WO2015087877A1 - シート状細胞培養物保存容器 - Google Patents

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WO2015087877A1
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陽介 車
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テルモ株式会社
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    • C12M27/00Means for mixing, agitating or circulating fluids in the vessel
    • C12M27/18Flow directing inserts
    • C12M27/20Baffles; Ribs; Ribbons; Auger vanes

Definitions

  • the present invention relates to a sheet-shaped cell culture storage container, and more particularly to a sheet-shaped cell culture storage container for storing a sheet-shaped cell culture together with a storage solution.
  • a sheet-like cell culture applicable to the heart is cultured on a temperature-responsive culture dish using tissue engineering, using cells derived from parts other than the adult myocardium as materials.
  • Patent Document 1 a storage transport container and storage transport method for membranous tissue that can easily preserve and transport membranous tissue while maintaining quality and biological activity without damaging the original shape of membranous tissue are also proposed.
  • Patent Document 2 a storage transport container and storage transport method for membranous tissue that can easily preserve and transport membranous tissue while maintaining quality and biological activity without damaging the original shape of membranous tissue are also proposed.
  • the cultured sheet-shaped cell culture C is stored in a state where it is immersed in the storage solution W in the storage container 1 as shown in FIG.
  • the storage container 1 containing the sheet-shaped cell culture C and the storage solution W is transported to the clinical site, and the sheet-shaped cell culture C is taken out from the storage container 1 and used.
  • the storage container 1 containing the storage liquid W is conveyed, as shown in FIG. 14, the storage liquid W may flow in the storage container 1 and the liquid level may be shaken.
  • the sheet-like cell culture C immersed in the preservation solution W is thin and fragile, it is easily affected by the flow of the preservation solution W and swings with the preservation solution W in the preservation container 1. It becomes. For this reason, as shown in FIG.
  • the sheet-shaped cell culture C may be bent or damaged.
  • the sheet-shaped cell culture C that has been bent or damaged becomes difficult to use for clinical use.
  • save transport container disclosed by patent document 2 since the inside of a tissue storage part needs to be filled with the preservation
  • the present invention has been made to solve such a conventional problem, and can easily accommodate the sheet-shaped cell culture and the preservation solution, and prevent the sheet-shaped cell culture from being bent and broken during transportation.
  • An object of the present invention is to provide a sheet-like cell culture storage container that can be used.
  • the sheet-shaped cell culture storage container has a bottom surface and a peripheral wall formed along the periphery of the bottom surface, and a culture medium for mounting the sheet-shaped cell culture on the center of the bottom surface
  • the liquid flow guide part which guides the flow of the above toward the circumferential direction of the culture placing region.
  • the liquid flow guide portion can be configured by a plurality of guide plates arranged in an annular shape along the outer periphery of the culture placing region.
  • each of the plurality of guide plates has a curved plate shape that curves in the same direction with respect to the circumferential direction of the culture placing region, or is inclined in the same direction with respect to the circumferential direction of the culture placing region. It is preferable to have a flat plate shape.
  • the liquid flow guide unit communicates between the cylindrical body disposed so as to enclose the culture placing area, and the inside and the outside of the cylindrical body, respectively, and stores the preservation solution in the culture placing area. It can also be configured to have a plurality of flow paths for guiding in the circumferential direction.
  • the liquid flow guide part can be fixed to the bottom surface of the container body.
  • a removable lid that covers the upper portion of the container body may be further provided, and the liquid flow guide portion may be fixed to the lid.
  • the liquid flow guide portion is disposed between the peripheral wall portion of the container body and the culture placement region, the flow of the storage solution formed in the container body is the circumference of the culture placement region.
  • the sheet-shaped cell culture and the preservation solution are easily accommodated in the container body, and it is possible to prevent the sheet-shaped cell culture from being bent and broken during transportation.
  • FIG. 3 is a plan view showing a container body of the sheet-shaped cell culture storage container according to Embodiment 1.
  • FIG. FIG. 3 is a perspective view showing a state where a sheet-shaped cell culture and a preservation solution are accommodated in the container body in the first embodiment.
  • FIG. 3 is a side cross-sectional view showing a state in which a sheet-shaped cell culture and a preservation solution are accommodated in the container main body in Embodiment 1 and a flow is generated in the preservation solution.
  • 3 is a plan view showing a flow of a preserving liquid stored in a container body in Embodiment 1.
  • FIG. 4 is a plan view showing the flow of the preservative liquid guided by the liquid flow guide portion in the container body in the first embodiment.
  • 6 is a perspective view showing a container body of a sheet-shaped cell culture storage container according to Embodiment 2.
  • FIG. 6 is a side cross-sectional view showing a container body and a lid of a sheet-like cell culture storage container according to Embodiment 3.
  • FIG. 6 is a side cross-sectional view showing a sheet-shaped cell culture storage container according to Embodiment 3.
  • FIG. 6 is a plan sectional view showing a container body of a sheet-shaped cell culture storage container according to Embodiment 4.
  • FIG. 10 is an enlarged plan cross-sectional view of a main part of a container body in a fourth embodiment.
  • FIG. 10 is a plan sectional view showing a container body of a sheet-shaped cell culture storage container according to a modification of the fourth embodiment. It is a perspective view which shows the conventional storage container in which the sheet-like cell culture and the preservation
  • FIG. 1 shows the configuration of a sheet-shaped cell culture storage container according to Embodiment 1.
  • the sheet-shaped cell culture storage container includes a container main body 11 for storing the sheet-shaped cell culture and a storage solution, and a removable cover 12 that covers the upper portion of the container main body 11.
  • the container main body 11 has a circular bottom surface 13 and an annular peripheral wall portion 14 formed along the periphery of the bottom surface 13, and is substantially circular for placing a sheet-shaped cell culture on the center of the bottom surface 13.
  • the culture placing region R is formed.
  • a liquid comprising eight guide plates 15 standing upright in a direction perpendicular to the bottom surface 13 of the container main body 11 between the peripheral wall portion 14 and the culture placing region R.
  • a flow guide portion 16 is formed and fixed.
  • the liquid flow guide unit 16 automatically guides the flow of the storage solution formed in the container body 11 toward the circumferential direction of the culture product mounting region R when the sheet-shaped cell culture storage container is transported.
  • the eight guide plates 15 are arranged annularly and at equal intervals along the outer periphery of the culture placement region R, respectively. It has a curved plate shape that is inclined in the same direction and curved in the same direction with respect to the circumferential direction of the culture placing region R, that is, curved so as to form a recess with respect to the adjacent peripheral wall portion 14.
  • each guide plate 15 is arranged so that a predetermined gap D is formed between the outer end portion 15 a closest to the peripheral wall portion 14 and the peripheral wall portion 14 without contacting the peripheral wall portion 14. Has been.
  • the sheet-shaped cell culture C is accommodated in the container body 11 together with the storage solution W.
  • the preservation solution W is stored so that the water level is lower than the upper end of the guide plate 15, and the sheet-shaped cell culture C is a culture formed at the center of the bottom surface 13 of the container body 11. It is arranged on the mounting area R. Since the eight guide plates 15 are annularly arranged between the peripheral wall portion 14 and the culture placement region R, the sheet-shaped cell culture C is a container surrounded by the eight guide plates 15. It will be accommodated in the central part of the main body 11. Further, the sheet-shaped cell culture C is stored in a state where the upper portion of the container body 11 is covered with the lid body 12.
  • save container which accommodates the sheet-like cell culture C and the preservation
  • vibration V is transmitted to the sheet-shaped cell culture storage container along with the transport, and for example, as shown in FIG. Shake occurs.
  • eight guide plates 15 are arrayed in the container body 11 along the outer periphery of the culture placement region R in an annular manner and at equal intervals, the flow of the storage solution W is different from each other. By hitting the guide plate 15, the guide plate 15 is restricted.
  • the eight guide plates 15 are inclined in the same direction and curved in the same direction with respect to the circumferential direction of the culture placement region R, the eight guide plates 15 are reflected by the inner wall portion 14a and reflected in the culture placement region R.
  • the flow F1a directed in the circumferential direction and the flow F1b directed in the circumferential direction of the culture placement region R reflected by the inner wall portion 14b are directed in the same rotational direction, and as a result, shown in FIG.
  • vortex flow F2 is formed in the culture mounting area
  • the sheet-like cell culture C disposed on the culture placement region R rotates on the swirl flow F2 of the preservation solution W, and maintains its shape without being bent or damaged. Can do.
  • the preservation solution W can easily form the swirl F2 in the culture placing region R without spilling out from the container main body 11. Since the eight guide plates 15 are arranged annularly and at equal intervals along the outer periphery of the culture placement region R, the vibration V accompanying the conveyance of the sheet-shaped cell culture storage container is caused by the vibration of the container body 11.
  • the swirl flow F2 of the preservation solution W is formed in the culture placement region R regardless of the direction parallel to the bottom surface 13, and it is possible to prevent the sheet-like cell culture C from being bent and broken. It becomes.
  • the guide plate 15 is not limited to eight plates, and may be a plurality of seven or less guide plates 15 provided that the guide plate 15 is annularly arranged along the outer periphery of the culture placement region R. it can. Further, the plurality of guide plates 15 are not necessarily arranged at equal intervals, and can be arranged at appropriate intervals.
  • each guide plate 15 has a curved plate shape.
  • the guide plate 15 is not limited to the curved plate shape, and a plurality of guide plates each having a flat plate shape are used as the bottom surface 23 of the container body 21.
  • the container body 21 may be fixed to the bottom surface 23 in a state where it stands upright in the vertical direction and is inclined by the same angle in the same direction with respect to the circumferential direction of the culture placing region R.
  • FIG. 7 shows a container body 31 of the sheet-shaped cell culture storage container according to the second embodiment.
  • the container main body 31 includes a circular bottom surface 33 and an annular peripheral wall portion 34 formed along the periphery of the bottom surface 33, and a substantially circular culture placement region R formed in the center of the bottom surface 33.
  • a liquid flow guide portion 36 including eight guide plates 35 is formed between the peripheral wall portion 34 and fixed to the bottom surface 33.
  • the eight guide plates 35 are arranged annularly and at equal intervals along the outer periphery of the culture placement region R, and are inclined in the same direction with respect to the circumferential direction of the culture placement region R, respectively.
  • the curved plates are curved in the same direction, that is, curved so as to form a recess with respect to the adjacent peripheral wall portion 34. is doing. Further, similar to the guide plate 15 in the first embodiment, a predetermined gap is formed between each guide plate 35 and the peripheral wall portion 34.
  • each guide plate 35 is inclined in the same direction and curved in the same direction with respect to the circumferential direction of the culture placing region R, it is parallel to the bottom surface 33 of the container body 31 as in the first embodiment. Regardless of the direction in which the storage liquid W flows, the flow of the storage liquid W is guided by the eight guide plates 35 and a swirl flow F2 is formed in the culture product mounting region R. Furthermore, since each guide plate 35 is also curved in the same direction in the height direction, the storage solution W in the height direction perpendicular to the bottom surface 33 is accompanied with the conveyance of the sheet-shaped cell culture storage container.
  • the flow of the preserving liquid W generated in any direction within a plane parallel to the bottom surface 33 of the container body 31 is also different from the flow of the preserving liquid W generated in the height direction perpendicular to the bottom surface 33.
  • a swirling flow F2 is formed in the culture placing region R. Accordingly, the flow of the preservation solution W generated in the container main body 31 can be guided more smoothly to form the swirl flow F2, and the sheet-like cell culture C can be prevented from being folded and damaged while being prevented from being folded. It becomes possible to transport the article storage container.
  • the number of guide plates 35 is not limited to eight.
  • FIG. 8 shows configurations of the container body 41 and the lid body 42 of the sheet-shaped cell culture storage container according to the third embodiment.
  • the container main body 41 has a circular bottom surface 43 and an annular peripheral wall portion 44 formed along the periphery of the bottom surface 43.
  • the lid body 42 has a circular upper plate portion 47 corresponding to the container main body 41 and an annular peripheral wall portion 48 suspended along the periphery of the upper plate portion 47 and is fixed to the lower surface of the upper plate portion 47.
  • a liquid flow guide portion 46 including a plurality of guide plates 45 is provided.
  • a substantially circular culture placement region R is formed at the center of the bottom surface 43 of the container main body 41, and the plurality of guide plates 45 of the lid body 42 attach the lid body 42 to the container main body 41. It is arranged so as to be positioned between the culture placing region R of the container main body 41 and the peripheral wall portion 44 when it is placed on the upper part.
  • the guide plate 15 or 35 is fixed to the bottom surface 13 or 33 of the container body 11 or 31, but in the third embodiment, the guide plate 45 is a lid. 42 is fixed.
  • the guide plate 45 a guide plate having the same shape as any of the guide plates 15 and 35 in the first and second embodiments is used. As shown in FIG. It is larger than the height of the peripheral wall 48 of 42 and has a value substantially equal to the height of the peripheral wall 44 of the container body 41.
  • the lower ends of the plurality of guide plates 45 come into contact with the bottom surface 43 of the container body 41 and are accommodated in the container body 41.
  • the flow of the preserving solution W is guided toward the circumferential direction of the culture placing region R by the plurality of guide plates 45 to form a swirl flow F2 in the culture placing region R. can do.
  • the sheet-shaped cell culture storage container can be used while preventing the sheet-shaped cell culture C from being bent and damaged. It can be transported.
  • liquid flow guide part 46 is fixed not to the bottom surface 43 of the container main body 41 but to the lid body 42, by removing the lid body 42 after transporting the sheet-shaped cell culture storage container, There is an effect that the sheet-shaped cell culture C can be easily taken out.
  • FIG. 10 shows a container main body 51 of the sheet-shaped cell culture storage container according to the fourth embodiment.
  • the container main body 51 has a circular bottom surface 53 and an annular peripheral wall portion 54 formed along the periphery of the bottom surface 53. Furthermore, a substantially circular culture placement region R is formed at the center of the bottom surface 53, and a liquid flow guide portion 56 is formed between the culture placement region R and the peripheral wall portion 54.
  • the liquid flow guide portion 56 has a cylindrical body 57 that is formed concentrically with the peripheral wall portion 54 and is disposed so as to contain the culture placing region R.
  • the cylindrical body 57 includes a plurality of first pieces.
  • a nozzle 58 and a plurality of second nozzles 59 are formed to protrude.
  • the first nozzle 58 protrudes on the outer peripheral surface of the cylindrical body 57, and communicates between the inside and the outside of the cylindrical body 57 inside the first nozzle 58.
  • a first flow path 58a is formed.
  • the first flow path 58 a includes an inflow port 58 b formed so as to open toward the inside of the cylindrical body 57 at the base portion of the first nozzle 58, and a cylindrical body at the tip portion of the first nozzle 58.
  • An outflow port 58 c formed so as to open outside 57 and toward the circumferential direction of the cylindrical body 57 is provided.
  • the outflow port 58c has a smaller opening area than the inflow port 58b, and most of the storage liquid W is directed from the inflow port 58b to the outflow port 58c, that is, from the inside to the outside of the cylindrical body 57. It circulates in the first flow path 58a only in the direction.
  • the second nozzle 59 protrudes on the inner peripheral surface of the cylindrical body 57, and the second nozzle 59 communicates between the inside and the outside of the cylindrical body 57 inside the second nozzle 59.
  • a path 59a is formed.
  • the second flow path 59 a includes an inflow port 59 b formed so as to open toward the outside of the cylindrical body 57 at the root portion of the second nozzle 59, and a cylindrical body at the tip portion of the second nozzle 59.
  • 57 and an outflow port 59 c formed so as to open toward the circumferential direction of the cylindrical body 57.
  • the outflow port 59c has a smaller opening area than the inflow port 59b, and most of the storage liquid W is directed from the inflow port 59b to the outflow port 59c, that is, from the outside to the inside of the cylindrical body 57. It flows through the second flow path 59a only in the direction.
  • the outflow port 58c of the first nozzle 58 and the outflow port 59c of the second nozzle 59 have the same rotational direction along the circumference of the cylindrical body 57, although there are differences between the outer side and the inner side of the cylindrical body 57. Facing.
  • the plurality of first nozzles 58 and the plurality of second nozzles 59 having such a structure are alternately arranged at equal intervals in the circumferential direction of the cylindrical body 57.
  • the storage solution W inside the cylindrical body 57 corresponds to the flow as shown in FIG. It flows into the first flow path 58a from the inlet 58b of the first nozzle 58, is guided to the flow F3 directed in the circumferential direction of the cylindrical body 57, and flows out of the cylindrical body 57 from the outlet 58c.
  • the preservation liquid W outside the cylindrical body 57 flows into the second flow path 59a from the inlet 59b of the second nozzle 59 corresponding to the flow, and flows in the circumferential direction of the cylindrical body 57 F4. To the inside of the cylindrical body 57 from the outlet 59c.
  • the storage liquid W is guided in the same rotation direction by the plurality of first nozzles 58 and the plurality of second nozzles 59, and as a result, as shown in FIG. A swirl flow F2 of the storage liquid W is formed in R. For this reason, it becomes possible to convey the sheet-shaped cell culture storage container while preventing the sheet-shaped cell culture C from being bent and broken.
  • the plurality of first nozzles 58 and the plurality of second nozzles 59 are arrayed along the circumferential direction of the cylindrical body 57, but are perpendicular to the bottom surface 53 of the container body 51, that is, A plurality of first nozzles 58 and a plurality of second nozzles 59 can also be arranged in the height direction of the cylindrical body 57.
  • the inlet 58b and outlet 58c of the first nozzle 58 and the inlet 59b and outlet 59c of the second nozzle 59 are respectively connected from the vicinity of the bottom surface 53 of the container body 51 to the vicinity of the upper end of the cylindrical body 57. It can also be formed to have an elongated shape in the height direction. Thereby, the flow of the preservation liquid W in the vertical direction is hardly generated, and the swirl flow F2 of the preservation liquid W can be efficiently formed.
  • a liquid flow guide portion 66 like a container body 61 shown in FIG.
  • a plurality of first flow paths 68a and a plurality of second flow paths 69a can also be formed inside the thick cylindrical body 67 constituting the.
  • the first flow path 68a includes an inlet 68b that opens toward the inside of the cylindrical body 67, and an outlet 68c that opens toward the outside of the cylindrical body 67 and has a smaller opening area than the inlet 68b.
  • the preservative liquid W almost circulates in the first flow path 68a only in the direction from the inlet 68b to the outlet 68c, that is, in the direction from the inner side to the outer side of the cylindrical body 67. . Further, the first flow path 68 a extends in an oblique direction inclined in the circumferential direction from the radial direction of the cylindrical body 67, so that the storage liquid W flows out from the outlet 68 c in the circumferential direction of the cylindrical body 67. It is configured.
  • the second flow path 69a has an inlet 69b that opens toward the outside of the cylindrical body 67, and a flow that opens toward the inside of the cylindrical body 67 and has a smaller opening area than the inlet 69b.
  • the storage liquid W has an outlet 69c, and most of the preservative liquid W passes through the second channel 69a only in the direction from the inlet 69b to the outlet 69c, that is, in the direction from the outside to the inside of the cylindrical body 67. Circulate.
  • the second flow path 69a extends from the radial direction of the cylindrical body 67 in an oblique direction inclined in the same circumferential direction as the first flow path 68a, and the storage liquid W is cylindrical from the outlet 69c. It is configured to flow out in the circumferential direction of the body 67.
  • the storage liquid W is guided to the plurality of first flow paths 68a and the plurality of second flow paths 69a and flows in the same rotational direction, and as a result, It becomes possible to form the swirl flow F2 of the preservation solution W in the culture placing region R.
  • the plurality of first flow paths 68a and the plurality of second flow paths 69a are not only arranged in the circumferential direction of the cylindrical body 67, but also in a direction perpendicular to the bottom surface 63 of the container body 61, that is,
  • the plurality of first flow paths 68a and the plurality of second flow paths 69a can also be arranged in the height direction of the cylindrical body 67, respectively.
  • the first flow path 68a and the second flow path 69a are each formed to have an elongated shape in the height direction from the vicinity of the bottom surface 63 of the container body 61 to the vicinity of the upper end portion of the cylindrical body 67. You can also.
  • the liquid flow guide portions 56 and 66 are not the bottom surfaces 53 and 63 of the container main bodies 51 and 61 but the lids that cover the upper parts of the container main bodies 51 and 61. It can also be fixed to.
  • the container main bodies 11, 31, 41, 51 and 61 have the circular bottom surfaces 13, 33, 43, 53 and 63.
  • the present invention is not limited to this.
  • it may have an elliptical shape, a polygonal shape or the like.
  • the sheet-shaped cell culture storage container according to the present invention can also be used as a culture container for culturing the sheet-shaped cell culture C by containing a culture solution in the container body.
  • the culture is preferably performed at the center of the bottom surface of the container body. After culturing the sheet-shaped cell culture C in the container body, it can be used as it is as a storage container.
  • the sheet-like cell culture storage container according to the present invention can be produced using various materials such as resin and glass. Moreover, the liquid flow guide part may be detachably attached to the container body or lid of the sheet-like cell culture storage container. Further, as the sheet-like cell culture C to be stored, either a single-layer cell culture or a cell culture layered in multiple layers can be used.

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Abstract

 シート状細胞培養物保存容器は、底面と底面の周縁に沿って形成された周壁部とを有すると共に底面の中央部にシート状細胞培養物を載置するための培養物載置領域が形成され且つシート状細胞培養物と保存液とを収容するための容器本体と、容器本体の周壁部と培養物載置領域の間に配置され且つ容器本体内に形成された保存液の流れを培養物載置領域の周方向に向けて誘導する液流ガイド部とを備えている。

Description

シート状細胞培養物保存容器
 この発明は、シート状細胞培養物保存容器に係り、特に、保存液と共にシート状細胞培養物を保存するためのシート状細胞培養物保存容器に関する。
 近年、心筋梗塞等の重症心不全治療の解決策として再生医療が検討されている。
 重症心筋梗塞等においては、心筋細胞が機能不全に陥り、さらに、線維芽細胞の増殖および間質の線維化が進行して、心不全を呈するようになる。心不全の進行に伴い、心筋細胞は傷害されてアポトーシスに陥るが、心筋細胞は殆ど細胞分裂を起こさないため、心筋細胞数が減少して、心機能の低下がさらに進むこととなる。
 このような重症心不全患者に対し、サイトカイン除放による心臓の回復を促す目的で細胞移植法が適用されることがあり、既に自己骨格筋芽細胞による臨床応用が開始されている。
 また、心機能回復を目的として、成体の心筋以外の部分に由来する細胞を材料とし、組織工学を応用した温度応答性培養皿の上で、心臓に適用可能なシート状の細胞培養物を培養することが開示されている(特許文献1)。
 さらに、膜状組織の原形状を損なうことなく品質および生物学的活性を保持すると共に、膜状組織の保存及び輸送を簡便に行うことができる膜状組織の保存輸送容器および保存輸送方法も提案されている(特許文献2)。
特表2007-528755号公報 特開2012-130311号公報
 培養されたシート状細胞培養物Cは、例えば図13に示されるように、保存容器1内で保存液Wに浸された状態で保存される。そして、臨床の際には、シート状細胞培養物Cと保存液Wが収容された保存容器1を臨床現場に搬送し、保存容器1からシート状細胞培養物Cが取り出されて使用される。
 しかしながら、保存液Wが収容された保存容器1を搬送すると、図14に示されるように、保存容器1内で保存液Wに流れが生じ、液面に揺れが発生することがある。このとき、保存液Wに浸されているシート状細胞培養物Cは、肉薄で脆弱なものであるので、保存液Wの流れの影響を受けやすく、保存容器1内で保存液Wと共に揺れ動くこととなる。
 このため、図15に示されるように、シート状細胞培養物Cが折れ曲がったり、あるいは、破損するおそれがある。このような折れ曲がり、破損等を来したシート状細胞培養物Cは、臨床への使用が困難になってしまう。
 また、特許文献2に開示された保存輸送容器では、膜上組織収容部内が保存液で満たされている必要があり、液密状態を形成する手間がかかるため、簡単に容器の開閉を繰り返すことができないという問題がある。
 この発明は、このような従来の問題点を解消するためになされたもので、シート状細胞培養物と保存液の収容が容易で且つ搬送時におけるシート状細胞培養物の折れ曲がりおよび破損を防止することができるシート状細胞培養物保存容器を提供することを目的とする。
 この発明に係るシート状細胞培養物保存容器は、底面とこの底面の周縁に沿って形成された周壁部とを有すると共に底面の中央部にシート状細胞培養物を載置するための培養物載置領域が形成され且つシート状細胞培養物と保存液とを収容するための容器本体と、容器本体の周壁部と培養物載置領域の間に配置され且つ容器本体内に形成された保存液の流れを培養物載置領域の周方向に向けて誘導する液流ガイド部とを備えたものである。
 液流ガイド部は、培養物載置領域の外周に沿って環状に配列された複数のガイド板により構成することができる。
 この場合、複数のガイド板は、それぞれ、培養物載置領域の周方向に対して同一方向に湾曲する湾曲板形状を有する、または、培養物載置領域の周方向に対して同一方向に傾斜する平板形状を有することが好ましい。
 また、液流ガイド部が、培養物載置領域を内包するように配置された筒状体と、それぞれ筒状体の内側と外側との間を連通し且つ保存液を培養物載置領域の周方向に向けて誘導するための複数の流路とを有するように構成することもできる。
 液流ガイド部は、容器本体の底面に固定することができる。あるいは、容器本体の上部を覆う脱着可能な蓋体をさらに備え、液流ガイド部が、蓋体に固定されるようにしてもよい。
 この発明によれば、容器本体の周壁部と培養物載置領域の間に液流ガイド部が配置されているので、容器本体内に形成された保存液の流れが培養物載置領域の周方向に向けて誘導され、容器本体内にシート状細胞培養物と保存液を容易に収容して搬送時におけるシート状細胞培養物の折れ曲がりおよび破損を防止することが可能となる。
この発明の実施の形態1に係るシート状細胞培養物保存容器を示す斜視図である。 実施の形態1に係るシート状細胞培養物保存容器の容器本体を示す平面図である。 実施の形態1における容器本体内にシート状細胞培養物と保存液とを収容した状態を示す斜視図である。 実施の形態1における容器本体内にシート状細胞培養物と保存液とを収容して保存液に流れが生じた様子を示す側面断面図である。 実施の形態1における容器本体内に収容された保存液の流れを示す平面図である。 実施の形態1における容器本体内で液流ガイド部により誘導された保存液の流れを示す平面図である。 実施の形態2に係るシート状細胞培養物保存容器の容器本体を示す斜視図である。 実施の形態3に係るシート状細胞培養物保存容器の容器本体と蓋体を示す側面断面図である。 実施の形態3に係るシート状細胞培養物保存容器を示す側面断面図である。 実施の形態4に係るシート状細胞培養物保存容器の容器本体を示す平面断面図である。 実施の形態4における容器本体の要部拡大平面断面図である。 実施の形態4の変形例に係るシート状細胞培養物保存容器の容器本体を示す平面断面図である。 シート状細胞培養物と保存液とが収容された従来の保存容器を示す斜視図である。 従来の保存容器内の保存液に流れが生じた様子を示す側面断面図である。 シート状細胞培養物に折れ曲がりが生じた従来の保存容器を示す斜視図である。
 以下、この発明の実施の形態を添付図面に基づいて説明する。
実施の形態1
 図1に実施の形態1に係るシート状細胞培養物保存容器の構成を示す。シート状細胞培養物保存容器は、シート状細胞培養物と保存液とを収容するための容器本体11と、容器本体11の上部を覆う脱着可能な蓋体12とを備えている。
 容器本体11は、円形の底面13と、底面13の周縁に沿って形成された環状の周壁部14とを有し、底面13の中央部にシート状細胞培養物を載置するためのほぼ円形の培養物載置領域Rが形成されている。さらに、容器本体11の底面13上には、周壁部14と培養物載置領域Rの間に、それぞれ容器本体11の底面13に対して垂直方向に直立する8枚のガイド板15からなる液流ガイド部16が形成され、固定されている。
 液流ガイド部16は、シート状細胞培養物保存容器の搬送時等に容器本体11内に形成された保存液の流れを自動的に培養物載置領域Rの周方向に向けて誘導するためのもので、図2に示されるように、上方から見たときに、8枚のガイド板15は、培養物載置領域Rの外周に沿って環状に且つ均等な間隔で配列され、それぞれ、培養物載置領域Rの周方向に対して同一方向に傾斜し且つ同一方向に湾曲する、すなわち、近接する周壁部14に対して凹部をなすように湾曲する湾曲板形状を有している。
 また、それぞれのガイド板15は、周壁部14に接触することはなく、周壁部14に最も近接する外側の端部15aと周壁部14との間に所定の隙間Dが形成されるように配置されている。
 シート状細胞培養物の保存時には、図3に示されるように、容器本体11の内部に保存液Wと共にシート状細胞培養物Cが収容される。このとき、保存液Wは、水位がガイド板15の上端よりも低い位置となるように収容され、シート状細胞培養物Cは、容器本体11の底面13の中央部に形成されている培養物載置領域Rの上に配置される。なお、周壁部14と培養物載置領域Rの間に8枚のガイド板15が環状に配列形成されているので、シート状細胞培養物Cは、8枚のガイド板15により囲まれた容器本体11の中央部分に収容されることとなる。
 さらに、容器本体11の上部を蓋体12で覆った状態で、シート状細胞培養物Cが保存される。
 そして、このようにして保存されているシート状細胞培養物Cを臨床に使用する際には、シート状細胞培養物Cと保存液Wを収容するシート状細胞培養物保存容器が臨床現場へと搬送されるが、このとき、搬送に伴ってシート状細胞培養物保存容器に振動Vが伝わり、例えば図4に示されるように、容器本体11内の保存液Wに流れが生じ、液面に揺れが発生する。
 ところが、容器本体11内には、8枚のガイド板15が培養物載置領域Rの外周に沿って環状に且つ均等な間隔で配列形成されているため、保存液Wの流れは、それぞれのガイド板15に当たることで、ガイド板15から規制を受けることとなる。
 シート状細胞培養物保存容器に伝わる振動Vに起因して、振動Vとほぼ平行な方向に保存液Wの流れが発生するものとすると、図5に示されるように、保存液Wは、環状の周壁部14のうち、主に振動Vとほぼ平行な方向に対向する内壁部分14aおよび14bへの衝突および反射を繰り返すが、内壁部分14aおよび14bの近傍に配置されているガイド板15により、周壁部14の内壁部分14aおよび14bで反射した保存液Wの流れは、それぞれ、対応するガイド板15によりほぼ円形の培養物載置領域Rの周方向を向いた流れF1aおよびF1bへと誘導される。
 さらに、8枚のガイド板15は、培養物載置領域Rの周方向に対して同一方向に傾斜し且つ同一方向に湾曲しているので、内壁部分14aで反射して培養物載置領域Rの周方向を向いた流れF1aと内壁部分14bで反射して培養物載置領域Rの周方向を向いた流れF1bは、互いに同一の回転方向を向くこととなり、その結果、図6に示されるように、培養物載置領域Rに旋回流F2が形成される。
 これにより、培養物載置領域Rの上に配置されたシート状細胞培養物Cは、保存液Wの旋回流F2に乗って回転し、折れ曲がったり、破損することなく、その形状を維持することができる。
 なお、それぞれのガイド板15の端部15aと周壁部14との間に所定の隙間Dが形成されているので、保存液Wの流れに伴ってガイド板15と周壁部14との間に入り込んだ保存液Wは隙間Dを通って流出し、ガイド板15と周壁部14との間で保存液Wがぶつかり合うことが防止される。このため、保存液Wは、容器本体11からこぼれ出ることなく、培養物載置領域Rに旋回流F2を形成しやすくなる。
 8枚のガイド板15が培養物載置領域Rの外周に沿って環状に且つ均等な間隔で配列されているため、シート状細胞培養物保存容器の搬送に伴う振動Vが、容器本体11の底面13と平行な面内のいずれの方向に伝わっても、培養物載置領域Rに保存液Wの旋回流F2が形成され、シート状細胞培養物Cの折れ曲がりおよび破損を防止することが可能となる。
 また、ガイド板15は、培養物載置領域Rの外周に沿って環状に配列されていれば、8枚に限らず、7枚以下あるいは9枚以上の複数のガイド板15を配置することができる。
 さらに、複数のガイド板15は、必ずしも、均等な間隔で配列される必要はなく、適宜の間隔で配列することもできる。
 なお、上記の実施の形態1では、それぞれのガイド板15が湾曲板形状を有していたが、湾曲板形状に限らず、それぞれ平板形状を有する複数のガイド板を、容器本体21の底面23に対して垂直方向に直立すると共に培養物載置領域Rの周方向に対して同一方向に同一角度だけ傾斜した状態で容器本体21の底面23に固定してもよい。
実施の形態2
 図7に、実施の形態2に係るシート状細胞培養物保存容器の容器本体31を示す。容器本体31は、円形の底面33と、底面33の周縁に沿って形成された環状の周壁部34とを有し、底面33の中央部に形成されたほぼ円形の培養物載置領域Rと周壁部34との間に、8枚のガイド板35からなる液流ガイド部36が形成され、底面33に固定されている。
 8枚のガイド板35は、培養物載置領域Rの外周に沿って環状に且つ均等な間隔で配列され、それぞれ、培養物載置領域Rの周方向に対して同一方向に傾斜すると共に、底面33に平行な面内においても、底面33に垂直な高さ方向においても、互いに同一方向に湾曲する、すなわち、近接する周壁部34に対して凹部をなすように湾曲する湾曲板形状を有している。
 また、実施の形態1におけるガイド板15と同様に、それぞれのガイド板35と周壁部34との間に所定の隙間が形成されている。
 それぞれのガイド板35は、培養物載置領域Rの周方向に対して同一方向に傾斜すると共に同一方向に湾曲しているので、実施の形態1と同様に、容器本体31の底面33と平行な面内のいずれの方向に保存液Wの流れが生じても、8枚のガイド板35により保存液Wの流れが誘導され、培養物載置領域Rに旋回流F2が形成される。
 さらに、それぞれのガイド板35は、高さ方向においても、互いに同一方向に湾曲しているため、シート状細胞培養物保存容器の搬送に伴って、底面33に垂直な高さ方向に保存液Wの流れが生じた場合でも、ガイド板35の高さ方向の湾曲形状により、保存液Wは培養物載置領域Rの周方向に向けて誘導され、その結果、培養物載置領域Rに旋回流F2が形成されることとなる。
 すなわち、容器本体31の底面33に平行な面内のいずれかの方向に生じた保存液Wの流れに対しても、また、底面33に垂直な高さ方向に生じた保存液Wの流れに対しても、培養物載置領域Rに旋回流F2が形成される。
 従って、容器本体31内に発生した保存液Wの流れをさらに滑らかに誘導して旋回流F2を形成することができ、シート状細胞培養物Cの折れ曲がりおよび破損を防止しつつ、シート状細胞培養物保存容器を搬送することが可能となる。
 なお、この実施の形態2においても、ガイド板35は8枚に限るものではない。
実施の形態3
 図8に、実施の形態3に係るシート状細胞培養物保存容器の容器本体41および蓋体42の構成を示す。容器本体41は、円形の底面43と、底面43の周縁に沿って形成された環状の周壁部44とを有している。一方、蓋体42は、容器本体41に対応した円形の上板部47と、上板部47の周縁に沿って垂下された環状の周壁部48を有すると共に、上板部47の下面に固定された複数のガイド板45からなる液流ガイド部46を有している。
 図示されていないが、容器本体41の底面43の中央部にほぼ円形の培養物載置領域Rが形成されており、蓋体42の複数のガイド板45は、蓋体42を容器本体41の上部に被せたときに、容器本体41の培養物載置領域Rと周壁部44との間に位置するように配置されている。
 すなわち、上記の実施の形態1および2では、ガイド板15または35が、容器本体11または31の底面13または33に固定されていたが、この実施の形態3においては、ガイド板45が蓋体42に固定されている。
 ガイド板45としては、実施の形態1および2におけるガイド板15および35のいずれかと同様の形状を有するものが用いられるが、図8に示されるように、ガイド板45の高さは、蓋体42の周壁部48の高さよりも大きく、容器本体41の周壁部44の高さとほぼ同等の値を有している。
 このため、図9に示されるように、容器本体41の上部を蓋体42で覆ったときには、複数のガイド板45の下端が容器本体41の底面43に接触し、容器本体41に収容されている保存液Wの量に関わらずに、保存液Wの流れが複数のガイド板45により培養物載置領域Rの周方向に向けて誘導され、培養物載置領域Rに旋回流F2を形成することができる。
 このように、複数のガイド板45からなる液流ガイド部46を蓋体42に固定する構成としても、シート状細胞培養物Cの折れ曲がりおよび破損を防止しつつ、シート状細胞培養物保存容器を搬送することが可能となる。
 また、液流ガイド部46が、容器本体41の底面43ではなく、蓋体42に固定されるため、シート状細胞培養物保存容器の搬送後に、蓋体42を取り外すことで、容器本体41からシート状細胞培養物Cを取り出しやすくなるという効果がある。
実施の形態4
 図10に、実施の形態4に係るシート状細胞培養物保存容器の容器本体51を示す。容器本体51は、円形の底面53と、底面53の周縁に沿って形成された環状の周壁部54とを有している。さらに、底面53の中央部にほぼ円形の培養物載置領域Rが形成され、この培養物載置領域Rと周壁部54との間に液流ガイド部56が形成されている。
 液流ガイド部56は、周壁部54と同心円上に形成され且つ培養物載置領域Rを内包するように配置された筒状体57を有し、筒状体57に、複数の第1のノズル58と、複数の第2のノズル59が突出形成されている。
 図11に示されるように、第1のノズル58は、筒状体57の外周面上に突出しており、第1のノズル58の内部に、筒状体57の内側と外側との間を連通する第1の流路58aが形成されている。第1の流路58aは、第1のノズル58の根本部分において筒状体57の内側に向かって開口するように形成された流入口58bと、第1のノズル58の先端部分において筒状体57の外側で且つ筒状体57の周方向に向かって開口するように形成された流出口58cを有している。流出口58cは、流入口58bに比べて小さな開口面積を有しており、保存液Wは、ほとんど、流入口58bから流出口58cへ向かう方向、すなわち、筒状体57の内側から外側へ向かう方向にのみ、第1の流路58a内を流通する。
 一方、第2のノズル59は、筒状体57の内周面上に突出しており、第2のノズル59の内部に、筒状体57の内側と外側との間を連通する第2の流路59aが形成されている。第2の流路59aは、第2のノズル59の根本部分において筒状体57の外側に向かって開口するように形成された流入口59bと、第2のノズル59の先端部分において筒状体57の内側で且つ筒状体57の周方向に向かって開口するように形成された流出口59cを有している。流出口59cは、流入口59bに比べて小さな開口面積を有しており、保存液Wは、ほとんど、流入口59bから流出口59cへ向かう方向、すなわち、筒状体57の外側から内側へ向かう方向にのみ、第2の流路59a内を流通する。
 第1のノズル58の流出口58cと第2のノズル59の流出口59cは、それぞれ筒状体57の外側と内側の違いはあるものの、筒状体57の周に沿って互いに同一の回転方向を向いている。
 このような構造を有する複数の第1のノズル58と複数の第2のノズル59が、筒状体57の周方向に均等な間隔で交互に配列形成されている。
 シート状細胞培養物保存容器の搬送時等に容器本体51内で保存液Wの流れが発生すると、図11に示されるように、筒状体57の内側の保存液Wは、流れに対応する第1のノズル58の流入口58bから第1の流路58a内に流入し、筒状体57の周方向に向かう流れF3へと誘導されて流出口58cから筒状体57の外側へ流出する。一方、筒状体57の外側の保存液Wは、流れに対応する第2のノズル59の流入口59bから第2の流路59a内に流入し、筒状体57の周方向に向かう流れF4へと誘導されて流出口59cから筒状体57の内側へ流出する。
 このようにして、複数の第1のノズル58および複数の第2のノズル59により、保存液Wが同一の回転方向に誘導され、その結果、図10に示されるように、培養物載置領域Rに保存液Wの旋回流F2が形成される。このため、シート状細胞培養物Cの折れ曲がりおよび破損を防止しつつ、シート状細胞培養物保存容器を搬送することが可能となる。
 なお、複数の第1のノズル58と複数の第2のノズル59は、筒状体57の周方向に沿って配列形成されるが、容器本体51の底面53に対して垂直な方向、すなわち、筒状体57の高さ方向にも、複数の第1のノズル58と複数の第2のノズル59をそれぞれ配列形成することができる。あるいは、第1のノズル58の流入口58bおよび流出口58cと第2のノズル59の流入口59bおよび流出口59cを、それぞれ、容器本体51の底面53の近傍から筒状体57の上端部付近まで高さ方向に細長い形状を有するように形成することもできる。これにより、保存液Wの上下方向の流れが生じにくく、効率よく保存液Wの旋回流F2を形成することが可能となる。
 また、筒状体57の外周面および内周面にそれぞれ第1のノズル58および第2のノズル59を突出形成する代わりに、図12に示される容器本体61のように、液流ガイド部66を構成する肉厚の筒状体67の内部に、複数の第1の流路68aと複数の第2の流路69aを形成することもできる。
 第1の流路68aは、筒状体67の内側に向かって開口する流入口68bと、筒状体67の外側に向かって開口し且つ流入口68bに比べて小さな開口面積を有する流出口68cを有しており、保存液Wは、ほとんど、流入口68bから流出口68cへ向かう方向、すなわち、筒状体67の内側から外側へ向かう方向にのみ、第1の流路68a内を流通する。さらに、第1の流路68aは、筒状体67の径方向から周方向に傾斜した斜めの方向に延びており、保存液Wが流出口68cから筒状体67の周方向に流出するように構成されている。
 一方、第2の流路69aは、筒状体67の外側に向かって開口する流入口69bと、筒状体67の内側に向かって開口し且つ流入口69bに比べて小さな開口面積を有する流出口69cを有しており、保存液Wは、ほとんど、流入口69bから流出口69cへ向かう方向、すなわち、筒状体67の外側から内側へ向かう方向にのみ、第2の流路69a内を流通する。さらに、第2の流路69aは、筒状体67の径方向から第1の流路68aと同一の周方向に傾斜した斜めの方向に延びており、保存液Wが流出口69cから筒状体67の周方向に流出するように構成されている。
 このような構造を有する複数の第1の流路68aと複数の第2の流路69aを、筒状体67の周方向に均等な間隔で交互に配列形成すれば、図10に示した実施の形態4のシート状細胞培養物保存容器と同様に、保存液Wが複数の第1の流路68aおよび複数の第2の流路69aに誘導されて同一の回転方向に流れ、その結果、培養物載置領域Rに保存液Wの旋回流F2を形成することが可能となる。
 複数の第1の流路68aと複数の第2の流路69aは、筒状体67の周方向に沿って配列形成するだけでなく、容器本体61の底面63に対して垂直な方向、すなわち、筒状体67の高さ方向にも、複数の第1の流路68aおよび複数の第2の流路69aをそれぞれ配列形成することができる。あるいは、第1の流路68aおよび第2の流路69aを、それぞれ、容器本体61の底面63の近傍から筒状体67の上端部付近まで高さ方向に細長い形状を有するように形成することもできる。これにより、保存液Wの上下方向の流れが生じにくく、効率よく保存液Wの旋回流F2を形成することが可能となる。
 なお、この実施の形態4においても、実施の形態3と同様に、液流ガイド部56,66を容器本体51,61の底面53,63ではなく、容器本体51,61の上部を覆う蓋体に固定することもできる。
 なお、上記の実施の形態1~4では、容器本体11、31、41、51および61が、円形の底面13、33、43、53および63を有していたが、これに限るものではなく、例えば、楕円形、多角形等の形状を有するものであってもよい。
 また、この発明に係るシート状細胞培養物保存容器は、容器本体内に培養液を収容してシート状細胞培養物Cを培養する培養容器としても利用可能である。この場合、培養は容器本体の底面の中央部で行うことが好ましい。容器本体内でシート状細胞培養物Cを培養した後、そのまま保存容器として使用することができる。
 この発明に係るシート状細胞培養物保存容器は、樹脂、ガラス等、各種の材料を用いて作製することができる。
 また、液流ガイド部は、シート状細胞培養物保存容器の容器本体または蓋体に着脱可能に取り付けられていてもよい。
 さらに、保存対象となるシート状細胞培養物Cとしては、単層の細胞培養物、複数層に重層された細胞培養物のいずれをも用いることができる。
 1 保存容器、11,31,41,51,61 容器本体、12,42 蓋体、13,33,43,53,63 底面、14,34,44,48,54 周壁部、14a,14b 内壁部分、15,35,45 ガイド板、15a ガイド板の端部、16,36,46,56 液流ガイド部、47 上板部、57,67 筒状体、58 第1のノズル、58a,68a 第1の流路、58b,59b,68b,69b 流入口、58c,59c,68c,69c 流出口、59 第2のノズル、59a,69a 第2の流路、R 培養物載置領域、C シート状細胞培養物、W 保存液、V 振動、F1a,F1b,F3,F4 流れ、F2 旋回流、D 隙間。

Claims (7)

  1.  底面と前記底面の周縁に沿って形成された周壁部とを有すると共に前記底面の中央部にシート状細胞培養物を載置するための培養物載置領域が形成され且つシート状細胞培養物と保存液とを収容するための容器本体と、
     前記容器本体の前記周壁部と前記培養物載置領域の間に配置され且つ前記容器本体内に形成された前記保存液の流れを前記培養物載置領域の周方向に向けて誘導する液流ガイド部と
     を備えたことを特徴とするシート状細胞培養物保存容器。
  2.  前記液流ガイド部は、前記培養物載置領域の外周に沿って環状に配列された複数のガイド板からなる請求項1に記載のシート状細胞培養物保存容器。
  3.  前記複数のガイド板は、それぞれ、前記培養物載置領域の周方向に対して同一方向に湾曲する湾曲板形状を有する請求項2に記載のシート状細胞培養物保存容器。
  4.  前記複数のガイド板は、それぞれ、前記培養物載置領域の周方向に対して同一方向に傾斜する平板形状を有する請求項2に記載のシート状細胞培養物保存容器。
  5.  前記液流ガイド部は、前記培養物載置領域を内包するように配置された筒状体と、それぞれ前記筒状体の内側と外側との間を連通し且つ前記保存液を前記培養物載置領域の周方向に向けて誘導するための複数の流路とを有する請求項1に記載のシート状細胞培養物保存容器。
  6.  前記液流ガイド部は、前記容器本体の前記底面に固定されている請求項1~5のいずれか一項に記載のシート状細胞培養物保存容器。
  7.  前記容器本体の上部を覆う脱着可能な蓋体をさらに備え、
     前記液流ガイド部は、前記蓋体に固定されている請求項1~5のいずれか一項に記載のシート状細胞培養物保存容器。
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