WO2019209061A1 - 총백을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 조성물 - Google Patents

총백을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 조성물 Download PDF

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WO2019209061A1
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bone growth
promoting
extract
growth
composition
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고병섭
박선민
육진아
정동호
편보정
안상우
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한국한의학연구원
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    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
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    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/306—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on bone mass, e.g. osteoporosis prevention

Definitions

  • the present invention relates to a composition for promoting bone growth comprising an extract of Allium fistulosum L. as an active ingredient, more specifically, a pharmaceutical or food that can promote bone growth by administering or ingesting a child or adolescent in a growing phase. It relates to a composition.
  • Bone is a tissue composed of calcium and phosphorus, and calcium phosphate complex, collagen fiber, glycoprotein, and proteoglycan are the main constituents, and the organs that make up and support the body. It plays a role in protecting internal organs and supports muscle movement, and also plays a role in constituting and maintaining a shape, but bone marrow can generate blood, an oxygen carrier of the body.
  • Osteoblasts one of the types of bone cells, secrete collagen and alkaline phosphatase to form bones.
  • Alkaline phosphatase does not yet know what function it performs, but it has high bone cell production. It is known to show high levels in the plasma of patients.
  • osteoclasts are cells that destroy bones, and break down bones to serve to release phosphate and calcium into plasma.
  • Bone growth is made by the interaction of osteoclasts and osteoblasts. When bone is absorbed by osteoclasts, osteoblasts can be combined again with calcium and phosphorus and bone growth. When osteoblasts have higher activity than osteoclasts, bone growth occurs, and in the opposite case, bone destruction occurs, which can lead to osteoporosis. When osteoblast activity is higher than osteoclasts, growth hormone is secreted at the growth stage, such as children and adolescence.
  • Calcium and phosphorus two major constituents of bone, are present in the form of two ions in the complex of bones, but in ionized form in the serum when they move. Depending on the concentration of calcium ions in the blood, calcium resorption is increased or excreted and homeostasis is maintained.
  • the hormones that affect growth include insulin, thyroid hormone, and sex hormones, among which hormones are secreted from the anterior lobe of the pituitary gland, which grows the body, promotes bone calcification, increases protein synthesis, and immunity. It plays a role in promoting action.
  • Growth hormone is associated with blood sugar because glucose is the energy source available to the brain, the main driver of growth. Excessive growth hormone secretion can lead to high blood sugar levels, which can lead to diabetes.
  • An object of the present invention is to solve the above problems, when administered to a child or adolescents in the growing phase as a medicine, food, etc. in bone growth and growth plate growth of children or adolescents in the growing phase without side effects of metabolic disease or obesity Not only to promote bone growth, but also to provide a composition for promoting bone growth comprising a total back extract effective in maintaining or increasing bone density.
  • a pharmaceutical composition for promoting bone growth comprising a baekbaek extract as an active ingredient.
  • the total back may be the root, ground or outpost of Allium fistulosum L.
  • the total bag extract may be extracted by water, alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof.
  • the pharmaceutical composition may be prepared from any one of granules, powders, tablets, coated tablets, capsules, solutions, syrups, juices, suspensions, emulsions, drops and injection solutions.
  • the pharmaceutical composition may be to induce bone growth by enhancing one or more signaling selected from a transforming growth factor beta (TGF- ⁇ ) receptor and a wnt receptor.
  • TGF- ⁇ transforming growth factor beta
  • the pharmaceutical composition may be for promoting bone growth of growing children or adolescents.
  • the pharmaceutical composition may be for promoting bone growth of obese children or adolescents.
  • a food composition for promoting bone growth which comprises a baekbaek extract as an active ingredient.
  • the total back may be the root, ground or outpost of Allium fistulosum L.
  • the total bag extract may be extracted by water, alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof.
  • the food composition may be to induce bone growth by enhancing one or more signaling selected from a transforming growth factor beta (TGF- ⁇ ) receptor and a wnt receptor.
  • TGF- ⁇ transforming growth factor beta
  • the food composition may be for promoting bone growth of growing children or adolescents.
  • the food composition may be for promoting bone growth of obese children or adolescents.
  • the food composition may be prepared from any one of granules, powders, tablets, coated tablets, capsules, solutions, syrups, juices, suspensions, and emulsions.
  • It provides a health functional food for promoting bone growth comprising the food composition.
  • the health functional food may be prepared by adding the ginseng extract to any one food material selected from beverages, teas, spices, gum and confectionery.
  • a method of preparing a pharmaceutical composition for promoting bone growth comprising extracting a total bag with water, an alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof to prepare a total bag extract.
  • Concentration under reduced pressure may be further performed after the step.
  • a method for preparing a food composition for promoting bone growth comprising extracting a total bag with water, an alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof to produce a total bag extract.
  • Concentration under reduced pressure may be further performed after the step.
  • a method for preparing a health functional food for promoting bone growth wherein the food composition is added to any one food material selected from beverages, teas, spices, gum and confectionery to produce a health functional food.
  • a novel use of ginseng extract for the manufacture of a medicament for promoting bone growth is provided.
  • the medicine for promoting bone growth may be a medicine for preventing or treating a growth disorder.
  • a method for treating a growth disorder comprising administering to a patient with a growth disorder a pharmaceutical composition comprising the extract as an active ingredient.
  • Bone growth promoting composition comprising the extract of the present invention, bone length growth, growth plate expansion of children or adolescents in the growth phase when administered as a medicine, food, etc. to children or adolescents in the growth phase without side effects of metabolic disease or obesity induction
  • bone density is also effective to maintain or increase. It also promotes bone growth and can be used for the prevention or treatment of growth disorders.
  • Figure 1 is a cytotoxicity test results by MTT analysis of osteoblast MG63 cells according to the Allium fistulosum L. plant parts in Experimental Example 1.
  • Figure 2 is a result of measuring the ALP activity of MG63 cells according to the Allium fistulosum L. plant site in Experimental Example 2.
  • Figure 3 is a cytotoxicity test results by MTT analysis of osteoblast MG63 cells according to the concentration of the total back extract in Experimental Example 3.
  • Figure 4 is the result of measuring the ALP activity of MG63 cells according to the concentration of the total back extract in Experimental Example 4.
  • Figure 9 shows the weight measurement results of the white paper after the dietary supply according to Experimental Example 7.
  • Figure 13 is a graph comparing the length of the growth section in the growth plate according to Experimental Example 9.
  • FIG. 15 is a graph comparing the entire joint length according to Experimental Example 9.
  • Figure 17 is the result of measuring the bone density change of the femur (femur) according to Experimental Example 10.
  • Chongbaek extract of the present invention can be used as an active ingredient of the pharmaceutical composition for promoting bone growth.
  • baekbaek extract can promote bone growth and can be used for the prevention or treatment of growth disorders.
  • the growth disorder can be normal mutant nephropathy or nephropathy secondary to disease.
  • the normal mutant short stature may be familial short stature, constitutional delay in growth, idiopathic short stature in consultation.
  • hypothyroidism secondary to disease may be primary growth disorders (endogenous disorders) or secondary growth disorders (exogenous growth disorders), and the primary growth disorders include osteochondral dysplasia, chromosomal abnormalities (Down syndrome or Turner syndrome), short stature due to unreasonable lightweight infants (delayed growth in the uterus), short stature by Freder-Willy syndrome, short stature by Russell-Silver syndrome, and short stature by Nurnan syndrome. Short stature due to systemic diseases, short stature due to growth hormone deficiency, short stature due to hypothyroidism, short stature due to Cushing's syndrome, and psychosocial dwarfism.
  • Chongbaek is the name of the medicine means the white root portion of leek, but in this specification 'baekbaek' includes all roots (ordinary baekbaek) of the scientific name Allium fistulosum (L.), above the ground or any outpost containing the same It is used to mean.
  • the total bag extract may be extracted using water, an organic solvent or a mixture thereof as an extraction solvent.
  • the kind of organic solvent used at this time and the mixing ratio of water and an organic solvent are not specifically limited.
  • the organic solvent may be one or more solvents selected from the group consisting of lower alcohols, hexane, acetone, ethyl acetate, chloroform, and diethyl ether.
  • the lower alcohol may be an alcohol having 1 to 6 carbon atoms.
  • methanol, ethanol, propanol, butanol, normal-propanol, iso-propanol, normal-butanol, 1-pentanol, 2-butoxyethanol or ethylene glycol may be used as the lower alcohol.
  • Organic solvents include polar solvents such as acetic acid, dimethyl-formamide (DMFO) and dimethyl sulfoxide (DMSO), acetonitrile, ethyl acetate, methyl acetate, fluoroalkane, pentane, 2,2,4-trimethylpentane, and decane.
  • polar solvents such as acetic acid, dimethyl-formamide (DMFO) and dimethyl sulfoxide (DMSO), acetonitrile, ethyl acetate, methyl acetate, fluoroalkane, pentane, 2,2,4-trimethylpentane, and decane.
  • nonpolar solvents such as benzene, diethyl ether, diethyl sulfide, chloroform, dichloromethane, 1,2-dichloroethane, anneal, diethylamine, ether, carbon tetrachloride, and THF (Tetrahydrofuran).
  • the total bag extract when extracting the total bag with an organic solvent, the total bag extract is separated into a supernatant and a lower layer solution, the supernatant is an oil fraction of the total bag extract, the lower layer corresponds to a general solvent extract.
  • the baekbaek extract of the present invention is interpreted as a concept including both the oil fraction of baekbaek extract, the liquid fraction of baekbaek extract, the wax fraction of baekbaek extract.
  • the total bag extract may include any one or more selected from the group consisting of an oil fraction of the total bag extract, a liquid fraction of the total bag extract and a wax fraction of the total bag extract.
  • the total bag extract may be a lower alcohol extract of the total bag, preferably an ethanol extract of the total bag.
  • the term 'extract' also includes fractions that additionally fractionate the extract. That is, the baekbaek extract includes not only obtained by using the above-described extraction solvent, but also obtained by additionally applying a purification process. In addition, fractions obtained by passing the extract or fraction through an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (manufactured for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity), etc. Fractions obtained through the various purification methods described above are also included in the extract of the present invention.
  • the total bag extract may be a fraction obtained by re-fractionation of the organic solvent extract of the total bag with a second organic solvent.
  • the extract of the organic solvent of the total bag includes all of the oil fraction of the total bag extract, the liquid fraction of the total bag extract, the wax fraction of the total bag extract, and broadly means the liquid fraction of the total bag extract. do. Therefore, in one embodiment, the fraction re-fractionated the organic extract of the total bag with a second organic solvent may mean a fraction re-fractionated the liquid fraction of the total bag extract with a second organic solvent.
  • the total bag extract may be a fraction obtained by re-fractionation of the lower alcohol extract of the total bag with a second organic solvent.
  • the total bag extract may be a fraction of the ethanol extract of the total bag re-fractionated with hexane.
  • the fraction of the extract of the total bag containing a large amount of fat-soluble components of the total bag shows a very good effect.
  • the term 'extract' as used herein to refer to the total bag includes not only the crude extract obtained by treating the extraction solvent on the total bag, but also the processed product of the total bag extract.
  • the total bag extract may be prepared in powder form by additional processes such as distillation under reduced pressure and freeze drying or spray drying.
  • the baekbaek extract of the present invention has a meaning that broadly includes a baekbaek processed material, such as baekbaek dried or baekbaek powder formulated to administer the baekbaek itself to the animal.
  • a baekbaek processed material such as baekbaek dried or baekbaek powder formulated to administer the baekbaek itself to the animal.
  • the term 'comprising as an active ingredient' in the present specification means that it contains an amount sufficient to achieve the efficacy or activity of the baekbaek extract.
  • the total bag extract in the composition of the invention is for example at least 0.001 mg / kg, preferably at least 0.1 mg / kg, more preferably at least 10 mg / kg, even more preferably Is at least 100 mg / kg, even more preferably at least 250 mg / kg, most preferably at least 1 g / kg. Since the total bag extract has no side effects on the human body even when the dose is excessively administered as a natural product, the upper limit of the total amount of the total bag extract included in the composition of the present invention can be selected and performed by those skilled in the art within an appropriate range.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be prepared using a pharmaceutically suitable and physiologically acceptable adjuvant in addition to the active ingredient, and the adjuvant may include excipients, disintegrants, sweeteners, binders, coating agents, swelling agents, lubricants, lubricants. Agents, flavors and the like can be used.
  • the pharmaceutical composition may be preferably formulated into a pharmaceutical composition comprising one or more pharmaceutically acceptable carriers in addition to the active ingredient described above for administration.
  • Formulation forms of the pharmaceutical composition may be granules, powders, tablets, coated tablets, capsules, suppositories, solutions, syrups, juices, suspensions, emulsions, drops or injectable solutions.
  • the active ingredient may be combined with an oral, nontoxic, pharmaceutically acceptable inert carrier such as ethanol, glycerol, water and the like.
  • suitable binders, lubricants, disintegrants and coloring agents may also be included in the mixture.
  • Suitable binders include but are not limited to natural and synthetic gums such as starch, gelatin, glucose or beta-lactose, corn sweeteners, acacia, trackercance or sodium oleate, sodium stearate, magnesium stearate, sodium Benzoate, sodium acetate, sodium chloride and the like.
  • Disintegrants include, but are not limited to, starch, methyl cellulose, agar, bentonite, xanthan gum, and the like.
  • Acceptable pharmaceutical carriers in compositions formulated in liquid solutions are sterile and physiologically compatible, including saline, sterile water, Ringer's solution, buffered saline, albumin injectable solutions, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol and One or more of these components may be mixed and used, and other conventional additives such as antioxidants, buffers and bacteriostatic agents may be added as necessary. Diluents, dispersants, surfactants, binders and lubricants may also be added in addition to formulate into injectable formulations, pills, capsules, granules or tablets such as aqueous solutions, suspensions, emulsions and the like.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be administered orally or parenterally, and in the case of parenteral administration, it may be administered by intravenous injection, subcutaneous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, transdermal administration, or the like, and preferably, oral administration.
  • Suitable dosages of the pharmaceutical compositions of the present invention vary depending on factors such as the formulation method, mode of administration, age, weight, sex, morbidity, condition of food, time of administration, route of administration, rate of excretion and response to reaction, and usually The skilled practitioner can readily determine and prescribe a dosage effective for the desired treatment or prophylaxis.
  • the daily dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is 0.001-10 g / kg.
  • compositions of the present invention may be prepared in unit dosage form by formulating with a pharmaceutically acceptable carrier and / or excipient according to methods which can be easily carried out by those skilled in the art. Or by incorporating into a multi-dose container.
  • the formulation may be in the form of a solution, suspension or emulsion in an oil or an aqueous medium, or may be in the form of extracts, powders, granules, tablets or capsules, and may further include a dispersant or stabilizer.
  • the present invention also provides a food composition for promoting bone growth comprising a total back extract as an active ingredient.
  • the food composition according to the present invention may be formulated in the same manner as the pharmaceutical composition, used as a functional food, or added to various foods.
  • examples of the food to which the composition of the present invention may be added include beverages, alcoholic beverages, confectionary, diet bars, dairy products, meat, chocolates, pizza, ramen noodles, other noodles, gums, ice creams, vitamin complexes, and health supplements. Etc.
  • the food composition of the present invention may include, as an active ingredient, ginseng extract or ginseng powder, as well as ingredients commonly added during food production, and include, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients, seasonings, and flavoring agents. Include. Examples of the above carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, oligosaccharides and the like; And sugars such as conventional sugars such as polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like and xylitol, sorbitol, erythritol.
  • carbohydrates include monosaccharides such as glucose, fructose and the like; Disaccharides such as maltose, sucrose, oligosaccharides and the like; And sugars such as conventional sugars such as polysaccharides such as dextrin, cyclodextrin and the like and xylitol, sorbitol
  • natural flavoring agents such as tauumatin, stevia extract (for example rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavoring agents (saccharin, aspartame, etc.) can be used.
  • synthetic flavoring agents sacharin, aspartame, etc.
  • citric acid, liquid fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, fruit juice, and various plant extracts may be further included in addition to the extract of the present invention.
  • the present invention provides a health functional food comprising a food composition for promoting bone growth comprising the extract as an active ingredient.
  • Health functional food is a food made by adding baekbaek extract or baekbaek powder to food materials such as beverages, teas, spices, gums, confectionery, encapsulated, powdered, suspension, etc. Means to bring, but unlike the general medicine has the advantage that there is no side effect that can occur when taking a long-term use of the drug as a raw material.
  • the health functional food of the present invention thus obtained is very useful because it can be consumed on a daily basis.
  • the amount of the total bag extract or the total bag powder in such a health functional food cannot be defined uniformly depending on the type of the health functional food to be targeted, but may be added within a range that does not impair the original taste of the food. It is usually in the range of 0.01 to 50% by weight, preferably 0.1 to 20% by weight.
  • a health functional food in the form of pills, granules, tablets or capsules it is usually added in the range of 0.1 to 100% by weight, preferably 0.5 to 80% by weight.
  • the dietary supplement of the present invention may be in the form of pills, tablets, capsules or beverages.
  • the present invention also provides the use of a total bag extract for the manufacture of a medicament or food for promoting bone growth.
  • the total back extract or total back powder may be used for promoting bone growth.
  • the present invention also provides a method for promoting bone growth, comprising administering to a mammal an effective amount of total back extract.
  • mammal refers to a mammal that is the subject of treatment, observation or experimentation, preferably human.
  • the term “effective amount” means an amount of an active ingredient or pharmaceutical composition that induces a biological or medical response in a tissue system, animal or human, as contemplated by a researcher, veterinarian, doctor or other clinician, Amounts that induce alleviation of the symptoms of the disease or disorder. It will be apparent to those skilled in the art that the effective amount and frequency of administration for the active ingredients of the present invention will vary depending on the desired effect. Therefore, the optimal dosage to be administered can be readily determined by one skilled in the art and includes the type of disease, the severity of the disease, the amount of active ingredients and other ingredients contained in the composition, the type of formulation, and the age, weight, general health of the patient. It may be adjusted according to various factors including the condition, sex and diet, time of administration, route of administration and the rate of secretion of the composition, the duration of treatment, and the drugs used simultaneously.
  • the composition comprising the extract of baekbaek as an active ingredient is administered in a conventional manner through oral, rectal, intravenous, intraarterial, intraperitoneal, intramuscular, intrasternal, transdermal, topical, intraocular or intradermal routes. May be administered.
  • Allium fistulosum L Allium fistulosum L.
  • White roots ie 200 g of 100 g of white sacks, were refluxed and extracted three times for 1 hour with 10 times 70% ethanol, and the filtrate was concentrated using a vacuum concentrator. Then, lyophilized to prepare a total bag extract.
  • Allium fistulosum L (200 g of Allium fistulosum L), common leek, was refluxed and extracted three times per hour with 10 times 70% ethanol for 3 hours, and the filtrate was concentrated using a vacuum condenser and then lyophilized. Green onion extract was prepared.
  • MG63 cells, osteoblasts were used in a DMEM medium containing 10% FBS, 100 unit / ml penicillin, 100 mg / ml streptomycin, and the like, and cultured in a 37 ° C., 5% CO 2 incubator.
  • Plating at 96 ⁇ well plate at 2 x 10 3 cells / well, and the following day the extracts of Preparation Examples 1, 2 and 3 were treated with 10 ⁇ g / mL, 50 ⁇ g / mL and 100 ⁇ g / mL respectively Incubated for 6 days.
  • MG63 cells cultured in the same manner as in Experimental Example 1 were prepared, and ALP (alkaline phosphatase) activity was measured in the following manner.
  • the root extract of Preparation Example 1, the ground extract of Preparation Example 2, and the ground extract of Preparation Example 2, and the outpost extract of Preparation Example 3, except the root extract 100 ⁇ g / ml treatment group of Preparation Example 1, were compared with the control group using only normal medium. It was confirmed that the ALP activity was significantly increased. ALP indicates the degree of cell destruction, but in cell experiments, osteoblasts must be destroyed to produce new cells. Therefore, increasing ALP activity implies increased cell growth.
  • the culture solution was removed, and the cells were divided into control and treatment groups, respectively, and cultured under the same conditions.
  • the treatment group treated the total bag extract of Preparation Example 1 at 1 ⁇ g / mL and 5 ⁇ g / mL to the MG63 cells cultured in the cultured osteoblasts, and treated with 100 ⁇ g / mL palmitate after 1 hour for cytotoxicity.
  • Chongbaek extract inhibited cytotoxicity by palmitate, suppressed apoptosis and increased cell survival in a concentration-dependent manner, and high concentration Chongbaek extract improved cell viability compared to the control group.
  • MG63 cells cultured in the same manner as in Experimental Example 3 were prepared, and ALP (alkaline phosphatase) activity was measured in the following manner.
  • MG63 cells were dispensed into 96 well plates, and divided into an untreated control group and a total bag extract treatment group of Preparation Example 1 and cultured in a CO 2 incubator. At this time, in the treatment group, the total bag extract of Preparation Example 1 was treated at 1 ⁇ g / ml and 5 ⁇ g / ml concentrations, respectively.
  • supernatants of cultured cells were collected and ALP activity was measured at 405 nm using a kit of Abcam (ab83369).
  • the absorbance of the standard the relationship between the protein concentration and the absorbance was prepared and applied to calculate the protein concentration of the cell solution for each treatment group. The ALP concentration was divided by the protein concentration and applied to the following relationship to calculate the ALP activity, and the results are shown in FIG. 4.
  • ALP shows the degree of cell destruction, but in cell experiments, osteoblasts must be destroyed to produce new cells, so increasing ALP activity increases cell growth. It seems to improve.
  • TGF- ⁇ and wnt signaling are activated. MRNA expression of genes involved in signaling was measured TGF- ⁇ signaling leads to BMP-2-> pSMAD1 / 5/7-> SMAD4-> bone growth.
  • baekbaek extract may enhance the signaling of TGF- ⁇ receptor, which may improve the cell division of bone.
  • baekbaek extracts significantly increased LRP5 and ⁇ -catenin mRNA expression compared to the control group. Therefore, baekbaek extract is thought to increase cell growth through TGF- ⁇ and wnt signaling in osteoblasts.
  • a diet was provided in the same manner as in Example 1 except that the total back extract of Preparation Example 1 was provided at 30 mg / kg body weight (0.045% diet) without providing 10 mg / kg body weight (0.015% diet). .
  • a diet was provided in the same manner as in Example 1 except that the extract of Total Bag of Preparation Example 1 was not provided.
  • a diet was provided in the same manner as in Example 1 except that 20 ⁇ g / kg body weight (Eutropin_LG Life Sciences) was administered subcutaneously instead of the extract of Total Bag of Preparation Example 1.
  • FIG. 9 is a graph comparing body weights of four white rats after feeding with a diet adjusted to only 43 calories of fat in AIN-93G feed.
  • the length of tibia was statistically significantly increased in the positive control group (36.704 mm) compared to the negative control group (35.966 mm), and Example 2 was 37.833 mm. It was 105.19% longer than the negative control group and was larger than the positive control group.
  • the femur length was not significantly different from that of the negative control group after feeding the diet for 4 weeks, but the negative control group in Example 2 provided with the diet at 30 mg / kg body weight. It can be observed that statistically significantly longer than.
  • FIG. 12 HE microscopic images of growth plates in the joint area of the white paper are shown in FIG. 12, and graphs comparing the lengths of the proliferation part and the hypertrophy part in the growth plate are shown in FIGS. 13 and 14. The graph is shown in FIG.
  • the negative control group showed a small growth plate area and irregular cells.
  • the positive control group showed a wide growth plate area and the cell nuclei were regularly arranged. Can see.
  • the growth plate region was widened in a concentration-dependent manner and the cells were regularly arranged as compared to the negative control group.
  • BMD bone mineral density
  • the increase in bone mineral density (BMD) of the lumbar spine for 4 weeks was greater than that of the negative control group in Example 2, and according to FIG. 17, the BMD of femur Example 2 was more increased than the negative control group, and the positive control group also increased bone density of the femur compared to the negative control group.
  • BMD bone mineral density
  • the ALP concentration indicating the degree of bone degradation was lower in Example 2 than in the negative control group, and showed a similar value to the positive control group.
  • the concentration of osteocalcin in serum which is an indicator of the degree of bone synthesis, was higher in Example 2 than in the negative control group and was not statistically different from the positive control group.
  • the length of femur and tibia is longer in Example 2 than in the negative control group and shows positive correlation with serum osteocalcin concentration.

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Abstract

본 발명은 총백 추출물을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 조성물에 관한 것이다. 이에 의하여, 본 발명의 총백 추출물을 포함하는 뼈 성장 촉진용 조성물은 성장기에 있는 어린이나 청소년에 의약, 식품 등으로 투여할 경우 성장기에 있는 어린이나 청소년의 골길이 성장, 성장판 확장에 의해 뼈 성장을 촉진시킬 뿐 아니라, 골밀도 또한 유지하거나 높이는 효과가 있다.

Description

총백을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 조성물
본 발명은 총백(Allium fistulosum L.) 추출물을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 성장기의 소아나 청소년이 투여하거나 섭취함으로써 뼈 성장을 촉진시킬 수 있는 약학 또는 식품 조성물에 관한 것이다.
교육열과 성장에 대한 관심이 높아지면서 부모들의 아이의 성장에 대한 관심이 높아지고 있다. 특히 발육, 키 성장에 대한 관심이 높아지는데 병원에서 아이들의 성장판 검사에 대한 항목이 필수로 들어갈 정도로 아이 성장에 대한 관심이 높다.
뼈는 칼슘과 인으로 이루어진 조직으로 인산칼슘복염, 콜라겐 섬유, glycoprotein, proteoglycan 이 주 구성물이며, 몸을 구성하고 지탱하는 역할을 수행하는 기관이다. 내부의 장기를 보호하는 역할을 수행하고 근육이 움직일 수 있도록 지탱하는 역할을 하며, 사람이 형태를 구성하고 유지하는 역할도 수행하지만, 뼈 속 골수에서는 몸의 산소운반체인 혈액을 생성할 수 있다.
뼈세포의 유형 중 하나인 조골 세포는 콜라겐과 알칼리인산분해효소를 분비하여 뼈를 형성하는 역할을 수행하는데, 알칼리인산분해효소의 경우 어떠한 기능을 수행하는지에 대해 아직 알려져 있지 않으나 뼈세포 생성이 높은 환자들의 혈장 내에서 높은 수치를 나타내는 것으로 알려져 있다. 또한, 파골세포는 뼈를 파괴하는 세포로 뼈를 분해하여 인산과 칼슘을 혈장으로 흘려보내는 역할을 수행한다.
골 성장은 파골세포와 조골세포의 상호작용에 의해 이루어지는데, 파골세포에 의해 골이 흡수되면 조골세포는 다시 칼슘과 인을 조합하면서 골 성장이 이루어질 수 있다. 조골세포의 활성이 파골세포보다 높을 경우 골 성장이 이루어지며, 반대의 경우에는 골 파괴가 이루어져 골다공증을 일으킬 수 있다. 조골세포의 활성이 파골세포 보다 높아지는 경우는 성장호르몬이 분비되는 시기로 주로 성장기 아동이나 청소년기를 들 수 있다.
뼈를 구성하는 주요소인 칼슘과 인은 뼈를 구성할 때는 두 이온이 복합체를 이루어 존재하지만 이동할 때는 혈청에서 이온화 된 형태로 존재한다. 혈중 칼슘이온의 농도에 따라서도 칼슘 재흡수가 증가되거나 배설이 되면서 항상성이 유지된다.
한편, 성장에 영향을 주는 호르몬으로는 인슐린, 갑상선호르몬, 성 호르몬이 있는데 그 중에서 성장호르몬은 뇌하수체 전엽에서 분비되는 호르몬으로, 신체를 성장시키고, 뼈의 석회화를 촉진하며, 단백질 합성량 증가, 면역작용 촉진 등의 역할을 수행한다. 성장의 주 동력원인 뇌가 사용할 수 있는 에너지원이 포도당이기 때문에 성장 호르몬은 혈당과 연관성이 있다. 성장 호르몬이 과다하게 분비될 경우 지속적으로 혈중 당의 농도가 높아져 당뇨를 유발할 수도 있다.
성장기 아동의 육체적 건강에 도움을 주고, 대사성 질환 및 비만 유도를 방지하며 부작용이 없는 성장 호르몬 개선제에 대한 연구가 지속적으로 필요한 실정이다.
[선행기술문헌]
[특허문헌]
한국등록특허 제10-1483255호
한국등록특허 제10-0818204호
본 발명의 목적은 상술한 문제점을 해결하기 위한 것으로 성장기에 있는 어린이나 청소년에 의약, 식품 등으로 투여할 경우 대사성 질환이나 비만 유도의 부작용 없이 성장기에 있는 어린이나 청소년의 골길이 성장, 성장판 확장에 의해 뼈 성장을 촉진시킬 뿐 아니라, 골밀도 또한 유지하거나 높이는 효과가 있는 총백 추출물을 포함하는 뼈 성장 촉진용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 하나의 측면에 따르면,
총백 추출물을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 약학 조성물이 제공된다.
상기 총백은 알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.)의 뿌리, 지상부 또는 전초일 수 있다.
상기 총백 추출물은 물, 탄소수 1-4의 알코올, 또는 이들의 혼합용매에 의해 추출된 것일 수 있다.
상기 약학 조성물은 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 및 주사 액제 중에서 선택된 어느 하나의 제제로 제조된 것일 수 있다.
상기 약학 조성물은 TGF-β(Transforming growth factor beta) 수용체 및 wnt 수용체 중에서 선택된 1종 이상의 신호전달을 향상시켜 골 성장을 유도하는 것일 수 있다.
상기 약학 조성물은 성장기 어린이 또는 청소년의 뼈 성장 촉진용일 수 있다.
상기 약학 조성물은 비만인 성장기 어린이 또는 청소년의 뼈 성장 촉진용일 수 있다.
본 발명의 다른 하나의 측면에 따르면,
총백 추출물을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물이 제공된다.
상기 총백은 알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.)의 뿌리, 지상부 또는 전초일 수 있다.
상기 총백 추출물은 물, 탄소수 1-4의 알코올, 또는 이들의 혼합용매에 의해 추출된 것일 수 있다.
상기 식품 조성물은 TGF-β(Transforming growth factor beta) 수용체 및 wnt 수용체 중에서 선택된 1종 이상의 신호전달을 향상시켜 골 성장을 유도하는 것일 수 있다.
상기 식품 조성물은 성장기 어린이 또는 청소년의 뼈 성장 촉진용일 수 있다.
상기 식품 조성물은 비만인 성장기 어린이 또는 청소년의 뼈 성장 촉진용일 수 있다.
상기 식품 조성물은 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 및 유제 중에서 선택된 어느 하나의 제제로 제조된 것일 수 있다.
본 발명의 다른 또 하나의 측면에 따르면,
상기 식품 조성물을 포함하는 뼈 성장 촉진용 건강기능식품을 제공한다.
상기 건강기능식품은 음료, 차류, 향신료, 껌 및 과자류 중에서 선택된 어느 하나의 식품 소재에 상기 총백 추출물을 첨가하여 제조된 것일 수 있다.
본 발명의 다른 또 하나의 측면에 따르면,
총백을 물, 탄소수 1-4의 알코올, 또는 이들의 혼합용매에 의해 추출하여 총백 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 뼈 성장 촉진용 약학 조성물의 제조방법이 제공된다.
상기 단계 이후 감압 농축하는 단계를 추가로 수행할 수 있다.
본 발명의 다른 또 하나의 측면에 따르면,
총백을 물, 탄소수 1-4의 알코올, 또는 이들의 혼합용매에 의해 추출하여 총백 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물의 제조방법이 제공된다.
상기 단계 이후 감압 농축하는 단계를 추가로 수행할 수 있다.
본 발명의 다른 또 하나의 측면에 따르면,
상기 식품 조성물을 음료, 차류, 향신료, 껌 및 과자류 중에서 선택된 어느 하나의 식품 소재에 첨가하여 건강기능식품을 제조하는 뼈 성장 촉진용 건강기능식품의 제조방법이 제공된다.
본 발명의 다른 또 하나의 측면에 따르면,
뼈 성장 촉진용 의약 제조를 위한 총백 추출물의 신규 용도가 제공된다.
상기 뼈 성장 촉진용 의약은 성장 장애의 예방 또는 치료용 의약일 수 있다.
본 발명의 다른 또 하나의 측면에 따르면,
성장 장애 환자에게 총백 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 것을 포함하는 성장 장애의 치료방법이 제공된다.
본 발명의 총백 추출물을 포함하는 뼈 성장 촉진용 조성물은 대사성 질환이나 비만 유도의 부작용 없이 성장기에 있는 어린이나 청소년에 의약, 식품 등으로 투여할 경우 성장기에 있는 어린이나 청소년의 골길이 성장, 성장판 확장에 의해 뼈 성장을 촉진시킬 뿐 아니라, 골밀도 또한 유지하거나 높이는 효과가 있다. 또한 뼈 성장을 촉진하므로 성장 장애의 예방 또는 치료 용도로 사용될 수 있다.
도 1은 실험예 1에서 알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.) 식물 부위에 따른 조골세포 MG63 cell의 MTT분석에 의한 세포 독성검사 결과이다.
도 2는 실험예 2에서 알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.) 식물 부위에 따른 MG63 세포의 ALP 활성도 측정 결과이다.
도 3은 실험예 3에서 총백 추출물의 농도에 따른 조골세포 MG63 cell의 MTT분석에 의한 세포 독성검사 결과이다.
도 4는 실험예 4에서 총백 추출물의 농도에 따른 MG63 세포의 ALP 활성도 측정 결과이다.
도 5 및 도 6은 실험예 5에 따른 TGF-β 신호전달 관련 유전자의 mRNA 발현 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 7 및 도 8은 실험예 6에 따른 wnt 신호전달 관련 유전자의 mRNA 발현 분석 결과를 나타낸 것이다.
도 9는 실험예 7에 따른 식이 공급 후 백서의 체중 측정 결과를 나타낸 것이다.
도 10은 실험예 8에 따른 백서의 정강뼈(tibia)의 길이 성장 효과 분석 결과이다.
도 11은 실험예 8에 따른 백서의 넙다리뼈(femur)의 길이 성장 효과 분석 결과이다.
도 12는 실험예 9에 따른 백서의 관절 부위에 있는 성장판을 H-E로 염색한 현미경 이미지이다.
도 13은 실험예 9에 따른 성장판에서 증식부의 길이를 비교한 그래프이다.
도 14는 실험예 9에 따른 성장판에서 비대부의 길이를 비교한 그래프이다.
도 15는 실험예 9에 따른 관절 전체 길이를 비교한 그래프이다.
도 16은 실험예 10에 따른 요추(Lumbar spine)의 골밀도 변화를 측정한 결과이다.
도 17은 실험예 10에 따른 넙다리뼈(femur)의 골밀도 변화를 측정한 결과이다.
도 18은 실험예 11에 따른 혈청 내 ALP 농도를 측정한 결과이다.
도 19는 실험예 11에 따른 혈청 내 오스테오칼신(osteocalcin)의 농도를 측정한 결과이다.
본 발명은 다양한 변환을 가할 수 있고 여러 가지 실시예를 가질 수 있는 바, 특정 실시예들을 도면에 예시하고 상세한 설명에 상세하게 설명하고자 한다. 그러나, 이는 본 발명을 특정한 실시 형태에 대해 한정하려는 것이 아니며, 본 발명의 사상 및 기술 범위에 포함되는 모든 변환, 균등물 내지 대체물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 본 발명을 설명함에 있어서 관련된 공지 기술에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.
본 발명의 총백 추출물은 뼈 성장 촉진용 약학 조성물의 유효성분으로 사용될 수 있다. 또한 총백 추출물은 뼈 성장을 촉진하므로 성장 장애의 예방 또는 치료 용도로 사용될 수 있다. 상기 성장 장애는 정상 변이 저신장증 또는 질병에 의해 2차적으로 오는 저신장증일 수 있다. 상기 정상 변이 저신장증은 가족성 저신장, 체질적 성장 지연, 협의의 특발성 저신장일 수 있다. 또한, 질병에 의해 2차적으로 오는 저신장증은 1차성 성장 장애(내인성 장애) 또는 2차성 성장 장애(외인성 성장 장애)일 수 있으며, 상기 1차성 성장 장애로는 골연골 이형성증, 염색체 이상(다운 증후군 또는 터너 증후군)에 의한 저신장, 부당 경량아(자궁 내 성장 지연), 프레더-윌리 증후군에 의한 저신장, 러셀-실버 증후군에 의한 저신장, 누난 증후군에 의한 저신장이 있으며, 상기 2차성 성장 장애로는 만성 전신성 질환에 의한 저신장, 성장호르몬 결핍증에 의한 저신장, 갑상샘 저하증에 의한 저신장, 쿠싱증후군에 의한 저신장, 정신사회적 왜소증이 있다.
총백은 파의 흰뿌리 부분을 의미하는 약재의 명칭이나, 본 명세서에서 '총백'은 학명 알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.)의 뿌리(통상의 총백), 지상부 또는 이를 포함하는 전초를 모두 포함하는 의미로 사용된다.
본 발명에 있어서, 상기 총백 추출물은 물, 유기용매 또는 이들의 혼합물을 추출 용매로서 이용하여 추출된 것일 수 있다. 이 때 사용되는 유기용매의 종류나 물과 유기용매의 혼합 비율은 특별히 제한되지 않는다.
예를 들어, 상기 유기용매는 저급 알코올, 헥산, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 및 디에틸에테르로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 용매일 수 있다. 상기 저급 알코올은 탄소수 1 내지 6의 알코올일 수 있다. 예를 들어, 저급 알코올로는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 노말-프로판올, 이소-프로판올, 노말-부탄올, 1-펜탄올, 2-부톡시에탄올 또는 에틸렌글리콜 등을 이용할 수 있다. 유기용매는 이 외에도 아세트산, DMFO(dimethyl-formamide), DMSO(dimethyl sulfoxide) 등의 극성 용매, 아세토나이트릴, 에틸 아세테이트, 메틸 아세테이트, 플루오로알칸, 펜탄, 2,2,4-트리메틸펜탄, 데칸, 사이클로헥산, 사이클로펜탄, 디이소부틸렌, 1-펜텐, 1-클로로부탄, 1-클로로펜탄, o-자일렌, 디이소프로필 에테르, 2-클로로프로판, 톨루엔, 1-클로로프로판, 클로로벤젠, 벤젠, 디에틸 에테르, 디에틸 설파이드, 클로로포름, 디클로로메탄, 1,2-디클로로에탄, 어닐린, 디에틸아민, 에테르, 사염화탄소 및 THF(Tetrahydrofuran) 등의 비극성 용매를 사용할 수도 있다.
하기 실시예에서 확인할 수 있는 바와 같이, 총백을 유기용매로 추출할 경우 총백 추출물은 상층액과 하층액으로 분리되는데, 상층액은 총백 추출물의 오일 분획이며, 하층액은 일반적인 용매 추출물에 해당한다. 하층액을 다시 원심분리 또는 여과지를 통해 분리하면 액상과 고형 상태의 잔사로 나눠지는데 이 때의 잔사는 총백 추출물의 왁스 분획이다. 따라서, 본 발명의 총백 추출물은 총백 추출물의 오일 분획, 총백 추출물의 액상 분획, 총백 추출물의 왁스 분획을 모두 포함하는 개념으로 해석된다. 한 구체예에서, 상기 총백 추출물은 총백 추출물의 오일 분획, 총백 추출물의 액상 분획 및 총백 추출물의 왁스 분획으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나 이상을 포함할 수 있다.
한 구체예에서, 상기 총백 추출물은 총백의 저급 알코올 추출물일 수 있으며, 바람직하게는 총백의 에탄올 추출물일 수 있다.
본 명세서에서 사용되는 용어 ‘추출물’은 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다. 즉, 총백 추출물은 상술한 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함한다. 또한, 상기 추출물이나 분획물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 총백 추출물에 포함된다.
한 구체예에서, 상기 총백 추출물은 총백의 유기용매 추출물을 제2의 유기용매로 재분획한 분획물일 수 있다. 여기에서, 총백의 유기용매 추출물이라 함은 광의로는 앞서 설명한 총백 추출물의 오일 분획, 총백 추출물의 액상 분획, 총백 추출물의 왁스 분획을 모두 포함하며, 협의로는 이 중 총백 추출물의 액상 분획을 의미한다. 그러므로, 한 구체예에서, 상기 총백의 유기 추출물을 제2의 유기용매로 재분획한 분획물은 총백 추출물의 액상 분획을 제2의 유기 용매로 재분획한 분획물을 의미할 수 있다. 다른 구체예에서, 상기 총백 추출물은 총백의 저급 알코올 추출물을 제2의 유기용매로 재분획한 분획물일 수 있다. 또다른 구체예에서, 상기 총백 추출물은 총백의 에탄올 추출물을 헥산으로 재분획한 분획물일 수 있다. 하기 실시예에서 살펴볼 수 있는 바와 같이, 이러한 총백의 지용성 성분이 다량 함유되어 있는 총백 추출물의 분획물은 매우 우수한 효과를 나타낸다.
본 명세서에서 총백을 언급하면서 사용되는 용어 ‘추출물’은 총백에 추출용매를 처리하여 얻은 조추출물뿐만 아니라 총백 추출물의 가공물도 포함한다. 예를 들어, 총백 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.
또한, 본 발명의 총백 추출물은 광의로는 총백 자체를 동물에게 투여할 수 있도록 제형화된 총백 가공물, 예컨대, 총백 건조물 또는 총백 분말도 포함하는 의미를 갖는다. 비록 본 발명에서 총백 추출물로 실험을 진행하긴 하였으나, 총백 가공물과 같은 형태로도 목적하는 효과를 달성할 수 있음은 당업자라면 예상가능할 것이다.
한편, 본 명세서에서 용어 ‘유효성분으로 포함하는’이란 총백 추출물의 효능 또는 활성을 달성하는 데 충분한 양을 포함하는 것을 의미한다. 본 발명의 한 구체예에서, 본 발명의 조성물 내에서 총백 추출물은 예를 들어, 0.001 mg/kg 이상, 바람직하게는 0.1 mg/kg 이상, 보다 바람직하게는 10 mg/kg 이상, 보다 더 바람직하게는 100 mg/kg 이상, 보다 더욱 더 바람직하게는 250 mg/kg 이상, 가장 바람직하게는 1 g/kg 이상 포함된다. 총백 추출물은 천연물로서 과량 투여하여도 인체에 부작용이 없으므로 본 발명의 조성물 내에 포함되는 총백 추출물의 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 상기 유효 성분 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 보조제를 사용하여 제조될 수 있으며, 상기 보조제로는 부형제, 붕해제, 감미제, 결합제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제 또는 향미제 등을 사용할 수 있다.
상기 약학 조성물은 투여를 위해서 상기 기재한 유효 성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 약학 조성물로 바람직하게 제제화할 수 있다.
상기 약학 조성물의 제제 형태는 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 좌제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 또는 주사 가능한 액제 등이 될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 캡슐제의 형태로의 제제화를 위해, 유효 성분은 에탄올, 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약제학적으로 허용 가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한, 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연 당, 옥수수 감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성 검, 소듐 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 소듐 벤조에이트, 소듐 아세테이트, 소듐 클로라이드 등을 포함한다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄 검 등을 포함한다.
액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용 가능한 약제학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다.
더 나아가 해당분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화 할 수 있다.
본 발명의 약학 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구 투여인 경우에는 정맥내 주입, 피하 주입, 근육 주입, 복강 주입, 경피 투여 등으로 투여할 수 있으며, 바람직하게는 경구 투여이다.
본 발명의 약학 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법, 투여 방식, 환자의 연령, 체중, 성, 병적 상태, 음식, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도 및 반응 감응성과 같은 요인들에 의해 다양하며, 보통으로 숙련된 의사는 소망하는 치료 또는 예방에 효과적인 투여량을 용이하게 결정 및 처방할 수 있다. 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 약학 조성물의 1일 투여량은 0.001-10g/㎏이다.
본 발명의 약학 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화 함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명은 또한 총백 추출물을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 식품 조성물은 상기 약학 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 알코올 음료류, 과자류, 다이어트바, 유제품, 육류, 초코렛, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류, 비타민 복합제, 건강보조식품류 등이 있다.
본 발명의 식품 조성물은 유효성분으로서 총백 추출물 또는 총백 분말뿐만 아니라, 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함할 수 있으며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소, 조미제 및 향미제를 포함한다. 상술한 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스, 올리고당 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 사이클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 향미제로서 천연 향미제 [타우마틴, 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등]) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 사용할 수 있다. 예컨대, 본 발명의 식품 조성물이 드링크제와 음료류로 제조되는 경우에는 본 발명의 총백 추출물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙, 및 각종 식물 추출액 등을 추가로 포함시킬 수 있다.
본 발명은 상기 총백 추출물을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물을 포함하는 건강기능식품을 제공한다. 건강기능식품이란, 총백 추출물 또는 총백 분말을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 것을 의미하나, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용시 발생할 수 있는 부작용 등이 없는 장점이 있다. 이와 같이 하여 얻어지는 본 발명의 건강기능식품은, 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 매우 유용하다. 이와 같은 건강기능식품에 있어서의 총백 추출물 또는 총백 분말의 첨가량은, 대상인 건강기능식품의 종류에 따라 달라 일률적으로 규정할 수 없지만, 식품 본래의 맛을 손상시키지 않는 범위에서 첨가하면 되며, 대상 식품에 대하여 통상 0.01 내지 50 중량%, 바람직하기로는 0.1 내지 20 중량%의 범위이다. 또한, 환제, 과립제, 정제 또는 캡슐제 형태의 건강기능식품의 경우에는 통상 0.1 내지 100 중량% 바람직하기로는 0.5 내지 80 중량%의 범위에서 첨가하면 된다. 한 구체예에서, 본 발명의 건강기능식품은 환제, 정제, 캡슐제 또는 음료의 형태일 수 있다.
본 발명은 또한 뼈 성장 촉진용 의약 또는 식품의 제조를 위한 총백 추출물의 용도를 제공한다. 상기한 바와 같이 총백 추출물 또는 총백 분말은 뼈 성장 촉진 용도로 이용될 수 있다.
또한 본 발명은 포유동물에게 유효량의 총백 추출물을 투여하는 것을 포함하는 뼈 성장 촉진 방법을 제공한다.
여기에서 사용된 용어 "포유동물"은 치료, 관찰 또는 실험의 대상인 포유동물을 말하며, 바람직하게는 인간을 말한다.
여기에서 사용된 용어 "유효량"은 연구자, 수의사, 의사 또는 기타 임상의에 의해 생각되는 조직계, 동물 또는 인간에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하는 유효 성분 또는 약학적 조성물의 양을 의미하는 것으로, 이는 해당 질환 또는 장애의 증상의 완화를 유도하는 양을 포함한다. 본 발명의 유효 성분에 대한 유효량 및 투여횟수는 원하는 효과에 따라 변화될 것임은 당업자에게 자명하다. 그러므로, 투여될 최적의 투여량은 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있으며, 질환의 종류, 질환의 중증도, 조성물에 함유된 유효성분 및 다른 성분의 함량, 제형의 종류, 및 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자에 따라 조절될 수 있다.
본 발명의 치료방법에서 총백 추출물을 유효 성분으로 포함하는 조성물은 경구, 직장, 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 흉골내, 경피, 국소, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 투여할 수 있다.
본 발명의 이점 및 특징, 그리고 그것들을 달성하는 방법은 상세하게 후술되어 있는 실시예들을 참조하면 명확해질 것이다. 그러나 본 발명은 이하에서 개시되는 실시예들에 한정되는 것이 아니라 서로 다른 다양한 형태로 구현될 것이며, 단지 본 실시예들은 본 발명의 개시가 완전하도록 하고, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 발명의 범주를 완전하게 알려주기 위해 제공되는 것이며, 본 발명은 청구항의 범주에 의해 정의될 뿐이다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시하나, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범주 및 기술사상 범위 내에서 다양한 변경 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연한 것이다.
[실시예: 총백 추출물 제조]
제조예 1: 알리움 피스툴로섬( Allium fistulosum L.)의 뿌리 추출물의 제조
알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.), 일반명 파의 흰 뿌리, 즉 총백 200 g을 10배의 70% 에탄올로 1시간씩 3회에 걸쳐 환류 냉각 추출한 후 여과한 액을 감압농축기를 이용해 농축한 다음 동결건조하여 총백 추출물을 제조하였다.
제조예 2: 알리움 피스툴로섬( Allium fistulosum L.)의 지상부 추출물의 제조
알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.), 일반명 파의 지상부 200 g을 10배의 70% 에탄올로 1시간씩 3회에 걸쳐 환류 냉각 추출한 후 여과한 액을 감압농축기를 이용해 농축한 다음 동결건조하여 파 지상부 추출물을 제조하였다.
제조예 3: 알리움 피스툴로섬( Allium fistulosum L.)의 전초 추출물의 제조
알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.), 일반명 파의 지상부 및 뿌리를 포함하는 전초 200 g을 10배의 70% 에탄올로 1시간씩 3회에 걸쳐 환류 냉각 추출한 후 여과한 액을 감압농축기를 이용해 농축한 다음 동결건조하여 파 전초 추출물을 제조하였다.
[실험예: 생체 외 실험]
실험예 1: 파의 식물 부위에 따른 조골세포 MG63 cell의 MTT분석에 의한 세포 독성검사
조골세포인 MG63 세포를 10% FBS, 100 unit/㎖ 페니실린(penicillin), 100 ㎎/㎖ 스트렙토마이신(streptomycin) 등을 포함시킨 DMEM 배양액을 사용하였고, 37℃, 5% CO2배양기에서 배양하였다. 96-웰 플레이트에 2 × 103 cells/well로 플레이팅(plating)하고, 다음날 제조예 1, 2 및 3의 추출물을 각각 10 ㎍/mL, 50 ㎍/mL 및 100 ㎍/mL로 처리한 후 6일 동안 배양하였다. 세포생존율을 측정하기 위하여 MTT Assay Kit (ab211091)를 이용하여, 3시간 동안 배양한 후 MTT Solvent로 용해시켜 590 nm에서 흡광도를 마이크로 플레이트 리더(microplate reader)로 측정하여 그 결과를 도 1에 나타내었다.
이에 따르면, 제조예 1의 뿌리 추출물, 제조예 2의 지상부 추출물 및 제조예 3의 전초 추출물을 MG63 세포에 처리한 결과, 정상군(Control)과 비교하여 세포 독성에 영향을 미치지 않음을 확인하였다.
각 군간 통계학적 유의성은 prism softward version7.0(Graphpad software inc., San Diego, CA, USA)을 이용하여 one way ANOVA와 T-test로 분석하였으며, 이하 실험예 2에서도 동일한 방법으로 분석하였다.
실험예 2: 파의 식물 부위에 따른 MG63 세포의 ALP 활성도 측정
실험예 1과 동일하게 배양된 MG63 세포를 준비하고, ALP (alkaline phosphatase) 활성도 측정은 아래와 같은 방법으로 수행하였다.
MG-63세포를 96-웰 플레이트에 각 웰당 2×103 개씩 분주한 후 1일 후, 제조예 1의 뿌리 추출물, 제조예 2의 지상부 추출물 및 제조예 3의 전초 추출물을 10 ㎍/㎖, 50㎍/㎖, 100 ㎍/㎖와 함께 5% CO2 조건으로 37℃ 배양기에서 배양하였다. 6일이 지난 후 셀을 lysate시켜 분석에 사용하였다. 분석은 Alkaline Phosphatase Assay Kit(Abcam, ab83369)를 사용하였으며 multiplate reader를 이용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였으며, 이에 따른 총백 에탄올 추출물에 의한 ALP 발현량 측정 결과를 도 2에 나타내었다.
이에 따르면, 일반 배지만을 사용한 대조군에 비하여 제조예 1의 뿌리 추출물 100 ㎍/㎖ 처리군을 제외한 제조예 1의 뿌리 추출물, 제조예 2의 지상부 추출물 및 제조예 3의 전초 추출물의 각 농도 처리군에서 ALP 활성이 유의적으로 증가된 것을 확인하였다. ALP는 세포의 파괴 정도를 나타내지만 세포 실험에서는 조골세포가 파괴되어야 새로운 세포가 생성되므로 ALP활성이 증가하는 것이 세포 성장이 높아지는 것을 의미한다.
상기 인산분해효소 활성 결과를 통하여 알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.)의 뿌리, 지상부 및 이를 포함하는 전초의 추출물 모두가 골 분화 활성 효과가 있음을 확인하였다.
이하에서는 알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.)의 뿌리 추출물, 즉 협의의 총백 추출물을 가지고 실험을 계속하였다.
실험예 3: 조골세포 MG63 cell의 MTT분석에 의한 세포 독성검사
96 well plate에 MG63 세포를 10% FBS, 100 unit/㎖ 페니실린(penicillin), 100 ㎎/㎖ 스트렙토마이신(streptomycin) 등을 포함시킨 DMEM 배양액을 사용하였고, 37℃, 5% CO2배양기에서 배양하였다. 세포가 각 well에 70%이상 찼을 때 배양액을 제거하고 대조군과 처리군으로 각각 구분하여 동일조건에서 배양하였다. 처리군은 배양된 조골세포에 배양된 MG63 세포에 1 ㎍/mL와 5 ㎍/mL로 제조예 1의 총백 추출물을 처리하고, 1시간 후에 100 ㎍/mL 팔미테이트(palmitate)를 처리하여 세포 독성을 유발하고, 24시간 후에 3-(4,5-dimethythiazol-2yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT) 용액을 10 ㎕를 대조군과 총백 처리군에 첨가한 후 4시간 동안 CO2배양기에서 배양하였다. 반응액을 제거하고 100 ㎕의 dimethyl sulfozide (DMSO)를 첨가하여 세포 내에 형성된 formazan결정을 용해시킨 후, 총백 추출물을 처리하지 않은 MG63 세포의 대조군, 1 ㎍/mL 총백 처리군, 및 5 ㎍/mL 총백 처리군을 준비하였다.
ELISA reader를 이용하여 570 ㎚ 파장에서 흡광도를 측정함으로써 대조군, 1 ㎍/mL 총백 처리군, 및 5 ㎍/mL 총백 처리군의 세포 생존율을 측정하고 그 결과를 도 3에 나타내었다.
총백 추출물은 팔미테이트에 의한 세포 독성을 억제하고 농도 의존적으로 세포사멸을 억제하고 세포의 생존을 높였으며, 고농도 총백 추출물은 대조군에 비해 세포 생존을 향상시켰다.
각 군 간 통계학적 유의성은 prism softward version7.0(Graphpad software inc., San Diego, CA, USA)을 이용하여 one way ANOVA와 T-test로 분석하였으며, 이하 실험예에서도 동일한 방법으로 분석하였다.
실험예 4: MG63 세포의 ALP 활성도 측정
실험예 3과 동일하게 배양된 MG63 세포를 준비하고, ALP (alkaline phosphatase) 활성도 측정은 아래와 같은 방법으로 수행하였다.
MG63 세포는 96 well plate에 분주하고, 무처리된 대조군과 제조예 1의 총백 추출물 처리군으로 구분하여 CO2배양기에서 배양하였다. 이때, 처리군에서는 시료에 제조예 1의 총백 추출물을 1㎍/㎖, 및 5㎍/㎖ 농도로 각각 처리하였다. 4일 후 배양된 세포의 상청액(supernatant)을 수집한 후 Abcam (ab83369)의 키트를 사용하여 ALP 활성도를 405 ㎚ 파장에서 측정하였다. standard의 흡광도를 이용하여 단백질 농도와 흡광도의 관계식을 작성하고 이를 적용하여 각 처리군별 세포액의 단백질 농도를 계산하였다. ALP농도를 단백질 농도로 나누어 아래와 같은 관계식에 적용하여 ALP 활성도를 계산하여 그 결과를 도 4에 나타내었다.
[식]
Figure PCTKR2019005037-appb-I000001
ALP는 세포가 파괴 정도를 나타내지만 세포 실험에서는 조골세포가 파괴되어야 새로운 세포가 생성되므로 ALP활성이 증가하는 것이 세포 성장이 높아지는 것인데 5㎍/㎖ 총백 처리군에서 ALP 활성을 높였으므로 이들이 세포 분열을 향상시키는 것으로 판단된다.
실험예 5: TGF-β 신호전달 관련 유전자의 mRNA 발현 분석
실험예 3과 동일한 조건으로 처리한 MG63세포의 대조군, 1 ㎍/mL 제조예 1의 총백 처리군, 및 5 ㎍/mL 제조예 1의 총백 처리군에서의 TGF-β 신호전달 관련 유전자의 mRNA 발현 분석 결과를 도 5 및 도 6에 나타내었다.
골세포 성장에 관여하는 신호전달에는 여러 가지가 있지만 특정한 호르몬을 처리하지 않을 때는 transforming growth factor-β(TGF-β와 wnt 신호전달이 활성화될 때 골세포 성장이 증가하게 된다. 이중이 TGF-β 신호전달에 관여하는 유전자의 mRNA 발현을 측정하였다. TGF-β 신호전달은 BMP-2 -> pSMAD1/5/7 -> SMAD4 -> 뼈 성장으로 이어진다.
본 연구에서는 고농도의 총백이 BMP-2의 발현을 증가시키므로 TGF-β 신호전달을 향상시킬 가능성이 높다. 또한 TGF-β에서 총백은 농도 의존적으로 pSMAD1/5/7의 결과 증가하는 SMAD4의 발현을 향상시켰다. 그러므로 총백 추출물은 TGF-β 수용체의 신호전달을 향상시키고 이것이 골의 세포 분열을 향상시킬 수 있을 것으로 사료된다.
실험예 6: wnt 신호전달 관련 유전자의 mRNA 발현 분석
실험예 3과 동일한 조건으로 처리한 GM63세포의 대조군, 1 ㎍/mL 제조예 1의 총백 처리군, 및 5 ㎍/mL 제조예 1의 총백 처리군에서의 wnt 신호전달 관련 유전자의 mRNA 발현 분석 결과를 도 7 및 도 8에 나타내었다.
wnt 신호전달에 관여하는 LRP가 활성화되면 β-catenin이 인산화되지 않고 세포질에서 핵으로 이동하여 wnt target 유전자의 발현을 증가시켜 wnt 신호전달이 증가하게 되므로 LRP5와 β-catenin의 mRNA 발현을 조사하였다. 특히 고농도 총백 추출물이 LRP5와 β-catenin mRNA 발현을 대조군에 비해 현저하게 증가시킨 것으로 나타났다. 따라서 총백 추출물은 조골세포에서 TGF-β와 wnt 신호전달을 통해 세포 성장을 증가시키는 것으로 사료된다.
[실시예: 총백 추출물 투여]
실시예 1
4주령 성장기 수컷 백서에게 AIN-93G 사료에서 지방 함량만 43열량%로 조정한 사료와 함께 제조예 1에 따라 제조된 총백 추출물을 경구로 10 mg/kg 체중(0.015% 식이)를 4주간 제공하였다.
실시예 2
제조예 1의 총백 추출물을 10 mg/kg 체중(0.015% 식이)을 제공하지 않고, 30 mg/kg 체중(0.045% 식이)로 제공한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 식이를 제공하였다.
음성 대조군
제조예 1의 총백 추출물을 제공하지 않은 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 식이를 제공하였다.
양성 대조군
제조예 1의 총백 추출물 대신에 20㎍/kg체중(유트로핀_엘지생명과학)을 피하 주사 투여한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 식이를 제공하였다.
[실험예: 생체 내 시험]
실험예 7: 식이 공급 후 체중 측정
도 9는 4주 동안 수컷 백서에게 AIN-93G 사료에서 지방 함량만 43열량%로 조정한 사료를 공급한 후 체중을 측정하여 비교한 그래프이다.
이에 따르면, 4주 동안 식이를 공급한 후 체중은 대조군과 총백 추출물 투여 군간의 통계적으로 유의한 차이는 없었다.
실험예 8: 뼈 성장 효과 분석
백서의 정강뼈(tibia)와 넙다리뼈(femur)의 길이 성장을 관찰하여 그 결과를 아래의 도 10에 및 도 11에 나타내었다.
도 10에 따르면, 4주 동안 식이를 공급한 후 정강뼈(tibia)의 길이는 음성대조군(35.966mm)에 비해 양성대조군(36.704mm)에서 통계적으로 유의하게 증가하였고, 실시예 2는 37.833mm로 음성대조군보다 105.19% 길었으며, 양성대조군 보다 더 큰 값을 나타내었다.
도 11에 따르면, 4주 동안 식이를 공급한 후에 넙다리뼈(femur) 길이는 양성대조군은 음성대조군과 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았으나 30 mg/kg 체중으로 식이 제공한 실시예 2에서는 음성대조군에 비해 통계적으로 유의하게 길어진 것을 관찰할 수 있었다.
실험예 9: 성장판의 H-E 염색
백서의 관절 부위에 있는 성장판을 H-E로 염색한 현미경 이미지를 도 12에 나타내었고, 성장판에서 증식부와 비대부의 길이를 비교한 그래프를 도 13 및 도 14에 나타내었으며, 관절 전체 길이를 비교한 그래프를 도 15에 나타내었다.
이에 다르면, 세포핵(nucleus)이 일정하게 증가하는지를 살펴 보았는데 음성대조군은 성장판 부위가 좁고 셀들이 불규칙적으로 나열되어 있는 것을 볼 수 있었으며, 양성 대조군은 성장판 부위가 넓고 세포의 핵들이 규칙적으로 나열 되어 있는 것을 볼 수 있었다.
실시예 1과 2는 음성대조군에 비해서는 농도 의존적으로 성장판 부위가 넓어지고 세포도 규칙적으로 나열된 것을 확인할 수 있었다.
실험예 10: 골밀도 변화 관찰
4주 후의 요추(Lumbar spine)의 골밀도 (bone mineral density; BMD)와 넙다리뼈(femur)의 골밀도를 측정하여 도 16 및 도 17에 각각 나타내었다.
도 16에 따르면, 4주 동안 요추(Lumbar spine)의 골밀도 (bone mineral density; BMD)의 증가량은 실시예 2가 음성대조군에 비해 많았으며, 도 17에 따르면, 넙다리뼈(femur)의 BMD의 증가량도 실시예 2가 음성대조군에 비해 많았으며 양성대조군도 음성대조군에 비하여 넙다리뼈의 골밀도를 증가시켰다.
실험예 11: 혈청 내 ALP 농도
백서를 해부하여 혈청 내 ALP 농도를 측정한 결과를 도 18에 나타내었고, 혈청내 오스테오칼신(osteocalcin)의 농도를 도 19에 나타내었다.
이에 따르면, 뼈의 분해 정도를 나타내는 ALP 농도는 음성대조군에 비해 실시예 2에서 낮게 나타났고, 양성대조군과 유사한 값을 나타내었다.
또한, 뼈의 합성 정도를 알 수 있는 지표인 혈청 내 오스테오칼신(osteocalcin)의 농도는 음성대조군에 비해 실시예 2에서 높게 나타났으며 양성대조군과 통계적인 차이가 없었다.
결과적으로 넙다리뼈(femur), 정강뼈(tibia)의 길이가 음성대조군에 비해 실시예 2에서 더 긴 것과 혈청 내 오스테오칼신 농도와 양의 상관 관계를 나타낸다.
이상, 본 발명의 실시예들에 대하여 설명하였으나, 해당 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서, 구성 요소의 부가, 변경, 삭제 또는 추가 등에 의해 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있을 것이며, 이 또한 본 발명의 권리범위 내에 포함된다고 할 것이다.

Claims (17)

  1. 총백 추출물 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 뼈 성장 촉진용 약학 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 총백은 알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.)의 뿌리, 지상부 또는 전초인 것을 특징으로 하는 뼈 성장 촉진용 약학 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 총백 추출물은 물, 탄소수 1-4의 알코올, 또는 이들의 혼합용매에 의해 추출된 것을 특징으로 하는 뼈 성장 촉진용 약학 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 뼈 성장 촉진용 조성물은 TGF-β(Transforming growth factor beta) 수용체 및 wnt 수용체 중에서 선택된 1종 이상의 신호전달을 향상시켜 골 성장을 유도하는 것을 특징으로 하는 뼈 성장 촉진용 약학 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 뼈 성장 촉진용 조성물은 성장기 어린이 또는 청소년의 뼈 성장 촉진용인 것을 특징으로 하는 뼈 성장 촉진용 약학 조성물.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 뼈 성장 촉진용 조성물은 비만인 성장기 어린이 또는 청소년의 뼈 성장 촉진용인 것을 특징으로 하는 뼈 성장 촉진용 약학 조성물.
  7. 총백 추출물을 유효성분으로 포함하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 총백은 알리움 피스툴로섬(Allium fistulosum L.)의 뿌리, 지상부 또는 전초인 것을 특징으로 하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물.
  9. 제7항에 있어서,
    상기 총백 추출물은 물, 탄소수 1-4의 알코올, 또는 이들의 혼합용매에 의해 추출된 것을 특징으로 하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물.
  10. 제7항에 있어서,
    상기 뼈 성장 촉진용 조성물은 TGF-β(Transforming growth factor beta) 수용체 및 wnt 수용체 중에서 선택된 1종 이상의 신호전달을 향상시켜 골 성장을 유도하는 것을 특징으로 하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물.
  11. 제7항에 있어서,
    상기 뼈 성장 촉진용 조성물은 성장기 어린이 또는 청소년의 뼈 성장 촉진용인 것을 특징으로 하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물.
  12. 제7항에 있어서,
    상기 뼈 성장 촉진용 조성물은 비만인 성장기 어린이 또는 청소년의 뼈 성장 촉진용인 것을 특징으로 하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물.
  13. 총백을 물, 탄소수 1-4의 알코올, 또는 이들의 혼합용매에 의해 추출하여 총백 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 뼈 성장 촉진용 약학 조성물의 제조방법.
  14. 총백을 물, 탄소수 1-4의 알코올, 또는 이들의 혼합용매에 의해 추출하여 총백 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 뼈 성장 촉진용 식품 조성물의 제조방법.
  15. 뼈 성장 촉진용 의약 제조를 위한 총백 추출물의 용도.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 뼈 성장 촉진용 의약은 성장 장애의 예방 또는 치료용 의약인 것을 특징으로 하는 총백 추출물의 용도.
  17. 성장 장애 환자에게 총백 추출물을 유효성분으로 포함하는 약학 조성물을 투여하는 것을 포함하는 성장 장애의 치료방법.
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