Invention de : Masaru Ywanami, Masuo Murakami, Yoshinobu Nagano, Masaharu Fujimoto, Tetsuya Maeda, Noriaki Nagano et Atsuki Yamazaki.
<EMI ID=1.1>
céphalosporines présentant un groupe méthoxy en position 7a. Plus particulièrement, la présente invention concerne un procédé de production de
<EMI ID=2.1>
générale :
<EMI ID=3.1>
<EMI ID=4.1>
<EMI ID=5.1>
(dans laquelle R3 et R4 qui peuvent être semblables ou différents représentent chacun un atome d'hydrogène, un groupe hydroxy, un groupe amino ou un groupe alcoyle inférieur, n représente 0 ou 1, R5 représente un groupe hydroxy, un groupe amino, un groupe mercapto, un groupe alcoylamino inférieur, un groupe alcanoylamino inférieur, un groupe alcoxycarbonylamino inférieur, un groupe
<EMI ID=6.1>
ureido et X représente -CH= ou -N=) et R<2> représente un groupe alcoyle inférieur-5- thiadiazol-1,3,4-yl-2 ou un groupe alcoyle inférieur-1-tétrazol-yl-5 et leurs sels acceptables pharmaceutiquement.
Des dérivés de la céphalosporine présentant un groupe méthoxy en position 7a , un groupe acyle hétérocyclique en position
<EMI ID=7.1>
connus. Par exemple la demande de brevet publiée allemande
<EMI ID=8.1> <EMI ID=9.1>
composés semblables sont aussi décrits dans, par exemple, le brevet des Etats Unis d'Amérique N[deg.] 3.887.547, le brevet hollandais N[deg.] 72 16268, les demandes de brevets publiées allemandes
N[deg.] 2.440.790, N[deg.] 2.448.582, N[deg.] 2.445.341, N[deg.] 2.412.598,
N[deg.] 2.432.415 et N[deg.] 2.455.884 et le brevet britannique N[deg.] 1.412.886.
Le but de la présente invention est de fournir de nouveaux dérivés de la céphalosporine présentant une excellente activité antibiotique contre les bactéries gram-positives et gram-négatives.
On a trouvé que le but ci-dessus de l'invention peut être
<EMI ID=10.1>
senté par la formule générale I ci-dessus- et ses sels acceptables pharmaceutiquement.
Les composés de la présente invention sont suggérés par l'art connu sous forme de concepts très larges et vagues tels que des dérivés de la céphalosporine substitués par un noyau hétérocyclique à 5 ou 6 éléments mais n'ont jamais été préparés et n'ont jamais fait l'objet de recherches en ce qui concerne leur activité pharmaceutique avant la présente invention.
Dans les composés de l'invention représentés par la formule I, des exemples du groupe alcoyle inférieur comportent des groupes hydrocarbures à chaîne droite ou ramifiée présentant de
1 à 4 atomes de carbone tels que les groupes méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, n-butyle, sec-butyle, tert-butyle, etc. Comme sels acceptables pharmaceutiquement des composés ci-dessus objet de la présente invention, on peut citer des sels de métaux alcalins tels que les sels de sodium, de potassium, etc. des
sels de métaux alcalino-terreux tels que les sels de calcium, de magnésium, etc. des sels d'amines organiques tels que les sels de triméthylamine, d'éthanolamine, diéthanolamine, de lysine, d'alginine, d'ornithine, etc.
Dans les cas où les substituants sont des groupes hydroxy, mercapto ou amino, il est possible que les substituants existent sous plus d'une forme tautomërique, à savoir hydroxy ou oxo, mercapto ou thioxo et amino substitué ou non substitué ou groupe imino substitué ou non substitué. Les composés peuvent exister exclusivement comme un tautomère ou peuvent être en mélange équilibré entre d'autres formas.
<EMI ID=11.1>
produits par plusieurs types de réaction qui varient avec le choix des matériaux de départ, la disponibilité des réactifs de la réaction, la procédure de séparations des sous-produits pendant la réaction, la possibilité d'appliquer la condition de réaction, etc. Des modes de réactions typiques pour la production des composés objets de la présente invention seront illustrés ci-après mais ne limitent pas l'invention.
Selon le premier type de réaction, un acide méthoxy 7a-thio-
<EMI ID=12.1>
céphem-carboxylique-4 représenté par la formule générale
<EMI ID=13.1>
dans laquelle Z représente le groupe Y-CH2CO- (dans lequel Y
<EMI ID=14.1>
présente un groupe alcoyle inférieur-5-thiadiazol-1,3,4-yl-2 ou un groupe alcoyle inférieur-1-tétrazol-yl-5 est mis en réaction avec un composé à noyau hétérocyclique représenté par la formule générale
<EMI ID=15.1>
dans laquelle R représente
<EMI ID=16.1>
(dans laquelle R<3> et R qui peuvent être identiques ou différents représentent chacun un atome d'hydrogène, un groupe hydroxy, un groupe amino ou un groupe alcoyle inférieur, n représente 0 ou 1, R5 représente un groupe hydroxy, un groupe amino, un groupe
<EMI ID=17.1> <EMI ID=18.1>
ou un dérivé réactif du groupe carboxy de celui-ci lorsque Z est un atome d'hydrogène.
La réaction du premier mode est expliquée ci-après plus en détail.
Selon un type du premier mode de réaction, l'acide
<EMI ID=19.1>
carboxylique-4 représenté par la formule générale
<EMI ID=20.1>
<EMI ID=21.1>
mis en réaction avec un composé représenté par
R<1>-S-A (III)
(dans laquelle A représente un atome d'hydrogène ou R -S-) , en présence d'une base.
A savoir la réaction du composé de formule II et du composé de formule III est habituellement effectuée dans un solvant organique qui n'affecte pas la réaction, de l'eau ou un mélange de ceux-ci sous refroidissement ou à la température ambiante. Comme base utilisée dans cette réaction, on peut utiliser des bases azotées aliphatiques, des bases azotées aromatiques, des bases azotées hétérocycliques, des carbonates de métaux alcalins, des hydrogénocarbonates de métaux alcalins, etc. Des exemples convenables de ces bases sont la triéthylamine, la N,N-diméthylaniline, la N-éthylmorpholine, la pyridine, la collidine, la lutidine-2,6 , le carbonate de potassium, le carbonate de sodium, l'hydrogénocarbonate de potassium et l'hydrogënocarbohate de sodium.
L'atome d'halogène représenté par Y dans la formule II décrite ci-dessus, peut être un atome de chlore, un atome de brome, un atome de fluor, etc. La quantité du composé de formule III utilisée dans cette réaction est une quantité équimoléculaire ou une quantité en excès molaire par rapport à celle du composé de formule II, de préférence un rapport molaire de 1 à 2.
<EMI ID=22.1>
utilisés sans influence sur la réactio:sont le méthanol, le chloroforme, chlorure de méthylène, le chlorure d'éthylène,
<EMI ID=23.1>
<EMI ID=24.1>
<EMI ID=25.1>
<EMI ID=26.1>
R<1>SCH2COOH (V)
<EMI ID=27.1>
<EMI ID=28.1>
organique qui n'affecte pas la réaction
<EMI ID=29.1>
<EMI ID=30.1>
dans laquelle R à la même signification que ci-dessus est mis en réaction avec le composé représenté par
R<2>-SM (VII)
dans laquelle R2 à la même signification que ci-dessus et M représente un atome d'hydrogène ou un atome d'un métal alcalin.
Il est préférable d'effectuer la réaction sous une condition presque neutre et le composé de formule VI est amené à réagir sous une quantité équimoléculaire ou une quantité en excès molaire du composé de formule VII. Comme sel de métal alcalin du composé de la formule VII, on peut employer le sel de sodium, le sel de potassium, etc. Lorsque le composé de formule VII dans laquelle M est un atome d'hydrogène est utilisé, on préfère effectuer la réaction en présence d'une base telle qu'un hydroxyde alcalin, un carbonate de métal alcalin, un hydrogénocarbonate de métal alcalin, une trialcoylamine (par exemple le triêthylamine), la pyridine,
la diéthylaniline, etc. La réaction est habituellement effectuée dans un solvant organique, qui n'affecte pas la réaction, tel que de l'acétone, du diméthylformamide, du mêthanol, de l'éthanol, etc., de l'eau ou un mélange de ceux-ci ou, de plus, une solution tampon au phosphate, à température ambiante ou sous chauffage.
Le groupe carboxy en position 3 du noyau céphem du matériau de départ peut aussi être protégé par un groupe de protection
<EMI ID=31.1>
un groupe méthyle ou un groupe éthyle durant les étapes de réaction et peut être séparé au cours de l'étape finale par une procèdure connue.
Les composés de la présente invention ainsi produits peuvent être transformés en leurs sels non toxiques utilisables ou acceptables pharmaceutiquement. Ces sels peuvent être formés de la manière usuelle. Par exemple le sel de métal alcalin du composé recherché de formule I peut être obtenu en ajoutant au composé un 2 <EMI ID=32.1>
et en ajoutant ensuite un solvant organique présentant une solubilité faible pour le sel formé tel que de l'éther, un acétate d'éthyle, etc. De même, en ajoutant au composé une quantité équimoléculaire ou légèrement en excès d'une base organique telle que la triëthylamine, la diéthanolamine, l'alginine, la lysine, etc , on peut former le sel de la base organique. En ajoutant de plus au composé de l'ammoniaque ou une solution d'ammoniac dans un solvant organique, on peut également former le sel d'ammonium du composé. Ces sels sont interchangeables entre eux si on le désire, de la manière usuelle.
Le composé de formule I objet de l'invention ou son sel est isolé et purifié par les procédés usuels.
Les composés de la présente invention produits par les méthodes ci-dessus sont des antibiotiques présentant une activité antimicrobienne excellente contre différentes bactéries grampositives et gram-négatives et sont utilisables pour les traitements et la prophylaxie des différentes maladies provoquées par ces bactéries, comme conservateurs pour les aliments et les produits de l'industrie chimique et comme additifs pour l'alimentation. La concentration d'inhibition minimale (CIM)/(mcg/ml) au cours d'essais in vitro sont donnés en détail dans les Tableaux suivants.
<EMI ID=33.1>
<EMI ID=34.1>
<EMI ID=35.1>
<EMI ID=36.1>
<EMI ID=37.1>
TABLEAU 2
<EMI ID=38.1>
<EMI ID=39.1>
<EMI ID=40.1>
<EMI ID=41.1>
<EMI ID=42.1>
une formulation d'une manière semblable aux autres dérivés de la céphalosporine connus et sont administrés par voie orale ou parentérale à l'état, par exemple, de comprimés, de poudre, de granulés, de pastilles, d'injections, de suppositoires, de suspensions, etc. et la dose diffère selon la gravité de la maladie des malades et la condition générale, l'âge, le poids, etc. du malade mais elle est habituellement de 10-50 mg/kg.
La présente invention sera illustrée en détail par les exemples suivants.
EXEMPLE 1
<EMI ID=43.1>
30 mg d'hydroxy-2-mercapto-4-pyridine, 40 mg d'hydrogénocarbonate de sodium, 5 ml d'eau et 10 ml de méthanol a été brassé pendant
4 heures 1/2 à la température ambiante. Après élimination par distillation du méthanol du mélange réactionnel, le pH du mélange a été ajusté à 9 avec de l'hydrogênocarbonate de sodium et le mélange a été filtré. Le filtrat a été acidifié avec de l'acide chlorhydrique à 1,5% et extrait avec 100 ml d'un mélange de n-butanol et d'acétate d'éthyle présentant un rapport en volume
de 1 : 1. L'extrait a été lavé avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, de l'eau et ensuite une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium et séchée sur du sulfate de magnésium anhydre, le solvant a été éliminé par distillation sous pression réduite. Le résidu obtenu a été soumis à une chromatographie sur colonne avec gradient d'élution en utilisant une solution initiale dans un mélange de chloroforme, de propanol et d'acide formique sous un rapport en volume de 90 : 10 : 3 et en accroissant ensuite le pourcentage de méthanol lorsque l'élution progresse. Les fractions contenant le composé recherché ont ensuite été rassemblées et le solvant a été éliminé par distillation des fractions combi-
<EMI ID=44.1>
céphem-carboxylique-4.
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D.--DMSO) :
<EMI ID=45.1>
<EMI ID=46.1> céphalosporanique, le mélange a été brassé à la température ambiante et, après avoir ajouté à celui-ci 2,8 mg de mercapto-4-pyridine sous brassage, le mélange résultant a été à nouveau brassé pendant deux heures. Après achèvement de la réaction, le mélange réactionnel a été refroidi à la glace pendant 30 minutes et les précipités formés ont été récupérés par filtration, lavés avec du chlorure de
<EMI ID=47.1>
<EMI ID=48.1>
<EMI ID=49.1>
b) Dans un mélange de 5ml de chlorure de méthylène et 19,5mg de triéthylamine on a dissous 92 mg d'acide bromoacétamido-7�- - <EMI ID=50.1>
carboxylique-4 sous brassage à la température ambiante et après avoir de plus ajouté à celui-ci 22 mg de mercapto-4-pyridine, le mélange résultant a été brassé pendant environ 40 mn.Les précipités formés ont été récupérés par filtration, lavés avec du chlorure d'éthylène et séchés pour fournir 58 mg d'acide méthoxy-7a-(méthyl-
<EMI ID=51.1>
céphem-carboxylique-4.
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D.--DMSO)
<EMI ID=52.1>
<EMI ID=53.1>
Dans un mélange de 5 ml de chlorure de méthylène et de
22,0 mg de triéthylamine ont été dissous 100 mg d'acide bromo-
<EMI ID=54.1>
carboxylique-4.
<EMI ID=55.1>
<EMI ID=56.1>
EXEMPLE 4
<EMI ID=57.1>
carboxylique-4, 65 mg d'hydroxy-2-mercapto-4-pyridine, 8 ml d'eau et 16 ml de méthanol a été brassé au bain de glace et après avoir de plus ajouté au mélange 80 mg d'hydrogênocarbonate de sodium,
le mélange résultant a été brassé pendant deux heures à la température ambiante. Le méthanol a été ensuite chassé par distillation sous pression réduite et, après filtration, le filtrat a été acidifié avec de l'acide chlorhydrique dilué et extrait avec 50 ml
<EMI ID=58.1>
volume 1 : 1. L'extrait � été lavé avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séché sur du sulfate de magnésium anhydre et le solvant a été chassé par distillation du résidu pour fournir 210 mg d'acide (hydroxy-2-pyridyl-4) thioacétamido-70-
<EMI ID=59.1>
carboxylique-4.
<EMI ID=60.1>
<EMI ID=61.1>
<EMI ID=62.1>
A un mélange de 120 mg d'hydroxy-3-mercapto-4-pyridine,
140 mg d'hydrogénocarbonate de sodium, 15 ml de méthanol et 7,5 ml
<EMI ID=63.1>
le mélange a été brassé sous refroidissement à la glace. Après avoir relevé la température jusqu'à la température ambiante, il a été de plus brassé pendant deux heures.
Après avoir chassé par distillation le méthanol, le mélange réactionnel a été filtré et le filtrat a été acidifié avec 2 ml d'acide chlorhydrique 1 N. Les précipités ainsi formés ont été récupérés par filtration, lavés avec de l'eau et séchés pour fournir 200 mg d'acide (hydroxy-3-pyridyl-4)thioacétamido-7�-méthoxy7a-(méthyl-1-tétrazol-yl-5) thiométhyl-3-A3-céphem-carboxylique-4 comme produit brut.
De même, la couche aqueuse formée dans la procédure cidessus a été extraite avec 50 ml d'un mélange de n-butanol et de méthanol sous un rapport en volume 1 : 1 et la couche organique
a été récupérée, lavée deux fois avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séchée sur du sulfate de magnésium anhydre et le solvant a été ensuite chassé par distillation pour fournir
280 mg du produit brut représenté ci-dessus.
En soumettant à une chromatographie sur colonne de gel de silice le produit brut obtenu à partir de la couche aqueuse en utilisant un mélange de chloroforme, d'isopropanol, d'acide formique et de méthanol sous un rapport en volume 20 : 3 : 1 : 8 comme solvant de développement, on a obtenu 100 mg de produit pur.
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D6-DMSO)
<EMI ID=64.1>
4,06 (s, 2H, -S-CH2CO) , 4,30 (q, 2H) , 5,10 (s, 1H, 6-H) ,
<EMI ID=65.1>
EXEMPLE 6
<EMI ID=66.1>
<EMI ID=67.1> <EMI ID=68.1>
amine, dans 3 ml de méthanol et la solution a été brassée pendant
30 mn à la température ambiante. Le solvant a été chassé du mélange réactionnel par distillation sous pression réduite et le résidu formé a été soumis à une chromatographie sur colonne de gel de silice en utilisant un mélange de chlorure de méthylène, de méthanol et d'acide formique sous un rapport en volume 80 : 20 : 2, comme solvant de développement. Les fractions contenant le composé recherché ont été combinées,le solvant a été chassé par distillation pour fournir 60 mg d'acide (imino-5-dihydro-4,5-thiadiazol-
<EMI ID=69.1>
<EMI ID=70.1>
EXEMPLE 7
<EMI ID=71.1>
dans 5 ml de méthanol a été ajoutée une solution du sel de sodium du mercapto-5-oxo-2-dihydro-2,3-thiadiazol-1,3,4 dans 3 ml de méthanol préparée en dissolvant 60 mg de mercapto-5-oxo-2-dihydro2,3-thiadiazol-1,3,4 et 0,59 ml d'une solution aqueuse 1 N d'hydroxyde de sodium dans 2 ml de mêthanol et le solvant en a été chassé par distillation. Après brassage du mélange pendant 30 mn à la température ambiante, le solvant a été chassé par distillation sous pression réduite et le résidu obtenu a été soumis à une chromatographie sur colonne en utilisant un mélange de méthanol et d'acétate d'éthyle sous un rapport en volume 1 : 4 comme solvant de développement pour enlever les impuretés et ensuite un mélange de méthanol et d'acétate d'éthyle sous un rapport en volume 1 : 2 comme solvant de développement pour le produit.
Les fractions contenant le composé recherché ont été combinées et le solvant a été ensuite chassé par distillation de <EMI ID=72.1>
Spectre de résonance magnétique nucléaire (L6-DMSO)
<EMI ID=73.1>
EXEMPLE 8 a) Une solution de 226 mg de thioxo-4-thiazolidinone-2 dans 5 ml de méthanol a été refroidie jusqu'à -10[deg.]C et après y avoir ajoute 344 mg de triêthylamine, la solution résultante a été <EMI ID=74.1>
méthoxy-7a-céphalosporanique dans 5 ml de méthanol à des températures inférieures à -5[deg.]C. Après avoir laissé se développer la réaction pendant 2 heures à des températures comprises entre
-5[deg.]C et 0[deg.]C, le solvant a été chassé par distillation sous pression réduite à faible température et le résidu formé a été soumis à une chromatographie sur gel de silice en utilisant un mélange de chloroforme, d'isopropanol et d'acide formique sous un rapport en volume de 90 : 10 : 2 comme solvant de développement.
Les fractions contenant le composé recherché ont été combinées, le solvant a été chassé par distillation pour fournir
<EMI ID=75.1>
3,31-3,62 (2H, position 2) , 3,81 (2H, -S-CH2-CO-) ; 4,97 (2H, C3-CH20COCH3) , 5,15 (1H, position 6) ,
<EMI ID=76.1>
b) A 27 ml d'une solution tampon de phosphate présentant <EMI ID=77.1>
sodium et ensuite on a laissé la réaction s'effectuer pendant 18 heures à 58-60[deg.]C. Après achèvement de la réaction, le pH du mélange <EMI ID=78.1>
tion aqueuse d'acide phosphorique à 40% sous refroidissement à la glace et le produit a été ensuite extrait deux fois, chaque fois avec 30 ml d'acétate d'éthyle. Les extraits ont été combinés, lavés avec de l'eau, séchés sur du sulfate de magnésium anhydre et le solvant a été ensuite chassé par distillation sous pression réduite. Le résidu formé a été soumis à une chromatographie sur colonne de gel de silice en utilisant un mélange de chloroforme, d'iso� propanol et d'acide formique sous un rapport en volume 80 : 20 : 2 comme solvant de développement.
Les fractions contenant le composé recherché ont été combinées et le solvant a été chassé par distillation pour fournir
<EMI ID=79.1>
<EMI ID=80.1>
EXEMPLE 9
A 4 ml de chlorure de méthylène ont été ajoutés 21,1 mg de
<EMI ID=81.1>
ont été dissous sous brassage à la température ambiante. A la solution ont été de plus ajoutés 34 mg de dimercapto-2,5-thiadiazol-1,3,4 et, après avoir ajouté goutte à goutte quelques gouttes de méthanol pour dissoudre le dimercapto-2,5-thiadiazol-l,3,4, le mélange résultant a été brassé pendant environ 3 heures. Après achèvement de la réaction, le solvant a été chassé du mélange réactionnel par distillation et au résidu formé ont été ajoutés
40 ml d'acétate d'éthyle et de l'acide chlorhydrique dilué pour l'acidifier, ce par quoi une couche d'acétate d'éthyle et une couche aqueuse ont été formées. La couche d'acétate d'éthyle ainsi formée a été récupérée, lavée avec de l'eau, séchée sur du sulfate de sodium anhydre et le solvant a été ensuite chassé par <EMI ID=82.1>
à une chromatographie sur colonne de gel de silice en utilisant un mélange de chloroforme, de méthanol et d'acide formique sous un rapport en volume de 50 : 4 : 1 comme solvant de développement. Les fractions contenant le composé recherché ont été combinées et le solvant a été chassé par distillation pour fournir 60 mg
<EMI ID=83.1>
carboxylique-4.
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D6-acétone)
<EMI ID=84.1>
EXEMPLE 10
Dans un mélange de 0,627 ml d'une solution aqueuse 1 N d'hydroxyde de sodium (f=0,998) et de 1,5 ml de méthanol ont été
<EMI ID=85.1>
un brassage pendant plusieurs minutes et le solvant a ensuite été éliminé par distillation. Le résidu solide blanc obtenu a été dissous dans 2,5 ml de méthanol et après avoir ajouté à la solution une solution préparée en dissolvant 200 mg d'acide bromo-
<EMI ID=86.1>
céphem-carboxylique-4 dans 2,5 ml de méthanol à la température ambiante, le mélange résultant a été brassé pendant 30 minutes à la température ambiante. Le solvant a été ensuite chassé par distillation et le résidu obtenu a été soumis à une chromatographie sur colonne de gel de silice en utilisant un mélange de chloroforme, d'alcool isopropylique et d'acide formique sous un rapport en volume de 90 : 10 : 3 pour éluer l'acétamido-5-mercapto-2thiadiazol-1,3,4 non modifié. Le produit a ensuite été élué en utilisant comme éluant un mélange de chloroforme, de méthanol et d'acide formique sous un rapport en volume de 90 : 10 : 2.
Les fractions contenant le composé recherché ont été combinées et le solvant a été éliminé par distillation pour fournir
<EMI ID=87.1>
<EMI ID=88.1>
<EMI ID=89.1>
EXEMPLE 11
<EMI ID=90.1>
dans 5 ml d'éthanol a été ajoutée une solution préparée en dissol-
<EMI ID=91.1>
amine dans 2 ml de méthanol à -5[deg.]C. Après avoir effectué la réaction pendant deux heures à des températures comprises entre -5[deg.]C et +5[deg.]C, le solvant a été chassé par distillation sous pression réduite et le résidu obtenu a été soumis à une chromatographie sur colonne de gel de silice en utilisant comme éluant un mélange de chloroforme, de méthanol et d'acide formique sous un rapport en volume de 85 : 15 : 2.
Les fractions contenant le composé recherché ont été combinées et le solvant a été chassé par distillation. Le résidu ainsi obtenu a été homogénéisé avec de l'acétone et ensuite solidifié par addition d'éther pour donner un matériau poudreux qui
a été récupéré par filtration et séché pour fournir 84,2 mg d'acide mêthoxy-7a-(mëthyl-1-tétrazolyl-5)thiométhyl-3-(thioxo-2-
<EMI ID=92.1>
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D -DMSO)
<EMI ID=93.1>
<EMI ID=94.1>
thiadiazol-1,3,4 dans 3 ml de méthanol.
Le mélange a été brassé pendant 30 minutes à la température ambiante, le solvant a été chassé par distillation sous pression réduite et le résidu obtenu a été soumis à une chromatographie sur colonne de gel de silice pour éliminer tout d'abord l'excès de méthylamino-1-mercapto-5-thiadiazol-1,3,4 en utilisant un mélange de chloroforme, d'isopropanol et d'acide formique sous un rapport en volume de 90 : 10 : 2 et pour éluer ensuite le produit en uti-
<EMI ID=95.1>
sous un rapport en volume de 80 : 20 : 10 comme solvant de développement. Les fractions contenant le matériau recherché ont été combinées et après élimination du solvant par distillation sous pression réduite, le résidu obtenu a été séché pour fournir 100 mg
<EMI ID=96.1>
4.
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D6-DMSO)
<EMI ID=97.1>
EXEMPLE 13
Dans 5 ml de méthanol ont été dissous 200 mg d'acide bromo-
<EMI ID=98.1>
méthyl-3-A<3>-céphem-carboxylique-4 et à la solution a été ajoutée une solution de 100 mg d'un sel de sodium de méthylamino-1-
<EMI ID=99.1>
<EMI ID=100.1>
<EMI ID=101.1>
EXEMPLE 14
Dans 5 ml de méthanol ont été dissous 200 mg d'acide bromo-
<EMI ID=102.1>
céphem-carboxylique-4 et à la solution a été ajoutée une solution de 150 mg du sel de sodium d'éthoxycarboxamido-1-mercapto-5-thiadiazol-1,3,4 dans 3 ml de méthanol. Le mélange a ensuite été traité comme dans l'Exemple 12 pour fournir 110 mg d'acide
<EMI ID=103.1>
carboxylique-4.
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D�-DMSO)
<EMI ID=104.1>
EXEMPLE 15
Dans 5 ml de méthanol ont été dissous 200 mg d'acide
<EMI ID=105.1>
tion de 140 mg du sel de sodium de méthoxycarboxamido-1-mercapto5-thiadiazol-1,3,4 dans 3 ml de méthanol.
Le mélange a été ensuite traité comme dans l'Exemple 12
<EMI ID=106.1>
thiométhyl-3-A<3>-céphem-carboxylique-4.
<EMI ID=107.1>
<EMI ID=108.1>
EXEMPLE 16
<EMI ID=109.1>
dans 5 ml de méthanol a été ajoutée une solution de 27,5 mg d'amino-5-mercapto-2-thiazole et 0,058 ml de triéthylamine dans
2 ml de mëthanol sous courant d'azote. Après brassage du mélange pendant 30 minutes à la température ambiante, le solvant a été chassé par distillation sous pression réduite et le résidu obtenu a été soumis à une chromatographie sur colonne de gel de silice et le produit a été ensuite développé en utilisant un mélange de chloroforme, de méthanol et d'acide formique sous un rapport en volume de 85 : 15 : 2. Les fractions contenant le composé recherché ont ensuite été rassemblées et le solvant a été chassé par distillation pour fournir 37 mg d'acide [(amino-5-thiazolyl-2)
<EMI ID=110.1>
<EMI ID=111.1>
i EXEMPLE 17
Dans 15 ml de chlorure de méthylène ont été dissous 50 mg
<EMI ID=112.1>
de méthanol et à la solution ont été ajoutés 200 mg d'acide
<EMI ID=113.1>
de la réaction, le solvant a été chasse par distillation sous pression réduite et, après adjonction au résidu obtenu d'une solution acqueuse diluée d'acide chlorhydrique, le produit a été extrait avec 50 ml d'un mélange de n-butanol et d'acétate d'éthyle sous un rapport en volume de 1 : 1. L'extrait a été lavé avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séché sur du chlorure de magnésium anhydre et le solvant a été ensuite chassé par distillation sous pression réduite. Le résidu obtenu a été soumis à une chromatographie sur colonne de gel de silice et développé en utilisant un mélange de chloroforme, de méthanol et d'acide formique sous un rapport en volume de 100 : 5 : 1. Les fractions contenant le composé revendiqué ont été ensuite réunies et le solvant a été chassé par distillation pour fournir 120 mg
<EMI ID=114.1>
céphem-carboxylique-4..
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D6-DMSO)
<EMI ID=115.1>
EXEMPLE 18
Dans 3 ml d'eau ont été dissous 140 mg d'acide mercapto-2-
<EMI ID=116.1>
sous brassage et sous refroidissement à la glace suivi par un brassage supplémentaire pendant deux heures.
Après achèvement de la réaction, le mélange réactionnel a été concentré sous pression réduite pour chasser par distillation le méthanol et après avoir acidifié le concentrat par addition d'une solution aqueuse diluée d'acide chlorhydrique, le produit
a été extrait deux fois, chaque fois avec 30 ml d'un mélange de n-butanol et d'acétate d'éthyle sous un rapport en volume de 1 : 1. Les extraits ont été combinés, lavés avec une solution saturée
de chlorure de sodium, séchés sur du sulfate de magnésium anhydre et le solvant a été ensuite chassé par distillation sous pression <EMI ID=117.1>
<EMI ID=128.1>
forme, méthanol et acide formique sous un rapport en volume ce
<EMI ID=118.1>
rassemblées, le solvant a été chassé par distillation sous pres-
<EMI ID=119.1>
<EMI ID=120.1>
carboxylique-4.
<EMI ID=121.1>
<EMI ID=122.1>
EXEMPLE 19
<EMI ID=123.1>
5-thiadiazol-1,3,4 dans 3 ml de méthanol.
Le mélange a été brassé pendant 30 mn à la température
<EMI ID=124.1>
<EMI ID=125.1>
<EMI ID=126.1>
<EMI ID=127.1>
1,3,4 en utilisant un mélange de chloroforme, isopropanol et acide
<EMI ID=129.1>
méthanol et acide formique sous un rapport en volume de 80 : 20 1. Les fractions contenant le produit recherché ont été rassemblées,
<EMI ID=130.1>
<EMI ID=131.1>
<EMI ID=132.1>
<EMI ID=133.1>
EXEMPLE 20
Dans environ 4 ml d'eau ont été dissous 115 mg d'hydroxy-2mercapto-4-méthyl-5-pyridine et 76 mg d'hydrogénocarbonate de sodium et à la solution a été ajoutée une solution de 300 mg
<EMI ID=134.1>
brassage et sous refroidissement à la glace, suivi par un brassage supplémentaire pendant environ 40 minutes.
Après achèvement de la réaction, le mélange réactionnel a été concentré sous pression réduite pour chasser presque complètement le méthanol par distillation et environ 20 ml d'eau ont été ajoutés au concentré. Après avoir acidifié la solution avec de l'acide chlorhydrique 1 N , sous refroidissement à la glace, le produit a été extrait deux fois,. à chaque fois avec environ 50 ml d'un mélange de n-butanol et d'acétate d'éthyle sous un rapport en volume 1 : 1. Les extraits combinés ont été lavés avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium et séchés sur du sulfate de magnésium anhydre. Le solvant a été ensuite chassé par distillation sous préssion réduite. Le résidu formé a été soumis
à une chromatographie.. sur.colonne de gel de silice et développé avec un mélange de chloroforme, méthanol et acide formique sous un rapport en volume de 100 : 8 : 1. Les fractions contenant le matériau recherché ont été combinées et on a obtenu 24 mg d'acide
(hydroxy-2-méthyl-5-pyridyl-4)thioacétamido-7B-méthoxy-7a-
<EMI ID=135.1>
<EMI ID=136.1>
<EMI ID=137.1>
EXEMPLE 21
Dans 2 ml d'eau ont été mis en suspension 120 mg d'hydroxy2-mercapto-4-méthyl-3-pyridine et ensuite 1,1 ml d'une solution aqueuse normale d'hydroxyde de sodium a été ajouté à la suspension pour dissoudre complètement la méthyl-pyridine. Ensuite 300 mg
<EMI ID=138.1>
été ajoutés à la solution préparée comme ci-dessus sous brassage et sous refroidissement à la glace et le mélange a de plus été brassé pendant environ 40 minutes sous les mêmes conditions. Après achèvement de la réaction, le mélange réactionnel a été concentré sous pression réduite pour chasser par distillation la presque totalité du méthanol et environ 20 ml d'eau ont été ensuite ajoutés au résidu. Le résidu a été alors acidifié avec de l'acide chlorhydrique 1 N sous refroidissement à la glace et extrait deux fois chaque fois avec environ 50 ml d'un mélange de n-butanol et d'acétate d'éthyle sous un rapport en volume 1 : 1. Les extraits ont été combinés, lavés avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, séchés sur du sulfate de magnésium anhydre et le solvant a été chassé par distillation sous pression réduite.
Le résidu obtenu a été soumis à une chromatographie sur colonne
de gel de silice en utilisant un mélange de chloroforme, méthanol et acide formique sous un rapport en volume de 100 : 10 : 1 comme solvant de développement.
Les fractions contenant le matériau recherché ont été
<EMI ID=139.1>
<EMI ID=140.1>
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D6-DMSO)
<EMI ID=141.1>
<EMI ID=142.1>
EXEMPLE 22
De la même manière que dans l'Exemple 20, le N-oxyde de mercapto-4-mêthyl-3-pyridine a été utilisé à la place de l'hydroxy-2-mercapto-4-méthyl-5-pyridine et comme solvant de développement de la chromatographie sur colonne de gel de silice, un mélange de chloroforme, de méthanol et d'acide formique sous un rapport en volume de 100 : 20 : 1 a été utilisé et les autres conditions de la réaction ont été les mêmes que dans l'Exemple 20. De cette manière on a obtenu 220 mg d'oxyde-1 de l'acide méthoxy-
<EMI ID=143.1>
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D,-DMSO)
<EMI ID=144.1>
<EMI ID=145.1>
Dans environ 1 ml d'eau ont été dissous 33 mg de carbonate de sodium et à la solution aqueuse a été ajoutée une solution de
<EMI ID=146.1>
nol, sous brassage et sous refroidissement à la.glace. Une solution de 105 mg du sel de sodium de l'amino-2-mercapto-4-pyridine dans environ 5 ml de méthanol a été ensuite ajoutée goutte à goutte en une durée d'environ 20 minutes au mélange préparé au cours du stade ci-dessus, sous brassage et sous refroidissement à <EMI ID=147.1>
minutes pour achever la réaction. Le mélange réactionnel a été ensuite concentré sous pression réduite, environ 10 ml d'eau ont été ajoutés au résidu pour dissoudre le produit et les matières non dissoutes ont été éliminées par filtration. Le filtrat a été neutralisé avec de l'acide chlorhydrique 1 N sous refroidissement à la glace et les précipités formés ont été récupérés par filtration, lavés avec de l'eau et ensuite du méthanol et séchés sous pression réduite sur du pentoxyde de phosphore pour fournir
<EMI ID=148.1>
<EMI ID=149.1>
<EMI ID=150.1>
<EMI ID=151.1>
A un mélange de 40 mg de dihydroxy-2,6-mercapto-4-pyridine,
50 mg d'hydrogénocarbonate de sodium, 5 ml d'eau et 10 ml de
<EMI ID=152.1>
sous brassage et sous refroidissement à la glace. Le mélange résultant a été chauffé jusqu'à la température ambiante et brassé pendant 2 heures. Après avoir chassé par distillation le méthanol, le
<EMI ID=153.1>
produit a été extrait avec 30 ml d'un mélange de n-butanol et d'acétate d'éthyle sous un rapport en volume de 1 : 1, lavé trois fois avec une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium et séché sur du sulfate de magnésium anhydre. Après élimination par distillation du solvant, on a obtenu l'acide (dihydroxy-2,6-pyridy�
<EMI ID=154.1>
soumis à une chromatographie sur colonne de gel de silice en utilisant un mélange de chloroforme, d'alcool isopropylique et d'acide formique sous un rapport en volume de 90 : 10 : 3 comme <EMI ID=155.1>
pur.
Spectre de résonance magnétique nucléaire (D6-DMSO)
<EMI ID=156.1>
EXEMPLE 25
Dans environ 2 ml d'eau, on a mis en suspension 120 mg d'hydroxy-3-mercapto-2-méthyl-6-pyridine et ensuite 1,2 ml d'une solution aqueuse normale d'hydroxyde de sodium a été ajoutée à la suspension pour dissoudre la méthylpyridine. A la solution a été
<EMI ID=157.1>
7a-(méthyl-1-tétrazolyl-5)thiométhyl-3-A<3>-céphem-carboxylique-4 dans environ 10 ml de méthanol sous brassage et sous refroidissement à la glace, suivi par un brassage supplémentaire sous refroidissement à la glace pendant environ 40 minutes pour assurer la réaction. Après élimination presque compléte par distillation sous pression réduite du méthanol du mélange réactionnel, environ 10 ml d'eau ont été ajoutés au résidu et après avoir acidifié le mélange en ajoutant de l'acide chlorhydrique r N sous refroidissement à
la glace, le produit a été extrait avec environ 150 ml d'acétate d'éthyle. L'extrait a été séché sur du sulfate de magnésium anhydre et le solvant a été chassé par distillation sous pression réduite. Le résidu formé a été ensuite soumis à une chromatographie sur colonne de gel de silice et développé en utilisant un mélange de chloroforme, méthanol et acide formique sous un rapport en volume
<EMI ID=158.1>
été combinées pour fournir environ 200 mg d'acide (hydroxy-3-
<EMI ID=159.1>
Spectre de résonance maléfique' nucléaire (D6-DMSO) ô (p.p.m.) :
<EMI ID=160.1>