WO2016198715A1 - Dispositivo para la recogida, preparación y/o cultivo de una muestra - Google Patents

Dispositivo para la recogida, preparación y/o cultivo de una muestra Download PDF

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WO2016198715A1
WO2016198715A1 PCT/ES2016/070433 ES2016070433W WO2016198715A1 WO 2016198715 A1 WO2016198715 A1 WO 2016198715A1 ES 2016070433 W ES2016070433 W ES 2016070433W WO 2016198715 A1 WO2016198715 A1 WO 2016198715A1
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tube
agar
culture medium
medium
sample
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PCT/ES2016/070433
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Inventor
Alberto TENORIO ABREU
José Antonio GÓMEZ FERNÁNDEZ
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Servicio Andaluz De Salud
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M1/00—Apparatus for enzymology or microbiology
    • C12M1/16—Apparatus for enzymology or microbiology containing, or adapted to contain, solid media
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M1/00—Apparatus for enzymology or microbiology
    • C12M1/26—Inoculator or sampler
    • C12M1/28—Inoculator or sampler being part of container
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B10/00—Other methods or instruments for diagnosis, e.g. instruments for taking a cell sample, for biopsy, for vaccination diagnosis; Sex determination; Ovulation-period determination; Throat striking implements
    • A61B10/02—Instruments for taking cell samples or for biopsy

Definitions

  • the present invention belongs to the field of microbiology, and more particularly to the field of collection, preparation and culture techniques of microbiological samples.
  • the object of the present invention is a device specially designed to carry out the collection, preparation and cultivation of a microbiological sample.
  • the preparation may consist, for example, in an enrichment process with the aid of a nutrient-rich medium to increase the bacterial population to be detected or a process for selecting a particular species. Subsequently, the culture is carried out, whose purpose is the creation of colonies that identify the bacterial species to be studied.
  • a swab is used for the collection and transport of the sample, which is preserved in a means of transport. Subsequently, the swab is inoculated into a tube with an enrichment medium or a selective medium. And finally, after incubation in the liquid enrichment medium or in the selective medium, the enriched or selected sample is sown in a solid culture medium to visualize the bacterial species to be studied.
  • document US4387725 describes a device for collecting and sample transport consisting of a tube and a cover to which the base of a sample collection swab is attached. Additionally, the lower end of the tube contains a liquid medium separated from the rest of the volume of the tube by a membrane. To use this device, the user first takes the lid with the swab and collects the sample. Next, place the lid by closing the tube with the swab inside. The end of the swab can thus pass through the membrane and mix with the stored liquid medium.
  • the present invention solves the above problem by means of a device specially designed to carry out the tasks of collecting, preparing and cultivating a sample.
  • the device of the invention is defined by claim 1, the preamble of which corresponds to the technical characteristics described in document US4387725 mentioned above.
  • the device of the present invention comprises a tube provided with a cap from which a sample collection swab protrudes, the length of the swab being such that, when the cap is fixed to the tube, its free end is housed in a lower portion of the tube .
  • the lower portion of the tube contains a first culture medium, so that the free end of the swab is within the first culture medium when the lid is fixed to the tube.
  • This device differs from other prior art devices in that it additionally comprises a second culture medium adhered to the wall of an upper portion of the tube.
  • a culture medium is in general a medium that contains the necessary nutrients to allow, under favorable conditions of pH and temperature, the growth of viruses, microorganisms, cells, plant tissues or even small plants.
  • This new configuration allows to carry out the tasks of collection, preparation and culture of a sample without changing the container.
  • the user collects the sample with the swab. Then, insert the swab into the tube and fix the lid on which the swab protrudes.
  • the free end of the swab that is, the end where the pad or milkweed where the sample is impregnated, is thus inserted into the first culture medium of the lower portion of the tube.
  • the user can remove the lid and carefully distribute the enriched sample on the surface of the second culture medium adhered to the tube wall. The culture is thus carried out directly in the same tube where the preparation has been carried out.
  • the first culture medium employed in the present invention may be sufficiently consistent that it does not require any containment element that prevents it from escaping from the lower portion of the tube.
  • it may be in gel form or the like.
  • the lower portion of the tube is separated by a membrane from the upper portion of the tube. The use of this membrane allows to use a first culture medium in a liquid state.
  • the membrane should have a sufficient strength to prevent the first culture medium from leaving said lower portion of the tube, but at the same time be sufficiently soft for the swab to pierce it.
  • it could be a membrane made of aluminum, a self-sealing polymer or silicone.
  • the self-sealing silicone membrane could have a sphincter in its central zone that prevents the reflux of the first culture medium.
  • the membrane could be smaller in its central area to facilitate puncture by the swab.
  • the first culture medium is preferably an enrichment medium.
  • an enrichment medium is a culture medium that contains the necessary nutrients to support the growth of a wide variety of microorganisms. Certain organisms do not grow in ordinary culture media, but require ingredients that promote growth, such as blood, glucose, serum, egg, among others.
  • the enrichment media contain ingredients that increase the stimulating qualities of the medium, promoting high growth.
  • the enrichment media may also contain chemical components that they inhibit certain types of microorganisms, which allows to obtain a sub-culture of an isolated colony.
  • the enrichment medium can be any of those commonly used in the art, although preferably it is chosen from the following list: Todd Hewitt broth, thioglycolate, LIM broth, brain-heart infusion, selenite broth, preston broth, and water alkaline peptone
  • the first culture medium is a selective or selection medium.
  • a selective or selection medium is a culture medium that has components that inhibit the growth of microorganisms whose growth does not interest, allowing to isolate one or certain species.
  • An example, but not limited to, selective media could be to use a medium rich in an antibiotic to enable the growth of bacteria resistant to it.
  • the selective medium may in principle be any, although preferably it comprises at least one antibiotic.
  • the second culture medium should have a consistency sufficient to remain adhered to the walls of the tube, so it will normally be in a solid state or in the form of a gel.
  • any culture medium known in the art can be used, although preferably it is an agar. More preferably, the agar is chosen from the following list: pomegranate agar, blood agar, chocolate agar, macconkey agar, SS agar, Campy agar, chromogenic agar for MRSA, chromogenic agar for BLEE, chromogenic agar for carbapenemase, and Sabouraud agar.
  • An especially preferred embodiment of the invention is specifically directed to the use of pomegranate agar for screening of Group B Streptococcus (GBS) in pregnant women.
  • pomegranate agar is a selective and differential culture medium specific for group B streptococcus (GBS, Streptococcus agalactiaé). After 24-48 hours of incubation in pomegranate agar at 35-37 ° C, preferably in anaerobiosis, hemolytic strains of GBS develop as orange or red colonies.
  • the pomegranate agar is used in solid or gel state, although there is also a liquid form. The composition of the pomegranate agar medium is described, but not limited to, in De la Rosa et al., 1992. J Clin Microbio! 30: 1019-1021.
  • the area of the wall of the tube in front of that where the second culture medium is adhered comprises a surface increasing element of said second culture medium.
  • This element can be configured, for example, as a selective increase in wall thickness of that area of the tube to form a kind of longitudinal magnifying glass. In this way, the user will be able to appreciate more easily if colonies occur on the surface of the second culture medium.
  • the wall of the upper portion of the tube to which the second culture medium is adhered is removable from the tube.
  • the tube can be constituted by a single piece of glass or plastic inside which an additional piece fitted with a flat face on which the second culture medium is attached is fixed.
  • the fixing of this additional piece to the tube can be carried out by means of cooperating flanges and holes to achieve a pressure fixation. This allows extracting this additional piece from inside the tube itself to carry out other additional interventions.
  • the shape of the tube cross section is elongated.
  • the purpose is also to provide the user with better visibility of the second culture medium where colonies of the sample that has been previously sown will be formed.
  • the elongated shape encompasses any shape that deviates from the conventional circular shape to give rise to at least one area of less curvature, or even flat, that facilitates visibility by decreasing distortion.
  • it can include rectangular, oval, or elliptical type shapes, as well as combinations thereof to give rise to shapes with flat and curved sides.
  • the second culture medium is preferably adhered to an area of the tube wall facing that which has less curvature.
  • Figs. 1a-1c show respectively elevation, plan and profile views of the device of the present invention.
  • Figs. 2a-2e show the steps of a procedure for collecting, enriching and culturing a sample with the device of the present invention. PREFERRED EMBODIMENTS OF THE INVENTION
  • Figs. 1a-1c show the device (1) of the present invention.
  • the tube (2) is shaped like a straight prism with an oval section with a closed lower end and an open upper end.
  • a cover (3) is configured to close the open end of the tube.
  • Fig. 1b shows a schematic image of the plant of the device (1) where its oval shape can be seen.
  • the oval shape of the cross section of this tube (1) prevents the fixing mechanism of the cover (3) from working by thread, so that a pressure fixation is used.
  • the inner face of the lid (3) has a swab (4) perpendicular for specimen collection.
  • the swab (4) is formed by a straight rod or rod at the free end (5) of which is a pad or milkweed intended to be impregnated in the sample in question.
  • the length of the swab (4) is calculated so that when the lid (3) is on, the pad containing the sample is housed in a lower portion of the tube (2).
  • the lower portion of the tube (2) is separated from the upper portion by a membrane (8) and contains an enrichment means (6) intended to enrich the sample collected by the swab (4).
  • one of the walls of the tube (2) with less curvature has a culture medium (7) attached.
  • Figs. 2a-2e schematically show a method of collection, enrichment and culture of a microbiological sample using the device (1) of the present invention.
  • the swab (4) is used to impregnate the pad of its free end (5) of the microbiological sample in question.
  • the swab (4) is inserted into the tube (2) and the cap (3) is fixed to the tube (2).
  • the free end (5) of the swab is inside the lower portion of the tube (2) where the enrichment means (6) is located. To do this, it must have passed through the membrane (8) that separates said lower and upper portions of the tube (2).
  • FIG. 2d shows how the cap (3) is removed from the tube (2) to extract the free end (5) of the swab (4) from the enrichment medium (6) and, as can be seen in Fig. 2e, said free end (5) is brought into contact with the medium (7) of culture adhered to the tube wall (2).
  • the process continues with the cultivation of the sample and the study of the results obtained. Since the culture medium (7) is adhered to one of the walls of less curvature, the user can observe the growth of the microorganisms in question more clearly and without the deformations that a conventional circular section tube would cause.
  • This new device (1) is directly applicable to the screening of Group B Streptococcus (GBS) in pregnant women, recommended internationally by the Centers for Diseases Control and Prevention (CDC), for the prevention of neonatal sepsis by GBS.
  • GBS Group B Streptococcus
  • a test was performed using a device (1) with Todd-Hewit broth as medium (6) for enrichment and solid pomegranate agar as culture medium (7).
  • a pilot was carried out with 199 samples of which 43 were positive. Concordance with the traditional method was 100%, and in addition 3 additional positives were obtained that with that traditional method had not been detected. The time needed for bacterial growth coincides with the traditional method.

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Abstract

La invención describe un dispositivo (1) para la recogida, preparación y/o cultivo de una muestra, que comprende un tubo (2) dotado de un tapón (3) del que sobresale un hisopo (4) de recogida de muestras, donde la longitud del hisopo (4) es tal que, cuando la tapa (3) está fijada al tubo (2), su extremo libre (5) se aloja en una porción inferior del tubo (2), donde la porción inferior del tubo (2) contiene un primer medio (6) de cultivo, y que además comprende un segundo medio (7) de cultivo adherido a la pared de una porción superior del tubo (2).

Description

DESCRIPCIÓN
Dispositivo para la recogida, preparación y/o cultivo de una muestra OBJETO DE LA INVENCIÓN
La presente invención pertenece al campo de la microbiología, y más particularmente al campo de las técnicas de recogida, preparación y cultivo de muestras microbiológicas.
El objeto de la presente invención es un dispositivo especialmente diseñado para llevar a cabo la recogida, preparación y cultivo de una muestra microbiológica.
ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN
Existen determinados procedimientos microbiológicos que exigen, tras la recogida de una muestra, la realización de un proceso de preparación previo al cultivo. La preparación puede consistir, por ejemplo, en un proceso de enriquecimiento con ayuda de un medio rico en nutrientes para aumentar la población bacteriana que se desea detectar o un proceso de selección de una determinada especie. Posteriormente, se lleva a cabo el cultivo, cuyo propósito es la creación de colonias que permitan identificar la especie bacteriana a estudiar.
En la actualidad, la recogida, preparación y cultivo de muestras microbiológicas se lleva a cabo normalmente empleando diferentes dispositivos. En primer lugar, para la recogida y transporte de la muestra se utiliza una torunda que se conserva en un medio de transporte. Posteriormente, se inocula la torunda en un tubo con un medio de enriquecimiento o un medio selectivo. Y por último, tras la incubación en el medio líquido de enriquecimiento o en el medio selectivo, se siembra la muestra enriquecida o seleccionada en un medio sólido de cultivo para visualizar la especie bacteriana a estudiar.
Por otra parte, existen diversos documentos de patente que describen dispositivos destinados a llevar a cabo de manera más compacta una o varias de estas técnicas. Por ejemplo, el documento US4387725 describe un dispositivo para la recogida y transporte de muestras que está formado por un tubo y una tapa a la que está fijada la base de un hisopo de recogida de muestras. Adicionalmente, el extremo inferior del tubo contiene un medio líquido separado del resto del volumen del tubo por una membrana. Para utilizar este dispositivo, en primer lugar el usuario coge la tapa con el hisopo y recoge la muestra. A continuación, coloca la tapa cerrando el tubo con el hisopo en su interior. El extremo del hisopo puede atravesar así la membrana y mezclarse con el medio líquido almacenado.
Sin embargo, no existe actualmente ningún dispositivo que permita llevar a cabo de una manera simple y compacta las técnicas tanto de recogida como de preparación y cultivo.
DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención resuelve el problema anterior mediante un dispositivo especialmente diseñado para llevar a cabo las tareas de recogida, preparación y cultivo de una muestra. El dispositivo de la invención está definido por la reivindicación 1 , cuyo preámbulo corresponde a las características técnicas descritas en el documento US4387725 mencionado anteriormente.
El dispositivo de la presente invención comprende un tubo dotado de un tapón del que sobresale un hisopo de recogida de muestras, siendo la longitud del hisopo tal que, cuando la tapa está fijada al tubo, su extremo libre se aloja en una porción inferior del tubo. La porción inferior del tubo contiene un primer medio de cultivo, de modo que el extremo libre del hisopo queda dentro del primer medio de cultivo cuanto la tapa está fijada al tubo. Este dispositivo se diferencia de otros dispositivos de la técnica anterior por que adicionalmente comprende un segundo medio de cultivo adherido a la pared de una porción superior del tubo. En este contexto, un medio de cultivo es en general un medio que contiene los nutrientes necesarios para permitir, en condiciones favorables de pH y temperatura, el crecimiento de virus, microorganismos, células, tejidos vegetales o incluso pequeñas plantas. Esta novedosa configuración permite llevar a cabo las tareas de recogida, preparación y cultivo de una muestra sin necesidad de cambiar de recipiente. En primer lugar, el usuario recoge la muestra con el hisopo. A continuación, introduce el hisopo en el tubo y fija al tubo la tapa de la que sobresale dicho hisopo. El extremo libre del hisopo, esto es, el extremo en el que se encuentra la almohadilla o algodoncillo donde se impregna la muestra, queda así introducido en el primer medio de cultivo de la porción inferior del tubo. Pasado el tiempo necesario, el usuario puede quitar la tapa y distribuir cuidadosamente la muestra enriquecida por la superficie del segundo medio de cultivo adherida a la pared del tubo. El cultivo se realiza así directamente en el mismo tubo donde se ha llevado a cabo la preparación.
En principio, el primer medio de cultivo empleado en la presente invención puede ser suficientemente consistente como para no requerir de ningún elemento de contención que impida que escape de la porción inferior del tubo. Por ejemplo, puede estar en forma de gel o similar. Sin embargo, de acuerdo con una realización preferida de la invención la porción inferior del tubo está separada por una membrana de la porción superior del tubo. El uso de esta membrana permite utilizar un primer medio de cultivo en estado líquido.
La membrana deberá tener una resistencia suficiente como para evitar que el primer medio de cultivo se salga de dicha porción inferior del tubo, pero al mismo tiempo ser suficientemente blanda como para que el hisopo la perfore. Por ejemplo, podría tratarse de una membrana hecha de aluminio, un polímero o silicona autosellable. En este último caso, la membrana de silicona autosellable podría tener un esfínter en su zona central que impida el reflujo del primer medio de cultivo. Alternativamente, la membrana podría tener menor grosor en su zona central para facilitar la punción por parte del hisopo.
El primer medio de cultivo es preferiblemente un medio de enriquecimiento. En este contexto, un medio de enriquecimiento es un medio de cultivo que contiene los nutrientes necesarios para apoyar el crecimiento de una amplia variedad de microorganismos. Ciertos organismos no crecen en medios de cultivo ordinarios, sino que requieren ingredientes que promueven el crecimiento, como la sangre, glucosa, suero, huevo, entre otros. Los medios de enriquecimiento contienen ingredientes que aumentan las cualidades estimulantes del medio propiciando un crecimiento elevado. Los medios de enriquecimiento también pueden contener componentes químicos que inhiben ciertos tipos de microorganismos, lo que permite obtener un sub-cultivo de una colonia aislada.
En principio, el medio de enriquecimiento puede ser cualquiera de los habitualmente usados en la técnica, aunque preferentemente se elige de la siguiente lista: caldo Todd Hewitt, tioglicolato, caldo LIM, infusión de cerebro-corazón, caldo selenito, caldo preston, y agua peptona alcalina.
En otra realización preferida, el primer medio de cultivo es un medio selectivo o de selección. En el contexto de la presente invención, un medio de selectivo o de selección es un medio de cultivo que tiene componentes que inhiben el crecimiento de microorganismos cuyo crecimiento no interesa, permitiendo aislar una o determinadas especies. Un ejemplo, aunque sin limitarnos, de medio selectivo podría ser utilizar un medio rico en un antibiótico para posibilitar el crecimiento de bacterias resistentes a éste.
El medio selectivo puede en principio ser cualquiera, aunque preferentemente comprende al menos un antibiótico. El segundo medio de cultivo deberá tener una consistencia suficiente como para permanecer adherido a las paredes del tubo, por lo que estará normalmente en estado sólido o en forma de gel. En principio, puede utilizarse cualquier medio de cultivo conocido en la técnica, aunque preferentemente se trata de un agar. Más preferentemente, el agar se elige de la siguiente lista: agar granada, agar sangre, agar chocolate, agar macconkey, agar SS, agar Campy, agar cromogénico para MRSA, agar cromogénico para BLEE, agar cromogénico para carbapenemasa, y agar Sabouraud.
Una realización especialmente preferida de la invención está específicamente dirigida al uso de agar granada para el cribado del Estreptococo del Grupo B (EGB) en mujeres embarazadas. En efecto, ell agar granada es un medio de cultivo selectivo y diferencial específico para estreptococo grupo B (EGB, Streptococcus agalactiaé). Tras 24-48 horas de incubación en agar granada a 35-37 °C, preferentemente en anaerobiosis, las cepas hemolíticas de EGB se desarrollan como colonias naranjas o rojas. Preferiblemente el agar granada se usa en estado sólido o de gel, aunque también existe forma líquida. La composición del medio agar granada se describe, aunque sin limitarnos, en De la Rosa et al., 1992. J Clin Microbio! 30: 1019-1021.
En otra realización preferida del dispositivo de la invención, la zona de la pared del tubo situada frente a aquella donde está adherido el segundo medio de cultivo comprende un elemento de aumento de la superficie de dicho segundo medio de cultivo. Este elemento puede configurarse, por ejemplo, como un aumento selectivo de grosor de la pared del esa zona del tubo para formar una especie de lupa longitudinal. De ese modo, el usuario podrá apreciar con mayor facilidad si se producen colonias en la superficie del segundo medio de cultivo.
En otra realización preferida más, la pared de la porción superior del tubo a la que está adherido el segundo medio de cultivo es extraíble del tubo. Por ejemplo, el tubo puede estar constituido por una única pieza de vidrio o plástico en cuyo interior se fija una pieza adicional dotada de una cara plana sobre la que está adherido el segundo medio de cultivo. La fijación de esta pieza adicional al tubo puede realizarse mediante rebordes y orificios que cooperan para conseguir una fijación a presión. Ello permite extraer esta pieza adicional del interior del propio tubo para llevar a cabo otras intervenciones adicionales.
Por otra parte, en otra realización preferida de la invención la forma de la sección transversal del tubo es alargada. El propósito es también facilitar al usuario una mejor visibilidad del segundo medio de cultivo donde se formarán colonias de la muestra que se ha sembrado con anterioridad. La forma alargada abarca cualquier forma que se aparte de la forma circular convencional para dar lugar a al menos una zona de menor curvatura, o incluso plana, que facilite la visibilidad al disminuir la distorsión. Por ejemplo, puede incluir formas de tipo rectangular, ovaladas, o elípticas, así como combinaciones de las mismas para dar lugar a formas con lados planos y curvos. En este caso, el segundo medio de cultivo preferentemente está adherido a una zona de la pared del tubo situada frente a aquella que tiene menor curvatura.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
Las Figs. 1a-1c muestran respectivamente sendas vistas en alzado, planta y perfil del dispositivo de la presente invención. Las Figs. 2a-2e muestran los pasos de un procedimiento de recogida, enriquecimiento y cultivo de una muestra con el dispositivo de la presente invención. REALIZACIONES PREFERENTES DE LA INVENCIÓN
Las Figs. 1a-1c muestran el dispositivo (1) de la presente invención. El tubo (2) tiene forma de prisma recto de sección ovalada con un extremo inferior cerrado y un extremo superior abierto. Una tapa (3) está configurada para cerrar el extremo abierto del tubo. La Fig. 1b muestra una imagen esquemática de la planta del dispositivo (1) donde se aprecia su forma ovalada. La forma ovalada de la sección transversal de este tubo (1) impide que el mecanismo de fijación de la tapa (3) funcione a rosca, por lo que se emplea una fijación a presión. La cara interior de la tapa (3) tiene fijado en perpendicular un hisopo (4) para la recogida de muestras. El hisopo (4) está formado por un vástago o bastoncillo recto en cuyo extremo libre (5) se encuentra una almohadilla o algodoncillo destinado a impregnarse en la muestra en cuestión. Como se puede apreciar, la longitud del hisopo (4) está calculada para que cuando la tapa (3) está puesta, la almohadilla que contiene la muestra quede alojada en una porción inferior del tubo (2). La porción inferior del tubo (2) está separada de la porción superior mediante una membrana (8) y contiene un medio (6) de enriquecimiento destinado a enriquecer la muestra recogida mediante el hisopo (4). Además, una de las paredes del tubo (2) con menor curvatura tiene adherido un medio (7) de cultivo.
Las Figs. 2a-2e muestran esquemáticamente un procedimiento de recogida, enriquecimiento y cultivo de una muestra microbiológica utilizando el dispositivo (1) de la presente invención. En primer lugar, como se muestra en la Fig. 2a, se maneja el hisopo (4) para impregnar la almohadilla de su extremo libre (5) de la muestra microbiológica en cuestión. A continuación, se introduce el hisopo (4) en el tubo (2) y se fija la tapa (3) al tubo (2). En esta posición, como se muestra en la Fig. 2c, el extremo libre (5) del hisopo queda dentro de la porción inferior del tubo (2) donde se encuentra el medio (6) de enriquecimiento. Para ello, habrá debido atravesar la membrana (8) que separa dichas porciones inferior y superior del tubo (2). Transcurrido el tiempo necesario, la Fig. 2d muestra cómo se quita la tapa (3) del tubo (2) para extraer el extremo libre (5) del hisopo (4) del medio (6) de enriquecimiento y, como se aprecia en la Fig. 2e, se pone en contacto dicho extremo libre (5) con el medio (7) de cultivo adherido a la pared del tubo (2). El proceso continúa con el cultivo de la muestra y el estudio de los resultados obtenidos. Al estar el medio (7) de cultivo adherido a una de las paredes de menor curvatura, el usuario puede observar el crecimiento de los microorganismos en cuestión más claramente y sin las deformaciones que provocaría un tubo de sección circular convencional.
Ejemplo de aplicación
Este nuevo dispositivo (1) es directamente aplicable al cribado del Estreptococo del Grupo B (EGB) en mujeres embarazadas, recomendado internacionalmente por los Centers for Diseases Control and Prevention (CDC), para la prevención de sepsis neonatal por el EGB.
Se realizó una prueba utilizando un dispositivo (1) con caldo Todd-Hewit como medio (6) de enriquecimiento y agar Granada sólido como medio (7) de cultivo. Se realizó un pilotaje con 199 muestras de las cuales 43 fueron positivas. La concordancia con el método tradicional fue del 100%, y además se obtuvieron 3 positivos adicionales que con dicho método tradicional no se habían detectado. El tiempo necesario para el crecimiento de la bacteria coincide con el método tradicional.

Claims

REIVINDICACIONES
1. Dispositivo (1) para la recogida, preparación y/o cultivo de una muestra, que comprende:
un tubo (2) dotado de un tapón (3) del que sobresale un hisopo (4) de recogida de muestras,
donde la longitud del hisopo (4) es tal que, cuando la tapa (3) está fijada al tubo (2), su extremo libre (5) se aloja en una porción inferior del tubo (2);
donde la porción inferior del tubo (2) contiene un primer medio (6) de cultivo; caracterizado por que además comprende un segundo medio (7) de cultivo adherido a la pared de una porción superior del tubo (2).
2. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 1 , donde la porción inferior del tubo (2) está separada por una membrana (8) de la porción superior del tubo (2).
3. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 2, donde la membrana (8) está hecha de aluminio, un polímero o silicona autosellable.
4. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 2-3, donde el primer medio (6) de cultivo es líquido.
5. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el primer medio (6) de cultivo es un medio (6) de enriquecimiento.
6. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 5, donde el medio (6) de enriquecimiento se elige de la siguiente lista: caldo Todd Hewitt, tioglicolato, caldo LIM, infusión de cerebro-corazón, caldo selenito, caldo preston, y agua peptona alcalina.
7. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, donde el primer medio (6) de cultivo es un medio (6) selectivo.
8. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 7, donde el medio selectivo comprende al menos un antibiótico.
9. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el segundo medio (7) de cultivo es un agar.
10. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 9, donde el agar se elige de la siguiente lista: agar Granada, agar sangre, agar chocolate, agar macconkey, agar SS, agar Campy, agar cromogénico para MRSA, agar cromogénico para BLEE, agar cromogénico para carbapenemasa, y agar Sabouraud.
11. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la pared de la porción superior del tubo (2) a la que está adherido el segundo medio (7) de cultivo es extraíble del tubo (2).
12. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la zona de la pared del tubo (2) situada frente a aquella donde está adherido el segundo medio (7) de cultivo comprende un elemento de aumento de la superficie de dicho segundo medio (7) de cultivo.
13. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la forma de la sección transversal del tubo (2) es alargada.
14. Dispositivo (1) de acuerdo con la reivindicación 13, donde la forma alargada de la sección transversal del tubo (2) se elige de la siguiente lista: ovalada, elíptica, rectangular, y una combinación de las anteriores.
15. Dispositivo (1) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 13-14, donde el segundo medio (7) de cultivo está adherido a una zona de la pared del tubo (2) situada frente a aquella que tiene menor curvatura.
PCT/ES2016/070433 2015-06-10 2016-06-09 Dispositivo para la recogida, preparación y/o cultivo de una muestra WO2016198715A1 (es)

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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112120738A (zh) * 2020-10-12 2020-12-25 广东威尔医院有限公司 一种鼻咽拭子自助采集装置
CN114955528A (zh) * 2022-06-20 2022-08-30 深圳市安保医疗感控科技股份有限公司 一种采样拭子智能传送和收集方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4387725A (en) * 1981-02-10 1983-06-14 Mull John D Device for use in the collection and transportation of medical specimens
US5096062A (en) * 1990-07-10 1992-03-17 Hoffmann-La Roche Inc. Transport system for shipping microbiological samples
US20040214316A1 (en) * 2003-04-24 2004-10-28 O'connell David Personal cell sampling kit
WO2005063960A1 (en) * 2003-12-31 2005-07-14 Han Rim Yum One touch-type transport medium vessel
US20050155440A1 (en) * 2004-01-16 2005-07-21 Andx, Inc. Sample collection device and method

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4387725A (en) * 1981-02-10 1983-06-14 Mull John D Device for use in the collection and transportation of medical specimens
US5096062A (en) * 1990-07-10 1992-03-17 Hoffmann-La Roche Inc. Transport system for shipping microbiological samples
US20040214316A1 (en) * 2003-04-24 2004-10-28 O'connell David Personal cell sampling kit
WO2005063960A1 (en) * 2003-12-31 2005-07-14 Han Rim Yum One touch-type transport medium vessel
US20050155440A1 (en) * 2004-01-16 2005-07-21 Andx, Inc. Sample collection device and method

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112120738A (zh) * 2020-10-12 2020-12-25 广东威尔医院有限公司 一种鼻咽拭子自助采集装置
CN114955528A (zh) * 2022-06-20 2022-08-30 深圳市安保医疗感控科技股份有限公司 一种采样拭子智能传送和收集方法

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