WO2024025050A1 - 사과발효조성물 - Google Patents

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WO2024025050A1
WO2024025050A1 PCT/KR2022/019571 KR2022019571W WO2024025050A1 WO 2024025050 A1 WO2024025050 A1 WO 2024025050A1 KR 2022019571 W KR2022019571 W KR 2022019571W WO 2024025050 A1 WO2024025050 A1 WO 2024025050A1
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apple
fermentation composition
composition
present application
skin
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PCT/KR2022/019571
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전경찬
정희경
김선희
박예은
이은용
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씨제이제일제당 (주)
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    • C12J1/00—Vinegar; Preparation or purification thereof

Definitions

  • This application relates to a fermented apple composition and its use for improving skin and preventing or suppressing skin photoaging.
  • Photoaging is a phenomenon in which collagen in the dermal layer is decomposed by reactive oxygen species (ROS) generated in skin cells by ultraviolet rays.
  • ROS reactive oxygen species
  • apples are the fruit of the apple tree, a perennial plant belonging to the genus of Malus in the family of Rosaceae, and are high in sugar, vitamin A, vitamin C, and mineral salts.
  • Vitamin C which is contained in large amounts in apples, is excellent for regenerating damaged skin cells by strengthening the bond between the skin's keratin and collagen.
  • apple extract is known to have a skin soothing and moisturizing effect
  • apples and apple juice contain malic acid, tartaric acid, and the enzyme amylase, which are known to have a skin exfoliating effect.
  • the present application provides a fermented apple composition and its use for improving skin and preventing or suppressing skin photoaging.
  • One object of the present application is to provide a fermented apple composition that has the effect of reducing or suppressing the expression of collagen decomposing enzymes caused by ultraviolet rays.
  • Another object of the present application is to provide a food containing the apple fermentation composition of the present application.
  • Another purpose of the present application is to provide a health functional food containing the apple fermentation composition of the present application.
  • Another object of the present application is to provide a cosmetic composition containing the apple fermentation composition of the present application.
  • the apple fermentation composition of the present application has the effect of reducing or suppressing the expression of collagen-degrading enzymes caused by ultraviolet rays, and can be used for improving skin and preventing or suppressing skin photoaging.
  • Figure 1 shows the results of confirming the expression level of MMP-1 (Matrix metalloproteinase-1) by treating UVB-irradiated HaCaT cells with apple fermentation composition or apple concentrate at various concentrations. * means p ⁇ 0.05, ** means p ⁇ 0.01.
  • One aspect of the present application provides a fermented apple composition that has the effect of reducing or suppressing the expression of collagen-degrading enzymes caused by ultraviolet rays.
  • the apple fermentation composition of the present application may include purified water and apple concentrate.
  • the term “apple concentrate” refers to a liquid obtained by concentrating apples, and either manufactured or commercially available liquid can be used without limitation.
  • the apple concentrate may be a 100% apple concentrate, but is not limited thereto.
  • the apple concentrate may have a sugar content of 60 brix or more based on a refractometer, but is not limited thereto.
  • the apple concentrate may have an acidity of 6% or less, but is not limited thereto.
  • the apple concentrate may refer to ingredients included before fermentation.
  • the apple concentrate is 1 to 50% (v/v), 1 to 30% (v/v), and 1 to 25% (v/) relative to the total volume of the apple fermentation composition. v), 5 to 50% (v/v), 5 to 30% (v/v), 5 to 25% (v/v), 10 to 50% (v/v), 10 to 30% (v/ v), 10 to 25% (v/v), 15 to 50% (v/v), 15 to 30% (v/v), or 15 to 25% (v/v).
  • the term “apple fermentation composition” refers to a fermented product obtained by fermenting apple concentrate.
  • the term “fermentation” usually refers to the phenomenon or process in which microorganisms decompose organic matter using their own enzymes to convert and accumulate metabolites.
  • the term "fermented product” may be comprehensively interpreted to include all materials produced by fermentation of the present application, its filtrate, its dilution, its concentrate, its crude product, or its purified product, etc., It is not limited to this.
  • the fermented product of the present application may be acetic acid fermented product or vinegar. More specifically, the fermented product of the present application may be yeast and acetic acid bacteria fermented product. More specifically, the fermented product of the present application may be a fermented product obtained by yeast fermentation followed by acetic acid bacteria fermentation.
  • the apple fermentation composition of the present application may be an apple acetic acid fermentation composition, an apple acetic acid fermentation product, or apple cider vinegar, in which apples are fermented with acetic acid bacteria.
  • the apple fermentation composition of the present application may be an apple yeast fermentation and acetic acid bacteria fermentation composition obtained by fermenting apples with yeast and acetic acid bacteria.
  • the apple fermentation composition of the present application may be a composition obtained by fermenting apples with yeast and then fermenting them with acetic acid bacteria, or by fermenting apples with yeast and then fermenting them with acetic acid bacteria.
  • the apple fermentation composition of the present application may have the effect of inhibiting collagen decomposition caused by ultraviolet rays.
  • the inhibition of collagen decomposition can be achieved, for example, by reducing or suppressing the expression of collagen decomposing enzymes.
  • the collagen decomposing enzyme of the present application may be MMP-1 (Matrix metalloproteinase-1), MMP-2, or MMP-9, and any collagen decomposing enzyme known in the art may be included in the scope of the present application.
  • the collagen degrading enzyme may be MMP-1.
  • the apple fermentation composition of the present application can reduce or inhibit the expression of collagen-degrading enzymes caused by ultraviolet rays compared to UV-irradiated cells that are not treated with the apple fermentation composition.
  • the apple fermentation composition reduces the expression of collagen decomposition enzyme by ultraviolet rays by more than 10%, more than 15%, more than 20%, more than 21%, more than 22%, more than 23%, more than 24%, more than 25%, 26% or more.
  • a range consisting of one lower limit selected from % or greater, 27% or greater, 28% or greater, 29% or greater, and 29.1% or greater, and/or one upper limit selected from 100% or lower, 50% or lower, 40% or lower, and 35% or lower. It can be reduced or suppressed, but is not limited to this.
  • the apple fermentation composition of the present application may have a skin improvement effect.
  • the apple fermentation composition of the present application may have an anti-skin aging effect.
  • skin improvement refers to improvement of skin condition by anti-aging effect. Alternatively, it may mean improving or promoting skin health.
  • the aging may be photoaging. More specifically, the aging may be skin aging caused by ultraviolet rays.
  • the skin improvement or skin aging prevention can be achieved, for example, by inhibiting collagen decomposition and/or reducing or inhibiting the expression of collagen degrading enzymes, as described above.
  • the apple fermentation composition of the present application may have the effect of suppressing the formation of wrinkles caused by ultraviolet rays.
  • the inhibition of wrinkle formation can be achieved, for example, by inhibiting collagen breakdown and/or reducing or inhibiting the expression of collagen degrading enzymes, as described above.
  • Another aspect of the present application provides a food comprising the apple fermentation composition of the present application.
  • the apple fermentation composition is as described above.
  • the food of the present application may have an effect of improving or promoting skin health.
  • the improvement or promotion of skin health may be achieved by inhibiting collagen breakdown and/or reducing or suppressing the expression of collagen degrading enzymes, as described above in the “skin improvement” section of the previous aspect.
  • Another aspect of the present application provides a health functional food containing the apple fermentation composition of the present application.
  • the apple fermentation composition is as described above.
  • the health functional food of the present application may have an effect of improving or promoting skin health.
  • the improvement or promotion of skin health can be achieved by inhibiting collagen breakdown and/or reducing or suppressing the expression of collagen degrading enzymes, as described above in the “skin improvement” section of the previous aspect.
  • Food in this application may include all forms of general food, functional food, nutritional supplements, health food, and food additives.
  • the above type of food can be manufactured in various forms according to conventional methods known in the art.
  • the food includes the form of pills, powders, granules, steeps, tablets, capsules, powders, or liquids.
  • Foods to which the composition of the present application can be added include, for example, various foods, such as rice. , edible grain flour, grain soup, rice bowl, noodles, soup, instant rice, seasoning, lunch box rice, dry cooked rice, bread, edible sugar, rice cake, bibim sauce, sauce, spice, edible salt, Seasonings, seasoning powders, processed, frozen, dried and cooked fruits and vegetables, jellies, jams, candied fruits, eggs, milk and other dairy products, edible fats and oils, coffee, cocoa and coffee substitutes, tapioca , grain flour and grain preparations, ramen, udon, noodles, noodle soup, cold noodles, porridge, soup, soup dishes, instant food, frozen food, instant food, retort food, other beverages, gum, tea, vitamin complex, health supplements, etc.
  • Ingredients that can be included in the food of this application may include various herbal extracts, food supplements, or natural carbohydrates as additional ingredients, like regular foods.
  • the food auxiliary additive may include food auxiliary additives common in the art, such as flavoring agents, flavoring agents, colorants, fillers, stabilizers, etc.
  • natural carbohydrates examples include monosaccharides such as glucose, fructose, etc.; Disaccharides such as maltose, sucrose, etc.; and polysaccharides, such as common sugars such as dextrin and cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol.
  • natural flavoring agents e.g., rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.
  • synthetic flavoring agents sacharin, aspartame, etc.
  • common food additives used to supplement taste and nutrition such as nucleic acids, amino acids, organic acids, etc., may be added.
  • the food of the present application contains various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavoring agents such as synthetic and natural flavors, colorants and fillers (cheese, chocolate, etc.), pectic acid and its salts, alginic acid and its salts. , organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohol, carbonating agents used in carbonated beverages, etc. In addition, it may contain pulp for the production of natural fruit juice, fruit juice drinks, and vegetable drinks. These ingredients can be used independently or in combination.
  • the food of this application can be manufactured by methods commonly used in the industry, and can be manufactured by adding raw materials and ingredients commonly added in the industry. Additionally, the food formulation can be manufactured without limitation as long as it is a formulation recognized as a food.
  • the food of this application when used as a health functional food, the food of this application can be manufactured in various dosage forms, and unlike general drugs, it is made from food as a raw material, so it is free from side effects that may occur during long-term use of the drug. It has the advantage of being portable and has excellent portability, so the food of this application can be consumed as a supplement.
  • the food of the present application may also include flavoring agents, flavors, colorants, fillers, stabilizers, and seasoning materials that can be classified as food additives.
  • the term 'flavor' in this application may be a material added to enhance the flavor of food.
  • the seasoning material may be a material that allows food to have excellent taste.
  • the seasoning materials can be divided according to taste components. That is, depending on the flavor, it can be divided into neutral seasoning material, beef flavor seasoning material, chicken seasoning material, pork seasoning material, kokumi seasoning material, etc.
  • 'Kokumi flavor' refers to a seasoning material that produces kokumi.
  • 'Kokumi' is a word of Japanese origin, and in English-speaking countries, 'mouthfulness', 'continuity', 'thickness', ' It is also expressed as 'heartiness', and in Korean it can mean a taste expressed as 'rich taste', 'thick taste', 'taste that fills the mouth', 'rich taste', 'rich taste', etc.
  • 'Neutral flavor' refers to a seasoning material that produces a mild and clean flavor by maximizing umami and minimizing other flavors. For example, among oils, oils such as canola oil or grape seed oil have a neutral flavor. It can be referred to as having. 'Taste quality' may mean having sour, sweet, salty, bitter, umami, etc., but is not limited thereto.
  • the food of this application may be apple cider vinegar or fermented fruit drinking vinegar product of CJ CheilJedang Co., Ltd., for example, Petitzel Micho® or Micho® product, but is not limited thereto.
  • the food of the present application contains 1 to 50% (v/v), 1 to 30% (v/v), 5 to 50% (v/v), 5 to 30% of the apple fermentation composition of the present application relative to the total food volume. (v/v) or 10 to 30% (v/v) concentration, but is not limited thereto.
  • Another aspect of the present application provides a cosmetic composition comprising the apple fermentation composition of the present application.
  • the apple fermentation composition is as described above.
  • the cosmetic composition of the present application may have an effect of alleviating or improving skin wrinkles.
  • the alleviation or improvement of wrinkles may be achieved by inhibiting collagen degradation and/or reducing or suppressing the expression of collagen degrading enzymes, as described above in the previous aspect of “inhibiting wrinkle formation.”
  • the cosmetic composition of the present application may have a skin improvement or skin aging prevention effect.
  • the skin improvement or skin aging prevention can be achieved by inhibiting collagen decomposition and/or reducing or suppressing the expression of collagen degrading enzymes, as described above in the previous embodiment.
  • the “cosmetic composition” of this application includes solutions, external ointments, creams, foams, nourishing lotions, softening lotions, packs, softening waters, emulsions, makeup bases, essences, soaps, liquid cleansers, bath salts, sunscreen creams, sun oils, and suspensions. , emulsions, pastes, gels, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansers, oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations, patches and sprays, but are limited thereto. It doesn't work.
  • the cosmetic composition may further include one or more cosmetically acceptable carriers that are mixed with general skin cosmetics, and common ingredients include, for example, oil, water, surfactants, moisturizers, lower alcohols, thickeners, and chelating agents. , colorants, preservatives, fragrances, etc. may be appropriately mixed, but are not limited thereto.
  • a cosmetically acceptable carrier included in the cosmetic composition of the present application can be appropriately selected by a person skilled in the art depending on the formulation of the cosmetic composition.
  • the cosmetic composition of the present application contains 0.001 to 2% (v/v), 0.005 to 1.9% (v/v), 0.02 to 1.8% (v/v), and 0.025% of the apple fermentation composition of the present application relative to the volume of the entire cosmetic composition. to 1.75% (v/v), 0.03 to 1.7% (v/v), 0.035 to 1.65% (v/v), 0.04 to 1.6% (v/v), 0.045 to 1.55% (v/v) or 0.05 It may be included at a concentration of from 1.5% (v/v).
  • the cosmetic composition may include the apple fermentation composition of the present application at a concentration of 0.05 to 1.5% (v/v) relative to the total volume of the cosmetic composition, but is not limited thereto.
  • Another aspect of the present application provides a method of reducing or inhibiting the expression of collagen decomposition enzyme by ultraviolet rays, comprising the step of administering the apple fermentation composition of the present application.
  • the collagen degrading enzyme may be MMP-1, but is not limited thereto. This is the same as described above.
  • the apple fermentation composition may, when treated with ultraviolet irradiated cells, reduce or inhibit the expression of collagen decomposition enzymes caused by ultraviolet rays by more than 10% compared to ultraviolet irradiated cells not treated with the apple fermentation composition, but is not limited thereto. This is the same as described above.
  • Another aspect of the present application provides a method for improving skin, comprising the step of administering the apple fermentation composition of the present application.
  • Another aspect of the present application provides a method for preventing skin aging, comprising administering the apple fermentation composition of the present application.
  • the aging may be photoaging, but is not limited thereto. This is the same as described above.
  • Another aspect of the present application provides a method of inhibiting wrinkle formation by ultraviolet rays, comprising the step of administering the apple fermentation composition of the present application.
  • the term "administration” means introducing the composition of the present application into an individual who excessively expresses inflammatory cytokines or is suspected of having enteritis by any appropriate method.
  • the pharmaceutical composition of the present application is not particularly limited as long as it is intended to reduce or inhibit the expression of collagen-degrading enzymes caused by ultraviolet rays, improve skin, prevent skin aging, or suppress the formation of wrinkles caused by ultraviolet rays.
  • non-human animals such as monkeys, dogs, cats, rabbits, guinea pigs, rats, mice, cows, sheep, pigs, goats, etc., birds and fish can be used.
  • composition of the present application can be administered in an amount effective in reducing or inhibiting the expression of collagen decomposition enzymes caused by ultraviolet rays, can be administered in an amount effective in improving skin, can be administered in an amount effective in preventing skin aging, or can be administered in an amount effective in preventing skin aging. It can be administered in an amount effective in suppressing the formation of wrinkles.
  • the preferred dosage of the composition of the present application varies depending on the individual's condition and weight, degree of disease, drug form, administration route and period, but can be appropriately selected by a person skilled in the art.
  • composition of the present application can be administered through various oral or parenteral routes as long as it can reach the target tissue. It can be administered, for example, orally, parenterally, subcutaneously, intraperitoneally, intrapulmonaryly, intranasally, rectally, or by injection intravenously, intramuscularly, subcutaneously, intrathecally, or intracerebrovascularly, for local treatment, and, if necessary, to lesions. It can be administered by any suitable method, including intravenous administration. However, it is not limited to this.
  • the apple fermentation composition may be administered in the form of a food composition containing it.
  • the administration may be oral administration.
  • the apple fermentation composition may be administered in the form of a health functional food composition containing it.
  • the administration may be oral administration.
  • Another aspect of the present application provides a method of reducing or inhibiting the expression of collagen decomposing enzyme by ultraviolet rays, comprising the step of applying the apple fermentation composition of the present application to the skin.
  • Another aspect of the present application provides a method for improving skin, comprising the step of applying the apple fermentation composition of the present application to the skin.
  • Another aspect of the present application provides a method for preventing skin aging, comprising applying the apple fermentation composition of the present application to the skin.
  • Another aspect of the present application provides a method of inhibiting wrinkle formation by ultraviolet rays, comprising the step of applying the apple fermentation composition of the present application to the skin.
  • the term "application” means contacting the composition of the present invention to the skin of an individual by any suitable method, and includes all actions aimed at allowing the composition to be absorbed into the skin. It is not limited to this.
  • the apple fermentation composition may be applied to the skin in the form of a cosmetic composition containing it.
  • Another aspect of the present application provides the use of the apple fermentation composition of the present application to reduce or inhibit the expression of collagen decomposition enzyme by ultraviolet rays.
  • the collagen decomposing enzyme may be MMP-1, but is not limited thereto. This is the same as described above.
  • the apple fermentation composition may, when treated with ultraviolet irradiated cells, reduce or inhibit the expression of collagen decomposition enzymes caused by ultraviolet rays by more than 10% compared to ultraviolet irradiated cells not treated with the apple fermentation composition, but is not limited thereto. This is the same as described above.
  • Another aspect of the present application provides a skin improvement use of the apple fermentation composition of the present application.
  • Another aspect of the present application provides a use of the apple fermentation composition of the present application to prevent skin aging.
  • the aging may be photoaging, but is not limited thereto. This is the same as described above.
  • Another aspect of the present application provides a use of the apple fermentation composition of the present application to suppress the formation of wrinkles caused by ultraviolet rays.
  • Another aspect of the present application provides a use for improving or promoting skin health of food containing the apple fermentation composition of the present application.
  • Another aspect of the present application provides a use for improving or promoting skin health of a health functional food containing the apple fermentation composition of the present application.
  • Another aspect of the present application provides a use for alleviating or improving skin wrinkles of a cosmetic composition containing the apple fermentation composition of the present application.
  • Apple concentrate is a commercial product made by concentrating 100% of apples. Apple concentrate from China, which has a sugar content of 60 brix or higher and an acidity of 6% or lower based on a refractometer, was diluted 4 times (w/w) with distilled water to produce about 20 brix.
  • the apple fermentation composition used commercially available apple cider vinegar (containing 20.86% of yeast and acetic acid bacteria fermentation, purified water, and apple concentrate, acidity 6-8%; CJ CheilJedang Healthy Fermented Apple Vinegar).
  • the photoaging inhibition ability of apple fermentation composition and apple concentrate was analyzed using HaCaT cells in which overexpression of MMP-1 (Matrix metalloproteinases-1), a collagen-degrading enzyme, was induced by UVB irradiation.
  • MMP-1 Microx metalloproteinases-1
  • the HaCaT cell line (Korea Cell Line Bank) was cultured in FBS-containing DMEM medium (Gibco, USA) at 37°C and CO 2 5% conditions to obtain cells between passages 8 and 12.
  • the obtained HaCaT cells were diluted with FBS-containing DMEM medium to 0.7
  • the medium was replaced with FBS-free DMEM and cultured for 1 day ( Figure 1, indicated as NC).
  • the cells were washed twice with PBS (Phosphate-Buffered Saline, Gibco), then 500ml of PBS was added to the well, irradiated with UVB 20mJ/cm 2 to induce MMP-1 overexpression, and washed additionally with PBS twice ( Figure 1, denoted as CON).
  • PBS Phosphate-Buffered Saline, Gibco
  • the apple fermentation composition and apple concentrate of Preparation Example 1 were each diluted in FBS-free DMEM to a concentration of 1% (v/v), treated with the cells (CON), and cultured for 1 day. After culturing, the supernatant was taken and centrifuged at 4°C at 13,000 rpm for 3 minutes to obtain a supernatant excluding cells. Afterwards, the supernatant was filtered using a 0.2um filter to remove remaining bacteria.
  • the obtained supernatant was analyzed by ELISA assay to measure the concentration of MMP-1.
  • the ELISA assay was performed using Human Total MMP-1 DuoSet ELISA (R&D systems) according to the manufacturer's instructions as follows. First, a capture antibody was attached to each well of a 96 well plate overnight. After washing three times with washing buffer, the solution was treated with reagent diluent for 1 hour. Next, after additional washing three times with washing buffer, the supernatant and standard solution for each experimental group and control group (NC, CON) were added to each well and incubated for 2 hours. After washing it, detection antibody was added and allowed to adhere for 2 hours. After additional washing, each well was treated with Streptavidin-HRP B for 20 minutes. After stopping the reaction by treating it with a stop solution, absorbance was measured at 450 nm and MMP-1 concentration was calculated using 4 parameter logistic.
  • R&D systems Human Total MMP-1 DuoSet ELISA
  • both the apple fermentation composition and the apple concentrate exhibit photoaging inhibition ability, and in particular, the apple fermentation composition has superior photoaging inhibition ability compared to the apple concentrate.
  • Treatment group treatment concentration 1% (v/v)
  • MMP-1 concentration pg/mL
  • CON 6002.6 apple concentrate 5311.9 Apple fermentation composition 4256.4

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Abstract

본 출원은 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 감소 또는 억제하는 효과를 가지는 사과발효조성물 및 이의 피부 개선, 피부 광노화 방지 또는 억제 용도에 관한 것이다.

Description

사과발효조성물
본 출원은 사과발효조성물 및 이의 피부 개선, 피부 광노화 방지 또는 억제 용도에 관한 것이다.
최근 피부 미용과 관련하여, 피부 노화의 지연 또는 완화에 대한 관심이 증가하고 있다. 특히 자연 노화 외에, 자외선 노출에 의한 광노화에 대한 관심이 급증함에 따라 이를 방지 또는 억제하기 위한 제품 개발이 다수 이루어지고 있다.
광노화란 자외선에 의해 피부세포에 생성된 활성산소종(Reactive oxygen species; ROS)에 의해 진피층의 콜라겐이 분해되는 현상이다. 자외선 자극에 의해 생성된 ROS가 세포 내로 침투해 콜라겐 분해 효소인 MMP-1(Matrix metalloproteinase-1)의 발현을 유도하면, 과발현된 MMP-1가 피부 진피층의 콜라겐을 분해하여 피부는 탄력을 잃고 노화하게 된다. 따라서 광노화를 방지 또는 억제하기 위해서는 MMP-1 발현을 효과적으로 억제시킬 수 있는 물질의 개발이 필요하다.
한편, 사과는 장미과(the family of Rosaceae) 사과나무속(the genus of Malus)에 속하는 다년생 식물인 사과나무의 열매로, 당분, 비타민 A, 비타민 C 및 무기염류의 함량이 높다. 사과에 다량 함유된 비타민 C는 피부의 케라틴과 콜라겐의 결합을 견고하게 해줌으로써 손상된 피부 세포를 재생시키는 데 탁월한 효과가 있다. 뿐만 아니라, 사과 추출물은 피부 진정 및 보습 효과가 있다고 알려져 있으며, 사과와 사과 주스에는 말산과 주석산, 효소인 아밀라아제가 함유되어 있어 피부 각질 제거 효과가 있다고 알려져 있다.
현재 사과를 이용한 다양한 식품 및 화장료 조성물들이 개발되어 있으나, 광노화를 방지 또는 억제하여 피부 상태를 개선할 수 있는 조성물의 국내외 수요가 증가함에 따라, 광노화 방지 또는 억제 효과가 보다 우수한 새로운 조성물의 개발이 요구되고 있는 실정이다.
본 출원은 사과발효조성물 및 이의 피부 개선, 피부 광노화 방지 또는 억제 용도를 제공한다.
본 출원의 하나의 목적은 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 감소 또는 억제하는 효과를 가지는, 사과발효조성물을 제공하는 것이다.
본 출원의 다른 하나의 목적은 본 출원의 사과발효조성물을 포함하는, 식품을 제공하는 것이다.
본 출원의 또 다른 하나의 목적은 본 출원의 사과발효조성물을 포함하는, 건강기능식품을 제공하는 것이다.
본 출원의 또 다른 하나의 목적은 본 출원의 사과발효조성물을 포함하는, 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 출원의 사과발효조성물은 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 감소 또는 억제하는 효과를 가지는바, 피부 개선, 피부 광노화의 예방 또는 억제 용도로 제공될 수 있다.
도 1은 UVB가 조사된 HaCaT 세포에 농도별 사과발효조성물 또는 사과농축액을 처리하여 MMP-1(Matrix metalloproteinase-1) 발현량을 확인한 결과이다. *은 p<0.05, **은 p<0.01.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 출원에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 출원에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 출원의 범주가 제한된다고 볼 수 없다. 또한, 본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 출원이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 출원의 내용이 보다 명확하게 설명된다.
본 출원의 하나의 양태는 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 감소 또는 억제하는 효과를 가지는, 사과발효조성물을 제공한다.
본 출원의 사과발효조성물은 정제수 및 사과농축액을 포함할 수 있다.
본 출원에서 용어, "사과농축액"은 사과를 농축하여 수득한 액체를 의미하며, 제조한 것 또는 시판되는 것 등을 제한 없이 사용할 수 있다. 일 예로, 상기 사과농축액은 사과 100% 농축액일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 상기 사과농축액은 당도가 굴절당도계 기준 당도 60 brix 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 더불어, 상기 사과농축액은 산도가 6% 이하일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
일 구현예로, 본 출원의 사과발효조성물에 있어서 상기 사과농축액은 발효 전 포함되는 성분을 의미할 수 있다. 구체적으로 본 출원의 사과발효조성물에 있어서, 상기 사과농축액은 상기 사과발효조성물의 총 부피 대비 1 내지 50 %(v/v), 1 내지 30 %(v/v), 1 내지 25 %(v/v), 5 내지 50 %(v/v), 5 내지 30 %(v/v), 5 내지 25 %(v/v), 10 내지 50 %(v/v), 10 내지 30 %(v/v), 10 내지 25 %(v/v), 15 내지 50 %(v/v), 15 내지 30 %(v/v) 또는 15 내지 25 %(v/v)으로 포함될 수 있다.
본 출원에서 용어, "사과발효조성물"은 사과농축액을 발효한 발효물을 의미한다.
본 출원에서 용어, "발효"는 통상 미생물이 자신이 가지고 있는 효소를 이용하여 유기물을 분해해서 대사산물을 전환하고 축적하는 현상 또는 그 과정을 의미한다.
본 출원에서 용어, "발효물"은 본 출원의 발효에 의해서 생산된 물질, 이의 여과액, 이의 희석액, 이의 농축액, 이의 조정제물 또는 이의 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
구체적으로, 본 출원의 발효물은 초산 발효물 또는 식초일 수 있다. 보다 구체적으로, 본 출원의 발효물은 효모 및 초산균 발효물일 수 있다. 보다 더 구체적으로, 본 출원의 발효물은 효모 발효 후 초산균 발효한 발효물일 수 있다.
일 예로, 본 출원의 사과발효조성물은 사과를 초산균으로 발효한, 사과 초산 발효 조성물, 사과 초산 발효물 또는 사과식초일 수 있다. 또한, 본 출원의 사과발효조성물은 사과를 효모 및 초산균으로 발효한, 사과 효모 발효 및 초산균 발효 조성물일 수 있다. 더불어, 본 출원의 사과발효조성물은 사과를 효모 발효 후 초산균 발효한 사과 효모 발효 후 초산균 발효한 조성물일 수 있다.
본 출원에 있어서, 본 출원의 사과발효조성물은 자외선에 의한 콜라겐 분해를 억제하는 효과를 갖는 것일 수 있다.
상기 콜라겐 분해 억제는 일 예로, 콜라겐 분해 효소의 발현의 감소 또는 억제에 의해 달성될 수 있다.
본 출원의 콜라겐 분해 효소는 MMP-1(Matrix metalloproteinase-1), MMP-2 또는 MMP-9일 수 있으며, 당 업계에 알려진 콜라겐 분해 효소라면 본 출원의 범위에 포함될 수 있다. 일 구현예로, 상기 콜라겐 분해 효소는 MMP-1일 수 있다.
본 출원의 사과발효조성물은 자외선이 조사된 세포에 처리시 사과발효조성물이 처리되지 않은 자외선 조사 세포에 비하여 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 감소 또는 억제할 수 있다.
그 예로, 상기 사과발효조성물은 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 10% 이상, 15% 이상, 20% 이상, 21% 이상, 22% 이상, 23% 이상, 24% 이상, 25% 이상, 26% 이상, 27% 이상, 28% 이상, 29% 이상 및 29.1% 이상에서 선택된 하나의 하한선 및/또는 100% 이하, 50% 이하, 40% 이하 및 35% 이하에서 선택된 하나의 상한선으로 구성된 범위로 감소 또는 억제할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 출원에 있어서, 본 출원의 사과발효조성물은 피부 개선 효과를 갖는 것일 수 있다.
본 출원에 있어서, 본 출원의 사과발효조성물은 피부 노화 방지 효과를 갖는 것일 수 있다.
본 출원에서 용어, "피부 개선"은 피부 노화 방지 효과에 의한 피부 상태 개선을 의미한다. 또는, 피부 건강 상태의 개선 또는 증진을 의미할 수 있다.
상기 노화는 광노화일 수 있다. 보다 구체적으로 상기 노화는 자외선에 의한 피부 노화일 수 있다.
상기 피부 개선 또는 피부 노화 방지는 일 예로, 콜라겐 분해 억제 및/또는 콜라겐 분해 효소의 발현의 감소 또는 억제에 의해 달성될 수 있으며, 이에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 출원에 있어서, 본 출원의 사과발효조성물은 자외선에 의한 주름 생성을 억제하는 효과를 갖는 것일 수 있다.
상기 주름 생성 억제는 일 예로, 콜라겐 분해 억제 및/또는 콜라겐 분해 효소의 발현의 감소 또는 억제에 의해 달성될 수 있으며, 이에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 출원의 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 포함하는, 식품을 제공한다.
상기 사과발효조성물은 전술한 바와 같다.
본 출원에 있어서, 본 출원의 식품은 피부 건강 개선 또는 증진 효과를 갖는 것일 수 있다. 상기 피부 건강 개선 또는 증진은 콜라겐 분해 억제 및/또는 콜라겐 분해 효소의 발현의 감소 또는 억제에 의해 달성될 수 있으며, 이에 대해서는 이전 양태의 "피부 개선"에서 전술한 바와 같다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 포함하는, 건강기능식품을 제공한다.
상기 사과발효조성물은 전술한 바와 같다.
본 출원에 있어서, 본 출원의 건강기능식품은 피부 건강 개선 또는 증진 효과를 갖는 것일 수 있다. 상기 피부 건강 개선 또는 증진은 콜라겐 분해 억제 및/또는 콜라겐 분해 효소의 발현의 감소 또는 억제에 의해 달성될 수 있으며, 이에 대해서는 이전 양태의 "피부 개선"에서 전술한 바와 같다.
본 출원의 "식품"은 일반 식품, 기능성 식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강 식품(health food) 및 식품 첨가제(food additives)등의 모든 형태를 포함할 수 있다.
상기 유형의 식품은 당 업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다.
상기 식품은 환제, 분말, 과립, 침제, 정제, 캡슐, 산제 또는 액제 등의 형태를 포함하며, 본 출원의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 예를 들어, 쌀, 식용 곡분(식용 곡물가루), 곡물수프, 덮밥, 면류, 국밥, 즉석밥, 조미료, 도시락밥, 건조조리된 밥, 빵, 식용 당(糖)류, 떡, 비빔장, 소스, 향신료, 식용 소금, 양념, 양념용 분말, 가공처리, 냉동, 건조 및 조리된 과일 및 채소, 젤리, 잼, 설탕에 절인 과실, 달걀, 우유 및 그 밖의 유제품, 식용 유지(油脂), 커피, 코코아와 대용커피, 타피오카, 곡분 및 곡물조제품, 라면, 우동, 국수, 칼국수, 냉면, 죽, 수프, 국물요리, 인스턴트 식품, 냉동식품, 즉석식품, 레토르트 식품, 기타 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강보조 식품류 등이 있으나 이에 제한되지 않는다.
본 출원의 식품에서 포함할 수 있는 성분으로 통상의 식품과 같이 여러가지 생약추출물, 식품 보조 첨가제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 또한, 상기 식품 보조 첨가제는 당 업계에 통상적인 식품 보조 첨가제, 예를 들어 향미제, 풍미제, 착색제, 충진제, 안정화제 등을 포함할 수 있다.
상기 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 것 이외에 향미제로서 천연 향미제(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 또한 맛과 영양을 보충시킬 목적으로 사용되는 통상의 식품 첨가물, 예를 들어 핵산, 아미노산, 유기산 등이 첨가될 수 있다.
상기 외에 본 출원의 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 이의 염, 알긴산 및 이의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
본 출원의 식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 제조시에는 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 식품의 제형 또한 식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다.
또한, 본 출원의 식품이 건강기능식품으로 이용되는 경우, 본 출원의 식품은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있고, 휴대성이 뛰어나, 본 출원의 식품은 보조제로 섭취가 가능하다.
한편 본 출원의 식품은 식품 첨가제로도 분류할 수 있는 향미제, 풍미제, 착색제, 충진제, 안정화제 및 조미소재 역시 포함할 수 있다.
본 출원의 용어 '조미소재(flavor)'는 식품의 풍미를 증진시키기 위하여 첨가되는 소재일 수 있다. 상기 조미소재는 식품이 뛰어난 정미성을 갖도록 하는 소재일 수 있다.
상기 조미소재는 맛 성분에 따라서 나누어질 수 있다. 즉, 풍미에 따라 뉴트럴(neutral) 조미소재, 소고기(beef) 풍미 조미소재, 닭고기(chicken) 조미소재, 돼지고기(pork) 조미소재, 코쿠미(kokumi) 조미소재 등으로 나누어질 수 있다.
'코쿠미 조미소재(kokumi flavor)'는 코쿠미를 내는 조미소재를 의미하는 것으로서, 상기 '코쿠미'는 일본어에서 유래된 단어로서, 영어권에서는 'mouthfulness', 'continuity', 'thickness', 'heartiness'라고도 표현되고, 우리말로는 '진한 맛', '두터운 맛', '입안에 꽉 차는 맛', '농후한 맛', '진득한 맛' 등으로 표현되는 맛을 의미할 수 있다. '뉴트럴 조미소재(neutral flavor)'는 감칠맛(umami)을 극대화시키고 기타 다른 풍미를 최소화시킴으로써, 순하고 깔끔한 풍미를 내는 조미소재를 의미하는 것으로, 예컨대 오일 중에서 카놀라유나 포도씨유와 같은 오일을 뉴트럴한 풍미를 갖는다고 지칭할 수 있다. '정미성' 은 신맛, 단맛, 짠맛, 쓴맛, 감칠맛 등을 가진다는 것을 의미할 수 있으나 이에 제한되지 않는다.
본 출원의 식품은, CJ제일제당㈜의 사과식초 또는 과일발효음용식초 제품일 수 있고, 그 예로, 쁘띠첼 미초® 또는 미초® 제품일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 본 출원의 식품은 전체 식품 부피 대비 본 출원의 사과발효조성물을 1 내지 50%(v/v), 1 내지 30%(v/v), 5 내지 50%(v/v), 5 내지 30%(v/v) 또는 10 내지 30%(v/v) 농도로 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 포함하는, 화장료 조성물을 제공한다.
상기 사과발효조성물은 전술한 바와 같다.
본 출원에 있어서, 본 출원의 화장료 조성물은 피부의 주름 완화 또는 개선 효과를 갖는 것일 수 있다. 상기 주름 완화 또는 개선은 콜라겐 분해 억제 및/또는 콜라겐 분해 효소의 발현의 감소 또는 억제에 의해 달성될 수 있으며, 이에 대해서는 이전 양태의 "주름 생성 억제"에서 전술한 바와 같다.
본 출원에 있어서, 본 출원의 화장료 조성물은 피부 개선 또는 피부 노화 방지 효과를 갖는 것일 수 있다. 상기 피부 개선 또는 피부 노화 방지는 콜라겐 분해 억제 및/또는 콜라겐 분해 효소의 발현의 감소 또는 억제에 의해 달성될 수 있으며, 이에 대해서는 이전 양태에서 전술한 바와 같다.
본 출원의 "화장료 조성물"은 용액, 외용 연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연 화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업 베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린 크림, 선 오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면 활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군에서 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면 활성제, 보습제, 저급 알코올, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 본 출원의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 화장료 조성물의 제형에 따라 당업자가 적절히 선택할 수 있다.
본 출원의 화장료 조성물은, 전체 화장료 조성물 부피 대비 본 출원의 사과발효조성물을 0.001 내지 2%(v/v), 0.005 내지 1.9%(v/v), 0.02 내지 1.8%(v/v), 0.025 내지 1.75%(v/v), 0.03 내지 1.7%(v/v), 0.035 내지 1.65%(v/v), 0.04 내지 1.6%(v/v), 0.045 내지 1.55%(v/v) 또는 0.05 내지 1.5%(v/v) 농도로 포함하는 것일 수 있다. 일 구현예로서, 상기 화장료 조성물은 전체 화장료 조성물 부피 대비 본 출원의 사과발효조성물을 0.05 내지 1.5%(v/v) 농도로 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 감소 또는 억제하는 방법을 제공한다.
상기 콜라겐 분해 효소는 MMP-1일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이에 대해서는 전술한 바와 같다.
상기 사과발효조성물은 자외선이 조사된 세포에 처리시 사과발효조성물이 처리되지 않은 자외선 조사 세포에 비하여 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 10% 이상 감소 또는 억제하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 피부 개선 방법을 제공한다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 피부 노화 방지 방법을 제공한다.
상기 노화는 광노화일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 투여하는 단계를 포함하는, 자외선에 의한 주름 생성 억제 방법을 제공한다.
본 출원에서 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 염증성 사이토카인이 과도하게 발현되거나, 장염이 의심되는 개체에게 본 출원의 조성물을 도입하는 것을 의미한다.
본 출원의 약학 조성물은 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 감소 또는 억제시키거나, 피부를 개선하거나, 피부 노화를 방지하거나, 자외선에 의한 주름 생성을 억제하는 것을 목적으로 하는 개체이면 특별히 한정되지 않고, 어떠한 개체에든 적용가능하다. 예를 들면, 원숭이, 개, 고양이, 토끼, 모르모트, 랫트, 마우스, 소, 양, 돼지, 염소 등과 같은 비인간동물, 조류 및 어류 등 어느 것이나 사용할 수 있다.
본 출원의 조성물은 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현 감소 또는 억제에 유효한 양으로 투여할 수 있고, 피부 개선에 유효한 양으로 투여할 수 있고, 피부 노화 방지에 유효한 양으로 투여할 수 있고, 또는 자외선에 의한 주름 생성 억제에 유효한 양으로 투여할 수 있다. 본 출원의 조성물의 바람직한 투여량은 개체의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
또한, 본 출원의 조성물은 목적 조직에 도달할 수 있는 한 경구 또는 비경구의 다양한 경로를 통하여 투여될 수 있다. 예를 들어, 경구, 비경구, 피하, 복강 내, 폐 내, 비강 내, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관 내 주사로 투여될 수 있고, 국부적 치료를 위해, 필요하다면 병변 내 투여를 포함하는 적합한 방법에 의하여 투여될 수 있다. 그러나, 이에 제한되는 것은 아니다.
일 구현예로, 상기 사과발효조성물은 이를 포함하는 식품 조성물의 형태로 투여하는 것일 수 있다. 이때, 상기 투여는 경구 투여일 수 있다.
다른 일 구현예로, 상기 사과발효조성물은 이를 포함하는 건강기능식품 조성물의 형태로 투여하는 것일 수 있다. 이때, 상기 투여는 경구 투여일 수 있다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 감소 또는 억제하는 방법을 제공한다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 피부 개선 방법을 제공한다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 피부 노화 방지 방법을 제공한다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 피부에 도포하는 단계를 포함하는, 자외선에 의한 주름 생성 억제 방법을 제공한다.
본 출원에서 용어, "도포"는 임의의 적절한 방법으로 개체의 피부에 본 발명의 상기 조성물을 접촉시키는 것을 의미하며, 이를 통해 해당 조성물을 피부 내부로 흡수시키는 것을 목적으로 하는 모든 행위를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
일 구현예로, 상기 사과발효조성물은 이를 포함하는 화장료 조성물의 형태로 피부에 도포하는 것일 수 있다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물의 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 감소 또는 억제하는 용도를 제공한다.
상기 콜라겐 분해 효소는 MMP-1일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이에 대해서는 전술한 바와 같다.
상기 사과발효조성물은 자외선이 조사된 세포에 처리시 사과발효조성물이 처리되지 않은 자외선 조사 세포에 비하여 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 10% 이상 감소 또는 억제하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물의 피부 개선 용도를 제공한다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물의 피부 노화 방지 용도를 제공한다.
상기 노화는 광노화일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이에 대해서는 전술한 바와 같다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물의 자외선에 의한 주름 생성을 억제하는 용도를 제공한다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 포함하는 식품의 피부 건강 개선 또는 증진 용도를 제공한다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 포함하는 건강기능식품의 피부 건강 개선 또는 증진 용도를 제공한다.
본 출원의 또 다른 하나의 양태는 본 출원의 사과발효조성물을 포함하는 화장료 조성물의 피부 주름 완화 또는 개선 용도를 제공한다.
여기에서 사용되는 용어는 이전 양태에서 전술한 바와 같다.
이하 본 출원을 실시예에 의해 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 출원을 예시하기 위한 바람직한 실시양태에 불과한 것이며 따라서, 본 출원의 권리범위를 이에 한정하는 것으로 의도되지는 않는다. 한편, 본 명세서에 기재되지 않은 기술적인 사항들은 본 출원의 기술 분야 또는 유사 기술 분야에서 숙련된 통상의 기술자이면 충분히 이해하고 용이하게 실시할 수 있다.
제조예 1: 사과발효조성물 제조
사과농축액은 사과를 100% 농축한 시중 제품으로 굴절당도계 기준 당도 60 brix 이상, 산도 6% 이하의 중국산 사과 농축액을 증류수로 4배(w/w) 희석하여 약 20 brix로 제조하여 사용하였다.
사과발효조성물은 시중의 사과식초(효모 및 초산균 발효물, 정제수 및 사과농축액 20.86% 함유, 산도 6~8%; CJ제일제당㈜ 건강발효사과식초)를 사용하였다.
사과발효조성물 및 사과농축액으로부터 미생물을 제거하기 위해 0.2um 필터를 이용하여 여과하였다.
실시예 1: in vitro 에서의 광노화 억제능 평가
사과발효조성물 및 사과농축액의 광노화 억제능을 UVB가 조사되어 콜라겐 분해 효소인 MMP-1(Matrix metalloproteinases-1) 과발현이 유도된 HaCaT세포를 이용하여 분석하였다.
구체적으로, HaCaT 세포주(한국세포주은행)는 FBS-contained DMEM 배지(Gibco, USA)에서 37℃, CO2 5% 조건으로 배양하여 8-12 계대(passage) 사이의 세포를 수득하였다. 수득한 HaCaT 세포를 FBS-contained DMEM 배지로 0.7 x 105 cells/well가 되도록 희석하여 24 웰 플레이트에 시딩한 후 37℃, CO2 5% 조건에서 2일 동안 배양하였다. 상기 세포에 기아(Starvation) 조건을 주기 위해 FBS-free DMEM으로 배지를 교체한 후 1일 동안 배양하였다(도 1, NC로 표시). 이후, 상기 세포를 PBS(Phosphate-Buffered Saline, Gibco)로 2회 세척 후 웰에 PBS 500ml을 넣고 UVB 20mJ/cm2를 조사하여 MMP-1과발현을 유도하고, PBS로 2회 추가 세척하였다(도 1, CON으로 표시). 실험군으로 상기 제조예 1의 사과발효조성물 및 사과농축액을 각각 FBS-free DMEM에 1%(v/v) 농도로 희석하여 상기 세포(CON)에 처리한 후 1일 동안 배양하였다. 배양 후 상등액을 취하여 4℃에서 13,000 rpm으로 3분 동안 원심분리하여 세포를 제외한 상등액을 수득하였다. 이후, 상등액 내 잔여 균체를 제거하기 위해 0.2um 필터를 이용하여 여과하였다.
수득한 상등액을 ELISA 어세이로 분석하여 MMP-1의 농도를 측정하였다.
구체적으로, ELISA 어세이는 Human Total MMP-1 DuoSet ELISA(R&D systems)를 사용하여 제조사의 지침에 따라 다음과 같이 수행하였다. 먼저, 96 웰 플레이트의 각 웰에 포획 항체(Capture antibody)를 밤새 부착하였다. 세척 버퍼로 3회 세척 후 시약 희석제(Reagent diluent)를 1시간 동안 처리하였다. 그 다음, 세척 버퍼로 3회 추가 세척 후 각 실험군 및 대조군(NC, CON)별 상등액과 표준용액을 각 웰에 넣고 2시간 동안 배양하였다. 이를 세척한 후 검출 항체(Detection antibody)를 넣고 2시간 동안 부착시켰다. 추가 세척 후 각 웰에 스트렙타비딘-HRP B(Streptavidin-HRP B)를 20분 동안 처리하였다. 반응 정지 용액(Stop solution)을 처리하여 반응을 정지시킨 후 450nm에서 흡광도를 측정하고 4 parameter logistic을 이용하여 MMP-1 농도를 계산하였다.
그 결과, 사과발효조성물과 사과농축액 모두 1%(v/v) 농도에서 MMP-1을 유의적으로 감소시켰으며, 사과농축액(11.5%) 대비 사과발효조성물(29.1%)이 MMP-1 감소율이 더 높았다(도1 및 표 1).
이에 따라, 사과발효조성물과 사과농축액 모두 광노화 억제능을 나타내며, 특히 사과발효조성물은 사과농축액 대비 광노화 억제능이 우수함을 확인하였다.
처리군(처리 농도 1%(v/v)) MMP-1농도 (pg/mL)
NC 3052.0
CON 6002.6
사과농축액 5311.9
사과발효조성물 4256.4
이상의 설명으로부터, 본 출원이 속하는 기술분야의 당업자는 본 출원이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 출원의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 출원의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims (16)

  1. 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 감소 또는 억제하는 효과를 가지는, 사과발효조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 콜라겐 분해 효소는 MMP-1인, 사과발효조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 사과발효조성물은 사과 초산 발효 조성물인, 사과발효조성물.
  4. 제3항에 있어서, 상기 사과발효조성물은 사과 효모 발효 및 초산균 발효 조성물인, 사과발효조성물.
  5. 제1항에 있어서, 상기 사과발효조성물은 피부 개선 효과를 가지는, 사과발효조성물.
  6. 제1항에 있어서, 상기 사과발효조성물은 피부 노화 방지 효과를 가지는, 사과발효조성물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 노화는 광노화인 것인, 사과발효조성물.
  8. 제1항에 있어서, 상기 사과발효조성물은 자외선에 의한 콜라겐 분해를 억제하는 효과를 가지는, 사과발효조성물.
  9. 제1항에 있어서, 상기 사과발효조성물은 자외선이 조사된 세포에 처리시 사과발효조성물이 처리되지 않은 자외선 조사 세포에 비하여 자외선에 의한 콜라겐 분해 효소의 발현을 10% 이상 감소 또는 억제하는 것인, 사과발효조성물.
  10. 제1항에 있어서, 상기 사과발효조성물은 자외선에 의한 주름 생성을 억제하는 효과를 가지는, 사과발효조성물.
  11. 제1항의 사과발효조성물을 포함하는, 식품.
  12. 제12항에 있어서, 상기 식품은 피부 건강 개선 또는 증진용인, 식품.
  13. 제1항의 사과발효조성물을 포함하는, 건강기능식품.
  14. 제13항에 있어서, 상기 건강기능식품은 피부 건강 개선 또는 증진용인, 건강기능식품.
  15. 제1항의 사과발효조성물을 포함하는, 화장료 조성물.
  16. 제15항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 피부의 주름 완화 또는 개선용인, 화장료 조성물.
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