WO2023194162A1 - Dihydroquinazolinones ayant une activité protectrice améliorée vis-à-vis de toxines au mode d'action intracellulaire, de virus et de bactéries intracellulaires - Google Patents

Dihydroquinazolinones ayant une activité protectrice améliorée vis-à-vis de toxines au mode d'action intracellulaire, de virus et de bactéries intracellulaires Download PDF

Info

Publication number
WO2023194162A1
WO2023194162A1 PCT/EP2023/058044 EP2023058044W WO2023194162A1 WO 2023194162 A1 WO2023194162 A1 WO 2023194162A1 EP 2023058044 W EP2023058044 W EP 2023058044W WO 2023194162 A1 WO2023194162 A1 WO 2023194162A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
group
compound
general formula
viruses
halogen atom
Prior art date
Application number
PCT/EP2023/058044
Other languages
English (en)
Inventor
Daniel Gillet
Jean-Christophe Cintrat
Julien Barbier
Lucie CARAMELLE
Original Assignee
Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives filed Critical Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives
Publication of WO2023194162A1 publication Critical patent/WO2023194162A1/fr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics

Definitions

  • the present invention relates to a new family of compounds of the 2,3-dihydroquinazolin-4(lH)-one type and their use as inhibitors of the toxic effects of toxins with intracellular activity, such as for example ricin, abrin and Shiga toxins, using retrograde transport to intoxicate cells, or viruses or bacteria using retrograde transport and/or dependent on syntaxin 5 to infect cells, in particular viruses or bacteria entering cells by endocytosis, or intracellular parasites.
  • toxins with intracellular activity such as for example ricin, abrin and Shiga toxins
  • Toxins with intracellular activity that use retrograde transport represent a major public health risk and are, in some cases, associated with more than a million deaths each year worldwide.
  • These toxins include ricin (produced in the seeds of the plant Ricinus communis), abrin (produced in the seeds of the plant Abrus precatorius), Shiga toxin and Shiga-like toxins (Stxs) produced by Shigella dysenteriae (Stx) and E. coli (Stxl and Stx2), pertussis toxin (Bordelella pertussis agent of whooping cough), cytotoxin subtilase and heat-labile enterotoxin (E. coli).
  • ricin produced in the seeds of the plant Ricinus communis
  • abrin produced in the seeds of the plant Abrus precatorius
  • Shiga toxin and Shiga-like toxins Stxs
  • Shigella dysenteriae Stx
  • E. coli E
  • Ricin is a 66 kDa glycoprotein composed of two polypeptide chains linked by a disulfide bridge.
  • the B chain (RTB, lectin of 262 residues) allows the toxin to bind to the glycolipids and glycoproteins of cell membranes and ensure its entry into the cell.
  • the A chain (RTA, 267 amino acids) provides the N-glycosidase enzymatic function of ricin, catalyzes the removal of adenine 4324 from the 28S RNA of targeted cells and causes the cessation of protein synthesis.
  • Abrin is an extremely toxic toxalbumin present in the seeds (EAbrus precatorius) with a structure and mechanism of action similar to those of ricin.
  • Shiga toxins include Shiga toxin (Stx) produced by Shigella dysenteriae and Shiga-like toxins 1 (Stxl) and 2 (Stx2) produced by enterohemorrhagic strains of E. coli. coli. Stx and Stxl toxins are 99% identical while Stxl and Stx2 share only 56% identity of their amino acid sequence.
  • the toxin subunit A (StxA) carries the same enzymatic activity as ricin and identically targets 28S RNA.
  • ricin After binding to its membrane receptors, ricin is internalized in these cells by multiple endocytosis pathways to reach the trans-Golgi network where it is transported to the endoplasmic reticulum (ER) by retrograde transport (Johannes, L. et al. , Cell 2008, 135, 1175-87).
  • Abrin acts by penetrating the cell by binding to the carbohydrate chains of glycoproteins and glycolipids on the cell surface before being internalized inside the cell. This little-known process is similar in terms of structure and mechanism of action to that of ricin. Shiga toxins are internalized by a unique endocytosis pathway and also reach the Golgi apparatus and then the endoplasmic reticulum (ibid.).
  • the toxins are then partially unfolded and the A chain/subunit is translocated into the cytosol (Lord, J.M. et al., Biochemical Society Transactions 2003, 31, 1260).
  • the final stage of the action of these toxins therefore takes place in the cytoplasm of the cells, the toxins bind to the ribosomes with great efficiency and cleave adenine 4324 of the 28S RNA of the 60S subunit of the ribosome .
  • This depurination of 28S RNA causes the cessation of protein synthesis and leads to cell death.
  • antitoxins To counter the threat posed by these toxins, several types of antitoxins have been developed: neutralizing antibodies, inhibitors of enzymatic activity (small molecules, substrate analogues), soluble receptor mimics and chemical compounds acting on the cells targeted by the toxin.
  • Poxviruses are DNA viruses related to the Poxviridae family, infective to animals and responsible for diseases such as monkeypox, or "simian pox", smallpox, vaccinia, cowpox infection, or "cow pox » camelpox infection affecting camelids (camels, dromedaries, llamas) or even molluscum contagiosum.
  • Poxviruses with animal reservoirs, in particular monkeypox and camelpox are emerging diseases with a risk of diffusion due to the increase in international transport, the fashion for pets, particularly exotic animals, the proximity of men with their draft animals, and the absence of smallpox vaccination protection.
  • the present invention seeks precisely to provide molecules making it possible to protect cells against toxins with intracellular activity, against viruses or bacteria and intracellular parasites.
  • the present invention relates to a compound of general formula (I):
  • - p is equal to 1, 2 or 3;
  • R 1 represents at each occurrence, independently, a hydrogen atom, a halogen atom, an alkoxy radical of 1 to 3 carbon atoms, in particular a methoxy group, -NO2, or -NH2;
  • R 2 and R 3 represent, independently of each other, a group chosen from -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR 4 , -NH2, -NHR 5 , -NR 7 R 8 , -SO2 -NH2, -SO2-NH-R 6 , SO3H, or a halogen atom;
  • R 4 , R 5 and R 6 represent, independently of each other, a group of formula (II) - L-(X)i-(PEG)-(Y)jZ, where:
  • - i and j independently represent 0 or 1;
  • R 7 and R 8 represent, independently of each other, a C to C 3 alkyl, linear or branched;
  • - X and Y independently represent a poly(lactic acid) or a poly(lactic acid-co-glycolic acid);
  • - PEG represents a poly(ethylene glycol
  • - Z represents a group chosen from H, a C1 to C3 alkyl, -OH, an O-C1 to C3 alkyl, or -L-Re, where L is defined as above and Re is a residue of formula (I ) connected to said group -L-(X)i-(PEG)-(Y)j- defined previously via its group R 2 or R 3 , said group R 2 or R 3 being -OH, -NH2 or -SO2-NH2;
  • - R 9 represents -CH3 or -CH2-OH, in particular represents CH3. as well as stereoisomeric forms, mixtures of stereoisomeric forms or their pharmaceutically acceptable salts.
  • the present invention relates to a compound of general formula (!'):
  • - p is equal to 1, 2 or 3;
  • R 1 represents at each occurrence, independently, a hydrogen atom, a halogen atom, an alkoxy radical of 1 to 3 carbon atoms, in particular a methoxy group, -NO2, or -NH2;
  • - R 2 and R 3 represent, independently of each other, a group chosen from -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR 4 , -NH2, -NHR 5 , -NR 7 R 8 , -SO2 -NH2, -SO2-NH-R 6 , SO3H, or a halogen atom;
  • - R 4 , R 5 and R 6 represent, independently of each other, a group of formula (II) - L-(X)i-(PEG)-(Y)jZ, where:
  • - i and j independently represent 0 or 1;
  • R 7 and R 8 represent, independently of each other, a C to C 3 alkyl, linear or branched;
  • - X and Y independently represent a poly(lactic acid) or a poly(lactic acid-co-glycolic acid);
  • - PEG represents a poly(ethylene glycol
  • - Z represents a group chosen from H, a C1 to C3 alkyl, -OH, an O-C1 to C3 alkyl, or -L-Re, where L is defined as above and Re is a residue of formula (I ) connected to said group -L-(X)i-(PEG)-(Y)j- defined previously via its group R 2 or R 3 , said group R 2 or R 3 being -OH, -NH2 or -SO2-NH2; as well as stereoisomeric forms, mixtures of stereoisomeric forms or their pharmaceutically acceptable salts.
  • this new family of molecules presents a biological activity as effective or even superior to the compounds of the family of molecules described in international application W02020/109510 Al. Very similar structurally, these molecules differ from those of the present invention by the presence of one or two ortho and meta substitutions in the phenyl ring.
  • the molecules of the present invention have a better calculated solubility (see the “log S” column in Table 3 below) which translates for certain molecules only, unexpectedly, into better bioavailability compared to molecules known in the art, and in particular with respect to compounds A to D presented in Tables 2 and 3 below. These properties are particularly increased when the molecules are administered in a vehicle solution as described below. Indeed, the poor solubility of the Retro-2.1 compound and its analogues in “conventional” delivery vehicles poses a great problem to formulators, in particular when it comes to producing pharmaceutical compositions on a large scale.
  • the invention relates to a compound of general formula (I) as described above, for its use for the prevention and/or treatment of disorders induced by toxins with an intracellular mode of action using retrograde transport, or by viruses or bacteria using retrograde transport and/or dependent on syntaxin 5 to infect cells, in particular viruses or bacteria entering cells by endocytosis, or by intracellular parasites.
  • the invention also relates to a pharmaceutical composition or medicament comprising at least one compound of general formula (I) as defined above as active principle, and a pharmaceutically acceptable vehicle, said pharmaceutical composition or said medicament being particularly suitable for administration by the air, oral, parenteral, local, intramuscular or subcutaneous routes.
  • FIG 1 represents the plasma concentration (in nM) of compound 1 (white circle), compound B (white square), compound C (white triangle) and compound E (white diamond) as a function of time (in hours ) administered to female BALB/c mice orally at a concentration of 33 mg/kg in a Lipiodol ⁇ /castor oil mixture in mass proportions 30%/70%.
  • FIG 2 represents the plasma concentration (in nM) of compound 1 (white circle), compound B (white square), compound C (white triangle) and compound E (white diamond) as a function of time (in hours ) administered to female BALB/c mice subcutaneously at a concentration of 33 mg/kg in a Lipiodol ⁇ /castor oil mixture in mass proportions 30%/70%.
  • FIG 3 represents the plasma concentration (in nM) of compound 1 in formulation B (white circle), of compound 1 in formulation C (black circle), of compound B in formulation B (white square) and of compound B in formulation C (black square) as a function of time (in hours) administered subcutaneously in female BALB/C mice at a concentration of 33 mg/kg.
  • FIG 4 represents a simulation of the plasma concentration (in nM) of compound B (left graph) or compound 1 (right graph) as a function of time (in hours) administered twice daily subcutaneously in female BALB/c mice at a concentration of 33 mg/kg in formulation C.
  • FIG 5 represents the residual percentage (in %) of the plasma concentration of compound 1 (curve 1), compound A (curve 2), compound B (curve 5), compound C (curve 4) and compound E (curve 3) versus time (in hours) incubated for 45 minutes with murine (A) or human (B) liver microsomes in the presence of NADPH versus time (in minutes).
  • the curves at 30 hours are, from top to bottom, those of compound 1, compound A, compound E, compound C and compound B.
  • FIG 6 represents a simulation of the plasma concentration (in pM) of (S)-compound 1 as a function of time (in hours) administered twice a day subcutaneously (top graph) or once a day subcutaneously (bottom graph) in female BALB/c mice at a concentration of 33 mg/kg.
  • the Applicant has identified a new family of compounds derived from 2,3-dihydroquinazolin-4(lH )-one, carrying a phenyl specifically substituted in di-ortho positions (ortho and ortho), which unexpectedly present a biological activity greater than that of Retro-2.2, the most active of the molecules already described, and therefore a marked interest for the prevention and/or treatment of poisoning with at least one toxin with an intracellular mode of action using retrograde transport to infect eukaryotic mammalian cells, but also for the prevention and/or treatment of infections by viruses or bacteria using retrograde and/or syntaxin 5-dependent transport to infect cells, in particular viruses or bacteria entering cells by endocytosis, or to intracellular parasites.
  • - p is equal to 1, 2 or 3;
  • R 1 represents at each occurrence, independently, a hydrogen atom, a halogen atom, an alkoxy radical of 1 to 3 carbon atoms, in particular a methoxy group, -NO2, or -NH2;
  • R 2 and R 3 represent, independently of each other, a group chosen from -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR 4 , -NH2, NHR 5 , -NR 7 R 8 , -SO2- NH2, -SO2-NH-R 6 , SO3H, or a halogen atom;
  • R 4 , R 5 and R 6 represent, independently of each other, a group of formula (II) - L-(X)i-(PEG)-(Y)jZ, where:
  • - i and j independently represent 0 or 1;
  • R 7 and R 8 represent, independently of each other, a C to C 3 alkyl, linear or branched;
  • - X and Y independently represent a poly(lactic acid) or a poly(lactic acid-co-glycolic acid);
  • - PEG represents a poly(ethylene glycol
  • - Z represents a group chosen from H, a C1 to C3 alkyl, -OH, an O-C1 to C3 alkyl, or -L-Re, where L is defined as above and Re is a residue of formula (I ) connected to said group -L-(X)i-(PEG)-(Y)j- defined previously via its group R 2 or R 3 , said group R 2 or R 3 being -OH, -NH2 or -SO2-NH2;
  • - R 9 represents -CH3 or -CH2-OH, in particular represents CH3. as well as stereoisomeric forms, mixtures of stereoisomeric forms or their pharmaceutically acceptable salts.
  • R 9 represents - CH3. According to one embodiment, p is equal to 1.
  • R 1 represents a halogen atom, in particular a fluorine atom.
  • the invention relates to a compound of general formula (I) in which R 2 and R 3 independently represent a group chosen from -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR 4 , -NH2, -NHR 5 , -NR 7 R 8 , -SO2-NH2, -SO2-NH-R 6 , SO3H, in particular R 3 , represents an -OH group, R 4 , R 5 , R 6 , R 7 and R 8 being defined as previously.
  • the compound of general formula (I) according to the invention has the following formula (la): where R 2 is as defined previously.
  • the compound of general formula (I) according to the invention has the following general formula (Ib): in which R 2 and R 3 are chosen from the following combinations: R 2 is an -OH group and R 3 is an -NH2 group, R 2 is an -OH group and R 3 is an -SO2NH2 group, R 2 is an -OH group and R 3 is an -SH group, R 2 is an -OH group and R 3 is an -SO3H group, R 2 is an -OH group and R 3 is an -SMe group, R 2 is a - group OH and R 3 is a - OMe group, R 2 is an -OH group and R 3 is a halogen atom, and in particular is a fluorine atom, R 2 is an -NH2 group and R 3 is a - group NH2, R 2 is -NH2 and R 3 is -SO2NH2, R 2 is -NH2 and R 3 is -SH, R 2 is -NH2
  • the compound has the following formula:
  • the compound has the following formula:
  • This compound is a metabolite of compound 1.
  • metabolite is meant a transformed form of a compound, following in vivo or in vitro administration of said compound. For example, this transformation may consist of hydroxylation of the compound.
  • the compound of general formula (I) has the following formula (III): the groups mentioned in formula (III) being as defined above.
  • the compound of general formula (I) according to the invention is chosen from:
  • the compounds of formula (I) can be found in the form of an R enantiomer, in the form of an S enantiomer, or in the form of a racemic mixture. According to a mode of particular embodiment, the compounds of formula (I) can be found in the form of an S enantiomer.
  • Certain compounds of general formula (I) constitute prodrugs.
  • the compounds of general formula (I) may be mentioned for which R 4 , R 5 and R 6 independently represent a group of formula (II) -L-(X)i-(PEG)- ( Y)jZ, where:
  • - i and j independently represent 0 or 1;
  • Prodrugs make it possible in particular to improve the bioavailability of compounds, and in particular to increase their selectivity for an intended target by increasing their capacity to pass through cell membranes.
  • Coupled we mean the creation of a chemical bond between compounds of formula (I) and other molecules. These bonds can be covalent bonds, ionic or iono-covalent bonds, metallic bonds, hydrogen bonds or Van der Waals forces.
  • certain compounds of general formula (I) can be coupled with hydrophilic molecules.
  • certain compounds of general formula (I) can be coupled with amphiphilic molecules.
  • certain compounds of general formula (I) can be coupled with lipophilic molecules.
  • certain compounds of general formula (I) can be coupled with fatty acids.
  • Fatty acids suitable for such a coupling are saturated fatty acids and unsaturated fatty acids.
  • the following saturated fatty acids may in particular be cited: caprylic acid (8:0), capric acid (10:0), lauric acid (12:0), myristic acid (14:0), palmitic acid (16:0), stearic acid (18:0), arachidic acid (20:0), behenic acid (22:0), lignoceric acid (24:0) and cerotic acid (26:0).
  • the following unsaturated fatty acids may also be mentioned: myristoleic acid (14:1), palmitoleic acid (16:1), sapienic acid (16:1), oleic acid (18:1), elaidic acid (18:1), trans-vaccenic acid (18:1), linoleic acid (18:2), linolelaidic acid (18:2), a-linolenic acid (18 :3), y-linolenic acid (18:3), dihomo-y-linolenic acid (20:3), arachidonic acid (20:4), eicosapentaenoic acid (20:5), clupanodonic acid (22:5) and docosahexaenoic acid (22:6).
  • the invention relates to a pharmaceutical composition or a medicine comprising at least one compound of general formula (I) as defined above, as active principle, and a pharmaceutically acceptable vehicle, said pharmaceutical composition or said medicine being particularly suitable for administration by the air, oral, parenteral, local, intramuscular or subcutaneous routes.
  • the invention relates to a compound of general formula (I) as defined above, for its use for the prevention and/or treatment of disorders induced by toxins with an intracellular mode of action using retrograde transport, or by viruses or bacteria using retrograde transport and/or dependent on syntaxin 5 to infect cells, in particular viruses or bacteria entering cells by endocytosis, or by intracellular parasites.
  • the invention relates to a compound of general formula (I) as defined above, for its use for the prevention and/or treatment of disorders induced by toxins with an intracellular mode of action using retrograde transport.
  • said toxins with an intracellular mode of action using retrograde transport are chosen from ricin, abrin, Shiga toxin and Shiga-like toxins (Stxs) produced by Shigella dysenteriae (Stx) and E. coli (Stxl and Stx2, Stx, Stx la, Stx2a, Stx2c, Stx2d, Stx2e as described for example by Melton-Celsa, Microbiol Spectr. 2014; 2(2)), pertussis toxin (Bordetella pertussis agent of pertussis), cytotoxin subtilase and heat-labile enterotoxin (E. coli).
  • the invention relates to a compound of general formula (I) as defined above, for its use for the prevention and/or treatment of disorders induced by viruses or bacteria using retrograde and/or dependent transport.
  • syntaxin 5 to infect cells, in particular viruses or bacteria entering cells by endocytosis, or intracellular parasites, such as leishmaniasis parasites.
  • the viruses are pox viruses, in particular smallpox virus, monkeypox virus, vaccinia virus and leporipoxviruses, in particular myxomatosis virus, adeno-associated viruses, in particular serotype 2, polyomaviruses, in particular polyomavirus JC and polyomavirus BK, papillomaviruses, filoviruses, in particular Ebola viruses and Marburg virus, enteroviruses, in particular enterovirus 71, herpesviruses, in particular Herpes simplex virus type 2 and cytomegalovirus (hCMV), viruses of the Arenavirus genus, notably lymphocytic choriomeningitis virus, and pneumoviruses, notably respiratory syncytial virus.
  • pox viruses in particular smallpox virus, monkeypox virus, vaccinia virus and leporipoxviruses, in particular myxomatosis virus, adeno-associated viruses, in particular
  • the bacteria are bacteria of the order Chlamydiales, in particular of the genus Chlamydia, such as Chlamydia trachomatis, Chlamydophila pneumoniae, Chlamydophila psyttaci, or Symkania, such as Symkania negevensis.
  • Chlamydiales in particular of the genus Chlamydia, such as Chlamydia trachomatis, Chlamydophila pneumoniae, Chlamydophila psyttaci, or Symkania, such as Symkania negevensis.
  • the disorders induced by intracellular parasites are leishmaniasis, in particular induced by trypanosomes of the Leishmania genus, in particular Leishmania infantum, Leishmania donovani or Leishmania infantum/donovani hybrid.
  • the present invention also relates to a method for preventing and/or treating disorders induced by toxins with intracellular activity using retrograde transport. and comprising administering to an individual in need an effective amount of at least one compound of general formula (I) as defined above.
  • the present invention relates to the use of at least one compound of general formula (I) as defined above for the manufacture of a medicament for the treatment of disorders induced by toxins with intracellular activity using retrograde transport.
  • a compound of general formula (I) as defined above may be useful in the treatment of human diseases such as acute poisoning by ricin or abrin toxins; in the prevention of complications linked to hemolytic uremic syndrome; in the treatment of poxvirus infections, including smallpox, monkeypox, cowpox, camelpox, or vaccinia infections; in the treatment of enterovirus infections.
  • a compound of general formula (I) as defined above may be useful in the treatment of animal diseases such as the treatment of myxomatosis in rabbits, monkeypox in monkeys or camelpox in camels.
  • the compounds of the present invention may be prepared according to methods well known to those skilled in the art, including, but not limited to, those described below, or by modifications of these methods by applying techniques standard known to those skilled in the art of organic synthesis. Appropriate modifications and substitutions will be well known, readily apparent, or readily accessible from the scientific literature to those skilled in the art. In particular, such methods can be found in R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, Wiley-VCH Publishers, 1999.
  • mixtures of stereoisomers can be separated by standard techniques, including, but not limited to, resolution of racemic forms, classical, reversed-phase and chiral chromatography, preferential salt formation, recrystallization and others, or by chiral synthesis from chiral raw materials or by deliberate synthesis of target chiral centers.
  • the compounds of the present invention can be prepared by various synthetic routes. In the reactions described below, it may be necessary to protect reactive functional groups, for example hydroxy, amino or thio groups, when present in the final product, in order to avoid their participation in side reactions. , unwanted. Conventional protection groups may be used in accordance with common practice, e.g. see T.W. Greene and P. G. M. Wuts in Protective Groups in Organic Chemistry, 3rd ed., John Wiley and Sons, 1999; J. F. W. McOmie in Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, 1973.
  • This reaction can in particular be carried out in an organic solvent.
  • the three starting compounds are mixed in an organic solvent, in particular acetic acid.
  • the organic solvent is heated, in particular under reflux or under microwave irradiation, for example at a temperature comprised from 100°C to 180°C, in particular from 110°C to 140°C, more particularly from 120°C. °C to 130°C.
  • the duration of heating is from 10 minutes to 6 hours, in particular from 30 minutes to 5 hours, in particular from 1 hour to 4 hours, more particularly from 2 to 3 hours.
  • R 1 and p are as defined above.
  • R 2 and R 3 represent, independently of each other, a group chosen from -OH, -OCH 3 , -SH, -SCH3, -OR 4 , -NH 2 , -NHR 5 , - NR 7 R 8 , -SO2-NH2, - SO2-NH-R 6 , SO3H, or a halogen atom.
  • R 2 and/or R 3 represent groups R 2 'and R 3 ' corresponding to ad hoc protection groups.
  • R 2 ' and/or R 3 ' represent -NO2
  • the present text also describes a pharmaceutically acceptable carrier solution.
  • This vehicle solution also makes it possible to improve the solubility of Retro-2.2 compounds as well as its analogues for subcutaneous or oral administration in order to promote their passage into the plasma of mammals.
  • the present text describes a pharmaceutically acceptable vehicle comprising compounds of formula (I).
  • the pharmaceutically acceptable carrier comprises (i) 20% to 40% v/v of ethyl esters of fatty acids of popsicle oil and (ii) 60% to 80% v/v v castor oil.
  • this pharmaceutically acceptable carrier comprises approximately 30% fatty acid ethyl esters of popsicle oil, and approximately 70% castor oil.
  • the pharmaceutically acceptable vehicle comprises a combination of dimethyl sulfoxide (DMSO), ethyl esters of fatty acids of popsicle oil with castor oil.
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • ethyl esters of fatty acids of popsicle oil with castor oil ethyl esters of fatty acids of popsicle oil with castor oil.
  • the pharmaceutically acceptable carrier comprises (i) 1% to 5% v/v dimethyl sulfoxide, (ii) 20% to 40% v/v fatty acid ethyl esters of the oil popcorn and (iii) 60% to 75% v/v castor oil.
  • this pharmaceutically acceptable carrier comprises about 3% dimethyl sulfoxide, about 29% ethyl esters of flaxseed oil fatty acids, and about 68% castor oil.
  • the ethyl esters of fatty acids in popsicle oil are iodized.
  • An example of ethyl esters of iodized fatty acids from popsicle oil is Lipiodol ®, marketed by the company Guerbet.
  • the ethyl esters of iodized fatty acids are mainly in the form of ethyl monoiodo stearate and ethyl diodostearate.
  • the ethyl esters of fatty acids of popsicle oil are a mixture of ethyl esters of fatty acids of popsicle oil, in which the fatty acids are chosen from palmitic acid, stearic acid, oleic acid, linoleic acid, linolenic acid, and mixtures thereof.
  • a mixture of ethyl esters of fatty acids of popsicle oil suitable in a vehicle solution as described can thus comprising a palmitic acid ethyl ester, a stearic acid ethyl ester, an oleic acid ethyl ester, a linoleic acid ethyl ester, a linolenic acid ethyl ester or a mixture thereof.
  • the mixture of ethyl esters of fatty acids of popsicle oil comprises from 5% to 15% of ethyl esters of palmitic acid, from 1% to 5% of ethyl esters stearic acid, 8% to 15% ethyl esters of oleic acid, 65% to 75% ethyl esters of linoleic acid, and 3% to 7% ethyl esters of linolenic acid .
  • the fatty acid ethyl ester mixture of popsicle oil comprises approximately 10% palmitic acid ethyl esters, approximately 2% stearic acid ethyl esters, approximately 11% ethyl esters of oleic acid, approximately 72% ethyl esters of linoleic acid, and approximately 5% ethyl esters of linolenic acid.
  • the inventors have surprisingly discovered that the administration of Rtri-2.2 compounds and its analogues in a vehicle solution of this type, in particular orally or subcutaneously, makes it possible to improve the passage into the circulation and the concentration of the compounds. in plasma, and therefore their bioavailability to individuals, compared to vehicles already known in the art.
  • the pharmaceutically acceptable vehicle comprises a combination of dimethyl sulfoxide (DMSO), ethyl esters of fatty acids of popsicle oil with castor oil.
  • the pharmaceutically acceptable carrier comprises
  • this pharmaceutically acceptable carrier comprises about 3% DMSO, about 11% glycerol triacetate, and about 86% castor oil.
  • Vehicle solutions as described are suitable for administration by the air, oral, parenteral, local, intramuscular or subcutaneous routes.
  • the vehicle solutions are suitable for intramuscular or subcutaneous administration.
  • the present invention also relates to a pharmaceutical composition or medicament comprising at least one compound of general formula (I) as defined above as active principle, and a pharmaceutically acceptable vehicle, said pharmaceutical composition or said medicament being particularly suitable for administration by the air, oral, parenteral, local, intramuscular or subcutaneous routes.
  • the pharmaceutically acceptable vehicle is as described above.
  • the pharmaceutical composition or the drug comprises, as a pharmaceutically acceptable vehicle, (i) from 20% to 40% v/v of ethyl esters of fatty acids from oil of popsicle and (ii) 60% to 80% v/v castor oil.
  • the pharmaceutical composition or the drug comprises, as a pharmaceutically acceptable vehicle, (i) from 1% to 5% v/v of dimethysulfoxide, (ii) from 20% to 40% v/v of ethyl esters of fatty acids from popsicle oil and (iii) from 60% to 75% v/v of castor oil.
  • the pharmaceutical composition or the drug comprises, as pharmaceutically acceptable vehicle, (i) from 1% to 5% of DMSO,
  • the composition or the drug comprises at least one compound of formula (I), in particular compound 1, and a vehicle pharmaceutically acceptable comprising (i) 1% to 5% DMSO, (ii) 5% to 15% glycerol triacetate and (iii) 80% to 94% v/v castor oil.
  • composition or the medicament may comprise at least the (S) enantiomer of compound 1 ((S)-compound 1) and a pharmaceutically acceptable vehicle comprising (i) from 1% to 5% of DMSO, (ii) from 5% to 15% glycerol triacetate and (iii) from 80% to 94% v/v castor oil.]
  • composition or the medicament may comprise at least the (S) enantiomer of compound 1 ((S)-compound 1) and a pharmaceutically acceptable vehicle comprising (i) approximately 3% DMSO, (ii) approximately 11% glycerol triacetate and (iii) approximately 86% v/v castor oil.
  • the pharmaceutical composition or the drug may be in the form of a hydrogel.
  • the pharmaceutical composition or the medication in the form of a hydrogel may comprise at least one compound of formula (I) and an aqueous solution of PLGA-PEG-PLGA.
  • the PLGA-PEG-PLGA polymer has been described to form fluid solutions when dissolved in water at low temperatures.
  • PLGA-PEG-PLGA solutions are capable of dissolving hydrophobic compounds.
  • the micelles formed by PLGA-PEG-PLGA chains interact with each other, leading to the formation of a hydrogel. This phenomenon can be exploited to generate a fluid formulation of a hydrophobic drug candidate at room temperature that will spontaneously form a hydrogel upon warming to body temperature (i.e., upon subcutaneous injection).
  • a galenic hydrogel comprising a PLGA-PEG-PLGA polymer of this type was described in Vinck et al. (In Vivo Sustained Release of the Retrograde Transport Inhibitor Retro- 2.1 Eormulated in a Thermosensitive Hydrogel. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 14611. https://doi.org/10.3390/ijms232314611) as allowing administration of Compound Retro-2.1 in mice.
  • This thermosensitive polymer notably allowed prolonged release of the compound and better control of its metabolism.
  • the pharmaceutical composition or the drug as described are suitable for administration by the air, oral, parenteral, local, intramuscular or subcutaneous routes. In particular, the pharmaceutical composition or the drug is suitable for intramuscular or subcutaneous administration.
  • the term “approximately” refers to a range of values of ⁇ 10% of a specific value.
  • the expression “approximately 120 mg” includes the values of 120 mg ⁇ 10%, i.e. the values of 108 mg to 132 mg.
  • percentages refer to percentages by weight relative to the total weight of the formulation, unless otherwise indicated.
  • the value ranges in the form of “x-y” or “from x to y” include the limits x and y as well as the integers between these limits.
  • “1-5”, or “from 1 to 5" designate the integers 1, 2, 3, 4 and 5.
  • the preferred embodiments include each integer taken individually in the value range, as well as any subcombination of these integers.
  • preferred values for "1-5" may include the integers 1, 2, 3, 4, 5, 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, 2-3, 2 -4, 2-5, etc.
  • pharmaceutically acceptable salt refers to salts which are, within the scope of sound medical judgment, suitable for contact with the tissues of humans and animals without toxicity. excessive, irritation, allergic response, or other problematic complications in proportion to a reasonable benefit/risk ratio.
  • salt of the compounds of general formula (I) is meant in particular hydrochlorides, bromhydrates, sulfates or bisulfates, phosphates or hydrogen phosphates, acetates, oxalates, benzoates, succinates, fumarates, maleates, lactates, citrates, tartrates, gluconates, methanesulphonates , benzene sulphonates and paratoluene sulphonates.
  • halogen atom we mean the chemical elements of group VII of the periodic table of elements, in particular, fluorine, chlorine, bromine and iodine.
  • alkyl radical of 1 to 3 or 4 carbon atoms designates a linear or branched hydrogencarbon radical; we can cite for example methyl, ethyl, propyl, isopropyl or tert-butyl.
  • PEG poly (ethylene glycol)” or “polyethylene glycol”, we mean in particular groups -(CH2-CH2-O)m-, optionally terminated by a group chosen from H, a C1 to C3 alkyl, or groups -(-O-CH2-CH2)m-, optionally terminated by a group chosen from H, -OH, and an O-C1 to C3 alkyl, m being chosen from 1 to 500, in particular from 4 to 500, notably from 30 to 60.
  • the average molar mass of PEG can in particular be indicated after the term “PEG” after the name, for example PEG-1450 (1,450 g- mol'1 ).
  • the average molar mass of PLA can in particular be indicated after the term "PLA" after the name, for example PLA-1036 (1036 g.mol' 1 ).
  • p, q and r are in particular such that the molar percentage of lactic acid in the PLGA is approximately 20%.
  • p, q and r are such that the PLGA consists of 12 units of lactic acid and 3 units of glycolic acid.
  • HPLC-MS The analysis and purification by HPLC-MS were notably carried out using a Waters system (binary gradient module 2525, online degasser, sample manager 2767, photodiode array detector 2996) with a system binary for the solvent gradient.
  • the eluent was in particular a gradient of (99.9% water / 0.1% HCOOH) and (99.9% MeCN / 0.1% HCOOH) or (99.9% water / 0.1% HCOOH) and (99.9% MeOH / 0.1% HCOOH).
  • Each compound was loaded onto a Zorbax SB-C18 100-4.6mm (5mm) column equilibrated with H2O/MeCN or H2O/MeOH 95:5.
  • This system was, for example, coupled to a Waters Micromass ZQ system with a ZQ2000 quadrupole analyzer. Ionization was carried out by electrospray and other parameters were as follows: source temperature 120 °C, cone voltage 20 V, and continuous injection of the sample at a flow rate of 0.3 mL per min. Mass spectra were recorded in positive and negative ion mode in the range m/z 100–2000 and processed with Mass Lynx 4.0 software.
  • the infrared spectra were recorded on a Spectrum Two equipped with a U ATR Two (Perkin Elmer), Diamond/ZnSe (1 reflection).
  • the NMR analyzes were notably carried out on a Bruker Avance 400 Ultrashield spectrometer.
  • the 1H-NMR and 13C spectra were recorded at room temperature at 400 MHz and 100 MHz respectively, the samples were dissolved in DMSO-d6 or CDCL at a concentration of approximately 5 mM.
  • the DMSO singlet signal was set at 2.50 ppm. Chemical shifts are given in ppm and coupling constants in Hz. The spectral data are consistent with the associated structures.
  • N-methyl-5-fluoro isatoic anhydride (195 g/mol, 0.195 g, 1 mmol, 1 equiv.) obtained as described in Gupta et al. (ACS Med. Chem. Lett. 2014, 5, 1, 94-97), 2-amino-l,3-benzenediol (125 g/mol, 0.187 g, 1.5 mmol, 1.5 equiv.) and commercially available 5-(2-methyl-1,3-thiazol-4-yl)-2-thiophenecarbaldehyde (209 g/mol, 0.209 g, 1 mmol, 1 equiv.) were dissolved in acetic acid ( 2 mL).
  • Compound 2 according to the invention can be obtained in a similar manner by following a synthesis protocol as described previously for compound 1 by following the synthesis scheme above.
  • the compounds were tested either on A549 cells (human lung epithelial cells) or on HeLa cells (human uterine cancer cells), against Shiga toxins (Stx-1 and/or Stx-2), against ricin, or against shelters it.
  • Human cells are cultured at 37°C in an atmosphere containing 5% CO2 in 150 cm 2 culture flasks in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) medium containing 100 U/mL penicillin and 100 g/mL streptomycin .
  • the cells are seeded at a density of 50,000 cells per well in 96-well plates with Cytostar-T solid scintillation bottom.
  • the cells (100 pL in complete DMEM: DMEM + 10% fetal calf serum, FCS) are pre -incubated or not with the inhibitors (50 pL; different concentrations, pre- incubation for 3 h).
  • Compound 1, according to the invention was prepared in accordance with the protocol presented previously.
  • Compounds A to J, outside the invention were prepared in accordance with the protocols presented in international applications W02014/060586 Al or W02020/109510 AL The structure of these compounds is indicated in the following table:
  • RK13 (ATCC CCL-37) (for myxomatosis virus) and HeLa (ATCC-CCL2) (for vaccinia virus) cells are cultured in DMEM without phenol red (DI 145; Sigma Aldrich) supplemented with 10 % SVE (Eurobio-Scientific), 1 mM sodium pyruvate (S8636; Sigma Aldrich), L-Glutamine (G7513; Sigma Aldrich) and Penicillin-Streptomycin solution (P0781; Sigma Aldrich).
  • the cells are seeded between 6000 and 8000 cells per well in a Corning Cellbind 96-well plate in complete DMEM medium. 24 h after seeding, the cells are treated with compounds 1 and A to J for a series of concentrations. The cells are then incubated at 37°C and 5% CO2 for 3 to 6 days.
  • the cells are labeled with Image-iT DEAD Green Viability Stain (Invitrogen 110291) and with MitoTracker Orange (Invitrogen M7510) 30 minutes at 37°C.
  • Cells were fixed with 4% formalin (Sigma) for 10 min, washed with PBS and incubated with PBS Hoechst 33342 (1 mg/mL).
  • CC50 50% cytotoxic concentration
  • Antiviral activity is measured using ANCHOR technology (NeoVirTech).
  • the cells are cultured under the same conditions as for the cytotoxicity test, treated at 8 concentrations in triplicate and infected with the myxomatosis-derived virus MYXV-T1-ANCHOR (MOI 0.5) and the vaccinia-derived virus VacV. -ANCHOR (ME 0.1).
  • the cells are fixed under the same conditions as previously described, and incubated with Hoechst 33342 PBS (1 mg/mL).
  • Plates are imaged with a Thermo Scientific Cellnsight CX7 HCS microscope.
  • a compartmental analysis coupled with a Spot Detector algorithm is used to detect and quantify the infection rate (number of fluorescent cells out of total number of cells) and the replication rate (intensity of ANCHOR spots).
  • results are obtained after measurement and automated analysis of a minimum of 2000 cells per well per replicate.
  • the results are extracted, normalized to infected/untreated conditions and expressed as the average of three independent wells +/- SD.
  • the ECso was determined for each compound.
  • the pharmacokinetic activity of the compound Retro-2.2 was compared to that of compound 1 according to the invention following subcutaneous administration in female BALB/C mice at a concentration of 33 mg/kg in a vehicle solution comprising a Lipiodol ⁇ /castor oil mixture in mass proportions 30%/70% (formulation B) or in a vehicle solution as described in the text comprising a DMSO/Lipiodol ⁇ /castor oil mixture in mass proportions 3%/29%/68%
  • the ECso of Retro-2.2 against ricin toxin, abrin or Stx is approximately 20 or 30 nM.
  • the ECso is around or less than 20 nM. Therefore, the simulation suggests that twice-daily subcutaneous injections of Retro-2.2 or a composition according to the invention should make it possible to achieve concentrations well ten times higher than their respective ECso against these toxins during a period of time. good part of the day. This criterion must be achieved to validate a molecule in early drug development studies.
  • Retro-2.2 analogues and compounds of formula (I) in a second vehicle solution (DMSO/glycerol triacetate/castor oil)
  • the pharmacokinetic activity (concentration of the molecule in plasma (pM) as a function of time (h)) of the enantiomer (S) of compound 1 according to the invention was tested.
  • the compound was administered to female BALB/c mice subcutaneously at a concentration of 33 mg/kg in a mixture of DMSO 3%/glycerol triacetate 11%/castor oil 86%.
  • the plasma concentration of the compound was measured by liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS-MS).
  • the calculated pharmacokinetic parameters are provided in the table below [Table 4]
  • compound 1 as well as other analogues of the Retro-2.2 molecule mentioned previously were incubated with liver microsomes from female CD1 mice in the presence or absence of NADPH.
  • the CYP450 cofactor at a final concentration of 5 pM for 45 minutes at 37°C and 300 rpm (Thermomixer).
  • Samples were taken at different times and added to cold acetonitrile to stop the reaction and precipitate the proteins. The samples were centrifuged, the supernatant diluted and analyzed by LC-MS-MS in the presence of a known concentration of Retro-2.1 as internal standard.
  • compound 1 presents a slowed metabolism compared to the other compounds, in particular in the presence of mouse liver microsomes.
  • the compounds are stable in the absence of NADPH (results not shown).
  • Compound 1 was identified in vivo in different organs of mice treated subcutaneously at 33 mg/kg as described previously, namely in the brain, in the lungs, in the liver, in the small intestine, in the colon, in the kidneys and in the plasma. Two hours after the administration of compound 1, the concentrations of compound 1 measured by LC-MS-MS were as follows:
  • Plasma 0.7 pM
  • This compound also called a metabolite, was also identified in vivo in the kidney, liver, colon, lungs and brain of female BALB/c mice after subcutaneous treatment with compound 1 in a concentration of 33 mg/ kg in a solution of DMSO/ethyl esters of fatty acids of popsicle oil/castor oil as described in Example III. Two hours after treatment, the following concentrations of compound 1 were measured by LC-MS-MS in the different organs:
  • Kidney 0.5pM

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

La présente invention concerne un composé de formule générale (I) ainsi que les formes stéréoisomères, les mélanges de formes stéréoisomères ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables ainsi que son utilisation pour la prévention et/ou le traitement des désordres induits par les toxines à mode d'action intracellulaire utilisant le transport rétrograde, ou par les virus ou bactéries utilisant le transport rétrograde et/ou dépendant de la syntaxine 5 pour infecter les cellules.

Description

Description
Titre : DIHYDROQUINAZOLINONES AYANT UNE ACTIVITÉ PROTECTRICE AMÉLIORÉE VIS-À-VIS DE TOXINES AU MODE D'ACTION INTRACELLULAIRE, DE VIRUS ET DE BACTÉRIES INTRACELLULAIRES
La présente invention concerne une nouvelle famille de composés du type 2,3- dihydroquinazolin-4(lH)-one et leur utilisation en tant qu’inhibiteurs des effets toxiques des toxines à activité intracellulaire, comme par exemple la ricine, l’abrine et les toxines de Shiga, utilisant le transport rétrograde pour intoxiquer les cellules, ou des virus ou bactéries utilisant le transport rétrograde et/ou dépendant de la syntaxine 5 pour infecter les cellules, notamment les virus ou bactéries entrant dans les cellules par endocytose, ou des parasites intracellulaires.
Domaine technique
Les toxines à activité intracellulaire qui utilisent le transport rétrograde représentent un risque majeur de santé publique et sont associées pour certaines à plus d'un million de décès chaque année dans le monde. Ces toxines sont notamment la ricine (produite dans les graines de la plante Ricinus communis), l’abrine (produite dans les graines de la plante Abrus precatorius), la toxine de Shiga et les toxines Shiga- like (Stxs) produites par Shigella dysenteriae (Stx) et E. coli (Stxl et Stx2), la toxine pertussique (Bordelella pertussis agent de la coqueluche), la cytotoxine subtilase et l'entérotoxine thermolabile (E. coli).
La ricine est une glycoprotéine de 66 kDa composée de deux chaînes polypeptidiques reliées par un pont disulfure. La chaîne B (RTB, lectine de 262 résidus) permet à la toxine de se lier aux glycolipides et glycoprotéines des membranes cellulaires et d'assurer son entrée dans la cellule. La chaîne A (RTA, 267 acides aminés) assure la fonction enzymatique N- glycosidase de la ricine, catalyse l'élimination de l'adénine 4324 de l'ARN 28S des cellules ciblées et provoque l'arrêt de la synthèse des protéines.
L’abrine est une toxalbumine extrêmement toxique présente dans les graines (EAbrus precatorius de structure et de mécanisme d’action similaire à ceux de la ricine.
Les toxines de Shiga incluent la toxine de Shiga (Stx) produite par Shigella dysenteriae et les toxines Shiga- like 1 (Stxl) et 2 (Stx2) produites par des souches entérohémorragiques d'E. coli. Les toxines Stx et Stxl sont à 99% identiques alors que les Stxl et Stx2 partagent seulement 56% d'identité de leur séquence en acides aminés. La sous-unité A de la toxine (StxA) porte la même activité enzymatique que la ricine et cible de manière identique l'ARN 28S. La sous-unité B (StxB), qui se présente sous forme pentamérique, permet la liaison de la toxine avec la cellule via son interaction avec le globo-triaosylcéramide Gb3, ce qui assure son internalisation et son routage intracellulaire.
Après liaison à ses récepteurs membranaires, la ricine est internalisée dans ces cellules par de multiples voies d’endocytose pour atteindre le réseau trans-golgien où elle est acheminée vers le réticulum endoplasmique (RE) par transport rétrograde (Johannes, L. et al., Cell 2008, 135, 1175-87). L’abrine agit en pénétrant dans la cellule en se liant aux chaînes glucidiques des glycoprotéines et glycolipides à la surface cellulaire avant d’être internalisée à l’intérieur de celle-ci. Ce processus, peu connu, est similaire en termes de structure et de mécanisme d’action à celui de la ricine. Les toxines de Shiga sont internalisées quant à elles par une voie d'endocytose unique et atteignent également l'appareil de Golgi puis le réticulum endoplasmique (ibid.). Les toxines sont alors partiellement dépliées et la chaîne/sous-unité A est transloquée dans le cytosol (Lord, J.M. et al., Biochemical Society Transactions 2003, 31, 1260). L'étape ultime de l'action de ces toxines a donc lieu dans le cytoplasme des cellules, les toxines se fixent sur les ribosomes avec une grande efficacité et clivent l’adénine 4324 de l’ARN 28S de la sous-unité 60S du ribosome. Cette dépurination de l’ARN 28S provoque l’arrêt de la synthèse des protéines et conduit à la mort cellulaire.
Pour contrer la menace posée par ces toxines, plusieurs types d’antitoxines ont été développés : anticorps neutralisants, inhibiteurs de l’activité enzymatique (petites molécules, analogues de substrat), mimes solubles de récepteurs et composés chimiques agissant sur les cellules ciblées par la toxine.
Ces dernières années, la recherche de nouvelles molécules visant à bloquer le routage intracellulaire des toxines à activité intracellulaire s'est accélérée. Le principal avantage de ce type de molécules est leur activité de type large spectre puisque ces molécules peuvent protéger efficacement les cellules contre les différentes toxines qui utilisent la voie rétrograde.
Les poxvirus sont des virus à ADN apparentés à la famille Poxviridae, infectants pour les animaux et responsables de maladies telles que la monkeypox, ou « variole simienne », la variole, la vaccine, l’infection à cowpox, ou « variole de la vache », l’infection à camelpox affectant les camélidés (chamaux, dromadaires, lamas) ou encore le molluscum contagiosum. Les poxviroses à réservoir animal, en particulier le monkeypox et le camelpox, sont des maladies émergentes avec un risque de diffusion du fait de l’augmentation des transports internationaux, de la mode des animaux de compagnie, notamment des animaux exotiques, de la proximité des hommes avec leurs animaux de trait, et de l’absence de protection vaccinale antivariolique. Il existe une molécule antivariolique sur le marché, le ST246-tecovirimat ou TPOXX®. Cependant, la monothérapie avec cette molécule génère des souches résistantes de virus et il existe un concensus sur la nécessité de disposer de plusieurs médicaments contre les poxvirus, notamment dans une approche OneHealth.
H demeure donc un besoin fort de proposer des traitements efficaces contre cette famille de virus.
La présente invention cherche précisément à proposer des molécules permettant de protéger les cellules contre les toxines à activité intracellulaire, contre les virus ou bactéries et les parasites intracellulaires.
Selon un premier mode de réalisation, la présente invention concerne un composé de formule générale (I) :
Figure imgf000005_0001
- p est égal à 1, 2 ou 3 ;
- R1 représente à chaque occurrence, de façon indépendante, un atome d’hydrogène, un atome d’halogène, un radical alcoxy de 1 à 3 atomes de carbone, notamment un groupe méthoxy, -NO2, ou -NH2 ;
- R2 et R3 représentent indépendamment l’un de l’autre un groupe choisi parmi -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR4, -NH2, -NHR5, -NR7R8, -SO2-NH2, -SO2-NH-R6, SO3H, ou un atome d’halogène ;
- R4, R5 et R6 représentent indépendamment les uns des autres un groupe de formule (II) - L-(X)i-(PEG)-(Y)j-Z, où :
- i et j représentent indépendamment l’un de l’autre 0 ou 1 ; - L représente -C(=0)- ou -C(=O)-(CH2)k-C(=O)-, avec k étant égal à 1, 2 ou 3, en particulier 2 ;
- R7 et R8 représentent, indépendamment l’un de l’autre, un alkyle en Ci à C3, linéaire ou ramifié ;
- X et Y représentent indépendamment l’un de l’autre un poly(acide lactique) ou un poly(acide lactique-co-acide glycolique) ;
- PEG représente un poly(éthylène glycol) ;
- Z représente un groupe choisi parmi H, un alkyle en Ci à C3, -OH, un O-alkyle en Ci à C3, ou -L-Re, où L est défini tel que précédemment et Re est un résidu de formule (I) relié au dit groupe -L-(X)i-(PEG)-(Y)j- défini précédemment par l’intermédiaire de son groupe R2 ou R3, ledit groupe R2 ou R3 étant -OH, -NH2 ou -SO2-NH2;
- R9 représente -CH3 ou -CH2-OH, en particulier représente CH3. ainsi que les formes stéréoisomères, les mélanges de formes stéréoisomères ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
Selon un autre mode de réalisation, la présente invention concerne un composé de formule générale (!’) :
Figure imgf000006_0001
(D où
- p est égal à 1, 2 ou 3 ;
- R1 représente à chaque occurrence, de façon indépendante, un atome d’hydrogène, un atome d’halogène, un radical alcoxy de 1 à 3 atomes de carbone, notamment un groupe méthoxy, -NO2, ou -NH2 ;
- R2 et R3 représentent indépendamment l’un de l’autre un groupe choisi parmi -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR4, -NH2, -NHR5, -NR7R8, -SO2-NH2, -SO2-NH-R6, SO3H, ou un atome d’halogène; - R4, R5 et R6 représentent indépendamment les uns des autres un groupe de formule (II) - L-(X)i-(PEG)-(Y)j-Z, où :
- i et j représentent indépendamment l’un de l’autre 0 ou 1 ;
- L représente -C(=O)- ou -C(=O)-(CÜ2)k-C(=O)-, avec k étant égal à 1, 2 ou 3, en particulier 2 ;
- R7 et R8 représentent, indépendamment l’un de l’autre, un alkyle en Ci à C3, linéaire ou ramifié ;
- X et Y représentent indépendamment l’un de l’autre un poly(acide lactique) ou un poly(acide lactique-co-acide glycolique) ;
- PEG représente un poly(éthylène glycol) ;
- Z représente un groupe choisi parmi H, un alkyle en Ci à C3, -OH, un O-alkyle en Ci à C3, ou -L-Re, où L est défini tel que précédemment et Re est un résidu de formule (I) relié au dit groupe -L-(X)i-(PEG)-(Y)j- défini précédemment par l’intermédiaire de son groupe R2 ou R3, ledit groupe R2 ou R3 étant -OH, -NH2 ou -SO2-NH2; ainsi que les formes stéréoisomères, les mélanges de formes stéréoisomères ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
De manière particulièrement surprenante, cette nouvelle famille de molécules présente une activité biologique aussi efficace voire supérieure aux composés de la famille de molécules décrite dans la demande internationale W02020/109510 Al. Très proches structurellement, ces molécules diffèrent de celles de la présente invention par la présence d’une ou deux substitutions en ortho et en méta dans le cycle phényle.
En outre, les molécules de la présente invention présentent une meilleure solubilité calculée (voir la colonne « log S » dans le Tableau 3 ci-après) qui se traduit pour certaines molécules uniquement, de manière inattendue, par une meilleure biodisponibilité par rapport aux molécules connues dans l’art, et notamment par rapport aux composés A à D présentés dans les Tableaux 2 et 3 ci-après. Ces propriétés sont notamment accrues lorsque les molécules sont administrées dans une solution véhicule telle que décrite ci-après. En effet, la mauvaise solubilité du composé Rétro-2.1 et de ses analogues dans les véhicules d’administration « classiques » pose un grand problème aux formulateurs, en particulier lorsqu’il s’agit de produire des compositions pharmaceutiques à grande échelle. Selon un second aspect, l’invention concerne un composé de formule générale (I) tel que décrit précédemment, pour son utilisation pour la prévention et/ou le traitement des désordres induits par les toxines à mode d’action intracellulaire utilisant le transport rétrograde, ou par les virus ou bactéries utilisant le transport rétrograde et/ou dépendant de la syntaxine 5 pour infecter les cellules, notamment les virus ou bactéries entrant dans les cellules par endocytose, ou par les parasites intracellulaires.
L’invention concerne également une composition pharmaceutique ou médicament comprenant au moins un composé de formule générale (I) tel que défini précédemment en tant que principe actif, et un véhicule pharmaceutiquement acceptable, ladite composition pharmaceutique ou ledit médicament étant notamment adapté à une administration par les voies aérienne, orale, parentérale, locale, intramusculaire ou sous cutanée.
Brève description des dessins
[Fig 1] représente la concentration plasmatique (en nM) du composé 1 (cercle blanc), du composé B (carré blanc), du composé C (triangle blanc) et du composé E (losange blanc) en fonction du temps (en heures) administrés chez la souris femelle BALB/c par voie orale à une concentration de 33 mg/kg dans un mélange Lipiodol ©/huile de ricin dans des proportions massiques 30%/70%.
[Fig 2] représente la concentration plasmatique (en nM) du composé 1 (cercle blanc), du composé B (carré blanc), du composé C (triangle blanc) et du composé E (losange blanc) en fonction du temps (en heures) administrés chez la souris femelle BALB/c par voie sous- cutanée à une concentration de 33 mg/kg dans un mélange Lipiodol ©/huile de ricin dans des proportions massiques 30%/70%.
[Fig 3] représente la concentration plasmatique (en nM) du composé 1 dans la formulation B (cercle blanc), du composé 1 dans la formulation C (cercle noir), du composé B dans la formulation B (carré blanc) et du composé B dans la formulation C (carré noir) en fonction du temps (en heures) administrés par voie sous-cutanée chez la souris femelle BALB/C à une concentration de 33 mg/kg.
[Fig 4] représente une simulation de la concentration plasmatique (en nM) du composé B (graphique de gauche) ou du composé 1 (graphique de droite) en fonction du temps (en heures) administrés deux fois par jour par voie sous-cutanée chez la souris femelle BALB/c à une concentration de 33 mg/kg dans une formulation C. [Fig 5] représente le pourcentage résiduel (en %) de la concentration plasmique du composé 1 (courbe 1), du composé A (courbe 2), du composé B (courbe 5), du composé C (courbe 4) et du composé E (courbe 3) en fonction du temps (en heures) incubés pendant 45 minutes avec des microsomes hépatiques murins (A) ou humains (B) en présence de NADPH en fonction du temps (en minutes).
Dans la figure 5A, les courbes à 30 heures sont, de haut à bas, celles du composé 1, du composé A, du composé E, du composé C et du composé B.
Dans la figure 5B, les courbes à 30 heures sont, de haut en bas, celles du composé E, du composé 1, du composé B et du composé C.
[Fig 6] représente une simulation de la concentration plasmatique (en pM) du (S)-composé 1 en fonction du temps (en heures) administrés deux fois par jour par voie sous-cutanée (graphique du haut) ou une fois par jour par voie sous-cutanée (graphique du bas) chez la souris femelle BALB/c à une concentration de 33 mg/kg.
Exposé de l’invention
Dans le cadre de ses recherches sur des composés bloquant le transport rétrograde et plus particulièrement d’études sur des composés plus avantageux que ceux des travaux précités, la Demanderesse a identifié une nouvelle famille de composés dérivés de 2,3- dihydroquinazolin-4(lH)-one, portant un phényle spécifiquement substitué en positions di- ortho (ortho et ortho), qui présentent de manière inattendue une activité biologique supérieure à celle de Retro-2.2, la plus active des molécules déjà décrites, et donc un intérêt marqué pour la prévention et/ou le traitement des intoxications à au moins une toxine à mode d’action intracellulaire utilisant le transport rétrograde pour infecter les cellules eucaryotes de mammifères, mais également pour la prévention et/ou le traitement des infections par des virus ou bactéries utilisant le transport rétrograde et/ou dépendant de la syntaxine 5 pour infecter les cellules, notamment les virus ou bactéries entrant dans les cellules par endocytose, ou à des parasites intracellulaires.
Ainsi, la présente invention se rapporte à un composé de formule générale (I) :
Figure imgf000010_0001
où
- p est égal à 1, 2 ou 3 ;
- R1 représente à chaque occurrence, de façon indépendante, un atome d’hydrogène, un atome d’halogène, un radical alcoxy de 1 à 3 atomes de carbone, notamment un groupe méthoxy, -NO2, ou -NH2 ;
- R2 et R3 représentent indépendamment l’un de l’autre un groupe choisi parmi -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR4, -NH2, NHR5, -NR7R8, -SO2-NH2, -SO2-NH-R6, SO3H, ou un atome d’halogène;
- R4, R5 et R6 représentent indépendamment les uns des autres un groupe de formule (II) - L-(X)i-(PEG)-(Y)j-Z, où :
- i et j représentent indépendamment l’un de l’autre 0 ou 1 ;
- L représente -C(=O)- ou -C(=O)-(CH2)k-C(=O)-, avec k étant égal à 1, 2 ou 3, en particulier 2 ;
- R7 et R8 représentent, indépendamment l’un de l’autre, un alkyle en Ci à C3, linéaire ou ramifié ;
- X et Y représentent indépendamment l’un de l’autre un poly(acide lactique) ou un poly(acide lactique-co-acide glycolique) ;
- PEG représente un poly(éthylène glycol) ;
- Z représente un groupe choisi parmi H, un alkyle en Ci à C3, -OH, un O-alkyle en Ci à C3, ou -L-Re, où L est défini tel que précédemment et Re est un résidu de formule (I) relié au dit groupe -L-(X)i-(PEG)-(Y)j- défini précédemment par l’intermédiaire de son groupe R2 ou R3, ledit groupe R2 ou R3 étant -OH, -NH2 ou -SO2-NH2;
- R9 représente -CH3 ou -CH2-OH, en particulier représente CH3. ainsi que les formes stéréoisomères, les mélanges de formes stéréoisomères ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
Selon un mode de réalisation, R9 représente - CH3. Selon un mode de réalisation, p est égal à 1.
Selon un mode de réalisation, R1 représente un atome d’halogène, en particulier un atome de fluor.
Selon un mode de réalisation, l’invention concerne un composé de formule générale (I) dans laquelle R2 et R3 représentent indépendamment l’un de l’autre un groupe choisi parmi -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR4, -NH2, -NHR5, -NR7R8, -SO2-NH2, -SO2-NH-R6, SO3H, en particulier R3, représente un groupe -OH, R4, R5, R6, R7 et R8 étant définis tel que précédemment.
Selon un mode de réalisation, le composé de formule générale (I) selon l’invention est de formule (la) suivante :
Figure imgf000011_0001
où R2 est tel que défini précédemment.
Selon un mode de réalisation particulier, le composé de formule générale (I) selon l’invention est de formule générale (Ib) suivante :
Figure imgf000011_0002
dans laquelle R2 et R3 sont choisis parmi les combinaisons suivantes : R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe -NH2, R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe -SO2NH2, R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe -SH, R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe -SO3H, R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe -SMe, R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe - OMe, R2 est un groupe -OH et R3 est un atome d’halogène, et en particulier est un atome de fluor, R2 est un groupe -NH2 et R3 est un groupe -NH2, R2 est un groupe - NH2 et R3 est un groupe -SO2NH2, R2 est un groupe -NH2 et R3 est un groupe -SH, R2 est un groupe -NH2 et R3 est un groupe -SO3H, R2 est un groupe - NH2 et R3 est un groupe -SMe, R2 est un groupe - NH2 et R3 est un groupe -OMe, R2 est un groupe - NH2 et R3 est un atome d’halogène, et en particulier est un atome de fluor, R2 est un groupe -SH et R3 est un groupe -SH, R2 est un groupe -SH et R3 est un groupe -SO2NH2, R2 est un groupe -SH et R3 est un groupe -SO3H, R2 est un groupe -SH et R3 est un groupe -SMe, R2 est un groupe -SH et R3 est un groupe - OMe, R2 est un groupe -SH et R3 est un atome d’halogène et en particulier est un atome de fluor, R2 est un groupe -OMe et R3 est un groupe -OMe, R2 est un groupe -OMe et R3 est un groupe -SMe, R2 est un groupe -OMe et R3 est un atome d’halogène, et en particulier est un atome de fluor, R2 est un groupe -SMe et R3 est un groupe -SMe, R2 est un groupe -SMe et R3 est un atome d’halogène, et en particulier est un atome de fluor, et R2 est un atome d’halogène et en particulier est un atome de fluor et R3 est atome d’halogène et en particulier est un atome de fluor, où Me est un méthyle.
Selon un mode de réalisation particulier, le composé a la formule suivante :
Figure imgf000012_0001
Dans la demande, ce composé portera le nom « composé 1 ».
Selon un mode de réalisation particulier, le composé a la formule suivante :
Figure imgf000012_0002
Ce composé est un métabolite du composé 1. Par « métabolite », on entend une forme transformée d’un composé, suite à l’administration in vivo ou in vitro dudit composé. Par exemple, cette transformation peut consister en une hydroxylation du composé. En ce qui concerne le groupe de formule (II) -L-(X)i-(PEG)-(Y)j-Z, L représente notamment -C(=O)- lorsque R2 ou R3 représente -NHR5 ou -SO2-NH-R6, et L représente notamment- C(=O)-(CH2)k-C(=O)- lorsque R2 ou R3 représente -OR4.
Selon un mode de réalisation, le groupe de formule (II) -L-(X)i-(PEG)-(Y)j-Z est choisi parmi -L-PEG, -L-PEG-PLA, et -L-PLGA-PEG-PLGA, avec L représentant notamment - C(=O)- lorsque R2 ou R3 représente -NHR5 ou -SO2-NH-R6, ou notamment-C(=O)-(CH2)k- C(=O)- lorsque R2 ou R3 représente -OR4.
Selon un mode de réalisation, le groupe de formule (II) -L-(X)i-(PEG)-(Y)j-Z est choisi parmi -C(=O)-(CH2-CH2-O)m-CH3, notamment lorsque R2 ou R3 représente -NHR5 ou -SO2- NH-R6, et -C(=O)-(CH2)k-C(=O)-(O-CH2-CH2)m-OCH3, notamment lorsque R2 ou R3 représente -OR4, m étant compris de 1 à 500, m étant en particulier compris de 30 à 60, plus particulièrement de 45.
Selon un mode de réalisation, le composé de formule générale (I) est de formule (III) suivante :
Figure imgf000013_0001
les groupes mentionnés dans la formule (III) étant tels que définis plus haut.
Selon un mode de réalisation, le composé de formule générale (I) selon l’invention est choisi parmi :
Figure imgf000014_0001
et (Composé l)-PLGA1036-PEG1450-PLGA1036-(Composé 1) ou
(Composé 1)-C(=0)-(CH2)2-C(=0)-PLGA1036-PEG1450-PLGA1036-C(=0)-(CH2)2- C(=O)-(Composé 1), en particulier de formule suivante :
Figure imgf000014_0002
Les composés de formule (I) peuvent se trouver sous la forme d’un énantiomère R, sous la forme d’un énantiomère S, ou sous la forme d’un mélange racémique. Selon un mode de réalisation particulier, les composés de formule (I) peuvent se trouver sous la forme d’un énantiomère S.
Certains composés de formule générale (I) constituent des prodrogues. A titre illustratif peuvent être mentionnés les composés de formule générale (I) pour lesquels R4, R5 et R6 représentent indépendamment les uns des autres un groupe de formule (II) -L-(X)i-(PEG)- (Y)j-Z, où :
- i et j représentent indépendamment l’un de l’autre 0 ou 1 ;
- L représente -C(=O)- ou -C(=O)-(CH2)k-C(=O)-, avec k étant égal à 1, 2 ou 3, en particulier 2.
D’autres composés de formule générale (I) peuvent être couplés avec des molécules données afin de former des prodrogues.
Les prodrogues permettent en particulier d’améliorer la biodisponibilité de composés, et notamment d’augmenter leur sélectivité pour une cible visée en augmentant leur capacité à passer les membranes cellulaires.
Par « couplage », on entend la création d’une liaison chimique entre des composés de formule (I) et d’autres molécules. Ces liaisons peuvent être des liaisons covalentes, des liaisons ioniques ou iono-covalentes, des liaisons métalliques, des liaisons hydrogène ou des forces de Van der Waals.
Selon un mode de réalisation particulier, certains composés de formule générale (I) peuvent être couplés avec des molécules hydrophiles.
Selon un mode de réalisation particulier, certains composés de formule générale (I) peuvent être couplés avec des molécules amphiphiles.
Selon un mode de réalisation particulier, certains composés de formule générale (I) peuvent être couplés avec des molécules lipophiles.
En particulier, certains composés de formule générale (I) peuvent être couplés avec des acides gras. Des acides gras convenant à un tel couplage sont des acides gras saturés et des acides gras insaturés. Peuvent notamment être cités les acides gras saturés suivants : l’acide caprylique (8 :O), l’acide caprique (10 :0), l’acide laurique (12 :0), l’acide myristique (14 :0), l’acide palmitique (16 :0), l’acide stéarique (18 :0), l’acide arachidique (20 :0), l’acide béhénique (22 :0), l’acide lignocérique (24 :0) et l’acide céro tique (26 :0).
Peuvent également être cités les acides gras insaturés suivants : l’acide myristoléique (14 : 1), l’acide palmitoléique(16 :1), l’acide sapiénique (16 :1), l’acide oléique (18 :1), l’acide élaïdique (18 :1), l’acide trans-vaccénique (18 :1), l’acide linoléique (18 :2), l’acide linolélaïdique (18 :2), l’acide a-linolénique (18 :3), l’acide y-linolénique (18 :3), l’acide dihomo-y-linolénique (20 :3), l’acide arachidonique (20 :4), l’acide eicosapentaénoïque (20 :5), l’acide clupanodonique (22 :5) et l’acide docosahexaénoïque (22 :6).
Selon un autre aspect, l’invention concerne une composition pharmaceutique ou un médicament comprenant au moins un composé de formule générale (I) tel que défini précédemment, en tant que principe actif, et un véhicule pharmaceutiquement acceptable, ladite composition pharmaceutique ou ledit médicament étant notamment adapté à une administration par les voies aérienne, orale, parentérale, locale, intramusculaire ou sous- cutanée.
Il est à noter que tous les modes de réalisation mentionnés ci-dessus à propos du composé de formule générale (I) s’appliquent également ici, seuls ou en combinaison.
Selon un autre aspect, l’invention concerne un composé de formule générale (I) tel que défini précédemment, pour son utilisation pour la prévention et/ou le traitement des désordres induits par les toxines à mode d’action intracellulaire utilisant le transport rétrograde, ou par les virus ou bactéries utilisant le transport rétrograde et/ou dépendant de la syntaxine 5 pour infecter les cellules, notamment les virus ou bactéries entrant dans les cellules par endocytose, ou par des parasites intracellulaires.
Il est à noter que tous les modes de réalisation mentionnés ci-dessus à propos du composé de formule générale (I) s’appliquent également ici, seuls ou en combinaison.
Selon un mode de réalisation, l’invention concerne un composé de formule générale (I) tel que défini précédemment, pour son utilisation pour la prévention et/ou le traitement des désordres induits par les toxines à mode d’action intracellulaire utilisant le transport rétrograde. Selon un mode de réalisation particulier, lesdites toxines à mode d’action intracellulaire utilisant le transport rétrograde sont choisies parmi la ricine, l’abrine, la toxine de Shiga et les toxines Shiga- like (Stxs) produites par Shigella dysenteriae (Stx) et E. coli (Stxl et Stx2, Stx, Stx la, Stx2a, Stx2c, Stx2d, Stx2e tels que décrites par exemple par Melton-Celsa, Microbiol Spectr. 2014 ; 2(2)), la toxine pertussique (Bordetella pertussis agent de la coqueluche), la cytotoxine subtilase et l'entérotoxine thermolabile (E. coli).
Selon un mode de réalisation, l’invention concerne un composé de formule générale (I) tel que défini précédemment, pour son utilisation pour la prévention et/ou le traitement des désordres induits par les virus ou bactéries utilisant le transport rétrograde et/ou dépendant de la syntaxine 5 pour infecter les cellules, notamment les virus ou bactéries entrant dans les cellules par endocytose, ou les parasites intracellulaires, tels que les parasites de la leishmaniose.
Selon un mode de réalisation particulier, les virus sont les virus pox, notamment le virus de la variole, le virus monkeypox, le virus de la vaccine et les leporipoxvirus, en particulier le virus de la myxomatose, les virus adéno-associés, en particulier de sérotype 2, les polyomavirus, notamment le polyomavirus JC et le polyomavirus BK, les papillomavirus, les filovirus, notamment les virus Ebola et le virus Marburg, les entérovirus, notamment l’entérovirus 71, les herpesvirus, notamment le virus Herpes simplex de type 2 et le cytomégalovirus (hCMV), les virus du genre Arenavirus, notamment le virus de la chorioméningite lymphocytaire, et les pneumovirus, notamment le virus respiratoire syncytial.
Selon un mode de réalisation particulier, les bactéries sont des bactéries de l'ordre des Chlamydiales, en particulier du genre Chlamydia, telles que Chlamydia trachomatis, Chlamydophila pneumoniae, Chlamydophila psyttaci, ou Symkania, comme Symkania negevensis.
Selon un mode de réalisation particulier, les désordres induits par les parasites intracellulaires sont la leishmaniose, notamment induite par des trypanosomes du genre Leishmania, en particulier Leishmania infantum, Leishmania donovani ou Leishmania infantum/donovani hybrid.
La présente invention se rapporte également à une méthode de prévention et/ou de traitement des désordres induits par les toxines à activité intracellulaire utilisant le transport rétrograde et comprenant l’administration à un individu en ayant besoin d’une quantité efficace d’au moins un composé de formule générale (I) tel que défini précédemment.
Enfin, la présente invention concerne l’utilisation d’au moins un composé de formule générale (I) tel que défini précédemment pour la fabrication d’un médicament pour le traitement des désordres induits par les toxines à activité intracellulaire utilisant le transport rétrograde.
H est à noter que tous les modes de réalisation mentionnés ci-dessus à propos du composé de formule générale (I) s’appliquent également ici, seuls ou en combinaison.
Selon un mode de réalisation particulier, un composé de formule générale (I) tel que défini précédemment peut être utile dans le traitement de maladies humaines telle que les intoxications aigues par les toxines ricine ou abrine ; dans la prévention de complications liées au syndrome hémolytique urémique ; dans le traitement d’infections par les poxvirus, notamment la variole, les infections au monkeypox, au cowpox, au camelpox, ou à la vaccine ; dans le traitement d’infections aux entérovirus.
Selon un mode de réalisation particulier, un composé de formule générale (I) tel que défini précédemment peut être utile dans le traitement de maladies animales telle que le traitement de la myxomatose chez le lapin, de la monkeypox chez les singes ou de la camelpox chez les chameaux.
Synthèse
Les composés de la présente invention peuvent être préparés selon des méthodes bien connues de l’homme du métier, y compris, mais sans s'y limiter, celles qui sont décrites ci- dessous, ou par des modifications de ces méthodes en appliquant des techniques standard connues de l’homme du métier de la synthèse organique. Les modifications et les substitutions appropriées seront bien connues, facilement apparentes, ou facilement accessibles de la littérature scientifique à l’homme du métier. En particulier, on peut trouver de telles méthodes dans R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, Wiley- VCH Publishers, 1999.
Tous les procédés divulgués dans le cadre de la présente invention sont envisagés pour être pratiqués à n'importe quelle échelle, y compris le milligramme, le gramme, le multigramme, le kilogramme, le multikilogramme ou l'échelle industrielle commerciale. H est à noter que les composés de la présente invention peuvent comprendre un atome de carbone asymétriquement substitué, et peuvent être isolés sous des formes optiquement actives ou racémiques. Ainsi, toutes les formes chirales, diastéréoisomères, racémiques, isomères d'une structure sont envisagées, à moins que la stéréochimie ou la forme isomère spécifique ne soit spécifiquement indiquée. Il est bien connu de préparer et d'isoler de telles formes optiquement actives. Par exemple, les mélanges de stéréoisomères peuvent être séparés par des techniques standard, y compris, mais sans s'y limiter, la résolution des formes racémiques, la chromatographie classique, en phase inverse et chirale, la formation préférentielle de sel, la recristallisation et autres, ou par synthèse chirale à partir de matières premières chirales ou par synthèse délibérée des centres chiraux cibles.
Les composés de la présente invention peuvent être préparés par diverses voies synthétiques. Dans les réactions décrites ci-après, il peut être nécessaire de protéger les groupes fonctionnels réactifs, par exemple les groupes hydroxy, amino ou thio, lorsque ceux-ci sont présents dans le produit final, afin d'éviter leur participation à des réactions secondaires, non désirées. Les groupes de protection conventionnels peuvent être utilisés conformément à la pratique courante, par exemple, voir T.W. Greene and P. G. M. Wuts in Protective Groups in Organic Chemistry, 3rd ed., John Wiley and Sons, 1999; J. F. W. McOmie in Protective Groups in Organic Chemistry, Plenum Press, 1973.
Les réactifs et les composés de départ sont disponibles sur le marché, ou facilement synthétisés par des techniques bien connues de l’homme du métier. Tous les substituants, sauf indication contraire, sont tels que définis précédemment.
Les composés de formule générale (I) peuvent être obtenus selon la réaction suivante :
Figure imgf000019_0001
Cette réaction peut notamment être réalisée dans un solvant organique.
Selon un mode de réalisation, les trois composés de départ sont mélangés dans un solvant organique, notamment l’acide acétique. Selon un mode de réalisation, le solvant organique est chauffé, notamment au reflux ou sous irradiations microondes, par exemple à une température comprise de 100°C à 180°C, en particulier de 110°C à 140°C, plus particulièrement de 120°C à 130°C.
La durée du chauffage est comprise de 10 minutes à 6 heures, notamment de 30 minutes à 5 heures, en particulier de 1 heure à 4 heures, plus particulièrement de 2 à 3 heures.
R1 et p sont tels que définis plus haut.
Selon un mode de réalisation, R2 et R3 représentent indépendamment l’un de l’autre un groupe choisi parmi -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR4, -NH2, -NHR5, -NR7R8, -SO2-NH2, - SO2-NH-R6, SO3H, ou un atome d’halogène.
Selon un mode de réalisation particulier, R2 et/ou R3 représentent des groupes R2’ et R3’ correspondant à des groupe de protection ad hoc. Lorsque R2’ et/ou R3’ représentent -NO2, R2’ et/ou R3’ sont alors convertis en R2 et/ou R3 = -NH2, notamment par l’une des techniques bien connues de l’homme du métier, par exemple par action de zinc au contact d’acide acétique.
Solution véhicule
Le présent texte décrit également une solution véhicule pharmaceutiquement acceptable.
Cette solution véhicule permettant en outre d’améliorer la solubilité des composés Rétro-2.2 ainsi que ses analogues pour une administration par voie sous-cutanée ou orale afin de favoriser leur passage dans le plasma des mammifères. En particulier, le présent texte décrit un véhicule pharmaceutiquement acceptable comprenant des composés de formule (I).
En effet, les inventeurs ont constaté que la plupart des solutions véhicules existant sur le marché ne permettaient pas de surmonter de manière satisfaisante les problèmes de solubilité des composés Rétro-2.2 et ses analogues. En outre, certains véhicules ne permettent pas de retenir toute la charge de molécules, ce qui entraîne une fuite puis une précipitation indésirable de ces composés lors de l’administration. Une solution véhicule telle que décrite permet une solubilisation et/ou le maintient en suspension fine et donc une administration efficaces de ces composés.
H est montré dans les exemples qu’une bonne solubilité des composés Rétro-2.2, et de ses analogues, et en particulier des composés de formule (I), est obtenue lorsque ces composés sont présents dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable comprenant une combinaison d’esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette, avec de l’huile de ricin. Dans certains modes de réalisation, le véhicule pharmaceutiquement acceptable comprend (i) de 20% à 40% v/v d’esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette et (ii) de 60% à 80 % v/v d’huile de ricin.
Dans certains modes de réalisation préférés, ce véhicule pharmaceutiquement acceptable comprend environ 30% d’esters éthyliques d'acides gras de l'huile d'œillette, et environ 70% d’huile de ricin.
H est aussi montré dans les exemples qu’une bonne solubilité des composés Rétro-2.2, et de ses analogues, et en particulier des composés de formule (I), est obtenue lorsque ces composés sont présents dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable comprenant une combinaison de diméthylsulfoxyde (DMSO), d’esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette avec de l’huile de ricin.
Ainsi, selon un mode de réalisation, le véhicule pharmaceutiquement acceptable comprend une combinaison de diméthylsulfoxyde (DMSO), d’esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette avec de l’huile de ricin.
Dans certains modes de réalisation, le véhicule pharmaceutiquement acceptable comprend (i) de 1 % à 5 % v/v de diméthylsulfoxyde, (ii) de 20 % à 40 % v/v d’esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette et (iii) de 60 % à 75 % v/v d’huile de ricin.
Dans certains modes de réalisation particuliers, ce véhicule pharmaceutiquement acceptable comprend environ 3 % de diméthylsulfoxyde, environ 29 % d’esters éthyliques d'acides gras de l'huile d'œillette, et environ 68 % d’huile de ricin.
Selon un mode de réalisation particulier, les esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette sont iodés. Un exemple d’esters éthyliques d’acides gras iodés de l’huile d’œillette est le Lipiodol ®, commercialisé par la société Guerbet. Dans ce mode de réalisation, les esters éthyliques d’acides gras iodés sont principalement sous la forme de monoiodo stéarate d’éthyle et de diiodostéarate d’éthyle.
Dans un mode de réalisation particulier, les esters éthyliques d'acides gras de l'huile d'œillette sont un mélange d’esters éthyliques d'acides gras de l'huile d'œillette, dans lesquels les acides gras sont choisis parmi l’acide palmitique, l’acide stéarique, l’acide oléique, l’acide linoléique, l’acide linolénique, et leurs mélanges. Un mélange d’esters éthyliques d'acides gras de l'huile d'œillette convenant dans une solution véhicule telle que décrite peut ainsi comprendre un ester éthylique d’acide palmitique, un ester éthylique d’acide stéarique, un ester éthylique d’acide oléique, un ester éthylique d’acide linoléique, un ester éthylique d’acide linolénique ou un mélange de ces derniers.
Dans un mode de réalisation particulier, le mélange d’esters éthyliques d'acides gras de l'huile d'œillette comprend de 5 % à 15 % d’esters éthyliques d’acide palmitique, de 1 % à 5 % d’esters éthyliques d’acide stéarique, de 8 % à 15 % d’esters éthyliques d’acide oléique, de 65 % à 75 % d’esters éthyliques d’acide linoléique, et de 3 % à 7 % d’esters éthyliques d’acide linolénique.
Dans un mode de réalisation préféré, le mélange d’esters éthyliques d'acides gras de l'huile d'œillette comprend environ 10 % d’esters éthyliques d’acide palmitique, environ 2 % d’esters éthyliques d’acide stéarique, environ 11 % d’esters éthyliques d’acide oléique, environ 72 % d’esters éthyliques d’acide linoléique, et environ 5 % d’esters éthyliques d’acide linolénique.
Les inventeurs ont découvert de manière surprenante que l’administration de composés Rétro-2.2 et ses analogues dans une solution véhicule de ce type, notamment par voie orale ou sous-cutanée, permettait d’améliorer le passage dans la circulation et la concentration des composés dans le plasma, et donc leur biodisponibilité auprès des individus, par rapport aux véhicules déjà connus dans l’art.
En outre, les inventeurs ont découvert que l’administration de composés de formule (I) était également optimisée lorsque ces derniers étaient inclus dans une solution véhicule tel que décrit ci-dessus.
Il est également montré dans les exemples qu’une bonne solubilité des composés Rétro-2.2, et de ses analogues, et en particulier des composés de formule (I), est obtenue lorsque ces composés sont présents dans un véhicule pharmaceutiquement acceptable comprenant une combinaison de diméthylsulfoxyde (DMSO), avec du triacétate de glycérol et de l’huile de ricin.
Ainsi, selon un mode de réalisation, le véhicule pharmaceutiquement acceptable comprend une combinaison de diméthylsulfoxyde (DMSO), d’esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette avec de l’huile de ricin. Dans certains modes de réalisation, le véhicule pharmaceutiquement acceptable comprend
(i) de 1% à 5 % de DMSO, (ii) de 5% à 15 % de triacétate de glycérol et (iii) de 80% à 94 % v/v d’huile de ricin.
Dans certains modes de réalisation particuliers, ce véhicule pharmaceutiquement acceptable comprend environ 3 % de DMSO, environ 11 % de triacétate de glycérol, et environ 86 % d’huile de ricin.
Des solutions véhicules telles que décrites sont adaptées à une administration par les voies aérienne, orale, parentérale, locale, intramusculaire ou sous cutanée. En particulier, les solutions véhicules sont adaptées à une administration intramusculaire ou sous-cutanée.
Comme indiqué précédemment, la présente invention concerne également une composition pharmaceutique ou médicament comprenant au moins un composé de formule générale (I) tel que défini précédemment en tant que principe actif, et un véhicule pharmaceutiquement acceptable, ladite composition pharmaceutique ou ledit médicament étant notamment adapté à une administration par les voies aérienne, orale, parentérale, locale, intramusculaire ou sous cutanée.
Selon un mode de réalisation particulier, le véhicule pharmaceutiquement acceptable est tel que décrit ci-dessus.
Ainsi, selon un mode de réalisation particulier, la composition pharmaceutique ou le médicament comprend, à titre de véhicule pharmaceutiquement acceptable, (i) de 20% à 40% v/v d’esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette et (ii) de 60% à 80 % v/v d’huile de ricin.
Selon un autre mode de réalisation, la composition pharmaceutique ou le médicament comprend, à titre de véhicule pharmaceutiquement acceptable, (i) de 1 % à 5 % v/v de diméthysulfoxyde, (ii) de 20 % à 40 % v/v d’esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette et (iii) de 60 % à 75 % v/v d’huile de ricin.
Selon un autre mode de réalisation, la composition pharmaceutique ou le médicament comprend, à titre de véhicule pharmaceutiquement acceptable, (i) de 1% à 5 % de DMSO,
(ii) de 5% à 15 % de triacétate de glycérol et (iii) de 80% à 94 % v/v d’huile de ricin.
Selon un mode de réalisation particulier, la composition ou le médicament comprend au moins un composé de formule (I), en particulier le composé 1, et un véhicule pharmaceutiquement acceptable comprenant (i) de 1% à 5 % de DMSO, (ii) de 5% à 15 % de triacétate de glycérol et (iii) de 80% à 94 % v/v d’huile de ricin.
En particulier, la composition ou le médicament peut comprendre au moins l’énantiomère (S) du composé 1 ((S)-composé 1) et un véhicule pharmaceutiquement acceptable comprenant (i) de 1% à 5 % de DMSO, (ii) de 5% à 15 % de triacétate de glycérol et (iii) de 80% à 94 % v/v d’huile de ricin.]
En particulier, la composition ou le médicament peut comprendre au moins l’énantiomère (S) du composé 1 ((S)-composé 1) et un véhicule pharmaceutiquement acceptable comprenant (i) environ 3 % de DMSO, (ii) environ 11 % de triacétate de glycérol et (iii) environ 86 % v/v d’huile de ricin.
Selon un mode de réalisation particulier, la composition pharmaceutique ou le médicament peut se présenter sous la forme d’un hydrogel.
En particulier, la compositioon pharmaceutique ou le médicament sous la forme d’un hydrogel peut comprendre au moins un composé de formule (I) et une solution aqueuse de PLGA-PEG-PLGA.
Le polymère PLGA-PEG-PLGA a été décrit pour former des solutions fluides lorsqu'il est dissous dans l'eau à basse température. Les solutions PLGA-PEG-PLGA sont capables de dissoudre les composés hydrophobes. Cependant, lors d'un chauffage à 37 ° C, les micelles formées par les chaînes PLGA-PEG-PLGA interagissent les unes avec les autres, conduisant à la formation d'un hydrogel. Ce phénomène peut être exploité pour générer une formulation fluide d'un médicament candidat hydrophobe à température ambiante qui formera spontanément un hydrogel lors du réchauffement à la température corporelle (c'est-à-dire lors d'une injection sous-cutanée).
Une galénique hydrogel comprenant un polymère PLGA-PEG-PLGA de ce type a été décrit dans Vinck et al. (In Vivo Sustained Release of the Retrograde Transport Inhibitor Retro- 2.1 Eormulated in a Thermosensitive Hydrogel. Int. J. Mol. Sci. 2022, 23, 14611. https://doi.org/10.3390/ijms232314611) comme permettant une administration du composé Rétro-2.1 chez la souris. Ce polymère thermosensible a notamment permis une libération prolongée du composé et un meilleur contrôle de son métabolisme. La composition pharmaceutique ou le médicament tels que décrits sont adaptés à une administration par les voies aérienne, orale, parentérale, locale, intramusculaire ou sous cutanée. En particulier, la composition pharmaceutique ou le médicament sont adaptés à une administration intramusculaire ou sous-cutanée.
Définitions
Tel qu’on l’utilise dans la présente description, le terme « environ » se réfère à un intervalle de valeurs de ± 10 % d’une valeur spécifique. A titre d’exemple, l’expression « environ 120 mg » comprend les valeurs de 120 mg ± 10 %, soit les valeurs de 108 mg à 132 mg.
Au sens de la présente description, les pourcentages se réfèrent à des pourcentages en poids par rapport au poids total de la formulation, sauf indication contraire.
Tel qu’on l’entend ici, les plages de valeur sous forme de « x-y » ou « de x à y » incluent les bornes x et y ainsi que les entiers compris entre ces bornes. A titre d’exemple, « 1-5 », ou « de 1 à 5 » désignent les entiers 1, 2, 3, 4 et 5. Les modes de réalisations préférés incluent chaque entier pris individuellement dans la plage de valeur, ainsi que toute sous-combinaison de ces entiers. A titre d’exemple, les valeurs préférées pour « 1-5 » peuvent comprendre les entiers 1, 2, 3, 4, 5, 1-2, 1-3, 1-4, 1-5, 2-3, 2-4, 2-5, etc.
Tel qu'il est utilisé ici, le terme «sel pharmaceutiquement acceptable» se réfère à des sels qui sont, dans la portée d'un jugement médical sensé, appropriés pour le contact avec les tissus d'êtres humains et d'animaux sans toxicité excessive, irritation, réponse allergique, ou autres complications problématiques en proportion avec un rapport bénéfice / risque raisonnable.
Par sel pharmaceutiquement acceptable des composés de formule générale (I), on entend notamment les chlorhydrates, bromhydrates, sulfates ou bisulfates, phosphates ou hydrogénophosphates, acétates, oxalates, benzoates, succinates, fumarates, maléates, lactates, citrates, tartrates, gluconates, méthanesulphonates, benzène- sulphonates et paratoluène- sulphonates .
Par atome d’halogène, on entend les éléments chimiques du groupe VII du tableau périodique des éléments, notamment, le fluor, le chlore, le brome et l’iode.
Le terme radical alkyle de 1 à 3 ou 4 atomes de carbone désigne un radical hydrogénocarboné, linéaire ou ramifié ; on peut citer par exemple le méthyle, l’éthyle, le propyle, l’isopropyle ou le tertiobutyle. Par « PEG » ou « poly (éthylène glycol) » ou « polyéthylène glycol », on entend notamment des groupes -(CH2-CH2-O)m-, éventuellement terminés par un groupe choisi parmi H, un alkyle en Cl à C3, ou des groupes -(-O-CH2-CH2)m-, éventuellement terminés par un groupe choisi parmi H, -OH, et un O-alkyle en Cl à C3, m étant choisi de 1 à 500, en particulier de 4 à 500, notamment de 30 à 60.
La masse molaire moyenne du PEG peut notamment être indiquée après le terme « PEG » après le nom, par exemple PEG- 1450 (1 450 g- mol'1).
Par « PLA » ou « poly (acide lactique) » ou « acide polylactique », on entend notamment des groupes -(C(=O)-CH(CH3)-O)p-, éventuellement terminés par un groupe choisi parmi H, un alkyle en Cl à C3, ou des groupes -(O-CH(CH3)-C(=O))p-, éventuellement terminés par un groupe choisi parmi -OH, et un O-alkyle en Cl à C3, p étant choisi de 1 à 2000, notamment de 5 à 500, particulièrement de 10 à 50.
La masse molaire moyenne du PLA peut notamment être indiquée après le terme « PLA » après le nom, par exemple PLA- 1036 (1 036 g.mol'1).
Par « PLGA » ou « PLG », on entend un poly(acide lactique-co-acide glycolique), et notamment des groupes -((C(=O)-CH(CH3)-O)p-(C(=O)-CH2-O)q)r-, éventuellement terminés par un groupe choisi parmi H, un alkyle en Cl à C3, ou des groupes -((O-CH2- C(=O))q-(O-CH(CH3)-C(=O))p)r-, éventuellement terminés par un groupe choisi parmi - OH, et un O-alkyle en Cl à C3, p, q et r étant tels que le polymère PLGA soit statistique ou à blocs, en particulier statistique, et notamment tels que la masse molaire moyenne du PLGA, par exemple indiquée après le terme « PLGA » après le nom, soit comprise de 200 à 4000, notamment de 800 à 1200 g.mol'1. p, q et r sont notamment tels que le pourcentage molaire d’acide lactique dans le PLGA est d’environ 20%. En particulier, p, q et r sont tels que le PLGA soit constitué de 12 unités d’acide lactique et de 3 unités d’acide glycolique.
Exemple
I. Synthèse de composés selon l’invention
Tous les produits chimiques et solvants utilisés dans les synthèses sont de grade réactif et ont été utilisés sans purification supplémentaire. Le CH2CI2 a été distillé sur hydrure de calcium avant utilisation. La verrerie a été séchée à la flamme sous vide et refroidie sous azote à température ambiante. Toutes les réactions ont été effectuées sous azote sec et contrôlées par TLC. La purification a notamment été réalisée sur un CombiFlash avec un détecteur UV-vis et des colonnes RediSep. Les échantillons ont notamment été adsorbés sur de la Célite ou de la silice et chargés dans des cartouches à charge solide. Un gradient acétate d'éthyle/cyclohexane ou méthanol/dichlorométhane a notamment été utilisé. Les fractions ont notamment été collectées sur la base d'une détection à 254 nm.
L'analyse et la purification par CLHP-SM ont notamment été effectuées à l'aide d'un système Waters (module de gradient binaire 2525, dégazeur en ligne, gestionnaire d'échantillons 2767, détecteur à barrettes de photodiodes 2996) avec un système binaire pour le gradient de solvant. L'éluant était en particulier un gradient de (99,9 % eau / 0,1 % HCOOH) et (99,9 % MeCN / 0,1 % HCOOH) ou (99,9 % eau / 0,1 % HCOOH) et (99,9 % MeOH / 0,1 % HCOOH). Chaque composé a été déposé sur une colonne Zorbax SB-C18 de 100-4.6mm (5mm) équilibrée avec H2O/MeCN ou H2O/MeOH 95:5. Ce système a été par exemple couplé à un système Waters Micromass ZQ avec un analyseur quadripolaire ZQ2000. L'ionisation a été réalisée par électropulvérisation et les autres paramètres étaient les suivants : température de la source 120 °C, tension du cône 20 V, et injection continue de l'échantillon à un débit de 0,3 mL par min. Les spectres de masse ont été enregistrés en mode ion positif et négatif dans la plage m/z 100-2000 et traités avec le logiciel Mass Lynx 4.0.
Les spectres infrarouges ont notamment été enregistrés sur un Spectrum Two équipé d'un U ATR Two (Perkin Elmer), Diamond/ZnSe (1 réflexion).
Les analyses RMN ont notamment été réalisées sur un spectromètre Bruker Avance 400 Ultrashield. Les spectres 1H-NMR et 13C ont été enregistrés à température ambiante à 400 MHz et 100 MHz respectivement, les échantillons ont été dissous dans du DMSO-d6 ou CDCL à une concentration d'environ 5 mM. Le signal singulet DMSO a été réglé à 2,50 ppm. Les déplacements chimiques sont donnés en ppm et les constantes de couplage en Hz. Les données spectrales sont cohérentes avec les structures associées.
Préparation du composé 1 : synthèse du 3-(2,6-dihydroxyphenyl)-6-fluoro-l-methyl-2-(5- (2-methylthiazol-4-yl)thiophen-2-yl)-2,3-dihvdroquinazolin-4(lH)-one
Figure imgf000028_0001
[Tableau 1]
Figure imgf000028_0002
De l’anhydride N-methyl-5-fluoro isatoique (195 g/mol, 0,195 g, 1 mmol, 1 equiv.) obtenu comme décrit dans Gupta et al. (ACS Med. Chem. Lett. 2014, 5, 1, 94-97), du 2-amino-l,3- benzenediol (125 g/mol, 0,187 g, 1,5 mmol, 1,5 equiv.) et du 5-(2-methyl-l,3-thiazol-4-yl)- 2-thiophenecarbaldehyde disponible commercialement (209 g/mol, 0,209 g, 1 mmol, 1 equiv.) ont été dissouts dans de l’acide acétique (2 mL). Le mélange a été chauffé dans un synthétiseur à microondes à 120°C durant 3 h. Le mélange brut a été dilué dans de l’acétate d’éthyle. La phase organique a été lavée avec une solution aqueuse saturée en NaHCOa et de l’eau distillée, puis séchée sur du sulfate de magnésium, filtrée et le solvant a été évaporé sous vide. La purification sur colonne de chromatographie sur gel de silice en utilisant un mélange d’élution de cyclohexane/acétate d’éthyle (90/10 à 70/30) a permis de récupérer le ZI composé 4 du schéma ci-dessus sous forme d’une poudre jaunâtre (467,5 g/mol, 0,467 g, quantitatif). Ce composé correspond au composé 1 selon l’invention.
RMN 1H (DMSO-d6) : 2,61 (s, 3H); 2,83 (s, 3H); 5,96 (s, 1H); 6,21 (dd, 1H, J = 1,1 , J = 8,2); 6,42 (dd, 1H, J = 1,1, J = 8,1); 6,79 (dd, 1H, J = 4,2, J =9), 6,86 (d, 1H, J = 3,7); 6,9 (t, 1H, J = 8,2); 7,21 (d, 1H, J = 3.6); 7,33 (td, 1H, J = 3.2, J = 8,8); 7,51 (dd, 1H, J = 3,1, J = 8,8); 7,66 (s, 1H); 9,03 (s, 1H); 9,82 (bs, 1H).
UPLC/MS : Temps de rétention : 2.95 min,
M+ H= 468.9
Préparation du composé 2 : synthèse du 3-(2,6-diaminophenyl)-6-fluoro-l-methyl-2-(5-(2- methylthiazol-4-yl)thiophen-2-yl)-2,3-dihvdroquinazolin-4(lH)-one
Figure imgf000029_0001
Acide acétique, micro-ondes
12OcC
Le composé 2 selon l’invention peut être obtenu de manière similaire en suivant un protocole de synthèse tel que décrit précédemment pour le composé 1 en suivant le schéma de synthèse ci-dessus.
II. Mesure d’évaluation de l’activité protectrice des composés de l’invention vis-à-vis de différentes toxines et virus
1. Vis-à-vis de la toxine de Shiga, de la ricine et de l’abrine
Protocole et calcul de l’ECso
Les composés ont été testés soit sur cellules A549 (cellules épithéliales pulmonaires humaines) soit sur cellules HeLa (cellules de cancer utérin humain), contre les toxines de Shiga (Stx-1 et/ou Stx-2), contre la ricine, ou contre l’abrine. Les cellules humaines sont cultivées à 37 °C dans une atmosphère contenant 5% de CO2 dans des flasques de culture de 150 cm2 dans du milieu DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) contenant 100 U/mL de pénicilline et 100 g/mL de streptomycine. Les cellules sont ensemencées à une densité de 50.000 cellules par puits dans des plaques 96 puits à fond en scintillant solide Cytostar- T. Les cellules (100 pL dans du DMEM complet: DMEM + 10% de sérum de veau fœtal, SVF) sont pré-incubées ou non avec les inhibiteurs (50 pL; différentes concentrations, pré- incubation de 3 h). Le composé 1, selon l’invention, a été préparé conformément au protocole présenté précédemment. Les composés A à J, hors invention, ont été préparés conformément aux protocoles présentés dans les demandes internationales W02014/060586 Al ou W02020/109510 AL La structure de ces composés est indiquée dans le tableau suivant :
[Tableau 2]
Figure imgf000030_0001
Ces composés, sous forme de poudre, ont ensuite été solubilisés dans le DMSO pur à une concentration de 10 mM. Cette solution est ensuite diluée dans le milieu de culture et utilisée dans les exemples ci-après dans une gramme de concentrations. Le milieu complet complémenté de toxine de Shiga, de ricine, ou d’abrine (50 pL, gamme de concentration variable) est ensuite ajouté à chaque puits. Après une incubation de 20 h, le milieu (200 pL) est éliminé et remplacé par un milieu DMEM sans leucine (Eurobio) contenant 10% de SVF et 0,5 pCi/mL de [14C]-leucine (GE). Après une incubation de 7 h à 37°C, l'incorporation de radioactivité par les cellules est déterminée par lecture des plaques par un compteur à scintillation Wallac 1450 Microbeta trilux (PE).
Comme ces toxines bloquent la synthèse des protéines, les cellules affectées ne sont plus capables d'incorporer la leucine radiomarquée dans leurs protéines. Par contre, les cellules traitées par des inhibiteurs synthétisent toujours des protéines et incorporent donc l'acide aminé radiomarqué. Comme les cellules concentrent le radioélément suffisamment près du fond du puits, cela entraine une excitation du scintillant contenu dans les plaques et conduit à l'émission de photons détectée par le compteur à scintillation (mesure en coups par minutes, cpm). Ces données sont ensuite exprimées en pourcentage de synthèse de protéine par les cellules. Les courbes de cytotoxicité peuvent ainsi être tracées sans inhibiteur ou en présence d'un inhibiteur. L’analyse des données par régression non linéaire permet d’estimer l’ICso en absence ou en présence de composé, soit la concentration de toxine pour laquelle on observe 50 % d’assimilation de leucine radioactive ce qui correspond à 50% de cellules viables. Plus la valeur de l’ICso est élevée, plus la protection cellulaire est importante car il faut alors une concentration plus élevée de toxine pour générer la même cytotoxicité.
La courbe des valeurs d’ICso en fonction des concentrations en composé permet de calculer l’ECso, qui représente la concentration de produit donnant 50% de son effet protecteur antitoxine maximum. Plus l’ECso est faible, plus le composé est efficace.
2. Vis-à-vis des poxyirus vaccine et de la Myxomatose
Cytotoxicité des composés
Les cellules RK13 (ATCC CCL-37) (pour le virus de la myxomatose) et HeLa (ATCC- CCL2) (pour le virus de la vaccine) sont cultivées dans du DMEM sans rouge phenol (DI 145; Sigma Aldrich) additionné de 10% SVE (Eurobio-Scientific), 1 mM sodium pyruvate (S8636; Sigma Aldrich), L-Glutamine (G7513; Sigma Aldrich) et une solution de Penicilline-Streptomycine (P0781; Sigma Aldrich).
Les cellules sont ensemencées entre 6000 et 8000 cellules par puits dans une plaque 96 puits Corning Cellbind dans du milieu DMEM complet. 24 h après ensemencement, les cellules sont traitées avec les composés 1 et A à J pour une série de concentrations. Les cellules sont ensuite incubées à 37 °C et 5% CO2 pendant 3 à 6 jours.
Un temps post-traitement les cellules sont marquées avec Image-iT DEAD Green Viability Stain (Invitrogen 110291) et avec MitoTracker Orange (Invitrogen M7510) 30 minutes à 37°C. Les cellules sont fixées avec de la formaline à 4% (Sigma) pendant 10 min, lavées au PBS et incubées avec du PBS Hoechst 33342 (1 mg/mL).
L’acquisition des données par microscopie à haut contenu est réalisée sur un microscope Thermo Celllnsight CX7 HCS microscope, utilisant un algorithme d’analyse compartimentale. Les résultats sont extraits, normalisés par rapport aux conditions non-traité et exprimés en moyenne de trois puits indépendants +/- SD.
La concentration cytotoxique 50 % (CC50), qui correspond à la concentration en composé administré réduisant de 50 % la viabilité des cellules, a été déterminé pour chaque composé. Plus la valeur du CC50 est faible, plus le composé est toxique pour les cellules.
Activité antivirale
L’activité antivirale est mesurée en utilisant la technologie ANCHOR (NeoVirTech). Les cellules sont cultivées dans les mêmes conditions que pour l’essai de cytotoxicité, traitées à 8 concentrations en triplicat et infectées avec le virus dérivé de la myxomatose MYXV-T1- ANCHOR (MOI 0,5) et le virus dérivé de la vaccine VacV-ANCHOR (MOI 0,1).
Trois à quatre jours post-infection les cellules sont fixées dans les mêmes conditions que précédemment décrit, et incubées avec du PBS Hoechst 33342 (1 mg/mL).
Les plaques sont imagées avec un microscope Thermo Scientific Celllnsight CX7 HCS. Une analyse compartimentale couplée à un algorithme Spot Detector est utilisée pour détecter et quantifier le taux d’infection (nombre de cellules fluorescentes sur nombre total de cellules) et le taux de réplication (intensité des spots ANCHOR).
Les résultats sont obtenus après mesure et analyse automatisée d’un minimum de 2000 cellules par puits par réplicat. Les résultats sont extraits, normalisés par rapport aux conditions infecté/non-traité et exprimées en moyenne de trois puits indépendants +/- SD. De la même manière qu’au point ILL, l’ECso a été déterminée pour chaque composé.
3. Résultats
Les résultats d’ECso pour chacun des composés vis-à-vis des toxines et des virus indiqués sont donnés dans le tableau suivant.
[Tableau 3]
Figure imgf000033_0001
Ces résultats montrent que les composés de formule (I), et en particulier le composé 1 selon l’invention, ont des EC50 très faibles. Ils présentent des propriétés améliorées en ce qui concerne la protection cellulaire contre les toxines de Shiga, la ricine et l’abrine et contre les virus de la vaccine et de la myxomatose, notamment par rapport à des composés équivalents de l’art antérieur.
H est en outre démontré que les composés de formule (I), et en particulier le composé 1 selon l’invention, ont des valeurs élevées de CC50, synonymes d’une faible cytotoxicité de ces composés vis-à-vis des cellules traitées.
Enfin, la solubilité calculée exprimée en log S, a été estimée par calcul in silico, pour chacun des composés. Plus la valeur du log S est élevée, plus la solubilité de la molécule est importante. Ces résultats montrent que les composés selon l’invention, notamment le composé 1, présentent une solubilité améliorée.
En conclusion, ces résultats montrent que des composés selon l’invention, tel que le composé 1, présentent à la fois une activité inhibitrice efficace vis-à-vis des différentes toxines Shiga Stx-1, Stx-2, la ricine et l’abrine, ainsi que vis-à-vis des différents virus pox de la vaccine et de la myxomatose, sans poser de problème de cytotoxicité pour les cellules traitées. En outre, ces caractéristiques, notamment de solubilité, sont améliorées avec les composés selon l’invention par rapport à celles obtenues pour des composés de l’art antérieur.
III. Mesure de l’activité pharmacocinétique d’analogues de Rétro-2.2 et des composés de formule (I) dans une première solution véhicule (DMSO/d’esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette/huile de ricin)
L’activité pharmacocinétique (concentration de la molécule dans le plasma (nM) en fonction du temps (h)) des analogues suivants de la molécule Rétro-2.2 a été testée : composé 1 (cercles blancs), Rétro-2.2 (composé B du tableau ci-dessus) (carrés blanc), composé C (triangles blancs) du tableau ci-dessus et composé E (losanges blancs), également rappelé dans le tableau ci-dessus. Les composés ont été administrés chez la souris femelle BALB/c par voie orale (gavage) (figure 1) et par voie sous-cutanée (figure 2) à une concentration de 33 mg/kg dans un mélange Lipiodol ©/huile de ricin dans des proportions massiques 30%/70%. La concentration plasmatique en ces composés a été mesurée par chromatographie en phase liquide avec spectrométrie de masse en tandem (LC-MS-MS). Les résultats de ces essais montrent que le composé 1 selon l’invention présente les meilleures propriétés pharmacocinétiques parmi toutes les molécules testées puisqu’elle permet la meilleure exposition en termes de concentration de la molécule, et ce pendant une durée prolongée. En outre, il est observé que la biodisponibilité relative du composé 1 selon l’invention est meilleure lorsqu’il est administré par voie sous-cutanée, puisque l’aire sous la courbe est supérieure comparée à une administration orale.
Par ailleurs, l’activité pharmacocinétique du composé Rétro-2.2 a été comparée à celle du composé 1 selon l’invention suite à une administration par voie sous-cutanée chez la souris femelle BALB/C à une concentration de 33 mg/kg dans une solution véhicule comprenant un mélange Lipiodol ©/huile de ricin dans des proportions massiques 30%/70% (formulation B) ou dans une solution véhicule telle que décrite dans le texte comprenant un mélange DMSO/Lipiodol ©/huile de ricin dans des proportions massiques 3%/29%/68%
(formulation C).
Pour préparer les formulations C, les molécules Rétro-2.2 et le composé 1 selon l’invention, sous forme de poudre, ont été solubilisés dans du DMSO pur. La solution a été homogénéisée par vortex durant 30 secondes à vitesse maximale. Le Lipiodol © a ensuite été ajouté. De nouveau, la solution a été homogénéisée par vortex durant 30 secondes à vitesse maximale. L’huile de ricin a été ajoutée doucement à la pipette. La solution a été homogénéisée en retournant le tube la contenant 20 fois. Elle a ensuite subie une sonication dans un bain d’eau à 37 °C durant 30 minutes. De nouveau, la solution a été homogénéisée en retournant le tube la contenant 20 fois.
Les résultats sont rapportés dans la figure 3 selon la représentation suivante : Rétro-2.2 dans formulation B (carrés blancs), Rétro-2.2 dans formulation C (carrés noirs), composé 1 selon l’invention dans formulation B (cercles blancs) et composé 1 selon l’invention dans formulation C (cercles noirs).
Les résultats de ces essais montrent que tant pour la molécule Rétro-2.2 que pour le composé 1 selon l’invention, la biodisponibilité relative est améliorée lorsque la molécule est administrée dans la formulation C. En outre, ces résultats montrent que le composé 1 selon l’invention présente une biodisponibilité relative encore meilleure que celle de la molécule Rétro-2.2, quel que soit la solution véhicule utilisée.
Enfin, une simulation d’une administration répétée de la molécule Rétro-2.2 et du composé 1 selon l’invention a été produite sur la base des résultats obtenus à partir des paramètres pharmacocinétiques des essais d’une unique administration. Ces essais ont été réalisés par administration sous-cutanée chez la souris femelle BALB/c à une concentration de 33 mg/kg, deux fois par jour dans une formulation C comprenant un mélange DMSO/Lipiodol ©/huile de ricin dans des proportions massiques 3%/29%/68%.
Les paramètres pharmacocinétiques obtenus avec Rétro-2.2 ou le composé 1 selon l’invention dans une formulation C administrés par voie sous-cutanée ont été utilisés pour simuler les concentrations plasmiques qui seraient obtenues en suivant deux injections sous- cutanées par jour, à 6 heures d’écart (figure 4).
Les résultats montrent que l’ECso de Rétro-2.2 contre la toxine ricine, l’abrine ou Stx est d’environ 20 ou 30 nM. Pour un composé 1 selon l’invention, l’ECso est autour de ou inférieur à 20 nM. De ce fait, la simulation suggère que des injections sous-cutanées deux fois par jour de Rétro-2.2 ou d’une composition selon l’invention devraient permettre d’atteindre des concentrations largement dix fois supérieurs à leurs ECso respectifs contre ces toxines durant une bonne partie de la journée. Ce critère doit être atteint pour valider une molécule dans des études précoces de développement de médicaments.
H en est de même pour leur activité à l’encontre des virus pox.
VI. Mesure de l’activité pharmacocinétique d’analogues de Rétro-2.2 et des composés de formule (I) dans une seconde solution véhicule (DMSO/triacétate de glycérol/huile de ricin)
L’activité pharmacocinétique (concentration de la molécule dans le plasma (pM) en fonction du temps (h)) de l’énantiomère (S) du composé 1 selon l’invention a été testée. Le composé a été administré chez la souris femelle BALB/c par voie sous-cutanée à une concentration de 33 mg/kg dans un mélange DMSO 3%/Triacétate de glycérol 11%/Huile de Ricin 86%. La concentration plasmatique du composé a été mesurée par chromatographie en phase liquide avec spectrométrie de masse en tandem (LC-MS-MS). Les paramètres pharmacocinétiques calculés sont fournis dans le tableau ci-après [Tableau 4]
Figure imgf000037_0001
Les résultats de ces essais montrent que le (S)-composé 1 (énantiomère (S) du composé 1) présente des propriétés pharmacocinétiques particulièrement satisfaisantes et ce pendant une durée prolongée.
Ensuite, le composé 1 ainsi que d’autres analogues de la molécule Rétro-2.2 cités précédemment (composé A, composé B, composé C et composé E) ont été incubés avec des microsomes hépatiques de souris CD1 femelles en présence ou en absence de NADPH, le cofacteur des CYP450, à une concentration finale de 5 pM pendant 45 minutes à 37 °C et 300 rpm (Thermomixer). Des échantillons ont été prélevés à différents temps et ajoutés à de l’acétonitrile froid pour stopper la réaction et précipiter les protéines. Les échantillons ont été centrifugés, le surnageant dilué et analysé en LC-MS-MS en présence d’une concentration connue de Retro-2.1 comme standard interne.
Comme le montrent les résultats en figure 5, le compose 1 présente un métabolisme ralenti par rapport aux autres composés, en particulier en présence de microsomes hépatiques de souris. Les composés sont stables en absence de NADPH (résultats non présentés).
A partir des courbes expérimentales, les inventeurs ont ensuite procédé à la simulation d’injections répétées de l’énantiomère (S) du composé 1 à la dose de 33 mg/kg une ou deux fois par jour. Ces simulations ont permis d’atteindre une concentration plasmatique théorique de 500 fois et 1000 fois l’ECso du (S)-composé 1 in vitro (figure 6).
Par la suite, l’injection sous-cutanée d’énantiomère (S) du composé 1 la dose de 33 mg/kg chez la souris Balb/c a permis d’obtenir une concentration de composé dans les organes comprise entre 67 et 350 fois l’ECso contre les toxines de Shiga du (S)-composé 1 in vitro. Aux doses de 1 à 3 mg/kg, une à deux fois par jour, les concentrations plasmatiques et pulmonaires ont atteint de 75 à 175 nM, soit entre 12 et 29 fois l’ECso du (S)-composé 1 in vitro. Elles étaient de 50 à 125 nM dans les poumons après 2 h, soit entre 8 et 21 fois l’ECso du (S)-composé 1 in vitro.
Le composé 1 a été identifié in vivo dans différents organes des souris traitées en sous cutané à 33 mg/kg tel que décrit précédemment, à savoir dans le cerveau, dans les poumons, dans le foie, dans le petit intestin, dans le côlon, dans les reins et dans le plascma. Deux heures après l’administration du composé 1, les concentrations en composé 1 mesurées par LC-MS- MS étaient les suivantes :
Cerveau : 1,7 pM
Poumons : 0,5 pM
Foie : 0,6 pM
Petit intestin : 2,1 pM
Côlon : 0,8 pM
Reins : 0,4 pM
Plasma : 0,7 pM
Ces résultats montrent que l’administration de composé 1 par voie sous cutanée, en particulier dans la formulation DMSO 3%/Triacétate de glycérol 11%/Huile de Ricin 86% permet d’obtenir une concentration théoriquement protectrice des souris contre les virus pox ou les toxines de Shiga.
V. Métabolite d’un composé de formule (I)
La structure du métabolite majoritaire du composé 1 identifié dans les surnageants de culture après incubation en présence des microsomes hépatiques (voir précédemment) a été déterminée par LC-MS-MS puis synthétisée pour confirmation selon les méthodes connues dans l’art par l’homme du métier, par exemple selon un mode opératoire analogue au procédé de synthèse décrit dans Forrester et al. (Functional dissection of the retrograde Shiga toxin trafficking inhibitor Retro-2. Nat Chem Biol. 2020 Mar;16(3):327-336. doi: 10.1038/s41589-020-0474-4. Epub 2020 Feb 17. PMID: 32080624; PMCID: PMC7039708).
Le composé obtenu est le suivant :
Figure imgf000039_0001
Ce composé, aussi appelé métabolite, a également été identifié in vivo dans le rein, le foie, le côlon, les poumons et le cerveau des souris femelles BALB/c après traitement en sous- cutané avec du composé 1 dans une concentration de 33mg/kg dans une solution DMSO/d’esters éthyliques d’acides gras de l’huile d’œillette/huile de ricin tel que décrit dans l’exemple III. Deux heures après traitement, les concentrations suivantes en composé 1 ont été mesurées par LC-MS-MS dans les différents organes :
Rein : 0,5pM
Eoie : IpM
Côlon : <200 nM
Poumons : <200 nM
Cerveau : l,5pM

Claims

Revendications
1. Composé de formule générale (I) :
Figure imgf000040_0001
où
- p est égal à 1, 2 ou 3 ;
- R1 représente à chaque occurrence, de façon indépendante, un atome d’hydrogène, un atome d’halogène, un radical alcoxy de 1 à 3 atomes de carbone, notamment un groupe méthoxy, -NO2, ou -NH2 ;
- R2 et R3 représentent indépendamment l’un de l’autre un groupe choisi parmi -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR4, -NH2, -NHR5, -NR7R8, -SO2-NH2, -SO2-NH-R6, SO3H, ou un atome d’halogène;
- R4, R5 et R6 représentent indépendamment les uns des autres un groupe de formule (II) - L-(X)i-(PEG)-(Y)j-Z, où :
- i et j représentent indépendamment l’un de l’autre 0 ou 1 ;
- L représente -C(=O)- ou -C(=O)-(CH2)k-C(=O)-, avec k étant égal à 1, 2 ou 3, en particulier 2 ;
- R7 et R8 représentent, indépendamment l’un de l’autre, un alkyle en Ci à C3, linéaire ou ramifié ;
- X et Y représentent indépendamment l’un de l’autre un poly(acide lactique) ou un poly(acide lactique-co-acide glycolique) ;
- PEG représente un poly(éthylène glycol) ;
- Z représente un groupe choisi parmi H, un alkyle en Ci à C3, -OH, un O-alkyle en Ci à C3, ou -L-Re, où L est défini tel que précédemment et Re est un résidu de formule (I) relié au dit groupe -L-(X)i-(PEG)-(Y)j- défini précédemment par l’intermédiaire de son groupe R2 ou R3, ledit groupe R2 ou R3 étant -OH, -NH2 ou -SO2-NH2;
- R9 représente -CH3 ou -CH2-OH, en particulier représente CH3. ainsi que les formes stéréoisomères, les mélanges de formes stéréoisomères ou leurs sels pharmaceutiquement acceptables.
2. Composé de formule générale (I) selon la revendication 1, dans lequel R9 représente -CH3.
3. Composé de formule générale (I) selon l’une quelconque des revendications 1 ou 2, dans lequel p est égal à 1.
4. Composé de formule générale (I) selon l’une quelconque des revendications précédentes, dans lequel R1 représente un atome d’halogène, en particulier un atome de fluor.
5. Composé de formule générale (I) selon l’une quelconque des revendications précédentes dans laquelle R2 et R3 représentent indépendamment l’un de l’autre un groupe choisi parmi -OH, -OCH3, -SH, -SCH3, -OR4, -NH2, -NHR5, -NR7R8, -SO2-NH2, -SO2-NH- R6, SO3H, en particulier R3, représente un groupe -OH, où R4, R5, R6, R7 et R8 sont tels que définis en revendication 1.
6. Composé de formule générale (I) selon l’une quelconque des revendications précédentes, de formule générale (la) suivante :
Figure imgf000041_0001
où R2 est tel que défini en revendication 1.
7. Composé de formule générale (I) selon l’une quelconque des revendications 1 à 5, de formule générale (Ib) suivante :
Figure imgf000041_0002
dans laquelle R2 et R3 sont choisis parmi les combinaisons suivantes : R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe -NH2, R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe -SO2NH2, R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe -SH, R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe -SO3H, R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe -SMe, R2 est un groupe -OH et R3 est un groupe - OMe, R2 est un groupe -OH et R3 est un atome d’halogène, et en particulier est un atome de fluor, R2 est un groupe -NH2 et R3 est un groupe -NH2, R2 est un groupe - NH2 et R3 est un groupe -SO2NH2, R2 est un groupe -NH2 et R3 est un groupe -SH, R2 est un groupe -NH2 et R3 est un groupe -SO3H, R2 est un groupe - NH2 et R3 est un groupe -SMe, R2 est un groupe - NH2 et R3 est un groupe -OMe, R2 est un groupe - NH2 et R3 est un atome d’halogène, et en particulier est un atome de fluor, R2 est un groupe -SH et R3 est un groupe -SH, R2 est un groupe -SH et R3 est un groupe -SO2NH2, R2 est un groupe -SH et R3 est un groupe -SO3H, R2 est un groupe -SH et R3 est un groupe -SMe, R2 est un groupe -SH et R3 est un groupe - OMe, R2 est un groupe -SH et R3 est un atome d’halogène et en particulier est un atome de fluor, R2 est un groupe -OMe et R3 est un groupe -OMe, R2 est un groupe -OMe et R3 est un groupe -SMe, R2 est un groupe -OMe et R3 est un atome d’halogène, et en particulier est un atome de fluor, R2 est un groupe -SMe et R3 est un groupe -SMe, R2 est un groupe -SMe et R3 est un atome d’halogène, et en particulier est un atome de fluor, et R2 est un atome d’halogène et en particulier est un atome de fluor et R3 est atome d’halogène et en particulier est un atome de fluor, où Me est un méthyle.
8. Composé de formule générale (I) selon l’une quelconque des revendications précédentes, de formule suivante :
Figure imgf000042_0001
9. Composé de formule générale (I) selon l’une quelconque des revendications 1 à 8, pour son utilisation pour la prévention et/ou le traitement des désordres induits par les toxines à mode d’action intracellulaire utilisant le transport rétrograde, ou par les virus ou bactéries utilisant le transport rétrograde et/ou dépendant de la syntaxine 5 pour infecter les cellules, notamment les virus ou bactéries entrant dans les cellules par endocytose, ou par les parasites intracellulaires.
10. Composé pour son utilisation selon la revendication 9, caractérisé en ce que lesdites toxines à mode d’action intracellulaire utilisant le transport rétrograde sont choisies parmi la ricine, l’abrine, la toxine de Shiga et les toxines Shiga-like produites par Shigella dysenteriae et E. coli, la toxine pertussique, la cytotoxine subtilase et l'entérotoxine thermolabile.
11. Composé pour son utilisation selon la revendication 9, caractérisé en ce que lesdits virus sont les virus pox, notamment le virus de la variole, le virus monkeypox, le virus de la vaccine et les leporipoxvirus, en particulier le virus de la myxomatose, les virus adéno- associés, en particulier de sérotype 2, les polyomavirus, notamment le polyomavirus JC et le polyomavirus B K, les papillomavirus, les filovirus, notamment les virus Ebola et le virus Marburg, les entérovirus, notamment l’entérovirus 71, les herpesvirus, notamment le virus Herpes simplex de type 2 et le cytomégalovirus (hCMV), les virus du genre Arenavirus, notamment le virus de la chorioméningite lymphocytaire, et les pneumovirus, notamment le virus respiratoire syncytial.
12. Composition pharmaceutique ou médicament comprenant au moins un composé de formule générale (I) tel que défini dans l’une quelconque des revendications 1 à 8 en tant que principe actif, et un véhicule pharmaceutiquement acceptable, ladite composition pharmaceutique ou ledit médicament étant notamment adapté à une administration par les voies aérienne, orale, parentérale, locale, intramusculaire ou sous-cutanée.
PCT/EP2023/058044 2022-04-08 2023-03-28 Dihydroquinazolinones ayant une activité protectrice améliorée vis-à-vis de toxines au mode d'action intracellulaire, de virus et de bactéries intracellulaires WO2023194162A1 (fr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FRFR2203227 2022-04-08
FR2203227A FR3134389B1 (fr) 2022-04-08 2022-04-08 Nouvelles dihydroquinazolinones ayant une activite protectrice amelioree vis-a-vis de toxines au mode d’action intracellulaire, de virus et de bacteries intracellulaires

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2023194162A1 true WO2023194162A1 (fr) 2023-10-12

Family

ID=81927806

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP2023/058044 WO2023194162A1 (fr) 2022-04-08 2023-03-28 Dihydroquinazolinones ayant une activité protectrice améliorée vis-à-vis de toxines au mode d'action intracellulaire, de virus et de bactéries intracellulaires

Country Status (2)

Country Link
FR (1) FR3134389B1 (fr)
WO (1) WO2023194162A1 (fr)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014060586A1 (fr) 2012-10-19 2014-04-24 Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives Nouveaux composes ayant une activite protectrice vis-a-vis de toxines au mode d'action intracellulaire
CN110372692A (zh) * 2018-04-13 2019-10-25 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 二氢喹唑啉酮类反向转运过程阻断剂、其制备方法及用途
WO2020109510A1 (fr) 2018-11-28 2020-06-04 Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives Nouvelles dihydroquinazolinones ayant une activite protectrice vis-a-vis de toxines au mode d'action intracellulaire, de virus et de bacteries intracellulaires

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2014060586A1 (fr) 2012-10-19 2014-04-24 Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives Nouveaux composes ayant une activite protectrice vis-a-vis de toxines au mode d'action intracellulaire
CN110372692A (zh) * 2018-04-13 2019-10-25 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 二氢喹唑啉酮类反向转运过程阻断剂、其制备方法及用途
WO2020109510A1 (fr) 2018-11-28 2020-06-04 Commissariat A L'energie Atomique Et Aux Energies Alternatives Nouvelles dihydroquinazolinones ayant une activite protectrice vis-a-vis de toxines au mode d'action intracellulaire, de virus et de bacteries intracellulaires

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FORRESTER ET AL.: "Functional dissection of the retrograde Shiga toxin trafficking inhibitor Retro-2", NAT CHEM BIOL., vol. 16, no. 3, March 2020 (2020-03-01), pages 327 - 336, XP037027550, DOI: 10.1038/s41589-020-0474-4
GUPTA ET AL., ACS MED. CHEM. LETT., vol. 5, no. 1, 2014, pages 94 - 97
JOHANNES, L. ET AL., CELL, vol. 135, 2008, pages 1175 - 87
LORD, J.M. ET AL., BIOCHEMICAL SOCIETY TRANSACTIONS, vol. 31, 2003, pages 1260
T.W. GREENEP. G. M. WUTS: "Protective Groups in Organic Chemistry", 1973, WILEY-VCH PUBLISHERS
VINCK ET AL.: "Vivo Sustained Release of the Retrograde Transport Inhibitor Retro-2.1 Formulated in a Thermosensitive Hydrogel", INT. J. MOL. SCI., vol. 23, 2022, pages 14611

Also Published As

Publication number Publication date
FR3134389A1 (fr) 2023-10-13
FR3134389B1 (fr) 2024-04-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FR2804959A1 (fr) Utilisation de derives de paullones pour la fabrication de medicaments
CN113727986A (zh) 环状泛硫醇衍生物及其用途
EP1231916A2 (fr) Utilisation de derives d&#39;indirubine pour la fabrication de medicaments
CA2754283A1 (fr) Derives indoliques pour le traitement de maladies neurodegeneratives
WO2023194162A1 (fr) Dihydroquinazolinones ayant une activité protectrice améliorée vis-à-vis de toxines au mode d&#39;action intracellulaire, de virus et de bactéries intracellulaires
EP3886859B1 (fr) Nouvelles dihydroquinazolinones ayant une activite protectrice vis-a-vis de toxines au mode d&#39;action intracellulaire, de virus et de bacteries intracellulaires
FR3019819A1 (fr) Composes cytotoxiques inhibiteurs de la polymerisation de la tubuline
EP3400210B1 (fr) Composés&#34;multi-cibles&#34;à activité inhibitrice des histone-désacétylases et de la polymérisation de la tubuline pour son utilisation dans le traitement du cancer
WO2002028851A1 (fr) Dérivés de 7-carboxy-flavones, procédé de préparation et application en thérapeutique
JP6872195B2 (ja) コラーゲン産生抑制剤
FR3050455B1 (fr) Derives amides des acides polycafeoylquiniques, procede de preparation et utilisations
WO2000059511A1 (fr) Utilisation de la tianeptine pour l&#39;obtention de medicaments destines au traitement des pathologies de la neurodegenerescence
EP1305317A1 (fr) Derives de dihydroporphyrine et leurs applications
EP3532048A1 (fr) Derives d&#39;acides quiniques polysubstitues et leur utilisation pour le traitement des maladies neurodégéneratives
EP3237015B1 (fr) Derives hydroxybisphosphoniques hydrosolubles de la doxorubicine
FR2851919A1 (fr) Lignanes utilisables comme inhibiteurs de cathepsines et leurs applications
FR2635778A1 (fr) Nouveaux derives de la 3(prime) azido-3(prime) deoxythymidine (azt) actifs contre le virus hiv du sida
EP0986390B1 (fr) Compositions pharmaceutiques contenant du dichlorhydrate de cinchonine
EP0470144B1 (fr) D-acide aspartique beta-hydroxamate pour le traitement des infections virales et des tumeurs
EP0315519A2 (fr) Nouveaux dérivés de l&#39;acide aminopimélique, leur procédé de préparation et leur application comme médicaments
KR20240094158A (ko) 골질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
WO2023194601A1 (fr) Inhibiteurs de xophos pour leur utilisation dans le traitement du lymphome b
EP0688323A1 (fr) Bistramides biologiquement actifs, leur obtention et leurs applications en therapeutique
JP5476650B2 (ja) 新規ｄｉｆ−１誘導体
BE889136A (fr) Derives n-(vinglastinoyl-23) d&#39;acides amines et de peptides, leur preparation et leur application therapeutique

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 23716218

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1