WO2018124708A1 - 용안육 추출물을 함유하는 숙취 예방 또는 해소용 조성물 - Google Patents

용안육 추출물을 함유하는 숙취 예방 또는 해소용 조성물 Download PDF

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hangover
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양현옥
배나영
이환
김준기
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한국과학기술연구원
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    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH

Definitions

  • the present invention relates to the use of alcoholic hangover prevention and / or hangover elimination of the long-term meat extract having an effect of improving the hangover phenomenon, alcohol dehydrogenase (ADH), and acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) activation after alcohol consumption.
  • ADH alcohol dehydrogenase
  • ADH acetaldehyde dehydrogenase
  • hangover beverage market Due to the frequent drinking and heavy drinking in modern society, there is a growing interest in drugs or drinks that can eliminate hangovers.
  • the hangover beverage market has grown annually, surpassing 100 billion won in sales, and is attracting attention from overseas markets as well (Kim, Eon-Kyung, Hangover Beverage Market, Korea Food Information Service, Food World, 2009).
  • a hangover is a symptom of headache, diarrhea, anorexia, nausea, vomiting, chills, and cold sweating after drinking alcohol.
  • Objective symptoms include perception, decreased motor performance, hematologic changes, and hormonal changes.
  • the causes of hangovers are known to be dehydration, toxicity of alcohols and alcohol metabolites (acetaldehyde, formaldehyde, acetone, etc.), nutrient deficiencies due to malabsorption (lack of blood sugar, vitamins, minerals) and the like.
  • the degree of hangover varies greatly depending on the individual's genetic variation and environmental conditions (nutrition, exercise, dehydration, health) (Kwon et al., Journal of the Korean Society for Applied Drugs, 2005, 13, 107).
  • alcohol After drinking alcohol, alcohol is metabolized through three pathways.When the concentration of ethanol is low, alcohol dehydrogenase and acetaldehyde dehydrogenase present in the gastrointestinal tract or liver are used. It is metabolized to acetaldehyde and acetic acid by the microsomal ethanol oxidizing system (MEOS) present in the endoplasmic reticulum, and then carbon dioxide (CO 2 ) through the action of catalase present in the peroxisome. ) And water (H 2 O).
  • MEOS microsomal ethanol oxidizing system
  • CO 2 carbon dioxide
  • H 2 O water
  • the metabolic system described above works smoothly and does not cause any symptoms caused by alcohol.However, when a large amount of alcohol is introduced, the balance of the metabolic system is destroyed, which prevents maintaining homeostasis. Feeling, loss of concentration, heartburn and indigestion can occur, and liver dysfunction can occur in the long term.
  • One example provides an alcoholic hangover prevention and / or hangover prevention pharmaceutical composition containing one or more selected from the group consisting of extracts of longan arillus, dried products of the extract and concentrates of the extract as an active ingredient.
  • Another example provides an alcoholic hangover prevention and / or hangover food composition containing at least one selected from the group consisting of extracts of longan arillus, dried products of the extract and concentrates of the extract as an active ingredient.
  • the food may be a beverage.
  • Another example includes administering at least one effective amount selected from the group consisting of extracts of longan arillus, dried products of the extract and concentrates of the extracts to a subject in need of preventing and / or eliminating hangovers.
  • alcoholic hangover prevention and / or hangover is provided.
  • Another example is for use in one or more alcoholic hangover prevention and / or hangover pharmaceutical compositions and / or food compositions selected from the group consisting of extracts of longan arillus, dried products of the extracts and concentrates of the extracts. Provides use.
  • the extract derived from longan arillus acts to rapidly recover from the loss of exercise and sleep-induced symptoms occurring after alcohol consumption, and increases the activity of alcohol dehydrogenase and acetaldehyde dehydrogenase to increase alcohol metabolism. By promoting it, it is suggested that it is effective in relieving hangover.
  • the extract of the longan arillus to improve the motor performance degradation phenomenon occurs in the alcohol-administered mouse, and also to improve the sleep-induced symptom by alcohol administration, the mouse administered the alcohol It is suggested that there is an effect of increasing the activity of alcohol dehydrogenase (ADH) and acetaldehyde dehydrogenase (ALDH) in liver tissue.
  • ADH alcohol dehydrogenase
  • ADH acetaldehyde dehydrogenase
  • One example provides an alcoholic hangover prevention and / or hangover relief pharmaceutical composition containing as an active ingredient at least one selected from the group consisting of yongan meat extract, dried product of the extract, and concentrate of the extract.
  • Another example provides an alcoholic hangover prevention and / or hangover food composition containing at least one selected from the group consisting of a long-term meat extract, a dried product of the extract, and a concentrate of the extract as an active ingredient.
  • Another example provides an alcoholic hangover prevention and / or hangover food composition containing at least one selected from the group consisting of extracts of longan arillus, dried products of the extract and concentrates of the extract as an active ingredient.
  • the food may be a beverage.
  • Another example may include an effective amount of an extract of longan arillus, one or more selected from the group consisting of dried extracts and concentrates of the extracts, or the above-described alcoholic hangover prevention and / or hangover pharmaceutical composition or food composition.
  • An alcoholic hangover prevention and / or hangover prevention method is provided, the method comprising administering to a subject in need thereof.
  • Another example is for use in one or more alcoholic hangover prevention and / or hangover pharmaceutical compositions and / or food compositions selected from the group consisting of extracts of longan arillus, dried products of the extracts and concentrates of the extracts. Provides use.
  • the pharmaceutical composition and food composition are provided.
  • It provides an alcoholic hangover prevention and / or hangover relief comprising a pharmaceutical composition as an active ingredient.
  • Another example is
  • It provides an alcoholic hangover prevention and / or hangover relief comprising a food composition as an active ingredient.
  • composition in another embodiment, the pharmaceutical composition and food composition,
  • It provides an alcoholic hangover prevention and / or hangover relief comprising a pharmaceutical composition as an active ingredient.
  • Another example is
  • It provides an alcoholic hangover prevention and / or hangover relief comprising a food composition as an active ingredient.
  • 'hangover' means an unpleasant physical condition caused by ingesting an alcoholic beverage (ethanol) such as alcohol more than its metabolic ability.
  • Alcohol ethanol
  • Alcohol is metabolized to acetaldehyde and remains in the body, causing hangover symptoms.
  • Hangovers can be a significant phenomenon after drinking at night and waking up the next morning.
  • Hangovers unlike acute alcoholism, are not a direct risk to life, but can often be accompanied by significant discomfort, such as motion sickness and headaches.
  • hangover prevention and / or amelioration effects provided herein are administered before, concurrently, or after ingestion of alcoholic beverages to collectively refer to the effects of preventing or reducing hangover symptoms as compared to when they are not administered. can do.
  • 'extract' may be used to mean any one of the extract and the dried product dried the extract, and the concentrate concentrated the extract.
  • Yongan refers to alfalfa of longan tree, and the herbal name is Longan Arillus.
  • “Gobon” is a drug plant belonging to the family Apiaceae, the herbal name is Angelicae tenuissimae Radix, can be used to extract the roots, stems and leaves of the plant, in one example can use the root of the plant.
  • Oil is a drug plant belonging to the family Polygalaceae, the herbal name is Polygalae Radix, can be used to extract the roots, stems and leaves of the plant, in one example can be used the root of the plant.
  • Gold is the herbal name Scutellariae Radix, a perennial herb of the dicotyledon moss moth plant, can be used to extract the roots, stems and leaves of the plant, for example, the root of the plant can be used.
  • Gilkyung is the name of the herb, Platycodi Radix, which is a perennial herbaceous genus, which blooms in white and purple in summer.
  • the roots, stems and leaves of the plant can be extracted and used, for example, the root of the plant can be used.
  • Ridding is a herb named Cimicifugae Rhizoma, a herb made from the roots of Cimicifuga heracleifolia Komarov or the same plant.
  • Body paper is a medicine made by drying the roots of the Angelica dahurica Bentham et Hooker or its variants.
  • the herbal name is Angelicae Dahuricae Radix.
  • the "underwear” is the cruciform radish ( Raphanus sativus L. ) or herb made from the same plant, the herbal name Raphani Semen.
  • the name "Sukchangpo” is a perennial herb with the name Acori Gramineri Rhizoma. Roots, stems and leaves of the plant can be extracted and used, for example, the root stem of the plant can be used.
  • Extracts of the herbal medicines described above, including the dragon's meat may be a hot water extract or an organic solvent extract, it may be prepared using a plant extract production method known in the art.
  • water as the extraction solvent
  • At least one organic solvent selected from the group consisting of C 1 to C 4 linear or branched lower alcohols, hexane, methylene chloride, acetonitrile, acetone, and the like
  • a mixed solvent of water and the at least one organic solvent for example, water as the extraction solvent; At least one organic solvent selected from the group consisting of C 1 to C 4 linear or branched lower alcohols, hexane, methylene chloride, acetonitrile, acetone, and the like.
  • the extraction solvent is water or a mixed solvent of water and C 1 to C 4 straight or branched lower alcohols (eg ethanol) (eg 10 to 50% (v / v), 10 to 45%) (v / v), 10 to 40% (v / v), 10 to 35% (v / v), 10 to 30% (v / v), 10 to 25% (v / v), 10 to 22% (v / v), 15 to 50% (v / v), 15 to 45% (v / v), 15 to 40% (v / v), 15 to 35% (v / v), 15 to 30% (v / v), 15 to 25% (v / v), 15 to 22% (v / v), 18 to 50% (v / v), 18 to 45% (v / v), 18 to 40% (v / v), 18 to 35% (v / v), 18 to 30% (v / v), 18 to 25% (v / v), or 18 to 22% (v /
  • the extract is a primary extract of the herbal medicine extracted with water, one or more selected from the group consisting of C1 to C4 linear or branched lower alcohol, or a mixture thereof; Secondary extract further extracted using the at least one selected from the group consisting of water, hexane, methylene chloride, and C 1 to C 4 linear or branched lower alcohol; Tertiary extract further extracted with at least one selected from the group consisting of acetonitrile, C 1 to C 4 linear or branched lower alcohols (eg, methanol), acetone and water; Or a mixture of two or more of these.
  • C1 to C4 linear or branched lower alcohol or a mixture thereof
  • Secondary extract further extracted using the at least one selected from the group consisting of water, hexane, methylene chloride, and C 1 to C 4 linear or branched lower alcohol
  • Tertiary extract further extracted with at least one selected from the group consisting of acetonitrile, C 1 to C 4 linear or branched lower alcohol
  • the extraction solvent used to obtain the primary and / or secondary and / or tertiary extracts may be water or a mixture of water and C 1 to C 4 straight or branched lower alcohols (eg ethanol).
  • Solvent e.g., 10-50% (v / v), 10-45% (v / v), 10-40% (v / v), 10-35% (v / v), 10-30% (v)) / v), 10 to 25% (v / v), 10 to 22% (v / v), 15 to 50% (v / v), 15 to 45% (v / v), 15 to 40% (v / v), 15 to 35% (v / v), 15 to 30% (v / v), 15 to 25% (v / v), 15 to 22% (v / v), 18 to 50% (v / v), 18 to 45% (v / v), 18 to 40% (v / v), 18 to 35% (v / v), 18 to 30% (
  • the mixed extract may mean a mixture of a longan and a raw paper extract or a mixture of a longan and raw paper.
  • the mixed extract of the longan meat and the base paper is a weight ratio of the longan meat and raw paper 1: 0.2 to 1:10, 1: 0.4 to 1: 5, 1: 0.8 to 1: 2.5, or 1: 1 (Long meat weight: raw paper weight ), Or the extract of the long-lean meat extract and the raw paper extract, in a weight ratio of 1: 0.2 to 1:10, 1: 0.4 to 1: 5, 1: 0.8 to 1: 2.5, or 1: 1 Weight) may be included.
  • the mixed extract may mean a mixture of a longan meat extract and a high bone extract or a mixture of a longan and high bone extract.
  • the mixed extract of the longan and the main bone may have a weight ratio of the longan and the main body 1: 0.1 to 1: 5, 1: 0.2 to 1: 2.5, 1: 0.8 to 1: 1.25, or 1: 1 (Long meat weight: the original weight).
  • the mixture is extracted with, or the weight ratio of the long-eye extract and the bone extract extract 1: 0.1 to 1: 5, 1: 0.2 to 1: 2.5, 1: 0.8 to 1: 1.25, or 1: 1 (Long eye extract weight: weight extract extract It may be to include.
  • the extract When the extract is a mixed extract of longan, raw paper and hard bones, the extract may be a mixture of longan meat extract, raw paper and hard extracts or a mixture of longan, raw paper and hard bones.
  • the mixed extract of the yong'an, the base and the original bone is yong'an, the base and the original 1: 0.1 to 10: 0.1 to 10, 1: 0.2 to 5: 0.2 to 5, 1: 0.4 to 2.5: 0.4 to 2.5, or 1: 1: 1 to 10: 0.1 to 10, 1: 0.2 to 5: 0.2 to 5, or extracting by mixing in a weight ratio of 1: 1 (weight of the raw meat: weight of the original: solid weight), or extract of the raw meat, raw paper extract, and the original extract , 1: 0.4 to 2.5: 0.4 to 2.5, or 1: 1: 1 by weight ratio (long-eye extract weight: original extract weight: the original extract weight).
  • the extract is a mixed extract containing all of Yongan, Wonji, Gobon, Brown root, Golden, Gilkyung, White Paper, Horse Riding, Underwear and Seokchangpo Extract
  • the mixed extract is Yongan Meat Extract, Wonji Extract, Gobon Extract, Brown Root Extract, Golden Extracts, gilpyong extract, white paper extract, horse riding extract, oral extract, and mixtures of changchang extract, or extracts of a mixture of longan meat, raw paper, hard bone, root, golden, gilyeong, white paper, horseback riding, orchard and changchang.
  • the mixed extract of the longan meat, raw paper, hard bone, brown root, golden, Gilkyung, white paper, horseback riding, underwear and Seokchangpo the mixed extract of the longan meat, raw paper, hard bone, brown root, golden, Gilkyung, white paper, horseback riding, underwear and Seokchangpo
  • the parts by weight of each component described above may be a value for 100 parts by weight of the extract (mixture of the components).
  • the weight of the extract may be the weight of the solid removed from the extraction solvent, the weight part is used to represent the weight ratio between each component contained in the extract.
  • the amount of the extraction solvent used to obtain the extract is not limited, and may be used in an amount normally used.
  • the amount of the extraction solvent used is 1 to 20 volume times the weight of the herbal medicine (eg, 1 L to 20 L per kg of herbal medicine, provided that the solvent usage is based on the weight). Can be expressed), 1 to 15 times, 1 to 10 times, or 1 to 5 times, but is not limited thereto.
  • the extraction time is not limited to this, but may be 1 to 12 hours, preferably 3 to 6 hours for sufficient extraction of the active ingredient.
  • the extraction temperature is not limited thereto, but for effective extraction of the active ingredient, from room temperature to the boiling point of the extraction solvent (for example, 25 to 100 ° C, 30 to 100 ° C, 35 to 100 ° C, 40 to 100 ° C, and 45 to 100 ° C) , 50 to 100 ° C, 55 to 100 ° C, 60 to 100 ° C, 65 to 100 ° C, 70 to 100 ° C, 75 to 100 ° C, 80 to 100 ° C, 25 to 97 ° C, 30 to 97 ° C, 35 to 97 ° C , 40-97 ° C, 45-97 ° C, 50-97 ° C, 55-97 ° C, 60-97 ° C, 65-97 ° C, 70-97 ° C, 75-97 ° C, 80-97 ° C, 25-95 ° C , 30 to 95 °
  • Extraction method for obtaining the extract may be prepared according to known extraction methods commonly used in the art to which the present invention belongs. Specifically, extraction methods commonly used such as cold extraction method, heating extraction method, hot water extraction method, ultrasonic extraction method, filtration method, pressure extraction method, reflux extraction method, supercritical extraction method, and electrical extraction method can be used.
  • the content of the extract as an active ingredient in the pharmaceutical composition can be appropriately adjusted according to the use form and purpose, the state of use, the type and symptom of the symptom, and 0.001 to 99.9% by weight, or 0.1 to 50% by weight, based on the solids weight. It may be, but is not limited thereto.
  • the pharmaceutical composition may be administered to a mammal including a human by various routes.
  • the mode of administration can be any of the routinely used methods and can be administered, for example, by oral administration, intravenous, intramuscular, subcutaneous, or intraperitoneal injection.
  • the pharmaceutical compositions may be formulated in oral dosage forms, such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, and parenteral formulations in the form of transdermal, suppository, and sterile injectable solutions, respectively, according to conventional methods. Can be used.
  • the pharmaceutical composition is generally selected from the group consisting of pharmaceutically and / or physiologically acceptable carriers, excipients, diluents, and the like, which are generally selected in consideration of the mode of administration and standard pharmaceutical practice. It can be administered in admixture with more than one adjuvant.
  • the pharmaceutically and / or physiologically acceptable carriers include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, It may include one or more selected from the group consisting of cellulose, methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methyl hydroxybenzoate, propyl hydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, mineral oil, and the like.
  • the present invention is not limited thereto, and may be any carrier commonly used in the pharmaceutical field.
  • the pharmaceutically and / or physiologically acceptable diluents and / or excipients are selected from the group consisting of all fillers, extenders, binders, humectants, disintegrants, lubricants, surfactants, and the like, commonly used in the proper formulation of pharmaceutical compositions. It may be one or more.
  • the excipients may contain at least one or more substances, for example starch, calcium carbonate, for the formulation of such solid formulations.
  • Sucrose Sucrose
  • lactose lactose
  • gelatin may be one or more selected from the group consisting of.
  • lubricants such as magnesium styrate talc and the like can also be used.
  • liquid preparations for oral administration such as suspensions, solvents, emulsions, syrups, one or more selected from the group consisting of water, liquid paraffin, and the like, which are commonly used simple diluents, may be used.
  • excipients that are commonly used such as wetting agents, sweeteners, fragrances, and / or preservatives may be included, but are not limited thereto.
  • the pharmaceutical composition may be in the form of tablets containing starch or lactose, in the form of capsules containing appropriate excipients, or in the form of elixirs or suspensions containing chemicals that flavor or color. It can be administered intra or sublingually.
  • Such liquid preparations may be suspending agents (e.g., semisynthetic glycerides such as methylcellulose, Whitepsol or a mixture of Apricot kernel oil and PEG-6 esters or PEG-8 and caprylic / capric Pharmaceutically acceptable additives such as glyceride mixtures such as mixtures of glycerides).
  • the term "food” means an edible natural product or processed product containing one or more nutrients, and as a general meaning, any one of various foods, nutraceuticals, beverages, food additives, and beverage additives. It may be used to mean, the term “food composition” may mean a combination of materials for producing the food. Examples of the foods include various foods, beverages, gums, candy, teas, and functional foods. In one example, the food may be a hangover drink.
  • the content of the extract as an active ingredient in the food composition may be appropriately adjusted according to the food use form, purpose, and the like, and may be, for example, 0.00001 to 99.9% by weight, or 0.001 to 50% by weight based on the weight of solids, but is not limited thereto. Do not.
  • At least one organic solvent consisting of C 1 to C 4 straight or branched lower alcohols, hexane, methylene chloride, acetonitrile, acetone, and the like; And extracting by adding a solvent selected from the group consisting of a mixed solvent of water and the at least one organic solvent to obtain a herbal extract.
  • the manufacturing method More specifically, in one embodiment, the manufacturing method,
  • the manufacturing method is
  • the herbal medicine is N-(2-aminoethyl)-2-aminoethyl-N-(2-aminoethyl)-2-aminoethyl-N-(2-aminoethyl)-2-aminoethyl-N-(2-aminoethyl)-2-aminoethyl-N-(2-aminoethyl)-2-aminoethyl-N-phenyl
  • a mixture of meat, meat and raw paper A mixture of meat, meat and raw paper; or
  • the ratio between each herbal in the mixture is as described above.
  • each extracting step 1) comprises extracting the extraction solvent in the herbal medicine in an amount of 1 to 20 times the volume of the weight of the herbal medicine (eg, 1 L to 20 L per kg of herbal medicine, provided that the amount of solvent is used when the extraction solvent is water). May be expressed by weight), 1 to 15 times by volume, 1 to 10 times by volume, or 1 to 5 times by volume.
  • each extraction step of the manufacturing method may further comprise the step of obtaining the filtrate by filtering the extract after extraction.
  • the preparation method may further comprise the step of concentrating and / or drying the finally obtained extract, if necessary.
  • the extraction may be performed according to all known extraction methods that are commonly used, for example, cold extraction, heat extraction, hot water extraction, ultrasonic extraction, filtration, pressure extraction, reflux extraction, supercritical extraction, electrical extraction, etc. It can be carried out by the extraction method used.
  • the extraction time is not limited to this, but may be 1 to 12 hours, preferably 3 to 6 hours for sufficient extraction of the active ingredient.
  • the extraction temperature is not limited thereto, but for effective extraction of the active ingredient, from room temperature to the boiling point of the extraction solvent (for example, 25 to 100 ° C, 30 to 100 ° C, 35 to 100 ° C, 40 to 100 ° C, and 45 to 100 ° C) , 50 to 100 ° C, 55 to 100 ° C, 60 to 100 ° C, 65 to 100 ° C, 70 to 100 ° C, 75 to 100 ° C, 80 to 100 ° C, 25 to 97 ° C, 30 to 97 ° C, 35 to 97 ° C , 40-97 ° C, 45-97 ° C, 50-97 ° C, 55-97 ° C, 60-97 ° C, 65-97 ° C, 70-97 ° C, 75-97 ° C, 80-97 ° C, 25-95 ° C , 30 to 95 °
  • the filtration, concentration (eg, concentration under reduced pressure, etc.), and / or drying (eg, freeze drying, etc.) may be performed by all methods commonly used in the field of herbal extract preparation, and there is no particular limitation.
  • the hangover relief composition provided herein significantly improves exercise deterioration and sleep induction induced by alcohol administration, and increases the activity of alcohol dehydrogenase and acetaldehyde dehydrogenase. It can have a hangover effect.
  • Figure 1 is after oral administration of the mixed ethanol extract of longan, meat and raw paper to the mouse, and the effect of reduced exercise ability by the abdominal administration of alcohol by Rota-rod test results Latency of Fallen off (s)) The graph shown.
  • Figure 2 is after oral administration of a mixture of extracts (DG) of the long-term meat, bone and raw paper to the mice, and the effect of reduced exercise ability by the abdominal administration of alcohol by Rota-rod test results Latency of Fallen off (s )) Is a graph.
  • DG mixture of extracts
  • Figure 3 is a graph showing the results of measuring the efficacy of awakening the sleep induced by the intraperitoneal administration of alcohol after the oral administration of the mixed ethanol extract of the long-term meat, bone and grass to the mouse (LORR duration).
  • FIG. 4 is a graph showing the results of measuring the efficacy of awakening the induced sleep by intraperitoneal administration of alcohol after the oral administration of a mixture of dragon meat, bone and grass to mice (LORR duration).
  • Figure 5 is a graph showing the change of alcohol dehydrogenase activity in liver tissues of mice after oral administration of mixed ethanol extract (WIN-1001X) of dragon meat, bone and grass to mice, followed by an intraperitoneal administration of alcohol.
  • WIN-1001X mixed ethanol extract
  • Figure 6 is a graph showing the change in alcohol dehydrogenase activity in liver tissues of mice after oral administration of a mixture of dragon's meat, bone and raw paper (DG) to mice, followed by alcohol intraperitoneally.
  • FIG. 7 is a graph showing the change of acetaldehyde dehydrogenase activity in liver tissues of mice after oral administration of mixed ethanol extract (WIN-1001X) of dragon meat, bone and grass to mice after intraperitoneal administration of alcohol. .
  • FIG. 8 is a graph showing the change of acetaldehyde dehydrogenase activity in liver tissues of mice after oral administration of a mixture of dragon meat, bone and grass to oral mice.
  • the two extracts were collected and filtered to remove solids, followed by centrifugation at 3200 rpm for 20 minutes to collect the supernatant. Again, the supernatant was collected by filtering only the liquid filtered using a 2.0 um micro filter to prepare a dragon meat extract.
  • the mixed extract of longan and high bone or longan and raw paper and a mixed extract of both longan and high and raw paper were prepared in various mixing ratios to prepare a mixed extract in the same manner as in ⁇ Example 1-1>. All of the herbal ingredients were purchased from Cheonan Oriental Hospital of Daejeon University.
  • the extract of the mixture of the dragon meat, bone and base paper in a ratio of 1: 1: 1 was named as DG.
  • the two extracts were collected and filtered to remove solids, followed by centrifugation at 3200 rpm for 20 minutes to collect the supernatant. Again, the supernatant was collected by filtering only the liquid filtered using a 2.0 um microfilter to obtain a mixed ethanol extract of long meat, raw paper, and high bone, which was named WIN-1001X.
  • the inhibitory effect on the reduction of exercise ability by ethanol administration of the yong'an extract or the yong'an and the mixed extract of other herbal ingredients obtained in Example 1 was measured.
  • 6-week-old male C57BL / 6J mice (Japan SLC Inc., Shizuoka, Japan) were used as experimental animals, and solid feeds and tap water were allowed to be ingested freely and used for pretesting after 1 week of breeding. Every two days before the test, the mice were trained four times for three minutes on a Rota-rod instrument (2-16 rpm) capable of measuring motor performance.
  • the inhibitory effect of WIN-1001X extract prepared in Example 1-2-2 by ethanol administration was measured by the following method: after 18 hours of fasting, the normal group and the control group were administered with Saline solution
  • WIN-1001X extract was dissolved in Saline and orally administered at a concentration of 300 mg / kg or 600 mg / kg, respectively.
  • one type of hangover lite drink (Morning Care (Dong-A) Co., Ltd.) sold in the market was selected, and one recommended intake was lyophilized, and then applied to one adult's reference weight (70 kg). Dose concentrations were selected, dissolved in Saline solution and administered orally (dosage concentration: lyophilized morningcare 3g / 10g).
  • the normal group, the control group, the control group and the experimental group were intraperitoneally administered alcohol (20% (v / v) ethanol) at a concentration of 4 g / kg.
  • alcohol 20% (v / v) ethanol
  • the mouse on the Rota-rod machine (2 ⁇ 16 rpm, 3 minutes constant acceleration condition) and lost the ability to exercise The time taken to fall in seconds was measured (Latency of Fallen off (s)).
  • the morning care group was orally administered with 0.17ml / 10g
  • the test group was prepared with the group orally administered with DG extract in an amount of 0.085ml / 10g or 0.17ml / 10g, respectively.
  • the morningcare or DG extract was prepared.
  • the administration of was performed twice a total of 1 hour 30 minutes before and 30 minutes before alcohol administration.
  • the DG-administered group improves the decrease in exercise ability due to alcohol intake to a significant level compared to the alcohol control group, and the degree of improvement is increased depending on the dose of DG. You can check it.
  • mice of 10 weeks old Male C57BL / 6 mice of 10 weeks old (Japan SLC Inc., Shizuoka, Japan) as an experimental animal for measuring sleep awakening efficacy by ethanol administration of the yong'an extract or the yong'an and other herbal extracts obtained in Example 1 ), And solid food and tap water were ingested freely and used for the test after 1 week of pre-breeding.
  • the control group was administered Saline solution
  • the experimental group was dissolved in Saline WIN-1001X prepared in Example 1-2-2 and administered orally at 300 and 600 mg / kg concentration, respectively.
  • one kind of hangover antibacterial drink (Morning Care (Dong-A) Co., Ltd.) sold on the market was selected. Dose concentrations were selected, dissolved in Saline solution and administered orally (dosage concentration: lyophilized morning care 3 g / kg).
  • control group the control group and the experimental group (dose 150 and 300 mg / kg / 10 ml administration) were intraperitoneally administered with alcohol (20% ethanol) in an amount of 4 g / kg.
  • alcohol 20% ethanol
  • a LORR test was performed to determine sleep awakenings of mice that entered the sleep due to alcohol administration. Sleeping mice are laid down in a litter cage with limbs facing up, and they wake up from sleep and return to the posture with the limbs down (determined whether they return to normal posture more than three times within 60 seconds). LORR duration was measured.
  • LORR duration The obtained result (LORR duration) is shown in FIG. 3.
  • WIN-1001X showed a significant effect in awakening the sleep state by alcohol intake, and improved efficacy than the commercial hangover drink at all doses tested.
  • Example 1-2-1 the same test as above was performed on the DG extract prepared in Example 1-2-1.
  • the morning care group was orally administered with 0.17ml / 10g
  • the test group was prepared with the group orally administered with DG extract in an amount of 0.085ml / 10g or 0.17ml / 10g, respectively.
  • the morningcare or DG extract was prepared.
  • the administration of was performed twice a total of 1 hour 30 minutes before and 30 minutes before the alcohol administration, LORR test was performed 30 minutes after the alcohol administration.
  • DG extract showed a significant effect in awakening the sleep state by alcohol intake compared to the alcohol control, in particular, at a dose of 0.17ml / 10g has an improved efficacy than the commercial hangover drink Seemed.
  • mice were taken at LORR duration 2 hours of dosing group LORR test) and 2.2 (DG dosing group LORR test).
  • Protein Extraction Solution PRO-PREPTM, iNtRON Biotechnology, Korea was added to 600 ⁇ l of 10 mg of liver tissue, ground and stored on ice for 20 minutes, followed by centrifugation (13,000 g, 20 minutes, 4 ° C). Used.
  • Alcohol dehydrogenase activity was determined using a Reaction buffer containing 5.214 ml of distilled water, 2.642 ml of 1.0 M Tris-HCl buffer (pH 8.8), 1.072 ml of 20 mM NAD + and 1.072 ml of 99.9% Absolute Ethanol per 10 ml. Briefly, 285 ⁇ l of Reaction Buffer and 15 ⁇ l of the measurement sample were injected into a 96 well plate and stored at 30 ° C. for 10 minutes. Thereafter, the absorbance at 0, 10, 20, and 30 minutes was measured at 340 nm to calculate the absorbance deviation for each time zone relative to 0 min, and the results are shown in FIG. 5 (test results for the WIN-1001X-administered group) and FIG. 6. (Test results for DG administration group).
  • the dragon eye meat extract (WIN-1001X or DG) administration group showed a significant effect of increasing the alcohol dehydrogenase activity in proportion to time, this effect was dose-dependently appeared.
  • Acetaldehyde dehydrogenase activity measurements were determined per 10 ml, 7.492 ml, 1.0 M Tris-HCl buffer (pH 8.8) 1.072 ml, 20 mM NAD + 0.359 ml, 1.0 M Acetaldehyde 0.359 ml, 3.0 M KCl 0.359 ml and 0.33 M 2- Measurement was made using Reaction buffer containing 0.359 ml of Mercaptoethanol. Briefly, 285 ⁇ l of Reaction Buffer and 15 ⁇ l of the measurement sample were injected into a 96 well plate and stored at 30 ° C. for 10 minutes. Thereafter, absorbance at 0, 10, 20, and 30 minutes was measured at 340 nm, and the absorbance deviation of each time zone relative to 0 min was calculated.

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Abstract

용안육 추출물을 유효성분으로 포함하는 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학 조성물 및 용안육 추출물을 포함하는 숙취 해소용 식품 조성물이 제공된다.

Description

용안육 추출물을 함유하는 숙취 예방 또는 해소용 조성물
본 발명은 알코올 섭취 후 발생하는 숙취 현상 개선 효능, 알코올 탈수소효소 (ADH), 및 아세트알데히드 탈수소효소 (ALDH) 활성화 효능을 갖는 용안육 추출물의 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소 용도에 관한 것이다.
현대 사회의 잦은 음주와 과음으로 인해, 숙취를 제거할 수 있는 약물 또는 음료에 대한 관심이 높아지고 있다. 숙취해소음료 시장은 매년 성장세를 보여 매출 1천억원을 뛰어넘는 규모로 성장하였으며, 해외 시장에서도 주목을 받고 있다 (김언경, 숙취해소음료 시장 동향, 한국식품정보원·식품세계, 2009).
숙취는 술을 마신 후에 나타나는 두통, 설사, 식욕부진, 오심, 구토, 오한, 식은땀 등의 증상을 뜻하며, 객관적인 증상으로는 인식, 운동능력 저하, 혈액학적 변화 및 호르몬의 변화를 일컫는다. 숙취의 원인은 탈수, 알코올 및 알코올 대사물 (아세트알데히드, 포름알데히드, 아세톤 등)의 독성, 흡수 장애에 의한 영양소 결핍 (혈당, 비타민, 무기질 결핍) 등인 것으로 알려져 있다. 숙취 정도는 유전에 따른 개인의 편차, 환경상태 (영양 상태, 운동 상태, 탈수 정도, 건강 상태)에 따라 정도의 차이가 매우 심하다 (권 등, 한국응용약물학회지, 2005, 13, 107).
음주 후 알코올은 3가지 경로를 통해 대사되는데, 에탄올의 농도가 낮을 때는 위장관 또는 간에 존재하는 알코올 탈수소효소 (Alcohol dehydrogenase)와 아세트알데히드 탈수소효소 (Acetaldehyde dehydrogenase)의 작용에 의해, 에탄올의 농도가 높을 때는 소포체에 존재하는 마이크로좀 에탄올 산화체계 (MEOS: Microsomal ethanol oxidizing system)에 의해 아세트알데히드와 아세트산으로 대사되며, 이후 퍼옥시좀 (peroxisome)에 존재하는 카탈라제 (catalase)의 작용 등을 거쳐 이산화탄소 (CO2)와 물 (H2O)로 최종 분해된다. 적당량의 알코올이 유입되면 상기 기술한 대사체계가 원활하게 작용하여 알코올 때문에 일어나는 제반 증상이 일어나지 않지만, 다량의 알코올 유입 시 대사체계의 균형이 파괴되어 생체 항상성을 유지하지 못하게 되어 단기적으로는 두통 또는 두중감, 집중력 감퇴, 속쓰림 및 소화불량 등이 초래되고 장기적으로는 간 기능 장애가 발생할 수 있다.
일 예는 용안육 (longan arillus)의 추출물, 상기 추출물의 건조물 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 약학 조성물을 제공한다.
다른 예는 용안육 (longan arillus)의 추출물, 상기 추출물의 건조물 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 식품 조성물을 제공한다. 상기 식품은 음료일 수 있다.
다른 예는 용안육 (longan arillus)의 추출물, 상기 추출물의 건조물 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유효량을 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소 방법을 제공한다.
다른 예는 용안육 (longan arillus)의 추출물, 상기 추출물의 건조물 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의, 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 약학 조성물 및/또는 식품 조성물에 사용하기 위한 용도를 제공한다.
본 명세서에서는 용안육(longan arillus)으로부터 유래된 추출물이 알코올 섭취 후 발생하는 운동 능력 소실과 수면 유도 증상에서 신속히 회복될 수 있도록 작용하고, 알코올 탈수소효소와 아세트알데히드 탈수소효소의 활성을 증가시켜 알코올 대사를 촉진함으로써 숙취해소에 효과가 있음이 제안된다.
보다 구체적으로, 본 명세서는, 용안육 (longan arillus)의 추출물이 알코올을 투여한 마우스에서 발생하는 운동 능력 저하 현상을 개선함과, 알코올 투여에 의한 수면 유도 증상 역시 개선함과, 알코올을 투여한 마우스의 간 조직에서 알코올 탈수소효소 (ADH) 및 아세트알데히드 탈수소효소 (ALDH)의 활성을 증가키는 효능이 있음을 제안한다.
일 예는 용안육 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 약학 조성물을 제공한다.
다른 예는 용안육 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 식품 조성물을 제공한다.
다른 예는 용안육 (longan arillus)의 추출물, 상기 추출물의 건조물 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 유효성분으로 함유하는 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 식품 조성물을 제공한다. 상기 식품은 음료일 수 있다.
다른 예는 용안육 (longan arillus)의 추출물, 상기 추출물의 건조물 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 또는 앞서 설명한 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 약학 조성물 또는 식품 조성물의 유효량을 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소 방법을 제공한다.
다른 예는 용안육 (longan arillus)의 추출물, 상기 추출물의 건조물 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의, 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 약학 조성물 및/또는 식품 조성물에 사용하기 위한 용도를 제공한다.
상기 약학 조성물 및 식품 조성물은,
(1) 용안육 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상에 더하여,
(2) 고본, 원지, 또는 이들의 혼합물의 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상
을 추가로 포함할 수 있다.
따라서, 본 발명의 일 예는
(1) 용안육 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상; 및
(2) 고본, 원지, 또는 이들의 혼합물의 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상
을 유효성분으로 포함하는 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 약학 조성물을 제공한다.
다른 예는,
(1) 용안육 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상; 및
(2) 고본, 원지, 또는 이들의 혼합물의 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상
을 유효성분으로 포함하는 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 식품 조성물을 제공한다.
다른 예에서, 상기 약학 조성물 및 식품 조성물은,
(1) 용안육 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 및
(2) 고본, 원지, 또는 이들의 혼합물의 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상에 더하여,
(3) 갈근, 황금, 길경, 승마, 백지, 내복자, 및 석창포로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상
을 추가로 포함할 수 있다.
따라서, 본 발명의 일 예는
(1) 용안육 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상;
(2) 고본, 원지, 또는 이들의 혼합물의 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상; 및
(3) 갈근, 황금, 길경, 승마, 백지, 내복자, 및 석창포로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상
을 유효성분으로 포함하는 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 약학 조성물을 제공한다.
다른 예는,
(1) 용안육 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상;
(2) 고본, 원지, 또는 이들의 혼합물의 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상; 및
(3) 갈근, 황금, 길경, 승마, 백지, 내복자, 및 석창포로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물, 상기 추출물의 건조물, 및 상기 추출물의 농축물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상
을 유효성분으로 포함하는 알코올성 숙취 예방 및/또는 숙취 해소용 식품 조성물을 제공한다.
본 명세서에서, '숙취'는 술 등의 알코올 음료(에탄올)를 자신의 대사 능력 이상으로 섭취함으로써 발생하는 불쾌한 신체적 상태를 의미한다. 알코올 (에탄올)이 아세트알데하이드로 대사되어 체내에 남아 그것이 숙취 증상을 일으킨다. 숙취는 야간에 술을 마시고 다음날 아침 기상 후 현저하게 나타나는 현상일 수 있다. 숙취는 급성 알코올 중독과는 달리, 생활에 직접적인 위험은 아니지만 종종 멀미와 두통 등의 현저한 불쾌감을 동반할 수 있다.
본 명세서에서 제공되는 숙취 예방 및/또는 개선 효과는 알코올 음료의 섭취 전, 동시, 또는 후에 투여되어, 숙취 증상이 발생하는 것을 방지하거나 비투여시와 비교하여 숙취 증상을 약화/완화시키는 효과를 총칭할 수 있다.
본 명세서에서, 별도의 언급이 없는 한, '추출물'은 추출물과 추출물을 건조한 건조물, 및 추출물을 농축한 농축물 중 어느 하나를 의미하기 위하여 사용될 수 있다.
"용안육"은 용안 나무의 가종피를 의미하며, 생약명이 Longan Arillus이다.
"고본"은 미나리과에 속하는 약품식물로 생약명이 Angelicae tenuissimae Radix이며, 상기 식물의 뿌리, 줄기 및 잎 부위를 추출하여 사용할 수 있고, 일 예에서 상기 식물의 뿌리를 사용할 수 있다.
"원지"는 원지과(Polygalaceae)에 속하는 약품식물로 생약명이 Polygalae Radix이며, 상기 식물의 뿌리, 줄기 및 잎 부위를 추출하여 사용할 수 있고, 일 예에서 상기 식물의 뿌리를 사용할 수 있다.
"갈근"은 칡(Pueraria lobate (Willd.) Ohwi)의 주피를 제거한 뿌리를 의미한다.
"황금"은 생약명이 Scutellariae Radix이며, 쌍떡잎식물 통화식물목 꿀풀과의 여러해살이풀로써, 상기 식물의 뿌리, 줄기 및 잎 부위를 추출하여 사용할 수 있으며, 예컨대 상기 식물의 뿌리를 사용할 수 있다.
"길경"은 생약명이 Platycodi Radix로 초롱꽃과의 여러해살이풀로 여름에 흰색과 보라색으로 꽃이 핀다. 상기 식물의 뿌리, 줄기 및 잎 부위를 추출하여 사용할 수 있으며, 예컨대 상기 식물의 뿌리를 사용할 수 있다.
"승마"는 생약명이 Cimicifugae Rhizoma로 미나리아재비과의 승마(Cimicifuga heracleifolia Komarov) 또는 동속 식물의 뿌리줄기로 만든 약재이다.
"백지"는 산형과의 구릿대(Angelica dahurica Bentham et Hooker) 또는 그 변종의 뿌리를 말려 만든 약재로 생약명이 Angelicae Dahuricae Radix이다.
"내복자"는 십자화과의 무(Raphanus sativus L.) 또는　동속식물의 씨를 사용해 만든 약재로 생약명이 Raphani Semen이다.
"석창포"는 생약명이 Acori Gramineri Rhizoma로 외떡잎식물 천남성목 천남성과의 여러해살이풀이다. 상기 식물의 뿌리, 줄기 및 잎 부위를 추출하여 사용할 수 있으며, 예컨대, 상기 식물의 뿌리줄기를 사용할 수 있다.
용안육을 포함하여 상기 기재된 생약의 추출물은 열수 추출물 또는 유기용매 추출물일 수 있으며, 당업계에 공지된 식물 추출물 제조방법을 이용하여 제조될 수 있다. 예컨대, 추출 용매로 물; C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올, 헥산, 염화메틸렌, 아세토니트릴, 및 아세톤 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유기용매; 및 물과 상기 1종 이상의 유기용매의 혼합 용매로 이루어진 군에서 선택된 것을 사용할 수 있다.
일 예에서, 상기 추출 용매는 물, 또는 물과 C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올 (예컨대, 에탄올)의 혼합 용매 (예컨대, 10 내지 50%(v/v), 10 내지 45%(v/v), 10 내지 40%(v/v), 10 내지 35%(v/v), 10 내지 30%(v/v), 10 내지 25%(v/v), 10 내지 22%(v/v), 15 내지 50%(v/v), 15 내지 45%(v/v), 15 내지 40%(v/v), 15 내지 35%(v/v), 15 내지 30%(v/v), 15 내지 25%(v/v), 15 내지 22%(v/v), 18 내지 50%(v/v), 18 내지 45%(v/v), 18 내지 40%(v/v), 18 내지 35%(v/v), 18 내지 30%(v/v), 18 내지 25%(v/v), 또는 18 내지 22%(v/v)의 C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올 (예컨대, 에탄올) 수용액)일 수 있다.
일 예에서, 상기 추출물은 생약을 물, C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 또는 이들의 혼합물로 추출한 1차 추출물; 상기 1차 추출물을 물, 헥산, 염화메틸렌, 및 C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 사용하여 추가적으로 추출한 2차 추출물; 상기 2차 추출물을 아세토니트릴, C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올 (예커대, 메탄올), 아세톤 및 물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 사용하여 추가적으로 추출한 3차 추출물; 또는 이들 중 2 이상의 혼합물일 수 있다. 에컨대, 상기 1차 추출물 및/또는 2차 추출물 및/또는 3차 추출물을 얻는데 사용된 추출 용매는 물, 또는 물과 C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올 (예컨대, 에탄올)의 혼합 용매 (예컨대, 10 내지 50%(v/v), 10 내지 45%(v/v), 10 내지 40%(v/v), 10 내지 35%(v/v), 10 내지 30%(v/v), 10 내지 25%(v/v), 10 내지 22%(v/v), 15 내지 50%(v/v), 15 내지 45%(v/v), 15 내지 40%(v/v), 15 내지 35%(v/v), 15 내지 30%(v/v), 15 내지 25%(v/v), 15 내지 22%(v/v), 18 내지 50%(v/v), 18 내지 45%(v/v), 18 내지 40%(v/v), 18 내지 35%(v/v), 18 내지 30%(v/v), 18 내지 25%(v/v), 또는 18 내지 22%(v/v)의 C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올 (예컨대, 에탄올) 수용액)일 수 있다.
일 구체예에서, 상기 추출물은 용안육 및 원지의 혼합 추출물인 경우, 상기 혼합 추출물은 용안육 추출물 및 원지 추출물의 혼합물 또는 용안육 및 원지의 혼합물의 추출물을 의미할 수 있다. 예컨대, 상기 용안육 및 원지의 혼합 추출물은 용안육 및 원지가 1:0.2 내지 1:10, 1:0.4 내지 1:5, 1:0.8 내지 1:2.5, 또는 1:1의 중량비 (용안육 중량:원지 중량)로 혼합되어 추출되거나, 용안육 추출물 및 원지 추출물을 1:0.2 내지 1:10, 1:0.4 내지 1:5, 1:0.8 내지 1:2.5, 또는 1:1의 중량비 (용안육 추출물 중량:원지 추출물 중량)로 포함하는 것일 수 있다.
상기 추출물이 용안육 및 고본의 혼합 추출물의 경우, 상기 혼합 추출물은 용안육 추출물 및 고본 추출물의 혼합물 또는 용안육 및 고본의 혼합물의 추출물을 의미할 수 있다. 예컨대, 용안육 및 고본의 혼합 추출물은 용안육 및 고본이 1:0.1 내지 1:5, 1:0.2 내지 1:2.5, 1:0.8 내지 1:1.25, 또는 1:1의 중량비 (용안육 중량:고본 중량)로 혼합되어 추출되거나, 용안육 추출물 및 고본 추출물을 1:0.1 내지 1:5, 1:0.2 내지 1:2.5, 1:0.8 내지 1:1.25, 또는 1:1의 중량비 (용안육 추출물 중량:고본 추출물 중량)포함하는 것일 수 있다.
상기 추출물이 용안육, 원지 및 고본의 혼합 추출물인 경우, 상기 추출물은 용안육 추출물, 원지 추출물 및 고본 추출물의 혼합물 또는 용안육, 원지 및 고본의 혼합물의 추출물일 수 있다. 예컨대, 상기 용안육, 원지 및 고본의 혼합 추출물 용안육, 원지 및 고본이 1:0.1 내지 10:0.1 내지 10, 1:0.2 내지 5:0.2 내지 5, 1:0.4 내지 2.5:0.4 내지 2.5, 또는 1:1:1의 중량비 (용안육 중량:원지 중량: 고본 중량)로 혼합되어 추출되거나, 용안육 추출물, 원지 추출물, 및 고본 추출물을 1:0.1 내지 10:0.1 내지 10, 1:0.2 내지 5:0.2 내지 5, 1:0.4 내지 2.5:0.4 내지 2.5, 또는 1:1:1의 중량비 (용안육 추출물 중량:원지 추출물 중량: 고본 추출물 중량)로 포함하는 것일 수 있다.
상기 추출물이 용안육, 원지, 고본, 갈근, 황금, 길경, 백지, 승마, 내복자 및 석창포 추출물을 모두 포함하는 혼합 추출물인 경우, 상기 혼합 추출물은 용안육 추출물, 원지 추출물, 고본 추출물, 갈근 추출물, 황금 추출물, 길경 추출물, 백지 추출물, 승마 추출물, 내복자 추출물, 및 석창포 추출물의 혼합물, 또는 용안육, 원지, 고본, 갈근, 황금, 길경, 백지, 승마, 내복자 및 석창포의 혼합물의 추출물일 수 있다. 예컨대, 상기 용안육, 원지, 고본, 갈근, 황금, 길경, 백지, 승마, 내복자 및 석창포의 혼합 추출물은,
용안육 15 내지 20 중량부, 15 내지 18 중량부, 또는 16 내지 18 중량부;
고본 10 내지 15 중량부, 10 내지 13 중량부, 또는 10 내지 12 중량부;
원지 10 내지 15 중량부, 10 내지 13 중량부, 또는 10 내지 12 중량부;
갈근 15 내지 20 중량부, 15 내지 18 중량부, 또는 16 내지 18 중량부;
황금 5 내지 10 중량부, 5 내지 8 중량부, 또는 5 내지 7 중량부;
길경 1 내지 5 중량부, 1 내지 3 중량부, 또는 2 내지 3 중량부;
백지 5 내지 10 중량부, 5 내지 8 중량부, 또는 5 내지 7 중량부;
승마 5 내지 10 중량부, 5 내지 8 중량부, 또는 5 내지 7 중량부;
내복자 5 내지 10 중량부, 5 내지 8 중량부, 또는 5 내지 7 중량부; 및
석창포 15 내지 20 중량부, 15 내지 18 중량부, 또는 16 내지 18 중량부
가 혼합되어 추출되거나,
용안육 추출물 15 내지 20 중량부, 15 내지 18 중량부, 또는 16 내지 18 중량부;
고본 추출물 10 내지 15 중량부, 10 내지 13 중량부, 또는 10 내지 12 중량부;
원지 추출물 10 내지 15 중량부, 10 내지 13 중량부, 또는 10 내지 12 중량부;
갈근 추출물 15 내지 20 중량부, 15 내지 18 중량부, 또는 16 내지 18 중량부;
황금 추출물 5 내지 10 중량부, 5 내지 8 중량부, 또는 5 내지 7 중량부;
길경 추출물 1 내지 5 중량부, 1 내지 3 중량부, 또는 2 내지 3 중량부;
백지 추출물 5 내지 10 중량부, 5 내지 8 중량부, 또는 5 내지 7 중량부;
승마 추출물 5 내지 10 중량부, 5 내지 8 중량부, 또는 5 내지 7 중량부;
내복자 추출물 5 내지 10 중량부, 5 내지 8 중량부, 또는 5 내지 7 중량부; 및
석창포 추출물 15 내지 20 중량부, 15 내지 18 중량부, 또는 16 내지 18 중량부
를 포함하는 것일 수 있다.
상기 기재된 각 성분의 중량부는 추출물 (상기 성분들의 혼합물) 100 중량부에 대한 수치일 수 있다.
본 명세서에서, 상기 추출물의 중량은 추출용매를 제거한 고형분의 중량일 수 있으며, 상기 중량부는 추출물에 함유된 각 성분들 간의 중량비를 나타내기 위하여 사용된다.
상기 추출물을 얻기 위한 추출용매의 사용량은 제한이 없으며, 통상적으로 사용되는 양으로 사용 가능하다. 예컨대, 유효성분 추출 효율을 고려하여, 추출 용매의 사용량은 생약의 중량의 1 내지 20 부피배 (예컨대, 생약 1 kg 당 1 L 내지 20 L, 단 추출용매가 물인 경우, 용매 사용량은 중량 기준으로 표현될 수 있음), 1 내지 15 부피배, 1 내지 10 부피배, 또는 1 내지 5 부피배일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
추출 시간은, 이에 한정되지 않지만, 유효성분의 충분한 추출을 위하여 1 내지 12시간, 바람직하게는 3 내지 6시간으로 할 수 있다. 추출 온도는 이에 한정되지 않지만, 유효성분의 효과적인 추출을 위하여, 실온 내지 추출용매의 끓는점까지(예컨대, 25 내지 100℃, 30 내지 100℃, 35 내지 100℃, 40 내지 100℃, 45 내지 100℃, 50 내지 100℃, 55 내지 100℃, 60 내지 100℃, 65 내지 100℃, 70 내지 100℃, 75 내지 100℃, 80 내지 100℃, 25 내지 97℃, 30 내지 97℃, 35 내지 97℃, 40 내지 97℃, 45 내지 97℃, 50 내지 97℃, 55 내지 97℃, 60 내지 97℃, 65 내지 97℃, 70 내지 97℃, 75 내지 97℃, 80 내지 97℃, 25 내지 95℃, 30 내지 95℃, 35 내지 95℃, 40 내지 95℃, 45 내지 95℃, 50 내지 95℃, 55 내지 95℃, 60 내지 95℃, 65 내지 95℃, 70 내지 95℃, 75 내지 95℃, 또는 80 내지 95℃)로 할 수 있다.
상기 추출물을 얻기 위한 추출방법은 본 발명이 속하는 기술분야의 통상적으로 사용되는 공지된 추출방법에 따라 제조될 수 있다. 구체적으로 냉침법, 가열 추출법, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 가압추출법, 환류추출법, 초임계 추출법, 전기적 추출법 등 통상적으로 사용되는 추출법을 사용할 수 있다.
상기 약학 조성물 내의 유효성분으로서 추출물의 함량은 사용 형태 및 목적, 사용 대상의 상태, 증상의 종류 및 경중 등에 의하여 적절하게 조절할 수 있으며, 고형분 중량 기준으로 0.001 내지 99.9 중량%, 또는 0.1 내지 50 중량%일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
상기 약학적 조성물은 인간을 포함하는 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여 방식은 통상적으로 사용되는 모든 방식일 수 있으며, 예컨대, 경구 투여, 정맥, 근육, 피하, 또는 복강 주사에 의해 투여될 수 있다. 상기 약학적 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 경피제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태의 비경구 제형 등으로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 약학 조성물은 앞서 유효성분 이외에도, 일반적으로 투여방식과 표준 약제학적 관행 (Standard pharmaceutical practice)을 고려하여 선택된 약제학적 및/또는 생리학적으로 허용되는 담체, 부형제, 및 희석제 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 보조제와 혼합되어 투여될 수 있다. 예컨대, 상기 약제학적 및/또는 생리학적으로 허용되는 담체는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니며, 약제학 분야에서 통상적으로 사용되는 모든 담체일 수 있다.
상기 약제학적 및/또는 생리학적으로 허용되는 희석제 및/또는 부형제는 약학 조성물의 적절한 제제화에 통상적으로 사용되는 모든 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 윤할제, 계면활성제 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
예컨대, 정제, 환제, 산제, 과립제, 또는 캡슐제 등의 경구투여를 위한 고형 제제의 경우, 상기 부형제는 이러한 고형 제제의 제제화를 위한 적어도 1종 이상의 물질, 예컨대, 전분, 칼슘카보네이트 (Calcium carbonate), 수크로스 (Sucrose), 락토오스 (Lactose), 젤라틴 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 이외에도, 마그네슘 스티레이트 탈크 등과 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 또한, 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등의 경구투여를 위한 액상제제의 제제화의 경우, 통상적으로 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이 사용될 수 있고, 이외에, 통상적으로 사용되는 여러 가지 부형제, 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 및/또는 보존제 등이 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
예컨대, 상기 약학적 조성물은 전분 또는 락토오즈를 함유하는 정제 형태로, 또는 적절한 부형제를 함유하는 캡슐 형태로, 또는 맛을 내거나 색을 띄게 하는 화학 약품을 함유하는 엘릭시르 또는 현탁제 형태로 경구, 구강내 또는 혀밑 투여될 수 있다. 이러한 액체 제제는 현탁제 (예를 들면, 메틸셀룰로오즈, 위텝솔 (Witepsol)과 같은 반합성 글리세라이드 또는 행인유 (Apricot kernel oil)와 PEG-6 에스테르의 혼합물 또는 PEG-8과 카프릴릭/카프릭 글리세라이드의 혼합물과 같은 글리세라이드 혼합물)와 같은 약제학적으로 허용 가능한 첨가제와 함께 제형화 될 수 있다.
상기 식품 조성물에서, 용어 "식품"은 영양소를 한 가지 이상 함유하고 있는 식용의 천연물 또는 가공품을 의미하며, 통상적인 의미로서, 각종 식품, 건강기능 식품, 음료, 식품 첨가제, 및 음료 첨가제 중 어느 하나를 의미하기 위하여 사용될 수 있으며, 용어 "식품 조성물"은 상기 식품을 제조하기 위한 재료의 조합을 의미할 수 있다. 상기 식품의 예로서 각종 식품류, 음료, 껌, 캔디류, 차, 기능성 식품 등이 있다. 일 예에서, 상기 식품은 숙취 해소 음료일 수 있다.
상기 식품 조성물 내의 유효성분으로서의 상기 추출물의 함량은 식품사용 형태, 목적 등에 의하여 적절하게 조절할 수 있으며, 예컨대, 고형분 중량 기준으로 0.00001 내지 99.9 중량%, 또는 0.001 내지 50 중량%일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
또 다른 측면에서 알코올 대사 활성화 작용 및/또는 숙취해소 작용이 우수한 생약 추출물의 제조 방법이 제공된다. 상기 제조 방법은,
생약에 물; C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올, 헥산, 염화메틸렌, 아세토니트릴, 및 아세톤 등으로 이루어진 1종 이상의 유기용매; 및 물과 상기 1종 이상의 유기용매의 혼합 용매로 이루어진 군에서 선택된 용매를 가하여 추출하여 생약 추출물을 얻는 단계
를 포함할 수 있다.
보다 구체적으로, 일 예에서, 상기 제조 방법은,
1) 생약에 물, C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 또는 이들의 혼합물을 가하여 1차 추출하는 단계
를 포함할 수 있다.
다른 예에서, 상기 제조 방법은,
1) 생약에 물, C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 또는 이들의 혼합물을 가하여 1차 추출하여 1차 추출물을 얻는 단계; 및
2) 상기 1차 추출물에 물, 헥산, 염화메틸렌, 및 C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 가하여 2차 추출하여 2차 추출물을 얻는 단계
를 포함할 수 있다.
또 다른 예에서, 다른 예에서, 상기 제조 방법은
1) 생약에 물, C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상, 또는 이들의 혼합물을 가하여 1차 추출하여 1차 추출물을 얻는 단계;
2) 상기 1차 추출물에 물, 헥산, 염화메틸렌, 및 C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 가하여 2차 추출하여 2차 추출물을 얻는 단계; 및
3) 상기 2차 추출물에 아세토니트릴, 메탄올, 아세톤 및 물로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 가하여 3차 추출하여 3차 추출하는 단계
를 포함할 수 있다.
상기 생약은
(1) 용안육,
(2) 용안육과, 고본, 원지, 또는 이들의 혼합물과의 혼합물, 또는
(3) 상기 (2)의 혼합물 및 갈근, 황금, 길경, 승마, 백지, 내복자, 및 석창포로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상과의 혼합물
일 수 있다.
일 예에서, 상기 생약은
용안육;
용안육, 고본 및 원지의 혼합물; 또는
용안육, 고본, 원지, 갈근, 황금, 길경, 승마, 백지, 내복자, 및 석창포의 혼합물
일 수 있다.
생약이 혼합물 형태인 경우, 혼합물 내 각 생약 간 비율은 앞서 설명한 바와 같다.
상기 방법에서, 상기 각각의 추출하는 단계는 1)은 생약에 추출 용매를 생약의 중량의 1 내지 20 부피배 (예컨대, 생약 1 kg 당 1 L 내지 20 L, 단 추출용매가 물인 경우, 용매 사용량은 중량 기준으로 표현될 수 있음), 1 내지 15 부피배, 1 내지 10 부피배, 또는 1 내지 5 부피배로 가하여 수행되는 것일 수 있다.
또한, 상기 추출 단계는 1회 수행되거나, 2회 이상, 예컨대, 2회 또는 3회 반복 수행되어 각 추출 단계에서 얻어진 여액을 합하여 최종 추출물을 얻을 수 있다. 따라서, 상기 제조 방법의 각 추출 단계는 추출 후 추출물을 여과하여 여액을 얻는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
또한, 상기 제조 방법은, 필요에 따라서, 최종적으로 얻어진 추출물을 농축 및/또는 건조하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
상기 추출은 통상적으로 사용되는 공지된 모든 추출 방법에 따라 수행될 수 있으며, 예컨대, 냉침법, 가열 추출법, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 가압추출법, 환류추출법, 초임계 추출법, 전기적 추출법 등 통상적으로 사용되는 추출법에 의하여 수행될 수 있다.
추출 시간은, 이에 한정되지 않지만, 유효성분의 충분한 추출을 위하여 1 내지 12시간, 바람직하게는 3 내지 6시간으로 할 수 있다. 추출 온도는 이에 한정되지 않지만, 유효성분의 효과적인 추출을 위하여, 실온 내지 추출용매의 끓는점까지(예컨대, 25 내지 100℃, 30 내지 100℃, 35 내지 100℃, 40 내지 100℃, 45 내지 100℃, 50 내지 100℃, 55 내지 100℃, 60 내지 100℃, 65 내지 100℃, 70 내지 100℃, 75 내지 100℃, 80 내지 100℃, 25 내지 97℃, 30 내지 97℃, 35 내지 97℃, 40 내지 97℃, 45 내지 97℃, 50 내지 97℃, 55 내지 97℃, 60 내지 97℃, 65 내지 97℃, 70 내지 97℃, 75 내지 97℃, 80 내지 97℃, 25 내지 95℃, 30 내지 95℃, 35 내지 95℃, 40 내지 95℃, 45 내지 95℃, 50 내지 95℃, 55 내지 95℃, 60 내지 95℃, 65 내지 95℃, 70 내지 95℃, 75 내지 95℃, 또는 80 내지 95℃)로 할 수 있다.
상기 여과, 농축 (예컨대, 감압 농축 등), 및/또는 건조 (예컨대, 동결 건조 등)는 생약 추출물 제조 분야에 통상적으로 사용되는 모든 방법에 의하여 수행될 수 있으며, 특별한 제한이 없다.
이상 살펴본 바와 같이, 본 명세서에서 제공되는 숙취 해소용 조성물은 알코올 투여에 의하여 유도된 운동 능력 저하 및 수면 유도 현상을 현저하게 개선시키며, 알코올 탈수소효소와 아세트알데히드 탈수소효소의 활성도를 증가킴으로써, 우수한 숙취해소 효과를 발휘할 수 있다.
도 1은 용안육, 고본 및 원지의 혼합 에탄올 추출물을 마우스에 경구 투여한 후, 알코올을 복강 투여하여 저하된 운동 능력에 대한 효능을 Rota-rod test로 측정한 결과 Latency of Fallen off (s))를 나타낸 그래프이다.
도 2는 용안육, 고본 및 원지의 혼합 물 추출물(DG)을 마우스에 경구 투여한 후, 알코올을 복강 투여하여 저하된 운동 능력에 대한 효능을 Rota-rod test로 측정한 결과 Latency of Fallen off (s))를 나타낸 그래프이다.
도 3은 용안육, 고본 및 원지의 혼합 에탄올 추출물을 마우스에 경구 투여한 후, 알코올을 복강 투여하여 유도된 수면을 각성시키는 효능을 LORR test로 측정한 결과(LORR duration)를 나타낸 그래프이다.
도 4은 용안육, 고본 및 원지의 혼합 물 추출물을 마우스에 경구 투여한 후, 알코올을 복강 투여하여 유도된 수면을 각성시키는 효능을 LORR test로 측정한 결과(LORR duration)를 나타낸 그래프이다.
도 5는 용안육, 고본 및 원지의 혼합 에탄올 추출물 (WIN-1001X)을 마우스에 경구 투여한 후, 알코올을 복강 투여한 뒤, 해당 마우스들의 간 조직에서의 알코올 탈수소효소의 활성 변화를 나타낸 그래프이다.
도 6은 용안육, 고본 및 원지의 혼합 물 추출물(DG)을 마우스에 경구 투여한 후, 알코올을 복강 투여한 뒤, 해당 마우스들의 간 조직에서의 알코올 탈수소효소의 활성 변화를 나타낸 그래프이다.
도 7은 용안육, 고본 및 원지의 혼합 에탄올 추출물(WIN-1001X)을 마우스에 경구 투여한 후, 알코올을 복강 투여한 뒤, 해당 마우스들의 간 조직에서의 아세트알데히드 탈수소효소의 활성 변화를 나타낸 그래프이다.
도 8은 용안육, 고본 및 원지의 혼합 물 추출물(DG)을 마우스에 경구 투여한 후, 알코올을 복강 투여한 뒤, 해당 마우스들의 간 조직에서의 아세트알데히드 탈수소효소의 활성 변화를 나타낸 그래프이다.
이하 본 발명을 다음의 실시예에 의하여 보다 구체적으로 설명하고자 한다. 그러나 이들은 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 제한되는 것은 아니다.
<실시예 1> 용안육 추출물 및 용안육이 함유된 혼합 추출물의 제조
<1-1> 용안육 추출물 제조
용안육 40 g을 깨끗이 세척하고 잘게 절단한 후 중량비율로 4배의 물을 가하여 옹기 약탕기에서 95℃에서 4시간 동안 1차 추출한 후, 여과하고 남은 고형분에 다시 물을 절반량 추가하여 상기와 동일한 조건에 따라 2차 추출하였다.
상기 두 가지 추출액을 모아서 여과하여 고형분을 제거한 후, 3200 rpm 에서 20분간 원심 분리한 후 상청액을 수집하였다. 다시 상청액을 2.0 um 마이크로 필터를 사용하여 필터링한 액체만을 수집하여 용안육 추출물을 제조하였다.
<1-2> 용안육, 고본 및 원지의 다양한 혼합비에 따른 혼합 추출물의 제조
<1-2-1> 물 추출물의 제조
용안육 및 고본 혹은 용안육 및 원지의 혼합 추출물과 용안육, 고본 및 원지를 모두 혼합한 혼합 추출물을 다양한 혼합 비율로 구성하여 상기 <실시예 1-1>과 동일한 방법으로 혼합 추출물을 제조하였다. 상기 약재 원료는 모두 대전대학교 부속 천안한방병원에서 구입하였다.
특히 용안육, 고본 및 원지를 1:1:1의 비율로 혼합한 혼합 물 추출물을 DG로 명명하였다.
2종 혼합 추출물 3종 혼합 추출물
명칭 혼합비율 명칭 혼합비율
Y1W1 용안육 30g : 원지 30g Y1W2G1 용안육 15g : 원지 30g : 고본 15g
Y1G1 용안육 30g : 고본 30g Y1W1G2 용안육 15g : 원지 15 : 고본 30g
Y1W2 용안육 20g: 원지 40g Y1W2G2 용안육 12g : 원지 24g : 고본 24g
Y1G2 용안육 20g : 고본 40g Y1W1G1 (DG) 용안육 20g : 원지 20g : 고본 20g
Y2W1 용안육 40g : 원지 20g Y2W1G1 용안육 30g : 원지 15g : 고본 15g
Y2G1 용안육 40g : 고본 20g Y2W2G1 용안육 24g : 원지 24g : 고본 12g
Y2W1G2 용안육 24g : 원지 12g : 고본 24g
<1-2-2> 에탄올 추출물의 제조
용안육 20g, 원지 20g, 및 고본 20g을 깨끗이 세척하고 잘게 절단한 후, 4부피배의 20%(v/v) 에탄올/물 (에탄올 수용액) 용매를 가하여 옹기 약탕기에서 95℃에서 4시간 동안 1차 추출한 후, 여과하고 남은 고형분에 다시 20%(v/v) 에탄올/물 용매를 절반량 추가하여 상기와 동일한 조건에 따라 2차 추출하였다.
상기 두 가지 추출액을 모아서 여과하여 고형분을 제거한 후, 3200 rpm 에서 20분간 원심 분리한 후 상청액을 수집하였다. 다시 상청액을 2.0 um 마이크로 필터를 사용하여 필터링한 액체만을 수집하여 용안육, 원지, 및 고본의 혼합 에탄올 추출물을 얻었으며, 이를 WIN-1001X라고 명명하였다.
<1-3> 용안육 , 갈근 , 고본, 황금, 길경 , 백지, 승마, 내복자 , 원지 및 석창포의 혼합 추출물의 제조
　갈근 12g, 고본 8g, 황금 4g, 길경 2g, 백지 4g, 승마 4g, 내복자 4g, 원지 8g, 석창포 12g, 및 용안육 12g을 준비하고, 이를 상기 <실시예 1-1>과 동일한 방법으로 추출하여 혼합 추출물을 제조하였다.
천연약재 생약명 중량(g) 및 조성비율(%)
용안육 Longan Arillus 12 g (17.14 중량%)
고본 Angelicae Tenuissimae Radix 8 g (11.43 중량%)
원지 Polygalae Radix 8 g (11.43 중량%)
갈근 Puerariae Radix 12 g (17.14 중량%)
황금 Scutellariae Radix 4 g (5.71 중량%)
길경 Platycodi Radix 2 g (2.86 중량%)
승마 Cimicifugae Rhizoma 4 g (5.71 중량%)
백지 Angelicae Dahuricae Radix 4 g (5.71 중량%)
내복자 Raphani Semen 4 g (5.71 중량%)
석창포 Acori Gramineri Rhizoma 12 g (17.14 중량%)
합계 　 70 g
< 실험예 1> 에탄올 투여 마우스에 대한 운동 능력 저하 억제 효능 측정(Alcohol-Induced Motor Impairment- RotaRod Test)
상기 실시예 1에서 수득된 용안육 추출물 또는 용안육 및 다른 생약 성분의 혼합 추출물의 에탄올 투여에 의한 운동 능력 저하 억제 효능을 측정하였다. 이를 위하여 실험동물로서 6주령의 웅성 C57BL/6J 마우스 (Japan SLC Inc., Shizuoka, Japan)를 사용하였으며, 고형 사료와 수돗물을 자유 섭취케 하여 1주간 예비사육 후 시험에 사용하였다. 시험 2일 전부터 매일 상기 마우스를 운동 능력을 측정할 수 있는 Rota-rod 기기 (2 ~ 16 rpm)에서 3분간 4차례씩 훈련시켰다.
우선, 실시예 1-2-2에서 제조된 WIN-1001X 추출물의 에탄올 투여에 의한 운동 능력 저하 억제 효능을 다음과 같은 방법으로 측정하였다: 18 시간 절식 후, 정상군 및 대조군에는 Saline 용액을 투여하고, 실험군에는 WIN-1001X 추출물을 Saline에 녹여 각각 300 mg/kg 또는 600 mg/kg 농도로 경구 투여하였다. 비교군에는 시중에 판매하는 숙취해소음료 중 1종 (모닝케어 (㈜동아제약))을 선정하여, 1 회 권장 섭취량을 동결 건조한 후, 성인 1인의 기준 체중 (70 kg)에 적용하여 이에 비례하는 투여 농도를 선정해 Saline 용액에 녹인 후 경구 투여하였다 (투여 농도: 동결건조 모닝케어 3g/10g). 1시간 후, 상기 정상군, 대조군, 비교군 및 실험군 (WIN-1001X 150 및 300 mg/kg 투여)에 알코올 (20%(v/v) 에탄올)을 4 g/kg 농도로 복강 투여하였다. 이후 각각 5분, 30분, 60분, 120분, 180분 및 300분 뒤, Rota-rod 기기 (2 ~ 16 rpm, 3분간 등가속 조건)에 마우스를 올려놓고 운동 능력을 상실하여 하단의 발판으로 떨어지는데 걸리는 시간(초)을 측정하였다 (Latency of Fallen off (s)).
상기 얻어진 결과 (Latency of Fallen off (s))를 도 1에 나타냈다. 도 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명에 따른 WIN-1001X은 시험된 모든 용량에서 알코올 섭취에 의한 운동 능력 저하를 유의성 있게 개선시킴을 알 수 있으며, 이러한 효과는 시중에 판매되는 숙취해소음료 보다 우월한 것으로 나타났다.
또한, 실시예 1-2-1에서 제조된 DG 추출물(용안육:원지:고본=1:1:1 중량비)에 대하여 상기와 동일한 시험을 수행하였다. 단, 대조군으로 모닝케어 0.17ml/10g를 경구투여한 군을, 시험군으로 DG 추출물을 0.085ml/10g 또는 0.17ml/10g의 양으로 경구투여한 군을 각각 준비하였으며, 상기 모닝케어 또는 DG 추출물의 투여는 알코올 투여 전 1시간30분 전 및 30분 전에 총 2회 실시하였다.
상기 얻어진 결과(Latency of Fallen off (s))를 아래의 표 3 및 도 2에 나타내었다:
Latency of Fallen Off (s)
시간　 5 min 30 min 60 min 90 min 180 min 300min
Normal Control 160.8 143.8 150.0 152.3 146.5 146.8
Alcohol Control 2.8 2.1 13.2 27.5 59.3 87.7
모닝케어 (3g/10g) 3.3 11.3 21.9 37.3 90.6 136.0
DG (0.085ml/10g) 4.3 4.7 20.0 36.0 72.3 128.0
DG (0.17ml/10g) 5.8 14.3 27.2 49.2 105.5 141.8
도 2에서 모닝(-▲-)은 모닝케어 투여군, DG(1/2) (-●-)는 DG 0.085ml/10g 투여군, DG (-■-)는 DG 0.17 ml/10g 투여군, 및 control (-□-)은 알코올만 투여한 군 (알코올 대조군)을 각각 의미한다.
도 2 및 표 3에 나타난 바와 같이, DG 투여군의 경우 알코올 대조군과 비교하여 알코올 섭취에 의한 운동 능력 저하를 유의미한 수준으로 개선시킴을 확인할 수 있으며, 그 개선 정도는 DG의 투여 용량 의존적으로 증가함을 확인할 수 있다.
< 실험예 2> 에탄올 투여 마우스에 대한 수면 각성 효능 (Alcohol-Induced Sedation: LORR Test) 측정
2.1. WIN-1001X 시험
상기 실시예 1에서 수득한 용안육 추출물 또는 용안육 및 다른 생약 성분의 혼합 추출물의 에탄올 투여에 의한 수면 각성 효능을 측정하기 위하여 실험동물로서 10 주령의 웅성 C57BL/6 마우스 (Japan SLC Inc., Shizuoka, Japan)를 사용하였으며, 고형 사료와 수돗물을 자유 섭취케 하여 1주간 예비사육 후 시험에 사용하였다.
18 시간 절식 후, 대조군에는 Saline 용액을 투여하고, 실험군에는 실시예 1-2-2에서 제조된 WIN-1001X을 Saline에 녹여 300 및 600 mg/kg 농도로 각각 경구 투여하였다. 비교군으로 시중에 판매하는 숙취해소음료 중 1종 (모닝케어 (㈜동아제약))을 선정했으며, 1 회 권장 섭취량을 동결건조한 후, 성인 1인의 기준 체중 (70 kg)에 적용하여 이에 비례하는 투여 농도를 선정해 Saline 용액에 녹인 후 경구 투여하였다 (투여 농도: 동결건조 모닝케어 3 g/kg).
1시간 후, 상기 대조군, 비교군 및 실험군 (용안육 추출물 150 및 300 mg/kg/10 ml 투여)에 알코올(20% 에탄올)을 4 g/kg 양으로 복강 투여하였다. 알코올 투여로 인해 수면에 돌입한 마우스들의 수면 각성을 판정하기 위해 LORR 실험법 (Loss of righting reflex test)을 수행하였다. 수면 상태에 돌입한 마우스들을 사지가 위를 향하도록 깔짚이 깔린 사육 케이지 안에 돌려 눕히고 이들이 수면에서 깨어나 사지를 아래로 하여 정자세로 돌아오는 데 (60초 이내에 3회 이상 정자세로 돌아오는지 여부로 판정)까지 걸린 시간 (LORR duration)을 측정하였다.
상기 얻어진 결과(LORR duration)를 도 3에 나타냈다. 도 3에 나타낸 바와 같이, WIN-1001X은 알코올 섭취에 의한 수면 상태를 각성시키는데 유의성 있는 효과를 보였으며, 시험된 모든 용량에서 시중에 판매하는 숙취해소음료 보다 개선된 효능을 보였다.
2.1. DG 추출물 시험
또한, 실시예 1-2-1에서 제조된 DG 추출물에 대하여 상기와 동일한 시험을 수행하였다. 단, 대조군으로 모닝케어 0.17ml/10g를 경구투여한 군을, 시험군으로 DG 추출물을 0.085ml/10g 또는 0.17ml/10g의 양으로 경구투여한 군을 각각 준비하였으며, 상기 모닝케어 또는 DG 추출물의 투여는 알코올 투여 전 1시간30분 전 및 30분 전에 총 2회 실시하고, LORR 시험은 알코올 투여 후 30분 후에 실시하였다.
상기 얻어진 결과 (LORR duration)를 도 4에 나타내었다. 도 4에 나타낸 바와 같이, DG 추출물은 알코올 대조군과 비교하여 알코올 섭취에 의한 수면 상태를 각성시키는데 유의성 있는 효과를 보였으며, 특히, 0.17ml/10g의 용량에서는 시판되는 숙취해소음료보다 개선된 효능을 보였다.
< 실험예 3> 알코올 탈수소효소 ( ADH ) 및 아세트알데히드 탈수소효소 ( ALDH )의 활성도 측정
상기 실시예 1에서 수득한 용안육 추출물 및 용안육과 다른 생약 성분의 혼합 추출물의 알코올 탈수소효소 (ADH) 활성화 효과 및 아세트알데히드 탈수소효소 (ALDH)의 활성화 효과를 알아보기 위하여 상기 실험예 2.1 (WIN-1001X 투여군 LORR 시험) 및 2.2 (DG 투여군 LORR 시험)의 LORR duration 2시간에서 마우스의 간 조직을 취했다. Protein Extraction Solution (PRO-PREPTM, iNtRON Biotechnology, Korea)을 간 조직 10 mg 당 600 μl 가하여 분쇄해 20분간 얼음 위에서 보관한 후, 원심분리 (13,000 g, 20분, 4℃)된 상등액을 측정 시료로써 사용하였다.
3.1. 알코올 탈수소효소 (ADH) 활성도 측정
알코올 탈수소효소 활성도 측정은 10 ml 당, 증류수 5.214 ml, 1.0 M Tris-HCl buffer (pH 8.8) 2.642 ml, 20 mM NAD+ 1.072 ml 및 99.9% Absolute Ethanol 1.072 ml를 함유하는 Reaction buffer를 사용하여 측정하였다. 간략히 설명하자면, 96 well plate에 Reaction buffer 285 μl와 측정 시료 15 μl를 주입한 후 30℃에서 10분간 보관하였다. 이후, 0, 10, 20, 30분째의 흡광도를 340 nm에서 측정하여, 0 min에 대한 각 시간대 별 흡광도 편차를 산출하였고, 그 결과를 도 5 (WIN-1001X 투여군에 대한 시험 결과) 및 도 6 (DG 투여군에 대한 시험 결과)에 나타내었다.
도 5 및 도 6에 나타낸 바와 같이, 용안육 추출물 (WIN-1001X 또는 DG) 투여군은 시간 경과에 비례하여 현저한 알코올 탈수소효소 활성 증가 효능을 나타냈으며, 이러한 효능은 투여 농도 의존적으로 나타났다.
3.2. 아세트알데히드 탈수소효소 (ALDH)의 활성도 측정
아세트알데히드 탈수소효소 활성도 측정은 10 ml 당, 증류수 7.492 ml, 1.0 M Tris-HCl buffer (pH 8.8) 1.072 ml, 20 mM NAD+ 0.359 ml, 1.0 M Acetaldehyde 0.359 ml, 3.0 M KCl 0.359 ml 및 0.33 M 2-Mercaptoethanol 0.359 ml를 함유하는 Reaction buffer를 사용하여 측정하였다. 간략히 설명하자면, 96 well plate에 Reaction buffer 285 μl와 측정 시료 15 μl를 주입한 후 30℃에서 10분간 보관하였다. 이후, 0, 10, 20, 30분째의 흡광도를 340 nm에서 측정하여, 0 min에 대한 각 시간대 별 흡광도 편차를 산출하였다.
그 결과를 도 7 (WIN-1001X 투여군에 대한 시험 결과) 및 도 8 (DG 투여군에 대한 시험 결과)에 나타내었다. 도 7 및 도 8에 나타낸 바와 같이, 용안육 추출물 (WIN-1001X 또는 DG) 투여군은 시간 경과에 비례하여 아세트알데히드 탈수소효소 활성을 증가시키는 경향을 나타냈다.

Claims (21)

  1. 용안육 (longan arillus) 추출물을 유효성분으로 함유하는 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 고본 및 원지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 추가로 함유하는, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학 조성물.
  3. 제2항에 있어서, 상기 추출물은 용안육, 원지 및 고본이 1: 0.1 내지 10: 0.1 내지 10의 중량비로 혼합된 혼합 추출물인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학 조성물.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 갈근, 황금, 길경, 백지, 승마, 내복자 및 석창포로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 추가로 함유하는, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학 조성물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유기용매, 또는 물과 상기 1종 이상의 유기 용매와의 혼합물을 사용하여 추출된 것인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 추출물은 물, 에탄올, 또는 물과 에탄올의 혼합물을 사용하여 추출된 것인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학 조성물.
  7. 용안육 (longan arillus) 추출물을 유효성분으로 함유하는 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물
  8. 제7항에 있어서, 고본 및 원지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물이 추가로 함유하는, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 상기 추출물은 용안육, 원지 및 고본이 1: 0.1 내지 10: 0.1 내지 10의 중량비로 혼합된 혼합 추출물인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
  10. 제7항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 갈근, 황금, 길경, 백지, 승마, 내복자 및 석창포로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 추가로 함유하는, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
  11. 제7항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유기용매, 또는 물과 상기 1종 이상의 유기 용매와의 혼합물을 사용하여 추출된 것인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 상기 추출물은 물, 에탄올, 또는 물과 에탄올의 혼합물을 사용하여 추출된 것인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 약학 조성물.
  13. 제7항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 식품은 음료인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소용 식품 조성물.
  14. 용안육 (longan arillus) 추출물을 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소를 필요로 하는 대상에게 투여하는 단계를 포함하는, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소 방법.
  15. 제14항에 있어서, 상기 추출물은 고본 및 원지로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 추가로 포함하는 것인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소 방법.
  16. 제15항에 있어서, 상기 추출물은 용안육, 원지 및 고본이 1: 0.1 내지 10: 0.1 내지 10의 중량비로 혼합된 혼합 추출물인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소 방법.
  17. 제15항에 있어서, 갈근, 황금, 길경, 백지, 승마, 내복자 및 석창포로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 추출물을 추가로 함유하는, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소 방법.
  18. 제14항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유기용매, 또는 물과 상기 1종 이상의 유기 용매와의 혼합물을 사용하여 추출된 것인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소 방법.
  19. 제18항에 있어서, 상기 추출물은 물, 에탄올, 또는 물과 에탄올의 혼합물을 사용하여 추출된 것인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소 방법.
  20. 제15항에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 직쇄 또는 분지형 저급 알코올로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 유기용매, 또는 물과 상기 1종 이상의 유기 용매와의 혼합물을 사용하여 추출된 것인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소 방법.
  21. 제20항에 있어서, 상기 추출물은 물, 에탄올, 또는 물과 에탄올의 혼합물을 사용하여 추출된 것인, 알코올성 숙취 예방 또는 숙취 해소 방법.
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