WO2015098476A1 - 自動電気泳動装置 - Google Patents

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transfer film
unit
transfer
electrophoresis apparatus
sample
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French (fr)
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大木　博
宇一 緑川
真一 後藤
田中　毅
豊 鵜沼
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シャープ株式会社
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    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/416—Systems
    • G01N27/447—Systems using electrophoresis
    • G01N27/44704—Details; Accessories
    • G01N27/44717—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones
    • G01N27/44739—Collecting the separated zones, e.g. blotting to a membrane or punching of gel spots

Definitions

  • the present invention relates to an automatic electrophoresis apparatus.
  • This application claims priority based on Japanese Patent Application No. 2013-265687 filed in Japan on December 24, 2013, the contents of which are incorporated herein by reference.
  • Electrophoresis is a method for separating molecules to be analyzed (analyte) by passing an electric current through a buffer through a separation medium. Electrophoresis is widely used as a technique for separating molecules having a large molecular weight, such as molecules in biological samples, based on the difference in their properties. In addition, various methods and apparatuses have been developed so far for immobilizing and analyzing proteins or nucleic acids.
  • SDS-polyacrylamide gel electrophoresis SDS-PAGE
  • SDS sodium dodecyl sulfate
  • Western blotting is well known as a method for analyzing and identifying separated proteins.
  • Western blotting is a method for identifying proteins by antigen-antibody reaction by immobilizing proteins separated by electrophoresis by transferring them from a gel to a transfer film that is an adsorbing member.
  • an automatic electrophoresis apparatus for electrophoresis of serum proteins, an automatic electrophoresis apparatus is used (see, for example, Patent Documents 1 to 3).
  • a support wetting unit that wets a support (transfer film) with a buffer solution
  • a sample applying unit that applies a sample to the support
  • a support on which a sample is applied a support on which a sample is applied.
  • An electrophoretic unit for supplying electricity to the substrate, a post-processing unit for dyeing, decoloring and drying the support after completion of electrophoresis, and a photometric unit for measuring the dyed electrophoretic image are supported by each processing unit.
  • An auto-electrophoresis device is disclosed that is sequentially arranged so that the cells are sequentially conveyed.
  • Patent Document 3 in order to determine the stop position of the support in the migration tank, the rear end (or front end) of the support being transported is detected by a photosensor or the like, and the support is kept for a certain period of time.
  • An automatic electrophoresis apparatus having a mechanism for stopping after being conveyed is disclosed.
  • the transfer film After the sample is applied to the transfer film, it is sequentially transported to the electrophoresis unit, the post-processing unit, and the photometry unit, thereby preventing contamination between samples (cross-contamination). Has become an issue.
  • the transfer film may be damaged during transportation, and improvement in transportation accuracy is also demanded.
  • One aspect of the present invention has been proposed in view of such a conventional situation, and an automatic electrophoresis apparatus capable of improving transfer film conveyance accuracy while preventing cross contamination of the transfer film. Is one of the purposes.
  • An automatic electrophoresis apparatus includes a transfer film supply unit that supplies a transfer film, an electrophoretic transfer unit that transfers a sample separated by electrophoresis to the transfer film, and the sample
  • the transfer film includes a post-processing unit that performs a process for obtaining a transfer image on the transfer film onto which the transfer film is transferred, and a transport unit that transports the transfer film along the transport direction between the units.
  • a guide member that is guided and supported along the transport direction is provided.
  • the guide member may be arranged along both edge portions in a direction parallel to the transport direction of the transfer film. Good.
  • the guide member may have a plurality of holes arranged at a predetermined interval.
  • a configuration is provided that includes a sample preparation unit that prepares a sample cell having a support attached to the transfer film facing the guide member. There may be.
  • the automatic electrophoresis apparatus may include a sample storage unit that stores the sample cell.
  • the automatic electrophoresis apparatus may include a measurement unit that measures a transfer image of the specimen.
  • an automatic electrophoresis apparatus that can improve transfer film conveyance accuracy while preventing cross contamination of the transfer film.
  • FIG. 1 is a schematic diagram showing a schematic configuration of an automatic electrophoresis apparatus according to a first embodiment of the present invention. It is a perspective view of the transfer film provided with the guide member.
  • FIG. 2B is a cross-sectional view taken along line XX shown in FIG. 2A.
  • FIG. 2B is a cross-sectional view taken along line YY shown in FIG. 2A.
  • It is sectional drawing which shows the state before heat-pressing to the transfer film 100 of a support body.
  • FIG. 1 is a schematic diagram showing a schematic configuration of the automatic electrophoresis apparatus 1.
  • the automatic electrophoresis apparatus 1 includes a transfer film supply unit 2, an electrophoretic transfer unit 3, a sample preparation unit 4, a post-processing unit 5, a measurement unit 6, and a sample storage unit 7. And a transport unit 8.
  • the transfer film supply unit 2 includes a transfer film roll 9 around which a long belt-shaped transfer film 100 is wound, and a cutter 10 that cuts the transfer film 100 fed from the transfer film roll 9 to a predetermined length. ing.
  • the transfer film 100 cut to a predetermined length is sequentially conveyed from the transfer film supply unit 2 to the electrophoretic transfer unit 3 by the conveyance unit 8.
  • FIG. 2A is a perspective view showing the configuration of the transfer film 100.
  • FIG. FIG. 2B is a cross-sectional view taken along line XX shown in FIG. 2A.
  • FIG. 2C is a cross-sectional view taken along line YY shown in FIG. 2A.
  • the transfer film 100 is provided with a pair of guide members 101 that are guided and supported along the transport direction (longitudinal direction).
  • the pair of guide members 101 are arranged along the edge portions on both sides in the direction parallel to the transfer direction of the transfer film 100.
  • the pair of guide members 101 are provided with a plurality of holes 102a arranged at predetermined intervals.
  • a through hole 102b having the same size as the hole 102a is formed at a position overlapping the hole 102a of the transfer film 100.
  • the transfer film 100 for example, polyvinylidene fluoride (PVDF), nitrocellulose, or the like can be used.
  • the guide member 101 include polypropylene (PP), polyvinyl chloride (PVC), polyethylene (PE), polystyrene (PS), acrylonitrile butadiene styrene (ABS), acrylonitrile styrene (AS), and polymethyl methacrylate (PMMA).
  • General-purpose plastics such as can be used.
  • the guide member 101 preferably has a width of about 1 mm to 5 mm and a thickness of about 0.2 mm to 1 mm.
  • PVDF polyvinylidene fluoride
  • PP polypropylene
  • the transport unit 8 includes a plurality of guide rolls 11 a to 11 e between the transfer film supply unit 2, the electrophoretic transfer unit 3, and the specimen preparation unit 4.
  • a plurality of guide pins are provided at a predetermined interval in the circumferential direction on the plurality of guide rolls 11a to 11e.
  • a plurality of guide rolls 11 a to 11 e are rotated in the transport direction in a state where the guide pins are fitted in the hole portions 102 a of the guide member 101 and the through holes 102 b of the transfer film 100, so that The transfer film 100 is conveyed between the guide rolls 11a to 11e.
  • the electrophoretic transfer unit 3 includes a hydrophilic treatment spray 12 that performs a hydrophilic treatment on the transfer film 100, a gel filling tank 15 in which an electrophoresis gel 14 is filled between a pair of upper and lower substrates 13a and 13b, and The cathode buffer tank 17 provided with the cathode 16, the anode buffer tank 19 provided with the anode 18, the sampler 20 for supplying a specimen (not shown), and the specimen supplied from the sampler 20 with the gel filling tank And a solution chip 21 leading to 15.
  • the buffer solution L is stored in the cathode buffer tank 17 and the anode buffer tank 19.
  • One end side of the gel filling tank 15 is disposed so as to be immersed in the buffer solution L in the cathode buffer tank 17.
  • an opening 15a into which a sample is introduced is provided on one end side of the gel filling tank 15.
  • the other end side of the gel filling tank 15 is arranged so as to be immersed in the buffer solution L in the anode buffer tank 19.
  • a slit 15 b through which the transfer film 100 passes is provided on the other end side of the gel filling tank 15.
  • the transfer film 100 is hydrophilized by applying the treatment liquid H to the transfer film 100 transported by the transport unit 8 by the hydrophilization spray 12.
  • the treatment liquid H for example, methanol or ethanol can be used.
  • the transfer film 100 subjected to the hydrophilic treatment passes between the slits 15b of the gel filling tank 15 while being guided by the guide rolls 11a to 11d.
  • the specimen supplied from the sampler 20 is introduced into the opening 15 a of the gel filling tank layer 15 through the solution chip 21.
  • the specimen moves from one end side of the gel 14 toward the other end side by applying a DC voltage between the cathode 16 and the anode 18. At this time, the specimen is separated by electrophoresis according to the difference in the molecular weight of the protein. The specimen separated by electrophoresis is transferred to the transfer film 100 that passes through the slit 15b.
  • the transfer film 100 to which the specimen has been transferred is transported from the electrophoresis transfer section 3 to the specimen preparation section 4 by the transport section 8.
  • the specimen preparation unit 4 includes a support attachment part 22 that attaches the support 103 to the transfer film 100 onto which the specimen is transferred, and a package storage part 23 that accommodates the transfer film 100 attached with the support 103 in the package 104. ing.
  • the support attachment portion 22 includes a pressing roll 24, a hot press 25, and a cutter 26 between the guide roll 11d and the guide roll 11e.
  • the pressing roll 24 presses the long belt-like support body 103 fed from a support roll (not shown) around which the long belt-like support body 103 is wound against the transfer film 100.
  • the hot press 25 heat-presses the support 103 to the transfer film 100.
  • the cutter 26 cuts the support body 103 while leaving a portion heat-pressed on the support body 103.
  • FIG. 3A shows a state before being heat-pressed to the transfer film 100 of the support 103
  • FIG. 3B shows a state after being heat-pressed to the transfer film 100 of the support 103
  • the support 103 has a protrusion 103 a that is fitted into the hole 102 a of the guide member 101 and the through hole 102 b of the transfer film 100.
  • a through hole 103b is formed in the protrusion 103a.
  • the support 103 is integrated with the transfer film 100 by the protrusion 103 a being crushed by the hot press 25.
  • the transfer film 100 is fixedly supported by the support 103 in a state where the rigidity is increased.
  • the transfer film 100 integrated with the support 103 is rotated in the transport direction by rotating the guide roll 11e in a state where the guide pin is fitted in the through hole 103b of the support 103. It is conveyed to the package storage unit 23.
  • the sample cell 100 ⁇ / b> A is manufactured by storing the transfer film 100 integrated with the support body 103 in the package 104.
  • the prepared sample cell 100A is transported to the post-processing unit 5 by the transport unit 8.
  • the support 103 for example, a material having higher rigidity than the transfer film 100 such as polytetrafluoroethylene (PTFE), polymethyl methacrylate (PMMA), polyethylene terephthalate (PET), or polypropylene (PP) is used. it can.
  • PTFE polytetrafluoroethylene
  • PMMA polymethyl methacrylate
  • PET polyethylene terephthalate
  • PP polypropylene
  • the package 104 for example, polymethyl methacrylate (PMMA), polyethylene terephthalate (PET), polyethylene (PE), or the like can be used.
  • PTFE polytetrafluoroethylene
  • PMMA polymethyl methacrylate
  • PMMA polymethyl methacrylate
  • the post-processing unit 5 performs a process for obtaining a transfer image of the specimen, such as blocking, staining, decoloring, washing, drying, and incubation, on the transfer film 100 onto which the specimen in the package 104 has been transferred. Further, the post-processing unit 5 can perform an operation of stirring the sample cell 100A during the processing.
  • the processed sample cell 100 ⁇ / b> A is transported to the measurement unit 6 by the transport unit 8.
  • the measurement unit 6 includes an illumination unit 27 that irradiates the sample cell 100A with the measurement light B, and an imaging unit 28 that captures a transfer image of the sample.
  • an excitation light source such as a laser diode (LD) can be used.
  • an imaging device such as a charge coupled device (CCD) can be used.
  • the measurement unit 6 performs measurement while scanning the illumination unit 27 and the imaging unit 28.
  • the presence or absence of antibodies in the specimen can be inspected by measuring the obtained transferred image of the specimen.
  • the sample cell 100A after the test is transported to the sample storage unit 7 by the transport unit 8.
  • the specimen storage unit 7 includes a storage container 29 that stores a plurality of specimen cells 100A.
  • the storage container 29 stores a plurality of sample cells 100A in an aligned state.
  • the transfer film 100 comes into contact with the guide rolls 11a to 11e constituting the transport unit 8 via the guide member 101 during transport. It will be. For this reason, the transfer film 100 does not come into direct contact with the guide rolls 11a to 11e. As a result, it is possible to prevent contamination (cross-contamination) between the specimens transferred to the transfer film 100.
  • the rigidity of both end portions where the pair of guide members 101 are provided can be increased. Therefore, in the automatic electrophoresis apparatus 1, it is possible to avoid apparatus troubles, such as the transfer film 100 being damaged at the time of conveyance.
  • the guide pins of the guide rolls 11a to 11e are fitted into the plurality of holes 102a and the through holes 102b provided in the pair of guide members 101 and the transfer film 100. It is conveyed in the state. Thereby, it is possible to improve the conveyance accuracy of the transfer film 100 and improve the reliability.
  • the support 103 is attached to the transfer film 100 to which the specimen is transferred, thereby increasing the rigidity of the transfer film 100 and moving the transfer film 100 accommodated in the package 104. To prevent that. In this case, since the transfer film 100 does not come into contact with the package 104, it is possible to prevent contamination of the specimen (cross contamination).
  • the automatic electrophoresis apparatus 1 shown in FIG. 1 is configured to include the measurement unit 6, the measurement unit 6 may be omitted.
  • the measurement unit 6 may be omitted.
  • FIG. 4 is a schematic diagram showing a schematic configuration of the automatic electrophoresis apparatus 51. Moreover, in the following description, about the site
  • the automatic electrophoresis apparatus 51 includes a transfer film supply unit 52, an electrophoretic transfer unit 53, a sample storage unit 57, and a transport unit 58.
  • the transfer film supply unit 52 includes a transfer film roll 59 around which a long belt-shaped transfer film 100 is wound, and a hydrophilization treatment tank 60 that performs a hydrophilization process on the transfer film 100.
  • the transfer film roll 59 is disposed in a state of being immersed in the treatment liquid H in the hydrophilization treatment tank 60.
  • the transfer film 100 is conveyed from the transfer film supply unit 52 to the electrophoretic transfer unit 53 by the conveyance unit 58.
  • the transport unit 58 includes a plurality of guide rolls 61 a to 61 c between the transfer film supply unit 52, the electrophoretic transfer unit 53, and the sample storage unit 57. As shown in FIG. 5, a plurality of guide pins 62 are provided on the plurality of guide rolls 61a to 61c side by side at a predetermined interval in the circumferential direction.
  • FIG. 5 is an enlarged schematic view of the guide roll 61b among the plurality of guide rolls 61a to 61c shown in FIG.
  • the plurality of guide rolls 61 a to 61 c are rotated in the transport direction with the guide pins 62 fitted in the holes 102 a of the guide member 101 and the through holes 102 b of the transfer film 100.
  • the transfer film 100 is conveyed between the guide rollers 61a to 61c.
  • the electrophoretic transfer unit 53 includes a gel filling tank 65 in which an electrophoresis gel 64 is filled between a pair of upper and lower substrates 63a and 63b, and a cathode buffer tank 67 in which a cathode 66 is provided. And an anode buffer tank 69 provided with an anode 68.
  • the buffer solution L is stored in the cathode buffer tank 67 and the anode buffer tank 69.
  • One end side of the gel filling tank 65 is disposed so as to be immersed in the buffer solution L in the cathode buffer tank 67.
  • an opening 65a into which the sample S is introduced is provided on one end side of the gel filling tank 65.
  • the other end side of the gel filling tank 65 is disposed so as to be immersed in the buffer solution L in the anode buffer tank 69.
  • a slit 65 b through which the transfer film 100 passes is provided on the other end side of the gel filling tank 65.
  • the transfer film 100 passes between the slits 65b of the gel filling tank 65 while being guided by the guide rolls 61a to 61c.
  • the specimen S is introduced into the opening 65 a of the gel filling tank layer 65.
  • the specimen S moves from one end side to the other end side of the gel 64 by applying a DC voltage between the cathode 66 and the anode 68. At this time, the specimen S is separated by electrophoresis according to the difference in the molecular weight of the protein. The sample S separated by electrophoresis is transferred to the transfer film 100 that passes through the slit 65b.
  • the transfer film 100 onto which the sample S has been transferred is transported from the electrophoresis transfer unit 53 to the sample storage unit 57 by the transport unit 58.
  • the sample storage unit 57 includes a sample roll 70 that winds the transfer film 100 onto which the sample S has been transferred.
  • the sample roll 70 is controlled independently of the transfer film roll 59.
  • the transfer film 100 wound up by the sample roll 70 is sent to a post-processing unit (not shown), subjected to processing for obtaining a transfer image of the sample S, and then sent to the measurement unit.
  • a test for the presence or absence of an antibody against the sample S is performed.
  • the automatic electrophoresis apparatus 51 of the present embodiment it is possible to obtain the same effect as that of the automatic electrophoresis apparatus 1 described above. That is, by providing the guide member 101 on the transfer film 100, the transfer film 100 comes into contact with the guide rolls 61a to 61c constituting the transport unit 58 via the guide member 101 during transport. Therefore, the transfer film 100 does not come into direct contact with the guide rolls 61a to 61c. As a result, it is possible to prevent contamination (cross-contamination) between the specimens transferred to the transfer film 100.
  • the rigidity of both end portions where the pair of guide members 101 are provided can be increased. Therefore, in the automatic electrophoresis apparatus 51, it is possible to avoid apparatus troubles such as the transfer film 100 being damaged during conveyance.
  • the guide pins 62 of the guide rolls 61a to 61c are fitted into the plurality of holes 102a and the through holes 102b provided in the pair of guide members 101 and the transfer film 100. It is conveyed in the state. Thereby, it is possible to improve the conveyance accuracy of the transfer film 100 and improve the reliability.
  • this invention is not necessarily limited to the thing of the said embodiment, A various change can be added in the range which does not deviate from the meaning of this invention.
  • the transfer film 100 (sample cell 100B) to which the support 103 is attached can be stored in a stacked state.
  • the plurality of laminated transfer films 100 come into contact via the guide member 101 and the support 103. For this reason, the laminated
  • the sample cell preparation unit is not limited to the configuration arranged between the above-described electrophoresis transfer unit and the post-processing unit, and the transfer film supply unit and the electrophoresis It is also possible to adopt a configuration arranged between the transfer unit.
  • the specimen storage unit can be arranged after the above-described measurement unit or after the electrophoresis transfer unit.
  • the automatic electrophoresis apparatus is not limited to the application to the above-described serum protein test, but can also be applied to a test of a disease-related marker (for example, a cancer marker).
  • a disease-related marker for example, a cancer marker
  • One embodiment of the present invention can be applied to an automatic electrophoresis apparatus or the like that needs to improve transfer film conveyance accuracy while preventing cross contamination of the transfer film.

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Abstract

　転写膜（１００）を供給する転写膜供給部（２）と、転写膜（１００）に電気泳動により分離された検体を転写する電気泳動転写部（３）と、検体が転写された転写膜（１００）に対して転写像を得るための処理を施す後処理部（５）と、検体の転写像を測定する測定部（６）と、転写膜（１００）を各部の間で搬送方向に沿って搬送させる搬送部（８）と、を備え、転写膜（１００）には、搬送方向に沿って案内支持されるガイド部材が設けられている。

Description

自動電気泳動装置
　本発明は、自動電気泳動装置に関する。
　本願は、２０１３年１２月２４日に、日本に出願された特願２０１３－２６５６８７号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。
　電気泳動は、分離媒体に緩衝液を介して電流を流すことにより、解析対象（検体）の分子を分離する方法である。電気泳動は、生体由来試料中の分子など、分子量が大きい分子を、その性質の相違に基づいて分離する手法として幅広く利用されている。また、タンパク質又は核酸の固定及び解析を行うため、これまでに種々の方法及び装置が開発されている。
　例えば、タンパク質の分離には、陰イオン系界面活性剤であるドデシル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ）を用いたＳＤＳ－ポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）と呼ばれる方法が広く利用されている。また、分離したタンパク質を解析及び同定する方法としては、ウエスタンブロッティングがよく知られている。ウエスタンブロッティングとは、電気泳動で分離したタンパク質を、吸着によりゲルから吸着部材である転写膜に転写させて固定し、抗原抗体反応によってタンパク質を同定する方法である。
　これらの分離及び同定方法は、特異性及び検出感度の点で極めて優れている。このため、信頼性が高い分析技術として、例えば、医学や薬学、生化学、食品等の分野で広く利用されている。
　一方、電気泳動及び転写を短時間で行う手法が種々検討されている。例えば、電気泳動を行いながら、泳動下流端において露出されたゲルに転写膜を接触させ、この接触状態を維持しつつ転写膜を移動させることで、電気泳動により検体から分離された分子を直ちに転写膜へと順次転写させる手法が開示されている。この手法は、電気泳動及び転写を同時進行で行うものであり、自動化にも好適である。
　例えば、血清タンパクの検査には、自動電気泳動装置が用いられる（例えば、特許文献１～３を参照。）。具体的に、下記特許文献１，２には、支持体（転写膜）を緩衝液に湿潤させる支持体湿潤部と、支持体に検体を塗布する検体塗布部と、検体が塗布された支持体に電気を通電させる電気泳動部と、泳動終了後の支持体に染色、脱色、乾燥処理を施す後処理部と、染色された電気泳動像を測光する測光部とが、各処理部を支持体が順次搬送されるように順次連設された自動電気泳動装置が開示されている。一方、下記特許文献３には、支持体の泳動槽内での停止位置を決定するために、搬送中の支持体の後端（又は前端）がフォトセンサ等により検知され、支持体が一定時間搬送された後、停止する機構を有する自動電気泳動装置が開示されている。
特許第３０７１９０８号公報 特許第３１５９４９９号公報 特許第３３４９７５２号公報
　ところで、従来の自動電気泳動装置では、転写膜に検体を塗布した後に、電気泳動部、後処理部、測光部へと順次搬送されるため、検体間の汚染（クロスコンタミネーション）を防止することが課題となっている。また、転写膜は、搬送時に破損することもあり、搬送精度の向上も求められている。
　本発明の一つの態様は、このような従来の事情に鑑みて提案されたものであり、転写膜のクロスコンタミネーションを防止しつつ、転写膜の搬送精度の向上を可能とした自動電気泳動装置を提供することを目的の一つとする。
　上記の目的を達成するために、本発明は以下の手段を採用した。
（１）　本発明の一つの態様に係る自動電気泳動装置は、転写膜を供給する転写膜供給部と、前記転写膜に電気泳動により分離された検体を転写する電気泳動転写部と、前記検体が転写された転写膜に対して転写像を得るための処理を施す後処理部と、前記転写膜を各部の間で搬送方向に沿って搬送させる搬送部と、を備え、前記転写膜には、前記搬送方向に沿って案内支持されるガイド部材が設けられている。
（２）　前記（１）に記載の自動電気泳動装置において、前記ガイド部材は、前記転写膜の前記搬送方向と平行な方向の両側の端縁部に沿って配置されている構成であってもよい。
（３）　前記（１）又は（２）に記載の自動電気泳動装置において、前記ガイド部材には、複数の孔部が所定の間隔で並んで設けられている構成であってもよい。
（４）　前記（１）～（３）の何れに記載の自動電気泳動装置において、前記転写膜の前記ガイド部材に対向して支持体を取り付けた検体セルを作製する検体作製部を備える構成であってもよい。
（５）　前記（４）に記載の自動電気泳動装置において、前記検体セルを保存する検体保存部を備える構成であってもよい。
（６）　前記（１）～（５）の何れかに記載の自動電気泳動装置において、前記検体の転写像を測定する測定部を備える構成であってもよい。
　以上のように、本発明の一つの態様によれば、転写膜のクロスコンタミネーションを防止しつつ、転写膜の搬送精度の向上を可能とした自動電気泳動装置を提供することが可能である。
本発明の第１の実施形態に係る自動電気泳動装置の概略構成を示す模式図である。 ガイド部材が設けられた転写膜の斜視図である。 図２Ａ中に示す線分Ｘ－Ｘによる断面図である。 図２Ａ中に示す線分Ｙ－Ｙによる断面図である。 支持体の転写膜１００に加熱圧着される前の状態を示す断面図である。 支持体の転写膜１００に加熱圧着された後の状態を示す断面図である。 本発明の第２の実施形態に係る自動電気泳動装置の概略構成を示す模式図である。 ガイドロールを拡大して示す模式図である。 支持体が取り付けられた転写膜を積層した状態を示す側面図である。
　以下、本発明の実施形態について、図面を参照して詳細に説明する。
　なお、以下の全ての図面においては、各構成要素を見やすくするため、構成要素によって寸法の縮尺を異ならせて示すことがある。
（第１の実施形態）
　先ず、本発明の第１の実施形態として図１に示す自動電気泳動装置１について、例えば血清タンパクの検査する場合を例に挙げて説明する。なお、図１は、自動電気泳動装置１の概略構成を示す模式図である。
　自動電気泳動装置１は、図１に示すように、転写膜供給部２と、電気泳動転写部３と、検体作製部４と、後処理部５と、測定部６と、検体保存部７と、搬送部８とを概略備えている。
　転写膜供給部２は、長尺帯状の転写膜１００が巻回された転写膜ロール９と、転写膜ロール９から送り出された転写膜１００を所定の長さで切断するカッター１０とを有している。所定の長さに切断された転写膜１００は、搬送部８により転写膜供給部２から電気泳動転写部３へと順次搬送される。
　ここで、転写膜１００の構成について、図２Ａ～図２Ｃを参照して説明する。なお、図２Ａは、転写膜１００の構成を示す斜視図である。図２Ｂは、図２Ａ中に示す線分Ｘ－Ｘによる断面図である。図２Ｃは、図２Ａ中に示す線分Ｙ－Ｙによる断面図である。
　転写膜１００には、図２Ａ～図２Ｃに示すように、搬送方向（長手方向）に沿って案内支持される一対のガイド部材１０１が設けられている。一対のガイド部材１０１は、転写膜１００の搬送方向と平行な方向の両側の端縁部に沿って配置されている。
　一対のガイド部材１０１には、複数の孔部１０２ａが所定の間隔で並んで設けられている。これに対応して、転写膜１００の孔部１０２ａと重なる位置には、この孔部１０２ａと同じ大きさの貫通孔１０２ｂが穿設されている。
　転写膜１００としては、例えば、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）や、ニトロセルロースなどを用いることができる。ガイド部材１０１としては、例えば、ポリプロピレン（ＰＰ）や、ポリビニルクロライド（ＰＶＣ）、ポリエチレン（ＰＥ）、ポリスチレン（ＰＳ）、アクリロニトリルブタジエンスチレン（ＡＢＳ）、アクリロニトリルスチレン（ＡＳ）、ポリメチルメタクレート（ＰＭＭＡ）などの汎用プラスチックを用いることができる。また、ガイド部材１０１は、幅が１ｍｍ～５ｍｍ程度、厚みが０．２ｍｍ～１ｍｍ程度であることが好ましい。なお、本実施形態では、転写膜１００として、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）を用い、ガイド部材１０１として、ポリプロピレン（ＰＰ）を用いている。
　搬送部８は、図１に示すように、転写膜供給部２と、電気泳動転写部３と、検体作製部４との間に、複数のガイドロール１１ａ～１１ｅを備えている。複数のガイドロール１１ａ～１１ｅには、複数のガイドピン（図示せず。）が周方向に所定の間隔で並んで設けられている。搬送部８では、ガイド部材１０１の孔部１０２ａ及び転写膜１００の貫通孔１０２ｂにガイドピンを嵌合させた状態で、複数のガイドロール１１ａ～１１ｅを搬送方向に回転させることによって、これら複数のガイドロール１１ａ～１１ｅの間で転写膜１００を搬送する。
　電気泳動転写部３は、転写膜１００に対して親水化処理を施す親水化処理スプレー１２と、上下一対の基板１３ａ，１３ｂの間に電気泳動用のゲル１４が充填されたゲル充填槽１５と、陰極１６が設けられた陰極バッファー槽１７と、陽極１８が設けられた陽極バッファー槽１９と、検体（図示せず。）を供給するサンプラー２０と、サンプラー２０から供給された検体をゲル充填槽１５へと導く溶液チップ２１とを概略備えている。
　また、陰極バッファー槽１７及び陽極バッファー槽１９には、緩衝液Ｌが貯留されている。ゲル充填槽１５の一端側は、陰極バッファー槽１７内の緩衝液Ｌに浸漬された状態で配置されている。ゲル充填槽１５の一端側には、検体が導入される開口部１５ａが設けられている。一方、ゲル充填槽１５の他端側は、陽極バッファー槽１９内の緩衝液Ｌに浸漬された状態で配置されている。ゲル充填槽１５の他端側には、転写膜１００が通過するスリット１５ｂが設けられている。
　電気泳動転写部３では、搬送部８により搬送される転写膜１００に対して、親水化処理スプレー１２が処理液Ｈを塗布することによって、転写膜１００を親水化処理する。処理液Ｈとしては、例えば、メタノールやエタノールなどを用いることができる。
　親水化処理が施された転写膜１００は、ガイドロール１１ａ～１１ｄに案内されながら、ゲル充填槽１５のスリット１５ｂの間を通過する。一方、サンプラー２０から供給された検体は、溶液チップ２１を介してゲル充填槽層１５の開口部１５ａへと導入される。
　検体は、陰極１６と陽極１８との間に直流電圧を印加することによって、ゲル１４の一端側から他端側に向かって移動する。このとき、検体は、電気泳動によりタンパク質の分子量の差に応じて分離される。そして、電気泳動により分離された検体は、スリット１５ｂを通過する転写膜１００に転写される。
　検体が転写された転写膜１００は、搬送部８により電気泳動転写部３から検体作製部４へと搬送される。検体作製部４は、検体が転写された転写膜１００に支持体１０３を取り付ける支持体取付部２２と、支持体１０３が取り付けられた転写膜１００をパッケージ１０４に収納するパッケージ収納部２３とを備えている。
　支持体取付部２２は、ガイドロール１１ｄとガイドロール１１ｅとの間に、押付ロール２４と、ホットプレス２５と、カッター２６とを有している。押付ロール２４は、長尺帯状の支持体１０３が巻回された支持体ロール（図示せず。）から送り出された長尺帯状の支持体１０３を転写膜１００に押し付ける。ホットプレス２５は、支持体１０３を転写膜１００に加熱圧着させる。カッター２６は、支持体１０３に加熱圧着された部分を残して支持体１０３を切断する。
　ここで、支持体１０３の転写膜１００に加熱圧着される前の状態を図３Ａに示し、支持体１０３の転写膜１００に加熱圧着された後の状態を図３Ｂに示す。
　支持体１０３は、図３Ａに示すように、ガイド部材１０１の孔部１０２ａ及び転写膜１００の貫通孔１０２ｂに嵌合される突起部１０３ａを有している。突起部１０３ａには、貫通孔１０３ｂが形成されている。そして、この支持体１０３は、図３Ｂに示すように、ホットプレス２５により突起部１０３ａが押し潰されることによって、転写膜１００と一体化される。これにより、転写膜１００は、支持体１０３により剛性が高められた状態で固定支持される。
　支持体１０３と一体化された転写膜１００は、図１に示すように、支持体１０３の貫通孔１０３ｂにガイドピンを嵌合させた状態で、ガイドロール１１ｅを搬送方向に回転させることによって、パッケージ収納部２３へと搬送される。パッケージ収納部２３では、支持体１０３と一体化された転写膜１００をパッケージ１０４に収納することによって、検体セル１００Ａが作製される。作製された検体セル１００Ａは、搬送部８により後処理部５へと搬送される。
　支持体１０３としては、例えば、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）や、ポリメチルメタクレート（ＰＭＭＡ）、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリプロピレン（ＰＰ）などの転写膜１００よりも剛性の高い材料を用いることができる。パッケージ１０４としては、例えば、ポリメチルメタクレート（ＰＭＭＡ）や、ポリエチレンテレフタレート（ＰＥＴ）、ポリエチレン（ＰＥ）などを用いることができる。なお、本実施形態では、支持体１０３として、耐薬品性及び耐熱性が高く、摩擦係数が小さいポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）を用い、パッケージ１０４として、透明性が高いポリメチルメタクレート（ＰＭＭＡ）を用いている。
　後処理部５は、パッケージ１０４内の検体が転写された転写膜１００に対して、例えば、ブロッキング、染色、脱色、洗浄、乾燥、インキュベーション等の検体の転写像を得るための処理を施す。また、後処理部５では、処理中に検体セル１００Ａを撹拌する操作を行うことができる。処理後の検体セル１００Ａは、搬送部８により測定部６へと搬送される。
　測定部６は、検体セル１００Ａに対して測定光Ｂを照射する照明部２７と、検体の転写像を撮像する撮像部２８とを有している。照明部２７には、例えばレーザーダイオード（ＬＤ）などの励起光源を用いることができる。撮像部２８には、例えば電荷結合素子（ＣＣＤ）などの撮像素子を用いることができる。測定部６では、これら照明部２７及び撮像部２８を走査しながら測定を行う。
　自動電気泳動装置１では、得られた検体の転写像を測定することで、検体における抗体の有無等を検査することができる。検査後の検体セル１００Ａは、搬送部８により検体保存部７へと搬送される。
　検体保存部７は、複数の検体セル１００Ａを保存する保存容器２９を有している。保存容器２９には、複数の検体セル１００Ａが整列した状態で収納される。
　本実施形態の自動電気泳動装置１では、転写膜１００にガイド部材１０１を設けることによって、搬送時に転写膜１００がガイド部材１０１を介して搬送部８を構成するガイドロール１１ａ～１１ｅ等と接触することになる。このため、転写膜１００は、ガイドロール１１ａ～１１ｅ等と直接接触することがない。これにより、転写膜１００に転写された検体間の汚染（クロスコンタミネーション）を防止することが可能である。
　また、転写膜１００では、一対のガイド部材１０１が設けられた両端部分の剛性を高めることができる。これにより、自動電気泳動装置１では、搬送時に転写膜１００が破損する等の装置トラブルを回避することが可能である。
　また、本実施形態の自動電気泳動装置１では、一対のガイド部材１０１及び転写膜１００に設けられた複数の孔部１０２ａ及び貫通孔１０２ｂに、ガイドロール１１ａ～１１ｅのガイドピンを嵌合させた状態で搬送される。これにより、転写膜１００の搬送精度を高めて、信頼性の向上を図ることが可能である。
　さらに、本実施形態の自動電気泳動装置１では、検体が転写された転写膜１００に支持体１０３を取り付けることによって、転写膜１００の剛性を高めると共に、パッケージ１０４に収納された転写膜１００が動くことを防止している。この場合、転写膜１００がパッケージ１０４と接触することがないため、検体の汚染（クロスコンタミネーション）を防止することが可能である。
　なお、図１に示す自動電気泳動装置１では、測定部６を備えた構成となっているが、測定部６については省略することも可能である。例えば、上述した測定部６による光学的な測定を行わずに、質量分析装置などの自動電気泳動装置１とは別の測定装置を用いて、検体の測定を行うことも可能である。
（第２の実施形態）
　次に、第２の実施形態として図４に示す自動電気泳動装置５１について説明する。
　なお、図４は、自動電気泳動装置５１の概略構成を示す模式図である。
　また、以下の説明では、上記自動電気泳動装置１と同等の部位については、説明を省略すると共に、図面において同じ符号を付すものとする。
　自動電気泳動装置５１は、図４に示すように、転写膜供給部５２と、電気泳動転写部５３と、検体保存部５７と、搬送部５８とを概略備えている。
　転写膜供給部５２は、長尺帯状の転写膜１００が巻回された転写膜ロール５９と、転写膜１００に対して親水化処理を施す親水化処理槽６０とを有している。転写膜ロール５９は、親水化処理槽６０内の処理液Ｈに浸漬された状態で配置されている。転写膜１００は、搬送部５８により転写膜供給部５２から電気泳動転写部５３へと搬送される。
　搬送部５８は、転写膜供給部５２と、電気泳動転写部５３と、検体保存部５７との間に、複数のガイドロール６１ａ～６１ｃを備えている。複数のガイドロール６１ａ～６１ｃには、図５に示すように、複数のガイドピン６２が周方向に所定の間隔で並んで設けられている。なお、図５は、図４中に示す複数のガイドロール６１ａ～６１ｃのうち、ガイドロール６１ｂを拡大して示す模式図である。
　搬送部５８では、ガイド部材１０１の孔部１０２ａ及び転写膜１００の貫通孔１０２ｂにガイドピン６２を嵌合させた状態で、複数のガイドロール６１ａ～６１ｃを搬送方向に回転させることによって、これら複数のガイドロール６１ａ～６１ｃの間で転写膜１００を搬送する。
　電気泳動転写部５３は、図４に示すように、上下一対の基板６３ａ，６３ｂの間に電気泳動用のゲル６４が充填されたゲル充填槽６５と、陰極６６が設けられた陰極バッファー槽６７と、陽極６８が設けられた陽極バッファー槽６９とを概略備えている。
　また、陰極バッファー槽６７及び陽極バッファー槽６９には、緩衝液Ｌが貯留されている。ゲル充填槽６５の一端側は、陰極バッファー槽６７内の緩衝液Ｌに浸漬された状態で配置されている。ゲル充填槽６５の一端側には、検体Ｓが導入される開口部６５ａが設けられている。一方、ゲル充填槽６５の他端側は、陽極バッファー槽６９内の緩衝液Ｌに浸漬された状態で配置されている。ゲル充填槽６５の他端側には、転写膜１００が通過するスリット６５ｂが設けられている。
　電気泳動転写部５３では、転写膜１００がガイドロール６１ａ～６１ｃに案内されながら、ゲル充填槽６５のスリット６５ｂの間を通過する。一方、検体Ｓは、ゲル充填槽層６５の開口部６５ａへと導入される。
　検体Ｓは、陰極６６と陽極６８との間に直流電圧を印加することによって、ゲル６４の一端側から他端側に向かって移動する。このとき、検体Ｓは、電気泳動によりタンパク質の分子量の差に応じて分離される。そして、電気泳動により分離された検体Ｓは、スリット６５ｂを通過する転写膜１００に転写される。
　検体Ｓが転写された転写膜１００は、搬送部５８により電気泳動転写部５３から検体保存部５７へと搬送される。検体保存部５７は、検体Ｓが転写された転写膜１００を巻き取る検体ロール７０を有している。検体ロール７０は、転写膜ロール５９とは独立に制御される。そして、この検体ロール７０により巻き取られた転写膜１００は、図示を省略する後処理部に送られて、検体Ｓの転写像を得るための処理が施された後、測定部に送られることによって、検体Ｓに対する抗体の有無等の検査が行われる。
　本実施形態の自動電気泳動装置５１では、上記自動電気泳動装置１と同様の効果を得ることが可能である。すなわち、転写膜１００にガイド部材１０１を設けることによって、搬送時に転写膜１００がガイド部材１０１を介して搬送部５８を構成するガイドロール６１ａ～６１ｃ等と接触することになる。このため、転写膜１００は、ガイドロール６１ａ～６１ｃ等と直接接触することがない。これにより、転写膜１００に転写された検体間の汚染（クロスコンタミネーション）を防止することが可能である。
　また、転写膜１００では、一対のガイド部材１０１が設けられた両端部分の剛性を高めることができる。これにより、自動電気泳動装置５１では、搬送時に転写膜１００が破損する等の装置トラブルを回避することが可能である。
　また、本実施形態の自動電気泳動装置５１では、一対のガイド部材１０１及び転写膜１００に設けられた複数の孔部１０２ａ及び貫通孔１０２ｂに、ガイドロール６１ａ～６１ｃのガイドピン６２を嵌合させた状態で搬送される。これにより、転写膜１００の搬送精度を高めて、信頼性の向上を図ることが可能である。
　なお、本発明は、上記実施形態のものに必ずしも限定されるものではなく、本発明の趣旨を逸脱しない範囲において種々の変更を加えることが可能である。
　例えば、上記図１に示す自動電気泳動装置１では、支持体１０３が取り付けられた転写膜１００をパッケージ１０４に収納した検体セル１００Ａを検体保存部７の保存容器２９にて保存する場合について説明したが、例えば図６に示すように、支持体１０３が取り付けられた転写膜１００（検体セル１００Ｂ）を積層した状態で保存することも可能である。
　この場合、積層された複数の転写膜１００は、ガイド部材１０１及び支持体１０３を介して接触することになる。このため、積層された複数の転写膜１００は、直接接触することがない。これにより、転写膜１００に転写された検体間の汚染（クロスコンタミネーション）を防止することが可能である。
　また、本発明の実施形態に係る自動電気泳動装置においては、検体セル作製部について、上述した電気泳動転写部と後処理部との間に配置した構成に限らず、転写膜供給部と電気泳動転写部との間に配置した構成とすることも可能である。また、検体保存部については、上述した測定部の後に配置したり、電気泳動転写部の後に配置したりすることが可能である。
　また、本発明の実施形態に係る自動電気泳動装置については、上述した血清タンパクの検査に適用する場合に限らず、疾病関連マーカー（例えば癌マーカーなど。）の検査等にも適用可能である。
　本発明の一つの態様は、転写膜のクロスコンタミネーションを防止しつつ、転写膜の搬送精度の向上が必要な自動電気泳動装置などに適用することができる。
　１…自動電気泳動装置（第１の実施形態）　２…転写膜供給部　３…電気泳動転写部　４…検体作製部　５…後処理部　６…測定部　７…検体保存部　８…搬送部　９…転写膜ロール　１０…カッター　１１ａ～１１ｅ…ガイドロール　１２…親水化処理スプレー　１３ａ，１３ｂ…基板　１４…ゲル　１５…ゲル充填槽　１５ａ…開口部　１５ｂ…スリット　１６…陰極　１７…陰極バッファー槽　１８…陽極　１９…陽極バッファー槽　２０…サンプラー　２１…溶液チップ　２２…支持体取付部　２３…パッケージ収納部　２４…押付ロール　２５…ホットプレス　２６…カッター　２７…照明部　２８…撮像部　２９…保存容器　５１…自動電気泳動装置（第２の実施形態）　５２…転写膜供給部　５３…電気泳動転写部　５７…検体保存部　５８…搬送部　５９…転写膜ロール　６０…親水化処理槽　６１ａ～６１ｃ…ガイドロール　６２…ガイドピン　６３ａ，６３ｂ…基板　６４…ゲル　６５…ゲル充填槽　６５ａ…開口部　６５ｂ…スリット　６６…陰極　６７…陰極バッファー槽　６８…陽極　６９…陽極バッファー槽　７０…検体ロール　１００…転写膜　１００Ａ，１００Ｂ…検体セル　１０１…ガイド部材　１０２ａ…孔部　１０２ｂ…貫通孔　１０３…支持体　１０３ａ…突起部　１０４…パッケージ　Ｌ…緩衝液　Ｈ…処理液　Ｂ…測定光　Ｓ…検体

Claims (6)

  1. 　転写膜を供給する転写膜供給部と、
    　前記転写膜に電気泳動により分離された検体を転写する検体転写部と、
    　前記検体が転写された転写膜に対して転写像を得るための処理を施す後処理部と、
    　前記転写膜を各部の間で搬送方向に沿って搬送させる搬送部と、を備え、
    　前記転写膜には、前記搬送方向に沿って案内支持されるガイド部材が設けられている自動電気泳動装置。
  2. 　前記ガイド部材は、前記転写膜の前記搬送方向と平行な方向の両側の端縁部に沿って配置されている請求項１に記載の自動電気泳動装置。
  3. 　前記ガイド部材には、複数の孔部が所定の間隔で並んで設けられている請求項１又は２に記載の自動電気泳動装置。
  4. 　前記転写膜の前記ガイド部材に対向して支持体を取り付けた検体セルを作製する検体作製部を備える請求項１～３の何れか一項に記載の自動電気泳動装置。
  5. 　前記検体セルを保存する検体保存部を備える請求項４に記載の自動電気泳動装置。
  6. 　前記検体の転写像を測定する測定部を備える請求項１～５の何れか一項に記載の自動電気泳動装置。
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