WO2021147882A1 - 一种二苯并呋喃类衍生物组织蛋白酶k抑制剂及其制备方法和医药用途 - Google Patents

一种二苯并呋喃类衍生物组织蛋白酶k抑制剂及其制备方法和医药用途 Download PDF

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周世强
肖瑛
黄艺
段振芳
黄奕强
陆银锁
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    • C07D307/91—Dibenzofurans; Hydrogenated dibenzofurans

Definitions

  • the present invention belongs to the technical field of chemical medicine, and provides a series of inhibitors of cathepsin K, in particular, provides an inhibitor of cathepsin K, a dibenzofuran derivative.
  • the present invention also relates to a pharmaceutical composition containing these compounds and the use of the compounds in the treatment of diseases such as osteoarthritis.
  • Osteoarthfitis also known as degenerative arthritis, is a degenerative disease in which joint pain is the main symptom caused by multifactorial fibrosis, chapped, ulcer, and loss of articular cartilage, which can cause patients The end result of the loss of exercise capacity and pain is often the need for total joint replacement, which is the most common disease among the elderly and obese.
  • Cathepsins belong to the papain superfamily of cysteine proteases.
  • cysteine proteases also include cathepsins B, C, F, H, L, O, S, W, and X. These proteases play a role in normal physiology as well as pathological connective tissue degradation. To date, a variety of cathepsins have been identified and ranked in a variety of sources. These cathepsins are naturally present in a variety of tissues.
  • Cathepsin K is a cysteine protease whose expression is controlled by the CTSK gene and is closely related to osteoporosis. Its main function is to hydrolyze collagen. Cat K is currently the only mammalian collagenase that can cut the triple helix interspersed between the three strands of collagen and also cut the N- and C-telopeptide regions of collagen. Its The ability to hydrolyze collagen is comparable to bacterial collagenases.
  • Cat K can hydrolyze collagen fibers into small peptide segments, and release cross-linked N- or C-terminal peptides by cutting the N- and C-terminal peptide regions of collagen, which can be quantified in urine or serum The detection has been used as a marker molecule to calibrate bone resorption in the body. At the same time, Cat K can also degrade other components of the bone matrix (such as osteopontin and osteonectin, etc.). Therefore, Cat K has become an important target for the treatment of osteoporosis. Inhibition of cathepsin K can lead to a decrease in osteoclast-mediated bone resorption. Cathepsin K inhibitors can be used to treat osteoporosis, osteoarthritis and other diseases.
  • Odanacatib from Merck & Co., Ltd. is the fastest researcher, but because of its low selectivity for Cat K over cathepsin L, cathepsin B and cathepsin S, it also has a good inhibitory effect on cathepsin S. Some signs of side effects have also appeared in clinical studies, so it is still necessary to design and synthesize some that have good inhibitory activity on cathepsin K, but have poor inhibitory activity on other subtypes such as cathepsin S, showing very high selectivity. Cathepsin inhibitor.
  • the present invention provides a series of dibenzofuran derivatives, their preparation methods and their medical applications.
  • the present invention provides a compound of formula (I) or a stereoisomer, tautomer, or pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein all variables are as defined herein.
  • R 1 is hydrogen, C 1-6 alkyl, hydroxy and/or halogen substituted C 1-6 alkyl, C 1-6 alkoxy, halogenated C 1-6 alkoxy, halogen, hydroxy, Cyano, -S(O 2 )R 4 , -OR 4 , -(CH 2 ) n R 4 , -CO-(CH 2 ) n -R 5 , -CO-NR 5 -(CH 2 ) n --( CH 6 ) 2 , -(CH 2 ) n -N(R 5 ) 2 , -(CH 2 ) n -NR 5 -(CH 2 ) n -N(R 6 ) 2 , -CO-R 4 , -( CH 2 ) n -NR 5 -(CH 2 ) n -OR 6 ⁇ -O-(CH 2 ) n -N(R 5 ) 2 ⁇ Phenyl,
  • X is O or S or NH;
  • Y is -CR 5 R 6 -, -C(O)- or -S(O) 2 -;
  • R 2 and R 3 are respectively hydrogen, C 1-6 alkyl, halo C 1-6 alkyl, halogen, or R 2 R 3 becomes C 3-8 cycloalkane, or C 3-8 cycloalkane is substituted by one or more Replaced by halogen;
  • R 4 is a cyano group, a C 1-6 alkyl group, an amino group, a halogenated C 1-6 alkyl group, a C 1-6 alkoxy group, or R 4 is a substituent of the following sub-structure:
  • X 1 and X 2 are C, O, S or N respectively, and Y 1 is O or S;
  • n 0, 1, 2, 3, 4 or 5;
  • R 5 , R 6 and R 7 are each hydrogen, C 1-6 alkyl, halo C 1-6 alkyl, halogen, C 1-6 alkyl substituted or unsubstituted amino.
  • the compound or its stereoisomers, tautomers, or pharmaceutically acceptable salts are selected from:
  • halogen is fluorine, chlorine, bromine, or iodine
  • the C 1-6 alkyl group is selected from methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, cyclopropyl, n-butyl, isobutyl, sec-butyl, tert-butyl, cyclobutyl, n- Pentyl, isopentyl, neopentyl, sec-pentyl, tert-pentyl, cyclopentyl, n-hexyl, isohexyl, neohexyl, sec-hexyl, tert-hexyl, cyclohexyl;
  • the C 1-6 alkoxy group is selected from methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, n-butoxy, isobutoxy, sec-butoxy, tert-butoxy, ring Butoxy, n-pentyloxy, isopentyloxy, neopentyloxy, sec-pentyloxy, tert-pentyloxy, cyclopentyloxy, n-hexyloxy, isohexyloxy, neohexyloxy, sec-hexyloxy Group, tert-hexyloxy, cyclohexyloxy.
  • the Y is selected from -C(HCF 3 )-, -S(O 2 )-, -C(O)-.
  • R 4 substituent is selected from the following sub-structure formula:
  • R 1 is selected from the following sub-structure formulas:
  • the C 3-8 cycloalkane is selected from cyclopropane, cyclobutane, cyclopentane, cyclohexane, cycloheptane, and cyclooctane.
  • the present invention provides a pharmaceutically acceptable salt comprising the compound of the present invention, and the pharmaceutically acceptable salt is selected from inorganic acid or organic acid salt.
  • the present invention provides a compound, which is one of the following structures:
  • the present invention provides a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising the compound of the present invention or a stereoisomer, tautomer, or pharmaceutically acceptable salt thereof.
  • the pharmaceutical composition may further comprise a pharmaceutically acceptable salt.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention further optionally includes an organic bisphosphonate compound (such as alendronate sodium), an estrogen receptor modulator (such as raloxifene), and estrogen receptor modulators.
  • an organic bisphosphonate compound such as alendronate sodium
  • an estrogen receptor modulator such as raloxifene
  • Hormone receptor beta modulators such as estradiol, conjugated estrogen
  • androgen receptor modulators such as estradiol, conjugated estrogen
  • osteoclast proton adenosine triphosphatase inhibitors such as estradiol, conjugated estrogen
  • osteoclast proton adenosine triphosphatase inhibitors such as HMG-CoA reductase inhibitors
  • integrin receptor antagonists Agents osteoblast assimilation agents, active vitamin D (such as 1 (enzyme hydroxy vitamin D (biocalcidol), 1,25-dihydroxy vitamin D (calcitriol)), phytoestrogens (epra Ketones), calcitonins (
  • the use of the compound of the present invention or the pharmaceutical composition of the present invention in the preparation of a medicine wherein the medicine is used for the preparation of a medicine for the treatment and/or prevention of cathepsin K inhibition related diseases
  • the medicine is used for the preparation of a medicine for the treatment and/or prevention of cathepsin K inhibition related diseases.
  • the use of the compound of the present invention or the pharmaceutical composition of the present invention in the preparation of a medicine refers to the prevention and/or treatment of osteoporosis, glucocorticoid-induced osteoporosis, Paget's disease, abnormal increase in bone turnover, periodontal disease, tooth loss, fractures, rheumatoid arthritis, osteoarthritis, periprosthetic osteolysis, incomplete osteogenesis, metastatic bone disease, malignant hypercalcemia Diseases such as hyperemia or multiple myeloma.
  • “Pharmaceutically acceptable salt” as used herein is a derivative of the compound of the present invention, wherein the parent compound is modified by forming a salt with an acid or a salt with a base.
  • prodrugs of the compounds described herein easily undergo chemical changes under physiological conditions to transform into the compounds of the invention.
  • prodrugs can be converted to the compounds of the present invention by chemical or biochemical methods in the in vivo environment.
  • Certain compounds of the present invention may exist in unsolvated or solvated forms, including hydrated forms.
  • the solvated form is equivalent to the unsolvated form, and both are included in the scope of the present invention.
  • the atoms of the compound molecules of the present invention are isotopes, and isotopic derivatization can generally prolong the half-life, reduce the clearance rate, enhance the stability of metabolism, and increase the activity in the body. And, an embodiment is included in which at least one atom is substituted with atoms having the same atomic number (number of protons) and different mass numbers (sum of protons and neutrons).
  • isotopes included in the compound of the present invention include hydrogen atom, carbon atom, nitrogen atom, oxygen atom, phosphorus atom, sulfur atom, fluorine atom, and chlorine atom, which respectively include 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 17O, 18O , 31P, 32P, 35S, 18F, 36Cl.
  • radioisotopes that emit radiation as they decay such as 3H or 14C, can be used for topographical examinations of pharmaceutical preparations or compounds in the body.
  • the stable isotope neither decays or changes with its amount, nor is it radioactive, so it can be used safely.
  • the isotopes can be converted according to general methods by replacing the reagents used in the synthesis with reagents containing the corresponding isotopes.
  • the compound of the present invention may contain unnatural proportions of atomic isotopes on one or more of the atoms constituting the compound.
  • compounds can be labeled with radioisotopes, such as deuterium (2H), iodine-125 (125I), or C-14 (14C). All changes in the isotopic composition of the compounds of the present invention, whether radioactive or not, are included in the scope of the present invention.
  • one or more hydrogen atoms of the compound of the present invention are replaced by the isotope deuterium (2H).
  • the compound of the present invention has the effects of prolonging the half-life, reducing the clearance rate, enhancing the stability of metabolism, and improving the activity in vivo.
  • the preparation method of the isotope derivative usually includes a phase transfer catalysis method.
  • the preferred deuteration method uses a phase transfer catalyst (e.g., tetraalkylammonium salt, NBu4HSO4).
  • a phase transfer catalyst e.g., tetraalkylammonium salt, NBu4HSO4
  • the use of a phase transfer catalyst to exchange the methylene protons of the diphenylmethane compound results in the use of deuterated silanes (e.g. triethyl deuterated monosilane) or Lewis acids such as trichlorosilane in the presence of an acid (e.g., methanesulfonic acid)
  • Aluminum chloride is reduced with deuterated sodium borate to introduce higher deuterium.
  • pharmaceutically acceptable carrier refers to any preparation carrier or medium that can deliver an effective amount of the active substance of the present invention, does not interfere with the biological activity of the active substance, and has no toxic or side effects to the host or patient.
  • Representative carriers include water and oil. , Vegetables and minerals, cream base, lotion base, ointment base, etc. These bases include suspending agents, tackifiers, penetration enhancers and the like. Their formulations are well known to those skilled in the field of cosmetics or topical medicine. For other information about the carrier, you can refer to Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott, Williams & Wilkins (2005), and the content of this document is incorporated herein by reference.
  • excipient generally refers to the carrier, diluent and/or medium required to formulate an effective pharmaceutical composition.
  • the term "effective amount” or “therapeutically effective amount” refers to a sufficient amount of a drug or agent that is non-toxic but can achieve the desired effect.
  • the "effective amount” of one active substance in the composition refers to the amount required to achieve the desired effect when combined with another active substance in the composition.
  • the determination of the effective amount varies from person to person, and depends on the age and general conditions of the recipient, as well as the specific active substance. The appropriate effective amount in each case can be determined by those skilled in the art according to routine experiments.
  • active ingredient refers to a chemical entity that can effectively treat the target disorder, disease or condition.
  • tautomeric transformation or “tautomeric form” transformation refers to structural isomers with different energies that can be converted into each other through a low energy barrier. If tautomerism is possible (as in solution), the chemical equilibrium of tautomers can be reached.
  • proton tautomers also called prototropic tautomers
  • keto-enol tautomerism include interconversion through the recombination of some bond-forming electrons.
  • keto-enol tautomerism are the tautomers of pentane-2,4-dione and 4-hydroxypent-3-en-2-one tautomers.
  • tautomerism is phenol-ketone tautomerism.
  • a specific example of phenol-ketone tautomerism is the interconversion of pyridine-4-ol and pyridine-4(1H)-one tautomers. Unless otherwise indicated, all tautomeric forms of the compounds of the present invention are within the scope of the present invention.
  • the compounds of the present invention may exist in specific geometric or stereoisomeric forms.
  • the present invention contemplates all such compounds, including cis and trans isomers, (-)- and (+)-enantiomers, (R)- and (S)-enantiomers, diastereomers Conformers, (D)-isomers, (L)-isomers, and their racemic mixtures and other mixtures, such as enantiomers or diastereomer-enriched mixtures, all of these mixtures belong to Within the scope of the present invention.
  • Additional asymmetric carbon atoms may be present in substituents such as alkyl groups. All these isomers and their mixtures are included in the scope of the present invention.
  • optically active (R)- and (S)-isomers can be prepared by chiral synthesis or chiral reagents or other conventional techniques. If you want to obtain an enantiomer of a compound of the present invention, it can be prepared by asymmetric synthesis or derivatization with chiral auxiliary agents, in which the resulting diastereomeric mixture is separated and the auxiliary group is cleaved to provide pure The desired enantiomer.
  • the molecule when the molecule contains a basic functional group (such as an amino group) or an acidic functional group (such as a carboxyl group), it forms a diastereomeric salt with an appropriate optically active acid or base, and then passes through a conventional method known in the art The diastereoisomers are resolved, and then the pure enantiomers are recovered.
  • the separation of enantiomers and diastereomers is usually accomplished through the use of chromatography, which uses a chiral stationary phase and is optionally combined with chemical derivatization (for example, the formation of amino groups from amines). Formate).
  • halo C 1-6 alkyl refers to the case where the alkyl group may be substituted by one or more halogen atoms which may be the same or different.
  • alkyl group has the meaning as described in the present invention, such examples include, but are not limited to, trifluoromethyl, 1-chloroethyl, difluoromethyl, dichloroethyl, 2,2-difluoro Ethyl, 3,3,3-trifluoropropyl, 2-fluoro-2-methylpropyl, etc.
  • amino refers to -NH 2 .
  • the compounds of the present invention can be prepared by a variety of synthetic methods well known to those skilled in the art, including the specific embodiments listed below, the embodiments formed by combining them with other chemical synthesis methods, and those well known to those skilled in the art Equivalent alternatives, preferred implementations include but are not limited to the embodiments of the present invention.
  • the structure of the compound is determined by nuclear magnetic resonance (NMR) or mass spectrometry (MS).
  • NMR shift ( ⁇ ) is given in units of 10 -6 (ppm).
  • the measurement of NMR was carried out with Bruker AVANCE-III nuclear magnetometer, and the measuring solvent was deuterated dimethyl sulfoxide (DMSO-d 6 ), deuterated chloroform (CDCl 3 ), and the internal standard was tetramethylsilane (TMS).
  • MS is measured with ISQ EC mass spectrometer (manufacturer: Thermo, model: ISQ EC).
  • HPLC high performance liquid chromatography
  • CombiFlash rapid preparation instrument uses CombiFlash Rf+LUMEN (TELEDYNE ISCO).
  • the thin layer chromatography silica gel plate uses Yantai Yinlong HSGF 254 or GF 254 silica gel plate.
  • the size of the silica gel plate used for thin layer chromatography (TLC) is 0.17mm ⁇ 0.23mm, and the specification for thin layer chromatography separation and purification products is 0.4mm ⁇ 0.5mm.
  • the silica gel column chromatography generally uses Rushan Shangbang silica gel 100-200 mesh silica gel as the carrier.
  • a white solid was obtained by suction filtration with filter paper, washed with dichloromethane 3 times (10 ml ⁇ 3), and 1.3 g of a white solid (yield: 99%) was obtained after suction drying (yield: 99%), and the solid was directly used in the next reaction.
  • Step C Synthesis of ((7-bromodibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine methyl ester
  • Step D Synthesis of ((7-bromodibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step E Synthesis of (S)-2-(((7-bromodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl Valeramide
  • Step A Synthesis of ((7-(4-(methylsulfonyl)phenyl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine methyl ester
  • Step B Synthesis of ((7-(4-(methylsulfonyl)phenyl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step C Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-(4-(methylsulfonyl)phenyl)dibenzo[b,d ]Furan)-2-sulfonamido)pentanamide
  • Step A Synthesis of ((7-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine methyl ester
  • Step B Synthesis of ((7-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step C Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d ]Furan)-2-sulfonamido)pentanamide
  • Step A Synthesis of ((7-morpholino dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine methyl ester
  • Step B Synthesis of ((7-morpholinodibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step C Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-morpholinyldibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido ) Valeramide
  • Step C Synthesis of ((8-bromodibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine methyl ester
  • Step D Synthesis of ((8-bromodibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step E Synthesis of (S)-2-(((8-bromodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl Valeramide
  • Step A Synthesis of ((8-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step B (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((8-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d] (Furan)-2-sulfonamido)pentanamide
  • Step A Synthesis of ((7-(2-oxo-4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine methyl ester
  • Step B Synthesis of ((7-(2-oxo-4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • LC -MS shows that after the reaction is over, add dichloromethane (30ml) to dilute the reaction solution, add water and 2N dilute hydrochloric acid to adjust the pH of the aqueous phase to 4-5, and extract with a mixed solution of dichloromethane/isopropanol (10/1) Three times (30 ml ⁇ 3), the organic phases were combined and dried with anhydrous sodium sulfate, filtered and concentrated to obtain 183 mg of crude product. The crude product was directly used in the next reaction without purification.
  • Step C Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-(2-oxo-4-methylpiperazin-1-yl)diphenyl And [b,d]furan)-2-sulfonamido)pentanamide
  • Step A Synthesis of 4'-bromo-6-fluoro-2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-3-carboxylic acid methyl ester
  • Step B Synthesis of methyl 7-bromodibenzo[b,d]furan-2-carboxylate
  • Step D Synthesis of (7-bromodibenzo[b,d]furan-2-carbonyl)tert-butyl-L-leucine
  • Step F Synthesis of (S)-7-bromo-N-(1-14.3 cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)dibenzo[b,d ]Furan-2-carboxamide
  • Step A Synthesis of (S)-2-((7-bromodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-4-fluoro-4-methylpentanoic acid ethyl ester
  • Step B Synthesis of (S)-2-((7-bromodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-4-fluoro-4-methylpentanoic acid
  • Step C Synthesis of (S)-2-((7-bromodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-fluoro-4 -Methyl valeramide
  • N,N-diisopropylethylamine (0.16 mL, 0.99 mL) was added. Mol), and react for 2 hours at room temperature. After LC-MS showed that the reaction was over, add ethyl acetate (50ml) to the reaction solution to dilute and transfer to a separatory funnel, wash 4 times with saturated saline (50ml ⁇ 4), and transfer the organic phase to an Erlenmeyer flask Add anhydrous sodium sulfate to dry, filter and concentrate to obtain an oily liquid.
  • Step A Synthesis of tert-butyl (S)-(1-((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)carbamate
  • Step B Synthesis of (S)-2-amino-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methylpentanamide hydrochloride
  • reaction solution was filtered to obtain a white solid, which was washed 3 times with dichloromethane (10 ml ⁇ 3), and then drained to obtain a white solid 7-bromo-dibenzo[b,d]thiophene-2-sulfonic acid (1.3 g, yield) Rate: 99%), the solid was directly used in the next reaction.
  • Step D Synthesis of 7-bromo-dibenzo[b,d]thiophene-2-sulfonyl chloride
  • Step E Synthesis of (S)-2-((7-bromodibenzo[b,d]thiophene)-2-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methylpentan Amide
  • Step A Synthesis of ((7-(2-oxo-4-tert-butoxycarbonylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine Methyl ester
  • Step B Synthesis of ((7-(2-oxo-4-tert-butoxycarbonylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step C Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-(2-oxo-4-tert-butoxycarbonylpiperazin-1-yl) Dibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)pentanamide
  • Step D Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-(2-oxopiperazin-1-yl)dibenzo[b,d ]Furan)-2-sulfonamido)pentanamide
  • Step A Synthesis of methyl 1-((7-bromodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)cyclohexane-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of 1-((7-bromodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)cyclohexane-1-carboxylic acid
  • Step C Synthesis of 1-((7-bromodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)cyclohexane-1-carboxamide
  • Step A Synthesis of 5'-bromo-2-fluoro-2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-4-carboxylic acid methyl ester
  • Step B Synthesis of methyl 8-bromodibenzo[b,d]furan-3-carboxylate
  • reaction solution was added with 2N dilute hydrochloric acid to adjust the pH of the aqueous phase to 5-6, and extracted with ethyl acetate 3 times (30 Ml ⁇ 3), the organic phases were combined, dried, and spin-dried to obtain 8-bromodibenzo[b,d]furan-3-carboxylic acid (165 mg, yield: 87.2%).
  • Step D Synthesis of (S)-8-bromo-N-(1-((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)dibenzo[ b,d]furan-3-carboxamide
  • Step A Synthesis of 4'-bromo-2-fluoro-2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-4-carboxylic acid methyl ester
  • Step B Synthesis of methyl 7-bromodibenzo[b,d]furan-3-carboxylate
  • reaction solution was added with 2N dilute hydrochloric acid to adjust the pH of the aqueous phase to 5-6, and extracted with ethyl acetate 3 times (30 Ml ⁇ 3), the organic phases were combined, dried, and spin-dried to obtain 7-bromodibenzo[b,d]furan-3-carboxylic acid (172 mg, yield: 91.1%).
  • Step D Synthesis of (S)-7-bromo-N-(1-((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)dibenzo[ b,d]furan-3-carboxamide
  • Step B Synthesis of methyl (S)-2-((8-bromodibenzo[b,d]furan)-3-sulfonamido)-4-methylvalerate
  • Step C Synthesis of ((8-bromodibenzo[b,d]furan-3-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step D Synthesis of (S)-2-((8-bromodibenzo[b,d]furan)-3-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methylpentan Amide
  • Step A Synthesis of methyl 1-((8-bromodibenzo[b,d]furan)-3-sulfonamido)-cyclohexylcarboxylate
  • Step B Synthesis of 1-((8-bromodibenzo[b,d]furan)-3-sulfonamido)-cyclohexylcarboxylic acid
  • Step C Synthesis of 1-((8-bromodibenzo[b,d]furan)-3-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)-cyclohexylcarboxamide
  • Step A Synthesis of ((7-(1-ethoxyethylene-1-yl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine methyl ester
  • Step B Synthesis of ((7-(acetyl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine methyl ester
  • Step C Synthesis of ((7-(acetyl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step D Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-(acetyl)dibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamide Base) pentaneamide
  • Step A Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-(1-hydroxyethyl)dibenzo[b,d]furan)-2 -Sulfonamide) pentaneamide
  • Step A Synthesis of 8-(3-oxomorpholine)dibenzo[b,d]furan-3-carboxylic acid methyl ester
  • the substrate 8-bromodibenzo[b,d]furan-3-carboxylic acid methyl ester (800 mg, 2.60 mmol) and 3-morpholinone (396 mg, 3.90 mmol) were dissolved in 6 ml of anhydrous To dioxane, add cesium carbonate (1.69 g, 5.20 mmol), N,N'-dimethylethylenediamine (23.0 mg, 0.260 mmol), and cuprous iodide (50.0 mg, 0.260 mmol). ), replace nitrogen and react in a microwave at 130 degrees Celsius for 3 hours.
  • Step B Synthesis of 8-((2-(carboxymethoxy)ethyl)amino)dibenzo[b,d]furan-3-carboxylic acid
  • Step C Synthesis of ((S)-N-(1-((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)-8-(3-oxo Morpholine) dibenzo[b,d]furan-3-carboxamide
  • Step A Synthesis of ((7-(3-oxomorpholine)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine methyl ester
  • Step B Synthesis of ((7-(3-oxomorpholine)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step C Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-(3-oxomorpholine)dibenzo[b,d]furan)- 2-sulfonamido)pentanamide
  • Step A Synthesis of ((8-bromodibenzo[b,d]furan-3-yl)sulfonyl)-L-leucine methyl ester
  • Step B Synthesis of (((8-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-L-leucine
  • Step C Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((8-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d ]Furan)-3-sulfonamido)valeramide
  • Step B Synthesis of (S)-N-(1-((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)-8-(4-methyl Piperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-3-carboxamide
  • Step A Synthesis of 7-(3-oxomorpholine)dibenzo[b,d]furan-3-carboxylic acid methyl ester
  • Step B 7-((2-(carboxymethoxy)ethyl)amino)dibenzo[b,d]furan-3-carboxylic acid
  • Step C (S)-N-(1-(((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)-7-(3-oxo Morpholine) dibenzo[b,d]furan-2-carboxamide
  • Step A Synthesis of (S)-N-(1-(((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)-8-(4-methyl 2-oxopiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-3-carboxamide
  • Step A Synthesis of (S)-7-bromo-N-(1-((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)dibenzo[ b,d]furan-2-carboxamide
  • Step B Synthesis of (S)-N-(1-(((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)-7-(3-oxo Morpholine) dibenzo[b,d]furan-2-carboxamide
  • the substrate (S)-7-bromo-N-(1-((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)dibenzo(b ,d]Furan-2-carboxamide (440 mg, 1 mmol) was placed in a 50 ml round bottom flask, 10 ml of dioxane solution was added to dissolve the substrate, and cesium carbonate (975 mg, 3 mmol) was added sequentially , N,N'-Dimethylethylenediamine (176 mg, 2 mmol), cuprous iodide (190 mg, 1 mmol), replace nitrogen and heat to 100 degrees Celsius for 12 hours, LC-MS shows the reaction After the completion, add ethyl acetate (30 ml) to dilute the reaction solution, wash the organic phase with saturated sodium chloride solution three times (30 ml ⁇ 3), then dry the organic phase with anhydrous sodium sulfate, filter and concentrate to obtain 400 mg of crude product
  • Step A Synthesis of (9H-fluoren-9-yl)methyl(1-((1-isocyanocyclopropyl)carbamoyl)cyclohexyl)carbamate
  • Step B Synthesis of 1-amino-N-(1-isocyanocyclopropyl)cyclohexane-1-carboxamide
  • Step C N-(1-((1-cyanocyclopropyl)carbamoyl)cyclohexyl)-7-(3-oxomorpholino)dibenzo[b,d]furan-3-methyl Amide
  • Step A Synthesis of N-(1-((1-cyanocyclopropyl)carbamoyl)cyclohexyl)-8-(3-oxomorpholine)dibenzo[b,d]furan-3-methyl Amide
  • Step A Synthesis of N-(1-((1-cyanocyclopropyl)carbamoyl)cyclohexyl)-8-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan -3-carboxamide
  • reaction solution was diluted with water (100 ml), extracted with ethyl acetate (30 ml ⁇ 2), the organic phases were combined, dried, and spin-dried to obtain the crude product by prep-HPLC (mobile phase).
  • Azin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-3-carboxamide trifluoroacetate (20.0 mg, yield: 25.1%).
  • Step C Synthesis of (S)-2-((Dibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methylpentanoamide
  • Step A Synthesis of N-(1-cyanocyclopropyl)-1-(dibenzo[b,d]furan-2-sulfonamido)cyclohexane-1-carboxamide
  • Step B Synthesis of 7-bromo-N-(1-(((1-cyanocyclopropyl)carbamoyl)cyclohexyl)dibenzo[b,d]furan-3-carboxamide
  • Step C Synthesis of N-(1-((1-cyanocyclopropyl)carbamoyl)cyclohexyl)-7-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan -3-carboxamide
  • dibenzo[b,d]furan (8.00 g, 47.6 mmol) was dissolved in 100 ml of anhydrous dichloromethane, and chlorosulfonic acid (4.1 ml, 61.9 mmol) was added dropwise at zero degrees Celsius. ), then gradually warmed to room temperature, reacted for 15 minutes, and a large amount of white solid precipitated.
  • the reaction solution was filtered to obtain a filter cake, which was washed 3 times with dichloromethane (20 ml ⁇ 3), and a white solid (10.2 g, yield: 86.4%) was obtained after being sucked dry and used directly in the next reaction.
  • Step C Synthesis of (S)-2-(Dibenzo[b,d]furan-2-sulfonamido)-4-fluoro-4-methylpentanoic acid ethyl ester
  • Step D Synthesis of (S)-2-(dibenzo[b,d]furan-2-sulfonamido)-4-fluoro-4-methylpentanoic acid
  • Step E Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-2-(dibenzo[b,d]furan-2-sulfonamido)-4-fluoro-4-methylpentaneamide
  • Step A Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-2-((7-(((2-(dimethylamino)ethyl)amino)dibenzo[b,d] (Furan)-2-sulfonamido)-4-methylpentanamide
  • N1,N1-dimethylethane-1,2-diamine 52 mg, 0.6 mmol
  • Sodium tert-butoxide 56 mg, 0.6 mmol
  • 2-dicyclohexylphosphorus-2,4,6-triisopropylbiphenyl 36 mg, 0.08 mmol
  • tris(dibenzylideneacetone) two Palladium 16 mg, 0.02 mmol
  • the reaction solution was filtered, and the filtrate was added dropwise to saturated brine (10 mL).
  • the mixture was ethyl acetate (20 ml ⁇ 3 times). Combine the organic phases.
  • Step A (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-2-((7-((2-(dimethylamino)ethyl)(methyl)amino)dibenzo[b, d)Furan)-2-sulfonamido)-4-methylpentanamide
  • N1,N1-dimethylethane-1,2-diamine (92 mg, 0.9 mmol) was added to the above solution, Sodium tert-butoxide (86 mg, 0.9 mmol), 2-Dicyclohexylphosphorus-2,4,6-triisopropylbiphenyl (57 mg, 0.12 mmol), tris(dibenzylideneacetone) two Palladium (27 mg, 0.03 mmol), replaced with nitrogen 3 times. Under microwave conditions, stirred at 130 degrees Celsius for 3 hours. The reaction solution was filtered, and the filtrate was added dropwise to saturated brine (10 mL). The mixture was ethyl acetate (20 ml ⁇ 3 times). Combine the organic phases.
  • Step E Synthesis of (7-chlorodibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl-L-leucine methyl ester
  • Step F Synthesis of (S)-2-((7-chlorodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-4-methylpentanoic acid
  • Step G Synthesis of (S)-2-((7-chlorodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methylpentan Amide
  • Step A Synthesis of 2'-amino-4'-bromo-2-fluoro-[1,1'-biphenyl]-4-carboxylic acid methyl ester
  • Step D (S)-7-bromo-N-(1-((1-cyanocyclopropyl)amino)-4-methyl-1-oxopentan-2-yl)-9H-carbazole -2-carboxamide
  • Step A ((7-Bromodibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-D-leucine methyl ester
  • Step B ((7-Bromodibenzo[b,d]furan-2-yl)sulfonyl)-D-leucine
  • Step C (R)-2-((7-bromodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methylpentanamide
  • Step A Synthesis of (2-hydroxy-4-carboxylic acid methyl ester) phenylboronic acid
  • Step B Synthesis of 2'-fluoro-2-hydroxy-4'-(methylsulfonyl)-[1,1'-biphenyl]-4-carboxylic acid methyl ester
  • Step C Synthesis of 7-(methylsulfonyl)dibenzo[b,d]furan-3-carboxylic acid methyl ester
  • Step E Synthesis of N-(1-((1-cyanocyclopropyl)carbamoyl)cyclohexyl)-7-(methylsulfonyl)dibenzo[b,d]furan-3-carboxamide
  • reaction solution was diluted with water (120 ml), extracted with ethyl acetate (50 ml ⁇ 2), the organic phases were combined, dried, and spin-dried to obtain the crude product by prep-HPLC (mobile phase).
  • Step A Synthesis of 2'-fluoro-4'-(methylsulfonyl)-[1,1'-biphenyl-2-ol
  • reaction solution was diluted with water (100 mL), extracted with ethyl acetate (50 mL ⁇ 3), and the organic phases were combined, dried, and the crude product (800 mg) was used directly in the next step.
  • Step D Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-(methylsulfonyl)dibenzo[b,d]furan)-2- Sulfonamide) pentaneamide
  • Step E Synthesis of 7-fluorodibenzo[b,d]furan-2-ylsulfonyl-L-leucine methyl ester
  • Step F Synthesis of (S)-2-(((7-fluorodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-4-methylpentanoic acid
  • Step G Synthesis of (S)-2-((7-fluorodibenzo[b,d]furan)-2-sulfonamido)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methylpentan Amide
  • Step A (R)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((7-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d] (Furan)-2-sulfonamido)pentanamide
  • Step A Synthesis of 1-(4-bromo-3-fluorophenyl)-2,2,2-trifluoroethane-1-ol
  • Step B Synthesis of 1-(4-bromo-3-fluorophenyl)-2,2,2-trifluoroethyl trifluoromethanesulfonate
  • Step C Synthesis of (1-(4-bromo-3-fluorophenyl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L-leucine methyl ester
  • Step D (2,2,2-Trifluoro-1-(2-fluoro-2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-4-yl)ethyl)-L-leucine methyl ester
  • the reaction solution was added dropwise to saturated brine (150 mL).
  • the mixture was extracted 3 times with ethyl acetate (50 ml ⁇ 3 times).
  • the organic phase was washed 3 times with saturated brine (30 ml ⁇ 3 times), then dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure.
  • Step E (1-(Dibenzo[b,d]furan-3-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L-leucine methyl ester
  • Step F (1-(Dibenzo[b,d]furan-3-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L-leucine
  • Step G (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-2-(((S)-1-(dibenzo[b,d]furan-3-yl)-2,2,2 -Trifluoroethyl)amino)-4-methylpentanamide
  • Step A Synthesis of methyl 1-((8-bromodibenzo[b,d]furan)-3-sulfonamido)cyclohexane-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of 1-((8-bromodibenzo[b,d]furan)-3-sulfonamido)cyclohexane-1-carboxylic acid
  • Step C Synthesis of 1-((8-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan)-3-sulfonamido)cyclohexane-1-carboxylic acid
  • Step D Synthesis of N-(1-cyanocyclopropyl)-1-(((8-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan)-3-sulfonamide Base) cyclohexane-1-carboxamide
  • reaction solution was diluted with water (200 mL), extracted with ethyl acetate (50 mL ⁇ 3), the organic phases were combined, dried, and spin-dried to obtain the crude product by prep-HPLC (mobile phase).
  • Step A 7-Bromo-N-(1-(((1-cyanocyclopropyl)carbamoyl)cyclohexyl)-9H-carbazole-2-carboxamide
  • Step A Synthesis of methyl 1-(7-bromodibenzo[b,d]furan-3-carboxamido)-4,4-difluorocyclohexane-1-carboxylate
  • Step B Synthesis of 1-(7-bromodibenzo[b,d]furan-3-carboxamido)-4,4-difluorocyclohexane-1-carboxylic acid
  • Step C Synthesis of 4,4-difluoro-1-(7-(4-methylpiperazin-1-yl)dibenzo[b,d]furan-3-carboxamido)cyclohexane-1- Formic acid
  • Step D Synthesis of N-(1-((1-cyanocyclopropyl)carbamoyl)-4,4-difluorocyclohexyl)-7-(4-methylpiperazin-1-yl)diphenyl And [b,d]furan-3-carboxamide
  • Step A Synthesis of (1-(2,4'-difluoro-2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-4-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L- Leucine Methyl Ester
  • Step B Synthesis of (2,2,2-trifluoro-1-(7-fluorodibenzo[b,d]furan-3-yl)ethyl)-L-leucine methyl ester
  • the 1-(2,4'-difluoro-2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-4-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L- Leucine methyl ester 120 mg, 0.278 mmol
  • potassium carbonate 115 mg, 0.835 mmol
  • reaction solution was poured into 50 ml of ice water, extracted twice with ethyl acetate (30 ml ⁇ 2), the organic phases were combined, dried, and spin-dried to obtain (2,2,2-trifluoro-1-( The crude 7-fluorodibenzo[b,d]furan-3-yl)ethyl)-L-leucine methyl ester (100 mg) was used directly in the next step.
  • Step C Synthesis of (2,2,2-trifluoro-1-(7-fluorodibenzo[b,d]furan-3-yl)ethyl)-L-leucine
  • Step D Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-(((S)-2,2,2-trifluoro-1-(7-fluorodiphenyl) And [b,d]furan-3-yl)ethyl)amino)valeramide
  • Step A Synthesis of (1-(4-bromo-3-fluorophenyl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L-leucine methyl ester
  • Step B Synthesis of (2S)-4-fluoro-4-methyl-2-(((2,2,2-trifluoro-1-(2-fluoro-2'-hydroxy-[1,1'-linked Benzene)-4-yl))ethyl)amino)ethyl valerate
  • Step C Synthesis of (2S)-2-((1-(dibenzo[b,d]furan-3-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)amino)-4-fluoro-4- Ethyl methylvalerate
  • Step D Synthesis of (2S)-2-(((1-(Dibenzo[b,d]furan-3-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)amino)-4-fluoro-4 -Methylvaleric acid
  • Step E Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-2-(((S)-1-(dibenzo[b,d]furan-3-yl)-2,2, 2-Trifluoroethyl)amino)-4-fluoro-4-methylpentanamide
  • Step A Synthesis of (1-(5'-fluoro-2-fluoro-2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-4-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L -Leucine Methyl Ester
  • Step B Synthesis of (1-(8-fluorodibenzo[b,d]furan-3-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L-leucine methyl ester
  • Step C Synthesis of (1-(8-fluorodibenzo[b,d]furan-3-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L-leucine
  • Step D Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-(((S)-2,2,2-trifluoro-1-(8-fluorodiphenyl) And [b,d]furan-3-yl)ethyl)amino)valeramide
  • Step A Synthesis of (1-(4'-fluoro-2-fluoro-2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-5-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L -Leucine Methyl Ester
  • Step B Synthesis of ((S)-2,2,2-trifluoro-1-(7-fluorodibenzo[b,d]furan-2-yl)ethyl)-L-leucine methyl ester
  • the (1-(4'-fluoro-2-fluoro-2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-5-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)- L-leucine methyl ester (110 mg, 0.26 mmol) was added to the microwave reaction tube, and 15 mL of N,N-dimethylformamide was added to dissolve the substrate, and then potassium carbonate (200 mg, 1.5 mmol) Mol), microwave heating to 140 degrees Celsius for 1 hour.
  • Step C Synthesis of ((S)-2,2,2-trifluoro-1-(7-fluorodibenzo[b,d]furan-2-yl)ethyl)-L-leucine
  • Step D Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-4-methyl-2-((((S)-2,2,2-trifluoro-1-(7-fluorodi Benzo[b,d]furan-2-yl)ethyl])amino)pentanamide
  • Step A Synthesis of 1-(4-bromo-3-fluorophenyl)-2,2,2-trifluoroethane-1-ol
  • Step B Synthesis of 1-(4-bromo-3-fluorophenyl)-2,2,2-trifluoroethyl trifluoromethanesulfonate
  • Step C Synthesis of (1-(4-bromo-3-fluorophenyl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L-leucine methyl ester
  • Step E Synthesis of 4-(methoxymethoxy)-3-(4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)benzonitrile
  • Step F Synthesis of (1-(5'-cyano-2-fluoro-2'-(methoxymethoxy)-[1,1'-biphenyl]-4-yl)-2,2,2 -Trifluoroethyl)-L-leucine methyl ester
  • Step G Synthesis of (1-(5'-cyano-2-fluoro-2'-hydroxy-[1,1'-biphenyl]-4-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)- L-Leucine Methyl Ester
  • Step H Synthesis of (1-(8-cyanodibenzo[b,d]furan-3-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L-leucine methyl ester
  • Step I Synthesis of (1-(8-cyanodibenzo[b,d]furan-3-yl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L-leucine
  • Step J Synthesis of (S)-N-(1-cyanocyclopropyl)-2-(((S)-1-(8-cyanodibenzo[b,d]furan-3-yl)- 2,2,2-Trifluoroethyl)amino)-4-methylpentanamide
  • N,N-diisopropylethylamine (0.14 mL, 0.86 mL) was added. Mol), react for 1 hour at room temperature. After LC-MS showed that the reaction was over, add ethyl acetate (50ml) to the reaction solution to dilute and transfer it to a separatory funnel. Wash the organic phase (50ml ⁇ 4) with saturated brine 4 times, and transfer the organic phase to the cone.
  • Step A Synthesis of methyl 4-bromo-3-(methoxymethoxy)benzoate
  • Step D Synthesis of 1-(4-bromo-3-(methoxymethoxy)phenyl)-2,2,2-trifluoroethane-1-ol
  • Step E Synthesis of 1-(4-bromo-3-(methoxymethoxy)phenyl)-2,2,2-trifluoroethyl triflate
  • Step F Synthesis of (1-(4-bromo-3-(methoxymethoxy)phenyl)-2,2,2-trifluoroethyl)-L-leucine methyl ester
  • Step G (2,2,2-Trifluoro-1-(2'-fluoro-2-(methoxymethoxy)-4'-(methylsulfonyl)-[1,1'-biphenyl )-4-yl)ethyl)-L-leucine methyl ester
  • the reaction solution was added dropwise to saturated brine (50 mL).
  • the mixture was extracted 3 times with ethyl acetate (20 ml ⁇ 3 times).
  • the organic phase was washed 3 times with saturated brine (20 ml ⁇ 3 times), then dried over anhydrous sodium sulfate, and concentrated under reduced pressure.
  • Step H (2,2,2-Trifluoro-1-(2'-fluoro-2-hydroxy-4'-(methylsulfonyl)-[1,1'-biphenyl]-4-yl)ethyl Yl)-L-leucine methyl ester

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Abstract

提供了一系列的组织蛋白酶K的抑制剂，尤其提供了一种二苯并呋喃衍生物组织蛋白酶K的抑制剂，属于化学药物技术领域。还涉及包含这些化合物的药物组合物以及使用该化合物治疗骨关节炎等疾病的药物中的用途。

Description

一种二苯并呋喃类衍生物组织蛋白酶K抑制剂及其制备方法和医药用途 技术领域
本发明属于化学药物技术领域，提供了一系列的组织蛋白酶K的抑制剂，尤其提供了一种二苯并呋喃衍生物组织蛋白酶K的抑制剂。本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物以及使用该化合物治疗骨关节炎等疾病的药物中的用途。
背景技术
骨关节炎(Osteoarthfitis，OA)也称为退行性关节炎，是一种由于多因素引起关节软骨纤维化、皲裂、溃疡、脱失而导致的关节疼痛为主要症状的退行性疾病，会造成患者的运动能力丧失和疼痛，最终的结果往往是需要全关节置换，它在老年人和肥胖者中是最普遍的疾病。组织蛋白酶属于半胱氨酸蛋白酶的木瓜蛋白酶总科。除了组织蛋白酶K，半胱氨酸蛋白酶还包括组织蛋白酶B、C、F、H、L、O、S、W和X。这些蛋白酶在正常生理学以及病理的结缔组织退化中起作用。迄今为止，多种组织蛋白酶已经在多种来源中得到了鉴定和排序。这些组织蛋白酶天然地存在于多种组织中。
组织蛋白酶K(Cathepsin K,Cat K)是一种由CTSK基因控制表达、与骨质疏松症密切相关的半胱氨酸蛋白酶，其主要功能为水解胶原蛋白。Cat K是目前已知的唯一一个既能够切断胶原蛋白中穿插于三链间的三重螺旋又能够切割胶原蛋白N-和C-端肽区域(Nand C-telopeptide regions)的哺乳动物胶原蛋白酶，其水解胶原蛋白的能力可以与细菌的胶原蛋白酶(bacterial collagenases)相媲美。Cat K能够将胶原纤维水解成小的肽链段，通过切割胶原蛋白N-和C-端肽区域，释放交联的N-或C-端肽，这些端肽在尿中或者血清中的定量检测已经被用作标志性分子标定体内的骨吸收情况。同时，Cat K还能降解骨基质的其它成分(如骨桥接素和骨连接素等)。因此，Cat K已经成为治疗骨质疏松症的重要靶点。抑制组织蛋白酶K会导致破骨细胞介导的骨吸收减弱。组织蛋白酶K抑制剂可以用于治疗骨质疏松、骨关节炎等病症。
目前研究进展较快的为默沙东的Odanacatib，但由于其对Cat K相对于组织蛋白酶L、组织蛋白酶B和组织蛋白酶S的选择性不高，对组织蛋白酶S也具有较好的抑制效果，因而在临床研究中也出现了一些副作用迹象，因此仍需要设计合成一些对组织蛋白酶K具有较好的抑制活性，而对其他亚型如组织蛋白酶S等的抑制活性较差，表现出非常高的选择性的组织蛋白酶抑制剂。
发明内容
鉴于现有技术存在的问题，本发明提供了一系列的二苯并呋喃类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用。
具体而言，本发明提供式(I)的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其中所有变量如本文所定义。
式(I)的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2021072803-appb-000001
其中，R 1是氢、C 1-6烷基、羟基和/或卤素取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、卤代C 1-6烷氧基、卤素、羟基、氰基、-S(O 2)R 4、-OR 4、-(CH 2) nR 4、-CO-(CH 2) n-R 5、-CO-NR 5-(CH 2) n–(CH 6) 2、-(CH 2) n-N(R 5) 2、-(CH 2) n-NR 5-(CH 2) n-N(R 6) 2、-CO-R 4、-(CH 2) n-NR 5-(CH 2) n-OR 6、-O-(CH 2) n-N(R 5) 2、
Figure PCTCN2021072803-appb-000002
苯基、
Figure PCTCN2021072803-appb-000003
Figure PCTCN2021072803-appb-000004
X为O或S或NH；Y为-CR 5R 6-、-C(O)-或者-S(O) 2-；
R 2、R 3分别为氢、C 1-6烷基、卤代C 1-6烷基、卤素、或者R 2R 3成C 3-8环烷、或者C 3-8环烷被一个以上的卤素所取代；
R 4为氰基、C 1-6烷基、氨基、卤代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、或者R 4为以下子结构式的取代基：
Figure PCTCN2021072803-appb-000005
或者
Figure PCTCN2021072803-appb-000006
X 1、X 2分别为C、O、S或N，Y 1为O或S；
其中，n为0、1、2、3、4或5；
R 5、R 6、R 7分别为氢、C 1-6烷基、卤代C 1-6烷基、卤素、C 1-6烷基取代或者未取代氨基。
进一步地，所述化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，选自：
Figure PCTCN2021072803-appb-000007
进一步地，所述卤素为氟、氯、溴、碘；
所述C 1-6的烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、环丁基，正戊基、异戊基、新戊基、仲戊基、叔戊基、环戊基、正己基、异己基、新己基、仲己基、叔己基、环已基；
所述C 1-6的烷氧基选自甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、环丁氧基，正戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、仲戊氧基、叔戊氧基、环戊氧基、正己氧基、异己氧基、新己氧基、仲己氧基、叔己氧基、环已氧基。
所述Y选自-C(HCF 3)-、-S(O 2)-、-C(O)-。
进一步地，所述R 4取代基选自以下子结构式：
Figure PCTCN2021072803-appb-000008
进一步地，所述R 1选自以下子结构式：
氢、溴、氯、氟、
Figure PCTCN2021072803-appb-000009
Figure PCTCN2021072803-appb-000010
Figure PCTCN2021072803-appb-000011
所述C 3-8的环烷选自环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环辛烷。
一方面，本发明提供一种药学上可接受的盐，包含本发明所述的化合物，所述药学上可接受的盐选自无机酸或有机酸成盐。
另一方面，本发明提供了一种化合物，其为以下其中之一的结构：
Figure PCTCN2021072803-appb-000012
Figure PCTCN2021072803-appb-000013
Figure PCTCN2021072803-appb-000014
Figure PCTCN2021072803-appb-000015
Figure PCTCN2021072803-appb-000016
Figure PCTCN2021072803-appb-000017
Figure PCTCN2021072803-appb-000018
Figure PCTCN2021072803-appb-000019
Figure PCTCN2021072803-appb-000020
Figure PCTCN2021072803-appb-000021
Figure PCTCN2021072803-appb-000022
Figure PCTCN2021072803-appb-000023
Figure PCTCN2021072803-appb-000024
Figure PCTCN2021072803-appb-000025
或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐和一种以上药学上可接受的载体。
一方面，本发明提供一种药物组合物，包含本发明所述的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述的药物组合物可进一步包含药学上可接受的载体，赋形剂，稀释剂，辅剂和媒介物中的至少一种。
一些实施例中，本发明所述的药物组合物，更进一步任选地包含选自：有机二膦酸化合物(如阿伦磷酸钠)、雌激素受体调节剂(如雷诺昔芬)、雌激素受体β调节剂(如雌二醇、结合雌激素)、雄激素受体调节剂、破骨细胞质子腺苷三磷酸酶抑制剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、整联蛋白受体拮抗剂、成骨细胞同化剂、活性维生素D(如1(酶羟维生素D(生素骨化醇)、1,25-双羟维生素D(骨化三醇))、植物雌激素(依普拉酮)、降钙素类(如密盖息)、雷尼酸锶、Odanacatib、ONO5334、MIV-711、MIV-710以及其药用的盐和混合物的另一种物质。
一些实施例中，本发明所述的化合物或本发明所述的药物组合物在制备药物中的用途，其中，所述药物用于制备用于治疗和/或预防组织蛋白酶K抑制相关疾病的药物方面的用途。
进一步地，本发明所述的化合物或本发明所述的药物组合物在制备药物中的用途，其中，所述药物是指预防和/或治疗骨质疏松、糖皮质激素诱导的骨质疏松、佩吉特氏病、骨更新异常增加、牙周疾病、牙损失、骨折、类风湿性关节炎、骨关节炎、假体周围骨质溶解、骨生成不完全、转移性骨疾病、恶性高钙血症或多发性骨髓瘤等疾病。
除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
本文所用的“药学上可接受的盐”属于本发明化合物的衍生物，其中，通过与酸成盐或与碱成盐的方式修饰所述母体化合物。
本文所描述的化合物的前药容易地在生理条件下发生化学变化从而转化成本发明的化合物。此外，前体药物可以在体内环境中通过化学或生化方法被转换到本发明的化合物。
本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式或者溶剂化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶剂化形式与非溶剂化的形式相当，都包含在本发明的范围之内。
本发明化合物分子的原子是同位素，通过同位素衍生化通常可以延长半衰期、降低清除率、增强代谢稳定和提高体内活性等效果。并且，包括一个实施方案，其中至少一个原子被具有相同原子数(质子数)和不同质量数(质子和中子和)的原子取代。本发明化合物中包括的同位素的实例包括氢原子、碳原子、氮原子、氧原子、磷原子、硫原子、氟原子、氯原子，其分别包括2H、3H、13C、14C、15N、17O、18O、31P、32P、35S、18F、36Cl。特别的是，随其衰退而发射辐射的放射性同位素例如3H或14C可用于药物制剂或者体内化合物的局部解剖学检验。稳定的同位素既不随其量衰减或变化，也不具有放射性，因此其可以安全使用。当构成本发明化合物分子的原子是同位素时，通过用包含相应同位素的试剂替代合成中所用的试剂，可以根据通用方法转化同位素。
本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氘(2H)，碘-125(125I)或C-14(14C)。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。进一步地，本发明的化合物一个或多个氢原子上被同位素氘(2H)取代，本发明化合物氘代后，具有延长半衰期、降低清除率、增强代谢稳定和提高体内活性等效果。所述同位素衍生物的制备方法通常包括：相转移催化方法。例如，优选的氘化方法采用相转移催化剂(例如，四烷基铵盐，NBu4HSO4)。使用相转移催化剂交换二苯基甲烷化合物的亚甲基质子，导致比在酸(例如，甲磺酸)存在下用氘化硅烷(例如三乙基氘化甲硅烷)或用路易斯酸如三氯化铝采用氘化硼酸钠还原而引入较高的氘。
例如，下式化合物：
Figure PCTCN2021072803-appb-000026
术语“药学上可接受的载体”是指能够递送本发明有效量活性物质、不干扰活性物质的生物活性并且对宿主或者患者无毒副作用的任何制剂载体或介质，代表性的载体包括水、油、蔬菜和矿物质、膏基、洗剂基质、软膏基质等。这些基质包括悬浮剂、增粘剂、透皮促进剂等。它们的制剂为化妆品领域或局部药物领域的技术人员所周知。关于载体的其他信息，可以参考Remington:The Science and Practice of Pharmacy,21st Ed.,Lippincott,Williams&Wilkins(2005)，该文献的内容通过引用的方式并入本文。
术语“赋形剂”通常是指配制有效的药物组合物所需要载体、稀释剂和/或介质。
针对药物或药理学活性剂而言，术语“有效量”或“治疗有效量”是指无毒的但能达到预期效果的药物或药剂的足够用量。对于本发明中的口服剂型，组合物中一种活性物质的“有效量”是指与该组合物中另一种活性物质联用时为了达到预期效果所需要的用量。有效量的确定因人而异，取决于受体的年龄和一般情况，也取决于具体的活性物质，个案中合适的有效量可以由本领域技术人员根据常规试验确定。
术语“活性成分”、“治疗剂”，“活性物质”或“活性剂”是指一种化学实体，它可以有效地治疗目标紊乱、疾病或病症。
术语“互变异构体”变或“互变异构形式”变是指具有不同能量的可通过低能垒(low energy barrier)互相转化的结构异构体。若互变异构是可能的(如在溶液中)，则可以达到互变异构体的化学平衡。例如，质子互变异构体(protontautomer)(也称为质子转移互变异构体(prototropic tautomer))包括通过质子迁移来进行的互相转化，如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体(valence tautomer)包括通过一些成键电子的重组来进行的互相转化。酮-烯醇互变异构的具体实例是戊烷-2,4-二酮和4-羟基戊-3-烯-2-酮互变异构体的互变。互变异构的另一个实例是酚-酮互变异构。酚-酮互变异构的一个具体实例是吡啶-4-醇和吡啶-4(1H)-酮互变异构体的互变。除非另外指出，本发明化合物的所有互变异构体形式都在本发明的范围之内。
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。
可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体，以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。
“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的，并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。
术语“卤代C 1-6烷基”表示烷基可以被一个或多个相同或不同卤素原子所取代的情况。其中烷基基团具有如本发明所述的含义，这样的实例包括，但并不限于三氟甲基，1-氯乙基，二氟甲基，二氯乙基，2,2-二氟乙基，3,3,3-三氟丙基，2-氟-2-甲基丙基等。
术语“氨基”是指-NH 2。
所述
Figure PCTCN2021072803-appb-000027
为连接键。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但发明的实施方式不限于此。
化合物的结构是通过核磁共振(NMR)或质谱(MS)来确定的。NMR位移(δ)以10 -6(ppm)的单位给出。NMR的测定是用Bruker AVANCE-III核磁仪，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(DMSO-d 6)，氘代氯仿(CDCl 3)，内标为四甲基硅烷(TMS)。
MS的测定用ISQ EC质谱仪(生产商:Thermo,型号:ISQ EC)。
高效液相色谱法(HPLC)分析使用Thermo U3000 HPLC DAD高效液相色谱仪。
CombiFlash快速制备仪使用CombiFlash Rf+LUMEN(TELEDYNE ISCO)。
薄层层析硅胶板使用烟台银龙HSGF 254或GF 254硅胶板，薄层色谱法(TLC)使用的硅胶板采用的规格是0.17mm～0.23mm，薄层层析分离纯化产品采用的规格是0.4mm～0.5mm。
硅胶柱色谱法一般使用乳山上邦硅胶100～200目硅胶为载体。
化合物合成及表征：
实施例1
合成(S)-2-(((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000028
具体合成路线如下：
步骤A：合成7-溴-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000029
室温条件下，将3-溴二苯并[b,d]呋喃(1.0克，4毫摩尔)加入50毫升圆底烧瓶中，加入二氯甲烷16毫升将底物全部溶解，零摄氏度条件下，逐滴加入氯磺酸(0.34毫升，5.2毫摩尔)，随后逐渐升温至室温条件下，反应1小时，反应结束后有白色固体析出。用滤纸抽滤的得到白色固体，用二氯甲烷洗3次(10毫升×3)，抽干后得到白色固体1.3克(收率：99％)，该固体直接用于下一步反应。
步骤B：合成7-溴-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯
Figure PCTCN2021072803-appb-000030
室温条件下，将7-溴-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸(326毫克)加入25毫升圆底烧瓶中，加入二氯亚砜(5毫升)，加入两滴N,N-二甲基甲酰胺，随后加热回流4小时，此时固体全部溶解，反应结束后蒸干溶剂得到白色粗产品，直接用于下一步反应。
步骤C：合成((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000031
将7-溴-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯(2.5克，7.3毫摩尔)，L-亮氨酸甲酯盐酸盐(1.82克，10毫摩尔)加入100毫升烧瓶中，加入二氯甲烷40毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(4.8毫升，35毫摩尔)，室温条件下反应2小时。
反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/3)纯化后得到2.5克产物((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(收率：76％)。LC-MS:RT＝4.52min,[M-H] -＝451.99。
步骤D：合成((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000032
取((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(150毫克，0.33毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(42毫克，1毫摩尔)，室温条件下反应12小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷萃取3次(30毫升×3)，合并有 机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到150毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤E：合成(S)-2-(((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000033
将((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸粗品(150毫克，0.34毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(60毫克，0.51毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(190毫克，0.51毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.16毫升，0.99毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化后得到120毫克产物(S)-2-(((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(收率：70％)。LC-MS:RT＝4.16min,[M-H] -＝501.99。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.87(s,1H),8.58(s,1H),8.25(d,J＝6.8Hz,1H),8.18(d,J＝7.2Hz,1H),8.12(d,J＝1.6Hz,1H),7.91(s,2H),7.57(dd,J＝6.8Hz,1.2Hz,1H),3.75-3.65(m,1H),1.61-1.55(m,1H),1.42-1.36(m,1H),1.28-1.15(m,3H),0.82(d,J＝5.6Hz,3H),0.73(d,J＝5.6Hz,3H),0.72-0.68(m,1H),0.43-0.38(m,1H)。
实施例2
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(4-(甲基磺酰基)苯基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000034
具体合成路线如下：
步骤A：合成((7-(4-(甲基磺酰基)苯基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000035
取((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(136毫克，0.3毫摩尔)溶于二氧六环/水(5毫升/1毫升)混合溶液中，先加入4-(甲磺酰基)苯硼酸(66毫克，0.33毫摩尔)，再加入磷酸钾(96毫克，0.45毫摩尔)，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(22毫克，0.03毫摩尔)，置换氮气后加热至80摄氏度反应2小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗1次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化后得到164毫克产物(收率：98％)。LC-MS:RT＝4.09min,[M-H] -＝528.05。
步骤B：合成((7-(4-(甲基磺酰基)苯基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000036
取((7-(4-(甲基磺酰基)苯基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(164毫克，0.3毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(40毫克，0.9毫摩尔)，室温条件下反应12小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到170毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(4-(甲基磺酰基)苯基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000037
将((7-(4-(甲基磺酰基)苯基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸(170毫克，0.33毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(58毫克，0.50毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(188毫克，0.50毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.16毫升，0.99毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到白色固体，白色固体用二氯甲烷洗3次(10毫升×3)后得到150毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(4-(甲基磺酰基)苯基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺(收率：79％)。LC-MS:RT＝3.82min,[M-H] -＝578.04。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.91(s,1H),8.62(s,1H),8.42(d,J＝6.8Hz,1H),8.24-8.17(m,2H),8.12(d,J＝6.8Hz,1H),8.05(d,J＝6.8Hz,1H),7.92(s,1H),7.90(d,J＝6.4Hz,1H),3.75-3.69(m,1H),3.29(s,3H),1.62-1.55(m,1H),1.30-1.14(m,3H),0.83(d,J＝5.2Hz,3H),0.76-0.71(m,4H),0.48-0.41(m,1H).
实施例3
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000038
具体合成路线如下：
步骤A：合成((7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000039
取((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(225毫克，0.5毫摩尔)溶于干燥甲苯(10毫升)中，先加入N-甲基哌嗪(0.17毫升，1.5毫摩尔)，再加入碳酸铯(489毫克，1.5毫摩尔)，再依次加入三二亚苄基丙酮二钯(23毫克，0.025毫摩尔)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(48毫克，0.1毫摩尔)置换氮气后加热至110摄氏度反应3小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗1次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到235毫克产物(收率：99％)。LC-MS:RT＝2.94min,[M+H] +＝474.16。
步骤B：合成((7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000040
取((7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(235毫克，0.5毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(63毫克，1.5毫摩尔)，室温条件下反应1小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至4-5，二氯甲烷/异丙醇(10/1)的混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到280毫克粗产物，粗产物不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.79min,[M-H] -＝458.10。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000041
将(((7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸粗产物(280毫克)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(88毫克，0.75毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(285毫克，0.75毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.25毫升，1.5毫摩尔)，室温条件下反应0.5小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到黄色油状液体，柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到100毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺 基)戊酰胺(收率：38％)。LC-MS:RT＝2.78min,[M+H] +＝524.19。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.86(s,1H),8.32(d,J＝1.2Hz,1H),8.06(d,J＝7.2Hz,1H),8.00(d,J＝8.0Hz,1H),7.77-7.69(m,2H),7.23(d,J＝2.0Hz,1H),7.12(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),3.71-3.64(m,1H),2.25(s,3H),1.60-1.53(m,1H),1.42-1.34(m,1H),1.29-1.21(m,3H),1.21-1.16(m,1H),0.82(d,J＝5.2Hz,3H),0.76-0.70(m,4H),0.38-0.33(m,1H).
实施例4
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-吗啉基二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000042
具体合成路线如下：
步骤A：合成((7-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000043
取((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(225毫克，0.5毫摩尔)溶于干燥甲苯(10毫升)中，先加入吗啡啉(0.13毫升，1.5毫摩尔)，再加入碳酸铯(489毫克，1.5毫摩尔)，再依次加入三二亚苄基丙酮二钯(23毫克，0.025毫摩尔)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(48毫克，0.1毫摩尔)置换氮气后加热至110摄氏度反应3小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)纯化后得到230毫克产物(收率：99％)。LC-MS:RT＝4.17min,[M+H] +＝461.13。
步骤B：合成((7-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000044
取(7-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(230毫克，0.5毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(63毫克，1.5毫摩尔)，室温条件下反应2小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至4-5，二氯甲烷/异丙醇(10/1)的混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到170毫克粗产物，LC-MS:RT＝3.94min,[M+H] +＝447.16,粗产物不需纯化直接用于下一步反应。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-吗啉基二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000045
将((7-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸(170毫克)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(67毫克，0.57毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(217毫克，0.57毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.19毫升，1.1毫摩尔)，室温条件下反应0.5小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到黄色油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/3)纯化后得到50毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-吗啉基二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺(收率：26％)。LC-MS:RT＝3.85min,[M+H] +＝511.17。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.86(s,1H),8.34-8.32(m,1H),8.06(d,J＝9.2Hz,1H),8.03(d,J＝8.4Hz,1H),7.79-7.65(m,2H),7.25(d,J＝2.0Hz,1H),7.13(dd,J＝8.8,2.4Hz,1H),3.78(t,J＝4.0Hz,4H),3.71-3.64(m,1H),3.27(t,J＝4.0Hz,4H),1.61-1.51(m,1H),1.30-1.21(m,3H),0.82(d,J＝6.4Hz,3H),0.74-0.68(m,4H),0.39-0.33(m,1H).
实施例5
合成(S)-2-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000046
具体合成路线如下：
步骤A：合成8-溴-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000047
室温条件下，将2-溴二苯并[b,d]呋喃(2.47克，10毫摩尔)加入50毫升圆底烧瓶中，加入二氯甲烷20毫升将底物全部溶解，零摄氏度条件下，逐滴加入氯磺酸(0.85毫升，13毫摩尔)，随后逐渐升温至室温条件下反应3小时，反应结束后有白色固体析出。滤纸抽滤得到白色固体，用二氯甲烷洗3次(10毫升×3)，抽干后得到白色固体1.1克(收率：33％)，该固体直接用于下一步反应。
步骤B：合成8-溴-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯
Figure PCTCN2021072803-appb-000048
室温条件下，将8-溴-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸(1.1克，3.4毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氯亚砜(15毫升)，加入DMF(0.1毫升)，随后加热回流6小时，此时固体全部溶解，反应结束后蒸干溶剂得到白色固体粗产品，直接用于下一步反应。
步骤C：合成((8-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000049
将8-溴-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯(1.1克，3.37毫摩尔)，L-亮氨酸甲酯盐酸盐(951毫克，5毫摩尔)加入100毫升烧瓶中，加入二氯甲烷30毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(2.3毫升，16.8毫摩尔)，室温条件下反应2小时。反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝4/1)纯化后得到670毫克产物((8-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(收率：44％)。LC-MS:RT＝4.46min,[M-H] -＝51.97。
步骤D：合成((8-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000050
取((8-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(110毫克，0.24毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(4毫升/1毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(31毫克，0.73毫摩尔)，室温条件下反应2小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到150毫克粗产品，LC-MS:RT＝4.30min,[M-H] -＝437.95，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤E：合成(S)-2-(((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000051
将((8-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸粗品(150毫克)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(42毫克，0.36毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(137毫克，0.36毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.12毫升，0.72毫摩尔)，室温条件下反应12小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化后得到30毫克产物(S)-2-(((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(收率：25％)。LC-MS:RT＝4.12min,[M+H] +＝504.01。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.87(s,1H),8.54(d,J＝1.2Hz,1H),8.08(d,J＝8.8Hz,1H),7.87-7.76(m,3H),7.62(d,J＝8.8Hz,1H),7.27(dd,J＝9.2,2.8Hz,1H),3.74-3.64(m,1H),1.61-1.53(m,1H),1.44-1.35(m,1H),1.22-1.14(m,3H),0.83(d,J＝6.8Hz,3H),0.74-0.69(m,4H),0.46-0.38(m,1H)。
实施例6
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000052
具体合成路线如下：
步骤A：合成((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000053
取((8-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(150毫克，0.33毫摩尔)溶于干燥甲苯(6毫升)中，先加入N-甲基哌嗪(0.11毫升，1.0毫摩尔)，再加入碳酸铯(326毫克，1.0毫摩尔)，最后依次加入三二亚苄基丙酮二钯(15毫克，0.016毫摩尔)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(31毫克，0.066毫摩尔)，置换氮气后加热至110摄氏度反应3小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，再加入水和2N稀盐酸调节水相pH至4-5，二氯甲烷/异丙醇(10/1)混合溶液萃取水相3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到210毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.82min,[M+H] +＝460.14。
步骤B：(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000054
将((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸粗品(170毫克)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(65毫克，0.55毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(211毫克，0.55毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.16毫升，1.0毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得到粗产品，经过制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离后得到65毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋 喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：38％)。LC-MS:RT＝2.80min,[M+H] +＝524.16。
实施例7
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(2-氧代-4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000055
具体合成路线如下：
步骤A：合成((7-(2-氧代-4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000056
取((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(236毫克，0.6毫摩尔)溶于干燥甲苯(10毫升)中，先加入2-氧代-4-甲基哌嗪(180毫克，1.1毫摩尔)，再加入碳酸铯(447毫克，1.4毫摩尔)，再依次加入N,N’-二甲基乙二胺(97毫克，1.1毫摩尔)，碘化亚铜(105毫克，0.6毫摩尔)置换氮气后加热至110摄氏度反应6小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗1次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化后得到178毫克产物(收率：66％)。LC-MS:RT＝2.80min,[M+H] +＝488.52。
步骤B：合成((7-(2-氧代-4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000057
取((7-(2-氧代-4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(178毫克，0.4毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(63毫克，1.5毫摩尔)，室温条件下反应1小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至4-5，二氯甲烷/异丙醇(10/1)的混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到183毫克粗产物，粗产物不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.58min,[M-H] -＝472.10.
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(2-氧代-4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000058
将((7-(2-氧代-4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸粗产物(183毫克)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(55毫克，0.46毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(217毫克，0.57毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(147毫克，1.2毫摩尔)，室温条件下反应0.5小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到黄色油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)提纯得到白色粉末状固体。LC-MS:RT＝2.61min,[M-H] -＝536.17。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.89(s,1H),8.57(t,J＝1.2Hz,1H),8.34(d,J＝8.4Hz,1H),8.19(d,J＝9.2Hz,1H),7.90(d,J＝0.8Hz,2H),7.82(d,J＝1.6Hz,1H),7.48(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),4.09(s,2H),4.02(t,J＝4.4Hz,2H),3.72(t,J＝4.4Hz,2H),2.97(s,3H),1.62-1.52(m,1H),1.44-1.33(m,1H),1.32-1.12(m,4H),0.82(d,J＝6.4Hz,3H),0.80-0.59(m,4H),0.52-0.42(m,1H).
实施例8
合成(S)-7-溴-N-(1–((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000059
具体合成路线如下：
步骤A：合成4'-溴-6-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000060
室温条件下，将5-溴-2-碘苯酚(299毫克，1毫摩尔)，(2-氟-5-(甲氧羰基)苯基)硼酸(198毫克，1毫摩尔)，磷酸钾(318毫克，1.5毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环5毫升，水1毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(73毫克，0.1毫摩尔)，置换氮气后常温反应12小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到220毫克产物4'-溴-6-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯(收率：68％)。LC-MS:RT＝4.17min,[M-H] -＝322.87。
步骤B：合成7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000061
室温条件下，将4'-溴-6-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-3-羧酸甲酯(100毫克，0.31毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺3毫升将底物全部溶解，加入碳酸钾(85毫克，0.61毫摩尔)，置换氮气后140摄氏度加热反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到白色固体(150毫克)，粗产品不需纯化直接用于下一步。
步骤C：合成7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000062
取7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸甲酯粗产品(150毫克)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(63毫克，1.5毫摩尔)，室温条件下反应2小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到82毫克粗产物，LC-MS:RT＝4.50min,[M-H] -＝288.92，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤D：合成(7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)叔丁基-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000063
取7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸粗品(82毫克，0.26毫摩尔)，L-亮氨酸叔丁酯盐酸盐(87毫克，0.39毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(148毫克，0.39毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.13毫升，0.78毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体100毫克(收率：84％)，粗产物不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝5.06min,[M-t-Bu+H] +＝404.03。
步骤E：合成(7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000064
取(7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)叔丁基-L-亮氨酸(100毫克，0.26毫摩尔)加入3毫升二氧六环中，再逐滴加入含4N盐酸的二氧六环溶液(0.25毫升，1毫摩尔)，室温条件下反应1小时，LC-MS监测反应结束后直接浓缩蒸干得到白色固体，过滤后得到126毫克粗产物，粗产物不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝4.35min,[M+H] +＝404.01。
步骤F：合成(S)-7-溴-N-(1-14.3氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000065
将(7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)-L-亮氨酸粗品(126毫克,0.26毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(46毫克，0.39毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(148毫克，0.39毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.25毫升，1.5毫摩尔)，室温条件下反应12小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)后得到20毫克产物(S)-7-溴-N-(1转移到锥形氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酰胺(收率：16％)。LC-MS:RT＝4.28min,[M+H] +＝468.05。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.01(s,1H),8.75(d,J＝1.6Hz,1H),8.63(d,J＝8.0Hz,1H),8.17(d,J＝8.3Hz,1H),8.12(dd,J＝8.7,1.9Hz,1H),8.09(d,J＝1.6Hz,1H),7.81(d,J＝8.4Hz,1H),7.64(dd,J＝8.4,2.0Hz,1H),4.54-4.43(m,1H),1.80-1.63(m,2H),1.57-1.42(m,3H),1.15-1.08(m,2H),0.93(d,J＝6.4Hz,3H),0.89(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例9
合成(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000066
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000067
将7-溴-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯(1.0克，3毫摩尔)，4-氟-4-甲基戊酸乙酯(531毫克，3毫摩尔)加入100毫升烧瓶中，加入二氯甲烷40毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(1.1毫升，7.5毫摩尔)，室温条件下反应2小时。
反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)纯化后得到973毫克产物(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(收率：67％)。LC-MS:RT＝4.43min,[M-H] -＝483.98。
步骤B：合成(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000068
取(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(120毫克，0.3毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(42毫克，1毫摩尔)，室温条件下反应12小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到112毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝4.18min,[M-H] -＝455.92。
步骤C：合成(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000069
将(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酸粗品(112毫克，0.3毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(33毫克，0.28毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(131毫克，0.35毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.16毫升，0.99毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化后得到56毫克产物(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺(收率：36％)。LC-MS:RT＝4.06min,[M+Na] +＝543.96。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.90(s,1H),8.58(s,1H),8.31(s,1H),8.23(d,J＝8.0Hz,1H),8.12(d,J＝1.6Hz,2H),7.93-7.88(m,2H),7.67(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),3.89(s,1H),1.96-1.86(m,1H),1.84-1.71(m,1H),1.33(d,J＝16.0Hz,3H),1.28(d,J＝16.0Hz,3H),1.21-1.13(m,2H),0.70-0.62(m,1H),0.40-0.32(m,1H).
实施例10
合成(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]噻吩)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000070
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000071
将(叔丁氧羰基)-L-亮氨酸(780毫克，3.37毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(400毫克，3.37毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(1.92克，5.00毫摩尔)溶解于10毫升无水二氯甲烷中，加入N，N-二异丙基乙胺(869毫克，6.74毫摩尔)，室温条件下反应2小时。TLC(碘显)显示反应结束后，向反应液中加入水(50毫升)稀释，用二氯甲烷萃取3次(50毫升×3)，合并有机相,干燥，旋干得粗品经过柱(正己烷：乙酸乙酯＝3:1)分离纯化得到(S)-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代-戊烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(740毫克，收率：74.4％)。
步骤B：合成(S)-2-氨基-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺盐酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000072
将(S)-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(740毫克，2.50毫摩尔)溶解于5毫升无水二氯甲烷中，加入含3毫升4N盐酸的二氧六环溶液，于室温下反应1小时。TLC(碘显)显示反应结束后，反应液旋干 得粗品直接用于下一步。
步骤C：合成7-溴-二苯并[b,d]噻吩-2-磺酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000073
室温条件下，将3-溴二苯并[b,d]噻吩(1.0克，4毫摩尔)加入50毫升圆底烧瓶中，加入二氯甲烷16毫升将底物全部溶解，零摄氏度条件下，逐滴加入氯磺酸(0.34毫升，5.2毫摩尔)，随后逐渐升温至室温条件下，反应1小时，反应结束后有白色固体析出。反应液过滤得到白色固体，用二氯甲烷洗3次(10毫升×3)，抽干后得到白色固体7-溴-二苯并[b,d]噻吩-2-磺酸(1.3克，收率：99％)，该固体直接用于下一步反应。
步骤D：合成7-溴-二苯并[b,d]噻吩-2-磺酰氯
Figure PCTCN2021072803-appb-000074
室温条件下，将7-溴-二苯并[b,d]噻吩-2-磺酸(984毫克，3毫摩尔)溶解于5毫升冷的二氯亚砜中，加入两滴DMF后加热回流2小时至固体完全溶解，反应液蒸干得到白色粗产品7-溴-二苯并[b,d]噻吩-2-磺酰氯(800毫克，77.6％)，直接用于下一步反应。
步骤E：合成(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]噻吩)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000075
将7-溴-二苯并[b,d]噻吩-2-磺酰氯(200毫克，0.578毫摩尔)，(S)-2-氨基-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺盐酸盐(146毫克，0.636毫摩尔)溶解于5毫升无水二氯甲烷中，缓慢加入三乙胺(116毫克，1.15毫摩尔)于室温条件下反应1.5小时。LC-MS监测反应结束后，向反应液中加入水(50毫升)稀释，用二氯甲烷(30毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品，经柱层析纯化(正己烷：乙酸乙酯＝2:1)分离纯化得到80％纯度的粗品，再用(正己烷：乙酸乙酯＝2/1)重结晶得到白色固体产物(S)-2-((7-溴二苯并[b,d]噻吩)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(16毫克，收率：5％)。LC-MS:RT＝4.23min,[M+H] +＝519.98。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.86(s,1H),8.66(d,J＝1.6Hz,1H),8.44(d,J＝2.0Hz,1H),8.38(d,J＝8.4Hz,1H),8.25(d,J＝8.8Hz,1H),8.19(s,1H),7.85(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.76(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),3.77-3.69(m,1H),1.66-1.52(m,1H),1.46-1.35(m,1H),1.33-1.01(m,3H),0.83(d,J＝6.8Hz,3H),0.74(d,J＝6.4Hz,3H),0.64-0.55(m,1H),0.26-0.17(m,1H).
实施例11
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000076
具体合成路线如下：
步骤A：合成((7-(2-氧代-4-叔丁氧羰基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000077
取((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(236毫克，0.6毫摩尔)溶于干燥甲苯(10毫升)中，先加入2-氧 代-4-叔丁氧羰基哌嗪(200毫克，1.1毫摩尔)，再加入碳酸铯(447毫克，1.4毫摩尔)，再依次加入N,N’-二甲基乙二胺(97毫克，1.1毫摩尔)，碘化亚铜(105毫克，0.6毫摩尔)置换氮气后加热至110摄氏度反应6小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化后得到140毫克产物(收率：49％)。LC-MS:RT＝4.10min,[M+H-56] +＝518.19。
步骤B：合成((7-(2-氧代-4-叔丁氧羰基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000078
取((7-(2-氧代-4-叔丁氧羰基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(140毫克，0.3毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(63毫克，1.5毫摩尔)，室温条件下反应1小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至4-5，二氯甲烷/异丙醇(10/1)的混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到248毫克粗产物，粗产物不需纯化直接用于下一步反应。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(2-氧代-4-叔丁氧羰基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000079
将(((7-(2-氧代-4-叔丁氧羰基哌嗪-1-基)二苯并[b,,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸粗产物(248毫克)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(60毫克，0.52毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(416毫克，0.64毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(277毫克，1.3毫摩尔)，室温条件下反应0.5小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到黄色油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/2)纯化后得到260毫克产物(收率：98％)。LC-MS:RT＝3.85min,[M+H] +＝624.22。[M-H] -＝536.17。
步骤D：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000080
将(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(2-氧代-4-叔丁氧羰基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺(260毫克)，加入二氯甲烷4毫升将底物全部溶解，最后加入三氟乙酸1毫升，室温条件下反应0.5小时。LC-MS显示反应结束后，直接真空旋干，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化后得到120毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：55％)。LC-MS:RT＝2.41min,[M+H] +＝524.24。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.35(s,1H),8.89(s,1H),8.57(s,1H),8.33(d,J＝6.8Hz,0H),8.19(d,J＝7.2Hz,0H),7.90(s,1H),7.79(d,J＝1.2Hz,1H),7.46(dd,J＝6.4,1.2Hz,0H),3.99-3.95(m,2H),3.74-3.68(m,1H),3.59(t,J＝4.8Hz,1H),1.61-1.53(m,1H),1.43-1.35(m,1H),1.34-1.14(m,3H),0.82(d,J＝5.2Hz,1H),0.79-0.3(m,1H),0.72(d,J＝5.2Hz,1H),0.51-0.44(m,1H).
实施例12
合成1-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)环己烷-1-羧酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000081
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000082
将7-溴-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯(688毫克，2毫摩尔)，1-氨基环己甲酸甲酯(314毫克，2毫摩尔)加入50毫升烧瓶中，加入二氯甲烷20毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(0.55毫升，4毫摩尔)，室温条件下反应2小时。
反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/3)纯化后得到700毫克产物1-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸甲酯(收率：75％)。LC-MS:RT＝4.55min,[M-H] -＝463.97。
步骤B：合成1-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000083
取1-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸甲酯(200毫克，0.43毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(5毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加氢氧化钾(72毫克，6毫摩尔)，加热至60摄氏度条件下反应24小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷/异丙醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到150毫克粗产物，LC-MS:RT＝4.34min,[M-H] -＝449.97，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤C：合成1-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)环己烷-1-羧酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000084
将1-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸粗品(150毫克，0.33毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(101毫克，0.86毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(243毫克，0.64毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.21毫升，1.29毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化后得到60毫克产物1-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)环己烷-1-羧酰胺(收率：35％)。LC-MS:RT＝4.25min,[M-H] -＝514.00。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.64(d,J＝1.2Hz,1H),8.45(s,1H),8.28(d,J＝6.8Hz,1H),8.12(d,J＝0.8Hz,1H),8.04(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),7.92(d,J＝7.2Hz,1H),7.70(s,1H),7.66(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),1.69(m,4H),1.41(m,2H),1.24(m,6H),1.03(m,2H).
实施例13
合成(S)-8-溴-N-(1–((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代-戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000085
具体合成路线如下：
步骤A：合成5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000086
室温条件下，将4-溴-2-碘苯酚(3.00克，10.0毫摩尔)，(2-氟-4-(甲氧羰基)苯基)硼酸(1.98克，10.0毫摩尔)，磷酸钾(3.18克，15.0毫摩尔)溶解于50毫升(二氧六环：水＝4：1)混合液中，加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(365毫克，0.50毫摩尔)，氮气置换3次于室温下反应2小时。TLC显示反应结束后，反应液过滤，滤液加入饱和氯化钠溶液(50毫升)洗涤，乙酸乙酯萃取3次(50毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷：乙酸乙酯＝5：1)分离纯化得5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-羧酸甲酯(1.65克，收率：50.9％)。
步骤B：合成8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000087
室温条件下，将5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-羧酸甲酯(200毫克，0.617毫摩尔)溶解于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(170毫克，1.23毫摩尔)，氮气置换后于120摄氏度加热反应2小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入50毫升水中，乙酸乙酯萃取3次(50毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干得粗品直接用于下一步。
步骤C：合成8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000088
取8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯粗品(200毫克，0.65毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入氢氧化钠(52.0毫克，1.30毫摩尔)，室温条件下反应3小时，TLC显示反应完全后，反应液加入2N稀盐酸调节水相pH至5-6，乙酸乙酯萃取3次(30毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干得8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(165毫克，收率：87.2％)。
步骤D：合成(S)-8-溴-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000089
取8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(100毫克，0.346毫摩尔)，(S)-2-氨基-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺盐酸盐(67.0毫克，0.346毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(197毫克，0.519毫摩尔)溶解于8毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(90.0毫克，0.692毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(50毫升)稀释，用乙酸乙酯(30毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-TLC(正己烷：乙酸乙酯＝2:1)分离纯化得(S)-8-溴-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺(45.0毫克，收率：27.8％)。LC-MS:RT＝4.22min,[M+H] +＝468.05。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.02(s,1H),8.70(d,J＝6.4Hz,1H),8.52(d,J＝1.2Hz,1H),8.29(d,J＝6.8Hz,1H),8.26(s,1H),8.00(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),7.82-7.70(m,2H),4.52-4.44(m,1H),1.78-1.64(m,2H),1.57-1.50(tm,1H),1.50-1.42(m,2H),1.16-1.08(m,2H),0.93(d,J＝5.2Hz,3H),0.88(d,J＝5.2Hz,3H).
实施例14
合成(S)-7-溴-N-(1–((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000090
具体合成路线如下：
步骤A：合成4'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000091
室温条件下，将5-溴-2-碘苯酚(3.00克，10.0毫摩尔)，(2-氟-4-(甲氧羰基)苯基)硼酸(1.98克，10.0毫摩尔)，磷酸钾(3.18克，15.0毫摩尔)溶解于50毫升(二氧六环：水＝4：1)混合液中，加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(365毫克，0.50毫摩尔)，氮气置换3次于室温下反应2小时。TLC显示反应结束后，反应液过滤，滤液加入饱和氯化钠溶液(50毫升)洗涤，乙酸乙酯萃取3次(50毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷：乙酸乙酯＝5：1)分离纯化得4'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-羧酸甲酯(1.38克，收率：42.5％)。
步骤B：合成7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000092
室温条件下，将4'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-羧酸甲酯(1.38克，4.25毫摩尔)溶解于12毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(1.17克，8.50毫摩尔)，氮气置换后于130摄氏度加热反应2小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入120毫升水中，乙酸乙酯萃取3次(50毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干得粗品直接用于下一步。
步骤C：合成7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000093
取7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯粗品(200毫克，0.65毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入氢氧化钠(52.0毫克，1.30毫摩尔)，室温条件下反应3小时，TLC显示反应完全后，反应液加入2N稀盐酸调节水相pH至5-6，乙酸乙酯萃取3次(30毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干得7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(172毫克，收率：91.1％)。
步骤D：合成(S)-7-溴-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000094
取7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(150毫克，0.520毫摩尔)，(S)-2-氨基-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺盐酸盐(101毫克，0.520毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(296毫克，0.780毫摩尔)溶解于15毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(134毫克，1.04毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用乙酸乙酯萃取2次(50毫升×2)，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-TLC(正己烷：乙酸乙酯＝2:1)分离纯化得(S)-7-溴-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺(46.0毫克，收率：18.9％)。LC-MS:RT＝4.25min,[M+H] +＝468.09。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.16(s,1H),8.79(d,J＝6.4Hz,1H),8.29(s,1H),8.26(d,J＝6.4Hz,1H),8.19(d,J＝6.8Hz,1H),8.10(d,J＝6.8Hz,1H),8.02(d,J＝6.8Hz,1H),7.64(dd,J＝6.4,0.8Hz,1H),4.54-4.45(m,1H),2.09-1.92(m,1H),1.80-1.70(m,1H),1.70-1.62(m,1H),1.58-1.48(m,1H),1.48-1.44(m,2H),1.17-1.10(qm,2H),0.92(d,J＝5.2Hz,3H),0.88(d,J＝5.2Hz,2H).
实施例15
合成(S)-2-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000095
具体合成路线如下：
步骤A：合成8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-磺酰氯
Figure PCTCN2021072803-appb-000096
室温条件下，将二苯并[b,d]呋喃-3-磺酰氯(1.4克，5毫摩尔)加入100毫升圆底烧瓶中，加入乙酸30毫升将底物全部溶解，零摄氏度条件下，逐滴加入液溴(2.5毫升，5.2毫摩尔)，随后逐渐升温至70摄氏度条件下，反应5小时，反应结束后，滴加饱和亚硫酸钠溶液至棕色褪去，用二氯甲烷洗3次(20毫升×3)，抽干后得到白色固体，该固体直接用于下一步反应。
步骤B：合成(S)-2-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-4-甲基戊酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000097
将8-溴-二苯并[b,d]呋喃-3-磺酰氯(0.5克，1.5毫摩尔)，L-亮氨酸甲酯盐酸盐(264毫克，1.5毫摩尔)加入25毫升烧瓶中，加入二氯甲烷10毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(0.5毫升，4.3毫摩尔)，室温条件下反应1小时。反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝4/1)纯化后得到(S)-2-(((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-4-甲基戊酸甲酯。LC-MS:RT＝4.50min,[M-H] -＝451.96。
步骤C：合成((8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000098
取((8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(590毫克，1.3毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(100毫克，2毫摩尔)，室温条件下反应12小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到556毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤D：合成(S)-2-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000099
将((8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)磺酰基)-L-亮氨酸粗品(556毫克，1.3毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(181毫克，1.51毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(722毫克，1.91毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.61毫升，3.8毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化后得到310毫克产物(S)-2-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(收率：47％)。LC-MS:RT＝4.12min,[M-H] -＝502.04。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.90(s,1H),8.65-8.44(m,1H),8.37(d,J＝8.0Hz,1H),8.29(d,J＝8.4Hz,1H),8.04(d,J＝1.2Hz,1H),7.83-7.73(m,3H),3.74-3.64(m,1H),1.60-1.50(m,1H),1.43-1.33(m,1H),1.32-1.12(m,3H),0.82(d,J＝6.8Hz,3H),0.80-0.74(m,1H),0.72(d,J＝6.8Hz,3H),0.44-0.37(m,1H).
实施例16
合成1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-环己基甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000100
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-环己基甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000101
将8-溴-二苯并[b,d]呋喃-3-磺酰氯(0.5克，1.5毫摩尔)，1-氨基环己基甲酸甲酯(228毫克，1.5毫摩尔)加入25毫升烧瓶中，加入二氯甲烷10毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(0.5毫升，4.3毫摩尔)，室温条件下反应1小时。反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝4/1)纯化后得到455毫克1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)磺酰胺基)-环己基甲酸甲酯(产率66％)。LC-MS:RT＝4.52min,[M+H] +＝463.93。
步骤B：合成1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-环己基甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000102
取1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-环己基甲酸甲酯溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入氢氧化钾(168毫克，3毫摩尔)，60摄氏度下反应20小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到340毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤C：合成1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-环己基甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000103
将1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-环己基甲酸粗品(340毫克，0.8毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(108毫克，0.91毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(429毫克，1.13毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.41毫升，2.27毫摩尔)，80摄氏度下反应6小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化后得到132毫克产物1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-环己基甲酰胺(产率32％)。LC-MS:RT＝4.20min,[M+H] +＝514.01。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.56(m,1H),8.47(s,1H),8.38(d,J＝6.4Hz,1H),8.13(d,J＝0.8Hz,1H),7.88(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),7.83(s,1H),7.79-7.76(m,2H),1.74-1.68(m,2H),1.68-1.60(m,2H),1.48-1.35(m,2H),1.28-1.18(m,6H),1.09-0.96(m,2H).
实施例17
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(乙酰基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000104
具体合成路线如下：
步骤A：合成((7-(1-乙氧基乙烯-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000105
取((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(927毫克，2.0毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中，先加入[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(147毫克，0.2毫摩尔)，再加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡(689微升，2.0毫摩尔)，置换氮气后加热至100摄氏度反应3小时，LC-MS显示反应结束后，加入饱和氟化钾溶液(30毫升)淬灭反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体。LC-MS:RT＝4.64min,[M+H] +＝444.12。
步骤B：合成((7-(乙酰基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000106
取((7-(1-乙氧基乙烯-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯粗品溶于氯化氢的二氧六环溶液(20毫升，2.0摩尔/升)中，加水(10毫升)后，于室温下反应3小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体。柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化后得到502毫克产物((7-(乙酰基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯。LC-MS:RT＝4.09min,[M+H] +＝416.07。
步骤C：合成((7-(乙酰基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000107
取((7-(乙酰基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(150毫克，0.4毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(63毫克，1.5毫摩尔)，室温条件下反应1小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至4-5，二氯甲烷/异丙醇(10/1)的混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到145毫克粗产物，粗产物不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝3.88min,[M-H] -＝402.02
步骤D：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(乙酰基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000108
将((7-(乙酰基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸粗产物(145毫克)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(55毫克，0.46毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(217毫克，0.57毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(147毫克，1.2毫摩尔)，室温条件下反应0.5小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到黄色油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)提纯的到83毫克白色粉末状固体(产率：44.3％)。LC-MS:RT＝3.77min,[M-H] -＝466.09。 1H NMR (400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.88(s,1H),8.65(s,1H),8.42(d,J＝6.4Hz,1H),8.35(s,1H),8.21(d,J＝7.2Hz,1H),8.09(dd,J＝6.4,0.8Hz,1H),7.96(d,J＝0.8Hz,2H),3.75-3.68(m,1H),2.71(s,3H),1.62-1.54(m,1H),1.44-1.36(m,1H),1.30-1.13(m,3H),0.83(d,J＝5.6Hz,3H),0.77-0.59(m,4H),0.44-0.36(m,1H).
实施例18
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(1-羟基乙基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000109
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(1-羟基乙基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000110
将(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(乙酰基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺(60毫克，0.13毫摩尔)溶于甲醇5毫升中，冰浴下加入硼氢化钠(3毫克，0.08毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，直接真空旋干，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)提纯的到42毫克白色粉末状固体(产率：67％)。LC-MS:RT＝3.61min,[M-H] -＝468.11。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.87(s,1H),8.49(s,1H),8.18(d,J＝6.4Hz,1H),8.14(d,J＝9.2Hz,1H),7.85(s,2H),7.72(d,J＝2.0Hz,1H),7.46(dd,J＝6.4,4.4Hz,1H),4.92(q,J＝4.8Hz,1H),3.73-3.66(m,5H),1.59-1.53(m,1H),1.44-1.34(m,4H),1.30-1.10(m,3H),0.82(d,J＝5.2Hz,4H),0.76-0.68(m,4H),0.42-0.35(m,1H).
实施例19
合成(S)-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-8-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000111
具体合成路线如下：
步骤A：合成8-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000112
将底物8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯(800毫克，2.60毫摩尔)，3-吗啉酮(396毫克，3.90毫摩尔)溶解于6毫升无水二氧六环中，依次加入碳酸铯(1.69克，5.20毫摩尔)，N,N'-二甲基乙二胺(23.0毫克，0.260毫摩尔),碘化亚铜(50.0毫克，0.260毫摩尔)，置换氮气于130摄氏度微波反应3小时，LC-MS显示反应结束后，反应液过滤，滤液倒入水(150毫升)中，加入乙酸乙酯(30毫升×3)萃取合并有机相,干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷：乙酸乙酯＝1:2)分离纯化得8-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯(600毫克，收率：62.8％)。
步骤B：合成8-((2-(羧基甲氧基)乙基)氨基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000113
取8-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯(600毫克，1.80毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(8毫升/2毫升)混合溶液中， 再加入一水氢氧化锂(232毫克，5.40毫摩尔)，室温条件下反应过夜，LC-MS显示反应完全后，反应液加入2N稀盐酸调节水相pH至5-6，乙酸乙酯萃取3次(30毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干得8-((2-(羧基甲氧基)乙基)氨基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(320毫克，收率：54.1％)。
步骤C：合成((S)-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-8-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000114
取8-((2-(羧基甲氧基)乙基)氨基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(90.0毫克，0.270毫摩尔)，(S)-2-氨基-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺盐酸盐(80.0毫克，0.410毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(307毫克，0.810毫摩尔)溶解于8毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(70.0毫克，0.540毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用乙酸乙酯萃取3次(30毫升×3)，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-TLC(正己烷：乙酸乙酯＝1:2)分离纯化得((S)-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-8-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺(12.0毫克，收率：9.09％)。LC-MS:RT＝3.46min,[M+H] +＝489.17。
实施例20
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000115
具体合成路线如下：
步骤A：合成((7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000116
取((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(250毫克，0.6毫摩尔)溶于干燥甲苯(10毫升)中，先加入3-氧代吗啉(111毫克，1.1毫摩尔)，再加入碳酸铯(447毫克，1.4毫摩尔)，再依次加入N,N’-二甲基乙二胺(97毫克，1.1毫摩尔)，碘化亚铜(105毫克，0.6毫摩尔)置换氮气后加热至110摄氏度反应6小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/2)纯化后得到59毫克产物(收率：21％)。LC-MS:RT＝3.51min,[M+H] +＝461.10。
步骤B：合成((7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000117
取((7-(3-氧代吗啉-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(59毫克，0.1毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(20毫克，0.5毫摩尔)，室温条件下反应1小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至4-5，二氯甲烷/异丙醇(10/1)的混合溶液萃取3次(10毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到77毫克粗产物，粗产物不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝3.63min,[M-H+18] -＝477.08
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000118
将(((7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸粗产物(77毫克，0.17毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(23毫克，0.19毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(182毫克，0.48毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(104毫克，0.81毫摩尔)，室温条件下反应0.5小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(20毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到黄色油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)提纯的到46毫克白色粉末状固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺(收率：52％)。LC-MS:RT＝3.48min,[M+H] +＝525.14。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.88(s,1H),8.55(s,1H),8.29(d,J＝6.4Hz,1H),8.17(d,J＝6.8Hz,1H),7.97-7.83(m,3H),7.54(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),4.27(s,2H),4.04-3.97(m,2H),3.92-3.80(m,2H),3.74-3.66(m,1H),1.62-1.51(m,1H),1.40-1.34(m,1H),1.27-1.17(m,3H),0.82(d,J＝5.2Hz,3H),0.79-0.67(m,4H),0.48-0.40(m,1H).
实施例21
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000119
具体合成路线如下：
步骤A：合成((8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000120
将8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-磺酰氯(701毫克，2毫摩尔)，L-亮氨酸甲酯盐酸盐(546毫克，3毫摩尔)加入50毫升烧瓶中，加入二氯甲烷20毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(0.8毫升，6毫摩尔)，室温条件下反应1小时。反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到700毫克产物((8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(收率：77％)。LC-MS:RT＝4.48min,[M-H] -＝451.98。
步骤B：合成(((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000121
取((8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)磺酰基)-L-亮氨酸甲酯(150毫克，0.33毫摩尔)溶于干燥甲苯(10毫升)中，先加入N-甲基哌嗪(0.73毫升，0.66毫摩尔)，再加入叔丁醇钠(79毫克，0.82毫摩尔)，最后依次加入三二亚苄基丙酮二钯(15毫克，0.016毫摩尔)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(31毫克，0.066毫摩尔)，置换氮气后加热至110摄氏度反应3小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，再加入水和2N稀盐酸调节水相pH至4-5，二氯甲烷/异丙醇(10/1)混合溶液萃取水相3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到210毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.81min,[M-H] -＝458.12。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000122
将(((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-L-亮氨酸粗品(210毫克)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(81毫克，0.69毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(262毫克，0.69毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.23毫升，1.38毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩得到粗产品，经过制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离后得到100毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：58％)。LC-MS:RT＝2.80min,[M+H] +＝524.25。
实施例22
合成(S)-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000123
具体合成路线如下：
步骤A：合成8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000124
取8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(200毫克，0.692毫摩尔)，N-甲基哌嗪(138毫克，1.38毫摩尔)，叔丁醇钠(132毫克，1.38毫摩尔)溶解于干燥甲苯(10毫升)中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(62.0毫克，0.069毫摩尔)，1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(42.0毫克，0.069毫摩尔)，氮气置换3次后加热至110摄氏度反应过夜(16个小时)。LC-MS监测显示反应完全后，反应液直接旋干的残留物先用20毫升的二氯甲烷/乙醇＝10/1混合液溶解，加水(50毫升)分液。取水相用2N稀盐酸调节至pH为4左右，再用二氯甲烷/异丙醇＝3/1混合液(50毫升×5)萃取，合并有机相,干燥，旋干得8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(162毫克，收率：25.0％)。
步骤B：合成(S)-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000125
取8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(162毫克，0.520毫摩尔)，(S)-2-氨基-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺盐酸盐(152毫克，0.780毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(395毫克，1.04毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(167毫克，1.30毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(50毫升)稀释，用乙酸乙酯萃取2次(30毫升×2)，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得((S)-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐(10.0毫克，收率：3.9％)。LC-MS:RT＝2.78min,[M+H] +＝488.27。
实施例23
合成(S)-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-7-(3-氧吗啉代)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000126
具体合成路线如下：
步骤A：合成7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000127
将底物7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯(480毫克，1.57毫摩尔)置于50毫升圆底烧瓶中，加入二氧六环溶液10毫升溶解底物，依次加入碳酸铯(1.53克，4.7毫摩尔)，N,N'-二甲基乙二胺(0.34毫升，3.15毫摩尔),碘化亚铜(298毫克，1.57毫摩尔)，置换氮气后加热至100摄氏度反应12小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(30毫升)稀释反应液，饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗品，柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到380毫克(S)-7-溴-N-(1–((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酰胺(收率：74％)。LC-MS:RT＝3.64min,[M+H] +＝326.10。
步骤B：7-((2-(羧基甲氧基)乙基)氨基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000128
取7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯(380毫克，1.17毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加一水合氢氧化锂(147毫克，3.5毫摩尔)，室温条件下反应12小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至3-4，二氯甲烷/异丙醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤C：(S)-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000129
取7-((2-(羧基甲氧基)乙基)氨基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(220毫克，0.67毫摩尔)，(1-氨基-N-(1-氰基环丙基)环己烷-1-羧酰胺盐酸盐(229毫克，1毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(760毫克，2毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.55毫升，3.35毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)得到100毫克(S)-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酰胺(收率：30％)。LC-MS:RT＝3.49min,[M+H] +＝489.16。
实施例24
合成(S)-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-8-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000130
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-8-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000131
将底物(S)-8-溴-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺(60.0毫克，0.128毫摩尔)，4-甲基哌嗪-2-酮(23.0毫克，0.193毫摩尔)溶解于5毫升无水二氧六环中，依次加入碳酸铯(84.0毫克，0.256毫摩尔)，N,N'-二甲基乙二胺(5.0毫克，0.0128毫摩尔),碘化亚铜(6.0毫克，0.0128毫摩尔)，氮气置换于110摄氏度反应过夜(16小时)，LC-MS监测显示反应50％左右，停止反应。反应液倒入水(50毫升)中，加入乙酸乙酯(50毫升×2)萃取合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得(S)-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-8-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐(8.0毫克，收率：12.5％)。LC-MS:RT＝2.67min,[M+H] +＝502.24。
实施例25
合成(S)-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000132
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-7-溴-N-(1–((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000133
取7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸粗品(320毫克，1.1毫摩尔)，(S)-2-氨基-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺盐酸盐(500毫克，1.65毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(627毫克，1.65毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.9毫升，5.5毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化得到440毫克(S)-7-溴-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酰胺(收率：94％)。LC-MS:RT＝4.26min,[M+H] +＝468.08。
步骤B：合成(S)-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000134
将底物(S)-7-溴-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酰胺(440毫克，1毫摩尔)置于50毫升圆底烧瓶中，加入二氧六环溶液10毫升溶解底物，依次加入碳酸铯(975毫克，3毫摩尔)，N,N'-二甲基乙二胺(176毫克，2毫摩尔),碘化亚铜(190毫克，1毫摩尔)，置换氮气后加热至100摄氏度反应12小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(30毫升)稀释反应液，饱和氯化钠溶液洗有机相三次(30毫升×3)，有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到400毫克粗产物，经过制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离后得到253毫克产物(S)-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-7-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酰胺(收率：52％)。LC-MS:RT＝3.48min,[M+H] +＝489.19。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.00(s,1H),8.72(s,1H),8.63(d,J＝7.6Hz,1H),8.21(d,J＝8.0Hz,1H),8.09(dd,J＝8.8,1.6Hz,1H),7.85(s,1H),7.79(d,J＝8.8Hz,1H),7.50(dd,J＝8.0,1.2Hz,1H),4.54-4.44(m,1H),4.26(s,2H),4.03(t,J＝5.6Hz,2H),3.86(t,J＝5.6Hz,2H),1.80-1.61(m,2H),1.57-1.42(m,3H),1.16-1.08(m,2H),0.93(d,J＝6.4Hz,3H),0.89(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例26
合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-7-(3-氧代吗啉代)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000135
具体合成路线如下：
步骤A：合成(9H-芴-9-基)甲基(1-((1-异氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)氨基甲酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000136
取1-(((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)环己烷-1-甲酸(5.00克，13.7毫摩尔)，1-异氰基环丙烷-1-胺盐酸盐(1.62克，13.7毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(7.80克，20.52毫摩尔)溶解于50毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(3.53克，27.36毫摩尔)，室温条件下反应3小时。TLC监测显示反应完全后，反应液倒入200毫升水中，用乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷：乙酸乙酯＝2:1)分离纯化得白色固体(9H-芴-9-基)甲基(1-((1-异氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)氨基甲酸酯(5.50克，收率：93.3％)。
步骤B：合成1-氨基-N-(1-异氰基环丙基)环己烷-1-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000137
将(9H-芴-9-基)甲基(1-((1-异氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)氨基甲酸酯(5.00克，11.6毫摩尔)溶解于50毫升无水二氯甲烷中，加入4-甲基哌啶(1.72克，17.4毫摩尔)于室温下反应4小时。TLC监测显示反应完全后，反应液旋干的粗品直接硅胶拌样柱层析分离纯化得白色固体1-氨基-N-(1-异氰基环丙基)环己烷-1-甲酰胺(2.01克，收率：83.7％)。
步骤C：N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-7-(3-氧代吗啉代)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000138
取7-((2-(羧基甲氧基)乙基)氨基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(120毫克，0.36毫摩尔)，1-氨基-N-(1-氰基环丙基)环己烷-1-羧酰胺盐酸盐(76毫克，0.36毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(401毫克，1毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺6毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.17毫升，1毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食 盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到50毫克N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-7-(3-氧代吗啉代)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺(收率：28％)。LC-MS:RT＝3.46min,[M+H] +＝501.15。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.50(s,1H),8.24(s,1H),8.22(d,J＝7.6Hz,1H),8.08(s,1H),7.92(dd,J＝6.4,1.2Hz,1H),7.87(d,J＝1.2Hz,1H),7.50(dd,J＝6.8,1.6Hz,1H),4.26(s,2H),4.03(t,J＝3.6Hz,2H),3.86(t,J＝3.6Hz,2H),2.08-2.00(m,2H),1.84-1.76(m,2H),1.57-1.49(m,4H),1.47-1.37(m,2H),1.32-1.22(m,2H),1.08-1.02(m,2H).
实施例27
合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-8-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000139
具体合成路线如下：
步骤A：合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-8-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000140
取8-((2-(羧基甲氧基)乙基)氨基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酸(50.0毫克，0.150毫摩尔)，1-氨基-N-(1-异氰基环丙基)环己烷-1-甲酰胺(38.0毫克，0.180毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(85.0毫克，0.225毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(38.0毫克，0.540毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(30毫升)稀释，用乙酸乙酯(30毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经重结晶(乙酸乙酯：甲醇＝10:1)得((S)-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-8-(3-氧代吗啉)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺(34.0毫克，收率：45.3％)。LC-MS:RT＝3.45min,[M+H] +＝501.18。
实施例28
合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000141
具体合成路线如下：
步骤A：合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000142
取8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(50.0毫克，0.160毫摩尔)，1-氨基-N-(1-异氰基环丙基)环己烷-1-甲 酰胺(34.0毫克，0.160毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(121毫克，0.320毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(51.6毫克，0.40毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用乙酸乙酯(30毫升×2)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐(20.0毫克，收率：25.1％)。LC-MS:RT＝3.45min,[M+H] +＝500.18。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.72(s,1H),8.49(s,1H),8.18-8.14(m,2H),8.07(s,1H),7.89(d,J＝6.0Hz,1H),7.83(d,J＝2.0Hz,1H),7.67(d,J＝7.2Hz,1H),7.32(dd,J＝7.2,2.0Hz,1H),3.89(d,J＝10.4Hz,2H),3.58(d,J＝9.2Hz,2H),3.28-3.20(m,2H),3.05(t,J＝9.6Hz,2H),2.90(s,3H),2.08-2.00(m,2H),1.85-1.75(m,2H),1.65-1.50(m,5H),1.47-1.37(m,2H),1.34-1.27(m,1H),1.10-0.97(m,2H).
实施例29
合成(S)-2-((二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000143
具体合成路线如下：
步骤A：合成二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000144
室温条件下，将二苯并[b,d]呋喃(840毫克，5.0毫摩尔)加入50毫升圆底烧瓶中，加入二氯甲烷16毫升将底物全部溶解，零摄氏度条件下，逐滴加入氯磺酸(0.43毫升，6.5毫摩尔)，随后逐渐升温至室温条件下，反应4小时，反应结束后有白色固体析出。用滤纸抽滤得到白色固体，用二氯甲烷洗3次(10毫升×3)，抽干后得到白色固体1.5克，该固体直接用于下一步反应。
步骤B：合成二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯
Figure PCTCN2021072803-appb-000145
室温条件下，将二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸(1克)加入25毫升圆底烧瓶中，加入二氯亚砜(10毫升)，加入两滴DMF，随后加热回流4小时，此时固体全部溶解，反应结束后蒸干溶剂得到白色粗产品，直接用于下一步反应。
步骤C：合成(S)-2-((二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000146
将二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯(270毫克，1.0毫摩尔)，1-氨基-N-(1-异氰基环丙基)环己烷-1-甲酰胺盐酸盐(200毫克，1.1毫摩尔)加入50毫升烧瓶中，加入二氯甲烷10毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(0.5毫升，3.5毫摩尔)，室温条件下反应2小时。反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化后得到165毫克产物(S)-2-(((二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(收率：39％)。LC-MS:RT＝3.91min,[M-H] -＝424.03。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.87(s,1H),8.55(s,1H),8.26(s,1H),8.16(d,J＝6.8Hz,1H),7.88(d,J＝0.8Hz,2H),7.78(d,J＝6.8Hz,1H),7.61(t,J＝5.6Hz,1H),7.49(t,J＝6.0Hz,1H),3.74-3.65(m,1H),1.61-1.55(m,1H),1.47-1.37(m,2H),1.31-1.23(m,4H),0.82(d,J＝5.2Hz,3H),0.75-0.61(m,4H),0.42-0.33(m,1H).
实施例30
合成N-(1-氰基环丙基)-1-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)环己烷-1-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000147
具体合成路线如下：
步骤A：合成N-(1-氰基环丙基)-1-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)环己烷-1-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000148
将二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯(270毫克，1.0毫摩尔)，1-氨基-N-(1-氰基环丙基)环己烷-1-羧酰胺(225毫克，1.1毫摩尔)加入50毫升烧瓶中，加入二氯甲烷10毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(0.5毫升，3.5毫摩尔)，室温条件下反应2小时。反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化后得到139毫克产物N-(1-氰基环丙基)-1-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)环己烷-1-甲酰胺(收率：32％)。LC-MS:RT＝3.96min,[M-H] -＝436.05。
实施例31
合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000149
具体合成路线如下：
步骤A：合成7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000150
取7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯(900毫克)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入氢氧化钠(360毫克，9毫摩尔)，室温条件下反应2小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，乙酸乙酯萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到1000毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤B：合成7-溴-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000151
取7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-甲酸粗品(291毫克，1毫摩尔)，1-氨基-N-(1-氰基环丙基)环己烷-1-羧酰胺盐酸盐(208毫克，1毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(570毫克，1.5毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.48毫升，3毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗1次(50毫升)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化得到200毫克7-溴-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺(收率：42％)。LC-MS:RT＝4.85min,[M+H] +＝479.3。
步骤C：合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000152
取7-溴-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺(190毫克，0.4毫摩尔)溶于干燥甲苯(20毫升)中，先加入N-甲基哌嗪(0.13毫升，1.2毫摩尔)，再加入叔丁醇钠(120毫克，1.2毫摩尔)，最后依次加入三二亚苄基丙酮二钯(18毫克，0.02毫摩尔)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(38毫克，0.08毫摩尔)，置换氮气后加热至110摄氏度反应2小时，LC-MS显示反应结束后，加入乙酸酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液(30毫升)分层有机相，乙酸乙酯萃取水相3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到60毫克N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐(收率：30％)。LC-MS:RT＝2.75min,[M+H] +＝500.67。
实施例32
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000153
具体合成路线如下：
步骤A：合成二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000154
室温条件下，将二苯并[b,d]呋喃(8.00克，47.6毫摩尔)溶解于100毫升无水二氯甲烷中，零摄氏度条件下逐滴加入氯磺酸(4.1毫升，61.9毫摩尔)，随后逐渐升温至室温，反应15分钟，析出大量白色固体。反应液过滤得滤饼，用二氯甲烷洗3次(20毫升×3)，抽干后得到白色固体(10.2克，收率：86.4％)直接用于下一步反应。
步骤B：合成二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯
Figure PCTCN2021072803-appb-000155
室温条件下，将二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸(500毫克，2.01毫摩尔)加入25毫升圆底烧瓶中，加入二氯亚砜(5毫升)，加入两滴N,N-二甲基甲酰胺，随后加热回流1小时，此时固体全部溶解，反应结束后蒸干溶剂得到白色粗产品，直接用于下一步反应。
步骤C：合成(S)-2-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000156
将二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯(200毫克，0.80毫摩尔)，L-氟代亮氨酸乙酯(142毫克，0.80毫摩尔)溶解于5毫升无水二氯甲烷中，零摄氏度下缓慢加入三乙胺(162毫克，1.60毫摩尔)，升至室温条件下反应2小时。TLC显示反应结束后，向反应液中加入50毫升水洗涤，二氯甲烷(50毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)纯化后得到(S)-2-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(280毫克，收率：85.8％)
步骤D：合成(S)-2-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000157
取(S)-2-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(280毫克，0.687毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(8毫升/2毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠(110毫克，2.75毫摩尔)，室温条件下反应2小时，TLC显示反应结束后，加入30毫升水稀释，2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯(30毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得到210毫克粗产物直接用于下一步反应。
步骤E：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000158
将(S)-2-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酸(210毫克，0.55毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(150毫克，0.83毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(315毫克，0.83毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，零摄氏度下加入N，N-二异丙基乙胺(142毫克，1.10毫摩尔)于零到室温条件下反应1小时。LC-MS监测显示反应结束后，反应液倒入50毫升水中，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰胺基)-4-氟-4-甲基戊酰胺(52毫克，收率：21.4％)。LC-MS:RT＝3.82min,[M+H] +＝442.09。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.08(s,1H),8.56(s,1H),8.25(d,J＝7.7Hz,1H),8.01-7.87(m,3H),7.78(d,J＝6.8Hz,1H),7.61(t,J＝6.4Hz,1H),7.48(t,J＝6.0Hz,1H),3.93-3.87(m,1H),2.00-1.87(m,1H),1.85-1.72(m,1H),1.43-1.21(m,8H),1.20-1.09(m,2H),0.66-0.58(m,1H),0.40-0.30(m,1H).
实施例33
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((7-(((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000159
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((7-(((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000160
将(S)-2-(((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(100毫克，0.2毫摩尔)溶于甲苯(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入N1，N1-二甲基乙烷-1,2-二胺(52毫克，0.6毫摩尔)，叔丁醇钠(56毫克，0.6毫摩尔)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(36毫克，0.08毫摩尔)，三(二亚苄基丙酮)二钯(16毫克，0.02毫摩尔)，置换氮气3遍。在微波条件下，130摄氏度搅拌3小时。将反应液过滤，滤液滴加到饱和食盐水(10毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，最后制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化。得到18毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((7-(((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：17.82％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
实施例34
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((7-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000161
具体合成路线如下：
步骤A：(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((7-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000162
将(S)-2-(((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(150毫克，0.3毫摩尔)溶于甲苯(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入N1，N1-二甲基乙烷-1,2-二胺(92毫克，0.9毫摩尔)，叔丁醇钠(86毫克，0.9毫摩尔)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(57毫克，0.12毫摩尔)，三(二亚苄基丙酮)二钯(27毫克，0.03毫摩尔)，置换氮气3遍。在微波条件下，130摄氏度搅拌3小时。将反应液过滤，滤液滴加到饱和食盐水(10毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，最后制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化。得到13毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((7-((2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：8.33％)。LC-MS：RT＝2.80min,[M+H] +＝300.05。
实施例35
合成(S)-2-((7-氯二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000163
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-氟-4’-氯-2'-羟基-[1,1'-联苯]
Figure PCTCN2021072803-appb-000164
室温条件下，将2-溴-5-氯苯酚(2.1克，10毫摩尔)，2-氟苯硼酸(1.4克，10毫摩尔)，磷酸钾(4.2克，20毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环45毫升，水15毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(732毫克，1毫摩尔)，置换氮气后常温反应12小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到1.8克产物2-氟-4'-氯-2'-羟基-[1,1'-联苯](收率：83％)。LC-MS:RT＝4.11min,[M-H] -＝220.95。
步骤B：合成7-氯二苯并[b,d]呋喃
Figure PCTCN2021072803-appb-000165
室温条件下，将2-氟-4’-氯-2'-羟基-[1,1'-联苯](1.8克，8毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺20毫升将底物全部溶解，加入碳酸钾(2.5克，16毫摩尔)，置换氮气后140摄氏度加热反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入饱和氯化钠溶液(50毫升)，静置后过滤，滤饼为粗产品，不需纯化直接用于下一步。
步骤C：合成7-氯-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000166
室温条件下，将3-氯二苯并[b,d]呋喃(408毫克，2毫摩尔)加入50毫升圆底烧瓶中，加入二氯甲烷8毫升将底物全部溶解，零摄氏度条件下，逐滴加入氯磺酸(0.17毫升，2.6毫摩尔)，随后逐渐升温至室温条件下，反应1小时，反应结束后有白色固体析出。用滤纸抽滤得到白色固体，用二氯甲烷洗3次(10毫升×3)，抽干后得到白色固体，该固体直接用于下一步反应。
步骤D：合成7-氯-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯
Figure PCTCN2021072803-appb-000167
室温条件下，将7-氯-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸加入25毫升圆底烧瓶中，加入二氯亚砜(5毫升)，加入两滴DMF，随后加热回流4小时，此时固体全部溶解，反应结束后蒸干溶剂得到白色粗产品，直接用于下一步反应。
步骤E：合成(7-氯二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000168
将7-氯-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯，L-亮氨酸甲酯盐酸盐(364毫克，2毫摩尔)加入50毫升烧瓶中，加入二氯甲烷10毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(1.1毫升，7.5毫摩尔)，室温条件下反应2小时。
反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到518毫克产物(7-氯二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基-L-亮氨酸甲酯。LC-MS:RT＝4.44min,[M-H] -＝407.98。
步骤F：合成(S)-2-((7-氯二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000169
取(S)-2-((7-氯二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酸乙酯(518毫克，1.3毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(300毫克，7.1毫摩尔)，室温条件下反应12小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到559毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝4.28min,[M-H] -＝394.02。
步骤G：合成(S)-2-((7-氯二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000170
将(S)-2-((7-氯二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酸粗品(559毫克，1.1毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(162毫克，1.4毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(646毫克，1.7毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.64毫升，4.0毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化后得到239毫克产物(S)-2-(((7-氯二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(收率：45％)。LC-MS:RT＝4.12min,[M+H] +＝482.11。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.87(s,1H),8.57(s,1H),8.31(d,J＝8.4Hz,1H),8.19(d,J＝8.8Hz,1H),8.00(d,J＝1.6Hz,1H),7.90(d,J＝1.2Hz,2H),7.55(dd,J＝8.4,1.6 Hz,1H),3.75-3.65(m,1H),1.65-1.51(m,1H),1.45-1.31(m,1H),1.30-1.15(m,4H),0.82(d,J＝6.8Hz,3H),0.77-0.67(m,4H),0.45-0.35(m,1H).
实施例36
合成(S)-7-溴-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-9H-咔唑-2-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000171
具体合成路线如下：
步骤A：合成2'-氨基-4'-溴-2-氟-[1,1'-联苯]-4-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000172
将5-溴-2-碘苯胺(1克，3.3毫摩尔)溶于二氧六环/水(10:1，20.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入(2-氟-4-(甲氧羰基)苯基)硼酸(553毫克，2.8毫摩尔)，磷酸钾(1.2克，5.5毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(205毫克，0.28毫摩尔)。氮气置换3遍。在100摄氏度条件下搅拌18小时。将反应液过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤(20毫升×3)，滤液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)。得到900毫克白色固体(2'-氨基-4'-溴-2-氟-[1,1'-联苯]-4-甲酸甲酯(收率：96.5％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤B：7-溴-9H-咔唑-2-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000173
将2'-氨基-4'-溴-2-氟-[1,1'-联苯]-4-甲酸甲酯(800毫克，2.4毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入碳酸铯(1.6克，4.8毫摩尔)。氮气置换3遍。在微波条件下，150摄氏度搅拌1小时。将反应液过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤(20毫升×3)，滤液加到饱和氯化铵溶液(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/5)。得到200毫克棕色油状物7-溴-9H-咔唑-2-甲酸甲酯(收率：26.7％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤C：7-溴-9H-咔唑-2-甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000174
将7-溴-9H-咔唑-2-甲酸甲酯(200毫克，0.66毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(2:1，9.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入一水合氢氧化锂(54毫克，1.3毫摩尔)。在室温条件下搅拌18小时。向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至3。混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到180毫克棕色油状物7-溴-9H-咔唑-2-甲酸(收率：94.7％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤D：(S)-7-溴-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-9H-咔唑-2-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000175
将7-溴-9H-咔唑-2-甲酸(90毫克，0.31毫摩尔)和(S)-2-氨基-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺盐酸盐(85毫克，0.37毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(178毫克，0.46毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(80毫克，0.62毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到79毫克白色固体(S)-7-溴-N-(1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)-9H-咔唑-2-甲酰胺三氟乙酸盐(收率：27.6％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)11.62(s,1H),8.99(s,1H),8.59(d,J＝6.4Hz,1H),8.20(d,J＝6.4Hz,1H),8.14(d,J＝6.8Hz,1H),8.06(s,1H),7.75(dd,J＝6.4,0.8Hz,1H),7.72(d,J＝1.2Hz,1H),7.34(dd,J＝6.8,1.6Hz,1H),4.52-4.43(m,1H),1.82-1.62(m,2H),1.55-1.45(m,3H),1.17-1.08(m,2H),0.93(d,J＝5.2Hz,3H),0.89(d,J＝5.2Hz,3H).
实施例37
合成(R)-2-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000176
具体合成路线如下：
步骤A：((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-D-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000177
将7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯(750毫克，2.2毫摩尔)溶于二氯甲烷(20.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入D-亮氨酸甲酯盐酸盐(441毫克，2.4毫摩尔)，三乙胺(557毫克，5.5毫摩尔)。氮气置换3遍。在室温条件下搅拌2小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)。得到530毫克无色油状物((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-D-亮氨酸甲酯(收率：53.7％)。LC-MS：RT＝3.22min，[M+H] +＝837.32。
步骤B：((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-D-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000178
将((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-D-亮氨酸甲酯(530毫克，1.1毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2:1:1，8.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化钠(88毫克，2.2毫摩尔)。在室温条件下搅拌3小时。向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至3。混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到480毫克白色油状物((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-D-亮氨酸(收率：93.4％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤C：(R)-2-((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000179
将((7-溴二苯并[b,d]呋喃-2-基)磺酰基)-D-亮氨酸(100毫克，0.21毫摩尔)和1-氨基环丙烷-1-腈盐酸盐(30毫克，0.25毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(122毫克，0.32毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(81毫克，0.63毫摩尔)，在室温下搅拌18个小时。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3 次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到78毫克白色固体(R)-2-(((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(收率：68.1％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.86(s,1H),8.57(s,1H),8.25(d,J＝6.8Hz,1H),8.17(s,1H),8.13(d,J＝1.2Hz,1H),7.93-7.88(m,2H),7.67(dd,J＝6.4,1.2Hz,1H),3.75-3.65(m,1H),1.62-1.53(m,1H),1.44-1.34(m,1H),1.30-1.12(m,4H),0.82(d,J＝5.2Hz,3H),0.76-0.67(m,4H),0.45-0.35(m,1H).
实施例38
合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-7-(甲磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000180
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2-羟基-4-羧酸甲酯)苯硼酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000181
室温条件下，4-溴-3-羟基苯甲酸甲酯(3.0克，12.9毫摩尔)，双联频哪醇硼酸酯(3.62克，14.3毫摩尔)，醋酸钾(3.18克，32.4毫摩尔)溶解于30毫升无水二氧六环中，加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(474毫克，1.29毫摩尔)，氮气置换3次，于90摄氏度下反应4小时。TLC显示反应结束后，反应液倒入200毫升水中，乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝5/2)分离纯化得(2-羟基-4-羧酸甲酯)苯硼酸(1.90克，收率：75.0％)。
步骤B：合成2'-氟-2-羟基-4'-(甲磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000182
室温条件下，1-溴-2-氟-4-甲磺酰基苯(648毫克，2.57毫摩尔)，(2-羟基-4-羧酸甲酯)苯硼酸(550毫克，2.82毫摩尔)，碳酸钠(544毫克，5.14毫摩尔)溶解于10毫升(二氧六环：水＝4：1)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(148毫克，0.128毫摩尔)，氮气置换3次，于80摄氏度下反应3小时。TLC显示反应结束后，反应液加水(200毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝2/1)分离纯化得2'-氟-2-羟基-4'-(甲磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸甲酯(320毫克，收率：40.9％)。
步骤C：合成7-(甲磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000183
室温条件下，将2'-氟-2-羟基-4'-(甲磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-羧酸甲酯(270毫克，0.888毫摩尔)溶解于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(245毫克，1.77毫摩尔)，氮气置换后于130摄氏度加热反应2小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入100毫升冰水中，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得7-(甲磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯粗品(300毫克)直接用于下一步。
步骤D：合成7-(甲磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000184
取7-(甲磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸甲酯粗品(300毫克，0.986毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(8毫升/2毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠(257毫克，3.90毫摩尔)，室温条件下反应10小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得到150毫克粗产物直接用于下一步反应。
步骤E：合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-7-(甲磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000185
取7-(甲磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酸(150毫克，0.517毫摩尔)，1-氨基-N-(1-异氰基环丙基)环己烷-1-甲酰胺(118毫克，0.568毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(294毫克，0.775毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(134毫克，1.03毫摩尔)，室温条件下反应16小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(120毫升)稀释，用乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-7-(甲磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺(60.0毫克，收率：24.19％)。LC-MS:RT＝3.58min,[M+H] +＝480.11。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.53-8.49(m,2H),8.37(d,J＝6.4Hz,1H),8.34(d,J＝4.4Hz,1H),8.17(s,1H),8.01(dd,J＝6.4,1.2Hz,1H),7.97(dd,J＝6.4,0.8Hz,1H),3.34(s,3H),2.09-2.00(m,1H),1.86-1.76(m,1H),1.62-1.48(m,5H),1.47-1.41(m,2H),1.34-1.28(m,1H),1.09-1.02(m,1H).
实施例39
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000186
具体合成路线如下：
步骤A：合成2'-氟-4'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯-2-醇
Figure PCTCN2021072803-appb-000187
室温条件下，1-溴-2-氟-4-(甲基磺酰基)苯(800毫克，3.16毫摩尔)，2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯酚(765毫克，3.47毫摩尔)，碳酸钠(670毫克，6.32毫摩尔)溶解于10毫升(二氧六环：水＝4：1)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(182毫克，0.158毫摩尔)，氮气置换3次，于80摄氏度下反应2小时。TLC显示反应结束后，反应液加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品(800毫克)直接用于下一步。
步骤B：合成3-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃
Figure PCTCN2021072803-appb-000188
室温条件下，将2'-氟-4'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-2-醇(646毫克，2.42毫摩尔)溶解于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(670毫克，4.84毫摩尔)，氮气置换后于130摄氏度加热反应2小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入50毫升冰水中，乙酸乙酯(50毫升)分液，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝2/1)纯化后得到3-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃(512毫克，收率：86.1％)。
步骤C：合成7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯
Figure PCTCN2021072803-appb-000189
将3-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃(100毫克，0.406毫摩尔)溶解于3毫升无水二氯甲烷中，零摄氏度条件下逐滴加入氯磺酸(142毫克，1.22毫摩尔)，于该温度下反应30分钟，析出固体再消失。TLC监测显示反应完全。反应液加入 50毫升二氯甲烷稀释后倒入200毫升冰水中，分液，有机相干燥，旋干得7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯粗品(114毫克)直接用于下一步反应。
步骤D：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000190
将7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯(114毫克，0.330毫摩尔)，(S)-2-氨基-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺盐酸盐(116毫克，0.397毫摩尔)溶解于5毫升无水二氯甲烷中，缓慢加入三乙胺(67.0毫克，0.66毫摩尔)于室温条件下反应1小时。LC-MS监测反应结束后，反应液倒入50毫升水中，用二氯甲烷(20毫升×2)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺(33.0毫克，收率：20.4％)。LC-MS:RT＝3.59min,[M+H] +＝502.01。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.87(s,1H),8.71(s,1H),8.58(d,J＝6.4Hz,1H),8.36(d,J＝1.2Hz,1H),8.24(d,J＝7.2Hz,1H),8.03(dd,J＝6.4,1.2Hz,1H),8.00(s,2H),3.76-3.67(m,1H),3.35(s,3H),1.62-1.55(m,1H),1.45-1.35(m,1H),1.30-1.15(m,3H),0.83(d,J＝5.2Hz,1H),0.75-0.70(m,4H),0.52-0.43(m,1H).
实施例40
合成(S)-2-((7-氟二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000191
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-氟-4'-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]
Figure PCTCN2021072803-appb-000192
室温条件下，将2-溴-5-氯苯酚(1.9克，10毫摩尔)，2-氟苯硼酸(1.4克，10毫摩尔)，磷酸钾(4.2克，20毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环45毫升，水15毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(732毫克，1毫摩尔)，置换氮气后常温反应12小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到1.7克产物2-氟-4'-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯](收率：84％)。LC-MS:RT＝3.95min,[M-H] -＝205.02。
步骤B：合成7-氟二苯并[b,d]呋喃
Figure PCTCN2021072803-appb-000193
室温条件下，将2-氟-4’-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯](1.7克，8毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺20毫升将底物全部溶解，加入碳酸钾(2.5克，16毫摩尔)，置换氮气后140摄氏度加热反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入饱和氯化钠溶液(50毫升)，静置后过滤，滤饼为粗产品，不需纯化直接用于下一步。
步骤C：合成7-氟-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000194
室温条件下，将3-氟二苯并[b,d]呋喃(1.3克，7毫摩尔)加入50毫升圆底烧瓶中，加入二氯甲烷8毫升将底物全部溶解，零摄氏度条件下，逐滴加入氯磺酸(0.6毫升，9毫摩尔)，随后逐渐升温至室温条件下，反应1小时，反应结束 后有白色固体析出。用滤纸抽滤得到白色固体，用二氯甲烷洗3次(10毫升×3)，抽干后得到白色固体，该固体直接用于下一步反应。
步骤D：合成7-氟-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯
Figure PCTCN2021072803-appb-000195
室温条件下，将7-氟-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酸加入25毫升圆底烧瓶中，加入二氯亚砜(5毫升)，加入两滴DMF，随后加热回流4小时，此时固体全部溶解，反应结束后蒸干溶剂得到白色粗产品，直接用于下一步反应。
步骤E：合成7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-基磺酰基-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000196
将7-氟-二苯并[b,d]呋喃-2-磺酰氯(1.34克，4.7毫摩尔)，L-亮氨酸甲酯盐酸盐(847毫克，4.7毫摩尔)加入50毫升烧瓶中，加入二氯甲烷10毫升将底物溶解，最后缓慢加入三乙胺(1.4毫升，9.3毫摩尔)，室温条件下反应2小时。
反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释，并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到产物7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-基磺酰基-L-亮氨酸甲酯。LC-MS:RT＝4.27min,[M-H] -＝392.07。
步骤F：合成(S)-2-(((7-氟二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000197
取(S)-2-(((7-氟二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酸乙酯溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(300毫克，7.1毫摩尔)，室温条件下反应12小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到501毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝4.09min,[M-H] -＝378.02。
步骤G：合成(S)-2-((7-氟二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000198
将(S)-2-((7-氟二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-4-甲基戊酸粗品(501毫克，1.1毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(162毫克，1.4毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(646毫克，1.7毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.64毫升，4.0毫摩尔)，室温条件下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化后得到154毫克产物(S)-2-((7-氟二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(收率：32％)。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.86(s,1H),8.55(s,1H),8.35-8.28(m,1H),8.16(d,J＝4.8Hz,1H),7.92-7.82(m,2H),7.82-7.74(m,1H),7.36(dd,J＝7.2,2.0Hz,1H),3.75-3.65(m,1H),1.62-1.51(m,1H),1.44-1.34(m,1H),1.30-1.15(m,3H),0.82(d,J＝5.2Hz,3H),0.74-0.70(m,4H),0.45-0.35(m,1H).
实施例41
合成(R)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000199
具体合成路线如下：
步骤A：(R)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000200
将(R)-2-(((7-溴二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(50毫克，98微摩尔)溶于甲苯(5.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入1-甲基哌嗪(12毫克，117微摩尔)，叔丁醇钠(19毫克，196微摩尔)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(9毫克，19微摩尔)，三(二亚苄基丙酮)二钯(9毫克，19微摩尔)，置换氮气3遍。在微波条件下，130摄氏度搅拌3小时。将反应液过滤，滤液滴加到饱和食盐水(10毫升)中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3次)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(10毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩，最后制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化。得到6毫克白色固体(R)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-2-磺酰胺基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：9.5％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
实施例42
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000201
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇
Figure PCTCN2021072803-appb-000202
将4-溴-3-氟苯甲醛(5克，24.6毫摩尔)溶于四氢呋喃(30毫升)中，加入三氟甲基三甲基硅烷(4.7毫升，32毫摩尔)，再逐滴加入1.0N的四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(2.0毫克，2毫摩尔)，室温条件下反应2小时，TLC显示反应结束后，加入2N稀盐酸溶液(5毫升)淬灭反应液，加入乙酸乙酯稀释反应液(30毫升)并转移到分液漏斗当中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相转移到锥形瓶后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到透明油状粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到5.46克1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇(收率：81％)。。
步骤B：合成1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000203
取1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇(5.46克，20毫摩尔)溶于二氯甲烷40毫升中，加入吡啶(2.42毫升，30毫摩尔)，零摄氏度条件下，逐滴加入三氟甲磺酸酐(4.4毫升，26毫摩尔)，逐渐升至室温条件下反应1小时。TLC显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和氯化铵溶液洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝30/1)纯化 得到7.7克1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(收率：95％)。
步骤C：合成(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000204
取1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(2克，4.94毫摩尔)溶于干燥乙酸乙酯(20毫升)中，先加入L-亮氨酸甲酯盐酸盐(1.35克，7.5毫摩尔)，再加入碳酸钾粉末(2.07克，15毫摩尔)，置换氮气后加热至70摄氏度反应12小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝30/1)纯化得到850毫克(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：43％)。LC-MS:RT＝2.32min,[M+H] +＝400.03。
步骤D：(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000205
将(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(450毫克，1.1毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1，55.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯酚(294毫克，1.3毫摩尔)，碳酸钾(303毫克，2.2毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(80毫克，110微摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌2小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(150毫升)中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(50毫升×3次)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(30毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)。得到220毫克无色油状物(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：47.3％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤E：(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000206
将(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(200毫克，0.48毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入碳酸钾(133毫克，0.96毫摩尔)。在微波条件下，150摄氏度搅拌1小时。
将反应液滴加到饱和氯化铵(30毫升)溶液中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3次)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。得到180毫克无色油状物(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：94.5％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤F：(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000207
将(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(180毫克，0.45毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2:1:1，8.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化钠(36毫克，0.91毫摩尔)。在室温条件下搅拌3小时。
向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至3。混合液用乙酸乙酯萃取3次(30毫升×3次)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到160毫克白色油状物(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(收率：92.8％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤G：(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000208
将(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(160毫克，0.41毫摩尔)和1-氨基环丙烷腈盐酸盐(59毫克，0.50毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(8.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(240毫克，0.63毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(163毫克，1.8毫摩尔)，在室温下搅拌4个小时。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3次)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到40毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：21.3％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05和30毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((R)-1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：16.0％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.72(s,1H),8.16(d,J＝6.4Hz,1H),8.13(d,J＝6.4Hz,1H),7.77(s,1H),7.73(d,J＝6.4Hz,1H),7.59-7.51(m,1H),7.46-7.38(m,2H),4.49-4.40(m,1H),3.28-3.20(m,1H),3.06-2.98(m,1H),1.79-1.68(m,1H),1.48-1.38(m,1H),1.35-1.17(m,3H),0.89(d,J＝4.0Hz,3H),0.88(d,J＝4.0Hz,3H),0.82-0.72(m,1H)，0.55-0.45(m,1H).
实施例43
合成N-(1-氰基环丙基)-1-((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-羧酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000209
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000210
将8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-磺酰氯(1.0克，3.03毫摩尔)，1-氨基环己烷-1-甲酸甲酯(571毫克，3.63毫摩尔)溶解于15毫升无水二氯甲烷中，缓慢加入三乙胺(612毫克，6.06毫摩尔)于室温条件下反应2小时。TLC监测反应结束后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用二氯甲烷(50毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷：乙酸乙酯＝3:1)分离纯化得1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸甲酯(624毫克，收率：45.8％)。
步骤B：合成1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000211
取1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸甲酯(624毫克，1.38毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(8毫升/6毫升/2毫升)混合溶液中，加入氢氧化钾(155毫克，2.76毫摩尔)于70摄氏度下反应16小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得到600毫克粗产物直接用于下一步反应。
步骤C：合成1-((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000212
取1-((8-溴二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸(250毫克，0.572毫摩尔)，N-甲基哌嗪(86.0毫克，0.858毫摩尔)，叔丁醇钠(110毫克，1.14毫摩尔)溶解于干燥甲苯(10毫升)中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(26.0毫克，0.028毫摩尔)，1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(17.0毫克，0.028毫摩尔)，氮气置换3次后加热至110摄氏度反应过夜(16个小时)。LC-MS监测显示反应完全后，反应液直接旋干的残留物先用20毫升的二氯甲烷/乙醇＝3/1混合液溶解，加水(100毫升)分液。取水相用2N稀盐酸中和至pH为5左右，再用二氯甲烷/异丙醇＝3/1混合液(50毫升×4)萃取，合并有机相,干燥，旋干得1-((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸(175毫克，收率：66.70％)。
步骤D：合成N-(1-氰基环丙基)-1-(((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000213
取1-((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-甲酸(120毫克，0.260毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(47.0毫克，0.390毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(198毫克，0.520毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(84.0毫克，0.650毫摩尔)于60摄氏度下反应4小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(200毫升)稀释，用乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得N-(1-氰基环丙基)-1-(((8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃)-3-磺酰胺基)环己烷-1-甲酰胺三氟乙酸盐(36.0毫克，收率：25.8％)。LC-MS:RT＝2.71min,[M+H] +＝536.23。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.75(s,1H),8.56-8.39(m,2H),8.13(d,J＝6.8Hz,1H),7.88(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),7.80(d,J＝7.2Hz,1H),7.65(s,1H),7.37(d,J＝1.6Hz,1H),7.18(dd,J＝7.2,1.6Hz,1H),4.05(d,J＝10.4Hz,2H),3.56(d,J＝8.4Hz,2H),3.23-3.14(m,2H),3.14-3.04(m,2H),2.88(s,3H),1.77-1.62(m,4H),1.48-1.35(m,2H),1.29-1.19(m,6H),1.05-0.98(m,2H).
实施例44
合成7-溴-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-9H-咔唑-2-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000214
具体合成路线如下：
步骤A：7-溴-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-9H-咔唑-2-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000215
将7-溴-9H-咔唑-2-甲酸(93毫克，0.32毫摩尔)和1-氨基-N-(1-氰基环丙基)环己烷-1-羧酰胺(85毫克，0.38毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(182毫克，0.48毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(82毫克，0.64毫摩尔)，在室温下搅拌4个小时。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3次)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到11毫克白色固体7-溴-N-(1-(((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)环己基)-9H-咔唑-2-甲酰胺三氟乙酸盐(收率：7.1％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)11.57(s,1H),8.46(s,1H),8.19(d,J＝6.4Hz,1H),8.14(d,J＝6.8Hz,0H),8.00(s,1H),7.96(s,1H),7.78-7.68(m,2H),7.33(dd,J＝6.8,1.6Hz,1H),2.08-2.01 (m,1H),1.84-1.75(m,1H),1.60-1.50(m,5H),1.47-1.40(m,2H),1.38-1.24(m,1H),1.13-1.02(m,1H).
实施例45
合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)-4,4-二氟环己基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000216
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺基)-4,4-二氟环己烷-1-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000217
取7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酸(200毫克，0.690毫摩尔)，1-氨基-4,4-二氟环己烷-1-甲酸甲酯(147毫克，0.760毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(393毫克，1.04毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(178毫克，1.38毫摩尔)于室温下反应4小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(200毫升)稀释，用乙酸乙酯萃取2次(50毫升×2)，合并有机相,干燥，旋干得粗品柱层析(正己烷：乙酸乙酯＝2:1)分离纯化得1-(7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺基)-4,4-二氟环己烷-1-甲酸甲酯(310毫克，收率：96.7％)。
步骤B：合成1-(7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酰胺基)-4,4-二氟环己烷-1-甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000218
取1-(7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺基)-4,4-二氟环己烷-1-甲酸甲酯(310毫克，0.668毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(8毫升/2毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠(53.0毫克，1.33毫摩尔)于室温条件下反应4小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯萃取3次(50毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干得到250毫克粗产物直接用于下一步反应。
步骤C：合成4,4-二氟-1-(7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺基)环己烷-1-甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000219
取1-(7-溴二苯并[b,d]呋喃-3-羧酰胺基)-4,4-二氟环己烷-1-甲酸(250毫克，0.551毫摩尔)，N-甲基哌嗪(82.0毫克，0.820毫摩尔)，叔丁醇钠(106毫克，1.11毫摩尔)溶解于干燥甲苯(20毫升)中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(25.0毫克，0.0275毫摩尔)，1,1'-联萘-2,2'-双二苯膦(18.0毫克，0.028毫摩尔)，氮气置换3次后加热至110摄氏度反应过夜(16个小时)。LC-MS监测显示反应完全后，反应液直接旋干的残留物先用20毫升的二氯甲烷/乙醇＝3/1混合液溶解，加水(200毫升)分液。取水相用2N稀盐酸调节至pH为6左右，再用二氯甲烷/异丙醇＝3/1混合液萃取5次(50毫升×5)，合并有机相,干燥，旋干得4,4-二氟-1-(7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺基)环己烷-1-甲酸粗品(130毫克)。
步骤D：合成N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)-4,4-二氟环己基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000220
将4,4-二氟-1-(7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺基)环己烷-1-甲酸粗品(79.0毫克，0.414毫摩尔)溶解于5毫升吡啶中搅拌反应5分钟后加入1-氨基-环丙基氰盐酸盐(49.0毫克，0.414毫摩尔)，于60摄氏度下反应16小时。LC-MS监测显示基本反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用二氯甲烷萃取2次(50毫升×2)，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得N-(1-((1-氰基环丙基)氨基甲酰基)-4,4-二氟环己基)-7-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-甲酰胺三氟乙酸盐(11.0毫克，收率：4.95％)。LC-MS:RT＝1.68min,[M+H] +＝536.21。
实施例46
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000221
具体合成路线如下：
步骤A：合成(1-(2,4'-二氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000222
室温条件下，(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(400毫克，1.00毫摩尔)，4-氟-2-羟基苯硼酸(187毫克，1.21毫摩尔)，碳酸钠(212毫克，2.00毫摩尔)溶解于10毫升(二氧六环：水＝4：1)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(58.5毫克，0.05毫摩尔)，氮气置换3次，于85摄氏度下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，反应液加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯萃取2次(50毫升×2)，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝2/1)分离纯化得1-(2,4'-二氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(120毫克，收率：27.8％)。
步骤B：合成(2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000223
室温条件下，将1-(2,4'-二氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(120毫克，0.278毫摩尔)溶解于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(115毫克，0.835毫摩尔)，氮气置换后于130摄氏度加热反应3小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入50毫升冰水中，乙酸乙酯萃取2次(30毫升×2)，合并有机相，干燥，旋干得(2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯粗品(100毫克)直接用于下一步。
步骤C：合成(2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000224
取2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯粗品(100毫克，0.243毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(5毫 升/1毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠(30.0毫克，0.729毫摩尔)于室温条件下反应3小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯萃取3次(25毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝1/1)分离纯化得2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(80.0毫克，收率：82.9％)。
步骤D：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000225
取2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(80.0毫克，0.201毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(28.6毫克，0.242毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(115毫克，0.302毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(52.0毫克，0.402毫摩尔)于室温下反应2小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(50毫升)稀释，用乙酸乙酯萃取3次(30毫升×3)，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得10.0毫克(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(12.0毫克)和(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((R)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：10.8％)。LC-MS:RT＝2.20min,[M+H] +＝462.16。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.72(s,1H),8.20(d,J＝5.6Hz,1H),8.18(d,J＝5.6Hz,1H),8.12(d,J＝8.0Hz,1H),7.78(s,1H),7.71(dd,J＝9.6,2.4Hz,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,1H),7.30(td,J＝9.6,2.4Hz,1H),4.51-4.39(m,1H),3.28-3.18(m,1H),3.07-2.98(m,1H),2.04-1.95(m,1H),1.79-1.68(m,1H),1.48-1.37(m,1H),1.35-1.17(m,2H),0.89(d,J＝3.6Hz,3H),0.87(d,J＝3.6Hz,3H),0.82-0.72(m,1H)，0.55-0.45(m,1H).
实施例47
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000226
具体合成路线如下：
步骤A：合成(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000227
取1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(405毫克，1毫摩尔)溶于干燥乙酸乙酯(5毫升)中，先加入(S)-2-氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(177毫克，1.0毫摩尔)，再加入碳酸钾粉末(269毫克，2毫摩尔)，置换氮气后加热至60摄氏度反应12小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到250毫克(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：58％)。LC-MS:RT＝2.25min,[M+H] +＝432.02。
步骤B：合成(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基))乙基)氨基)戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000228
将(2S)-2-(((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(230毫克，0.55毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1，11.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯酚(181毫克，0.82 毫摩尔)，碳酸钾(152毫克，1.1毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(40毫克，55微摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌2小时。将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)。得到210毫克无色油状物(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基))乙基)氨基)戊酸乙酯(收率：88.6％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤C：合成(2S)-2-((1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000229
将(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基))乙基)氨基)戊酸乙酯(190毫克，0.44毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入碳酸钾(121毫克，0.88毫摩尔)。在微波条件下，150摄氏度搅拌1小时。将反应液滴加到饱和氯化铵(30毫升)溶液中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。得到180毫克棕色油状物(2S)-2-(((1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(收率：99.1％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤D：合成(2S)-2-(((1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000230
将(2S)-2-(((1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(160毫克，0.38毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2:1:1，8.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化钠(30毫克，0.77毫摩尔)。在室温条件下搅拌3小时。向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液调pH至3。混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到130毫克白色固体(2S)-2-(((1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(收率：87.0％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤E：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000231
将(2S)-2-(((1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(120毫克，0.30毫摩尔)和1-氨基环丙烷-1-腈盐酸盐(43毫克，0.36毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(8.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(171毫克，0.45毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(77毫克，0.6毫摩尔)，在室温下搅拌2小时。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到45毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：32.3％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05和48毫克白色固体(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：34.4％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
实施例48
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基])氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000232
具体合成路线如下：
步骤A：合成(1-(5'-氟-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000233
室温条件下，将2-羟基-5-氟苯硼酸(377毫克，0.88毫摩尔)，(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(400毫克，1毫摩尔)，磷酸钾(424毫克，2毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环20毫升，水4毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(241毫克，0.33毫摩尔)，置换氮气后加热至80摄氏度反应4小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到产物(1-(5'-氟-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯。LC-MS:RT＝2.20min,[M+H] +＝432.14。
步骤B：合成(1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000234
室温条件下，将((1-(5'-氟-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-亮氨酸甲酯(377毫克，0.88毫摩尔)加入微波反应管中，加入15毫升N,N-二甲基甲酰胺中将底物全部溶解，再加入碳酸钾(400毫克，2.9毫摩尔)，微波加热至140摄氏度反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到109毫克产物(1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：30％)。LC-MS:RT＝2.37min,[M+H] +＝412.15。
步骤C：合成(1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000235
取(1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(109毫克，0.26毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(34毫克，0.86毫摩尔)，室温条件下反应4小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到216毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.22min,[M-H] -＝396.07。
步骤D：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000236
取(1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(粗品216毫克，0.88毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(125毫克，1.06毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(502毫克，1.32毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.64毫升，3.44毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到22毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：5.4％)。LC-MS:RT＝2.20min,[M+H] +＝462.15。
实施例49
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000237
具体合成路线如下：
步骤A：合成(1-(4'-氟-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-5-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000238
室温条件下，将2-羟基-4-氟苯硼酸(179毫克，0.5毫摩尔)，(1-(3-溴-4-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(250毫克，0.6毫摩尔)，磷酸钾(424毫克，2毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环20毫升，水4毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(241毫克，0.33毫摩尔)，置换氮气后加热至80摄氏度反应4小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到110毫克产物(1-(4'-氟-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-5-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(产率52％)。LC-MS:RT＝2.22min,[M+H] +＝430.12。
步骤B：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000239
室温条件下，将(1-(4'-氟-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-5-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(110毫克，0.26毫摩尔)加入微波反应管中，加入15毫升N,N-二甲基甲酰胺中将底物全部溶解，再加入碳酸钾(200毫克，1.5毫摩尔)，微波加热至140摄氏度反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到72毫克产物((S)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：67％)。LC-MS:RT＝2.36min,[M+H]+＝412.09。
步骤C：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000240
取((S)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(72毫克，0.17毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(34毫克，0.86毫摩尔)，室温条件下反应4小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.22min,[M-H] -＝396.08。
步骤D：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-基)乙基])氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000241
取(1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(粗品，0.17毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(25毫克，0.21毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(99毫克，0.26毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.16毫升，0.86毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS 显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到16毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(7-氟二苯并[b,d]呋喃-2-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：20.5％)。LC-MS:RT＝2.20min,[M+H] +＝462.19。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.75(s,1H),8.24-8.11(m,2H),7.77-7.67(m,2H),7.53(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),7.35-7.27(m,1H),4.43-4.36(m,1H),3.31-3.22(m,1H),2.92-2.85(m,1H),1.79-1.70(m,1H),1.48-1.38(m,1H),1.35-1.20(m,3H),0.90(d,J＝3.2Hz),0.88(d,J＝3.2Hz),0.85-0.76(m,1H),0.62-0.54(m,1H).
实施例50
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-氰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000242
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇
Figure PCTCN2021072803-appb-000243
将4-溴-3-氟苯甲醛(5克，24.6毫摩尔)溶于四氢呋喃(30毫升)中，加入三氟甲基三甲基硅烷(4.7毫升，32毫摩尔)，再逐滴加入1.0N的四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(2.0毫克，2毫摩尔)，室温条件下反应2小时，TLC显示反应结束后，加入2N稀盐酸溶液(5毫升)淬灭反应液，加入乙酸乙酯稀释反应液(30毫升)并转移到分液漏斗当中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相转移到锥形瓶后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到透明油状粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到5.46克1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇(收率：81％)。
步骤B：合成1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000244
取1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇(5.46克，20毫摩尔)溶于二氯甲烷40毫升中，加入吡啶(2.42毫升，30毫摩尔)，零摄氏度条件下，逐滴加入三氟甲磺酸酐(4.4毫升，26毫摩尔)，逐渐升至室温条件下反应1小时。TLC显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和氯化铵溶液洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝30/1)纯化得到7.7克1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(收率：95％)。
步骤C：合成(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000245
取1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(2克，4.94毫摩尔)溶于干燥乙酸乙酯(20毫升)中，先加入(L)-亮氨酸甲酯盐酸盐(1.35克，7.5毫摩尔)，再加入碳酸钾粉末(2.07克，15毫摩尔)，置换氮气后加热至70摄氏度反应12小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝30/1)纯化得到850毫克(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：43％)。LC-MS:RT＝2.32min,[M+H] +＝400.03。
步骤D：合成3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苄腈
Figure PCTCN2021072803-appb-000246
取3-溴-4-羟基苄腈(1.98克，10毫摩尔)溶于40毫升N,N-二甲基甲酰胺中，零摄氏度条件下逐渐加入氢化钠固体(520毫克，13毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后，逐滴加入溴甲基甲基醚(1.05毫升，13毫摩尔)，随后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到2.1克3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苄腈(收率：87％)。
步骤E：合成4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼环-2-基)苄腈
Figure PCTCN2021072803-appb-000247
室温条件下，将3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苄腈(800毫克，3.3毫摩尔)，联硼酸频那醇酯(1.26克，5毫摩尔)，醋酸钾(650毫克，6.6毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环20毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(241毫克，0.33毫摩尔)，置换氮气后加热至100摄氏度反应4小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到540毫克产物4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼环-2-基)苄腈(收率：56％)。
步骤F：合成(1-(5'-氰基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000248
室温条件下，将4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼环-2-基)苄腈(400毫克，1.3毫摩尔)，(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(400毫克，1毫摩尔)，磷酸钾(424毫克，2毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环20毫升，水4毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(241毫克，0.33毫摩尔)，置换氮气后加热至80摄氏度反应4小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到332毫克产物(1-(5'-氰基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：69％)。LC-MS:RT＝2.25min,[M+H] +＝483.16。
步骤G：合成(1-(5'-氰基-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000249
室温条件下，将(1-(5'-氰基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(290毫克，0.6毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环10毫升将底物全部溶解，再加入4N的盐酸二氧六环溶液10毫升室温度反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，该产品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.14min,[M+H] +＝439.15。
步骤H：合成(1-(8-氰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000250
室温条件下，将((1-(5'-氰基-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(粗品350毫克)加入微波反应管中，加入15毫升N,N-二甲基甲酰胺中将底物全部溶解，再加入碳酸钾(400毫克，2.9毫摩尔)，微波加热至140摄氏度反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到120毫克产物(1-(8-氰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：49％)。LC-MS:RT＝2.29min,[M+H] +＝419.12。
步骤I：合成(1-(8-氰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000251
取(1-(8-氰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(120毫克，0.29毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(34毫克，0.86毫摩尔)，室温条件下反应4小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到120毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤J：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-氰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000252
取(1-(8-氰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(120毫克，0.36毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(51毫克，0.43毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(163毫克，0.43毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.14毫升，0.86毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次有机相(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)得到42毫克(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-氰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：31％)。LC-MS:RT＝2.13min,[M+H] +＝469.14。
实施例51
合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((2,2,2-三氟-1-(7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000253
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000254
取4-溴-3-羟基苯甲酸甲酯(231毫克，1毫摩尔)溶于2毫升N,N-二甲基甲酰胺中，零摄氏度条件下逐渐加入氢化钠固体(60毫克，1.5毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后，逐滴加入溴甲基甲基醚(0.12毫升，1.5毫摩尔)，随后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸乙酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，粗品无需纯化直接投下一步反应。
步骤B：合成(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)甲醇
Figure PCTCN2021072803-appb-000255
取4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯甲酸甲酯(5.5克，20毫摩尔)溶于60毫升四氢呋喃中，零摄氏度条件下逐渐加入1.0N的氢化铝锂的四氢呋喃溶液(24毫升，24毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，逐滴加入2毫升水淬灭反应液，待固体析出后加入无水硫酸镁干燥，过滤分离有机相后用浓缩得到粗产品，粗品无需纯化直接投下一步反应。
步骤C：合成4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯甲醛
Figure PCTCN2021072803-appb-000256
取(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)甲醇(14.82克，60毫摩尔)溶于100毫升二氯甲烷中，零摄氏度条件下逐渐加入戴斯马丁试剂(25.4克，60毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，先过滤出白色固体，滤液用饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，滤液分离后用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到12.7克产物合成4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯甲醛(收率：86％)。
步骤D：合成1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇
Figure PCTCN2021072803-appb-000257
将4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯甲醛(6克，24.4毫摩尔)溶于四氢呋喃(48毫升)中，再加入三氟甲基三甲基硅烷(4.3毫升，29毫摩尔)，逐滴加入1.0N的四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(2.0毫克，2毫摩尔)，室温条件下反应2小时，TLC显示反应结束后，加入2N稀盐酸溶液(5毫升)淬灭反应液，加入乙酸乙酯稀释反应液(50毫升)并转移到分液漏斗当中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(50毫升×3)，有机相转移到锥形瓶后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到透明油状粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到7.6克1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇(收率：99％)。
步骤E：合成1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000258
取1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇(7.6克，24.4毫摩尔)溶于二氯甲烷100毫升中，加入吡啶(3.9毫升，48.8毫摩尔)，零摄氏度条件下，逐滴加入三氟甲磺酸酐(6.1毫升，36.6毫摩尔)，逐渐升至室温条件下反应1小时。TLC显示反应结束后，向反应液中加入二氯甲烷(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和氯化铵溶液洗有机相3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到6克1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(收率：55％)。
步骤F：合成(1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000259
取1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(6克，13.4毫摩尔)溶于干燥乙酸乙酯(50毫升)中，先加入L-亮氨酸甲酯盐酸盐(3.62克，20毫摩尔)，再加入碳酸钾粉末(5.5克，40毫摩尔)，置换氮气后加热至70摄氏度反应12小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸乙酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶 液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到2.4克1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：41％)。LC-MS:RT＝2.21min,[M+H] +＝441.95。
步骤G：(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-4'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000260
将(1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(150毫克，0.33毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1，11.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入(2-氟-4-(甲基磺酰基)苯基)硼酸(88毫克，0.40毫摩尔)，碳酸钾(93毫克，0.68毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(24毫克，34微摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌2小时。将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3次)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)。得到120毫克白色固体(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-4'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：66.0％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤H：(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-4'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000261
将(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-4'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(120毫克，0.22毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(3.0毫升)中，再加入4N的盐酸二氧六环溶液(3.0毫升)，室温反应2小时。
将反应液减压浓缩。得到90毫克无色油状物(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-4'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：81.7％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤I：(2,2,2-三氟-1-(7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000262
将(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-4'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(90毫克，0.18毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入碳酸钾(50毫克，0.36毫摩尔)。在微波条件下，150摄氏度搅拌1小时。将反应液滴加到饱和氯化铵(30毫升)溶液中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。得到78毫克棕色油状物(2,2,2-三氟-1-(7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：90.3％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤J：(2,2,2-三氟-1-(7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000263
将(2,2,2-三氟-1-(7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(78毫克，0.16毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2:1:1，8.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化钠(13毫克，0.33毫摩尔)。在室温条件下搅拌3小时。向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至3。混合液用乙酸乙酯(30毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到85毫克无色油状物(2,2,2-三氟-1-(7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(收率：87.0％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤K：(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((2,2,2-三氟-1-(7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000264
将(2,2,2-三氟-1-(7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(65毫克，0.17毫摩尔)和1-氨基环丙烷-1-腈盐酸盐(24毫克，0.20毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(8.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(97毫克，0.25毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(44毫克，0.34毫摩尔)，在室温下搅拌2个小时。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到27毫克白色固体(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((2,2,2-三氟-1-(7-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：36.5％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05.
实施例52
合成(S)-2-(((S)-1-(8-乙酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000265
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)乙醇
Figure PCTCN2021072803-appb-000266
将3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯甲醛(2.70克，11.1毫摩尔)溶解于30毫升四氢呋喃中，零摄氏度下加入1M的甲基溴化镁(13.3毫升，13.3毫摩尔)，于零到室温下反应2小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入250毫升冰水中，乙酸乙酯(100毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得1-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)乙醇(2.10克，收率：72.7％)。
步骤B：合成1-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酮
Figure PCTCN2021072803-appb-000267
将1-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)乙醇(2.10克，8.07毫摩尔)溶解于20毫升无水二氯甲烷中，零摄氏度下加入戴斯-马丁氧化剂(5.13克，12.1毫摩尔)，于零到室温下反应1小时。TLC显示反应完全后，反应液过滤，滤液倒入200毫升碳酸氢钠溶液中，乙酸乙酯(100毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝5/1)分离纯化得1-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酮(1.90克，收率：91.7％)。
步骤C：合成1-(4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)乙酮
Figure PCTCN2021072803-appb-000268
室温条件下，将1-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)乙酮(200毫克，0.772毫摩尔)，双联频哪醇硼酸酯(294毫克，1.16毫摩尔)，醋酸钾(151毫克，1.54毫摩尔)溶解于15毫升无水二氧六环中，加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(56.4毫克，0.0772毫摩尔)，氮气置换3次，于90摄氏度下反应4小时。LC-MS监测显示反应完全后。反应液倒入100毫升水中，乙酸乙酯(30毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得1-(4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)乙酮(158毫克，收率：66.1％)。
步骤D：合成(2S)-2-(((1-(5'-乙酰基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000269
将1-(4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)乙酮(158毫克，0.514毫摩尔)，(2S)-2-(((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(200毫克，0.464毫摩尔)，碳酸钠(100毫克，0.928毫摩尔)溶解于6毫升(二氧六环：水＝5：1)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(53.2毫克，0.0464毫摩尔)，氮气置换3次，于80摄氏度下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，反应液加水
(200毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝2/1)分离纯化得(2S)-2-(((1-(5'-乙酰基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(230毫克，收率：92.7％)。
步骤E：合成(2S)-2-(((1-(5'-乙酰基-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000270
将(2S)-2-(((1-(5'-乙酰基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(230毫克，0.433毫摩尔)溶解于5毫升4N的盐酸二氧六环中，室温下反应1小时。TLC显示反应结束后，反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液(50毫升)中，乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝1/1)分离纯化得(2S)-2-(((1-(5'-乙酰基-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(186毫克，收率：88.2％)。
步骤F：合成(S)-3-(((1-(8-乙酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基]-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000271
将(2S)-2-(((1-(5'-乙酰基-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(186毫克，0.382毫摩尔)溶解于10毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(158毫克，1.14毫摩尔)，氮气置换后于150摄氏度加热反应1小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入50毫升冰水中，乙酸乙酯(30毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得(S)-3-(((1-(8-乙酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基]-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(90.0毫克，收率：47.7％)。
步骤G：合成(2S)-2-(((1-(8-乙酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000272
取(S)-3-(((1-(8-乙酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(90.0毫克，0.182毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2毫升/1毫升/2毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠(82.0毫克，0.545毫摩尔)于室温下反应2小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯(20毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得(2S)-2-(((1-(8-乙酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸粗品(80毫克)直接用于下一步。
步骤H：合成(S)-2-((((S)-1-(8-乙酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基]-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000273
取(2S)-2-(((1-(8-乙酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸粗品(80毫克，0.182毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(23.7毫克，0.201毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(104毫克，0.273毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(47.0毫克，0.364毫摩尔)于室温下反应1小 时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得(S)-2-(((S)-1-(8-乙酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(12.8毫克，收率：14％)和(S)-2-(((R)-1-(8-乙酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(10.2毫克，收率：11％)。LC-MS:RT＝2.09min,[M+H] +＝504.18。
实施例53
(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((2,2,2-三氟-1-(8-(羟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000274
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2S)-2-(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000275
室温条件下，将4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯甲醛(421毫克，1.44毫摩尔)，(2S)-2-(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基-4-氟-4-甲基-戊酸乙酯(603毫克，1.44毫摩尔)，磷酸钾(765毫克，3.61毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环9毫升，水3毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(106毫克，0.14毫摩尔)，置换氮气后加热至80摄氏度反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液(50毫升)洗一次，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到389毫克产物(2S)-2-(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(收率：54％)。
步骤B：合成(2S)-2-(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000276
室温条件下，将(2S)-2-((2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(389毫克，0.77毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环10毫升将底物全部溶解，再加入4N的盐酸二氧六环溶液10毫升室温度反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，该产品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.08min,[M-H] -＝472.15。
步骤C：合成2-((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000277
室温条件下，将(2S)-2-(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯加入微波反应管中，加入10毫升N,N-二甲基甲酰胺中将底物全部溶解，再加入碳酸钾(207毫克，1.5毫摩尔)，微波加热至 140摄氏度反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到120毫克产物(2S)-2-((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯。LC-MS:RT＝2.21min,[M+H] +＝454.16。
步骤D：合成(2S)-2-((1S)-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000278
取(2S)-2-((1S)-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(70毫克，0.15毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(26毫克，0.6毫摩尔)，室温条件下反应2小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到84毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.06min,[M+H] +＝424.16。
步骤E：合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000279
取(2S)-2-((1S)-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-4-氟-4-甲基戊酸(84毫克粗品)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(21毫克，0.18毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(84毫克，0.22毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺3毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.1毫升，0.59毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体(2S)-2-N-(1-氰基环丙基)-2-((1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺。LC-MS:RT＝2.08min,[M-H] -＝524.13。
步骤F：合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((2,2,2-三氟-1-(8-(羟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000280
取(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺(196毫克粗品)，加入甲醇5毫升将底物全部溶解，最后于冰浴下加入硼氢化钠(2毫克，0.05毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，直接真空旋干，经高效制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到48毫克白色固体(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((2,2,2-三氟-1-(8-(羟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：61％)。LC-MS:RT＝1.99min,[M-H] -＝526.14。
实施例54
合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000281
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2S)-2-((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000282
取(2S)-2-((1S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(70毫克，0.15毫摩尔)溶于四氢呋喃(5毫升)中，再加入(二氟甲基)三甲基-硅烷(0.95毫克，0.86毫摩尔)，室温条件下滴加1.0N的四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(0.03毫升，0.03毫摩尔)，反应12小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(30毫升)稀释反应液，饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到粗产物，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到50毫克产物(2S)-2-((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯。LC-MS:RT＝2.14min,[M+H] +＝506.16。
步骤B：合成(2S)-2-((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000283
取(2S)-2-((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(50毫克，0.1毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(26毫克，0.6毫摩尔)，室温条件下反应2小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝1.99min,[M-H] -＝476.16。
步骤C：(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000284
取(2S)-2-((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-4-氟-4-甲基戊酸粗品，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(22毫克，0.13毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(65毫克，0.17毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺3毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.1毫升，0.59毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗有机相4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到22毫克(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：41％)。LC-MS:RT＝2.02min,[M+H] +＝542.19。
实施例55
合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((2,2,2-三氟-1-(8-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙 酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000285
具体合成路线如下：
步骤A：2-溴-1-氟-4-(甲基磺酰基)苯
Figure PCTCN2021072803-appb-000286
将1-氟-4-(甲基磺酰基)苯(500毫克，2.8毫摩尔)溶于6摩尔/升硫酸(10毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入N-溴代丁二酰亚胺(613毫克，3.4毫摩尔)。在室温条件下搅拌2小时。将反应液滴加到饱和碳酸氢钠(100毫升)中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(40毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)。得到480毫克白色固体2-溴-1-氟-4-(甲基磺酰基)苯(收率：66.0％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤B：2-(2-氟-5-(甲基磺酰基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷
Figure PCTCN2021072803-appb-000287
将2-溴-1-氟-4-(甲基磺酰基)苯(800毫克,3.16毫摩尔)溶于乙二醇二甲醚(15毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入频哪醇硼酸酯(1.2克，4.71毫摩尔)，醋酸钾(620毫克，6.3毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(230毫克，316微摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌4小时。将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(30毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)。得到730毫克白色固体2-(2-氟-5-(甲基磺酰基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(收率：133％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤C：(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-5'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000288
将2-(2-氟-5-(甲基磺酰基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(150毫克，0.86毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1，11.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入(1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(459毫克，1.0毫摩尔)，碳酸钾(239毫克，1.73毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(63毫克，86微摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌18小时。将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)。得到60毫克棕色油状物(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-5'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：13.0％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤D：(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-5'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000289
将(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-5'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(60毫克，0.12毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(3.0毫升)中，再加入4N的盐酸二氧六环溶液(3.0毫升)，室温反应2小时。将反应液减压浓缩。得到48毫克无色油状物((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-5'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-亮氨酸甲酯(收率：87％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤E：(2,2,2-三氟-1-(8-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000290
将(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-5'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(48毫克，0.091毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入碳酸钾(40毫克，0.29毫摩尔)。在微波条件下，150摄氏度搅拌1小时。将反应液滴加到饱和氯化铵(30毫升)溶液中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。得到35毫克棕色油状物(2,2,2-三氟-1-(8-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：76％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤F：(2,2,2-三氟-1-(8-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000291
将(2,2,2-三氟-1-(8-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(35毫克，0.074毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2:1:1，4毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化钠(6.0毫克，0.14毫摩尔)。在室温条件下搅拌3小时。向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至3。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到10毫克无色油状物(2,2,2-三氟-1-(8-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(收率：45.0％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤G：(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((2,2,2-三氟-1-(8-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000292
将(2,2,2-三氟-1-(8-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(45毫克，0.098毫摩尔)和1-氨基环丙烷-1-腈盐酸盐(14毫克，0.118毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(8.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(55毫克，0.147毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(25毫克，0.20毫摩尔)，在室温下搅拌2个小时。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到15毫克白色固体(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((2,2,2-三氟-1-(8-(甲基磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：29％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05.
实施例56
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000293
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2S)-2-((1-(2,5'-二氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000294
将(2S)-2-(((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(331毫克，0.769毫摩尔)，5-氟-2-羟基苯硼酸(100毫克，0.64毫摩尔)，碳酸钠(136毫克，1.28毫摩尔)溶解于10毫升(二氧六环：水＝4：1)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(38.9毫克，0.032毫摩尔)，氮气置换3次于85摄氏度下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，反应液加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯萃取2次(50毫升×2)，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝2/1)分离纯化得(2S)-2-((1-(2,5'-二氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸酯(190毫克，收率：64.1％)。
步骤B：合成(S)-5-氟-5-甲基-2-氧代-3-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)己酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000295
将(2S)-2-(((1-(2,5'-二氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸酯(190毫克，0.411毫摩尔)溶解于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(170毫克，1.23毫摩尔)，氮气置换后于140摄氏度加热反应1小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入50毫升冰水中，乙酸乙酯萃取3次(30毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到(S)-5-氟-5-甲基-2-氧代-3-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)己酸乙酯(100毫克，产率32.8％)。
步骤C：合成(S)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000296
取(S)-5-氟-5-甲基-2-氧代-3-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)己酸乙酯粗品(100毫克，0.213毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(5毫升/1毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠(25.0毫克，0.636毫摩尔)于室温条件下反应6小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯萃取3次(35毫升×3)，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝1/1)分离纯化得(S)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸(68.0毫克，收率：77.2％)。
步骤D：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000297
取(S)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸(68.0毫克，0.163毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(23.2毫克，0.196毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(92.7毫克，0.244毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(42.0毫克，0.326毫摩尔)于室温下反应2小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(50毫升)稀释，用乙酸乙酯萃取3次(30毫升×3)，合并有机相,干燥，旋干得粗品经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1)分离纯化得(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-氟二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(7.0毫克，收率：9％)。LC-MS:RT＝2.15min,[M+H] +＝480.16。
实施例57
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲氧基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000298
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-溴-4-甲氧基-1-(甲氧基甲氧基)苯
Figure PCTCN2021072803-appb-000299
取2-溴-4-甲氧基苯酚(2.44克，12毫摩尔)溶于40毫升N,N-二甲基甲酰胺中，零摄氏度条件下逐渐加入氢化钠固体(520毫克，13毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后，逐滴加入溴甲基甲基醚(1.05毫升，13毫摩尔)，随后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸乙酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化得到2.7克2-溴-4-甲氧基-1-(甲氧基甲氧基)苯(收率：91％)。
步骤B：合成2-(甲氧基甲氧基)-5-(甲氧基)苯硼酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000300
在零下78摄氏度下，将2-溴-4-甲氧基-1-(甲氧基甲氧基)苯(741毫克，3.1毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入四氢呋喃25毫升，将底物全部溶解，继续在低温条件下缓慢加入正丁基锂(2.4毫升，1.6摩尔/升)。保持零下78摄氏度1小时，再加入硼酸三甲酯(501微升，4.5微摩尔)，缓慢升温至室温，于室温下反应2小时。然后加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，粗品直接用于下一步反应。
步骤C：合成(1-(5'-甲氧基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000301
室温条件下，将2-(甲氧基甲氧基)-5-(甲氧基)苯硼酸粗品，(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(810毫克，2.1毫摩尔)，磷酸钾(890毫克，4.2毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环21毫升，水7毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(146毫克，0.2毫摩尔)，置换氮气后加热至80摄氏度反应4小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到1.02克产物(1-(5'-甲氧基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：99％)。LC-MS:RT＝2.27min,[M+H] +＝488.17。
步骤D：合成(1-(5'-甲氧基-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000302
室温条件下，将(1-(5'-甲氧基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(1.02克，2.0 毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环10毫升将底物全部溶解，再加入4N的盐酸二氧六环溶液10毫升室温度反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，该产品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.16min,[M+H] +＝444.17。
步骤E：合成(1-(8-甲氧基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000303
室温条件下，将((1-(5'-甲氧基-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯粗品加入微波反应管中，加入15毫升N,N-二甲基甲酰胺中将底物全部溶解，再加入碳酸钾(800毫克，5.8毫摩尔)，微波加热至140摄氏度反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到176毫克产物(1-(8-甲氧基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：10％)。LC-MS:RT＝2.32min,[M+H] +＝424.16。
步骤F：合成(1-(8-甲氧基基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000304
取(1-(8-甲氧基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(176毫克，0.42毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(34毫克，0.86毫摩尔)，室温条件下反应四小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到277毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.19min,[M-H] -＝408.12。
步骤G：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲氧基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000305
取(1-(8-甲氧基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(277毫克，0.68毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(97毫克，0.82毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(388毫克，1.02毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.42毫升，2.58毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到56毫克(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲氧基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：17.4％)。LC-MS:RT＝2.16min,[M+H] +＝473.42。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.73(s,1H),8.11(d,J＝8.0Hz,1H),7.72(d,J＝2.4Hz,2H),7.63(d,J＝8.8Hz,1H),7.40(d,J＝8.0Hz,1H),7.11(dd,J＝8.8,2.8Hz,1H),4.49-4.40(m,1H),3.87(s,3H),3.30-3.18(m,1H),3.09-2.97(m,1H),1.79-1.67(m,1H),1.49-1.38(m,1H),1.36-1.17(m,3H),0.89(d,J＝3.6Hz),0.87(d,J＝3.6Hz),0.82-0.72(m,1H),0.54-0.45(m,1H).
实施例58
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(三氟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000306
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-5'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000307
室温条件下，(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(300毫克，0.680毫摩尔)，2-氟-5-(三氟甲基)苯硼酸频呢醇酯(170毫克，0.816毫摩尔)，碳酸钠(144毫克，1.36毫摩尔)溶解于5毫升(二氧六环：水＝4：1)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(78.0毫克，0.068毫摩尔)，氮气置换3次，于85摄氏度下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，反应液加水(50毫升)稀释，乙酸乙酯(30毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-5'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸粗品(400毫克)。
步骤B：合成(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-5'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000308
将(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-5'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸粗品(400毫克，0.760毫摩尔)溶解于5毫升4N的盐酸二氧六环中，室温下反应1.5小时。LC-MS显示反应结束后，反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液(150毫升)中，乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝1/1)分离纯化得2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-5'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸(280毫克，收率：76.7％)。
步骤C：合成(2,2,2-三氟-1-(8-(三氟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000309
将2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-5'-(三氟甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸(280毫克，0.580毫摩尔)溶解于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(240毫克，1.74毫摩尔)，氮气置换后，于132摄氏度加热反应1小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入50毫升冰水中，乙酸乙酯(30毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得(2,2,2-三氟-1-(8-(三氟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯粗品(200毫克)直接用于下一步。
步骤D：合成(2,2,2-三氟-1-(8-(三氟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000310
取2,2,2-三氟-1-(8-(三氟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯粗品200毫克，0.434毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(8毫升/2毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠52.0毫克，1.30毫摩尔)于室温条件下反应4小时，TLC显示反应结束后， 反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝1/2)分离纯化得2,2,2-三氟-1-(8-(三氟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(170毫克，收率：87.6％)。
步骤E：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(三氟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000311
取(2,2,2-三氟-1-(8-(三氟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(170毫克，0.380毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(54.0毫克，0.456毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(216毫克，0.570毫摩尔)溶解于10毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(98.0毫克，0.760毫摩尔)于室温下反应2小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(三氟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(25.0毫克，收率：13％)和(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((R)-2,2,2-三氟-1-(8-(三氟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(21.0毫克，收率：11％)。LC-MS：RT＝2.21min,[M+H] +＝512.15。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.72(s,1H),8.68(s,1H),8.31(d,J＝8.0Hz,1H),7.96(d,J＝8.4Hz,1H),7.90(dd,J＝8.8,1.6Hz,1H),7.87(s,1H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),4.55-4.44(m,1H),3.29-3.20(m,1H),3.13-3.02(m,1H),1.79-1.68(m,1H),1.49-1.38(m,1H),1.36-1.16(m,3H),0.89(d,J＝4.0Hz,3H),0.88(d,J＝4.0Hz,3H),0.85-0.75(m,1H)，0.55-0.45(m,1H).
实施例59
合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000312
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000313
室温条件下，将4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯甲醛(292毫克，1毫摩尔)，(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(300毫克，0.68毫摩尔)，磷酸钾(212毫克，1毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环8毫升，水2毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(50毫克，0.068毫摩尔)，置换氮气后加热至80摄氏度反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液(50毫升)洗一次，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到400毫克产物(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：82％)。LC-MS:RT＝2.23min,[M+H] +＝486.12。
步骤B：(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000314
室温条件下，将((2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(500毫克，1毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环10毫升将底物全部溶解，再加入4N的盐酸二氧六环溶液10毫升室温度反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，该产品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.13min,[M+H] +＝442.13。
步骤C：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000315
室温条件下，将(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(粗品467毫克)加入微波反应管中，加入10毫升N,N-二甲基甲酰胺中将底物全部溶解，再加入碳酸钾(207毫克，1.5毫摩尔)，微波加热至140摄氏度反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到120毫克产物((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：28％)。LC-MS:RT＝2.27min,[M+H] +＝422.14。
步骤D：合成((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000316
取((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(120毫克，0.29毫摩尔)溶于四氢呋喃(5毫升)中，再加入(二氟甲基)三甲基-硅烷(0.95毫克，0.86毫摩尔)，室温条件下滴加1.0N的四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(0.03毫升，0.03毫摩尔)，反应12小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(30毫升)稀释反应液，饱和氯化钠溶液洗三次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到120毫克粗产物，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝4/1)纯化后得到90毫克产物((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：68％)。LC-MS:RT＝2.18min,[M+H] +＝474.16。
步骤E：((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000317
取((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(90毫克，0.19毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(26毫克，0.6毫摩尔)，室温条件下反应2小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到90毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤F：(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000318
取((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(90毫克，0.20毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(34毫克，0.29毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(111毫克，0.29毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺3毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.1毫升，0.59毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到36毫克(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((1S)-1-(8-(2,2-二氟-1-羟乙基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：35％)。LC-MS:RT＝2.05min,[M+H] +＝524.14。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ(ppm)8.72(s,1H),8.20(d,J＝1.2Hz,1H),8.15(d,J＝6.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.73(d,J＝6.8Hz,1H),7.59(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),7.43(d,J＝6.4Hz,1H),6.36(s,1H),6.11(td,J＝44.4,3.2Hz,1H),5.00-4.90(m,1H),4.50-4.40(m,1H),3.04(s,1H),1.76-1.70(m,1H),1.50-1.40(m,1H),1.37-1.17(m,4H),0.89(d,J＝4.0Hz,3H),0.88(d,J＝4.0Hz,3H),0.8000.73(m,1H),0.54-0.46(m,1H).
实施例60
合成N-(1-氰基环丙基)-1-((1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000319
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-((1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000320
将1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(2.40克，5.38毫摩尔)溶解于30毫升乙酸乙酯中，加入碳酸钾(1.01克，6.45毫摩尔)，氮气置换后于70摄氏度加热反应16小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入150毫升冰水中，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝5/1)分离纯化得1-((1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(840毫克，收率：34.9％)。
步骤B：合成1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000321
室温条件下，(1-((1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(440毫克，0.971毫摩尔)，2-氟-苯硼酸(149毫克，1.06毫摩尔)，碳酸钠(206毫克，1.94毫摩尔)溶解于10毫升(二氧六环：水＝8：2)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(112毫克，0.097毫摩尔)，氮气置换3次，于85摄氏度下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，反应液加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(30毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(276毫克，收率：60.1％)。
步骤C：合成1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000322
将1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(276毫克，0.588毫摩尔)溶解于5毫升4N的盐酸二氧六环中，室温下反应1.5小时。TLC显示反应结束后，反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液(100毫升)中，乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯粗品(250毫克)直接用于下一步。
步骤D：合成1-((1-(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000323
将1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯粗品(250毫克，0.588毫摩尔)溶解于8毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(243毫克，1.76毫摩尔)，氮气置换后于135摄氏度加热反应1小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入50毫升冰水中，乙酸乙酯(30毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得(1-((1-(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(130毫克，收率：54.5％)。
步骤E：合成1-((1-(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000324
取(1-((1-(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(130毫克，0.321毫摩尔)溶于四氢呋喃/水(8毫升/2毫升)混合溶液中，加入氢氧化钾(71.9毫克，1.28毫摩尔)于70摄氏度下反应4小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得1-((1-(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酸粗品(115毫克)直接用于下一步。
步骤F：合成N-(1-氰基环丙基)-1-((1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000325
取(1-((1-(1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酸粗品(115毫克，0.294毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(41.8毫克，0.352毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(79.4毫克，0.441毫摩尔)溶解于6毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(75.8毫克，0.588毫摩尔)于50摄氏度下反应3小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得N-(1-氰基环丙基)-1-((1-(二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酰胺三氟乙酸盐(26毫克，收率：19.4％)。LC-MS:RT＝2.18min,[M+H] +＝456.14.
实施例61
合成(S)-2-((((S)-1-(8-氯二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000326
具体合成路线如下：
步骤A：合成((1-(5'-氯-2-羟基-2'-氟-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000327
将(5-氯-2-羟基苯基)硼酸(129毫克，0.75毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(6毫升/2毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(200毫克，0.5毫摩尔)，磷酸钾(159毫克，0.75毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(37毫克，50微摩尔)，置换氮气3遍。在80摄氏度条件下搅拌3小时。反应结束后加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，混合液用饱和食盐水(30毫升×3次)洗三次，有机相转移到锥形瓶中，用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)。得到198毫克棕色油状物(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2-(甲氧基甲氧基)-5'-(甲基磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：89％)。LC-MS：RT＝2.23min，[M+H] +＝448.04。
步骤B：合成(1-(8-氯二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000328
室温条件下，将((1-(5'-氯-2-羟基-2'-氟-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(198毫克，0.44毫摩尔)加入微波反应管中，加入15毫升N,N-二甲基甲酰胺中将底物全部溶解，再加入碳酸钾(400毫克，2.9毫摩尔)，微波加热至140摄氏度反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体157毫克，粗品直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.45min,[M+H] +＝428.09。
步骤C：合成(1-(8-氯二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000329
取(1-(8-氯二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(157毫克)粗品溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(34毫克，0.86毫摩尔)，室温条件下反应4小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.26min,[M-H] -＝412.08。
步骤D：合成(S)-2-(((S)-1-(8-氯二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000330
取(1-(8-氯二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(粗品)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(57毫克，0.48毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(228毫克，0.61毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.31毫升，1.2毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到56毫克产物(S)-2-(((S)-1-(8-氯二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：30％)。LC-MS:RT＝2.30min,[M+H] +＝424.08。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.71(s,1H),8.31(d,J＝2.0Hz,1H),8.18(d,J＝6.4Hz,1H),7.80(s,1H),7.77(d,J＝7.2Hz,1H),7.57(dd,J＝7.2,2.0Hz,1H),7.46(d,J＝6.4Hz,1H),4.49-4.43(m,1H),3.27-3.18(m,1H),3.08-3.01(m,1H),1.78-1.68(m,1H),1.47-1.39(m,1H),1.35-1.17(m,3H),0.89(d,J＝4.0Hz),0.87(d,J＝4.0Hz),0.81-0.72(m,1H),0.54-0.45(m,1H).
实施例62
合成N-(1-氰基环丙基)-1-((2,2,2-三氟-1-(8-(羟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000331
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-5'-甲酰基-2-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000332
室温条件下，1-((1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(539毫克，1.19毫摩尔)，2-氟-5-甲酰基苯硼酸(200毫克，1.19毫摩尔)，碳酸钠(252毫克，2.38毫摩尔)溶解于10毫升(二氧六环：水＝8：2)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(137毫克，0.119毫摩尔)，氮气置换3次，于85摄氏度下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，反应液加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝2/1)分离纯化得1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-5'-甲酰基-2-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(240毫克，收率：40.5％)。
步骤B：合成1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-5'-甲酰基-2-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000333
将1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-5'-甲酰基-2-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(240毫克，0.182毫摩尔)溶解于5毫升4N的盐酸二氧六环中，室温下反应1.5小时。TLC显示反应结束后，反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液(100毫升)中，乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-5'-甲酰基-2-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯粗品(200毫克)直接用于下一步。
步骤C：合成1-((2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000334
将1-((2,2,2-三氟-1-(2'-氟-5'-甲酰基-2-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯粗品(200毫克，0.441毫摩尔)溶解于8毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(183毫克，1.32毫摩尔)，氮气置换后于135摄氏度加热反应2小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入50毫升冰水中，乙酸乙酯(30毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得1-(((2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(140毫克，收率：73.2％)。
步骤D：合成1-((2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000335
取1-((2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸甲酯(140毫克，0.323毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(4毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，加入氢氧化钾(38.2毫克，0.646毫摩尔)于70摄氏度下反应3小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝1/1)分离纯化得1-((2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸(105毫克，收率：77.7％)。
步骤E：合成N-(1-氰基环丙基)-1-((2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000336
取1-((2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酸(105毫克，0.251毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(39.6毫克，0.301毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(143毫克，0.376毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(64.7毫克，0.502毫摩尔)于50摄氏度下反应4小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝1/2)分离纯化得N-(1-氰基环丙基)-1-((2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酰胺(77.0毫克，收率：63.3％)。
步骤F：合成N-(1-氰基环丙基)-1-((2,2,2-三氟-1-(8-(羟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000337
将N-(1-氰基环丙基)-1-((2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酰胺(7 7.0毫克，0.159毫摩尔)溶解于5毫升无水甲醇中，零摄氏度下加入硼氢化钠(10.0毫克，0.255毫摩尔)于该温度下继续反应1小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(50毫升)稀释，用乙酸乙酯(30毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得N-(1-氰基环丙基)-1-((2,2,2-三氟-1-(8-(羟甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)环己烷-1-甲酰胺三氟乙酸盐(16.0毫克，收率：20.7％)。LC-MS:RT＝2.02min,[M+H] +＝486.11。
实施例63
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-((二甲氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000338
具体合成路线如下：
步骤A：合成3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯甲醛
Figure PCTCN2021072803-appb-000339
将3-溴-4-羟基苯甲醛(10.5克,50.0毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(100.0毫升)中,零摄氏度下将氢化钠(2.4克,60.0毫摩尔,60％)缓慢加入其中,氮气保护下搅拌30分钟,然后向混合液中加溴(甲氧基)甲烷(4.9毫升,60.0毫摩尔)。迅速升温至室温并搅拌1小时。将反应液缓慢滴加到水(150.0毫升)中,
混合液用乙酸乙酯(60毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。 所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚＝1/9)得到12.0克白色固体3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯甲醛(收率：94.4％)。LC-MS：RT＝1.95min,[M+H] +＝246.94/244.92。
步骤B：合成4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯甲醛
Figure PCTCN2021072803-appb-000340
将3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯甲醛(12.0克,49.4毫摩尔)，4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-(1,3,2-二氧杂硼烷)(18.81克,74.0毫摩尔)和醋酸钾(9.8克,100.0毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(100.0毫升)中。氮气保护后,加[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(1.9克,2.5毫摩尔),置换氮气,加热升温到96摄氏度并恒温搅拌6小时后,LC-MS监测至反应完全,将反应液冷却至室温。
将反应液缓慢滴加到水(150.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(60毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚＝1/15)得到12.0克无色液体4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯甲醛(收率：83.3％)。LC-MS：RT＝2.02min,[M+H] +＝293.08。
步骤C：合成(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000341
将4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯甲醛(3.1克,10.8毫摩尔)和(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(3.6克,9.0毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(40.0毫升)中,然后将磷酸钾(3.8克,18.0毫摩尔)的水溶液(10.0毫升)加入反应液中,氮气保护后，加[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(660毫克,0.9毫摩尔),置换氮气,加热升温到100摄氏度并恒温搅拌2小时后,LC-MS监测至反应完全。
反应液冷却至室温,垫硅藻土过滤,滤饼用乙酸乙酯(10毫升×3次)洗涤，合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,所得残渣经硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚＝1/4)得到2.6克黄色固体(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：60.0％)。LC-MS：RT＝2.21min,[M+H] +＝486.09。
步骤D：合成(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000342
将(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(2.6克,5.4毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(6.0毫升)中，将4.0盐酸1,4-二氧六环溶液(3.0毫升)加入反应液中,室温下搅拌2小时后
向反应液中加水(15.0毫升)稀释,用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,分液。合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩得到2.3克黄色固体(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：97.0％)。LC-MS：RT＝2.12min，[M+H] +＝442.04。
步骤E：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000343
将(2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(2.3克,5.2毫摩尔)和碳酸钾(1.4克,10.4毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中,迅速升温至136摄氏度并恒温搅拌2小时。
反应液冷却至室温,向反应液中加水(50.0毫升),混合液用乙酸乙酯(60毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物经高效液相色谱仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟 乙酸)制备纯化后得到500毫克黄色固体((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：22.7％)。LC-MS：RT＝2.25min,[M+H] +＝422.11。
步骤F：合成((S)-1-(8-(((二甲基氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000344
将((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(80毫克,0.2毫摩尔)和醋酸(0.1毫升)溶于甲醇(2.0毫升)中,加二甲胺四氢呋喃溶液(0.2毫升,0.4毫摩尔,2.0M)后,室温搅拌30分钟。然后将氰基硼氢化钠(63毫克,1.0毫摩尔)加入混合液中,室温搅拌2.5小时。
向反应液中加水(10.0毫升),混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(6毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚＝1/5)得到65毫克黄色固体((S)-1-(8-(((二甲基氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：72.2％)。LC-MS：RT＝1.83min,[M+H] +＝451.18。
步骤G：合成((S)-1-(8-(((二甲基氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000345
将((S)-1-(8-(((二甲基氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(65毫克,0.14毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中,再加入一水合氢氧化锂(42毫克,1毫摩尔),室温条件下反应2小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取3次(30毫升×3),合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到54毫克黄色固体((S)-1-(8-(((二甲基氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(收率：85.7％),粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS：RT＝1.76min,[M+H] +＝437.21。
步骤H：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-((二甲氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000346
将((S)-1-(8-(((二甲基氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(54毫克,0.12毫摩尔),1-氨基-环丙基氰盐酸盐(30毫克,0.26毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(97毫克,0.25毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.2毫升,0.5毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(50毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,经制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)制备纯化后得到19毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-((二甲氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：38％)。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝501.12。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.70(s,1H),8.75(s,1H),8.26(d,J＝1.2Hz,1H),8.11(d,J＝8.0Hz,1H),7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.84(s,1H),7.67(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.48(d,J＝7.6Hz,1H),4.52-4.42(m,3H),3.29-3.20(m,1H),2.79(s,3H),2.78(s,3H),3.13-3.02(m,1H),1.79-1.68(m,1H),1.49-1.38(m,1H),1.36-1.16(m,3H),0.89(d,J＝3.6Hz,3H),0.88(d,J＝3.6Hz,3H),0.85-0.75(m,1H),0.60-0.50(m,1H).
实施例64
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((((2-甲氧基乙基)氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000347
具体合成路线如下：
步骤A：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000348
取((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(150毫克,0.36毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中,再加入一水合氢氧化锂(30毫克,0.71毫摩尔),室温条件下反应2小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取三次(30毫升×3),合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到86毫克粗产物,粗品不需纯化直接用于下一步反应。(收率：60％)。LC-MS：RT＝2.11min,[M+H] +＝408.01。
步骤B：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000349
将((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(86毫克,0.34毫摩尔),1-氨基-环丙基氰盐酸盐(81毫克,0.68毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(150毫克,0.41毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.2毫升,1.0毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(50毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,用乙酸乙酯(1毫升)溶解后,缓慢滴加到正己烷(20毫升)中,析出大量固体,过滤,滤饼用少量正己烷(3毫升×2)洗涤后收集固体,得到138毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)氨基)戊酰胺(收率：86％)。LC-MS:RT＝2.11min,[M+H] +＝472.13。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((((2-甲氧基乙基)氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000350
将(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(40毫克,0.08毫摩尔)和醋酸(0.1毫升,0.42毫摩尔)溶于1,2-二氯乙烷/甲醇((1毫升/2毫升)中,加2-甲氧基乙烷-1-胺(0.05毫升,0.24毫摩尔)后,室温搅拌30分钟。然后将氰基硼氢化钠(25毫克,0.4毫摩尔)加入混合液中,室温搅拌2.5小时。
向反应液中加水(10.0毫升),混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(6毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得油状物用经制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)制备纯化后得到16毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((((2-甲氧基乙基)氨基)甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：38％)。LC-MS：RT＝1.75min,[M+H] +＝531.16。
实施例65
合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((1-(8-二甲胺基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000351
具体合成路线如下：
步骤A：合成3-溴-4-(甲氧基甲氧基)硝基苯
Figure PCTCN2021072803-appb-000352
取3-溴-4-羟基硝基苯(5.01克，23.0毫摩尔)溶于40毫升N,N-二甲基甲酰胺中，零摄氏度条件下逐渐加入氢化钠固体(1.38克，34.5毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后，逐滴加入溴甲基甲基醚(2.87毫升，34.5毫摩尔)，随后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化得到5.4克3-溴-4-(甲氧基甲氧基)硝基苯(收率：99％)。
步骤B：合成3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000353
室温条件下，将3-溴-4-(甲氧基甲氧基)硝基苯(3.6克，13.7毫摩尔)，铁粉(3.8克，68.7毫摩尔)，氯化铵(4.4克，82.4毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入乙醇45毫升，水9毫升，加热至70摄氏度回流反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷(50毫升)稀释反应液，过滤后用饱和氯化钠溶液(50毫升)洗涤一次，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到粗品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)纯化后得到3.2克产物3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯胺(收率：99％)。LC-MS:RT＝1.50min,[M+H] +＝231.96。
步骤C：合成N,N-二甲基-3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000354
室温条件下，将3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯胺(300毫克，1.3毫摩尔)，碳酸钾(980毫克，7.1毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺15毫升，滴加碘甲烷(203微升，2.6毫摩尔)，于室温下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，用饱和氯化钠溶液(50毫升)洗涤一次，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到粗品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化后得到278毫克产物N,N-二甲基-3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯胺(收率：82％)。LC-MS:RT＝1.88min,[M+H] +＝261.99。
步骤D：合成2-(甲氧基甲氧基)-5-二甲胺基苯硼酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000355
在零下78摄氏度下，将3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯胺(278毫克，1.1毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入四氢呋喃10毫升，将底物全部溶解，继续在低温条件下缓慢加入正丁基锂(1.0毫升，1.6摩尔/升)。保持零下78摄氏度1小时，再加入硼酸三甲酯(155微升，1.4微摩尔)，缓慢升温至室温，于室温下反应2小时。然后加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，粗品直接用于下一步反应。
步骤E：合成(1-(5'-二甲胺基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000356
室温条件下，将2-(甲氧基甲氧基)-5-二甲氨基苯硼酸(粗品，1.1毫摩尔)，(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(428毫克，1.1毫摩尔)，磷酸钾(424毫克，2毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环20毫升，水4毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(241毫克，0.33毫摩尔)，置换氮气后加热至80摄氏度反应4小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝4/1)纯化后得到226毫克产物(1-(5'-二甲胺基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：42％)。LC-MS:RT＝2.20min,[M+H] +＝501.07。
步骤F：合成(1-(5'-二甲胺基-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000357
室温条件下，将(1-(5'-二甲胺基-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(226毫克，0.45毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环10毫升将底物全部溶解，再加入4N的盐酸二氧六环溶液10毫升室温度反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，该产品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝1.86min,[M-H] -＝457.16。
步骤G：合成(1-(8-二甲胺基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000358
室温条件下，将((1-(5'-二甲胺基-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(粗品)加入微波反应管中，加入15毫升N,N-二甲基甲酰胺中将底物全部溶解，再加入碳酸钾(400毫克，2.9毫摩尔)，微波加热至140摄氏度反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，粗品直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.27min,[M+H] +＝437.14。
步骤H：合成(1-(8-二甲胺基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000359
取(1-(8-二甲胺基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-亮氨酸甲酯粗品溶于四氢呋喃/甲醇/水(6毫升/2毫升/2毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(34毫克，0.86毫摩尔)，室温条件下反应四小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.03min,[M+H] +＝421.06。
步骤I：合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((1-(8-二甲胺基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000360
取(1-(8-二甲胺基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(142毫克，1.2毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(570毫克，1.5毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.5毫升，3.0毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(50毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到(2S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((1-(8-二甲胺基二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐。LC-MS:RT＝2.05min,[M+H] +＝487.18。
实施例66
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000361
具体合成路线如下：
步骤A：(2,2,2-三氟-1-(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)甲基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000362
将(1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(17.3克,43.2毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(300毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入频哪醇硼酸酯(16.4克，64.8毫摩尔)，醋酸钾(6.3克，64.8毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(3.0克，4.3毫摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌18小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(800毫升)中。混合液用乙酸乙酯(300毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(200毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)。得到13.5克黄色固体(2,2,2-三氟-1-(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)甲基)-L-亮氨酸(收率：70％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤B：(1-(5'-溴-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000363
将(2,2,2-三氟-1-(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)甲基)-L-亮氨酸(11.0克，24.6毫摩尔)溶于甲苯(220毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入4-溴-2-碘-1-(甲氧基甲氧基)苯(10.1克，29.5毫摩尔)，碳酸铯(16.0克，49.2毫摩尔)，四三苯基膦钯(1.3克，1.2毫摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌18小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(500毫升)中。混合液用乙酸乙酯(200毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(200毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)。得到4.3克黄色油状物(1-(5'-溴-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：32.6％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤C：(1-(5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000364
将(1-(5'-溴-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(4.3克，7.8毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(20毫升)中，再加入4N的盐酸1,4-二氧六环溶液(20毫升)，室温反应2小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)。得到1.1毫克无色油状物(1-(5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：27.8％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤D：(1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000365
将(1-(5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(1.1克，2.2毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入碳酸钾(607毫克，4.4毫摩尔)。在135摄氏度条件下搅拌30分钟。
将反应液滴加到饱和氯化铵(300毫升)溶液中。混合液用乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(30毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到410毫克白色固体(1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：38.8％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤E：((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000366
将1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-(S)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(50毫克，0.10毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入吗啉-3-酮(21毫克，0.21毫摩尔)，N 1，N 2-二甲基乙烷-1,2-二胺(18毫克，0.21毫摩尔)，碘化亚铜(21毫克，0.10毫摩尔)，碳酸钾(29毫克，0.21毫摩尔)。在微波条件下，130摄氏度搅拌1小时。
向反应液中加入饱和氯化钠溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备TLC板纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到43毫克无色油状物(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：82.3％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05
步骤F：((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000367
将((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(43毫克，0.087毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2:1:1，4毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化钠(7.0毫克，0.17毫摩尔)。在室温条件下搅拌3小时。
向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至4。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到35毫克无色油状物((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(收率：83.7％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤G：(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000368
将((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(35毫克，0.073毫摩尔)和1-氨基环丙烷-1-腈盐酸盐(13毫克，0.11毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(8.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(35毫克，0.11毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(28毫克，0.22毫摩尔)，在室温下搅拌2个小时。向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到22毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(收率：55％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05. 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.72(s,1H),8.18(d,J＝2.0Hz,1H),8.12(d,J＝8.0Hz,1H),7.79(s,1H),7.73(d,J＝8.8Hz,1H),7.54(dd,J＝8.8Hz,2.4Hz,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,1H),4.52-4.40(m,1H),4.24(s,2H),4.05-3.89(m,1H),3.85-3.79(m,1H),3.29-3.20(m,1H),3.09-2.98(m,1H),1.79-1.68(m,1H),1.49-1.37(m,1H),1.35-1.17(m,3H),0.89(d,J＝3.6Hz,3H),0.87(d,J＝3.6Hz,3H),0.83-0.72(m,1H)，0.54-0.45(m,1H).
实施例67
合成(S)-2-((((S)-1-(8-(2-氨基乙氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000369
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯甲酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000370
取4-溴-3-羟基苯甲酸甲酯(231毫克，1毫摩尔)溶于2毫升N,N-二甲基甲酰胺中，零摄氏度条件下逐渐加入氢化钠固体(60毫克，1.5毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后，逐滴加入溴甲基甲基醚(0.12毫升，1.5毫摩尔)，随后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，粗品无需纯化直接投下一步反应。
步骤B：合成(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)甲醇
Figure PCTCN2021072803-appb-000371
取4-溴-3-羟基苯甲酸甲酯(5.5克，20毫摩尔)溶于60毫升四氢呋喃中，零摄氏度条件下逐渐加入1.0N的氢化铝锂的四氢呋喃溶液(24毫升，24毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，逐滴加入2毫升水淬灭反应液，待固体析出后加入无水硫酸镁干燥，过滤分离有机相后用浓缩得到粗产品，粗品无需纯化直接投下一步反应。
步骤C：合成4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯甲醛
Figure PCTCN2021072803-appb-000372
取(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)甲醇(14.82克，60毫摩尔)溶于100毫升二氯甲烷中，零摄氏度条件下逐渐加入戴斯 马丁试剂(25.4克，60毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，先过滤出白色固体，滤液用饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，滤液分离后用无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到12.7克产物合成4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯甲醛(收率：86％)。
步骤D：合成1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇
Figure PCTCN2021072803-appb-000373
将4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯甲醛(6克，24.4毫摩尔)溶于四氢呋喃(48毫升)中，再加入三氟甲基三甲基硅烷(4.3毫升，29毫摩尔)，逐滴加入1.0N的四丁基氟化铵的四氢呋喃溶液(2.0毫克，2毫摩尔)，室温条件下反应2小时，TLC显示反应结束后，加入2N稀盐酸溶液(5毫升)淬灭反应液，加入乙酸乙酯稀释反应液(50毫升)并转移到分液漏斗当中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(50毫升×3)，有机相转移到锥形瓶后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到透明油状粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到7.6克1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇(收率：99％)。
步骤E：合成1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000374
取1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙烷-1-醇(7.6克，24.4毫摩尔)溶于二氯甲烷100毫升中，加入吡啶(3.9毫升，48.8毫摩尔)，零摄氏度条件下，逐滴加入三氟甲磺酸酐(6.1毫升，36.6毫摩尔)，逐渐升至室温条件下反应1小时。TLC显示反应结束后，向反应液中加入二氯甲烷(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和氯化铵溶液洗3次(50毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到6克1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(收率：55％)。
步骤F：合成(1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000375
取1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯(6克，13.4毫摩尔)溶于干燥乙酸乙酯(50毫升)中，先加入(L)-亮氨酸甲酯盐酸盐(3.62克，20毫摩尔)，再加入碳酸钾粉末(5.5克，40毫摩尔)，置换氮气后加热至70摄氏度反应12小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸酯(30毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到2.4克1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：41％)。LC-MS:RT＝2.21min,[M+H] +＝441.95。
步骤G：合成2-溴-1-氟-4-(甲氧基甲氧基)苯
Figure PCTCN2021072803-appb-000376
取3-溴-4-氟苯酚(5.73克，30毫摩尔)溶于30毫升N,N-二甲基甲酰胺中，零摄氏度条件下逐渐加入氢化钠固体(1.44克，36毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后，逐滴加入溴甲基甲基醚(3.18毫升，39毫摩尔)，随后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸酯(50毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相4次(30毫升×4)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化得到6.1克2-溴-1-氟-4-(甲氧基甲氧基)苯(收率：87％)。
步骤H：合成(2-氟-5-(甲氧基甲氧基)苯基)硼酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000377
室温条件下，将2-溴-1-氟-4-(甲氧基甲氧基)苯(1.17克，5毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入四氢呋喃50毫升，将底物全部溶解，零下78摄氏度条件下加入1.6N正丁基锂溶液(4.0毫升，6.5毫摩尔)，零下78摄氏度保持1小时后，加入三甲氧基硼(0.83毫升，7.5毫摩尔)，零下78摄氏度保持1小时后，逐渐升至室温反应12小时。TLC反应结束后，加入饱和氯化铵溶液淬灭反应，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，粗品直接用于下一步反应。
步骤I：合成(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2,5'-双(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000378
室温条件下，将(2-氟-5-(甲氧基甲氧基)苯基)硼酸(848毫克，4.24毫摩尔)，(1-(4-溴-3-(甲氧基甲氧基)苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(1.246克，2.82毫摩尔)，磷酸钾(937毫克，4.24毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环24毫升，水6毫升，将底物全部溶解，室温条件下加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(205毫克，0.28毫摩尔)，置换氮气后加热至80摄氏度反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液(50毫升)洗1次，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，柱层析(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)纯化后得到208毫克产物(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2,5'-双(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-亮氨酸甲酯(收率：14％)。LC-MS:RT＝2.27min,[M+H] +＝518.14。
步骤J：合成(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2,5'-二羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000379
室温条件下，将(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2,5'-双(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(208毫克，0.4毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入二氧六环(8毫升)将底物全部溶解，再加入4N的盐酸二氧六环溶液(8毫升)室温度反应2小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，该产品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.05min,[M+H] +＝430.16。
步骤K：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(8-羟基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000380
室温条件下，将(2,2,2-三氟-1-(2'-氟-2,5'-二羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(208毫克,0.4毫摩尔)加入圆底烧瓶中，加入5毫升N,N-二甲基甲酰胺中将底物全部溶解，再加入碳酸钾(138毫克，1毫摩尔)，加热至140摄氏度反应1小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(50毫升)稀释反应液，加入饱和氯化钠溶液洗一次(50毫升)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到油状液体，经制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到70毫克产物合成((S)-2,2,2-三氟-1-(8-羟基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：34％)。LC-MS:RT＝2.16min,[M+H] +＝430.13。
步骤L：合成((S)-1-(8-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)乙氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000381
取((S)-2,2,2-三氟-1-(8-羟基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(70毫克，0.17毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中，再加入碳酸钾(70毫克，0.51毫摩尔)，碘化钾(2.8毫克，0.017毫摩尔)，60摄氏度加热反应12小时。LC-MS 显示反应结束后，加入乙酸乙酯(30毫升)稀释反应液，饱和氯化钠溶液洗有机相3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到100毫克粗产物，直接用于下一步不需纯化。LC-MS:RT＝2.34min,[M+H] +＝553.10。
步骤M：(S)-1-(8-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)乙氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000382
取((S)-1-(8-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)乙氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(100毫克，0.17毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(4毫升/2毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(10毫克，0.23毫摩尔)，室温条件下反应3小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至4-5，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到100毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤N：合成叔丁基-(2–(7-(1–(((S-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)氧基)乙基)氨基甲酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000383
取(S)-1-(8-(2-(((叔丁氧基羰基)氨基)乙氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(100毫克，0.186毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(33毫克，0.28毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(106毫克，0.28毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺2毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.092毫升，0.56毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(30毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(30毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝2.20min,[M+H] +＝625.16。
步骤O：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(2-氨基乙氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000384
取叔丁基(2–(7-(1–(((S-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)氧基)乙基)氨基甲酸酯(100毫克粗品)，加入二氯甲烷4毫升将底物全部溶解，最后加入三氟乙酸(1毫升)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，直接蒸干溶剂得到油状液体，制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到10毫克(S)-2-((((S)-1-(8-(2-氨基乙氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：12％)。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝503.15。
实施例68
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)二苯并][b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000385
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)二苯并][b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000386
将(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基])氨基)戊酰胺(40毫克,0.08毫摩尔)和醋酸(0.1毫升,0.42毫摩尔)溶于1,2-二氯乙烷/甲醇((1毫升/2毫升)中,加4-甲基哌嗪(32毫克,0.32毫摩尔)后,室温搅拌30分钟。然后将氰基硼氢化钠(24毫克,0.4毫摩尔)加入混合液中,室温搅拌2.5小时。
向反应液中加水(10.0毫升),混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(6毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得油状物用经制备HPLC纯化(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)制备纯化后得到14毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)二苯并][b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：31.5％)。LC-MS：RT＝1.75min,[M+H] +＝556.29。
实施例69
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-吗啉基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基])氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000387
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-溴-4-碘苯酚
Figure PCTCN2021072803-appb-000388
将4-碘苯酚(10.0克，45.4毫摩尔)溶解于60毫升无水甲醇中，零摄氏度下缓慢滴入液溴(2.57毫升，49.9毫摩尔)于该温度下继续反应30分钟。TLC监测显示反应完全后，向反应液中加入饱和亚硫酸氢钠溶液至澄清，用正己烷(50毫升×2)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝4/1)分离纯化得2-溴-4-碘苯酚(13.0克，收率：95.7％)。
步骤B：合成2-溴-4-碘-1-(甲氧基甲氧基)苯
Figure PCTCN2021072803-appb-000389
将2-溴-4-碘苯酚(13.0克，43.5毫摩尔)溶解于130毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，零摄氏度下缓慢加入氢化钠(2.08克，52.2毫摩尔)于该温度下反应40分钟后加入2-溴乙基甲基醚(6.50克，52.17毫摩尔)，继续反应1.5小时。TLC监测显示反应完全后，反应液倒入400毫升饱和氯化铵溶液中，用乙酸乙酯(250毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝10/1)分离纯化得2-溴-4-碘-1-(甲氧基甲氧基)苯(8.60克，收率：58.1％)。
步骤C：合成4-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)吗啉
Figure PCTCN2021072803-appb-000390
取2-溴-4-碘-1-(甲氧基甲氧基)苯(5.0克，14.6毫摩尔)，吗啡啉(1.27克，14.6毫摩尔)，叔丁醇钠(2.10克，21.8毫摩尔)溶解于干燥二氧六环(50毫升)中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(666毫克，0.730毫摩尔)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(347毫克，0.730毫摩尔)，氮气置换3次后于65摄氏度反应过夜(16个小时)。LC-MS监测显示反应完全，停止反应。反应液过滤，滤液加水(200毫升)稀释再用乙酸乙酯(150毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得4-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)吗啉(1.10克，收率：24.8％)。
步骤D：合成4-(4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)吗啉
Figure PCTCN2021072803-appb-000391
室温条件下，将4-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)吗啉(1.10克，3.61毫摩尔)，双联频哪醇硼酸酯(1.38克，5.46毫摩尔)，醋酸钾(705毫克，7.20毫摩尔)溶解于10毫升无水二氧六环中，加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(263毫克，0.36毫摩尔)，氮气置换3次于85摄氏度下反应16小时。TLC显示反应结束后，反应液倒入100毫升水中，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得4-(4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)吗啉(530毫克，收率：41.8％)。
步骤E：合成(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-吗啉代-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000392
将((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(390毫克，0.837毫摩尔)，4-(4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)吗啉(250毫克，0.714毫摩尔)，碳酸钠(151毫克，1.43毫摩尔)溶解于6毫升(二氧六环：水＝5：1)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(42毫克，0.036毫摩尔)，氮气置换3次于80摄氏度下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，反应液加水(200毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-吗啉代-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(200毫克，收率：51.4％)。
步骤F：合成(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-吗啉代-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000393
将(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-吗啉代-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(200毫克，0.367毫摩尔)溶解于5毫升4N的盐酸二氧六环中，室温下反应2小时。TLC显示反应结束后，反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液(100毫升)中，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝2/1)分离纯化得(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-吗啉代-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(120毫克，收率：65.6％)。
步骤G：合成(2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000394
将(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-吗啉代-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(120毫克，0.241毫摩尔)溶解于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(166毫克，1.20毫摩尔)，氮气置换后于135摄氏度加热反应2小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入100毫升冰水中，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得(2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(52.0毫克，收率：45.8％)。
步骤H：合成(2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000395
取(2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b，,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(52.0毫克，0.110毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2毫升/1毫升/2毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠(13.0毫克，0.330毫摩尔)于室温下反应2小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯(20毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝1/1)分离纯化得(2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(25.0毫克，收率：45.5％)。
步骤I：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-吗啉基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000396
取((2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(25.0毫克，0.05毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(10.0毫克，0.08毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(30.4毫克，0.08毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(13.0毫克，0.10毫摩尔)于室温下反应1小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-吗啉基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(5.4毫克)和(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((R)-2,2,2-三氟-1-(8-吗啉基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(4.6毫克)。LC-MS:RT＝2.11min,[M+H] +＝529.26。
实施例70
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000397
具体合成路线如下：
步骤A：合成7-((S)-1-((((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000398
取(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(40毫克,0.08毫摩尔)溶于四氢呋喃/叔丁醇(3毫升/1毫升)混合溶液中,零摄氏度下,再加入亚氯酸钠(220毫克,2.4毫摩尔)和磷酸二氢钠(210毫克,2.4毫摩尔)的水溶液(2毫升),室温条件下反应0.5小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取3次(30毫升×3),合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到36毫克粗产物,粗品不需纯化直接用于下一步反应。(收率：86％)。LC-MS：RT＝2.17min,[M+H] +＝436.20。
步骤B：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000399
将7-((S)-1-((((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-3-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(36毫克,0.07毫摩尔),N-甲基哌嗪(11毫克,0.2毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(42毫克,0.11毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.04毫升,0.2毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,经备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到27毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：69％)。LC-MS:RT＝1.98min,[M+H] +＝557.14。
实施例71
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(哌嗪-1-基甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000400
具体合成路线如下：
步骤A：合成叔丁基4-((7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)甲基)哌嗪-1-甲酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000401
将(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(40毫克,0.08毫摩尔)和醋酸(0.1毫升,0.42毫摩尔)溶于1,2-二氯乙烷/甲醇((1毫升/2毫升)中,加哌嗪-1-羧酸叔丁酯(60毫克,0.32毫摩尔)后,室温搅拌30分钟。然后将氰基硼氢化钠(24毫克,0.4毫摩尔)加入混合液中,室温搅拌2.5小时。
向反应液中加水(10.0毫升),混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(6毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得油状物用经高效液相制备仪器制备纯化后得到52毫克黄色固体叔丁基4-((7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)甲基)哌嗪-1-甲酸(收率：99.0％)。LC-MS：RT＝1.84min,[M+H] +＝642.34。
步骤B：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(哌嗪-1-基甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000402
将叔丁基4-((7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)甲基)哌嗪-1-甲酸(50毫克,0.08毫摩尔)溶于二氯甲烷/三氟乙酸(2毫升/0.5毫升)混合溶液中,室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,经制备HPLC纯化(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)制备纯化得到22毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(哌嗪-1-基甲基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：50.8％)。LC-MS:RT＝1.70min,[M+H] +＝542.34。
实施例72
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000403
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000404
将7-((S)-1-((((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(30毫克,0.06毫摩尔),哌嗪-1-羧酸叔丁酯(23毫克,0.12毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(36毫克,0.09毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.1毫升,0.6毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,经硅胶柱层析纯化得到40毫克黄色固体4-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(收率：98％)。LC-MS:RT＝2.13min,[M+H] +＝678.31。
步骤B：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000405
将4-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(40毫克,0.06毫摩尔)溶于二氯甲烷/三氟乙酸(2毫升/0.5毫升)混合溶液中,室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,经制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)制备纯化得到22毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：67％)。LC-MS:RT＝1.75min,[M+H] +＝556.24。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.87(s,1H),8.75(s,1H),8.31(s,1H),8.19(d,J＝6.0Hz,1H),7.82(d,J＝6.8Hz,1H),7.66(dd,J＝8.4,1.2Hz,1H),7.48(d,J＝6.4Hz,1H),4.52-4.42(m,1H),3.74(br.s,4H),3.28-3.18(m,5H),1.79-1.69(m,1H),1.48-1.38(m,1H),1.36-1.16(m,4H),0.89(d,J＝4.0Hz,3H),0.88(d,J＝4.0Hz,3H),0.85-0.76(m,1H),0.62-0.50(m,1H).
实施例73
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000406
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)-4-甲基哌嗪
Figure PCTCN2021072803-appb-000407
取2-溴-4-碘-1-(甲氧基甲氧基)苯(5.0克，14.6毫摩尔)，N-甲基哌嗪(1.45克，14.6毫摩尔)，叔丁醇钠(2.10克，21.8毫摩尔)溶解于干燥二氧六环(50毫升)中，加入三(二亚苄基丙酮)二钯(666毫克，0.730毫摩尔)，2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(347毫克，0.730毫摩尔)，氮气置换3次后于65摄氏度反应过夜(16个小时)。LC-MS监测显示反应转化80％左右，停止反应。反应液过滤，滤液加水(200毫升)稀释再用乙酸乙酯(150毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1)分离纯化得1-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)-4-甲基哌嗪(1.40克，收率：30.5％)。
步骤B：合成1-(4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)-4-甲基哌嗪
Figure PCTCN2021072803-appb-000408
室温条件下，将1-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)-4-甲基哌嗪(1.40克，4.44毫摩尔)，双联频哪醇硼酸酯(1.70克，6.66毫摩尔)，醋酸钾(1.08克，11.1毫摩尔)溶解于20毫升无水二氧六环中，加入[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(163毫克，0.222毫摩尔)，氮气置换3次于85摄氏度下反应16小时。TLC显示反应转化85％左右，停止反应。反应液倒入200毫升水中，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝16/1)分离纯化得1-(4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)-4-甲基哌嗪(370毫克，收率：20.9％)。
步骤C：合成(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-(4-甲基哌嗪-1-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000409
将((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(558毫克，1.22毫摩尔)，1-(4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)-4-甲基哌嗪(370毫克，1.02毫摩尔)，碳酸钠(276毫克，2.50毫摩尔)溶解于10毫升(二氧六环：水＝5：1)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(116毫克，0.051毫摩尔)，氮气置换3次于80摄氏度下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，反应液加水(200毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1)分离纯化得(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-(4-甲基哌嗪-1-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-L-亮氨酸甲酯(236毫克，收率：41.6％)。
步骤D：合成(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-(4-甲基哌嗪-1-基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000410
将(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-(4-甲基哌嗪-1-基)-[1,1'-联苯]-4-基)-L-亮氨酸甲酯(236毫克，0.425毫摩 尔)溶解于5毫升4N的盐酸二氧六环中，室温下反应1小时。TLC显示反应结束后，反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液(50毫升)中，乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1)分离纯化得(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-(4-甲基哌嗪-1-基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(180毫克，收率：82.8％)。
步骤E：合成(2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000411
将(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-(4-甲基哌嗪-1-基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(180毫克，0.352毫摩尔)溶解于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(145毫克，1.05毫摩尔)，氮气置换后于136摄氏度加热反应2小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入50毫升冰水中，乙酸乙酯(30毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1)分离纯化得(2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(147毫克，收率：85.2％)。
步骤F：合成(2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000412
取(2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(147毫克，0.30毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2毫升/1毫升/2毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠(36.0毫克，0.90毫摩尔)于室温下反应16小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，用二氯甲烷/异丙醇＝3/1混合液(20毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得(2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸粗品(120毫克)直接用于下一步。
步骤G：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000413
取(2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸粗品(120毫克，0.251毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(45.0毫克，0.375毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(143毫克，0.375毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(65.0毫克，0.50毫摩尔)于室温下反应2小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经prep-HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(5.74毫克)和(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((R)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(7.8毫克),LC-MS:RT＝1.78min,[M+H] +＝542.31。
实施例74
合成7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000414
具体合成路线如下：
步骤A：合成7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000415
将7-((S)-1-((((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(30毫克,0.06毫摩尔),N1,N1-二甲基乙烷-1,2-二胺(12毫克,0.12毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(30毫克,0.08毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.03毫升,0.6毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,经制备HPLC纯化(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)制备纯化得到14毫克白色固体7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)-N-(2-(二甲基氨基)乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酰胺三氟乙酸盐(收率：42％)。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝558.27。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.30(s,1H),8.87-8.79(m,1H),8.74(s,1H),8.67(d,J＝1.6Hz,1H),8.18(d,J＝8.0Hz,1H),8.07(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.85(d,J＝8.8Hz,2H),7.49(d,J＝8.0Hz,2H),4.54-4.44(m,1H),3.71-3.62(m,2H),3.35-3.27(m,2H),3.27-3.20(m,1H),2.89(s,3H),2.87(s,3H),1.80-1.69(m,1H),1.48-1.37(m,1H),1.36-1.16(m,4H),0.90(d,J＝4.8Hz,3H),0.88(d,J＝4.8Hz,3H),0.81-0.71(m,1H),0.55-0.45(m,1H).
实施例75
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000416
具体合成路线如下：
步骤A：((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000417
将(S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(100毫克，0.21毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入4-甲基哌嗪-2-酮(48毫克，0.42毫摩尔)，N 1，N 2-二甲基乙烷-1,2-二胺(36毫克，0.42毫摩尔)，碘化亚铜(42毫克，0.21毫摩尔)，碳酸钾(58毫克，0.42毫摩尔)。在微波条件下，130摄氏度搅拌1小时。
向反应液中加入饱和氯化钠溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备TLC板纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝15/1)得到65毫克无色油状物((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：60.7％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05
步骤B：((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000418
将((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基-2-氧杂哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(65毫克，0.127毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2:1:1，4毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化钠(10.0毫克，0.25毫摩尔)。在室温条件下搅拌3小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到20毫克无色油状物(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(收率：31.6％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05。
步骤C：(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000419
将((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基-2-氧杂哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(20毫克，0.04毫摩尔)和1-氨基环丙烷-1-腈盐酸盐(7毫克，0.06毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5.0毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(22毫克，0.06毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(15毫克，0.12毫摩尔)，在室温下搅拌2个小时。
向反应液中加入饱和氯化钠溶液(20毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物经过制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到5毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4-甲基-2-氧代哌嗪-1-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：31％)。LC-MS：RT＝2.80min，[M+H] +＝300.05.
实施例76
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000420
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-吗啉代-[1,1'-联苯基]-4-基)乙基)氨基)戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000421
将(2S)-2-(((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(714毫克，1.51毫摩尔)，4-(4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基)吗啉(530毫克，1.51毫摩尔)，碳酸钠(320毫克，3.02毫摩尔)溶解于10毫升(二氧六环：水＝5：1)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(173毫克，0.151毫摩尔)，氮气置换3次于85摄氏度下反应3小时。LC-MS显示反应结束后，反应液加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-吗啉代-[1,1'-联苯基]-4-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(283毫克，收率：32.6％)。
步骤B：合成(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-吗啉代-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000422
将(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-吗啉代-[1,1'-联苯基]-4-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(283毫克，0.493毫摩尔)溶解于5毫升4N的盐酸二氧六环中，室温下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液(100毫升)中，乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-吗啉代-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)戊酸乙酯粗品(250毫克)。
步骤C：合成(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000423
将(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-吗啉代-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)戊酸乙酯粗品(250毫克，0.471毫摩尔)溶解于5毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(195毫克，1.41毫摩尔)，氮气置换后于136摄氏度加热反应2小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入100毫升冰水中，乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(正己烷/乙酸乙酯＝3/1)分离纯化得(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(65.0毫克，收率：21.1％)。
步骤D：合成(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000424
取(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(65.0毫克，0.127毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2毫升/1毫升/2毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠(15.0毫克，0.381毫摩尔)于室温下反应16小时，TLC显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯(20毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸(45.0毫克，收率：40.1％)。
步骤E：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000425
取(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸(45.0毫克，0.089毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(16.0毫克，0.134毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(51.1毫克，0.134毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(23.0毫克，0.178毫摩尔)于室温下反应1.5小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(100毫升)稀释，用乙酸乙酯(50毫升×2)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经过制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(12.0毫克)和(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((R)-2,2,2-三氟-1-(8-吗啉代二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(14.0毫克)。LC-MS:RT＝2.08min,[M+H] +＝547.28。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.80(s,1H),8.09(d,J＝6.4Hz,1H),7.69(s,2H),7.58(d,J＝7.2Hz,1H),7.38(d,J＝6.8Hz,1H),7.21(dd,J＝7.2Hz,2.0Hz,1H),4.48-4.41(m,1H),3.80(t,J＝3.6Hz,4H),3.39-3.38(m,1H),3.18(t,J＝3.6Hz,4H),1.94-1.88(m,2H),1.40(d,J＝13.2Hz,3H),1.36(d,J＝13.2Hz,3H),1.30-1.15(m,3H),0.82-0.73(m,1H),0.49-0.40(m,1H).
实施例77
合成((S)-2-((((S)-1-(8-(4-(叔丁基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000426
具体合成路线如下：
步骤A：合成乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000427
将4-(甲氧基甲氧基)-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯甲醛(1.2克,4.2毫摩尔)和(2S)-2-(((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(1.5克,3.5毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(12毫升)中,然后将磷酸钾(1.5克,7.0毫摩尔)的水溶液(4毫升)加入反应液中,氮气保护后，加[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(260毫克,0.35毫摩尔),置换氮气,加热升温到100摄氏度并恒温搅拌2小时后，LC-MS显示反应结束。
反应液冷却至室温,垫硅藻土过滤,滤饼用乙酸乙酯(10毫升×3次)洗涤,合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,所得残渣经硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚＝1/9)得到2.5克黄色油状物乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯(收率：83.0％)。LC-MS：RT＝2.17min,[M+H] +＝518.21。
步骤B：合成乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000428
将乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯基]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯(1.5克,2.9毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(6.0毫升)中，将4.0M盐酸1,4-二氧六环溶液(4.0毫升)加入反应液中,室温下搅拌2小时。
向反应液中加水(15.0毫升)稀释,用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,分液。合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩得到1.3克黄色固体乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯(收率：94.8％)。LC-MS：RT＝2.07min,[M+H] +＝474.15。
步骤C：合成乙基(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000429
将乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-5'-甲酰基-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯(1.3克,2.75毫摩尔)和碳酸钾(1.1克,8.24毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(6.0毫升)中,迅速升温至136摄氏度并恒温搅拌2小时。
反应液冷却至室温,向反应液中加水(50.0毫升),混合液用乙酸乙酯(60毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物经过制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到290毫克黄色固体乙基(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸酯(收率：23.3％)。LC-MS：RT＝2.21min,[M+H] +＝454.19。
步骤D：合成7-((S)-1-(((S)-1-乙氧基-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000430
取乙基(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸酯(290毫克,0.64毫摩尔)溶于四氢呋喃/叔丁醇(3毫升/1毫升)混合溶液中,零摄氏度下,再加入亚氯酸钠(580毫克,6.4毫摩尔)和磷酸二氢钠(760毫克,6.4毫摩尔)的水溶液(3毫升),室温条件下反应0.5小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取3次(30毫升×3),合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到250毫克粗产物,粗品不需纯化直接用于下一步反应。(收率：83.3％)。LC-MS：RT＝2.11min,[M+H] +＝470.19。
步骤E：合成乙基(S)-2-(((S)-1-(8-(4-(叔丁基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000431
将7-((S)-1-(((S)-1-乙氧基-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(47毫克,0.1毫摩尔),1-(叔丁基)哌嗪(30毫克,0.2毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(57毫克,0.15毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.3毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(50毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到50毫克黄色固体(S)-2-((((S)-1-)(8-(4-(叔丁基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸酯(收率：84.2％)。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝594.30。
步骤F：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(4-(叔丁基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000432
取乙基(S)-2-(((S)-1-(8-(4-(叔丁基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2--三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸酯(50毫克,0.08毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中,再加入氢氧化钠(80毫克,2.0毫摩尔),室温条件 下反应2小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取三次(30毫升×3),合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到35毫克粗产物,粗品不需纯化直接用于下一步反应。(收率：77.3％)。LC-MS：RT＝1.75min,[M+H] +＝566.26。
步骤G：合成((S)-2-((((S)-1-(8-(4-(叔丁基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000433
将(S)-2-((((S)-1-(8-(4-(叔丁基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(35毫克,0.075毫摩尔),1-氨基-环丙基氰盐酸盐(18毫克,0.15毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(42毫克,0.11毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.04毫升,0.22毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,经制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到16毫克白色固体((S)-2-((((S)-1-(8-(4-(叔丁基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：34.0％)。LC-MS:RT＝1.74min,[M+H] +＝630.32。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.65(s,1H),8.82(s,1H),8.32(s,1H),8.21(d,J＝6.4Hz,1H),7.82(s,2H),7.70(s,1H),7.47(d,J＝6.4Hz,1H),4.55-4.48(m,1H),3.64-3.58(m,1H),3.41-3.30(m,4H),3.25-3.10(m,4H),1.94-1.88(m,2H),1.42(d,J＝14.4Hz,3H),1.36(d,J＝14.4Hz,3H),1.29-1.15(m,12H),0.82-0.73(m,1H),0.52-0.43(m,1H).
实施例78
合成((S)-2-((((S)-1-(8-(4-(甲基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000434
具体合成路线如下：
步骤A：合成乙基(S)-2-(((S)-1-(8-(4-(甲基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000435
将7-((S)-1-(((S)-1-乙氧基-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(50毫克,0.1毫摩尔),1-(甲基)哌嗪(30毫克,0.2毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(57毫克,0.15毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.3毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到50毫克黄色固体(S)-2-((((S)-1-)(8-(4-(甲基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2乙基-三氟乙基)氨基)-4,4-二甲基戊酸酯(收率：91.0％)。LC-MS:RT＝1.80min,[M+H] +＝552.26。
步骤B：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(4-(甲基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000436
取乙基(S)-2-(((S)-1-(8-(4-(甲基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2--三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸酯(50毫克,0.09毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中,再加入氢氧化钠(36毫克,0.9毫摩尔),室温条件下反应2小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取次(30毫升×3),合并有机相后用硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到35毫克粗产物,粗品不需纯化直接用于下一步反应。(收率：74.0％)。LCMS：RT＝1.69min,[M+H] +＝522.22。
步骤C：合成((S)-2-((((S)-1-(8-(4-(甲基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000437
将(S)-2-((((S)-1-(8-(4-(甲基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(35毫克,0.07毫摩尔),1-氨基-环丙基氰盐酸盐(12毫克,0.1毫摩尔),2-(7-氧化苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(38毫克,0.1毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.04毫升,0.22毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,经制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到23毫克白色固体((S)-2-((((S)-1-(8-(4-(甲基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：56.1％)。LCMS:RT＝1.72min,[M+H] +＝588.26。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ9.82(s,1H),8.82(s,1H),8.30(s,1H),8.19(d,J＝6.4Hz,1H),7.86-7.80(m,2H),7.65(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),7.48(d,J＝6.4Hz,1H),4.56-4.46(m,1H),3.96(br.s,4H),3.57-3.02(m,5H),2.85(s,3H),2.17-1.75(m,2H),1.40(d,J＝14.4Hz,3H),1.35(d,J＝14.4Hz,3H),1.32-1.18(m,3H),0.87-9.76(m,1H),0.54-0.45(m,1H).
实施例79
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((1-甲基哌啶-4-基)氧基))二苯并[b，,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000438
具体合成路线如下：
步骤A：合成(8-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000439
取(2,2,2-三氟-1-(8-羟基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(80毫克，0.20毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中，再加入三苯基膦(79毫克，0.30毫摩尔)，N-甲基-4-羟基哌啶(35毫克，0.30毫摩尔)，偶氮二甲酸二乙酯(52毫克，0.30毫摩尔)。于室温下反应3小时。LC-MS显示反应结束后，加入乙酸乙酯(30毫升)稀释反应液，饱和氯化钠溶液洗3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到粗产物，柱层析(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20/1)得到127毫克(8-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯。LC-MS:RT＝1.89min,[M+H] +＝557.18。
步骤B：合成(8-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000440
取(8-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(127毫克，0.20毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(100毫克，2.3毫摩尔)，室温条件下反应3小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲醇(10毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相pH至4-5，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到粗产物120毫克，粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS:RT＝1.76min,[M-H] -＝537.27
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((1-甲基哌啶-4-基)氧基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000441
取(8-((1-甲基哌啶-4-基)氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸粗品(120毫克)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(33毫克，0.28毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(106毫克，0.28毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺2毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.092毫升，0.56毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(30毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(30毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，经制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到35毫克(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基哌啶-4-基)氧基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：25.8％)。LC-MS:RT＝1.75min,[M+H] +＝557.28。
实施例80
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000442
具体合成路线如下：
步骤A：合成3-溴-4-羟基苯磺酰氯
Figure PCTCN2021072803-appb-000443
将邻溴苯酚(10.0克，57.8毫摩尔)溶解于300毫升无水二氯甲烷中，零摄氏度条件下，慢慢加入氯磺酸(11.5毫升，173毫摩尔)并于该温度下反应30分钟。取上层反应液旋干得淡黄色油状液体3-溴-4-羟基苯磺酰氯粗品(8.2克)直接用于下一步。
步骤B：合成2-溴-4-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)苯酚
Figure PCTCN2021072803-appb-000444
将N-甲基哌嗪(6.01克，60.1毫摩尔)，三乙胺(4.58克，79.3毫摩尔)溶解于200毫升无水二氯甲烷中，零摄氏度下 缓慢加入50毫升3-溴-4-羟基苯磺酰氯粗品(8.2克，30.1毫摩尔)的二氯甲烷溶液于该温度下反应1小时。TLC监测反应结束后，反应液直接硅胶拌样柱层析(二氯甲烷：甲醇＝15:1)分离纯化得2-溴-4-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)苯酚(5.40克，收率：26.8％)。
步骤C：合成1-((3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)磺酰基)-4-甲基哌嗪
Figure PCTCN2021072803-appb-000445
将2-溴-4-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)苯酚(2.04克，6.08毫摩尔)溶解于20毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，零摄氏度下加入60％氢化钠(364毫克，9.12毫摩尔)于该温度下反应20分钟后慢慢加入溴甲基甲基醚(754毫克，6.08毫摩尔)继续反应2小时。TLC监测转化50％左右，停止反应。反应液倒入200毫升冰水中，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1)分离纯化得1-((3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)磺酰基)-4-甲基哌嗪(410毫克，收率：17.7％)。
步骤D：合成(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000446
将((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(470毫克，1.05毫摩尔)，1-((3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)磺酰基)-4-甲基哌嗪(410毫克，1.05毫摩尔)，碳酸钠(222毫克，2.10毫摩尔)溶解于15毫升(二氧六环：水＝5：1)混合液中，加入四(三苯基膦)钯(121毫克，0.105毫摩尔)，氮气置换3次于100摄氏度下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，反应液加水(100毫升)稀释，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯粗品(510毫克)。
步骤E：合成(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000447
将(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯粗品(510毫克，0.820毫摩尔)溶解于10毫升4N的盐酸二氧六环中，室温下反应2小时。LC-MS显示反应结束后，反应液倒入饱和碳酸氢钠溶液(200毫升)中，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干的粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝25/1)分离纯化得(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(238毫克，收率：50.5％)。
步骤F：合成(2,2,2-三氟-1-(8-(((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000448
将(2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(238毫克，0.414毫摩尔)溶解于20毫升N,N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾(130毫克，0.941毫摩尔)，氮气置换后于135摄氏度加热反应2小时。TLC显示反应完全后，反应液倒入100毫升冰水中，乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，合并有机相，干燥，旋干得粗品经柱层析(二氯甲烷/甲醇＝30/1)分离纯化得(2,2,2-三氟-1-(8-(((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(108毫克，收率：46.8％)。
步骤G：合成(2,2,2-三氟-1-(8-(((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000449
取(2,2,2-三氟-1-(8-(((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(108毫克，0.194毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(3毫升/2毫升/3毫升)混合溶液中，加入氢氧化钠(19.0毫克，0.776毫摩尔)于室温下反应16小时，LC-MS显示反应结束后，反应液用2N稀盐酸调节pH至5-6，乙酸乙酯(20毫升×2)萃取，合并有机相，干燥，旋干得(2,2,2-三氟-1-(8-(((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸粗品(104毫克)直接用于下一步。
步骤H：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000450
取旋干得(2,2,2-三氟-1-(8-(((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸粗品(104毫克，0.194毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(35.0毫克，0.291毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(110毫克，0.291毫摩尔)溶解于5毫升无水N,N-二甲基甲酰胺中，加入N，N-二异丙基乙胺(50.0毫克，0.388毫摩尔)于室温下反应2小时。LC-MS监测显示反应完全后，向反应液中加入水(50毫升)稀释，用乙酸乙酯(30毫升×2)萃取，合并有机相,干燥，旋干得粗品经制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)]二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(15.0毫克)和(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((R)-2,2,2-三氟-1-(8-((4-甲基哌嗪-1-基)磺酰基)]二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(36.0毫克)。LC-MS:RT＝1.79min,[M+H] +＝606.26。 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.77(s,1H),8.73(d,J＝2.0Hz,1H),8.37(d,J＝8.0Hz,1H),8.05(d,J＝8.8Hz,1H),7.95(dd,J＝8.8,2.0Hz,1H),7.90(s,1H),7.54(d,J＝8.0Hz,1H),4.56-4.46(m,1H),3.96(br.s,4H),3.53-3.45(br.s,2H),3.28-3.23(m,1H),3.23-3.16(br.s,2H),2.78(s,3H),1.80-1.70(m,1H),1.48-1.38(m,1H),1.35-1.17(m,3H),0.89(d,J＝4.4Hz,3H),0.88(d,J＝4.4Hz,3H),0.87-0.79(m,1H),0.64-0.54(m,1H).
实施例81
合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000451
具体合成路线如下：
步骤A：合成2-溴-4-碘-1-(甲氧基甲氧基)苯
Figure PCTCN2021072803-appb-000452
取2-溴-4-碘酚(2.97克，10毫摩尔)溶于20毫升N,N-二甲基甲酰胺中，零摄氏度条件下逐渐加入氢化钠固体(520毫克，13毫摩尔)，零摄氏度反应30分钟后，逐滴加入溴甲基甲基醚(1.06毫升，13毫摩尔)，随后升至室温反应1小时，TLC显示反应结束后，加入乙酸酯(50毫升)稀释反应液，并转移到分液漏斗中，加入饱和氯化钠溶液洗有机相3次(40毫升×3)，有机相分离后用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩得到粗产品，硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚＝1/10)得到2.74克油状液体2-溴-4-碘-1-(甲氧基甲氧基)苯(收率：80％)。
步骤B：合成4-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)吗啉-3-酮
Figure PCTCN2021072803-appb-000453
将2-溴-4-碘-1-(甲氧基甲氧基)苯(0.5克,1.46毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10.0毫升)中,将碘化亚铜(277毫克,1.46毫摩尔),碳酸铯(950毫克,2.90毫摩尔)和吗啉-3-酮(277毫克,2.90毫摩尔)加入反应瓶中,氮气保护后,130摄氏度下搅拌2小时。
将反应液过滤,滤液缓慢滴加到饱和氯化铵水水溶液(20.0毫升)中,混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(15毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚＝1/5)得到120毫克黄色固体4-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)吗啉-3-酮(收率：26.0％)。
步骤C：合成乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-(3-氧代吗啉代))-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000454
将乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)苯基)乙基)氨基)戊酸酯(574毫克,1.2毫摩尔)和4-(3-溴-4-(甲氧基甲氧基)苯基)吗啉-3-酮(300毫克,0.9毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(12.0毫升)中,然后将磷酸钾(426毫克,2.0毫摩尔)的水溶液(3.0毫升)加入反应液中,氮气保护后，加[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(73毫克,0.1毫摩尔),置换氮气,加热升温到100摄氏度并恒温搅拌2小时后,LC-MS监测至反应完全。
反应液冷却至室温,垫硅藻土过滤,滤饼用乙酸乙酯(20毫升×3次)洗涤，合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,所得残渣经硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/石油醚＝1/3)得到211毫克黄色固体乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-(3-氧代吗啉代))-[1,1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯(收率：38.0％)。LC-MS：RT＝2.05min,[M+H] +＝589.21。
步骤D：合成乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-(3-氧代吗啉代))-[1,1'-联苯基]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000455
将乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-5'-(3-氧代吗啉代))-[1，1'-联苯]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯(211毫克,0.4毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(1.0毫升)中，将4.0M盐酸1,4-二氧六环溶液(1.0毫升)加入反应液中,室温下搅拌2小时后
向反应液中加水(15.0毫升)稀释,用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取,分液。合并有机相,有机相用饱和食盐水(30毫升×3次),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩得到180毫克黄色固体乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-(3-氧代吗啉代))-[1,1'-联苯基]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯(收率：89.0％)。LC-MS：RT＝1.99min,[M+H] +＝545.23。
步骤E：合成乙基(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000456
将乙基(2S)-4-氟-4-甲基-2-(((2,2,2-三氟-1-(2-氟-2'-羟基-5'-(3-氧代吗啉代))-[1,1'-联苯基]-4-基)乙基)氨基)戊酸酯(180毫克,0.33毫摩尔)和碳酸钾(91毫克,0.66毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2.0毫升)中,迅速升温至136摄氏度并恒温搅拌2小时。
反应液冷却至室温,向反应液中加水(50.0毫升),混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取,合并有机相,有机相用饱和食盐水(10毫升×3次),无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物经过制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到40毫克黄色固体乙基(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸酯(收率：23.1％)。LC-MS：RT＝2.08min,[M+H] +＝525.22。
步骤F：合成(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000457
将乙基(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸酯(65毫克,0.14毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中,再加入氢氧化钠(42毫克,1毫摩尔),室温条件下反应2小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取3次(30毫升×3),合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到35毫克黄色固体(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸(收率：90.0％),粗品不需纯化直接用于下一步反应。LC-MS：RT＝1.97min,[M-H] -＝495.30。
步骤G：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000458
将(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸(35毫克,0.07毫摩尔),1-氨基-环丙基氰盐酸盐(12毫克,0.1毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(38毫克,0.1毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.3毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(30毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗1次(20毫升),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,经制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到18毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(3-氧代吗啉代))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：46.0％)。LC-MS:RT＝1.95min,[M+H] +＝561.30。
实施例82
合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1H-吡唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000459
具体合成路线如下：
步骤A：合成((R)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000460
将((R)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(75毫克，0.158毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2:1:1，4毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢氧化钠(12毫克，0.317毫摩尔)。在室温条件下搅拌3小时。
向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至3。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到62毫克无色油状物((R)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(收率：85.2％)。
步骤B：合成(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000461
将((R)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(62毫克，0.135毫摩尔)和1-氨基环丙烷-1-腈盐酸盐(19毫克，0.162毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(102毫克，0.27毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(34毫克，0.27毫摩尔)，在室温下搅拌3个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得残余物用制备TLC板纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)纯化得到65毫克无色油状物(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(收率：92.1％)。LC-MS：RT＝2.72min，[M+H] +＝522.16
步骤C：合成4-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000462
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(40毫克，0.076毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1，11.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑-1-甲酸叔丁酯(33毫克，0.114毫摩尔)，碳酸钾(21毫克，0.152毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(5毫克，7微摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用制备TLC板纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)。得到42毫克棕色油状物4-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2，2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯(收率：89.3％)。LC-MS：RT＝2.41min，[M+H] +＝610.20。
步骤D：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1H-吡唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000463
将4-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2，2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-1H-吡唑-1-羧酸叔丁酯(42毫克，0.069毫摩尔)溶于二氯甲烷(4毫升)中，再加入2,2,2-三氟乙酸(0.25毫升)，室温反应3小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物经制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到17毫克白色固体(S)-2-((((S)-1-(8-(1H-吡唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：87％)。LC-MS：RT＝2.02min，[M+H] +＝510.02。
实施例83
合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1H-吡唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000464
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((1S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000465
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(45毫克，0.086毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1，11.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-吡唑(28毫克，0.103毫摩尔)，碳酸钾(23毫克，0.172毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(6毫克，8.6微摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用制备TLC板纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)。得到43毫克棕色油状物(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((1S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(收率：84.3％)。LC-MS：RT＝2.38min，[M+H] +＝594.03。
步骤B：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1H-吡唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000466
将(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((1S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(43毫克，0.072毫摩尔)溶于二氯甲烷(4毫升)中，再加入2,2,2-三氟乙酸(0.25毫升)，室温反应3小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物经制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到7毫克白色固体(S)-2-((((S)-1-(8-(1H-吡唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：15.5％)。LC-MS：RT＝2.04min，[M+H] +＝510.28。
实施例84 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(4-环丙基哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000467
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-2-(((S)-1-(8-(4-(环丙基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000468
将7-((S)-1-(((S)-1-乙氧基-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(50毫克,0.1毫摩尔),1-(环丙基)哌嗪(0.1毫升,0.2毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(57毫克,0.15毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.3毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到55毫克黄色固体(S)-2-((((S)-1-)(8-(4-(环丙基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(收率：91.0％)。LC-MS:RT＝1.80min,[M+H] +＝578.21。
步骤B：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(4-(环丙基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000469
取(S)-2-(((S)-1-(8-(4-(环丙基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(55毫克,0.09毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中,再加入氢氧化钠(36毫克,0.9毫摩尔),室温条件下反应2小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取3次(30毫升×3),合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到50毫克(S)-2-(((S)-1-(8-(4-(环丙基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(收率：74.0％)。LC-MS：RT＝1.69min,[M+H] +＝550.22。
步骤C：合成((S)-2-((((S)-1-(8-(4-(甲基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000470
将(S)-2-((((S)-1-(8-(4-(环丙基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(50毫克,0.09毫摩尔),1-氨基-环丙基氰盐酸盐(12毫克,0.1毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(38毫克,0.1毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.04毫升,0.22毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后,经高效液相制备仪(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到3毫克白色固体((S)-2-((((S)-1-(8-(4-(环丙基)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：56.1％)。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝614.32。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.20(d,J＝6.4Hz,2H),7.84(d,J＝6.8Hz,2H),7.66(d,J＝8.0Hz,1H),7.48(d,J＝6.4Hz,1H),4.54-4.45(m,1H),3.50-3.05(m,7H),1.93-1.86(m,2H),1.40(d,J＝14.8Hz,3H),1.36(d,J＝14.4Hz,3H),1.30-1.17(m,4H),1.1-0.84(m,2H),0.92-0.71(m,3H),0.52-0.49(m,1H).
实施例85 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-((R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000471
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-2-(((S)-1-(8-((R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4- 氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000472
将7-((S)-1-(((S)-1-乙氧基-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(50毫克,0.1毫摩尔),(R)-N,N-二甲基吡咯烷基-3-胺(0.1毫升,0.2毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(57毫克,0.15毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.3毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(20毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到50毫克黄色固体(S)-2-((((S)-1-)(8-((R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(收率：89.0％)。LC-MS:RT＝1.82min,[M+H] +＝566.21。
步骤B：合成(S)-2-((((S)-1-(8-((R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000473
取((S)-2-((((S)-1-(8-((R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(50毫克,0.09毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中,再加入氢氧化钠(36毫克,0.9毫摩尔),室温条件下反应2小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取3次(30毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到45毫克(S)-2-(((S)-1-(8-((R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(收率：74.0％)。LC-MS：RT＝1.72min,[M+H] +＝538.21。
步骤C：合成((S)-2-((((S)-1-(8-((R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000474
将(S)-2-((((S)-1-(8-((R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(45毫克,0.08毫摩尔),1-氨基-环丙基氰盐酸盐(12毫克,0.1毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(38毫克,0.1毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.04毫升,0.22毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后,经高效液相制备仪(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到36毫克白色固体((S)-2-((((S)-1-(8-((R)-3-(二甲基氨基)吡咯烷-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：75.0％)。LC-MS:RT＝1.73min,[M+H] +＝602.33。
实施例86 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000475
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000476
将(S)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(220毫克,0.49毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中,再加入一水合氢氧化锂(40毫克,0.71毫摩尔),室温条件下反应2小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至弱酸性,二氯甲烷萃取3次(30毫升×3),合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到170毫克黄色固体(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸(收率：82.0％)。
步骤B：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000477
将(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸(170毫克,0.40毫摩尔),1-氨基-环丙基氰盐酸盐(70毫克,0.60毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(228毫克,0.60毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.2毫升,1.0毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(50毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(50毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后得到油状液体,用乙酸乙酯(1毫升)溶解后,缓慢滴加到正己烷(20毫升)中,析出大量固体,过滤,滤饼用少量正己烷(3毫升×2)洗涤后收集固体,得到180毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(收率：92％)。
步骤C：合成7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000478
取(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-甲酰基二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(180毫克,0.37毫摩尔)溶于四氢呋喃/叔丁醇(3毫升/1毫升)混合溶液中,零摄氏度下,再加入亚氯酸钠(202毫克,1.8毫摩尔)和磷酸二氢钠(216毫克,1.8毫摩尔)的水溶液(2毫升),室温条件下反应0.5小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取3次(30毫升×3),合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到180毫克7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(收率：96％)。
步骤D：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(4-(二甲基氨基)哌啶-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000479
将7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(40毫克,0.08毫摩尔),N,N-二甲基哌啶-4-胺(20毫克,0.16毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(38毫克,0.1毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.24毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后,经高效液相制备仪(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到25毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(4-(二 甲基氨基)哌啶-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：51.0％)。LC-MS:RT＝1.72min,[M+H] +＝616.36。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.78(s,1H),8.83(s,1H),8.26(s,1H),8.19(d,J＝8.0Hz,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.60(d,J＝8.8Hz,1H),7.47(d,J＝8.0Hz,1H),4.56-4.45(m,4H),3.51-3.35(m,2H),2.783(s,3H),2.772(s,3H),2.10-1.83(m,4H),1.70-1.58(m,2H),1.43(d,J＝13.6Hz,3H),1.35(d,J＝13.6Hz,3H),1.30-1.18(m,3H),0.87-0.76(m,1H),0.52-0.45(m,1H).
实施例87 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-((S)-2,4-二甲基哌嗪-1-羰基]二苯并[b,d]呋喃-3-基]-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000480
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-((S)-2,4-二甲基哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000481
将7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(40毫克,0.08毫摩尔),(S)-1,3-二甲基哌嗪(20毫克,0.16毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(38毫克,0.1毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.24毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后,经高效液相制备仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到23毫克白色固体((S)-2-((((S)-1-(8-((S)-2,4-二甲基哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：48.0％)。LC-MS:RT＝1.75min,[M+H] +＝601.33。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.83(s,1H),8.84(s,1H),8.27(s,1H),8.20(d,J＝8.0Hz,1H),7.84-7.80(m,2H),7.62(d,J＝8.4Hz,1H),7.48(d,J＝8.0Hz,1H),4.56-4.48(m,1H),3.42-3.35(m,1H),3.31-3.19(m,2H),3.18-3.10(m,2H),2.84(s,3H),1.95-1.84(m,2H),1.45-1.33(m,10H),1.30-1.17(m,4H),0.87-0.76(m,1H),0.54-0.47(m,1H).
实施例88 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-((S)-3,4-二甲基哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000482
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-((S)-3,4-二甲基哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000483
将7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-氟-4-甲基-1-氧戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(40毫克,0.08毫摩尔),(S)-1,2-二甲基哌嗪(20毫克,0.16毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(38毫克,0.1毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.24毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后,经高效液相制备仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到20毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-((S)-3,4-二甲基哌嗪-1-羰基]二苯并[b,d]呋喃-3-基]-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：41.7％)。LC-MS:RT＝1.74min,[M+H] +＝601.33。
实施例89 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(4-(甲基-d3)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000484
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(4-(甲基-d3)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000485
将7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(40毫克,0.08毫摩尔),N-(甲基-d3)哌嗪盐酸盐(28毫克,0.16毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(38毫克,0.1毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.24毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后,经高效液相制备仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到16毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(4-(甲基-d3)哌嗪-1-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：34.0％)。LC-MS:RT＝1.73min,[M+H] +＝591.33。
实施例90 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000486
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000487
将7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-羧酸(40毫克,0.08毫摩尔),2-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷溴酸盐(44毫克,0.16毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(38毫克,0.1毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.24毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后,经高效液相制备仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到9毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.1]庚烷-2-羰基]二苯并[b,d]呋喃-3-基]-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：18.8％)。LC-MS:RT＝1.73min,[M+H] +＝600.27。
实施例91 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000488
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000489
将7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-氟-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-甲酸(100毫克,0.20毫摩尔),2-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷盐酸盐(47毫克,0.24毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(114毫克,0.3毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(1毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.1毫升,0.6毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后,经高效液相制备仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到54毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(5-甲基-2,5-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-2-羰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率:18.8％)。LC-MS:RT＝1.73min,[M+H] +＝600.27。
实施例92 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000490
具体合成路线如下：
步骤A：合成甲基((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000491
将甲基((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸甲酯(26毫克，0.05毫摩尔)，(1-甲基-1H-咪唑-4-基)硼酸(20.8毫克，0.05毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水的混合液(4:1，2.0毫升)中。随后，向溶液中加入碳酸钠(16毫克，0.15毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(4毫克，5微摩尔)，置换氮气3遍。在80摄氏度条件下搅拌3小时，LC-MS监测反应直至反应结束。
将反应液用乙酸乙酯(20毫升)稀释，加入饱和食盐水(20毫升)中洗一次，水相再用乙酸乙酯(20毫升×2次)萃取两次。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)。得到16毫克棕色油状物甲基((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(收率：67.7％)。LC-MS：RT＝1.89min，[M+H] +＝474.25。
步骤B：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000492
取甲基((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(16毫克，0.34毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(42毫克，1毫摩尔)，室温条件下反应3小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯甲烷/甲醇混合液(10/1,20毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相Ph至3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(20毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到16毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000493
取((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(16毫克，0.034毫摩尔)，1-氨基-环丙基1-氰盐酸盐(6.1毫克，0.052毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(20毫克，0.052毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺2毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.024毫升，0.14毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(30毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(30毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，经过制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化后得到10毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：46％)。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝524.28。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.17(s,1H),8.75(s,1H),8.56(s,1H),8.19(d,J＝1.2Hz,1H),8.11(d,J＝8.0Hz,1H),7.94-7.84(m,2H),7.85(s,1H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),4.54-4.45(m,1H),3.93(s,3H),3.28-3.22(m,1H),1.79-1.70(m,1H),1.48-1.39(m,1H),1.35-1.17(m,4H),0.90(d,J＝3.2Hz,3H),0.88(d,J＝3.2Hz,3H),0.83-0.76(m,1H),0.57-0.50(m,1H).
实施例93 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000494
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000495
将(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(85毫克,0.15毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1,30.0毫升)的溶液中。随后,向上述溶液中加入4-碘-1-甲基-1H-咪唑(42毫克,0.20毫摩尔),碳酸钾(40毫克,0.30毫摩尔),[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(16毫克,0.02毫摩尔),置换氮气3遍。在100摄氏度下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(10毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(10毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物经硅胶柱层析分离纯化得到70毫克黄色固体(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(收率：92.1％)。LC-MS：RT＝1.86min,[M+H] +＝506.29。
步骤B：合成(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000496
取(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(70毫克,0.13毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中,再加入氢氧化钠(21毫克,0.5毫摩尔),室温条件下反应2小时,LC-MS显示反应结束后,加入二氯甲烷(30毫升)稀释反应液,加入水和2N稀盐酸调节水相pH至2-3,二氯甲烷萃取3次(30毫升×3),合并有机相后用无水硫酸钠干燥,过滤后浓缩得到55毫克(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸(收率：91.7％)。LC-MS：RT＝1.77min,[M+H] +＝478.26。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000497
将(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸(55毫克,0.11毫摩尔),1-氨基-环丙基氰盐酸盐(20毫克,0.17毫摩尔),2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(60毫克,0.17毫摩尔)加入烧瓶中,加入N,N-二甲基甲酰胺(2毫升)将底物全部溶解,最后加入N,N-二异丙基乙胺(0.05毫升,0.34毫摩尔),室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后,向反应液中加入乙酸乙酯(15毫升)稀释并转移到分液漏斗中,用饱和食盐水洗4次(10毫升×4),将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后,经高效液相制备仪(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到27毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：45.0％)。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝542.28。
实施例94 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-(S)2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000498
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-4-氟-4-甲基-2-((2,2,2-三氟-1-(3-氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)苯基)乙基)氨基)戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000499
将(S)-2-(((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(3.0克,6.4毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(30毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入频哪醇硼酸酯(2.5克，9.9毫摩尔)，醋酸钾(1.2克，12.7毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(0.47克，0.6毫摩尔)，置换氮气3遍。在80摄氏度条件下搅拌16小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(200毫升)中。混合液用乙酸乙酯(50毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(50毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)。得到2.5克黄色固体(S)-2-(((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(收率：82％)。LC-MS：RT＝2.27min，[M+H] +＝480.31。
步骤B：合成(S)-2-(((1-(5'-溴-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000500
将(S)-2-(((1-(4-溴-3-氟苯基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(2.5克，5.2毫摩尔)溶于二氧六环(60毫升)和水(20毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入4-溴-2-碘-1-(甲氧基甲氧基)苯(2.5克，7.4毫摩尔)，碳酸钠(1.7克，12.4毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(0.48克，0.62毫摩尔)，置换氮气3遍。在室温条件下搅拌18小时。
将反应液滴加到饱和食盐水100毫升中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(200毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)。得到1.3克黄色油状物(S)-2-(((1-(5'-溴-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(收率：44％)。LC-MS：RT＝2.20min，[M+H] +＝568.26。
步骤C：合成(S)-2-(((1-(5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000501
将(S)-2-(((1-(5'-溴-2-氟-2'-(甲氧基甲氧基)-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(1.3克，2.1毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(5毫升)中，再加入4N的盐酸1,4-二氧六环溶液(5毫升)，室温反应1小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)。得到1.1毫克无色油状物(S)-2-(((1-(5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(收率：99％)。LC-MS：RT＝2.06min，[M+H] +＝526.32。
步骤D：合成(S)-2-((((S)-1-(5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000502
将(S)-2-(((1-(5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(1.1克，2.1毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入碳酸钾(870毫克，6.3毫摩尔)。在120摄氏度条件下搅拌2小时。
将反应液滴加到饱和氯化铵(100毫升)溶液中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(50毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(50毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到170毫克白色固体(S)-2-((((S)-1-(5'-溴-2-氟-2'-羟基-[1,1'-联苯]-4-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(收率：16％)。LC-MS：RT＝2.36min，[M+H] +＝504.15。
步骤E：合成(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000503
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(170毫克,0.34毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(5毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入频哪醇硼酸酯(128毫克，0.51毫摩尔)，醋酸钾(66毫克，0.68毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(26毫克，0.03毫摩尔)，置换氮气3遍。在80摄氏度条件下搅拌16小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(20毫升)中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(10毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(10毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝10/1)。得到140毫克黄色固体(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(收率：82％)。LC-MS：RT＝2.45min，[M+H] +＝552.32。
步骤F：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000504
将(S)-4-氟-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(50毫克，0.09毫摩尔)溶于二氧六环(4毫升)和水(1毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入4-溴-1,5-二甲基-1H-咪唑(31毫克，0.18毫摩尔)，磷酸钾(38毫克，0.18毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(10毫克，0.009毫摩尔)，置换氮气3遍。在室温条件下搅拌18小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(10毫升)中。混合液用乙酸乙酯萃取3次(10毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(10毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝0/1)。得到45毫克黄色油状物(S)-2-((((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(收率：95％)。LC-MS：RT＝1.92min，[M+H] +＝520.31。
步骤G：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000505
将乙基(S)-2-((((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸酯(45毫克，0.086毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2:1:1，4毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入一水和氢氧化锂(8毫克，0.19毫摩尔)。在室温条件下搅拌1小时。
向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至4。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到40毫克无色油状物(S)-2-((((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(收率：94％)。LC-MS：RT＝1.77min，[M+H]+＝492.27。
步骤H：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000506
将(S)-2-((((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(40毫克，0.08毫摩尔)和1-氨基环丙烷-1-腈盐酸盐(18.9毫克，0.16毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(45毫克，0.12毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(31毫克，0.24毫摩尔)，在室温下搅拌0.5个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯萃取3次(20毫升×3)。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得粗品经高效液相制备仪(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到20毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：45％)。LC-MS：RT＝1.77min，[M+H] +＝556.31. 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.16(s,1H),8.82(s,1H),8.37(d,J＝1.2Hz,1H),8.23(d,J＝6.4Hz,1H)，7.94(m,J＝6.8Hz,1H),7.84(s,1H),7.72(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),7.49(d,J＝6.4Hz,1H),4.54-4.48(m,1H),3.86(s,3H),3.43-3.35(m,1H),2.47(s,3H),1.94-1.86(m,1H),1.40(d,J＝14.8Hz,3H),1.36(d,J＝14.8Hz,3H),0.87-0.76(m,1H),0.52-0.48(m,1H).
实施例95 合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000507
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000508
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(1.2克,2.3毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1,30.0毫升)的溶液中。随后,向上述溶液中加入(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基)硼酸(1.6克,11.4毫摩尔),碳酸钾(1.2克,8.7毫摩尔),[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(168毫克,0.23毫摩尔),置换氮气3遍。在100气下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(100毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(40毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物经高效液相制备仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到900毫克白色固体(S)-2-((((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：72.6％)。LC-MS：RT＝1.81min,[M+H] +＝538.31。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.18(s,1H),8.75(s,1H),8.37(d,J＝1.6Hz,1H),8.22(d,J＝6.4Hz,1H),7.94(m,J＝6.8Hz,1H),7.85(s,1H),7.72(dd,J＝6.8,1.2Hz,1H),7.50(d,J＝6.4Hz,1H),4.52-4.45(m,1H),3.86(s,3H),3.27-3.22(m,1H),2.47(s,3H),1.79-1.71(m,1H),1.48-1.38(m,1H),1.34-1.20(m,4H),0.89(d,J＝3.6Hz,3H),0.88(d,J＝3.6Hz,3H),0.87-0.76(m,2H),0.59-0.52(m,1H).
实施例96 合成(S)-N-(氰甲基)-2-(((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000509
具体合成路线如下：
步骤A：(S)-N-(氰甲基)-2-(((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000510
将(S)-2-((((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(40毫克，0.08毫摩尔)和2-氨基乙腈盐酸盐(14.8毫克，0.16毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(45毫克，0.12毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(31毫克，0.24毫摩尔)，在室温下搅拌0.5个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(40毫升)。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得粗品经高效液相制备仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到20毫克白色固体(S)-N-(氰甲基)-2-(((S)-1-(8-(1,5-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：31％)。LC-MS：RT＝1.75min，[M+H] +＝530.31. 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.09(s,1H),8.70(s,1H),8.36(d,J＝1.6Hz,1H),8.21(d,J＝8.0Hz,1H),7.92(m,J＝8.8Hz,1H),7.85(s,1H),7.72(dd,J＝8.4,1.6Hz,1H),7.49(d,J＝7.6Hz,1H),4.55-4.50(m,1H),3.89(d,J＝5.2Hz,2H),3.85(s,3H),2.47(s,3H),2.04-1.83(m,3H),1.40(d,J＝16.8Hz,3H),1.35(d,J＝16.8Hz,3H).
实施例97 合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000511
具体合成路线如下：
步骤A：合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((1S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000512
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(45毫克，0.086毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1，11.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-咪唑(28毫克，0.103毫摩尔)，碳酸钾(23毫克，0.172毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(6毫克，8.6微摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用制备TLC板纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)。得到37毫克棕色油状物(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((1S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(收率：72.5％)。LC-MS：RT＝2.35min，[M+H] +＝594.03。
步骤B：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000513
将(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((1S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(37毫克，0.062毫摩尔)溶于二氯甲烷(4毫升)中，再加入2,2,2-三氟乙酸(0.25毫升)，室温反应3小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到16毫克白色固体(S)-2-((((S)-1-(8-(1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：49.2％)。LC-MS：RT＝1.98min，[M+H] +＝510.28。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)12.2(s,1H),8.72(s,1H),8.51(s,1H),8.14(d,J＝6.0Hz,1H),7.96(s,1H),7.75(d,J＝4.8Hz,2H),7.70(s,1H),7.68(s,1H),7.43(d,J＝6.4Hz,1H),4.48-4.43(m,1H),3.28-3.20(m,1H),3.04-2.98(m,1H),1.80-1.70(m,1H),1.48-1.40(m,1H),1.40-1.19(m,3H),0.90(d,J＝3.2Hz,3H),0.88(d,J＝3.2Hz,3H),0.81-0.75(m,1H),0.55-0.50(m,1H).
实施例98 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000514
具体合成路线如下：
步骤A：合成(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)硼酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000515
将4-溴-1,2-二甲基-1H-咪唑(175毫克，1毫摩尔)溶于无水四氢呋喃(10毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入异丙基氯化镁(0.9毫升，1.5毫摩尔)。在40摄氏度条件下搅拌1小时。然后，向上述溶液中加入硼酸三甲酯(156毫克，1.5毫摩尔)，在室温条件下再搅拌2小时。
将反应液过滤，固体用四氢呋喃(20毫升)洗涤并减压干燥得到粗品390毫克白色固体(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)硼酸(收率：278.5％)。LC-MS：RT＝0.78min，[M+H] +＝141.08。
步骤B：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000516
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(200毫克，0.38毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(5:1，25毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)硼酸(308毫克，0.19毫摩尔)，磷酸钾(241毫克，1.14毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(27毫克，38微摩尔)，置换氮气3遍。在80摄氏度条件下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(80毫升)中。混合液用乙酸乙酯(40毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(30毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物经过制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化后得到65毫克灰色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：31.8％)。LC-MS：RT＝1.81min，[M+H] +＝538.33。
实施例99 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000517
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-碘-1,2-二甲基-1H-咪唑
Figure PCTCN2021072803-appb-000518
将5-碘-2-甲基-1H-咪唑(100毫克，0.48毫摩尔)溶于无水四氢呋喃(10毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入氢化钠(28.8毫升，0.77毫摩尔)。在零摄氏度条件下搅拌0.5小时。然后，向上述溶液中加入碘甲烷(82毫克，0.57毫摩尔)，在零摄氏度条件下再搅拌1小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(30毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(30毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物经过制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化后得到65毫克无色油状物5-碘-1,2-二甲基-1H-咪唑(收率：61.0％)。LC-MS：RT＝1.05min，[M+H] +＝223.10。
步骤B：合成甲基((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000519
将甲基((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)甲基)-L-亮氨酸(71毫克，0.14毫摩尔)，5-碘-1,2-二甲基-1H-咪唑(60毫克，0.18毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水的混合液(2:1，9毫升)中。随后，向溶液中加入磷酸钾(87毫克，0.41毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(10毫克，13微摩尔)，置换氮气3遍。在90摄氏度条件下搅拌4小时。
将反应液用乙酸乙酯(20毫升)稀释，加入饱和食盐水(20毫升)中洗一次，水相再用乙酸乙酯(20毫升×2次)萃取两次。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)。得到25毫克棕色油状物甲基((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(收率：28.7％)。LC-MS：RT＝1.89min，[M+H] +＝488.25。
步骤C：合成((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000520
取甲基((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(25毫克，0.051毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(10毫克，0.25毫摩尔)，室温条件下反应2小时。
加入二氯甲烷/甲醇混合液(10/1,20毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相Ph至3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(20毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到20毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤D：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000521
将((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)-L-亮氨酸(20毫克，0.042毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(6毫克，0.052毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(24毫克，0.063毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(21毫克，0.17毫摩尔)，室温条件下反应1小时。
向反应液中加入乙酸乙酯(30毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗涤(30毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，经过制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化后得到18毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：79.8％)。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝538.33。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)14.2(s,1H),8.76(s,1H),8.36(d,J＝1.2Hz,1H),8.20(d,J＝8.0Hz,1H),7.94(d,J＝8.0Hz,1H),7.86(s,1H),7.82(s,1H),7.70(dd,J＝8.4 1.6Hz,1H),7.50(d,J＝8.0Hz,1H)，4.60-4.43(m,1H),3.72(s,3H),3.28-3.21(m,1H),2.69(s,3H),1.79-1.70(m,1H),1.48-1.40(m,1H),1.39-1.20(m,3H),0.90(d,J＝4.0Hz,3H),0.88(d,J＝4.0Hz,3H),0.85-0.79(m,1H),0.61-0.53(m,1H).
实施例100 合成((S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(2-甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000522
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-碘-2-甲基-1H-咪唑-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000523
将5-碘-2-甲基-1H-咪唑(750毫克，3.6毫摩尔)溶于无水四氢呋喃(15毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入二碳酸二叔丁酯(1克，4.6毫摩尔)，4-二甲氨基吡啶(219毫克，1.8毫摩尔)。在室温条件下搅拌1小时。将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)。得到1.1克棕色油状物5-碘-2-甲基-1H-咪唑-1-羧酸叔丁酯(收率：99.2％)。LC-MS：RT＝1.78min，[M+H] +＝208.03。
步骤B：合成(1-(叔丁氧羰基)-2-甲基-1H-咪唑-5-基)硼酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000524
将5-碘-2-甲基-1H-咪唑-1-羧酸叔丁酯(1.1克，3.6毫摩尔)溶于无水四氢呋喃(15毫升)的溶液中。随后，在零下70摄氏度条件下向上述溶液中加入异丙基氯化镁(2.8毫升，5.7毫摩尔)，并搅拌30分钟。然后，体系恢复至室温并搅拌1小时。最后，在零下70摄氏度条件下向上述溶液中加入硼酸三甲酯(546毫克，5.2毫摩尔)，搅拌10分钟恢复至室温并再搅拌2小时。
将反应液过滤，固体用四氢呋喃(30毫升)洗涤并减压干燥得到粗品2.6克白色固体(1-(叔丁氧羰基)-2-甲基-1H-咪唑-5-基)硼酸。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000525
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(50毫克，0.096毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(2:1，6毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入(1-(叔丁氧羰基)-2-甲基-1H-咪唑-5-基)硼酸(108毫克，0.48毫摩尔)，碳酸钠(30毫克，0.29毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(10毫克，9微摩尔)，置换氮气3遍。在90摄氏度条件下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(80毫升)中。混合液用乙酸乙酯(40毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(30毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物经过制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化后得到40毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：79.6％)。LC-MS：RT＝1.81min，[M+H] +＝524.29。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)14.2(s,1H),8.75(s,1H),8.53(s,1H),8.10(d,J＝8.0Hz,1H),8.05(s,1H),7.91(d,J＝0.8Hz,1H),7.85(s,1H),7.50(d,J＝8.0Hz,1H),7.50(dd,J＝8.0Hz,1H),4.53-4.43(m,1H),3.28-3.22(m,1H),2.66(s,3H),1.79-1.70(m,1H),1.48-1.40(m,1H),1.35-1.18(m,3H),0.90(d,J＝3.2Hz,3H),0.88(d,J＝3.2Hz,3H),0.83-0.75(m,1H),0.58-0.51(m,1H).
实施例101 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(4-甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000526
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(4-甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000527
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(70毫克,0.14毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1,22.0毫升)的溶液中。随后,向上述溶液中加入(1-(叔丁氧羰基)-4-甲基-1H-咪唑-5-基)硼酸(300毫克,0.70毫摩尔),碳酸钾(41毫克,0.30毫摩尔),[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(10毫克,0.014摩尔),置换氮气3遍。在100摄氏度下搅拌3小时。停止加热,向混合液中加氢氧化锂(100毫克,2.38毫摩尔)的水溶液(10.0毫升),室温下搅拌1小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物经高效液相制备仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到37毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(4-甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：50.2％)。LC-MS：RT＝1.77min,[M+H] +＝524.28。
实施例102 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(2,4-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000528
具体合成路线如下：
步骤A：合成5-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-2,4-二甲基-1H-咪唑-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000529
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(45毫克，0.086毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1，11.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-咪唑(28毫克，0.103毫摩尔)，碳酸钾(23毫克，0.172毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(6毫克，8.6微摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用制备TLC板纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)。得到22毫克棕色油状物5-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基氯丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-2,4-二甲基-1H-咪唑-1-羧酸叔丁酯(收率：40.2％)。LC-MS：RT＝2.23min，[M+H] +＝638.33。
步骤B：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(2,4-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000530
将5-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基氯丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-2,4-二甲基-1H-咪唑-1-羧酸叔丁酯(22毫克，0.034毫摩尔)溶于二氯甲烷(4毫升)中，再加入2,2,2-三氟乙酸(0.25毫升)，室温反应3小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用高效液相制备仪(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)纯化得到12毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(2,4-二甲基-1H-咪唑-5-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：65.6％)。LC-MS：RT＝1.99min，[M+H] +＝538.34。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)14.2(s,2H),8.76(s,1H),8.36(d,J＝1.6Hz,1H),8.19(d,J＝8.0Hz,1H)，7.93(d,J＝8.8Hz,1H),7.84(s,1H)，7.72(dd,J＝8.4Hz,1.6Hz,1H)，7.49(d,J＝8.0Hz,1H),4.53-4.46(m,1H),3.28-3.21(m,1H),2.61(s,3H),2.46(s,3H),1.79-1.70(m,1H),1.48-1.40(m,1H),1.35-1.18(m,3H),0.90(d,J＝3.2Hz,3H),0.88(d,J＝3.2Hz,3H),0.84-0.76(m,1H),0.58-0.51(m,1H).
实施例103 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((S)-1-(8-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000531
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((S)-1-(8-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000532
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(90毫克，0.172毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(10:1，11.0毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-1H-咪唑(28毫克，0.103毫摩尔)，碳酸钾(46毫克，0.344毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(12毫克，17.2微摩尔)，置换氮气3遍。在100摄氏度条件下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用制备TLC板纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝2/1)。得到46毫克淡黄色油状物(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((S)-1-(8-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺(收率：50.9％)。LC-MS：RT＝2.18min，[M+H] +＝526.27。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.72(s,1H),8.24(d,J＝0.8Hz,1H),8.15(d,J＝6.4Hz,1H),7.76(s,1H),7.69(d,J＝6.8Hz,1H),7.65(dd,J＝6.8Hz,1.2Hz,1H)，7.43(d,J＝6.4Hz,1H),6.34(s,1H),4.48-4.42(m,1H),4.27(d,J＝2.0Hz,1H)，3.88(t,J＝4.4Hz,1H),3.28-3.21(m,1H),3.13-2.98(m,1H),2.61-2.55(m,2H),1.78-1.70(m,1H),1.48-1.40(m,1H),1.43-1.07(m,3H),0.89(d,J＝4.0Hz,3H),0.88(d,J＝4.0Hz,3H),0.81-0.72(m,1H),0.58-0.45(m,1H).
实施例104 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(四氢呋喃-2H-吡喃-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000533
具体合成路线如下：
步骤A：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(四氢呋喃-2H-吡喃-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000534
将(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((S)-1-(8-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺(20毫克，0.038毫摩尔)溶于甲醇(3毫升)中。随后，向上述溶液中加入Pd/C(12毫克，0.114毫摩尔)，置换氢气3遍。在室温下反应12小时。
反应液用滤头过滤，滤液浓缩得到13毫克淡黄色油状物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(四氢呋喃-2H-吡喃-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺(收率：65.2％)。LC-MS：RT＝2.33min，[M+H] +＝528.31。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.72(s,1H),8.12(d,J＝6.4Hz,1H),8.05(d,J＝1.2Hz,1H),7.73(s,1H),7.64(d,J＝6.8Hz,1H),7.44(dd,J＝6.8Hz,1.6Hz,1H),7.41(d,J＝6.4Hz,1H),4.48-4.40(m,1H),4.05-3.95(m,2H),3.55-3.40(m,2H),3.30-3.15(m,1H),3.05-2.85(m,2H),1.85-1.65(m,4H),1.50-1.35(m,1H),1.38-1.14(m,3H),0.88(d,J＝4.0Hz,3H),0.87(d,J＝4.0Hz,3H),0.85-0.72(m,1H),0.56-0.50(m,1H).
实施例105 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-酰基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000535
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(7-((S)1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000536
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(50毫克,0.096毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(6毫升)和水(2毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(44毫克，0.144毫摩尔)，碳酸钠(30毫克，0.288毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(10毫克，0.009毫摩尔)，置换氮气3遍。在80摄氏度条件下搅拌2小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(20毫升)中。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝3/1)。得到40毫克白色固体4-(7-((S)1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯.(收率：67％)。LC-MS：RT＝2.31min，[M+H] +＝625.41。
步骤B：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000537
将(S)-4-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(20毫克,0.064毫摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)中,然后将三氟乙酸(0.5毫升)加入反应液中,室温搅拌0.5小时后,LC-MS监测至反应完全。
反应液室温室温旋干,反应液室温室温旋干,粗品经高效液相制备仪分离纯化得到10毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：59％)。LC-MS：RT＝1.75min,[M+H] +＝529.33。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.74(s,1H),8.22(s,1H),8.16(d,J＝6.4Hz,1H),7.75(s,1H),7.68(d,J＝6.8Hz,1H),7.62(dd,J＝6.8Hz,1.2Hz,1H),7.43(d,J＝6.4Hz,1H),6.29(s,1H)，4.50-4.40(m,1H),3.30-3.21(m,2H),3.10-2.95(m,3H),2.54(s,2H),1.78-1.70(m,1H),1.50-1.41(m,1H),1.35-1.20(m,3H),0.89(d,J＝3.6Hz,3H),0.88(d,J＝3.6Hz,3H),0.84-0.73(m,1H),0.58-0.45(m,1H).
实施例106 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((S)-1-(8-(4,5-二氢-1H-吡咯-3-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000538
具体合成路线如下：
步骤A：合成3-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000539
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(100毫克,0.20毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(4:1,15.0毫升)的溶液中。随后,向上述溶液中加入3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(118毫克,0.40毫摩尔),碳酸钾(78毫克,0.50毫摩尔),[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(15毫克,0.020毫摩尔),置换氮气3遍。在100摄氏度下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(50毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(20毫升×3次),然后用无水硫酸钠干燥,减压浓缩。所得残余物用制备TLC板纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝1/1)得到90毫克淡黄色油状物3-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(收率：74.0％)。LC-MS：RT＝2.13min,[M+H] +＝611.20。
步骤B：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000540
将3-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(30毫克,0.050毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中,再加入2,2,2-三氟乙酸(0.5毫升),室温反应0.5小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到15毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(2,5-二氢-1H-吡咯-3-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：60.0％)。LC-MS：RT＝1.77min,[M+H] +＝511.22。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.93(s,1H),8.34(s,1H),8.14(d,J＝8.0Hz,1H),7.82(s,1H),7.76(s,2H),7.47(d,J＝8.0Hz,1H),6.49(s,1H),4.54-4.46(m,1H),4.44(s,2H),4.17(s,2H), 3.15-3.04(m,1H),1.78-1.68(m,1H),1.48-1.38(m,1H),1.38-1.14(m,3H),0.89(d,J＝1.6Hz,3H),0.87(d,J＝1.6Hz,3H),0.80-0.70(m,1H),0.50-0.41(m,1H).
实施例107 合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((1S)-2,2,2-三氟-1-(8-(吡咯烷-3-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000541
具体合成路线如下：
步骤A：合成3-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000542
将3-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-2,5-二氢-1H-吡咯-1-羧酸叔丁酯(60毫克,0.098毫摩尔)溶于乙酸乙酯(6毫升)中。随后,向上述溶液中加入Pd/C(18毫克),置换氢气3遍。在室温下反应1小时。
反应液垫硅藻土过滤,滤液浓缩得到50毫克淡黄色油状物3-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(收率：65.2％)。LC-MS：RT＝2.27min,[M+Na] +＝635.21。
步骤B：合成(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((1S)-2,2,2-三氟-1-(8-(吡咯烷-3-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000543
将3-(7-((S)-1-(((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(50毫克,0.082毫摩尔)溶于二氯甲烷(2.0毫升)中,再加入2,2,2-三氟乙酸(0.5毫升),室温反应0.5小时。
将反应液减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化得到11毫克白色固体(2S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((1S)-2,2,2-三氟-1-(8-(吡咯烷-3-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：26.2％)。LC-MS：RT＝1.78min,[M+H] +＝513.22。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.01(s,1H),8.79(s,1H),8.15(d,J＝1.2Hz,1H),8.11(d,J＝6.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.72(d,J＝6.8Hz,1H),7.53(dd,J＝6.8Hz,1.2Hz,1H),7.44(d,J＝6.4Hz,1H)，4.50-4.40(m,1H),3.75-3.64(m,1H),3.64-3.55(m,1H),3.53-3.43(m,1H),3.30-3.21(m,1H),3.20-3.15(m,1H),3.10-3.08(m,1H),2.52-2.42(m,1H),2.12-1.95(m,1H),1.78-1.68(m,1H),1.48-1.38(m,1H),1.35-1.14(m,3H),0.89(d,J＝3.2Hz,3H),0.88(d,J＝3.2Hz,3H),0.83-0.70(m,1H),0.58-0.45(m,1H).
实施例108 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000544
具体合成路线如下：
步骤A：合成4-(7-((S)-2,2,2-三氟-1-((S)-1-甲氧基-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000545
将(S)-2-(((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酸甲酯(100毫克,0.211毫摩尔)溶于1,4-二氧六环(10毫升)和水(2毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(97毫克，0.316毫摩尔)，碳酸钠(67毫克，0.633毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(15毫克，0.02毫摩尔)，置换氮气3遍。在80摄氏度条件下搅拌2小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(20毫升)中。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：正己烷/乙酸乙酯＝5/1)。得到90毫克白色固体4-(7-((S)-2,2,2-三氟-1-((S)-1-甲氧基-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(收率：74％)。LC-MS：RT＝2.52min，[M+H] +＝575.32。
步骤B：合成4-(7-((S)-2,2,2-三氟-1-((S)-1-甲氧基-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000546
将4-(7-((S)-2,2,2-三氟-1-((S)-1-甲氧基-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(90毫克,0.157毫摩尔)溶于甲醇(5毫升)和水(1毫升)中,然后将甲酸铵(88毫克，1.57毫摩尔)，湿钯碳(10毫克)加入反应液中,75摄氏度搅拌0.5小时后,LC-MS监测至反应完全。
反应液冷却至室温，过滤,滤液旋干得到90毫克白色固体4-(7-((S)-2,2,2-三氟-1-((S)-1-甲氧基-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：99％)。LC-MS：RT＝2.50min,[M+H] +＝577.31。
步骤C：合成(S)-2-(((S)-1-(8-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000547
将4-(7-((S)-2,2,2-三氟-1-((S)-1-甲氧基-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(90毫克，0.156毫摩尔)溶于四氢呋喃/水/甲醇(2:1:1，4毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入一水合氢氧化锂(18毫克，0.45毫摩尔)。在室温条件下搅拌1小时。
向反应液中加入1摩尔/升盐酸溶液，调pH至4。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗3次(20毫升×3)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。得到80毫克白色固体(S)-2-(((S)-1-(8-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酸(收率：91％)。LC-MS：RT＝1.77min，[M+H] +＝563.27。
步骤D：合成4-(7-((S)-1-((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000548
将(S)-2-(((S)-1-(8-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-甲基戊酸(80毫克，0.14毫摩尔)和1-氨基环丙烷-1-腈盐酸盐(35毫克，0.28毫摩尔)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5毫升)中。随后，向上述溶液中加入2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(85毫克，0.21毫摩尔)，N,N-二异丙基乙胺(55毫克，0.42毫摩尔)，在室温下搅拌0.5个小时。
向反应液中加入饱和氯化铵溶液(20毫升)。混合液用乙酸乙酯(10毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(10毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，最后减压浓缩。所得粗品经高效液相制备仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到40毫克白色固体4-(7-((S)-1-((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(收率：46％)。LC-MS：RT＝1.91min，[M+H] +＝626.31.
步骤E：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000549
将4-(7-((S)-1-((S)-1-((1-氰基环丙基)氨基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基)-2,2,2-三氟乙基)二苯并[b,d]呋喃-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(40毫克,0.064毫摩尔)溶于二氯甲烷(5毫升)中,然后将三氟乙酸(0.5毫升)加入反应液中,室温搅拌0.5小时后,LC-MS监测至反应完全。
反应液室温室温旋干,反应液室温室温旋干,粗品经高效液相制备仪(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化得到10毫克白色固体(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：30％)。LC-MS：RT＝1.79min,[M+H] +＝527.30。
实施例109 合成((S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000550
具体合成路线如下：
步骤A：合成1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基三氟甲磺酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000551
将1-甲基哌啶-4-酮(1克，8.8毫摩尔)溶于无水四氢呋喃(30毫升)的溶液中。随后，在零下78摄氏度条件向上述溶液中加入二异丙基氨基锂(6.6毫升，13.2毫摩尔)。在零下78摄氏度条件下搅拌0.5小时。然后，向上述溶液中加入N-苯基双(三氟甲烷磺酰)亚胺(3.8克，10.6毫摩尔)，恢复至室温并搅拌1小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(30毫升)中。混合液用乙酸乙酯(20毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水(30毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。得到900毫克棕色油状物甲基1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基三氟甲磺酸(收率：40.9％)。
步骤B：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000552
将((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)甲基)-L-亮氨酸甲酯(600毫克，1.1毫摩尔)，1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基三氟甲磺酸(340毫克，1.38毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水的混合液(10:1，15毫升)中。随后，向溶液中加入磷酸钾(466毫克，2.2毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(80毫克，110微摩尔)，置换氮气3遍。在90摄氏度条件下搅拌2小时。
将反应液用乙酸乙酯(20毫升)稀释，加入饱和食盐水(20毫升)中洗一次，水相再用乙酸乙酯(20毫升×2次)萃取两次。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。得到210毫克棕色油状物((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-L-亮氨酸甲酯(收率：39.0％)。LC-MS：RT＝1.88min，[M+H] +＝489.25。
步骤C：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000553
取((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-L-亮氨酸甲酯(110毫克，0.224毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(36毫克，0.89毫摩尔)，室温条件下反应2小时。
加入二氯/甲醇混合液(10/1,20毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相Ph至3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(20毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到200毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤D：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶丁-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000554
将((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-L-亮氨酸(200毫克，0.42毫摩尔)，1-氨基-环丙基1-氰盐酸盐74毫克，0.63毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(240毫克，0.63毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(190毫克，1.5毫摩尔)，室温条件下反应18小时。
向反应液中加入乙酸乙酯(30毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗涤(30毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，经过制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化后得到30毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶丁-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：13.2％)。LC-MS:RT＝1.80min,[M+H] +＝539.36。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.85(s,1H),8.75(s,1H),8.32(d,J＝1.2Hz,1H),8.16(d,J＝6.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.74(d,J＝6.8Hz,1H),7.70(dd,J＝6.8Hz,1.2Hz,1H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),6.30(s,1H),4.50-4.35(m,1H),4.08-4.01(m,1H),3.85-3.76(m,1H),3.73-3.63(m,1H),3.38-3.20(m,2H),2.96-2.89(m,5H),1.79-1.70(m,1H),1.49-1.38(m,1H),1.35-1.16(m,3H),0.89(d,J＝3.6Hz,3H),0.88(d,J＝3.6Hz,3H),0.84-0.74(m,1H),0.58-0.45(m,1H).
实施例110 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基哌啶-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000555
具体合成路线如下：
步骤A：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000556
将((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基-L-亮氨酸甲酯(110毫克，0.22毫摩尔)溶于甲醇(10毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入甲酸铵(63毫克，1毫摩尔)，湿钯/碳(24毫克)。在70摄氏度条件下搅拌18小时。
将反应液过滤，固体用甲醇(20毫升)洗涤并减压干燥，所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝10/1)。得到130毫克棕色油状物((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(收率：115％)。LC-MS：RT＝1.82min，[M+H] +＝491.25。
步骤B：合成((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000557
取((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸甲酯(130毫克，0.26毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(42毫克，1毫摩尔)，室温条件下反应2小时。
加入二氯/甲醇混合液(10/1,20毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相Ph至3，二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(20毫升×3)，合并有机相后用硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到200毫克粗产物，粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基哌啶-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000558
将((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基哌啶-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)-L-亮氨酸(200毫克，0.42毫摩尔)，1-氨基-环丙基1-氰盐酸盐(59毫克，0.50毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(238毫克，0.63毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺10毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(162毫克，1.25毫摩尔)，室温条件下反应1小时。
向反应液中加入乙酸乙酯(30毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗涤(30毫升×3)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，经过制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化后得到24毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基-2-((((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基哌啶-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：10.8％)。LC-MS:RT＝1.81min,[M+H] +＝541.26。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)9.31(s,1H),8.74(s,1H),8.13(d,J＝8.0Hz,1H),8.01(s,1H),7.76(s,1H),7.70(d,J＝8.0Hz,1H),7.48-7.38(m,2H),4.50-4.35(m,1H),3.62-3.53(m,2H),3.21-3.05(m,2H),3.04-2.91(m,2H),2.85(d,J＝4.0Hz,3H),2.17-2.09(m,2H),1.98-1.84(m,2H),1.79-1.71(m,1H),1.48-1.38(m,1H),1.35-1.17(m,3H),0.89(d,J＝4.0Hz,3H),0.88(d,J＝4.0Hz,3H),0.86-0.76(m,1H),0.59-0.49(m,1H).
实施例111 合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-(((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000559
具体合成路线如下：
步骤A：(S)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯
Figure PCTCN2021072803-appb-000560
将(S)-2-(((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸乙酯(50毫克，0.1毫摩尔)，(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)硼酸(140毫克，1毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水的混合液(4:1，10毫升)中。随后，向溶液中加入磷酸钾(106毫克，0.5毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯络合物(7.3毫克，10微摩尔)，置换氮气3遍。在80摄氏度条件下搅拌3小时，LC-MS监测反应直至反应结束。
将反应液用乙酸乙酯(30毫升)稀释，加入饱和食盐水(30毫升)中洗一次，水相再用乙酸乙酯(30毫升×2次)萃取两次。合并有机相，用无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。所得残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝1/1)。得到50毫克棕色油状物(S)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(收率：96％)。LC-MS：RT＝1.82min，[M+H] +＝520.29。
步骤B：合成(S)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸
Figure PCTCN2021072803-appb-000561
取(S)-4-氟-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1，2-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酸乙酯(50毫克，0.1毫摩尔)溶于四氢呋喃/甲醇/水(3毫升/1毫升/1毫升)混合溶液中，再加入一水合氢氧化锂(12毫克，0.3毫摩尔)，室温条件下反应3小时，LC-MS显示反应结束后，加入二氯/甲醇混合液(10/1,20毫升)稀释反应液，加入水和2N稀盐酸调节水相Ph至3，再用二氯甲烷/甲醇(10/1)混合溶液萃取3次(20毫升×3)，合并有机相后用无水硫酸钠干燥，过滤后，滤液浓缩得到50毫克粗产物，LC-MS：RT＝1.77min，[M+H] +＝492.25。粗品不需纯化直接用于下一步反应。
步骤C：合成(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺
Figure PCTCN2021072803-appb-000562
取(S)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基))二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酸(49毫克，0.1毫摩尔)，1-氨基-环丙基氰盐酸盐(18毫克，0.152毫摩尔)，2-(7-氮杂苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐(57毫克，0.152毫摩尔)加入烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺5毫升将底物全部溶解，最后加入N，N-二异丙基乙胺(0.07毫升，0.4毫摩尔)，室温条件下反应1小时。LC-MS显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(30毫升)稀释并转移到分液漏斗中，用饱和食盐水洗4次(30毫升×4)，将有机相转移到锥形瓶中并加入无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后得到油状液体，经过制备HPLC(流动相A:乙腈，流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离后得到30毫克产物(S)-N-(1-氰基环丙基)-2-((((S)-1-(8-(1,2-二甲基-1H-咪唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-4-氟-4-甲基戊酰胺三氟乙酸盐(收率：45％)。LC-MS:RT＝1.77min,[M+H] +＝556.29。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ(ppm)8.81(s,1H),8.44(s,1H),8.16(d,J＝8.0Hz,1H)，7.85(dd,J＝8.8Hz,1.6Hz,1H),7.74(s,1H)，7.65(d,J＝8.8Hz,1H),7.54(s,1H)，7.41(d,J＝8.0Hz,1H),4.54-4.43(m,1H),3.60(s,3H),3.24-3.12(m,1H),2.35(s,3H),1.95-1.84(m,2H),1.41(d,J＝13.6Hz,3H),1.35(d,J＝13.6Hz,3H),1.30-1.15(m,2H),0.83-0.75(m,1H),0.55-0.43(m,1H).
实施例112 合成(S)-N-(1-氰基氯丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000563
具体合成路线如下：
步骤A：(S)-N-(1-氰基氯丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐
Figure PCTCN2021072803-appb-000564
将(S)-2-((((S)-1-(8-溴二苯并[b,d]呋喃-3-基)-2,2,2-三氟乙基)氨基)-N-(1-氰基环丙基)-4-甲基戊酰胺(100毫克，0.19毫摩尔)溶于1,4-二氧六环/水(2:1，6毫升)的溶液中。随后，向上述溶液中加入(1-甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸(35.91毫克，0.28毫摩尔)，碳酸钠(60毫克，0.29毫摩尔)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(20毫克，18微摩尔)，置换氮气3遍。在90摄氏度条件下搅拌3小时。
将反应液滴加到饱和食盐水(80毫升)中。混合液用乙酸乙酯(40毫升×3次)萃取。合并有机相。有机相先用饱和食盐水洗(30毫升×3次)，然后用无水硫酸钠干燥，减压浓缩。所得残余物经过制备HPLC(流动相A:乙腈,流动相B:水+0.1％三氟乙酸)分离纯化后得到34.81毫克白色固体(S)-N-(1-氰基氯丙基)-4-甲基-2-(((S)-2,2,2-三氟-1-(8-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)二苯并[b,d]呋喃-3-基)乙基)氨基)戊酰胺三氟乙酸盐(收率：35.1％)。LC-MS：RT＝2.07min，[M+H] +＝524.26。
实施例113组织蛋白酶的药理实验测试方法：
(1)组织蛋白酶K体外抑制活性试验方法：
以0.05ng/μl的Cathepsin K作为酶反应终浓度，终浓度为10μM的Z-Phe-Arg-AMC作为底物，根据优化好的实验条件，使用15μl反应体系，将测试化合物和酶25C孵育15min后，测定酶和底物在37C下反应15min的动力学斜率，算出化合物对人组织蛋白酶K的IC 50值。
(2)组织蛋白酶S体外抑制活性试验方法：
以0.5ng/μl的Cathepsin S作为酶反应终浓度，终浓度为20μM的Z-VVR-AMC作为底物，根据优化好的实验条件，使用15μl反应体系，将测试化合物和酶25C孵育15min后，测定酶和底物在37C下反应15min的动力学斜率，算出化合物对人组织蛋白酶S的IC 50值。
化合物溶液加入DMSO促进溶解后进行测定。
表一：本发明化合物的体外活性测试数据
实施例 组织蛋白酶K IC50(nM) 组织蛋白酶S IC 50(nM)
Mk-0822 0.2 60
26 11.43 >33330
27 8.46 4028
28A 3.58 4069
31A 1.29 >10000
38 9.6 >3700
42A 12 >33330
44A 15.6 >11110
56 8.2 >11110
66 2.6 1398
68A 1.9 2703
70A 0.3 2927
71A 0.56 4111
72A 0.59 6087
73A 1.9 5260
74A 1.1 1463
75A 6.7 3711
76A 9.4 ND
77A 0.94 ND
78A 0.88 ND
81A 3.5 ND
82 11.2 ND
85A 0.77 837.3
86A 0.88 118
87A 0.3 1930
88A 1.9 ND
89D 2.2 ND
90A 1.9 ND
91A 1.1 ND
92A 1.5 2595
93A 2.63 652
94A 1.2 698
95A 2.8 2117
96A 2.0 477
97A 1.6 631
98A 1.4 5134
99A 0.8 1139
100A 1.6 2850
101A 2.2 7346
102A 2.3 6023
103 4.0 >33333
104 2.1 >33333
105A 1.5 1080
106A 2.3 2952
107A 1.4 958
108A 2.0 948
109A 1.4 1744
110A 1.4 847
111A 2.2 961
112A 8.9 >11111
结论：从上表数据可知，本发明化合物对组织蛋白酶K具有较好的抑制活性，而对组织蛋白酶S的抑制活性差，表现出非常高的选择性。由于本发明化合物的高选择性，降低了因化合物选择性而引起的脱靶副作用，从而大大提高了本发明化合物作为组织蛋白酶K抑制剂用于治疗骨质疏松、骨关节炎等疾病。
注：ND表示未检测到
实施例114组织蛋白酶的溶解度测试方法：
1)母液配制
精密称取待测样品适量于离心管中，加入适量DMSO配制成100mg/ml的样品溶液A；
2)供试品溶液的配制
精密量取PBS＝2.0的缓冲溶液995μl于离心管中，往其中加入5μl的溶液A，配成饱和的样品溶液。放置37℃水浴中加热1h，1h后取出，用0.22um滤膜过滤后进样；(若需考察的PH值较多，配制方法以此类推)。
3)对照溶液的配制
精密量取溶液A10μl，加入甲醇稀释至200μl，得5mg/ml得对照溶液1；
将对照溶液1依次梯度洗脱5倍，分别得到浓度为1mg/ml、0.2mg/ml、0.04mg/ml、0.008mg/ml的对照溶液2、3、
4、5；用0.22um滤膜过滤后进样；
4)计算
将5份对照溶液以峰面积为横坐标，浓度为纵坐标，绘制标准曲线，会得到一个二元一次方程。
将供试品的峰面积带入方程，即可得到供试品溶液中样品浓度，此浓度为质量浓度。
表二：本发明化合物的溶解性测试数据
Figure PCTCN2021072803-appb-000565
Figure PCTCN2021072803-appb-000566
备注：药物先溶解再加入buffer中溶解度测定结果，ND表示未检测到
结论：从上表数据可知，本发明化合物具有较好的溶解性，促进吸收从而大大提高了本发明化合物作为组织蛋白酶K抑制剂用于治疗骨质疏松、骨关节炎等疾病。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (15)

  1. 式(I)的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，
    Figure PCTCN2021072803-appb-100001
    其中，R 1是氢、C 1-6烷基、羟基和/或卤素取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、卤代C 1-6烷氧基、卤素、羟基、氰基、-S(O 2)R 4、-OR 4、-(CH 2) nR 4、-CO-(CH 2) n-R 5、-CO-NR 5-(CH 2) n–(CH 6) 2、-(CH 2) n-N(R 5) 2、-CO-R 4、-(CH 2) n-NR 5-(CH 2) n-N(R 6) 2、-(CH 2) n-NR 5-(CH 2) n-OR 6、-O-(CH 2) n-N(R 5) 2、
    Figure PCTCN2021072803-appb-100002
    苯基、
    Figure PCTCN2021072803-appb-100003
    X为O或S或NH；Y为-CR 5R 6-、-C(O)-或者-S(O) 2-；
    R 2、R 3分别为氢、C 1-6烷基、卤代C 1-6烷基、卤素、或者R 2R 3成C 3-8环烷、或者C 3-8环烷被一个以上的卤素所取代；
    R 4为氰基、C 1-6烷基、氨基、卤代C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、或者R 4为以下子结构式的取代基：
    Figure PCTCN2021072803-appb-100004
    或者
    Figure PCTCN2021072803-appb-100005
    X 1、X 2分别为C、O、S或N，Y 1为O或S；
    其中，n为0、1、2、3、4或5；
    R 5、R 6、R 7分别为氢、C 1-6烷基、卤代C 1-6烷基、卤素、C 1-6烷基取代或者未取代氨基。
  2. 根据权利要求1所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，式(I)化合物选自
    Figure PCTCN2021072803-appb-100006
  3. 根据权利要求1所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述卤素为氟、氯、溴、碘；所述C 1-6的烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、环丁基，正戊基、异戊基、新戊基、仲戊基、叔戊基、环戊基、正己基、异己基、新己基、仲己基、叔己基、环已基；所述C 1-6的烷氧基选自甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、环丁氧基，正戊氧基、异戊氧基、新戊氧基、仲戊氧基、叔戊氧基、环戊氧基、正己氧基、异己氧基、新己氧基、仲己氧基、叔己氧基、环已氧基。
  4. 根据权利要求1所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述Y选自-C(HCF 3)-、-S(O 2)-、-C(O)-。
  5. 根据权利要求1所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述R 4取代基选自以下子结构式：
    Figure PCTCN2021072803-appb-100007
  6. 根据权利要求1所述的化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述R 1选自以下子结构式：
    氢、溴、氯、氟、
    Figure PCTCN2021072803-appb-100008
    Figure PCTCN2021072803-appb-100009
  7. 根据权利要求1所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述C 3-8的环烷选自环丙烷、环丁烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环辛烷。
  8. 根据权利要求1所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，所述药学上可接受的盐选自无机酸或有机酸成盐。
  9. 根据权利要求1所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，选自以下化合物
    Figure PCTCN2021072803-appb-100010
    Figure PCTCN2021072803-appb-100011
    Figure PCTCN2021072803-appb-100012
    Figure PCTCN2021072803-appb-100013
    Figure PCTCN2021072803-appb-100014
    Figure PCTCN2021072803-appb-100015
    Figure PCTCN2021072803-appb-100016
    Figure PCTCN2021072803-appb-100017
    Figure PCTCN2021072803-appb-100018
    Figure PCTCN2021072803-appb-100019
    Figure PCTCN2021072803-appb-100020
    Figure PCTCN2021072803-appb-100021
    Figure PCTCN2021072803-appb-100022
    Figure PCTCN2021072803-appb-100023
    Figure PCTCN2021072803-appb-100024
  10. 根据权利要求1-9任一项所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于：所述化合物的一个以上的氢原子上被同位素氘取代。
  11. 根据权利要求10任一项所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，其特征在于，选自以下化合物：
    Figure PCTCN2021072803-appb-100025
  12. 一种药物组合物，其特征在于，包括前述权利要求1-11任一项所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐和一种以上药学上可接受的载体。
  13. 根据权利要求1-11任一项所述化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐在制备用于治疗和/或预防组织蛋白酶K抑制相关疾病的药物方面的用途。
  14. 根据权利要求13所述药物组合物在制备用于治疗和/或预防组织蛋白酶K抑制相关疾病的药物方面的用途。
  15. 根据权利要求13或14所述的用途，其中所述疾病是骨质疏松、糖皮质激素诱导的骨质疏松、佩吉特氏病、骨更新异常增加、牙周疾病、牙损失、骨折、类风湿性关节炎、骨关节炎、假体周围骨质溶解、骨生成不完全、转移性骨疾病、恶性高钙血症或多发性骨髓瘤。
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