WO2019039701A1 - 대마씨 및 광천수를 배지로 한 동충하초 배양 및 생육방법 - Google Patents

대마씨 및 광천수를 배지로 한 동충하초 배양 및 생육방법 Download PDF

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WO2019039701A1
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cordyceps
medium
mineral water
temperature
humidity
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PCT/KR2018/005038
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임세규
임제원
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임세규
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01G—HORTICULTURE; CULTIVATION OF VEGETABLES, FLOWERS, RICE, FRUIT, VINES, HOPS OR SEAWEED; FORESTRY; WATERING
    • A01G18/00—Cultivation of mushrooms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C05—FERTILISERS; MANUFACTURE THEREOF
    • C05F—ORGANIC FERTILISERS NOT COVERED BY SUBCLASSES C05B, C05C, e.g. FERTILISERS FROM WASTE OR REFUSE
    • C05F11/00—Other organic fertilisers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor

Definitions

  • the present invention relates to a method for cultivating and cultivating Cordyceps sinensis with medium of cannabis seed and mineral water. More specifically, the present invention relates to a method for cultivating and harvesting caterpillar fungus, which contains germanium and selenium, The medium composition added to mineral water containing minerals is steamed at high temperature and high pressure in a high pressure zone, sterilized, cooled and then inoculated with Cordyceps sinensis or Cordyceps militaris or Cordyceps mushroom A medium composition is fermented and aged for a certain period of time under the environmental conditions of temperature and humidity so that the mycelium can adapt to the culture medium in the dark room of the dark room. The fruit body is allowed to grow for a certain period of time under the conditions of temperature, humidity, To a method for cultivating and cultivating Cordyceps sinensis.
  • Cordyceps has long been known as one of the top three ginsengs along with ginseng and antler. In Korea, it also helps the lungs and gums in stopping blood, stopping the blood and removing the sputum.
  • the body is weak as a tonic, sedative and cough medicine. , Pulmonary tuberculosis, shedding of sweat, anemia, ambulation, oil well, and back pain.
  • the components of the Cordyceps sinensis Cordyceps sinensis were identified as 25-32% of protein, 84% of fat (13% of saturated fatty acid, 82% of unsaturated fatty acid), 19% of crude fiber, 29% of carbohydrate, 4% Amino acids such as glutamate, phenylalanine, proline, histidine, valine, oxyvaline, arginine, and alanine were identified as the hydrolyzate.
  • cordisepine 3'-deoxyadenosine and homochytyrylaminoadenosine are identified.
  • the function of the pharmacological component of cordisepin is It is known as an antibiotic substance which acts on anti-leukemia, anti-cancer effect, HIV virus inhibitory effect, intestinal noxious organism inhibitory effect and anti-bacterial antifungal activity. Mannitol is also used for prevention and treatment of cerebral thrombosis, cerebral hemorrhage and kidney weakness.
  • Korean Patent Publication No. 10-1347219 discloses a technique for cultivating the mulberry leafhopper, and the technical feature is that the mulberry leafhopper is cultivated in a medium containing a mixture of fluid pellets, After inoculation, incubate for 4 ⁇ 7days in a closed space with keeping temperature 18 ⁇ 22 °C and humidity 20 ⁇ 90%. Allow fruiting body to germinate and keep humidity at 20 ⁇ 90 °C at 18 ⁇ 22 °C And culturing the mixture at an illuminance of 400 to 500 Lux for 35 to 45 days. (Prior Art 1)
  • KCCM-10115 spores were cultured in 10 8 spores / water using a water sputtering apparatus. The cultivation was carried out in the same manner as in Example 1, Ml and then sprayed on larvae of 5th instar larvae of the mosquito and incubated for 24 hours at a temperature of 26 ⁇ 30 °C and a humidity of 95%. The inoculated larvae of the silkworm were protected from 15 ⁇ 24 °C and infected at 15 ⁇ 24 °C , And humidity of 95% to form a fruiting body.
  • Prior Art 2 In the artificial cultivation method,
  • Korean Patent Publication No. 10-2004-32001 discloses a method of cultivating a bee harvesting caterpillar fungus.
  • the method comprises culturing a bee larva of a matured bee larvae or a honeybee of a culture medium consisting of immature bee larvae and cereals Was sterilized at 120 to 125 ° C and 15 to 60 minutes for 60 to 90 minutes and then subjected to a drying treatment while being cooled at 20 to 25 ° C for 20 to 30 minutes to prepare a culture medium having a water content of 50 to 55% (Prior Art 3)
  • a method for cultivating a caterpillar fungus with bees as a host which comprises culturing the inoculated seeds at a temperature of 20 to 25 ° C for 8 to 10 days,
  • Korean Patent Publication No. 10-1183123 discloses a description of a method of inoculating a seedling of a caterpillar fungus in a silkworm pupa and a method of producing a caterpillar fungus using the same, The method comprising the steps of immersing a silkworm pupa in a silkworm pupa for 5 to 3 minutes, sealing the container, and then pressurizing the silkworm pupa to penetrate the silkworm larvae into the silkworm pupa.
  • Korean Patent Publication No. discloses a description of a technique for "cultivation and growth method for increasing the content of cordisepin in Cordyceps sinensis,
  • the seed culture is inoculated into a liquid culture medium at a temperature of 18 to 15 ° C. and a light irradiation dose of 800 to 1,300 Lux for 5 to 10 days.
  • the cultured strains are transferred to a sterilized liquid culture medium, The culturing is carried out for 5 to 10 days at a light irradiation dose of 800 to 1,300 Lux and the cultured product is inoculated into a solid medium containing 5 to 40% by weight of sterilized peptanide and grown at 20 to 26 DEG C for 45 to 55 days
  • the present invention relates to a method of cultivating and growing a long-
  • the seedling culture conditions the conditions for culturing the mycelium, the conditions for growing and growing the fruit bodies, and the temperature, humidity, culture period and growth period are all similar
  • the conditions required for a good cordyceps include a high content of excellent protein, a good human nutritive substance, an anticancer substance such as cordisepin, a high content of mannitol, polysaccharide and a pharmacological component
  • the commercialization of the Cordyceps is a mixture of the medium composition and the fruiting body, and most of the selection of the medium composition is very important.
  • the nutritional and pharmacological components of Cordyceps are the nutritional and pharmacological components inherent to the host insect, and the metabolism products of Cordyceps inoculants such as Kordissephsinensis and Kordissephs militaris. It can be said to be a complex of nutritional components and pharmacological components of fulvestrant and fulvestrant, and it is important that the culture composition inoculating the bacterium as well as the selection of the bacterium of the genus Cordyceps on the nutritional and pharmacological aspects I can do it.
  • the culture medium of the prior art 1 forms a medium with a mixture of a hypochlorous liquid mixture having a low protein content and a green algae having the lowest protein content among seaweeds.
  • a hypochlorous liquid mixture having a low protein content
  • a green algae having the lowest protein content among seaweeds.
  • Is inoculated into the liquid medium Is inoculated into the liquid medium.
  • the present invention aims at enhancing the pharmacological components and functionalities of caterpillar fungus, and cultivating high quality caterpillar fungus, by constituting a culture composition excellent in nutritional, pharmacological and functional components unlike the conventional cultivation and cultivation methods of caterpillar fungus, Specifically, the present invention relates to a method for inoculating a mycelium of Cordyceps sinensis or Cordyceps militaris selected from Cordyceps militaris with a composition having superior nutritional and pharmacological properties and functionality The present invention aims at cultivating high quality Cordyceps, by converting the nutrients of the culture medium composition into higher nutrients by the action of the microorganisms generated in the cultivation process of the Cordyceps cichorifera mycelium and at the same time giving the unique function of the composition to Cordyceps.
  • a medium composition is obtained by mixing 50 wt% of hemp seed with 50 wt% of removed hemp seeds and 50 wt% of mineral water, placing it in dozens of bottles, placing it in a high-pressure zone, and maintaining the temperature at 115 to 120 ° C for 20 to 30 minutes The bottle is then taken out and cooled to 18 ⁇ 20 °C.
  • the bottles inoculated with Kordissephsinensis or Cordyceps ssp.
  • Milliliteris mycelia are blocked with a breathable lid, moved to a sterile room where light is blocked, and then incubated at 23 ⁇ 25 °C , Humidity 80 ⁇ 90%, fermentation culture for 10 ⁇ 15 days, and then transferred to the growth chamber, and the average length of fruiting body is 6 ⁇ 7cm under the environmental condition of 19 ⁇ 21 °C, humidity 80 ⁇ 90%, illumination 1,200 ⁇ 1,300 Lux And cultivating the caterpillar fungus with the medium of canned seeds and mineral water as a medium.
  • the Cordyceps obtained by the method of culturing and growing the Cordyceps sinensis, is characterized in that the mineral water containing trace elements such as unsaturated fatty acids, vitamins, hemp seeds containing omega 3, 6 ⁇ 9 and trace minerals germanium and selenium, , And the essential amino acids such as glutamate, phenylalanine histidine, valine, oxyvaline, arginine and alanine are produced as a hydrolyzate of tremendous vegetable protein contained in hemp seed during the fermentation process during the cultivation of the mycelia of Chinese caterpillar fungus, Can be given excellent nutrients, and omega 3 ⁇ 6 ⁇ 9 contained in hemp seeds, anticancer of germanium and selenium, immune strengthening function capable of treating leukemia, and antioxidant function are given to the Chinese cabbage, Can be obtained, and in the 4-step process, This is a process in which the hydrolysis reaction of the sex protein produces organic acids and essential amino acids, carbohydrates are saccharified, and cordy sepin, which
  • the present invention relates to a method for culturing a mycelia of Cordyceps sinensis or Cordyceps milletalis Cordyceps sinensis with a mixture of hemp seed and mineral water, Culturing the mycelium under suitable temperature, humidity and culture period and growing the fruiting body under temperature, humidity and illumination suitable for the growth conditions of the fruiting body to grow and grow until the length of the fruit body reaches 6 to 7 cm.
  • the inoculated bottle of the culture medium composition was sealed with a breathable stopper, and light
  • the mycelia were cultured for 10 ⁇ 15 days under the conditions of temperature 23 ⁇ 25 °C and humidity 80 ⁇ 90%, and the cultured mycelia were transferred to the growth chamber, Characterized in that the growth is carried out until the average length of the fruiting bodies is 6 to 7 cm while maintaining the environmental conditions of 21 ° C, 80 to 90% of humidity and 1,200 to 1,300 Lux of illumination, Hacho relates to culture and cultivation methods.
  • the above-mentioned dislodged cannabis seed is a canned hemp seed of Canadian origin, which is a proven cannabis seed imported from Canada and South Korea customs without any hallucinogenic THC, and has a taste similar to pine nut, It contains abundant high quality vegetable protein, unsaturated fatty acids, vitamins, minerals and other essential nutrients such as nucleic acids, amino acids and omega 3 ⁇ 6 ⁇ 9 that can not be produced in the body.
  • the protein content of hemp seed contains 3156 g of protein per 100 g of hamseed, and compared with other foods with high protein content, 125 g of egg per 100 g of food, 17,44 g of chicken, 19,42 g of beef, 1984 g of salmon , And hemp seed (3156 g).
  • the ham-seed when comparing the contents of omega-3, 6, and 9 of hemp seed, contains 381 g per 100 g of polyunsaturated fatty acid (omega 3 ⁇ 6 ⁇ 9), and in comparison with other foods having high content of unsaturated fatty acid, It is 25 grams of salmon per 100 grams, 33 grams of mackerel, 508 grams of ducks, and 1232 grams of almonds. (Source: USDA National Nutrient Database for Standard Reference Release 28)
  • the mineral water is 03 g / l of germanium, 10 g / l of selenium, 295 mg / l of silica, 2313 mg of calcium (Korea Institute of Geoscience and Mineral Resources, Korea Institute of Geoscience and Mineral Resources, Korea Institute of Geoscience and Mineral Resources, Incheon, Republic of Korea); , Gyeonggi Provincial Health and Environment Research Institute)
  • the hemp seed used as the culture medium for the caterpillar fungus cultivation contains a tremendous protein, hydrolysis occurs during the fermentation process during the cultivation of the caterpillar fungus mycelium, as in the case of the above-mentioned component of Cordyceps sinensis cordis. It can not be synthesized in the body but it can produce essential amino acids that can be consumed through food. Therefore, essential nutrients beneficial to human body can be obtained.
  • Omega 3, 6 ⁇ 9 is contained in a large amount among unsaturated fatty acids contained in large quantity. It is a pharmacological component effective for the treatment and prevention of the related diseases.
  • germanium acts as an oxygen catalyst to help oxygen efficiently. That is, when oxygen is supplied to the human body, extra oxygen gives blood to the blood. Therefore, chronic oxygen deficiency And the fact that it will be released from modern medicine.
  • the human body has two major immune systems. First, it is caused by leukocytes. It is a system that eats pathogenic bacteria that enter the body by phagocytosis. Secondly, it is an antibody-mediated action. T-lymphocytes cause B-lymphocytes to bind with pathogens Therefore, it has been proved that T-lymphocyte count is decreased, and germanium has a function of inhibiting the onset of cancer cell toxicant virus by proliferating T-lymphocyte There is a bar.
  • Interferon is the most excellently effective substance that has ever been developed to attack cancer cells and inhibit proliferation.
  • Organic germanium acts as an oxygen catalyst to help the human body to efficiently utilize oxygen. Therefore, when germanium is supplied to the human body, the oxygen requirement of the cell is reduced. Therefore, oxygen is used in the body, .
  • it is a metal having a wide range of functions because it has a pain relieving action, a detoxifying action, a discharging action of heavy metals in the body, a strengthening action of natural healing power and a dehydrogenating action, and the healing effect is arthritis, rheumatism, rectum, Ovarian, uterine and lung cancer, leukemia, asthma, diabetes, psychosis, depression, gastritis, gastric ulcer, heart disease, hypertension, etc.
  • the typical effect of selenium contained in mineral water is antioxidant activity.
  • Selenium's antioxidant activity has a strong antioxidative effect of 1,970 times more than natural vitamin E, which is known as another antioxidant, and 2,920 times more than synthetic vitamin E.
  • the vegetable protein contained in an enormous amount of hemp seeds is fermented by the microorganism in the step of culturing the mycelium of Chinese caterpillar fungus, so that hydrolysis of glutamate and phenylalanine, histidine, valine, oxyvaline, arginine, It can not be produced in the same human body but it can produce the essential amino acid that can be obtained from the food. It will increase the flavor of Cordyceps and give good nutrients to Cordyceps.
  • the ratio of cannabis seed and mineral water in the medium composition of the present invention is very important. If the space between the cannabis seeds and the cannabis seeds is not secured if the cannabis seeds and mineral water are not cooked in a cooked state, Therefore, it is not possible to achieve effective fermentation at a later time. Therefore, it is impossible to expect a smooth mycelium to grow and cultivate out of the weight ratio of hemp seed and mineral water. Moreover, by accelerating the saccharification and hydrolysis reaction of carbohydrates contained in hemp seed, .
  • the culture and cultivation method of the present invention it is possible to constitute the culture medium on the bottle top in order to prevent the easy operation, the abnormal fermentation, the contamination and the transmission.
  • a round bottle having a bottle height of 17 cm, a bottle inner diameter of 9 cm,
  • an open cell synthetic resin foam or a non-woven fabric of fiber yarn so that air and moisture can be circulated.
  • the thickness of the inoculum-filled inoculum medium is 2 cm
  • the growth space of fruiting body is about 75 cm from the surface of the inoculation medium.
  • the medium containing one unit as a unit has an advantage that it is not contaminated or infected by abnormal fermentation or decay by germs.
  • the vegetable protein contained in a large amount of hemp seeds composed of the medium composition is hydrolyzed by the hydrolysis reaction while the mycelium is cultured and undergoes simultaneous fermentation process, so that it can not be produced in the organic acid and the human body, Possible amino acids such as phenylalanine, histidine, valine, oxyvaline, arginine and alanine are produced, and in the artificially cultured metabolism products of Kordispemmi- tallis bacteria, codistepin, 3'-deoxyadenosine, homocytruyrylaminoadenosine , And it was recognized that cordisepine was effective for anticancer and leukemia, and it has a virus inhibitory effect, a harmful bacterial inhibitory effect, an antibacterial and an antifungal activity as an international price of $ 317 per 100 mg.
  • the step of culturing the mycelium of the present invention is a process of producing nutrients and pharmacological components useful for the human body, it is necessary to increase the efficiency by giving sufficient time.
  • the fruiting bodies that have undergone growth are integrated on the basis of the medium and dried in a constant temperature drier at 40 to 50 ° C to be commercialized or made into a product by immersing it in soju (ethanol) do.
  • the medium and embryo By the first dewatering and drying three days to maintain a temperature of 48 °C was the weight of the weight of a 15% water content when the medium 236g 78g fruit bodies, the weight of the weight of the fruit body of the medium in the remaining bottle was almost the same.
  • Example 2 The same procedure as in Example 1 was carried out using a composition composed of 7 kg of hemp seed and 13 kg of mineral water
  • the weight of the raw material was 1304 g.
  • the weight of the medium was 94.8 g and the weight of fruiting body was 356 g.
  • the weight of the fruiting body was 25 g and the weight of the fruit body was 68 g when the water content was 15%.
  • Table 1 shows the results of investigation of the growth state of Cordyceps sinensis according to the above examples
  • Example 1 the amount of dried fruit bodies in Example 1 is the largest, meaning that the growth state of Cordyceps sinensis is the best, and Example 2 shows that the weight of fruiting bodies is smaller than that of Example 1, The ratio of hemp seed to mineral water is not adequate and the amount of mineral water is high. Therefore, it can not maintain the particle shape of hemp seed during high-temperature steaming, and it is gelled like porridge and air circulation is not smooth. And Example 3 also had a lower weight of fruiting body than that of Example 1. This means that the fermentation time and culturing time of the mycelial body of the Chinese cabbage was shortened as in Example 3,

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Abstract

외피를 제거한 대마씨(hemp seed) 50중량%와 광천수 50중량% 혼합하여 배지조성물을 얻고 이를 수십 개의 병에 넣어 고압부 내에 안착한 다음 온도 115~120℃를 유지 20~30분간 열처리로 증숙시킨 다음 병을 취출하여 18~20℃로 냉각시켜 코디세프스 시넨시스 또는 코디세프스 밀리타리스 동충하초 균사체를 접종시킨 병을 통기성 뚜껑으로 막고 빛이 차단된 무균실로 이동 안치한 다음 온도 23~25℃, 습도 80~90%로 유지시킨 다음 10~15일간 발효 배양시킨 다음 생육실로 이동시켜 19~21℃, 습도 80~90%, 조도 1,200~1,300Lux의 환경조건에서 자실체의 평균 길이가 6~7cm 될 때까지 재배함을 특징으로 하는 대마씨 및 광천수의 증숙물을 배지로 하는 동충하초 배양 및 재배방법에 관한 것이다

Description

대마씨 및 광천수를 배지로 한 동충하초 배양 및 생육방법
본 발명은 대마씨 및 광천수를 배지로 하는 동충하초 배양 및 생육방법에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 캐나다산의 외피를 제거한 마약성분(THC)이 전혀 함유되지 않은 대마씨를 게르마늄 및 셀레늄을 비롯한 인체의 유익한 미네랄 성분이 함유된 광천수에 첨가한 배지조성물을 고압부에서 고온 고압으로 증숙하여 멸균시키고 냉각시킨 다음 코디세프스의 시넨시스(Cordyceps sinensis) 또는 코디세프스 밀리타리스(Cordyceps militaris), 동충하초 균사체를 접종한 배지조성물을 암실의 무균실에서 균사체가 배지에 적응할 수 있도록 온도, 습도의 환경조건으로 일정기간 발효 숙성시킨 후 자실체가 활착 생육할 수 있는 온도, 습도 및 조도의 환경조건으로 일정기간 생육시켜서 됨을 특징으로 하는 동충하초 배양 및 생육방법에 관한 것이다.
동충하초는 예로부터 인삼, 녹용과 더불어 3대 보약의 하나로 알려져 왔고, 우리나라 동의보감 치료에서도 폐와 신을 돕고 피를 멈추며 가래를 삭힌다고 하여 강장, 진정, 기침멎이약으로서 몸이 쇠약한데, 기침, 각혈, 폐결핵, 땀흘리기, 빈혈, 양위, 유정, 허리통증에 사용한 일종의 버섯이다.
본래 올바른 개념의 동충하초는 코디세프스(Codyceps)속에 포함되는 것으로 현재 300여종이 발견되어 있지만 코디세프스속에 속하는 동충하초라 하더라도 약리적인 성분 및 효과가 밝혀지지 않은 종이 대부분이며 그 약리효과가 밝혀지고 널리 유통되고 있는 동충하초는 코디세프스 시넨시스(Cordyceps sinensis)와 코디세프스 밀리타리스(Cordyceps militaris)로서 약리효과에서는 큰 차이가 없으나 자연산 박쥐나방 동충하초인 코디세프스 시넨시스가 제일 좋다하고 있으나 생산 또는 채취량이 적고 고가이다.
상기 코디세프스 시넨시스 동충하초의 성분은 단백질 25~32%, 지방 84%(포화지방산 13%, 불포화지방산 82%), 조섬유 19%, 탄수화물 29%, 희분 4%, 만니톨이 확인되었고, 상기 단백질의 가수분해물로 구루타민산, 페닐알라닌, 프롤린, 히스티딘, 발린, 옥시발린, 아르기닌, 알라닌 등의 아미노산이 확인되었다.
상기와 같은 성분을 갖는 동충하초나 코디세프스 밀리타리스 동충하초균을 인공배양한 대사생성물에서 코디세핀3'-디옥시아데노신, 호모찌트루릴아미노아데노신이 확인되며 그중 코디세핀의 약리성분의 기능이 항백혈병, 항암작용, HIV바이러스 억제효과, 장내유해균 억제효과, 항세균 항진균 작용을 하는 항생물질로 알려져 있고, 또한 만니톨이란 성분은 뇌혈전, 뇌일혈, 신장쇠약의 예방과 치료에 사용되고 있다.
동충하초의 상기와 같은 약리작용의 효과로 동충하초의 부가가치가 높아지고 건강식품으로도 활용도가 커지고 있어 천연에서 채취되는 동충하초는 수요량을 감당할 수 없는 실정이고 경쟁력이 있는 상품이어서 농가의 부업형태와 산업적 규모를 갖는 기업들의 다양한 형태의 동충하초 배양법 및 재배방법으로 그 수요량을 충당하고 있으며, 중국이나 우리나라에서는 번데기를 기주로 하는 동충하초 배양 및 재배방법, 현미를 배지로 사용하는 방법들이 가장 많이 사용되고 있으며, 각종 곤충을 기주로 배양재배하는 방법, 동충하초의 균을 다양한 재료들로 구성된 배지에 접종하여 배양재배하는 방법들이 있으며, 보다 구체적인 종래 방법들을 특허문헌을 통해 알아보기로 한다.
종래기술로 국내등록 특허공보 제10-1347219호에는 밀리타리스 동충하초재배방법에 관한 기술내용이 소개되고 있으며, 기술 구성으로는 밀리타리스 동충하초 종균을 유체박 혼합물과 갈파래와 녹조류가 함유된 배지에 접종한 후 온도 18~22℃, 습도 20~90%를 유지한 상태에서 4~7일간 밀폐공간에서 암배양하여 자실체가 발아될 수 있도록 하고, 18~22℃, 20~90%의 습도를 유지 35~45일간 조도 400~500Lux로 광배양해서되는 밀리타리스 동충하초의 제조방법이다.(종래기술1)
국내등록 특허공보(등록번호: 제10-239210호)에는 "가잠을 이용한 번데기 봉형 눈꽃 동충하초의 인공재배방법"에 관한 것으로, 번데기 봉형 눈꽃 동충하초 균주(KccM-10115)의 포자를 물로 108spores/㎖의 농도로 희석한 다음 가잠의 5령기 유충에 분무하고 온도 26~30℃, 습도 95% 조건에서 24시간 접종한 후 접종된 가잠 유충을 15~24℃에서 보호하여 감염시키고 온도 15~24℃, 습도 95%로 유지시켜 자실체를 형성시키는 번데기 봉형 눈꽃 동충하초의 인공재배방법이다.(종래기술2)
국내공개 특허공보(공개번호: 제10-2004-32001호)는 "꿀벌을 기주로 하는 동충하초 재배방법"에 관한 것으로, 성숙된 꿀벌 유충으로 이루어진 배지 또는 미성숙 꿀벌 유충 및 곡물로 이루어진 배양배지의 꿀벌을 120~125℃, 15기압에서 60~90분간 멸균처리한 후 20~25℃에서 20~30분간 냉각하면서 건조처리하여 수분함량 50~55%가 되도록 배지를 준비하고, 이 배양배지에 동충하초 액체 종균을 접종하며 접종된 배지를 20~25℃ 온도를 유지하고 8~10일간 균사체를 배양한 다음, 이를 자실체로 생육하는 단계를 포함하는 꿀벌을 기주로 한 동충하초 재배방법이다.(종래기술3)
국내등록 특허공보(등록번호: 제10-1183123호)에는 "누에 번데기에 동충하초 종균의 접종방법 및 이를 이용한 동충하초 제조방법"에 관한 기술 내용이 개시되어 있고, 그 기술내용은 용기에 담긴 동충하초 액체 종균에 누에 번데기를 05~3분 동안 침지시키고 용기를 밀폐시킨 후 가압처리하여 동충하초액체 종균을 누에 번데기에 침투시키는 단계를 포함하는 누에 번데기에 종균을 접종하는 방법에 관한 것이다.(종래기술4)
그 밖에 국내공개 특허공보(공개번호: 재10-2017-64143호)에는 "장수하늘소 동충하초의 코디세핀 함량을 증가시키기 위한 배양 및 생육방법"에 관한 기술내용이 기술되어 있으며, 이는 장수하늘소 동충하초의 종균을 액체배지에 접종하여 온도 18~15℃, 광조사량 800~1,300Lux의 조건으로 5~10일 배양하고 배양된 균주를 멸균된 액체배지로 옮겨 20±2℃ 범위에서 낮과 밤의 기온을 달리하면서 광조사량 800~1,300Lux 조건하에서 5~10일간 배양하고 이 배양체를 멸균된 펩타니드 5~40중량%를 포함하는 고체배지에 접종하고 20~26℃로 45~55일간 생육시키는 단계를 포함하는 장수하늘소 동충하초의 배양 및 생육방법에 관한 것이다.(종래기술5)
상기 열거한 종래 실시 예의 전체를 살펴보면, 동충하초의 종류에 관계없이 종균의 접종 배양조건, 균사체를 배양하는 조건, 자실체를 생육재배하는 조건, 구체적으로 온도, 습도, 배양기간, 생육기간이 전체적으로 유사함범위이고, 특이한 차이가 없으며, 우수한 동충하초에 요구되는 조건은 우수한 단백질의 높은 함량을 비롯하여 인체 유익한 영양성분, 코디세핀과 같은 항암성물질, 마니톨, 폴리사카라이트와 겉은 약리성분의 높은 함량 등이 요구됨을 조건이라 할 수 있으며, 더욱이나 동충하초의 상품화는 배지조성물과 자실체의 혼합물된 것과 대부분이 배지조성물의 선택은 아주 중요하다 할 수 있다.
동충하초의 영양성분 및 약리적인 성분은 기주로 하는 곤충 고유의 영양성분 및 약리적인 성분, 그리고 동충하초 접종균, 예를 들면 코디세프스 시넨시스, 코디세프스 밀리타리스균 배양과정의 대사생성물로 코디세핀 3'-디옥시아데노신, 호모시트로릴아니노아데노신과 자실체의 영양성분 및 약리성분의 복합체라 할 수 있어 동충하초균의 선택 못지않게 균을 접종하는 배지조성물은 영양면에서나 약리적인 측면에서 중요하다 할 수 있다.
상술한 내용의 측면에서 볼 때, 상기 종래기술1의 배지조성물은 단백질함량이 많지 않은 유체박 혼합물과 해조류 중에서도 단백질함량이 가장 적은 녹조류의 혼합물로 배지를 형성하고 있고, 종래기술5에서는 장수하늘소 동충하초의 종균을 액체배지에 접종한다 하나 어떤 액체배지인지 알 수 없고 물론 예측할 수 있으나 영양분이 없어 배양속도가 느리거나 원활하지 못하다.
또한, 종래기술3에서와 같이, 성숙된 꿀벌의 유충 또는 미성숙 꿀벌유충과 곡물로 된 배지나 종래기술2에서와 같이, 가잠의 5령기 유충을 기주로 하는 경우 종래기술4에서와 같이, 번데기를 기주로 하는 경우는 기주로 하는 꿀벌의 유충, 가잠의 유충을 길러야 하므로서 이에 따른 노력과 사육에 소비되는 경비 등을 부담하므로서 경쟁력을 확보하기 어렵다.
본 발명은 종래 동충하초의 배양 및 재배방법과는 달리 영양성분, 약리성분, 기능성분에 우수한 배지조성물을 구성하므로서 동충하초의 약리적 성분 및 기능성을 보강함과 동시에 고품질의 동충하초를 재배함에 그 목적이 있으며, 구체적으로 본 발명은 코디세프스 시넨시스(Cordyceps sinensis) 또는 코디세프스 밀리타리스(Cordyceps militaris) 중에서 선택되는 하나의 동충하초 균사체를 접종하는 배지조성물을 우수한 영양 및 약리성분 그리고 기능성을 갖는 물질로 구성하여 동충하초 균사체 배양과정에서 발생하는 미생물의 작용에 의해 배지조성물 영양성분을 보다 높은 영양물질로 전환시킴과 동시에 조성물 고유의 기능을 동충하초에 부여하므로서 고품질의 동충하초를 재배함을 그 목적으로 한다.
본 발명은 외피를 제거한 대마씨(hemp seed) 50중량%와 광천수 50중량% 혼합하여 배지조성물을 얻고 이를 수십개의 병에 넣어 고압부 내에 안착한 다음 온도 115~120℃를 유지 20~30분간 열처리로 증숙시킨 다음 병을 취출하여 18~20℃로 냉각시켜 코디세프스 시넨시스 또는 코디세프스 밀리타리스 동충하초 균사체를 접종시킨 병을 통기성 뚜껑으로 막고 빛이 차단된 무균실로 이동 안치한 다음 온도 23~25℃, 습도 80~90%로 유지시킨 다음 10~15일간 발효 배양시킨 다음 생육실로 이동시켜 19~21℃, 습도 80~90%, 조도 1,200~1,300Lux의 환경조건에서 자실체의 평균 길이가 6~7cm 될 때까지 재배함을 특징으로 하는 대마씨 및 광천수의 증숙물을 배지로 하는 동충하초 배양 및 재배방법을 제공한다
본 발명 동충하초 배양 및 생육방법으로 얻어진 동충하초는 엄청난 식물성 단백질을 비롯 불포화지방산, 비타민, 오메가 3·6·9가 함유된 대마씨와 미량이나마 게르마늄 및 셀레늄을 비롯 미량성분을 함유하고 있는 광천수를 배지성분으로 하고 있어 동충하초 균사체 배양시에 일어나는 발효과정에서 대마씨에 포함된 엄청난 식물성 단백질의 가수분해물로 구루타민산, 페닐알라닌 히스티딘, 발린, 옥시발린, 아르기닌, 알라닌과 같은 필수아미노산이 생성되므로 배양 재배되는 동충하초에 우수한 영양분을 부여할 수 있고, 대마씨에 함유된 오메가 3·6·9와 게르마늄 및 셀레늄의 항암, 백혈병 치료가능 면역성 강화기능, 항산화기능 등이 동충하초에 부여되므로서 영양, 약리성분, 약리적 기능면에서 탁월한 동충하초를 얻을 수 있고 4단계 공정에서 식물성 단백질의 가수분해 반응물로 유기산 및 필수아미노산이 생성되고 탄수화물이 당화되며 발효미생물의 대사물로서 각종암, 백혈병의 예방 및 치료기능을 갖는 코디세핀(cordy sepin)이 생성되는 공정이므로 가능한 적정조건을 유지하여 균사체 배양기간을 길게 하므로서 유효성분으로 전환하는 수율을 높일 수 있어 방법 또한 효율적인 동충하초 배양 및 생육방법이라 할 수 있다.
본 발명은 코디세프스 시넨시스 동충하초 균사체 또는 코디세프스 밀리타리스 동충하초 균사체를 외피를 제거한 대마씨(hemp seed)와 광천수를 혼합 고온고압에서 증숙 및 멸균처리하여 배지를 접종하여 무균암실배양 조건에 적합한 온도, 습도, 배양기간으로 균사체를 배양하고 자실체의 생육조건에 적합한 온도, 습도, 조도하에서 자실체를 생육시켜 자실체의 길이가 6~7cm 될 때까지 생육재배하는 방법으로 이를 구체적으로 설명하면,
외피를 제거한 대마씨 50중량%, 광천수 50중량% 비율로 혼합한 배지조성물을 다수개의 병에 각각 100g씩 주입하여 고압부에 안치하고 온도 115~120℃로 20~30분간 열처리로 배지조성물을 증숙처리하여 증숙배지 조성물을 얻고 증숙된 병입 배지조성물을 온도 18~20℃로 냉각시킨 상태에서 동충하초 균사체 20~25g을 병입된 배지조성물에 첨가하여 접종시키며 접종된 배지조성물의 병을 통기성 마개로 막은 후 빛이 차단된 무균실로 이동 안착하고 온도 23~25℃, 습도 80~90%로 유지시킨 상태에서 10~15일간 발효과정을 통해 균사체를 배양하고 배양처리된 균사체 병을 생육실로 옮겨 안착하고 온도 19~21℃, 습도 80~90%, 조도 1,200~1,300Lux의 환경조건을 유지시킨 상태에서 자실체의 평균길이가 6~7cm 될 때까지 생육시킴을 특징으로 하는 대마씨 및 광천수를 배지로 하는 동충하초 배양 및 재배방법에 관한 것이다.
상기 탈각한 대마씨라 함은 캐나다산으로 대마씨의 껍질을 벗긴 대마씨로 환각물질인 THC가 전혀 없는, 캐나다, 한국세관을 통과 수입된 검증된 대마씨로 잣과 비슷한 맛, 고소하고 부드러운 식감으로 풍부한 양질의 식물성 단백질을 비롯 불포화지방산, 비타민, 미네랄 등 체내에서 생산하지 못하는 핵산, 아미노산, 오메가 3·6·9와 같은 필수영양소가 다량 함유되어 있다.
대마씨(hemp seed)의 단백질 함량은 햄프시드 100g당 단백질이 3156g가 포함되어 있으며 단백질 함량이 높은 다른 식품과 비교하면 각 식품 100g당 달걀이 125g, 닭고기 17,44g, 소고기 19,42g, 연어 1984g, 대마씨 3156g으로 가장 높다.(출처: USDA National Nutrient Database for Standard Reference Release 28)
또한 대마씨의 오메가 3·6·9의 함량을 비교하면 햄프씨드는 다가 불포화지방산(오메가 3·6·9)이 100g당 381g이 포함되어 있으며 불포화지방산의 함량이 높은 다른 식품과 비교시 각 식품 100g당 연어 25g, 고등어 33g, 오리 508g, 아몬드 1232g이다.(출처: USDA National Nutrient Database for Standard Reference Release 28)
또한, 상기 발명에서 광천수라 함은 한국지질연구원(대전 광역시 유성구 과학로 124번지 소재)에서 수질 분석한 결과에 의하면 게르마늄 03㎍/ℓ, 셀레늄 10㎍/ℓ, 규사 295㎎/ℓ, 칼슘 2313㎎/ℓ, 칼륨 136㎎/ℓ, 나트륨 84㎎/ℓ, 마그네슘 336㎎/ℓ, 극미량의 아연 0138㎎/ℓ 및 망간 025㎎/ℓ이 함유되어 있다.(한국지질자원연구원, (주)제일랩, 경기도 보건환경연구원의 수질시험성적서 참조)
이상과 같이, 동충하초 배양재배의 배지로 사용되고 있는 대마씨에는 엄청난 단백질이 함유되어 있어 상술한 코디세프스 시넨시스 동충하초의 성분에서와 같이 동충하초 균사체 배양과정을 거치는 동안 발효과정에서 가수분해가 일어나므로 우리 몸에서 합성할 수 없고 음식물을 통하여 섭취할 수 있는 필수아미노산이 생성되므로 인체에 유익한 필수영양소들을 얻을 수 있고 다량으로 함유된 불포화지방산 중 오메가 3·6·9가 다량으로 함유되어 있어 특히 남성의 심혈관계질환의 치료나 예방에 유효한 약리성분이라 할 수 있다.
또한, 배지조성물로 사용되는 광천수에는 미량이지만 천연 유기 게르마늄이 용해되어 있으며 다음과 같은 유기 게르마늄의 효능과 효과를 알아보면,
1. 산소공급(산소 대체작용)
최근에 와서 의학자들이 실험에 의해 게르마늄은 산소의 효율적인 활동을 돕는 산소촉매제의 역할을 한다는 사실이 밝혀졌다 즉 인체에 유기 게르마늄을 공급하게 되면 여분의 산소는 혈액에 생명력을 공급하기 때문에 만성 산소결핍현상에서 벗어나게 된다는 사실이 현대 의학에 의해 밝혀지게 되었다.
2. 인체의 면역력 강화작용
인체는 크게 2가지의 면역체계를 가지고 있어 첫째는 백혈구에 의한 것으로 체내에 들어온 병원균을 식균작용에 의해 잡아먹는 체계이고, 둘째는 항체에 의한 작용인데 T-임파구에 의해 B-임파구가 병원균과 결합하여 그 균을 죽이는 작용을 하는 체계이다 따라서 암에 걸렸다고 하는 것은 T-임파구 수가 저하되었다는 것을 의미하며 게르마늄은 T-임파구를 증식시켜 암세포 독성물질 바이러스에 의한 발병도 억제하는 작용이 있다는 것이 입증된바 있다.
3. 인터페론 생성 유도작용
인터페론은 암세포를 공격하고 증식을 억제하는 지금까지 개발된 물질 중에서 가장 탁월한 효과를 보이는 물질이다.
일본 사토 박사는 임상실험 논문에서 게르마늄이 우리의 몸안에서 감마인터페론을 유발시킨다고 보고한 바가 있으며, 일본 아키바 교수의 실험에 의하면 유기 게르마늄의 투여량과 신체내 인터페론의 생산량은 비례한다고 입증되어 게르마늄이 인체내에서 인터페론 생성을 유도한다는 사실이 밝혀졌다.
4. 엔돌핀 생성 촉진작용
유기 게르마늄은 인체의 산소에 대한 효율적인 활용을 돕는 산소촉매제로서의 역할을 하므로 인체에 게르마늄을 공급하면 세포의 산소요구량이 감소되므로 산소가 몸속에 사용되고도 남게 됨에 따라 인체의 자연치료체인 엔돌핀의 생성을 촉진시킨다.
따라서 피로회복이 빠르게 되고 만성산소결핍증에서 벗어나게 해주며 맑은 정신을 갖게 해준다.
그 밖에도 통증제거작용, 제독작용 및 체내중금속 배출작용, 자연치유력 증강작용, 탈수소작용 등이 있어 실로 기능성 범위가 넓은 금속이라 할 수 있고, 치유효과로는 관절염, 류머티즈, 직장, 전립선, 유방, 난소, 자궁 및 폐암, 백혈병, 천식, 당뇨병, 정신병, 우울증, 위염, 위궤양, 심장질환, 고혈압, 등 치유효과 범위가 너무나도 넓다.
또한, 광천수 중에 함유된 셀레늄의 대표적인 효능으로는 항산화작용을 들수 있으며 셀레늄의 항산화 작용은 다른 항산화제로 알려진 천연 비타민E 보다 1,970배, 합성비타민E 보다 2,920배 정도의 강력한 항산화 효과를 나타낸다.
또한 피부노화를 방지하고 아토피성 피부염, 여드럼 염증, 습진, 건선, 기미 등의 피부질환에도 큰 효과가 있는 것으로 보고되고 있다.
상술한 바와 같이, 대마씨에 엄청난 양으로 함유된 식물성 단백질은 동충하초 균사체 배양단계에서 미생물에 의한 발효가 진행되므로서 가수분해에 의해 구루타민산 그리고 페닐알라닌, 히스티딘, 발린, 옥시발린, 아르기닌, 알라닌과 같은 우리 인체에서는 생성할 수 없고 음식물을 통해 얻을 수 있는 필수아미노산이 생성되어 동충하초의 풍미를 높이고 동시에 동충하초에 우수한 영양소를 부여하게 되며 그 밖에도 대마씨에 다량으로 함유된 다가불포화 지방산인 오메가 3·6·9의 영양과 약리적인 기능이 동충하초에 부여되고 더욱이 광천수에 함유된 게르마늄 및 셀레늄의 약리적인 기능 또한 재배된 동충하초에 부여되므로서 동충하초에 영양과 약리적인 기능을 보강시키므로 고품질의 동충하초를 얻을 수 있다.
또한 본 발명 배지조성물의 대마씨와 광천수의 비율은 매우 중요하며 그 이유로는 대마씨 및 광천수를 증숙시 꼬두밥 형태로 증숙되지 않으면 대마씨와 대마씨 간의 공간이 확보되지 않으면 균사체의 활착과 배양이 늦어 효과적인 발효를 달성할 수 없게 된다 그러므로 대마씨와 광천수의 중량비를 벗어나서는 원활한 균사체의 활착과 배양을 기대할 수 없고 또한 배지조성물을 증숙하므로서 대마씨에 함유된 탄수화물의 당화 그리고 가수분해 반응을 촉진 발효시킬 수 있다.
본 발명의 동충하초 배양 및 재배방법에서 작업의 편이성과 이상발효, 오염, 전염을 방지하기 위해 병단위로 배지를 구성시킬 수 있다 병의 일예로 병높이 17cm, 병내경 9cm, 두껑의 내경 75cm의 둥근 병으로 균사체의 배양시에는 통기성 두껑, 예를 들어 연속기포성(open cell)의 합성수지 발포체이거나 섬유사의 부직포 등으로 구성되어 공기 및 수분이 유통될 수 있도록 한 뚜껑이고, 병내 충전된 접종배지의 두께는 2cm 정도이고, 자실체의 생육공간은 접종배지 표면에서 75cm 정도이다 이와 같이 하나의 병을 단위체로 한 배지는 잡균에 의한 이상발효 또는 부패시 오염되거나 감염되지 않는 잇점이 있다.
본 발명 4단계 공정은 균사체를 배양함과 동시 발효과정을 거치면서 가수분해 반응으로 배지조성물로 구성된 대마씨 중에 다량으로 함유된 식물성 단백질이 가수분해되면서 유기산과 인체에서 생성할 수 없고 음식물을 통해 섭취가능한 페닐알라닌, 히스티딘, 발린, 옥시발린, 아르기닌, 알라닌과 같은 필수아미노산이 생성되며 코디세프스 밀리타리스균의 인공배양한 대사생성물에서 코디세핀, 3'-디옥시아데노신, 호모시트루릴아미노아데노신이 확인되었으며 여기에서 코디세핀은 항암, 백혈병에 효과가 있는 것으로 인정되었고, 바이러스 억제효과, 장내유해세균 억제효과, 항세균, 항진균 작용을 하는 물질로서 국제가격이 100mg에 $317을 호가하고 있다.
그러므로서 본 발명 균사체 배양단계 공정은 인체에 유용한 영양소와 약리성분이 생성되는 공정이므로 충분한 기간을 부여하여 효율을 높일 필요가 있다.
자실체 생육재배 공정에서는 자실체의 생육조건을 유지시키면서 자실체의 평균길이가 6~7cm 될 때까지 생육시키고 이후 생육을 중단시킨다.
생육이 완료된 자실체는 배지를 바탕으로 하여 일체로 되어 있으며 이를 40~50℃의 항온건조기에서 건조시켜 분말화하여 제품화하거나 생육종료상태의 형태를 그대로 유지하여 소주(에타놀)에 침지시킨 상태로 제품화하기도 한다.
이하, 동충하초 생육상태의 결과를 알아보기 위해 실시 예를 들기로 한다
[ 실 시 예 1 ]
외피를 제거한 대마씨 10kg과 광천수 10kg을 각각의 자동홉파기에 투입한 다음 높이 170cm, 내경 9cm, 뚜껑내경75cm로 된 병에 각각의 홉파기로부터 대마씨를 50g과 광천수 50g을 투입하는 방식으로 200개를 마련하여 고압부에 넣고 온도 115~120℃로 20~30분간 열처리하여 배지조성물을 증숙하고, 이를 취출하여 온도 18~20℃로 냉각시킨 상태에서 각각의 병에 동충하초 균사체 20g씩 첨가하여 균일하게 분산시킨 다음, 온도 25℃, 습도 90%로 유지시킨 다음 15일간 발효 및 배양시킨 다음 생육실로 옮겨 안치시킨 상태에서 온도 20℃, 습도 80%, 조도1,250Lux의 조건을 유지시킨 상태에서 자실체의 평균길이가 6~7cm될 때까지 생육재배한 다음 생초의 무게를 측정한 결과 130g,이를 배지와 자실체를 분리하여 무게를 측정한 결과 배지중량 89g, 자실체중량 41g이였으며, 배지와 자실체를 1차탈수하고 온도 48℃로 유지시켜 3일간 건조시켜 수분함량 15%일때 배지의 무게가 236g이고 자실체의 무게가 78g이였으며, 나머지 병의 배지의 무게와 자실체의 무게가 거의 동일하였다.
[ 실 시 예 2 ]
실시예 1과 동일한 방법으로 실시하되 대마씨 7kg과 광천수 13kg으로 구성된 조성물로 실시하였다
생초의 무게 1326g 이를 배지와 자실체를 분리하여 각각 무게를 측정한 결과 배지중량 942g이고 자실체의 중량 374g이였으며, 배지와 자실체를 1차 탈수하고 수분함량 15%일때 배지중량 25g이고 자실체의 무게는 71g이였다
[ 실 시 예 3 ]
실시예 1과 동일한 방법으로 실시하되 균사체 배양기간을 7일로 하였다
생초의 무게 1304g이고 이를 배지와 자실체를 분리하여 무게를 측정한 결과, 배지중량 94,8g, 자실체중량356g이였으며, 수분함량 15%로 건조시켰을때 배지중량 2512g 자실체 무게는 68g이였다.
상기 실시예에 따라 동충하초 생육상태를 조사한 결과를 표1로 나타내었다
< 실시예에 따른 동충하초 생육상태 결과 >
항목 실시예1 실시예2 실시예3
생초중량(g) 130 132.6 130.4
생초분리 배지중량(g) 89 94.2 94.8
생초분리 자실체중량(g) 41 37.4 35.6
건조 배지중량(g) 23.6 25 25.1
건조 자실체 중량(g) 7.8 7.1 6.8
상기 표1에 의하면, 실시예 1의 건조자실체량이 가장 많아 동충하초 생육재배 상태가 가장 좋다는 것을 의미하고, 실시예 2는 실시예 1에 비해 자실체 중량이 적어 동충하초 배양 및 생육재배상태가 좋지 못한 것을 의미하며, 이는 대마씨와 광천수와의 비율이 적합치 않고 광천수의 양이 많아 고온증숙시 대마씨의 입자형태를 유지하지 못하고 죽처럼 교질화되어 공기유통이 원활하지 못해 동충하초균의 활착이 원활하지 못한 것이 원인이라 할 수 있고, 실시예 3 역시 실시예 1에 비해 자실체의 중량이 적다 이는 실시예 3에서처럼 동충하초 균사체의 배양기간을 단축시키므로서 충분한 발효와 배양이 이루어지지 않는데 원인이 있다고 판단된다.

Claims (1)

  1. 대마씨와 게르마늄 03㎍/ℓ, 셀레늄 10㎍/ℓ, 규사 295㎎/ℓ, 칼슘 2313㎎/ℓ, 칼륨 136㎎/ℓ, 나트륨 84㎎/ℓ, 마그네슘 336㎎/ℓ, 아연 0138㎎/ℓ, 망간 025㎎/ℓ이 함유된 광천수를 1:1의 중량비로 배합하여 배지조성물을 조성하는 1단계공정;
    배지조성물을 고압부에서 온도 115~120℃로 20~30분간 증숙처리하여 18~20℃로 냥각시킨 꼬두밥 형태의 증숙배지조성물을 얻는 2단계공정;
    상기 증숙배지조성물 100중량부에 균사체 20~25 중량부를 균일하게 배합 접종하여 빛이 차단된 무균실에서 온도23~25℃, 습도 80~90%의 조건하에 10~15일간 배양 발효시키는 3단계공정; 및 상기 배양된 균사체를 생육실로 옮겨 온도 19~21℃, 습도 80~90%, 조도 1,200~1,300Lux의 조건을 유지하여 자실체의 평균길이가 6~7cm 자랄때까지 생육재배함을 특징으로 하는 대마씨 및 광천수를 배지로 하는 동충하초 배양 및 생육방법
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