WO2023020674A1 - Composición orgánica de accion elicitor y nematicida - Google Patents

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Definitions

  • the present invention refers to a process and biological composition with icitor action, strengthening the immune system of plants, as well as insecticidal and nematicidal action.
  • the lupine alkaloids are generally extracted with acidic aqueous solutions, in this way the alkaloids and their salts are separated and can be recovered for use. These compounds are present in all species of the genus Lupinus and are distributed in the plant, particularly in the branches and seeds (Arias, 2000).
  • the INIAP document reveals a study on the toxicity of lupine alkaloids.
  • the study indicates that lupine alkaloids do not inhibit the germination of cereal and legume seeds, however, they present certain adverse reactions in plants.
  • lupine alkaloids act as insecticidal and antibacterial agents, these alkaloids affect the degree of development of the plants because it is well known that lupine alkaloids have toxic effects on the health of a living mammal, as well Also, it is seen that they turn out to be toxic for the cultivation of plants.
  • the method consists in evaluating the insecticidal efficacy of the alkaloidal and non-alkaloidal fractions obtained from the slow debittering waters of the lupinus seed.
  • the patent document CN111253185 (June 9, 2020) describes a method for preparing a foliar fertilizer using Ascophyllum nodosum as raw material and foliar fertilizer, it also refers to the technical field of fertilizer preparation.
  • the preparation method comprises the following steps:
  • the preparation of an enzyme composition that can effectively destroy the cell structure of Ascophyllum nodosum is prepared by mixing the leaf soak algae extract with monopotassium phosphate and sugar alcohol chelated calcium, and can be rapidly absorbed by crops, comprehensively supplement the nutrition of crops, improve crop growing conditions and improve crop stress, resistance and yield quality when sprayed on the surface of crop leaves.
  • the prepared seaweed foliar fertilizer has obvious fertilizing effect and comprehensive functions, can effectively adjust the growth potential of crops, and reduces the phenomena of overgrowth or weakness; protecting the leaves, improving the health status of the leaves and improving the efficiency of photosynthesis; the quality of the fruit is improved.
  • BR102018072544 (April 7, 2020) refers to a nematotoxic composition and its use in the control of phytonmatodes.
  • the present technology consists of a nematotoxic composition, preferably used for the control of species belonging to the genus Meloidogyne sp.
  • the technology is based on the association of a hydrogel with derivatives of solanum stramonifolium jacq, more particularly the internal dialysate (di) and/or external dialysate (de) obtained from the extract of solanum stramonifolium jacq (naranjilla), the composition proved to be quite efficient, reaching approximately 100% lethality against second stage juveniles (ex2) of meloidogyne incognita in bioassays carried out in vitro, thus, the aforementioned composition can be used in the progressive and persistent control of phytomatomatoids of the genus meloidogyne sp., allowing the gradual release of nematotoxic fractions to the soil, other advantages such as thermostability, the absence of cytotoxicity and specificity against non-target organisms are also associated with the
  • Table 2 (page 115) shows the results of the study on the percentage of mortality of juveniles of Meloidogyne sp. exposed to the extract of Brugmansia suaveolens under in vitro conditions in 2012. León, Portugal.
  • SALAZAR Y GUZM ⁇ N Botanical extracts for the control of Meloidogyne sp. in tomato AGRONOM ⁇ A MESOAMERICANA 25(1 ): 111-119. 2014 https://www.redalyc.org/pdf/437/43730495011.pdf Numbers followed by the same letter and within the same column are not significantly different (P ⁇ 0.05) according to Duncan's Multiple Range test at 5%.
  • the trial data show that as the exposure time of Meloidogyne sp. to the Brugmansia suaveolens extract increases, the mortality or nematicidal effect increases, but it does not reach the nematicidal effect of the chemical control, furthermore, the nematicidal action is limited. .
  • Patent ES 2 575 113 (June 24, 2016), reveals a method for producing an improved fertilizer comprising a combination of bacterial species, the bacterial species working cooperatively, preferably synergistically, to improve plant growth, development and yield. .
  • the preparation of the improved fertilizer comprises two types of ferments:
  • Ferment I contained only Lactobacillus acidophilus. Lactobacillus acidophilus was incubated at a temperature of approximately 30 ⁇ 3 °C in a serum-based culture medium. This bacterium can be incubated at temperatures other than 5 °C up to its maximum lethal temperature.
  • This bacterium can be incubated at temperatures other than 5 °C up to its maximum lethal temperature.
  • Ferment II contained Bacillus subtilus, Bacillus licheniformis and Pseudomonas putida. Bacillus subtilus, Bacillus licheniformis and Pseudomonas putida.
  • the fertilizer is prepared with the cultivation and extraction of 2 types of bacteria generated from milk whey.
  • the FAO document 3 Biopreparations for the sustainable management of pests and diseases in urban and peri-urban agriculture, reveals an enriched liquid biofertilizer, preventive of pests and diseases, in which milk or whey is used as an ingredient since it acts mainly as a growth stimulator given its high nitrogen and mineral content. In addition, it vivifies the soil and the flora on the leaf due to its high load of beneficial microorganisms. It provides enzymes, amino acids and other substances to the soil and plants, increasing the diversity and availability of nutrients, improving the health, development and production of treated plants.
  • the present invention provides a biological composition that overcomes the beneficial effects of crops, achieving unexpected eliciting effects.
  • Figure 1 Shows the elicitor effect on the percentage growth of roots in banana plants produced under the elicitor effect of the biological composition of the present invention ( Figures 1a - 1 h)
  • the present invention provides a biological composition that promotes plant crops in an efficient and safe manner with unexpected results in the field.
  • the biological composition there is the recovery and permeability of the soils that are in direct contact with the roots of the plants, so that, thanks to the biological composition of the present invention, the nutrients are distributed in form of macro and micronutrients, which is why it favors the permeability of the soil and the reach of nutrients towards the roots and the total affectation on the vegetative production.
  • the biological composition of the invention that which is characterized by containing a wide range of bio-nutrients, especially the mixture of alkaloids of the genus Lupinus, well known in our environment as chocho; likewise, those biological substances extracted from the flowers and/or leaves of certain plants, among them preferably the alkaloids of the genus Brugmansia; it also contains organic nutrients from a dairy product such as milk, yogurt or a whey liquor, enriched with bio-nutrients;
  • the biological composition acts synergistically exerting a highly eliciting effect and exerting a highly effective effect against the nematodes that infect the roots of the plants.
  • Bionutrients should be understood as that biological matter resulting from the culture of the mixture of microorganisms from a dairy product such as milk, yogurt and/or whey, such bionutrients are, for example, Lactobacillus sp. , Regulator of the acidity of the medium; Lactococcus sp., Protein catalytic, peptide activator; Leuconostoc sp., Plasma agent; Lactosphaera spp., Former of vitamin trophobiotic chains; Pedicoccus sp., Plasmid mineral encapsulator; Streptococcus spp., Lipid splitter, catalytic encapsulator; Mlissococcus sp., Trophobiotic component contributes with secondary metabolites for plasma structuring; Oenococcus sp.
  • the biological composition delivers the bionutrients both to the substrate or soil and to the plants directly, the bionutrients reach the roots of the plants causing an unexpected growth of young and healthy roots, producing an eliciting effect. unexpected.
  • the ingredients of the biological composition especially the mixture of alkaloids and organic nutrients, act synergistically against the nematodes that infect the roots of the plants, producing an unexpected and prolonged nematicidal effect over time; its effect has been evaluated up to 8 months after its first application.
  • bio-alkaloids When we speak of "bio-alkaloids” we must understand those biological substances extracted from certain legumes, from the flowers and/or leaves of certain plants, among them preferably the alkaloids of the genus Lupinus, well known in our environment as chocho; likewise, those biological substances extracted from the flowers and/or leaves of certain plants, among them preferably the alkaloids of the genus Brugmansia. These alkaloids are characterized by their high degree of toxicity; however, the biological composition of the present invention manages to extrapolate their effects to obtain highly satisfactory results in the agricultural field.
  • the term "dairy” refers to the industrial dairy product such as milk, yogurt and/or the residual product of the cheese industry, a whey liquor, ingredients that by their nature contain lactose that provides [3-D-galactop! ranos ⁇ l-(1— >4)-D- glucopyranose, Fat for its energy intake, Ampholite-type proteins, Caseinate of sodium, alpha, beta, k casein, albumin, globulin, micelles, organic Calcium Ca of high vegetable assimilation, Phosphorus for its energy contribution for vital processes, highly available for energy processes;
  • the proteins are of the Alpha-Lactalbumin type that act by chelating minerals such as Ca, Zn, Mn, Cd, Cu, Al, protein of log 4.146128 Daltons;
  • the biological composition of the application also contains a biological fertilizer such as lactose that provides [3-D-galactopyranosyl-(1 ⁇ 4)-D-glucopyranose and/or Fat and/or Ampholyte-type proteins and/or Lactalbumin and/or Beta-Lactoglobulin and/or Sodium Caseinate and/or Bovine Serum Albumin and/or Immunoglobulins and/or Lactoferrin and/or Transferrin and/or Siderophyllin and/or Lactoperoxidase and/or Potassium Lactate and/or Protease- Peptone and/or Glycomacropeptide, vitamins B1, B2, B3, B5, B6, B12, Vit C, minerals such as organic Calcium, Al, P, K, P, Mg, Zn, Mn, Cd, Cu.
  • a biological fertilizer such as lactose that provides [3-D-galactopyranosyl-(1 ⁇ 4)-D-glucopyranose and
  • whey or milk whey is the liquid that separates during cheese production and contains the components that are not integrated into casein coagulation. It has a high nutritional content, however, a tiny percentage is used as feed for farm animals and the rest is discarded, causing pollution problems in rivers and soils. Proteins and lactose become contaminants when whey is released into the environment due to the load of biological matter it contains. The whey allows the reproduction of microorganisms producing significant changes in the Biochemical Oxygen Demand of the water, in addition the amount of lactic acid significantly alters the biological processes.
  • Lactofemna is a multifunctional glycoprotein that has the ability to bind iron.
  • One of the primary functions of the Lf is the transport of metals. It also acts as a protein
  • the "biological composition" of the present invention in addition to the composition of Lupinus alkaloids and tropane alkaloids of the genus Brugmansia, includes at least one biological fertilizer, such as, for example, a concentrate or extract of algae of the genus Ascophyllum nodosum, which provide iodine as a catalyst and nutrients for foliar fertilization.
  • biological fertilizer such as, for example, a concentrate or extract of algae of the genus Ascophyllum nodosum, which provide iodine as a catalyst and nutrients for foliar fertilization.
  • microorganisms are all those beneficial microorganisms that are obtained from the culture of the dairy product, yogurt and/or milk whey, among the most preferred are those described in the biological composition of the invention:
  • Lactobacillus sp. Regulator of the acidity of the medium; Lactococcus sp., Protein catalytic, peptide activator; Leuconostoc sp., Plasma agent; Lactosphaera spp., former of vitamin trophobiotic chains; Pedicoccus sp., Plasma mineral encapsulator; Streptococcus spp., Lipid splitter, catalytic encapsulator; Mlissococcus sp., Trophobiotic component contributes with secondary metabolites for plasma structuring; Oenococcus sp., Lipid catalytic; Aerococcus sp., Peptide encapsulator; Carnobacterium sp., metabolic chaperon 1 as a component of the trophobiotic map; Enterococcus sp., Provides secondary metabolites in the construction of lactic trophobiotic maps; Dolosigranulum sp., trophobiotic metabolic chaperon; Globicat
  • the biological composition of the invention contains more than 20 bioactive substances, high quality biological substances, designed to act both as an elicitor agent and as a nematicidal agent.
  • the biological fertilizers that are part of the invention are suitable and compatible with the microbiological composition according to the present invention, have the purpose of promoting the growth and/or performance of plants, these fertilizers include microbes, animals, bacteria, fungi , genetic material, plants and organic residues rich in nitrogen.
  • the phytotherapeutic properties of the biological composition of the invention are due to more than 20 active substances formulated in the biological composition of the product with unique properties and high productive intensity.
  • the biological composition of the invention is made up of:
  • a solid concentrate or aqueous and/or hydroalcoholic extract of the alkaloids from the seeds of the genus lupinus which comprises between 0.3 and 90% of the formulation, between 0.3 and 83-86% of the formulation, between 0.3 and 80-82% of the formulation, between 0.3 and 75-78% of the formulation, between 0.3 and 50-60% of the formulation, or between 0.3 and 40 -45% of the formulation in weight volume w/v.
  • a solid concentrate or aqueous and/or hydroalcoholic extract of the alkaloids from the flowers, and/or seeds, and/or leaves and/or stems of the genus Brugmansia which comprises between 0.3 to 10-15% of the formulation, between 0.3 and 5-9% of the formulation, between 0.3-1 and 3-5% of the formulation, between 1 and 2% of the formulation and between 0.3 and 1, 5-2% of the formulation by weight w/v.
  • a dairy product such as milk, yogurt and/or whey liquor that comprises lactose that provides [3-D-galactopyranosyl-(1 ⁇ 4)-D-glucopyranose and/or Fat and/or Ampholite-type proteins and /or Lactalbumin and/or Beta-Lactoglobulin and/or Sodium Caseinate and/or Bovine Serum Albumin and/or Immunoglobulins and/or Lactofemna and/or Transferin and/or Siderophyllin and/or Lactoperoxidase and/or Potassium Lactate and/ o Protease-Peptone and/or Glycomacropeptide, its content is between 5 to 50% of the formulation, between 5 and 40% of the formulation, between 5 and 30% of the formulation, between 3 and 20% of the formulation, between 3 and 10-15% of the formulation, between 3-5 and 8-15% of the formulation by w/v weight.
  • a sugar-based energy source comprising between 1 to 10% of the formulation, between 0.5 to 5% of the formulation or comprising between 0.3-0.4 to 1 - 2% of the formulation.
  • Bio-nutrients based on cultured microorganisms from the dairy product including Lactobacillus sp., which regulates the acidity of the medium; Lactococcus sp., Protein catalytic, peptide activator; Leuconostoc sp., Plasma agent; Lactosphaera spp., former of vitamin trophobiotic chains; Pedicoccus sp., Plasma mineral encapsulator; Streptococcus spp., Lipid splitter, catalytic encapsulator; Mlissococcus sp., Trophobiotic component contributes with secondary metabolites for plasma structuring; Oenococcus sp., Lipid catalytic; Aerococcus sp., Peptide encapsulator; Carnobacterium sp., metabolic chaperon 1 as a component of the trophobiotic map; Enterococcus sp., Provides secondary metabolites in the construction of lactic trophobiotic maps; Dolos
  • a biological catalyst rich in iodine which in this case is a solid concentrate or liquid extract and/or hydroalcoholic extract of algae of the genus Ascophyllum Nodosum, between 1 and 5% of the formulation, between 0.5 and 4% of the formulation between 0.5 and 3% of the formulation, between 0.5 and 2% of the formulation by weight volume w/v
  • the mode of action of the biological composition of the invention is by contact and adherence at any stage and phenophysiological age of the plant, the active ingredients are activated by the conduction systems of the plant cell, its particular characteristic in the formulation, It leads to stimulating vital systems related to the defensive properties of the plant that has been affected by injuries or infection processes by nematodes, organisms that act as pathogenic growth blockers.
  • the biological composition of the invention acts on adult nematodes which lose their reproductive capacity, reduce their motor potential and finally die.
  • the bioactive complexes stop the physiology of ingestion and digestion, paralyzing the nervous and muscular systems, and as a consequence, the normal feeding process is paralyzed, which leads the nematodes to an end.
  • the crops applied with the biological composition of the invention induce resistance mechanisms in plants against adverse conditions caused by the pest of phytonematodes, as well as resistance and overcoming diseases that can worsen the pathological system of the physiological processes expressed by the affected plant, consequently, the biological composition of the invention is also aimed at recovering the physiological processes involved with the safety of the harvest. From the tests carried out in the field when applying the biological composition of bionutrients, unexpectedly two types of effect have been produced;
  • MER* Samples 2 / 5 contiguous floors
  • the field elicitor test demonstrates that the biological composition of the present invention breaks the toxicity scheme presented by the alkaloids disclosed by the INIAP document, so that, when compared with the INIAP tests ( Figure 2), it can be clearly seen that, root development exceeds the damage of INIAP crops since when applying the biological composition of the invention, the percentages of root development are activated in a percentage between 40 and 45% in living roots, which demonstrates an unexpected effect against the known disclosures. At this point, the biological composition of the invention is an excellent elicitor agent.
  • MER* Samples 2 / 5 contiguous floors
  • X is the average sum.
  • the field nematicidal test shows that the biological composition of the present invention exceeds the 39% nematicidal action of the genus brugmancia, thus it also exceeds the 46.25% nematicidal action of the chemical control, the biological composition of the present invention also breaks the scheme of nematicidal toxicity presented by the alkaloids disclosed by the Salazar and Guzmán document, the which reveals a study on the nematicity effect of a composition of alkaloid extracts of Quassia amara and Brugmansia suaveolens on Meloidogyne sp.
  • the in vitro nematicidal action does not reach the mortality values of the chemical control, contrary to the nematicidal action of the biological composition of the present invention, which presents average nematicidal effects of 77% in assays. field, demonstrating an unexpected effect against known disclosures.
  • the biological composition of the invention is an excellent nematicidal agent.
  • the Organic Plasma Nematicide effect originates from the fermentation processes of the biological factions of selected bacterial species, of lacto-levo specialization, whose nematicidal active principles, they are extracted, conserved and potentialized via enzymatic means. It has a translaminar, transcuticular effect, its active ingredients are directed and formulated with substances to attenuate plant stress and stop the mechanical damage caused by lesioning and nodulating nematodes.
  • the biological composition of the invention is a nematicide of organic origin, with a wide field of action designed for both ecto and endoparasitic nematode species.
  • the biological composition acts directly on the vital and reproductive metabolism of the pest, in the processes of juvenile stages, and in adults, it suppresses, neutralizes and eliminates populations of Meloidogyne incognita, M. javanica, Hoplolaimus sp., Rotylenchus sp., nematodes. Pratylenchus sp., Rotylenchus sp., Tylenchulus semipenetrans, Radopholus similis, Trichodorus sp.
  • the biological composition of the present invention is not limited to fractions of each of its components because each treatment and trial responds to different percentages of each of its ingredients and bio-nutrients, the same as claimed in the following set of claims :

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Abstract

La presente invención está relacionada con composiciones biológicas que presenten efectos benéficos para el crecimiento vegetal, un efecto elicitor, así como, una composición biológica que presente actividad nematicida. Es decir, un producto totalmente beneficioso para los cultivos agrícolas.

Description

COMPOSICIÓN ORGÁNICA DE ACCION ELICITOR y NEMATICIDA
CAMPO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a un proceso y composición biológica de acción el icitor, de fortalecimiento del sistema inmune de las plantas, así como de acción insecticida y nematicida.
ANTECEDENTES
En el Ecuador, el Instituto Nacional de Investigaciones Agropecuarias (INIAP) viene realizando con mucho éxito algunas investigaciones sobre la aplicación de los alcaloides del chocho, planta herbácea del género Lupinas Mutabilis Sweet.,
El documento (INIAP) Propiedades y Aplicaciones de los alcaloides del chocho1 señala que, los alcaloides son de tipo quinolizidinico y son de carácter básico.
Los alcaloides del chocho generalmente se extraen con soluciones acuosas de carácter ácido, de esta manera se separan los alcaloides y sus sales y pueden ser recuperados para su utilización. Estos compuestos están presentes en todas las especies del género Lupinus y se distribuye en la planta particularmente en las ramas y semillas (Arias, 2000).
Adicionalmente, el documento INIAP, revela un estudio sobre la toxicidad de los alcaloides del chocho. El estudio señala que, los alcaloides del chocho no inhiben la germinación de las semillas de cereales y leguminosas, sin embargo, presenta ciertas reacciones adversas en las plantas.
1 E. Villacrés, E. Peralta, L. Cuadrado, J. Revelo, S. Abdo, R. Aldaz. Propiedades y Aplicaciones de los alcaloides del chocho (Lupinus mutabilis sweet). Quito-Ecuador. 2009. Páginas 6-8 Mediante ensayos de germinación realizados en semilleros y bajo invernadero se determinó que las soluciones acuosas de los alcaloides quinolizidinicos a concentraciones de 1 ,3; 2,3 y 3,3% utilizadas como agua de riego, no afectan la capacidad ni el poder de germinación de las semillas de haba, fréjol, cebada y maíz, sin embargo, el tamaño de las plantas disminuye en función de la concentración de los alcaloides (Figura 2)
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Como se observa, aunque los alcaloides del chocho actúen como agentes insecticidas y antibacterianos, estos alcaloides afectan el grado de desarrollo de las plantas debido a que es bien conocido que los alcaloides del chocho tienen efectos tóxicos para la salud de un ser vivo mamífero, así también, queda visto que resultan ser tóxicos para el cultivo de las plantas.
El documento patente WO2015079080 (4 junio 2015), revela un método de extracción de alcaloides del lupinus y su uso como biocida ecológico. Este documento revela ensayos de la actividad insecticida de los alcaloides de la semilla del lupinus.
El método consiste en evaluar la eficacia insecticida de las fracciones alcaloideas y no alcaloideas obtenidas de las aguas de desamargam lento de la semilla de lupinus.
Como ensayo modelo se analizaron dichas fracciones como insecticida en el control de pulgones Toxoptera citricidus Kirkaldi, el áfido transmisor del virus de la tristeza de los cítricos (CTV), y sobre otras especies de insectos.
Como ejemplos de los ensayos efectuados se muestra los resultados obtenidos utilizando distintos extractos sobre cuatro especies de homópteros: los áfidos Toxoptera citricidus y Toxoptera aurantii, el pulgón verde del manzano Aphis pomi y el psílido de los eucaliptos Ctenarytaina spatulata.
Se evaluó la eficacia como insecticida de las fracciones alcaloideas a pH 5 y pH 12 y las no alcaloideas obtenidas de las aguas de desamargam lento de la semilla de lupinus frente a pulgones de Toxoptera citricidus Kirkaldi.
Esta patente demuestra que los alcaloides del antramuz (lupinus), son agentes efectivos como insecticidas por sí solos.
El documento patente CN111253185 (9 junio 2020) describe un método para preparar un fertilizante foliar utilizando Ascophyllum nodosum como materia prima y fertilizante foliar, también se refiere al campo técnico de la preparación de fertilizantes. El método de preparación comprende los siguientes pasos:
La preparación de una composición enzimática que puede destruir efectivamente la estructura celular del Ascophyllum nodosum. El fertilizante de la superficie de la hoja se prepara mezclando el extracto de algas de remojo de hojas con fosfato monopotásico y calcio quelado con alcohol de azúcar, y puede ser absorbido rápidamente por los cultivos, complementar de manera integral la nutrición de los cultivos, mejorar las condiciones de crecimiento de los cultivos y mejorar el estrés, resistencia y la calidad del rendimiento de los cultivos cuando se pulverizan sobre la superficie de las hojas de los cultivos.
Según la patente CN111253185, el fertilizante foliar de algas preparado tiene un efecto fertilizante evidente y funciones integrales, puede ajustar eficazmente el potencial de crecimiento de los cultivos y reduce los fenómenos de crecimiento excesivo o debilidad; protegiendo las hojas, mejorando el estado de salud de las hojas y mejorando la eficiencia de la fotosíntesis; se mejora la calidad de la fruta.
BR102018072544 (7 abril 2020) se refiere a una composición nematotóxica y su uso en el control de fitonematodos.
Este documento patente indica en su resumen que, la presente tecnología consiste en una composición nematotóxica, preferentemente utilizada para el control de especies pertenecientes al género meloidogyne sp. la tecnología se basa en la asociación de un hidrogel con derivados de solanum stramonifolium jacq, más particularmente el dializado interno (di) y/o dializado externo (de) obtenido a partir del extracto de solanum stramonifolium jacq (naranjilla), la composición demostró ser bastante eficiente, alcanzando aproximadamente el 100% de letalidad contra juveniles de segunda etapa (ej2) de meloidogyne incognita en bioensayos realizados in vitro, así, la referida composición puede ser utilizada en el control progresivo y persistente de fitomatomatoides del género meloidogyne sp., permitiendo la liberación gradual de fracciones nematotóxicas al suelo, otras ventajas como la termoestabilidad, la ausencia de citotoxicidad y especificidad frente a organismos no objetivo también están asociadas con la tecnología. Finalmente, todos los componentes involucrados en la elaboración de la composición se presentan como parte de un posible sistema de producción sustentable (semillas, hidrogel, agua), minimizando los impactos en humanos, animales, medio ambiente y costos asociados.
Como se observa, aunque se trate de alcaloides orgánicos, el resumen de este documento no revela los alcaloides de la presente invención.
El documento de Salazar y Guzmán2 revela un estudio sobre el efecto nematicidad de una composición de extractos de alcaloides de Quassia amara y Brugmansia suaveolens sobre Meloidogyne sp.
En el Cuadro 2 (página 115), constan los resultados del estudio sobre el porcentaje de mortalidad de juveniles de Meloidogyne sp. expuestos al extracto de Brugmansia suaveolens en condiciones in vitro en el año 2012. León, Nicaragua.
Figure imgf000005_0001
2 SALAZAR Y GUZMÁN: Extractos botánicos para el control Meloidogyne sp. en tomate AGRONOMÍA MESOAMERICANA 25(1 ): 111-119. 2014 https://www.redalyc.org/pdf/437/4373049501 1 .pdf Números seguidos por la misma letra y dentro de la misma columna no son significativamente diferentes (P<0,05) según la prueba de Rangos múltiples de Duncan al 5%.
Los datos del ensayo muestran que a medida que avanza el tiempo de exposición del Meloidogyne sp., al extracto de Brugmansia suaveolens, la mortalidad o efecto nematicida aumenta, pero no alcanza al efecto nematicida del testigo químico, es más, la acción nematicida es limitado.
La patente ES 2 575 113 (24 junio 2016), revela un método para producir un fertilizante mejorado que comprende una combinación de especies bacterianas, trabajando las especies bacterianas en cooperación, preferiblemente sinérgicamente, para la mejora del crecimiento, desarrollo y rendimiento de la planta.
En el EJEMPLO I, la preparación del fertilizante mejorado comprende dos tipos de fermentos:
El fermento I contenía únicamente Lactobacillus acidophilus. El Lactobacillus acidophilus se incubó a una temperatura de aproximadamente 30 ± 3 °C en un medio de cultivo basado en suero. Esta bacteria puede incubarse a otras temperaturas de 5 °C hasta su temperatura letal máxima. Un experto en la técnica comprenderá que cuando se usan otras cepas, la temperatura óptima y los rangos de crecimiento diferentes variarán consecuentemente.
El fermento II contenía Bacillus subtilus, Bacillus licheniformis y Pseudomonas putida. Bacillus subtilus, Bacillus licheniformis y Pseudomonas putida.
Se cultivaron conjuntamente a una temperatura de aproximadamente 27 ± 2 °C en un medio de cultivo basado en suero. La forma no esporulante de los miembros de la familia Bacillus se escogen porque están en su estado más activo. Las bacterias pueden incubarse a otras temperaturas dentro de sus rangos de crecimiento. Un experto en la técnica comprenderá que cuando se usan otras cepas, la temperatura de crecimiento óptima y los intervalos de crecimiento vaharán. Una vez que los cultivos bacterianos alcanzaron 108 -109 bacterias células por mi, el fermento I y el fermento II se enfriaron (con un baño de hielo) y se pulverizaron concurrentemente sobre partículas de fertilizante. El fertilizante que se pulveriza puede ser cualquier fertilizante mineral recomendado por un especialista en fertilizantes del campo de acuerdo con los resultados del análisis del suelo para una planta específica. Cada fermento se atomizó por separado y se pulverizó concurrentemente sobre partículas de fertilizante móviles. La Tabla 1 indica las diversas combinaciones de los fermentos pulverizados sobre el fertilizante usado.
Como se observa, aunque, el medio de cultivo parte del suero de leche, el fertilizante se prepara con el cultivo y extracción de 2 tipos de bacterias generadas a partir del suero de la leche.
El documento de la FAO3, Biopreparados para el manejo sostenible de plagas y enfermedades en la agricultura urbana y periurba, revela un biofertilizante liquido enriquecido, preventivo de plagas y enfermedades, en el que se utiliza como ingrediente leche o suero de leche ya que actúa fundamentalmente como estimulador de crecimiento dado su alto contenido de nitrógeno y minerales. Además, vivifica el suelo y la flora en la hoja por su alta carga de microorganismos benéficos. Aporta enzimas, aminoácidos y otras sustancias al suelo y a las plantas, aumentando la diversidad y la disponibilidad de nutrientes mejorando la sanidad, el desarrollo y la producción de las plantas tratadas.
De los documentos del estado de la técnica se puede apreciar que existe la necesidad de composiciones biológicas, que sean amigables con el medio ambiente y que, a la vez, tengan la fuerza de ejercer efectos benéficos en el cultivo de las plantas, por lo tanto, la presente invención proporciona una composición biológica que supera los efectos benéficos de los cultivos, logrando efectos inesperados elicitores.
DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
Figura 1. Muestra el efecto elicitor sobre el crecimiento porcentual de raíces en plantas de banano producidas bajo el efecto elicitor de la composición biológica de la presente invención (Figuras 1a - 1 h)
3 IPES, RUAF Fundation, FAO. Biopreparados para el manejo sostenible de plagas y enfermedades en la agricultura urbana y periurba, Numeral 2. http://www.fao.Org/3/a-as435s.pdf Figura 2. Muestra el efecto nematicida sobre la sobrevivencia de especies nemátidas que atacan las raíces en plantas de banano, su efecto porcentual nematicida bajo el efecto de la composición biológica de la presente invención (Figuras 1 ¡ - 1 p)
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
La presente invención proporciona una composición biológica que favorece los cultivos de las plantas de una manera eficaz y segura con resultados en campo inesperados.
Dentro de los beneficios de la composición biológica, se encuentra la recuperación y la permeabilidad de los suelos que están en contacto directo con las raíces de las plantas, es así que, gracias a la composición biológica de la presente invención, los nutrientes se reparten en forma de macro y micronuthentes, motivo por el cual favorece la permeabilidad del suelo y el alcance de los nutrientes hacia las raíces y la total afectación sobre la producción vegetativa.
Se debe entender como “la composición biológica de la invención” aquella que se caracteriza por contener una gama extensa de bio-nutrientes, especialmente la mezcla de alcaloides del género Lupinus, muy conocido en nuestro medio como chocho; así también, aquellas sustancias biológicas extraídas de las flores y/o las hojas de ciertas plantas, entre ellas de preferencia los alcaloides del género Brugmansia; contiene además nutrientes orgánicos provenientes de un producto lácteo tal como la leche, yogurt o un licor del suero de la leche, enriquecidos con bio-nutrientes; La composición biológica actúa sinérgicamente ejerciendo un efecto altamente elicitor y ejerciendo un efecto altamente eficaz contra los nematodos que infectan las raíces de las plantas.
Se debe entender como “bio-nutrientes” aquella materia biológica resultante del cultivo de la mezcla de microorganismos provenientes de un producto lácteo tal como la leche, yogurt y/o suero de la leche, tales bio-nutrientes son por ejemplo, Lactobacillus sp., Regulador de la acides del medio; Lactococcus sp., Catalítico proteico, activador peptídico; Leuconostoc sp., Agente plásmico; Lactosphaera spp., Formador de cadenas trofobioticas vitamínicas; Pedicoccus sp., Encapsulador mineral plasmidico; Streptococcus spp., Desdoblador lipídico, encapsulador catalítico; Mlissococcus sp., Componente trofobiotico aporta con metabolites secundarios para la estructuración plásmica; Oenococcus sp. , Catalítico lipídico; Aerococcus sp., Encapsulador peptídico; Carnobacterium sp., Chaperon metabólico 1 como componente del mapa trofobiotico; Enterococcus sp., Aporta metabolites secundarios en la construcción de mapas trofobioticos lácticos; Dolosigranulum sp., Chaperon metabólico trofobiotico; Globicatella sp., Catalítico vitamínico; Teragenococcus sp., Catalítico peptídico; Alloiococcus sp., Aporta con metabolites secundarios antimicrobianos; Streptococcus sp., Chaperon energético de cadenas trofobioticas internas; Vagococcus sp y Weisella sp., Aportan con metabolites secundarios antimicrobianos; Lacobacillus delbrueckii, Catalítico de acidificación; L plantarum, Equilibrante de la expresión de acidificación del medio; L bulgaricus, Desdoblador de lactosa hacia ácido láctico; L helveticus, L casei, Catalíticos de acidificación; S. lactis, S. cremoris, S. faecalis, S. thermophilus, P. cerevisiae, Catalíticos proteicos. Estos bio-nutrientes tienen la función de fortalecer los sustratos con los que actúa. Por un lado, la composición biológica entrega los bio- nutrientes tanto al sustrato o suelo como a los vegetales en forma directa, los bio- nutrientes llegan a las raíces de las plantas provocando un crecimiento inesperado de raíces jóvenes y saludables, produciendo un efecto elicitor inesperado. Por otro lado, los ingredientes de la composición biológica, especialmente la mezcla de alcaloides y nutrientes orgánicos actúan sinérgicamente contra los nematodos que infectan las raíces de las plantas, produciendo un efecto nematicida inesperado y prolongado en el tiempo, su efecto se ha llegado a evaluar hasta los 8 meses después de su primera aplicación.
Cuando hablamos de “bio-alcaloides” se debe entender aquellas sustancias biológicas extraídas de ciertas leguminosas, de las flores y/o las hojas de ciertas plantas, entre ellas de preferencia los alcaloides del género Lupinus, muy conocido en nuestro medio como chocho; así también, aquellas sustancias biológicas extraídas de las flores y/o las hojas de ciertas plantas, entre ellas de preferencia los alcaloides del género Brugmansia. Estos alcaloides se caracterizan por su alto grado de toxicidad, sin embargo, la composición biológica de la presente invención, logra extrapolar sus efectos para obtener resultados altamente satisfactorios en el campo agrícola.
El término “lácteo” se refiere al producto industrial lácteo como la leche, yogurt y/o el producto residual de la industria quesera, un licor de suero de leche, ingredientes que por su naturaleza contiene lactosa que aporta [3-D-galactop¡ranos¡l-(1— >4)-D- glucopiranosa, Grasa por su aporte energético, Proteínas tipo Anfolita, Caseinate de sodio, alfa, beta, k caseína, albúmina, globulina, micelas, Calcio Ca orgánico de alta asimilación vegetal, Fosforo por su Aporte energético para procesos vitales, altamente disponible a procesos energéticos; Las proteínas son del tipo Alfa-Lactoalbumina que actúan quelando los minerales como el Ca, Zn, Mn, Cd, Cu, Al, proteína de log 4,146128 Daltons; Las [3-Lactoglobulina que actúa como Emulsificante, gelificacion; una Proteína con un peso molecular de log 4,227 Daltons, de cadenas ramificadas, portadores de aminoácidos esenciales; Albúmina de suero bovino, Proteina de log 4,81954393, aporta con aminoácidos esenciales; Inmunoglobulinas, Proteína de log 5,17609 Daltons; Lactoferhna, Antiparasitico, anti fúngico, antiviral, antibacteriano, proteasa, inhibidor proteasa, ribonucleasa, absorción de hierro. Proteína de log 4,88649 Daltons; Transferina, Siderofilina, importante en la quelacion de Fe; Lactoperoxidasa, Proteína bactericida de log 4,88649 Daltons; Lactato de potasio, Regulador del pH, altamente efectivo como antioxidante, antimicrobiano; Proteosa-Peptona, Aporte de polipéptidos y N; Glicomacropeptido, Proteína de log 3,934498 Daltons, es fuente de aminoácidos especialmente de cadena ramificada, no tiene aminoácidos aromáticos; vitaminas, B1 y B2, Activadores energéticos orgánicos para procesos energéticos celulares vegetales; B3, Catalítico de complejos lipidíeos, para la formación de complejos nutricionales; B5, Biocatalitzador enzimático en procesos de recuperación celular o compensadores fisiológicos de los productos fotosintéticos; B6, Activador metabólico energético; B12, Activador catalítico del metabolismo energético de las células vegetales. Coadyuva la tasa de eficiencia fotosintética, especialmente en épocas de estrés vegetal, como es el caso de sequías o bajas temperaturas; Vit C, Poderoso antioxidante, en procesos de degradación de ingredientes activos biológicos; Minerales, Calcio, potasio, fósforo, magnesio.
En general, la composición biológica de la solicitud contiene además un fertilizante biológico tal como la lactosa que aporta [3-D-galactopiranosil-(1 ^4)-D-glucopiranosa y/o Grasa y/o Proteínas tipo Anfolita y/o Lactoalbumina y/o Beta-Lactoglobulina y/o Caseinato de sodio y/o Albúmina de suero bovino y/o Inmunoglobulinas y/o Lactoferrina y/o Transferina y/o Siderofilina y/o Lactoperoxidasa y/o Lactato de potasio y/o Proteasa- Peptona y/o Glicomacropeptido, vitaminas B1 , B2, B3, B5, B6, B12, Vit C, minerales como Calcio orgánico, Al, P, K, P, Mg, Zn, Mn, Cd, Cu. Los productos lácteos que por su naturaleza contiene nutrientes útiles para el cultivo de ciertos microorganismos benéficos ya que contiene lactoalbúminas, lactoferhnas. Según Brito Hannibal4, el lactosuero o suero de leche es el líquido que se separa durante la obtención del queso y contiene los componentes que no se integran en la coagulación de la caseína. Posee alto contenido nutritional, sin embargo, un porcentaje ínfimo es utilizado como alimento para animales de granja y el restante desechado, causando problemas de contaminación en ríos y suelos. Las proteínas y lactosa se transforman en contaminantes cuando el suero de leche es arrojado al ambiente debido a la carga de materia biológica que contiene. El suero de leche permite la reproducción de microorganismos produciendo cambios significativos en la Demanda Bioquímica de Oxígeno del agua, además la cantidad de ácido láctico, altera significativamente los procesos biológicos. Por lo anterior, se planteó la posibilidad de aprovechar la alta cantidad de nutrientes y aminoácidos presentes en el suero de leche, por medio de la elaboración de una bebida energizante, tomando en consideración el creciente número de estudiantes universitarios que las consumen y el impacto ambiental producido por las industrias lácteas al descartar el lactosuero. En base a ensayos experimentales se seleccionó el proceso más adecuado para la preparación de la bebida energizante dando como resultado dos formulaciones con diferente composición. La aptitud de la bebida para el consumo se determinó a través de análisis físicos, químicos y microbiológicos basados en la norma del Instituto Ecuatoriano de Normalización (INEN):2609 (2012), Bebidas de suero lácteo. A través de encuestas aplicadas a estudiantes universitarios se determinó el consumo de energizantes y las mejores características organolépticas consiguiendo la formulación de mayor aceptabilidad.
Según Dora Alicia Rodríguez-Franco5 La lactofemna (Lf) es una glicoproteína multifuncional que presenta la capacidad de unir hierro. Una de las funciones primordiales de la Lf es el transporte de metales. También actúa como proteína de
4 Brito Hannibal Docente Investigador Grupo de Investigación Ambiental y Desarrollo de la ESPOCH (GIADE)Aprovechamiento del suero de leche como bebida energizante para minimizar el impacto ambiental https://www.researchgate.net/profile/Hannibal_Brito/publication/315455479_APROVECHAMIENTO_DEL_SUERO_ DE_LECHE_COMO_BEBIDA_ENERGIZANTE_PARA_MINIMIZAR_EL_IMPACTO_AMBIENTAL/links/58dOa947a 6fdcc344bOc12e3/APROVECHAMIENTO-DEL-SUERO-DE-LECHE-COMO-BEBIDA-ENERGIZANTE-PARA- MINIMIZAR-EL-IMPACTO-AMBIENTAL.pdf
5 Dora Alicia Rodríguez-Franco. Actividad antimicrobiana de la lactoferrina: Mecanismos y aplicaciones clínicas potenciales. Revista Latinoamericana de Microbiología. Vol. 47, Nos. 3-4. Julio - Septiembre. 2005. Octubre - Diciembre. 2005. pp. 102 - 111 defensa no específica. La Lf se encuentra en diversas secreciones mucosas como la leche, las lágrimas y la saliva.
También es un componente abundante de los neutrófilos y puede ser liberada al plasma sanguíneo por la acción de éstos. Las lactofemnas humana y bovina, despliegan un amplio espectro antimicrobiano, actuando contra bacterias Gram positivas y Gram negativas y contra algunos virus y hongos. Inicialmente se pensó que esta actividad antimicrobiana se debía únicamente a su capacidad de secuestrar hierro. En la actualidad, se sabe que existen diversos mecanismos que contribuyen a la capacidad de esta glicoproteína, para defender a los mamíferos de las infecciones microbianas, presenta un panorama del conocimiento actual acerca de dichos mecanismos y de las aplicaciones clínicas potenciales de la Lf, contra infecciones microbianas. Sin embargo, la presente invención toma en cuenta estas propiedades que contiene la Lf para aplicarlas en el campo agrícola, hecho que ha generado resultados inesperados debido a la fragilidad de degradación que presenta la Lf liberada al ambiente.
La “composición biológica” de la presente invención además de la composición de alcaloides del Lupinus y alcaloides del tropano del género Brugmansia incluye al menos un fertilizante biológico, tal y como por ejemplo un concentrado o extracto de algas del género Ascophyllum nodosum, las cuales aportan yodo como catalizador y nutrientes para fertilización foliar.
Se debe precisar que todos y cada uno de los “microorganismos” de la invención son todos aquellos microorganismos benéficos que se obtienen a partir del cultivo del producto lácteo, yogurt y/o suero de la leche, entre los más preferidos son los descritos en la composición biológica de la invención:
Lactobacillus sp., Regulador de la acides del medio; Lactococcus sp., Catalítico proteico, activador peptídico; Leuconostoc sp., Agente plásmico; Lactosphaera spp., Formador de cadenas trofobioticas vitamínicas; Pedicoccus sp., Encapsulador mineral plasm idico; Streptococcus spp., Desdoblador lipídico, encapsulador catalítico; Mlissococcus sp., Componente trofobiotico aporta con metabolites secundarios para la estructuración plásmica; Oenococcus sp., Catalítico lipídico; Aerococcus sp., Encapsulador peptídico; Carnobacterium sp., Chaperon metabólico 1 como componente del mapa trofobiotico; Enterococcus sp., Aporta metabolites secundarios en la construcción de mapas trofobioticos lácticos; Dolosigranulum sp., Chaperon metabólico trofobiotico; Globicatella sp., Catalítico vitamínico; Teragenococcus sp., Catalítico peptídico; Alloiococcus sp., Aporta con metabolites secundarios antimicrobianos; Streptococcus sp., Chaperon energético de cadenas trofobioticas internas; Vagococcus sp y Weisella sp., Aportan con metabolites secundarios antimicrobianos; Lacobacillus delbrueckii, Catalítico de acidificación; L plantarum, Equilibrante de la expresión de acidificación del medio; L bulgaricus, Desdoblador de lactosa hacia ácido láctico; L helveticus, L casei, Catalíticos de acidificación; S. lactis, S. cremoris, S. faecalis, S. thermophilus, P. cerevisiae, Catalíticos proteicos.
La composición biológica de la invención, contiene más de 20 sustancias bio-activas, sustancias biológicas de alta calidad, diseñadas para actuar tanto como agente elicitor, así como agente nematicida.
Los fertilizantes biológicos que forman parte de la invención, son adecuados y compatibles con la composición microbiológica de acuerdo con la presente invención, tienen el objeto de promover el crecimiento y/o rendimiento de las plantas, estos fertilizantes incluyen microbios, animales, bacterias, hongos, material genético, plantas y residuos orgánicos ricos en nitrógeno.
Las propiedades fitoerapéuticas de la composición biológica de la invención, se debe a más de 20 substancias activas formuladas en la composición biológica del producto con propiedades únicas y de alta intensidad productiva.
Ejemplo de realización de la invención
La composición biológica de la invención está conformada por:
* Un concentrado sólido o extracto acuoso y/o hidroalcohólico de los alcaloides proveniente de las semillas del género lúpinus, que comprende entre el 0,3 al 90% de la formulación, entre el 0,3 y 83-86% de la formulación, entre el 0,3 y 80-82 % de la formulación, entre el 0,3 y 75-78% de la formulación, entre el 0,3 y 50-60% de la formulación, o entre el 0,3 y 40-45% de la formulación en peso volumen p/v. * Un concentrado sólido o extracto acuoso y/o hidroalcohólico de los alcaloides proveniente de las flores, y/o semillas, y/o hojas y/o tallos del género Brugmansia, que comprende entre el 0,3 al 10-15% de la formulación, entre el 0,3 y 5-9% de la formulación, entre el 0,3-1 y 3-5 % de la formulación, entre el 1 y 2% de la formulación y entre el 0,3 y 1 ,5-2% de la formulación en peso p/v.
* Un producto lácteo tal como la leche, yogurt y/o licor de suero de leche que comprende lactosa que aporta [3-D-galactopiranosil-(1 ^4)-D-glucopiranosa y/o Grasa y/o Proteínas tipo Anfolita y/o Lactoalbumina y/o Beta-Lactoglobulina y/o Caseinato de sodio y/o Albúmina de suero bovino y/o Inmunoglobulinas y/o Lactofemna y/o Transferina y/o Siderofilina y/o Lactoperoxidasa y/o Lactato de potasio y/o Proteasa- Peptona y/o Glicomacropeptido, su contenido se encuentra entre el 5 al 50% de la formulación, entre el 5 y 40% de la formulación, entre el 5 y 30 % de la formulación, entre el 3 y 20% de la formulación, entre el 3 y 10-15% de la formulación, entre el 3-5 y 8-15% de la formulación en peso p/v.
* Una fuente de energía a base de azúcares, que comprende entre el 1 al 10% de la formulación, entre el 0,5 al 5% de la formulación o que comprende entre el 0,3-0, 4 al 1 - 2% de la formulación.
* Bio-nutrientes a base de microorganismos cultivados del producto lácteo, entre los cuales se encuentran Lactobacillus sp., Regulador de la acides del medio; Lactococcus sp., Catalítico proteico, activador peptídico; Leuconostoc sp., Agente plásmico; Lactosphaera spp., Formador de cadenas trofobioticas vitamínicas; Pedicoccus sp., Encapsulador mineral plasm idico; Streptococcus spp., Desdoblador lipídico, encapsulador catalítico; Mlissococcus sp., Componente trofobiotico aporta con metabolites secundarios para la estructuración plásmica; Oenococcus sp., Catalítico lipídico; Aerococcus sp., Encapsulador peptídico; Carnobacterium sp., Chaperon metabólico 1 como componente del mapa trofobiotico; Enterococcus sp., Aporta metabolites secundarios en la construcción de mapas trofobioticos lácticos; Dolosigranulum sp., Chaperon metabólico trofobiotico; Globicatella sp., Catalítico vitamínico; Teragenococcus sp., Catalítico peptídico; Alloiococcus sp., Aporta con metabolites secundarios antimicrobianos; Streptococcus sp., Chaperon energético de cadenas trofobioticas internas; Vagococcus sp y Weisella sp., Aportan con metabolites secundarios antimicrobianos; Lacobacillus delbrueckii, Catalítico de acidificación; L plantarum, Equilibrante de la expresión de acidificación del medio; L bulgaricus, Desdoblador de lactosa hacia ácido láctico; L helvéticas, L casei, Catalíticos de acidificación; S. lactis, S. cremoris, S. faecalis, S. thermophilus, P. cerevisiae, Catalíticos proteicos, que comprende entre el 5 al 50% de la formulación, entre el 5 y 40% de la formulación, entre el 5 y 30 % de la formulación, entre el 3 y 20% de la formulación y entre el 3 y 10-15% de la formulación en peso p/v.
* Un catalizador biológico rico en yodo, que en este caso es un concentrado sólido o extracto líquido y/o extracto hidroalcoholico de algas del género Ascophyllum Nodosum, comprendido entre el 1 y 5 % de la formulación, entre el 0,5 y 4 % de la formulación entre el 0,5 y 3 % de la formulación, entre el 0,5 y 2 % de la formulación en peso volumen p/v
* Vitaminas B1 , B2, B3, B5, B6, B12, Vit C.
* Minerales tales como Calcio orgánico, K, P, Mg, Zn, Mn, Cd y Cu.
Ensayos de campo
El modo de acción de la composición biológica de la invención es por contacto y adherencia en cualquier estadio y edad feno-fisiológica de la planta, los ingredientes activos son activados por los sistemas de conducción de la célula vegetal, su particular característica en la formulación, conlleva a estimular sistemas vitales relacionados con las propiedades defensivas del vegetal que ha sido afectado por causa de lesiones o procesos de infección por nematodos, organismos que actúan como bloqueadores de crecimiento patogénico.
La composición biológica de la invención, actúa sobre los nematodos adultos los cuales pierden la capacidad reproductiva, reducen su potencial motriz y finalmente mueren. Además, entre otros mecanismos los complejos bioactivos detienen la fisiología de ingestión y digestión, paralizando el sistema nervioso y muscular, y como consecuencia se paraliza el proceso normal de alimentación lo que conduce a los nematodos a su fin.
Para el caso de tratamientos preventivos con la composición biológica de la invención, se tiene resultados excelentes ya que cuando se aplica la composición biológica sobre las porciones del vegetal tratadas en forma preventiva, la planta se toma desagradable para la plaga y el nematodo o plaga pierde el interés, especialmente por las porciones del vegetal que contiene o se encuentra impregnado con el ingrediente activo de la invención.
Los cultivos aplicados con la composición biológica de la invención, inducen mecanismos de resistencia en las plantas frente a condiciones adversas originadas por la plaga de fitonemátodos, así también, resistencia y superación sobre enfermedades que pueden empeorar el sistema patológico de los procesos fisiológicos expresados por el vegetal afectado, en consecuencia, la composición biológica de la invención se direcciona también a recuperar los procesos fisiológicos involucrados con la inocuidad de cosecha. De los ensayos realizados en campo al aplicar la composición biológica de bio- nutrientes, en forma inesperada se ha llegado a producir dos tipos de efecto;
1. EFECTO ELICITOR
Actúa sobre las raíces y producción vegetativa, lo cual se detalla en los siguientes ensayos:
CAR*: Muestra 1
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MER*: Muestras 2 /5 plantas contiguas
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SAN* Muestra 1
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VIZ* Muestra 1
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BA9* Muestra 1
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PAT4*; Muestra 1
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PAT5*; Muestra 1
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SEMP*; Muestra 1
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El ensayo elicitor de campo demuestra que, la composición biológica de la presente invención rompe el esquema de toxicidad que presentan los alcaloides divulgados por el documento INIAP, es así que, al comparar con los ensayos de INIAP (Figura2) se puede ver claramente que, el desarrollo radicular supera el perjuicio de los cultivos de INIAP ya que al aplicar la composición biológica de la invención, los porcentajes del desarrollo radicular se activan en porcentaje entre el 40 y 45 % en raíces vivas, lo que demuestra un efecto inesperado frente a las divulgaciones conocidas. En este punto, la composición biológica de la invención es un excelente agente elicitor.
2. EFECTO NEMATICIDA PLASMA ORGÁNICO (NO-O)
Actúa sobre varias especies de nematodos, lo cual se detalla en los siguientes ejemplos:
CAR*: Muestra 1
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MER*: Muestras 2 /5 plantas contiguas
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SAN* Muestra 1
Figure imgf000019_0003
Figure imgf000020_0001
VIZ* Muestra 1
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BA9* Muestra 1
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PAT4*; Muestra 1
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PAT5*; Muestra 1
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SEMP*; Muestra 1
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X es la sumatoria media.
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El ensayo Nematicida de campo demuestra que, la composición biológica de la presente invención supera el 39% de acción nematicida del género brugmancia, así también supera el 46,25% de acción nematicida del testigo químico, la composición biológica de la presente invención también rompe el esquema de toxicidad nematicida que presentan los alcaloides divulgados por el documento de Salazar y Guzmán, el cual revela un estudio sobre el efecto nematicidad de una composición de extractos de alcaloides de Quassia amara y Brugmansia suaveolens sobre Meloidogyne sp.
En Salazar y Guzmán, en el Cuadro 2 (página 115), constan los resultados del estudio sobre el porcentaje de mortalidad de juveniles de Meloidogyne sp. expuestos al extracto de Brugmansia suaveolens en condiciones in vitro.
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Como se observa, según Salazar y Guzmán, la acción nematicida in vitro, no alcanza los valores de mortalidad del testigo químico, contrario a la acción nematicida de la composición biológica de la presente invención, que presenta efectos nematicidas promedio de 77% en ensayos de campo, lo que demuestra un efecto inesperado frente a las divulgaciones conocidas. En este punto, la composición biológica de la invención es un excelente agente nematicida.
De los ensayos realizados se ha podido establecer que, el efecto Nematicida Plasma Orgánico (NO-O), se origina a partir de los procesos de fermentación de las facciones biológicas de especies bacterianas seleccionadas, de especialización lacto-levo, cuyos principios activos nematicidas, son extraídos, conservados y potencial izados vía enzimática. Posee efecto translaminar, transcuticular, sus ingredientes activos son direccionados y formulados con substancias para atenuar el estrés vegetal y detener el daño mecánico ocasionado por nematodos lesionadores y noduladores. La composición biológica de la invención es un nematicida de origen orgánico, con un amplio campo de acción diseñado para especies de nemátodos tanto ecto como endoparásitos. La composición biológica actúa directamente sobre el metabolismo vital y reproductivo de la plaga, en los procesos de estados juveniles, y en los adultos, suprime, neutraliza y elimina poblaciones de nemátodos Meloidogyne incognita, M. javanica, Hoplolaimus sp., Rotylenchus sp., Pratylenchus sp., Rotylenchus sp., Tylenchulus semipenetrans, Radopholus similis, Trichodorus sp. La composición biológica de la presente invención no está limitada a fracciones de cada uno de sus componentes debido a que cada tratamiento y ensayo responde a diferentes porcentajes de cada uno de sus ingredientes y bio-nuthentes, la misma que se reclama en el siguiente juego reivindicatorío:

Claims

COMPOSICIÓN ORGÁNICA DE ACCION ELICITOR y NEMATICIDA
PLIEGO REIVINDICATORIO
Reivindicación 1.- La composición orgánica sólida o líquida de acción elicitor y nematicida, CARACTERIZADA POR: a) Un concentrado sólido o extracto acuoso y/o hidroalcohólico de los alcaloides proveniente de las semillas del género lúpinus, que comprende entre el 0,3 al 90% de la formulación en peso volumen p/v; b) Un concentrado sólido o extracto acuoso y/o hidroalcohólico de los alcaloides proveniente de las flores, y/o semillas, y/o hojas y/o tallos del género Brugmansia, que comprende entre el 0,3 al 10-15% de la formulación en peso volumen p/v; c) Un nutriente orgánico que es un producto lácteo tal como la leche, yogurt y/o licor de suero de leche que comprende lactosa y/o Grasa y/o Proteínas tipo Anfolita y/o Lactoalbumina y/o Beta-Lactoglobulina y/o Caseinato de sodio y/o Albúmina de suero bovino y/o Inmunoglobulinas y/o Lactoferrina y/o Transfehna y/o Siderofili na y/o Lactoperoxidasa y/o Lactato de potasio y/o Proteasa-Peptona y/o Glicomacropeptido, su contenido se encuentra entre el 5 al 50% de la formulación en peso volumen p/v; d) Una fuente de energía a base de azúcares, que comprende entre el 0,3 al 10% de la formulación, en peso volumen p/v; e) Bio-nutrientes a base de microorganismos cultivados del producto lácteo, entre los cuales se encuentran Lactobacillus sp; Lactococcus sp; Leuconostoc sp; Lactosphaera spp; Pedicoccus sp; Streptococcus spp; Mlissococcus sp; Oenococcus sp; Aerococcus sp; Carnobacterium sp; Enterococcus sp; Dolosigranulum sp; Globicatella sp; Teragenococcus sp; Alloiococcus sp; Streptococcus sp; Vagococcus sp y Weisella sp; Lacobacillus delbrueckü; L. plantarum; L. bulgaricus; L. helveticus; S. lactis, S. cremoris, S. faecalis, S. thermophilus, P. cerevisiae, Catalíticos proteicos, que comprende entre el 1 al 15% de la formulación en peso volumen p/v; f) Un catalizador biológico rico en yodo, es un concentrado sólido o extracto líquido y/o extracto hidroalcoholico de algas del género Ascophyllum Nodosum, comprendido entre el 1 y 5 % de la formulación en peso volumen p/v; g) Vitaminas B1 , B2, B3, B5, B6, B12, Vit C; h) Minerales tales como Calcio orgánico, Al, K, P, Mg, Zn, Mn, Cd y Cu.
Reivindicación 2.- La composición orgánica de la reivindicación 1 , CARACTERIZADA PORQUE, el concentrado sólido o extracto acuoso y/o hidroalcoholico de los alcaloides proveniente de las semillas del género lúpinus, comprende entre el comprende entre el 0,3 al 90% de la formulación, entre el 0,3 y 83-86% de la formulación, entre el 0,3 y 80- 82 % de la formulación, entre el 0,3 y 75-78% de la formulación, entre el 0,3 y 50-60% de la formulación, o entre el 0,3 y 40-45% de la formulación en peso volumen p/v.
Reivindicación 3.- La composición orgánica de la reivindicación 2, CARACTERIZADA PORQUE, el concentrado sólido o extracto acuoso y/o hidroalcoholico de los alcaloides proveniente de las flores, y/o semillas, y/o hojas y/o tallos del género Brugmansia, que comprende entre el 0,3 al 10-15% de la formulación, entre el 0,3 y 5-9% de la formulación, entre el 0,3-1 y 3-5 % de la formulación, entre el 1 y 2% de la formulación y entre el 0,3 y 1 ,5-2% de la formulación en peso volumen p/v;
Reivindicación 4.- La composición orgánica de la reivindicación 3, CARACTERIZADA PORQUE el nutriente orgánico es un producto lácteo tal como la leche, yogurt y/o licor de suero de leche comprende lactosa que aporta [3-D-galactop¡ranos¡l-(1 — >4)-D- glucopiranosa y/o Grasa y/o Proteínas tipo Anfolita y/o Lactoalbumina y/o Beta- Lactoglobulina y/o Caseinato de sodio y/o Albúmina de suero bovino y/o Inmunoglobulinas y/o Lactoferrina y/o Transferina y/o Siderofilina y/o Lactoperoxidasa y/o Lactato de potasio y/o Proteasa-Peptona y/o Glicomacropeptido, su contenido se encuentra entre el 5 al 50% de la formulación, entre el 5 y 40% de la formulación, entre el 5 y 30 % de la formulación, entre el 3 y 20% de la formulación, entre el 3 y 10-15% de la formulación, entre el 3-5 y 8-15% de la formulación en peso volumen p/v;
Reivindicación 5.- La composición orgánica de la reivindicación 4, CARACTERIZADA
PORQUE, la fuente de energía a base de azúcares, comprende entre el 1 al 10% de la formulación, entre el 0,5 al 5% de la formulación o que comprende entre el 0,3-0, 4 al 1 - 2% de la formulación.
Reivindicación 6.- La composición orgánica de la reivindicación 5, CARACTERIZADA PORQUE, la fuente de Bio-nuthentes a base de microorganismos cultivados del producto lácteo, entre los cuales se encuentran Lactobacillus sp; Lactococcus sp; Leuconostoc sp; Lactosphaera spp; Pedicoccus sp; Streptococcus spp; Mlissococcus sp; Oenococcus sp; Aerococcus sp; Carnobacterium sp; Enterococcus sp; Dolosigranulum sp; Globicatella sp; Teragenococcus sp; Alloiococcus sp; Streptococcus sp; Vagococcus sp y Weisella sp; Lacobacillus delbrueckii ; L. plantarum; L. bulgaricus; L. helveticus; S. lactis, S. cremohs, S. faecalis, S. thermophilus, P. cerevisiae, comprende entre el 1 al 15% de la formulación, entre el 5 y 10% de la formulación, entre el 1 y 5 % de la formulación, entre el 0,5 y 1 % de la formulación y entre el 0,3 y 1 -2% de la formulación en peso p/p.
Reivindicación 7.- La composición orgánica de la reivindicación 6, CARACTERIZADA PORQUE, el catalizador biológico rico en yodo, es un concentrado sólido o extracto líquido y/o extracto hidroalcoholico de algas del género Ascophyllum Nodosum, comprendido entre el 1 y 5 % de la formulación, entre el 0,5 y 4 % de la formulación entre el 0,5 y 3 % de la formulación, entre el 0,5 y 2 % de la formulación en peso volumen p/v.
Reivindicación 8.- La composición orgánica de la reivindicación 7, CARACTERIZADA PORQUE, incluye Vitaminas B1 , B2, B3, B5, B6, B12, Vit C; y minerales como Calcio orgánico, Al, P, K, Mg, Zn, Mn, Cd, Cu.
Reivindicación 9.- Un método para producir La composición orgánica sólida o líquida de acción elicitor y nematicida de las reivindicaciones 1 a 8, CARACTERIZADA PORQUE, se incorporan los siguientes ingredientes, previo su tratamiento de extracción: a) El concentrado sólido o extracto acuoso y/o hidroalcoholico de los alcaloides proveniente de las semillas del género lúpinus, son extraídos en autoclave por medio de infusión y/o maceración por periodos entre 12 a 24 horas; b) El concentrado sólido o extracto acuoso y/o hidroalcohólico de los alcaloides proveniente de las flores, y/o semillas, y/o hojas y/o tallos del género Brugmansia, son extraídos en autoclave por medio de infusión y/o maceración por periodos entre 1 a 3 y 4 semanas; c) El nutriente orgánico es un producto lácteo tal como la leche, yogurt y/o licor de suero de leche que comprende lactosa y/o Grasa y/o Proteínas tipo Anfolita y/o Lactoalbumina y/o Beta-Lactoglobulina y/o Caseinato de sodio y/o Albúmina de suero bovino y/o Inmunoglobulinas y/o Lactoferrina y/o Transferina y/o Siderofilina y/o Lactoperoxidasa y/o Lactato de potasio y/o Proteasa-Peptona y/o Glicomacropeptido, su calidad se conserva por medio de pasteurización y dosificación a temperaturas entre 15 a 30 °C; d) La fuente de energía a base de azúcares, son disueltos en agua a temperatura entre 30 y 50 °C, se obtiene un licor homogéneo, se deja en reposo y aclimatación para su incorporación en la composición orgánica de la invención; e) Los bio-nutrientes a base de microorganismos Lactobacillus sp., Lactococcus sp., peptídico; Leuconostoc sp; Lactosphaera spp.; Pedicoccus sp.; Streptococcus spp., Mlissococcus sp.; Oenococcus sp.; Aerococcus sp.; Carnobacterium sp.; Enterococcus sp.; Dolosigranulum sp.; Globicatella sp.; Teragenococcus sp.; Alloiococcus sp.; Streptococcus sp.; Vagococcus sp y Weisella sp.; Lacobacillus delbrueckü; L. plantarum; L. bulgaricus; L. helveticus, L. easel; S. lactis; S. cremoris; S. faecalis; S. thermophilus; P. cerevisiae, son cultivados en el producto lácteo, leche, yogurt y/o licor del suero de leche, en un proceso de fermentación lenta y con temperatura y humedad controlada. f) El catalizador biológico rico en yodo, es un concentrado sólido o extracto líquido y/o extracto hidroalcoholico de algas del género Ascophyllum Nodosum, las cuales son extruidas y tamizadas en tamiz No 80, se recolecta los sólidos secos o sólidos suspendidos, se lavan con agua clara por triplicado y opcionalmente la masa obtenida se suspende en etanol. g) Las Vitaminas del complejo B1 , B2, B3, B5, B6, B12, Vit C; y h) Los minerales como Calcio orgánico, Al, P, K, Mg, Zn, Mn, Cd, Cu, se incluyen en la composición orgánica de una manera homogénea.
La composición resultante es homogenizada, tamizada y/o filtrada en un mezclador rotor para ser almacenada para su maduración y posterior dispensación.
Reivindicación 10.- Un método para tratar las raíces de las plantas con la composición orgánica de las reivindicaciones 1 a 10, CARACTERIZADA PORQUE, entre 4 a 6 l/ha de la composición activa mecanismos de defensa, estímulo y desarrollo radicular en porcentajes entre el 40 y 50 % como efecto elicitor.
Reivindicación 11 Un método para tratar las raíces de las plantas con la composición orgánica de las reivindicaciones 1 a 10, CARACTERIZADA PORQUE, entre 4 a 6 l/ha de la composición elimina la población nematicida en porcentajes entre el 69 al 90%
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