WO2016159524A2 - 인삼 열매 추출물을 포함하는 난소 노화 개선용 조성물 - Google Patents

인삼 열매 추출물을 포함하는 난소 노화 개선용 조성물 Download PDF

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WO2016159524A2
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김선미
이지해
배일홍
박찬웅
서대방
신송석
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(주)아모레퍼시픽
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
    • A61K36/258—Panax (ginseng)

Definitions

  • the present invention relates to a ginseng fruit extract that improves aging of the ovary, and more specifically, the ginseng fruit component includes a ginseng fruit extract having an effect of delaying menopause and preventing early menopause due to ovarian aging by increasing the number of follicles in the ovary. It relates to a composition to be.
  • Ginseng is a perennial semi-negative medicinal plant belonging to the genus Araliaceae Ginseng (Panax) .In 1843, it was greeted by the Russian botanist Meyer (CAMeyer) to mean ⁇ cure all diseases ''. "Panax ginseng CA Meyer” and "Axos”. Ginseng is mainly used as a medicinal or natural health food, and its demand is increasing as a medicine and a functional food.
  • Ginseng's ginsenosides include Protopanaxadiol (PD), Protopanaxatriol (PT), and Oleanane.
  • carbohydrates such as starch, poly Antioxidant aromatic compounds of acetylene, Gomisin NA, which protects the liver, and acidic peptides that act like insulin.
  • ginsenosides The main pharmacological action of ginsenosides, including the central nervous system, affects the endocrine system, immune system, metabolic system, and has various effects on body control functions.
  • ginsenosides have high lipolytic power, help nutrient absorption and digestion, promote metabolism by activating enzymes in cells, and increase energy to promote energy recovery, fatigue, weakness, anorexia, and synthesis of serum proteins. It is known to have an effect.
  • the ginseng fruit is not only the same ingredient as the ginseng root, but also triterpene (Luc Pharm Res., 35, 647-651) and isoconifer having a lupane structure not present in the ginseng root but present only in the ginseng fruit. Isoconiferoside, Molecules, 16, 6577-6581, Panaxadione, Chem Pharm Bull (Tokyo), 57, 283-287, Ginsenine, J Asian Nat Prod Res.
  • ginseng fruit is likely to have a difference in the mechanism of pharmacological action with ginseng root, to date, ginseng fruit extract is effective in improving male sexual function (Korean Patent 1,481,778) and ginseng fruit extract is the overall body function of women And it has been reported that it is effective in the improvement of menopausal symptoms, etc. (Korea Patent Registration 2014-0120280), but to increase the number of follicles in the ovary to increase the effect of delaying menopause and early menopause due to improved ovarian aging There was no disclosure or teaching applied directly.
  • PCOS Polycystic Ovary Syndrome
  • menopause caused by the loss of ovarian function before the age of 40 is 'early menopause', the root cause is not yet clear, but the symptoms caused by a decrease in the number of follicles due to aging or degeneration of the ovary.
  • the inventors have found that, as a result of a long study, as the ginseng fruit extract increases the number of follicles in the ovary, although it may not necessarily be effective for infertility, at least it may inhibit aging of the ovary to prevent premature menopause or slow menopause. It has been found and reached the present invention.
  • compositions for inhibiting ovarian aging comprising ginseng fruit extract as an active ingredient which can increase the number of follicles and inhibit aging of the ovary, thereby delaying menopause in women and preventing premature menopause.
  • the present invention provides a composition for inhibiting ovarian aging comprising ginseng fruit extract containing ginsenosides, minerals and vitamins as an active ingredient for delaying menopause and preventing early menopause in women.
  • Composition for inhibiting ovarian aging comprising the ginseng fruit extract of the present invention as an active ingredient is composed of tablets, pills, granules, fine granules, powders, powders, soft capsules, hard capsules, emulsions, syrups and drinks for oral administration It may be prepared in a dosage form selected from the group, and may be a pharmaceutical composition or a food composition.
  • composition comprising the ginseng fruit extract of the present invention as an active ingredient increases the number of follicles in the ovary to a significant value to suppress the aging of the ovary of women, which is effective in delaying the menopause of women and preventing early menopause.
  • FIG. 2 shows the results of analyzing the levels of anti-mullerian hormone (AMH) in the blood of the experimental group and the control experimental mice of the present invention.
  • Figure 3 is the result of measuring the number of follicles in the ovary of the experimental group and control mice of the present invention.
  • Figure 4 is an image comparing the ovary tissue of the experimental group and the control experimental mouse of the present invention.
  • the present invention relates to a ginseng fruit extract for improving ovarian aging, and more particularly to a composition comprising a ginseng fruit extract that is effective in improving ovarian aging by increasing the number of follicles.
  • the composition comprising the ginseng fruit extract of the present invention as an active ingredient can be used to prevent menopausal delay and early menopause by increasing the number of follicles to a significant value to suppress depletion due to aging of the follicles.
  • the ginseng fruit in the present specification is different from the ginseng root commonly used in ginseng, the type and content of the components it contains.
  • Ginseng fruit in the present specification may contain more minerals and vitamins, including ginsenosides than ginseng root, the composition of the ginsenosides contained is different. Therefore, the ginseng fruit of the present invention and the conventional ginseng root may have a difference in effect and pharmacological mechanism.
  • the ginseng fruit used in the present specification is not limited to the method of obtaining, and may be grown and used or purchased and commercially available.
  • the range is not limited as long as the raw material of the form suitable for extracting the active ingredient of ginseng fruit.
  • Raw ginseng fruit in the present specification means ginseng fruit that is not processed such as drying after harvesting ginseng fruit.
  • the ginseng fruit extract in the present specification includes all materials obtained by extracting the components of ginseng fruit, regardless of the extraction method, extraction solvent, extracted component or extract form, heat, acid, in the process of extracting the components It is a broad concept that includes not only the material obtained by the extraction method including the step of treating with a base, an enzyme, etc., but also the material obtained by further processing or treating the extract of the ginseng fruit component. Specific examples of the above processing or processing include fermentation or enzyme treatment of the ginseng fruit extract.
  • the ginseng fruit extract herein may be a raw ginseng fruit, dried ginseng fruit or other processed products of the ginseng fruit (for example, fermented product, dry ground product, etc.), and they may be similar or identical in composition to each other. Can be. Therefore, the raw ginseng fruit, dried ginseng fruit or other processed products of the ginseng fruit having the same or similar composition may represent the same effects and uses of the ginseng fruit extract disclosed herein.
  • the ginseng fruit extraction method of the present invention is preferably a method selected from the group consisting of reflux extraction, hot water extraction, high pressure extraction and microwave extraction.
  • the ginseng fruit is dried, and then refluxed with water, an organic solvent or a combination thereof to obtain a ginseng fruit extract, and additionally extracted and concentrated by removing the fat-soluble component from the ginseng fruit extract. It may further comprise a step.
  • the organic solvent for obtaining the ginseng fruit extract of the present invention may be a solvent selected from the group consisting of alcohol having 1 to 20 carbon atoms, acetone, ether, ethyl acetate, diethyl ether, ethyl methyl ketone and chloroform It is not limited, and preferably at least one selected from the group consisting of methanol, ethanol, propanol, butanol and pentanol can be used.
  • Ginsenoside a component of ginseng fruit extract, is commonly referred to as "Ginsenoside", which is named Glycoside separated from ginseng to distinguish it from other plant saponins.
  • Ginseng has the pharmacological activity that distinguishes and differentiates it from other saponin-containing plants because of this ginsenoside component.
  • Ginsenoside is composed of a protopanaxadiol (PD) -based ginsenoside of Formula 1 and a protopanaxatriol (PT) -based ginsenoside of Formula 1, which is a kind of effective saponin.
  • PD protopanaxadiol
  • PT protopanaxatriol
  • Ginsenosides Rb1, Rb2, Rc, Rd, and the like belonging to the protopanaxadiol (PD) -based ginsenosides are classified as protopanaxatriol (PT) -based ginsenosides. , Rg1, Rg2 and the like.
  • the amount of ProtoPanax Diol (PD) Ginsenoside and ProtoPanax Triol (PT) Ginsenoside is important, but it is reported that the composition ratio is not excessively biased to either side and the balance shows excellent pharmacological efficacy in the body. It has been.
  • the ginseng fruit extract may have a ginsenoside content of 20% by weight or more based on the total weight of the ginseng fruit extract, and a protopanaxanadiol (protopanacanatriol (PT) -based ginsenoside)
  • the weight ratio (PD / PT) of the PD) ginsenoside may be 0.5 to 1.5.
  • the ginseng fruit extract as an embodiment of the present invention may include ginsenosides Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rg1 and Rg2, in particular the content of ginsenoside Re is the total weight of the ginseng fruit extract It may be 8 to 20% by weight on the basis.
  • the structure of ginsenoside Re is represented by the following formula (3).
  • composition comprising the ginseng fruit extract according to the present invention is applicable as a formulation for oral administration, the form is tablets, pills, granules, fine granules, powders, powders, soft capsules, hard capsules, emulsions, syrups and It may be selected from the group consisting of drink.
  • the composition of the formulation may be appropriately selected by those skilled in the art according to the formulation or purpose of use, in addition to the active ingredient, may be appropriately selected by those skilled in the art, and synergistic effects may occur when applied simultaneously with other raw materials.
  • the composition may be a pharmaceutical composition or a food composition.
  • composition for inhibiting ovarian aging of the present invention may include ginseng fruit extract alone as an active ingredient, or may further include one or more active ingredients for ovarian aging inhibition.
  • additional ingredient ie, a pharmaceutically acceptable or nutritionally acceptable carrier, excipient, diluent and subcomponent.
  • the active ingredient in addition to the active ingredient, in addition to nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, coloring agents, enhancers, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH regulators, stabilizers, preservatives, glycerin It may further include an alcohol, a carbonation agent used in the carbonated beverage.
  • the carrier, excipient or diluent may be lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, ziitol, erythritol, maltitol, starch, acycia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, microcrystalline 1 type selected from the group consisting of cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methyl hydroxy benzoate, propyl hydroxy benzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil, dextrin, calcium carbonate, propylene glycol, liquid paraffin, physiological saline
  • the above may be, but is not limited thereto, and any conventional carrier, excipient, or diluent may be used.
  • Raw ginseng (Panax ginseng C.A. Meyer) fruit was harvested to separate and removed seeds, and then the ginseng fruit dried raw material was prepared by sun drying or hot air drying.
  • Ginseng root extract was prepared in the same manner as in Example 1 except that ginseng root was used instead of ginseng fruit.
  • Ginseng Fruit Extract Ginseng root extract Irradiated Phonine Content (Dry Weight) 33.42% 16.70% PD / PT 0.73 3.23
  • the ginseng fruit extract has about twice the content of the ginseng root extract prepared in Comparative Example 1 in the content of irradiated ponin (ginsenoside), ginsenoside "protopanaxadiol system ( PD) Ginseng fruit extract and ginseng root extract are divided into PD / PT, which is the ratio of ginsenoside Rb1, Rb2, Rc, Rd "and” protopanaxanatriol (PT) ginsenoside Re, Rg1, Rg2 ".
  • Figure 1 as a result of analyzing the ginseng fruit extract and ginseng root extract for each ginsenoside component, it can be seen that the amount of the extract has a difference in the content of each component, in particular ginseng fruit extract compared to ginseng root extract The content of side Re was found to be significantly higher.
  • ginseng fruit extract has twice the total content of ginsenosides compared to ginseng root extract, and especially contains high content of ginsenoside Re, protopanax analyses diol (PD) and protopanaxacatriol (PT). ), It was confirmed that the content of either side is balanced without any bias.
  • the ginseng fruit extract of the present invention was found to contain more ginsenosides than ginseng root, and rich in the content of 16 kinds of minerals and vitamins as fruits, unlike ginseng root. As described above, the ginseng fruit extract is different from the ginseng root extract components and its content is expected to be different in efficacy and pharmacological mechanism.
  • mice C57 / BL6 40-week-old female mice were composed of eight groups per group as the following experimental group and control group, and orally administered five times a week for two weeks. At 52 weeks of age, mice were sacrificed and analyzed as follows.
  • Group 1 40 weeks of age / control group (physiological saline)
  • Group2 40 weeks / Ginseng Fruit Extract 100mg / kg
  • Group3 40 weeks / Ginseng Fruit Extract 300mg / kg
  • Group4 40 weeks / Ginseng Root Extract 300mg / kg
  • Serum was separated from blood collected from the orbital venous layer after sacrifice and mice were quantified by the use of ELISA (USCN Life Science Inc.). As a result, as shown in FIG. 2, the anti-gulhorrian concentration of Group 3, which is 300 mg / kg of ginseng fruit extract, was significantly improved compared to Group 1, which is a control group.
  • the ovaries were extracted from the sacrificed mice, fixed with 10% neutral buffered formalin solution, and washed with distilled water for 16 hours.
  • One ovary per subject was tissue treated using an automatic tissue processor (Thermo Shandon, Citadel 1000, USA) and embedded in paraffin to make tissue sections. Tissue sections were stained with hematoxylin-eosin (H & E: Hematoxylin and Eosin) and counted by the number of follicles observed under an optical microscope.
  • H & E Hematoxylin and Eosin
  • composition comprising the ginseng fruit extract of the present invention as an active ingredient can be used to prevent menopausal delay and early menopause by increasing the number of follicles to a significant value to suppress depletion of follicles due to aging.
  • an increase in the number of follicles does not necessarily lead to an improvement in egg quality [Acta Radiol. 2014 Mar; 55 (2): 248-56], although the present invention may be used indirectly to improve infertility, it does not include a direct treatment of infertility.

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Abstract

본 발명은 난소 노화를 개선하는 인삼 열매 추출물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 인삼 열매 성분이 난포 수를 증가시켜 난소 노화를 개선하는데 효과가 있는 인삼 열매 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 노화에 의한 난포의 고갈을 억제함으로써, 조기 폐경의 예방 및 폐경기 지연에 이용할 수 있다.

Description

인삼 열매 추출물을 포함하는 난소 노화 개선용 조성물
본 출원은 2015년 4월 2일자 한국 특허 출원 제10-2015-0046643호에 기초한 우선권의 이익을 주장하며, 해당 한국 특허 출원의 문헌에 개시된 모든 내용을 본 명세서의 일부로서 포함한다.
본 발명은 난소 노화를 개선하는 인삼 열매 추출물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 인삼 열매 성분이 난소 내 난포 수를 증가시킴으로써 난소 노화 개선으로 인한 폐경기 지연 및 조기 폐경 예방의 효과가 있는 인삼 열매 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다.
인삼은 두릅나무과(Araliaceae) 인삼속(Panax)에 속하는 다년생 반음지성 약용식물로서, 1843년 러시아의 식물학자인 메이어(C.A.Meyer)에 의해 '만병을 치료한다'는 의미로 그리스 어원인 'Pan(모든 것)'과 'Axos(의학, 치료하다)'를 합성하여 "Panax ginseng C.A. Meyer"라 명명되었다. 인삼은 주로 뿌리가 약용 또는 자연 건강식품으로 이용되고 있으며, 의약품 및 기능성 식품으로서 그 수요가 증가하고 있다.
인삼의 효능은 주로 인삼 사포닌(Saponin)인 진세노사이드(Ginsenoside)에 의한 것으로, 인삼에는 다양한 종류의 진세노사이드 성분이 포함되어 있다. 인삼의 진세노사이드는 프로토파낙사디올(Protopanaxadiol, PD)계, 프로토파낙사트리올(Protopanaxatriol, PT)계, 올레안(Oleanane)계 등이 있으며, 진세노사이드 성분 이외에도 전분 등의 탄수화물, 폴리아세틸렌의 항산화성 방향족 화합물, 간장을 보호하는 고미신(Gomisin N-A), 유사 인슐린 작용을 하는 산성 펩티드 등이 있다.
진세노사이드의 주요 약리작용은 중추신경계를 비롯하여, 내분비계, 면역계, 대사계 등에 영향을 미쳐 신체조절기능에 다양한 효과를 발휘한다. 이외에도 진세노사이드는 지방분해력이 크고, 영양분 흡수와 소화를 도우며, 세포 내의 효소 활성화로 신진대사를 촉진시키고, 에너지를 증가시켜 원기회복, 피로, 무력감, 식욕부진 개선, 혈청단백질 합성을 촉진시키는 등의 효과가 있다고 알려져 있다.
한편, 인삼 열매는 인삼 뿌리와 동일한 성분뿐만 아니라, 인삼 뿌리에는 없고 인삼 열매에만 존재하는 루펜(lupane) 구조의 트리테르펜(Triterpene, 참조: Arch Pharm Res., 35, 647-651), 이소코니페로사이드(Isoconiferoside, 참조: Molecules, 16, 6577-6581), 파낙사디온[Panaxadione, 참조: Chem Pharm Bull (Tokyo), 57, 283-287], 진세나인(Ginsenine, 참조: J Asian Nat Prod Res., 8, 605-608), 이소진세노사이드-Rh3(Isoginsenoside-Rh3, 참조: J Asian Nat Prod Res., 6, 289-293), 하이드록시프로토파낙사디올(25-hydroxyprotopanaxadiol, 참조: Eur J Drug Metab Pharmacokinet., 35, 109-113) 등의 성분들이 보고된 바 있으며, 인삼 뿌리에 비하여 진세노사이드 Re(Ginsenoside Re, 참조: Nat Prod Commun., 4, 903-906; Diabetes, 51, 1851-1858)가 다량 포함되어 있는 것으로 알려져 있다. 따라서 인삼 열매는 인삼 뿌리와는 약리작용 기전에 있어서 차이가 있을 가능성이 큰데, 현재까지 인삼 열매 추출물이 남성 성기능 개선에 효과가 있다(한국등록특허 1,481,778)는 것과 인삼 열매 추출물이 여성의 전반적인 신체 기능 및 갱년기 증상 등의 개선에 효과가 있다(한국등록특허 2014-0120280)는 것이 보고된 바 있지만, 아직까지 난소 내 난포 수를 증가시킴으로써 난소 노화 개선으로 인한 폐경기 지연 및 조기 폐경 예방의 효과에 관하여는 직접적으로 적용된 어떠한 개시나 교시가 없었다.
한편, 난소 내 난포 수가 증가한다고 하더라도 이에 따라 반드시 난임이 개선된다고 할 수는 없다. 난임의 원인에는 여러 요인이 있으나, 특히 난소에서 배란이 정상적으로 일어나지 않는 배란장애는 여성측 불임원인의 약 40%를 차지하는 가장 중요한 요인이다. 이러한 배란장애를 유발하는 대표적인 요인인 '다낭성 난소 증후군(PCOS; Polycystic Ovary Syndrome)'은 여성의 난소 또는 부신에서 정상치 이상의 남성호르몬을 생산함으로 인해 난자의 성숙과 배란이 정상적으로 일어나지 못하는 상태로서, 난포 형태의 낭종을 다수 가지고 있기 때문에 배란을 하더라도 생식 가능한 난자를 배란하지 못하거나, 혹은 정상적인 난자가 배란되었다고 하더라도 수정란이 착상되기 위한 자궁의 조건이 형성되지 못해 난임의 요인이 된다[Acta Radiol. 2014 Mar;55(2):248-56].
[선행기술문헌]
대한민국 공개특허공보 제2014-0120280호 "인삼 열매 추출물을 포함하는 여성 건강 및 삶의 질 개선용 조성물"
여성의 경우 100 ~ 200만 개의 난포를 가지고 출생하며, 초경 시 30 ~ 40만 개에서, 매 월경주기 마다 하나의 난포가 난자로 성숙되어 배란되면서 다수의 난포가 소멸되어, 폐경 시 1,000여 개로 그 수가 감소한다. 난포는 여성호르몬이 생성 및 분비되는 장소이기 때문에 난포의 수가 급감하는 폐경기에는 에스트로겐 역시 감소하게 된다. 이러한 폐경기에는 여성호르몬의 감소와 관련하여 심혈관계 질환, 신경학적 질환, 정신 과학적인 질환 및 골다공증을 포함하는 다양한 퇴행성 질환의 발병 가능성이 높다. 특히 40세 이전에 난소 기능을 상실하여 발생하는 폐경이 '조기 폐경'이며, 근본적인 원인은 아직까지 확실히 밝혀진 바 없으나, 난소의 노화 또는 퇴화로 인해 난포의 수가 감소하여 발생되는 증상이다.
본 발명자들은 오랜 연구 끝에 인삼 열매 추출물이 난소 내 난포 수를 증가시킴에 따라, 반드시 난임에 효과적이라고 할 수는 없더라도, 적어도 난소의 노화를 억제하여 조기 폐경을 예방하거나, 폐경기를 늦출 수 있다는 점을 밝혀내어 본 발명에 이르게 되었다.
따라서, 본 발명의 목적은 난포 수를 증가시켜 난소의 노화를 억제함으로써 여성의 폐경기를 지연시키고 조기 폐경을 예방할 수 있는 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 노화 억제용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명은 상기의 과제를 해결하기 위하여, 여성의 폐경기 지연 및 조기 폐경 예방을 위해 진세노사이드, 미네랄 및 비타민이 포함된 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 노화 억제용 조성물을 제공한다.
본 발명의 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 노화 억제용 조성물은 경구 투여를 위한 정제, 환제, 과립제, 세립제, 산제, 분제, 연질 캡슐제, 경질 캡슐제, 유탁제, 시럽제 및 드링크제로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조가 가능하며, 약학 조성물 또는 식품 조성물일 수 있다.
본 발명의 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 난소 내 난포 수를 유의한 수치로 증가시켜 여성의 난소 노화를 억제함으로써 여성의 폐경기를 지연시키고 조기 폐경을 예방하는데 효과가 있다.
도 1은 HPLC를 이용하여 본 발명의 인삼 열매 추출물의 성분을 분석한 결과이다.
도 2는 본 발명의 실험군 및 대조군 실험 마우스의 혈중 항뮬러리안 호르몬(AMH)의 수치를 분석한 결과이다.
도 3은 본 발명의 실험군 및 대조군 실험 마우스의 난소 내 난포 수를 측정한 결과이다.
도 4는 본 발명의 실험군 및 대조군 실험 마우스의 난소 조직을 비교한 이미지이다.
본 발명은 난소 노화를 개선하는 인삼 열매 추출물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 난포 수를 증가시켜 난소 노화를 개선하는데 효과가 있는 인삼 열매 추출물을 포함하는 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 난포 수를 유의한 수치로 증가시켜 난포의 노화에 의한 고갈을 억제함으로써 여성의 폐경기 지연 및 조기 폐경 예방에 이용할 수 있다.
본 명세서에서 인삼 열매는 인삼에서 통상적으로 사용되는 인삼 뿌리와는 함유하는 성분의 종류 및 함량 구성이 다르다. 본 명세서에서 인삼 열매는 인삼 뿌리에 비하여 진세노사이드를 비롯한 미네랄 및 비타민 성분을 더 많이 함유할 수 있으며, 함유된 진세노사이드의 조성이 상이하다. 따라서 본 발명의 인삼 열매와 통상의 인삼 뿌리는 효과 및 약리기전에 있어서 차이가 있을 수 있다.
또한, 본 명세서에서 사용되는 인삼 열매는 그 입수 방법에 제한이 없으며, 재배하여 사용하거나 시판되는 것을 구입하여 사용할 수도 있다. 또한, 인삼 열매의 유효 성분을 추출하기에 적절한 형태의 원료라면 그 범위가 제한되지 않는다. 본 명세서에서 생(生) 인삼 열매는 인삼 열매를 수확한 뒤 건조 등의 가공을 하지 않은 인삼 열매를 의미한다.
본 명세서에서 인삼 열매 추출물은 추출 방법, 추출 용매, 추출된 성분 또는 추출물의 형태를 불문하고, 인삼 열매의 성분을 추출하여 얻어진 물질을 모두 포함하는 것이며, 그 성분을 추출하는 과정에서 열, 산, 염기, 효소 등으로 처리하는 공정을 포함하는 추출 방법으로 수득된 물질은 물론, 인삼 열매 성분의 추출물을 추가적인 방법으로 가공 또는 처리하여 수득된 물질까지 모두 포함하는 광의적 개념이다. 상기 가공 또는 처리의 구체적인 예로서, 인삼 열매 추출물을 추가로 발효 또는 효소 처리하는 것을 들 수 있다.
또한, 본 명세서에서 인삼 열매 추출물은 생(生) 인삼 열매, 건조된 인삼 열매 또는 인삼 열매의 다른 가공물(예컨대 발효물, 건조 분쇄물 등)일 수 있으며, 이들은 서로 그 조성이 유사하거나 또는 동일한 것일 수 있다. 따라서 상기 조성이 유사하거나 또는 동일한 생(生) 인삼 열매, 건조된 인삼 열매 또는 인삼 열매의 다른 가공물은 본 명세서에서 개시하는 인삼 열매 추출물의 효과 및 용도를 동일하게 나타내는 것일 수 있다.
본 발명의 인삼 열매 추출 방법은 환류 추출, 열수 추출, 고압 추출 및 마이크로웨이브 추출로 이루어진 군에서 선택되는 방법이 바람직하다. 본 발명의 일 실시예로서, 인삼 열매를 건조한 후, 물, 유기용매 또는 이들의 조합으로 환류 추출하여 인삼 열매 추출물을 수득할 수 있으며, 추가적으로 상기 인삼 열매 추출물에서 지용성 성분을 제거하여 추출 및 농축하는 단계를 더 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 인삼 열매 추출물을 수득하기 위한 유기용매는 탄소수가 1 ~ 20인 알코올, 아세톤, 에테르, 에틸아세테이트, 디에틸에테르, 에틸메틸케톤 및 클로로포름으로 이루어진 군으로부터 선택되는 용매일 수 있으나 이에 제한되는 것은 아니며, 바람직하게는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 및 펜탄올로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상을 사용할 수 있다.
인삼 열매 추출물의 성분인 사포닌(Saponin)은 보통 "진세노사이드(Ginsenoside)"라고 하는데, 이는 타 식물사포닌과 구별하기 위해서 인삼에서 분리된 글리코사이드(Glycoside)란 의미로 붙여진 이름이다. 인삼이 다른 사포닌 함유 식물과 구별되고 차별화 되는 약리활성을 가지는 것은 이 진세노사이드 성분 때문이다. 진세노사이드는 유효 사포닌의 일종인 하기 화학식 1의 프로토파낙사디올(Protopanaxadiol, PD)계 진세노사이드와 하기 화학식 2의 프로토파낙사트리올(Protopanaxatriol, PT)계 진세노사이드로 구성된다.
Figure PCTKR2016002229-appb-C000001
Figure PCTKR2016002229-appb-C000002
상기 프로토파낙사디올(PD)계 진세노사이드에 속하는 것으로 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd 등이 있으며, 프로토파낙사트리올(PT)계 진세노사이드로 분류되는 것으로는 진세노사이드 Re, Rg1, Rg2 등이 있다. 프로토파낙사디올(PD)계 진세노사이드 및 프로토파낙사트리올(PT)계 진세노사이드는 그 양도 중요하지만 그 구성비가 어느 한쪽으로 지나치게 치우치지 않고 균형적인 것이 체내에서 우수한 약리 효능을 나타낸다고 보고된 바 있다.
본 발명의 일실시예로서 인삼 열매 추출물은 진세노사이드의 함량이 인삼 열매 추출물 총 중량 기준으로 20중량% 이상일 수 있으며, 프로토파낙사트리올(PT)계 진세노사이드에 대한 프로토파낙사디올(PD)계 진세노사이드의 중량비(PD/PT)가 0.5 내지 1.5일 수 있다.
또한 본 발명의 일 실시예로서 인삼 열매 추출물은 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rg1 및 Rg2를 포함할 수 있으며, 특히 진세노사이드 Re의 함량이 인삼 열매 추출물의 총 중량 기준으로 8 ~ 20중량%일 수 있다. 진세노사이드 Re의 구조는 하기 화학식 3과 같다.
Figure PCTKR2016002229-appb-C000003
본 발명에 따른 인삼 열매 추출물을 포함하는 조성물은 경구투여를 위한 제형으로 적용 가능하며, 그 형태는 정제, 환제, 과립제, 세립제, 산제, 분제, 연질 캡슐제, 경질 캡슐제, 유탁제, 시럽제 및 드링크제로 구성된 군으로부터 선택될 수 있다. 제형의 조성물은 유효성분 이외에 해당 분야에서 통상적으로 사용되는 성분들을 제형 또는 사용 목적에 따라 당업자가 적절히 선택하여 배합할 수 있으며, 다른 원료와 동시에 적용할 경우 상승효과가 일어날 수 있다. 또한, 상기 조성물은 약학 조성물 또는 식품 조성물일 수 있다.
본 발명의 난소 노화 억제용 조성물은 유효성분으로 인삼 열매 추출물을 단독으로 포함하거나, 난소 노화 억제를 위한 유효성분을 1종 이상 추가로 포함하는 것이 가능하며, 상기 유효성분 외에 제형 형태, 사용 방법 및 사용 목적에 따라 추가성분 즉, 약제학적으로 허용되거나 영양학적으로 허용되는 담체, 부형제, 희석제 및 부성분 중에서 선택된 1종 이상을 추가로 포함하는 것이 가능하다.
보다 상세하게는 상기 유효성분 외에 추가로 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 증진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 담체, 부형제 또는 희석제는 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자이리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아키시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유, 덱스트린, 칼슘카보네이트, 프로필렌글리콜, 리퀴드 파라핀, 생리식염수로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 통상의 담체, 부형제 또는 희석제 모두 사용 가능하다.
이하, 본 발명을 구체적인 실시예에 의해 보다 상세히 설명하고자 한다. 하지만, 본 발명은 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술 사상 범위 내에서 여러 가지 변형 또는 수정할 수 있음은 이 분야의 통상의 지식을 가진 자에게는 명백한 것이다. 또한, 본 명세서에서 사용되는 기술 용어 및 과학 용어에 있어서 다른 정의가 없다면, 이 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 통상적으로 이해하고 있는 의미를 가진다. 따라서, 종래와 동일한 기술적 구성 및 작용에 대한 반복되는 설명은 생략하기로 한다.
실시예 1: 인삼 열매 추출물 제조
(1) 인삼 열매 전처리
생(生) 인삼(Panax ginseng C.A. Meyer) 열매를 수확하여 종자를 분리하고 제거한 후, 인삼 열매의 과육과 과피를 일광건조 또는 열풍건조를 통하여 인삼 열매 건조원료를 제조하였다.
(2) 인삼 열매 추출물 제조
인삼 열매 건조물 1kg에 70% 주정 3l를 가하여 70에서 4시간 동안 환류 추출하고 여과한 후, 45에서 감압 농축하여 인삼 열매 추출물 300g을 얻었다.
비교예 1: 인삼 뿌리 추출물 제조
인삼 열매 대신에 인삼 뿌리를 사용한 것을 제외하고는 실시예 1과 동일한 방법으로 인삼 뿌리 추출물을 제조하였다.
실험예 1: 성분 분석
(1) 인삼 열매 및 인삼 뿌리 추출물의 진세노사이드 성분 분석
상기에서 각각 인삼 열매와 인삼 뿌리 추출물을 제조한 후, 이들 추출물에 에테르를 처리하여 지용성 성분을 제거한 다음, 부탄올로 조사포닌을 추출 및 농축하여, 이를 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC: High performance liquid chromatography)를 사용하여 진세노사이드 성분 분석을 실시하였으며, 그 결과를 하기 표 1 및 도 1에 제시하였다.
인삼 열매 추출물 인삼 뿌리 추출물
조사포닌 함량(건조중량) 33.42% 16.70%
PD/PT 0.73 3.23
표 1의 결과와 같이, 인삼 열매 추출물은 조사포닌(진세노사이드) 함량에 있어서 비교예 1에서 제조한 인삼 뿌리 추출물보다 약 2배 함량을 가지고 있으며, 진세노사이드를 "프로토파낙사디올계(PD) 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rc, Rd" 및 "프로토파낙사트리올계(PT) 진세노사이드 Re, Rg1, Rg2"의 비율인 PD/PT로 구분하였을 때 인삼 열매 추출물과 인삼 뿌리 추출물은 PD/PT 값이 각각 0.73과 3.23으로 그 조성과 함량에 있어서 분명한 차이가 있는 것으로 나타났다.
또한 도 1은 인삼 열매 추출물과 인삼 뿌리 추출물을 진세노사이드 성분별로 각각 분석한 결과로서, 양 추출물은 성분별 함량에 차이가 있음을 확인할 수 있으며, 특히 인삼 열매 추출물이 인삼 뿌리 추출물에 비하여 진세노사이드 Re의 함량이 유의하게 높은 것으로 나타났다.
따라서 인삼 열매 추출물은 인삼 뿌리 추출물에 비하여 진세노사이드 총 함량이 2배 가량으로, 특히 진세노사이드 Re가 고함량으로 포함되어 있으며, 프로토파낙사디올계(PD)와 프로토파낙사트리올계(PT)의 함량이 어느 한 쪽에 치우침이 없이 균형적으로 포함되어 있음을 확인하였다.
(2) 인삼 열매 추출물의 진세노사이드 이외의 성분 분석
실시예 1에서 제조한 인삼 열매 추출물의 미네랄 및 비타민 성분 분석을 실시하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
성분 함량
칼륨(K) 5865.57 mg/100g
칼슘(Ca) 819.26 mg/100g
철(Fe) 59.31 mg/100g
인(P) 187.17 mg/100g
비타민 A 213.11ug/100g,RE
비타민 B1 12.29 mg/100g
비타민 B2 8.45 mg/100g
비타민 B6 10.50 mg/100g
비타민 C 4.91 mg/100g
비타민 E 23.61 mg/100g,a-TE
비타민 K 232.12 mg/100g
판토텐산 5.87 mg/100g
마그네슘 354.38 mg/100g
아연 178.49 mg/100g
나이아신 5.76 mg/100g,NE
엽산 349.97 ㎍/100g
실험예 1의 결과로부터, 본 발명의 인삼 열매 추출물은 인삼 뿌리보다 진세노사이드를 많이 포함함과 동시에, 인삼 뿌리와 달리 과실로서 미네랄과 비타민 16종의 함량이 풍부함을 확인하였다. 상기와 같이, 인삼 열매 추출물은 인삼 뿌리 추출물과 비교하여 성분 및 그 함량이 상이하므로 효능 및 약리기전에서도 차이가 있을 것으로 예측된다.
실험예 2: 난소 노화 개선 효과 확인
(1) 실험군 구성 (군당 8마리)
C57/BL6 40주령 암컷 마우스에 하기와 같은 실험군 및 대조군으로 그룹별 8마리로 구성하여 2주간 주 5회 경구투여를 진행하였으며, 52주령이 되었을 때 마우스를 희생하여 하기와 같이 분석을 진행하였다.
Group1: 40주령/ 대조군(생리식염수)
Group2: 40주령/ 인삼 열매 추출물 100mg/kg
Group3: 40주령/ 인삼 열매 추출물 300mg/kg
Group4: 40주령/ 인삼 뿌리 추출물 300mg/kg
Group5: 10주령/ 무처리군
(2) 혈중 항뮬러리안호르몬(AMH: Anti-Mullerian Hormone) 분석
마우스를 희생시킨 후 안와 정맥층에서 채혈한 혈액으로부터 혈청을 분리하여 ELISA(USCN Life Science Inc.)를 이용하여 난소 내 난포 수의 지표라 할 수 있는 항뮬러리안호르몬 농도를 정량하였다. 그 결과, 도 2와 같이 대조군인 Group1에 비하여 인삼 열매 추출물 300mg/kg 섭취군인 Group3의 항뮬러리안호르몬 농도가 유의하게 개선되었다. 또한 인삼 열매 추출물 100mg/kg 섭취군인 Group2와 인삼 열매 추출물 300mg/kg 섭취군인 Group3의 항뮬러리안호르몬 농도 수치를 비교해보면 항뮬러리안호르몬 농도는 인삼 열매 추출물의 섭취량에 따라 증가하는 것을 알 수 있으며, 이에 따라 인삼 열매 추출물의 섭취량으로 난소 내 난포 수의 증가량을 조절할 수 있음을 알 수 있다. 반면 인삼 뿌리 추출물 300mg/kg 섭취군인 Group4는 대조군과 비교할 때 유의한 차이가 없는 것을 확인할 수 있으며, 이는 인삼 열매와 인삼 뿌리의 성분 차이에 기인한 효과 및 약리기전의 차이 때문인 것으로 판단된다.
(3) 난소 내 난포 수 측정
상기 항뮬러리안호르몬 농도로 예측한 난소 내 난포 수를 직접 확인하기 위하여, 희생시킨 마우스에서 난소를 적출한 후, 10% 중성의 버퍼된 포르말린 용액으로 16시간 고정한 후 증류수로 세척하였다. 개체 당 한 쪽 난소를 자동조직처리기(Thermo Shandon, Citadel 1000, USA)를 이용하여 조직처리를 한 후 파라핀에 포매하여 조직 절편을 만들었다. 조직 절편을 헤마톡실린-에오신(H&E: Hematoxylin and Eosin)으로 염색하여 광학현미경으로 관찰하면서 난포의 수를 계수하였다. 그 결과, 도 3 및 도 4와 같이 인삼 열매 300mg/kg 섭취군인 Group3이 대조군인 Group1에 비하여 난포의 수가 증가하는 경향을 나타내었다.
(4) 인간에게 경구 투여시 복용량 판단
마우스에서 인체로의 체표면적대비 환산계수 3/37을 사용하면 300mg/kg은 24.3mg/kg으로 환산되고, 성인 체중 60kg 적용 시 1.46g/day로 환산된다. 인체시험을 통해 일일 1.4g의 인삼열매 섭취 시 안전성에 문제가 없다는 것이 확인되었으므로(Int J Impot Res. 2013 Mar-Apr;25(2):45-50.), 본 실험에서 마우스에서 효능을 확인한 농도 300mg/kg은 인체에 적용 가능한 섭취량이라 판단된다.
본 발명의 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 난포 수를 유의한 수치로 증가시켜 노화에 의한 난포의 고갈을 억제함으로써 여성의 폐경기 지연 및 조기 폐경 예방에 이용할 수 있다. 그러나 난포 수의 증가가 반드시 난임을 개선하는 것으로 이어지지는 않는 바[Acta Radiol. 2014 Mar;55(2):248-56], 본 발명이 난임증 개선용으로 간접적으로 활용될 수는 있으나, 직접적으로 난임증 치료 효과를 포함하는 것은 아님을 명시한다.

Claims (14)

  1. 인삼 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 난소 노화 억제용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 인삼 열매 추출물은 난소 내 난포 수를 증가시키는 것을 특징으로 하는 난소 노화 억제용 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 인삼 열매 추출물은 여성의 폐경기를 지연시키는 것을 특징으로 하는 난소 노화 억제용 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 인삼 열매 추출물은 여성의 조기 폐경을 예방하는 것을 특징으로 하는 난소 노화 억제용 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 인삼 열매 추출물은 인삼열매에서 지용성 성분을 제거한 후, 유기용매로 추출 및 농축한 성분인 것을 특징으로 하는 난소 노화 억제용 조성물.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 인삼 열매 추출물은 총 진세노사이드 함량이 인삼 열매 추출물의 총 중량 기준으로 20중량% 이상인 것을 특징으로 하는 난소 노화 억제용 조성물.
  7. 제5항에 있어서,
    상기 인삼 열매 추출물은 프로토파낙사트리올(Protopanaxatriol, PT)계 진세노사이드에 대한 프로토파낙사디올(Protopanaxadiol, PD)계 진세노사이드의 중량비(PD/PT)가 0.5 내지 1.5인 것을 특징으로 하는 난소 노화 억제용 조성물.
  8. 제5항에 있어서,
    상기 인삼 열매 추출물은 진세노사이드 Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rg1 및 Rg2를 포함하는 것을 특징으로 하는 난소 노화 억제용 조성물.
  9. 제5항에 있어서,
    상기 인삼 열매 추출물은 진세노사이드 Re의 함량이 인삼 열매 추출물의 총 중량 기준으로 8 ~ 20중량%인 것을 특징으로 하는 난소 노화 억제용 조성물.
  10. 제5항에 있어서,
    상기 인삼 열매 추출물은 미네랄과 비타민을 포함하는 것을 특징으로 하는 난소 노화 억제용 조성물.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 조성물은 경구투여를 위한 제형의 조성물인 것을 특징으로 하는 난소 노화 억제용 조성물.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 경구투여를 위한 제형은 정제, 환제, 과립제, 세립제, 산제, 분제, 연질 캡슐제, 경질 캡슐제, 유탁제, 시럽제 및 드링크제로 구성된 군으로부터 선택되는 제형인 것을 특징으로 하는 조성물.
  13. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 조성물은 약학 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  14. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
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