WO2023239016A1 - 디메틸제일아스테럴을 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 - Google Patents

디메틸제일아스테럴을 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물 Download PDF

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김예은
윤정한
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    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives

Definitions

  • the present invention relates to dimethyl jeil asteral and its pharmaceutically acceptable salts, which have excellent anti-obesity effects.
  • the purpose of the present invention is to provide a food composition that helps reduce body fat.
  • composition for the treatment or prevention of metabolic diseases containing a compound represented by Formula 1 or a pharmaceutically acceptable salt thereof (hereinafter referred to as ‘compound represented by Formula 1, etc.’):
  • compositions for the treatment or prevention of metabolic diseases according to 1 above for administration to any one subject selected from the group consisting of humans, livestock, and pets.
  • R 1 is H, OH or CH 3
  • R 2 is H, OH, OCH 3 or OCOCH 3
  • R 3 is H, CHO, CH 2 OH or CH 3
  • R 4 is CH 2 OH, COOH or CH 3 phosphorus, pharmaceutical composition for the treatment or prevention of metabolic diseases.
  • a food composition helpful in reducing body fat containing the compound represented by Formula 1, a foodologically acceptable salt thereof, or an extract of a natural product containing the same.
  • R 1 is H, OH or CH 3
  • R 2 is H, OH, OCH 3 or OCOCH 3
  • R 3 is H, CHO, CH 2 OH or CH 3
  • R 4 is CH 2 OH, COOH or CH 3 phosphorus, a food composition that helps reduce body fat.
  • R 1 is H, OH or CH 3
  • R 2 is H, OH, OCH 3 or OCOCH 3
  • R 3 is H, CHO, CH 2 OH or CH 3
  • R 4 is CH 2 OH, COOH or CH 3 phosphorus, feed composition.
  • the compound represented by Formula 1 of the present invention is effective in the treatment and prevention of metabolic diseases such as obesity, diabetes, hyperlipidemia, and hypertriglyceridemia.
  • the compound represented by Formula 1 of the present invention acts as an antagonist of the glucocorticoid receptor and can regulate the transcription mechanism of genes related to metabolism.
  • the compound represented by Formula 1 of the present invention can inhibit the differentiation of fat cells and promote the decomposition of fat.
  • Figure 1 shows the binding capacity of dimethyl asterel to the glucocorticoid receptor.
  • Figure 2 shows the inhibitory effect of dimethyl jeil asterel on intracellular glucocorticoid receptor activity.
  • Figure 4 shows the results of confirming molecular docking between dimethyl asteral and glucocorticoid receptor using the AutoDock Vina tool.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of metabolic diseases, including the compound represented by Formula 1.
  • R 1 is H, OH or CH 3
  • R 2 is H, OH, OCH 3 or OCOCH 3
  • R 3 is H, CHO, CH 2 OH or CH 3
  • R 4 is CH 2 OH, COOH or CH 3 is preferred.
  • the compound represented by Formula 2 is dimethyl jeil asteral. This is a triterpenoid series compound with the molecular formula C 29 H 36 O 6 and molecular weight 480.60, and is 12-oxodendrobane or (2R,4aS,6aR,6aS,14aS,14bR)-9-formyl. -10,11-dihydroxy-2,4a,6a,6a,14a-pentamethyl-8-oxo-1,3,4,5,6,13,14,14b-octahydropycene-2-carboxyl It is also named as a mountain.
  • Dimethyl First Asteral can be synthesized chemically or isolated from natural products such as Tripterygium wilfordii Hook.f. , Tripterygium regelii , and Tripterygium hypoglaucum .
  • solvents such as chloroform, dichloromethane, ethyl acetate, DMSO, or acetone can be used.
  • Metabolic diseases collectively refer to diseases caused by lifestyle habits such as obesity, lack of exercise, and excessive nutrition. Examples include obesity, high blood pressure, hyperlipidemia, and diabetes. Metabolic diseases can accompany or cause inflammation and cardiovascular diseases (angina, myocardial infarction, stroke, etc.).
  • Pharmaceutically acceptable salts may be, for example, acid addition salts or metal salts.
  • These pharmaceutically non-toxic salts include sulfate, pyrosulfate, bisulfate, sulfite, bisulfite, nitrate, phosphate, monohydrogen phosphate, dihydrogen phosphate, metaphosphate, pyrophosphate, chloride, bromide, and iodine.
  • salts can be prepared by conventional chemical methods from compounds having a base or acid function and the corresponding acid or base.
  • the pharmaceutical composition of the present invention can be formulated and used in the form of oral dosage forms such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, external preparations, suppositories, and sterile injection solutions according to conventional methods. , but is not limited to this.
  • Solid preparations for oral administration include, but are not limited to, tablets, pills, powders, granules, capsules, etc., but these solid preparations may contain at least one excipient, such as starch or calcium carbonate, to the compound. It is prepared by mixing , sucrose or lactose, and gelatin. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc can also be used.
  • excipient such as starch or calcium carbonate
  • Liquid preparations for oral use include suspensions, oral solutions, emulsions, syrups, etc.
  • various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and preservatives may be included.
  • Preparations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, lyophilized preparations, and suppositories.
  • Non-aqueous solvents and suspensions may include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, and injectable ester such as ethyl oleate.
  • a base for suppositories witepsol, macrogol, tween 61, cacao, laurin, glycerogeratin, etc. can be used.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount.
  • pharmaceutically effective amount means an amount sufficient to treat a disease with a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical treatment, and the effective dose level is determined by the type of patient's disease, severity, activity of the drug, and the drug. It can be determined based on factors including sensitivity to, time of administration, route of administration and excretion rate, duration of treatment, concurrently used drugs, and other factors well known in the field of medicine.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be administered as an individual therapeutic agent or in combination with other therapeutic agents, may be administered sequentially or simultaneously with conventional therapeutic agents, and may be administered singly or multiple times. Considering all of the above factors, it is important to administer an amount that can achieve the maximum effect with the minimum amount without side effects, and this can be easily determined by a person skilled in the art.
  • the effective amount in the pharmaceutical composition of the present invention may vary depending on the patient's age, gender, and weight. However, since it may increase or decrease depending on the route of administration, severity of disease, gender, weight, age, etc., the above dosage does not limit the scope of the present invention in any way.
  • livestock refers to all animals that humans have domesticated and improved from wild animals and are useful in human life.
  • the livestock may include cattle, horses, mules, donkeys, goats, goats, sheep, deer, pigs, rabbits, and poultry.
  • Poultry includes chickens, turkeys, ducks, ostriches, geese, quail, etc., but they are raised to produce livestock products. If it is suitable for, it is not limited to this.
  • the above “livestock products” are defined by Article 2, Paragraph 3 of the Livestock Act, as defined by the Ordinance of the Ministry of Agriculture, Food and Rural Affairs, as meat, milk, eggs, honey and their processed products, raw skins (including raw fur), raw wool, and other livestock products produced from livestock. means that
  • the “food” of the present invention can be manufactured in all forms, such as functional food, nutritional supplement, health food, and food additives.
  • Items listed in the Food Additives Code include, for example, chemical compounds such as ketones, glycine, calcium citrate, nicotinic acid, and cinnamic acid; Natural additives such as dark pigment, licorice extract, crystalline cellulose, kaoliang pigment, and guar gum; It includes, but is not limited to, mixed preparations such as L-glutamate sodium preparations, noodle added alkaline preparations, preservative preparations, and tar coloring preparations.
  • hard capsules can be manufactured by filling a regular hard capsule with a mixture of the composition mixed with additives such as excipients
  • soft capsules can be manufactured by filling a mixture of the composition with additives such as excipients. It can be manufactured by filling a capsule base such as gelatin.
  • the soft capsule may contain plasticizers such as glycerin or sorbitol, colorants, preservatives, etc., if necessary.
  • the food composition in the form of a ring can be prepared by molding a mixture of the composition and excipients, binders, disintegrants, etc. by a previously known method, and if necessary, it can be coated with white sugar or other coating agent, or starch, The surface can also be coated with a substance such as talc.
  • composition may include food additives that are foodologically acceptable in addition to the active ingredients.
  • feed of the invention means any natural or artificial diet, meal, etc., or a component of the meal, for or suitable for eating, ingestion, and digestion by animals.
  • the feed may be feed for reptiles, fish, birds, or mammals.
  • it can be feed for livestock or aquatic life that has purified wild habits, is suitable for breeding, and can contribute to increasing the income of farmers, as defined in Article 2, Paragraph 1 of the Livestock Act and Article 2 of the Enforcement Rules of the same Act. .
  • Formula 1 of the present invention may have the substituents shown in Table 1 below.
  • the dimethylzeylasteral used in the experiment was 10 mg of Demethylzeylasteral (CAS No. 107316-88-1, product number 28595, Cayman Chemical, USA) dissolved in DMSO.
  • Fluorescence polarization competition assay was measured by mixing fluormone tracer, a fluorescent substance that binds to the purified glucocorticoid receptor, and dimethyl jeil asteral.
  • the analysis method measures the degree to which polarization decreases when the fluormone tracer fails to bind to the glucocorticoid receptor when there is a small molecule compound that can competitively bind to the fluormone tracer that binds to the substrate binding site of the glucocorticoid receptor, and the small molecule compound This is the principle of measuring the glucocorticoid receptor binding force.
  • the IC50 was confirmed to be 1188 nM.
  • a luciferase assay was performed to measure the inhibitory effect of dimethyl asteral on intracellular glucocorticoid receptor activity.
  • the transformed cell GR-GAL4 Reporter (Luc)-HEK293 (BPS Bioscience, USA), which contains a recombinant luciferase gene in the promoter site of GRE, was used.
  • Transformed cells were seeded at 30,000 cells per well in 96 wells and stabilized for 16 hours. Afterwards, dimethyl jeil asteral was treated at different concentrations, or mifepristone, a positive control, was treated at a concentration of 9 nM.
  • dimethyl jeil asteral inhibits intracellular glucocorticoid receptor activity in a concentration-dependent manner.
  • 3T3-L1 cells which are preadipocytes, were seeded in a 48 well plate and incubated with 10% Bovine Calf Serum (BCS). ) and antibiotic-antimycotic (DMEM (Dulbecco-modified Eagle medium)) supplemented with 10 ml/L and confluent in an incubator at 37°C and 10% CO 2 were cultured until they grew.
  • BCS Bovine Calf Serum
  • DMEM Dulbecco-modified Eagle medium
  • DMEM medium was supplemented with MDI (0.5 mM isobutyl-methylxanthine, 1 ⁇ M dexamethasone, and 5 ⁇ g/ml insulin).
  • MDI 0.5 mM isobutyl-methylxanthine, 1 ⁇ M dexamethasone, and 5 ⁇ g/ml insulin.
  • Molecular docking is a method of predicting interactions between molecules (proteins, compounds, etc.). Through this method, the three-dimensional structural movements and interactions between molecules in an aqueous solution state can be reproduced in silico , and the binding energy between molecules can be calculated to predict sites with a high possibility of bonding between molecular structures.

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Abstract

본 발명의 디에틸제일아스테럴 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 조성물은 글루코코르티코이드 수용체의 길항제로서 세포 내 글루코코르티코이드 수용체 활성을 억제하고 대사성 질환의 예방 및 치료를 위한 지방 세포의 축적 억제에 우수한 효과를 가진다.

Description

디메틸제일아스테럴을 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명은 항비만 효과가 우수한 디메틸제일아스테럴 및 이의 약학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.
현대 사회는 육식 위주의 식생활로 변화되면서 열량 섭취는 과다해진 반면 운동량은 부족해져 비만, 당뇨병, 고지혈증, 비알코올성 지방간, 이상지질혈증 등 다양한 질환을 포함하는 대사성 질환의 발병이 급증하고 있다.
상기 비만은 에너지 소모량에 비하여 에너지 섭취량이 많아 체내에 과잉된 에너지가 지방으로 과다하게 축적된 상태를 말한다. 현재 사용되고 있는 비만 치료제의 약리기전은 크게 1) 지방흡수 억제, 2) 지방 분해 및 열 발생 촉진, 3) 식욕 및 포만감의 조절, 4) 단백질 대사 저해 그리고 5)　음식물의 섭취와 관련된 정서 조절 등으로 나눌 수 있다. 대표적인 비만 치료제로는 지방 흡수를 억제하는 제니칼™ (Xenical™), 교감신경계를 자극하여 식욕을 억제하는 리덕틸™ (Reductil™)을 들 수 있다. 　그러나, 제니칼™의 경우에는 지방변, 복부통증, 구토, 가려움증, 간 손상 등의 부작용이 보고되었으며, 리덕틸™의 경우에는 두통, 식욕부진, 불면, 변비 등의 부작용뿐만 아니라 심각한 심혈관계 부작용을 일으키는 것으로 보고된 바 있다.
상기 당뇨병은 인슐린의 분비량이 부족하거나 정상적인 기능이 이루어지지 않아 발생하는 질병으로, 혈중 포도당의 농도가 높아지는 고혈당 및 소변으로 포도당이 배출되는 증상을 특징으로 한다. 현재 사용되고 있는 당뇨병 치료제로는 PPAR-γ 활성제, GLP-1 유도체, DPP-IV 저해제 등이 있으나, 이러한 종래의 약제들은 체중 증가 및 간, 신장, 근육, 심장 등에 독성을 나타내는 부작용이 있는 것으로 보고되고 있다.
상기 고지혈증은 필요 이상으로 많은 지방 성분 물질이 혈액 내에 존재하면서 혈관 벽에 쌓여 염증을 일으키고, 그 결과 심근경색, 뇌졸중이나 뇌경색 등과 같은 심혈관계 질환을 일으키는 원인이 되는 질병으로 알려져 있다. 현재 사용되고 있는 고지혈증 치료제로는 HMG-CoA 환원효소 억제활성을 갖는 '스타틴' 계열의 약물이 있으나, 이는 장기간 사용할 경우 간이나 근육 등에 독성을 나타내는 부작용이 있는 것으로 보고되고 있다.
현재 전반적인 비만 또는 대사성 질환에 대한 탁월한 치료제의 개발이 미비한 상태이고, 개개의 구체적인 질환에 대한 치료제들 역시 위와 같은 여러 부작용이 보고되고 있으므로, 비만 또는 대사성 질환에 대한 치료 효능이 우수하면서도 부작용이 없는 안전한 치료제의 개발이 절실히 요구되고 있는 실정이다.
한편, 뇌공등은 화살나무과의 덩굴성 식물이다. 높이는 2 내지 3m 이며, 작은 가지는 적갈색이고 뾰족한 모서리가 있으며 타원형 모양의 작은 혹모양 돌기와 녹갈색의 보드라운 잔털이 있다. 개화기는 5월 내지 6월이고 결실기는 8월 내지 9월이다. 그늘지고 축축하며 비옥한 산비탈, 골짜기, 냇가의 관목림속에서 자라고 잡목림 속에서도 자란다.
미역줄나무는 노박덩굴과의 낙엽 덩굴식물로 메역순나무라고도 하며, 산기슭이나 골짜기 또는 숲 속에서 무리 지어 자란다. 길이는 2m 정도이고, 가지는 적갈색이며 혹 모양의 돌기가 빽빽이 나고 5개의 모가 난 줄이 있다. 잎은 어긋나고 길이가 5 내지 15cm의 달걀 모양 또는 타원 모양이며 밝은 녹색이고 뒷면의 맥 위에 털이 있으며 가장자리에 둔한 톱니가 있다. 꽃은 6월 내지 7월에 맺고, 열매는 9월 내지 10월에 맺는다. 살충, 소염, 해독의 효능이 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명은 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 체지방 감소에 도움이 되는 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 혈압 및 혈당 조절 효과가 있는 사료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
1. 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염(이하, ‘화학식 1로 표시되는 화합물 등')을 포함하는 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물:
[화학식 1]
Figure PCTKR2023003227-appb-img-000001
(식 중, R1은 H, OH 또는 C1 내지 C5의 알킬이고, R2는 H, OH, OCH3, OCOCH3 또는 C1 내지 C5의 알킬이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 C1 내지 C5의 알킬이며, R4는 CH2OH, COOH 또는 C1 내지 C5의 알킬임).
2. 위 1에 있어서, 인간, 가축 및 애완 동물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 대상에 투여하기 위한, 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
3. 위 1에 있어서, 대사성 질환은 비만, 고혈압, 고지혈증 및 당뇨로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인, 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
4. 위 1에 있어서, R1은 H, OH 또는 CH3이고, R2는 H, OH, OCH3 또는 OCOCH3이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 CH3이고, R4는 CH2OH, COOH 또는 CH3인, 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
5. 위 1에 있어서, 화학식 1로 표시되는 화합물은 뇌공등, 미역줄나무 또는 곤명산해당에 포함되어 있는 것인, 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
6. 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 식품학적으로 허용되는 염, 또는 이를 포함하는 천연물의 추출물을 포함하는 체지방 감소에 도움이 되는 식품 조성물.
7. 위 6에 있어서, 혈압 및 혈당 조절 효과가 있는, 체지방 감소에 도움이 되는 식품 조성물.
8. 위 6에 있어서, R1은 H, OH 또는 CH3이고, R2는 H, OH, OCH3 또는 OCOCH3이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 CH3이고, R4는 CH2OH, COOH 또는 CH3인, 체지방 감소에 도움이 되는 식품 조성물.
9. 위 6에 있어서, 상기 천연물은 뇌공등, 미역줄나무 및 곤명산해당으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인, 체지방 감소에 도움이 되는 식품 조성물.
10. 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 사료학적으로 허용되는 염, 또는 이를 포함하는 천연물의 추출물을 포함하는 사료 조성물.
11. 위 10에 있어서, R1은 H, OH 또는 CH3이고, R2는 H, OH, OCH3 또는 OCOCH3이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 CH3이고, R4는 CH2OH, COOH 또는 CH3인, 사료 조성물.
12. 위 10에 있어서, 상기 천연물은 뇌공등, 미역줄나무 및 곤명산해당으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인, 사료 조성물.
본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물 등은 비만, 당뇨, 고지혈증, 고중성지방혈증 등의 대사성 질환의 치료 및 예방에 효과적이다.
본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물 등은 글루코코르티코이드 수용체의 길항제로 작용하여 대사와 관련된 유전자들의 전사 기전을 조절할 수 있다.
본 발명의 화학식 1로 표시되는 화합물 등은 지방 세포의 분화를 억제할 수 있고 지방의 분해를 촉진한다.
도 1은 디메틸제일아스테럴의 글루코코르티코이드 수용체의 결합력을 나타낸 것이다.
도 2는 디메틸제일아스테럴의 세포 내 글루코코르티코이드 수용체 활성 억제 효과를 나타낸 것이다.
도 3은 디메틸제일아스테럴의 지방 축적 억제효과를 나타낸 것이다.
도 4는 AutoDock Vina 툴을 이용하여 디메틸제일아스테럴과 글루코코르티코이드 수용체 간의 분자 도킹(molecular docking)을 확인한 결과이다.
도 5는 PoseView 툴을 이용하여 디메틸제일아스테럴과 글루코코르티코이드 수용체의 결합자리 잔기(binding site residue)와의 상호작용을 관찰한 결과이다.
본 발명은 화학식 1로 표시되는 화합물 등을 포함하는 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물을 제공한다.
화학식 1에서 R1은 H, OH 또는 C1 내지 C5의 알킬이고, R2는 H, OH, OCH3, OCOCH3 또는 C1 내지 C5의 알킬이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 C1 내지 C5의 알킬이며, R4는 CH2OH, COOH 또는 C1 내지 C5의 알킬이다.
화학식 1에서 R1은 H, OH 또는 CH3이고, R2는 H, OH, OCH3 또는 OCOCH3이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 CH3이고, R4는 CH2OH, COOH 또는 CH3인 것이 바람직하다.
화학식 1로 표시되는 화합물은 하기 화학식 2의 구조를 갖는 것이 더욱 바람직하다.
[화학식 2]
Figure PCTKR2023003227-appb-img-000002
화학식 2로 표시되는 화합물은 디메틸제일아스테럴이다. 이는 분자식 C29H36O6, 분자량 480.60을 갖는 트리테르페노이드 계열의 화합물로서, 12-옥소덴드로베인(12-oxodendrobane) 또는 (2R,4aS,6aR,6aS,14aS,14bR)-9-포밀-10,11-디하이드록시-2,4a,6a,6a,14a-펜타메틸-8-옥소-1,3,4,5,6,13,14,14b-옥타하이드로피센-2-카르복실산으로도 명명된다.
상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학 조성물은 글루코코르티코이드의 수용체와 소수성 상호작용(hydrophobic interaction) 또는 수소결합(hydrogen bond)을 형성할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
디메틸제일아스테럴은 화학적으로 합성할 수도 있고 뇌공등(Tripterygium　wilfordii　Hook.f.), 미역줄나무(Tripterygium regelii) 및 곤명산행당(Tripterygium hypoglaucum) 등의 천연물로부터 분리할 수도 있다. 천연물로부터 분리할 경우 클로로포름, 디클로로메테인, 에틸 아세테이트, DMSO 또는 아세톤 등의 용매를 이용할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 대사성 질환의 치료 및 예방 효과가 있다. 대사성 질환은 비만이나 운동부족, 과잉영양 등의 생활 습관이 원인이 되어 나타나는 병을 통칭한다. 예컨대 비만, 고혈압, 고지혈증, 당뇨 등이 포함된다. 대사성 질환은 염증과 심혈관계질환(협심증, 심근경색, 뇌졸중 등)을 동반하거나 유발할 수 있다.
본 발명의 화합물의 약학적으로 허용되는 염이란, 본 발명에서 정의된 약학적으로 허용되고 모 화합물의 바람직한 약리 활성을 가지는 염을 의미한다.
약학적으로 허용 가능한 염은 예를 들어 산 부가염 또는 금속염일 수 있다.
산 부가염은 염산, 질산, 인산, 황산, 브롬화수소산, 요드화수소산, 아질산 또는 아인산과 같은 무기산류와 지방족 모노 및 디카르복실레이트, 페닐-치환된 알카노에이트, 하이드록시 알카노에이트 및 알칸디오에이트, 방향족 산류, 지방족 및 방향족 설폰산류와 같은 무독성 유기산으로부터 형성될 수 있다. 이러한 약학적으로 무독한 염은 설페이트, 피로설페이트, 바이설페이트, 설파이트, 바이설파이트, 니트레이트, 포스페이트, 모노하이드로겐 포스페이트, 디하이드로겐 포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트, 클로라이드, 브로마이드, 아이오다이드, 플루오라이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피을레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 석시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말리에이트, 부틴- 1,4-디오에이트, 핵산-1，6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로 벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 벤젠설포네이트, 를투엔설포네이트, 클로로벤젠설포네이트, 크실렌설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β_하이드톡시부티레이트, 글리콜레이트, 말레이트, 타트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트 또는 만델레이트를 포함할 수 있다. 예를 들어, 산 부가염은 화합물을 과량의 산 수용액 중에 용해시키고, 염을 수화성 유기 용매, 예컨대 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세토니트릴을 사용하여 침전시켜 수득할 수 있다.
금속염은 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염일 수 있다. 금속염은 염기를 사용하여 제조할 수 있으며, 예를 들어, 알칼리 금속 또는 알칼리 토금속 염은 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리 토금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물 염을 여과하고 여액을 증발 및/또는 건조시켜 수득할 수 있다.
이들 염은 염기 또는 산 기능을 가지는 화합물, 및 상응하는 산 또는 염기로부터 통상의 화학적 방법으로 제조될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
조성물에 함유될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오즈, 덱스트로즈, 수크로스, 덱스트린, 말토덱스트린, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면 활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제되나, 이에 제한되지 않는다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며 이에 제한되지는 않으나, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.
경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서 "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물에서 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
상기 약학 조성물의 투여 대상 중 "가축"이란 인류가 야생동물을 길들여 개량한 것으로 인류생활에 유용한 동물을 통틀어 이른다.
상기 가축에는 소, 말, 노새, 당나귀, 염소, 산양, 면양, 사슴, 돼지, 토끼, 가금류 등일 수 있으며, 가금류에는 닭, 칠면조, 오리, 타조, 거위, 메추리 등이 있으나, 사육하여 축산물을 얻기에 적합한 것이라면 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 "축산물"은 축산법 제2조 3호의 정의인, 가축에서 생산된 고기, 젖, 알, 꿀과 이들의 가공품, 원피 (원모피를 포함한다), 원모, 기타 가축의 생산물로서 농림부령이 정하는 것을 의미한다.
상기 약학 조성물의 투여 대상이 되는 애완동물은 가축, 가금, 어류 중에서 애완을 목적으로 가까이 두고 기르는 동물을 말한다.
본 발명의 다른 양태로서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 식품학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 식품 조성물을 제공한다.
상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 식품학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 식품 조성물은 글루코코르티코이드의 수용체와 소수성 상호작용(hydrophobic interaction) 또는 수소결합(hydrogen bond)을 형성할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 "식품"은, 기능성　식품(functional food), 영양 보조제(nutritional supplement), 건강식품(health food) 및　식품　첨가제(food additives) 등의 모든 형태로 제조할 수 있다.
식품 조성물은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.
식품 첨가물 공전에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류 첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
예를 들어, 정제 형태의 식품 조성물은 상기 조성물을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축 성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 식품 조성물은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다.
캡슐 형태의 식품 조성물 중 경질 캡슐제는 통상의 경질 캡슐에 상기 조성물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캡슐제는 상기 조성물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캡슐기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캡슐제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.
환 형태의 식품 조성물은 상기 조성물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다.
과립 형태의 식품 조성물은 상기 조성물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.
식품 조성물은 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류. 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등일 수 있다.
본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 식품학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 체지방 감소용, 혈당 조절용, 혈압 조절용, 항비만용 식품 조성물을 제공할 수 있다.
또한 상기 조성물은 유효성분 이외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명의 또 다른 양태로서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 및 또는 이의 사료학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 사료 조성물을 제공한다.
상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 사료학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 사료 조성물은 글루코코르티코이드의 수용체와 소수성 상호작용(hydrophobic interaction) 또는 수소결합(hydrogen bond)을 형성할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
발명의 용어 "사료"는 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분을 의미한다.
또한, 구체적으로, 본 발명은 상기 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 사료학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 체지방 감소용, 혈당 조절용, 혈압 조절용, 항비만용 사료 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명에 있어서 상기　사료는 파충류, 어류, 조류 또는 포유류의　사료　일 수 있다. 바람직하게, 축산법 제2조 제1호 및 동법 시행규칙 제2조 각호에서 정의하고 있는, 야생습성이 순화되어 사육하기에 적합하며 농가의 소득증대에 기여할 수 있는 가축 또는 수산생물의　사료일 수 있다.
본 발명의 화학식 1은 하기 표 1의 치환기를 가질 수 있다.
순번 R1 R2 R3 R4
1 H H H CH3
2 H H H CH2OH
3 H H H COOH
4 H H CH3 CH3
5 H H CH3 CH2OH
6 H H CH3 COOH
7 H H CHO CH3
8 H H CHO CH2OH
9 H H CHO COOH
10 H H CH2OH CH3
11 H H CH2OH CH2OH
12 H H CH2OH COOH
13 H OH H CH3
14 H OH H CH2OH
15 H OH H COOH
16 H OH CH3 CH3
17 H OH CH3 CH2OH
18 H OH CH3 COOH
19 H OH CHO CH3
20 H OH CHO CH2OH
21 H OH CHO COOH
22 H OH CH2OH CH3
23 H OH CH2OH CH2OH
24 H OH CH2OH COOH
25 H OCH3 H CH3
26 H OCH3 H CH2OH
27 H OCH3 H COOH
28 H OCH3 CH3 CH3
29 H OCH3 CH3 CH2OH
30 H OCH3 CH3 COOH
31 H OCH3 CHO CH3
32 H OCH3 CHO CH2OH
33 H OCH3 CHO COOH
34 H OCH3 CH2OH CH3
35 H OCH3 CH2OH CH2OH
36 H OCH3 CH2OH COOH
37 H OCOCH3 H CH3
38 H OCOCH3 H CH2OH
39 H OCOCH3 H COOH
40 H OCOCH3 CH3 CH3
41 H OCOCH3 CH3 CH2OH
42 H OCOCH3 CH3 COOH
43 H OCOCH3 CHO CH3
44 H OCOCH3 CHO CH2OH
45 H OCOCH3 CHO COOH
46 H OCOCH3 CH2OH CH3
47 H OCOCH3 CH2OH CH2OH
48 H OCOCH3 CH2OH COOH
49 CH3 H H CH3
50 CH3 H H CH2OH
51 CH3 H H COOH
52 CH3 H CH3 CH3
53 CH3 H CH3 CH2OH
54 CH3 H CH3 COOH
55 CH3 H CHO CH3
56 CH3 H CHO CH2OH
57 CH3 H CHO COOH
58 CH3 H CH2OH CH3
59 CH3 H CH2OH CH2OH
60 CH3 H CH2OH COOH
61 CH3 OH H CH3
62 CH3 OH H CH2OH
63 CH3 OH H COOH
64 CH3 OH CH3 CH3
65 CH3 OH CH3 CH2OH
66 CH3 OH CH3 COOH
67 CH3 OH CHO CH3
68 CH3 OH CHO CH2OH
69 CH3 OH CHO COOH
70 CH3 OH CH2OH CH3
71 CH3 OH CH2OH CH2OH
72 CH3 OH CH2OH COOH
73 CH3 OCH3 H CH3
74 CH3 OCH3 H CH2OH
75 CH3 OCH3 H COOH
76 CH3 OCH3 CH3 CH3
77 CH3 OCH3 CH3 CH2OH
78 CH3 OCH3 CH3 COOH
79 CH3 OCH3 CHO CH3
80 CH3 OCH3 CHO CH2OH
81 CH3 OCH3 CHO COOH
82 CH3 OCH3 CH2OH CH3
83 CH3 OCH3 CH2OH CH2OH
84 CH3 OCH3 CH2OH COOH
85 CH3 OCOCH3 H CH3
86 CH3 OCOCH3 H CH2OH
87 CH3 OCOCH3 H COOH
88 CH3 OCOCH3 CH3 CH3
89 CH3 OCOCH3 CH3 CH2OH
90 CH3 OCOCH3 CH3 COOH
91 CH3 OCOCH3 CHO CH3
92 CH3 OCOCH3 CHO CH2OH
93 CH3 OCOCH3 CHO COOH
94 CH3 OCOCH3 CH2OH CH3
95 CH3 OCOCH3 CH2OH CH2OH
96 CH3 OCOCH3 CH2OH COOH
97 OH H H CH3
98 OH H H CH2OH
99 OH H H COOH
100 OH H CH3 CH3
101 OH H CH3 CH2OH
102 OH H CH3 COOH
103 OH H CHO CH3
104 OH H CHO CH2OH
105 OH H CHO COOH
106 OH H CH2OH CH3
107 OH H CH2OH CH2OH
108 OH H CH2OH COOH
109 OH OH H CH3
110 OH OH H CH2OH
111 OH OH H COOH
112 OH OH CH3 CH3
113 OH OH CH3 CH2OH
114 OH OH CH3 COOH
115 OH OH CHO CH3
116 OH OH CHO CH2OH
117 OH OH CHO COOH
118 OH OH CH2OH CH3
119 OH OH CH2OH CH2OH
120 OH OH CH2OH COOH
121 OH OCH3 H CH3
122 OH OCH3 H CH2OH
123 OH OCH3 H COOH
124 OH OCH3 CH3 CH3
125 OH OCH3 CH3 CH2OH
126 OH OCH3 CH3 COOH
127 OH OCH3 CHO CH3
128 OH OCH3 CHO CH2OH
129 OH OCH3 CHO COOH
130 OH OCH3 CH2OH CH3
131 OH OCH3 CH2OH CH2OH
132 OH OCH3 CH2OH COOH
133 OH OCOCH3 H CH3
134 OH OCOCH3 H CH2OH
135 OH OCOCH3 H COOH
136 OH OCOCH3 CH3 CH3
137 OH OCOCH3 CH3 CH2OH
138 OH OCOCH3 CH3 COOH
139 OH OCOCH3 CHO CH3
140 OH OCOCH3 CHO CH2OH
141 OH OCOCH3 CHO COOH
142 OH OCOCH3 CH2OH CH3
143 OH OCOCH3 CH2OH CH2OH
144 OH OCOCH3 CH2OH COOH
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다.
실시예
실시예 1
실험에 사용한 디메틸제일아스테럴은 Demethylzeylasteral(CAS No. 107316-88-1, 제품번호 28595, Cayman Chemical, USA) 10mg을 DMSO에 녹여 사용하였다.
실험예 1: 디메틸제일아스테럴의 글루코코르티코이드수용체 결합력 측정
실험예 1에서는 디메틸제일아스테럴의 글루코코르티코이드 수용체 결합력을 측정하기 위하여 PolarScreen쪠 Glucocorticoid Receptor Competitor Assay Kit, Red(ThermoFisher Scientific, USA)을 활용해 Fluorescence polarization competition assay를 수행하였다.
정제한 글루쿠코르티코이드 수용체와 결합하는 형광 물질인 fluormone tracer와 디메틸제일아스테럴을 혼합하여 Fluorescence polarization competition assay를 측정하였다. 상기 분석 방법은 글루코코르티코이드 수용체의 기질 결합부위에 결합하는 fluormone tracer와 경쟁적으로 결합할 수 있는 저분자 화합물이 존재할 경우, 상기 fluormone tracer가 글루코코르티코이드 수용체와 결합하지 못하면서 편광이 감소하는 정도를 측정하여 저분자 화합물의 글루코코르티코이드 수용체 결합력을 측정하는 원리이다.
보다 구체적으로, 2,585 nM 농도의 글루코코르티코이드 수용체, 1.4 nM의 fluormone tracer, 디메틸제일아스테럴 (최고 농도 16 uM, 5-fold serial dilution)을 준비하고 384 웰 블랙 플레이트에 넣고 혼합하여 상온에서 3시간 동안 반응시킨 후 Hidex Sense(Hidex, Finland)을 이용해 상온에서 현광편광(fluorescence polarization(mP))을 측정하였다. 측정시 사용한 excitation 파장은 535 nm, emission 파장은 590 nm였다. 본 실험은 동일한 방법으로 3회 수행하여 평균값을 산출하였다. 측정값을 활용하여 dose-response curve를 도출하고, 최고측정값의 절반수치에 해당하는 시료의 농도를 구해 IC50값을 산출하였다. 그 결과는 도 1과 같다.
상기 방법에 따라 디메틸제일아스테럴의 글루코코르티코이드 수용체 결합력을 계산한 결과, IC50은 1188 nM으로 확인되었다.
실험예 2: 디메틸제일아스테럴의 세포 내 글루코코르티코이드수용체 활성 억제 효과 측정
디메틸제일아스테럴의 세포 내 글루코코르티코이드 수용체 활성 억제 효과를 측정하기 위하여 루시퍼라제 분석(luciferase assay)을 실시했다. 본 실험에서는 GRE의 프로모터(promoter) 사이트에 루시퍼라제(luciferase)가 재조합된 재조합 유전자를 포함하는 형질전환 세포 GR-GAL4 Reporter (Luc)-HEK293(BPS Bioscience, 미국)를 활용했다. 형질전환 세포는 96 웰에 웰 당 30,000 개의 세포를 시딩(seeding)한 후 16시간 동안 안정화시켰다. 그 후 디메틸제일아스테럴을 농도별로, 또는 positive control인 mifepristone을 9 nM 농도로 처리하였다. 1시간 후 글루코코르티코이드 작용제인 dexamethasone을 20 nM 농도로 처리한 후 24시간 동안 배양하였다. ONE-Step쪠 Luciferase Assay System(BPS Bioscience, 미국)을 웰 당 100 uL씩 넣어 10분 간 반응시킨 후, SpectraMax iD3 (Molecular Devices, 미국)을 활용하여 인광(luminescence)을 측정하였다. 그 결과는 도 2와 같다.
디메틸제일아스테럴이 세포 내 글루코코르티코이드 수용체 활성을 농도 의존적으로 억제함을 확인할 수 있었다.
실험예 3: 디메틸제일아스테럴의 지방 축적 억제 효과 측정
실험예 3에서는 디메틸제일아스테럴의 지방 축적 억제 효과를 분석하기 위하여 지방 전구세포를 분화시킨 후, Oil Red O staining을 수행하였다.
디메틸제일아스테럴이 MDI(Methylisobutylxanthine)에 의한 지방세포의 분화 및 성장에 치는 영향을 평가하기 위해 지방 전구 세포인 3T3-L1 세포를 48 well plate에 시딩하고 10% 우아 혈청(Bovine Calf Serum; BCS)과 안티바이오틱-안티마이코틱(Antibiotic-antimycotic) 10 ml/L이 첨가된 DMEM(Dulbecco-modified Eagle medium) 배지를 사용하여 37 ℃, 10 % CO2 배양기에서 컨플루언트(confluent)한 상태로 자랄 때까지 배양시켰다.
컨플루언트한 상태로 자란 3T3-L1 세포를 지방세포로 분화시키기 위하여 DMEM 배지에 MDI{0.5 mM 아이소부틸-메틸잔틴(isobutylꠓmethylxanthine), 1 μM 덱사메타손(dexamethason) 및 5 ㎍/㎖ 인슐린}가 첨가된 배양액에서 48시간 동안 배양 후, insulin이 5 ㎍/㎖ 이 혼합된 DMEM 배양액에서 48시간 배양하고, 그 후 10 % 우태아 혈청(Fetal bovine serum)이 첨가된 배양에서 48시간 동안 배양하였다.
3T3-L1세포에 MDI를 첨가하여 분화시키는 첫날부터 48시간 간격으로 배지를 교체할 때마다 디메틸제일아스테럴을 0.5, 1 μM 농도로 배양액에 처리하였다. 디메틸제일아스테럴은 DMSO에 녹여서 사용하였으며, 총 6일간 배양하여 분화가 완성된 시점에 배양액을 제거하고 분화된 지방세포에 함유된 지방구를 염색하였다. 이를 위해 35 내지 40 % 포름알데히드(formaldehyde)로 15분 동안 고정시킨 다음, PBS로 세척하고, Oil Red O 용액을 넣고 20분 동안 염색시켰다. 염색 완료 후 PBS로 4번 세척한 후, 이소프로파놀(2-프로파놀)(isopropanol(2-propanol))에 녹여 515 ㎚에서 O.D 값을 측정하였다. 그 결과는 도 3과 같다.
디메틸제일아스테럴을 지방전구세포인 3T3-L1 세포에 처리한 결과, 디메틸제일아스테럴 처리로 인해 세포 내 지방 축적량이 농도 의존적으로 감소함을 확인할 수 있었다.
실험예 4: 디메틸제일아스테럴과 글루코코르티코이드 수용체 간의 in silico 분자 도킹(molecular docing) 실험
분자 도킹은 분자(단백질, 화합물 등)간의 상호작용을 예측하는 방법이다. 이 방법을 통해 in silico 상에서 수용액 상태 내 분자 간 입체구조 움직임과 상호작용을 재현할 수 있으며, 분자 간의 결합 에너지를 계산하여 분자구조 간 결합 가능성이 높은 부위를 예측할 수 있다.
글루코코르티코이드 수용체의 입체구조를 Protein Data Bank(PDB) 데이터베이스로부터 확보하였고, 디메틸제일아스테럴의 입체구조를 PubChem 데이터베이스로부터 확보하였으며, UCSF Chimera v1.15 프로그램 내 AutoDock Vina 툴을 이용하여 분자 도킹을 실시하였다. 실험 결과, 디메틸제일아스테럴은 글루코코르티코이드 수용체의 결합 자리(binding site) 내에 안정적으로 결합함이 검증되었다(도 4).
해당 결합 구조 내에서 형성된 분자간 상호작용을 확인하기 위하여 ProteinPlus 프로그램 내 PoseView 툴을 활용하여 글루코코르티코이드 수용체의 결합 자리 잔기(binding site residue)와 디메틸제일아스테럴 간의 상호작용을 관찰하였다(도 5). 그 결과, 디메틸제일아스테럴의 C1 ring의 OH기와 CHO기가 각각 단백질의 Met604, Gln570 잔기와 수소결합을 형성하고 있음을 알 수 있었다. 또한, C3 내지 C5 ring의 잔기들이 결합자리 내 잔기들과 소수성 상호작용(hydrophobic interaction)을 형성함을 알 수 있었다. 이로부터 디메틸제일아스테럴이 글루코코르티코이드 수용체와 강한 결합력을 가지는 주요한 원인으로는 C1 ring의 OH기와 CHO기가 형성하는 수소결합임을 유추할 수 있었다.

Claims (12)

  1. 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 포함하는 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물:
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2023003227-appb-img-000003
    (식 중, R1은 H, OH 또는 C1 내지 C5의 알킬이고, R2는 H, OH, OCH3, OCOCH3 또는 C1 내지 C5의 알킬이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 C1 내지 C5의 알킬이며, R4는 CH2OH, COOH 또는 C1 내지 C5의 알킬임).
  2. 청구항 1에 있어서, 인간, 가축 및 애완 동물로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 대상에 투여하기 위한, 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 대사성 질환은 비만, 고혈압, 고지혈증 및 당뇨로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인, 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
  4. 청구항 1에 있어서, R1은 H, OH 또는 CH3이고, R2는 H, OH, OCH3 또는 OCOCH3이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 CH3이고, R4는 CH2OH, COOH 또는 CH3인, 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
  5. 청구항 1에 있어서, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 뇌공등, 미역줄나무 또는 곤명산해당에 포함되어 있는 것인, 대사성 질환의 치료 또는 예방용 약학 조성물.
  6. 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 식품학적으로 허용되는 염, 또는 이를 포함하는 천연물의 추출물을 포함하는 체지방 감소에 도움이 되는 식품 조성물:
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2023003227-appb-img-000004
    (식 중, R1은 H, OH 또는 C1 내지 C5의 알킬이고, R2는 H, OH, OCH3, OCOCH3 또는 C1 내지 C5의 알킬이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 C1 내지 C5의 알킬이며, R4는 CH2OH, COOH 또는 C1 내지 C5의 알킬임).
  7. 청구항 6에 있어서, 혈압 및 혈당 조절 효과가 있는, 체지방 감소에 도움이 되는 식품 조성물.
  8. 청구항 6에 있어서, R1은 H, OH 또는 CH3이고, R2는 H, OH, OCH3 또는 OCOCH3이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 CH3이고, R4는 CH2OH, COOH 또는 CH3인, 체지방 감소에 도움이 되는 식품 조성물.
  9. 청구항 6에 있어서, 상기 천연물은 뇌공등, 미역줄나무 및 곤명산해당으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인, 체지방 감소에 도움이 되는 식품 조성물.
  10. 화학식 1로 표시되는 화합물 또는 이의 사료학적으로 허용되는 염, 또는 이를 포함하는 천연물의 추출물을 포함하는 사료 조성물:
    [화학식 1]
    Figure PCTKR2023003227-appb-img-000005
    (식 중, R1은 H, OH 또는 C1 내지 C5의 알킬이고, R2는 H, OH, OCH3, OCOCH3 또는 C1 내지 C5의 알킬이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 C1 내지 C5의 알킬이며, R4는 CH2OH, COOH 또는 C1 내지 C5의 알킬임).
  11. 청구항 10에 있어서, R1은 H, OH 또는 CH3이고, R2는 H, OH, OCH3 또는 OCOCH3이며, R3는 H, CHO, CH2OH 또는 CH3이고, R4는 CH2OH, COOH 또는 CH3인, 사료 조성물.
  12. 청구항 10에 있어서, 상기 천연물은 뇌공등, 미역줄나무 및 곤명산해당으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나인, 사료 조성물.
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2015531376A (ja) * 2012-09-27 2015-11-02 ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレイション 肥満の処置のための化合物およびそれの使用方法
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Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2015531376A (ja) * 2012-09-27 2015-11-02 ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレイション 肥満の処置のための化合物およびそれの使用方法
KR102470686B1 (ko) * 2022-06-07 2022-11-23 서울대학교산학협력단 디메틸제일아스테럴을 포함하는 대사성 질환 예방 또는 치료용 약학 조성물

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHANG BAOCHAO, CHEN WEIDONG, ZHANG YAN, YANG PING, LIU LEI: "Tripterygium wilfordii mitigates hyperglycemia-induced upregulated Wnt/β-catenin expression and kidney injury in diabetic rats", EXPERIMENTAL AND THERAPEUTIC MEDICINE, SPANDIDOS PUBLICATIONS, GR, vol. 15, GR , pages 3874 - 3882, XP093114771, ISSN: 1792-0981, DOI: 10.3892/etm.2018.5901 *
HUANG WEI-JUN; LIU WEI-JING; XIAO YONG-HUA; ZHENG HUI-JUAN; XIAO YAO; JIA QI; JIANG HAN-XUE; ZHU ZE-BING; XIA CHEN-HUI; HAN XUE-TI: "Tripterygium and its extracts for diabetic nephropathy: Efficacy and pharmacological mechanisms", BIOMEDICINE & PHARMACOTHERAPY, ELSEVIER, FR, vol. 121, 7 November 2019 (2019-11-07), FR , XP085930349, ISSN: 0753-3322, DOI: 10.1016/j.biopha.2019.109599 *
HUANG YING, WANG SHAOFENG, ZHANG CHUNYA, XU ZHIQING, SHEN JINGHUA, DU XIAOGANG, ZHANG HUANHUA, ZHANG KANGJIAN, ZHANG DAIFU: "Experimental study of the anti-atherosclerotic effect of demethylzeylasteral", EXPERIMENTAL AND THERAPEUTIC MEDICINE, SPANDIDOS PUBLICATIONS, GR, vol. 13, no. 6, 1 June 2017 (2017-06-01), GR , pages 2787 - 2792, XP093114768, ISSN: 1792-0981, DOI: 10.3892/etm.2017.4352 *
KANG MYUNG-JI, KWON EUN-BIN, YUK HEUNG JOO, RYU HYUNG WON, KIM SOO-YEON, LEE MI-KYEONG, MOON DONG-OH, LEE SU UI, OH SEI-RYANG, LEE: "Tripterygium regelii decreases the biosynthesis of triacylglycerol and cholesterol in HepG2 cells", BIOSCIENCE, BIOTECHNOLOGY, AND BIOCHEMISTRY, JAPAN SOCIETY FOR BIOSCIENCE, BIOTECHNOLOGY, AND AGROCHEMISTRY, JP, vol. 81, no. 12, 2 December 2017 (2017-12-02), JP , pages 2285 - 2291, XP093114773, ISSN: 0916-8451, DOI: 10.1080/09168451.2017.1390392 *

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