WO2015093471A1

WO2015093471A1 - 蚊の幼虫の駆除剤および蚊の幼虫の駆除方法

Info

Publication number: WO2015093471A1
Application number: PCT/JP2014/083245
Authority: WO
Inventors: 亜紀柴田; 稔前田; 智子下川
Original assignee: 株式会社九州メディカル
Priority date: 2013-12-17
Filing date: 2014-12-16
Publication date: 2015-06-25
Also published as: JP2017031057A

Abstract

　環境負荷が小さく、少量の薬剤で効率的に蚊の幼虫を駆除する方法を提供する。微生物によって産生された蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫に対する誘引作用を有する誘引物質を含有する蚊の幼虫の駆除剤を、蚊の幼虫の生息場所に施用する蚊の幼虫の駆除方法。

Description

蚊の幼虫の駆除剤および蚊の幼虫の駆除方法

　本発明は、蚊の幼虫の駆除剤および蚊の幼虫の駆除方法に関する。

　世界的に蚊を媒介した感染症は多く発生し、特に熱帯・亜熱帯地域で広く流行している。蚊媒介感染症としては、デング熱、マラリア、ウェストナイル熱などがあるが、治療としては現在のところ対症療法が中心で、蚊に刺されないための対策が何よりも重要となっている。
　中でもデング熱は、特に東南アジア、南アジア、中南米、カリブ海諸国で発生しており、全世界では年間約１億人が発症すると推定されている。テング熱は、かつては東南アジアの風土病であったが、地球温暖化に伴い媒介するネッタイシマカやヒトスジシマカの生息域が拡大し、流行する地域も広がっている。
　また、これらの蚊は排水溝、空き缶や古タイヤなどに溜まった水でも産卵・発生するため都市部で流行することも多く、流行地域での急激な人口の増加や密集化が感染者の増加する一因でもある。
　日本でも、２０１４年の夏季～秋季に、東京を中心に多くの地方でデング熱に感染した患者が７０年ぶりに報告され、大きな波紋を広げた。東南アジアで媒介蚊とされているネッタイシマカは日本には常在しないが、病原体を媒介した蚊はネッタイシマカではなく、日本の多くの地域で生育しているヒトスジシマカであった。海外でデングウィルスに感染した患者の血を吸ったヒトスジシマカが媒介し、感染が拡大したと考えられている。このように世の中がグローバル化し、デング熱の流行地域との往来が多くなると、ネッタイシマカは日本に常在していなくても、日本に広く分布するヒトスジシマカが媒介蚊となり、デング熱が発生する可能性が高くなる。
　デング熱には特別な治療法はなく、症状に応じた対症治療が行われるのみである。また、ワクチンや予防する薬もないため、蚊に刺されないようにすることが唯一の予防法である。

　蚊の駆除剤として、ピレスロイド系化合物や有機リン系化合物を有効成分とする蚊の駆除剤があり、当該駆除剤を成虫の蚊の生息箇所に散布して使用される。このような駆除剤は、製造コストも比較的低いため、開発途上国においても広く用いられている。
　一方、上記駆除剤を散布する方法は、室内等の限られた空間では有効であるが、外界において成虫の蚊を全滅させることは不可能であり、蚊の発生自体を抑制できるものではない。

　蚊の発生の抑制をより効率的に行うには、蚊の幼虫（ボウフラ）の段階において駆除することが有効な手段といえる。
　蚊の幼虫の防除方法として、ピレスロイド系化合物や有機リン系化合物等の殺虫成分を蚊の幼虫が発生する貯水槽、沼地、河川、水たまり等の水源に散布する方法が挙げられる。しかしながら、このような殺虫成分を使用することよって、蚊の幼虫を死滅させるには高濃度で散布する必要があるが、当該薬剤の毒性によって蚊の幼虫以外の生物も死滅するおそれがあり、環境負荷の点から問題があった。

　一方、蚊を駆除する方法のひとつとして、蚊の幼虫（ボウフラ）に対してのみ殺虫活性を有する殺虫性タンパク質を蚊の幼虫に摂食させることにより、蚊の幼虫を駆除する方法がある（例えば、非特許文献１参照）。このような殺虫性タンパク質は、蚊の幼虫の腸内で、プロテアーゼにより活性化され、蚊の幼虫に対して殺虫活性を示す。

Glare T. R., O'Callaghan M. 1998. Environmental and health impacts of Bacillus thuringiensis israelensis. Report prepared for the New Zealand Ministry of Health. New Zealand Ministry of Health, Wellington, New Zealand.

　非特許文献１で開示された殺虫性タンパク質による蚊の幼虫の駆除方法は、環境負荷が小さい。しかしながら、当該殺虫性タンパク質が高価であるため、例えば、沼地や河川など広範囲に使用する場合、十分な殺虫作用を発現する濃度にすることはコスト的に現実的ではない。
　かかる状況下、本発明の目的は、環境負荷が小さく、少量の薬剤で効率的に蚊の幼虫を駆除することが可能な蚊の幼虫の駆除剤及び蚊の幼虫の駆除方法を提供することである。

　本発明者は、上記課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、下記の発明が上記目的に合致することを見出し、本発明に至った。

　すなわち、本発明は、以下の発明に係るものである。
　＜１＞　微生物によって産生された蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫に対する誘引作用を有する誘引物質を含有してなる蚊の幼虫の駆除剤。
　＜２＞　前記微生物が、バチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）である＜１＞に記載の駆除剤。
　＜３＞　前記誘引物質が、蚊の幼虫の捕食生物に対する誘引作用を有する誘引物質である＜１＞または＜２＞に記載の駆除剤。
　＜４＞　前記誘引物質が、オキアミ由来の誘引物質である＜３＞に記載の駆除剤。
　＜５＞　発泡性成分を含有する＜１＞から＜４＞のいずれかに記載の駆除剤。

　＜６＞　蚊の幼虫を駆除するための＜１＞から＜５＞のいずれかに記載の駆除剤の使用。
　＜７＞　前記蚊の幼虫が、イエカ属（Culex）及びヤブカ属（Aedes）に属する蚊から選択される１種以上の蚊の幼虫である＜６＞に記載の駆除剤の使用。

　＜８＞　微生物によって産生された蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫に対する誘引作用を有する誘引物質を含有する蚊の幼虫の駆除剤を、蚊の幼虫の生息場所に施用する蚊の幼虫の駆除方法。
　＜９＞　前記微生物が、バチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）である＜８＞に記載の駆除方法。
　＜１０＞　前記誘引物質が、蚊の幼虫の捕食生物に対する誘引作用を有する誘引物質である＜８＞または＜９＞に記載の駆除方法。
　＜１１＞　前記誘引物質が、オキアミ由来の誘引物質である＜１０＞に記載の駆除方法。
　＜１２＞　前記駆除剤が、発泡性成分を含有する＜８＞から＜１１＞のいずれかに記載の駆除方法。
　＜１３＞　前記蚊の幼虫が、前記蚊の幼虫が、イエカ属（Culex）及びヤブカ属（Aedes）に属する蚊から選択される１種以上の蚊の幼虫である＜８＞から＜１２＞のいずれかに記載の駆除方法。

　本発明によれば、従来よりも少量の薬剤で蚊の幼虫を駆除することが可能な蚊の幼虫の駆除剤及び蚊の幼虫の駆除方法が提供される。

誘引物質のスクリーニングに用いた水槽の模式図である。６０分後の蚊の幼虫の移動度を示す図である。誘引物質（オキアミ粉）の有無による蚊の幼虫（ネッタイシマカ）の殺虫効果の比較（死亡率の時間経過）を示す図である。実施例の発泡性固形製剤による蚊の幼虫（ネッタイシマカ）の殺虫効果（死亡率の時間経過）を示す図である。実施例の発泡性固形製剤による蚊の幼虫（ヒトスジシマカ）の殺虫効果（死亡率の時間経過）を示す図である。

　以下、本発明について例示物等を示して詳細に説明するが、本発明は以下の例示物等に限定されるものではなく、本発明の要旨を逸脱しない範囲において任意に変更して実施できる。

　本発明は、微生物によって産生された蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫に対する誘引物質を含有してなる蚊の幼虫の駆除剤（以下、「本発明の駆除剤」と称す。）に関する。詳しくは後述するが、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質を産生する性質を有する微生物の好適例は、バチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）である。
　以下、本明細書において、バチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）を「BT」と称す。また、「微生物によって産生された蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質」を「本発明に係る殺虫性タンパク質」、あるいは単に「殺虫性タンパク質」と称する場合がある。また、「蚊の幼虫に対する誘引物質」を「本発明に係る誘引物質」、あるいは単に「誘引物質」と称する場合がある。

　本発明の駆除剤は、蚊の幼虫の生息場所に施用された際に、当該駆除剤に含有される殺虫性タンパク質及び誘引物質が周囲に溶出する。溶出した幼虫を誘引する効果を有する誘引物質によって駆除剤の近傍に蚊の幼虫が引きよせられ、殺虫性タンパク質によって蚊の幼虫が殺虫される。このように、蚊の幼虫に対する誘引物質と殺虫性タンパク質との相乗作用により、単にこれらの誘引物質と殺虫性タンパク質をそれぞれを使用したとき以上の効果を得ることができる。そのため、本発明の駆除剤を蚊の幼虫の生息場所に施用することにより、少量の薬剤で効率的に蚊の幼虫の駆除を行うことができる。

　以下、本発明の駆除剤の構成成分について、より詳細に説明する。

（殺虫性タンパク質）
　本発明の駆除剤が含有する殺虫性タンパク質は、微生物によって産生された蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質である。微生物としては、蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質を産生できる微生物であればよく、好適な一例としては土壌細菌の一種であるBTが挙げられる。

　本発明に係る殺虫性タンパク質は、微生物、例えば、BTが、栄養細胞中に胞子を形成する際、胞子に隣接して結晶性のタンパク質を産生し、このタンパク質は特定の昆虫の腸内で、プロテアーゼにより活性化され、特定の昆虫に対して殺虫活性を示す。
　ＢＴはその血清型（亜種）の違いにより殺虫活性が異なっており、双翅目昆虫である蚊（幼虫含む）に対する殺虫性タンパク質を産生できるＢＴとして、鱗翅目、双翅目昆虫に活性を示す血清型（亜種）クルスタキー（ｋｕｒｓｔａｋｉ）およびアイザワイ（ａｉｚａｗａｉ）、双翅目昆虫に活性を示すイスラエレンシス（ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓ）が挙げられる。この中でも、ｉｓｒａｅｌｅｎｓｉｓが好ましい。
　具体的な殺虫性タンパク質の好適例として、Bacillus thuringiensis　Ｄ１４２株由来の殺虫タンパク質が挙げられる。
　駆除対象となる蚊（幼虫含む）としては、特に限定はなく、イエカ属（Culex）、ヤブカ属（Aedes）、ナガハシカ属（Tripteroides）、ハマダラカ属（Anopheles）などが挙げられる。また、蚊以外の双翅目昆虫（幼虫含む）も駆除対象となりうる。

　イエカ属（Culex）に属する蚊としては、例えば、アカイエカ（Culex pipiens pallens）、チカイエカ（Culex pipiens molestu）、ネッタイイエカ（Culex pipiens quinquefasciatus）、コガタイエカ（Culex tritaeniorhynchus）等が挙げられる。

　ヤブカ属（Aedes）に属する蚊としては、キンイロヤブカ亜属（Aedimorphus）であるオオムラヤブカ（Aedes alboscutellatus）、キンイロヤブカ（Aedes vexans nipponii）；
シマカ亜属（Stegomyia）であるネッタイシマカ（Aedes aegypti）、ヒトスジシマカ（Aedes albopictus）、ヤマダシマカ（Aedes flavopictus）；
セスジヤブカ亜属（Ochlerotatus）であるセスジヤブカ（Aedes dorsalis）；
トウゴウヤブカ亜属（Finlaya）であるトウゴウヤブカ（Aedes togoi）、ヤマトヤブカ（Aedes japonicus）；
等が挙げられる。

　ナガハシカ属（Tripteroides）に属する蚊としては、キンパラナガハシカ（Tripteroides bambusa）が挙げられる。
　ハマダラカ属（Anopheles）に属する蚊としては、コガタハマダラカ（Anopheles minimus）、シナハマダラカ（Anopheles sinesis）等が挙げられる。

　上記蚊の中でも、イエカ属（Culex）及びヤブカ属（Aedes）に属する蚊から選択される１種以上が好適な駆除対象である。特に、テング熱の原因であるネッタイシマカ（Aedes aegypti）及びヒトスジシマカ（Aedes albopictus）が好適な駆除対象である。

　殺虫性タンパク質としては、ＢＴによって産生された殺虫性タンパク質を含有する市販品の発泡性錠剤を使用してもよい。例えば、株式会社九州メディカル製の発泡性錠剤を好適な一例に挙げることができる。当該発泡性錠剤については、実施例においてその組成を例示する。

（誘引物質）
　本発明の駆除剤が含有する誘引物質としては、蚊の幼虫に対する誘引作用を有する物質であれば、天然物でも合成物でもよい。一方で、環境負荷を少なくする点では、天然物由来の誘引物質が好ましく、天然物由来の誘引物質の原料としては、オキアミ、トウガラシ、シシトウ、ピーマン等が挙げられる。これらの誘引物質は単独でも、２種以上を任意の割合で組み合わせて用いることができる。

　誘引物質は、その誘引作用を失わない限りは、原料を未加工で使用しても、乾燥物や抽出物等の加工物として使用してもよい。具体的には、未加工原料は、細断、すり潰された形態、乾燥物は、粉砕して粉末化された形態、抽出物は液状物として駆除剤に配合される。なお、本明細書において「抽出物」とは、対象となる原料、又はこれを必要に応じて乾燥、細切したものを、圧搾又は溶媒抽出するなどして、有効成分の含有量を高めた形態のものを総括した概念である。具体的には上記誘引物質の原料として得られる、抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、又はこれらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。なお、抽出液を乾燥して得られる乾燥物も、抽出物に該当するものとする。

　また、本発明に係る誘引物質は、蚊の幼虫に対する誘引作用だけでなく、蚊の幼虫の捕食生物の誘引作用を併せて有する誘引物質であることが好ましい。蚊の幼虫の捕食生物として、例えば、小型の魚類、カエル等の両性類、トンボの幼生等の昆虫類、等が挙げられる。このような誘引物質であれば、蚊の幼虫を誘引するのみならず、蚊の幼虫の捕食生物も誘引することになる。その結果、上記殺虫性タンパク質による殺虫作用によって蚊の幼虫が殺されるのみならず、誘引された捕食生物によって蚊の幼虫が捕食されるため、蚊の幼虫が相乗的に駆除される、という利点がある。
　蚊の幼虫に対する誘引作用と、捕食生物に対する誘引作用とを併せて有する誘引物質のうち、好適な一例として、オキアミを由来とする成分からなるオキアミ由来の誘引物質が挙げられる。オキアミは、また食用や釣り餌などにも利用されている非常に安全な原材料であり、安価なため、製品の価格上昇も抑えられる。
　オキアミを由来とする誘引物質は、小型の魚類を誘引する集魚効果が高く、蚊の幼虫以外の生物への悪影響も小さい。

　なお、前記オキアミ由来の誘引物質の原料としてオキアミは、未加工で使用しても、乾燥物や抽出物等の加工物として使用してもよい。
具体的には、具体的には、未加工原料は、細断、すり潰された形態、乾燥物は、粉砕して粉末化された形態、抽出物は液状物として駆除剤に配合される。

　上記殺虫性タンパク質と誘引物質との割合は、殺虫性タンパク質：誘引物質で、通常、１：０．０１～１０（重量比）、好ましくは１：０．１～５（重量比）である。

（駆除剤の形態）
　本発明の駆除剤は、その有効量を担体とともに配合し、固形製剤又は液状製剤とすることができる。剤形は、蚊の幼虫の生息箇所に施行できるかぎり、どのような剤形でもよい。具体的には、固形製剤として、粉末剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液状製剤としては懸濁剤、乳剤等が例示される。

　本発明の駆除剤による駆除作用を持続させることができる点では、有効成分（殺虫性タンパク質と誘引物質）を徐々に放出することが可能な固形製剤が好適である
　固形製剤において、上記殺虫性タンパク質と誘引物質に加えて、賦形剤、結合剤、崩壊剤、潤沢剤、矯味剤、安定化剤などの補助剤を用いてもよい。殺虫性タンパク質と誘引物質と補助剤の比率は目的に応じて適宜選択される。

　特に固形製剤からの有効成分の放出性を高めることができる点で、本発明の駆除剤には、発泡性成分を含むことが好ましい。発泡性成分としては、従来公知の発泡性成分を使用することができ、特に限定されない。具体的には、クエン酸、フマル酸、酒石酸、アジピン酸及びコハク酸等の有機酸と、炭酸塩からなる発泡性成分が挙げられる。炭酸塩としては、例えば、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム等が挙げられる。

　本発明の駆除剤には、本願発明の目的を損なわない範囲で、害虫の駆除剤、防除剤、忌避剤に用いられる任意の成分を含んでいてもよい。

　また、製剤形態にもよるが、製剤全重量に対する上記殺虫性タンパク質と誘引物質の合計量として、通常、０．０１～５０重量％、好ましくは０．１～１０重量％、より好ましくは１～５重量％含有する。

　製剤の製造は、従来公知の方法で行うことができる。例えば、（１）上記殺虫性タンパク質と誘引物質とを、固体担体、液体担体等と混合し、必要であればその他の製剤用補助剤を添加・加工する方法や、（２）上記殺虫性タンパク質、誘引物質及び基材を混合した後に成形加工する方法、などが挙げられる。

（蚊の幼虫の駆除方法）
　本発明の駆除剤は、蚊の幼虫を駆除するために使用される。
　本発明の蚊の幼虫の駆除方法は、上述した本発明の駆除剤を蚊の幼虫の生息場所に施用することを特徴とする。
　蚊の幼虫の生息場所としては、貯水槽、沼地、河川、水たまり等の水源が挙げられる。上述の通り、本発明の駆除剤は、有効成分（殺虫性タンパク質と誘引物質）を徐々に放出することができ、長期間にわたって効果を持続できるので、沼地、河川等のゆるやかな水の流れがある水源においても有効に蚊の幼虫を死滅させ、蚊の発生を抑制することができる。

　駆除対象となる蚊（幼虫含む）としては、特に限定はなく、イエカ属（Culex）、ヤブカ属（Aedes）、ナガハシカ属（Tripteroides）、ハマダラカ属（Anopheles）などが挙げられる。蚊の具体例については上述したため、詳細は省略する。また、蚊以外の双翅目昆虫（幼虫含む）も駆除対象となりうる。

　本発明の駆除剤の施用量や、施用頻度などは、駆除目的とする蚊の幼虫の種類や量、水源の種類等の条件に応じて適宜選択すればよい。例えば、きれいな水源では、深さ１ｍ程度で表面積が１平方メートル当たり殺虫性タンパク質が０．０５～５ｇになるような量を目安に投与すればよい。汚れの多い水源、幼虫の数が多い水源また幼虫の生育段階が進んだ水源では、必要に応じて使用量を増やせばよい。施用頻度としては、幼虫の残存数に応じて頻度を調整すればよい。

　以下に実施例を挙げて本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

　なお、Ｄ１４２株由来の殺虫タンパク質は、特開２００５－１３９１６７号公報で開示された方法に準じる方法で得た。簡単に説明すると、Ｄ１４２株を培養する培地としては、一般的細菌用培地、普通ブイヨン液体培地等があげられるが、当該微生物が増殖する培地であれば何でもよい。培養された微生物及びその産生物である殺虫タンパク質を培地ごと遠心分離及び乾燥して殺虫タンパク質として用いた。

（評価１：誘引物質のスクリーニング）
　誘引物質の候補として、イカミール、オキアミ粉、スキムミルク、トウモロコシ粉、小麦粉、トウガラシ粉、トウガラシ、シシトウ、ピーマン、ローリエを使用した。
　イカミール、オキアミ粉、スキムミルク、トウモロコシ粉、小麦粉、トウガラシ粉については２０％（w/w）の濃度になるように水に懸濁し、遠心分離し夾雑物を取り除いたのち上清を得た。得られた上清をペーパーディスクに１００μL浸み込ませて試験に用いた。トウガラシ、シシトウ、ピーマン、ローリエについては３ｍｍ程度に切り取り細断試料とした。
　評価には、４区画を設定した水槽を使用した。図１に誘引物質のスクリーニングに用いた水槽の模式図を示す。
　図１に模式図を示す４区画を設定した水槽に水（３００ｍＬ）を入れ、水槽の第１の区画に７～１１匹のネッタイシマカの幼虫を入れ、第４の区画に試料を浸み込ませたペーパーディスクまたは細断試料３ｍｍ×３ｍｍを入れた。光の影響を防ぐため、水槽にはアルミ缶をかぶせ光が入らないようにした。６０分後に幼虫がどの区画まで移動したかを数値で表した。投入した幼虫が全て第１区画にいた場合を０％、全て第４区画に移動していた場合を１００％とし、６０％未満を「誘引効果ほぼなし」、６０％以上を「誘引効果あり」とし、７０％以上を「誘引効果が特にあり」とした。図２に誘引物質のスクリーニング結果を示す。

（評価２：オキアミ粉の誘引濃度の決定）
　評価１の結果より、蚊の幼虫に対する誘引作用に特に優れる誘引物質としてオキアミ粉を選択した。
　円形水槽に２Ｌの水を入れたのち、ネッタイシマカの幼虫を５０匹入れた。０．８ｍｇのオキアミ粉を不織布に入れ、水槽の水面に浸かる程度に設置した。
　対照として、何も入れていない不織布をオキアミ粉入りの不織布と対称の位置に設置した。光の影響を防ぐため、水槽には暗幕をかぶせ光が入らないようにした。６０分後に水槽の半分よりオキアミ粉側にいる幼虫の数を数えた。毎回汲み置き水と幼虫を交換しながら、繰り返し試験を行った。
　オキアミ粉側に寄った割合は、７２．１％±７．０％で、対照に比べ有意に高かった（有意水準１％の片側検定）。したがって、２Ｌの水に対して０．８ｍｇのオキアミ粉で、すなわち１００Ｌの水に対して４０ｍｇのオキアミ粉で、ネッタイシマカの幼虫に対して誘引効果があることがわかった。

（評価３：オキアミ粉の誘引濃度の決定）
　評価２と同様に、ヒトスジシマカの幼虫に対してもオキアミ粉の誘引効果を調べた。
　円形水槽に２Ｌの水を入れたのち、ヒトスジシマカの幼虫を５０匹入れた。０．８ｍｇのオキアミ粉を不織布に入れ、水槽の水面に浸かる程度に設置した。
　対照として、何も入れていない不織布をオキアミ粉入りの不織布と対称の位置に設置した。光の影響を防ぐため、水槽には暗幕をかぶせ光が入らないようにした。６０分後に水槽の半分よりオキアミ粉側にいる幼虫の数を数えた。毎回汲み置き水と幼虫を交換しながら、繰り返し試験を行った。
　オキアミ粉側に寄った割合は、６９．１％±４．１％で、対照に比べ有意に高かった（有意水準１％の片側検定）。したがって、２Ｌの水に対して０．８ｍｇのオキアミ粉で、すなわち１００Ｌの水に対して４０ｍｇのオキアミ粉で、ヒトスジシマカの幼虫に対して誘引効果があることがわかった。

（評価４：誘引物質の有無による蚊の幼虫（ネッタイシマカ）の殺虫効果の比較）
　Bacillus thuringiensis　Ｄ１４２株由来の殺虫タンパク質を含有し、誘引物質を含んでいない、以下の組成の発泡性錠剤１を使用して、誘引物質の有無による蚊の幼虫の殺虫効果の比較を行った。

（発泡性錠剤１）
１錠の重量：４ｇ
殺虫タンパク質：Ｄ１４２株由来の殺虫タンパク質（１重量％）
発泡性成分：重曹（５１重量％）、クエン酸（３５重量％）
その他の成分：ショ糖（９重量％）、ポリエチレングリコール（３重量％）、タルク（１重量％）

　評価４の駆除剤（実施例）として、発泡性錠剤１を粉砕した粉体に、誘引物質としてオキアミ粉を１％混合したものを使用した。水槽（５００ｍＬ）にネッタイシマカの幼虫を５０匹入れ、実施例１の駆除剤（オキアミ粉が混合された粉体状の発泡性錠剤１）０．０２ｇをなるべく水面に広がらないように入れた。対照（比較例）の駆除剤として、別の水槽には誘引物質であるオキアミ粉が混合されていない粉体状の発泡性錠剤１を入れた。両方の水槽を観察し、経時的に幼虫の死亡個体数を数えた結果を、図３に示す。
　図３からわかるように、オキアミ粉を添加した実施例の駆除剤の方が、殺虫効果が高いことが確認された。LT50（50% lethal time）は、試作品が１７７分であったのに対して、オキアミ粉混合試作品は１１９分であった。この結果から、誘引物質であるオキアミ粉を添加した実施例の駆除剤の方が、殺虫効果が高いことが分かった。

（評価５：発泡性固形製剤による蚊の幼虫（ネッタイシマカ）の殺虫効果）
　Bacillus thuringiensis　Ｄ１４２株由来の殺虫タンパク質、誘引物質として、オキアミ粉を含有する、以下の組成の発泡性錠剤２を使用して、誘引物質の有無によるネッタイシマカの幼虫の殺虫効果の比較を行った。比較例として、Bacillus thuringiensis　Ｄ１４２株由来の殺虫タンパク質を含有し、誘引物質を含んでいない、以下の組成の発泡性錠剤３を使用した。

（発泡性錠剤２）
１錠の重量：４ｇ
殺虫タンパク質：Ｄ１４２株由来の殺虫タンパク質（０．５重量％）
オキアミ粉：１重量％
発泡性成分：重曹（５１重量％）、クエン酸（３５重量％）
その他の成分：ショ糖（８．５重量％）、ポリエチレングリコール（３重量％）、タルク（１重量％）

（発泡性錠剤３）
１錠の重量：４ｇ
殺虫タンパク質：Ｄ１４２株由来の殺虫タンパク質（０．５重量％）
発泡性成分：重曹（５１重量％）、クエン酸（３５重量％）
その他の成分：ショ糖（９．５重量％）、ポリエチレングリコール（３重量％）、タルク（１重量％）

　評価５の駆除剤（実施例）として、発泡性錠剤２を使用した。水槽（１００Ｌ）にネッタイシマカの幼虫を５０匹入れ、発泡性錠剤２（１錠）が水中で動き回らないようにネットに入れ、水槽内に固定した。対照（比較例）として、別の水槽にはオキアミ粉を混ぜていない発泡性錠剤３（１錠）を入れた。光の影響を避けるために、窓や出入り口を遮光カーテンで覆った。経時的に幼虫の死亡個体数を数えた。図４に結果を示す。
　オキアミ粉を含有する実施例の駆除剤（発泡性錠剤２）の方が、殺虫効果が高いことが分かった。LT50（50% lethal time）は、発泡性錠剤３が４４分であったのに対して、発泡性錠剤２は３３分であった。この結果から、オキアミ粉を添加した実施例の駆除剤（発泡性錠剤２）の方が、殺虫効果が高いことが分かった。

（評価６：発泡性固形製剤による蚊の幼虫（ヒトスジシマカ）の殺虫効果）
　評価６の駆除剤（実施例）として、発泡性錠剤２を使用して、ヒトスジシマカの幼虫の殺虫効果の比較を行った。
　水槽（１００Ｌ）にヒトスジシマカの幼虫を５０匹入れ、発泡性錠剤２（１錠）が水中で動き回らないようにネットに入れ、水槽内に固定した。対照（比較例）として、別の水槽にはオキアミ粉を混ぜていない発泡性錠剤３（１錠）を入れた。光の影響を避けるために、窓や出入り口を遮光カーテンで覆った。経時的に幼虫の死亡個体数を数えた。図５に結果を示す。
　オキアミ粉を添加した実施例の駆除剤（発泡性錠剤２）の方が、殺虫効果が高いことが分かった。LT50（50% lethal time）は、発泡性錠剤３が９８分であったのに対して、発泡性錠剤２は６８分であった。この結果から、オキアミ粉を添加した実施例の駆除剤（発泡性錠剤２）の方が、殺虫効果が高いことが分かった。

（評価７：誘引物質含有発泡性固形製剤による蚊の幼虫（イエカ）の殺虫効果の比較）
　実施例の駆除剤として以下の組成の発泡性錠剤４を使用し、野外での蚊の幼虫防除の実施試験を行った。

（発泡性錠剤４）
１錠の重量：４ｇ
殺虫タンパク質：Ｄ１４２株由来の殺虫タンパク質（１重量％）
オキアミ粉：１重量％
発泡性成分：重曹（５１重量％）、クエン酸（３５重量％）
その他の成分：ショ糖（８重量％）、ポリエチレングリコール（３重量％）、タルク（１重量％）

　野外に設置した水槽（６５３Ｌ　表面積２．２７ｍ²、水深２８ｃｍ）に、ボウフラ（蚊の幼虫）を自然発生させた。効果の確認は蚊の幼虫の数を調査した。水槽に蚊の幼虫のトラップを仕掛けて、３時間後にトラップに入ったすべての蚊の幼虫の数を計数した。一回の計数に３つのトラップを使用した。一回当たりの発泡性錠剤２４の使用量は２錠とし、初日（０日目）と、５日目に水槽に発泡性錠剤４を投与した。
　表１に結果を示す。表１において、蚊の幼虫の数を平均と標準誤差で結果を表した。なお、発生した蚊の幼虫の種類を確認したところ、イエカの一種であった。
　試験開始前は平均で１５９６頭の蚊の幼虫がトラップされたが、発泡性錠剤４を投入後、水槽内の蚊の幼虫の数が急激に減少した。１５日以降、５０日まで蚊の幼虫はトラップされなかった。このことから野外においても本発明の駆除剤の有効性が確認できた。

　本発明の駆除剤によれば、蚊の幼虫を少量の有効成分で駆除することが可能であるため、蚊の発生を効率的に行うことができる。

Claims

　微生物によって産生された蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫に対する誘引作用を有する誘引物質を含有してなることを特徴とする蚊の幼虫の駆除剤。
　前記微生物が、バチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）である請求項１に記載の駆除剤。
　前記誘引物質が、蚊の幼虫の捕食生物に対する誘引作用を有する誘引物質である請求項１または２に記載の駆除剤。
　前記誘引物質が、オキアミ由来の誘引物質である請求項３に記載の駆除剤。
　発泡性成分を含有する請求項１から４のいずれかに記載の駆除剤。
　蚊の幼虫を駆除するための請求項１から５のいずれかに記載の駆除剤の使用。
　前記蚊の幼虫が、イエカ属（Culex）及びヤブカ属（Aedes）に属する蚊から選択される１種以上の蚊の幼虫である請求項６に記載の駆除剤の使用。
　微生物によって産生された蚊の幼虫に対する殺虫性タンパク質と、蚊の幼虫に対する誘引作用を有する誘引物質を含有する蚊の幼虫の駆除剤を、蚊の幼虫の生息場所に施用することを特徴とする蚊の幼虫の駆除方法。
　前記微生物が、バチルス・チューリンジェンシス（Bacillus thuringiensis）である請求項８に記載の駆除方法。
　前記誘引物質が、蚊の幼虫の捕食生物に対する誘引作用を有する誘引物質である請求項８または９に記載の駆除方法。
　前記誘引物質が、オキアミ由来の誘引物質である請求項１０に記載の駆除方法。
　前記駆除剤が、発泡性成分を含有する請求項８から１１のいずれかに記載の駆除方法。
　前記蚊の幼虫が、イエカ属（Culex）及びヤブカ属（Aedes）に属する蚊から選択される１種以上の蚊の幼虫である請求項８から１２のいずれかに記載の駆除方法。