WO2016125924A1 - 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치 및 시료 냉각방법 - Google Patents

광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치 및 시료 냉각방법 Download PDF

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electron microscope
chamber
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전상미
정현석
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Korea Basic Science Institute KBSI
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Korea Basic Science Institute KBSI
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    • HELECTRICITY
    • H01ELECTRIC ELEMENTS
    • H01JELECTRIC DISCHARGE TUBES OR DISCHARGE LAMPS
    • H01J37/00Discharge tubes with provision for introducing objects or material to be exposed to the discharge, e.g. for the purpose of examination or processing thereof
    • H01J37/02Details
    • H01J37/20Means for supporting or positioning the object or the material; Means for adjusting diaphragms or lenses associated with the support
    • HELECTRICITY
    • H01ELECTRIC ELEMENTS
    • H01JELECTRIC DISCHARGE TUBES OR DISCHARGE LAMPS
    • H01J37/00Discharge tubes with provision for introducing objects or material to be exposed to the discharge, e.g. for the purpose of examination or processing thereof
    • H01J37/26Electron or ion microscopes; Electron or ion diffraction tubes

Definitions

  • the present invention relates to a sample cooling device, and more particularly, to a sample cooling device and a sample cooling method for detecting a linked image of an optical microscope and an electron microscope.
  • An optical microscope is a microscope made to investigate the position and characteristics of a particular component or element by injecting a fluorescent dye that fluoresces under ultraviolet light close to visible rays into a sample.
  • the fluorescent dye used is characterized by absorbing ultraviolet light of short wavelength and emitting energy of long wavelength.
  • optical microscopy is performed by immunofluorescence staining of antibodies capable of reacting with a specific antigen when the immunoassay is performed in a hospital, followed by observing it, and is classified as a fluorescence microscope by this feature.
  • Such an optical microscope can be usefully used for a sample which has a fluorescent substance itself or can be adsorbed on a fluorescent material. Therefore, the optical microscope can be used to identify the path of infection of bacteria or viruses, to locate functional proteins in the cell, and to change the environment. It is widely used for identifying biological phenomena such as specific protein expression and intracellular detection / testing of biological samples.
  • an electron microscope uses an electron beam instead of visible rays used in an optical microscope and an electron lens instead of a glass lens to create an enlarged image of an object.
  • the electron microscope scans the surface of a sample placed in a vacuum with a fine electron beam to accelerate the electrons from the filament and scanning electron microscopy (SEM) to display an enlarged image, and transmits the electron beam exiting the hole of the anode to the specimen.
  • SEM scanning electron microscopy
  • TEM Transmission electron microscopy
  • the observation of the sample is cooled by grasping the position of the sample with an optical microscope and freezing before the position of the sample is changed. Thereafter, the sample is precisely observed with an electron microscope.
  • the work of cooling the sample to freeze is performed manually, a long time phenomenon occurs.
  • Korean Patent Laid-Open Publication No. 10-2012-0138487 discloses a gas liquefaction apparatus for rapid freezing of biological samples for electron microscope observation, which prevents waste of gas in the manufacturing process of liquefied gas for instantaneous freezing of biological tissues and can liquefy gas quickly. to provide.
  • the present invention provides a sample cooling apparatus and a sample cooling method for detecting a linked image of an optical microscope and an electron microscope to fix the movement of a sample by shortening a cooling speed for freezing the sample in a desired state.
  • the purpose is to.
  • Another object of the present invention is to provide a sample cooling apparatus and a sample cooling method for detecting a linked image of an optical microscope and an electron microscope that minimize damage to a sample by automating a process of freezing a sample.
  • a step of loading a sample into a transfer frame accommodating the loaded sample in a culture solution, observing the received sample under an optical microscope, moving the observed sample for cooling, and before the cooling, And removing the culture solution formed on the surface of the sample and dropping the sample from which the culture solution is removed to an external coolant.
  • the sample cooling device and the sample cooling method for detecting the linked image of the optical microscope and the electron microscope according to the present invention can fix the movement of the sample by shortening the cooling speed for freezing the sample in a desired state.
  • the process of freezing the sample can be automated to minimize damage to the sample.
  • FIG. 1 is a perspective view for explaining a sample cooling device according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 2 is a plan view for explaining a sample cooling device according to an embodiment of the present invention.
  • FIG 3 is a side view for explaining a sample cooling device according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 4 is a cross-sectional view for explaining a sample cooling device according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 5 is a perspective view for explaining the discharge of the sample according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 6 is a plan view for explaining a carrier is cultured the sample according to an embodiment of the present invention.
  • Figure 7 is a side view for explaining the removal of the culture medium according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 8 is a flowchart illustrating a sample cooling method according to an embodiment of the present invention.
  • FIG. 1 is a perspective view for explaining a sample cooling device according to an embodiment of the present invention
  • Figure 2 is a plan view for explaining a sample cooling device according to an embodiment of the present invention
  • Figure 3 is an embodiment of the present invention 4 is a side view illustrating a sample cooling device according to an example
  • FIG. 4 is a cross-sectional view illustrating a sample cooling device according to an embodiment of the present invention.
  • the sample cooling device 1 shortens the cooling speed for freezing to observe a sample having a fast moving speed to fix the movement of the sample.
  • the sample chiller 1 can automate the process of freezing the sample to minimize damage to the sample that can occur manually.
  • the sample cooling device 1 includes a transfer part 100, an observation part 200, and a discharge part 300.
  • the transfer unit 100 includes a sample 10 and moves the provided sample 10.
  • the transfer unit 100 includes a guide rail 110, a transfer frame 120, a first motor 130, a second motor 140, and a driver 150.
  • the guide rail 110 is coupled with the lower portion of the transfer frame 120 to prevent the departure from the movement of the transfer frame 120.
  • the guide rail 110 is formed in the longitudinal direction while maintaining a straight line.
  • the guide rail 110 has a length of 20 to 25 cm and a width of 1 to 2 cm.
  • the guide rail 110 has grooves formed on both sides thereof to facilitate the coupling with the transfer frame 120 and to prevent the coupling from being released.
  • the guide rail 110 may further include a rail support at the bottom to prevent the bending phenomenon due to the load generated while the transfer frame 120 moves.
  • the transfer frame 120 is provided with a sample 10 to be transferred from the observation unit 200 to the discharge unit 300.
  • the transfer frame 120 is 30 to 35 cm in the longitudinal direction, the width is 1 to 2 cm.
  • the transfer frame 120 includes a first support part 122 and a second support part 124 that support the frame formed at the center.
  • a sample support 50 for loading and moving the sample 10 may be provided at an upper portion of the first support 122.
  • the first support 122 is formed by passing a portion of the lower portion and is not penetrated.
  • An extended support is formed extending from the bottom. That is, the extended support may have the same shape as the support of the carriage.
  • the extension support in this shape supports the sample support 50 to be provided.
  • the penetrated portion is a size that the jig 350 to be described later can pass through.
  • the upper portion of the sample support 50 is formed with a groove so that the sample 10 is provided.
  • the groove may vary depending on the size and shape of the sample 10.
  • the groove may further include a shape such as a cross, X, Y, etc. so that the user can easily load the sample 10 with tongs, such as pincette, tweezer.
  • the second support part 124 includes an arm rail coupled to the guide rail 110 at the bottom.
  • the arm rail includes a protrusion coupled to a groove formed on the side surface of the guide rail 110 described above. Therefore, as the coupling between the guide rail 110 and the second support 124 is hardened, the separation between the movements is prevented.
  • the frame formed between the first and second support parts 122 and 124 moves to the left and right in engagement with a cog wheel connected to the first motor 130 to be described later, with teeth formed thereon.
  • the first motor 130 controls the left and right movement of the transfer frame 120.
  • the first motor 130 may be a step motor for controlling the rotation angle according to the pulse signal.
  • the rotor of the first motor 130 is coupled with the cog wheels. Therefore, the gear wheel rotates according to the rotation of the first motor 130, and the gear wheel can be engaged with the gear formed on the upper portion of the frame of the transfer frame 120 as described above to control the left and right movement.
  • the second motor 140 controls the vertical movement of the transfer frame 120.
  • the second motor 140 may be the same step motor as the first motor 130.
  • the rotor of the second motor 140 is connected to the support shaft.
  • the support shaft moves up and down according to the rotation of the second motor 140, and thus the moving shaft of the transport frame 120 can be controlled.
  • the driving unit 150 instructs a driving signal to the first motor 130 and the second motor 140.
  • the driving unit 150 controls the rotation angles and the rotation speeds of the first and second motors 130 and 140 as driving signals.
  • the driver 150 may be performed according to a preset algorithm.
  • the observation unit 200 is a space where the sample 10 provided in the transfer unit 100 is observed on an optical microscope installed outside. Observation unit 200 is formed in the center of the transfer unit 100 and the discharge unit 300 in the longitudinal direction is connected to each other.
  • the observation unit 200 includes a first chamber 210, a receiving groove 220, a through hole 230, and a first transparent cover 240.
  • the first chamber 210 is formed in a quadrangular shape, and an upper portion thereof is opened. Both ends of the first chamber 210 are connected to the transfer part 100 and the discharge part 300, respectively, and part of the first chamber 210 is open.
  • the first chamber 210 has a length of 15 to 18 cm, a width of 10 to 14 cm, and a height of 6 to 8 cm in the longitudinal direction.
  • the first chamber 210 is formed with an inner wall of 2 to 3 cm to form a through hole 230 described below.
  • the interior of the first chamber 210 maintains 5% carbon dioxide (CO 2 ) and a temperature of 37 ° C. in order to optimize the state of the sample.
  • the first chamber 210 may include a carbon dioxide sensor (not shown) and a temperature sensor (not shown) therein to maintain an observation environment.
  • the receiving groove 220 is a donut-shaped groove in the central lower inner wall of the first chamber 210.
  • the donut-shaped hole is a through hole 230 to be described later.
  • Receiving groove 220 is provided with a culture plate (not shown) containing the culture solution at the top.
  • the culture plate is transparent, the center is made of glass to facilitate the observation of the optical microscope, the culture medium is a liquid to help the sample 10 is well cultured. In particular, the sample 10 is observed in the state accommodated in the culture solution.
  • the through hole 230 is a hole formed in the lower center of the first chamber 210 to insert an optical lens (not shown).
  • the diameter of the through hole 230 is a size into which the optical lens can be inserted, and preferably, may be 2 to 3 cm.
  • the first transparent cover 240 is provided on the upper portion of the first chamber made of a transparent material.
  • the first transparent cover 240 has a handle 250 formed at one corner thereof to enable the user to open and close easily.
  • a light source (not shown) of an optical microscope is disposed on the first transparent cover 240 to observe the sample 10 contained in the culture solution.
  • the discharge unit 300 removes the culture solution formed on the surface of the sample 10 transferred by the transfer unit 100, and discharges the sample 10 to the outside.
  • the discharge part 300 includes a second chamber 310, a culture medium removal part 320, a second transparent cover 330, a door 340, and a jig 350.
  • the second chamber 310 is a space through which the sample 10 is transferred from the observation unit 200 and passed through.
  • the second chamber 310 is formed with an outlet 315 for discharging the sample 10 to the outside.
  • the outlet 315 may be formed under the second chamber 310, and a coolant (not shown) may be disposed below the outlet 315. Therefore, the sample 10 may be dropped through the outlet 315 and immersed in the coolant to be rapidly frozen.
  • the culture solution removing unit 320 removes the culture solution formed on the surface of the sample 10 with paper.
  • the culture medium removal unit 320 includes a first contact portion 322 and a second contact portion 324 moved up and down to abut each other. That is, the culture medium removal unit 320 compresses the sample 10 to the first and second contact portions 322 and 324 which are moved up and down.
  • the first and second contact portions 322 and 324 both have the paper on one end surface in contact with the sample 10 to remove the culture solution formed on the surface of the sample 10.
  • the paper is merely an example of removing the culture solution, and the like is not limited thereto, and a soft cloth may be used.
  • the second transparent cover 330 is provided on the upper portion of the second chamber 310 of a transparent material. Therefore, the user may check the process of discharging the sample 10 through the second transparent cover 330, and if a malfunction occurs, the user may quickly cope with it.
  • the door 340 is formed at the end of the second chamber 310, and includes a hinge 345 to form a swing door.
  • Door 340 may be formed to replace the paper.
  • the hinge 345 may further include an elastic material such as a spring to automatically close the door 340.
  • the jig 350 gives a shock to the transfer unit 100 so that the sample 10 falls into the discharge port 315. That is, the jig 350 causes the lowering of the first support part 122 to impact the sample support 50 including the sample 10 provided on the upper part of the first support part 122. Through this, the sample support 50 can freely fall into the outlet 315.
  • FIG. 5 is a perspective view for explaining the discharge of the sample according to an embodiment of the present invention.
  • the sample cooling device 1 quickly discharges the sample 10 to an external coolant and cools it.
  • the sample cooling device 1 includes a sample support 50 including the sample 10 on the first support 122, and then observes the result in the first chamber 210. In the observation, the sample 10 contained in the culture solution is taken as an external optical microscope.
  • the sample cooling device 1 drives the first and second motors 130 and 140 to transfer the transfer frame 120 provided with the sample 10 to the discharge part 300.
  • the sample cooling device 1 may maintain a feed rate of the transfer frame 120 at 0.1 to 1 kPa, preferably at 0.5 kPa.
  • the sample cooling device 1 removes the culture solution formed in the sample 10 with the culture solution removing unit 320. At this time, the sample cooling device 1 is formed in a state where the height of the transfer frame 120, more specifically, the height of the first support portion 122 is higher than the height of the jig 350 so as not to contact the jig 350. 1 Transfer the support 122.
  • the sample cooling apparatus 1 lowers the height of the first support part 122 using the second motor 140 and moves in the direction of the jig 350 using the first motor 130. By engaging the lower portion of the jig 350 and the first support portion 122 to generate a locking shock. Through this, the sample support 50 including the sample 10 is separated from the first support portion 122 and freely falls into the outlet 315.
  • the sample support 50 may include a high metal having high thermal conductivity such as copper, gold, and silver.
  • FIG. 6 is a plan view for explaining a carrier is cultured the sample according to an embodiment of the present invention.
  • the carrier 600 safely transports and incubates the sample 10.
  • the carrier 600 includes a cartridge 610, a grid 620, and a fixing pin 630.
  • the cartridge 610 is a mold formed in a donut shape at the outermost portion of the carrier 600.
  • the cartridge 610 protects the sample 10 from external shock.
  • the cartridge 610 also provides a space for the user to easily transport the carrier 600 with tongs.
  • the cartridge 610 and the fixing pin 620 may include a metal having high thermal conductivity, such as copper, gold, and silver.
  • the grid 620 is a space where the sample 10 is substantially cultured.
  • the grid 620 is disposed inside the cartridge 610 and is formed in a circular shape.
  • the grid 620 is formed with a grating, and each grating has a number so that the position of the sample 10 can be easily identified when observing the sample 10.
  • Grid 620 is formed of a metal such as gold, copper, nickel, may be formed thin.
  • the grid 620 is coated with collagen or the like on top of the metal so that the sample 10 is easily cultured.
  • the fixing pin 630 fixes the cartridge 610 and the grid 620 into one.
  • the fixing pin 630 is fixed at the top so that the cartridge 610 and the grid 620 do not fall off.
  • the pin 630 is formed in a smaller donut or C-shape than the cartridge 610.
  • Figure 7 is a side view for explaining the removal of the culture medium according to an embodiment of the present invention.
  • Figure 7 (a) is a view showing a carrier state when the sample 10 is received in the culture medium and the observation is completed
  • Figure 7 (b) is a view showing a carrier state when the carrier 600 is transferred.
  • FIG. 7C is a view showing a carrier state when the culture solution is removed by the culture solution removing unit 320.
  • the sample cooling device 1 removes the culture solution formed on the upper surface of the carrier 600 including the sample 10.
  • the culture solution 750 is formed on the surface of the sample 10, that is, the upper surface of the carrier 600.
  • the sample 10 becomes difficult to measure due to the culture solution 750. Therefore, in order to accurately and precisely measure the sample 10, the culture solution must be removed.
  • the sample chiller 1 removes the culture solution 750 over a second time.
  • the sample cooling device 1 firstly removes the culture solution 750 by the transfer speed while the carrier 600 is provided on the first support 122. At this time, the amount of the culture medium 750 to be removed may vary depending on the feed rate.
  • the sample cooling device 1 is first removed and the remaining culture solution 750 is completely removed by the culture medium removal unit 320.
  • the sample cooling device 1 By removing the culture medium 750 in this manner, the sample cooling device 1 reduces the amount of the culture medium 750 that can be absorbed by the paper provided in the culture medium removal unit 320 so that the sample can be more easily removed. Can be.
  • FIG. 8 is a flowchart illustrating a sample cooling method according to an embodiment of the present invention.
  • the sample cooling method fixes the movement of the sample by shortening the cooling rate of freezing to observe the sample 10 in a desired state.
  • the sample cooling method may minimize the damage of the sample 10 by automating the process of freezing the sample 10.
  • the sample is loaded (S100).
  • the first transparent cover 240 is opened using the handle 250, and the first chamber 210 is opened.
  • the sample 10 is loaded on the sample support 50 provided on the upper part of the first support part 122 located in the opened first chamber 210. At this time, the sample 10 is loaded in the state of the carrier 600 to protect from external shock.
  • the first chamber 210 is closed by closing the first transparent cover 240 again.
  • the sample is observed with an optical microscope (S110).
  • an optical lens is inserted into a through hole formed in the first chamber 210, and a light source microscope is disposed on an upper side of the first transparent cover 240.
  • the sample 10 is accommodated in the culture solution 750, and the received sample 10 is observed. At this time, the observation is completed when the sample 10 is in a desired state.
  • the sample is moved (S120).
  • the third step is conveyed to cool the sample 10 whose observation has been completed.
  • the sample 10 is transferred from the observation unit 200 to the discharge unit 300.
  • the culture solution of the sample surface is removed (S130).
  • the culture solution formed on the surface of the sample is removed by the culture solution removal unit 320.
  • the first and second contact portions 322 and 324 of the culture medium removing unit 320 are moved up and down to abut each other and the culture medium is removed.
  • the sample is introduced into the coolant (S140).
  • the sample support 50 on which the carrier 600 including the sample 10 is raised and the jig 350 formed under the second chamber 310 are caught.
  • the sample support 50 including the sample 10 is separated from the sample support 50 and the jig 350 by the locking impact, and then falls to the outlet 315. Through this, the sample 10 is injected into the external coolant and cooled.

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  • Analytical Chemistry (AREA)
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Abstract

광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치 및 시료 냉각방법이 개시된다. 시료가 광원에 비춰져 관찰되는 관찰부, 시료의 관찰이 완료되면 관찰부를 통과하여 상기 시료를 이송시키는 이송부 및 이송된 시료의 표면에 형성된 배양액을 제거하고, 시료를 외부로 배출하는 배출부를 포함한다.

Description

광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치 및 시료 냉각방법
본 발명은 시료 냉각장치에 관한 것으로, 보다 상세하게는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치 및 시료 냉각방법에 관한 것이다.
일반적으로 의료, 생명 기술분야에서 생체 시료를 관찰하기 위한 장치로서, 광학현미경(light Microscope)과 전자현미경(Electron Microscope)이 널리 사용되고 있다.
광학현미경은 가시광선(visible rays)에 가까운 자외선 하에서 형광을 발하는 형광색소를 시료에 주입함으로써 특별한 성분이나 원소의 위치와 특성 등을 조사할 수 있도록 만들어진 현미경이다. 이때 사용되는 형광색소는 단파장의 자외선을 흡수해 장파장의 에너지를 방출하는 특징이 있다. 예컨데 광학현미경은 병원에서 면역검사를 할 때 특정 항원과 반응할 수 있는 항체를 형광물질로 염색시킨 뒤, 이를 관찰하는 방식으로 면역 검사를 하도록 하며, 이러한 특징에 의해 형광현미경으로 분류되기도 한다. 이러한 광학현미경은 시료 자체가 형광성을 가지거나, 형광물질에 흡착할 수 있는 시료에 유용하게 사용될 수 있으며, 따라서 광학현미경은 박테리아나 바이러스의 감염 경로 규명과 세포내 기능성 단백질의 위치확인 및 환경변화에 따른 특정 단백질 발현여부와 같은 생물학적 현상규명과 생체 시료의 세포내 검출/검사에 많이 이용된다.
한편, 전자현미경은 광학현미경에서 사용하는 가시광선(visible rays) 대신 전자선(electron beam)을 사용하고, 유리렌즈(glass lens) 대신에 전자렌즈(electron lens)를 사용하여 물체의 확대상을 만드는 장치를 말한다. 이러한 전자현미경은 진공 중에 놓여진 시료 표면을 미세한 전자선으로 주사하여 확대상을 표시하는 주사전자현미경(SEM; scanning electron microscopy)과 필라멘트에서 나온 전자를 가속하여 양극의 구멍을 빠져 나온 전자빔을 시편에 투과시켜 상을 얻고 그 상을 전자렌즈로 확대하는 투과전자현미경(TEM; transmission electron microscopy)로 구분될 수 있다.
여기서, 시료의 관찰은 광학현미경으로 시료의 위치를 파악하고, 시료의 위치가 변경되기 전에 동결되도록 냉각을 한다. 그 후, 전자현미경으로 시료를 정밀하게 관찰을 한다. 하지만 시료가 동결되도록 냉각하는 작업이 수동으로 이루어짐에 따라 작업 시간이 길어지는 현상이 발생하고 있다.
즉, 시료 중 이동속도가 빠른 시료의 경우, 동결되기 전에 시료의 위치가 변경되기 때문에, 사용자가 시료를 관찰하는데 어려움을 겪고 있다. 또한 수동으로 냉각 작업이 진행됨에 따라 시료가 손상되는 경우가 발생될 수 있으므로, 자동화 작업 및 빠른 작업 속도가 요구되고 있다.
이에 따라, 상기 문제점을 해결하기 위한 연구가 진행되고 있는 실정이다.
한국 공개특허공보 제10-2012-0138487호는 생체조직 순간동결용 액화가스 제조과정에서 가스의 낭비를 막고 신속하게 가스가 액화될 수 있는 전자현미경 관찰용 생체시료의 급속동결을 위한 가스 액화장치를 제공한다.
본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 시료를 원하는 상태에서 관찰하기 위해 동결하는 냉각속도를 단축하여 시료의 움직임을 고정시키는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치 및 시료 냉각방법을 제공하는데 목적이 있다.
본 발명이 이루고자 하는 다른 기술적 과제는 시료를 동결시키는 과정을 자동화하여 시료의 손상을 최소로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치 및 시료 냉각방법을 제공하는데 목적이 있다.
상기 목적을 해결하기 위해,
본 발명에 따른 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치는,
시료가 광학렌즈에 비춰져 관찰되는 관찰부, 상기 시료의 관찰이 완료되면 상기 관찰부를 통과하여 상기 시료를 이송시키는 이송부 및 상기 이송된 시료의 표면에 형성된 배양액을 제거하고, 상기 시료를 외부로 배출하는 배출부를 포함한다.
본 발명에 따른 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각방법은,
시료가 이송프레임에 로드되는 단계, 상기 로드된 시료를 배양액에 수용시키고, 상기 수용된 시료가 광학현미경으로 관찰되는 단계, 상기 관찰된 시료를 냉각을 위해 이동되는 단계, 상기 냉각을 하기 전, 상기 시료의 표면에 형성된 상기 배양액이 제거되는 단계 및 상기 배양액이 제거된 시료를 외부의 냉각제로 낙하되는 단계를 포함한다.
본 발명에 따른 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치 및 시료 냉각방법은 시료를 원하는 상태에서 관찰하기 위해 동결하는 냉각속도를 단축하여 시료의 움직임을 고정시킬 수 있다.
또한 시료를 동결시키는 과정을 자동화하여 시료의 손상을 최소로 할 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 시료 냉각장치를 설명하기 위한 사시도이다.
도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 시료 냉각장치를 설명하기 위한 평면도이다.
도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 시료 냉각장치를 설명하기 위한 측면도이다.
도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 시료 냉각장치를 설명하기 위한 단면도이다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 시료의 배출을 설명하기 위한 사시도이다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 시료가 배양되는 캐리어를 설명하기 위한 평면도이다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 배양액 제거를 설명하기 위한 측면도이다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 시료 냉각방법을 설명하기 위한 순서도이다.
이하 본 발명의 실시예를 첨부된 도면들을 참조하여 상세히 설명한다. 우선 각 도면의 구성요소들에 참조부호를 부가함에 있어서, 동일한 구성요소들에 대해서는 비록 다른 도면상에 표시되더라도 가능한 한 동일한 부호를 가지도록 하고 있음에 유의한다. 또한 본 발명을 설명함에 있어, 관련된 공지 구성 또는 기능에 대한 구체적인 설명이 당업자에게 자명하거나 본 발명의 요지를 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명은 생략한다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 시료 냉각장치를 설명하기 위한 사시도이고, 도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 시료 냉각장치를 설명하기 위한 평면도이며, 도 3은 본 발명의 일 실시예에 따른 시료 냉각장치를 설명하기 위한 측면도이고, 도 4는 본 발명의 일 실시예에 따른 시료 냉각장치를 설명하기 위한 단면도이다.
도 1 내지 도 4를 참조하면, 시료 냉각장치(1)는 이동속도가 빠른 시료를 관찰하기 위해 동결하는 냉각속도를 단축하여 시료의 움직임을 고정시킨다. 시료 냉각장치(1)는 시료를 동결시키는 과정을 자동화하여 수동으로 발생할 수 있는 시료의 손상을 최소로 할 수 있다. 시료 냉각장치(1)는 이송부(100), 관찰부(200) 및 배출부(300)를 포함한다.
이송부(100)는 시료(10)를 구비하고, 상기 구비된 시료(10)를 이동시킨다. 이송부(100)는 가이드레일(110), 이송프레임(120), 제1 모터(130), 제2 모터(140) 및 구동부(150)를 포함한다.
가이드레일(110)은 이송프레임(120)의 하부와 결합되어 이송프레임(120)의 이동 시에 이탈을 방지시킨다. 가이드레일(110)은 일직선을 유지하며 길이방향으로 형성된다. 가이드레일(110)의 길이는 20 내지 25㎝이고, 폭은 1 내지 2㎝이다. 가이드레일(110)은 양측면에 홈이 형성되어 이송프레임(120)과의 결합이 용이하게 하는 동시에 결합이 풀리지 않도록 한다.
특히, 가이드레일(110)은 하부에 레일지지대를 더 포함하여 이송프레임(120)이 이동하면서 발생되는 하중으로 인해 휨 현상을 미연에 방지할 수 있다.
이송프레임(120)은 시료(10)를 구비하여 관찰부(200)에서 배출부(300)로 이송시킨다. 이송프레임(120)는 길이방향으로 30 내지 35㎝이고, 폭은 1 내지 2㎝이다. 이송프레임(120)은 중앙에 형성되어 있는 프레임을 지지하는 제1 지지부(122) 및 제2 지지부(124)를 포함한다. 또한 제1 지지부(122)의 상부에 시료(10)의 로딩과 이동을 위한 시료지지대(50)가 구비할 수 있다.제1 지지부(122)는 하부의 일부가 관통되어 형성되고, 관통되지 않은 하부로부터 연장되는 연장지지부가 형성된다. 즉, 상기 연장지지부는 지개차의 지지대와 같은 형상을 할 수 있다. 이러한 형상으로 연장지지부는 시료지지대(50)가 구비될 수 있도록 지지한다. 여기서, 상기 관통된 일부는 후술되는 지그(350)가 통과할 수 있는 크기이다.
여기서, 시료지지대(50)의 상부는 시료(10)가 구비되도록 홈이 형성된다. 상기 홈은 시료(10)의 크기와 형상에 따라 달라질 수 있다. 또한 상기 홈은 사용자가 핀셋(pincette), 트위저(tweezer)와 같은 집게로 시료(10)를 용이하게 로드(load)할 수 있도록 십자형, X형, Y형 등과 같은 형상이 더 포함될 수 있다.
제2 지지부(124)는 하부에 가이드레일(110)과 결합되는 암레일을 포함한다. 상기 암레일은 전술된 가이드레일(110)의 측면에 형성된 홈과 결합이 되는 돌출부를 포함한다. 따라서, 가이드레일(110)과 제2 지지부(124)의 결합이 단단해짐에 따라 이동 간에 이탈이 방지된다.
제1 및 제2 지지부(122, 124) 사이에 형성된 프레임은 상부에 톱니가 형성되어 후술되는 제1 모터(130)와 연결된 톱니바퀴와 맞물려 좌우이동을 한다.
제1 모터(130)는 이송프레임(120)의 좌우이동을 제어한다. 제1 모터(130)는 펄스신호에 따라 회전각도를 제어하는 스텝모터일 수 있다. 제1 모터(130)의 회전자(rotor)는 톱니바퀴와 결합된다. 따라서, 제1 모터(130)의 회전에 따라 톱니바퀴가 회전하며, 상기 톱니바퀴가 전술된 이송프레임(120)의 프레임 상부에 형성된 톱니와 맞물리면서 좌우이동을 제어할 수 있다.
제2 모터(140)는 이송프레임(120)의 상하운동을 제어한다. 제2 모터(140)는 제1 모터(130)와 동일한 스텝모터일 수 있다. 제2 모터(140)의 회전자는 지지축과 연결된다. 상기 지지축은 제2 모터(140)의 회전에 따라 상하로 이동하며, 이를 통해 이송프레임(120)의 상하이동을 제어할 수 있다.
구동부(150)는 제1 모터(130) 및 제2 모터(140)에 구동신호를 지시한다. 구동부(150)는 구동신호로 제1 및 제2 모터(130, 140)의 회전각도와 회전속도를 제어한다. 구동부(150)는 기 설정된 알고리즘에 따라 수행될 수 있다.
관찰부(200)는 이송부(100)에 구비된 시료(10)가 외부에 설치된 광학현미경에 관찰되는 공간이다. 관찰부(200)는 길이방향으로 이송부(100)와 배출부(300)의 중앙에 형성되어 서로 간에 연결된다. 관찰부(200)는 제1 챔버(210), 수용홈(220), 관통구(230) 및 제1 투명커버(240)을 포함한다.
제1 챔버(210)는 사각형상으로 형성되고, 상부가 개방된다. 제1 챔버(210)는 길이방향의 양단이 각각 이송부(100)와 배출부(300)와 연결되어 있으며, 이를 위해 일부가 개방되어 있다. 제1 챔버(210)는 길이방향으로 길이가 15 내지 18㎝이고, 폭은 10 내지 14㎝이며, 높이는 6 내지 8㎝이다. 제1 챔버(210)는 하부에 후술되는 관통구(230)가 형성되도록 2 내지 3㎝의 내벽이 형성된다.
제1 챔버(210)의 내부는 시료의 상태를 최적화하기 위해 5%의 이산화탄소(CO2) 및 37℃의 온도를 유지한다. 이를 위해, 제1 챔버(210)는 이산화탄소센서(미도시) 및 온도센서(미도시)를 내부에 포함하여 관찰 환경을 유지할 수 있다.
수용홈(220)은 제1 챔버(210)의 중앙 하부 내벽에 도넛모양의 홈이다. 상기 도넛모양의 구멍은 후술되는 관통구(230)이다. 수용홈(220)은 상부에 배양액이 담긴 배양액접시(미도시)가 구비된다. 상기 배양액접시는 투명하고, 중앙이 유리로 되어 있어 광학현미경 관찰이 용이하게 되도록 하며, 상기 배양액은 시료(10)가 잘 배양이 되도록 도와주는 액체이다. 특히, 시료(10)는 상기 배양액에 수용된 상태에서 관찰이 된다.
관통구(230)는 제1 챔버(210)의 중앙 하부에 형성되어 광학렌즈(미도시)가 삽입되는 구멍이다. 관통구(230)의 지름은 광학렌즈가 삽입될 수 있는 크기이며, 바람직하게는 2 내지 3㎝일 수 있다.
제1 투명커버(240)는 투명한 재질로 제1 챔버의 상부에 구비된다. 제1 투명커버(240)는 일측 모서리에 손잡이(250)가 형성되어 사용자가 개폐를 용이하게 할 수 있게 한다. 제1 투명커버(240)의 상부에는 광학현미경의 광원(미도시)이 배치되어 배양액에 수용된 시료(10)가 관찰된다.
배출부(300)는 관찰부(200)에서 관찰이 완료된 후, 이송부(100)에 의해 이송된 시료(10)의 표면에 형성된 배양액을 제거하고, 상기 시료(10)를 외부로 배출한다. 배출부(300)는 제2 챔버(310), 배양액 제거부(320), 제2 투명커버(330), 도어(340) 및 지그(jig)(350)를 포함한다.
제2 챔버(310)는 시료(10)가 관찰부(200)로부터 이송되어 통과되는 공간이다. 제2 챔버(310)는 시료(10)를 외부로 배출하기 위한 배출구(315)가 형성된다. 배출구(315)는 제2 챔버(310)의 하부에 형성되며, 배출구(315)의 아래에는 냉각제(미도시)가 배치될 수 있다. 따라서, 시료(10)는 배출구(315)를 통해 낙하되어 상기 냉각제에 담가져 급속동결이 될 수 있다.
배양액 제거부(320)는 시료(10)의 표면에 형성된 배양액을 종이(paper)로 제거를 한다. 배양액 제거부(320)는 상하로 이동되어 서로 간에 맞닿는 제1 접촉부(322)와 제2 접촉부(324)를 포함한다. 즉, 배양액 제거부(320)는 상하로 이동되는 제1 및 제2 접촉부(322, 324)로 시료(10)를 압착한다. 특히, 제1 및 제2 접촉부(322, 324)는 양쪽 모두 시료(10)와 접촉되는 일단면에 상기 종이를 구비하여 시료(10)의 표면에 형성된 배양액을 제거한다.
여기서, 배양액을 제거하는 것으로 종이를 예시한 것 일뿐, 이에 한정되지 않고, 부드러운 재질의 천 등도 가능하다.
제2 투명커버(330)는 투명한 재질로 제2 챔버(310)의 상부에 구비된다. 따라서, 제2 투명커버(330)를 통해 사용자는 시료(10)의 배출되는 과정을 확인할 수 있으며, 만약 동작 이상이 발생시에는 빠른 대처를 할 수 있다.
도어(340)는 제2 챔버(310)의 끝단에 형성되며, 힌지(345)를 포함하여 여닫이문 형태로 형성된다. 도어(340)는 상기 종이를 교체하기 위해 형성될 수 있다. 특히, 힌지(345)에 스프링과 같은 탄성물질을 더 구비하여 자동으로 도어(340)가 닫히도록 할 수 있다.
지그(350)는 배출구(315)로 시료(10)가 낙하하도록 이송부(100)에 걸림 충격을 준다. 즉, 지그(350)는 제1 지지부(122)의 하부에 걸림 충격을 주어 제1 지지부(122)의 상부에 구비된 시료(10)가 포함된 시료지지대(50)를 이탈하게 한다. 이를 통해, 시료지지대(50)는 배출구(315)로 자유낙하 할 수 있다.
도 5는 본 발명의 일 실시예에 따른 시료의 배출을 설명하기 위한 사시도이다.
도 5를 참조하면, 시료 냉각장치(1)는 시료(10)를 외부의 냉각제로 빠르게 배출하여 냉각시킨다.
시료 냉각장치(1)는 제1 지지부(122)의 상부에 시료(10)를 포함한 시료지지대(50)를 구비한 후, 제1 챔버(210)에서 관찰을 한다. 상기 관찰은 배양액에 수용된 시료(10)를 외부의 광학현미경으로 한다.
관찰이 완료된 후, 시료 냉각장치(1)는 제1 및 제2 모터(130, 140)를 구동시켜 시료(10)가 구비된 이송프레임(120)을 배출부(300)으로 이송시킨다. 시료 냉각장치(1)는 이송프레임(120)의 이송속도를 0.1 내지 1㎧를 유지할 수 있고, 바람직하게는 0.5㎧로 유지할 수 있다.
시료 냉각장치(1)는 시료(10)에 형성된 배양액을 배양액 제거부(320)로 제거한다. 이 때, 시료 냉각장치(1)는 이송프레임(120)의 높이, 보다 상세하게는 제1 지지부(122)의 높이가 지그(350)와 접촉되지 않도록 지그(350)의 높이보다 높은 상태에서 제1 지지부(122)를 이송한다.
배양액이 제거된 후, 시료 냉각장치(1)는 제2 모터(140)를 이용하여 제1 지지부(122)의 높이를 하강시키고, 제1 모터(130)를 이용하여 지그(350) 방향으로 이동시켜 지그(350)와 제1 지지부(122)의 하부를 걸리게 하여 걸림충격을 발생시킨다. 이를 통해, 시료(10)를 포함하는 시료지지대(50)는 제1 지지부(122)에서 이탈되어 배출구(315)로 자유낙하한다. 상기 시료지지대(50)는 구리, 금, 은과 같은 열전도율이 높은 높은 금속을 포함할 수 있다.
도 6은 본 발명의 일 실시예에 따른 시료가 배양되는 캐리어를 설명하기 위한 평면도이다.
도 6을 참조하면, 캐리어(600)는 시료(10)를 안전하게 이송하고, 배양되도록 한다. 캐리어(600)는 카트리지(610), 그리드(620) 및 고정핀(630)을 포함한다.
카트리지(610)는 캐리어(600)의 최외각에 도넛모양으로 형성된 틀이다. 카트리지(610)는 시료(10)를 외부충격으로부터 보호해준다. 또한 카트리지(610)는 사용자가 집게로 용이하게 캐리어(600)를 이송시키도록 공간을 제공한다. 카트리지(610)와 고정핀(620)은 구리, 금, 은과 같은 열전도율이 높은 금속을 포함할 수 있다.
그리드(620)는 시료(10)가 실질적으로 배양되는 공간이다. 그리드(620)는 카트리지(610)의 안쪽에 배치되고, 원형으로 형성된다. 그리드(620)는 격자가 형성되어있고, 각 격자에는 번호가 기재되어 있어서 시료(10)를 관찰할 때, 시료(10)의 위치를 용이하게 파악할 수 있게 도와준다. 그리드(620)는 금, 구리, 니켈과 같은 금속으로 형성되며, 얇게 형성될 수 있다. 그리드(620)는 상기 금속의 상부에 콜라겐 등으로 코팅을 하여 시료(10)가 용이하게 배양되도록 한다.
고정핀(630)은 카트리지(610)와 그리드(620)를 하나로 고정시켜준다. 고정핀(630)는 카트리지(610)와 그리드(620)가 떨어지지 않게 상부에서 고정을 한다. 고정핀(630)는 카트리지(610)보다 작은 도넛모양 또는 C-모양으로 형성된다.
도 7은 본 발명의 일 실시예에 따른 배양액 제거를 설명하기 위한 측면도이다. 도 7(a)는 시료(10)가 배양액에 수용되어 관찰이 완료된 시점의 캐리어 상태를 도시한 도면이고, 도 7(b)는 캐리어(600)가 이송되는 시점의 캐리어 상태를 도시한 도면이며, 도 7(c)는 배양액 제거부(320)에 의해 배양액이 제거된 시점의 캐리어 상태를 도시한 도면이다.
도 7을 참조하면, 시료 냉각장치(1)는 시료(10)를 포함하는 캐리어(600)의 상면에 형성된 배양액을 제거한다.
시료(10)는 배양액(750)에 수용된 상태에서 관찰이 되기 때문에 관찰이 완료된 후에는 시료(10)의 표면, 즉 캐리어(600)의 상면에 배양액(750)이 형성된다. 하지만 배양액이 형성된 상태에서 시료(10)를 냉각시키는 경우, 시료(10)는 배양액(750)으로 인해 측정이 어려워진다. 따라서, 시료(10)의 측정을 정확하고, 정밀하게 하기 위해서는 배양액을 제거해야만 한다.
시료 냉각장치(1)는 2차에 걸쳐 배양액(750)을 제거한다. 시료 냉각장치(1)는 캐리어(600)가 제1 지지부(122)에 구비되어 이송되는 동안 이송속도에 의해 배양액(750)을 1차로 제거한다. 이 때, 제거되는 배양액(750)의 양은 이송속도에 따라 달라질 수 있다. 시료 냉각 장치(1)는 1차로 제거되고 남은 배양액(750)을 배양액 제거부(320)에 의해 완벽하게 제거한다.
시료 냉각장치(1)는 이렇게 2차에 걸쳐 배양액(750)을 제거함으로써, 배양액 제거부(320)에 구비된 종이가 흡수할 수 있는 배양액(750)의 양을 줄여주어 보다 제거가 용이하도록 할 수 있다.
도 8은 본 발명의 일 실시예에 따른 시료 냉각방법을 설명하기 위한 순서도이다.
도 8을 참조하면, 시료 냉각방법은 시료(10)를 원하는 상태에서 관찰하기 위해 동결하는 냉각속도를 단축하여 시료의 움직임을 고정시킨다. 시료 냉각방법은 시료(10)를 동결시키는 과정을 자동화하여 시료(10)의 손상을 최소로 할 수 있다.
제1 단계는 시료가 로드된다(S100). 제1 단계는 손잡이(250)를 이용하여 제1 투명커버(240)가 열리고, 제1 챔버(210)가 개방된다. 제1 단계는 개방된 제1 챔버(210)에 안에 위치된 제1 지지부(122)의 상부에 구비된 시료지지대(50)에 시료(10)가 로드된다. 이 때, 시료(10)는 캐리어(600) 상태로 로드되어 외부충격으로부터 보호한다. 제1 단계는 시료(10)가 로드된 다음 상기 제1 투명커버(240)를 다시 닫아서 제1 챔버(210)가 패쇄된다.
제2 단계는 시료가 광학현미경으로 관찰된다(S110). 제2 단계는 제1 챔버(210)에 형성된 관통구로 광학렌즈가 삽입되고, 제1 투명커버(240)의 상측에 광원현미경이 배치된다. 제2 단계는 시료(10)가 배양액(750)에 수용되며, 상기 수용된 시료(10)가 관찰된다. 이 때, 상기 시료(10)가 원하는 상태가 되면 관찰이 완료된다.
제3 단계는 시료가 이동된다(S120). 제3 단계는 관찰이 완료된 시료(10)가 냉각되기 위해 이송된다. 제3 단계는 관찰부(200)에서 배출부(300)으로 시료(10)가 이송된다.
제4 단계는 시료 표면의 배양액이 제거된다(S130). 제4 단계는 시료 표면에 형성되어 있는 배양액이 배양액 제거부(320)로 제거된다. 제4 단계는 배양액 제거부(320)의 제1 및 제2 접촉부(322, 324)가 상하로 이동되어 서로 간에 맞닿으며 배양액이 제거된다.
제5 단계는 시료를 냉각제로 투입한다(S140). 제5 단계는 시료(10)를 포함하는 캐리어(600)가 높여져 있는 시료지지대(50)와 제2 챔버(310)의 하부에 형성된 지그(350)가 걸린다. 제5 단계는 시료지지대(50)와 지그(350)의 걸림으로 발생되는 걸림충격으로 시료(10)를 포함하는 시료지지대(50)가 이탈되어 배출구(315)로 낙하된다. 이를 통해 시료(10)는 외부의 냉각제로 투입되어 냉각이 된다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대해 도시하고 설명하였으나, 본 발명은 상술한 특정의 바람직한 실시예에 한정되지 아니하며, 청구범위에서 청구하는 본 발명의 요지를 벗어남이 없이 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 누구든지 다양한 변형 실시가 가능한 것은 물론이고, 그와 같은 변경은 청구범위 기재의 범위 내에 있게 된다.
[부호의 설명]
1: 시료 냉각장치
10: 시료
50: 시료지지대
100: 이송부
110: 가이드레일
120: 이송프레임
122: 제1 지지부
124: 제2 지지부
130: 제1 모터
140: 제2 모터
150: 구동부
200: 관찰부
210: 제1 챔버
220: 수용홈
230: 관통구
240: 제1 투명커버
250: 손잡이
300: 배출부
310: 제2 챔버
315: 배출구
320: 배양액 제거부
322: 제1 접촉부
324: 제2 접촉부
330: 제2 투명커버
340: 도어
345: 힌지
350: 지그
600: 캐리어
610: 카트리지
620: 그리드
630: 고정핀
750: 배양액

Claims (14)

  1. 시료가 광학렌즈에 비춰져 관찰되는 관찰부;
    상기 시료의 관찰이 완료되면 상기 관찰부를 통과하여 상기 시료를 이송시키는 이송부; 및
    상기 이송된 시료의 표면에 형성된 배양액을 제거하고, 상기 시료를 외부로 배출하는 배출부를 포함하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 관찰부는,
    길이방향으로 상기 이송부와 상기 배출부의 중앙에 형성되어 연결되되,
    사각형상으로 형성되고, 상부가 개방되는 제1 챔버;
    상기 제1 챔버의 중앙 하부에 형성되어 상기 광학렌즈가 삽입되는 관통구;
    상기 제1 챔버의 중앙 하부 내벽에 상기 관통구를 기준으로 도넛모양의 홈이 형성되는 수용홈; 및
    투명한 재질로 상기 제1 챔버의 상부에 구비되는 제1 투명커버를 포함하는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  3. 제 2항에 있어서,
    상기 관찰부는,
    상기 수용홈의 상부에 구비되고, 상기 배양액이 담긴 배양액접시를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  4. 제 3항에 있어서,
    상기 시료는,
    상기 배양액접시에 담긴 배양액에 수용된 상태에서 관찰이 되는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  5. 제 2항에 있어서,
    상기 제1 챔버의 내부는,
    5%의 이산화탄소(CO2) 및 37℃의 온도를 유지하는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  6. 제 1항에 있어서,
    상기 이송부는,
    상기 시료를 구비하여 상기 관찰부에서 상기 배출부로 이송시키는 이송프레임;
    상기 이송프레임의 하부와 결합되어 이탈을 방지시켜주는 가이드레일;
    상기 이송프레임의 좌우이동을 제어하는 제1 모터;
    상기 이송프레임의 상하이동을 제어하는 제2 모터; 및
    상기 제1 및 제2 모터에 구동신호를 지시하는 제어부를 포함하는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  7. 제 6항에 있어서,
    상기 이송프레임은,
    양단에 프레임을 지지하는 제1 및 제2 지지부를 포함하고,
    상기 제1 지지부는 상기 시료가 구비되도록 홈이 형성된 시료지지대를 포함하고, 상기 제2 지지부는 하부에 상기 가이드레일과 결합되는 암레일을 포함하는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  8. 제 6항에 있어서,
    상기 이송프레임은,
    프레임의 상부에 톱니가 형성되고, 상기 톱니가 상기 제1 모터와 연결된 톱니바퀴와 맞물려 좌우이동을 하는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  9. 제 1항에 있어서,
    상기 배출부는,
    상기 시료가 상기 관찰부에서 이송되어 통과하는 제2 챔버;
    상기 시료의 표면에 형성된 배양액을 종이(paper)로 제거하는 배양액 제거부; 및
    투명한 재질로 상기 제2 챔버의 상부에 구비되는 제2 투명커버를 포함하는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  10. 제 9항에 있어서,
    상기 제2 챔버는,
    하부에 상기 시료가 외부의 냉각제로 낙하하기 위해 개방된 배출구가 형성하는 것을 특징으로 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  11. 제 10항에 있어서,
    상기 제2 챔버는,
    상기 배출구로 상기 시료가 낙하하도록 상기 이송부에 걸림 충격을 주는 지그(jig)를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  12. 제 9항에 있어서,
    상기 제2 챔버는,
    상기 종이를 교체하기 위해 힌지가 포함된 도어를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  13. 제 9항에 있어서,
    상기 배양액 제거부는,
    상하로 이동되어 서로 간에 맞닿는 제1 및 제2 접촉부를 포함하고,
    상기 제1 및 제2 접촉부는 일단면에 상기 종이를 구비하여 상기 시료의 표면에 형성된 배양액을 제거하는 것을 특징으로 하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각장치.
  14. 시료가 이송프레임에 로드되는 단계;
    상기 로드된 시료를 배양액에 수용시키고, 상기 수용된 시료가 광학현미경으로 관찰되는 단계;
    상기 관찰된 시료를 냉각을 위해 이동되는 단계;
    상기 냉각을 하기 전, 상기 시료의 표면에 형성된 상기 배양액이 제거되는 단계; 및
    상기 배양액이 제거된 시료를 외부의 냉각제로 낙하되는 단계를 포함하는 광학현미경과 전자현미경의 연계형 이미지 검출을 위한 시료 냉각방법.
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