WO2018197814A1 - Plaque d'analyse maldi-tof a support papier et son utilisation - Google Patents

Plaque d'analyse maldi-tof a support papier et son utilisation Download PDF

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WO2018197814A1
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analysis
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Patrick Broyer
Nadine Perrot
Jérôme BLAZE
Jean-Marie Baumlin
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bioMérieux
Arjo Wiggins Fine Papers Limited
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Definitions

  • the present invention relates to the field of microbiology. More specifically, the invention relates to the analysis of a biological sample using mass spectrometry, and in particular, matrix-assisted desorption-ionization mass spectrometry and MALDI-TOF time of flight measurement.
  • the MALDI-TOF technique has been used for a few years to carry out a rapid identification of micro-organisms, at the level of the species.
  • the identification of a microorganism is made from the MALDI-TOF mass spectrum of the most abundant proteins in the microorganism, compared with baseline data allowing (identification of family, gender and most often of the microorganism species).
  • the protocol implemented includes the deposition of at least a portion of the colony of the microorganism on a MALDI plate, the addition of a matrix adapted to the MALDI technique, the acquisition of the mass spectrum and the identification of the species by comparison with reference data stored in a database.
  • the MALDI technique has also been used to detect the resistance of a microorganism to an antibiotic, and in particular to identify a phenotype responsible for the hydrolysis of beta-lactam antibiotics, because of the secretion of beta-lactamase type enzymes, and in particular of the carbapenemase type.
  • the population of microorganism (s) placed within the MALDI matrix is subjected to gentle ionization by laser.
  • the laser beam used for the ionization may have any type of wavelength favorable to sublimation or vaporization of the matrix.
  • an ultraviolet or even infrared wavelength will be used.
  • This ionization may, for example, be carried out with a nitrogen laser emitting a UV ray at 337.1 nm.
  • the matrix then absorbs the photonic energy and the restitution of this energy leads to the sublimation of the matrix, the desorption of the molecules present in the population of micro-organism (s) and the appearance of matter in a qualified state of plasma.
  • this plasma there is exchange of charges between molecules from the matrix and molecules from microorganisms. For example, protons can be torn from the matrix and transferred to the proteins, peptides and organic compounds present in the analysis zone. This step allows gentle ionization of the molecules present without inducing their destruction.
  • the population of microorganism (s) thus releases ions of different sizes. The latter are then accelerated by an electric field and fly freely in a tube under reduced pressure, called flight tube.
  • the smaller ions will then "travel" faster than larger ions, allowing them to separate.
  • a detector At the end end of the flight tube is located a detector.
  • the time of flight (or TOF for "Time Of Flight” in English) put by the ions is used to calculate their mass.
  • a mass spectrum is obtained, representing the intensity of the signal corresponding to the number of ionized molecules of the same mass on charge [m / z], in function of the ratio m / z molecules that hit the detector.
  • the mass-to-charge ratio [m / z] is expressed in Thomson [Th].
  • the MALDI-TOF analysis can be a simple MALDI-TOF analysis, or a MALDI-TOF TOF analysis.
  • a MALDI analysis plate has at least one and, in general, several analysis zones.
  • the analysis zones form a spot, most often of circular shape.
  • the surface of the plate is generally conductive, at least at the level of the analysis zone or zones.
  • such an analysis plate is generally formed of a metal, or formed of a polymer such as polypropylene, said polymer being covered with a layer of stainless steel.
  • the polymer may contain conductive material such as carbon black.
  • Such a plate may be, for example, that marketed by the company Shimadzu, under the reference Fleximass TM DS disposable MALDI targets.
  • MALDI plates are commercially available such as BioMérieux VITEK® MS (disposable) and Bruker Daltonics Maldi Biotarget (reusable). Such plates most often comprise from 48 to 96 analysis zones or spots, and at least one or even two or three reference analysis zones, which may be of different size from the analysis zones.
  • the analysis plates intended for analysis by MALDI-TOF must have very rigorous geometrical characteristics, in particular thickness characteristics of the analysis plate and flatness of the test face. perfectly mastered. Indeed, the MALDI-TOF analysis relies notably on the comparison of the flight times of the different particles resulting from the ionization. It is easy to see that flight time is affected by the distance to be covered, and therefore by good control of the initial position of the sample.
  • EP-2.106.858 discloses an analysis plate whose surface is structured to modify the wetting. This analysis plate is intended to allow analysis by mass spectrometry, but the nature of the analyzer considered for this analysis is not specified. The person skilled in the art would therefore certainly not consider using such a structured analysis plate for a mass spectrometry analysis in which the analysis is based on the measurement of a time of flight of the ionized particles.
  • EP-1.814.137 discloses an analysis plate comprising a separate substrate and a measuring element which are in electrical contact.
  • EP-2,792,471 discloses a MALDI analysis plate made of a polymeric material with a hydrophobic agent. The analysis plate is further coated with a layer of metallic material.
  • EP-2,808,887 discloses an analysis plate for MALDI-TOF analysis which comprises a base plate of metal material covered with a strongly oriented graphite layer, which is assembled to the base plate by a conductive adhesive electricity.
  • Some MALDI-TOF analysis plates are reusable. This implies that the analysis plate is cleaned and decontaminated, for example with a solvent, between two uses. It is therefore necessary that the plate supports the cleaning / decontamination process without alteration, which increases the manual procedure for using this type of analysis plate and the time required for the complete process of using the MALDI-TOF, especially in requiring a longer preparation time and more labor intensive.
  • Other analysis plates are for single use, for example made of polymer material. Until now, the unit cost of such plates remains high. It appears the need to reduce the cost of manufacturing such analysis plates.
  • the invention proposes an analysis plate comprising at least one analysis zone intended to receive a sample to be analyzed by mass spectrometry according to the MALDI-TOF technique, of the type comprising at least one test face on which is delimited at least one analysis zone, and of the type in which the plate comprises a flat support, characterized in that the support comprises at least one sheet of paper material comprising cellulosic fibers, and in that the analysis plate comprises at least one layer of metallic material.
  • the layer of metallic material is attached to the sheet of paper material on the side of the test face.
  • the layer of metallic material is reported on the sheet of paper material by vacuum metallization of the sheet of paper material.
  • the layer of metallic material is reported on the sheet of paper material by transfer metallization.
  • the layer of metallic material has a thickness of less than 0.5 micron.
  • the layer of metallic material comprises aluminum.
  • the sheet of paper material comprises, as fibers, exclusively cellulosic fibers.
  • the sheet of paper material comprises cellulosic fibers and synthetic fibers, especially synthetic polymeric fibers.
  • the sheet of paper material comprises cellulosic fibers and synthetic fibers, with, by mass, more cellulosic fibers than synthetic fibers.
  • the paper material of the sheet of paper material comprises at least one hydrophobic agent.
  • the sheet of paper material has a basis weight greater than or equal to 120 grams per square meter, preferably greater than or equal to 150 grams per square meter.
  • the sheet of paper material has a basis weight less than or equal to 400 grams per square meter, preferably less than or equal to 300 grams per square meter.
  • the support consists exclusively of paper material.
  • the support comprises at least one support blade on which is reported the sheet of paper material.
  • the support comprises at least one support strip of polymer material on which the sheet of paper material is attached.
  • the support comprises two sheets of polymeric material superimposed, and the sheet of paper material is attached to one side of one of the two superimposed blades.
  • the blade of polymeric material has a thickness in the range of 0.2 to 2 millimeters.
  • the sheet of paper material has a grammage in the range of 60 grams per square meter to 200 grams per square meter.
  • the sheet of paper material comprises at least one deformation obtained mechanically along the contour of at least one analysis zone, thus delimiting the at least one analysis zone.
  • At least one analysis zone on the sheet of paper material comprises a deformation obtained mechanically over the entire extent of said analysis zone.
  • the analysis plate comprises an ink marking defining at least one analysis zone.
  • the invention also relates to the use of an assay plate having any of the above characteristics as a sample holder in a method of analyzing the sample by mass spectrometry according to the ALDI-TOF technique. .
  • the analysis plate may be used with an adapter that holds the sheet of paper material around it.
  • an adapter may comprise a plate, a frame and a clamping mechanism which causes the analysis plate to be clamped between the frame and the plate, the frame cooperating with the periphery of the analysis plate and having an opening that makes it possible to appear. at least one analysis zone of the analysis plate.
  • Figure 1 is a schematic perspective view of an analysis plate according to the invention.
  • FIGS 2, 3A and 3B schematically illustrate, in cross section, three embodiments of an analysis plate according to the invention, without support blade.
  • FIGS 4A and 4B schematically illustrate, in cross section, two embodiments of an analysis plate according to the invention, with respectively one and two blade (s) of support.
  • Figure 5A is a top view of a portion of the test face of an analysis plate according to the invention, illustrating more particularly a first embodiment of a marking of a test area.
  • Figure 5B is a fragmentary diagrammatic cross-sectional view, broken away, illustrating the embodiment by mechanical deformation of the marking of FIG. 5A.
  • Figures 6A and 6B are views similar to those of Figs. 5A and 5B, illustrating an alternative embodiment.
  • Figures 7A and 7B are views similar to those of Figs. 5A and 5B, illustrating another alternative embodiment.
  • Figure 8 schematically illustrates the production of several analysis plates by cutting a strip.
  • FIG. 9A is a schematic exploded perspective view illustrating the use of an analysis plate according to the invention with a adapter, the elements being seen on the side of their lower face, in particular on the side of the support face of the analysis plate.
  • Figure 9B is a schematic perspective view illustrating the use of an assay plate according to the invention with the adapter of Fig. 9B; 9A, seen from the side of the test face of the analysis plate.
  • Figure 10 is a schematic cross-sectional exploded view of the whole of the Figs. 9B.
  • Figure 11 is a schematic cross-sectional view illustrating the assembly of FIG. 9B in use configuration.
  • Figures 12A to 12E are schematic views illustrating different structural variants of the analysis plate.
  • FIGs. 1 and 2 We have illustrated in Figs. 1 and 2 a first example of an analysis plate 10 made according to the invention.
  • the analysis plate 10 has, for example, in a known manner a plane shape in an extension plane.
  • the analysis plate 10 has a thickness in the direction perpendicular to its extension plane which is for example less than one-tenth of the smallest dimension of the plate measured in the extension plane, commonly called width.
  • the analysis plate 10 thus has a test face 12 and a bearing face 14 which extend parallel to the extension plane.
  • the test face 12 is that on which at least one analysis zone is provided, in the illustrated example several analysis zones 16 each for collecting a biological sample to be analyzed.
  • the analysis plate 10 thus has 48 analysis zones arranged in four columns of twelve analysis zones.
  • it can be expected that it comprises a reduced number of analysis zones, for example one, two, four, five or eight zones of analysis 16.
  • the analysis plate 10 may have, in its plane of extension, a smaller dimension of between 10 and 50 millimeters, for example 25 millimeters, and a larger dimension between 50 and 100 millimeters, for example 75 millimeters. millimeters.
  • the analysis plate 10 extends in a horizontal plane, and that the test face 12 is an upper face and that the bearing face 14 is a lower face of the analysis plate 10.
  • each analysis zone 16 is visually delimited from the remainder of the test face 12 of the analysis plate 10.
  • each analysis zone 16 is substantially circular in shape.
  • the analysis plate 10 can also comprise reference analysis zones (not shown in the figures), which can be used, for example, for the calibration of the apparatus as part of the MALDI-TOF analysis.
  • the analysis plate 10 comprises a plane support 18, which comprises at least one sheet of paper material 20 comprising cellulosic fibers.
  • the sheet of paper material 20 therefore has an extension plane corresponding to the plane of extension of the analysis plate 10.
  • the paper material is a material which consists of agglomerated fibers, the fibers comprising cellulosic fibers.
  • Cellulosic fibers are for example of plant origin.
  • the agglomeration of the fibers of the paper material is obtained by the papermaking technique. According to this technique, the fibers are dispersed in an aqueous solution, optionally with the addition of auxiliary materials (fillers, dyes, glue, etc.), thus forming a pulp.
  • the paper pulp is deposited in a thin sheet on a perforated table allowing the draining of a large part of the water contained in the paper pulp.
  • Various pressing and drying operations of the web allow the agglomeration of the fibers giving the sheet of paper material 20 its cohesion.
  • a sheet of paper material 20 may undergo surface treatments for example to deposit, on the surface of the sheet, one or more layers of additive materials for modifying the surface condition of the sheet of paper material.
  • the sheet of paper material may also undergo mechanical treatments, including calendering, embossing, etc., also aimed at modifying the surface condition of the sheet of paper material.
  • the sheet of paper material 20 may comprise, as fibers, exclusively cellulosic fibers.
  • the sheet of paper material 20 comprises, as fibers, only cellulosic fibers, with the exception, however, of the possible presence of fibrous impurities.
  • the mass of these fibrous impurities is less than 2% of the mass of paper material. This quantity can be measured according to the TAPPI T401 standard.
  • the mass per square meter of the sheet of paper material also called basis weight, is measured according to ISO 536.
  • the paper material sheet comprises cellulosic fibers and non-cellulosic fibers, especially glass fibers and / or synthetic polymers.
  • Synthetic polymer fibers may in particular comprise polyester, polyethylene or polylactic acid fibers.
  • glass microfibers from Lauscha Fiber International for example B-08-F fibers having a diameter of 0.8 microns in borosilicate; synthetic polymer fibers of the company Eastman Cyphrex, for example Cyphrex tm 10001 diameter 2.5 microns and length 2.5 millimeters PET
  • Advansa synthetic polymer fibers for example Advansa 328 NSD fibers with a length of 6 mm and with a dtex of 1.7 in polyester or Advansa PLA fibers with a length of 3 mm and a dtex of 1.7 in PLA.
  • an analysis plate 10 according to the invention will advantageously be preserved in a moisture-proof package.
  • a package comprising an aluminum foil completely enclosing the analysis plate 10 may be formed.
  • the analysis plate is packed under a controlled atmosphere, preferably by providing that the atmosphere inside the packaging either the driest possible, and possibly by providing inside the package a desiccant.
  • an internal atmosphere is advantageously provided with a relative humidity of less than 5%.
  • the relative humidity measurement can be measured using a calibrated hygrometer. The relative humidity can then be calculated from the formulas defined in standard NF X 15-110.
  • analysis 10 comprising such a sheet of paper material, in particular by decreasing the time of evacuation for carrying out the analysis.
  • the ratio between the mass of non-cellulosic fibers and the total mass of the fibers of the sheet of paper material is less than 50%. This value can be measured for a given paper according to the Tappi 401 method.
  • the resistance of the paper material sheet to moisture absorption can also be achieved by other means.
  • hydrophobic material for example a paraffin-containing material.
  • PVDC Polyvinylidene
  • the analysis plate 10 may comprise elements other than the sheet of paper material 20.
  • the analysis plate 10 may comprise several sheets of paper material.
  • the sheets of paper material are advantageously superimposed on each other, preferably over the entire extent of the analysis plate 10 in its extension plane.
  • the different sheets of paper material can be assembled to one another, for example by gluing.
  • one will use in this case a one-component polyurethane glue or a two-component polyurethane glue based on solvent (preferably non-aqueous) or without solvent.
  • the application of the glue can be done by sprinkling or roller coating. It is possible to use an ultraviolet activatable glue. It is also possible to use a double-sided adhesive film. We will then prefer a film of the smallest possible thickness.
  • the sheets of paper materials may be identical or not.
  • the paper materials constituting these sheets of paper material, their grammage, and / or their thickness, etc. may be identical or different.
  • the sheets of paper materials may have different dimensions, for example at least one different dimension in the extension plane of the analysis plate 10.
  • the support 18 of the analysis plate 10 consists exclusively of paper material. This case does not prevent the analysis plate 10 further comprises additional layers or strata as will be described later. However, it is considered in this case that the support 18, which gives most of its mechanical rigidity to the analysis plate, consists exclusively of paper material. In the case of a support consisting exclusively of several sheets of paper material, the presence of an adhesive, especially an adhesive, or other means of assembly between the different sheets of paper material will not prevent the support from being made exclusively of paper material.
  • the support 18 of the analysis plate 10 consists of a single sheet of paper material 20, as illustrated in FIGS. 2 and 3A, it preferably has a basis weight greater than or equal to 120 grams per square meter, more preferably greater than or equal to 150 grams per square meter.
  • the support 18 of the analysis plate comprises several sheets of paper materials, as illustrated in FIG. 3B, the sum of the grammages of the sheets of paper materials of the support is preferably greater than or equal to 120 g per square meter, more preferably greater than or equal to 150 grams per square meter.
  • this basis weight makes it possible to obtain sufficient rigidity for easy handling of the analysis plate in the context of its use in a MALDI-TOF analysis, but especially to thus guarantee a sufficiently flat geometry , including after handling, so as not to disturb the measurements by MALDI-TOF.
  • the analysis plate 10 has a basis weight of paper material less than or equal to 400 grams per square meter, preferably less than or equal to 300 grams per square meter, in a sheet or distributed between several sheets. Indeed, it appears that, even in the presence of a single sheet of paper material and / or even in the case where the support of the analysis plate 10 consists exclusively of paper material, such weighting makes it possible to obtain a more than sufficient rigidity of the analysis plate. Beyond such a weight, there is a risk of increasing the susceptibility of the analysis plate 10 to store moisture, which has been seen to be a brake on the use, by requiring an increase in the emptying time of the analysis chamber in a MALDI-TOF analysis apparatus.
  • the sheet of paper material 20 used in the analysis plate 10 according to the invention preferably has a thickness which may be between 100 and 450 microns, measured according to the standard NF EN ISO 534.
  • the cumulative thickness of the sheets of paper materials, after their assembly to form the analysis plate is preferably between 100 and 1000 microns, measured according to standard NF EN ISO 534.
  • the sheet of paper material 20 has, at least on its face turned towards the test face 12 of the analysis plate 10, a low roughness.
  • this roughness measured according to the Bendtsen method defined in the ISO 8791-2: 2013 standard, may have a value of less than 750 milliliters per minute, preferably less than 500 milliliters per minute.
  • the support 18 may comprise at least one support blade 22 on which the sheet of paper material 20 is attached.
  • the support 18 thus comprises at least two elements, namely the support blade 22 and the sheet of paper material 20, as illustrated for example in FIG. 4A.
  • the support blade 22 preferably has a planar shape extending parallel to the plane of extension of the analysis plate 10.
  • the support blade 22 has a thickness in the direction perpendicular to its extension plane which is for example less than one-tenth of the smallest dimension of the plate measured in the extension plane.
  • the carrier blade 22 is arranged below the sheet of paper material 20 or the plurality of sheets of paper material.
  • the support blade 22 preferably has a lower face which forms the bearing face 14 of the analysis plate 10.
  • the support blade 22 is for example made of polymer material, for example polypropylene or polypropylene-based material.
  • the support blade is a black 800 Priplak® Classic polypropylene sheet, 800 micron thick.
  • Such a support plate can be laminated with a plate of the same type using a Super-Lok® 364 glue from the company National Starch.
  • Particles and / or fibers or other additives may be embedded in the polymeric material, especially electrically conductive particles and / or fibers, especially metal and / or metal-based particles and / or fibers and / or particles and / or or carbon fibers.
  • the support blade 22 may be derived from a strip of material obtained by extrusion.
  • the support blade 22 can thus be obtained in very long strip, packaged in roll or plate, so in a presentation similar to paper material obtained at the output of a paper machine.
  • the sheet of paper material 20 and the support blade 22 can be assembled to one another, for example by gluing.
  • the application of the adhesive can be done by sprinkling or by roller coating or by direct etching. It is possible to use an ultraviolet activatable glue. It is also possible to use a double-sided adhesive film. We will then prefer a film of the smallest possible thickness.
  • the support 18 may comprise a plurality of support blades, in particular two superposed polymer material support blades, and the sheet of paper material 20 is attached to one face of the two superposed blades.
  • the support blade 22 of polymeric material, or the plurality of support blades has, for example, a thickness in the range of 0.2 to 2 millimeters.
  • the sheet of paper material 20 may have a basis weight less than that envisaged in the case where the support 18 consists exclusively of paper material.
  • the sheet of paper material may have a basis weight in the range of 60 grams per square meter to 200 grams per square meter.
  • the analysis plate 10 comprises at least one layer of metallic material.
  • a stratum is understood to be an element or part of an element of the analysis plate 10 which extends in the extension plane of the analysis plate 10.
  • the metallic materials include metals and their alloys.
  • the layer 24 of metallic material is attached to the sheet of paper material 20.
  • the layer 24 of metallic material may be attached directly to the sheet of paper material 20, with only the interposition of a possible layer of adhesive material such as a glue or an adhesive film, without the interposition of another support layer. as shown in FIG. 2.
  • a possible layer of adhesive material such as a glue or an adhesive film
  • a layer of metallic material may be attached to the sheet of paper material 20, on the side of the test face 12.
  • the stratum 24 of metallic material may for example be an aluminum stratum, or an aluminum alloy. However, other metallic materials can be envisaged, for example silver or silver alloys.
  • a layer 24 of metallic material may be attached to the sheet of paper material 20 by vacuum metallization of the sheet of paper material 20.
  • the layer 24 of metallic material may form the surface of the test surface 12 of the analysis plate 10.
  • the vacuum metallization technique is a thin film deposition technique widely used in the paper industry.
  • the metal to be deposited is evaporated from a source of solid metal by heating at a high temperature in a vacuum deposition chamber in which a substrate, for example a strip of paper material, is introduced in a continuous manner.
  • the particles resulting from the evaporation are deposited directly on the paper material on which they condense in the solid state.
  • Such a Vacuum metallization is typically achieved in a vacuum metallizer.
  • such a layer 24 of metallic material may be attached to the sheet of paper material 20 by transfer metallization.
  • An exemplary embodiment of a transfer metallization is described in detail in the document FR-2,406,523 to which the skilled person can relate. Note that in this case, as illustrated in Figs. 3A and 3B, the analysis plate 10 can comprise, starting from the test face 12:
  • a resin layer for example an acrylic or epoxy-acrylic resin 26;
  • a layer of adhesive 28 for example a one-component polyurethane adhesive in a solvent phase
  • An example of an embodiment of an analysis plate 10 according to the invention, in the variant of FIG. 3A, is constructed in the following manner.
  • a sheet of paper material 20 made of cellulose fibers is obtained using a Foudrinier type paper machine.
  • the paper preferably comprises at least one hydrophobic agent which is mixed with the pulp before the formation of the sheet.
  • the hydrophobic agent that has been used is an aqueous emulsion of Alkyl Ketene Dimer (AKD).
  • This sheet of paper is coated on both sides with a pigment solution (not visible in the drawings), for example a solution of calcium carbonate and Kaolin, by the coating technique air knife. Removal is about 10 g / m 2 per side.
  • This sheet of paper material has a basis weight of 250 g / m 2 .
  • metallization is applied by transfer metallization according to the teaching of FR-2,406,523.
  • a laminate complex consisting of a PET base film (polyethylene) is formed terephthalate), a release layer (release), an acrylic resin layer 26 of about 2 microns and a deposit of aluminum alloy 24 (10 to 100 nanometers thick, preferably 15 to 50 nanometers, preferably about 20 nanometers), deposited under vacuum on the resin layer 26 to form the layer of metal material 24.
  • This metal layer can be measured by commercial equipment for measuring thickness, especially those using radiometric methods ( X-ray fluorescence or backscattering p) allowing access to measurement resolutions between 100 nanometers and some Angstroms.
  • This complex is assembled, with the layer of metallic material 24 turned towards the sheet of paper, using a layer of one-component solvent glue 28, against the upper face of the paper sheet 20.
  • the glue 28 can to be one of those mentioned above.
  • the amount of glue used can be for example 3 to 12 grams per square meter.
  • the base film is detached in order to leave the adhesive layer 28, the metallization 24 and the resin layer 26 on the paper.
  • the surface of the test face 12 of the analysis plate 10 is formed by the non-electrically conductive resin layer 26 which covers the metal material layer 24 .
  • such an analysis plate 10 may comprise, as indicated above, other sheets of paper material and / or possibly one or more support blades.
  • FIG. 3B an alternative embodiment which comprises all the elements of the embodiment of FIG. 3A, except that the sheet of paper material 20 has a basis weight of 80 g / m 2 , and which comprises an additional sheet of paper material 20 'assembled against the underside of the sheet of paper material 20, so the face opposite to the one on which is reported the layer 24 of metallic material.
  • the assembly can be done by gluing with a layer of glue 28 '.
  • the glue 28 ' can be one of those mentioned above.
  • the sheet of additional paper material 20 ' has for example a basis weight of 170 g / m 2 .
  • a PET film previously coated with a nano-chromium chloride-based release layer is coated with an epoxy / acrylic resin which is dried.
  • This coated face is introduced into a metallizer in order to receive an aluminum deposit of about 20 nanometers.
  • the metallized side is coated with a single-component solvent-based polyurethane glue by a coating in direct etching. It is dried before being pressed against a paper Satimat® 90 g / m 2 of the company Arjowiggins. The next day, the PET film is peeled from the surface of the paper leaving the visible metal deposit on the paper.
  • This assembly is then bonded to a support assembly comprising at least a support blade, for example using a Super-Lok® 364 adhesive from the company National Starch.
  • the support assembly comprises two support blades each of which is formed of a Priplak® Classic polypropylene black plate 800, 800 microns thick.
  • the two support blades are for example glued with a Super-Lok® 364 glue from the company National Starch.
  • an analysis plate 10 comprising a layer of metallic material, in particular of aluminum or of aluminum alloy, attached to an upper face of a sheet of paper material 20, such as illustrated in Figs. 3A or 3B, can form a perfectly satisfactory analysis plate 10 making it possible to obtain analysis results with the same reliability as a reference plate.
  • a layer of metallic material in particular aluminum or aluminum alloys, having a thickness of less than 0.5 micron, or even less than 0.1 micron, or less than 0 , 05 micron.
  • This layer of thin metal material may be the only electrically conductive layer of the analysis plate 10, including the possible presence, above the layer of metal material 24, of a layer of non-conductive material , in this case the resin layer 26.
  • a layer 24 of metallic material, and more particularly aluminum or aluminum alloy preferably has a thickness greater than 0.01 micron. Such a thickness makes it possible in particular for the stratum not to be degraded during the evacuation of the analysis chamber.
  • an analysis plate consisting exclusively of a sheet of paper by Powercoat HD 230 Arjowiggins company, which is an extremely smooth coated paper whose thickness is 222 microns and the grammage 219 g / m 2 , has not satisfied, with only a few peaks detected but with a spectrum without quality.
  • Other tests with test plates not including a layer of metallic material reported on the test surface were unsatisfactory, including with a sheet of paper material having a basis weight of 300 g / m 2 .
  • each analysis zone 16 of the test face 12 is at least visually marked on the test face 12.
  • an analysis zone may be delimited on the test face by the presence of a mechanical deformation of the analysis plate 10, in particular by mechanical deformation of the sheet of paper material 20.
  • the sheet of paper material 20 is mechanically deformed according to the contour of the analysis zone, in this case specific case according to a part of the contour of the analysis zone.
  • the analysis zone 16 is a circular zone whose contour is delimited in part by a groove 29.
  • the groove 29 is here in two parts, each in the shape of an arc of a circle, and the two parts face each other This groove 29 can be obtained by depressing the test face 12 in the direction of the thickness of the analysis plate 10, with plastic deformation of the sheet of paper material 20, thus obtaining a permanent mechanical deformation.
  • the sheet of paper material is mechanically deformed over the entire extent of the analysis zone, in the form of a flat-bottomed bowl.
  • the sheet of paper material is mechanically deformed over the entire extent of the analysis zone 16, and also around the analysis zone 16 to leave a raised bead 30 which extends into the illustrated example in a circle along the contour of the analysis zone 16.
  • the analysis zone 16 is thus hollow with respect to the top of the bead 30, forming a bowl as in the previous example.
  • the sheet of paper material 20 is surmounted by a layer 24 of metallic material forming the test face 12, and this layer of metal material 24 is also deformed to form the groove 29 or the bowl to Flat bottom or bead 30.
  • the layer 24 of metallic material is obtained by transfer metallization, including with the possible additional presence of one or more support blades 22 as mentioned above.
  • the depth of the permanent mechanical deformation is for example between 10 and 300 microns.
  • the mechanical deformation which delimits the analysis zone 16 not only delimits it visually, but also allows to form a barrier to the propagation of the sample, and / or the reagent or reagents, and / or the matrix during the deposition on the analysis plate 10.
  • this mechanical deformation can easily be performed according to conventional embossing techniques used in the paper industry.
  • embossing can be carried out online, for example when the support is still in the form of a continuous strip.
  • the analysis plate may comprise an ink marking. Such marking is preferably affixed to the test face 12.
  • the marking may have, for example, a geometry similar to the mechanical deformation illustrated in the examples of FIGS. 5A, 6A or 7A.
  • the marking can be carried out on the test surface 12, preferably over the entire extent of the analysis zone 16, with an ink having, once dried, a wetting angle for the sample and / or matrix which is different from the wetting angle of the surface of the constituent material of the test face 12, for the sample and / or the matrix.
  • the wetting angle between the ink and the sample and / or the matrix is lower than the wetting angle between the surface of the constituent material of the test face 12 and the sample and / or the matrix, for example with AGFA Orgacon TM EL-P3145 ink sold by AGFA GEVAERT NV or its affiliates.
  • the surface of the ink when it is dry, is more hydrophilic than the surface of the test surface 12.
  • the ink makes it easier to deposit the sample and or the liquid-phase matrix, but the difference in wetting angle between the ink and the surface of the material constituting the test face 12 forms a barrier which will prevent, or at least limit, the extension of the deposit, confining the latter inside the analysis zone 16 marked by the ink.
  • the ink is deposited not on the analysis zone 16, but around it, and it is then possible for example to provide that the wetting angle between the ink and the sample and or the matrix is larger than the wetting angle between the surface of the constituent material of the test face 12 and the sample and / or the matrix.
  • this is done with the DuPont TM 5064H ink sold by EI from Pont de Nemours and Company or its affiliates, which has a higher wetting angle with water or formic acid than the surface of the metallized transfer paper carrier.
  • This ink is conductive of electricity.
  • the values below are wetting angles in degrees as a function of time measured with a Dynamic Absorption Tester device from Testing Machines, Inc. (TMI) using the TAPPI 558 method.
  • the marking can be performed on the test surface 12, preferably over the entire extent of the analysis zone 16, with an electrically conductive ink.
  • the ink-jet marking may be carried out by any known technique, in particular any technique used in the printing industry such as, for example, electrophotography printing, inkjet printing, screen printing, flexographic printing or an offset printing.
  • the analysis zone 16 is a smooth surface, having, for example, a roughness comparable to, or even inferior to, that of the sheet of paper material 20.
  • the surface of the analysis zone 16 is structured.
  • this structuring will be obtained by mechanical deformation of the surface, and in particular by mechanical deformation of the sheet of paper material 20.
  • This structuring can thus form, on the surface of the analysis zone 16, hollows and reliefs according to a regular or irregular geometry.
  • the relative depth between the hollows and the reliefs of the surface of the structured analysis zone may for example be between 10 and 300 microns.
  • the geometry and the relative depth of the depressions and reliefs of the surface of the structured analysis zone 16 can be scalable over the extent of an analysis zone 16, for example by variation of shape, size, step and / or depth of the hollows or reliefs.
  • the structuring is formed of concentric circular lines 52, recessed or raised relative to the surface of the analysis zone 16.
  • the circular lines are for example equidistant from each other, but they could have an evolutionary spacing, not constant.
  • the circular lines 52 are for example distributed over the entire extent of the analysis zone 16.
  • the circular lines are for example concentric with a circular contour 54 of the analysis zone 16.
  • the structuring is formed of radial lines 56 coming from the same central point of the analysis zone 16, recessed or in relief with respect to the surface of the analysis zone 16.
  • the radial lines are, for example, discarded angularly from each other at a constant angle, but they could have an evolutive, non-constant spacing.
  • the lines Radial lines are, for example, distributed over the entire extent of the analysis zone 16.
  • the radial lines are for example derived from the center of a circular contour 54 of the analysis zone 16.
  • the patterning is formed of concentric circular lines 52 as described in FIG. 12A, and radial lines 56, as described in FIG. 12B.
  • the structuring is formed of lines, recessed or raised relative to the surface of the analysis zone 16, forming a grid 54.
  • the grid 58 may be a square grid formed of two perpendicular series of parallel straight lines, but one can also consider two non-perpendicular series of parallel straight lines, or more than two series of parallel lines, each series each having a different orientation. Within a series of parallel lines, the lines are for example equidistant from each other, but they could have an evolutionary spacing, not constant.
  • the grid 58 extends for example over the entire extent of the analysis zone 16. However, the grid may be limited to only a part of the analysis zone 16, for example to a peripheral crown, of the zone Analysis 16.
  • the patterning is formed of a multitude of repeated geometric elements, forming a repeating pattern 60, recessed or raised with respect to the surface of the analysis zone 16.
  • the structuring is formed of a checkerboard repeating pattern 60, recessed or raised relative to the surface of the analysis zone 16.
  • the pattern 60, 62 extends for example over any the extent of the analysis zone 16.
  • the pattern could be limited to only a part of the analysis zone 16, for example to a peripheral crown of the analysis zone 16.
  • an analysis plate 10 makes it possible to produce the analysis plate 10 using materials and techniques commonly used in the paper industry, making it possible to obtain a plate of analysis at very low cost, both from the point of view of the cost of the materials used and, more importantly, from the point of view of the cost of the manufacturing processes implemented.
  • an analysis plate 10 according to the invention can be carried out, as illustrated in FIG. 8, by cutting individual analysis plates 10 starting from a strip of material 32 produced at very low cost.
  • This strip of material 32 may comprise all of the sheet (s) of paper material 20, blade (s) support 22, layer 24 of metallic material, etc., envisaged for the production of the analysis plate 10 according to FIG. invention, pre-assembled in a laminated complex capable of being obtained in strip line of great length.
  • mechanical deformation marking operations or ink deposition marking operations can use the corresponding techniques used in the printing industry, again implemented online for long length belts.
  • analysis plates made according to the teachings of the invention make it possible to obtain, in a standard apparatus, a characterization of the samples in accordance with what is generally obtained with the pre-existing analysis plates. .
  • MS spectra were also comparable, having the same resolution, the same number of peaks and the same dynamic range. All the peptides and proteins tested with the different matrix were detected on an analysis plate according to the invention, in a smooth version, with the same quality as on the reference target. The tests were carried out on 22 bacterial species and on yeasts, with masses between 2000 and 20000 Daltons, and with peptides and proteins whose mass was between 300 and 46000 Daltons.
  • a plate according to the invention is therefore advantageously used as a sample support in a method of analysis of the sample by mass spectrometry according to the MALDI-TOF technique.
  • the inventors For use in standard equipment for mass spectrometry according to the MALDI-TOF technique, the inventors have designed an adapter 34 which makes it possible to use the analysis plates 10 according to the invention, in particular the analysis plates according to the invention.
  • Figs. 3A and 3B described above which have a reduced thickness compared to conventional analysis plates.
  • the adapter 34 holds the analysis plate 10 by its periphery and makes it possible to position this sheet of paper material 20 in the analysis chamber of the apparatus so that the test face 12 of the analysis plate 10 is located at an equivalent position, in the direction perpendicular to its extension plane, to that of a conventional analysis plate, despite the difference in thickness between the two.
  • the adapter 34 comprises a plate 36 and a frame 38.
  • the plate 36 has a flat shape, and its dimensions are equal to that of the analysis plate 10 in the plane of extension of the plate.
  • the plate 36 has an upper face 40 intended to receive the bearing face 14 of the analysis plate 10, and a lower face 41.
  • the frame 38 is in the form of a profile which extends in a plane parallel to the plane of extension of the analysis plate 10, around the perimeter of the analysis plate 10.
  • upper face 42 and a lower face 44 In the lower face 44, a clearance 45 is arranged which has the exact contour of the analysis plate 10.
  • the depth of the clearance 45, in the direction perpendicular to the plane of extension of the analysis plate 10, is preferably greater than the thickness of the Analysis plate 10. In the example illustrated, this depth substantially corresponds to the sum of the thickness of the analysis plate 10 with the thickness of the plate 36, which can then also be received, at least in part in the clearance 45.
  • the frame 38 delimits, in its upper face 42, an opening 46 whose dimensions in the extension plane are sufficient to reveal the entirety of the analysis zones 16 of the analysis plate 10 through this opening 46 when the analysis plate 10 is engaged in the clearance 45 of the lower face 44 of the frame 38, the test face 12 upwards.
  • the opening 46 has, in the plane of extension of the plate 10, smaller dimensions than that of the plate 10 so that the bottom of the clearance 45 of the frame 38 forms a stop surface 48 against which press around the test surface 12 of the analysis plate 10.
  • the adapter 34 also comprises a clamping mechanism which causes the clamping of the analysis plate 10 between the frame 38 and the plate 36.
  • the clamping mechanism is a mechanism Magnet comprising a series of magnets 50.
  • the magnets 50 are carried by the frame 38, so that the plate 36 is made at least partly of ferromagnetic material, for example of ferromagnetic metal and / or comprises also corresponding magnets arranged with their inverted magnetic polarity.
  • the opposite arrangement could be provided.
  • Other clamping mechanisms could be envisaged, for example with clamps or screws.
  • the magnetic mechanism has the advantage of a very easy implementation and provides a clamping force sufficient to maintain the plate 10 without damaging it, especially in avoiding excessive tightening and adapting to a variable range of paper thickness without modification of the adapter.
  • the depth of the clearance 45 of the frame 38 and the thickness of the plate 36 thus determine, according to whether one or the other rests against the reception face of the analysis chamber, the position of the test face 12 of the analysis plate 10 in the analysis chamber, in a direction perpendicular to the plane of extension of the plate 10. Also, the depth of the clearance 45 of the frame 38 and the thickness of the plate 36 are calculated so that the test face 12 of the analysis plate 10 is arranged, in a direction perpendicular to the plane of extension of the plate 10, at a desired altitude for the proper functioning of the apparatus.
  • an adapter 34 makes it possible to avoid any damage to the analysis plate 10 during its handling, in particular when it is introduced into the mass spectrometry equipment. It is indeed possible to handle only the adapter 34, which can be made of plastic material and / or metal. This avoids in particular the risk of folding the analysis plate 10 when it is thin, for example with a support 18 consisting only of one or more sheets of paper materials 20, 20 ', without the presence of a blade additional support.
  • the same apparatus can be used indifferently with a conventional analysis plate or with an analysis plate according to the invention without requiring registration of the mass peaks.
  • the invention is not limited to the examples described and shown because various modifications can be made without departing from its scope.

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Abstract

L'invention concerne une plaque d'analyse (10) comportant au moins une zone d'analyse destinée à recevoir un échantillon à analyser par spectrométrie de masse selon la technique MALDI-TOF, du type comprenant au moins une face d'essai (12) sur laquelle est délimitée au moins une zone d'analyse, du type dans lequel la plaque comporte un support plan (18), caractérisée en ce que le support (18) comporte au moins une feuille (20) de matériau papier comprenant des fibres cellulosiques, et en ce que la plaque d'analyse (10) comporte au moins une strate (24) de matériau métallique.

Description

PLAQUE D'ANALYSE MALDI-TOF A SUPPORT PAPIER ET SON
UTILISATION
La présente invention concerne le domaine de la microbiologie. Plus précisément, l'invention concerne l'analyse d'un échantillon biologique en utilisant la spectrométrie de masse, et en particulier, la spectrométrie de masse par désorption-ionisation assistée par matrice et mesure du temps de vol dite MALDI-TOF. La technique MALDI-TOF est utilisée depuis quelques années pour réaliser une identification rapide de micro-organismes, au niveau de l'espèce.
L'identification d'un micro-organisme est réalisée à partir du spectre de masse MALDI-TOF des protéines les plus abondantes dans le micro-organisme, par comparaison avec des données de référence permettant (identification de la famille, du genre et le plus souvent de l'espèce du micro-organisme). En routine, le protocole mis en œuvre comprend le dépôt d'au moins une portion de colonie du micro-organisme sur une plaque MALDI, l'ajout d'une matrice adaptée à la technique MALDI, l'acquisition du spectre de masse et l'identification de l'espèce par comparaison avec des données de référence stockées dans une base de données. Plus récemment, la technique MALDI a également été utilisée pour permettre de détecter la résistance d'un micro-organisme à un antibiotique, et notamment pour identifier un phénotype, responsable de l'hydrolyse des antibiotiques du type bêta-lactamine, du fait de la sécrétion d'enzymes de type bêta-lactamase, et notamment, de type carbapénémase.
Différents appareillages adaptés à une telle caractérisation sont commercialisés par la demanderesse, et par les sociétés Bruker Daltonics et Andromas notamment, ces appareils comprenant notamment une source d'ionisation laser et un spectrographe de masse à temps de vol. Ces appareils sont donc prévus pour fonctionner avec une plaque d'analyse sur laquelle on dépose, sur au moins une zone d'analyse, un échantillon biologique à analyser qui est ensuite recouvert de la matrice adaptée à la technique MALDI. Ensuite, la plaque d'analyse est introduite dans une chambre d'analyse de l'appareil qui est amenée à un niveau de vide relativement important, avec une pression qui est par exemple inférieure à 10"5 millibar, par exemple comprise dans la gamme allant de 10"6 à 1CT9 millibars.
Dans ces conditions de vide, la population de micro-organisme(s) placée au sein de la matrice MALDI est soumise à une ionisation douce par laser. Le rayon laser utilisé pour l'ionisation pourra avoir tout type de longueur d'onde favorable à la sublimation ou à la vaporisation de la matrice. De préférence, une longueur d'onde ultraviolette ou même infrarouge sera utilisée. Cette ionisation pourra, par exemple, être réalisée avec un laser à azote émettant un rayon UV à 337.1 nm.
La matrice absorbe alors l'énergie photonique et la restitution de cette énergie entraîne la sublimation de la matrice, la désorption des molécules présentes dans la population de micro-organisme(s) et l'apparition de matière dans un état qualifié de plasma. Au sein de ce plasma, il se produit des échanges de charges entre des molécules issues de la matrice et des molécules issues des micro-organismes. Par exemple, des protons peuvent être arrachés à la matrice et transférés aux protéines, peptides et composés organiques présents au niveau de la zone d'analyse. Cette étape permet une ionisation douce des molécules présentes sans induire leur destruction. La population de micro-organisme(s) libère ainsi des ions de différentes tailles. Ces derniers sont alors accélérés par un champ électrique et volent librement dans un tube sous pression réduite, nommé tube de vol. Les ions les plus petits vont alors « voyager » plus rapidement que les ions plus gros, permettant ainsi leur séparation. A l'extrémité terminale du tube de vol est situé un détecteur. Le temps de vol (ou TOF pour « Time Of flight » en anglais) mis par les ions est utilisé pour calculer leur masse. Ainsi, un spectre de masse est obtenu, représentant l'intensité du signal correspondant au nombre de molécules ionisées d'une même masse sur charge [m/z], en fonction du rapport m/z des molécules qui frappent le détecteur. Le rapport masse sur charge [m/z] est exprimé en Thomson [Th]. Après que la plaque d'analyse a été introduite dans le spectromètre de masse et que le niveau de vide requis a été atteint, le spectre peut être obtenu très rapidement, le plus souvent en moins d'une minute.
Dans le cadre de l'invention, l'analyse par MALDI-TOF peut être une analyse par MALDI-TOF simple, ou encore une analyse par MALDI-TOF TOF.
Une plaque d'analyse MALDI présente, au moins une et, en général plusieurs zones d'analyse. Les zones d'analyse forment un spot, le plus souvent de forme circulaire. Afin de favoriser l'ionisation ultérieure, la surface de la plaque est généralement conductrice, au moins au niveau de la ou des zones d'analyse. A titre d'exemple, une telle plaque d'analyse est généralement formée d'un métal, ou formée d'un polymère tel que le polypropylène, ledit polymère étant recouvert d'une couche d'acier inoxydable. Le polymère peut contenir un matériel conducteur tel que le noir de charbon. Une telle plaque peut-être, par exemple, celle commercialisée par la société Shimadzu, sous la référence Fleximass™ DS disposable MALDI targets.
Différentes plaques MALDI sont disponibles dans le commerce telles que les plaques VITEK® MS de BioMérieux (jetables) et les plaques Maldi Biotarget de Bruker Daltonics (réutilisables). De telles plaques comprennent le plus souvent de 48 à 96 zones d'analyse ou spots, et au moins une, voire deux ou trois zones d'analyse de référence, qui peuvent être de taille différente des zones d'analyse.
De manière générale, il est considéré que les plaques d'analyse destinées à une analyse par MALDI-TOF doivent présenter des caractéristiques géométriques très rigoureuses, notamment des caractéristiques d'épaisseur de la plaque d'analyse et de planéité de la face d'essai parfaitement maîtrisées. En effet, l'analyse MALDI-TOF repose notamment sur la comparaison des temps de vols des différentes particules issues de l'ionisation. On conçoit très aisément que le temps de vol est affecté par la distance à parcourir, et donc par une bonne maîtrise de la position initiale de l'échantillon. Le document EP-2.106.858 décrit une plaque d'analyse dont la surface est structurée pour modifier le mouillage. Cette plaque d'analyse est destinée à permettre une analyse par spectrométrie de masse, mais la nature de l'analyseur envisagé pour cette analyse n'est pas précisée. L'homme du métier n'envisagerait donc certainement pas d'utiliser une telle plaque d'analyse structurée pour une analyse de spectrométrie de masse dans laquelle l'analyse est basée sur la mesure d'un temps de vol des particules ionisées.
Le document EP-1.814.137 décrit une plaque d'analyse comprenant un substrat et un élément de mesure distincts qui sont en contact électrique. Le document EP-2.792.471 décrit une plaque d'analyse MALDI fabriquée en matériau polymère, avec un agent hydrophobe. La plaque d'analyse est par ailleurs revêtue d'une strate de matériau métallique. Le document EP-2.808.887 décrit une plaque d'analyse destinée à l'analyse MALDI-TOF qui comporte une plaque de base en matériau métallique recouverte d'une couche de graphite fortement orienté, qui est assemblée à la plaque de base par un adhésif conducteur de l'électricité.
Certaines plaques d'analyse MALDI-TOF sont réutilisables. Cela implique que la plaque d'analyse soit nettoyée et décontaminée, par exemple avec un solvant, entre deux utilisations. Il faut donc que la plaque supporte le processus de nettoyage / décontamination sans altération, ce qui alourdit la procédure manuelle d'utilisation de ce type de plaque d'analyse et le temps nécessaire au processus complet d'utilisation du MALDI-TOF, notamment en nécessitant un temps de préparation plus long et plus coûteux en main d'œuvre. D'autres plaques d'analyse sont à usage unique, par exemple fabriquées en matériau polymère. Jusqu'à présent, le coût unitaire de telles plaques reste élevé. Il apparaît le besoin de réduire le coût de fabrication de telles plaques d'analyse.
Dans ce but, l'invention propose une plaque d'analyse comportant au moins une zone d'analyse destinée à recevoir un échantillon à analyser par spectrométrie de masse selon la technique MALDI-TOF, du type comprenant au moins une face d'essai sur laquelle est délimitée au moins une zone d'analyse, et du type dans lequel la plaque comporte un support plan, caractérisée en ce que le support comporte au moins une feuille de matériau papier comprenant des fibres cellulosiques, et en ce que la plaque d'analyse comporte au moins une strate de matériau métallique.
Selon d'autres caractéristiques optionnelles de l'invention, prises seules ou en combinaison ;
- La strate de matériau métallique est rapportée sur la feuille de matériau papier du côté de la face d'essai.
- La strate de matériau métallique est rapportée sur la feuille de matériau papier par métallisation sous vide de la feuille de matériau papier.
- La strate de matériau métallique est rapportée sur la feuille de matériau papier par métallisation par transfert.
- La strate de matériau métallique présente une épaisseur inférieure à 0,5 micron.
- La strate de matériau métallique comporte de l'aluminium.
- La feuille de matériau papier comprend, en tant que fibres, exclusivement des fibres cellulosiques.
- La feuille de matériau papier comprend des fibres cellulosiques et des fibres synthétiques, notamment des fibres polymères synthétiques.
- La feuille de matériau papier comprend des fibres cellulosiques et des fibres synthétiques, avec, en masse, plus de fibres cellulosiques que de fibres synthétiques.
- Le matériau papier de la feuille de matériau papier comporte au moins un agent hydrophobe.
- La feuille de matériau papier présente un grammage supérieur ou égal à 120 grammes par mètre carré, de préférence supérieur ou égal à 150 grammes par mètre carré. - La feuille de matériau papier présente un grammage inférieur ou égal à 400 grammes par mètre carré, de préférence inférieur ou égal à 300 grammes par mètre carré.
- Le support est constitué exclusivement de matériau papier.
- Le support comporte au moins une lame support sur laquelle est rapportée la feuille de matériau papier.
- Le support comporte au moins une lame support en matériau polymère sur laquelle est rapportée la feuille de matériau papier.
- Le support comporte deux lames de matériau polymère superposées, et la feuille de matériau papier est rapportée sur une face d'une des deux lames superposées.
- La lame de matériau polymère présente une épaisseur comprise dans la gamme allant de 0,2 à 2 millimètres.
- La feuille de matériau papier présente un grammage compris dans la gamme allant de 60 grammes par mètre carré à 200 grammes par mètre carré.
- La feuille de matériau papier est collée sur la lame support.
- La feuille de matériau papier comporte au moins une déformation obtenue mécaniquement selon le contour d'au moins une zone d'analyse, délimitant ainsi l'au moins une zone d'analyse.
- Au moins une zone d'analyse sur la feuille de matériau papier comporte une déformation obtenue mécaniquement, sur toute l'étendue de ladite zone d'analyse.
- La plaque d'analyse comporte un marquage par une encre délimitant au moins une zone d'analyse.
L'invention concerne aussi l'utilisation d'une plaque d'analyse ayant l'une quelconque des caractéristiques précédentes en tant que support d'échantillon dans un procédé d'analyse de l'échantillon par spectrométrie de masse selon la technique ALDI-TOF.
Dans une telle utilisation, la plaque d'analyse peut être utilisée avec un adaptateur qui maintient la feuille de matériau papier par son pourtour. Un tel adaptateur peut comporter un plateau, un cadre et un mécanisme de serrage qui provoque le serrage de la plaque d'analyse entre le cadre et le plateau, le cadre coopérant avec le pourtour de la plaque d'analyse et comportant une ouverture laissant apparaître au moins une zone d'analyse de la plaque d'analyse.
Diverses autres caractéristiques ressortent de la description faite ci-dessous en référence aux dessins annexés qui montrent, à titre d'exemples non limitatifs, des formes de réalisation de l'objet de l'invention. La Figure 1 est une vue schématique en perspective d'une plaque d'analyse selon l'invention.
Les Figures 2, 3A et 3B illustrent schématiquement, en coupe transversale, trois variantes de réalisation d'une plaque d'analyse selon l'invention, sans lame de support.
Les Figures 4A et 4B illustrent schématiquement, en coupe transversale, deux variantes de réalisation d'une plaque d'analyse selon l'invention, avec respectivement une et deux lame(s) de support.
La Figure 5A est une vue de dessus d'une portion de la face d'essai d'une plaque d'analyse selon l'invention, illustrant plus particulièrement un premier mode de réalisation d'un marquage d'une zone d'essai.
La Figure 5B est une vue schématique partielle en coupe transversale, avec arrachement, illustrant la réalisation par déformation mécanique du marquage de la Fig. 5A.
Les Figures 6A et 6B sont des vues similaires à celles des Figs. 5A et 5B, illustrant une variante de réalisation.
Les Figures 7A et 7B sont des vues similaires à celles des Figs. 5A et 5B, illustrant une autre variante de réalisation.
La Figure 8 illustre de manière schématique la réalisation de plusieurs plaques d'analyse par découpe d'une bande.
La Figure 9A est une vue schématique en perspective éclatée illustrant l'utilisation d'une plaque d'analyse selon l'invention avec un adaptateur, les éléments étant vus du côté de leur face inférieure, notamment du côté de la face d'appui de la plaque d'analyse.
La Figure 9B est une vue schématique en perspective illustrant l'utilisation d'une plaque d'analyse selon l'invention avec l'adaptateur de la Fîg. 9A, vue du côté de la face d'essai de la plaque d'analyse.
La Figure 10 est une vue schématique en coupe transversale éclatée de l'ensemble de la Fîg. 9B.
La Figure 11 est une vue schématique en coupe transversale illustrant l'ensemble de la Fig. 9B en configuration d'utilisation.
Les Figures 12A à 12E sont des vues schématiques illustrant différentes variantes de structuration de la plaque d'analyse.
Diverses autres caractéristiques ressortent de la description faite ci-dessous en référence aux dessins annexés qui montrent, à titre d'exemples non limitatifs, des formes de réalisation de l'objet de l'invention.
On a illustré sur les Figs. 1 et 2 un premier exemple d'une plaque d'analyse 10 réalisée selon l'invention.
La plaque d'analyse 10 présente par exemple de manière connue une forme plane dans un plan d'extension. La plaque d'analyse 10 présente une épaisseur selon la direction perpendiculaire à son plan d'extension qui est par exemple inférieure à un dixième de la plus petite dimension de la plaque mesurée dans le plan d'extension, couramment appelée largeur. La plaque d'analyse 10 présente ainsi une face d'essai 12 et une face d'appui 14 qui s'étendent parallèlement au plan d'extension. La face d'essai 12 est celle sur laquelle on prévoit au moins une zone d'analyse, dans l'exemple illustré plusieurs zones d'analyse 16 destinées à recueillir chacune un échantillon biologique à analyser. Dans l'exemple illustré, la plaque d'analyse 10 présente ainsi 48 zones d'analyse disposées en quatre colonnes de douze zones d'analyse. Cependant, grâce au faible coût d'une plaque d'analyse 10 selon invention, on peut prévoir que celle-ci comporte un nombre réduit de zones d'analyse, par exemple une, deux, quatre, cinq ou huit zones d'analyse 16.
Par exemple, la plaque d'analyse 10 peut présenter, dans son plan d'extension, une plus petite dimension comprise entre 10 et 50 millimètres, par exemple 25 millimètres, et une plus grande dimension comprise entre 50 et 100 millimètres, par exemple 75 millimètres.
Par convention, on considère pour la suite du texte que la plaque d'analyse 10 s'étend dans un plan horizontal, et que la face d'essai 12 est une face supérieure et que la face d'appui 14 est une face inférieure de la plaque d'analyse 10.
De préférence, chaque zone d'analyse 16 est délimitée visuellement du reste de la face d'essai 12 de la plaque d'analyse 10. Dans l'exemple illustré, chaque zone d'analyse 16 est sensiblement de forme circulaire.
La plaque d'analyse 10 peut aussi comporter des zones d'analyse de référence (non représentées sur les figures), qui peuvent être par exemple utilisées pour la calibration de l'appareillage dans le cadre de l'analyse MALDI-TOF.
Selon l'invention, la plaque d'analyse 10 comporte un support plan 18, lequel comporte au moins une feuille de matériau papier 20 comprenant des fibres cellulosiques. La feuille de matériau papier 20 présente donc un plan d'extension correspondant au plan d'extension de la plaque d'analyse 10.
Le matériau papier est un matériau qui est constitué de fibres agglomérées, les fibres comprenant des fibres cellulosiques. Les fibres cellulosiques sont par exemple d'origine végétale. L'agglomération des fibres du matériau papier est obtenue par la technique papetière. Selon cette technique, les fibres sont dispersées dans une solution aqueuse, éventuellement avec adjonction de matières auxiliaires (charges, colorants, colle, etc.), formant ainsi une pâte à papier. La pâte à papier est déposée en une fine nappe sur une table ajourée permettant l'égouttage d'une grande partie de l'eau contenue dans la pâte à papier. Diverses opérations de pressage et de séchage de la nappe permettent l'agglomération des fibres donnant à la feuille de matériau papier 20 sa cohésion. De manière connue, une feuille de matériau papier 20 peut subir des traitements de surface visant par exemple à déposer, en surface de la feuille, une ou plusieurs couches de matériaux additifs permettant de modifier l'état de surface de la feuille de matériau papier. La feuille de matériau papier peut aussi subir des traitements mécaniques, notamment calandrage, embossage, etc.. visant là aussi à modifier l'état de surface de la feuille de matériau papier.
Dans certains modes de réalisation de l'invention, la feuille de matériau papier 20 pourra comprendre, en tant que fibres, exclusivement des fibres cellulosiques. On entend par là que la feuille de matériau papier 20 comprend, en tant que fibres, uniquement des fibres cellulosiques, à l'exception toutefois de la possible présence d'impuretés fibreuses. De préférence, la masse de ces impuretés fibreuses représente moins de 2% de la masse de matériau papier. Cette grandeur peut être mesurée selon la norme TAPPI T401.
Dans la présente demande, la masse par mètre carré de la feuille de matériau papier, aussi appelé grammage, est mesurée selon la norme ISO 536.
Toutefois, dans certains modes de réalisation, on pourra prévoir que la feuille de matériau papier comprend des fibres cellulosiques et des fibres non-cellulosiques, notamment des fibres de verre et/ou de polymères synthétiques. Des fibres de polymères synthétiques peuvent notamment comprendre des fibres de polyester, polyéthylène ou d'acide polylactique. Un des avantages de l'adjonction de fibres non-cellulosiques telles qu'envisagées ci-dessus est de permettre à la couche de papier de moins retenir d'humidité en cas d'exposition à une atmosphère humide. Parmi les fibres non- cellulosiques, on peut par exemple prévoir :
- des microfibres de verre de la société Lauscha Fiber International, par exemple fibres B-08-F ayant un diamètre de 0,8 microns en borosilicate ; - des fibres polymères synthétiques Cyphrex de la société Eastman, par exemple Cyphrextm 10001 de diamètre 2,5 microns et de longueur 2,5 millimètres en PET
- des fibres polymères synthétiques de la société Advansa, par exemple les fibres Advansa 328 NSD de longueur 6mm et avec un dtex de 1,7 en polyester ou les fibres Advansa PLA de longueur 3 mm ayant un dtex de 1,7 en PLA
En effet, il est apparu que, lors de l'utilisation de la plaque d'analyse selon l'invention, comprenant au moins une feuille de matériau papier 20, l'humidité absorbée par la feuille de matériau papier 20 pouvait ralentir l'étape de mise sous vide de la chambre d'analyse dans laquelle la feuille d'analyse est introduite pour l'analyse MALDI-TOF. Ce ralentissement peut être contrebalancé par une augmentation de la capacité de pompage de l'installation MALDI-TOF. Il peut aussi être contrebalancé par un conditionnement adéquat de la plaque d'analyse avant son utilisation. Ainsi, une plaque d'analyse 10 selon l'invention sera avantageusement conservée dans un emballage étanche vis-à-vis de l'humidité. On peut par exemple former un emballage comportant une feuille d'aluminium enfermant complètement la plaque d'analyse 10. On peut prévoir que la plaque d'analyse soit emballée sous atmosphère contrôlée, de préférence en prévoyant que l'atmosphère interne à l'emballage soit la plus sèche possible, et éventuellement en prévoyant à l'intérieur de l'emballage un agent dessicant. Notamment, on prévoira avantageusement une atmosphère interne ayant une humidité relative inférieure à 5%. La mesure d'humidité relative mesure peut s'effectuer à l'aide d'un hygromètre calibré. L'humidité relative peut alors être calculée à partir des formules définies dans la norme NF X 15-110.
Ainsi, en construisant la feuille de matériau papier 20 de telle sorte qu'elle soit moins susceptible de retenir de l'humidité en cas d'exposition à une atmosphère humide, on améliore les caractéristiques de la plaque d'analyse 10 comportant une telle feuille de matériau papier, notamment en diminuant le temps de mise sous vide pour la réalisation de l'analyse.
Cependant, dans le cas de la présence de fibres synthétiques, on prévoira de préférence que, pour la feuille de matériau papier, le ratio entre la masse de fibres non-cellulosique et la masse totale des fibres de la feuille de matériau papier soit inférieur à 50 %. Cette valeur peut être mesurée pour un papier donné selon la méthode Tappi 401.
La résistance de la feuille de matériau papier à l'absorption d'humidité peut être obtenue aussi par d'autres moyens.
Selon une variante, on peut prévoir de traiter une feuille de matériau papier, préalablement formée, en l'imprégnant d'un matériau hydrophobe, par exemple un matériau contenant de la paraffine. Parmi les matéraiux hydrophobes envisageables, on peut citer :
- Vapor Coat® 2200. E de la société Michelman ;
- Diofan® A050 de la société Solvay à base de Chlorure de
Polyvinylidene (PVDC). ;
- Aquacer 497 de la société BYK Additives & Instruments qui est une émulsion de cire à base de paraffine. Toutefois, a contrario, on peut prévoir qu'aucune feuille de matériau papier de la plaque d'analyse ne contient d'agent hydrophobe et/ou que la plaque d'analyse ne contient pas de feuille de matériau papier traitée par imprégnation d'un matériau hydrophobe contenant de la paraffine. On peut prévoir que la plaque d'analyse ne contient pas de papier ciré et/ou pas de papier paraffiné.
Selon une autre variante, on peut prévoir de traiter une feuille de matériau papier, préalablement formée, par exemple par trempage dans un acide, par exemple un acide sulfurique. Au contact de l'acide, une partie de la cellulose des fibres cellulosiques est transformée, ce qui résulte en une plus grande résistance de la feuille de matériau papier ainsi traitée à la reprise d'humidité. Comme on le verra par la suite, la plaque d'analyse 10 peut comporter d'autres éléments que la feuille de matériau papier 20.
La plaque d'analyse 10 peut comprendre plusieurs feuilles de matériau papier. Dans ce cas, les feuilles de matériau papier sont avantageusement superposées les unes sur les autres, de préférence sur l'ensemble de l'étendue de la plaque d'analyse 10 dans son plan d'extension. Les différentes feuilles de matériau papier peuvent être assemblées les une aux autres, par exemple par collage. De préférence, on utilisera dans ce cas une colle polyuréthane à un composant ou une colle polyuréthane à deux composants à base solvant (de préférence non aqueux) ou sans solvant. L'application de la colle peut se faire par aspersion ou par couchage au rouleau. Il est possible d'utiliser une colle activable aux ultraviolets. Il est également possible d'utiliser un film adhésif double face. On préférera alors un film de la plus faible épaisseur possible.
Dans le cas d'une plaque d'analyse 10 comprenant plusieurs feuilles de matériaux papier, les feuilles de matériaux papier peuvent être identiques ou pas. Les matériaux papier constitutifs de ces feuilles de matériau papier, leur grammage, et/ou leur épaisseur, etc.. peuvent être identiques ou différents. De même, les feuilles de matériaux papier peuvent avoir des dimensions différentes, par exemple au moins une dimension différente dans le plan d'extension de la plaque d'analyse 10.
Dans certains cas, comme illustré aux Figs. 2, 3A et 3B, le support 18 de la plaque d'analyse 10 est constitué exclusivement de matériau papier. Ce cas n'empêche pas que la plaque d'analyse 10 comporte par ailleurs des couches ou strates supplémentaires telles que cela sera décrit plus loin. Toutefois, on considère dans ce cas que le support 18, qui donne l'essentiel de sa rigidité mécanique à la plaque d'analyse, est constitué exclusivement de matériau papier. Dans le cas de figure d'un support constitué exclusivement de plusieurs feuilles de matériau papier, la présence d'un adhésif, notamment d'une colle, ou autre moyen d'assemblage entre les différentes feuilles de matériau papier n'empêchera pas de considérer le support comme constitué exclusivement de matériau papier.
Dans le cas où le support 18 de la plaque analyse 10 est constitué d'une unique feuille de matériau papier 20, comme illustré aux Figs. 2 et 3A, celle-ci présente de préférence un grammage supérieur ou égal à 120 grammes par mètre carré, plus préférentiellement supérieur ou égal à 150 grammes par mètre carré. Dans le cas où le support 18 de la plaque d'analyse comporte plusieurs feuilles de matériaux papier, comme illustré à la Fig. 3B, la somme des grammages des feuilles de matériaux papier du support est de préférence supérieure ou égale à 120 g par mètre carré plus préférentiellement supérieure ou égale à 150 grammes par mètre carré. Il a été en effet constaté que ce grammage permet d'obtenir une rigidité suffisante pour une manipulation aisée de la plaque d'analyse dans le cadre de son l'utilisation dans une analyse MALDI-TOF, mais surtout pour garantir ainsi une géométrie suffisamment plane, y compris après manipulation, pour ne pas perturber les mesures par MALDI-TOF.
De préférence, la plaque d'analyse 10 présente un grammage de matériau papier inférieur ou égal à 400 grammes par mètre carré, de préférence inférieur ou égal à 300 grammes par mètre carré, en une feuille ou réparti entre plusieurs feuilles. En effet, il apparaît que, même en présence d'une seule feuille de matériau papier et/ou même dans le cas où le support de la plaque d'analyse 10 est constitué exclusivement de matériau papier, un tel grammage permet d'obtenir une rigidité plus que suffisante de la plaque d'analyse. Au-delà d'un tel grammage, on risque d'augmenter la susceptibilité de la plaque d'analyse 10 à emmagasiner de l'humidité, ce dont on a vu qu'il s'agissait d'un frein à l'utilisation, en nécessitant une augmentation du temps de mise au vide de la chambre d'analyse dans un appareillage d'analyse MALDI-TOF.
Ainsi, la feuille de matériau papier 20 mise en œuvre dans la plaque analyse 10 selon l'invention présente de préférence une épaisseur qui peut être comprise entre 100 et 450 microns, mesurée selon la norme NF EN ISO 534. Dans le cas d'une plaque d'analyse comprenant plusieurs feuilles de matériau papier, l'épaisseur cumulée des feuilles de matériaux papier, après leur assemblage pour former la plaque d'analyse, est de préférence comprise entre 100 et 1000 microns, mesurée selon la norme NF EN ISO 534.
De préférence, la feuille de matériau papier 20 présente, au moins sur sa face tournée du côté de la face d'essai 12 de la plaque d'analyse 10, une faible rugosité. Par exemple cette rugosité, mesurée selon la méthode Bendtsen définie dans la norme ISO 8791-2:2013, peut avoir une valeur inférieure à 750 millilitres par minute, de préférence inférieure à 500 millilitres par minute.
Dans certains modes de réalisation de l'invention, on peut prévoir que le support 18 comporte au moins une lame support 22 sur laquelle est rapportée la feuille de matériau papier 20. Dans ce cas, le support 18 comporte ainsi au moins deux éléments, à savoir la lame support 22 et la feuille de matériau papier 20, comme illustré par exemple à la Fig. 4A.
Dans un tel cas, la lame support 22 présente de préférence une forme plane s'étendant parallèlement au plan d'extension de la plaque d'analyse 10. La lame support 22 présente une épaisseur selon la direction perpendiculaire à son plan d'extension qui est par exemple inférieure à un dixième de la plus petite dimension de la plaque mesurée dans le plan d'extension.
De préférence, en considérant la convention énoncée ci-dessus, la lame support 22 est agencée en dessous de la feuille de matériau papier 20 ou de la pluralité de feuilles de matériau papier. Ainsi, la lame support 22 présente de préférence une face inférieure qui forme la face d'appui 14 de la plaque d'analyse 10.
La lame support 22 est par exemple réalisée en matériau polymère, par exemple en polypropylène ou en matériau à base de polypropylène. Selon un exemple, la lame support est une plaque de Polypropylène Priplak® Classic noir 800, d'épaisseur 800 micron. Une telle plaque support peut être contrecollée avec une plaque de même type à l'aide d'une colle Super-Lok® 364 de la société National Starch.
Des particules et/ou fibres ou autres additifs peuvent être noyés dans le matériau polymère, notamment des particules et/ou fibres conductrices de l'électricité, notamment des particules et/ou fibres métalliques ou à base de métal et/ou des particules et/ou fibres de carbone.
Avantageusement, la lame support 22 peut être issue d'une bande de matériau obtenue par extrusion. Avantageusement, la lame support 22 peut ainsi être obtenue en bande de très grande longueur, conditionnée en rouleau ou en plaque, donc sous une présentation analogue à du matériau papier obtenu en sortie d'une machine à papier.
Avantageusement, la feuille de matériau papier 20 et la lame support 22 peuvent être assemblées l'une à l'autre, par exemple par collage. De préférence, on utilisera dans ce cas une colle polyuréthane à un composant ou une colle polyuréthane à deux composants à base solvant (de préférence non aqueux) ou sans solvant. L'application de la colle peut se faire par aspersion ou par couchage au rouleau ou par gravure directe. Il est possible d'utiliser une colle activable aux ultraviolets. Il est également possible d'utiliser un film adhésif double face. On préférera alors un film de la plus faible épaisseur possible.
Comme illustré à la Fig. 4B, le support 18 peut comporter plusieurs lames support, notamment deux lames support en matériau polymère superposées, et la feuille de matériau papier 20 est rapportée sur une face des deux lames superposées.
La lame support 22 de matériau polymère, ou la pluralité de lames supports, présente(nt) par exemple une épaisseur comprise dans la gamme allant de 0,2 à 2 millimètres. Dans ce cas de présence d'au moins une lame support 22, la feuille de matériau papier 20 peut présenter un grammage inférieur à celui envisagé dans le cas où le support 18 est constitué exclusivement de matériau papier. Par exemple, la feuille de matériau papier peut présenter un grammage compris dans la gamme allant de 60 grammes par mètre carré à 200 grammes par mètre carré.
La plaque d'analyse 10 comporte au moins une strate de matériau métallique. Une strate est entendue comme étant un élément ou une partie d'un élément de la plaque d'analyse 10 qui s'étend dans le plan d'extension de la plaque d'analyse 10. Les matériaux métalliques incluent les métaux et leurs alliages.
La strate 24 de matériau métallique est rapportée sur la feuille de matériau papier 20.
De manière préférentielle, la strate 24 de matériau métallique peut être rapportée directement sur la feuille de matériau papier 20, avec seulement interposition d'une éventuelle couche de matériau adhésif tel qu'une colle ou un film adhésif, sans interposition d'autre couche support, comme cela est illustré à la Fig. 2.
De préférence, une strate de matériau métallique peut être rapportée sur la feuille de matériau papier 20, du côté de la face d'essai 12.
La strate 24 de matériau métallique peut être par exemple une strate d'aluminium, ou d'un alliage d'aluminium. Cependant, d'autres matériaux métalliques peuvent être envisagés, par exemple l'argent ou les alliages d'argent.
Une strate 24 de matériau métallique peut être rapportée sur la feuille de matériau papier 20 par métallisation sous vide de la feuille de matériau papier 20. Dans ce cas, la strate 24 de matériau métallique peut former la surface de la face d'essai 12 de la plaque d'analyse 10. La technique de métallisation sous vide est une technique de dépôt de couche mince largement utilisée dans l'industrie papetière. Le métal à déposer est évaporé à partir d'une source de métal solide, par chauffage à haute température dans une chambre de dépôt sous vide dans laquelle un substrat, par exemple une bande de matériau papier, est introduite selon un déroulement continu. Les particules résultant de l'évaporation viennent se déposer directement sur le matériau papier sur lequel elles se condensent à l'état solide. Une telle métallisation sous vide est obtenue typiquement dans un métalliseur sous vide.
Selon une autre technique, une telle strate 24 de matériau métallique peut être rapportée sur la feuille de matériau papier 20 par métallisation par transfert. Un exemple de réalisation d'une métallisation par transfert est décrit en détail dans le document FR-2.406.523 auquel l'homme du métier pourra se rapporter. On note que dans ce cas, comme illustré aux Figs. 3A et 3B, la plaque d'analyse 10 peut comporter, en partant de la face d'essai 12 :
- une couche de résine, par exemple une résine acrylique ou époxy-acrylique 26 ;
- la strate de matériau métallique 24 ;
- une couche de colle 28, par exemple une colle Polyuréthane mono composant en phase solvant ;
- la feuille de matériau papier 20.
Un exemple d'un mode de réalisation d'un plaque d'analyse 10 selon l'invention, dans la variante de la Fig. 3A, est construit de la manière suivante. Une feuille de matériau papier 20 constituée de fibres de cellulose est obtenue à l'aide d'une machine à papier du type Foudrinier. Le papier 20 comporte de préférence au moins un agent hydrophobe qui est mélangé à la pâte à papier avant la formation de la feuille. L'agent hydrophobe qui a été utilisé est une émulsion aqueuse de Dimère d'Alkyl Cétène (AKD).
Cette feuille de papier est couchée sur ses deux faces par une solution pigmentaire (non visible sur les dessins), par exemple une solution de carbonate de calcium et de Kaolin, par la technique de couchage lame d'air. La dépose est d'environ 10 g/m2 par face. Cette feuille de matériau papier 20 possède un grammage de 250 g/m2. Sur une face supérieure de cette feuille de matériau papier 20, on applique une métallisation par métallisation transfert suivant l'enseignement du document FR-2.406.523. On forme un complexe stratifié constitué d'un film de base PET (polyéthylène téréphtalate), d'une couche de séparation (release), une couche de résine 26 acrylique d'environ 2 microns et un dépôt d'alliage d'aluminium 24 (d'une épaisseur de 10 à 100 nanomètres, de préférence 15 à 50 nanomètres, de préférence environ 20 nanomètres), déposé sous vide sur la couche de résine 26 pour former la strate de matériau métallique 24. Cette couche métallique peut être mesurée par des appareillages commerciaux de mesure d'épaisseur, notamment ceux utilisant les méthodes radiométriques (fluorescence X ou rétrodiffusion p) permettant d'accéder à des résolutions de mesure comprises entre 100 nanomètres et quelques Angstroms. Ce complexe est assemblé, avec la strate de matériau métallique 24 tournée vers la feuille de papier, à l'aide d'une couche de colle solvant à un composant 28, contre la face supérieure de la feuille de papier 20. La colle 28 peut être l'une de celle évoquée plus haut. La quantité de colle utilisée peut être par exemple de 3 à 12 grammes par mètre carré. Par la suite, grâce à la couche de séparation, par exemple à base de stéaro-chlorure de chrome, le film de base est détaché afin de laisser la couche de colle 28, la métallisation 24 et la couche de résine 26 sur le papier. On note que, dans ce mode de réalisation, la surface de la face d'essai 12 de la plaque d'analyse 10 est formée par la couche de résine 26, non conductrice de l'électricité, qui recouvre la strate 24 de matériau métallique.
Bien entendu, une telle plaque d'analyse 10 peut comporter comme indiqué plus haut d'autres feuilles de matériau papier et/ou éventuellement une ou plusieurs lames support.
Ainsi, on a illustré à la Fig. 3B une variante de réalisation qui comprend tous les éléments du mode de réalisation de la Fig. 3A, à part que la feuille de matériau papier 20 présente un grammage de 80 g/m2, et qui comprend une feuille de matériau papier supplémentaire 20' assemblée contre la face inférieure de la feuille de matériau papier 20, donc la face opposée à celle sur laquelle est rapportée la strate 24 de matériau métallique. L'assemblage peut être fait par collage à l'aide d'une couche de colle 28'. La colle 28' peut être l'une de celle évoquée plus haut. La feuille de matériau papier supplémentaire 20' présente par exemple un grammage de 170 g/m2.
Dans un autre mode de réalisation, un film en PET préalablement recouvert d'une couche antiadhésive à base de stéaro-chlorure de chrome est couché avec une résine Epoxy/Acrylique qui est séchée. Cette face enduite est introduite dans un métalliseur afin d'y recevoir un dépôt d'aluminium d'environ 20 nanomètre. La face métallisée est enduite d'une colle polyuréthane mono composant en phase solvant par un couchage en gravure directe. Elle est séchée avant d'être contre collée avec un papier Satimat® 90 g/m2 de la société Arjowiggins. Le lendemain, le film en PET est pelé de la surface du papier laissant le dépôt métallique visible sur le papier. Cet ensemble est ensuite collé sur un ensemble de support comportant au moins lame support, par exemple à l'aide d'une colle Super-Lok® 364 de la société National Starch. De préférence, l'ensemble de support comporte deux lames support dont chacune est formée d'une plaque de Polypropylène Priplak® Classic noir 800, d'épaisseur 800 microns. Les deux lames support sont par exemple collées à l'aide d'une colle Super-Lok® 364 de la société National Starch.
De manière générale, des essais ont montré qu'une plaque d'analyse 10 comportant une strate de matériau métallique, notamment d'aluminium ou d'alliage d'aluminium, rapportée sur une face supérieure d'une feuille de matériau papier 20, comme illustré aux Figs. 3A ou 3B, peut former une plaque d'analyse 10 parfaitement satisfaisante permettant d'obtenir des résultats d'analyses avec la même fiabilité qu'une plaque de référence.
Notamment, des résultats satisfaisants ont été obtenus avec une strate de matériau métallique, notamment d'aluminium ou d'alliages d'aluminium, présentant une épaisseur inférieure à 0,5 micron, voir même inférieure à 0,1 micron, voir inférieure à 0,05 micron. Cette strate de matériau métallique de faible épaisseur peut être la seule strate électriquement conductrice de la plaque d'analyse 10, y compris en l'éventuelle présence, au-dessus de la strate de matériau métallique 24, d'une couche de matériau non conducteur, en l'occurrence la couche de résine 26.
Toutefois, des essais ont montré qu'une strate 24 de matériau métallique, et plus particulièrement d'aluminium ou d'alliage d'aluminium, présente de préférence une épaisseur supérieure à 0,01 micron. Une telle épaisseur permet notamment à la strate de ne pas être dégradée lors de la mise sous vide de la chambre d'analyse.
On notera que des essais réalisés en l'absence de strate de matériau métallique n'ont pas permis d'obtenir des résultats satisfaisants lors de l'analyse par spectrométrie de masse selon la technique MALDI-TOF.
Par exemple, une plaque d'analyse constituée exclusivement par une feuille de papier Powercoat HD 230 de la société Arjowiggins, qui est un papier couché extrêmement lisse dont l'épaisseur est de 222 microns et le grammage 219 g/m2, n'a pas donné satisfaction, avec seulement quelques pics détectés mais avec un spectre sans qualité. D'autres essais avec des plaques d'analyse ne comprenant pas de strate de matériau métallique rapportée sur la surface d'essai n'ont pas donné satisfaction, y compris avec une feuille de matériau papier ayant un grammage de 300 g/m2.
De préférence, chaque zone d'analyse 16 de la face d'essai 12 est repérée au moins visuellement sur la face d'essai 12.
Pour cela, une zone d'analyse peut être délimitée sur la face d'essai par la présence d'une déformation mécanique de la plaque d'analyse 10, notamment par une déformation mécanique de la feuille de matériau papier 20.
Par exemple, dans l'exemple illustré sur les Figs. 5A et 5B, pour délimiter au moins une zone d'analyse 16, la feuille de matériau papier 20 est déformée mécaniquement selon le contour de la zone d'analyse, dans ce cas précis selon une partie du contour de la zone d'analyse. En effet, on voit que la zone d'analyse 16 est une zone circulaire dont le contour est délimité en partie par une gorge 29. La gorge 29 est ici en deux parties, chacune en forme d'arc de cercle, et les deux parties se font face. Cette gorge 29 peut être obtenue par enfoncement de la face d'essai 12 selon la direction de l'épaisseur de la plaque d'analyse 10, avec déformation plastique de la feuille de matériau papier 20, obtenant ainsi une déformation mécanique permanente.
Dans la variante illustrée sur les Figs. 6A et 6B, la feuille de matériau papier est déformée mécaniquement sur toute l'étendue de la zone d'analyse, sous la forme d'une cuvette à fond plat.
Dans la variante illustrée sur les Figs. 7A et 7B, la feuille de matériau papier est déformée mécaniquement sur toute l'étendue de la zone d'analyse 16, et aussi autour de la zone d'analyse 16 pour laisser subsister un bourrelet en relief 30 qui s'étend dans l'exemple illustré selon un cercle le long du contour de la zone d'analyse 16. La zone d'analyse 16 est ainsi en creux par rapport au sommet du bourrelet 30, formant une cuvette comme dans l'exemple précédent.
Dans les exemples illustrés aux Figs. 5B, 6B et 7B, la feuille de matériau papier 20 est surmontée d'une strate 24 de matériau métallique formant la face d'essai 12, et cette strate de matériau métallique 24 est elle aussi déformée pour former la gorge 29 ou la cuvette à fond plat ou le bourrelet 30. On obtient le même résultat avec une plaque d'analyse présentant la structure illustrée à la Fig. 3 dans lequel la strate 24 de matériau métallique est obtenue par métallisation par transfert, y compris avec la présence éventuelle additionnelle d'une ou plusieurs lames support 22 comme évoqué ci-dessus.
La profondeur de la déformation mécanique permanente est par exemple comprise entre 10 et 300 microns.
On comprend que, dans les deux cas, la déformation mécanique qui délimite la zone d'analyse 16 permet non seulement de la délimiter visuellement, mais permet aussi de former une barrière à la propagation de l'échantillon, et/ou du ou des réactifs, et/ou de la matrice lors du dépôt sur la plaque d'analyse 10.
Grâce à la faible résistance mécanique de la feuille de matériau papier 20 selon la direction d'un enfoncement selon son épaisseur, cette déformation mécanique peut aisément être réalisée selon les techniques classiques d'embossage utilisées dans l'industrie papetière. Notamment un tel embossage peut être réalisé en ligne, par exemple lorsque le support est encore sous la forme d'une bande continue.
Par ailleurs, pour délimiter au moins une zone d'analyse 16, la plaque d'analyse peut comporter un marquage par une encre. Un tel marquage est de préférence apposé sur la face d'essai 12.
Le marquage peut présenter par exemple une géométrie analogue à la déformation mécanique illustrée dans les exemples des Figs. 5A, 6A ou 7A.
Selon un mode de réalisation avantageux, le marquage peut être réalisé sur la face d'essai 12, de préférence sur toute l'étendue de la zone d'analyse 16, avec une encre présentant, une fois séchée, un angle de mouillage pour l'échantillon et/ou la matrice qui est différent de l'angle de mouillage de la surface du matériau constitutif de la face d'essai 12, pour l'échantillon et/ou la matrice. De préférence, l'angle de mouillage entre l'encre et l'échantillon et/ou la matrice est plus faible que l'angle de mouillage entre la surface du matériau constitutif de la face d'essai 12 et l'échantillon et/ou la matrice, par exemple avec l'encre AGFA Orgacon™ EL- P3145 vendue par AGFA GEVAERT N.V. ou ses affiliés. En d'autres termes, la surface de l'encre, lorsqu'elle est sèche, est plus hydrophile que la surface de la face d'essai 12. De cette manière, l'encre permet de faciliter le dépôt de l'échantillon et ou la matrice en phase liquide, mais la différence d'angle de mouillage entre l'encre et la surface du matériau constituant la face d'essai 12 forme une barrière qui empêchera, ou tout du moins limitera, l'extension du dépôt, en cantonnant celui-ci à l'intérieur de la zone d'analyse 16 marquée par l'encre. Toutefois on peut prévoir aussi que l'encre soit déposée non pas sur la zone d'analyse 16, mais autour de celle-ci, et on peut alors par exemple prévoir que l'angle de mouillage entre l'encre et l'échantillon et/ou la matrice est plus grand que l'angle de mouillage entre la surface du matériau constitutif de la face d'essai 12 et l'échantillon et/ou la matrice. A titre d'exemple cela est réalisé avec l'encre DuPont™ 5064H vendue par E. I. du Pont de Nemours and Company ou ses affiliés, qui présente un angle de mouillage plus élevé avec de l'eau ou de l'acide formique que la surface du support papier métallisé transfert. Cette encre est conductrice de l'électricité. Les valeurs ci-dessous sont des angles de mouillage en degrés en fonction du temps mesurés avec un appareil Dynamic Absorption Tester de Testing Machines, Inc (TMI) qui utilise la méthode TAPPI 558.
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Selon un mode de réalisation avantageux, le marquage peut être réalisé sur la face d'essai 12, de préférence sur toute l'étendue de la zone d'analyse 16, avec une encre conductrice de l'électricité.
Le marquage par dépôt d'encre peut être réalisé par toute technique connue, notamment toute technique utilisée dans l'industrie de l'impression telle que par exemple une impression par électrophotographie, une impression par jet d'encre, par sérigraphie, par flexographie ou une impression offset.
Bien entendu, il est possible de combiner la délimitation de la zone d'analyse par déformation mécanique de la feuille de matériau papier et la délimitation de la zone d'analyse par marquage par une encre. Ainsi, dans l'exemple décrit illustré à la Fig. 5A, on peut prévoir de marquer avec une encre la zone circulaire délimitée par la gorge 28. Dans les exemples illustrés aux Figs. 6A et 7Â, on peut prévoir de marquer le fond plat de la cuvette avec une encre.
Dans les exemples mentionnés ci-dessus, la zone d'analyse 16 est une surface lisse, présentant par exemple une rugosité comparable, voire inférieure, à celle de la feuille de matériau papier 20.
Cependant, pour faciliter l'étape de dépôt, il est possible de prévoir que la surface de la zone d'analyse 16 soit structurée. De préférence, cette structuration sera obtenue par déformation mécanique de la surface, et notamment par déformation mécanique de la feuille de matériau papier 20. Cette structuration peut ainsi former, à la surface de la zone d'analyse 16, des creux et des reliefs selon une géométrie régulière ou irrégulière. La profondeur relative entre les creux et les reliefs de la surface de la zone d'analyse structurée peut par exemple être compris entre 10 et 300 microns. La géométrie et la profondeur relative des creux et des reliefs de la surface de la zone d'analyse 16 structurée peut être évolutive sur l'étendue d'une zone d'analyse 16, par exemple par variation de forme, de taille, de pas et/ou de profondeur des creux ou des reliefs.
Sur les Figs. 12A à 12F, on a illustré différentes structurations possibles.
A la Fig. 12A, la structuration est formée de lignes circulaires concentriques 52, en creux ou en relief par rapport à la surface de la zone d'analyse 16. Les lignes circulaires sont par exemple équidistantes les unes des autres, mais elles pourraient avoir un écartement évolutif, non constant. Les lignes circulaires 52 sont par exemple réparties sur toute l'étendue de la zone d'analyse 16. Les lignes circulaires sont par exemple concentriques avec un contour circulaire 54 de la zone d'analyse 16.
A la Fig. 12B, la structuration est formée de lignes radiales 56 issues d'un même point central de la zone d'analyse 16, en creux ou en relief par rapport à la surface de la zone d'analyse 16. Les lignes radiales sont par exemple écartées angulairement les unes des autres d'un angle constant, mais elles pourraient avoir un écartement évolutif, non constant. Les lignes radiales sont par exemple réparties sur toute l'étendue de la zone d'analyse 16. Les lignes radiales sont par exemple issues du centre d'un contour circulaire 54 de la zone d'analyse 16.
A la Fïg. 12C, la structuration est formée de lignes circulaires concentriques 52, comme décrit à la Fig. 12A, et de lignes radiales 56, comme décrit à la Fig. 12B.
A la Fig. 12D, la structuration est formée de lignes, en creux ou en relief par rapport à la surface de la zone d'analyse 16, formant un quadrillage 54. Le quadrillage 58 peut être un quadrillage carré formé de deux séries perpendiculaires de lignes droites parallèles, mais on peut aussi envisager deux séries non perpendiculaires de lignes droites parallèles, ou plus de deux séries de lignes parallèles, chaque série ayant chacune une orientation différente. Au sein d'une série de lignes parallèles, les lignes sont par exemple équidistantes les unes des autres, mais elles pourraient avoir un écartement évolutif, non constant. Le quadrillage 58 s'étend par exemple sur toute l'étendue de la zone d'analyse 16. Cependant, le quadrillage pourrait être limité à une partie seulement de la zone d'analyse 16, par exemple à une couronne périphérique, de la zone d'analyse 16.
A la Fig. 12E, la structuration est formée d'une multitude d'éléments géométriques répétés, formant un motif répétitif 60, en creux ou en relief par rapport à la surface de la zone d'analyse 16. A la Fig. 12F, la structuration est formée d'un motif répétitif en damier 60, en creux ou en relief par rapport à la surface de la zone d'analyse 16. Dans les deux cas, le motif 60, 62 s'étend par exemple sur toute l'étendue de la zone d'analyse 16. Cependant, le motif pourrait être limité à une partie seulement de la zone d'analyse 16, par exemple à une couronne périphérique de la zone d'analyse 16.
On peut prévoir que, sur la face active 12 de la plaque d'analyse 10, seule la ou les zones d'analyse soit munie(s) d'une structuration telle que décrite ci-dessus. Cependant, on peut aussi prévoir qu'au moins une partie de la face active 12 de la plaque d'analyse 10, en dehors de la zone d'analyse 16 ou des zones d'analyse 16, soit aussi munie d'une structuration telle que décrite ci-dessus, voire que l'intégralité de la face active 12 de la plaque d'analyse 10 soit munie d'une structuration telle que décrite ci- dessus.
Les exemples de réalisation d'une plaque d'analyse 10 selon l'invention permettent de réaliser la plaque d'analyse 10 à l'aide de matériaux et de techniques couramment utilisées dans l'industrie papetière, permettant d'obtenir une plaque d'analyse 10 à très bas coût, tant du point de vue du coût des matériaux mis en œuvre que, de manière encore plus importante, du point de vue du coût des procédés de fabrication mis en œuvre.
En effet, le coût des matériaux papier et de leur production et de leur mise en œuvre pour la fabrication de plaques d'analyse selon invention est très faible comparé au coût des matériaux et de production des plaques d'analyse connues jusqu'à présent. Les plaques d'analyse métalliques utilisées jusqu'à présents sont en effet onéreuses à produire. Les plaques d'analyse en matériau polymère connues jusqu'à présent, généralement réalisées par moulage par injection de plaques d'analyse individuelles, sont elles aussi relativement onéreuses.
La fabrication d'une plaque d'analyse 10 conforme à l'invention peut être réalisée, comme illustré à la Fig. 8, par découpe de plaques d'analyse individuelles 10 en partant d'une bande de matériau 32 produite à très faible coût. Cette bande de matériau 32 peut comprendre l'ensemble des feuille(s) de matériau papier 20, lame(s) support 22, strate 24 de matériau métallique, etc.. envisagées pour la réalisation de la plaque d'analyse 10 selon l'invention, pré-assemblées dans un complexe stratifié susceptible d'être obtenu en ligne en bande de grande longueur. De même, les opérations de marquage par déformation mécanique ou les opérations de marquage par dépôt d'encre peuvent utiliser les techniques correspondantes utilisées dans l'industrie de l'impression, là encore mises en œuvre en ligne pour des bandes de grandes longueurs. Ainsi, on peut prévoir une opération de découpe de la plaque d'analyse 10 à sa dimension finale dans un tel complexe stratifié préassemblé, comme étant une étape ultime dans le procédé de fabrication, tout du moins une étape postérieure à la réalisation du complexe stratifié. Bien entendu, certaines étapes comme le marquage par déformation mécanique ou par dépôt d'encre peuvent être réalisées après une telle opération de découpe.
Il en résulte un coût de production d'une plaque d'analyse très bas, en particulier dans le cas de l'utilisation de procédés de fabrication en masse issus des techniques papetières, notamment des procédés de type « Roll to Roll », permettant une automatisation du procédé de fabrication, sans intervention humaine ou avec une intervention humaine minimale.
Contrairement à toute attente, il est apparu que des plaques d'analyse réalisées conformément aux enseignements de l'invention permettent d'obtenir, dans un appareillage standard, une caractérisation des échantillons conformes à ce qui est obtenu généralement avec les plaques d'analyse préexistantes.
En effet, avec des plaques d'analyse telles que décrites ci-dessus en référence à la Fig. 3A, il a été possible de détecter, par l'analyse MALDI-TOF, avec la même précision qu'avec une plaque de référence de l'art antérieur de nombreuses souches bactériennes, peptides ou protéines. Notamment, l'identification sur les plaques d'analyse selon l'invention était aussi bonne que l'identification sur les plaques d'analyse VITEK® MS commercialisées et étaient 100% correctes. Les probabilités d'identification étaient similaires avec en moyenne 98,4%, pour la référence, 96,5% pour une plaque d'analyse selon l'invention, telle que décrite en relation avec la Fig. 3A, en version lisse, et 98% pour une plaque d'analyse selon l'invention, elle aussi telle que décrite en relation avec la Fig. 3A, mais en version structurée. Les spectres MS étaient également comparables, présentant la même résolution, le même nombre de pics et la même plage dynamique. Tous les peptides et protéines testés avec la matrice différente ont été détectés sur plaque d'analyse selon l'invention, en version lisse, avec la même qualité que sur la cible de référence. Les tests ont porté sur 22 espèces bactériennes et sur des levures, ayant des masses comprises entre 2000 et 20000 Daltons, et avec des peptides et protéines dont la masse était comprise entre 300 et 46000 Daltons.
Une plaque selon l'invention est donc avantageusement utilisée en tant que support d'échantillon dans un procédé d'analyse de l'échantillon par spectrométrie de masse selon la technique MALDI-TOF.
Pour l'utilisation dans un appareillage standard de spectrométrie de masse selon la technique MALDI-TOF, les inventeurs ont conçu un adaptateur 34 qui permet d'utiliser les plaques d'analyse 10 selon l'invention, notamment les plaques d'analyse selon les Figs. 3A et 3B décrites ci-dessus, qui présentent une épaisseur réduite par rapport aux plaques d'analyse conventionnelles.
L'adaptateur 34 maintient la plaque d'analyse 10 par son pourtour et permet de positionner cette feuille de matériau papier 20 dans la chambre d'analyse de l'appareillage de sorte que la face d'essai 12 de la plaque d'analyse 10 se situe à une position équivalente, selon la direction perpendiculaire à son plan d'extension, à celle d'une plaque d'analyse conventionnelle, malgré la différence d'épaisseur entre les deux.
Selon un exemple d'un adaptateur 34, illustré sur les Figs. 9A, 9B, 10 et 11 l'adaptateur 34 comporte un plateau 36 et un cadre 38.
Le plateau 36 présente une forme plane, et ses dimensions sont égales à celle de la plaque d'analyse 10 dans le plan d'extension de la plaque. Le plateau 36 présente une face supérieure 40 destinée à recevoir la face d'appui 14 de la plaque d'analyse 10, et une face inférieure 41.
Le cadre 38 se présente sous la forme d'un profilé qui s'étend dans un plan parallèle au plan d'extension de la plaque d'analyse 10, selon le pourtour de la plaque d'analyse 10. Le cadre 38 présente ainsi une face supérieure 42 et une face inférieure 44. Dans la face inférieure 44, un dégagement 45 est aménagé qui présente le contour exact de la plaque d'analyse 10. La profondeur du dégagement 45, selon la direction perpendiculaire au plan d'extension de la plaque d'analyse 10, est de préférence supérieure à l'épaisseur de la plaque d'analyse 10. Dans l'exemple illustré, cette profondeur correspond sensiblement à la somme de l'épaisseur de la plaque d'analyse 10 avec l'épaisseur du plateau 36, lequel peut alors être lui aussi reçu, au moins en partie, dans le dégagement 45. Le cadre 38 délimite, dans sa face supérieure 42, une ouverture 46 dont les dimensions dans le plan d'extension sont suffisantes pour laisser apparaître l'intégralité des zones d'analyse 16 de la plaque d'analyse 10 au travers de cette ouverture 46 lorsque la plaque d'analyse 10 est engagée dans le dégagement 45 de la face inférieure 44 du cadre 38, la face d'essai 12 vers le haut. En revanche, l'ouverture 46 présente, dans le plan d'extension de la plaque 10, des dimensions inférieures à celle de la plaque 10 de telle sorte que le fond du dégagement 45 du cadre 38 forme une surface de butée 48 contre laquelle vient s'appuyer le pourtour de la face d'essai 12 de la plaque d'analyse 10.
Selon un mode de réalisation avantageux, l'adaptateur 34 comporte aussi un mécanisme de serrage qui provoque le serrage de la plaque d'analyse 10 entre le cadre 38 et le plateau 36. Dans l'exemple illustré, le mécanisme de serrage est un mécanisme magnétique comportant une série d'aimants 50. Dans l'exemple illustré, les aimants 50 sont portés par le cadre 38, si bien que le plateau 36 est réalisé au moins en partie en matériau ferromagnétique, par exemple en métal ferromagnétique et/ou comporte lui aussi des aimants correspondants disposés avec leur polarité magnétique inversée. Bien entendu, la disposition inverse pourrait être prévue. D'autres mécanismes de serrage pourraient être envisagés, par exemple à pinces ou à vis. Cependant, le mécanisme magnétique présente l'avantage d'une mise en œuvre très facile et procure une force de serrage suffisante pour maintenir la plaque 10 sans l'endommager, notamment en évitant un serrage excessif et s'adaptant à une gamme variable d'épaisseur de papier sans modification de l'adaptateur.
Suivant la profondeur prévue pour le dégagement 45, soit la face inférieure 44 du plateau 38, soit la face inférieure du plateau 36 est susceptible de venir reposer contre une face d'accueil de la chambre d'analyse. La profondeur du dégagement 45 du cadre 38 et l'épaisseur du plateau 36 déterminent donc, suivant que l'une ou l'autre repose contre la face d'accueil de la chambre d'analyse, la position de la face d'essai 12 de la plaque d'analyse 10 dans la chambre d'analyse, selon une direction perpendiculaire au plan d'extension de la plaque 10. Aussi, la profondeur du dégagement 45 du cadre 38 et l'épaisseur du plateau 36 sont calculées pour que la face d'essai 12 de la plaque d'analyse 10 soit agencée, selon une direction perpendiculaire au plan d'extension de la plaque 10, à une altitude voulue pour le bon fonctionnement de l'appareillage.
L'utilisation d'un adaptateur 34 permet d'éviter tout endommagement de la plaque d'analyse 10 lors de sa manipulation, notamment lors de son introduction dans l'appareillage de spectrométrie de masse. Il est en effet ainsi possible de manipuler uniquement l'adaptateur 34, qui peut être réalisé en matériau plastique et/ou en métal. Cela évite notamment de risquer de plier la plaque d'analyse 10 lorsque celle-ci est de faible épaisseur, par exemple avec un support 18 constitué seulement d'une ou plusieurs feuilles de matériaux papier 20, 20', sans présence d'une lame support additionnelle.
De plus, lorsque les dimensions de l'adaptateur 34 sont prévues pour positionner la face d'essai 12 de la plaque d'analyse 10 à la hauteur, par rapport à la face d'accueil de la chambre d'analyse, identique à celle de la face d'essai d'une plaque d'analyse conventionnelle, un même appareillage peut être utilisé indifféremment avec une plaque d'analyse conventionnelle ou avec une plaque d'analyse selon l'invention sans nécessiter de recalage des pics de masse. L'invention n'est pas limitée aux exemples décrits et représentés car diverses modifications peuvent y être apportées sans sortir de son cadre.

Claims

REVENDICATIONS
1 - Plaque d'analyse (10) comportant au moins une zone d'analyse (16) destinée à recevoir un échantillon à analyser par spectrométrie de masse selon la technique MALDI-TOF, du type comprenant au moins une face d'essai (12) sur laquelle est délimitée au moins une zone d'analyse (16), du type dans lequel la plaque comporte un support plan (18), caractérisée en ce que le support (18) comporte au moins une feuille (20) de matériau papier comprenant des fibres cellulosiques, et en ce que la plaque d'analyse (10) comporte au moins une strate (24) de matériau métallique.
2 - Plaque d'analyse selon la revendication 1, caractérisée en ce que la strate (24) de matériau métallique est rapportée sur la feuille de matériau papier (20) du côté de la face d'essai (12).
3 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la strate (24) de matériau métallique est rapportée sur la feuille de matériau papier (20) par métallisation sous vide de la feuille de matériau papier (20).
4 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la strate (24) de matériau métallique est rapportée sur la feuille de matériau papier (20) par métallisation par transfert.
5 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la strate de matériau métallique (24) présente une épaisseur inférieure à 0,5 micron.
6 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la strate de matériau métallique (24) comporte de l'aluminium.
7 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la feuille de matériau papier (20) comprend, en tant que fibres, exclusivement des fibres cellulosiques. 8 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que la feuille de matériau papier (20) comprend des fibres cellulosiques et des fibres synthétiques, notamment des fibres polymères synthétiques.
9 - Plaque d'analyse selon la revendication 8, caractérisée en ce que la feuille de matériau papier (20) comprend des fibres cellulosiques et des fibres synthétiques, avec, en masse, plus de fibres cellulosiques que de fibres synthétiques.
10 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le matériau papier de la feuille de matériau papier (20) comporte au moins un agent hydrophobe.
11 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la feuille de matériau papier (20) présente un grammage supérieur ou égal à 120 grammes par mètre carré, de préférence supérieur ou égal à 150 grammes par mètre carré.
12 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la feuille de matériau papier (20) présente un grammage inférieur ou égal à 400 grammes par mètre carré, de préférence inférieur ou égal à 300 grammes par mètre carré.
13 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que le support (18) est constitué exclusivement de matériau papier.
14 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications 1 à 10, caractérisée en ce que le support (18) comporte au moins une lame support (22) sur laquelle est rapportée la feuille de matériau papier (20).
15 - Plaque d'analyse selon la revendication 14, caractérisée en ce que le support (18) comporte au moins une lame support (22) en matériau polymère sur laquelle est rapportée la feuille de matériau papier (20). 16 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications 14 ou 15, caractérisée en ce que le support (18) comporte deux lames de matériau polymère (22) superposées, et en ce que la feuille de matériau papier (20) est rapportée sur une face d'une des deux lames superposées (22).
17 - Plaque d'analyse selon la revendication 15, caractérisée en ce que la lame de matériau polymère (22) présente une épaisseur comprise dans la gamme allant de 0,2 à 2 millimètres.
18 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications 14 à 17, caractérisée en ce que la feuille de matériau papier présente un grammage compris dans la gamme allant de 60 grammes par mètre carré à 200 grammes par mètre carré.
19 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications 14 à 18, caractérisée en ce que la feuille de matériau papier (20) est collée sur la lame support (22).
20 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la feuille de matériau papier comporte au moins une déformation obtenue mécaniquement selon le contour d'au moins une zone d'analyse (16), délimitant ainsi l'au moins une zone d'analyse (16).
21 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce qu'au moins une zone d'analyse (16) sur la feuille de matériau papier (20) comporte une déformation obtenue mécaniquement, sur toute l'étendue de ladite zone d'analyse (16).
22 - Plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la plaque d'analyse (10) comporte un marquage par une encre délimitant au moins une zone d'analyse (16).
23 - Utilisation d'une plaque d'analyse selon l'une quelconque des revendications 1 à 22 en tant que support d'échantillon dans un procédé d'analyse de l'échantillon par spectrométrie de masse selon la technique MALDI-TOF. 24 - Utilisation selon la revendication 23, caractérisée en ce que la plaque d'analyse est utilisée avec un adaptateur (34) qui maintient la feuille de matériau papier (20) par son pourtour.
25 - Utilisation selon la revendication 24, caractérisée en ce que l'adaptateur (34) comporte un plateau (36), un cadre (38) et un mécanisme de serrage (50) qui provoque le serrage de la plaque d'analyse entre le cadre (38) et le plateau (36), le cadre (38) coopérant avec le pourtour de la plaque d'analyse (10) et comportant une ouverture (46) laissant apparaître au moins une zone d'analyse (16) de la plaque d'analyse (10).
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