WO2019106907A1 - 乳化組成物 - Google Patents

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WO2019106907A1
WO2019106907A1 PCT/JP2018/033592 JP2018033592W WO2019106907A1 WO 2019106907 A1 WO2019106907 A1 WO 2019106907A1 JP 2018033592 W JP2018033592 W JP 2018033592W WO 2019106907 A1 WO2019106907 A1 WO 2019106907A1
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WO
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composition
glycosphingolipid
hydroxyl groups
emulsion composition
molecule
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PCT/JP2018/033592
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English (en)
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Inventor
渡邉 誠
圭子 松井
千晶 稲本
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キッコーマン株式会社
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    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/02Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by special physical form
    • A61K8/04Dispersions; Emulsions
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/68Sphingolipids, e.g. ceramides, cerebrosides, gangliosides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin

Definitions

  • the present invention relates to an emulsified composition in which particles containing glycosphingolipid are dispersed.
  • a glycosphingolipid is a type of glycolipid in which a sugar chain is glycosidically bonded to ceramide, and is used in cosmetics, food, medicine and the like.
  • various attempts have been made to improve the dispersion state of glycosphingolipids (Patent Documents 1 to 5).
  • Ceramide is an ester of free fatty acid and sphingoid, and is known to have a physical barrier function as an intercellular lipid component of the stratum corneum. Moreover, in recent years, there is a report that ceramide which is an ester of free fatty acid having a specific carbon number and sphingoid promotes the production of cornified envelope protein in normal epidermal cells (Patent Document 1). However, there has been no report that a glycosphingolipid in which a sugar chain is linked to ceramide passes through the stratum corneum and acts on epidermal cells to promote the production of a cornified envelope protein.
  • Patent Document 6 a skin quality improving composition comprising hyaluronic acid or a salt thereof and a glycosphingolipid.
  • Patent Document 6 does not disclose nanoization of glycosphingolipid and the effect exerted by combining it with hyaluronic acid and the like.
  • An emulsion composition for promoting the production of a cornified envelope protein comprising particles containing glycosphingolipid.
  • An emulsified composition containing particles containing glycosphingolipid is a cosmetic for promoting the production of a cornified envelope protein.
  • An emulsified composition containing particles containing glycosphingolipid is a cosmetic for promoting the production of a cornified envelope protein.
  • An emulsified composition containing particles containing glycosphingolipid is a cosmetic for promoting the production of a cornified envelope protein.
  • An emulsified composition containing particles containing glycosphingolipid is a cosmetic for promoting the production of a cornified envelope protein.
  • [20] The emulsified composition according to any one of [13] to [19], further containing a phospholipid.
  • [21] The composition according to [20], wherein the phospholipid is localized near the surface of the particle.
  • [22] The composition according to any one of [13] to [21], wherein the particles are dispersed without a surfactant.
  • [23] The composition according to any one of [13] to [22], wherein the glycosphingolipid is derived from a microorganism.
  • a method for promoting production of a cornified envelope protein which comprises transdermally administering the composition according to any one of [13] to [23] to a subject.
  • [25] Use of a particle comprising glycosphingolipid for preparing an emulsified composition for promoting the production of a cornified envelope protein.
  • [29] The use according to any one of [25] to [28], further using a water-soluble polymer.
  • composition is a cosmetic for promoting the production of cornified envelope protein.
  • “stability” or “stability” as used in the present specification means a state in which the composition does not substantially precipitate when left to stand at 25 ° C for 4 weeks or more, preferably Means that the particle size of particles containing glycosphingolipids is maintained at nanoscale for 4 weeks or more (including the particle size measured after manually stirring it if it produces a precipitate) .
  • glycosphingolipids can pass through the stratum corneum and act on epidermal cells to promote the production of the cornified envelope protein.
  • the moistening effect is enhanced by combining nanosized glycosphingolipid with a water-soluble polymer such as hyaluronic acid.
  • the emulsified composition is such that particles comprising glycosphingolipids have an average particle size of less than 100 nm, the composition is highly transparent and passes easily through the stratum corneum.
  • the bacteria-derived phospholipid is contained, thereby stabilizing the dispersion of the particles forming the liposome, and the emulsion composition is in the absence of a surfactant. It is stable for a long time and the nanoscale particle size of the particles is maintained for a long time.
  • composition obtained by diluting the composition obtained in Example 3 with water by a factor of 5 was applied to the skin of the forearm of the subject, and the composition obtained in Example 3 was not subjected to high-pressure emulsification treatment
  • the composition of Comparative Example 7 which differs only in points is applied by diluting it five times with water, and the composition obtained in Example 3 is different from the composition obtained in Example 3 only in that it does not contain high-pressure emulsifying treatment. It is a graph which shows the improvement rate of the stratum corneum water content of the skin after 2 days and 4 days after application about the case where the composition of Example 8 is diluted 5 times with water, and is applied.
  • the composition obtained by diluting the composition obtained in Example 3 with water by a factor of 5 was applied to the skin of the forearm of the subject, and the composition obtained in Example 3 was not subjected to high-pressure emulsification treatment
  • the composition of Comparative Example 7 which differs only in points is applied by diluting it five times with water, and the composition obtained in Example 3 is different from the composition obtained in Example 3 only in that it does not contain high-pressure emulsifying treatment. It is a graph which shows the improvement rate of the amount of transepidermal water loss of the skin two days after application, and four days after application, when the composition of Example 8 is diluted 5 times with water, and is applied.
  • a particle comprising glycosphingolipid, a polyhydric alcohol optionally having 3 or more hydroxyl groups in the molecule, and a polyhydric alcohol optionally having 2 hydroxyl groups in the molecule And providing an emulsion composition for promoting the production of a cornified envelope protein.
  • the glycosphingolipid contained in the emulsified composition of the present invention is a kind of glycolipid in which a sugar is glycosidically bonded to ceramide, and includes galactosylceramide, glucosylceramide, galactosylphytoceramide, glucosylphytoceramide, sphingomyelin and the like.
  • Glycosphingolipids can be obtained from animals, microorganisms, algae, or plants, or can be synthesized.
  • microorganism-derived glycosphingolipids examples include glycosphingolipids produced by bacteria of the sphingomonas ( Sphingomonas ) genus or sphingobacterium ( Sphingobacterium ) genus.
  • Sphingomonas sphingomonas
  • Sphingobacterium sphingobacterium
  • the kind of sugar which comprises glycosphingolipid changes with whether it originates in any (nonpatent literature 1).
  • phospholipids are usually contained in the composition.
  • the content of phospholipids differs depending on whether it is from animals or from microorganisms, and the content of the latter is higher.
  • glycosphingolipids of microbial origin glycosphingolipids produced by bacteria of the genus Sphingomonas are more preferred.
  • the composition of the present invention may contain one or more of glycosphingolipids of various origins, and in particular, it is preferable to contain glycosphingolipids of microbial origin.
  • the coexisting phospholipids contribute to the stability of the composition to obtain a more stable composition. Therefore, when the “sphingoglycolipid” in the present specification is derived from a microorganism, the composition contains, in addition to the glycosphingolipid, a substance other than the glycosphingolipid such as phospholipid.
  • compositions containing a glycosphingolipid of biological origin and concomitantly containing a phospholipid a composition containing 30 parts by mass to 60 parts by mass of the phospholipid relative to 100 parts by mass of the glycosphingolipid is particularly preferable.
  • Glycosphingolipids of microbial origin are typically represented by the following structural formula.
  • R 1 in the formula (1) is a sugar moiety composed of 4 hexoses or 1 uronic acid selected from the group consisting of uronic acid, glucosamine, galactose, and mannose.
  • the number, bonding order, bonding format and optical isomerism of each hexose are not particularly limited as long as 1 to 4 of uronic acid, glucosamine, galactose and mannose are combined.
  • combinations of R 1 mention may be made of those in which uronic acid is the only hexose, and those consisting of 4 hexoses composed of uronic acid, glucosamine, galactose and mannose.
  • the following structures A and B can be illustrated as a specific example of R 1 .
  • R 2 in the formula (1) is an alkyl group, an alkenyl group or an alkynyl group which may have a cycloalkyl group.
  • the carbon number of R 2 is not particularly limited, but is preferably in the range of 15 to 25.
  • the alkyl group, the alkenyl group and the alkynyl group of R 2 may be linear or branched and may or may not be substituted with a hydroxyl group or the like.
  • a cycloalkyl group such as a cyclopropyl group may be present in the chain of the alkyl group.
  • the position of the double bond of the alkenyl group and the position of the triple bond of the alkynyl group are not particularly limited.
  • R 3 in the formula (1) is an alkyl group.
  • the alkyl group that R 3 may adopt may be linear or branched, and may or may not be substituted by hydroxyl group or the like.
  • the carbon number of the alkyl group is usually in the range of 1 to 50, preferably in the range of 15 to 25.
  • a linear alkyl group having 12 carbon atoms can be exemplified.
  • R 1 in the formula (1) is a sugar moiety represented by the structures A and B, and R 3 is a linear alkyl group having 12 carbon atoms And glycosphingolipids, which are
  • R 2 of the formula (1) is represented by the structure a, b or c and R 3 is a linear alkyl group having 12 carbon atoms it can.
  • R 1 in the formula (1) is a sugar moiety represented by the structures A and B
  • R 2 is represented by the structures a, b or c
  • R 3 has 12 carbon atoms
  • glycosphingolipids which are linear alkyl groups There may be mentioned glycosphingolipids which are linear alkyl groups.
  • the emulsifying composition according to the preferred embodiment of the present invention preferably contains 1 to 10% by mass, more preferably 2 to 8% by mass, still more preferably 3 to 7% by mass of glycosphingolipid. Do. Also, particles containing glycosphingolipids, in a preferred embodiment of the present invention, are dispersed at the nanoscale.
  • the glycosphingolipid has an average particle size of less than 100 nm, usually has an average particle size of 30 nm or more and less than 100 nm, and preferably has an average particle size of 60 to 90 nm.
  • the glycosphingolipid has a structure in which a saccharide is further bonded to ceramide, it passes through the stratum corneum more easily and acts on surface cells, Promotes the production of cornified envelope proteins such as filaggrin, involucrin, loricrin and transglutaminase.
  • the particles form a liposome and are stably dispersed in cooperation with a coexistent substance described later.
  • the liposome can also incorporate into it a hydrophobic functional substance, typically an active substance that acts on surface cells, to assist transport to the surface cells.
  • SALD-7500 nano manufactured by Shimadzu Corporation.
  • the emulsion composition contains a polyhydric alcohol having 3 or more hydroxyl groups.
  • polyhydric alcohols having three or more hydroxyl groups include polyglycerins such as glycerin, diglycerin, triglycerin and tetraglycerin, and one or more of these can be contained.
  • polyglycerin preferably has a carbon number equal to or less than that of decaglycerin and may be used alone, but is preferably used in combination with glycerin or diglycerin.
  • Glycerin is particularly preferable as the polyhydric alcohol having 3 or more hydroxyl groups.
  • the content of polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups can be relatively reduced. Therefore, in the composition of the present invention, the content varies depending on the content of polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule, but the content of polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule is preferably 5 to It is 50% by weight, more preferably 10 to 45% by weight, still more preferably 25 to 40% by weight.
  • the emulsified composition further contains a polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule.
  • a polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule Coexistence of a polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule with a polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule can greatly reduce the bubbles generated in the latter case alone, and the defoaming treatment becomes unnecessary. .
  • numerator it has the effect which suppresses the increase in the viscosity by addition of the said polyhydric alcohol. By this, the viscosity of the composition obtained can be suppressed low, and a cosmetic with a refreshing feel can be provided.
  • polyhydric alcohols having two hydroxyl groups in the molecule examples include ethylene glycol, diethylene glycol, polyethylene glycol (average molecular weight 1000 or less), propylene glycol, 1,2-pentanediol, 1,3-butylene glycol, dipropylene glycol And 1,2-hexanediol, 1,2-octanediol, isoprene glycol, hexylene glycol and the like.
  • 1,3-butylene glycol or propylene glycol is preferable, and 1,3-butylene glycol is particularly preferable.
  • the polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule can reduce the generation of bubbles due to the polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule and adversely affects the dispersion effect by the polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule. It is preferable to contain the quantity of the range which does not exert. Therefore, in the composition according to the preferred embodiment of the present invention, the content of polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in a molecule is preferably 3 to 25% by weight, more preferably 5 to 20% by weight. More preferably, it is 7 to 15% by weight.
  • the emulsion composition of the present invention may optionally contain a surfactant such as a nonionic surfactant, a cationic surfactant or an anionic surfactant.
  • a surfactant such as a nonionic surfactant, a cationic surfactant or an anionic surfactant.
  • particles containing glycosphingolipids are stably dispersed in nanoscale in the presence of the above-mentioned polyhydric alcohol and typically phospholipid, even without containing surfactant. Can. Therefore, it is preferable to basically have a composition that does not contain a surfactant.
  • phospholipids phosphates are compared as compared to a composition prepared using glycosphingolipids derived from animals And an ester of fatty acid, which is typically high in cell membrane phospholipids, and this component is preferable because it enhances the dispersion stability of the composition.
  • a surfactant other than a phospholipid to be contained along with the preparation of the composition is substantially It is preferable to set it as the composition which is not contained, ie, the composition which does not contain surfactant other than a phospholipid. Also, the presence of such phospholipids facilitates the passage of glycosphingolipid nanoparticles through the stratum corneum. Therefore, it is useful in promoting the production of cornified envelope protein.
  • the phospholipid may contain those derived from organisms other than microorganisms such as bacteria, but in any case, the content of the phospholipid in the composition is preferably 0.005 to 3.0% by mass, 0.05 to 1.0% by mass is more preferable.
  • Examples of phospholipids include phosphatidyl choline, phosphatidyl ethanolamine, phosphatidyl glycerol, lysophosphatidyl choline, and lysophosphatidyl ethanolamine.
  • nonionic surfactant for example, sorbitan ester (eg, sorbitan monolaurate, sorbitan monooleate, sorbitan monoisostearate), polyoxyethylene sorbitan ester (eg, polyoxyethylene sorbitan monoisostearate, poly Oxyethylene sorbitan monolaurate, polyoxyethylene sorbitan monooleate), glycerol ether (eg glycerol monoisostearate, glycerol monomyristate), polyoxyethylene glycerol ether (eg polyoxyethylene glycerol monoisostearate) Ethylene glycerol monomyristate), polyglycerin fatty acid ester (eg diglyceryl monostearate, decaglyceryl decal) Stearate, diglyceryl diisostearate, glycerin fatty acid ester (eg glyceryl monocaprate, glyceryl monolaurate,
  • polyoxyethylene octyl phenol ether polyoxyethylene octyl phenol ether
  • anionic surfactant for example, salts of higher fatty acids (eg, oleic acid, stearic acid, isostearic acid, palmitic acid, myristic acid, behenic acid) (eg, diethanolamine salt, triethanolamine salt, amino acid salt, potassium)
  • salts, sodium salts) include salts, sodium salts), alkali salts of ether carboxylic acids, N-acyl amino acid salts, N-acyl sarcone salts and higher alkyl sulfonates.
  • cationic surfactants or amphoteric surfactants there can be mentioned, for example, alkyl quaternary ammonium salts, polyamines and alkylamine salts.
  • alkyl quaternary ammonium salts Preferably, they are phosphatidyl choline, phosphatidyl ethanolamine, or phosphatidyl glycerol.
  • the emulsion composition further comprises a water soluble polymer.
  • a water soluble polymer By combining particles containing glycosphingolipids, particularly nanoparticles, with a water-soluble polymer, the moisturizing effect of the water-soluble polymer can be significantly improved.
  • the water-soluble polymer is typically a water-soluble polymer compound (including a so-called semi-polymer compound) having a molecular weight of 1000 or more, and is a component that exerts a moisturizing effect when applied to the skin.
  • water-soluble polymers mention may be made of hyaluronic acid, salts of hyaluronic acid, derivatives of hyaluronic acid, carboxyvinyl polymers, salts of carboxyvinyl polymers, hydroxyethylcellulose, salts of hydroxyethylcellulose, carboxymethylcellulose and salts of carboxymethylcellulose And may contain one or more of these.
  • the water-soluble polymer is more preferably at least one selected from the group consisting of hyaluronic acid, salts of hyaluronic acid, and derivatives of hyaluronic acid.
  • Examples of salts of hyaluronic acid include alkali metal salts such as sodium and potassium; alkaline earth metal salts such as calcium and magnesium; metal salts such as aluminum and zinc; and sodium salt is preferable.
  • Examples of derivatives of hyaluronic acid include propylene glycol hyaluronic acid, sodium acetylated hyaluronic acid, hydroxypropyltrimonium hyaluronic acid, glyceryl hydrolyzed hyaluronic acid, hyaluronic acid crosspolymer and the like.
  • the carboxyvinyl polymer is a crosslinkable polymer, which is an acidic polymer compound having a carboxyl group generated by a polymerization reaction with a vinyl group, and the main constituent monomer is typically acrylic acid.
  • Examples of salts of carboxyvinyl polymers include alkali metal salts such as sodium and potassium; alkaline earth metal salts such as calcium and magnesium; and metal salts such as aluminum and zinc.
  • Hydroxyethylcellulose is a cellulose ether which has been hydroxyethylated to at least one part of the hydroxyl groups of cellulose.
  • Examples of salts of hydroxyethyl cellulose include alkali metal salts such as sodium and potassium; alkaline earth metal salts such as calcium and magnesium; and metal salts such as aluminum and zinc.
  • Carboxymethylcellulose is a cellulose ether carboxymethylated to at least one part of the hydroxyl group of cellulose.
  • Examples of salts of carboxymethylcellulose include alkali metal salts such as sodium and potassium; alkaline earth metal salts such as calcium and magnesium; and metal salts such as aluminum and zinc.
  • the average molecular weight of the water-soluble polymer is not particularly limited, but 100,000 or less is preferable, and 10,000 or less is particularly preferable. When the average molecular weight of the water-soluble polymer is a predetermined value or less, the transparency (transparency after solution) of the entire composition of the present invention can be made high.
  • the average molecular weight of the water-soluble polymer can be measured, for example, by a laser diffraction / scattering method, and may be measured, for example, using an analyzer used in the examples described later.
  • the content of the water-soluble polymer is preferably 0.01 to 1.00% by mass, and more preferably 0.05 to 0.50% by mass.
  • the emulsified composition of the present invention may optionally contain a fat and oil component, it is preferable not to contain from the viewpoint of micronization of particles containing glycosphingolipid.
  • fat and oil components include fatty acids (eg, oleic acid, behenic acid, isostearic acid, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, behenic acid, linoleic acid, ⁇ -linolenic acid, columbinic acid, eicosa-(n-6) , 9, 13) -trienoic acid, arachidonic acid, ⁇ -linolenic acid, thymnodonic acid, hexaenoic acid), ester oil (eg pentaerythritol-tetra-2-ethylhexanoate, isopropyl myristate, butyl stearate, hexyl laure) , Octyl
  • composition of the present invention may contain polysaccharides as an optional component.
  • Some conventional glycosphingolipid-containing compositions contain monosaccharides together with polyhydric alcohols, but in the composition of the present invention monosaccharides in that they are stably dispersed at the nano level with fingoglycolipids. More preferably, polysaccharides are contained.
  • polysaccharides to be added to the composition of the present invention include pectin, kappa carrageenan, locust bean gum, guar gum, hydroxypropyl guar gum, hydroxypropyl gua gum, xanthan gum, karaya gum, tamarind seed polysaccharide, gum arabic, tragacanth gum, hyaluronic acid and salts of hyaluronic acid Hyaluronic acid derivatives, chondroitin sulfate, salts of chondroitin sulfate (for example, sodium salt), alginic acid, salts of alginic acid (for example, sodium salt) and the like are mentioned. Among them, hyaluronic acid, salts of hyaluronic acid and hyaluronic acid derivatives are preferable.
  • the emulsion composition according to a preferred embodiment of the present invention contains a polyhydric alcohol having 3 or more hydroxyl groups in the molecule, in which case the weight ratio of glycosphingolipid to the polyhydric alcohol having 3 or more hydroxyl groups in the molecule Can be relatively large, and the composition can be high in content of glycosphingolipids.
  • the dispersion effect by the polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule It is preferable to well balance the defoaming effect of a polyhydric alcohol having two or more hydroxyl groups in the molecule.
  • the weight ratio (DA: MA) of the polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule to the polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule is preferably Is 1: 1 to 1: 4, more preferably 1: 2 to 1: 3.
  • the content of polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule is preferably 30 to 50% by weight of the whole composition.
  • the weight ratio of polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule to the glycosphingolipid (MA: S ) Is preferably 2: 1 to 9: 1, more preferably 5: 1 to 8: 1.
  • the content of each component can be measured by commercially available high performance liquid chromatography (HPLC), thin layer chromatography (TLC) or the like.
  • the emulsified composition contains a polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule and a polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule, preferably containing the same at the ratio described above. Therefore, the viscosity of the composition can be kept low, and a cosmetic having a refreshing feel can be provided.
  • the composition according to the present invention can be used typically as a skin quality improving agent (for skin quality improvement), as a raw material for cosmetics, medicines, etc. Can be used when preparing the Therefore, depending on the final product, in addition to amino acids, nucleic acids, collagen, acetylglucosamine etc., excipients such as dextrin, cellulose, lactose etc., vitamins such as vitamin B2, vitamin B6, vitamin B12, ascorbic acid or salts thereof, Minerals such as iron and calcium, lubricants, flavors, alginic acid or salts thereof, thickeners such as xanthan gum, emulsifiers such as sucrose fatty acid ester and glycerin fatty acid ester, pH adjusters such as sodium hydrogencarbonate and citric acid It can be contained to produce various products.
  • a skin quality improving agent for skin quality improvement
  • excipients such as dextrin, cellulose, lactose etc.
  • vitamins such as vitamin B2, vitamin B6, vitamin B12,
  • the cosmetic composition in which the composition of the present invention is used can be exemplified as a typical example of a product intended to improve the moisture retention of the skin or to enhance the barrier properties, but in particular, it is possible to produce a cornified envelope protein.
  • the composition of the present invention can be applied to a subject suffering from atopic dermatitis.
  • a cosmetic which is particularly excellent in moisture retention is provided.
  • cosmetic soap for example, cosmetic soap, shampoo, face wash, rinse, eye cream, eye shadow, cream / milky lotion, cosmetic liquid, cosmetic liquid, perfume, whitening agent, cosmetic oil, hair cosmetic, hair dye, Perfume, powder, pack, shaving cream, shaving lotion, suntan oil, suntan oil, suntan lotion, suntan lotion, suntan cream, suntan cream, foundation, powder perfume, blusher, mascara, black ink, nail cream,
  • nail enamels for removing nails, nail enamel removal solutions, hair washing agents, bath cosmetics, lipsticks, lip balms, eyeliners, toothpastes, toothpastes, deodorants, eau de cologne, bleaching agents, hair restorers and hair restorers.
  • the cosmetics which concern on this embodiment are excellent not only in moisture retention property but in transparency, it made the product which high transparency is requested
  • a fat and oil component for example, a UV absorber, an IR absorber, an emulsifier, a surfactant, an antiseptic, an anti-mildew agent, an antioxidant Agents, whitening agents, polysaccharides, fluorescent materials, pigments, dyes, perfumes, sequestering agents, binders, fillers, antibiotics, blood circulation promoters, anti-inflammatory agents, cell activators and the like.
  • a fat and oil component for example, a UV absorber, an IR absorber, an emulsifier, a surfactant, an antiseptic, an anti-mildew agent, an antioxidant Agents, whitening agents, polysaccharides, fluorescent materials, pigments, dyes, perfumes, sequestering agents, binders, fillers, antibiotics, blood circulation promoters, anti-inflammatory agents, cell activators and the like.
  • a glycosphingolipid typically a glycosphingolipid derived from bacteria as described above and a polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule are mixed with water, and the resulting mixture is subjected to high pressure treatment
  • An emulsified composition is prepared by adding and mixing a polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule to the obtained emulsified mixture. According to such a process, although nano-scale fine particles are stably dispersed, the foam is hardly foamed in the manufacturing process, and the process of reducing the foam is not necessary.
  • the order of addition may be arbitrary, for example, after mixing the glycosphingolipid with water A polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule may be added.
  • a high pressure emulsification device such as a high pressure homogenizer. Since the average particle diameter of the particles is different depending on the conditions of the high pressure treatment process, it is preferable to perform the high pressure treatment under conditions such as higher pressure, in particular, when it is desired to form fine particles.
  • a chamber type high pressure homogenizer such as a microfluidizer (manufactured by Micro Fluid Disc Co., Ltd.) or a nanomizer (manufactured by Yoshida Kikai Kogyo Co., Ltd.) may be used.
  • the mixing after adding the polyhydric alcohol having three or more hydroxyl groups in the molecule is preferably gently stirred and mixed to suppress the generation of bubbles, and a normal stirring process using a stirrer or a vortex You can do
  • a glycosphingolipid obtained by extraction from Sphingomonas paucimobilis is a main component and also contains phospholipid
  • 1,3-butylene glycol is added, high pressure emulsification treatment is performed under the condition of 90 MPa or more using a high pressure homogenizer (manufactured by APV, trade name: APV-1000), and then
  • Examples 6 to 8 After the same glycosphingolipid as in Example 1 is dispersed in water, glycerin is added without adding 1,3-butylene glycol, and high-pressure emulsification treatment is carried out with a high-pressure homogenizer as in Example 1 to obtain an emulsion composition. I got a thing.
  • Comparative Examples 1 to 5 An emulsion composition was obtained in the same manner as in Example 1, except that glycerin was not added after high-pressure emulsification treatment was performed using a high-pressure homogenizer.
  • Comparative Examples 7 to 8 The same glycosphingolipid as in Example 1 was dispersed in water, and after adding 1,3-butylene glycol and glycerin, an emulsion composition was obtained without performing high-pressure emulsification treatment with a high-pressure homogenizer.
  • the compounding quantity (unit is mass%) of each component in the composition of each Example and a comparative example is as follows.
  • Average particle size (nm) The average particle size of the particles in the composition of each example and each comparative example was measured using SALD-7500 nano (manufactured by Shimadzu Corporation).
  • compositions of the respective examples and comparative examples were heated at a natural atmosphere (25 ° C.) and a thermostat DO-300A (manufactured by As One Corporation) and left at 50 ° C., two weeks later, After the week, the properties of the composition (precipitate, presence or absence of precipitate, etc.) were confirmed. (Evaluation criteria) ⁇ : no precipitation ⁇ : small amount of precipitates ⁇ : white turbidity, precipitates
  • Evaluation Results The evaluation results of the transparency, average particle diameter, foaming and stability of the compositions of Examples 1 to 8 and Comparative Examples 1 to 6 are as follows.
  • compositions containing glycosphingolipids but containing no polyhydric alcohol having three hydroxyl groups in the molecule (Comparative Examples 1 to 4), particles of nanoscale particle diameter are obtained by high-pressure emulsification treatment, and high transmittance is exhibited. However, precipitation occurred over time.
  • composition containing 40% by weight of a polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule (comparative example 5) containing a glycosphingolipid and not having a polyhydric alcohol having three hydroxyl groups in the molecule (high pressure)
  • the emulsification process did not yield nanoscale particle size particles, and was opaque and precipitated.
  • compositions containing polyhydric alcohols having three hydroxyl groups in the molecule together with glycosphingolipids (Examples 6 to 8)
  • particles of nanoscale particle size are obtained by high-pressure emulsification treatment, and high transmittance Even when left at 25 ° C. and 50 ° C. for 4 weeks, no precipitation occurred and the nanoscale particle size was also maintained.
  • the composition containing the polyhydric alcohol having two hydroxyl groups in the molecule (Examples 1 to 5)
  • the composition containing the polyhydric alcohol having three hydroxyl groups in the molecule together with the glycosphingolipid (Example 6) Since the viscosity of the composition is very low as compared to (8) and there is almost no generation of bubbles due to the polyhydric alcohol having three hydroxyl groups in the molecule during the production process, it was not necessary to remove the bubbles.
  • the composition in which the content of the polyhydric alcohol having two hydroxyl groups is larger than the content of the polyhydric alcohol having three hydroxyl groups in the molecule (Comparative Example 6)
  • Example 3 and the composition of Comparative Example 7 prepared in the same manner as that of the composition of Example 3 except that the high pressure emulsification treatment was not performed, and the composition obtained in Example 3 and biosphing.
  • the composition of Comparative Example 8 prepared similarly except that the high pressure emulsification treatment was not performed was diluted 5 times with purified water, respectively, and the moisturizing test and the barrier property test were carried out according to the following procedure. .
  • the transmittance of the composition of Comparative Example 7 was 0.7, and the average particle size was 5.2 ⁇ m.
  • Each coating amount was 20 ⁇ l. 6)
  • the stratum corneum water content and the transcutaneous water loss were measured 2 and 4 days after the first application, and the condition of the skin was also observed 4 days after.
  • Corneum water content Corneometer CM 825 (Courage + Khazaka Electronic Gmbh)
  • Percutaneous water loss Tewameter TM-300 (Courage + Khazaka Electronic Gmbh) (Observation of skin condition) A part of the skin was collected and the condition of the skin was confirmed with a microscope (30 ⁇ ).
  • Evaluation results were calculated relative values when the value before 5% SDS treatment was 100% and the value after 5% SDS treatment was 0%, and shown as the improvement rate.
  • the stratum corneum water content has recovered to the level before treatment 4 days after application, and the composition of Comparative Example 8 containing no glycosphingolipid, and high-pressure emulsification treatment Compared with the composition of Comparative Example 7 which did not, the stratum corneum water content increased predominantly.
  • the transdermal water transpiration amount also showed a recovery tendency in the composition of Example 3 as compared with the compositions of Comparative Examples 7 and 8.
  • the emulsion composition according to the present invention is excellent in the effect of improving the moisturizing property and the barrier property.
  • the composition of Example 3 in which glycosphingolipids were made into nanoscale particles by high-pressure emulsification treatment was not treated with placebo or high-pressure emulsification treatment.
  • Example 3 and Example 9 are diluted 10-fold with water to a glycosphingolipid concentration of 0.5 and 0.1 w / v%, and then using a PTFE filter having a pore diameter of 0.22 ⁇ m.
  • the sample after filtration was used as a sample.
  • the sample was added to the HuMedia-KB2 medium (manufactured by Kurashiki Spinning Co., Ltd.) so that the final concentrations of glycosphingolipids become 0.002% and 0.01%.
  • a HuMedia-KB2 medium was prepared by diluting Comparative Example 8 containing no glycosphingolipid 10-fold with water 10-fold and adding the same amount as the sample.
  • a normal human epidermal keratinocytes (NHEK (NB) manufactured by Kurashiki Spinning Co., Ltd. prepared at 1 ⁇ 10 5 cells / ml are seeded in a 6-well plate, and the carbon dioxide concentration is 37 ° C.
  • the cells were cultured in 5 vol% for 24 hours.
  • HuMedia-KG2 medium manufactured by Kurashiki Spinning Co., Ltd.
  • the culture supernatant was removed and replaced with the above-mentioned sample-containing culture medium, and the culture was further continued for 24 hours.
  • biosphing treatment solution can be a production promoter that promotes the expression of filaggrin, involucrin, loricrin, and transglutaminase, which are a group of genes involved in the barrier function.
  • biosphing a glycosphingolipid obtained by extraction from Sphingomonas paucimobilis and also containing phospholipid
  • 3-Butylene glycol is added, high pressure emulsification treatment is performed under the condition of 90 MPa or more using a high
  • Comparative Example 11 The same glycosphingolipid as in Examples 10 and 11 is dispersed in water, 1,3-butylene glycol is added, and high pressure is applied under conditions of 90 MPa or more using a high pressure homogenizer (manufactured by APV, trade name: APV-1000). After emulsification treatment, glycerin was added, stirred and mixed to obtain an emulsion composition.
  • a high pressure homogenizer manufactured by APV, trade name: APV-1000.
  • Comparative Example 12 The same glycosphingolipid as in Examples 10 and 11 is dispersed in water, 1,3-butylene glycol and glycerin are added, and then high-pressure emulsification treatment with a high-pressure homogenizer is not performed, and sodium hyaluronate is added. I got
  • the compounding quantity (unit is mass%) of each component in the composition of each Example and a comparative example is as follows.
  • Example 10 the stratum corneum water content was increased in Example 10 as compared to Comparative Example 12. Furthermore, also in Example 11 in which the compounding amount of hyaluronic acid was reduced, a stratum corneum moisture mark equivalent to Comparative Example 12 was exhibited.
  • the appearance of the compositions of Examples 10 and 11 and the compositions of Comparative Examples 9 to 12 is shown in FIG. Although Examples 10 and 11 contain biofingo at the same concentration as Comparative Example 12, the transparency of the appearance is high, and it is possible to apply to cosmetics for various dosage forms.
  • the present invention is a skin quality improving agent such as a cosmetic which is highly transparent and has high moisturizing property and barrier ability when applied to the skin, and is particularly effective for promoting the production of a cornified envelope protein
  • An emulsion composition having high storage stability for providing The present invention can also provide an emulsified composition such as a cosmetic which is particularly excellent in moisture retention.

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Abstract

角層を通過して表皮細胞に作用し、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進することができる、新規乳化組成物を提供する。 スフィンゴ糖脂質を含む粒子を含有する乳化組成物では、当該粒子が角層を通過して表皮細胞に作用し、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進することを可能にする。

Description

乳化組成物
 本発明は、スフィンゴ糖脂質を含む粒子が分散化している乳化組成物に関する。
 スフィンゴ糖脂質は、セラミドに糖鎖がグリコシド結合した糖脂質の一種であり、化粧品、食品及び医薬等で利用されている。また、スフィンゴ糖脂質の分散状態を改善する種々の試みがなされている(特許文献1乃至5)。
 セラミドは、遊離脂肪酸とスフィンゴイドのエステルであり、角層の細胞間脂質成分として物理的なバリア機能を有することが知られている。また、近年、特定の炭素数の遊離脂肪酸とスフィンゴイドのエステルであるセラミドが、正常表皮細胞におけるコーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進するとの報告がある(特許文献1)。但し、セラミドに糖鎖が結合したスフィンゴ糖脂質が、角層を通過して表皮細胞に作用し、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促すとの報告はない。
 また、本発明者らは、ヒアルロン酸又はその塩と、スフィンゴ糖脂質とを含む肌質改善組成物を提案している(特許文献6)。但し、この文献では、スフィンゴ糖脂質のナノ化及びそれをヒアルロン酸等に組合せることよって奏される効果について開示はない。
特開2015-221755号公報 特昭59-39338号公報 特開2000-128760号公報 特開2002-338499号公報 特許第5230965号公報 特開2017-31111号公報
たん白質 核酸 酵素 109-116,Vol3, No.2,(1992)
 本発明は、角層を通過して表皮細胞に作用し、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進することができる、新規乳化組成物を提供することを目的とする。本発明はまた、水溶性高分子との相乗効果で保湿性を顕著に向上できる乳化組成物を提供することを目的とする。
 上述の課題を解決するために、本発明は、以下の解決手段を提供する。
[1]スフィンゴ糖脂質を含む粒子を含有する、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進するための、乳化組成物。
[2]前記スフィンゴ糖脂質を含む粒子が100nm未満の平均粒径である、[1]に記載の乳化組成物。
[3]更に、分子内に水酸基を3個有する多価アルコールを含有する、[1]又は[2]に記載の乳化組成物。
[4]更に、分子内に水酸基を2個有する多価アルコールを含有する、[1]乃至[3]の何れか1つに記載の乳化組成物。
[5]更に、水溶性高分子を含有する、[1]乃至[4]の何れか1つに記載の乳化組成物。
[6]前記分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールは、グリセリンである、[1]乃至[5]の何れか1つに記載の乳化組成物。
[7]前記粒子が、リポソームを形成している、[1]乃至[6]の何れか1つに記載の乳化組成物。
[8]更に、リン脂質を含有する、[1]乃至[7]の何れか1つに記載の乳化組成物。
[9]前記リン脂質が、前記粒子の表面付近に局在する、[8]に記載の組成物。
[10]前記粒子が、界面活性剤なしで分散している[1]乃至[9]の何れか1つに記載の組成物。
[11]前記スフィンゴ糖脂質は、微生物由来である、[1]乃至[10]の何れか1つに記載の組成物。
[12]コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進するための化粧料である、[1]乃至[11]の何れか1つに記載の組成物。
[13]スフィンゴ糖脂質を含む粒子を含有する、乳化組成物。
[14]前記スフィンゴ糖脂質を含む粒子が100nm未満の平均粒径である、[13]に記載の乳化組成物。
[15]更に、分子内に水酸基を3個有する多価アルコールを含有する、[13]又は[14]に記載の乳化組成物。
[16]更に、分子内に水酸基を2個有する多価アルコールを含有する、[13]乃至[15]の何れか1つに記載の乳化組成物。
[17]更に、水溶性高分子を含有する、[13]乃至[16]の何れか1つに記載の乳化組成物。
[18]前記分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールは、グリセリンである、[13]乃至[17]の何れか1つに記載の乳化組成物。
[19]前記粒子が、リポソームを形成している、[13]乃至[18]の何れか1つに記載の乳化組成物。
[20]更に、リン脂質を含有する、[13]乃至[19]の何れか1つに記載の乳化組成物。
[21]前記リン脂質が、前記粒子の表面付近に局在する、[20]に記載の組成物。
[22]前記粒子が、界面活性剤なしで分散している[13]乃至[21]の何れか1つに記載の組成物。
[23]前記スフィンゴ糖脂質は、微生物由来である、[13]乃至[22]の何れか1つに記載の組成物。
[24][13]乃至[23]の何れか1つに記載の組成物を、対象に経皮投与する、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進する方法。
[25]コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進するための、乳化組成物を調製するための、スフィンゴ糖脂質を含む粒子の使用。
[26]前記スフィンゴ糖脂質を含む粒子が100nm未満の平均粒径である、[25]に記載の使用。
[27]更に、分子内に水酸基を3個有する多価アルコールを使用する、[25]又は[26]に記載の使用。
[28]更に、分子内に水酸基を2個有する多価アルコールを使用する、[25]乃至[27]の何れか1つに記載の使用。
[29]更に、水溶性高分子を使用する、[25]乃至[28]の何れか1つに記載の使用。
[30]前記分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールは、グリセリンである、[25]乃至[29]の何れか1つに記載の使用。
[31]前記粒子が、リポソームを形成している、[25]乃至[30]の何れか1つに記載の使用。
[32]更に、リン脂質を使用する、[25]乃至[31]の何れか1つに記載の使用。
[33]前記リン脂質が、前記粒子の表面付近に局在する、[32]に記載の使用。
[34]前記粒子が、界面活性剤なしで分散している[25]乃至[33]の何れか1つに記載の使用。
[35]前記スフィンゴ糖脂質は、微生物由来である、[25]乃至[34]の何れか1つに記載の使用。
[36]前記組成物は、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進するための化粧料である、[25]乃至[35]の何れか1つに記載の使用。
 
 ここで、本願明細書で使用する際の「安定性」又は「安定」とは、組成物を25℃で4週間以上放置した際に実質的に沈殿物を生じない状態を意味し、好ましくはスフィンゴ糖脂質を含む粒子の粒径がナノスケールで4週間以上維持される(仮に沈殿物を生じた場合には、それを手動で攪拌した後に、測定した粒径も含まれる)ことを意味する。
 本発明による乳化組成物では、スフィンゴ糖脂質は、角層を通過することができ、表皮細胞に作用して、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進することができる。また、本発明の好ましい実施形態では、ナノ化したスフィンゴ糖脂質を、ヒアルロン酸等の水溶性高分子と組合せることで、保湿効果を増進する。他の好ましい実施形態では、乳化組成物は、スフィンゴ糖脂質を含む粒子が100nm未満の平均粒径を有しており、組成物の透明性が高く、角層を容易に通過する。また、更に他の好ましい実施形態では、細菌由来のリン脂質を含有しており、これにより、リポソームを形成している粒子の分散を安定化し、乳化組成物は、界面活性剤の不存在下で長期間安定であり、粒子のナノスケールの粒径が長期間維持される。
被検者の前腕部の皮膚に、実施例3で得られた組成物を水で5倍希釈した乳化組成物を塗布した場合と、実施例3で得られた組成物と高圧乳化処理をしない点のみ異なる比較例7の組成物を水で5倍希釈して塗布した場合と、実施例3で得られた組成物とスフィンゴ糖脂質を含まず、高圧乳化処理を行わない点でのみ異なる比較例8の組成物を水で5倍希釈して塗布した場合について、塗布して2日後、及び4日後の皮膚の角質水分量の改善率を示すグラフである。 被検者の前腕部の皮膚に、実施例3で得られた組成物を水で5倍希釈した乳化組成物を塗布した場合と、実施例3で得られた組成物と高圧乳化処理をしない点のみ異なる比較例7の組成物を水で5倍希釈して塗布した場合と、実施例3で得られた組成物とスフィンゴ糖脂質を含まず、高圧乳化処理を行わない点でのみ異なる比較例8の組成物を水で5倍希釈して塗布した場合について、塗布して2日後、及び4日後の皮膚の経皮水分蒸散量の改善率を示すグラフである。 被検者の前腕部の皮膚に、実施例3で得られた組成物を水で5倍希釈した乳化組成物を塗布した場合(C)と、実施例3で得られた組成物と高圧乳化処理をしない点のみ異なる比較例7の組成物を水で5倍希釈して塗布した場合(B)と、実施例3で得られた組成物とスフィンゴ糖脂質を含まず、高圧乳化処理を行わない点でのみ異なる比較例8の組成物を水で5倍希釈して塗布した場合(A)について、塗布して4日後の皮膚の状態を示す顕微鏡写真(30倍)である。 比較例9乃至12の組成物と、実施例10及び11の組成物との角層水分増加量を示すグラフである。 比較例9乃至12の組成物、及び実施例10及び11の組成物の外観を示す写真である。 実施例3及び9の組成物の希釈液と、比較対象としての水をそれぞれ表皮細胞に添加した際のフィラグリン、インボルクリン、ロリクリン、及びトランスグルタミナーゼに関するmRNAの相対発現量を示すグラフである。
 以下、本発明の実施の形態により、本発明を詳細に説明する。但し、本発明は以下で説明する実施形態によって限定的に理解されるものではない。
 本発明は、上述の通り、その実施形態で、スフィンゴ糖脂質を含む粒子と、場合によって分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールと、場合によって分子内に水酸基を2個有する多価アルコールとを含む、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進するための、乳化組成物を提供する。
<スフィンゴ糖脂質>
 本発明の乳化組成物に含有されるスフィンゴ糖脂質は、セラミドに糖がグリコシド結合した糖脂質の一種であり、ガラクトシルセラミド、グルコシルセラミド、ガラクトシルフィトセラミド、グルコシルフィトセラミド、スフィンゴミエリンなどが含まれる。スフィンゴ糖脂質は、動物、微生物、藻類、又は植物から得ることができ、或いは合成することもできる。微生物由来のスフィンゴ糖脂質としては、スフィンゴモナス(Sphingomonas)属又はスフィンゴバクテリウム(Sphingobacterium)属の細菌によって生産されるスフィンゴ糖脂質が挙げられる。
 何れに由来するかにより、スフィンゴ糖脂質を構成する糖の種類が変わる(非特許文献1)。また、動物及び微生物由来のスフィンゴ糖脂質を用いる場合、通常、リン脂質も組成物中に含有される。また、動物由来か、微生物由来かによってリン脂質の含有量が異なり、後者の含有量がより高い。微生物由来のスフィンゴ糖脂質の中では、スフィンゴモナス(Sphingomonas)属の細菌によって生産されるスフィンゴ糖脂質がより好ましい。
 本発明の組成物では、種々の由来のスフィンゴ糖脂質の1種又は2種以上を含み得るが、特に微生物由来のスフィンゴ糖脂質を含有することが好ましい。共存するリン脂質が、組成物の安定性に寄与し、より安定な組成物が得られる。したがって、本明細書における「スフィンゴ糖脂質」が微生物由来の場合には、組成物中にスフィンゴ糖脂質の他に、例えばリン脂質といったスフィンゴ糖脂質以外の物質も含有する。生物由来のスフィンゴ糖脂質を含み、それに伴い、リン脂質も併せて含有する組成物では、スフィンゴ糖脂質100質量部に対して、リン脂質を30質量部~60質量部含有する組成物が、特に好ましい。
 微生物由来のスフィンゴ糖脂質は、典型的には以下の構造式により表わされる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
 式(1)におけるRは、ウロン酸、グルコサミン、ガラクトース、及びマンノースからなる群より選択される4個のヘキソースまたは1個のウロン酸で構成される糖部分である。4個のヘキソースについては、ウロン酸、グルコサミン、ガラクトースおよびマンノースの中から1~4個を組み合わせたものであれば、各ヘキソースの数や結合順序、結合形式、光学異性はとくに限定されない。Rの組み合わせの例として、ウロン酸を唯一のヘキソースとするもの、ウロン酸、グルコサミン、ガラクトースおよびマンノースで構成される4個のヘキソースからなるものを挙げることができる。
 Rの具体例として以下の構造A、Bを例示することができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
 式(1)におけるRは、シクロアルキル基を有していてもよいアルキル基、アルケニル基またはアルキニル基である。Rの炭素数はとくに限定されないが、15~25の範囲内であるのが好ましい。Rのアルキル基、アルケニル基およびアルキニル基は直鎖であっても分枝鎖であってもよく、また、水酸基などで置換されていてもいなくてもよい。
とくに、アルキル基の鎖中にシクロプロピル基などのシクロアルキル基が存在していてもよい。アルケニル基の二重結合の位置や、アルキニル基の三重結合の位置はとくに限定されない。
 Rの具体例として以下の構造a~cを例示することができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
 式(1)におけるRはアルキル基である。Rが取り得るアルキル基は直鎖であっても分枝鎖であってもよく、水酸基などで置換されていてもいなくてもよい。アルキル基の炭素数は、通常1~50の範囲内であり、15~25の範囲内であるのが好ましい。Rの具体例として、炭素数12の直鎖アルキル基を例示することができる。
 本発明の組成物に使用するのが好ましいスフィンゴ糖脂質群として、式(1)のRが構造A、Bで表される糖部分であって、Rが炭素数12の直鎖アルキル基であるスフィンゴ糖脂質群を挙げることができる。また、別の好ましいスフィンゴ糖脂質群として、式(1)のRが構造a、bまたはcで表され、Rが炭素数12の直鎖アルキル基であるスフィンゴ糖脂質群を挙げることができる。特に好ましいスフィンゴ糖脂質群として、式(1)のRが構造A、Bで表される糖部分であって、Rが構造a、bまたはcで表され、Rが炭素数12の直鎖アルキル基であるスフィンゴ糖脂質群を挙げることができる。
 スフィンゴ糖脂質は、通常、高濃度で含有させると沈殿するので、これまでは、含有量を1重量%未満としていたが、本発明の好ましい実施形態では、高濃度でスフィンゴ糖脂質を含有させても、ナノスケールの粒子として分散させる事ができる。従って、本発明の好ましい実施形態による乳化組成物は、スフィンゴ糖脂質を好ましくは1~10質量%含有し、より好ましくは、2~8質量%含有し、更に好ましくは、3~7質量%含有する。
 また、スフィンゴ糖脂質を含有する粒子は、本発明の好ましい実施形態では、ナノスケールで分散している。具体的には、100nm未満の平均粒径を有し、通常30nm以上100nm未満の平均粒径を有し、好ましくは60~90nmの平均粒径を有する。このようなナノ粒子にすると、後述する実施例で示す通り、スフィンゴ糖脂質がセラミドに更に糖が結合した構造であるにも拘らず、角層をより通過し易くなり表層細胞に作用して、フィラグリン、インボルクリン、ロリクリン、トランスグルタミナーゼといったコーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進する。また、このようなナノ粒子として分散させることで、組成物の透明性が高くなり、乳化組成物の皮膚への浸透性、保湿性及びバリア能の向上にも寄与する。
 また、本発明の好ましい実施形態では、粒子はリポソームを形成し、後述する共存物質と協働して、安定的に分散している。当該リポソームは、その中に疎水性機能性物質、典型的には、表層細胞に作用する活性物質をリポソーム中に取り込んで、表層細胞への輸送を補助することもできる。
 なお、本発明の組成物が含有する粒子の平均粒子径は、例えば、ナノ粒子径測定分布装置SALD-7500nano(島津製作所製)によって測定することができる。
<分子内に水酸基を3個以上もつ多価アルコール>
 本発明の好ましい実施形態では、乳化組成物は、水酸基を3個以上もつ多価アルコールを含有する。水酸基を3個以上もつ多価アルコールとしては、例えば、グリセリン、ジグリセリン、トリグリセリン、テトラグリセリンなどのポリグリセリンを挙げることができ、これらを1種以上含むことができる。但し、ポリグリセリンは、デカグリセリン以下の炭素数のものが好ましく、単独で用いてもよいが、グリセリン又はジグリセリンと併用することが好ましい。水酸基を3個以上もつ多価アルコールとしては、特にグリセリンが好ましい。なお、単糖類は含まないことが好ましい。
 従来のスフィンゴ糖脂質を含有する組成物では、多量のグリセリンを配合してゲル化し、必要に応じて水を添加して乳化組成物としていたが、本発明の好ましい実施形態によれば、分子内に水酸基を3個以上もつ多価アルコールの含有量を比較的少なくすることができる。このため、本発明の組成物では、分子内に水酸基を2個もつ多価アルコールの含有量によって変動するが、分子内に水酸基を3個以上もつ多価アルコールの含有量は、好ましくは5~50重量%であり、より好ましくは10~45重量%であり、更に好ましくは25~40重量%である。
<分子内に水酸基を2個もつ多価アルコール>
 本発明の好ましい実施形態では、乳化組成物は、分子内に水酸基を2個もつ多価アルコールを更に含有する。分子内に水酸基を2個もつ多価アルコールを分子内に水酸基を3個以上もつ多価アルコールと共存させると、後者のみの場合に発生する泡を大幅に軽減でき、消泡処理が不要となる。また、分子内に水酸基を3個以上もつ多価アルコールによる分散効果を維持させながらも、当該多価アルコールの添加による粘性の増加を抑制する効果を有する。これによって、得られる組成物の粘度が低く抑えられ、さっぱりとした感触の化粧料を提供することができる。
 分子内に水酸基を2個もつ多価アルコールとしては、例えば、エチレングリコール、ジエチレングリコール、ポリエチレングリコール(平均分子量1000以下)、プロピレングリコール、1,2-ペンタンジオール、1,3-ブチレングリコール、ジプロピレングリコール、1,2-ヘキサンジオール、1,2-オクタンジオール、イソプレングリコール、ヘキシレングリコール等が挙げられる。中でも、1,3-ブチレングリコール、又はプロピレングリコールが好ましく、1,3-ブチレングリコールが特に好ましい。なお、単糖類は含まないことが好ましい。
 分子内に水酸基を2個もつ多価アルコールは、分子内に水酸基を3個以上もつ多価アルコールによる泡の発生を軽減でき、分子内に水酸基を3個以上もつ多価アルコールによる分散効果に悪影響を及ぼさない範囲の量を含有することが好ましい。従って、本発明の好ましい実施形態による組成物では、分子内に水酸基を2個もつ多価アルコールの含有量は、好ましくは3~25重量%であり、より好ましくは5~20重量%であり、更に好ましくは7~15重量%である。
<界面活性剤、リン脂質>
 本発明の乳化組成物では、任意に、非イオン界面活性剤、カチオン界面活性剤、アニオン界面活性剤等の界面活性剤を含有してもよい。但し、本発明の組成物では、上記多価アルコールと典型的にはリン脂質の存在で、界面活性剤を含有しなくとも、スフィンゴ糖脂質を含有する粒子をナノスケールで安定的に分散させることができる。従って、基本的に界面活性剤を含まない組成とすることが好ましい。特に、上述の通り、微生物由来のスフィンゴ糖脂質を使用して組成物を調製する場合には、動物由来のスフィンゴ糖脂質を使用して組成物を調製する場合に比較してリン脂質(リン酸と脂肪酸のエステルであり、典型的には細胞膜リン脂質)の含有が多くなり、この成分が、組成物の分散安定性を高めるため好ましい。この結果、微生物由来、特に細菌由来のスフィンゴ糖脂質を使用して組成物を調製する場合には、当該組成物の調製に伴って含有されることとなるリン脂質以外の界面活性剤を、実質的に含まない組成、すなわちリン脂質以外の界面活性剤を含まない組成、とすることが好ましい。また、このようなリン脂質の存在は、スフィンゴ糖脂質のナノ粒子が、角層を通過するのを容易にする。このため、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進する上で有益である。
 リン脂質は細菌等の微生物以外の生物に由来するものを含有しても良いが、何れにしても、組成物中のリン脂質の含有量は、0.005~3.0質量%が好ましく、0.05~1.0質量%がより好ましい。
 なお、リン脂質としては、例えば、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノールアミンを挙げることができる。また、非イオン界面活性剤としては、例えば、ソルビタンエステル(例えばソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノイソステアレート)、ポリオキシエチレンソルビタンエステル(例えばポリオキシエチレンソルビタンモノイソステアレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート)、グリセロールエーテル(例えばグリセロールモノイソステアレート、グリセロールモノミリステート)、ポリオキシエチレングリセロールエーテル(例えばポリオキシエチレングリセロールモノイソステアレート、ポリオキシエチレングリセロールモノミリステート)、ポリグリセリン脂肪酸エステル(例えばジグリセリルモノステアレート、デカグリセリルデカイソステアレート、ジグリセリルジイソステアレート)、グリセリン脂肪酸エステル(例えばグリセリルモノカプレート、グリセリルモノラウレート、グリセリルモノミリステート、グリセリルモノパルミテート、グリセリルモノオレエート、グリセリルモノステアレート、グリセリルモノリノレエート、グリセリルモノイソステアレート、グリセリルモノジリノレエート、グリセリルモノジカプレート)、ポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル(例えばポリオキシエチレングリセリルモノミリステート、ポリオキシエチレングリセリルモノオレエート、ポリオキシエチレングリセリルモノステアレート)、ポリオキシエチレン分岐アルキルエーテル(例えばポリオキシエチレンオクチルドデシルアルコール、ポリオキシエチレン-2-デシルテトラデシルアルコール)、ポリオキシエチレンアルキルエーテル(例えばポリオキシエチレンオレイルアルコールエーテル、ポリオキシエチレンセチルアルコールエーテル)、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油脂肪酸エステル(例えばポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンジヒドロコレステロールエーテル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油イソステアレート)、ポリオキシエチレンアルキルアリールエーテル(例えばポリオキシエチレンオクチルフェノールエーテル)を挙げることができる。また、陰イオン界面活性剤としては、例えば、高級脂肪酸(例えばオレイン酸、ステアリン酸、イソステアリン酸、パルミチン酸、ミリスチン酸、ベヘン酸)の塩(例えばジエタノールアミン塩、トリエタノールアミン塩、アミノ酸塩、カリウム塩、ナトリウム塩)、エーテルカルボン酸アルカリ塩、N-アシルアミノ酸塩、N-アシルサルコン塩、高級アルキルスルホン酸塩を例示することができる。さらに、陽イオン界面活性剤または両性界面活性剤としては、例えばアルキル4級アンモニウム塩、ポリアミン、アルキルアミン塩を挙げることができる。
 好ましくは、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、又はホスファチジルグリセロールである。
<水溶性高分子>
 本発明の好ましい実施形態において、乳化組成物は、水溶性高分子を更に含有する。スフィンゴ糖脂質を含有する粒子、特にナノ粒子を水溶性高分子と組合せる事で、水溶性高分子による保湿効果を顕著に向上できる。
 水溶性高分子は、典型的には、分子量が1000以上の水溶性の高分子化合物(いわゆる準高分子化合物も含む)であり、皮膚に塗布された際に保湿効果を奏する成分である。水溶性高分子としては、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の塩、ヒアルロン酸の誘導体、カルボキシビニルポリマー、カルボキシビニルポリマーの塩、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロースの塩、カルボキシメチルセルロース、およびカルボキシメチルセルロースの塩を挙げることができ、これらを1種又は2種以上含んでよい。これらの中でも、水溶性高分子は、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の塩、及びヒアルロン酸の誘導体からなる群から選択される少なくとも1種であることがさらに好ましい。
 ヒアルロン酸の塩としては、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属塩、アルミニウム、亜鉛などの金属塩などを挙げることができるが、ナトリウム塩が好ましい。
 ヒアルロン酸の誘導体としては、ヒアルロン酸プロピレングリコール、アセチル化ヒアルロン酸ナトリウム、ヒアルロン酸ヒドロキシプロピルトリモニウム、加水分解ヒアルロン酸グリセリル、ヒアルロン酸クロスポリマーなどを挙げることができる。
 カルボキシビニルポリマーは、ビニル基による重合反応で生じるカルボキシル基を持つ酸性高分子化合物で、主たる構成モノマーが典型的にはアクリル酸である、架橋型ポリマーである。
 カルボキシビニルポリマーの塩としては、例えば、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属塩、アルミニウム、亜鉛などの金属塩などを挙げることができる。
 ヒドロキシエチルセルロースは、セルロースの水酸基の少なくとも1部にヒドロキシエチル化したセルロースエーテルである。
 ヒドロキシエチルセルロースの塩としては、例えば、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属塩、アルミニウム、亜鉛などの金属塩などを挙げることができる。
 カルボキシメチルセルロースは、セルロースの水酸基の少なくとも1部にカルボキシメチル化したセルロースエーテルである。
 カルボキシメチルセルロースの塩としては、例えば、ナトリウム、カリウムなどのアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウムなどのアルカリ土類金属塩、アルミニウム、亜鉛などの金属塩などを挙げることができる。
 水溶性高分子の平均分子量は、特に限定されないが、10万以下が好ましく、1万以下が特に好ましい。水溶性高分子の平均分子量が所定値以下であると、本発明の組成物全体の透明度(溶液化後の透明度)を高い状態とすることができる。
 なお、水溶性高分子の平均分子量は、例えば、レーザ回折・散乱法により、測定することができ、例えば、後述する実施例で用いた分析機器を使用して測定すればよい。
 水溶性高分子の含有量は、0.01~1.00質量%が好ましく、0.05~0.50質量%がより好ましい。
<油分>
 本発明の乳化組成物では、任意に、油脂成分を含んでよいが、スフィンゴ糖脂質を含有する粒子の微粒子化の観点からは、含まない方が好ましい。
 油脂成分として、例えば、脂肪酸(例えばオレイン酸、ベヘン酸、イソステアリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、ベヘニン酸、リノール酸、γ-リノレン酸、コルンビン酸、エイコサ-(n-6,9,13)-トリエン酸、アラキドン酸、α-リノレン酸、チムノドン酸、ヘキサエン酸)、エステル油(例えばペンタエリスリトール-テトラ-2-エチルヘキサノエート、イソプロピルミリステート、ブチルステアレート、ヘキシルラウレート、オクチルドデシルミリステート、ジイソプロピルアジペート、ジイソプロピルセバケート)、ロウ(例えばミツロウ、鯨ロウ、ラノリン、カルナウバロウ、キャンデリラロウ、ワセリン)、動物油および植物油(例えばミンク油、オリーブ油、ヒマシ油、カカオ脂、パーム油、タラ肝油、牛脂、バター脂、月見草油、コメヌカ油、スクワラン)、鉱物油(例えば炭化水素系オイル、流動パラフィン)、シリコーンオイル(例えばメチルフェニルシリコン、ジメチルシリコン)、高級アルコール(例えばラウリルアルコール、ステアリルアルコール、オレイルアルコール、セチルアルコール、2-オクチルドデカノール、2-デシルテトラデカノール)およびこれらの誘導体を挙げることができる。
<多糖類>
 本発明の組成物では、任意成分として、多糖類を含有してもよい。従来のスフィンゴ糖脂質を含有する組成物では、多価アルコールと共に単糖を含有するものがあるが、本発明の組成物では、フィンゴ糖脂質をナノレベルで安定的に分散させる点で、単糖類より、多糖類を含有させることが好ましい。本発明の組成物に配合させる多糖類としては、例えば、ペクチン、カッパーカラギーナン、ローカストビーンガム、グアーガム、ヒドロキシプロピルグアガム、キサンタンガム、カラヤガム、タマリンド種子多糖、アラビアガム、トラガカントガム、ヒアルロン酸、ヒアルロン酸の塩、ヒアルロン酸誘導体、コンドロイチン硫酸、コンドロイチン硫酸の塩(例えば、ナトリウム塩)、アルギン酸、アルギン酸の塩(例えば、ナトリウム塩)等が挙げられ、中でもヒアルロン酸、ヒアルロン酸の塩、ヒアルロン酸誘導体が好ましい。
<各成分の重量比>
 本発明の好ましい実施形態による乳化組成物では、分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールを含有するが、この場合分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールに対するスフィンゴ糖脂質の重量比を比較的大きくすることができ、スフィンゴ糖脂質の含有量の多い組成とすることができる。また、本発明の他の好ましい実施形態による更に分子内に水酸基を2個以上有する多価アルコールを含有する乳化組成物おいては、分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールによる分散効果と分子内に水酸基を2個以上有する多価アルコールの消泡効果を上手くバランスさせることが好ましい。従って、本発明の好ましい実施形態における組成物では、分子内に水酸基を2個有する多価アルコールと、分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールとの重量比(DA:MA)は、好ましくは、1:1~1:4であり、より好ましくは、1:2~1:3である。また、この両者をこのような重量比で組合せる組成の場合には、分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールの含有量は組成物全体の30~50重量%とすることが好ましい。同様に、分子内に水酸基を2個以上有する多価アルコールを含有する組成物の場合には、分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールと、スフィンゴ糖脂質との重量比(MA:S)は、好ましくは、2:1~9:1であり、より好ましくは、5:1~8:1である。
 なお、各成分の含有量については、市販の高速液体クロマトグラフィー(HPLC)や薄層クロマトグラフィー(TLC)などにより測定することができる。
<組成物の粘度>
 本発明の好ましい実施形態によれば、乳化組成物は、分子内に水酸基を3個以上もつ多価アルコールと共に分子内に水酸基を2個有する多価アルコールを配合、好ましくは上述した比率で含有するため、組成物の粘度が低く抑えられ、さっぱりとした感触の化粧料を提供することができる。
<適用>
 本発明による組成物は、典型的には、肌質改善剤としての(肌質改善用の)、化粧料、医薬などの原料として使用することができ、好適には、肌質改善用の化粧料を調製する際に利用することができる。従って、最終製品に応じて、アミノ酸、核酸、コラーゲン、アセチルグルコサミン等の他、デキストリン、セルロース、ラクトース等の賦形剤、ビタミンB2、ビタミンB6、ビタミンB12、アスコルビン酸またはその塩等のビタミン類、鉄、カルシウム等のミネラル、その他、潤沢剤、香料、アルギン酸またはその塩、キサンタンガム等の増粘剤、ショ糖脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル等の乳化剤、炭酸水素ナトリウムやクエン酸等のpH調整剤を含有させて各種製品を製造することができる。
 また、本発明の組成物が利用される化粧料は、肌の保湿性を向上させたり、バリア性を高める目的の製品を典型例として挙げることができるが、特に、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進することで、角層のバリア機能を高めたり、修復又は改善するために化粧料に用いることが好ましい。従って、例えば、アトピー性皮膚炎を患う対象に本発明の組成物を適用することもできる。また、本発明の好ましい実施形態によれば、特に保湿性に優れる化粧料が提供される。
 化粧料の種類としては、例えば、化粧石鹸、シャンプー、洗顔料、リンス、アイクリーム、アイシャドウ、クリーム・乳液、化粧水、美容液、香水、おしろい、化粧油、頭髪用化粧料、染毛料、練香水、パウダー、パック、ひげそり用クリーム、ひげそり用ローション、日焼けオイル、日焼け止めオイル、日焼けローション、日焼け止めローション、日焼けクリーム、日焼け止めクリーム、ファンデーション、粉末香水、ほお紅、マスカラ、眉墨、爪クリーム、美爪エナメル、美爪エナメル除去液、洗毛料、浴用化粧料、口紅、リップクリーム、アイライナー、歯磨き、デオドラント剤、オーデコロン、ブリーチング剤、養毛剤および育毛剤などを挙げることができる。また、軟膏剤や湿布剤などとして使用することもできる。
 なお、本実施形態に係る化粧料は、保湿性に優れるだけでなく、透明性にも優れることから、前記の化粧料の中でも、高い透明性が要求される製品や、無着色を長所とした製品、例えば、化粧水、美容液などに好適に適用することができる。
 化粧料には、使用目的に応じて様々な成分が添加され、添加成分としては、例えば、油脂成分、UV吸収剤、IR吸収剤、乳化剤、界面活性剤、防腐剤、防黴剤、抗酸化剤、美白剤、多糖類、蛍光材料、顔料、色素、香料、金属イオン封鎖剤、バインダー、増量剤、抗生物質、血行促進剤、消炎剤、細胞賦活剤などが挙げられる。
<製造例>
 次に、本発明の乳化組成物の製造方法を説明する。
 本発明においては、例えば、スフィンゴ糖脂質、典型的には、上述した細菌由来のスフィンゴ糖脂質及び分子内に水酸基を2個有する多価アルコールを水と混合し、得られた混合物を高圧処理して乳化し、得られた乳化混合物に、分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールを添加、混合して、乳化組成物を製造する。このようなプロセスにより、ナノスケールの微細な粒子を安定的に分散しながらも、製造過程でほとんど発泡せず、泡を軽減する処理が不要となっている。
 本発明の好ましい実施形態に従って、スフィンゴ糖脂質及び分子内に水酸基を2個有する多価アルコールを水と混合する工程では、添加順は何れでもよく、例えば、スフィンゴ糖脂質を水と混合した後で、分子内に水酸基を2個有する多価アルコールを添加してもよい。
 高圧処理工程は、高圧ホモジナイザー等の高圧乳化装置を用いて、90MPaの条件で分散処理をすることが好ましい。この高圧処理工程の条件により、粒子の平均粒径が異なる事となるので、特に微細な粒子としたい場合には、より圧力が高い条件等で高圧処理をすることが好ましい。また、高圧乳化装置は上記のような均質バルブ型高圧ホモジナイザーの他、マイクロフルイダイザー(マイクロフルイディスク社製)やナノマイザー(吉田機械工業製)のようなチャンバー型高圧ホモジナイザーを用いてもよい。分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールを添加した後の混合は、泡の発生を抑制するために、穏やかに攪拌して混合することが好ましく、スターラーやボルテックスを用いた通常の攪拌処理を行えばよい。
 以下で、本発明の実施例及び比較例を例示して、本発明をより具体的に説明する。言うまでもないが、本発明は、以下の実施例によって限定されるものではない。
<実施例1~5及び比較例6>
 キッコーマンバイオケミファ株式会社製の商品名:バイオスフィンゴ(スフィンゴモナス・パウシモビリス(Sphingomonas paucimobilis)より抽出して得られたスフィンゴ糖脂質が主な主成分でありリン脂質も含有している)を水に分散させた後、1,3-ブチレングリコールを添加し、高圧ホモジナイザー(APV社製、商品名:APV-1000)を用いて90MPa以上の条件で高圧乳化処理を行い、その後、グリセリンを添加し、攪拌、混合して乳化組成物を得た。
<実施例6~8>
 実施例1と同じスフィンゴ糖脂質を水に分散させた後、1,3-ブチレングリコールを添加せずにグリセリンを添加し、実施例1と同様に、高圧ホモジナイザーで高圧乳化処理を行って乳化組成物を得た。
<比較例1~5>
 高圧ホモジナイザーを用いて高圧乳化処理を行った後、グリセリンを添加しなかった以外は、実施例1と同様にして乳化組成物を得た。
<比較例7~8>
 実施例1と同じスフィンゴ糖脂質を水に分散させて、1,3-ブチレングリコール、及びグリセリンを添加した後、高圧ホモジナイザーによる高圧乳化処理を行わずに、乳化組成物を得た。
 各実施例及び比較例の組成物における各成分の配合量(単位は質量%である)は、以下の通りである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
<透明性、平均粒径、発泡、及び安定性の評価>
評価方法
1.平均粒子径(nm)
 SALD-7500nano(島津製作所社製)を用いて各実施例及び各比較例の組成物中の粒子の平均粒子を測定した。
2.透過率(%T)
 紫外可視分光光度計V-630(日本分光社製)用いて各実施例及び各比較例の組成物中の粒子の平均粒子を測定した。
3.保存安定性
 各実施例及び各比較例の組成物を、自然雰囲気(25℃)と、恒温器DO-300A(アズワン社製)で昇温して50℃で放置し、2週間後と、4週間後に、組成物の性状(沈殿物、析出物の有無など)を確認した。
(評価基準)
○:沈殿なし
△:少量の析出物あり
×:白濁、析出物あり
4.泡立ちの状態
 肉眼で評価した。
評価結果
 実施例1~8及び比較例1~6の組成物の透明性、平均粒径、発泡、及び安定性の評価結果は以下の通りとなった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
 スフィンゴ糖脂質を含むが分子内に水酸基を3個有する多価アルコールを含まない組成物(比較例1~4)でも、高圧乳化処理によりナノスケール粒径の粒子が得られ、高い透過率を示したが、経時的に沈殿が発生した。また、スフィンゴ糖脂質を含み、分子内に水酸基を3個有する多価アルコールを含まず、分子内に水酸基を2個有する多価アルコールを40重量%含有する組成物(比較例5)では、高圧乳化処理によってナノスケール粒径の粒子は得られず、不透明で沈殿が発生した。これに対して、スフィンゴ糖脂質と共に分子内に水酸基を3個有する多価アルコールを含む組成物(実施例6~8)では、高圧乳化処理によりナノスケール粒径の粒子が得られ、高い透過率を示し、25℃と50℃で4週間放置した場合でも、沈殿が発生せず、ナノスケールの粒径も維持された。また、更に分子内に水酸基を2個有する多価アルコールを含む組成物(実施例1~5)では、スフィンゴ糖脂質と共に分子内に水酸基を3個有する多価アルコールを含む組成物(実施例6~8)に比べ、組成物の粘度が非常に低く、製造過程で分子内に水酸基を3個有する多価アルコールによる泡の発生が殆どないため、泡を除去する必要がなかった。但し、水酸基を2個有する多価アルコールの含有量を分子内に水酸基を3個有する多価アルコールの含有量より多くした組成物では(比較例6)、経時的に沈殿が発生した。
<保湿性、バリア性、及び鏡顕による皮膚状態の評価>
評価方法
 実施例3の組成物と、それと同じ組成であるが高圧乳化処理をしなかった以外は同様に調製した比較例7の組成物と、実施例3で得られた組成物とバイオスフィンゴを含まず、高圧乳化処理を行わない点以外は同様に調製した比較例8の組成物とを、それぞれ精製水で5倍希釈して用い、以下の手順で保湿性試験とバリア性試験を実施した。なお、比較例7の組成物の透過率は、0.7であり、平均粒径は、5.2μmであった。
試験手順
1)健常者のボランティアを被験者とし(n=9)、その前腕部を洗浄した。
2)温度20℃、湿度50%に環境を調整した部屋で20分以上待機してもらった。
3)各組成物を塗布する前に、塗布予定部位の角層水分量、経皮水分蒸散量を測定した。
4)塗布予定部位に、5%SDSを含浸した不織布を30分間貼り付け、水洗後、再度環境調整室で20分待機後、角層水分量及び経皮水分蒸散量を測定した。
5)測定後直ぐに各組成物をSDS処理した部位に塗布し、その後は、毎日、朝及び入浴後に各組成物を塗布した。各塗布量は20μlとした。
6)最初の塗布から2日及び4日後に角層水分量及び経皮水分蒸散量を測定し、4日後に皮膚の状態も観察した。
(測定機器)
 角層水分量: Corneometer CM825(Courage+Khazaka Electronic Gmbh社製)
経皮水分蒸散量:Tewameter  TM-300(Courage+Khazaka Electronic Gmbh社製)
(皮膚の状態の観察)
 皮膚の一部を採取して、顕微鏡で(30倍)皮膚の状態を確認した。
評価結果
 得られた測定値を、5%SDS処理前の値を100%、5%SDS処理後の値を0%とした時の相対値を算出し、改善率として示した。図1に示す通り、実施例3の組成物では、角質水分量が塗布後4日後に処理前の水準に回復しており、スフィンゴ糖脂質を含まない比較例8の組成物や、高圧乳化処理をしなかった比較例7の組成物と比較して、優位に角層水分量が増加した。また、図2に示す通り、経皮水分蒸散量も実施例3の組成物において比較例7及び8の組成物と比較して、回復傾向が見られた。従って、本発明による乳化組成物が、保湿性及びバリア性の改善効果に優れることが実証された。
 顕微鏡で観察した被験者の皮膚状態についても、図3に示す通り、高圧乳化処理によりスフィンゴ糖脂質をナノスケールの粒子にした実施例3の組成物で、プラセボや高圧乳化処理しなかった比較例7の組成物と比較して、明らかな肌の改善が認められた。
<バリア造伝子発現の促進効果>
評価方法
 実施例3および実施例9の組成物をスフィンゴ糖脂質濃度0.5および0.1w/v%となるように水で10倍希釈した後、孔径が0.22μmのPTFEフィルターを用いて濾過を行ったものを試料とした。そしてHuMedia-KB2培地(倉敷紡績株式会社製)に試料をスフィンゴ糖脂質の最終濃度が0.002%および0.01%になるよう添加した。なお、コントロールとして、HuMedia-KB2培地にスフィンゴ糖脂質を含まない比較例8を水で10倍希釈して試料と同量添加したものを調製した。
 続いて、1×10個/mlに調製した正常ヒト表皮角化細胞(倉敷紡績株式会社製、NHEK(NB))を1ウェルあたり3mlずつ6ウェルプレートに播種し、37℃、二酸化炭素濃度5vol%中にて24時間培養した。播種培地には、HuMedia-KG2培地(倉敷紡績株式会社製)を用いた。その後、培地上清を除去して、前述した試料含有培地と交換し、さらに24時間培養した。その後、totalRNA分離用試薬(Thermo Fisher SCIENTIFIC社製、TRIzol reagent)を規定量使用して細胞抽出液を調製し、フェノール・クロロホルム法にてRNAを精製してtotalRNAを得た。続いて、市販の逆転写キット(TaKaRa社、Prime Script RT Reagent Kit for SYBR with gDNA Eraser)を用いてRNAを逆転写しcDNAを得た。このcDNAをテンプレートとしてフィラグリン、インボルクリン、ロリクリンおよび卜ランスグルタミナーゼ遺伝子のプライマー(ライフテクノロジーズジャパン社)と市販キット(日本ジェネティクス社、KAPA SYBR FAST Universal qPCR kit)を用いてリアルタイム定量PCRを行い、比較Ct法により各遺伝子の発現量を測定した。内在性コントロール遺伝子には、GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)を用いた。コントロールの相対発現量を1として試料の各遺伝子の発現レベルを評価した。
評価結果
 図6に示す通り、フィラグリン、インボルクリン、ロリクリン、トランスグルタミナーゼのいずれも実施例3および9を含有する培地で培養した試験区では、mRNA発現量の増加が認められた。本結果より、バイオスフィンゴのナノ化処理液はバリア機能に関与する造伝子群であるフィラグリン、インボルクリン、ロリクリン、トランスグルタミナーゼの発現を促進する産生促進剤となり得ることが明らかとなった。
<実施例10及び11>
 キッコーマンバイオケミファ株式会社製の商品名:バイオスフィンゴ(スフィンゴモナス・パウシモビリス(Sphingomonas paucimobilis)より抽出して得られたスフィンゴ糖脂質でありリン脂質も含有している)を水に分散させた後、1,3-ブチレングリコールを添加し、高圧ホモジナイザー(APV社製、商品名:APV-1000)を用いて90MPa以上の条件で高圧乳化処理を行い、その後、グリセリンを添加し、攪拌、混合し、次いで、ヒアルロン酸Na(キッコーマンバイオケミファ社製、商品名FCH-200)水溶液を添加して乳化組成物を得た。
<比較例9~10>
 バイオスフィンゴは添加せず、水に1,3-ブチレングリコール、及びグリセリンを添加した後、高圧ホモジナイザーによる高圧乳化処理を行わずに、ヒアルロン酸Naを添加して組成物を得た。
<比較例11>
 実施例10及び11と同じスフィンゴ糖脂質を水に分散させて、1,3-ブチレングリコールを添加し、高圧ホモジナイザー(APV社製、商品名:APV-1000)を用いて90MPa以上の条件で高圧乳化処理を行い、その後、グリセリンを添加し、攪拌、混合して乳化組成物を得た。
<比較例12>
 実施例10及び11と同じスフィンゴ糖脂質を水に分散させて、1,3-ブチレングリコール、及びグリセリンを添加した後、高圧ホモジナイザーによる高圧乳化処理を行わず、ヒアルロン酸Naを添加して組成物を得た。
 各実施例及び比較例の組成物における各成分の配合量(単位は質量%である)は、以下の通りである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
<ヒアルロン酸とバイオスフィンゴのナノ粒子の併用による保湿性の向上>
評価方法
 実施例10及び11、並びに比較例9乃至12の組成物を用いて、スフィンゴ糖脂質とヒアルロン酸の併用による保湿効果の向上について試験した。試験は、試験試料の構成成分を合わせるために調製されたプラセボ液と伴に行なった。
試験方法
 以下の手順で試験を行なった。
被験者の前腕部を洗浄(n=9)
・温度21±1℃、湿度50±10%RHに環境を調整した部屋で20分以上待機
・塗布前の角層水分量を測定
・各試料を10μl塗布
・塗布後120分後に角層水分量を測定
塗布前後における水分変化量を比較
 角層水分量は、Skicon200EX(株式会社ヤヨイ製)を使用して測定した。
評価結果
 図4に示す通り、実施例10は、比較例12と比べて、角層水分量が増加していた。さらにヒアルロン酸の配合量を減らした実施例11についても、比較例12と同程度の角層水分暈を示した。実施例10および11の組成物並びに比較例9乃至12の組成物の外観を図5に示した。実施例10、11は比較例12と比べて同じ濃度のバイオフィンゴを含有しているが、外観の透明性が高く、様々な剤形への化粧品へ応用することが可能である。
 本発明により、透明性が高く、且つ肌に適用した際に保湿性及びバリア能の高く、特に、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進するのに有効である、化粧料等の肌質改善剤を提供するための保存安定性が高い乳化組成物が提供される。本発明はまた、特に保湿性に優れる化粧料等の乳化組成物を提供できる。

Claims (12)

  1.  スフィンゴ糖脂質を含む粒子を含有する、コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進するための、乳化組成物。
  2.  スフィンゴ糖脂質を含む粒子が100nm未満の平均粒径である、請求項1に記載の乳化組成物。
  3.  更に、分子内に水酸基を3個有する多価アルコールを含有する、請求項1又は2に記載の乳化組成物。
  4.  更に、分子内に水酸基を2個有する多価アルコールを含有する、請求項1~3の何れか1つに記載の乳化組成物。
  5.  更に、水溶性高分子を含有する、請求項1~4の何れか1つに記載の乳化組成物。
  6.  前記分子内に水酸基を3個以上有する多価アルコールは、グリセリンである、請求項3~5の何れか1つに記載の乳化組成物。
  7.  前記粒子が、リポソームを形成している、請求項1~6の何れか1つに記載の乳化組成物。
  8.  更に、リン脂質を含有する、請求項1~7の何れか1つに記載の乳化組成物。
  9.  前記リン脂質が、前記粒子の表面付近に局在する、請求項8に記載の乳化組成物。
  10.  前記粒子が、界面活性剤なしで分散している、請求項1~9の何れか1つに記載の乳化組成物。
  11.  前記スフィンゴ糖脂質は、微生物由来である、請求項1~10の何れか1つに記載の乳化組成物。
  12.  コーニファイド・エンベロープタンパクの産生を促進するための化粧料である、請求項1~11の何れか1つに記載の乳化組成物。
     
     
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