WO2021060048A1 - ペプチド化合物の製造方法 - Google Patents

ペプチド化合物の製造方法 Download PDF

Info

Publication number
WO2021060048A1
WO2021060048A1 PCT/JP2020/034686 JP2020034686W WO2021060048A1 WO 2021060048 A1 WO2021060048 A1 WO 2021060048A1 JP 2020034686 W JP2020034686 W JP 2020034686W WO 2021060048 A1 WO2021060048 A1 WO 2021060048A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
group
amino acid
mmol
peptide
protected
Prior art date
Application number
PCT/JP2020/034686
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
圭介 諸留
道玄 半田
Original Assignee
日産化学株式会社
ペプチドリーム株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 日産化学株式会社, ペプチドリーム株式会社 filed Critical 日産化学株式会社
Priority to CN202080064410.6A priority Critical patent/CN114401978A/zh
Priority to JP2021548816A priority patent/JPWO2021060048A1/ja
Priority to EP20870211.8A priority patent/EP4036103A4/en
Priority to CA3156019A priority patent/CA3156019A1/en
Priority to US17/763,185 priority patent/US20220372069A1/en
Publication of WO2021060048A1 publication Critical patent/WO2021060048A1/ja

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/107—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides
    • C07K1/1072—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups
    • C07K1/1077—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by chemical modification of precursor peptides by covalent attachment of residues or functional groups by covalent attachment of residues other than amino acids or peptide residues, e.g. sugars, polyols, fatty acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
    • C07K1/061—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using protecting groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/10—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using coupling agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
    • C07K1/08—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using activating agents
    • C07K1/088—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using activating agents containing other elements, e.g. B, Si, As
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06043—Leu-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06052—Val-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0606—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing heteroatoms not provided for by C07K5/06086 - C07K5/06139, e.g. Ser, Met, Cys, Thr
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06104—Dipeptides with the first amino acid being acidic
    • C07K5/06113—Asp- or Asn-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0812—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0819—Tripeptides with the first amino acid being acidic
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Definitions

  • Condensation reagents for forming amide bonds are widely used in the production of physiologically active substances such as pharmaceuticals and pesticides.
  • a condensation reagent that can obtain the desired product in a high yield is strongly desired (Non-Patent Document 1).
  • Condensation reagents that can be industrially used in the production of peptide compounds include (1-cyano-2-ethoxy-2-oxoethylideneaminooxy) dimethylamino-morpholino-carbenium hexafluorophosphate (COMU), isobutyl.
  • Patent Documents 1 and 2 Non-Patent Documents 2 and 3
  • COMU and isobutylchloroformate are known to have exothermic properties due to autolysis (Non-Patent Document 4).
  • pivaloyl chloride was used as a condensation reagent to react the N-terminal of the C-protected amino acid or C-protected peptide with the C-terminal of the N-protected amino acid or N-protected peptide.
  • the pivaloyl group derived from the condensing reagent was introduced into the C-protected amino acid or the N-terminal of the C-protected peptide to produce a by-product, which reduced the yield of the peptide compound of interest. ..
  • the by-products accumulate as impurities. Therefore, the above method is expected to have problems in terms of efficiency and economy as an industrial manufacturing method.
  • the present invention provides a method for producing a peptide compound in high yield using a safe condensation reagent that does not generate heat due to self-decomposition.
  • the present invention is characterized by the following.
  • the carboxylic acid halide is of formula (II)
  • X represents a chlorine atom or a bromine atom.
  • the method for producing a peptide according to any one of [1] to [8], wherein the amino acid in the N-protected amino acid is an ⁇ -amino acid other than glycine.
  • the target peptide could be obtained in high yield using an industrially applicable reagent.
  • n- is normal, “s-” is secondary, “t-” and “tert-” are tertiary, “Me” is methyl, “Et” is ethyl, “Bu” is butyl, and ""Bn” means benzyl, “Boc” means t-butoxycarbonyl, “Cbz” means benzyloxycarbonyl, “Fmoc” means 9-fluorenylmethoxycarbonyl, "Trt” means trityl, and "NMP” means N-methylpyrrolidone. To do.
  • Halogen atom means a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom or an iodine atom.
  • alkyl group is meant a linear or branched chain monovalent group of saturated aliphatic hydrocarbons.
  • C 1-6 alkyl group means a linear or branched alkyl group having 1 to 6 carbon atoms, and specific examples thereof include a methyl group, an ethyl group, an n-propyl group, and an isopropyl group.
  • n-butyl group isobutyl group, s-butyl group, t-butyl group, n-pentyl group, 3-pentyl group, 2-methylbutyl group, 3-methylbutyl group, 1,1-dimethylpropyl group, 1, Examples thereof include 2-dimethylpropyl group, 2,2-dimethylpropyl group, 1-ethylpropyl group, n-hexyl group and 3,3-dimethylbutane-2-yl group.
  • C 1-40 alkyl group means a linear or branched alkyl group having 1 to 40 carbon atoms, and specific examples thereof include a methyl group, an ethyl group, an n-propyl group, and an isopropyl group.
  • n-butyl group isobutyl group, s-butyl group, t-butyl group, n-pentyl group, n-hexyl group, octyl group, decyl group, dodecyl group, hexadecyl group, octadecyl group, docosyl group, triacontyl group , Tetracontyl group, 3,7,11,15-tetramethylhexadecyl group (hereinafter, also referred to as 2,3-dihydrophytyl group) and the like.
  • the "C 3-10 alkyl group” means a linear or branched alkyl group having 3 to 10 carbon atoms, and specific examples thereof include an n-propyl group, an isopropyl group, and an n-butyl group. , Isobutyl group, s-butyl group, t-butyl group, n-pentyl group, n-hexyl group, octyl group, decyl group, 2,3-dimethylbutyl group, 2,2-dimethylbutyl group, 2,2 Examples thereof include 4-trimethylpentyl group, 2,2,4-trimethylhexyl group, 2,2,3,4-tetramethylhexyl group and 4-ethyl-2,2-dimethylhexyl group.
  • cycloalkyl group is meant a monovalent group of cyclic saturated aliphatic hydrocarbons.
  • C 3-6 cycloalkyl group means a cycloalkyl group having 3 to 6 carbon atoms, and specific examples thereof include a cyclopropyl group, a cyclobutyl group, a cyclopentyl group, and a cyclohexyl group.
  • alkenyl group is meant a monovalent group of linear or branched unsaturated aliphatic hydrocarbons having a double bond.
  • C 2-6 alkenyl group means an alkenyl group having 2 to 6 carbon atoms, and specific examples thereof include a vinyl group, a 1-propenyl group, an allyl group, an isopropenyl group, and a 2-butenyl group. , 3-Butenyl group and the like.
  • alkynyl group means a monovalent group of a linear or branched unsaturated aliphatic hydrocarbon having a triple bond.
  • C 2-6 alkynyl group means an alkynyl group having 2 to 6 carbon atoms, and specific examples thereof include an ethynyl group and a 1-propynyl group.
  • the "aralkyl group” means an alkyl group having an aromatic hydrocarbon as a substituent.
  • the "C 7-14 aralkyl group” means an aralkyl group having 7 to 14 carbon atoms, and specific examples thereof include a benzyl group, a 1-phenylethyl group, a 2-phenylethyl group, and a 1-phenylpropyl group. Examples include a group, a naphthylmethyl group, a 1-naphthylethyl group, a 1-naphthylpropyl group and the like.
  • the "C 6-14 aryl group” means an aromatic hydrocarbon group having 6 to 14 carbon atoms, and specific examples thereof include a phenyl group, a 1-naphthyl group, a 2-naphthyl group, and a 1-. Examples thereof include an anthryl group, a 2-anthryl group, a 9-antryl group and a biphenyl group.
  • C 6-14 haloaryl group means an aromatic hydrocarbon group having 6 to 14 carbon atoms substituted with one or more halogen atoms, and specific examples thereof include a 4-chlorophenyl group. 2,4-Dichlorophenyl group, 5-fluoro-1-naphthyl group, 6-bromo-2-naphthyl group, 6,7-diiodo-1-anthryl group, 10-bromo-9-anthryl group, 4'-chloro- Examples thereof include (1,1'-biphenyl) -2-yl group.
  • the "C 6-14 aryloxy group” means an aryloxy group having 6 to 14 carbon atoms, and specific examples thereof include a phenoxy group, a 1-naphthyloxy group, a 2-naphthyloxy group, and a 1-. Examples thereof include an anthryloxy group, a 2-antioxy group, a 9-anthrioxy group, and a biphenyloxy group.
  • the "5-10-membered heterocyclic group” has 5 to 10 atoms constituting the ring and is independent of the group consisting of nitrogen atom, oxygen atom and sulfur atom in the atom constituting the ring. It means a heterocyclic group of a monocyclic system or a fused ring system containing 1 to 4 heteroatoms selected from the above.
  • the heterocyclic group may be saturated, partially unsaturated or unsaturated, and specific examples thereof include a pyrrolidinyl group, a tetrahydrofuryl group, a tetrahydrothienyl group, a piperidyl group, a tetrahydropyranyl group and a tetrahydrothiopyranyl group.
  • C 1-6 alkoxy group means a linear or branched alkoxy group having 1 to 6 carbon atoms, and specific examples thereof include a methoxy group, an ethoxy group, an n-propoxy group, and an iso. Examples thereof include a propoxy group, an n-butoxy group, an isobutoxy group, a t-butoxy group, an n-pentyloxy group and an n-hexyloxy group.
  • the "C 1-40 alkoxy group” means a linear or branched alkoxy group having 1 to 40 carbon atoms, and specific examples thereof include a methoxy group, an ethoxy group, an n-propoxy group, and an iso.
  • C 3-6 cycloalkoxy group means a cycloalkyloxy group having 3 to 6 carbon atoms, and specific examples thereof include a cyclopropoxy group, a cyclobutoxy group, a cyclopentyloxy group, and a cyclohexyloxy group. Can be mentioned.
  • the "mono-C 1-6 alkylamino group” means a group in which one "C 1-6 alkyl group” is bonded to an amino group, and specific examples thereof include a monomethylamino group and a monoethylamino group.
  • Mono-n-propylamino group, monoisopropylamino group, mono-n-butylamino group, monoisobutylamino group, mono-t-butylamino group, mono-n-pentylamino group, mono-n-hexylamino group, etc. Can be mentioned.
  • di C 1-6 alkylamino group means a group in which two identical or different "C 1-6 alkyl groups” are bonded to an amino group, and specific examples thereof include a dimethylamino group and a diethylamino group.
  • Di-n-propylamino group diisopropylamino group, di-n-butylamino group, diisobutylamino group, di-t-butylamino group, di-n-pentylamino group, di-n-hexylamino group, N -Ethyl-N-methylamino group, N-methyl-Nn-propylamino group, N-isopropyl-N-methylamino group, Nn-butyl-N-methylamino group, N-isobutyl-N-methyl Amino group, Nt-butyl-N-methylamino group, N-methyl-Nn-pentylamino group, Nn-hexyl-N-methylamino group, N-ethyl-Nn-propylamino group , N-ethyl-N-isopropylamino group, Nn-butyl-N-ethylamino group,
  • C 1-6 alkoxycarbonyl group means a linear or branched alkoxycarbonyl group having 1 to 6 carbon atoms, and specific examples thereof include a methoxycarbonyl group, an ethoxycarbonyl group, and n-. Examples thereof include a propoxycarbonyl group, an isopropoxycarbonyl group, an n-butoxycarbonyl group, an isobutoxycarbonyl group, a t-butoxycarbonyl group, an n-pentyloxycarbonyl group, and an n-hexyloxycarbonyl group.
  • tri-C 1-6 alkylsilyl group means a group in which the same or different three "C 1-6 alkyl groups" are bonded to a silyl group, and specific examples thereof include a trimethylsilyl (TMS) group. Examples thereof include a triethylsilyl group, a triisopropylsilyl group, a t-butyldimethylsilyl group and a di-t-butylisobutylsilyl group.
  • tri-C 1-6 alkylsilyloxy group means a group in which the same or different three "C 1-6 alkyl groups" are bonded to a silyloxy group, and specific examples thereof include a trimethylsilyloxy group and a triethyl. Examples thereof include a silyloxy group, a triisopropylsilyloxy group, a t-butyldimethylsilyloxy group, and a di-t-butylisobutylsilyloxy group.
  • the "bicycloalkyl group” means a monovalent group of a saturated aliphatic hydrocarbon containing two bridgehead carbons and having two rings, and as a specific example, an octahydroinden-3-yl group. , Octahydronaphthalene-4-yl group, bicyclo [2.2.1] heptane-1-yl group or bicyclo [2.2.1] heptane-2-yl group and the like.
  • the "C 5-10 bicycloalkyl group” means a bicycloalkyl group having 5 to 10 carbon atoms
  • the "C 5-7 bicycloalkyl group” means a bicycloalkyl group having 5 to 7 carbon atoms. To do.
  • tricycloalkyl group means a monovalent group of a saturated aliphatic hydrocarbon containing at least 3 bridge carbons and having 3 rings, and a specific example thereof is tricyclo [3.3. 1.1 3,7 ] Decane-1-yl (adamantan-1-yl) group or tricyclo [3.3.1.1 3,7 ] decane-2-yl (adamantan-2-yl) group, etc. Be done.
  • the "C 5-15 tricycloalkyl group” has 5 to 15 carbon atoms, and the "C 7-15 tricycloalkyl group” has 7 to 15 carbon atoms. Means a group.
  • the "aliphatic hydrocarbon group” is a linear, branched or cyclic, saturated or unsaturated aliphatic hydrocarbon group, which includes an alkyl group, a cycloalkyl group, an alkenyl group, an alkynyl group, an aralkyl group and the like. Specific examples thereof include a C 1-40 alkyl group, a C 3-6 cycloalkyl group, a C 2-6 alkenyl group, a C 2-6 alkynyl group, a C 7-14 aralkyl group and the like.
  • aliphatic hydrocarbon group containing one or more tertiary or quaternary carbon atom means a group in which one or more of the carbon atoms constituting the aliphatic hydrocarbon group are tertiary or quaternary carbon atoms.
  • 2-methylbutane-2-yl group 3-methylbutane-2-yl group, 3,3-dimethylbutane-2-yl group, t-butyl group, 3-pentyl group, 2, 2,4-trimethylpentane-3-yl group, 2,4,4-trimethylpentyl group, 2,4-dimethylpentane-3-yl group, 4-ethyl-2,2-dimethylhexane-3-yl group, Examples thereof include 3-heptyl group, 2,2,4,8,10,10-hexamethylundecane-5-yl group, 3-methylcyclobutyl group, 2-methylcyclopentyl group, 4-isopropylcyclohexyl group and the like.
  • the "C 3-10 alkyl group containing one or more tertiary or quaternary carbon atom” means that one or more of the carbon atoms constituting the C 3-10 alkyl group are tertiary or quaternary carbon atoms. It means a group, and specific examples thereof include an isobutyl group, a t-butyl group, an isopentyl group, a neopentyl group, a 2,2-dimethylbutyl group, a 2,3-dimethylbutyl group, and a 2,2,4-trimethylpentyl group.
  • the "reactive functional group of the amino acid side chain” means a group existing in the amino acid side chain and capable of reacting with another group to form a covalent bond, and specific examples thereof include a hydroxy group, a carboxy group and an amino group. Examples thereof include a group, an amide group and a thiol group. Examples of amino acids containing these functional groups in the side chain include arginine, asparagine, aspartic acid, lysine, glutamine, cysteine, serine, threonine, tyrosine, tryptophan, and histidine. Further, "the reactive functional group of the amino acid side chain is protected” means that a protecting group generally used in peptide chemistry or the like is introduced into the above-mentioned reactive functional group.
  • arbitrary substituent is not particularly limited in type as long as it is a substituent that does not adversely affect the reaction targeted by the present invention.
  • Examples of the "substituent" in the "aliphatic hydrocarbon group which may have a substituent” include a C 6-14 aryl group, a C 6-14 aryloxy group, a 5-10-membered heterocyclic group and a hydroxy group.
  • N-protected amino acid and “N-protected peptide” are an amino group present in the amino acid main chain or an amino group at the N-terminal of the peptide, and the carboxy group or the peptide C-terminal present in the amino acid main chain is protected. Means an amino acid or peptide in which the carboxy group is unprotected.
  • C-protected amino acid and “C-protected peptide” are a carboxy group present in the amino acid main chain or a carboxy group at the C-terminal of the peptide, and the amino group or the N-terminal of the peptide present in the amino acid main chain is protected. It means an amino acid or peptide in which the amino group is unprotected.
  • amino acids used in the present invention also include N-substituted amino acids.
  • N-substituted amino acid means an amino acid in which one substituent is introduced into an amino group existing in the main amino acid chain, and specific examples thereof include NC 1-6 alkyl amino acid and NC 2-. 6 Alkenyl amino acids, NC 2-6 alkynyl amino acids, NC 6-14 aryl amino acids, NC 1-6 alkoxy amino acids (the C 1-6 alkyl, C 2-6 alkenyl, C 2-6 alkynyl, C 6-14 aryl and C 1-6 alkoxy may have substituents, and examples of such substituents are "substitutions" in the above "aliphatic hydrocarbon groups which may have substituents". It is the same as the example of "group”).
  • the NC 1-6 alkyl amino acid is preferably an amino group, preferably a C 6-14 aryl group, a C 1-6 alkoxy group, a C 1-6 alkoxycarbonyl group, a di C 1-6 alkyl amino group, 5- An amino acid into which one C 1-6 alkyl group, which may have a 10-membered heterocyclic group or a tri-C 1-6 alkylsilyl group, has been introduced, more preferably a C 6-14 aryl group, C 1-6.
  • amino acid-derived group used in the present invention is a primary or secondary amino group present in the main chain of an amino acid in which a hydrogen atom is removed from the nitrogen atom and a hydroxy group is present in the main chain.
  • the "peptide-derived group” used in the present invention is derived from the carboxy group of the amino acid constituting the C-terminal, in which the hydrogen atom is removed from the nitrogen atom of the primary or secondary amino group of the amino acid constituting the N-terminal. It means a divalent group from which the hydroxy group has been removed.
  • the three-dimensional structure of ⁇ -amino acid is not particularly limited, but it is preferably L-form.
  • the peptide production method of the present invention can be carried out by combining all or appropriately of the unit steps described as the steps (1) to (5) below. This specific description will be described based on the following.
  • R 1 , R 2 and R 3 in the description of steps (1) to (5) have the same meanings as described above.
  • the specific conditions of the reaction are not particularly limited as long as the production of the peptide of the present invention is achieved. Preferred conditions for each reaction will be described in detail as appropriate.
  • Each reaction can be carried out in a solvent, if necessary, preferably in a solvent. The solvent described in each reaction may be used alone or in combination of two or more.
  • This step is a step of mixing an N-protected amino acid or an N-protected peptide with a carboxylic acid halide.
  • This step is a step of activating the C-terminal of an N-protected amino acid or N-protected peptide with a carboxylic acid halide.
  • the formula (III) P 1 -A 1 -OH (wherein, P 1 is an N-terminal protecting group, A 1 represents. A group or a peptide derived from group derived from an amino acid) in This is a step of mixing the represented N-protected amino acid or N-protected peptide with a carboxylic acid halide.
  • the carboxylic acid halide is represented by the following formula (I).
  • X represents a halogen atom
  • R 1 , R 2 and R 3 represent aliphatic hydrocarbon groups that may have substituents independently of each other, and R 1 , R 2 and R 3 represent.
  • the total number of carbon atoms in it is 3 to 40.
  • a carboxylic acid halide is a hydrocarbon group, more preferably, R 1 is a methyl group, independently R 2 and R 3 together contain at least one tertiary or quaternary carbon atom C 3- It is a carboxylic acid halide which is a 10 alkyl group, and is particularly preferably a compound represented by the following formula (II).
  • halogen atom represented by X in the formulas (I) and (II) is not particularly limited as long as it is a halogen atom, but is preferably a chlorine atom or a bromine atom, and more preferably a chlorine atom.
  • the amount of the carboxylic acid halide used is preferably 0.2 to 50 equivalents, more preferably 0.5 to 20 equivalents, still more preferably 0.8 equivalents, relative to the N-protected amino acid or N-protected peptide. To 5 equivalents.
  • the N-terminal protecting group represented by P 1 of the formula (III) is not particularly limited, and specific examples thereof include a carbamate-based protecting group (9-fluorenylmethoxycarbonyl group, t-butoxycarbonyl group, benzyloxycarbonyl group).
  • the amino acid in the N-protected amino acid represented by the formula (III) and the amino acid in the C-terminal residue of the N-protected peptide are not particularly limited, but are preferably ⁇ -amino acid, ⁇ -amino acid, ⁇ -amino acid or ⁇ -amino acid. , More preferably ⁇ -amino acid or ⁇ -amino acid, still more preferably ⁇ -amino acid, even more preferably ⁇ -amino acid other than glycine, and particularly preferably valine, phenylalanine, threonine, leucine, tryptophan. , Serine, cysteine, aspartic acid or tyrosine.
  • amino acids have two or more amino groups (for example, arginine, lysine, etc.), two or more carboxy groups (for example, glutamic acid, aspartic acid, etc.), or reactive functional groups are present.
  • amino groups for example, arginine, lysine, etc.
  • carboxy groups for example, glutamic acid, aspartic acid, etc.
  • reactive functional groups present on the side chains of amino acids that are not involved in peptide formation may be protected.
  • the number of amino acid residues contained in the group is not particularly limited, but is preferably 2 to 40, more preferably 2 to 20.
  • This step can be carried out by adding a base as needed.
  • the base used in this step is not particularly limited, and examples thereof include aliphatic amines (eg, triethylamine, N, N-diisopropylethylamine, N-methylmorpholin), aromatic amines (eg, pyridine, imidazole, etc.). N, N-dimethyl-4-aminopyridine), amidine (eg, diazabicycloundecene), alkali metal salts (eg, sodium hydrogencarbonate, potassium carbonate) and the like can be mentioned. It is preferably an aliphatic amine, more preferably N, N-diisopropylethylamine, triethylamine or N-methylmorpholine.
  • aliphatic amines eg, triethylamine, N, N-diisopropylethylamine, N-methylmorpholin
  • aromatic amines eg, pyridine, imidazole, etc.
  • the amount of the base used in this step is preferably 0.2 to 50 equivalents, more preferably 0.5 to 20 equivalents, still more preferably 0.8 to 5 equivalents, relative to the carboxylic acid halide. Is.
  • the solvent used in this step is not particularly limited as long as it does not interfere with the activation reaction, and examples thereof include halogen-containing hydrocarbon solvents (for example, dichloromethane and chloroform) and aromatic hydrocarbon solvents (for example, toluene and xylene).
  • Ether solvent eg, tetrahydrofuran, 1,4-dioxane, cyclopentylmethyl ether, methyl-t-butyl ether
  • amide solvent eg, N, N-dimethylformamide, N, N-dimethylacetamide
  • nitrile solvent eg, eg.
  • Acetonitrile ketone solvents (eg acetone, methyl ethyl ketone), aliphatic hydrocarbon solvents (eg hexane, heptane, cyclohexane), ester solvents (eg ethyl acetate) and the like. It is preferably a nitrile solvent, an amide solvent or an ether solvent, and more preferably acetonitrile, tetrahydrofuran or N, N-dimethylacetamide.
  • ketone solvents eg acetone, methyl ethyl ketone
  • aliphatic hydrocarbon solvents eg hexane, heptane, cyclohexane
  • ester solvents eg ethyl acetate
  • It is preferably a nitrile solvent, an amide solvent or an ether solvent, and more preferably acetonitrile, tetrahydrofuran or N, N-d
  • the amount of the solvent used is preferably 100 times by mass or less, more preferably 1 to 50 times by mass, and further preferably 3 to 20 times by mass with respect to the carboxylic acid halide.
  • the temperature may be controlled by using an oil bath or a cooling bath, and the temperature is not particularly limited, but is preferably from ⁇ 40 ° C. to the reflux temperature of the mixture, more preferably ⁇ 20. ° C to 50 ° C, more preferably ⁇ 10 ° C to 30 ° C.
  • an N-protected amino acid or N-protected peptide having an activated C-terminal is formed.
  • the product obtained by this step means a C-terminally activated N-protected amino acid or N-protected peptide, or a mixture containing either of them.
  • the C-terminally activated N-protected amino acid or N-protected peptide thus obtained is isolated as a reaction solution or as a (crude) purified product without going through a purification step, and C- It may be mixed with a protective peptide.
  • Process (2) This step is a step of mixing the product obtained in the step (1) with a C-protected amino acid or a C-protected peptide.
  • This step is a step of mixing the C-terminal activated N-protected amino acid or N-protected peptide obtained in step (1) with the C-protected amino acid or C-protected peptide.
  • the amino acid in the C-protected amino acid represented by the formula (IV) and the amino acid in the N-terminal residue of the C-protected peptide are not particularly limited, but are preferably ⁇ -amino acid, ⁇ -amino acid, ⁇ -amino acid or ⁇ -amino acid. It is more preferably ⁇ -amino acid or ⁇ -amino acid, further preferably ⁇ -amino acid, and even more preferably phenylalanine, glycine, valine, proline, leucine or ornithine.
  • amino acids for example, arginine, lysine, etc.
  • carboxy groups for example, glutamic acid, aspartic acid, etc.
  • reactive functional groups eg, cysteine, serine, etc.
  • the number of amino acid residues contained in the group is not particularly limited, but is preferably 2 to 40, more preferably 2 to 20.
  • C-terminal protecting group represented by P 2 of formula (IV) but it if not particularly limited a protecting group in the synthesis of amino acids or peptides are typically used, for example a methyl group, an ethyl group, t- butyl group, Benzyl group, allyl group, silyl group and the like can be mentioned.
  • P 2 may be a group derived from a solid phase carrier, and the embodiment is not particularly limited, but it is bound directly or via a linker.
  • the solid phase carrier is not particularly limited, and examples thereof include synthetic resins such as nitrocellulose, agarose beads, modified cellulose fibers, polypropylene, polyethylene glycol, polystyrene, and polyacrylamide.
  • the linker is not particularly limited, and is, for example, 2-chlorotrityl (2-ClTrt), 4- (hydroxymethyl) benzoic acid, 3,4-dihydro-2H-pyran-2-ylmethanol, 4- (hydroxymethyl). Examples thereof include phenoxyacetic acid, 3-hydroxy-xanthene-9-one, N-methoxy-3-aminopropionic acid, 3-methoxy-2-nitropyridine and the like.
  • the solvent used in this step is not particularly limited, and examples thereof include halogen-containing hydrocarbon solvents (for example, dichloromethane and chloroform), aromatic hydrocarbon solvents (for example, toluene and xylene), and ether solvents (for example, tetrahydrofuran). , 1,4-Dioxane, cyclopentyl methyl ether, methyl-t-butyl ether), amide solvent (eg, N, N-dimethylformamide), nitrile solvent (eg, acetonitrile) and the like. It is preferably a nitrile solvent, an amide solvent or an ether solvent, and more preferably acetonitrile, tetrahydrofuran or N, N-dimethylacetamide.
  • halogen-containing hydrocarbon solvents for example, dichloromethane and chloroform
  • aromatic hydrocarbon solvents for example, toluene and xylene
  • ether solvents for example, t
  • the amount of the solvent used is preferably 100 times by mass or less, more preferably 1 to 50 times by mass, and further preferably 3 to 20 times by mass with respect to the C-protected amino acid or C-protected peptide. It is double.
  • the temperature of the obtained mixture is controlled by using an oil bath or a cooling bath as needed.
  • the temperature of the mixture is not particularly limited, but is preferably from ⁇ 40 ° C. to the reflux temperature of the reaction mixture, more preferably ⁇ 20 ° C. to 50 ° C., still more preferably ⁇ 10 ° C. to 30 ° C.
  • the C-protected amino acid or C-protected peptide used in this step is a salt, it can be converted to a free form by adding an organic amine.
  • the organic amine used for converting the salt of the C-protected amino acid or C-protected peptide to the free form is not particularly limited, and examples thereof include aliphatic amines (for example, dicyclohexylamine, piperidine, triethylamine, N, N-diisopropylethylamine, N-methylmorpholin), aromatic amines (eg, pyridine, imidazole, N, N-dimethyl-4-aminopyridine) and the like. It is preferably an aliphatic amine, more preferably triethylamine or N, N-diisopropylethylamine.
  • the amount of the organic amine used in converting the salt of the C-protected amino acid or C-protected peptide to the free form is preferably 0.01 to 50 equivalents with respect to the C-protected amino acid or C-protected peptide. , More preferably 0.1 to 20 equivalents, and even more preferably 0.2 to 5 equivalents.
  • the peptide chain can be further extended by repeating the following steps (3) to (5) a desired number of times with respect to the peptide obtained in the step (2). .. (3) A step of removing the N-terminal protecting group of the peptide obtained in step (2) or (5). (4) A step of mixing an N-protected amino acid or N-protected peptide with a carboxylic acid halide represented by the formula (I). (5) A step of mixing the product obtained in the step (4) with the product obtained in the step (3). Steps (4) and (5) can be carried out by the same operation as in steps (1) and (2) above, or by a general peptide synthesis reaction.
  • N-protected amino acid or N-protected peptide used in step (4) may be the same as or different from that used in step (1).
  • carboxylic acid halide represented by formula (I) used in step (4) may be the same as or different from that used in step (1).
  • This step is a step of removing the N-terminal protecting group from the peptide obtained in step (2) or step (5).
  • the deprotection conditions used in this step are appropriately selected depending on the type of N-terminal protecting group.
  • a secondary or tertiary amine for example, pyrrolidine, piperidine, etc.
  • Morpholine triethylamine
  • acids eg, trifluoroacetic acid, hydrochloric acid, Lewis acid
  • benzyloxycarbonyl groups and allyloxycarbonyl In the case of groups, it is neutral, for example by hydrogenation in the presence of a metal catalyst.
  • reaction substrate has a hydroxy group, a mercapto group, an amino group, a carboxy group or a carbonyl group (particularly when the side chain of the amino acid or peptide has a functional group), these groups are generally used in peptide chemistry and the like.
  • a protective group such as that used in the above may be introduced, and the target compound can be obtained by removing the protective group if necessary after the reaction.
  • Protection and deprotection use commonly known protecting groups for protection and deprotection reactions (eg, Protective Groups in Organic Synthesis, Fourth edition). , TWGreene, John Wiley & Sons Inc. (2006), etc.).
  • the 2- (4,4-dimethylpentane-2-yl) -5,7,7-trimethyloctanoyl group may be referred to as ISTA, and the pivaloyl group may be referred to as Piv.
  • high performance liquid chromatography / mass spectrometry is either ACQUITY UPLC H-Class / QDa manufactured by Waters, ACQUITY UPLC H-Class / SQD2 manufactured by Waters, or LC-20AD / Triple Tof5600 manufactured by Shimadzu. Was measured using.
  • ESI + means a positive mode of electrospray ionization
  • M + H means a proton adduct.
  • ⁇ Analysis condition 1> High Performance Liquid Chromatography: LC-20 manufactured by SHIMADZU Column: Agilent Poroshell 120 EC-C18 (2.7 ⁇ m, 3.0 ⁇ 100 mm) Column oven temperature: 40 ° C Eluent: 0.025 vol% trifluoroacetic acid, acetonitrile: 0.025 vol% trifluoroacetic acid aqueous solution 95: 5 (0-12 minutes), 95: 5 (12 minutes-18 minutes), 10:90 (18. 1 minute-23 minutes) (v / v) Eluent rate: 0.7 mL / min Detection wavelength: 210 nm
  • silica gel column chromatography used either a Hi-Flash column manufactured by Yamazen, SNAP Ultra Silicon Cartridge manufactured by Biotage, silica gel 60 manufactured by Merck, or PSQ60B manufactured by Fuji Silysia Chemical Ltd.
  • the yield or quantitative yield may exceed 100%. All of these exceed 100% due to measurement error, the influence of the purity of the raw material or product, or other factors based on common general knowledge. In the following examples, the causes when the yield exceeds 100% are not individually mentioned, but those skilled in the art can fully understand the scientific validity of these examples.
  • the quantitative yields of the target product and the by-product may be shown, but these are the result of the reaction. Further, when the quantitative yield is shown, if there is no particular description regarding the yield of the by-product, it means that the by-product was not generated.
  • Reference example 3 Synthesis of ISTA-Br 2- (4,4-dimethylpentane-2-yl) -5,7,7-trimethyloctanoic acid (4.0 g, 14.06 mmol), N, N-dimethylformamide (0.031 g, 0.422 mmol) ) was mixed with xylene (4.0 mL), thionyl bromide (4.8 g, 21.15 mmol) was added at 0 ° C., the temperature was raised to room temperature, and the mixture was stirred for 1 hour.
  • reaction solution was distilled under reduced pressure to make 2- (4,4-dimethylpentane-2-yl) -5,7,7-trimethyloctanoyl bromide (4.31 g, yield 88%) transparent. Obtained as a liquid.
  • Fmoc-Val-OH (0.177 g, 0.522 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.073 g, 0.566 mmol) were mixed with acetonitrile (1.8 mL) and pivaloyl chloride (1.8 mL) was added at 0 ° C. 0.058 g, 0.479 mmol) was added, and the mixture was stirred for 1 hour.
  • Boc-Val-OH (0.114 g, 0.522 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.073 g, 0.566 mmol) were mixed with acetonitrile (1.1 mL) and pivaloyl chloride (0.1 mL) at 0 ° C. 0.058 g, 0.479 mmol) was added, and the mixture was stirred for 1 hour.
  • a solution in which HCl ⁇ H-Phe-OEt (0.1 g, 0.435 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.068 g, 0.522 mmol) and acetonitrile (1.0 mL) are separately mixed with this solution.
  • Fmoc-Trp (Boc) -OH (0.293 g, 0.556 mmol)
  • N, N-diisopropylethylamine (0.078 g, 0.602 mmol) was mixed with acetonitrile (2.9 mL) and pivalo at 0 ° C.
  • Ilchloride (0.061 g, 0.509 mmol) was added and the mixture was stirred for 2 hours.
  • a solution in which HCl ⁇ H-Ala-OBn (0.1 g, 0.463 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.072 g, 0.556 mmol) and acetonitrile (1.0 mL) are separately mixed with this solution.
  • Fmoc-Val-OH (0.118 g, 0.348 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.048 g, 0.377 mmol) were mixed with acetonitrile (1.2 mL) and pivaloyl chloride (at 0 ° C.). 0.039 g (0.32 mmol) was added, and the mixture was stirred for 1 hour.
  • This solution is separately mixed with HCl ⁇ H-Phe-Phe-OEt (0.1 g, 0.29 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.045 g, 0.348 mmol), and acetonitrile (1.0 mL). The solution was added and stirred for 1 hour.
  • reaction solution was diluted with tetrahydrofuran (3.0 g) ethyl acetate (3.0 g), saturated aqueous ammonium chloride solution (1.0 g) and water (1.0 g) were added, and the solution was separated. After the aqueous layer was separated again with ethyl acetate (3.0 g), the quantitative yield of the obtained organic layer of Fmoc-Val-Phe-Phe-OEt (target product) was 85%, and Piv-Phe-. The Ph-OEt (by-product) was 18%. Piv-Phe-Phe-OEt MASS (ESI +) m / z; 425.2 (M + H) +
  • Fmoc-Trp (Boc) -OH (0.209 g, 0.40 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.055 g, 0.43 mmol) are mixed with acetonitrile (2.1 mL) and pivalo at 0 ° C.
  • Ilchloride (0.044 g, 0.36 mmol) was added and the mixture was stirred for 1 hour.
  • This solution is separately mixed with HCl ⁇ H-Ala-Phe-OEt (0.1 g, 0.33 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.051 g, 0.40 mmol) and acetonitrile (1.0 mL).
  • Fmoc-Val-OH (0.177 g, 0.522 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.073 g, 0.566 mmol) were mixed with acetonitrile (1.8 mL) and 2- (4, 4) at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution (0.29 g, 0.479 mmol) of 4-dimethylpentane-2-yl) -5,7,7-trimethyloctanoyl chloride (ISTA-Cl) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • Fmoc-Val-OH (0.207 g, 0.610 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.084 g, 0.650 mmol) were mixed with acetonitrile (1 mL) and 2- (4,4-4,4-) at 0 ° C.
  • This reaction solution was separately mixed with HCl ⁇ H-Phe-OEt (0.1 g, 0.435 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.068 g, 0.526 mmol), and acetonitrile (1.0 mL). The solution was added and stirred for 1 hour. The obtained reaction solution is diluted with tetrahydrofuran (3.0 g) and ethyl acetate (6.0 g), 10% by mass potassium hydrogen sulfate aqueous solution (1.0 g) and water (2.0 g) are added, and the solution is separated. It was.
  • Boc-Val-OH (0.114 g, 0.522 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.073 g, 0.566 mmol) were mixed with acetonitrile (1.1 mL) and 50 of ISTA-Cl at 0 ° C.
  • a mass% toluene solution (0.29 g, 0.479 mmol) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • a solution in which HCl ⁇ H-Phe-OEt (0.1 g, 0.435 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.068 g, 0.522 mmol) and acetonitrile (1.0 mL) are separately mixed with this solution.
  • Fmoc-Phe-OH (0.202 g, 0.522 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.073 g, 0.566 mmol) were mixed with acetonitrile (2.0 mL) and 50 of ISTA-Cl at 0 ° C.
  • a mass% toluene solution (0.29 g, 0.479 mmol) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • a solution in which HCl ⁇ H-Phe-OEt (0.1 g, 0.435 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.068 g, 0.522 mmol) and acetonitrile (1.0 mL) are separately mixed with this solution.
  • Fmoc-Phe-OH (0.202 g, 0.522 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.073 g, 0.566 mmol) were mixed with acetonitrile (2.0 mL) and 50 of ISTA-Cl at 0 ° C.
  • a mass% toluene solution (0.29 g, 0.479 mmol) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • Fmoc-Leu-OH (0.210 g, 0.60 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.083 g, 0.65 mmol) were mixed with acetonitrile (2.1 mL) and 50 of ISTA-Cl at 0 ° C.
  • a mass% toluene solution (0.330 g, 0.55 mmol) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • Fmoc-Trp (Boc) -OH 0.313 g, 0.60 mmol
  • N, N-diisopropylethylamine (0.083 g, 0.65 mmol) were mixed with acetonitrile (3.1 mL) and ISTA- at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution of Cl (0.330 g, 0.55 mmol) was added, and the mixture was stirred for 3 hours.
  • Fmoc-Leu-OH (0.197 g, 0.556 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.078 g, 0.602 mmol) were mixed with acetonitrile (2.0 mL) and 50 of ISTA-Cl at 0 ° C.
  • a mass% toluene solution (0.309 g, 0.509 mmol) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • Fmoc-Trp (Boc) -OH (0.293 g, 0.556 mmol)
  • N, N-diisopropylethylamine (0.078 g, 0.602 mmol) was mixed with acetonitrile (2.9 mL) and ISTA- at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution of Cl (0.309 g, 0.509 mmol) was added, and the mixture was stirred for 3 hours.
  • Fmoc-Trp (Boc) -Ala-OBn (target product) was 96%, and ISTA-Ala.
  • the quantitative yield of -OBn (by-product) was 1%.
  • Fmoc-Ser (tBu) -OH (0.213 g, 0.556 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.078 g, 0.602 mmol) were mixed with acetonitrile (2.1 mL) and ISTA- at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution of Cl (0.309 g, 0.509 mmol) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • Fmoc-Cys (Trt) -OH 0.326 g, 0.556 mmol
  • N, N-diisopropylethylamine (0.078 g, 0.602 mmol) were mixed with acetonitrile (3.3 mL) and ISTA- at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution of Cl 0.309 g, 0.509 mmol was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • Fmoc-Thr (tBu) -OH (0.221 g, 0.556 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.078 g, 0.602 mmol) were mixed with acetonitrile (2.2 mL) and ISTA- at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution of Cl (0.309 g, 0.509 mmol) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • Fmoc-Asp (tBu) -OH (0.215 g, 0.522 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.073 g, 0.566 mmol) were mixed with acetonitrile (2.2 mL) and ISTA- at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution of Cl (0.29 g, 0.479 mmol) was added, and the mixture was stirred for 3 hours.
  • Boc-Gly-OH (0.086 g, 0.50 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.070 g, 0.538 mmol) were mixed with acetonitrile (0.9 mL) and 50 of ISTA-Cl at 0 ° C.
  • a mass% toluene solution (0.27 g, 0.456 mmol) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • a solution in which HCl ⁇ H-Pro-OBn (0.1 g, 0.414 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.053 g, 0.50 mmol) and acetonitrile (1.0 mL) are separately mixed with this solution.
  • Boc-Asp (tBu) -OH (0.191 g, 0.66 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.092 g, 0.715 mmol) were mixed with acetonitrile (2.0 mL) and ISTA- at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution of Cl (0.367 g, 0.61 mmol) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • a solution in which HCl ⁇ H-Leu-OMe (0.1 g, 0.55 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.085 g, 0.66 mmol) and acetonitrile (1.0 mL) are separately mixed with this solution.
  • Boc-Tyr (tBu) -OH (0.142 g, 0.42 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.059 g, 0.46 mmol) were mixed with acetonitrile (1.4 mL) and ISTA- at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution of Cl (0.233 g, 0.39 mmol) was added, and the mixture was stirred for 2 hours.
  • N, N-diisopropylethylamine (0.054 g, 0.42 mmol) and acetonitrile (1.0 mL) are separately mixed with this solution.
  • Fmoc-Val-OH (0.118 g, 0.348 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.048 g, 0.377 mmol) were mixed with acetonitrile (1.2 mL) and 50 of ISTA-Cl at 0 ° C.
  • a mass% toluene solution (0.193 g, 0.32 mmol) was added, and the mixture was stirred for 3 hours.
  • This solution is separately mixed with HCl ⁇ H-Phe-Phe-OEt (0.1 g, 0.29 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.045 g, 0.348 mmol), and acetonitrile (1.0 mL).
  • the solution was added and stirred for 1 hour.
  • the obtained reaction solution was diluted with tetrahydrofuran (3.0 g) ethyl acetate (3.0 g), saturated aqueous ammonium chloride solution (1.0 g) and water (1.0 g) were added, and the solution was separated. After the aqueous layer was separated again with ethyl acetate (3.0 g), the quantitative yield of the obtained organic layer Fmoc-Val-Phe-Phe-OEt (target product) was 96%, and ISTA-Phe-. The Ph-OEt (by-product) was 1%.
  • Fmoc-Asp (tBu) -OH (0.143 g, 0.348 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.048 g, 0.377 mmol) were mixed with acetonitrile (1.4 mL) and ISTA- at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution of Cl (0.193 g, 0.32 mmol) was added, and the mixture was stirred for 3 hours.
  • This solution is separately mixed with HCl ⁇ H-Phe-Phe-OEt (0.1 g, 0.29 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.045 g, 0.348 mmol), and acetonitrile (1.0 mL). The solution was added and stirred for 1 hour. The obtained reaction solution was diluted with tetrahydrofuran (3.0 g) ethyl acetate (3.0 g), saturated aqueous ammonium chloride solution (1.0 g) and water (1.0 g) were added, and the solution was separated.
  • Fmoc-Trp (Boc) -OH (0.209 g, 0.40 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.055 g, 0.43 mmol) were mixed with acetonitrile (2.1 mL) and ISTA- at 0 ° C.
  • a 50 mass% toluene solution of Cl (0.220 g, 0.36 mmol) was added, and the mixture was stirred for 3 hours.
  • This solution is separately mixed with HCl ⁇ H-Ala-Phe-OEt (0.1 g, 0.33 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.051 g, 0.40 mmol) and acetonitrile (1.0 mL).
  • reaction solution was added and stirred for 1 hour.
  • the obtained reaction solution was diluted with tetrahydrofuran (3.0 g) ethyl acetate (3.0 g), saturated aqueous ammonium chloride solution (1.0 g) and water (1.0 g) were added, and the solution was separated. After the aqueous layer was separated again with ethyl acetate (3.0 g), the quantitative yield of the obtained organic layer Fmoc-Trp (Boc) -Ala-Phe-OEt (target product) was 97%, and ISTA. The quantitative yield of -Ala-Phe-OEt (by-product) was 1%.
  • Boc-Val-OH (0.340 g, 1.56 mmol)
  • N, N-diisopropylethylamine 0.219 g, 1.69 mmol
  • acetonitrile 3.4 mL
  • 50 of ISTA-Cl 50 of ISTA-Cl at 0 ° C.
  • a mass% toluene solution (0.870 g, 1.43 mmol) was added, and the mixture was stirred for 3 hours.
  • a solution in which HCl ⁇ H-Phe-OEt (0.3 g, 1.3 mmol), N, N-diisopropylethylamine (0.203 g, 1.32 mmol) and acetonitrile (3.0 mL) are separately mixed with this solution.
  • Boc-Val-Phe-OEt (0.20 g, 0.51 mmol) was mixed with 4M-HCl / 1,4-dioxane (1.0 mL) and stirred at 25 ° C. for 2 hours. The obtained reaction solution was concentrated, and the obtained white solid HCl ⁇ H-Val-Phe-OEt was used in the next step.
  • Cbz-Val-OH (0.154 g, 0.612 mmol
  • N, N-diisopropylethylamine (0.086 g, 0.663 mmol) were mixed with acetonitrile (3.0 mL) and 50 of ISTA-Cl at 0 ° C.
  • a mass% toluene solution (0.340 g, 0.561 mmol) was added, and the mixture was stirred for 3 hours.
  • the obtained reaction solution was diluted with acetonitrile (4.0 g) and ethyl acetate (8.0 g), saturated aqueous ammonium chloride solution (2.0 g) and water (2.0 g) were added, and the solution was separated.
  • Synthesis Example 25 Synthesis of Fmoc-Phe-Phe-OH (1) Add NMP (1.0 mL) to H-Phe-2-ClTrt resin (109.9 mg, 0.1 mmol, manufactured by Merck, resin is polystyrene). After stirring for 15 minutes, the solvent was removed. (2) After dissolving Fmoc-Phe-OH (155.0 mg, 0.4 mmol) and N, N-diisopropylethylamine (0.07 mL, 0.4 mmol) in NMP (0.8 mL), ISTA-Cl at room temperature. A 50 mass% toluene solution (0.24 mL, 0.4 mmol) was added, and the mixture was stirred for 3 hours.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

本発明は、ペプチドの高効率な製造方法を提供することを課題とし、下記工程（１）及び（２）： （１）　Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドと、式（Ｉ） （式中、Ｘはハロゲン原子を表し、 Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、互いに独立して、置換基を有してもよい脂肪族炭化水素基を表し、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３中の炭素原子の総数が３乃至４０である）で表されるカルボン酸ハロゲン化物とを混合する工程；及び （２）　工程（１）で得られた生成物と、Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドとを混合する工程 を含む、ペプチドの製造方法を提供する。

Description

ペプチド化合物の製造方法
　本発明は、ペプチド化合物の製造方法に関する。
　アミド結合を形成するための縮合試薬は、医薬、農薬などの生理活性物質の製造等で広く用いられている。特に、ペプチド化合物の製造においては、複数のアミド結合を形成する必要があることから、高収率で目的物が得られる縮合試薬が強く望まれている（非特許文献１）。
　ペプチド化合物の製造において、工業的に利用可能な縮合試薬としては、（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチリデンアミノオキシ）ジメチルアミノ－モルホリノ－カルベニウムヘキサフルオロリン酸塩（ＣＯＭＵ）、イソブチルクロロホルメート、ピバロイルクロリド等が知られている（特許文献１、２、非特許文献２、３）。一方で、ＣＯＭＵやイソブチルクロロホルメートは、自己分解による発熱性を有することが知られている（非特許文献４）。
国際公開第２０１７／１２９７９６号 国際公開第２０１２／００４５５４号
ケミカルレビューズ　２０１１年、１１１巻、６６５７－６６０２頁 ブルガリア科学アカデミーのレポート　２００４年、５７巻、５３－５７頁 ジャーナル　オブ　バイオオーガニック　ケミストリー　２００９年、３５巻、１５０－１５６頁 オーガニック　プロセス　リサーチ　アンド　ディベロップメント　２０１８年、２２巻、１２６２－１２７５頁
　本発明者らが確認したところ、ピバロイルクロリドを縮合試薬に用いて、Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドのＮ末端と、Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドのＣ末端を反応させた場合、縮合試薬由来のピバロイル基が、Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドのＮ末端に導入された副生成物が生成し、目的とするペプチド化合物の収率が低下することが見出された。アミド結合を繰り返し形成するペプチド化合物の製造においては、上記副生成物が不純物として蓄積する。そのため、上記方法は工業的な製造方法としては効率や経済性の点で課題が想定された。
　本発明は、自己分解による発熱のない安全な縮合試薬を用いて、高収率でペプチド化合物を製造する方法を提供する。
　本発明者らは鋭意検討した結果、特定の構造を有するカルボン酸ハロゲン化物を用いることにより、上記課題を解決できることを見出し、本発明を完成するに至った。すなわち、本発明は以下を特徴とするものである。
［１］
　下記工程（１）及び（２）：
（１）
　Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドと、式（Ｉ）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
（式中、Ｘはハロゲン原子を表し、
Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、互いに独立して、置換基を有してもよい脂肪族炭化水素基を表し、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３中の炭素原子の総数が３乃至４０である）で表されるカルボン酸ハロゲン化物とを混合する工程；及び
（２）
　工程（１）で得られた生成物と、Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドとを混合する工程、
を含む、ペプチドの製造方法。
［２］
　さらに下記工程（３）乃至（５）：
（３）
　工程（２）又は（５）で得られたペプチドのＮ末端の保護基を除去する工程；
（４）
　Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドと式（Ｉ）で表されるカルボン酸ハロゲン化物とを混合する工程；及び
（５）
　工程（４）で得られた生成物と、工程（３）で得られた生成物とを混合する工程、
の繰り返しを１以上含む、［１］に記載のペプチドの製造方法。
［３］
　Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の内、２つ以上が互いに独立して、３級又は４級炭素原子を１つ以上含む脂肪族炭化水素基である、［１］又は［２］に記載のペプチドの製造方法。
［４］
　Ｒ１がメチル基であり、Ｒ２及びＲ３が互いに独立して、３級又は４級炭素原子を１つ以上含む脂肪族炭化水素基である、［１］又は［２］に記載のペプチドの製造方法。
［５］
　Ｒ２及びＲ３が互いに独立して、３級又は４級炭素原子を１つ以上含むＣ３－１０アルキル基である、［４］に記載のペプチドの製造方法。
［６］
　カルボン酸ハロゲン化物が、式（ＩＩ）
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
（式中、Ｘはハロゲン原子を表す）で表される化合物である、［１］に記載のペプチドの製造方法。
［７］
　Ｘが塩素原子又は臭素原子である、［１］乃至［６］のいずれか１つに記載のペプチドの製造方法。
［８］
　Ｘが塩素原子である、［１］乃至［６］のいずれか１つに記載のペプチドの製造方法。
［９］
　Ｎ－保護アミノ酸におけるアミノ酸が、グリシン以外のα－アミノ酸である、［１］乃至［８］のいずれか１つに記載のペプチドの製造方法。
［１０］
　Ｎ－保護アミノ酸におけるアミノ酸が、グリシン以外のα－アミノ酸であり、そのアミノ酸側鎖の反応性官能基が保護されている、［９］に記載のペプチドの製造方法。
［１１］
　グリシン以外のα－アミノ酸が、バリン、フェニルアラニン、トレオニン、ロイシン、トリプトファン、セリン、システイン、アスパラギン酸又はチロシンである、［９］又は［１０］に記載のペプチドの製造方法。
［１２］
　Ｃ－保護アミノ酸におけるアミノ酸又はＣ－保護ペプチドのＮ末端残基におけるアミノ酸が、Ｎ－置換アミノ酸以外のα－アミノ酸である、［１］乃至［１１］のいずれか１つに記載のペプチドの製造方法。
［１３］
　工程（２）が、工程（１）で得られた生成物と、Ｃ－保護ペプチドとを混合する工程である、［１］乃至［１２］のいずれか１つに記載のペプチドの製造方法。
［１４］
　Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドのＮ末端保護基が、カルバメート系保護基である、［１］乃至［１３］のいずれか１つに記載のペプチドの製造方法。
［１５］
　カルバメート系保護基が、９－フルオレニルメチルオキシカルボニル基又はベンジルオキシカルボニル基である、［１４］に記載のペプチドの製造方法。
　本発明により、工業的に適用可能な試薬を用い、高収率で目的とするペプチドを得ることができた。
　以下、本発明について詳細に説明する。
　本明細書における「ｎ－」はノルマル、「ｓ－」はセカンダリー、「ｔ－」及び「ｔｅｒｔ－」はターシャリー、「Ｍｅ」はメチル、「Ｅｔ」はエチル、「Ｂｕ」はブチル、「Ｂｎ」はベンジル、「Ｂｏｃ」はｔ－ブトキシカルボニル、「Ｃｂｚ」はベンジルオキシカルボニル、「Ｆｍｏｃ」は９－フルオレニルメトキシカルボニル、「Ｔｒｔ」はトリチル、「ＮＭＰ」はＮ－メチルピロリドンを意味する。
　「ハロゲン原子」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を意味する。
　「アルキル基」とは、直鎖又は分岐鎖状の、飽和脂肪族炭化水素の１価の基を意味する。「Ｃ１－６アルキル基」とは、炭素数が１乃至６個である直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、具体例としては、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓ－ブチル基、ｔ－ブチル基、ｎ－ペンチル基、３－ペンチル基、２－メチルブチル基、３－メチルブチル基、１，１－ジメチルプロピル基、１，２－ジメチルプロピル基、２，２－ジメチルプロピル基、１－エチルプロピル基、ｎ－ヘキシル基、３，３－ジメチルブタン－２－イル基などが挙げられる。
　「Ｃ１－４０アルキル基」とは、炭素数が１乃至４０個である直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、具体例としては、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓ－ブチル基、ｔ－ブチル基、ｎ－ペンチル基、ｎ－ヘキシル基、オクチル基、デシル基、ドデシル基、ヘキサデシル基、オクタデシル基、ドコシル基、トリアコンチル基、テトラコンチル基、３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデシル基（以下、２，３－ジヒドロフィチル基ということもある。）などが挙げられる。
　「Ｃ３－１０アルキル基」とは、炭素数が３乃至１０個である直鎖又は分岐鎖状のアルキル基を意味し、具体例としては、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、ｎ－ブチル基、イソブチル基、ｓ－ブチル基、ｔ－ブチル基、ｎ－ペンチル基、ｎ－ヘキシル基、オクチル基、デシル基、２，３－ジメチルブチル基、２，２－ジメチルブチル基、２，２，４－トリメチルペンチル基、２，２，４－トリメチルヘキシル基、２，２，３，４－テトラメチルヘキシル基、４－エチル－２，２－ジメチルヘキシル基などが挙げられる。
　「シクロアルキル基」とは、環状の飽和脂肪族炭化水素の１価の基を意味する。「Ｃ３－６シクロアルキル基」とは、炭素数が３乃至６個であるシクロアルキル基を意味し、具体例としては、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロヘキシル基などが挙げられる。
　「アルケニル基」とは、二重結合を有する直鎖又は分岐鎖状の不飽和脂肪族炭化水素の１価の基を意味する。「Ｃ２－６アルケニル基」とは、炭素数が２乃至６個であるアルケニル基を意味し、具体例としては、ビニル基、１－プロペニル基、アリル基、イソプロペニル基、２－ブテニル基、３－ブテニル基などが挙げられる。
　「アルキニル基」とは、三重結合を有する直鎖又は分岐鎖状の不飽和脂肪族炭化水素の１価の基を意味する。「Ｃ２－６アルキニル基」とは、炭素数が２乃至６個であるアルキニル基を意味し、具体例としては、エチニル基、１－プロピニル基などが挙げられる。
　「アラルキル基」とは、芳香族炭化水素を置換基として有するアルキル基を意味する。「Ｃ７－１４アラルキル基」とは、炭素数が７乃至１４個であるアラルキル基を意味し、具体例としては、ベンジル基、１－フェニルエチル基、２－フェニルエチル基、１－フェニルプロピル基、ナフチルメチル基、１－ナフチルエチル基、１－ナフチルプロピル基などが挙げられる。
　「Ｃ６－１４アリール基」とは、炭素数が６乃至１４個である芳香族炭化水素基を意味し、その具体例としては、フェニル基、１－ナフチル基、２－ナフチル基、１－アントリル基、２－アントリル基、９－アントリル基、ビフェニル基などが挙げられる。
　「Ｃ６－１４ハロアリール基」とは、１つ以上のハロゲン原子で置換された炭素数が６乃至１４個である芳香族炭化水素基を意味し、その具体例としては、４－クロロフェニル基、２，４－ジクロロフェニル基、５－フルオロ－１－ナフチル基、６－ブロモ－２－ナフチル基、６，７－ジヨード－１－アントリル基、１０－ブロモ－９－アントリル基、４’－クロロ－（１，１’－ビフェニル）－２－イル基などが挙げられる。
　「Ｃ６－１４アリールオキシ基」とは、炭素数が６乃至１４個であるアリールオキシ基を意味し、具体例としては、フェノキシ基、１－ナフチルオキシ基、２－ナフチルオキシ基、１－アントリルオキシ基、２－アントリオキシ基、９－アントリオキシ基、ビフェニルオキシ基などが挙げられる。
　「５－１０員複素環基」とは、環を構成する原子の数が５乃至１０個であり、かつ環を構成する原子中に、窒素原子、酸素原子及び硫黄原子からなる群より独立して選ばれる１乃至４個のヘテロ原子を含有する単環系又は縮合環系の複素環基を意味する。この複素環基は飽和、部分不飽和、不飽和のいずれであってもよく、具体例としては、ピロリジニル基、テトラヒドロフリル基、テトラヒドロチエニル基、ピペリジル基、テトラヒドロピラニル基、テトラヒドロチオピラニル基、ピロリル基、フリル基、チエニル基、ピリジル基、ピリミジニル基、ピリダジニル基、アゼパニル基、オキセパニル基、チエパニル基、アゼピニル基、オキセピニル基、チエピニル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、オキサゾリル基、チアゾリル基、イミダゾリニル基、ピラジニル基、モルホリニル基、チアジニル基、インドリル基、イソインドリル基、ベンゾイミダゾリル基、プリニル基、キノリル基、イソキノリル基、キノキサリニル基、シンノリニル基、プテリジニル基、クロメニル基、イソクロメニル基などが挙げられる。
　「Ｃ１－６アルコキシ基」とは、炭素数が１乃至６個である直鎖又は分岐鎖状のアルコキシ基を意味し、具体例としては、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ－ブトキシ基、イソブトキシ基、ｔ－ブトキシ基、ｎ－ペンチルオキシ基、ｎ－ヘキシルオキシ基などが挙げられる。
　「Ｃ１－４０アルコキシ基」とは、炭素数が１乃至４０個である直鎖又は分岐鎖状のアルコキシ基を意味し、具体例としては、メトキシ基、エトキシ基、ｎ－プロポキシ基、イソプロポキシ基、ｎ－ブトキシ基、イソブトキシ基、ｔ－ブトキシ基、ｎ－ペンチルオキシ基、ｎ－ヘキシルオキシ基、オクチルオキシ基、デシルオキシ基、ドデシルオキシ基、ヘキサデシルオキシ基、オクタデシルオキシ基、ドコシルオキシ基、トリアコンチルオキシ基、テトラコンチルオキシ基、３，７，１１，１５－テトラメチルヘキサデシルオキシ基（以下、２，３－ジヒドロフィチルオキシ基ということもある。）などが挙げられる。
　「Ｃ３－６シクロアルコキシ基」とは、炭素数が３乃至６個であるシクロアルキルオキシ基を意味し、具体例としては、シクロプロポキシ基、シクロブトキシ基、シクロペンチルオキシ基、シクロヘキシルオキシ基などが挙げられる。
　「モノＣ１－６アルキルアミノ基」とは、１個の前記「Ｃ１－６アルキル基」がアミノ基に結合した基を意味し、具体例としては、モノメチルアミノ基、モノエチルアミノ基、モノ－ｎ－プロピルアミノ基、モノイソプロピルアミノ基、モノ－ｎ－ブチルアミノ基、モノイソブチルアミノ基、モノ－ｔ－ブチルアミノ基、モノ－ｎ－ペンチルアミノ基、モノ－ｎ－ヘキシルアミノ基などが挙げられる。
　「ジＣ１－６アルキルアミノ基」とは、同一又は異なる２個の前記「Ｃ１－６アルキル基」がアミノ基に結合した基を意味し、具体例としては、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ジ－ｎ－プロピルアミノ基、ジイソプロピルアミノ基、ジ－ｎ－ブチルアミノ基、ジイソブチルアミノ基、ジ－ｔ－ブチルアミノ基、ジ－ｎ－ペンチルアミノ基、ジ－ｎ－ヘキシルアミノ基、Ｎ－エチル－Ｎ－メチルアミノ基、Ｎ－メチル－Ｎ－ｎ－プロピルアミノ基、Ｎ－イソプロピル－Ｎ－メチルアミノ基、Ｎ－ｎ－ブチル－Ｎ－メチルアミノ基、Ｎ－イソブチル－Ｎ－メチルアミノ基、Ｎ－t－ブチル－Ｎ－メチルアミノ基、Ｎ－メチル－Ｎ－ｎ－ペンチルアミノ基、Ｎ－ｎ－ヘキシル－Ｎ－メチルアミノ基、Ｎ－エチル－Ｎ－ｎ－プロピルアミノ基、Ｎ－エチル－Ｎ－イソプロピルアミノ基、Ｎ－ｎ－ブチル－Ｎ－エチルアミノ基、Ｎ－エチル－Ｎ－イソブチルアミノ基、Ｎ－t－ブチル－Ｎ－エチルアミノ基、Ｎ－エチル－Ｎ－ｎ－ペンチルアミノ基、Ｎ－エチル－Ｎ－ｎ－ヘキシルアミノ基などが挙げられる。
　「Ｃ１－６アルコキシカルボニル基」とは、炭素数が１乃至６個である直鎖又は分岐鎖状のアルコキシカルボニル基を意味し、具体例としては、メトキシカルボニル基、エトキシカルボニル基、ｎ－プロポキシカルボニル基、イソプロポキシカルボニル基、ｎ－ブトキシカルボニル基、イソブトキシカルボニル基、ｔ－ブトキシカルボニル基、ｎ－ペンチルオキシカルボニル基、ｎ－ヘキシルオキシカルボニル基などが挙げられる。
　「トリＣ１－６アルキルシリル基」とは、同一又は異なる３個の前記「Ｃ１－６アルキル基」がシリル基に結合した基を意味し、具体例としては、トリメチルシリル（ＴＭＳ）基、トリエチルシリル基、トリイソプロピルシリル基、ｔ－ブチルジメチルシリル基、ジ－ｔ－ブチルイソブチルシリル基などが挙げられる。
　「トリＣ１－６アルキルシリルオキシ基」とは、同一又は異なる３個の前記「Ｃ１－６アルキル基」がシリルオキシ基に結合した基を意味し、具体例としては、トリメチルシリルオキシ基、トリエチルシリルオキシ基、トリイソプロピルシリルオキシ基、ｔ－ブチルジメチルシリルオキシ基、ジ－ｔ－ブチルイソブチルシリルオキシ基などが挙げられる。
　「ビシクロアルキル基」とは、２個の橋頭炭素を含み、かつ２個の環を有する飽和脂肪族炭化水素の一価の基を意味し、具体例としては、オクタヒドロインデン－３－イル基、オクタヒドロナフタレン－４－イル基、ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－１－イル基又はビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル基などが挙げられる。また「Ｃ５－１０ビシクロアルキル基」とは、炭素数が５乃至１０個であり、「Ｃ５－７ビシクロアルキル基」とは、炭素数が５乃至７個である、ビシクロアルキル基を意味する。
　「トリシクロアルキル基」とは、少なくとも３個の橋頭炭素を含み、かつ３個の環を有する飽和脂肪族炭化水素の一価の基を意味し、具体例としては、トリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン－１－イル（アダマンタン－１－イル）基又はトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン－２－イル（アダマンタン－２－イル）基などが挙げられる。また「Ｃ５－１５トリシクロアルキル基」とは、炭素数が５乃至１５個であり、「Ｃ７－１５トリシクロアルキル基」とは、炭素数が７乃至１５個である、トリシクロアルキル基を意味する。
　「脂肪族炭化水素基」とは、直鎖、分岐鎖状又は環状の、飽和又は不飽和の脂肪族炭化水素基であり、アルキル基、シクロアルキル基、アルケニル基、アルキニル基、アラルキル基等が挙げられ、具体例としては、Ｃ１－４０アルキル基、Ｃ３－６シクロアルキル基、Ｃ２－６アルケニル基、Ｃ２－６アルキニル基、Ｃ７－１４アラルキル基などが挙げられる。
　「３級又は４級炭素原子を１つ以上含む脂肪族炭化水素基」とは、脂肪族炭化水素基を構成する炭素原子の内、１つ以上が３級又は４級炭素原子である基を意味し、具体例としては、２－メチルブタン－２－イル基、３－メチルブタン－２－イル基、３，３－ジメチルブタン－２－イル基、ｔ－ブチル基、３－ペンチル基、２，２，４－トリメチルペンタン－３－イル基、２，４，４－トリメチルペンチル基、２，４－ジメチルペンタン－３－イル基、４－エチル－２，２－ジメチルヘキサン－３－イル基、３－ヘプチル基、２，２，４，８，１０，１０－ヘキサメチルウンデカン－５－イル基、３－メチルシクロブチル基、２－メチルシクロペンチル基、４－イソプロピルシクロヘキシル基などが挙げられる。
　「３級又は４級炭素原子を１つ以上含むＣ３－１０アルキル基」とは、Ｃ３－１０アルキル基を構成する炭素原子の内、１つ以上が３級又は４級炭素原子である基を意味し、具体例としては、イソブチル基、ｔ－ブチル基、イソペンチル基、ネオペンチル基、２，２－ジメチルブチル基、２，３－ジメチルブチル基、２，２，４－トリメチルペンチル基、２，４，４－トリメチルペンチル基、２，２，４－トリメチルヘキシル基、２，２，３，４－テトラメチルヘキシル基、２，２，４，４－テトラメチルペンチル基、４－エチル－２，２－ジメチルヘキシル基などが挙げられる。
　「アミノ酸側鎖の反応性官能基」とは、アミノ酸側鎖に存在し、他の基と反応して共有結合を形成し得る基を意味し、具体例としては、ヒドロキシ基、カルボキシ基、アミノ基、アミド基、チオール基などが挙げられる。これらの官能基を側鎖に含有するアミノ酸としては、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、リシン、グルタミン、システイン、セリン、トレオニン、チロシン、トリプトファン、ヒスチジンなどが挙げられる。
　また、「アミノ酸側鎖の反応性官能基が保護されている」とは、上記の反応性官能基に、ペプチド化学等で一般的に用いられる保護基が導入されていることを意味する。
　「置換基を有してもよい」とは、無置換であるか、又は化学的に許容される任意の数の任意の置換基で置換されていることを意味する。
　「置換基を有している」とは、化学的に許容される任意の数の任意の置換基で置換されていることを意味する。
　上記の「任意の置換基」は、本発明が対象とする反応に悪影響を与えない置換基であれば特に種類は限定されない。
　「置換基を有してもよい脂肪族炭化水素基」における「置換基」としては、例えば、Ｃ６－１４アリール基、Ｃ６－１４アリールオキシ基、５－１０員複素環基、ヒドロキシ基、Ｃ１－４０アルコキシ基、Ｃ３－６シクロアルコキシ基、アセトキシ基、ベンゾイルオキシ基、アミノ基、モノＣ１－６アルキルアミノ基、Ｎ－アセチルアミノ基、ジＣ１－６アルキルアミノ基、ハロゲン原子、Ｃ１－６アルコキシカルボニル基、フェノキシカルボニル基、Ｎ－メチルカルバモイル基、Ｎ－フェニルカルバモイル基、トリＣ１－６アルキルシリル基、トリＣ１－６アルキルシリルオキシ基、シアノ基、ニトロ基、カルボキシ基等が挙げられる。
　「Ｎ－保護アミノ酸」及び「Ｎ－保護ペプチド」とは、アミノ酸主鎖に存在するアミノ基又はペプチドＮ末端のアミノ基が保護されており、アミノ酸主鎖に存在するカルボキシ基又はペプチドＣ末端のカルボキシ基が無保護である、アミノ酸又はペプチドを意味する。
　「Ｃ－保護アミノ酸」及び「Ｃ－保護ペプチド」とは、アミノ酸主鎖に存在するカルボキシ基又はペプチドＣ末端のカルボキシ基が保護されており、アミノ酸主鎖に存在するアミノ基又はペプチドＮ末端のアミノ基が無保護である、アミノ酸又はペプチドを意味する。
　本発明で使用されるアミノ酸には、Ｎ－置換アミノ酸も含まれる。
　「Ｎ－置換アミノ酸」とは、アミノ酸主鎖に存在するアミノ基に置換基が一つ導入されたアミノ酸を意味し、具体例としては、Ｎ－Ｃ１－６アルキルアミノ酸、Ｎ－Ｃ２－６アルケニルアミノ酸、Ｎ－Ｃ２－６アルキニルアミノ酸、Ｎ－Ｃ６－１４アリールアミノ酸、Ｎ－Ｃ１－６アルコキシアミノ酸（該Ｃ１－６アルキル、Ｃ２－６アルケニル、Ｃ２－６アルキニル、Ｃ６－１４アリール及びＣ１－６アルコキシは、置換基を有してもよく、そのような置換基の例は、上記「置換基を有してもよい脂肪族炭化水素基」における「置換基」の例と同じである）などが挙げられる。
　上記Ｎ－Ｃ１－６アルキルアミノ酸は、アミノ基に、好ましくはＣ６－１４アリール基、Ｃ１－６アルコキシ基、Ｃ１－６アルコキシカルボニル基、ジＣ１－６アルキルアミノ基、５－１０員複素環基又はトリＣ１－６アルキルシリル基を有してもよいＣ１－６アルキル基が一つ導入されたアミノ酸であり、より好ましくはＣ６－１４アリール基、Ｃ１－６アルコキシ基、又はＣ１－６アルコキシカルボニル基を有してもよいＣ１－６アルキル基が一つ導入されたアミノ酸であり、更に好ましくはメチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、ｎ－ブチル基又はベンジル基が一つ導入されたアミノ酸である。
　本発明で使用される「アミノ酸由来の基」は、アミノ酸の主鎖に存在する１級又は２級アミノ基の窒素原子上から水素原子が除かれ、且つ主鎖に存在するカルボキシ基からヒドロキシ基が除かれた２価の基を意味する。
　本発明で使用される「ペプチド由来の基」は、Ｎ末端を構成するアミノ酸の１級又は２級アミノ基の窒素原子上から水素原子が除かれ、且つＣ末端を構成するアミノ酸のカルボキシ基からヒドロキシ基が除かれた２価の基を意味する。
　α－アミノ酸の立体構造は特に限定されないが、好ましくはＬ体である。
　本明細書で用いるすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する技術分野の当業者に一般に理解されるのと同じ意味をもつ。本明細書に記載されたものと同様又は同等の任意の方法及び材料は、本発明の実施又は試験において使用することができるが、好ましい方法及び材料を以下に記載する。本明細書で言及したすべての刊行物及び特許は、例えば、記載された発明に関連して使用されうる刊行物に記載されている、構築物及び方法論を記載及び開示する目的で、参照として本明細書に組み入れられる。
　（本発明のペプチドの製造法の具体的な説明）
　以下に本発明のペプチド製造法は各工程（１）乃至（５）として記載される単位工程を、すべて又は適宜組み合わせることで行うことができる。
　なお、本具体的な説明は以下に基づき説明される。
（ａ）工程（１）乃至（５）の記載におけるＲ１、Ｒ２及びＲ３は、上記と同義である。
（ｂ）反応の具体的な条件は、本発明のペプチドの製造が達成される限りにおいて特に制限されない。各反応における好ましい条件は適宜詳述される。
（ｃ）各反応は、必要に応じて溶媒中で行うことができ、好ましくは溶媒中で行う。各反応で記載される溶媒は、単独で用いても、２種類以上を混合して用いても良い。
　工程（１）
　本工程は、Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドをカルボン酸ハロゲン化物と混合する工程である。本工程は、Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドのＣ末端をカルボン酸ハロゲン化物で活性化する工程である。本発明の一態様では、式（ＩＩＩ）Ｐ１－Ａ１－ＯＨ（式中、Ｐ１はＮ末端保護基であり、Ａ１は、アミノ酸由来の基又はペプチド由来の基を表す。）で表されるＮ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドを、カルボン酸ハロゲン化物と混合する工程である。
　カルボン酸ハロゲン化物は、下記式（Ｉ）で表される。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
（式中、Ｘはハロゲン原子を表し、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、互いに独立して、置換基を有してもよい脂肪族炭化水素基を表し、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３中の炭素原子の総数が３乃至４０である。）
　式（Ｉ）で表されるカルボン酸ハロゲン化物は、好ましくは、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の内、２つ以上が互いに独立して、３級又は４級炭素原子を１つ以上含む脂肪族炭化水素基であるカルボン酸ハロゲン化物であり、より好ましくは、Ｒ１がメチル基であり、Ｒ２及びＲ３が互いに独立して、３級又は４級炭素原子を１つ以上含む脂肪族炭化水素基であるカルボン酸ハロゲン化物であり、更に好ましくは、Ｒ１がメチル基であり、Ｒ２及びＲ３が互いに独立して、３級又は４級炭素原子を１つ以上含むＣ３－１０アルキル基であるカルボン酸ハロゲン化物であり、特に好ましくは、下記式（ＩＩ）に示す化合物である。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
　式（Ｉ）及び式（ＩＩ）のＸで示されるハロゲン原子は、ハロゲン原子であれば特に制限されないが、好ましくは塩素原子又は臭素原子であり、より好ましくは塩素原子である。
　カルボン酸ハロゲン化物の使用量は、Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドに対して、好ましくは０.２当量乃至５０当量、より好ましくは０．５当量乃至２０当量、さらに好ましくは０．８当量乃至５当量である。
　式（ＩＩＩ）のＰ１で示されるＮ末端保護基は特に制限されないが、その具体例としては、カルバメート系保護基（９－フルオレニルメトキシカルボニル基、ｔ－ブトキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基、アリルオキシカルボニル基、２，２，２-トリクロロエトキシカルボニル基、２－（ｐ－ビフェニル）イソプロピルオキシカルボニル基等）、アミド系保護基（アセチル基、トリフルオロアセチル基等）、イミド系保護基（フタロイル基等）、スルホンアミド系保護基（ｐ－トルエンスルホニル基、２－ニトロベンゼンスルホニル基等）、ベンジル基等であり、好ましくは９－フルオレニルメトキシカルボニル基、ｔ－ブトキシカルボニル基又はベンジルオキシカルボニル基であり、より好ましくは９－フルオレニルメトキシカルボニル基又はベンジルオキシカルボニル基である。
　式（ＩＩＩ）で示されるＮ－保護アミノ酸におけるアミノ酸、及びＮ－保護ペプチドのＣ末端残基におけるアミノ酸は、特に制限されないが、好ましくはα－アミノ酸、β－アミノ酸、γ－アミノ酸又はδ－アミノ酸であり、より好ましくはα－アミノ酸又はβ－アミノ酸であり、更に好ましくはα－アミノ酸であり、より更に好ましくはグリシン以外のα－アミノ酸であり、特に好ましくはバリン、フェニルアラニン、トレオニン、ロイシン、トリプトファン、セリン、システイン、アスパラギン酸又はチロシンである。なおこれらのアミノ酸に２以上のアミノ基が存在する場合（例えば、アルギニン、リシン等）、２以上のカルボキシ基が存在する場合（例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸等）、又は反応性官能基が存在する場合（例えば、システイン、セリン等）、ペプチドの形成に関与しないアミノ酸の側鎖に存在する反応性官能基は、保護されていても良い。
　式（ＩＩＩ）において、Ａ１がペプチド由来の基である場合、その基に含まれるアミノ酸残基の数は特に制限されないが、好ましくは２乃至４０であり、より好ましくは２乃至２０である。
　本工程は、必要に応じて、塩基を添加して実施することができる。
　本工程で使用する塩基は、特に制限は無いが、その例としては、脂肪族アミン（例えば、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ－メチルモルホリン）、芳香族アミン（例えば、ピリジン、イミダゾール、Ｎ，Ｎ－ジメチル－４－アミノピリジン）、アミジン（例えば、ジアザビシクロウンデセン）、アルカリ金属塩（例えば、炭酸水素ナトリウム、炭酸カリウム）等が挙げられる。好ましくは、脂肪族アミンであり、より好ましくはＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、トリエチルアミン又はＮ－メチルモルホリンである。
　本工程で使用する塩基の使用量は、カルボン酸ハロゲン化物に対して、好ましくは０.２当量乃至５０当量、より好ましくは０．５当量乃至２０当量、さらに好ましくは０．８当量乃至５当量である。
　本工程で使用する溶媒は、活性化反応を妨げない限り特に限定されないが、その例としては、含ハロゲン炭化水素溶媒（例えば、ジクロロメタン、クロロホルム）、芳香族炭化水素溶媒（例えば、トルエン、キシレン）、エーテル溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、シクロペンチルメチルエーテル、メチル－ｔ－ブチルエーテル）、アミド溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド）、ニトリル溶媒（例えば、アセトニトリル）、ケトン溶媒（例えば、アセトン、メチルエチルケトン）、脂肪族炭化水素溶媒（例えばヘキサン、ヘプタン、シクロヘキサン）、エステル溶媒（例えば、酢酸エチル）等が挙げられる。好ましくはニトリル溶媒、アミド溶媒又はエーテル溶媒であり、より好ましくはアセトニトリル、テトラヒドロフラン又はＮ，Ｎ－ジメチルアセトアミドである。
　溶媒の使用量は、カルボン酸ハロゲン化物に対して、好ましくは１００質量倍以下であり、より好ましくは１質量倍乃至５０質量倍であり、さらに好ましくは３質量倍乃至２０質量倍である。
　本工程は必要に応じて、油浴や冷却浴を用いて温度を制御してもよく、温度は、特に制限は無いが、－４０℃から混合物の還流温度までが好ましく、より好ましくは－２０℃乃至５０℃であり、さらに好ましくは－１０℃乃至３０℃である。
　本工程により、Ｃ末端が活性化されたＮ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドが形成される。したがって、本工程により得られる生成物は、Ｃ末端が活性化されたＮ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチド、あるいはそれらのいずれかを含む混合物を意味する。このようにして得られたＣ末端が活性化されたＮ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドは、精製工程を経ることなく、反応液のまま、又は（粗）精製物として単離して、Ｃ－保護ペプチドと混合してもよい。
　工程（２）
　本工程は、工程（１）で得られた生成物と、Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドを混合する工程である。本工程は、工程（１）で得られたＣ末端が活性化されたＮ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドと、Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドを混合する工程である。本発明の一態様では、工程（１）で得られたＣ末端が活性化されたＮ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドと、式（ＩＶ）Ｈ－Ａ２－ＯＰ２（Ａ２は、アミノ酸由来の基又はペプチド由来の基を表し、Ｐ２はＣ末端保護基である。）で表されるＣ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドを混合する工程である。
　式（ＩＶ）で示されるＣ－保護アミノ酸におけるアミノ酸、及びＣ－保護ペプチドのＮ末端残基におけるアミノ酸は、特に制限されないが、好ましくはα－アミノ酸、β－アミノ酸、γ－アミノ酸又はδ－アミノ酸であり、より好ましくはα－アミノ酸又はβ－アミノ酸であり、更に好ましくはα－アミノ酸であり、より更に好ましくはフェニルアラニン、グリシン、バリン、プロリン、ロイシン又はオルニチンである。なお、これらのアミノ酸に２以上のアミノ基が存在する場合（例えば、アルギニン、リシン等）、２以上のカルボキシ基が存在する場合（例えば、グルタミン酸、アスパラギン酸等）、又は反応性官能基が存在する場合（例えば、システイン、セリン等）、ペプチドの形成に関与しないアミノ酸側鎖の反応性官能基は、保護されていても良い。
　式（ＩＶ）において、Ａ２がペプチド由来の基である場合、その基に含まれるアミノ酸残基の数は特に制限されないが、好ましくは２乃至４０であり、より好ましくは２乃至２０である。
　式（ＩＶ）のＰ２で示されるＣ末端保護基は、アミノ酸又はペプチドの合成で一般的に使用される保護基であれば特に制限されないが、例えばメチル基、エチル基、ｔ－ブチル基、ベンジル基、アリル基、シリル基などが挙げられる。
　式（ＩＶ）において、Ｐ２は固相担体由来の基であってもよく、態様は特に制限されないが、直接又はリンカーを介して結合する。固相担体は特に制限されないが、例えばニトロセルロース、アガロースビーズ、修飾セルロース繊維、ポリプロピレン、ポリエチレングリコール、ポリスチレン又はポリアクリルアミド等の合成樹脂が挙げられる。リンカーとしては、特に制限されないが、例えば２－クロロトリチル（２－ＣｌＴｒｔ）、４－（ヒドロキシメチル）安息香酸、３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イルメタノール、４－（ヒドロキシメチル）フェノキシ酢酸、３－ヒドロキシ－キサンテン－９－オン、Ｎ－メトキシ－３－アミノプロピオン酸、３－メトキシ－２－ニトロピリジン等が挙げられる。
　本工程で使用する溶媒は、特に限定されないが、その例としては、含ハロゲン炭化水素溶媒（例えば、ジクロロメタン、クロロホルム）、芳香族炭化水素溶媒（例えば、トルエン、キシレン）、エーテル溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、１，４－ジオキサン、シクロペンチルメチルエーテル、メチル－ｔ－ブチルエーテル）、アミド溶媒（例えば、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド）、ニトリル溶媒（例えば、アセトニトリル）等が挙げられる。好ましくはニトリル溶媒、アミド溶媒又はエーテル溶媒であり、より好ましくはアセトニトリル、テトラヒドロフラン又はＮ，Ｎ－ジメチルアセトアミドである。
　溶媒の使用量は、Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドに対して、好ましくは１００質量倍以下であり、より好ましくは１質量倍乃至５０質量倍であり、さらに好ましくは３質量倍乃至２０質量倍である。
　得られた混合物は、必要に応じて、油浴や冷却浴を用いて温度を制御する。混合物の温度は、特に制限は無いが、－４０℃から反応混合物の還流温度までが好ましく、より好ましくは－２０℃乃至５０℃であり、さらに好ましくは－１０℃乃至３０℃である。
　本工程で使用するＣ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドが塩になっている場合、有機アミンを添加することで、フリー体に変換することができる。
　Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドの塩をフリー体に変換する際に使用する有機アミンは、特に制限は無いが、その例としては脂肪族アミン（例えば、ジシクロヘキシルアミン、ピペリジン、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、Ｎ－メチルモルホリン）、芳香族アミン（例えば、ピリジン、イミダゾール、Ｎ，Ｎ－ジメチル－４－アミノピリジン）等が挙げられる。好ましくは、脂肪族アミンであり、より好ましくはトリエチルアミン又はＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンである。
　Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドの塩をフリー体に変換する際に使用する有機アミンの使用量は、Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドに対して、好ましくは０.０１当量乃至５０当量、より好ましくは０．１当量乃至２０当量、さらに好ましくは０．２当量乃至５当量である。
　また、本発明のペプチドの製造方法において、工程（２）で得られたペプチドに対して、下記工程（３）乃至（５）を所望の回数繰返すことにより、ペプチド鎖をさらに伸長することができる。
（３）工程（２）又は（５）で得られたペプチドのＮ末端の保護基を除去する工程。
（４）Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドと式（Ｉ）で表されるカルボン酸ハロゲン化物とを混合する工程。
（５）工程（４）で得られた生成物と、工程（３）で得られた生成物とを混合する工程。
　工程（４）及び（５）は、上記工程（１）及び（２）と同様の操作、又は一般的なペプチド合成反応により実施することができる。
　工程（４）で使用される「Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチド」は、工程（１）で使用されるものと同一であっても、異なっていてもよい。同様に、工程（４）で使用される「式（Ｉ）で表されるカルボン酸ハロゲン化物」は、工程（１）で使用されるものと同一であっても、異なっていてもよい。
　本発明のペプチド製造法においては、次工程の反応に影響を及ぼさない範囲で工程（１）乃至（５）で得られるペプチドの精製を適宜省略することが可能である。
　工程（３）
　本工程は、工程（２）又は工程（５）で得られたペプチドから、Ｎ末端保護基を除去する工程である。
　本工程で使用する脱保護条件は、Ｎ末端保護基の種類により適宜選択されるが、例えば、９－フルオレニルメトキシカルボニル基の場合は、２級又は３級アミン（例えば、ピロリジン、ピペリジン、モルホリン、トリエチルアミン）で処理することにより行なわれ、ｔ－ブトキシカルボニル基の場合は、酸（例えば、トリフルオロ酢酸、塩酸、ルイス酸）で処理することにより行われ、ベンジルオキシカルボニル基やアリルオキシカルボニル基の場合は、中性で、例えば金属触媒の存在下、水素添加することにより行われる。
　各反応において、反応基質がヒドロキシ基、メルカプト基、アミノ基、カルボキシ基又はカルボニル基を有する場合（特にアミノ酸又はペプチドの側鎖に官能基を有する場合）、これらの基にペプチド化学等で一般的に用いられるような保護基が導入されていてもよく、反応後に必要に応じて保護基を除去することにより目的化合物を得ることができる。
　保護及び脱保護は、一般的に知られている保護基を用いて、保護・脱保護反応（例えば、プロテクティブ・グループス・イン・オーガニック・シンセシス第４版（Protective Groups　in Organic Synthesis, Fourth edition）、グリーン（T.W.Greene）著、ジョン・ワイリー・アンド・サンズ・インコーポレイテッド（John Wiley ＆ Sons Inc.）（2006年）など参照）を行うことにより実施することができる。
　以下に参考例、比較例及び実施例としての合成例を示し、本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
　本明細書において、アミノ酸等を略号で表示する場合、各表示は、ＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎ ｏｎ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅによる略号あるいは当該分野における慣用略号に基づくものである。
　本明細書において、２－（４，４－ジメチルペンタン－２－イル）－５，７，７－トリメチルオクタノイル基をＩＳＴＡと、ピバロイル基をＰｉｖと表記する場合がある。
　なお、合成例中、「（ｖ／ｖ）」は（体積／体積）を、「Ｍ」はｍｏｌ／Ｌを意味する。
　ＩＳＴＡ－Ｃｌ、ＩＳＴＡ－Ｂｒの安全性評価は、ＭＥＴＴＬＥＲ　ＴＯＬＥＤ社製　示差走査熱量測定装置を用い、下記に示す＜測定条件＞にて測定した。
＜測定条件＞
昇温域：３０－３００　℃
昇温速度：１０℃　／ｍｉｎ
使用パン：スイスインスティチュート社製　Ａｕパン　Ｍ２０
　高速液体クロマトグラフィー／質量分析は、特に記載が無い場合は、Ｗａｔｅｒｓ社製ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　Ｈ－Ｃｌａｓｓ／ＱＤａ、Ｗａｔｅｒｓ社製ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　Ｈ－Ｃｌａｓｓ／ＳＱＤ２、又はＳｈｉｍａｄｚｕ社製ＬＣ－２０ＡＤ／Ｔｒｉｐｌｅ　Ｔｏｆ５６００のいずれかを用いて測定した。
　高速液体クロマトグラフィー／質量分析の記載において、ＥＳＩ＋はエレクトロスプレーイオン化法のポジティブモードであり、Ｍ＋Ｈはプロトン付加体を意味する。
　以下、特に記載のない場合、各生成物及び副生成物の定量収率は、高速液体クロマトグラフィーを用いた分析＜分析条件１＞によって算出した。
＜分析条件１＞
高速液体クロマトグラフィー：ＳＨＩＭＡＤＺＵ製　ＬＣ－２０
カラム：Ａｇｉｌｅｎｔ製Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ　１２０　ＥＣ－Ｃ１８（２．７　μｍ、３．０×１００　ｍｍ）
カラムオーブン温度：４０℃
溶離液：０．０２５ ｖｏｌ％ トリフルオロ酢酸、アセトニトリル： ０．０２５ ｖｏｌ％トリフルオロ酢酸水溶液
９５：５（０－１２分）、９５：５（１２分－１８分）、１０：９０（１８．１分－２３分）（v／v）
溶離液速度：０．７ｍＬ／分
検出波長：２１０ｎｍ
　シリカゲルカラムクロマトグラフィーでの精製は、特に記述がない場合は、山善製Ｈｉ－Ｆｌａｓｈカラム、バイオタージ製ＳＮＡＰ　Ｕｌｔｒａ　Ｓｉｌｉｃａ　Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ、メルク製シリカゲル６０又は富士シリシア化学製ＰＳＱ６０Ｂのいずれかを用いた。
　以下の参考例、実施例において収率又は定量収率が１００％を超える場合がある。これらは、いずれも測定誤差、原料又は生成物の純度の影響、もしくはその他の技術常識に基づく要因により１００％を超えたものである。以下の実施例においては、収率が１００％を超えた場合の原因について、個別に言及はしないが、当業者であれば、これらの実施例の科学的妥当性を十分に理解しうる。
　以下の、参考例、合成例において、目的物と副生成物の定量収率を示す場合があるが、これらは反応の結果生じるものである。また、定量収率を示す際に、副生成物の収率に関して特に記載がない場合には、副生成物が生じなかったことを意味する。
参考例１：ＩＳＴＡ－Ｃｌの示差走査熱量測定による安全性評価
　ＩＳＴＡ－Ｃｌ（１６．８ｍｇ）をＡｕパンに入れ、封止し、熱量測定を実施した。発熱ピークは確認されなかった。これにより、ＩＳＴＡ－Ｃｌは自己分解による発熱性が無いことが明らかとなった。なお、ＣＯＭＵ、イソブチルクロロホルメートの発熱量は、それぞれ７７３．１７Ｊ／ｇ、４６７．３１Ｊ／ｇである（非特許文献４）。
参考例２：ＩＳＴＡ－Ｂｒの示差走査熱量測定による安全性評価
　ＩＳＴＡ－Ｂｒ（１４．９ｍｇ）をＡｕパンに入れ、封止し、熱量測定を実施した。発熱ピークは確認されなかった。これにより、ＩＳＴＡ－Ｂｒは自己分解による発熱性が無いことが明らかとなった。
参考例３：ＩＳＴＡ－Ｂｒの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
　２－（４，４－ジメチルペンタン－２－イル）－５，７，７－トリメチルオクタノイックアシッド（４．０ｇ、１４．０６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（０．０３１ｇ、０．４２２ｍｍｏｌ）をキシレン（４．０ｍＬ）と混合させ、０℃にてチオニルブロミド（４．８ｇ、２１．１５ｍｍｏｌ）を加え、室温に昇温し、１時間撹拌した。得られた反応液に対して減圧蒸留を行い、２－（４，４－ジメチルペンタン－２－イル）－５，７，７－トリメチルオクタノイルブロミド（４．３１ｇ、収率８８％）を透明な液体として得た。
参考例４：Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
　Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．１７７ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．８ｍＬ）と混合させ、０℃にてピバロイルクロリド（０．０５８ｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を加え１時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液をテトラヒドロフラン（３．０ｇ）、酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は７９％であり、Ｐｉｖ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）の定量収率は２１％であった。
Ｐｉｖ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ　ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；２７８．０（Ｍ＋Ｈ）＋
参考例５：Ｃｂｚ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
　Ｃｂｚ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．１３１ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．３ｍＬ）と混合させ、０℃にてピバロイルクロリド（０．０５８ｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を加え１時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＣｂｚ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は７７％であり、Ｐｉｖ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）の定量収率は２２％であった。
参考例６：Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
　Ｂｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．１１４ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．１ｍＬ）と混合させ、０℃にてピバロイルクロリド（０．０５８ｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を加え１時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＢｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は７９％であり、Ｐｉｖ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）の定量収率は１８％であった。
参考例７：Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ａｌａ－ＯＢｎの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
　Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ（０．２９３ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７８ｇ、０．６０２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．９ｍＬ）と混合させ、０℃にてピバロイルクロリド（０．０６１ｇ、０．５０９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ａｌａ－ＯＢｎ（０．１ｇ、０．４６３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７２ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ａｌａ－ＯＢｎ（目的物）の定量収率は８４％であり、Ｐｉｖ－Ａｌａ－ＯＢｎ（副生成物）の定量収率は１０％であった。
Ｐｉｖ－Ａｌａ－ＯＢｎ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；２６４．９（Ｍ＋Ｈ）＋
参考例８：Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
　Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．１１８ｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０４８ｇ、０．３７７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．２ｍＬ）と混合させ、０℃にてピバロイルクロリド（０．０３９ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加え１時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０４５ｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液をテトラヒドロフラン（３．０ｇ）酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（３．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は８５％であり、Ｐｉｖ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）は１８％であった。
Ｐｉｖ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；４２５．２（Ｍ＋Ｈ）＋
参考例９：Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
　Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ（０．２０９ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０５５ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．１ｍＬ）と混合させ、０℃にてピバロイルクロリド（０．０４４ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を加え１時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０５１ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液をテトラヒドロフラン（３．０ｇ）酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（３．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は６９％であり、Ｐｉｖ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）の定量収率は２６％であった。
Ｐｉｖ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；３４９．１（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例１：Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
　Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．１７７ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．８ｍＬ）と混合させ、０℃にて２－（４，４－ジメチルペンタン－２－イル）－５，７，７－トリメチルオクタノイルクロリド（ＩＳＴＡ－Ｃｌ）の５０質量％トルエン溶液（０．２９ｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液をテトラヒドロフラン（３．０ｇ）、酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は９５％であり、ＩＳＴＡ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）の定量収率は１％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５１５．７（Ｍ＋Ｈ）＋
ＩＳＴＡ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ　ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；４６１．１（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例２：Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
　Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ（０.２０７ｇ、０．６１０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０８４ｇ、０．６５０ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１ｍＬ）と混合させ、０℃にて２－（４，４－ジメチルペンタン－２－イル）－５，７，７－トリメチルオクタノイルブロミド（ＩＳＴＡ－Ｂｒ）（０．１９７ｇ、０．５６６）とトルエン（０．１９７ｇ）を混合させた溶液を加え１時間撹拌した。この反応液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２６ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液をテトラヒドロフラン（３．０ｇ）、酢酸エチル（６．０ｇ）で希釈後、１０質量％硫酸水素カリウム水溶液（１．０ｇ）、水（２．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（３．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は９４％であり、ＩＳＴＡ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）の定量収率は１％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５１５．７（Ｍ＋Ｈ）＋
ＩＳＴＡ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ　ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；４６１．１（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例３：Ｃｂｚ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
　Ｃｂｚ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．１３１ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．３ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．２９ｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＣｂｚ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は９５％であり、ＩＳＴＡ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）の定量収率は１％であった。
Ｃｂｚ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；４２７．６（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例４：Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
　Ｂｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．１１４ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．１ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．２９ｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＢｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は９６％であり、ＩＳＴＡ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）の定量収率は１％であった。
Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；３９３．５（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例５：Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000018
　Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ（０．２０２ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．０ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．２９ｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液をテトラヒドロフラン（３．０ｇ）、酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は１０１％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５６３．６（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例６：Ｃｂｚ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000019
　Ｃｂｚ－Ｐｈｅ－ＯＨ（０．１５６ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．６ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．２９ｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＣｂｚ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は９９％であった。
Ｃｂｚ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５６３．６（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例７：Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＭｅＰｈｅ－ＯＭｅの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000020
　Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ（０．２０２ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．０ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．２９ｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－ＭｅＰｈｅ－ＯＭｅ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＭｅＰｈｅ－ＯＭｅ（目的物）の定量収率は９１％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＭｅＰｈｅ－ＯＭｅ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５６３．７（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例８：Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－ＯＢｎの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000021
　Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－ＯＨ（０．２１０ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０８３ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．１ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．３３０ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｇｌｙ－ＯＢｎ（０．１ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７７ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－ＯＢｎ（目的物）の定量収率は９８％であり、Ｐｉｖ－Ｇｌｙ－ＯＢｎ（副生成物）の定量収率は１％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－Ｇｌｙ－ＯＢｎ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５０１．６（Ｍ＋Ｈ）＋
ＩＳＴＡ－Ｇｌｙ－ＯＢｎ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；４３２．７（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例９：Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｙ－ＯＢｎの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000022
　Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ（０．３１３ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０８３ｇ、０．６５ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３．１ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．３３０ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）を加え３時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｇｌｙ－ＯＢｎ（０．１ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７７ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｇｌｙ－ＯＢｎ（目的物）の定量収率は９３％であり、ＩＳＴＡ－Ｇｌｙ－ＯＢｎ（副生成物）の定量収率は２％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ－Ｇｌｙ－ＯＢｎ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５７４．３（Ｍ＋Ｈ）＋　（脱Ｂｏｃ体として検出）
合成例１０：Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－ＯＢｎの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000023
　Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－ＯＨ（０．１９７ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７８ｇ、０．６０２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．０ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．３０９ｇ、０．５０９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ａｌａ－ＯＢｎ（０．１ｇ、０．４６３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７２ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－ＯＢｎ（目的物）の定量収率は９８％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－Ａｌａ－ＯＢｎ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５１５．７（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例１１：Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ａｌａ－ＯＢｎの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000024
　Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ（０．２９３ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７８ｇ、０．６０２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．９ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．３０９ｇ、０．５０９ｍｍｏｌ）を加え３時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ａｌａ－ＯＢｎ（０．１ｇ、０．４６３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７２ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ａｌａ－ＯＢｎ（目的物）の定量収率は９６％であり、ＩＳＴＡ－Ａｌａ－ＯＢｎ（副生成物）の定量収率は１％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ａｌａ－ＯＢｎ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；６８８．４（Ｍ＋Ｈ）＋
ＩＳＴＡ－Ａｌａ－ＯＢｎ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；４４６．３（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例１２：Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－Ａｌａ－ＯＢｎの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000025
　Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ（０．２１３ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７８ｇ、０．６０２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．１ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．３０９ｇ、０．５０９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ａｌａ－ＯＢｎ（０．１ｇ、０．４６３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７２ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－Ａｌａ－ＯＢｎ（目的物）の定量収率は９７％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－Ａｌａ－ＯＢｎ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５４５．３（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例１３：Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｌａ－ＯＢｎの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000026
　Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ（０．３２６ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７８ｇ、０．６０２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３．３ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．３０９ｇ、０．５０９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ａｌａ－ＯＢｎ（０．１ｇ、０．４６３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７２ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－Ａｌａ－ＯＢｎ（目的物）の定量収率は９６％であった。
合成例１４：Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－Ａｌａ－ＯＢｎの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000027
　Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ（０．２２１ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７８ｇ、０．６０２ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．２ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．３０９ｇ、０．５０９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ａｌａ－ＯＢｎ（０．１ｇ、０．４６３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７２ｇ、０．５５６ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－Ａｌａ－ＯＢｎ（目的物）の定量収率は９２％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－Ａｌａ－ＯＢｎ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５５９．４（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例１５：Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000028
　Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－ＯＨ（０．２１５ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７３ｇ、０．５６６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．２ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．２９ｇ、０．４７９ｍｍｏｌ）を加え３時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．４３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０６８ｇ、０．５２２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は９９％であり、ＩＳＴＡ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）の定量収率は１％であった。
Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５８７．７（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例１６：Ｂｏｃ－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－ＯＢｎの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000029
　Ｂｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ（０．０８６ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７０ｇ、０．５３８ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（０．９ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．２７ｇ、０．４５６ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｒｏ－ＯＢｎ（０．１ｇ、０．４１４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０５３ｇ、０．５０ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＢｏｃ－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－ＯＢｎ（目的物）の定量収率は９１％であった。
Ｂｏｃ－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－ＯＢｎ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；３６３．１（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例１７：Ｂｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｌｅｕ－ＯＭｅの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000030
　Ｂｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－ＯＨ（０．１９１ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０９２ｇ、０．７１５ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．０ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．３６７ｇ、０．６１ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｌｅｕ－ＯＭｅ（０．１ｇ、０．５５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０８５ｇ、０．６６ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＢｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｌｅｕ－ＯＭｅ（目的物）の定量収率は９９％であった。
Ｂｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｌｅｕ－ＯＭｅ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；４１７．１（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例１８：Ｂｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）－ＯＭｅの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000031
　Ｂｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ（０．１４２ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０５９ｇ、０．４６ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．４ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．２３３ｇ、０．３９ｍｍｏｌ）を加え２時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）－ＯＭｅ（０．１ｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０５４ｇ、０．４２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（２．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＢｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）－ＯＭｅ（目的物）の定量収率は９９％であった。
Ｂｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－Ｏｒｎ（Ｂｏｃ）－ＯＭｅ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５６６．４（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例１９：Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000032
　Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．１１８ｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０４８ｇ、０．３７７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．２ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．１９３ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加え３時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０４５ｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液をテトラヒドロフラン（３．０ｇ）酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（３．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は９６％であり、ＩＳＴＡ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）は１％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；６６２．４（Ｍ＋Ｈ）＋
ＩＳＴＡ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；６０７．４（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例２０：Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000033
　Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－ＯＨ（０．１４３ｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０４８ｇ、０．３７７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（１．４ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．１９３ｇ、０．３２ｍｍｏｌ）を加え３時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．２９ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０４５ｇ、０．３４８ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液をテトラヒドロフラン（３．０ｇ）酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（３．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は９４％であった。
Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；７３４．４（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例２１：Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000034
　Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ（０．２０９ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０５５ｇ、０．４３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（２．１ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．２２０ｇ、０．３６ｍｍｏｌ）を加え３時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１ｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０５１ｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液をテトラヒドロフラン（３．０ｇ）酢酸エチル（３．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（１．０ｇ）、水（１．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（３．０ｇ）で分液後、得られた有機層のＦｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（目的物）の定量収率は９７％であり、ＩＳＴＡ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（副生成物）の定量収率は１％であった。
Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；７７３．４（Ｍ＋Ｈ）＋
ＩＳＴＡ－Ａｌａ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５３１．３（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例２２：Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000035
　Ｂｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．３４０ｇ、１．５６ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．２１９ｇ、１．６９ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３．４ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．８７０ｇ、１．４３ｍｍｏｌ）を加え３時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．３ｇ、１．３ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．２０３ｇ、１．３２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（３．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液を酢酸エチル（６．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（３．０ｇ）、水（２．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（３．０ｇ）で分液後得られた有機層を濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し、Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．４９ｇ、収率９５％）を白色固体として得た。
Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；３９３．２（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例２３：Ｃｂｚ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000036
　Ｂｏｃ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．２０ｇ、０．５１ｍｍｏｌ）を４Ｍ－ＨＣｌ／１，４－ジオキサン（１．０ｍＬ）と混合させ、２５℃にて２時間撹拌した。得られた反応液を濃縮し、得られた白色固体のＨＣｌ・Ｈ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔを次の工程に使用した。
　Ｃｂｚ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．１５４ｇ、０．６１２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０８６ｇ、０．６６３ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（３．０ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．３４０ｇ、０．５６１ｍｍｏｌ）を加え３時間撹拌した。この溶液に、別途、ＨＣｌ・Ｈ―Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．５１ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７９ｇ、０．６１２ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（２．０ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液をアセトニトリル（４．０ｇ）、酢酸エチル（８．０ｇ）で希釈後、飽和塩化アンモニウム水溶液（２．０ｇ）、水（２．０ｇ）を加え、分液を行った。水層を再度、酢酸エチル（５．０ｇ）で分液後、硫酸ナトリウムで乾燥させ、得られた有機層を濃縮し白色固体を得た。得られた白色固体に酢酸エチル（４．０ｇ）を加え、析出した固体をろ取し、Ｃｂｚ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．２６ｇ、収率９７％）を白色固体として得た。
Ｃｂｚ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５２６．７（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例２４：Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔの合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000037
　Ｃｂｚ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１０ｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を２，２，２－トリフルオロエタノール（４ｍＬ）に溶解させ、１０質量％Ｐｄ－Ｃ（２０ｍｇ）を加えた後、水素ガス雰囲気下、２５℃で１時間撹拌した。反応液をろ過、濃縮し、得られたＨ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔを次の工程に使用した。
　Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ（０．０７７ｇ、０．２２８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０３２ｇ、０．２４７ｍｍｏｌ）をアセトニトリル（０．７７ｍＬ）と混合させ、０℃にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．１２７ｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を加え３時間撹拌した。この溶液に、前工程で得られた、Ｈ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１９ｍｍｏｌ）、アセトニトリル（１．０ｍＬ）、ＮＭＰ（０．２ｍＬ）を混合させた溶液を加えて１時間撹拌した。得られた反応液にジイソプロピルエーテル（１０ｍＬ）を加え、析出した固体をろ取し、Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ（０．１４ｇ、収率１０３％）を白色固体として得た。
Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｖａｌ－Ｐｈｅ－ＯＥｔ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；７１３．４（Ｍ＋Ｈ）＋
合成例２５：Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＨの合成
（１）Ｈ－Ｐｈｅ－２－ＣｌＴｒｔ樹脂（１０９．９ｍｇ、０．１ｍｍｏｌ、Ｍｅｒｃｋ社製、樹脂はポリスチレン）にＮＭＰ（１．０ｍＬ）を加えて、１５分撹拌後溶媒を除去した。
（２）Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ（１５５．０ｍｇ、０．４ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０７ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）をＮＭＰ（０．８ｍＬ）に溶解後、室温にてＩＳＴＡ－Ｃｌの５０質量％トルエン溶液（０．２４ｍＬ、０．４ｍｍｏｌ）を加え、３時間撹拌した。
（３）上記（２）で得られた溶液に、上記（１）で得られた固体を加え１時間撹拌した。反応溶媒を除去後、得られた固体を、ＮＭＰ、メタノールを用いて順に洗浄後、乾燥させ、Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－２－ＣｌＴｒｔ樹脂を得た。
（４）上記（３）で得られた全量のＦｍｏｃ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－２－ＣｌＴｒｔ樹脂に、酢酸／２，２，２－トリフルオロエタノール／ジクロロメタン（体積比１／２／７）（２ｍＬ）を加え、２時間撹拌した。脱離した樹脂をろ過にて除去後、反応液を減圧濃縮し、残渣にジイソプロピルエーテルを加えて析出した固体をろ過によって集め、Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＨ（５１．４ｍｇ、得率９６．１％）を白色固体として得た。
Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－Ｐｈｅ－ＯＨ ＭＡＳＳ（ＥＳＩ＋）ｍ／ｚ；５３５．３（Ｍ＋Ｈ）＋
　本発明により、ペプチドの高効率な製造方法を提供することができる。

Claims (15)

  1. 　下記工程（１）及び（２）：
    （１）
    　Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドと、式（Ｉ）
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
    （式中、Ｘはハロゲン原子を表し、
    Ｒ１、Ｒ２及びＲ３は、互いに独立して、置換基を有してもよい脂肪族炭化水素基を表し、Ｒ１、Ｒ２及びＲ３中の炭素原子の総数が３乃至４０である）で表されるカルボン酸ハロゲン化物とを混合する工程；及び
    （２）
    　工程（１）で得られた生成物と、Ｃ－保護アミノ酸又はＣ－保護ペプチドとを混合する工程、
    を含む、ペプチドの製造方法。
  2. 　さらに下記工程（３）乃至（５）：
    （３）
    　工程（２）又は（５）で得られたペプチドのＮ末端の保護基を除去する工程；
    （４）
    　Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドと式（Ｉ）で表されるカルボン酸ハロゲン化物とを混合する工程；及び
    （５）
    　工程（４）で得られた生成物と、工程（３）で得られた生成物とを混合する工程、
    の繰り返しを１以上含む、請求項１に記載のペプチドの製造方法。
  3. 　Ｒ１、Ｒ２及びＲ３の内、２つ以上が互いに独立して、３級又は４級炭素原子を１つ以上含む脂肪族炭化水素基である、請求項１又は２に記載のペプチドの製造方法。
  4. 　Ｒ１がメチル基であり、Ｒ２及びＲ３が互いに独立して、３級又は４級炭素原子を１つ以上含む脂肪族炭化水素基である、請求項１又は２に記載のペプチドの製造方法。
  5. 　Ｒ２及びＲ３が互いに独立して、３級又は４級炭素原子を１つ以上含むＣ３－１０アルキル基である、請求項４に記載のペプチドの製造方法。
  6. 　カルボン酸ハロゲン化物が、式（ＩＩ）
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
    （式中、Ｘはハロゲン原子を表す）で表される化合物である、請求項１に記載のペプチドの製造方法。
  7. 　Ｘが塩素原子又は臭素原子である、請求項１乃至６のいずれか１項に記載のペプチドの製造方法。
  8. 　Ｘが塩素原子である、請求項１乃至６のいずれか１項に記載のペプチドの製造方法。
  9. 　Ｎ－保護アミノ酸におけるアミノ酸が、グリシン以外のα－アミノ酸である、請求項１乃至８のいずれか１項に記載のペプチドの製造方法。
  10. 　Ｎ－保護アミノ酸におけるアミノ酸が、グリシン以外のα－アミノ酸であり、そのアミノ酸側鎖の反応性官能基が保護されている、請求項９に記載のペプチドの製造方法。
  11. 　グリシン以外のα－アミノ酸が、バリン、フェニルアラニン、トレオニン、ロイシン、トリプトファン、セリン、システイン、アスパラギン酸又はチロシンである、請求項９又は１０に記載のペプチドの製造方法。
  12. 　Ｃ－保護アミノ酸におけるアミノ酸又はＣ－保護ペプチドのＮ末端残基におけるアミノ酸が、Ｎ－置換アミノ酸以外のα－アミノ酸である、請求項１乃至１１のいずれか１項に記載のペプチドの製造方法。
  13. 　工程（２）が、工程（１）で得られた生成物と、Ｃ－保護ペプチドとを混合する工程である、請求項１乃至１２のいずれか１項に記載のペプチドの製造方法。
  14. 　Ｎ－保護アミノ酸又はＮ－保護ペプチドのＮ末端保護基が、カルバメート系保護基である、請求項１乃至１３のいずれか１項に記載のペプチドの製造方法。
  15. 　カルバメート系保護基が、９－フルオレニルメチルオキシカルボニル基又はベンジルオキシカルボニル基である、請求項１４に記載のペプチドの製造方法。
PCT/JP2020/034686 2019-09-25 2020-09-14 ペプチド化合物の製造方法 WO2021060048A1 (ja)

Priority Applications (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202080064410.6A CN114401978A (zh) 2019-09-25 2020-09-14 肽化合物的制造方法
JP2021548816A JPWO2021060048A1 (ja) 2019-09-25 2020-09-14
EP20870211.8A EP4036103A4 (en) 2019-09-25 2020-09-14 METHOD FOR PRODUCING A PEPTIDE COMPOUND
CA3156019A CA3156019A1 (en) 2019-09-25 2020-09-14 METHOD FOR PRODUCTION OF A PEPTIDE COMPOUND
US17/763,185 US20220372069A1 (en) 2019-09-25 2020-09-14 Method for producing peptide compound

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2019-174364 2019-09-25
JP2019174364 2019-09-25
JP2020-077224 2020-04-24
JP2020077224 2020-04-24

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2021060048A1 true WO2021060048A1 (ja) 2021-04-01

Family

ID=75166647

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2020/034686 WO2021060048A1 (ja) 2019-09-25 2020-09-14 ペプチド化合物の製造方法

Country Status (7)

Country Link
US (1) US20220372069A1 (ja)
EP (1) EP4036103A4 (ja)
JP (1) JPWO2021060048A1 (ja)
CN (1) CN114401978A (ja)
CA (1) CA3156019A1 (ja)
TW (1) TW202126675A (ja)
WO (1) WO2021060048A1 (ja)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011504175A (ja) * 2007-11-21 2011-02-03 ソルヴェイ（ソシエテ アノニム） ペプチドの製造方法および精製方法
WO2012004554A1 (en) 2010-07-06 2012-01-12 St George's Hospital Medical School Aldehyde compounds as inhibitors of dust mite group 1 peptidase allergen and their use
WO2017129796A1 (en) 2016-01-29 2017-08-03 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Organic reactions carried out in aqueous solution in the presence of a hydroxyalkyl(alkyl)cellulose or an alkylcellulose
WO2020111086A1 (ja) * 2018-11-29 2020-06-04 日産化学株式会社 （メタ）アクリル化合物および感光性絶縁膜組成物

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2652581B1 (fr) * 1989-10-02 1991-12-13 Rhone Poulenc Chimie Procede de solubilisation de peptides et procede de synthese de peptides.
ATE236880T1 (de) * 1996-12-11 2003-04-15 Hoffmann La Roche Verfahren zur herstellung gemischter anhydride

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011504175A (ja) * 2007-11-21 2011-02-03 ソルヴェイ（ソシエテ アノニム） ペプチドの製造方法および精製方法
WO2012004554A1 (en) 2010-07-06 2012-01-12 St George's Hospital Medical School Aldehyde compounds as inhibitors of dust mite group 1 peptidase allergen and their use
WO2017129796A1 (en) 2016-01-29 2017-08-03 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Organic reactions carried out in aqueous solution in the presence of a hydroxyalkyl(alkyl)cellulose or an alkylcellulose
WO2020111086A1 (ja) * 2018-11-29 2020-06-04 日産化学株式会社 （メタ）アクリル化合物および感光性絶縁膜組成物

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
BULGARIAN ACADEMY OF SCIENCE, vol. 57, 2004, pages 53 - 57
CHEMICAL REVIEWS, vol. 111, 2011, pages 6657 - 6602
JOURNAL OF BIOORGANIC CHEMISTRY, vol. 35, 2009, pages 150 - 156
ORGANIC PROCESS RESEARCH AND DEVELOPMENT, vol. 22, 2018, pages 1262 - 1275
SPERRY, J. B. ET AL.: "Thermal Stability Assessment of Peptide Coupling Reagents Commonly Used in Pharmaceutical Manufacturing", ORG. PROCESS RES. DEV., vol. 22, 2018, pages 1262 - 1275, XP055810242 *
T. W. GREENE: "Protective Group in Organic Synthesis", 2006, JOHN WILEY & SONS INC.

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2021060048A1 (ja) 2021-04-01
CA3156019A1 (en) 2021-04-01
TW202126675A (zh) 2021-07-16
CN114401978A (zh) 2022-04-26
EP4036103A4 (en) 2023-10-18
US20220372069A1 (en) 2022-11-24
EP4036103A1 (en) 2022-08-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106146359B (zh) α‑酰氧基烯酰胺类化合物温和高效的制备方法及其在酰胺和多肽合成中的应用
JP6350632B2 (ja) ペプチドの製造方法
JP5768712B2 (ja) ジフェニルメタン化合物
JP7196087B2 (ja) ペプチド化合物の製造方法
WO2010104169A1 (ja) フルオレン化合物
JP2023065511A (ja) ペプチド化合物の製造方法、保護基形成用試薬、及び、芳香族複素環化合物
WO2021039901A1 (ja) ペプチド化合物の製造方法
Chen et al. Metal-free direct amidation of peptidyl thiol esters with α-amino acid esters
AU2016260693A1 (en) Process for preparation of nitrogen mustard derivatives
WO2021060048A1 (ja) ペプチド化合物の製造方法
WO2020189621A1 (ja) ペプチド化合物の製造方法
Tanaka et al. Catalytic dehydrogenative N-((triisopropylsilyl) oxy) carbonyl (Tsoc) protection of amines using iPr 3 SiH and CO 2
Aussedat et al. ‘Bis-ornithine’(2, 2-bis (aminopropyl) glycine): a new tetravalent template for assembling different functional peptides
JPWO2020162393A1 (ja) ペプチド化合物の製造方法
CN113710684B (zh) 肽化合物的制造方法
Olma et al. A convenient route to optically pure α-alkyl-β-(sec-amino) alanines
KR101890979B1 (ko) 알카인을 이용한 아마이드 화합물의 제조방법 및 이를 이용한 펩타이드 제조 방법
Tantry et al. 1-(t-Butyldimethylsilyloxy) benzotriazole (TBDMS-OBt): A new and novel reagent for the synthesis of peptides
WO2013097456A1 (zh) 西洛多辛中间体及其制备方法
McKerrow et al. Synthesis of Some N-Aryl α-Amino Acids Using Diaryliodonium Salts
Balducci et al. Stereoselective synthesis of a new chiral synthon: a cyclic pseudodipeptide containing an aspartic acid derivative and l-valine
Zangana Synthesis of Amino Acids from Chiral NiII Schiff Base Complexes for Novel Stapled Peptides
US20210261610A1 (en) Method for producing amide
US6291716B1 (en) Ortho-alkylation method of aromatic ketones
WO2019009317A1 (ja) ベンジル化合物

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 20870211

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2021548816

Country of ref document: JP

Kind code of ref document: A

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 3156019

Country of ref document: CA

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2020870211

Country of ref document: EP

Effective date: 20220425