WO2020179781A1 - 五環式化合物の塩およびそれらの結晶 - Google Patents

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賢史 吉田
芳章 大橋
環 星川
信明 佐藤
郁雄 櫛田
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エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社
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    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Definitions

  • the present invention presents pharmaceutically acceptable salts of pentacyclic compounds and crystals of pentacyclic compounds and pharmaceutically acceptable salts thereof, which have cholinergic neuronal activation and / or neuroprotective effects. Regarding.
  • the present invention also relates to a pharmaceutical composition containing the above salt or crystal as an active ingredient.
  • Non-Patent Document 1 cholinergic neurons that release acetylcholine as transmitters project widely from the Nucleus basalis and septal nucleus of the basal forebrain to the hippocampus, amygdala, and cerebral cortex, and memory, learning, and cognition. It is responsible for the regulation of attention.
  • Non-Patent Document 2 cholinergic neurons in the pedunculopontine nucleus and dorsolateral tegmental nucleus of the brain stem project to the striatum, nucleus accumbens, substantia nigra and thalamus, and are thought to be involved in motivation and regulation of wakefulness.
  • Non-Patent Documents 8-12 the role of cholinergic neurons in the basal portion of the forebrain has been clarified by analysis using many disorder model animals. Among them, it has been shown in a disorder model animal that the dysfunction of cholinergic neurons is correlated with the decrease in memory learning (Non-Patent Document 5-7), and the amount of acetylcholine is increased by a cholinesterase inhibitor to increase the amount of acetylcholine in cholinergic neurons. It has been shown that cognitive function is improved by increasing the function (Non-Patent Documents 8-12).
  • NGF Nerve Growth Factor
  • AD Alzheimer's dementia
  • cholinergic neuron loss is seen from the early stage of onset, which is one of the pathological features of AD.
  • senile plaque accumulation due to deposition of amyloid ⁇ and changes in neurofibrils due to aggregation of tau are also pathological features, and it is known that changes in neurofibrils increase with the progression of pathological conditions and cause nerve cell death.
  • Changes in neurofibrils have been observed in the Nucleus basalis and the entorhinal infield cortex from the early stage of AD onset.
  • Non-Patent Document 16-17 cholinergic neurons present in the Nucleus basalis are shed due to tau accumulation from an early stage, and their shedding and cognitive function It has been reported that the decrease in score correlates (Non-Patent Document 16-17).
  • a genetically modified mouse Human tau P301S transgenic mouse
  • a tau gene having a P301S mutation found in familial frontotemporal dementia hyperphosphorylation and abnormal accumulation of tau were observed as in AD. Get up.
  • changes in neurofibrils which are pathological features of AD, occur (Non-Patent Document 18), causing cognitive dysfunction due to synaptic disorders, neurodegeneration, and neuronal loss.
  • Human tau P301S transgenic mice are widely used as AD-like model animals (Non-patent documents 19-22), and by suppressing AD-like pathological changes in Human tau P301S transgenic mice. , It can be expected to improve the cognitive decline of Alzheimer's disease and suppress the progression of pathology.
  • Non-Patent Document 23-25 analysis using a plurality of genetically modified mice and disorder model animals suggests axonal transport disorder as one of the causes of cholinergic nerve cell shedding.
  • the hippocampal fornix amputation model impairs the axonal transport of cholinergic neurons that project from the septal field to the hippocampus, causing cell shedding by impairing the retrograde transport of molecules involved in survival and function ( Non-Patent Documents 26-28).
  • This impaired retrograde transport is also seen in genetically modified mice (Non-Patent Documents 23 and 24), and the loss of cholinergic neurons due to hippocampal fornix amputation reflects one aspect of the pathology. Therefore, by suppressing / ameliorating the loss of cholinergic neurons in this disorder model, the effects of improving cognitive decline in Alzheimer's disease and suppressing the progression of pathological conditions can be expected.
  • Lewy bodies In dementia with Lewy bodies (DLB; Dementia with Lewis bodies) and Parkinson's disease (PD; Parkinson disease), abnormal inclusion bodies (Lewy bodies) whose main component is ⁇ -synuclein appear in nerve cells, and nerve cells It is a progressive neurodegenerative disease that causes degeneration and shedding.
  • a large distribution of Lewy bodies in the cerebral cortex causes cognitive dysfunction, and a large distribution in the brainstem causes Parkinsonism.
  • psychiatric symptoms such as vision, hallucinations, delusions, and depressive symptoms, sleep disorders, and autonomic nervous symptoms are observed.
  • Lewy body dementia is diagnosed if dementia occurs before or within 1 year of onset of Parkinsonism, but Parkinson's disease with dementia occurs if Parkinsonism has been present for more than 1 year before the onset of dementia. (PDD; Parkinson disease with with mentia) is diagnosed.
  • PDD Parkinson disease with with mentia
  • LBD Lewy body disease
  • Non-Patent Documents 29-31 In dementia with Lewy bodies and Parkinson's disease with dementia, nerve cells of Meinert's basal ganglia, which is the origin of acetylcholinergic nerves, are degenerated and lost as in Alzheimer's disease. It has been reported that functional neuronal damage is observed (Non-Patent Documents 29-31). In addition, the progression of cholinergic nerve cell damage and cognitive decline are correlated (Non-Patent Document 29), and it has been shown that a cholinesterase inhibitor improves cognitive function. From these, it is shown that cognitive function is improved by improving the function of cholinergic neurons, and suppressing / improving the loss of cholinergic neurons in multiple disorder models is Alzheimer's dementia. Similarly, the effects of improving dementia of Lewy bodies and dementia of Parkinson's disease associated with dementia and suppressing the progression of disease state can be expected.
  • the cognitive decline caused by the functional decline of cholinergic neurons can be improved by achieving the functional activation and / or neuroprotection of cholinergic neurons in clinical practice.
  • Lapchak PA et al. “Effect of recombinant human nerve growth factor on presynaptic cholinergic function in rat hippocampal slices following partial septohippocampal lesions: measurements of [3H] acetylcholine -49.
  • Gilmor ML et al. “Coordinate expression of the vesicular acetylcholine transporter and choline acetyltransferase following septohippocampal pathwaylesions” J.Neurochem. 71 (1998) 2411-20. Gu Het al.
  • compound (I) The compound represented by the following formula (I) (5,10-dimethyl-5,6,9,10,11,12-hexahydropyrido [4'', 3'': 4', 5'] thieno [2] ',3':4,5]pyrimido[1,2-a]thieno[3,2-f][1,4]diazepine-4,13-dione, hereinafter also referred to as "compound (I)").
  • the present inventors have found that they have a cholinergic nerve cell activating effect and / or a neuroprotective effect. Therefore, compound (I) has the potential as an ameliorating agent for cognitive decline caused by functional decline of cholinergic neurons.
  • the present invention relates to the following ⁇ 1> to ⁇ 35>.
  • ⁇ 1> 5,10-Dimethyl-5,6,9,10,11,12-hexahydropyrido[4′′,3′′:4′,5′]thieno[represented by the formula (I) 2',3':4,5]Pyrimido[1,2-a]thieno[3,2-f][1,4]diazepine-4,13-dione monohydrochloride or hydrobromide.
  • E-type crystal of compound (I) monohydrochloride having the powder X-ray diffraction pattern of FIG. 6 in powder X-ray diffraction using CuK ⁇ as an X-ray source.
  • the pharmaceutical composition according to ⁇ 16> which is a cholinergic neuron protective agent.
  • a therapeutic agent for cognitive impairment which comprises the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15>.
  • a method for treating cognitive dysfunction wherein the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15> is administered to a patient.
  • ⁇ 23> Use of the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15> for producing a therapeutic agent for cognitive dysfunction.
  • An Alzheimer's disease therapeutic agent comprising the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15>.
  • ⁇ 25> A method for treating Alzheimer's disease, wherein the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15> is administered to a patient.
  • ⁇ 26> The salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15>, which is used for treating Alzheimer's disease.
  • ⁇ 27> Use of the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15> for producing a therapeutic agent for Alzheimer's disease.
  • a therapeutic agent for dementia with Lewy bodies which comprises the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15>.
  • ⁇ 29> A method for treating dementia with Lewy bodies, wherein the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15> is administered to a patient.
  • ⁇ 31> Use of the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15> for producing a therapeutic agent for dementia with Lewy bodies.
  • a therapeutic agent for Parkinson's disease associated with dementia which comprises the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15>.
  • ⁇ 33> A method for treating Parkinson's disease associated with dementia, wherein the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15> is administered to a patient.
  • ⁇ 34> The salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15>, which is used for treating Parkinson's disease associated with dementia.
  • ⁇ 35> Use of the salt according to ⁇ 1> or the crystal according to any one of ⁇ 2> to ⁇ 15> for producing a therapeutic agent for Parkinson's disease associated with dementia.
  • FIG. 1 is a powder X-ray diffraction pattern of the crystal of compound (I) obtained in Example 1.
  • the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ ), and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 2 is a powder X-ray diffraction pattern of the A-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 2.
  • the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ ), and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 3 is a powder X-ray diffraction pattern of the B-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 4.
  • the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ ), and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 1 is a powder X-ray diffraction pattern of the crystal of compound (I) obtained in Example 1.
  • the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ ), and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 4 is a powder X-ray diffraction pattern of the C-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 3.
  • the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ ), and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 5 is a powder X-ray diffraction pattern of the D-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 5.
  • the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ ), and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 6 is a powder X-ray diffraction pattern of the E-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 6.
  • the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ ), and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 5 is a powder X-ray diffraction pattern of the D-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 5.
  • the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ ), and the vertical
  • FIG. 7 is a powder X-ray diffraction pattern of the F-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 7.
  • the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ ), and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 8 is a powder X-ray diffraction pattern of the crystals of compound (I) hydrobromide obtained in Example 8.
  • the horizontal axis represents the diffraction angle (2 ⁇ ), and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 9 is a 13 C solid-state NMR spectrum of the A-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 2.
  • the horizontal axis represents the chemical shift ( ⁇ ) and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 10 is a 13 C solid-state NMR spectrum of the B-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 4.
  • the horizontal axis represents the chemical shift ( ⁇ ) and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 11 is a 13 C solid-state NMR spectrum of the C-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 3.
  • the horizontal axis represents the chemical shift ( ⁇ ) and the vertical axis represents the peak intensity.
  • FIG. 12 is a thermal analysis TG-DTA chart of the Form A crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 2.
  • the horizontal axis shows the temperature
  • the left vertical axis shows the weight change of TG
  • the right vertical axis shows the heat flow rate of DTA.
  • FIG. 13 is a thermal analysis TG-DTA chart of the B-type crystal of the compound (I) monohydrochloride obtained in Example 4.
  • the horizontal axis shows the temperature, the left vertical axis shows the weight change of TG, and the right vertical axis shows the heat flow rate of DTA.
  • FIG. 14 is a thermal analysis TG-DTA chart of the C-type crystal of the compound (I) monohydrochloride obtained in Example 3.
  • the horizontal axis shows the temperature, the left vertical axis shows the weight change of TG, and the right vertical axis shows the heat flow rate of DTA.
  • FIG. 15 is a thermal analysis TG-DTA chart of the D-type crystal of the compound (I) monohydrochloride obtained in Example 5.
  • FIG. 16 is a thermal analysis TG-DTA chart of the E type crystal of the compound (I) monohydrochloride obtained in Example 6.
  • the horizontal axis shows the temperature, the left vertical axis shows the weight change of TG, and the right vertical axis shows the heat flow rate of DTA.
  • FIG. 17 is a thermal analysis TG-DTA chart of the F type crystal of the compound (I) monohydrochloride obtained in Example 7.
  • the horizontal axis shows the temperature, the left vertical axis shows the weight change of TG, and the right vertical axis shows the heat flow rate of DTA.
  • FIG. 16 is a thermal analysis TG-DTA chart of the E type crystal of the compound (I) monohydrochloride obtained in Example 6.
  • the horizontal axis shows the temperature, the left vertical axis shows the weight change of TG, and the right vertical axis shows the heat flow rate of DTA.
  • FIG. 17 is a thermal analysis TG-DTA chart of the F type crystal of the compound (
  • FIG. 18 is a thermal analysis TG-DTA chart of the crystal of the compound (I) monohydrobromide obtained in Example 8.
  • the horizontal axis shows the temperature
  • the left vertical axis shows the weight change of TG
  • the right vertical axis shows the heat flow rate of DTA.
  • FIG. 19 shows a Raman spectrum of a type A crystal of compound (I) monohydrochloride obtained in Example 2.
  • salt means a chemical substance consisting of compound (I), which is a basic component, and an acid having a specific equivalent number with respect to compound (I).
  • salts used in the present specification include a salt with an inorganic acid, a salt with an organic acid, a salt with an acidic amino acid, and the like, and among them, a pharmaceutically acceptable salt is preferable.
  • salts with inorganic acids include salts with hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitrate, phosphoric acid and the like
  • examples of salts with organic acids include acetic acid, succinic acid and fumal.
  • Salts with organic carboxylic acids such as acids, maleic acid, tartaric acid, malic acid, citric acid, lactic acid, stearic acid, benzoic acid, methanesulfonic acid (mesylic acid), ethanesulfonic acid, benzenesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid
  • Examples thereof include salts with organic sulfonic acids such as (tosyl acid), and among them, hydrochloric acid, hydrobromic acid and phosphoric acid are preferable.
  • salts with acidic amino acids include salts with aspartic acid, glutamic acid and the like.
  • the salt of the present invention may be anhydrous, hydrate or solvate.
  • the hydrate or solvate refers to a solid formed by combining compound (I) or a salt thereof and a water molecule or a solvent molecule, respectively, even if the solid is a crystal.
  • the solvent of the solvent mixture is, for example, a ketone solvent such as acetone, 2-butanone, cyclohexanone; an ester solvent such as methyl acetate or ethyl acetate; 1,2-dimethoxyethane, t-butyl methyl ether and the like.
  • Ether-based solvents such as methanol, ethanol, 1-propanol and isopropanol
  • polar solvents such as N-methyl-2-pyrrolidone, N, N-dimethylformamide and dimethylsulfoxide
  • the number of water molecules or solvent molecules with respect to compound (I) or a salt thereof is not particularly limited, and may be, for example, one molecule or two molecules.
  • crystal means an anhydride or hydrate crystal of compound (I) or a salt thereof.
  • preferable compounds (I) and crystals of the hydrochloride and hydrobromide of compound (I) include: A crystal of compound (I) having diffraction peaks at diffraction angles (2 ⁇ 0.2°) of 9.0°, 11.1° and 23.6° in powder X-ray diffraction; In powder X-ray diffraction, the diffraction angle (2 ⁇ ⁇ 0.2 °) 9.0 °, 11.1 °, 14.5 °, 18.1 °, 20.0 °, 21.9 °, 23.6 ° , A crystal of compound (I) having diffraction peaks at 24.4°, 24.9° and 28.5°; A-type crystal of compound (I) monohydrochloride having diffraction peaks at diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °) of 11.6 °, 20.8 ° and 25.7 ° in powder X-ray diffraction; In powder X-ray diffraction, the diffraction angles (2 ⁇ ⁇ 0.2 °) of 9.
  • the diffraction peaks in the powder X-ray diffraction described above, the chemical shifts in the 13C solid-state NMR spectrum, and the Raman shift peaks in Raman spectroscopy are the crystals of compound (I), the A to F type crystals of compound (I) monochloride, and It is peculiar to each crystal of compound (I) hydromonobromide, and is a peak characteristic of the crystal.
  • the diffraction angle (2 ⁇ ) in powder X-ray diffraction may have an error within the range of ⁇ 0.2 °, so the above diffraction angle value is assumed to include a value within the range of about ⁇ 0.2 °. Need to be understood. Therefore, in a specific compound or a salt thereof, not only the crystals in which the peak diffraction angles in powder X-ray diffraction are completely the same, but also the crystals in which the peak diffraction angles are the same with an error of about ⁇ 0.2 ° are the same. , Included in the present invention.
  • the peak intensity or full width at half maximum of the diffraction angle (2 ⁇ ) in powder X-ray diffraction has different measurement conditions and the size and shape of each particle of the powder crystal used as a measurement sample even if the crystal shape is the same. Due to variability, it varies from measurement to measurement and does not always show a constant peak intensity or full width at half maximum. Therefore, in the comparison of powder X-ray diffraction patterns, even if there is a difference in peak intensity or full width at half maximum at the same diffraction angle (2 ⁇ ), the difference does not mean that it is derived from a different crystal form.
  • the crystal of the powder X-ray diffraction pattern having such a difference with respect to the diffraction peak characteristic of the specific crystal of the present invention has the same crystal form as the crystal of the present invention.
  • "having the powder X-ray diffraction pattern of FIG. 1" means that the powder X-ray diffraction pattern having a characteristic diffraction peak is ⁇ 0.
  • the powder X-ray diffraction pattern represented by FIG. not only in the case of matching within the error range of 2 °, but also in the case of powder X-ray diffraction patterns in which the characteristic diffraction angles match within the error range of ⁇ 0.2 ° but the peak intensity or half value width is different.
  • all the crystals showing the powder X-ray diffraction pattern shown in FIG. 1 are the same crystals as the crystals of the present invention.
  • chemical shift ( ⁇ 0.5 ppm) 164.0 ppm, 129.6 ppm and 36.5 ppm means “ 13 C under normal measurement conditions or substantially the same conditions as in the present specification”.
  • a solid-state NMR spectrum measurement is performed, and each has a peak substantially equivalent to a chemical shift ( ⁇ 0.5 ppm) of 164.0 ppm, 129.6 ppm, and 36.5 ppm”.
  • the chemical shift ⁇ in the 13 C solid state NMR spectrum may cause an error within a range of ⁇ 0.5 ppm, and thus the above-mentioned chemical shift value Needs to be understood as including numerical values in the range of about ⁇ 0.5 ppm. Therefore, the present invention includes not only a crystal whose chemical shifts in the 13 C solid state NMR spectrum completely match, but also a crystal whose chemical shifts match with an error of about ⁇ 0.5 ppm.
  • “having a peak at a chemical shift ( ⁇ 0.5 ppm) of 164.0 ppm” means having a peak in the range of a chemical shift ( ⁇ ) of 163.5 ppm to 164.5 ppm. This means the same for other chemical shifts in the 13 C solid-state NMR spectrum.
  • the Raman shift peak (cm -1 ) in Raman spectroscopy can have an error within the range of ⁇ 2 cm -1 , so the above peak value is understood to include the value within the range of ⁇ 2 cm -1. Needs to be done. Therefore, in a specific compound or a salt thereof, not only the crystals in which the Raman shift peaks in Raman spectroscopy are completely matched but also the crystals in which the Raman shift peaks are matched with an error of about ⁇ 2 cm -1 are the same. included.
  • the peak intensity or full width at half maximum of Raman shift in Raman spectroscopy is measured due to differences in measurement conditions and variations in the size and shape of each particle of the powder crystal used as a measurement sample, even if the crystal shapes are the same. It varies from one to another and does not always show a constant peak intensity or full width at half maximum. Therefore, in comparison of Raman spectroscopic measurements, differences in peak intensity or full width at half maximum for the same Raman shift peak (cm -1 ) do not mean that the differences are derived from different crystal forms. .. Therefore, the Raman spectrum having such a difference with respect to the Raman shift peak characteristic of the particular crystal of the present invention means that the crystal has the same crystal form as the crystal of the present invention.
  • “having the spectrum of FIG. 19 in Raman spectroscopy measurement” means that the Raman spectrum having a characteristic Raman shift peak (cm -1 ) is ⁇ 2 cm with respect to the Raman spectrum represented by FIG. not only if it matches within an error range of -1, even if the peak intensity or half width of those characteristic Raman shift peaks are matched within an error range of ⁇ 2 cm -1 different Raman spectrum, FIG. It means that all the crystals showing the Raman spectrum represented by 19 are the same crystals as the crystals of the present invention.
  • Compound (I) may be produced by a method well known to those skilled in the art.
  • compound (I) can be synthesized by the method described in Reference Examples described below.
  • the salt of compound (I) according to the present invention can be obtained by a method for producing a normal salt. Specifically, for example, compound (I) is suspended or dissolved in a solvent by heating, if necessary, and then an acid is added to the resulting suspension or solution, followed by room temperature or cooling. However, it can be produced by stirring or leaving for several minutes to several days.
  • the salt of compound (I) can be obtained as crystalline or amorphous. Further, the amorphous substance can be obtained by further performing an operation such as freeze-drying on these production methods, if necessary.
  • solvents examples include alcohol solvents such as ethanol, 1-propanol and isopropanol; acetonitrile; ketone solvents such as acetone and 2-butanone; ester solvents such as ethyl acetate; saturated carbonization such as hexane and heptane. Hydrogen solvent; ether solvent such as t-butyl methyl ether or water can be mentioned. These solvents may be used alone or in combination of two or more.
  • a crystal of compound (I) or a salt thereof can be produced by the above-mentioned method for producing compound (I) or a method for producing a salt thereof, or It can also be produced by heating and dissolving I) or a salt thereof in a solvent, cooling with stirring and crystallizing.
  • the compound (I) or a salt thereof used for crystallization may be in any form, may be a solvate or a hydrate or an anhydrous, and may be amorphous or crystalline (from a plurality of polymorphs). It may be a mixture of these.
  • Solvents used for crystallization include, for example, alcohol solvents such as methanol, ethanol, isopropanol, 1-propanol; acetonitrile; amide solvents such as N,N-dimethylformamide; ester solvents such as ethyl acetate; hexane and heptane. Examples thereof include saturated hydrocarbon solvents such as; ketone solvents such as acetone and 2-butanone; ether solvents such as t-butyl methyl ether; and water. Further, these solvents may be used alone or in combination of two or more.
  • the amount of the solvent used can be appropriately selected with the lower limit being the amount at which the compound (I) or its salt is dissolved by heating or the amount at which the suspension can be agitated, and the upper limit being the amount at which the crystal yield does not significantly decrease. ..
  • seed crystals may or may not be added.
  • the temperature at which the seed crystal is added is not particularly limited, but is preferably 0 to 80 ° C.
  • the temperature at which compound (I) or a salt thereof is dissolved by heating may be appropriately selected depending on the solvent, but the recrystallization solvent is preferably from 50 ° C. It is in the range of the temperature at which reflux is started, and more preferably 55 to 80 ° C.
  • Cooling at the time of crystallization may include crystals (polymorphs) having different aspects when rapidly cooled, so it is desirable to appropriately adjust the cooling rate in consideration of the influence on the quality and particle size of the crystals. , Preferably, for example, cooling at a rate of 5-40 ° C./hour. More preferably, for example, cooling at a rate of 5 to 25 ° C./hour.
  • the final crystallization temperature can be appropriately selected depending on the crystal yield and quality, but is preferably -25 to 30°C.
  • the crystallized crystals can be separated by a normal filtration operation, the separated crystals can be washed with a solvent if necessary, and the crystals can be further dried to obtain the desired crystals.
  • a solvent e.g., ethanol, acetone, 2-butanone, ethyl acetate, diethyl ether, t-butyl methyl ether, hexane and the like can be mentioned. Further, these solvents may be used alone or in combination of two or more.
  • the crystals separated by the filtration operation can be appropriately dried by leaving them in the air or in a nitrogen stream, or by heating.
  • the drying time the time until the residual solvent falls below a predetermined amount may be appropriately selected according to the production amount, the drying device, the drying temperature, etc.
  • drying can be performed under ventilation or under reduced pressure.
  • the degree of decompression may be appropriately selected according to the production amount, the drying apparatus, the drying temperature, and the like. After drying, the obtained crystals can be left in the air if necessary.
  • the crystals of the compound (I) and the salt of the compound (I) obtained by the production method described above have a cholinergic neuron activating effect and / or as shown in the activity data in the pharmacological test examples described later. It has a neuroprotective effect and can be used as an ameliorating agent for cognitive decline caused by functional decline of cholinergic neurons.
  • [Pharmaceutical composition] Another embodiment of the invention is a pharmaceutical composition containing crystals of compound (I) and pharmaceutically acceptable additives.
  • the pharmaceutical composition can be prepared by mixing a pharmaceutically acceptable additive with the crystals of compound (I).
  • the pharmaceutical composition according to the present invention can be produced according to a known method such as the method described in the 17th revised Japanese Pharmacopoeia General Formulation Regulations.
  • the pharmaceutical composition according to this embodiment can be appropriately administered to a patient according to its dosage form.
  • the dose of compound (I) according to the present invention varies depending on the degree of symptoms, age, sex, body weight, administration form / salt type, specific type of disease, etc., but is usually 1 for adults.
  • the crystal of compound (I) of the present invention can be produced, for example, by the method described in the following Examples, and the effect of the compound can be confirmed by the method described in the following Test Examples. it can.
  • the sample was precisely weighed in an aluminum sample pan and measured under the following conditions. (Measurement condition) Atmosphere: 100 mL / min Nitrogen gas Airflow Control: Empty aluminum sample pan Temperature rise rate: 10 ° C / min Sampling interval: 1 sec Measurement temperature range: room temperature to 320°C
  • the 13 C solid-state NMR spectrum of the crystal was measured under the following conditions with a solid sample enclosed in a sample tube in an amount of about 300 mg.
  • Equipment used Avance 400MHz (manufactured by Bruker) 7mm-CPMAS probe (manufactured by Bruker) Measurement nucleus: 13 C (resonance frequency 100.6248425 MHz) Measurement temperature: Room temperature Pulse mode: CPTOSS Measurement rotation speed: 5000 Hz Pulse repetition time: 3 sec Contact time: 1 msec Number of integrations: 5120 times Reference substance: Glycine (external standard: 176.03 ppm)
  • the Raman spectrum of the crystal was measured under the following measurement conditions by placing the sample on the sample table of a microscopic Raman spectrometer.
  • Diffraction grating 1200 lines/mm
  • Objective lens 50x scanning style: Continuous exposure time: 5 seconds
  • Total number of times 5 times Measurement range: 400 to 1800 cm -1 (Raman shift) Error: ⁇ 2cm -1
  • Root temperature in the following examples and reference examples usually indicates about 10 ° C to about 35 ° C. % Indicates weight percent unless otherwise specified.
  • Initiator TM or Initiator+ TM manufactured by Biotage was used.
  • the silica gel used is Merck's Silica Gel60 (70-230 mesh ASTM) or Fuji Silysia Chemical's PSQ60B, or a prepack column ⁇ column: YAMAZEN's Hi-Flash TM Column (Silicagel), size: S ( 16 x 60 mm), M (20 x 75 mm), L (26 x 100 mm), 2 L (26 x 150 mm), 3 L (46 x 130 mm), or Biotage TM SNAP Ultra Silica Gel, size: 10 g , 25 g, or 50 g ⁇ was used.
  • NH silica gel For NH silica gel, use CHROMATOREX NH-DM2035 manufactured by Fuji Silysia Chemical Ltd., or prepack column ⁇ column: Hi-Flash TM Column (Amino) manufactured by YAMAZEN, size: S (16 x 60 mm), M (20 x 75 mm). ), L (26 x 100 mm), 2 L (26 x 150 mm), 3 L (46 x 130 mm), or Wako Pure Chemical Industries, Ltd.
  • Example 1 Preparation of crystals of compound (I) To 1.5 L of 0.3 M hydrochloric acid, 152.08 g of compound (I) was added, 450 ml of ethyl acetate was added to this solution, and the mixture was stirred for 5 minutes. The aqueous layer was separated, washed with 450 ml of ethyl acetate, and the insoluble material was filtered off. 100 ml of a 1N aqueous sodium hydroxide solution was added to the filtrate in a water bath at 20 ° C., and the mixture was stirred for 15 minutes.
  • Example 2 Preparation of A-type Crystals of Compound (I) Monohydrochloride 101 mg of Compound (I) was added to a screw cap test tube. 0.2 mL of 1.5 M hydrochloric acid was added and dissolved. 1.8 mL of IPA was added, and after ultrasonic irradiation, the mixture was stirred at 40 ° C. for one day using a stirrer. After stirring at room temperature for an additional 1 hour, the sample was filtered using a filter (0.2 ⁇ m), rinsed with 0.5 mL of IPA/water (9/1, v/v), and ventilated under a nitrogen stream. Dried. The crystals were dried at 70 ° C. for about 1 hour to obtain the title crystals (103 mg).
  • Powder X-ray diffraction peak (transmission method, 2 ⁇ 0.2°): 6.1°, 7.8°, 11.6°, 16.2°, 19.9°, 20.8°, 25.2 °, 25.7°, 26.9°, 29.9° 13 C-NMR (100MHz, solid state) ⁇ (ppm): 164.0, 162.5, 160.5, 153.9, 151.6, 150.7, 133.6, 131.1, 129.6 , 128.4, 126.9, 125.2, 123.7, 121.3, 120.3, 119.5, 53.7, 52.0, 50.9, 44.7, 36.5, 22 .6
  • Raman shift peak (cm -1 ): 409,587,763,976,1428,1493,1688
  • the powder X-ray diffraction pattern of the A-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained by the above method is shown in FIG. 2, the 13 C-solid-state NMR spectrum is shown in FIG. 9, and the thermogravimetric TG-DTA chart
  • Example 3 Preparation of C-type Crystals of Compound (I) Monohydrochloride 1020 mg of Compound (I) was added to a screw cap test tube. 1.5 equivalents of hydrochloric acid (353 ⁇ L) was dissolved in 20 mL of methanol and added to the sample. The mixture was stirred at room temperature for 2 days using a stirrer. A sample was collected by filtration using a filter (0.2 ⁇ m). The obtained solid was dried under reduced pressure for about 2 hours and then dried at 70 ° C. for 1 hour to obtain the title crystals (1048 mg).
  • Powder X-ray diffraction peak (transmission method, 2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 6.0 °, 7.7 °, 9.7 °, 11.4 °, 15.8 °, 16.9 °, 18.1 °, 23.2°, 25.4°, 27.6° 13 C-NMR (100 MHz, solid state) ⁇ (ppm): 162.5, 160.5, 159.6, 153.8, 151.1, 134.1, 131.6, 128.4, 127.6. , 125.6, 120.0, 54.0, 52.6, 50.9, 44.3, 43.5, 38.9, 32.3, 22.4
  • the powder X-ray diffraction pattern of the C-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained by the above method is shown in FIG. 4, the 13 C-solid-state NMR spectrum is shown in FIG. 11, and the thermogravimetric TG-DTA chart is shown in FIG. ..
  • Example 4 Preparation of B-type Crystals of Compound (I) Monohydrochloride 303 mg of the hydrochloride crystals obtained in Example 3 was added to a platinum crucible and heated at 160 ° C. for 15 minutes to obtain the title crystals (293 mg). Powder X-ray diffraction peak (transmission method, 2 ⁇ ⁇ 0.2 °): 6.3 °, 9.7 °, 10.1 °, 17.9 °, 19.0 °, 19.4 °, 23.4 °, 26.3°, 27.3°, 32.0° 13 C-NMR (100 MHz, solid state) ⁇ (ppm): 162.0, 160.1, 153.8, 151.1, 133.4, 130.7, 128.3, 126.9, 125.6.
  • Example 5 Preparation of Form D Crystals of Compound (I) Monohydrochloride 227 mg of the mixture of hydrochloride crystals obtained in each of Examples 2 and 3 and 8 mL of ethanol were added to a screw cap test tube. The mixture was stirred at 65 ° C. using a stirrer. After about 1 hour, ultrasonic waves were applied and the mixture was stirred at the same temperature for one day. The sample was collected by filtration using a filter (0.2 ⁇ m) to obtain the title crystal (203 mg).
  • FIG. 5 shows a powder X-ray diffraction pattern of a D-type crystal of compound (I) monohydrochloride obtained by the above method
  • FIG. 15 shows a thermal analysis TG-DTA chart.
  • Example 6 Preparation of Form E Crystal of Compound (I) Monohydrochloride 108 mg of the hydrochloride crystal obtained in Example 2 and 5 mL of acetonitrile were added to a screw cap test tube. The mixture was stirred at 60 ° C. for one day using a stirrer, and the sample was collected by filtration using a filter (0.2 ⁇ m). The obtained solid and 5 mL of acetonitrile were added to the screw cap test tube again, and the mixture was stirred at 60 ° C. for one day using a stirrer. The crystals were collected by filtration under a nitrogen stream using a filter (0.2 ⁇ m) to obtain the title crystals (89.7 mg).
  • FIG. 6 shows the powder X-ray diffraction pattern of the E type crystal of the compound (I) monohydrochloride obtained by the above method
  • FIG. 16 shows the thermal analysis TG-DTA chart.
  • Example 7 Preparation of Form F Crystals of Compound (I) Monohydrochloride Hydrochloride crystals 101 mg obtained in Example 2 and 5 mL of ethanol were added to a screw cap test tube. The mixture was stirred at 60 ° C. for one day using a stirrer. A sample was collected by filtration using a filter (0.2 ⁇ m). The obtained solid and 5 mL of ethanol were added to the screw cap test tube again, and the mixture was stirred at 60 ° C. for 4 hours using a stirrer. The crystals were collected by filtration using a filter (0.2 ⁇ m) to obtain the title crystals (75.0 mg).
  • Powder X-ray diffraction peak (transmission method, 2 ⁇ 0.2°): 5.9°, 7.3°, 9.3°, 10.7°, 13.8°, 15.6°, 16.4 °, 18.7°, 25.1°, 26.8°
  • the powder X-ray diffraction pattern of the F type crystal of the compound (I) monohydrochloride obtained by the above method is shown in FIG. 7, and the thermal analysis TG-DTA chart is shown in FIG.
  • Example 8 Preparation of Crystals of Compound (I) Hydrohydrobromide
  • Compound (I) 933 mg was added to a screw cap test tube.
  • 1.5 equivalents (434 ⁇ L) of hydrobromic acid was dissolved in 20 mL of methanol and added to the sample. It stirred at room temperature for 3 days using the stirrer. The sample was collected by filtration using a filter (0.2 ⁇ m) and dried at 60 ° C. for 1 hour to obtain the title crystal (1111 mg).
  • Powder X-ray diffraction peak (transmission method, 2 ⁇ 0.2°): 6.0°, 7.8°, 10.0°, 11.7°, 17.8°, 20.8°, 23.5 °, 24.5°, 25.2°, 27.3°
  • a powder X-ray diffraction pattern of the compound (I) monohydrobromide obtained by the above method is shown in FIG. 8, and a thermal analysis TG-DTA chart is shown in FIG.
  • the collected septal field is enzymatically treated with an enzyme solution containing 0.25% trypsin (15050-065, Thermo Fisher Scientific) and 0.01% DNase (D5025-150KU, Sigma) at 37 ° C. for 30 minutes. By doing so, the cells were dispersed. At this time, the enzymatic reaction was stopped by adding deactivated horse serum (26050-088, Thermo Fisher Scientific). The enzyme-treated solution was centrifuged at 1000 rpm for 3 minutes to remove the supernatant. 10 mL of medium was added to the obtained cell mass.
  • Dulbecco's Modified Eagle's Medium (044-29765, WAKO) was supplemented with N2 supplements (17502-048, Thermo Fisher Scientific 122/140) and 1 mM Sodium pyruvic (S60) 10% (11360-070). , Thermo Fisher Scientific) was used.
  • the cell mass to which the medium had been added was redispersed by gentle pipetting operation, and then centrifuged again at 1000 rpm for 3 minutes to remove the supernatant. 10 mL of medium was added to the obtained cell mass, and this cell dispersion was filtered through a 40 ⁇ m nylon mesh (Cell Strainer) to remove the cell mass to obtain a nerve cell suspension.
  • the neuronal suspension was diluted with medium and 10% deactivated bovine serum (26140-079, Thermo Fisher Scientific) and 10% deactivated horse serum were added. Then, 100 ⁇ L/well was seeded in a 96-well incubator (354461, CORNING) previously coated with poly-D-lysine at an initial culture density of 1.4 ⁇ 10 5 cells/cm 2 . Seeded cells 5% CO 2 -95% air under were cultured two days at in 37 ° C. incubator, the medium was changed total volume of fresh medium 120 [mu] L, were incubated subsequently for 5 days. (2) Compound addition On the 7th day of the culture, drug addition was carried out as follows.
  • the DMSO solution of the test compound was diluted in medium to 10 times the final concentration.
  • NGF 450-01, PEPRO TECH, INC.
  • the final DMSO concentration was 0.1% or less.
  • only DMSO and NGF were added to the control group.
  • a buffer containing 10 ⁇ M choline, 10 ⁇ M physostigmine and 6 mM KCl was added.
  • the buffer was 125 mM NaCl, 25 mM 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazinecinethenesulfonic acid, 1.2 mM KH 2 PO 4 , 1.2 mM MgSO 4 , 2.2 mM CaCl 2 (2H 2 O), and 10 mM Glucose in sterile water.
  • the final pH of the solution was adjusted to 7.4. After incubating the 96-well incubator with buffer under 5% CO 2 -95% air for 40 minutes in a 37° C. incubator, 80 ⁇ L was collected.
  • ChAT choline acetyltransferase
  • RNA purification was performed by the method described in the package insert of the kit. After RNA purification, total RNA concentration was measured by QIAexpert Instrument (QIAGEN). The cDNA was prepared using the SuperScript® VILO TM cDNA Synthesis Kit (# 11754: Thermo Fisher Scientific). The cDNA was prepared by the method described in the kit package insert. The prepared cDNA was diluted 4-fold with RNase free water, and the diluted cDNA solution was used as a sample.
  • Taqman registered trademark
  • Universal PCR Master Mix #43044437: Thermo Fisher Scientific
  • Taqman registered trademark
  • Gene Expression ResorpLass Rhs INVENTORIhsRhsRh
  • Inventor RheaRs INVENTORIhEhRhsRs
  • INVENTORIhedRs INVENTORIhedRs
  • INVENTORIEDT #4331182
  • 5 ⁇ l each were mixed to prepare a measurement sample solution.
  • Quantitative prism chain reaction qPCR was performed by fluorescent probe method using ABI PRISM® 7900HT (Thermo Fisher Scientific). The analysis was performed by SDS2.4 (Thermo Fisher Scientific).
  • the result was 56.4% at 10 mg / kg when the increase in the ChAT mRNA expression level of the compound-administered group of Reference Example 1 was calculated as a percentage with respect to the ChAT mRNA expression level of the vehicle-administered group.
  • Acetylcholine (ACh) amount in rat Cerebrospinal fluid (CSF) (1) Background It has been clarified from rodent studies that the increase and decrease of neurotransmitters in the brain and in Cerebrospinal fluid (CSF) are correlated, and that the correlation is also understood in humans. (Lowe S et al. Psychopharmacology 219 (2012) 959-70.). Therefore, in order to detect the change in the amount of acetylcholine in the brain due to the test compound, the change in the amount of acetylcholine in CSF was evaluated. (2) Compound administration In this test, male Fischer 344 strain rats (Japan Charles River) having a body weight of about 150 to 250 g were used.
  • the test compound was orally administered once a day for 3 days at 10 mg/kg.
  • the medium used was 0.01N hydrochloric acid.
  • CSF was collected from the cisterna in a tube containing an AChE inhibitor under pentobarbital anesthesia.
  • the collected CSF was centrifuged at 3500 xg at 4 ° C. for 10 minutes, and the supernatant was collected.
  • the recovered supernatant was frozen in liquid nitrogen and then stored at ⁇ 80 ° C.
  • ChAT Choline acetyltransferase
  • the number of ChAT-positive cells present along the main axis of the medial septum was measured by (Keyence). The results showed the number of ChAT-positive cells in the medium-administered group and the test compound-administered group as a percentage when the number of ChAT-positive cells in the administration start group (4 months old) was 100%. The results are expressed as the average value ⁇ standard error.
  • the difference between the administration start group and the vehicle administration group (significant difference: *) and the difference between the vehicle administration group and the test compound group (significant difference: #) were analyzed by unpaired t-test. p ⁇ 0.05 was judged as a statistically significant difference. Statistical analysis was performed using GraphPad Prism version 7.02. The results are shown in Table 1.
  • rat hippocampal fimbria fornix transection model a Sprague-Dawley male rat (Charles River Laboratories, Japan) weighing about 250-350 g was used. Rats were anesthetized by mixing three kinds of subcutaneous administration of midazolam (2 mg/kg), medetomidine hydrochloride (0.15 mg/kg) and butorphanol tartrate (2.5 mg/kg), and the rats were fixed on a stereotaxic apparatus (Narishige Co., Ltd.).
  • the skull was exposed and the right skull was drilled to a width of 5 mm from the midline 2 mm posterior to Bregma.
  • a razor with a width of 4 mm was inserted into the depth of 5.5 mm from Bregma to cut the hippocampal fimbria-fornix. After hemostasis, the scalp was sutured and the rat was returned to the cage after surgery to recover from anesthesia.
  • the group in which the right skull was drilled to a width of 5 mm from the midline 2 mm behind Bregma and the razor was not inserted was defined as the sham surgery group.
  • test compound was orally administered once a day for 5 to 9 days (Example 1: 10 mg / kg) or 7 days to 14 days (Example 3: 3 mg / kg).
  • vehicle 0.01 N hydrochloric acid was used, and in the sham-operated group, the vehicle was orally administered once a day like the compound.
  • a brain coronal frozen section with a thickness of 30 ⁇ m was obtained from a sample of the forebrain including the medial septal area using a sliding microtome (Leica, SM2000R). Made.
  • ChAT Choline acetyltransferase positive cells
  • VAChT vesicular acetylcholine transporter
  • DAV staining DAB PERO XIDASE SUBSTRATE KIT (Vector, SK-4100) was performed using a VAChT antibody (Merck Millipore, ABN100).
  • the number of ChAT-positive cells or OD of hippocampal VAChT in the vehicle-administered group and the test compound-administered group was shown as a percentage when the medial septal area ChAT-positive cells or hippocampal VAChT OD in the sham-operated group was defined as 100%. ..
  • the results are expressed as mean ⁇ standard error.
  • the difference between the vehicle administration group and the test compound group (significant difference: #) was analyzed by unpaired t-test. p ⁇ 0.05 was judged as a statistically significant difference.
  • Statistical analysis was performed using GraphPad Prism version 7.02. The results are shown in Tables 2 and 3.

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Abstract

式（Ｉ）で表される化合物の塩およびそれらの結晶は、医薬品の原薬としての利用可能性を有する。

Description

五環式化合物の塩およびそれらの結晶
　本発明は、コリン作動性神経細胞賦活作用および／または神経保護作用を有する、五環式化合物の薬剤学的に許容される塩ならびに五環式化合物およびその薬剤学的に許容される塩の結晶に関する。本発明はまた、上記塩または結晶を有効成分として含有する医薬組成物に関する。
　アセチルコリンを伝達物質として放出するコリン作動性神経細胞は、前脳では前脳基底部のマイネルト基底核や中隔核から海馬、偏桃体、そして大脳皮質へ広く投射し、記憶・学習や認知・注意の調節を担っている（非特許文献１）。また、脳幹の脚橋被蓋核と背外側被蓋核のコリン作動性神経細胞は線条体、側坐核、黒質や視床へ投射し、動機付けや覚醒状態の調節に関与すると考えられている（非特許文献２－４）。
　特に、前脳基底部のコリン作動性神経細胞の役割については、多くの障害モデル動物等を用いた解析により明らかとなってきた。中でも、コリン作動性神経細胞の機能障害と記憶学習の低下が相関することが障害モデル動物において示され（非特許文献５－７）、コリンエステラーゼ阻害剤によりアセチルコリン量を増加させコリン作動性神経細胞の機能を上げることにより認知機能が改善されることが示されてきた（非特許文献８－１２）。
　コリン作動性神経細胞の脱落を示す動物モデルにおいて、Ｎｅｒｖｅ　Ｇｒｏｗｔｈ　Ｆａｃｔｏｒ（ＮＧＦ）による神経保護作用を示すことが報告されている（非特許文献１３－１５）。
　特にアルツハイマー型認知症（ＡＤ）では、コリン作動性神経細胞の脱落は発症初期より見られ、ＡＤの病理学的特徴の一つでもある。ＡＤではアミロイドβの沈着による老人斑蓄積と，タウの凝集による神経原繊維変化も病理学的特徴に持ち、特に神経原繊維変化は病態の進行に伴い増大し、神経細胞死を引き起こすことが知られている。ＡＤ発症初期からマイネルト基底核や経嗅内野皮質おいて神経原繊維変化が見られ、中でも、マイネルト基底核に存在するコリン作動性神経細胞は早期よりタウの蓄積により脱落し、その脱落と認知機能スコアの低下は相関することが報告されている（非特許文献１６－１７）。同様に、家族性前頭側頭葉認知症から発見されたＰ３０１Ｓ変異を持つタウ遺伝子を発現させた遺伝子改変マウス（Ｈｕｍａｎ　ｔａｕ　Ｐ３０１Ｓトランスジェニックマウス）では、ＡＤ同様にタウの過剰リン酸化および異常蓄積が起きる。その結果、ＡＤの病理学的特徴である神経原繊維変化が起き（非特許文献１８）、シナプス障害，神経変性および神経細胞脱落による認知機能障害を引き起こす。これらの結果から、Ｈｕｍａｎ　ｔａｕ　Ｐ３０１ＳトランスジェニックマウスはＡＤ様モデル動物としても広く用いられており（非特許文献１９－２２）、Ｈｕｍａｎ　ｔａｕ　Ｐ３０１ＳトランスジェニックマウスにおいてＡＤ様病理学的変化を抑制することで、アルツハイマー型認知症の認知機能低下の改善および病態進行抑制の効果が期待できる。
　また、複数の遺伝子改変マウスや障害モデル動物を用いた解析からコリン作動性神経細胞の脱落の原因の一つとして、軸索輸送障害が示唆されている（非特許文献２３－２５）。中でも、海馬采脳弓切断モデルは、中隔野から海馬に投射するコリン作動性神経細胞の軸索を障害し、生存や機能に関わる分子の逆行性輸送を障害させることで細胞脱落を引き起こす（非特許文献２６－２８）。この逆行性輸送の障害は遺伝子改変マウスにおいても見られ（非特許文献２３、２４）、海馬采脳弓切断によるコリン作動性神経細胞の脱落は病態の一つの側面を反映している。そのため、この障害モデルにおいてコリン作動性神経細胞の脱落を抑制・改善することで、アルツハイマー型認知症の認知機能低下の改善および病態進行抑制の効果が期待できる。
　レビー小体型認知症（ＤＬＢ；　Ｄｅｍｅｎｔｉａ　ｗｉｔｈ　Ｌｅｗｙ　ｂｏｄｉｅｓ）、パーキンソン病（ＰＤ；　Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ　ｄｉｓｅａｓｅ）はαシヌクレインを主成分とする異常な封入体（レビー小体）が神経細胞内に出現し、神経細胞の変性・脱落をきたす進行性の神経変性疾患である。レビー小体が大脳皮質に多く分布すると認知機能障害などを発症し、脳幹に多く分布するとパーキンソニズムを発症する。その他、幻視、幻覚、妄想、うつ症状などの精神症状、睡眠障害、自律神経症状が見られる。パーキンソニズム発症前あるいは発症1年以内に認知症を生じた場合はレビー小体型認知症と診断されるが、パーキンソニズムが認知症発症の１年以上前から存在する場合は認知症を伴うパーキンソン病（ＰＤＤ；　Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｗｉｔｈ　ｄｅｍｅｎｔｉａ）と診断される。このように、認知機能障害やパーキンソニズムの時間的な出現順序や程度の違いによって、レビー小体型認知症、認知症を伴うパーキンソン病、パーキンソン病という異なる診断名となるが、病理学的には同一疾患とみなされ、これらはまとめてレビー小体病（ＬＢＤ；　Ｌｅｗｙ　ｂｏｄｙ　ｄｉｓｅａｓｅ）と呼ばれる。レビー小体型認知症、認知症を伴うパーキンソン病においては、アルツハイマー病同様にアセチルコリン作動性神経の起始核であるマイネルト基底核の神経細胞が変性、脱落しており、海馬や皮質において重度のコリン作動性神経細胞障害が見られることが報告されている（非特許文献２９－３１）。また、コリン作動性神経細胞障害の進行と認知機能低下は相関し（非特許文献２９）、コリンエステラーゼ阻害剤により認知機能が改善されることが示されてきた。これらから、コリン作動性神経細胞の機能を改善することにより認知機能が改善されることが示され、複数の障害モデルにおいてコリン作動性神経細胞の脱落を抑制・改善することは、アルツハイマー型認知症同様にレビー小体型認知症、認知症を伴うパーキンソン病の認知機能低下の改善および病態進行抑制の効果が期待できる。
　したがって、これらの知見より、臨床においてもコリン作動性神経細胞の機能賦活化および／または神経保護を達成することで、コリン作動性神経細胞の機能低下によって起こる認知機能低下の改善が期待できる。
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　下記式（Ｉ）で表わされる化合物（５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン、以下「化合物（Ｉ）」ともいう。）が、コリン作動性神経細胞賦活作用および／または神経保護作用を有することを、本発明者らは見出した。したがって、化合物（Ｉ）は、コリン作動性神経細胞の機能低下によって起こる認知機能低下の改善剤としての利用可能性を有している。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000015
　一般に、医薬品として用いられる化合物およびその塩ならびにそれらの結晶の物性は、薬物のバイオアベイラビリティー、原薬の純度、製剤の処方などに大きな影響を与える。したがって、本発明の目的は、医薬品の原薬としての利用可能性を有する化合物（Ｉ）の薬剤学的に許容される塩およびそれらの結晶を提供することにある。
　本発明者らは、化合物（Ｉ）について、上記事情に鑑み鋭意研究を重ねた結果、化合物（Ｉ）の塩およびそれらの結晶を見出し、本発明を完成した。
　すなわち、本発明は以下の＜１＞から＜３５＞に関する。
＜１＞式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩または一臭化水素酸塩。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000016
 ＜２＞５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンまたは５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩もしくは一臭化水素酸塩の結晶。
＜３＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．０°、１１．１°および２３．６°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの結晶。
＜３．１＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．０°、１１．１°、１４．５°、１８．１°、２０．０°、２１．９°、２３．６°、２４．４°、２４．９°および２８．５°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの結晶。
＜３．２＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、図１の粉末Ｘ線回折パターンを有する５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの結晶。
＜４＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１１．６°、２０．８°および２５．７°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＡ型結晶。
＜４．１＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．１°、７．８°、１１．６°、１６．２°、１９．９°、２０．８°、２５．２°、２５．７°、２６．９°および２９．９°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＡ型結晶。
＜４．２＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、図２の粉末Ｘ線回折パターンを有する５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＡ型結晶。
＜４．３＞グリシンを外部基準（１７６．０３ｐｐｍ）とする１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、ケミカルシフト（δ±０．５ｐｐｍ）１６４．０ｐｐｍ，１２９．６ｐｐｍおよび３６．５ｐｐｍにピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＡ型結晶。
＜５＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．７°、１０．１°および１７．９°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＢ型結晶。
＜５．１＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．３°、９．７°、１０．１°、１７．９°、１９．０°、１９．４°、２３．４°、２６．３°、２７．３°および３２．０°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＢ型結晶。
＜５．２＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、図３の粉末Ｘ線回折パターンを有する５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＢ型結晶。
＜５．３＞グリシンを外部基準（１７６．０３ｐｐｍ）とする１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、ケミカルシフト（δ±０．５ｐｐｍ）１６０．１ｐｐｍ，１３３．４ｐｐｍおよび１３０．７ｐｐｍにピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＢ型結晶。
＜６＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．０°、７．７°および１６．９°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＣ型結晶。
＜６．１＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．０°、７．７°、９．７°、１１．４°、１５．８°、１６．９°、１８．１°、２３．２°、２５．４°および２７．６°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＣ型結晶。
＜６．２＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、図４の粉末Ｘ線回折パターンを有する５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＣ型結晶。
＜６．３＞グリシンを外部基準（１７６．０３ｐｐｍ）とする１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、ケミカルシフト（δ±０．５ｐｐｍ）１５９．６ｐｐｍ，１２７．６ｐｐｍおよび３８．９ｐｐｍにピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＣ型結晶。
＜７＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．６°、１４．６°および２６．４°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＤ型結晶。
＜７．１＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．６°、１４．６°、１６．１°、２０．５°、２１．０°、２３．０°、２４．５°、２６．４°、２８．０°および３２．５°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＤ型結晶。
＜７．２＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、図５の粉末Ｘ線回折パターンを有する５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＤ型結晶。
＜８＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．４°、１１．３°および２７．３°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＥ型結晶。
＜８．１＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．４°、１１．３°、１５．７°、１８．０°、１９．２°、２２．８°、２４．６°、２５．４°、２６．０°および２７．３°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＥ型結晶。
＜８．２＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、図６の粉末Ｘ線回折パターンを有する化合物（Ｉ）一塩酸塩のＥ型結晶。
＜９＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）７．３°、９．３°および１０．７°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＦ型結晶。
＜９．１＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）５．９°、７．３°、９．３°、１０．７°、１３．８°、１５．６°、１６．４°、１８．７°、２５．１°および２６．８°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＦ型結晶。
＜９．２＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、図７の粉末Ｘ線回折パターンを有する５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＦ型結晶。
＜１０＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）７．８°、２４．５°および２５．２°に回折ピークを有する５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一臭化水素酸塩の結晶。
＜１０．１＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．０°、７．８°、１０．０°、１１．７°、１７．８°、２０．８°、２３．５°、２４．５°、２５．２°および２７．３°に回折ピークを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一臭化水素酸塩の結晶。
＜１０．２＞ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、図８の粉末Ｘ線回折パターンを有する５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一臭化水素酸塩の結晶。
＜１１＞ラマン分光測定において、５８７ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩のＡ型結晶。
＜１２＞ラマン分光測定において、５８７ｃｍ－１、１４２８ｃｍ－１および１４９３ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩のＡ型結晶。
＜１３＞ラマン分光測定において、５８７ｃｍ－１、７６３ｃｍ－１、１４２８ｃｍ－１、１４９３ｃｍ－１および１６８８ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩のＡ型結晶。
＜１４＞ラマン分光測定において、４０９ｃｍ－１、５８７ｃｍ－１、７６３ｃｍ－１、９７６ｃｍ－１、１４２８ｃｍ－１、１４９３ｃｍ－１および１６８８ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩のＡ型結晶。
＜１５＞ラマン分光測定において、図１９のスペクトルを有する、５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩のＡ型結晶。
＜１６＞＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶を含有する医薬組成物。
＜１７＞コリン作動性神経細胞賦活剤である＜１６＞記載の医薬組成物。
＜１８＞コリン作動性神経細胞保護剤である＜１６＞記載の医薬組成物。
＜１９＞認知機能障害の治療のための＜１６＞記載の医薬組成物。
＜２０＞＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶を含有する、認知機能障害の治療剤。
＜２１＞＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶を患者に投与する、認知機能障害の治療方法。
＜２２＞認知機能障害の治療に使用される、＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶。
＜２３＞認知機能障害の治療剤を製造するための、＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶の使用。
＜２４＞＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶を含有する、アルツハイマー病治療剤。
＜２５＞＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶を患者に投与する、アルツハイマー病の治療方法。
＜２６＞アルツハイマー病の治療に使用される、＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶。
＜２７＞アルツハイマー病の治療剤を製造するための、＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶の使用。
＜２８＞＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶を含有する、レビー小体型認知症治療剤。
＜２９＞＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶を患者に投与する、レビー小体型認知症の治療方法。
＜３０＞レビー小体型認知症の治療に使用される、＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶。
＜３１＞レビー小体型認知症の治療剤を製造するための、＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶の使用。
＜３２＞＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶を含有する、認知症を伴うパーキンソン病治療剤。
＜３３＞＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶を患者に投与する、認知症を伴うパーキンソン病の治療方法。
＜３４＞認知症を伴うパーキンソン病の治療に使用される、＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶。
＜３５＞認知症を伴うパーキンソン病の治療剤を製造するための、＜１＞記載の塩または＜２＞～＜１５＞のいずれか一項に記載の結晶の使用。
　本発明によれば、医薬品の原薬としての利用可能性が期待される、良好な物性を有する化合物（Ｉ）の塩およびそれらの結晶を提供できる。
図１は、実施例１で得られた化合物（Ｉ）の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。 図２は、実施例２で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。 図３は、実施例４で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＢ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。 図４は、実施例３で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＣ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。 図５は、実施例５で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＤ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。 図６は、実施例６で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＥ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。 図７は、実施例７で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＦ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。 図８は、実施例８で得られた化合物（Ｉ）一臭化水素酸塩の結晶の粉末Ｘ線回折パターンである。横軸は回折角（２θ）、縦軸はピーク強度を示す。 図９は実施例２で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルである。横軸は化学シフト（δ）、縦軸はピーク強度を示す。 図１０は実施例４で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＢ型結晶の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルである。横軸は化学シフト（δ）、縦軸はピーク強度を示す。 図１１は実施例３で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＣ型結晶の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルである。横軸は化学シフト（δ）、縦軸はピーク強度を示す。 図１２は、実施例２で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶の熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートである。横軸は温度、左縦軸はＴＧの重量変化、右縦軸はＤＴＡの熱流量を示す。 図１３は、実施例４で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＢ型結晶の熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートである。横軸は温度、左縦軸はＴＧの重量変化、右縦軸はＤＴＡの熱流量を示す。 図１４は、実施例３で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＣ型結晶の熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートである。横軸は温度、左縦軸はＴＧの重量変化、右縦軸はＤＴＡの熱流量を示す。 図１５は、実施例５で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＤ型結晶の熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートである。横軸は温度、左縦軸はＴＧの重量変化、右縦軸はＤＴＡの熱流量を示す。 図１６は、実施例６で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＥ型結晶の熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートである。横軸は温度、左縦軸はＴＧの重量変化、右縦軸はＤＴＡの熱流量を示す。 図１７は、実施例７で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＦ型結晶の熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートである。横軸は温度、左縦軸はＴＧの重量変化、右縦軸はＤＴＡの熱流量を示す。 図１８は、実施例８で得られた化合物（Ｉ）一臭化水素酸塩の結晶の熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートである。横軸は温度、左縦軸はＴＧの重量変化、右縦軸はＤＴＡの熱流量を示す。 図１９は、実施例２で得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶のラマンスペクトルを示す。
　以下、本発明の化合物（Ｉ）の塩およびそれらの結晶およびその製造方法について詳細に説明する。
　本明細書において、「塩」とは、塩基性成分である化合物（Ｉ）と、化合物（Ｉ）に対して特定の当量数の酸とからなる化学物質を意味する。
　本明細書において使用する「塩」としては、例えば、無機酸との塩、有機酸との塩、酸性アミノ酸との塩等が挙げられ、中でも薬剤学的に許容される塩が好ましい。
　無機酸との塩の例としては、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等との塩が挙げられ、有機酸との塩の例としては、例えば酢酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、乳酸、ステアリン酸、安息香酸等の有機カルボン酸との塩、メタンスルホン酸（メシル酸）、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸（トシル酸）等の有機スルホン酸との塩が挙げられ、中でも、塩酸、臭化水素酸、リン酸が好ましい。
　酸性アミノ酸との塩の例としては、例えばアスパラギン酸、グルタミン酸等との塩が挙げられる。
　本発明の塩は、無水物または、水和物もしくは溶媒和物でもよい。本明細書において、水和物または溶媒和物とは、化合物（Ｉ）またはその塩と、水分子または溶媒分子とがそれぞれ一緒になって形成する固体をいい、その固体は結晶であってもよく、溶媒和物の溶媒としては、例えば、アセトン、２－ブタノン、シクロヘキサノンなどのケトン系溶媒；酢酸メチル、酢酸エチル等のエステル系溶媒；１，２－ジメトキシエタン、ｔ－ブチルメチルエーテルのようなエーテル系溶媒；メタノール、エタノール、１－プロパノール、イソプロパノール等のアルコール系溶媒、Ｎ－メチル－２－ピロリドン、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド等の極性溶媒が挙げられる。化合物（Ｉ）またはその塩に対する水分子または溶媒分子の数は特に限定されず、例えば、１分子または２分子であってもよい。
　本明細書において「結晶」とは、化合物（Ｉ）またはその塩の無水物または水和物の結晶を意味する。
　本明細書において、好ましい化合物（Ｉ）ならびに化合物（Ｉ）の塩酸塩および臭化水素酸塩の結晶としては、
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．０°、１１．１°および２３．６°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）の結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．０°、１１．１°、１４．５°、１８．１°、２０．０°、２１．９°、２３．６°、２４．４°、２４．９°および２８．５°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）の結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１１．６°、２０．８°および２５．７°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．１°、７．８°、１１．６°、１６．２°、１９．９°、２０．８°、２５．２°、２５．７°、２６．９°および２９．９°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶；
　１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）１６４．０ｐｐｍ、１２９．６ｐｐｍおよび３６．５ｐｐｍにピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶；
　ラマン分光測定において、５８７ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶；
　ラマン分光測定において、５８７ｃｍ－１、１４２８ｃｍ－１および１４９３ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶；
　ラマン分光測定において、５８７ｃｍ－１、７６３ｃｍ－１、１４２８ｃｍ－１、１４９３ｃｍ－１および１６８８ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶；
　ラマン分光測定において、４０９ｃｍ－１、５８７ｃｍ－１、７６３ｃｍ－１、９７６ｃｍ－１、１４２８ｃｍ－１、１４９３ｃｍ－１および１６８８ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶；
　ラマン分光測定において、実質的に図１９に示すスペクトルを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．７°、１０．１°および１７．９°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＢ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．３°、９．７°、１０．１°、１７．９°、１９．０°、１９．４°、２３．４°、２６．３°、２７．３°および３２．０°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＢ型結晶；
　１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）１６０．１ｐｐｍ、１３３．４ｐｐｍおよび１３０．７ｐｐｍにピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＢ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．０°、７．７°および１６．９°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＣ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．０°、７．７°、９．７°、１１．４°、１５．８°、１６．９°、１８．１°、２３．２°、２５．４°および２７．６°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＣ型結晶；
　１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおいて、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）１５９．６ｐｐｍ、１２７．６ｐｐｍおよび３８．９ｐｐｍにピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＣ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．６°、１４．６°および２６．４°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＤ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．６°、１４．６°、１６．１°、２０．５°、２１．０°、２３．０°、２４．５°、２６．４°、２８．０°および３２．５°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＤ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．４°、１１．３°および２７．３°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＥ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．４°、１１．３°、１５．７°、１８．０°、１９．２°、２２，８°、２４．６°、２５．４°、２６．０°および２７．３°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＥ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）７．３°、９．３°および１０．７°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＦ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）５．９°、７．３°、９．３°、１０．７°、１３．８°、１５．６°、１６．４°、１８．７°、２５．１°および２６．８°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＦ型結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）７．８°、２４．５°および２５．２°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一臭化水素酸塩の結晶；
　粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．０°、７．８°、１０．０°、１１．７°、１７．８°、２０．８°、２３．５°、２４．５°、２５．２°および２７．３°に回折ピークを有する、化合物（Ｉ）一臭化水素酸塩の結晶などを挙げることができる。
　上記記載の粉末Ｘ線回折における回折ピーク、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトおよびラマン分光測定におけるラマンシフトピークは、化合物（Ｉ）の結晶、化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ～Ｆ型結晶および化合物（Ｉ）一臭化水素酸塩の結晶にそれぞれ特有なものであり、当該結晶に特徴的なピークである。
　一般に、粉末Ｘ線回折における回折角度（２θ）は±０．２°の範囲内で誤差が生じ得るため、上記の回折角度の値は±０．２°程度の範囲内の数値も含むものとして理解される必要がある。したがって、特定の化合物またはその塩において、粉末Ｘ線回折におけるピークの回折角度が完全に一致する結晶だけでなく、ピークの回折角度が±０．２°程度の誤差で一致する結晶も同一であり、本発明に含まれる。
　本明細書において、例えば、「回折角度（２θ±０．２°）９．０°に回折ピークを有する」とは、「回折角度（２θ）８．８°～９．２°に回折ピークを有する」ということを意味し、その他の回折角度の場合も同様である。
　また、一般に、粉末Ｘ線回折における回折角度（２θ）のピーク強度または半値幅は、結晶形が同一であっても、測定条件の違いや測定試料として用いる粉末結晶の各粒子の大きさや形状のばらつきにより、測定ごとに異なり、必ずしも一定のピーク強度または半値幅が常に示されるとは限らない。そのため、粉末Ｘ線回折パターンの比較において、同じ回折角度（２θ）で、そのピーク強度または半値幅に違いがあっても、その違いは、異なる結晶形に由来することを意味するものではない。したがって、本発明の特定の結晶に特徴的な回折ピークに対して、そのような違いを有する粉末Ｘ線回折パターンの当該結晶は、本発明の結晶と同一の結晶形であることを意味する。また、本明細書において「図１の粉末Ｘ線回折パターンを有する」とは、特徴的な回折ピークを有する粉末Ｘ線回折パターンが、図１で表される粉末Ｘ線回折パターンに±０．２°の誤差範囲内で一致する場合だけでなく、特徴的な回折角度が±０．２°の誤差範囲内で一致するもののピーク強度または半値幅が異なる粉末Ｘ線回折パターンの場合であっても、図１で表される粉末Ｘ線回折パターンを示す結晶はすべて、本発明の結晶と同一の結晶であることを意味する。
　本明細書において、「化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）１６４．０ｐｐｍ、１２９．６ｐｐｍおよび３６．５ｐｐｍ」とは、「通常の測定条件または本明細書と実質的に同一の条件にて１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトル測定を行い、それぞれ、化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）１６４．０ｐｐｍ、１２９．６ｐｐｍおよび３６．５ｐｐｍと実質的に同等なピークを有すること」を意味する。
　「実質的に同等なピークを有する」か否かの判断に際して、一般に、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトδは、±０．５ｐｐｍの範囲内で誤差が生じ得るため、上記の化学シフトの値は、±０．５ｐｐｍ程度の範囲内の数値も含むものとして理解される必要がある。したがって、１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトが完全に一致する結晶だけでなく、化学シフトが±０．５ｐｐｍ程度の誤差で一致する結晶も本発明に含まれる。それ故に、本明細書において、例えば「化学シフト（δ±０．５ｐｐｍ）１６４．０ｐｐｍにピークを有する」とは、化学シフト（δ）１６３．５ｐｐｍ～１６４．５ｐｐｍの範囲にピークを有することを意味し、その他の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルにおける化学シフトの場合も同様である。
　一般に、ラマン分光測定におけるラマンシフトピーク（ｃｍ－１）は±２ｃｍ－１の範囲内で誤差が生じ得るため、上記のピークの値は±２ｃｍ－１程度の範囲内の数値も含むものとして理解される必要がある。したがって、特定の化合物またはその塩において、ラマン分光測定におけるラマンシフトピークが完全に一致する結晶だけでなく、ラマンシフトピークが±２ｃｍ－１程度の誤差で一致する結晶も同一であり、本発明に含まれる。
　本明細書において、例えば、「ラマン分光測定において、５８７ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する」とは、「ラマン分光測定において、５８５ｃｍ－１～５８９ｃｍ－１にラマンシフトピークを有する」ということを意味し、その他のラマンシフトの場合も同様である。
　また、一般に、ラマン分光測定におけるラマンシフトのピーク強度または半値幅は、結晶形が同一であっても、測定条件の違いや測定試料として用いる粉末結晶の各粒子の大きさや形状のばらつきにより、測定ごとに異なり、必ずしも一定のピーク強度または半値幅が常に示されるとは限らない。そのため、ラマン分光測定の比較において、同じラマンシフトピーク（ｃｍ－１）で、そのピーク強度または半値幅に違いがあっても、その違いは、異なる結晶形に由来することを意味するものではない。したがって、本発明の特定の結晶に特徴的なラマンシフトピークに対して、そのような違いを有するラマンスペクトルの当該結晶は、本発明の結晶と同一の結晶形であることを意味する。また、本明細書において「ラマン分光測定において、図１９のスペクトルを有する」とは、特徴的なラマンシフトピーク（ｃｍ－１）を有するラマンスペクトルが、図１９で表されるラマンスペクトルに±２ｃｍ－１の誤差範囲内で一致する場合だけでなく、特徴的なラマンシフトピークが±２ｃｍ－１の誤差範囲内で一致するもののピーク強度または半値幅が異なるラマンスペクトルの場合であっても、図１９で表されるラマンスペクトルを示す結晶はすべて、本発明の結晶と同一の結晶であることを意味する。
　以下に、本発明の一実施形態である化合物（Ｉ）の塩、結晶等の製造方法について説明する。
化合物（Ｉ）の製造方法
　化合物（Ｉ）は、当業者に周知な方法により製造されたものであってもよい。例えば、化合物（Ｉ）は、後述する参考例に記載の方法で合成することができる。
化合物（Ｉ）の塩の製造方法
　本発明に係る化合物（Ｉ）の塩は、通常の塩を製造する方法により得ることができる。具体的には、例えば、化合物（Ｉ）を溶媒に、必要に応じて加温して、懸濁または溶解させ、次いで、得られる懸濁液または溶液に、酸を加え、室温下あるいは冷却しながら数分から数日間、撹拌または放置することにより、製造することができる。これらの製造方法により、化合物（Ｉ）の塩を、結晶または非晶質として得ることができる。また、非晶質は、これらの製造方法に、必要に応じて、さらに凍結乾燥等の操作を行うことにより得ることもできる。ここで使用する溶媒としては、例えばエタノール、１－プロパノール、イソプロパノール等のアルコール系溶媒；アセトニトリル；アセトン、２－ブタノン等のケトン系溶媒；酢酸エチル等のエステル系溶媒；ヘキサン、ヘプタン等の飽和炭化水素系溶媒；ｔ－ブチルメチルエーテル等のエーテル系溶媒または水を挙げることができる。これらの溶媒は単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。
化合物（Ｉ）またはその塩の結晶の製造方法
　化合物（Ｉ）またはその塩の結晶は、上述の化合物（Ｉ）の製造方法、またはその塩の製造方法により製造することができ、または、化合物（Ｉ）またはその塩を、溶媒中で加熱溶解し、攪拌下冷却して晶析することにより、製造することもできる。
　晶析に使用する化合物（Ｉ）またはその塩は、どのような形態であってもよく、溶媒和物もしくは水和物または無水物でもよく、非晶質でも結晶質（複数の結晶多形からなるものを含む）でもよく、これらの混合物でもよい。
　晶析に使用する溶媒は、例えば、メタノール、エタノール、イソプロパノール、１－プロパノール等のアルコール系溶媒；アセトニトリル；Ｎ,Ｎ－ジメチルホルムアミド等のアミド系溶媒；酢酸エチル等のエステル系溶媒；ヘキサン、ヘプタン等の飽和炭化水素系溶媒；アセトン、２－ブタノン等のケトン系溶媒；ｔ－ブチルメチルエーテル等のエーテル系溶媒または水を挙げることができる。また、これらの溶媒は単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。
　溶媒の使用量は、化合物（Ｉ）またはその塩が加熱により溶解する量または懸濁液が撹拌可能となる量を下限とし、結晶の収量が著しく低下しない量を上限として適宜選択することができる。
　晶析において、種結晶（所望の化合物（Ｉ）またはその塩の結晶など）を加えても、加えなくてもよい。種結晶を加える温度は、特に限定されないが、好ましくは０～８０℃である。
　化合物（Ｉ）またはその塩を加熱して溶解する場合の温度は、溶媒に応じて化合物（Ｉ）またはその塩が溶解する温度を適宜選択すればよいが、好ましくは５０℃から再結晶溶媒が還流を開始する温度の範囲であり、より好ましくは５５～８０℃である。
　晶析時の冷却は、急冷すると態様の異なる結晶（多形）を含むものを与えうるので、結晶の品質や粒度等への影響を考慮して適宜冷却速度を調整して実施することが望ましく、好ましくは、例えば５～４０℃／時間の速度での冷却である。より好ましくは、例えば５～２５℃／時間の速度での冷却である。
　また、最終的な晶析温度は、結晶の収量と品質等から適宜選択することができるが、好ましくは－２５～３０℃である。
　晶析した結晶を通常の濾過操作で分離し、必要に応じてろ別した結晶を溶媒で洗浄し、さらにこれを乾燥して、目的の結晶を得ることができる。結晶の洗浄に使用する溶媒には、晶析溶媒と同様のものを使用できる。好ましくは、例えば、エタノール、アセトン、２－ブタノン、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ｔ－ブチルメチルエーテル、ヘキサン等を挙げることができる。また、これらの溶媒は単独で使用してもよく、２種以上を混合して使用してもよい。
　濾過操作で分離した結晶は、適宜、大気下または窒素気流下に放置することにより、または加熱によって乾燥することができる。
　乾燥時間は、残留溶媒が所定の量を下回るまでの時間を製造量、乾燥装置、乾燥温度等に応じて適宜選択すればよい。また、乾燥は通風下でも減圧下でも行うことができる。減圧度は、製造量、乾燥装置、乾燥温度等に応じて適宜選択すればよい。得られた結晶は、乾燥後、必要に応じて大気中に放置することもできる。
　以上に説明した製造方法によって得られる化合物（Ｉ）および化合物（Ｉ）の塩の結晶は、後述の薬理試験例における活性データに示されているように、コリン作動性神経細胞賦活作用および／または神経保護作用を有し、コリン作動性神経細胞の機能低下によって起こる認知機能低下の改善剤としての利用可能性を有している。
［医薬組成物］
　本発明の他の実施形態は、化合物（Ｉ）の結晶および薬剤学的に許容される添加物を含有する医薬組成物である。医薬組成物は、薬剤学的に許容される添加物を化合物（Ｉ）の結晶と混和することにより製造することができる。本発明に係る医薬組成物は例えば第十七改正日本薬局方の製剤総則に記載の方法など既知の方法に従って製造することができる。
　本実施形態に係る医薬組成物は、その剤形に応じて適切に患者に投与することができる。
　本発明に係る化合物（Ｉ）の投与量は、症状の程度、年齢、性別、体重、投与形態・塩の種類、疾患の具体的な種類等に応じて異なるが、通常、成人の場合は１日あたり経口投与で約３０μｇ～１０ｇ、好ましくは１００μｇ～５ｇ、さらに好ましくは１００μｇ～１ｇを、注射投与で約３０μｇ～１ｇ、好ましくは１００μｇ～５００ｍｇ、さらに好ましくは１００μｇ～３００ｍｇをそれぞれ１回または数回に分けて投与する。
　本発明の化合物（Ｉ）の結晶は、例えば、以下の実施例に記載した方法により製造することができ、また、当該化合物が奏する効果は、以下の試験例に記載した方法により確認することができる。ただし、これらは例示的なものであって、本発明は、如何なる場合も以下の具体例に制限されるものではなく、また本発明の範囲を逸脱しない範囲で変化させてもよい。
　以下の実施例において製造された結晶の粉末Ｘ線結晶回折は、得られた結晶を、粉末Ｘ線回折装置の試料台に載せ、下記のいずれかの条件で測定した。
（透過法条件）
Ｘ線源：ＣｕＫα
電圧：４５ｋＶ
電流：４０ｍＡ
光学系：集束ミラー
ソーラースリット：０．０２°
検出器：Ｘ’Ｃｅｌｅｒａｔｏｒ（半導体検出器）
スキャン範囲：５°～３５°
ステップサイズ：０．０１７°
スキャンステップ時間：６００ｓｅｃ
サンプルホルダー：カプトン膜
（反射法条件）
Ｘ線源：ＣｕＫα
電圧：５０ｋＶ
電流：３００ｍＡ
スリット：発散スリット０．５ｍｍ、散乱スリット開放、受光スリット開放
検出器：シンチレーションカウンター
スキャン速度：５°／ｍｉｎ
サンプリング間隔：０．０２°
スキャン範囲：５°～３５°
サンプルホルダー：アルミニウム製ホルダー
熱分析は試料をアルミニウム製試料パンに精密に秤取し、以下の条件で測定した。
（測定条件）
雰囲気：１００ｍＬ／ｍｉｎ窒素ガス気流下
対照：空のアルミニウム製試料パン
昇温速度：１０℃／ｍｉｎ
サンプリング間隔：１ｓｅｃ
測定温度範囲：室温～３２０℃
　結晶の１３Ｃ固体ＮＭＲスペクトルは試料管に固体試料を約３００ｍｇ内封し、以下の条件で測定した。
（測定条件）
　使用装置：Ａｖａｎｃｅ４００ＭＨｚ（ＢＲＵＫＥＲ社製）７ｍｍ－ＣＰＭＡＳプローブ（ＢＲＵＫＥＲ社製）
測定核：１３Ｃ（共鳴周波数 １００．６２４８４２５ＭＨｚ）
測定温度：室温
パルスモード：ＣＰＴＯＳＳ測定
回転数：５０００Ｈｚ
パルス繰り返し時間：３ｓｅｃ
コンタクトタイム：１ｍｓｅｃ
積算回数：５１２０回
基準物質：グリシン（外部基準：１７６．０３ｐｐｍ）
　結晶のラマンスペクトルは試料を顕微ラマン分光装置の試料台に置き、以下の測定条件で測定した。
（測定条件）
使用装置：ＲＥＮＩＳＨＡＷラマンマイクロスコープｉｎＶｉａ　Ｒｅｆｌｅｘ
レーザー波長：７８５ｎｍ
回折格子：１２００ｌｉｎｅｓ／ｍｍ
対物レンズ：５０倍
走査様式：連続
露光時間：５秒
積算回数：５回
測定範囲：４００～１８００ｃｍ－１（ラマンシフト）
誤差：±２ｃｍ－１
　文献名等が記載されている化合物は、その文献等に従って製造したことを示す。
　また、本明細書に使用される略号は当業者に周知の慣用的な略号である。本明細書においては下記の略号を使用する。
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＩＰＡ：イソプロパノール
ｎ－：ノルマル
ＴＥＡ：トリエチルアミン
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
１Ｈ－ＮＭＲ：プロトン核磁気共鳴スペクトルメトリー
ＭＳ：マススペクトルメトリー
　以下の実施例および参考例中の「室温」は通常約１０℃から約３５℃を示す。％は特記しない限り重量パーセントを示す。
　プロトン核磁気共鳴スペクトルの化学シフトは、テトラメチルシランに対するδ単位（ｐｐｍ）で記録され、カップリング定数はヘルツ（Ｈｚ）で記録されている。分裂パターンの略号は以下の通りである。
ｓ：シングレット、ｄ：ダブレット、ｔ：トリプレット、ｑ：カルテット、ｍ：マルチプレット、ｂｒ．ｓ：ブロードシングレット。
　参考例においてマイクロウェーブ反応装置を用いた反応は、Ｂｉｏｔａｇｅ社製ｉｎｉｔｉａｔｏｒＴＭまたはｉｎｉｔｉａｔｏｒ＋ＴＭを用いた。
　クロマトグラフィーに関して、シリカゲルは、Ｍｅｒｃｋ社製Ｓｉｌｉｃａ　Ｇｅｌ６０（７０－２３０ｍｅｓｈ　ＡＳＴＭ）または富士シリシア化学社製ＰＳＱ６０Ｂを用いるか、プレパックカラム｛カラム：ＹＡＭＡＺＥＮ社製　Ｈｉ－ＦｌａｓｈＴＭ　Ｃｏｌｕｍｎ（Ｓｉｌｉｃａｇｅｌ）、サイズ：Ｓ（１６×６０ｍｍ）、Ｍ（２０×７５ｍｍ）、Ｌ（２６×１００ｍｍ）、２Ｌ（２６×１５０ｍｍ）、３Ｌ（４６×１３０ｍｍ）のいずれか、またはＢｉｏｔａｇｅ社製ＢｉｏｔａｇｅＴＭＳＮＡＰ　Ｕｌｔｒａ　Ｓｉｌｉｃａ　Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ、サイズ：１０ｇ、２５ｇ、５０ｇのいずれか｝を用いた。
　ＮＨシリカゲルは、富士シリシア化学（株）製ＣＨＲＯＭＡＴＯＲＥＸ　ＮＨ－ＤＭ２０３５を用いるか、プレパックカラム｛カラム：ＹＡＭＡＺＥＮ社製　Ｈｉ－ＦｌａｓｈＴＭ　Ｃｏｌｕｍｎ（Ａｍｉｎｏ）、サイズ：Ｓ（１６×６０ｍｍ）、Ｍ（２０×７５ｍｍ）、Ｌ（２６×１００ｍｍ）、２Ｌ（２６×１５０ｍｍ）、３Ｌ（４６×１３０ｍｍ）のいずれか、もしくは和光純薬工業社製　プレセップＴＭ（ルアーロック）ＮＨ２（ＨＣ）、サイズ：タイプＭ（１４ｇ／２５ｍＬ）、タイプＬ（３４ｇ／７０ｍＬ）、タイプ２Ｌ（５０ｇ／１００ｍＬ）、タイプ３Ｌ（１１０ｇ／２００ｍＬ）のいずれか｝を用いた。
　中性アルミナはＡｌｕｍｉｎｉｕｍ　ｏｘｉｄｅ　９０　ａｃｔｉｖｅ　ｎｅｕｔｒａｌ，７０－２３０ｍｅｓｈ，Ｍｅｒｃｋ，Ｅ６ＮＸＸを用いた。
　以下に示す化合物の命名は、一般的に用いられる試薬を除き、「Ｅ－ノートブック」バージョン１２（パーキンエルマー社）で表示されたものを用いた。
参考例１
５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン（以下化合物（Ｉ）という。）の合成
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000017
 （１）エチル　２－アミノ－６－メチル－４，５，６，７－テトラヒドロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－３－カルボキシレートの合成
　１－メチル－４－ピペリドン（ＣＡＳ　Ｎｏ．１４４５－７３－４）（５１．５ｍＬ，４４２ｍｍｏｌ）、エチルシアノアセテート（ＣＡＳ　Ｎｏ．１０５－５６－６）（４７．２ｍＬ，４４２ｍｍｏｌ）、硫黄（ＣＡＳ　Ｎｏ．７７０４－３４－９）（１４．２ｇ，４４２ｍｍｏｌ）およびエタノール（８００ｍＬ）の混合物に室温でＴＥＡ（６１．６ｍＬ，４４２ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を４０℃で１５時間撹拌した後、減圧下濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＮＨシリカゲル、酢酸エチル）で精製した。得られた濃縮残渣を酢酸エチルでトリチュレーションした。沈殿物をろ取し、酢酸エチルで洗浄し、そして減圧下に乾燥して、標記化合物（５８．４ｇ）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：１．３３（ｔ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ），２．４４（ｓ，３Ｈ），２．６２－２．７０（ｍ，２Ｈ），２．７９－２．８８（ｍ，２Ｈ），３．３７（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，２Ｈ），４．２６（ｑ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，２Ｈ），５．９７（ｂｒ．ｓ，２Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４１［Ｍ＋Ｈ］＋
（２）４－メチル－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－チエノ［２，３－ｅ］［１，４］ジアゼピン－２，５－ジオンの合成
　サルコシン（７９０ｍｇ，８．８７ｍｍｏｌ）の水（１２ｍＬ）溶液へ、１Ｈ，２Ｈ，４Ｈ－チエノ［２，３－ｄ］［１，３］オキサジン－２，４－ジオン（ＣＡＳ　Ｎｏ．１０３９７９－５４－０）（６００ｍｇ，３．５５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１．５時間加熱還流した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物へクロロホルムを加え、有機層を分離した。水層をクロロホルム（２回）、酢酸エチル（３回）で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下に濃縮した。得られた固体を乾燥し、標記化合物（４３０ｍｇ）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：３．２３（ｓ，３Ｈ），３．９９（ｓ，２Ｈ），６．９０（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝５．７Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｂｒ．ｓ，１Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１９７［Ｍ＋Ｈ］＋
（３）化合物（Ｉ）の合成
工程(２)で得た４－メチル－３，４－ジヒドロ－１Ｈ－チエノ［２，３－ｅ］［１，４］ジアゼピン－２，５－ジオン（１．００ｇ，５．１０ｍｍｏｌ）、工程(１)で得たエチル　２－アミノ－６－メチル－４，５，６，７－テトラヒドロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－３－カルボキシレート（１．８４ｇ，７．６４ｍｍｏｌ），および１，４－ジオキサン（３０ｍＬ）の混合物へ、オキシ塩化リン（１．４３ｍＬ，１５．３ｍｍｏｌ）を室温で加えた。反応混合物を室温で５分攪拌し、９０℃で２時間撹拌した。室温まで冷却した反応混合物に、ナトリウム　エトキシド（２０％エタノール溶液、２１．７ｍＬ，５６．１ｍｍｏｌ）を５分かけて加えた。反応混合物を室温で１．５時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチル、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、そして水を順次加え、有機層を分離した。水層を酢酸エチルで抽出した。合せた有機層を無水硫酸マグネシウム上で乾燥し、ろ過し、ろ液を減圧下に濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、２０％－５０％メタノール／酢酸エチル）で精製した。得られた固体をエタノールでトリチュレーションし、沈殿物をろ取した。得られた固体をエタノールで洗浄し、減圧下に乾燥して標記化合物（７１２ｍｇ）を得た。
１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）δ（ｐｐｍ）：２．５２（ｓ，３Ｈ），２．７１－２．８７（ｍ，２Ｈ），３．０５－３．３０（ｍ，５Ｈ），３．５９－３．７５（ｍ，２Ｈ），４．２３（ｄ，Ｊ＝１４．８Ｈｚ，１Ｈ），４．５７（ｄ，Ｊ＝１４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，１Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７３［Ｍ＋Ｈ］＋
実施例１
化合物（Ｉ）の結晶の調製
　０．３Ｍ塩酸１．５Ｌに化合物（Ｉ）１５２．０８ｇを加え、この溶液に酢酸エチル４５０ｍｌを加えて５分間攪拌した。水層を分離し、酢酸エチル４５０ｍｌで洗い、不溶物をろ去した。ろ液に２０℃水浴中１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液１００ｍｌを加え１５分攪拌した。この混合物中に１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液３５０ｍｌを加え、生じた懸濁液を２時間３０分攪拌した。生じた結晶をろ取し、水３００ｍｌ、４５０ｍｌ、３００ｍｌ、エタノール３００ｍｌ、３５０ｍｌおよび３００ｍｌで順次洗浄し、減圧下乾燥して標記結晶１４１．７ｇを得た。
粉末Ｘ線回折ピーク（反射法、２θ±０．２°）：９．０°、１１．１°、１４．５°、１８．１°、２０．０°、２１．９°、２３．６°、２４．４°、２４．９°、２８．５°
上記方法により得られた化合物（Ｉ）結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図１に示す。
実施例２
化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶の調製
　化合物（Ｉ）　１０１ｍｇをねじ口試験管に添加した。１．５Ｍ　塩酸０．２ｍＬを加え溶解した。ＩＰＡ　１．８ｍＬを添加し、超音波照射後、スターラーを用いて４０℃で一日攪拌した。室温にてさらに１時間攪拌後、フィルター（０．２μｍ）を用いて試料をろ取し、０．５ ｍＬのＩＰＡ/水（９／１，ｖ／ｖ）でリンスし、窒素気流下で通風乾燥した。７０℃で約１時間乾燥させ、標記結晶を得た（１０３ｍｇ）。
粉末Ｘ線回折ピーク（透過法、２θ±０．２°）：６．１°、７．８°、１１．６°、１６．２°、１９．９°、２０．８°、２５．２°、２５．７°、２６．９°、２９．９°
１３Ｃ－ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ｓｏｌｉｄ　ｓｔａｔｅ）δ（ｐｐｍ）：１６４．０，１６２．５，１６０．５，１５３．９，１５１．６，１５０．７，１３３．６，１３１．１，１２９．６，１２８．４、１２６．９，１２５．２，１２３．７，１２１．３，１２０．３、１１９．５，５３．７，５２．０，５０．９，４４．７，３６．５，２２．６
ラマンシフトピーク（ｃｍ－１）：４０９、５８７、７６３、９７６、１４２８、１４９３、１６８８
上記方法により得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＡ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図２に、１３Ｃ－固体ＮＭＲスペクトルを図９に、熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートを図１２に、ラマンスペクトルを図１９に、それぞれ示す。
実施例３
化合物（Ｉ）一塩酸塩のＣ型結晶の調製
　化合物（Ｉ）　１０２０ｍｇをねじ口試験管に添加した。１．５当量の塩酸（３５３μＬ）を２０ｍＬのメタノールに溶解し、これを試料に加えた。スターラーを用いて室温にて２日間攪拌した。フィルター（０．２μｍ）を用いて試料をろ取した。得られた固体を約２時間減圧乾燥後、７０℃で１時間乾燥させ、標記結晶を得た（１０４８ｍｇ）。
粉末Ｘ線回折ピーク（透過法、２θ±０．２°）：６．０°、７．７°、９．７°、１１．４°、１５．８°、１６．９°、１８．１°、２３．２°、２５．４°、２７．６°
１３Ｃ－ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ｓｏｌｉｄ　ｓｔａｔｅ）δ（ｐｐｍ）：１６２．５，１６０．５，１５９．６，１５３．８，１５１．１，１３４．１，１３１．６，１２８．４，１２７．６，１２５．６，１２０．０，５４．０，５２．６，５０．９，４４．３，４３．５，３８．９，３２．３，２２．４
上記方法により得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＣ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図４に、１３Ｃ－固体ＮＭＲスペクトルを図１１に、熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートを図１４に示す。
実施例４
化合物（Ｉ）一塩酸塩のＢ型結晶の調製
　実施例３で得られる塩酸塩結晶　３０３ｍｇを白金製るつぼに加え、１６０℃で１５分加熱し、標記結晶を得た（２９３ｍｇ）。
粉末Ｘ線回折ピーク（透過法、２θ±０．２°）：６．３°、９．７°、１０．１°、１７．９°、１９．０°、１９．４°、２３．４°、２６．３°、２７．３°、３２．０°
１３Ｃ－ＮＭＲ（１００ＭＨｚ、ｓｏｌｉｄ　ｓｔａｔｅ）δ（ｐｐｍ）：１６２．０，１６０．１，１５３．８，１５１．１，１３３．４，１３０．７，１２８．３，１２６．９，１２５．６，１２０．３，５１．２，４３．６，３２．３，２２．３
上記方法により得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＢ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図３に、１３Ｃ－固体ＮＭＲスペクトルを図１０に、熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートを図１３に示す。
実施例５
化合物（Ｉ）一塩酸塩のＤ型結晶の調製
　実施例２，３でそれぞれ得られる塩酸塩結晶の混合物　２２７ｍｇおよびエタノール８ｍＬをねじ口試験管に添加した。スターラーを用いて６５℃にて攪拌した。約１時間後、超音波照射し、同温度で一日攪拌した。フィルター（０．２μｍ）を用いて試料をろ取し、標記結晶を得た（２０３ｍｇ）。
粉末Ｘ線回折ピーク（透過法、２θ±０．２°）：６．６°、１４．６°、１６．１°、２０．５°、２１．０°、２３．０°、２４．５°、２６．４°、２８．０°、３２．５°
上記方法により得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＤ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図５に、熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートを図１５に示す。
実施例６
化合物（Ｉ）一塩酸塩のＥ型結晶の調製
　実施例２で得られる塩酸塩結晶１０８ｍｇおよびアセトニトリル５ｍＬをねじ口試験管に添加した。スターラーを用いて６０℃にて一日攪拌し、フィルター（０．２μｍ）を用いて試料をろ取した。得られた固体およびアセトニトリル５ｍＬを再度ねじ口試験管に添加し、スターラーを用いて６０℃にて一日攪拌した。フィルター（０．２μｍ）を用いて窒素気流下にてろ取し、標記結晶を得た（８９．７ｍｇ）。
粉末Ｘ線回折ピーク（透過法、２θ±０．２°）：６．４°、１１．３°、１５．７°、１８．０°、１９．２°、２２．８°、２４．６°、２５．４°、２６．０°、２７．３°
上記方法により得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＥ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図６に、熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートを図１６に示す。
実施例７
化合物（Ｉ）一塩酸塩のＦ型結晶の調製
　実施例２で得られる塩酸塩結晶１０１ｍｇおよびエタノール５ｍＬをねじ口試験管に添加した。スターラーを用いて６０℃にて一日攪拌した。フィルター（０．２μｍ）を用いて試料をろ取した。得られた固体およびエタノール５ｍＬを再度ねじ口試験管に添加し、スターラーを用いて６０℃にて４時間攪拌した。フィルター（０．２μｍ）を用いてろ取し、標記結晶を得た（７５．０ｍｇ）。
粉末Ｘ線回折ピーク（透過法、２θ±０．２°）：５．９°、７．３°、９．３°、１０．７°、１３．８°、１５．６°、１６．４°、１８．７°、２５．１°、２６．８°
上記方法により得られた化合物（Ｉ）一塩酸塩のＦ型結晶の粉末Ｘ線回折パターンを図７に、熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートを図１７に示す。
実施例８
化合物（Ｉ）一臭化水素酸塩の結晶の調製
　化合物（Ｉ）９３３ｍｇをねじ口試験管に添加した。２０ｍＬのメタノールに１．５当量（４３４μＬ）の臭化水素酸を溶解し、これを試料に添加した。スターラーを用いて、室温にて３日間攪拌した。フィルター（０．２μｍ）を用いて試料をろ取し、６０℃で１時間乾燥させて標記結晶を得た（１１１１ｍｇ）。
粉末Ｘ線回折ピーク（透過法、２θ±０．２°）：６．０°、７．８°、１０．０°、１１．７°、１７．８°、２０．８°、２３．５°、２４．５°、２５．２°、２７．３°
上記方法により得られた化合物（Ｉ）一臭化水素酸塩の粉末Ｘ線回折パターンを図８に、熱分析ＴＧ－ＤＴＡチャートを図１８に示す。
＜薬理試験例＞
ラット胎仔脳由来神経細胞培養系におけるＮＧＦ存在下Ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ（ＡＣｈ）放出量の測定
（１）ラット初代神経細胞培養
　胎生１８日齢のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ系（ＳＤ）ラット（日本チャールズリバー社）より中隔野を単離し培養に供した。具体的には、イソフルラン麻酔下、妊娠ラットより無菌的に胎仔を摘出した。胎仔より脳を摘出し、氷冷Ｌ－１５　ｍｅｄｉｕｍ（１１４１５－０６４、Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）に浸した。その摘出脳から、実体顕微鏡下で中隔野を採取した。採取した中隔野を、０．２５％　ｔｒｙｐｓｉｎ（１５０５０－０６５、Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）および０．０１％　ＤＮａｓｅ（Ｄ５０２５－１５０ＫＵ，Ｓｉｇｍａ）を含有した酵素溶液中、３７℃下３０分間の酵素処理することにより、細胞を分散させた。この際、酵素反応は非働化済みウマ血清（２６０５０－０８８、Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を加えることで停止させた。この酵素処理溶液を１０００ｒｐｍにて３分間遠心分離し、上清を除いた。得られた細胞塊に培地を１０ｍＬ加えた。培地にはＤｕｌｂｅｃｃｏ‘ｓ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅ’ｓ　Ｍｅｄｉｕｍ（０４４－２９７６５、ＷＡＫＯ）にＮ２サプリメント（１７５０２－０４８、Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）と１ｍＭ　Ｓｏｄｉｕｍ　ｐｙｒｕｖａｔｅ（１１３６０－０７０、Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）およびＰｅｎｉｃｉｌｉｎ　ｓｔｒｅｐｔｍｙｃｉｎ（１５１４０－１２２１、Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を用いた。培地が加えられた細胞塊を、緩やかなピペッティング操作により細胞を再分散後、再度１０００ｒｐｍにて３分間遠心分離し、上清を除いた。得られた細胞塊に培地を１０ｍＬ加え、この細胞分散液を４０μｍナイロンメッシュ（Ｃｅｌｌ　Ｓｔｒａｉｎｅｒ）でろ過し、細胞塊を除くことにより神経細胞懸濁液を得た。この神経細胞懸濁液を培地にて希釈し、１０％非働化済みウシ血清（２６１４０－０７９、Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）と１０％非働化済みウマ血清を加えた。その後、予めｐｏｌｙ－Ｄ－ｌｙｓｉｎｅにてコーティングされた９６ｗｅｌｌ培養器（３５４４６１、ＣＯＲＮＩＮＧ）に初期培養密度が１．４×１０５ｃｅｌｌｓ／ｃｍ２になるように１００μＬ／ｗｅｌｌにて播種した。播種した細胞は５％ＣＯ２－９５％ａｉｒ下、３７℃インキュベータ中にて二日培養した後、培地全量を新鮮な培地１２０μＬと交換し、引き続き５日間培養した。
（２）化合物添加
　培養７日目に薬物添加を以下の通りに行った。試験化合物のＤＭＳＯ溶液を培地にて最終濃度の１０倍になるように希釈した。ＮＧＦ（４５０－０１、ＰＥＰＲＯ　ＴＥＣＨ，ＩＮＣ．）を０．３ｎｇ／ｍＬに調製した。これらの２つの溶液をそれぞれ１５μＬ／ｗｅｌｌ添加し、よく混和した。最終ＤＭＳＯ濃度は０．１％以下とした。また、対照群にはＤＭＳＯおよびＮＧＦのみを添加した。
（３）ＡＣｈ放出量測定
　薬物添加１日後に、以下の方法でＨＰＬＣにてＡＣｈ放出量を測定した。培地回収後のｗｅｌｌに温めたバッファーを１００μＬ／ｗｅｌｌ加え、直ぐにバッファーを除いた。その後、１０μＭ　ｃｈｏｌｉｎｅ、１０μＭ　ｐｈｙｓｏｓｔｉｇｍｉｎｅと６ｍＭ　ＫＣｌを加えたバッファーを１２０μＬ／ｗｅｌｌ加えた。バッファーは、１２５ｍＭ　ＮａＣｌ、２５ｍＭ　４－（２－ｈｙｄｒｏｘｙｅｔｈｙｌ）－１－ｐｉｐｅｒａｚｉｎｅｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ　ａｃｉｄ、１．２ｍＭ　ＫＨ２ＰＯ４、１．２ｍＭ　ＭｇＳＯ４、２．２ｍＭ　ＣａＣｌ２（２Ｈ２Ｏ）、１０ｍＭ　Ｇｌｕｃｏｓｅに滅菌水にて調製し、溶液の最終ｐＨを７．４にした。バッファーを加えた９６ｗｅｌｌ培養器を５％ＣＯ２－９５％ａｉｒ下、３７℃インキュベータ中にて４０分間インキュベートした後、８０μＬを回収した。回収したバッファーに内部標準液ＩＰＨＣ（５×１０－７Ｍ）を６μＬ加え、ＨＰＬＣ測定用チューブにバッファーを移し、ＨＰＬＣ測定に供した。結果は、対照群のバッファー中ＡＣｈ濃度に対する百分率（％　ｏｆ　ｃｏｎｔｒｏｌ）にて化合物の作用を示し、対照群のバッファー中ＡＣｈ濃度に対して２０％の上昇を示した参考例１の化合物濃度は０．１μＭであった。
ラット中隔野におけるｃｈｏｌｉｎｅ　ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＣｈＡＴ）ｍＲＮＡ発現量の測定
（１）化合物投与
　本試験では体重約２５０－３５０ｇのＳＤ雄性ラット（日本チャールズリバー社）を使用した。試験化合物は０．０１Ｎ塩酸に溶解し、経口投与した。
（２）サンプリング
　試験化合物投与２４時間目に、ペントバルビタール麻酔下で脳組織を摘出した。氷冷下で中隔野を分画し、液体窒素で凍結後－８０℃にて保管した。
（３）ＣｈＡＴ　ｍＲＮＡ発現量の測定
　ＲＮＡ精製にはＲＮｅａｓｙ（登録商標）　Ｐｌｕｓ　Ｍｉｎｉ　Ｋｉｔ（＃７４１３６：ＱＩＡＧＥＮ社）を使用した。ＲＮＡ精製はキットの添付文書に記載の方法にて実施した。ＲＮＡ精製後、ｔｏｔａｌ　ＲＮＡ濃度はＱＩＡｘｐｅｒｔ　Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ（ＱＩＡＧＥＮ社）で測定した。ｃＤＮＡはＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ（登録商標）　ＶＩＬＯＴＭ　ｃＤＮＡ　Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ　Ｋｉｔ（＃１１７５４：Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して調製した。ｃＤＮＡの調製はキットの添付文書に記載の方法で実施した。調製したｃＤＮＡをＲＮａｓｅ　ｆｒｅｅ　ｗａｔｅｒで４倍希釈し、希釈したｃＤＮＡ溶液をサンプルとした。Ｔａｑｍａｎ（登録商標）　Ｕｎｉｖｅｒｓａｌ　ＰＣＲ　Ｍａｓｔｅｒ　Ｍｉｘ（＃４３０４４３７：Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、Ｔａｑｍａｎ（登録商標）　Ｇｅｎｅ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　Ａｓｓａｙｓ，ＩＮＶＥＮＴＯＲＩＥＤ（＃４３３１１８２：Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）、ＲＮａｓｅ　ｆｒｅｅ　ｗａｔｅｒおよびｃＤＮＡ溶液をそれぞれ１０μＬ、１μＬ、４μＬおよび５μｌずつ混和し、測定サンプル溶液とした。Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ　ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ（ｑＰＣＲ）はＡＢＩ　ＰＲＩＳＭ（登録商標）　７９００ＨＴ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用し、蛍光プローブ法で実施した。解析はＳＤＳ２．４（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で実施した。結果は媒体投与群のＣｈＡＴ　ｍＲＮＡ発現量に対しての参考例１の化合物投与群のＣｈＡＴ　ｍＲＮＡ発現量の増加量を百分率で算出すると１０ｍｇ／ｋｇで５６．４％であった。
ラットＣｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ　ｆｌｕｉｄ（ＣＳＦ）におけるＡｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ（ＡＣｈ）量の測定
（１）背景
　脳内とＣｅｒｅｂｒｏｓｐｉｎａｌ　ｆｌｕｉｄ（ＣＳＦ）中の神経伝達物質の増減は相関することが齧歯類の研究から明らかとなり、その相関はヒトにおいても同様に捉えられることが明らかとなっている（Ｌｏｗｅ　Ｓ　ｅｔ　ａｌ．　Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ　２１９　（２０１２）　９５９－７０．）。そこで、試験化合物による脳内のアセチルコリン量変化を検出するために、ＣＳＦ中アセチルコリン量変化を評価した。
（２）化合物投与
　本試験では体重約１５０－２５０ｇのＦｉｓｃｈｅｒ３４４系雄性ラット（日本チャールズリバー社）を使用した。試験化合物は１日１回、３日間、１０ｍｇ／ｋｇ経口投与した。媒体は０．０１Ｎ塩酸を使用した。
（３）サンプリング
　媒体および試験化合物の最終投与２４時間後に、ペントバルビタール麻酔下で大槽からＡＣｈＥ阻害剤入りのチューブにＣＳＦを採取した。採取したＣＳＦを３５００ｘｇ、４℃で１０分間遠心し、上清を回収した。回収した上清を液体窒素で凍結後、－８０℃にて保管した。
（４）ＬＣＭＳを用いたＡＣｈ測定
　内標準物質としてＣＳＦ　１０μＬに最終濃度０．３４ｎｍｏｌ／Ｌ　ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ－ｄ９　ｃｈｌｏｒｉｄｅ（ＡＣｈ－ｄ９）を５０μＬ加えた。ピペッティングにて混和後、１２００ｘｇ、４℃で１０分間遠心した。上清を回収し，ＬＣ／ＭＳ法（ＮｅｘｅｒａＸ２（ＭＳ）、ＴＳＱ　Ａｌｔｉｓ（ＨＰＬＣ））により、ＡＣｈはｐｒｅｃｕｒｓｏｒ　ｉｏｎ　ｍ／ｚ　１４６．０５０、ｐｒｏｄｕｃｔ　ｉｏｎ　ｍ／ｚ　８７．０７１を（内標のＡＣｈ－ｄ９はｐｒｅｃｕｒｓｏｒ　ｉｏｎ　ｍ／ｚ　１５５．０８８、ｐｒｏｄｕｃｔ　ｉｏｎ　ｍ／ｚ　８７．０００）を検出した。結果は、媒体投与群のＣＳＦ中ＡＣｈ濃度に対しての参考例１の化合物投与群のＣＳＦ中ＡＣｈ濃度増加を百分率（％　ｏｆ　ｃｏｎｔｒｏｌ）で算出すると１５６．８％であった。
Ｈｕｍａｎ　ｔａｕ　Ｐ３０１Ｓトランスジェニックマウスにおける評価
（１）化合物投与
　本試験では４ヶ月齢から７ヶ月齢までの約３ヶ月間、Ｈｕｍａｎ　ｔａｕ　Ｐ３０１Ｓ　ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃマウスに１日１回，試験化合物を経口投与した。媒体は０．０１Ｎ塩酸を使用した。
（２）サンプリング
　投与開始日に投与開始時群（４ヶ月齢）、最終投与翌日に媒体投与群および試験化合物投与群にペントバルビタール（５０ｍｇ／ｋｇ，ｉｐ）で麻酔後，ＰＢＳで経心的に灌流した。灌流後，内側中隔野を含む前脳を採取し，４％パラホルムアルデヒドで固定した。
（３）脳冠状凍結切片作製
　採取した内側中隔野を含む前脳を４％パラホルムアルデヒドで一晩浸漬、振とうした後、７．５％スクロース溶液に置換した。翌日に７．５％スクロース溶液に置換し一晩浸漬、振とう後、１５％スクロース溶液に置換しさらに一晩浸漬、振とうした。浸漬液を３０％スクロース溶液に置換し一晩浸漬、振とう後、内側中隔野を含む前脳のサンプルから滑走式ミクロトーム（Ｌｅｉｃａ，ＳＭ２０００Ｒ）を用いて３０μｍの厚さの脳冠状凍結切片を作製した。
（４）Ｃｈｏｌｉｎｅ　ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＣｈＡＴ）陽性細胞数の免疫組織学的定量
　作製した脳冠状凍結切片を用いて，一次抗体としてＣｈＡＴ抗体（ＳａｎｔａＣｒｕｚ，ＳＣ－２０６７２）を使用し，ＤＡＢ染色（ＤＡＢ　ＰＥＲＯＸＩＤＡＳＥ　ＳＵＢＳＴＲＡＴＥ　ＫＩＴ（Ｖｅｃｔｏｒ，ＳＫ－４１００））を行った。オールインワン蛍光顕微鏡（キーエンス，ＢＺ－Ｘ７１０）でＴｈｅ　ｍｏｕｓｅ　Ｂｒａｉｎ　ｉｎ　ｓｔｅｒｅｏｔａｘｉｃ　ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｓ（ＣＯＭＰＡＣＴ　ＴＨＩＲＤ　ＥＤＩＴＩＯＮ，　Ｋｅｉｔｈ　Ｂ．Ｊ．　Ｆｒａｎｋｌｉｎ　＆　Ｇｅｒｏｇｅ　Ｐａｘｉｎｏｓ）に示される内側中隔野を含む切片画像を撮影し、ＢＺ解析ソフト（キーエンス）によりその内側中隔野の主軸沿いに存在するＣｈＡＴ陽性細胞数の計測を行った。結果は投与開始時群（４ヶ月齢）のＣｈＡＴ陽性細胞数を１００％としたときの媒体投与群と試験化合物投与群のＣｈＡＴ陽性細胞数を百分率で示した。結果は平均値±標準誤差で表した。投与開始時群と媒体投与群間の差（有意差あり：＊）および媒体投与群と試験化合物群の差（有意差あり：＃）はそれぞれ対応のないｔ検定で解析した。ｐ＜０．０５を統計学的有意差として判断した。統計解析はＧｒａｐｈＰａｄ　Ｐｒｉｓｍ　ｖｅｒｓｉｏｎ　７．０２を用いて行った。結果を表１に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000018
ラット海馬采脳弓切断モデルを用いたコリン作動性神経細胞に対する神経細胞保護および改善効果
（１）ラット海馬采-脳弓切断モデルの作製
　本試験では体重約２５０－３５０ｇのＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ系雄性ラット（日本チャールズリバー社）を使用した。ラットをミダゾラム２ｍｇ／ｋｇ皮下投与、塩酸メデトミジン０．１５ｍｇ／ｋｇ皮下投与、酒石酸ブトルファノール２．５ｍｇ／ｋｇ皮下投与の三種を混合して麻酔し、脳定位固定装置（株式会社ナリシゲ）に固定した。頭蓋を露出し、Ｂｒｅｇｍａより２ｍｍ後方の正中線から右側頭蓋骨を横幅５ｍｍにドリルで穴をあけた。４ｍｍ幅のカミソリをＢｒｅｇｍａより深さ５．５ｍｍに刺入し、海馬采-脳弓を切断した。止血後、頭皮を縫合し、手術後ラットをケージにもどし麻酔から回復させた。Ｂｒｅｇｍａより２ｍｍ後方の正中線から右側頭蓋骨を横幅５ｍｍにドリルで穴をあけ、カミソリを刺入しない群を偽手術群とした。
（２）化合物投与
　手術５日後から９日間（実施例１：１０mg／kg）、または７日後から１４日間（実施例３：３mg／kg）、１日１回、試験化合物を経口投与した。媒体は０．０１Ｎ塩酸を使用し、偽手術群も化合物同様に１日１回、媒体を経口投与した。
（３）サンプリング
ペントバルビタール麻酔下で氷冷ＰＢＳで経心的に灌流した。灌流後，内側中隔野を含む前脳を採取し，４％パラホルムアルデヒドに一晩浸漬、振とうした。翌日に７．５％スクロース溶液に置換し一晩浸漬、振とう後、１５％スクロース溶液に置換しさらに一晩浸漬、振とうした。浸漬液を３０％スクロース溶液に置換し一晩浸漬、振とう後、内側中隔野を含む前脳のサンプルから滑走式ミクロトーム（Ｌｅｉｃａ，ＳＭ２０００Ｒ）を用いて３０μｍの厚さの脳冠状凍結切片を作製した。
（４）Ｃｈｏｌｉｎｅ　ａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＣｈＡＴ）陽性細胞数およびｖｅｓｉｃｕｌａｒ　ａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ　ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ〈ＶＡＣｈＴ〉の免疫組織学的定量
作製した脳冠状凍結切片を用いて，一次抗体としてＣｈＡＴ抗体（ＳａｎｔａＣｒｕｚ，ＳＣ－２０６７２）またはＶＡＣｈＴ抗体（Ｍｅｒｃｋ　Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，ＡＢＮ１００）を使用し，ＤＡＢ染色（ＤＡＢ　ＰＥＲＯＸＩＤＡＳＥ　ＳＵＢＳＴＲＡＴＥ　ＫＩＴ（Ｖｅｃｔｏｒ，ＳＫ－４１００））を行った。オールインワン蛍光顕微鏡（キーエンス，ＢＺ－Ｘ７１０）でＴｈｅ　Ｒａｔ　Ｂｒａｉｎ　ｉｎ　ｓｔｅｒｅｏｔａｘｉｃ　ｃｏｏｒｄｉｎａｔｅｓ　（ＣＯＭＰＡＣＴ　ＴＨＩＲＤ　ＥＤＩＴＩＯＮ，　ＧＥＯＲＧＥ　ＰＡＸＩＮＯＳ　＆　ＣＨＡＲＬＥＳ　ＷＡＴＳＯＮ）に示される内側中隔野または海馬を含む切片画像を撮影し、ＢＺ解析ソフト（キーエンス）により内側中隔野のＣｈＡＴ陽性細胞数または海馬ＶＡＣｈＴの光学密度（Ｏｐｔｉｃａｌ　ｄｅｎｓｉｔｙ，ＯＤ）の計測を行った。結果は、偽手術群の内側中隔野ＣｈＡＴ陽性細胞数または海馬ＶＡＣｈＴのＯＤを１００％としたときの媒体投与群と試験化合物投与群のＣｈＡＴ陽性細胞数または海馬ＶＡＣｈＴのＯＤを百分率で示した。結果は平均値±標準誤差で表した。媒体投与群と試験化合物群の差（有意差あり：＃）はそれぞれ対応のないｔ検定で解析した。ｐ＜０．０５を統計学的有意差として判断した。統計解析はＧｒａｐｈＰａｄ　Ｐｒｉｓｍ　ｖｅｒｓｉｏｎ　７．０２を用いて行った。結果を表２、表３に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000019
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000020

Claims (15)

  1. 　式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩または一臭化水素酸塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
  2. 　式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンまたは式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩もしくは一臭化水素酸塩の結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
  3. 　ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．０°、１１．１°および２３．６°に回折ピークを有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
  4. 　ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）１１．６°、２０．８°および２５．７°に回折ピークを有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＡ型結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
  5. 　ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）９．７°、１０．１°および１７．９°に回折ピークを有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＢ型結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
  6. 　ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．０°、７．７°および１６．９°に回折ピークを有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＣ型結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
  7. 　ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．６°、１４．６°および２６．４°に回折ピークを有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＤ型結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000007
  8. 　ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）６．４°、１１．３°および２７．３°に回折ピークを有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＥ型結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
  9. 　ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）７．３°、９．３°および１０．７°に回折ピークを有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一塩酸塩のＦ型結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
  10. 　ＣｕＫαをＸ線源とする粉末Ｘ線回折において、回折角度（２θ±０．２°）７．８°、２４．５°および２５．２°に回折ピークを有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオン一臭化水素酸塩の結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
  11. 　ラマン分光測定において、５８７ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩のＡ型結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000011
  12. 　ラマン分光測定において、５８７ｃｍ－１、１４２８ｃｍ－１および１４９３ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩のＡ型結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000012
  13. 　ラマン分光測定において、５８７ｃｍ－１、７６３ｃｍ－１、１４２８ｃｍ－１、１４９３ｃｍ－１および１６８８ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩のＡ型結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000013
  14. 　ラマン分光測定において、４０９ｃｍ－１、５８７ｃｍ－１、７６３ｃｍ－１、９７６ｃｍ－１、１４２８ｃｍ－１、１４９３ｃｍ－１および１６８８ｃｍ－１にラマンシフトピーク（±２ｃｍ－１）を有する、式（Ｉ）で表される５，１０－ジメチル－５，６，９，１０，１１，１２－ヘキサヒドロピリド［４’’，３’’：４’，５’］チエノ［２’，３’：４，５］ピリミド［１，２－ａ］チエノ［３，２－ｆ］［１，４］ジアゼピン－４，１３－ジオンの一塩酸塩のＡ型結晶。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000014
  15. 　請求項１記載の塩または請求項２～１４のいずれか一項に記載の結晶を含有する医薬組成物。
PCT/JP2020/008889 2019-03-05 2020-03-03 五環式化合物の塩およびそれらの結晶 WO2020179781A1 (ja)

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