WO2020149373A1

WO2020149373A1 - 植物生育調節剤

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Publication number: WO2020149373A1
Application number: PCT/JP2020/001350
Authority: WO
Inventors: 栞石田; 康二稲井; 元気田中; 野本　尚
Original assignee: 出光興産株式会社; 株式会社エス・ディー・エスバイオテック
Priority date: 2019-01-16
Filing date: 2020-01-16
Publication date: 2020-07-23
Also published as: JPWO2020149373A1; EP3912470A1; US20220095617A1; CN113301803A

Abstract

本発明は、植物の環境ストレス耐性向上用、植物の生育促進用または植物の抗菌用の植物生育調節剤を提供することを課題とし、ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類を有効成分として含有する植物の環境ストレス耐性向上用、植物の生育促進用または植物の抗菌用の植物生育調節剤を提供する。

Description

植物生育調節剤

　本発明は、植物の環境ストレスに対する耐性を向上させる効果を有する植物生育調節剤に関する。本発明は、さらに、植物の生育促進用、および植物の抗菌用の植物生育調節剤に関する。

　世界人口の爆発的な増加により食糧供給量の増加が急務とされている。しかしながら、作物栽培に使用可能な農耕地は限られていることに加えて、地球温暖化や天候不順等の環境要因により作物収量が損失しているといわれている。作物が受ける環境ストレスの影響を緩和し、作物の生育維持・促進による収量増加および品質の向上をもたらす植物生育調節剤の需要が増加している。
　植物に対して環境ストレス耐性を向上させる手法として、育種やストレス耐性関連遺伝子組換え植物の作製、環境ストレスを緩和する植物生育調節剤が挙げられる。育種や組換え作物については作物種が限られる、栽培場所の制限がある、育種や組み換え作物の作製に時間・コストがかかるという欠点がある。
　これらの点から多種多様な植物に対して施用が可能であり、どのような場所でも使用可能な植物生育調節剤の研究が広く行われており、植物ホルモン（非特許文献１、２）や化学農薬の有効成分といった各分野で研究が進められている。

　しかしながら、従来技術による植物生育調節剤は保存安定性や安全性が低く、特にストレスに対する耐性を向上させる効果が不十分であるという問題点が存在する。例えば、サンギナリンまたはその塩の少なくとも１種を含有する植物由来物を植物に処理することで植物の環境ストレス耐性を向上させる方法(特許文献４)が報告されているが、植物の環境ストレスに対する耐性を安定的に向上させるには、数ｐｐｍ～数十ｐｐｍという処理量が必要であり、またその成分を植物から抽出するためには、溶媒抽出処理、亜臨界水抽出処理および熱抽出処理が必要となるため、工業的な大量生産は容易ではない。また、保全安定性が低いため安定的な効果を発揮するためには複数回の処理が必要となる。

　一方、例えば、フラボノイド類であるゲニステイン、ダイゼイン、ヘスペレチンとナリンゲニンは植物に対して葉面散布することで地上部重量の増加や収穫物量の増加等の生育促進効果をもたらすことが示されているが（特許文献１）、環境ストレスに対する耐性を向上させる効果についての示唆はない。また、乾燥ストレス条件下に置かれた場合に植物がストレス応答として体内にフラボノイド類を蓄積することは知られているが、葉面散布等の外生施用による効果については示されていない（非特許文献３）。

　また、ヘスペリジンは、抗酸化作用、抗アレルギー作用、抗炎症作用等が知られている（特許文献２、非特許文献４）が、これら作用については基本的には動物・人間に対する作用である。また、ヘスペリジンは抗菌作用を示すことが知られており、かんきつ類の病害やイネいもち病、キュウリ炭疽病に対して防除効果を示すことが知られている（特許文献３）。また、特許文献１において、ヘスペリジンは植物に対して葉面散布することで地上部重量の増加や収穫物量の増加等の生育促進効果をもたらすことが示唆されているものの、実際に使用されたデータはなく、環境ストレスに対する耐性を向上させる効果についてのデータも示されていない。

国際公開第２０１４／１６０８２６号特開平４－２９５４２８号公報特公昭６３－１９４８４号公報特許第５５４４４５０号公報

Brian, P. W. "Effects of gibberellins on plant growth and development." Biological Reviews34.1 (1959): 37-77. Bottini, Ruben, Fabricio Cassan, and Patricia Piccoli. "Gibberellin production by bacteria and its involvement in plant growth promotion and yield increase." Applied microbiology and biotechnology 65.5 (2004): 497-503. Nakabayashi, Ryo, et al. "Enhancement of oxidative and drought tolerance in Arabidopsis by overaccumulation of antioxidant flavonoids." The Plant Journal 77.3 (2014): 367-379. Galati, E. M., et al. "Biological effects of hesperidin, a citrus flavonoid.(Note I): antiinflammatory and analgesic activity." Farmaco (Societa chimica italiana: 1989)40.11 (1994): 709-712.

　本発明は、環境ストレスがかかる前の植物へ予防的に処理することで植物の環境ストレスに対する耐性を向上し、環境ストレス条件下においても安定的、かつ高効率に植物を健全に生育させる植物生育調節剤およびそれを植物に施用して環境ストレスに対する耐性を高効率で向上させる方法を提供することを課題とする。また、植物の生育を促進または植物の病害を防除することで、作物の収量、または品質を向上させる、植物の生育促進用または植物の抗菌用の植物生育調節剤を提供することを課題とする。

　本発明者らは、鋭意検討を重ねた結果、ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類を植物生育調節剤、植物生育促進剤、または抗菌剤の有効成分として含有させることにより上記課題を解決可能であることを見いだし、本発明に至った。

　即ち、本発明は以下の通りである。
［１］　ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類を有効成分として含有する、植物の環境ストレス耐性向上用の植物生育調節剤。
［２］　前記環境ストレスが、高温、低温、浸透圧、乾燥、多雨、ｐＨ、紫外線および高塩からなる群から選ばれる１以上のストレスである、［１］に記載の植物生育調節剤。
［３］　前記植物が、ナス科植物、セリ科植物、アカザ科植物、キク科植物、マメ科植物、ユリ科植物、バラ科植物、ウリ科植物、ヒルガオ科植物、ツバキ科植物、ヒノキ科植物、フトモモ科植物、モクセイ科植物、ミカン科植物、ブドウ科植物、シソ科植物、イネ科植物、アブラナ科植物、バショウ科植物、ウルシ科植物およびパパイヤ科植物からなる群から選ばれる１以上の植物である、［１］または［２］に記載の植物生育調節剤。
［４］　前記ヘスペリジン誘導体が、α－モノグルコシルヘスペリジン、ヘスペリジンメチルカルコン、ネオヘスペリジン、およびネオヘスペリジンジヒドロカルコンからなる群から選ばれる１以上のヘスペリジン誘導体である、［１］～［３］のいずれかに記載の植物生育調節剤。
［５］　前記フラボノイド類が、ヘスペレチン、タンゲレチン、ノビレチンおよびフロレチンからなる群から選ばれる１以上のフラボノイド類である、［１］～［４］のいずれかに記載の植物生育調節剤。
［６］　前記フラボノイド類が、タンゲレチン、ノビレチンおよびフロレチンからなる群から選ばれる１以上のフラボノイド類である、［１］～［５］のいずれかに記載の植物生育調節剤。
［７］　ヘスペリジンを有効成分として含有する、［１］～［６］のいずれかに記載の植物生育調節剤。
［８］　ヘスペリジンおよびネオヘスペリジンを有効成分として含有する、［１］～［７］のいずれかに記載の植物生育調節剤。
［９］　［１］～［８］のいずれかに記載の植物生育調節剤を植物に施用する工程を含む、植物の環境ストレス耐性を向上させる方法。
［１０］　前記施用が土壌、培地または植物本体への施用である、［９］に記載の方法。
［１１］　前記施用が土壌混和、潅注、種子塗沫、種子浸漬および葉面散布からなる群から選ばれる１以上の施用である、［９］または［１０］に記載の方法。
［１２］　ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類を有効成分として含有する、植物の生育促進用の植物生育調節剤。
［１３］　ヘスペリジンを有効成分として含有する、［１２］に記載の植物生育調節剤。
［１４］　ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類を有効成分として含有する、植物の抗菌用の植物生育調節剤。
［１５］　ヘスペリジンを有効成分として含有する、［１４］に記載の植物生育調節剤。
［１６］　ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類の、植物の環境ストレス耐性向上剤の製造のための使用。
［１７］　ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類の、植物の環境ストレス耐性を向上させるための使用。

　本発明により、環境ストレスがかかる前の植物へ予防的に処理することで植物の環境ストレスに対する耐性を向上することができ、人体にとって安全で経済的な植物生育調節剤およびそれを植物に施用して環境ストレスに対する耐性を高効率で向上させる植物生育調節剤を提供することができる。また、植物の生育促進用または植物の抗菌用の植物生育調節剤を提供することもできる。

植物生育調節剤をベントグラスに施用した結果を示す写真である（図面代用写真）。

　本発明の植物生育調節剤は、ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類を有効成分として含有する。ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類は２種以上を使用してもよい。

　ヘスペリジン誘導体としては、ヘスペリジンの１または数個（例えば２～３個）の置換基を置換して得られる化合物が含まれ、具体的には、α-モノグルコシルヘスペリジン、ヘスペリジンメチルカルコン、ネオヘスペリジンおよびネオヘスペリジンジヒドロカルコンが例示される。

　フラボノイド類としては、フラバン骨格を有する化合物およびその前駆体が含まれ、例えば、ヘスペレチン、タンゲレチン、ノビレチンまたはフロレチンが例示される。

　この中では、ヘスペリジンを使用することがより好ましい。
　ヘスペリジンは下記の構造を持つ。ここで、Ｒ_１がＨ；Ｒ_２がルチノシル基；Ｒ_３がＨ；Ｒ_４がＯＨ；Ｒ_５がＨ；Ｒ_６がＨ；Ｒ_７がＯＨ；Ｒ_８がＯＣＨ_３；Ｒ_９がＨである。

　ヘスペリジンは、天然供給源から調製されてもよいし、化学合成によって調製されてもよい。天然供給源としては限定されないが、オレンジ、レモン、タンジリン、シトロンなど柑橘類果物が用いられる。柑橘類果物からのヘスペリジンの調製法は公知である。ヘスペリジンはヘスペリジンを含む粗精製物や濃縮液でもよいが、精製物を使用することがより好ましい。

　本発明の植物生育調節剤は、ヘスペリジンとともに、ネオヘスペリジン（上記の構造式においてＲ_１がＨ；Ｒ_２がネオヘスペリドシル基；Ｒ_３がＨ；Ｒ_４がＯＨ；Ｒ_５がＨ；Ｒ_６がＨ；Ｒ_７がＯＨ；Ｒ_８がＯＣＨ_３；Ｒ_９がＨ）を有効成分として組み合わせて使用してもよい。ヘスペリジンおよびネオヘスペリジンを含むことで、相乗効果により植物への環境ストレスに対する耐性向上の能力が増強される。

　植物生育調節剤の生育調節機能は、植物の環境ストレス耐性向上作用、植物の生育促進作用および植物の抗菌作用を含む。

　環境ストレスには、高温、低温、乾燥、浸透圧、多雨、ｐＨ、紫外線、高塩などによるストレスが含まれる。
　一般に植物の生育至適温度は１５～３０℃付近であり、至適温度は植物により異なる。例えば、レタスやキャベツ、ニンジンの至適温度は１５～２０℃、コマツナは２０～２５℃である。高温ストレスとは、夏期や熱帯・亜熱帯地域などにおいて、例えば、作物の至適温度より５℃以上高い高温状態に一時的もしくは恒常的に曝される状態をいう。低温ストレスとは、冬期や寒冷地域における例えば、至適温度より５℃以上低い低温状態に一時的もしくは恒常的に曝される状態をいう。
　乾燥ストレスとは、生育・生命活動に十分な水分量を植物体内に保持できない状態に一時的もしくは恒常的に曝される状態をいう。
　浸透圧ストレスは、高浸透圧ストレス、低浸透圧ストレスのいずれも含み、ｐＨストレスは、酸性、アルカリ性のいずれ側のｐＨストレスも含む。
　多雨ストレスは、一定期間以上、例えば、一週間以上、続く雨によるストレスが例示され、紫外線ストレスは、一定期間以上紫外線に曝されるストレスが挙げられる。
　高塩ストレスは、植物の生育が阻害または減弱するような濃度の塩に曝されるストレスが挙げられる。

　通常、上記のような環境ストレス存在下では植物が生育できない、生育が抑制される、成長しない、果実がつかない、花が咲かない、などの好ましくない状態に陥る。本発明では、植物が環境ストレスに曝される影響を以下の方法により評価することができる。生育に適した条件下で栽培する場合（通常栽培、環境ストレスなし）の植物体の発芽率、植物体新鮮重量、乾燥重量、伸長度合、着果率、着花率等の数値に対する、環境ストレス条件下で栽培する場合（ヘスペリジン等を施用しない無添加区、環境ストレスあり）の植物体の発芽率、植物体新鮮重量・乾燥重量、伸長度合等、着果率、着花率等の数値の減少率を算出し（下記式１参照）、１０％以上減少している場合に、植物体は環境ストレスによる影響を受けていると評価することができる。
（式１）
減少率（％）
＝｛（生育に適した条件下で栽培する場合の無添加区植物体の各パラメーター数値）－（環境ストレス条件下で栽培する場合の無添加区植物体の各パラメーター数値）｝／（生育に適した条件下で栽培する場合の無添加区植物体の各パラメーター数値）×１００

　また、環境ストレスに対する耐性の向上とは、通常、上記のような環境ストレス存在下では植物が生育できない、抑制される、成長しない、果実がつかない、花が咲かない、などの好ましくない状態に陥るところ、ヘスペリジン等を施用することによりそのような状態が改善されることをいう。環境ストレス存在下で植物の栽培を行い、植物体の生育状況、発芽率、植物体新鮮重量・乾燥重量、伸長度合等、着果率、着花率、外観から目視で評価される状態または障害程度平均等において、ヘスペリジン等を施用しない対照区の植物と比較して良好な状態にあることにより、環境ストレスに対する耐性の向上が確認できる。本発明では、ヘスペリジン等による植物の環境ストレスに対する耐性を向上させる効果を以下の方法により評価することができる。環境ストレス条件下で栽培する場合（ヘスペリジン等を施用しない無添加区、環境ストレスあり）の植物体の発芽率、植物体新鮮重量・乾燥重量、伸長度合等、着果率、着花率等の数値に対する、環境ストレス条件下でヘスペリジン等を施用して栽培する場合（ヘスペリジン等施用区、環境ストレスあり）の植物体の発芽率、植物体新鮮重量・乾燥重量、伸長度合等、着果率、着花率等の数値の増加率を算出し（下記式２参照）、環境ストレス条件下で栽培する場合の無添加区植物体の各パラメーター数値を１００％としたときに１０％以上向上している場合に、ヘスペリジン等は環境ストレスに対する耐性を向上させる効果があると評価することができる。なお、環境ストレス耐性向上の対象となるのは、植物体全体に限定されず、花、葉、果実、茎または根等の植物器官の少なくとも１つであってもよい。
（式２）
増加率（％）
＝（環境ストレス条件下で栽培する場合のヘスペリジン等施用区植物体の各パラメーター数値）／（環境ストレス条件下で栽培する場合の無添加区植物体の各パラメーター数値）×１００

　植物の環境ストレスに対する耐性を向上させた結果、植物の生育を調節することができる。植物の生育を調節するとは、生育の促進、維持、向上を含む。植物体全体の生育・成長に限定されず、花、葉、果実、茎または根等の植物器官の少なくとも１つの成長であってもよい。

　植物の生育促進とは、生育に適した条件下で栽培する場合（通常栽培、環境ストレスなし）の植物体の生育状況、発芽率、植物体新鮮重量・乾燥重量、伸長度合等、着果率、着花率、外観から目視で評価される状態において、ヘスペリジン等を施用しない無添加区の植物と比較して良好な状態にあることをいう。
　本発明では、ヘスペリジン等による植物の生育促進効果を以下の方法により評価することができる。植物の生育に適した条件下で、ヘスペリジン等を施用せず栽培する(ヘスペリジン等を施用しない無添加区、環境ストレスなし）場合の植物体の発芽率、植物体新鮮重量、乾燥重量、伸長度合、着果率、着花率等の数値に対する、ヘスペリジン等を施用して栽培する(ヘスペリジン等施用区、環境ストレスなし）場合の植物体の発芽率、植物体新鮮重量・乾燥重量、伸長度合等、着果率、着花率等の数値の増減率を算出し（下記式３参照）、５％以上増加している場合に、ヘスペリジン等は植物の生育促進効果があると評価することができる。なお、植物の生育促進効果の対象となるのは、植物体全体に限定されず、花、葉、果実、茎または根等の植物器官の少なくとも１つであってもよい。
（式３）
増減率（％）
＝｛（生育に適した条件下で栽培する場合のヘスペリジン等施用区植物体の各パラメーター数値））－（生育に適した条件下で栽培する場合の無添加区植物体の各パラメーター数値）｝／（生育に適した条件下で栽培する場合の無添加区植物体の各パラメーター数値）×１００

　植物生育調節剤は、植物の抗菌用として用いることができる。例えば、イネ苗立枯病、キュウリうどんこ病、トマト疫病等に対して防除効果を有する。

　本発明で保護すべき植物種としては、双子葉植物または単子葉植物のいずれでもよく、特に限定されないが、例えば、トマト、ナス、ピーマン、トウガラシ、ジャガイモなどのナス科植物、ニンジン、セロリなどのセリ科植物、ビート、ホウレンソウなどのアカザ科植物、シュンギク、レタス、ゴボウ、ガーベラなどのキク科植物、ダイズ、エンドウ、カンゾウ、アルファルファ、スイートピーなどのマメ科植物、ネギ、タマネギ、ニンニク、チューリップなどのユリ科植物、イチゴ、バラ、リンゴ、モモ、ナシなどのバラ科植物、スイカ、メロン、キュウリなどのウリ科植物、サツマイモなどのヒルガオ科植物、チャ、ツバキなどのツバキ科植物、スギ、ヒノキなどのヒノキ科植物、ユーカリなどのフトモモ科植物、オリーブなどのモクセイ科植物、ウンシュウミカン、レモンなどのミカン科植物、ブドウなどのブドウ科植物、シソ、バジル、ミント、ローズマリー、セージなどのシソ科植物、イネ、コムギ、トウモロコシ、シバ、ライグラス、ベントグラス等のイネ科植物、コマツナ、チンゲンサイ、ブロッコリー、キャベツ等のアブラナ科植物、バナナ等のバショウ科植物、マンゴー等のウルシ科植物、パパイヤ科植物、その他の熱帯性植物などが挙げられる。

　ヘスペリジン等は単独で植物に施用してもよいが、植物生育調節剤に使用可能な担体や成分と組み合わせて使用されてもよい。例えば、展着剤、界面活性剤、水溶性高分子、滑沢剤、酸化防止剤、防腐剤等を添加してもよい。市場での取引状況や保存状況や使用状況に応じて、ヘスペリジン等を単体で含有するだけでなく、ヘスペリジン等としての有効性を失わず、植物に対して悪影響を与えない範囲において、他の成分を加えるなど適宜変更を加えることができる。

　植物生育調節剤の剤型は特に限定されないが、例えば粉剤、粒剤、粉粒剤、水和剤、顆粒水和剤、乳剤、液剤、油剤、フロアブル剤、エマルション剤、ＡＬ剤、マイクロカプセル剤などの形態をとることができる。

　植物生育調節剤の剤型が液剤、粉体または粒体である場合には直接散布するか、所定濃度に水等の溶媒で希釈したのち散布、噴霧、潅注等によって施用することができる。

　植物生育調節剤の施用は、植物体の根元の土壌や培地に対して行われるか、保護すべき植物本体の器官（花、葉、果実、茎または根など）の少なくとも１つに対して行われる。時期としては植物の播種時、生育初期、生育中期、生育後期、収穫前、（収穫後）の各時期に施用ができる。具体的には、施用は土壌混和、培地練り込み、潅注、種子塗沫、種子散布、種子浸漬、葉面散布などの方法で実施される。

　植物生育調節剤中のヘスペリジン等（２種以上を用いるときはそれらの合計）の含有量は、希釈して使用される態様の場合は、通常０．１～２０重量％であり、好ましくは０．５重量％以上、より好ましくは１重量％以上、また、好ましくは１５重量％以下、より好ましくは１０重量％以下である。希釈せずに使用される様態の場合は、０．００００１～０．００２重量％であり、好ましくは０．００００５重量％以上、より好ましくは０．０００１重量％以上、また、好ましくは０．００１５重量％以下、より好ましくは０．００１重量％以下である。

　植物生育調節剤の使用時の濃度は、ヘスペリジン等の濃度（２種以上を用いるときはそれらの合計）が、例えば、０．１～１０００ｐｐｍ、好ましくは１～１００ｐｐｍ、より好ましくは１～１０ｐｐｍになるよう植物生育調節剤を適宜希釈し、例えば、土壌混和、培地練り込み、葉面散布または潅注等の方法により、施用することができる。

　各作物種に環境ストレスに対する耐性を向上させるヘスペリジン等の最適処理濃度範囲が存在し、この濃度範囲の処理濃度で処理した場合に十分な効果が得られ、薬害や生育抑制傾向などは見られない。
　施用量は環境ストレス耐性向上効果が発揮される限り特に制限されず、施用は１回でも複数回でもよい。

　なお、種子塗沫、種子散布、種子浸漬のように、植物の種子を植物生育調節剤で処理する場合、ヘスペリジン等の濃度（２種以上を用いるときはそれらの合計）が、例えば、０．１～１００００ｐｐｍ、好ましくは１～１０００ｐｐｍになるよう植物生育調節剤を必要に応じて希釈し、１または複数回、植物の種子を処理し、処理後の種子を播種して環境ストレスを含みうる環境にて植物を栽培することができる。

　散布処理時と同じく各作物種に環境ストレスに対する耐性を向上させるヘスペリジン等の最適処理濃度範囲が存在し、この濃度範囲の処理濃度で処理した場合に十分な効果が得られ、薬害や生育抑制傾向が見られない。

　保護すべき植物が環境ストレスを受ける前に植物生育調節剤を予防的に施用することにより、施用された植物は、環境ストレスを受けている間に植物体を維持し続け、または環境ストレスを受けた後に急速に回復する効果を有する。このように、植物生育調節剤を前もって植物に施用することで、環境ストレス耐性を向上させることができるため、保護すべき植物、特に農作物や園芸植物などを簡便に環境ストレスから保護することができる。また、植物生育調節剤を施用する時期は、保護すべき植物が環境ストレスを受けている間であってもよい。

　また、植物生育調節剤は、従来の植物生育調節剤、すなわち肥料、化学農薬、微生物農薬（バチルス剤等）、他のストレス耐性向上剤などを併用することができる。

　以下、本発明を実施例により詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

＜実施例１：　高温ストレスシャーレ試験（レタス）＞
・目的　　　　他天然物との効果比較
・方法
　種子を、表１に示すヘスペリジン等の終濃度が０．１ｐｐｍとなるよう調製した２％素寒天培地（溶媒は水）を角シャーレ（アズワン社製「型番：Ｄ－２１０－１６」）に充填した。高温処理前に２％の素寒天培地にレタス（グリーンウェーブ、タキイ種苗）を播種し、播種後２日目のレタス幼苗を上述のヘスペリジン等添加寒天培地上に移植した。移植時の根の先端に印をつけた。移植したシャーレを恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）内にて底面に対して４５度の角度で静置し、４２℃に１．５時間おき、高温処理を行った。高温処理後、同じく２３℃にて２日間培養し、移植時の幼苗の根の先端からの根長の伸長を評価した。各区の測定数はＮ＝１５である。結果を表１に示す。
　本試験の通常栽培時の根長は平均１７．５ｍｍ、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の根長は平均９．３ｍｍであることから、その減少率は４７％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表１から明らかなように、ヘスペリジン等を添加した区では、高温処理後に無添加区と比較して、根長の伸長抑制が著しく緩和されていた。従ってヘスペリジン等に植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる効果があることが認められた。

＜実施例２：　高温ストレスシャーレ試験（レタス）＞
・目的　　　　ネオヘスペリジン混合による相乗効果の評価
・方法
　種子を、表２に示すヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）およびネオヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）の終濃度が指定濃度となるよう調製した２％素寒天培地（溶媒は水）を角シャーレ（アズワン社製「型番：Ｄ－２１０－１６」）に充填した。高温処理前に２％の素寒天培地にレタス（グリーンウェーブ、タキイ種苗）を播種し、播種後２日目のレタス幼苗を上述のヘスペリジン等を添加寒天培地上に移植した。移植時の根の先端に印をつけた。移植したシャーレを恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）内にて底面に対して４５度の角度で静置し、４２℃に１．５時間おき、高温処理を行った。高温処理後、同じく２３℃にて２日間培養し、移植時の幼苗の根の先端からの根長の伸長を評価した。また、通常栽培時のヘスペリジンとネオヘスペリジンの混合による効果を評価するため、高温処理を行わず、同じく２３℃にて培養し、根長の伸長を評価した。ヘスペリジンとネオヘスペリジンの混合施用による相乗効果を確認するため、コルビーの式(Colby, S.R. "Calculating synergistic and antagonistic responses of herbicide combinations", Weeds, 15, pp. 20-22, 1967)を用いて、混合施用により期待される根長を決定し、実測された根長と比較した。コルビーの式は以下の通りである。
コルビーの式: E=(ｘ+ｙ)-(ｘ・ｙ)/100
Ｅ：期待される根長
ｘ：ヘスペリジン単体施用時の根長
ｙ：ネオヘスペリジン単体施用時の根長
各区の測定数はＮ＝１５である。結果を表２に示す。

　本試験の通常栽培時の根長は平均１７．１ｍｍ、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の根長は平均４．４ｍｍであることから、その減少率は７４％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表２から明らかなように、ヘスペリジンやネオヘスペリジンを添加した区では、高温処理後に無添加区と比較して、根長の伸長抑制が著しく緩和されていた。ヘスペリジン、ネオヘスペリジンを各０．１ｐｐｍ、０．０３ｐｐｍ混合添加時の期待される根長をコルビーの式より算出すると１５．３ｍｍであり、実測値は１８．１ｍｍであることから混合添加による相乗的な効果の向上が見られた。同様に、ヘスペリジン、ネオヘスペリジンを各０．１ｐｐｍ混合添加時の期待される根長を算出すると１８．６ｍｍであり、実測値は１９．９ｍｍであることから混合添加による相乗的な効果の向上が見られた。従ってヘスペリジン等に植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。また、ヘスペリジンとネオヘスペリジンを混合することにより単体添加時と比較して、植物の高温ストレスに対する耐性を向上させるより高い相乗的な効果を示すことが認められた（太字で示した添加区）。

＜実施例３：　高温ストレスシャーレ試験（レタス）＞
・目的　　　　柑橘含有天然物であるβ‐カロテン混合による相乗効果の評価
・方法
　種子を、表３に示すヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）およびネオヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）の終濃度が指定濃度となるよう調製した２％素寒天培地（溶媒は水）を角シャーレ（アズワン社製「型番：Ｄ－２１０－１６」）に充填した。高温処理前に2％の素寒天培地にレタス（グリーンウェーブ、タキイ種苗）を播種し、播種後２日目のレタス幼苗を上述のヘスペリジン等を添加寒天培地上に移植した。移植時の根の先端に印をつけた。移植したシャーレを恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）内にて底面に対して４５度の角度で静置し、４２℃に１．５時間おき、高温処理を行った。高温処理後、同じく２３℃にて２日間培養し、移植時の幼苗の根の先端からの根長の伸長を評価した。
各区の測定数はＮ＝１５である。結果を表３に示す。
　本試験の通常栽培時の根長は平均２０．８ｍｍ、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の根長は平均６．２ｍｍであることから、その減少率は７０％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表３から明らかなように、ヘスペリジンやネオヘスペリジンを添加した区では、高温処理後に無添加区と比較して根長の伸長抑制が著しく緩和されていた。従ってヘスペリジン等に植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。一方でヘスペリジンとβ‐カロテンを混合添加した場合に各単体添加時と比較して増加率の低下が見られた。ヘスペリジンと柑橘が含有し、果皮抽出物に含まれると想定されるβ‐カロテンを０．１ｐｐｍずつ混合することにより単体施用時と比較して、植物の高温ストレスに対する低下しており、濃度によって効果が拮抗することが認められた。

＜実施例４：　高温ストレスシャーレ試験（レタス）＞
・目的　　　　フラボノイド類との効果比較
・方法
　種子を、表４に示すヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）等の終濃度が０．１ｐｐｍとなるよう調製した２％素寒天培地（溶媒は水）を角シャーレ（アズワン社製「型番：Ｄ－２１０－１６」）に充填した。高温処理前に2％の素寒天培地にレタス（グリーンウェーブ、タキイ種苗）を播種し、播種後2日目のレタス幼苗を上述のヘスペリジン等を添加した寒天培地上に移植した。移植時の根の先端に印をつけた。移植したシャーレを恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）内にて底面に対して４５度の角度で静置し、４２℃に１．５時間おき、高温処理を行った。高温処理後、同じく２３℃にて２日間培養し、移植時の幼苗の根の先端からの根長の伸長を評価した。各区の測定数はＮ＝１５である。結果を表４に示す。
　本試験の通常栽培時の根長は平均２１．７ｍｍ、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の根長は平均６．７ｍｍであることから、その減少率は６９％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表４から明らかなように、ヘスペリジンを添加した区では、高温処理後に無添加区と比較して根長の伸長抑制が著しく緩和されていた。従ってヘスペリジン等に植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例５：　高温ストレスシャーレ試験（イネ）＞
・目的　　　　イネ種子に対する高温ストレス耐性向上効果の評価
・方法
　イネ（コシヒカリ）の種子を６５℃の熱水に１０分間浸漬し、高温処理を行った。高温処理後、種子を水道水で冷却、風乾後、ヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）終濃度が１～１００ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（溶媒は水）に室温（２０～２５℃）にて１時間浸漬した。また、同じく蒸留水に浸漬した区を無添加区とした。浸漬処理後、風乾させた種子を、定性濾紙を敷いた浅型シャーレに２０粒ずつ播種し、蒸留水をシャーレあたり５ｍLずつ濾紙に均一に滴下した。播種したシャーレは恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）で２８℃にて５日間培養し、発芽率を評価した。各区の測定数はＮ＝３である。
　結果を表５に示す。本試験の通常栽培時の発芽率は平均９０．２％、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の発芽率は平均５８．８％であることから、その減少率は３５％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表５から明らかなように、ヘスペリジンに浸漬した区では、通常播種時（熱水浸漬なし）の発芽率と比較して高温処理後に同等の発芽率を示し、また対照剤と比較して発芽率の低下が著しく緩和されていた。従ってヘスペリジンに植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例６：　高温ストレスシャーレ試験（キャベツ）＞
・目的　　　　キャベツ種子に対する高温耐性向上効果の評価
・方法
　キャベツ（おきな、タキイ種苗）の種子を５２℃の熱水に２５分間浸漬し、高温処理を行った。高温処理後、種子を水道水で冷却、風乾後、ヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）終濃度が１００～１０００ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（溶媒は水）に室温（２０～２５℃）にて１時間浸漬した。また、同じく蒸留水に浸漬した区を無添加区とした。浸漬処理後、風乾させた種子を、定性濾紙を敷いた浅型シャーレに２０粒ずつ播種し、蒸留水をシャーレあたり３ｍLずつ濾紙に均一に滴下した。播種したシャーレは恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）で２３℃にて４日間培養し、発芽率およびランダムに選抜した幼苗の根長を評価した。各区の測定数は、発芽率はＮ＝３、根長はＮ＝１５である。
　結果を表６に示す。本試験の通常栽培時の発芽率は平均９３．３％、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の発芽率は平均５２．１％であることから、その減少率は４４％であり、同じく各根長は平均５３．８ｍｍ、平均２３．０ｍｍであることから、その減少率は５７％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表６から明らかなように、ヘスペリジンに浸漬した区では、高温処理後に無添加区と比較して発芽率の低下が著しく緩和されていた。また、根長についても通常時（熱水浸漬なし）の根長と比較して同等程度の根長を示し、無添加区と比較して根長の伸長抑制が著しく緩和されていた。従ってヘスペリジンに植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例７：　高温ストレスシャーレ試験（ニンジン）＞
・目的　　　　ニンジン種子に対する高温耐性向上効果の評価
・方法
　ニンジン（ＵＳ春蒔五寸人参、横浜植木）の種子を５５℃の熱水に２０分間浸漬し、高温処理を行った。高温処理後、種子を水道水で冷却、風乾後、ヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）終濃度が１００～１０００ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（溶媒は水）に室温（２０～２５℃）にて１時間浸漬した。また、同じく蒸留水に浸漬した区を無添加区とした。浸漬処理後、風乾させた種子を、定性濾紙を敷いた浅型シャーレに２０粒ずつ播種し、蒸留水をシャーレあたり３ｍLずつ濾紙に均一に滴下した。播種したシャーレは恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）で２３℃にて７日間培養し、発芽率を評価した。各区の測定数は、Ｎ＝３である。
　結果を表７に示す。本試験の通常栽培時の発芽率は平均７５．０％、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の発芽率は平均３１．７％であることから、その減少率は５８％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表７から明らかなように、ヘスペリジンに浸漬した区では、高温処理後に無添加区と比較して発芽率の低下が著しく緩和されていた。従ってヘスペリジンに植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例８：　高温ストレスポット試験（芝）＞
・目的　　　　ベントグラスに対する高温耐性向上効果の評価
・方法
　ベントグラス（ペンクロス、雪印種苗）を、育苗培土（片倉コープアグリ株式会社製、くみあい園芸用育苗培土げんきくん１号）を充填したポット（土容量１００ｍｌ）に均一に播種し、１４～２０日間栽培し、ヘスペリジン施用前日に地上部約１ｃｍの長さで刈りそろえた。ヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）終濃度が０．０６～０．６ｐｐｍとなるよう調整した希釈液を１ポットあたり１０ｍｌずつ潅注処理した。無添加区は蒸留水を同じく潅注処理した。ガラス温室内（日中平均気温５０℃）で７日間栽培することで高温処理を行ない、地上部新鮮重量を評価した。各区の測定数は、Ｎ＝３である。
　結果を表８に示す。本試験の通常栽培時の地上部新鮮重量は平均３．７ｇ、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の地上部新鮮重量は平均２．２ｇであることから、その減少率は４１％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表８から明らかなように、ヘスペリジンを潅注処理した区では、高温処理後に無添加区と比較して地上部新鮮重量の減少が著しく緩和されていた。また、図１から明らかなようにヘスペリジンを潅注処理した区では、地上部の枯死は見られなかった。従って、ヘスペリジンに植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例９：　高温ストレスポット試験（レタス）＞
・目的　　　　レタスに対する高温耐性向上効果の評価
・方法
　レタス（グリーンウェーブ、タキイ種苗）を、育苗培土（日本肥糧株式会社製、「苗美人Ｎ１００」）を充填したセルトレーに播種した。播種直後にヘスペリジン終濃度が１００～１０００ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（溶媒は水）を１ウェルあたり５ｍｌずつ潅注処理した。無添加区は蒸留水を同じく潅注処理した。日中平均気温３５℃の温室内で２０日間栽培することで高温処理を行い、地上部新鮮重量および地下部新鮮重量を評価した。各区の測定数は、Ｎ＝１５～２０である。
　結果を表９に示す。本試験の通常栽培時の地上部新鮮重量は平均０．８２ｇ、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の地上部新鮮重量は平均０．６６ｇであることから、その減少率は２０％、同じく地下部新鮮重量は平均０．３３ｇ、平均０．２４ｇであることから、その減少率は２７％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表９から明らかなように、ヘスペリジンを潅注処理した区では、高温処理後に顕著な無添加区と比較して地上部新鮮重量、地下部新鮮重量の減少が著しく緩和されていた。従って、ヘスペリジンに植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例１０：　高温ストレスポット試験（キャベツ）＞
・目的　　　　キャベツに対する高温耐性向上効果の評価
・方法
　キャベツ（おきな、タキイ種苗）を、育苗培土（日本肥糧株式会社製、「苗美人Ｎ１００」）を充填したセルトレーに播種した。播種直後にヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）終濃度が１００～１０００ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（溶媒は水）を１ウェルあたり５ｍｌずつ潅注処理した。温室内（日中平均気温３５℃）で３０日間栽培し、地上部生重量および地下部生重量を評価した。各区の測定数は、Ｎ＝１５～２０である。
　結果を表１０に示す。本試験の通常栽培時の地上部新鮮重量は平均０．９１ｇ、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の地上部新鮮重量は平均０．６６ｇであることから、その減少率は２７％、同じく地下部新鮮重量は平均０．３７ｇ、平均０．２４ｇであることから、その減少率は３５％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表１０から明らかなように、ヘスペリジンを潅注処理した区では、高温処理後に無添加区と比較して地上部新鮮重量の減少が著しく緩和されていた。従って、ヘスペリジンに植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例１１：　高温ストレス圃場試験（芝）＞
・目的　　　　圃場レベルでの高温ストレス耐性向上効果（夏越し対策）の評価
・方法
　西日本グリーン研究所内圃場にて表１１に示す製剤組成のヘスペリジン１％含有水和剤を０．２５～１．２５ｇ／ｍ^２（散布水量２５０ｍｌ）の割合で７月～９月にかけて隔週で計３回葉面散布処理した。最終散布から１か月後、ホールカッターで芝を回収し、芽数および根長、根乾燥重量を測定した。各区の測定数は、Ｎ＝３である。
　結果を表１２、１３に示す。本試験の散布前の根長は平均１４．３ｃｍ、高温処理条件下での栽培時（無添加区）の根長は平均９．９ｃｍであることから、その減少率は２７％、同じく地下部乾燥重量（根部乾重量）は平均０．２５ｇ、平均０．０９ｇであることから、その減少率は６４％であり、高温ストレスによる影響があったと評価した。表１２、１３から明らかなように、ヘスペリジンを葉面散布処理した区では、高温下で栽培後の無添加区と比較して芽数、根長および地下部乾燥重量（根部乾重量）の減少が著しく緩和されていた。従って、ヘスペリジンに植物の高温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例１２：　低温ストレス圃場試験（芝）＞
・目的　　　　芝に対する低温耐性向上効果の評価
・方法
　研究所内にて表１１に示す製剤組成のヘスペリジン１％含有水和剤を０．１５～０．７５ｇ／ｍ^２（散布水量２５０ｍｌ）の割合で２０１７年１０月下旬～１２月下旬にかけて隔週で計４回葉面散布処理した。最終散布から３か月後、ホールカッターで芝を回収し、芽数を測定した。各区の測定数は、Ｎ＝３である。
　結果を表１４に示す。２０１７年１１月～２０１８年３月の最高気温は１６．６℃、最低気温は－３．７℃、平均気温は６．０℃であった。高麗芝の生育至適温度が２４～３５℃であり、１０℃以下で休眠に入ることから、低温ストレスによる影響があったと判断した。表１４から明らかなように、ヘスペリジンを葉面散布処理した区では、低温下で栽培後に無添加区およびヘスペリジンを含有しない肥料を施用した対照区と比較して芽数の減少が著しく緩和されていた。従って、ヘスペリジンに植物の低温ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例１３：　塩ストレスポット試験（キュウリ）＞
・目的　　　　キュウリに対する塩耐性向上効果の評価
・方法
　キュウリ（半白節成、タキイ種苗）を、育苗培土（片倉コープアグリ株式会社製、くみあい園芸用育苗培土げんきくん１号）を充填したポット（土容量１００ｍｌ）に播種し、２１日間栽培した。表１１に示す製剤組成のヘスペリジン１％含有水和剤をヘスペリジン終濃度が１ｐｐｍとなるよう調製した希釈液を１ポットあたり１０ｍｌずつ葉面散布した。キュウリをＮａＣｌ終濃度が７５ｍＭに調整した希釈液中に静置し、底面吸水させた。温室内（２０～２５℃）で７日間、栽培し、地上部生重量を測定した。各区の測定数は、Ｎ＝６である。
　結果を表１５に示す。本試験の通常栽培時（ＮａＣｌ　０ｍＭ、無添加区）の地上部新鮮重量は４．２ｇであり、高塩濃度条件下での栽培時（ＮａＣｌ　７５ｍＭ、無添加区）の地上部新鮮重量はで３．１ｇであることから、その減少率は２６％であり、塩ストレスによる影響があると評価した。表１５から明らかなように、ヘスペリジンを葉面散布処理した区では、塩ストレス処理後に無添加区と比較して地上部新鮮重量の減少が著しく緩和されていた。従って、ヘスペリジンに植物の塩ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例１４：　生育促進効果（デントコーン）＞
・目的　　　　デントコーンに対する生育促進効果の評価
・方法
　デントコーン（３４Ｖ５２）を、育苗培土（片倉コープアグリ株式会社製、くみあい園芸用育苗培土げんきくん１号）を充填したポット（土容量１３０ｍｌ）に播種した。発芽確認後、ヘスペリジン終濃度１～１０ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（溶媒は水）を５ｍｌずつ潅注処理した。温室内（日中平均気温２５℃）で１４日間栽培し、地上部乾燥重量および地下部乾燥重量を評価した。
　結果を表１６に示す。表１６から明らかなように、ヘスペリジンを潅注処理区では、顕著な地上部乾燥重量および地下部乾燥重量の増加が見られた。従って、ヘスペリジンに植物の生育を促進させる高い効果があることが認められた。また、最も高濃度である１０ｐｐｍ潅注処理時は無添加区と比較して地上部・地下部重量の顕著な増加は見られなかった。

＜実施例１５：　生育促進効果（コムギ）＞
・目的　　　　コムギに対する生育促進効果の評価
・方法
　コムギ（さとのそら）を、育苗培土（片倉コープアグリ株式会社製、くみあい園芸用育苗培土げんきくん１号）を充填したポット（土容量１００ｍｌ）に播種した。発芽確認後、ヘスペリジン終濃度１０～３３ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（溶媒は水）を５ｍｌずつ潅注処理した。温室内（日中平均気温２５℃）で１４日間栽培し、地上部乾燥重量および地下部乾燥重量を評価した。
　結果を表１７に示す。表１７から明らかなように、ヘスペリジンを潅注処理区では、顕著な地上部乾燥重量および地下部乾燥重量の増加が見られた。従って、ヘスペリジンに植物の生育を促進させる高い効果があることが認められた。

＜実施例１６：　生育促進効果（レタス）＞
・目的　　　　レタスに対する生育促進効果の評価（潅注処理）
・方法
　レタス（グリーンウェーブ）を、育苗培土（日本肥糧株式会社製、「苗美人Ｎ１００」）を充填したセルトレーに播種し、本葉２葉展開後、ポット（土容量１００ｍｌ）に移植した。発芽確認後、ヘスペリジン終濃度１～１０ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（溶媒は水）を５ｍｌずつ潅注処理した。温室内（日中平均気温２５℃）で１４日間栽培し、地上部乾燥重量および地下部乾燥重量を評価した。
　結果を表１８に示す。表１８から明らかなように、ヘスペリジンを潅注処理区では、顕著な地上部乾燥重量および地下部乾燥重量の増加が見られた。従って、ヘスペリジンに植物の生育を促進させる高い効果があることが認められた。また、添加濃度低下に伴い、地上部・地下部重量の低下傾向が見られており、最も低濃度である１ｐｐｍ潅注処理時には地上部重量の顕著な増加は見られなかった。

＜実施例１７：　生育促進効果（レタス）＞
・目的　　　　レタスに対する生育促進効果の評価（種子処理）
・方法
　レタス（グリーンウェーブ、タキイ種苗）に５％種子重量のヘスペリジン終濃度１～１００ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（溶媒は水）を塗布し、種子塗沫した。塗沫済レタス種子を、育苗培土（日本肥糧株式会社製、「苗美人Ｎ１００」）を充填したセルトレーに播種した。温室内（日中平均気温２５℃）で２８日間栽培し、地上部乾燥重量および地下部乾燥重量を評価した。
　結果を表１９に示す。表１９から明らかなように、ヘスペリジンを潅注処理区では、顕著な地上部乾燥重量および地下部乾燥重量の増加が見られた。従って、ヘスペリジンに植物の生育を促進させる高い効果があることが認められた。また、添加濃度低下に伴い、地上部・地下部重量の低下傾向が見られており、最も低濃度である１ｐｐｍ潅注処理時には地上部重量の顕著な増加は見られなかった。

＜実施例１８：　生育促進効果（キャベツ）＞
・目的　　　　キャベツに対する生育促進効果の評価
・方法
　キャベツ（おきな、タキイ種苗）に５％種子重量のヘスペリジン終濃度１～１００ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（溶媒は水）を塗布し、種子塗沫した。塗沫済キャベツ種子を、育苗培土（日本肥糧株式会社製、「苗美人Ｎ１００」）を充填したセルトレーに播種した。温室内（日中平均気温２５℃）で２８日間栽培し、地上部乾燥重量および地下部乾燥重量を評価した。
　結果を表２０に示す。表２０から明らかなように、ヘスペリジンを潅注処理区では、顕著な地上部乾燥重量および地下部乾燥重量の増加が見られた。従って、ヘスペリジンに植物の生育を促進させる高い効果があることが認められた。最も高濃度である１００ｐｐｍ潅注処理時は無添加区と比較して地上部・地下部重量の顕著な増加は見られなかった。キャベツにおける最適添加濃度は１００ｐｐｍより低濃度であると判断した。

＜実施例１９：　抗菌作用（ピシウム）＞
・目的　　　　イネ苗立枯病（Pythium graminicora）に対する防除効果の評価
・方法
　０．２％土重量の割合で培養土にPythium graminicora菌体（ベントグラス種子培地で培養後７～１０日）をよく混和し、ポット（土容量８０ｍｌ）に充填した。ポットへイネ種子（コシヒカリ）を播種し、表１１に示す製剤組成のヘスペリジン１％含有水和剤を１０～１００倍希釈液（溶媒は水）を１０ｍｌずつ潅注処理し、覆土した。恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）で２８℃にて３日間催芽処理後、４℃にて３日間静置し、その後、３０℃にて３日間栽培した。３０℃処理後、ポットは温室内で７日間栽培し、防除効果を評価した。発病程度は、以下の基準に従って評価した。
（発病程度基準）
０・・・健常苗
１・・・地上部・地下部生育がやや抑制されている
２・・・地上部・地下部生育が抑制されている
３・・・地上部・地下部生育が著しく抑制されている
４・・・枯死
　結果を表２１に示す。表２１から明らかなように、ヘスペリジンを潅注処理区では、無添加区と比較して発病苗率および発病度が抑制された。従って、ヘスペリジンにイネ苗立枯病菌に対する防除効果があることが認められた。

＜実施例２０：　抗菌作用（うどんこ病）＞
・目的　　　　キュウリうどんこ病（Sphaerotheca cucurbitae）に対する防除効果の評価
・方法
　本葉２葉展開期のキュウリ（半白節成、タキイ種苗）の本葉３葉以上をカットし、ヘスペリジン終濃度１０～１０００ｐｐｍとなるよう調整した希釈液（溶媒は０．０１％ｔｗｅｅｎ２０液）を１５ｍｌずつ葉面散布した。風乾後、キュウリうどんこ病胞子（１ｘ１０^４ｓｐｏｒｅｓ／ｍｌ、溶媒は０．０１％ｔｗｅｅｎ２０液）を葉面散布した。風乾後、温室内で１４日間栽培し、防除効果を評価した。
　結果を表２２に示す。表２２から明らかなように、ヘスペリジン潅注処理区では、下記式３で算出される防除価が６８を示した。
（式３）
　　防除価＝１００－（添加区の被害／無添加区の被害）×１００
　従って、ヘスペリジンにキュウリうどんこ病に対する防除効果があることが認められた。

＜実施例２１：　抗菌作用（トマト疫病）＞
・目的　　　　トマト疫病（Phythophthora infestans）に対する防除効果の評価
・方法
　本葉７～８葉展開期のトマト（レジナ）の本葉７葉以上をカットし、ヘスペリジン終濃度１０～１００ｐｐｍとなるよう調整した希釈液（溶媒は水）を１０ｍｌずつ葉面散布した。風乾後、トマト疫病遊走子（１ｘ１０^４ｚｏｏｓｐｏｒｅｓ／ｍｌ）を葉面散布した。風乾後、温室内で１４日間栽培し、防除効果を評価した。
　結果を表２３に示す。表２３から明らかなように、ヘスペリジンを潅注処理区では、上記式３で算出される防除価が９２を示した。従って、ヘスペリジンにトマト疫菌に対する防除効果があることが認められた。

＜実施例２２：　ｐＨストレスシャーレ試験（レタス）＞
・目的　　　　レタスに対するｐＨストレス耐性向上効果の評価
・方法
　ヘスペリジンの終濃度が０、０．１ｐｐｍまたは１ｐｐｍとなるよう調製した２％素寒天培地（ｐＨ４、７または９）を角シャーレ（アズワン社製「型番：Ｄ－２１０－１６」）に充填した。２％素寒天培地（ｐＨ７）にレタス種子（グリーンウェーブ、タキイ種苗）を播種し、播種後２日目のレタス幼苗を上述各濃度でヘスペリジンを添加した寒天培地（ｐＨ４、７または９）上に移植した。移植時の根の先端に印をつけた。移植したシャーレを恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）内にて底面に対して４５度の角度で静置し、２３℃にて２日間培養し、移植時の幼苗の根の先端からの根長の伸長を評価した。各区の測定数はＮ＝１５である。結果を表２４に示す。
　本試験の通常栽培時（ｐＨ７）の根長は平均１９．３７ｍｍ、ｐＨ４培養条件下での栽培時（無添加区）の根長は平均１４．５１ｍｍであり、ｐＨ９培養条件下での栽培時（無添加区）の根長は平均１５．３８ｍｍであることから、その減少率はそれぞれ２５％、２１％であり、酸性又はアルカリ性ストレスによる影響があったと評価した。表２４から明らかなように、ヘスペリジンを添加した区では、酸性またはアルカリ性条件で培養後に無添加区と比較して根長の伸長抑制が著しく緩和されていた。従ってヘスペリジンに植物のｐＨストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例２３：　金属ストレスシャーレ試験（レタス）＞
・目的　　　　レタスに対する金属ストレス耐性向上効果の評価
・方法
　ヘスペリジンの終濃度が０または１ｐｐｍとなるよう調製した２％素寒天培地（１００μＭのＡｌＣｌ_３（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）を含有）を角シャーレ（アズワン社製「型番：Ｄ－２１０－１６」）に充填した。２％素寒天培地にレタス種子（グリーンウェーブ、タキイ種苗）を播種し、播種後２日目のレタス幼苗を上述のＡｌＣｌ_３を含有する寒天培地上に移植した。移植時の根の先端に印をつけた。移植したシャーレを恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）内にて底面に対して４５度の角度で静置し、２３℃にて２日間培養し、移植時の幼苗の根の先端からの根長の伸長を評価した。各区の測定数はＮ＝１５である。結果を表２５に示す。
　本試験の通常栽培時の根長は平均２６．９４ｍｍ、ＡｌＣｌ_３添加条件下での栽培時（無添加区）の根長は平均１６．６２ｍｍであることから、その減少率は３８％であり、金属ストレスによる影響があったと評価した。表２５から明らかなように、ヘスペリジンを添加した区では、金属存在下で培養後に無添加区と比較して根長の伸長抑制が著しく緩和されていた。従ってヘスペリジンに植物の金属ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

＜実施例２４：　乾燥ストレスシャーレ試験（トマト）＞
・目的　　　　トマトに対する乾燥ストレス耐性向上効果の評価
・方法
　トマト（桃太郎ホーム、タキイ種苗）の種子を、定性濾紙を敷いた浅型シャーレに６粒ずつ播種し、ヘスペリジン（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬特級）終濃度が０、０．１ｐｐｍまたは１ｐｐｍとなるよう調製した希釈液（ポリエチレングリコール６０００（富士フィルム和光純薬株式会社、試薬１級）を含有）をシャーレあたり４ｍLずつ濾紙に均一に滴下した。播種したシャーレは恒温器（ＥＹＥＬＡ社製「型番：ＦＬＩ－２０１０Ａ」）で２８℃にて１２日間培養し、根長を評価した。各区の測定数はＮ＝３である。
　結果を表２６に示す。本試験の通常栽培時の根長は平均５３．１４ｍｍ、ポリエチレングリコールによる疑似乾燥条件下での栽培時（無添加区）の根長は平均２３．２９ｍｍであることから、その減少率は５６％であり、乾燥ストレスによる影響があったと評価した。表２６から明らかなように、ヘスペリジンを添加した区では、通常播種時（ポリエチレングリコールなし）の根長と比較して乾燥処理後に同等の根長を示した。また、無添加区と比較して根長の伸長抑制が著しく緩和されていた。従ってヘスペリジンに植物の乾燥ストレスに対する耐性を向上させる高い効果があることが認められた。

Claims

　ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類を有効成分として含有する、植物の環境ストレス耐性向上用の植物生育調節剤。
　前記環境ストレスが、高温、低温、浸透圧、乾燥、多雨、ｐＨ、紫外線および高塩からなる群から選ばれる１以上のストレスである請求項１に記載の植物生育調節剤。
　前記植物が、ナス科植物、セリ科植物、アカザ科植物、キク科植物、マメ科植物、ユリ科植物、バラ科植物、ウリ科植物、ヒルガオ科植物、ツバキ科植物、ヒノキ科植物、フトモモ科植物、モクセイ科植物、ミカン科植物、ブドウ科植物、シソ科植物、イネ科植物、アブラナ科植物、バショウ科植物、ウルシ科植物およびパパイヤ科植物からなる群から選ばれる１以上の植物である、請求項１または２に記載の植物生育調節剤。
　前記ヘスペリジン誘導体がα－モノグルコシルヘスペリジン、ヘスペリジンメチルカルコン、ネオヘスペリジンおよびネオヘスペリジンジヒドロカルコンからなる群から選ばれる１以上のヘスペリジン誘導体である、請求項１～３のいずれか１項に記載の植物生育調節剤。
　前記フラボノイド類がヘスペレチン、タンゲレチン、ノビレチンおよびフロレチンからなる群から選ばれる１以上のフラボノイドである、請求項１～４のいずれか１項に記載の植物生育調節剤。
　前記フラボノイド類がタンゲレチン、ノビレチンおよびフロレチンからなる群から選ばれる１以上のフラボノイドである、請求項１～５のいずれか１項に記載の植物生育調節剤。
　ヘスペリジンを有効成分として含有する、請求項１～６のいずれか１項に記載の植物生育調節剤。
　ヘスペリジンおよびネオヘスペリジンを有効成分として含有する、請求項１～７のいずれか１項に記載の植物生育調節剤。
　請求項１～８のいずれか１項に記載の植物生育調節剤を植物に施用する工程を含む、植物の環境ストレス耐性を向上させる方法。
　前記施用が土壌、培地または植物本体への施用である、請求項９に記載の方法。
　前記施用が土壌混和、潅注、種子塗沫、種子浸漬および葉面散布からなる群から選ばれる１以上の施用である、請求項９または１０に記載の方法。
　ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類を有効成分として含有する、植物の生育促進用の植物生育調節剤。
　ヘスペリジンを有効成分として含有する、請求項１２に記載の植物生育調節剤。
　ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類を有効成分として含有する、植物の抗菌用の植物生育調節剤。
　ヘスペリジンを有効成分として含有する、請求項１４に記載の植物生育調節剤。
　ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類の、植物の環境ストレス耐性向上剤の製造のための使用。
　ヘスペリジンもしくはヘスペリジン誘導体またはフラボノイド類の、植物の環境ストレス耐性を向上させるための使用。