332143T1 (bg) |
AU (2) | AU5643501A (bg) |
BG (1) | BG65884B1 (bg) |
BR (1) | BR0111135A (bg) |
CA (1) | CA2410350C (bg) |
CZ (1) | CZ303600B6 (bg) |
DE (1) | DE60121327T2 (bg) |
DK (1) | DK1283714T3 (bg) |
EA (1) | EA005081B1 (bg) |
ES (1) | ES2267763T3 (bg) |
FR (1) | FR2809312B1 (bg) |
HK (1) | HK1055898A1 (bg) |
HR (1) | HRP20020935A2 (bg) |
HU (1) | HUP0302041A3 (bg) |
IL (1) | IL152980A0 (bg) |
MA (1) | MA25760A1 (bg) |
MX (1) | MXPA02011636A (bg) |
NO (1) | NO332369B1 (bg) |
PL (1) | PL201801B1 (bg) |
PT (1) | PT1283714E (bg) |
SK (1) | SK18272002A3 (bg) |
WO (1) | WO2001089541A1 (bg) |
ZA (1) | ZA200209087B (bg) |
Families Citing this family (29)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6800744B1 (en) * | 1997-07-02 | 2004-10-05 | Genome Therapeutics Corporation | Nucleic acid and amino acid sequences relating to Streptococcus pneumoniae for diagnostics and therapeutics |
GB0009294D0 (en) | 2000-04-15 | 2000-05-31 | Sec Dep For The Home Departmen | Improvements in and relating to analysis of DNA samples |
US9610347B2 (en) * | 2001-04-30 | 2017-04-04 | Cortcontrol | Vaccination response for immunodeficiency or high cortisol |
CN1317385C (zh) * | 2003-05-30 | 2007-05-23 | 上海光明乳业股份有限公司 | 干酪乳杆菌Bd-II菌株及其在降低血脂方面的应用 |
US8877178B2 (en) | 2003-12-19 | 2014-11-04 | The Iams Company | Methods of use of probiotic bifidobacteria for companion animals |
US20050158294A1 (en) | 2003-12-19 | 2005-07-21 | The Procter & Gamble Company | Canine probiotic Bifidobacteria pseudolongum |
ATE361101T1 (de) * | 2004-08-24 | 2007-05-15 | Nutricia Nv | Nahrungszusammensetzung die unverdauliche oligosaccharide enthält |
ZA200705844B (en) * | 2004-12-15 | 2008-09-25 | Van Der Westhuzen Corne Floris | Detoxifying and immunity-booster composition |
EP1683425A1 (en) * | 2005-01-21 | 2006-07-26 | Compagnie Gervais Danone | Use of a fermented milk containing L. Casei for the manufacture of a composition for the prevention or treatment of a delayed-type hypersensitivity reaction |
ES2264368B1 (es) * | 2005-02-11 | 2007-12-01 | Francisco Exposito Mesa | Complemento alimenticio o dietetico compuesto por productos procedentes del lisado de microorganismos. |
BRPI0611492B1 (pt) | 2005-05-31 | 2021-10-13 | Mars, Incorporated | Bifidobactéria probiótica felina |
WO2006130187A1 (en) | 2005-05-31 | 2006-12-07 | The Iams Company | Feline probiotic lactobacilli |
CA2662226C (en) | 2006-09-10 | 2020-08-04 | Glycotope Gmbh | Fully human high yield production system for improved antibodies and proteins |
FR2912657B1 (fr) * | 2007-02-16 | 2009-04-17 | Gervais Danone Sa | Utilisation de lactobacillus casei pour renforcer la protection induite par la vaccination anti-grippale. |
WO2009021585A1 (en) * | 2007-08-13 | 2009-02-19 | Dsm Ip Assets B.V. | Probiotic bacteria for rducing the occurence of symptoms of winter infections |
WO2009067000A1 (en) * | 2007-11-20 | 2009-05-28 | N.V. Nutricia | Composition with synbiotics |
EP2119365B1 (de) | 2008-05-13 | 2017-08-16 | Glycotope GmbH | Fermentationsprozess |
CA2722738C (en) * | 2008-05-13 | 2017-04-25 | Glycotope Gmbh | Fermentation process |
US9771199B2 (en) | 2008-07-07 | 2017-09-26 | Mars, Incorporated | Probiotic supplement, process for making, and packaging |
EP2153837A1 (en) | 2008-08-14 | 2010-02-17 | Compagnie Gervais Danone | Compositions comprising Lactobacillus casei for improving resistance to common infectious diseases |
FR2937252B1 (fr) * | 2008-10-17 | 2011-05-20 | Pf Medicament | Association d'un extrait de sureau et d'une souche de l. paracasei. |
US10104903B2 (en) | 2009-07-31 | 2018-10-23 | Mars, Incorporated | Animal food and its appearance |
BR112012016894A2 (pt) * | 2010-01-08 | 2015-09-15 | Gervais Danone Sa | lactobacilos com ação antioxidante. |
EA031179B1 (ru) * | 2010-03-12 | 2018-11-30 | Компани Жервэ Данон | Молочнокислые бактерии, применяемые при чревной болезни |
CN105288616B (zh) * | 2010-10-15 | 2018-10-19 | 科.汉森有限公司 | 免疫佐剂 |
EP2455092A1 (en) | 2010-11-11 | 2012-05-23 | Nestec S.A. | Non-replicating probiotic micro-organisms protect against upper respiratory tract infections |
US9700610B2 (en) | 2011-08-22 | 2017-07-11 | Glycotope Gmbh | Microorganisms carrying a tumor antigen |
WO2014038929A1 (en) | 2012-09-07 | 2014-03-13 | N.V. Nutricia | Probiotics for producing antiviral factors |
CA3100608A1 (en) | 2018-05-18 | 2019-11-21 | Daiichi Sankyo Co., Ltd. | Anti-muc1 antibody-drug conjugate |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH05236872A (ja) * | 1992-02-27 | 1993-09-17 | Takanashi Nyugyo Kk | 乳酸菌含有食品 |
JP4112021B2 (ja) * | 1994-02-16 | 2008-07-02 | 明治乳業株式会社 | 乳酸菌を用いた免疫賦活剤 |
WO1996020607A1 (fr) * | 1995-01-02 | 1996-07-11 | Compagnie Gervais Danone | Ferment lactique, et son utilisation pour la preparation de produits anti-diarrheiques |
CN1150314C (zh) * | 1997-08-21 | 2004-05-19 | 纽西兰乳品局 | 增强免疫的乳酸菌 |
US6699517B2 (en) * | 1997-11-28 | 2004-03-02 | Compagnie Gervais Danone | Method for preparing food products by fermenting soy milk with streptococcus thermophilus |
IT1298918B1 (it) * | 1998-02-20 | 2000-02-07 | Mendes Srl | Uso di batteri dotati di arginina deiminasi per indurre apoptosi e/o ridurre una reazione infiammatoria e composizioni farmaceutiche |
KR100324441B1 (ko) * | 1999-02-08 | 2002-02-27 | 이은선 | 위염, 위궤양, 십이지장궤양 예방을 위한 식품 |
-
2000
- 2000-05-25 FR FR0006679A patent/FR2809312B1/fr not_active Expired - Fee Related
-
2001
- 2001-04-27 HU HU0302041A patent/HUP0302041A3/hu unknown
- 2001-04-27 SK SK1827-2002A patent/SK18272002A3/sk not_active Application Discontinuation
- 2001-04-27 AU AU5643501A patent/AU5643501A/xx active Pending
- 2001-04-27 MX MXPA02011636A patent/MXPA02011636A/es active IP Right Grant
- 2001-04-27 JP JP2001585785A patent/JP2003534284A/ja active Pending
- 2001-04-27 BR BR0111135-3A patent/BR0111135A/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-04-27 PT PT01929743T patent/PT1283714E/pt unknown
- 2001-04-27 EP EP01929743A patent/EP1283714B1/fr not_active Expired - Lifetime
- 2001-04-27 AT AT01929743T patent/ATE332143T1/de active
- 2001-04-27 DK DK01929743T patent/DK1283714T3/da active
- 2001-04-27 CA CA2410350A patent/CA2410350C/fr not_active Expired - Lifetime
- 2001-04-27 CN CNB018100511A patent/CN1194707C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-04-27 US US10/276,315 patent/US7604809B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-04-27 WO PCT/FR2001/001310 patent/WO2001089541A1/fr active IP Right Grant
- 2001-04-27 AU AU2001256435A patent/AU2001256435B2/en not_active Ceased
- 2001-04-27 ES ES01929743T patent/ES2267763T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-04-27 IL IL15298001A patent/IL152980A0/xx unknown
- 2001-04-27 CZ CZ20024189A patent/CZ303600B6/cs unknown
- 2001-04-27 PL PL358408A patent/PL201801B1/pl unknown
- 2001-04-27 EA EA200201248A patent/EA005081B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-04-27 DE DE60121327T patent/DE60121327T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-05-24 AR ARP010102498A patent/AR028626A1/es unknown
-
2002
- 2002-11-08 ZA ZA200209087A patent/ZA200209087B/xx unknown
- 2002-11-20 BG BG107299A patent/BG65884B1/bg unknown
- 2002-11-21 NO NO20025595A patent/NO332369B1/no not_active IP Right Cessation
- 2002-11-25 HR HR20020935A patent/HRP20020935A2/hr not_active Application Discontinuation
- 2002-12-20 MA MA26968A patent/MA25760A1/fr unknown
-
2003
- 2003-11-12 HK HK03108188A patent/HK1055898A1/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
BG107299A (bg) | Употреба на lactobacillus casei в имуностимулиращи пептиди | |
Fernández et al. | The microbiota of the human mammary ecosystem | |
Liu et al. | An in vitro approach to study effects of prebiotics and probiotics on the faecal microbiota and selected immune parameters relevant to the elderly | |
Roessler et al. | The immune system in healthy adults and patients with atopic dermatitis seems to be affected differently by a probiotic intervention | |
CN103037876B (zh) | 用于治疗免疫病症的包含益生菌的组合物 | |
Tannock | Probiotics: time for a dose of realism | |
Perdigón et al. | Interaction of bifidobacteria with the gut and their influence in the immune function | |
Donohue | Safety of probiotics | |
CN110964658B (zh) | 一种具有免疫调节功能的副干酪乳杆菌et-22 | |
CN105288616B (zh) | 免疫佐剂 | |
JP2011195513A (ja) | 抗アレルギー用組成物 | |
Damaceno et al. | Isolation and identification of potential probiotic bacteria from human milk | |
US8349315B2 (en) | Use of Lactobacillus casei for increasing the protection provided by the influenza vaccine | |
AboNahas et al. | Trust your gut: the human gut microbiome in health and disease | |
US20040058409A1 (en) | Micro-oraganisms with glycosylation modulating action of intestinal cell surface | |
Berman et al. | Daily ingestion of a nutritional probiotic supplement enhances innate immune function in healthy adults | |
Suzuki et al. | A quantitative and relative increase in intestinal bacteroides in allergic infants in rural Japan | |
Namdag et al. | Determination Result of Colonic Lactobacillus in Healthy Adults | |
Ramani et al. | Lactobacilli and Obesity | |
Lahcene et al. | Characterization of intestinal microbiota in celiac children | |
JP2007091694A (ja) | スギ花粉又はハウスダスト特異的IgE抗体産生抑制剤、及び該抗原特異的IgE抗体産生抑制のために用いられる飲食品 | |
Patel | Immunomodulatory effect of dietary intervention of probiotic Lactobacillus helveticus MTCC 5463 in geriatric volunteers of Gujarat, India |