BE1010976A5 - Bereiding en gebruik van preparaten die hoge concentraties vitamine b12 bevatten. - Google Patents
Bereiding en gebruik van preparaten die hoge concentraties vitamine b12 bevatten. Download PDFInfo
- Publication number
- BE1010976A5 BE1010976A5 BE9700673A BE9700673A BE1010976A5 BE 1010976 A5 BE1010976 A5 BE 1010976A5 BE 9700673 A BE9700673 A BE 9700673A BE 9700673 A BE9700673 A BE 9700673A BE 1010976 A5 BE1010976 A5 BE 1010976A5
- Authority
- BE
- Belgium
- Prior art keywords
- vitamin
- preparation
- lysate
- natural
- sep
- Prior art date
Links
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 44
- RMRCNWBMXRMIRW-WYVZQNDMSA-L vitamin b12 Chemical compound N([C@@H]([C@@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@H](CCC(N)=O)\C(N1[Co+]C#N)=C(/C)\C1=N\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NCC(C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO RMRCNWBMXRMIRW-WYVZQNDMSA-L 0.000 title 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 claims abstract description 137
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 claims abstract description 137
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 claims abstract description 137
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 37
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims abstract description 21
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 claims abstract description 11
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims abstract description 10
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 10
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 4
- FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+3].N#[C-].N([C@@H]([C@]1(C)[N-]\C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C(\C)/C1=N/C([C@H]([C@@]1(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=C\C1=N\C([C@H](C1(C)C)CCC(N)=O)=C/1C)[C@@H]2CC(N)=O)=C\1[C@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H](N2C3=CC(C)=C(C)C=C3N=C2)O[C@@H]1CO FDJOLVPMNUYSCM-WZHZPDAFSA-L 0.000 claims abstract 16
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract 2
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 claims abstract 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 11
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 11
- OAJLVMGLJZXSGX-NDSREFPTSA-L (2r,3s,4s,5r)-2-(6-aminopurin-9-yl)-5-methanidyloxolane-3,4-diol;cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12 Chemical compound [Co+3].O[C@H]1[C@H](O)[C@@H]([CH2-])O[C@H]1N1C2=NC=NC(N)=C2N=C1.C1([C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)[N-]\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O OAJLVMGLJZXSGX-NDSREFPTSA-L 0.000 claims description 10
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 10
- 241000186429 Propionibacterium Species 0.000 claims description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 9
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 claims description 8
- 235000007672 methylcobalamin Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000011585 methylcobalamin Substances 0.000 claims description 8
- JEWJRMKHSMTXPP-BYFNXCQMSA-M methylcobalamin Chemical compound C[Co+]N([C@]1([H])[C@H](CC(N)=O)[C@]\2(CCC(=O)NC[C@H](C)OP(O)(=O)OC3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)C)C/2=C(C)\C([C@H](C/2(C)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O JEWJRMKHSMTXPP-BYFNXCQMSA-M 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- 238000009928 pasteurization Methods 0.000 claims description 4
- 241001468161 Acetobacterium Species 0.000 claims description 3
- 241000589158 Agrobacterium Species 0.000 claims description 3
- 241000588986 Alcaligenes Species 0.000 claims description 3
- 241000186063 Arthrobacter Species 0.000 claims description 3
- 241000589151 Azotobacter Species 0.000 claims description 3
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims description 3
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 claims description 3
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 3
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 claims description 3
- 241000186394 Eubacterium Species 0.000 claims description 3
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 claims description 3
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 claims description 3
- 241000589180 Rhizobium Species 0.000 claims description 3
- 241000190932 Rhodopseudomonas Species 0.000 claims description 3
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 claims description 3
- 241000607720 Serratia Species 0.000 claims description 3
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 claims description 3
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 claims description 3
- 241000589634 Xanthomonas Species 0.000 claims description 3
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 3
- 241000589565 Flavobacterium Species 0.000 claims description 2
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 claims description 2
- 230000001420 bacteriolytic effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 2
- 241000589220 Acetobacter Species 0.000 claims 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims 2
- 241000202974 Methanobacterium Species 0.000 claims 1
- 241000205276 Methanosarcina Species 0.000 claims 1
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 abstract description 51
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 abstract description 3
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 122
- RMRCNWBMXRMIRW-BYFNXCQMSA-M cyanocobalamin Chemical compound N#C[Co+]N([C@]1([H])[C@H](CC(N)=O)[C@]\2(CCC(=O)NC[C@H](C)OP(O)(=O)OC3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)C)C/2=C(C)\C([C@H](C/2(C)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O RMRCNWBMXRMIRW-BYFNXCQMSA-M 0.000 description 38
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 27
- 235000000639 cyanocobalamin Nutrition 0.000 description 19
- 239000011666 cyanocobalamin Substances 0.000 description 19
- 229960002104 cyanocobalamin Drugs 0.000 description 19
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 14
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 13
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 13
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 13
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 13
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 12
- 239000000047 product Substances 0.000 description 12
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000186428 Propionibacterium freudenreichii Species 0.000 description 8
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 8
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 7
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 235000021472 generally recognized as safe Nutrition 0.000 description 4
- YOZNUFWCRFCGIH-BYFNXCQMSA-L hydroxocobalamin Chemical compound O[Co+]N([C@]1([H])[C@H](CC(N)=O)[C@]\2(CCC(=O)NC[C@H](C)OP(O)(=O)OC3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)C)C/2=C(C)\C([C@H](C/2(C)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O YOZNUFWCRFCGIH-BYFNXCQMSA-L 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000006052 feed supplement Substances 0.000 description 3
- 230000004907 flux Effects 0.000 description 3
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 3
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 3
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 3
- 230000036515 potency Effects 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 2
- XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N Cyanide Chemical compound N#[C-] XFXPMWWXUTWYJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 241000186334 Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii Species 0.000 description 2
- 241000168053 Pseudomonas denitrificans (nomen rejiciendum) Species 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 125000003346 cobalamin group Chemical group 0.000 description 2
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 2
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 2
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 description 2
- 235000004867 hydroxocobalamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011704 hydroxocobalamin Substances 0.000 description 2
- 229960001103 hydroxocobalamin Drugs 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000012533 medium component Substances 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000012465 retentate Substances 0.000 description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 2
- 238000001612 separation test Methods 0.000 description 2
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 235000019737 Animal fat Nutrition 0.000 description 1
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 241001134654 Lactobacillus leichmannii Species 0.000 description 1
- 235000019738 Limestone Nutrition 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 240000003183 Manihot esculenta Species 0.000 description 1
- 235000016735 Manihot esculenta subsp esculenta Nutrition 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- 206010029240 Neuritis Diseases 0.000 description 1
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 1
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 206010064097 avian influenza Diseases 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 230000037058 blood plasma level Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- -1 cyano, hydroxyl Chemical group 0.000 description 1
- 125000002235 cyanocobalamin group Chemical group 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 239000002095 exotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000776 exotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 description 1
- 235000021050 feed intake Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000004362 fungal culture Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000009655 industrial fermentation Methods 0.000 description 1
- 229940029329 intrinsic factor Drugs 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000006028 limestone Substances 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000000696 methanogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 201000001119 neuropathy Diseases 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 235000019449 other food additives Nutrition 0.000 description 1
- 238000012261 overproduction Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 238000011020 pilot scale process Methods 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000004094 preconcentration Methods 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 239000002453 shampoo Substances 0.000 description 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 238000013060 ultrafiltration and diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
- C12P19/28—N-glycosides
- C12P19/42—Cobalamins, i.e. vitamin B12, LLD factor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/174—Vitamins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/15—Vitamins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/67—Vitamins
- A61K8/673—Vitamin B group
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
- A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Birds (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
De uitvinding verschaft een werkwijze voor de bereiding van een preparaat dat natuurlijk vitamine B12 bevat, waarbij de werkwijze de stappen omvat van : (a) het kweken van microbiële cellen onder omstandigheden zodanig dat zij intracellulair natuurlijk vitamine B12 produceren; (b) het lyseren of op andere wijze openbreken van de buitenmembraan van de microbiële cellen die natuurlijk vitamine B12 hebben geproduceerd, zodat het vitamine B12 wordt afgegeven; (c) het scheiden van de vaste en vloeibare fasen van de lysis door het lysaat geproduceerd, waarbij de vloeibare fase het natuurlijke B12 bevat; (d) het wassen van de vaste fase van het lysaat en het combineren van de wasvloeistof met de vloeibare fase van het lysaat omvat; (e) het toevoegen van ten minste een deel van de vaste fase van het lysaat aan de vloeibare fase die het natuurlijke vitamine B12 bevat.
Description
<Desc/Clms Page number 1> Bereiding en gebruik van preparaten die hoge concentraties vitamine B12 bevatten Terrein van de uitvinding De uitvinding heeft betrekking op de bereiding van preparaten die natuurlijk vitamine B12 bevatten. Achtergrond van de uitvinding Vitamine B12 is een belangrijk vitamine voor mensen en dieren. Het wordt gebruikt om pernicieuze anaemie en perifere neuritis te behandelen en wordt gebruikt als een voedingssupplement. Vitamine B12 is ook een belangrijk diervoersupplement als groeiverbeteraar. De term vitamine B12 wordt gebruikt om verbindingen van de kobaltcorrinoidenfamilie te beschrijven, in het bijzonder die van de cobalaminegroep. De meest gebruikte verbinding van deze groep is cyanocobalamine en als zodanig wordt de term vitamine B12 soms gebruikt om te verwijzen naar cyanocobalamine. In deze beschrijving moet aan de term vitamine B12 de algemene betekenis worden toegekend zodat hij alle kobaltcorrinoiden van de cobalaminegroep omvat, die in het bijzonder cyanocobalamine, hydroxocobalamine, methylcobalamine en 5'-desoxyadenosylcobalamine omvatten respectievelijk gekenmerkt door een cyaan-, hydroxyl-, EMI1.1 methyl- de methylcobalamineen 5'-desoxyadenosylcobalamineverbindingen is bekend dat ze in geïsoleerde vorm instabiel zijn voor licht en in een waterige oplossing gemakkelijk worden omgezet in hydroxocobalamine. Om deze reden bestaan bijna alle commerciële vitamine B12-preparaten uit het stabiele cyanocobalamine dat als zodanig niet de chemische vorm is waarin vitami- <Desc/Clms Page number 2> ne B12 in de natuur kan worden gevonden. In deze beschrijving wordt de term natuurlijk vitamine B12 zo gedefinieerd dat hij alle chemische vormen van vitamine B12 omvat die natuurlijk voorkomen in de natuur, waarbij cyanocobalamine dus wordt uitgesloten. I Vitamine B12 wordt industrieel geproduceerd door microbiële fermentatie, waarbij bijna uitsluitend Pseudomonas denitrificans en Propionibacterium-soorten worden gebruikt, waarbij het natuurlijke vitamine B12 vervolgens in de cyanocobalaminevorm wordt omgezet door chemische werkwijzen waaronder cyanidisering gevolgd door extractieen zuiveringsstappen met gebruikmaking van organische oplosmiddelen (waarvan een overzicht gegeven wordt door Spalla et al, 1989 "Microbial production of vitamin B12", in : Biotechnology of vitamins, pigments and growth factors, E. J. Vandamme red., Elsevier, London, New York, blz. 257-284). De chemische omzettingsstap en eventueel daaropvolgende zuiveringsstappen zorgen ervoor dat deze bereidingswerkwijze duur, onveilig voor de operators en milieuonvriendelijk is. Bij opname zetten dieren en mensen cyanocobalamine om in één van de natuurlijke vormen van vitamine B12 zoals methylcobalamine of 5'-desoxyadenosylcobalamine die dienen te functioneren als een coënzym voor verschillende biologische omzettingen (Ellenbogen, L. in : Handbook of vitamins, Nutritional biochemical and clinical aspects ; red. : L. J. Machlin, Marcel Dekker Inc., New York and Basel). Bovendien vraagt efficiënte groei van dieren de aanwezigheid van een voldoende hoeveelheid vitamine B12-activiteit in het diervoer. Vitamine B12-preparaten worden vaak verkocht als voersupplementen zodanig of als onderdeel van een voormengsel dat verdere vitaminen en andere voedseladditieven bevat. Het is dus duidelijk dat een bron van 5'-desoxyadenosylcobalamine of methylcobalamine in plaats van cyanocobalamine voordelig zou zijn. Gezien de instabiliteit van deze twee verbindingen worden ze niet in geïsoleerde <Desc/Clms Page number 3> vorm bereid, maar worden ze bereid in een droge samenstelling samen met de biomassa van het organisme waarin zij worden geproduceerd. Dergelijke samenstellingen zijn zeer geschikt voor gebruik als diervoersupplement. Voor de bereiding van methylcobalamine en 5'-desoxyadenosylcobala- mine hebben bacteriën van het geslacht Propionibacterium het meest de voorkeur, omdat, in tegenstelling tot P. denitrificans, bacteriën van dit geslacht de GRAS-status (Generally Recognized As Safe, algemeen beschouwd als veilig) van de U. S. Food and Drug Administration hebben verkregen en omdat van deze bacteriën bekend is dat ze geen endotoxinen produceren. Propionibacterium-soorten zijn aerotolerante, niet beweeglijke, niet-sporenvormende, Grampositieve bacteriën die verder gekenmerkt worden door de productie van grote hoeveelheden propionzuur uit koolhydraten, melkzuur en polyhydroxyalcoholen. Het geslacht Propionibacterium valt in de hoge "GC"-onderafdeling van de Gram-positieve bacteriën (T. D. Brock, M. T. Madigan, J. M. Martinko en J. Parker in : The Biology of Microorganisms 7th Edition, Prentice-Hall International Inc., 1994). Octrooiaanvrage RU 2001953 (Antibiotics Enzymes Research Technical Institute) heeft betrekking op een sproeidroogwerkwijze voor Propionibacterium shermanii die is gebruikt om 5'-desoxyadenosylcobalamine-bevattende biomassa te produceren. Methylcobalamine in biomassa van methanogene bacteriën is commercieel verkrijgbaar bij de Gedeon Richter Company. Het vitamine B12-gehalte in deze preparaten is echter beperkt door het gehalte waarbij het vitamine B12 wordt geproduceerd tijdens fermentatie en dientengevolge is het vitamine B12-gehalte in deze preparaten niet hoger dan 0, 1% (gew. /gew.). De concentratie van vitamine B12 in een preparaat wordt gewoonlijk gemeten als het droge gewicht van vitamine B12 als een percentage van het droge gewicht van het preparaat. Geconcentreerde (dat wil zeggen > 0, 1% gew. /gew.) producten van cyanocobalamine zijn in de handel verkrijg- <Desc/Clms Page number 4> baar. Voerfabrieken en fabrikanten van voormengsel kunnen dit materiaal niet gebruiken omdat als gevolg van de elektrostatische eigenschappen cyanocobalamine zich afscheidt van zijn drager bij verwerking in voerfabrieken en bij fabrikanten van voormengsel wanneer het wordt samenge- steld met concentraties > 0, 1% gew./gew.. Afscheiding is een bijzonder probleem tijdens zeven, windziften of als men de samenstelling een lange tijd laat staan. De uitvinding beschrijft een werkwijze waarmee het mogelijk wordt een samenstelling te bereiden die een relatief hoge concentratie ( > 0, 1% gew. jgew.) natuurlijk vitamine B12 bevat. Deze nieuwe geconcentreerde producten kunnen bijvoorbeeld worden gebruikt in diervoer, menselijk voedsel of als een bestanddeel in cosmetica. Deze nieuwe geconcentreerde producten kunnen gemakkelijker te gebruiken en te transporteren zijn zodat een verlaging van de kosten mogelijk wordt. Ze kunnen voordelig worden gebruikt door voerfabrieken en fabrikanten van voormengsels daar ze verminderde afscheiding van de vitamine B12 van de drager tijdens verwerking kunnen vertonen. De werkwijze kan gemakkelijk worden uitgevoerd op een industriële schaal en is relatief milieuvriendelijk omdat er geen noodzaak is om organische oplosmiddelen te gebruiken of te cyanideren. Beschrilvinq van de uitvindinq De uitvinding verschaft een werkwijze voor de bereiding van een samenstelling die natuurlijk vitamine B12 bevat die een vitamine B12-concentratie op basis van droge stof hoger dan 0, 1% (gew. /gew.) heeft. De werkwijze omvat de stappen van a) het verkrijgen van microbiële cellen die natuurlijk vitamine B12 bevatten, b) het open breken van de microbiële cellen zodanig dat ten minste een deel van de oplosbare inhoud van de cellen die vitamine B12 bevatten wordt afgegeven aan een vloeistof waarin de cellen aanwezig zijn, c) het scheiden van de opengebroken cellen en de vloeistof die het vitamine B12 bevat en eventueel d) het <Desc/Clms Page number 5> bereiden van een mengsel van het vitamine B12 en ten minste een deel van de opengebroken cellen. De microbiële cellen die vitamine B12 bevatten worden bij voorkeur verkregen in een industrieel fermentatieproces met een micro-organisme waarvan bekend is dat het vitamine B12 produceert. Deze omvatten bacteriën die behoren tot de geslachten van Acetobacterium, Aerobacter, Agrobacterium, Alcaligenes, Arthrobacter, Azotobacter, Bacillus, Clostridium, Corynebacterium, Escherichia, EMI5.1 Eubacterium, Flavobacterium, Methanobacillus, Methanosarci- na, Mycobacterium, Propionibacterium, Proteus, Pseudomonas, Rhizobium, Rhodopseudomonas, Salmonella, Serratia, Streptococcus, Streptomyces en Xanthomonas. Bij voorkeur is de in de werkwijze volgens de uitvinding te gebruiken bacterie veilig voor consumptie door mensen en/of dieren en produceert geen endo- of exotoxinen. Liever heeft de bacterie de GRAS-status (Generally Recognized As Safe) van de U. S. Food and Drug Administration verkregen. De bacterie die het meest de voorkeur heeft voor gebruik bij de werkwijze van de uitvinding is van het geslacht Propionibacterium, waarvan de soorten die de voorkeur hebben P. freudenreichii of P. shermanii zijn. Het is bekend bij deskundigen dat de industriële bereiding van vitamine B12, zoals die van vele andere microbiële metabolieten, wordt uitgevoerd met stammen die verkregen zijn uit programma's ontwikkeld om de gewenste kwaliteiten van een bepaalde stam te verbeteren. Deze programma's bestaan in wezen uit de behandeling van de productiestam met een mutageen middel en de keuze van mutanten die een verbeterde productiviteit of andere voordelen vertonen. Verschillende technieken zijn beschreven voor de rationele selectie van mutante micro-organismen met een overproductie van vitamine B12 (Spalla, C., Grein, A., Garofo, L en Ferni, G. Microbial production of vitamin B12, in : Biotechnology of vitamins, pigments and growth factors blz. 257-284 (E. J. Vandamme, red.) Elsevier, London/NY, 1989). Dergelijke mutante stammen worden ge- <Desc/Clms Page number 6> bruikt bij voorkeurswerkwijzen van de uitvinding en kunnen de vitamine B12-concentraties in de verkregen preparaten verder verhogen. In de uitvinding wordt de term"natuurlijk vitamine B12" zo gedefinieerd dat deze alle chemische vormen van vitamine B12 omvat die natuurlijk voorkomen in de natuur, waarbij de cyanococobalaminevorm van vitamine B12 wordt uitgesloten. In de voorkeurswerkwijzen en-preparaten van de uitvinding omvat het natuurlijke vitamine B12 5'-desoxyadenosylcobalamine en/of methylcobalamine. Bij de werkwijze van de uitvinding worden de microbiële cellen die vitamine B12 bevatten zo behandeld dat lysis of ander openbreken van de celmembraan wordt veroorzaakt. Lysis beschrijft het openbreken van de microbiële cellen zodanig dat (ten minste een deel van) de oplosbare inhoud van de cellen die het vitamine B12 bevatten wordt afgegeven aan een vloeistof waarin de cellen aanwezig zijn. Voorkeursbehandelingen voor het openen van de cellen zijn behandelingen met warmte waaronder pasteurisatie of verwarmen in een autoclaaf, behandeling met bacteriolytische enzymen zoals lysozym, mechanisch openbreken van de cellen waaronder malen of het gebruik van afschuifkrachten, behandeling met chemicaliën die cellysis veroorzaken zoals detergenten of organische oplosmiddelen, alsook combinaties van deze behandelingen. De lysis of ander openbreken van de membraan geeft een lysaat dat kan worden gescheiden in vaste en vloeibare fasen. Bij een voorkeurswerkwijze van de uitvinding wordt ten minste een deel van de vaste fase (opengebroken cellen) toegevoegd aan de vloeistoffase die het natuurlijke vitamine B12 bevat, zodat een preparaat wordt verkregen dat een mengsel is dat biomassa, dat wil zeggen bij voorkeur opengebroken microbiële cellen, en natuurlijk vitamine B12 bevat. Het vitamine B12-gehalte of de vitamine B12-concentratie van deze preparaten wordt uitgedrukt als het gewichtspercentage van vitamine B12 op basis van het drogestofgehalte van het preparaat. <Desc/Clms Page number 7> De werkwijze van de uitvinding geeft preparaten met een vitamine B12-concentratie hoger dan 0, 1% (gew. /gew.) op basis van droge stof. In voorkeurswerkwijzen heeft het preparaat een concentratie natuurlijk vitamine B12 hoger dan 0, 2% (gew. /gew.), liever hoger dan 0, 4% (gew. /gew.), nog liever hoger dan 0, 6%, nog liever hoger dan 0, 8% (gew. /gew.) en liefst hoger dan 1, 0% (gew. /gew.). Het heeft de voorkeur dat vitamine B12-concentraties van de preparaten van de uitvinding niet hoger zijn dan 10% (gew. /gew.), liever zijn de vitamine B12-concentraties niet hoger dan 5%. Bij de werkwijze van de uitvinding wordt de vaste fase van het lysaat dat de celbrokstukken afkomstig van het openbreken van de cellen bevat, gescheiden van de vloeistof die het afgegeven vitamine B12 bevat. Een aantal verschillende vaste-vloeistofscheidingstechnieken zijn beschikbaar voor de deskundige om deze scheiding uit te voeren, waaronder centrifugatie en filtratietechnieken. Een voorkeurswerkwijze voor het scheiden van de vaste celbrokstukken van de vloeistof die vitamine B12 bevat is ultrafiltratie. Bij een voorkeurswerkwijze van de uitvinding worden de geopende microbiële cellen gewassen en wordt de wasvloeistof gecombineerd met het vitamine B12 verkregen na een scheiding van de cellen en de vloeistof die vitamine B12 bevat. Bij voorkeur wordt het wassen bewerkstelligd door diafiltratie, waarbij bij voorkeur ionen-vrij water wordt gebruikt voor het wassen van de opengebroken cellen. Het diafiltraat dat vitamine B12 bevat, wordt vervolgens gecombineerd met de vloeibare fase die vitamine B12 bevat. In een voorkeurswerkwijze van de uitvinding wordt de vloeibare fase die natuurlijk vitamine B12 bevat onderworpen aan een droogbehandeling. Ieder geschikt middel voor drogen kan worden gebruikt zoals bijvoorbeeld sproeidrogen, drogen met een gefluidiseerd bed, vriesdrogen of drogen in vacuüm. In een voorkeurswerkwijze van de uitvinding worden de microbiële cellen die vitamine B12 bevatten gewassen <Desc/Clms Page number 8> voordat ze lysis ondergaan, zodat de vitamine B12-concentratie op basis van droge stof verder wordt verhoogd door het verwijderen van mediumcomponenten. Bij voorkeur wordt het wassen uitgevoerd met diafiltratie, waarbij bij voorkeur ionen-vrij water wordt gebruikt. In een verder aspect verschaft de uitvinding preparaten die vitamine B12 bevatten, die kunnen worden verkregen met een werkwijze van de uitvinding. Bij voorkeur is het grootste deel van de vitamine B12-activiteit in deze preparaten in de vorm van natuurlijk vitamine B12. Preparaten van de uitvinding worden gekenmerkt doordat het vitamine B12 aanwezig is in een concentratie op basis van droge stof hoger dan 0, 1% (gew. /gew.). In een voorkeurspreparaat van de uitvinding is de vitamine B12-concentratie hoger dan 0, 2% (gew. /gew.), bij voorkeur hoger dan 0, 4% (gew. /gew.), liever hoger dan 0, 6%, nog liever hoger dan 0, 8% (gew. /gew.) en liefst hoger dan 1, 0% (gew. /gew.). De vitamine B12-concentraties van de preparaten van de uitvinding zijn echter bij voorkeur niet hoger dan 10% (gew. /gew.), liever zijn de vitamine B12-concentraties niet hoger dan 5%. De preparaten van de uitvinding bevatten vitamine B12 en een drager die bij voorkeur biomassa, bijvoorbeeld hele cellen en/of celbrokstukken bevat. De biomassa die aanwezig is in deze preparaten is bij voorkeur afkomstig van een micro-organisme dat vitamine B12 kan produceren, zoals de hiervoor genoemde bacteriën, waarvan de Propionibacterium-soorten het meest de voorkeur hebben. De preparaten van de uitvinding zijn bij voorkeur droge preparaten, waarbij droog wordt gedefinieerd als EMI8.1 hebbende een watergehalte van minder dan 15 gew. liever minder dan 10 %, liefst minder dan 5 gew. In droge preparaten van de uitvinding die de voorkeur hebben is de vitamine B12-activiteit nagenoeg homogeen verdeeld door het poeder of het gegranuleerde poeder dat de drager en het vitamine B12 bevat. Dientengevolge scheidt de vitamine B12-activiteit in deze preparaten zich voordelig niet in een grote mate van de andere be- <Desc/Clms Page number 9> standdelen in het preparaat af, in het bijzonder wanneer blootgesteld aan gravitatiekrachten, zeven, windziften of elektrostatische krachten tijdens verwerken van de preparaten, zelfs wanneer gebruikt bij concentraties hoger dan 0, 1% (gew. /gew.). Het is de bedoeling dat verwerken hierin het verwerken van de preparaten van de uitvinding tot voer en voervoormengsels omvat. In een verder aspect van de uitvinding wordt het preparaat van de uitvinding gebruikt als of bij de bereiding van groeibevorderend voedingssupplement voor dieren. Voor dit doel worden de preparaten die vitamine B12 bevatten toegevoegd aan de andere voercomponenten, direct of in de vorm van een voormengsel dat ook andere vitaminen, mineralen en/of biologisch actieve bestanddelen bevat. Zoals getoond in het specifieke voorbeeld bevordert het voeren van een dier met voer dat een preparaat van de uitvinding bevat de groei van het dier. In nog een verder aspect van de uitvinding worden preparaten die vitamine B12 bevatten gebruikt als of bij de productie van een menselijk voedingssupplement en/of worden opgenomen in cosmetische preparaten, zoals shampoo's of bodylotions. Voorbeelden Experimenteel Vitamine B12-bepalinQ Vitamine B12-activiteit werd bepaald met de turbidimetrische biologische bepaling op basis van de groeirespons van Lactobacillus leichmanii ATCC 7830 zoals in detail beschreven in : The United States Pharmacopoeia, The National Formulary, 1995, blz. 1719-1721, United States Pharmacopoeial Convention, Inc., Rockville MD. Plasma B12-concentraties Plasma B12 werd gemeten met een in de handel verkrijgbare radioassay-kit (Bio-Rad Laboratories Ltd., <Desc/Clms Page number 10> Hemel Hempstead, UK. ). Het plasmamonster wordt gecombineerd met vitamine B12 (57CO) in een oplossing die dithiothreitol en cyanide bevat. Het mengsel wordt 30 minuten gekookt om endogene bindingseiwitten te inactiveren en om de verschillende vormen van vitamine B12 in cyanocobalamine om te zetten. Het mengsel wordt gekoeld en vervolgens gecombineerd met geimmobiliseerde (gebonden aan polymeerkralen), affiniteit-gezuiverde intrinsic factor van het varken. Dit regelt en buffert de pH van het reactiemengsel op 9, 35. Het reactiemengsel wordt vervolgens 60 minuten bij kamertemperatuur geincubeerd. Tijdens incubatie concurreren endogene en gemerkte vitamine voor het beperkte aantal bindingsplaatsen op basis van hun relatieve concentraties. Het reactiemengsel wordt vervolgens 10 minuten bij 1500g gecentrifugeerd. De gemerkte en niet-gemerkte vitaminen die binden aan de geimmobiliseerde bindingseiwitten worden geconcentreerd op de bodem van de buis in de vorm van een pellet en de niet-gebonden vitaminen blijven in de bovenstaande vloeistof. De bovenstaande vloeistof wordt afgezogen en de radioactiviteit verbonden met de pellet wordt geteld. Standaardcurven worden samengesteld met vitamine B12-standaards in een menselijke serumalbuminebasis. De concentratie van vitamine B12 in het plasmamonster wordt bepaald uit de standaardcurven. Standaardcurven werden ingetekend en onbekenden werden bepaald met AssayZap universal assay calculator, versie 2. 32 (Biosoft, Cambridge, Groot Brittannië). Plasmamonsters moesten 10-50 maal worden verdund om ze in het meest gevoelige traject van de bepaling te brengen. Verqelijkinqsvoorbeeld 1 Een fermentatie werd uitgevoerd met Propionibacterium freudenreichii met een werkwijze bekend bij de deskundigen (zie bijvoorbeeld Spalla et al, 1989"Microbial production of vitamin B12", in : Biotechnology of vitamins, pigments and growth factors, E. J. Vandamme red., Elsevier, <Desc/Clms Page number 11> London, New York, blz. 257-284). Een geschikte P. freudenreichii-stam is verkrijgbaar bij de American Type Culture Collection onder toegangsnummer ATCC 6207. Aan het eind van de fermentatie werd een kweekmengsel verkregen dat een 5'-desoxyadenosylcobalaminepotentie van 10 mg/l had en een droge-stofgehalte van 7, 5%. Sproeidrogen van dit kweekmengsel leidde tot een product met een vitamine B12-concentratie van 0, 01%. Om een hogere vitamine B12-concentratie te verkrijgen werd een poging gedaan tot een vast-vloeistofschei- ding van het kweekmengsel. Vitamine B12 is intracellulair in P. freudenreichii, om welke reden verwijdering van (extracellulaire) mediumcomponenten en daaropvolgend sproeidrogen van de biomassa zou moeten leiden tot een gesproeidroogd product met een hogere vitamine B12-concentratie. Op laboratoriumschaal werd een centrifugestap uitgevoerd bij een maximale g-kracht van 5000-6000*g. Deze g-kracht is vergelijkbaar met de centrifugale krachten van centrifuges die op industriële schaal gebruikt worden. Porties van 1000 ml kweekmengsel werden 10 minuten gecentrifugeerd in een Beckmann JM/6E centrifuge bij 5000 opm. Er werd onder deze omstandigheden echter geen scheiding van biomassa en kweekmedium verkregen. Omdat om economische redenen hogere centrifugale krachten op industriële schaal minder aantrekkelijk zijn, hebben we getest of het mogelijk was de vloeistof en de vaste stof in het kweekmengsel te scheiden met ultrafiltratie. 2000 ml kweekmengsel met een aanvankelijke concentratie van 4, 5 mg vitamine B12/1 (vitamine B12 op basis van droge stof 0, 02%) werd behandeld met ultrafiltratie door middel van een 30 kD AMICON spiraalsgewijs gewonden module (0, 09 m2) met een voedingsdruk van 1 bar. Onder deze omstandigheden was het mogelijk om het monster van vitamine B12 vijfmaal te concentreren. De gemiddelde permeaatflux was 30 l/m2h. De vitamine B12-concentratie in het concen- <Desc/Clms Page number 12> traat was 20 mg/l, terwijl het in het permeaat minder dan 0, 2 mg/l vitamine B12 werd gedetecteerd. De vitamine B12concentratie in het concentraat, wanneer uitgedrukt in termen van droge-stofgehalte was 0, 05%, vergeleken met 0, 02% voor ultrafiltratie. Om de titer van vitamine B12 op basis van droge stof verder te verhogen, hebben we vervolgens diafiltratie van de biomassa getest. Het ultrafiltratieconcentraat zoals verkregen in het hierboven geschreven experiment werd zesmaal gewassen met ionen-vrij water, hetgeen leidde tot een vitamine B12potentie in het concentraat van 20 mg/l. In het diafiltraat werd geen vitamine B12-activiteit gedetecteerd. Daaropvolgend sproeidrogen van het concentraat leidde tot een gesproeidroogd product met een vitamine B12-concentratie van 0, 06%. We concluderen uit de bovenstaande experimenten dat het niet mogelijk is een product te verkrijgen met een vitamine B12-concentratie hoger dan 0, 06% op basis van droge stof uitgaande van een kweekmengsel met een vitamine B12-titer van 5-10 mg/l. Voorbeeld 2 Om de aanwezigheid van levensvatbare productieorganismen, dat wil zeggen levende cellen, in het gedroogde product te voorkomen wordt gedurende 30 minuten een pasteurisatiestap van 65 OC uitgevoerd op een kweekmengsel dat was verkregen zoals beschreven in voorbeeld 1. Het behandelde kweekmengsel werd zoals boven beschreven behandeld met ultrafiltratie. Een roze gekleurd permeaat werd waargenomen met een vitamine B12-concentratie (op basis van droge stof) van 0, 2-0, 4%. Men denkt dat pasteurisatie lysis van (ten minste een deel van) de P. freudenreichii-cellen en afgifte van het intracellulaire vitamine B12 in het medium veroorzaakt. Dit kan mogelijk maken dat men gedroogde producten verkrijgt die vitamine B12 bevatten in concentraties variërend <Desc/Clms Page number 13> van 0, 06% tot 0, 3% (op basis van droge stof), door het combineren van het permeaat en het gepasteuriseerde kweekmengsel voorafgaand aan sproeidrogen. In meer detail werd 350 ml van de met warmte behandelde kweekmengsels met ultrafiltratie behandeld onder de hierboven in voorbeeld 1 beschreven omstandigheden. Het concentraat werd behandeld met diafiltratie met 2500 ml ionen-vrij water. Het helder roze gekleurde permeaat en het diafiltraat werden gecombineerd en gemengd met 750 ml gepasteuriseerd ultrafiltratieconcentraat. Het mengsel werd gesproeidroogd in een laboratorium Büchi-sproeidroger EMI13.1 waarbij de inlaattemperatuur op 180 C wordt ingesteld en de uitlaat werd ingesteld op een temperatuur van 104 C. De vitamine B12-concentratie van het zo verkregen gesproeidroogde product was 0, 13%. Voorbeeld 3 1200 1 kweekmengsel met een vitamine B12-concentratie van 8 mg/l werd verkregen in een proeffabriekfermentatie van P. freudenreichii en werd behandeld met ultrafiltratie in een DDS-ultrafiltratiemodule M37 met 20 kD membranen en een aanvankelijke waterflux van 38 1/m2h. De temperatuur tijdens ultrafiltratie werd op omgevingstemperatuur gehouden. De circulatiestroom was ongeveer 15 m3/h. De voedingsdruk werd ingesteld op ongeveer 7 bar. Het kweekmengsel werd 11, 5 maal geconcentreerd (gemiddelde flux van 23 1/m2h). Het concentraat werd gewassen met 500 1 ionen-vrij water bij omgevingstemperatuur tot een geleiding van ongeveer 3 mS/cm werd bereikt. Het verkregen concentraat werd 6 uur bij 90 oc behandeld. Een deel van het met warmte behandelde concentraat werd met diafiltratie behandeld, hetgeen leidt tot ongeveer 300 1 permeaat dat vitamine B12 bevat. Het retentaat werd bij 4 OC bewaard. Het permeaat werd op proeffabriekschaal in een glazen verdamper bij 40 OC onder vacuüm geconcentreerd, hetgeen leidt tot ongeveer 6 1 concentraat. <Desc/Clms Page number 14> Door het combineren en mengen van een geschikte hoeveelheid van het retentaat met het geconcentreerde permeaat, stelden we een mengsel samen dat werd gesproeidroogd in een NIRO-sproeidroger. De luchttemperatuur bij de inlaat werd ingesteld op 160 0 e en de uitlaattemperatuur werd geregeld op ongeveer 90-95'C. In een werktijd van 5 uur was ongeveer 45 l van het mengsel gesproeidroogd (ongeveer 9 kg/uur). Dit leidde tot 1307 g gesproeidroogd materiaal met een vitamine B12-activiteit van 1100 mg/kg, dat wil zeggen 0, 11%. Voorbeeld 4 In een experiment gelijk aan het experiment zoals beschreven in voorbeeld 3 werd een fermentatie uitgevoerd met de verbeterde P. freudenreichii-stam CBS 929. 97. De verkregen vitamine B12-concentratie in het fermentatiekweekmengsel was 40 mg/l. De ultrafiltratie en diafiltratie werden in wezen uitgevoerd als beschreven in voorbeeld 3. Met ultrafiltratie werd 100 l van het 40 mg/l kweekmengsel geconcentreerd tot ongeveer 401. Met diafiltratie werd het concentraat gewassen met 200 ionenvrij water. Het verkregen gewassen concentraat had een vitamine B12-activiteit van 96, 5 mg/kg en 6, 72% droge stof (sproeidrogen van dit gewassen concentraat zou een vitamine B12-activiteit van 0, 14% hebben gegeven). Het gewassen concentraat werd vervolgens 5 minuten bij 90 oe gelyseerd, gevolgd door een scheiding van celbrokstukken en vloeistof door ultrafiltratie. De potentiële vitamine B12-concentratie van het permeaat bereikte 0, 87% op basis van droge stof (berekend uit een vitamine B12activiteit van 52, 1 mg/kg en een droge-stofgehalte van 0, 6%). Na voorconcentratie van het permeaat in vacuüm bij 65 oe werden vershillende hoeveelheden permeaat en concentraat gecombineerd en gedroogd. De vitamine B12-potenties van de verkregen gedroogde producten waren zoals hierna gegeven : <Desc/Clms Page number 15> concentraat : permeaat vitamine B12-activiteit op basis van droge stof EMI15.1 1 : 1 0, 3 : 7 0, 2 : 8 0, 72% 8 : 2 0, 29% P. freudenreichii CBS 929. 97 werd 10 juli 1997 bij het Centraalbureau voor Schimmelcultures, Baarn, Nederland, gedeponeerd. Voorbeeld 5 Toepassing van natuurlijk vitamine B12 in diervoer Een proef werd uitgevoerd met slachtkuikens om de werkzaamheid van natuurlijk vitamine B12 met cyanocobalamine te vergelijken. Mannelijke slachtkuikens van 1 dag oud werden willekeurig toegekend aan kooien. Er werden 8 dieren per kooi gehouden. De kooien werden geplaatst in een kunstmatig verwarmde, geventileerde en verlichte slachtkuikenbatterij. De dieren werden ingeënt tegen pseudovogelpest <Desc/Clms Page number 16> als ze 1 en 14 dagen oud zijn. De dieren ontvingen vanaf dag 1 onbeperkt het experimentele voer, de eerste tien dagen in de vorm van kruimels, later in de vorm van pellets. Water was vrij beschikbaar. Het experiment duurde 28 dagen. Op dag 28 werden de dieren gewogen, werd de voerconsumptie bepaald en werden bloedmonsters genomen. De bloedmonsters werden genomen bij vier willekeurig gekozen slachtkuikens per kooi. Het bloed werd verzameld in gehepariniseerde buizen. De buizen werden gecentrifugeerd en het plasma werd bevroren (-18 C) totdat vitamine B12-analyse werd uitgevoerd. Deze analyse werd uitgevoerd als bovenbeschreven onder experimenteel (plasma B12-concentraties). Dit experiment omvatte drie behandelingen : I. Basisvoer zonder toevoeging van vitamine B12 II. Basisvoer met toevoeging van cyanocobalamine (30 ppb actieve stof) III. Basisvoer met toevoeging van natuurlijk vitamine B12 (30 pp actieve stof) Elke behandeling werd vijf maal herhaald. De samenstelling van het basisvoer wordt weergegeven in tabel l, de resultaten in tabel 2. <Desc/Clms Page number 17> Tabel 1. Samenstelling van het basisvoedsel (in %) Mais 55 Tapioca 1 Sojaboonmeel 30 Sojabonen, met warmte behandeld 5 Verenmeel 1 Soja-olie 2 Dierlijk vet 3 Vitaminen*, mineralen, aminozuren 3 Berekende gehalten : Metabolische energie 13, 3 MJ/kg Ruw eiwit 22, 0% Lysine (totaal) 1, 27% Methionine + Cystein (totaal) 0, 95% * : zonder vitamine B12. Tabel 2. Effect van cyanocobalamine in natuurlijk vitamine B12 op gemiddelde groei, voeropname en voeromzettingsverhouding bij een leeftijd tussen 1 en 28 dagen en op bloedplasmagehalte van vitamine B12 op dag 28. EMI17.1 <tb> <tb> Groe <SEP> Voer-Voer-om-Bloedi <SEP> op-zettings-plasma <tb> (g) <SEP> name <SEP> verhou-vit. <SEP> B12 <tb> (g) <SEP> ding <SEP> (ng/l) <tb> Basisvoer <SEP> 1139 <SEP> 1738 <SEP> 1, <SEP> 53 <SEP> 14 <tb> + <SEP> Cyanocobalamine <SEP> 1264 <SEP> 1782 <SEP> 1, <SEP> 41 <SEP> 32 <tb> + <SEP> Natuurlijk <SEP> vi- <SEP> 1261 <SEP> 1771 <SEP> 1, <SEP> 40 <SEP> 41 <tb> tamine <SEP> B12 <tb> <Desc/Clms Page number 18> Voorbeeld 6 Afscheiding van vitamine B12-activiteit van een drager Afscheiding van de actieve verbinding van de drager kan worden veroorzaakt door deeltjesvorm, dichtheid en bulkdichtheid, stromingsvermogen, hechtende en elektrostatische eigenschappen, vochtgehalte en hygroscopiciteit. Deze afscheidingsprocessen kunnen optreden tijdens vervaardiging van voormengsels en mengvoer en tijdens daaropvolgend transport en bewaren. Deze afscheiding is bijzonder kritisch in het geval van voormengsels die microcomponenten zoals vitaminen en sporenelementen, en macrocomponenten, zoals mineralen en dragers, bevatten. De ontmengingseigenschappen van bestaande in de handel verkrijgbare cyanocobalaminepreparaten (verkregen bij Rhone Poulenc onder het handelsmerk Microvit* B12) is vergeleken met een preparaat met natuurlijk vitamine B12 bereid als beschreven in voorbeeld 4. Kalksteen wordt als een drager voor de bestaande in de handel verkrijgbare cyanocobalaminepreparaten gebruikt. Men liet de teststoffen via een vibrerend kanaal uit een opslagvat stromen zodat een berg wordt gevormd, zoals getoond in figuur 1. Er werden drie monsters uit het midden genomen en gemengd. De procedure werd herhaald met monsters van de voet van de berg. De monsters werden zoals bovenbeschreven geanalyseerd op vitamine B12-activiteit en vergeleken met het oorspronkelijke homogene mengsel. Afwijkingen in monsters van het oorspronkelijke homogene mengsel worden als volgt berekend : Afwijking bij de basis (%) = { (concentratie aan de voet-concentratie oorspronkelijk mengsel)/concentratie oorspronkelijk mengsel} * 100 <Desc/Clms Page number 19> Afwijking in het midden (%) = { (concentratie in het midden-concentratie oorspronkelijk mengsel)/concentratie oorspronkelijk mengsel) * 100 Vergelijking van de afwijkingen aan de voet van de berg en in het midden van de berg van preparaten en van cyanocobalamine en natuurlijk vitamine B12 van de uitvinding worden getoond in tabel 3. Tabel 3 EMI19.1 <tb> <tb> Teststof <SEP> Scheidingstest <SEP> Scheidingstest <tb> (%) <SEP> voet <SEP> berg <SEP> (%) <SEP> midden <SEP> berg <tb> Cyanocobalamine <SEP> < <SEP> +10 <SEP> < <SEP> -10 <SEP> <tb> 0, <SEP> 1% <SEP> <tb> Cyanocobalamine <SEP> +56 <SEP> -78 <SEP> <tb> 1% <tb> Natuurlijk <SEP> vita- <SEP> +8 <SEP> -12 <SEP> <tb> mine <SEP> B12 <SEP> (0,9%) <tb>
Claims (18)
- CONCLUSIES 1. - Werkwijze voor het bereiden van natuurlijk vitamine B12, gekenmerkt doordat de werkwijze omvat : (a) het kweken van microbiele cellen onder omstandigheden zodanig dat zij intracellulair natuurlijk vitamine B12 produceren ; (b) het lyseren of op andere wijze openbreken van de buitenmembraan van de microbille cellen die natuurlijk vitamine B12 hebben geproduceerd, zodat het vitamine B12 wordt afgegeven ; (c) het scheiden van de vaste en vloeibare fasen van het lysaat door de lysis geproduceerd, waarbij de vloeibare fase het natuurlijke B12 bevat ; (d) het wassen van de vaste fase van het lysaat en het combineren van de wasvloeistof met de vloeibare fase van het lysaat omvat ;(e) het toevoegen van ten minste een deel van de vaste fase van het lysaat aan de vloeibare fase die het natuurlijke vitamine B12 bevat.
- 2.-Werkwijze volgens conclusie 1, gekenmerkt doordat het wassen van de vaste fase van het lysaat met diafiltratie wordt uitgevoerd met diafiltratie.
- 3.-Werkwijze volgens één van de voorgaande conclusies, gekenmerkt doordat deze verder het wassen van de microbille cellen voorafgaand aan lysis omvat.
- 4.-Werkwijze volgens conclusie 3, gekenmerkt doordat het wassen van de microbiële cellen voorafgaand aan lysis wordt uitgevoerd met diafiltratie.
- 5.-Werkwijze volgens een van de conclusies 1 tot 4, gekenmerkt doordat deze verder het drogen van de vloeibare fase die het natuurlijke vitamine B12 bevat, omvat. <Desc/Clms Page number 21>
- 6.-Werkwijze volgens een van de voorgaande conclusies, gekenmerkt doordat de microbiële cellen cellen zijn van één of meer van de bacteriegeslachten Acetobacterium, Acetobacter, Agrobacterium, Alcaligenes, Arthrobacter, Azotobacter, Bacillus, Clostridium, Corynebacterium, Escherichia, Eubacterium, Flavobacterium, Methanobacillus, Methanosarcina, Mycobacterium, Propionibacterium, Proteus, Pseudomonas, Rhizobium, Rhodopseudomonas, Salmonella, Serratia, Streptococcus, Streptomyces en Xanthomonas.
- 7.-Werkwijze volgens conclusie 6, gekenmerkt doordat de microbiële cellen cellen zijn van het bacteriegeslacht Propionibacterium.
- 8.-Werkwijze volgens een van de voorgaande conclusies, gekenmerkt doordat de lysis wordt veroorzaakt door behandeling met warmte, pasteurisatie, behandeling met bacteriolytische enzymen, mechanisch openbreken of chemische behandeling, alleen of in combinatie met elkaar.
- 9.-Werkwijze volgens een van de conclusies 1 tot 8, gekenmerkt doordat de scheiding van de vaste en vloeibare fasen van het lysaat wordt uitgevoerd met ultrafiltratie of microfiltratie.
- 10. Werkwijze volgens een van de voorgaande conclusies, gekenmerkt doordat het natuurlijke vitamine B12 5'-desoxyadenosylcobalamine of methylcobalamine is.
- 11. - Preparaat, met natuurlijk vitamine B12 in een hoeveelheid groter dan 0. 1 gew. % op basis van het droge-stofgehalte, gekenmerkt doordat het preparaat verkregen kan worden door de werkwijze gedefinieerd in een van de conclusies 1 tot 10.
- 12.-Preparaat volgens conclusie 11, gekenmerkt doordat het een droog preparaat is, waarin het natuurlijke vitamine B12 nagenoeg homogeen door het preparaat is verdeeld en waarin het vitamine B12 zich niet afscheidt van de andere componenten wanneer blootgesteld aan zeven, <Desc/Clms Page number 22> EMI22.1 windziften, gravitatiekrachten of elektrostatische krachten.
- 13.-Preparaat volgens één van de conclusies 11 en 12, gekentmerkt doordat het biomassa bevat.
- 14.-Preparaat volgens conclusie 13, gekenmerkt doordat de biomassa afkomstig is van bacteriën de geslachten Acetobacterium, Acetobacter, Agrobacterium, Alcaligenes, Arthrobacter, Azotobacter, Bacillus, Clostridium, Corynebacterium, Escherichia, Eubacterium, Flavobacterium, Methanobacillus, Methanosarcina, Mycobacterium, Propionibacterium, Proteus, Pseudomonas, Rhizobium, Rhodopseudomonas, Salmonella, Serratia, Streptococcus, Streptomyces en Xanthomonas, afzonderlijk of in combinaties van twee of meer.
- 15.-Preparaat volgens conclusie 14, gekenmerkt doordat het geslacht Propionibacterium is.
- 16.-Preparaat volgens een van de conclusies 11 tot 15, gekenmerkt doordat het natuurlijke vitamine B12 5'-desoxyadenosylcobalamine of methylcobalamine is.
- 17.-Gebruik van een preparaat volgens één vande conclusies 11 tot 16, bij de bereiding van een voedingssupplement.
- 18.-Gebruik van een preparaat volgens een van de conclusies 11 tot 17 bij de bereiding van een cosmetisch preparaat.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP96202254 | 1996-08-12 | ||
EP97200054 | 1997-01-14 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
BE1010976A5 true BE1010976A5 (nl) | 1999-03-02 |
Family
ID=26143080
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
BE9700673A BE1010976A5 (nl) | 1996-08-12 | 1997-08-12 | Bereiding en gebruik van preparaten die hoge concentraties vitamine b12 bevatten. |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US5955321A (nl) |
EP (1) | EP0824152B1 (nl) |
KR (1) | KR20000029904A (nl) |
CN (1) | CN1229440A (nl) |
AR (1) | AR022986A1 (nl) |
AT (1) | ATE228171T1 (nl) |
AU (1) | AU730618B2 (nl) |
BE (1) | BE1010976A5 (nl) |
BR (1) | BR9710884A (nl) |
CA (1) | CA2261286A1 (nl) |
DE (1) | DE69717207T2 (nl) |
DK (1) | DK0824152T3 (nl) |
ES (1) | ES2187720T3 (nl) |
HU (1) | HUP9903580A3 (nl) |
IL (1) | IL128032A0 (nl) |
IT (1) | IT1293968B1 (nl) |
NL (1) | NL1006764C2 (nl) |
NO (1) | NO990653L (nl) |
NZ (1) | NZ333821A (nl) |
PL (1) | PL331514A1 (nl) |
PT (1) | PT824152E (nl) |
WO (1) | WO1998006868A2 (nl) |
Families Citing this family (23)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5739313A (en) * | 1995-11-13 | 1998-04-14 | Regents Of The University Of Minnesota | Radionuclide labeling of vitamin B12 and coenzymes thereof |
GB9806444D0 (en) * | 1998-03-25 | 1998-05-27 | Mars Uk Ltd | Food |
HUP0204186A3 (en) * | 1998-12-18 | 2004-07-28 | Dsm Ip Assets Bv | Improved process for the production of vitamin b12 |
US6806363B1 (en) * | 1999-04-16 | 2004-10-19 | Mayo Foundation For Medical Education & Research | Cobalamin conjugates useful as antitumor agents |
US7314732B2 (en) * | 2000-02-17 | 2008-01-01 | Tfk Inc. | Drug and manufacturing method of same |
EP1334114A2 (en) * | 2000-10-25 | 2003-08-13 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Transcobalamin binding conjugates useful for treating abnormal cellular proliferation |
WO2003000010A2 (en) * | 2001-06-20 | 2003-01-03 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Adenosyl-cobalamin fortified compositions |
TWI328612B (en) | 2002-07-25 | 2010-08-11 | Dsm Ip Assets Bv | Genes and their encoded polypeptides involved in the biosynthetic pathway of vitamin b12, vectors and host cells comprising the genes, and process for producing vitamin b12 |
AU2003288051A1 (en) * | 2002-11-14 | 2004-06-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Formulations comprising vitamin b12, method of production and use thereof |
DK1800675T3 (da) | 2005-12-23 | 2011-09-05 | Nutricia Nv | Sammensætninger omfattende polyumættede fedtsyrer, proteiner og mangan og/eller molybdæn og nucleosider/nucleotider til behandling af demens |
DE102010023324A1 (de) * | 2010-06-10 | 2011-12-15 | Thomas Schütz | Verwendung von Corrinoiden zur kosmetischen Anwendung bei gesundem Fell bzw. gesunder Haut, sowie zur kosmetischen Pflege bei Fell- und Hauterkrankungen bei Klein- und Groß-Tieren (warm- und kaltblütig), (z.B. bei Fischen, Vögeln, Pferden, Rindern, Kamelen, Hunden Katzen, Reptilien) |
FR2973700B1 (fr) * | 2011-04-05 | 2013-04-26 | Oreal | Nouvel actif derivant d'une bacterie appartenant au genre vitreoscilla sp. utile pour prevenir et/ou traiter les etats pelliculaires du cuir chevelu |
US20170232047A1 (en) * | 2012-01-16 | 2017-08-17 | Elizabeth McKenna | Control of Cellular Redox Levels |
KR20200106088A (ko) | 2012-01-16 | 2020-09-10 | 엘라자베스 맥켄나 | 간 질환들 및 장애들의 치료를 위한 조성물들 및 방법들 |
JP2015535829A (ja) | 2012-09-21 | 2015-12-17 | マッケーナ、エリザベス | 天然に存在するCpGオリゴヌクレオチド組成物およびその治療的適用 |
DE102013100891A1 (de) | 2013-01-29 | 2014-07-31 | Erdinger Weissbräu Franz Brombach e.K. | Verfahren zur Herstellung eines Sauergutes, einer Maische oder Würze, eines Getränks, eines Konzentrats sowie die damit hergestellten Erzeugnisse und Verwendung von Milchsäurebakterien, eines Sauerguts, einer Maische, einer Würze oder eines Konzentrats |
DE102013008336A1 (de) | 2013-01-29 | 2014-07-31 | Erdinger Weissbräu Franz Brombach e.K. | Verfahren zur Herstellung eines Malzes sowie damit hergestelltes Malz, Verfahren zur Herstellung eines Weichwassers sowie damit hergestelltes Weichwasser; Verwendung von Milchsäurebakterien |
DE102013008335A1 (de) | 2013-01-29 | 2014-07-31 | Erdinger Weissbräu Franz Brombach e.K. | Verfahren zur Herstellung eines Nahrungsmittels sowie das damit hergestellte Nahrungsmittel und Verwendung von Milchsäurebakterien, eines Sauerguts, einer Maische, einer Würze, eines Getränks oder eines Konzentrats |
DE102014110182A1 (de) | 2014-07-18 | 2016-01-21 | Erdinger Weißbräu Werner Brombach GmbH & Co. KG | Verfahren zur Herstellung eines Nahrungsmittels oder einer Vorstufe desselben, Nahrungsmittel oder eine Vorstufe desselben und entsprechende Verwendung |
DE102017120283A1 (de) | 2017-09-04 | 2019-03-07 | Erdinger Weißbräu Werner Brombach GmbH & Co. KG | Verfahren zur Herstellung eines Nahrungsmittels oder einer Vorstufe desselben, Nahrungsmittel oder eine Vorstufe desselben und eine entsprechende Verwendung |
CN110759959B (zh) * | 2018-07-28 | 2023-04-07 | 广济药业(孟州)有限公司 | 一种从发酵液中分离提取维生素b12的方法 |
CA3078001A1 (en) * | 2019-04-11 | 2020-10-15 | Goli Nutrition Inc. | Apple cider vinegar nutritional supplement |
US20230332097A1 (en) * | 2020-02-27 | 2023-10-19 | Hinoman Ltd. | Bacterial cultures for increasing vitamin b12 in plants |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH03244376A (ja) * | 1982-02-26 | 1991-10-31 | Nippon Oil Co Ltd | ビタミンb↓1↓2生産菌 |
EP0595006A1 (en) * | 1992-09-14 | 1994-05-04 | Vesta Medicines (Proprietary) Limited | Pharmaceutical and dietary compositions for the treatment and prophylaxis of metabolic disturbances in infants containing vitamin B6, folic acid and vitamin B12 |
WO1995017157A2 (de) * | 1993-12-20 | 1995-06-29 | Ctt Coiffeur Consulting Team Cosmetics Gmbh | Kosmetisches produkt zur spezifischen haarpflege |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3146165A (en) * | 1960-08-26 | 1964-08-25 | Distillers Co Yeast Ltd | Composition containing cobalamin and glutathione and process of employing same |
US4383110A (en) * | 1980-11-29 | 1983-05-10 | Nippon Oil Company, Ltd. | Process for purifying and separating vitamin B12 |
US4544633A (en) * | 1982-02-26 | 1985-10-01 | Nippon Oil Company, Ltd. | Process for producing vitamin B12 by the fermentation technique, and vitamin B12 -producing microorganism |
EP0131456A3 (en) * | 1983-07-08 | 1986-07-23 | Kureha Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Production of vitamin b12 employing a fused cell hybrid |
HU188955B (en) * | 1983-09-16 | 1986-05-28 | Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt,Hu | Process for preparing a fermentation broth for the production of coenzyme b down 12 |
RU2001953C1 (ru) * | 1990-10-30 | 1993-10-30 | Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт антибиотиков и ферментов медицинского назначени | Способ получени препарата витамина @ |
US5098691A (en) * | 1991-05-06 | 1992-03-24 | Colgate-Palmolive Company | Composition for disclosing dental plaque |
JP3085320B2 (ja) * | 1991-09-17 | 2000-09-04 | 日石三菱株式会社 | ヒドロキソコバラミンの製造方法 |
EP0647717A1 (en) * | 1993-10-06 | 1995-04-12 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Method of producing vitamin B12 |
US5925625A (en) * | 1994-05-13 | 1999-07-20 | Merkus; Franciscus W. H. M. | Pharmaceutical composition for the intranasal administration of hydroxocobalamin |
FR2740973B1 (fr) * | 1995-11-15 | 1998-02-06 | Lipha | Nouvelle forme d'administration de l'hydroxocobalamine et son utilisation dans les intoxications par les cyanures |
-
1997
- 1997-08-11 AR ARP970103634A patent/AR022986A1/es not_active Application Discontinuation
- 1997-08-12 IT IT97TO000738A patent/IT1293968B1/it active IP Right Grant
- 1997-08-12 AT AT97202466T patent/ATE228171T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-08-12 NL NL1006764A patent/NL1006764C2/nl not_active IP Right Cessation
- 1997-08-12 PT PT97202466T patent/PT824152E/pt unknown
- 1997-08-12 CA CA002261286A patent/CA2261286A1/en not_active Abandoned
- 1997-08-12 US US08/909,715 patent/US5955321A/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-08-12 IL IL12803297A patent/IL128032A0/xx unknown
- 1997-08-12 ES ES97202466T patent/ES2187720T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1997-08-12 BE BE9700673A patent/BE1010976A5/nl not_active IP Right Cessation
- 1997-08-12 NZ NZ333821A patent/NZ333821A/xx unknown
- 1997-08-12 HU HU9903580A patent/HUP9903580A3/hu unknown
- 1997-08-12 CN CN97197234A patent/CN1229440A/zh active Pending
- 1997-08-12 AU AU42065/97A patent/AU730618B2/en not_active Ceased
- 1997-08-12 WO PCT/EP1997/004568 patent/WO1998006868A2/en not_active Application Discontinuation
- 1997-08-12 KR KR1019997001087A patent/KR20000029904A/ko not_active Application Discontinuation
- 1997-08-12 DK DK97202466T patent/DK0824152T3/da active
- 1997-08-12 PL PL97331514A patent/PL331514A1/xx unknown
- 1997-08-12 BR BR9710884A patent/BR9710884A/pt not_active Application Discontinuation
- 1997-08-12 DE DE69717207T patent/DE69717207T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1997-08-12 EP EP97202466A patent/EP0824152B1/en not_active Expired - Lifetime
-
1999
- 1999-01-19 US US09/232,920 patent/US6187761B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-02-11 NO NO990653A patent/NO990653L/no not_active Application Discontinuation
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH03244376A (ja) * | 1982-02-26 | 1991-10-31 | Nippon Oil Co Ltd | ビタミンb↓1↓2生産菌 |
EP0595006A1 (en) * | 1992-09-14 | 1994-05-04 | Vesta Medicines (Proprietary) Limited | Pharmaceutical and dietary compositions for the treatment and prophylaxis of metabolic disturbances in infants containing vitamin B6, folic acid and vitamin B12 |
WO1995017157A2 (de) * | 1993-12-20 | 1995-06-29 | Ctt Coiffeur Consulting Team Cosmetics Gmbh | Kosmetisches produkt zur spezifischen haarpflege |
Non-Patent Citations (9)
Title |
---|
ASAHI GARASU KOGYO GIJUTSU SHOREIKAI KENKYU HOKOKU, vol. 24, 1974, JP, pages 231 - 241 * |
ATSUO TANAKA ET AL.: "Production of vitamin B12 by methanol-assimilating bacteria.", J. FERMENT. TECHNOL., vol. 52, no. 12, 1974, pages 921 - 924, XP000614245 * |
CHEMICAL ABSTRACTS, vol. 83, no. 5, 4 August 1975, Columbus, Ohio, US; abstract no. 41434b, FUKUI SABURO ET AL.: "Production of vitamin B12 by methanol assimilating bacteria" XP002024719 * |
CHEMICAL ABSTRACTS, vol. 84, no. 3, 19 January 1976, Columbus, Ohio, US; abstract no. 14412g, KVASINOV, E.I. ET AL.: "Synthesis of B vitamins by bacteria of the genus Arthrobacter." XP002024720 * |
HARUKI MORIKAWA AND TADASHI KAMIKUBO: "Utilisation of hydrocarbons by microorganisms.", J. FERMENT. TECHNOL., vol. 47, no. 8, 1969, pages 470 - 477, XP000614246 * |
KATSUHIKO FUJII ET AL.: "Studies on the formation of vitamins and their functions in hydrocarbon fermentation.", HAKKO KOGAKU ZASSHI, vol. 44, no. 4, 1966, pages 185 - 191, XP000614244 * |
KOLHOUSE ET AL.: "Multivitamin/Mineral Food Supplements containing Vitamin B12 may also contain analogues of Vitamin B12", N. ENGL. J. MED., vol. 307, no. 4, 1982, pages 255 - 256, XP002048651 * |
MIKROBIOL. ZH., vol. 37, no. 5, 1975, KIEV, pages 573 - 579 * |
SCHLIWA M. ET AL.: "Stabilzation of the cytoplasmic ground substance in detergent-opened cells and a structural and biochemical analysis of its composition.", PROC. NATL. ACAD. SCI., vol. 78, no. 7, 1981, USA, pages 4329 - 4333, XP000614241 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US5955321A (en) | 1999-09-21 |
KR20000029904A (ko) | 2000-05-25 |
NZ333821A (en) | 2000-08-25 |
AU4206597A (en) | 1998-03-06 |
DE69717207D1 (de) | 2003-01-02 |
CN1229440A (zh) | 1999-09-22 |
ES2187720T3 (es) | 2003-06-16 |
WO1998006868A2 (en) | 1998-02-19 |
IT1293968B1 (it) | 1999-03-15 |
ITTO970738A1 (it) | 1999-02-12 |
EP0824152B1 (en) | 2002-11-20 |
DE69717207T2 (de) | 2003-07-24 |
WO1998006868A3 (en) | 1998-03-26 |
EP0824152A3 (en) | 1998-02-25 |
IL128032A0 (en) | 1999-11-30 |
PT824152E (pt) | 2003-04-30 |
US6187761B1 (en) | 2001-02-13 |
EP0824152A2 (en) | 1998-02-18 |
ATE228171T1 (de) | 2002-12-15 |
NL1006764A1 (nl) | 1997-09-10 |
AR022986A1 (es) | 2002-09-04 |
AU730618B2 (en) | 2001-03-08 |
PL331514A1 (en) | 1999-07-19 |
NO990653D0 (no) | 1999-02-11 |
BR9710884A (pt) | 1999-08-17 |
DK0824152T3 (da) | 2003-03-10 |
HUP9903580A2 (hu) | 2000-03-28 |
CA2261286A1 (en) | 1998-02-19 |
NL1006764C2 (nl) | 1997-11-18 |
NO990653L (no) | 1999-04-09 |
HUP9903580A3 (en) | 2001-09-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
BE1010976A5 (nl) | Bereiding en gebruik van preparaten die hoge concentraties vitamine b12 bevatten. | |
US11999941B2 (en) | Composition suitable for protecting microorganisms | |
EP0753303B1 (en) | Use of a physiologically functional food for improving and/or enhancing brain function, learning ability and memory functions | |
Elmayergi et al. | Influence of growth of Streptomyces fradiae on pepsin-HCl digestibility and methionine content of feather meal | |
Golowczyc et al. | Use of whey permeate containing in situ synthesised galacto-oligosaccharides for the growth and preservation of Lactobacillus plantarum | |
US20120082759A1 (en) | Compositions and methods for mycotoxin decontamination, nucleotide, protein and vitamin enrichment and palatability enhancement of food and animal feed using micronized yeast biomass | |
US5310555A (en) | Oral nutritional and dietary composition | |
Gao et al. | Screening of lactic acid bacteria with cholesterol-lowering and triglyceride-lowering activity in vitro and evaluation of probiotic function | |
CN115141775A (zh) | 一种提升益生菌的自身功效及富硒能力的培养方法及其应用 | |
TR201809682T4 (tr) | Kapsüllenmiş probiyotiklere sahip tahıl süspansiyonuna bağlı olarak önceden fermente edilen simbiyotik matris, üretim prosesi ve ilgili kullanım. | |
JP3174611B2 (ja) | 免疫賦活組成物 | |
GB1577361A (en) | Method of purifying distillers solubles and use of the purified matter | |
Rozmierska et al. | Preparation of sedimented wine yeast derived products for potential application in food and feed industry | |
JPH01221319A (ja) | 有用細菌の腸内定着を促進する組成物 | |
Wong et al. | Contribution of Streptococcus thermophilus to growth-stimulating effect of yogurt on rats | |
MXPA99001243A (en) | Production and use of compositions comprising high concentrations of vitamin b12 activity | |
AU609444B2 (en) | Improvements in probiotic-type products | |
CN105925645A (zh) | 一种活性乳酸菌素的制备方法及其在生物饲料中的应用 | |
Naidu et al. | Toxicological assessment of the yeast Rhodotorula gracilis in experimental animals | |
DE69818181T2 (de) | Verdauungsenzymen enthaltenden Inaktivierten Mikroorganismen, Verfahren zu deren Herstellung, und ihre Verwendung im Lebensmittelbereich | |
Rutkowski et al. | Rapeseed meal XX. Influence of toxic compounds of rapeseed meal on the technological properties of propionic acid bacteria | |
EP4260905A1 (en) | Composition containing acidipropionibacterium spp. or treated product thereof | |
Michałowski et al. | Factors influencing the development of population of the rumen ciliates Anoplodinium denticulatum in vitro | |
JPS63251080A (ja) | ビフイドバクテリウム菌含有粉末の製造法 | |
OTSUKA et al. | Effect of administration of acid‐and bile‐tolerant lactobacilli on pigs intestinal microbial population |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
RE | Patent lapsed |
Effective date: 20040831 |
|
RE | Patent lapsed |
Effective date: 20040831 |