WO2020124191A1

WO2020124191A1 - Composições alimentícia e aditiva, bem como usos da lignina e da composição aditiva

Info

Publication number: WO2020124191A1
Application number: PCT/BR2019/050557
Authority: WO
Inventors: Vinícius FERNANDES NUNES DA SILVA; Henrique BUENO DA SILVA
Original assignee: Suzano S.A.
Priority date: 2018-12-20
Filing date: 2019-12-20
Publication date: 2020-06-25
Also published as: CL2021001637A1; CN113710099A; AU2019408275B2; BR102018076813A2; US20230157318A2; UY38521A; AR123747A1; AU2019408275A1; US20220378066A1; CA3124156A1; KR20210139213A; EP3900546A4; MX2021007550A; EP3900546A1; AU2019408275C1

Abstract

A presente invenção se refere a uma composição alimentícia compreendendo lignina como aditivo alimentar, a uma composição alimentícia compreendendo uma composição aditiva a qual, por sua vez, compreende lignina, a uma composição aditiva compreendendo lignina, bem como aos usos da lignina e da composição aditiva. São revelados também benefícios para o animal, bem como para produtos derivados do mesmo, da composição alimentícia compreendendo lignina ou compreendendo uma composição aditiva compreendendo lignina.

Description

COMPOSIÇÕES ALIMENTÍCIA E ADITIVA, BEM COMO USOS DA LIGNINA E DA

COMPOSIÇÃO ADITIVA

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção se refere a uma composição alimentícia compreendendo lignina como aditivo alimentar, a uma composição alimentícia compreendendo uma composição aditiva a qual, por sua vez, compreende lignina, a uma composição aditiva compreendendo lignina, bem como aos usos da lignina e da composição aditiva.

[002] São revelados também benefícios para o animal, bem como para produtos derivados do mesmo, da composição alimentícia compreendendo lignina ou compreendendo uma composição aditiva compreendendo lignina.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[003] Há uma constante busca na indústria alimentícia por aditivos alimentares a serem usados na dieta animal para suplementação nutritiva e melhora no desempenho do animal. Antibióticos são aditivos comumente utilizados para esse fim. Contudo, têm a desvantagem de aumentar o custo do produto final e de contribuir para o aumento da resistência antimicrobiana.

[004] Além disso, o uso de antibióticos como aditivos alimentares promotores de crescimento gera dificuldades de comercialização entre países para a indústria alimentícia, uma vez que animais cuja alimentação continha antibióticos não são permitidos em alguns mercados internacionais. A União Europeia, por exemplo, baniu o uso de antibióticos como aditivos promotores de crescimento em 2006.

[005] A fim de superar as desvantagens do uso de compostos antibióticos, a indústria começou a empregar aditivos de fontes naturais obtidos a partir de, por exemplo, extratos de plantas e óleos essenciais. No entanto, tais aditivos naturais apresentam problemas de custo e escalabilidade, uma vez que estes são produtos muitas vezes obtidos por processos custosos e de difícil produção em massa.

[006] Existem documentos no estado da técnica que revelam o uso de produtos naturais em composições alimentícias com diferentes objetivos, indicando uma tendência pelo uso de materiais de fontes renováveis, sem solucionar, entretanto, o desafio técnico aqui exposto, qual seja, um aditivo que seja capaz de melhorar o desempenho zootécnico do animal e que, ao mesmo tempo, possa ser produzido em larga escala e com baixo custo.

[007] O documento intitulado "The Potentiol of Phytogenic Feed Additives in Pigs ond Poultry", J.D. van der Klis e E. Vinyeta-Punti, descreve o uso de óleos essenciais, ervas aromáticas e especiarias como aditivos alimentares. Tais aditivos atuam aumentando a palatabilidade das rações, promovendo alterações enzimáticas no trato gastrointestinal, prevenindo infecções ou até mesmo alterando a performance reprodutiva, além de apresentarem efeito antioxidante. Entretanto, o documento ressalta que a atividade antimicrobiana de extratos de plantas só seria evidente para altas concentrações de extrato, de modo que efeitos sinérgicos com outros aditivos alimentares, como ácidos orgânicos ou enzimas, precisariam ser estudados para reduzir a concentração mínima efetiva.

[008] O documento US 2004/0241194 descreve uma combinação de extratos de folhas de eucalipto, folhas de boldo e de sementes de feno-grego, como suplemento alimentar para inclusão em uma composição alimentícia para o tratamento curativo ou preventivo de coccidiose em ruminantes, aves de criação, coelhos e porcos. No suplemento alimentar, o extrato de eucalipto está presente na forma de um óleo essencial que representa de entre 8 e 15%, em peso, do referido suplemento. Além de ser eficaz no tratamento curativo ou preventivo de coccidiose, o suplemento descrito nesse documento se mostrou benéfico no ganho de peso dos animais.

[009] O documento US 7,150,889 revela o uso de extrato de plantas do gênero Eucolyptus em composições alimentícias visando diminuir o aumento de peso e prevenir doenças relacionadas ao aumento de peso e acúmulo de gordura. O objetivo da invenção é fornecer um agente antiobesidade. O documento deixa claro que o extrato de eucalipto tem ação eficaz na inibição do aumento de peso.

[010] O documento intitulado "Effects of Supplementotion of Eucolyptus (E. Camaldulensis) LeofMeol on Feed Intoke ond Rumen Fermentotion Efficiency in Swomp Buffoloes" Thoo et ol., revela que a suplementação alimentar com folhas de eucalipto melhora a estabilidade da fermentação no rúmen de búfalos. Diferentes tipos de óleos essenciais podem ser extraídos a partir de folhas de eucalipto.

[011] Diante deste contexto, buscam-se aditivos de fontes naturais e renováveis, de baixo custo e capazes de serem obtidos em grande escala. Um aditivo que vem sendo estudado na arte é a lignina, um produto de fonte natural e renovável, de baixo custo e capaz de ser obtida em grande escala.

[012] Historicamente, a lignina era considerada apenas como material de descarte, um subproduto da extração de celulose. Ela está presente em grandes quantidades em todas as plantas. As gramíneas contêm de 17 a 24%, as madeiras moles ( softwood ) de 18 a 25% e as madeiras duras ( hordwood ) de 27 a 33%, em peso, de lignina.

[013] Estima-se que sua capacidade mundial de produção seja de 50 milhões de toneladas por ano, apesar da grande maioria desta quantidade ser utilizada como fonte de calor e energia na produção de celulose. Com a evolução de mercado e com novos entrantes no mesmo, estima-se um crescimento na casa de 2,5% em 5 anos no mercado global de lignina. [014] Devido à sua grande disponibilidade e baixo custo, a lignina vem sendo utilizada como uma alternativa interessante para suprimir o problema de escalabilidade observado com o uso de produtos naturais. Neste contexto, existem documentos no estado da técnica que já descrevem a aplicação na lignina na indústria alimentícia.

[015] O documento DE 10106078 descreve o uso de lignina em alimentos para consumo humano ou animal. Nesse documento, a lignina presente nas composições alimentícias age como adsorvente ou ligante de toxinas e tem a função de se ligar à micotoxina e eliminá-la nas fezes de forma a prevenir intoxicações alimentares.

[016] O documento US 2013/0164413, por sua vez, descreve o uso de lignina per se como fonte de fibra, ou como um componente de um material fonte de fibras, em rações para gatos e cães, especialmente gatos. Apesar de ser mencionado que a lignina poderia ser usada per se como a fonte de fibra, o documento trata apenas de lignina bruta contida em grãos e vegetais ou presente na polpa da madeira. O objetivo deste uso é prover uma composição que ajude na eliminação de bolas de pelos formadas no organismo do animal provenientes de sua lambedura usando componentes de madeira como uma fibra dietética que contém lignina. Neste documento, não há o uso da lignina extraída da madeira como aditivo alimentar, mas sua adição como uma fração funcional da fibra dietética. Aparentemente, não há a absorção sistémica da fonte de fibras e, consequentemente, não há melhoras no desempenho zootécnico do animal. Há, na verdade, a melhora na formação de bolas de pelos no trato gastrointestinal do gato que é promovida pela adição da fibra dietética contendo lignina, uma vez que esta atua estimulando a passagem da bola de pelos pelo trato digestivo com a sua consequente eliminação.

[017] O documento WO 2017/056275 também trata do problema de formação de bola de pelos pela lambedura dos animais. De acordo com esse documento, a formação de bola de pelos no organismo do animal induz o vomito da bola de pelos e, consequentemente, do alimento ingerido pelo animal. Como solução para o problema de vómitos constantes (em média a cada dois dias), a publicação WO 2017/056275 descreve um alimento para animais compreendendo celulose refinada a qual compreende um teor de lignina em peso inferior a 1%, mais preferivelmente, 0,3% ou menos. Novamente, não há a absorção sistémica da celulose contida no alimento pelo animal e a fonte de lignina é lignina bruta contida na celulose.

[018] Contudo, apesar de já ser descrito o uso de lignina em dietas animais como um aditivo alimentar, ainda há na arte uma necessidade por aditivos alimentares capazes de melhorar o desempenho zootécnico a base de fontes naturais e renováveis. Essa necessidade foi suprida pela composição alimentícia da presente invenção a qual compreende até 5%, em peso, de lignina ou compreende uma composição aditiva compreendendo até 99% de lignina, em que a lignina é, preferivelmente, lignina isolada. Diferentemente do observado da arte, a lignina presente nas composições da invenção é absorvida e atua no organismo animal de forma benéfica, melhorando, inclusive, características de produtos originados do referido animal.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[019] É descrita aqui uma composição alimentícia compreendendo até 5%, em peso, de um aditivo alimentar, em que o aditivo alimentar é a lignina.

[020] Em uma modalidade preferida, a composição compreende de 1 a 3%, em peso, do aditivo alimentar.

[021] É descrita aqui também uma composição aditiva compreendendo até 99%, em peso, de lignina.

[022] Em uma modalidade da invenção, a composição aditiva é um suplemento, concentrado, pré-mistura, núcleo, entre outros.

[023] Em uma modalidade preferida da invenção, a composição aditiva é para preparar uma composição alimentícia compreendendo até 5%, em peso, de um aditivo alimentar, em que o aditivo alimentar é a lignina.

[024] É descrita aqui ainda uma composição alimentícia compreendendo a referida composição aditiva.

[025] Em uma modalidade da invenção, a lignina presente nas composições alimentícia e aditiva da invenção é lignina isolada. Em uma modalidade preferida da invenção, a lignina é lignina kraft.

[026] Em uma modalidade mais preferida, a lignina kraft é lignina kraft de madeira dura.

[027] Em uma modalidade preferida, a madeira dura é madeira de eucalipto.

[028] As composições alimentícias da presente invenção compreendem componentes usuais da alimentação animal como açúcar, farinhas, farelos, amido, caldo de cana, melaço de cana, levedura, leite em pó, óleos, sorgo, milho, soja integral tostada, aminoácidos, calcário, fosfato bicálcico, sal, vitaminas, ácido fólico, cloreto de colina, antioxidantes, minerais, e outros componentes usuais de uma composição alimentícia.

[029] Em uma modalidade preferida, a composição alimentícia da presente invenção compreende lignina, como parte ou não de uma composição aditiva, milho, farelo de soja, fosfato bicálcico, calcário, óleo de soja, sal, Dl- metionina, vitaminas A, D3, E, K3, tiamina, riboflavina, piridoxina, B12, biotina e niacina, pantotenato de cálcio, ácido fólico, cloreto de colina, antioxidante, ferro, cobre, manganês, zinco, iodo e selênio.

[030] Em uma modalidade da invenção, a composição alimentícia é uma composição de ração animal. [031] Em uma modalidade da invenção, a composição alimentícia melhora o desempenho zootécnico do animal.

[032] Em uma modalidade preferida, a melhora do desempenho zootécnico é selecionada a partir do grupo consistindo em aumento do ganho de peso, redução do consumo alimentar, redução da conversão alimentar, redução dos níveis de gordura, redução da deposição de gordura na cavidade abdominal e alterações histomorfológicas intestinais.

[033] Em uma modalidade preferida, a redução dos níveis de gordura é uma redução nos níveis de LDL, HDL, triglicerídeos, oxidação plasmática ou Tbars.

[034] Em uma modalidade preferida, as alterações histomorfológicas intestinais são o aumento da profundidade das criptas ou o aumento da altura das vilosidades. Em outra modalidade preferida, as alterações histomorfológicas intestinais ocorrem no jejuno e/ou no duodeno.

[035] Em uma modalidade da invenção, a composição alimentícia melhora as características nos produtos de origem animal.

[036] Em uma modalidade preferida, a melhora das características nos produtos de origem animal é selecionada a partir do grupo consistindo em retardamento dos efeitos oxidativos no post mortem de carne de frango, redução da oxidação e do colesterol em ovos e aumento na resistência e no peso das cascas de ovos.

[037] Em uma modalidade da invenção, a composição alimentícia é para a alimentação de animais de produção e de companhia.

[038] Em outra modalidade preferida da invenção, os animais de produção são animais monogástricos.

[039] Em uma modalidade mais preferida, a composição alimentícia é para alimentação de aves. [040] É descrito aqui também o uso de lignina como aditivo alimentar em uma composição alimentícia ou em uma composição aditiva.

[041] Em uma modalidade, é descrito o uso de lignina como aditivo alimentar em uma composição alimentícia, em que a referida composição alimentícia compreende até 5%, em peso, de lignina. Mais preferivelmente, a composição alimentícia compreende de 1 a 3%, em peso, de lignina.

[042] Em uma modalidade, a lignina é lignina kraft, preferencialmente, lignina kraft de madeira dura, mais preferencialmente, lignina kraft de eucalipto.

[043] Em uma modalidade, é descrito o uso de lignina como aditivo alimentar em uma composição alimentícia, em que a referida composição alimentícia é uma composição de ração animal.

[044] Em uma modalidade, a referida composição alimentícia melhora o desempenho zootécnico do animal.

[045] Em uma modalidade, a melhora do desempenho zootécnico é selecionada a partir do grupo consistindo em aumento do ganho de peso, redução do consumo alimentar, redução da conversão alimentar, redução dos níveis de gordura, redução da deposição de gordura na cavidade abdominal e alterações histomorfológicas intestinais.

[046] Em uma modalidade preferida, a redução dos níveis de gordura é uma redução nos níveis de LDL, HDL, triglicerídeos, oxidação plasmática ou Tbars.

[047] Em uma modalidade preferida, as alterações histomorfológicas intestinais são o aumento da profundidade das criptas ou o aumento da altura das vilosidades. Em outra modalidade preferida, as alterações histomorfológicas intestinais ocorrem no jejuno e/ou no duodeno.

[048] Em uma modalidade, a composição alimentícia melhora as características nos produtos de origem animal. [049] Em uma modalidade preferida, a melhora das características nos produtos de origem animal é selecionada a partir do grupo consistindo em retardamento dos efeitos oxidativos no post mortem de carne de frango, redução da oxidação e do colesterol em ovos e aumento na resistência e no peso das cascas de ovos.

[050] Em uma modalidade, a referida composição alimentícia é para a alimentação de animais de produção ou de companhia.

[051] Em outra modalidade preferida da invenção, os animais de produção são animais monogástricos.

[052] Em uma modalidade mais preferida, a composição alimentícia é para alimentação de aves.

[053] É descrito aqui, ainda, o uso de lignina para preparar uma composição alimentícia para melhorar o desempenho zootécnico de animais e/ou as características nos produtos de origem animal.

[054] Em uma modalidade, é descrito o uso de lignina para preparar uma composição alimentícia para melhorar o desempenho zootécnico de animais e/ou as características nos produtos de origem animal, em que a referida composição alimentícia compreende até 5%, em peso, de lignina. Mais preferivelmente, a composição alimentícia compreende de 1 a 3%, em peso, de lignina.

[055] É descrito aqui, ainda, o uso de lignina para preparar uma composição aditiva compreendendo até 99% de lignina, bem como o uso da composição aditiva para preparar uma composição alimentícia para melhorar o desempenho zootécnico de animais e/ou as características nos produtos de origem animal, em que a referida composição alimentícia compreende até 5%, em peso, de lignina. Mais preferivelmente, a composição alimentícia compreende de 1 a 3%, em peso, de lignina. [056] Em uma modalidade preferida, a lignina é lignina kraft, preferencialmente, lignina kraft de madeira dura, mais preferencialmente, lignina kraft de eucalipto.

[057] Em uma modalidade, a composição alimentícia é uma composição de ração animal.

[058] Em uma modalidade, a melhora do desempenho zootécnico é selecionada a partir do grupo consistindo em aumento do ganho de peso, redução do consumo alimentar, redução da conversão alimentar, redução dos níveis de gordura, redução da deposição de gordura na cavidade abdominal e alterações histomorfológicas intestinais.

[059] Em uma modalidade preferida, a redução dos níveis de gordura é uma redução nos níveis de LDL, HDL, triglicerídeos, oxidação plasmática ou Tbars.

[060] Em uma modalidade preferida, as alterações histomorfológicas intestinais são o aumento da profundidade das criptas ou o aumento da altura das vilosidades. Em outra modalidade preferida, as alterações histomorfológicas intestinais ocorrem no jejuno e/ou no duodeno.

[061] Em uma modalidade, a melhora das características nos produtos de origem animal é selecionada a partir do grupo consistindo em retardamento dos efeitos oxidativos no post mortem de carne de frango, redução da oxidação e do colesterol em ovos e aumento na resistência e no peso das cascas de ovos.

[062] Em uma modalidade, a referida composição alimentícia é para a alimentação de animais de produção ou de companhia.

[063] Em outra modalidade preferida da invenção, os animais de produção são animais monogástricos.

[064] Em uma modalidade mais preferida, a composição alimentícia é para alimentação de aves. BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[065] A figura 01 representa a estrutura química genérica suposta para lignina.

[066] A figura 02 representa um gráfico de viabilidade do lote de galinhas, durante quatro ciclos produtivos, alimentadas com diferentes níveis de lignina.

[067] A figura 03 representa um gráfico da equação de regressão para consumo de ração (g/ave/dia), em função do nível de inclusão de lignina na dieta, após quatro ciclos produtivos.

[068] A figura 04 representa um gráfico da equação de regressão para produção de ovos (%), em função do nível de inclusão de lignina na dieta, após quatro ciclos produtivos.

[069] A figura 05 representa um gráfico da equação de regressão para peso dos ovos (g), em função do nível de inclusão de lignina na dieta, após quatro ciclos produtivos.

[070] A figura 06 representa um gráfico da equação de regressão para porcentagem de ovos sujos encontrada para as aves alimentadas com diferentes níveis de lignina na dieta, durante quatro ciclos produtivos.

[071] A figura 07 representa um gráfico da equação de regressão para gravidade específica de ovos, em função do nível de inclusão de lignina na dieta, após quatro ciclos produtivos.

[072] A figura 08 representa um gráfico da equação de regressão para resistência da casca de ovos, em função do nível de inclusão de lignina na dieta, após quatro ciclos produtivos.

[073] A figura 09 representa um gráfico da equação de regressão para porcentagem da casca de ovos, em função do nível de inclusão de lignina na dieta, após quatro ciclos produtivos.

[074] As figuras 10 a 15 representam gráficos que indicam, respectivamente, os teores de colesterol total em gema de ovos, os teores de Tbars em gema de ovos, a resistência da casca de ovos, a porcentagem de casca de ovos, a porcentagem de gema de ovos e a porcentagem de albúmen de ovos versus o período de armazenamento, em que os ovos são provenientes de galinhas poedeiras alimentadas com diferentes níveis de inclusão de lignina e o armazenamento é de até 30 dias.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[075] A presente invenção se refere a composições alimentícias compreendendo lignina ou compreendendo uma composição aditiva a qual, por sua vez, compreende lignina como aditivo alimentar, as quais levam à melhora do desempenho zootécnico do animal e/ou melhora das características nos produtos de origem animal. A presente invenção se refere ainda a composições aditivas compreendendo lignina.

[076] Aditivos alimentares são definidos como produtos utilizados na nutrição animal com o propósito de melhora da qualidade do alimento ou de melhora da performance e saúde do animal. Os aditivos podem ser tecnológicos, sensoriais, nutricionais, zootécnicos ou coccidiostáticos e histomonostáticos. Os aditivos podem ser incluídos na composição alimentícia como parte de uma composição aditiva compreendendo outros aditivos ou como componentes isolados. Quando incluídos na composição alimentícia como parte de uma composição aditiva, esta pode ser uma composição concentrada que compreende majoritariamente um componente aditivo ou pode ser um suplemento vitamínico.

[077] As composições alimentícias da invenção podem compreender até 5%, em peso, preferencialmente entre 1 e 3%, em peso, de lignina ou de uma composição aditiva compreendendo lignina.

[078] Pela expressão "composição aditiva" entende-se qualquer composição adicionada ao produto final compreendendo vitaminas, nutrientes ou outros componentes melhoradores de desempenho, em que o produto final é destinado à alimentação de animais. Exemplos não limitativos de composições aditivas são suplementos, concentrados, pré-misturas, núcleos, entre outros.

[079] As composições aditivas da invenção podem ser, por exemplo, concentrados compreendendo até 99%, em peso, de lignina ou suplementos vitamínicos compreendendo até 5%, em peso, de lignina.

[080] Além da lignina ou da composição aditiva compreendendo lignina, as composições alimentícias da presente invenção compreendem ainda componentes usuais da alimentação animal como, por exemplo, açúcar; farinhas, tais como farinha de algarroba, de batata doce, de coco, de peixe, de sangue, de carne e ossos, e de penas; farelos, tais como, farelo de algodão, de amendoim, de canola, de soja, de arroz e de trigo; amido; caldo de cana; melaço de cana; levedura; leite em pó; óleos, tais como, óleo de canola, de milho e de soja; sorgo; milho; soja integral tostada; aminoácidos; calcário; fosfato bicálcico; sal; vitaminas, tais como, vitaminas A, D3, E, K3, tiamina, riboflavina, piridoxina, B12, biotina e niacina; ácido fólico; cloreto de colina; antioxidantes; minerais, tais como, ferro, cobre, manganês, zinco, iodo e selênio; e outros componentes usuais de uma composição alimentícia.

[081] Em uma modalidade preferida, a composição alimentícia da presente invenção compreende lignina como parte ou não de uma composição aditiva, milho, farelo de soja, fosfato bicálcico, calcário, óleo de soja, sal, Dl- metionina, vitaminas A, D3, E, K3, tiamina, riboflavina, piridoxina, B12, biotina e niacina, pantotenato de cálcio, ácido fólico, cloreto de colina, antioxidante, ferro, cobre, manganês, zinco, iodo e selênio.

[082] A lignina pode ser utilizada em larga escala e possui baixo custo, sendo uma opção vantajosa frente aos produtos naturais utilizados com essa função atualmente.

[083] Qualquer tipo de lignina isolada pode ser usado nas composições da invenção, sendo a lignina kraft preferida. De forma ainda mais preferida, as composições alimentícia e aditiva da invenção compreendem lignina kraft de madeira dura, preferencialmente, de eucalipto.

[084] A lignina pode ser incorporada na composição alimentícia da invenção na forma de pó, grânulo, pellets, líquido ou como parte de uma composição aditiva compreendendo outros aditivos. Já na composição aditiva da invenção, a ser incorporada na composição alimentícia, a lignina pode ser incorporada na forma de pó, grânulo, pellets ou líquido.

[085] A lignina pode ser definida, tecnicamente, como um material amorfo derivado de reações desidrogenativas de três tipos de fenil-propanóides: álcoois trans-coniferílico (tipo-G), trans-sinapílico (tipo-S) e trans-pcumarílico (tipo-H), os quais podem se conectar de distintas maneiras por ligações covalentes, não havendo uma unidade repetitiva (característica de polímeros), mas sim um arranjo complexo de tais unidades precursoras que geram macromoléculas.

[086] Como toda matéria natural, a lignina apresenta diferenças substanciais na sua composição, estrutura e pureza, que afetam suas propriedades e, por consequência, seus potenciais de aplicação. Tais variações dependem da origem botânica, uma vez que a relação das unidades geradoras (H/G/S) muda de acordo com o tipo de planta. Por exemplo, esta razão é 0-5 / 95-100 / 0 em madeira mole ( softwood ), 0-8 / 25-50 / 46-75 em madeira dura ( hardwood ) e 5-33 / 33-80 / 20-54 em gramíneas.

[087] Além disso, existe uma outra variável que é o processo de extração da lignina, visto que é impossível isolá-la sem realizar modificações químicas em sua estrutura. Um dos principais pontos afetados pelo processo de extração é a massa molecular da lignina isolada (também chamada de lignina técnica), a qual pode ficar numa faixa bastante larga de 260 a 50.000.000 g/mol. Os principais processos para extração da lignina dos materiais lignocelulósicos são: soda, kraft, sulfito e organosolv.

[088] A lignina proveniente da biomassa (matéria bruta) está na forma de biomassa ligninocelulósica, a qual é composta principalmente por celulose, hemicelulose e lignina. Os processos para isolar a lignina da biomassa lignocelulósica geram alterações estruturais e cisões da cadeia da lignina nativa. Portanto, a lignina extraída (isolada) não apresenta as mesmas características e efeitos na aplicação da lignina bruta contida na fibra lignocelulósica. De forma preferencial, as composições alimentícia e aditiva da presente invenção compreendem lignina isolada.

[089] Como pode ser percebido, a lignina possui uma estrutura química bastante complexa. Existem modelos que buscam descrevê-la, mas não há uma definição plena. A figura 01 apresenta uma fórmula suposta para tal.

[090] Lignina kraft é aquela obtida pelo processo de extração kraft. Tal processo é o mais comum na indústria de papel e polpa. Nele, partículas de madeira são tratadas com uma solução de hidróxido de sódio e sulfeto de sódio a 150 - 180° C. O processo fornece uma lignina com maior teor de grupos hidroxila fenólicos, ligações carbono-carbono estáveis em meio alcalino e introdução de quantidades de enxofre.

[091] Após o isolamento por processo kraft, a lignina isolada apresenta uma estrutura fragmentada e mais reativa, que permite que a mesma seja absorvida pelo organismo dos animais, enquanto que a lignina bruta proveniente de biomassa não apresenta essa capacidade de absorção.

[092] As composições alimentícias da invenção compreendendo até 5%, em peso, de lignina ou de uma composição aditiva compreendendo até 99% de lignina promovem um efeito prebiótico ao animal, conferindo uma melhora na sua saúde e desempenho zootécnico, além de otimizarem a utilização de recursos alimentares frente a uma dieta controle negativo. Além disso, as composições da presente invenção promovem uma melhora nas características de produtos originados dos animais que consomem as referidas composições.

[093] Prebiótico é um componente alimentar não digerível que possui propriedades benéficas, ao estimular seletivamente o crescimento ou atividade de microrganismos da flora intestinal.

[094] A melhora do desempenho zootécnico promovida pela composição alimentícia da invenção consiste em aumento do ganho de peso, redução do consumo alimentar, redução da conversão alimentar, aumento do peso vivo, redução dos níveis de gordura, redução da deposição de gordura na cavidade abdominal, promoção de desenvolvimento da mucosa intestinal e/ou alterações histomorfológicas intestinais, quando comparados com uma dieta controle negativo.

[095] Uma dieta controle negativo de acordo com a invenção consiste em uma dieta sem lignina e/ou quaisquer outros aditivos alimentares em sua composição.

[096] A expressão "conversão alimentar" significa uma medida de produtividade animal definida pelo consumo total de ração divido pelo ganho de peso dos animais.

[097] A expressão "peso vivo" como aqui utilizada refere-se ao peso total do animal vivo.

[098] A expressão "redução dos níveis de gordura" como aqui utilizada é entendida como uma redução nos níveis séricos de LDL, HDL, triglicerídeos, oxidação plasmática ou Tbars (substâncias reativas com ácido tiobarbitúrico) e/ou como uma redução nos níveis de acúmulo de gordura cavitária. [099] O termo "LDL" (ou "lipoproteína de baixa densidade") refere-se a uma lipoproteína na forma em que o colesterol é transportado na corrente sanguínea para as células e tecidos do corpo.

[100] O termo "HDL" (ou "lipoproteína de alta densidade") refere-se a uma lipoproteína na forma em que o colesterol é transportado na corrente sanguínea dos tecidos para o fígado.

[101] O termo "lipoproteínas" refere-se a macromoléculas que contêm lipídios e proteínas conhecidos como apolipoproteínas ou apoproteínas.

[102] O termo "triglicerídeos" refere-se a lipídeos que são ésteres formados por uma molécula de glicerol e três moléculas de um ou mais ácidos graxos.

[103] A expressão "oxidação plasmática" refere-se à peroxidação lipídica.

[104] O termo "Tbars" refere-se à quantificação de peroxidação lipídica e pode ser definido como substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico.

[105] Pela expressão "desenvolvimento da mucosa intestinal" entende-se que há o aumento da altura e densidade das vilosidades intestinais, as quais são renovadas constantemente pelas criptas intestinais.

[106] Pela expressão "alterações histomorfológicas intestinais" entende- se que há o aumento da profundidade das criptas ou da altura das vilosidades do trato gastrointestinal.

[107] O termo "vilosidades" ou "vilos" refere-se a vilosidades intestinais, as quais são estruturas que se protejam no lúmen intestinal.

[108] O termo "criptas" refere-se a criptas intestinais, as quais são glândulas tubulares encontradas nas fossetas localizadas entre as vilosidades.

[109] A melhora na saúde do animal promovida pela composição alimentícia da presente da invenção consiste em redução dos níveis séricos de gordura e/ou oxidação plasmática, sendo esta última proporcionada pela ação antioxidante da lignina.

[110] A melhora da saúde do animal pode ser entendida como uma redução nos níveis de LDL, HDL, triglicerídeos, oxidação plasmática ou Tbars, quando comparado a uma dieta controle negativo.

[111] Considera-se ideal que os níveis de HDL sejam superiores aos de LDL, uma vez que as lipoproteínas de alta densidade recolhem o colesterol das células e o transportam de volta ao fígado para ser reprocessado, diminuindo o colesterol em circulação.

[112] A composição alimentícia da invenção tem a capacidade de promover um aumento do ganho de peso de entre 8 e 14% e/ou um aumento do peso vivo de entre 6 e 11%.

[113] A composição alimentícia da invenção tem a capacidade de promover também uma redução na conversão alimentar de entre 9 e 20% e/ou uma redução no consumo de ração de até 16%.

[114] A composição alimentícia da invenção tem, ainda, a capacidade de promover uma redução do acúmulo de gordura cavitária de entre 10 e 40%; uma redução dos níveis sanguíneos de LDL de entre 2 e 24%; uma redução dos níveis sanguíneos de HDL de entre 8 e 24%; uma redução dos níveis de triglicerídeos de entre 13 e 34% e/ou uma redução da oxidação plasmática de entre 15 e 35%.

[115] A composição alimentícia da invenção tem a capacidade de promover um aumento na altura das vilosidades de até 24% e/ou um aumento na profundidade das criptas de entre 10 e 40%.

[116] Estas alterações histomorfológicas intestinais podem aumentar a absorção de nutrientes dos animais, otimizando a utilização de recursos alimentares.

[117] A composição alimentícia da presente invenção promove desempenho zootécnico semelhante a uma dieta controle positivo. [118] Uma dieta controle positivo pode ser entendida como uma dieta contendo aditivos alimentares normalmente utilizados como melhoradores de desempenho zootécnico, como, por exemplo, antibióticos, extratos naturais ou óleos essenciais utilizados como promotores de crescimento.

[119] Em uma modalidade da invenção, a composição alimentícia é uma composição de ração animal. Preferivelmente, a composição alimentícia é para alimentação de animais de produção e animais de companhia.

[120] Pela expressão "animais de produção" como aqui utilizada, entende-se o animal cuja finalidade da criação seja a obtenção de carne, leite, ovos, lã, pele, couro e mel ou qualquer outro produto com finalidade comercial. Como exemplos não limitativos de animais de produção pode-se citar gado, galinhas, peixes, porcos, ovelhas, abelhas, crustáceos, coelhos, patos, peru, avestruzes, entre outros.

[121] Pela expressão "animais de companhia" como aqui utilizada, entende-se o animal pertencente às espécies criadas e mantidas pelo homem para seu entretenimento, sem propósito de fornecimento de produtos ou subprodutos de interesse económico. Como exemplos não limitativos de animais de companhia pode-se citar cachorro, gato, peixes, pássaros, tartarugas, entre outros.

[122] Efeitos observados no organismo do animal, como redução do estresse oxidativo, podem ser extrapolados para o produto obtido a partir deste animal, uma vez que o produto é parte ou derivado do organismo do animal. Entretanto, uma melhora no desempenho zootécnico não está necessariamente atrelada à obtenção de um produto de origem animal melhorado.

[123] Todavia, os produtos obtidos a partir dos animais de produção alimentados com a composição alimentícia da presente invenção também apresentam o efeito antioxidante observado nos próprios animais que a consumiram. Assim, tais produtos apresentam um menor nível e velocidade de oxidação e, consequentemente, uma maior durabilidade/vida de prateleira ( shelf life ). Exemplos destes produtos são carne, leite e ovos.

[124] Devido à ingestão das composições da presente invenção pelos animais, foi verificado, por exemplo, um retardamento dos efeitos oxidativos no post mortem de carne de frango, uma redução da oxidação e do colesterol em ovos e um aumento na resistência e no peso das cascas de ovos.

[125] Foi observado na presente invenção que quanto maior a produção de ovos das galinhas que se alimentaram das composições aqui reveladas, maiores foram as espessuras das cascas dos ovos. Tal efeito foi surpreendente uma vez que se espera que quanto maior a produção de ovos por uma ave, menor é a espessura das cascas dos referidos ovos. Tal efeito inesperado representa um benefício, uma vez que cascas mais espessas são menos porosas, o que permite uma melhor proteção de trocas gasosas, possibilitando uma menor oxidação do ovo ao longo do tempo.

[126] A composição alimentícia da invenção pode ser preparada por quaisquer técnicas convencionais utilizadas na indústria de alimentos ou farmacêutica e compreender componentes adicionais amplamente empregados nessas indústrias. Assim como a composição alimentícia, a composição aditiva da invenção pode ser preparada por quaisquer técnicas convencionais utilizadas na indústria de alimentos ou farmacêutica e compreender aditivos alimentares adicionais amplamente empregados nessas indústrias.

[127] A invenção refere-se, ainda, ao uso da lignina como aditivo alimentar nas composições alimentícias e aditivas da invenção descritas acima como um substituto para os aditivos presentes no mercado.

[128] O referido uso da lignina como aditivo alimentar confere às composições alimentícias da invenção as mesmas características descritas acima.

[129] A invenção refere-se, ainda, ao uso da lignina como aditivo alimentar para a preparação de composições alimentícias ou aditivas da invenção descritas acima como um substituto para os aditivos presentes no mercado.

[130] A invenção refere-se, ainda, ao uso da composição aditiva compreendendo até 99% de lignina como aditivo alimentar para a preparação das composições alimentícias da invenção.

EXEMPLOS

[131] Os exemplos aqui apresentados são não-exaustivos, servem apenas para ilustrar a invenção e não devem ser usados como base para limitá-la.

[132] São apresentados aqui exemplos com o objetivo de demonstrar os benefícios da composição alimentícia da presente invenção, tanto para os animais quanto para os produtos derivados dos mesmos.

[133] O estudo no exemplo 1 avalia os dados de desempenho dos animais. Os parâmetros avaliados foram peso corporal e ganho de peso corporal, consumo de ração, conversão alimentar corrigida e mortalidade.

[134] O estudo no exemplo 2 avalia o rendimento de carcaça dos animais alimentados com as diferentes composições alimentícias.

[135] O exemplo 3 mostra a avaliação dos parâmetros hematológicos dos animais do estudo.

[136] No exemplo 4 são apresentados os experimentos realizados para avaliar a histomorfometria do intestino dos animais alimentados com as composições alimentícias da invenção.

[137] Para os estudos apresentados nos exemplos 1 a 4, foram utilizados 600 pintos machos e fêmeas da linhagem caipira Paraíso Pedrêz com um dia de idade, provenientes de um mesmo lote de matrizes, vacinados contra as doenças de Marek e Gumboro, originários do incubatório Aves do Paraíso, Itatiba-SP. Foi utilizado um delineamento experimental inteiramente ao acaso (DIC), com quatro tratamentos e seis repetições de 25 aves cada.

[138] Os resultados obtidos nos experimentos 1 a 4 foram tabulados e analisados utilizando análise de variância (ANOVA) com auxílio do procedimento General Lineal Model (GLM) do programa estatístico SAS (2002) e quando significativas, as médias entre os tratamentos foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Os dados de mortalidade foram transformados para raiz de (x + 0,5)/100, sendo x a porcentagem da mortalidade (Steel e Torrie, 1980).

[139] Nos exemplos 1 a 4, a dieta controle (DC) foi formulada sem inclusão de anticoccidiano ionóforo e sem nenhum outro aditivo, e as demais dietas com suplementação isolada de lignina em pó, conforme descrito a seguir:

• Tratamento 1: Dieta Controle (DC) + 1% de lignina;

• Tratamento 2: DC + 2% de lignina;

• Tratamento 3: DC + 3% de lignina; e

• Tratamento 4: Dieta Controle.

[140] A composição das rações experimentais em tais estudos apresentados nos exemplos 1 a 4 foi à base de milho, farelo de soja, fosfato bicálcico, calcário, óleo de soja, sal, Dl-metionina, vitaminas A, D3, E, K3, tiamina, riboflavina, piridoxina, B12, biotina e niacina, pantotenato de cálcio, ácido fólico, cloreto de colina, antioxidante, ferro, cobre, manganês, zinco, iodo e selênio, em concentrações condizentes com a porcentagem de nutrientes necessária para o animal, segundo a referência "ROSTAGNO, H.S. (Ed.). Tabelas brasileiras para aves e suínos: composição de alimentos e exigências nutricionais. 3^ ed. Viçosa: UFV, 2011.". A inclusão da lignina foi em substituição a material inerte presente na dieta controle, sendo que todas as dietas foram isonutritivas, formuladas para atender as exigências de criação de frangos Caipira em três fases: inicial (1 a 21 dias), crescimento (21 a 35 dias) e final (35 a 63 dias). Independente da fase, todas as rações foram batidas no mesmo dia, e fornecidas de forma farelada.

[141] O exemplo 5 representa um estudo, dividido em dois experimentos, acerca do uso de lignina na alimentação de frangos de corte. No primeiro experimento do estudo, foram avaliados dados de desempenho e a digestibilidade do extrato etéreo, proteína e dos aminoácidos. No segundo experimento, foram avaliados dados de desempenho, características de carcaça, matéria mineral óssea, morfometria intestinal, níveis de triglicérides e colesterol sanguíneo e de qualidade de carne.

[142] Por fim, o exemplo 6 representa um estudo acerca da utilização de lignina em dietas para aves de postura, indicando desempenho nas referidas aves e vantagens nas características dos ovos por elas produzidos.

[143] Os principais efeitos visando o aumento da vida de prateleira dos produtos de origem animal podem ser observados nas avaliações de envelhecimento, tanto da carne do frango, quanto dos ovos. Nesse sentido, um dos parâmetros avaliados nos exemplos 5 e 6 foi o Tbars, o qual visa quantificar os produtos da oxidação lipídica reativa com o ácido tiobarbitúrico.

Exemplo 1

[144] Este estudo mostra a avaliação de desempenho dos animais que receberam as composições alimentícias com lignina e a composição alimentícia de dieta controle.

[145] As avaliações de desempenho foram realizadas no Polo Leste Paulista. As aves foram alojadas em galpão de alvenaria da APTA Regional do Leste Paulista, com dimensões de 23 m de comprimento e 9 m de largura, equipado com 24 boxes de 1,75 x 1,65 m com capacidade para 25 aves cada. Os boxes foram equipados com campânulas elétricas individuais, comedouros e bebedouros independentes e próprios para cada fase do crescimento das aves. O galpão era construído em alvenaria, com piso de terra batida, ventiladores, cobertura de telha de barro, muretas laterais de alvenaria (0,5 m de altura), tela lateral e cortinas plásticas móveis. Foram utilizadas 24 unidades experimentais. Cada unidade foi forrada com cama nova de maravalha espalhada uniformemente a uma altura de 10 cm, aproximadamente.

[146] Cada unidade experimental foi equipada com um comedouro tubular semi-automático infantil (metálico com bandeja plástica, capacidade 10 kg), bebedouro tipo nipple, lâmpada infravermelho de 250 watts usada como fonte de aquecimento; no décimo dia de criação das aves, os boxes foram equipados com comedouro tubular adulto (metálico com bandeja plástica, capacidade 20 kg).

[147] As aves foram retiradas das caixas ao acaso, pesadas em lotes de 25 aves e distribuídas nas unidades experimentais.

[148] Até o 14⁵ dia de idade o controle da temperatura dentro dos boxes foi feito através de campânula elétrica, mantendo a temperatura dentro da faixa de conforto térmico das aves. Após esse período e até o final da criação das aves (14 a 63 dias), o manejo de aquecimento do galpão foi realizado de acordo com a temperatura ambiente e o comportamento das aves, sendo a climatização feita por meio de ventiladores (pressão positiva) e manejo das cortinas, que passaram a permanecer abertas durante o período diurno e eventualmente fechadas na ocorrência de chuvas ou no período noturno, se a previsão de temperatura fosse inferior a 15 °C. A temperatura ambiente foi aferida através de termómetro de máxima e mínima diariamente.

[149] O programa de iluminação utilizado foi o de 23 horas diárias de luz e 1 hora de escuro (no final do dia), completando-se a luz natural com luz artificial. [150] As aves mortas foram retiradas diariamente e a mortalidade registrada através do número da unidade experimental, peso da ave e dia da ocorrência. Aves e sobra de ração foram pesadas semanalmente, desde o dia do alojamento até o final do período experimental, aos 63 dias de criação. Foram utilizadas balanças com capacidade de 15,0 kg para pesagens iniciais e de aves mortas, e 150 kg para as demais pesagens semanais. O comedouro era sacudido pelo lado de fora dos boxes, duas vezes ao dia, e a retirada de aves mortas era feita com um puxador. A entrada de ração foi feita em baldes específicos para cada tratamento, seguindo a ordem dos tratamentos (iniciando pelo controle).

[151] Água e ração foram fornecidas od libitum durante todo o período de criação. O programa de alimentação utilizado foi composto por três fases de arraçoamento, sendo as fases inicial (1 a 21 dias), crescimento (21 a 35 dias) e final (35 a 63 dias). As rações foram oferecidas à vontade na forma farelada. Água foi fornecida à vontade durante todo período experimental.

[152] Os dados de desempenho foram obtidos e analisados nos períodos acumulados. Os seguintes dados foram coletados e/ou calculados.

[153] Peso corporal e ganho de peso corporal: todas as aves de cada parcela experimental foram pesadas com 1, 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56 e 63 dias de idade para cálculo de peso corporal médio. O ganho de peso foi calculado em períodos acumulados, através da diferença entre o peso das aves no início de cada semana e o peso das aves ao final da mesma.

[154] Consumo de ração: o consumo de ração foi determinado através da diferença entre a quantidade de ração fornecida no início e as sobras existentes ao final de cada período semanal, o resultado obtido foi dividido pelo número médio de aves de cada parcela experimental.

[155] Conversão alimentar corrigida: a conversão alimentar foi calculada dividindo-se o peso total da ração consumida pelas aves da parcela, expressa em quilogramas, pelo peso total das aves no mesmo período também expresso em quilogramas. Foi considerado, no cálculo, o peso e o consumo de ração das aves mortas em cada período avaliado.

[156] Mortalidade: a mortalidade, bem como o peso das aves mortas foram coletados diariamente e a partir desse dado foi calculado o resultado que se dá pelo percentual de aves mortas ao final de cada período em relação ao número inicial de aves alojadas.

[157] Os resultados médios de desempenho no período de criação de 1- 21 dias de idade são observados na Tabela 1. Não houve interação entre tratamentos e sexo.

Tabela 1: Desempenho de frangos tipo Caipira aos 21 dias de idade submetidos às dietas com diferentes níveis de inclusão de lignina

GPM = ganho de peso médio; CA = conversão alimentar; PV = peso vivo; Mort = Mortalidade;

CRM = consumo de ração médio; e a, b, c = médias para cada fator seguidas por letras distintas na linha diferem entre si pelo Teste de Tukey (P<0,05).

*CV: coeficiente de variação.

[158] Observou-se o efeito dos tratamentos nos resultados médios das variáveis ganho de peso médio (GPM), conversão alimentar (CA), peso vivo (PV), e consumo de ração médio (CRM) (Tabela 1). As dietas contendo lignina proporcionaram melhores resultados quando comparados às dietas controle de forma isolada. As aves que receberam 1% de lignina consumiram menos ração, obtiveram melhor conversão alimentar e ganho de peso médio e peso vivo maior ao final dos 21 dias. [159] Os resultados médios de desempenho no período de criação de 21- 42 dias de idade são observados na Tabela 2.

Tabela 2: Desempenho de frangos tipo colonial dos 21 aos 42 dias de idade submetidos às dietas com diferentes níveis de inclusão de lignina

GPM = ganho de peso médio; CA = conversão alimentar; PV = peso vivo; Mort = Mortalidade e CRM = consumo de ração médio.

*CV: coeficiente de variação.

[160] Contrariamente aos resultados observados com a aditivação da ração no período de criação inicial das aves, a inclusão de lignina na dieta das aves no período de criação de 21 a 42 dias não alterou as variáveis de desempenho estudadas. Isso acontece porque nos primeiros dias de vida os animais possuem um sistema imune deficiente, sendo mais propício que a composição alimentícia da invenção auxilie na defesa do sistema imune e, consequentemente, apresentando diferenças visíveis nas variáveis. Para o período de criação de 21 a 42 dias, o sistema imune das aves já estava consolidado e, portanto, os animais não foram desafiados - por isso não apresentou diferenças.

[161] Os resultados médios de desempenho no período de criação de 42- 63 dias de idade são observados na Tabela 3. Não houve interação entre tratamentos e sexo.

Tabela 3: Desempenho de frangos tipo colonial dos 42 aos 63 dias de idade submetidos às dietas com diferentes níveis de inclusão de lignina

*CV: coeficiente de variação.

[162] Com relação ao ganho de peso médio, as aves que receberam a ração aditivada com 1, 2 e 3% de lignina tiveram um maior ganho de peso em comparação com o controle. A conversão alimentar foi melhor no grupo de aves que receberam a ração aditivada com 1 e 2% de lignina e o peso vivo das aves que receberam ração aditivada com 2% de lignina foi superior aos outros três grupos estudados.

[163] Os resultados médios de desempenho no período total de criação de 1-63 dias de idade encontram-se na Tabela 4. Não houve interação entre tratamentos e sexo.

Tabela 4: Desempenho de frangos tipo colonial aos 63 dias de idade submetidos às dietas com diferentes níveis de inclusão de lignina

*CV: coeficiente de variação.

[164] Como explicado acima, nos primeiros dias de vida os animais possuem um sistema imune deficiente, sendo mais propício que a composição alimentícia da invenção auxilie na defesa do sistema imune e, consequentemente, apresentando diferenças visíveis nas variáveis. Dessa forma, o desempenho das aves foi melhor no período de 21 dias. Para os períodos de criação compreendidos de 21 a 63 dias, o sistema imune das aves já está consolidado e, portanto, os animais não são desafiados.

Exemplo 2

[165] Este estudo mostra os efeitos das composições da presente invenção sobre o rendimento de carcaça e órgãos vitais dos animais.

[166] O manejo das aves e do local do experimento foram como descritos no exemplo 1.

[167] As avaliações de rendimento de carcaça foram realizadas no PRDTA Leste Paulista. Aos 63 dias de criação foram anilhadas 2 aves por unidade experimental (um macho e uma fêmea), totalizando 12 aves/tratamento. As aves foram submetidas a jejum de oito horas e transportadas em caixas plásticas até o local do procedimento, onde foram abatidas por meio de sangria, após insensibilização por choque elétrico. Os cortes obtidos foram: carcaça eviscerada (sem pés, pescoço e cabeça), peito com osso, pernas (coxa + sobrecoxa), dorso e asas. Para cálculo de rendimento de carcaça foi tomado como base o peso vivo na plataforma, imediatamente antes do abate, e o peso da carcaça eviscerada e resfriada, sem cabeça, pescoço e pés. Os rendimentos de peito e pernas (coxa e sobrecoxa) foram calculados em relação ao peso da carcaça eviscerada.

[168] Houve efeito significativo de tratamento para % de gordura abdominal, as demais características não apresentaram efeitos significativos para os tratamentos (Tabelas 5.1 e 5.2). Os rendimentos foram calculados como a porcentagem relativa ao peso vivo ((peso da parte x 100)/peso vivo).

Tabelas 5.1 e 5.2: Rendimento de carcaça (%) e órgãos vitais de frango tipo caipira machos (M) e fêmeas (F) aos 63 dias de idade submetidos às dietas com diferentes níveis de inclusão de lignina.

Tabela 5.1

PV = peso vivo; PCar = peso da carcaça eviscerada; RC= rendimento de carcaça; RAsa = rendimento de asa; RPei = rendimento de peito; RPer = rendimento de pernas e a e b = médias para cada fator seguidas por letras distintas na linha diferem entre si pelo Teste de Tukey (P<0,05).

*TRAT*S = interação tratamento e sexo.

**CV: coeficiente de variação.

Tabela 5.2

RDorso= rendimento de dorso; RCor= rendimento de coração; RMoela = rendimento de moela; RFig= rendimento de fígado; RGor=rendimento de gordura abdominal e a e b = médias para cada fator seguidas por letras distintas na linha diferem entre si pelo Teste de Tukey (P<0,05).

*TRAT*S = interação tratamento e sexo.

**CV: coeficiente de variação.

[169] Apesar do maior (P<0,05) peso vivo ao abate para os machos, o sexo dos animais não influenciou (P>0,05) no valor observado para o rendimento de carcaça, coração e asa. Os resultados de rendimento de corte responderam conforme o esperado, onde as fêmeas apresentaram maiores resultados para rendimento de moela, gordura, fígado e peito, enquanto os machos apresentaram melhor rendimento de dorso e pernas, independente da ação da suplementação com lignina.

[170] Não houve efeito significativo da interação tratamento X sexo.

[171] Os resultados obtidos demonstram que os animais que receberam a ração aditivada com lignina não apresentaram rendimento de carcaça melhor. Todavia, esses animais apresentaram menor porcentagem de gordura abdominal em comparação aos animais que receberam a dieta controle. Dentre os animais que receberam a ração aditivada com lignina, aqueles que receberam 1% de lignina tiveram uma menor porcentagem de gordura. Um menor acúmulo de gorduras cavitárias está diretamente relacionado com melhores desempenhos, corroborando com os dados de desempenho obtidos nos primeiros 21 dias de experimento (exemplo 1).

Exemplo 3

[172] Este estudo mostra os efeitos das composições da presente invenção sobre os parâmetros hematológicos dos animais.

[173] O manejo das aves e do local do experimento foram como descritos no exemplo 1.

[174] Por ocasião da sangria, no abate, o sangue de 1 ave por repetição foi retirado, colocado em tubos heparinizados, centrifugados e congelados para posterior análise de Tbars, LDL, HDL e triglicerídeos.

[175] Os resultados obtidos para os parâmetros sanguíneos estão apresentados na Tabela 6.

Tabela 6: Parâmetros sanguíneos de frango tipo coloniais machos (M) e fêmeas (F) aos 63 dias submetidos a dietas com diferentes níveis de inclusão de lignina

a, b e c = médias para cada fator seguidas por letras distintas na linha diferem entre si pelo

Teste de Tukey (P<0,05)

*T*S: interação tratamento e sexo

**CV: coeficiente de variação.

[176] Os resultados obtidos com relação à interação de HDL com o tratamento estão apresentados na Tabela 7.

Tabela 7: Desdobramento da interação para HDL: tratamento dentro de sexo

a e b = médias para cada fator seguidas por letras distintas na linha diferem entre si pelo Teste de Tukey (P<0,05).

[177] As concentrações séricas de triglicerídeos, Tbars, colesterol LDL e colesterol HDL foram influenciadas (P>0,05) pelos tratamentos, aos 63 dias de idade (Tabela 6). Utilizando como referência a faixa de variação de triglicerídeos (136 a 164) e LDL (72 a 130), descrita por González et al. (2001), para frangos sadios, conclui-se que os valores encontrados podem ser considerados normais, independente do tratamento, mas a inclusão de lignina na ração proporcionou níveis menores de colesterol LDL, HDL, triglicerídeos e Tbars no sangue das aves. Os valores de colesterol HDL e LDL apresentados foram maiores para os machos, mas no geral, indicam que os frangos, tanto machos como fêmeas, não apresentaram condições deletérias de saúde.

[178] Com relação à oxidação plasmática (Tbars), os tratamentos com menor porcentagem de lignina apresentaram maior concentração de malonaldeído/mL de sangue, comprovando neste caso, a propriedade antioxidante da lignina que proporcionou uma redução na concentração de peróxidos no organismo. Apesar disso, não houve diferença entre os tratamentos com adição de lignina no que se refere à quantidade do resíduo utilizada.

Exemplo 4

[179] Este estudo teve como objetivo avaliar a histomorfometria do intestino dos animais alimentados com as composições alimentícias da invenção.

[180] O manejo das aves e do local do experimento foram como descritos no exemplo 1.

[181] As avaliações da histomorfometria do intestino foram realizadas no Laboratório de Nutrição de Aves, da FMVZ/UNESP, campus de Botucatu, conforme descritos a seguir.

[182] Na ocasião do abate, foram coletados fragmentos de duodeno, íleo e jejuno para confecção de lâminas histológicas. Cada segmento intestinal correspondeu a uma lâmina. A altura dos vilos e profundidade das criptas foram determinados por meio de imagens, obtidas em microscópio óptico com objetiva planapocromática 10X. As imagens foram capturadas com câmera acoplada ao microscópio e transferidas para um analisador de imagem (Leica). Vinte leituras de altura de vilos e profundidade de cripta foram realizadas por lâmina. A altura de vilo foi medida da região apical à região basal, que corresponde a porção superior das criptas. As criptas foram medidas da base até a região de transição entre a cripta e os vilos.

[183] Os resultados de histomorfometria intestinal de frangos aos 63 dias de idade estão apresentados nas Tabelas 8.1, 8.2 e 8.3.

Tabelas 8.1, 8.2 e 8.3: Altura de vilosidade (AV), profundidade de cripta (PC) e relação vilo:cripta (VC) dos segmentos do intestino delgado de frangos de corte aos 63 dias de idade

Tabela 8.1

Jejuno

a e b = médias para cada fator seguidas por letras distintas na linha diferem entre si pelo Teste de Tukey (P<0,05)

Tabela 8.2

Tabela 8.3

[184] Nas porções do jejuno da mucosa intestinal das aves analisadas, os animais que receberam ração aditivada com lignina apresentaram maiores alturas de vilosidade e profundidades de cripta (P>0,05), sendo que os machos apresentaram valores superiores àqueles observados para as fêmeas. Já nas porções do íleo e do duodeno da mucosa intestinal das aves analisadas, os animais que receberam ração aditivada com lignina apresentaram maiores profundidades de cripta (P>0,05) e, para os grupos que receberam ração aditivada com 2 e 3% de lignina, os valores de altura de vilosidade também foram maiores.

[185] Esses achados indicam uma maior absorção dos nutrientes pelas aves.

[186] Não foram observadas evidências estatísticas (P>0,05) de efeito trófico dos tratamentos empregados em nível de mucosa do íleo, bem como de interações entre tratamentos e o sexo das aves. Não houve alteração na relação vilo:cripta.

[187] É possível de se observar que a adição de lignina às composições alimentícias foi benéfica, levando a melhorias no desempenho e saúde dos animais, além da otimização dos recursos alimentares. Assim, a lignina apresenta-se como um substituto a antibióticos melhoradores de desempenho e outros tipos de aditivos zootécnicos.

Exemplo 5

[188] O presente estudo tem como objetivo avaliar o efeito da suplementação de lignina na dieta de frangos de corte no período de 1 a 42 dias de idade.

[189] As avaliações foram realizadas na Universidade de São Paulo (USP), Faculdade de Zootecnia e Engenharia de Alimentos, Departamento de Zootecnia, campus de Pirassununga.

[190] O presente estudo foi dividido em dois experimentos (denominados a seguir como experimentos I e II).

[191] No experimento I, foram utilizados 490 pintos de corte machos da linhagem Cobb 500, alojados em gaiolas metabólicas, que foram distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, com 5 tratamentos e 14 repetições de 07 aves cada, totalizando 70 parcelas experimentais. Os 5 tratamentos realizados são: Dieta controle positivo com antibiótico 0% de lignina (Tl); Dieta controle negativo: sem adição de lignina (T2); Dieta controle negativo + 1% de lignina (T3); Dieta controle negativo + 2% de lignina (T4); Dieta controle negativo + 3% de lignina (T5).

[192] As dietas experimentais foram à base de milho e farelo de soja e são apresentadas na Tabela 9:

Tabela 9: Dietas experimentais

[193] As aves foram alimentadas com as dietas experimentais desde o primeiro dia de idade, sendo que no 18° dia foi iniciada a coleta de excretas experimentais, as quais foram colhidas durante 3 dias. Após o período de coleta, as excretas foram homogeneizadas e congeladas para armazenamento. Foi retirada uma amostra de 200 gramas, de cada repetição, a qual foi seca em estufa de ventilação forçada e então a amostra foi moída e enviada para laboratório para a sua análise bromatológica. Foram calculadas a digestibilidade do extrato etéreo, proteína e aminoácidos.

[194] Já no experimento II, foram utilizados 1.300 pintos de corte machos da linhagem Cobb 500, alojados em gaiolas metabólicas, que foram distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado, em boxes experimentais, com 5 tratamentos e 20 repetições de 13 aves cada, totalizando 100 parcelas experimentais.

[195] Os tratamentos foram os mesmos do experimento anterior, sendo que os níveis de lignina propostos foram alcançados em substituição do inerte presente nas dietas, ocorrendo da mesma forma com a dieta controle positivo com a inclusão de 50g/ton. Todos os tratamentos foram amostrados após as batidas (200g de cada) e enviadas para análises laboratoriais (MS, EE, PB, energia bruta).

[196] As aves foram alojadas em boxes durante todo o período experimental, sendo a água e ração oferecidas od libitum e o programa de iluminação adotado foi de 24 horas de luz. As dietas experimentais são apresentadas na Tabela 10:

Tabela 10: Dietas experimentais

Inicial resciment Final

Milho 49,61 53,27 56,42

Farelo de s 37,95 33,18 30,54

Óleo de so 5,12 6,57 6,59

Inerte 3,00 3,00 3,00

Fosfato bicál 1,87 1,50 1,11

Calcário 0,94 0,85 0,70

Sal 0,46 0,43 0,41

Metionin 0,40 0,38 0,35

Lisina 0,35 0,37 0,37

Treonina 0,15 0,16 0,20

Vitamina 0,10 0,10 0,10

Minerais 0,05 0,05 0,05

Lignina 0,00 0,00 0,00

Total

100,00

EM, kcal/kg 3.050 3.200 3.250

PB, % 22,20 20,62 19,54

Ca, % 0,96 0,82 0,66

Pd, % 0,46 0,38 0,31

Lisd, % 1,34 1,24 1,24

AASd, %

0,98

0,91

Tred, % 0,87 0,82 0,76

Vald, % 0,89 0,95 0,93

FB, %

3,21

3,00

2,91

[197] Para promover o desafio sanitário, as aves foram vacinadas contra coccidiose, utilizando 10 vezes a dose recomendada para provocar um desafio experimental. Da mesma forma, as aves foram criadas em cama reutilizada vinda de uma granja comercial e, aos 11 dias de idade, foi feito o desafio via água de bebida. Para tanto foi feita uma solução com 1 Kg de cama reutilizada misturada à 4 litros

[198] Para análise de cinzas ósseas, aos 21 e 42 dias de idade, nove aves por tratamento foram submetidas à coleta da tíbia esquerda. Foram retirados os resíduos de carne e, posteriormente, as tíbias esquerdas foram cobertas individualmente com gaze e secas durante 12 horas em estufa a 105°C. Em seguida, as tíbias foram colocadas em recipientes fechados contendo 90% de éter etílico e 10% de metanol para serem desengorduradas. Após dois dias os ossos foram colocados em nova solução de 90% de éter etílico e 10% de metanol por 24 horas, secos em estufa a 105°C e pesados, com auxílio de balança de precisão (0,0001g) para cálculo da matéria seca desengordurada. Os ossos foram incinerados na mufla em temperatura de 600°C durante 24 horas para determinação das cinzas na matéria seca desengordurada.

[199] Em relação aos parâmetros sanguíneos dos animais, aos 21 e 42 dias, foram coletadas amostras de sangue de uma ave com peso próximo ao peso médio da parcela (5% a mais ou menos da média), de 8 parcelas por tratamento, através de tubos vacutainer heparinizados. As amostras foram centrifugadas e congeladas para posterior análises de HDL, LDL, HLDL, triglicerídeos e oxidação lipídica (Tbars).

[200] Com relação às características intestinais dos animais, aos 21 e 42 dias de idade, uma ave com peso médio próximo ao peso médio da parcela (5% a mais ou menos da média) de 8 parcelas por tratamento foi abatida para coleta do duodeno, jejuno e íleo. As amostras foram coletadas, lavadas com água destilada e introduzidas em frascos contendo Bouin por 24 horas para fixação dos tecidos e posterior análise histológica. As características morfométricas avaliadas foram o comprimento das vilosidades intestinais, profundidade de cripta e relação vilosidade/cripta. O comprimento das vilosidades foi medido a partir da extremidade apical da vilosidade até a junção das vilosidades com a cripta, e a profundidade das criptas foi definida como a profundidade da invaginação entre as vilosidades adjacentes.

[201] Para determinação do desemprenho e rendimento, as aves e as sobras de ração foram pesadas aos 7, 21, 35 e 42 dias de idade, para cálculo do peso médio (kg), ganho de peso (kg), consumo de ração (kg) e conversão alimentar (kg/kg). A mortalidade foi anotada diariamente para correção do consumo de ração e cálculo da viabilidade (100 - mortalidade, %). Com base nestas informações, foi calculado também o fator de produção (FP = (GP (kg) x viabilidade (%) / CA x idade) x 100).

[202] Aos 42 dias de idade, 2 aves por repetição foram abatidas para a estimativa do rendimento de carcaça e gordura abdominal.

[203] Para avaliar a qualidade da carne, após o abate, foram coletados 2 peitos de 5 parcelas de cada tratamento, a pele foi retirada e desossados. De cada peito foi retirado 4 amostras de 100 gramas, sendo uma utilizada para realização das análises de colesteróis, e três para análise de Tbars. As amostras foram embaladas em bandejas individuais de polietileno expandido, cobertas com filme plástico transparente e ficaram em temperatura entre 1 e 3 graus durante 0, 7 e 14 dias. Ao final de cada período foram realizadas as análises.

[204] Para o experimento I, os resultados de desempenho até 21 dias das aves suplementadas com diferentes níveis de lignina na dieta são apresentados na Tabela 11. Não foram observadas diferenças entre os tratamentos para o consumo de ração (P>0,439). As aves que receberam a dieta com a inclusão de 1% de lignina na dieta apresentaram estatisticamente o mesmo ganho de peso e a mesma conversão alimentar que as aves do tratamento controle positivo, com o uso do antibiótico melhorador de desempenho (P<0,001). Entretanto, a inclusão de níveis superiores a 1% de lignina na dieta, resultaram em uma diminuição no desempenho das aves.

Tabela 11: Desempenho de frangos de corte alimentados com lignina

[205] Com relação à digestibilidade dos nutrientes no experimento I, pôde-se observar um efeito positivo com a inclusão de 1% de fibra na dieta (vide Tabela 12). Observou-se uma melhoria de 1,65% na digestibilidade da energia e de 1,5% na digestibilidade da proteína e de aminoácidos, resultados estes que provavelmente colaboraram para que as aves apresentassem um desempenho satisfatório no período de 1 a 21 dias de idade.

Tabela 12: Digestibilidade de nutrientes de frangos de corte alimentados com lignina na dieta

[206] Em relação ao experimento II, as características de desempenho, de carcaça e dos órgãos digestivos de aves alimentadas com diferentes níveis de lignina na dieta são apresentados nas Tabelas 13 a 18 a seguir.

[207] Através desses dados obtidos no experimento II, observou-se que no período de 1 a 7 dias (Tabela 13) não ocorreram diferenças estatísticas para o peso final, ganho de peso, consumo de ração e conversão alimentar para as aves alimentadas com as dietas dos diferentes tratamentos. Já no período de 1 a 21 dias de criação (Tabela 14), observou-se que as aves do tratamento controle negativo (CN) apresentaram menor consumo e pior conversão alimentar quando comparada com as aves do tratamento controle positivo (CP). Entretanto, as aves alimentadas com a inclusão de 2% de lignina na dieta apresentaram, estatisticamente, o mesmo peso, mesmo ganho de peso e conversão alimentar das aves alimentadas com as aves CP. Estes resultados diferem do que foi encontrado no experimento I, pelo fato que no experimento anterior as aves foram criadas em gaiolas e sem a presença de um desafio sanitário como foi o observado neste trabalho. No período de 1 a 35 dias (Tabela 15), observa-se que as aves CN apresentaram o pior peso final e ganho de peso. Como demonstrado no período anterior, as aves que receberam 2% de lignina na dieta apresentaram maior peso, maior ganho de peso e melhor conversão alimentar que os demais tratamentos. Na Tabela 16, a qual apresenta os dados do período experimental total (1 a 42 dias), pode-se observar que, confirmando os resultados obtidos nos períodos anteriores, o desempenho das aves alimentadas com 2% de lignina proporcionou o melhor desempenho, comparável com o desempenho das aves CP. Não ocorreram diferenças estatísticas para o rendimento de carcaça entre as aves alimentadas com as dietas dos diferentes tratamentos, contudo, a inclusão de lignina na dieta diminuiu a percentagem de gordura (Tabela 17). Pela Tabela 18, nota-se que a porcentagem da moela não foi afetada pelos tratamentos. Entretanto, a porcentagem e comprimento do intestino foi maior em aves que receberam lignina na dieta, quando comparado com aves dos tratamentos CP e CN.

Tabela 13: Desempenho de frangos de corte alimentados com lignina (1 a 7 dias)

Tabela 14: Desempenho de frangos de corte alimentados com lignina (1 a

21 dias)

Tabela 15: Desempenho de frangos de corte alimentados com lignina (1 a

35 dias)

Tabela 16: Desempenho de frangos de corte alimentados com lignina (1 a 42 dias)

Tabela 17: Características de carcaça de frangos de corte alimentados com lignina (1 a 42 dias)

Tabela 18: Características dos órgãos digestivos de frangos de corte alimentados com lignina

[208] Ademais, quando os parâmetros sanguíneos - indicados na Tabela 19 adiante - são observados, nota-se que nenhuma característica avaliada foi influenciada pelo tratamento aos 21 dias de idade. A ausência de diferenças estatísticas nesta idade pode ter ocorrido em função do período de fornecimento de lignina na dieta dos animais, o qual pode não ter sido o suficiente para promover as diferenças entre os tratamentos. Todavia, ao observar estas mesmas características aos 42 dias de idade, verifica-se que há uma redução nos níveis de colesterol, HDL e LDL sanguíneos quando adicionamos lignina na dieta de frangos de corte, não ocorrendo variações para os níveis de triglicérides e de VLDL.

Tabela 19: Parâmetros sanguíneos de frangos de corte alimentados com lignina na dieta

[209] Com relação ao índice de Tbars (Tabela 20 abaixo) foi observado um aumento no índice com o aumento no tempo de estocagem. Entretanto, dentro de uma mesma data de estocagem, o uso de lignina na dieta aumentou os valores deste parâmetro. Tabela 20: índice de Tbars do peito de frangos de corte alimentados com lignina

[210] Como pode ser observado na Tabela 21, não houve diferenças estatísticas na matéria mineral de aves dos diferentes tratamentos avaliados:

Tabela 21: Matéria mineral óssea (%) de frangos de corte alimentados com níveis de lignina

[211] Avaliando os dados de morfometria intestinal apresentados na Tabela 22 a seguir, não foram observadas diferenças estatísticas para a morfologia intestinal do duodeno e jejuno com 21 dias de idade. Entretanto, o uso de 3% de lignina na dieta diminuiu a relação AV:PC no íleo das aves. Um maior comprimento das vilosidades intestinais em relação à profundidade de cripta está correlacionado com a melhora na saúde intestinal, proporcionando melhor uniformidade e integridade da mucosa, além de proporcionar maior absorção de nutrientes, devido ao aumento da superfície de absorção. Com a idade de 42 dias, o uso de lignina diminuiu a relação AV:PC no duodeno. Entretanto, a maior profundidade de cripta foi observada em aves que receberam 2% de lignina na dieta para jejuno e íleo e 1% para duodeno. Tabela 22: Altura de vilosidades (AV, mm), profundidade de criptas (PC, mm) e sua relação (AV:PC) de intestinos de frangos de corte alimentados com lignina

[212] A partir do presente estudo (dados dos experimentos I e II), foi possível concluir que há um grande potencial de uso da lignina na alimentação de frangos de corte com a melhoria do desempenho e na digestibilidade dos ingredientes.

[213] Pela melhora apresentada no desempenho e nas condições em que foi realizado o estudo, pôde-se observar que o uso de 2% de lignina na dieta de frangos de corte se apresenta como uma ferramenta que pode ser utilizada na substituição ao uso de antibióticos melhoradores de desempenho, na produção avícola.

[214] Outra grande informação encontrada neste estudo foi a redução de colesterol e LDL na corrente sanguínea dos animais.

Exemplo 6

[215] O presente estudo tem como objetivo avaliar a utilização de lignina em dietas para aves de postura. Como será detalhadamente mostrado a seguir, o estudo indica tanto uma melhora no desempenho nas aves, como vantagens nas características dos ovos por elas obtidos.

[216] As avaliações foram realizadas na Universidade Estadual Paulista (UNESP), Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ), Departamento de Produção Animal, campus de Botucatu.

[217] Para a avaliação, galinhas poedeiras comerciais foram alojadas em um sistema convencional, em aviário californiano, com gaiolas metálicas com dimensões de 1,00 m de comprimento x 0,45 m de profundidade x 0,40 m de altura, divididas em 2 compartimentos, onde foram alojadas 4 aves por compartimento, totalizando 8 aves por gaiola. As gaiolas foram equipadas, individualmente, com comedouros metálicos e bebedouros tipo nipple. Para este experimento foram utilizadas 384 aves da linhagem H&N Nick Chick.

[218] As 384 aves do presente estudo receberam diferentes tratamentos, os quais são classificados da seguinte maneira:

TI - Dieta sem inclusão de lignina (96 aves);

T2 - Dieta com inclusão de 0,5% de lignina (96 aves);

T3 - Dieta com inclusão de 1,0% de lignina (96 aves); e

T4 - Dieta com inclusão de 1,5% de lignina (96 aves).

[219] O período experimental foi subdividido em 4 ciclos de 21 dias, totalizando 84 dias experimentais, quando as aves estavam entre 59 semanas a 71 semanas de vida. Nos três últimos dias de cada período experimental foram coletados 72 ovos por tratamento, totalizando 288 ovos por ciclo de 21 dias. Estes ovos foram utilizados para a avaliação do peso dos ovos, gravidade específica, porcentagem de gema, porcentagem de albúmen, porcentagem e resistência da casca.

[220] Também foram avaliadas as características de qualidade da mucosa intestinal, a fim de verificar possíveis alterações na capacidade absortiva. Para isso, foram coletadas porções do intestino delgado, segmentos do duodeno, jejuno e íleo, para a avaliação da altura de vilosidade, profundidade da cripta e relação vilosidade x cripta.

[221] Desta forma, foram eutanasiadas 48 aves (12 por tratamento), no início do experimento e 48 aves (12 aves por tratamento), no final do experimento, sendo confeccionadas 288 lâminas histológicas. No início do período experimental, também foram coletados sangue e ovos de 48 aves para análise dos valores de HDL (lipoproteína de alta densidade) e LDL (lipoproteína de baixa densidade), Colesterol total e Tbars (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico - nmol MDA/mL). Ao final do experimento esta avaliação foi repetida para fins de comparação, utilizando-se 12 aves por tratamento.

[222] Ovos foram coletados ao final do último ciclo experimental e armazenados por até 30 dias para avaliações de qualidade, denominadas vida de prateleira. Para esta avaliação, a cada 10 dias verificou-se a qualidade dos ovos por meio de gravidade específica, resistência da casca, porcentagens de casca, albúmen e gema, colesterol total e Tbars, o que permitiu avaliar quanto a inclusão de lignina nas dietas das aves garantiu a qualidade dos ovos.

[223] Ao final de cada ciclo experimental avaliou-se o desempenho produtivo dos animais, por meio das seguintes análises:

- Consumo de ração (g/ave/dia): toda vez que a ração foi distribuída às aves, as mesmas foram pesadas e, ao final de cada semana, pesou-se a sobra nos comedouros, calculando-se assim o consumo semanal de ração.

- Produção de ovos (%): todos os dias os ovos foram coletados e a produção anotada em ficha específica. Assim, pôde-se calcular a porcentagem de ovos produzidos no período de 21 dias em função do número de aves alojadas no experimento.

- Peso dos ovos (g): os ovos coletados diariamente foram pesados em bandejas de 30 ovos, descontando o peso da bandeja. Assim, pôde-se calcular o peso médio dos ovos produzidos a cada período de 21 dias.

- Viabilidade (%): anotou-se a mortalidade das aves sempre que isso ocorreu. Desta forma, foi possível calcular a viabilidade do lote, por período de 21 dias (100 - mortalidade = viabilidade).

- Conversão alimentar: uma vez que os pesos dos ovos, o número de ovos produzidos e o consumo de ração pelas aves foram obtidos, foi possível calcular a conversão alimentar por quilograma de ração consumida e por dúzia de ovos produzidos.

[224] Avaliou-se, ainda a qualidade dos ovos obtidos pelas aves do presente experimento, por meio dos seguintes critérios:

- Gravidade específica: para esta avaliação foram elaboradas cinco soluções salinas com densidades de 1,060, 1,070, 1,080, 1,090 e 1,100 e colocadas em ordem crescente em recipientes identificados. Primeiramente, os ovos foram colocados no recipiente de 1,060, e assim sucessivamente, até que os ovos flutuassem na solução. A gravidade específica do ovo foi representada pela solução de menor densidade onde este emergiu.

- Resistência da casca à quebra (kgf): esta avaliação foi realizada utilizando- se o texturômetro TA.XT plus Texture Anolyser equipado com a sonda de ruptura de 75 mm (P/75), calibrado para velocidade de teste de 1 mm/segundo de descida. O aparelho marca a força necessária para quebrar a casca dos ovos, a qual foi expressa em kfg/cm².

- Porcentagem de gema e de albúmen : a porcentagem de gema foi obtida considerando-se o peso total do ovo e o peso da gema e a mesma medida foi realizada para albúmen, conforme equações abaixo:

- Porcentagem de casca: a porcentagem de casca foi obtida considerando- se o peso total do ovo e o peso da casca, o qual foi medido após as cascas serem secas em estufa a 60⁵C por 3 dias. A equação abaixo expressa essa medida:

Pcasca

%c x lOO

Povo

- Ovos sujos (%): todos os dias, durante as colheitas de ovos, foram anotados os ovos com sujidades na casca. Assim, pôde-se estimar a porcentagem de ovos sujos em cada tratamento.

[225] Os dados das análises indicadas acima obtidos no presente estudo foram submetidos ao pacote estatístico SAS 9.2, para Análise de Variância, e as médias comparadas pelo Teste de Tukey (p<0,05). Os dados de produção e qualidade de ovos também foram submetidos à avaliação de regressão (p<0,05), com o objetivo de estimar o melhor nível de inclusão de lignina.

[226] A figura 02 representa um gráfico que ilustra os dados de viabilidade para os tratamentos TI a T4 do presente estudo em cada ciclo produtivo. Como pode ser observado na referida figura, os diferentes níveis de inclusão de lignina não afetaram (p>0,05) a viabilidade do lote de aves, sendo que cada 1,04% representa uma ave.

[227] Ademais, a Tabela 23 a seguir indica os dados de desempenho das aves estudadas, bem como a característica do produto referente à % de ovos sujos.

Tabela 23: Desempenho de aves suplementadas com diferentes níveis de lignina.

Médias seguidas por letras diferentes, na coluna, diferem entre si pelo Teste de Tukey (p<0,05).

[228] A partir da tabela acima, verifica-se que, ao final de quatro ciclos produtivos, houve diferença (p<0,05) entre os tratamentos para diversas características, como consumo de ração, produção de ovos, porcentagem de ovos sujos e conversão alimentar para dúzia de ovos produzidos.

[229] De maneira geral, os melhores resultados foram encontrados para as aves que receberam ração com 1% de lignina (T3). Não foi possível detectar diferença (p>0,05) para a conversão alimentar por quilograma de ovos produzidos. Pode-se inferir que esta característica não se apresentou diferente entre os tratamentos testados, pois a mesma considera o consumo de ração e o peso total de ovos produzidos, o que indiretamente considera a viabilidade do lote. Como não houve diferença para as características peso do ovo e viabilidade, a conversão alimentar por quilograma de ovos produzidos não foi afetada.

[230] Após avaliação de regressão para as características de desempenho das aves, encontrou-se regressão cúbica significativa para a característica de consumo de ração e quadrática para produção de ovos e peso dos ovos, conforme pode ser observado nos gráficos das figuras 03 a 05. Verifica-se, através de tais figuras, que essas características apresentaram maiores valores com inclusões entre 0,50 e 1,00% de lignina.

[231] A avaliação de regressão para porcentagem de ovos sujos, por sua vez, pode ser verificada através do gráfico da figura 06. Essa avaliação demonstrou que, independentemente do tratamento utilizado, existe uma tendência a diminuir entre o terceiro e o quarto ciclos produtivos. Todavia, não se pode afirmar se este comportamento se manteria para outros ciclos posteriores.

[232] Finalmente, a qualidade de ovos das aves submetidas às dietas com diferentes níveis de inclusão de lignina do presente estudo é apresentada na Tabela 24 abaixo.

Tabela 24: Qualidade de ovo de aves suplementadas com diferentes níveis de lignina.

[233] Como pode ser observado a partir dos dados da tabela acima, para qualidade de ovos, verificou-se que a inclusão de lignina foi muito eficiente para melhorar a qualidade da casca dos ovos, especialmente nos níveis de 0,50 e 1,00% (T2 e T3, respectivamente). Percebe-se que as características de gravidade específica, resistência da casca e porcentagem de casca foram melhores (p<0,05) para os ovos das aves que receberam esses níveis de inclusão de lignina na dieta. Para a gravidade específica, o tratamento com inclusão de 1,50% de lignina também proporcionou bons resultados. As demais características não foram influenciadas pelos tratamentos.

[234] A avaliação de regressão para a característica de qualidade de ovos seguiu a mesma tendência da avaliação estatística convencional, com efeito significativo apenas para as características de gravidade específica, resistência da casca e porcentagem de casca, os quais apresentaram comportamento quadrático, com melhores resultados para níveis de inclusão entre 0,50 e 1,00%, como pode ser observado nas figuras 07, 08 e 09. [235] Antes do início do experimento aqui descrito e após seu término, coletou-se sangue de 48 aves para avaliação de colesterol total, LDL (lipoproteína de baixa densidade), triglicérides, HDL (lipoproteína de alta densidade) e Tbars (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico - nmol MDA/mL) no soro de sangue. Tais dados encontram-se na Tabela 25.

Tabela 25: Valores de colesterol total, LDL, triglicerídeos, HDL e Tbars no soro de sangue de galinhas poedeiras suplementadas com diferentes níveis de lignina.

Médias seguidas por letras diferentes, na coluna, diferem entre si pelo Teste de Tukey (p<0,05). CV % = coeficiente de variação (%)

[236] Observa-se, portanto, que um dia antes do início do experimento foram encontrados os seguintes valores: Colesterol Total de 82,43 mg/dL (para colesterol total aceita-se o limite máximo em 120 mg/dL), LDL de 12,35 mg/dL, Triglicérides de 1.169,67 mg/dL, HDL colesterol de 48,71 mg/dL, e Tbars de 1,64 nmol MDA/mL. Estes valores encontram-se dentro dos limites normais para galinhas poedeiras entre 40 e 80 semanas.

[237] No entanto, ao final de 84 dias, ou seja, quatro ciclos de produção, a inclusão de lignina na dieta das aves proporcionou diferença para as características de colesterol total, LDL, HDL e Tbars, com redução (p<0,05) para todos os tratamentos em que a lignina foi utilizada. A maior redução no nível de colesterol total e HDL foi encontrada para 1,50% de inclusão de lignina (-13,70 % - colesterol e -42,93% - HDL), o melhor resultado para o nível de LDL foi encontrado para o tratamento com inclusão de 1,00% de lignina (46,15%), entretanto, para Tbars, os melhores resultados foram encontrados para as aves dos tratamentos com 0,50 e 1,00% de lignina (-13,89%).

[238] As avaliações referentes colesterol total e Tbars também foram realizadas para os ovos das aves antes do início do experimento, ao final de quatro ciclos produtivos e durante 30 dias (vida de prateleira). Os dados estão contidos na Tabela 26 a seguir.

Tabela 26: Valores de colesterol total e Tbars nos ovos galinhas poedeiras suplementadas com diferentes níveis de lignina.

[239] O valor médio de Tbars nos ovos, no início o experimento foi de 0,123 mg MDA/kg, que são valores adequados para ovos frescos (aceitável até 0,540 mg MDA/kg). Na tabela acima estão os dados de colesterol total e Tbars no início e ao final do experimento. Verifica-se que, novamente, a inclusão de 0,50% e 1,00% de lignina permitiu melhores resultados para os níveis de colesterol total nas gemas dos ovos (p<0,05). Já a taxa de oxidação lipídica, medida pelo Tbars, foi diminuída nos ovos das aves suplementadas com diferentes porcentagens de inclusão da lignina.

[240] Nas Tabelas 27 a 29 a seguir são apresentados os dados de vida de prateleira para qualidade dos ovos provenientes das aves do presente estudo e armazenados até 30 dias em geladeira. Tabela 27: Valores de colesterol total e Tbars nos ovos de galinhas poedeiras suplementadas com diferentes níveis de ignina, durante diferentes períodos de armazenamento.

édias seguidas de A, B na coluna; a, b, c, na linha, diferem entre si pelo teste de Tukey (p<0,05). CV % = coeficiente de variação (%)

Tabela 28: Parâmetros de qualidade de ovos de galinhas poedeiras alimentadas com diferentes níveis de inclusão de ignina na dieta

édias seguidas de A, B na coluna; a, b, c, na linha, diferem entre si pelo teste de Tukey (p<0,05).

Tabela 29: Parâmetros composição percentual para ovos de galinhas poedeiras alimentadas com diferentes níveis de nclusão de lignina na dieta.

[241] Observa-se que os menores valores de Tbars para ovos frescos (dia 0) foram encontrados para os ovos das galinhas alimentadas com 1,00 e 1,50% de lignina, embora o nível de 0,50% de inclusão deste produto também tenha proporcionado valor de Tbars inferior (p<0,05) aos ovos das aves alimentadas com a dieta controle (0,00% de inclusão), conforme Tabela 27.

[242] Os valores desta característica tiveram comportamento distintos entre os diferentes níveis de inclusão de lignina em função do tempo de armazenamento. Apenas os tratamentos com 0,00 e 1,50% de inclusão do produto testado apresentaram diferença (p<0,05) nos valores de Tbars com o passar do tempo. Estes dados demonstram que os tratamentos 2 e 3 (0,50% e 1,00% de inclusão, respectivamente) apresentaram oxidação lipídica constante, ou seja, sem pico de oxidação lipídica, enquanto os tratamentos 1 e 4 (0,00 e 1,50%) permitiram alta oxidação dos lipídios da gema já no início do período de armazenamento, com pico até 10 dias.

[243] Desta forma, pode-se inferir que a qualidade dos ovos provenientes das aves alimentadas com dietas com 0,50 e 1,00% de inclusão de lignina proporcionam melhores proteção contra a oxidação lipídica das gemas.

[244] Além disso, pode-se verificar na Tabela 28 que o peso dos ovos não diferiu (p>0,05) entre os tratamentos no mesmo dia de avaliação. Já entre os períodos de avaliação, percebeu-se que o peso dos ovos diminuiu (p<0,05) a partir de 20 dias de armazenamento. A maior variação de peso foi encontrada para o tratamento 3 (1,00%), que foi de -3,46%.

[245] A gravidade específica também diferiu entre os tratamentos apenas no dia 0 de avaliação (posteriormente este comportamento não se repetiu). No entanto, percebe-se uma piora nesta característica (p<0,05) a partir de 20 dias de armazenamento.

[246] A resistência da casca dos ovos, por sua vez, foi influenciada pelos tratamentos e pelo tempo de armazenamento, sendo que os tratamentos com 0,50 e 1,00% de inclusão de lignina apresentaram os melhores resultados ao longo do período de armazenamento (vide Tabela 28).

[247] A partir da Tabela 29, nota-se que a porcentagem de gema e albúmen dos ovos foi afetada pelo tempo de armazenamento (p<0,05), com perceptível aumento na porcentagem de gema e diminuição na porcentagem de albúmen. O nível de inclusão de lignina não foi um fator decisivo nestas alterações (p>0,05). Tais alterações demonstram perda de água dos ovos, todavia esta perda de umidade dos ovos não foi suficiente para alterar significativamente a porcentagem de casca no decorrer do período de armazenamento (p>0,05). Entretanto, aos 30 dias de armazenamento, os tratamentos com inclusão de 0,50 e 1,00% apresentaram menor porcentagem de casca, o que corrobora a afirmativa que os ovos provenientes de aves que consumiram dietas com esses níveis de lignina tiveram menor perda de água.

[248] As figuras 10 a 15 representam gráficos os quais demonstram os comportamentos dos teores de colesterol total e Tbars, bem como as características de resistência de casca, porcentagem de casca, gema e albúmen dos ovos durante os 30 dias de armazenamento.

[249] No presente estudo foi avaliada também a qualidade de intestino de galinhas alimentadas com lignina. Os dados dessa análise encontram-se na Tabela 30 abaixo.

[250] Sabe-se que o duodeno é a porção responsável pela maior parte da digestão e absorção dos nutrientes. O jejuno, por sua vez, é responsável principalmente pela absorção de óleos, gorduras e vitaminas lipossolúveis. Já o íleo é a porção responsável pela maior parte da absorção de água, minerais e vitaminas hidrossolúveis. Assim, a melhora na altura das vilosidades destas porções é de grande importância para melhoria no desempenho das aves. [251] A cripta é responsável pela formação de novas células intestinais. Quando a profundidade de cripta é muito elevada e, consequentemente, a relação viloxripta é menor, entende-se que algum agente estressor está promovendo morte de células intestinais ativas e, por isso, é necessária uma renovação maior.

[252] Os resultados encontrados neste experimento foram muito interessantes, uma vez que a administração de lignina melhorou (p<0,05) a qualidade intestinal para a maior parte das porções intestinais avaliadas, sobretudo para o Tratamento 2 (0,50% de inclusão).

Tabela 30: Qualidade de intestino de galinhas poedeiras suplementadas com diferentes níveis de lignina.

Tratamento Comprimento Profundidade Cripta Relação Vilo:Cripta

Duodeno Jejuno íleo Duodeno Jejuno íleo Duodeno Jejuno íleo

Inicial 1781,8 B 1332,0 C 839,4 C 254.6 B 153,0 B 119,9 B 6,9 B 8,7 AB 7,0 B

TI 1749,7 B 1333,7 C 839,2 C 253.5 B 153,1 B 117,0 B 6,9 B 8,7 AB 7,2 B

T2 1926,0 A 1513,2 A 966,7 A 268.5 A 162,2 AB 125,8 A 7,2 A 9,3 A 7,7 A

T3 1902,1 A 1505,0 A 855,9 C 266.7 A 161,2 AB 116,0 B 7,2 A 9,3 A 7,4 AB

T4 1681,6 C 1379,2 B 884,7 B 274,2 A 209,9 A 118,7 B 6,1 C 6,6 B 7,5 AB

CV (%) 4,10 3,62 2,55 6,13 5,67 3,31 3,87 4,23 5,01 Valor de P 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,03 0,01 0,03

Médias seguidas de letras diferentes na coluna diferem entre si pelo teste de Tukey (p<0,05).

[253] A partir do estudo descrito no presente exemplo de concretização da invenção observou-se que a inclusão de lignina nas dietas das galinhas poedeiras mostrou-se bastante interessante. Foi possível concluir, a partir do presente estudo, que para a produção de ovos o nível de 1,00% de inclusão foi aquele que proporcionou melhores resultados, embora os níveis de 0,50 e 1,50% também tenham melhorado as características avaliadas. Destaca-se, neste contexto, a melhoria expressiva na porcentagem de ovos sujos, que é um problema recorrente para aves poedeiras após 60 semanas de idade.

[254] As características de qualidade de ovos também melhoraram para os ovos de galinhas suplementadas com lignina, e os resultados mais expressivos foram encontrados para as aves submetidas a 0,50 e 1,00% de inclusão deste produto. Pode-se destacar a melhoria acentuada na qualidade da casca destes ovos.

[255] A avaliação de vida de prateleira corroborou os resultados de melhoria na qualidade da casca dos ovos das aves suplementadas com lignina. Estes dados são reforçados pelos resultados de Tbars, que foram melhores para os ovos provenientes das aves suplementadas com lignina (0,50 e 1,00% de inclusão).

[256] A utilização da lignina, principalmente em 0,50 e 1,00% de inclusão, foi eficiente também para melhorar bastante a qualidade do intestino delgado, promovendo maior área de absorção de nutrientes.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composição alimentícia, caracterizada pelo fato de que compreende até 5%, em peso, de um aditivo alimentar, em que o aditivo alimentar é a lignina.

2. Composição alimentícia de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende de l a 3%, em peso, do aditivo alimentar.

3. Composição aditiva, caracterizada pelo fato de que compreende até 99%, em peso, de lignina.

4. Composição aditiva de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de ser um suplemento, um concentrado, uma pré-mistura ou um núcleo.

5. Composição alimentícia, caracterizada pelo fato de que compreende a composição aditiva definida na reivindicação 3 ou 4.

6. Composição alimentícia de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2 ou 5, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente componentes da alimentação animal.

7. Composição alimentícia de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que os componentes da alimentação animal são selecionados de açúcar, farinhas, farelos, amido, caldo de cana, melaço de cana, levedura, leite em pó, óleos, sorgo, milho, soja integral tostada, aminoácidos, calcário, fosfato bicálcico, sal, vitaminas, ácido fólico, cloreto de colina, antioxidantes e minerais.

8. Composição alimentícia ou aditiva de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que a lignina é lignina kraft.

9. Composição alimentícia ou aditiva de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que a lignina kraft é lignina kraft de madeira dura.

10. Composição alimentícia ou aditiva de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que a madeira dura é madeira de eucalipto.

11. Composição alimentícia de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2 ou 5 a 10, caracterizada pelo fato de ser uma composição de ração animal.

12. Composição alimentícia de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2 ou 5 a 11, caracterizada pelo fato de ser para melhorar o desempenho zootécnico do animal e/ou as características nos produtos de origem animal.

13. Composição alimentícia de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que a melhora do desempenho zootécnico é selecionada a partir do grupo consistindo em aumento do ganho de peso, redução do consumo alimentar, redução da conversão alimentar, redução dos níveis de gordura, redução da deposição de gordura na cavidade abdominal e alterações histomorfológicas intestinais.

14. Composição alimentícia de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pelo fato de que a redução dos níveis de gordura é uma redução nos níveis de LDL, HDL, triglicerídeos, oxidação plasmática ou Tbars.

15. Composição alimentícia de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pelo fato de que as alterações histomorfológicas intestinais são o aumento da profundidade das criptas ou o aumento da altura das vilosidades.

16. Composição alimentícia de acordo com a reivindicação 13 ou 15, caracterizada pelo fato de que as alterações histomorfológicas intestinais ocorrem no jejuno e/ou no duodeno.

17. Composição alimentícia de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que a melhora nas características nos produtos de origem animal é selecionada a partir do grupo consistindo em retardamento dos efeitos oxidativos no post mortem de carne de frango, redução da oxidação e do colesterol em ovos e aumento na resistência e no peso das cascas de ovos.

18. Composição alimentícia de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2 ou 5 a 17, caracterizada pelo fato ser para a alimentação de animais de produção e de companhia.

19. Uso de lignina, caracterizado pelo fato de ser como aditivo alimentar em uma composição alimentícia, definida em qualquer uma das reivindicações 1, 2, 6, 7 ou 11, ou em uma composição aditiva, definida na reivindicação 3 ou 4.

20. Uso de lignina, caracterizado pelo fato de ser para preparar uma composição alimentícia, definida em qualquer uma das reivindicações 1, 2, 6, 7 ou 11, para melhorar o desempenho zootécnico de animais e/ou as características nos produtos de origem animal.

21. Uso de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a melhora do desempenho zootécnico é selecionada a partir do grupo consistindo em aumento do ganho de peso, redução do consumo alimentar, redução da conversão alimentar, redução dos níveis de gordura, redução da deposição de gordura na cavidade abdominal e alterações histomorfológicas intestinais.

22. Uso de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que a redução dos níveis de gordura é uma redução nos níveis de LDL, HDL, triglicerídeos, oxidação plasmática ou Tbars.

23. Uso de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que as alterações histomorfológicas intestinais são o aumento da profundidade das criptas ou o aumento da altura das vilosidades.

24. Uso de acordo com a reivindicação 21 ou 23, caracterizado pelo fato de que as alterações histomorfológicas intestinais ocorrem no jejuno e/ou no duodeno.

25. Uso de acordo com a reivindicação 20, caracterizado pelo fato de que a melhora nas características nos produtos de origem animal é selecionada a partir do grupo consistindo em retardamento dos efeitos oxidativos no post mortem de carne de frango, redução da oxidação e do colesterol em ovos e aumento na resistência e no peso das cascas de ovos.

26. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 25, caracterizado pelo fato de que a composição alimentícia é para a alimentação de animais de produção ou de companhia.

27. Uso de lignina, caracterizado pelo fato de ser para preparar uma composição aditiva, definida na reivindicação 3 ou 4.

28. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 19 a 27, caracterizado pelo fato de que a lignina é lignina kraft.

29. Uso de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que a lignina kraft é lignina kraft de madeira dura.

30. Uso de acordo com a reivindicação 29, caracterizado pelo fato de que a madeira dura é madeira de eucalipto.

31. Uso da composição aditiva definida na reivindicação 3 ou 4, caracterizado pelo fato de ser para preparar uma composição alimentícia, definida na reivindicação 1 ou 2, para melhorar o desempenho zootécnico de animais e/ou as características nos produtos de origem animal.

32. Invenção de produto, processo, sistema ou uso, caracterizada pelo fato de que compreende um ou mais elementos descritos no presente pedido de patente.