WO2017168026A1 - Dispositivo de sujeción de muestras para microscopio - Google Patents

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WO2017168026A1
WO2017168026A1 PCT/ES2017/070184 ES2017070184W WO2017168026A1 WO 2017168026 A1 WO2017168026 A1 WO 2017168026A1 ES 2017070184 W ES2017070184 W ES 2017070184W WO 2017168026 A1 WO2017168026 A1 WO 2017168026A1
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WO
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microscope
test tube
circular
duct
sample
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Application number
PCT/ES2017/070184
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English (en)
French (fr)
Inventor
Jorge Ripoll Lorenzo
Alicia ARRANZ DE MIGUEL
Original Assignee
Universidad Carlos Iii De Madrid
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Filing date
Publication date
Application filed by Universidad Carlos Iii De Madrid filed Critical Universidad Carlos Iii De Madrid
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Classifications

    • G—PHYSICS
    • G02—OPTICS
    • G02B—OPTICAL ELEMENTS, SYSTEMS OR APPARATUS
    • G02B21/00—Microscopes
    • G02B21/34—Microscope slides, e.g. mounting specimens on microscope slides

Definitions

  • the present invention pertains to the field of devices used to hold samples in a microscope, and more particularly in flat beam laser illumination or selective optical projection microscopes.
  • the object of the present invention is a new sample holding device for a microscope that allows the holding of both test tubes, used for large samples, and capillary tubes, used for measuring small samples.
  • a flat laser beam microscope is essentially formed by a camera coupled to a high numerical aperture lens and arranged in a direction called "detection direction", and a lighting medium capable of emitting a thin sheet of light according to a direction called “ lighting direction "which is perpendicular to the detection direction, following the original configuration of Siedentopf and Zsigmondy coupled to a detection chamber.
  • the camera can obtain a 2D fluorescence image of the part of the sample illuminated by the illumination sheet or plane. If the sample is also moved in the direction of the detection axis and several 2D images are taken in different positions, a set or stack of 2D images is generated where each of the 2D images corresponds to a position of the illumination plane with respect to the sample.
  • This stack of 2D images contains information on the z-position (depth of the sample according to the detection direction) obtained by moving the sample, and the x and y positions, present in each 2D image.
  • the 2D image stack can then be merged to generate a 3D image of the sample, as described in US 7,554,725 by Stelzer et al. Subsequently, it was proposed to rotate the sample around its own axis, normally vertical, to capture several stacks of 2D images (commonly called "angular measures") and merge them later, which allows to improve anisotropy and image quality (S Preibisch et al, Nature Methods 7 (2010)).
  • the OPT technique (Optical Projection Tomography, Optical Projection Tomography), described in US20060122498 A1
  • OPT technique is relatively similar to X-ray tomography. It is essentially based on optically illuminating the sample homogeneous and obtain, on the side of the sample opposite to the one from which it is illuminated, an image that can be assimilated to the "shadow” that the sample casts on a plane, or in the case of measuring the fluorescence, the total emission of the illuminated volume
  • This "shadow” or fluorescence emission, normally called projection image has different shades of gray depending on the absorption of light and / or fluorescence emission that occurs in different parts of the sample.
  • This reconstruction algorithm is usually based on solving the Radon transform, originally developed for the X-ray 3D image.
  • the inventors of the present application have also filed the patent application P201531401, entitled “Multiple charge device for flat laser beam microscope” which describes a multiple charge device for feeding a flat laser beam microscope of a continuous flow and Sequential samples.
  • This device basically comprises a capillary conduit that crosses the measuring area of the microscope sample receiving cell having a diameter such that it only allows the passage of the samples one at a time, and an adjustable flow generating element connected to the capillary conduit capable of causing a continuous and controllable flow of samples immersed in a fluid medium through said capillary conduit. This allows a plurality of samples to be passed sequentially through the interior of the receiving cell, accelerating the process of data acquisition of multiple samples.
  • the inventors of the present application have also submitted the patent application P201630071, entitled “Automatic lens change device for flat laser beam microscope”, which describes a device that allows the lens used for image acquisition to be automatically changed depending on the desired magnification at all times.
  • This device essentially comprises two supports configured for parallel coupling of at least two targets oriented according to a detection direction; a lateral translation means configured to laterally displace said at least two supports so that one of the objectives is facing a flat laser beam microscope cuvette; and a longitudinal translation means configured to move longitudinally according to the direction of detection at least the support to which the target facing the cuvette is coupled.
  • the samples to be measured in a microscope are normally arranged in a test tube or in a capillary duct.
  • the test tubes are used for large samples, such as cleared organs (mouse or chicken brain, for example), and have an approximate diameter of 1 cm or greater.
  • Capillary ducts are used to pass small samples (Drosophila melanogaster or zebrafish, for example) along the microscope measurement area as described in document P201531401.
  • the present invention is directed to a sample holding device for microscope.
  • This clamping device is generally applicable to any type of horizontal configuration microscope, that is, with the optical axis perpendicular to the ground, although it is specially designed for use in flat laser beam or optical projection microscopes.
  • the sample clamping device of the present invention essentially comprises the following elements: a clamping means of a test tube that houses the samples; and a means for coupling the device to a rotating sample holder of a microscope. Each of these elements is described in more detail below.
  • the means for holding the test tube have the function of holding the test tube where the samples are held firmly to allow manipulation during imaging operations using the microscope.
  • the test tube clamping means comprises a circular conduit provided with a fixing and centering means of said test tube.
  • the circular duct will house the test tube in question, and for this its diameter will be slightly larger than the usual diameters of the test tubes used in this type of procedure.
  • the circular duct can have an inside diameter of between 0.5 cm and 2 cm, more preferably an inside diameter of about 1 cm.
  • the fixing and centering means this can be configured in different ways, although one or more elastic circular joints housed within the circular duct are preferably used.
  • the coupling means of this device to the rotating support of a microscope can in principle be implemented in different ways, although according to a preferred embodiment of the invention it simply comprises coupling holes located in a proximal flange of the device. These holes will allow the use of bolts, screws, or the like, to fix the device of the invention
  • this device allows to acquire the images of the samples directly from the test tube, avoiding the need to extract them from it. Indeed, the user only has to insert the test tube into the conduit. Obviously, it is a partial introduction where the tube portion where the sample is located protrudes through the distal end of the duct. The circular joint or joints housed inside the conduit will prevent the test tube from sliding freely inside the conduit and at the same time ensure its centering.
  • the device is then fixed to the rotating support of the microscope by means of the coupling holes with the help of screws or the like. Finally, the rotating microscope stand can be manipulated, either automatically or manually, to insert the part of the test tube that protrudes from the conduit into the cuvette of a flat laser beam microscope and, if necessary, rotate it to obtain several images of the same. An adequate selection of the fluid in which the sample is immersed within the test tube, as well as the fluid that fills the microscope cuvette, will allow obtaining high quality sharp images.
  • the device of the present invention allows fixing a capillary tube to obtain images of several samples immersed in a fluid as they flow through said capillary tube, for example as described in document P201531401.
  • the device of the present invention may further comprise a removable additional fixing and centering means configured to fix and center a capillary tube in the circular conduit. This fixing and centering means is briefly described below.
  • This fixing and centering means has the function of fixing and centering a capillary tube in the circular duct.
  • this means is configured for coupling to a distal end of the circular duct, for example through pressure or by thread, although other options would be possible.
  • this additional detachable fixing and centering means is a head provided with a central longitudinal duct of adjustable diameter.
  • it may be a head similar to that used for fixing the drill bit in small holes, and which is provided with a central longitudinal hole whose diameter can be closed to firmly catch the drill bit.
  • the user only has to fix the cylindrical head to the distal end of the circular duct and then pass the capillary tube through the circular duct and the central longitudinal hole of the head. Once this is done, the central longitudinal hole of the head is closed until it "catches" the capillary duct, keeping it centered on the circular duct of the device.
  • the device is fixed to the rotating support of the microscope in a manner similar to that described above, and the microscope is normally used.
  • Fig. 1 shows a perspective view of an example of the device according to the present invention.
  • Figs. 2a-2c show a method of fixing a test tube in the example of the device shown in Fig. 1.
  • Fig. 3 shows the example of the device of the invention to which a capillary tube has been attached thanks to the use of a fixing and centering head for capillary tubes.
  • distal refers to the area furthest from the junction between the device (1) and a sample holder of a microscope
  • proximal refers to the area closest to that connection between the device (1) and said sample holder.
  • Fig. 1 shows a perspective view of a device (1) according to the present invention.
  • the device (1) is formed by a body that has a cylindrical portion (1a) and a flange portion (1 b).
  • a conduit (2) also cylindrical longitudinally crosses the entire body of the device (1).
  • the cylindrical portion (1 a) in this example has a cylinder shape through which the duct (2) runs longitudinally.
  • the conduit (2) has a diameter of approximately 1 cm, which is sufficient to allow the passage of a test tube (100) through its interior.
  • inside the duct (2) one or more elastic circular joints are housed. These joints can be fixed to the inner side walls of the duct (2) under pressure, and their inner diameter is slightly smaller than that of the test tube (100) to be used.
  • the introduction of the test tube (100) into the conduit (2) causes compression of the joints so that the test tube (100) is coupled to the conduit (2) and centered therein.
  • the flange portion (1 b) is disposed at a proximal end of the cylindrical portion (1 a).
  • the flange portion (1 b) can be an integral part of the cylindrical portion (1 a), and is a flat circular piece crossed by the conduit (2) and comprising peripheral holes (3) for fixing the device (1 ) to a sample holder of a microscope, for example a rotating holder. This connection can be carried out by screws, bolts, or the like.
  • Figs. 2a-2c schematically show an operation of coupling a test tube (100) to the device (1) of the invention.
  • Fig. 2a shows the device (1) of the invention about to be introduced into the conduit (2).
  • Fig. 2b shows a user's hand pushing the test tube (100) down (distal direction) through the conduit (2). It can be seen how the lower end of the test tube (100) where the sample is located (102) begins to appear at the distal end of the cylindrical portion (1 b) of the device (1).
  • Fig. 2c shows the final result of this operation where a section of the test tube (100) protrudes inferiorly from the distal end of the duct (2).
  • Fig. 3 shows another configuration of the device (1) of the invention which, in addition to the elements described, additionally comprises a fixing and centering means for capillary tubes fixed to the distal end of the conduit (2).
  • This fixing and centering means for capillary tubes takes the form of a fixing and centering head (4).
  • the fixing of this head (4) to the distal end of the duct (2) can be carried out in different ways, such as by means of thread, by means of a pressure fixation, etc.
  • the head (4) is similar to a small drill chuck, comprising a central cylindrical bore whose diameter can be increased or decreased by, for example, the rotation of a key.
  • a capillary tube (101) can be passed through the conduit (2) for the passage of samples of little size.
  • said head (4) is actuated to close the central cylindrical orifice thereof until the capillary duct (101) is trapped, which is thus centered in the duct (2).

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Abstract

La invención describe un nuevo dispositivo (1) de sujeción de muestras para un microscopio que permite la sujeción tanto de tubos (100) de ensayo, usados para muestras (102) de gran tamaño, como de tubos capilares (102), empleados para la medida de muestras (102) de pequeño tamaño. El dispositivo (1) comprende fundamentalmente: un medio de sujeción de un tubo (100) de ensayo que aloja las muestras; y un medio de acoplamiento del dispositivo (1) a un soporte giratorio de muestras de un microscopio.

Description

DESCRIPCIÓN
Dispositivo de sujeción de muestras para microscopio OBJETO DE LA INVENCIÓN
La presente invención pertenece al campo de los dispositivos empleados para la sujeción de muestras en un microscopio, y más particularmente en microscopios de iluminación de haz láser plano o de proyección óptica selectiva.
El objeto de la presente invención es un nuevo dispositivo de sujeción de muestras para un microscopio que permite la sujeción tanto de tubos de ensayo, usados para muestras de gran tamaño, como de tubos capilares, empleados para la medida de muestras de pequeño tamaño.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Los estudios de embriones y muestras biológicas similares a través de microscopio óptico presentan, a diferencia de lo que sucede con células individuales, problemas particulares relacionados con la absorción de la luz y la pérdida de resolución debida a la dispersión de la luz. Para solucionar estos problemas, en los últimos años se han desarrollado mejoras importantes sobre los microscopios de haz láser plano, cuya invención data del 1903.
Un microscopio de haz láser plano está formado fundamentalmente por una cámara acoplada a un objetivo de alta apertura numérica y dispuesta según una dirección denominada "dirección de detección", y un medio de iluminación capaz de emitir una lámina delgada de luz según una dirección denominada "dirección de iluminación" que es perpendicular a la dirección de detección, siguiendo la configuración original de Siedentopf y Zsigmondy acoplada a una cámara de detección. Con esta configuración, la cámara puede obtener una imagen 2D de fluorescencia de la parte de la muestra iluminada por la lámina o plano de iluminación. Si además se desplaza la muestra en la dirección del eje de detección y se toman varias imágenes 2D en diferentes posiciones, se genera un conjunto o pila de imágenes 2D donde cada una de las imágenes 2D corresponde a una posición del plano de iluminación con respecto a la muestra. Esta pila de imágenes 2D contiene información de la posición en z (profundidad de la muestra según la dirección de detección) obtenida al mover la muestra, y de las posiciones x e y, presentes en cada imagen 2D. La pila de imágenes 2D puede entonces fusionarse para generar una imagen 3D de la muestra, como se describe en el documento US 7,554,725 de Stelzer et al. Posteriormente, se propuso hacer rotar la muestra alrededor de su propio eje, normalmente vertical, para captar varias pilas de imágenes 2D (comúnmente denominadas "medidas angulares") y fusionarlas posteriormente, lo que permite mejorar la anisotropía y la calidad de las imágenes (S. Preibisch et al, Nature Methods 7 (2010)).
Por otro lado, la técnica OPT (Tomografía de Proyección Óptica, Optical Projection Tomography según sus siglas en inglés), descrita en el documento US20060122498 A1 , es relativamente similar a la tomografía por rayos X. Se basa fundamentalmente en iluminar ópticamente la muestra de forma homogénea y obtener, en el lado de la muestra opuesto a aquel desde el que se ilumina, una imagen que puede asimilarse a la "sombra" que proyecta la muestra sobre un plano, o en el caso de medir la fluorescencia, la emisión total del volumen iluminado. Esta "sombra" o emisión de fluorescencia, normalmente denominada imagen de proyección, tiene diferentes tonos de gris en función de la absorción de la luz y/o emisión de fluorescencia que se produce en diferentes partes de la muestra. Si se ilumina la muestra desde varios ángulos, es posible implementar un algoritmo de reconstrucción sobre todas las imágenes obtenidas para generar una imagen 3D de dicha muestra. Este algoritmo de reconstrucción suele estar basado en resolver la transformada de Radon, originalmente desarrollada para la imagen 3D con rayos X.
Recientemente, los inventores de la presente solicitud han presentado la solicitud de patente PCT/ES2015/070455 titulada "Microscopio y procedimiento para la generación de imágenes 3D de una colección de muestras", que describe un nuevo microscopio que combina las mencionadas técnicas de haz láser plano de tipo SPIM (Selective Plañe lllumination Microscope) y la tomografía de proyección óptica (OPT, Optical Projection Tomography). Este nuevo microscopio no almacena una imagen 2D completa por cada posición de la lámina de iluminación, sino que para cada ángulo de adquisición almacena únicamente un parámetro representativo de cada píxel obtenido mediante técnicas de tipo OPT. Es decir, para cada ángulo de adquisición se almacena una única imagen de proyección 2D, en lugar de toda una pila de imágenes 2D (como en la técnica de haz láser plano). Esto permite no sólo disminuir los requerimientos del sistema, sino también aumentar la velocidad de adquisición.
Los inventores de la presente solicitud han presentado también la solicitud de patente P201531401 , titulada "Dispositivo de carga múltiple para microscopio de haz láser plano" que describe un dispositivo de carga múltiple para la alimentación a un microscopio de haz láser plano de un flujo continuo y secuencial de muestras. Este dispositivo fundamentalmente comprende un conducto capilar que atraviesa la zona de medida de la cubeta de recepción de muestras del microscopio que tiene un diámetro tal que sólo permite el paso de las muestras de una en una, y un elemento de generación de flujo regulable conectado al conducto capilar capaz de provocar un flujo continuo y controlable de muestras inmersas en un medio fluido a través de dicho conducto capilar. Ello permite hacer pasar de manera secuencial una pluralidad de muestras por el interior de la cubeta de recepción, acelerando el proceso de adquisición de datos de muestras múltiples.
Los inventores de la presente solicitud han presentado también la solicitud de patente P201630071 , titulada "Dispositivo automático de cambio de objetivo para microscopio de haz láser plano", que describe un dispositivo que permite cambiar de manera automática el objetivo empleado para la adquisición de las imágenes en función de la magnificación deseada en cada momento. Este dispositivo fundamentalmente comprende dos soportes configurados para el acoplamiento en paralelo de al menos dos objetivos orientados según una dirección de detección; un medio de traslación lateral configurado para desplazar lateralmente dichos al menos dos soportes de modo que uno de los objetivos quede enfrentado a una cubeta del microscopio de haz láser plano; y un medio de traslación longitudinal configurado para desplazar longitudinalmente según la dirección de detección al menos el soporte al que está acoplado el objetivo enfrentado a la cubeta.
En cualquiera de estos casos, las muestras que se van a medir en un microscopio normalmente están dispuestas en un tubo de ensayo o en un conducto capilar. Los tubos de ensayo se utilizan para muestras grandes, tales como órganos clareados (cerebro de ratón o de pollo, por ejemplo), y tienen un diámetro aproximado de 1 cm o superior. Los conductos capilares se usan para hacer pasar muestras pequeñas (Drosophila melanogaster o pez cebra, por ejemplo) a lo largo de la zona de medida del microscopio del modo descrito en el documento P201531401.
Actualmente, no existe ningún dispositivo de sujeción que permita la sujeción adecuada en un microscopio tanto de tubos de ensayo como de conductos capilares. En general, actualmente el usuario debe abrir el tubo de ensayo en cuestión, extraer la muestra e introducirla en un dispositivo diseñado al efecto. Un ejemplo de dispositivo de sujeción de muestras actual de tejido fijado y clareado se describe en Abe et al, "Light sheet fluorescence microscopy for in situ cell interaction analysis in mouse lymph nodes", Journal of Immunological Methods (2015). Otro ejemplo de un dispositivo de sujeción de muestras vivas se describe en Kaufmann et al, "Multilayer mounting enables long term imaging of zebrafish development in a light sheet microscope", Developement 139 (2012). DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN
La presente invención está dirigida a un dispositivo de sujeción de muestras para microscopio. Este dispositivo de sujeción es aplicable en general a cualquier tipo de microscopio de configuración horizontal, es decir, con el eje óptico perpendicular al suelo, aunque está especialmente pensado para su uso en microscopios de haz láser plano o de proyección óptica. El dispositivo de sujeción de muestras de la presente invención comprende fundamentalmente los siguientes elementos: un medio de sujeción de un tubo de ensayo que aloja las muestras; y un medio de acoplamiento del dispositivo a un soporte giratorio de muestras de un microscopio. A continuación, se describe cada uno de estos elementos con más detalle.
1. Medio de sujeción del tubo de ensayo
El medio de sujeción del tubo de ensayo tiene la función de sujetar el tubo de ensayo donde se encuentran las muestras de manera firme para permitir su manipulación durante las operaciones de obtención de imágenes mediante el microscopio. Además, normalmente será necesario que el tubo de ensayo esté centrado, ya que el medio de sujeción del tubo de ensayo puede acoplarse a un soporte de microscopio de tipo giratorio para la obtención de imágenes de la muestra desde diferentes ángulos.
Por ello, preferentemente el medio de sujeción del tubo de ensayo comprende un conducto circular dotado de un medio de fijación y centrado de dicho tubo de ensayo. El conducto circular alojará el tubo de ensayo en cuestión, y para ello su diámetro será ligeramente mayor que los diámetros habituales de los tubos de ensayo empleados en este tipo de procedimientos. Por ejemplo, el conducto circular puede tener un diámetro interior de entre 0,5 cm y 2 cm, más preferentemente un diámetro interior de aproximadamente 1 cm. En cuanto al medio de fijación y centrado, éste puede configurarse de diferentes modos, aunque preferentemente se utiliza una o más juntas circulares elásticas alojadas dentro del conducto circular.
2. Medio de acoplamiento del dispositivo al soporte giratorio El medio de acoplamiento de este dispositivo al soporte giratorio de un microscopio puede en principio implementarse de diferentes modos, aunque de acuerdo con una realización preferida de la invención comprende simplemente unos orificios de acoplamiento ubicados en un reborde proximal del dispositivo. Estos orificios permitirán el uso de pernos, tornillos, o similares, para fijar el dispositivo de la invención
Por lo tanto, este dispositivo permite adquirir las imágenes de las muestras directamente desde el tubo de ensayo, evitando la necesidad de extraerlas del mismo. En efecto, el usuario sólo tiene que introducir el tubo de ensayo en el conducto. Se trata, evidentemente, de una introducción parcial donde la porción de tubo donde se encuentra la muestra sobresale por el extremo distal del conducto. La junta o juntas circulares alojadas en el interior del conducto impedirán que el tubo de ensayo pueda deslizar libremente por el interior de dicho conducto y al mismo tiempo asegurarán su centrado. El dispositivo se fija entonces al soporte giratorio del microscopio por medio de los orificios de acoplamiento con ayuda de unos tornillos o similares. Por último, el soporte giratorio del microscopio puede manipularse, bien automáticamente o manualmente, para introducir la parte de tubo de ensayo que sobresale del conducto en la cubeta de un microscopio de haz láser plano y, si es necesario, hacerlo girar para obtener varias imágenes del mismo. Una adecuada selección del fluido en el que se encuentra inmersa la muestra dentro del tubo de ensayo, así como del fluido que rellena la cubeta del microscopio, permitirá la obtención de imágenes nítidas de gran calidad.
Adicionalmente, el dispositivo de la presente invención permite fijar un tubo capilar para obtener imágenes de varias muestras inmersas en un fluido a medida que se hacen fluir a través de dicho tubo capilar, por ejemplo como se ha descrito en el documento P201531401. Para ello, el dispositivo de la presente invención puede comprender además un medio de fijación y centrado adicional desmontable configurado para fijar y centrar un tubo capilar en el conducto circular. Este medio de fijación y centrado se describe brevemente a continuación.
3. Medio de fijación y centrado adicional para tubos capilares
Este medio de fijación y centrado tiene la función de fijar y centrar un tubo capilar en el conducto circular. Preferentemente, este medio está configurado para su acoplamiento a un extremo distal del conducto circular, por ejemplo a través de presión o mediante rosca, aunque serían posibles otras opciones. De acuerdo con una realización especialmente preferida de la invención, este medio de fijación y centrado adicional desmontable es un cabezal dotado de un conducto longitudinal central de diámetro regulable. Por ejemplo, puede tratarse de un cabezal similar al empleado para la fijación de la broca en taladros de pequeño tamaño, y que está dotado de un orificio longitudinal central cuyo diámetro puede cerrarse para atrapar firmemente la broca.
Así, para utilizar el dispositivo de la invención el usuario sólo tiene que fijar el cabezal cilindrico al extremo distal del conducto circular y, a continuación, hacer pasar el tubo capilar a través del conducto circular y el orificio longitudinal central del cabezal. Una vez hecho esto, se cierra el orificio longitudinal central del cabezal hasta que "atrapa" el conducto capilar, manteniéndolo centrado en el conducto circular del dispositivo. El dispositivo se fija al soporte giratorio del microscopio de una manera similar a la descrita anteriormente, y se utiliza el microscopio normalmente.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
La Fig. 1 muestra una vista en perspectiva de un ejemplo del dispositivo según la presente invención.
Las Figs. 2a-2c muestran un procedimiento de fijación de un tubo de ensayo en el ejemplo de dispositivo mostrado en la Fig. 1. La Fig. 3 muestra el ejemplo del dispositivo de la invención al que se ha fijado un tubo capilar gracias al uso de un cabezal de fijación y centrado para tubos capilares.
REALIZACIÓN PREFERENTE DE LA INVENCIÓN A continuación se describe con mayor detalle el dispositivo (1) de la presente invención haciendo referencia a las figuras adjuntas donde se aprecian las diferentes partes que lo componen. En este documento, el término "distal" se refiere a la zona más alejada de la unión entre el dispositivo (1) y un soporte de muestras de un microscopio, mientras que el término "proximal" se refiere a la zona más cercana a dicha unión entre el dispositivo (1) y dicho soporte de muestras.
La Fig. 1 muestra una vista en perspectiva de un dispositivo (1) de acuerdo con la presente invención. El dispositivo (1) está formado por un cuerpo que tiene una porción (1a) cilindrica y una porción (1 b) de reborde. Un conducto (2) también cilindrico atraviesa longitudinalmente la totalidad del cuerpo del dispositivo (1). La porción (1 a) cilindrica tiene en este ejemplo forma de cilindro por cuyo interior transcurre longitudinalmente el conducto (2). En este ejemplo, el conducto (2) tiene un diámetro de aproximadamente 1 cm, lo que es suficiente para permitir el paso de un tubo (100) de ensayo a través de su interior. Aunque no se aprecia en las figuras, en el interior del conducto (2) se aloja una o varias juntas circulares elásticas. Estas juntas pueden estar fijadas a presión a las paredes laterales interiores del conducto (2), y su diámetro interior es ligeramente menor que el del tubo (100) de ensayo que se va a utilizar. Así, la introducción del tubo (100) de ensayo en el conducto (2) provoca la compresión de las juntas de tal modo que el tubo (100) de ensayo queda acoplado al conducto (2) y centrado en el mismo. La porción (1 b) de reborde está dispuesta en un extremo proximal de la porción (1 a) cilindrica. La porción (1 b) de reborde puede formar parte integral de la porción (1 a) cilindrica, y es una pieza circular plana atravesada por el conducto (2) y que comprende unos orificios (3) periféricos para la fijación del dispositivo (1) a un soporte de muestras de un microscopio, por ejemplo un soporte giratorio. Esta unión puede llevarse a cabo mediante tornillos, pernos, o similares.
Las Figs. 2a-2c muestran de manera esquemática una operación de acoplamiento de un tubo (100) de ensayo al dispositivo (1) de la invención. La Fig. 2a muestra el dispositivo (1) de la invención a punto de ser introducido en el conducto (2). La Fig. 2b muestra la mano de un usuario empujando el tubo (100) de ensayo hacia abajo (dirección distal) a través del conducto (2). Se aprecia cómo el extremo inferior del tubo (100) de ensayo donde se encuentra la muestra (102) empieza a aparecer por el extremo distal de la porción (1 b) cilindrica del dispositivo (1). La Fig. 2c muestra el resultado final de esta operación donde un tramo del tubo (100) de ensayo sobresale inferiormente del extremo distal del conducto (2).
La Fig. 3 muestra otra configuración del dispositivo (1) de la invención que, además de los elementos descritos, comprende adicionalmente un medio de fijación y centrado para tubos capilares fijado al extremo distal del conducto (2). Este medio de fijación y centrado para tubos capilares adopta la forma de un cabezal (4) de fijación y centrado. La fijación de este cabezal (4) al extremo distal del conducto (2) puede realizarse de diferentes modos, como por ejemplo mediante rosca, mediante una fijación a presión, etc. El cabezal (4) es similar a un portabrocas de pequeño tamaño, comprendiendo un orificio cilindrico central cuyo diámetro puede aumentarse o disminuirse mediante, por ejemplo, el giro de una llave. Así, una vez el cabezal (4) se ha fijado al extremo distal de la porción (1a) cilindrica del dispositivo (1), puede hacerse pasar a través del conducto (2) un tubo capilar (101) para el paso de muestras de pequeño tamaño. Cuando el conducto capilar (101) ha pasado a través del orificio central del cabezal (4), se acciona dicho cabezal (4) para cerrar el orificio cilindrico central del mismo hasta atrapar el conducto capilar (101), que de ese modo queda centrado en el conducto (2).

Claims

REIVINDICACIONES
1. Dispositivo (1) de sujeción de muestras para microscopio, caracterizado por que comprende:
- un medio de sujeción de un tubo (100) de ensayo que aloja las muestras; y
- un medio de acoplamiento a un soporte giratorio de muestras de un microscopio.
2. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 1 , donde el medio de sujeción del tubo (100) de ensayo comprende un conducto (2) circular dotado de un medio de fijación y centrado de dicho tubo (100) de ensayo.
3. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 2, donde el medio de fijación y centrado del tubo de ensayo comprende una junta circular elástica alojada dentro del conducto (2) circular.
4. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2-3, donde el conducto (2) circular tiene un diámetro interior de entre 0,5 cm y 2 cm.
5. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 4, donde el conducto (2) circular tiene un diámetro interior aproximado de 1 cm.
6. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el medio de acoplamiento al soporte giratorio de muestras del microscopio comprende unos orificios (3) de acoplamiento ubicados en un reborde (1 a) proximal del dispositivo (1).
7. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que además comprende un medio (4) de fijación y centrado adicional desmontable configurado para fijar y centrar un tubo capilar (101) en el conducto (2) circular
8. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 7, donde el medio (4) de fijación y centrado adicional desmontable está configurado para su acoplamiento a un extremo distal del conducto (2) circular.
9. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 8, donde el acoplamiento del medio (4) de fijación y centrado adicional desmontable al extremo distal del conducto (2) circular se lleva a cabo a presión o mediante rosca.
10. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 9, donde el medio (4) de fijación y centrado adicional desmontable es un cabezal dotado de un conducto longitudinal central de diámetro regulable.
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