WO2022069704A2 - Immundiagnostische mittel und verfahren für den nachweis und die differenzierung von coronavirus-infektionen - Google Patents

Immundiagnostische mittel und verfahren für den nachweis und die differenzierung von coronavirus-infektionen Download PDF

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Robert Lange
Jörg-Michael HOLLIDT
Dirk Roggenbuck
Lutz Melchior
Pavlo HOLENYA
Ulf Reimer
Michael DROSCH
Maren ECKEY
Florian Kern
Holger Wenschuh
Karsten Schnatbaum
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    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6854—Immunoglobulins
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    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/569—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for microorganisms, e.g. protozoa, bacteria, viruses
    • G01N33/56983—Viruses

Definitions

  • Patent Application No. 102020 125 915.8 of October 02, 2020 the content of which is hereby incorporated by reference in its entirety.
  • This application contains an electronic sequence listing in txt format according to the WIPO ST.25 standard with 72 sequences as part of the description, the content of which is hereby included in its entirety.
  • the present invention relates to means and methods for the immunological or serological in vitro detection and the
  • HoVs human corona viruses
  • SARS-associated coronavirus SARS-associated coronavirus
  • SARS-CoV-2 (hereinafter also referred to as “SARS2”) and
  • Coronavirus MERS-CoV
  • seasonal coronaviruses SVS-CoV
  • the present invention solves this problem in that the inventors were able to identify various immunodominant linear epitopes against which a pathogen-typical adaptive immune reaction can only be detected in the case of a SARS-CoV-2 infection. It has been shown that a high test specificity for SARS-CoV-2 can be achieved through a combinatorial interaction of these epitopes as antigenically active components in a diagnostic without the affect detection sensitivity (also known as sensitivity). Accordingly, in a first embodiment of the invention, an immunodiagnostic for the detection of a coronavirus infection is specified.
  • a generic immunodiagnostic has a carrier on which several antigenic virus components are arranged.
  • the virus components can in principle be of natural or artificial origin, ie in particular produced recombinantly or chemically-synthetically.
  • antibodies that are specific for the antigenically active virus components can be selectively bound to the carrier via antibody-antigen interaction from a patient sample (e.g. blood, serum or saliva) and detected using suitable detection methods.
  • a patient sample e.g. blood, serum or saliva
  • suitable detection methods e.g. blood, serum or saliva
  • the antigenically active virus components of the immunodiagnostic according to the invention comprise at least one peptide from a first group which, at least in sections, has more than 85% sequence similarity to an amino acid sequence selected from Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7) and Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8), and additionally at least one peptide of a second group, at least in sections more than 85% sequence similarity with an amino acid sequence selected from Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) and Tyr-Lys-Thr -Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (S
  • the at least one peptide of the first group can also at least partially have more than 85% sequence similarity with an amino acid sequence selected from Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO: 7), Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe (SEQ ID NO:71) and Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys- Gln-Leu (SEQ ID NO:72), having greater than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:72) is preferred.
  • sequence similarity refers to the degree of relatedness of two sequences in percent according to the usual understanding of the term, the degree of relatedness depending on the number of identical amino acids in a sequence segment. Accordingly, “at least in sections” is to be understood as “at least in a sequence section”.
  • the feature “more than 85% sequence similarity” can, for the purposes of the present invention, e.g. B. also mean more than 90% sequence similarity, more than 95% sequence similarity or 100% sequence similarity, wherein the amino acid sequence is completely contained in the peptide at 100% sequence similarity.
  • the at least one peptide of the first group and the at least one peptide of the second group each have no more than 30 amino acids.
  • the at least one peptide of the first group and the at least one peptide of the second group each independently have no more than 25 amino acids, no more than 20 amino acids, no more than 18 amino acids, no more than 17 amino acids, no more than 16 amino acids or no more than 15 amino acids. Peptides with 15 amino acids or not more than 15 amino acids are particularly preferred. These short peptide sequences increase the Achieved stringency in antibody-antigen interaction and improved diagnostic specificity. A further advantage is that such short peptide sequences can be produced synthetically in a particularly simple and cost-effective manner, for example by chemical solid-phase synthesis.
  • the antigenically active virus components comprise a first peptide of the first group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO :7) in combination with a second peptide of the first group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln -Leu (SEQ ID NO:8).
  • the antigenically active components comprise a first peptide of the second group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO: 9) in combination with a second peptide of the second group with at least partially more than 85% sequence similarity with the Amino acid sequence Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11).
  • the antigenically active virus components additionally comprise at least one peptide from a third group which, at least in sections, has more than 85% sequence similarity to an amino acid sequence selected from Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly-Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO:2), Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln-Gly-Leu-Pro-Asn (SEQ ID NO:3), Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu-Pro- Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO:4), Leu-Leu-Leu-Leu-Asp-Arg-Leu-Asn-Gln-Leu-Glu (SEQ ID NO:5), and Ile-Asp-Ala-Tyr- Lys-Thr-Phe-Pro-Thr-Thr-Thr-Thr-Thr-Ser (SEQ ID NO:2), Ser-Lys-Gln-Arg-Arg
  • the at least one peptide of the third group in turn has no more than 30 amino acids, preferably no more than 25 amino acids, no more than 20 amino acids, no more than 18 amino acids, no more than 17 amino acids, no more than 16 amino acids or no more than 15 Amino acids, with peptides having 15 amino acids or no more than 15 amino acids being particularly preferred.
  • the antigenically active virus components comprise a first peptide of the third group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly-Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO: 2).
  • the antigenic virus components comprise a second peptide of third group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln-Gly-Leu-Pro-Asn (SEQ ID NO:3).
  • the antigenically active virus components comprise a third peptide of the third group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu-Pro-Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO: 4).
  • the antigenically effective virus components comprise a fourth peptide of the third group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Leu-Leu-Leu-Leu-Asp-Arg-Leu-Asn-Gln-Leu-Glu (SEQ ID NO: 5).
  • the antigenic virus components include a fifth peptide of the third group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Ile-Asp-Ala-Tyr-Lys-Thr-Phe-Pro-Pro-Thr-Glu-Pro-Lys- Lys-Asp (SEQ ID NO:6).
  • any combination of two or more of the aforementioned peptides is also possible.
  • the first, second, third, fourth and fifth peptide of the third group are contained in the antigenically active virus components in combination.
  • the antigenically active virus components additionally comprise at least one peptide from a fourth group which, at least in sections, has more than 85% sequence similarity to an amino acid sequence selected from Glu-Cys-Asp-Ile-Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO:10) and Asp-Asp-Ser-Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu-His (SEQ ID NO:14).
  • the at least one peptide of the fourth group has no more than 30 amino acids, preferably no more than 25 amino acids, no more than 20 amino acids, no more than 18 amino acids, no more than 17 amino acids, no more than 16 amino acids or no more than 15 amino acids, with peptides having 15 amino acids or no more than 15 amino acids being particularly preferred.
  • the antigenically effective virus components comprise a first peptide of the fourth group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Glu-Cys-Asp-Ile-Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO: 10).
  • the antigenically active virus components comprise a second peptide of the fourth group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Asp-Asp-Ser-Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu-His ( SEQ ID NO:14).
  • both the first peptide and the second peptide of the fourth group are contained in the antigenic virus components.
  • the inventors have recognized that specific antibody reactions to a SARS-CoV infection, ie SARS-CoV-1 as well as SARS-CoV-2, can be detected with high reliability using the peptides of the third and fourth groups.
  • an antibody reaction with the peptides of the first, second and third or fourth group can indicate an infection with SARS-CoV-2, while a reaction with only one or more peptides of the third and/or fourth group provides differentiated evidence of an infection with SARS-CoV-1.
  • the antigenically effective virus components can also comprise at least one peptide from a fifth group which, at least in sections, has more than 85% sequence similarity to an amino acid sequence selected from Arg-Ser-X3-Ile-Glu-Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), where X3 is selected from Phe and Ala and X7 from Leu and Ile, and Phe-X2-X3-Glu-Leu-Asp-X7-X8-Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO:13), wherein X2 is selected from Lys and Gln, X3 is selected from Glu and Asp, X7 is selected from Lys, Glu and Gln, and X8 is selected from Tyr, Phe and Trp.
  • the at least one peptide of the fifth group has no more than 30 amino acids, preferably no more than 25 amino acids, no more than 20 amino acids, no more than 18 amino acids, no more than 17 amino acids, no more than 16 amino acids or no more than 15 amino acids on, wherein peptides with 15 amino acids or not more than 15 amino acids are particularly preferred.
  • the antigenic virus components comprise a first peptide of the fifth group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Arg-Ser-X3-Ile-Glu-Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), where X3 is selected from Phe and Ala and X7 from Leu and Ile. In one embodiment, X3 is Phe.
  • X3 is Ala.
  • X7 is Leu.
  • X7 is Ile.
  • the first peptide of the fifth group has, at least in sections, more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Ser-Lys-Arg-Ser-Phe-Ile-Glu-Asp-Leu-Leu-Phe (SEQ ID NO:70).
  • the antigenically active virus components comprise a second peptide of the fifth group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Phe-X2-X3-Glu-Leu-Asp-X7-X8-Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO: 13) where X2 is selected from Lys and Gln, X3 from Glu and Asp, X7 from Lys, Glu and Gln and X8 from Tyr, Phe and Trp.
  • X2 is Lys.
  • X2 is Eqn.
  • X3 is Glu.
  • X3 is Asp.
  • X7 is Lys.
  • X7 is Glu. In one embodiment, X7 is Eqn. In one embodiment, X8 is Tyr. In one embodiment, X8 is Phe. In one embodiment, X8 is Trp. In one embodiment, the second peptide of the fifth group has, at least in sections, more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Leu-Asp-Ser-Phe-Lys-Glu-Glu-Leu-Asp-Lys-Tyr-Phe -Lys-Asn-His (SEQ ID NO:69).
  • the antigenically active virus components preferably contain both the first and the second peptide of the fifth group.
  • the peptides of the fifth group can also be used to detect coronavirus infections other than those based on SARS-CoV-2 and SARS-CoV-1, including infections with MERS-CoV and common cold coronaviruses such as HCoV- OC34 and HCoV-229E.
  • coronavirus infections can also be reliably detected and, through the combination with the peptides of the first and second group and, if appropriate, the third and/or fourth group of infections with SARS-CoV-2 or SARS-CoV- 1 can be distinguished.
  • the antigenically active virus components additionally comprise at least one peptide from a sixth group which, at least in sections, has more than 85% sequence similarity to an amino acid sequence selected from Asn-Gly-Thr-Ile-Thr-Val-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys -Leu-Leu-Glu-Gln (SEQ ID NO:15), Lys-Tyr-Pro-Gln-Val-Asn-Gly-Leu-Thr-Ser-Ile-Lys-Trp-Ala-Asp (SEQ ID NO: 16) and Thr-Thr-Asn-Ile-Val-Thr-Arg-Cys-Leu-Asn-Arg-Val-Cys-Thr-Asn (SEQ ID NO:17).
  • the at least one peptide of the sixth group has no more than 30 amino acids, preferably no more than 25 amino acids, no more than 20 amino acids, no more than 18 amino acids, no more than 17 amino acids, no more than 16 amino acids or no more than 15 amino acids on, wherein peptides with 15 amino acids or not more than 15 amino acids are particularly preferred.
  • the antigenically active virus components comprise a first peptide of the sixth group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Asn-Gly-Thr-Ile-Thr-Val-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Leu- Glu-Gln (SEQ ID NO:15).
  • the antigenically active virus components comprise a second peptide of the sixth group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Lys-Tyr-Pro-Gln-Val-Asn-Gly-Leu-Thr-Ser-Ile-Lys-Trp- Ala-Asp (SEQ ID NO:16).
  • the antigenically active virus components comprise a third peptide of the sixth group with at least in sections more than 85% sequence similarity to the amino acid sequence and Thr-Thr-Asn-Ile-Val-Thr-Arg-Cys-Leu-Asn-Arg-Val-Cys -Thr-Asn (SEQ ID NO:17).
  • the first, second and third peptides are the sixth group contained in the antigenic virus components.
  • the inventors were able to determine a high specific seroreactivity in COVID-19 patients against these peptides, which can contribute to an additional improvement in the detection sensitivity of the immunodiagnostic according to the invention.
  • the antigenic virus components contain at least one peptide of the first group with at least in sections more than 85% sequence similarity with an amino acid sequence selected from Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln- Lys (SEQ ID NO:7) and Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8) and/or at least one Peptide of the second group with at least in sections more than 85% sequence similarity with an amino acid sequence selected from Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) and Tyr-Lys- Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11) in combination with at least one peptide
  • the at least one peptide of the first group can also at least partially have more than 85% sequence similarity with an amino acid sequence selected from Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO: 7), Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe (SEQ ID NO:71) and Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys- Gln-Leu (SEQ ID NO:72), having greater than 85% sequence similarity to the amino acid sequence Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:72) is preferred.
  • the antigenically active virus components are selected from peptides which have a sequence section with at least 85% sequence similarity to an amino acid sequence from the group consisting of Glu-Pro-Ile-Tyr-Asp-Glu-Pro-Thr-Thr-Thr-Thr-Ser -Val-Pro-Leu (SEQ ID NO:18), Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly-Pro-Ser-Asp-Ser-Thr-Gly-Ser-Asn (SEQ ID NO:19), Ser-Gly-Ala-Arg-Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln-Gly-Leu-Pro-Asn (SEQ ID NO:20), Ser-Lys-Gln-Arg- Arg-Pro-Gln-N-
  • the antigenically active virus components are selected from peptides that have a sequence section with at least 85% sequence similarity to an amino acid sequence from the group consisting of SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:66 and any Combinations thereof, in particular of peptides which have a sequence segment with at least 85% sequence similarity to an amino acid sequence from the group consisting of SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:61
  • the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:28. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:33. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:8. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:36.
  • the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:50. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with a sequence similarity of more than 85% to SEQ ID NO:56, at least in sections. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with a sequence similarity of more than 85% to SEQ ID NO:57, at least in sections. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:69.
  • the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:62. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with a sequence similarity of more than 85% to SEQ ID NO:65, at least in sections. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with at least sections of more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:17. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:27.
  • the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:38. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:42. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with a sequence similarity of more than 85% to SEQ ID NO:43, at least in sections. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:44.
  • the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:45. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:48. In one embodiment, the antigenically effective virus components comprise a peptide with at least sections of more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:61. In one embodiment, the antigenically active virus components comprise a peptide with, at least in sections, more than 85% sequence similarity to SEQ ID NO:66.
  • the antigenically active virus components contain a combination of several of the aforementioned peptides, so that the peptides comprise sequence sections with more than 85% sequence similarity with the following three amino acid sequences: SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:56 and SEQ ID NO:57; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:42 and SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 and SEQ ID NO:57; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:38 and SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50 and SEQ ID NO:57; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:44 and SEQ ID NO:69; SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 and SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:38 and SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:38 and SEQ ID NO:50; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:36, S
  • the antigenic virus components contain several of the aforementioned combinations.
  • the combination of the peptides comprises sequence sections with more than 85% sequence similarity with the following four amino acid sequences: SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 and SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 and SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 and SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 and SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 and SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 and SEQ ID NO:44; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 and SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:36
  • the antigenic virus components contain several of the above combinations.
  • the combination of the peptides comprises sequence sections with more than 85% sequence similarity with the following five amino acid sequences: SEQ ID NO: 36, SEQ ID NO: 50, SEQ ID NO: 56, SEQ ID NO: 57 and SEQ ID NO: 42; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 and SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 and SEQ ID NO:44; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:62 and SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:62 and SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 and SEQ ID NO:42; S
  • the antigenic virus components contain several of the aforementioned combinations.
  • the peptides of the above combinations have proven to be particularly advantageous in combination for the sensitive and specific immunological detection of SARS-CoV-2 infections.
  • the antigenically active components consist of one or more of the combinations mentioned above.
  • the antigenic virus components comprise no more than 30 different peptides, no more than 25 different peptides, no more than 20 different peptides, no more than 15 different peptides, no more than 10 different peptides, no more than 9 different peptides, no more than eight different peptides, not more than seven different peptides, not more than six different peptides, not more than five different peptides, not more than four different peptides or not more than three different peptides.
  • the antigenic virus components can consist of the aforementioned peptides. In this way, the risk of non-specific reactions can be advantageously reduced.
  • the carrier has a plurality of test areas or cavities that are separate from one another, so that the antigenically active virus components can be arranged at least partially in different test areas or cavities.
  • the peptides are each arranged separately from one another or in combination with one other peptide or several other peptides in a test area or a cavity.
  • the peptides of the first, second and, if present, third, fourth, fifth and sixth group are at least partially arranged in different test areas or cavities. In this way, more detailed information on the patient's antibody specificity can be obtained, which can contribute to important knowledge gain with regard to the course and clinical outcome of COVID-19. It is possible e.g. B.
  • a preferred embodiment provides for the peptides to be arranged separately according to groups in different test areas or cavities.
  • the simultaneous detection of antibodies against several peptides of a group allows the measurement signals in the individual test areas or cavities to be advantageously accumulated without at the same time detrimentally increasing the risk of non-specific interactions, so that even small amounts of antibodies can still be reliably detected in combination. In this way, the precision of the detection is significantly improved compared to conventional methods. It is Z. B. possible, the peptides of the first group and the second group as a mixture together in the same Arrange the test area or the same well to ensure particularly reliable detection of SARS-CoV-2 infections.
  • the peptides of the first and/or second group are arranged separately from the peptides of the third, fourth and/or fifth group in order to advantageously differentiate between infections with SARS-CoV-2, SARS-CoV- 1 and other corona viruses.
  • the peptides of the third and/or fourth group are arranged separately from the peptides of the fifth group.
  • the peptides of the first, second, third, fourth, fifth and sixth group, if present are arranged as a mixture on the carrier or in the same test area or the same cavity, for example around a particularly sensitive one to get the overall signal.
  • the type of support is not particularly limited.
  • Suitable carriers of generic immunodiagnostics are known to the person skilled in the relevant art or can be determined without further ado on the basis of this description.
  • Non-limiting examples are membranes e.g. B. from derivatized cellulose, nylon or polyvinylidene difluoride, as well as semiconductor materials, treated or untreated glass and treated or untreated plastic such. B. polystyrene, polycarbonate, polyvinyl chloride or the like. Any combinations of such carrier materials are also possible.
  • the carrier is a microtiter plate.
  • the carrier is a chip or a microarray substrate or a functionalized glass surface.
  • the peptides according to the invention can advantageously be produced by chemical synthesis, in particular by solid-phase synthesis according to Merrifield.
  • the immunodiagnostic according to the invention can not only be produced more economically than conventional immunodiagnostics based on recombinant conformation antigens, but also makes it possible to equip the peptides with useful, non-natural or non-proteinogenic modifications.
  • non-natural or non-proteinogenic modifications refer in particular to the equipment of the peptides with chemical functions, groups and/or building blocks that do not form part of protein biosynthesis.
  • the at least one peptide from the first and/or second group and/or, if present, the at least one peptide from the third, fourth, fifth and/or sixth group can be formed C-terminally as a carboxylic acid amide, in particular as a primary amide or as a secondary amide Amide with an acyl substituent. It has been shown that in this way non-specific peptide-antibody interactions can be significantly reduced and an improvement in the sensitivity and specificity of the diagnostic agent is achieved. All of the aforementioned peptides contained in the antigenically active components are preferably in the form of carboxamides.
  • a further possibility is to equip the peptides with a non-proteinogenic coupling group which allows a directed covalent or affine attachment of the peptides to the carrier.
  • a non-proteinogenic coupling group which allows a directed covalent or affine attachment of the peptides to the carrier.
  • Suitable coupling groups for the directed covalent or affine binding such.
  • biotin, His tag or chemoselective functional groups are known to those skilled in the relevant art.
  • the peptide of the first and/or second group and/or, if present, the at least one peptide of the third, fourth, fifth and/or sixth group has a non-proteinogenic spacer molecule which is located between the non-proteinogenic coupling group and a preferably terminal amino acid of the peptide is arranged.
  • a non-proteinogenic spacer molecule which is located between the non-proteinogenic coupling group and a preferably terminal amino acid of the peptide is arranged.
  • suitable spacer molecules are C3, C6, C12, and C18 aliphatic spacers, various hydrophilic polyethylene glycol (PEG) spacers, and the like.
  • the coupling group or the spacer molecule is arranged at the N-terminus of the peptide.
  • the present invention further provides an artificial polypeptide.
  • the polypeptide according to the invention has several different sequence sections, with at least two of the sequence sections each independently having more than 85% sequence similarity with an amino acid sequence selected from Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7), Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8), Lys-Lys-Phe-Leu -Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) and Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11).
  • the present invention provides a peptide composition comprising a plurality of different peptides in a soluble or dissolved form.
  • the peptide composition according to the invention is characterized in that at least two of the peptides each independently of one another at least partially have more than 85% sequence similarity with an amino acid sequence selected from Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO :7), Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8), Lys-Lys-Phe-Leu-Pro -Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) and Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11).
  • the artificial polypeptide and the peptide composition can also comprise one or more further sequence sections or one or more further peptides which have the characteristics of one or more peptides of the third, fourth, fifth and/or sixth group according to the above statements .
  • At least two of the peptides of the peptide composition can each have more than 85% sequence similarity with an amino acid sequence selected from Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO: SEQ ID NO: 7), Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8), Lys-Lys-Phe-Leu- Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9), and Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11) , Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly-Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO:2)
  • the invention provides a use of the artificial polypeptide or the peptide composition for the production of an immunodiagnostic for a coronavirus infection or for the production of a vaccine against SARS-CoV-2.
  • one embodiment of the invention relates to a method for detecting and/or differentiating coronavirus infections.
  • the method comprises the following steps: a) providing at least one peptide of a first group with at least in sections more than 85% sequence similarity with an amino acid sequence selected from Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7) and Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8) and/or at least one peptide a second group having at least in sections more than 85% sequence similarity with an amino acid sequence selected from Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) and Tyr-Lys-Thr-Pro- Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11), b) providing at least
  • the antibodies are IgG antibodies.
  • the various embodiments and advantages of the immunodiagnostic according to the invention can also relate to the artificial polypeptide, the peptide composition and their uses as well as the method for detecting and/or differentiating coronavirus infections.
  • Features that are disclosed above and below in connection with the immunodiagnostic can therefore also relate to the polypeptide, the peptide composition, their uses and the method for detecting and/or differentiating coronavirus infections and vice versa.
  • BRIEF DESCRIPTION OF THE FIGURES The invention is explained in more detail below using exemplary embodiments with reference to the attached figures. In no way should the invention be limited to the exemplary embodiments and the figures shown.
  • 1 shows a peptide microarray-based analysis of the IgG immune response against the SARS-CoV-2 nucleoprotein (N) and spike glycoprotein (S) measured in human patient sera
  • 2 Peptide microarray-based analyzes of the IgG immune response against the nucleoprotein (N) of various corona viruses measured in human patient sera
  • 3 shows peptide microarray-based analyzes of the IgG immune response against the spike glycoprotein (S) of various corona viruses measured in human patient sera
  • 4 shows peptide microarray-based analyzes of the IgG immune response against the membrane protein (M) of various corona viruses measured in human patient sera
  • 5 shows peptide microarray-based analyzes of the IgG immune response against the envelope small membrane protein (E) of various corona viruses measured in human patient sera
  • 6 Peptide microarray-based analyzes of the IgG immune response against non-structural proteins from replicase polyprotein 1ab of SARS-CoV-2 measured in human patient sera
  • the peptide microarrays comprised a library of 5513 peptides in total, covering the entire proteome of SARS-CoV-2 and additionally the spike glycoprotein (S), nucleoprotein (N), envelope small membrane protein (E), and membrane protein (M) of the following HCoVs: SARS-CoV-1, MERS-CoV, HCoV-229E and HCoV-OC43.
  • the individual spots were treated with aqueous triethylamine (2.5% v/v).
  • the peptide containing solution was centrifugally filtered in daughter plates and the solvent removed by evaporation under reduced pressure.
  • the dry peptides were each dissolved in 35 ⁇ L print buffer (40% DMSO, 5% glycerol in 200 mM sodium acetate buffer pH 4) and aliquoted using automated liquid handling systems.
  • the peptide microarrays were printed using a high-speed, non-contact microarray printer epoxy-modified slides (PolyAn, Berlin, Germany). All peptides and controls were printed in triplicate.
  • the peptide microarrays were incubated with sera at a 1:200 dilution in SuperBlock blocking buffer (Thermo Scientific, Bremen, Germany) in a HS 4800 microarray processing station (Tecan, Crailsheim, Germany) for two hours at 30 °C, followed by a Incubation with 0.1 ⁇ g/mL fluorescently labeled anti-human IgG detection antibody (Jackson Immunoresearch, Ely, UK). Washes with 0.1% Tween-20 in Tris-buffered saline (TBS buffer) were performed before each incubation step.
  • TBS buffer Tris-buffered saline
  • microarrays were washed (0.05% Tween-20 in 0.1x concentrated sodium citrate-buffered saline, SSC) and dried in a stream of nitrogen.
  • SSC 0.1x concentrated sodium citrate-buffered saline
  • Each microarray was scanned with a GenePix Autoloader 4300 SL50 (Molecular Devices, San Jose, USA) with a resolution of 10 ⁇ m. Signal intensities were evaluated with GenePix Pro 7.0 analysis software (Molecular Devices).
  • the MMC2 value of the three triplicates was calculated. The MMC2 value corresponds to the mean of all three instances on the microarray, except when the coefficient of variation (CV), ie the standard deviation divided by the mean, was greater than 0.5.
  • CV coefficient of variation
  • the mean of the two closest values was assigned to MMC2.
  • the further data analysis and the creation of the diagrams for the visualization of the data were carried out with the statistical calculation and graphics software R (version 4.0.2, www.r-project.org).
  • the dataset used for the statistical analysis of the microarray results and for the creation of the heatmaps was based on MMC2 values calculated from the signals of the three times immobilized spots of each individual peptide.
  • the MMC2 values were recoded into gray values, with white standing for no signal or low signal intensity and the gray value increasing with increasing signal intensity (up to a maximum intensity of 65535 light units, LE).
  • the right column in each heatmap represents the highest possible signal intensity.
  • the heat maps contain two groups of serum samples: sera from SARS-CoV-2 infected people and sera from control groups without SARS-CoV-2 infection.
  • the columns represent peptide sequences, the rows the samples.
  • the gray values indicate the signal intensity obtained from triplicate spots.
  • the top two lines of the heatmaps reflect signals obtained with detection antibodies only (no serum).
  • the right column in each heatmap reflects the highest possible signal intensity.
  • the box plots, also shown in FIG. 1, reflect the signal distribution in the two serum groups for selected immunodominant regions.
  • the central rectangles span from the first quartile to the third quartile (the interquartile range, or IQR).
  • the dots in the boxplots show the MMC2 values for each sample.
  • the ROC analysis was performed with the R package ROCR.
  • the selection of peptides with significant separation between the sample groups was based on the accuracy value (ACC2) calculated as "true positive + true negative/total number of findings".
  • FIG. 2 shows the results of peptide microarray analysis of IgG responses to nucleoprotein ( Figure 2), spike glycoprotein (Figure 3), membrane protein ( Figure 4) and envelope small membrane protein ( Fig. 5) of different corona viruses.
  • Figures 6 and 7 complement the peptide microarray analysis of IgG responses to nonstructural proteins from replicase polyprotein 1ab ( Figure 6) and other nonstructural proteins ( Figure 7) of SARS-CoV-2.
  • the results of the analyzes show that the sera of the COVID-19 patients showed a high level of antibody reactivity, whereas little or no reactivity could be detected in the control sera.
  • Several immunodominant regions have been identified in the SARS-CoV-2 proteome. These were mainly found in the SARS2 spike glycoprotein and the SARS2 nucleoprotein. Strong IgG reactivity was also detected against several peptides derived from the SARS2 membrane protein, protein 3a and replicase polyprotein 1ab, although the immunodominance detected in these proteins was less pronounced overall. All other SARS2 antigens showed little or no immunogenicity with regard to the IgG response.
  • the immune responses in SARS-CoV-2 infected patients were compared to those in the control group for each peptide by the nonparametric Wilcoxon rank sum test.
  • Figure 8 shows the results for selected peptides. The statistical evaluation shows that the peptides ensure a reliable differentiation between the patient groups.
  • Table 2 shows a selection of the epitopes identified in this way, represented either by single peptides or by common core sequences derived from two or more overlapping peptides.
  • the peptides with the highest fidelity values were listed in the order of their occurrence in the corresponding antigens.
  • NCAP_0157-0171 denotes the peptide representing amino acids 157 to 171 of the SARS-CoV-2 nucleoprotein.
  • VH indicates the ratio of the median of the measured signal intensities of triplicate spots of the respective peptide in SARS-CoV-2-infected patients and the control group.
  • Table 2 Selected SARS-CoV-2 epitopes according to the invention that ensure good separation between the groups.
  • AUC area under the ROC curve.
  • Table 3 A complete list of the peptides of the invention that allowed significant differentiation between SARS-CoV-2 infected patients and the control group is shown in Table 3.
  • the peptide designations are in turn composed according to the statements made in Table 2 above.
  • Table 3 Peptides according to the invention with the highest distinctiveness determined between SARS-CoV-2 infected and the control group.
  • the diagnostic potential of the peptide-based immunodiagnostic according to the invention was evaluated by comparing the test results with a conventional ELISA test based on a complete conformational antigen (Euroimmun, Lübeck, Germany).
  • 9 shows the quantitative measurement results for the SARS-CoV-2 infected patient group with the commercial ELISA test (x-axis) and the immunodiagnostic according to the invention in a version as a peptide microarray (y-axis). Spearman's correlation coefficient between the ELISA signal and the summed microarray signals for peptides from the SARS-CoV-2 spike glycoprotein and nucleoprotein was calculated for sera from SARS-CoV-2 infected patients.
  • the quotient of the absorbance of the patient sample compared to the calibrator was used as the net assay signal.
  • the total microarray signals for each sample were calculated as the sum of all corresponding signal intensities over the upper 10-16 % quantile of the noise distribution. The tests showed a high Correlation with a Spearman correlation coefficient of 0.88.
  • Antibody cross-reactivity between SARS-CoV-2 and seasonal cold coronaviruses may be of great importance in terms of the clinical course of COVID-19 and at the same time poses a challenge for the development of a specific immunoassay for SARS-CoV-2 against this background, the IgG reactivity to peptides from the S, N, E and M proteins of SARS-CoV, MERS-CoV, HCoV-OC43 and HCoV-229E (see Table 1 above) was additionally analyzed. The inventors were able to determine very similar IgG binding profiles against the N and M proteins of SARS-CoV-2 and SARS-CoV, while the corresponding proteins of the other virus strains only showed weak and scattered signals (see Fig.
  • peptides derived from the S protein of all virus strains showed clear signal patterns in SARS-CoV-2 positive patients, indicating that this antigen contained potentially cross-reactive determinants (see Fig. 3).
  • This serological cross-reactivity between SARS-CoV-2 and other coronaviruses with regard to the S protein is additionally shown in Fig. 10.
  • the heatmaps illustrate strong IgG seroreactivity in sera from SARS-CoV-2 infected patients towards conserved S-protein regions of different coronaviruses. The IgG reactivity was mainly directed against two sequence regions, each formed by two overlapping peptides with highly conserved cross-reactive epitopes.
  • the consensus motif I R 0815 S-IED-LF 0823 (numbers refer to the position of the epitopes in the SARS2 antigen) was present in all five viruses analyzed, while a second consensus motif II, F 1148 --ELD-- FKN 1158 , was present in the viruses SARS-CoV-2, SARS-CoV, MERS-Cov and HCoV- OC43 but not found in HCoV-229E.
  • F 1148 --ELD--- FKN 1158 was present in the viruses SARS-CoV-2, SARS-CoV, MERS-Cov and HCoV- OC43 but not found in HCoV-229E.
  • combinations of these peptide epitopes according to the invention can advantageously be used to detect infections with SARS-CoV-2 with high reliability and, if necessary, to differentiate them from infections with SARS-CoV-1 and/or other corona viruses at the same time.
  • the invention is not limited to these by the description based on the exemplary embodiments. Rather, the invention encompasses every new feature and every combination of features, which in particular includes every combination of features in the patent claims and the description, even if this feature or this combination of features itself is not explicitly stated in the patent claims, the description or the exemplary embodiments .

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Abstract

Es werden Mittel und Verfahren für den immunologischen bzw. serologischen Nachweis und die Differenzierung von Infektionen mit humanen Coronaviren, insbesondere der Spezies Severe acute respiratory syndrome-related coronavirus (SARS-CoV), angegeben.

Description

Titel
IMMUNDIAGNOSTISCHE MITTEL UND VERFAHREN FÜR DEN NACHWEIS UND DIE
DIFFERENZIERUNG VON CORONAVIRUS-INFEKTIONEN
Bezugnahme auf frühere Anmeldungen
Diese Patentanmeldung beansprucht die Priorität der deutschen
Patentanmeldung Nr. 102020 125 915.8 vom 02. Oktober 2020, deren Inhalt hiermit in vollem Umfang durch Verweis einbezogen wird.
Sequenzprotokoll
Diese Anmeldung beinhaltet ein elektronisches Sequenzprotokoll im txt-Format nach WIPO ST.25 Standard mit 72 Sequenzen als Teil der Beschreibung, dessen Inhalt hiermit in vollem Umfang einbezogen wird.
Gebiet der Erfindung
Die vorliegende Erfindung betrifft Mittel und Verfahren für den immunologischen bzw. serologischen in vitro Nachweis und die
Differenzierung von Infektionen mit humanen Coronaviren (HCoVs), insbesondere der Spezies Severe acute respiratory syndrome- related coronavirus (SARS-assoziiertes Coronavirus bzw. SARS-
CoV) wie z. B. SARS-CoV-2 (nachfolgend auch kurz „SARS2") und
SARS-CoV-1 sowie Middle East respiratory syndrome-related
Coronavirus (MERS-CoV) und saisonaler Coronaviren.
Hintergrund der Erfindung Die COVID-19-Pandemie traf die Welt unvorbereitet. Weltweit gibt es Millionen von Infektionsfällen mit weiterhin steigender Tendenz. Neben der sozialen Distanzierung ist die rasche Untersuchung von Verdachtsfällen und Kontakten eine der wichtigsten Maßnahmen, um das Infektionsgeschehen einzudämmen. Die Erfahrungen aus vielen Ländern haben gezeigt, dass ungenaue oder unvollständige Kenntnisse über die Infektionsprävalenz und die Virusübertragungsraten zu einer falschen Einschätzung der epidemiologischen Situation, zu falschen Vorhersagen und zu unzureichenden Maßnahmen mit potenziell schwerwiegenden Folgen für Gesellschaften und Volkswirtschaften führen können. Diese Erkenntnisse verdeutlichen einen weltweiten Bedarf an zuverlässigen und hochspezifischen Tests für den Nachweis von Coronavirus-Infektionen. Für eine labordiagnostische Abklärung des Verdachts auf eine Infektion mit dem SARS-CoV-2 wurden PCR-Systeme für den Nukleinsäurenachweis aus Abstrichen aus Nase und Rachen entwickelt. Problematisch ist jedoch, dass die Viruslast nach der akuten Infektion oft innerhalb kurzer Zeit auf diese Art nicht mehr nachweisbar ist. Eine überstandene SARS-CoV-2- Infektion lässt sich mit PCR-basierten Verfahren praktisch gar nicht nachweisen. Ein zuverlässiges serologisches Monitoring ist daher erforderlich, um den SARS-CoV-2-Infektionsstatus größerer Populationen zu bestimmen, die bestehende Immunität zu ermitteln und lokale Ausbrüche nachzuverfolgen. Darüber hinaus kann es auch einen wichtigen Beitrag zur Beurteilung der durch kommende Impfstoffe induzierten Immunität auf Bevölkerungsebene leisten. Aus EP 3715 847 A1 sind Verfahren und Reagenzien zur serologischen Diagnose von SARS-CoV-2 bekannt. Allerdings sind die derzeit verfügbaren Antikörpertests oft nicht sehr spezifisch und können zu falschen Interpretationen führen. Es ist daher eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung, verbesserte Mittel und Verfahren für den immunologischen Nachweis von HCoV-Infektionen bzw. SARS-CoV-2-Infektionen bereitzustellen. Diese Aufgabe wird durch die Gegenstände der unabhängigen Ansprüche gelöst. Vorteilhafte und bevorzugte Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung sind den Unteransprüchen, der nachfolgenden Beschreibung und den Figuren zu entnehmen. Beschreibung der Erfindung Die Erfinder haben erkannt, dass der spezifische Nachweis von SARS-CoV-2-Antikörpern durch serologische Kreuzreaktivitäten zwischen SARS-CoV-2 und anderen HCoVs erheblich erschwert ist. Insbesondere hat sich gezeigt, dass herkömmliche Tests, die Konformationsantigene in voller Länge oder Teile davon verwenden, bei Personen, die zuvor gewöhnlichen Erkältungs- Coronaviren ausgesetzt waren, falsch positive Ergebnisse liefern können. Die vorliegende Erfindung löst dieses Problem, indem die Erfinder verschiedene immundominante lineare Epitope identifizieren konnten, gegen die nur bei einer SARS-CoV-2- Infektion eine pathogentypische adaptive Immunreaktion nachweisbar ist. Dabei hat sich gezeigt, dass sich durch eine kombinatorische Zusammenwirkung dieser Epitope als antigenwirksame Bestandteile in einem Diagnostikum eine hohe Testspezifität für SARS-CoV-2 erreichen lässt, ohne die Nachweisempfindlichkeit (auch als Sensitivität bezeichnet) zu beeinträchtigen. Dementsprechend wird in einer ersten Ausführungsform der Erfindung ein Immundiagnostikum für den Nachweis einer Coronavirus-Infektion angegebenen. Ein gattungsgemäßes Immundiagnostikum weist einen Träger auf, auf dem mehrere antigenwirksame Virusbestandteile angeordnet sind. Die Virusbestandteile können grundsätzlich natürlichen oder künstlichen Ursprungs, d. h. insbesondere rekombinant oder chemisch-synthetisch hergestellt sein. Auf diese Weise lassen sich Antikörper, die für die antigenwirksamen Virusbestandteile spezifisch sind, selektiv über Antikörper-Antigen-Wechselwirkung aus einer Patientenprobe (z. B. Blut, Serum oder Speichel) an den Träger binden und mithilfe geeigneter Detektionsverfahren nachweisen. Entsprechende Immuntestformate sind dem Fachmann einschlägig bekannt. Diesbezüglich wird auch auf die nachfolgenden Ausführungsbeispiele verwiesen. Die antigenwirksamen Virusbestandteile des erfindungsgemäßen Immundiagnostikums umfassen mindestens ein Peptid einer ersten Gruppe, das zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7) und Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8) aufweist, sowie zusätzlich mindestens ein Peptid einer zweiten Gruppe, das zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) und Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11) aufweist. Das mindestens eine Peptid der ersten Gruppe kann in einer Ausführungsvariante auch zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7), Thr- Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe (SEQ ID NO:71) und Ala- Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:72), aufweisen, wobei mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:72) bevorzugt ist. So, wie der Begriff hier verwendet wird, bezeichnet „Sequenzähnlichkeit“ gemäß dem üblichen fachmännischen Begriffsverständnis den Verwandtschaftsgrad zweier Sequenzen in Prozent, wobei das Ausmaß an Verwandtschaft von der Anzahl identischer Aminosäuren in einem Sequenzabschnitt abhängt. „Zumindest abschnittsweise“ ist dementsprechend als „zumindest in einem Sequenzabschnitt“ zu verstehen. Das Merkmal „mehr als 85% Sequenzähnlichkeit“ kann im Sinne der vorliegenden Erfindung z. B. auch mehr als 90% Sequenzähnlichkeit, mehr als 95% Sequenzähnlichkeit oder 100% Sequenzähnlichkeit bedeuten, wobei die Aminosäuresequenz bei 100% Sequenzähnlichkeit vollständig in dem Peptid enthalten ist. Das mindestens eine Peptid der ersten Gruppe und das mindestens eine Peptid der zweiten Gruppe weisen jeweils nicht mehr als 30 Aminosäuren auf. Vorzugsweise weisen das mindestens eine Peptid der ersten Gruppe und das mindestens eine Peptid der zweiten Gruppe unabhängig voneinander jeweils nicht mehr als 25 Aminosäuren, nicht mehr als 20 Aminosäuren, nicht mehr als 18 Aminosäuren, nicht mehr als 17 Aminosäuren, nicht mehr als 16 Aminosäuren oder nicht mehr als 15 Aminosäuren auf. Peptide mit 15 Aminosäuren bzw. nicht mehr als 15 Aminosäuren sind besonders bevorzugt. Durch diese kurzen Peptidsequenzen wird eine erhöhte Stringenz bei der Antikörper-Antigen-Wechselwirkung erreicht und die Spezifität des Diagnostikums verbessert. Ein weiterer Vorteil ist, dass sich solche kurzen Peptidsequenzen besonders einfach und kostengünstig synthetisch herstellen lassen, beispielsweise durch chemische Festphasensynthese. Mit diesen erfindungsgemäßen Peptidkombinationen wird eine hohe Zuverlässigkeit des immunologischen SARS-CoV-2-Nachweises erreicht und gleichzeitig das Risiko falsch-positiver Testergebnisse gegenüber herkömmlichen, auf Konformationsantigenen basierenden Immundiagnostika deutlich verringert. Diese vorteilhafte Zusammenwirkung überrascht, da in der Regel nur ein sehr geringer Teil von Virusantigenen lineare B-Zellepitope bildet. In einer bevorzugten Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein erstes Peptid der ersten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Asp-Glu-Thr-Gln- Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7) in Kombination mit einem zweiten Peptid der ersten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe- Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8). In einer weiterhin bevorzugten Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Bestandteile ein erstes Peptid der zweiten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Lys-Lys-Phe-Leu- Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) in Kombination mit einem zweiten Peptid der zweiten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11). Mithilfe dieser Peptidkombinationen wird eine besonders hohe Empfindlichkeit und gleichzeitig hohe Spezifität bei dem Nachweis von SARS-CoV-2-Infektionen erreicht. Auf diese Weise kann besonders effektiv zwischen COVID-19-Patienten und Patienten mit anderen HCoV-Infektionen differenziert werden. Vorzugsweise umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile zusätzlich mindestens ein Peptid einer dritten Gruppe, das zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly- Gly-Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO:2), Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln- Gly-Leu-Pro-Asn (SEQ ID NO:3), Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu-Pro- Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO:4), Leu-Leu-Leu-Leu-Asp-Arg-Leu-Asn-Gln- Leu-Glu (SEQ ID NO:5) und Ile-Asp-Ala-Tyr-Lys-Thr-Phe-Pro-Pro- Thr-Glu-Pro-Lys-Lys-Asp (SEQ ID NO:6) aufweist. Das mindestens eine Peptid der dritten Gruppe weist wiederum nicht mehr als 30 Aminosäuren, vorzugsweise nicht mehr als 25 Aminosäuren, nicht mehr als 20 Aminosäuren, nicht mehr als 18 Aminosäuren, nicht mehr als 17 Aminosäuren, nicht mehr als 16 Aminosäuren oder nicht mehr als 15 Aminosäuren auf, wobei Peptide mit 15 Aminosäuren bzw. nicht mehr als 15 Aminosäuren besonders bevorzugt sind. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein erstes Peptid der dritten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly-Pro-Ser-Asp- Ser (SEQ ID NO:2). In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein zweites Peptid der dritten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Ser-Lys-Gln-Arg- Arg-Pro-Gln-Gly-Leu-Pro-Asn (SEQ ID NO:3). In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein drittes Peptid der dritten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu-Pro-Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO:4). In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein viertes Peptid der dritten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Leu-Leu-Leu-Leu- Asp-Arg-Leu-Asn-Gln-Leu-Glu (SEQ ID NO:5). In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein fünftes Peptid der dritten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Ile-Asp-Ala-Tyr-Lys-Thr-Phe-Pro-Pro-Thr-Glu- Pro-Lys-Lys-Asp (SEQ ID NO:6). Selbstverständlich sind auch beliebige Kombinationen von zwei oder mehr der vorgenannten Peptide möglich. In bevorzugten Ausführungsformen sind das erste, zweite, dritte, vierte und fünfte Peptid der dritten Gruppe kombiniert in den antigenwirksamen Virusbestandteilen enthalten. In einer weiteren Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile zusätzlich mindestens ein Peptid einer vierten Gruppe, das zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Glu-Cys-Asp-Ile-Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO:10) und Asp-Asp-Ser-Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu-His (SEQ ID NO:14) aufweist. Das mindestens eine Peptid der vierten Gruppe weist nicht mehr als 30 Aminosäuren, vorzugsweise nicht mehr als 25 Aminosäuren, nicht mehr als 20 Aminosäuren, nicht mehr als 18 Aminosäuren, nicht mehr als 17 Aminosäuren, nicht mehr als 16 Aminosäuren oder nicht mehr als 15 Aminosäuren auf, wobei Peptide mit 15 Aminosäuren bzw. nicht mehr als 15 Aminosäuren besonders bevorzugt sind. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein erstes Peptid der vierten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Glu-Cys-Asp-Ile-Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile- Cys (SEQ ID NO:10). In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein zweites Peptid der vierten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Asp-Asp-Ser-Glu- Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu-His (SEQ ID NO:14). In bevorzugten Ausführungsformen sind sowohl das erste Peptid als auch das zweite Peptid der vierten Gruppe in den antigenwirksamen Virusbestandteilen enthalten. Die Erfinder haben erkannt, dass sich mit den Peptiden der dritten und vierten Gruppe spezifische Antikörperreaktionen auf eine SARS-CoV-Infektion, d. h. neben SARS-CoV-2 auch SARS-CoV-1, mit hoher Zuverlässigkeit nachweisen lassen. Das hat den Vorteil, dass sich mithilfe der erfindungsgemäßen Kombination von Peptiden der ersten und zweiten Gruppe mit einem oder mehreren Peptiden der dritten und/oder vierten Gruppe Infektionen mit SARS-CoV-2 und/oder SARS-CoV-1 gemeinsam erfassen und ggf. gleichzeitig differenzieren lassen. Beispielsweise kann eine Antikörperreaktion mit den Peptiden der ersten, zweiten und dritten bzw. vierten Gruppe eine Infektion mit SARS-CoV-2 anzeigen, während eine Reaktion mit ausschließlich einem oder mehreren Peptiden der dritten und/oder vierten Gruppe den differenzierten Nachweis für eine Infektion mit SARS-CoV-1 erbringt. Gemäß einer weiteren Ausführungsform können die antigenwirksamen Virusbestandteile zudem mindestens ein Peptid einer fünften Gruppe umfassen, das zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Arg-Ser-X3-Ile-Glu-Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), wobei X3 aus Phe und Ala und X7 aus Leu und Ile ausgewählt ist, und Phe-X2- X3-Glu-Leu-Asp-X7-X8-Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO:13), wobei X2 aus Lys und Gln, X3 aus Glu und Asp, X7 aus Lys, Glu und Gln und X8 aus Tyr, Phe und Trp ausgewählt ist, aufweist. Das mindestens eine Peptid der fünften Gruppe weist nicht mehr als 30 Aminosäuren, vorzugsweise nicht mehr als 25 Aminosäuren, nicht mehr als 20 Aminosäuren, nicht mehr als 18 Aminosäuren, nicht mehr als 17 Aminosäuren, nicht mehr als 16 Aminosäuren oder nicht mehr als 15 Aminosäuren auf, wobei Peptide mit 15 Aminosäuren bzw. nicht mehr als 15 Aminosäuren besonders bevorzugt sind. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein erstes Peptid der fünften Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Arg-Ser-X3-Ile-Glu-Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), wobei X3 aus Phe und Ala und X7 aus Leu und Ile ausgewählt ist. In einer Ausführungsform ist X3 Phe. In einer Ausführungsform ist X3 Ala. In einer Ausführungsform ist X7 Leu. In einer Ausführungsform ist X7 Ile. In einer Ausführungsform hat das erste Peptid der fünften Gruppe zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Ser-Lys-Arg-Ser-Phe-Ile-Glu-Asp-Leu-Leu-Phe (SEQ ID NO:70). In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein zweites Peptid der fünften Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Phe-X2-X3-Glu-Leu-Asp-X7-X8-Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO:13), wobei X2 aus Lys und Gln, X3 aus Glu und Asp, X7 aus Lys, Glu und Gln und X8 aus Tyr, Phe und Trp ausgewählt ist. In einer Ausführungsform ist X2 Lys. In einer Ausführungsform ist X2 Gln. In einer Ausführungsform ist X3 Glu. In einer Ausführungsform ist X3 Asp. in einer Ausführungsform ist X7 Lys. In einer Ausführungsform ist X7 Glu. In einer Ausführungsform ist X7 Gln. In einer Ausführungsform ist X8 Tyr. In einer Ausführungsform ist X8 Phe. In einer Ausführungsform ist X8 Trp. In einer Ausführungsform hat das zweite Peptid der fünften Gruppe zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Leu-Asp-Ser-Phe-Lys-Glu-Glu-Leu-Asp- Lys-Tyr-Phe-Lys-Asn-His (SEQ ID NO:69). Vorzugsweise beinhalten die antigenwirksamen Virusbestandteile sowohl das erste als auch das zweite Peptid der fünften Gruppe. Es hat sich gezeigt, dass sich mithilfe der Peptide der fünften Gruppe auch andere als auf SARS-CoV-2 und SARS-CoV-1 basierende Coronavirus-Infektionen nachweisen lassen, unter anderem Infektionen mit MERS-CoV sowie herkömmlichen Erkältungs- Coronaviren wie HCoV-OC34 und HCoV-229E. Auf diese Weise können mithilfe des erfindungsgemäßen Immundiagnostikums auch solche Coronavirus-Infektionen zuverlässig nachgewiesen und durch die Kombination mit den Peptiden der ersten und zweiten Gruppe sowie gegebenenfalls der dritten und/oder vierten Gruppe von Infektionen mit SARS-CoV-2 bzw. SARS-CoV-1 unterschieden werden. In einer weiteren Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile zusätzlich mindestens ein Peptid einer sechsten Gruppe, das zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asn-Gly-Thr-Ile-Thr-Val-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Leu-Glu-Gln (SEQ ID NO:15), Lys-Tyr-Pro-Gln-Val-Asn-Gly-Leu-Thr-Ser-Ile-Lys-Trp- Ala-Asp (SEQ ID NO:16) und Thr-Thr-Asn-Ile-Val-Thr-Arg-Cys-Leu- Asn-Arg-Val-Cys-Thr-Asn (SEQ ID NO:17) aufweist. Das mindestens eine Peptid der sechsten Gruppe weist nicht mehr als 30 Aminosäuren, vorzugsweise nicht mehr als 25 Aminosäuren, nicht mehr als 20 Aminosäuren, nicht mehr als 18 Aminosäuren, nicht mehr als 17 Aminosäuren, nicht mehr als 16 Aminosäuren oder nicht mehr als 15 Aminosäuren auf, wobei Peptide mit 15 Aminosäuren bzw. nicht mehr als 15 Aminosäuren besonders bevorzugt sind. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein erstes Peptid der sechsten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Asn-Gly-Thr-Ile-Thr-Val-Glu-Glu-Leu-Lys- Lys-Leu-Leu-Glu-Gln (SEQ ID NO:15). In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein zweites Peptid der sechsten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Lys-Tyr- Pro-Gln-Val-Asn-Gly-Leu-Thr-Ser-Ile-Lys-Trp-Ala-Asp (SEQ ID NO:16). In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein drittes Peptid der sechsten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz und Thr-Thr-Asn-Ile-Val-Thr-Arg-Cys-Leu- Asn-Arg-Val-Cys-Thr-Asn (SEQ ID NO:17). In bevorzugten Ausführungsformen sind das erste, zweite und dritte Peptid der sechsten Gruppe in den antigenwirksamen Virusbestandteilen enthalten. Gegen diese Peptide konnten die Erfinder eine hohe spezifische Seroreaktivität bei COVID-19-Patienten feststellen, die zu einer zusätzlichen Verbesserung der Nachweisempfindlichkeit des erfindungsgemäßen Immundiagnostikums beitragen kann. In einer alternativen Ausführungsform ist vorgesehen, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile mindestens ein Peptid der ersten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7) und Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8) und/oder mindestens ein Peptid der zweiten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe- Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) und Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile- Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11) in Kombination mit mindestens einem Peptid der dritten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly-Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO:2), Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln-Gly-Leu-Pro-Asn (SEQ ID NO:3), Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu-Pro-Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO:4), Leu-Leu-Leu-Leu-Asp-Arg-Leu-Asn-Gln-Leu-Glu (SEQ ID NO:5) und Ile-Asp-Ala-Tyr-Lys-Thr-Phe-Pro-Pro-Thr-Glu-Pro-Lys-Lys-Asp (SEQ ID NO:6), mindestens einem Peptid der vierten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Glu-Cys-Asp-Ile-Pro-Ile- Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO:10) und Asp-Asp-Ser-Glu-Pro-Val- Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu-His (SEQ ID NO:14), mindestens einem Peptid der fünften Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Arg-Ser-X3-Ile-Glu-Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), wobei X3 aus Phe und Ala und X7 aus Leu und Ile ausgewählt ist, und Phe- X2-X3-Glu-Leu-Asp-X7-X8-Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO:13), wobei X2 aus Lys und Gln, X3 aus Glu und Asp, X7 aus Lys, Glu und Gln und X8 aus Tyr, Phe und Trp ausgewählt ist, und/oder mindestens einem Peptid der sechsten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asn-Gly-Thr-Ile-Thr-Val-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu- Leu-Glu-Gln (SEQ ID NO:15), Lys-Tyr-Pro-Gln-Val-Asn-Gly-Leu-Thr- Ser-Ile-Lys-Trp-Ala-Asp (SEQ ID NO:16) und Thr-Thr-Asn-Ile-Val- Thr-Arg-Cys-Leu-Asn-Arg-Val-Cys-Thr-Asn (SEQ ID NO:17) umfassen. Das mindestens eine Peptid der ersten Gruppe kann in einer Ausführungsvariante auch zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7), Thr- Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe (SEQ ID NO:71) und Ala- Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:72), aufweisen, wobei mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit der Aminosäuresequenz Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:72) bevorzugt ist. Diese Kombinationen von wenigstens einem Peptid aus der ersten oder zweiten Gruppe mit wenigstens einem Peptid aus der dritten, vierten, fünften oder sechsten Gruppe gewährleisten ebenfalls einen zuverlässigen Nachweis von SARS-CoV-2-Infektionen. In bevorzugten Ausführungsformen sind die antigenwirksamen Virusbestandteile ausgewählt aus Peptiden, die einen Sequenzabschnitt mit zumindest 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz aus der Gruppe bestehend aus Glu-Pro-Ile-Tyr- Asp-Glu-Pro-Thr-Thr-Thr-Thr-Ser-Val-Pro-Leu (SEQ ID NO:18), Pro- Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly-Pro-Ser-Asp-Ser-Thr-Gly-Ser-Asn (SEQ ID NO:19), Ser-Gly-Ala-Arg-Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln-Gly-Leu-Pro- Asn (SEQ ID NO:20), Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln-Gly-Leu-Pro-Asn- Asn-Thr-Ala-Ser (SEQ ID NO:21), Arg-Pro-Gln-Gly-Leu-Pro-Asn-Asn- Thr-Ala-Ser-Trp-Phe-Thr-Ala (SEQ ID NO:22), Thr-Ala-Ser-Trp-Phe- Thr-Ala-Leu-Thr-Gln-His-Gly-Lys-Glu-Asp (SEQ ID NO:23), Ile-Val- Leu-Gln-Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu-Pro-Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO:24), Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu-Pro-Lys-Gly-Phe-Tyr-Ala-Glu- Gly (SEQ ID NO:25), Thr-Thr-Leu-Pro-Lys-Gly-Phe-Tyr-Ala-Glu-Gly- Ser-Arg-Gly-Gly (SEQ ID NO:26), Ala-Ala-Leu-Ala-Leu-Leu-Leu-Leu- Asp-Arg-Leu-Asn-Gln-Leu-Glu (SEQ ID NO:27), Leu-Leu-Leu-Leu-Asp- Arg-Leu-Asn-Gln-Leu-Glu-Ser-Lys-Met-Ser (SEQ ID NO:28), Lys-Gly- Gln-Gln-Gln-Gln-Gly-Gln-Thr-Val-Thr-Lys-Lys-Ser-Ala (SEQ ID NO:29), Thr-Val-Thr-Lys-Lys-Ser-Ala-Ala-Glu-Ala-Ser-Lys-Lys-Pro- Arg (SEQ ID NO:30), Lys-Ser-Ala-Ala-Glu-Ala-Ser-Lys-Lys-Pro-Arg- Gln-Lys-Arg-Thr (SEQ ID NO:31), Ile-Asp-Ala-Tyr-Lys-Thr-Phe-Pro- Pro-Thr-Glu-Pro-Lys-Lys-Asp (SEQ ID NO:6), Lys-Lys-Lys-Ala-Asp- Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:32), Asp-Glu- Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys-Lys-Gln-Gln-Thr (SEQ ID NO:33), Arg-Gln-Lys-Lys-Gln-Gln-Thr-Val-Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala- Asp (SEQ ID NO:34), Gln-Gln-Thr-Val-Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp- Leu-Asp-Asp-Phe (SEQ ID NO:35), Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu- Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8), Ala-Ala-Asp-Leu-Asp- Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu-Gln-Gln-Ser-Met (SEQ ID NO:36), Tyr-Val- Gln-Ile-Pro-Thr-Thr-Cys-Ala-Asn-Asp-Pro-Val-Gly-Phe (SEQ ID NO:37), Gly-Val-Leu-Val-Pro-His-Val-Gly-Glu-Ile-Pro-Val-Ala-Tyr- Arg (SEQ ID NO:38), Ser-Glu-Lys-Ser-Tyr-Glu-Leu-Gln-Thr-Pro-Phe- Glu-Ile-Lys-Leu (SEQ ID NO:39), Thr-Pro-Phe-Glu-Ile-Lys-Leu-Ala- Lys-Lys-Phe-Asp-Thr-Phe-Asn (SEQ ID NO:40), Ser-Phe-Leu-Glu-Met- Lys-Ser-Glu-Lys-Gln-Val-Glu-Gln-Lys-Ile (SEQ ID NO:41), Asp-Ala- Val-Thr-Ala-Tyr-Asn-Gly-Tyr-Leu-Thr-Ser-Ser-Ser-Lys (SEQ ID NO:42), Lys-Tyr-Pro-Gln-Val-Asn-Gly-Leu-Thr-Ser-Ile-Lys-Trp-Ala- Asp (SEQ ID NO:16), Thr-Thr-Asn-Ile-Val-Thr-Arg-Cys-Leu-Asn-Arg- Val-Cys-Thr-Asn (SEQ ID NO:17),Leu-Gln-Leu-Cys-Thr-Phe-Thr-Arg- Ser-Thr-Asn-Ser-Arg-Ile-Lys (SEQ ID NO:43), Pro-Gln-Thr-Ser-Ile- Thr-Ser-Ala-Val-Leu-Gln-Ser-Gly-Phe-Arg (SEQ ID NO:44), Ser-Gln- Gly-Leu-Leu-Pro-Pro-Lys-Asn-Ser-Ile-Asp-Ala-Phe-Lys (SEQ ID NO:45), Gln-Lys-Leu-Leu-Lys-Ser-Ile-Ala-Ala-Thr-Arg-Gly-Ala-Thr- Val (SEQ ID NO:46), Ala-Thr-Arg-Gly-Ala-Thr-Val-Val-Ile-Gly-Thr- Ser-Lys-Phe-Tyr (SEQ ID NO:47), His-Arg-Leu-Tyr-Glu-Cys-Leu-Tyr- Arg-Asn-Arg-Asp-Val-Asp-Thr (SEQ ID NO:48), Leu-Gln-Phe-Thr-Ser- Leu-Glu-Ile-Pro-Arg-Arg-Asn-Val-Ala-Thr (SEQ ID NO:49), Leu-Leu- Ala-Leu-His-Arg-Ser-Tyr-Leu-Thr-Pro-Gly-Asp-Ser-Ser (SEQ ID NO:50), Thr-Gly-Val-Leu-Thr-Glu-Ser-Asn-Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe- Gln (SEQ ID NO:51), Thr-Glu-Ser-Asn-Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln- Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:52), Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln-Gln- Phe-Gly-Arg-Asp-Ile-Ala-Asp (SEQ ID NO:53), His-Ala-Asp-Gln-Leu- Thr-Pro-Thr-Trp-Arg-Val-Tyr-Ser-Thr-Gly (SEQ ID NO:54), Asn-Asn- Ser-Tyr-Glu-Cys-Asp-Ile-Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO:55), Asn-Thr-Gln-Glu-Val-Phe-Ala-Gln-Val-Lys-Gln-Ile-Tyr-Lys- Thr (SEQ ID NO:56), Val-Lys-Gln-Ile-Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys- Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:57), Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp- Phe-Gly-Gly-Phe-Asn-Phe-Ser (SEQ ID NO:58), Pro-Ser-Lys-Pro-Ser- Lys-Arg-Ser-Phe-Ile-Glu-Asp-Leu-Leu-Phe (SEQ ID NO:59), Ser-Lys- Arg-Ser-Phe-Ile-Glu-Asp-Leu-Leu-Phe-Asn-Lys-Val-Thr (SEQ ID NO:60), Leu-Asp-Ser-Phe-Lys-Glu-Glu-Leu-Asp-Lys-Tyr-Phe-Lys-Asn- His (SEQ ID NO:69), Lys-Glu-Glu-Leu-Asp-Lys-Tyr-Phe-Lys-Asn-His- Thr-Ser-Pro-Asp (SEQ ID NO:61), Val-Asn-Ile-Gln-Lys-Glu-Ile-Asp- Arg-Leu-Asn-Glu-Val-Ala-Lys (SEQ ID NO:62), Ser-Cys-Gly-Ser-Cys- Cys-Lys-Phe-Asp-Glu-Asp-Asp-Ser-Glu-Pro (SEQ ID NO:63), Cys-Cys- Lys-Phe-Asp-Glu-Asp-Asp-Ser-Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly (SEQ ID NO:64), Asp-Glu-Asp-Asp-Ser-Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu- His (SEQ ID NO:65), Asp-Asp-Ser-Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys- Leu-His-Tyr-Thr (SEQ ID NO:66), Asn-Gly-Thr-Ile-Thr-Val-Glu-Glu- Leu-Lys-Lys-Leu-Leu-Glu-Gln (SEQ ID NO:15), Gln-Arg-Val-Ala-Gly- Asp-Ser-Gly-Phe-Ala-Ala-Tyr-Ser-Arg-Tyr (SEQ ID NO:67) und Gly- Asp-Ser-Gly-Phe-Ala-Ala-Tyr-Ser-Arg-Tyr-Arg-Ile-Gly-Asn (SEQ ID NO:68) und beliebigen Kombinationen davon aufweisen. Diese Peptide haben sich als besonders immunreaktiv erwiesen. In besonders bevorzugten Ausführungsformen sind die antigenwirksamen Virusbestandteile ausgewählt aus Peptiden, die einen Sequenzabschnitt mit zumindest 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz aus der Gruppe bestehend aus SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:66 aufweisen und beliebige Kombinationen davon, insbesondere aus Peptiden, die einen Sequenzabschnitt mit zumindest 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz aus der Gruppe bestehend aus SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:65 aufweisen und beliebigen Kombinationen davon. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:28. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:33. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:8. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:36. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:50. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:56. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:57. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:69. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:62. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:65. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:17. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:27. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:38. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:42. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:43. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:44. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:45. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:48. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:61. In einer Ausführungsform umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile ein Peptid mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit SEQ ID NO:66. In bevorzugten Ausführungsformen beinhalten die antigenwirksamen Virusbestandteile eine Kombination von mehreren der vorgenannten Peptide, sodass die Peptide Sequenzabschnitte mit mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit den folgenden drei Aminosäuresequenzen umfassen: SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:57; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:42 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:57; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:38 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50 und SEQ ID NO:57; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:44 und SEQ ID NO:69; SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:38 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:38 und SEQ ID NO:50; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:48 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50 und SEQ ID NO:57; SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:42 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:48 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36 und SEQ ID NO:50; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:65; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:57; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:65; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:65; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:42 und SEQ ID NO:69; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:38 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:38 und SEQ ID NO:62; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:17 und SEQ ID NO:69; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:38 und SEQ ID NO:43; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50 und SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:57. Es ist auch möglich, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile mehrere der vorgenannten Kombinationen enthalten. In weiteren bevorzugten Ausführungsformen umfasst die Kombination der Peptide Sequenzabschnitte mit mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit den folgenden vier Aminosäuresequenzen: SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:44; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50 und SEQ ID NO:45; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:57; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:50; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:28; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:69 und SEQ ID NO:44; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:61; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:65; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:69 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:27; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:48; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:61; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:48; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:44; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:57; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:56; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:36. Es ist auch möglich, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile mehrere der vorgenannten Kombinationen enthalten. In weiteren bevorzugten Ausführungsformen umfasst die Kombination der Peptide Sequenzabschnitte mit mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit den folgenden fünf Aminosäuresequenzen: SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:44; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:61; SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:61; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:48; SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:66; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:44; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:69 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:69 und SEQ ID NO:38; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:69 und SEQ ID NO:44; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:65; SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:42; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:61; SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57 und SEQ ID NO:44; SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:62 und SEQ ID NO:42. Es ist auch möglich, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile mehrere der vorgenannten Kombinationen enthalten. Die Peptide der oben genannten Kombinationen haben sich in Zusammenwirkung für den empfindlichen und spezifischen immunologischen Nachweis von SARS-CoV-2-Infektionen als besonders vorteilhaft erwiesen. Es ist auch möglich, dass die antigenwirksamen Bestandteile aus einer oder mehreren der oben genannten Kombinationen bestehen. In bestimmten Ausführungsformen umfassen die antigenwirksamen Virusbestandteile nicht mehr als 30 unterschiedliche Peptide, nicht mehr als 25 unterschiedliche Peptide, nicht mehr als 20 unterschiedliche Peptide, nicht mehr als 15 unterschiedliche Peptide, nicht mehr als zehn unterschiedliche Peptide, nicht mehr als neun unterschiedliche Peptide, nicht mehr als acht unterschiedliche Peptide, nicht mehr als sieben unterschiedliche Peptide, nicht mehr als sechs unterschiedliche Peptide, nicht mehr als fünf unterschiedliche Peptide, nicht mehr als vier unterschiedliche Peptide oder nicht mehr als drei unterschiedliche Peptide. Insbesondere können die antigenwirksamen Virusbestandteile aus den vorgenannten Peptiden bestehen. Auf diese Weise kann das Risiko unspezifischer Reaktionen vorteilhaft reduziert werden. In einer Ausführungsform ist vorgesehen, dass der Träger mehrere voneinander getrennte Testbereiche oder Kavitäten aufweist, sodass die antigenwirksamen Virusbestandteile zumindest teilweise in verschiedenen Testbereichen oder Kavitäten angeordnet sein können. Eine Möglichkeit ist, dass die Peptide jeweils separat voneinander oder in Kombination mit jeweils einem weiteren Peptid oder mehreren weiteren Peptiden in einem Testbereich oder einer Kavität angeordnet sind. In bestimmten Ausführungsformen ist vorgesehen, dass die Peptide der ersten, zweiten und, soweit vorhanden, dritten, vierten, fünften und sechsten Gruppe zumindest teilweise in verschiedenen Testbereichen oder Kavitäten angeordnet sind. Auf diese Weise lassen sich detailliertere Informationen zur Antikörperspezifität des Patienten erhalten, die zu einem wichtigen Erkenntnisgewinn in Bezug auf den Verlauf und den klinischen Ausgang von COVID-19 beitragen können. Möglich ist z. B. jedes Peptid in einem separaten Testbereich oder einer separaten Kavität anzuordnen. Eine bevorzugte Ausführungsform sieht eine Anordnung der Peptide nach Gruppen getrennt in verschiedenen Testbereichen oder Kavitäten vor. Durch den gleichzeitigen Nachweis von Antikörpern gegen mehrere Peptide einer Gruppe lassen sich die Messsignale in den einzelnen Testbereichen bzw. Kavitäten vorteilhaft kumulieren, ohne gleichzeitig das Risiko unspezifischer Wechselwirkungen abträglich zu erhöhen, sodass auch geringe Antikörpermengen in Zusammenwirkung noch zuverlässig nachgewiesen werden können. Auf diese Weise wird die Präzision des Nachweises gegenüber herkömmlichen Verfahren signifikant verbessert. Es ist z. B. möglich, die Peptide der ersten Gruppe und der zweiten Gruppe als Gemisch zusammen in demselben Testbereich oder derselben Kavität anzuordnen, um einen besonders zuverlässigen Nachweis von SARS-CoV-2-Infektionen zu gewährleisten. In einer weiteren Ausführung ist vorgesehen, dass die Peptide der ersten und/oder zweiten Gruppe getrennt von den Peptiden der dritten, vierten und/oder fünften Gruppe angeordnet sind, um eine vorteilhafte Differenzierung zwischen Infektionen mit SARS-CoV-2, SARS-CoV-1 und weiteren Coronaviren zu ermöglichen. Insbesondere ist vorgesehen, dass die Peptide der dritten und/oder vierten Gruppe getrennt von den Peptiden der fünften Gruppe angeordnet sind. Alternativ oder zusätzlich ist es natürlich auch möglich, dass die Peptide der ersten, zweiten, dritten, vierten, fünften und sechsten Gruppe, soweit vorhanden, als Gemisch auf dem Träger bzw. in demselben Testbereich oder derselben Kavität angeordnet sind, beispielsweise um ein besonders empfindliches Gesamtsignal zu erhalten. Die Art des Trägers ist nicht sonderlich beschränkt. Geeignete Träger gattungsgemäßer Immundiagnostika sind dem Fachmann einschlägig bekannt oder können auf Grundlage dieser Beschreibung ohne Weiteres bestimmt werden. Nicht limitierende Beispiele sind Membranen z. B. aus derivatisierter Cellulose, Nylon oder Polyvinylidendifluorid, sowie Halbleitermaterialien, behandeltes oder unbehandeltes Glas und behandelter oder unbehandelter Kunststoff wie z. B. Polystyrol, Polycarbonat, Polyvinylchlorid oder dergleichen. Auch beliebige Kombinationen solcher Trägermaterialien sind möglich. In einer bevorzugten Ausführungsform ist der Träger eine Mikrotiterplatte. In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform ist der Träger ein Chip bzw. ein Mikroarraysubstrat oder eine funktionalisierte Glasoberfläche. Wie bereits oben ausgeführt wurde, lassen sich die erfindungsgemäßen Peptide mit Vorteil durch chemische Synthese, insbesondere durch Festphasensynthese nach Merrifield, erzeugen. Dadurch lässt sich das erfindungsgemäße Immundiagnostikum nicht nur wirtschaftlicher herstellen als herkömmliche Immundiagnostika, die auf rekombinanten Konformationsantigenen basieren, sondern stellt auch die Möglichkeit bereit, die Peptide mit zweckdienlichen, nichtnatürlichen bzw. nichtproteinogenen Modifikationen auszustatten. So, wie die Begriffe hier verwendet werden, bezeichnen nichtnatürliche bzw. nichtproteinogene Modifikationen insbesondere die Ausstattung der Peptide mit chemischen Funktionen, Gruppen und/oder Bausteinen, die keinen Bestandteil der Proteinbiosynthese bilden. Beispielsweise kann das mindestens eine Peptid der ersten und/oder zweiten Gruppe und/oder, soweit vorhanden, das mindestens eine Peptid der dritten, vierten, fünften und/oder sechsten Gruppe C-terminal als Carbonsäureamid ausgebildet sein, insbesondere als primäres Amid oder als sekundäres Amid mit einem Acylsubstituenten. Es hat sich gezeigt, dass sich auf diese Weise unspezifische Peptid-Antikörper-Wechselwirkungen deutlich reduzieren lassen und eine Verbesserung der Sensitivität und Spezifität des Diagnostikums erreicht wird. Vorzugsweise sind sämtliche der vorgenannten, in den antigenwirksamen Bestandteilen enthaltene Peptide als Carbonsäureamid ausgebildet. Eine weitere Möglichkeit ist es, die Peptide mit einer nichtproteinogenen Kopplungsgruppe auszustatten, die eine gerichtete kovalente oder affine Anbindung der Peptide an den Träger erlauben. Durch die gerichtete Anbindung lassen sich mehr Peptide in einer aktiven, d. h. zur Antikörperbindung befähigten, Form an den Träger koppeln, wodurch die Zuverlässigkeit des Antikörpernachweises und die Reproduzierbarkeit des Diagnostikums verbessert wird. Geeignete Kopplungsgruppen für die gerichtete kovalente oder affine Anbindung wie z. B. Biotin, His-Tag oder chemoselektive funktionelle Gruppen sind dem Fachmann einschlägig bekannt. Selbstverständlich ist es aber auch möglich, die Peptide ungerichtet, d. h. insbesondere durch unspezifische Adsorption, auf dem Träger anzuordnen. Vorzugsweise weist das Peptid der ersten und/oder zweiten Gruppe und/oder, soweit vorhanden, das mindestens eine Peptid der dritten, vierten, fünften und/oder sechsten Gruppe ein nichtproteinogenes Spacermolekül auf, welches zwischen der nichtproteingenen Kopplungsgruppe und einer, vorzugsweise terminalen, Aminosäure des Peptids angeordnet ist. Auf diese Weise wird das Peptid vom Träger beabstandet und eine effizientere Antikörperbindung an das Peptid erreicht. Nicht beschränkende Beispiele für geeignete Spacermoleküle sind aliphatische C3-, C6-, C12- und C18-Spacer, verschiedene hydrophile Polyethylenglykol-Spacer (PEG-Spacer) und dergleichen. In bevorzugten Ausführungsformen ist die Kopplungsgruppe bzw. das Spacermolekül am N-Terminus des Peptids angeordnet. Die vorliegende Erfindung stellt weiterhin ein artifizielles Polypeptid bereit. Das erfindungsgemäße Polypeptid weist mehrere unterschiedliche Sequenzabschnitte auf, wobei mindestens zwei der Sequenzabschnitte jeweils unabhängig voneinander mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7), Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8), Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) und Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11) aufweisen. Auf diese Weise wird ein hochreaktives, künstliches Antigen bereitgestellt, das mit Vorteil für die Immunisierung gegen SARS-CoV-2 oder für den empfindlichen immunologischen Nachweis von SARS-CoV-2-Infektionen eingesetzt werden kann. In einer weiteren Ausführungsform stellt die vorliegende Erfindung eine Peptidzusammensetzung mit mehreren unterschiedlichen Peptiden in einer lösbaren oder gelösten Form bereit. Die erfindungsgemäße Peptidzusammensetzung charakterisiert, dass mindestens zwei der Peptide jeweils unabhängig voneinander zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7), Thr- Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8), Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) und Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11) aufweisen. Es versteht sich, dass das artifizielle Polypeptid und die Peptidzusammensetzung auch ein oder mehrere weitere Sequenzabschnitte bzw. ein oder mehrere weitere Peptide umfassen kann, welche die Merkmale von einem oder mehreren Peptiden der dritten, vierten, fünften und/oder sechsten Gruppe gemäß obigen Ausführungen aufweisen. Beispielsweise können mindestens zwei der Peptide der Peptidzusammensetzung jeweils unabhängig voneinander zumindest abschnittsweise jeweils mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu- Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7), Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp- Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8), Lys-Lys-Phe-Leu- Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9), und Tyr-Lys-Thr-Pro- Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11), Pro-Arg-Ile-Thr-Phe- Gly-Gly-Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO:2), (SEQ ID NO:3), Leu-Pro- Gln-Gly-Thr-Thr-Leu-Pro-Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO:4), Leu-Leu-Leu- Leu-Asp-Arg-Leu-Asn-Gln-Leu-Glu (SEQ ID NO:5), Ile-Asp-Ala-Tyr- Lys-Thr-Phe-Pro-Pro-Thr-Glu-Pro-Lys-Lys-Asp (SEQ ID NO:6), Glu- Cys-Asp-Ile-Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO:10) und Asp- Asp-Ser-Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu-His (SEQ ID NO:14), Arg-Ser-X3-Ile-Glu-Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), wobei X3 aus Phe und Ala und X7 aus Leu und Ile ausgewählt ist, Phe-X2-X3- Glu-Leu-Asp-X7-X8-Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO:13), wobei X2 aus Lys und Gln, X3 aus Glu und Asp, X7 aus Lys, Glu und Gln und X8 aus Tyr, Phe und Trp ausgewählt ist, Asn-Gly-Thr-Ile-Thr-Val-Glu- Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Leu-Glu-Gln (SEQ ID NO:15), Lys-Tyr-Pro-Gln- Val-Asn-Gly-Leu-Thr-Ser-Ile-Lys-Trp-Ala-Asp (SEQ ID NO:16) und Thr-Thr-Asn-Ile-Val-Thr-Arg-Cys-Leu-Asn-Arg-Val-Cys-Thr-Asn (SEQ ID NO:17) aufweisen. Die Erfindung sieht insbesondere eine Verwendung des artifiziellen Polypeptids oder der Peptidzusammensetzung zur Herstellung eines Immundiagnostikums für eine Coronavirus- Infektion bzw. zur Herstellung eines Impfstoffs gegen SARS-CoV-2 vor. Schließlich betrifft eine Ausführungsform der Erfindung ein Verfahren zum Nachweis und/oder zur Differenzierung von Coronavirus-Infektionen. Das Verfahren umfasst die folgenden Schritte: a) Bereitstellen mindestens eines Peptids einer ersten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7) und Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8) und/oder mindestens eines Peptids einer zweiten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Lys-Lys-Phe-Leu-Pro- Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) und Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro- Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11), b) Bereitstellen mindestens eines Peptids einer dritten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly- Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO:2), Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln-Gly- Leu-Pro-Asn (SEQ ID NO:3), Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu-Pro-Lys- Gly-Phe (SEQ ID NO:4), Leu-Leu-Leu-Leu-Asp-Arg-Leu-Asn-Gln-Leu- Glu (SEQ ID NO:5) und Ile-Asp-Ala-Tyr-Lys-Thr-Phe-Pro-Pro-Thr- Glu-Pro-Lys-Lys-Asp (SEQ ID NO:6), mindestens eines Peptids einer vierten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Glu-Cys-Asp-Ile-Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO:10) und Asp-Asp-Ser-Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu-His (SEQ ID NO:14) und/oder mindestens eines Peptids einer fünften Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Arg-Ser-X3-Ile-Glu- Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), wobei X3 aus Phe und Ala und X7 aus Leu und Ile ausgewählt ist, und Phe-X2-X3-Glu-Leu-Asp-X7-X8- Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO:13), wobei X2 aus Lys und Gln, X3 aus Glu und Asp, X7 aus Lys, Glu und Gln und X8 aus Tyr, Phe und Trp ausgewählt ist, c) unterscheidbares Kontaktieren des mindestens einen Peptids der ersten und/oder zweiten Gruppe und des mindestens einen Peptids der dritten, vierten und/oder fünften Gruppe mit einer Patientenprobe, die im Verdacht steht, Antikörper gegen ein Coronavirus zu enthalten, unter Bedingungen, die eine Bindung der Antikörper an die Peptide erlauben, d) Überprüfen, ob in Schritt c) eine Bindung der Antikörper an das mindestens eine Peptid der ersten und/oder zweiten Gruppe und das mindestens eine Peptid der dritten, vierten und/oder fünften Gruppe erfolgt ist, um die Coronavirus- Infektion nachzuweisen und/oder zu differenzieren. Insbesondere handelt es sich bei den Antikörpern um IgG- Antikörper. Es versteht sich, dass sich die verschiedenen Ausführungsformen und Vorteile des erfindungsgemäßen Immundiagnostikums, soweit anwendbar, auch auf das artifizielle Polypeptid, die Peptidzusammensetzung und deren Verwendungen sowie das Verfahren zum Nachweis und/oder zur Differenzierung von Coronavirus- Infektionen beziehen können. Merkmale, die vorstehend und im Folgenden im Zusammenhang mit dem Immundiagnostikum offenbart sind, können sich daher auch auf das Polypeptid, die Peptidzusammensetzung, deren Verwendungen und das Verfahren zum Nachweis und/oder zur Differenzierung von Coronavirus- Infektionen beziehen und umgekehrt. Kurze Beschreibung der Figuren Die Erfindung wird im Folgenden anhand von Ausführungsbeispielen unter Bezugnahme auf die beigefügten Figuren näher erläutert. Keinesfalls soll die Erfindung auf die Ausführungsbeispiele und die gezeigten Figuren beschränkt sein. Es zeigen: Fig. 1 eine Peptid-Mikroarray basierte Analyse der in humanen Patientenseren gemessenen IgG-Immunantwort gegen das SARS-CoV-2 Nucleoprotein (N) und Spike-Glycoprotein (S); Fig. 2 Peptid-Mikroarray basierte Analysen der in humanen Patientenseren gemessenen IgG-Immunantwort gegen das Nucleoprotein (N) verschiedener Coronaviren; Fig. 3 Peptid-Mikroarray basierte Analysen der in humanen Patientenseren gemessenen IgG-Immunantwort gegen das Spike-Glycoprotein (S) verschiedener Coronaviren; Fig. 4 Peptid-Mikroarray basierte Analysen der in humanen Patientenseren gemessenen IgG-Immunantwort gegen das Membranprotein (M) verschiedener Coronaviren; Fig. 5 Peptid-Mikroarray basierte Analysen der in humanen Patientenseren gemessenen IgG-Immunantwort gegen das Envelope small membrane protein (E) verschiedener Coronaviren; Fig. 6 Peptid-Mikroarray basierte Analysen der in humanen Patientenseren gemessenen IgG-Immunantwort gegen Nichtstrukturproteine aus Replicase polyprotein 1ab von SARS-CoV-2; Fig. 7 Peptid-Mikroarray basierte Analysen der in humanen Patientenseren gemessenen IgG-Immunantwort gegen weitere Nichtstrukturproteine von SARS-CoV-2; Fig. 8 eine Auswertung der Unterscheidungskraft ausgewählter immundominanter SARS-CoV-2 Epitope mittels Wilcoxon- Rangsummentest in Bezug auf die Fähigkeit der Peptide zur Unterscheidung zwischen Patientengruppen mit und ohne SARS-CoV-Infektion; Fig. 9 eine Korrelationsanalyse von den Ergebnissen der serologischen Diagnose von SARS-CoV-2 Patienten mit einem erfindungsgemäßen Immundiagnostikum im Mikroarray-Format im Vergleich zu einem herkömmlichen ELISA-Test als Referenz; Fig. 10 eine grafische Darstellung der serologischen Kreuzreaktivität zwischen SARS-CoV-2 und anderen Coronaviren; Fig. 11 eine grafische Darstellung verschiedener erfindungsgemäßer Epitopkombinationen. Detaillierte Beschreibung von Ausführungsbeispielen Für die Identifizierung von immundominanten Epitopen wurde die humorale Immunantwort gegen SARS-CoV-2 mit Serumproben von COVID-19 Patienten auf der Ebene einzelner linearer Peptidepitope mithilfe von Peptid-Mikroarrays analysiert. Die Peptid-Mikroarrays umfassten eine Bibliothek von insgesamt 5513 Peptiden, welche das gesamte Proteom von SARS-CoV-2 und zusätzlich das Spike-glycoprotein (S), Nucleoprotein (N), Envelope small membrane protein (E), und Membranprotein (M) der folgenden HCoVs enthielt: SARS-CoV-1, MERS-CoV, HCoV-229E und HCoV-OC43. Alle Proteine wurden durch überlappende Peptide repräsentiert welche die gesamte Proteinsequenz abbildeten. Die Peptidlänge betrug jeweils 15 Aminosäuren bei einer Überlappung von 11 Aminosäuren zwischen aufeinanderfolgenden Peptiden. Alle in der Peptidbibliothek abgebildeten Proteine sind in der folgenden Tabelle 1 aufgeführt. Tabelle 1: Aufstellung der mithilfe der Peptidbibliothek dargestellten Coronavirus-Proteine.
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Die Peptide wurden mithilfe der SPOT-Synthesetechnologie auf Cellulosemembranen synthetisiert. Nach einem letzten Syntheseschritt, bei dem eine Kopplungsgruppe am N-Terminus jedes Peptids angefügt wurde, wurden die Seitenketten entschützt und die festphasengebundenen Peptide in 96-Well-Mikrotiter- Filtrationsplatten (Millipore, Bedford, MA, USA) überführt. Zur Abspaltung der Peptide von der Cellulosemembran wurden die einzelnen Spots mit wässrigem Triethylamin (2,5% v/v) behandelt. Die peptidhaltige Lösung wurde in Tochterplatten zentrifugenfiltriert und das Lösungsmittel durch Verdampfen unter reduziertem Druck entfernt. Zur Übertragung der Peptide auf 384-Well-Platten wurden die trockenen Peptide jeweils in 35 µL Druckpuffer (40% DMSO, 5% Glycerol in 200 mM Natriumacetat- Puffer pH 4) gelöst und mit automatisierten Liquid-Handling- Systemen aliquotiert. Die Peptid-Mikroarrays wurden mit einem kontaktfreien Hochleistungs-Mikroarray-Drucker auf epoxymodifizierten Objektträgern hergestellt (PolyAn, Berlin, Deutschland). Alle Peptide und Kontrollen wurden in Triplikaten gedruckt. Die Peptid-Mikroarrays wurden mit Seren in einer 1:200 Verdünnung in SuperBlock Blockierungspuffer (Thermo Scientific, Bremen, Deutschland) in einer HS 4800 Mikroarray- Verarbeitungsstation (Tecan, Crailsheim, Deutschland) für zwei Stunden bei 30 °C inkubiert, gefolgt von einer Inkubation mit 0,1 μg/mL fluoreszenzmarkiertem Anti-Human-IgG- Detektionsantikörper (Jackson Immunoresearch, Ely, UK). Vor jedem Inkubationsschritt wurden Waschschritte mit 0,1% Tween-20 in Tris-gepufferter Salzlösung (TBS-Puffer) durchgeführt. Nach dem letzten Inkubationsschritt wurden die Microarrays gewaschen (0,05% Tween-20 in 0,1-fach konzentrierter Natriumcitrat- gepufferter Salzlösung, SSC) und in einem Stickstoffstrom getrocknet. Jeder Mikroarray wurde mit einem GenePix Autoloader 4300 SL50 (Molecular Devices, San Jose, USA) mit einer Auflösung von 10 μm gescannt. Die Signalintensitäten wurden mit der GenePix Pro 7.0-Analysesoftware (Molecular Devices) ausgewertet. Für jedes Peptid wurde der MMC2-Wert der drei Triplikate berechnet. Der MMC2-Wert entspricht dem Mittelwert aller drei Instanzen auf dem Mikroarray, außer wenn der Variationskoeffizient (CV), d. h. die Standardabweichung geteilt durch den Mittelwert, größer als 0,5 war. In diesem Fall wurde der Mittelwert der beiden einander am nächsten liegenden Werte (MC2) dem MMC2 zugeordnet. Die weitere Datenanalyse und die Erstellung der Diagramme zur Visualisierung der Daten (sog. Heatmaps) erfolgte mit der statistischen Berechnungs- und Grafiksoftware R (Version 4.0.2,www.r-project.org). Der für die statistische Analyse der Mikroarray-Ergebnisse und für die Erstellung der Heatmaps verwendete Datensatz basierte auf MMC2-Werten, die aus den Signalen der dreimal immobilisierten Spots jedes einzelnen Peptids berechnet wurden. In den Heatmaps wurden die MMC2-Werte in Grauwerte umkodiert, wobei weiß für kein Signal oder geringe Signalintensität steht und der Grauwert mit steigender Signalintensität (bis zu einer maximalen Intensität von 65535 Lichteinheiten, LE) zunimmt. Die rechte Spalte in jeder Heatmap repräsentiert die höchstmögliche Signalintensität. Fig. 1 zeigt die Peptid-Mikroarray basierte Analyse von IgG- Reaktionen auf das SARS-CoV-2 Nucleoprotein (N) und Spike- Glycoprotein (S), gemessen in Humanseren. Die Heatmaps beinhalten zwei Gruppen von Serumproben: Seren von SARS-CoV-2- Infizierten und Seren von Kontrollgruppen ohne SARS-CoV-2- Infektion. Die Spalten repräsentieren Peptidsequenzen, die Zeilen die Proben. Die Grauwerte geben die Signalintensität an, die von dreifachen Spots erhalten wurden. Die beiden oberen Zeilen der Heatmaps reflektieren Signale, die nur mit Detektionsantikörpern (kein Serum) erhalten wurden. Die rechte Spalte in jeder Heatmap spiegelt die höchstmögliche Signalintensität wider. Die ebenfalls in Fig. 1 gezeigten Box-Plots geben die Signalverteilung in den beiden Serumgruppen für ausgewählte immundominante Regionen wider. Die zentralen Rechtecke erstrecken sich vom ersten Quartil bis zum dritten Quartil (dem Interquartilsbereich oder IQR). Die Whisker repräsentieren die folgenden Werte: oberer Whisker = min(max(x), Quartil 3 + 1,5∙IQR); unterer Whisker = max(min(x), Quartil 1 - 1,5∙IQR). Die Punkte in den Boxplots zeigen die MMC2-Werte für die einzelnen Proben. Der statistische Vergleich von zwei Stichprobengruppen wurde mit dem Wilcoxon-Rangsummentest durchgeführt (R-Paket-Statistik, n=24 Patientenproben und n=12 Kontrollstichproben). Die ROC-Analyse wurde mit dem R-Paket ROCR durchgeführt. Die Auswahl der Peptide mit signifikanter Trennung zwischen den Probengruppen basierte auf dem Genauigkeitswert (ACC2), der als „wahr positiv + wahr negativ/Gesamtzahl der Befunde“ berechnet wurde. Ein Genauigkeitswert von ≥ 0.39 wurde als Hinweis auf Immunogenität angesehen. Die Immundominanz wurde den Epitopen auf der Grundlage der höchsten Genauigkeitswerte und der Sequenzen des entsprechenden überlappenden Peptids zugeordnet. In Ergänzung zeigen die Fig. 2 bis 5 die Ergebnisse der Peptid- Mikroarray-Analyse der IgG-Reaktionen auf das Nucleoprotein (Fig. 2), Spike-Glycoprotein (Fig. 3), Membranprotein (Fig 4) und Envelope small membrane protein (Fig. 5) verschiedener Coronaviren. Fig. 6 und Fig. 7 zeigen ergänzend die Peptid- Mikroarray-Analyse der IgG-Reaktionen auf Nichtstrukturproteine aus Replicase polyprotein 1ab (Fig. 6) und andere Nichtstrukturproteine (Fig. 7) von SARS-CoV-2. Die Ergebnisse der Analysen zeigen, dass die Seren der COVID-19 Patienten ein hohes Maß an Antikörper Reaktivität aufwiesen, wohingegen in den Kontrollseren kaum oder keine Reaktivität nachgewiesen werden konnte. Es wurden mehrere immundominante Regionen in dem SARS-CoV-2 Proteom identifiziert. Diese fanden sich hauptsächlich in dem SARS2 Spike-Glycoprotein und dem SARS2 Nucleoprotein. Es wurde ebenfalls eine starke IgG-Reaktivität gegenüber mehreren Peptiden ermittelt, die aus dem SARS2 Membranprotein, Protein 3a und Replicase polyprotein 1ab abgeleitet wurden, wobei die ermittelte Immundominanz in diesen Proteinen jedoch insgesamt weniger stark ausgeprägt war. Alle übrigen SARS2-Antigene zeigten hinsichtlich der IgG-Antwort keine oder nur eine geringe Immunogenität. Zur quantitativen Charakterisierung der identifizierten immundominanten Regionen wurden die Immunantworten in SARS-CoV- 2-infizierten Patienten mit denen in der Kontrollgruppe für jedes Peptid durch den nichtparametrischen Wilcoxon- Rangsummentest verglichen. In Fig. 8 sind die Ergebnisse für ausgewählte Peptide dargestellt. Die statistische Auswertung zeigt, dass die Peptide eine zuverlässige Unterscheidung zwischen den Patientengruppen gewährleisten. Tabelle 2 zeigt eine Auswahl der auf diese Weise identifizierten Epitope, die entweder durch einzelne Peptide oder durch gemeinsame Kernsequenzen, die von zwei oder mehr überlappenden Peptiden abgeleitet sind, repräsentiert werden. Um die identifizierten immundominanten Peptide auf die potentiellen immundominanten Epitopsequenzen einzugrenzen, wurden die Peptide mit den höchsten Genauigkeitswerten in der Reihenfolge ihres Auftretens in den entsprechenden Antigenen aufgelistet. Soweit möglich, wurden Sequenzüberlappungen durch Unterstreichung hervorgehoben. Die Peptidbezeichnung setzt sich aus der Abkürzung des jeweiligen SARS-CoV-2 Proteins (AP3A = Protein 3a; NCAP = Nucleoprotein; SPIKE = Spike glycoprotein; VME1 = Membrane protein; R1AB = Replicase polyprotein 1ab) und der Aminosäureposition im Protein zusammen. Beispielsweise bezeichnet „NCAP_0157-0171“ das Peptid, das die Aminosäuren 157 bis 171 des SARS-CoV-2 Nucleoproteins repräsentiert. VH gibt das Verhältnis aus dem Median der gemessenen Signalintensitäten von Triplikat-Spots des jeweiligen Peptids in SARS-CoV-2-infizierten Patienten und der Kontrollgruppe an. Tabelle 2: Ausgewählte erfindungsgemäße SARS-CoV-2-Epitope, die eine gute Trennung zwischen den Gruppen gewährleisten. AUC = Fläche unter der ROC-Kurve.
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Eine vollständige Liste der erfindungsgemäßen Peptide, die eine signifikante Unterscheidung zwischen SARS-CoV-2 infizierten Patienten und der Kontrollgruppe erlaubten, ist in Tabelle 3 gezeigt. Die Peptidbezeichnungen setzen sich wiederum entsprechend der obigen Ausführungen zu Tabelle 2 zusammen. Tabelle 3: Erfindungsgemäße Peptide mit der höchsten ermittelten Unterscheidungskraft zwischen SARS-CoV-2-Infizierten und der Kontrollgruppe.
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Das diagnostische Potenzial des erfindungsgemäßen, peptidbasierten Immundiagnostikums wurde durch einen Vergleich der Testergebnisse mit einem herkömmlichen, auf einem vollständigen Konformationsantigen basierenden ELISA-Test (Euroimmun, Lübeck, Deutschland) evaluiert. Fig. 9 zeigt die quantitativen Messergebnisse für die SARS-CoV-2 infizierte Patientengruppe mit dem kommerziellen ELISA Test (x-Achse) und dem erfindungsgemäßen Immundiagnostikum in einer Ausführung als Peptid-Mikroarray (y-Achse). Der Spearman'sche Korrelationskoeffizient zwischen dem ELISA-Signal und den summierten Mikroarray-Signalen für Peptide aus dem SARS-CoV-2 Spike-Glycoprotein und Nucleoprotein wurde für Seren von SARS- CoV-2-infizierten Patienten berechnet. Im ELISA-Assay, der ein rekombinantes Spike-Glycoprotein als Antigen verwendet, wurde der Quotient aus der Extinktion der Patientenprobe im Vergleich zum Kalibrator als Netto-Assay-Signal verwendet. Die gesamten Mikroarray-Signale für jede Probe wurden als Summe aller entsprechenden Signalintensitäten über dem oberen 10-16%-Quantil der Rauschverteilung berechnet. Die Tests zeigten eine hohe Korrelation mit einem Spearman'schen Korrelationskoeffizienten von 0,88. Die Antikörper-Kreuzreaktivität zwischen SARS-CoV-2 und saisonalen Erkältungs-Coronaviren kann im Hinblick auf den klinischen Verlauf von COVID-19 von großer Bedeutung sein und stellt gleichzeitig eine Herausforderung für die Entwicklung eines spezifischen Immuntests für SARS-CoV-2 dar. Vor diesem Hintergrund wurde ergänzend die IgG-Reaktivität auf Peptide aus den S-, N-, E- und M-Proteinen von SARS-CoV, MERS- CoV, HCoV-OC43 und HCoV-229E (siehe Tabelle 1 oben) analysiert. Dabei konnten die Erfinder sehr ähnliche IgG-Bindungsprofile gegen die N- und M-Proteine von SARS-CoV-2 und SARS-CoV feststellen, während die entsprechenden Proteine der übrigen Virusstämme nur schwache und gestreute Signale zeigten (siehe Fig. 2 und Fig. 4). Insbesondere die vom S-Protein aller Virusstämme abgeleiteten Peptide zeigten bei SARS-CoV-2- positiven Patienten klare Signalmuster, die darauf hindeuteten, dass dieses Antigen potenziell kreuzreaktive Determinanten enthielt (siehe Fig. 3). Diese serologische Kreuzreaktivität zwischen SARS-CoV-2 und anderen Coronaviren in Bezug auf das S-Protein ist zusätzlich in Fig. 10 gezeigt. Die Heatmaps veranschaulichen eine starke IgG- Seroreaktivität in Seren von SARS-CoV-2-infizierten Patienten gegenüber konservierten S-Protein-Regionen verschiedener Coronaviren. Die IgG-Reaktivität richtete sich vor allem gegen zwei Sequenzbereiche, die jeweils von zwei überlappenden Peptiden mit hochkonservierten kreuzreaktiven Epitopen gebildet wurden. Mithilfe dieser Ergebnisse konnten zwei hochgradig kreuzreaktive Motive abgeleitet werden. Das Konsensmotiv I, R0815S-IED-LF0823 (Zahlen beziehen sich auf die Position des Epitops im SARS2-Antigen), war bei allen fünf analysierten Viren vorhanden, während ein zweites Konsensmotiv II, F1148--ELD-- FKN1158, bei den Viren SARS-CoV-2, SARS-CoV, MERS-Cov und HCoV- OC43, jedoch nicht bei HCoV-229E gefunden wurde. Zur weiteren Analyse der serologischen Kreuzreaktivität von SARS-CoV-2-positiven Patienten gegen gewöhnliche Erkältungs- Coronaviren wurde ein lückenloser Abgleich der N- und S- Sequenzen aller Coronaviren durchgeführt. Daraus ergaben sich für jeden Stamm die Sequenzbereiche, die zu den zuvor identifizierten SARS-CoV-2-Epitopen komplementär waren. Schließlich wurde für jeden der Aminosäurereste der so identifizierten Sequenzenbereiche das mediane Signal aller überlappenden Peptide berechnet, die diesen Aminosäurerest enthielten, und mit den gleichen Grauwerten wie in den zuvor präsentierten Heatmaps visualisiert. Die Ergebnisse sind in Fig. 11 gezeigt. Die immundominanten Epitope mit SEQ ID NO:7 und SEQ ID NO:8 des N-Proteins und SEQ ID NO:9 und SEQ ID NO:11 des S-Proteins von SARS-CoV-2 zeigten bei Proben von SARS-CoV-2-infizierten Personen im Vergleich zu den Kontrollproben starke Signale. Gleichzeitig wurden keine Signale für die direkt homologen Sequenzen der anderen Coronavirusstämme gefunden, was belegt, dass IgG-Reaktionen auf diese Epitope hochspezifisch für SARS-CoV-2 sind (Fig. 11 oben). Die SARS-CoV-2-Epitope SEQ ID NO:2 bis SEQ ID NO:6 des N- Proteins und SEQ ID NO:10 und SEQ ID NO:14 des S-Proteins zeigten eine starke Homologie zu SARS-CoV, was zu einer serologischen Kreuzreaktivität mit diesem Virus führte (Fig. 11 Mitte). Schließlich waren die Epitope mit SEQ ID NO:12 und SEQ ID NO:13 des S-Proteins am wenigsten SARS-CoV-2-spezifisch und wiesen eine beträchtliche immunologische Kreuzreaktivität auf (Fig. 11 unten). Auf diese Weise können erfindungsgemäße Kombinationen dieser Peptidepitope mit Vorteil eingesetzt werden, um Infektionen mit SARS-CoV-2 mit hoher Zuverlässigkeit nachzuweisen und ggf. gleichzeitig von Infektionen mit SARS-CoV-1 und/oder weiteren Coronaviren zu differenzieren. Die Erfindung ist nicht durch die Beschreibung anhand der Ausführungsbeispiele auf diese beschränkt. Vielmehr umfasst die Erfindung jedes neue Merkmal sowie jede Kombination von Merkmalen, was insbesondere jede Kombination von Merkmalen in den Patentansprüchen und der Beschreibung beinhaltet, auch wenn dieses Merkmal oder diese Kombination von Merkmalen selbst nicht explizit in den Patentansprüchen, der Beschreibung oder den Ausführungsbeispielen angegeben ist.

Claims

Patentansprüche 1. Ein Immundiagnostikum für eine Coronavirus-Infektion mit einem Träger und mehreren antigenwirksamen Virusbestandteilen von mindestens einem Coronavirus, die auf dem Träger angeordnet sind, dadurch gekennzeichnet, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile mindestens ein Peptid einer ersten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro- Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7) und Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala- Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8) und mindestens ein Peptid einer zweiten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln- Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) und Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile- Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11) umfassen, wobei das mindestens eine Peptid der ersten Gruppe und das mindestens eine Peptid der zweiten Gruppe jeweils nicht mehr als 30 Aminosäuren aufweist.
2. Das Immundiagnostikum nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile mindestens ein Peptid einer dritten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly- Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO:2), Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln- Gly-Leu-Pro-Asn (SEQ ID NO:3), Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu- Pro-Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO:4), Leu-Leu-Leu-Leu-Asp-Arg-Leu- Asn-Gln-Leu-Glu (SEQ ID NO:5) und Ile-Asp-Ala-Tyr-Lys-Thr- Phe-Pro-Pro-Thr-Glu-Pro-Lys-Lys-Asp (SEQ ID NO:6) umfassen, wobei das mindestens eine Peptid der dritten Gruppe nicht mehr als 30 Aminosäuren aufweist.
3. Das Immundiagnostikum nach einem der Ansprüche 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile mindestens ein Peptid einer vierten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Glu-Cys-Asp-Ile- Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO:10) und Asp-Asp-Ser- Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu-His (SEQ ID NO:14) umfassen, wobei das mindestens eine Peptid der vierten Gruppe nicht mehr als 30 Aminosäuren aufweist.
4. Das Immundiagnostikum nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile mindestens ein Peptid einer fünften Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Arg-Ser-X3-Ile- Glu-Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), wobei X3 aus Phe und Ala und X7 aus Leu und Ile ausgewählt ist, und Phe-X2-X3-Glu-Leu- Asp-X7-X8-Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO:13), wobei X2 aus Lys und Gln, X3 aus Glu und Asp, X7 aus Lys, Glu und Gln und X8 aus Tyr, Phe und Trp ausgewählt ist, umfassen, wobei das mindestens eine Peptid der fünften Gruppe nicht mehr als 30 Aminosäuren aufweist.
5. Das Immundiagnostikum nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile mindestens ein Peptid einer sechsten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asn-Gly-Thr-Ile- Thr-Val-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Leu-Glu-Gln (SEQ ID NO:15), Lys-Tyr-Pro-Gln-Val-Asn-Gly-Leu-Thr-Ser-Ile-Lys-Trp-Ala-Asp (SEQ ID NO:16) und Thr-Thr-Asn-Ile-Val-Thr-Arg-Cys-Leu-Asn- Arg-Val-Cys-Thr-Asn (SEQ ID NO:17) umfassen, wobei das mindestens eine Peptid der sechsten Gruppe nicht mehr als 30 Aminosäuren aufweist.
6. Das Immundiagnostikum nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch gekennzeichnet, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile ausgewählt sind aus Peptiden mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz der Gruppe bestehend aus SEQ ID NO:28, SEQ ID NO:33, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:36, SEQ ID NO:50, SEQ ID NO:56, SEQ ID NO:57, SEQ ID NO:69, SEQ ID NO:62, SEQ ID NO:65, SEQ ID NO:17, SEQ ID NO:27, SEQ ID NO:38, SEQ ID NO:42, SEQ ID NO:43, SEQ ID NO:44, SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:61, SEQ ID NO:66 und beliebigen Kombinationen davon.
7. Das Immundiagnostikum nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass der Träger mehrere voneinander getrennte Testbereiche oder Kavitäten aufweist, wobei die antigenwirksamen Virusbestandteile zumindest teilweise in verschiedenen Testbereichen oder Kavitäten angeordnet sind.
8. Das Immundiagnostikum nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass die Peptide der ersten Gruppe und der zweiten Gruppe als Gemisch zusammen in demselben Testbereich oder derselben Kavität angeordnet sind.
9. Das Immundiagnostikum nach einem der Ansprüche 7 oder 8, soweit zurückbezogen auf einen der Ansprüche 2 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass die Peptide der ersten und/oder zweiten Gruppe getrennt von den Peptiden der dritten, vierten und/oder fünften Gruppe angeordnet sind.
10. Das Immundiagnostikum nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, dass die Peptide der dritten und/oder vierten Gruppe getrennt von den Peptiden der fünften Gruppe angeordnet sind.
11. Das Immundiagnostikum nach einem der Ansprüche 1 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass der Träger ausgewählt ist aus der Gruppe bestehend aus Membran, Halbleiter, behandeltes oder unbehandeltes Glas, behandelter oder unbehandelter Kunststoff und beliebigen Kombinationen davon.
12. Das Immundiagnostikum nach einem der Ansprüche 1 bis 11, dadurch gekennzeichnet, dass der Träger eine Mikrotiterplatte oder ein Mikroarray ist.
13. Das Immundiagnostikum nach einem der Ansprüche 1 bis 12, dadurch gekennzeichnet, dass das mindestens eine Peptid der ersten und/oder zweiten Gruppe und/oder, soweit vorhanden, das mindestens eine Peptid der dritten, vierten fünften und/oder sechsten Gruppe C-terminal als Carbonsäureamid ausgebildet ist.
14. Das Immundiagnostikum nach einem der Ansprüche 1 bis 13, dadurch gekennzeichnet, dass das mindestens eine Peptid der ersten und zweiten Gruppe und, soweit vorhanden, das mindestens eine Peptid der dritten, vierten, fünften und sechsten Gruppe eine nichtproteinogene Kopplungsgruppe aufweist, die das Peptid kovalent oder nichtkovalent mit dem Träger verbindet.
15. Das Immundiagnostikum nach Anspruch 14, dadurch gekennzeichnet, dass das mindestens Peptid der ersten und zweiten Gruppe und, soweit vorhanden, das mindestens eine Peptid der dritten, vierten, fünften und sechsten Gruppe ein nichtproteinogenes Spacermolekül aufweist, welches zwischen der nichtproteinogenen Kopplungsgruppe und einer Aminosäure des Peptids angeordnet ist.
16. Ein Immundiagnostikum für eine Coronavirus-Infektion mit einem Träger und mehreren antigenwirksamen Virusbestandteilen von mindestens einem Coronavirus, die auf dem Träger angeordnet sind, dadurch gekennzeichnet, dass die antigenwirksamen Virusbestandteile mindestens ein Peptid einer ersten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro- Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7) und Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala- Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8) und/oder einer zweiten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) und Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11) und mindestens ein Peptid einer dritten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly- Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO:2), Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln- Gly-Leu-Pro-Asn (SEQ ID NO:3), Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu- Pro-Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO:4), Leu-Leu-Leu-Leu-Asp-Arg-Leu- Asn-Gln-Leu-Glu (SEQ ID NO:5) und Ile-Asp-Ala-Tyr-Lys-Thr- Phe-Pro-Pro-Thr-Glu-Pro-Lys-Lys-Asp (SEQ ID NO:6), einer vierten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Glu-Cys-Asp-Ile-Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO:10) und Asp-Asp-Ser-Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu-His (SEQ ID NO:14), einer fünften Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Arg-Ser-X3-Ile-Glu-Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), wobei X3 aus Phe und Ala und X7 aus Leu und Ile ausgewählt ist, und Phe-X2-X3-Glu-Leu-Asp-X7-X8-Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO:13), wobei X2 aus Lys und Gln, X3 aus Glu und Asp, X7 aus Lys, Glu und Gln und X8 aus Tyr, Phe und Trp ausgewählt ist, und/oder einer sechsten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asn-Gly-Thr-Ile-Thr-Val-Glu- Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Leu-Glu-Gln (SEQ ID NO:15), Lys-Tyr-Pro- Gln-Val-Asn-Gly-Leu-Thr-Ser-Ile-Lys-Trp-Ala-Asp (SEQ ID NO:16) und Thr-Thr-Asn-Ile-Val-Thr-Arg-Cys-Leu-Asn-Arg-Val- Cys-Thr-Asn (SEQ ID NO:17) umfassen, wobei das mindestens eine Peptid der ersten und/oder zweiten Gruppe und das mindestens eine Peptid der dritten, vierten, fünften und/oder sechsten Gruppe jeweils nicht mehr als 30 Aminosäuren aufweisen.
17. Ein artifizielles Polypeptid mit mehreren unterschiedlichen Sequenzabschnitten, dadurch gekennzeichnet, dass mindestens zwei der Sequenzabschnitte jeweils unabhängig voneinander mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7), Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe- Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8), Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln- Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) und Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile- Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11) aufweisen.
18. Eine Peptidzusammensetzung mit mehreren unterschiedlichen Peptiden in einer lösbaren oder gelösten Form, dadurch gekennzeichnet, dass mindestens zwei der Peptide jeweils unabhängig voneinander zumindest abschnittsweise jeweils mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7), Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe- Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8), Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln- Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9),Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys- Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11), Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly- Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO:2), (SEQ ID NO:3), Leu-Pro-Gln- Gly-Thr-Thr-Leu-Pro-Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO:4), Leu-Leu-Leu- Leu-Asp-Arg-Leu-Asn-Gln-Leu-Glu (SEQ ID NO:5), Ile-Asp-Ala- Tyr-Lys-Thr-Phe-Pro-Pro-Thr-Glu-Pro-Lys-Lys-Asp (SEQ ID NO:6), Glu-Cys-Asp-Ile-Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO:10) und Asp-Asp-Ser-Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu- His (SEQ ID NO:14), Arg-Ser-X3-Ile-Glu-Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), wobei X3 aus Phe und Ala und X7 aus Leu und Ile ausgewählt ist, Phe-X2-X3-Glu-Leu-Asp-X7-X8-Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO:13), wobei X2 aus Lys und Gln, X3 aus Glu und Asp, X7 aus Lys, Glu und Gln und X8 aus Tyr, Phe und Trp ausgewählt ist, Asn-Gly-Thr-Ile-Thr-Val-Glu-Glu-Leu-Lys-Lys-Leu-Leu-Glu- Gln (SEQ ID NO:15), Lys-Tyr-Pro-Gln-Val-Asn-Gly-Leu-Thr-Ser- Ile-Lys-Trp-Ala-Asp (SEQ ID NO:16) und Thr-Thr-Asn-Ile-Val- Thr-Arg-Cys-Leu-Asn-Arg-Val-Cys-Thr-Asn (SEQ ID NO:17) aufweisen.
19. Eine Verwendung eines artifiziellen Polypeptids nach Anspruch 17 oder einer Peptidzusammensetzung nach Anspruch 18 zur Herstellung eines Immundiagnostikums für eine Coronavirus- Infektion oder zur Herstellung eines Impfstoffs gegen SARS- CoV-2.
20. Ein Verfahren zum Nachweis und/oder zur Differenzierung von Coronavirus-Infektionen, umfassend a) Bereitstellen mindestens eines Peptids einer ersten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Asp-Glu-Thr-Gln-Ala-Leu-Pro-Gln-Arg-Gln-Lys (SEQ ID NO:7) und Thr-Leu-Leu-Pro-Ala-Ala-Asp-Leu-Asp-Asp-Phe-Ser-Lys-Gln-Leu (SEQ ID NO:8) und/oder mindestens eines Peptids einer zweiten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Lys-Lys-Phe-Leu-Pro-Phe-Gln-Gln-Phe-Gly-Arg (SEQ ID NO:9) und Tyr-Lys-Thr-Pro-Pro-Ile-Lys-Asp-Phe-Gly-Gly (SEQ ID NO:11), b) Bereitstellen mindestens eines Peptids einer dritten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Pro-Arg-Ile-Thr-Phe-Gly-Gly-Pro-Ser-Asp-Ser (SEQ ID NO:2), Ser-Lys-Gln-Arg-Arg-Pro-Gln-Gly-Leu-Pro-Asn (SEQ ID NO:3), Leu-Pro-Gln-Gly-Thr-Thr-Leu-Pro-Lys-Gly-Phe (SEQ ID NO:4), Leu-Leu-Leu-Leu-Asp-Arg-Leu-Asn-Gln-Leu-Glu (SEQ ID NO:5) und Ile-Asp-Ala-Tyr-Lys-Thr-Phe-Pro-Pro-Thr-Glu-Pro-Lys-Lys-Asp (SEQ ID NO:6), mindestens eines Peptids einer vierten Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Glu-Cys-Asp-Ile- Pro-Ile-Gly-Ala-Gly-Ile-Cys (SEQ ID NO:10) und Asp-Asp-Ser- Glu-Pro-Val-Leu-Lys-Gly-Val-Lys-Leu-His (SEQ ID NO:14) und/oder mindestens eines Peptids einer fünften Gruppe mit zumindest abschnittsweise mehr als 85% Sequenzähnlichkeit mit einer Aminosäuresequenz ausgewählt aus Arg-Ser-X3-Ile-Glu- Asp-X7-Leu-Phe (SEQ ID NO:12), wobei X3 aus Phe und Ala und X7 aus Leu und Ile ausgewählt ist, und Phe-X2-X3-Glu-Leu-Asp- X7-X8-Phe-Lys-Asn (SEQ ID NO:13), wobei X2 aus Lys und Gln, X3 aus Glu und Asp, X7 aus Lys, Glu und Gln und X8 aus Tyr, Phe und Trp ausgewählt ist, c) unterscheidbares Kontaktieren des mindestens einen Peptids der ersten und/oder zweiten Gruppe und des mindestens einen Peptids der dritten, vierten und/oder fünften Gruppe mit einer Patientenprobe, die im Verdacht steht, Antikörper gegen ein Coronavirus zu enthalten, unter Bedingungen, die eine Bindung der Antikörper an die Peptide erlauben, d) Überprüfen einer in Schritt c) erfolgten Bindung der Antikörper an das mindestens eine Peptid der ersten und/oder zweiten Gruppe und das mindestens eine Peptid der dritten, vierten und/oder fünften Gruppe, um die Coronavirus-Infektion nachzuweisen und/oder zu differenzieren.
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