WO2019045263A1 - 항균성 락토패드 조성물 - Google Patents

항균성 락토패드 조성물 Download PDF

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WO2019045263A1
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정명준
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Definitions

  • the present invention relates to an antimicrobial composition, and more particularly to a composition for various uses that can effectively kill harmful bacteria such as causative bacteria of acne, bacteria of other skin diseases, causative bacteria of food poisoning, and causative agents of food spoilage.
  • the skin of a human is preferably a skin of the order Staphylococcus, Corynebacterium, Propionibacterium, Micrococcus, Streptococcus, Brevibacterium, Acinetobacterium and Pseudomonas are known to be present.
  • Propionibacterium acnes is a known acne bacterium, which accounts for more than 50% of the total germs present in the skin. , And is present in the face skin in an amount of 102 ⁇ 106 / cm2 depending on the person.
  • acne bacteria which are found not only in the skin but also in the oral cavity, the colon, the conjunctiva and the external ear canal, are bacteria that are observed in the sebaceous glands of the head, face, back, chest, Non-runny Gram-positive anaerobic bacteria, mainly opportunistic bacteria that cause inflammation.
  • the sebaceous gland is located in the dermis, which is a thick layer below the skin epidermis. It forms a pilosebaceous unit, and is linked to the pores to secrete sebum containing lipophilic triglyceride to the skin surface.
  • acne causes of acne are age, sex, specific body parts, genetic factors, lifestyle, occupation, immune system, and surrounding environment.
  • acne is caused by acne bacteria, secrete enzymes such as lipases, proteases and hyaluronidases that damage the pilosebaceous unit, leading to excessive sebum production, colonization of acne bacteria, inflammation through the immune system of the host, abnormal keratinization .
  • Acne bacterium hydrolyzes sebum containing triglyceride secreted from the sebaceous gland and releases it as free fatty acid.
  • Acne bacteria are bound to the released free fatty acid to induce colonization of acne bacteria, thereby generating acne.
  • Another object of the present invention is to provide a composition which effectively exterminates causative agents of acne and has an excellent effect of preventing, ameliorating or treating acne.
  • Another object of the present invention is to provide a composition which effectively exterminates causative bacteria of food poisoning and is excellent in prevention, improvement or therapeutic effect of food poisoning.
  • an antimicrobial composition comprising as an active ingredient a culture solution obtained by culturing Enterococcus faecalis SL-5 in a medium supplemented with vitamin.
  • the vitamin is selected from the group consisting of vitamin B1 (thiamine), vitamin B2 (riboflavin), vitamin B3 (nicotinamide), vitamin B5 (pantothenic acid), vitamin B6 (pyridoxine), vitamin B7 (biotin) Vitamin D2 (ergosterol), vitamin D3 (calciphediol), vitamin D4 (dihydro-ergocalciferol), vitamin E (tocopherol), and vitamin B (cobalamin), vitamin C (ascorbic acid) Vitamin K (naphthoquinone), and the like.
  • the vitamin may be vitamin B3.
  • the vitamin may be added in an amount of 0.05 to 0.6% by weight based on the total weight of the medium.
  • the vitamin may be added in an amount of 0.1 to 0.4% by weight based on the total weight of the medium.
  • the medium may be one in which an amino acid is further added.
  • the amino acid is selected from the group consisting of arginine, lysine, aspartic acid, glutamic acid, glycine, leucine, cysteine, proline and phenylalanine (phenylalanine).
  • the amino acid may be glutamic acid.
  • the amino acid may be added in an amount of 0.1 to 0.4% by weight based on the total weight of the medium.
  • the medium comprises 2.0 to 5.0% by weight of glucose, based on the total weight of the medium; 0.1 to 1.0% by weight of yeast extract; 0.5 to 2.0% by weight of meat extract; 0.5 to 2.0% by weight of protein hydrolysates; 0.01 to 0.1% by weight of amino acid salt; 0.1 to 0.5% by weight of a metal salt; 0.01 to 0.1% by weight of polysorbate; And a remainder.
  • the cultivation can be carried out at a temperature of 30 to 40 DEG C for 6 to 48 hours.
  • the culture solution may be obtained by removing the cells of Enterococcus falciparum SL-5 through one or more steps of centrifugation and membrane separation after culturing.
  • composition for preventing, ameliorating or treating acne comprising as an active ingredient a culture solution obtained by culturing Enterococcus faecalis SL-5 in a medium supplemented with vitamin.
  • the vitamin is selected from the group consisting of vitamin B1 (thiamine), vitamin B2 (riboflavin), vitamin B3 (nicotinamide), vitamin B5 (pantothenic acid), vitamin B6 (pyridoxine), vitamin B7 (biotin) Vitamin D2 (ergosterol), vitamin D3 (calciphediol), vitamin D4 (dihydro-ergocalciferol), vitamin E (tocopherol), and vitamin B (cobalamin), vitamin C (ascorbic acid) Vitamin K (naphthoquinone), and the like.
  • the vitamin may be vitamin B3.
  • the vitamin may be added in an amount of 0.05 to 0.6% by weight based on the total weight of the medium.
  • the vitamin may be added in an amount of 0.1 to 0.4% by weight based on the total weight of the medium.
  • the medium may be one in which an amino acid is further added.
  • the amino acid is selected from the group consisting of arginine, lysine, aspartic acid, glutamic acid, glycine, leucine, cysteine, proline and phenylalanine (phenylalanine).
  • the amino acid may be glutamic acid.
  • the amino acid may be added in an amount of 0.1 to 0.4% by weight based on the total weight of the medium.
  • the medium comprises 2.0 to 5.0% by weight of glucose, based on the total weight of the medium; 0.1 to 1.0% by weight of yeast extract; 0.5 to 2.0% by weight of meat extract; 0.5 to 2.0% by weight of protein hydrolysates; 0.01 to 0.1% by weight of amino acid salt; 0.1 to 0.5% by weight of a metal salt; 0.01 to 0.1% by weight of polysorbate; And a remainder.
  • the cultivation can be carried out at a temperature of 30 to 40 DEG C for 6 to 48 hours.
  • the culture solution may be obtained by removing the cells of Enterococcus falciparum SL-5 through one or more steps of centrifugation and membrane separation after culturing.
  • composition for preventing, ameliorating or treating food poisoning which comprises as an active ingredient a culture solution obtained by culturing Enterococcus faecalis SL-5 in a medium supplemented with vitamins.
  • the vitamin is selected from the group consisting of vitamin B1 (thiamine), vitamin B2 (riboflavin), vitamin B3 (nicotinamide), vitamin B5 (pantothenic acid), vitamin B6 (pyridoxine), vitamin B7 (biotin) Vitamin D2 (ergosterol), vitamin D3 (calciphediol), vitamin D4 (dihydro-ergocalciferol), vitamin E (tocopherol), and vitamin B (cobalamin), vitamin C (ascorbic acid) Vitamin K (naphthoquinone), and the like.
  • the vitamin may be vitamin B3.
  • the vitamin may be added in an amount of 0.05 to 0.6% by weight based on the total weight of the medium.
  • the vitamin may be added in an amount of 0.1 to 0.4% by weight based on the total weight of the medium.
  • the medium may be one in which an amino acid is further added.
  • the amino acid is selected from the group consisting of arginine, lysine, aspartic acid, glutamic acid, glycine, leucine, cysteine, proline and phenylalanine (phenylalanine).
  • the amino acid may be glutamic acid.
  • the amino acid may be added in an amount of 0.1 to 0.4% by weight based on the total weight of the medium.
  • the medium comprises 2.0 to 5.0% by weight of glucose, based on the total weight of the medium; 0.1 to 1.0% by weight of yeast extract; 0.5 to 2.0% by weight of meat extract; 0.5 to 2.0% by weight of protein hydrolysates; 0.01 to 0.1% by weight of amino acid salt; 0.1 to 0.5% by weight of a metal salt; 0.01 to 0.1% by weight of polysorbate; And a remainder.
  • the cultivation can be carried out at a temperature of 30 to 40 DEG C for 6 to 48 hours.
  • the culture solution may be obtained by removing the cells of Enterococcus falciparum SL-5 through one or more steps of centrifugation and membrane separation after culturing.
  • composition provided in the present invention can be used as an antibacterial agent for various purposes because it has an antibacterial activity that effectively kills various harmful bacteria such as causative bacteria of acne, bacteria of other skin diseases, causative bacteria of food poisoning, and causative agents of food spoilage.
  • composition provided by the present invention can prevent, ameliorate, or treat acne by effectively killing Propionibacterium acnes which is a representative causative agent of acne.
  • composition provided by the present invention can effectively kill food poisoning or food poisoning, such as Bacillus cereus, Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenenis, thereby preventing food corruption and preventing, improving or treating food poisoning .
  • food poisoning or food poisoning such as Bacillus cereus, Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenenis
  • the inventors of the present invention have found that when enterococcus faecalis SL-5 is cultured in the medium after addition of vitamin B3, especially vitamin B3, to the medium, The present inventors have found that the obtained culture solution significantly increases the antimicrobial effect on the causative bacteria of acne, other skin diseases bacteria, causative bacteria of food poisoning and causative bacteria of food spoilage.
  • an antimicrobial composition comprising as an active ingredient a culture solution obtained by culturing Enterococcus faecalis SL-5 in a medium supplemented with vitamin.
  • the culture solution obtained by inoculating and culturing Enterococcus falcis SL-5 in a medium supplemented with vitamins has an effective killing effect against a variety of harmful bacteria such as causative bacteria of acne, causative bacteria of skin diseases, causative bacteria of food poisoning, I have.
  • the composition of the basic medium for obtaining the culture medium of Enterococcus falcis SL-5 is not particularly limited.
  • the composition may be MRS, BL, M17, NB, BHI medium, 2.0 to 5.0% by weight of glucose; 0.1 to 1.0% by weight of yeast extract; 0.5 to 2.0% by weight of meat extract; 0.5 to 2.0% by weight of protein hydrolysates; 0.01 to 0.1% by weight of amino acid salt; 0.1 to 0.5% by weight of a metal salt; 0.01 to 0.1% by weight of polysorbate; And a remainder.
  • the protein hydrolyzate may be soy peptone.
  • the amino acid salt may be in the form of a salt of cysteine, preferably a salt having an inorganic acid such as hydrochloric acid, bromic acid, sulfuric acid, sodium hydrogen sulfate, phosphate, nitrate or carbonate; Or salts with organic acids such as formic, acetic, propionic, oxalic, succinic, benzoic, citric, maleic, malonic, tartaric, gluconic, lactic, gentisic, fumaric, lactobionic, salicylic, trifluoroacetic or It may be in the salt form of acetylsalicylic acid (aspirin), and most preferably it may be a cysteine hydrochloride salt.
  • an inorganic acid such as hydrochloric acid, bromic acid, sulfuric acid, sodium hydrogen sulfate, phosphate, nitrate or carbonate
  • organic acids such as formic, acetic, propionic, oxalic, succinic
  • the metal salt is selected from the group consisting of dipotassium phosphate, sodium acetate, potassium citrate, magnesium sulfate, manganese sulphate, and calcium chloride. , Preferably two or more, and more preferably all of the above-mentioned metal salts.
  • the polysorbate may be polysorbate 80.
  • the cells are removed by centrifugation and / or membrane separation, and a concentrated culture liquid can be obtained.
  • the culture broth at the time of membrane separation can be obtained by filtration through a filter having a pore size of 0.45 mu m to obtain filtrate filtrate.
  • an adsorbent such as maltodextrin of 1 to 40% by weight is mixed with the concentrated culture broth or filtered filtrate, followed by lyophilization and hot air spray drying to obtain an isolated concentrate excellent in antibacterial activity have.
  • the types of vitamins to be added to the medium in the present invention include vitamin B1 (thiamine), vitamin B2 (riboflavin), vitamin B3 (nicotinamide), vitamin B5 (pantothenic acid), vitamin B6 Vitamin D2 (ergosterol), vitamin D3 (calciphediol), and vitamin D (erythropterin), which are fat-soluble vitamins, , Vitamin D4 (dihydroergocerciferol), vitamin E (tocopherol) or vitamin K (naphthoquinone), or a mixture of two or more thereof, preferably water-soluble vitamins, and most preferably, Among the above-mentioned water-soluble vitamins, vitamin B3 (nicotinamide) can be particularly mentioned.
  • the vitamin B3, that is, " nicotinamide " is a compound represented by the following formula (1) and is also referred to as " niacinamide ".
  • These nicotine amides were discovered between 1935 and 1937 and are commonly used for pellagra treatment.
  • each nicotinamide adenine dinucleotide (NAD) or nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADP) is present in the form of a coenzyme.
  • NAD nicotinamide adenine dinucleotide
  • NADP nicotinamide adenine dinucleotide phosphate
  • NAD and NADP act as coenzyme of oxidation-reduction reaction and participate in more than 50 biochemical reactions such as carbohydrate, fat, protein metabolism and steroid synthesis.
  • nicotinamide is a substance essential for maintaining normal life, including energy production in the body. It also expands peripheral blood vessels to
  • the vitamin preferably vitamin B3
  • the vitamin may be added in an amount of 0.05 to 0.6% by weight, more preferably 0.1 to 0.4% by weight, based on the total weight of the medium.
  • the vitamin when the vitamin is added in an amount exceeding the above-defined content range, it is difficult to expect an improvement effect of the antimicrobial activity.
  • an antimicrobial activity of the culture liquid finally prepared can be given an unpredictable improvement effect.
  • the types of the amino acids include arginine, lysine, an anionic amino acid such as aspartic acid, glutamic acid, glycine, aliphatic non-polar amino acids, leucine leucine, cysteine which is a hydrophilic polar amino acid, proline, and phenylalanine which is an aromatic amino acid, but it may be preferably an anionic amino acid, more preferably glutamic acid Lt; / RTI >
  • glutamic acid is a kind of acidic? -Amino acid represented by Glu or E as a weak acid, specifically a compound represented by the following formula (2).
  • L-glutamic acid has been widely found in gluten and is widely distributed in general proteins, especially in cereal proteins (43.7% in wheat gliadin). The good taste of kelp soup is due to its single sodium salt.
  • D-glutamic acid which is most abundant as free amino acid in the brain gray matter, mediates information as excitatory neurotransmitter, and confronts gamma-aminobutyric acid (GABA) Glutamate polypeptide in the ganglious membrane of bacteria such as Bacillus anthracis, B. mesentericus, and B. subtilis, and also in the peptide glycans of bacterial cell walls.
  • GABA gamma-aminobutyric acid
  • a synergistic effect can be imparted to the antimicrobial activity of the culture broth by concurrently administering glutamic acid among amino acids in addition to vitamin B3 to the medium for culturing Enterococcus falcis SL-5.
  • the amino acid preferably glutamic acid
  • the amino acid may be added in an amount of 0.1 to 0.4% by weight based on the total weight of the medium.
  • the amino acid when the amino acid is added in an amount exceeding the above defined range, it is difficult to expect further improvement in antibacterial activity.
  • the culture conditions of the Enterococcus falciparum SL-5 are not particularly limited.
  • the culture can be carried out at a temperature of 30 to 40 ° C for 6 to 48 hours, and can be suitably adjusted according to the culture scale.
  • a pharmaceutical composition for preventing or treating acne comprising as an active ingredient a culture solution obtained by culturing Enterococcus faecalis SL-5 in a medium supplemented with vitamin.
  • the culture solution obtained by inoculating and culturing Enterococcus falcis SL-5 in a medium supplemented with vitamins has an effective killing effect on Propionibacterium acnes, which is known as a causative agent of acne.
  • amino acids in addition to vitamins can be added to the culture medium for the culture of Enterococcus falciparum SL-5, thereby giving a synergistic effect to the death of acne causative microorganisms in the final culture.
  • contents of the Enterococcus flavus SL-5, vitamins, amino acids and culture conditions are the same as those described in the antimicrobial composition, and detailed description thereof will be omitted.
  • a pharmaceutical composition for preventing or treating food poisoning which comprises as an active ingredient a culture solution obtained by culturing Enterococcus faecalis SL-5 in a medium supplemented with vitamin .
  • the culture broth obtained by inoculating and culturing Enterococcus falciparum SL-5 in a medium supplemented with vitamin B contains Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes (Listeria monocytogenes ), Escherichia coli, Salmonella enterica, Pseudomonas aeruginosa, Vibrio parahaemolyticus, Clostridium perfringens and the like, Such as Campylobacter jejuni, can effectively kill the causative bacteria of food poisoning or food poisoning.
  • the term "food poisoning" refers to a clinical syndrome that causes symptoms such as vomiting, diarrhea and abdominal pain caused by ingesting foods contaminated with harmful substances.
  • substances causing food poisoning include natural toxins, Food, contaminated food, microorganisms (mainly bacteria) and toxic substances secreted by them.
  • Much of acute food poisoning is caused by bacteria and their toxic products.
  • food poisoning by bacteria that is, bacterial food poisoning, contamination or propagation of bacteria into foods is not generally observed by the naked eye, and detection is very difficult without professional methods. have.
  • addition of an amino acid in addition to vitamins to the culture medium for the culture of Enterococcus falciparum SL-5 can confer a synergistic effect on food corruption or death of food-borne causative bacteria in the culture liquid finally prepared.
  • contents of the Enterococcus flavus SL-5, vitamins, amino acids and culture conditions are the same as those described in the antimicrobial composition, and detailed description thereof will be omitted.
  • the pharmaceutical composition may be in the form of a capsule, a tablet, a granule, an injection, an ointment, a powder or a drink, and the pharmaceutical composition may be a human.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be formulated in the form of oral preparations such as powders, granules, capsules, tablets, aqueous suspensions, etc., external preparations, suppositories and sterilized injection solutions according to a conventional method, .
  • the pharmaceutical composition of the present invention may include a pharmaceutically acceptable carrier.
  • the pharmaceutically acceptable carrier may be a binder, a lubricant, a disintegrant, an excipient, a solubilizing agent, a dispersing agent, a stabilizer, a suspending agent, a coloring matter, a perfume or the like in the case of oral administration.
  • a solubilizing agent, an isotonic agent, a stabilizer and the like may be mixed and used.
  • a base an excipient, a lubricant, a preservative and the like may be used.
  • Formulations of the pharmaceutical compositions of the present invention may be prepared in a variety of ways by mixing with a pharmaceutically acceptable carrier as described above.
  • oral administration may be in the form of tablets, troches, capsules, elixirs, suspensions, syrups, wafers, etc.
  • they may be formulated in unit dosage ampoules or in multiple dosage forms have.
  • suitable carriers, excipients and diluents for formulation include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltoditol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, Cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate or mineral oil. Further, it may further include a filler, an anticoagulant, a lubricant, a wetting agent, a flavoring agent, an emulsifying agent, an antiseptic, and the like.
  • the route of administration of the pharmaceutical composition according to the present invention may be, but is not limited to, oral, intravenous, intramuscular, intraarterial, intramedullary, intrathecal, intracardiac, transdermal, subcutaneous, intraperitoneal, intranasal, , Sublingual or rectal. Oral or parenteral administration is preferred.
  • parenteral includes subcutaneous, intradermal, intravenous, intramuscular, intraarticular, intrasynovial, intrasternal, intrathecal, intralesional and intracranial injection or infusion techniques.
  • the pharmaceutical compositions of the present invention may also be administered in the form of suppositories for rectal administration.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be administered orally or parenterally depending on various factors including the activity of the specific compound used, age, weight, general health, sex, diet, time of administration, route of administration, rate of excretion, drug combination, And the dosage of the pharmaceutical composition may be appropriately selected by a person skilled in the art depending on the condition of the patient, the body weight, the degree of disease, the type of drug, the route of administration and the period of time, and is preferably from 0.0001 to 50 mg / kg or 0.001 to 50 mg / kg.
  • the administration may be carried out once a day or divided into several times. The dose is not intended to limit the scope of the invention in any way.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention can be formulated into pills, dragees, capsules, solutions, gels, syrups, slurries, suspensions.
  • a cosmetic composition for preventing or ameliorating acne comprising as an active ingredient a culture solution obtained by culturing Enterococcus faecalis SL-5 in a medium supplemented with vitamin.
  • the culture solution obtained by inoculating and culturing Enterococcus falciparum SL-5 in a medium supplemented with vitamins has an effective killing effect on Propionibacterium acnes, which is known as a typical acne bacterium.
  • the contents of the Enterococcus flavus SL-5, vitamins, amino acids and culture conditions are the same as those described in the above pharmaceutical composition, and detailed description thereof will be omitted below.
  • the cosmetic composition according to the present invention may be used in cosmetics, nutritional lotions, nutritional essences, massage creams, cosmetic bath additives, body lotions, body milks, bath oils, baby oils, baby powders, shower gels, shower creams, sunscreen lotions, Face and Body Cream, Face and Body Cream, Skin Whitening Cream, Hand Lotion, Hair Lotion, Cosmetic Cream, Jasmine Oil, Face Cream, Skin Cream, Skin Cream, Sunscreen Cosmetics, Bath soap, water soap, soap, shampoo, hand cleanser, medicinal soap ⁇ non-medical use ⁇ , cream soap, facial wash, whole body cleanser, scalp cleanser, hair rinse, cosmetic soap, tooth whitening gel, . ≪ / RTI >
  • the composition of the present invention may further comprise a solvent commonly used in the production of a cosmetic composition, or a suitable carrier, excipient or diluent.
  • water, saline solution, DMSO, or a combination thereof may be used.
  • the carrier, excipient or diluent include purified water, oil, wax But are not limited to, fatty acids, fatty acid alcohols, fatty acid esters, surfactants, humectants, thickeners, antioxidants, viscosity stabilizers, chelating agents, buffers, lower alcohols and the like. Further, if necessary, it may contain a whitening agent, a moisturizing agent, a vitamin, an ultraviolet screening agent, a perfume, a dye, an antibiotic, an antibacterial agent, and an antifungal agent.
  • oil hydrogenated vegetable oil, castor oil, cottonseed oil, olive oil, palm oil, jojoba oil and avocado oil may be used.
  • wax examples include wax, wax, carnauba, candelilla, montan, ceresin, liquid paraffin, Can be used.
  • fatty acid stearic acid, linoleic acid, linolenic acid and oleic acid may be used.
  • fatty acid alcohol cetyl alcohol, octyldodecanol, oleyl alcohol, panthenol, lanolin alcohol, stearyl alcohol and hexadecanol may be used.
  • fatty acid esters isopropyl myristate, isopropyl palmitate, and butyl stearate may be used.
  • surfactant a cationic surfactant, an anionic surfactant and a nonionic surfactant known in the art can be used, and a surfactant derived from a natural material is preferably used.
  • it may contain a hygroscopic agent, a thickening agent, an antioxidant and the like widely known in the field of cosmetics, and the kind and amount thereof are well known in the art.
  • a food composition for preventing or ameliorating acne comprising as an active ingredient a culture solution obtained by culturing Enterococcus faecalis SL-5 in a medium supplemented with vitamin.
  • the culture solution obtained by inoculating and culturing Enterococcus falciparum SL-5 in a medium supplemented with vitamins has an effective killing effect on Propionibacterium acnes, which is known as a typical acne bacterium.
  • contents of the Enterococcus flavus SL-5, vitamins, amino acids and culture conditions are the same as those described in the antimicrobial composition, and detailed description thereof will be omitted.
  • a food composition for preventing or improving food poisoning which comprises as an active ingredient a culture solution obtained by culturing Enterococcus faecalis SL-5 in a medium supplemented with vitamin.
  • the culture solution obtained by inoculating and culturing Enterococcus falciparum SL-5 in a medium supplemented with vitamin is selected from the group consisting of Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, Listeria monocytogenes, Escherichia coli, Salmonella enterica, It is possible to effectively kill microorganisms causing food spoilage or food poisoning, such as Auriginosa, Vibrio parahaemolyticus, Clostridium perfringens and Campylobacter jejuni.
  • addition of an amino acid in addition to vitamins to the culture medium for the culture of Enterococcus falciparum SL-5 can confer a synergistic effect on food corruption or death of food-borne causative bacteria in the culture liquid finally prepared.
  • contents of the Enterococcus flavus SL-5, vitamins, amino acids and culture conditions are the same as those described in the antimicrobial composition, and detailed description thereof will be omitted.
  • the food composition of the present invention may be prepared in the form of various foods such as beverage, gum, tea, vitamin complex, powder, granule, tablet, capsule, confection, rice cakes, bread and the like. Since the food composition of the present invention is composed of a plant extract having little toxicity and side effects, it can be safely used for prolonged use even for prophylactic purposes.
  • the amount thereof may be added in a proportion of 0.1 to 50% of the total weight.
  • natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose, disaccharides such as fructose, sucrose and the like and sugar sugars such as polysaccharide, dextrin and cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol can do.
  • natural flavors include natural flavors (such as tau martin and stevia extract (for example, rebaudioside A and glycyrrhizin) and synthetic flavors (for example, saccharine and aspartame).
  • the food composition of the present invention can be used as a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, colorants, pectic acid and its salts, alginic acid and its salts, , a pH adjusting agent, a stabilizer, a preservative, a glycerin, an alcohol, a carbonating agent used in a carbonated drink, and the like.
  • a flavoring agent such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, colorants, pectic acid and its salts, alginic acid and its salts, , a pH adjusting agent, a stabilizer, a preservative, a glycerin, an alcohol, a carbonating agent used in a carbonated drink, and the like.
  • additives may be used independently or in combination.
  • the proportion of such additives is not so critical, but is generally selected in the range of 0.1 to about 50 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.
  • a method of preparing a composition having an antimicrobial activity comprising the steps of: (a) preparing a medium to which a vitamin is added; And (b) inoculating Enterococcus faecalis SL-5 into the prepared medium, followed by culturing to obtain a culture medium.
  • the vitamin is selected from the group consisting of vitamin B1 (thiamine), vitamin B2 (riboflavin), vitamin B3 (nicotinamide), vitamin B5 (pantothenic acid), vitamin B6 (pyridoxine), vitamin B7 (biotin) Vitamin D2 (ergosterol), vitamin D3 (calciphediol), vitamin D4 (dihydroergocerciferol), vitamin E (tocopherol), vitamin E (vitamin C), vitamin C (ascorbic acid) And vitamin K (naphthoquinone).
  • the vitamin may be added in an amount of 0.05 to 0.6% by weight based on the total weight of the medium.
  • amino acids may be further added to the medium.
  • the amino acid is selected from the group consisting of arginine, lysine, aspartic acid, glutamic acid, glycine, leucine, cysteine, proline, Phenylalanine, and the like.
  • the amino acid may be added in an amount of 0.05 to 0.6% by weight based on the total weight of the medium.
  • the medium comprises 2.0 to 5.0% by weight of glucose, based on the total weight of the medium; 0.1 to 1.0% by weight of yeast extract; 0.5 to 2.0% by weight of meat extract; 0.5 to 2.0% by weight of protein hydrolysates; 0.01 to 0.1% by weight of amino acid salt; 0.1 to 0.5% by weight of a metal salt; 0.01 to 0.1% by weight of polysorbate; 0.05 to 0.6% by weight of vitamin B3 (nicotinamide); And residues.
  • the culturing can be carried out at a temperature of 30 to 40 DEG C for 6 to 48 hours.
  • the step (c) may further include the step (c) of removing the cells of the Enterococcus flavus SL-5 by performing at least one of centrifugation and membrane separation for the culture solution after the step (b).
  • the Enterococcus faecalis SL-5 (16s rRNA sequence, registered as GenBank Accession No. AY692453) was inoculated into 3 L of the liquid medium shown in Table 1 at a level of 1% by weight, and then replaced with nitrogen gas Lt; / RTI > for about 12 hours under anaerobic conditions.
  • 'vitamin or amino acid' is the kind shown in Table 2 below. After culturing, the cells were removed by centrifugation, and only the supernatant was filtered through a filter having a pore size of 0.20 mu m to prepare a filtrate.
  • Raw material name Content (% by weight) 3L reference usage glucose 3% 90g Soy peptone One% 30g Yeast extract One% 30g Meat extract One% 30g Cysteine hydrochloride 0.05% 0.15 g Dipotassium phosphate 0.05% 0.15 g Sodium acetate 0.05% 0.15 g Potassium citrate 0.05% 0.15 g Magnesium sulfate 0.01% 0.03 g Manganese sulfate 0.005% 0.015 g Calcium chloride 0.05% 0.15 g Polysorbate 80 0.05% 0.15 g Additives (vitamins or amino acids) 0.1% 0.3 g
  • Propionibacterium acnes (ATCC 29399), Bacillus cereus, Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenes were inoculated into RCM broth (reinforced clostridial medium broth, Merck, Darmstadt, Germany) and incubated at 37 ° C for about 16 hours.
  • the culture filtrate obtained in Preparation Example 1 was diluted and dispensed on the solid medium on which the test strain grew, and the test strain was cultured.
  • the titer of the clear zone was calculated and the titer was calculated. The results are shown in Tables 3 to 6, respectively.
  • filtration filtrate of the culture solution obtained by culturing Enterococcus falciparum SL-5 in the medium supplemented with nicotinamide, which is vitamin B3, was more effective than the other types of vitamins and amino acids which is a cause of food poisoning, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, and Listeria monocytoseniens can be effectively killed.
  • the filtered filtrate was obtained from the Enterococcus versicolus SL-5 medium in the same manner as in Preparation Example 1, and nicotinamide, which is vitamin B3, was added as a medium addition substance at various concentrations as shown in Table 7 below.
  • filtration filtrate of the culture solution obtained by culturing Enterococcus falcis SL-5 in a medium supplemented with nicotinamide in an amount of 0.05 to 0.6% by weight showed that the filtration filtrate of the culture broth was composed of Propionibacterium acnes, Bacillus cereus, Aureus and Listeria monocytogenenes.
  • nicotinamide when 0.1 to 0.4% by weight of nicotinamide is added, a synergistic effect that is unexpected in the death of the cause of acne and causative agents of food poisoning is given can see.
  • Nicotinamide a vitamin B3 was added to the culture filtrate from the Enterococcus falciparum SL-5 medium in the same manner as in Preparation Example 1, and the amino acid or the metal salt shown in Table 9 was added in an amount of 0.1 By weight (0.3 g).
  • the filtered filtrate of the culture solution obtained by culturing Enterococcus falcis SL-5 in a medium supplemented with glutamic acid among amino acids together with nicotinamide showed a higher affinity than that of the culture without addition of propionibacterium acnes, Bacillus cereus, Staphylococcus aureus, and Listeria monocytogenenes were killed in the synergistic effect.
  • the addition of other amino acids or metal salts other than glutamic acid did not show any synergistic effect.
  • the filtrate filtrate of the culture obtained by culturing Enterococcus falcis SL-5 in a medium containing 0.1% by weight of nicotinamide and 0.1 to 0.4% by weight of glutamic acid was used as the filtrate, Cereus, Staphylococcus aureus and Listeria monocytogenenis, but no synergistic effect was observed when added in other contents.
  • the culture solution obtained by culturing the Enterococcus falciparum SL-5 in a medium supplemented with nicotinamide, especially vitamins can effectively kill acne causing bacteria and food poisoning causative bacteria, 0.4% by weight, the killing effect can be further improved.
  • the addition of glutamic acid, particularly glutamic acid, in the amino acid together with the nicotinamide in an amount of 0.1 to 0.4% by weight The synergistic effect is imparted to the antimicrobial effect of the culture medium.
  • the culture solution obtained by culturing the Enterococcus flavus SL-5 in the culture medium supplemented with nicotinamide and optionally glutamic acid can be used not only as various antibacterial agents, but also as a preventive and preventive agent for acne or food poisoning, Can be used for improvement or treatment.

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Abstract

본 발명은 비타민과 추가적으로 아미노산이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 항균성 조성물을 제공한다. 본 발명에서 제공하는 조성물은 여드름의 원인균, 기타 피부 질환 세균, 식중독의 원인균 및 식품 부패의 원인균 등과 같은 다양한 유해균을 효과적으로 사멸시키는 항균 활성을 가져, 여드름의 예방, 개선 또는 치료 효과가 뛰어나고, 식품의 부패를 막고 식중독을 예방할 수 있다.

Description

항균성 락토패드 조성물
본 발명은 항균성 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 여드름의 원인균, 기타 피부 질환 세균, 식중독의 원인균 및 식품 부패의 원인균 등과 같은 유해균을 효과적으로 사멸할 수 있는 다양한 용도의 조성물에 관한 것이다.
사람의 피부에는 스테필로코커스(Staphylococcus), 코리네박테리움(Corynebacterium), 프로피오니박테리움(Propionibacterium), 마이크로코카스(Micrococcus), 스트렙토코카스(Streptococcus), 브레비박테리움(Brevibacterium), 아시네토박테리움(Acinetobacterium) 및 슈도모나스(Pseudomonas) 등의 세균들이 존재한다고 알려져 있으며, 특히 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes)는 대표적으로 알려진 여드름 균으로, 피부에 존재하는 전체 세균들 중 50% 이상을 차지하며, 사람에 따라 얼굴 피부에 102~106/㎠의 양으로 존재한다. 피부뿐만 아니라 구강, 대장, 결막, 외이도 등에서도 발견되는 이와 같은 여드름 균은 산소가 거의 존재하지 않는 머리, 얼굴, 등, 가슴, 목 등의 피지선(sebaceous glands)에서 관찰되는 세균으로 포자를 형성하지 않는 비운동성 그람 양성 혐기성균이며, 주로 염증을 일으키는 기회감염세균이다.
피지선은 피부 표피 아래의 두꺼운 층인 진피 부위에 존재하며, 모낭 피지선 단위(pilosebaceous unit)를 형성하고, 모공과 연결되어 있어 친유성의 triglyceride를 함유한 피지를 피부 표면으로 분비한다.
여드름을 야기하는 여러가지 원인들로는 나이, 성별, 특정 신체 부위, 유전적 요인, 생활방식, 직업, 면역체계, 주위 환경 등이 있으나, 이 중에서 특히 여드름 균에 의해 유발되는 경우는 여드름 균이 모낭 피지선 단위(pilosebaceous unit)를 손상시키는 리파아제(lipases), 프로테아제(proteases) 및 히알루로니다제(hyaluronidases) 등과 같은 효소를 분비함으로써 과도한 피지 생성, 여드름 균의 집락화, 숙주의 면역체계를 통한 염증반응, 비정상적인 각질화 등을 유도하게 된다. 여드름 균은 피지선에서 분비되는 트리글리세라이드(triglyceride)를 함유한 피지를 가수분해하여 유리 지방산으로 방출시키고, 방출된 유리 지방산에 여드름 균이 결합하여 여드름 균의 집락화를 유도함으로써 여드름을 발생시킨다.
이러한 여드름을 치료하기 위해서는 박탈된 각질형성세포의 응집을 막는 방법, 프로피오니박테리움 아크네 세균을 감소시키거나 없애는 방법, 면포용해제를 이용해 모공을 막는 물질을 제거하는 방법, 항염증제를 사용하여 염증성 반응을 치료하는 방법, 피지선 활동을 감소시켜 피지분비를 막는 방법 등이 널리 알려져 있고, 여드름 치료제로는 국부성 레티노이드류 치료제, 호르몬 치료제, 국부성 항균제, 구강투여 항생제 등 많은 치료제들이 개발되어 있다.
하지만, 종래의 여드름 치료제나 개선용 화장품은 남용 시 스테로이드에 대한 위험성, 피부 건조 유발 및 모공 확장, 구순염, 기미 유발과 함께 화학 소재로 인한 부작용 발생 위험이 있고, 이미 발생한 여드름을 완화시키는 효과는 있어도 근본적으로 치료할 수 없는 문제점이 있다. 따라서 최근에는 안전하면서도 효과적으로 여드름을 치료할 수 있는 방법이 요구되고 있는 실정이다.
본 발명의 일 목적은 여드름의 원인균, 기타 피부 질환 세균, 식중독의 원인균 및 식품 부패의 원인균 등과 같은 다양한 유해균에 대하여 항균 활성이 우수한 항균용 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명의 다른 목적은 여드름의 원인균을 효과적으로 사멸시켜 여드름의 예방, 개선 또는 치료 효과가 뛰어난 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명의 또 다른 목적은 식중독의 원인균을 효과적으로 사멸시켜 식중독의 예방, 개선 또는 치료 효과가 뛰어난 조성물을 제공하고자 한다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
본 발명의 일 구현 예에 따르면, 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 항균성 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 상기 비타민은 비타민 B1(티아민), 비타민 B2(리보플라빈), 비타민 B3(니코틴아마이드), 비타민 B5(판토텐산), 비타민 B6(피리독신), 비타민 B7(비오틴), 비타민 B9(엽산), 비타민 B12(코발라민), 비타민 C(아스코르브산), 비타민 A(레티놀), 비타민 D2(에르고스테롤), 비타민 D3(칼시페디올), 비타민 D4(디하이드로에르고칼시페롤), 비타민 E(토코페롤) 및 비타민 K(나프토퀴논)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
본 발명에서 상기 비타민은 비타민 B3일 수 있다.
본 발명에서 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서 상기 배지는 아미노산이 추가로 첨가된 것일 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산은 아르기닌(arginine), 라이신(lysine), 아스파르트산(aspartic acid), 글루탐산(glutamic acid), 글라이신(glycine), 류신(leucine), 시스테인(cysteine), 프롤린(proline) 및 페닐알라닌(phenylalanine)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산은 글루탐산일 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산은 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서 상기 배지는 배지 총 중량에 대하여 포도당 2.0~5.0 중량%; 효모추출물 0.1~1.0 중량%; 육추출물 0.5~2.0 중량%; 단백가수분해물 0.5.0~2.0 중량%; 아미노산 염 0.01~0.1 중량%; 금속 염 0.1~0.5 중량%; 폴리소르베이트 0.01~0.1 중량%; 및 잔부 물을 포함하는 배지일 수 있다.
본 발명에서 상기 배양은 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 6 내지 48 시간 동안 수행될 수 있다.
본 발명에서 상기 배양액은 배양 후 원심분리 및 막 분리 중 어느 하나 이상의 공정을 통해서 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 균체가 제거된 것일 수 있다.
본 발명의 다른 구현 예에 따르면, 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 여드름의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 상기 비타민은 비타민 B1(티아민), 비타민 B2(리보플라빈), 비타민 B3(니코틴아마이드), 비타민 B5(판토텐산), 비타민 B6(피리독신), 비타민 B7(비오틴), 비타민 B9(엽산), 비타민 B12(코발라민), 비타민 C(아스코르브산), 비타민 A(레티놀), 비타민 D2(에르고스테롤), 비타민 D3(칼시페디올), 비타민 D4(디하이드로에르고칼시페롤), 비타민 E(토코페롤) 및 비타민 K(나프토퀴논)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
본 발명에서 상기 비타민은 비타민 B3일 수 있다.
본 발명에서 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서 상기 배지는 아미노산이 추가로 첨가된 것일 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산은 아르기닌(arginine), 라이신(lysine), 아스파르트산(aspartic acid), 글루탐산(glutamic acid), 글라이신(glycine), 류신(leucine), 시스테인(cysteine), 프롤린(proline) 및 페닐알라닌(phenylalanine)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산은 글루탐산일 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산은 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서 상기 배지는 배지 총 중량에 대하여 포도당 2.0~5.0 중량%; 효모추출물 0.1~1.0 중량%; 육추출물 0.5~2.0 중량%; 단백가수분해물 0.5.0~2.0 중량%; 아미노산 염 0.01~0.1 중량%; 금속 염 0.1~0.5 중량%; 폴리소르베이트 0.01~0.1 중량%; 및 잔부 물을 포함하는 배지일 수 있다.
본 발명에서 상기 배양은 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 6 내지 48 시간 동안 수행될 수 있다.
본 발명에서 상기 배양액은 배양 후 원심분리 및 막 분리 중 어느 하나 이상의 공정을 통해서 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 균체가 제거된 것일 수 있다.
본 발명의 다른 구현 예에 따르면, 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 식중독의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 상기 비타민은 비타민 B1(티아민), 비타민 B2(리보플라빈), 비타민 B3(니코틴아마이드), 비타민 B5(판토텐산), 비타민 B6(피리독신), 비타민 B7(비오틴), 비타민 B9(엽산), 비타민 B12(코발라민), 비타민 C(아스코르브산), 비타민 A(레티놀), 비타민 D2(에르고스테롤), 비타민 D3(칼시페디올), 비타민 D4(디하이드로에르고칼시페롤), 비타민 E(토코페롤) 및 비타민 K(나프토퀴논)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
본 발명에서 상기 비타민은 비타민 B3일 수 있다.
본 발명에서 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서 상기 배지는 아미노산이 추가로 첨가된 것일 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산은 아르기닌(arginine), 라이신(lysine), 아스파르트산(aspartic acid), 글루탐산(glutamic acid), 글라이신(glycine), 류신(leucine), 시스테인(cysteine), 프롤린(proline) 및 페닐알라닌(phenylalanine)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산은 글루탐산일 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산은 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서 상기 배지는 배지 총 중량에 대하여 포도당 2.0~5.0 중량%; 효모추출물 0.1~1.0 중량%; 육추출물 0.5~2.0 중량%; 단백가수분해물 0.5.0~2.0 중량%; 아미노산 염 0.01~0.1 중량%; 금속 염 0.1~0.5 중량%; 폴리소르베이트 0.01~0.1 중량%; 및 잔부 물을 포함하는 배지일 수 있다.
본 발명에서 상기 배양은 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 6 내지 48 시간 동안 수행될 수 있다.
본 발명에서 상기 배양액은 배양 후 원심분리 및 막 분리 중 어느 하나 이상의 공정을 통해서 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 균체가 제거된 것일 수 있다.
본 발명에서 제공하는 조성물은 여드름의 원인균, 기타 피부 질환 세균, 식중독의 원인균 및 식품 부패의 원인균 등과 같은 다양한 유해균을 효과적으로 사멸시키는 항균 활성을 가져 다양한 용도의 항균제로 사용이 가능하다.
또한, 본 발명에서 제공하는 조성물은 여드름의 대표적인 원인균인 프로피오니박테리움 아크네를 효과적으로 사멸시켜 여드름을 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
또한, 본 발명에서 제공하는 조성물은 식품 부패 또는 식중독의 대표적인 원인균인 바실러스 세레우스, 스태필로코커스 아우레우스 및 리스테리아 모노사이토제니스를 효과적으로 사멸시켜 식품의 부패를 막고 식중독을 예방, 개선 또는 치료할 수 있다.
본 발명의 발명자들은 항균성 조성물을 개발하기 위하여 예의 노력한 결과, 배지에 비타민 중에서도 특히 비타민 B3인 니코틴아마이드를 첨가한 뒤 상기 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하는 경우 비타민을 첨가하지 않은 경우에 비하여 얻어진 배양액이 여드름의 원인균, 기타 피부 질환 세균, 식중독의 원인균 및 식품 부패의 원인균 등에 대한 항균 효과가 현저히 증가함을 발견하여 본 발명에 이르게 되었다.
본 발명의 일 구현 예에 따르면, 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 항균성 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서는 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 접종 및 배양하여 얻어진 배양액은 여드름의 원인균, 기타 피부 질환 세균, 식중독의 원인균 및 식품 부패의 원인균 등 다양한 유해균에 대하여 효과적인 사멸 효과를 가진다.
본 발명에서 상기 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양액을 얻기 위한 기본 배지의 조성은 특별히 제한하지는 않으나, 예를 들면, MRS, BL, M17, NB, BHI 배지일 수 있으나, 바람직하게는 배지 총 중량에 대하여 포도당 2.0~5.0 중량%; 효모추출물 0.1~1.0 중량%; 육추출물 0.5~2.0 중량%; 단백가수분해물 0.5.0~2.0 중량%; 아미노산 염 0.01~0.1 중량%; 금속 염 0.1~0.5 중량%; 폴리소르베이트 0.01~0.1 중량%; 및 잔부 물을 포함하는 배지일 수 있다.
본 발명에서 상기 단백가수분해물은 소이펩톤(soy peptone)일 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산 염은 시스테인의 염 형태일 수 있고, 바람직하게는 무기산을 갖는 염들, 예컨대 염화수소산, 브롬산, 황산, 황산수소나트륨, 포스페이트, 니트레이트 또는 카보네이트; 또는 유기산을 갖는 염들, 예컨대 포름산, 아세트산, 프로피온산, 옥살산, 숙신산, 벤조산, 시트르산, 말레산, 말론산, 타르타르산, 글루콘산, 젖산, 겐티신산, 푸마르산, 락토바이온산, 살리실산, 트리플루오로아세트산 또는 아세틸살리실산(아스피린)의 염 형태일 수 있으며, 가장 바람직하게는 시스테인 염화수소산염일 수 있다.
본 발명에서 상기 금속 염은 디포타슘 포스페이트(dipotassium phosphate), 소디움 아세테이트(sodium acetate), 포타슘 시트레이트(potassium citrate), 마그네슘 설페이트(magnesium sulphate), 망간 설페이트(manganese sulphate) 및 칼슘 클로라이드(calcium chloride)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있고, 바람직하게는 2종 이상일 수 있으며, 보다 바람직하게는 상기 금속 염을 모두 포함할 수 있다.
본 발명에서 상기 폴리소르베이트는 폴리소르베이트 80일 수 있다.
또한, 본 발명에서는 상기와 같은 배양 후 원심분리 및/또는 막분리를 통해서 균체를 제거하고 농축한 배양액을 얻을 수 있다.
또한, 본 발명에서는 상기 막분리 시 배양액을 포어 사이즈가 0.45 ㎛인 필터에 여과시켜 여과 여액으로 얻을 수 있다.
또한, 본 발명에서는 상기 농축한 배양액 또는 여과 여액에 대하여 1~40 중량%의 말토덱스트린(maltodextrin)등의 흡착제를 혼합한 후 동결건조, 열풍분무건조를 통하여 항균 활성이 뛰어난 분리 농축물을 얻을 수 있다.
또한, 본 발명에서 상기 배지에 첨가되는 비타민의 종류는 수용성 비타민인 비타민 B1(티아민), 비타민 B2(리보플라빈), 비타민 B3(니코틴아마이드), 비타민 B5(판토텐산), 비타민 B6(피리독신), 비타민 B7(비오틴), 비타민 B9(엽산), 비타민 B12(코발라민) 또는 비타민 C(아스코르브산)일 수 있고, 혹은 지용성 비타민인 비타민 A(레티놀), 비타민 D2(에르고스테롤), 비타민 D3(칼시페디올), 비타민 D4(디하이드로에르고칼시페롤), 비타민 E(토코페롤) 또는 비타민 K(나프토퀴논)이거나, 이들 중 2종 이상의 혼합물일 수 있으나, 바람직하게는 수용성 비타민일 수 있고, 가장 바람직하게는 상기 수용성 비타민 중에서도 특히 비타민 B3(니코틴아마이드)일 수 있다.
본 발명에서 상기 비타민 B3, 즉 "니코틴아마이드(nicotinamide)"는 하기 화학식 1로 표시되는 화합물로 '니아신아마이드'라고도 불린다. 이러한 니코틴아마이드는 1935년과 1937년 사이에 발견된 것으로, 일반적으로 펠라그라(pellagra) 치료에 사용된다. 상기 니코틴아마이드의 섭취 후 각 신체조직으로 전달된 후에는 조효소 형태인 NDA(nicotinamide adenine dinucleotide) 또는 NADP(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate)의 형태로 존재하게 된다. NAD와 NADP는 산화환원 반응의 조효소로 작용하여 탄수화물, 지방, 단백질의 대사과정, 스테로이드 합성 등 50여 가지 생체 화학반응에 관여한다. 따라서 니코틴아마이드는 체내 에너지 생성을 비롯하여 정상적인 생명을 유지하는데 필수적인 물질이다. 또한 말초혈관을 확장시켜 혈액순환을 촉진시킴으로써 세포 내 호흡을 원활하게 하고, 신경조직의 기능 유지를 돕는다.
Figure PCTKR2018007926-appb-C000001
본 발명에서 상기 비타민, 바람직하게 상기 비타민 B3는 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가될 수 있고, 보다 바람직하게는 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가될 수 있다. 본 발명에서 상기 비타민이 상기 한정한 함량 범위를 벗어나는 양으로 첨가되는 경우, 항균 활성의 향상 효과를 기대하기 어렵다.
본 발명에서는 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양을 위한 배지에 비타민 외에도 아미노산을 추가함으로써 최종 제조되는 배양액의 항균 활성에 예측하기 어려운 향상 효과를 부여할 수 있다.
본 발명에서 상기 아미노산의 종류는 양이온성 아미노산인 아르기닌(arginine), 라이신(lysine), 음이온성 아미노산인 아스파르트산(aspartic acid), 글루탐산(glutamic acid), 지방족 비극성 아미노산인 글라이신(glycine), 류신(leucine), 친수성 극성 아미노산인 시스테인(cysteine), 프롤린(proline) 및 방향족 아미노산인 페닐알라닌(phenylalanine)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으나, 바람직하게는 음이온성 아미노산일 수 있고, 보다 바람직하게는 글루탐산일 수 있다.
본 발명에서 상기 "글루탐산(glutamic acid)"은 약기로는 Glu, E로 나타내어지는 산성 α-아미노산의 일종으로, 구체적으로는 하기 화학식 2로 표시되는 화합물이다. 일찍이 글루텐에서 발견되어 L-글루탐산은 일반 단백질에 널리 분포하며, 특히 곡류단백질에는 다량으로(밀의 글리아딘에는 43.7%) 함유되어 있다. 다시마국물의 좋은 맛은 이것의 단일 나트륨염에 기인한다. 동물에서는 뇌의 회백질 등에 유리아미노산으로서는 가장 많이 분포하고, 흥분성 신경전도물질로서 정보의 중개를 하며, 억제성 γ-아미노부티르산(GABA)과 대치하는 D-글루탐산은 단백질에 존재하지 않는 것으로 생각되지만, 세균의 바실러스 안트라시스(Bacillus anthracis), 바실러스 메센테리쿠스(B. mesentericus), 바실러스 섭틸리스(B. subtilis) 등의 협막에 D-글루탐산폴리펩티드로서, 또한 세균세포벽의 펩티드글리칸 속에 존재한다.
Figure PCTKR2018007926-appb-C000002
본 발명에서는 상기 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양을 위한 배지에 비타민 B3 외에 아미노산 중에서도 특히 글루탐산을 병용 투여함으로써 배양액의 항균 활성에 시너지 효과를 부여할 수 있는 것이다.
본 발명에서 상기 아미노산, 바람직하게 상기 글루탐산은 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가될 수 있다. 본 발명에서 상기 아미노산이 상기 한정한 함량 범위를 벗어나는 함량으로 첨가된 경우 항균 활성에 추가의 향상 효과를 기대하기 어렵다.
본 발명에서 상기 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양 조건은 특별히 제한하지 않으나, 예를 들면 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 6 내지 48 시간 동안 배양할 수 있으며, 배양 규모에 따라서 적절히 조절할 수 있다.
본 발명의 다른 구현 예에 따르면, 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 여드름의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서는 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 접종 및 배양하여 얻어진 배양액은 대표적 여드름의 원인균으로 알려진 프로피오니박테리움 아크네에 효과적인 사멸 효과를 가진다.
본 발명에서는 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양을 위한 배지에 비타민 외에도 아미노산을 추가함으로써 최종 제조되는 배양액의 여드름 원인균의 사멸에 시너지 효과를 부여할 수 있다.
본 발명에서 상기 엔테로코커스 패컬리스 SL-5, 비타민, 아미노산 및 배양 조건에 관한 내용은 상기 항균성 조성물에 기재된 바와 중복되어 이하 그 자세한 기재를 생략한다.
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 식중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서는 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 접종 및 배양하여 얻어진 배양액은 바실러스 세레우스(Bacillus cereus), 스태필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus), 리스테리아 모노사이토제니스(Listeria monocytogenes), 에스케리키아 콜라이(Escherichia coli), 살모넬라 엔터리카(Salmonella enterica), 슈도모나스 애루기노사(Pseudomonas aeruginosa), 비브리오 파라해모라이티쿠스(Vibrio parahaemolyticus), 클로스트리디움 퍼프린젠스(Clostridium perfringens) 및 캄필로박터 제주니(Campylobacter jejuni) 등과 같은 식품 부패 또는 식중독의 원인균을 효과적인 사멸시킬 수 있다.
본 발명에서 상기 "식중독"이란 유해한 물질로 오염된 음식물을 섭취함으로서 발생하는 구토, 설사, 복통 등의 증세를 일으키는 임상증후군을 말하는데 식중독을 일으키는 물질로는 동·식물에 존재하는 자연독소, 화학독소에 오염된 음식물, 미생물(주로 세균)이나 이들이 분비하는 독성물질 등의 3종류가 있다. 급성 식중독의 대부분은 세균과 이들이 내는 독성산물에 의해서 발생한다. 하지만, 세균에 의한 식중독, 즉 세균성 식중독의 경우는 세균의 음식물에의 혼입 내지는 번식이 일반적으로 육안으로 관찰되지 않고 전문적인 방법에 의하지 않고는 검출이 매우 곤란하기 때문에 가장 예방이 어려운 식중독이라고 할 수 있다.
본 발명에서는 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양을 위한 배지에 비타민 외에도 아미노산을 추가함으로써 최종 제조되는 배양액의 식품 부패 또는 식중독 원인균의 사멸에 시너지 효과를 부여할 수 있다.
본 발명에서 상기 엔테로코커스 패컬리스 SL-5, 비타민, 아미노산 및 배양 조건에 관한 내용은 상기 항균성 조성물에 기재된 바와 중복되어 이하 그 자세한 기재를 생략한다.
본 발명에 있어서, 상기 약학적 조성물은 캡슐, 정제, 과립, 주사제, 연고제, 분말 또는 음료 형태임을 특징으로 할 수 있으며, 상기 약학적 조성물은 인간을 대상으로 하는 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 이들로 한정되는 것은 아니지만, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 캡슐, 정제, 수성 현탁액 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 약제적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약제학적으로 허용되는 담체는 경구 투여 시에는 결합제, 활탁제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 분산제, 안정화제, 현탁화제, 색소, 향료 등을 사용할 수 있으며, 주사제의 경우에는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제 등을 혼합하여 사용할 수 있으며, 국소투여용의 경우에는 기제, 부형제, 윤활제, 보존제 등을 사용할 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물의 제형은 상술한 바와 같은 약제학적으로 허용되는 담체와 혼합하여 다양하게 제조될 수 있다. 예를 들어, 경구 투여 시에는 정제, 트로키, 캡슐, 엘릭서(elixir), 서스펜션, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 제조할 수 있으며, 주사제의 경우에는 단위 투약 앰플 또는 다수회 투약 형태로 제조할 수 있다. 기타, 용액, 현탁액, 정제, 캡슐, 서방형 제제 등으로 제형할 수 있다.
한편, 제제화에 적합한 담체, 부형제 및 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말디톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유 등이 사용될 수 있다. 또한, 충진제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장이 포함된다. 경구 또는 비경구 투하가 바람직하다.
본 발명에서, "비경구"는 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액낭내, 흉골내, 경막내, 병소내 및 두개골내 주사 또는 주입기술을 포함한다. 본 발명의 약학적 조성물은 또한 직장 투여를 위한 좌제의 형태로 투여될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 사용된 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 정식, 투여시간, 투여경로, 배출율, 약물 배합 및 예방 또는 치료될 특정 질환의 중증을 포함한 여러 요인에 따라 다양하게 변할 수 있고, 상기 약학적 조성물의 투여량은 환자의 상태, 체중, 질병의 정도, 약물 형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있고, 1일 0.0001 내지 50mg/kg 또는 0.001 내지 50mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 본 발명에 따른 의약 조성물은 환제, 당의정, 캡슐, 액제, 겔, 시럽, 슬러리, 현탁제로 제형될 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 여드름의 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서는 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 접종 및 배양하여 얻어진 배양액은 대표적 여드름 균으로 알려진 프로피오니박테리움 아크네에 효과적인 사멸 효과를 가진다.
본 발명에서는 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양을 위한 배지에 비타민 외에도 아미노산을 추가함으로써 최종 제조되는 배양액의 여드름 균 사멸에 향상된 효과를 부여할 수 있다.
본 발명에서 상기 엔테로코커스 패컬리스 SL-5, 비타민, 아미노산 및 배양 조건에 관한 내용은 상기 약학적 조성물에 기재된 바와 중복되어 이하 그 자세한 기재를 생략한다.
본 발명에서 화장료 조성물은 화장수, 영양로션, 영양에센스, 마사지 크림, 미용 목욕물 첨가제, 바디로션, 바디밀크, 배스오일, 베이비오일, 베이비파우더, 샤워겔, 샤워크림, 선스크린로션, 선스크린크림, 선탠크림, 스킨로션, 스킨크림, 자외선차단용 화장품, 크렌징밀크, 탈모제{화장용}, 페이스 및 바디로션, 페이스 및 바디크림, 피부미백크림, 핸드로션, 헤어로션, 화장용크림, 쟈스민오일, 목욕비누, 물비누, 미용비누, 샴푸, 손세정제(핸드클리너), 약용비누{비의료용}, 크림비누, 페이셜 워시, 전신 세정제, 두피 세정제, 헤어린스, 화장비누, 치아미백용 겔, 치약 등의 형태로 제조될 수 있다. 이를 위해 본 발명의 조성물은 화장료 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 용매나, 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물 내에 더 추가될 수 있는 용매의 종류는 특별히 한정하지 않으나, 예를 들어, 물, 식염수, DMSO 또는 이들의 조합을 사용할 수 있고, 담체, 부형제 또는 희석제로는 정제수, 오일, 왁스, 지방산, 지방산 알콜, 지방산 에스테르, 계면활성제, 흡습제(humectant), 증점제, 항산화제, 점도 안정화제, 킬레이팅제, 완충제, 저급 알콜 등이 포함되지만, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 필요에 따라 미백제, 보습제, 비타민, 자외선 차단제, 향수, 염료, 항생제, 항박테리아제, 항진균제를 포함할 수 있다.
상기 오일로서는 수소화 식물성유, 피마자유, 면실유, 올리브유, 야자인유, 호호바유, 아보카도유가 이용될 수 있으며, 왁스로는 밀랍, 경랍, 카르나우바, 칸델릴라, 몬탄, 세레신, 액체 파라핀, 라놀린이 이용될 수 있다.
지방산으로는 스테아르산, 리놀레산, 리놀렌산, 올레산이 이용될 수 있고, 지방산 알콜로는 세틸 알콜, 옥틸 도데칸올, 올레일 알콜, 판텐올, 라놀린 알콜, 스테아릴 알콜, 헥사데칸올이 이용될 수 있으며 지방산 에스테르로는 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 부틸 스테아레이트가 이용될 수 있다. 계면 활성제로는 당업계에 알려진 양이온 계면활성제, 음이온 계면활성제 및 비이온성 계면활성제가 사용 가능하며 가능한 한 천연물 유래의 계면활성제가 바람직하다.
그 외에도 화장품 분야에서 널리 알려진 흡습제, 증점제, 항산화제 등을 포함할 수 있으며, 이들의 종류와 양은 당업계에 공지된 바에 따른다.
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 여드름의 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서는 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 접종 및 배양하여 얻어진 배양액은 대표적 여드름 균으로 알려진 프로피오니박테리움 아크네에 효과적인 사멸 효과를 가진다.
본 발명에서는 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양을 위한 배지에 비타민 외에도 아미노산을 추가함으로써 최종 제조되는 배양액의 여드름 균 사멸에 향상된 효과를 부여할 수 있다.
본 발명에서 상기 엔테로코커스 패컬리스 SL-5, 비타민, 아미노산 및 배양 조건에 관한 내용은 상기 항균성 조성물에 기재된 바와 중복되어 이하 그 자세한 기재를 생략한다.
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 식중독의 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서는 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 접종 및 배양하여 얻어진 배양액은 바실러스 세레우스, 스태필로코커스 아우레우스, 리스테리아 모노사이토제니스, 에스케리키아 콜라이, 살모넬라 엔터리카, 슈도모나스 애루기노사, 비브리오 파라해모라이티쿠스, 클로스트리디움 퍼프린젠스 및 캄필로박터 제주니 등과 같은 식품 부패 또는 식중독의 원인균을 효과적인 사멸시킬 수 있다.
본 발명에서는 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양을 위한 배지에 비타민 외에도 아미노산을 추가함으로써 최종 제조되는 배양액의 식품 부패 또는 식중독 원인균의 사멸에 시너지 효과를 부여할 수 있다.
본 발명에서 상기 엔테로코커스 패컬리스 SL-5, 비타민, 아미노산 및 배양 조건에 관한 내용은 상기 항균성 조성물에 기재된 바와 중복되어 이하 그 자세한 기재를 생략한다.
본 발명의 식품 조성물은 각종 식품류, 예를 들어, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 과자, 떡, 빵 등의 형태로 제조될 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 독성 및 부작용이 거의 없는 식물추출물로 구성된 것이므로 예방 목적으로 장기간 복용 시에도 안심하고 사용할 수 있다.
본 발명의 배양액이 식품 조성물에 포함될 때 그 양은 전체 중량의 0.1 내지 50%의 비율로 첨가할 수 있다.
여기서, 상기 식품 조성물이 음료 형태로 제조되는 경우 지시된 비율로 상기 식품 조성물을 함유하는 것 외에 특별한 제한점은 없으며 통상의 음료와 같이 여러가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 즉, 천연 탄수화물로서 포도당 등의 모노사카라이드, 과당 등의 디사카라이드, 슈크로스 등의 및 폴리사카라이드, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜 등을 포함할 수 있다. 상기 향미제로서는 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등) 등을 들 수 있다.
그 외 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.1 내지 약 50 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
본 발명의 또 다른 구현예에 따르면, 다음의 단계를 포함하는 항균 활성을 갖는 조성물의 제조 방법에 관한 것이다: (a) 비타민이 첨가된 배지를 준비하는 단계; 및 (b) 상기 준비한 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 접종한 후 배양하여 배양액을 얻는 단계.
본 발명에서, 상기 비타민은 비타민 B1(티아민), 비타민 B2(리보플라빈), 비타민 B3(니코틴아마이드), 비타민 B5(판토텐산), 비타민 B6(피리독신), 비타민 B7(비오틴), 비타민 B9(엽산), 비타민 B12(코발라민), 비타민 C(아스코르브산), 비타민 A(레티놀), 비타민 D2(에르고스테롤), 비타민 D3(칼시페디올), 비타민 D4(디하이드로에르고칼시페롤), 비타민 E(토코페롤) 및 비타민 K(나프토퀴논)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
본 발명에서, 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서, 상기 배지에는 아미노산이 추가로 첨가될 수 있다.
본 발명에서, 상기 아미노산은 아르기닌(arginine), 라이신(lysine), 아스파르트산(aspartic acid), 글루탐산(glutamic acid), 글라이신(glycine), 류신(leucine), 시스테인(cysteine), 프롤린(proline) 및 페닐알라닌(phenylalanine)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
본 발명에서, 상기 아미노산은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가될 수 있다.
본 발명에서, 상기 배지는 배지 총 중량에 대하여 포도당 2.0~5.0 중량%; 효모추출물0.1~1.0 중량%; 육추출물 0.5~2.0 중량%; 단백가수분해물 0.5.0~2.0 중량%; 아미노산 염 0.01~0.1 중량%; 금속 염 0.1~0.5 중량%; 폴리소르베이트 0.01~0.1 중량%; 비타민 B3(니코틴아마이드) 0.05~0.6 중량%; 및 잔부 물을 포함할 수 있다.
본 발명에서, 상기 배양은 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 6 내지 48 시간 동안 수행할 수 있다.
본 발명에서, 상기 단계 (b) 이후에, 배양액에 대해 원심분리 및 막 분리 중 어느 하나 이상의 공정을 행하여 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 균체를 제거하는 단계 (c)를 더욱 포함할 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예
[제조예 1] 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양액 제조
엔테로코커스 패컬리스 SL-5(Enterococcus faecalis SL-5, 16s rRNA sequence가 GenBank Accession No. AY692453로 등록)를 하기 표 1에 나타낸 액체 배지 3L에 1 중량% 수준으로 접종한 후 37, 질소 가스로 치환된 혐기 조건하에 약 12시간 동안 배양하였다. 단, 하기 표 1에서 '비타민 또는 아미노산'의 종류로는 하기 표 2에 나타난 종류를 사용하였다. 배양 후 원심 분리하여 균체를 제거하고, 상층액만을 포어 사이즈가 0.20 ㎛인 필터에 여과시켜 여과액을 준비하였다.
원료명 함량(중량%) 3L 기준 사용량
포도당 3% 90g
소이펩톤 1% 30g
효모추출물 1% 30g
육추출물 1% 30g
시스테인염산염 0.05% 0.15g
디포타슘 포스페이트 0.05% 0.15g
소디움 아세테이트 0.05% 0.15g
포타슘 시트레이트 0.05% 0.15g
마그네슘 설페이트 0.01% 0.03g
망간 설페이트 0.005% 0.015g
칼슘 클로라이드 0.05% 0.15g
폴리소르베이트 80 0.05% 0.15g
첨가물(비타민 또는 아미노산) 0.1% 0.3g
대분류 중분류 명칭
무첨가
비타민 지용성 비타민 A 레티놀
비타민 E 토코페롤
수용성 비타민 B1 티아민
비타민 B2 리보플라빈
비타민 B3 니코틴아마이드
비타민 B12 코발라민
비타민 C 아스코브산
아미노산 양이온성 아르기닌
라이신
음이온성 아스파르트산
글루탐산
지방족 비극성 글라이신
류신
친수성 극성 시스테인
프롤린
방향족 페닐알라닌
[실험예 1] 항균 효과 확인
상기 제조예 1에서 얻어진 배양액의 여과 여액을 확인하기 위하여, 시험균주로 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes, ATCC 29399), 바실러스 세레우스(Bacillus cereus), 스태필로코커스 아우레우스(Staphylococcus aureus) 및 리스테리아 모노사이토제니스(Listeria monocytogenes)는 RCM 브로쓰(reinforced clostridial medium broth, Merck, Darmstadt, Germany)에 접종하여 37℃ 온도에서 약 16 시간 배양하였다. 이렇게 시험 균주가 생육하는 고체 배지 위에 상기 제조예 1에서 얻어진 배양 여과 여액을 희석하여 분주하고 시험 균주를 배양하였다. 저지환(clear zone)이 생성된 희석 배수를 확인하여 역가를 산출하였다. 그 결과는 각각 하기 표 3 내지 6과 같다.
프로피오니박테리움 아크네의 사멸 효과
대분류 중분류 명칭 역가(AU/ml)
무첨가 12,800
비타민 지용성 비타민 A 레티놀 12,800
비타민 E 토코페롤 12,800
수용성 비타민 B1 티아민 12,800
비타민 B2 리보플라빈 12,800
비타민 B3 니코틴아마이드 38,400
비타민 B12 코발라민 12,800
비타민 C 아스코브산 12,800
아미노산 양이온성 아르기닌 12,800
라이신 12,800
음이온성 아스파르트산 12,800
글루탐산 12,800
지방족 비극성 글라이신 12,800
류신 12,800
친수성 극성 시스테인 12,800
프롤린 12,800
방향족 페닐알라닌 12,800
바실러스 세레우스의 사멸 효과
대분류 중분류 명칭 역가(AU/ml)
무첨가 6,400
비타민 지용성 비타민 A 레티놀 6,400
비타민 E 토코페롤 6,400
수용성 비타민 B1 티아민 6,400
비타민 B2 리보플라빈 6,400
비타민 B3 니코틴아마이드 25,600
비타민 B12 코발라민 6,400
비타민 C 아스코브산 6,400
아미노산 양이온성 아르기닌 6,400
라이신 6,400
음이온성 아스파르트산 6,400
글루탐산 6,400
지방족 비극성 글라이신 6,400
류신 6,400
친수성 극성 시스테인 6,400
프롤린 6,400
방향족 페닐알라닌 6,400
스태필로코커스 아우레우스의 사멸 효과
대분류 중분류 명칭 역가(AU/ml)
무첨가 6,400
비타민 지용성 비타민 A 레티놀 6,400
비타민 E 토코페롤 6,400
수용성 비타민 B1 티아민 6,400
비타민 B2 리보플라빈 6,400
비타민 B3 니코틴아마이드 25,600
비타민 B12 코발라민 6,400
비타민 C 아스코브산 6,400
아미노산 양이온성 아르기닌 6,400
라이신 6,400
음이온성 아스파르트산 6,400
글루탐산 6,400
지방족 비극성 글라이신 6,400
류신 6,400
친수성 극성 시스테인 6,400
프롤린 6,400
방향족 페닐알라닌 6,400
리스테리아 모노사이토제니스의 사멸 효과
대분류 중분류 명칭 역가(AU/ml)
무첨가 12,800
비타민 지용성 비타민 A 레티놀 12,800
비타민 E 토코페롤 12,800
수용성 비타민 B1 티아민 12,800
비타민 B2 리보플라빈 12,800
비타민 B3 니코틴아마이드 38,400
비타민 B12 코발라민 12,800
비타민 C 아스코브산 12,800
아미노산 양이온성 아르기닌 12,800
라이신 12,800
음이온성 아스파르트산 12,800
글루탐산 12,800
지방족 비극성 글라이신 12,800
류신 12,800
친수성 극성 시스테인 12,800
프롤린 12,800
방향족 페닐알라닌 12,800
상기 표 3 내지 6에서 보는 바와 같이, 비타민 B3인 니코틴아마이드가 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 배양하여 얻어진 배양액의 여과 여액은 그 외의 다른 종류의 비타민이나 아미노산을 첨가한 경우보다 여드름의 원인균인 프로피오니박테리움 아크네와, 그 외에 식중독의 원인균인 바실러스 세레우스, 스태필로코커스 아우레우스 및 리스테리아 모노사이토제니스를 모두 효과적으로 사멸시킬 수 있는 것을 볼 수 있다.
[제조예 2] 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양액 제조
상기 제조예 1과 동일한 방법으로 엔테로코커스 패컬리스 SL-5 배양액으로부터 여과 여액을 얻되, 배지 첨가물로는 비타민 B3인 니코틴아마이드를 하기 표 7에 나타낸 바와 같이 농도를 달리하며 첨가하였다.
구분 농도(중량%)
0% 0.05% 0.1% 0.2% 0.4% 0.6% 0.8% 1.0%
[실험예 2] 항균 효과 확인
상기 제조예 2에서 얻어진 엔테로코커스 패컬리스 SL-5 배양액으로부터 여과 여액에 대하여 상기 실험예 1과 동일한 방법으로 실험을 수행하여 프로피오니박테리움 아크네의 사멸 역가를 산출해 그 결과를 하기 표 8에 나타내었다.
구분 농도(중량%)
0% 0.05% 0.1% 0.2% 0.4% 0.6% 0.8% 1.0%
역가(AU/ml) Propionium acnes 12,800 19,200 38,400 38,400 38,400 19,200 12,800 12,800
Bacillus cereus 6,400 12,800 25,600 25,600 25,600 12,800 6,400 6,400
Staphylococcus aureus 6,400 12,800 25,600 25,600 25,600 12,800 6,400 6,400
Listeria monocytogenes 12,800 19,200 38,400 38,400 38,400 19,200 12,800 12,800
상기 표 8에서 보는 바와 같이, 니코틴아마이드가 0.05 내지 0.6 중량%로 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 배양하여 얻어진 배양액의 여과 여액은 프로피오니박테리움 아크네, 바실러스 세레우스, 스태필로코커스 아우레우스 및 리스테리아 모노사이토제니스의 사멸에 상승 효과를 부여하였으며, 특히 니코틴아마이드가 0.1 내지 0.4 중량%로 첨가된 경우 상기 여드름 원인균 및 식중독 원인균의 사멸에 예측하기 어려운 수준의 상승 효과가 부여된 것을 볼 수 있다.
[제조예 3] 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양액 제조
상기 제조예 1과 동일한 방법으로 엔테로코커스 패컬리스 SL-5 배양액으로부터 여과 여액을 얻되, 배지 첨가물로는 비타민 B3인 니코틴아마이드를 첨가하였고, 그 외에 추가로 하기 표 9에 나타낸 아미노산 또는 금속 염을 0.1중량%(0.3g)으로 첨가하였다.
기본 첨가물 (0.1중량%) 추가 첨가물 (0.1중량%)
니코틴아마이드 없음
아르기닌
라이신
아스파르트산
글루탐산
류신
시스테인
프롤린
MgSO4
CaCO3
[실험예 3] 항균 효과 확인
상기 제조예 3에서 얻어진 엔테로코커스 패컬리스 SL-5 배양액의 여과 여액에 대하여 상기 실험예 1과 동일한 방법으로 실험을 수행하여 프로피오니박테리움 아크네, 바실러스 세레우스, 스태필로코커스 아우레우스 및 리스테리아 모노사이토제니스의 사멸 역가를 산출해 그 결과를 각각 하기 표 10 내지 13에 나타내었다.
프로피오니박테리움 아크네의 사멸 효과
기본 첨가물 (0.1중량%) 추가 첨가물 (0.1중량%) 역가(AU/ml)
니코틴아마이드 없음 38,400
아르기닌 38,400
라이신 38,400
아스파르트산 38,400
글루탐산 76.800
류신 38,400
시스테인 38,400
프롤린 38,400
MgSO4 38,400
CaCO3 38,400
바실러스 세레우스의 사멸 효과
기본 첨가물(0.1중량%) 추가 첨가물 (0.1중량%) 역가(AU/ml)
니코틴아마이드 없음 25,600
아르기닌 25,600
라이신 25,600
아스파르트산 25,600
글루탐산 51.200
류신 25,600
시스테인 25,600
프롤린 25,600
MgSO4 25,600
CaCO3 25,600
스태필로코커스 아우레우스의 사멸 효과
기본 첨가물(0.1중량%) 추가 첨가물 (0.1중량%) 역가(AU/ml)
니코틴아마이드 없음 25,600
아르기닌 25,600
라이신 25,600
아스파르트산 25,600
글루탐산 51.200
류신 25,600
시스테인 25,600
프롤린 25,600
MgSO4 25,600
CaCO3 25,600
리스테리아 모노사이토제니스의 사멸 효과
기본 첨가물 (0.1중량%) 추가 첨가물 (0.1중량%) 역가(AU/ml)
니코틴아마이드 없음 38,400
아르기닌 38,400
라이신 38,400
아스파르트산 38,400
글루탐산 76.800
류신 38,400
시스테인 38,400
프롤린 38,400
MgSO4 38,400
CaCO3 38,400
상기 표 10 내지 13에서 보는 바와 같이, 니코틴아마이드와 함께 아미노산 중에서도 글루탐산이 추가로 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 배양하여 얻어진 배양액의 여과 여액은 무첨가한 경우보다 프로피오니박테리움 아크네, 바실러스 세레우스, 스태필로코커스 아우레우스 및 리스테리아 모노사이토제니스의 사멸에 시너지 효과가 부여된 것을 볼 수 있다. 하지만, 글루탐산 외의 다른 종류의 아미노산 또는 금속 염이 추가로 첨가된 경우는 별다른 상승 효과를 보이지 않았다.
[제조예 4] 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양액 제조
상기 제조예 3과 동일한 방법으로 니코틴아마이드 0.1 중량%와, 글루탐산을 배지에 첨가한 뒤 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 배양하여 배양액을 얻고, 이후 원심 분리 및 막 분리 여과하여 여과 여액을 얻었다. 단, 상기 글루탐산은 하기 표 14에 나타낸 바와 같이 농도를 달리하며 첨가하였다.
구분 농도(중량%)
0% 0.05% 0.1% 0.2% 0.4% 0.6% 0.8% 1.0%
[실험예 3] 항균 효과 확인
상기 제조예 4에서 얻어진 엔테로코커스 패컬리스 SL-5 배양액의 여과 여액에 대하여 상기 실험예 1과 동일한 방법으로 실험을 수행하여 프로피오니박테리움 아크네, 바실러스 세레우스, 스태필로코커스 아우레우스 및 리스테리아 모노사이토제니스의 사멸 역가를 산출해 그 결과를 하기 표 15에 나타내었다.
구분 농도(중량%)
0% 0.05% 0.1% 0.2% 0.4% 0.6% 0.8% 1.0%
역가(AU/ml) Propionium acnes 38,400 38,400 76,800 76,800 76,800 38,400 38,400 38,400
Bacillus cereus 25,600 25,600 51,200 51,200 51,200 25,600 25,600 25,600
Staphylococcus aureus 25,600 25,600 51,200 51,200 51,200 25,600 25,600 25,600
Listeria monocytogenes 38,400 38,400 76,800 76,800 76,800 38,400 38,400 38,400
상기 표 15에서 보는 바와 같이, 니코틴아마이드 0.1 중량%와 함께 글루탐산이 0.1 내지 0.4 중량%로 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 배양하여 얻어진 배양액의 여과 여액은 프로피오니박테리움 아크네, 바실러스 세레우스, 스태필로코커스 아우레우스 및 리스테리아 모노사이토제니스의 사멸에 우수한 상승 효과를 부여하였으나, 그 외의 함량으로 첨가된 경우 상승 효과를 보이지 않았다.
이를 통하여, 본 발명에서는 비타민 중에서도 특히 니코틴아마이드가 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 배양하여 얻어진 배양액은 여드름 원인균과 식중독 원인균을 효과적으로 사멸시킬 수 있고, 첨가량을 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%로 첨가하는 경우 그 사멸 효과를 더욱 향상시킬 수 있으며, 상기 니코틴아마이드와 함께 아미노산 중에서도 특히 글루탐산을 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 추가로 배지에 첨가하는 경우 얻어지는 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 배양액의 항균 효과에 시너지 효과가 부여됨을 알 수 있었다.
즉, 본 발명에서 니코틴아마이드, 및 선택적으로 글루탐산이 함께 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스 SL-5를 배양하여 얻어진 배양액은 다양한 항균제로 사용될 수 있을 뿐만 아니라, 보다 구체적으로는 여드름 또는 식중독의 예방, 개선 또는 치료에 사용될 수 있다.
이상에서 본 발명의 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고, 청구범위에 기재된 본 발명의 기술적 사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양한 수정 및 변형이 가능하다는 것은 당 기술분야의 통상의 지식을 가진 자에게는 자명할 것이다.

Claims (38)

  1. 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 항균성 조성물.
  2. 제 1 항에 있어서, 상기 비타민은 비타민 B1(티아민), 비타민 B2(리보플라빈), 비타민 B3(니코틴아마이드), 비타민 B5(판토텐산), 비타민 B6(피리독신), 비타민 B7(비오틴), 비타민 B9(엽산), 비타민 B12(코발라민), 비타민 C(아스코르브산), 비타민 A(레티놀), 비타민 D2(에르고스테롤), 비타민 D3(칼시페디올), 비타민 D4(디하이드로에르고칼시페롤), 비타민 E(토코페롤) 및 비타민 K(나프토퀴논)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 항균성 조성물.
  3. 제 2 항에 있어서, 상기 비타민은 비타민 B3(니코틴아마이드)인, 항균성 조성물.
  4. 제 1 항에 있어서, 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가되는, 항균성 조성물.
  5. 제 4 항에 있어서, 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가되는, 항균성 조성물.
  6. 제 1 항에 있어서, 상기 배지는 아미노산이 추가로 첨가된 것인, 항균성 조성물.
  7. 제 6 항에 있어서, 상기 아미노산은 아르기닌(arginine), 라이신(lysine), 아스파르트산(aspartic acid), 글루탐산(glutamic acid), 글라이신(glycine), 류신(leucine), 시스테인(cysteine), 프롤린(proline) 및 페닐알라닌(phenylalanine)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 항균성 조성물.
  8. 제 7 항에 있어서, 상기 아미노산은 글루탐산인, 항균성 조성물.
  9. 제 6 항에 있어서, 상기 아미노산은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가되는, 항균성 조성물.
  10. 제 1 항에 있어서, 상기 배지는 배지 총 중량에 대하여 포도당 2.0~5.0 중량%; 효모추출물 0.1~1.0 중량%; 육추출물 0.5~2.0 중량%; 단백가수분해물 0.5.0~2.0 중량%; 아미노산 염 0.01~0.1 중량%; 금속 염 0.1~0.5 중량%; 폴리소르베이트 0.01~0.1 중량%; 및 잔부 물을 포함하는 배지인, 항균성 조성물.
  11. 제 1 항에 있어서, 상기 배양은 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 6 내지 48 시간 동안 수행되는, 항균성 조성물.
  12. 제 1 항에 있어서, 상기 배양액은 배양 후 원심분리 및 막 분리 중 어느 하나 이상의 공정을 통해서 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 균체가 제거된 것인, 항균성 조성물.
  13. 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 여드름의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  14. 제 13 항에 있어서, 상기 비타민은 비타민 B3(니코틴아마이드)인, 약학적 조성물.
  15. 제 13 항에 있어서, 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가되는, 약학적 조성물.
  16. 제 13 항에 있어서, 상기 배지는 아미노산이 추가로 첨가된 것인, 약학적 조성물.
  17. 제 16 항에 있어서, 상기 아미노산은 글루탐산인, 약학적 조성물.
  18. 제 16 항에 있어서, 상기 아미노산은 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가되는, 약학적 조성물.
  19. 제 13 항에 있어서, 상기 배지는 배지 총 중량에 대하여 포도당 2.0~5.0 중량%; 효모추출물 0.1~1.0 중량%; 육추출물 0.5~2.0 중량%; 단백가수분해물 0.5.0~2.0 중량%; 아미노산 염 0.01~0.1 중량%; 금속 염 0.1~0.5 중량%; 폴리소르베이트 0.01~0.1 중량%; 및 잔부 물을 포함하는 배지인, 약학적 조성물.
  20. 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 여드름의 예방 또는 개선용 화장료 조성물.
  21. 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 여드름의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  22. 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 식중독의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
  23. 제 22 항에 있어서, 상기 비타민은 비타민 B3(니코틴아마이드)인, 약학적 조성물.
  24. 제 22 항에 있어서, 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가되는, 약학적 조성물.
  25. 제 22 항에 있어서, 상기 배지는 아미노산이 추가로 첨가된 것인, 약학적 조성물.
  26. 제 25 항에 있어서, 상기 아미노산은 글루탐산인, 약학적 조성물.
  27. 제 25 항에 있어서, 상기 아미노산은 배지 총 중량에 대하여 0.1 내지 0.4 중량%의 양으로 첨가되는, 약학적 조성물.
  28. 제 22 항에 있어서, 상기 배지는 배지 총 중량에 대하여 포도당 2.0~5.0 중량%; 효모추출물 0.1~1.0 중량%; 육추출물 0.5~2.0 중량%; 단백가수분해물 0.5.0~2.0 중량%; 아미노산 염 0.01~0.1 중량%; 금속 염 0.1~0.5 중량%; 폴리소르베이트 0.01~0.1 중량%; 및 잔부 물을 포함하는 배지인, 약학적 조성물.
  29. 비타민이 첨가된 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 배양하여 얻어진 배양액을 유효 성분으로 포함하는 식중독의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  30. 다음의 단계를 포함하는 항균 활성을 갖는 조성물의 제조 방법:
    (a) 비타민이 첨가된 배지를 준비하는 단계; 및
    (b) 상기 준비한 배지에 엔테로코커스 패컬리스(Enterococcus faecalis) SL-5를 접종한 후 배양하여 배양액을 얻는 단계.
  31. 제 30 항에 있어서, 상기 비타민은 비타민 B1(티아민), 비타민 B2(리보플라빈), 비타민 B3(니코틴아마이드), 비타민 B5(판토텐산), 비타민 B6(피리독신), 비타민 B7(비오틴), 비타민 B9(엽산), 비타민 B12(코발라민), 비타민 C(아스코르브산), 비타민 A(레티놀), 비타민 D2(에르고스테롤), 비타민 D3(칼시페디올), 비타민 D4(디하이드로에르고칼시페롤), 비타민 E(토코페롤) 및 비타민 K(나프토퀴논)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 항균 활성을 갖는 조성물의 제조 방법.
  32. 제 30 항에 있어서, 상기 비타민은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가되는, 항균 활성을 갖는 조성물의 제조 방법.
  33. 제 30 항에 있어서, 상기 배지는 아미노산이 추가로 첨가된 것을 특징으로 하는 항균 활성을 갖는 조성물의 제조 방법.
  34. 제 33 항에 있어서, 상기 아미노산은 아르기닌(arginine), 라이신(lysine), 아스파르트산(aspartic acid), 글루탐산(glutamic acid), 글라이신(glycine), 류신(leucine), 시스테인(cysteine), 프롤린(proline) 및 페닐알라닌(phenylalanine)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는 항균 활성을 갖는 조성물의 제조 방법.
  35. 제 33 항에 있어서, 상기 아미노산은 배지 총 중량에 대하여 0.05 내지 0.6 중량%의 양으로 첨가되는 것을 특징으로 하는 항균 활성을 갖는 조성물의 제조 방법.
  36. 제 30 항에 있어서, 상기 배지는 배지 총 중량에 대하여 포도당 2.0~5.0 중량%; 효모추출물0.1~1.0 중량%; 육추출물 0.5~2.0 중량%; 단백가수분해물 0.5.0~2.0 중량%; 아미노산 염 0.01~0.1 중량%; 금속 염 0.1~0.5 중량%; 폴리소르베이트 0.01~0.1 중량%; 비타민 B3(니코틴아마이드) 0.05~0.6 중량%; 및 잔부 물을 포함하는 배지인 것을 특징으로 하는 항균 활성을 갖는 조성물의 제조 방법.
  37. 제 30 항에 있어서, 상기 배양은 30 내지 40 ℃의 온도 하에서 6 내지 48 시간 동안 수행하는 것을 특징으로 하는 항균 활성을 갖는 조성물의 제조 방법.
  38. 제 30 항에 있어서, 상기 단계 (b) 이후에, 배양액에 대해 원심분리 및 막 분리 중 어느 하나 이상의 공정을 행하여 엔테로코커스 패컬리스 SL-5의 균체를 제거하는 단계 (c)를 더욱 포함하는 것을 특징으로 하는 항균 활성을 갖는 조성물의 제조 방법.
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