WO2018222088A1 - Вирулицидный препарат на основе природного изоборнеола (варианты) - Google Patents

Вирулицидный препарат на основе природного изоборнеола (варианты) Download PDF

Info

Publication number
WO2018222088A1
WO2018222088A1 PCT/RU2018/000351 RU2018000351W WO2018222088A1 WO 2018222088 A1 WO2018222088 A1 WO 2018222088A1 RU 2018000351 W RU2018000351 W RU 2018000351W WO 2018222088 A1 WO2018222088 A1 WO 2018222088A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
isoborneol
virucidal
oil
borneol
natural
Prior art date
Application number
PCT/RU2018/000351
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Всеволод Иванович КИСЕЛЁВ
Элла Германовна Деева
Original Assignee
Всеволод Иванович КИСЕЛЁВ
Элла Германовна Деева
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Всеволод Иванович КИСЕЛЁВ, Элла Германовна Деева filed Critical Всеволод Иванович КИСЕЛЁВ
Publication of WO2018222088A1 publication Critical patent/WO2018222088A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/429—Thiazoles condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/43—Compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula, e.g. penicillins, penems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/75—Rutaceae (Rue family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/06—Ointments; Bases therefor; Other semi-solid forms, e.g. creams, sticks, gels
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/12—Aerosols; Foams

Definitions

  • the invention relates to the field of medical biotechnology, namely to the creation and production of natural virucidal disinfectants that are safe for human health, animals and the environment.
  • a broad-spectrum antimicrobial viroseptic includes the well-known non-ionic detergent Triton-X-100, a solvent of tri- ⁇ -butyl phosphate, in a suspension of water / soybean oil (US 6034073 A, 03/07/2000). According to the authors of the development, such an antiseptic is active both against anthrax bacteria and against influenza viruses. It should be noted that Triton-X-100 is used to a greater extent for technological purposes as a detergent and emulsifier. The oil base of such antiseptics also does not seem convenient for individual use, and even more so for soaking napkins. Despite the imperfection of the composition, it is interesting to use emulsifiers to obtain stable emulsions of the main hydrophobic components of virucidal preparations. However, this antiseptic also does not meet environmental requirements.
  • virucidal agents that contain a disinfecting agent, alcohol and / or water, while alkyldimethylbenzylammonium chloride (RU 2235558 CI; RU 2286145 C1), carbamide didecyldimethylammonium bromide (RU 2158143 C1), lactic acid, are used as a disinfectant. and a zinc-containing compound (RU 2436304 C2), an organic acid or an organic acid anhydride (RU 2366460 C2).
  • a virucidal agent containing alkyldimethylbenzylammonium chloride, ethyl alcohol, propylene glycol, glycerin and grape seed oil, a 5.0-33.5% solution of tocopherol acetate and water in the following proportions, wt.%:
  • alkyldimethylbenzylammonium chloride has an adverse side effect, polluting the environment.
  • search for natural antiseptic compounds, the biodegradation of which in the environment, involves them in the natural processes of biotransformation and biodegradation is of particular relevance.
  • the drug must be of natural origin and undergo biotransformation in nature or come from semi-synthetic substances of partially natural origin.
  • norbornanes as natural compounds with high lipophilicity correspond to these criteria to the greatest extent.
  • it is borneol and isoborneol that are the main active component of the bactericidal action.
  • they are used in extremely high concentrations to inactivate bacteria (US 2008/0214518 A, 09/04/2008; El-Zemity. Synthesis and molluscitidial activity of novel N - methyl carbamate derivatives based on naturally occurring monoterpenoids. J. of Appl. Sci. Res ., 2006, Vol. 2 (2), p. 86 - 94).
  • Borneols and isoborneols are the most common bicyclic compounds belonging to the class of monoterpenes.
  • borneol the hydroxyl group is in the en position of endo-1, 7,7-Trimethyl-bicyclo [2.2.1] heptan-2-ol), and in isoborneol, it is in exo (ex-1, 7,7-Trimethyl- bicyclo [2.2.1] heptan-2-ol), that is, isoborneol is the exo-isomer of borneol (http://en.wikipedia.org/wiki/Borneol).
  • borneol and isoborneol Due to the high hydrophobicity, borneol and isoborneol exhibit high lipophilicity and are therefore toxic in high concentrations to animal and human cells.
  • Monoterpenes are an extensive class of compounds. No less wide is the spectrum of their action. Monoterpenes have antimicrobial and anti-inflammatory activity [McPartland J. M., Russo E.V. Cannabis and Cannabis extracts; greater than the sum of their parts? J. of Cannabis therapeutics. The Haworth Press, Inc. 2001, Vol. 1, p. 103-132], (http://www.cannabis-med.org/data/pdf/2001 -03-04-7.pdf).
  • their previously unknown virucidal activity against type A influenza virus was established and their use with a fundamentally new purpose was proposed - to create a virucidal drug for sterilizing hands, face and surrounding household items.
  • the invention is aimed at studying the properties of natural isoborneol and borneol and the creation on their basis of highly effective drugs that are active against current pandemic viruses, in particular the 2009 HlNl sw virus.
  • the technical problem is solved by the use of isoborneol as a virucidal agent active against type A influenza viruses.
  • the virucidal preparation according to the first embodiment contains a virucidal agent, ethyl alcohol and water, while it contains isobornoleol as a virucidal agent and additionally contains a polymer component that forms a complex with isobornoleol - polysorbitol, in the following ratio, wt.%:
  • the virucidal preparation according to the second embodiment contains a virucidal agent, ethyl alcohol and water, while it contains a mixture of natural borneol and natural isoborneol in an equimolar amount and additionally contains a polymer component polysorbite, in the following ratio, wt.%:
  • the drug according to any option may additionally contain a perfume additive in an amount of 0.05 ... 0.5 May. %
  • the preparation according to any embodiment may contain at least one essential oil selected from the group: geranium oil, lime oil, lemon oil, bergamot oil, lemon oil.
  • the preparation according to any embodiment may be in the form of a gel, or a spray, or an ointment, or a perfume product, or a paste.
  • the created virucidal preparation meets all the above criteria, which is confirmed by the above examples.
  • FIG. 1 shows the structural formulas of borneol (left) and isoborneol (right).
  • FIG. 2 photographs illustrating the virucidal effect of isoborneol on a virus concentrate A / Duck / Potsdam (H5N2): left: bird flu virus concentrate A / Ducl / Potsdam (H5N2); rounded virions are visible, surrounded by a pronounced "brush" of surface antigens - receptors (HA, NA);
  • FIG. 3 concentrate of avian influenza virus A / Duck / Potsdam (H5N2), exposed in a volume ratio of 1: 1 with 0, 1% isobornoleol solution for 10 min (final concentration of isobornoleol 0.05%); strong destruction of virions; arrows indicate dilapidated virions devoid of surface receptors; negative contrast, pH 7.0; scale segment of YuOnm.
  • Solutions of borneol and isoborneol were prepared by dissolving crystalline substances in ethanol to prepare uterine concentrated solutions. As the first series of mother liquors, 5% solutions in 96% ethanol were used. As the second series of mother solutions, solutions of borneol or isoborneol at a concentration of 2.5% in 50% were used. ethyl alcohol. For testing, dilutions of the mother liquor from 2% to 0.01% with the appropriate dilution of ethyl alcohol were prepared. In solutions with borneol concentrations of 1%, the final concentration of ethyl alcohol was 20%. (All% mass).
  • Ethanol in this concentration and below did not affect the infectivity of influenza viruses and did not lead to precipitation of proteins of the culture medium or allantoic fluid of chicken embryos. Stabilization of solutions at a low ethanol content, if necessary, was achieved by adding 10% polyethylene glycol or sodium alginate.
  • Working solutions of virucidal preparations were prepared ex tempore by mixing the appropriate amounts of drugs (reagents), ethyl alcohol and water. The working solutions of the following concentrations were studied: from 0.01% to 10%. All prepared solutions were transparent and retained their properties for a long time at room temperature (observation duration up to 2 months).
  • Table 1 shows the compositions of the preparations obtained.
  • Components Composition 1 Composition 2 Composition 3 Composition 4 Composition 5 wt.% Wt.% Wt.% Wt.% Wt.% Wt.% Isoborneol 0.01 od 1, 0 3.0 10.0 ethyl 0.2 2.0 5.0 12.0 20.0 alcohol
  • influenza viruses seasonal H1N1, H3N2 B
  • avian influenza viruses H5N1 An analysis of the spread of the pandemic swine HlNl sw virus in the world since the spring of 2009 showed that the virus is actively spreading not only by airborne droplets, but also by contact.
  • Viral particles are surrounded by a lipoprotein membrane, which includes lipids borrowed from the host cells, as well as surface proteins hemagglutinin (HA) and neuraminidase (HA), which play a key role in maintaining the infectious activity of virions.
  • the surface of virions is a protein-lipid membrane highly sensitive to non-ionic detergents and any other lipophilic substances. Such substances include monoterpenes and, in particular, borneol or isoborneol.
  • a strain of avian influenza virus was used as a test virus.
  • the titer of the virus was taken to be the reciprocal of the decimal logarithm of the highest dilution of the virus, capable of inducing a positive hemagglutination reaction and expressed in the logarithms of 50% of the infectious dose of the virus (-lg ID 50 ).
  • the infectious titer of the virus used in the experiment was 5.5 (-lg ID 50 ).
  • HAO chorionallantoic membranes
  • Virus-containing allantoic fluid was mixed in a 1: 1 ratio with the test agent in various concentrations and kept in sterile plastic tubes for 2-60 minutes at a temperature of 20 ⁇ 2 ° C.
  • the level of virus reproduction in the panel wells after exposure to the drug and in the control was assessed by the hemagglutination reaction (RGA) of red blood cells.
  • RAA hemagglutination reaction
  • the residual infectious activity of the virus after exposure to the drug was evaluated by reducing the titer of the virus in the experiment compared with the control.
  • TEM transmission electron microscopy
  • a drop of the test drug was placed on the surface of a parafilm in a plastic Petri dish.
  • a copper mesh with a carbon substrate was dropped onto a drop. After adsorption for 30-60 seconds. the mesh was washed in a drop of distilled water 2 times, then the preparation was contrasted with a 1.5% solution of potassium phosphoric tungsten acid (pH 6.7), excess fluid was removed with the edge of the filter paper, and the mesh with the preparation was dried for 1–2 minutes at room temperature .
  • influenza virus concentrate obtained by precipitation of allantoic fluid on an L-8 ultracentrifuge (Beckman, USA) in the mode of 100 OOOg, 1, 5 hours.
  • the viral concentrate was stored at -70 ° C in aliquots, and before testing, it was thawed and diluted with STE buffer solution (pH 7.4).
  • the survey was performed on a FT-41MD sheet of photographic film; the negatives were scanned on an Epson 4870 scanner.
  • the avian influenza virus on the example of the H5N2 virus and HlNlsw was completely inactivated in vitro with 0.01% -5.0% solution of funds for 2-30 minutes
  • concentration of the tested agents is higher than 0.1%
  • complete inactivation of the avian influenza virus was achieved in a very short time (less than 2 minutes).
  • concentration of 0, 1% inactivation of the virus occurred in 10 minutes, which corresponds to the next interval of change.
  • Allantoic fluid in terms of quantitative protein content is close to blood plasma; therefore, no additional in vitro experiments with protein loading were performed.
  • norbornanes are hydrophobic substances, and the coefficient of their binding to proteins does not exceed 1%.
  • the lipophilicity of these reagents makes them attractive to membranes, in this case, to the membranes of viral particles.
  • the protective role of allantoic fluid components cannot be ruled out, therefore, on the smooth surface of materials or skin integument, the inactivation rate can increase significantly.
  • Table 2 shows the residual infectious activity of the virus-containing allantoic fluid after exposure with isobornoleol and a mixture of isobornoleol + borneol.
  • isoborneol and a mixture of isoborneol + borneol are characterized by a high level of virucidal activity and already at a concentration of 0.1% completely inactivate the influenza viruses H5N2 and HlNl sw - 2009 (pandemic isolate).
  • TEM electron microphotograms
  • FIG. Figure 4 shows the destroyed virions with elements of aggregation and "outpouring" of the nucleoid. Duration of exposure is indicated on microphotograms. Fundamental differences between exposure for 15 minutes or 1 hour. practically not observed. In fact, the destruction of virions occurs during the first 1 - 2 minutes. contact of a solution of isobornol with viral particles. Of considerable interest are mini-virus-like particles lacking internal (RNP) content. This processing method can be used to obtain immunogenic safe virus-like particles.
  • RNP internal
  • Isoborneol solutions have a rather pungent odor with a coniferous component. Borneol is especially inferior in this respect.
  • the resulting disinfectant solutions are compatible with a repellent such as parametan-3,8-diol (p-methane-3,8-diol), which allows the proposed composition to be used as a disinfectant - repellent in conditions of danger of infection by an infection transmitted by insects, in particular mosquitoes, for example, Dengue fever (US 2007/0166342, 07.19.2007).
  • a repellent such as parametan-3,8-diol (p-methane-3,8-diol)
  • the drug has a natural origin, causes irreversible changes in the structure of viruses, has high bioavailability and does not cause irritation of the skin and mucous membranes. It is safe when it enters the gastrointestinal tract and can be stored for a long time.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Изобретение относится к области медицинской биотехнологии, а именно к созданию и производству натуральных вирулицидных дезинфектантов, безопасных для здоровья человека, животных и окружающей среды. Вирулицидный препарат создан на основе природного изоборнеола. Вирулицидный препарат содержит вирулицидное средство, этиловый спирт, полимерный компонент-полисорбит, образующий комплекс с изоборнеолом, и воду, при этом в качестве вирулицидного средства он содержит изоборнеол (по первому варианту) или смесь борнеола и изоборнеола (по второму варианту), при следующем соотношении компонентов, мас. %: изоборнеол или смесь борнеола и изоборнеола 0,01-10, этиловый спирт 0,2-20, полисорбит 0,05-10, вода - остальное. Препарат по любому варианту может дополнительно содержать парфюмерную добавку в количестве 0,05-0,5 мас. %. Кроме того, в качестве парфюмерной добавки препарат может содержать, по меньшей мере, одно эфирное масло, выбранное из группы: масло герани, масло лайма, масло лимона, масло бергамота, масло лимона. Препарат по любому варианту может иметь форму геля, или спрея, или мази, или парфюмерного изделия, или пасты. Препарат имеет естественное происхождение, вызывает необратимые изменения в структуре вирусов, обладает высокой биодоступностью и не вызывает раздражения кожных покровов и слизистых. Он является безопасным при попадании в желудочно-кишечный тракт и может длительно храниться.

Description

ВИРУЛИЦИДНЫЙ ПРЕПАРАТ НА ОСНОВЕ ПРИРОДНОГО ИЗОБОРНЕОЛА (ВАРИАНТЫ)
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Изобретение относится к области медицинской биотехнологии, а именно к созданию и производству натуральных вирулицидных дезинфектантов, безопасных для здоровья человека, животных и окружающей среды.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Распространение в мире различных заболеваний, вызываемых вирусными агентами, привело к возрастающему спросу на антисептические препараты. Большинство этих препаратов основано на таких традиционных антисептиках, как формалин, глютаровый альдегид, перекись водорода, хлорамин и т.д. (McDonnell G., Russell A.D. Anticeptics and disinfectants: action and resistance. Clin. Microbiol. Rev., 1999, Vol. 12, p. 147 - 179). Однако эти антисептики применяются в значительных концентрациях, и не все проявляют вирулицидное действие. В условиях развития пандемии H1N1 гриппа разработка средств массовой защиты от вирусных инфекций является особенно актуальной, так как контактный путь передачи этой инфекции наряду с аэрозольным играет важнейшую роль в распространении инфекции. Следует также отметить, что подавляющее большинство гигиенических средств для рук не содержат вирулицидных компонентов и ни одно из них не сертифицировано в этом отношении.
Вторая не менее важная проблема состоит в том, что масштабы применения традиционных антисептиков настолько велики, что возникает реальная угроза загрязнению окружающей среды достаточно токсичными химикатами ионами металлов, альдегидов, поверхностно активных веществ синтетического происхождения (Voss J.G. Effect of Inorganic Cations on Bactericidal Activity of Anionic Surfactants. Journal of Bacteriology. 1963, vol. 36, pp. 207-21 1 ; Pal В., Heda B.I.D., P.V. Khadikar, S.G. Kaskedikar, Antimicrobial Activity of Metal Chelates of Salicyclic Acid. Indian Journal of Microbiology, 1981 , vol. 21, pp. 331- 334). Фактически, это относится ко всем современным дезинфектантам .
Наиболее функциональным дезинфектантом с виросептическими свойствами является препарат, разработанный фирмой Novavax (CIF). Антимикробный виросептик широкого спектра действия включает широко известный неионный детергент Тритон-Х-100, растворитель три-η- бутилфосфат, в суспензии воды/соевое масло (US 6034073 А, 07.03.2000). По данным авторов разработки такой антисептик активен как против бактерий сибирской язвы, так и против вирусов гриппа. При этом следует отметить, что Тритон-Х- 100 в большей степени используется в технологических целях в качестве детергента и эмульгатора. Масляная основа таких антисептиков также не представляется удобной для индивидуального применения и тем более для пропитывания салфеток. Несмотря на несовершенство состава, интересным является использование эмульгаторов для получения стабильных эмульсий основных гидрофобных компонентов вирулицидных препаратов. Однако данный антисептик также не удовлетворяет экологическим требованиям.
В целом, проблема создания доступных и относительно простых виросептиков настолько актуальна, что разрабатываются и апробируются даже простейшие спиртовые смеси и виросептическое мыло, чтобы предотвратить контактную передачу пандемического вируса HlNl sw в период активного развития пандемии (Grayson ML, Melvani S, Druce J, et al. Efficacy of soap and water and alcohol-based hand-rub preparations against live HlNl influenza virus on the hands of human volunteers. Clin Infect Dis. 2009;48(3):285-291). За рубежом самыми доступными средствами дезинфекции являются просто растворы этанола.
Известны различные вирулицидные средства, содержащие дезинфицирующий агент, спирт и/или воду, при этом в качестве дезинфицирующего агента используют алкилдиметилбензиламмоний хлорид (RU 2235558 CI ; RU 2286145 С1), клатрат карбамид дидецилдиметиламмоний бромид (RU 2158143 С 1 ), молочную кислоту, лимонную кислоту и цинксодержащее соединение (RU 2436304 С2), органическую кислоту или ангидрид органической кислоты (RU 2366460 С2).
Наиболее близким к предложенному является вирулицидное средство, содержащее алкилдиметилбензиламмоний хлорид, этиловый спирт, пропиленгликоль, глицерин и масло на основе виноградных косточек, 5,0-33,5% раствор токоферол ацетата и воду в следующих соотношениях, мас.%:
этиловый спирт 75,0-80,0
алкилдиметилбензиламмоний хлорид 0,05-0, 15
глицерин дистиллированный 0,01 -0,3
пропиленгликоль 0,01 -0,3
масло из виноградных косточек 0, 1 -0,3
токоферол ацетат 0,005-0, 1
вода остальное (RU 2235558 С 1 , опуб 10.09.2004)
Недостаток известного средства заключается в том, что алкилдиметилбензиламмония хлорид оказывает неблагоприятное побочное действие, загрязняя окружающую среду. В связи с этим представляет особую актуальность изыскание природных антисептических соединений, биодеградация которых в окружающей среде вовлекает их в естественные процессы биотрансформации и биодеградации.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Технической проблемой, решаемой изобретением, является создание безопасного вирулицидного препарата, удовлетворяющего следующим требованиям:
1. Препарат должен иметь естественное происхождение и подвергаться биотрансформации в природе или происходить из полусинтетических веществ частично природного происхождения.
2. Вызывать необратимые изменения в структуре вирусов и особенно тех компонентов вирусных частиц, которые ответственны за инфекционную активность.
3. Обладать высокой био доступностью и не вызывать раздражения кожных покровов и слизистых.
4. Быть безопасным при попадании в желудочно - кишечный тракт.
5. Длительно храниться.
6. Быть совместимым с некоторыми другими антисептиками.
По мнению авторов изобретения, этим критериям в наибольшей степени соответствуют норборнаны как природные соединения с высокой липофильностью. В большинстве лечебных растительных масел именно борнеол и изоборнеол являются основным действующим компонентом бактерицидного действия. Однако для инактивации бактерий они используются в чрезвычайно высоких концентрациях (US 2008/0214518 А, 04.09.2008; El-Zemity. Synthesis and molluscitidial activity of novel N - methyl carbamate derivatives based on naturally occurring monoterpenoids. J. of Appl. Sci. Res., 2006, Vol.2(2), p. 86 - 94). Данные вещества используются не только поверхностно, но прописываются для приема внутрь и хорошо известны в традиционной народной китайской медицине (Chang Minyi, Chinese Medicinal Herbs, 1973 Georgetown Press, San Francisco, CA.; Hong- Yen Hsu, et al., Oriental Materia Medica: A Concise Guide, 1986 Oriental Healing Arts Institute, Long Beach, CA, Pharmacopoeia Commission of PRC, Pharmacopoeia of the PRC, (English edition) 1988 People's Medical Publishing House, Beijing., Anticancer Medicinal Herbs, 1992 Hunan Science and Technology Publishing House, Changsha., Smith F.P. and Stuart G.A.).
Борнеолы и изоборнеолы являются наиболее распространенными бициклическими соединениями, относящимися к классу монотерпенов. У борнеола гидроксильная группа находится в эн о-положении endo- 1 ,7,7-Trimethyl- bicyclo[2.2.1]heptan-2-ol), а у изоборнеола - в экзо (ехо- 1 ,7,7-Trimethyl- bicyclo[2.2.1]heptan-2-ol), то есть изоборнеол является экзо-изомером борнеола (http://en.wikipedia.org/wiki/Borneol) .
В связи с высокой гидрофобностью борнеол и изоборнеол проявляют высокую липофильность и поэтому в высоких концентрациях токсичны для клеток животных и человека.
Монотерпены представляют собой обширный класс соединений. Не менее широк и спектр их действия. Монотерпены обладают антимикробной и противовоспалительной активностью [McPartland J. М., Russo Е.В. Cannabis and Cannabis extracts; greater than the sum of their parts? J. of Cannabis therapeutics. The Haworth Press, Inc. 2001 , Vol. 1, p. 103-132], (http://www.cannabis-med.org/data/pdf/2001 -03-04-7.pdf ).
Для исследования свойств из всех известных монотерпенов авторы выбрали борнеол и изоборнеол, т.к. они имеют длительную историю использования в народной медицине [Smith F.P, Stuart G.A, Chinese Medicinal Herbs, 1973. Georgetown Press, San Francisco, CA.]. Авторами исследованы свойства этих природных соединений. Впервые установлена неизвестная ранее их вирулицидная активность в отношении вируса гриппа типа А и предложено их использование с принципиально новой целью - для создания вирулицидного препарата для стерилизации рук, лица и окружающих предметов обихода. Таким образом, изобретение направлено на изучение свойств природного изоборнеола и борнеола и создание на их основе высокоэффективных препаратов, проявляющих активность в отношении актуальных пандемических вирусов, в частности вируса HlNl sw - 2009 года.
Техническая проблема решается применением изоборнеола в качестве вирулицидного средства, активного в отношении вирусов гриппа типа А.
В рамках настоящего изобретения предложено два варианта вирулицидного препарата с применением изоборнеола.
Вирулицидный препарат по первому варианту содержит вирулицидное средство, этиловый спирт и воду, при этом в качестве вирулицидного средства он содержит изоборнеол и дополнительно содержит полимерный компонент, образующий комплекс с изоборнеолом - полисорбит, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
изоборнеол 0,01 - 10
этиловый спирт 0,2 - 20
полимерный компонент
полисорбит 0,05 - 10
вода остальное
Вирулицидный препарат по второму варианту содержит вирулицидное средство, этиловый спирт и воду, при этом в качестве вирулицидного средства содержит смесь природного борнеола и природного изоборнеола в эквимолярном количестве и дополнительно содержит полимерный компонент полисорбит, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
смесь борнеола и изоборнеола 0,01 ...10
этиловый спирт 0,2 ... 20
полимерный компонент
полисорбит 0,05 - 10
вода остальное
Кроме того, препарат по любому варианту может дополнительно содержать парфюмерную добавку в количестве 0,05...0,5 мае. %.
Кроме того, в качестве парфюмерной добавки препарат по любому варианту может содержать по меньшей мере, одно эфирное масло, выбранное из группы: масло герани, масло лайма, масло лимона, масло бергамота, масло лимона.
Кроме того, препарат по любому варианту может иметь форму геля, или спрея, или мази, или парфюмерного изделия, или пасты.
Введение дополнительных компонентов усиливает действие вирулицидного средства на вирусы и обеспечивает необходимые потребительские качества препаратов.
Созданный вирулицидный препарат отвечает всем названным выше критериям, что подтверждается приведенными примерами.
ПЕРЕЧЕНЬ ЧЕРТЕЖЕЙ
Сущность изобретения подтверждается иллюстрациями.
На фиг. 1 приведены структурные формулы борнеола (слева) и изоборнеола (справа).
На фиг. 2 - фотографии, иллюстрирующие вирулицидное действие изоборнеола на концентрат вируса А/Duck/ Potsdam (H5N2): слева: концентрат вируса гриппа птиц А/Ducl / Potsdam (H5N2); видны округлые вирионы, окруженные ясно выраженной «щеткой» поверхностных антигенов - рецепторов (НА, NA);
справа: тот же вирусный концентрат, экспонированный в объемном соотношении 1 : 1 с 1% раствором изоборнеола в течение 10 мин (конечная концентрация средства составила 0,2%); видно полное разрушение вирионов.
На фиг. 3 - концентрат вируса гриппа птиц A/Duck/Potsdam (H5N2), экспонированный в объемном соотношении 1 : 1 с 0, 1% раствором изоборнеола в течение 10 мин (конечная концентрация изоборнеола 0,05%); сильное разрушение вирионов; стрелками отмечены полуразрушенные вирионы, лишенные поверхностных рецепторов; негативное контрастирование, рН 7,0; масштабный отрезок ЮОнм.
На фиг. 4 - электронная микрофотограмма вируса H1N1
А//Санкт - Петербург/2009 HlNl sw после обработки 10% раствором изоборнеола (время экспозиции 15 мин и 1 час обозначено на микрофотограммах).
ПРИМЕРЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Осуществление изобретения иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1.
Получение вирулицидных средств и их тестирование
1. Растворы борнеола и изоборнеола получали, растворяя кристаллические вещества в этиловом спирте для приготовления маточных концентрированных растворов. В качестве первой серии маточных растворов использовали 5%-ные растворы на 96% этиловом спирте. В качестве второй серии маточных растворов использовали растворы борнеола или изоборнеола в концентрации 2,5% в 50% этиловом спирте. Для тестирования готовили разведения маточного раствора от 2 % до 0,01 % с соответствующим разведением этилового спирта. В растворах с концентраций борнеола 1%, конечная концентрация этилового спирта составляла 20%. (Все % массовые). Этанол в этой концентрации и ниже не оказывал влияния на инфекционность вирусов гриппа и не приводил к преципитации белков культуральной среды или аллантоисной жидкости куриных эмбрионов. Стабилизация растворов при низком содержании этанола, в случае необходимости, достигалась добавлением 10% полиэтиленгликоля или альгината - натрия.
Рабочие растворы вирулицидных препаратов готовили ех tempore путем смешивания соответствующих количеств препаратов (реагентов), этилового спирта и воды. Исследовались рабочие растворы следующих концентраций: от 0,01 % до 10%. Все приготовленные растворы были прозрачными и длительно сохраняли свои свойства при комнатной температуре (длительность наблюдения до 2 месяцев).
В таблице 1 приведены составы полученных препаратов.
Таблица 1
Компоненты Состав 1 Состав 2 Состав 3 Состав 4 Состав 5 мас.% мас.% мас.% мас.% мас.% изоборнеол 0,01 од 1 ,0 3,0 10,0 этиловый 0,2 2,0 5,0 12,0 20,0 спирт
вода 99,79 97,9 94,0 15,0 30,0
Компоненты Состав 6 Состав 7 Состав 8 Состав 9 Состав 10 мас.% мас.%) мас.%) мас.%) мас.% борнеол + 0,01 0, 1 1 ,0 3,0 10,0 изоборнеол
этиловый 0,5 4,0 10,0 15,0 20,0 спирт
вода 99,49 95,9 89,0 82,0 70,0 2. Выбор и характеристика вирусов в качестве объекта воздействия вирулицидных препаратов.
Как уже указывалось, наибольшую опасность передачи воздушно-капельным и контактным путями представляют собой вирусы гриппа (сезонные H1N1 , H3N2 В) и вирусы птичьего гриппа H5N1. Анализ распространения пандемического свиного вируса HlNl sw в мире, начиная с весны 2009 года, показал, что вирус активно распространяется не только воздушно-капельным, но и контактными путями.
Практически все респираторные вирусы, кроме аденовирусов, относятся к так называемым оболочечным вирусам. Вирусные частицы (вирионы) окружены липопротеидной оболочкой, в состав которой входят липиды, заимствованные от клеток хозяина, а также поверхностные белки гемагглютинин (ГА) и нейраминидаза (НА), играющие ключевую роль в поддержании инфекционной активности вирионов. Поверхность вирионов представляет собой белково- липидную мембрану, высоко чувствительную к неионным детергентам и любым другим липофильным субстанциям. К таким субстанциям относятся монотерпены и, в частности, борнеол или изоборнеол.
Изучение дезинфицирующих свойств вирулицидных растворов и композиций проводилось в соответствии с методиками, изложенными в сборнике «Методы испытаний дезинфекционных средств для оценки их эффективности и безопасности», Москва, 1998 г., в соответствии с «Нормативными показателями безопасности и эффективности средств, подлежащих контролю при проведении обязательной сертификации» N« 01- 12/75-97 и «Методическими рекомендациями по определению вирулицидной активности препаратов JSfo 1119-73 от 06.09.73 г.», принятыми в Российской Федерации. Также принимались во внимание ряд других рекомендаций, действующих в других странах (Eggers H.J. Experiments on antiviral activity of hand disinfectants. Some theoretical and practical consideration. Zentralbl. Bakteriol., Mikrobiol. Hyg.Abt. l Orig. B, Vol. 273, p. 36 -51 ; Springthorpe V.S., Sattar S.A. Chemical disinfection of virus - contaminating surface. Crit. Rev., Environ. Control. 1990, Vol. 20, p. 169 - 229]
Вирусы и клеточные культуры
В качестве тест-вируса использовали штамм вируса гриппа птиц
А/Утка/Потстдам (H5N2) из А/С. - Петербург 05.2009 HlNl sw из коллекции ГУ НИИ гриппа РАМН. В эксперименте использовали вирус, накопленный в течение 48 часов при 36°С в аллантоисной полости 10- 12 дневных куриных эмбрионов до титров не ниже 5,5 (-lg ИД50).
В соответствии с общепринятыми методиками за титр вируса принимали величину, равную обратному десятичному логарифму наибольшего разведения вируса, способного вызвать положительную реакцию гемагглютинации и выражали в логарифмах 50% инфекционной дозы вируса (-lg ИД50). Инфекционный титр вируса, использованного в эксперименте, составлял 5,5 (-lg ИД50).
Для заражения в опытах использовали фрагменты переживающих хорионаллантоисных оболочек (ХАО) куриных эмбрионов. Исследования проводили по модифицированному методу Fazekas de St.Growts [Hyng J., 1958, С.151]. Фрагменты XAO готовили из хорионаллантоисной оболочки 10-12 дневных куриных эмбрионов после предварительной их стерилизации этанолом и удаления эмбриона вместе с желточным мешком. Кусочки ХАО размером (20x25) мм размещали в лунки панелей из полистирола, содержащие по 0,5 мл поддерживающей среды DMEM с 2% сыворотки КРС.
Оценка вирулицидного действия
Вируссодержащую аллантоисную жидкость смешивали в соотношении 1 : 1 с исследуемым средством в различных концентрациях и выдерживали в стерильных пластиковых пробирках в течение 2-60 минут при температуре 20±2°С.
По истечении этого срока готовили серию десятикратных разведений исследуемых препаратов аллантоисной жидкости и добавляли к фрагментам ХАО в лунки панелей. Панели покрывали стеклом, выдерживали 48 ч при температуре 37°С, удаляли фрагменты ХАО и вносили по 0,5 мл 1%-ной суспензии куриных эритроцитов в физиологическом растворе.
Уровень репродукции вируса в лунках панели после воздействия средства и в контроле оценивали по реакции гемагглютинации (РГА) эритроцитов. Остаточную инфекционную активность вируса после воздействия средства оценивали по снижению титра вируса в опыте по сравнению с контролем.
Лабораторный контроль.
Одновременно выполнялся контроль следующих фрагментов ХАО: а) Чистые (незараженные) фрагменты ХАО (отсутствие вируса в контроле).
б) Фрагменты ХАО, зараженные вирусом гриппа птиц в разведении 10"4 (контроль вируса).
в) Фрагменты ХАО с добавлением дезинфектанта (вместо суспензии вируса и нейтрализатора добавляется соответствующий объем среды), г) Фрагменты ХАО с добавлением нейтрализатора (вместо суспензии вируса и дезинфектанта добавляется соответствующий объем среды). Электронно-микроскопические исследования
Длительный опыт исследования вирулицидных препаратов показал, что наряду с применением тестов на инактивацию вирусов наиболее объективным контролем деструкции вирусов является трансмиссионная электронная микроскопия (ТЕМ), которая не только позволяет зарегистрировать морфологическую деструкцию вирионов, но также и определить механизм их действия, оценить аддитивный эффект добавок и представить визуальные доказательства деструктивного действия дезинфектанта.
Электронно-микроскопические исследования проводили в соответствии с методиками, описанными в руководствах (Almeida JD. Practical aspects of diagnostic electron microscopy. Yale J Biol Med 1980 Jan-Feb;53(l):5-18.; Doane FW, Anderson N. Electron Microscopy in Diagnostic Virology, a Guide and Atlas. Cambridge, 1986)
Каплю исследуемого препарата помещали на поверхность парафильма в пластиковой чашке Петри. На каплю опускали медную сетку с углеродной подложкой. После адсорбции в течение 30-60 сек. сетку отмывали в капле дистиллированной воды 2 раза, затем препарат контрастировали 1 ,5% раствором калиевой соли фосфорно- вольфрамовой кислоты (рН 6,7), удаляли избыток жидкости краем фильтровальной бумаги и высушивали сетку с препаратом в течение 1 -2 минут при комнатной температуре.
Просмотр препаратов производили на электронном микроскопе JEM-100S (JEOL, Япония) при инструментальном увеличении 20000- 50000. Исследовали не менее 20 полей зрения каждого препарата.
В электронно-микроскопических исследованиях использовали концентрат вируса гриппа, полученный осаждением аллантоисной жидкости на ультрацентрифуге L-8 (Beckman, USA) в режиме 100 OOOg, 1 ,5 часа. Вирусный концентрат хранили при -70°С в аликвотах и перед исследованием размораживали и разводили буферным раствором STE (рН 7.4).
Съемку производили на листовую фотопленку ФТ-41МД, негативы сканировали на сканере Epson 4870.
Пример 2.
Исследований вирулицидного действия изоборнеола и смеси изоборнеол+борнеол in vitro
Результаты исследований в опытах in vitro приведены в таблице 2.
Как видно из данных, приведенных в таблице 2, вирус гриппа птиц на примере вируса H5N2 и HlNlsw полностью инактивировался in vitro 0,01%-5,0% растворами средств в течение 2-30 мин. При концентрации тестируемых средств выше 0, 1% полная инактивация вируса гриппа птиц достигалась за очень короткое время (менее 2 мин). Например, при концентрации 0, 1 % инактивация вируса происходила за 10 мин, что соответствует следующему интервалу изменения.
Аллантоисная жидкость по количественному содержанию белков близка к плазме крови, поэтому дополнительных опытов in vitro с белковой нагрузкой не проводили. Как уже указывалось, норборнаны являются гидрофобными веществами, и коэффициент их связывания с белками не превышает 1%. Липофильность этих реагентов делает их аттрактивными к мембранам, в данном случае к мембранам вирусных частиц. Вместе с тем, протективную роль компонентов аллантоисной жидкости исключить нельзя, поэтому на гладкой поверхности материалов или кожных покровах скорость инактивации может существенно возрастать. В таблице 2 приведена остаточная инфекционная активность вируссодержащей аллантоисной жидкости после экспозиции с изоборнеолом и смесью изоборнеол+борнеол.
Таблица 2
Figure imgf000017_0001
Изоборнеол
2 6,8 1,5 0,0 0,0 0,0 0,0
10 6,8 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
30 6,8 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
60 6,8 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
Смесь Изоборнеол+Борнеол
2 6,8 0,8 0,0 0,0 0,0 0,0
10 6,8 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
30 6,8 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
60 6,8 0,0 0,0 0,0 0,0 0,0
Как видно из приведенной таблицы 2, изоборнеол и смесь изоборнеол+борнеол характеризуются высоким уровнем вирулицидной активности и уже при концентрации 0, 1% полностью инактивируют вирусы гриппа H5N2 и HlNl sw - 2009 (пандемический изолят).
Пример 3.
Действие изоборнеола и смеси изоборнеол+борнеол на обеззараживание поверхности материалов, онтаминированиых вирусом гриппа типа H5N2.
Результаты исследований по обеззараживанию различных тест- объектов, контаминированиых аллантоисной жидкостью куриных эмбрионов, содержащей вирус гриппа птиц, приведены в таблице 3. В качестве тест-объектов выбраны фильтровальная бумага и фрагменты полиэтиленовой пленки. Данные, приведенные в таблице 3, свидетельствуют о том, что изоборнеол и смесь изоборнеол+борнеол в концентрациях 0, 1-0,3% проявляют сильную вирулицидную активность с полной инактивацией вируса в течение 2 - 10 мин. Таблица 3.
Препарат Концен- Время Кол-во Эффек- трация обезза- тест- тив- Способ рабочего ражива- объектов ность обезза-
Тест- раствора, ния / обезза- ражива- объект % (мин) кол-во ражи- ния
(по пре- обеззара- вания,
парату) женных %
Тест- Изобор- поверх- неол 0,2% 10 10/10 100
ности:
Фильтро- 20 12/12 100 Протира- вальная Смесь ние, бумага Изобор- 0,2% 10 10/10 100 орошение неол+бо- рнеол 20 12/12 100
Полиэти- Изобор- леновая неол 0,2% 10 11/11 100
пленка Протира-
Смесь ние,
Изобор- 0,2% 10 12/12 100 орошение неол+бо- рнеол
Полиэти- Изоборне 0,2% 10 12/12 100
леновая ол
пленка со 0,5% 20 10/10 100 Ороше- стандарт- Смесь 0,2% 10 10/10 100 ние ного Изобор- Замачива пищевого неол+бо- 0,5% 20 10/10 100 ние пакета рнеол
Гигиени- Изобор- 0,2 30 12/12 100
ческая неол
салфетка 0,5 60 11/1 1 100 Ороше- из хлопка ние
Смесь 0,2 30 11/11 100 Замачива
Изобор- ние неол+бо- 0,5 60 1 1/11 100
рнеол Пример 4.
Изучение вирулицидного действия изоборнеола методом трансмиссионной электронной микроскопии
При электронно-микроскопическом морфологическом исследовании вирусного концентрата до и после экспозиции с изоборнеолом было обнаружено, что кратковременная обработка вирусных частиц приводит к полной деструкции вирионов.
Наблюдалась прямая зависимость между концентрацией изоборнеола и времени экспозиции и скоростью и степени деструкции вирусных частиц (в пределах исследованных концентраций от 0,01% до 0,5%).
Результаты исследований приведены на фиг. 2, 3.
По результатам электронно-микроскопического исследования можно сделать вывод, что изоборнеол без дополнительных активаторов в виде раствора эффективно разрушает частицы вируса гриппа птиц. Поэтому можно рекомендовать растворы изоборнеола для обтирания или орошения в целях инфекционной инактивации вирусных контаминаций различных поверхностей, вплоть до кожи рук, при концентрации препарата от 0, 1% до 1 ,0%. В этих условиях происходит значительное нарушение интактности вирусных частиц (фиг. 4, внизу), коррелирующее с полной инфекционной инактивацией исследованных вирусов.
Пример 5.
Инактивация пандемических вирусов гриппа с помощью растворов изоборнеола
Для применения разрабатываемых натуральных вирулицидных дезинфектантов необходимо подтверждение эффективности изоборнеола, как основного компонента в отношении прямого вирулицидного действия на пандемические вирусы гриппа HlNl sw - 2009, продолжение циркуляции которых прогнозируется на ближайшие 3-5 лет. Для этих целей был выбран сезонный изолят вируса гриппа HlNl sw, изолированный в Санкт - Петербурге осенью 2009 года (А/Санкт-Петербург/05/2009 HlNl sw). Исследования проводились в соответствии с процедурой, описанной в примерах 1 и 2. Данный объект является адекватным по отношению к вирусу HlNl sw, вызвавшему пандемию «свиного» гриппа, начавшуюся в Мексике, так как полностью идентичен этому вирусу по структуре генов и белков.
На фиг.З на электронных микрофотограммах (ТЕМ) представлено действие изоборнеола на вирусные частицы вируса H1N1 в течение 15 мин и 1 час. Фактически, деструкция и частичная агрегации вирионов происходит в самом начале экспозиции. Изоборнеол как липофильный агент повреждает мембраны вирусов с отделением поверхностных антигенов и излиянием внутреннего содержимого - рибонуклеопротеида, что приводит к полной инактивации вируса.
На фиг. 4 видны разрушенные вирионы с элементами агрегации и «излияния» нуклеоида. Длительность экспозиции указана на микрофотограммах. Принципиальных различий между экспозицией в течение 15 мин. или 1 час. практически не наблюдается. Фактически, деструкция вирионов происходит в течение первых 1 - 2 мин. контакта раствора изоборнеола с вирусными частицами. Значительный интерес представляют мини-вирусоподобные частицы, лишенные внутреннего (РНП) содержимого. Такой способ обработки может быть использован для получения иммуногенных безопасных вирусопободных частиц.
Пример 6.
Получение растворов изоборнеола и смеси изоборнеол+борнеол с высокими потребительскими качествами путем использования парфюмерных добавок и полимерного компонента
Растворы изоборнеола обладают достаточно резким запахом с хвойным компонентом. В этом отношении особенно уступает борнеол. Для улучшения потребительских свойств изоборнеола и смеси изоборнеол+ борнеол в качестве дезинфектантов были проведены органолептические исследования растворов изоборнеола, борнеола и смеси изоборнеол+борнеол с парфюмерными и
* полимерными добавками. Данные оценки представлены в таблице 4 .
Таблица 4. Органолептические свойства растворов изоборнеола, борнеола и смеси изоборнеол+борнеол с парфюмерными и
полимерными добавками
Figure imgf000022_0001
*- для оценки органолептических свойств растворов условно принята 5-бальная шкала, где 5 - высокое качество, 4 - хорошее, 3 - удовлетворительное, 2 - плохое.
Анализ парфюмерных свойств растворов изоборнеола с полимерным компонентом (полисорбитом) и эфирными маслами, использующимися в парфюмерной промышленности, показал, что большинство эфирных масел существенно улучшают парфюмерные (потребительские) качества растворов изоборнеола, делая их подобными традиционным лосьонам и туалетным водам, широко представленным на потребительском рынке всех стран. Более того, некоторые из масел сильно потенцировали вирулицидную активность изоборнеола. Борнеол обладает в растворах более резким запахом по сравнению с изоборнеолом, и смягчить и сделать растворы более приемлемыми для применения трудно. Поэтому по этим качествам преимущество имеют растворы изоборнеола.
Дополнительно на вирулицидную активность и органолептические свойства были исследованы кальвеол, эугенол, карвакрол, терпинеол. Многие из монотерпенов обладают различным уровнем вирулицидной активности, однако, в большинстве случаев они уступают изоборнеолу в удельной активности и органолептических качествах. Преимущества изоборнеола не только в высокой вирулицидной активности, но также и в том, что для изоборнеола известен широкий ряд производных, что позволяет усовершенствовать как основной состав предлагаемого виросептика, так и расширять спектр его действия (ЕР 0456843 А1 , 21.11.1991 ; US 5166348 А, 24.11.1992).
Полученные дезинфицирующие растворы совместимы с таким репеллентом, как параметан-3,8-диол (р- methane-3,8-diol), что позволяет предложенную композицию использовать в качестве дезинфектанта - репеллента в условиях опасности заражения инфекцией, передающейся насекомыми, в частности москитами, например, лихорадки Денге (US 2007/0166342, 19.07.2007).
Таким образом, авторами получен препарат со всеми искомыми свойствами. Препарат имеет естественное происхождение, вызывает необратимые изменения в структуре вирусов, обладает высокой биодоступностью и не вызывает раздражения кожных покровов и слизистых. Он является безопасным при попадании в желудочно- кишечный тракт и может длительно храниться.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Вирулицидный препарат, содержащий вирулицидное средство, этиловый спирт и воду и отличающийся тем, что в качестве вирулицидного средства содержит изоборнеол и дополнительно содержит полимерный компонент полисорбит, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
изоборнеол 0,01 - 10
этиловый спирт 0,2 - 20
полимерный компонент полисорбит 0,05 - 10
вода остальное
2. Препарат по п. 1 , отличающийся тем, что дополнительно содержит парфюмерную добавку в количестве 0,05 - 0,5 мае. %.
3. Препарат по п. 2, отличающийся тем, что в качестве парфюмерной добавки содержит, по меньшей мере, одно эфирное масло, выбранное из группы: масло герани, масло лайма, масло лимона, масло бергамота, масло лимона.
4. Препарат по п. 3, отличающийся тем, что имеет форму геля, или спрея, или мази, или парфюмерного изделия, или пасты.
5. Вирулицидный препарат, содержащий вирулицидное средство, этиловый спирт и воду, отличающийся тем, что в качестве вирулицидного средства содержит смесь природного борнеола и природного изоборнеола в эквимолярном количестве и дополнительно содержит полимерный компонент полисорбит, при следующем соотношении компонентов, мас.%:
смесь борнеола и изоборнеола 0,01 - 10
этиловый спирт 0,2 - 20
полимерный компонент полисорбит 0,05 - 10
вода остальное
6. Препарат по п. 5, отличающийся тем, что дополнительно содержит парфюмерную добавку в количестве 0,05...0,5 мае. %.
7. Препарат по п. 6, отличающийся тем, что в качестве парфюмерной добавки содержит по меньшей мере, одно эфирное масло, выбранное из группы: масло герани, масло лайма, масло лимона, масло бергамота, масло лимона.
8. Препарат по п. 7, отличающийся тем, что имеет форму геля, или спрея, или мази, или парфюмерного изделия, или пасты.
PCT/RU2018/000351 2017-06-01 2018-05-31 Вирулицидный препарат на основе природного изоборнеола (варианты) WO2018222088A1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2017119202 2017-06-01
RU2017119202A RU2655524C1 (ru) 2017-06-01 2017-06-01 Натуральное вирулицидное средство и вирулицидный препарат на его основе (варианты)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2018222088A1 true WO2018222088A1 (ru) 2018-12-06

Family

ID=62559887

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2018/000351 WO2018222088A1 (ru) 2017-06-01 2018-05-31 Вирулицидный препарат на основе природного изоборнеола (варианты)

Country Status (2)

Country Link
RU (1) RU2655524C1 (ru)
WO (1) WO2018222088A1 (ru)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5213803A (en) * 1990-10-04 1993-05-25 Northeastern Ohio Universities College Of Medicine Antiviral composition and method
EA000113B1 (ru) * 1996-01-31 1998-08-27 Елена Борисовна Иванова Дезинфицирующий состав "велтолен"
RU2448692C2 (ru) * 2009-11-09 2012-04-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский Институт гриппа" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГБУ "НИИ гриппа" Минздравсоцразвития России) Фармацевтические соли аминобицикло[2.2.1]гептанов как ингибиторы транскрипционного фактора nf-kb с противовирусной активностью (варианты) и их применение
CN104430602A (zh) * 2014-12-30 2015-03-25 青岛崂乡茶制品有限公司 杀菌抗病毒的生物农药水剂

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006087039A1 (en) * 2005-02-17 2006-08-24 Propharex Sa Broad spectrum anti viral herbal composition
RU2286145C1 (ru) * 2005-03-15 2006-10-27 Леонид Иванович Калягин Дезинфицирующее средство
WO2012012498A2 (en) * 2010-07-20 2012-01-26 Pulmatrix, Inc. Use of trp channel agonists to treat infections

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5213803A (en) * 1990-10-04 1993-05-25 Northeastern Ohio Universities College Of Medicine Antiviral composition and method
EA000113B1 (ru) * 1996-01-31 1998-08-27 Елена Борисовна Иванова Дезинфицирующий состав "велтолен"
RU2448692C2 (ru) * 2009-11-09 2012-04-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский Институт гриппа" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГБУ "НИИ гриппа" Минздравсоцразвития России) Фармацевтические соли аминобицикло[2.2.1]гептанов как ингибиторы транскрипционного фактора nf-kb с противовирусной активностью (варианты) и их применение
CN104430602A (zh) * 2014-12-30 2015-03-25 青岛崂乡茶制品有限公司 杀菌抗病毒的生物农药水剂

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ARMAKA M ET AL.: "Antiviral properties of isoborneol, a potent inhibitor of herpes simplex virus type 1", ANTIVIRAL RES., vol. 43, no. 2, 1999, pages 84, XP055562542 *

Also Published As

Publication number Publication date
RU2655524C1 (ru) 2018-05-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7578970B2 (en) Methods of inhibiting growth of microorganisms using disinfectant compositions comprising orange oil mixtures
US9364511B2 (en) Antiviral preparations obtained from a natural cinnamon extract
AU2004273779B2 (en) Compositions for inactivating pathogenic microorganisms, methods of making the compositions, and methods of use thereof
Reichling Antiviral and virucidal properties of essential oils and isolated compounds–A scientific approach
EP3650012A1 (en) Solid composition comprising iodine agent and sodium chloride having improved water solubility, and antiviral and antimicrobial composition for eye, oral cavity, nasal cavity or inhalation containing aqueous solution thereof
WO2018024087A1 (zh) 空气净化消毒剂及制备方法
WO2011044916A1 (en) Multipurpose eco-friendly disinfecting composition comprising nano size antibacterial agent
KR20160079473A (ko) 녹차 추출물을 유효성분으로 포함하여 항바이러스 활성을 가지는 세정 또는 소독용 조성물 제조방법
DE3117792A1 (de) Die verwendung einer waessrigen loesung von alkoholen, phenolen und oberflaechenaktiven stoffen als viruzides mittel"
CN102600496A (zh) Ⅰ、ⅱ、ⅲ类医疗器械产品作用于皮肤、粘膜、伤口灭活病毒
WO2021217324A1 (zh) 消毒剂组合物、其制备方法和用途
US20200289552A1 (en) Solid composition comprising iodine agent and sodium chloride having improved water solubility, and antiviral and antimicrobial composition for eye, oral cavity, nasal cavity or inhalation containing aqueous solution thereof
RU2655524C1 (ru) Натуральное вирулицидное средство и вирулицидный препарат на его основе (варианты)
KR20160079459A (ko) 녹차 추출물을 유효성분으로 포함하여 항바이러스 활성을 가지는 세정 또는 소독용 조성물
CN115500364B (zh) 包含丁香花油和百里香油的水基产品及其灭螨应用
CN115568478A (zh) 包含丁香花油的水基产品及其灭螨应用
CN103110541A (zh) 纯天然免洗消毒净手液
Hughes et al. Preservative sensitization—Safety with and safety without
CN104434994A (zh) 一种皮肤黏膜消毒液
RU2724581C1 (ru) Антисептическое дезинфицирующее средство
CN111248235A (zh) 一种可杀灭冠状病毒的中西药复配消毒/抑菌剂及制备方法
US20230151302A1 (en) Cationic surfactants, in particular ethyl lauroyl arginate LAE, for treating or preventing infections and contaminations with Coronavirus
EP4082528A1 (en) Liquid spray formulation
US20220370535A1 (en) Antiviral essential oil compositions
Kaur et al. Role of gemini surfactants in fight against COVID19

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 18810677

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 18810677

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

32PN Ep: public notification in the ep bulletin as address of the adressee cannot be established

Free format text: NOTING OF LOSS OF RIGHTS PURSUANT TO RULE 112(1) EPC (EPO FORM 1205A DATED 14/04/2020)

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 18810677

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1