<Desc/Clms Page number 1>
EMI1.1
,.. :,...": !')."1 Nouveaux cnti1nylam1ae8.: " ';' :/<
EMI1.2
,.-:,../,.,'..;. 1 .,\ :;.f"'-,,: \²: ,"J : /: ,> '. ',, :?f:\ ':;1!:" j- ..=. , .:."? ait .du'"lha.. 'posterie;de'''l*.pophy9e'''.' ouoxytocine est susceptible 'de provsquar lacpn;tràcion p41o'd.';;i ..-. : .... - = - ¯ , ¯ ......; -, m ... q*ae de t'utérus, Cette' pi*a 4tè de l*<)toe;depr<oqwrle :i':..'" É avail - eel . appliqu4e.<én..obs%étriqué, .
Vn, tra#éil. inàufflisant . n' pendant 1 accouchement -peut étro active', par .i.?.admsxi<tbotion d'oxytoctne en injection. intraveIneuse . %on$g1 ', 0n ' sal % .aussi que 1-*-Utérus de la femme.-nce1n.te-: secrète "sayosr i>;oxy- ..,j.g -'.:;. toc1nase, susceptible de.,décomposer- On admet que *et,,. - enzyme a pour ,..tQncion¯ qe protéger t-la gl'sejse' le foetué.#ù contre,. des contra.c;ton.s,xq$fi1'Ve.t ' " ' :...,;; .i; . ,.jilil La présente inv conoerno la préparation de. ?i'l,i
<Desc/Clms Page number 2>
EMI2.1
veaux composée dont on ce trouve qu'ili ' ,oà%, la décomposition de 1?oitq%ooino qU11à, ':Qn{'OàPat"''.'\";I' Les composes suivant 1-'invention $l1xV3n% Let\! oampoe', 8suivant ' .
i< .< ";' , ..,, ' au lieu de lloxytoctne pour activer le travail men$., ..' .'a1c1e des composes auivant l'invention d1m1è & ';&.oompo.1. ' de, lJOx²too,1n 1Jl'qprë de :'¯an1.m en 11'>'\:\i,iîi::f.f' a:'oX1toQ1ae, de sorte que le travail est aotvé.</ naturelle. En outre, les nouvelles substances inhibant; li de l'Q²y;oo1nale peuvent être administrera en même te <'9 1'o$çjooine,,,pa> oxempie lorsque 14 pro4l;ict;on 14. ',4.: " J..r8$.n1sme est trop ta1,le. Dans ce cas) on P04eveec a une quantité beaucoup 1ndre d'oxytooine pourazri lq ' résultat que lorsqu'on administre :L'ocyto1n seule, m'tant 4oê if. l que les c¯oppoJ4J suivant l'invention .f.()1; e.C.ls à 81nth'-,e,..
.et que les composes de départ,sont obtenus facilement en scandes quantités, tandis que ,l'.çtocine est un produit naturel 41 . ' re t"cpmpiqu4e et disponible seulement en petites .le remplacement de l'oxytocine comme agent activant le 'ail1:.
, .par une substance facile à synthéttearj augmentant.l v;'1;4',:d!t "¯> l'oXJtQC1ne dans l'organisme, est de la plus haute .Àmpnr%ayçç'., Zoo composés suivant l'invention sont des 01.t)}y"!" simples de formule Z >i'">/; (j
EMI2.2
EMI2.3
,'¯ -r ' *E,' k<,;""g'ù '-k, ou leurs sels d'addition dtades non tox1<tue's" Q;l.,*ep;r$:b.{ un groupe de formule s ,1 ¯ . / '1 ')/- ; Îléll/j##
<Desc/Clms Page number 3>
EMI3.1
où n = 0 ou 1, R2 représente un groupe alkylène de 2 à 6 atomes de carbone et Y1 et Y2 représentent des atomes d'hydrogène ou bien des groupes hydroxy éventuellement estérifiés ou éthérifiés, ou bien où R1 représente un groupe phényle substitué par au moins un groupe hydroxy.
L'in@ bition de l'activité de l'oxytocitase par ces composés a été découverte en examinant l'effet des composés sui- vant l'invention sur la décomposition de l'oxytocine.
A cette fin, on compare la quantité d'oxytocine docom- posée par l'oxytocinase dans une solution contenant, outre l'oxy- toine, seulement de l'oxytocinase avec la quantité décomposée dans une solution contenant, de plus, la substance suivant l'in- vention qui inhibe cette décomposition-
Il est apparu que le L-cystinyl-bis (p-hydrox@pnénylamide) et le L-cystinyl-bis-(2-phénoxyéthylamide) inhibent particulière- ment bien la décomposition de l'oxytocine. On a trouvé que par addi- tion de ces composés, la décomposition de l'oxytocine est ramenée, respectivement, à 22 et 10% de la valeur constatée en l'absence de tels composés.
Les composés suivant l'invention peuvent être préparés par des procédés connus pour la synthèse de substances voisines et par des procédés analogues.
Par exemple, on copule dans les conditions normales pour la synthèse des peptides, 1 mole de cystine et 2 moles d'une amine R1NH2. On peut aussi copuler d'abord la cystéine avec 1 mole d'amine R1NH2 puis, par oxydation ménagée, faire re@@@r 2 woles du cystéinamide formé pour obtenir l mole de cystinediamide.
De préférence, les groupes amine de la molécule d'acide
<Desc/Clms Page number 4>
aminé sont protégés pendant la copulation, par exemple par trans- formation, avant la réaction avec l'amine R1NH2, de la cystine en
N,N'-dicarbobenzyloxy ou N,N'-ditrityl-cystine et, après forma- tion de la liaison peptidique du groupe carboxyle, par élimination des groupes de protection par des procédés connus, par exemple à l'aide d'un mélange de HBr et d'acide acétique glacial.
La formation de la liaison peptidique des groupes car- boxyle de la cystine dont les fonctions amine sont protégées, peut également se faire de façon connue pour ce genre de réactions, par exemple de la façon décrite dans "Advances in Protein Chemistry" i volume V, (1949), pages 1 à 82 et volume XII (1957) pages 465 à @ 638 et dans le "Journal of the American Chemical Society", 77, , 1067 (1955).
On obtient d'excellents résultats en appliquant le procédé dit des anhydrides, suivant lequel on prépare d'abord l'anhydride mixte de cystine et d'un ester carbonique, de pré- férence un ester alkylique, par réaction de le cystine (dont les fonctions amine sont protégées) avec 2 molécules d'un ester chloro- carbonique, en présence d'un agent accepteur d'acide, de préférence ' une amine tertiaire telle que la triéthylamine.
Dans ces conditions, on obtient l'anhydride mixte de formule : C-S - CH2- CHNHX - CO - 0 - CO- OY/2 où X représente le groupe protégeant la fonction amine, de préférence un groupe carbobenzyloxy, et Y représente un groupe hydrocar- boné, de préférence un groupe alkyle. Cette réaction se fait de préférence dans un solvant, par exemple un éther, de préférence , le dioxanne ou le tétrahydrofuranne. Avantageusement, l'amine
R1NH2 est ajoutée au mélange de réaction sans séparation intermé- diaire de l'anhydride mixte, le diamide étant obtenu avec dégagement d'acide carbonique et formation de l'alcool YOR suivant la réaction :
<Desc/Clms Page number 5>
EMI5.1
2 ' CHN "2 l'2 8 - 2 CHNHX - CO - CO - OY"J 2 2 1 2 r- 8 - CH2 - CHNHX - CO'- NHRIJ 2 + 2C02 + 2YOH.
On obtient les rendements les plus élevés lorsque Y représente un groupe s-butyle, de sorte qu'on utilise, de préférence, du chlorure de s-butoxycarbonyle pour la formation de l'anhydride mixte avec la cystine.
Un procédé particulièrement avantageux pour préparer les composés suivant l'invention consiste à faire réagir avec l'amine R1NH2 un ester activé de cystine dont les fonctions amine sont protégées, L'ester dicyano méthylique de la N,N'- dicarbobenzyloxy-cystine convient particulièrement pour une telle réaction.
Les composés obtenus peuvent être transformés en compo- sitions pharmaceutiques de la façon habituelle, soit tels quels, soit sous forme de leurs sels d'addition d'acides non toxiques.
Le traitement à l'aide des compositions suivant l'inven- tion pendant l'accouchement se fait, de préférence, par adminis- tration intraveineuse lente d'une solution diluée du composé actif, de préférence sous la forme d'un sel d'addition d'acide non toxique, dans une solution saline physiologique, par exemple une solution à 1/500 - 1/50% en poids de substance active, par exemple à raison de 2 à 10 cm3/minute pendant quelques minutes à 1 heure. Si on le désire, l'opération peut être répétée plusieurs fois. Eventuellement, on peut administrer,également de préférence par injection intraveineuse lente, un mélange d'oxytocine et d'au moins un composé suivant l'invention dissous dans une solution saline physiologique.
EMI5.2
EXEMPLE 1.- L-cystinyl-bis-(2-nhénoxyéthylamide). s - CH2 - CH(NH2) - CO - NH - CH2 - CH 2 - 0 - 2
Pour préparer l'ester bis-cyanométhylique de N,N'-bis- (benzyloxycarbonyl) L-cystinyle, on mélange 48 g de chloracétoni- trile refroidi avec 48 g de triéthylamine en refroidissant à environ 0 C. Ce mélange, maintenu entre 0 et 5 C, est additionné en 1 heure de 80 g de N,N'-bis-(benzpyloxycarbonyl)-L-cystine
<Desc/Clms Page number 6>
pulvérisée. Le mélange est agité pendant encore 2 heures, puis on laisse la Masse visqueuse formée reposer jusqu'au lendemain.' Le mélange est additionné, sous refroidissement de 750 cm3 d'ecétate d'ethnie et agité pendant 1 heure à environ 5 C.
Du chiorlhydrate de triéthylamine qui se sépare est éliminé par filtrat-ion et lavé avec 1 litre d'acétate d'éthyle. La solution dans l'acétate d'éthyle est lavée successivement avec 400 cm3 d'acide chlorhydrique 1 N, 400 cm3 d'eau, 400 cm3 de solution de bicarbonate de sodium à 5% et deux fois 400 cm3 d'eau. La solution est alors séchée sur du sulfate de sodium anhydre, puis concen- trée soue passion réduite. Le concentré est chauffé à l'ébul- lition avec 1200 cm3 de chlorure de méthylène et la solution obtenue est filtrée, après addition d'une petite quantité de "Nerit", après quoi le filtrat est concentré sous pression @@ouite. Le concentré est additionné de 100 cm3d'étha- nel et de 40 CET d'éther diéthylique.
L'ester bis-cyano méthylique se sépare en cristaux du mélange mis à reposer jusqu'au lendemain dans vue armoire frigorifique. L'ester est recueilli par filtra- tion, lavé avec un peu d'éthanol et d'éther et séché sous pres- sion réduite. Rendement 38,2 g. Pojnt de fusion 103-104 C.
De l'ester activé obtenu, 36,9 g sont dissous dans 150 cm3 d'acétate d'éthyle en chauffant légère,ment, La solution est refroidie à la température ambiante et .Jditionnée de 17,5g de amine. Un précipité gélatineux se forme lentement dans le mélange. Après avoir été maintenu pendant 2 heures à la température ambiante, le mélange est mis' dans une armoire frigorifi- que entre environ 0 et 5 C jusqu'au lendemain. Le mélange de réaction est alors émietté dans 300 cm3d'éther diéthylique.
Le précipité est essoré sous vide et lavé avec de l'éther, puis séché sous pression réduite et recristallisé dans 2,5- litres d'éthanol. Rendement 20,7, point de fusion 160-163 C.
De ce N,N'-bis-(benzyloxycarbonyl)-L-cystinyl-bis-(2- phénoxyéthylamide), 20,5 g sont soigneusement pulvérisés et intro-
<Desc/Clms Page number 7>
duits, sous agitation à la température ambiante, dans 250 cm3 d'une solution d'acide bromhydrique à 50% dans l'acide acétique glacial. Après la fin du dégagement d'anhydride carbonique (environ 1 heure) la solution est mélangée avec un litre d'éther diéthylique sec, ce qui fait précipiter le bromhydrate de l'amide.
Le sel est lavé plusieurs fois avec de l'éther absolu, puis séché et dissous de nouveau dans 120 cm3 d'eau,. La solution est filtrée et additionnée de 9 cm3 d'ammoniaque concentrée Le L-cystinyl-bis (2-phénoxyéthylamide) cr llin est recueilli par filtration Lavé avec de l'eau et séché sous pression réduite.
Rendement 10,1 g , point de fusion 77-80 C.
EXEMPLE 2.- L-cystinyl-bis- (4-hydroxyohénylamide)
EMI7.1
Une solution de 5,08 g de N,N'-bis-(benzyloxycarbonyl) cystine dans 20 cm3 de tétrahydrofuranne sec est mélangée avec 2,95 cm3 de triéthylamine et 5 cm3 de tétrahydrofuranne. Le mélange est refroidi à -10 C puis additionné, sous agitation, de @ cm de chlorure de butoxycarbonyle dilué avec un peu de tétrahydrofuranne.
A une température d'environ -5 C, le mélange de réac- tion est additionné, sous agitation, d'une solution de 2,3 g de p-aminophénol dans un mélange de 10 cm3 de diméthylformamide et de 12 cm3 de tétrahydrofuranne, prs quoi le mélange de réac- tion est agité pendant encore 1 heure en étant refroidi à envi- ron 0 C. Après que le mélange de réaction ait été mis à @@poser @ jusqu'au lendemain, le précipité (chlorhydrate du triéthylamine) est séparé par filtration. Le filtrat est mélangé avec 30 cm3 d'eau, 30 cm3 de chloroforme et 20 cm3 d'acide chlorhydrique.
Après bonne agitation, la couche de chloroforme est séparée et la solu- tion aqueuse est extraite encore une fois à l'aide de 20 cm3 de chloroforme. Les solutions chloroformiques réunies sont agitées avec 14 cm3 d'acide chlorhydrique 0,5N, ce qui fait apparaltre un précipité gélatineux. Ce précipité est essoré sous vida e;. la
<Desc/Clms Page number 8>
couche chloroformique du filtrat est agitée encore une fois avec
10 cm3 d'eau, ce qui fait se former un second précipité. Le mélange est additionné du précipité essoré et de 40 cm3 d'une solution de bicarbonate de sodium à 5%, puis l'ensemble est bien agité, après quoi le précipité est séparé.
Le composé benzyl- oxycarbonylé obtenu ainsi est lavé plusieurs fois avec de l'eau et du chloroforme, puis séché sous pression réduite. Rendement
1,94 g, point de fusion 155-160 C.
On pulvérisé soigneusement 0,50 g du composé benzyloxy- carbonylé ci-dessus qu'on introduit alors dans 5 cm d'une solu- tion d'acide bromhydrique à 50% dans l'acide acétique glacial.
Après environ 40 minutes, le dégagement d'anhydride carbonique est achevé et le mélange est additionné de 14 cm3.d'éther absolu.
. L'amide précipite immédiatement dans ces conditions et est recueilli par filtration, lavé avec beaucoup d'éther diéthylique sec, puis séché sous pression réduite. Rendement 0,38 g.
REVENDICATIONS.
**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.
<Desc / Clms Page number 1>
EMI1.1
, ..:, ... ":! ')." 1 New cnti1nylam1ae8 .: "'; ' : / <
EMI1.2
, .-:, .. /,., '..;. 1., \:;. F "'- ,,: \ ²:," J: /:,>'. ',,:? f: \':; 1 !: "j- .. =.,.:."? ait .du '"lha ..' posterie; de '' 'l * .pophy9e' ''. ' ouoxytocin is likely 'to provsquar lacpn; tràcion p41o'd.' ;; i ..-.: .... - = - ¯, ¯ ......; -, m ... q * ae of t 'uterus, This' pi * was 4 from the * <) toe; depr <oqwrle: i ': ..' "Work. applied. <en..obs% narrow,.
Vn, tra # ed. insufficient. n 'during childbirth -may be very active', by .i.?. admsxi <oxytocin injection. intravenous. % on $ g1 ', 0n' sal% .as well as 1 - * - Uterus of woman.-nce1n.te-: secret "sayosr i>; oxy- .., jg - '.:;. toc1nase, susceptible to ., decompose- We admit that * and ,,. - enzyme has for, .. tQncion¯ qe protect t-la sl'sejse 'the fetus. # ù against ,. contra.c; ton.s, xq $ fi1 'Ve.t' "': ..., ;; .i; . , .jilil The present inv conoerno the preparation of. ? i'l, i
<Desc / Clms Page number 2>
EMI2.1
calves composed of which we find ili ', oà%, the decomposition of 1? oitq% ooino qU11à,': Qn {'OàPat "' '.' \"; I 'The compounds according to 1-'invention $ l1xV3n% Let\! oampoe ', 8next'.
i <. <"; ' , .. ,, 'instead of lloxytoctne to activate the work men $., ..'. 'a1c1e compounds according to the invention of the invention of &'; &. oompo.1. 'de, lJOx²too, 1n 1Jl'qprë de : '¯an1.m in 11'> '\: \ i, iîi :: ff' a: 'oX1toQ1ae, so that the work is aotvé. </ Natural. In addition, the new inhibiting substances; li of the Q²y; oo1nale can be administered at the same time to you <'9 1'o $ çjooine ,,, pa> oxempie when 14 pro4l; ict; on 14.', 4 .: "J..r8 $ .n1sme is too ta1, the . In this case) one P04eveec has a very large quantity of oxytooine pourazri the result that when one administers: Oxytoin alone, me 40%. l that the c¯oppoJ4J according to the invention .f. () 1; e.C.ls at 81nth '-, e, ..
. and that the starting compounds, are easily obtained in small quantities, while, çtocin is a natural product 41. It is cpmpique4e and available only in small .replacement of oxytocin as a garlic activating agent :.
, .by a substance easy to synthéttearj increasing.lv; '1; 4',: d! t "¯> the oXJtQC1ne in the organism, is of the highest .Àmpnr% ayçç '., Zoo compounds following the invention are simple 01.t)} y "!" of formula Z> i '"> /; (j
EMI2.2
EMI2.3
, '¯ -r' * E, 'k <,; "" g'ù' -k, or their addition salts of non-toxic1 <tue's "Q; l., * Ep; r $: b. {A group of formula s, 1 ¯. / '1') / -; Îléll / j ##
<Desc / Clms Page number 3>
EMI3.1
where n = 0 or 1, R2 represents an alkylene group of 2 to 6 carbon atoms and Y1 and Y2 represent hydrogen atoms or optionally esterified or etherified hydroxy groups, or else where R1 represents a phenyl group substituted by minus one hydroxy group.
The influence of oxytocitase activity by these compounds was discovered by examining the effect of compounds according to the invention on the decomposition of oxytocin.
To this end, the amount of oxytocin docom- posed by oxytocinase in a solution containing, besides oxytoin, only oxytocinase, is compared with the amount decomposed in a solution containing, in addition, the following substance the invention which inhibits this decomposition-
It has been found that L-cystinyl-bis (p-hydrox @ pnenylamide) and L-cystinyl-bis- (2-phenoxyethylamide) inhibit the decomposition of oxytocin particularly well. It has been found that by adding these compounds the decomposition of oxytocin is reduced to 22% and 10%, respectively, of the value seen in the absence of such compounds.
The compounds according to the invention can be prepared by known methods for the synthesis of related substances and by analogous methods.
For example, under normal conditions for the synthesis of peptides, 1 mole of cystine and 2 moles of an amine R1NH2 are copulated. It is also possible to first couple the cysteine with 1 mole of amine R1NH2 and then, by controlled oxidation, to make 2 woles of the cysteinamide formed to obtain 1 mole of cystinediamide.
Preferably, the amine groups of the acid molecule
<Desc / Clms Page number 4>
amine are protected during coupling, for example by transformation, before the reaction with the amine R1NH2, from cystine to
N, N'-dicarbobenzyloxy or N, N'-ditrityl-cystine and, after formation of the peptide bond of the carboxyl group, by removing the protecting groups by known methods, for example using a mixture of HBr and glacial acetic acid.
The formation of the peptide bond of the carboxyl groups of cystine, the amine functions of which are protected, can also be carried out in a known manner for this type of reactions, for example as described in "Advances in Protein Chemistry" i volume V , (1949), pages 1-82 and volume XII (1957) pages 465-638 and in the "Journal of the American Chemical Society", 77,, 1067 (1955).
Excellent results are obtained by applying the so-called anhydride process, according to which the mixed anhydride of cystine and a carbon dioxide ester, preferably an alkyl ester, is first prepared by reaction of cystine (of which the amine functions are protected) with 2 molecules of a chlorocarbon ester, in the presence of an acid acceptor agent, preferably a tertiary amine such as triethylamine.
Under these conditions, the mixed anhydride of formula is obtained: CS - CH2- CHNHX - CO - 0 - CO- OY / 2 where X represents the group protecting the amine function, preferably a carbobenzyloxy group, and Y represents a hydrocarbon group. - boné, preferably an alkyl group. This reaction is preferably carried out in a solvent, for example an ether, preferably dioxane or tetrahydrofuran. Advantageously, the amine
R1NH2 is added to the reaction mixture without intermediate separation of the mixed anhydride, the diamide being obtained with evolution of carbonic acid and formation of the alcohol YOR following the reaction:
<Desc / Clms Page number 5>
EMI5.1
2 'CHN "2 l 28 - 2 CHNHX - CO - CO - OY" J 2 2 1 2 r- 8 - CH2 - CHNHX - CO'- NHRIJ 2 + 2CO2 + 2YOH.
The highest yields are obtained when Y is s-butyl, so that s-butoxycarbonyl chloride is preferably used for the formation of the mixed anhydride with cystine.
A particularly advantageous process for preparing the compounds according to the invention consists in reacting with the amine R1NH2 an activated ester of cystine whose amine functions are protected. The dicyano methyl ester of N, N'-dicarbobenzyloxy-cystine is particularly suitable. for such a reaction.
The compounds obtained can be converted into pharmaceutical compositions in the usual manner, either as such or in the form of their non-toxic acid addition salts.
Treatment with the compositions of the invention during childbirth is preferably by slow intravenous administration of a dilute solution of the active compound, preferably in the form of a salt of. addition of non-toxic acid, in a physiological saline solution, for example a solution at 1/500 - 1/50% by weight of active substance, for example at a rate of 2 to 10 cm3 / minute for a few minutes to 1 hour. If desired, the operation can be repeated several times. Optionally, a mixture of oxytocin and at least one compound according to the invention dissolved in physiological saline solution can be administered, also preferably by slow intravenous injection.
EMI5.2
EXAMPLE 1. L-cystinyl-bis- (2-nhenoxyethylamide). s - CH2 - CH (NH2) - CO - NH - CH2 - CH 2 - 0 - 2
To prepare the bis-cyanomethyl ester of N, N'-bis- (benzyloxycarbonyl) L-cystinyl, 48 g of cooled chloracetonitrile are mixed with 48 g of triethylamine while cooling to about 0 C. This mixture, kept at 0 and 5 C, is added in 1 hour of 80 g of N, N'-bis- (benzpyloxycarbonyl) -L-cystine
<Desc / Clms Page number 6>
sprayed. The mixture is stirred for a further 2 hours, then the viscous mass formed is allowed to stand overnight. The mixture is added, under cooling, 750 cm3 of ethnic ecetate and stirred for 1 hour at approximately 5 C.
Triethylamine hydrochloride which separates is filtered off and washed with 1 liter of ethyl acetate. The solution in ethyl acetate is washed successively with 400 cm3 of 1N hydrochloric acid, 400 cm3 of water, 400 cm3 of 5% sodium bicarbonate solution and twice 400 cm3 of water. The solution is then dried over anhydrous sodium sulfate and then concentrated with reduced passion. The concentrate is heated to boiling with 1200 cc of methylene chloride and the resulting solution is filtered, after addition of a small amount of "Nerit", after which the filtrate is concentrated under pressure. To the concentrate are added 100 cc of ethal and 40 TEC of diethyl ether.
The bis-cyano methyl ester separates into crystals from the mixture, which is left to stand overnight in a refrigerated cabinet. The ester is collected by filtration, washed with a little ethanol and ether and dried under reduced pressure. Yield 38.2 g. Melting point 103-104 C.
Of the activated ester obtained, 36.9 g are dissolved in 150 cm3 of ethyl acetate with slight heating, the solution is cooled to room temperature and .Jplus 17.5 g of amine. A gelatinous precipitate slowly forms in the mixture. After standing for 2 hours at room temperature, the mixture is placed in a refrigerated cabinet at about 0 to 5 ° C overnight. The reaction mixture is then crumbled into 300 cm3 of diethyl ether.
The precipitate is filtered off under vacuum and washed with ether, then dried under reduced pressure and recrystallized from 2.5 liters of ethanol. Yield 20.7, mp 160-163 C.
Of this N, N'-bis- (benzyloxycarbonyl) -L-cystinyl-bis- (2-phenoxyethylamide), 20.5 g are carefully pulverized and intro-
<Desc / Clms Page number 7>
duits, with stirring at room temperature, in 250 cm3 of a 50% solution of hydrobromic acid in glacial acetic acid. After the evolution of carbon dioxide has ceased (about 1 hour), the solution is mixed with one liter of dry diethyl ether, which precipitates the hydrobromide from the amide.
The salt is washed several times with absolute ether, then dried and dissolved again in 120 cm3 of water. The solution is filtered and added with 9 cm3 of concentrated ammonia. L-cystinyl-bis (2-phenoxyethylamide) crllin is collected by filtration, washed with water and dried under reduced pressure.
Yield 10.1 g, melting point 77-80 C.
EXAMPLE 2.- L-cystinyl-bis- (4-hydroxyohenylamide)
EMI7.1
A solution of 5.08 g of N, N'-bis- (benzyloxycarbonyl) cystine in 20 cm3 of dry tetrahydrofuran is mixed with 2.95 cm3 of triethylamine and 5 cm3 of tetrahydrofuran. The mixture is cooled to -10 C and then added, with stirring, of @ cm of butoxycarbonyl chloride diluted with a little tetrahydrofuran.
At a temperature of about -5 ° C., the reaction mixture is added, with stirring, to a solution of 2.3 g of p-aminophenol in a mixture of 10 cm3 of dimethylformamide and 12 cm3 of tetrahydrofuran, whereupon the reaction mixture is stirred for a further 1 hour while being cooled to about 0 C. After the reaction mixture has been left to stand overnight, the precipitate (triethylamine hydrochloride) is separated by filtration. The filtrate is mixed with 30 cm3 of water, 30 cm3 of chloroform and 20 cm3 of hydrochloric acid.
After good stirring, the chloroform layer is separated and the aqueous solution is extracted again with 20 cm3 of chloroform. The combined chloroform solutions are stirred with 14 cm3 of 0.5N hydrochloric acid, which reveals a gelatinous precipitate. This precipitate is filtered off under vacuum. the
<Desc / Clms Page number 8>
chloroform layer of the filtrate is stirred again with
10 cm3 of water, which causes a second precipitate to form. The mixture is added with the drained precipitate and 40 cm3 of a 5% sodium bicarbonate solution, then the whole is stirred well, after which the precipitate is separated.
The benzyloxycarbonyl compound thus obtained is washed several times with water and chloroform, then dried under reduced pressure. Yield
1.94 g, mp 155-160 C.
0.50 g of the above benzyloxycarbonyl compound was carefully sprayed, which was then introduced into 5 cm 3 of a 50% solution of hydrobromic acid in glacial acetic acid.
After about 40 minutes, the evolution of carbon dioxide is complete and the mixture is added with 14 cm3 of absolute ether.
. The amide precipitates immediately under these conditions and is collected by filtration, washed with plenty of dry diethyl ether, then dried under reduced pressure. Yield 0.38 g.
CLAIMS.
** ATTENTION ** end of DESC field can contain start of CLMS **.